KR20230172664A - 백수오 추출물을 이용한 여성 갱년기 증상 예방 또는 완화를 위한 조성물 - Google Patents

백수오 추출물을 이용한 여성 갱년기 증상 예방 또는 완화를 위한 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 백수오 추출물을 이용한 여성 갱년기 증상 예방 또는 완화를 위한 조성물에 관한 것으로,
이의 구성은 석류열매 추출물과 백수오 추출물을 1:1∼1:500의 중량비로 혼합하고;
상기 각 추출물은 물, 주정, 탄소수, 에틸아세테이트, 헥산, 디클로로메탄, 아세폰, 클로로포름, 메틸렌 클로라이드 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매로 추출하고;
상기 각 추출물은 홍삼 추출물, 감초 추출물, 대두 추출물, 감마리놀렌산, 비타민A, 비타민B6, 비타민C, 비타민D3, 및 비타민E 로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 추가로 포함한다.

Description

백수오 추출물을 이용한 여성 갱년기 증상 예방 또는 완화를 위한 조성물{Composition for preventing or alleviating female menopausal symptoms using baeksuo extract}
본 발명은 석류 추출물과 백수오 추출물의 병용투여의 상승작용을 이용하여 체내 에스트로겐 감소로 유발되는 여성 갱년기 증상을 예방 또는 개선하기 위한 식품용 조성물에 관한 것이다.
여성의 폐경 이전에 생리가 불규칙해지는 시기부터 폐경에 이를 때까지의 시기를 폐경 이행기, 즉 여성이 가임기에서 폐경기로 이행되는 시기를 포괄적으로 갱년기라고 한다. 우리나라 여성들은 초경 연령이 낮아지는 경향에도 불구하고 폐경 연령은 평균 51∼55세인 것으로 조사되었다. 우리나라 국민 중 여성이 차지하는 비율 및 중년기 여성의 비율이 증가하는 추세이며, 나아가 현재 중년 여성들의 경제활동 참가와 기여의 비중도 크기 때문에, 모든 중년기 여성이 겪는 다양한 폐경기 증상을 완화하여 정신과 신체의 건강 뿐 아니라 삶의 질을 제고하기 위한 방안의 모색이 매우 중요한 실정이다.
여성이 폐경을 전후로 큰 내분비적 혼란과 관련 증상을 겪는 이유는 여성 호르몬의 주요 공급원인 난포의 수가 태어날 때부터 결정되어 있고, 이후 생리로 소실되는 난포를 보충해 줄 새로운 난포가 생성되지 않기 때문이다. 약 40년의 가임기 동안 약 480여개의 난자가 성숙되어 배출되고, 나머지는 퇴화하여 사라지게 되므로, 폐경 이후의 여성은 심각한 여성호르몬 결핍 상태에 놓이게 된다. 대표적인 여성호르몬인 에스트로겐은 주로 난소의 여포와 황체에서 분비되고, 여성 생식기와 유방의 발달과 같은 성징 발현, 자궁내막 조절을 통한 생리 주기 조절에 중요한 역할을 한다. 갱년기에 경험하는 가장 초기 증상이며 가장 흔한 증상인 안면홍조는 혈관 운동 조절 이상으로 생기며, 목과 가슴 등에 갑자기 화끈거림과 피부 열감이 나타나는 것이다. 더불어 혈관계 이상으로 빈맥과 발한 증상이 나타날 수도 있다. 또한 질과 요도의 상피세포 두께가 감소하고 점막이 위축되며 탄력성을 잃는 질 건조증, 질 위축증, 요실금, 요로 감염, 요급박증과 빈뇨 등의 비뇨생식기계 이상이 나타난다. 또한 에스트로겐의 결핍은 중추신경계에도 영향을 미쳐 인지기능에 장애가 생길 수 있으며, 불면증, 불안감, 초조, 근심, 우울, 기억력 감퇴, 성욕 감퇴, 무기력증 등의 비뇨생식계 이상도 동반될 수 있다.
이러한 폐경기 증상을 치료 또는 완화하기 위하여 대표적으로 호르몬 대체 요법이 이용된다. 폐경으로 인해 체내 생성이 충분히 이루어지지 않는 여성 호르몬을 보충시켜주는 방법이다. 호르몬 요법은 감소된 에스트로겐 수치를 정상으로 회복시킴으로써 특히 골다공증과 심장질환 등 호르몬 결핍으로 유발되는 다양한 증상을 호전시킨다.
