KR20240077267A - 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 함유하는 항스트레스 및 인지기능 개선 효능을 갖는 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 함유하는 항스트레스 및 인지기능 개선 효능을 갖는 조성물에 관한 것이다.

Description

옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 함유하는 항스트레스 및 인지기능 개선 효능을 갖는 조성물{Composition containing corn silk and hydrangea leaf extracts with anti-stress and cognitive function improvement effects}
본 발명은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 함유하는 항스트레스 및 인지기능 개선 효능을 갖는 조성물에 관한 것이다.
현대인에게 기억력은 급변하는 생활에서 그 중요성이 증대되고 있으며, 사회적으로 학습량이 많은 청소년에서부터 노년에 이르기까지 주요 관심 대상이 되고 있다.
또한, 최근 생활수준의 향상과 의학기술의 발달에 따라 노령 인구가 증가하여 인구의 고령화 현상이 두드러지고 있으며, 조직사회의 치열한 경쟁화에 따른 극심한 스트레스로 인한 성인병의 발병률 또한 급격한 증가 추세를 보이고 있다. 사망원인의 경우 과거 주원인이었던 감염형 질환에서 대표적인 성인병인 순환기계 질환, 암 등에 의한 사망이 전체의 절반을 넘기기에 이르렀다. 이에 건강한 삶을 누리고자 하는 '웰빙(wellbeing)' 이 하나의 큰 관심사로 대두하게 되고 장수에 대한 욕구 증가로 일상생활을 통한 성인병 및 노인성 질환에 대한 예방에 관심이 고조되고 있다. 최근 식품성분에 대해 새로운 관점에서의 체계적인 연구가 발전함에 따라 식품기원의 특정 성분들이 인체의 신경계, 생체 방어계, 세포분화(cell differentiation) 등 각종 생리기능 조절계 등에 작용하여 직간접적으로 생체조절기능 효과를 나타낸다는 사실들이 밝혀지고 있다. 이들 특정성분들에 의한 생체 조절계 및 생체 방어계에 대한 적절한 조절이 가능하게 된다면 그것은 가장 자연스러운 건강유지를 위한 최적의 수단이 될 수 있음을 의미한다.
노인성 치매의 일종인 알츠하이머병(Alzheimer's disease, AD)로부터 유발되는 기억력 및 학습능력의 상실 등 인지 기능 장애는 대뇌 기저부의 아세틸콜린(Acethylcholine)성 신경세포의 손상에서 비롯된다는 연구결과에 의해 무스카린성 아세틸콜린 수용체(muscarine acetylcholine receptor)에 대한 효능제(agonist), 아세틸콜린 생성촉진제, 아세틸콜린 분해효소(Acetylcholinesterase, AChE) 저해제 등 여러 가지 작용기전에 따라 아세틸콜린성 신경세포의 기능을 강화시켜줄 수 있는 약물들이 개발되어 왔다. 실제로 현재 각국에서 사용되고 있는 알츠하이머병 치료제는 이러한 아세틸콜린 분해효소 억제제가 대부분이며, 타크린(tacrine)과 도네페질(donepezil) 등이 이에 속한다. 이 밖에도 리바스티그민(rivastigmin), 갈라타민(galatamine) 등이 사용되고 있다.
오늘날은, 퇴행성 뇌신경 질환으로 인한 인지기능 또는 기억능력 저하 현상 개선을 위한 더욱 효과적인 제제(건강기능식품 소재 포함)의 개발 수요가 어느 때보다 높은 시기이다. 결국, 퇴행성 뇌신경 질환, 특히 치매 치료에 탁월한 효과를 나타내고 부작용이 없는 치료제에 대한 연구개발이 절실한 실정이다.
대한민국 공개특허 제10-2019-0056860호(2019.05.27. 공개)
본 발명이 해결하고자 하는 과제는, 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물의 단독 사용 대비 유의하게 향상된 항스트레스 효과 및 인지기능 개선 효과를 갖는 조성물을 제공하는 것이다.
