KR850700214A - B형 간염비루스 표면항원과 중합된 인체혈청 알부민의 수용체를 지니는 입자를 함유하는, 백신의 제조에 유용한 조성물 및 그 입자생산성의 동물세포와 그 세포의 획득방법 - Google Patents
B형 간염비루스 표면항원과 중합된 인체혈청 알부민의 수용체를 지니는 입자를 함유하는, 백신의 제조에 유용한 조성물 및 그 입자생산성의 동물세포와 그 세포의 획득방법Info
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Claims (22)
- HBsAg항원의 면역학적 특성과 18 내지 25nm의 크기 특히 20 내지 22nm 크기를 가지는 구형의 폴리펩티드 입자로 이루어지며 CsCl 농도 구배에서 1.20―1.22g/ml의 농도영역으로 그 분리를 가능케하는 밀도와 데인입자 및 HBe항원을 포함하지 않는 순도를 가지면서 HBc를 함유하며, 그 구형의 입자가 또한 중합된 인체알부민에 대한 수용체를 함유하는 것을 특징으로 하는 배신제조의 조성물.
- 제1항에 있어서, 34,000 달톤정도의 분자량을 갖는 폴리펩티드의 존재를 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 34,000 달톤정도의 이들 폴리펩티드가 전술한 입자의 폴리펩티드 성분의 총량의 10%이상, 바람직하게는 20% 이상의 비율로 존재하는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1 내지 3항의 어느한 형에 있어서, 인체유래의 혈청성분이 존재하지 않는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 비루스성 B형 간염의 비루스 게놈의 S 및 pre―S 부위를 암호하는 DNA 서열을 함유하며, 이 서열이 그 유전자의 전사가 직접적으로 동물세포내에서 이것의 조절하에 개시되도록 하는 공지된 외생프로모터의 직접적인 조절하에 위치하여, 그 벡터의 내측에 존재하는 것을 특징으로 하는, 진핵세포의 변협, 특히 배양중의 인체나 동물세포의 변형에 적합한 벡터.
- 제5항에 있어서, 전술한 일차프로모터가 비루스 SV40으로부터 유래하며 이 프로모터가 특히 비루스 SV40의 조생 프로모터인 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제5항 내지 6항에 있어서, 상기 S 및 pre―S 부위를 암호하는 상기 DNA 서열이 일차프로모터의 결합된 할성화서열과 그 프로모터를 포함하는 DNA 분체바로뒤에 위치하는 것을 특징으로하는 벡터.
- 제7항에 있어서, 상기 분체가 300 내지 400 염기쌍을 포함하는 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제5항 내지 8항 중 어느 한 항에 있어서, 다른 프로모터의 조절하에, 효소와 같은 라벨을 암호하는 DNA를 포함하며, 이 이차프로모터가 상기의 일차 프로모터보다 약한 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제9항에 있어서, 그 라벨이 디하이드로폴레이트 리덕타제를 암호하는 유전자로 구성되는 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제9항 또는 10항에 있어서, 그 이차 프로모터가 마우스 유방암 비루스(MMTV)로부터 유래되는 것을 특징으로하는 벡터.
- 배양제로 유지될 수 있으며, 제5항 내지 11항의 어떠한 벡터에 의해 변형되는 것을 특징으로 하는 동물세포라인.
- 제12항에 있어서, 포유동물유래, 특히 CHO 세포로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 세포라인.
- 그 배양배지로 제1항에서 4항에서 정의된 바와 같은 입자를 24시간동안 106세포당 1mg 이상의 HBsAg 항원, 특히 10mg이상의 비율로 배출하는 것을 특징으로 하는, 제12항 또는 13항에 의한 세로포부터 이루어지는 라인.
- 2.1kb 이상, 특히 2.2 내지 2.8kb 정도의 크기를 가지는 특히 HBV―RNA의 존재를 특징으로 하는 라인.
- 제15항에 있어서, 약 2.4―2.5kb의 크기를 가지는 HBV―RNA의 존재를 특징으로 하는 라인.
- 제15 또는 16항에 있어서, S 및 pre―S부위, 특히 pre―S 부위에서 개시되는 전사로부터 결과된 것과 같은 약 2.1kb 크기의 특이 HBV―RNA가 또한 동시에 존재하는 것을 특징으로 하는 라인.
- 제13 내지 17항의 어느한 항에 있어서, HBsAg 항원의 면역학적 특성을 가지며, 부분적으로 약 3,000 분자량의 단백질로 이루어지며, HBsAg와 pHSA 수용체의 항원부위를 가지는 입자를 배출하는 것을 특징으로 하는 라인.
- 배양체로 유지될 수 있는 인체 또는 동물유래의 세포라인을 제5항 내지 11항의 어느하나의 벡터로써 변형시키며 B형간염 비루스게놈의 S 및 per―S부위를 표현하는 배양체를 분리하는 것을 특징으로 하는 제14항 내지 18항의 어느한 항에 의한 세포라인의 생산방법.
- 제19항에 있어서, 그 벡터가 제9항 내지 11항 중 어느하나에 의한 것이며 변형된 세포라인의 배양이 배양중인 콜로니의 최소한 일부에서 그 라벨을 암호하는 유전자 복제수의 증가를 자극하기에 충분한 농도로 그 배양배지중에서 그 함량이 조절되는 라벨의 억제제 존재하에서 실시되며, 그 라벨을 암호하는 유전자수의 확대로써, 또한 저항성 콜로니의 선별과 상기 입자의 생성된 양을 분비하는 세포클론의 획득이 가능해지는 것을 특징으로하는, 세포라인의 생산방법.
- 제20항에 있어서, 그 라벨이 디하이드로폴레이트―리턱타제를 암호하는 서열 또는 유전자로 이루어지며 그 억제제는 메토트렉세이트로 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법.
- 선택된 투여형태에 적합한 약학부형제와 함께, 제1항 내지 4항 중 어느 하나에 의한 조성물의 유효분량을 함유하는 것을 특징으로 하는 배신.※참고사항:최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임
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