KR20220068485A - 로가닌을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
로가닌을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 로가닌을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는, 로가닌, 이의 유도체, 또는 이의 약학적 또는 식품학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 로가닌 등은 요산염 결정에 의해 증가된 사이토카인, 미엘로페록시다제(MPO), 또는 카스파제-1(caspase-1) 등을 효과적으로 감소시키는 바, 이를 활용하여, 보다 안전하고 효과적으로 통풍 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
상기 로가닌 등은 요산염 결정에 의해 증가된 사이토카인, 미엘로페록시다제(MPO), 또는 카스파제-1(caspase-1) 등을 효과적으로 감소시키는 바, 이를 활용하여, 보다 안전하고 효과적으로 통풍 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
Description
본 발명은 로가닌을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
통풍(Gout)은 대표적인 대사질환의 하나로 퓨린(purine) 대사의 최종 산물인 요산이 혈액 내 남아 농도가 높아지는 고요산혈증(hyperuricemia)으로 인해 발생되는 질환이다. 혈액 및 관절액 내의 요산은 요산염(urate) 결정으로 남아있는데 이것이 관절의 윤활막(synovial membrane), 연골, 연골하골(subchondral bone) 및 관절 주위 조직과 피하조직에 침착되고 이로 인해 염증과 통증을 동반한다.
통풍 발작이 재발하는 등 오래되면 골, 연골 등이 파괴되고 관절이 변형, 섬유화, 골강직증(bony ankylosis) 등으로 진행하는 유전적 성향을 가진다. 통풍은 주로 중년 이상의 남성에게 많이 발생하는데, 근래에 발생 빈도가 증가되고 발병 연령이 낮아지는 이유는 환경적 영향에 의한 것으로 보인다. 여성 환자의 경우는 대개 폐경기 이후이거나 유전적 소인이 강하거나 신장 기능이 약화된 여성에게서 발병하곤 한다.
통풍은 크게 두 가지 종류로 분류되는데, 요산 자체가 과다하게 생성되는 경우(과다생성형)와 생성된 요산이 제대로 배출되지 않는 경우(배출저하형)이며, 국내 환자 중 90%가 배출저하형이다. 이러한 통풍의 원인과 종류에 따라 과다생성형은 요산생성억제제, 배출저하형은 요산배설촉진제로 약물치료를 진행하고 있다. 하지만, 기존 약물들은 그 효과가 미미하거나 알레르기, 요로 결석 부작용 등 안전성 문제가 제기되고 있다.
2014년 30만8725명이던 통풍 환자 수가 2018년 43만953명까지 늘어났다. 여러 원인이 있지만 식습관이 서구화되고 노화로 요산이 쌓이기 쉬운 고령 인구가 많아지면서 통풍 환자가 계속 늘어나는 추세이다. 이에 따라, 안전하고 효과적인 통풍 치료제가 필요한 실정이다.
본 발명의 목적은 통풍 증상 개선 효과가 우수한 천연 성분을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공하는 데에 있다.
상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 로가닌(loganin), 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 로가닌(loganin), 이의 유도체, 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 로가닌, 이의 유도체, 또는 이의 약학적 또는 식품학적으로 허용가능한 염은 요산염 결정에 의해 증가된 사이토카인, 미엘로페록시다제(MPO), 또는 카스파제-1(caspase-1) 등을 효과적으로 감소시키는 바, 통풍 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학 조성물 및 건강기능식품 조성물로 활용될 수 있다.
상기의 약학 조성물 및 건강기능식품 조성물을 활용함으로써, 보다 안전하고 효과적으로 통풍 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실험예에 따른 급성 통풍 유도 동물모델에서 로가닌에 따른 변화를 확인한 것으로, A는 발바닥 두께 변화를 나타낸 그래프, B 및 C는 사이토카인(IL-1β, IL-18) 생성 변화를 나타낸 그래프, D는 MPO(myeloperoxidase) 활성 변화를 나타낸 그래프, E는 카스파제-1(caspase-1)의 활성 변화를 웨스턴 블롯으로 확인한 결과이다.
