KR890001487B1 - 푸린 유도체의 제조방법 - Google Patents

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내용 없음.

Description

푸린 유도체의 제조방법

본 발명은 9-위치에 비환식 쇄를 함유하는 항비루스성의 푸린 유도체에 관한 것이다.

영국 특허 명세서 제1523865호에는 9-위치에 비환식 측쇄를 함유하는 여러부류의 푸린 유도체에 대해 기술되어 있는데, 이런 푸린 유도체는 DNA비루스류, 특히 헤르페스비루스(예 : 단순 헤르페스)에 대한 항비루스성 활성을 가지는 것으로 밝혀졌다.

이러한 유도체중에서, 9-(2-히드록시에톡시메틸) 구아닌(아시크로비르라고 공지되어 있음)은 특히 단순헤르페스 등의 헤르페스 비루스에 대한 탁월한 활성을 가지는 것으로 밝혀졌다. 그러나, 아시콜로비르는 국소투여 또는 비경구적 투여에는 매우 효과적인 반면, 이를 경구투여하면 혈장내에서 대응하는 함량으로 흡수가 일어난다. 즉, 내부 질병시 경구투여로 치료를 하게 되면, 투여용량에 의해 혈장의 농도가 높게 유발되면서 위장에서 흡수가 일어난다.

푸른 핵의 6-위치에 수소원자가 존재하는 푸린 유도체는 생체내에서 몰리브도-플라보-단백질 형의 효소(특히 크산틴 산화효소/탈수소 효소 또는 알데히드 산화효소)작용에 의해 항 비루스 활성을 가진 대응하는 6-히드록시 푸린 유도체로 쉽게 전환될 수 있는 것으로 밝혀졌다. 더우기, 쥐에 대한 실험으로부터, 상기 6-수소 유도체를 경구투여하면 6-수소화합물의 전환 효소에 의해 형성된 대응하는 6-히드록시 화합물의 농도가 높아지며, 또한 위장관에서의 흡수도 충분하게 일어난다는 것을 알게되었다. 예를 들면, 아시클로비르의 6-수소 유사물인 데옥시아시클로비르(즉, 2-아미노-9-(2-히드록시에톡시메틸)푸린은 아시클로비르보다 물에 대한 용해도가 훨씬 커서, 전자의 6-데옥시아시클로비르 화합물은 25℃에서 50㎎/ml의 용해도를, 후자의 아시클로비르는 25℃에서 1.23㎎/ml의 용해도를 갖는다. 그러므로 6-데옥시아시클로비르의 향상된 물에 대한 용해도 때문에 약제의 용화성이 필요한 여러 수성약학제제에 사용될 수 있다.

상술된 6-수소 푸린 유도체 부류 및 R²가 히드록시 또는 히드록시알킬, R⁴가 히드록시, 히드록시알킬 또는 카르복시프로 피오닐옥시 이거나 R⁵가 히드록시알킬인 상기 푸린 유도체 화합물의 에스테레르, 및 상기 푸린 유도체의 생리학적으로 허용되는 염 및 그 에스테르 화합물은 하기 일반식(Ⅰ)로 표시할 수 있다.

상기식에서,X는 황 또는 산소, 또는 하나의 화학결합이고 : R¹는 할로겐, 아미노 또는 아지도이며 : R²는 수소, 히드록시, 알킬 또는 히드록시알킬이며 : R³는 수소 또는 알킬이며 : R⁴는 히드록시, 히드록시알킬, 벤질옥시, 포스페이트 또는 카르복시 프로피오닐옥시이며 : R⁵는 수소, 알킬 또는 히드록시알킬이다.

상기식(Ⅰ)에서, 알킬기는 직쇄 또는 측쇄로서 1-8개의 탄소 원자, 바람직하게는 1-4개의 탄소원자를 함유하며, 예로는 메틸기를 들수 있다. 일반식(Ⅰ)의 화합물 부류중에서 바람직한 화합물은 하기 일반식(ⅠA)의 화합물과 이의 생리학적으로 허용되는 에스테르 및 그 염이다.

상기 식에서, X는 산소 또는 황원자이고, Y는 수소원자 또는 히드록시메틸기이다.

치료에 사용될 수 있는 일반식(Ⅰ)의 화합물의 염에는 락트산, 아세트산, 밀산 또는 p-톨루엔술폰산과 같은 유기산의 생리학적으로 허용되는 염 뿐만아니라 염산 또는 황산과 같은 무기산의 생리학적으로 허용되는 염도 포함된다.

치료에 사용될 수 있는 일반식(Ⅰ)의 화합물의 에스테르에는 일반식(Ⅰ)의 화합물의 9-측쇄의 말단 위치 하나또는 둘 모두에 포르밀옥시 또는 C_1-16(예를 들면, C_1-6)알카노일옥시(예를 들면 아세톡시 또는 프로피오닐옥시)를 함유하거나, 아르알카노일옥시(예를 들면, 페닐-아세톡시 등과 같은 페닐-C_1-4알카노일옥시)에스테르기로 선택 치환되거나, 아로일옥시(예를 들면, 벤조일옥시 또는 나프토일옥시)에스테르기로 선택 치환된 화합물이 포함된다. 상기 아르알카노일옥시 및 아로일옥시 에스테르기는 하나 이상의 할로겐(예 : 염소 또는 브롬)원자 또는 아미노, 니트릴 또는 설파미도기, 6-10개의 탄소원자를 함유하는 아틸기로 치환될 수 있다.

또한, 본 발명에는 일반식(Ⅰ)의 생체성 전구물질과 이의 생리학적으로 허용되는 염 및 에스테르기의 생체성 전구물질, 즉 생체내에서 일반식(Ⅰ)의 화합물 및 상술된 유도체로 전환되는 화합물도 포함된다.

특히, 바람직한 일반식(Ⅰ)의 화합물로는 2-아미노-9-(2-히드록시 에톡시메틸)-9H-푸린 및 2 -아미노-9-[(2-히드록시-1-히드록시에톡시)메틸]-9H-푸린이 있다.

2-아미노-9-(2-벤조일옥시 에톡시메틸)푸린(즉, X가 산소 원자이고 Y가 수소원자인 일반식(Ⅰ)의 화합물의 벤조에이트 에스테르)은 미합중국 특허 명세서 제4,199,547호의 내용에는 명시되어 있으나, 특허청구범위에는 청구하고 있지 않다. 그러나, 상기 미합중국 명세서에는 상기 화합물이 생체내에서 대응하는 6-히드록시 유사물로 전환될 수 있다는 사실에 대해서는 전혀 언급되어 있지 않다.

상기 6-수소 푸린이 대응하는 6-히드록시 푸린으로 쉽게 전환될 수 있다는 발견은 우유로부터의 크산틴산화효소에 대한연구(H Lettre et al(1967)Biochem. Pharmacol., 16, 1747-1755 : T.A.Krenitsky et al(1972) Arch. Biophys., 150, 585-599)이래 매우 획기적인 연구로서, 9치환체는 각종 푸린의 산호율을 소멸시키거나 대폭 감소시키는 것으로 나타났다. 또한, 효소에대한 연구가 진행됨에 따라, 상기크산틴 효소는 6-데옥시아클로비르(2-아미노 푸린의 9-치환 유도체)를 9-비치환 푸린보다 빠른 속도로 산화시킴을 알게 되었다.

