CN110574927B - 一种抗糖化组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种抗糖化组合物及其制备方法，按重量份数计具体如下：苹果1％～30％，红石榴1％～25％，淡竹叶粉0.5％～20％，鲣鱼低聚肽0.5％～20％，葡萄0.5％～20％，黑加仑0.5％～10％，桑葚0.1％～10％，葛根0.1％～10％，沙棘0.1％～10％，黑生姜0.1％～10％，表没食子儿茶素没食子酸酯0.01％～5％，辅料余量。该组合物可做成片剂，颗粒剂，胶囊，软胶囊，粉剂或口服液等剂型。本发明将功能化合物、功能食品与传统中药相结合，从人体代谢机理出发，全方位抗糖化，同时兼顾抗氧化、抗衰老、抗炎和美白等作用。

Description

一种抗糖化组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种抗糖化组合物及其制备方法，属于功能性食品、保健食品技术领域。
背景技术
进入21世纪后，医学研究发现，作为人类最好的朋友-糖，也同时扮演着“天使”和“杀手”的双重身份，随着年龄的增加，人体代谢逐渐减缓，导致人体内集聚的糖分无法及时代谢出去，多余的糖分会通过非酶促糖基化反应加到蛋白质的氨基酸基团上形成糖化蛋白质，又称蛋白质高度糖化终产物(AGEs)。胶原蛋白和弹性蛋白是皮肤的支架，一旦和糖分子结合后就会使原本饱满富有弹性的胶原蛋白和弹性蛋白硬化，进而断裂、受损，导致皮肤塌陷，失去弹性，紧致度也会下降，皱纹也会慢慢显现，随着糖化蛋白质在皮肤的积累，皮肤就会变的黯淡无光。过多的糖分还会使身体的雄性激素增高，油脂分泌增加，皮肤易出油，容易导致痤疮的生成。黑色素的生成过程中，糖会使酪氨酸酶变的更活跃，进而增加黑色素的生成，肌肤逐渐变得暗黄。
AGE的生成过程很复杂，还原糖如葡萄糖上的羰基，与蛋白质、脂质或核酸经过多步反应后形成Schiff碱和Amadori产物，它们的性质相对不稳定，发生重排、降解，在此过程中，生成许多反应性羰基化合物，其中包括了α一二羧基，氧化醛，3一脱氧葡糖醛酮、甲基乙二醛、乙二醛等物质。它们通过氧化性或非氧化性途径与蛋白质发生反应，最终生成具有棕黄色、交联性、结构稳定性质的AGEs。
目前市售的抗糖化产品仍较少，且普遍存在成分单一，功效单一，见效缓慢的弊端，无法满足广大爱美女士想要抗糖化、全面改善皮肤问题的需求。本发明从非酶糖基化的作用机理出发，全面阻断糖基化过程，且在抗糖化的同时兼顾抗氧化、抗衰老、抗炎、美白的作用，添加了多种功效性成分，有效改善随着年龄增长出现的一系列皮肤问题。
鲣鱼低聚肽粉中的有效成分肌肽能与人体非酶糖基化反应的中间产物羰基化合物反应，保护蛋白质不被糖基化，同时肌肽可以与已经发生糖基化的蛋白质产物作用，阻止糖基化蛋白质的进一步交联，此外，肌肽可以清除自由基，隔绝脂质过氧化产物MDA，提高总抗氧化能力，通过合理调节细胞凋亡以减慢衰老进程，通过抑制酪氨酸酶活性，从而减少黑色素的生成。
黑生姜能够加速血液流动，改善末梢循环，能够抑制AGEs的生成，从而阻断蛋白间的交联，减少AGEs在皮肤微循环过程中的滞留和沉积。
桑葚可使蛋白结构变性，从而不能与中间产物羰基化合物结合，保护游离氨基，阻断糖基化反应，桑葚中的花青素等多酚物质能降低心肌线粒体中MDA含量，升高心肌线粒体中 SOD量，提高总抗氧化能力，桑葚中还含较高的白藜芦醇，能减弱促炎症反应，发挥抗炎功效。
沙棘总黄酮具有抑制AGEs形成的作用，通过抑制晚期糖基化终产物受体mRNA表达水平，从而抑制AGEs的生成，沙棘中的黄酮提取液对羟自由基有很强的清除能力，还能减少脂质过氧化产物MDA的生成，抑制细胞凋亡从而延缓衰老，此外沙棘黄酮还具有抑制酪氨酸酶活性，美白的作用。
葛根素可明显下调RAGE mRNA的表达，减少主动脉AGEs的沉积，下调主动脉中RAGEmRNA 的表达来抑制非酶糖化反应，葛根黄酮能清除自由基、提高体内抗氧化酶活性以及降低MDA 含量，葛根素还可影响白介素系统，主要表现在对抗炎因子的促进和对促炎因子的抑制，从而减少炎症的发生，此外葛根黄酮的总还原能力较强，对活性氧离子均有一定的清除作用。
竹叶黄酮可抑制早期糖基化产物Amadori重排、氧化生成羰基化合物来阻断非酶糖基化反应，竹叶黄酮清除超氧阴离子自由基能力是Vc的约1.2倍，可提高抗氧化酶活性，抑制脂质过氧化产物，保护胶原蛋白，延缓衰老，此外，竹叶黄酮对酪氨酸酶活性，黑色素生成均有抑制作用。
EGCG可抑制早期糖基化产物Amadori重排、氧化生成羰基化合物，EGCG具有很强的清除羟基自由基和过氧阴离子自由基的能力，EGCG能提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的酶活力及总抗氧化能力水平，降低MDA水平，对衰老产生一定的抵抗作用，EGCG能改变炎症细胞细胞壁和细胞膜的通透性，抑制炎症细胞活性，从而对炎症细胞产生抑制和灭活作用，除此之外，EGCG还具有清除自由基，减少黑色素沉积，抑制酪氨酸酶活性，美白的作用。
黑加仑对早期糖基化产物、羰基化中间产物和AGEs均有一定程度的抑制作用，对DPPH 自由基、羟基自由基、超氧自由基清除率高达60％以上，具有显著抗氧化活性，黑加仑能通过降低脂质过氧化产物MDA含量，提高抗氧化物酶活性。
石榴具有清除羟自由基和超氧阴离子自由基的能力，能够抑制促炎因子的活性，起到抗炎促愈的作用，石榴皮中的鞣花酸成分是天然的自由基清除剂，增加皮肤弹性延缓衰老，对酪氨酸酶也有明显的抑制作用。
葡萄多酚的主要成分是原花青素，原花青素有较强的抗氧化和清除自由基的能力，原花青素还可抑制炎症细胞活性，原花青素清除自由基的能力较强，即使浓度很低也可以起到清除自由基的作用，因此可以防止肌肤老化，并且变得更白皙、润泽而有弹性，原花青素还有抑制酪氨酸酶活性的作用。
苹果中含原花青素，具有较强的抗氧化和清除自由基的能力，苹果中多酚提取物可有效抑制酪氨酸酶活性，还可抑制炎症介质的合成和释放，提高抗氧化酶活性。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种抗糖化组合物以起到对人体有抗糖化、抗氧化、抗衰老、抗炎和美白的功效。
本发明的目的之二是提供一种抗糖化组合物的制备方法。
本发明的这些以及其它目的将通过下列详细描述和说明来进一步阐述。一种抗糖化组合物及其制备方法，所述的抗糖化组合物由如下重量百分比制备而成：苹果1％～30％，红石榴 1％～25％，淡竹叶粉0.5％～20％，鲣鱼低聚肽0.5％～20％，葡萄0.5％～20％，黑加仑0.5％～10％，桑葚0.1％～10％，葛根0.1％～10％，沙棘0.1％～10％，黑生姜0.1％～10％，表没食子儿茶素没食子酸酯0.01％～5％，辅料余量；
进一步，一种抗糖化组合物及其制备方法，所述的抗糖化组合物由如下重量百分比制备而成：苹果10％～20％，红石榴5％～15％，淡竹叶1％～10％，鲣鱼低聚肽1％～10％，葡萄1％～ 5％，黑加仑1％～5％，桑葚0.5％～5％，葛根0.5％～5％，沙棘0.5％～5％，黑生姜0.5％～5％，表没食子儿茶素没食子酸酯0.1％～0.5％，辅料余量；
最优地，一种抗糖化组合物及其制备方法，所述抗糖化组合物由如下重量百分比的原料制备而成：苹果15％，红石榴10％，淡竹叶5％，鲣鱼低聚肽3％，葡萄3％，黑加仑3％，桑葚 3％，葛根2％，沙棘2％，黑生姜1％，表没食子儿茶素没食子酸酯0.3％，辅料余量。
抗糖化组合物中苹果为苹果粉，苹果提取物或苹果浓缩汁，优选苹果浓缩汁；
抗糖化组合物中红石榴为红石榴粉，红石榴提取物或红石榴浓缩汁，优选红石榴浓缩汁；
抗糖化组合物中竹叶为竹叶粉，淡竹叶提取物，优选淡竹叶提取物；
抗糖化组合物中鲣鱼低聚肽中肌肽含量为5％～30％，优选肌肽含量30％；
抗糖化组合物中葡萄为葡萄粉，葡萄提取物或葡萄浓缩汁，优选葡萄浓缩汁；
抗糖化组合物中黑加仑为黑加仑粉，黑加仑提取物或黑加仑浓缩汁，优选黑加仑提取物；
抗糖化组合物中桑葚为桑葚粉，桑葚提取物或桑葚浓缩汁，优选桑葚提取物；
抗糖化组合物中葛根为葛根粉或葛根提取物，优选葛根提取物；
抗糖化组合物中沙棘为沙棘粉，沙棘提取物或沙棘浓缩汁，优选沙棘浓缩汁；
抗糖化组合物中黑生姜为黑生姜粉，黑生姜提取物或黑生姜浓缩汁，优选黑生姜提取物；
抗糖化组合物中表没食子儿茶素没食子酸酯含量为95％～99％，优选含量为95％；
抗糖化组合物中辅料为乳糖，微晶纤维素，麦芽糊精，硬脂酸镁，二氧化硅，二氧化钛，蜂蜡，纯化水，三氯蔗糖，果粉香精，甘油，聚维酮K30或明胶，优选纯化水；
