KR20230009407A - 비알코올성 지방간 질환 및 비알코올성 지방간염 치료용 카보네이트를 함유한 프테로스틸벤 아미노산의 신규 유사체 - Google Patents

비알코올성 지방간 질환 및 비알코올성 지방간염 치료용 카보네이트를 함유한 프테로스틸벤 아미노산의 신규 유사체 Download PDF

Info

Publication number
KR20230009407A
KR20230009407A KR1020227041592A KR20227041592A KR20230009407A KR 20230009407 A KR20230009407 A KR 20230009407A KR 1020227041592 A KR1020227041592 A KR 1020227041592A KR 20227041592 A KR20227041592 A KR 20227041592A KR 20230009407 A KR20230009407 A KR 20230009407A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
nmr
ppm
mhz
compound
amino
Prior art date
Application number
KR1020227041592A
Other languages
English (en)
Inventor
타이황 쿠오
포-췐 시에
밍-롱 청
치-웨이 푸
Original Assignee
애피컬 몰레큘러 바이오테크 씨오., 엘티디.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 애피컬 몰레큘러 바이오테크 씨오., 엘티디. filed Critical 애피컬 몰레큘러 바이오테크 씨오., 엘티디.
Publication of KR20230009407A publication Critical patent/KR20230009407A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C329/00—Thiocarbonic acids; Halides, esters or anhydrides thereof
    • C07C329/02—Monothiocarbonic acids; Derivatives thereof
    • C07C329/04—Esters of monothiocarbonic acids
    • C07C329/06—Esters of monothiocarbonic acids having sulfur atoms of thiocarbonic groups bound to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/20—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/27—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbamic or thiocarbamic acids, meprobamate, carbachol, neostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C219/00—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C219/02—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having esterified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C219/20—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having esterified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated
    • C07C219/22—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having esterified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated and containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C229/06—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having only one amino and one carboxyl group bound to the carbon skeleton
    • C07C229/10—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having only one amino and one carboxyl group bound to the carbon skeleton the nitrogen atom of the amino group being further bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C229/24—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having more than one carboxyl group bound to the carbon skeleton, e.g. aspartic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C229/26—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having more than one amino group bound to the carbon skeleton, e.g. lysine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/40—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C271/42—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/48—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/40—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C271/42—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/52—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/14—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/24—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/29—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/60—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxyl groups bound to nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D209/20—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals substituted additionally by nitrogen atoms, e.g. tryptophane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/64—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms, e.g. histidine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

일련의 카보네이트 함유 수용성 프테로스틸벤 아미노산의 신규 유사체가 합성되었으며, 이는 비알코올성 지방간 질환 및 비알코올성 지방간염(NASH)의 치료에 있어서 활성을 나타낸다.

