KR20240059480A - 아미노산 함량과 항산화 능력이 향상된 병아리콩 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 아미노산 함량과 항산화 능력이 향상된 병아리콩 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 효소처리공정, 갈변반응의 공정을 통하여 병아리콩으로부터 아미노산과 항산화물질 함량이 증가된 추출물을 제조하고, 이를 화장료로 이용하는 기술에 관한 것이다.
Description
본 발명은 아미노산 함량과 항산화 능력이 향상된 병아리콩 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 효소처리공정, 갈변공정을 통하여 병아리콩으로부터 아미노산과 항산화물질 함량이 증가된 추출물을 제조하고, 이를 화장료로 이용하는 기술에 관한 것이다.
최근, 환경오염이나 동물실험의 윤리성에 대한 관심이 대두되면서 환경과 사회에 미치는 영향을 고려하여 바람직하고 윤리적인 소비를 하려는 소비경향이 나타나고 있다. 인간이 소비하는 음식과 같은 식품산업 외에도 패션을 비롯한 뷰티산업 전반에서 비거니즘(Veganism)이 나타나며 새로운 소비문화로 발전되고 있다. 비거니즘은 다양한 이유로 동물 착취에 반대하는 철학으로 동물과 관련된 소비를 지양하는 양상을 보이며, 뷰티 분야에서도 비건 화장품 시장이 계속해서 성장하고 있다.
아쿠아파바(Aquafaba)는 라틴어로 물이라는 뜻의 '아쿠아'(aqua), 콩을 뜻하는 '파바'(faba)를 합친 말로, 병아리콩, 렌틸콩 등을 삶고 나면 나오는 콩물을 뜻한다. 베이킹에서 아쿠아파바를 거품기로 5분가량 휘저으면 머랭이나 생크림처럼 크림 질감으로 변해 디저트 반죽을 만들 때 사용하는 달걀 흰자의 역할을 대신할 수 있어 채식주의자의 달걀 대신 사용할 수 있는 달걀 대체재로 주목받고 있다.
아쿠아파바 제조에 사용되는 병아리콩은 계란 흰자와 가장 비슷한 질감을 나타내고, 콩 특유의 비린내가 다른콩보다 적다. 또한, 미국 타임지가 뽑은 세계 10대 슈퍼푸드에 선정되기도 한 우수한 소재로 비타민과 단백질, 식이섬유가 풍부하다. 원물의 가격이 저렴하고 수급에 큰 어려움이 없는 것 또한 장점 중 하나이다.
본 발명자들은 이러한 장점을 가지는 병아리 콩을 소재로 하는 화장료의 개발을 위하여 노력하였으며, 병아리 콩을 이용한 아쿠아파바의 제조 공정에 이은 효소처리, 갈변처리 등의 특정한 방법에 의하여 제조되는 병아리콩 추출물의 아미노산 함량과 항산화 활성이 증대되고, 이렇게 제조된 병아리콩 추출물이 우수한 항산화, 보습 및 피부장벽강화 활성을 나타내는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 아미노산 함량과 항산화 능력이 향상된 병아리콩 추출물의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 병아리콩 추출물을 함유하여 항산화, 피부보습 및 피부장벽강화효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면,
(A) a1)병아리콩에 물을 가하고 60~120℃로 가열한 후, 상온에서 추출하는 단계; a2)고액분리하여 잔사와 제1 추출물로 분리하는 단계; a3)상기 제1 추출물에 용매를 혼합하는 단계;
(B) b1)상기 a2)단계에서 분리된 잔사를 분쇄한 후 물을 가하고 단백질분해효소를 가하여 효소반응시키는 단계; b2)원심분리하고 잔사와 상등액인 제2 추출물로 분리하는 단계; b3)상기 제2 추출물에 용매를 혼합하는 단계;
(C) 상기 b2)단계에서 분리된 잔사를 90~200℃로 가열하여 건조 및 갈변시키는 단계; 및
(D) d1)상기 a3)단계의 제1 추출물과 용매의 혼합물, b3)단계의 제2 추출물과 용매의 혼합물 및 상기(C)단계의 갈변시킨 잔사를 혼합하여 추출하는 단계; d2)고액분리하여 액상을 회수하는 단계를 포함하는 병아리콩 추출물의 제조방법이 제공된다.
