FI76088C - Foerfarande foer framstaellning av antivirala purinderivat. - Google Patents

Description

1 76088

Menetelmä virusten vastaisten puriinijohdosten valmistamiseksi

Jakamalla erotettu hakemuksesta 833730 5 Tämä keksintö koskee menetelmää virusten vastaisten puriinijohdosten valmistamiseksi, jotka sisältävät asykli-sen ketjun 9-asemassa.

GB-patenttijulkaisussa nro 1 523 865 kuvataan laaja 10 joukko puriinijohdosta, jotka sisältävät asyklisen sivu-ketjun 9-asemassa. Näillä puriinijohdoksilla on havaittu olevan virusten vastaista tehoa erilaisisa DNA-virusryhmiä vastaan, erityisesti herpesviruksia kuten Herpes simpelxiä vastaan.

15 Näistä johdoksista 9-(2-hydroksietoksimetyyli)-guanii- nilla (tunnettu myös nimellä asyklovir) on havaittu olevan erityisen hyvä teho herpesviruksia kuten esimerkiksi Herpes simplexiä vastaan. Mutta vaikka asyklovir on todettu erittäin tehokkaaksi käytettynä paikallisesti tai parenteraali-20 sesti, se absorboituu vain keskinkertaisesti suun kautta annettuna lääkkeen pitoisuuksien verinesteessä ollessa vastaavat. On täysin ymmärrettävää, että hoidettaessa sisäistä häiriötilaa antamalla lääkettä oraalisesti on ilmeisen toivottavaa, että lääkeaine absorboituisi gastrotestinaali-25 alueesta hyvin, jolloin tuloksena olisi suuret pitoisuudet verinesteessä.

Olemme nyt tehneet yllättävän havainnon, että puriini-johdokset, joille on tunnusomaista, että niissä on vetyatomi puriiniytimen 6-asemassa, ovat helposti muutettavissa in 30 vivo molybro-flavo-proteiini-tyyppisten entsyymien vaikutuksesta (varsinkin ksantiinioksidaasi/dehydrogenaasin tai aldehydioksidaasin vaikutuksesta) vastaaviksi 6-hydroksipu-riinijohdoksiksi, joilla on viruksia vastustava teho. Edelleen olemme rotilla suoritetuissa kokeissa havainneet, että 35 tällaisten 6-vetyjohdosten oraalinen anto johtaa tehokkaaseen absorptioon gastrointestinaalialueesta ja 6-vety-yh- 2 76088 disteen entsymaattisen muuttumisen tuloksena muodostuneen vastaavan 6-hydroksiyhdisteen suuriin pitoisuuksiin verinesteessä.

Tällaisten 6-vetypuriinijohdosten ryhmään kuuluvat 5 yhdisteet, joilla on yleinen kaava (I) rrN\ H2N ^ 10 ch2xch2ch2oh jossa X on happi- tai rikkiatomi sekä tällaisten kaavan (I) mukaisten yhdisteiden ja niiden esterien fysiologisesti hyväksyttävät suolat, lukuunottamatta kaavan I mukaista 15 yhdistettä, jossa X on happi ja sen bentsoaattiesteriä ja fysiologisesti hyväksyttäviä suoloja. Keksinnön kohteena on näiden yhdisteiden valmistusmenetelmä, jolle on tunnusomaista, että a) poistetaan suojaryhmät yhdisteestä, jolla on kaava 20 (II) xx> 25 CH2XCH2CH2r4 jossa X tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty, R* tarkoittaa aminoryhmää tai suojattua aminoryhmää ja R* tarkoittaa hydroksiryhmää, edellyttäen, että ainakin toinen sym-30 boleista R* ja R* tarkoittaa suojattua ryhmää; tai b) hydrataan yhdiste, jolla on kaava (III)

II

3 76088 rVx I X (III) ch2xch2ch2oh jossa X tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty ja M tarkoittaa halogeeniatomia, tai sen suola tai esteri; ja mahdollisesti suoritetaan yksi tai useampia seuraavista 10 reaktioista missä tahansa halutussa järjestyksessä: i) kun saatu tuote on emäs, muutetaan tämä emäs fysiologisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolakseen, ii) kun saatu tuote on happoadditiosuola, muutetaan tämä suola vastaavaksi emäkseksi, 15 iii) kun saatu tuote on kaavan (I) mukainen yhdiste, muutetaan tämä yhdiste fysiologisesti hyväksyttäväksi este-rikseen; ja/tai iv) kun saatu tuote on kaavan (I) mukaisen yhdisteen esteri, muutetaan tämä esteri vastaavaksi kaavan (I) mukai-20 seksi yhdisteeksi.

Menetelmässä a) voidaan suojaryhmät ymmärrettävästi valita esimerkiksi asyyliryhmistä kuten C^.^-alkanoyyliryh-mistä, esim. asetyyli tai pivaloyyli, tai aroyyliryhmistä, esim. bentsoyyli; aryylimetyyliryhmistä, esim. bentsyyli; 25 tai tri-C1_4-alkyylisilyyliryhmistä, esim. trimetyylisilyy- li. Aryylimetyylisuojaryhmät voidaan poistaa esimerkiksi hydrogenolyysillä, esim. hydraamalla Raney-nikkelin tai palladiumkatalysaattorin läsnä ollessa tai käyttämällä natriumia nestemäisessä ammoniakissa. Asyylisuojaryhmät voidaan 30 poistaa esimerkiksi hydrolyysillä käyttäen esimerkiksi amiinia kuten metyyliamiinia tai trietyyliamiinia, edullisesti vesipitoisessa väliaineessa. Trialkyylisilyylisuojaryhmät voidaan poistaa esimerkiksi solvolyysillä, esim. alkoholipitoisella tai vesipitoisella ammoniakilla tai alkoholyy-35 sillä.