抗糖化组合物的剂型为片剂，颗粒剂，胶囊，软胶囊，粉剂或口服液，优选口服液；
抗糖化组合物口服液的制备工艺如下：
1)苹果浓缩汁制备：(a)原料拣选、清洗：将未成熟的青果、霉烂果和病虫果剔除，好果清洗后备用；(b)前处理：在常温下把经过清洗分捡过的苹果输送至涡轮式冷提取设备料斗中进行削皮、去籽、打浆；(c)热烫：将苹果原料投入沸水中，一般使用不锈钢夹层锅加热，热烫3～5min，优选热烫3min，然后捞出；(d)打浆、破碎：热烫后的苹果原料用打浆机迅速打浆破碎，期间控制浆温在50℃～70℃，优选浆温在60℃，使果浆中的色素和溶质能充分溶出，果浆通过筛网流到下方的大型容器内，打浆时加入80～90℃热水，优选80℃热水，便于压榨和提取汁液；(e)酶解：在40～50℃，优选50℃，pH值为4～7，优选pH值为6，纤维素酶用量为浆液质量0.5％～1％，优选纤维素酶用量为浆液质量0.8％，酶解果浆时间为 10～18h，优选酶解时间为10h；(f)榨汁：将上述浆料输入螺旋压榨机中进行压榨，取其汁液；(g)过滤：通过筛滤分离较大颗粒的悬浮固形物，把榨出的果汁静置沉淀，取上层果汁用回转振动筛筛分，过滤网一般采用80～120目，优选过滤网为120目；(h)均质和脱气：采用高压均质机和真空脱气机进行均质和脱气；(i)灭菌：采用高温瞬时灭菌，灭菌温度为 110～130℃，优选灭菌温度为120℃，灭菌时间为5～10s，优选灭菌时间为5s，加热灭菌后，迅速冷却；(j)浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.5Mpa～0.8Mpa进行浓缩，优选真空度为0.6Mpa，浓度控制30％～50％停止浓缩，优选浓度在40％，用泵打入中间储罐备用；
2)红石榴浓缩汁制备：(a)原料选择：选无病虫害，无霉变，无腐烂的新鲜红石榴，以保证果汁的质量；(b)清洗：将石榴用清水浸泡后用喷淋或流动水洗，洗除表皮的灰尘、杂质、微生物和部分农药残留物；(c)剥皮取籽：用刀具将石榴皮划破，用手剥果去皮，去白色隔膜，去除籽粒；(d)清洗：用纯化水流动冲洗石榴籽，除去剥皮时残留下来的石榴表皮和碎隔膜等杂质，洗去附在籽粒上的微生物，洗完后沥干；(e)护色：将石榴籽浸泡在柠檬酸中3～4h以上，优选浸泡4h，以防石榴在打浆后果汁变色；(f)打浆：洗净的籽粒送入打浆机，打浆过程中严格控制打浆工作条件，使果核与果肉既能充分分离又不导致果核破裂，引起石榴汁的变色变味；(g)过滤：用板框压滤机过滤除去打浆时残留在果汁中的果渣；(h) 均质：将石榴汁以150～200kgf/cm2的压力通过高压均质机，优选150kgf/cm2压力，使其中的果肉在强烈的剪力和气蚀力的作用下破碎，均匀的分散在液汁中而达到稳定；(i)灭菌：采用高温瞬时灭菌，灭菌温度为110～130℃，优选灭菌温度为120℃，灭菌时间为5～10s，优选灭菌时间5s，加热杀菌后，迅速冷却；(j)浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.5Mpa～0.8Mpa进行浓缩，优选真空度在0.6Mpa，浓度控制30％～50％停止浓缩，优选浓度为40％，用泵打入中间储罐备用；
3)葡萄浓缩汁制备：(a)原料选择：选择无病虫害，无霉变，无腐烂的新鲜葡萄，以保证果汁的质量；(b)清洗、去梗：将葡萄在水中浸泡10～15min，优选浸泡15min，再于0.03～ 0.05％高锰酸钾溶液中浸泡消毒2～3min，优选0.05％高锰酸钾溶液，浸泡消毒2min，取出后用清水漂洗干净；(c)脱粒与除梗：防止压榨时果梗混入果浆，在加热时溶出大量单宁等物质，使果汁颜色发黑，风味变差；(d)破碎：用破碎机将葡萄进行适当的破碎，提高榨汁率； (e)榨汁与过滤：用内气囊袋式榨汁机，避免葡萄籽粒破碎，榨出的葡萄原汁用300～500 目的网筛过滤，优选500目筛网过滤，以除去果皮、籽粒及果肉等块状物；(f)离心：粗滤后的葡萄汁含细碎的果皮、果肉及油脂等物质，3000～5000r/min离心15～30min，优选5000r/min离心15min，经离心后比重小的油脂浮在表面，较沉的果皮、果肉等则沉在底部，取中间的纯液即为葡萄原果汁；(g)均质：将葡萄汁以150～200kgf/cm2的压力通过高压均质机，优选150kgf/cm2的压力，使其中的果肉在强烈的剪力和气蚀力的作用下破碎，均匀的分散在液汁中而达到稳定；(h)灭菌：采用高温瞬时灭菌，灭菌温度为110～130℃，灭菌时间为5～10s，加热灭菌后，迅速冷却；(i)浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.5Mpa～0.8Mpa进行浓缩，优选真空度在0.6Mpa，浓度控制30％～50％停止浓缩，优选浓度为40％，用泵打入中间储罐备用；
4)沙棘浓缩汁制备：(a)原料选择：选无病虫害，无霉变，无腐烂的新鲜沙棘果，以保证果汁的质量；(b)清洗：将沙棘用清水浸泡后用喷淋或流动水洗，洗除表皮的灰尘、杂质、微生物；(c)打浆：洗净的沙棘果送入打浆机，打浆过程中严格控制打浆工作条件，使果核与果肉既能充分分离又不导致果核破裂，引起沙棘汁的变色变味；(d)过滤：用板框压滤机过滤除去打浆时残留在果汁中的果渣；(h)均质：将沙棘汁以150～200kgf/cm2的压力通过高压均质机，优选压力为150kgf/cm2，使其中的果肉在强烈的剪力和气蚀力的作用下破碎，均匀的分散在液汁中而达到稳定；(i)灭菌：采用高温瞬时灭菌，杀菌温度为110～130℃，优选灭菌温度为120℃，灭菌时间为5～10s，优选灭菌时间为5s，加热杀菌后，迅速冷却；(j) 浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.5Mpa～0.8Mpa进行浓缩，优选真空度为 0.6Mpa，浓度控制30％～50％停止浓缩，优选浓度为40％，用泵打入中间储罐备用；
5)葛根提取物制备：(a)除杂：将晒干的葛根块进行挑拣，筛除杂质；(b)粉碎：用粉碎机对葛根块进行粉碎，目数控制在40目～80目之间，优选目数为60目；(c)提取：称取一定量葛根粉，以水作为溶剂，按照料液比1∶6～1∶12，优选料液比为1∶10，提取时间为 1.5～3h，优选提取时间2h，提取次数2～4次，优选提取次数3次，合并滤液；(b)浓缩：葛根提取液在真空度为0.6～0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.1～1.5g/cm3时，优选真空度0.8Mpa，相对密度为1.2g/cm3即得浓缩液；(c)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～180℃，优选进风温度为180℃，出口温度70℃～90℃，优选出风温度为90℃，干燥后粉碎成80～100目细粉，优选80目细粉，水分控制在5％以下，葛根素含量为10％～30％，优选葛根素含量为30％；
6)淡竹叶提取物制备：(a)清洗：淡竹叶洗净后在50～60℃烘箱内干燥2～3h，优选烘干温度为60℃，干燥时间为3h；(b)粉碎：取出后用粉碎机粉碎成40～80目的细粉备用，优选粉碎目数为60目；(c)提取：称取一定量淡竹叶，以水作为溶剂，按照料液比1∶6～1∶ 12，优选料液比为1∶12，提取时间为1.5～3h，优选提取时间为2h，提取次数2～4次，优选提取次数为3次，合并滤液；(d)浓缩：葛根提取液在真空度为0.6～0.8Mpa，优选真空度0.8Mpa，浓缩至相对密度为1.1～1.5g/cm3时，优选浓缩相对密度为1.2g/cm3，即得浓缩液；(e)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～180℃，优选进风温度为180℃，出风温度70℃～90℃，优选出风温度为90℃，干燥后碎成80～100目细粉，优选粉碎目数为80目，水分控制在5％以下，竹叶黄酮含量为24％～40％，优选竹叶黄酮含量为30％；
7)黑加仑提取物制备：(a)粉碎：以黑加仑新鲜成熟果实为原料，用破碎机将黑加仑进行适当的破碎；(b)提取：称取一定量粉碎的黑加仑，以水作为溶剂，按照料液比1∶8～1∶ 12，优选料液比为1∶10，提取时间为1.5～3h，优选提取时间为2h，提取次数2～4次，优选提取次数为3次，合并滤液；(c)浓缩：葛根提取液在真空度为0.6～0.8Mpa，优选真空度为0.8Mpa，浓缩至相对密度为1.1～1.5g/cm3时，优选相对密度为1.2g/cm3，即得浓缩液； (d)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～180℃，优选进风温度为180℃，出口温度70℃～90℃，优选出风温度为90℃，干燥后碎成80～100目细粉，优选80目细粉，水分控制在5％以下，黑加仑黄酮含量为10％～40％，优选黑加仑黄酮含量为20％；