도 2는 본 발명의 다른 실험예에 따른 공기 주머니(air-pouch) 동물모델에서 로가닌에 따른 변화를 확인한 것으로, A 및 B는 사이토카인(IL-1β, IL-18) 생성 변화를 나타낸 그래프, C는 웨스턴 블롯으로 caspase-1 활성 변화를 확인한 결과, 및 D는 MPO 활성 변화를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 다른 실험예에 따른 공기 주머니(air-pouch) 동물모델에서 로가닌에 따른 변화를 확인한 것으로, A 및 B는 사이토카인(IL-1β, IL-18) 생성 변화를 나타낸 그래프, C는 웨스턴 블롯으로 caspase-1 활성 변화를 확인한 결과, 및 D는 MPO 활성 변화를 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명하기로 한다.
본 발명은 로가닌(loganin), 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 명세서에서, "로가닌(loganin)"은 하기 화학식 1로 나타나며, 화학식으로 C17H26O10인 이리도이드 모노테르페노이드(iridoid monoterpenoid)로, 신경 보호 및 항염증 특성을 가진다.
[화학식 1]
본 발명에 있어서, 상기 로가닌은 이와 동일한 효능을 갖는 범위 내에서 약학적 또는 식품학적으로 허용가능한 염의 형태로 사용할 수 있다.
본 명세서에서, "약학적 또는 식품학적으로 허용가능한"이란, 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 것을 의미한다.
상기 염은 약학적 또는 식품학적으로 허용가능한 염기성 염 또는 산성염 중 어느 하나의 형태로 사용할 수 있다. 염기성염은 유기 염기염, 무기 염기염 중 어느 하나의 형태로 사용할 수 있으며, 나트륨염, 칼륨염, 칼슘염, 리튬염, 마그네슘염, 세슘염, 아미늄염, 암모늄염, 트리에칠아미늄염 및 피리디늄염으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
산성염은 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 브롬산, 황산, 아황산, 인산, 이중 인산, 질산 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 구연산, 초산, 말레산, 말산, 퓨마르산, 글루코산, 메탄설폰산, 벤젠설폰산, 캠퍼설폰산, 옥살산, 말론산, 글루타릭산, 아세트산, 글리콘산, 석신산, 타타르산, 4-톨루엔설폰산, 갈락투론산, 엠본산, 글루탐산, 시트르산, 아스파르탄산, 스테아르산 등을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않고 당업계에서 통상적으로 사용되는 다양한 무기산 및 유기산을 이용하여 형성되는 염이 모두 포함될 수 있다.
또한, 상기 로가닌은 약학적 또는 식품학적으로 허용되는 염뿐만 아니라, 통상의 방법에 의해 제조될 수 있는 모든 염, 수화물, 용매화물, 유도체 등을 모두 포함할 수 있다. 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있고, 수혼화성 유기용매, 예를 들면 아세톤, 메탄올, 에탄올, 또는 아세토니트릴 등에 녹여 과량의 유기염기를 가하거나 무기염기의 염기 수용액을 가한 후 침전시키거나 결정화시켜서 제조할 수 있다. 또는 이 혼합물에서 용매나 과량의 염기를 증발시킨 후 건조시켜서 부가염을 얻거나 또는 석출된 염을 흡인 여과시켜 제조할 수 있다.
상기 로가닌, 이의 유도체, 또는 이의 염은 당업계에서 잘 알려진 방법으로 분리 또는 추출되거나 화학적 합성법에 의해 제조될 수 있으며, 시판중인 것을 선택하여 사용할 수 있으나, 그 방법 또는 물질은 특별히 한정되지 않는다.