위장에서의 일반식(Ⅰ) 화합물의 흡수정도가 높기 때문에 이 화합물은 헤르페스 감염(예 : 단순 헤르페스, 수두 또는 대상포진)등의 DNA비루스, 기대세포 비루스에 의해 유발되는 질병의 치료 뿐만 아니라 간염 B 또는 엡스타인-바르비루스에 의해 유발되는 질병의 치료시에 경구투여하면 매우 효과적이다. 또한 일반식(Ⅰ) 화합물은 사람의 치료에 뿐만 아니라, 포유동물의 동물에서 비루스 질병의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다. 예를 들면, Y가 히드록시메틸인 일반식(Ⅰ) 화합물은 말의 비폐염(equine rhinopneumonitis)의 치료에 특히 유용하다. 또한, 일반식(Ⅰ) 화합물이나 이의 생리학적으로 허용되는 염 또는 에스테르도 경구 투여하면, 상기 질병에 대한 효과적인 효능을 얻을 수 있다.

즉, 본 발명의 여러 특징에 의하면 일반식(Ⅰ) 화합물과 이의 생리학적으로 허용되는 염 또는 에스테르는 사람등의 포유동물의 비루스 질병의 예방 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있다.

본 발명은 또한 동물(예 : 포유동물 및 사람)의 비루스 질병에 대한 예방 또는 치료방법에 관한 것으로, 일반식(Ⅰ) 화합물 또는 이의 생리학적으로 허용되는 염 또는 에스테르를 항 비루스 작용에 효과적인 유효량을 동물에 투여하는 방법에 관한 것이다.

일반식(Ⅰ)의 화합물과 이의 생리학적으로 허용되는 염 또는 에스테르(이하,활성 성분으로 공동 칭한다)는 치료 조건에 따라 적합한 방식으로 투여할 수 있으며, 적합한 투여 방식에는 경구투여, 직장투여, 비강투여, 국소투여(예 : 구강투여 및 설하투여), 질투여 및 비경구투여(예 : 피하투여, 근육내투여, 정맥내투여, 피내투여, 포막내투여 및 뇌막투여)등이 있다. 그런데, 이러한 바람직한 투여 방식은 수용체의 상태에 따라 다르다.

상술된 각 용도 및 처방에 있어서, 활성성분의 필요량은 치료상태의 경중 및 수용체의 종별등의 여러 요소에 의해 다르며, 결국 주치의나 수의사 등의 지시에 따른다. 그러나, 일반적으로 적합한 하루의 유효 용량은 수용체의 ㎏체중당 0.1-250㎎, 바람직하게는 수용체의 ㎏체중당 1-100㎎, 가장 바람직하게는 수용체의 ㎏체중당 5-20㎎이며, 하루의 최적 용량은 수용체의 ㎏체중당 약 10㎎이다(상기의 활성 성분의 모든 중량은 일반식(Ⅰ)의 모체 화합물(또는 이의 염 및 에스테르)의 중량이며, 적당하게 증가시킬수도 있다.) 하루에 2번, 3번, 4번 또는 그 이상으로 그 유효 용량을 분할투여하는 것이 바람직하다. 상기의 분할투여 용량은 단위 투약형태로 투여되며, 단위투약 형태당 10-1000㎎의 활성성분을, 바람직하게는 20-500㎎의 활성성분을, 가장 바람직하게는 100-400㎎의 활성 성분을 함유한다.

활성 성분을 단독 투여할 수도 있지만, 악학제제로 투여하는 것이 바람직하다. 본 발명의 수의용 및 인체용 제제는 전술한 적어도 하나의 활성 성분과 약학적으로 허용되는 하나 이상의 담체로 구성되며 기타 치료학적 성분을 선택적으로 함유한다. 담체는 약학제제의 다른 성분과 서로 모순되는 성질이 없어야 하며, 또한 이의 수용체에 역효과를 주지 않는 생리학적으로 허용되는 물질이어야 한다.

약학제제는 경구투여, 직장투여, 비강투여, 국소투여(예 : 구강투여 및 설하투여), 질투여 또는 비경구투여(예 : 피하투여, 근육내투여, 정맥내투여, 피내투여, 포막내투여 및 뇌막투여)에 적합한 제제가 포함된다. 일반적으로, 약학제제는 단위 투약형태로 존재하며, 공지된 약학적 방법으로 제조할 수 있다.

상기 방법에는 하나 이상의 부가성분으로 구성되는 담체와 상기 활성 성분을 결합시키는 단계가 포함된다. 일반적으로, 약학제제는 상기 활성 성분을 액체 담체 또는 미분 고체 담체 또는 두 담체를 균일하게 결합시키고, 필요에 따라 생성물을 형상화하여 제조한다.

경구투여용으로 적합한 본 발명의 약학제제는 소정량의 활성 성분을 함유한 캡슐, 카세 도는 정제와 같은 개별 유닛으로 : 분말이나 과립형으로 : 수성액 또는 비수성액중의 현탁액 또는 용액으로 : 또는 수내유 유탁액 또는 유내수 유탁액으로 존재한다. 또한, 활성 성분은 거환, 연약 또는 페이스트로서 존재한다.

정제는 임의의 하나 이상의 부가성분과 함께 압착 또는 타정하여 제조할 수 있다. 압착 정제는 분말 또는 과립형과 같은 자유 유동형태의 활성 성분을 임의의 결합제, 윤활제, 불활성 희석제, 방부제, 계면 활성제 또는 분산제등과 함게 적합한 장치로 압착하여 제조할 수 있다. 타정 정제는 불활성 액체 희석제와 습윤된 분말형 화합물이 혼합물을 적합한 장치로 타정ㅇ하여 제조할 수 있다. 정제는 정제내의 활성 성분이 서서히 방출되도록 피복하여 제제화할 수 있다.

눈 또는, 다른 외부조직(예 : 입 및 피부)의 질병시, 제제는 0.075-20% w/w, 바람직하게는 0.02-15% w/w 가장 바람직하게는 0.5-10% w/w의 활성 성분을 함유하는 국소용 연고 또는 크림으로 제조되는 것이 바람직하다. 연고로 제조될 때, 활성 성분은 파라핀성 도는 수혼화성 연고 기제와 함게 사용된다. 또는 활성 성분은 수내유 크림 기제와 함께 크림으로 제제화 할 수도 있다.

필요에 따라, 크림 기제의 수상에는 최소한 30% w/w의 다가 알콜, 즉 프로필렌글리콜, 부탄1.3-디올, 만니톨, 소르비톨, 글리세롤 및 폴리에틸렌과 이의 혼합물 등과 같이 2개 이상의 히드록실기를 함유한 알콜을 함유랑 수 있다. 국소용 약학제제는 피부또는 다른 치료영역에 활성 성분의 흡수력이나 침투력을 향상시킬수 있는 화합물을 포함시키는 것이 바람직하다. 이런 피부에 대한 침투력을 향상시킬수 있는 물질의 예로는 디메틸설폭사이드 및 이와 관련된 유사물이 있다.

본 발명의 현탁액의 유상은 공지된 방법에 따라 공지된 성분으로 구성시킬 수 있다. 상기의 유상은 단지 한 성분의 유화제(에멀전트로서 공지됨)로 구성될 수도 있지만, 적어도 하나 이상의 유학제와 지방 또는 오일 또는 양자와의 혼합물로 구성되는 것이 바람직하다. 친수성 유화제에는 안정제로서 작용하는 친유성 유화제를 함게 포함하는 것이 바람직하다. 또한, 오일과 지방을 함께 포함하는 것이 바람직하다. 안정제의 유무에 관계없이 유화제는 유화 왁스를 구성하며, 왁스는 오일 및/또는 지방과 함께 크림제제의 유분산상을 형성하는 유화연고를 구성한다.