상기 b1)단계에서 효소반응은 20~60℃에서 수행된다. 상기 단백질분해효소로는 파파인(Papain), 펩신(Pepsin), 트립신(Trypsin), 알파-키모트립신(α-Chymotrypsin), 수미자임(Sumizyme), 코지자임(Kojizyme), 판크레아틴(pancreatin), 칼리크레인(kallikrein), 카텝신(Cathepsin), 써모리신(thermolisin), 서브틸리신(Subtilisin), 브로멜라인(Bromelain), 피신(Ficin), 액티니딘(Actinidin), 펩티다제(Peptidase) 및 트랜스글루타미나제(Transglutaminase)로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 효소가 사용된다.
상기 (A) (B)단계의 용매는 탄소수 1 내지 4의 무수 또는 함수알코올, 탄소수 2 내지 6의 무수 또는 함수 다가알코올, 에틸아세테이트, 헥세인 및 아세톤으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나이며, 더욱 바람직하게는 1,2-헥산디올이다.
상기 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, 상기 방법에 의하여 제조된 병아리콩 추출물을 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.
상기 화장료 조성물은 항산화용, 피부 보습용 또는 피부 장벽강화용인 것을 특징으로 한다.
본 발명 제조방법에 의하면 아미노산 함량과 항산화 능력이 향상된 병아리콩 추출물이 제조된다. 또한, 상기 병아리콩 추출물은 항산화, 피부보습 및 피부장벽강화효과가 우수하여 항노화 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명 제조예의 병아리콩 추출물의 TLC 분석결과를 나타낸다.
도 2는 본 발명 제조예의 병아리콩 추출물의 갈변반응시간에 따른 TLC 분석결과를 나타낸다.
도 3은 본 발명 제조예의 병아리콩 추출물의 갈변반응 전후의 TLC 분석결과를 나타낸다.
도 4는 본 발명 실시예의 병아리콩 추출물의 TLC 분석결과를 나타낸다.
도 5는 본 발명 실시예의 병아리콩 추출물의 보습 및 피부장벽인자 발현정도를 나타내는 그래프이다.
도 6은 본 발명 제조예 및 실시예의 병아리콩 추출물의 HPLC 분석결과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 본 발명 제조예의 병아리콩 추출물의 갈변반응시간에 따른 TLC 분석결과를 나타낸다.
도 3은 본 발명 제조예의 병아리콩 추출물의 갈변반응 전후의 TLC 분석결과를 나타낸다.
도 4는 본 발명 실시예의 병아리콩 추출물의 TLC 분석결과를 나타낸다.
도 5는 본 발명 실시예의 병아리콩 추출물의 보습 및 피부장벽인자 발현정도를 나타내는 그래프이다.
도 6은 본 발명 제조예 및 실시예의 병아리콩 추출물의 HPLC 분석결과를 나타내는 그래프이다.
이하, 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다.
본 발명에 따르면 (A) a1)병아리콩에 물을 가하고 60~120℃로 가열한 후, 상온에서 추출하는 단계; a2)고액분리하여 잔사와 제1 추출물로 분리하는 단계; a3)상기 제1 추출물에 용매를 혼합하는 단계;
(B) b1)상기 a2)단계에서 분리된 잔사를 분쇄한 후 물을 가하고 단백질분해효소를 가하여 효소반응시키는 단계; b2)원심분리하고 잔사와 상등액인 제2 추출물로 분리하는 단계; b3)상기 제2 추출물에 용매를 혼합하는 단계;
(C) 상기 b2)단계에서 분리된 잔사를 90~200℃로 가열하여 건조 및 갈변시키는 단계; 및
(D) d1)상기 a3)단계의 제1 추출물과 용매의 혼합물, b3)단계의 제2 추출물과 용매의 혼합물 및 상기(C)단계의 갈변시킨 잔사를 혼합하여 추출하는 단계; d2)고액분리하여 액상을 회수하는 단계를 포함하는 병아리콩 추출물의 제조방법이 제공된다.