4 76088

Kaavan (III) mukaisen yhdisteen muuttaminen kaavan (I) mukaiseksi yhdisteeksi menetelmällä b) voidaan toteuttaa tavanomaisilla menetelmillä. Näitä on kuvattu julkaisussa Fused Pyrimidines, Part II, Purines, toim. D.J.

5 Brown (1971), Wiley-Interscience.

Yllä kuvatuissa menetelmissä kytketyt lähtöaineet voidaan valmistaa tavanomaiseen tapaan, esim. menetelmillä, joita on kuvattu edellä mainitussa GB-patenttijulkaisussa nro 1 523 865.

10 Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden suoloihin, joita voidaan mukavasti käyttää terapiassa, kuuluvat orgaanisten happojen kuten maito-, etikka-, maleiini- tai p-tolueeni-sulfonihapon fysiologisesti hyväksyttävät suolat sekä mine-raalihappojen kuten vetykloridi- tai rikkihapon fysiologi-15 sesti hyväksyttävät suolat.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden estereihin, joita voidaan mukavasti käyttää terapiassa, kuuluvat yhdisteet, jotka sisältävät formyylioksi- tai C^_jg-(esimerkiksi Cj^g)-alkanoyylioksiesteriryhmän (esim. asetoksi- tai propionio-20 nyylioksiryhmän), mahdollisesti substituoidun aralkanoyyli-oksi- (esim. fenyyli-C^_^-alkanoyylioksi- kuten fenyyli-asetoksi-) tai mahdollisesti substituoidun aroyylioksi-(esim. bentsoyylioksi- tai naftoyylioksi-) ryhmän kaavan (I) mukaisten yhdisteiden 9-aseman sivuketjun pääteasemassa.

25 Yllä mainitut aralkanoyylioksi- ja aroyylioksiesteriryhmät voivat olla substituoituja esimerkiksi yhdellä tai useammalla halogeeniatomilla (esim. kloorilla tai bromilla) tai amino-, syaani- tai sulfamidoryhmällä ryhmän aryyliosan sisältäessä edullisesti 6-10 hiiliatomia.

30 2-amino-9-(2-bentsoyylioksietoksimetyyli)puriini (so.

kaavan (I) mukaisen yhdisteen, jossa X on happiatomi, bentsoaattiesteri) on kuvattu US-patenttijulkaisussa 4 199 547 eivätkä patenttivaatimukset kohdistu tämän yhdisteen valmistukseen. Mainitussa US-patenttijulkaisussa ei 35 kuitenkaan ole mitään mainintaa tai viittausta siitä, että yhdiste voidaan muuttaa in vivo vastaavaksi 6-hydroksiana-logiksi.

5 76088

Se havainto, että yllä mainitut 6-vetypuriinit ovat helposti muutettavissa vastaaviksi 6-hydroksianalogeiksi, on yllättävä, koska aikaisemmissa tutkimuksissa, joissa käytettiin lehmänmaidon ksantiinioksidaasia (H. Lettre et 5 ai. (1967) Biochem. Pharmacol. 16, 1747-1755; T.A. Krenitsky et ai. (1972) Arch. Biophys., 150, 585-599), ilmeni, että 9-substituutio estää tai pienentää suuresti nopeutta, jolla erilaiset puriinit hapettuvat. Näiden havaintojen valossa oli yllättävää todeta, että tämä entsyymi hapetti esimer-10 kiksi 6-deoksiasyklovirin, 2-aminopuriinin 9-substituoidun johdoksen, suuremmalla nopeudella kuin 9-substituoimattoman puriinin, kuten olemme todenneet entsyymitutkimuksissa.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden korkea absorptiotaso gastrointestinaalialueelta tekee yhdisteet erityisen käyt-15 tökelpoisiksi silloin kun yhdisteitä halutaan antaa suun kautta, esim. hoidettaessa sairauksia, joiden aiheuttajien ovat erilaiset DNA-virukset kuten herpes-infektioita, esimeriksi Herpes simplex. Varicella tai Zoster, cytomegalovirus sekä sairauksia, joiden aiheuttajana on hepatitis B 20 tai Epstein-Barr-virus. Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää myös papilloma- eli syylävirusinfektioiden hoitoon tai ennalta ehkäisyyn. Sen lisäksi, että kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää ihmisten lääkehoidossa, niitä voidaan antaa muille eläinlajeille virussairauksien 25 hoitamiseksi tai ennaltaehkäisemiseksi, esim. muille nisäkkäille .