본 발명의 제제에 사용되는 유화제와 유화 안정제에는 트윈60(Tween 60), 스판 80(Span 80), 세토스테아릴알콜, 미리스틸알콜, 글리세릴 모노-스테아레이트 및 나트륨 라우릴 설페이트가 포함된다.

제형시 사용되는 오일 또는 지방의 선택은 목적하는 제제의 성질에 따라 다른데, 그 이유는 약학적 유화제제에 사용되는 대부분의 오일중에서는 활성 성분의 용해도가 매우 낮기 때문이다. 또한, 크림은 튜브 또는 기타 용기로부터 크림이 누출되지 않을 정도의 농도를 가진 비윤활성, 비오염성의 세척이 용이한 제품이 바람직하다. 이로서, 디-이소아디페이트, 이소세틸 스테아레이트, 코코닛 지방산의 프로필렌글리콜 디에스테르. 이소프로필 미리스테이트, 데실 올레이트, 이소프로필 팔미테이트, 부틸스테아레이트, 2-에틸헥실 팔미테이트 또는 Crodamol CAP로 알려진 측쇄 에스테르의 혼합물과 같은 촉쇄 또는 직쇄, 모노-또는 디-염기성 알킬 에스테르를 사용 할수 있으며, 이중 부틸 스테아레이트, 2-에틸헥실 팔미테이트 또는 Crodamol CAP로 알려진 측쇄 에스테르의 혼합물이 바람직하다. 이런 물질들은 필요성질에 따라 단독으로, 또는 조합해서 사용할 수 있다. 또한 백색 연성 및/또는 액체 파라핀 또는 기타 무기오일 등의 높은 융점을 갖는 지방도 사용할 수 있다.

눈의 국소투여에 적합한 제제에는 활성 성분이 적합한 담체, 특히 활성 성분용의 수용성 용매에 용해되어 있거나 현탁되어 있는 점안액이 있다. 상기 제제에서, 활성 성분의 농도는 0.5-20% w/w, 바람직하게는 0.5-10% w/w, 특히 약 1.5% w/w바람직하다.

입의 국소투여에 적합한 제제에는, 미향기제, 일반적으로 수크로오스 및 아카시아 또는 트라가칸트에 활성 성분이 함유되어 있는 로제지 : 불활성 기제(예 : 젤라틴 및 글리세린, 또는 수크로오스 및 아카시아 )에 활성 성분이 함유되어 있는 패스틸 그리고 적합한 액체 담체에 활성 성분이 함유되어 있는 목가심약 등이 있다.

직장투여용 제제는 코코아 버터 또는 살리실레이트 등이 함유되어 있는 적합한 기제와 함게 좌약으로 제조할 수 있다.

담체가 고체인 비강 투여용 제제에는 20-500마이크론의 입자 크기를 갖는 조 분말이 포함되는 데, 이는 냄새를 흡입하는 방법, 즉 분말이 든 용기를 코 가까이에 대어 냄새를 흡입하는 방법으로 투여한다. 비강 분무제 또는 비강 점적제로서 투여되는 담체가 액체인 제제에는 활성 성분의 수용액 또는 유성용액이 포함된다.

질투여에 적합한 제제는 공지된 적합한 담체와 활성 성분을 함유하는 페서리, 탐폰, 크림, 젤, 페이트스, 포말 또는 분무제제 등이 있다.

비경구 투여에 적합한 제제에는 항 산화제, 완충용액, 제균제 및 제제를 수용체 혈액내에 균일하게 침투시키는 용질을 함유라는 수성 무균주사용액및 비수성 무균 주사용액 : 현탁제와 농후제를 함유하는 수성 및 비수성의 무균 현탁액이 있다. 제제는 단위 용량 또는 다회 용량의 용기, 에를 들면 밀봉 앰플 및 바이알내에 장입할 수 있으며, 사용직전 주사용 수와 같은 무균액체 담체의 첨가만을 필요로 하는 동결건조상태로 보관할 수 있다. 즉석의 주사용 용액과 현탁액을 상술된 무균 분말, 과립형 및 정제형으로 제조할 수 있다. 바람직한 단위 용량형 제제에는, 전술한 바와 같이 일일용량 또는 일일단위 분할용량 또는 이들의 적합한 분량의 활성 성분을 함유하는 것들이 있다.

본 발명의 상술된 제제의 성분과 더불어 제제의 종류에 따라 종래의 다른 성분이 포함될 수 있는데. 예를 들면 경구투여용의 다른 성분으로 미향제를 포함할 수 있다.

본 발명은 또한 상술된 최소한 하나 이상의 활성 성분과 수의학 담체로 구성되는 수의학 조성물에 관한 것이다.

수의학적 담체는 조성물을 투여하는데 유용한 물질로서, 수의학적 면에서 불활성이거나 허용 가능하며 활성 성분과 상용성인 고체, 액체 또는 기체상 물질이다. 수의학적 조성물은 경구, 비경구 또는 여러 적합한 방식으로투여 할 수 있다.

경구투여용 조성물은 정제, 과립형, 물약, 페이스트, 카세, 캡슐 또는 사료 보조제형으로 제조할 수 있다. 과립형은 공지된 방법의 습윤 과립화 방법, 예비압축법 또는 슬러깅 방법 등에 따라 제조된다. 이 조성물은 불활성 액체 담체와 함께 물약 형태로 또는 물 혹은 오일 기제와의 현탁액으로 동물에 투여할 수 있다. 분산제와 같은 부가의 보조성분을 포함하는 것이 바람직하다. 이러한, 제제는 15-85%의 활성 성분을 함유하는 것이 바람직하다.

페이스트는 액체 희석제속에 활성 성분을 현탁시킴으로써 제조할 수 있다. 액체 희석제가 물인 경우, 연석제 또는 습윤제와 함께 강직제 또는 농후제도 포함할 수 있다. 유화페이스트가 필요한 경우에는, 하나 이상의 계면활성제를 포함하여야 한다. 이러한 페이스트 제제의 25-80중량%는 활성 성분으로 구성된다.

사료 보조제에 있어서, 활성 성분은 일반적으로 보조 성분에 비례하여 상당히 많은 양으로 존재하며, 보조제는 혼합 또는 희석 즉시 혹은 직후에 첨가할 수 있다. 이러한 제제의 보조 성분의 예에는 옥수수 가루, 콩가루, 밀, 콩 그리트, 식용채소 및 발효 자유물 등의 고체, 경구적으로 흡수 가능한 담체가 포함된다. 통상적으로, 활성 성분은 하나 이상의 보조성분에 첨가되며, 종래 장치로 혼합, 텀블링 또는 교반 등에 의해 균일하게 분산된다. 1-90중량 퍼센트의 활성 성분을 함유하는 제제가 사료에 첨가하는데 적합하다.

말의 헤르페스 질병치료에 있어서, 경구 또는 비경구투여 용량은 ㎏체중당 0.1-250㎎, 바람직하게는 2-100㎎이다. 투여용량은 하루에 일정한 간격을 두고 나누어 단위 용량으로 투여할 수 있으며, 질병이 회복될 때까지 또는 14일째까지 매일 반복해서 투여한다. 또 다른 동물의 비루스 질병에 있어서, 투여량은 동물의 크기와 대사작용에 따라 다르다. 조성물은 단위 용량당 10-100㎎이 함유된 정제 등의 단위 투여형태로 1일 수회 투여할수 있다.

