KR20220062380A - 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법 - Google Patents
음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20220062380A KR20220062380A KR1020227012281A KR20227012281A KR20220062380A KR 20220062380 A KR20220062380 A KR 20220062380A KR 1020227012281 A KR1020227012281 A KR 1020227012281A KR 20227012281 A KR20227012281 A KR 20227012281A KR 20220062380 A KR20220062380 A KR 20220062380A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- mobile phase
- fingerprint atlas
- extract
- acetonitrile
- methanol
- Prior art date
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 48
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 34
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 8
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 150
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 135
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 50
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 49
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 45
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 45
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 44
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 38
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 30
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims description 30
- 239000012676 herbal extract Substances 0.000 claims description 16
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 15
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 15
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 15
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 12
- 235000020710 ginseng extract Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 10
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 9
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 claims description 7
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 claims description 7
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 claims description 7
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 7
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 7
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 claims description 7
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 claims description 7
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 claims description 7
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 7
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 claims description 7
- 240000005893 Pteridium aquilinum Species 0.000 claims description 6
- 235000009936 Pteridium aquilinum Nutrition 0.000 claims description 6
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 claims description 6
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 claims description 6
- HYXITZLLTYIPOF-UHFFFAOYSA-N Tanshinone II Natural products O=C1C(=O)C2=C3CCCC(C)(C)C3=CC=C2C2=C1C(C)=CO2 HYXITZLLTYIPOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 5
- AZEZEAABTDXEHR-UHFFFAOYSA-M sodium;1,6,6-trimethyl-10,11-dioxo-8,9-dihydro-7h-naphtho[1,2-g][1]benzofuran-2-sulfonate Chemical compound [Na+].C12=CC=C(C(CCC3)(C)C)C3=C2C(=O)C(=O)C2=C1OC(S([O-])(=O)=O)=C2C AZEZEAABTDXEHR-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- AIGAZQPHXLWMOJ-UHFFFAOYSA-N tanshinone IIA Natural products C1=CC2=C(C)C=CC=C2C(C(=O)C2=O)=C1C1=C2C(C)=CO1 AIGAZQPHXLWMOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 abstract description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 abstract description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 36
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 25
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 14
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 12
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 240000001949 Taraxacum officinale Species 0.000 description 1
- 235000005187 Taraxacum officinale ssp. officinale Nutrition 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960005188 collagen Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012468 concentrated sample Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 229960002849 glucosamine sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940124595 oriental medicine Drugs 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/86—Signal analysis
- G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
- G01N30/8686—Fingerprinting, e.g. without prior knowledge of the sample components
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/74—Optical detectors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/027—Liquid chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N2030/042—Standards
- G01N2030/047—Standards external
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P90/00—Enabling technologies with a potential contribution to greenhouse gas [GHG] emissions mitigation
- Y02P90/30—Computing systems specially adapted for manufacturing
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Library & Information Science (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
본 발명은 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법을 개시하고, 상기 방법은 고성능 액상 크로마토그래피법을 이용하여, 한약 성분을 포함하는 제품에 대한 품질 제어를 효과적으로 실현할 수 있고, 특히 처방에 대량의 비한약 성분을 함유하는 제품 품질의 안정적인 제어가 가능하며, 단계별 품질 제어를 통해 제품 품질의 변동을 감소하고, 품질의 안정을 보장하는 동시에 방법이 간단하고 별도의 의기 및 표준품 등이 필요없어 비용을 절약하고 실제 생산에 더 유리하다.
Description
본 발명은 한약 분석 분야에 관한 것이고, 더 구체적으로 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법에 관한 것이다.
본 발명은 제품의 품질 제어 방법 및 핑거프린트 아틀라스에 관한 것이고, 구체적으로 함량 측정 및 핑거프린트 아틀라스 방법을 통해 제품 품질을 제어하는 방법에 관한 것이다. 지표 성분 함량 측정은 고성능 액상을 사용하여 대응되는 표준품 및 시험품을 통해 함량 검출을 수행하고, 표준품의 함량을 통해 시험품 중 상기 물질의 함량을 계산하는 것이며, 현재 한약 관련 제품에서 품질 제어를 수행하는 통상적인 방법이다.
한약 핑거프린트 아틀라스는 특정 한약재 또는 한약을 적절히 처리한 후 현대 정보 수집 기술 및 품질 분석 수단을 이용하여 얻은 한약재 또는 한약의 화학적 특성을 보여주는 이미지, 그래픽, 스펙트로그램 및 그 데이터의 한 가지 아틀라스이다. 한약 핑거프린트 아틀라스는 품질 제어의 한 가지 방식으로 점차 사람들에게 관심을 받고 있는데, 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스에서 가장 기본적인 속성은 완전성과 흐릿함이다. 이는 종합적이고 양화(Quantification) 가능한 검정 수단으로, 한약의 화학 성분 시스템에 대한 연구를 기초로 한약재, 한약 제제 반제품 품질의 진실성, 우수성 및 안정성을 평가하는 데 주로 사용된다.
