KR20230159844A

KR20230159844A - 미토콘드리아 기능을 개선시키기 위한 조성물 및 방법

Info

Publication number: KR20230159844A
Application number: KR1020237035422A
Authority: KR
Inventors: 케샤브 케이. 싱; 레오폴도 아길레라 아기레; 그레그 슈메르겔
Original assignee: 유바 바이오사이언시즈, 인크.
Priority date: 2021-03-18
Filing date: 2022-03-18
Publication date: 2023-11-22
Also published as: WO2022198066A1; CN117320691A; TW202304495A; EP4308073A1; JP2024511070A; BR112023018945A2

Abstract

미토콘드리아 기능장애를 치료하거나 예방하는 방법이 개시된다. 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법이 개시된다. 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화-연관 만성 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법이 개시된다. 에너지 수준 및/또는 활력의 감소를 개선시키거나 예방하는 방법이 개시된다. 방법은 엠블리카 추출물 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분, 또는 푸쿠스 추출물 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분, 또는 케불라 추출물 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분을 투여하는 것을 포함한다.

Description

미토콘드리아 기능을 개선시키기 위한 조성물 및 방법

본원에 개시된 측면 및 실시양태는 미토콘드리아 기능장애와 관련된 질환 및 상태의 치료 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본원에 개시된 측면 및 실시양태는 미토콘드리아 DNA 고갈과 관련된 질환 및 상태의 치료 방법에 관한 것이다.

미토콘드리아 기능장애, 예컨대 미토콘드리아 DNA (mtDNA) 고갈은 많은 질환 및 상태, 예컨대 mtDNA 고갈 증후군, 미토콘드리아 질환, 노화, 노화-연관 만성 질환 또는 상태, 감소된 에너지 수준 및 활력, 탈모 및 회색화를 포함하는 모발 노화의 특징, 피부 주름 및 노인성 흑점을 포함하는 피부 노화의 특징, 피부 질환 및 상태, 및 다른 인간 병리현상에 관여한다. 미토콘드리아 생물학 및 mtDNA 생물학 및 이러한 질환 및 상태에서의 그들의 역할에 관한 근본적인 질문은 대부분 해결되지 않은 채 남아 있다. 미토콘드리아 기능장애를 유도하고/거나 mtDNA 카피 수 및/또는 농도를 조정할 수 있는 동물 모델이 개발되었으며, 미토콘드리아 병리현상 및 질환 과정에서의 그들의 역할을 조사하기 위한 시스템을 제공한다. 미토콘드리아 기능장애, 예컨대 mtDNA 고갈과 관련된 질환 및 상태를 위한 치료 방법에 대한 필요가 있다.

요약

한 측면에 따르면, 대상체에서 미토콘드리아 기능장애를 치료하거나 예방하는 방법이 제공된다. 방법은 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법이 제공된다. 방법은 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화-연관 만성 질환 또는 상태를 치료하거나 예방하는 방법이 제공된다. 방법은 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 에너지 수준 및/또는 활력의 감소를 개선시키거나 예방하는 방법이 제공된다. 방법은 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 엠블리카 추출물은 엠블리카 오피시날리스(Emblica officinalis)로부터 유래된다.

일부 실시양태에서, 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분은 1 내지 5개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 3개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 5개의 히드록시 기로 치환된 벤젠, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 상기의 조합이다.

일부 실시양태에서, 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분은 갈산, 바닐산, 클로로겐산, 카페인산, 시링산, 쿠마르산, 퀘르세틴, 엠블리카닌 A, 엠블리카닌 B, 푸니글루코닌, 페둔쿨라긴, 푸니카폴린, 필라넴블린, 카엠프페롤, 엘라그산, 케불린산, 케불라그산, 푸니칼라긴, 상기 중 임의의 것의 대사물, 상기 중 임의의 것과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물, 또는 상기 중 임의의 것의 제약상 허용되는 형태이다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 미토콘드리아 기능장애를 치료하거나 예방하는 방법이 제공된다. 방법은 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법이 제공된다. 방법은 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화-연관 만성 질환 또는 상태를 치료하거나 예방하는 방법이 제공된다. 방법은 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 에너지 수준 및/또는 활력의 감소를 개선시키거나 예방하는 방법이 제공된다. 방법은 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 푸쿠스 추출물은 푸쿠스 베시쿨로수스(Fucus vesiculosus), 푸쿠스 세라투스(Fucus serratus), 푸쿠스, 스피랄리스(Fucus, spiralis), 또는 푸쿠스 구이리이(Fucus guiryi)로부터 유래된다.

일부 실시양태에서, 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분은 1 내지 5개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 3개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 5개의 히드록시 기로 치환된 벤젠, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 상기의 조합이다.

일부 실시양태에서, 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분은 갈산, 바닐산, 클로로겐산, 카페인산, 시링산, 쿠마르산, 퀘르세틴, 푸코이단, 푸니글루코닌, 및 페둔쿨라긴, 푸니카폴린, 필라넴블린, 카엠프페롤, 엘라그산, 케불린산, 케불라그산, 푸니칼라긴, 상기 중 임의의 것의 대사물, 상기 중 임의의 것과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물, 또는 상기 중 임의의 것의 제약상 허용되는 형태이다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 미토콘드리아 기능장애를 치료하거나 예방하는 방법이며, 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 제공된다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법이며, 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 제공된다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화-연관 만성 질환 또는 상태를 치료하거나 예방하는 방법이며, 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 제공된다.

한 측면에 따르면, 대상체에서 에너지 수준 및/또는 활력의 감소를 개선시키거나 예방하는 방법이며, 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 제공된다.

일부 실시양태에서, 케불라 추출물은 테르미닐리아 케불라(Terminilia chebula), 테르미날리아 아르보레아(Terminalia arborea), 또는 룸니체라 라세모스(Lumnitzera racemose)로부터 유래된다.

일부 실시양태에서, 케불라 추출물의 화합물 구성성분은 1 내지 5개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 3개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 5개의 히드록시 기로 치환된 벤젠, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 상기의 조합이다.

일부 실시양태에서, 케불라 추출물의 화합물 구성성분은 갈산, 바닐산, 클로로겐산, 카페인산, 시링산, 쿠마르산, 퀘르세틴, 탄닌산, 푸니글루코닌, 페둔쿨라긴, 푸니카폴린, 필라넴블린, 카엠프페롤, 엘라그산, 케불린산, 케불라그산, 푸니칼라긴, 상기 중 임의의 것의 대사물, 상기 중 임의의 것과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물, 또는 상기 중 임의의 것의 제약상 허용되는 형태이다.

일부 실시양태에서, 조성물은

엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량;

푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량; 및

케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량

중 2종 이상을 포함한다.

일부 실시양태에서, 방법은

푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 함유된 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량; 및

중 2종 이상을 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 방법은 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 제2 또는 후속 양을 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함한다.

일부 실시양태에서, 방법은 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 제2 또는 후속 양을 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함한다.

일부 실시양태에서, 방법은 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 제2 또는 후속 양을 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함한다.

일부 실시양태에서, 제2 또는 후속 양은 동일한 제제의 제2 용량으로서 투여된다.

일부 실시양태에서, 제2 또는 후속 양은 또 다른 제제에서 투여된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태로 강화된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태로 강화된다.

일부 실시양태에서, 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것은 정제된, 예를 들어, 적어도 80% 정제된, 적어도 85% 정제된, 적어도 90% 정제된, 적어도 95% 정제된, 적어도 98% 정제된, 적어도 99% 정제된, 적어도 99.9% 정제된, 적어도 99.99% 정제된, 또는 적어도 99.999% 정제된 것이다.

일부 실시양태에서, 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것은 정제된, 예를 들어, 적어도 80% 정제된, 적어도 85% 정제된, 적어도 90% 정제된, 적어도 95% 정제된, 적어도 98% 정제된, 적어도 99% 정제된, 적어도 99.9% 정제된, 적어도 99.99% 정제된, 또는 적어도 99.999% 정제된 것이다.

일부 실시양태에서, 유효량은 치료 유효량이다.

일부 실시양태에서, 치료 또는 예방은 미토콘드리아 생물발생을 유도하는 것 및/또는 미토콘드리아 기능을 개선시키는 것을 수반한다.

일부 실시양태에서, 유효량 또는 치료 유효량은 미토콘드리아 생물발생을 유도하는데 충분하다.

일부 실시양태에서, 투여는 PGC-1a, TFAM, NRF-1, 및 COX II로부터 선택되는 적어도 1종의 단백질의 발현을 증가시킨다.

일부 실시양태에서, 조성물은 국부적으로 투여된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 비경구로, 예를 들어, 정맥내로, 복강내로, 또는 근육내로 투여된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 장관내로 투여된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 국부 용액, 오일, 크림, 에멀젼, 또는 겔로서 제제화된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 샴푸, 컨디셔너, 스프레이, 크림, 겔, 밤, 바디 워시, 비누, 로션, 또는 화장품으로서 제제화된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 비경구 액체 용액으로서 제제화된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 장용 캡슐 또는 정제, 또는 식이 보충제 또는 식품, 예를 들어, 식품, 식품 보충제, 의료용 식품, 식품 첨가제, 뉴트라슈티칼, 또는 드링크로서 제제화된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 국소적으로 투여된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 전신적으로 투여된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 즉시 방출을 위해 제제화된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 연장된 방출, 예를 들어, 제어된 또는 지속된 방출을 위해 제제화된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 나노입자-기반 전달 담체를 포함한다.

일부 실시양태에서, 조성물은 피부 침투 증진제를 포함하거나 또는 피부 침투 증진제, 예를 들어, 화학적 피부 침투 증진제 또는 물리적 피부 침투 증진제와 조합으로 투여된다.

일부 실시양태에서, 조성물은 미토콘드리아-표적화제 또는 미토콘드리아-표적화제로 관능화된 전달 담체를 포함한다.

일부 실시양태에서, 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상은 심혈관 질환, 당뇨병, 암, 신경 장애, 또는 피부 질환 또는 상태이다.

일부 실시양태에서, 피부 질환 또는 상태는 피부 주름, 피부 색소침착의 변화, 노인성 흑점, 또는 피지선의 질환 또는 상태이다.

일부 실시양태에서, 피부 질환 또는 상태는 두피 또는 모발 질환 또는 상태, 예를 들어, 탈모, 모발 가늘어짐, 또는 모발 색소침착의 변화이다.

일부 실시양태에서, 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분은 엠블리카 추출물로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리되었다.

일부 실시양태에서, 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분은 엠블리카 추출물 이외의 공급원으로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리되었다.

일부 실시양태에서, 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분은 합성되었다.

일부 실시양태에서, 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분은 엠블리카 추출물로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리되었다.

일부 실시양태에서, 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분은 엠블리카 추출물 이외의 공급원으로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리되었다.

일부 실시양태에서, 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분은 합성되었다.

일부 실시양태에서, 케불라 추출물의 화합물 구성성분은 엠블리카 추출물로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리되었다.

일부 실시양태에서, 케불라 추출물의 화합물 구성성분은 엠블리카 추출물 이외의 공급원으로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리되었다.

일부 실시양태에서, 케불라 추출물의 화합물 구성성분은 합성되었다.

본 개시내용은 상기 측면 및/또는 실시양태 중 임의의 하나 이상의 모든 조합, 뿐만 아니라 상세한 설명 및 임의의 실시예에 제시된 실시양태 중 임의의 하나 이상과의 조합을 구상한다.

첨부된 도면은 일정한 비율로 그려진 것으로 의도되지 않는다. 도면에서, 다양한 도면에서 예시된 각각의 동일하거나 거의 동일한 성분은 비슷한 숫자에 의해 나타내어진다. 명확성의 목적을 위해, 모든 성분이 모든 도면에 표지되지는 않을 수 있다. 도면에서:
도 1A는 dox 유도 및 국부 엠블리카 추출물 처리 또는 대조군 처리의 16주 후의 파라핀 등쪽 피부 섹션 대조군 및 mtDNA-고갈체 마우스에서의 상대 형광 단위 (RFU)로의 OXPHOS 복합체 IV (COXII)의 면역형광 분석의 정량화를 제시한다. 데이터는 평균 ± SD (n = 3)이고; *P<0.05;
도 1B는 dox 유도 및 국부 엠블리카 추출물 처리 또는 대조군 처리의 16주 후의 대조군 및 mtDNA-고갈체 마우스로부터의 mtDNA 코딩된 유전자에 대한 등쪽 피부 RNA의 RT-PCR 분석을 제시하고;
도 1C는 dox 유도 및 국부 엠블리카 추출물 처리 또는 대조군 처리 적용의 16주 후의 대조군 (n=3) 및 mtDNA-고갈체 (n=3) 마우스로부터의 등쪽 피부 샘플에서의 mtDNA 함량의 정량화를 제시하고 (평균 ± s.e.m; *P<0.05, 스튜던트(Student) t 검정);
도 1D는 dox 유도 및 국부 엠블리카 추출물 처리 또는 대조군 처리의 16주 후의 대조군 및 mtDNA-고갈체 마우스로부터의 피부 섹션에서의 염증 세포의 정량적 분석을 제시하고 (평균 ± SD; *P≤0.05 ; **P≤0.01 ; ***P≤0.001 스튜던트 t 검정);
도 2A는 (i) dox 유도 후의 대조군 마우스; (ii) dox-유도 후의 mtDNA-고갈체 마우스; (iii) dox 유도 및 푸쿠스 추출물로의 처리의 51일 후의 대조군 마우스; 및 (iv) dox 유도 및 푸쿠스 추출물로의 처리의 51일 (예방적 개입) 후의 mtDNA-고갈체 마우스 (각각의 그룹에 대해 n=3)의 대표적인 사진을 제시하고;
도 2B는 dox 유도 및 국부 푸쿠스 추출물 처리 또는 대조군 처리 적용의 16주 후의 대조군 (n=3) 및 mtDNA-고갈체 (n=3) 마우스로부터의 등쪽 피부 샘플에서의 mtDNA 함량의 정량화를 제시하고 (평균 ± s.e.m; *P<0.05, 스튜던트 t 검정);
도 3은 엠블리카 추출물 예방적 및 치료적 생체내 실험의 개략도를 제시하고;
도 4A는 한 실시양태에 따른, 다양한 조성물에 의한 미토콘드리아 복합체 IV 서브유닛 2 (COXII)의 유도된 발현을 제시하는 그래프이고;
도 4B는 한 실시양태에 따른, 다양한 조성물에 의한 미토콘드리아 전사 인자 A (TFAM)의 유도된 발현을 제시하는 그래프이고;
도 4C는 한 실시양태에 따른, 다양한 조성물에 의한 퍼옥시좀 증식체-활성화된 수용체 감마 공동활성화제 1-알파 (PGC-1a)의 유도된 발현을 제시하는 그래프이고;
도 5는 한 실시양태에 따른, 다양한 조성물에 의해 유도된 미토콘드리아 생물발생 마커 COXII, TFAM, 및 PGC-1a의 단백질 수준을 제시하는 전기영동 겔의 화상이고;
도 6A는 생체내 피부 주름 연구 동안 본원에 개시된 조성물의 저용량을 받은 참가자에 의해 제공된 백분율 설문지 대답을 제시하는 그래프이고;
도 6B는 생체내 피부 주름 연구 동안 본원에 개시된 조성물의 고용량을 받은 참가자에 의해 제공된 백분율 설문지 대답을 제시하는 그래프이고;
도 7A 내지 7B는 투여 후 6시간 내지 96시간에서의 시험관내에서 엠블리카 추출물의 투여에 의해 유도된 COXII 발현을 제시하는 그래프이고;
도 8A 내지 8B는 투여 후 6시간 내지 96시간에서의 시험관내에서 엠블리카 추출물의 투여에 의해 유도된 TFAM 발현을 제시하는 그래프이고;
도 7A 내지 7B는 투여 후 6시간 내지 96시간에서의 시험관내에서 엠블리카 추출물의 투여에 의해 유도된 PCG-1a 발현을 제시하는 그래프이고;
도 10 내지 10D는 투여 후 6시간 및 24시간에서의, 임의로 나노입자 전달 담체와 함께, 시험관내에서 엠블리카 추출물의 투여에 의해 유도된 COXII 발현을 제시하는 그래프이고;
도 11은 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 생체외 투여 후의 현미경적 인간 모발 사이클 스테이징을 제시하는 그래프이고;
도 12는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 생체외 투여 후의 인간 모발 매트릭스 각질형성세포 증식을 제시하는 그래프이고;
도 13은 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 인간 모발에의 생체외 투여 후의 각질형성세포 증식의 면역조직화학적 분석을 제시하는 화상을 포함하고;
도 14는 한 실시양태에 따른, 인간 모발에의 엠블리카 추출물의 생체외 투여 후의 멜라닌 응괴를 제시하는 그래프이고;
도 15는 한 실시양태에 따른, 인간 피부에의 엠블리카 추출물의 생체외 투여 후의 LDH 방출을 제시하는 그래프이고;
도 16A 내지 16B는 한 실시양태에 따른, 인간 피부에의 엠블리카 추출물의 생체외 투여 후 24시간 및 5일에서의 COL1A1 유전자의 발현을 제시하는 그래프이고;
도 17A 내지 17C는 한 실시양태에 따른, 인간 피부에의 엠블리카 추출물의 생체외 투여 후 24시간에서의 MTCO2, TFAM, 및 VDAC 유전자의 발현을 각각 제시하는 그래프이고;
도 18A 내지 18B는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 생체외 투여 후 24 또는 120시간에서의 FGF2, FGFR1, COX7A1, PDK4, FAM173A, MRPL12, 및 WNT11 유전자의 발현을 제시하는 그래프이고;
도 19A 내지 19B는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 6시간에서의 COXII 및 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 20A 내지 20D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 12시간 및 24시간에서의 COXII 및 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 21A 내지 21D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 12시간 및 24시간에서의 COXII 및 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 22A 내지 22D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 12시간 및 24시간에서의 COXII 및 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 23A 내지 23D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 12시간 및 24시간에서의 COXII 및 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 24A 내지 24D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 COXII의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 25A 내지 25D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 26A 내지 26D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 COXII의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 27A 내지 27D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 28A 내지 28D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 COXII의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 29A 내지 29D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 30A 내지 30D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 COXII의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 31A 내지 31D는 한 실시양태에 따른, 엠블리카 추출물의 구성성분의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 32A 내지 32D는 한 실시양태에 따른, 임의로 나노입자 담체에 캡슐화된 케불린산의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 COXII의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 33A 내지 33D는 한 실시양태에 따른, 임의로 나노입자 담체에 캡슐화된 케불린산의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 34A 내지 34B는 한 실시양태에 따른, 나노입자 담체에 캡슐화된 엠블리카 추출물의 시험관내 투여 후 6시간에서의 COXII의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 35A 내지 35D는 한 실시양태에 따른, 나노입자 담체에 캡슐화된 엠블리카 추출물의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 COXII의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 36A 내지 36D는 한 실시양태에 따른, 나노입자 담체에 캡슐화된 엠블리카 추출물의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 37A 내지 37D는 한 실시양태에 따른, 나노입자 담체에 캡슐화된 엠블리카 추출물의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 COXII의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 38A 내지 38D는 한 실시양태에 따른, 나노입자 담체에 캡슐화된 엠블리카 추출물의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 COXII의 발현을 제시하는 그래프를 포함하고;
도 39A 내지 39D는 한 실시양태에 따른, 나노입자 담체에 캡슐화된 엠블리카 추출물의 시험관내 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 TFAM의 발현을 제시하는 그래프를 포함한다.

미토콘드리아 기능장애는 많은 미토콘드리아 질환과 연관되며, 이들 중 많은 것은 기능장애성 미토콘드리아 산화적 인산화 (OXPHOS)의 결과이다. 미토콘드리아 OXPHOS는 세포 내의 대부분의 세포성 아데노신 트리포스페이트 (ATP)의 생성을 설명한다. OXPHOS 기능은 핵 및 미토콘드리아 게놈 둘 다에 의해 코딩되는 단백질의 조화된 발현에 크게 좌우된다. 인간 미토콘드리아 게놈은 OXPHOS 시스템의 13개의 폴리펩티드를 코딩하고, 핵 게놈은 OXPHOS 시스템의 어셈블리에 요구되는 나머지 85개 초과의 폴리펩티드를 코딩한다. mtDNA 고갈은 OXPHOS를 손상시키고, mtDNA 고갈 증후군을 초래한다 (Alberio,et al., Mitochondrion 7, 6-12, 2007; Ryan, Met al., Annu. Rev. Biochem. 76, 701-722, 2007). mtDNA 고갈 증후군은 특이적 조직 내의 낮은 mtDNA 수준을 특징으로 하는 장애의 이질적인 그룹이다. 상이한 표적 기관에서, mtDNA 고갈은 특이적 병리학적 변화를 초래한다 (Tuppen, et al., Biochim. Biophys. Acta 1797, 113-128, 201)). mtDNA 고갈 증후군은 mtDNA 복제, 및 미토콘드리아 뉴클레오티드 대사 및 뉴클레오티드 구제 경로에 참여하는 핵-코딩된 유전자에서의 유전적 결함으로부터 초래된다 (Alberio,et al., Mitochondrion 7, 6-12, 2007). mtDNA 고갈은 또한 다른 인간 질환 및 상태, 예컨대, mtDNA 고갈 증후군, 미토콘드리아 질환, 노화, 노화-연관 만성 질환 또는 상태, 감소된 에너지 수준 및 활력, 탈모 및 회색화를 포함하는 모발 노화의 특징, 피부 주름 및 노인성 흑점을 포함하는 피부 노화의 특징, 피부 질환 및 상태 및 다른 인간 병리현상 (그러나 이에 제한되지 않음)에 연루되어 있다.

미토콘드리아 기능의 일반적인 감소는 노화 동안 광범위하게 보고되었다. 더욱이, 미토콘드리아 기능장애는 연령-관련 인간 질환의 기저를 이루는 유인력인 것으로 공지되어 있다. 특이적 mtDNA 돌연변이를 보유하는 마우스는 조기 노화의 징후를 나타내는 것으로 제시되었다 (즉, mtDNA 고갈체 마우스). mtDNA에서의 돌연변이 외에도, 연구는 또한 연령에 따른 mtDNA 함량 및 미토콘드리아 카피 수의 감소를 시사한다. 낮은 mtDNA 카피 수는 쇠약과 관련되며, 다민족 집단에 대해, 모든-원인 사망의 예측자이다. 최근의 연구는 인간이 평균적으로 10년마다 mtDNA의 약 4개의 카피를 소실함을 밝혀내었다. 이 연구는 또한 mtDNA 카피 수의 감소와 연령-관련 생리학적 파라미터의 연관을 확인하였다.

축적된 증거는 미토콘드리아 기능장애, 미토콘드리아 질환, 노화, 및 노화-연관 질환 사이의 강한 관련을 시사한다. 특히, 증가된 체세포 mtDNA 돌연변이 및 미토콘드리아 기능의 감소는 인간 노화 동안 광범위하게 보고되었다. 연구는 또한 연령에 따른 mtDNA 함량 및 미토콘드리아 수의 감소를 시사한다.

정의

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "담체"는 화합물이 투여되는 희석제 또는 비히클을 지칭한다. 담체는 제약상 허용되는 담체일 수 있다. 담체는 화장품상 허용되는 담체일 수 있다. 적합한 제약 담체의 예는 문헌 ["Remington's Pharmaceutical Sciences" by E. W. Martin]에 기재되어 있다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "상응하는 아스파르트산"은 인간 POLG1 서열의 위치 1135에서의 아스파르트산의 등가물인 POLG1 아미노산 서열 내의 알라닌 (A) 잔기로 돌연변이된 아스파르트산 (D) 잔기를 의미한다. 특정한 실시양태에서, "상응하는 아스파르트산"은 S/T I/V H X, I S/T I/V H X, 또는 C/A I S/T I/V H X의 아미노산 서열이 아미노 말단 측 상에, 및/또는 X E V/I R, X E V/I R Y/F, 또는 X E V/I R Y/F L의 아미노산 서열이 카르복시 말단 측 상에 플랭킹되고, 여기서 "X"는 알라닌으로 돌연변이되거나 또는 돌연변이될 아스파르트산 아미노산을 지시한다.

mtDNA에 관하여 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "고갈된", "고갈", 또는 "고갈체"는 인간에서 또는 비-인간 동물, 비-인간 동물의 조직, 또는 세포에서 mtDNA 카피 수 및/또는 농도의 감소를 지칭한다. 이러한 결정은 본 개시내용의 화합물 또는 조성물이 투여된 인간 또는 대조군 비-인간 동물 조직, 또는 세포 (예를 들어, 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드를 발현하지 않았거나 또는 발현하지 않는 비-인간 동물)에 관하여 이루어질 수 있다.

본원에 사용된 바와 같이, 질환 또는 상태의 "치료"는 유사한 그러나 비치료된 환자에 비해, 그 질환 또는 상태의 적어도 하나의 증상의 중증도 또는 빈도를 감소시키거나 줄이는 것을 지칭한다. 치료는 또한 유사한 그러나 비치료된 환자에 비해, 질환 또는 상태의 진행을 중지시키거나, 감속시키거나, 반전시키는 것을 지칭할 수 있다. 치료는 질환 및/또는 하나 이상의 증상의 근본 원인을 다루는 것을 포함할 수 있다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "유효량"은 대상체에서 목적하는 반응 및/또는 효과를 제공하는데 유효한, 대상체에게 투여되는 본 개시내용의 화합물 또는 조성물의 양을 지칭한다. 반응 및/또는 효과는 화장품적 반응 및/또는 효과일 수 있다. 반응 및/또는 효과는 치료적 반응 및/또는 효과일 수 있다. 반응 및/또는 효과는 예방적(prophylactic) 또는 예방적(preventative) 반응 및/또는 효과일 수 있다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "치료 유효량"은 대상체에서 본원에 기재된 질환 또는 상태를 치료하고/거나 대상체에서 목적하는 생리학적 반응 및/또는 치료적 효과를 생성하는데 유효한, 대상체에게 투여되는 본 개시내용의 화합물 또는 조성물의 양을 지칭한다. 목적하는 생리학적 반응의 한 예는 mtDNA 카피 수 및/또는 농도를 증가시키는 것을 포함한다.