일 양태에서 본 발명은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 함유하는 항스트레스 및 인지기능 개선 효능을 갖는 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 조성물은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 1:0.5~2 중량비로 포함할 수 있다.
본 발명에서 옥수수수염 추출물은 70%(v/v) 이상의 에탄올 추출물일 수 있다.
본 발명에서 수국 잎 추출물은 50%(v/v) 이상의 에탄올 추출물일 수 있다.
본 발명에서 상기 옥수수수염 추출물은 옥수수수염을 에탄올에 투입하고 20~30℃의 온도조건에서 4~6일 동안 침지하여 얻은 것일 수 있다.
본 발명에서 상기 수국 잎 추출물은 수국 잎을 에탄올에 투입하고 50~70℃의 온도 조건에서 2~4시간 동안 감압 추출하여 얻은 것일 수 있다.
다른 양태에서 본 발명은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 함유하는 항스트레스 및 인지기능 개선 효능을 갖는 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 조성물은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 1:0.5~2 중량비로 포함할 수 있다.
본 발명에서 옥수수수염 추출물은 70%(v/v) 이상의 에탄올 추출물일 수 있다.
본 발명에서 수국 잎 추출물은 50%(v/v) 이상의 에탄올 추출물일 수 있다.
본 발명에서 옥수수수염 추출물은 옥수수수염을 에탄올에 투입하고 20~30℃의 온도조건에서 4~6일 동안 침지하여 얻은 것일 수 있다.
본 발명에서 상기 수국 잎 추출물은 수국 잎을 에탄올에 투입하고 50~70℃의 온도 조건에서 2~4시간 동안 감압 추출하여 얻은 것일 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 옥수수수염 추출물 또는 수국 잎 추출물의 단독 사용 대비 아세틸콜린에스터라제의 활성을 억제하는 효과가 우수하고, 코르티코스테론 분비 억제 효과가 우수하여, 뇌신경질환 등의 인지 기능 질환의 개선 효과 및 스트레스로 인한 신체적, 심리적 증상의 개선 효과가 있는 조성물을 제공할 수 있다.
도 1은 비교예 1의 세포 독성 효과를 분석한 결과이다(A:MTT assay, B: LDH assay).
도 2는 비교예 2의 세포 독성 효과를 분석한 결과이다(A:MTT assay, B: LDH assay).
도 3은 본 발명의 일 실시형태에 따른 실시예의 세포독성 효과를 분석한 결과이다(A:MTT assay, B: LDH assay).
도 4는 비교예 1의 글루타메이트 독성 저해 효과를 나타낸 것이다.
도 5는 비교예의 글루타메이트 독성 저해 효과를 나타낸 것이다.
도 6은 본 발명의 일 실시형태에 따른 실시예의 글루타메이트 독성 저해 효과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시형태에 대하여 첨부한 도면을 참고로 하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 실시형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시형태에 한정되지 않는다. 명세서 전체를 통하여 유사한 부분에 대해서는 동일한 도면 부호를 붙였다.
또한, 본 발명에서 수치와 관련하여 용어 "약(about)", "대략(approximately)" 또는, 적어도(at least)와 같은 유사한 표현이 사용되는 경우, 해당 수치를 기준으로 ±10%, ±7%, ±5%, ±3%, ±2%, 또는 ±1%의 이론적, 실험적, 통계적, 또는 경험칙상의 오차가 허용되는 것으로 의도된다.
본 발명은 항스트레스 및 인지기능 개선 효과를 갖는 조성물에 관한 것으로 구체적으로 옥수수수염 추출물과 수국 잎 추출물의 조합에 의한 시너지 효과에 관한 것이다.
일 양태에서 본 발명은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 함유하는 항스트레스 및 인지기능 개선 효능을 갖는 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 조성물은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 1:0.5~2 중량비로 포함할 수 있으며, 바람직하게는 1:1 중량비로 포함할 수 있다.