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ja niiden fysiologisesti hyväksyttäviä suoloja ja estereitä (joita seuraavassa yhteisesti nimitetään aktiiviaineosiksi) voidaan antaa mitä 30 tahansa antotietä, joka sopii käsiteltävään tilaan, sopivien antoteiden käsittäessä oraalisen, rektaalisen, nasaalisen, ulkonaisen (mukaan luettuna anto poskeen tai kielen alle), vaginaalisen ja parenteraalisen (mukaan luettuina anto ihon alle, lihakseen, laskimoon, ihoon, kalvoihin, ja epiduraa-35 lisesti). On täysin ymmärrettävää, että suositeltava antotapa voi vaihdella riippuen esimerkiksi vastaanottajan tilasta .

6 76088

Kaikissa yllä mainituissa käyttötavoissa ja indikaatioissa tarvittava aktiiviaineosan (kuten edellä on määritelty) määrä riippuu useista tekijöistä, joita ovat hoidettavan tilan vakavuus ja saajan ominaisuudet ja on lopulli-5 sesti hoitavan lääkärin tai eläinlääkärin harkinnassa. Yleensä kuitenkin kaikissa näissä käyttötavoissa ja indikaatioissa on sopiva, tehokas annos alueella 0,1 mgrsta 250 mg:aan potilaan kehon kilogrammaa kohti vuorokaudessa, edullisesti alueella 1-100 mg kehon kilogrammaa kohti vuo-10 rokaudessa ja edullisimmin alueella 5-20 mg kehon kilogrammaa kohti vuorokaudessa; optimiannos on noin 10 mg kehon kilogrammaa kohti vuorokaudessa. (Mikäli toisin ei ole mainittu, on kaikki aktiiviaineosan määrät laskettu vastaavana kaavan (I) mukaisena yhdisteenä: yhdisteen suoloille ja 15 estereille lukuarvot olisivat suhteellisesti suurempia).

Haluttu annos annetaan edullisesti kahtena, kolmena, neljänä tai useampana osa-annoksena sopivin välein vuorokauden kuluessa. Nämä osa-annokset annetaan yksikköannosmuotoina, jotka sisältävät esimerkiksi 10-1000 mg, edullisesti 20-20 500 mg ja edullisimmin 100-400 mg aktiiviaineosaa yksikkö- annosmuotoa kohti.

Vaikkakin on mahdollista antaa aktiiviaineosia yksistään, on edullista antaa niitä farmaseuttisina valmiste-muotoina. Tämän keksinnön valmistemuodot sekä eläinlääke-25 teiteessä että lääketieteessä käytettäviksi sisältävät ainakin yhtä edellä määriteltyä aktiiviaineosaa yhdessä yhden tai useamman kantoaineen kanssa ja mahdollisesti muita terapeuttisia aineosia. Kantoaineen tai -aineiden täytyy olla "hyväksyttäviä" siinä mielessä, että ne sopivat yhteen val-30 mistemuodon muiden aineosien kanssa eivätkä ole vahingollisia valmisteen saajalle.

Valmistemuotoihin kuuluvat oraaliseen, rektaaliseen, nasaaliseen, ulkonaiseen (mukaan luettuna anto poskeen tai kielen alle), vaginaaliseen ja parenteraaliseen (mukaan 35 luettuna anto ihon alle, lihakseen, laskimoon, ihoon, kalvoihin ja epiduraalisesti) antoon sopivat valmistemuodot. Valmistemuodot ovat edulliset! yksikköannosmuotoina ja ne

II

7 76088 voidaan valmistaa millä tahansa menetelmistä, jotka ovat farmasian alalla hyvin tunnettuja. Näihin menetelmiin sisältyy vaihe, jossa aktiiviaineosa saatetaan yhteen kanto-aineen kanssa, joka koostuu yhdestä tai useammista lisä-5 aineista. Yleensä valmistemuodot valmistetaan siten, että aktiiviaineosa saatetaan tasaisesti ja tehokkaasti yhteen nestemäisten kantoaineiden tai hienojakoisten kiinteiden kantoaineiden tai näiden molempien kanssa ja siten, mikäli se on tarpeen, muotoutetaan tuote.

10 Tämän keksinnön mukaiset oraaliseen antoon sopivat valmistemuodot voivat olla erillisinä yksikköinä kuten kapseleina, lääkepusseina tai tabletteina, joista jokainen sisältää ennalta määrätyn määrän aktiiviaineosaa; jauheena tai rakeina; liuoksena tai suspensiona vesipitoisessa nes-15 teessä tai vedettömässä nesteessä; tai nestemäisenä öljy-vedessä-emulsiona tai nestemäisenä vesi-öljyssä-emulsiona. Aktiiviaineosa voidaan antaa myös isona pillerinä, lääke-puurona tai tahnana.

Tabletti voi olla tehty puristamalla tai valamalla 20 ja mahdollisesti sisältää yhden tai useampia lisäaineita. Puristetabletit voidaan valmistaa puristamalla sopivassa koneessa vapaasti valuvassa muodossa kuten jauheena tai rakeina oleva aktiiviaineosa mahdollisesti sekoitettuna sideaineeseen, luistoaineeseen, inerttiin laimentimeen, säilöt-25 teeseen, pinta-aktiiviseen aineeseen tai dispergointiainee-seen. Valettuja tabletteja voidaan valmistaa valamalla sopivassa koneessa seos, jonka muodostaa jauhemaisen yhdisteen seos, joka on kostutettu inertillä nestemäisellä laimenti-mella. Tabletit voivat mahdollisesti olla pinnoitettuja tai 30 uritettuja ja ne voivat olla siten formuloituja, että niistä vapautuu aktiiviaineosa hitaasti tai kontrolloidulla nopeudella .