"유효량" 또는 "치료 유효량"을 포함하는 실제 용량은 투여의 경로, 대상체의 크기 및 건강, 치료될 장애 등에 좌우될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 맥락에서 "유효량" 또는 "치료 유효량"은 미토콘드리아 생물발생을 유도하는데 충분하다. "유효량" 또는 "치료 유효량"은 미토콘드리아 생물발생을 국소적으로 유도하는데 충분할 수 있다. "유효량" 또는 "치료 유효량"은 미토콘드리아 생물발생을 전신적으로 유도하는데 충분할 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 맥락에서 "유효량" 또는 "치료 유효량"은 염증성 표현형을 감소시키고/거나, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 발현을 증가시키고/거나, 피부의 콜라겐 함량을 증가시키고/거나, 표피 두께를 감소시키고/거나, 표피 과다형성을 감소시키고/거나, 극세포증을 감소시키고/거나, 과다각화증을 감소시키고/거나, 주름 길이를 감소시키고/거나, 주름 깊이를 감소시키고/거나, 한정된 영역에서의 주름의 수를 감소시키고/거나, 주름 사이의 공간을 증가시키고/거나, 과다색소침착을 감소시키고/거나, 색소침착저하를 감소시키고/거나, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 안정성을 증가시키고/거나, NF-κB, COX-2, INF-β1, CCL5, MMP1, MMP2, MMP9, MMP13, IGF1R, VEGF, 및 MRPS5로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 발현을 변경, 예를 들어 감소시키고/거나, TIMP1 KLOTHO, COL1A1, MTCO2, TFAM, 및 VDAC로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 발현을 변경, 예를 들어 증가시키고/거나, FGF2, FGFR1, COX7A1, PDK4, FAM173A, MRPL12, 및 WNT11로부터 선택되는, 미토콘드리아 건강 및 활성과 연관된 유전자를 활성화시키고/거나, 피부 및/또는 모낭 내의 염증성 침윤물을 감소시키고/거나, 비정상적 모낭, 예컨대, 결함성 피지선을 갖는 비정상적 휴지기 및 성장기 모낭 (그러나 이에 제한되지 않음)을 감소시키고/거나, 탈모를 감소시키고/거나, 모발 가늘어짐을 감소시키고/거나, 성장 상에서의 모낭의 양을 증가시키고/거나, 모발 회색화를 감소시키고/거나, 불규칙적 모발 줄기를 갖는 모발의 발생을 감소시키고/거나, 거친 외표면을 갖는 모발의 발생을 감소시키고/거나, 불규칙적 폭의 수질을 갖는 모발의 발생을 감소시키고/거나, 불규칙적 중격형성을 갖는 모발의 발생을 감소시키고/거나, 대상체에서 감소된 멜라닌 농도를 갖는 수질 공간을 갖는 모발의 발생을 감소시키고/거나, PGC-1a, TFAM, NRF-1, 및 COXII로부터 선택되는 적어도 1종의 단백질의 발현을 증가시킨다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 맥락에서 "유효량" 또는 "치료 유효량"은 mtDNA 카피 수 또는 농도를 적어도 5%, 예를 들어, 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 또는 100% 증가시킨다. 상기의 각각에서, 감소 또는 증가가 특정되는 경우, 이러한 감소 또는 증가는 본 개시내용의 화합물 또는 조성물로 치료되지 않았고 본원에 기재된 질환 또는 상태를 앓고 있는 대상체 또는 비-인간 동물에 관하여 결정될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 맥락에서 "유효량" 또는 "치료 유효량"은 염증성 표현형의 발생을 예방하고/거나, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 발현의 감소를 예방하고/거나, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 안정성의 감소를 예방하고/거나, 피부의 콜라겐 함량의 감소를 예방하고/거나, 표피 두께의 증가를 예방하고/거나, 표피 과다형성의 증가를 예방하고/거나, 극세포증의 증가를 예방하고/거나, 과다각화증의 증가를 예방하고/거나, 주름 길이의 증가를 예방하고/거나, 주름 깊이의 증가를 예방하고/거나, 한정된 영역에서의 주름의 수의 증가를 예방하고/거나, 주름 사이의 공간의 증가를 예방하고/거나, 과다색소침착의 증가를 예방하고/거나, 색소침착저하의 증가를 예방하고/거나, NF-κB, COX-2, INF-β1, CCL5, MMP1, MMP2, MMP9, MMP13, IGF1R, VEGF, 및 MRPS5로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 발현의 증가를 예방하고/거나, TIMP1, KLOTHO, COL1A1, MTCO2, TFAM, 및 VDAC로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 발현의 감소를 예방하고/거나, FGF2, FGFR1, COX7A1, PDK4, FAM173A, MRPL12, 및 WNT11로부터 선택되는 미토콘드리아 건강 및 활성과 연관된 유전자의 불활성화를 예방하고/거나, 피부 및/또는 모낭 내의 염증성 침윤물의 증가를 예방하고/거나, 비정상적 모낭, 예컨대, 결함성 피지선을 갖는 비정상적 휴지기 및 성장기 모낭 (그러나 이에 제한되지 않음)의 증가를 예방하고/거나, 탈모의 증가를 예방하고/거나, 모발 가늘어짐의 증가를 예방하고/거나, 성장 상에서의 모낭의 양의 감소를 예방하고/거나, 모발 회색화의 증가를 예방하고/거나, 불규칙적 모발 줄기를 갖는 모발의 발생의 증가를 예방하고/거나, 거친 외표면을 갖는 모발의 발생의 증가를 예방하고/거나, 불규칙적 폭의 수질을 갖는 모발의 발생의 증가를 예방하고/거나, 불규칙적 중격형성을 갖는 모발의 발생의 증가를 예방하고/거나, 대상체에서 감소된 멜라닌 농도를 갖는 수질 공간을 갖는 모발의 발생의 증가를 예방하고/거나, mtDNA 카피 수 또는 농도의 감소를 예방하고/거나, PGC-1a, TFAM, NRF-1, 및 COXII로부터 선택되는 적어도 1종의 단백질의 발현의 감소를 예방한다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "부형제"는 장기 안정화, 강력한 활성 성분을 소량으로 함유하는 고체 제제를 벌크화하는 것 (따라서 종종 벌크화제, 충전제, 또는 희석제로 지칭됨), 또는 최종 투여 형태 내의 활성 성분에 대한 치료적 증진을 부여하는 것, 예컨대 약물 흡수를 용이하게 하거나, 점도를 감소시키거나, 가용성을 증진시키는 것 (그러나 이에 제한되지 않음)과 같은 목적을 위해 포함되는 조성물의 활성 성분과 함께 제제화되는 물질을 의미한다. 부형제는 또한 시험관내 안정성, 예컨대 예상된 저장 수명에 비해 변성 또는 응집의 예방을 보조하는 것 외에도, 예컨대 분말 유동성 또는 비-점착 특성을 용이하게 함으로써 활성 물질 문제의 취급을 보조하기 위한 제조 과정에서 유용할 수 있다. 부형제는 제약상 허용되는 부형제일 수 있다. 부형제는 화장품상 허용되는 부형제일 수 있다. 적합한 부형제의 예는 문헌 ["Remington's Pharmaceutical Sciences" by E. W. Martin]에 기재되어 있다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "필요로 하는" (예컨대 어구 "치료를 필요로 하는"에서)은 대상체가 본 개시내용의 화합물의 투여를 요구하거나 그로부터 이익을 얻을 것이라는 건강관리 전문가에 의해 이루어지는 판단을 지칭한다. 이 판단은 건강관리 전문가의 전문지식, 예컨대 본 개시내용의 방법 또는 약물 조성물에 의해 치료가능한 질환 또는 상태의 결과로서 대상체가 아프거나, 또는 아플 것이라는 지식 (그러나 이에 제한되지 않음) 내인 다양한 인자에 기반하여 이루어진다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "돌연변이체 POLG1" 또는 "돌연변이된 POLG1"은 그 종으로부터의 야생형 POLG1 서열과 비교하여 적어도 1개의 돌연변이를 함유하는 특정한 종으로부터의 POLG1 아미노산 서열을 지칭한다. 돌연변이는 질환을 유발할 필요는 없다. 단일 돌연변이 또는 1개 초과의 돌연변이가 존재할 수 있다. 특정한 실시양태에서, 단일 우성 음성 돌연변이는 임의로 1개 또는 추가적인 돌연변이와 함께 존재할 수 있다 (예컨대, D1135A 돌연변이 (그러나 이에 제한되지 않음)).

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "제약상 허용되는"은 조성물의 다른 성분과 혼화성이고, 화합물 또는 조성물을 받는 대상체에게 유해하지 않은 화합물을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 용어 "제약상 허용되는"은 연방 또는 주 정부의 규제 기관에 의해 승인되거나 또는 미국 약전 또는 동물에서, 및 보다 특히 인간에서 사용하기 위한 다른 일반적으로 인식된 약전에 열거된 것을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "화장품상 허용되는"은 조성물의 다른 화장품 성분과 혼화성이고, 화합물 또는 조성물을 받는 대상체에게 유해하지 않은 화합물을 지칭한다. 화장품상 허용되는 조성물 또는 화합물은 제약상 허용될 수 있다. 그러나, 화장품상 허용되는 조성물 또는 화합물은 제약상 허용될 필요는 없다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "제약상 허용되는 형태"는 본 개시내용의 화합물의 용매화물, 수화물, 프로드러그, 동형체, 다형체, 위형체, 중화 형태 및 염 형태를 포함하지만 이에 제한되지 않는, 대상체에게 투여될 수 있는 본 개시내용의 화합물의 공지된 형태를 포함하는 것으로 의미된다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "제약상 허용되는 염"은 본 발명의 화합물의 생리학상 및 제약상 허용되는 염: 즉, 모 화합물의 목적하는 생물학적 활성을 보유하고, 개시된 화합물에 대해 목적하지 않는 독성학적 효과를 부여하지 않는 염을 지칭한다. 올리고뉴클레오티드에 대해, 예시적인 제약상 허용되는 염은 (a) 양이온, 예컨대 나트륨, 칼륨, 암모늄, 마그네슘, 칼슘, 폴리아민, 예컨대 스페르민 및 스페르디민 등으로 형성된 염; (b) 무기 산, 예를 들어 염산, 브롬화수소산, 황산, 인산, 질산 등으로 형성된 산 부가 염; (c) 유기 산, 예컨대, 예를 들어, 아세트산, 옥살산, 타르타르산, 숙신산, 말레산, 푸마르산, 글루콘산, 시트르산, 말산, 아스코르브산, 벤조산, 탄닌산, 팔미트산, 알긴산, 폴리글루탐산, 나프탈렌술폰산, 메탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 나프탈렌디술폰산, 폴리갈락투론산 등으로 형성된 염; 및 (d) 원소 음이온, 예컨대 염소, 브롬, 및 아이오드로부터 형성된 염을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "제약 조성물"은 본 개시내용의 화합물 중 1종 이상과, 다른 성분, 예컨대 제약상 허용되는 담체 및/또는 부형제 (그러나 이에 제한되지 않음)의 혼합물을 지칭한다. 제약 조성물의 목적은 개시내용의 화합물의 투여를 용이하게 하는 것이다.

일부 실시양태에서, "화장품상 허용되는" 부형제는 화장품상 허용되는 물질, 조성물, 또는 비히클, 예컨대 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 용매, 또는 캡슐화 물질을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 각각의 부형제는 화장품 제제의 다른 성분과 혼화성이고, 합리적인 이익/위험 비와 어울리는, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 면역원성, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직 또는 기관과 접촉하여 사용하는데 적합하다는 의미에서 화장품상 허용된다.

mtDNA에 관하여 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "충만한", "충만", 또는 "충만체"는 인간 또는 비-인간 동물, 조직, 또는 세포에서 mtDNA 카피 수 및/또는 농도의 증가를 지칭한다. 이러한 결정은 mtDNA 고갈을 겪은 (예컨대 충만이 개시되기 직전에) 인간 또는 대조군 비-인간 동물 조직, 또는 세포에 관하여 이루어질 수 있다. 특정 측면에서, mtDNA 충만은 대조군 비-인간 동물, 조직, 또는 세포 (예를 들어, 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드를 발현하지 않았거나 또는 발현하지 않는 비-인간 동물)에서 관찰된 mtDNA 카피 수 및/또는 농도와 대략 동등한 mtDNA 카피 수 및/또는 농도를 발생시킨다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "용매화물"은 적합한 용매의 1개 이상의 분자가 결정 격자에 혼입된 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 의미한다. 적합한 용매는 투여되는 투여량에서 생리학상 허용가능하다. 적합한 용매의 예는 에탄올, 물 등이다. 물이 용매인 경우, 분자는 "수화물"로 지칭될 수 있다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "대상체" 또는 "환자"는 척추동물, 포유동물, 동물 (예를 들어, 고양이, 개, 말, 돼지, 설치류 등) 및 인간을 포함하지만 이에 제한되지 않는 동물계의 모든 구성원을 포함한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 인간이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 동물, 예를 들어, 연구 동물, 예를 들어, 마우스, 래트이다.

화합물에 관하여 사용되는 경우, 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "유사성" 또는 "유사성 점수"는 화학적 구조, 화학적 기능, 및/또는 하나 이상의 화학적 특성에 있어서의 2종 이상의 화합물 사이의 유사성의 정도를 지칭한다. 유사성 점수는 임의의 주어진 화합물에 대한 복수의 화학 반응을 모델링하도록 트레이닝된 심부 신경 네트워크에 의해 생성된 데이터를 증강시킴으로써 정량화될 수 있다. 데이터는 화합물에 대한 임베딩 점수를 생성하는 화합물을 수반하는 화합물 또는 화학 반응의 특성의 매트릭스를 정의하는 다중-차원 벡터에 의해 증강될 수 있다. 2종 이상의 화합물에 대한 임베딩 점수를 비교하여 2종 이상의 화합물 사이의 유사성 점수를 생성할 수 있다.

본원에 인용된 모든 특허 출원, 특허, 및 인쇄된 공보는 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

내재적 및 외재적 노화에 대한 미토콘드리아 기능의 영향

미토콘드리아 기능장애는 내재적 및 외재적 노화 둘 다에 연루되어 있다. 피부 주름의 존재, 극세포증, 과다각화증을 갖는 표피 과다형성, 및 피부 내의 현저한 염증성 침윤물은 mtDNA-고갈체 마우스에서 관찰되었고, 인간에서 피부의 외재적 노화와 유사한 특징을 나타낸다. 더욱이, 내재적 노화-연관 유전적 마커의 발현의 변화는 mtDNA-고갈체 마우스에서 관찰된 표현형적 변화의 기저를 이루는 내재적 메카니즘을 지지한다.

콜라겐 섬유의 소실은 피부 주름의 기저를 이루는 것을 보고되어 있다. 단백질분해적 매트릭스 메탈로프로테아제 (MMP) 효소 및 그들의 조직-특이적 억제제 조직 억제제 메탈로프로테이나제-1 (TIMP1) 사이의 긴밀한 균형은 피부 내의 콜라겐 섬유 함량을 유지하는데 필수적이다. MMP의 발현은 노화된 피부에서 변경된다. 이들 보고와 일치하게, mtDNA-고갈체 마우스의 피부는 MMP의 증가된 발현 및 TIMP1의 감소된 발현을 나타내었으며, 이는 피부 주름의 발달에 기여하는 균형의 소실을 지시한다. mtDNA 함량의 충만은 MMP 발현을 복원시켜 주름진 피부 및 탈모의 반전을 초래한다. 이들 실험은 미토콘드리아가 노화의 조절인자임을 제시한다. 이 관찰은 놀라운 것이며, 미토콘드리아-대-핵 혼선의 기저를 이루는 후성유전학적 메카니즘이 정상적인 피부 및 모발 표현형의 복원에서 중요한 역할을 함에 틀림 없음을 시사한다.

mtDNA 스트레스는 염증 반응을 촉발시킨다. 염증은 또한 노화 및 연령-관련 질환의 기저를 이룬다. mtDNA-고갈체 마우스에서의 염증의 마커의 증가된 수준은 mtDNA-고갈체 마우스의 피부에서의 활성화된 면역 반응을 지시한다. mtDNA 고갈시 염증 반응의 주요 조절인자인 NF-κB의 증가된 발현 및 mtDNA 함량의 복원 후의 그의 감소된 발현은 NF-κB 신호전달이 mtDNA-고갈체 마우스에서 관찰되는 피부 및 모낭 병리현상에 기여하는 중요한 메카니즘임을 시사한다. 더욱이, mtDNA에 의해 코딩되는 단백질의 고유한 특색은 N 말단에서의 N-포르밀-메티오닌이다. 세포외 공간에 존재하는 경우 N-포르밀화된 펩티드는 미토콘드리아 손상-연관 분자 패턴으로서 작용하고, 호중구를 활성화시키거나 또는 각질형성세포-내재적 반응을 활성화시켜 면역 세포의 동원을 발생시키는 것으로 공지되어 있다. 이전의 동물 모델은 국재화 접근법 (예를 들어 특이적 세포 유형만을 표적화함)을 사용하여 mtDNA 항상성 및/또는 mtDNA 카피 수 또는 농도의 변경을 나타내었지만, 본 개시내용은 제어된 방식으로 mtDNA 항상성 및/또는 농도의 mtDNA 카피 수의 전반적이고 표적화된 파괴를 제공하는 동물 모델을 이용한다. 이러한 동물 모델을 사용하여, 본 개시내용은 유의한 mtDNA 고갈의 배경에서 미토콘드리아 기능장애와 관련된 질환 및 상태를 치료하는데 유효한 화합물을 확인하였다. 또한, 본 개시내용은 이러한 화합물이 미토콘드리아 기능장애에 의해 매개되는 생리학적 및 표현형적 효과를 반전시킴을 입증한다. 반전된 내재적 및 외재적 노화의 예시적인 생리학적 및 표현형적 효과는 피부 주름의 감소, 탈모의 감소, 성장 상에서의 모낭의 증가, 감소된 염증성 유전자 발현, 피부 및 모낭 내의 감소된 염증성 침윤물, 및 피부 내의 증가된 콜라겐 함량을 포함한다.

또한, 통상적인 실시의 동물 모델의 짧은 수명으로 인해, 이전의 연구는 노화 과정에 대한 미토콘드리아 기능장애의 효과를 결정하는 것이 방지되었으며, 이러한 연구는 미토콘드리아 기능장애와 관련된 많은 생리학적 및 표현형적 변화의 출현을 관찰하지 않았다. 따라서, 통상적인 실시는 본원에서 보고된 미토콘드리아 기능장애와 관련된 이러한 생리학적 및 표현형적 변화를 치료하는데 유효한 화합물을 확인할 수 없었다.

상기 제한은 미토콘드리아 기능장애가 문제가 되고 있는 피부 질환 및 상태에 대한 유효한 치료를 확인하는 것을 곤란하게 만든다. 또한, 현재 모델에서의 정상적인 상피 발달 및 모낭 형태형성의 비정상으로 인해, 가양성 및 가음성 결과의 문제가 높다. 본 개시내용은 전체 동물 또는 선택된 세포/조직에서 (예를 들어 mtDNA의 고갈에 의해) 미토콘드리아 기능장애를 유도하는 돌연변이된 POLG1 폴리펩티드 (예컨대, 우성-음성 (DN) 돌연변이를 발현하는 POLG1 폴리펩티드 (그러나 이에 제한되지 않음))를 발현하는 유도가능한 비-인간 동물 모델을 이용한다. 비-인간 동물 모델은 전체 동물에서 또는 특이적 세포/조직에서 미토콘드리아 기능의 편재적인 억제 및 복원을 허용한다.

개시된 비-인간 동물 모델은 mtDNA-관련 질환 및 상태를 치료하는데 유효한 화합물을 신속하게 확인하는데 사용될 수 있다. 돌연변이된 POLG1 발현의 발현의 부재 하에서의 동물 모델은 정상적인 표피 분화 및 모낭 형태형성을 유지하여, 이 동물 모델 시스템을 미토콘드리아 기능장애를 특징으로 하는 다양한 질환 및 상태의 치료를 위한 요법을 확인하는데 있어서 가치 있는 도구로 만든다. 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드가 발현되는 경우, 동물 모델은 피부 주름의 발달 및 탈모를 포함하는 피부의 현저한 표현형적 연령-관련 변화를 입증한다. 표현형적 변화는 (예컨대 본원에 기재된 추출물 또는 화합물의 투여를 통해) 미토콘드리아 기능이 복원되는 경우 반전가능하다.

비-인간 동물 모델

특정 측면에서, 본원에 기재된 방법은 제어된 방식으로 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드를 발현하는 유전적으로 변형된 비-인간 동물을 이용한다. 이러한 동물 모델로부터의 조직, 기관 및 세포가 또한 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드는 (비-인간 동물의 모든 세포에서) 편재적으로 발현된다. 또 다른 실시양태에서, 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드는 특이적 조직 또는 조직의 세트에서 또는 특이적 세포 유형에서 발현된다. 이러한 비-인간 동물 모델은 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 공개 번호 2020-0085021-A1에 기재되어 있다.

특정한 측면에서, 동물 모델은 감소된 미토콘드리아 (mt) DNA 함량, 감소된 mtDNA 카피 수, 미토콘드리아 단백질 발현의 변화, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 발현, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 안정성, 피부 주름, 탈모, 증가된 표피 두께, 표피 과다형성, 극세포증, 과다각화증, NF-κB, COX-2, INF-β1, CCL5, MMP1, MMP2, MMP9, MMP13, IGF1R, VEGF, 및 MRPS5로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, TIMP1 및 KLOTHO로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, 증가된 피부 염증, 및 비정상적 모낭으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 특징을 나타낸다.

치료제에 대해 스크리닝하는 방법

본 개시내용은 임의의 주어진 화합물에 대한 복수의 화학 반응을 모델링하도록 트레이닝된 인공 신경 네트워크를 제공한다. 본원에 기재된 인공 신경 네트워크의 사용을 통해, 미토콘드리아 생물발생의 공지된 촉진제 또는 억제제와의 유사성 점수를 갖는 화합물 및 조성물이 신뢰성 있게 확인될 수 있다. 유사성 점수는 화합물에 대한 임베딩 점수를 생성하는 화합물을 수반하는 화합물 또는 화학 반응의 특성의 매트릭스를 정의하는 다중-차원 벡터에서 심부 신경 네트워크에 의해 생성된 데이터를 증강시킴으로써 정량화될 수 있다. 화합물에 대한 임베딩 점수를 미토콘드리아 생물발생의 공지된 촉진제 또는 억제제에 대한 임베딩 점수와 비교하여 유사성 점수를 생성할 수 있다. 따라서, 본 개시내용은 공지된 화합물과의 충분한 유사성 점수를 갖는 화합물 및 조성물을 스크리닝하는 방법을 제공한다. 확인된 화합물은 미토콘드리아 생물발생을 촉진시키거나 또는 억제하는데 유효할 것으로 예측된다.

본 개시내용은 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드를 포함하고, 동물 전반에 걸쳐 또는 특이적 조직에서 제어된 방식으로 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드를 발현하는 비-인간 동물 모델을 제공한다. 본원에 기재된 비-인간 동물 모델의 사용을 통해, 미토콘드리아 기능장애와 관련된 질환 및 상태를 치료하는데 유효한 화합물 및 조성물이 신뢰성 있게 확인될 수 있다. 이러한 비-인간 동물로부터의 세포, 및 조직을 이용하는 방법이 또한 제공된다. 따라서, 본 개시내용은 mtDNA 고갈과 관련된 질환 및 상태를 포함하는, 대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 관련된 질환 및 상태를 치료하는데 유효한 화합물 및 조성물을 스크리닝하는 방법을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 mtDNA 카피 수 및/또는 농도의 변화, 및/또는 기능장애성 미토콘드리아 OXPHOS를 포함하는, 적어도 부분적으로 미토콘드리아 기능장애로 인한 질환 또는 상태의 치료를 위한 화합물의 확인을 제공한다. 이러한 질환 및 상태는 mtDNA 고갈 증후군, 미토콘드리아 질환, 노화, 노화-연관 만성 질환 또는 상태, 감소된 에너지 수준 및 활력, 탈모 및 회색화를 포함하는 모발 노화의 특징, 피부 주름 및 노인성 흑점을 포함하는 피부 노화의 특징, 및 다른 인간 병리현상을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 예시적인 미토콘드리아 질환은 심혈관 질환, 당뇨병, 암, 신경 장애, 예컨대 연령-연관 신경 장애, 피부 질환 및 상태, 예를 들어, 피부 주름, 피부 색소침착의 변화, 노인성 흑점, 피부 노화의 특징, 모발 또는 두피 질환 및 상태, 예를 들어, 탈모, 모발 가늘어짐, 모발 색소침착의 변화, 예를 들어, 모발 회색화를 포함한다.

한 실시양태에서, 이러한 스크리닝 방법은 a) 미토콘드리아 생물발생의 공지된 촉진제 또는 억제제에 대한 복수의 화학 반응을 모델링하도록 트레이닝된 심부 신경 네트워크를 제공하는 단계; b) 심부 신경 네트워크를 실행하여 미토콘드리아 생물발생의 공지된 촉진제 또는 억제제와 적어도 70%의 역치 유사성 점수를 갖는 1종 이상의 화합물을 확인하는 단계; c) 적어도 하나의 포함 기준에 기반하여 적어도 1종의 확인된 화합물을 선택하는 단계; 및 d) 선택된 화합물에 의한 미토콘드리아 생물발생에 대한 효과를 결정하는 검정에서 적어도 1종의 선택된 화합물을 평가하는 단계이며, 여기서 검정은 시험관내 검정, 생체외 검정, 또는 생체내 검정을 포함할 수 있는 것인 단계를 포함한다. 적어도 하나의 포함 기준은 확인된 화합물의 구조적, 기능적, 물리적, 또는 화학적 특성을 포함할 수 있다. 예시적인 특성은 크기, 전하, 이온 강도, 결합 강도, 원자가, 혼성화, 미세분자 구조, 거대분자 구조, 및 기타를 포함한다. 역치 유사성 점수는 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.9%, 적어도 99.95%, 적어도 99.99%, 적어도 99.995%, 적어도 99.999%, 또는 그 초과일 수 있다.

일부 실시양태에서, 검정은 본원에 기재된 바와 같이, 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드의 유도가능한 발현이 가능한 비-인간 동물로 적어도 1종의 선택된 화합물을 스크리닝하는 것을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 검정은 본원에서 확인된 바와 같이, 적어도 1종의 선택된 화합물을 스크리닝하여 미토콘드리아 건강 바이오마커의 단백질 또는 유전자 발현에 대한 효과를 측정하는 것을 포함할 수 있다. 스크리닝 방법은 심부 신경 네트워크를 실행하여 적어도 1종의 확인된 화합물 및/또는 적어도 1종의 선택된 화합물과 적어도 70%의 유사성 점수를 갖는 1종 이상의 화합물을 확인함으로써 반복될 수 있다. 일부 실시양태에서, 심부 신경 네트워크는 적어도 1종의 확인된 화합물 및/또는 적어도 1종의 선택된 화합물로 재트레이닝될 수 있다.

한 실시양태에서, 이러한 스크리닝 방법은 a) 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드의 유도가능한 발현이 가능한 비-인간 동물을 제공하는 단계; b) 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드의 발현을 자극시키는 단계이며, 여기서 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드의 발현을 자극시키는 것은 생리학적 또는 표현형적 반응을 유도하는 것인 단계; c) 단계 b) 전에 또는 단계 b) 후에 작용제를 비-인간 동물에게 투여하는 단계; d) 병리현상에 대한 작용제의 효과를 결정하는 단계; 및 e) 작용제의 효과를 대조군 동물과 비교하는 단계이며, 여기서 작용제의 투여 후의 비-인간 동물에서의 생리학적 또는 표현형적 반응의 감소 또는 증가 (적절한 경우)는 작용제가 생리학적 또는 표현형적 반응의 치료를 위한 치료제임을 지시하는 것인 단계를 포함한다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 미토콘드리아 기능장애의 치료를 위한 치료제를 확인하는 방법을 제공한다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상의 치료를 위한 치료제를 확인하는 방법을 제공한다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화-연관 만성 질환 또는 상태 또는 그의 증상의 치료를 위한 치료제를 확인하는 방법을 제공한다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 에너지 수준 및/또는 활력의 감소를 개선시키거나 예방하기 위한 치료제를 확인하는 방법을 제공한다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 피부 노화의 특징의 치료를 위한 치료제를 확인하는 방법을 제공한다. 피부 노화의 특징은 피부 주름, 증가된 주름 길이, 증가된 주름 깊이, 한정된 영역에서의 주름의 수의 증가, 주름 사이의 감소된 공간, 탈모, 모발 가늘어짐, 모발 회색화, 성장 상에서의 모낭의 양의 감소, 불규칙적 모발 줄기를 갖는 모발, 거친 외표면을 갖는 모발, 불규칙적 폭의 수질을 갖는 모발, 불규칙적 중격형성을 갖는 모발, 감소된 멜라닌 농도를 갖는 수질 공간을 갖는 모발, 또는 상기의 조합을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 피부 질환 또는 상태의 치료를 위한 치료제를 확인하는 방법을 제공한다. 피부 상태 (피부 주름 및/또는 주름진 피부 및/또는 탈모 및/또는 모발 가늘어짐을 포함함)는 하기 중 하나 이상을 특징으로 할 수 있다: 피부에서의 염증성 표현형, 미토콘드리아 단백질 발현의 변화, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 발현, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 안정성, 피부의 콜라겐 함량의 감소, 증가된 표피 두께, 표피 과다형성, 극세포증, 과다각화증, NF-κB, COX-2, INF-β1, CCL5, MMP1, MMP2, MMP9, MMP13, IGF1R, VEGF, 및 MRPS5로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, TIMP1, KLOTHO, COL1A1, MTCO2, TFAM, 및 VDAC로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, 피부 및/또는 모낭 내의 증가된 염증성 침윤물, 비정상적 모낭, 예컨대, 결함성 피지선을 갖는 비정상적 휴지기 및 성장기 모낭 (그러나 이에 제한되지 않음), 또는 상기의 조합.

피부 상태는 노화의 출현 또는 효과로서 특징규명될 수 있다. 피부 상태는 피부 표면 위상학의 상태로서 특징규명될 수 있다. 피부 상태는 피부 완전성의 상태로서 특징규명될 수 있다. 따라서, 피부 상태 또는 피부 상태의 특징의 감소는 노화의 출현 또는 효과의 조정, 피부 표면 위상학의 조정, 및/또는 피부 완전성의 조정에 의해 확인될 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 피부 주름의 치료를 위한 치료제를 확인하는 방법을 제공한다. 피부 주름은 하기 중 하나 이상과 연관될 수 있다: 피부에서의 염증성 표현형, 미토콘드리아 단백질 발현의 변화, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 발현, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 안정성, 피부의 콜라겐 함량의 감소, 증가된 표피 두께, 표피 과다형성, 극세포증, 과다각화증, NF-κB, COX-2, INF-β1, CCL5, MMP1, MMP2, MMP9, MMP13, IGF1R, VEGF, 및 MRPS5로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, TIMP1, KLOTHO, COL1A1, MTCO2, TFAM, 및 VDAC로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, 피부 및/또는 모낭 내의 증가된 염증성 침윤물, 비정상적 모낭, 예컨대, 결함성 피지선을 갖는 비정상적 휴지기 및 성장기 모낭 (그러나 이에 제한되지 않음), 또는 상기의 조합.

피부 주름의 파라미터는 주름 길이, 주름 깊이, 한정된 영역에서의 주름의 수, 및/또는 주름 사이의 공간일 수 있다. 한정된 영역에서의 주름의 수는 경험적으로 결정될 수 있다. 한 실시양태에서, 피부 주름의 파라미터를 측정하는 방법은 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함되는 2013년 1월 27일에 출원된 국제 출원 공개 번호 WO 2013/112974A1에 기재되어 있다. 이러한 방법은 주름의 길이 및 피부 주름의 적어도 하나의 다른 측정된 물리적 특징, 예컨대 주름 깊이, 한정된 영역에서의 주름의 수, 및/또는 주름 사이의 공간을 결정하는 것을 포함한다. 또한, 피부 주름 파라미터는 피부 주름의 중증도 수준을 정의하는데 사용될 수 있으며, 중증도 수준은 주름 길이 및 피부 주름의 적어도 하나의 다른 측정된 물리적 특징의 조합에 기반한다. 주름의 수는 경험적으로 결정될 수 있다. 예를 들어, 한정된 영역에서의 피부 주름의 수가 사용될 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 탈모 또는 모발 가늘어짐의 치료를 위한 치료제를 확인하는 방법을 제공한다.