일반식(Ⅰ)의 화합물과 이의 생리학적으로 허용되는 염 및 에스테르는 종래의 유사구조 화합물의 제조방법에 따라 제조할 수 있으며, 이러한 방법에 대해서는 영국 특허 명세서 제1523865호에 명시되어 있다.

또한, 본 발명은 하기의 방법 (a) 내지 (f)에 의해 일반식(Ⅰ)의 화합물 또는 약학적으로 허용되는 그의 염 및 에스테르를 형성시킨후, 필요에 따라 하기의 하나 전환 공정(ⅰ) 내지 (ⅳ)를 선택적으로 행하는 일반식(Ⅰ)의 화합물 및 약학적으로 허용되는 그의 염 및 에스테르의 제조방법에 관한 것이다.

a)하기식(Ⅱ)의 화합물을 탈블록화 시킨다.

상기식에서, X와 R³는 상기 정의와 같으며,

은 아미노 또는 블록된 아미노기이며,

및

는 동일하거나 상이한 것으로서, 각각 히드록시기, 히드록시알킬기, 블록된 히드록시기, 또는 블록된 히드록시알킬기이고,

는 히드록시알킬 또는 블록된 히드록시알킬기이며,

,

,

및

중 적어도 하나는 블록된 기이어야 한다.

b) 하기 일반식(Ⅲ)의 화합물 또는 그의 염 및 에스테르를 일반식(Ⅰ)의 화합물(R¹은 아미노기이다)또는 생리학적으로 허용되는 그의 염 및 에스테르로 전환시킨다 ;

상기식에서, X, R², R³,R⁴및 R⁵는 상기 정의와 같으며, M은 수소원자 또는 수소원자로 전환될 수 있는 기 또는 원자이며, G는 아미노기로 전환될 수 있는 기 또는 원자이거나, M이 수소 이외의 다른 기일 때는 아미노기이다.

c) 하기 일반식(Ⅳ)의 화합물을 일반식(Ⅴ)의 화합물과 반응시킨다 ;

상기식에서, Q는 이탈원자 또는 이탈기이며, X, R², R³및 R⁵는 상기 정의와 같으며, A는 이탈기 또는 이탈원자이고, B는 선택적으로 보호된 히드록시기이다.

d) 불완전하게 형성된 피리미딘 또는 이미다졸고리를 가지는 화합물을 고리닫힘화시킨다 ;

e) 하기 일반식(Ⅵ)의 화합물또는 그의 염 에스테르를 환원시켜서 일반식(Ⅰ)의 화합물(Y는 히드록시메틸기이다)또는 그의 생리학적으로 허용되는 염 및 에스테르를 형성시킨다.

상기식에서, X, R², R³,R⁴및 R⁵는 상기 정의와 같다.

f) 하기 일반식(Ⅶ)의 화합물을 대응하는 일반식(Ⅰ)의 화합물(R⁴는 히드록시기이다)로 전환시킨다 ;

상기식에서, X, R², R³,R⁴및 R⁵는 상기 정의와 같다. 전환방법은 하기와 같다.

ⅰ) 생성물이 염기인 경우, 이 염을 생리학적으로 허용되는그의 산부가염으로 전환시킨다 ;

ⅱ) 생성물이 산부가염인 경우, 이 염을 모체 염기로 전환시킨다 ;

ⅲ) 생성물이 일반식(Ⅰ)의 화합물 또는 그의 염인 경우, 이 화합물 또는 그의 염을 생리학적으로 허용되는 상기 화합물의 에스테르 또는 염으로 전환시킨다 ; 그리고/ 또는 ⅳ) 생성물이 일반식(Ⅰ)의 화합물의 에스테르인 경우 ; 이 에스테르를 일반식(Ⅰ)의 화합물, 생리학적으로 허용되는 그의 염 또는 다른 생리학적으로 허용되는 그의 에스테르로 전환시킨다

방법 a)에 있어서, 블록킹기는 C_1-4알카노일기(예 : 아세틸 또는 피발로일), 아로일기(예 : 벤조일)와 같은 아실기 ; 아릴메틸기(예 : 벤질) ; 또는 트리- C_1-4알킬실기(예 : 트리메틸실리)기로 부터 선택할 수 있다. 아릴메틸블록킹기는 가수소분해, 즉 라니 니켈 또는 팔라듐 촉매 존재하에서의 수소화시키거나 암모니아수중의 나트륨을 사용하여 제거할 수 있다. 아실블록킹기는 수용성 매질중에서 아민(예 : 메틸아민 또는 트리메틸아민)을 사용하여 가수분해 시킴으로써 제거할 수 있다. 트리알킬실릴블록킹기는 알콜성 암모니아 또는 수성 암모 니아에 의해 가용매 분해시키거나 가알콜 분해시켜 제거할 수 있다.

또한,

가 불록된 히드록시메틸기이고,

가 블록된 히드록시기인 경우, 통상의 방법, 즉 하기 일반식 VIII의 화합물에서와 같이 블록키을 행할 수 있다.

(상기 식에서, X, R¹및 R⁵는 상기 정의와 같다.)

탈 블록킹은 염기성 조건하에서 가수분해, 바람직하게는 유기아민(예: 메틸아민 또는 트리에틸아민)의 처리에 의해 행할 수 있다.

방법 b) 에 의한 일반식(III) 화합물의 일반식(I) 화합물로의 전환은 여러 종래의 방법에 의해 행할 수 있다. 예를 들면 G는 적합한 촉매(예 : 팔라듐)을 사용하여 촉매성 수소화 반응에 의해 아미노기로 환원시킬 수있는 아지드기이다. 또한, G는 암모니아 등을 사용하여 기아미노 분해에 의해 아미노기로 전환시킬 수 있는 할로겐원자, 알킬티오기 또는 알킬술포닐기이다. M은 종래 방법에 의해 수소 원자로 전환시킬수 있는 할로겐(예 : 염소)원자, 메르캅토기, 또는 티오(s＜)기이다. M이 티오기일 때, 아마노 또는 히드록실기가 아실기에 의해 선택적으로 블록된 일반식(II)의 화합물을 사용하여 전환시킬 수 있으며, 방법 a)에 따라 아미노 및/또는 히드록시 블록킹기를 부가적으로 제거하는 염기성 매질중에서 라니 니켈 촉매를 사용하여 전환시킬 수도 있다.

다른 종래의 방법과 더불어 상기의 방법들은 Fused Pyrimidines Part III, Purines Ed.D.J.Brown(1971), Wiley-Intrescience에 명시되어 있다.

방법 c)에서, 일반식(IV)의 Q기는 수소원자 : C_1-4알카노일기(예 : 아세틸기) 또는 알로일기(예 : 벤조일기)등의 아실기 ; 또는 트리-C_1-4알카실릴기(예 : 트리메틸실릴기)이다. 일반식(IV)의 기 A는 할로겐원자(예 : 염소)또는 아실부가 C_1-4알카노일기(예 : 아세틸기) 또는 알로일기(예 : 벤조일)인 아실옥시기이다. 반응은 강한 극성 용매(예 : 디메틸포름아미드 또는 헥사메틸포스포르아미드)중에서, 바람직하게는 염기(예 : 트리에틸아민 또는 탄산칼륨)의 존재하에서 행한다. 또한 열 축합 반응을 강한(예 : 황산)의 존재하에서 일반식(IV)와(V)의 화합물을 가열함으로써 행할 수 있다.

