TW202146374A - 用於治療非酒精性脂肪肝疾病及非酒精性脂肪肝炎之帶有碳酸酯的紫檀芪胺基酸的新穎類似物 - Google Patents

用於治療非酒精性脂肪肝疾病及非酒精性脂肪肝炎之帶有碳酸酯的紫檀芪胺基酸的新穎類似物 Download PDF

Info

Publication number
TW202146374A
TW202146374A TW110121538A TW110121538A TW202146374A TW 202146374 A TW202146374 A TW 202146374A TW 110121538 A TW110121538 A TW 110121538A TW 110121538 A TW110121538 A TW 110121538A TW 202146374 A TW202146374 A TW 202146374A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
compound
nmr
ppm
mhz
amino
Prior art date
Application number
TW110121538A
Other languages
English (en)
Other versions
TWI826795B (zh
Inventor
郭代璜
謝博銓
鄭明龍
傅志偉
Original Assignee
樹頂分子生技股份有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 樹頂分子生技股份有限公司 filed Critical 樹頂分子生技股份有限公司
Publication of TW202146374A publication Critical patent/TW202146374A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI826795B publication Critical patent/TWI826795B/zh

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C329/00—Thiocarbonic acids; Halides, esters or anhydrides thereof
    • C07C329/02—Monothiocarbonic acids; Derivatives thereof
    • C07C329/04—Esters of monothiocarbonic acids
    • C07C329/06—Esters of monothiocarbonic acids having sulfur atoms of thiocarbonic groups bound to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/20—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/27—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbamic or thiocarbamic acids, meprobamate, carbachol, neostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C219/00—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C219/02—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having esterified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C219/20—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having esterified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated
    • C07C219/22—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having esterified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated and containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C229/06—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having only one amino and one carboxyl group bound to the carbon skeleton
    • C07C229/10—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having only one amino and one carboxyl group bound to the carbon skeleton the nitrogen atom of the amino group being further bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C229/24—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having more than one carboxyl group bound to the carbon skeleton, e.g. aspartic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C229/26—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having more than one amino group bound to the carbon skeleton, e.g. lysine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/40—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C271/42—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/48—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/40—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C271/42—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/52—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/14—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/24—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/29—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/60—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxyl groups bound to nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D209/20—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals substituted additionally by nitrogen atoms, e.g. tryptophane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/64—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms, e.g. histidine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

合成一系列之帶有碳酸酯的水溶性紫檀芪胺基酸的新穎類似物，其顯示活性於治療非酒精性脂肪性肝疾病及非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。