탈모 및 모발 가늘어짐은 하기 중 하나 이상과 연관될 수 있다: NF-κB, COX-2, INF-β1, CCL5, MMP1, MMP2, MMP9, MMP13, IGF1R, VEGF, 및 MRPS5로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, TIMP1, KLOTHO, COL1A1, MTCO2, TFAM, 및 VDAC로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, 모낭 내의 증가된 염증성 침윤물, 및 비정상적 모낭, 예컨대, 결함성 피지선을 갖는 비정상적 휴지기 및 성장기 모낭 (그러나 이에 제한되지 않음)의 증가, 또는 상기의 조합.

특정 실시양태에서, 탈모 및 모발 가늘어짐은 사진의 사용을 통해 시각적으로 정량화된다. 사진은 모습, 배율 및 조명이 상이한 측정 기간에 걸쳐 일관되는 것을 보장하기 위해, 카메라가 실장된 정위적 위치화 장치의 도움으로 찍을 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 노인성 흑점의 치료를 위한 치료제를 확인하는 방법을 제공한다. 노인성 흑점은 하기 중 하나 이상과 연관될 수 있다: 피부에서의 염증성 표현형, 미토콘드리아 단백질 발현의 변화, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 발현, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 안정성, 피부의 콜라겐 함량의 감소, 증가된 표피 두께, 표피 과다형성, 극세포증, 과다각화증, NF-κB, COX-2, INF-β1, CCL5, MMP1, MMP2, MMP9, MMP13, IGF1R, VEGF, 및 MRPS5로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, TIMP1, KLOTHO, COL1A1, MTCO2, TFAM, 및 VDAC로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, 피부 및/또는 모낭 내의 증가된 염증성 침윤물, 비정상적 모낭, 예컨대, 결함성 피지선을 갖는 비정상적 휴지기 및 성장기 모낭 (그러나 이에 제한되지 않음), 또는 상기의 조합.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 피부 또는 모발 색소침착의 변화를 예방하거나 치료하기 위한 치료제를 확인하는 방법을 제공한다. 피부 또는 모발 색소침착의 변화는 하기 중 하나 이상과 연관될 수 있다: 피부에서의 염증성 표현형, 미토콘드리아 단백질 발현의 변화, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 발현, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 안정성, 피부의 콜라겐 함량의 감소, 증가된 표피 두께, 표피 과다형성, 극세포증, 과다각화증, NF-κB, COX-2, INF-β1, CCL5, MMP1, MMP2, MMP9, MMP13, IGF1R, VEGF, 및 MRPS5로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, TIMP1, KLOTHO, COL1A1, MTCO2, TFAM, 및 VDAC로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 변경된 발현, 피부 및/또는 모낭 내의 증가된 염증성 침윤물, 비정상적 모낭, 예컨대, 결함성 피지선을 갖는 비정상적 휴지기 및 성장기 모낭 (그러나 이에 제한되지 않음), 또는 상기의 조합.

임의의 기재된 스크리닝 방법에서, 작용제는 화학적 화합물, 제약 조성물, 화장품 조성물, 추출물, 식물 추출물, 해조 추출물, 미생물 추출물, 생물학적 화합물 및 조성물 (예를 들어, 단백질, DNA, RNA, siRNA, 백신 등), 및 미생물을 포함할 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 또한, 작용제는 규제 기관, 예컨대 FDA에 의해 승인된 작용제의 라이브러리를 포함하는 라이브러리로부터 선택될 수 있다.

임의의 기재된 스크리닝 방법에서, 본 개시내용의 임의의 트랜스제닉 비-인간 동물이 사용될 수 있다.

임의의 기재된 스크리닝 방법에서, 단계 b)는 유도제 화합물을 트랜스제닉 비-인간 동물에게 제공하거나 또는 유도제 화합물을 트랜스제닉 비-인간 동물에게 주지 않음으로써 달성될 수 있다.

임의의 기재된 스크리닝 방법에서, 작용제는 단계 b) 전에 첨가된다. 임의의 기재된 스크리닝 방법에서, 작용제는 단계 b) 후에 첨가된다.

임의의 기재된 스크리닝 방법에서, 동물 모델은 선행하는 섹션에 기재된 동물 모델이다. 임의의 기재된 스크리닝 방법에서, 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드는 본원에 기재된 임의의 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드일 수 있다. 특정 측면에서, 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드는 우성 음성 돌연변이를 포함한다. 특정 측면에서, 돌연변이체 POLG1 폴리펩티드는 D1135A 돌연변이를 포함한다.

치료 방법

본 개시내용은 mtDNA 고갈을 포함하는 미토콘드리아 기능장애와 관련된 질환 및 상태를 치료하거나 예방하는데 유효한 화합물 및 조성물을 제공한다. 특정 실시양태에서, mtDNA 고갈을 포함하는 미토콘드리아 기능장애와 관련된 질환 및 상태는 노화-연관 만성 질환 또는 상태를 치료하거나 예방하는 것, 에너지 수준 및 활력의 감소를 개선시키거나 예방하는 것, 노화의 특징을 치료하거나 예방하는 것, 및/또는 피부 질환 또는 상태를 치료하거나, 개선시키거나, 예방하는 것을 포함한다. 임의의 특정한 이론에 구애되지는 않지만, 이러한 화합물은 미토콘드리아 DNA 카피 수 또는 농도의 감소를 억제하는 것, 미토콘드리아 DNA의 고갈을 억제하는 것, 미토콘드리아 DNA의 분해를 억제하는 것, 미토콘드리아 DNA 카피 수 또는 농도의 증가에 기여하는 것, 미토콘드리아 DNA를 충만화하는 것, 및/또는 미토콘드리아 DNA의 증가된 활성을 촉진시키는 것을 통해 관찰된 효과를 발휘할 수 있다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에서 미토콘드리아 기능장애를 치료하거나 예방하는 방법이며, 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법이며, 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화-연관 만성 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법이며, 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화의 특징 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법이며, 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에서 에너지 수준 및/또는 활력의 감소를 개선시키거나 예방하는 방법이며, 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에서 피부 질환 또는 상태를 개선시키거나 예방하는 방법이며, 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

예시적인 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태는 심혈관 질환, 당뇨병, 암, 및 신경 장애, 예컨대 노화-연관 신경 장애를 포함한다. 따라서, 예시적인 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화-연관 질환은 신경 장애를 포함한다.

노화의 특징을 치료하거나 예방하는 것의 예는 피부 주름을 치료하고/거나 예방하는 것, 주름 길이를 감소시키는 것, 주름 깊이를 감소시키는 것, 한정된 영역에서의 주름의 수를 감소시키는 것, 주름 사이의 공간을 증가시키는 것, 탈모를 예방하는 것, 모발 회색화를 예방하는 것, 규칙적 모발 줄기를 갖는 모발을 제공하는 것, 부드러운 외표면을 갖는 모발을 제공하는 것, 규칙적 폭의 수질을 갖는 모발을 제공하는 것, 규칙적 중격형성을 갖는 모발을 제공하는 것, 멜라닌으로 충전된 수질 공간을 갖는 모발을 제공하는 것, 또는 상기의 조합을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 특정 측면에서, 노화의 특징을 치료하거나 예방하는 것은 피부 주름을 치료하고/거나 예방하는 것을 포함한다. 특정 측면에서, 노화의 특징을 치료하거나 예방하는 것은 탈모를 예방하는 것을 포함한다. 특정 측면에서, 노화의 특징을 치료하거나 예방하는 것은 모발 회색화를 예방하는 것을 포함한다. 특정 측면에서, 노화의 특징을 치료하거나 예방하는 것은 피부 또는 모발 색소침착의 변화를 예방하는 것을 포함한다. 특정 측면에서, 노화의 특징을 치료하거나 예방하는 것은 노인성 흑점을 치료하거나 예방하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 노화의 특징은 화학물질 또는 치료제에의 노출에 의해 촉발될 수 있다. 예를 들어, 노화의 특징은 화학물질 또는 치료제의 부작용일 수 있다. 특정 실시양태에서, 노화의 특징은 화학요법 및/또는 방사선 요법의 부작용일 수 있다. 본원에 개시된 방법에 의해 치료되거나, 제한되거나, 억제되거나, 예방될 수 있는 예시적인 화학요법 및/또는 방사선 요법의 부작용은 탈모, 피부 주름, 피부 탄성의 변화, 피부 또는 모발 색소침착의 변화, 수포형성, 흉터형성, 또는 광노화를 포함한다. 특정 실시양태에서, 노화의 특징은 환경적 인자, 예를 들어, 자외선 방사에의 노출, 극도의 추위, 또는 극도의 열에 의해 촉발될 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체에서 노화의 출현 또는 효과를 감소시키는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체에서 노화의 출현 또는 효과를 감소시키는 것을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 피부 질환 또는 상태는 이전에 기재된 바와 같이 노화-연관 질환 또는 상태를 포함한다. 일부 실시양태에서, 피부 질환 또는 상태는 연령과 연관되지 않는다. 피부 질환 또는 상태는 치료, 예를 들어, 화학요법 또는 방사선 요법의 과정과 연관될 수 있다. 피부 질환 또는 상태는 유전적일 수 있다. 피부 질환 또는 상태는 자가면역 질환과 연관될 수 있다. 피부 질환 또는 상태는 환경적 인자, 예컨대 자외선 방사에의 노출, 극도의 추위, 또는 극도의 열과 연관될 수 있다. 따라서, 본원에 개시된 방법에 의해 치료가능한 피부 질환 또는 상태는 노화-연관되거나 또는 그렇지 않을 수 있다.

예시적인 피부 질환 또는 상태는 피부 주름, 탈모, 모발 가늘어짐, 피부 또는 모발 색소침착의 변화, 예를 들어, 모발 회색화, 노인성 흑점, 피지선의 질환 또는 상태, 건선, 피부 발진, 말단청색증, 및 기타를 포함한다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체의 피부를 치료하는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부를 치료하는 것을 포함할 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체에서 피부 완전성을 개선시키는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부 완전성을 개선시키는 것을 포함할 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체에서 피부 표면 위상학을 개선시키는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부 표면 위상학을 개선시키는 것을 포함할 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체의 피부 내의 콜라겐의 분해를 감소시키거나 예방하거나 또는 대상체의 피부 내의 콜라겐 함량을 증가시키는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부 내의 콜라겐의 분해를 감소시키거나 예방하거나 또는 대상체의 피부 내의 콜라겐 함량을 증가시키는 것을 포함할 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체의 피부 또는 모낭 내의 염증을 감소시키거나 예방하는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부 또는 모낭 내의 염증을 감소시키거나 예방하는 것을 포함할 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체의 피부에서 노화의 출현 또는 효과의 진행을 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부에서 노화의 출현 또는 효과의 진행을 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 것을 포함할 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체에서 피부 염증을 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부 염증을 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 것을 포함할 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체에서 피부 완전성 또는 상태에 대한 손상을 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부 완전성 또는 상태에 대한 손상을 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 것을 포함할 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체에서 피부 완전성 또는 상태의 상태를 실질적으로 유지하는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부 완전성 또는 상태의 상태를 실질적으로 유지하는 것을 포함할 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체의 피부의 피부층의 지형적 변화를 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부의 피부층의 지형적 변화를 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 것을 포함할 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 대상체의 피부 또는 모발 색소침착의 변화를 치료하거나 예방하는 방법이 개시된다. 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하고, 그에 의해 대상체의 피부 또는 모발 색소침착의 변화를 치료하거나 예방하는 것을 포함할 수 있다.

피부 또는 모발 색소침착의 변화를 치료하거나 예방하는 것은 멜라닌세포 기능의 변화를 치료하거나, 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 것을 포함할 수 있다. 멜라닌세포 기능의 변화는 백반증, 노인성 흑점, 반상 색소침착, 망상 색소침착, 점상 색소침착, 이소성 색소침착, 소포주위 색소침착, 소포간 색소침착, 색소침착저하 또는 과다색소침착 (예를 들어, 반점형, 초점형, 또는 미만성 색소침착저하 또는 과다색소침착), 홍반, 낙설, 및 모세혈관확장증 중 하나 이상과 연관될 수 있다. 피부 또는 모발 색소침착 및/또는 멜라닌세포 기능의 변화는 국소적이거나 전신적일 수 있다.

피부 또는 모발 색소침착의 변화를 치료하거나 예방하는 것은 진피 색소침착 및/또는 표피 색소침착 (예를 들어, 기저 및/또는 초기저 색소침착)의 변화를 치료하거나, 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 것을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 변화는 진피층 내의 국재화된 높은 및 낮은 색소침착의 형성을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 변화는 표피층 내의 증가된 색소침착을 포함할 수 있다. 피부 또는 모발 색소침착의 변화는 과다형성, 극세포증, 과다각화증, 이상각화증, 정상각화증, 멜라닌저하증, 멜라닌형성, 및/또는 증가된 표피 두께와 연관될 수 있다.

특정 실시양태에서, 피부 또는 모발 색소침착의 변화는 자외광에의 노출에 의해 촉발될 수 있다. 예를 들어, 자외광에의 노출은 mtDNA에서 돌연변이를 생성하여 광노화에 기여하는 미토콘드리아 기능장애를 유도할 수 있다.

특정 실시양태에서, 피부 또는 모발 색소침착의 변화는 화학물질 또는 치료제에의 노출, 예를 들어, 화학요법 또는 방사선 요법에 의해 촉발될 수 있다.

특정 실시양태에서, 피부 또는 모발 색소침착의 변화는 노화에 의해 촉발될 수 있다.

특정 실시양태에서, 피부 또는 모발 색소침착의 변화는 색소 분포의 변화를 포함할 수 있다. 예를 들어, 피부 또는 모발 색소침착의 변화는 멜라닌세포 형태 및/또는 색상의 변화를 포함할 수 있다. 피부 또는 모발 색소침착의 변화는 표피 멜라닌세포 수의 변화를 포함할 수 있다. 피부 또는 모발 색소침착의 변화는 진피 멜라닌세포 수의 변화를 포함할 수 있다. 피부 또는 모발 색소침착의 변화는 성장 인자 KGF, HGF, SCF, 및/또는 EDN1의 탈조절된 분비와 연관될 수 있다.

하나 이상의 측면에 따르면, 노인성 흑점을 치료하거나, 예방하거나, 제한하거나, 억제하는 방법이 개시된다. 방법은 노인성 흑점의 수 및/또는 크기를 감소시키는 것을 포함할 수 있다. 방법은 노인성 흑점의 발생을 예방하는 것을 포함할 수 있다. 방법은 노인성 흑점의 성장을 억제하는 것을 포함할 수 있다. 노인성 흑점은 과다색소침착과 연관될 수 있다. 노인성 흑점은 색소침착저하와 연관될 수 있다. 노인성 흑점은 병변주위 표피에 걸친 병변 내의 멜라닌세포의 수의 증가와 연관될 수 있다. 노인성 흑점은 멜라닌세포 세포 수의 증가, 수지화도의 증가, 수지상 조직의 신장, 진피 멜라닌세포의 증가된 입상도, 각질형성세포 노쇠, 및/또는 증가된 표피 두께와 연관될 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에서 피부 주름을 치료하는 방법이며, 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 이 실시양태의 특정 측면에서, 투여는 주름 길이를 감소시키거나, 주름 깊이를 감소시키거나, 한정된 영역에서의 주름의 수를 감소시키거나, 주름 사이의 공간을 감소시키거나, 또는 상기의 조합이다.

또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에서 탈모를 치료하는 방법이며, 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 이 실시양태의 특정 측면에서, 투여는 모발 회색화를 예방하거나, 규칙적 모발 줄기를 갖는 모발을 제공하거나, 부드러운 외표면을 갖는 모발을 제공하거나, 규칙적 폭의 수질을 갖는 모발을 제공하거나, 규칙적 중격형성을 갖는 모발을 제공하거나, 멜라닌으로 충전된 수질 공간을 갖는 모발을 제공하거나, 또는 상기의 조합이다.

본원에 개시된 방법은 mtDNA의 촉진제의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다. 본원에 개시된 방법은 mtDNA의 억제제의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

특정 추출물은 mtDNA를 촉진시키고/거나 억제하는 1종 이상의 화합물을 포함하는 것으로서 확인되었다. 엠블리카 추출물, 푸쿠스 추출물, 및 케불라 추출물이 본원에 기재된다. 유사한 추출물, 특히, 본원에 개시된 1종 이상의 화합물을 포함하는 추출물, 본원에 개시된 추출물의 구성성분인 화합물, 및/또는 본원에 개시된 1종 이상의 화합물과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물은 유사한 mtDNA 촉진 및/또는 억제를 제공할 것으로 예상됨을 이해해야 한다. 따라서, 다른 추출물, 다른 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물, 및 다른 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물은 본 개시내용의 범위 내에 있다.

예시적인 추출물은 폴리고눔 아비쿨라레(Polygonum aviculare) 추출물, 피살리스 굴라타(Physalis gngulata) 추출물, 두날리엘라 살리나(Dunaliella salina) 추출물, 카멜리아 시넨시스(Camellia sinensis) 잎 추출물, 트레멜라 푸시포르미스 스포로카르프(Tremella fuciformis sporocarp) 추출물, 알테로모나스 페르멘트(Alteromonas ferment) 추출물, 테오브로마 카카오(Theobroma cacao) (코코아) 종자 추출물, 비티스 비니페라(Vitis vinifera) (포도) 꽃 세포 추출물, 미라빌리스 잘라파 칼루스(Mirabilis jalapa callus) 추출물, 알테로모나스 페르멘트 추출물, 및 비브리오 알기놀리티쿠스(Vibrio alginolyticus) 발효 여액을 포함한다.

따라서, 본원에 기재된 화합물은 추출물로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리될 수 있다. 본원에 기재된 화합물은 추출물 이외의 공급원으로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리될 수 있다. 추출물의 화합물 구성성분은 또 다른 천연 또는 인공 공급원으로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리될 수 있다. 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 화합물은 합성일 수 있다. 예를 들어, 본 개시내용의 화합물은 실험실, 제조, 또는 다른 환경에서 합성될 수 있다. 상기는 추출물에 함유된 화합물 또는 그의 구성성분, 뿐만 아니라 그의 높은 유사성 점수를 갖는 화합물에 적용된다.

본원에 개시된 방법은 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

본원에 개시된 방법은 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

본원에 개시된 방법은 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

본원에 개시된 방법은 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

본원에 개시된 방법은 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

본원에 개시된 방법은 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.

본 개시내용은 일반적으로 추출물 및 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물에 관한 것이다. 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물과 적어도 95%, 예를 들어, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.9%, 적어도 99.95%, 적어도 99.99%, 적어도 99.995%, 또는 적어도 99.999%의 유사성 점수를 갖는 화합물은 본원에 기재된 바와 같은 임의의 조성물에 이용될 수 있음을 이해해야 한다.

이론에 구애되기를 원하지는 않지만, 본원에 개시된 조성물의 투여는 미토콘드리아 DNA 카피 수 또는 농도의 감소의 억제, 미토콘드리아 DNA의 고갈의 억제, 미토콘드리아 DNA의 분해의 억제, 또는 상기의 조합을 수반할 수 있는 것으로 믿어진다. 이론에 구애되기를 원하지는 않지만, 본원에 개시된 조성물의 투여는 미토콘드리아 생물발생을 유도하고/거나 미토콘드리아 기능을 개선시키는 것을 수반할 수 있는 것으로 믿어진다.

특정 측면에 따르면, 본원에 개시된 조성물의 투여는 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 발현의 증가, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 안정성의 증가, 및/또는 PGC-1a, TFAM, NRF-1, 및 COXII로부터 선택되는 적어도 1종의 단백질의 발현의 증가를 수반할 수 있다.

특정 측면에서, 엠블리카 추출물은 엠블리카 오피시날리스 (일명 필란투스 엠블리카(Phyllanthus emblica), 인도 구스베리, 또는 그의 힌디어 명칭에 의해 암라(Amla))로부터 유래된다. 이러한 엠블리카 오피시날리스로부터의 추출물은 목적에 따라 식물의 임의의 부분으로부터 유래될 수 있다. 예를 들어, 추출물은 엠블리카 오피시날리스의 줄기 부분, 과실 부분, 또는 줄기 부분 및 과실 부분 둘 다로부터 유래될 수 있다. 이러한 추출물을 제조하는데 있어서, 엠블리카 오피시날리스는 분말화된 형태로 제공되고, 관련 기술분야에 공지된 화학적 용매, 예컨대 수성 에틸 아세테이트 에탄올, 및 메탄올 (그러나 이에 제한되지 않음)을 사용하여 추출될 수 있다. 본원에 개시된 다른 용매 또는 부형제가 사용될 수 있다. 특정 예시적인 실시양태에서, 화학적 용매는 메탄올일 수 있다.

특정 측면에서, 엠블리카 추출물 또는 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물의 유효량은 1 내지 100 mg, 예컨대 1 mg, 5, mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 또는 100 mg이다.

특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 탄닌의 파괴 생성물이고, 여기서 엠블리카 추출물은 임의로 상기 기재된 바와 같다. 특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 엘라기탄닌이다. 특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 엠블리카닌 A, 엠블리카닌 B, 푸니글루코닌, 페둔쿨라긴, 및/또는 케불린산이다.

특정 측면에서, 화합물은 엘라기탄닌 또는 엘라기탄닌과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물이다. 예시적인 엘라기탄닌 및 이러한 엘라기탄닌과 높은 유사성 점수를 갖는 화합물은 표 1에 열거된다. 엘라기탄닌과 높은 유사성 점수를 갖는 다른 화합물은 본 개시내용의 범위 내이다.

표 1: 엘라기탄닌 및 엘라기탄닌과 높은 유사성 점수를 갖는 화합물

특정 측면에서, 화합물은 케불린산 또는 케불린산 (하기 화학식 I)과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물이다. 예시적인 케불린산과 높은 유사성 점수를 갖는 화합물은 표 2에 열거된다.

화학식 I (케불린산):

표 2: 케불린산과 높은 유사성 점수를 갖는 화합물.

특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 1 내지 5개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 3개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산이다. 특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 1 내지 3개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 2개의 O-(C₁-C₅알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산이다.

특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 5개의 히드록시 기로 치환된 벤젠이다. 특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 3개의 히드록시 기로 치환된 벤젠이다. 특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0임), 및 1 내지 3개의 히드록시 기로 치환된 벤젠이다.

특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 갈산, 바닐산, 클로로겐산, 카페인산, 시링산, 쿠마르산, 퀘르세틴, 엠블리카닌 A, 엠블리카닌 B, 푸니글루코닌, 페둔쿨라긴, 푸니카폴린, 필라넴블린, 카엠프페롤, 엘라그산, 케불린산, 케불라그산, 푸니칼라긴, 또는 상기 중 임의의 것의 대사물이다. 특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 아스코르브산 또는 시트르산이다.

특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 갈산, 바닐산, 클로로겐산, 카페인산, 시링산, 쿠마르산, 퀘르세틴, 비타민 C, 또는 상기 중 임의의 것의 대사물이다.

특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 갈산 또는 갈산과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물이다.

특정 측면에서, 조성물 내의 활성제는 갈산이다. 활성제는 엘라기탄닌이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 활성제는 엠블리카닌 A, 엠블리카닌 B, 푸니글루코닌, 페둔쿨라긴, 및/또는 케불린산이거나 또는 이를 포함할 수 있다.

특정 실시양태에 따르면, 조성물은 엠블리카 추출물의 구성성분인 1종 이상의 화합물로 강화된 엠블리카 추출물을 포함할 수 있다. 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분의 조합물은 정제된, 예를 들어, 적어도 80% 정제된, 적어도 85% 정제된, 적어도 90% 정제된, 적어도 95% 정제된, 적어도 98% 정제된, 적어도 99% 정제된, 적어도 99.9% 정제된, 적어도 99.99% 정제된, 또는 적어도 99.999% 정제된 것일 수 있다.

특정 측면에서, 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물의 유효량, 임의로 조성물의 활성제의 유효량은 1 내지 100 mg, 예컨대 1 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 또는 100 mg의 엠블리카 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물이다.

특정 측면에서, 푸쿠스 추출물은 푸쿠스 베시쿨로수스, 푸쿠스 세라투스, 푸쿠스, 스피랄리스, 또는 푸쿠스 구이리이로부터 유래된다. 특정 측면에서, 푸쿠스 추출물은 푸쿠스 베시쿨로수스로부터 유래된다. 이러한 추출물은 목적에 따라 조류의 임의의 부분으로부터 유래될 수 있다. 이러한 추출물을 제조하는데 있어서, 푸쿠스 베시쿨로수스, 푸쿠스 세라투스, 푸쿠스, 스피랄리스, 또는 푸쿠스 구이리이는 분말화된 형태로 제공되고, 관련 기술분야에 공지된 화학적 용매, 예컨대 수성 에틸 아세테이트 에탄올, 및 메탄올 (그러나 이에 제한되지 않음)을 사용하여 추출될 수 있다. 본원에 개시된 다른 용매 또는 부형제가 사용될 수 있다. 특정 예시적인 실시양태에서, 화학적 용매는 메탄올일 수 있다.

특정 측면에서, 푸쿠스 추출물의 유효량은 1 내지 100 mg의 추출물, 예컨대 1 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 또는 100 mg의 푸쿠스 추출물이다.

특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 탄닌의 파괴 생성물이다. 특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 엘라기탄닌이다. 특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 푸코이단이다.

특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 1 내지 5개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 3개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산이다. 특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 1 내지 3개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 2개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산이다.

특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 5개의 히드록시 기로 치환된 벤젠이다. 특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 3개의 히드록시 기로 치환된 벤젠이다. 특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0임), 및 1 내지 3개의 히드록시 기로 치환된 벤젠이다.

특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 갈산, 바닐산, 클로로겐산, 카페인산, 시링산, 쿠마르산, 또는 상기 중 임의의 것의 대사물이다.

특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 갈산이다.

특정 측면에서, 조성물 내의 활성제는 갈산 또는 갈산과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물이다. 특정 측면에서, 조성물 내의 활성제는 케불린산 또는 케불린산과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물이다 (예를 들어, 상기 표 2를 참조한다). 활성제는 엘라기탄닌 또는 엘라기탄닌과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물이거나 또는 이를 포함할 수 있다 (예를 들어, 상기 표 1을 참조한다). 활성제는 푸코이단 또는 푸코이단과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물이거나 또는 이를 포함할 수 있다.

특정 실시양태에 따르면, 조성물은 푸쿠스 추출물의 구성성분인 1종 이상의 화합물로 강화된 푸쿠스 추출물을 포함할 수 있다. 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분의 조합물은 정제된, 예를 들어, 적어도 80% 정제된, 적어도 85% 정제된, 적어도 90% 정제된, 적어도 95% 정제된, 적어도 98% 정제된, 적어도 99% 정제된, 적어도 99.9% 정제된, 적어도 99.99% 정제된, 또는 적어도 99.999% 정제된 것일 수 있다.

특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물의 유효량, 임의로 조성물의 활성제의 유효량은 1 내지 100 mg, 예컨대 1 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 또는 100 mg의 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물이다.

특정 측면에서, 케불라 추출물은 테르미닐리아 케불라, 테르미날리아 아르보레아, 또는 룸니체라 라세모스로부터 유래된다. 특정 측면에서, 케불라 추출물은 테르미브닐리아 케불라로부터 유래된다. 이러한 추출물은 목적에 따라 식물의 임의의 부분으로부터 유래될 수 있다. 이러한 추출물을 제조하는데 있어서, 테르미닐리아 케불라, 테르미날리아 아르보레아, 또는 룸니체라 라세모스는 분말화된 형태로 제공되고, 관련 기술분야에 공지된 화학적 용매, 예컨대 수성 에틸 아세테이트 에탄올, 및 메탄올 (그러나 이에 제한되지 않음)을 사용하여 추출될 수 있다. 본원에 개시된 다른 용매 또는 부형제가 사용될 수 있다. 특정 예시적인 실시양태에서, 화학적 용매는 메탄올일 수 있다.

특정 측면에서, 케불라 추출물의 유효량은 1 내지 100 mg의 추출물, 예컨대 1 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 또는 100 mg의 케불라 추출물이다.

특정 측면에서, 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 탄닌의 파괴 생성물이다. 특정 측면에서, 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 엘라기탄닌이다. 특정 측면에서, 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 케불린산이다.

특정 측면에서, 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 1 내지 5개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 3개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산이다. 특정 측면에서, 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 1 내지 3개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 2개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산이다.

특정 측면에서, 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 5개의 히드록시 기로 치환된 벤젠이다. 특정 측면에서, 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 3개의 히드록시 기로 치환된 벤젠이다. 특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0임), 및 1 내지 3개의 히드록시 기로 치환된 벤젠이다.

특정 측면에서, 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 케불린산, 엘라그산, 갈산, 탄닌산, 푸니칼라긴, 케불라그산, 또는 상기 중 임의의 것의 대사물이다.

특정 측면에서, 푸쿠스 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물은 케불린산이다.

특정 측면에서, 조성물 내의 활성제는 케불린산 또는 케불린산과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물이다 (예를 들어, 상기 표 2를 참조한다). 활성제는 엘라기탄닌 또는 엘라기탄닌과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물이거나 또는 이를 포함할 수 있다 (예를 들어, 상기 표 1을 참조한다).

특정 실시양태에 따르면, 조성물은 케불라 추출물의 구성성분인 1종 이상의 화합물로 강화된 케불라 추출물을 포함할 수 있다. 케불라 추출물의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분의 조합물은 정제된, 예를 들어, 적어도 80% 정제된, 적어도 85% 정제된, 적어도 90% 정제된, 적어도 95% 정제된, 적어도 98% 정제된, 적어도 99% 정제된, 적어도 99.9% 정제된, 적어도 99.99% 정제된, 또는 적어도 99.999% 정제된 것일 수 있다.