본 발명의 일 구체예에 따르면, 병아리콩으로부터 피부개선활성이 우수한 화장료를 제조하기 위하여 먼저, 병아리콩에 5~10배 중량의 물을 가하고 60~120℃로 가열한다. 더욱 바람직하게는 80~100℃에서 4~6시간 가열한다. 냉각한 후 15~25℃의 상온에서 추출한다. 이때, 바람직하게는 20~30시간 추출한다. 고액분리하여 잔사와 제1 추출물로 분리한다. 상기 제1 추출물에 용매를 혼합하여 보관한다.
이어서, 분리된 잔사를 분쇄한 후 5~10배 중량의 물을 가하고, 단백질분해효소를 가하여 효소반응을 실시한다. 이때 필요에 따라 120~130℃로 20~30분간 가열하여 멸균하고, 냉각시킨 후 효소반응을 실시한다.
이때, 단백질분해효소로는 파파인(Papain), 펩신(Pepsin), 트립신(Trypsin), 알파-키모트립신(α-Chymotrypsin), 수미자임(Sumizyme), 코지자임(Kojizyme), 판크레아틴(pancreatin), 칼리크레인(kallikrein), 카텝신(Cathepsin), 써모리신(thermolisin), 서브틸리신(Subtilisin), 브로멜라인(Bromelain), 피신(Ficin), 액티니딘(Actinidin), 펩티다제(Peptidase) 및 트랜스글루타미나제(Transglutaminase)로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나가 사용될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 브로멜라인(Bromelain)이 사용된다. 상기 단백질분해효소를 가하여 20~60℃에서 효소반응시킨다. 바람직하게는 40~60℃에서 20~30시간 반응시킨다. 효소반응 완료 후 원심분리하고 잔사와 상등액인 제2 추출물로 분리한다. 분리된 제2 추출물을 용매와 혼합하여 보관한다.
효소는 동, 식물을 포함한 모든 생물체에서 합성되는 생체촉매로 생체에서 직간접적으로 물질을 합성하거나 분해하여 생물이 존속하는데 중요한 역할을 한다. 상기 제1 추출물 제조시 분리된 잔사에 추출되지 않고 잔류하는 비수용성 단백질을 브로멜라인과 같은 단백질 분해효소를 사용하여 물에 잘 녹는 아미노산으로 분해하여 추출할 수 있다. 아미노산은 피부의 천연보습인자(NMF) 중 가장 많은 부분을 차지하는 성분이므로 상기 효소반응을 통해 보습활성이 증대된 병아리콩 추출물을 제조할 수 있다.
이어서, 상기 원심분리를 통하여 분리된 잔사를 90~200℃로 가열하여 건조 및 갈변시킨다. 바람직하게는 90~200℃로 10분~24시간, 더욱 바람직하게는 170~180℃에서 3~5시간 가열하여 건조 및 갈변시킨다.
갈변반응은 조리할 때 식재료의 맛과 향, 풍미를 높이거나, 백삼을 홍삼, 흑삼으로 만들어 효능을 향상 시키는 등의 식품 공정에서 사용되는 인체친화적인 반응이며 일반적으로 마이야르반응이라고 하는 아세트카르보닐반응이다. 이 반응은 단백질과 아미노산이 가지고 있는 아미노기와 환원당과같은 카르보닐기를 갖는 물질의 비 효소적 반응으로 자연적으로 일어나는 반응이지만, 수분에 의해 저해되고 온도에 의해 반응 속도가 빨라지며, 170℃~180℃에서 빠르게 일어난다. 병아리콩에 존재하는 단백질과 전분과 같은 당이 반응하면 이와같은 갈변반응이 일어날 수 있다. 이러한 갈변반응을 거쳐 제조되는 병아리콩 추출물의 항산화 활성이 크게 증가됨을 확인하였다.