Description

비알코올성 지방간 질환 및 비알코올성 지방간염 치료용 카보네이트를 함유한 프테로스틸벤 아미노산의 신규 유사체
본 발명은 비알코올성 지방간 질환(NAFLD) 및 비알코올성 지방간염(NASH)을 치료하기 위한 카보네이트를 함유한 프테로스틸벤 아미노산의 신규 유사체에 관한 것이다.
비알코올성 지방간 질환(NAFLD)은, 역시 비알코올성 지방간 질환으로 알려져 있는 간에의 단순한 지방의 침윤으로 시작되는, 일련의 조직학적 변화로 구성된다(1). 비알코올성 지방간염(NASH)은 NAFLD의 중증 악성 형태이다. 이러한 질병은 섬유증성 간경화, 간부전, 간세포암(HCC)으로 진행될 수 있으며, 말기 간질환이나 간 이식 C의 주요 암으로 급격하게 변할 수 있다(2, 3). NAFLD는 가장 널리 퍼진 만성 간 질환이며 전 세계 성인 인구의 4분의 1이 NAFLD를 앓고 있다(4).
현재 추정치에 따르면 NASH 진단을 받은 성인 인구의 유병률은 2027년까지 일본, 영국, 프랑스, 독일, 이탈리아, 스페인에서 1,800만 명에 달할 것이다. 식이 열량 제한 및 운동과 같은 생활 습관 개입은 현재 NASH에 대한 기본적인 치료법이지만, 약물 치료에 대한 긴급한 요구를 충족시키지 못한다는 것은 말할 것도 없고, 개선하고 유지하기 어려울 수 있다(2).
개발 중인 NASH 약물 후보에 대한 일부 임상 시험이 있지만(5-7) 현재로서는 NASH를 치료하기 위해 미국 FDA에서 승인한 약물이 없다. 임상 시험 중인 제제 중 오베티콜산(Ocaliva, 주로 담즙성 담관염 치료제로 알려짐)은 현재 NASH 억제 효능에 긍정적인 결과를 얻은 유일한 3상 임상 시험 약물 후보이고, 그리하여 이에 대한 미국 NDA(New Drug Application) 신청이 접수되었다 (8,9). 대체로, 새롭고 안전하며 효과적인 NASH/NAFLD 치료 또는 예방 약물의 개발이 시급한 우선순위에 있다.
프테로스틸벤(트랜스-3,5-디메톡시-4-히드록시스틸벤(trans-3,5-dimethoxy-4-hydroxystilbene))은 주로 블루베리, 포도 및 다양한 나무의 목재에서 발견되는 자연 발생 식물 화학 화합물이다(10-12). 프테로스틸벤은 암, 이상지질혈증, 당뇨병, 인지 기능 퇴화를 포함한 일부 질병의 예방 및 치료에 다양한 이점이 있는 것으로 알려져 있다(10, 11, 13).
최근 프테로스틸벤은 간 지방증을 감소시키고 비만 쥐의 간 지방산 구성을 변화시키는 것으로 알려졌다(14, 15). 동물 및 인간 실험에서 프테로스틸벤을 사용한 결과 독성은 낮고 안전성은 높은 것으로 나타났다(16). 그러므로 프테로스틸벤이 NAFLD/NASH 치료를 위한 임상약으로 개발될 가능성이 높다. 그러나 프테로스틸벤은 수용해도가 0.011 mg/mL로 좋지 않아(www.vcclab.org) 임상 연구에 적합하지 않다. 일부 제약 화학자들은 그것을 수용성 인산염 유도체로 유도하였다(17). 일반적으로 페놀릭포스페이트는 안정성이 좋지 않아 경구용 제제로 제조되는 경우는 드물다. 현재까지 프테로스틸벤 인산염의 경구 생체 내 효능에 관한 문언은 존재하지 않는다. 오직 iv 동물 실험만 보고되어 있다(18). 이후 Chava Satyanarayana 등은 프테로스틸벤 인산염 및 시타글립틴 (경구 활성 디펩티딜 펩티다제-4, (DPP-IV) 효소 억제제)로부터 치료적 유효량의 결정 형태(또는 비정질 형태)의 시타글립틴 프테로스틸벤 인산염을 포함하는 약학 조성물을 만들어내었다(Chava satyanarayana et.al. 특허 번호: WO2014147641). 위 화합물은 시타글립틴을 기반으로 한다. 시타글립틴 프테로스틸벤 인산염과 관련된 본 특허는 생체 내 효능 결과 없이 제조 방법 및 동일한 약학 조성물을 포함한다.
Azzolini M et.al은 일련의 프테로스틸벤 아미노산 카바메이트의 수용성 유도체를 합성하고(19), 약동학 및 분포 프로파일을 테스트했으며, 흡수 증가 및 대사 감소를 발견했지만, 생체 내 효능을 추가로 테스트하지는 않았다. 이를 설명 가능한 이유 중 하나는, 카바메이트 에스테르 결합이, 카바메이트 유도체를 생물학적 활성 대사물질(예: 이리노테칸)로 전환하기에는 체내에서 너무 느리게 분해되기 때문이다. 또한 Gonzalez-Alfonso JL et al.은 수용성이 좋은 일련의 새로운 8-arm-폴리에틸렌 글리콜 프테로스틸벤(polyethylene glycol pterostilbene) 유도체를 합성했지만 항종양 활성을 테스트하기 위해 IV 방법만 수행하였다(20). Kuo et. al은 편평 암종 및 간암에 대한 억제제로서 일련의 스틸베노이드를 합성하였다(Kuo Sheng-Chu et al. 미국 특허, 9.266.813 B2.2016). 합성된 스틸베노이드 중에서, 수용성 프테로스틸베노이드의 일부는 불안정하고, 안정한 프테로스틸베노이드의 일부는 수용성이 좋지 않다. 최근 Jose'L et al.은 프테로스틸벤 a-클루코시드를 효소를 통해 합성하였다. 그것의 물에 대한 용해도는 증가하였으나, 체내 효능에 대한 보고는 없었다(20).
본 발명의 목적은, 하기 화학식을 갖는 일련의 새로운 화합물 또는 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 것이다.
Figure pct00001
(식 중, n은 1∼3이고;
m은 2∼6이며;
Q, X, 및 Y는 독립적으로 O, S, 또는 NH이고;
Ra, Rb, 및 Rc는 독립적으로 H, 할로겐, C1-C6 선형 알킬, C1-C6 선형 알콕시, C3-C6 분지형 알킬, C3-C6 분지형 알콕시, 또는 C1-C6 플루오로알콕시이며;
Rd 및 Re는 독립적으로 H, 할로겐, C1-C6 선형 알킬, C1-C6 선형 알콕시, C3-C6 분지형 알킬, C3-C6 분지형 알콕시, 또는 C1-C6 플루오로알콕시이거나, Rd 및 Re는 연결되어
Figure pct00002
의 고리 구조를 형성하고, j는 1∼3이다)
본 발명의 다른 목적은 환자의 비알코올성 지방간 질환 및 비알코올성 지방간염을 치료하기 위한 의약 제조에 있어서 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 신규 용도를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 대상체의 비알코올성 지방간 질환을 치료하기 위한 약학 조성물로서, 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료를 위한 치료 유효량을 포함하는 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명은 추가로 비알코올성 지방간 질환 또는 비알코올성 지방간염의 상기 치료를 필요로 하는 비알코올성 지방간 질환 또는 비알코올성 지방간염을 앓고 있는 대상체에게 유효량의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 것을 포함하는, 비알코올성 지방간 질환 또는 비알코올성 지방간염을 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 합성에 유용한 중간체 화합물을 제공하며, 이는 하기 화학식으로 표현된다:
Figure pct00003
(식 중, m, Rc, Rd 및 Re는 상기 정의된 바와 같고, Boc는 빌딩 블록 작용기이다) 본 발명의 바람직한 실시예는 명세서 말미에 첨부된 청구범위에 인용된 특징을 포함하지만 이에 한정되지 않는다.
도 1은 5개 그룹의 마우스 간 샘플을 보여주는 사진(배율: 200X)이다: 허위 그룹(비MCD 식이); MCD 식이 그룹; MCD 식이 + 75 mg/kg의 본 발명에 따른 화합물 5c; MCD 식이 + 100 mg/kg 의 화합물 5c; 및 MCD 식이 + 150 mg/kg의 화합물 5c, 이때 간 샘플은 헤마톡실린-에오신(H&E) 염색에 의해 위상차 현미경을 사용하여 촬영되었다.
도 2는 화합물 5c의 25℃에서 24시간 동안 H2O에서의 용해도를 나타낸다.
본 발명의 바람직한 실시양태에 따라 카보네이트를 함유한 수용성 프테로스틸벤 아미노산의 일련의 신규 유사체를 합성하였으며, 이는 비알코올성 지방간 질환 및 비알코올성 지방간염(NASH)을 치료하는데에 있어 활성을 나타낸다.
실시예
1. 화학 합성
1-1. 재료 및 기구
출발 물질, 시약 및 용매는 상업적 공급업체(Sigma-Aldrich, Acros, TCI, Alfa, Combi-Blocks, Matrix 및 Fischer)에서 구입했으며 추가 정제 없이 받은 그대로 사용하였다. 1H 및 13C-NMR 스펙트럼은 표시된 용매에서 Varian AS500 500 NMR-분광계 또는 Agilent Technologies VnmrJ 500 NMR-분광계를 통하여 구하였다. 화학적 이동(chemical shift)은 내부 표준으로서 TMS 신호에 상대적인 ppm(δ 단위)로 표시하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피는 Merck silica gel 60(0.063-0.200 ㎛)으로 채워진 컬럼에서 수행되었다. 화합물 또는 최종 화합물의 정제는 Inertsil ODS-3 C18 컬럼(5 ㎛, 30 mm X 250 mm)을 사용하여 220 또는 254 nm에서 UV 검출(Jasco UV-975 detector)과 함께 역상 고성능 액체 크로마토그래피(RP-HPLC)로 수행하였다. 이동상은 H2O 및 CH3CN(용리액 A, 70% ACN 또는 80% ACN, 등용매(isocratic), 42mL/분 유속; 용리액 B, 구배, 실험에서 상세 설명)으로 구성되었다. 전자 충격(MS)을 사용한 질량 스펙트럼은 API 3200 LC/MS/MS에서 기록되었다. 용매는 시약 등급이었으며 필요한 경우 표준 방법으로 정제 및 건조되었다. 반응 용액의 농축은 감압에서 회전식 증발기의 사용을 통하였다.
1-2. 표적 화합물 5a-10의 합성
1-2-1. 화합물 5a-5s의 합성
표적 화합물 5a-5s는 반응식 1에 따라 합성되었다. 상응하는 히드록실 아미드 유도체(화합물 2a-2s)를 제공하기 위해, 여러 아미노산(1a-1s)을, CH2Cl2 중의 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드(EDCI), 디이소프로필에틸아민(DIPEA) 및 N,N-디메틸아미노피리딘(DMAP), 또는 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트(HATU) 및 DIPEA의 존재 하에, 에탄올아민과 반응시켰다. 2a-2s와 p-니트로페닐 클로로포르메이트의 반응으로 상응하는 p-니트로페닐 카보네이트(3a-3s)가 생성되었으며, 추가 정제 없이 프테로스틸벤과 반응하여 상응하는 4a-4s가 생성되었다. 이어서 1,4-디옥산 중 4M HCl으로, 또는 CH2Cl2 중 트리플루오로아세트산(TFA) 및 트리이소프로필실란(TIPS)으로, 화합물 4a-4s를 탈보호하여 표적 화합물 5a-5s를 얻었다.
반응식 1: 화합물 5a-5s의 합성
Figure pct00004
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
시약 및 조건은 다음과 같다: (a) EDCI, DIPEA, DMAP, CH2Cl2 또는 HATU, DIPEA, CH2Cl2; (b) NEt3, CH2Cl2; (c) DMAP, ACN, 50℃; (d) 1,4-디옥산 중 4M HCl, 또는 TFA, TIPS, CH2Cl2.
Tert-부틸(2-((2-히드록시에틸)아미노)-2-옥소에틸)카바메이트 (2a)
CH2Cl2(80ml) 중의 에탄올아민(3.03g, 49.6mmol), Boc-Gly-OH 1a(7.2g, 41.3mmol) 및 DIPEA(16g, 124mmol)의 교반 용액에 EDCI(61.7g, 46.6mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 후, 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(n-헥산에서 EA/n-헥산으로 = 1/5(V/V))로 정제하여 백색 분말의 표적 생성물 2a(3.3g, 수율 37%)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 6.98 (s, NH), 5.62 (s, NH), 3.80 (s, 2H), 3.70-3.68 (m, 2H), 3.43-3.40 (m, 2H), 3.25 (s, OH), 1.44 (s, 9H).
Tert-부틸(1-((2-히드록시에틸)아미노)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트 (2b)
2a와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Ala-OH 1b로부터 2b를 얻었다.
수율 37%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 6.90 (s, NH), 5.37 (s, NH), 4.13-4.10 (m, 2H), 3.69-3.68 (m, 2H), 3.44-3.43 (m, 1H), 3.37-3.36 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.35 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
Tert-부틸(1-((2-히드록시에틸)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)카바메이트 (2c)
CH2Cl2(40ml) 중의 에탄올아민(335mg, 5.4819mmol), Boc-Val-OH 1c(1191mg, 5.5mmol) 및 DIPEA(2387 ㎕, 13.7 mmol)의 교반 용액에 HATU(2501mg, 6.6mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 후 용매를 진공에서 제거하고 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(n-헥산에서 EA/n-헥산으로 = 3/1(V/V))로 정제하여 백색 분말의 표적 생성물 2c(1113 mg, 수율 78%)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 6.65 (s, NH), 5.15 (s, NH), 3.86 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.70 (s, 2H), 3.49-3.41 (m, 1H), 3.40-3.36 (m, 1H), 3.07 (s, 1H), 2.11-2.10 (m, 1H) 1.43 (s, 9H), 0.96 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
Tert-부틸 (1-((2-히드록시에틸)아미노)-4-메틸-1-옥소펜탄-2-일)카바메이트 (2d)
2a와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Leu-OH 1d로부터 2d를 얻었다.
수율 70 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.05 (s, NH), 5.31 (s, NH), 4.13-4.12 (m, 1H), 3.70-3.67 (m, 2H), 3.47-3.44 (m, 1H), 3.38-3.34 (m, 1H), 1.67-1.60 (m, 2H), 1.52-1.47 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 0.94-0.91 (m, 6H).
Tert-부틸 (1-((2-히드록시에틸)아미노)-3-메틸-1-옥소펜탄-2-일)카바메이트 (2e)
2a와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Ile-OH 1e로부터 2e를 얻었다.
수율 64 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 6.73 (s, NH), 5.19 (s, NH), 3.90 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 3.71-3.69 (m, 2H), 3.49-3.44 (m, 1H), 3.39-3.36 (m, 1H), 2.48-2.46 (m, 1H), 1.86-1.84 (m, 1H), 1.56-1.53 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 0.94-0.89 (m, 6H).
Tert-부틸 (1-((2-히드록시에틸)아미노)-4-(메틸티오)-1-옥소부탄-2-일)카바메이트 (2f)
2c와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Met-OH 1f로부터 2f를 얻었다.
수율 32 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.30 (s, NH), 5.73 (s, NH), 4.14-4.12 (m, 1H), 3.59-3.58 (m, 2H), 3.39-3.24 (m, 2H), 2.49-2.46 (m, 2H), 2.05 (s, 3H), 2.02-1.98 (m, 1H), 1.85-1.82 (m, 1H), 1.38 (s, 9H).
Tert-부틸 (3-(tert-부톡시)-1-((2-하이드록시에틸)아미노)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트 (2g)
2a와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Ser(tBu)-OH 1g으로부터 2g을 얻었다.
수율 41 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 6.93 (s, NH), 5.42 (s, NH), 4.19-4.17 (m, 1H), 3.76 (s, OH), 3.75-3.69 (m, 2H), 3.42-3.40 (m, 2H), 2.55-2.52 (m, 1H) 1.43 (s, 9H), 1.17 (s, 9H).
Tert-부틸 (3-(tert-부톡시)-1-((2-하이드록시에틸)아미노)-1-옥소부탄-2-일) 카바메이트 (2h)
2a와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Thr(tBu)-OH 1h로부터 2h를 얻었다.
수율 24 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.12 (s, NH), 5.62 (s, NH), 4.13-4.09 (m, 2H), 3.72-3.70 (m, 2H), 3.49-3.48 (m, 1H), 3.38-3.37 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.24 (s, 9H), 1.06 (d, J = 5.5 Hz, 3H).
Tert-부틸 (1-((2-하이드록시에틸)아미노)-1-옥소-3-(트리틸티오)프로판-2-일) 카바메이트(2i)
2c와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Cys(Trt)-OH 1i로부터 2i를 얻었다.
수율 71 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.42-7.40 (m, 6H), 7.31-7.27 (m, 6H), 7.26-7.20 (m, 3H), 6.42 (s, NH), 4.88 (s, NH), 3.81-3.80 (m, 1H), 3.64-3.63 (m, 2H), 3.34-3.33 (m, 2H), 2.69-2.66 (m, 1H), 2.57-2.53 (m, 1H), 1.41 (s, 9H).
Tert-부틸 (1-((2-히드록시에틸)아미노)-1-옥소-3-페닐프로판-2-일)카바메이트 (2j)
2c와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Phe-OH 1j로부터 2j를 얻었다.
수율 88 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.33-7.30 (m, 2H), 7.25-7.21 (m, 3H), 6.21 (brs, 1H, NH), 5.11 (brs, 1H, NH), 4.29 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.58-3.57 (m, 2H), 3.32 (s, 2H), 3.10-3.01 (m, 2H), 2.44 (brs, 1H, OH), 1.44 (s, 9H).
Tert-부틸 (3-(4-(tert-부톡시)페닐)-1-((2-히드록시에틸)아미노)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트 (2k)
2c와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Tyr(tBu)-OH 1k로부터 2k를 얻었다.
수율 34 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.09 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.91 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.39 (s, NH), 5.22 (s, NH), 4.27-4.26 (m, 1H), 3.59-3.56 (m, 2H), 3.31-3.30 (m, 2H), 2.99-2.97 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.32 (s, 9H).
Tert-부틸 3-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-((2-히드록시에틸)아미노)-3-옥소프로필)-1H-인돌-1-카르복실레이트 (2l)
2a와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Trp(Boc)-OH 1l로부터 2l을 얻었다.
수율 35 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 8.13-8.11 (m, 1H), 7.60 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.33 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.28-7.25 (m, 1H), 6.20 (s, NH), 5.18 (s, NH), 4.39-4.38 (m, 1H), 3.60-3.52 (m, 2H), 3.31-3.28 (m, 2H), 3.21-3.14 (m, 2H), 1.67 (s, 9H), 1.43 (s, 9H).
Tert-부틸 (1-((2-히드록시에틸)아미노)-1-옥소-3-(1-트리틸-1H-이미다졸-2-일)프로판-2-일)카르바메이트 (2m)
2c와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-His(Trt)-OH 1m으로부터 2m을 얻었다.
수율 67 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.37 (s, 1H), 7.34-7.33 (m, 9H), 7.11-7.10 (m, 6H), 6.34 (s, 1H), 6.57 (s, NH), 5.79 (s, NH), 4.33 (s, 1H), 3.73-3.60 (m, 2H), 3.51 (brs, 1H), 3.21 (brs, 1H), 3.08-3.02 (m, 2H), 1.43 (s, 9H).
디-tert-부틸 (6-((2-히드록시에틸)아미노)-6-옥소헥산-1,5-디일)디카르바메이트 (2n)
2c와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Lys(Boc)-OH 1n으로부터 2n을 얻었다.
수율 70 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 6.88 (s, NH), 5.43 (s, NH), 4.78 (s, NH), 4.07-4.04 (m, 1H), 3.70-3.68 (m, 2H), 3.41-3.40 (m, 2H), 3.10-3.09 (m, 2H), 1.85-1.79 (m, 1H), 1.66-1.62 (m, 1H), 1.49-1.46 (m, 2H), 1.42 (s, 18H), 1.39-1.37 (m, 2H).
Tert-부틸 (1-((2-히드록시에틸)아미노)-1-옥소-5-(3-((2,2,4,6,7-펜타메틸-2,3-디히드로벤조푸란-5-일)술포닐) 구아니디노)펜탄-2-일)카바메이트 (2o)
2a와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Arg(Pbf)-OH 1o로부터 2o를 얻었다.
수율 50 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.42 (s, NH), 6.37 (s, NH), 5.81 (s, NH), 4.23-4.18 (m, 1H), 3.72-3.71 (m, 2H), 3.42-3.41 (m, 2H), 3.31-3.26 (m, 2H), 2.92 (s, 3H), 2.57 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.90-1.56 (m, 4H), 1.46 (s, 6H), 1.42 (s, 9H).
Tert-부틸 (1-((2-하이드록시에틸)아미노)-1,4-디옥소-4-(트리틸아미노)부탄-2-일)카바메이트 (2p)
2a와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Asn(Trt)-OH 1p로부터 2p를 얻었다.
수율 37 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.30-7.23 (m, 9H), 7.19-7.17 (m, 6H), 7.11 (s, NH), 6.91 (s, NH), 6.06 (s, NH), 4.41 (m, 1H), 3.57-3.55 (m, 2H), 3.31-3.29 (m, 2H), 3.06-3.03 (m, 1H), 2.62-2.58 (m, 1H), 1.93 (s, 1H), 1.42 (s, 9H).
Tert-부틸 (1-((2-하이드록시에틸)아미노)-1,5-디옥소-5-(트리틸아미노)펜탄-2-일)카바메이트 (2q)
2c와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Gln(Trt)-OH 1q로부터 2q를 얻었다.
수율 51 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.30-7.23 (m, 15H), 6.83 (s, NH), 5.67 (s, NH), 4.11-3.98 (m, 1H), 3.54-3.53 (m, 2H), 3.32-3.22 (m, 2H), 2.48-2.46 (m, 1H), 2.37-2.34 (m, 1H), 2.04-1.98 (m, 1H), 1.85-1.84 (m, 1H), 1.41 (s, 9H).
Tert-부틸 3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-4-((2-히드록시에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트 (2r)
2a와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Asp(tBu)-OH 1r로부터 2r를 얻었다.
수율 37 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 6.93 (s, NH), 5.63 (s, NH), 4.43-4.40 (m, 1H), 3.70-3.68 (m, 2H), 3.44-3.37 (m, 2H), 2.87-2.83 (m, 1H), 2.66-2.64 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.43 (s, 9H).
Tert-부틸 4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-5-((2-히드록시에틸)아미노)-5-옥소펜타노에이트 (2s)
2a와 동일한 합성 절차를 사용하여 Boc-Glu(tBu)-OH 1s로부터 2s를 얻었다.
수율 37 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 6.96 (s, NH), 5.52 (s, NH), 4.13-4.10 (m, 1H), 3.69-3.68 (m, 2H), 3.41-3.40 (m, 2H), 2.39-2.30 (m, 2H), 2.05-2.03 (m, 1H), 1.91-1.88 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.42 (s, 9H).
Tert-부틸 (E)-(2-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-2-옥소에틸)카르바메이트(4a)의 합성
무수 CH2Cl2(15ml) 중의 화합물 2a(2.02g, 9.3mmol)의 교반 용액에 트리에틸아민(3.22ml, 23.1mmol)을 첨가하고 4-니트로페닐 클로로포르메이트 용액(1.96g, 10ml CH2Cl2 중 9.7mmol)을 0℃에서 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하고 실온으로 데웠다. 상기 혼합물을 실온에서 추가로 4시간 동안 교반하였다. 상기 반응이 완료된 후(TLC로 확인) 용매를 증발시켜 제거하였다. 조(crude) 중간체를 ACN(20ml) 중의 프테로스틸벤(2.50g, 9.8mmol) 및 DMAP(2.27g, 18.6mmol)와 혼합하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 50℃로 가열하였다. 반응 후 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔류물을 EA에 넣고 포화 시트르산 용액으로 세척하였다. 유기층을 수집하고, Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 상기 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/n-헥산 0∼25%)로 정제하여 조(crude) 생성물을 얻었고, 이를 분취용 HPLC(70% ACN, 30% H2O)로 추가로 정제하여 백색 분말의 표적 화합물 4a(2.22 g, 수율 48%)을 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.51 (brs, NH), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 5.10 (brs, NH), 4.35 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.84-3.79 (m, 8H), 3.67 (q, J = 5.5 Hz, 2H), 1.46 (s, 9H). Mass found [M - Boc + H]+ = 402.2; [M + H]+ = 502.2, [M + Na]+ = 524.2, [2M + H]+ = 902.4.
중간체 4b-4s는 4a와 유사한 합성 절차에 따라 합성되었다.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1-옥소프로판-2-일)카르바메이트 (4b)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2b로부터 4b를 얻었다.
수율 56 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.67 (s, 2H), 6.58 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.94 (s, 1H), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.17 (s, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.65-3.64 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.38 (d, J = 7.5 Hz, 3H). Mass found [M - Boc + H]+ = 416.2; [M + H]+ = 516.3, [M + Na]+ = 538.3.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)카르바메이트 (4c)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2c로부터 4c를 얻었다.