본 발명에 있어서, 상기 로가닌, 이의 유도체, 또는 이의 염은 요산염(monosodium urate monohydrate, MSU) 결정에 의해 증가된 인터류킨-1β(interleukin-1β, IL-1β) 또는 인터류킨-18(IL-18)에서 선택되는 하나 이상의 사이토카인의 분비를 감소시킬 수 있고, 요산염 결정에 의해 증가된 미엘로페록시다제(myeloperoxidase, MPO) 또는 카스파제-1(caspase-1)에서 선택되는 하나 이상의 활성을 감소시킬 수 있어, 통풍의 예방 또는 치료를 위한 약학 조성물로 활용될 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 통풍(gout)은 상술한 바와 같이, 요산이 혈액 내 남아 농도가 높아지는 고요산혈증(hyperuricemia)으로 인해 발생되는 질환으로, 바람직하게는, 요산염 결정에 의해 유발된 통풍일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 상기 약학 조성물은 약학 조성물 전체 100 중량부에 대하여, 상기 로가닌, 이의 유도체, 또는 이의 염이 0.01 내지 90 중량부로 함유될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 약학적 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 상기 약학 조성물은 제형에 따라 약학적으로 허용가능한 적절한 담체와 배합될 수 있고, 필요에 따라, 부형제, 희석제, 분산제, 유화제, 완충제, 안정제, 결합제, 붕해제, 용제 등을 더 포함하여 제조될 수 있다. 상기 적절한 담체 등은 본 발명에 따른 로가닌, 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 활성 및 특성을 저해하지 않는 것으로, 투여 형태 및 제형에 따라 달리 선택될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 어떠한 제형으로도 적용될 수 있고, 보다 상세하게는 통상의 방법에 따라 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 비경구형 제형으로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 경구형 제형 중 고형 제형은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등의 형태로, 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로스, 락토오스, 솔비톨, 만니톨, 셀룰로오스, 젤라틴 등을 섞어 조제할 수 있고, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 포함될 수 있다. 또한, 캡술제형의 경우 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체를 더 포함할 수 있다.
상기 경구형 제형 중 액상 제형은 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
상기 비경구 제형은 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 이에 제한되지 않고, 당해 기술 분야에 알려진 적합한 제제를 모두 사용 가능하다.
또한, 본 발명에 따른 약학 조성물은 치료 효능의 증진을 위해 칼슘이나 비타민 등을 더 첨가할 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물에 있어서, 상기 약학 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있다.
본 명세서에서, "약학적으로 유효한 양"이란, 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미한다.
상기 약학 조성물의 유효 용량 수준은 사용 목적, 환자의 연령, 성별, 체중 및 건강 상태, 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 달리 결정될 수 있다. 예를 들어, 일정하지는 않지만 일반적으로 0.001 내지 100mg/kg으로, 바람직하게는 0.01 내지 10mg/kg을 일일 1회 내지 수회 투여될 수 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 통풍이 발생할 수 있는 임의의 동물에 투여할 수 있고, 상기 동물은 예를 들어, 인간 및 영장류뿐만 아니라 소, 돼지, 말, 개 등의 가축 등을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 제제 형태에 따른 적당한 투여 경로로 투여될 수 있고, 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다. 투여 방법은 특히 한정할 필요 없이, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피부 도포, 호흡기내 흡입, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracere-broventricular) 주사 등의 통상적인 방법으로 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 통풍의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로 사용될 수 있고, 수술 또는 다른 약물 치료 등과 병용하여 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 로가닌(loganin), 이의 유도체, 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 로가닌, 이의 유도체, 또는 이의 염은 요산염(monosodium urate monohydrate, MSU) 결정에 의해 증가된 인터류킨-1β(interleukin-1β, IL-1β) 또는 인터류킨-18(IL-18)에서 선택되는 하나 이상의 사이토카인의 분비를 감소시킬 수 있고, 요산염 결정에 의해 증가된 미엘로페록시다제(myeloperoxidase, MPO) 또는 카스파제-1(caspase-1)에서 선택되는 하나 이상의 활성을 감소시킬 수 있어, 통풍의 예방 또는 개선을 위한 건강기능식품 조성물로 활용될 수 있다.