8)桑葚提取物制备：(a)粉碎：以黑加仑新鲜成熟果实为原料，用破碎机将黑加仑进行适当的破碎；(b)醇提：称取一定量的桑葚，用50～70％浓度的乙醇作为提取溶剂，优选50％乙醇，按照料液比1∶8～1∶12，优选料液比1∶10，提取时间为1.5～3h，优选提取时间为2h，提取次数2～4次，优选提取次数3次，合并滤液；(c)浓缩：葛根提取液在真空度为 0.6～0.8Mpa，优选真空度为0.8Mpa，浓缩至相对密度为1.1～1.5g/cm3时，优选相对密度为1.2g/cm3，即得浓缩液；(d)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～ 180℃，优选进风温度150℃，出风温度70℃～90℃，出风温度70℃，干燥后碎成80～100目细粉，优选100目细粉，水分控制在5％以下，桑葚花青素含量为5％～10％，优选桑葚花青素含量为10％；
9)黑生姜提取物制备：(a)粉碎：以黑生姜晒干用破碎机进行粉碎，目数控制在40～ 80目，优选目数为80目；(b)提取：称取一定量黑生姜粉，以10％～30％乙醇溶液作为溶剂，优选10％乙醇作为溶剂，料液比按1∶8～1∶12，优选料液比1∶10，提取时间为1.5～3h，优选提取时间2h，提取次数2～4次，优选提取次数3次，合并滤液；(c)浓缩：葛根提取液在真空度为0.6～0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.1～1.5时，优选真空度0.8Mpa，密度为 1.2g/cm3，即得浓缩液；(d)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～ 180℃，优选进风温度160℃，出风温度70℃～90℃，出风温度70℃，干燥后碎成80～100 目细粉，优选100目细粉，水分控制在5％以下，黑生姜黄酮含量为10％～30％，优选黑生姜黄酮含量为20％；
10)鲣鱼低聚肽液制备：(a)前处理：将鲣鱼去皮去骨取鱼肉，用4℃的冷水清洗所得鱼肉，沥干水分，得到预处理的鱼肉；(b)匀浆：将上述预处理的鱼肉搅碎，得到鱼肉糜，按质量体积比1∶5(g/mL)向所得鱼肉糜中加入水，混匀，得到匀浆液；(c)酶解：采用复合水解酶进行酶解，复合水解酶为酸性蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶＝1∶2∶1～1∶2∶4，优选酸性蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶＝1∶2∶2，添加量为鱼肉质量的0.5‰～1.0‰，优选添加量为0.8‰，酶解温度控制在45℃～60℃，优选酶解温度为60℃，酶解时间在1h～ 4h，优选酶解时间为2h，溶液pH值控制在4.0～7.0，优选pH值为6.0；(d)灭酶：酶解后，选取70℃～90℃进行灭酶活性，优选灭酶温度为90℃，维持30min～60min，优选灭酶时间 30min；(e)脱色脱臭：在上述酶解液中加入滤液质量5％～10％的活性碳粉，优选活性炭粉添加量为8％，混匀后置于75～90℃条件下脱色，优选脱色温度为90℃；(f)分离精制：将灭酶后的料液从酶解罐中放出，经过板框过滤器进行一次过滤，再经过膜过滤进行二次过滤，通过纳滤膜除盐，得到精制鲣鱼水解液；(g)浓缩：鲣鱼水解液通过负压浓缩器，控制真空度在0.5Mpa～1.0Mpa，优选真空度为0.6Mpa，当质量浓度在30％～60％，优选质量浓度为40％，停止浓缩，将鲣鱼低聚肽浓缩液用泵输送到中间储罐备用；(h)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～180℃，优选进风温度为180℃，出风温度70℃～90℃，优选出风温度为80℃，干燥后碎成80～100目细粉，优选100目细粉；
11)表没食子儿茶素没食子酸酯制备：(a)粗提物处理：绿茶粉碎，装入提取罐，按照固液比1：8装入去离子水，温度50～80℃，搅拌转速55～80r/min，0.1～0.5Mpa真空提取20～30min，优选50℃，搅拌转速60r/min，真空度0.5Mpa，提取30min；(b)过滤：将上述提取液冷却至40℃，采用孔径为0.5μm的无机陶瓷膜0.2～0.35Mpa过滤，优选0.3Mpa，得到滤液和滤渣；(c)浓缩：取上述滤液，导入真空浓缩机，40～50℃，0.1～0.5Mpa下真空浓缩60～90min，优选浓缩温度50℃，真空度0.1Mpa，浓缩时间60min，得浓缩提取液；(d) 层析分离：采用大孔吸附树脂对浓缩提取液进行儿茶素富集，上样流速为2～4BV/h，优选上样流速为2BV/h，再依次使用10％、25％、40％、95％乙醇以2～4BV/h的流速洗脱5～8个柱体积，优选洗脱流速为2BV/h，根据薄层色谱跟踪检测结果，收集儿茶素混合物；(e)浓缩：采用真空浓缩机，浓缩温度55～80℃，优选浓缩温度60℃，真空度为0.1～0.5Mpa，优选真空度为0.5Mpa，浓缩时间60～90min，优选浓缩时间60min，再采用真空冻干机进行冷冻干燥，水分含量控制在5％以下，即得高纯度EGCG冻干粉；
12)稀释浓缩果汁：分别称取配方量苹果浓缩汁、红石榴浓缩汁、沙棘浓缩汁和葡萄浓缩汁，投入装有纯净水的配料罐中，进行搅拌溶解，搅拌速率为10r/min～30r/min，优选搅拌速率为10r/min，搅拌时间为15～30min，优选搅拌时间30min，配制浓缩果汁溶液浓度为30％～50％，优选浓缩果汁浓度30％；
13)过滤：浓缩果汁溶液用泵引入滤袋过滤器进行过滤，滤袋孔径在300～600目，优选 300目孔径；
14)溶解：称取配方量黑加仑提取物、桑葚提取物、葛根提取物、淡竹叶提取物、黑生姜提取物、鲣鱼低聚肽粉、表没食子儿茶素没食子酸酯，投入果汁混合液中，余量用水补足，进行搅拌，搅拌速率为10r/min～30r/min，优选搅拌转速为10r/min，搅拌时间为15～30min，优选搅拌时间为30min；
15)过滤：混合液用泵引入滤袋过滤器进行过滤，滤袋孔径在300～600目，优选600目孔径；
16)高温瞬时灭菌：采用高温瞬时灭菌方式，灭菌温度控制在110～130℃条件下对混合液进行灭菌，优选灭菌温度为120℃，时间为2～8s，优选时间为5s；
17)冷却：灭菌后的混合液冷却至30℃以下后进行无菌灌装，即得成品。
与现有技术相比，本发明的有益效果表现在：
本发明从人体代谢机理出发，将功能性化合物，功能食品及传统中药有机结合，对机体进行全方位抗糖化。各原料功能相辅相成，经试验验证，具有抗糖化，抗氧化，抗衰老，抗炎及美白等功效。本发明组合物可做多种剂型，产品稳定，易于工业化生产。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明做进一步阐述。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。对于本领域的技术人员来说，在上述说明的基础上，可以对本发明做出不同形式的变化或变动，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。
实施例1
一种抗糖化组合物，该组合物为口服液剂型，抗糖化组合物组成如下：纯化水52.7％，苹果浓缩汁15％，红石榴浓缩汁10％，淡竹叶提取物5％，鲣鱼低聚肽粉3％，葡萄浓缩汁3％，黑加仑提取物3％，桑葚提取物3％，葛根提取物2％，沙棘浓缩汁2％，黑生姜提取物1％，表没食子儿茶素没食子酸酯0.3％。
抗糖化组合物口服液的制备方法按如下方案进行：
1)苹果浓缩汁制备：(a)原料拣选、清洗：将未成熟的青果、霉烂果和病虫果剔除，好果清洗后备用；(b)前处理：在常温下把经过清洗分捡过的苹果输送至涡轮式冷提取设备料斗中进行削皮、去籽、打浆；(c)热烫：将苹果原料投入沸水中，一般使用不锈钢夹层锅加热，热烫3min，然后捞出；(d)打浆、破碎：热烫后的苹果原料用打浆机迅速打浆破碎，期间控制浆温在50℃，使果浆中的色素和溶质能充分溶出，果浆通过筛网流到下方的大型容器内，打浆时加入80℃热水，便于压榨和提取汁液；(e)酶解：在50℃，pH值为6，纤维素酶用量为浆液质量0.8％，酶解果浆时间为12h；(f)榨汁：将上述浆料输入螺旋压榨机中进行压榨，取其汁液；(g)过滤：通过筛滤分离较大颗粒的悬浮固形物，把榨出的果汁静置沉淀，取上层果汁用回转振动筛筛分，过滤网一般采用120目；(h)均质和脱气：采用高压均质机和真空脱气机进行均质和脱气；(i)灭菌：采用高温瞬时灭菌，灭菌温度为120℃，灭菌时间为5s，加热灭菌后，迅速冷却；(j)浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.6Mpa 进行浓缩，浓度控制40％停止浓缩，用泵打入中间储罐备用；