수율 78 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41-6.60 (m, 2H), 5.03 (s, 1H), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.93-3.83 (m, 1H), 3.70 (s, 6H), 3.68-3.63 (m, 2H), 2.17-2.16 (m, 1H) 1.45 (s, 9H), 0.98 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H). Mass found [M - Boc + H]+ = 444.1; [M + Na]+ = 566.1.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-4-메틸-1-옥소펜탄-2-일)카르바메이트 (4d)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2d로부터 4d를 얻었다.
수율 32 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.55 (s, NH), 6.41 (s, 1H), 4.84 (s, NH), 4.33 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.11 (s, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.64 (dd, J = 5.0, 10.5 Hz, 2H), 1.73-1.66 (m, 2H), 1.51-1.47 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.96-0.94 (m, 6H). Mass found [M - Boc + H]+ = 457.3; [M - Boc + Na]+ = 479.2; [M + Na]+ = 579.3; [2M + Na]+ = 1135.5.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-3-메틸-1-옥소펜탄-2-일)카르바메이트 (4e)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2e로부터 4e를 얻었다.
수율 27 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41-6.40 (m, 2H), 5.02 (s, NH), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.98-3.94 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.71-3.61 (m, 2H), 1.92-1.91 (m, 1H), 1.57-1.51 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.18-1.09 (m, 1H), 0.95-0.88 (m, 6H). Mass found [M - Boc + H]+ = 457.3; [M + Na]+ = 579.3; [2M + H]+ = 1135.5.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-4-(메틸티오)-1-옥소부탄-2-일 )카바메이트 (4f)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2f로부터 4f를 얻었다.
수율 49 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.52 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.64 (s, NH), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.32-4.28 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.69-3.61 (m, 2H), 2.63-2.52 (m, 2H), 2.16-2.08 (m, 4H), 1.98-1.92 (m, 1H), 1.45 (s, 9H). Mass found [M - Boc + H]+ = 476.2; [M + H]+ = 576.3; [M + Na]+ = 598.3.
Tert-부틸 (E)-(3-(tert-부톡시)-1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시) 카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트 (4g)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2g에서 4g을 얻었다.
수율 46 %.1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.44 (s, NH), 4.33 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.19 (s, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.80 (s, 1H), 3.68-3.64 (m, 2H), 3.41-3.39 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.20 (s, 9H). Mass found [M - Boc - tBu + H]+ = 432.3; [M + H]+ = 588.5; [M + Na]+ = 610.4; [2M + H]+ = 1174.8; [2M + Na]+ = 1196.9.
Tert-부틸 (E)-(3-(tert-부톡시)-1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시) 카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1-옥소부탄-2-일)카바메이트 (4h)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2h로부터 4h를 얻었다.
수율 48 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.34 (s, NH), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 5.64 (d, J = 5.0 Hz, NH), 4.37-4.31 (m, 2H), 4.15-4.13 (m, 2H), 3.84 (s, 6H), 3.69-3.65 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.28 (s, 9H), 1.07 (d, J = 6.0 Hz, 3H). Mass found [M - Boc - tBu + H]+ = 446.2; [M + H]+ = 602.5; [M + Na]+ = 624.4; [2M + H]+ = 1202.9; [2M + Na]+ = 1224.9.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1-옥소-3-(트리틸티오)프로판-2-일)카르바메이트 (4i)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2i로부터 4i를 얻었다.
수율 27 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.49 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.44-7.42 (m, 6H), 7.31-7.28 (m, 6H), 7.24-7.21 (m, 3H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.28 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.84 (s, 6H), 3.57-3.56 (m, 2H), 2.80-2.77 (m, 1H), 2.58-2.56 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), Mass found [M + H]+ = 789.3; [M + Na]+ = 811.3.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1-옥소-3-페닐프로판-2-일)카르바메이트 (4j)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2j로부터 4j를 얻었다.
수율 46 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.33-7.30 (m, 2H), 7.24-7.21 (m, 3H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.67 (s, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.13 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 4.34 (s, 1H) , 4.24-4.23 (m, 1H), 4.17 (s, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.56 (s, 2H), 3.11-3.02 (m, 2H), 1.42 (s, 9H). Mass found [M - Boc + H]+ = 492.2; [M + H]+ = 592.4; [M + Na]+ = 614.3.
Tert-부틸 (E)-(3-(4-(tert-부톡시)페닐)-1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴) 페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)- 1-옥소프로판-2-일)카바메이트 (4k)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2k로부터 4k를 얻었다.
수율 39 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.10 (d, J = 7.5 Hz, 2H),7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.18 (t, J = 6.0 Hz, NH), 5.01 (brs, NH), 4.31-4.24 (m, 2H), 4.23-4.19 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.60-3.52 (m, 2H), 3.07-2.99 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.32 (s, 9H). Mass found [M - Boc - tBu + H]+ = 508.2; [M - Boc + H]+ = 564.3; [M + H]+ = 664.4, [M + Na]+ = 686.4; [M + K]+ = 702.4.
Tert-부틸 (E)-3-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-((2-(((4-(3,5-디메톡시 스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노) -3-옥소프로필)-1H-인돌-1-카르복실레이트 (4l)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2l로부터 4l을 얻었다.
수율 30 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 8.14-8.12 (m, 1H), 7.59 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.51-7.47 (m, 3H), 7.32 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 7.26-7.24 (m, 2H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 6.30 (s, NH), 5.18 (s, NH), 4.22-4.18 (m, 1H), 4.18-4.10 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.52-3.51 (m, 2H), 3.22-3.17 (m, 2H), 1.65 (s, 9H) 1.42 (s, 9H). Mass found [M - 2Boc + H]+ = 530.2; [M - Boc + H]+ = 630.2; [M + H]+ = 730.2; [2M + H]+ = 1459.5.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1-옥소-3-(1-트리틸-1H- 이미다졸-2-일)프로판-2-일)카바메이트 (4m)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2m로부터 4m을 얻었다.
수율 62 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 8.18 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.43-7.38 (m, 9H), 7.15 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.12-7.10 (m, 6H), 7.03 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 5.69 (d, J = 8.0 Hz, NH), 4.50-4.45 (m, 1H), 4.37-4.32 (m, 1H), 4.28-4.26 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.64-3.50 (m, 2H), 3.28-3.23 (m, 1H), 3.08-3.06 (m, 1H), 1.38 (s, 9H). Mass found [M + H]+ = 832.4.
디-tert-부틸 (6-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-6-옥소헥산-1,5-디일)(E)-디카르바메이트 (4n)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2n로부터 4n를 얻었다.
수율 39 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.62 (brs, NH), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.13 (brs, NH), 4.61 (brs, NH), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.07 (s, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.69-3.62 (m, 2H), 3.12-3.11 (m, 2H) 1.90-1.83 (m, 1H), 1.67-1.61 (m, 1H), 1.57-1.47 (m, 2H), 1.45-1.42 (m, 18H), 1.40-1.37 (m, 2H). Mass found [M-2Boc+H]+ = 473.0; [M-Boc+H]+ = 573.4; [M + H]+ = 673.4, [M + Na]+ = 695.4, [M + K]+ = 711.4.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1-옥소-5-(3-((2,2,4,6,7-펜타메틸-2,3-디하이드로벤조푸란-5-일)술포닐)구아니디노)펜탄-2-일)카르바메이트 (4o)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2o로부터 4o를 얻었다.
수율 29 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.46 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.39 (brs, NH), 7.13 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.04 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 1.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 6.27 (brs, NH), 5.57 (d, J = 6.0 Hz, NH), 4.33-4.29 (m, 2H), 4.25 (s, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.68-3.62 (m, 1H), 3.59-3.55 (m, 1H), 3.30-3.25 (m, 2H), 2.93 (s, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.69-1.55 (m, 4H), 1.44 (s, 6H), 1.42 (s, 9H). Mass found [M + H]+ = 852.3.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1,4-디옥소-4-(트리틸아미노)부탄- 2-일)카바메이트(4p)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2p로부터 4p를 얻었다.
수율 28 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.50 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.31-7.23 (m, 11H), 7.20-7.15 (m, 6H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (brs, NH), 6.98 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.19 (brs, NH), 4.46-4.42 (m, 1H), 4.31-4.19 (m, 2H), 3.84 (s, 6H), 3.64-3.51 (m, 2H), 3.11-3.09 (m, 1H), 2.60-2.57 (m, 1H), 1.42 (s, 9H). Mass found [M + H]+ = 799.5.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1,5-디옥소-5-(트리틸아미노)펜탄- 2-일)카바메이트 (4q)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2q로부터 4q를 얻었다.
수율 27 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.30-7.28 (m, 15H), 7.15 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.76 (brs, NH), 6.67 (s, 2H), 6.62 (brs, NH), 6.41 (s, 1H), 5.53 (brs, NH), 4.27-4.26 (m, 1H), 4.15-4.12 (m, 1H), 3.99-3.96 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.56-3.54 (m, 1H), 3.47-3.46 (m, 1H), 2.53-2.50 (m, 1H), 2.45-2.40 (m, 1H), 2.04-1.87 (m, 2H), 1.42 (s, 9H). Mass found [M + H]+ = 814.3.
Tert-부틸 (E)-3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-4-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴) 페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트 (4r)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2r로부터 4r을 얻었다.
수율 48 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.93 (brs, NH), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 5.68 (brs, NH), 4.47 (s, 1H), 4.32 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.83 (s, 6H), 3.64-3.63 (m, 2H), 2.90 (dd, J = 5.0, 17.5 Hz, 1H), 2.62 (dd, J = 6.5, 17.0 Hz, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.45 (s, 9H). Mass found [M-Boc-tBu+H]+ = 460.1; [M + H]+ = 616.3; [M + Na]+ = 638.3.
Tert-부틸 (E)-4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-5-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴) 페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-5-옥소펜타노에이트 (4s)
4a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2s로부터 4s를 얻었다.
수율 55 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.76 (brs, NH), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.29 (brs, NH), 4.33 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.14 (s, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.69-3.63 (m, 2H), 2.46-2.40 (m, 1H), 2.35-2.29 (m, 1H), 2.13-2.06 (m, 1H), 1.94-1.87 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.44 (s, 9H). Mass found [M - Boc - OtBu + H]+ = 456.1, [M - Boc - tBu + H]+ = 474.0; [M + H]+ = 630.4; [M + Na]+ = 652.3.
(E)-2-(2-아미노아세트아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5a)
DCM(10mL) 중 화합물 4a(726mg, 1.5mmol)의 교반 용액에 1,4-디옥산 중 4M HCl(7.25mL)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 그 다음 반응 용액을 증발시키고 분취용 HPLC 정제(완충제로서 TFA, 자세한 구배 용리는 아래 정보 참조)를 수행하였다. 이어서 수성 분획을 농축 HCl 몇 방울로 처리하고 동결건조하여 백색 고체의 화합물 5a(602mg, 수율 95%)를 얻었다. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.33 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.80 (s, 6H), 3.71 (s, 2H), 3.61 (t, J = 5.5 Hz, 2H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 166.26, 161.12, 153.66, 150.50, 139.18, 135.47, 128.95, 127.43, 127.19, 120.96, 104.22, 99.60, 66.73, 54.39, 40.09, 38.13; Mass found [M - HCl + H]+ = 402.2; [M - HCl + Na]+ = 424.2; [M - HCl + K]+ = 440.1; [2M - 2HCl + H]+ = 802.3; [2M - 2HCl + Na]+ = 824.4.
컬럼: Inertsil ODS-3 C18, 5um, 30*250mm
유속: 38ml/분
용매 A: H2O 중 10% ACN + 0.1%TFA
용매 B: H2O 중 90% ACN + 0.1%TFA
구배:
Figure pct00008
(E)-2-(2-아미노프로판아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5b)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4b로부터 5b를 얻었다.
수율 98 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.37-4.31 (m, 2H), 3.97-3.93 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.67-3.62 (m, 1H), 3.59-3.54 (m, 1H), 1.50 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 169.97, 161.14, 153.67, 150.51, 139.18, 135.48, 128.96, 127.42, 127.18, 120.95, 104.21, 99.59, 66.62, 54.39, 48.86, 38.22, 16.24; Mass found [M - HCl + H]+ = 416.2; [M - HCl + Na]+ = 438.2; [2M - HCl + H]+ = 830.5; [2M - 2HCl + Na]+ = 852.4.
(E)-2-(2-아미노-3-메틸부탄아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5c)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4c로부터 5c를 얻었다.
수율 99 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.43 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 6.99-6.88 (m, 2H), 6.60 (s, 2H), 6.36 (s, 1H), 4.37-4.30 (m, 2H), 4.15 (brs, 1H), 3.77 (s, 6H), 3.50 (brs, 1H), 2.98-2.92 (m, 2H), 2.34-2.33 (m, 1H), 1.10-1.05 (m, 6H); 13C- NMR (CDCl3, 125 MHz), δ(ppm): 168.94, 160.94, 153.59, 150.23, 138.99, 135.32, 129.23, 127.78, 127.55, 121.33, 104.61, 100.11, 66.81, 58.91, 55.32, 38.42, 30.18, 18.60, 18.16; Mass found [M - HCl + H]+ = 444.1; [M - HCl + Na]+ = 466.1.
(E)-2-(2-아미노-4-메틸펜탄아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5d)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4d로부터 5d를 얻었다.
수율 95 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.40-4.30 (m, 2H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.72-3.67 (m, 1H), 3.55-3.50 (m, 1H), 1.75-1.67 (m, 3H), 1.00 (t, J = 5.5 Hz, 6H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 169.66, 161.15, 153.61, 150.51, 139.19, 135.49, 128.98, 127.42, 127.18, 120.92, 104.23, 99.61, 66.53, 54.39, 51.70, 43.34, 38.21, 24.05, 21.61, 20.82; Mass found [M - HCl + H]+ = 457.2; [2M - 2HCl + H]+ = 913.3.
(E)-2-(2-아미노-3-메틸펜탄아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5e)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4e로부터 5e를 얻었다.
수율 98 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.40-4.36 (m, 1H), 4.33-4.28 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.78-3.72 (m, 2H), 3.52-3.47 (m, 1H), 1.95-1.92 (m, 1H), 1.63-1.58 (m, 1H), 1.28-1.22 (m, 1H), 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.98 (t, J = 7.0 Hz, 3H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.41, 161.15, 153.56, 150.50, 139.19, 135.49, 128.97, 127.43, 127.18, 120.92, 104.23, 99.61, 66.60, 57.68, 54.39, 38.05, 36.62, 24.19, 13.66, 10.32; Mass found [M - HCl + H]+ = 457.2; [2M - 2HCl + H]+ = 913.3.
(E)-2-(2-아미노-4-(메틸티오)부탄아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5f)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4f로부터 5f를 얻었다.
수율 85 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.42-4.38 (m, 1H), 4.33-4.28 (m, 1H), 3.99 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.78-3.73 (m, 1H), 3.52-3.47 (m, 1H), 2.60 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.18-2.11 (m, 2H), 2.09 (s, 3H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.70, 161.14, 153.62, 150.49, 139.18, 135.49, 128.97, 127.43, 127.18, 120.99, 104.21, 99.60, 66.58, 54.39, 52.32, 38.21, 30.70, 28.33, 13.69; Mass found [M - HCl + H]+ = 476.2; [M - HCl + Na]+ = 498.2; [2M - HCl + H]+ = 950.4.
(E)-2-(2-아미노-3-하이드록시프로판아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5g)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4g로부터 5g을 얻었다.
수율 76 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.98-3.94 (m, 2H), 3.86-3.81 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.62-3.60 (m, 2H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 167.21, 161.13, 153.69, 150.51, 139.20, 135.47, 128.96, 127.44, 127.19, 120.97, 104.23, 99.61, 66.64, 60.30, 54.93, 54.40, 38.29; Mass found [M - HCl + H]+ = 431.2; [2M - 2HCl + H]+ = 861.2.
(E)-2-(2-아미노-3-하이드록시부탄아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5h)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4h로부터 5h를 얻었다.
수율 74 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.38-4.31 (m, 2H), 4.06-4.01 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.72-3.65 (m, 2H), 3.58-3.53 (m, 1H), 1.31 (d, J = 6.0 Hz, 3H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 167.54, 161.14, 153.58, 150.50, 139.19, 135.49, 128.97, 127.43, 127.18, 120.95, 104.23, 99.61, 66.61, 65.97, 59.12, 54.40, 38.14, 18.91; Mass found [M - HCl + H]+ = 445.2; [2M - 2HCl + H]+ = 889.2.