특정 측면에서, 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물의 유효량, 임의로 조성물의 활성제의 유효량은 1 내지 100 mg, 예컨대 1 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 또는 100 mg의 케불라 추출물로부터 유래된, 그로 구성된, 또는 그로부터 정제된 화합물이다.

방법, 및 상기의 임의의 측면은 엠블리카 추출물 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분, 푸쿠스 추출물 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분의 유효량, 및 케불라 추출물 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분의 유효량 중 2종 이상의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에 따르면, 엠블리카 추출물 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분, 푸쿠스 추출물 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분, 및 케불라 추출물 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분 중 2종 이상은 질환 또는 상태의 치료에 있어서 상승작용적 효과를 제공할 수 있다.

본원에 개시된 조성물은 엠블리카 추출물 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분, 푸쿠스 추출물 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분, 케불라 추출물 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분, BAMLET 10, BAMLET 50, 페룰산, 퀘르세틴, 우롤리틴 A, 프테로스틸벤, 아카데신, 엠벨린, EGCG, 에리오시트린, 갈산, 곰신 A, 루테인, 루테올린, NAD, 루틴, 제아크산틴, 및 멜라토닌 중 1종 이상을 포함하거나 또는 이로 강화될 수 있다.

방법, 및 상기의 임의의 측면은 i) 치료를 필요로 하는 대상체를 확인하는 단계; 및 (ii) 본 개시내용의 화합물 또는 본 개시내용의 화합물을 포함하는 제약 조성물을 제공하는 단계 중 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.

임의의 상기 실시양태, 및 상기의 임의의 측면에서, 용어 "예방함"이 사용되는 경우 상기 용어는 적어도 부분적 억제, 예를 들어 10% 억제, 20% 억제, 30% 억제, 40% 억제, 50% 억제, 60% 억제, 70% 억제, 80% 억제, 90% 억제, 95% 억제 또는 95% 초과의 억제를 지칭할 수 있다.

임의의 상기 실시양태, 및 상기의 임의의 측면에서, 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태는 단독으로 또는 제약 조성물의 일부로서 투여될 수 있다. 제약 조성물은 화합물의 용액을 제약상 적합한 담체와 배합함으로써 제제화될 수 있다. 화합물의 용액은 1 내지 1,000 mg의 화합물, 예를 들어, 10 내지 600 mg, 20 내지 500 mg, 30 내지 200 mg, 50 내지 100 mg, 또는 1 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg, 800 mg, 900 mg, 또는 1,000 mg의 화합물을 포함할 수 있다.

화합물 및 제약상 적합한 담체는 1:5 내지 5:1의 비로 배합될 수 있다. 제약 조성물은 1 내지 1,000 mg/ml의 화합물, 예를 들어, 10 내지 600 mg/ml, 20 내지 500 mg/ml, 30 내지 200 mg/ml, 50 내지 100 mg/ml, 또는 1 mg/ml, 5 mg/ml, 10 mg/ml, 20 mg/ml, 30 mg/ml, 40 mg/ml, 50 mg/ml, 60 mg/ml, 70 mg/ml, 80 mg/ml, 90 mg/ml, 100 mg/ml, 200 mg/ml, 300 mg/ml, 400 mg/ml, 500 mg/ml, 600 mg/ml, 700 mg/ml, 800 mg/ml, 900 mg/ml, 또는 1,000 mg/ml의 화합물의 농도를 갖도록 제제화될 수 있다.

제약 조성물은 0.01% 내지 2%의 화합물, 예를 들어, 0.01%, 0.02%, 0.05%, 0.1%, 0.2%, 0.5%, 1%, 또는 2%의 화합물의 농도를 갖도록 제제화될 수 있다.

제약 조성물은 2.5 내지 50 μM의 화합물, 예를 들어, 2.5 μM, 5 μM, 10 μM, 25 μM, 또는 50 μM의 화합물의 농도를 갖도록 제제화될 수 있다. 제약 조성물은 50 내지 500 μM의 화합물, 예를 들어, 50 μM, 100 μM, 200 μM, 300 μM, 400 μM, 또는 500 μM의 화합물의 농도를 갖도록 제제화될 수 있다.

제약 조성물은 2.5 내지 50 μM의 화합물, 예를 들어, 2.5 μg/L, 5 μg/L, 10 μg/L, 25 μg/L, 또는 50 μg/L의 화합물의 농도를 갖도록 제제화될 수 있다. 제약 조성물은 50 내지 500 μg/L의 화합물, 예를 들어, 50 μg/L, 100 μg/L, 200 μg/L, 300 μg/L, 400 μg/L, 또는 500 μg/L의 화합물의 농도를 갖도록 제제화될 수 있다.

임의의 상기 실시양태, 및 상기의 임의의 측면에서, 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태는 단독으로 또는 화장품 조성물의 일부로서 투여될 수 있다. 화장품 조성물은 화합물의 용액을 화장품상 적합한 담체와 배합함으로써 제제화될 수 있다. 화합물의 용액은 1 내지 1,000 mg의 화합물, 예를 들어, 10 내지 600 mg, 20 내지 500 mg, 30 내지 200 mg, 50 내지 100 mg, 또는 1 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg, 800 mg, 900 mg, 또는 1,000 mg의 화합물을 포함할 수 있다.

화합물 및 화장품상 적합한 담체는 1:5 내지 5:1의 비로 배합될 수 있다. 화장품 조성물은 1 내지 1,000 mg/ml의 화합물, 예를 들어, 10 내지 600 mg/ml, 20 내지 500 mg/ml, 30 내지 200 mg/ml, 50 내지 100 mg/ml, 또는 1 mg/ml, 5 mg/ml, 10 mg/ml, 20 mg/ml, 30 mg/ml, 40 mg/ml, 50 mg/ml, 60 mg/ml, 70 mg/ml, 80 mg/ml, 90 mg/ml, 100 mg/ml, 200 mg/ml, 300 mg/ml, 400 mg/ml, 500 mg/ml, 600 mg/ml, 700 mg/ml, 800 mg/ml, 900 mg/ml, 또는 1,000 mg/ml의 화합물의 농도를 갖도록 제제화될 수 있다.

임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 본원에 기재된 화합물은 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 수화물의 형태이다. 이러한 화합물은 제약상 허용되는 염, 예를 들어, 산 부가 염, 및 그의 복합체로서 제제화될 수 있다. 이러한 염의 제제는 그의 생리학적 효과를 방지하지 않으면서 작용제의 물리적 특징을 변경시킴으로써 약리학적 사용을 용이하게 할 수 있다. 유용한 물리적 특성의 변경의 예는 가용성을 증가시켜 화합물의 보다 높은 농도를 투여하는 것을 용이하게 하는 것을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.

임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 본원에 기재된 화합물 또는 추출물은 국부적으로, 정맥내로, 복강내로, 비경구로, 근육내로, 경구로 또는 호흡관을 통해 투여된다. 임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 화합물 또는 추출물은 국부적으로 투여된다.

본원에 기재된 화합물 또는 추출물은 국소적으로, 예를 들어, 질환 또는 상태의 국소 부위에서 투여될 수 있다. 본원에 기재된 화합물 또는 추출물은 예를 들어, 질환 또는 상태의 표적 부위에의 국소 투여를 위해 제제화될 수 있다. 본원에 기재된 화합물 또는 추출물은 전신적으로 투여될 수 있다. 전신 투여는 예를 들어, 국부, 정맥내, 복강내, 비경구, 근육내, 경구, 또는 호흡관을 통한 것일 수 있다. 본원에 기재된 화합물 또는 추출물은 전신 투여를 위해 제제화될 수 있다.

임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 대상체 동물은 척추동물이다. 임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 대상체는 포유동물이다. 임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 대상체는 인간이다. 임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 대상체는 비-인간 포유동물, 예를 들어, 설치류, 예를 들어, 마우스이다.

일부 측면에서, 대상체는 여성일 수 있다. 일부 측면에서, 대상체는 남성일 수 있다. 대상체는 하기 민족성/인종 중 하나로서 특징규명될 수 있다: 아시아인, 흑인 또는 아프리카 미국인, 히스패닉계 또는 라틴계, 백인, 또는 다인종. 대상체는 I 내지 IV의 피츠파트릭 스케일 (Fitzpatrick Scale) 점수를 가질 수 있다. 대상체는 1세 미만, 또는 1 내지 5세, 5 내지 10세, 10 내지 20세, 20 내지 30세, 30 내지 40세, 40 내지 50세, 50 내지 60세, 또는 60세 초과의 연령일 수 있다.

임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 화합물 또는 추출물은 유효량으로 투여된다. 적합한 유효량은 본원에서 보다 상세하게 기재된다. 임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 화합물 또는 추출물은 치료 유효량으로 투여된다. 임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 투여 단계는 치료의 과정에 따라 화합물 또는 추출물의 단일 용량을 투여하는 것을 포함할 수 있다 (여기서 용량은 유효량을 함유할 수 있다). 임의의 방법, 및 상기의 임의의 측면에서, 투여 단계는 치료의 과정에 따라 화합물 또는 추출물의 1개 초과의 용량을 투여하는 것을 포함할 수 있다 (여기서 1개 이상의 용량은 유효량을 함유할 수 있다). 치료의 과정 동안 투여되는 각각의 용량 내의 화합물 또는 추출물의 양은 동일할 것이 요구되지 않는다. 예를 들어, 투여 단계는 치료의 과정 동안 적어도 1개의 로딩 용량 및 적어도 1개의 유지 용량을 투여하는 것을 포함할 수 있다. 투여는 본원에서 보다 상세하게 기재된다.

화합물은 예방적 치료로서 투여될 수 있다. 화합물은 화장품 또는 치료적 치료로서 투여될 수 있다.

일부 측면에서, 대상체에서 치료되는 적어도 하나의 주름은 미세한 라인, 표면 라인, 또는 깊은 고랑을 포함할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체에서 주름의 출현, 예를 들어, 중증도를 감소시키는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체에서 주름의 폭을 감소시키는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체에서 주름의 길이를 감소시키는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체에서 주름의 깊이를 감소시키는데 충분할 수 있다.

일부 측면에서, 대상체에서 치료되는 탈모는 전체 탈모, 부분 탈모, 남성/여성 패턴 대머리, 뒤로 올라가는 머리선, 모발 가늘어짐, 또는 성장 상에서의 모낭의 양의 감소를 포함할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체에서 모발 부피 또는 길이의 출현을 증가시키는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체에서 성장 상에서의 모낭의 양을 증가시키는데 충분할 수 있다. 양 및/또는 빈도는 대상체에서 휴면 모낭의 모발 성장을 유도하는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 탈모의 출현을 감소시키는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체에서 전이 또는 휴기기에서의 모낭의 양을 감소시키는데 충분할 수 있다. 양 및/또는 빈도는 대상체에서 휴면 모낭의 양을 감소시키는데 충분할 수 있다.

본원에 개시된 화합물은 다양한 적용, 예를 들어, 화장품 및/또는 치료적 적용에 사용될 수 있다. 화합물은 의도되는 용도, 예를 들어, 화장품 또는 치료적 적용을 위한 유효량으로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 목적하는 화장품 효과를 갖는데 충분한 화합물의 농도 또는 양, 예를 들어, 유효량을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 목적하는 치료적 효과를 갖는데 충분한 화합물의 농도 또는 양, 예를 들어, 유효량을 포함할 수 있다.

투여의 양 및/또는 빈도는 미토콘드리아 생물발생을 유도하는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 미토콘드리아 기능장애, 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상, 미토콘드리아 기능장애와 연관된 노화-연관 만성 상태 또는 그의 증상, 및/또는 에너지 수준 또는 활력의 감소 중 적어도 하나의 진행을 치료하거나, 억제하거나, 예방하는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체 또는 임상 등급결정자에 의해 등급화된 바와 같은, 정성적 스케일로 파라미터의 점수를 변형시키는데 충분할 수 있다. 정성적 스케일은 하기 카테고리를 포함할 수 있다: 없음 (가장 좋은 가능한 상태), 경도, 중등도, 중증 (가장 나쁜 가능한 상태). 정성적 스케일은 인지된 또는 실제 에너지 수준 및/또는 활력을 지칭할 수 있다.

투여의 양 및/또는 빈도는 대상체에서 흉터형성 (예를 들어, 일광화상, 욕창, 상처, 염증성 병변, 또는 화상과 관련된 흉터), 피부 두꺼워짐 (예를 들어 켈로이드 흉터형성), 균열, 갈라짐, 티눈, 피지 분비, 피부 두꺼워짐, 주름, 주근깨, 쥐젖, 다크 패치, 임신선, 거미 정맥, 정맥류성 정맥, 검버섯, 또는 구멍 출현 중 적어도 하나의 진행을 치료하거나, 억제하거나, 예방하는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 탈모의 진행을 치료하거나, 억제하거나, 예방하는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체의 피부와 연관된 얼룩덜룩함 또는 변색 (예를 들어, 백반증 또는 염증 후 과다색소침착)의 진행을 감소시키거나, 억제하거나, 예방하는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체의 피부와 연관된 주근깨의 진행을 감소시키거나, 억제하거나, 예방하는데 충분할 수 있다. 투여의 양 및/또는 빈도는 대상체의 피부와 연관된 단단함, 수화, 탄성, 광채, 톤 균일함, 시각적 부드러움, 또는 촉각적 부드러움을 촉진시키는데 충분할 수 있다.

투여의 양 및/또는 빈도는 예를 들어, 하기 의학적 정의에 따라, 대상체 또는 임상 등급결정자에 의해 등급화된 바와 같이, 그리피스(Griffiths) 10-포인트 스케일로 파라미터의 점수를 변형시키거나 감소시키는데 충분할 수 있다 (피부 상태를 정확하게 기재하는데 필요한 바와 같이 할당된 절반-포인트 점수를 가짐):

0 = 없음 (가장 좋은 가능한 상태)

1 내지 3 = 경도

4 내지 6 = 중등도

7 내지 9 = 중증 (가장 나쁜 가능한 상태).

예시적인 파라미터는 0 = 광택 없음, 평평한/무광의 외관 및 9 = 강한 광택있는/기름진 외관을 갖는 기름진 외관 (광택 및 느낌); 0 = 작은, 밀집한, 간신히 감지가능한 구멍 및 9 = 큰, 뚜렷한 구멍을 갖는 구멍 외관; 0 = 빛나는, 발광의 외관 및 9 = 윤기 없는/무광의 및 또는 누런 외관을 갖는 광채; 0 = 얼룩덜룩함 없음/투명한 및 9 = 얼룩덜룩한 피부 외관을 갖는 얼룩덜룩함; 0 = 균등한, 건강한 피부 색상 및 9 = 균등하지 않은, 변색된 외관을 갖는 피부 톤 (색상) 균등함; 0 = 부드러운, 균등하게 보이는 피부 질감 및 9 = 거친, 균등하지 않게 보이는 피부 질감을 갖는 시각적 부드러움; 및 0 = 부드러운, 균등하게 느껴지는 피부 질감 및 9 = 거친, 균등하지 않게 느껴지는 피부 질감을 갖는 촉각적 부드러움을 포함한다. 점수의 변형 또는 감소는 9 포인트, 8 포인트, 7 포인트, 6 포인트, 5 포인트, 4 포인트, 3 포인트, 2 포인트, 또는 1 포인트 만큼일 수 있다.

일부 측면에서, 화합물의 유효량을 투여하는 것은 대상체에서 피부의 피부층의 피부 완전성에 대한 손상을 제한하거나 억제할 수 있다. 화합물의 유효량을 투여하는 것은 대상체에서 피부의 피부층의 목적하지 않는 지형적 변화를 예방할 수 있다. 화합물의 유효량을 투여하는 것은 대상체에서 피부의 피부층과 연관된 제1 지형적, 구조적, 또는 매트릭스 프로파일로부터 제2 지형적, 구조적, 또는 매트릭스 프로파일로의 진행을 감속시킬 수 있다. 일부 측면에서, 피부층은 대상체의 표피 (예를 들어 각질층, 투명층, 과립층, 유극층, 또는 기저층), 기저막, 진피-표피 연접부, 진피 (예를 들어 유두상 진피, 망상 진피, 또는 진피를 포함하는 임의의 혈관구조), 또는 피하조직 (예를 들어 피하 지방층)과 관련될 수 있다.

일부 측면에서, 화합물의 유효량을 투여하는 것은 미토콘드리아 기능장애, 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상, 미토콘드리아 기능장애와 연관된 노화-연관 만성 상태 또는 그의 증상, 및/또는 에너지 수준 또는 활력의 감소 중 적어도 하나를 제한하거나 억제할 수 있다. 예를 들어, 화합물의 유효량은 미토콘드리아 기능장애, 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상, 미토콘드리아 기능장애와 연관된 노화-연관 만성 상태 또는 그의 증상, 및/또는 에너지 수준 또는 활력의 감소 중 적어도 하나의 진행을 감속시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 화합물의 유효량을 투여하는 것은 미토콘드리아 생물발생, 미토콘드리아 기능, 및/또는 에너지 수준 또는 활력의 증가를 촉진시킬 수 있다.

일부 측면에서, 대상체의 피부는 실질적으로 질환에 걸리지 않을 수 있다. 대상체의 피부는 실질적으로 손상되지 않을 수 있다. 대상체의 피부는 염증성 병변이 실질적으로 없을 수 있다. 대상체의 피부는 경도 내지 중증 균열, 갈라짐, 또는 주름이 실질적으로 없을 수 있다. 대상체의 피부는 경도 내지 중증 흉터 (예를 들어, 일광화상, 욕창, 상처, 염증성 병변, 또는 화상과 관련된 흉터) 또는 임신선이 실질적으로 없을 수 있다. 대상체의 피부는 경도 내지 중증 주근깨, 다크 패치, 또는 검버섯이 실질적으로 없을 수 있다. 대상체의 피부는 경도 내지 중증 티눈, 피부 두꺼워짐, 쥐젖, 또는 켈로이드 흉터가 실질적으로 없을 수 있다. 대상체의 피부는 정맥류성 정맥 또는 거미 정맥의 출현이 실질적으로 없을 수 있다. 대상체의 피부는 구멍의 경도 내지 중증 출현이 실질적으로 없을 수 있다. 대상체의 피부는 경도 내지 중증 세포염이 실질적으로 없을 수 있다.

일부 측면에서, 화합물은 대상체에서 질환 또는 상태의 발병 전에 투여될 수 있다. 화합물은 대상체에서 질환 또는 상태의 발생 동안 투여될 수 있다. 화합물은 대상체에서 질환 또는 상태의 적어도 부분적 감소에 후속하여 투여될 수 있다. 화합물은 미토콘드리아 기능장애 또는 노화-연관 상태, 예를 들어, 노화, 조기 노화, 습관성 수면 상태, 습관성 수면 위치, 습관성 얼굴 표현, 체중 감소, 자외선 (UV) 광 노출, 화학물질 또는 치료제로의 치료, 예를 들어, 화학요법 및/또는 방사선 요법, 흡연, 탈수, 또는 침지의 촉발제 또는 경고 징후에 반응하여 투여될 수 있다. 대상체는 예를 들어, 연령, 인종, 피부 유형, 눈 색상, 습관, 또는 유전에 기반하여 미토콘드리아 기능장애 상태에 잘 걸릴 수 있다. 방법은 대상체가 치료를 필요로 하는지 여부를 결정하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 화합물을 포함하는 조성물은 보습제, 방취제, 향, 착색제, 살충제, 세정제, 또는 UV-차단제를 추가적으로 포함할 수 있다. 조성물은 미소구 또는 마이크로캡슐을 포함할 수 있다.

조성물은 즉시 방출 또는 연장된 방출을 위해 제제화될 수 있다. 조성물은 제어된 또는 지속된 방출을 위해 제제화될 수 있다. 예를 들어, 조성물은 6시간, 12시간, 18시간, 24시간, 36시간, 48시간, 또는 그 초과의 기간에 걸쳐 지속된 방출을 위해 제제화될 수 있다.

대상체는 정상적인 미토콘드리아 기능을 갖는 것으로서 특징규명될 수 있다. 대상체는 감소된 미토콘드리아 기능을 갖는 것으로서 특징규명될 수 있다. 대상체는 조기 노화 또는 조기 노화의 증상을 경험하는 것으로서 특징규명될 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 피부에서의 염증성 표현형, 미토콘드리아 단백질 발현의 변화, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 발현, 미토콘드리아 산화적 인산화 복합체의 감소된 안정성, 피부의 콜라겐 함량의 감소, 증가된 표피 두께, 증가된 표피 과다형성, 극세포증, 과다각화증, NF-κB, COX-2, INF-β1, CCL5, MMP1, MMP2, MMP9, MMP13, IGF1R, VEGF, 및 MRPS5로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종의 유전자의 증가된 발현, TIMP1, KLOTHO, COL1A1, MTCO2, TFAM, 및 VDAC로 이루어진 군으로부터 선택되는 유전자 중 적어도 1종의 감소된 발현, 및 피부 내의 증가된 염증성 침윤물 중 하나 이상을 특징으로 할 수 있다. 대상체는 PGC-1a, TFAM, NRF-1, 및 COXII로부터 선택되는 적어도 1종의 단백질의 감소된 발현을 갖는 것으로서 특징규명될 수 있다.

일부 측면에서, 방법은 화합물의 제2 양을 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 제2 양은 동일한 제제의 제2 용량으로서 투여될 수 있다. 제2 양은 또 다른 제제에서 투여될 수 있다. 제2 양은 동일한 투여의 경로에 의한 또 다른 제제, 예를 들어, 샴푸, 컨디셔너, 스프레이, 크림, 겔, 바디 워시, 비누, 또는 로션으로의 국부 용액 또는 오일에서 투여될 수 있다. 제2 양은 또 다른 투여의 경로에 의해 투여될 수 있고, 예를 들어, 각각의 양은 국부적으로, 비경구로, 또는 장관내로 독립적으로 투여될 수 있다.

일부 측면에서, 방법은 제2 화합물을 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 제2 화합물은 동일한 추출물의 구성성분인 화합물일 수 있다. 제2 화합물은 또 다른 추출물의 구성성분인 화합물일 수 있다. 제2 화합물은 제1 화합물과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물일 수 있다. 제2 화합물은 동일한 제제에서 투여될 수 있다. 제2 화합물은 또 다른 제제에서 투여될 수 있다.

화합물은 조합 요법의 일부로서 투여될 수 있다. 방법은 화합물과 조합으로 제2 치료를 투여하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 화합물은 제2 치료를 개시하기 전의 시간의 기간 동안 투여될 수 있다. 화합물은 제2 치료와 공동으로 투여될 수 있다. 화합물은 제2 치료를 중단하는 것에 후속하는 시간의 기간 동안 투여될 수 있다. 제2 치료는 대체의 투여의 방식을 통해 투여될 수 있다. 제2 치료는 화장품 및/또는 치료적 치료일 수 있다.

화합물은 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하는 것으로 승인되거나 또는 이를 치료하는데 통상적으로 사용되는 제2 작용제, 예를 들어, 화장품 또는 치료제와 조합으로 투여될 수 있다.

화합물은 카페인, B 비타민 (예를 들어, B1, B2, B3, B5, B6, B8, B9 및/또는 B12), 비타민 C, 철, 마그네슘, 및/또는 아연과 조합으로 투여될 수 있다.

화합물은 UV-차단제, 보습제, 선스크린, 주름 크림, 레티노이드, 알파-히드록시산, 베타-히드록시산, 스쿠알렌, 항산화제, 트레티노인, 글리코스아미노글리칸 (GAG), 락트산, 말산, 시트르산, 타르타르산, 히드로퀴논, 코지산, L-아스코르브산, 감초 추출물, N-아세틸글루코스아민, 니아신아미드, 스쿠알렌, 대두, 진피 충전제 또는 주사, 예를 들어 히알루론산 또는 칼슘 히드록실아파타이트, 보툴리눔 독소, 레이저 재표면화 절차, 초음파 요법, 화학적 박피, 예를 들어 글리콜산 박피, 트리클로로아세트산 또는 살리실산, 또는 박피술 절차와 조합으로 투여될 수 있다.

화합물은 항산화제와 조합으로 투여될 수 있다. 예시적인 항산화제는 CoQ10, 비타민 C, 비타민 E, 카로테노이드, 예를 들어, 베타-카로텐, 미네랄, 예를 들어, 셀레늄 및 망간, 글루타티온, 리포산, 플라보노이드, 베타플라비노이드, 페놀, 폴리페놀, 피토에스트로겐, 미토퀴놀 메실레이트, 및 유비퀴논을 포함한다.

푸쿠스 화합물은 엠블리카 추출물 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 조합으로 투여될 수 있다. 푸쿠스 화합물은 케불라 추출물 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 조합으로 투여될 수 있다. 엠블리카 화합물은 푸쿠스 추출물 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 함께 투여될 수 있다. 엠블리카 화합물은 케불라 추출물 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 함께 투여될 수 있다. 특정 실시양태에 따르면, 엠블리카 화합물, 푸쿠스 화합물, 및 케불라 화합물 중 2종 이상의 조합은 질환 또는 상태의 치료에 있어서 상승작용적 효과를 제공할 수 있다.

하나 이상의 실시양태에 따르면, 화합물의 유효량은 대상체의 얼굴에 투여될 수 있다. 하나 이상의 실시양태에 따르면, 화합물은 대상체의 두피에 투여될 수 있다. 하나 이상의 실시양태에 따르면, 화합물은 대상체의 몸에 투여될 수 있다. 예를 들어, 화합물은 대상체의 이마, 눈 영역, 목, 두피, 머리, 어깨, 팔, 손, 다리, 겨드랑이, 몸통, 가슴, 발, 무릎, 발목, 등, 엉덩이, 또는 생식기의 보다 많은 것 중 하나 이상에 적용될 수 있다.

투여랑 및 투여

방법에 따르면, 본 개시내용의 화합물은 유효량으로 대상체에게 투여된다 (또는 대상체의 세포와 접촉된다).

특정 실시양태에서, 치료적으로 본 개시내용의 화합물의 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 50 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 40 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 30 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 20 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 10 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 8 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 6 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 4 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 3 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 2 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 1 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 0.8 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 0.6 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 유효량은 약 0.05 mg/kg/일 내지 약 0.4 mg/kg/일의 범위이다. 특정 실시양태에서, 상기 기재된 일당 양은 치료의 과정에 따라 투여되고, 일당 단일 용량으로 또는 1개 초과의 용량으로 투여될 수 있다. 상기 기재된 일당 양은 치료의 과정에 따라 투여되고, 매일 1개의 용량 (q.d.) 또는 2개의 용량 (b.i.d.)으로 투여될 수 있고, 여기서 각각의 용량 내의 본 개시내용의 화합물의 양은 동일할 필요는 없다.

특정 실시양태에서, 각각의 용량은 치료의 과정에 따라 투여된다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "용량"은 치료의 과정에 따라 주어진 시점에서 투여되는 본 개시내용의 화합물의 양을 지칭한다. 예를 들어, 본 개시내용의 화합물에 대한 치료의 과정이 7일 동안 b.i.d (2회/일당 투여)인 경우, 제1일 내지 제7일 각각에 대한 2개의 투여는 각각 본 개시내용의 화합물을 용량을 투여하는 것을 포함할 것이다 (매일 2개의 용량에 대해). 특정 실시양태에서, 용량은 치료의 과정에 따라 q.d. (1회/일당 투여) 투여된다. 특정 실시양태에서, 용량은 치료의 과정에 따라 b.i.d. 투여된다. 특정 실시양태에서, 용량은 치료의 과정에 따라 t.i.d. (3회/일당 투여) 투여된다.

2개 이상의 용량이 치료의 과정에 따라 주어진 일에 투여되는 경우, 치료의 과정에 따라 투여되는 각각의 용량은 본 개시내용의 화합물의 동일한 양을 함유할 수 있거나, 또는 치료의 과정에 따라 투여되는 용량 중 1개 이상은 치료의 과정에 따라 투여되는 또 다른 용량과 비교하여 더 많거나 또는 더 적은 본 개시내용의 화합물의 양을 함유할 수 있다. 예를 들어, 본 개시내용의 화합물에 대한 치료의 과정이 7일 동안 b.i.d인 경우, 제1일에 투여되는 제1 용량은 제1 양 (즉, 2 mg/kg)을 함유할 수 있고, 제1일에 투여되는 제2 용량은 제2 양 (즉, 0.5 mg/kg)을 함유할 수 있다. 또 다른 예로서, 본 개시내용의 화합물에 대한 치료의 과정이 7일 동안 b.i.d인 경우, 제1일에 투여되는 제1 용량은 제1 양 (즉, 2 mg/kg)을 함유할 수 있고, 제1일에 투여되는 제2 용량은 제2 양 (즉, 0.5 mg/kg)을 함유할 수 있고, 제2일 내지 제4일 각각에 투여되는 2개의 용량은 제2 양을 함유할 수 있고, 제5일 내지 제7일 각각에 투여되는 2개의 용량은 제3 양 (즉, 1 mg/kg)을 함유할 수 있다.

용량은 하위-용량으로 추가로 나누어질 수 있다. 임의의 주어진 용량은 단일 단위 용량 형태 또는 1개 초과의 단위 용량 형태로 전달될 수 있다. 예를 들어, IV 투여에 의해 주어지는 경우 용량은 단일 IV 주입 (즉, 단일 5 mg/kg IV 주입)으로서 또는 번갈아 투여되는 2개 이상의 IV 주입 (즉, 2개의 2.5 mg/kg IV 주입)으로서 제공될 수 있다. 또한, 하위-용량은 예를 들어, 별개의 느슨하게 이격된 투여의 수, 예컨대 취입기로부터의 다수의 흡입, 눈 내로의 복수의 점안액의 적용에 의해, 또는 경구 투여를 위한 다수의 정제일 수 있다.