2)红石榴浓缩汁制备：(a)原料选择：选无病虫害，无霉变，无腐烂的新鲜红石榴，以保证果汁的质量；(b)清洗：将石榴用清水浸泡后用喷淋或流动水洗，洗除表皮的灰尘、杂质、微生物和部分农药残留物；(c)剥皮取籽：用刀具将石榴皮划破，用手剥果去皮，去白色隔膜，去除籽粒；(d)清洗：用纯化水流动冲洗石榴籽，除去剥皮时残留下来的石榴表皮和碎隔膜等杂质，洗去附在籽粒上的微生物，洗完后沥干；(e)护色：将石榴籽浸泡在柠檬酸中3～4h以上，以防石榴在打浆后果汁变色；(f)打浆：洗净的籽粒送入打浆机，打浆过程中严格控制打浆工作条件，使果核与果肉既能充分分离又不导致果核破裂，引起石榴汁的变色变味；(g)过滤：用板框压滤机过滤除去打浆时残留在果汁中的果渣；(h)均质：将石榴汁以150kgf/cm2的压力通过高压均质机，使其中的果肉在强烈的剪力和气蚀力的作用下破碎，均匀的分散在液汁中而达到稳定；(i)灭菌：采用高温瞬时灭菌，灭菌温度为120℃，灭菌时间为5s，加热杀菌后，迅速冷却；(j)浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.6Mpa进行浓缩，浓度控制30％～50％停止浓缩，用泵打入中间储罐备用；
3)葡萄浓缩汁制备：(a)原料选择：选择无病虫害，无霉变，无腐烂的新鲜葡萄，以保证果汁的质量；(b)清洗、去梗：将葡萄在水中浸泡10min，再于0.05％高锰酸钾溶液中浸泡消毒3min，取出后用清水漂洗干净；(c)脱粒与除梗：防止压榨时果梗混入果浆，在加热时溶出大量单宁等物质，使果汁颜色发黑，风味变差；(d)破碎：用破碎机将葡萄进行适当的破碎，提高榨汁率；(e)榨汁与过滤：用内气囊袋式榨汁机，避免葡萄籽粒破碎，榨出的葡萄原汁用500目的网筛过滤，以除去果皮、籽粒及果肉等块状物；(f)离心：粗滤后的葡萄汁含细碎的果皮、果肉及油脂等物质，5000r/min离心15min，经离心后比重小的油脂浮在表面，较沉的果皮、果肉等则沉在底部，取中间的纯液即为葡萄原果汁；(g)均质：将葡萄汁以150～200kgf/cm2的压力通过高压均质机，使其中的果肉在强烈的剪力和气蚀力的作用下破碎，均匀的分散在液汁中而达到稳定；(h)灭菌：采用高温瞬时灭菌，灭菌温度为120℃，灭菌时间为5s，加热灭菌后，迅速冷却；(i)浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.6Mpa进行浓缩，浓度控制40％停止浓缩，用泵打入中间储罐备用；
4)沙棘浓缩汁制备：(a)原料选择：选无病虫害，无霉变，无腐烂的新鲜沙棘果，以保证果汁的质量；(b)清洗：将沙棘用清水浸泡后用喷淋或流动水洗，洗除表皮的灰尘、杂质、微生物；(c)打浆：洗净的沙棘果送入打浆机，打浆过程中严格控制打浆工作条件，使果核与果肉既能充分分离又不导致果核破裂，引起沙棘汁的变色变味；(d)过滤：用板框压滤机过滤除去打浆时残留在果汁中的果渣；(h)均质：将沙棘汁以150kgf/cm2的压力通过高压均质机，使其中的果肉在强烈的剪力和气蚀力的作用下破碎，均匀的分散在液汁中而达到稳定； (i)灭菌：采用高温瞬时灭菌，杀菌温度为120℃，时间为5s，加热灭菌后，迅速冷却；(j) 浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.6Mpa进行浓缩，浓度控制40％停止浓缩，用泵打入中间储罐备用；
5)葛根提取物制备：(a)除杂：将晒干的葛根块进行挑拣，筛除杂质；(b)粉碎：用粉碎机对葛根块进行粉碎，目数控制在60目之间；(c)提取：称取一定量葛根粉，以水作为溶剂，按照料液比1∶8，提取时间为2h，提取次数3次，合并滤液；(b)浓缩：葛根提取液在真空度为0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.2g/cm3时，即得浓缩液；(c)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度180℃，出口温度90℃，干燥后粉碎成80目细粉，水分控制在5％以下，葛根素含量为30％；
6)淡竹叶提取物制备：(a)清洗：淡竹叶洗净后在60℃烘箱内干燥2h；(b)粉碎：取出后用粉碎机粉碎成60目的细粉备用；(c)提取：称取一定量淡竹叶，以水作为溶剂，按照料液比1：8，提取时间为2h，提取次数3次，合并滤液；(d)浓缩：葛根提取液在真空度为 0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.2g/cm3时，即得浓缩液；(e)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度180℃，出口温度90℃，干燥后碎成80目细粉，水分控制在5％以下，竹叶黄酮含量为30％；
7)黑加仑提取物制备：(a)粉碎：以黑加仑新鲜成熟果实为原料，用破碎机将黑加仑进行适当的破碎；(b)提取：称取一定量粉碎的黑加仑，以水作为溶剂，按照料液比1∶10，提取时间为2h，提取次数3次，合并滤液；(c)浓缩：葛根提取液在真空度为0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.2g/cm3时，即得浓缩液；(d)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度180℃，出口温度90℃，干燥后碎成80目细粉，水分控制在5％以下，黑加仑黄酮含量为30％；
8)桑葚提取物制备：(a)粉碎：以黑加仑新鲜成熟果实为原料，用破碎机将黑加仑进行适当的破碎；(b)醇提：称取一定量的桑葚，用50％浓度的乙醇作为提取溶剂，按照料液比1∶ 10，提取时间为2h，提取次数3次，合并滤液；(c)浓缩：葛根提取液在真空度为0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.2g/cm3时，即得浓缩液；(d)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度180℃，出口温度90℃，干燥后碎成80目细粉，水分控制在5％以下，桑葚花青素含量为10％；
9)黑生姜提取物制备：(a)粉碎：以黑生姜晒干用破碎机进行粉碎，目数控制在40～ 80目；(b)提取：称取一定量黑生姜粉，以10％乙醇溶液作为溶剂，料液比按1∶10，提取时间为2h，提取次数3次，合并滤液；(c)浓缩：葛根提取液在真空度为0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.2g/cm3时，即得浓缩液；(d)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度180℃，出风温度90℃，干燥后碎成80目细粉，水分控制在5％以下，黑生姜黄酮含量为30％；
10)鲣鱼低聚肽粉制备：(a)前处理：将鲣鱼去皮去骨取鱼肉，用4℃的冷水清洗所得鱼肉，沥干水分，得到预处理的鱼肉；(b)匀浆：将上述预处理的鱼肉搅碎，得到鱼肉糜，按质量体积比1∶5(g/mL)向所得鱼肉糜中加入水，混匀，得到匀浆液；(c)酶解：采用复合水解酶进行酶解，复合水解酶为酸性蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶＝1∶2∶2，添加量为鱼肉质量的0.8‰，酶解温度控制在60℃，酶解时间在1h～4h，溶液pH值控制在6；(d) 灭酶：酶解后，将酶解罐的温度升高到90℃，维持30min；(e)脱色脱臭：在上述酶解液中加入滤液质量5％的活性碳粉，混匀后置于75℃条件下脱色；(f)分离精制：将灭酶后的料液从酶解罐中放出，经过板框过滤器进行一次过滤，再经过膜过滤进行二次过滤，通过纳滤膜除盐，得到精制鲣鱼水解液；(g)浓缩：鲣鱼水解液通过负压浓缩器，控制真空度在0.6Mpa，当质量浓度在40％，停止浓缩，将鲣鱼低聚肽浓缩液用泵输送到中间储罐备用；(h)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度180℃，出口温度90℃，干燥后碎成80 目细粉；