(E)-2-(2-아미노-3-메르캅토프로판아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5i)
DCM(15mL) 중 화합물 4i(760mg, 1.0mmol)의 교반 용액에 TFA(14.9mL) 및 트리이소프로필실란(TIPS, 790㎕, 3.9mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응 용액을 증발시키고 분취용 HPLC 정제(완충제로서 TFA, 자세한 구배 용리는 아래 정보 참조)를 수행하였다. 이어서 수성 분획을 농축 HCl 몇 방울로 처리하고 동결건조하여 백색 고체의 화합물 5i(354mg, 76%)를 얻었다. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.41-4.37 (m, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 4.05 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.74-3.69 (m, 1H), 3.57-3.52 (m, 1H), 3.06 (dd, J = 5.5, 14.5 Hz, 1H), 2.98 (dd, J = 6.5, 15.0 Hz, 1H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 167.31, 161.14, 153.63, 150.50, 139.19, 135.50, 128.97, 127.43, 127.18, 120.97, 104.23, 99.62, 66.61, 54.69, 54.39, 38.28, 24.96; Mass found [M - HCl + H]+ = 448.2; [M - HCl + Na]+ = 470.2; [2M - 2HCl + H]+ = 894.4.
컬럼: Inertsil ODS-3 C18, 5um, 30*250mm
유속: 38mL/분
용매 A: H2O 중 10% ACN + 0.1%TFA
용매 B: H2O 중 90% ACN + 0.1%TFA
구배:
Figure pct00009
(E)-2-(2-아미노-3-페닐프로판아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5j)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4j로부터 5j를 얻었다.
수율 90 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.38-7.35 (m, 2H), 7.31-7.29 (m, 3H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.24-4.20 (m, 2H), 4.07 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.65-3.60 (m, 1H), 3.48-3.44 (m, 1H), 3.19 (dd, J = 7.5, 14.0 Hz, 1H), 3.09 (dd, J = 7.5, 14.0 Hz, 1H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.49, 161.14, 153.51, 150.50, 139.19, 135.49, 134.15, 129.12, 128.98,128.71, 127.48, 127.42, 127.19, 120.92, 104.23, 99.61, 66.66, 54.40, 54.40, 38.02, 37.29; Mass found [M - HCl + H]+ = 491.3; [M - HCl + Na]+ = 513.2.
(E)-2-(2-아미노-3-(4-하이드록시페닐)프로판아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5k)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4k에서 5k를 얻었다.
수율 84 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.57 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.27-4.24 (m, 2H), 4.00 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.66-3.61 (m, 1H), 3.50-3.45 (m, 1H), 3.10 (dd, J = 7.0, 14.0 Hz, 1H), 2.98 (dd, J = 7.0, 14.0 Hz, 1H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.67, 161.14, 156.89, 153.57, 150.51, 139.19, 135.47, 130.22, 128.96, 127.43, 127.18, 124.55, 121.00, 115.42, 104.22, 99.61, 66.68, 54.61, 54.39, 38.05, 36.54; Mass found [M - HCl + H]+ = 507.2; [2M - 2HCl + H]+ = 1013.2.
(E)-2-(2-아미노-3-(1H-인돌-3-일)프로판아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5l)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4l로부터 5l을 얻었다.
수율 78 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.65 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.39 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.17-7.15 (m, 3H), 7.12 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.06-7.03 (m, 1H), 6.70 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.25-4.21 (m, 1H), 4.18-4.10 (m, 2H), 3.80 (s, 6H), 3.60-3.55 (m, 1H), 3.50-3.45 (m, 1H), 3.39 (dd, J = 6.5, 15.0 Hz, 1H), 3.25 (dd, J = 8.0, 15.0 Hz, 1H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 169.10, 161.13, 153.54, 150.50, 139.18, 136.88, 135.47, 128.95, 127.41, 127.17, 126.91, 124.19, 121.52, 120.95, 118.88, 117.69, 111.26, 106.58, 104.22, 99.61, 66.53, 54.40, 54.38, 53.74, 38.17, 27.51; Mass found [M - HCl + H]+ = 530.3; [2M - 2HCl + H]+ = 1059.4.
(E)-2-(2-아미노-3-(1H-이미다졸-2-일)프로판아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 디하이드로클로라이드 (5m)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4m로부터 5m을 얻었다.
수율 82 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 8.90 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.36-4.32 (m, 1H), 4.31-4.27 (m, 2H), 3.81 (s, 6H), 3.71-3.66 (m, 1H), 3.55-3.50 (m, 1H), 3.42-3.35 (m, 2H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 167.46, 161.15, 153.55, 150.48, 139.17, 135.54, 134.43, 129.00, 127.40, 127.18, 126.62, 121.05, 118.36, 104.23, 99.61, 66.58, 54.40, 51.96, 38.30, 26.20; Mass found [M - HCl + H]+ = 482.2; [M - HCl + Na]+ = 504.1; [2M - 2HCl + H]+ = 962.3.
(E)-2-(2,6-디아미노헥산아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 디하이드로클로라이드 (5n)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4n로부터 5n을 얻었다.
수율 78 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 4.42-4.38 (m, 1H), 4.35-4.30 (m, 1H), 3.93 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.75-3.70 (m, 1H), 3.56-3.51 (m, 1H), 2.93 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.97-1.87 (m, 2H), 1.75-1.69 (m, 2H), 1.56-1.50 (m, 2H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.97, 161.15, 153.63, 150.50, 139.18, 135.54, 129.01, 127.41, 127.21, 121.03, 104.23, 99.60, 66.68, 54.42, 54.39, 52.81, 38.88, 38.17, 30.66, 26.71, 21.44; Mass found [M - 2HCl + H]+ = 472.2.
(E)-2-(2-아미노-5-구아니디노펜탄아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 디하이드로클로라이드 (5o)
5i와 동일한 합성 절차를 사용하여 4o로부터 5o를 얻었다.
수율 64 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (s, 2H), 6.39 (s, 1H), 4.37-4.33 (m, 2H), 3.96 (s, 1H), 3.79 (s, 6H), 3.72-3.69 (m, 1H), 3.60-3.55 (m, 1H), 3.22 (s, 2H), 1.94 (s, 2H), 1.71 (s, 2H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.87, 161.12, 157.19, 153.70, 150.49, 139.18, 135.50, 128.98, 127.43, 127.22, 121.05, 104.24, 99.63, 66.69, 54.42, 52.64, 40.43, 38.21, 28.31, 23.92; Mass found [M - 2HCl + H]+ = 500.1.
(E)-2-(2,4-디아미노-4-옥소부탄아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5p)
5i와 동일한 합성 절차를 사용하여 4p로부터 5p를 얻었다.
수율 68 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.35-4.32 (m, 2H), 4.22-4.19 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.67-3.60 (m, 1H), 3.59-3.55 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 4.5, 17.5 Hz, 1H), 2.79 (dd, J = 4.0, 17.0 Hz, 1H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 171.80, 168.41, 161.14, 153.69, 150.50, 139.18, 135.50, 128.97, 127.42, 127.19, 120.99, 104.22, 99.59, 66.65, 54.39, 49.90, 38.29, 34.82; Mass found [M - HCl + H]+ = 459.2; [M - HCl + Na]+ = 481.1; [2M - 2HCl + H]+ = 916.4.
(E)-2-(2,5-디아미노-5-옥소펜탄아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드(5q)
5i와 동일한 합성 절차를 사용하여 4q로부터 5q를 얻었다.
수율 62 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (s, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.41-4.35 (m, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 3.97 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.72-3.68 (m, 1H), 3.58-3.53 (m, 1H), 2.50-2.47 (m, 2H), 2.16-2.09 (m, 2H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 175.66, 168.78, 161.14, 153.64, 150.50, 139.20, 135.50, 128.97, 127.45, 127.19, 121.00, 104.23, 99.64, 66.66, 54.40, 52.65, 38.21, 30.19, 26.78; Mass found [M - HCl + H]+ = 473.3; [M - HCl + Na]+ = 495.3; [2M - 2HCl + H]+ = 944.6.
(E)-3-아미노-4-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-4-옥소부탄산 하이드로클로라이드 (5r)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4r로부터 5r을 얻었다.
수율 82 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.37-4.32 (m, 2H), 4.22-4.19 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.69-3.64 (m, 1H), 3.58-3.54 (m, 1H), 2.99 (dd, J = 4.0, 18.0 Hz, 1H), 2.89 (dd, J = 4.0, 18.0 Hz, 1H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 171.18, 168.13, 161.14, 153.67, 150.52, 139.19, 135.48, 128.96, 127.44, 127.18, 120.99, 104.23, 99.60, 66.54, 54.39, 49.63, 38.35, 34.60; Mass found [M - HCl + H]+ = 459.1; [2M - 2HCl + H]+ = 917.2.
(E)-4-아미노-5-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-5-옥소펜탄산 하이드로클로라이드 (5s)
5a와 동일한 합성 절차를 사용하여 4s로부터 5s를 얻었다.
수율 88 %. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.41-4.36 (m, 1H), 4.33-4.29 (m, 1H), 3.96 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.75-3.70 (m, 1H), 3.55-3.50 (m, 1H), 2.52 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.18-2.13 (m, 2H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 174.27, 168.72, 161.12, 153.64, 150.51, 139.21, 135.45, 128.93, 127.47, 127.18, 121.00, 104.23, 99.60, 66.61, 54.43, 52.44, 38.15, 28.69, 26.30; Mass found [M - HCl + H]+ = 473.0.
1-2-2. 표적 화합물 5t의 합성
반응식 1과 유사한 반응식 2에 따라 화합물 5t를 합성하였다.
반응식 2: 화합물 5t의 합성
Figure pct00010
시약 및 조건: (a) HATU, DIPEA, CH2Cl2, 41%; (b) NEt3, CH2Cl2, 0℃; (c) DMAP, ACN, 50℃, 57%; (d) 1,4-디옥산 중 4M HCl, CH2Cl2, 92%.
(E)-4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐(2-(피롤리딘-2-카르복스아미도)에틸)카보네이트 하이드로클로라이드 (5t)
5a와 유사한 합성 절차를 사용하여 1t로부터 5t의 화합물을 얻었다.
백색 분말. 수율 92%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.39-4.32 (m, 2H), 4.31-4.27 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.69-3.61 (m, 1H), 3.59-3.54 (m, 1H), 3.43-3.36 (m, 1H), 3.34-3.31 (m, 1H), 2.46-2.40 (m, 1H), 2.08-2.01 (m, 3H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.66, 161.15, 153.67, 150.52, 139.18, 135.50, 128.98, 127.41, 127.18, 120.95, 104.23, 99.61, 66.62, 59.77, 54.39, 45.95, 38.46, 29.56, 23.59; Mass found [M - HCl + H]+ = 442.0; [M - HCl + Na]+ = 464.1; [2M - 2HCl + H]+ = 882.4; [2M - 2HCl + Na]+ = 904.4.
1-2-3.표적 화합물 5u의 합성
반응식 1과 유사한 반응식 3에 따라 화합물 5u를 합성하였다.
반응식 3: 화합물 5u의 합성
Figure pct00011
시약 및 조건: (a) EDCI, DIPEA, CH2Cl2, 45%; (b) NEt3, CH2Cl2, 0℃; (c) DMAP, ACN, 50℃, 33%; (d) 디옥산 중 4M HCl, CH2Cl2, 90%.
(E)-3-(2-아미노-3-메틸부탄아미도)프로필(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (5u)
5a와 유사한 합성 절차를 사용하여 1c 및 3-아미노프로판-1-올로부터 5u의 화합물을 얻었다.
백색 분말. 수율 90%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.57 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.30 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.80 (s, 6H), 3.65 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 3.47-3.41 (m, 1H), 3.39-3.34 (m, 1H), 2.21-2.17 (m, 1H), 2.00-1.95 (m, 3H), 1.06 (t, J = 7.5 Hz, 6H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.22, 161.12, 153.66, 150.56, 139.21, 135.40, 128.91, 127.46, 127.18, 120.97, 104.23, 99.61, 65.92, 58.54, 54.40, 35.77, 30.05, 28.09, 17.51, 16.62; Mass found [M - HCl + H]+ = 457.3; [M - HCl + Na]+ = 479.2; [2M - 2HCl + Na]+ = 935.4.
1-2-4. 표적 화합물 5v 및 5w의 합성
반응식 4에 나타낸 바와 같이, 화합물 5a 또는 5c를 탄산소듐으로 중화한 다음 니코틴산으로 처리하여 상응하는 니코티네이트 염 5v, 5w를 얻었다.
반응식 4: 화합물 5v 및 5w의 합성
Figure pct00012
시약 및 조건: (a) 1. K2CO3, H2O, CH2Cl2, 1시간; 2. 니코틴산, 에탄올, 3시간
(E)-2-(2-아미노아세트아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 니코티네이트 (5v)
CH2Cl2(20ml) 중 화합물 5a(0.42g, 1.0mmol)의 교반 용액에 H2O(0.4ml) 중 K2CO3(0.182g, 1.3mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여 유리 아민을 수득하고 이를 10mL 에탄올에 용해시키고 니코틴산(0.145g, 1.2mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고 조 생성물을 에탄올 및 무수 에테르로부터 재결정화하여 백색 분말의 화합물 5v를 얻었다(0.39g, 수율 78%). 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 9.07 (s, 1H), 8.57-8.56 (m, 1H), 8.34 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.47-7.44 (m, 1H), 7.18-7.14 (m, 3H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.33 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.81 (s, 6H), 3.68-3.66 (m, 2H), 3.61 (t, J = 5.0 Hz, 2H).
(E)-2-(2-아미노-3-메틸부탄아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카보네이트 니코티네이트(5w)
5v와 동일한 합성 절차를 사용하여 5c로부터 5w를 얻었다.
백색 분말. 수율 79 %. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 9.19 (s, 1H), 8.70 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 8.32-8.30 (m, 1H), 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.40-7.37 (m, 1H), 7.13 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.33-4.28 (m, 2H), 3.80 (s, 6H), 3.67-3.62 (m, 2H), 3.56-3.53 (m, 1H), 2.20-2.05 (m, 1H), 1.02-0.90 (m, 6H).
1-2-5. 표적 화합물 6a-6h의 합성
반응식 5에 따라 화합물 6a-6h를 합성하였다. 나타낸 바와 같이, 출발화합물 4-히드록시벤즈알데히드(11a-11b)를 이미다졸 및 TIPS로 처리하여 상응하는 실릴 에테르(12a-12b)를 형성하고 이를 NaBH4로 환원시켜 상응하는 카르비놀(13a-13b)을 얻었다. 상기 화합물 13a-13b를 트리에틸 포스페이트 및 ZnI2로 처리하여 상응하는 포스포네이트(14a-14b)를 얻었다. 상기 화합물 14a-14b는 각각 시판되는 알데하이드(15a-15d)와 커플링되어 상응하는 16a-16d를 생성하고, 이어서 THF 중의 Bu4NF로 처리하여 원하는 화합물 17a-17d를 생성하였다. 한편, 화합물 2a, 2c 및 2j를 p-니트로페닐 클로로포르메이트와 반응시켜 상응하는 18a, 18c 및 18j를 얻었고, 이를 추가 정제 없이 DMAP의 존재하에 17a-17d와 별도로 반응시켜 상응하는 카보네이트 19a-19h를 수득하였다. 이어서 1,4-디옥산 중 4M HCl로 19a-19h를 탈보호하여 표적 화합물 6a-6h를 얻었다.
화학식 5: 화합물 6a-6h의 합성
Figure pct00013
Figure pct00014
시약 및 조건: (a) 이미다졸, TIPSCl, CH2Cl2, 16시간; (b) NaBH4, THF, MeOH, 0℃, 1시간; (c) ZnI2, 트리에틸 포스파이트, THF, 80℃, 16시간; (d) t-BuOK, THF, 0℃, 3시간; (e) THF 중 1.0M Bu4NF, THF; (f) NEt3, CH2Cl2, 0℃; (g) DMAP, ACN, 50℃; (h) 1,4-디옥산 중 4M HCl, CH2Cl2.
4-((트리이소프로필실릴)옥시)벤즈알데히드 (12a)
DCM(500mL) 중 4-하이드록시벤즈알데하이드 11a(50g, 409.8mmol)의 용액에 이미다졸(41.8g, 614.7mmol)을 첨가한 후, TIPSCl(86.5g, 450.8mmol)을 적가하였다. 혼합물을 16시간 동안 교반하고 얼음/물에 부었으며 DCM으로 추출하였다. 유기층을 염수(brine)로 세척한 뒤 Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(용출 용매: 에틸 아세테이트/석유 에테르 = 1/50)로 정제하여 노란색 오일의 화합물 12a(95g, 99%)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 9.88 (s, 1H, CHO), 7.78 (dd, J = 2.0, 8.5 Hz, 2H), 6.98 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 1.32-1.25 (m, 3H), 1.11 (d, J = 8.0 Hz, 18H).
3-메톡시-4-((트리이소프로필실릴)옥시)벤즈알데히드 (12b)
12a와 동일한 합성 절차를 사용하여 11b로부터 12b를 얻었다.
노란색 오일. 수율 98%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 9.83 (s, 1H, CHO), 7.39 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 1.5, 8.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 1.31-1.25 (m, 3H), 1.09 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
(4-((트리이소프로필실릴)옥시)페닐)메탄올 (13a)
MeOH/THF(1:1, 1L) 중 화합물 12a(100g, 359.7mmol)의 용액에 NaBH4(27.3g, 719.4mmol)를 0℃에서 첨가하고 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 얼음/물에 붓고 DCM으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척한 뒤 Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(용출 용매: 에틸 아세테이트/석유 에테르 = 1/20)로 정제하여 노란색 오일의 화합물 13a(88g, 수율 99%)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.21 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.86 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 4.60 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 1.29-1.22 (m, 3H), 1.10-1.06 (m, 18H).
(3-메톡시-4-((트리이소프로필실릴)옥시)페닐)메탄올 (13b)
13a와 동일한 합성 절차를 사용하여 12b로부터 13b를 얻었다.
노란색 오일. 수율 95%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 6.89 (s, 1H), 6.84 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 1.57 (s, 1H), 1.28-1.22 (m, 3H), 1.09 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
디에틸(4-((트리이소프로필실릴)옥시)벤질)포스포네이트 (14a)
THF(850mL) 중 화합물 13a(85g, 303.6mmol)의 용액에 ZnI2(145.3g, 455.4mmol) 및 트리에틸 포스파이트(100.8g, 607.2mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 환류시키고 증발시켰다. 잔류물에 2 N NaOH(500 mL)를 첨가하고 에테르로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척한 뒤 Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(용출 용매: 에틸 아세테이트/석유 에테르 = 1/30)로 정제하여 노란색 오일의 화합물 14a(90g, 75% 수율)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.16 (dd, J = 2.5, 8.5 Hz, 2H), 6.81 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 4.07-4.03 (m, 4H), 3.20 (d, J = 21.0 Hz, 2H), 1.65-1.21 (m, 9H), 1.08 (d, J = 7.0 Hz, 18H).
디에틸(3-메톡시-4-((트리이소프로필실릴)옥시)벤질)포스포네이트 (14b)
14a와 동일한 합성 절차를 사용하여 13b로부터 14b를 얻었다.
노란색 오일. 수율 78%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 6.83-6.79 (m, 2H), 6.71 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.17-3.90 (m, 4H), 3.79 (s, 3H), 3.07 (d, J = 21.0 Hz, 2H), 1.38-1.19 (m, 9H), 1.08-1.03 (m, 18H).
(E)-(4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페녹시)트리이소프로필실란 (16a)
THF(175mL) 중 화합물 14a(7.0g, 17.5mmol)의 용액에 화합물 15a(3.0g, 17.5mmol) 및 t-BuOK(4.1g, 36.7mmol)를 0℃에서 첨가하고 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 얼음/물에 붓고 EA로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척한 뒤 Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(용출 용매: 에틸 아세테이트/n-헥산 = 1/8)로 정제하여 백색 고체의 화합물 16a(5.6g, 수율 76%)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.37 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.91-6.86 (m, 3H), 6.65 (s, 2H), 6.37 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 1.29-1.24 (m, 3H), 1.12 (d, J = 7.5 Hz, 18 H).
(E)-(4-(3,5-디에톡시스티릴)페녹시)트리이소프로필실란 (16b)
16a와 동일한 합성 절차를 사용하여 14b 및 15b로부터 16b를 얻었다.