방법 d)는 최종 생성물을 제조하기 위해 이미다졸고리 또는 피리미딘고리를 고리닫힘화 시키는 것을 포함한다. 이미다졸고리의 경우에는, 적합한 선구 물질과 C₁시약(예 : 트리에틸 오르토포르메이트)을 약산성 조건 및 25℃의 온도에서 여러시간동안 반응시킴으로써 성취할 수 있다. 적합한 선구 물질은 하기 일반식(VI)의 치환된 피리미딘이다 :

또한, 약 100℃의 중성 조건에서 10-15분간 반응시키는 것이 바람직한 경우에, 시약으로는 디에톡시메틸아세테이트를 사용한다.

방법 e)에서 일반식(IV)의 화합물의 환원은 적합한 알데히드 환원제(예 : 나트륨 보로하이드라이드, 나트륨시아노보로하이드, 라이드테트라에틸암모늄 보로하이드라이드 또는 피리딘/디보란/테트라 하이드로푸란/트리플루오로아세트산)와 반응시켜서 행할 수 있다.

방법 f)에서, 전환은 일반식(VII)의 아미노 화합물을 산성 매질중에서 니트라이트(예 : 나트륨 니트라이트)로 처리함으로써 행할 수 있다.

상술된 여러방법에 사용되는 출발 물질은 종래 방법, 예를 들면 전술한 영국 특허 명세서 제1523865호에 기술된 방법에 따라 행할 수 있다.

[실시예 1]

2-아미노-9(2-히드록시에톡시메틸)-9H-푸린

2.48g(7.13mM)의 2-아미노-6-클로로-9-(2-벤조일옥시에톡시메틸)푸린, 250ml의 무수에탄올, 1.9ml의 트리에틸아민과 차콜상의 5%팔라듐 0.6g의 혼합물을 실온에서 초기압력 50p.s.i.의 수소 압력하에서 20시간동안 진탕하였다. 혼합물을 여과한 후, 0.256g의 새로운 팔라듐 촉매와 1.9ml의 트리에틸아민을 첨가하고, 이 혼합물을 부가의 16시간동안 수소하에서 진탕하였다.

셀라이트의 패드를 통해 여과시킨 후, 에탄올성 용액을 진공증발시키고, 생성된 백색 고체를 끓고 있는 벤젠으로 수회 추출하였다. 벤젠 추출물은 농축시키고, 20ml의 40% 메틸아민 수용액과 20ml의 메탄올과 혼합하여 스팀배스상의 개방 플라스크 속에서 증발건조시켰다. 생성된 혼합물을 에테르와 함께 연마하여 N-메틸벤즈아미드를 제거한 후, 100%의 에탄올로 재결정화하여 순수한 백색 과립형의 2-아미노-9-(2-히드록시에톡시메틸)-9H-푸린을 수득하였다(융점=186-187.5℃.

[실시예 2]

2-아미노-9-(2-히드록시에틸티오메틸)-9H-푸린

자기 교반 막대와 CaCl₂건조튜브가 부착되어 있는 1l의 둥근 바닥 플라스크에 5.0g(29.5mM)의 2-아미노-6-클로로-푸린, 6.8g(29.50mM)의 2-(클로로메틸티오)에틸 벤조에이트, 4.07g(29.50mM)의 탄산칼륨과 750ml의 무수디메틸 포름아미드를 장입하였다. 16시간동안 실온에서 교반시킨 후, 2.0g(8.7mM)의 2-(클로로메틸티오)에틸 벤조에이트와 1.2g(8.7mM)의 탄산칼륨을 첨가하고 실온에서 부가의 24시간동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 소결 유리 깔대기속에 있는 셀라이트 패드를 통해 여과시킨 후, 진공회전 증발시켜서 점성의 노란색 오일을 얻었다.

오일은 20.0g의 메르크 실리카겔60(70-230메쉬)에 흡착시키고, 이 예비 흡착상을 메르크 실리카겔60(230-400메쉬)칼럼의 상부에 장입하였다. 6 : 4의 에틸 아세테이트-벤젠을 사용하여 칼럼을 용리시켜서 회백색고체의 2-아미노-9-(2-벤조일옥시에틸티오메틸)-6-클로로-9H-푸린을 수득하였으며, 이것은 8 : 2의 에틸 아세티이트-헥산을 사용하여 실리카겔 상에서 TCL시킨 결과 단일물질로 확인되었다.¹H NMR(CDCI₃) : 8.0-7.15, 6H, 다중상태 ; 5.1, 4H, 넓은 단일상태 ; 4.5, 2H, 삼중상태 ; 2.985, 2H, 삼중상태.

최종 생성물(0.98g, 2.70mM)을 2.5g의 Pd(OH)₂촉매, 50ml의 트리에틸아민 및 200ml의 메탄올과 함께 500ml들이 Parr수소화 반응기에 장입하였다. 실온에서 16시간동안 50p.s.i.의 수소 압력하의 Parr수소반응기내에서 진탕하였다. 8%메탄올-에틸 아세테이트를 사용하여 실리카상에서 TCL시킨 결과 가수소분해 생성물은 부분 반응만이 일어난 것으로 나타났다. 촉매는 소결 유리 깔때기의 셀라이트 패드를 통해 여거하고 2.0g의 새로운 Pd(OH)₂촉매와 7.0ml의 트리에틸아민을 첨가한 후, 반응 혼합물을 20시간동안 50 p.s.i.의 수소 압력하에서 다시 진탕하였다. 이 단계에 이른 후의 t.l.c에 의하면 반응이 완결된 것으로 나타났으며, 상기와 마찬가지의 방법으로 촉매를 제거하고, 진공회전 증발시켜서 메탄올을 제거하여 유리병을 깨끗이 한후, 이 유리병에 20%의 메틸아민을 함유하는 100ml의 1 : 1메탄올-물 용액을 장입하였다. 생성된 용액을 4시간동안 실온에서 교반한 후, 진공회전 증발시켜서 비결정질의 고체를 수득하였다. 이 고체를 10.0g의 70-230메쉬 메르크 실리카겔 60의 흡착시킨후, 이 예비 흡착상을 230-400메쉬 메르크 실리카겔 60의 칼럼 상부에 장입하였다. 10%의 메탄올 에틸 아세테이트를 사용하여 칼럼을 용출시켜서 고체를 수득하였으며, 에틸 아세테이트-헥산으로 결정화하여 침상의 표제 화합물을 수득하였다(융점 : 122-124℃).

t.l.c ; 15%의 메탄올 : 에틸 아세테이트에 의해 실리카겔 상에서 1스폿.

¹H NMR(dmso-d₆) : 8.59, 1H단일상태 ; 8.15, 1H단일상태 ; 6.56, 2H 넓은 단일상태 ; 5.24, 2H단일상태 ; 4.83, 1H삼중상태 ; 3.49 2H다중상태 ; 2.69, 2H, 다중상태.