특정 실시양태에서, 치료의 과정 동안 본 개시내용의 화합물의 1개 초과의 용량이 투여된다. 따라서, 본원에 기재된 방법에서, 방법은 치료의 과정 동안 다수의 용량의 투여를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 치료의 과정은 수 개월 내지 수 년의 범위일 수 있다. 특정 실시양태에서, 치료의 과정은 2일 내지 1개월, 2일 내지 3주, 2일 내지 2주, 또는 2일 내지 1주의 범위일 수 있다. 특정 실시양태에서, 치료의 과정은 1년 내지 20년 또는 그 초과의 범위일 수 있다. 특정 실시양태에서, 용량은 치료의 과정 동안 일당 적어도 1회 (즉, 1 내지 3회) 전달된다. 특정 실시양태에서, 용량은 치료의 과정 동안 매일 투여되지 않는다 (예를 들어, 용량은 치료의 과정 동안 격일로, 3일마다, 매주, 또는 매월 일당 적어도 1회 투여된다). 더욱이, 각각의 용량 내의 본 개시내용의 화합물의 양은 상기 논의된 바와 같이 동일할 필요는 없다. 상기의 특정 실시양태에서, 1개 이상의 용량, 또는 모든 용량은 본 개시내용의 화합물의 유효량을 함유한다.

한 실시양태에서, 치료의 과정은 로딩 용량으로서 적어도 1개의 용량 및 유지 용량으로서 적어도 1개의 용량을 투여하는 것을 포함할 수 있고, 여기서 로딩 용량은 유지 용량과 비교하여 더 많은 (예컨대, 2 내지 10배 더 높은, 그러나 이에 제한되지 않음) 본 개시내용의 화합물의 양을 함유한다. 이 실시양태의 한 측면에서, 로딩 용량은 초기에 단일 투여 또는 1개 초과의 투여로서 투여되고, 이어서 치료의 나머지 과정을 통해 1개 이상의 유지 용량의 투여가 이어진다. 예를 들어, 10년 동안 매주 q.d.인 치료의 과정에 대해, 3 mg/kg의 로딩 용량이 치료의 과정의 제1주에 제1 용량으로서 투여될 수 있고, 이어서 치료의 과정의 나머지 동안 매주 0.5 mg/kg의 유지 용량이 투여될 수 있다. 더욱이, 로딩 용량은 치료의 과정 동안 투여되는 제1 용량이 아닌 용량으로서 주어질 수 있다. 예를 들어, 로딩 용량은 주에 제1 용량으로서 및 1개 이상의 추가적인 주 (예를 들어, 제10주 및 제20주)에 용량으로서 투여될 수 있다.

한 실시양태에서, 치료의 과정은 제1 조성물에서 제제화된 제1 용량을 투여하고, 제2 조성물에서 제제화된 적어도 1개의 제2 또는 후속 용량을 투여하는 것을 포함할 수 있다. 제1 조성물 및 제2 조성물은 동일한 제제일 수 있다. 제1 조성물 및 제2 조성물은 상이한 제제일 수 있다.

제약, 화장품, 및/또는 식이 조성물

본 개시내용의 화합물의 양, 예를 들어, 유효량을 포함하는 제약 조성물이 제공된다. 한 실시양태에서, 이러한 제약 조성물은 본 개시내용의 화합물의 치료 유효량을 함유한다. 또한, 다른 활성제는 이러한 제약 조성물에 포함될 수 있다. 포함되는 추가적인 활성제는 치료될 질환 또는 상태에 기반하여 선택될 수 있다.

개시된 제약 조성물은 단독으로 또는 추가적인 활성제와 조합으로, 제약상 허용되는 담체 및/또는 부형제와 조합으로 및/또는 화장품상 허용되는 담체 및/또는 부형제와 조합으로 본 개시내용의 1종 이상의 화합물을 포함할 수 있다. 이러한 제약 조성물은 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 의약의 제조에 사용될 수 있다. 본 개시내용의 화합물은 유리 형태 및 제약상 허용되는 형태, 예컨대 제약상 허용되는 염 둘 다에 유용하다.

제약상 허용되는 담체 및/또는 부형제 및/또는 화장품상 허용되는 담체 및/또는 부형제는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다. 담체 및/또는 부형제의 선택은 부분적으로 특정한 화합물(들)에 의해, 뿐만 아니라 화합물 조성물을 투여하는데 사용되는 특정한 방법에 의해 결정될 것이다. 따라서, 본 개시내용의 조성물의 폭넓게 다양한 적합한 제제가 있다. 하기 방법 및 부형제는 단지 예시적이며, 어떤 식으로도 제한적이지 않다. 적합한 담체 및 부형제는 용매, 예컨대 물, 알콜, 및 프로필렌 글리콜, 고체 흡수제 및 희석제, 표면 활성제, 현탁화제, 정제 결합제, 윤활제, 향미제, 및 착색제를 포함한다. 제약상 및/또는 화장품상 허용되는 담체는 중합체 및 중합체 매트릭스를 포함할 수 있다. 허용되는 담체의 예는 다른 것들 중에서도 카르복시메틸 셀룰로스, 결정질 셀룰로스, 글리세린, 아라비아 검, 락토스, 스테아르산마그네슘, 메틸 셀룰로스, 분말, 염수, 알긴산나트륨, 수크로스, 전분, 활석 및 물을 포함한다. 전형적으로, 허용되는 담체는 조성물 내의 활성제에 대해 화학적으로 불활성이고, 사용 조건 하에서 유해한 부작용 또는 독성을 갖지 않는다.

계면활성제, 예컨대, 예를 들어, 세정제는 또한 제제에 사용하는데 적합하다. 계면활성제의 구체적인 예는 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐 알콜, 비닐 아세테이트의 및 비닐피롤리돈의 공중합체, 폴리에틸렌 글리콜, 벤질 알콜, 만니톨, 글리세롤, 소르비톨 또는 소르비탄의 폴리옥시에틸렌화 에스테르; 레시틴 또는 나트륨 카르복시메틸셀룰로스; 또는 아크릴산 유도체, 예컨대 메타크릴레이트 및 기타, 음이온성 계면활성제, 예컨대 알칼리성 스테아레이트, 특히 스테아르산나트륨, 칼륨 또는 암모늄; 스테아르산칼슘 또는 트리에탄올아민 스테아레이트; 알킬 술페이트, 특히 나트륨 라우릴 술페이트 및 나트륨 세틸 술페이트; 나트륨 도데실벤젠술포네이트 또는 나트륨 디옥틸 술포숙시네이트; 또는 지방산, 특히 코코넛 오일로부터 유래된 것들, 양이온성 계면활성제, 예컨대 화학식 N+R'R"R"'R""Y- (여기서 R 라디칼은 동일하거나 상이한 임의로 히드록실화된 탄화수소 라디칼이고, Y-는 강산의 음이온, 예컨대 할라이드, 술페이트 및 술포네이트 음이온임)의 수용성 4급 암모늄 염; 세틸트리메틸암모늄 브로마이드는 사용될 수 있는 양이온성 계면활성제 중 하나임, 화학식 N+R'R"R"' (여기서 R 라디칼은 동일하거나 상이한 임의로 히드록실화된 탄화수소 라디칼임)의 아민 염; 옥타데실아민 히드로클로라이드는 사용될 수 있는 양이온성 계면활성제 중 하나임, 비-이온성 계면활성제, 예컨대 임의로 소르비탄의 폴리옥시에틸렌화 에스테르, 특히 폴리소르베이트(Polysorbate) 80, 또는 폴리옥시에틸렌화 알킬 에테르; 폴리에틸렌 글리콜 스테아레이트, 피마자유의 폴리옥시에틸렌화 유도체, 폴리글리세롤 에스테르, 폴리옥시에틸렌화 지방 알콜, 폴리옥시에틸렌화 지방산 또는 에틸렌 옥시드의 및 프로필렌 옥시드의 공중합체, 양쪽성 계면활성제, 예컨대 베타인의 치환된 라우릴 화합물을 포함한다.

예시적인 제약상 허용되는 담체 및/또는 부형제 및/또는 화장품상 허용되는 담체 및/또는 부형제는 물, 실리카, 글리세린, 디메티콘, 부틸렌 글리콜, 펜틸렌 글리콜, 에톡시디글리콜, 폴리아크릴레이트-13, 펜타펩티드-34 트리플루오로아세테이트, 폴리이소부텐, 리소레시틴, 균핵 검, 풀루란, 폴리소르베이트 20, 디에틸헥실 시린길리덴말로네이트, 카프릴릴 글리콜, 글리세릴 스테아레이트, PEG-100 스테아레이트, 세테아릴 알콜, 부티로스페르뭄 파르키이(butyrospermum parkii) (시어) 버터, 아세틸 테트라펩티드-2, 베타인, 멜라닌, 토코페릴 아세테이트, 토코페롤, 히드록시아세토페논, 카프릴산/카프르산 트리글리세리드, 바틸 알콜, C12-15 알킬 벤조에이트, 판테놀, 세테아레트-20, 크산탄 검, 에틸헥실글리세린, 디나트륨 EDTA, 프로판디올, 카프릴릴 글리콜, 소르브산칼륨, 소르브산, 및 페녹시에탄올을 포함한다. 본 개시내용의 화합물 및 본 개시내용에 기재된 바와 같은 이러한 화합물을 함유하는 제약 조성물은 개별적인 치료제로서 또는 추가적인 치료제와 조합으로, 제약과 함께 사용하기 위해 이용가능한 임의의 통상적인 방법에 의해 투여될 수 있다.

한 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 단독으로든 또는 제약 조성물의 일부로서든, 유효량으로 투여된다. 투여되는 유효량 및 투여량은 물론 공지된 인자, 예컨대 특정한 작용제의 약역학적 특징 및 그의 투여의 방식 및 경로, 수용자의 연령, 건강 및 중량; 질환 상태 또는 상태의 중증도 및 병기; 공동 치료의 종류; 치료의 빈도; 및 목적하는 효과에 따라 다양할 것이다.

투여되는 화합물의 총량은 또한 투여의 경로, 시기 및 빈도 뿐만 아니라 화합물의 투여에 동반될 수 있는 임의의 유해 부작용의 존재, 성질, 및 정도 및 목적하는 생리학적 효과에 의해 결정될 것이다. 다양한 상태 또는 질환 상태, 특히 만성 상태 또는 질환 상태는 다수의 투여를 수반하는 연장된 치료를 요구할 수 있음을 관련 기술분야의 통상의 기술자는 인정할 것이다.

이들 제약 또는 화장품 조성물에서, 본 개시내용의 화합물(들)은 통상적으로 조성물의 총 중량을 기준으로 약 0.5 내지 95 중량%, 또는 조성물의 총 중량을 기준으로 약 0.1 내지 99.9 중량%의 양으로 존재할 것이다. 다수의 투여 형태는 단일 치료의 일부로서 투여될 수 있다.

활성제는 고체 투여 형태, 예컨대 캡슐, 정제, 및 분말로, 또는 액체 투여 형태, 예컨대 밀크, 엘릭시르, 시럽 및 현탁액으로 장관내로 투여될 수 있다. 이는 또한 멸균 액체 투여 형태로 비경구로 투여될 수 있다. 본 개시내용의 화합물(들)은 또한 비강내로 (점비액) 또는 폐 시스템을 통한 흡입에 의해, 예컨대 추진제 기반 계량된 용량 흡입기 또는 건조 분말 흡입 장치에 의해 투여될 수 있다. 다른 투여 형태는 국부 투여, 예컨대 경피로, 패치 메카니즘 또는 연고를 통한 투여를 포함한다.

장관 또는 경구 투여에 적합한 제제는 액체 용액, 예컨대 희석제, 예컨대 밀크, 물, 염수, 완충 용액, 영아 포뮬라, 다른 적합한 담체, 또는 이들의 조합에 용해된 화합물(들)의 유효량일 수 있다. 본 개시내용의 화합물의 장관 또는 경구 투여에 적합한 제제는 문헌 [Shaji, et al., Indian J Pharm Sci. 2008 May-Jun; 70(3): 269-277]; [Bruno, et al., Ther Deliv. 2013 Nov; 4(11): 1443-1467]; [Ibrahim, et al., DARU Journal of Pharmaceutical Sciences, 2020, 28, 403-416]에 의해 예시된 바와 같이 관련 기술분야에 공지되어 있다. 이어서 화합물(들)은 투여 직전에 희석제에 혼합될 수 있다. 대체의 실시양태에서, 장관 또는 경구 투여에 적합한 제제는 캡슐, 사세, 정제, 로젠지, 및 트로키일 수 있다. 각각의 실시양태에서, 제제는 본 개시내용의 화합물(들)의 미리 결정된 양을, 고체 또는 과립, 분말, 현탁액 및 적합한 에멀젼으로서 함유할 수 있다. 액체 제제는 허용되는 계면활성제, 현탁화제, 또는 유화제를 첨가한 또는 첨가하지 않은, 희석제, 예컨대 물 및 알콜, 예를 들어, 에탄올, 벤질 알콜, 프로필렌 글리콜, 글리세린, 및 폴리에틸렌 알콜을 포함할 수 있다. 캡슐 형태는 예를 들어, 계면활성제, 윤활제, 및 불활성 충전제, 예컨대 락토스, 수크로스, 인산칼슘, 및 옥수수 전분을 함유하는 통상적인 경질- 또는 연질-쉘화된 젤라틴 유형의 것일 수 있다. 정제 형태는 하기 중 1종 이상을 포함할 수 있다: 락토스, 수크로스, 만니톨, 옥수수 전분, 감자 전분, 알긴산, 미세결정질 셀룰로스, 아카시아, 젤라틴, 구아 검, 콜로이드성 이산화규소, 크로스카르멜로스 나트륨, 활석, 스테아르산마그네슘, 스테아르산칼슘, 스테아르산아연, 스테아르산, 및 다른 부형제, 착색제, 희석제, 완충제, 붕해제, 습윤제, 보존제, 향미제, 및 약리학상 혼화성 담체.

로젠지 형태는 향미제, 통상적으로 수크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트 중 활성 성분, 뿐만 아니라 불활성 베이스, 예컨대 젤라틴 및 글리세린, 또는 수크로스 및 아카디아 중 활성 성분을 포함하는 캔디, 활성 성분 외에도 관련 기술분야에 공지된 바와 같은 담체를 함유하는 에멀젼, 및 겔을 포함할 수 있다.

비경구 투여에 적합한 제제는 항산화제, 완충제, 정균제, 및 제제를 환자의 혈액과 등장성이 되게 하는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비-수성, 등장성 멸균 주사 용액, 및 현탁화제, 가용화제, 증점제, 안정화제, 및 보존제를 포함할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 현탁액을 포함한다. 화합물(들)은 허용되는 계면활성제, 예컨대 비누 또는 세정제, 현탁화제, 예컨대 펙틴, 카르보머, 메틸셀룰로스, 히드록시프로필메틸셀룰로스, 또는 카르복시메틸셀룰로스, 또는 유화제 및 다른 제약 아주반트를 첨가한 또는 첨가하지 않은, 허용되는 담체, 예컨대 물, 염수, 수성 덱스트로스 및 관련된 당 용액, 알콜, 예컨대 에탄올, 이소프로판올, 또는 헥사데실 알콜, 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜, 예컨대 폴리(에틸렌글리콜) 400, 글리세롤 케탈, 예컨대 2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-메탄올, 에테르, 오일, 지방산, 지방산 에스테르 또는 글리세리드, 또는 아세틸화 지방산 글리세리드를 포함하는 멸균 액체 또는 액체의 혼합물 중 생리학상 허용되는 희석제에서 투여될 수 있다.

비경구 제제에 사용될 수 있는 오일은 석유, 동물, 식물성, 또는 합성 오일을 포함한다. 오일의 구체적인 예는 땅콩, 대두, 참깨, 면실, 옥수수, 올리브, 광유, 및 미네랄을 포함한다. 비경구 제제에 사용하기 위한 적합한 지방산은 올레산, 스테아르산, 및 이소스테아르산을 포함한다. 에틸 올레에이트 및 이소프로필 미리스테이트는 적합한 지방산 에스테르의 예이다. 비경구 제제에 사용하기 위한 적합한 비누는 지방 알칼리 금속, 암모늄, 및 트리에탄올아민 염을 포함하고, 적합한 세정제는 (a) 양이온성 세정제, 예컨대, 예를 들어, 디메틸디알킬암모늄 할라이드, 및 알킬피리디늄 할라이드, (b) 음이온성 세정제, 예컨대, 예를 들어, 알킬, 아릴, 및 올레핀 술포테이트, 알킬, 올레핀, 에테르 및 모노글리세리드 술페이트, 및 술포술시네이트, (c) 비이온성 세정제, 예컨대, 예를 들어, 지방 아민 옥시드, 지방산 알칸올아미드, 및 폴리옥시에틸렌 폴리프로필렌 공중합체, (d) 양쪽성 세정제, 예컨대, 예를 들어, 알킬 .베타.-아미노프로피오네이트, 및 2-알킬이미다졸린 4급 암모늄 염, 및 (e) 이들의 혼합물을 포함한다.

비경구 제제는 전형적으로 용액 중 약 0.5 중량% 내지 약 50 중량%의 화합물(들)을 함유한다. 적합한 보존제 및 완충제는 이러한 제제에 사용될 수 있다. 주사의 부위에서의 자극을 최소화하거나 제거하기 위해, 이러한 조성물은 약 12 내지 약 17의 친수성-친유성 균형 (HLB)을 갖는 1종 이상의 비이온성 계면활성제를 함유할 수 있다. 이러한 제제 중의 계면활성제의 양은 약 5 중량% 내지 약 15 중량%의 범위이다. 적합한 계면활성제는 폴리에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르, 예컨대 소르비탄 모노올레에이트, 및 프로필렌 옥시드와 프로필렌 글리콜의 축합에 의해 형성된 에틸렌 옥시드와 소수성 염기의 고분자량 부가물을 포함한다.

본 개시내용의 화합물(들)은 비강 또는 폐 흡입을 통해 투여되는 에어로졸 제제 내로 제제화될 수 있다. 이들 에에로졸 제제는 가압화된 허용되는 추진제, 예컨대 디클로로디플루오로메탄, 프로판, 및 질소 내로 정치될 수 있다. 이러한 에어로졸 제제는 계량된 용량 흡입기에 의해 투여될 수 있다. 이들은 또한 예컨대 네불라이저 또는 아토마이저 중 비-가압화된 제제를 위한 제약으로서 제제화될 수 있다.

단독으로 또는 다른 적합한 성분과 조합으로 본 개시내용의 화합물(들)은 비강 또는 폐 스프레이로서 수용액에서 투여될 수 있고, 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 다양한 방법에 의해 스프레이 형태로 분배될 수 있다. 액체를 비강 스프레이로서 분배하기 위한 시스템은 미국 특허 번호 4,511,069에 개시되어 있다. 제제는 다중-용량 용기에서, 예를 들어 미국 특허 번호 4,511,069에 개시된 밀봉된 분배 시스템에서 제공될 수 있다. 추가적인 에어로졸 전달 형태는 제약 용매, 예를 들어, 물, 에탄올, 또는 이들의 혼합물에 용해되거나 현탁된 활성제를 전달하는 예를 들어, 압축 공기-, 제트-, 초음파-, 및 압전 네불라이저를 포함할 수 있다.

본 개시내용의 비강 및 폐 용액은 전형적으로 임의로 표면-활성제, 예컨대 비이온성 계면활성제 (예를 들어, 폴리소르베이트-80), 및 1종 이상의 완충제로 제제화된, 전달될 약물 또는 약물을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 비강 스프레이 용액은 추진제를 추가로 포함한다. 비강 스프레이 용액의 pH는 임의로 약 pH 3.0 내지 6.0, 또는 4.5 +/- 0.5이다. 이들 조성물 내에 사용하기 위한 적합한 완충제는 상기 기재된 바와 같거나 또는 다른 방식으로 관련 기술분야에 공지된 바와 같다. 보존제, 계면활성제, 분산제, 또는 기체를 포함하는 다른 성분은 화학적 안정성을 증진시키거나 유지하기 위해 첨가될 수 있다. 적합한 보존제는 페놀, 메틸 파라벤, 파라벤, m-크레솔, 티오메르살, 클로로부탄올, 벤질알코늄 클로라이드 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 적합한 계면활성제는 올레산, 소르비탄 트리올레에이트, 폴리소르베이트, 레시틴, 포스파티딜 콜린, 및 다양한 장쇄 디글리세리드 및 인지질을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 적합한 분산제는 에틸렌디아민테트라아세트산 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 적합한 기체는 질소, 헬륨, 클로로플루오로카본 (CFC), 히드로플루오로카본 (HFC), 이산화탄소, 공기 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.

대체의 실시양태 내에서, 비강 및 폐 제제는 비강내 전달을 위한 적절한 입자 크기의, 또는 적절한 입자 크기 범위 내의 건조, 통상적으로 동결건조된 형태 중에 활성제를 포함하는 건조 분말 제제로서 투여된다. 비강 또는 폐 통로 내의 침착을 위해 적절한 최소 입자 크기는 대개 약 0.5 μm 질량 중위 등가 공기역학 직경 (MMEAD), 통상적으로 약 1 μm MMEAD, 및 보다 전형적으로 약 2 μm MMEAD이다. 비강 통로 내의 침착을 위해 적절한 최대 입자 크기는 대개 약 10 μm MMEAD, 통상적으로 약 8 μm MMEAD, 및 보다 전형적으로 약 4 μm MMEAD이다. 이들 크기 범위 내의 비강내로 및 폐로 호흡가능한 분말은 다양한 통상적인 기술, 예컨대 제트 밀링, 분무 건조, 용매 침전, 초임계 유체 응축 등에 의해 생성될 수 있다. 적절한 MMEAD의 이들 건조 분말은 에어로졸화된 양 내로 분말을 분산시키는, 폐 또는 비강 흡입시 환자의 호흡에 좌우되는, 통상적인 건조 분말 흡입기 (DPI)를 통해 환자에게 투여될 수 있다. 대안적으로, 건조 분말은 에어로졸화된 양 내로 분말을 분산시키는 외부 전력 공급원을 사용하는 공기-보조 장치, 예를 들어, 피스톤 펌프를 통해 투여될 수 있다.

비강 또는 폐 전달을 위한 조성물을 제제화하기 위해, 활성제는 다양한 제약상 및/또는 화장품상 허용되는 첨가제, 뿐만 아니라 활성제(들)의 분산을 위한 베이스 또는 담체와 배합될 수 있다. 목적하는 첨가제는 pH 제어제, 예컨대 아르기닌, 수산화나트륨, 글리신, 염산, 시트르산 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 또한, 국소 마취제 (예를 들어, 벤질 알콜), 등장화제 (예를 들어, 염화나트륨, 만니톨, 소르비톨), 흡착 억제제 (예를 들어, 트윈(Tween) 80), 가용성 증진제 (예를 들어, 시클로덱스트린 및 그의 유도체), 안정화제 (예를 들어, 혈청 알부민), 및 환원제 (예를 들어, 글루타티온)가 포함될 수 있다. 비강 또는 폐 전달을 위한 조성물이 액체인 경우, 일체로서 취해지는 0.9% (w/v) 생리학적 염수 용액의 긴장성에 관하여 측정된 바와 같은 제제의 긴장성은 전형적으로 투여의 부위에서 비강 점막에 실질적인, 비가역적 조직 손상이 유도되지 않을 값으로 조정된다. 일반적으로, 용액의 긴장성은 약 1/3 내지 3, 보다 전형적으로 1/2 내지 2, 및 가장 종종 3/4 내지 1.7의 값으로 조정된다.

본 개시내용의 화합물(들)은 활성제 및 임의의 목적하는 첨가제를 분산시키는 능력을 갖는 친수성 화합물을 포함할 수 있는 베이스 또는 비히클에 분산될 수 있다. 베이스는 다른 단량체 (예를 들어, 메틸 (메트)아크릴레이트, 아크릴산 등)와의 폴리카르복실산 또는 그의 염, 카르복실산 무수물 (예를 들어, 말레산 무수물)의 공중합체, 친수성 비닐 중합체, 예컨대 폴리비닐 아세테이트, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스 유도체, 예컨대 히드록시메틸셀룰로스, 히드록시프로필셀룰로스 등, 및 천연 중합체, 예컨대 키토산, 콜라겐, 알긴산나트륨, 젤라틴, 히알루론산, 및 그의 비독성 금속 염을 포함하지만 이에 제한되지 않는 폭넓은 범위의 적합한 담체로부터 선택될 수 있다. 종종, 생체분해성 중합체, 예를 들어, 폴리락트산, 폴리(락트산-글리콜산) 공중합체, 폴리히드록시부티르산, 폴리(히드록시부티르산-글리콜산) 공중합체 및 이들의 혼합물은 베이스 또는 담체로서 선택된다. 대안적으로 또는 추가적으로, 합성 지방산 에스테르, 예컨대 폴리글리세린 지방산 에스테르, 수크로스 지방산 에스테르 등은 담체로서 채용될 수 있다. 친수성 중합체 및 다른 담체는 단독으로 또는 조합으로 사용될 수 있고, 증진된 구조적 완전성은 부분적 결정화, 이온 결합, 가교 등에 의해 담체에 부여될 수 있다. 담체는 비강 점막에의 직접 적용을 위한 유체 또는 점성 용액, 겔, 페이스트, 분말, 미소구 및 필름을 포함하는 다양한 형태로 제공될 수 있다. 이 맥락에서 선택된 담체의 사용은 활성제의 흡수의 촉진을 발생시킬 수 있다.

본 개시내용의 화합물은 나노입자-기반 전달 담체에서 제제화될 수 있다. 본원에 개시된 나노입자 전달 시스템은 미토콘드리아-표적화된 전달에서 이익을 제공하고, 화합물의 치료 능력을 개선시킬 수 있다. 나노입자 제제는 그들의 원래 형태로 약물 분자를 효과적으로 수송하고, 소수성 약물 분자를 가용화시키고, 분자의 반감기를 증진시키고, 분자에 기인한 부작용 및 면역원성을 감소시키는 것으로 제시되었다. 본원에 개시된 나노입자 전달 담체는 증진된 피부 침투, 보다 높은 안정성, 부위 특이적 표적화, 예를 들어 화물을 미토콘드리아 매트릭스 내부에 효율적으로 전달하는 것, 높은 포착 효율, 및/또는 화합물의 시간-제어된, 예를 들어, 지연된 또는 지속된 방출을 제공하도록 선택되거나 디자인될 수 있다. 제제의 화합물을 대상체의 표적 부위에 효과적으로 전달하도록 디자인될 수 있는 나노입자 전달 담체의 특성은 표면 화학, 코팅, 구조, 크기, 응집하는 능력, 및 가용성을 포함한다. 예시적인 나노물질은 문헌 ["Nanotherapeutic Approaches to Target Mitochondria in Cancer," (Mani, 2021)] 및 ["Role of Nanotechnology in Cosmeceuticals: A Review of Recent Advances," (Kaul, 2018)]에 기재되어 있으며, 이들 각각은 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

나노입자 전달 담체는 탄소-기반 나노물질, 리포솜 전달 비히클, 중합체성 나노캐리어, 미셀, 덴드리머, 친지질성 양이온, 고체-지질 나노입자 (SLN), 펩티드-기반 나노물질, 나노구조화된 지질 담체 (NLC), 니오솜, 나노에멀젼, 금속 나노입자, 나노구, 폴리머로솜, 쿠보솜, 및 이들의 조합을 포함하고/거나 이로 관능화될 수 있다. 전달 담체는 미토콘드리아 표적화 또는 특이적 세포 유형 표적화를 위해 디자인될 수 있다. 예시적인 미토콘드리아 표적화제는 항체, 중합체성 관능성 모이어티, 예컨대 PEG, 친지질성 양이온, 예컨대 트리페닐포스핀 (TPP), 및 펩티드, 예컨대 미토콘드리아 침투 펩티드 (MPP)를 포함한다. 전달 담체는 표적화 모이어티, 예를 들어, 캡슐화로 형성되거나, 또는 본원에 개시된 화합물과 접합될 수 있고/거나, 전달 담체는 표면 표적화 모이어티로 관능화될 수 있다. 나노입자 담체는 약 10 내지 5000 nm, 예를 들어 10 내지 50 nm, 10 내지 100 nm, 50 내지 500 nm, 50 내지 100 nm, 100 내지 500 nm, 500 내지 1000 nm, 또는 1000 nm 내지 5000 nm의 평균 크기를 갖도록 치수화될 수 있으며, 이는 표적 조직, 전달될 화합물, 및 나노물질의 다른 특성에 기반하여 선택될 수 있다.

예시적인 탄소-기반 나노물질은 탄소 점 (C-점 또는 CD), 탄소 나노튜브 (CNT), 그라펜 유도체, 나노다이아몬드 (ND), 양자 점 (QD), 및 자기 나노입자 (MNP)를 포함한다. 탄소 나노입자는 예를 들어, 구형, 타원형, 튜브, 뿔-형상, 및 이들의 조합을 포함하는 상이한 형상으로 형성될 수 있다.