백색 분말. 수율 75%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.36 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.01 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.37 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.05 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 1.29-1.25 (m, 3H), 1.11 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
(E)-(4-(3,5-디메톡시스티릴)-2-메톡시페녹시)트리이소프로필실란 (16c)
16a와 동일한 합성 절차를 사용하여 14c 및 15c로부터 16c를 얻었다.
백색 고체. 수율 78%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.03-7.00 (m, 2H), 6.96 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.88-6.85 (m, 1H), 6.65 (s, 2H), 6.38 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.83 (s, 6H), 1.30-1.23 (m, 3H), 1.11 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
(E)-(4-(3,5-디메톡시스티릴)-2-메톡시페녹시)트리이소프로필실란 (16d)
16a와 동일한 합성 절차를 사용하여 14d 및 15d로부터 16d를 얻었다.
담황색 고체, 수율 77%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.30 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.91 (dd, J = 10.5, 16.5 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.81 (dd, J = 10.5, 16.5 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.55 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.36 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 3.81 (s, 6H), 1.30-1.22 (m, 3H), 1.11 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
(E)-4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페놀 (17a)
무수 THF(15mL) 중 화합물 16a(0.80g, 1.9mmol) 및 테트라-부틸암모늄 플루오라이드(THF 중 1.0M, 2.50mL, 2.5mmol)의 용액을 N2 대기 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고 유기층을 물로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고 증발시킨 뒤 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(용출 용매: 에틸 아세테이트/n-헥산 = 1/8)로 정제하여 백색 분말의 산출물 17a(0.46g, 수율 91%)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.39 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.92-6.82 (m, 3H), 6.65 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.5 Hz, 1H).
(E)-4-(3,5-디에톡시스티릴)페놀 (17b)
17a와 동일한 합성 절차를 사용하여 16b로부터 17b를 얻었다.
백색 분말. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.38 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.01 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.89-6.81 (m, 3H), 6.63 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.37 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.08-4.04 (m, 4H), 1.42 (t, J = 7.5 Hz, 6H).
(E)-4-(3,5-디메톡시스티릴)-2-메톡시페놀 (17c)
17a와 동일한 합성 절차를 사용하여 16c로부터 17c를 얻었다.
백색 분말. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.04-7.00 (m, 3H), 6.92-6.87 (m, 2H), 6.66 (s, 2H), 6.39 (s, 1H), 5.68 (brs, 1H, OH), 3.96 (s, 3H), 3.83 (s, 6H).
4-((1E,3E)-4-(3,5-디메톡시페닐)부타-1,3-디엔-1-일)페놀 (17d)
17a와 동일한 합성 절차를 사용하여 16d로부터 17d를 얻었다.
백색 분말. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.33 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.91 (dd, J = 10.0, 15.5 Hz, 1H), 6.83-6.78 (m, 3H), 6.62 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.55 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 6.37 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.94 (brs, 1H, OH), 3.82 (s, 6H).
Tert-부틸 (E)-(2-((2-(((4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-2-옥소에틸)카르바메이트 (19a)
무수 CH2Cl2(15ml) 중 화합물 2a(1.12g, 5.1mmol)의 교반 용액에 트리에틸아민(2.15mL, 15.4mmol)을 첨가한 다음 4-니트로페닐 클로로포르메이트 용액(10mL CH2Cl2 중 1.15g, 5.7mmol)을 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하고 실온으로 데웠다. 상기 혼합물을 실온에서 추가로 4시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후(TLC로 확인) 용매를 증발시켜 제거하였다. 조 중간체를 ACN(30ml) 중의 프테로스틸벤 유도체 17a(1.41g, 5.4mmol) 및 DMAP(1.26g, 10.3mmol)와 혼합하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 50℃로 가열하였다. 반응 후, 용매를 진공 하에 제거하여 조 잔류물을 얻었고 이를 컬럼 크로마토그래피(EA/n-헥산 = 1/5(V/V))로 정제하여 조 생성물을 얻었다. 상기 조 생성물을 분취용 HPLC(70% ACN, 30% H2O)로 정제하여 백색 분말의 표적 화합물 19a(0.99g, 38% 수율)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.53 (brs, NH), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.12 (brs, NH), 4.35 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.83 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.66 (q, J = 5.5 Hz, 2H), 1.46 (s, 9H). Mass found [M - Boc + H]+ = 408.3; [M + H]+ = 508.4; [M + Na]+ = 530.4, [2M + H]+ = 914.6.
Tert-부틸 (E)-(2-((2-(((4-(3,5-디에톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-2-옥소에틸)카르바메이트 (19b)
19a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2a 및 17b로부터 19b를 얻었다.
백색 분말. 수율 45%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.50 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.53 (brs, NH), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.12 (brs, NH), 4.35 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.06 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 3.83 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.66 (q, J = 5.5 Hz, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 6H). Mass found [M - Boc + H]+ = 430.3; [M + H]+ = 530.3; [M + Na]+ = 552.2, [2M + H]+ = 1058.6, [2M + Na]+ = 1080.6.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-3-메틸-1 -옥소부탄-2-일)카르바메이트 (19c)
19a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2c 및 17a로부터 19c를 얻었다.
백색 분말. 수율 42%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.39 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 4.34 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.93-3.91 (m, 1H), 3.70-3.61 (m, 2H), 2.17-2.16 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H). Mass found [M - Boc + H]+ = 450.2; [M + H]+ = 550.4; [M + Na]+ = 572.4.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디에톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)카르바메이트 (19d)
19a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2c 및 17b로부터 19d를 얻었다.
백색 분말. 수율 41%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.50 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.38 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 4.34 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.05 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 3.93-3.90 (m, 1H), 3.70-3.61 (m, 2H), 2.19-2.16 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H). Mass found [M - Boc + H]+ = 472.3; [M + H]+ = 572.4; [M + Na]+ = 594.4; [2M + H]+ = 1142.8; [2M + Na]+ = 1164.9.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1-옥소-3 -페닐프로판-2-일)카바메이트 (19e)
19a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2j 및 17a로부터 19e를 얻었다.
백색 분말. 수율 47%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.33-7.30 (m, 2H), 7.25-7.21 (m, 3H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.16 (brs, NH), 5.04 (brs, NH), 4.34-4.33 (m, 1H), 4.26-4.22 (m, 1H), 4.17-4.16 (m, 1H), 3.56-3.54 (m, 2H), 3.13-3.09 (m, 1H), 3.07-3.02 (m, 1H), 1.42 (s, 9H). Mass found [M - Boc + H]+ = 498.3; [M + Na]+ = 620.4; [2M + H]+ = 1194.9; [2M + Na]+ = 1216.9.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디에톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-1-옥소-3-페닐프로판-2-일)카르바메이트 (19f)
19a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2j 및 17b로부터 19f를 얻었다.
백색 분말. 수율 47%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.33-7.30 (m, 2H), 7.25-7.21 (m, 3H), 7.16 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.15 (brs, NH), 5.04 (brs, NH), 4.33-4.32 (m, 1H), 4.26-4.22 (m, 1H), 4.17-4.16 (m, 1H), 4.06 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 3.59-3.51 (m, 2H), 3.13-3.09 (m, 1H), 3.07-3.02 (m, 1H), 1.44-1.42 (m, 15H). Mass found [M - Boc + H]+ = 519.2; [M + H]+ = 619.2; [M + Na]+ = 641.2; [2M + Na]+ = 1259.5.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)-2-메톡시페녹시)카르보닐)옥시)에틸)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)카바메이트 (19g)
19a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2c 및 17c로부터 19g을 얻었다.
백색 분말. 수율 37%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.11-7.08 (m, 3H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.67 (s, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.37 (brs, NH), 5.04 (brs, NH), 4.34 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.98-3.92 (m, 4H), 3.84 (s, 6H), 3.69-3.65 (m, 2H), 2.17-2.16 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.97 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 7.0 Hz, 3H). Mass found [M - Boc + H]+ = 474.3; [M + H]+ = 574.4; [M + Na]+ = 596.4.
Tert-부틸 (1-((2-(((4-((1E,3E)-4-(3,5-디메톡시페닐)부타-1,3-디엔-1-일) 페녹시)카르보닐)옥시)에틸 )아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)카르바메이트 (19h)
19a와 동일한 합성 절차를 사용하여 2c 및 17d로부터 19h를 얻었다.
백색 분말. 수율 35%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.45 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.95-6.86 (m, 2H), 6.67 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.37 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 4.33 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.93-3.90 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.70-3.61 (m, 2H), 2.18-2.16 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H). Mass found [M - Boc + H]+ = 470.0; [M + H]+ = 570.3; [M + Na]+ = 592.3.
(E)-2-(2-아미노아세트아미도)에틸(4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드(6a)
DCM(20mL) 중 화합물 19a(639mg, 1.3mmol)의 교반 용액에 1,4-디옥산(6.3mL) 중 4M HCl을 첨가하고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응 용액을 증발시키고 분취용 HPLC 정제(완충제로서 TFA, 자세한 구배 용리는 아래 정보 참조)를 수행하였다. 이어서 수성 분획을 농축 HCl 몇 방울로 처리하고 동결건조하여 백색 고체의 화합물 6a(491mg, 수율 92%)를 얻었다. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.62 (t, J = 5.5 Hz, 2H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 166.23, 161.14, 153.66, 150.50, 139.18, 135.49, 128.98, 127.40, 127.18, 120.95, 104.18, 99.58, 66.72, 40.06, 38.13; Mass found [M - HCl + H]+ = 408.3; [M - HCl + Na]+ = 430.2; [2M - 2HCl + H]+ = 814.5; [2M - 2HCl + Na]+ = 836.5.
컬럼: Inertsil ODS-3 C18, 5um, 30*250mm
유속: 38ml/분
용매 A: H2O 중 10% ACN + 0.1%TFA
용매 B: H2O 중 90% ACN + 0.1%TFA
구배:
Figure pct00015
6b-6h의 최종 화합물은 일부 중요하지 않은 변형과 함께 6a에 기술된 바와 같은 실험 절차에 의해 제조되었다.
(E)-2-(2-아미노아세트아미도)에틸(4-(3,5-디에톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (6b)
6a와 동일한 합성 절차를 사용하여 19b로부터 6b를 얻었다.
백색 고체. 수율 95%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.06-4.02 (m, 4H), 3.71 (s, 2H), 3.62 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 1.39 (t, J = 7.0 Hz, 6H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 166.24, 160.36, 153.66, 150.48, 139.09, 135.51, 129.06, 127.27, 127.16, 120.93, 104.74, 100.71, 66.72, 63.15, 40.08, 38.14, 13.77; Mass found [M - HCl + H]+ = 430.3; [M - HCl + Na]+ = 452.2; [2M - 2HCl + H]+ = 858.5; [2M - 2HCl + Na]+ = 880.5.
(E)-2-(2-아미노-3-메틸부탄아미도)에틸 4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6) 페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (6c)
6a와 동일한 합성 절차를 사용하여 19c로부터 6c를 얻었다.
백색 고체. 수율 89%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.40-4.32 (m, 1H), 4.31-4.29 (m, 1H), 3.73-3.72 (m, 1H), 3.67 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.54-3.49 (m, 1H), 2.22-2.16 (m, 1H), 1.08 (t, J = 6.5 Hz, 6H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.45, 161.14, 153.58, 150.50, 139.18, 135.50, 128.98, 127.40, 127.17, 120.93, 104.19, 99.58, 66.62, 58.46, 38.04, 30.09, 17.37, 16.60; Mass found [M - HCl + H]+ = 449.3; [M - HCl + Na]+ = 471.3; [2M - 2HCl + Na]+ = 919.4.
(E)-2-(2-아미노-3-메틸부탄아미도)에틸(4-(3,5-디에톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드(6d)
6a와 동일한 합성 절차를 사용하여 19d로부터 6d를 얻었다.
백색 고체. 수율 93%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.40-4.34 (m, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 4.06-4.02 (m, 4H), 3.77-3.72 (m, 1H), 3.66 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.54-3.49 (m, 1H), 2.23-2.16 (m, 1H), 1.39 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 1.08 (t, J = 7.0 Hz, 6H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.48, 160.36, 153.58, 150.47, 139.10, 135.52, 129.06, 127.28, 127.16, 120.93, 104.77, 100.73, 66.62, 63.16, 58.48, 38.05, 30.10, 17.37, 16.62, 13.78; Mass found [M - HCl + H]+ = 472.3; [M - HCl + Na]+ = 494.3; [2M - 2HCl + H]+ = 942.6; [2M - 2HCl + Na]+ = 964.6.
(E)-2-(2-아미노-3-페닐프로판아미도)에틸 4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6) 페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (6e)
6a와 동일한 합성 절차를 사용하여 19e로부터 6e를 얻었다.
백색 고체. 수율 90%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.59 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.39-7.36 (m, 2H), 7.32-7.29 (m, 3H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.27-4.19 (m, 2H), 4.06 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 3.66-3.61 (m, 1H), 3.48-3.43 (m, 1H), 3.19 (dd, J = 7.0, 13.5 Hz, 1H), 3.08 (dd, J = 7.0, 13.5 Hz, 1H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.48, 161.14, 153.51, 150.50, 139.18, 135.50, 134.15, 129.13, 129.00, 128.71, 127.48, 127.40, 127.19, 120.92, 104.20, 99.59, 66.66, 54.41, 38.03, 37.29; Mass found [M - HCl + H]+ = 498.2; [M - HCl + Na]+ = 520.4; [2M - 2HCl + H]+ = 994.6.
(E)-2-(2-아미노-3-페닐프로판아미도)에틸(4-(3,5-디에톡시스티릴)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (6f)
6a와 동일한 합성 절차를 사용하여 19f로부터 6f를 얻었다.
백색 고체. 수율 92%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.57 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.38-7.35 (m, 2H), 7.32-7.29 (m, 3H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.12 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.24-4.20 (m, 2H), 4.07-4.02 (m, 5H), 3.65-3.60 (m, 1H), 3.48-3.43 (m, 1H), 3.19 (dd, J = 7.5, 14.0 Hz, 1H), 3.08 (dd, J = 7.5, 14.0 Hz, 1H), 1.38 (t, J = 7.5 Hz, 6H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.48, 160.36, 153.51, 150.47, 139.10, 135.52, 134.15, 129.12, 129.07, 128.71, 127.48, 127.27, 127.18, 120.91, 104.77, 100.74, 66.65, 63.16, 54.41, 38.03, 37.29, 13.78; Mass found [M - HCl + H]+ = 519.2; [2M - 2HCl + H]+ = 1037.4.
(E)-2-(2-아미노-3-메틸부탄아미도)에틸(4-(3,5-디메톡시스티릴)-2-메톡시페닐) 카보네이트 하이드로클로라이드 (6g)
6a와 동일한 합성 절차를 사용하여 19g에서 6g을 얻었다.
백색 고체. 수율 85%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.29 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.17-7.13 (m, 2H), 7.12-7.07 (m, 2H), 6.73 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.38-4.28 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.80 (s, 6H), 3.75-3.64 (m, 2H), 3.54-3.51 (m, 1H), 2.20 (s, 1H), 1.08 (t, J = 7.0 Hz, 6H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.43, 161.14, 153.30, 151.30, 139.40, 139.18, 136.92, 129.09, 127.81, 121.97, 118.72, 110.16, 104.24, 99.61, 66.65, 58.47, 55.10, 54.39, 38.11, 30.10, 17.41, 16.63; Mass found [M - HCl + H]+ = 474.2; [M - HCl + Na]+ = 496.2; [2M - 2HCl + H]+ = 946.5; [2M - 2HCl + Na]+ = 968.5.
2-(2-아미노-3-메틸부탄아미도)에틸(4-((1E,3E)-4-(3,5-디메톡시페닐)부타-1,3-디엔-1-일)페닐)카보네이트 하이드로클로라이드 (6h)
6a와 동일한 합성 절차를 사용하여 19h로부터 6h를 얻었다.
백색 고체. 수율 80%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.49 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.01-6.95 (m, 2H), 6.71-6.62 (m, 4H), 6.38 (s, 1H), 4.39-4.35 (m, 1H), 4.33-4.29 (m, 1H), 3.78 (s, 6H), 3.77-3.71 (m, 1H), 3.68 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.53-3.49 (m, 1H), 2.22-2.18 (m, 1H), 1.07 (t, J = 7.0 Hz, 6H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.46, 161.09, 153.56, 150.39, 139.36, 135.65, 133.01, 131.38, 129.53, 129.33, 126.99, 120.94, 104.09, 99.55, 66.62, 58.45, 54.39, 38.04, 30.09, 17.37, 16.63; Mass found [M - HCl + H]+ = 469.0; [M - HCl + Na]+ = 491.1; [2M - 2HCl + H]+ = 937.0.
1-2-6. 표적 화합물 7a-7f의 합성
반응식 6에 따라 화합물 7a-7f를 합성하였다. 표시된 바와 같이, 벤질 N-(2-아미노에틸)카바메이트 하이드로클로라이드를 EDCI 및 DMAP의 존재 하에 N-Boc-아미노산(화합물 1a, 1c, 및 1j)과 반응시켜 상응하는 아미드 유도체(화합물 20a-20c)를 얻었다. 화합물 20a-20c를 Pd/C로 수소화하여 상응하는 화합물 21a-21c를 얻었다. 한편, 프테로스틸벤 또는 17a를 NEt3의 존재 하에서 트리포스겐으로 처리하여 상응하는 22a-22b를 얻었고, 이를 추가 정제 없이 별도로 화합물 21a-21c와 반응시켜 상응하는 23a-23f를 얻었다. 이어서 1,4-디옥산 중 4M HCl로 23a-23f를 탈보호하여 표적 화합물 7a-7f를 얻었다.
반응식 6: 화합물 7a-7f의 합성
Figure pct00016
Figure pct00017
시약 및 조건: (a) EDCI, DIPEA, CH2Cl2, 실온, 12시간; (b) 10% Pd/C, MeOH, 실온, 12시간; (c) 트리에틸아민, 0℃에서 실온으로, 1.5시간; (d) 트리메틸아민, 실온, 1.5시간; (e) 1,4-디옥산 중 4M HCl.
벤질(2-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)아세트아미도)에틸)카르바메이트 (20a)
CH2Cl2(80ml) 중 벤질 (2-아미노에틸)카바메이트 HCl(8.5g, 36.8mmol), Boc-Gly-OH 1a(5.3g, 30.4mmol) 및 DIPEA(9.5g, 73.6mmol)의 교반 용액에 EDCL(8.6g, 45.0mmol)을 첨거하고, 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 후 용매를 감압 제거하고 컬럼 크로마토그래피(n-헥산에서 EA/n-헥산으로 = 1/5 (V/V))로 정제하여 백색 분말의 목적물 20a(8.0 g, 수율 74%)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.33-7.30 (m, 5H), 6.86 (brs, NH), 5.56 (brs, NH), 5.07 (s, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.37-3.30 (m, 4H), 1.42 (s, 9H).