Description

用於治療非酒精性脂肪性肝疾病及非酒精性脂肪性肝炎之帶有碳酸酯的紫檀芪胺基酸的新型類似物
本發明係關於用於治療非酒精性脂肪性肝疾病(NAFLD)及非酒精性脂肪性肝炎(NASH)之帶有碳酸酯的紫檀芪胺基酸的新穎類似物。
非酒精性脂肪性肝疾病(NAFLD)由一系列之起始於肝臟的單純脂肪性浸潤的組織學變化所組成，也已知為非酒精性脂肪性肝疾病(1)。非酒精性脂肪性肝炎(NASH)係NAFLD的嚴重惡化型。其可能進展為纖維化肝硬化、肝衰竭及肝細胞癌(HCC)且可快速地轉為對晚期肝疾病或肝臟移植C(2,3)的主要癌症。NAFLD係最為盛行的慢性肝疾病且全世界成人族群的四分之一罹患NAFLD (4)。
根據目前的估算，於2027年合併日本、英國、法國、德國、義大利及西班牙中經診斷患有NASH的成人族群的盛行率將接近1800萬。生活型態干預，如膳食卡洛里限制及運動，為目前對於NASH之基本治療療法，但其等難以改良及維持，更不用述及其等無法符合對於醫藥的緊急需求(2)。
雖然對於開發中的NASH-藥物候選者有數個臨床試驗(5-7)，但暫時沒有經US FDA核准用於治療NASH的藥物。在臨床試驗的藥劑中，奧貝膽酸(Obeticholic acid)(Ocaliva)，已知主要作為膽汁性膽管炎藥物，係目前唯一的三期臨床試驗藥物候選者，於抑制NASH藥效中達成正向結果，且後續將向US FDA提出申請(新藥申請) (8, 9)。總而言之，為新穎、安全且有效的 NASH/NAFLD治療或預防藥物的開發係即時優先。
紫檀芪(反式-3,5-二甲氧基-4-羥基芪)為天然產生的植物化學化合物，主要可見於藍莓、葡萄及各種樹木的木材(10-12)。紫檀芪已知具有多種優勢於預防及治療某些疾病，包括癌症、血脂異常、糖尿病及認知性功能退化(10, 11, 13)。
近來，已報導紫檀芪於肥胖大鼠種降低肝脂肪變性及修飾肝脂肪酸趨勢(14, 15)。於動物及人類試驗使用紫檀芪的結果已顯示低毒性及高安全性 (16)。因此，高度可能為紫檀芪可開發為用於治療NAFLD/NASH的臨床藥物。然而，紫檀芪聚有不佳的水溶解度，0.011 mg/mL，(www.vcclab.org)，其無法進行臨床研究。一些醫藥化學家已將其衍生至水可溶磷酸鹽衍生物(17)。一般而言，酚系磷酸鹽具有不佳安定性，因此很少製造為口服劑型。至今，沒有文獻關於紫檀芪磷酸鹽的口服活體藥效。僅有靜脈注射(iv)動物研究被報導(18)。稍後， Chava satyanarayana等人製造紫檀芪磷酸鹽及希格列汀(sitagliptin)(一種口服活性二肽基肽酶-4，(DPP-IV)酵素抑制劑)為醫藥組成物，包含治療有效量的希格列汀紫檀芪磷酸鹽呈結晶型(或無定型)(Chava satyanarayana等人，專利案號: WO2014147641)。此化合物系基於希格列汀。該專利，相關於希格列汀紫檀芪磷酸鹽，含有用於製備希格列汀紫檀芪磷酸鹽的方法及相同的醫藥組成物，但無任何體內藥效結果。
Azzolini M等人合成一系列的紫檀芪胺基酸胺甲酸酯的水可溶衍生物(19)，測試其藥物動力學及分布趨勢，且發現吸收的增加以及代謝的減低，但無進一步的測試其體內藥效。可能的原因為胺甲酸酯的酯鏈結於體內分解過於緩慢以致於胺甲酸酯衍生物無法轉化為生物活性代謝物(例如，依立替康 irinotecan)。此外，Gonzalez-Alfonso JL等人合成一系列新穎的八臂-聚乙二醇紫檀芪衍生物，其具有良好的水可溶性，但僅進行用於測試其抗腫瘤活性的IV方法 (20)。Kuo等人合成用於鱗狀癌及肝癌作為抑制劑的一系列芪類(Kuo Sheng-Chu et al. 美國專利案號9.266.813 B2.2016)。在所合成的芪類中，一些水溶性的類紫檀芪為不安定的，以及一些安定的類紫檀芪為不佳水溶解姓。其水溶解度增加，但沒有報導其體內藥效(20)。 [先前技術文獻]
[非專利文獻] 1.   FDA. Nonalcoholic Steatohepatitis with Compensated Cirrhosis: Developing Drugs for Treatment Guidance for Industry. FDA DRAFT GUIDANCE. 2019. 2. Sumida Y, Yoneda M. Current and future pharmacological therapies for NAFLD/NASH. J Gastroenterol. 2018;53(3):362-76. 3. Goldberg D, 二tah IC, Saeian K, Lalehzari M, Aronsohn A, Gorospe EC, et al. Changes in the Prevalence of Hepatitis C Virus Infection, Nonalcoholic Steatohepatitis, and Alcoholic Liver 二sease Among Patients With Cirrhosis or Liver Failure on the Waitlist for Liver Transplantation. Gastroenterology. 2017;152(5):1090-9 e1. 4. Younossi ZM, Koenig AB, Abdelatif D, Fazel Y, Henry L, Wymer M. Global epidemiology of nonalcoholic fatty liver 二sease-Meta-analytic assessment of prevalence, incidence, and outcomes. Hepatology. 2016;64(1):73-84. 5. Thiagarajan P, Aithal GP. Drug Development for Nonalcoholic Fatty Liver 二sease: Landscape and Challenges. J Clin Exp Hepatol. 2019;9(4):515-21. 6. Wu J. [Machanism and intervention of nonalcoholic steatohepatitis-associated fibrosis]. Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2019;27(6):415-9. 7. Kudaravalli P, John S. Nonalcoholic Fatty Liver.  StatPearls. Treasure Island (FL)2019. 8. Mathews SE, Kumar RB, Shukla AP. Nonalcoholic steatohepatitis, obesity, and car二ac dysfunction. Curr Opin Endocrinol 二abetes Obes. 2018;25(5):315-20. 9. Fiorucci S, 二 Giorgio C, 二strutti E. Obeticholic Acid: An Update of Its Pharmacological Activities in Liver 二sorders. Handb Exp Pharmacol. 2019;256:283-95. 10. Ma Z, Zhang X, Xu L, Liu D, 二 S, Li W, et al. Pterostilbene: Mechanisms of its action as oncostatic agent in cell models and in vivo stu二es. Pharmacol Res. 2019;145:104265. 11. Akinwumi BC, Bordun KM, Anderson HD. Biological Activities of Stilbenoids. Int J Mol Sci. 2018;19(3). 12. Lange KW, Li S. Resveratrol, pterostilbene, and dementia. Biofactors. 2018;44(1):83-90. 13. Estrela JM, Ortega A, Mena S, Rodriguez ML, Asensi M. Pterostilbene: Biome二cal applications. Crit Rev Clin Lab Sci. 2013;50(3):65-78. 14. Aguirre L, Palacios-Ortega S, Fernandez-Quintela A, Hijona E, Bujanda L, Portillo MP. Pterostilbene Reduces Liver Steatosis and Mo二fies Hepatic Fatty Acid Profile in Obese Rats. Nutrients. 2019;11(5). 15. Gomez-Zorita S, Milton-Laskibar I, Aguirre L, Fernandez-Quintela A, Xiao J, M PP. Effects of pterostilbene on 二abetes, liver steatosis and serum lipids. Curr Med Chem. 2019. 16. Ruiz MJ, Fernandez M, Pico Y, Manes J, Asensi M, Carda C, et al. 膳食ary administration of high doses of pterostilbene and quercetin to mice is not toxic. J Agric Food Chem. 2009;57(8):3180-6. 17. Coimbra M, Isacchi B, van Bloois L, Torano JS, Ket A, Wu X, et al. Improving solubility and chemical stability of natural compounds for me二cinal use by incorporation into liposomes. Int J Pharm. 2011;416(2):433-42. 18. Kapetanovic IM, Muzzio M, Huang Z, Thompson TN, McCormick DL. Pharmacokinetics, oral bioavailability, and metabolic profile of resveratrol and its 二甲基ether analog, pterostilbene, in rats. Cancer Chemother Pharmacol. 2011;68(3):593-601. 19. Azzolini M, Mattarei A, La Spina M, Fanin M, Chiodarelli G, Romio M, et al. New natural胺基酸-bearing prodrugs boost pterostilbene's oral pharmacokinetic and 二stribution profile. Eur J Pharm Biopharm. 2017;115:149-58. 20. Gonzalez-Alfonso JL, Rodrigo-Frutos D, Belmonte-Reche E, Penalver P, Poveda A, Jimenez-Barbero J, et al. Enzymatic Synthesis of a Novel Pterostilbene alpha-Glucoside by the Combination of Cyclodextrin Glucanotransferase and Amyloglucosidase. Molecules. 2018;23(6).
本發明之一目的係提供一系列具有下述式之化合物:
Figure 02_image001
其中n為1至3； m為2至6； Q、X及Y獨立地為O、S或NH； Ra、Rb及Rc獨立地為H、鹵素、C1-C6直鏈烷基、C1-C6直鏈烷氧基、C3-C6 支鏈烷基、C3-C6支鏈烷氧基或C1-C6氟烷氧基； Rd及Re獨立地為H、鹵素、C1-C6直鏈烷基、C1-C6直鏈烷氧基、C3-C6 支鏈烷基、C3-C6支鏈烷氧基或C1-C6氟烷氧基，或Rd及Re係鏈結以形成環結構，使得
Figure 02_image003
，其中 j為1至3；或 其醫藥可接受鹽。
本發明之另一目的係提供本發明化合物或其醫藥可接受鹽之新用途，係用於製造醫藥用以於患者治療非酒精性脂肪性肝疾病及非酒精性脂肪性肝炎。
本發明之又另一目的係提供醫藥組成物，用於個體治療非酒精性脂肪性肝疾病或非酒精性脂肪性肝炎，該醫藥組成物包含本發明之化合物或其醫藥可接受鹽之用於該治療的治療有效量。
本發明進一步提供一種方法用於治療非酒精性脂肪性肝疾病或非酒精性脂肪性肝炎，該方法包含對有需要該治療之罹患非酒精性脂肪性肝疾病或非酒精性脂肪性肝炎的個體投藥有效量之本發明之化合物或其醫藥可接受鹽。
本發明亦提供一種有用於合成本發明之化合物或其醫藥可接受鹽之中間體化合物，其具有下述式:
Figure 02_image005
其中 m、Rc、Rd及Re係如上述定義，以及Boc為建構組件官能基。
本發明之較佳具體例包括(但不限於)於本說明書末所附的申請專利範圍中所記載的特徵。。
根據本發明之較佳具體例合成一系列水可溶之帶有碳酸酯的紫檀芪胺基酸的新穎類似物，其顯示活性於治療非酒精性脂肪性肝疾病及非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。實施例
1. 化學合成 1-1. 材料及儀器 起始材料、世紀即溶劑係由商業購應商(Sigma- Aldrich、Acros、TCI、Alfa、Combi-Blocks、Matrix及Fischer)購得且無進一步純化而直接使用。1 H及13 C-NMR光譜 係於Varian AS500 500 NMR-光譜儀或Agilent Technologies VnmrJ 500 NMR-光譜儀於指示的溶劑中獲得。化學偏移係相對於作為內標準的TMS表示為ppm(δ單位)。快速管柱層析係於填裝有 Merck矽膠60 (0.063-0.200 μm)的管柱進行。化合物或最終化合物的純化係利用逆相高效液體層析(RP-HPLC)以UV偵測於220或254 nm (Jasco UV-975 detector)使用Inertsil ODS-3 C18 (5 μm, 30 mm X 250 mm)管柱進行。移動相係由H2 O及CH3 CN (沖提液A，70 % ACN或80 % CAN，等強度，42 mL/min流速；沖提液B，梯度，詳細敘述於試驗)構成。利用電子撞擊的質譜(MS)係由API 3200 LC/MS/MS紀錄。溶劑為試劑等級，以及當必要時，其等可藉由標準方法予以純化及除水。反應溶液的濃度涉及減壓使用旋轉蒸發器。
1-2 目標化合物5a-10的合成 1-2-1.化合物 5a-5s 的合成 目標化合物5a-5s 係根據方案 1合成。各種胺基酸(1a-1s )與乙醇胺於1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺(EDCI)、二異丙基乙基胺(DIPEA)及N,N-二甲基胺基吡啶(DMAP)於CH2 Cl2 或1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]嘧啶鎓 3-氧化物六氟磷酸鹽 (HATU)及DIPEA的存在下反應以獲得對應的羥基醯胺衍生物(化合物2a-2s )。2a-2s 與氯甲酸p -硝基苯基酯的反應產生對應的碳酸p -硝基苯基酯 (3a-3s )，其無進一步純化而與紫檀芪反應以獲得對應的4a-4s 。化合物4a-4s 與4 M HCl於1,4-二噁烷或三氟乙酸(TFA)及三異丙基矽烷(TIPS)於CH2 Cl2 的後續脫保護以提供目標化合物5a-5s 。
方案 1:化合物5a-5s 的合成
Figure 02_image007
Figure 02_image009
試劑與條件: (a) EDCI、DIPEA、DMAP、CH2 Cl2 或HATU、DIPEA、CH2 Cl2 ； (b) NEt3 、CH2 Cl2 ； (c) DMAP、CAN，50℃； (d) 4 M HCl於1,4-二噁烷，或TFA、TIPS、CH2 Cl2 。
(2-((2-羥基乙基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸第三丁基酯(2a) 對乙醇胺(3.03 g, 49.6 mmol)、Boc-Gly-OH1a (7.2 g, 41.3 mmol)及DIPEA(16 g, 124 mmol)於CH2 Cl2 (80 mL)的攪拌溶液添加EDCI (61.7 g, 46.6 mmol)。反應混合物於室溫攪拌12小時。反應後，溶劑於真空移除，殘質藉由管柱層析純化(正己烷至EA/正己烷= 1/5 (V/V))以提供目標產物2a (3.3 g, 37 %產率)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 6.98 (s, NH), 5.62 (s, NH), 3.80 (s, 2H), 3.70-3.68 (m, 2H), 3.43-3.40 (m, 2H), 3.25 (s, OH), 1.44 (s, 9H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2b )2b 由Boc-Ala-OH1b 獲得，使用如2a 的相同合成步驟。 產率37%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 6.90 (s, NH), 5.37 (s, NH), 4.13-4.10 (m, 2H), 3.69-3.68 (m, 2H), 3.44-3.43 (m, 1H), 3.37-3.36 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.35 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(2c) 對乙醇胺(335 mg, 5.4819 mmol)、Boc-Val-OH1c (1191 mg, 5.5 mmol)及DIPEA(2387 uL, 13.7 mmol)於CH2 Cl2 (40 mL)的攪拌溶液添加HATU (2501 mg, 6.6 mmol)。反應混合物於室溫攪拌12小時。反應後，溶劑於真空移除，殘質藉由管柱層析純化(正己烷至EA/正己烷= 3/1(V/V))以提供目標產物2c (1113 mg, 78 %產率)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 6.65 (s, NH), 5.15 (s, NH), 3.86 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.70 (s, 2H), 3.49-3.41 (m, 1H), 3.40-3.36 (m, 1H), 3.07 (s, 1H), 2.11-2.10 (m, 1H) 1.43 (s, 9H), 0.96 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2d )2d 由Boc-Leu-OH1d 獲得，使用如2a 的相同合成步驟。 產率70%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.05 (s, NH), 5.31 (s, NH), 4.13-4.12 (m, 1H), 3.70-3.67 (m, 2H), 3.47-3.44 (m, 1H), 3.38-3.34 (m, 1H), 1.67-1.60 (m, 2H), 1.52-1.47 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 0.94-0.91 (m, 6H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基戊烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2e )2e 由Boc-Ile-OH1e 獲得，使用如2a 的相同合成步驟。 產率 64%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 6.73 (s, NH), 5.19 (s, NH), 3.90 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 3.71-3.69 (m, 2H), 3.49-3.44 (m, 1H), 3.39-3.36 (m, 1H), 2.48-2.46 (m, 1H), 1.86-1.84 (m, 1H), 1.56-1.53 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 0.94-0.89 (m, 6H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-4-(甲基硫基)-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2f )2f 由Boc-Met-OH1f 獲得，使用如2c 的相同合成步驟。 產率 32%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.30 (s, NH), 5.73 (s, NH), 4.14-4.12 (m, 1H), 3.59-3.58 (m, 2H), 3.39-3.24 (m, 2H), 2.49-2.46 (m, 2H), 2.05 (s, 3H), 2.02-1.98 (m, 1H), 1.85-1.82 (m, 1H), 1.38 (s, 9H).
(3-(第三丁氧基)-1-((2-羥基乙基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2g )2g 由Boc-Ser(tBu)-OH1g 獲得，使用如2a 的相同合成步驟。 產率 41%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 6.93 (s, NH), 5.42 (s, NH), 4.19-4.17 (m, 1H), 3.76 (s, OH), 3.75-3.69 (m, 2H), 3.42-3.40 (m, 2H), 2.55-2.52 (m, 1H) 1.43 (s, 9H), 1.17 (s, 9H).
(3-(第三丁氧基)-1-((2-羥基乙基)胺基)-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2h )2h 由Boc-Thr(tBu)-OH1h 獲得，使用如2a 的相同合成步驟。 產率 24%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.12 (s, NH), 5.62 (s, NH), 4.13-4.09 (m, 2H), 3.72-3.70 (m, 2H), 3.49-3.48 (m, 1H), 3.38-3.37 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.24 (s, 9H), 1.06 (d, J = 5.5 Hz, 3H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-1-側氧基-3-(三苯甲基硫基)丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2i )2i 由Boc-Cys(Trt)-OH1i 獲得，使用如2c的相同合成步驟。 產率 71%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): .7.42-7.40 (m, 6H), 7.31-7.27 (m, 6H), 7.26-7.20 (m, 3H), 6.42 (s, NH), 4.88 (s, NH), 3.81-3.80 (m, 1H), 3.64-3.63 (m, 2H), 3.34-3.33 (m, 2H), 2.69-2.66 (m, 1H), 2.57-2.53 (m, 1H), 1.41 (s, 9H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2j )2j 由Boc-Phe-OH1j 獲得，使用如2c 的相同合成步驟。 產率 88%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.33-7.30 (m, 2H), 7.25-7.21 (m, 3H), 6.21 (brs, 1H, NH), 5.11 (brs, 1H, NH), 4.29 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.58-3.57 (m, 2H), 3.32 (s, 2H), 3.10-3.01 (m, 2H), 2.44 (brs, 1H, OH), 1.44 (s, 9H).
(3-(4-(第三丁氧基)苯基)-1-((2-羥基乙基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2k )2k 由Boc-Tyr(tBu)-OH1k 獲得，使用如2c 的相同合成步驟。 產率 34%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.09 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.91 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.39 (s, NH), 5.22 (s, NH), 4.27-4.26 (m, 1H), 3.59-3.56 (m, 2H), 3.31-3.30 (m, 2H), 2.99-2.97 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.32 (s, 9H).
3-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((2-羥基乙基)胺基)-3-側氧基丙基)-1H-吲哚-1-羧酸第三丁基酯 (2l )2l 由Boc-Trp(Boc)-OH1l 獲得，使用如2a 的相同合成步驟。 產率 35%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 8.13-8.11 (m, 1H), 7.60 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.33 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.28-7.25 (m, 1H), 6.20 (s, NH), 5.18 (s, NH), 4.39-4.38 (m, 1H), 3.60-3.52 (m, 2H), 3.31-3.28 (m, 2H), 3.21-3.14 (m, 2H), 1.67 (s, 9H), 1.43 (s, 9H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-1-側氧基-3-(1-三苯甲基-1H-咪唑-2-基)丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2m )2m 由Boc-His(Trt)-OH1m 獲得，使用如2c 的相同合成步驟。 產率 67%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.37 (s, 1H), 7.34-7.33 (m, 9H), 7.11-7.10 (m, 6H), 6.34 (s, 1H), 6.57 (s, NH), 5.79 (s, NH), 4.33 (s, 1H), 3.73-3.60 (m, 2H), 3.51 (brs, 1H), 3.21 (brs, 1H), 3.08-3.02 (m, 2H), 1.43 (s, 9H).
(6-((2-羥基乙基)胺基)-6-側氧基己烷-1,5-二基)二胺甲酸二-第三丁基酯 (2n )2n 由Boc-Lys(Boc)-OH1n 獲得，使用如2c 的相同合成步驟。 產率 70%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 6.88 (s, NH), 5.43 (s, NH), 4.78 (s, NH), 4.07-4.04 (m, 1H), 3.70-3.68 (m, 2H), 3.41-3.40 (m, 2H), 3.10-3.09 (m, 2H), 1.85-1.79 (m, 1H), 1.66-1.62 (m, 1H), 1.49-1.46 (m, 2H), 1.42 (s, 18H), 1.39-1.37 (m, 2H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-1-側氧基-5-(3-((2,2,4,6,7-五甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)磺醯基)胍基)戊烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2o )2o 由Boc-Arg(Pbf)-OH1o 獲得，使用如2a 的相同合成步驟。 產率 50%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.42 (s, NH), 6.37 (s, NH), 5.81 (s, NH), 4.23-4.18 (m, 1H), 3.72-3.71 (m, 2H), 3.42-3.41 (m, 2H), 3.31-3.26 (m, 2H), 2.92 (s, 3H), 2.57 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.90-1.56 (m, 4H), 1.46 (s, 6H), 1.42 (s, 9H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-1,4-二側氧基-4-(三苯甲基胺基)丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2p )2p 由Boc-Asn(Trt)-OH1p 獲得，使用如2a 的相同合成步驟。 產率 37%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.30-7.23 (m, 9H), 7.19-7.17 (m, 6H), 7.11 (s, NH), 6.91 (s, NH), 6.06 (s, NH), 4.41 (m, 1H), 3.57-3.55 (m, 2H), 3.31-3.29 (m, 2H), 3.06-3.03 (m, 1H), 2.62-2.58 (m, 1H), 1.93 (s, 1H), 1.42 (s, 9H).
(1-((2-羥基乙基)胺基)-1,5-二側氧基-5-(三苯甲基胺基)戊烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (2q )2q 由Boc-Gln(Trt)-OH1q 獲得，使用如2c 的相同合成步驟。 產率 51%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.30-7.23 (m, 15H), 6.83 (s, NH), 5.67 (s, NH), 4.11-3.98 (m, 1H), 3.54-3.53 (m, 2H), 3.32-3.22 (m, 2H), 2.48-2.46 (m, 1H), 2.37-2.34 (m, 1H), 2.04-1.98 (m, 1H), 1.85-1.84 (m, 1H), 1.41 (s, 9H).
3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-((2-羥基乙基)胺基)-4-側氧基丁酸第三丁基酯(2r )2r 由Boc-Asp(tBu)-OH1r 獲得，使用如2a 的相同合成步驟。 產率 37%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 6.93 (s, NH), 5.63 (s, NH), 4.43-4.40 (m, 1H), 3.70-3.68 (m, 2H), 3.44-3.37 (m, 2H), 2.87-2.83 (m, 1H), 2.66-2.64 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.43 (s, 9H).
4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-((2-羥基乙基)胺基)-5-側氧基戊酸第三丁基酯(2s )2s 由Boc-Glu(tBu)-OH1s 獲得，使用如2a 的相同合成步驟。 產率 37%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 6.96 (s, NH), 5.52 (s, NH), 4.13-4.10 (m, 1H), 3.69-3.68 (m, 2H), 3.41-3.40 (m, 2H), 2.39-2.30 (m, 2H), 2.05-2.03 (m, 1H), 1.91-1.88 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.42 (s, 9H).
(E)-(2-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸第三丁基酯(4a )的合成 對化合物2a (2.02 g, 9.3 mmol)於無水CH2 Cl2 (15 ml)的攪拌溶液添加三乙基胺(3.22 mL, 23.1 mmol)及於0℃滴加氯甲4-硝基苯基酯溶液 (1.96 g, 9.7 mmol於10 mL CH2 Cl2 )。反應混合物於0℃攪拌15分鐘，且溫熱至室溫。混合物於室溫攪拌額外的4小時。反應完成後(以TLC確認)，藉由蒸發移除溶劑。粗製中間體混合紫檀芪 (2.50 g, 9.8 mmol)及DMAP (2.27 g, 18.6 mmol)於ACN(20 ml)中。所得混合物加熱至50
Figure 02_image011
℃持續1小時。反應後，於真空移除溶劑。殘質取至EA且以飽和檸檬酸溶液清洗。收集有機層，以Na2 SO4 乾燥後蒸發。殘質藉由管柱層析純化(矽膠，0至25 %的EtOAc/正己烷)以提供粗製產物，其進一步藉由製備型HPLC純化(70 % ACN, 30 % H2 O)以提供目標化合物4a (2.22 g, 48 %產率)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.51 (brs, NH), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 5.10 (brs, NH), 4.35 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.84-3.79 (m, 8H), 3.67 (q, J = 5.5 Hz, 2H), 1.46 (s, 9H).質量觀察值 [M - Boc + H]+ = 402.2； [M + H]+ = 502.2, [M + Na]+ = 524.2, [2M + H]+ = 902.4.
中間體4b-4s 係根據如使用於4a 的類似合成步驟合成。
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (4b )4b 由2b 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 56%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.67 (s, 2H), 6.58 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.94 (s, 1H), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.17 (s, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.65-3.64 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.38 (d, J = 7.5 Hz, 3H).質量觀察值 [M - Boc + H]+ = 416.2； [M + H]+ = 516.3, [M + Na]+ = 538.3.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (4c )4c 由2c 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 78%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41-6.60 (m, 2H), 5.03 (s, 1H), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.93-3.83 (m, 1H), 3.70 (s, 6H), 3.68-3.63 (m, 2H), 2.17-2.16 (m, 1H) 1.45 (s, 9H), 0.98 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 444.1； [M + Na]+ = 566.1.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (4d )4d 由2d 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 32%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.55 (s, NH), 6.41 (s, 1H), 4.84 (s, NH), 4.33 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.11 (s, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.64 (dd, J = 5.0, 10.5 Hz, 2H), 1.73-1.66 (m, 2H), 1.51-1.47 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.96-0.94 (m, 6H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 457.3； [M – Boc + Na]+ = 479.2； [M + Na]+ = 579.3； [2M + Na]+ = 1135.5.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基戊烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (4e )4e 由2e 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 27%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41-6.40 (m, 2H), 5.02 (s, NH), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.98-3.94 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.71-3.61 (m, 2H), 1.92-1.91 (m, 1H), 1.57-1.51 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.18-1.09 (m, 1H), 0.95-0.88 (m, 6H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 457.3； [M + Na]+ = 579.3； [2M + H]+ = 1135.5.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-4-(甲基硫基)-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (4f )4f 由2f 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 49%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.52 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.64 (s, NH), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.32-4.28 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.69-3.61 (m, 2H), 2.63-2.52 (m, 2H), 2.16-2.08 (m, 4H), 1.98-1.92 (m, 1H), 1.45 (s, 9H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 476.2； [M + H]+ = 576.3； [M + Na]+ = 598.3.