CNT는 원통형 튜브로 형성된 그라펜 쉬트이다. CNT는 낮은 독성 프로파일, 우수한 생체적합성, 및 표적화된 축적을 입증하였다. 본 개시내용의 CNT는 단일-벽 탄소 나노튜브 (SWCNT) 및/또는 다중-벽 탄소 나노튜브 (MWCNT)일 수 있다. SWCNT는 1 내지 10 nm의 범위의 보다 작은 직경을 갖는다. MWCNT는 2 내지 50 nm의 범위의 보다 큰 직경을 갖는다. CNT는 표적화 서열로 관능화될 수 있다. 예를 들어, CNT는 미토콘드리아 및/또는 특이적 세포 유형을 표적화하도록 관능화될 수 있다. 그라펜 유도체는 또한 2차원 탄소 동소체를 포함한다. 그라펜 유도체는 특이적 물리화학적 특성, 예컨대 높은 표면적 및 선택된 다면적인 표면 특성을 나타내도록 디자인될 수 있다. 그라펜 유도체는 미토콘드리아 및/또는 특이적 세포 유형에의 표적화된 전달을 위해 관능화될, 예를 들어, 표면 관능화될 수 있다. CNT는 모발 착색제 및 화장품 모발 케어 제제에서 성공적으로 사용되었다.

나노다이아몬드는 생체분자에의 높은 친화도, 생체적합성, 및 비- 또는 저-세포독성을 제공하는 것으로 제시되었다. 나노다이아몬드, 양자 점, 및 자기 나노입자는 표적화된 전달을 위해 본원에 개시된 화합물과 접합될 수 있다. 특정 MNP는 본원에 개시된 화합물을 캡슐화하도록 디자인될 수 있다. QD는 일반적으로 선택된 물리적 및 화학적 특징을 제공하도록 디자인된 쉘에 의해 층화된 반도체 코어로 형성된다. MNP는 생리학적 환경에서 안정성 및 생체적합성을 개선시키도록 디자인된 자기 코어, 예컨대 산화철 물질 코어, 및 표면 코팅으로 형성된다. 따라서, MNP 및 QD는 그들의 선택된 용도를 위해 고도로 적응가능하다.

리포솜 기반 전달 비히클은 전형적으로 내부 이중층 및 내부 수성 코어 영역을 갖는 지질 이중층으로 구성된 에워싸인 구형 베지클로 형성된다. 리포솜은 단일층판 또는 다중층판 구조를 가질 수 있다. 리포솜은 표적화된 전달 및/또는 제어된 방출 전달을 위해 효과적인 표면 화학을 갖도록 디자인될 수 있다. 예를 들어, 조작된 리포솜은 개선된 세포 갱신 및 미토콘드리아 내의 전달 화합물의 축적을 나타내었다. 항산화제, 예컨대 카로테노이드, CoQ10, 리코펜 및 비타민 A, E, 및 K와 같은 작용제는 물리적 및 화학적 안정성을 증폭시키기 위해 리포솜 내로 혼입될 수 있다. 리포솜은 피부 및 모발 케어 제품에 보습 특성을 제공하는 포스파티딜콜린으로 제제화될 수 있다. 식물성 인지질 및 대두 인지질은 그들의 에스테르화 필수 지방산의 높은 함량을 위해 국부 제제에 사용될 수 있다. 예를 들어, 활성제와 함께 적용되는 경우, 피부의 장벽 기능이 증가되고, 물 소실이 감소된다. 특정 리포솜은 주름 감소, 여드름 치료에서 백화의 감소, 및 피부 부드러움의 증가에 대한 효과를 갖는 것으로 제시되었다.

니오솜은 자기-어셈블리된 수화된 비이온성 계면활성제로 구성된 이중층 구조를 갖는 베지클이다. 니오솜은 그들의 지질 내로 혼입된 콜레스테롤을 가질 수 있거나, 또는 콜레스테롤이 없을 수 있다. 니오솜은 계면활성제 거대분자가 이중층으로서 조직화되는 경우 형성되는 막에 의해 본원에 개시된 화합물을 캡슐화하는 다중층판 또는 단일층판 구조로서 제제화될 수 있다. 예시적인 비이온성 계면활성제는 스팬, 트윈, 브리지, 알킬 아미드, 소르비탄 에스테르, 크라운 에스테르, 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르, 및 스테로이드-연결된 계면활성제를 포함한다. 니오솜은 본원에 개시된 화합물을 캡슐화하여, 연장된 전신 순환 및 표적 조직 내로의 증진된 침투를 제공할 수 있다. 화장품 및 피부 케어 적용에서의 니오솜은 피부 침투, 포착된 성분의 증가된 안정성, 및 전형적으로 불량하게 흡착되는 화합물의 개선된 생체이용률을 제공한다. 니오솜은 입자의 크기 및 형상에 영향을 미치는 계면활성제의 성질 및 구조, 막 조성, 및 수화의 온도를 제어함으로써 표적 적용을 위해 디자인될 수 있다. 프로니오솜으로 지칭되는 특수한 니오솜이 사용될 수 있다. 프로니오솜은 수성 노이솜 분산액을 생성하기 위해 사용 직전에 수화되는 비이온성 기반 계면활성제 베지클이다. 약물 전달을 추가로 증진시키기 위해, 니오솜 및 프로니오솜은 제제에서 조합될 수 있다.

중합체성 나노캐리어는 일반적으로 생체분해성 중합체로 형성된다. 중합체성 나노캐리어는 저장소 유형 (화합물이 중합체의 코어에 용해된/분포된 나노캡슐), 매트릭스 유형 (화합물이 중합체 매트릭스에 포착된 나노구), 및 이들의 조합일 수 있다. 중합체성 나노캐리어는 낮은 독성, 용이한 변형 (예를 들어, 표적화된 전달을 위해), 높은 약물 로딩 용량, 작은 크기, 우수한 수가용성, 및 생체적합성의 이익을 제공할 수 있다. 미토콘드리아 표적화를 위한 예시적인 중합체성 나노캐리어는 친수성 블록 중합체, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 폴리 E-카프로락톤 (PCL)을 포함한다. 본원에 개시된 다른 나노입자는 예컨대 표면 친수성 블록 중합체 (예를 들어, PEG화)를 포함함으로써 미토콘드리아 표적화를 위해 변형될 수 있다. 폴리머로솜은 자기-어셈블리 블록 공중합체 양친매성물질로 형성된 인공 베지클이다. 폴리머로솜은 전형적으로 친수성 코어 및 친지질성 이중층을 갖는다. 폴리머로솜은 고도로 맞춤화가능하다. 약물 캡슐화 및 방출 능력은 생체분해성 및/또는 자극에 대해 반응성인 블록 공중합체로 폴리머로솜을 형성함으로써 제어될 수 있다. 폴리머로솜의 조성 및 분자량은 자극에 대한 반응, 막 두께, 침투성, 유연성, 및 크기와 같은 특성을 제어하도록 선택될 수 있다 (폴리머로솜은 50 nm 내지 5000 nm 또는 그 초과의 반경을 갖도록 디자인될 수 있다). 폴리머로솜은 개선된 피부 탄성 및 피부 세포 활성화 에너지 증진과 같은 이익을 제공한다.

쿠보솜은 수성 지질 및 계면활성제의 자기-어셈블리된 액체 결정질 입자로부터 형성된 나노구조화된 입자이다. 쿠보솜은 강하게 패킹된 구조에서 계면활성제-제어된 이중층에 의해 나누어진 수성 제제의 2개의 별개의 베지클을 에워싸는 복연속성 액체 상으로 형성된다. 쿠보솜은 2개 초과의 별개의 베지클을 갖는 벌집모양 구조로서 디자인될 수 있다. 각각의 베지클의 방출은 별개로 제어될 수 있다. 쿠보솜은 화합물의 제어된 및/또는 표적화된 방출을 제공하는 것, 지질 생체분해성을 갖는 것, 및 상이한 약물-로딩 양상을 갖는 높은 내부 표면적을 갖는 것과 같은 이익을 제공할 수 있다.

미셀은 친수성 머리 및 소수성 꼬리를 갖는, 일반적으로 성질상 양친매성인 콜로이드성 응집체이다. 미셀 나노입자의 크기 및 형상은 용액의 등장성 강도, pH, 온도, 및 양친매성 분자의 성질을 다양화함으로써 선택될 수 있다. 미셀은 미토콘드리아에서의 본원에 개시된 화합물의 흡수를 개선시키는데 이용될 수 있다. 예를 들어, 미셀 제제는 낮은 흡수 화합물의 생체이용률을 개선시키고, 미토콘드리아 팽윤 (낮은 미토콘드리아 침투성 전이 구멍 (mPTP) 개방 및 손상의 예방을 지시함)을 방지하고, 세포를 질산화적 스트레스로부터 보호하는 것으로 밝혀졌다, 문헌 ["Curcumin Micelles Improve Mitochondrial Function in Neuronal PC12 Cells and Brains of NMRI Mice - Impact on Bioavailability" (Hagl, 2015)] (모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함됨). 미셀은 표적화 기, 예컨대 미토콘드리아 표적화 TPP, MPP, 또는 PEG화로 관능화될 수 있다. 일부 실시양태에서, 미셀 나노입자는 중합체성 미셀일 수 있다.

덴드리머는 당, 아미노산, 및/또는 뉴클레오티드로 형성될 수 있는 과분지된 거대분자이다. 덴드리머는 일반적으로 중심 코어, 반복된 분지, 및 다양한 말초 기로 형성된다. 말초 기는 표적 적용, 예컨대 표적화된 전달을 위해 디자인되거나 관능화될 수 있다. 덴드리머의 이익은 약물 캡슐화를 제공하는 능력, 높은 수가용성, 높은 체류 시간, 생체분해성, 특이성, 낮은 독성, 및 단분산성, 다원자가, 및 안정성과 같은 특성을 제공할 수 있는 표면 변형 능력을 포함한다. 덴드리머는 표적화 기, 예컨대 TPP, MPP, 또는 PEG화로 관능화될 수 있다. 덴드리머는 화합물을 캡슐화하거나 또는 화합물에 접합되도록 제제화될 수 있다.

친지질성 양이온은 플라스마 및 미토콘드리아 막을 침투할 수 있는 양으로 하전된 이온이다. 친지질성 양이온은 미토콘드리아에서 축적되는 경향이 있다. 따라서, 친지질성 양이온, 예컨대 TPP, 디퀄리눔, 및 로다민 123은 미토콘드리아-표적화된 치료적 전달을 위해 이용될 수 있다. 탈국재화된 친지질성 양이온 (DLC)은 막을 횡단하고, 세포의 미토콘드리아 내의 부착된 모이어티의 특이적 응집을 유도하는 강한 미토콘드리아 표적화 능력을 갖는다. 따라서, DLC는 나노입자 담체로서 및/또는 표적화된 전달을 위한 표면 변형으로서 이용될 수 있다. 예를 들어, 본원에 개시된 조성물은 DLC, 예컨대 TPP에 접합되거나, 또는 표적화된 전달을 위한 TPP 표면 관능화를 갖는 또 다른 담체에 캡슐화될 수 있다.

고체-지질 나노입자는 50 내지 1000 nm, 예를 들어 50 내지 500 nm 또는 50 내지 100 nm의 범위의 마이크로미터 이하 콜로이드성 담체이다. SLN은 일반적으로 물 또는 오일-기반 또는 유지질 코어를 갖는 액체 계면활성제 용액에 유포된 생리학적 지질로 형성된다. SLN은 복합 글리세리드 혼합물, 정제된 트리글리세리드, 및 지방 매트릭스 내에 인지질 소수성 쇄를 갖는 왁스로부터 제조될 수 있다. SLN은 작은 크기, 큰 표면적, 높은 약물 로딩 용량, 및 계면에서의 상의 접촉과 같은 이익을 제공한다. SLN은 화합물의 제어된 또는 지속된 방출을 제공하도록 디자인될 수 있다. 화장품 및 제약에서, SLN은 피부를 통한 본원에 개시된 화합물의 증가된 침투를 제공할 수 있다. SLN은 자외선 (UV) 저항 특성, 피부 수화를 증가시키는데 사용될 수 있는 폐색 특성, 및 활성 분자의 이동성 및 누출을 감소시키는 그들의 고체 성질로 인한 우수한 안정성 유착을 가질 수 있다.

나노구조화된 지질 담체 (NLC)는 고체 지질을 공간적으로 비혼화성 액체 지질 조성물과 블렌딩하여 비정질 고체를 형성함으로써 형성된 지질 나노입자의 형태이다. NLC는 불완전한 유형, 비정질 유형, 또는 다중 유형의 것일 수 있다. NLC 입자는 전형적으로 크기가 10 nm 내지 1000 nm의 범위이다. 생체분해성 및 생리학적 지질로부터 제제화되는 경우, NLC는 매우 낮은 독성을 나타낸다. 따라서, NLC 제제는 감소된 전신 부작용 및 보다 높은 약물 로딩 용량의 이익을 제공할 수 있다. NLC는 이중상 약물 방출 패턴을 갖도록 디자인될 수 있다. 예를 들어, 제1 화합물 방출 프로파일은 즉시 또는 제어된 방출일 수 있고, 제2 화합물 방출 프로파일은 제어된 또는 지연된 방출일 수 있다. SLN과 같이, NLC는 또한 피부를 통한 본원에 개시된 화합물의 증가된 침투, 자외선 (UV) 저항 특성, 피부 수화를 증가시키는데 사용될 수 있는 폐색 특성, 및 우수한 안정성 유착을 제공할 수 있다.

나노에멀젼은 계면활성제와 조합으로 유상 및 수상으로부터 형성된 액체의 동역학적으로 및 열역학적으로 안정한 분산액이다. 본원에 개시된 나노에멀젼은 수중유, 유중수, 또는 복연속성 제제일 수 있다. 나노에멀젼의 특성은 제조 방법을 제어함으로써 디자인될 수 있다. 나노에멀젼은 전형적으로 낮은 오일 또는 물 계면 장력을 갖는 작은 입자 또는 액적을 포함하는 분산된 상이다. 나노에멀젼은 전형적으로 인지질의 단분자 층에 의해 둘러싸인 친지질성 코어로 형성된다. 나노에멀젼은 낮은 점도, 높은 동역학적 안정성, 높은 계면 면적, 높은 가용화 용량, 및 증가된 흡수율과 같은 이익을 제공한다. 화장품 및 제약에서, 나노에멀젼은 활성 성분의 급속한 침투 및 능동 수송 및 피부에의 수화를 제공할 수 있다. 나노에멀젼은 폼, 크림, 스프에이, 또는 액체로 제제화될 수 있다.

특정 나노입자 제제, 예컨대 SLN, 나노에멀젼, 리포솜, 및 니오솜은 연장된 시간의 기간 동안 수분을 보유하는 습윤제를 제공하는 보습 제제에 사용될 수 있다.

금속 나노입자는 특이적 특성을 갖도록 디자인될 수 있고, 나노구, 나노쉘, 나노클러스터, 나노로드, 나노스타, 나노큐브, 분지형, 및 나노삼각형으로서 형상화될 수 있다. 금속 나노입자의 형상, 크기, 및 유전체 특성은 공명 빈도에 대한 효과를 가질 수 있다. 금속 나노입자는 크기, 표면적, 및 결정성을 제어함으로써 높은 약물 로딩 용량을 갖고 세포벽을 효과적으로 침투하도록 디자인될 수 있다. 금속 나노입자의 이익은 혈액 순환의 가속화, 항-염증 특성, 살균 특성, 피부의 단단함 및 탄성의 개선, 노화의 지연, 및 피부 대사의 활력화를 포함한다. 예시적인 금속 나노입자는 금, 은, 및 구리이다. 이러한 금속 나노입자는 강한 항진균 및/또는 항미생물 특성을 제공하는 것으로 제시되었다. 또 다른 예시적인 금속 나노입자는 자외선 (UV) 방사로부터 보호를 제공하는 것으로 제시된 이산화티타늄 (TiO₂)이다. 금속 나노입자는 성질상 불활성이고, 고도로 안정하고, 생체적합성이고, 비세포독성이도록 디자인될 수 있다. 1종 초과의 금속은 선택된 특성을 갖는 금속 나노복합재를 형성하는데 사용될 수 있다.

나노구는 코어-쉘 구조를 갖는 구형 나노입자이다. 화합물은 나노입자에 캡슐화되거나, 접합되거나, 용해되거나, 또는 다른 방식으로 포착될 수 있다. 나노구는 결정질 또는 비정질 구조일 수 있다. 나노구는 생체분해성 또는 비생체분해성일 수 있다. 예시적인 생체분해성 생체구는 젤라틴, 변형된 전분, 및 알부민 나노구를 포함한다. 한 예시적인 비생체분해성 나노구는 폴리락트산이다. 화장품 및 제약에서, 나노구는 본원에 개시된 화합물을 피부의 깊은 층 내로 보다 정확하고 효율적으로 전달하는데 사용될 수 있다. 나노구는 화학선 노화에 대한 보호를 제공하는 것으로 제시되었다.

펩티드-기반 나노물질은 펩티드 결합에 의해 연결된 몇몇 아미노산으로 구성된 생체분자이다. 펩티드는 일반적으로 효소적 분해로 인해 신장에서 급속한 청소를 제공한다. 펩티드 나노물질은 표적화 및 축적 용량, 작은 크기, 생산 및 맞춤화의 용이성, 및 생체적합성을 포함하는 몇몇 이익을 제공할 수 있다. 특정 펩티드 나노물질은 환경적 인자, 예컨대 온도, pH, 이온 강도, 또는 숙주 및 펩티드 사이의 분자 상호작용에 반응하여 독특한 형상 및 크기로 자기-어셈블리하도록 디자인될 수 있다. 펩티드 나노입자는 또한 표적화된 전달을 위해 관능화될 수 있다. 관능화된 펩티드는 개선된 표적화성 및 증진된 효능을 나타내는 것으로 밝혀졌다.

미토콘드리아-표적화 능력을 갖는 한 예시적인 펩티드 나노물질은 미토콘드리아 침투 펩티드 (MPP)이다. MPP는 미토콘드리아 이중 막을 효율적으로 관통할 수 있는 세포 침투 펩티드이다. MPP는 일반적으로 양으로 하전된 펩티드이도록 디자인되거나 선택된다. 미토콘드리아 막의 강한 음전하로 인해, 양으로 하전된 펩티드는 미토콘드리아에 침투할 수 있다. MPP는 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함되는 문헌 ["Mitochondrial targeted strategies and their application for cancer and other diseases treatment," (Li, 2020)]에 보다 상세하게 기재되어 있다. 따라서, MPP는 나노입자 담체로서 및/또는 표적화된 전달을 위한 표면 변형으로서 이용될 수 있다. 예를 들어, 본원에 개시된 조성물은 MPP에 접합되거나 또는 표적화된 전달을 위한 MPP 표면 관능화를 갖는 또 다른 담체에 캡슐화될 수 있다.

본원에 개시된 제제는 1종 이상의 피부 침투 증진제를 포함할 수 있다. 일반적으로, 작고 중간정도로 친지질성 분자는 피부 장벽을 침투할 가능성이 있다. 다른 화합물은 피부의 장벽 특성을 감소시키거나 또는 외부 에너지의 투입과 함께 피부에 걸쳐 화합물의 이동을 능동적으로 유도함으로써 장벽을 침투하는 적합한 피부 침투 증진제를 요구할 수 있다. 피부 침투 증진제는 문헌 ["Penetration Enhancement of Topical Formulations," (Ng, 2018)] 및 ["Transdermal Delivery Systems in Cosmetics," (Kim, 2020)]에 기재되어 있으며, 이들 각각은 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

본원에 개시된 나노입자 전달 담체는 화합물에 대한 피부 침투 증진을 제공할 수 있다. 본원에 개시된 제제는 추가적으로 또는 대안적으로 1종 이상의 화학적 또는 물리적 피부 침투 증진제를 함유할 수 있다. 예시적인 화학적 피부 침투 증진제는 알콜, 예컨대, 에탄올 및 글리콜, 술폭시드, 예컨대, 디메틸 술폭시드, 라우로카프람, 피롤리돈, 디메틸 이소소르비드, 이소프로필 미리스테이트, 프로필렌 글리콜, 올레산, 유칼립톨, 물/아쿠아 (수화), 계면활성제, 우레아, 지방산, 지방 알콜, 및 테르펜 및/또는 테르페노이드를 포함한다. 예시적인 물리적 피부 침투 증진제는 롤러, 스크래퍼, 스크러버, 각질제거제, 미세박피술 바늘, 이온이동법 장치, 전기천공 장치, 초음파 장치, 예컨대 초음파치료, 열 삭마, 자기영동, 사진제판 파동, 전자 빔 조사, 및 저광 요법 장치, 예컨대 발광 다이오드 (LED) 공급원을 포함한다. 2종 이상의 피부 침투 증진제는 상승작용적으로 제제에 사용될 수 있다.

화학적 피부 침투 증진제는 약물 화합물의 진피 흡수를 증진시키기 위해 피부과학, 경피, 화장품, 및 제약 생성물에 포함될 수 있다. 화학적 증진제는 본원에 개시된 화합물의 가용성, 침투, 및/또는 흡수를 가능하게 하거나 개선시킬 수 있다. 예시적인 화학적 증진제는 하기 기재된다.

물 (아쿠아)은 일반적으로 조성물의 유동성을 증가시켜 보다 높은 침투성을 제공한다. 추가적으로, 물은 피부 장벽을 수화시켜, 개선된 침투를 위해 피부 지질 및/또는 단백질을 변경시킨다. 수화 화합물, 예컨대 글리세롤 및 우레아는 각질층의 수화를 용이하게 하고 장벽 내의 친수성 확산 채널을 형성함으로써 경피 침투를 촉진시킬 수 있다.

알콜 용매, 예컨대 에탄올 및 프로필렌 글리콜은 화합물의 유동성을 증가시킴으로써 침투 증진을 제공하고, 또한 우수한 용매로서 작용할 수 있다. 침투의 정도는 지방 알콜의 알킬 쇄 길이를 제어함으로써 선택될 수 있다.

계면활성제는 일반적으로 제제의 활성 성분 뿐만 아니라 각질층 내의 지질을 포함하는 친지질성 작용제를 가용화시킨다. 따라서, 계면활성제는 상피 세포 막 내로 분배하고, 막 완전성을 감소시키는 구조적 결함을 형성하는 막 지질의 패킹을 파괴함으로써 피부 침투성을 증진시킬 수 있다. 피부 침투에 대한 계면활성제의 효과는 계면활성제의 농도 및 유형을 선택함으로써 디자인될 수 있다. 계면활성제는 음이온성, 양이온성, 또는 비이온성일 수 있다. 음이온성 계면활성제는 이들이 케라틴 및 지질과 상호작용하기 때문에 피부 또는 모발 적용을 위해 선택될 수 있다. 양이온성 계면활성제는 이들이 극성 상호작용을 통해 피부 단백질과 상호작용하기 때문에 피부 적용을 위해 선택될 수 있다. 비-이온성 계면활성제는 일반적으로 피부에 자극이 적고, 보다 우수한 내약성을 갖는다.

지방산은 경피 약물 흡수를 증가시킬 수 있다. 전형적으로 긴, 비분지된 지방족 꼬리를 갖는 카르복실산인 장쇄 지방산은 알킬 쇄 길이의 효과로서 경피 약물 흡수를 증가시키는 것으로 입증되었다. 저분자량 알칸올은 각질층의 지방 매트릭스에서 화합물의 가용성을 증진시키는 가용화제로서 작용할 수 있다. 다가불포화 지방산, 예컨대 리놀레산, 알파-리놀레산, 및 아라키돈산은 피부 침투를 증진시킬 수 있다. 한 예시적인 지방산 화학적 침투 증진제는 올레산이다. 올레산은 증가된 유동성 및 분자의 침투에 대한 감소된 저항성을 제공한다.

테르펜은 식물 추출물에서 통상적으로 발견되는 탄화수소이다. 테르페노이드는 추가적인 관능기를 함유하는 테르펜이다. 침투 증진을 제공할 수 있는 테르펜의 한 그룹은 산소-함유 테르펜이다. 예시적인 산소 함유 테르펜은 메탄올, 티몰, 카르바크롤, 메톤, 및 시네올을 포함한다. 이러한 테르펜은 알콜과 유사한 메카니즘으로 침투를 증진시킬 수 있다. 그러나, 테르펜은 천연 생성물로 간주될 수 있다. 테르펜의 이익은 최소 자극 및 독성을 갖는 높은 경피 능력을 포함한다.

본 개시내용의 화합물은 미토콘드리아-표적화제로 제제화될 수 있다. 예시적인 미토콘드리아 표적화제는 항체, 중합체성 관능성 모이어티, 예컨대 PEG, 친지질성 양이온, 예컨대 트리페닐포스핀 (TPP), 및 펩티드, 예컨대 미토콘드리아 표적화 펩티드 (MPP)를 포함한다.

본 개시내용의 화합물은 대안적으로 대략적인 생리학적 상태에 요구되는 바와 같은 제약상 및/또는 화장품상 허용되는 담체 물질로서, 예컨대 pH 조정제 및 완충제, 긴장성 조정제, 습윤화제 등, 예를 들어, 아세트산나트륨, 락트산나트륨, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화칼슘, 소르비탄 모노라우레이트, 트리에탄올아민 올레에이트 등을 함유할 수 있다. 고체 조성물에 대해, 예를 들어, 제약 등급의 만니톨, 락토스, 전분, 스테아르산마그네슘, 나트륨 사카린, 활석, 탄산마그네슘 등을 포함할 수 있는 통상적인 비독성 제약상 및/또는 화장품상 허용되는 담체가 사용될 수 있다.

본 개시내용의 조성물은 또한 높은 농도의 활성 성분에 적합한 용액, 마이크로에멀젼, 또는 다른 정돈된 구조로서 제제화될 수 있다. 담체는 예를 들어, 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 및 이들의 적합한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 용액을 위한 적절한 유동성은 예를 들어, 코팅, 예컨대 레시틴의 사용에 의해, 분산가능한 제제의 경우 목적하는 입자 크기의 유지에 의해, 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.

특정 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물(들) 및 조성물은 시간-방출 제제에서, 예를 들어 느린 방출 중합체를 포함하는 조성물에서 투여된다. 이러한 조성물은 급속한 방출에 대해 보호할 담체, 예를 들어 제어된 방출 비히클, 예컨대 중합체, 미세캡슐화된 전달 시스템 또는 생체흡착성 겔로 제조될 수 있다. 본 발명의 다양한 조성물에서 연장된 전달은 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어, 알루미늄 모노스테아레이트 히드로겔 및 젤라틴을 조성물에 포함시킴으로써 야기될 수 있다. 제어된 방출 제제가 요망되는 경우, 본 발명에 따라 사용하는데 적합한 제어된 방출 결합제는 활성제에 대해 불활성이고 생물학적 활성제를 혼입할 수 있는 임의의 생체적합성 제어된-방출 물질을 포함한다. 다수의 이러한 물질은 관련 기술분야에 공지되어 있다.

국부 투여에 적합한 제제는 활성 성분 외에도, 관련 기술분야에 공지된 바와 같은 담체를 함유하는 용액, 오일, 크림, 에멀젼, 및 겔을 포함한다. 국부 제제는 제약 또는 화장품 제제일 수 있다. 일부 실시양태에서, 화합물은 샴푸, 컨디셔너, 스프레이, 크림, 겔, 밤, 바디 워시, 비누, 로션, 또는 화장품으로서 제제화된다.

본 개시내용의 화합물 및 본 개시내용의 조성물은 단일-용량 또는 다중-용량 밀봉된 용기, 예컨대 앰풀 및 바이알에서 제공될 수 있고, 사용 직전에 멸균 액체 부형제, 예를 들어, 주사용수의 첨가만을 요구하는 동결-건조된 (동결건조된) 상태로 저장될 수 있다. 적합한 단위 용량, 즉, 유효량은 선택된 화합물의 투여가 지시되고, 물론, 목적하는 임상적 종점에 따라 다양할 상태 각각에 대해 적절하게 디자인된 임상 시험 동안 결정될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 멸균 분말, 과립, 및 정제로부터 제조될 수 있다. 주사가능한 조성물을 위한 유효한 제약상 허용되는 담체에 대한 요건은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다. 문헌 [Pharmaceutics and Pharmacy Practice, J.B. Lippincott Co., Philadelphia, Pa., Banker and Chalmers, Eds., 238-250 (1982)] 및 [ASHP Handbook on Injectable Drugs, Toissel, 4^th ed., 622-630 (1986)]을 참조한다.

추가적으로, 직장 투여에 적합한 제제는 다양한 베이스, 예컨대 유화 베이스 또는 수용성 베이스와 혼합함으로써 좌제로서 제공될 수 있다. 질 투여에 적합한 제제는 활성 성분 외에도, 관련 기술분야에 적절한 것으로 공지되어 있는 바와 같은 담체를 함유하는 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 폼, 또는 스프레이 포뮬라로서 제공될 수 있다.

본원에 개시된 조성물은 다양한 천연 생성물과 연관될 수 있으며, 이러한 생성물의 예는 하기 제시된다. 본원에 개시된 조성물은 천연 생성물로서 제제화될 수 있다. 본원에 개시된 조성물은 천연 생성물과 조합으로 투여될 수 있다. 본원에 개시된 조성물은 천연 생성물에 혼입될 수 있다. 이들 천연 생성물은 본 개시내용 전반에 걸쳐 개시된 제제 또는 조성물로 구성될 수 있다.