벤질(2-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부탄아미도)에틸)카르바메이트 (20b)
20a와 동일한 합성 절차를 사용하여 1c로부터 20b를 얻었다.
백색 분말. 수율 41%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.34-7.31 (m, 5H), 6.55 (brs, NH), 5.35 (brs, NH), 5.05 (s, 2H), 5.03 (brs, NH), 3.86-3.83 (m, 1H), 3.40-3.33 (m, 4H), 2.12-2.10 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.88 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
벤질(2-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-페닐프로판아미도)에틸)카르바메이트(20c)
20a와 동일한 합성 절차를 사용하여 1j로부터 20c를 얻었다.
백색 분말. 수율 48%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.36-7.18 (m, 11H), 6.18 (brs, NH), 5.07 (s, 2H), 5.04 (brs, NH), 4.26 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.48-3.17 (m, 4H), 3.04-3.01 (m, 2H), 1.40 (s, 9H).
Tert-부틸 (2-((2-아미노에틸)아미노)-2-옥소에틸)카르바메이트 (21a)
화합물 20a(4.0g 11.4mm)를 MeOH(50mL)에 용해시킨 뒤 10% Pd/C(0.6g)로 처리하고, 반응 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액의 용매를 증발시키고 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/메탄올 = 1/19(V/V))로 정제하여 백색 분말의 화합물 21a(2.35g, 95%)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.16 (brs, NH), 5.62 (brs, NH), 3.79 (brs, 2H), 3.38-3.36 (m, 2H), 2.90-2.88 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).
Tert-부틸 (1-((2-아미노에틸)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)카르바메이트 (21b)
21a와 동일한 합성 절차를 사용하여 20b로부터 21b를 얻었다.
백색 분말. 수율 95%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 6.93 (brs, NH), 5.24 (brs, NH), 3.89-3.86 (m, 1H), 3.40-3.37 (m, 1H), 3.32-3.29 (m, 1H), 2.87-2.85 (m, 2H), 2.13-2.09 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 0.94 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
Tert-부틸 (1-((2-아미노에틸)아미노)-1-옥소-3-페닐프로판-2-일)카바메이트 (21c)
21a와 동일한 합성 절차를 사용하여 20c로부터 21c를 얻었다.
백색 분말. 수율 95%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.29-7.19 (m, 5H), 6.77 (brs, NH), 5.34 (s, NH), 4.32-4.31 (m, 1H), 3.24-3.23 (m, 2H), 3.06-3.02 (m, 2H), 2.79 (s, 2H), 2.71 (s, NH2), 1.37 (s, 9H).
Tert-부틸 (E)-(2-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)아미노) 에틸)아미노)-2-옥소에틸)카르바메이트 (23a)
무수 CH2Cl2(15ml) 중의 프테로스틸벤(1.41g, 5.51mmol) 및 트리포스겐(0.54g, 1.82mm)의 용액에 트리에틸아민(1.36g, 13.4mmol)을 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음 실온으로 가온하여 중간체 22a 용액을 얻었다. 무수 CH2Cl2(15ml) 중의 화합물 21a(1.17g, 5.9mmol) 및 트리에틸아민(1.36g, 13.4mmol)의 용액을 상기 중간체 22a 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 추가로 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 후, 용매를 진공 하에 제거하고 잔류물을 EA에 취하고 포화 시트르산 용액으로 세척하였다. 유기층을 수집하고, Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/n-헥산 0∼67%)로 정제하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분취용 HPLC(70% ACN, 30% H2O)로 정제하여 백색 분말의 표적 화합물 23a(0.86g, 32% 수율, 2단계)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.70 (brs, NH), 6.65 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 5.74 (brs, NH), 5.19 (brs, NH), 3.83 (s, 6H), 3.79 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.50-3.46 (m, 2H), 3.43-3.40 (m, 2H), 1.44 (s, 9H). Mass found [M + Na]+ = 522.0, [2M + Na]+ = 1021.3.
Tert-부틸 (E)-(2-((2-(((4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페녹시)카르보닐)아미노)에틸)아미노)-2-옥소에틸)카르바메이트 (23b)
23a와 동일한 합성 절차를 사용하여 21a 및 22b로부터 23b를 얻었다.
흰색 분말. 수율 27%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.69 (brs, NH), 6.65 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.73 (brs, NH), 5.19 (brs, NH), 3.79 (d, J = 5.5 Hz, 2H) , 3.49-3.47 (m, 2H), 3.43-3.40 (m, 2H), 1.44 (s, 9H). Mass found [M + Na]+ = 528.2, [2M + Na]+ = 1033.4.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)아미노) 에틸)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)카르바메이트 (23c)
23a와 동일한 합성 절차를 사용하여 21b 및 22a로부터 23c를 얻었다.
흰색 분말. 수율 18%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.52 (brs, NH), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.77 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 3.87-3.85 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.47-3.41 (m, 4H), 2.18-2.16 (m, 1H) 1.45 (s, 9H), 0.97 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H). Mass found [M - Boc + H]+ = 443.3; [M + H]+ = 543.4; [M + Na]+ = 565.3.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페녹시)카르보닐)아미노)에틸)아미노)-3-메틸-1 -옥소부탄-2-일)카르바메이트 (23d)
23a와 동일한 합성 절차를 사용하여 21b 및 22b로부터 23d를 얻었다.
백색 분말. 수율 28%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.47 (brs, NH), 6.39 (t, J = 2.5Hz, 1H), 5.73 (brs, NH), 5.00 (brs, NH), 3.87-3.84 (m, 1H) , 3.52-3.42 (m, 4H), 2.17-2.14 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H). Mass found [M + Na]+ = 570.3, [2M + Na]+ = 1117.6.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)아미노) 에틸)아미노)-1-옥소-3-페닐프로판-2-일)카르바메이트 (23e)
23a와 동일한 합성 절차를 사용하여 21c 및 22a로부터 23e를 얻었다.
백색 분말. 수율 27%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.35-7.27 (m, 3H), 7.23-7.22 (m, 2H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.15 (brs, NH), 5.42 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 4.31-4.26 (m, 1H), 3.81 (s, 6H), 3.38-3.33 (m, 2H), 3.31-3.25 (m, 2H), 3.11-3.03 (m, 2H), 1.45 (s, 9H). Mass found [M - Boc + H]+ = 491.0; [M + H]+ = 591.4; [M + Na]+ = 613.3.
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페녹시)카르보닐)아미노)에틸)아미노)-1-옥소-3 -페닐프로판-2-일)카바메이트(23f)
23a와 동일한 합성 절차를 사용하여 21c 및 22b로부터 23f를 얻었다.
백색 분말. 수율 30%. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.34-7.27 (m, 3H), 7.25-7.22 (m, 2H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.19 (brs, NH), 5.44 (brs, NH), 5.05 (brs, NH), 4.31-4.27 (m, 1H), 3.38-3.33 (m, 2H), 3.32-3.24 (m, 2H), 3.11-3.03 (m, 2H), 1.41 (s, 9H). Mass found [M - Boc + H]+ = 497.3; [M + H]+ = 597.4; [M + Na]+ = 619.5; [2M + H]+ = 1192.9; [2M + Na]+ = 1214.8.
(E)-4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐(2-(2-아미노아세트아미도)에틸)카르바메이트 하이드로클로라이드 (7a)
DCM(10mL) 중 화합물 23a(760mg, 1.5mmol)의 교반 용액에 1,4-디옥산(7.60mL) 중 4M HCl을 첨가하고 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 증발시키고 분취용 HPLC 정제(완충제로서 TFA, 상세한 구배 용리는 아래 정보 참조)를 수행하였다. 이어서 수성 분획을 농축 HCl 몇 방울로 처리하고 동결건조하여 백색 고체의 화합물 7a(614mg, 93% 수율)를 얻었다. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.42-3.40 (m, 2H), 3.35-3.31 (m, 4H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 166.19, 161.13, 155.99, 150.61, 139.31, 134.66, 128.46, 127.67, 127.01, 121.56, 104.16, 99.52, 54.40, 40.10, 39.94, 39.12; Mass found [M - HCl + H]+ = 400.2; [2M - 2HCl + H]+ = 799.3.
컬럼: Inertsil ODS-3 C18, 5um, 30*250mm
유속: 38ml/분
용매 A: H2O 중 10% ACN + 0.1%TFA
용매 B: H2O 중 90% ACN + 0.1%TFA
구배:
Figure pct00018
(E)-4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페닐(2-(2-아미노아세트아미도)에틸)카바메이트 하이드로클로라이드 (7b)
7a와 동일한 합성 절차를 사용하여 23b로부터 7b를 얻었다.
백색 고체. 수율 95%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 3.42-3.40 (m, 2H), 3.35-3.31 (m, 4H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 166.19, 161.13, 155.99, 150.61, 139.31, 134.66, 128.47, 127.66, 127.01, 121.56, 104.13, 99.50, 40.10, 39.94, 39.12; Mass found [M - HCl + H]+ = 406.3; [2M - 2HCl + H]+ = 811.3.
(E)-4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐(2-(2-아미노-3-메틸부탄아미도)에틸)카르바메이트 하이드로클로라이드 (7c)
7a와 동일한 합성 절차를 사용하여 23c로부터 7c를 얻었다.
백색 고체. 수율 92%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.56 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.61 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 3.50-3.45 (m, 1H), 3.41-3.35 (m, 3H), 2.21-2.17 (m, 1H), 1.07 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.44, 161.13, 155.92, 150.57, 139.30, 134.67, 128.47, 127.65, 127.01, 121.54, 104.14, 99.49, 58.57, 54.37, 39.96, 38.97, 29.97, 17.51, 16.52; Mass found [M - HCl + H]+ = 443.0; [M - HCl + Na]+ = 465.2; [2M - 2HCl + H]+ = 884.5; [2M - 2HCl + Na]+ = 906.5.
(E)-4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페닐(2-(2-아미노-3-메틸부탄아미도) 에틸)카르바메이트 하이드로클로라이드 (7d)
7a와 동일한 합성 절차를 사용하여 23d로부터 7d를 얻었다.
백색 고체. 수율 93%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 3.65 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 3.64-3.35 (m, 4H), 2.23-2.16 (m, 1H), 1.07 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.45, 161.12, 155.90, 150.58, 139.31, 134.66, 128.47, 127.65, 127.01, 121.54, 104.13, 99.49, 58.57, 39.96, 38.96, 29.97, 17.51, 16.55; Mass found [M - HCl + H]+ = 448.3; [M - HCl + Na]+ = 470.2; [2M - 2HCl + Na]+ = 1149.5.
(E)-4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐(2-(2-아미노-3-페닐프로판아미도)에틸)카르바메이트 하이드로클로라이드 (7e)
7a와 동일한 합성 절차를 사용하여 23e로부터 7e를 얻었다.
백색 고체. 수율 90%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.41-7.31 (m, 2H), 7.33-7.29 (m, 3H), 7.13 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.04 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.04 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.75-3.57 (m, 1H), 3.40-3.34 (m, 2H), 3.28-3.20 (m, 2H), 3.08-3.04 (m, 1H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.50, 161.12, 155.91, 150.55, 139.30, 134.68, 134.31, 129.09, 128.75, 128.47, 127.65, 127.49, 127.02, 121.55, 104.15, 99.50, 54.52, 54.39, 39.84, 39.04, 37.26; Mass found [M - HCl + H]+ = 491.2; [M - HCl + Na]+ = 513.3; [2M - 2HCl + H]+ = 980.5.
(E)-4-(3,5-비스(메톡시-d3)스티릴-d6)페닐(2-(2-아미노-3-페닐프로판 아미도)에틸)카바메이트 하이드로클로라이드 (7f)
7a와 동일한 합성 절차를 사용하여 23f로부터 7f를 얻었다.
백색 고체. 수율 96%. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.53 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.39-7.36 (m, 2H), 7.33-7.29 (m, 3H), 7.13 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.04 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.05 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 3.39-3.34 (m, 2H), 3.29-3.20 (m, 3H), 3.08-3.04 (m, 1H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.48, 161.13, 155.89, 150.56, 139.30, 134.69, 134.31, 129.09, 128.74, 128.49, 127.64, 127.49, 127.00, 121.55, 104.14, 99.50, 54.52, 39.84, 39.04, 37.26; Mass found [M - HCl + H]+ = 496.3; [2M - 2HCl + H]+ = 991.4.
1-2-7. 표적 화합물 8의 합성
반응식 7은 화합물 8의 합성을 설명한 것이다. 표시된 바와 같이, 2-히드록시에틸 아세테이트를 NEt3 및 DMAP의 존재 하에 tert-부틸클로로디페닐실란(TPDPS-Cl)과 반응시켜 화합물 24를 얻고, 이를 소듐 메톡사이드(NaOMe)로 추가로 탈아세틸화하여 화합물 25를 얻었다. 화합물 25를 EDCI 및 DMAP의 존재 하에서 Boc-Val-OH(1c)와 결합시켜 화합물 26을 얻은 후, TBDPS기를 TBAF로 탈보호하여 하이드록실 화합물 27을 얻었다. 화합물 27을 p-니트로페닐 클로로포르메이트와 반응시켜 상응하는 화합물 28을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 프테로스틸벤과 반응시켜 예상된 카보네이트 29를 얻은 다음, Boc 그룹을 탈보호하여 표적 화합물 8을 얻었다.
반응식 7: 화합물 8의 합성
Figure pct00019
시약 및 조건: (a) TBDPS-Cl, 트리메틸아민, DMAP, CH2Cl2, 12시간; (b) MeOH 중 5.4M NaOMe, MeOH, 2시간; (c) Boc-Val-OH 1c, EDCI, 트리에틸아민, DMAP, CH2Cl2, 12시간; (d) THF 중 1.0M TBAF, THF, 1시간, 72%; (e) 트리에틸아민, CH2Cl2, 0℃; (f) DMAP, ACN, 50℃; (g) 1,4-디옥산 중 4M HCl, 3시간.
2-((tert-부틸디페닐실릴)옥시)에틸 아세테이트 (24)
CH2Cl2(25mL) 중의 2-히드록시에틸 아세테이트(3.12g, 30.0mmol)의 교반 용액에 tert-부틸클로로디페닐실란(TBDPS-Cl)(8.65g, 31.5mmol), Et3N(4.6mL, 33.0mmol) 및 DMAP(110mg, 0.9mmol)를 첨가하고, 출발 물질이 완전히 소모될때까지 상온에서 교반하였다(12시간). 반응 혼합물을 CH2Cl2(25mL)로 희석하고 물(25mL)로 세척하였다. 유기층을 건조(Na2SO4), 여과 및 증발시켰다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/n-헥산 0∼2%)로 처리하여 무색 오일의 화합물 24를 얻었다(4.59g, 수율 43%). 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ(ppm): 7.69-7.67 (m, 4H), 7.43-7.37 (m, 6H), 4.18 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 3.85 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.06 (s, 9H).
2-((tert-부틸디페닐실릴)옥시)에탄올 (25)
MeOH(100mL) 중 화합물 24(4589mg, 13.4mmol)의 교반 용액에 MeOH 중 5.4M 소듐 메톡사이드(4.96mL, 26.8mmol)를 적가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이후 용매를 진공에서 증발시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/n-헥산 0∼17%)로 처리하여 무색 오일의 화합물 25를 얻었다(4.00g, 수율 99%). 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ(ppm): 7.71-7.67 (m, 4H), 7.45-7.37 (m, 6H), 3.77 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 1.58 (brs, OH, 1H), 1.05 (s, 9H).
2-((tert-부틸디페닐실릴)옥시)에틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트 (26)
CH2Cl2(100mL) 중의 화합물 25(2871mg, 9.6mmol), Boc-Val-OH 1c(2076mg, 9.6mmol) 및 NEt3(1598㎕, 11.5mmol)의 교반 용액에 EDCI(2198mg, 11.5mmol) 및 DMAP(350mg, 2.9mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 후, 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/n-헥산 0∼5%)로 정제하여 백색 분말의 표적 생성물 26(2719mg, 수율 57%)을 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.67-7.66 (m, 4H), 7.44-7.26 (m, 6H), 5.03 (d, J = 8.5 Hz, NH, 1H), 4.25-4.11 (m, 3H), 3.88-3.85 (m, 2H), 2.15-2.04 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.04 (s, 9H), 0.94 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.89 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
2-히드록시에틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트 (27)
THF(25mL) 중 화합물 26(2719mg, 5.4mmol)의 교반 용액에 THF(10.88mL, 10.9mmol) 중 1.0M TBAF를 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 후, 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/n-헥산 0∼5%)로 정제하여 연황색 오일의 표적 생성물 27(1022mg, 수율 72%)을 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 5.00 (brs, 1H), 4.35-4.22 (m, 2H), 4.20-4.14 (m, 1H), 3.82 (s, 2H), 2.33 (brs, OH, 1H), 2.17-2.13 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.96 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
(E)-2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸 2-((tert-부톡시 카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트 (29)
무수 CH2Cl2(20ml) 중의 화합물 27(1022mg, 3.9mmol)의 교반 용액에 트리에틸아민(1363㎕, 9.8mmol)을 첨가한 다음, 30mL CH2Cl2 중의 4-니트로페닐 클로로포르메이트(867mg, 4.3mmol) 용액을 0℃에서 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 0에서 30분 동안 교반한 다음 실온으로 데웠다. 실온에서 추가로 4시간 동안 교반한 후, 용매를 진공 하에 제거하여 조 중간체 28을 얻었고, 이를 ACN(30ml) 중의 프테로스틸벤(1002mg, 3.9mmol) 및 DMAP(956mg, 7.8mmol)와 혼합하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 50℃로 가열하였다. 반응 후, 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 EA에 넣고 포화 시트르산 용액으로 세척하였다. 유기층을 수집하고, Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/n-헥산 0∼33%)로 정제하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분취용 HPLC(80% ACN, 20% H2O)로 정제하여 백색 분말의 화합물 29(600mg, 수율 28%, 2단계)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (s, 2H), 6.41 (s, 2H), 5.02 (d, J = 9.5 Hz, NH, 1H), 4.52-4.45 (m, 3H), 4.42-4.39 (m, 1H), 4.30-4.29 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 2.19-2.17 (m, 1H) 1.45 (s, 9H), 0.99 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 6.5 Hz, 3H). Mass found [M - Boc + H]+ = 445.1; [M + H]+ = 545.1, [M + Na]+ = 567.1.
(E)-2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)옥시)에틸 2-아미노-3-메틸부타노에이트 하이드로클로라이드 (8)
50mL 둥근 바닥 플라스크에 화합물 29(561mg, 1.0mmol) 및 1,4-디옥산 중 4M HCl(5.16ml)을 채웠다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 감압하에서 용매를 제거한 후 동결건조하여 백색 분말의 원하는 생성물 8을 얻었다(446 mg, 수율 90%). 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 8.90 (brs, NH2, HCl, 3H), 7.48 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.64 (s, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.58-4.49 (m, 4H), 4.04 (s, 1H), 3.81 (s, 6H), 2.50 (s, 1H), 1.18-1.16 (m, 6H); 13C-NMR (CDCl3, 125 MHz), δ(ppm): 168.29, 160.99, 153.33, 150.30, 139.05, 135.34, 129.23, 127.90, 127.54, 121.30, 104.61, 100.14, 65.82, 63.39, 58.65, 55.37, 29.98, 18.35, 18.28; Mass found [M - HCl + H]+ = 445.2; [M - HCl + Na]+ = 467.2; [2M - 2HCl + H]+ = 888.6.
1-2-8. 표적 화합물 9의 합성
반응식 8에 따라 화합물 9를 합성하였다. 도시된 바와 같이, 2-브로모에탄올과 아지드화소듐(NaN3)의 치환 반응은 화합물 30을 제공하고, 이는 EDCI 활성화를 통해 Boc-Val-OH(1c)와 커플링되어 에스테르 31을 제공한 다음, N3 그룹을 추가로 수소화하여 아민 32이 형성된다. 화합물 32를 p-니트로페닐 클로로포르메이트와 반응시켜 상응하는 카바메이트 33을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 프테로스틸벤과 반응시켜 예상되는 카바메이트 34를 얻은 다음, Boc 그룹을 탈보호하여 아미노 유도체 9를 얻었다.
반응식 8: 화합물 9의 합성
Figure pct00020
시약 및 조건: (a) NaN3, 물, 80℃ 24시간; (b) Boc-Val-OH 1c, EDCI, 트리에틸아민, DMAP, CH2Cl2, 12시간; (c) H2, 10% Pd/C, EtOAc, MeOH, 2시간; (d) 트리에틸아민, CH2Cl2, 0℃; (e) DMAP, ACN, 50℃, 1시간; (f) 1,4-디옥산 중 4M HCl, 3시간.
2-아지도에탄올 (30)
100mL 둥근 바닥 플라스크에 물(50mL) 중 2-브로모에탄올(5827mg, 46.6mmol) 및 아지드화소듐(6062mg, 93.3mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 80℃에서 24시간 동안 교반한 다음 실온으로 냉각시켰다. 상기 용액을 에틸 아세테이트(30 ml x 4)로 추출하고 유기층을 Na2SO4로 건조시키고 여과하였다. 여액의 용매를 증발시키고 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/n-헥산 0∼25%)로 정제하여 연황색 액체의 표적 화합물 30(3735mg, 수율 92%)을 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 3.78 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 3.45 (s, 2H), 1.86 (s, OH, 1H).