Silmän tai muiden ulkoisten kudosten, esim. suun tai ihon infektioihin valmistemuotoja käytetään edulli-35 sesti ulkonaisesti käytettävänä salvana tai voiteena, joka sisältää aktiiviaineosaa esimerkiksi 0,075-20 paino-%, edullisesti 0,2-15 paino-% ja edullisimmin 0,5-10 paino-%.

ΤΓΖ.

8 76088

Kun aktiiviaineosat formuloidaan salvaksi, niitä voidaan . käyttää yhdessä parafiinisen tai veteen sekoittuvan voide-pohjan kanssa. Vaihtoehtoisesti voidaan aktiiviaineosat formuloida voiteeksi voidepohjan kanssa, joka on tyyppiä 5 öljy-vedessä.

Voidepohjan vesifaasi voi haluttaessa sisältää esimerkiksi vähintään 30 paino-S polyhydroksialkoholia, so. alkoholia, jossa on kaksi tai useampia hydroksirynmiä kuten propyleeniglykolia, butaani-1,3-diolia, mannitolia, 10 sorbitolia, glyserolia ja polyetyleeniglykolia ja niiden seoksia. Ulkonaisesti käytettävä valmistemuodot voivat edullisesti sisältää yhdistettä, joka parantaa aktiiviaine-osan absorboitumista tai tunkeutumista ihon tai muiden infektoituneiden alueiden läpi. Esimerkkejä tällaisista 15 yhdisteistä, jotka edistävät tunkeutumista ihoon, ovat dimetyylisulfoksidi ja sen analogit.

Tämän keksinnön mukaisten emulsioiden öljyfaasi voidaan koostaa tunnetuista aineosista tunnettuun tapaan. Vaikkakin tämä faasi voi koostua vain emulgoivasta ainees-20 ta (tunnettu myös emulgaattorina), se käsittää edullisesti ainakin yhtä emulgaattoria seoksena rasvan tai öljyn kanssa tai sekä rasvan että öljyn kanssa. Edullisesti käytetään hydrofiilistä emulgaattoria yhdessä lipofiilisen amulgaattorin kanssa, joka toimii stabiloivana aineena.

25 On myös edullista käyttää sekä öljyä että rasvaa. Emulgaat-tori (t) yhdessä stabilisaattorin tai stabilisaattorien kanssa tai ilman näitä muodostavat niin kutsutun emulgoin-tivahan ja vaha yhdessä öljyn ja/tai rasvan kanssa muodostaa niin kutsutun emulgointivoidepohjan, joka muodos-30 taa öljymäisen dispergoituneen faasin voideformulaatioissa.

Tämän keksinnön valmistemuodoissa käytettäviksi sopiviin emulgaattoreihin ja stabilisaattoreihin kuuluvat Tween 60, Span 80, setostearyy1ialkoholi, myristyylialkonoli, glyseryylimonostearaatti ja natriumlauryylisu.l faatti.

35 Valmistemuodoissa käytettävien sopivien öljyjen ja β 76088 rasvojen valinta perustuu haluttujen kosmeettisten ominaisuuksien saavuttamiseen, sillä aktiivisen yhdisteen liukoisuus useimpiin öljyihin, joita todennäköisimmin käytetään farmaseuttisissa emulsioformulaatioissa, on hyvin 5 pieni. Siten voiteen tulisi edullisesti olla ei-rasvamai-nen, tahraamaton ja pestävissä oleva tuote, jonka sakeus on sikäli sopiva, että vältetään vuotaminen putkiloista tai muista säilytysastioista. Voidaan käyttää haarautumattomia tai haarautuneita, mono- tai diemäksisiä alkyyliestereitä 10 kuten di-isoadipaattia, isoetyylistearaattia, kookospähkinän rasvahappojen propyleeniglykoli-diesteriä, isopropyyli-myristaattia, dekyylioleaattia, isopropyylipalmitaattia, butyvlistearaattia, 2-etyyliheksyylipalmitaattia tai haarautuneita hiilivetyketjuja omaavien esterien seosta, joka 15 tunnetaan nimellä Crodamol CAP, kolmen viimeksi mainitun ollessa edullisia estereitä. Näitä voidaan käyttää yksin tai seoksina riippuen halutuista ominaisuuksista. Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää korkealla sulavia lipidejä kuten valkoista pehmeää parafiinia ja/tai nestemäistä para-20 fiiniä tai muita mineraaliöljyjä.

Ulkonaisesti käytettäviin valmistemuotoihin, joita annetaan silmään, kuuluvat myös silmätipat, joissa aktii-viaineosa on liuotettu tai suspendoitu sopivaan kantoainee-seen, varsinkin vesipitoiseen aktiiviainetta liuottavaan 25 liuottimeen. Tällaisissa valmistemuodoissa aktiiviaineen pitoisuudeksi 0,5-20 paino-%, edullisesti 0,5-10 paino-%, varsinkin noin 1,5 paino-%.

