KR880007722A - 합성유전자에 의한 대장균으로부터 연어 성장호르몬의 제조방법 - Google Patents

Abstract

내용 없음.

Description

합성유전자에 의한 대장균으로부터 연어 성장호르몬의 제조방법

본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

제1도는 전체 연어 성장호르몬 유전자에 해당하는 28종류의 합성 올리고 뉴클리오티드의 염기 순서를 5′ 말단에서 3′말단 순서로 나타낸 것이며,

제2도는 제1도의 올리고 뉴클리오티드의 접합전략을 도시한 것이며,

제3도는 합성 올리고 뉴클리오티드의 접합을 위해 대장균 운반체 pUC 18에로의 전체 연어 성장호르몬 유전자 재조합 과정을 나타낸 것이고,

제4도는 확인된 연어 성장호르몬의 염기 배열 순서 및 아미노산 배열 순서를 나타낸 것이고,

제5도는 재조합된 전체 연어 성장호르몬 유전자를 대장균 발현운반체로 재조합 시키는 과정을 나타낸 것이다.

Claims (6)

1. 연어 성장호르몬의 아미노산 배열 순서에 따라 올리고 뉴클리오티드를 합성한 후 이를 대장균 운반체에 클로닝하여 아미노 말단 유전자가 없는 연어 성장호르몬 유전자를 제조한 다음 이 유전자를 아미노 말단 합성유전자와 함께 대장균 운반체에 접합시켜 연어 성장호로몬 전체 유전자를 만든 후 이를 합성연결체와 함께 trp 프로모터가 있는 발현운반체에 접합시켜 최종발현 운반체를 만든 후, 이를 대장균내에서 발현시킴을 특징으로 하는 연어 성장호르몬의 제조방법.
2. 제1항에 있어서 합성 올리고 뉴클리오티드에는 제한효소 Xba I, HIndIII, Sal I의 인지부위가 존재함을 특징으로 하는 연어 성장호르몬의 제조방법.
3. 제1항에 있어서 아미노 말단의 일부가 없는 연어 성장호르몬 유전자는 합성 올리고 뉴클리오티드의 카복시쪽 HindIII/Sal I의 절편과 아미노쪽 Xba I/HindIII의 절편을 Xba I, HindIII, Sal I의 제한효소 인지부위가 존재하는 대장균 운반체(pUC 18)에 각각 클로닝시켜, 증식시킨 후 이 절편들을 다시 분리하여 접합시킨 후 대장균 운반체(pUC 18)에 재클로닝시켜 제조된 것임을 특징으로 하는 연어 성장호르몬의 제조방법.
4. 제1항에 있어서 아미노 말단 합성 유전자는 제한효소 Nde I과 Xba I의 인지부위가 존재하는 윗가닥 38mer(5′-T ATG ATC GAA AAT CAG CGT TTA TTC AAC ATT GCA GTT T-3′)와 아랫가닥 40mer(3′-AC TAG CTT TTA GTC GCA AAT AAG TTG TAA CGT CAA AGA TC-5′)로 구성된 것임을 특징으로 하는 연어 성장호르몬의 제조방법.
5. 제1항에 있어서, 최종발현 운반체는 trp 프로모터가 있는 발현운반체를 제한효소 Hpa I와 Sal I으로 절단시킨 후 여기에 연어 성장호르몬과 합성연결체를 접합시켜서 된 것임을 특징으로 하는 연어 성장호르몬의 제조방법.
6. 제1항 또는 제5항에 있어서, 합성연결체는 제한효소 Hpa I과 Nde I의 인지부위가 존재하는 윗가닥 36mer(5′-AAC TAG TAC GCA AGT TCA CGT AAA AAG GGT AAT ACA-3′)와 아랫가닥 38mer(3′-TTG ATC ATG CGT TCA AGT GCA TTT TTC CCA TTA TGT AT-5′)로 구성된 올리고 뉴클리오티드 임을 특징으로 하는 연어 성장호르몬의 제조방법.

   ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.