(E)-(3-(第三丁氧基)-1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (4g )4g 由2g 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 46 %.1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.44 (s, NH), 4.33 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.19 (s, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.80 (s, 1H), 3.68-3.64 (m, 2H), 3.41-3.39 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.20 (s, 9H).質量觀察值 [M – Boc – tBu + H]+ = 432.3； [M + H]+ = 588.5； [M + Na]+ = 610.4； [2M + H]+ = 1174.8； [2M + Na]+ = 1196.9.
(E)-(3-(第三丁氧基)-1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (4h )4h 由2h 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 48%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ (ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.34 (s, NH), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 5.64 (d, J = 5.0 Hz, NH), 4.37-4.31 (m, 2H), 4.15-4.13 (m, 2H), 3.84 (s, 6H), 3.69-3.65 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.28 (s, 9H), 1.07 (d, J = 6.0 Hz, 3H).質量觀察值 [M – Boc – tBu + H]+ = 446.2； [M + H]+ = 602.5； [M + Na]+ = 624.4； [2M + H]+ = 1202.9； [2M + Na]+ = 1224.9.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1-側氧基-3-(三苯甲基硫基)丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (4i )4i 由2i 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 27%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.49 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.44-7.42 (m, 6H), 7.31-7.28 (m, 6H), 7.24-7.21 (m, 3H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.28 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.84 (s, 6H), 3.57-3.56 (m, 2H), 2.80-2.77 (m, 1H), 2.58-2.56 (m, 1H), 1.42 (s, 9H),質量觀察值 [M + H]+ = 789.3； [M + Na]+ = 811.3.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (4j )4j 由2j 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 46%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.33-7.30 (m, 2H), 7.24-7.21 (m, 3H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.67 (s, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.13 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 4.34 (s, 1H) , 4.24-4.23 (m, 1H), 4.17 (s, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.56 (s, 2H), 3.11-3.02 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 492.2； [M + H]+ = 592.4； [M + Na]+ = 614.3.
(E)-(3-(4-(第三丁氧基)苯基)-1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯 (4k )4k 由2k 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 39%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.10 (d, J = 7.5 Hz, 2H),7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.18 (t, J = 6.0 Hz, NH), 5.01 (brs, NH), 4.31-4.24 (m, 2H), 4.23-4.19 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.60-3.52 (m, 2H), 3.07-2.99 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.32 (s, 9H).質量觀察值 [M – Boc – tBu + H]+ = 508.2； [M – Boc + H]+ = 564.3； [M + H]+ = 664.4, [M + Na]+ = 686.4； [M + K]+ = 702.4.
(E)-3-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-3-側氧基丙基)-1H-吲哚-1-羧酸第三丁基酯(4l )4l 由2l 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 30%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 8.14-8.12 (m, 1H), 7.59 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.51-7.47 (m, 3H), 7.32 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 7.26-7.24 (m, 2H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 6.30 (s, NH), 5.18 (s, NH), 4.22-4.18 (m, 1H), 4.18-4.10 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.52-3.51 (m, 2H), 3.22-3.17 (m, 2H), 1.65 (s, 9H) 1.42 (s, 9H).質量觀察值 [M - 2Boc + H]+ = 530.2； [M – Boc + H]+ = 630.2； [M + H]+ = 730.2； [2M + H]+ = 1459.5.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1-側氧基-3-(1-三苯甲基-1H-咪唑-2-基)丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(4m )4m 由2m 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 62%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 8.18 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.43-7.38 (m, 9H), 7.15 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.12-7.10 (m, 6H), 7.03 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 5.69 (d, J = 8.0 Hz, NH), 4.50-4.45 (m, 1H), 4.37-4.32 (m, 1H), 4.28-4.26 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.64-3.50 (m, 2H), 3.28-3.23 (m, 1H), 3.08-3.06 (m, 1H), 1.38 (s, 9H).質量觀察值 [M + H]+ = 832.4.
(6-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-6-側氧基己烷-1,5-二基)(E)-二胺甲酸二-第三丁基酯(4n )4n 由2n 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 39%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.62 (brs, NH), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.13 (brs, NH), 4.61 (brs, NH), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.07 (s, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.69-3.62 (m, 2H), 3.12-3.11 (m, 2H) 1.90-1.83 (m, 1H), 1.67-1.61 (m, 1H), 1.57-1.47 (m, 2H), 1.45-1.42 (m, 18H), 1.40-1.37 (m, 2H).質量觀察值 [M-2Boc+H]+ = 473.0； [M-Boc+H]+ = 573.4； [M + H]+ = 673.4, [M + Na]+ = 695.4, [M + K]+ = 711.4.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1-側氧基-5-(3-((2,2,4,6,7-五甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)磺醯基)胍基)戊烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(4o )4o 由2o 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 29%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.46 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.39 (brs, NH), 7.13 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.04 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 1.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 6.27 (brs, NH), 5.57 (d, J = 6.0 Hz, NH), 4.33-4.29 (m, 2H), 4.25 (s, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.68-3.62 (m, 1H), 3.59-3.55 (m, 1H), 3.30-3.25 (m, 2H), 2.93 (s, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.69-1.55 (m, 4H), 1.44 (s, 6H), 1.42 (s, 9H).質量觀察值 [M + H]+ = 852.3.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1,4-二側氧基-4-(三苯甲基胺基)丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(4p )4p 由2p 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 28%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.50 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.31-7.23 (m, 11H), 7.20-7.15 (m, 6H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (brs, NH), 6.98 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.19 (brs, NH), 4.46-4.42 (m, 1H), 4.31-4.19 (m, 2H), 3.84 (s, 6H), 3.64-3.51 (m, 2H), 3.11-3.09 (m, 1H), 2.60-2.57 (m, 1H), 1.42 (s, 9H).質量觀察值 [M + H]+ = 799.5.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1,5-二側氧基-5-(三苯甲基胺基)戊烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(4q )4q 由2q 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 27%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.30-7.28 (m, 15H), 7.15 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.76 (brs, NH), 6.67 (s, 2H), 6.62 (brs, NH), 6.41 (s, 1H), 5.53 (brs, NH), 4.27-4.26 (m, 1H), 4.15-4.12 (m, 1H), 3.99-3.96 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.56-3.54 (m, 1H), 3.47-3.46 (m, 1H), 2.53-2.50 (m, 1H), 2.45-2.40 (m, 1H), 2.04-1.87 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).質量觀察值 [M + H]+ = 814.3.
(E)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-4-側氧基丁酸第三丁基酯(4r )4r 由2r 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 48%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.93 (brs, NH), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 5.68 (brs, NH), 4.47 (s, 1H), 4.32 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.83 (s, 6H), 3.64-3.63 (m, 2H), 2.90 (dd, J = 5.0, 17.5 Hz, 1H), 2.62 (dd, J = 6.5, 17.0 Hz, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.45 (s, 9H).質量觀察值 [M-Boc-tBu+H]+ = 460.1； [M + H]+ = 616.3； [M + Na]+ = 638.3.
(E)-4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-5-側氧基戊酸第三丁基酯(4s )4s 由2s 獲得，使用如4a 的相同合成步驟。 產率 55%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.76 (brs, NH), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.29 (brs, NH), 4.33 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.14 (s, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.69-3.63 (m, 2H), 2.46-2.40 (m, 1H), 2.35-2.29 (m, 1H), 2.13-2.06 (m, 1H), 1.94-1.87 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.44 (s, 9H).質量觀察值 [M – Boc – OtBu + H]+ = 456.1, [M – Boc – tBu + H]+ = 474.0； [M + H]+ = 630.4； [M + Na]+ = 652.3.
碳酸(E)-2-(2-胺基乙醯胺基)乙基酯(4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽(5a ) 對化合物4a (726 mg, 1.5 mmol)於DCM (10 mL)的攪拌溶液添加 4 M HCl 於 1,4-二噁 (7.25 mL)且混合物於室溫攪拌3小時。然後蒸發反應溶液且進行pre-HPLC純化(TFA作為緩衝液，詳細梯度，請參照下述資訊)。然後水性分液以數滴的濃HCl處理後冷凍乾燥以提供化合物5a (602 mg, 95 %產率)呈白色固體。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.33 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.80 (s, 6H), 3.71 (s, 2H), 3.61 (t, J = 5.5 Hz, 2H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 166.26, 161.12, 153.66, 150.50, 139.18, 135.47, 128.95, 127.43, 127.19, 120.96, 104.22, 99.60, 66.73, 54.39, 40.09, 38.13；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 402.2； [M - HCl + Na]+ = 424.2； [M - HCl + K]+ = 440.1； [2M - 2HCl + H]+ = 802.3； [2M – 2HCl + Na]+ = 824.4. 管柱: Inertsil ODS-3 C18，5um，30*250 mm 流速: 38 ml/min 溶劑 A: 10%ACN於H2 O中 + 0.1%TFA 溶劑 B: 90 % ACN 於H2 O 中+ 0.1%TFA 梯度:
時間(min) 流速(ml/min) %A %B
0 38 100 0
20 38 0 100
24 38 0 100
28 38 100 0
30 38 100 0
碳酸(E)-2-(2-胺基丙醯胺基)乙基酯(4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽(5b )5b 由4b 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 98%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.37-4.31 (m, 2H), 3.97-3.93 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.67-3.62 (m, 1H), 3.59-3.54 (m, 1H), 1.50 (d, J = 7.0 Hz, 3H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 169.97, 161.14, 153.67, 150.51, 139.18, 135.48, 128.96, 127.42, 127.18, 120.95, 104.21, 99.59, 66.62, 54.39, 48.86, 38.22, 16.24；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 416.2； [M – HCl + Na]+ = 438.2； [2M - HCl + H]+ = 830.5； [2M – 2HCl + Na]+ = 852.4.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-甲基丁醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5c )5c 由4c 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 99%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.43 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 6.99-6.88 (m, 2H), 6.60 (s, 2H), 6.36 (s, 1H), 4.37-4.30 (m, 2H), 4.15 (brs, 1H), 3.77 (s, 6H), 3.50 (brs, 1H), 2.98-2.92 (m, 2H), 2.34-2.33 (m, 1H), 1.10-1.05 (m, 6H)；13 C- NMR (CDCl3 , 125 MHz), δ(ppm): 168.94, 160.94, 153.59, 150.23, 138.99, 135.32, 129.23, 127.78, 127.55, 121.33, 104.61, 100.11, 66.81, 58.91, 55.32, 38.42, 30.18, 18.60, 18.16；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 444.1； [M - HCl + Na]+ = 466.1.
碳酸(E)-2-(2-胺基-4-甲基戊醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5d )5d 由4d 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 95%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.40-4.30 (m, 2H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.72-3.67 (m, 1H), 3.55-3.50 (m, 1H), 1.75-1.67 (m, 3H), 1.00 (t, J = 5.5 Hz, 6H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 169.66, 161.15, 153.61, 150.51, 139.19, 135.49, 128.98, 127.42, 127.18, 120.92, 104.23, 99.61, 66.53, 54.39, 51.70, 43.34, 38.21, 24.05, 21.61, 20.82；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 457.2； [2M - 2HCl + H]+ = 913.3.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-甲基戊醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5e )5e 由4e 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 98%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.40-4.36 (m, 1H), 4.33-4.28 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.78-3.72 (m, 2H), 3.52-3.47 (m, 1H), 1.95-1.92 (m, 1H), 1.63-1.58 (m, 1H), 1.28-1.22 (m, 1H), 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.98 (t, J = 7.0 Hz, 3H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.41, 161.15, 153.56, 150.50, 139.19, 135.49, 128.97, 127.43, 127.18, 120.92, 104.23, 99.61, 66.60, 57.68, 54.39, 38.05, 36.62, 24.19, 13.66, 10.32；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 457.2； [2M - 2HCl + H]+ = 913.3.
碳酸(E)-2-(2-胺基-4-(甲基硫基)丁醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5f )5f 由4f 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 85%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.42-4.38 (m, 1H), 4.33-4.28 (m, 1H), 3.99 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.78-3.73 (m, 1H), 3.52-3.47 (m, 1H), 2.60 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.18-2.11 (m, 2H), 2.09 (s, 3H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.70, 161.14, 153.62, 150.49, 139.18, 135.49, 128.97, 127.43, 127.18, 120.99, 104.21, 99.60, 66.58, 54.39, 52.32, 38.21, 30.70, 28.33, 13.69；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 476.2； [M - HCl + Na]+ = 498.2； [2M - HCl + H]+ = 950.4.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-羥基丙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5g )5g 由4g 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 76%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.98-3.94 (m, 2H), 3.86-3.81 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.62-3.60 (m, 2H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 167.21, 161.13, 153.69, 150.51, 139.20, 135.47, 128.96, 127.44, 127.19, 120.97, 104.23, 99.61, 66.64, 60.30, 54.93, 54.40, 38.29；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 431.2； [2M - 2HCl + H]+ = 861.2.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-羥基丁醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5h )5h 由4h 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 74%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.38-4.31 (m, 2H), 4.06-4.01 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.72-3.65 (m, 2H), 3.58-3.53 (m, 1H), 1.31 (d, J = 6.0 Hz, 3H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 167.54, 161.14, 153.58, 150.50, 139.19, 135.49, 128.97, 127.43, 127.18, 120.95, 104.23, 99.61, 66.61, 65.97, 59.12, 54.40, 38.14, 18.91；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 445.2； [2M - 2HCl + H]+ = 889.2.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-巰基丙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5i ) 對化合物4i (760 mg, 1.0 mmol)於DCM (15 mL)的攪拌溶液添加TFA (14.9 mL)及三異丙基矽烷 (TIPS, 790 uL, 3.9 mmol)，所得混合物於室溫攪拌2小時。然後蒸發反應溶液且進行pre-HPLC純化(TFA作為緩衝液，詳細梯度，請參照下述資訊).然後水性分液以數滴的濃HCl處理後冷凍乾燥以提供化合物5i (354 mg, 76 %)呈白色固體。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.41-4.37 (m, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 4.05 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.74-3.69 (m, 1H), 3.57-3.52 (m, 1H), 3.06 (dd, J = 5.5, 14.5 Hz, 1H), 2.98 (dd, J = 6.5, 15.0 Hz, 1H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 167.31, 161.14, 153.63, 150.50, 139.19, 135.50, 128.97, 127.43, 127.18, 120.97, 104.23, 99.62, 66.61, 54.69, 54.39, 38.28, 24.96；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 448.2； [M - HCl + Na]+ = 470.2； [2M - 2HCl + H]+ = 894.4. 管柱: Inertsil ODS-3 C18，5um，30*250 mm 流速: 38 mL/min 溶劑 A: 10%ACN於H2 O + 0.1%TFA 溶劑 B: 90%ACN於H2 O + 0.1%TFA 梯度:
時間(min) 流速(ml/min) %A %B
0 38 100 0
20 38 0 100
24 38 0 100
28 38 100 0
30 38 100 0
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-苯基丙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5j )5j 由4j 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 90%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.38-7.35 (m, 2H), 7.31-7.29 (m, 3H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.24-4.20 (m, 2H), 4.07 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.65-3.60 (m, 1H), 3.48-3.44 (m, 1H), 3.19 (dd, J = 7.5, 14.0 Hz, 1H), 3.09 (dd, J = 7.5, 14.0 Hz, 1H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.49, 161.14, 153.51, 150.50, 139.19, 135.49, 134.15, 129.12, 128.98,128.71, 127.48, 127.42, 127.19, 120.92, 104.23, 99.61, 66.66, 54.40, 54.40, 38.02, 37.29；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 491.3； [M - HCl + Na]+ = 513.2.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-(4-羥基苯基)丙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5k )5k 由4k 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 84%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.57 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.27-4.24 (m, 2H), 4.00 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.66-3.61 (m, 1H), 3.50-3.45 (m, 1H), 3.10 (dd, J = 7.0, 14.0 Hz, 1H), 2.98 (dd, J = 7.0, 14.0 Hz, 1H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.67, 161.14, 156.89, 153.57, 150.51, 139.19, 135.47, 130.22, 128.96, 127.43, 127.18, 124.55, 121.00, 115.42, 104.22, 99.61, 66.68, 54.61, 54.39, 38.05, 36.54；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 507.2； [2M – 2HCl + H]+ = 1013.2.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-(1H-indol-3-基)丙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5l )5l 由4l 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 78%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.65 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.39 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.17-7.15 (m, 3H), 7.12 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.06-7.03 (m, 1H), 6.70 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.25-4.21 (m, 1H), 4.18-4.10 (m, 2H), 3.80 (s, 6H), 3.60-3.55 (m, 1H), 3.50-3.45 (m, 1H), 3.39 (dd, J = 6.5, 15.0 Hz, 1H), 3.25 (dd, J = 8.0, 15.0 Hz, 1H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 169.10, 161.13, 153.54, 150.50, 139.18, 136.88, 135.47, 128.95, 127.41, 127.17, 126.91, 124.19, 121.52, 120.95, 118.88, 117.69, 111.26, 106.58, 104.22, 99.61, 66.53, 54.40, 54.38, 53.74, 38.17, 27.51；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 530.3； [2M – 2HCl + H]+ = 1059.4.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-(1H-咪唑-2-基)丙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯二鹽酸鹽 (5m )5m 由4m 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 82%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 8.90 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.36-4.32 (m, 1H), 4.31-4.27 (m, 2H), 3.81 (s, 6H), 3.71-3.66 (m, 1H), 3.55-3.50 (m, 1H), 3.42-3.35 (m, 2H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 167.46, 161.15, 153.55, 150.48, 139.17, 135.54, 134.43, 129.00, 127.40, 127.18, 126.62, 121.05, 118.36, 104.23, 99.61, 66.58, 54.40, 51.96, 38.30, 26.20；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 482.2； [M - HCl + Na]+ = 504.1； [2M – 2HCl + H]+ = 962.3.