Ulkonaisesti käytettäviin valmistemuotoihin, joita annetaan suuhun, kuuluvat pillerit, jotka sisältävät aktii-30 viaineen maustetussa pohjamateriaalissa, tavallisesti ruokosokerissa ja arabi- tai traganttikumissa; pastillit, jotka sisältävät aktiiviaineen inerttipohjassa kuten gelatiinissa ja glyseriinissä tai ruokosokerissa ja arabikumis-sa; ja suuvedet, jotka sisältävät aktiiviaineen sopivassa 35 nestemäisessä kantoaineessa.

___ .. HZ.- 10 76088

Rektaaliseen antoon tarkoitetut valmistemuodot voivat olla peräpuikkoina,joissa on sopiva perusmassa, joka koostuu esimerkiksi kaakaovoista tai salisylaatista.

Nasaaliseen antoon tarkoitetut valmistemuodot, jois-5 sa kantoaine on kiinteä aine, käsittävät luonnollisesti jauheen, jonka hiukkaskoko on esimerkiksi alueella 20-500 mikronia ja jota käytetään samalla tavalla kuin otetaan nuuskaa, so hengittämällä nopeasti sisään nenäkäytävän kautta jauheastiasta, jota pidetään lähellä nenää. Sopi-10 via valmistemuotoja, joissa kantoaine on neste ja joita annetaan esimerkiksi nenäsuihkeina tai nenätippoina, ovat aktiiviaineosan vesi- tai öljyliuokset.

Vaginaaliseen käyttöön tarkoitetut valmistemuodot voivat olla pessaareina, tampooneina, voiteina, hyyteiöi-15 nä, tahnoina, vaahtoina tai suihkevalmistemuotoina, jotka sisältävät aktiiviaineosan lisäksi kantoaineita, jotka tällä alalla tiedetään sopiviksi.

Parenteraaliseen käyttöön tarkoitetut valmiste-muodot käsittävät vesipitoiset ja vedettömät steriilit 20 ruiskeliuokset, jotka voivat sisältää antioksidantteja, puskureita, bakteriostaatteja ja liuotettuja aineita, jotka tekevät valmistemuodon isotoniseksi käsiteltävän kohteen veren kanssa; sekä vesipitoiset ja vedettömät steriilit suspensiot, jotka voivat sisältää suspendointiaineita 25 ja sakeuttamisaineita. Valmistemuodot voivat olla kerta-annossäiliöissä tai useita annoksia sisältävissä säiliöissä, esimerkiksi suljetuissa ampulleissa ja viaaleissa, ja niitä voidaan säilyttää pakastekuivattuina (lyofilisoi-tuina), jolloin tarvitaan vain steriilin nestemäisen kan-30 toaineen, esimerkiksi ruiskeisiin sooivan veden lisääminen juuri ennen käyttöä. Välittömästi käytettäviä ruiske-liuoksia ja -suspensioita voidaan valmistaa steriileistä, edellä kuvatunlaisista jauheista, rakeista ja tableteista. Suositeltavia yksikköannosformulaatioita ovat valmistemuo-35 dot, jotka sisältävät aktiiviainoosaa vuorokausiannoksen tai kerralla käytettävän osan vuorokausiannoksesta, kuten 11 76088 aikaisemmin on esitetty tai sopivan osan tästä.

On ymmärrettävää, että edellä nimenomaisesti mainittujen aineosien lisäksi tämän keksinnön mukasiet valmiste-muodot voivat sisältää muita aineita, jotka ovat tavanomai-5 siä kulloinkin kysymyksessä olevaan valmistemuotoon liittyvällä alalla, esimerkiksi valmistemuodot, jotka sopivat annettaviksi oraalisesti, voivat sisältää makua antavia aineita.

Tämän keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä 10 voidaan käyttää, edelleen eläinlääketieteessä käytettävissä koostumuksissa yhdessä eläinlääkinnässä käytetyn kantoai-neen kanssa.

Eläinlääkinnässä käytetyt kantoaineet ovat aineita, jotka ovat käyttökelpoisia koostumuksen antamista silmällä-15 pitäen ja ne voivat olla kiinteitä, nestemäisiä tai kaasumaisia aineita, jotka ovat muuten inerttejä tai hyväksyttyjä eläinlääketieteessä ja sopivat yhteen aktiiviaineosan kanssa. Näitä eläinlääkintäkoostumuksia voidaan antaa oraalisesti, parenteraalisesti tai mitä tahansa muuta haluttua 20 tietä.

Oraalisesti annettaviksi tarkoitetut koostumukset voivat olla tabletteina, rakeina, lääkejuomana, tahnana, lääke-pusseina, kapseleina tai rehun lisäaineena. Rakeet voidaan valmistaa märkägranuloinnin, esipuristuksen tai rakeistuk-25 sen hyvin tunnetuilla tekniikoilla. Niitä voidaan antaa eläimille inertissä nestemäisessä vehikkelissä niin että muodostuu lääkejuoma tai suspensiossa vesi- tai öljykanta-jan kanssa. Edullisesti lisätään muita lisäaineita kuten dispergointiainetta. Nämä valmistemuodot sisältävät aktii-30 viaineosaa edullisesti 15-85 %.