그러나, 호르몬 대체 요법을 장기간 받게 되면, 유방암이나 자궁내막암 등 여성암의 발병할 위험이 높아지고, 모든 폐경기 여성이나 모든 폐경 증상을 완화시킬 수 없다는 단점이 있다. 특히 질출혈, 오심, 구토, 유방 통증, 복부 팽만감 등의 부작용이 드물지 않게 동반된다. 이에 따라 독성과 부작용은 적으면서, 폐경기 여성에서 결핍된 에스트로겐의 기능을 회복시켜 줄 수 있는 대체 요법과 에스트로겐 유사 활성을 갖는 물질의 발굴이 필요하다.
대한민국 공개특허 10-2017-0006865호
이에, 본 발명의 해결하고자 하는 과제는 에스트로겐 유사 활성의 상승 작용을 일으켜 여성 갱년기 증상 예방 또는 완화를 기대할 수 있는 백수오 추출물을 이용한 여성 갱년기 증상 예방 또는 완화를 위한 조성물을 제공함에 있다.
상기 해결하고자 하는 과제를 달성하기 위한 본 발명은 석류열매 추출물과 백수오 추출물을 1:1∼1:500의 중량비로 혼합하고;
상기 각 추출물은 물, 주정, 탄소수, 에틸아세테이트, 헥산, 디클로로메탄, 아세폰, 클로로포름, 메틸렌 클로라이드 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매로 추출한다.
또한, 본 발명을 구성하는 각 추출물은 홍삼 추출물, 감초 추출물, 대두 추출물, 감마리놀렌산, 비타민A, 비타민B6, 비타민C, 비타민D3, 및 비타민E 로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.
상기와 같이 구성된 본 발명은 석류열매와 백수오 추출물의 에스트로겐 유사 활성의 상승 작용으로 인해 단독 추출물보다 적은 양으로 유사한 효과를 낼 수 있고, 단독 추출물을 과량 복용하는 것에서 나타날 수 있는 부작용을 피할 수 있어 경제적이고 안전하게 여성 갱년기 또는 폐경기 증상을 개선할 수 있는 효과가 있다.
도 1은 다양한 농도에서의 천연물 추출물의 MCF-7 세포주 증식 촉진 효과를 나타낸다. 도 1의 A는 석류열매 추출물, B는 백수오 추출물, C는 인진쑥 추출물, D는 백복령 추출물이다. 세로축은 세포생존율(cell viability,%), 가로축은 각 추출물의 농도(ug/ml)을 나타낸 것이다.
본 발명은 실험을 통해 확인한 바에 따르면, 석류열매 추출물과 백수오 추출물은 각각 에스트로겐 의존성 세포주인 MCF-7 세포에서 세포 증식을 촉진하고 에스트로겐 유사 활성을 보인다. 나아가 석류열매 추출물과 백수오 추출물을 함께 병용투여하면, 각각의 추출물을 단독으로 처리할 때보다 에스트로겐 유사 활성이 더욱 향상되어 나타난다.
따라서, 석류열매 추출물과 백수오 추출물을 두 가지 유효성분으로 포함하는 복합 추출물은 에스트로겐 감소로 유발되는 여성 갱년기 증상을 개선하는데 효과적으로 이용될 수 있음을 알 수 있다.
석류열매(Sophorae fructus)는 콩과에 속하는 회화나무(Sophora japonica L.)의 열매로, 콩꼬투리 모양의 씨방에 1~6개의 흑갈색이나 검은색의 씨앗이 들어있다. 항염, 지혈 등의 효과가 있어서, 민간 또는 한방에서 잘 익은 열매를 수확하여 건조한 것을 그대로 또는 불에 볶아 약으로 쓰며, 괴실(槐實), 괴자(槐子), 괴두(槐豆) 등으로도 불린다. 맛은 약간 쓰고 콩비린 맛이 난다. 성질이 차갑고 열기를 식히는 작용이 있어서, 소화기관이 약하거나 맥이 약한 사람은 과량 복용해서는 안 되고, 일부 사람에게 알레르기를 유발할 수 있어 주의해야 한다.
백수오(Cynanchum wilfordii)는 박주가리과의 백미꽃속의 덩굴성 여러해살이풀이다. 큰조롱 또는 은조롱이라고도 한다. 한방에서 백수오의 뿌리를 약재로 사용해왔으며, 자양강장, 보혈 등의 작용을 하는 것으로 알려져 있다. 쓰고 달고 떪은 맛이 난다. 본 발명에서의 백수오 추출물은 백수오의 뿌리 추출물을 의미한다.