본 발명 병아리콩 추출물의 제조방법에 있어서, 상기 갈변 반응은 효소반응 후에 실시되는 것이 바람직하다. 갈변반응 시킨 병아리콩을 단백질분해효소 반응 시킨 후 추출하여 제조된 추출물에서는, 효소반응 후 갈변시켜 추출하여 제조된 추출물에 비하여 아미노산의 함량이 낮아지는 것을 확인하였다. 그러므로, 병아리콩 추출물의 항산화능력과 아미노산 함량을 모두 높이기 위해서는 갈변반응은 효소반응 후에 시행하는 것이 유리하다.
최종적으로, 상기 제1 추출물과 용매의 혼합물, 제2 추출물과 용매의 혼합물 및 갈변시킨 잔사를 혼합하여 추출한다. 갈변시킨 잔사를 액상의 상기 제1 추출물과 용매의 혼합물 및 제2 추출물과 용매의 혼합물에 침지하여 바람직하게는 상온에서 1~2일간 추출한다. 상기 제1 추출물과 용매의 혼합물 및 제2 추출물과 용매의 혼합물은 추출용매로서 사용된다. 상기 제1 추출물과 용매의 혼합물 및 제2 추출물과 용매의 혼합물은 각각 1~10:1~10의 중량비율로 사용될 수 있다. 상기 제1 추출물 및 제2 추출물과 혼합되는 용매로는 탄소수 1 내지 4의 무수 또는 함수알코올, 탄소수 2 내지 6의 무수 또는 함수 다가알코올, 에틸아세테이트, 헥세인 및 아세톤으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나가 사용될 수 있으며, 바람직하게는 1,2-헥산디올이 사용된다.
바람직하게는 상기 용매는 3~10%(w/w)의 농도가 되도록, 더욱 바람직하게는 5%(w/w)의 농도가 되도록 첨가된다. 상기 제1 추출물과 제2 추출물의 혼합물에 3~10%(w/w)의 농도가 되도록 용매를 첨가하여 추출용매로 사용하는 것도 가능하다.
추출 후 고액분리하여 얻은 액상 추출물을 회수하여 병아리콩 추출물을 제조한다.
이와 같은 방법에 의하여 추출된 병아리콩 추출물은 아미노산 함량이 증가할 뿐만아니라 항산화 능력이 향상되어, 우수한 항산화효과, 피부 보습효과 및 피부 장벽강화효과를 나타내었다.
상기 병아리콩 추출물은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001~30중량% 함유된다.
상기 화장료 조성물은 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 가능하며 예를 들면, 스킨로션, 스킨토너, 팩, 영양크림, 수분 크림, 에센스, 바디크림, 바디로션, 바디오일, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 젤, 클렌징폼, 클렌징로션, 비누, 패치, 파운데이션, 립스틱, 메이크업 베이스 등으로 제조될 수 있다.
[실시예]
이하, 본 발명을 하기의 실시예 및 시험예에 의거하여 좀 더 상세하게 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것이 아니고, 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 치환 및 균등한 타 실시예로 변경할 수 있음은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 명백할 것이다.
제조예 1: 병아리콩 추출물의 제조
병아리콩 180g에 5배 중량의 물을 가하고 80℃로 5시간 가열하였다. 냉각 후 1일간 상온에서 추출하였다. 추출한 병아리콩은 고액분리하여 잔사와 추출물(추출물 1)로 분리하였다.