(E)-2-(2,6-二胺基己醯胺基)乙基 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯二鹽酸鹽 (5n )5n 由4n 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 78%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 4.42-4.38 (m, 1H), 4.35-4.30 (m, 1H), 3.93 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.75-3.70 (m, 1H), 3.56-3.51 (m, 1H), 2.93 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.97-1.87 (m, 2H), 1.75-1.69 (m, 2H), 1.56-1.50 (m, 2H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.97, 161.15, 153.63, 150.50, 139.18, 135.54, 129.01, 127.41, 127.21, 121.03, 104.23, 99.60, 66.68, 54.42, 54.39, 52.81, 38.88, 38.17, 30.66, 26.71, 21.44；質量觀察值 [M - 2HCl + H]+ = 472.2.
碳酸(E)-2-(2-胺基-5-胍基戊醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯二鹽酸鹽 (5o )5o 由4o 獲得，使用如的相同合成步驟5i . 產率 64%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (s, 2H), 6.39 (s, 1H), 4.37-4.33 (m, 2H), 3.96 (s, 1H), 3.79 (s, 6H), 3.72-3.69 (m, 1H), 3.60-3.55 (m, 1H), 3.22 (s, 2H), 1.94 (s, 2H), 1.71 (s, 2H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.87, 161.12, 157.19, 153.70, 150.49, 139.18, 135.50, 128.98, 127.43, 127.22, 121.05, 104.24, 99.63, 66.69, 54.42, 52.64, 40.43, 38.21, 28.31, 23.92；質量觀察值 [M - 2HCl + H]+ = 500.1.
碳酸(E)-2-(2,4-二胺基-4-側氧基丁醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5p )5p 由4p 獲得，使用如5i 的相同合成步驟。 產率 68%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.35-4.32 (m, 2H), 4.22-4.19 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.67-3.60 (m, 1H), 3.59-3.55 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 4.5, 17.5 Hz, 1H), 2.79 (dd, J = 4.0, 17.0 Hz, 1H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 171.80, 168.41, 161.14, 153.69, 150.50, 139.18, 135.50, 128.97, 127.42, 127.19, 120.99, 104.22, 99.59, 66.65, 54.39, 49.90, 38.29, 34.82；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 459.2； [M - HCl + Na]+ = 481.1； [2M – 2HCl + H]+ = 916.4.
碳酸(E)-2-(2,5-二胺基-5-側氧基戊醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5q )5q 由4q 獲得，使用如5i 的相同合成步驟。 產率 62%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (s, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.41-4.35 (m, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 3.97 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.72-3.68 (m, 1H), 3.58-3.53 (m, 1H), 2.50-2.47 (m, 2H), 2.16-2.09 (m, 2H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 175.66, 168.78, 161.14, 153.64, 150.50, 139.20, 135.50, 128.97, 127.45, 127.19, 121.00, 104.23, 99.64, 66.66, 54.40, 52.65, 38.21, 30.19, 26.78；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 473.3； [M - HCl + Na]+ = 495.3； [2M – 2HCl + H]+ = 944.6.
(E)-3-胺基-4-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-4-側氧基丁酸 鹽酸鹽 (5r )5r 由4r 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 82%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.37-4.32 (m, 2H), 4.22-4.19 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.69-3.64 (m, 1H), 3.58-3.54 (m, 1H), 2.99 (dd, J = 4.0, 18.0 Hz, 1H), 2.89 (dd, J = 4.0, 18.0 Hz, 1H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 171.18, 168.13, 161.14, 153.67, 150.52, 139.19, 135.48, 128.96, 127.44, 127.18, 120.99, 104.23, 99.60, 66.54, 54.39, 49.63, 38.35, 34.60；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 459.1； [2M – 2HCl + H]+ = 917.2.
(E)-4-胺基-5-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-5-側氧基戊酸 鹽酸鹽 (5s )5s 由4s 獲得，使用如5a 的相同合成步驟。 產率 88%。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.41-4.36 (m, 1H), 4.33-4.29 (m, 1H), 3.96 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.75-3.70 (m, 1H), 3.55-3.50 (m, 1H), 2.52 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.18-2.13 (m, 2H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 174.27, 168.72, 161.12, 153.64, 150.51, 139.21, 135.45, 128.93, 127.47, 127.18, 121.00, 104.23, 99.60, 66.61, 54.43, 52.44, 38.15, 28.69, 26.30；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 473.0.
1-2-2.目標化合物5t 的合成 化合物5t 係根據類似於方案1的方案2合成。 方案 2: 化合物5t 的合成
Figure 02_image013
試劑及條件: (a) HATU，DIPEA，CH2 Cl2 ，41 %； (b) NEt3 ，CH2 Cl2 ，0℃ ； (c) DMAP，ACN，50℃，57 %； (d) 4 M HCl於1,4-二噁烷，CH2 Cl2 ，92 %。
碳酸(E)-4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基酯 (2-(吡咯啶-2-胺甲醯基)乙基)酯 鹽酸鹽 (5t ) 化合物5t 由1t 獲得，使用如5a 的類似合成步驟。 白色粉末。92%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.39-4.32 (m, 2H), 4.31-4.27 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.69-3.61 (m, 1H), 3.59-3.54 (m, 1H), 3.43-3.36 (m, 1H), 3.34-3.31 (m, 1H), 2.46-2.40 (m, 1H), 2.08-2.01 (m, 3H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.66, 161.15, 153.67, 150.52, 139.18, 135.50, 128.98, 127.41, 127.18, 120.95, 104.23, 99.61, 66.62, 59.77, 54.39, 45.95, 38.46, 29.56, 23.59；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 442.0； [M - HCl + Na]+ = 464.1； [2M - 2HCl + H]+ = 882.4； [2M - 2HCl + Na]+ = 904.4.
1-2-3. 目標化合物5u 的合成 化合物5u 係根據類似於方案1的方案3合成。 方案 3:化合物5u 的合成
Figure 02_image015
試劑及條件: (a) EDCI，DIPEA，CH2 Cl2 ，45 %； (b) NEt3 ，CH2 Cl2 ，0℃； (c) DMAP，ACN，50℃，33 %； (d) 4 M HCl於二噁烷，CH2 Cl2 ，90 %。
碳酸(E)-3-(2-胺基-3-甲基丁醯胺基)丙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (5u )5u 的化合物由1c 及3-胺基丙烷-1-醇，使用如5a 的類似合成步驟獲得。 白色粉末。90%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.57 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.30 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.80 (s, 6H), 3.65 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 3.47-3.41 (m, 1H), 3.39-3.34 (m, 1H), 2.21-2.17 (m, 1H), 2.00-1.95 (m, 3H), 1.06 (t, J = 7.5 Hz, 6H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.22, 161.12, 153.66, 150.56, 139.21, 135.40, 128.91, 127.46, 127.18, 120.97, 104.23, 99.61, 65.92, 58.54, 54.40, 35.77, 30.05, 28.09, 17.51, 16.62；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 457.3； [M - HCl + Na]+ = 479.2； [2M - 2HCl + Na]+ = 935.4.
1-2-3. 目標化合物5v 及5w 的合成 如示於方案4， 化合物5a 或5c 係以碳酸鈉中和後以菸鹼酸裡以獲得對應的菸鹼酸鹽類5v 、5w 。 方案 4:化合物5v 及5w 的合成
Figure 02_image017
試劑及條件: (a) 1. K2 CO3 ，H2 O，CH2 Cl2 ，1 小時； 2. 菸鹼酸，乙醇，3小時。
碳酸(E)-2-(2-胺基乙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 菸鹼酸鹽(5v ) 對化合物5a (0.42 g, 1.0 mmol)於CH2 Cl2 (20 ml)的攪拌溶液添加 was added K2 CO3 (0.182 g, 1.3 mmol)於H2 O (0.4 mL)中且反應混合物於室溫攪拌1小時。於真空移除溶劑以獲得游離胺，將其溶解於10 mL 乙醇且添加菸鹼酸 (0.145 g, 1.2 mmol)。反應混合物於室溫攪拌3小時。蒸發溶劑且粗製產物由乙醇及無水醚再結晶以獲得化合物5v 呈白色粉末(0.39 g, 78 %產率)。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 9.07 (s, 1H), 8.57-8.56 (m, 1H), 8.34 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.47-7.44 (m, 1H), 7.18-7.14 (m, 3H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.33 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.81 (s, 6H), 3.68-3.66 (m, 2H), 3.61 (t, J = 5.0 Hz, 2H).
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-甲基丁醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 菸鹼酸鹽(5w )5w 由5c 獲得，使用如5v 的相同合成步驟。 白色粉末。產率 79%。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 9.19 (s, 1H), 8.70 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 8.32-8.30 (m, 1H), 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.40-7.37 (m, 1H), 7.13 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.33-4.28 (m, 2H), 3.80 (s, 6H), 3.67-3.62 (m, 2H), 3.56-3.53 (m, 1H), 2.20-2.05 (m, 1H), 1.02-0.90 (m, 6H).
1-2-5. 目標化合物6a-6h 的合成 化合物6a-6h 係根據方案5合成。如所示，起始的 4-羥基苯甲醛(11a-11b ) 以咪唑及 TIPS處理以形成對應的矽基醚類(12a-12b )，將其以NaBH4 還原以獲得對應的碳醇類(13a-13b )。化合物13a-13 以亞磷酸三乙基酯及ZnI2 處理以提供對應的膦酸酯類(14a-14b )。化合物14a-14b 係分別地與市售可得的醛類(15a-15d )偶合，以產生對應的16a-16d ，其後續以Bu4 NF於THF處理以獲得所期望的化合物17a-17d 。另一方面，化合物2a 、2c 及2j 係與氯甲酸p -硝基苯基酯反應以產生對應的18a 、18c 及18j ，其無進一步純化而分開地與17a-17d 於 DMAP的存在下反應以獲得對應的碳酸酯類19a-19h 。19a-19h 以4 M HCl於1,4-二噁烷之後續的脫保護以提供目標化合物6a-6h 。 方案 5:化合物6a-6h 的合成
Figure 02_image018
Figure 02_image020
試劑及條件: (a) 咪唑，TIPSCl，CH2 Cl2 ，16小時； (b) NaBH4 ，THF，MeOH，0℃，1小時； (c) ZnI2 ，亞磷酸三乙基酯，THF，80
Figure 02_image022
，16小時； (d) t-BuOK，THF，0℃，3小時； (e) 1.0 M Bu4 NF於THF，THF； (f) NEt3 ，CH2 Cl2 ，0℃； (g) DMAP，ACN，50℃； (h) 4 M HCl於1,4-二噁烷，CH2 Cl2 .
4-((三異丙基矽基)氧基)苯甲醛 (12a ) 對4-羥基苯甲醛11a (50 g, 409.8 mmol)於DCM (500 mL)的溶液添加咪唑 (41.8 g, 614.7 mmol)，接著滴加 TIPSCl (86.5 g, 450.8 mmol)。混合物攪拌16小時後倒入至冰/水，以DCM萃取。有機層以鹽水清洗，於Na2 SO4 乾燥後蒸發。殘質藉由矽膠管柱層析純化(沖提溶劑: 乙酸乙酯/石油醚 = 1/50)以獲得化合物 12a (95 g, 99 %)呈黃色油。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 9.88 (s, 1H, CHO), 7.78 (dd, J = 2.0, 8.5 Hz, 2H), 6.98 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 1.32-1.25 (m, 3H), 1.11 (d, J = 8.0 Hz, 18H).
甲氧基-4-((三異丙基矽基)氧基)苯甲醛 (12b )12b 由11b 獲得，使用如12a 的相同合成步驟。 黃色油。98%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 9.83 (s, 1H, CHO), 7.39 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 1.5, 8.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 1.31-1.25 (m, 3H), 1.09 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
(4-((三異丙基矽基)氧基)苯基)甲醇 (13a ) 於0℃對化合物 12a (100 g, 359.7 mmol)於MeOH/THF (1:1, 1 L)的溶液添加 NaBH4 (27.3 g, 719.4 mmol)且攪拌1小時。反應混合物倒入至冰/水且以DCM萃取。有機層以鹽水清洗，於Na2 SO4 乾燥後蒸發。殘質藉由矽膠管柱層析純化(沖提溶劑: 乙酸乙酯/石油醚 = 1/20)以獲得化合物 13a (88 g, 99 %產率)呈黃色油。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.21 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.86 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 4.60 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 1.29-1.22 (m, 3H), 1.10-1.06 (m, 18H).
(3-甲氧基-4-((三異丙基矽基)氧基)苯基)甲醇 (13b )13b 由12b 獲得，使用如13a 的相同合成步驟。 黃色油。95%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 6.89 (s, 1H), 6.84 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 1.57 (s, 1H), 1.28-1.22 (m, 3H), 1.09 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
(4-((三異丙基矽基)氧基)苄基)膦酸二乙基酯 (14a ) 對化合物 13a (85 g, 303.6 mmol)於THF (850 mL)的溶液添加ZnI2 (145.3 g, 455.4 mmol)及亞磷酸三乙基酯 (100.8 g, 607.2 mmol)。混合物回流16小時及蒸發。殘質添加2 N NaOH (500 mL)且以醚萃取。有機層以鹽水清洗，於Na2 SO4 乾燥後蒸發。殘質藉由矽膠管柱層析純化(沖提溶劑: 乙酸乙酯/ 石油醚 = 1/30)以獲得化合物 14a (90 g, 75 %產率)呈黃色油。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.16 (dd, J = 2.5, 8.5 Hz, 2H), 6.81 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 4.07-4.03 (m, 4H), 3.20 (d, J = 21.0 Hz, 2H), 1.65-1.21 (m, 9H), 1.08 (d, J = 7.0 Hz, 18H).
(3-甲氧基-4-((三異丙基矽基)氧基)苄基)膦酸二乙基酯(14b )14b 由13b 獲得，使用如14a 的相同合成步驟。 黃色油。78%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 6.83-6.79 (m, 2H), 6.71 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.17-3.90 (m, 4H), 3.79 (s, 3H), 3.07 (d, J = 21.0 Hz, 2H), 1.38-1.19 (m, 9H), 1.08-1.03 (m, 18H).
(E)-(4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯氧基)三異丙基矽烷 (16a ) 於0℃，對化合物 14a (7.0 g, 17.5 mmol)於THF (175 mL)的溶液添加化合物 15a (3.0 g, 17.5 mmol)及 t- BuOK (4.1 g, 36.7 mmol) 且於0℃攪拌3小時。反應混合物倒入至冰/水且以EA萃取。有機層以鹽水清洗，於Na2 SO4 乾燥後蒸發。殘質藉由矽膠管柱層析純化(沖提溶劑: 乙酸乙酯/正己烷 = 1/8)以獲得化合物 16a (5.6 g, 76 %產率)呈白色固體。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.37 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.91-6.86 (m, 3H), 6.65 (s, 2H), 6.37 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 1.29-1.24 (m, 3H), 1.12 (d, J = 7.5 Hz, 18 H).
(E)-(4-(3,5-二乙氧基苯乙烯基)苯氧基)三異丙基矽烷 (16b )16b 由14b 及15b 獲得，使用如16a 的相同合成步驟。 白色粉末。75%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.36 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.01 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.37 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.05 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 1.29-1.25 (m, 3H), 1.11 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
(E)-(4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基苯氧基)三異丙基矽烷 (16c )16c 由14c 及15c 獲得，使用如16a 的相同合成步驟。 白色固體。78%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.03-7.00 (m, 2H), 6.96 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.88-6.85 (m, 1H), 6.65 (s, 2H), 6.38 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.83 (s, 6H), 1.30-1.23 (m, 3H), 1.11 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
(E)-(4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基苯氧基)三異丙基矽烷 (16d )16d 由14d 及15d 獲得，使用如16a 的相同合成步驟。 淺黃色固體。 77%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.30 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.91 (dd, J = 10.5, 16.5 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.81 (dd, J = 10.5, 16.5 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.55 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.36 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 3.81 (s, 6H), 1.30-1.22 (m, 3H), 1.11 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
(E)-4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)酚 (17a ) 化合物16a (0.80 g, 1.9 mmol)於無水THF(15 mL)及氟化四丁基銨 (1.0 M in THF, 2.50 mL, 2.5 mmol)的溶液於 N2 氛圍於室溫攪拌2小時。反應混合物以EtOAc稀釋且有機層以水清洗。有機層於Na2 SO4 乾燥後蒸發且殘質藉由管柱層析於矽膠純化(沖提溶劑: 乙酸乙酯/正己烷 = 1/8)以獲得產物17a (0.46 g, 91 %產率)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.39 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.92-6.82 (m, 3H), 6.65 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.5 Hz, 1H).
(E)-4-(3,5-二乙氧基苯乙烯基)酚 (17b )17b 由16b 獲得，使用如17a 的相同合成步驟。 白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.38 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.01 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.89-6.81 (m, 3H), 6.63 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.37 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.08-4.04 (m, 4H), 1.42 (t, J = 7.5 Hz, 6H).
(E)-4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基酚 (17c )17c 由16c 獲得，使用如17a 的相同合成步驟。 白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.04-7.00 (m, 3H), 6.92-6.87 (m, 2H), 6.66 (s, 2H), 6.39 (s, 1H), 5.68 (brs, 1H, OH), 3.96 (s, 3H), 3.83 (s, 6H).
4-((1E,3E)-4-(3,5-二甲氧基苯基)丁-1,3-二烯-1-基)酚 (17d )17d 由16d 獲得，使用如17a 的相同合成步驟。 白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.33 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.91 (dd, J = 10.0, 15.5 Hz, 1H), 6.83-6.78 (m, 3H), 6.62 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.55 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 6.37 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.94 (brs, 1H, OH), 3.82 (s, 6H).
(E)-(2-((2-(((4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸第三丁基酯(19a ) 對化合物2a (1.12 g, 5.1 mmol)於無水CH2 Cl2 (15 ml)的攪拌溶液添加三乙基胺(2.15 mL, 15.4 mmol)後於0℃滴加氯甲酸4-硝基苯基酯溶液 (1.15 g, 5.7 mmol於10 mL CH2 Cl2 )。反應混合物於0℃攪拌15分鐘，且溫熱至室溫。混合物於室溫攪拌額外4小時。反應完成後(以TLC確認)，藉由蒸發移除溶劑。粗製中間體與紫檀芪衍生物17a (1.41g, 5.4 mmol)及DMAP (1.26 g, 10.3 mmol)於 ACN(30 ml)混合。所得混合物加熱至50℃持續1小時。反應後， 溶劑於真空移除以獲得粗製殘質，其藉由管柱層析純化(EA/正己烷= 1/5 (V/V))以提供粗製產物。粗製產物藉由製備型HPLC純化(70 % ACN, 30 % H2 O)以提供目標化合物19a (0.99 g, 38 %產率)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.53 (brs, NH), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.12 (brs, NH), 4.35 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.83 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.66 (q, J = 5.5 Hz, 2H), 1.46 (s, 9H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 408.3； [M + H]+ = 508.4； [M + Na]+ = 530.4, [2M + H]+ = 914.6.
