KR20240007028A - 작약씨로부터 항산화 기능성을 위한 트란스-레스베라트롤 성분의 추출방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 건조된 작약씨로부터 트란스-레스베라트롤 성분을 추출하는 방법에 관한 것이다. 트란스-레스베
라트롤 성분은 작약씨에 많이 함유되어 있으며 항암, 항염증, 항혈전, 항고지혈증 및 항산화 작용이 우수
한 것으로 알려져 있다.
건조된 작약씨를 핵산으로 탈지하여 얻은 잔사를 메탄올로 열탕 추출하고 여과ㆍ농축한 후 다이아이온 에
이치피-20로 칼럼크로마토그래피를 실시하여 얻어진 60% 수용성 메탄올 추출물을 세파덱스 엘에이치-20로
칼럼크로마토그래피 및 분취-고속액체크로마토그래피를 실시하여 순수한 트란스-레스베라트롤 성분을 추출
하는 데 있다.

Description

작약씨로부터 항산화 기능성을 위한 트란스-레스베라트롤 성분의 추출방법{EXTRACTION METHOD OF TRANS-LESVERATOL COMPONENT FOR ANTIOXIDATION FUNCTIONALITY FROM PUNCTIONAL SEED}

[0002] 본 발명은 건조된 작약씨로부터 트란스-레스베라트롤 성분을 추출하는 방법에 관한 것이다.

일반적으로 트란스-레스베라트롤(trans-resveratrol; 3,5-dihydroxy- 4'-hydroxystilbenzene) 성분은 작약씨에 많이

함유되어 있으며 항암, 항염증, 항혈전, 항고지혈증 및 항산화 작용이 우수한 것으로 알려져 있다.

작약 (芍藥, 영명: Peony, 생약명: Paeoniae radix)은 미나리아재비과 (Ranuculaceae) [0003] 작약속 (Paeonia)

에 속하는 약용작물로서 초본인 작약과 목본인 모란으로 구분된다(윤평섭, 한국원예식물도감, 1995) 국내

에서 재배되는 작약은 식물 분류면에서 적작약 (Paeonia lactiflora Pall), 백작약(Paeonia obovata

Max) 및 산작약 (Paeonia japonica Miyabe et Takeda)으로 구분되며 국내에서는 적작약의 변종이 주로

재배되고 있다(윤평섭, 한국원예식물도감, 1995)

[0004] 작약은 국내에서 인삼, 당귀 다음으로 가장 많이 이용되고 있는 약용작물로서 첩약을 비롯한 쌍화탕, 사물

탕, 당귀작약산, 계지가작약탕, 작약감초탕, 우황청심환, 소청룡탕 등의 생약제제의 원료로서 널리 이용되

고 있다(본초학, 이상인, 1980) 작약의 국내 재배 규모는 더덕, 당귀, 도라지, 두충, 황기와 더불어 6대

주요 약용작물로서 그 생산량은 2,026 M/T (1998년 기준)으로 다른 약용작물에 비해 수요량이 큰 작물(특

용작물생산실적, 농림부통계, 1999) 중의 하나이다.

[0005] 한편, 최근 값싼 중국산 적작약이 대규모로 국내에 수입되면서 국내 작약 재배 농가의 큰 감소로 생산기반

그 자체가 존폐위기에 놓여 있으며, 아울러 대외 수출 경쟁력이 크게 둔화되고 있다. 따라서 수입 국외 작

약과 경쟁력이 있는 고품질의 품종 개발과 더불어 현재 미활용 상태로 폐기되고 있는 작약씨를 효과적으로

이용할 수 있는 방법의 모색이 필요하다.

[0006] 작약뿌리는 예로부터 진통, 진경, 진해, 부인약, 고혈압 및 염증 치료제로 널리 이용되어져 왔으며 그 주

된 활성성분으로서 페오니프로린(paeoniflorin), 알비프로린(albiflorin)을 포함한 여러 가지의 모노터펜

글루코사이드(monoterpene glucoside)와 페놀산 및 탄닌 등이 잘 알려져 있다(생약학, 한대석, 1998) 그

러나 작약씨는 지금까지 종자 번식용으로 사용되어 왔을 뿐 약제로는 거의 사용되지 않고 폐기되고 있는

실정이므로 이에 대한 이용방안의 하나로서 새로운 생리활성물질을 검색하는 데 있다.