잔사는 분쇄하여 표면적을 증가시켰다. 그 후 물 900g을 다시 추가한 후 121℃에서, 20분간 멸균하였다. 냉각 후 0.9g의 브로멜라인 효소를 첨가한 후 50℃, 1일간 효소반응시켰다. 그 후 원심분리하여 상등액인 추출물(추출물 2)과 잔사를 분리하였다.
비교예 1: 병아리콩 추출물의 제조
병아리콩 180g에 5배 중량의 물을 가하고 80℃로 5시간 가열하였다. 냉각 후 1일간 상온에서 추출하였다. 추출한 병아리콩은 고액분리하여 잔사와 추출물(추출물 1)로 분리하였다.
잔사는 분쇄하여 표면적을 증가시켰다. 그 후 물 900g을 다시 추가한 후 121 ℃에서, 20분간 멸균하였다. 냉각하여 50℃로 1일간 보관 후 원심분리로 상등액인 추출물(추출물 2)과 잔사를 분리하였다.
시험예 1: 효소반응에 의한 아미노산 생성증가 확인
상기 제조예와 비교예의 추출물에 대한 TLC 분석을 하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에서 확인되는 바와 같이, 추출물 각각의 아미노산을 TLC로 분석한 결과 추출물 1과 추출물 2에서 아미노산의 띠가 선명하게 검출되었다. 그런데 TLC 분석결과 추출물 1에서 병아리콩의 아미노산 대부분이 추출되었기 때문에 잔사를 다시 추출한 비교예 1의 추출물 2에서는 아미노산이 거의 검출되지 않았다. 하지만 잔사를 브로멜라인 효소로 가수분해하여 추출한 제조예 1의 추출물 2에서는 아미노산의 생성이 증가하였다.
따라서 병아리콩에서 아미노산을 고함량으로 추출하기 위해서는 단백질 분해효소를 처리하는 공정을 수행하는 것이 유리함을 알 수 있다.
제조예 2: 병아리콩 추출물의 제조
상기 제조예 1에서 원심분리하여 분리된 잔사를 회수하여 오븐에 넣어 170℃로 건조, 갈변시켜 아미노산 함량의 변화와 항산화능을 확인하였다. 잔사의 건조, 갈변시간을 각각 1, 2, 3, 4, 5 시간으로 나누어 수행하였고, 초기 무게를 30g으로 하였다. 갈변반응이 끝난 후 시료의 중량을 측정하였다. 각각의 시료는 건조 중량대비 10배의 5%(w/w) 1,2-hexanediol 용매로 상온에서 1일간 추출하였고, 추출이 완료된 시료는 고액분리하여 액상 추출물을 분석하였다.
시험예 2: 갈변반응에 의한 아미노산 분석 및 항산화능 확인
항산화능 확인
상기 제조예 2에서 제조된 추출물의 항산화능을 DPPH로 측정하였다. 그 결과를 표 1에 나타내었다.
| 반응 시간 | 반응 전 | 1시간 | 2시간 | 3시간 | 4시간 | 5시간 |
| 건조 중량(g) | 30 | 9 | 8 | 7.5 | 7.2 | 7.36 |
| IC 50 (DPPH 항산화, %) |
50 이상 | 50 | 12.48 | 6.80 | 5.00 | 5.36 |
상기 표 1에서 확인되는 바와 같이, 항산화능은 갈변시간이 지날수록 좋아짐을 알 수 있었다. 3시간 이후에는 건조 중량이 일정한 경향을 보이며, 항산화능도 일정하였다.
아미노산 분석
갈변반응 시간에 따른 아미노산 분석 결과를 도 2에 나타내었다. 시간이 경과함에 따라 아미노산의 함량이 줄어드는 것을 확인할 수 있었다. 이는 갈변반응에 의하여 병아리콩에 포함된 아미노산이 소모되어 항산화 물질을 생성하기 때문인 것으로 예측된다. 아미노산은 3시간 이후에서 비슷한 경향을 보여 반응은 3시간에서 거의 완료됨을 확인할 수 있었다.