11)表没食子儿茶素没食子酸酯制备：(a)粗提物处理：绿茶粉碎，装入提取罐，按照固液比1∶8装入去离子水，温度50℃，搅拌转速60r/min，0.5Mpa真空提取20min；(b)过滤：将上述提取液冷却至40℃，采用孔径为0.5μm的无机陶瓷膜0.2Mpa过滤，得到滤液和滤渣；(c)浓缩：取上述滤液，导入真空浓缩机，40℃，0.5Mpa下真空浓缩60min，得浓缩提取液；(d)层析分离：采用大孔吸附树脂对浓缩提取液进行儿茶素富集，上样流速为2BV/h，再依次使用10％、25％、40％、95％乙醇以2BV/h的流速洗脱5个柱体积，根据薄层色谱跟踪检测结果，收集儿茶素混合物；(e)浓缩：采用真空浓缩机，浓缩温度60℃，真空度为0.5Mpa，浓缩时间为60min，再采用真空冻干机进行冷冻干燥，水分含量控制在5％以下，即得高纯度 EGCG冻干粉；
12)稀释浓缩果汁：分别称取配方量苹果浓缩汁、红石榴浓缩汁、沙棘浓缩汁和葡萄浓缩汁，投入装有纯净水的配料罐中，进行搅拌溶解，搅拌速率为10r/min，搅拌时间为30min，配制浓缩果汁溶液浓度为30％；
13)过滤：浓缩果汁溶液用泵引入滤袋过滤器进行过滤，滤袋孔径在300目；
14)溶解：称取配方量黑加仑提取物、桑葚提取物、葛根提取物、淡竹叶提取物、黑生姜提取物、鲣鱼低聚肽粉、表没食子儿茶素没食子酸酯，投入果汁混合液中，余量用水补足，进行搅拌，搅拌速率为10r/min，搅拌时间为30min；
15)过滤：混合液用泵引入滤袋过滤器进行过滤，滤袋孔径在600目；
16)高温瞬时灭菌：采用高温瞬时灭菌方式，灭菌温度控制在120℃条件下对混合液进行灭菌，时间为5s；
17)冷却：灭菌后的混合液冷却至30℃以下后进行无菌灌装，即得成品。
实施例2
一种抗糖化组合物，该组合物的剂型为颗粒剂，组成为：苹果提取物30％，红石榴提取物10％，淡竹叶提取物10％，鲣鱼低聚肽粉10％，葡萄提取物10％，黑加仑提取物9％，桑葚提取物7％，葛根提取物7％，沙棘提取物4％，黑生姜提取物2.3％，聚维酮K30 0.5％，表没食子儿茶素没食子酸酯0.2％。
抗糖化组合物颗粒剂的制备方法如下：苹果提取物，红石榴提取物，淡竹叶提取物，鲣鱼低聚肽粉，葡萄提取物，黑加仑提取物，桑葚提取物，葛根提取物，沙棘提取物，黑生姜提取物，表没食子儿茶素没食子酸酯经过筛，混合，聚维酮K30粘合剂配制，流化床制粒，过筛而成。
实施例3
一种抗糖化组合物，该组合物的剂型为胶囊剂，组成为：苹果提取物27％，红石榴提取物13％，淡竹叶粉13％，鲣鱼低聚肽粉8％，葡萄粉8％，黑加仑粉7％，桑葚粉6％，葛根粉5％，沙棘粉5％，黑生姜粉4％，表没食子儿茶素没食子酸酯3.9％，二氧化硅0.1％。
抗糖化组合物胶囊剂的制备方法如下：苹果提取物，红石榴提取物，淡竹叶粉，鲣鱼低聚肽粉，葡萄粉，黑加仑粉，桑葚粉，葛根粉，沙棘粉，黑生姜粉，表没食子儿茶素没食子酸酯经过筛，混合，灌装而成。
实施例4
一种抗糖化组合物，该组合物的剂型为粉剂，组成为：苹果提取物25％，红石榴提取物 15％，淡竹叶提取物15％，鲣鱼低聚肽粉10％，葡萄粉10％，黑加仑粉10％，桑葚提取物6％，葛根粉4％，沙棘提取物3％，黑生姜提取物1.5％，表没食子儿茶素没食子酸酯0.45％，二氧化硅0.05％。
抗糖化组合物粉剂的制备方法如下：苹果提取物，红石榴提取物，淡竹叶提取物、鲣鱼低聚肽粉粉，葡萄粉，黑加仑粉，桑葚提取物，葛根粉，沙棘提取物，黑生姜提取物，表没食子儿茶素没食子酸酯经过筛，混合而成。
实施例5
一种抗糖化组合物，该组合物的剂型为软胶囊剂，组成为：苹果浓缩汁22％，红石榴浓缩汁20％，淡竹叶提取物17％，鲣鱼低聚肽粉12％，葡萄浓缩汁12％，黑加仑提取物7％，桑葚提取物4％，葛根提取物2.5％，沙棘浓缩汁2.2％，黑生姜提取物1％，表没食子儿茶素没食子酸酯0.3％。囊皮由明胶，甘油，水按照质量分数300∶150∶300。
抗糖化组合物软胶囊剂的制备方法如下：苹果浓缩汁，红石榴提取物，淡竹叶提取物，鲣鱼低聚肽粉，葡萄浓缩汁，黑加仑提取物，桑葚提取物，葛根提取物，沙棘浓缩汁，黑生姜提取物，表没食子儿茶素没食子酸酯经过筛，混合，制备囊皮，压制而成。
实施例6
一种抗糖化组合物，该组合物的剂型为片剂，组成为：乳糖57.3％，苹果提取物10％，红石榴提取物8％，淡竹叶粉8％，鲣鱼低聚肽粉6％，葡萄提取物3％，黑加仑粉2％，桑葚粉2％，葛根粉2％，沙棘粉1％，黑生姜粉0.5％，硬脂酸镁0.1％，表没食子儿茶素没食子酸酯0.05％，二氧化硅0.05％。
抗糖化组合物片剂的制备方法如下：乳糖，苹果提取物，红石榴提取物，葡萄粉，鲣鱼低聚肽，黑加仑粉，桑葚粉，葛根粉，沙棘粉，淡竹叶粉，黑生姜粉，表没食子儿茶素没食子酸酯经过筛，混合，压片而成。
实施例7 产品口感验证实验
采用实施例1所制得的抗糖化组合物与市售的颜如玉小分子肽抗糖饮口服液及台湾微米胶原蛋白肽抗糖饮等进行口感及感官的盲评测评。随机选取10人进行测试，考察产品颜色、气味、口感等指标进行综合评定评价。
测试指标及标准如下：
表1 测试指标及评定标准
Figure RE-GSB0000184395580000141
测试结果如下：
表2 盲测测试综合评分汇总
Figure RE-GSB0000184395580000142
由上述数据可知，本发明所制得的抗糖化组合物与市售同类产品相比，具有风味怡人，果味浓郁，颜色均一的特点，整体认可度高于市售同类产品。
实施例8 抑制非酶糖基化反应实验
1.实验材料与方法
1.1 实验仪器与试剂
实验仪器：F-7000荧光分光光度计：日立高新技术公司；
实验试剂：葡萄糖、甘氨酸；
实验样品：实施例1样品、颜如玉小分子肽抗糖饮口服液、台湾微米胶原蛋白肽抗糖饮
1.2 实验方法
量取4.5mL浓度为0.1mol/L的葡萄糖溶液，4.5mL浓度为0.1mol/L的甘氨酸溶液，加入实施例1中的样品、颜如玉小分子肽抗糖饮口服液及台湾微米胶原蛋白肽抗糖饮，在80℃下反应4h后测定所得AGEs的荧光值，对照组以红酒多酚为参照物，配制浓度为0.2％，每个实验重复3次。
1.3 分析方法
采用荧光分光光度计在激发波长370nm，发射波长440nm下测定荧光强度，按照下式计算葡萄糖、甘氨酸模拟体系中AGEs相对抑制率。
相对抑制率/％＝(F对照-F样品)/(F对照-F空白)×100
式中：F样品为加入多酚且加热的反应液的荧光吸收强度；
F对照为不加多酚但加热的反应液的荧光吸收强度；
F空白为不加多酚也不加热的反应液的荧光吸收强度。
1.4 统计方法
每个实验重复3次或3次以上，使用SPSS Statistics17.0对实验数据进行方差分析。
2.实验结果与分析
表1 不同样品对AGEs的相对抑制率的影响
Figure RE-GSB0000184395580000151
注：与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01
通过测定实施例1中的样品、颜如玉小分子肽抗糖饮口服液及台湾微米胶原蛋白肽抗糖饮对葡萄糖、甘氨酸模拟体系中的抑制率，得到三者对非酶糖基化反应均有一定的抑制作用，如表1所示。与对照组相比，实施例1中的样品相对抑制率具有显著性(p＜0.01)；台湾微米胶原蛋白肽抗糖饮相对抑制率有一定的显著性(p＜0.05)；颜如玉小分子肽抗糖饮口服液相对抑制率不明显(p＞0.05)；说明实施例1具有抑制抗糖化效果，且抑制效果要显著高于颜如玉小分子肽抗糖饮口服液及台湾微米胶原蛋白肽抗糖饮中的样品。
3.结论
综上所述，本发明具有抗糖化功效。
实施例9 抗氧化实验
1.实验材料与方法
1.1 实验仪器与试剂
实验仪器：TU-1810型紫外分光光度计：岛津公司；
实验试剂：无水乙醇：国药集团化学试剂有限公司；
实验样品：实施例1样品、颜如玉小分子肽抗糖饮口服液、台湾微米胶原蛋白肽抗糖饮。
1.2 实验方法
1.2.1 DPPH法测定抗氧化能力
准确移取样品溶液2mL于试管中，加入2mL 0.2mol/L DPPH的无水乙醇溶液，混合均匀，暗处放置30min，以无水乙醇调零，测定517nm波长处的吸光度记为A标准样。分别移取不同体积分数的乙醇提取液2mL与无水乙醇2mL，混合均匀，暗处放置30min，在517nm 处的吸光度记为A对照。准确移取DPPH溶液2mL与无水乙醇2mL，混合均匀，在517nm波长处的吸光度，记为A空白，按式(1)计算DPPH清除率。
DPPH·清除率＝[1-(A标准样-A对照)/A空白]×100％ (1)
1.2.2 羟基自由基清除能力测定
