KR900006011A - 성장 호르몬-유사 물질로부터 응집체를 분리시키는 크로마토그래피법 - Google Patents
성장 호르몬-유사 물질로부터 응집체를 분리시키는 크로마토그래피법 Download PDFInfo
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 출발물질의 SDS-PAGE(레인 1) 및 실시예 1의 방법을 사용하여 크로마토그래피시킨 물질(레인 2)이다.
제2도는 수퍼로즈 6(Superose 6) (조제용(Pharmacia)) 컬럼을 사용하는 겔 투과 크로마토그래프이다. 하부 크로마토그램이 실시예 2에서 기술한 바와 같은 음이온 교환체로부터 얻은 동결건조시킨 유출액인 한편, 상부 크로마토그램은 공급용액이다.
제3도는 실시예 3에서 기술한 용리법을 사용하여 얻은 크로마토그램이다. 사용된 컬럼은 1-cc 흡착제 부피(bed volume)의 모노-Q 음이온-교환체(조제용)였다.
Claims (10)
- 단량체 성장 호르몬-유사 물질이 매질로 흡수되지 않도록 하기에 충분한 농도의 단순염 및 pKa 약11.5로 출발 완충액 내에 매질을 평형시키고 ; 각각의 농도가 출발 완충액과 동일한 정도가 되도록 경제될 성장 호르몬-유사 물질 용액에 적정량의 완충액 및 단순염을 첨가시키고 ; 매질로 채워진 컬럼상에 성장 호르몬-유사물질 용액을 장입시키고, 출발 완충액을 사용하는 치환 세정으로부터, 그리고 공급 용액으로부터 병류 유출액을 수집하고 ; 고 염 및/또는 가성 알칼리 용액으로 컬럼 매질을 세정시켜 강하게 흡착시킨 종의 매질을 스트리핑시킨 다음, 다음 주기를 위한 매질을 재생시키는 것으로 구성되는, 단량체 성장 호르몬-유사 물질로부터 공유 및 비-공유 응집체를 분리시키는 강한 음이온 교환체-형 매질을 사용하는 병류 크로마토그래피법.
- 제1항에 있어서, 출발 완충액의 pH가 10.5 이상이고, 단순염이 출발 완충액내 50-250mM 농도의 염화나트륨인 방법.
- 제2항에 있어서, 완충액이 피페리딘 또는 포스페이트 염인 방법.
- 제3항에 있어서, 성장 호르몬-유사 물질이 재조합 또는 뇌하수체 소 또는 돼지 소마토트로핀인 방법.
- 제4항에 있어서, 정제될 성장 호르몬-유사 물질 용액이 조야(불순물이 많음)하거나, 비교적 순수(불순물이 적음)한 방법.
- pKa 약 11.5 및 단순염의 적절한 농도로 출발 완충액내에 매질을 평형시키고 ; 각각의 농도가 출발완충액과 동일한 정도가 되도록 정제될 성장 호르몬-유사 물질 용액에 적정량의 완충액 및 단순염을 첨가시키고 ; 매질로 채워진 컬럼상에 성장 호르몬-유사 물질 용액을 장입시키고 나서, 출발 완충액으로 치환세정하고 ; 이소크레틱(isocratic) 또는 기울기 방법을 사용하여 단량체 성장 호르몬-유사 물질을 용리시키고 ; 적절한 완충액으로 매질을 세정하고, 재생성시켜 강하게 흡착된 종을 제거하고, 다음 주기를 위한 매질을 준비하는 것으로 구성되는, 단량체 성장 호르몬-유사 물질로부터 공유 및 비-공유 응집체를 분리시키는 강한 음이온 교환체-형 매질을 적용하는 흡착/탈착 용리 크로마토그래피법.
- 제6항에 있어서, 출발 완충액의 pH가 10.5이상이고, 단순염이 50-1000mM 농도의 염화 나트륨인 방법.
- 제7항에 있어서, 완충액이 피페리딘 또는 포스페이트 염인 방법.
- 제8항에 있어서, 성장 호르몬-유사 물질이 재조합 또는 뇌하수체 소 또는 돼지 소마토트로핀인 방법.
- 제9항에 있어서, 정제될 성장 호르몬-유사 물질 용액이 조야(물순물이 많음)하거나 비교적 순수(불순물이 적음)한 방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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