이에 상응하는 특징들은 상술된 부분에서 대신할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 건강기능식품 조성물은 건강기능식품 조성물 전체 100 중량부에 대하여, 상기 로가닌, 이의 유도체 또는 이의 염이 0.01 내지 90 중량부로 함유될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물에 있어서, 상기 건강기능식품은 통풍의 예방 또는 개선 목적으로, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽 또는 음료 등으로 제조될 수 있다. 상기 건강기능식품이 취할 수 있는 형태에는 제한이 없으며, 상기 약학 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가될 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물에 있어서, 상기 건강기능식품은 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있다. 예를 들어, 음료 및 각종 드링크, 과실 및 그의 가공식품(과일통조림, 잼 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(햄, 베이컨 등), 빵류 및 면류, 쿠키 및 스낵류, 유제품(버터, 치즈 등) 등이 가능하며, 통상적인 의미에서의 기능성 식품을 모두 포함할 수 있다. 또한 동물을 위한 사료로 이용되는 식품도 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 당업계에서 통상적으로 사용되는 식품학적으로 허용가능한 식품 첨가제(식품 첨가물) 및 적절한 기타 보조 성분을 더 포함하여 제조될 수 있다. 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전처에 승인된 식품첨가물공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정할 수 있다. 상기 '식품첨가물공전'에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소제제 등의 혼합 제제류 등을 들 수 있다.
상기 기타 보조 성분은 예를 들어, 향미제, 천연 탄수화물, 감미제, 비타민, 전해질, 착색제, 펙트산, 알긴산, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산화제 등을 추가로 함유할 수 있다. 특히, 상기 천연 탄수화물로는 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로오스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜을 사용할 수 있으며, 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품에 함유된 상기 로가닌, 이의 유도체 또는 이의 염의 유효용량은 통풍의 예방 또는 개선 등 그 사용 목적에 따라 적절하게 조절될 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물은 식품을 원료로 하여 일반 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 통풍의 예방 또는 개선을 위한 보조제로 섭취될 수 있다.
이하, 본 발명의 조성물의 약학 또는 건강기능식품 제조예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
<제조예 1> 약제
<제조예 1-1> 정제의 제조
로가닌 20 mg, 옥수수전분 100 mg, 유당 100 mg 및 스테아린산 마그네슘 2 mg을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
<제조예 1-2> 캡슐제의 제조
로가닌 10 mg, 옥수수전분 100 mg, 유당 100 mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합한 후 통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<제조예 1-3> 주사제의 제조
로가닌 10 mg, 소디움 메타비설파이트 3.0 mg, 메틸파라벤 0.8 mg, 프로필파라벤 0.1 mg, 주사용 멸균 증류수 적량 및 pH 조절제 적량을 혼합한 후 통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조하였다.
<제조예 2> 건강기능식품
<제조예 2-1> 건강식품의 제조
로가닌 1 ㎎, 비타민 혼합물 적량(비타민 A 아세테이트 70 ㎍, 비타민 E 1.0 ㎎, 비타민 B 1 0.13 ㎎, 비타민 B 2 0.15 ㎎, 비타민 B 6 0.5 ㎎, 비타민 B 12 0.2 ㎍, 비타민 C 10 ㎎, 비오틴 10 ㎍, 니코틴산아미드 1.7㎎, 엽산 50 ㎍, 판토텐산 칼슘 0.5 ㎎) 및 무기질 혼합물 적량(황산제1철 1.75 ㎎, 산화아연 0.82 ㎎, 탄산마그네슘 25.3 ㎎, 제1인산칼륨 15 ㎎, 제2인산칼슘 55 ㎎, 구연산칼륨 90 ㎎, 탄산칼슘 100 ㎎, 염화마그네슘 24.8 ㎎)을 혼합한 다음 과립을 제조하고 통상의 방법에 따라 건강식품을 제조하였다.