본 발명에 따른 조성물은 석류열매의 추출물과 백수오의 추출물을 유효성분을 포함하는 것을 특징으로 하며, 바람직하게는 석류열매 추출물과 백수오 추출물을 1:1∼1:500의 중량비로 혼함한다. 배합비가 1:1 미만이면 석류열매 추출물과 백수오 추출물의 에스트로겐 활성의 병용 효과가 나타나지 않을 수 있고, 1:500 이상이면 효과에 비하여 경제성이 떨어질 수 있다.
상기 각 추출물은 물, 주정, 탄소수, 에틸아세테이트, 헥산, 디클로로메탄, 아세폰, 클로로포름, 메틸렌 클로라이드 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매로 추출한다. 바람직하게는 주정을 이용하여 추출할 수 있다.
본 발명의 각 추출물은 공지된 천연물 추출법에 의해 추출될 수 있으며, 예를 들어 용매 추출법으로 추출할 수 있다. 석류열매 또는 백수오로부터 물, 에탄올, 주정, 메탄올, 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol)과 같은 탄소수 1 내지 6개의 알코올, 아세톤, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, 헥산, 시클로헥산, 석유에테르(petroleum ether), 디에틸에테르, 벤젠과 같은 유기 용매 중에서 선택된 어느 하나 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 추출할 수 있다.
본 발명의 각 추출물은 용매 추출법에 의하여 추출된 추출물을 그대로 사용할 수 있으며, 또는 불순물을 제거하고 활성성분의 농도를 높이기 위해 공지의 방법으로 분리, 분획, 정제, 또는 여과할 수 있다. 분획을 위한 용매로는 물, 에탄올, 주정 및 메탄올과 같은 탄소수, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, 디클로로메탄, 클로로포름, n-헥산 (n-Hexane), 디에틸에테르, 아세톤, 벤젠과 같은 유기용매 중에서 선택된 어느 하나 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다. 분획물은 그대로 사용되거나 재분획할 수 있다. 최종 추출물은 공비 농축, 감압 농축 등 공지된 방법으로 농축할 수 있으며, 동결 건조, 분무 건조 등의 방법에 의하여 용매를 제거하고 고형화하여 분말 형태로 제조할 수 있다.
본 실시예에서는 석류열매를 60% 주정을 이용하여 추출하고 여과 및 농축한 후 분무건조기로 건조 및 분말화하였다. 다른 천연물 추출물도 유사하게 열수추출 또는 주정추출 방법으로 추출물을 제조하고 분무 또는 동결건조하여 분말화하였다.
또한 본 발명에 따른 조성물은 여성 갱년기에 도움이 되는 것으로 알려진 홍삼 추출물, 감초 추출물, 대두 추출
물, 감마리놀렌산, 비타민A, 비타민B6, 비타민C, 비타민D3, 및 비타민E 로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및 식품첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형들은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다.
예컨대, 건강식품으로는 본 발명의 식품용 조성물 자체를 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한 본 발명의 식품용 조성물은 체지방 감소, 콜레스테롤 개선, 혈압강하 등 여성 갱년기 또는 폐경기 증상의 개선 효과가 있다고 알려진 공지의 물질 또는 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.
또한 기능성 식품으로는 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예를 들어, 과일 통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예를 들어, 햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류(예를 들어, 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예를 들어, 버터, 치즈 등), 식용식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예를 들어, 된장, 간장, 소스 등) 등에 본 발명의 식품용 조성물을 첨가하여 제조할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물의 바람직한 함유량으로는 최종적으로 제조된 식품 총 중량 중 0.01 내지 50중량% 이다. 본 발명의 식품용 조성물을 식품첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다.
또한, 본 발명의 식품 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100mL당 일반적으로 약 0.01~0.04g, 바람직하게는 약 0.02∼0.03g 일 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 상기 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 교미제, 착향제 등에 대한 용어 정의는 당업계에 공지된 문헌에 기재된 것으로 그 기능 등이 동일 내지 유사한 것들을 포함한다 (대한약전 해설편, 문성사, 한국약학대학협의회, 제5개정판, p33-48, 1989).
본 발명에 따른 약학적 조성물은 석류열매 추출물과 백수오 추출물의 복합 조성물을 단독으로 함유하거나 약학적으로 허용되는 담체와 함께 적합한 형태로 제형화될 수 있으며, 부형제 또는 희석제를 추가로 함유할 수 있다. 상기에서 '약학적으로 허용되는'이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증 등과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 비독성의 조성물을 말한다.