分别移取不同体积分数乙醇提取液2mL于试管中，依次加入6mol/L FeSO4和6mol/L H2O2各2mL，混合均匀，静置10min，再加6mol/L水杨酸2mL，混匀，静置30min，于510nm 处测定Ai，以蒸馏水代替6mol/L水杨酸，测得吸光度为Aj，以蒸馏水代替样品测得吸光度为A0，按式(2)计算·OH自由基抑制率。
清除率＝[1-(Ai-Aj)/A0]×100％ (2)
式中，Ai-代表待测样组吸光度；Aj-样品空白组吸光度；A0-对照组的吸光度。
2.实验结果与分析
表2 不同样品对DPPH自由基和羟基自由基的清除能力实验结果
Figure RE-GSB0000184395580000161
通过测定不同样品对DPPH自由基和羟基自由基的清除能力，结果显示表2，与市售产品相比，实施例1的样品对DPPH自由基、羟基自由基的清除能力要高于市售产品，能起到一个很好的抗氧化效果。
3.结论
综上所述，本发明具有抗氧化功效。
实施例10 抗衰老实验
1.实验材料与方法
1.1 实验仪器与试剂
实验仪器：高速冷冻离心机，上海创赛科学仪器有限公司；冷冻离心机，莱比信(中国) 科技发展有限公司；超声波清洗器(KQ-3200)，昆山市超声仪器有限公司。
实验试剂：D-半乳糖(分析纯)，上海试一化学试剂有限公司；丙二醛(MDA)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒，南京建成生物工程研究所。
试验动物：SPF级昆明种小鼠，雌雄各半，2～3月龄，体质量(20±2)g/只，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供(动物合格证号：SCXK(京) 2006-0009)，饲养温度19～26℃，相对湿度40～70％，试验前适应性喂养1周。
实验样品：试验组：实施例1样品；对照组：维生素E，颜如玉小分子肽抗糖饮口服液。
1.2 实验方法
1.2.1 试验动物分组、造模及处理
选取健康、体况均等的60只SPF级昆明种小鼠，随机分5组(n＝10)，分别为空白组、衰老模型组、维生素E组、颜如玉小分子肽抗糖饮口服液组。建立D-半乳糖小鼠衰老模型，其中空白组小鼠用等体积生理盐水灌胃；衰老模型组小鼠颈背部皮下注射125mg/(kg·d) D-半乳糖，灌胃等体积生理盐水；维生素E组小鼠颈背部皮下注射125mg/(kg·d)D-半乳糖，灌胃颜如玉小分子肽抗糖饮口服液50mg/((kg·d)；维生素E组小鼠颈背部皮下注射 125mg/(kg·d)D-半乳糖，灌胃维生素E溶液2.0g/(kg·d)；试验组小鼠均颈背部皮下注射125mg/(kg·d)D-半乳糖，并灌实施例1样品溶液2.0g/(kg·d)，试验为期6周。
1.2.2 小鼠脑、胸腺和脾脏指数的测定
试验结束后，取各组小鼠采血后颈椎脱臼法处死称质量，迅速解剖取小鼠脑、胸腺、脾脏，用4℃的生理盐水冲洗2次，滤纸拭干，立即称质量，用下式计算各脏器指数，脏器指数(mg/g)＝脏器质量/体质量。
1.2.3 抗氧化指标的测定
组织器官称质量后各取0.5g，用0.85％冷生理盐水9倍体积匀浆，3000r/min离心15min，取上清液；严格按照试剂盒说明，测定各组织样品及血清中SOD和GSH-Px(谷胱甘肽过氧化物酶)活性及MDA(丙二醛)浓度。
2.实验结果与分析
表3 各样品对衰老小鼠脑及免疫器官指数的影响
Figure RE-GSB0000184395580000181
注：与空白组相比，*p＜0.05，**p＜0.01；与衰老组相比，(p＜0.05，((p＜0.01；与维生素E组相比，△p＜0.05，△△p＜0.01
由表3可知，衰老模型组小鼠的脑、脾脏、胸腺指数均极显著低于空白组(p＜0.01)，说明D-半乳糖亚急性衰老模型造模成功；与衰老模型组相比，维生素E组、颜如玉小分子肽抗糖饮口服液组、及实施例1组小鼠脑指数，脾脏指数及胸腺指数均极显著升高(p＜0.05)，说明维生素E，颜如玉小分子肽抗糖饮口服液及实施例1都具有延缓衰老的功能；与维生素E 组相比，颜如玉小分子肽抗糖饮口服液组小鼠的脑、脾脏、胸腺指数差异不显著(p＞0.05)；实施例1组脑、脾脏、胸腺指数均显著升高(p＜0.01)说明实施例1组抗衰效果强于维生素 E，颜如玉小分子肽抗糖饮口服液。
表4 各样品对对衰老小鼠血清中抗氧化指标的影响
Figure RE-GSB0000184395580000182
Figure RE-GSB0000184395580000191
注：与空白组相比，*p＜0.05，**p＜0.01；与衰老组相比，(p＜0.05，((p＜0.01；与维生素E组相比，△p＜0.05，△△p＜0.01
由表4可知，与空白组相比，衰老模型组小鼠血清的SOD和GSH-Px活性均显著降低(p＜0.05)，MDA浓度则显著升高(p＜0.05)。与衰老模型组相比，维生素E组，颜如玉小分子肽抗糖饮口服液及实施例1小鼠血清的SOD，GSH-Px活性显著升高(p＜0.05)，MDA浓度显著降低(p＜0.01)；与维生素E组相比，实施例1组小鼠血清的SOD，GSH-Px活性极显著升高(p＜0.01)，MDA浓度极显著降低(p＜0.01)，但颜如玉小分子肽抗糖饮口服液组差异不著(p＞0.05)，说明实施例1能提高血清中超氧化物歧化酶，谷胱甘肽过氧化物酶等酶的浓度，降低丙二醛的浓度，且效果优于维生素E和颜如玉小分子肽抗糖饮口服液。
3.结论
综上所述，本发明具有抗衰老功效。
实施例11 美白实验
1.1 主要试剂与仪器
熊果昔，Sigma公司；小鼠黑色素瘤细胞(B16)，中国科学院上海细胞库。RPMI-1640培养基、胎牛血清(FBS)、100x青霉素-链霉素溶液、质量分数0.25％胰蛋自酶-EDTA溶液，美国Thermo公司。CO2培养箱，德国Memmert公司；酶标仪，BioTek公司；细胞计数仪，Biorad 公司；超纯水机，美国Thermo公司；BSA224S型电子天平，德国赛多利斯科学仪器有限公司；BPC-150E生化培养箱、电热恒温水浴锅，上海一恒科学仪器有限公司；UV-1750型紫外- 可见分光光度计，日本岛津公司；台式离心机，上海安亭仪器公司；高压蒸汽灭菌锅，上海博迅实业有限公司医疗设备厂。
1.2 受试品
对照组以熊果苷为受试品，试验组以实施例1为受试品，分别配制浓度为25，50，80， 100，150mg/L。
1.3 B16细胞培养和样品配制
用含体积分数10％胎牛血清、100U/mL青霉素和100U/mL链霉素的RPMI-1640培养基在 37℃、体积分数为5％的CO2条件下培养B16细胞，每2-3d传代一次。
1.4 B16细胞黑色素生成抑制率的测定
取对数生长期的B16细胞，以1x105个/mL的细胞浓度接种于6孔培养板，每孔2mL，置于37℃、5％CO2培养箱内培养，镜下观察细胞贴壁后，换液，分别加人含不同浓度样品的培养液，对照组以RPMI-1640培养基代替样品溶液，每孔2mL。每一个样品浓度设三个平行。37℃、5％CO2培养48h后，弃去上清液。每孔加人质量分数0.25％胰蛋自酶-EDTA溶液于室温下消化，加入2mL培养基终止消化，并吹打成单细胞悬液。取20μL作细胞计数，其余细胞悬液于1 000r/min离心5min，弃上清液，加入1mL 1mol/L的NaOH溶液(含质量分数10％DMSO)，并置于80℃水浴40min后，在酶标仪490nm处测其吸光值。按公式计算样品对黑色素生成的抑制率。
Figure RE-GSB0000184395580000201
其中，AS为样品组吸光度，AC为对照组吸光值，Ds为样品组细胞浓度，DC为对照组细胞浓度。
2.实验结果与分析
表6 实施例1对B16细胞黑色素生成的影响
Figure RE-GSB0000184395580000202
从表4可以看出，实施例1能显著抑制细胞内黑色素的合成，且随着其浓度的升高，黑色素合成抑制率显著上升，呈浓度依赖性。当用150mg/L的熊果昔处理细胞时，细胞内黑色素合成抑制率达到30.15％，而实施例1在质量浓度100mg/L时，细胞内黑色素合成抑制率已大于29.25％，且在质量浓度150mg/L时抑制率超过50％。可见，实施例1具有较强的黑色素合成抑制能力。
3.结论
综上所述，本发明具有美白功效。
实施例12 添加功能性食品，功能化合物，中药对抑制非酶糖基化反应的影响