제조예 3: 병아리콩 추출물의 제조
병아리콩을 170℃ 드라이 오븐으로 3시간 가열하여 갈변반응 시켰다. 가열된 병아리콩을 상온으로 냉각시킨 후 분쇄하였다. 시료 5g에 물 50g을 넣고, 멸균한 후 냉각하였다. 냉각 후 브로멜라인 0.25g을 넣은 시료와 넣지 않은 시료로 구분하여 모든 시료를 50℃에서 1일간 보관하였다. 반응이 완료된 시료는 고액분리하여 잔사를 제거하고, 액상의 병아리콩 추출물을 분리하였다.
비교예 2: 병아리콩 추출물의 제조
가열, 갈변시키지 않은 건조 병아리콩을 분쇄하여 준비하였다. 시료 5g에 물 50g을 넣고, 멸균한 후 냉각하였다. 냉각 후 브로멜라인 0.25g을 넣은 시료와 넣지 않은 시료로 구분하여 모든 시료를 50℃에서 1일간 보관하였다. 반응이 완료된 시료는 고액분리하여 잔사를 제거하고, 액상의 병아리콩 추출물을 분리하였다.
시험예 3: 갈변반응에 따른 아미노산 분석
상기 제조예 3과 비교예 2의 추출물에 대한 TLC 분석을 하였으며, 그 결과를 도 3에 나타내었다.
아미노산 분석 결과, 갈변반응시키지 않은 비교예 2의 시료에 비하여, 갈변반응시킨 제조예 3의 시료에서는 아미노산이 거의 검출되지 않음을 확인하였고, 효소반응도 잘 되지 않았음을 확인할 수 있었다. 이는 브로멜라인과 반응하기 위한 단백질(기질)이 당과 결합하여 변성되었고, 기질의 변화에 의해 효소가 반응할 수 없어 아미노산이 생성되지 않은 것으로 판단된다.
따라서 공정의 효율측면에서 갈변반응 공정은 효소반응공정 후에 수행되는 것이 바람직한 것으로 확인되었다.
실시예 1: 병아리콩 추출물의 제조
병아리콩 180g에 5배 중량의 물을 가하고 80℃로 5시간 가열하였다. 냉각 후 1일간 상온에서 추출하였다. 추출한 병아리콩은 고액분리하여 잔사와 추출물(추출물 1)로 분리하였고, 추출물 1에 5%(w/w) 농도가 되도록 1,2-헥산디올을 가하였다.
잔사는 분쇄하여 표면적을 증가시켰다. 그 후 물 900g을 다시 추가한 후 121℃에서, 20분간 멸균하였다. 냉각 후, 0.9g의 브로멜라인 효소를 첨가한 후 50℃에서, 1일간 효소반응시켰다. 그 후 각각 원심분리하여 상등액인 추출물(추출물 2)과 잔사를 분리하였고, 추출물 2에 5%(w/w) 농도가 되도록 1,2-헥산디올을 가하였다.
원심분리에 의해 분리된 잔사를 170℃에서 3시간 동안 가열하여 수분을 제거하고, 갈변시켰다. 갈변이 완료된 잔사를 회수하여 1,2-헥산디올과 혼합한 상기 추출물 1과 추출물 2를 동일 중량비로 혼합한 용매에 침지시켜 1일간 추출하였다. 추출 완료 후 고액분리하여 액상의 최종 추출물을 회수하였다.
비교예 3: 병아리콩 추출물의 제조
상기 실시예 1에서 제조된 추출물 1과 추출물 2를 혼합하여 비교예 3으로 하였다.
시험예 4: 갈변반응에 의한 아미노산 분석 및 항산화능 확인
항산화능 확인
상기 실시예 1 및 비교예 3의 추출물에 대한 항산화능을 DPPH로 측정하였다. 그 결과를 표 2에 나타내었다.
| DPPH 항산화능 IC 50값(%) | |
| 비교예 3 | 실시예 1 |
| 36.56 | 5.64 |
상기 표 2에서 확인되는 바와 같이 비교예 3의 추출물에 비하여 실시예 1의 추출물에서 매우 뛰어난 항산화능을 나타내었다.