약학적으로 허용되는 담체로는 예컨대, 경구 투여용 담체 또는 비경구 투여용 담체를 추가로 포함할 수 있다. 경구 투여용 담체는 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 등을 포함할 수 있다.
아울러, 펩티드 제제에 대한 경구투여용으로 사용되는 다양한 약물전달물질을 포함할 수 있다. 또한, 비경구 투여용 담체는 물, 적합한 오일, 식염수, 수성 글루코오스 및 글리콜 등을 포함할 수 있으며, 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 항산화제가 있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸-또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현택제 등을 추가로 포함할 수 있다. 그 밖의 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 다음의 문헌에 기재되어 있는 것을 참고로 할 수 있다(Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995).
<실험 방법>
1. 추출물의 제조
석류열매는 20kg을 세척 후, 건조하여 분쇄기를 이용하여 30 mesh의 크기로 분쇄하였다. 상기 분쇄물에 60% 주정을 첨가하여 주정 추출 후 50℃로 냉각시킨 다음 100 mesh의 여과포를 사용하여 여과한 후 다시 200 mesh 여과포로 여과하여 침전물을 제거하고 여과액을 수득하였다. 상기 상등액을 농축기를 이용하여 1/5의 부피가 되도록 농축한 다음, 상기 농축액을 분무건조기를 이용하여 건조 및 분말화하였다.
백수오 추출물은 건조 백수오를 시료양 중량 대비 5∼10배에 해당하는 정제수에 넣어 70℃ 이상으로 2시간 이상 가열하여 열탕 추출한 후, 추출액을 여과포로 여과한 다음 원심분리하여 침전물을 제거하였다. 분리된 추출물은 감압농축하여 동결건조시켰다.
본 실시예에서 사용한 다른 천연물 추출물도 유사한 방법으로 열수 또는 주정추출하였다.
2. MCF-7 세포주 배양 및 시험 물질의 처리
L-glutamine(300㎎/ℓ), 25mM NaHCO3, 10% heat inactivated fetal bovine serum(FBS), insulin 등이 함유된 DMEM 배지를 이용하여 humidified CO2 incubator에서 37℃, 5% CO2 조건으로 배양하였다. 이후, 96 well plate에 5×103cells/㎖의 농도로 cell을 분주한 후 24시간 추가 배양하였다. 여기에 시험 물질을 처리하여 20시간 동안 배양하고, MTT solution을 첨가(final conc. 0.5㎎/㎖)하여 4시간을 더 배양한 후, 배지를 제거하고 DMSO를 이용하여 cell을 lysis시켜 microplate reader를 이용하여 570㎚에서 흡광도를 측정하여 세포생존률을 측정하였다.
3. 에스트로겐 유사 활성 측정(E-스크린)
24 well plate에 2×104 cells/㎖의 농도로 cell을 분주한 후 24시간 배양하였다. 17β-estradiol(E2, 10-13∼10-8M)을 양성대조군으로 하고, 시험물질을 단독 또는 병용으로 처리하여 3일간 더욱 배양하였다. MTT solution을 첨가(final conc. 0.5㎎/㎖)한 후 4시간을 더 배양하였다. 배지를 제거하고 DMSO를 이용하여 cell을 lysis시킨 후 microplate reader를 이용하여 570㎚에서 흡광도를 측정하여 E2와 비교해 estrogenic activity를 산출하였다.
E-스크린용 배지는 일반 FBS 대신 charcoal stripped FBS를 첨가한 phenol red-free 배지로서 에스트로겐 유사 활성물질(estrogen-like substance)을 모두 배제시킨 배지이며, 에스트라디올(17β-estradiol)을 표준 대조군으로 사용하여 각 농도별(10-13∼10-8M)로 각각 처리한 후, 세포증식률이 포화상태가 되는 최소 증식농도를 산출하여 각 시험물질의 농도별 세포 증식률 결과에서 표준 대조군의 최소 증식률을 100%로 기준을 잡았을 때 증가 또는 감소함을 확인하여 에스트로겐 유사활성(estrogenic activity)을 확인하였다.