<제조예 2-2> 건강음료의 제조
로가닌 1 ㎎, 구연산 1000 ㎎, 올리고당 100 g, 매실농축액 2 g, 타우린 1 g 및 정제수를 가하여 전체 900 ㎖가 되도록 하며, 통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관하였다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<실험준비>
1. 동물모델
본 발명의 실험예에서 사용된 생쥐는 라온바이오 (Seoul, Korea)에서 구입하였으며, 구입된 동물의 관리 및 실험 프로토콜은 가톨릭대학교(Korea)의 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)의 지침서에 따라 수행되었다 (permission No. 2017-015-01)
생쥐는 실험 전 최소 일주일 동안 무균조건에 적응시켰으며, 23±3℃ 온도와 40-60% 상대 습도를 유지하였다.
2. 시약
요산염(monosodium urate monohydrate, MSU)는 Invivogen (San Diego, USA)에서 구입하였으며, 인터루킨(interleukin)-1β(IL-1β) ELISA 키트는 R&D systems (Minneapolia, MN, USA)에서 구입하였다.
<실험예 1> 요산염(monosodium urate monohydrate, MSU)에 의한 급성 통풍 동물모델에서의 로가닌의 효과 확인
C57BL/6 생쥐를 이용하여 급성 통풍 모델인 발바닥 (Foot-pad) 모델을 유도하였다. 먼저, 생쥐의 발바닥 피하조직 내에 멸균된 무독소 PBS 1 ml에 현탁시킨 MSU 결정 0.2 ml을 주입하여 통풍 동물모델을 제작하였으며, MSU 결정 주입 1시간 전에 로가닌(loganin) 5, 30 mg/kg 또는 대조군인 PBS를 생쥐의 구강으로 투입하였다.
MSU 결정 주입 24시간 후 생쥐를 안락사시키고, 발바닥 조직을 RIPA 버퍼(50 mM Tris-HCl, pH 7.4; 1% NP-40; 0.25% sodium deoxycholate; 150 mM NaCl; 1 mM EGTA; 1 mM Na3VO4; 10 μg/ml aprotinin; 10 μg/ml leupeptin)로 분쇄하고(homogenized) 12,000 rpm으로 10분간 원심 분리하여 상층액을 -80℃에서 측정 전까지 냉각시켜 보관하였다.
그 결과, 도 1(A)에 나타난 바와 같이, 요산염을 주입하는 경우 발 두께가 증가하나, 요산염 투입 전에 로가닌을 경구 투여한 경우에는 요산염에 의해 증가된 발 두께가 감소하는 것으로 나타났다.
도 1의 (B), (C), (D) 및 (E)에 나타난 바와 같이, ELISA, 웨스턴블롯 등을 통해 분석한 결과, 로가닌을 경구 투여한 경우 요산염에 의해 증가한 사이토카인 IL-1β 및 IL-18, 미엘로페록시다제(myeloperoxidase, MPO) 및 카스파제-1(caspase-1)의 활성이 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 로가닌을 경구 투여한 경우는 양성 대조군인 콜히친(colchicine)을 처리한 경우와 유사하거나 더 우수한 효과를 나타내었다.
<실험예 2> 요산염에 의한 공기 주머니(air-pouch) 동물모델에서의 로가닌의 효과 확인
C57BL/6 생쥐를 이용하여 국소 염증반응 모델인 공기 주머니(air-pouch) 모델을 유도하였다. 먼저, 생쥐 등의 피하조직 내로 멸균된 공기를 5 ml 주입하고, 3일 후 동일한 방법으로 두 번째 멸균된 공기 5 ml을 주입하였다.
첫 번째 공기주입 7일 후 공기 주머니 안으로 멸균된 무독소 PBS 1 ml에 현탁시킨 MSU 결정을 주입하여 통풍 동물모델을 제작하였으며, MSU 결정 주입 1시간 전에 로가닌(loganin) 5, 30 mg/kg 또는 대조군인 PBS를 생쥐의 구강으로 투입하였다.