(E)-(2-((2-(((4-(3,5-二乙氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸第三丁基酯(19b )19b 由2a 及17b 獲得，使用如19a 的相同合成步驟。 白色粉末。45%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.50 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.53 (brs, NH), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.12 (brs, NH), 4.35 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.06 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 3.83 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.66 (q, J = 5.5 Hz, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 6H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 430.3； [M + H]+ = 530.3； [M + Na]+ = 552.2, [2M + H]+ = 1058.6, [2M + Na]+ = 1080.6.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(19c )19c 由2c 及17a 獲得，使用如19a 的相同合成步驟。 白色粉末。42%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.39 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 4.34 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.93-3.91 (m, 1H), 3.70-3.61 (m, 2H), 2.17-2.16 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 450.2； [M + H]+ = 550.4； [M + Na]+ = 572.4.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二乙氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(19d )19d 由2c 及17b 獲得，使用如19a 的相同合成步驟。 白色粉末。41%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.50 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.38 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 4.34 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.05 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 3.93-3.90 (m, 1H), 3.70-3.61 (m, 2H), 2.19-2.16 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 472.3； [M + H]+ = 572.4； [M + Na]+ = 594.4； [2M + H]+ = 1142.8； [2M + Na]+ = 1164.9.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(19e )19e 由2j 及17a 獲得，使用如19a 的相同合成步驟。 白色粉末。47%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.33-7.30 (m, 2H), 7.25-7.21 (m, 3H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.16 (brs, NH), 5.04 (brs, NH), 4.34-4.33 (m, 1H), 4.26-4.22 (m, 1H), 4.17-4.16 (m, 1H), 3.56-3.54 (m, 2H), 3.13-3.09 (m, 1H), 3.07-3.02 (m, 1H), 1.42 (s, 9H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 498.3； [M + Na]+ = 620.4； [2M + H]+ = 1194.9； [2M + Na]+ = 1216.9.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二乙氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(19f )19f 由2j 及17b 獲得，使用如19a 的相同合成步驟。 白色粉末。47%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.33-7.30 (m, 2H), 7.25-7.21 (m, 3H), 7.16 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.15 (brs, NH), 5.04 (brs, NH), 4.33-4.32 (m, 1H), 4.26-4.22 (m, 1H), 4.17-4.16 (m, 1H), 4.06 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 3.59-3.51 (m, 2H), 3.13-3.09 (m, 1H), 3.07-3.02 (m, 1H), 1.44-1.42 (m, 15H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 519.2； [M + H]+ = 619.2； [M + Na]+ = 641.2； [2M + Na]+ = 1259.5.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(19g )19g 由2c 及17c 獲得，使用如19a 的相同合成步驟。 白色粉末。37%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.11-7.08 (m, 3H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.67 (s, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.37 (brs, NH), 5.04 (brs, NH), 4.34 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.98-3.92 (m, 4H), 3.84 (s, 6H), 3.69-3.65 (m, 2H), 2.17-2.16 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.97 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 7.0 Hz, 3H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 474.3； [M + H]+ = 574.4； [M + Na]+ = 596.4.
(1-((2-(((4-((1E,3E)-4-(3,5-二甲氧基苯基)丁-1,3-二烯-1-基)苯氧基)羰基)氧基)乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(19h )19h 由2c 及17d 獲得，使用如19a 的相同合成步驟。 白色粉末。35%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.45 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.95-6.86 (m, 2H), 6.67 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.37 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 4.33 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.93-3.90 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.70-3.61 (m, 2H), 2.18-2.16 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 470.0； [M + H]+ = 570.3； [M + Na]+ = 592.3.
碳酸(E)-2-(2-胺基乙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯基)酯 鹽酸鹽 (6a ) 對化合物19a (639 mg, 1.3 mmol)於DCM (20 mL)的攪拌溶液添加4 M HCl於 1,4-二噁烷 (6.3 mL)且於室溫攪拌3小時。然後蒸發反應溶液且進行pre-HPLC純化(TFA作為緩衝液，詳細梯度，請參照下述資訊).然後水性分液以數滴的濃HCl處理後冷凍乾燥以提供化合物6a (491 mg, 92 %產率)呈白色固體。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.62 (t, J = 5.5 Hz, 2H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 166.23, 161.14, 153.66, 150.50, 139.18, 135.49, 128.98, 127.40, 127.18, 120.95, 104.18, 99.58, 66.72, 40.06, 38.13；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 408.3； [M - HCl + Na]+ = 430.2； [2M - 2HCl + H]+ = 814.5； [2M – 2HCl + Na]+ = 836.5. 管柱: Inertsil ODS-3 C18，5um，30*250 mm 流速: 38 ml/min 溶劑 A: 10%ACN於H2 O + 0.1%TFA 溶劑 B: 90%ACN於H2 O + 0.1%TFA 梯度:
時間(min) 流速(ml/min) %A %B
0 38 100 0
20 38 0 100
24 38 0 100
28 38 100 0
30 38 100 0
對6b-6h 的最終化合物係藉由記載於6a的實驗步驟而製備，具有某些非重要性的變動。
碳酸(E)-2-(2-胺基乙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二乙氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (6b )6b 由19 b 獲得，使用如6a 的相同合成步驟。 白色固體。95%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.06-4.02 (m, 4H), 3.71 (s, 2H), 3.62 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 1.39 (t, J = 7.0 Hz, 6H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 166.24, 160.36, 153.66, 150.48, 139.09, 135.51, 129.06, 127.27, 127.16, 120.93, 104.74, 100.71, 66.72, 63.15, 40.08, 38.14, 13.77；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 430.3； [M - HCl + Na]+ = 452.2； [2M - 2HCl + H]+ = 858.5； [2M – 2HCl + Na]+ = 880.5.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-甲基丁醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯基)酯 鹽酸鹽 (6c )6c 由19 c 獲得，使用如6a 的相同合成步驟。 白色固體。89%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 4.40-4.32 (m, 1H), 4.31-4.29 (m, 1H), 3.73-3.72 (m, 1H), 3.67 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.54-3.49 (m, 1H), 2.22-2.16 (m, 1H), 1.08 (t, J = 6.5 Hz, 6H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.45, 161.14, 153.58, 150.50, 139.18, 135.50, 128.98, 127.40, 127.17, 120.93, 104.19, 99.58, 66.62, 58.46, 38.04, 30.09, 17.37, 16.60；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 449.3； [M - HCl + Na]+ = 471.3； [2M – 2HCl + Na]+ = 919.4.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-甲基丁醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二乙氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (6d )6d 由19 d 獲得，使用如6a 的相同合成步驟。 白色固體。93%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.40-4.34 (m, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 4.06-4.02 (m, 4H), 3.77-3.72 (m, 1H), 3.66 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.54-3.49 (m, 1H), 2.23-2.16 (m, 1H), 1.39 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 1.08 (t, J = 7.0 Hz, 6H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.48, 160.36, 153.58, 150.47, 139.10, 135.52, 129.06, 127.28, 127.16, 120.93, 104.77, 100.73, 66.62, 63.16, 58.48, 38.05, 30.10, 17.37, 16.62, 13.78；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 472.3； [M - HCl + Na]+ = 494.3； [2M – 2HCl + H]+ = 942.6； [2M – 2HCl + Na]+ = 964.6.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-苯基丙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯基)酯 鹽酸鹽 (6e )6e 由19 e 獲得，使用如6a 的相同合成步驟。 白色固體。90%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.59 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.39-7.36 (m, 2H), 7.32-7.29 (m, 3H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.27-4.19 (m, 2H), 4.06 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 3.66-3.61 (m, 1H), 3.48-3.43 (m, 1H), 3.19 (dd, J = 7.0, 13.5 Hz, 1H), 3.08 (dd, J = 7.0, 13.5 Hz, 1H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.48, 161.14, 153.51, 150.50, 139.18, 135.50, 134.15, 129.13, 129.00, 128.71, 127.48, 127.40, 127.19, 120.92, 104.20, 99.59, 66.66, 54.41, 38.03, 37.29；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 498.2； [M - HCl + Na]+ = 520.4； [2M – 2HCl + H]+ = 994.6.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-苯基丙醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二乙氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (6f )6f 由19 f 獲得，使用如6a 的相同合成步驟。 白色固體。92%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.57 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.38-7.35 (m, 2H), 7.32-7.29 (m, 3H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.12 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.38 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.24-4.20 (m, 2H), 4.07-4.02 (m, 5H), 3.65-3.60 (m, 1H), 3.48-3.43 (m, 1H), 3.19 (dd, J = 7.5, 14.0 Hz, 1H), 3.08 (dd, J = 7.5, 14.0 Hz, 1H), 1.38 (t, J = 7.5 Hz, 6H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.48, 160.36, 153.51, 150.47, 139.10, 135.52, 134.15, 129.12, 129.07, 128.71, 127.48, 127.27, 127.18, 120.91, 104.77, 100.74, 66.65, 63.16, 54.41, 38.03, 37.29, 13.78；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 519.2； [2M – 2HCl + H]+ = 1037.4.
碳酸(E)-2-(2-胺基-3-甲基丁醯胺基)乙基酯 (4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基苯基)酯 鹽酸鹽 (6g )6g 由19 g 獲得，使用如6a 的相同合成步驟。 白色固體。85%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.29 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.17-7.13 (m, 2H), 7.12-7.07 (m, 2H), 6.73 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.38-4.28 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.80 (s, 6H), 3.75-3.64 (m, 2H), 3.54-3.51 (m, 1H), 2.20 (s, 1H), 1.08 (t, J = 7.0 Hz, 6H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.43, 161.14, 153.30, 151.30, 139.40, 139.18, 136.92, 129.09, 127.81, 121.97, 118.72, 110.16, 104.24, 99.61, 66.65, 58.47, 55.10, 54.39, 38.11, 30.10, 17.41, 16.63；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 474.2； [M - HCl + Na]+ = 496.2； [2M – 2HCl + H]+ = 946.5； [2M - 2HCl + Na]+ = 968.5.
碳酸2-(2-胺基-3-甲基丁醯胺基)乙基酯 (4-((1E,3E)-4-(3,5-二甲氧基苯基)丁-1,3-二烯-1-基)苯基)酯 鹽酸鹽 (6h )6h 由19 h 獲得，使用如6a 的相同合成步驟。 白色固體。80%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.49 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.01-6.95 (m, 2H), 6.71-6.62 (m, 4H), 6.38 (s, 1H), 4.39-4.35 (m, 1H), 4.33-4.29 (m, 1H), 3.78 (s, 6H), 3.77-3.71 (m, 1H), 3.68 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.53-3.49 (m, 1H), 2.22-2.18 (m, 1H), 1.07 (t, J = 7.0 Hz, 6H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.46, 161.09, 153.56, 150.39, 139.36, 135.65, 133.01, 131.38, 129.53, 129.33, 126.99, 120.94, 104.09, 99.55, 66.62, 58.45, 54.39, 38.04, 30.09, 17.37, 16.63；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 469.0； [M - HCl + Na]+ = 491.1； [2M – 2HCl + H]+ = 937.0.
1-2-6. 目標化合物7a-7f 的合成 化合物7a-7f 係根據方案6而合成。如所示，N-(2-胺基乙基)胺甲酸苄基酯 鹽酸鹽係與N-Boc-胺基酸(化合物1a 、1c 及1j )於 EDCI及DMAP的存在下反應以獲得對應的醯胺衍生物(化合物20a-20c )。化合物20a-20c 係於Pd/C氫化以提供對應的化合物21a-21c 。另一方面， 紫檀芪或17a 係以三光氣於NEt3 存在下處理以提供對應的22a-22b ，其無進一步純化而分別與化合物21a-21c 反應以獲得對應的23a-23f 。23a-23f 以 4 M HCl於1,4-二噁烷之後續脫保護以提供目標化合物7a-7f 。 方案 6:化合物7a-7f 的合成
Figure 02_image024
Figure 02_image026
試劑及條件: (a) EDCI，DIPEA， CH2 Cl2 ，RT，12小時； (b) 10 % Pd/C，MeOH，RT，12小時； (c) 三乙基胺，0℃ 至 RT，1.5小時； (d)三甲基胺，RT，1.5 小時； (e) 4 M HCl 於1,4-二噁烷。
(2-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)乙醯胺基)乙基)胺甲酸苄基酯(20a ) 對(2-胺基乙基)胺甲酸苄基酯HCl (8.5 g, 36.8 mmol)、Boc-Gly-OH1a (5.3 g, 30.4 mmol)及DIPEA(9.5 g, 73.6 mmol)於CH2 Cl2 (80 mL)的攪拌溶液添加EDCI (8.6 g, 45.0 mmol)，,且反應混合物於室溫攪拌12小時。反應後，減壓移除溶劑，殘質藉由管柱層析純化(正己烷至EA/正己烷= 1/5 (V/V))以提供目標產物20a (8.0 g, 74 %產率)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.33-7.30 (m, 5H), 6.86 (brs, NH), 5.56 (brs, NH), 5.07 (s, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.37-3.30 (m, 4H), 1.42 (s, 9H).
(2-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)乙基)胺甲酸苄基酯(20b )20b 由1 c 獲得，使用如20a 的相同合成步驟。 白色粉末。41%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.34-7.31 (m, 5H), 6.55 (brs, NH), 5.35 (brs, NH), 5.05 (s, 2H), 5.03 (brs, NH), 3.86-3.83 (m, 1H), 3.40-3.33 (m, 4H), 2.12-2.10 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.88 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
(2-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-苯基丙醯胺基)乙基)胺甲酸苄基酯(20c )20c 由1 j 獲得，使用如20a 的相同合成步驟。 白色粉末。48%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.36-7.18 (m, 11H), 6.18 (brs, NH), 5.07 (s, 2H), 5.04 (brs, NH), 4.26 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.48-3.17 (m, 4H), 3.04-3.01 (m, 2H), 1.40 (s, 9H).
(2-((2-胺基乙基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸第三丁基酯(21a ) 化合物20a (4.0 g 11.4 mm)溶解於MeOH (50 mL)且以10 % Pd/C (0.6 g)處理，反應混合物於室溫於氫氛圍攪拌12小時。反應混合物經由矽藻土過濾。蒸發濾液的溶劑且殘質以管柱層析純化(CH2 Cl2 /甲醇 = 1/19 (V/V))以提供化合物21a (2.35 g, 95%)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.16 (brs, NH), 5.62 (brs, NH), 3.79 (brs, 2H), 3.38-3.36 (m, 2H), 2.90-2.88 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).
(1-((2-胺基乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(21b )21b 由20 b 獲得，使用如21a 的相同合成步驟。 白色粉末。95%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 6.93 (brs, NH), 5.24 (brs, NH), 3.89-3.86 (m, 1H), 3.40-3.37 (m, 1H), 3.32-3.29 (m, 1H), 2.87-2.85 (m, 2H), 2.13-2.09 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 0.94 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
(1-((2-胺基乙基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(21c )21c 由20 c 獲得，使用如21a 的相同合成步驟。 白色粉末。95%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.29-7.19 (m, 5H), 6.77 (brs, NH), 5.34 (s, NH), 4.32-4.31 (m, 1H), 3.24-3.23 (m, 2H), 3.06-3.02 (m, 2H), 2.79 (s, 2H), 2.71 (s, NH2 ), 1.37 (s, 9H).
(E)-(2-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)胺基)乙基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸第三丁基酯(23a ) 對紫檀芪 (1.41 g, 5.51 mmol)及三光氣 (0.54 g, 1.82 mm)於無水CH2 Cl2 (15 ml)的溶液於0℃滴加三乙基胺(1.36 g, 13.4 mmol)。反應混合物於0℃攪拌 30 分鐘後溫熱至室溫以提供中間體22a 溶液。 The 溶液 of 化合物21a (1.17 g, 5.9 mmol) 及三乙基胺(1.36 g, 13.4 mmol)於無水CH2 Cl2 (15 ml)的溶液滴加至中間體22a 溶液。所得混合物攪拌另外的1.5小時。反應後，真空移除溶劑且殘質取入至EA且以飽和檸檬酸溶液清洗。收集有機層，於 Na2 SO4 乾燥後蒸發。殘質藉由管柱層析純化(矽膠，0 至 67百分比之EtOAc/正己烷)以提供粗製產物。粗製產物藉由製備型HPLC純化(70 % ACN, 30 % H2 O)以提供目標化合物23a (0.86 g, 32 %產率, 2步驟)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.70 (brs, NH), 6.65 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 5.74 (brs, NH), 5.19 (brs, NH), 3.83 (s, 6H), 3.79 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.50-3.46 (m, 2H), 3.43-3.40 (m, 2H), 1.44 (s, 9H).質量觀察值 [M + Na]+ = 522.0, [2M + Na]+ = 1021.3.
(E)-(2-((2-(((4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯氧基)羰基)胺基)乙基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸第三丁基酯(23b )23b 由21 a 及22b 獲得，使用如23a 的相同合成步驟。 白色粉末。27%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.69 (brs, NH), 6.65 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.73 (brs, NH), 5.19 (brs, NH), 3.79 (d, J = 5.5 Hz, 2H) , 3.49-3.47 (m, 2H), 3.43-3.40 (m, 2H), 1.44 (s, 9H).質量觀察值 [M + Na]+ = 528.2, [2M + Na]+ = 1033.4.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)胺基)乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(23c )23c 由21 b 及22a 獲得，使用如23a 的相同合成步驟。 白色粉末。18%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.52 (brs, NH), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.77 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 3.87-3.85 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.47-3.41 (m, 4H), 2.18-2.16 (m, 1H) 1.45 (s, 9H), 0.97 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 443.3； [M + H]+ = 543.4； [M + Na]+ = 565.3.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯氧基)羰基)胺基)乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(23d )23d 由21 b 及22b 獲得，使用如23a 的相同合成步驟。 白色粉末。28%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.47 (brs, NH), 6.39 (t, J = 2.5Hz, 1H), 5.73 (brs, NH), 5.00 (brs, NH), 3.87-3.84 (m, 1H) , 3.52-3.42 (m, 4H), 2.17-2.14 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H).質量觀察值 [M + Na]+ = 570.3, [2M + Na]+ = 1117.6.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)胺基)乙基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(23e )23e 由21 c 及22a 獲得，使用如23a 的相同合成步驟。 白色粉末。27%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.35-7.27 (m, 3H), 7.23-7.22 (m, 2H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.15 (brs, NH), 5.42 (brs, NH), 5.03 (brs, NH), 4.31-4.26 (m, 1H), 3.81 (s, 6H), 3.38-3.33 (m, 2H), 3.31-3.25 (m, 2H), 3.11-3.03 (m, 2H), 1.45 (s, 9H).質量觀察值 [M - Boc + H]+ = 491.0； [M + H]+ = 591.4； [M + Na]+ = 613.3.
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯氧基)羰基)胺基)乙基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(23f )23f 由21 c 及22b 獲得，使用如23a 的相同合成步驟。 白色粉末。30%產率。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.34-7.27 (m, 3H), 7.25-7.22 (m, 2H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.19 (brs, NH), 5.44 (brs, NH), 5.05 (brs, NH), 4.31-4.27 (m, 1H), 3.38-3.33 (m, 2H), 3.32-3.24 (m, 2H), 3.11-3.03 (m, 2H), 1.41 (s, 9H).質量觀察值 [M - Boc + H]+ = 497.3； [M + H]+ = 597.4； [M + Na]+ = 619.5； [2M + H]+ = 1192.9； [2M + Na]+ = 1214.8.
(2-(2-胺基乙醯胺基)乙基)胺甲酸(E)-4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基酯 鹽酸鹽 (7a ) 對化合物23a (760 mg, 1.5 mmol)於DCM (10 mL)的攪拌溶液添加 4 M HCl於1,4-二噁烷(7.60 mL)且混合物於室溫攪拌3小時。蒸發反應混合物且進行-HPLC純化(TFA作為緩衝液，詳細梯度，請參照下述資訊).然後水性分液以數滴的濃HCl處理後冷凍乾燥以提供化合物7a (614 mg, 93 percent產率)呈白色固體。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.42-3.40 (m, 2H), 3.35-3.31 (m, 4H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 166.19, 161.13, 155.99, 150.61, 139.31, 134.66, 128.46, 127.67, 127.01, 121.56, 104.16, 99.52, 54.40, 40.10, 39.94, 39.12；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 400.2； [2M - 2HCl + H]+ = 799.3. 管柱: Inertsil ODS-3 C18，5um，30*250 mm 流速: 38 ml/min 溶劑 A: 10%ACN於H2 O + 0.1%TFA 溶劑 B: 90%ACN於H2 O + 0.1%TFA 梯度:
時間(min) 流速(ml/min) %A %B
0 38 100 0
20 38 0 100
24 38 0 100
28 38 100 0
30 38 100 0
(2-(2-胺基乙醯胺基)乙基)胺甲酸(E)-4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯基酯 鹽酸鹽 (7b )7b 由23 b 獲得，使用如7a 的相同合成步驟。 白色固體。95%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 3.42-3.40 (m, 2H), 3.35-3.31 (m, 4H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 166.19, 161.13, 155.99, 150.61, 139.31, 134.66, 128.47, 127.66, 127.01, 121.56, 104.13, 99.50, 40.10, 39.94, 39.12；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 406.3； [2M - 2HCl + H]+ = 811.3.
(2-(2-胺基-3-甲基丁醯胺基)乙基)胺甲酸(E)-4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基酯 鹽酸鹽 (7c )7c 由23 c 獲得，使用如7a 的相同合成步驟。 白色固體。92%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.56 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.40 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.61 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 3.50-3.45 (m, 1H), 3.41-3.35 (m, 3H), 2.21-2.17 (m, 1H), 1.07 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.44, 161.13, 155.92, 150.57, 139.30, 134.67, 128.47, 127.65, 127.01, 121.54, 104.14, 99.49, 58.57, 54.37, 39.96, 38.97, 29.97, 17.51, 16.52；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 443.0； [M – HCl + Na]+ = 465.2； [2M - 2HCl + H]+ = 884.5； [2M – 2HCl + Na]+ = 906.5.