아미노산 분석
갈변된 성분이 아미노산에 영향을 미치는지 알아보기 위하여 TLC 분석을 하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.
추출물 1과 추출물 2의 혼합용매로 갈변반응시킨 병아리콩 잔사를 추출하여 얻어지는 실시예 1의 추출물과 비교예 3의 추출물에 대한 아미노산 분석결과, 갈변잔사 추출 전(비교예 3)과 후(실시예 1) 모두 동일한 아미노산이 검출됨을 확인할 수 있었고, 갈변잔사는 아미노산에 영향을 미치지 않음을 확인할 수 있었다.
시험예 5 : 피부 보습 및 장벽인자 mRNA 발현 증가 확인
상기 비교예 3, 실시예 1에서 제조된 추출물의 피부 보습 및 장벽강화 활성을 확인하기 위하여 피부 보습 및 장벽인자(Filaggrin)의 mRNA 발현을 확인하였다.
인간각질세포인 HaCaT 세포를 10% 우태반 혈청, 10 U/㎖ penicillin, 100 ㎍/㎖ streptomycin이 포함된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지에서 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 배양된 각질세포를 1X 트립신(Trypsin)-EDTA로 떼어내고, 6-well plate에 3×105 cell로 분주하여 24시간 동안 배양하였다. 이후에 배양액을 제거하고 DPBS로 씻어낸 후, 비교예 3, 실시예 1을 적절한 농도로 세포에 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 24시간이 지난 후에 HaCaT 세포의 RNA를 얻은 후에 cDNA로 합성하여 SYBR Green 기법을 활용한 Real-time PCR 시험을 진행하여 filaggrin mRNA 발현량을 확인하였다. 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5에서 확인되는 바와 같이 실시예 1이 비교예 3과 비교하여 filaggrin mRNA 발현을 더 증가시키는 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.
시험예 6: 유리 아미노산의 HPLC 분석
상기 제조예, 비교예 및 실시예 1의 추출물의 유리아미노산의 분포와 함량을 HPLC 분석을 통하여 평가하였다.
그 결과를 하기 표 3과 도 6에 나타내었다.
| 아미노산 함량(ppm) | ||||
| 제조예 1 (추출물 1) |
비교예 1 (추출물 2) |
제조예 1 (추출물 2) |
비교예 3 | 실시예 1 |
| 814 | 391 | 1,013 | 1,288 | 1,339 |
상기 표 3 및 도 6에서 확인되는 바와 같이 효소반응에 의해 아미노산이 증가하고(비교예 1의 추출물 2와 제조예 1의 추출물 2), 아미노산의 분포가 달라지는 것을 알 수 있었다. 또한, 도 6에서 확인되는 바와 같이 갈변잔사를 제1, 2 추출물로 추출함에 따른 아미노산의 변화가 크게 없음을 알 수 있었다.
제형 실시예 1: 병아리콩 추출물 함유 로션의 제조
상기 실시예 1의 병아리콩 추출물을 함유하는 로션을 하기 표 4의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.