분석 ; 이론치 : C 42.65 H 4.95 N 31.09

실측치 : C 42.70 H 4.94 N 31.04

[실시예 3]

a) 2-아미노-9-[(2-벤조일옥시-1-벤조일옥시메틸에톡시)메틸]-6-클로로-9H-푸린

7.0g의(41.2mM)의 2-아미노-6-클로로-9H-푸린, 4.55g(34.4mM)의 암모늄 설페이트 및 200ml의 헥사메틸디실라잔의 혼합물을 질소하에서 서로 화합시키고, 5시간동안 교반하면서 환류시켰다. 혼합물을 순간 증발시킨 후, 약 10ml의 벤젠중의 8.8g(23.6mM)의 2-0-(아세틸메틸)-1,3-비스-(0-벤조일) 글리세롤을 첨가하였다. 이 혼합물을 상부에 분별 증류기가 부착되어 있는 흡인기 입력하의 오일 배스내에서 1.5시간동안 가열하였다. 다음, 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 30분동안 스팀배스상에 두었던 혼합물에 첨가한 후, 혼합물을 물로 세정하고, 에틸 아세테이트로 3호 추출하여 유기층을 약30분간 무수 황산 마그네슘으로 건조시켰다. 이이서, 혼합물을 여과하고, 염을 에틸 아세테이트로 세정한 후, 순간 증발시켰다. 6 : 1의 CH₂Cl₂/아세톤 용리액으로 플래쉬 칼럼 크로마토그래피하여 순수한 백색 고체상의 표제 화합물을 수득하였다(융점 : 130-131℃).

b) 2-아미노-9-[(2-벤조일옥시-1-벤조일옥시메틸에톡시)메틸]-9H-푸린

3.393g(7.04mM)의 2-아미노-9/(2-벤조일옥시-1벤조일옥시메틸에톡시)메틸/6-클로로-9H-푸린, 100ml의 에탄올, 100ml의 테트라하이드로푸란, 1.9ml의 트리에틸아민의 혼합물을 Parr용기내의 0.6g의 Pd-C촉매에 첨가하였다.

이 혼합물을 24시간 동안 수소하에서 진탕하였다. Pd-C는 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 0.650g의 새로운 Pd-C를 반응 혼합물에 첨가한 후, 4일동안 수소화 반응을 계속시켰다. 100%의 CH₂Cl₂, 4 : 1의 CH₂Cl₂/ 아세톤 및 100%의 아세톤을 사용하여 칼럼 크로마토그래피하여 표제 화합물을 수득하였다.(융점 : 132-133℃).

[실시예 4]

2-아미노-9-[2-히드록시-1-히드록시메틸에톡시)메틸]-9H-푸린

0.844g(1.88mM)의 2-아마노-9-[(2-벤조일옥시-벤조일 옥시메틸에톡시)메틸]-9H-푸린과 100ml의 40% 메틸아민 수용액을 30분간 실온에서 교반하였다. 혼합물을 순간 증발시켜서 얻은 노란색 오일을 수세하였다. 수층을 메틸렌클로라이드로 2회 추출하였다. 생성물을 함유하는 수층을 메틸렌클라이드로 2회 추출하였다. 생성물을 함유하는 수층을 순간 증발시켜서 밝은 노란색을 오일을 얻었다. 뜨거운 아세토니트릴중에서 오일을 재결정하여 순수한 미색 교체의 표제 화합물을 수득하였다.(융점 ; 148-151℃).

[실시예 5]

9-(2-아세톡시에톡시메틸)-2-아미노-9H-푸린

0.82g(3.92mM)의 9-(2-히드록시에톡시메틸)-2-아미노-9H-푸린, 48m

g(0.392mM)의 4-디메틸아미노피리딘, 0.75ml(7.84mM)의 아세트산무수물과 18m

l의 무수디메틸포름아미드와의 혼합물을 실온에서 2일동안 교반하였다.

반응 혼합물을 진공증발시킨 후 잔사를 에틸 아세티이트에 용해시키고 실리카겔상에 흡착시켰다. 용매를 순간 증발에 의해 제거하고, 잔류 분말을 플래쉬 크로마토그래피를 위해 제조한 컬럼에 첨가하였다. 디클로로메탄중의 5%메탄올로 용리하여 1.0g의 반결정질 오일을 얻었으며, 이를 벤젠-헥산으로 재결정화하여 순수한 9-(2-아세톡시에톡시메틸)-2-아미노-9H-푸린을 수득하였다(융점 115-118℃).

[실시예 6]

2-아미노-9-[(2-아세톡시-1-에톡시메틸에톡시)메틸]-9H-푸린

0.45g(1.88mM)의 2-아미노-9-[(-2히드록시-1-히드록시메틸에톡시)메틸]-9H-푸린, 1.15g(11.30mM)의 아세트산 무수물, 23mg (0.188mM)의 4-디메틸아미노피리딘 및 10ml의 무수 디메틸포름아미드의 혼합물을 실온에서 18시간동안 교반하였다. 용액을 진공증발시키고, 잔사를 메탄올에 용해시켜서 실리카겔에 미리 흡착시켰다. 용매는 진공즐발시켜서, 제거하고, 분말을 플래쉬 크로마토그래피을 위해 제조한 컬럼에 첨가하였다. 디클로로메탄중에 10%메탄올로 용리한 후 증발시켜서 표제의 화합물을 수득하였다. 에틸 아세테이트-헥산으로 재결정하여 순수한 2-아미노-9-[(-2-아세톡시-1-아세톡시메틸에톡시)메틸]-9H-푸린을 수득하였다.

[실시예 7]

9-(2-아세톡시에틸티오메틸)-2-아미노-9H-푸린

자기 교반 막대와 CaCl₂건조 튜브가 부착된 100ml들이 플라스크에 1.0g(4.4m

M)의 2-아미노-9-(2-히드록시에틸티오메틸)-9H-푸린, 0.054g(0.44mM)의 4-디메틸아미노피리딘, 0.9ml(8.8mM)의 아세트산무수물과 20ml의 무수 DMF를 장입하였다. 용액을 24시간동안 실온에서 교반시킨 후 5ml의 MeOH로 급속냉각하였다. 용액을 진공증발시키고(배스온도 40℃) 생성된 갈색 오일을 "플래쉬"법으로 크로마토그래피 하였다.

에틸 아세테이트중의 1.5% 메탄올로 칼럼을 용리시켜서 노락색 오일을 얻었으며, 이것을 방치시켜서 결정화 하였다. 밝은 노락색 결정체를 톨루엔중의 2% MeOH 용액에 용해시키고 0.05g Darco G-60으로 처리하였다. 메탄올을 톨루엔 용액으로 부터 증발시켜서 담황색 침전물을 얻었다.

생성물은 78℃에서 16시간동안 건조시켜서 표제의 화합물을 수득하였다(융점 : 119-120.5℃).

C₁₀H₁₃N₅O₂S분석

산출치 : C 44.93 ;H 4.9 ; N 26.20

실측지 : C 44.97 ;H 4.96 ; N 26.17

¹H NMR(DMSO₆) : 8.59(1HS), 8.15(1HS), 6.25(2H, 넓은 s), 5.26(2Hs), 4.15

(2Ht, J=6.36Hz), 2.89(2Ht, J=6.36Hz), 1.99(3Hs)

[실시예 8]

2-아미노-9-(2-벤조일옥시에틸티오메틸)-9H-푸린

3개의 가지달린 5l들이 플라스크에 공기교반모터, 테플론 패들을 구비한 유리교반 막대를 부착하고, 탈기시킨 후 플라스크를 질소가스 또는 수소가스로 충진하였다. 플라스크에 7.0g(0.019M)의 2-아미노-9-(2-벤조일옥시에틸티오메틸-6-클로로-9H-푸린, 탄소상의 14.0g의 수산화 팔라듐, 12,0ml(0.163M)의 트리에틸아민, 75.0ml의 물과 3.0l의 메탄올을 장입하였다. 플라스크를 밀봉하고 수분 흡인기를 사용하여 탈기시킨 후, 질소 가스를 충진하여 완전한 순환이 3번 이루어질 때까지 배기시켰다. 프라스크를 배기시키고 수소가스로 충진한 후 배기시켜서 수소가스로 재충진시켰다. 교반모터를 작동시키고, 실온에서 4일동안 수소하에서 교반시켰다.