Tahna voidaan valmistaa suspendoimalla aktiiviaineosa nestemäiseen laimentimeen. Tahnan jäykkyyttä tai sakeutta lisäävää ainetta voidaan käyttää mukana yhdessä kasteluai-neen tai kosteuttavan aineen kanssa, jos nestemäinen lai-35 mennin on vesi. Mikäli tarvitaan emulsiotahna, on suositeltavaa, että käytetään mukana yhtä tai useampaa pinta-aktii- 12 76088 vista ainetta. 25-80 paino-% näistä tahnavalmistemuodoista voi olla aktiiviaineosaa.

Rehun lisäaineina aktiiviaineosaa on yleensä suurina määrinä, jotka vastaavat lisäaineosia ja täyteaineet voi-5 daan lisätä suoraan tai välillä suoritetun sekoittamisen tai laimentamisen jälkeen. Esimerkkejä tällaisissa valmiste-muodoissa käytettävistä lisäaineosista ovat kiinteät, suun kautta nautittuina ravinnoksi kelpaavat kantoaineet kuten maissijauho, soijajauho, karkea vehnäjauho, soijasuurimot, 10 syötäväksi kelpaavat kasvimateriaalit ja käymisjätteet. Ak-tiiviaineosa lisätään tavallisesti yhteen tai useampaan li-säaineosaan ja dispergoidaan tehokkaasti ja tasaisesti jauhamalla, rumpukäsittelyllä tai sekoittamalla tavanomaisilla laitteilla. Valmistemuodot, jotka sisältävät 1-90 paino-% 15 aktiiviaineosaa ovat sopivia lisättäviksi rehuihin.

Hevosten herpes-infektioiden käsittelyyn voidaan tarvita oraalinen tai parenteraalinen annos, joka on 0,1-250 mg kehon kilogrammaa kohti vuorokaudessa, edullisesti 2-100 mg/kg vuorokaudessa. Annos voidaan jakaa erillisiksi yksi-20 köiksi, jotka annetaan vuorokauden kuluessa säännöllisin välein, ja toistaa päivittäin jopa 14 vuorokauden ajan tai kunnes infektio on hävinnyt. Muiden eläinten virusinfektioiden käsittelyssä annos voi vaihdella riippuen eläimen koosta ja metaboliasta. Koostumukset voidaan antaa yksikköannos-25 muotona kuten tabletteina muutamia kertoja vuorokaudessa määrinä 10-100 mg/yksikköannos.

Seuraavat esimerkit havainnollistavat tätä keksintöä.

Esimerkki 1 2-amino-9-(2-hydroksietyylitiometyyli)-9H-puriini 30 1 litran pyöreäpohjaiseen pulloon, joka oli varustet tu magneettisekoittimella ja CaCl2-kuivuasputkella, mitattiin 5,0 g (29,50 mmol) 2-amino-6-klooripuriinia, 6,8 g (29,50 mmol) 2-(kloorimetyylitio)etyylibentsoaattia, 4,07 g (29,50 mmol) kaliumkarbonaattia ja 750 ml vedetöntä dimetyy-35 liformamidia. Reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämmössä 16 tuntia, minkä jälkeen lisättiin vielä 2,0 g (8,7 mmol) li 13 76088 2-(kloorimetyylitio) etyylibentsoaattia ja 1,2 g (8,7 nunol) kaliumkarbonaattia ja sekoittamista jatkettiin vielä 24 tuntia huoneenlämmössä. Sen jälkeen reaktioseos suodatettiin Celite-kerroksen läpi lasisintterisuppilossa ja haih-5 dutettiin tyhjössä kiertohaihduttimessa viskoosiksi keltaiseksi öljyksi.

öljy adsorboitiin 20,0 g:aan silikageleiä Merck silica gel 60 (70-230 mesh) ja tämä esiadsorboitu faasi vietiin silikageelillä Merck silica gel 60 (230-400 mesh) täytetyn 10 pylvään yläosaan. Pylvään eluointi etyyliasetaatti/bentsee-ni-seoksella 6:4 antoi 2-amino-9-(2-bentsoyylioksietyyli-tiometyyli)-6-kloori-9H-puriinin luonnonvalkoisena kiinteänä aineena, joka oli yhtä yhdistettä ohutkerroskromatogra-fian mukaan, jossa käytettiin silikageeliä ja 8:2 etyyli-15 asetaatti/heksaaniseosta. Ή NMR, CDCl^: 8,0-8,15, 6H, mul-tipletti; 5,1 4H, leveä singletti; 4,5, 2H, tripletti; 2,985, 2H, tripletti.