2-아지도에틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트 (31)
CH2Cl2(50ml) 중의 2-아지도에탄올 30(683 mg, 7.9 mmol), Boc-Val-OH 1c(1705 mg, 7.9 mmol) 및 NEt3(1313 ㎕, 9.4 mmol)의 교반 용액에 EDCI(1805 mg, 9.4 mmol) 및 DMAP(288 mg, 2.4 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 후, 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/n-헥산 0∼11%)로 정제하여 백색 분말의 목적 생성물 31(1527mg, 수율 68%)을 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 4.99 (d, J = 6.5 Hz, NH, 1H), 4.31-4.27 (m, 3H), 3.51-3.50 (m, 2H), 2.18-2.17 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
2-아미노에틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트(32)
1527 mg의 화합물 31을 25 mL 메탄올 및 25 mL EA에 용해시키고, 568 mg의 10% Pd/C를 첨가하고 수소 대기 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. Pd/C를 여과 제거하고 15mL 메탄올로 세척하였다. 그 후 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물에 물 10mL를 첨가한 다음 동결건조하여 오일의 생성물 32를 얻었다(1319mg, 수율 95%). 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 5.08 (brs, NH, 1H), 4.20-4.10 (m, 1H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.73-3.71 (m, 1H), 3.49-3.41 (m, 1H), 3.01-2.97 (m, 1H), 2.30 (brs, NH2, 2H), 2.12 (s, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.97-0.88 (m, 6H).
(E)-2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)아미노)에틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트 (34)
무수 CH2Cl2(30ml) 중의 화합물 32(1469mg, 5.6mmol) 의 교반 용액에 트리에틸아민(1966㎕, 14.1mmol)을 첨가한 다음 4-니트로페닐 클로로포르메이트 용액(1251mg, 30mL CH2Cl2 중 6.2mmol)을 0℃에서 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 0에서 30분 동안 교반하고 실온으로 데웠다. 실온에서 추가로 4시간 동안 교반한 후, 용매를 진공 하에 제거하여 조 중간체 33을 얻었고 이를 ACN(30ml) 중의 프테로스틸벤(1446mg, 5.6mmol) 및 DMAP(1379mg, 11.3mmol)와 혼합하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 50℃로 가열하였다. 반응 후, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 EA에 넣고 포화 시트르산 용액으로 세척하였다. 유기층을 수집하고, Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/n-헥산 0∼30%)로 정제하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분취용 HPLC(80% ACN, 20% H2O)로 추가 정제하여 백색 분말의 34(320mg, 수율 11%, 2단계)를 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (s, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.36 (brs, NH, 1H), 5.02 (brs, NH, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.91 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.65 (s, 2H), 2.17 (s, 1H) 1.44 (s, 9H), 0.97 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 6.5 Hz, 3H). Mass found [M - Boc + H]+ = 444.3; [M + H]+ = 544.3, [M + Na]+ = 566.3.
(E)-2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)아미노)에틸 2-아미노-3-메틸부타노에이트 하이드로클로라이드 (9)
50mL 둥근 바닥 플라스크에 화합물 34(320mg, 0.6mmol) 및 1,4-디옥산 중 4M HCl(2.95mL)을 채웠다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 감압하에서 용매를 제거한 다음 동결건조하여 백색 분말의 원하는 생성물 화합물 9를 얻었다(249 mg, 88 %). 1H-NMR (d6-DMSO, 500 MHz), δ(ppm): 8.80 (t, J = 5.0 Hz, NH, 1H), 8.22 (brs, NH2, HCl, 3H), 7.63 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 4.30-4.27 (m, 1H), 4.24-4.20 (m, 1H), 3.76 (s, 6H), 3.64-3.60 (m, 3H), 2.10-2.06 (m, 1H), 0.95-0.90 (m, 6H); 13C-NMR (d6-DMSO, 125 MHz), δ(ppm): 168.64, 161.13, 153.35, 150.49, 139.37, 135.53, 129.37, 128.26, 128.04, 121.92, 105.00, 100.44, 67.38, 57.93, 55.69, 38.01, 30.11, 18.60, 18.37; Mass found [M + H]+ = 444.3; [M + Na]+ = 466.3.
1-2-9. 표적 화합물 10의 합성
반응식 9는 화합물 10의 합성을 보여준다. Boc-Val-OH(1c)의 카르복실산은 N-하이드록시숙신이미드(NHS)에 의해 활성화되고 디사이클로헥실카르보디이미드(DCC)는 아미노기를 통해 시스테아민의 컨쥬게이션을 허용하고 예측되는 아미드 35를 제공한다. 화합물 35를 p-니트로페닐 클로로포르메이트와 반응시켜 상응하는 p-니트로페닐 티오카보네이트 36을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 프테로스틸벤과 반응시켜 예측되는 티오카보네이트 37을 얻었다. Boc 그룹의 후속 탈보호를 통해 표적 화합물 10을 얻었다.
반응식 9: 화합물 10의 합성
Figure pct00021
시약 및 조건: (a) 1. NHS, DCC, THF, 24시간; 2. DIPEA, CH2Cl2, 24시간; (b) DIPEA, CH2Cl2, 0℃; (c) DMAP, ACN, 50℃, 2시간; (d) 1,4-디옥산 중 4M HCl, CH2Cl2.
Tert-부틸 (1-((2-메르캅토에틸)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)카르바메이트 (35)
THF(16mL) 중의 Boc-Val-OH 1c(3.23g, 14.9mmol)의 용액에 NHS(1.72g, 15.0mmol) 및 DCC(3.1g, 15.0mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하고 여과하였다. 여액의 용매를 증발시키고 잔류물을 CH2Cl2(12mL)에 취한 다음 DIPEA(5.7g, 44.2mmol) 및 시스테아민 하이드로클로라이드(1.23g, 15.9mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 24시간 동안 교반하였다. 물(5mL)을 첨가하고 반응 혼합물을 EA(3 x 20mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 1N HCl(2 x 10mL) 및 염수(10mL)로 세척하였다. 유기상을 MgSO4 상에서 건조시키고 증발시키고 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, n-헥산/EtOAc (4:1, v/v))로 정제하여 백색 고체의 35(1.67g, 수율 41%)를 얻었다. 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm): 6.41 (s, 1H), 5.05 (s, 1H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.49-3.42 (m, 2H), 2.69-2.65 (m, 2H), 2.17-2.15 (m, 1H) 1.45 (s, 9H), 0.96 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
Tert-부틸 (E)-(1-((2-(((4-(3,5-디메톡시스티릴)페녹시)카르보닐)티오)에틸)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)카르바메이트 (37)
무수 CH2Cl2(40 ml) 중 화합물 35(1.26 g, 4.6 mmol)의 교반 용액에 DIPEA(1.78 g, 13.8 mmol)를 첨가한 다음 10 mL CH2Cl2 중 4-니트로페닐 클로로포르메이트 용액(1.02 g, 5.1 mmol)을 0℃에서 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반한 다음 실온으로 데웠다. 실온에서 추가로 4시간 동안 교반한 후, 용매를 진공 하에 제거하여 조 중간체 36을 수득하고 이를 ACN(30ml) 중의 프테로스틸벤(1.19g, 4.7mmol) 및 DMAP(1.13g, 9.3mmol)와 혼합하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 50℃로 가열하였다. 반응 후 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(EA/n-헥산 = 1/5(V/V))로 정제하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분취용 HPLC(80% ACN, 20% H2O)로 추가 정제하여 백색 분말의 표적 화합물 37(1.46g, 56% 수율)을 얻었다. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5Hz, 1H), 6.38 (brs, NH), 5.00 (brs, NH), 3.98-3.85 (m, 1H), 3.82 (s, 6H), 3.65-3.54 (m, 2H), 3.13-3.07 (m, 2H), 2.17-2.16 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 0.90 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.87 (d, J = 7.0 Hz, 3H); Mass found[M - Boc + H]+ = 460.2; [M + H]+ = 560.3; [M + Na]+ = 582.3.
(E)-S-(2-(2-아미노-3-메틸부탄아미도)에틸) O-(4-(3,5-디메톡시스티릴)페닐)카르보노티오에이트 하이드로클로라이드 (10)
DCM(15mL) 중 화합물 37(805mg, 1.4mmol)의 교반 용액에 1,4-디옥산(7.20mL) 중 4M HCl을 첨가하고 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응 용액을 증발시키고 분취용 HPLC 정제(완충제로서 TFA, 자세한 구배는 아래 정보 참조)를 수행하였다. 이어서 수성 분획을 농축 HCl 몇 방울로 처리하고 동결건조하여 백색 고체의 화합물 10(647mg, 91% 수율)을 얻었다. 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.57 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15-7.12 (m, 3H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.68-3.62 (m, 2H), 3.52-3.46 (m, 1H), 3.17-3.10 (m, 2H), 2.22-2.18 (m, 1H), 1.08 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.06 (d, J = 6.5 Hz, 3H); 13C-NMR (CD3OD, 125 MHz), δ(ppm): 169.66, 168.37, 161.13, 150.53, 139.16, 135.69, 129.09, 127.38, 127.23, 121.15, 104.25, 99.66, 58.48, 54.42, 38.55, 30.22, 30.05, 17.52, 16.55; Mass found [M - HCl + H]+ = 459.2; [2M - 2HCl + H]+ = 917.3.
컬럼: Inertsil ODS-3 C18, 5um, 30*250mm
유속: 38ml/분
용매 A: H2O 중 10% ACN + 0.1%TFA
용매 B: H2O 중 90% ACN + 0.1%TFA
구배:
Figure pct00022
2. 생체내(in vivo) 연구에서 표적 화합물의 항-NAFLD 및 항-NASH 효과
2-1. 재료 및 방법
동물 및 실험 프로토콜: 4주령의 수컷 C57BL/6 마우스를 National Laboratory Animal Center(타이페이, 타이완)에서 구입하여 Institutional Animal Care and Use Committee of the National Health Research Institutes(타이페이, 타이완)에서 제공한 절차 및 지침에 따라 유지하였다. 위 대상체는 12시간 명/암 주기로 21±2℃의 온도에서 스테인레스 스틸 케이지에서 펠릿 음식과 물에 자유롭게 접근할 수 있도록 유지되었다. 모든 실험은 프로토콜 번호(CMUIACUC-2020-117)로 China Medical University(타이청, 타이완)의 Institutional Animal Care and Use Committee에서 감독하였다.
합성 표적 화합물(5a, 5b, 5c, 5d, 5e, 5f, 5g, 5h, 5j, 5m, 5p, 5t, 5v, 5w, 6a, 6b, 6g, 7c, 7e)을 PG/TPSG(1:1)에 용해하였다. 마우스에게 14일 동안 MCD 식이를 투여한 후 대조(control)로 PG/TPSG(1:1), 그리고 모든 화합물 100mg/kg을 42일 동안 1일 1회 및 1주일에 5회 경구 투여하였다. 마우스를 무작위로 5개 그룹으로 나누고 다음과 같이 처리하였다: (1) MCD 식이 + PG/TPSG (2) MCD 식이 + 100 mg/kg의 모든 화합물. 28일 후, 혈장 ALT 및 AST 농도 측정을 위한 혈액 수집과 H&E 염색을 위한 간 샘플 수집을 위해 동물들을 희생시켰다.
마우스에게 14일 동안 MCD 식이를 투여한 다음 DDW, 75, 100 및 150 mg/kg 화합물 5c를 42일 동안 매일 1회 및 주 5회 경구 투여하였다. 마우스를 다음과 같이 처리되는 5개 그룹으로 무작위로 나누었다: (1) 허위 그룹(비 MCD 식이) (2) MCD 식이 (3) MCD 식이 + 75mg/kg 화합물 5c (4) MCD 식이 + 100mg/kg 화합물 5c (5) MCD 식이 + 150mg/kg 화합물 5c. 28일 후, 혈장 ALT 및 AST 농도 측정을 위한 혈액 수집과 H&E 염색을 위한 간 샘플 수집을 위해 동물들을 희생시켰다.
2-2. 결과 및 고찰
MCD 식이에 의해 유도된 간 지방증의 경과에 대한 모든 화합물(5a, 5b, 5c, 5d, 5e, 5f, 5g, 5h, 5j, 5m, 5p, 5t, 5v, 5w, 6a, 6b, 6g, 7c, 7e)의 효과를 결정하기 위해 조직학적 연구가 이루어졌다. H&E 염색 결과는 MCD 식이 섭취가 간 지방증, 간세포 손상, 염증 세포 침윤, 풍선화 및 섬유증을 유의하게 유발함을 보여주었다. 화합물 5a, 5b, 5c, 5f, 5t, 6g, 7c, 7e, 5w, 5g, 5d, 5e, 5j, 5m, 5p, 6a, 6b를 통한 치료는 지방증, 염증, 풍선화 및 섬유증의 감소와 함께 MCD 식이 유발성 지방간염을 예방하였다. (표 1).
Figure pct00023
Figure pct00024
Figure pct00025
Figure pct00026
AST와 ALT의 혈청 농도는 간 손상의 지표이다. 표 2에 나타낸 바와 같이, MCD 식이를 공급한 마우스에서 AST 및 ALT의 혈청 농도는 정상 식이를 공급한 마우스에 비해 상당히 증가하였다. 화합물 5c, 5a, 5b, 5f, 5h, 5d, 5m 및 5p는 용량 의존적으로 AST 및 ALT의 혈청 농도를 유의하게 억제하였다.
표 2: 화합물들로 처리된 NASH 마우스로부터의 혈청 AST 및 ALT 파라미터
Figure pct00027
알라닌 트랜스아미나제(ALT); 아스파르테이트 트랜스아미나제(AST); 메티오닌 및 콜린 결핍 식이(MCD); ***MCD 그룹에 대하여 p<0.001
표 2: 화합물들로 처리된 NASH 마우스로부터의 혈청 AST 및 ALT 파라미터
Figure pct00028
알라닌 트랜스아미나제(ALT); 아스파르테이트 트랜스아미나제(AST); 메티오닌 및 콜린 결핍 식이(MCD); ***MCD 그룹에 대하여 p<0.001
화합물 5c가 가장 유력한 효과를 보였고 추가 가치 평가를 위해 선택되었다. MCD 식이에 의해 유도된 간 지방증의 발달에 대한 화합물 5c의 효과를 결정하기 위해 조직학적 연구가 이루어졌다. H-E 염색 결과는 MCD 식이 섭취가 간 지방증, 간세포 손상, 염증 세포 침윤, 풍선화 및 섬유증을 유의하게 유발함을 보여주었다. 화합물 5c 치료는 지방증, 염증, 풍선화 및 섬유증의 감소와 함께 MCD 식이 유발성 지방간염을 예방하였다 (도 1, 표 3).
Figure pct00029
AST와 ALT의 혈청 농도는 간 손상의 지표이다. 표 4에 나타낸 바와 같이, MCD 식이를 공급한 마우스에서 AST 및 ALT의 혈청 농도는 정상 식이를 공급한 마우스에 비해 상당히 증가하였다. 화합물 5c는 용량 의존적으로 AST 및 ALT의 혈청 농도를 유의하게 억제하였다.
표 4: 화합물 5c로 처리된 NASH 마우스로부터의 혈청 AST 및 ALT 파라미터
Figure pct00030
알라닌 트랜스아미나제(ALT); 아스파르테이트 트랜스아미나제(AST); 메티오닌 및 콜린 결핍 식이(MCD); ***대조군에 대하여 p<0.001, ### MCD 그룹에 대하여 p<0.001
3. 대상체 화합물의 안정성 및 용해도
3-1. pH=1.2에서 화합물 5a, 5c, 5m, 5v, 5w, 6a 및 6b의 안정성.
pH 1.2 용액(효소가 없는 USP 위액)에서 화합물 5a,5c,5m,5v,5w,6a 및 6b의 시험관내(in vitro) 안정성
3-1-1. 재료 및 방법
재료: 본 발명의 목적 화합물 5a, 5c, 5m, 5v, 5w, 6a 및 6b.
시약: pH=1.2 용액 NaCl 2.0g을 H2O 800mL에 용해시키고 진한 HCl 7.0mL를 첨가하였다. 혼합물을 교반하고 2N NaOH 및 2N 진한 HCl을 사용하여 pH1.2로 조정하고 H2O로 1000mL로 10배 희석하였다.
시험관내(in vitro) 실험: 화합물 5a, 5c, 5m, 5v, 5w, 6a 및 6b를 별도로 pH 1.2 용액과 함께 37℃에서 6시간 동안 배양하였다.
샘플 수집: 0, 0.17, 0.5, 1, 2, 4 및 6시간에 배양 혼합물에서 100mL의 분취량을 취하여 100μL의 얼음처럼 차가운 아세토니트릴 과 반응이 종료된 시점의 1㎛ 내부 표준을 포함하는 원심분리 튜브에 넣었다. 샘플을 15000 rpm에서 10분 동안 원심분리하고 상층액을 HPLC 시스템에 주입하였다.
HPLC 방법: HPLC: Waters 1525 바이너리 HPLC 펌프; Waters 2707 오토샘플러; Waters 2487 이중 ℃ 흡광도 검출기; 컬럼: XBridge Shield RP18, 5㎛, 4.6x50mm 컬럼; UV 검출기: 305nm; 온도: 실온; 구동시간: 15.0분; 이동상: A: H2O 중 0.1%FA; B: 아세토니트릴.
HPLC 이동상 구배 :
Figure pct00031
노트: 이동상: A: H2O 중 0.1% FA ; B: 아세토니트릴.화합물 5a, 5c, 5m, 5v, 5w, 6a 및 6b의 체류 시간(RT):
Figure pct00032
3-1-2. 결과 및 검토
테스트한 화합물들의 수준은 표 5에서 비교하였다. 결과는 이들 시험 화합물들이 pH=1.2 용액에서 비교적 안정하다는 것을 보여주었다. 6시간 배양 후, 화합물 5a, 5c, 5m, 5w, 6a 및 6b의 90% 이상이 pH=1.2 용액에 남아 있었다. 반면 화합물 5v는 84.8%만 남았다.
결론적으로, 체외 연구(in vitro)는 이러한 표적 화합물들이 위액(효소 없이)에 대해 상대적으로 안정하다는 것을 입증하였다. 시간에 따른 분해는 관찰되지 않았다.
표 5: pH=1.2 용액에서 화합물 5a, 5c, 5m, 5v, 5w, 6a 및 6b의 시간에 따른 안정성
시간
(h) 		화합물
5a (%) 		화합물
5c (%) 		화합물
5m (%) 		화합물
5v (%) 		화합물
5w (%) 		화합물
6a (%) 		화합물
6b (%)
0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0
0.167 104.6 88.5 88.6 100.6 128.3 106.4 130.5
0.5 104.0 93.2 109.8 106.8 113.4 101.2 103.9
1 110.2 96.0 113.5 101.0 123.9 119.4 111.7
2 101.7 91.7 102.6 103.0 128.5 101.5 97.9
4 103.5 97.4 85.6 106.9 122.4 104.6 99.2
6 103.6 96.9 91.5 84.8 133.7 99.8 102.6
3-2. H 2 O에서 화합물 5c의 용해도
3-2-1. 재료 및 방법
화합물 5c 농도는 H2O에서 40mg/mL로 설정하였다. 각각 30분 동안 초음파 처리 및 볼텍스 처리 후 튜브는 25℃에 두었다. 시료 채취 시점(1, 3, 6 및 24시간)에 튜브를 15,000rpm에서 10분 동안 원심분리하고 상층액을 수집하여 아세토니트릴로 적절하게 희석하였다. 샘플을 HPLC로 정량하였다.
HPLC 방법: 컬럼: XBridge Shield RP18, 5㎛, 4.6x50mm; UV 검출기: 305nm; 온도: 실온; 주입 부피: 10μL; 구동시간: 15.0분; 이동상: A: H2O 중 0.1% FA; B: 아세토니트릴
HPLC 이동상 구배 :
Figure pct00033
노트: 이동상: A: H2O 중 0.1% FA ; B: 아세토니트릴.
3-2-2. 결과 및 검토
표 6 및 도 2에 나타낸 바와 같이, H2O 상에서 화합물 5c의 24시간 후 25℃에서의 용해도는 34mg/mL보다 높다. 미국 약전의 기준에 따르면 화합물 5c는 수용성 물질이라고 할 수 있다.
표 6: H 2 O에서 화합물 5c의 용해도 특성.
Figure pct00034
4. 결론
본 발명에서는 하이드로클로라이드를 함유하는 수용성 프테로스틸벤 아미노산의 일련의 새로운 유사체들을 합성하였다. 위 화합물들은 pH=1.2(위액의 pH 값(효소 없음))에서 안정적이었고, 항-NASH 작용에 대해 분석되었다. 대부분의 합성 화합물은 항-NASH/NAFLD 활성을 보였다(표 1.2 참조). 그 중에서 화합물 5c가 가장 유력한 효과를 보였고 추가 분석을 위해 선택되었다. 결과는 화합물 5c(대표 화합물)가 상당한 항-NASH/NAFLD 활성을 나타냄을 보여주었다(도 1, 표 3 및 표 4 참조).
본 발명의 카보네이트 유사체를 포함하는 프테로스틸벤 아미노산의 새로운 일련의 화학 구조는 수용성이며 안정하고 생체 내(in vivo)에서 NAFLD/NASH를 치료하는 데 생체적으로 유효하므로 NAFLD/NASH를 치료하기 위한 새로운 약물로 개발될 가능성이 있다.
약어 목록
Figure pct00035
참고문헌
1. FDA. Nonalcoholic Steatohepatitis with Compensated Cirrhosis: Developing Drugs for Treatment Guidance for Industry. FDA DRAFT GUIDANCE. 2019.
2. Sumida Y, Yoneda M. Current and future pharmacological therapies for NAFLD/NASH. J Gastroenterol. 2018;53(3):362-76.
3. Goldberg D, Ditah IC, Saeian K, Lalehzari M, Aronsohn A, Gorospe EC, et al. Changes in the Prevalence of Hepatitis C Virus Infection, Nonalcoholic Steatohepatitis, and Alcoholic Liver Disease Among Patients With Cirrhosis or Liver Failure on the Waitlist for Liver Transplantation. Gastroenterology. 2017;152(5):1090-9 e1.
4. Younossi ZM, Koenig AB, Abdelatif D, Fazel Y, Henry L, Wymer M. Global epidemiology of nonalcoholic fatty liver disease-Meta-analytic assessment of prevalence, incidence, and outcomes. Hepatology. 2016;64(1):73-84.
5. Thiagarajan P, Aithal GP. Drug Development for Nonalcoholic Fatty Liver Disease: Landscape and Challenges. J Clin Exp Hepatol. 2019;9(4):515-21.
6. Wu J. [Machanism and intervention of nonalcoholic steatohepatitis-associated fibrosis]. Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2019;27(6):415-9.
7. Kudaravalli P, John S. Nonalcoholic Fatty Liver. StatPearls. Treasure Island (FL)2019.
8. Mathews SE, Kumar RB, Shukla AP. Nonalcoholic steatohepatitis, obesity, and cardiac dysfunction. Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes. 2018;25(5):315-20.
9. Fiorucci S, Di Giorgio C, Distrutti E. Obeticholic Acid: An Update of Its Pharmacological Activities in Liver Disorders. Handb Exp Pharmacol. 2019;256:283-95.
10. Ma Z, Zhang X, Xu L, Liu D, Di S, Li W, et al. Pterostilbene: Mechanisms of its action as oncostatic agent in cell models and in vivo studies. Pharmacol Res. 2019;145:104265.
11. Akinwumi BC, Bordun KM, Anderson HD. Biological Activities of Stilbenoids. Int J Mol Sci. 2018;19(3).
12. Lange KW, Li S. Resveratrol, pterostilbene, and dementia. Biofactors. 2018;44(1):83-90.
13. Estrela JM, Ortega A, Mena S, Rodriguez ML, Asensi M. Pterostilbene: Biomedical applications. Crit Rev Clin Lab Sci. 2013;50(3):65-78.
14. Aguirre L, Palacios-Ortega S, Fernandez-Quintela A, Hijona E, Bujanda L, Portillo MP. Pterostilbene Reduces Liver Steatosis and Modifies Hepatic Fatty Acid Profile in Obese Rats. Nutrients. 2019;11(5).
15. Gomez-Zorita S, Milton-Laskibar I, Aguirre L, Fernandez-Quintela A, Xiao J, M PP. Effects of pterostilbene on diabetes, liver steatosis and serum lipids. Curr Med Chem. 2019.
16. Ruiz MJ, Fernandez M, Pico Y, Manes J, Asensi M, Carda C, et al. Dietary administration of high doses of pterostilbene and quercetin to mice is not toxic. J Agric Food Chem. 2009;57(8):3180-6.
17. Coimbra M, Isacchi B, van Bloois L, Torano JS, Ket A, Wu X, et al. Improving solubility and chemical stability of natural compounds for medicinal use by incorporation into liposomes. Int J Pharm. 2011;416(2):433-42.
18. Kapetanovic IM, Muzzio M, Huang Z, Thompson TN, McCormick DL. Pharmacokinetics, oral bioavailability, and metabolic profile of resveratrol and its dimethylether analog, pterostilbene, in rats. Cancer Chemother Pharmacol. 2011;68(3):593-601.
19. Azzolini M, Mattarei A, La Spina M, Fanin M, Chiodarelli G, Romio M, et al. New natural amino acid-bearing prodrugs boost pterostilbene's oral pharmacokinetic and distribution profile. Eur J Pharm Biopharm. 2017;115:149-58.
20. Gonzalez-Alfonso JL, Rodrigo-Frutos D, Belmonte-Reche E, Penalver P, Poveda A, Jimenez-Barbero J, et al. Enzymatic Synthesis of a Novel Pterostilbene alpha-Glucoside by the Combination of Cyclodextrin Glucanotransferase and Amyloglucosidase. Molec㎕es. 2018;23(6).