천연 생성물은 상업적 목적을 위한 생성물이거나 또는 이를 포함할 수 있고, 천연 공급원으로부터 생산된 식이 보충제, 및 식품, 예를 들어, 식품, 식품 보충제, 의료용 식품, 식품 첨가제, 뉴트라슈티칼, 또는 드링크를 지칭할 수 있다. 천연 생성물은 예를 들어, 질환 또는 상태를 치료하는데 있어서 치료적 이익이 있을 수 있는 약리학적 또는 생물학적 활성을 가질 수 있다. 천연 생성물은 전통적인 의료, 화장품학적 목적을 위한 치료, 화장품, 및 스파 치료에 포함될 수 있다. 본원에서 언급된 천연 생성물은 1종 이상의 다른 성분, 예를 들어, 부형제를 포함하는 조성물 또는 제제 내로 혼입될 천연 생성물로서 기재된 성분 중 임의의 1종 이상을 포함할 수 있다. 천연 생성물로 지칭되는 제조물 또는 제제는 본원에서 정의된 천연 생성물 및 1종 이상의 추가적인 성분 또는 성분을 포함할 수 있다. 본 개시내용 전반에 걸쳐 논의된 임의의 조성물, 제조물, 또는 제제는 1종 이상의 천연 생성물이거나 또는 이를 포함할 수 있다.

관련 기술분야의 통상의 기술자는 본 개시내용의 화합물을 환자에게 투여하는 적합한 방법이 이용가능하고, 특정한 화합물을 투여하는데 하나 초과의 경로가 사용될 수 있지만, 특정한 경로는 또 다른 경로보다 더 즉각적이고 더 효과적인 반응을 제공할 수 있음을 인정할 것이다.

실시예

이들 및 다른 실시양태의 기능 및 이점은 하기 실시예로부터 보다 잘 이해될 수 있다. 이들 실시예는 성질상 예시적인 것으로 의도되며, 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 간주되지 않는다.

실시예 1: 엠블리카 추출물로부터의 화합물의 확인

엠블리카에 존재하는 화합물을 확인하기 위해, 엠블리카 추출물을 제조하고, HPLC에 의해 분석하였다.

본 실시예에서, 이.오피시날리스(E.officinalis) 추출물을 함유하는 40.9 그램의 당의정 (히말라야 드럭 컴퍼니(Himalaya Drug Company), 미국 텍사스주 슈가 랜드, 로트 112000924; 각각의 당의정은 250 mg 과실 추출물 (45% 탄닌) 및 350 mg 분말 줄기 (2% 탄닌)를 함유한다)을 실온에서 6시간 동안 250 ml 메탄올과 교반하였다. 생성된 용액을 여과하여 불용성 물질을 제거하고, 메탄올 층을 로토밥(Rotovap)을 사용하여 스트리핑하였다 (분획 1). 여과 단계로부터 초래된 고체 물질을 실온에서 4시간 동안 추가적인 250 ml의 메탄올과 교반하고, 여과하여 불용성 물질을 제거하고, 필터 깔대기 및 메탄올 층을 로토밥을 사용하여 스트리핑하였다 (분획 2). 분획 1 및 2를 합하여 8.25 그램의 어두운 흡습성 고체를 수득하였다.

상기 기재된 바와 같이 단리된 450 mg의 고체를 2 ml의 메탄올에 용해시켰다. 생성된 용액을 모든 내용물이 용해될 때까지 초음파처리하고, 페노메넥스 게미니(Phenomenex Gemini)® 5μM NX-C18 110A 150 x 4.6 mm 액체 크로마토그래피 칼럼 (페노메넥스(Phenomenex), 미국 캘리포니아주 토랜스)을 갖는 ACCQPrep 기기 (텔레다인 아이에스씨오 (Teledyne ISCO), 미국 네브라스카주 링컨)를 사용하여 정제용 HPLC 정제에 적용하였다. HPLC를 하기 표에 기재된 바와 같이 2개의 용매 구배로 수행하였다.

용매 A- 아세토니트릴; 용매 B- 물

퓨어랩(PureLab)® 울트라(Ultra) 물 정제 시스템 (엘가 랩워터(ELGA LabWater), 미국 일리노이즈주 우드리지)을 통해 정제된 물.

수집된 분획을 스트리핑하고, 분획을 11개의 별개의 바이알 내로 옮겼다. 1 mg의 각각의 분획을 취하고, 1.5 ml 바이알 중 1 ml의 메탄올에 용해시켰다. 생성된 용액을 모든 내용물이 용해될 때까지 초음파처리하고, 페노메넥스 게미니® 5μM NX-C18 110A 150 x 4.6 mm 액체 크로마토그래피 칼럼 (페노메넥스, 미국 캘리포니아주 토랜스)을 갖는 애질런트(Agilent) 1100 시리즈 기기 (애질런트 테크놀로지스(Agilent Technologies), 미국 캘리포니아주 산타 클라라)를 사용하여 분석용 HPLC 분석에 적용하였다. HPLC를 하기 표에 기재된 바와 같이 2개의 용매 구배로 수행하였다.

용매 A- 0.1% 트리플루오로아세트산 (TFA)을 갖는 아세토니트릴

용매 B- 0.1% TFA를 갖는 물

퓨어랩® 울트라 물 정제 시스템 (엘가 랩워터, 미국 일리노이즈주 우드리지)을 통해 정제된 물.

엠블리카 추출물 내의 특이적 화합물을 확인하기 위해, 하기 표준물을 사용하였다:

1 mg의 표준물을 1 ml 메탄올에 용해시키고, 용액을 초음파처리하고, 용액을 2 ml 바이알에 첨가함으로써 표준물을 제조하였다. 샘플을 상기 기재된 바와 같이 및 순도를 확인하기 위해 분석용 HPLC에 적용하였다. 100 ul의 각각의 표준물을 별개의 2 ml 바이알에 첨가함으로써 배합된 표준 용액을 생성하였다. 표준물을 사용하여 엠블리카 추출물 내의 성분을 확인하였다.

상기 기재된 바와 같이 제조되고 분석된 엠블리카 추출물에서 하기 화합물이 확인되었다.

또한, 대략 20종의 다른 화합물이 존재하였지만, 아직 확인되지 않았다.

실시예 2: 엠블리카 추출물의 적용의 생체내 에너지 및 활력 개선 효과를 제시하는 예언적 실시예

추가의 특이적 포함 기준을 갖지 않는 가시적인 눈 주름의 형태로 노화를 나타내는 35 내지 70세의 남성 및 여성 대상체가 연구를 위해 평가될 것이다. 대상체는 선택될 미리 정의된 선택안을 갖는 10개의 폐쇄형 질문의 기준선 설문지를 완결할 것이다. 설문지는 기준선 에너지 수준 및 활력에 관한 정보를 요청할 것이다. 다른 기준선 파라미터는 더마톱(DermaTOP) (표면 구조의 3차원 영상화)에 의해 피부 거칠기 (Ra, Rz), 코네오미터(Corneometer) (커리지 앤드 카자카(Courage & Khazaka), 독일 쾰른)에 의해 피부 수화 (전기적 정전용량 측정), 및 큐토미터(Cutometer)에 의해 피부 탄성 (300 mbar 흡입 동안 피부 변위의 광학 측정)에 대해 측정될 것이다.

대상체는 대략 12주 동안 얼굴의 한쪽 측면에 국부적으로 매일 2회 엠블리카 추출물 (2 내지 5 방울의 엠블리카 추출물 오일) 또는 위약을 적용할 것이다. 연구는 스플리트-페이스 디자인으로 수행될 것이다. 항-주름 특성은 눈가 잔주름의 영역에서 안와주위로 측정될 것이다. 피부 보습 효과는 볼의 뼈 상에서 평가될 것이다. 엠블리카 추출물의 효과는 참조 생성물 또는 위약과 비교될 것이다.

대상체는 연구의 완결시에 최종 설문지를 완결할 것이다. 최종 설문지는 기준선 에너지 수준 및 활력에 관한 정보를 요청할 것이다. 피부 거칠기 (Ra, Rz), 피부 수화, 및 피부 탄성은 또한 연구의 완결시에 측정될 것이다. 기준선 결과는 최종 결과와 비교될 것이다.

엠블리카 추출물의 투여는 에너지 수준 및 활력을 개선시킬 것으로 예상된다. 또한, 엠블리카 추출물의 투여는 피부 거칠기, 피부 수화, 피부 탄성을 포함하는 노화-연관 파라미터, 및 설문지에 의해 측정된 추가적인 정성적 파라미터를 개선시킬 것이다.

실시예 3: 생체내에서 엠블리카 추출물에 의한 미토콘드리아 DNA 고갈 및 기능의 복원 및 염증의 억제

이들 실험에서, 8 내지 9주령 암컷 C57BL/6 대조군 및 mtDNA-고갈체 마우스 (D1135A-POLG1을 발현함)의 면도한 등쪽 피부를 dox 투여 (200 mg/kg 식이 단독)의 시작 전 1주에 시작하여 매일 200 μl의 50 mg/ml 엠블리카 추출물 연고 (방법 섹션에 기재된 바와 같이 제조됨) 또는 상응하는 양의 대조군 연고 (엠블리카 추출물을 결여함)로 국부적으로 처리하고, 16주 동안 매일 적용을 계속하였다 (112일).

mtDNA 기능의 반전에 대한 엠블리카 추출물 처리의 효과를 옥스포스(Oxphos) 복합체 IV 항체 (COXII)를 갖는 엠블리카 추출물 연고 또는 대조군 연고로 처리된 mtDNA-고갈체 마우스의 파라핀 포매된 등쪽 피부 섹션을 염색함으로써 조사하였다 (n=3). 대조군 처리와 비교하여 엠블리카 추출물로 처리된 mtDNA-고갈체 피부에서 COXII 염색의 통계적으로 유의한 증가가 관찰되었다 (도 1A). 또한, mtDNA 코딩된 유전자의 RT-PCR 분석은 대조군 처리와 비교하여 엠블리카 추출물로 처리된 mtDNA-고갈체 피부에서의 상향조절을 제시하였다 (도 1B). 마지막으로, 대조군 처리와 비교하여 엠블리카 추출물로 처리된 mtDNA-고갈체 마우스로부터의 피부 샘플에서 mtDNA 함량의 증가가 관찰되었다 (도 1C).

본원에 기재된 바와 같이, mtDNA 고갈체 마우스의 피부는 비만 세포, 호중구 및 림프구를 포함하는 진피 및 부속기 주위 혼합된 염증 세포의 증가를 나타내었다. 엠블리카 추출물로의 처리 후, mtDNA 고갈체 마우스의 피부는 비만 세포 (김사(Giemsa) +ve 양성 세포; p= 3.56E-07), 과립구 (MPO +ve 세포; P= 0.002), 대식세포 및 조직구 (CD163 +ve 세포; p= 0.007), 및 B 림프구 (Pax-5 +ve 세포; p= 0.042)를 포함하는 진피 및 부속기 주위 염증 세포의 통계적으로 유의한 감소 (도 1D)를 나타내었다. 대조군 연고로 처리된 mtDNA-고갈체 마우스에 대해 엠블리카 추출물로 처리된 mtDNA-고갈체 마우스의 피부 샘플에서의 염증성 유전자의 감소된 발현이 또한 관찰되었다 (데이터는 제시되지 않음).

실시예 4: 생체내에서 푸쿠스 추출물에 의한 주름진 피부 및 탈모의 반전

미토콘드리아 DA 및 기능을 복원하는 다른 작용제의 능력을 조사하기 위해, 푸쿠스 추출물을 조사하였다. 이들 실험에서, 8 내지 9주령 암컷 C57BL/6 대조군 및 mtDNA-고갈체 마우스 (D1135A-POLG1을 발현함)의 면도한 등쪽 피부를 dox 투여 (200 mg/kg 식이 및 5% 수크로스 물 중 2 mg/mL)의 시작 전 1주에 시작하여 매일 200 μl의 50 mg/ml 푸쿠스 추출물 연고 (방법 섹션에 기재된 바와 같이 제조됨) 또는 상응하는 양의 대조군 연고 (푸쿠스 추출물을 결여함)로 국부적으로 처리하고, 51일 동안 계속하였다 (각각의 그룹에 대해 n=4).

결과는 도 2A에 제시된다. 이전의 결과와 일치하게, mtDNA-고갈체 마우스에의 dox 투여는 유의한 탈모 및 피부 주름 표현형을 발생시켰다. 푸쿠스 추출물의 투여는 푸쿠스 추출물 처리 없는 mtDNA-고갈체 마우스 (dox 투여 단독)와 비교하여 탈모 및 주름진 피부 표현형을 부분적으로 반전시켰다. 대조군 마우스는 dox 단독 또는 푸쿠스 추출물과 조합으로 dox로 처리된 경우 효과를 나타내지 않았다.

실시예 5: 생체내에서 푸쿠스 추출물에 의한 미토콘드리아 DNA 함량의 복원

미토콘드리아 DNA 함량에 대한 푸쿠스 추출물 처리의 효과를 또한 조사하였다. 실시예 4의 동물로부터의 피부 샘플을 수집하고, 미토콘드리아 DNA 함량에 대해 분석하였으며, 결과는 도 2B에 제시된다. 도 2B에 제시된 바와 같이, mtDNA-고갈체 마우스에의 dox 투여는 대조군 마우스와 비교하여 미토콘드리아 DNA 함량의 유의한 감소를 발생시켰다. 푸쿠스 추출물의 투여는 미토콘드리아 DNA 함량을 완전히 복원시켰다. 이들 결과는 mtDNA-고갈체 마우스에서 탈모 및 주름진 피부 표현형을 반전시키는 것에 대한 푸쿠스 추출물의 유익한 효과가 미토콘드리아 DNA 함량의 보존과 상관됨을 제시한다.

실시예 6: 시험관내에서 미토콘드리아 생물발생 조절 단백질의 발현

엠블리카 추출물, 그의 성분, 푸쿠스 추출물, 및 관련된 화합물을 투여 후 6시간, 24시간, 및 48시간의 시점에서 미토콘드리아 복합체 IV 서브유닛 2 (COXII), 미토콘드리아 전사체 인자 A (TFAM), 및 퍼옥시좀 증식체-활성화된 수용체 감마 공동활성화제 1-알파 (PGC-1a)를 포함하는 미토콘드리아 생물발생 조절 단백질의 유도된 발현에 대해 시험관내에서 시험하였다. 결과는 도 4A 내지 4C의 그래프 및 도 5의 겔-전기영동 화상에 제시된다.

많은 시험된 조성물은 DMSO 참조물과 비교하여 단백질의 증가된 발현을 나타내었다. 발현은 일반적으로 시간의 증가에 따라 증가하였다.

실시예 7: 엠블리카 추출물에 의한 인간 피부 기관 배양물에서의 연령 연관 판독 파라미터의 생체외 조정을 제시하는 예언적 실시예

인간 전체 두께 피부 기관 배양물은 3회의 기술적 반복실험에서 48 x 6 mm 피부 펀치를 받을 것이다. 엠블리카 추출물은 피부 펀칭 후 24시간 및 96시간 또는 120시간에서 전신 및 국부 적용에 의한 0.05% 내지 0.2%의 다양한 농도에서 피부 기관 배양물에 적용될 것이다.

매질의 피부 세포독성은 LDH 검정에 의해 평가될 것이다. 표피 및 진피 형태는 매슨 트리콤(Masson Trichome) 염색에 의해 계내에서 평가될 것이다. 콜라겐 I 발현 및 섬유 조직화는 콜라겐 I 면역형광에 의해 계내에서 평가될 것이다. 표피에서의 MMP1 발현은 MMP1 면역형광에 의해 계내에서 평가될 것이다. 미토콘드리아 마커, 예컨대 MTCO II 및 TFAM의 발현은 미토콘드리아 에너지 및 MTCO II 및 TFAM 면역염색의 상관관계에 의해 계내에서 평가될 것이다. 미토콘드리아 질량은 VDAC 면역염색에 의해 계내에서 평가될 것이다. MTCO II, TFAM, MMP1, VDAC, 및 Col1의 유전자 발현이 또한 평가될 것이다.

나머지 RNA, 매질, 및 조직 샘플은 추적 분석을 위해 저장될 것이다.

엠블리카 추출물 투여 샘플은 비히클 대조군 샘플에 비해 연령 연관 파라미터의 개선된 조정을 나타낼 것으로 예상된다.

실시예 8: 엠블리카 추출물의 적용에 의한 인간 피부에 대한 생체내 항-노화 효과

추가의 특이적 포함 기준을 갖지 않는 가시적인 눈 주름을 나타내는 35 내지 70세의 여성 대상체를 연구를 위해 평가하였다.

대상체에게 대략 12주 동안 얼굴의 한쪽 측면에 매일 2회 엠블리카 추출물 (2 내지 5방울의 엠블리카 추출물 오일) 또는 위약을 적용하도록 지시하였다. 대상체를 저용량의 조성물을 받은 제1 그룹 및 고용량의 조성물을 받은 제2 그룹으로 나누었다. 연구를 스플리트-페이스 디자인으로 수행하였다. 항-주름 특성을 눈가 잔주름의 영역에서 안와주위로 측정하였다. 피부 보습 효과를 볼의 뼈 상에서 평가하였다. 엠블리카 추출물의 효과를 참조 생성물 또는 위약과 비교한다. 대상체는 6주의 시험 후에 선택되는 미리 정의된 선택안을 갖는 10개의 폐쇄형 질문의 설문지를 완결하였다.

대상체는 또한 연구의 완결시에 (12주 후) 최종 설문지를 완결하였다. 중간-연구 결과를 최종 결과와 비교하였다.

설문지는 연구 참가자가 하기 질문에 "동의한다" 또는 "동의하지 않는다"를 선택함으로써 대답하도록 하였다.

Q01 나는 보다 정력적으로 느꼈다

Q02 내 얼굴 피부는 수분을 유지하는 것으로 보인다

Q03 나는 다른 사람들로부터 내 피부에 대한 칭찬을 받았다

Q04 나는 내 얼굴 피부의 외관에 대해 긍정적으로 느꼈다

Q05 나는 일 및/또는 다른 활동에 있어서 보다 생산적이었다

Q06 내 얼굴 피부 위의 라인은 덜 뚜렷한 것으로 보인다

Q07 내 얼굴 피부는 보다 부드러운 것으로 보인다

Q08 내 얼굴 피부는 보다 젊어 보인다

Q09 내 얼굴 피부의 단단함이 개선된다

Q10 나는 시험 오일이 나에게 유익하다고 느끼고, 이 시험 후에 그것을 계속 사용하고 싶다

설문지의 결과는 도 6A 내지 6B의 그래프에 제시된다. 도 6A는 저용량의 조성물을 받은 참가자에 의해 제공된 결과를 포함하고, 도 6B는 고용량의 조성물을 받은 참가자에 의해 제공된 결과를 포함한다.

실시예 9: 시험관내에서 미토콘드리아 생물발생 조절 단백질의 연장된 발현

일반적으로 실시예 6에 기재된 바와 같이, 엠블리카 추출물을 투여 후 6시간, 12시간, 24시간, 48시간, 72시간, 및 96시간의 시점에서 미토콘드리아 복합체 IV 서브유닛 2 (COXII), 미토콘드리아 전사체 인자 A (TFAM), 및 퍼옥시좀 증식체-활성화된 수용체 감마 공동활성화제 1-알파 (PGC-1a)를 포함하는 미토콘드리아 생물발생 조절 단백질의 유도된 발현에 대해 시험관내에서 시험하였다. 0.01%, 0.05%, 0.1% 및 0.2% 엠블리카 추출물의 제제를 시험하였다. 결과는 도 7A 내지 7F (COXII 발현), 8A 내지 8F (TFAM 발현), 및 9A 내지 9F (PCG-1a 발현)의 그래프에 제시된다. 일반적인 경향은 특정 제제가 보다 빠른 시점에서보다 96시간 후에 보다 큰 발현을 유도하였다는 것이다.

나노입자 전달 담체로 제제화된 엠블리카 추출물을 COXII의 유도된 발현에 대해 시험관내에서 시험하고, 투여 후 6시간 및 24시간의 시점에서 비-캡슐화된 조성물과 비교하였다. 결과는 도 10A 내지 10D의 그래프에 제시된다. 구체적으로, 도 10A는 비-캡슐화된 조성물의 투여 후 6시간에서의 COXII 발현을 제시한다. 도 10B는 나노캡슐화된 조성물의 투여 후 6시간에서의 COXII 발현을 제시한다. 도 10C는 비-캡슐화된 조성물의 투여 후 24시간에서의 COXII 발현을 제시한다. 도 10D는 나노캡슐화된 조성물의 투여 후 24시간에서의 COXII 발현을 제시한다.

도 10A 내지 10D에 제시된 데이터에 제시된 바와 같이, 모든 엠블리카 추출물 제제는 COXII 발현의 증가를 나타내었고, 특정 나노캡슐화된 제제는 COXII 발현의 보다 큰 증가를 나타내었다.

실시예 10: 인간 모발 및 인간 피부에 대한 생체외 효과

엠블리카 추출물을 인간 모발 및 인간 피부 샘플에 대해 생체외에서 시험하였다.

인간 모발 샘플

성장기 상에서의 현미경적 모발 사이클 스테이징을 투여 후 6일에 측정하였다 (도 11). 도 11의 그래프에 제시된 바와 같이, 0.01% 엠블리카 추출물 제제는 모발 성장의 성장기 상 (활성 단계)을 연장시킨다.

모발 매트릭스 각질형성세포 증식을 투여 후 6일에 측정하였다 (도 12). 도 12의 그래프에 제시된 바와 같이, 0.01% 엠블리카 추출물 제제는 발아성 모발 매트릭스의 증식을 현저하게 증가시킨다.

면역조직화학적 분석을 수행하여 투여 후 6일에 각질형성세포 증식을 분석하였다 (도 13). 멜라닌 응괴를 면역조직화학적 분석으로부터 측정하였다 (도 14). 도 14의 그래프에 제시된 바와 같이, 0.01% 엠블리카 추출물 제제는 모낭 이영양증, 즉, 조직 취약성 및 멜라닌 응괴를 유발하지 않는다.

인간 피부 샘플

LDH는 세포 독성의 신뢰성 있는 지표로서 널리 확립된 많은 상이한 세포 유형에 존재하는 세포액 효소이다. LDH 방출을 측정하고, 최대 방출에 대해 정규화하였다 (도 15). 도 15의 그래프에 제시된 바와 같이, 다양한 농도 (0.1%, 0.2%, 및 1%)에서 투여되는 경우 엠블리카 추출물 제제는 LDH 방출을 유도하지 않는다.

COL1A1 유전자 발현을 투여 후 24시간 및 5일에 측정하였다 (각각 도 16A 및 16B). COL1A1 유전자는 콜라겐 생산을 담당한다. 도 16A 내지 16B의 그래프에 제시된 바와 같이, 엠블리카 추출물의 투여는 24시간 후에 COL1A1 유전자 발현을 증가시키고, 5일 후에 COL1A1 유전자 발현을 계속 증가시킨다.

MTCO2, TFAM, 및 VDAC 유전자 발현을 투여 후 24시간에 측정하였다 (각각 도 17A 내지 17C). MTCO2, TFAM, 및 VDAC는 미토콘드리아 생물발생 및/또는 미토콘드리아 건강의 바이오마커이다. 도 17A 내지 17B의 그래프에 제시된 바와 같이, 엠블리카 추출물은 MTCO2 및 TFAM 유전자 발현을 각각 유도한다. 도 17C의 그래프에 제시된 바와 같이, 다양한 농도의 엠블리카 추출물 (0.1%, 0.2%, 및 1%)은 24시간 후에 VDAC 유전자 발현을 유도한다.

미토콘드리아 건강 및 활성을 증가시키고, 미토콘드리아를 보호하고, 미토콘드리아 호흡을 조정하는 것을 담당하는 몇몇 표적 유전자의 발현을 실시간 정량적 PCR을 사용하여 확인하였다. 간략하게, 인큐베이션 후, 처리된 생체외 세포를 직접 PCR 용해 시약 (비아젠 바이오테크(Viagen Biotech))으로 용해시켰다. DNA를 택맨 패스트 어드밴스드 마스터 믹스(TaqMan Fast Advanced Master Mix) (라이프 테크놀로지스(Life Technologies))를 사용하여 제조업체의 지시서에 따라 추출하였다. 택맨 유전자 발현 검정 (어플라이드 바이오시스템스(Applied Biosystems))을 각각의 적절한 프라이머로 표준 실시간 정량적 PCR 프로토콜에 따라 수행하였다. 데이터를 2-ΔΔCT 방법에 따라 분석하였다.

표적 유전자는 염기성 섬유모세포 성장 인자 (FGF2), 섬유모세포 성장 인자 수용체 1 (FGFR1), 시토크롬 C 옥시다제 서브유닛 7A1 (COX7A1), 피루베이트 데히드로게나제 키나제 4 (PDK4), 아데닌 뉴클레오티드 트랜스로카제 리신 메틸트랜스퍼라제 (FAM173A), 미토콘드리아 리보솜 단백질 L12 (MRPL12), 및 무시-유형 MMTV 통합 부위 패밀리, 구성원 11 (WNT11)을 포함한다. 발현을 투여 후 24시간 또는 120시간에 측정하였다. 결과는 도 18A 내지 18B의 그래프에 제시된다. 도 18A 내지 18B의 그래프에 제시된 바와 같이, 국부적으로 적용되는 경우, 엠블리카 추출물 제제는 시험된 시점에서 모든 u7 중요한 유전자를 활성화시킨다.

실시예 11: 시험관내에서 미토콘드리아 생물발생 조절 단백질의 발현

일반적으로 실시예 6에 기재된 바와 같이, 엠블리카 추출물의 선택된 구성성분을 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간의 시점에서 COXII 및 TFAM을 포함하는 미토콘드리아 생물발생 조절 단백질의 유도된 발현에 대해 시험관내에서 시험하였다. 다양한 농도의 제제를 시험하였다. 결과는 도 19A 내지 31D의 그래프에 제시된다. 간략하게, 케불라그산, 케불린산, 카엠프페롤, 엘라그산, 아스코르브산, 시트르산, 갈산, 퀘르세틴, 푸니칼라긴을 표적 단백질의 유도된 발현에 대해 2.5 μM 내지 100 μM의 범위의 농도에서 시험하였다.

실시예 12: 엠블리카 추출물 및 케불린산의 나노캡슐화

일반적으로 실시예 6에 기재된 바와 같이, 엠블리카 추출물 및 케불린산 제제 및 나노캡슐화된 케불린산 제제를 투여 후 6, 12, 18, 및 24시간의 시점에서 미토콘드리아 생물발생 조절 단백질 COXII 및 TFAM의 유도된 발현에 대해 시험관내에서 시험하였다. 다양한 농도의 제제를 시험하였다. 결과는 도 32A 내지 32D (COXII) 및 33A 내지 33D (TFAM)의 그래프에 제시된다.

0.01% 내지 0.2% 엠블리카 추출물 및 50 내지 400 μg/L의 다양한 농도의 나노입자 로딩의 투여 후 6시간에서의 COXII의 유도된 발현을 시험하였다. 결과는 도 34A 내지 34B의 그래프에 제시된다. 도 34A 내지 34B의 그래프에 제시된 바와 같이, 보다 큰 화합물 로딩의 결과로서 보다 큰 효과가 관찰되었다.

4.4 μm 내지 95 μm의 크기의 나노입자 조성물 (엠블리카 추출물의 존재 및 부재 하에)의 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 COXII 및 TFAM의 유도된 발현을 시험하였다. 결과는 도 35A 내지 35D (COXII), 도 36A 내지 36D (TFAM), 및 도 37A 내지 37D (COXII)의 그래프에 제시된다. 그래프에서, x 축 범례는 하기와 같다:

나노 A: Y100 (엠블리카 추출물) 분말 로딩됨 (40% LF; 평균 입자 크기 = 11.6 μm)

나노 B: Y100 (엠블리카 추출물) 오일 로딩됨 (42% LF; 평균 입자 크기 = 9.4 μm)

나노 C: 비도핑된 블랭크 (평균 입자 크기 7.7 μm)

나노 D: 큰 크기 옥틸-도핑된 블랭크 (평균 입자 크기 95 μm)

나노 E; 작은 크기 옥틸-도핑된 블랭크 (평균 입자 크기 = 4.4 μm)

도 35A 내지 35D, 36A 내지 36D, 및 37A 내지 37D의 그래프에 제시된 바와 같이, 보다 작은 입자의 결과로서 보다 큰 효과가 일반적으로 관찰되었다.

유사한 크기를 갖는 나노입자 조성물 (엠블리카 추출물의 존재 및 부재 하에) (옥틸-도핑의 존재 및 옥틸-도핑의 부재 하에)의 투여 후 6, 12, 24, 및 48시간에서의 COXII 및 TFAM의 유도된 발현을 시험하였다. 결과는 도 38A 내지 38D (COXII), 및 도 39A 내지 39D (TFAM)의 그래프에 제시된다. 도 38A 내지 38D 및 39A 내지 39D에 제시된 데이터에 제시된 바와 같이, 옥틸-도핑된 입자는 그들의 비도핑된 대응물보다 더 큰 발현을 나타내었다.

전체적으로, 데이터는 미토콘드리아 생물발생의 유도가 나노입자 로드에 좌우되고, 나노입자의 크기가 미토콘드리아 생물발생에 영향을 미침을 제시한다. 나노입자 제조 (옥틸-도핑된 것 및 비도핑된 것 사이) 및 로드의 차이는 미토콘드리아 생물발생 유도에 대한 효과를 갖는다.