Viimemainittu tuote (0,98 g, 2,70 mmol) pantiin 500 ml:n Parr-hydrauspulloon, johon mitattiin samalla 2,5 g 20 Pd(OH)2~katalysaattoria, 50 ml trietyyliamiinia ja 200 ml metanolia. Tätä seosta ravistettiin Parr-hydrauslaitteessa 3,4 atm:n vetypaineessa 16 tuntia huoneenlämmössä. Ohutker-roskromatografia, joka suoritettiin hydrogenolyysituottees-ta silikageelillä käyttäen 8-prosenttista metanoli/etyyli-25 asetaattia osoitti reaktion tapahtuneen vain osittain. Katalysaattori poistettiin suodattamalla Celite-kerroksen läpi lasisintrerisuppilossa, lisättiin 2,0 g uutta Pd(OH)2~ katalysaattoria ja 7,0 ml trietyyliamiinia ja reaktioseosta ravistettiin taas 3,4 atm:n vetypaineessa 20 tuntia. Tällöin 30 ohutkerroskromatografia osoitti reaktion olevan täydellinen, katalysaattori poistettiin kuten edellä ja metanoli poistettiin kiertohaihduttimella tyhjössä, jolloin saatiin kirkas lasimainen tuote, joka otettiin 100 ml:aan 1:1 metanoli-ve-si-seosta, joka sisälsi 20 % metyyliamiinia. Muodostunutta 35 liuosta sekoitettiin huoneen lämmössä 4 tuntia ja haihdutettiin kiertohaihduttimessa tyhjössä, jolloin saatiin amorfi- 14 76088 nen kiinteä aine. Kiinteä aine adsorboitiin 10,0 g:aan 70-230 meshin Merck silica gel 60 ja tämä esiadsorboitu faasi vietiin 230-400 meshin Merck silica gel 60:llä täytetyn pylvään yläosaan. Pylvään eluointi 10-prosenttisella 5 metanoli-etyyliasetaatilla antoi kiinteän aineen, joka kiteytyi etyyliasetaatti-heksaanista, jolloin saatiin ot-sikkoyhdiste neulasina, sp. 122-124°C, ohutkerroskromato-grafia: 1 täplä silikageelillä 15-prosenttisella metanoli/-etyyliasetaatilla; Ή NMR dmso-66 8,59, 1H, singletti; 8,15, 10 1H, singletti; 6,56, 2H, leveä singletti; 5,24, 2H, singletti; 4,83, 1H, tripletti; 3,49, 2H, multipletti; 2,69, 2H, multipletti.

Analyysi, teoreettinen C 42,65, H 4,92, N 31,09

Saatu: C 42,70, H 4,94, N 31,04.

15 Esimerkki 2 9-(2-asetoksietoksimetyyli)-2-amino-9H-puriini

Seosta, jonka muodostivat 0,82 g (2,92 mmol) 9-(2-hydorksietoksimetyyli)-2-amino-9H-puriinia, 48 mg (0,392 mmol) 4-dimetyyliaminopyridiiniä ja 0,75 ml (7,84 mmol) 20 etikkahappoanhydridiä 18 ml:ssa dimetyyliformamidia, sekoitettiin huoneen lämmössä kaksi vuorokautta.

Reaktioseos haihdutettiin tyhjössä ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja absorboitiin silikageeliin. Liuotin poistettiin "flash"-haihdutuksella ja jäljelle jää-25 nyt jauhe lisättiin pylvääseen, joka oli valmistettu "flash"-kromatografiaa varten. Eluointi 5-prosenttisella metanolil-la dikloorimetaanissa antoi 1,0 g puolikiteistä öljyä, joka uudelleen kiteytettynä bentseeni-heksaanista antoi analyyttisesti puhdasta 9-(2-asetoksietoksimetyyli)-2-amino-9H-30 puriinia, sp. 115-118°C.

Esimerkki 3 9-(2-asetoksietyylitiometyyli)-2-amino-9H-puriini 100 ml:n pulloon, joka oli varustettu magneettisekoit-timella ja CaCl2~kuivausputkella, annostettiin 1,0 g (4,4 35 mmol) 2-amino-9-(2-hydroksietyylitiometyyli)-9H-puriinia, 0,045 g (0,44 mmol) 4-dimetyyliaminopyridiiniä, 0,9 ml (8,8 15 76088 mmol) etikkahappoanhydridiä ja 20 ml kuivaa DMF. Liuosta sekoitettiin 24 tuntia huoneen lämmössä ja siihen lisättiin 5 ml MeOH. Liuos haihdutettiin tyhjössä (haudelämpötila 40°C) ja näin saatu ruskea öljy kromatografoitiin käyttäen 5 "flash"-menetelmää. Pylvään eluointi 1,5-prosenttisella me-tanolilla etyyliasetaatissa antoi keltaisen öljyn, joka kiteytyi seistessään. Vaaleankeltaiset kiteet liuotettiin 2-prosenttiseen MeOH:n tolueeniliuokseen ja käsiteltiin 0,05 g:11a Darco G-60. Metanoli haihdutettiin tolueeniliuok-10 sesta, jolloin saostui vaaleankeltaisia kiteitä.

Tuotetta kuivattiin 16 tuntia 78°C:ssa, jolloin saatiin otsikkoyhdiste, sp. 119-120,5°C.

Analyysi: laskettu yhdisteelle cioh13n5°2s: C 44,93, H 4,9, N 26,20 15 Saatu: C 44,97, H 4,96, N 26,17.

1H NMR DMSOg:ssa 8,59 (1H, s) 8,15 (1H, s), 6,52 (2H leveä, s), 5,26 (2H, s) 4,15 (2H t J =6, 36 Hz), 2,89 (2H t J=6, 36 Hz), 1,99 (3H,s).