Claims (16)

  1. 하기 화학식으로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
    Figure pct00036

    (식 중, n은 1∼3이고;
    m은 2∼6이며;
    Q, X, 및 Y는 독립적으로 O, S, 또는 NH이고;
    Ra, Rb, 및 Rc는 독립적으로 H, 할로겐, C1-C6 선형 알킬, C1-C6 선형 알콕시, C3-C6 분지형 알킬, C3-C6 분지형 알콕시, 또는 C1-C6 플루오로알콕시이며;
    Rd 및 Re는 독립적으로 H, 할로겐, C1-C6 선형 알킬, C1-C6 선형 알콕시, C3-C6 분지형 알킬, C3-C6 분지형 알콕시, 또는 C1-C6 플루오로알콕시이거나, 또는 Rd 및 Re는 연결되어
    Figure pct00037

    의 고리 구조를 형성하고, j는 1∼3이다)
  2. 제1항에 있어서,
    Q는 O이고; X는 O이며; Y는 NH인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  3. 제1항에 있어서,
    Q는 O이고; X는 NH이며; Y는 NH인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  4. 제1항에 있어서,
    Q는 O이고; X는 O이며; Y는 O인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  5. 제1항에 있어서,
    Q는 O이고; X는 NH이며; Y는 O인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  6. 제1항에 있어서,
    Q는 O이고; X는 S이며; Y는 NH인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    m은 2이고; 및 n은 1 또는 2인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  8. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    Ra 및 Rb는 메톡시인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  9. 제8항에 있어서,
    Ra 및 Rb는 3,5-디메톡시인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  10. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    Rd는 C3-C6 분지형 알킬인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  11. 제10항에 있어서,
    Rd는 이소프로필인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  12. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    Rd 및 Re는 연결되어
    Figure pct00038

    의 고리 구조를 형성하고, j는 1인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  13. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 약학적으로 허용가능한 염은 염산염 또는 니코티네이트염인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  14. 대상체의 비알코올성 지방간 질환(non-alcoholic fatty liver disease)을 치료하기 위한 약학 조성물로서, 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료를 위한 치료 유효량을 포함하는 약학 조성물.
  15. 대상체의 비알코올성 지방간염(nonalcoholic steatohepatitis)을 치료하기 위한 약학 조성물로서, 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료를 위한 치료 유효량을 포함하는 약학 조성물.
  16. 하기 화학식을 갖는, 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 합성에 유용한 중간체 화합물.
    Figure pct00039

    (m, Rc, Rd, 및 Re는 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같고, Boc는 빌딩 블록 작용기이다)
KR1020227041592A 2020-06-12 2021-06-08 비알코올성 지방간 질환 및 비알코올성 지방간염 치료용 카보네이트를 함유한 프테로스틸벤 아미노산의 신규 유사체 KR20230009407A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063038142P 2020-06-12 2020-06-12
US63/038,142 2020-06-12
PCT/CN2021/098765 WO2021249364A1 (en) 2020-06-12 2021-06-08 Novel analogs of pterostilbene amino acid bearing carbonates for treating a non-alcoholic fatty liver disease and nonalcoholic steatohepatitis

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230009407A true KR20230009407A (ko) 2023-01-17

Family

ID=78845324

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020227041592A KR20230009407A (ko) 2020-06-12 2021-06-08 비알코올성 지방간 질환 및 비알코올성 지방간염 치료용 카보네이트를 함유한 프테로스틸벤 아미노산의 신규 유사체

Country Status (9)

Country Link
US (1) US20230234912A1 (ko)
EP (1) EP4136063A4 (ko)
JP (1) JP7486615B2 (ko)
KR (1) KR20230009407A (ko)
CN (1) CN115835860A (ko)
AU (1) AU2021288365B2 (ko)
CA (1) CA3182510A1 (ko)
TW (1) TWI826795B (ko)
WO (1) WO2021249364A1 (ko)

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6768008B2 (en) * 2000-04-24 2004-07-27 Aryx Therapeutics Materials and methods for the treatment of diabetes, hyperlipidemia, hypercholesterolemia, and atherosclerosis
WO2007074171A1 (en) * 2005-12-29 2007-07-05 Immupharma France Sa Aza heterocyclics for the treatment of malaria or aids
WO2010046926A2 (en) * 2008-10-17 2010-04-29 Aptuit Laurus Pvt Ltd Novel stilbene analogs
EP2475254A4 (en) * 2009-09-11 2013-05-22 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
WO2014147641A2 (en) 2013-03-21 2014-09-25 Laurus Labs Private Limited Sitagliptin pterostilbene phosphate salt, process for the preparation and pharmaceutical composition thereof
RS62618B1 (sr) * 2014-01-31 2021-12-31 Daiichi Sankyo Co Ltd Anti-her2 antitelo-lek konjugat
TW201713365A (zh) 2015-07-22 2017-04-16 華上生技醫藥股份有限公司 遞送治療藥物之ｐｈ－敏感性的連接物
WO2017090007A1 (en) * 2015-11-29 2017-06-01 Rao M Surya Compositions and methods for the treatment of urea cycle disorders and hepatic diseases
WO2018049068A1 (en) * 2016-09-07 2018-03-15 Pliant Therapeutics, Inc. N-acyl amino acid compounds and methods of use
DK3532057T3 (da) 2016-10-31 2023-02-20 Biocryst Pharm Inc Prodrugs af kallikreininhibitorer
CA3116556A1 (en) * 2018-10-16 2020-04-23 President And Fellows Of Harvard College Sirt1 activating compounds

Also Published As

Publication number Publication date
JP2023533661A (ja) 2023-08-04
US20230234912A1 (en) 2023-07-27
JP7486615B2 (ja) 2024-05-17
CA3182510A1 (en) 2021-12-16
AU2021288365B2 (en) 2023-07-06
WO2021249364A1 (en) 2021-12-16
CN115835860A (zh) 2023-03-21
EP4136063A1 (en) 2023-02-22
AU2021288365A1 (en) 2023-02-02
EP4136063A4 (en) 2023-10-11
TW202146374A (zh) 2021-12-16
TWI826795B (zh) 2023-12-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11866515B2 (en) Hemiasterlin derivatives for conjugation and therapy
US12043833B2 (en) Targeted compositions
US6911467B2 (en) Antidiabetic agents
JP5198063B2 (ja) 新規バイオ開裂性リンカー
CN111295372B (zh) 硝羟喹啉前药及其用途
ES2315897T3 (es) Aminoacidos derivados de porfarmacos de composiciones de propofol y usos del mismo.
EA025794B1 (ru) Противовирусные соединения
JPH0381256A (ja) レニン阻害剤
CA2885973C (en) Dolastatin-10 derivative, method of producing the same and anticancer drug composition containing the same
JP2006523214A (ja) タマンダリン類似物およびこれらのフラグメントそして製造方法および使用方法
CN111417620B (zh) 肌酸前药、其组合物以及使用方法
TWI826795B (zh) 用於治療非酒精性脂肪肝疾病及非酒精性脂肪肝炎之帶有碳酸酯的紫檀芪胺基酸的新穎類似物
CN112218878A (zh) Ntcp抑制剂
WO2013081118A1 (ja) リードスルー活性を有する化合物
US20150011484A1 (en) Prodrugs of d-gamma-glutamyl-d-tryptophan and d-gamma-glutamyl-l-tryptophan
JP2014509613A (ja) Ｄ−イソグルタミル−［ｄ／ｌ］−トリプトファンのプロドラッグ
KR19980703588A (ko) 선택된 용해성 히드록실 함유 인돌로카르바졸의 에스테르
AU2023255392A1 (en) Gamma-hydroxybutyrate delivering compounds and processes for making and using them
CN117858882A (zh) 具有1-(二硫烷基)烷氧基-羰基单元的前药
JPH09263577A (ja) ジフェニルメチル−アゼチジノン化合物及びエラスターゼ阻害剤