本发明在苹果粉、红石榴粉、鲣鱼低聚肽粉、葡萄粉、黑加仑粉、桑葚粉、黑生姜提取物基础上，添加功能化合物表没食子儿茶素没食子酸酯以及中药淡竹叶提取物、葛根提取物、沙棘提取物。将功能性食品，功能性化合物及中药相结合，与功能食品制备的产品进行比较，对照组为苹果粉、红石榴粉、鲣鱼低聚肽粉、葡萄粉、黑加仑粉、桑葚粉、黑生姜提取物制成组合物，制备剂型为片剂，制备组方如表1。对照组和给药组以相同剂量给，空白组以同体积的生理盐水代替，功效验证方法按照实施例8，试验结果如下：
表7 制备组方明细
Figure RE-GSB0000184395580000211
表8 添加功能化合物，中药对抑制非酶糖基化反应的影响
Figure RE-GSB0000184395580000212
注：与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01
由表2可知，与对照组相比，组方1对抑制非酶糖基化反应具有差异性(p＜0.05)；与对照组相比，组方2对抑制非酶糖基化反应具有显著差异(p＜0.01)。说明组方中添加表没食子儿茶素没食子酸、淡竹叶提取物、葛根提取物、沙棘提取物等都可以抑制非酶糖基化反应，还能增强功效。组方中同时加入功能性化合物表没食子儿茶素没食子酸和中药淡竹叶，葛根，沙棘等，能明显提高功效作用。
实施例13 添加功能性食品，功能化合物，中药对抑制非酶糖基化反应的影响
本发明在苹果、红石榴、鲣鱼低聚肽、葡萄、黑生姜、表没食子儿茶素没食子酸酯基础上，添加中药淡竹叶提取物。将功能性食品，功能性化合物及中药相结合，与功能食品制备的产品进行比较，对照组为苹果粉、红石榴粉、鲣鱼低聚肽粉、葡萄粉、黑生姜粉、表没食子儿茶素没食子酸酯制成组合物，制备剂型为片剂，制备组方如表3。对照组和给药组以相同剂量给，空白组以同体积的生理盐水代替，功效验证方法按照实施例8，试验结果如下：
表9 制备组方明细
Figure RE-GSB0000184395580000213
Figure RE-GSB0000184395580000221
表10 添加功能化合物，中药对抑制非酶糖基化反应的影响
Figure RE-GSB0000184395580000222
注：与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01
由表4可知，与对照组相比，组方1对抑制非酶糖基化反应具有差异性(p＜0.05)；与对照组相比，组方2对抑制非酶糖基化反应具有显著差异(p＜0.01)。说明组方中添加淡竹叶提取物可以抑制非酶糖基化反应，还能增强功效。组方中同时加入表没食子儿茶素没食子酸和淡竹叶提取物，能明显提高功效作用。

Claims (14)

1.一种抗糖化组合物，其特征在于，所述抗糖化组合物由如下重量百分比的原料制备而成：
苹果15％，红石榴10％，淡竹叶5％，鲣鱼低聚肽3％，葡萄3％，黑加仑3％，桑葚3％，葛根2％，沙棘2％，黑生姜1％，表没食子儿茶素没食子酸酯0.3％，辅料余量。
2.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中苹果为苹果粉，苹果提取物或苹果浓缩汁。
3.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中红石榴为红石榴粉，红石榴提取物或红石榴浓缩汁。
4.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中竹叶为竹叶粉，或淡竹叶提取物。
5.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中鲣鱼低聚肽中肌肽含量为5％～30％。
6.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中葡萄为葡萄粉，葡萄提取物或葡萄浓缩汁。
7.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中黑加仑为黑加仑粉，黑加仑提取物或黑加仑浓缩汁。
8.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中桑葚为桑葚粉，桑葚提取物或桑葚浓缩汁。
9.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中葛根为葛根粉或葛根提取物。
10.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中沙棘为沙棘粉，沙棘提取物或沙棘浓缩汁。
11.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中黑生姜为黑生姜粉，黑生姜提取物或黑生姜浓缩汁。
12.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物中辅料为乳糖，微晶纤维素，麦芽糊精，硬脂酸镁，二氧化硅，二氧化钛，蜂蜡，纯化水，三氯蔗糖，果粉香精，甘油，聚维酮K30，明胶中的一种或多种。
13.根据权利要求1所述的一种抗糖化组合物，其特征在于，所述组合物的剂型为片剂，颗粒剂，胶囊，软胶囊，粉剂或口服液中一种或多种。
14.根据权利要求1-13任一项所述的一种抗糖化组合物的制备方法，其特征在于，所述组合物口服液的制备工艺如下：
1)苹果浓缩汁制备：(a)原料拣选、清洗：将未成熟的青果、霉烂果和病虫果剔除，好果清洗后备用；(b)前处理：在常温下把经过清洗分捡过的苹果输送至涡轮式冷提取设备料斗中进行削皮、去籽；(c)热烫：将苹果原料投入沸水中，使用不锈钢夹层锅加热，热烫3～5min，然后捞出；(d)打浆、破碎：热烫后的苹果原料用打浆机迅速打浆破碎，期间控制浆温在50℃～70℃，使果浆中的色素和溶质能充分溶出，果浆通过筛网流到下方的大型容器内，打浆时加入80～90℃热水，便于压榨和提取汁液；(e)酶解：在40～50℃，pH值为4～7，纤维素酶用量为浆液质量0.5％～1％，酶解果浆时间为10～18h；(f)榨汁：将上述浆料输入螺旋压榨机中进行压榨，取其汁液；(g)过滤：通过筛滤分离较大颗粒的悬浮固形物，把榨出的果汁静置沉淀，取上层果汁用回转振动筛筛分，过滤网采用80～120目；(h)均质和脱气：采用高压均质机和真空脱气机进行均质和脱气；(i)灭菌：采用高温瞬时灭菌，灭菌温度为110～130℃，灭菌时间为5～10s，加热灭菌后，迅速冷却；(j)浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.5Mpa～0.8Mpa进行浓缩，浓度控制30％～50％停止浓缩，用泵打入中间储罐备用；
2)红石榴浓缩汁制备：(a)原料选择：选无病虫害，无霉变，无腐烂的新鲜红石榴，以保证果汁的质量；(b)清洗：将石榴用清水浸泡后用喷淋或流动水洗，洗除表皮的灰尘、杂质、微生物和部分农药残留物；(c)剥皮取籽：用刀具将石榴皮划破，用手剥果去皮，去白色隔膜，取出籽粒；(d)清洗：用纯化水流动冲洗石榴籽，除去剥皮时残留下来的石榴表皮和碎隔膜等杂质，洗去附在籽粒上的微生物，洗完后沥干；(e)护色：将石榴籽浸泡在柠檬酸中3～4h以上，以防石榴在打浆后果汁变色；(f)打浆：洗净的籽粒送入打浆机，打浆过程中严格控制打浆工作条件，使果核与果肉既能充分分离又不导致果核破裂，引起石榴汁的变色变味；(g)过滤：用板框压滤机过滤除去打浆时残留在果汁中的果渣；(h)均质：将石榴汁以150～200kgf/cm2的压力通过高压均质机，使其中的果肉在强烈的剪力和气蚀力的作用下破碎，均匀的分散在液汁中而达到稳定；(i)灭菌：采用高温瞬时灭菌，灭菌温度为110～130℃，灭菌时间为5～10s，加热杀菌后，迅速冷却；(j)浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.5Mpa～0.8Mpa进行浓缩，浓度控制30％～50％停止浓缩，用泵打入中间储罐备用；
3)葡萄浓缩汁制备：(a)原料选择：选择无病虫害，无霉变，无腐烂的新鲜葡萄，以保证果汁的质量；(b)清洗、去梗：将葡萄在水中浸泡10～15min，再于0.03～0.05％高锰酸钾溶液中浸泡消毒2～3min，取出后用清水漂洗干净；(c)脱粒与除梗：防止压榨时果梗混入果浆，在加热时溶出大量单宁等物质，使果汁颜色发黑，风味变差；(d)破碎：用破碎机将葡萄进行适当的破碎，提高榨汁率；(e)榨汁与过滤：用内气囊袋式榨汁机，避免葡萄籽粒破碎，榨出的葡萄原汁用300～500目的网筛过滤，以除去果皮、籽粒及果肉等块状物；(f)离心：粗滤后的葡萄汁含细碎的果皮、果肉及油脂等物质，3000～5000r/min离心15～30min，经离心后比重小的油脂浮在表面，较沉的果皮、果肉等则沉在底部，取中间的纯液即为葡萄原果汁；(g)均质：将葡萄汁以150～200kgf/cm2的压力通过高压均质机，使其中的果肉在强烈的剪力和气蚀力的作用下破碎，均匀的分散在液汁中而达到稳定；(h)灭菌：采用高温瞬时灭菌，灭菌温度为110～130℃，灭菌时间为5～10s，加热灭菌后，迅速冷却；(i)浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.5Mpa～0.8Mpa进行浓缩，浓度控制30％～50％停止浓缩，用泵打入中间储罐备用；