Esimerkki 4 20 2-amino-9-(2-bentosyylioksietyylitiometyyli)-9H- puriini 5 litran kolmikaulapullo varustettiin ilmasekoitus-moottorilla, lasisella sekoitussauvalla, jossa oli tefloniapa sekä laitteistolla, jonka avulla oli mahdollista imeä 25 pulloon tyhjö ja syöttää sinne joko N2~ tai H2-kaasua. Pulloon annostettiin sitten 7,0 g (0,019 mol) 2-amino-9-(2-bentsoyylitiometyyli)-6-kloori-9H-puriinia, 14,0 g palla-diumhydroksidia hiilellä, 12,0 ml (0,163 mol) trietyyli-amiinia, 75,0 ml vettä ja 3,0 litraa metanolia. Sen jälkeen 30 pullo suljettiin tiiviisti ja sinne imettiin tyhjö vesi-suihkupumpulla, huuhdeltiin N2-kaasulla, imettiin tyhjö ja jatkettiin kolme täyttä kierrosta. Pulloon imettiin tyhjö, huuhdeltiin H2-kaasulla, imettiin tyhjö ja täytettiin uudelleen H2-kaasulla. Sekoitusmoottori käynnistettiin ja reak-35 tioseosta sekoitettiin H2:ssa 4 vuorokautta huoneen lämmössä.

ie 76088

Liuos suodatettiin lasisintterin läpi ja katalysaattori pestiin 800 ml:11a metanolia. Metanoliliuos haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin 6,0 g vaaleankeltaista kiinteää ainetta. Kiinteä aine absorboitiin 18,0 gsaan 70-230 5 meshin silikageeliä 60 ja tämä esiabsorboitu faasi vietiin 230-400 meshin silikageeli 60:llä täytetyn pylvään yläosaan. Pylvään eluointi "flash"-menetelmällä käyttäen 5-prosent-tista metanolia etyyliasetaatissa antoi valkean kiinteän aineen, joka uudelleen kiteytettiin etyyliasetaatti/heksaa-10 nista, kuivattiin 78°C:ssa 1,0 mmHg:n tyhjössä valkoisiksi hiutaleiksi, sp. 120-121°C, H NMR dsmo:ssa dg 8,60 (1H, s), 8,19 (1H, s), 8,0, 7,5 (5H, m), 6,55 (2H, s); 5,32 (2H, s), 4,52 (2H, t), 3,06 (2H, t).

Analyysi teoreettinen: C 54,69, H 4,59, N 21,26 15 Saatu: C 54,68, H 4,64, N 21,24.

2-amino-9-(2-hydroksietyylitiometyyli)-9H-puriini saatiin jatkettaessa eluointia yllä esitetyssä pylväässä.

Claims (5)

17 76088 5

1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava (I) xx> h2n

10 CH2XCH2CH2OH jossa X on happi- tai rikkiatomi, ja niiden fysiologisesti hyväksyttävien esterien ja suolojen valmistamiseksi, lukuunottamatta kaavan (I) mukaista yhdistettä, jossa X on happi ja sen bentsoaattiesteriä ja fysiologisesti hyväksyttäviä suoloja, tunnettu siitä, että a) poistetaan suojaryhmät yhdisteestä, jolla on kaava (II) 20 *1 Il \> (II) Rixk. Jk. y a n CH0XCH0CH„R4 2 2 2 a jossa X tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty, R* 25 tarkoittaa aminoryhmää tai suojattua aminoryhmää ja 4 R tarkoittaa hydroksiryhmää tai suojattua hydroksiryh- a 1 mää, edellyttäen, että ainakin toinen symboleista R cl ^ d 4 R tarkoittaa suojattua ryhmää; tai b) hydrataan yhdiste, jolla on kaava (III) 30 CH2XCH2CH2OH ie 76088 jossa X tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty ja M tarkoittaa halogeeniatomia, tai sen suola tai esteri? ja mahdollisesti suoritetaan yksi tai useampia seuraavista reaktioista missä tahansa halutussa järjestyksessä: 5 i) kun saatu tuote om emäs, muutetaan tämä emäs fysiologisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolakseen, ii) kun saatu tuote on happoadditiosuola, muutetaan tämä suola vastaavaksi emäkseksi, (iii) kun saatu tuote on kaavan (I) mukainen yhdis-10 te, muutetaan tämä yhdiste fysiologisesti hyväksyttäväksi esterikseen; ja/tai iv) kun saatu tuote on kaavan (I) mukaisen yhdisteen esteri, muutetaan tämä esteri vastaavaksi kaavan (I) mukaiseksi yhdisteeksi. 15 2) Patenttivaatimuksen la) mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mikä tahansa asyylisuojaryh-mä poistetaan hydrolysoimalla.

3. Patenttivaatimuksen Ib) mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että hydraus suoritetaan palla-20 diumkatalysaattorin läsnäollessa. il 19 n ^ 76088

1. Förfarande för framställning av terapeutiskt akti-va föreningar med den allmänna formeln (I) 5 ,.xx> CH9XCH9CH90H 10 z väri X är en syre- eller svavelatom, och fysiologiskt god-tabara estrar och salter därav, med undantag av en förening med formeln I väri X är syre och bensoatestern och fysiologiskt godtagbara salter därav, kännetecknat 15 därav, att man a) avlägsnar skyddsgrupperna frän en förening med formeln (II) - iOC> CH2XCH2CH2Ra väri X är som ovan definierats, R* betecknar en aminogrupp 25 eller en skyddad aminogrupp och R^ betecknar en hydroxi-grupp eller en skyddad hydroxigrupp, med villkor att ät-minstone en av symbolerna och betecknar en skyddad grupp; eller b) hydrerar en förening med formeln (III) 30 M is ^ l111' h2n 35 ch2xch2ch2oh