상기 수국 잎 추출물의 중량비가 0.5 이하이거나, 2를 초과하는 경우 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물의 혼합에 따른 항스트레스 및 인지기능 개선 효과를 나타낼 수 없다.
본 발명에서 사용하는 용어 '스트레스'는 인체에 해로운 육체적 또는 정신적 자극이 가해졌을 때 그 생체가 나타내는 반응으로 심리적 또는 신체적 건강상태를 포괄하는 의미로, 스트레스로 인한 다양한 증상(예컨대, 우울증, 인지기능 또는 학습 능력 감소, 두통, 소화불량, 피로, 피부의 거칠어짐, 신경증, 위궤양 등)을 포괄하는 의미로 사용될 수 있다.
본 발명에서 사용하는 용어 '인지기능장애'는 스트레스나 우울 증상에 의해 유발된 주의 집중력, 기억력, 판단력, 학습능력이 저하되는 신체적 또는 정신적 건강상태를 모두 포괄하는 것을 의미한다.
본 발명에서 사용하는 용어 '옥수수수염'은 옥수수의 열매 부분을 싸고 있는 실 같은 부분으로 옥수수(Zea mays L)의 꽃술을 말한다. 옥수수수염은 예로부터 '옥촉수(玉蜀鬚)' 또는 '옥미수(玉米鬚)', '옥촉서예(玉蜀黍蘂)'로 불리며, 이뇨작용, 강압작용, 지혈작용 등이 있어 식품 또는 식품첨가물로 널리 활용되고 있다. 특히 차(茶), 또는 음료로서 많이 달여서 복용하고 있다.
본 발명에서 사용하는 용어 "수국(Hydrangeae Folium dulcis)"은 쌍떡잎식물 장미목(Rosales) 수국과(Hydrangeaceae) 수국속(Hydrangea)의 낙엽관목으로, 학명으로는 Hydrangea macrophylla for. otaksa, Hydrangea serrata Seringe, Hydrangea serrata var. amagiana 등이 알려져 있다. 수국은 일본이 원산지이고, 우리나라에서는 주로 남부지방인 제주도, 거제도, 남해안 등지에서 재배되고 있으며, 민간에서는 수국의 꽃을 말려 해열제로 사용되어 왔다. 또한, 수국 추출물은 항말라리아 효과, 항산화 효과, 혈압강하 효과, 당뇨 및 당뇨합병증 예방 효과가 있는 것으로 알려져 있고, 수국 뿌리에 함유되어 있는 할로푸지논은 여러가지 자가면역질환의 진행을 억제하는 성분으로 알려져 있다.
본 발명에서 “추출물”은 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
본 발명에서 추출물의 건조한 식물로부터 유용한 성분들이 파괴되지 않는 범위에서 공지의 방법으로 진행될 수 있고, 예를 들어 음지에서 자연건조의 방법으로 진행될 수 있다. 또한, 파쇄 또는 분쇄는 이후 추출과정에서 식물의 유용한 성분들이 충분하게 추출될 수 있을 정도로 파쇄 또는 분쇄하여 분말화할 수 있다. 건조와 파쇄 또는 분쇄 공정은 필요에 따라서 순서를 뒤바꿔서 진행하거나 반복하여 실시할 수 있다.
본 발명에서 추출물은 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있으며, 구체적으로는 용매추출법, 수침추출법, 냉침추출법, 온침추출법 또는 초음파 추출법 등일 수 있으며, 통상의 추출기기, 초음파분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다.
본 발명에서 추출물의 추출용매는 물 또는 유기용매일 수 있으며, 구체적으로 극성 용매, 비극성 용매 또는 이들의 혼합액일 수 있고, 일예로, 알코올, 알코올 희석수, 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 에틸에테르, 클로로포름 또는 이들의 혼합액일 수 있으며, 알코올은 C1 내지 C5 알코올, 일예로 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 이소프로판올 등일 수 있다. 또한, 알코올 희석수는 알코올을 50 내지 99.9%(v/v)로 물에 희석한 것일 수 있다.