(2-(2-胺基-3-甲基丁醯胺基)乙基)胺甲酸(E)-4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯基酯 鹽酸鹽 (7d )7d 由23 d 獲得，使用如7a 的相同合成步驟。 白色固體。93%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 3.65 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 3.64-3.35 (m, 4H), 2.23-2.16 (m, 1H), 1.07 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.45, 161.12, 155.90, 150.58, 139.31, 134.66, 128.47, 127.65, 127.01, 121.54, 104.13, 99.49, 58.57, 39.96, 38.96, 29.97, 17.51, 16.55；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 448.3； [M – HCl + Na]+ = 470.2； [2M – 2HCl + Na]+ = 1149.5.
(2-(2-胺基-3-苯基丙醯胺基)乙基)胺甲酸(E)-4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基酯 鹽酸鹽 (7e )7e 由23 e 獲得，使用如7a 的相同合成步驟。 白色固體。90%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.41-7.31 (m, 2H), 7.33-7.29 (m, 3H), 7.13 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.04 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.04 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.75-3.57 (m, 1H), 3.40-3.34 (m, 2H), 3.28-3.20 (m, 2H), 3.08-3.04 (m, 1H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.50, 161.12, 155.91, 150.55, 139.30, 134.68, 134.31, 129.09, 128.75, 128.47, 127.65, 127.49, 127.02, 121.55, 104.15, 99.50, 54.52, 54.39, 39.84, 39.04, 37.26；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 491.2； [M - HCl + Na]+ = 513.3； [2M – 2HCl + H]+ = 980.5.
(2-(2-胺基-3-苯基丙醯胺基)乙基)胺甲酸(E)-4-(3,5-雙(甲氧基-d3)苯乙烯基-d6)苯基酯 鹽酸鹽 (7f )7f 由23 f 獲得，使用如7a 的相同合成步驟。 白色固體。96%產率。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.53 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.39-7.36 (m, 2H), 7.33-7.29 (m, 3H), 7.13 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.04 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.05 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 3.39-3.34 (m, 2H), 3.29-3.20 (m, 3H), 3.08-3.04 (m, 1H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 168.48, 161.13, 155.89, 150.56, 139.30, 134.69, 134.31, 129.09, 128.74, 128.49, 127.64, 127.49, 127.00, 121.55, 104.14, 99.50, 54.52, 39.84, 39.04, 37.26；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 496.3； [2M – 2HCl + H]+ = 991.4.
1-2-7. 目標化合物8 的合成 方案 7記載化合物8 的合成。如所示，乙酸2-羥基乙酯係與 第三丁基氯二苯基矽烷(TPDPS-Cl)於NEt3 及DMAP的存在下反應以提供化合物24 ，其進一步以甲氧基鈉(NaOMe)去乙醯化以獲得化合物25 。 化合物 25係與 was coupled with Boc-Val-OH (1c )於EDCI及DMAP的存在下偶合以獲得化合物26 ，接著藉由以TBAF脫保護TBDPS基團以獲得羥基化合物27 。化合物27 係與氯甲酸p-硝基苯基酯反應以獲得對應的化合物28 ，其無進一步純化與紫檀芪反應所期望的以獲得碳酸酯29 ，接著藉由脫保護 Boc基團而提供目標化合物8 。 方案 7: 化合物8 的合成
Figure 02_image028
試劑及條件: (a) TBDPS-Cl，三甲基胺，DMAP，CH2 Cl2 ，12 小時； (b) 5.4 M NaOMe 於MeOH，MeOH，2 小時； (c) Boc-Val-OH1c ，EDCI，三乙基胺，DMAP，CH2 Cl2 ，12 小時； (d) 1.0 M TBAF於THF，THF，1小時，72 %； (e) 三乙基胺，CH2 Cl2 ，0℃； (f) DMAP，ACN，50℃； (g) 4 M HCl於1,4-二噁烷，3 小時。
2-((第三丁基二苯基矽基)氧基)乙酸乙酯 (24 ) 對2-羥基乙酸乙酯 (3.12 g, 30.0 mmol)於CH2 Cl2 (25 mL)的攪拌溶液添加第三丁基氯二苯基矽烷(TBDPS-Cl) (8.65 g, 31.5 mmol)、Et3 N (4.6 mL, 33.0 mmol)及DMAP (110 mg, 0.9 mmol)，然後於室溫攪拌直到起始材料完全消耗(12小時)。反應混合物以CH2 Cl2 (25 mL)稀釋且以水(25 mL)清洗。有機層經乾燥(Na2 SO4 )、過濾及蒸發。殘質進行快速層析(矽膠，0 至2 % 的 EtOAc/正己烷)以提供化合物24 呈無色油(4.59 g, 43 %產率)。1 H-NMR (500 MHz, CDCl3 ), δ(ppm): 7.69-7.67 (m, 4H), 7.43-7.37 (m, 6H), 4.18 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 3.85 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.06 (s, 9H).
2-((第三丁基二苯基矽基)氧基)乙醇 (25 ) 對化合物24 (4589 mg, 13.4 mmol)於MeOH (100 mL)的攪拌溶液滴加5.4 M 甲氧化鈉於MeOH (4.96 mL, 26.8 mmol)。混合物於室溫攪拌2小時。溶劑於真空蒸發，且殘質進行快速層析(矽膠，0 至17百分比的EtOAc/正己烷)以提供化合物25 呈無色油(4.00 g, 99 %產率)。1 H-NMR (500 MHz, CDCl3 ), δ(ppm): 7.71-7.67 (m, 4H), 7.45-7.37 (m, 6H), 3.77 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 1.58 (brs, OH, 1H), 1.05 (s, 9H).
2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-甲基丁酸2-((第三丁基二苯基矽基)氧基)乙基酯(26 ) 對化合物25 (2871 mg, 9.6 mmol)、Boc-Val-OH1c (2076 mg, 9.6 mmol)及NEt3 (1598 uL, 11.5 mmol)於CH2 Cl2 (100 mL)的攪拌溶液添加EDCI (2198 mg, 11.5 mmol)及DMAP (350 mg, 2.9 mmol)。反應混合物於室溫攪拌12小時。反應後，溶劑於真空移除，殘質藉由管柱層析純化(矽膠，0至5 % of EtOAc/正己烷)以提供目標產物26 (2719 mg, 57 %產率)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.67-7.66 (m, 4H), 7.44-7.26 (m, 6H), 5.03 (d, J = 8.5 Hz, NH, 1H), 4.25-4.11 (m, 3H), 3.88-3.85 (m, 2H), 2.15-2.04 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.04 (s, 9H), 0.94 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.89 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-甲基丁酸羥基乙基酯(27 ) 對化合物26 (2719 mg, 5.4 mmol)於THF (25 mL)的攪拌溶液滴加1.0 M TBAF於 THF (10.88 mL, 10.9 mmol)。反應混合物於室溫攪拌1小時。反應後，於真空移除溶劑，殘質藉由管柱層析純化(矽膠，0至30 % of EtOAc/正己烷)以提供目標產物27 (1022 mg, 72 %產率)呈淺黃色油。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 5.00 (brs, 1H), 4.35-4.22 (m, 2H), 4.20-4.14 (m, 1H), 3.82 (s, 2H), 2.33 (brs, OH, 1H), 2.17-2.13 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.96 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-甲基丁酸(E)-2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基酯(29 ) 對化合物27 (1022 mg, 3.9 mmol)於無水CH2 Cl2 (20 ml)的攪拌溶液添加三乙基胺(1363 ul, 9.8 mmol)後於0℃滴加氯甲酸4-硝基苯基酯溶液 (867 mg, 4.3 mmol)於30 mL CH2 Cl2 。反應混合物於0℃攪拌 30分鐘後，溫熱至室溫。於室溫攪拌另外4小時後，於真空移除溶劑以獲得粗製中間體28 ， 其與紫檀芪 (1002 mg, 3.9 mmol)及DMAP (956 mg, 7.8 mmol)於ACN (30 ml)混合。 所得混合物加熱至50℃持續1小時。反應後， 於真空移除溶劑，殘質取入至EA且以飽和檸檬酸溶液清洗。收集有機層，於Na2 SO4 乾燥及蒸發。殘質藉由管柱層析純化(矽膠，0至33 % of EtOAc/正己烷)以提供粗製產物。粗製產物藉由製備型HPLC純化(80 % ACN, 20 % H2 O)以提供化合物29 (600 mg, 28 %產率, 2步驟)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (s, 2H), 6.41 (s, 2H), 5.02 (d, J = 9.5 Hz, NH, 1H), 4.52-4.45 (m, 3H), 4.42-4.39 (m, 1H), 4.30-4.29 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 2.19-2.17 (m, 1H) 1.45 (s, 9H), 0.99 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 6.5 Hz, 3H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 445.1； [M + H]+ = 545.1, [M + Na]+ = 567.1.
2-胺基-3-甲基丁酸(E)-2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)氧基)乙基酯 鹽酸鹽(8) 於50 mL圓底燒瓶饋入化合物29 (561 mg, 1.0 mmol)及4 M HCl於1,4-二噁烷 (5.16 ml)。所得混合物於室溫攪拌3小時。減壓移除溶劑後經冷凍乾燥以獲得所期望的產物8 呈白色粉末 (446 mg, 90 %產率)。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 8.90 (brs, NH2 , HCl, 3H), 7.48 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.64 (s, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.58-4.49 (m, 4H), 4.04 (s, 1H), 3.81 (s, 6H), 2.50 (s, 1H), 1.18-1.16 (m, 6H)；13 C-NMR (CDCl3 , 125 MHz), δ(ppm): 168.29, 160.99, 153.33, 150.30, 139.05, 135.34, 129.23, 127.90, 127.54, 121.30, 104.61, 100.14, 65.82, 63.39, 58.65, 55.37, 29.98, 18.35, 18.28；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 445.2； [M – HCl + Na]+ = 467.2； [2M – 2HCl + H]+ = 888.6.
1-2-8. 目標化合物9 的合成 化合物9 係根據方案 8合成。 如所示，2-溴乙醇 以疊氮化鈉 (NaN3 )的置換反應完成化合物30 ，其與Boc-Val-OH (1c )偶合經由EDCI活化以提供酯31 ，然後進一步的N3 基團氫化為胺32 。化合物32 係與氯甲酸p -硝基苯基酯反應以獲得對應的胺甲酸第三丁基酯33 ，其無進一步純化而與紫檀芪反應以獲得所期望的胺甲酸第三丁基酯34 ，接著藉由Boc基團的脫保護，提供胺基衍生物9 。
方案 8: 化合物9 的合成
Figure 02_image030
試劑及條件: (a) NaN3 ，水，80℃，24小時； (b) Boc-Val-OH1c ，EDCI，三乙基胺，DMAP，CH2 Cl2 ，12小時； (c) H2 ，10 % Pd/C，EtOAc，MeOH，2小時； (d) 三乙基胺，CH2 Cl2 ，0℃； (e) DMAP，ACN，50℃，1小時； (f) 4 M HCl於1,4-二噁烷，3小時。
疊氮基乙醇(30) 對100 mL圓底燒瓶添加2-溴乙醇 (5827 mg, 46.6 mmol)及疊氮化鈉(6062 mg, 93.3 mmol)於水(50 mL)。混合物於80℃攪拌24小時，然後冷卻至室溫。溶液以乙酸乙酯 (30 ml x 4)萃取且有機層於Na2 SO4 乾燥及過濾。蒸發濾液的溶劑且殘質藉由管柱層析純化(矽膠，0至25 % of EtOAc/正己烷)以提供目標化合物30 呈淺黃色液體(3735 mg, 92 %產率)。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 3.78 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 3.45 (s, 2H), 1.86 (s, OH, 1H).
2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-甲基丁酸2-疊氮基乙基酯(31 ) 對2-疊氮基乙醇30 (683 mg, 7.9 mmol)、Boc-Val-OH1c (1705 mg, 7.9 mmol)及NEt3 (1313 uL, 9.4 mmol)於CH2 Cl2 (50 mL)的攪拌溶液添加EDCI (1805 mg, 9.4 mmol)及DMAP (288 mg, 2.4 mmol)。反應混合物於室溫攪拌12小時。反應後，溶劑於真空移除，殘質藉由管柱層析純化(矽膠，0至11 % of EtOAc/正己烷)以提供目標產物31 (1527 mg, 68 %產率)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 4.99 (d, J = 6.5 Hz, NH, 1H), 4.31-4.27 (m, 3H), 3.51-3.50 (m, 2H), 2.18-2.17 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
胺基乙基 2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-甲基丁酸酯(32) 1527 mg的化合物31 溶解於25 mL 甲醇及25 mL EA，添加568 mg的10 % Pd/C且於氫氛圍於室溫攪拌 2小時。濾除Pd/C且以 15 mL 甲醇清洗。於真空移除溶劑。殘質添加10 mL水後冷凍乾燥以產生產物32 呈油(1319 mg, 95%產率)。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 5.08 (brs, NH, 1H), 4.20-4.10 (m, 1H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.73-3.71 (m, 1H), 3.49-3.41 (m, 1H), 3.01-2.97 (m, 1H), 2.30 (brs, NH2 , 2H), 2.12 (s, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.97-0.88 (m, 6H).
2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-甲基丁酸(E)-2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)胺基)乙基酯(34 ) 對化合物32 (1469 mg, 5.6 mmol)於無水CH2 Cl2 (30 ml)的攪拌溶液添加三乙基胺(1966 ul, 14.1 mmol)以及然後於0℃滴加氯甲酸4-硝基苯基酯溶液 (1251 mg, 6.2 mmol於30 mL CH2 Cl2 )。反應混合物於0℃攪拌 30 分鐘，且溫熱至室溫。於室溫攪拌另外的4小時後，於真空移除溶劑以獲得粗製中間體33 ，其與紫檀芪 (1446 mg, 5.6 mmol)及DMAP (1379 mg, 11.3 mmol)於ACN (30 ml)混合。所得混合物加熱至50℃持續1小時。反應後蒸發溶劑。殘質取至EA且以飽和檸檬酸溶液清洗。收集有機層，於Na2 SO4 乾燥且蒸發。殘質藉由管柱層析純化(矽膠，0至30 % of EtOAc/正己烷)以提供粗製產物。粗製產物進一步藉由製備型HPLC純化(80 % ACN, 20 % H2 O)以提供34 (320 mg, 11 %產率, 2步驟)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.66 (s, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.36 (brs, NH, 1H), 5.02 (brs, NH, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.91 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.65 (s, 2H), 2.17 (s, 1H) 1.44 (s, 9H), 0.97 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 6.5 Hz, 3H).質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 444.3； [M + H]+ = 544.3, [M + Na]+ = 566.3.
2-胺基-3-甲基丁酸(E)-2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)胺基)乙基酯 鹽酸鹽(9) 於50 mL圓底燒瓶置入化合物34 (320 mg, 0.6 mmol)及4 M HCl於1,4-二噁烷(2.95 mL)。所得混合物於室溫攪拌3小時。減壓移除溶劑後冷凍乾燥以獲得所期望的粗製產物化合物9 呈白色粉末(249 mg, 88%)。1 H-NMR (d6-DMSO, 500 MHz), δ(ppm): 8.80 (t, J = 5.0 Hz, NH, 1H), 8.22 (brs, NH2 , HCl, 3H), 7.63 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 4.30-4.27 (m, 1H), 4.24-4.20 (m, 1H), 3.76 (s, 6H), 3.64-3.60 (m, 3H), 2.10-2.06 (m, 1H), 0.95-0.90 (m, 6H)；13 C-NMR (d6-DMSO, 125 MHz), δ(ppm): 168.64, 161.13, 153.35, 150.49, 139.37, 135.53, 129.37, 128.26, 128.04, 121.92, 105.00, 100.44, 67.38, 57.93, 55.69, 38.01, 30.11, 18.60, 18.37；質量觀察值 [M + H]+ = 444.3； [M + Na]+ = 466.3.
1-2-9. 目標化合物10 的合成 方案 9記載化合物10 的合成。 Carboxylic acid of Boc-Val-OH (1c )的羧酸藉由N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)及二環己基碳二亞胺(DCC)活化而允許半胱胺經由其胺基的接合且獲得所預期的胺35 。化合物35 係與氯甲酸p -硝基苯基酯反應以獲得對應的硫基碳酸p -硝基苯基酯36 ，其無進一步純化而與紫檀芪反應以獲得預期的硫基碳酸酯37 。後續的脫保護Boc基團以提供目標化合物10 。
方案 9: 化合物10 的合成
Figure 02_image032
試劑及條件: (a) 1. NHS，DCC，THF，24小時； 2. DIPEA，CH2 Cl2 ，24小時； (b) DIPEA，CH2 Cl2 ，0℃； (c) DMAP，ACN，50℃，2小時； (d) 4 M HCl於1,4-二噁烷，CH2 Cl2 。
(1-((2-巰基乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯( 35 ) 對溶液 of Boc-Val-OH1c (3.23 g, 14.9 mmol)於THF (16 mL)的溶液添加 NHS (1.72 g, 15.0 mmol)及DCC (3.1 g, 15.0 mmol)。反應混合物於室溫攪拌24小時且過濾。蒸發濾液的溶劑且殘質取入至 CH2 Cl2 (12 mL)，然後添加DIPEA(5.7 g, 44.2 mmol)及半胱胺鹽酸鹽 (1.23 g, 15.9 mmol)以及反應混合物攪拌 24小時。添加水(5 mL)且反應混合物以 EA (3 × 20 mL)萃取。合併的有機層以1 N HCl (2 × 10 mL)及brine (10 mL)清洗。有機層於MgSO4 乾燥且蒸發以及殘質藉由管柱層析純化(矽膠，正己烷/EtOAc, (4:1, v/v))以獲得35 (1.67 g, 41 %產率)呈白色固體。1 H-NMR (500 MHz, CDCl3 ), δ (ppm): 6.41 (s, 1H), 5.05 (s, 1H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.49-3.42 (m, 2H), 2.69-2.65 (m, 2H), 2.17-2.15 (m, 1H) 1.45 (s, 9H), 0.96 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
(E)-(1-((2-(((4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯氧基)羰基)硫基)乙基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁烷-2-基)胺甲酸第三丁基酯(37 ) 對化合物35 (1.26 g, 4.6 mmol)於無水CH2 Cl2 (40 ml)的攪拌溶液添加 DIPEA(1.78 g, 13.8 mmol)後於0℃滴加氯甲酸4-硝基苯基酯溶液 (1.02 g, 5.1 mmol) 於10 mL CH2 Cl2 。反應混合物於0℃攪拌15分鐘，然後溫熱至室溫。於室溫攪拌另外的4小時後，於真空移除溶劑以獲得粗製中間體36 ，其與紫檀芪 (1.19 g, 4.7 mmol)及DMAP (1.13 g, 9.3 mmol)於ACN (30 ml)混合。 所得混合物加熱至50℃持續2小時。 反應後，於真空移除溶劑。殘質藉由管柱層析純化(EA/正己烷= 1/5 (V/V))以提供粗製產物。粗製產物進一步藉由製備型HPLC純化(80 % ACN, 20 % H2 O)以提供目標化合物37 (1.46 g, 56 %產率)呈白色粉末。1 H-NMR (CDCl3 , 500 MHz), δ(ppm): 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.41 (t, J = 2.5Hz, 1H), 6.38 (brs, NH), 5.00 (brs, NH), 3.98-3.85 (m, 1H), 3.82 (s, 6H), 3.65-3.54 (m, 2H), 3.13-3.07 (m, 2H), 2.17-2.16 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 0.90 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.87 (d, J = 7.0 Hz, 3H)；質量觀察值 [M – Boc + H]+ = 460.2； [M + H]+ = 560.3； [M + Na]+ = 582.3.
硫代碳酸(E)-S-(2-(2-胺基-3-甲基丁醯胺基)乙基)酯 O-(4-(3,5-二甲氧基苯乙烯基)苯基)酯 鹽酸鹽 (10 ) 對化合物37 (805 mg, 1.4 mmol)於DCM (15 mL)的攪拌溶液添加4 M HCl於1,4-二噁烷 (7.20 mL)且混合物於室溫攪拌3小時。然後蒸發反應溶液且進行pre-HPLC純化(TFA作為緩衝液，詳細梯度，請參照下述資訊)。然後水性分液以數滴的濃HCl處理後冷凍乾燥以提供化合物10 (647 mg, 91 %產率)呈白色固體。1 H-NMR (CD3 OD, 500 MHz), δ(ppm): 7.57 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.15-7.12 (m, 3H), 7.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.68-3.62 (m, 2H), 3.52-3.46 (m, 1H), 3.17-3.10 (m, 2H), 2.22-2.18 (m, 1H), 1.08 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.06 (d, J = 6.5 Hz, 3H)；13 C-NMR (CD3 OD, 125 MHz), δ(ppm): 169.66, 168.37, 161.13, 150.53, 139.16, 135.69, 129.09, 127.38, 127.23, 121.15, 104.25, 99.66, 58.48, 54.42, 38.55, 30.22, 30.05, 17.52, 16.55；質量觀察值 [M - HCl + H]+ = 459.2； [2M - 2HCl + H]+ = 917.3. 管柱: Inertsil ODS-3 C18，5um，30*250 mm 流速: 38 ml/min 溶劑 A: 10%ACN於H2 O + 0.1%TFA 溶劑 B: 90%ACN於H2 O + 0.1%TFA 梯度:
時間(min) 流速(ml/min) %A %B
0 38 100 0
20 38 0 100
24 38 0 100
28 38 100 0
30 38 100 0
2. 目標化合物於活體研究之抗 -NAFLD 及抗 -NASH 2-1. 材料及方法 動物及試驗程序: 雄性C57BL/6小鼠，4週齡，購自國家實驗室動物中心(台北，台灣)根據國家衛生研究院(台北，台灣) 機構動物照護及使用機構委員會提供的步驟和指南予以維持。動物係維持自由攝取粒狀食物及水於不鏽鋼籠中，於溫度21±2 °C具有12小時的光/暗週期。所有試驗係於機構動物照護及使用機構委員會的監督，中國醫藥大學，台中，具程序編號(CMUIACUC-2020-117)。
合成的目標化合物(5a、5b、5c、5d、5e、5f、5g、5h、5j、5m、5p、5t、5v、5w、6a、6b、6g、7c、7e)係溶解於PG/TPSG (1:1)。小鼠係投與MCD膳食14日後投與 PG/TPSG (1:1)作為對照，以及100 mg/kg的所有化合物每日一次經口投與且週間5次持續42日。小鼠係隨機分為5群且處理如下: (1) MCD 膳食＋PG/TPSG (2) MCD 膳食＋100 mg/kg 所有化合物。28日後，犧牲動物用以收集血液以測定血漿ALT及AST濃度，以及肝臟樣品用於H&E染色。
小鼠係投予 MCD 膳食14日後以 DDW投與75, 100 and 150 mg/kg 化合物 5c經口每日一次且一週5次持續42日。小鼠隨機分為5群且處理如下: (1) 偽組 (Non-MCD 膳食) (2) MCD 膳食 (3) MCD 膳食＋75 mg/kg 化合物 5c (4) MCD 膳食＋100 mg/kg 化合物 5c (5) MCD 膳食＋150 mg/kg 化合物 5c。 28日後，犧牲動物用以收集血液以測定血漿ALT及AST濃度，以及肝臟樣品用於H&E染色。
2-2. 結果及討論 進行組織學研究以測定所有化合物(5a、5b、5c、5d、5e、5f、5g、5h、5j、5m、5p、5t、5v、5w、6a、6b、6g、7c、7e)對於由MCD膳食所誘發的肝的脂肪變性的發展的功效。H&E 染色結果顯示MCD 膳食餵食誘發顯著的肝的脂肪變性、肝細胞損傷及炎性細胞浸潤、腫脹及纖維化。化合物 5a、5b、5c、5f、5t、6g、7c、7e、5w、5g、5d、5e、5j、5m、5p、6a、6b處理，防止 MCD 膳食-誘發的脂肪肝炎而具有減低的脂肪變性、炎症、腫脹及纖維化。(表 1)。
Figure 02_image034
Figure 02_image036
Figure 02_image038
Figure 02_image040
AST及ALT的血清濃度為肝臟損傷的標記。如示於表2，相較於餵食正常膳食的小鼠，餵食MCD膳食的小鼠中的AST及ALT的血清濃度顯著地增加。化合物 5c、5a、5b、5f、5h、5d、5m及5p以劑量依賴形式顯著地抑制AST及ALT的血清濃度 。
表2: 來自化合物處理之NASH小鼠的血清AST及ALT參數
Figure 02_image042
丙胺酸轉胺酶(ALT)；天冬胺酸轉胺酶(AST)；甲硫胺酸及膽鹼缺陷膳食(MCD)； ***p＜0.001對於MDC 群
表2: 來自化合物處理之NASH小鼠的血清AST及ALT參數
Figure 02_image044
丙胺酸轉胺酶(ALT)；天冬胺酸轉胺酶(AST)；甲硫胺酸及膽鹼缺陷膳食(MCD)； ***p＜0.001對於MDC 群
化合物 5c係最為確證且選擇用於進一步評估。進行組織學研究 以測定化合物5c於藉由MCD膳食所誘發的肝的脂肪變性的發展的功效。MCD 膳食餵食誘發顯著的肝的脂肪變性、肝細胞損傷及炎性細胞浸潤、腫脹及纖維化。化合物 5c處理防止，防止 MCD 膳食-誘發的脂肪肝炎而具有減低的脂肪變性、炎症、腫脹及纖維化。(圖 1，表3)。
Figure 02_image046
AST及ALT的血清濃度為肝臟損傷的標記。如示於表4，相較於餵食正常膳食的小鼠，餵食MCD膳食的小鼠中AST及ALT的血清濃度顯著地增加。化合物5c以劑量/依賴形式顯著地抑制AST及ALT的血清濃度。
Figure 02_image048
丙胺酸轉胺酶(ALT)；天冬胺酸轉胺酶(AST)；甲硫胺酸及膽鹼缺陷膳食(MCD)； ***p＜0.001對於對照群。### p＜0.001對於MCD群。
3. 目標化合物的安定性及溶解性 3-1. 化合物 5a 、 5c 、 5m 、 5v 、 5w 、 6a 及 6b 於 pH=1.2 的安定性 化合物5a、5c、5m、5v、5w、6a及6b 於PH 1.2 溶液 (無酵素的USP胃液)的活體外安定性3-1-1. 材料及方法 材料 : 本發明的目標化合物5a、5c、5m、5v、5w、6a及6b 。試劑 : pH=1.2 溶液 NaCl 2.0g 係溶解於H2 O 800mL 且添加濃HCl 7.0 mL 。攪拌混合物且以2N的NaON及2N的濃HCl調整至pH1.2後以H2 O to 1000 mL稀釋。. 活體外試驗: 化合物5a、5c、5m、5v、5w、6a及6b 係分別地與 pH 1.2 溶液於37°C 培育6小時。樣品收集: 於0、0.17、0.5、1、2、4及6小時，由培育混合物分取100 mL且置入含有 100 μL 的冰冷乙腈以及1μm 內標準的離心管而於該處終止反應。樣品於15000 rpm離心10分鐘，且 將上清注射置HPLC系統。HPLC 方法 : HPLC: Waters 1525 Binary HPLC Pump； Waters 2707 Autosampler； Waters 2487 Dual λ Absorbance Detector； 管柱: XBridge Shield RP18, 5μm，4.6x50 mm 管柱； UV Detector: 305 nm；溫度: 室溫； 運行時間: 15.0分鐘； 移動相: A: 0.1%FA 於 H2 O； B: 乙腈。
HPLC 移動相 梯度:
時間 流速 (mL) %A %B
0 1 90 10
3 1 90 10
9 1 10 90
12 1 90 10
15 1 90 10
註: 移動相: A: 0.1% FA於 H2 O； B: 乙腈.
化合物 5a 、 5c 、 5m 、 5v 、 5w 、 6a 及 6b 的滯留時間 (RT):
化合物 RT (min) 注射體積 (μL)
化合物 5a 6.96 5
化合物 5c 7.13 10
化合物 5m 6.37 5
化合物 5v 6.96 5
化合物 5w 8.96 10
化合物 6a 6.95 5
化合物 6b 7.28 10
3-1-2. 結果及討論 測試化合物的量級係比較於表5。結果顯示該等測試化合物為相對安定於pH=1.2 溶液。6小時培育後，多於 90%的化合物5a、5c、5m、5w、6a及6b殘留在 pH=1.2 溶液。然而，僅有 84.8% 的化合物5v殘留。 總結，活體外研究顯展現該等目標化合物針對胃液(無酵素)為相對安定。胃觀察到時間-依賴性降解。表 5. 化合物 5a 、 5c 、 5m 、 5v 、 5w 、 6a 及 6b 於 pH=1.2 溶液的時間 - 依賴性安定性
時間 ( 小時 ) 化合物 5a (%) 化合物 5c (%) 化合物 5m (%) 化合物 5v (%) 化合物 5w (%) 化合物 6a (%) 化合物 6b (%)
0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0
0.167 104.6 88.5 88.6 100.6 128.3 106.4 130.5
0.5 104.0 93.2 109.8 106.8 113.4 101.2 103.9
1 110.2 96.0 113.5 101.0 123.9 119.4 111.7
2 101.7 91.7 102.6 103.0 128.5 101.5 97.9
4 103.5 97.4 85.6 106.9 122.4 104.6 99.2
6 103.6 96.9 91.5 84.8 133.7 99.8 102.6
3-2. 化合物 5c 於 H2 O 的溶解度 3-2-1. 材料及方法 化合物 5c 濃度係設定40 mg/mL於H2 O中。超音波及渦旋30分鐘後，分別地，管於25℃靜置。 在取樣時間點(1、3、6及24小時)，管於15,000 rpm離心10分鐘，收集上清且合適地以乙腈稀釋。樣品藉由HPLC定量。HPLC 方法 : 管柱: XBridge Shield RP18，5μm，4.6x50 mm； UV Detector: 305 nm； 溫度:室溫；注射體積: 10 μL； 運行時間: 15.0分鐘； 移動相: A: 0.1% FA於H2 O； B: 乙腈
HPLC 移動相 梯度:
時間 流速 %A %B
0 1 90 10
3 1 90 10
9 1 10 90
12 1 90 10
15 1 90 10
註: 移動相: A: 0.1% FA於H2 O； B: 乙腈。
3-2-2. 結果與討論 如表6及圖2所示， 化合物 5c 於H2 O中於25℃24小時後的溶解度係高於34 mg/mL。根據US藥典的準則，化合物 5c可稱為水可溶物質。.
表 6: 化合物 5c 於 H2 O 的溶解度趨勢
1小時 3小時 6小時 24小時
mg/mL 37 33 33 34
4. 結論 本發明中，合成一系列的水可溶之帶有碳酸第三丁基酯的紫檀芪胺基酸的新穎類似物。該等化合物係安定於 pH=1.2 (胃液(無酵素)的pH值)且經檢查其抗-NASAH活性。多數的所合成化合物顯示抗-NASH/NAFLD活性(如示於表1.2)。其等之中，化合物 5c最有希望且選擇用於進一步評估。結果指示化合物 5c (代表性化合物)顯示顯著的抗-NASH/NAFLD活性 (圖 1，表3及表4)。 本發明之帶有碳酸酯的紫檀芪胺基酸類似物的新系列化學結構為水可溶、安定且生物有效於活體內用於治療NAFLD/NASH，且因此具有潛力開發作為治療 NAFLD/NASH的新藥物。
縮寫列單
ACN 乙腈
DCC 二環己基碳二亞胺
DCM 二氯甲烷
DIPEA N,N-二異丙基乙基胺
DMAP 4-二甲基胺基吡啶
EA 乙酸乙酯
EDCI 1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺
EtOAc 乙酸乙酯
HATU 1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]嘧啶鎓 3-氧化物六氟磷酸鹽
MeOH 甲醇
NHS N-羥基琥珀醯亞胺
Pd/C 鈀於碳
RP-HPLC 逆相高效液體層析
TBAF 氟化四正丁基銨
TEA 三乙基胺
TFA 三氟乙酸
THF 四氫呋喃
TIPS 三異丙基矽烷
TIPS-Cl 三異丙基矽基氯化物
TMS 四甲基矽烷
TPDPS-Cl 第三丁基二苯基氯矽烷
無
圖1為照相圖 (放大率: 200X)顯示五群中之小鼠的肝臟樣品: 偽組 (非-MCD膳食)；MCD膳食組；MCD膳食＋75 mg/kg 本發明化合物5c ；MCD膳食＋100 mg/kg 化合物5c ；以及MCD膳食＋150 mg/kg 化合物5c ，其中該肝臟樣品係藉由蘇木精-伊紅(H&E)染色使用相位差顯微鏡照相。 圖2顯示化合物5c 於H2 O中，於25℃於24小時的溶解度。