MSU 결정 주입 6시간 후 생쥐를 안락사 시키고, 공기 주머니(air-pouch) 내 액체를 PBS 2 ml로 세척하여 수집하고 12,000 rpm으로 2분간 원심분리한 후 -80℃에서 측정 전까지 냉각시켜 보관하였다.
MSU 결정에 노출된 단핵 세포는 IL-1β 활성화가 유도되며, IL-1β의 활성화는 NLRP3 염증조절복합체(inflammasome)에 의해 유도되는 것이 보고됨에 따라, 통풍 동물모델에서 수집한 공기주머니 내 액체를 포함하는 PBS, 조직 상층액에서 ELISA (R&D Systems; Minneapolis, MN, USA) 분석을 통하여 로가닌에 의한 IL-1β 분비량 변화 등을 확인하였다.
그 결과, 도 2에 나타난 바와 같이, 로가닌을 경구 투여한 경우 요산염에 의해 증가한 사이토카인 IL-1β 및 IL-18과 caspase-1, MPO의 활성이 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 로가닌을 경구 투여한 경우는 양성 대조군인 콜히친(colchicine)을 처리한 경우와 유사하거나 더 우수한 효과를 나타내었다.
이를 통해, 로가닌의 경구 투여로 통풍 증상이 완화될 수 있음을 알 수 있다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 즉, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다.
Claims (6)
- 로가닌(loganin), 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제 1 항에 있어서,
상기 통풍은,
요산염(monosodium urate monohydrate, MSU) 결정에 의해 유발되는 것을 특징으로 하는 통풍 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 제 1 항에 있어서,
상기 로가닌, 이의 유도체, 또는 이의 염은,
요산염 결정에 의해 증가된 인터류킨-1β(IL-1β) 또는 인터류킨-18(IL-18)에서 선택되는 하나 이상의 사이토카인의 분비를 감소시키는 것을 특징으로 하는 통풍 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 제 1 항에 있어서,
상기 로가닌, 이의 유도체, 또는 이의 염은,
요산염 결정에 의해 증가된 미엘로페록시다제(myeloperoxidase, MPO) 또는 카스파제-1(caspase-1)에서 선택되는 하나 이상의 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는 통풍 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 제 1 항에 있어서,
상기 조성물은,
약학 조성물 전체 100 중량부에 대하여, 상기 로가닌, 이의 유도체, 또는 이의 염을 0.01 내지 90 중량부로 함유하는 것을 특징으로 하는 통풍 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 로가닌(loganin), 이의 유도체, 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200155320A KR102485444B1 (ko) | 2020-11-19 | 2020-11-19 | 로가닌을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200155320A KR102485444B1 (ko) | 2020-11-19 | 2020-11-19 | 로가닌을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20220068485A true KR20220068485A (ko) | 2022-05-26 |
| KR102485444B1 KR102485444B1 (ko) | 2023-01-05 |
Family
ID=81808604
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020200155320A KR102485444B1 (ko) | 2020-11-19 | 2020-11-19 | 로가닌을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102485444B1 (ko) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100527109B1 (ko) | 2005-05-19 | 2005-11-09 | 학교법인 인제학원 | 부추 추출물을 함유하는 통풍의 예방 및 치료용 약학조성물 |
-
2020
- 2020-11-19 KR KR1020200155320A patent/KR102485444B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100527109B1 (ko) | 2005-05-19 | 2005-11-09 | 학교법인 인제학원 | 부추 추출물을 함유하는 통풍의 예방 및 치료용 약학조성물 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Rongmei Yao, et al., Evidence-Based Complementray and Alternative Medicine, 2020, 3095624. (2020.04.22.)* * |
| Yao Wang, et al., Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2019, 55917269. (2019.02.03.)* * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR102485444B1 (ko) | 2023-01-05 |
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