또한, 용매로 추출한 추출물은 이후, 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 에틸에테르, 클로로포름, 물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 용매로 분획과정을 더욱 실시할 수 있다. 분획 시 용매는 2종 이상 사용할 수 있으며, 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하거나 혼합하여 사용하여, 각 용매 분획물을 제조할 수 있다.
제조된 추출물 또는 분획과정을 수행하여 수득한 분획물은 이후 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 구체적으로 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 농축은 감압 농축기, 일예로 회전 증발기를 이용하여 감압 농축할 수 있으며, 건조는 일예로 동결건조법으로 수행할 수 있다.
본 발명에서 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물의 일 실시형태로 옥수수수염 추출물은 70%(v/v) 이상의 에탄올 추출물일 수 있고, 구체적으로 90~98%(v/v)의 에탄올 추출물일 수 있으며, 더욱 구체적으로 95%(v/v) 에탄올 추출물일 수 있다. 또한, 수국 잎 추출물은 50% 이상의 에탄올 추출물일 수 있고, 구체적으로, 50~70%(v/v)의 에탄올 추출물일 수 있고, 더욱 구체적으로 60%(v/v) 에탄올 추출물일 수 있다.
본 발명에서 옥수수수염 추출물은 옥수수수염을 에탄올에 투입하고 20~30℃의 온도조건에서 4~6일 동안 침지하여 얻을 수 있고, 구체적으로 옥수수수염을 10배수의 95%(v/v) 에탄올에 투입하고 25℃의 온도 조건에서 5일 동안 침지하여 얻을 수 있다.
본 발명에서 수국 잎 추출물은 수국 잎을 에탄올에 투입하고 50~70℃의 온도, 0.1~0.5atm의 압력 조건에서 2~4시간 동안 감압 추출하여 얻을 수 있고, 구체적으로 수국 잎을 10배수의 60%(v/v) 에탄올에 투입하고 60℃의 온도 조건에서 3시간 동안 감압 추출하여 얻을 수 있다.
본 발명의 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물은 추출 이후 농축, 감압건조, 동결건조 등의 방법을 추가로 거칠 수 있다.
일 실시형태에서, 본 발명에 따른 약학 조성물은 유효성분에 통상의 무독성 약제학적으로 허용 가능한 담체 및 부형제 등을 첨가하여 약제학적 분야에서 통상적인 제제, 예를 들면 정제, 환제, 경·연질 캡슐제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제, 엘릭서제(Elixirs) 등의 경구투여용 제제 또는 정맥내, 피하, 설하, 근육내 투약용 멸균성 수성 또는 오일상 용제의 비경구 투여용 제제로 제제화할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물에 사용될 수 있는 약제학적으로 허용 가능한 담체는 제형화시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 마그네슘스테아레이트 및/또는 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물에 사용될 수 있는 부형제로는 감미제, 결합제, 용해제, 용해보조제, 습윤제, 유화제, 장화제, 흡착제, 붕해제, 산화방지제, 방부제, 활탁제, 충진제 및 방향제 등이 있으며, 이러한 부형제의 비율 및 성질은 선택된 정제의 용해도, 화학적 특성, 선택된 투여경로 및 표준 약제 실무에 의해 결정될 수 있다. 부형제의 예로는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로오스, 글라이신, 실리카, 탈크, 스테아린산, 마그네슘 스테아레이트, 글리세릴모노스테아레이트, 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 녹말, 젤라틴, 트라가칸트 고무, 아르기닌, 알긴산, 소디움 알지네이트, 메틸셀룰로오스, 소디움 카르복실메틸셀룰로오스, 아가, 물, 에탄올, 폴리에틸렌글리콜, 폴리비닐피롤리돈, 염화나트륨, 염화칼슘, 오렌지 에센스, 딸기 에센스 및 바닐라 향 등을 들 수 있다.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 비경구 투여 형태로 제형화될 수도 있는데, 이러한 경우 정맥 내 투여, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 피하 투여 또는 국부 투여 등을 이용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이 때, 비경구 투여용 제형으로 제형화하기 위하여, 상기 약학 조성물은 유효성분이 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합되어 용액 또는 현탁액으로 제조되고, 이러한 용액 또는 현탁액이 앰플 또는 바이알의 단위 투여형으로 제조될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 멸균되거나, 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제를 더 포함할 수도 있고, 기타 치료적으로 유용한 물질을 더 포함할 수도 있으며, 혼합, 과립화 또는 코팅의 통상적인 방법에 따라 제제화될 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 약학 조성물에서 유효성분의 사람을 포함하는 포유류에 대한 투여용량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질병정도에 따라 달라질 수 있다. 일반적으로 하루에 0.001 내지 500 ㎎/㎏(체중), 바람직하게는 0.01 내지 300 ㎎/㎏(체중)의 유효량으로 상기 약학 조성물에 포함될 수 있고, 이러한 약학 조성물은 1 일 1 회 또는 2 회 이상 분할되어 경구 또는 비경구적 경로를 통해 투여될 수 있다.