| 성분 | 제형 실시예 1 |
| 병아리콩 추출물(실시예 1) | 5.0 |
| 글리세린 | 8.0 |
| 부틸렌글라이콜 | 2.0 |
| 스테아릭애씨드 | 2.5 |
| 세테아릴에틸헥사노에이트 | 3.0 |
| 다이펜타에리스리틸헥사하이드록시스테아레이트/헥사스테아레이트/헥사로지네이트 | 1.0 |
| 솔비탄스테아레이트 | 0.8 |
| 폴리솔베이트80 | 1.0 |
| 아이소프로필미리스테이트 | 1.0 |
| 다이메티콘 | 5.0 |
| 다이메티콘/비닐다이메티콘크로스폴리머 | 0.1 |
| 포타슘하이드록사이드 | 0.02 |
| 카보머 | 0.2 |
| 소듐폴리아크릴레이트 | 0.45 |
| 방부제 | 미량 |
| 정제수 | To 100 |
Claims (8)
- (A) a1)병아리콩에 물을 가하고 60~120℃로 가열한 후, 상온에서 추출하는 단계; a2)고액분리하여 잔사와 제1 추출물로 분리하는 단계; a3)상기 제1 추출물에 용매를 혼합하는 단계;
(B) b1)상기 a2)단계에서 분리된 잔사를 분쇄한 후 물을 가하고 단백질분해효소를 가하여 효소반응시키는 단계; b2)원심분리하고 잔사와 상등액인 제2 추출물로 분리하는 단계; b3)상기 제2 추출물에 용매를 혼합하는 단계;
(C) 상기 b2)단계에서 분리된 잔사를 90~200℃로 가열하여 건조 및 갈변시키는 단계; 및
(D) d1)상기 a3)단계의 제1 추출물과 용매의 혼합물, b3)단계의 제2 추출물과 용매의 혼합물 및 상기(C)단계의 갈변시킨 잔사를 혼합하여 추출하는 단계; d2)고액분리하여 액상을 회수하는 단계를 포함하는 병아리콩 추출물의 제조방법. - 제1항에 있어서, 상기 b1)단계에서 효소반응은 20~60℃에서 수행되는 것임을 특징으로 하는 병아리콩 추출물의 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 단백질분해효소는 파파인(Papain), 펩신(Pepsin), 트립신(Trypsin), 알파-키모트립신(α-Chymotrypsin), 수미자임(Sumizyme), 코지자임(Kojizyme), 판크레아틴(pancreatin), 칼리크레인(kallikrein), 카텝신(Cathepsin), 써모리신(thermolisin), 서브틸리신(Subtilisin), 브로멜라인(Bromelain), 피신(Ficin), 액티니딘(Actinidin), 펩티다제(Peptidase) 및 트랜스글루타미나제(Transglutaminase)로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 효소인 것을 특징으로 하는 병아리콩 추출물의 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 (A) (B)단계의 용매는 탄소수 1 내지 4의 무수 또는 함수알코올, 탄소수 2 내지 6의 무수 또는 함수 다가알코올, 에틸아세테이트, 헥세인 및 아세톤으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것을 특징으로 하는 병아리콩 추출물의 제조방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 제조방법에 의하여 제조된 병아리콩 추출물을 함유하는 화장료 조성물.
- 제5항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 항산화용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제5항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 보습용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제5항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 장벽강화용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220140771A KR20240059480A (ko) | 2022-10-27 | 2022-10-27 | 아미노산 함량과 항산화 능력이 향상된 병아리콩 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물 |
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|---|---|
| KR20240059480A true KR20240059480A (ko) | 2024-05-07 |
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ID=91078258
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| KR (1) | KR20240059480A (ko) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101970144B1 (ko) | 2018-11-15 | 2019-04-18 | 주식회사 에스제이인터내셔널 | 그린 토마토 물 추출물, 우엉 물 추출물 및 병아리콩 물 추출물의 복합물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물 |
| KR20190091783A (ko) | 2018-01-29 | 2019-08-07 | 주식회사 코씨드바이오팜 | 병아리콩 추출물을 포함하는 피부 미백용 또는 피부 보습용 화장료 조성물 |
| KR20200092518A (ko) | 2019-01-24 | 2020-08-04 | 주식회사 코씨드바이오팜 | 식물추출물을 함유하는 세포보습, 세포간 보습, 피부 장벽보습에 효과적인 화장료 조성물 |
-
2022
- 2022-10-27 KR KR1020220140771A patent/KR20240059480A/ko unknown
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