[0007] 레스페라톨은 나자식물 및 쌍자엽식물에 널리 분포되어 있으며 식물체 중에서 유리상태로 존재하기도

하나, 대부분 당류와 결합된 배당체의 형태로 존재한다 (Gorham, J, Prog Phytochem, 6: 203-209,

1980) 그리고 레스베라트롤은 cis형과 trans형이 있으며, 자연계에서는 몇몇을 제외하고는 대부분 안정한

trans 이성질체로 존재한다(Trela, BC ＆ Waterhouse, AL, J Agric Food Chem, 44(5): 1253-1257,

1996)

[0008] 트란스-레스베라트롤은 항암 (Jang M, et al, Sci, 275: 218-220, 1997) 뿐만 아니라 항혈전 (Chung,

ML et al, Planta Med, 58: 274-276, 1992; Frankel, EN et al, Lancet, 341: 1103-1104, 1993;

Bertrlli, AAE et al, Int J Tissue React, 17: 1-3, 1995; Pae-Asciak, CR et al, Clin

Chim Acta, 235: 207-219, 1995), 항염증 (Kimura, Y et al, Biochim Biophys Acta, 834: 275-

278, 1985) 및 고지혈증 (Arichi, H, et al, Chem Pharm Bull, 30(5): 1766-1770, 1982) 예방 효과가

있는 생리활성물질로서 잘 알려져 있다. 특히 최근 트란스-레스베라트롤은 여성호르몬 에스트로겐 유사작

용이 밝혀지면서 피토에스트로겐 (phytoestrogen)으로서 각광을 받고 있다(Gehm, BD et al, Proc

Natl Acad Sci, 94: 14138-14143, 1997) 한편, 레스베라트롤 유도체는 피부 멜라닌(melanin) 색소의

합성을 촉진하는 티로시나제 효소의 강력한 저해제로서 피부 미백효과가 우수한 물질로 보고되어 있다

(Iida, K et al, Planta Med, 61: 425-428, 1995; Shimizu K et al, Planta Med, 64: 408-412,

1998) 이러한 트란스-레스베라트롤의 치료효과는 이를 함유한 식물체의 생리적ㆍ약리적 작용에서 찾아볼

수 있다. 지금까지 발견된 대표적인 트란스-레스베라트롤 함유 생약 및 식품으로서는 호장근, 대황, 포도

및 땅콩 등이 잘 알려져 있다(Ingham, JL, Phytochem, 15: 1791-1793, 1976; Kimura, Y et al,

Planta Med, 49: 51-54, 1983; Kashiwada, Y, et al, Chem Pharm Bull, 32(9): 3501-3517, 1984;

Jayatilake, GS, et al, J Natural Products, 56(10): 1805-1810, 1993) 특히 포도에서 발견된 트란

스-레스베라트롤은 당도 높은 포도가 곰팡이와 같은 감염균으로부터 자신의 몸을 보호하기 위해 생산하는

방어물질, 즉 피토알렉신 (phytoalexin) 물질로 잘 알려져 있으며(Langcake, P, Pryce, RJ, Physiol

Planta Pathol, 9: 77-86, 1976), 백포도 보다 적포도 껍질에 많이 함유되어 있기에 적포도주를 즐겨 마

시는 사람은 심장병에 의한 사망률이 낮는 사실과 깊은 연관이 있는 것으로 밝혀지고 있다(Goldberg,

DM, et al, Am J Enol Vitic, 46(2): 159-165, 1995; Jeandet, P, et al, J Phytopathology

143: 135-139, 1995) 본 발명과 관련된 종래기술은 아직까지 발표된바 없는 새로운 기술이다.