그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중 및 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 인지기능 저하에 의한 인지장애 질환을 개선, 예방 또는 치료할 수 있다.
상기 인지장애 질환은 기억력, 공간지각력, 판단력, 집행기능, 언어능력 등의 기능 저하로부터 발생되는 질환을 의미하는 것으로, 바람직하게는 학습장애, 기억력 장애, 건망증, 경도인지장애(일상생활이 가능한 정상과 치매의 중간) 또는 신경퇴행성 질환(중증인지장애에 해당)으로 이루어진 군에서 선택되는 질환이고, 상기 신경퇴행성 질환은 알츠하이머병, 파킨슨병, 헌팅턴병, 피크병, 근위축성 축삭경화증 및 크로이츠펠트-야콥병으로 이루어진 군에서 선택되는 질환이다. 그러나 특별히 이에 제한되지 않고 다양한 원인에 기인한 인지장애 관련 질환이라면 모두 포함될 수 있다.
알츠하이머　질환은 만성 및 진행성 신경퇴행성 질환으로, 기억력 손실, 방향감각 상실, 인식력 기능장애 및 행동장애를 일으킨다. 알츠하이머　질환은 전뇌 기저부 및 대뇌피질에서 콜린의 손실과 관련이 있다. 콜린 신경전달의 부족이　알츠하이머　질환 환자의 학습력 및 기억력 감퇴에 결정적인 역할을 하므로 콜린에스테라아제를 저해함으로써 콜린의 기능을 활성화시키는 것이　알츠하이머　질환의 치료에 효과적일 수 있다는 사실이 보고된 바 있다. 타크린(Tacrine), 도네페질(Donepezil), 리바스티그민(Rivastigmine) 및 갈란타민(Galanthamine)을 포함한 합성　아세틸콜린 에스테라제 저해제가　알츠하이머 질환 치료제로 사용되어 왔다. 그러나, 이들 약물은 불충분한 활성, 간독성 및 위장관 장애 등의 부작용을 유발하는 것으로 알려져 있어, 이에 대한 개선이 요구된다.
아울러,　파킨슨병,　알츠하이머　치매, 뇌졸중 등으로 대표되는 퇴행성 신경계 뇌질환은 신경세포 손상과 소실로 이어지는 세포 사멸이 그 궁극적 원인인 것으로 알려져 있다. 퇴행성 신경계 뇌질환의 신경 세포 죽음의 주요 원인으로 활성산소가 지적되고 있다. 활성산소란 호흡과정에서 체내로 들어간 산소가 산화과정에 이용되면서 여러 대사과정에서 생성되어 생체조직을 공격하고 세포를 손상시키는 산화력이 강한 산소를 말한다. 이러한 활성산소는 생체 세포 내 DNA, 세포 구성 단백질, 지질 등에 비가역적인 손상을 준다. 특히 뇌세포에서 활성산소가 다량 생성되면 그로 인한 산화적 스트레스가 세포 내 미토콘드리아의 구조와 기능에 변화를 일으킴으로써　파킨슨병,　알츠하이머　등의 신경계 뇌질환을 일으키게 된다.
