KR890013178A - 인간의 콜로니 자극인자 - Google Patents

인간의 콜로니 자극인자 Download PDF

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KR890013178A
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토오루 히라토
사또루 나까이
홍영만
나오미 고오노
요시가쯔 히라이
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오스카 아끼히꼬
오스카 세이야꾸 가부시기가이샤
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    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
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Abstract

내용 없음.

Description

인간의 콜로니 자극인자
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 λ cM 5의 cDNA의 제한 효소에 대한 도면.
제2도는(제2-1∼2-4도)는 M 13파지를 사용한 디데옥시뉴클레오티드 사슬 종지법 및 맥삼-길버트(Maxam-Gilbert)화학적 변이법으로 측정한 cDNA의 뉴클레오티드의 결합 서열도.
제3도(제3-1와 3-2도)는 cDNA에 의하여 암호화된 M-CSF 선구단백질의 1차 구조도.

Claims (21)

  1. 한부분의 결핍이나 또는 전부 그냥 그대로, 다음과 같은 식(1)의 아미노산 결합서열에 대한 인간의 M- CSF 유전자 암호화를 발현해서 얻게되는 생물학적으로 활성이며 재조합한 인간의 M-CSF.
    식(1) :
    여기서 X는 Tyr 또는 Asp임.
  2. 제1항에 있어서, 언급된 인간의 M-CSF 유전자가 인간의 M-CSF 발현플라스미드들인 ptrpIL-2X·M·CSF 101, ptrpIL-2X·M·CSF 104, pCDM·CSF 11-dhfr·pCDM·CSF11-185dhfr·pcDM·CSF 11-177, pcDM ·CSF11-163 및 pcDM·CSF중의 하나에 속하는 재조합한 인간의 M-CSF.
  3. 제1항에 있어서, 언급된 인간의 M-CSF를 함유하고, 생물학적으로 활성인 인간의 M-CSF를 발현 가능한 발현플라스미드를 함유한 변환물의 배양 및 생성된 인간의 M-CSF에 대한 수집으로 이루어진 재조합한 인간의 M-CSF의 제조방법.
  4. 제3항에 있어서, 언급된 변환물이 CHO 세포를 숙주로 사용해서 얻게되는 공정.
  5. 제4항에 있어서, 그것의 발현플라스미드가 pcDM·CSF11-dhfr, pcDM·CSF11-dhfrRO, pcDM·CSF11-185-dhfr, pRSVS-MCSF 11-dhfr 및 pSV2s-MCSF 11-dhfr로부터 선택되는 공정.
  6. 제5항에 있어서, 언급된 공정으로 얻게되는 재조합한 인간의 M-CSF.
  7. 제1항에 있어서, 다음과 같은 물리화학적 특성을 갖는 제조합한 인간의 M-CSF. (a) 분자량 : SDS-PAGE에 의하여, 2-머캡토에탄을 존재하에 38000정도, 그리고 2-머캡토에탄올이 없을시는 76000정도. (b) 등전점 : pH 4.55 (c) N-말단 아미노산 결합서열 : Glu-Glu-Val-Ser-Glu-Tyr -.
  8. 제1항에 있어서, 다음과 같은 물리화학적 특성을 갖는 재조합한 인간의 M-CSF. (a) 분자량 : SDS-PAGE에 의하여, 2-머캡토에탄올 존재하에 22000과 27000정도, 그리고 2-머캡토에탄올이 없을시는 42000과 46000정도. (b) 등전점 : pH 3.5-4.6 (c) N-말단 아미노산 결합서열 : Glu- Glu-Val-Ser-Glu-Tyr -.
  9. 제3항에 있어서, 언급된 변환물이 숙주로 COS세포를 써서 얻게되는 공정.
  10. 제9항에 있어서, 언급된 발현플라스미드가, pcDM·CSF, pcDM,CSF-185, pcDM CSF-177,pcDM·CSF 11, pcDM·CSF 11-185, pcDM·CSF 11-177 및 pcDM·CSF 11-163으로부터 선택된 공정.
  11. 제10항에 있어서, 언급된 공정으로 얻게되는 재조합한 인간의 M-CSF.
  12. 제3항에 있어서, 언급된 변환물이 숙주로 대장균을 사용해서 얻게되는 공정.
  13. 제12항에 있어서, 언급된 인간의 M-CSF가 2-시스트톤으로 발현되는 공정.
  14. 제13항에 있어서, 그것의 발현플라스미드가 ptrpIL-2X·M·CSF 101, ptrpIL-2X·M·CSF 102, ptrpIL-2X·M·CSF 103, ptrpIL-2X·M ·CSF 104, ptrIL-2X·M·CSF 105 및 ptrpIL-2X·M·CSF106 으로부터 선택되는 공정.
  15. 제12항에 있어서, 인간의 M-CSF가 신호펩티드를 유용하게 하는 분비발현으로 발현되는 공정.
  16. 제15항에 있어서, 발현플라스미드가 PIN-III(IppP-5)-OmpA-MCSF 11-NV 151 또는 pIN-III(IppP-5)-OmpA-MCSF 11-NV 143인 공정.
  17. 제16항에 있어서, 언급된 공정으로 얻게되는 재조합한 인간의 M-CSF.
  18. 제1항에 있어서, 다음과 같은 물리화학적 특성을 갖는 재조합한 인간의 M-CSF. (a) 분자량 : SDS-PAGE에 의하여, 2-머캡토에탄올 존재하에 17000정도 그리고 2-머캡토에탄올이 없을시는 3000정도. (b) 등전점 : pH 4.8 (c) N-말단 아미노산 결합서열 : (Met)-Val-Ser-Glu-Tyr- 여기서(Met)는 존재하거나 존재않할 수 있음.
  19. 제1항에 있어서, 언급된 인간의 M-CSF유전자를 포함하고 생물학적으로 활성인 인간의 M-CSF의 발현이 가능한 발현플라스미드.
  20. 제19항에 있어서, 언급된 발현플라스미드가 ptrpIL-2X·M·CSF 101, ptrpIL-2X·M·CSF 102, ptrpIL-2X·M·CSF 103, ptrpIL-2X·M ·CSF 104, ptrpIL-2X·M·CSF 105, ptrpIL-2X·M·CSF106, pcDM·CSF11-dhfr, pcDM·CSF11-dhfrRO, pcDM·CSF11-185-dhfr, pRSVS-MCSF11-dhfr, pRSV2S-MCSF11-dhfr, pcDM·CSF11, pcDM·CSF11-185, pcDM CSF11-177, pcDM·CSF11-163, pcDM·CSF, pcDM·CSF-185, pcDM·CSF177, pIN-III(IppP-5)OmpA-MCSF11 NV151 또는 PIN-III(IppP-5)-OmpA-MCSF11-NV143인 경우.
  21. 제1항에 있어서, 언급된 인간의 M-CSF 유전자를 함유하고, 생물학적으로 활성인 인간의 M-CSF의 발현이 가능한 발현플라스미드를 함유하는 변환물.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019890001432A 1988-02-08 1989-02-08 인간의 콜로니 자극 인자 KR0123892B1 (ko)

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