용액을 소결유리 깔때기를 통해 여과시키고, 촉매를 800ml의 메탄올로 세정하였다. 메탄올 용액을 진공증발시켜서 밝은 노란색을 고체 6.0g을 수득하였다. 고체를 18.0g의 70-230메쉬 실리카겔 60에 흡착시키고, 이예비흡착사을 230-400 메쉬 실리카겔 60의 칼럼 상부에 장입하였다. 에틸 아세테이트중의 5%메탄올을 사용해 "플래쉬"법에 의해 칼럼을 용리시켜서 얻은 백색 고체를 에틸 아세테이트-헥산으로 재결정화하고, 78℃, 1.0mmHg압력하에서 건조시켜서 백색 조각들을 수득하였다(융점 : 120-121℃).

H NMR(dmso d₆) : 8.60(1H, s), 8.19(1H, s), 8.0-7.5(5H, m), 6.55(2H, s),

5.32(2H, s), 4.52(2H, t), 3.06(2H, t)

분석이론치 : C 54.69, H 4.59, N 21.26

K-실측치 : C 54.68, H 4.64, N 21.24

2-아미노-9-(2-히드록시에틸티오메틸)-9H-푸린은 상기 칼럼을 연속적으로 용리시켜서 수득하였다.

[실시예 9]

a) 2-아세트 아미드-9-아세틸-6-메르캅토-9H-푸린

티오구아닌(54.0g), 아세트산 무수물(250ml)및 p-톨루엔 설폰산(2.0g)의 혼합물을 하룻밤동안 환류 가열하였다. 반응 혼합물을 냉가시키고, 생성된 고체를 여거한 후, 아세톤으로 철저히 세정하여 갈색 고체의 2-아세트아미도-9-아세틸-6-메르캅토-9H-푸린(62.3g)을 수득하였으며, nmr스펙트럼 결과 공인된 구조와 일치하였다.

b) 2-아세트 아미도-9-(2-아세톡시에톡시메틸)-6-메르캅토-9H-푸린

2-아세트아미도-9-아세틸-6-메르캅토-9H-푸린-(30.0g)및 p-톨루엔 설폰산(2.

.0g)과 톨루엔(150ml)의 혼합물에 2-옥사-1, 4-부탄디올 디아세테이트(40.0g)을 90

-95℃에서 4시간에 걸쳐 적가하였다. 10시간 후, 반응 혼합물을 냉각시키고, 생성된 고체를 여거하여 아세톤으로 세정하였다. 활성탄을 사용하여 탈색시키면서 디메틸포름아미드/아세토니트릴(1/1)으로 재결정화하여 노란색 고체의 2-아세트아미도-9-(2-아세톡시에톡시메틸)-6-메르 캅토-9H-푸린(25.6g)을 수득 하였다.(융점 : 205

-206℃).

c) 2-아미노-9-(2-히드록시에톡메틸)-9H-푸린

2-아세트아미도-9-(2-아세톡시에톡시메틸)-6-메르캅토-9H-푸린(0.50g, 1,53m

mole), 금방 제조한 w-2라니 니켈 (2g) 및 58%의 수산화암모늄(25ml)을 2시간동안 환류 가열하였다. 촉매를 여거하고 여액을 5ml로 농축시켰다. 아세톤(20ml)를 첨가하고 생성된 침전물을 여과, 건조시켜서 0.21g(65%) 백색 고체를 수득하였으며 (융점 ; 188-189℃), 이것은 TLC와 NMR결과 인증된 샘플과 일치하였다.

하기 실시예 10-13은 활성 성분이 일반식(I)의 화합물 또는 생리학적으로 허용되는 그의 염 및 에스테르, 특히 2-아미노-9-(2-히드록시에톡시메틸)-9H-푸린 또는 2-아미노-9[(2-히드록시시-1-히드록시메틸에톡시)메틸]-9H-푸린인 본 발명에 의한 약학제제를 예시하는 것이다.

[실시예 10]

a) 9-(2-프탈이미도에톡시메틸)2-아미노푸린

1.35(10.0mM)의 2-아미노푸린 및 0.44g(11.0mM)의 60%나트륨 하이드라이드-오일 분산액과 50ml의 무수 디메틸 포름아미드의 혼합물을 실온에서 35분간 교반시켰다. 이 혼합물에 2.63g(11.0mM)의 2-프탈이미도 에톡시메틸 클로라이드를 첨가하고, 실온에서 5시간동안 교반을 계속하였다. 부가로 156mg(3.9mM)의 나트륨 하이드라이드 분산액과 0.94g(3.9mM)의 2-프탈이미도에 에톡시메틸클로라이드를 첨가하고

, 반응 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다.

혼합물을 진공증발시키고, 잔사를 클로로포름과 물에 분배시켰다. 수상을 클로로포름으로 2회이상 추출하고, 혼합된 클로로프롬 추출액을 물로 세정한 후 황상나트륨으로 건조시켰다. 건조된 추출물을 건조시키고 실리카겔로 크로마토그래피하고 디클로로메탄중의 10%메탄올로 용리하여 1.7g의 9-(2-프탈이미도 에톡시에탈)-2-아미노프린을 수득하였다.

b) 9-(2-아미노에톡시메틸)-2-아미노푸린

5.0g(14.7mM)의 9-(2-프탈아미도 에톡시메탈)-2-아미노푸린, 500ml의 에탄올 및 15ml의 히드라진(95%)의 혼합물을 4시간동안 교반하에, 환류시켰다. 반응 혼합물을 진공증발시키고 에탄올로 2배이상 증발시켰다. 고체를 200ml의 5%아세트산 수용액을 30분간 교반한 후, 이 용액을 진공증발 및 건조 시켰다. 에탄올-에테르 및 에탄올로 1회씩 2회 재 결정화하여 디아세테이트 상태의 순수한 9-(2-아미노에톡시메틸)-2-아미노푸린을 수득하였다. 강한 OH수지로 생성물의 수용액을 처리하고 증발시켜서 1.5g의 유리염기를 수득하였다.

c) 2-아미노-9-(2-히드록시에톡시메틸)-9H-푸린

0.2N의 HC125ml와 에탄올 25ml중의 냉각된 (0℃)1.0g(4.8mM)의 9-(2-아미노에톡시메틸)-2-아미노푸린 용액에 0.335g(4.86mM)의 아질산 나타륨을 45분동안 소량씩 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 18시간동안 교반하였다.

반응 혼합물을 진공 증발시키고 (배스온도<30℃), 잔사를 메탄올에 용해시켜서 실리카겔에 흡수시켰다. 용매를 증발 제거하고, 분말을 플래쉬 크로마토그래피를 위해 제조하고 컬럼에 장입하였다. 디클로로 메탄중의 10%의 메탄올로 용리하고 증발시켜서 목적하는 9-(2-히드록시에톡시메틸)-2-아미노푸린을 수득하였다. 에탄올로 재결정화하여 순수한 생성물을 수득하였다.