본 발명의 약학 조성물은 스트레스로 인해 유발될 수 있는 신체적 증상 및 심리적 증상 등을 개선, 예방 또는 치료할 수 있다.
상기 스트레스로 유발되는 신체 증상의 예로는 과민성 대장염, 소화불량, 위염, 위경련, 위십이지장궤양, 변비 등의 소화기 증상, 편두통과 같은 신경계 증상, 발기부전, 불감증과 같은 비뇨기 증상, 고혈압, 협심증 등과 같은 심혈관 증상, 탈모, 두드러기 등의 피부 증상 등을 들 수 있다. 이와 같은 증상은 지속적인 스트레스에 의하여 질환으로 발전할 수 있다. 상기 심리적 증상의 예로는 우울증, 불안장애, 불면증, 신경과민 등을 들 수 있다.
본 발명에서 약학 조성물의 구체적인 제형은, 예를 들어, 다중 라멜라 에멀젼(Multi lamella emulsion) 또는 사방 결정 구조(Orthorhombic crystalline phase) 형태일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
다른 양태에서 본 발명은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 함유하는 항스트레스 및 인지기능 개선 효능을 갖는 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 함유하는 항스트레스 및 인지기능 개선 효능은 전술한 바와 같다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 및 액제 등의 형태로 제조될 수 있으며, 본 발명의 옥수수수염 및 수국 잎 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 종류에는 별다른 제한이 없으며, 예를 들어 각종 음료, 껌, 차, 비타민 복합제 및 건강보조 식품류 등이 있다.
본 발명에서 건강기능식품 조성물은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물 이외에도 다른 성분을 추가할 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약 추출물, 식품학적으로 허용되는 식품보조첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 “식품보조첨가제”는 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
천연 탄수화물의 예는 포도당, 과당 등의 단당류; 말토스, 수크로스 등의 이당류; 및 덱스트린, 사이클로덱스트린 등의 다당류와, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이 있으며, 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴 등), 스테비아 추출물(레바우디오시드 Ａ, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없으며, 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있다.
본 발명에서 “건강기능식품”은 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 건강기능이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조 가능하며, 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어날 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예: 옥수수수염 및 수국 잎 추출물의 제조
옥수수수염 추출물은 건조된 옥수수수염(신광약업사, 한국)을 10배수의 95%(v/v) 에탄올(우리주정, 한국)에 투입하고 25℃의 조건에서 5일간 침지하고 여과하여 제조하였으며, 수국 잎 추출물은 수국 잎(제주산)과 10배수의 60%(v/v) 에탄올(덕산과학, 한국)을 감압추출기에 투입하고 60℃에서 3시간 동안 추출하고 여과하여 제조하였다.
제조된 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 1:1로 혼합하고, 농축과정을 거친 후, -75℃의 초저온 냉장고(Deep Ffreezer)에서 냉동 후, 동결 건조하여 시험예의 시료로 사용하였다.
비교예 1
실시예에서 제조한 옥수수수염 추출물을 준비하였다.
비교예 2
실시예에서 제조한 수국 잎 추출물을 준비하였다.
시험예 1: 세포독성 분석
1. 세포배양
Neuro2a 세포(마우스 신경 아세포종 세포주)는 ATCC(American Type Culture Collection)(USA)에서 얻고, 10% 우태아 혈청(FBS, welGENE Inc.gyeongsan, Korea) 및 1% 페니실린-스트렙토마이신(welGENE Inc.gyeongsan, Korea)을 포함하는 Minimum Essential Medium (WelGENE Inc., Gyeongsan, Korea)에서 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하였다.
2. 세포 독성 평가
실시예, 비교예 1 및 비교예 2에 대한 세포 독성을 평가하였다.