<실시예 1>
에스트로겐 유사 활성을 갖는 천연 추출물의 선별
<1-1> MCF-7 유방암 세포주 증식 촉진 효과
여성 갱년기 또는 폐경기 증상을 완화하는 효과를 최대화하고 부작용은 최소화하기 위한 병용 투여를 위한 물질의 조합을 찾기 위하여, 먼저 여성 갱년기 증상을 완화하거나, 대표적인 에스트로겐 결핍 현상인 골다공증에 효과가 있는 것으로 알려진 물질에 대하여 실제로 세포 수준에서 에스트로겐 유사 활성이 있는지 유방암 세포주증식 촉진 효과 여부를 확인하여 알아보았다.
여성 건강이나 여성 갱년기 증상 완화에 도움이 되는 것으로 알려진 후보 물질로서, 석류열매, 산수유, 은행잎, 홍삼, 당귀, 백작약, 감초, 석류, 대두, 석류, 인진쑥, 백복령, 백수오 등 천연물질을 분석 대상으로 선정하였다. 그리고 이들 후보 물질을 단독으로 MCF-7 세포주에 다양한 농도(0∼20mg/ml 범위)로 처리하고, 세포생존율을 측정하였다.
실험 결과, 일반에 공지된 바와는 달리, 모든 후보 물질이 MCF-7 세포의 증식을 촉진하지는 않았으며, 물질에 따라 차등적인 것으로 나타났다. 일부 물질은 아무 물질도 처리하지 않은 음성대조군과 비교했을 때 MCF-7의 세포 증식을 촉진하는 효과가 관찰되어 에스트로겐 유사 활성이 존재할 것으로 예상되었다. 그러나 다른 물질들은 음성대조군과 유사하거나, 인진쑥과 백복령 추출물과 같이 일정 농도에서는 별다른 효과가 없다가 농도가 높아질수록 오히려 MCF-7의 증식을 저해하는 것으로 나타난 경우도 있었다(도 1). 백수오 추출물의 경우에는 62.5m㎍/㎖에서 효과가 가장 높았다가 10mg/ml 이상에서는 효과가 감소하였다. 석류열매 추출물의 경우에는 25㎍/㎖ 근처의 좁은 농도 범위에서 현저한 효과를 보였다.
또한, 기존에 갱년기 증상 완화 효과가 있다고 기존에 알려진 것과는 달리 MCF-7 세포의 증식을 촉진하지 않는 물질의 경우에는 에스트로겐 신호전달이 아닌 다른 메커니즘을 통하여 갱년기 또는 폐경기 증상을 완화할 것으로 추정된다.
<1-2> 에스트로겐 유사 활성 확인 (E-스크린)
<실시예 1-1>에서 선별한 여성 건강이나 여성 갱년기 증상 완화에 도움이 되는 것으로 알려진 물질들에 대하여, MCF-7 세포에서 에스트로겐 유사 활성이 있는지 보다 직접적으로 확인하였다. 유방암 세포주 MCF-7을 에스트라디올(estradiol)이 없는 배지로 배양하고, 상기 후보 물질을 단독으로 MCF-7 세포주에 다양한 농도로 처리하고, 세포 생존율을 측정하여 이들 후보 물질에 알려진 것과 같은 에스트로겐 유사 활성이 존재하는지 알아보았다.
MCF-7 세포는 에스트로겐 의존성 세포이므로, 에스트로겐이 결핍된 배지 배양 조건에서는 배지에 추가하는 후보물질의 에스트로겐 유사 활성에 증식을 의존하게 된다.
실험 결과, 분석 대상인 물질들의 활성은 <실시예 1-1>에서와 유사한 경향을 나타내었다. 즉, 알려진 바와는 달리, 모든 후보 물질이 MCF-7 세포주에서 에스트로겐 유사 활성을 나타내지는 않았으며, MCF-7 세포 증식으로 나타나는 에스트로겐 유사 활성도는 후보 물질에 따라 차별적인 것으로 나타났다. 일부 물질은 양성대조군인 17β-estradiol과 유사한 정도로 MCF-7 세포의 증식을 촉진하여, 세포 수준에서 높은 에스트로겐 유사 활성을 나타내는 것으로 확인되었다. 반면, 다른 물질들은 양성대조군에 못미치는 효과가 있었으며, MCF-7 세포의 증식을 촉진 정도는 물질에 따라 매우 다양하게 나타났다.