[실시예 11]

활성화합물을 락토오스 및 전분과 혼합하고, 과립을 폴리비닐 피롤리돈 용액으로 습윤시켰다. 건조 및 체선별 후 마그네슘 스테아레이트와 함께 혼합하고 압축시켰다.

[실시예 12]

활성 화합물을 락토오스 및 나트륨 스타치 글리콜레이트와 혼합하고, 과립을 폴리비닐피롤리돈 용액으로 습윤시켰다. 건조 및 체서별 후 마그네슘 스테아레이트와 혼합하고 경질의 젤라틴 캡슐속에 충진하였다.

[실시예 13]

정제수와 글리세롤의 혼합물에 활성 화합물을 용해시키고, 70℃로 가열하였다. 나머지 성분들을 70℃로 가열하였다. 두 부분을 함께 첨가하여 유탁시켰다. 냉각시켜서 용기속에 충진하였다.

[실시예 14]

정맥내 주사

A) 활성 화합물 200mg

수산화나트륨 용액으로 pH를 7.0-7.5로 조정 주사용수로 5.0ml가 되게 한다.

주사용수의 일부에 활성 성분을 용해시켰다. 수산화나트륨 용액으로 pH를 조정하고, 주사용수를 첨가하여 일정 용량으로 하였다. 멸균 조건하에서, 여과에 의해 용액을 살균시켜서 무균앰플속에 충진한 후, 앰플을 밀봉하였다.

B) 활성화합물 100mg

수산화나트륨 용액으로 pH를 7.0-7.5로 조정

만니톨 125mg

주사용수로 2.5ml가 되게 한다.

주사용수의 일부에 활성 화합물과 만니톨을 용해시켰다. 수산화나트륨 용액으로 pH를 조정하고, 주사용수를 첨가해 일정용량으로 만들었다. 멸균 조건하에서, 여과에 의해 용액을 살균시키고, 멸균 비이알속에 충진한 후 동결건조시켜서 수분을 제거하였다. 질소대기하에서 바이알을 밀봉하고 멸균 스토퍼와 알루미늄칼라로 폐쇄시켰다.

생물학적 활성

하기 실험들을 아시클로비르, 6-데옥시아시클로비르 및 이의 6-아미노유사물, 즉 이하에서 아미노아시클로비르로 인용하는 2, 6-디아미노-9(2-히드록시에톡시메틸)-푸린을 쥐에 경구투여한 후 아시클로비르의 혈장농도와 소변 배설을 측정하기 위한 것이다. 후자의 화합물은 생체내에서 아시클로비르로의 전환을 위해 아데노신 탈아미노 효소에 의존하는 아시클로비르 프로약제(prodrug)(Good S]S])및 de Miranda P.Fed.Prod(1982), 41, 1733)이다.

절 차

롱에반스 숫쥐(Long Evans male rats)에 약제를 위내 탐침 투여하고, 배설물로부터 소변을 분리하는 신진대사 관찰 실험기구(metabolic cages)에 두었다. 수집된 소변과 혈장 샘플을 방사선면역 분석시험법(Quinn등, 1979)에 의해 아시클로비르 함량을 분석하였다. 아미노 아시클로비르와 6-데옥시아시클로비르중 어떤 것도 실험에 사용된 항혈청제와 교차 반응하지 않음을 알 수 있었다.

결 과

결과는 하기표 I과 II에 기록한다.

[표 I]

아시클로비르, 아미노아시클로비르 및 6-데옥시아시클로비르를 쥐에 경구 투여한 후의 아시클로비르의 소변 배설

[표 II]

데옥시아시클로비르와 아미노 아시클로비르를 쥐에 경구 투여한 후의 아시클로비르의 혈장농도비교

독성연구

2마리의 비글 숫개와 2마리의 비글 암개에 6-데옥시아시클로비르를 일일 4-mg/kg의 용량을 5일동안 매일 1회씩 투여하였다.

치료기간 말기의 1마리와 암개와 1마리의 숫개에서, 또는 2주간의 복용기간 후의 1마리의 암개와 1마리의 숫개에서 어떤 영향도 없었다.

항비루스 활성도

a) 70마리의 CDI 쥐를 제1형 단순 헤르페스 비루스의 ICI 균주 0.025ml를 대뇌투여하여 300LD₅₀으로 감염시켰다. 이 쥐를 10마리씩 나누고 한 군을 비치료 비루스 대조군으로 하였으며 나머지 군들은

A) 이시클로비르 100mg/kg을 i) 피하투여 ii) 경구투여 iii) 복강내 투여하였다.

B) 실시예 1의 화합물(6-데옥시아시클로비르) 100mg/kg을 i) 피하투여 ii) 경구투여 iii) 복강내 투여하였다.

처리그룹에는 감염후 2-3시간이 경과한 후부터 4일동안 매일 2회 약제를 투여하였다. 14일에 걸쳐 관찰하고, 생존기간을 기록하였다. 결과는 하기 표에 기록한다.

결 과

상기 결과로부터, 경구투여시 아시클로비르보다 6-데옥시아시클로비르가 훨씬 효과적임을 알 수 있다.

b) 40마리 CDI 쥐를 a) 에서 상술한 방법에 따라 감영시키고 치료하였다.

이 쥐들을 10마리씩 4군으로 나누고, 한 군을 비치료 비루스 대조군으로 하였다. 치료군 1은 실시예 4의 화합물을 100mg/kg투여하고, 치료군 2는 실시예 3의 화합물을 100mg/kg투여했으며, 치료군 3은 양성대조군으로서 작용하기 위해 아시클로비르를 100mg/kg투여하였다. 모든 약제는 피하투여하였다. 14일동안 생존기간을 기록 및 비교하였으며 결과는 하기 표와 같다.

결 과

Claims (5)

1. 하기일반식(II)의 화합물을 탈블록화 시켜서 하기 일반식(I)의 화합물 및 생리학적으로 허용되는 그의 에스테르(여기서, R²는 히드록시메틸이고 R⁴는 히드록시이다)를 제조 하는 방법.

   

   식중, X는 황 또는 산소이고, R¹은 아미노이고, R²는 수소 또는 히드록시메틸이고, R³는 수소이고, R⁴는 히드록시이고, R⁵는 수소이고,

   

   는 아미노 또는 블록된 아미노기이고,

   

   는 수소 또는 히드록시메틸 또는 블록된 히드록시메틸기이고,

   

   는 히드록시 또는 블록된 히드록시기이며,

   

   

   및

   

   중 적어도 하나는 블록된 기이다.
2. 제1항에 있어서, 하기 일반식(VIII)의 화합물을 탈블록화시켜서 R²가 히드록시메틸기, R³가 수소원자, R⁴가 히드록시기인 일반식(I)의 화합물을 제조하는 방법.

   
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 아실블록킹기는 가수분해에 의해 탈블록화시키는 것을 특징으로 하는 방법.
4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 아릴메틸 블록킹기는 가수소분해에 의해 탈블록화시키는 것을 특징으로 하는 방법.
5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 트리알킬실리 블록킹기는 가용매 분해 또는 가알콜 분해에 의해 탈블록화시키는 것을 특징으로 하는 방법.