실시예 13: 심부 신경 네트워크로 엠블리카닌을 스크리닝하는 방법

트랜스포머(Transformer) 아키텍처에 기반한 심부 신경 네트워크, 구체적으로 엘렉트라(Electra) 디자인을 화합물을 스크리닝하는 목적을 위해 개발하였다. 화학 반응의 크고 광범위하게 증강된 데이터세트를 사용하여, 베이스 신경 네트워크를 유기 화학에 대한 비배타적 초점을 갖는 폭넓은 범위의 일반적 화학 반응을 모델링하도록 트레이닝하였다. 데이터 증강을 사용하여 신경 네트워크가 베이스 트레이닝 데이터의 서열 순서와 무관하에 일반적 화학의 통계적 패턴을 학습하는 것을 보장하였다. 따라서, 신경 네트워크는 어떻게 화학 반응이 SMILES 묘사의 서열의 임의적 변화 또는 반응물 분자가 제시되는 순서와 무관하게 작동하는지 학습하도록 강제된다.

본 실시예에서, 신경 네트워크는 화학물질 또는 화학 반응에 관한 모든 관련된 정보를 '임베딩'으로 공지된 콤팩트한 묘사로 증류시키는데 유용하다. 신경 네트워크의 경우, 임베딩은 모델이 화학물질 또는 화학 반응에 관하여 결정할 수 있는 모든 관련된 정보를 포함하는 768개의 수의 서열이다. 이는 다른 용도 중에서도, 임의의 2개의 화합물의 유사성을 결정하는데 사용될 수 있는 사실상 768-차원 벡터이다. 수학적 측정, 예컨대 코사인 유사성과 함께, 기계 학습 기술, 예컨대 부분적 성분 분석 (PCA) 및 T-분포된 추계적 이웃 임베딩 (T-SNE) - 일반적으로 "차원수-감소"로 지칭되는 기술 - 을 768-차원 임베딩에 대해 사용하여 인간 전문가에 의해 확인된 후보 분자와 화학적으로 유사한 화합물을 검출하였다. 이는 시험을 위해 이용가능한 가장 화학적으로 유사한 화합물을 선택함으로써 후보 천연 생성물 분자의 필드를 많은 정도의 크기만큼 걸러내는 것을 가능하게 만들었다.

상기 기재된 "비감독된 학습" 기술 외에도, 모델은 추가의 용도를 갖는다. 예를 들어, 문헌 ["NPClassifier: A Deep Neural Network-Based Structural Classification Tool for Natural Products," (Kim, 2021)] (모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 방법을 사용한 표지된 트레이닝 데이터세트는 이러한 표지된 2차 데이터세트의 정도에 의해서만 제한되는 특이적 과업, 예컨대 천연 화합물의 주요 및 부수 카테고리, 예컨대 알칼로이드/아미노산/펩티드/탄수화물 및 마크롤리드/선형 폴리케티드/테트라메이트 알칼로이드 등으로의 분류에 대한 네트워크를 미세-조정하는 것을 가능하게 만든다. 전달 학습의 기술을 통해 이 2차 과업에 대한 네트워크를 트레이닝함으로써, 네트워크는 카테고리 및 화학적 유사성 둘 다에 의해 유용한 화합물을 보다 더 확인할 수 있게 된다.

물질 및 방법

mtDNA-고갈체 마우스의 생성

D1135A-POLG1 부위-지정 돌연변이를 전장 인간 POLG1 상보적 DNA (cDNA)에서 부위-지정 돌연변이유발 키트 (애질런트, 미국 캘리포니아주 산타 클라라)를 사용하여 생성하였다. 부위-지정 돌연변이유발에 사용된 프라이머 서열은 하기와 같으며, 돌연변이된 부위는 대문자이다: D1135A_F:5'-gcatcagcatccatgCGgaggttcgctacctgg-3' (서열식별번호(SEQ ID NO): 1) 및 D1135A_R:5'-ccaggtagcgaacctcCGcatggatgctgatgc-3' (서열식별번호: 2). 돌연변이를 시퀀싱에 의해 확인하였다. D1135A-POLG1 cDNA를 dox-유도가능한 포유동물 발현 벡터, pTRE-타이트(Tight)-BI-AcGFP1 (클론테크(Clontech), 미국 캘리포니아주 팔로 알토) 내로 서브클로닝하였다. 인간 D1135A-POLG1 (POLG1-DN)의 배선 전파를 수득하기 위해, C57BL/6 마우스로부터의 수정된 난모세포 내로의 pTRE-타이트-BI-AcGFP1-D1135A-POLG1 구축물의 미세주사를 수행하였다. 잠재적 파운더를 PCR을 사용하여 인간 Polg1 트랜스진의 존재에 대해 꼬리 생검으로부터의 게놈 DNA를 스크리닝함으로써 확인하였다. 이형접합성 인간 POLG1-양성 (+/POLG1-DN⁺) 파운더 수컷 마우스를 CAG-rtTA3 (rtTA) C57BL/6 암컷 마우스 (잭슨 래버로토리스(Jackson Laboratories), 스톡 번호 016532)와 교미시켜 +/POLG1-DN⁺ rtTA⁺ 이형접합성 트랜스제닉 마우스를 수득하였다. +/POLG1-DN⁺ rtTA⁺ 이형접합성 마우스를 상호교배하여 동형접합성 POLG1-DN⁺ rtTA⁺/POLG1-DN⁺ rtTA⁺ 마우스 (mtDNA-고갈체 마우스)를 생성하였다. 이 교배는 정상적인 한배새끼 수 (6 내지 7마리의 새끼) 및 유전자형의 멘델 분포, 즉, 야생형, 이형접합성 +/POLG1-DN⁺ 또는 +/rtTA⁺ 및 동형접합성 POLG1-DN⁺ rtTA⁺/POLG1-DN⁺ rtTA⁺의 1:2:1 분포를 발생시켰으며, 이는 POLG1-DN 대립유전자에 대한 동형접합성이 배아 또는 출생후 치명성을 발생시키지 않음을 제시한다. 모든 마우스는 식이에 있어서 dox (200 mg/kg 식이) 및 물 (5% 수크로스 물 중 2 mg/ml dox)이 무제한으로 주어졌다. 모든 동물 실험은 기관 동물 관리 및 사용 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)에 의해 확립된 지침을 따름으로써 수행되었다.

조직학적 및 면역조직화학적 분석

등쪽 측면으로부터의 피부 뿐만 아니라 다른 조직을 완충된 포르말린에서 고정시키고, 파라핀에 포매시키고, 섹션화하고 (5μM), 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다. 피부 섹션을 김사 염색으로 염색하여 비만 세포를 검출한 반면, MPO, CD3, CD163, 및 Pax-5 항체를 면역조직화학적 분석에 의한 염증 세포의 다른 유형의 검출에 사용하였다 (Carson, et al., Histotechnology: A Self-Instruction Text, 3 ed., American Society for Clinical Pathology Press, Hong Kong, 2009).

RT-PCR 및 mtDNA 함량 분석

RT-PCR에 의해 상대 유전자 발현을 측정하기 위해, 피부 샘플로부터의 총 세포 RNA를 트리졸(Trizol) (인비트로젠(Invitrogen), 미국 캘리포니아주 칼스배드)을 사용하여 단리하였다. 대략 1000 내지 2000ng RNA를 샘플에 걸쳐 정규화하고, cDNA를 이스크립트(Iscript) cDNA 합성 키트 (바이오-래드 래버러토리스(Bio-Rad Laboratories), 미국 캘리포니아주 허큘레스)를 사용하여 생성하였다. 이어서 cDNA를 그린 택(Green Taq) PCR 혼합물 (프로메가(Promega), 미국 위스콘신주 매디슨) 및 하기 표 1에 주어진 바와 같은 유전자-특이적 프라이머를 사용하여 RT-PCR에 적용하였다. PCR 생성물을 1.5 내지 2% 아가로스 겔 상에서 구동시키고, 겔 문서화 시스템을 사용하여 사진을 찍었다. 적어도 3회의 생물학적 반복실험을 각각의 PCR에 사용하였다. β2-마이크로글로불린 또는 RNU6B를 각각의 PCR에서 내부 대조군으로서 사용하였다.

피부 및 다른 조직 내의 mtDNA 함량 분석을 이전에 보고된 바와 같이 수행하였다 (Singh et al., PloS One, 10, e0139846, 2015). 간략하게, mtDNA 함량을 실시간 PCR에 의해 하기 프라이머로의 절대 정량화에 의해 분석하였다: mMitoF: 5'-CTAGAAACCCCGAAACCAAA-3' (서열식별번호. 55), mMitoR: 5'-CCAGCTATCACCAAGCTCGT-3' (서열식별번호. 56), mB2MF: 5'-ATGGGAAGCCGAACATACTG-3' (서열식별번호. 57), 및 mB2MR: 5'-CAGTCTCAGTGGGGGTGAAT -3' (서열식별번호. 58). 베타-2-마이크로글로불린 (B2M)을 내부 대조군으로서 사용하였다.

마이크로어레이 유전자 분석

총 RNA 샘플을 5일의 dox 유도 후에 MCF-7 세포를 발현하는 POLG1 D1135A로부터 및 트리졸 추출 방법 (인비트로젠)에 의해 5일 동안 dox의 부재 하에서 성장된 세포로부터 추출하였다. 일루미나(Illumina) 인간 마이크로어레이 유전자 발현 분석을 이전에 기재된 바와 같이 총 RNA 샘플로 수행하였다.

BN-PAGE 및 웨스턴 블롯 분석

미토콘드리아 단리를 이전에 기재된 바와 같이 수행하였다 (Johnstone et al., J Biol Chem, 277, 42197-42204, 2002). 미토콘드리아 OXPHOS 슈퍼 복합체를 분석하기 위해, 블루-네이티브(Blue-Native) 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 (BN-PAGE)을 피부 샘플로부터 제조된 미토콘드리아 분획으로 이전에 기재된 바와 같이 수행하였다 (Schagger et al., Mehtods Enzymol, 260, 190-202, 1995). 피부 샘플에서의 미토콘드리아 OXPHOS 서브유닛의 단백질 발현을 표준 이뮤노블롯에 따라 수행하였다. OXPHOS 복합체의 서브유닛에 대한 1차 모노클로날 항체 (미토사이언시스(Mitosciences), 미국 오레곤주 유진)를 함유하는 사전 혼합된 칵테일을 사용하여, BN-PAGE 분석에서 OXPHOS 슈퍼 복합체 및 이뮤노블롯 분석에서 OXPHOS 서브유닛의 단백질 발현을 검출하였다. 전압-의존성 음이온 채널 (VDAC) 또는 β-액틴 항체를 로딩 대조군으로서 사용하였다.

OXPHOS 복합체의 효소적 활성의 분석

단리된 미토콘드리아를 이전에 기재된 바와 같이 OXPHOS 복합체의 효소적 활성의 측정에 사용하였다 (Owens et al., PloS One, 6, e23846, 2011).

투과 전자 현미경검사

피부 샘플의 투과 전자 현미경 분석을 이전에 기재된 바와 같이 수행하였다 (NAG et al., J Mol Cell Cardiol, 15, 301-317, 1983). 화상을 FEI-테크나이(Tecnai) 전자 현미경으로 취하였다.

세포 배양

야생형 C57BL/6 (대조군 세포) 및 D1135A-POLG1 부위-지정 돌연변이 (POLG1-DN 세포)를 함유하는 mtDNA-고갈체 마우스로부터의 피부 섬유모세포를 생성하고, 기재된 바와 같이 자발적으로 불멸화하였다 (Todaro et al., J Cell Biol, 17, 299-313 (1963). 이들 세포를 10% FBS (아틀란타 바이올로지칼스(Atlanta Biologicals), 미국 조지아주 로렌스빌)로 보충된 DMEM/F12 (셀그로(Cellgro), 미국 버지니아주 헌던)에서 유지하였다. 피부 섬유모세포에서 POLG1-DN 발현을 유도하기 위해, 물에 용해된 1 μg/ml dox를 배양물 중 세포에 첨가하고, 6일의 인큐베이션 후, 세포를 PBS로 세척하고, 총 RNA의 단리를 위해 트리졸에서 수집하였다.

세포 증식 및 세포 생존을 추정하기 위해, MTT 검정을 이전에 기재된 바와 같이 수행하였다 (Ronghe et al., J Steroid Biochem Mol Biol, 144 PtB, 500-512, 2014). 대조군 및 POLG1-DN 세포 둘 다를 먼저 3일 동안 dox (1 μg/ml)로 처리하고, 이어서 세포를 dox (1 μg/ml) 함유 배양 배지의 존재 또는 부재 하에 96 웰 플레이트에 3000개의 세포/웰의 밀도로 플레이팅하였다. 24시간마다 판독을 수행하였다.

엠블리카 추출물의 제조

엠블리카 오피시날리스를 상업적으로 입수가능한 당의정 (히말라야 드럭 컴퍼니, 미국 텍사스주 슈가 랜드)으로부터 수득하였다. 각각의 당의정은 600 mg (250 mg 과실 추출물 (45% 탄닌), 350 mg 분말 줄기 (2% 탄닌)를 함유한다. 당의정을 분쇄하고, 멸균수에 용해시켜 100 mg/ml 용액을 만들고, 이어서 여과하였다. 이어서 엠블리카 용액을 국부 적용을 위한 적절한 연고 베이스와 혼합하였다. 적합한 연고 베이스는 더마베이스 연고 (마르셀(MARCELLE)®; 물, 미네랄 오일, 프로필렌 글리콜, 스테아릴 알콜, 세틸 에스테르, 세틸 알콜, 글리세릴 스테아레이트, 나트륨 라우릴 술페이트, 레시틴, 및 메틸파라벤) 및 1:1 w/v) 및 게리트렉스(Geritrex) 친수성 연고 (NDC 54162-670-14)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 연고 베이스 및 엠블리카 용액을 임의의 편리한 비, 예를 들어 1:5 w/v 엠블리카 용액 대 연고 베이스 내지 5:1 w/v 엠블리카 용액 대 연고 베이스로 첨가하였다. 연고 베이스 및 엠블리카 용액을 1:1 w/v 비 엠블리카 용액 대 연고 베이스로 첨가하였다.

푸쿠스 추출물의 제조

푸쿠스 베시쿨로수스 (일명 블래더 랙, 블랙 탕, 록위드, 블래더 푸쿠스, 씨 오크, 컷 위드, 디어스 푸쿠스, 레드 푸쿠스, 및 록 랙) 분말을 메인 코스트 씨 베지터블스, 인크.(Maine Coast Sea Vegetables, Inc.) (미국 미네소타주 핸콕)로부터 수득하였다. 수용액 (100 mg/ml) 용액을 푸쿠스 분말로부터 제조하고, 여과하였다. 이어서 푸쿠스 용액을 국부 적용을 위한 적절한 연고 베이스와 혼합하였다. 적합한 연고 베이스는 더마베이스 연고 (마르셀®; 물, 미네랄 오일, 프로필렌 글리콜, 스테아릴 알콜, 세틸 에스테르, 세틸 알콜, 글리세릴 스테아레이트, 나트륨 라우릴 술페이트, 레시틴, 및 메틸파라벤) 및 1:1 w/v) 및 게리트렉스 친수성 연고 (NDC 54162-670-14)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 연고 베이스 및 푸쿠스 용액을 임의의 편리한 비, 예를 들어 1:5 w/v 푸쿠스 용액 대 연고 베이스 내지 5:1 w/v 푸쿠스 용액 대 연고 베이스로 첨가하였다. 연고 베이스 및 푸쿠스 용액을 1:1 w/v 비 푸쿠스 용액 대 연고 베이스로 첨가하였다.

엠블리카 추출물 생체내 실험 디자인

동물 실험을 위해, 마우스의 등쪽 피부를 피부에의 조성물의 투여의 개시 전 대략 2일에 탈모시켰다 (예를 들어, 저-용량 이소플루란 흡입 마취 하에서 면도하였다). 다양한 활성 조성물 및 대조군 조성물을 기재된 바와 같이 매일 등쪽 피부에 국부적으로 적용하였다. 마우스의 피부를 수집 및 분석 전에 탈모시켰다.

100 mg/mL 수용액의 농도의 엠블리카 추출물 연고를 마우스의 등쪽 피부의 한정된 면도된 영역에 매일 국부적으로 적용하였다. 대조군 조성물은 엠블리카 추출물의 첨가 없이 동일한 양의 연고 베이스를 포함하였다.

100 mg/mL 수용액의 농도의 푸쿠스 추출물 연고를 마우스의 등쪽 피부의 한정된 면도된 영역에 매일 국부적으로 적용하였다. 대조군 조성물은 푸쿠스 추출물의 첨가 없이 동일한 양의 연고 베이스를 포함하였다.

mtDNA-고갈체 마우스 (D1135A-POLG1 돌연변이를 함유함) 뿐만 아니라 야생형 C57BL/6 마우스 (대조군)를 예방 및 치료적 실험에 사용하였다.

예방적 실험에서, 상기 기재된 바와 같은 매일 엠블리카 추출물 처리를 POLG1-DN의 dox-매개 유도를 시작하기 전 7일에 시작하였다. mtDNA-고갈체 및 야생형 C57BL/6 마우스 둘 다를 2개의 처리 그룹으로 나누었다: i) 대조군 그룹 (연고 베이스만으로 처리됨, n = 5); 및 ii) 시험 그룹 (엠블리카 추출물 연고로 처리됨, n=5). 매일 투여를 실험의 종료까지 계속하였다 (최대 112일).

치료적 실험에서, 야생형 C57BL/6 마우스 (대조군) 및 mtDNA-고갈체 마우스를 먼저 30일 동안 dox로 유도하고, 이어서 상기 기재된 바와 같은 엠블리카 추출물 처리를 실험의 종료까지 매일 적용하였다 (최대 112일). mtDNA-고갈체 및 야생형 C57BL/6 마우스 둘 다를 2개의 처리 그룹으로 나누었다: i) 대조군 그룹 (연고 베이스만으로 처리됨, n = 5); 및 ii) 시험 그룹 (엠블리카 추출물 연고로 처리됨, n=5).

dox 투여의 기간 동안, 실시예 1 내지 13에 대해 마우스는 식이에 있어서 dox (200 mg/kg 식이) 및 물 (5% 수크로스 물 중 2 mg/ml dox)이 무제한으로 주어졌고, 실시예 14 내지 15에 대해 마우스는 식이에 있어서 dox (2 mg/kg 식이) 및 물 (5% 수크로스 물 중 2 mg/ml dox)이 무제한으로 주어졌다. 예방적 및 치료적 생체내 실험 둘 다의 개략도는 도 3에 제시되며, 실시예 3 내지 5에서의 특정 실험에서, 엠블리카 추출물 또는 푸쿠스 추출물 투여의 시간 과정은 도 3에 명시된 시간 기간의 종료 넘어서 계속되었음을 주목한다 (즉, 최대 112일).

통계적 분석

통계적 분석을 독립표본 스튜던트 t 검정을 사용하여 수행하였다. 데이터는 평균±s.e.m으로서 표현된다. P 값 <0.05는 유의한 것으로 간주되었다. 모든 세포 실험을 적어도 3회 반복하였다.

본원에 사용된 어구 및 용어는 설명의 목적을 위한 것이며, 제한적인 것으로 간주되지 않아야 한다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "복수"는 2개 이상의 항목 또는 성분을 지칭한다. 용어 "포함하는(comprising)", "포함하는(including)", "보유하는", "갖는", "함유하는", 및 "수반하는"은 서면의 설명에서든지 청구범위 등에서든지, 개방-단부 용어, 즉, "포함하지만 이에 제한되지 않는"을 의미한다. 따라서, 이러한 용어의 사용은 그 뒤에 열거된 항목, 및 그의 등가물, 뿐만 아니라 추가적인 항목을 포함하는 것으로 의미된다. 단지 전이적 어구 "이루어진" 및 "본질적으로 이루어진"은 청구범위에 관하여 각각 폐쇄 또는 반-폐쇄 전이적 어구이다. 청구항 요소를 수식하기 위한 청구범위에서의 서수 용어, 예컨대 "제1", "제2", "제3" 등의 사용은 그것만으로 또 다른 것에 비한 한 청구항 요소의 임의의 우선성, 선행성, 또는 순서 또는 방법의 작용이 수행되는 시간적 순서를 내포하지 않지만, 단지 특정 명칭을 갖는 한 청구항 요소를 동일한 명칭 (서수 용어의 사용을 제외하고)을 갖는 또 다른 요소로부터 구별하여 청구항 요소를 구별하는 표지로서 사용된다.

적어도 한 실시양태의 몇몇 측면이 그렇게 기재되었지만, 다양한 변경, 변형, 및 개선이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 용이하게 일어날 것임을 인정해야 한다. 임의의 실시양태에 기재된 임의의 특색은 임의의 다른 실시양태의 임의의 특색에 포함되거나 그에 대해 치환될 수 있다. 이러한 변경, 변형, 및 개선은 본 개시내용의 일부인 것으로 의도되며, 본 발명의 범위 내인 것으로 의도된다. 따라서, 상기 설명 및 도면은 단지 예로서이다.

관련 기술분야의 통상의 기술자는 본원에 기재된 파라미터 및 배치가 예시적이며, 실제 파라미터 및/또는 배치는 개시된 방법 및 물질이 사용되는 구체적인 적용에 좌우될 것임을 인정해야 한다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 또한 통상적인 실험 이하를 사용하여, 개시된 구체적인 실시양태에 대한 등가물을 인식하거나 확인할 수 있을 것이다.

Claims

대상체에서 미토콘드리아 기능장애를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법으로서, 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화-연관 만성 질환 또는 상태를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
대상체에서 에너지 수준 및/또는 활력의 감소를 개선시키거나 예방하는 방법으로서, 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 엠블리카 추출물이 엠블리카 오피시날리스(Emblica officinalis)로부터 유래된 것인 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분이 1 내지 5개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 3개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 5개의 히드록시 기로 치환된 벤젠, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 상기의 조합인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분이 갈산, 바닐산, 클로로겐산, 카페인산, 시링산, 쿠마르산, 퀘르세틴, 엠블리카닌 A, 엠블리카닌 B, 푸니글루코닌, 페둔쿨라긴, 푸니카폴린, 필라넴블린, 카엠프페롤, 엘라그산, 케불린산, 케불라그산, 푸니칼라긴, 또는 상기 중 임의의 것의 대사물, 상기 중 임의의 것과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물, 또는 상기 중 임의의 것의 제약상 허용되는 형태인 방법.
대상체에서 미토콘드리아 기능장애를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법으로서, 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화-연관 만성 질환 또는 상태를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
대상체에서 에너지 수준 및/또는 활력의 감소를 개선시키거나 예방하는 방법으로서, 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 푸쿠스 추출물이 푸쿠스 베시쿨로수스(Fucus vesiculosus), 푸쿠스 세라투스(Fucus serratus), 푸쿠스, 스피랄리스(Fucus, spiralis), 또는 푸쿠스 구이리이(Fucus guiryi)로부터 유래된 것인 방법.
제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분이 1 내지 5개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 3개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 5개의 히드록시 기로 치환된 벤젠, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 상기의 조합인 방법.
제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분이 갈산, 바닐산, 클로로겐산, 카페인산, 시링산, 쿠마르산, 퀘르세틴, 푸코이단, 푸니글루코닌, 페둔쿨라긴, 푸니카폴린, 필라넴블린, 카엠프페롤, 엘라그산, 케불린산, 케불라그산, 푸니칼라긴, 상기 중 임의의 것의 대사물, 상기 중 임의의 것과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물, 또는 상기 중 임의의 것의 제약상 허용되는 형태인 방법.
대상체에서 미토콘드리아 기능장애를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상을 치료하거나 예방하는 방법으로서, 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
대상체에서 미토콘드리아 기능장애와 관련된 노화-연관 만성 질환 또는 상태를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
대상체에서 에너지 수준 및/또는 활력의 감소를 개선시키거나 예방하는 방법으로서, 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
제15항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 케불라 추출물이 테르미닐리아 케불라(Terminilia chebula), 테르미날리아 아르보레아(Terminalia arborea), 또는 룸니체라 라세모스(Lumnitzera racemose)로부터 유래된 것인 방법.
제15항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 케불라 추출물의 화합물 구성성분이 1 내지 5개의 히드록시 기 및 임의로 1 내지 3개의 O-(C₁-C₅ 알킬) 또는 O-(C₁-C₅ 알케닐) 기로 치환된 벤조산, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 -CH=CH-(CH₂)_a-C(O)OH (여기서 a는 0 내지 5임), 및 1 내지 5개의 히드록시 기로 치환된 벤젠, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 상기의 조합인 방법.
제15항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 케불라 추출물의 화합물 구성성분이 갈산, 바닐산, 클로로겐산, 카페인산, 시링산, 쿠마르산, 퀘르세틴, 탄닌산, 푸니글루코닌, 페둔쿨라긴, 푸니카폴린, 필라넴블린, 카엠프페롤, 엘라그산, 케불린산, 케불라그산, 푸니칼라긴, 또는 상기 중 임의의 것의 대사물, 상기 중 임의의 것과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 화합물, 또는 상기 중 임의의 것의 제약상 허용되는 형태인 방법.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이
엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량;
푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량; 및
케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량
중 2종 이상을 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 방법이
엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량;
푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 함유된 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량; 및
케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 유효량
중 2종 이상을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 엠블리카 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 제2 또는 후속 양을 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 푸쿠스 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 제2 또는 후속 양을 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 케불라 추출물, 또는 그의 제약상 허용되는 형태, 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분 또는 케불라 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태의 제2 또는 후속 양을 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제23항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 또는 후속 양이 동일한 제제의 제2 용량으로서 투여되는 것인 방법.
제23항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 또는 후속 양이 또 다른 제제에서 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태로 강화된 것인 방법.
제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 형태로 강화된 것인 방법.
제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 엠블리카 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것이 정제된, 예를 들어, 적어도 80% 정제된, 적어도 85% 정제된, 적어도 90% 정제된, 적어도 95% 정제된, 적어도 98% 정제된, 적어도 99% 정제된, 적어도 99.9% 정제된, 적어도 99.99% 정제된, 또는 적어도 99.999% 정제된 것인 방법.
제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 푸쿠스 추출물의 1종 이상의 화합물 구성성분 또는 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분과 적어도 95%의 유사성 점수를 갖는 것이 정제된, 예를 들어, 적어도 80% 정제된, 적어도 85% 정제된, 적어도 90% 정제된, 적어도 95% 정제된, 적어도 98% 정제된, 적어도 99% 정제된, 적어도 99.9% 정제된, 적어도 99.99% 정제된, 또는 적어도 99.999% 정제된 것인 방법.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 유효량이 치료 유효량인 방법.
제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 치료 또는 예방이 미토콘드리아 생물발생을 유도하는 것 및/또는 미토콘드리아 기능을 개선시키는 것을 수반하는 것인 방법.
제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 유효량 또는 치료 유효량이 미토콘드리아 생물발생을 유도하는데 충분한 것인 방법.
제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 투여가 PGC-1a, TFAM, NRF-1, 및 COX II로부터 선택되는 적어도 1종의 단백질의 발현을 증가시키는 것인 방법.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 국부적으로 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 비경구로, 예를 들어, 정맥내로, 복강내로, 또는 근육내로 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 장관내로 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 국부 용액, 오일, 크림, 에멀젼, 또는 겔로서 제제화되는 것인 방법.
제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 샴푸, 컨디셔너, 스프레이, 크림, 겔, 밤, 바디 워시, 비누, 로션, 또는 화장품으로서 제제화되는 것인 방법.
제1항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 비경구 액체 용액으로서 제제화되는 것인 방법.
제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 장용 캡슐 또는 정제, 또는 식이 보충제 또는 식품, 예를 들어, 식품, 식품 보충제, 의료용 식품, 식품 첨가제, 뉴트라슈티칼, 또는 드링크로서 제제화되는 것인 방법.
제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 국소적으로 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 전신적으로 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 즉시 방출을 위해 제제화되는 것인 방법.
제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 연장된 방출, 예를 들어, 제어된 또는 지속된 방출을 위해 제제화되는 것인 방법.
제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 나노입자-기반 전달 담체를 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 피부 침투 증진제를 포함하거나 또는 피부 침투 증진제, 예를 들어, 화학적 피부 침투 증진제 또는 물리적 피부 침투 증진제와 조합으로 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 미토콘드리아-표적화제 또는 미토콘드리아-표적화제로 관능화된 전달 담체를 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, 미토콘드리아 기능장애와 연관된 질환 또는 상태 또는 그의 증상이 심혈관 질환, 당뇨병, 암, 신경 장애, 또는 피부 질환 또는 상태인 방법.
제51항에 있어서, 피부 질환 또는 상태가 피부 주름, 피부 색소침착의 변화, 노인성 흑점, 또는 피지선의 질환 또는 상태인 방법.
제51항에 있어서, 피부 질환 또는 상태가 두피 또는 모발 질환 또는 상태, 예를 들어, 탈모, 모발 가늘어짐, 또는 모발 색소침착의 변화인 방법.
제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분이 엠블리카 추출물로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리된 것인 방법.
제1항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분이 엠블리카 추출물 이외의 공급원으로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리된 것인 방법.
제1항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 엠블리카 추출물의 화합물 구성성분이 합성된 것인 방법.
제1항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분이 푸쿠스 추출물로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리된 것인 방법.
제1항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분이 푸쿠스 추출물 이외의 공급원으로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리된 것인 방법.
제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 푸쿠스 추출물의 화합물 구성성분이 합성된 것인 방법.
제1항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 케불라 추출물의 화합물 구성성분이 케불라 추출물로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리된 것인 방법.
제1항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 케불라 추출물의 화합물 구성성분이 케불라 추출물 이외의 공급원으로부터 유래되거나, 그로부터 정제되거나, 또는 그로부터 단리된 것인 방법.
제1항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 케불라 추출물의 화합물 구성성분이 합성된 것인 방법.