각 물질들이 세포독성을 가지는지 여부를 시험하기 위해 쥐의 신경모세포종 세포주 인 neuro2a(ATCC, Manassas, VA, USA)를 10% 소태아혈청이 포함된 Minimum Essential Medium (WelGENE Inc., Gyeongsan, Korea)에서 배양하였다. 세포 생존력 및 세포독성을 확인하기 위해, 3-(4,5-디메틸티아졸-2일)-2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드(MTT) 및 젖산 탈수소효소(LDH) 분석을 수행하였다. 세포를 4 x 104 cells/ml로 접종하고 37 °C에서 24시간 동안 배양하였다. 배지를 제거한 후, 여러 농도의 물질을 포함하는 신선한 배지를 가하였다. 약물 처리 후 24시간 째에 배지를 LDH 분석을 위해 Eppendorf 튜브로 옮기고 세포가 남아있는 well에 0.5 mg/mL MTT working solution을 가한 후 30분 동안 배양하였다. 이후에 이를 제거하고 DMSO와 반응시킨 후 96-well 플레이트로 옮기고 540 nm의 파장에서 판독하였다. 수집된 배지는 1000 rpm에서 2분 동안 원심분리하고, 상등액을 제조자의 지시에 따라 LDH 키트 시약(Sigma-Aldrich)과 함께 30분 동안 상온 shaker에서 차광하며 배양하였다. 흡광도는 490 nm의 파장에서 측정하였으며, 양성대조군으로 NMDA 수용체 길항제인 MK-801을 사용하였다.
도 1 내지 3을 참조하면, MTT assay에서 비교예 1 및 실시예 농도가 100㎍/㎖인 경우 세포 독성을 나타내었고, 비교예 2는 농도가 30 및 100㎍/㎖ 일 때 세포 독성을 확인할 수 있다. 그러나, 비교예 1, 비교예 2 및 실시예는 LDH assay에서 분석한 모든 농도에서 세포독성을 나타내지 않았다.
3. 글루타메이트 독성 저해 효과
비교예 1, 비교예 2 및 실시예의 농도별 글루타메이트 독성 저해 효과를 확인하였다.
Neuro2a 세포에 비교예 1, 비교예 2 및 실시예와 글루타메이트를 동시에 처리하고 24시간 후에 농도별(0, 1, 3, 10, 30 ㎍/㎖) 신경보호효과를 측정하였으며, 측정은 LDH assay로 측정하였다.
도 4 내지 6을 참조하면, 글루타메이트는 대조군 대비 150%의 세포 독성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
비교예 1은 3㎍/㎖ 농도부터 세포보호 효과를 나타내었고 10 및 30㎍/㎖ 농도에서는 대조군과 유사한 수준의 효과를 나타내었으며, 비교예 2는 1㎍/㎖ 농도부터 세포보호 효과를 나타내었고 3 및 10㎍/㎖ 농도에서는 대조군과 유사한 수준의 효과를 나타내었으며, 실시예는 3㎍/㎖ 농도부터 세포보호 효과를 나타내었고 3, 10 및 30㎍/㎖ 농도에서는 대조군과 유사한 수준의 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있다. 따라서, 비교예 1, 비교예 2 및 실시예 모두 신경세포 보호 효과를 나타냄을 확인할 수 있다.
시험예 2: 항스트레스 효과 분석
비교예 1, 비교예 2 및 실시예의 항스트레스 효과를 분석하였다.
실험동물에게 억압스트레스(14일간 하루 4시간 동안)를 가하기 1시간 전 시험물질을 경구투여하였고, 스트레스를 가한 직후 실험동물의 혈액을 복대동맥을 통해 수득하였다. 수득된 복대동맥을 상온에 2시간 배양 후 2000 x g에서 20분 동안 원심분리를 하여 혈청을 분리하였다. Well에 항체를 넣고 1시간 상온 shaker에서 배양한 이후에 시약을 따내고 washing 후 건조하였다. 얻어진 혈청은 well에 각각 50ml씩 옮겨 담고 corticosterone conjugate 50ml 실온에서 shaker 2시간 동안 배양하였다. Washing 3번 하고 substrate solution 200ml를 넣고 차광상태에서 30분 동안 반응시켜준 다음 stop solution 100ml를 투입하고 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 흡광도는 540nm로 한번 더 측정하였으며, 450nm의 흡광도 값에서 540nm 값을 빼주어 항스트레스 효과를 계산하였다.