<실시예 2>
에스트로겐 유사 활성을 보이는 천연 추출물의 병용 투여 효과
다음으로, <실시예 1>에서 에스트로겐 유사 활성이 있는 것으로 확인된 물질을 함께 처리하여 에스트로겐 유사활성의 상승 작용(synergy)을 나타낼 수 있는지 알아보았다. 상기 <실시예 1>에서 에스트로겐 유사 활성을 보인 석류열매 추출물과 다른 천연추출물 두 가지를 조합하여 함께 처리한 병용 처리의 효과를 <실시예 1-2>의 E-스크린 방법으로 확인하였다.
실험 결과, 석류열매 추출물과 다른 천연 추출물을 조합한 복합 조성물의 병용 처리 효과는 조합한 물질에 따라 모두 다르게 나타나는 것으로 관찰되었다. 특정한 조합에서는 각각의 물질을 단독으로 처리한 경우보다 높은 세포 증식 효과가 관찰되어, 에스트로겐 유사 활성의 상승 작용이 있음을 보여주었다. 그러나 다른 조합(인진쑥, 백복령, 감초 등)에서는 병용 처리의 효과가 미미하거나, 오히려 단독 물질을 처리한 경우보다 효과가 감소하는 경우도 관찰되었다(표 1)에서 ‘추출물 단독’은 석류열매 추출물과 병용처리한 천연추출물을 단독으로 처리한 것을 의미함).
석류열매 추출물과 백수오 추출물의 조합에서는 병용 처리시 각각의 추출물을 단독으로 처리하는 것보다 효과가 높은 것으로 측정되었다. 즉, 두 가지 추출물을 함께 처리하면 단독 추출물보다 에스트로겐 유사 활성을 통하여 MCF-7 세포의 증식을 촉진하는 효과가 더욱 향상된 것으로 나타났다.
석류열매 추출물 병용 효과(E-스크린 결과)
추출물 단독
(17㎍/㎖)		 석류열매 추출물 단독
(17㎍/㎖)		 병용
(추출물, 석류열매 추출물 각 8.5㎍/㎖)
백수오 병용 89.91 92.08 108.87
인진쑥 병용 74.80 89.08 81.50
감초 병용 69.80 81.80 72.29
백복령 병용 77.36 82.63 77.43
<실시예 3>
에스트로겐 유사활성 천연물질의 병용 투여를 위한 배합비 결정
석류열매 추출물과 백수오 추출물의 병용 투여의 배합비를 결정하기 위하여 1:1 내지 1:256 등 다양한 중량비로 석류열매 추출물과 백수오 추출물을 혼합하여 복합 조성물을 제조하고, <실시예 1-2>의 E-스크린 방법으로 서로 다른 배합비 간 효과를 비교하였다.
석류열매 추출물과 백수오 추출물 병용 처리의 배합비 및 실험 결과는 표 2의 기재와 같다. 석류열매 추출물과 백수오 추출물의 병용 효과는 배합비가 1:16일 때 가장 우수한 것으로 나타났다.
석류열매 추출물과 백수오 추출물 병용 처리 배합비 실험 결과
석류열매 추출물
(㎍/㎖)		 백수오 추출물
(㎍/㎖)		 배합비
(중량비)		 Estrogen Activity
(%)
8.5 8.5 1:1 108.90
17 17 1:1 101.01
34 1:2 124.40
68 1:4 134.61
272 1:16 161.39
1088 1:64 112.08
2176 1:128 84.82
4352 1:256 79.35
이상 살펴본 바와 같이, 본 발명은 석류열매 추출물과 백수오 추출물을 유효성분을 포함하는 여성 갱년기 증상의 예방 또는 개선용 식품용 및 갱년기 증상의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 조성물은 석류열매와 백수오의 에스트로겐 유사 활성의 상승 작용으로 인해 효과는 뛰어나고 부작용은 줄어든 여성 갱년기 또는 폐경기 증상을 개선할 수 있는 유익한 발명이라 하겠다.

Claims (1)

  1. 석류열매 추출물과 백수오 추출물을 1:1∼1:500의 중량비로 혼합하고;
    상기 각 추출물은 물, 주정, 탄소수, 에틸아세테이트, 헥산, 디클로로메탄, 아세폰, 클로로포름, 메틸렌 클로라이드 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매로 추출하고;
    상기 각 추출물은 홍삼 추출물, 감초 추출물, 대두 추출물, 감마리놀렌산, 비타민A, 비타민B6, 비타민C, 비타민D3, 및 비타민E 로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 추가로 포함하는 것;을 특징으로 하는 백수오 추출물을 이용한 여성 갱년기 증상 예방 또는 완화를 위한 조성물.
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