4)沙棘浓缩汁制备：(a)原料选择：选无病虫害，无霉变，无腐烂的新鲜沙棘果，以保证果汁的质量；(b)清洗：将沙棘用清水浸泡后用喷淋或流动水洗，洗除表皮的灰尘、杂质、微生物；(c)打浆：洗净的沙棘果送入打浆机，打浆过程中严格控制打浆工作条件，使果核与果肉既能充分分离又不导致果核破裂，引起沙棘汁的变色变味；(d)过滤：用板框压滤机过滤除去打浆时残留在果汁中的果渣；(h)均质：将沙棘汁以150～200kgf/cm2的压力通过高压均质机，使其中的果肉在强烈的剪力和气蚀力的作用下破碎，均匀的分散在液汁中而达到稳定；(i)灭菌：采用高温瞬时灭菌，杀菌温度为110～130℃，时间为5～10s，加热杀菌后，迅速冷却；(j)浓缩：浓缩设备采用离心薄膜蒸发器，真空度要求0.5Mpa～0.8Mpa进行浓缩，浓度控制30％～50％停止浓缩，用泵打入中间储罐备用；
5)葛根提取物制备：(a)除杂：将晒干的葛根块进行挑拣，筛除杂质；(b)粉碎：用粉碎机对葛根块进行粉碎，目数控制在40目～80目之间；(c)提取：称取一定量葛根粉，以水作为溶剂，按照料液比1∶6～1∶12，提取时间为1.5～3h，提取次数2～4次，合并滤液；(b)浓缩：葛根提取液在真空度为0.6～0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.1～1.5g/cm3时，即得浓缩液；(c)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～180℃，出口温度70℃～90℃，干燥后粉碎成80～100目细粉，水分控制在5％以下，葛根素含量为10％～30％；
6)淡竹叶提取物制备：(a)清洗：淡竹叶洗净后在50～60℃烘箱内干燥2～3h；(b)粉碎：取出后用粉碎机粉碎成40～80目的细粉备用；(c)提取：称取一定量淡竹叶，以水作为溶剂，按照料液比1∶6～1∶12，提取时间为1.5～3h，提取次数2～4次，合并滤液；(d)浓缩：淡竹叶提取液在真空度为0.6～0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.1～1.5g/cm3时，即得浓缩液；(e)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～180℃，出口温度70℃～90℃，干燥后碎成80～100目细粉，水分控制在5％以下，竹叶黄酮含量为24％～40％；
7)黑加仑提取物制备：(a)粉碎：以黑加仑新鲜成熟果实为原料，用破碎机将黑加仑进行适当的破碎；(b)提取：称取一定量粉碎的黑加仑，以水作为溶剂，按照料液比1∶8～1∶12，提取时间为1.5～3h，提取次数2～4次，合并滤液；(c)浓缩：黑加仑提取液在真空度为0.6～0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.1～1.5g/cm3时，即得浓缩液；(d)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～180℃，出口温度70℃～90℃，干燥后碎成80～100目细粉，水分控制在5％以下，黑加仑黄酮含量为10％～40％；
8)桑葚提取物制备：(a)粉碎：以桑葚新鲜成熟果实为原料，用破碎机将桑葚进行适当的破碎；(b)醇提：称取一定量的桑葚，用50～70％浓度的乙醇作为提取溶剂，按照料液比1∶8～1∶12，提取时间为1.5～3h，提取次数2～4次，合并滤液；(c)浓缩：桑葚提取液在真空度为0.6～0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.1～1.5g/cm3时，即得浓缩液；(d)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～180℃，出口温度70℃～90℃，干燥后碎成80～100目细粉，水分控制在5％以下，桑葚花青素含量为5％～10％；
9)黑生姜提取物制备：(a)粉碎：以黑生姜晒干用破碎机进行粉碎，目数控制在40～80目；(b)提取：称取一定量黑生姜粉，以10％～30％乙醇溶液作为溶剂，料液比按1∶8～1∶12，提取时间为1.5～3h，提取次数2～4次，合并滤液；(c)浓缩：黑生姜提取液在真空度为0.6～0.8Mpa下浓缩至相对密度为1.1～1.5g/cm3时，即得浓缩液；(d)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～180℃，出风温度70℃～90℃，干燥后碎成80～100目细粉，水分控制在5％以下，黑生姜黄酮含量为10％～30％；
10)鲣鱼低聚肽粉制备：(a)前处理：将鲣鱼去皮去骨取鱼肉，用4℃的冷水清洗所得鱼肉，沥干水分，得到预处理的鱼肉；(b)匀浆：将上述预处理的鱼肉搅碎，得到鱼肉糜，按质量体积比1∶5(g/mL)向所得鱼肉糜中加入水，混匀，得到匀浆液；(c)酶解：采用复合水解酶进行酶解，复合水解酶为酸性蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶＝1∶2∶1～1∶2∶4，添加量为鱼肉质量的0.5‰～1.0‰，酶解温度控制在45℃～60℃，酶解时间在1h～4h，溶液pH值控制在4.0～7.0；(d)灭酶：酶解后，将酶解罐的温度升高到70℃～90℃，维持30min～60min；(e)脱色脱臭：在上述酶解液中加入滤液质量5％～10％的活性碳粉，混匀后置于75～90℃条件下脱色；(f)分离精制：将灭酶后的料液从酶解罐中放出，经过板框过滤器进行一次过滤，再经过膜过滤进行二次过滤，通过纳滤膜除盐，得到精制鲣鱼水解液；(g)浓缩：鲣鱼水解液通过负压浓缩器，控制真空度在0.5Mpa～1.0Mpa，当质量浓度在30％～60％，停止浓缩，将鲣鱼低聚肽浓缩液用泵输送到中间储罐备用；(h)喷雾干燥：采用离心喷雾干燥塔进行喷雾干燥，进风温度150℃～180℃，出口温度70℃～90℃，干燥后碎成80～100目细粉；
11)表没食子儿茶素没食子酸酯制备：(a)粗提物处理：绿茶粉碎，装入提取罐，按照固液比1∶8装入去离子水，温度50～80℃，搅拌转速55～80r/min，0.1～0.5Mpa真空提取20～30min；(b)过滤：将上述提取液冷却至40℃，采用孔径为0.5μm的无机陶瓷膜0.2～0.35Mpa过滤，得到滤液和滤渣；(c)浓缩：取上述滤液，导入真空浓缩机，40～50℃，0.1～0.5Mpa下真空浓缩60～90min，得浓缩提取液；(d)层析分离：采用大孔吸附树脂对浓缩提取液进行儿茶素富集，上样流速为2～4BV/h，再依次使用10％、25％、40％、95％乙醇以2～4BV/h的流速洗脱5～8个柱体积，根据薄层色谱跟踪检测结果，收集儿茶素混合物；(e)浓缩：采用真空浓缩机，浓缩温度55～80℃，真空度为0.1～0.5Mpa，浓缩时间为60～90min，再采用真空冻干机进行冷冻干燥，水分含量控制在5％以下，即得高纯度EGCG冻干粉；
12)稀释浓缩果汁：分别称取配方量苹果浓缩汁、红石榴浓缩汁、沙棘浓缩汁和葡萄浓缩汁，投入装有纯净水的配料罐中，进行搅拌溶解，搅拌速率为10r/min～30r/min，搅拌时间为15～30min，配制浓缩果汁溶液浓度为30％～50％；
13)过滤：浓缩果汁溶液用泵引入滤袋过滤器进行过滤，滤袋孔径在300～600目；
14)溶解：称取配方量黑加仑提取物、桑葚提取物、葛根提取物、淡竹叶提取物、黑生姜提取物、鲣鱼低聚肽粉、表没食子儿茶素没食子酸酯，投入果汁混合液中，余量用水补足，进行搅拌，搅拌速率为10r/min～30r/min，搅拌时间为15～30min；
15)过滤：混合液用泵引入滤袋过滤器进行过滤，滤袋孔径在300～600目；
16)高温瞬时灭菌：采用高温瞬时灭菌方式，灭菌温度控制在110～130℃条件下对混合液进行灭菌，时间为2～8s；
17)冷却：灭菌后的混合液冷却至30℃以下后进行无菌灌装，即得成品。
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