시험예 3: 인지기능 개선 효과 분석
비교예 1, 비교예 2 및 실시예의 인지기능 개선 효과를 확인하기 위하여, acetylcholinesterase 저해 활성을 분석하였다.
AChE 활성 측정은 요오드화 아세틸티오콜린(acetylthiocholine iodide)을 기질로 사용한 비색법을 이용하여 측정하였으며, 마우스 뇌 조직에 대하여 200mg/ml에 해당하는 0.1M PB(phosphate buffer pH 8.0)에 울트라소니케이터(ultra sonicator, SONICS & MATERIALS, Inc., USA)로 균질화 시킨 후 14,000rpm에서 20분간 원심 분리하였고 이 상등액의 40배 희석 용액을 사용하였다. DTNB는 0.1M 포스페이트 버퍼(phosphate buffer, pH 7.0)에 sodium bicarbonate와 섞어서 차광 상태로 준비하였다. 요오드화 아세틸티오콜린은 0.1M 포스페이트 버퍼(phosphate buffer, pH 8.0)에 녹여서 사용하였으며, 0.1M 포스페이트 버퍼에 DTNB와 준비한 효소를 넣고 샘플을 섞어 상온에서 1시간 배양하였다. 이를 200μl씩 96웰 플레이트에 넣고 415nm에서 흡광도를 측정하였다. 데이터는 약물이 들어가지 않은 control(100%)에서 빼주어 비교하여 분석하였다.

Claims (12)

  1. 옥수수 수염 추출물 및 수국 잎 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는, 항스트레스 및 인지기능 개선용 약학 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 혼합물은 옥수수 수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 1:0.5~2 중량비로 혼합한 것인, 약학 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    옥수수 수염 추출물은 70%(v/v) 이상의 에탄올로 추출하여 수득한 추출물인, 약학 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    수국 잎 추출물은 50%(v/v) 이상의 에탄올로 추출하여 수득한 추출물인, 약학 조성물.
  5. 제3항에서,
    상기 옥수수 수염 추출물은 옥수수수염을 에탄올에 투입하고 20~30℃의 온도조건에서 4~6일 동안 침지하여 얻은 것인, 약학 조성물.
  6. 제4항에서,
    상기 수국 잎 추출물은 수국 잎을 에탄올에 투입하고 50~70℃의 온도 조건에서 2~4시간 동안 감압 추출하여 얻은 것인, 약학 조성물.
  7. 옥수수 수염 추출물 및 수국 잎 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는, 항스트레스 및 인지기능 개선용 건강기능식품 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 혼합물은 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 1:0.5~2 중량비로 혼합한 것인, 건강기능식품 조성물.
  9. 제7항에 있어서,
    옥수수수염 추출물은 70%(v/v) 이상의 에탄올로 추출하여 수득한 추출물인, 건강기능식품 조성물.
  10. 제7항에서,
    수국 잎 추출물은 50%(v/v) 이상의 에탄올로 추출하여 수득한 추출물인, 건강기능식품 조성물.
  11. 제9항에서,
    상기 옥수수수염 추출물은 옥수수수염을 에탄올에 투입하고 20~30℃의 온도조건에서 4~6일 동안 침지하여 얻은 것인, 건강기능식품 조성물.
  12. 제10항에서,
    상기 수국 잎 추출물은 수국 잎을 에탄올에 투입하고 50~70℃의 온도 조건에서 2~4시간 동안 감압 추출하여 얻은 것인, 건강기능식품 조성물.
KR1020220159603A 2022-11-24 2022-11-24 옥수수수염 추출물 및 수국 잎 추출물을 함유하는 항스트레스 및 인지기능 개선 효능을 갖는 조성물 KR20240077267A (ko)

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