Claims (16)

  1. 一種具下式之化合物或其醫藥可接受鹽，
    Figure 03_image001
    其中n為1至3； m 為2至6； Q、X及Y獨立地為O、S或NH； Ra、Rb及Rc獨立地為H、鹵素、C1-C6直鏈烷基、C1-C6直鏈烷氧基、C3-C6 支鏈烷基、C3-C6支鏈烷氧基或C1-C6氟烷氧基； Rd及Re獨立地為H、鹵素、C1-C6直鏈烷基、C1-C6直鏈烷氧基、C3-C6 支鏈烷基、C3-C6支鏈烷氧基或C1-C6氟烷氧基，或Rd及Re係鏈結以形成環結構，使得
    Figure 03_image003
    ，其中 j為1至3。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥可接受鹽，其中Q為O； X為O；以及Y為NH。
  3. 如請求項1之化合物或其醫藥可接受鹽，其中Q為O； X為NH以及 Y為NH。
  4. 如請求項1之化合物或其醫藥可接受鹽，其中Q為O； X為O；以及 Y為O。
  5. 如請求項1之化合物或其醫藥可接受鹽，其中Q為O； X為NH；以及Y為O。
  6. 如請求項1之化合物或其醫藥可接受鹽，其中Q為O； X為S；以及Y為NH。
  7. 如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥可接受鹽，其中， m為2；以及n為1或2。
  8. 如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥可接受鹽，其中， Ra及Rb為甲氧基。
  9. 如請求項8之化合物或其醫藥可接受鹽，其中Ra及Rb為3,5-二甲氧基。
  10. 如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥可接受鹽，其中， Rd為C3-C6 支鏈烷基。
  11. 如請求項10之化合物或其醫藥可接受鹽，其中Rd為異丙基。
  12. 如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥可接受鹽，其中， Rd 及Re 係鏈結以形成環結構，使得
    Figure 03_image003
    ，其中j為1。
  13. 如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥可接受鹽，其中， 該醫藥可接受鹽為鹽酸鹽或菸鹼酸鹽。
  14. 一種於個體用以治療非酒精性脂肪肝疾病的醫藥組成物，包含對該治療的治療有效量的如請求項1至13之化合物或其醫藥可接受鹽。
  15. 一種於個體用以治療非酒精性脂肪肝炎的醫藥組成物，包含對該治療的治療有效量的如請求項1至13之化合物或其醫藥可接受鹽。
  16. 一種有用於如請求項1至13之化合物或其醫藥可接受鹽的合成的中間體化合物，其具有下式:
    Figure 03_image005
    其中 m、Rc、Rd及Re係如請求項1至13中任一項所定義，以及Boc為建構組件官能基。
TW110121538A 2020-06-12 2021-06-11 用於治療非酒精性脂肪肝疾病及非酒精性脂肪肝炎之帶有碳酸酯的紫檀芪胺基酸的新穎類似物 TWI826795B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063038142P 2020-06-12 2020-06-12
US63/038,142 2020-06-12