[0009] 본 발명은 생리학적ㆍ약리학적 작용을 지니고 있는 트란스-레스베라트롤을 다량 함유하고 있는 미활용 식

물종자로부터 새로운 항염증 물질을 찾아내기 위한 연구의 일환으로 약 30종의 국내산 식물종자의 메탄올

추출물을 조제하여 그들의 리폭시게나제(콩유래) 저해작용을 측정한 결과 작약뿌리와 달리 작약씨추출물은

매우 강한 리폭시게나제 저해작용을 보였다. 따라서 작약씨 추출물로부터 리폭시게나제 저해제를 분리하게

되었으며, 그 결과 지금까지 작약뿌리 및 종자에서 발견되지 않은 생리활성물질인 트란스-레스베라트롤 성

분이 다량으로 들어 있는 것을 확인하고 기능성 식품, 화장품 및 의약품의 원료로 사용할 수 있는 트란스-

레스베라트롤을 순수 분리하는데 본 발명의 목적이 있다.

[0010] 본 발명은 건조 작약씨를 고르게 분쇄한 후 노르말 핵산으로 2시간 환류냉각 장치가 부착된 추출장치에서

탈지한 다음 잔사에 80% 수용성 메탄올 가하여 2시간 열탕 추출한 다음 여과 농축한다. 여기에 10% 메탄올

용액을 가하여 가용화한 후 다이아이온 헤이치피-20 칼럼에 흡착시킨 후 60% 수용성 메탄올용액으로 추출

하는 제 1공정과 60% 수용성 메탄올 추출물을 농축한 후 다시 세파덱스 엘에이치-20 칼럼 크로마토그래피

하여 트란스-레스베라트롤을 분리하는 제 2공정으로 구성된 작약씨의 트란스-레스베라트롤의 추출방법에

관한 것이다.

본 발명은 작약씨에 함유된 트란스-레스베라트롤 성분을 고수율로 순수 분리하여 항암, 항염증, 항혈전,

항고지혈증 및 항산화용 의약품, 화장품 및 기능성식품의 원료로 제공할 수 있다.

도 1은 본 발명의 분획물인 [0001] 트란스-레스베라트롤의 구조식이다.
도 2는 분취-고속액체크로마토그래피에 의해 분리된 4가지 분획물중 2번째 피이크가 트란스-레스베라트롤
이다.
도 3은 수소-핵자기공명분광기로 트란스-레스베라트롤을 측정한 것이다.
도 4는 탄소-핵자기공명분광기로 트란스-레스베라트롤을 측정한 것이다.
도 5는 질량분석기로 트란스-레스베라트롤을 측정한 것이다.

*루테올린(Luteolin), 캄페롤(Kaempferol), 퀘세틴(Quercetin), 미리세틴 (Myricetin), 카테콜

(Catechol), 레소시놀(Resorcinol) 노르디하이드로구아이아레산(NDGA) 등은 참고 분획물로 사용하였음.

*IC50값은 선회귀(Liner regression) 분석에 의해 계산하였음.

Claims (3)

1. 건조된 작약씨를 미세하게 분쇄하여 노르말 핵산으로 탈지하여 지방을 제거하는 단계와, 잔사에 메탄올을
   가하여 80℃로 가열하고 추출한 후 감압ㆍ농축하는 단계와, 전기의 농축물을 다이아이온 에이치-20를 이용
   하여 칼럼크로마토그래피를 실시하는 단계와, 전기의 추출물을 세파덱스 엘에이치 20 칼럼을 이용하여 분
   리한 후 재결정하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 작약씨로부터 트란스-레스베라트롤 성분의 추출
   방법.
2. 건조된 작약씨를 미세하게 분쇄하여 노르말 핵산으로 탈지하여 지방을 제거하는 단계와, 잔사에 메탄올을
   가하여 가열하고 추출한 후 감압ㆍ농축하는 단계와, 전기의 농축물에 에테르를 넣고 에테르 및 수층으로
   분획한 후 에테르층을 감압농축하는 단계와, 전기의 에테르층을 순차적으로 실리카겔, 세파덱스 엘에이치
   20 칼럼 및 분취-고속액체크로마토그래피를 이용하여 분리한 후 재결정하는 단계로 이루어지는 것을 특징
   으로 하는 작약씨로부터 트란스-레스베라트롤 성분의 추출방법.
3. 제 1 항에 있어서, 추출용매를 메탄올 대신 에탄올을 사용하는 것을 특징으로 하는 작약씨로부터 트란스-
   레스베라트롤의 추출방법.