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW202146374A true TW202146374A (zh) 2021-12-16
TWI826795B TWI826795B (zh) 2023-12-21

Family

ID=78845324

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW110121538A TWI826795B (zh) 2020-06-12 2021-06-11 用於治療非酒精性脂肪肝疾病及非酒精性脂肪肝炎之帶有碳酸酯的紫檀芪胺基酸的新穎類似物

Country Status (9)

Country Link
US (1) US20230234912A1 (zh)
EP (1) EP4136063A4 (zh)
JP (1) JP7486615B2 (zh)
KR (1) KR20230009407A (zh)
CN (1) CN115835860A (zh)
AU (1) AU2021288365B2 (zh)
CA (1) CA3182510A1 (zh)
TW (1) TWI826795B (zh)
WO (1) WO2021249364A1 (zh)

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6768008B2 (en) * 2000-04-24 2004-07-27 Aryx Therapeutics Materials and methods for the treatment of diabetes, hyperlipidemia, hypercholesterolemia, and atherosclerosis
CN101395143A (zh) * 2005-12-29 2009-03-25 安姆弗拉玛法国股份公司 用于治疗疟疾或aids的氮杂杂环化合物
WO2010046926A2 (en) * 2008-10-17 2010-04-29 Aptuit Laurus Pvt Ltd Novel stilbene analogs
EP2475254A4 (en) * 2009-09-11 2013-05-22 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
WO2014147641A2 (en) 2013-03-21 2014-09-25 Laurus Labs Private Limited Sitagliptin pterostilbene phosphate salt, process for the preparation and pharmaceutical composition thereof
CN105829346B (zh) * 2014-01-31 2019-08-23 第一三共株式会社 抗her2抗体－药物偶联物
AU2016295602B2 (en) 2015-07-22 2019-11-14 Gnt Biotech & Medicals Corporation PH-sensitive linkers for delivering a therapeutic agent
WO2017090007A1 (en) * 2015-11-29 2017-06-01 Rao M Surya Compositions and methods for the treatment of urea cycle disorders and hepatic diseases
EP3509590A4 (en) * 2016-09-07 2020-12-02 Pliant Therapeutics, Inc. N-ACYL AMINO ACID COMPOUNDS AND METHOD OF USING
JP7128181B2 (ja) 2016-10-31 2022-08-30 バイオクリスト ファーマスーティカルズ，インコーポレイテッド カリクレイン阻害剤のプロドラッグ
EP3866922A1 (en) * 2018-10-16 2021-08-25 President and Fellows of Harvard College Sirt1 activating compounds

Also Published As

Publication number Publication date
JP7486615B2 (ja) 2024-05-17
TWI826795B (zh) 2023-12-21
CA3182510A1 (en) 2021-12-16
JP2023533661A (ja) 2023-08-04
KR20230009407A (ko) 2023-01-17
CN115835860A (zh) 2023-03-21
AU2021288365B2 (en) 2023-07-06
EP4136063A4 (en) 2023-10-11
US20230234912A1 (en) 2023-07-27
EP4136063A1 (en) 2023-02-22
WO2021249364A1 (en) 2021-12-16
AU2021288365A1 (en) 2023-02-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10544185B2 (en) Deuterated chenodeoxycholic acid derivative and pharmaceutical composition comprising compound thereof
ES2315897T3 (es) Aminoacidos derivados de porfarmacos de composiciones de propofol y usos del mismo.
EP3950004A1 (en) Targeted compositions
CN107033087B (zh) 1h-吲唑-4-胺类化合物及其作为ido抑制剂的用途
CN111295372B (zh) 硝羟喹啉前药及其用途
KR20060055438A (ko) 아미노산 유도된 프로포폴의 프로드러그, 이의 조성물 및용도
WO2003059866A1 (fr) Composes de geranyle
CA3152264A1 (en) Pyrazole compounds, formulations thereof, and a method for using the compounds and/or formulations
FR2723093A1 (fr) Esters d'acyle d'acides amines achiraux du glanciclovir
PT92554A (pt) Processo para a preparacao de peptideos inibidores de protease retroviral
TWI826795B (zh) 用於治療非酒精性脂肪肝疾病及非酒精性脂肪肝炎之帶有碳酸酯的紫檀芪胺基酸的新穎類似物
CN111417620B (zh) 肌酸前药、其组合物以及使用方法
CN104587487B (zh) 一种应用于靶向给药系统的新的支链连接体
CN112218878A (zh) Ntcp抑制剂
CN116472273A (zh) 抗糖尿病化合物和组合物
US9346853B2 (en) Synthesis of telaprevir and boceprevir, or pharmaceutically acceptable salts or solvates as well as intermediate products thereof including β-amino acids prepared via Mukaiyama aldol addition
WO2013081118A1 (ja) リードスルー活性を有する化合物
WO2017070794A1 (en) Process for the preparation of 2-[2-(2-amino-2-carboxy-ethylamino)-2-carboxy-ethylamino]-succinic acid (am-a) and analogs and derivatives thereof
JP2014509613A (ja) Ｄ−イソグルタミル−［ｄ／ｌ］−トリプトファンのプロドラッグ
US11565999B2 (en) Methods of synthesizing aztreonam derivatives
WO2021033766A1 (ja) ビタミンｄ活性を有するリトコール酸誘導体
WO2023205245A1 (en) Gamma-hydroxybutyrate delivering compounds and processes for making and using them
AU2004268492C1 (en) Amino acid derived prodrugs of propofol, compositions and uses thereof
CN117858882A (zh) 具有1-(二硫烷基)烷氧基-羰基单元的前药
JPH09263577A (ja) ジフェニルメチル−アゼチジノン化合物及びエラスターゼ阻害剤