종래의 한약 조각 및 복합 탕약 및 과립의 품질 표준은 일반적으로 형태 동정, 물리적 및 화학적 동정, 크로마토그래피 분석 등의 두 가지 방면이 포함되며, 여기서 스펙트럼 크로마토그래피 분석은 일반적으로 박층 크로마토그래피 분석, 고성능 액상 함량 측정 방법, 핑거프린트 아틀라스법 등을 포함한다. 만약 제품 중에 많은 성분이 있을 경우, 이에 함유된 화학적 성분이 상대적으로 복잡하고 다방면 간섭 요인이 많아 연구 난이도가 높아지고 생산면에서 정확하고 안정적인 제어가 어렵다. 현재 한약 복합 제제 분야에서 함량 제어는 기본적으로 하나 또는 두 개의 지표 성분만 존재하고, 품질 제어가 단일하고 지표가 적기에 제품의 품질 상황을 종합적으로 반영하기 어렵다. 한약은 추출 과정에서, 공법, 한약재의 품질 등 제한으로 인해 얻은 추출물이 배치마다 비교적 현저한 차이가 있고, 일반적인 함량 측정을 통해서만 질량 제어를 수행하면, 함량 요구를 만족하더라도 제품의 전반적인 품질이 변동한다. 제어 지표를 증가하면, 질량 분석을 통해 물질의 기초를 명확히 한 다음 표준품을 통해 함량 검출을 수행해야 한다. 한약에 함유된 성분의 다양성으로 인해, 지표를 증가하는 것을 통해 함량을 측정하는 방법은 품질 제어를 위한 품질 제어 시간 및 비용을 증가시키고, 품질 제어 난이도를 증가시켜 실제 응용에 도움이 되지 않는다.
따라서, 상기 문제를 종합하면, 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법을 제공하는 것은 당업자에게 있어 시급히 해결해야 할 과제이다.
이를 감안하여, 본 발명은 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법을 제공하고, 상기 방법은 고성능 액상 크로마토그래피법을 이용하여, 한약 성분을 포함하는 제품에 대한 품질 제어를 효과적으로 실현할 수 있고, 특히 처방에 대량의 비한약 성분을 함유하는 제품 품질에 대한 안정적인 제어가 가능하다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 다음과 같은 과제 해결 수단을 사용한다.
음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법에 있어서, 복합물 원료에 대한 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법은,
S1 이카리인:
a 표준품 용액의 제조: 10mg 이카리인 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
b 추출물 샘플 용액의 제조: 음양곽 추출물 0.1g을 취하여 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 50ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고 여과하며 방치한 다음 상청액을 취하며;
c 함량 측정:
크로마토그래피 조건:
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 아세토니트릴:물=30:70이고, 등용매 용리하며;
검출 파장은 270nm이고, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
등용매 용리 조건:
시간, min
이동상 A%,
아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-15 30 70;
d 표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며;
추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 아카리인 함량을 계산하고;
음양곽 추출물 핑거프린트 아틀라스 조건:
① 0.1g 음양곽 추출물을 정밀히 달아 50ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키며, 30분 동안 초음파 처리하고, 실온에 방치하여, 정용, 여과, 농축, 멤버린 통과시키고;
② 크로마토그래피 조건: 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고, 유속 1ml/min, 파장 269nm, 컬럼 온도 30℃, 주입 부피 10μl, 주입 횟수 1회이며;
시간(분)은 0-17, 17-35, 35-65, 65-70, 70-85이고;
아세토니트릴(%)은 15-23, 23, 23-50, 50-15, 15이며;
S2 탄시논 IIA:
a 표준품 용액의 제조: 6mg 탄시논 IIA 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
b 추출물 샘플 용액의 제조: 단삼 추출물 0.1g을 취하여 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 50ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고 여과하며 방치한 다음 상청액을 취하며;
c 함량 측정:
크로마토그래피 조건:
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 구배 용리하며;
검출 파장은 270nm이고, 컬럼 온도는 20℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
구배 용리 조건:
시간, min
이동상 A%,
아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-6
61
39
6-20
61-90
39-10
20-20.5
90-61
10-39
20.5-30
61
39;
d 표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며;
추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 탄시논 IIA 함량을 계산하고;
단삼 추출물 핑거프린트 아틀라스 조건:
① 0.1g 단삼 추출물을 정밀히 달아 50ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키며, 30분 동안 초음파 처리하고, 실온에 방치하여, 정용, 여과, 농축, 멤버린 통과시키고;
② 크로마토그래피 조건: 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고, 유속 1ml/min, 파장 270nm, 컬럼 온도 실온, 주입 부피 10μl, 주입 횟수 1회이며;
시간(분)은 0-20, 20-50, 50-52, 52-62이고;
아세토니트릴(%)은 20-60, 60-80, 80-20, 20이며;
S3 프로토디오신:
a 표준품 용액의 제조: 8mg 프로토디오신 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
b 추출물 샘플 용액의 제조: 천산용 추출물 0.1g을 취하여 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 50ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고 여과하며 방치한 다음 상청액을 취하며;
c 함량 측정:
크로마토그래피 조건:
옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고;
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 아세토니트릴:물=37:63이고, 등용매 용리하며;
검출 파장은 203nm, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
등용매 용리 조건:
시간, min
이동상 A%,
아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-10
37
63;
표준품 용액 및 추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 원-포인트 법을 통해 프로토디오신의 함량을 계산하고;
천산용 추출물 핑거프린트 아틀라스 조건:
① 0.1g 천산용 추출물을 정밀히 달아 50ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키며, 30분 동안 초음파 처리하고, 실온에 방치하여, 정용, 여과, 농축, 멤버린 통과시키고;
② 크로마토그래피 조건: 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고, 유속 1ml/min, 파장 210nm, 컬럼 온도 30℃, 주입 부피 10μl, 주입 횟수 1회이며;
시간(분)은 0-10, 10-20, 20-40, 40-55, 55-65, 65-70, 70-80이고;
아세토니트릴(%)은 20-25, 25-35, 35-80, 80-100, 100, 100-20, 20이다.
바람직하게, 상기 음양곽 복합물은 중량부로 계산하여, 글루코사민 1.2 부, 콜라겐 0.4 부, 콘드로이틴 설페이트 0.2 부, 한약 추출물 0.35 부의 원료로 이루어진다.
바람직하게, 상기 한약 추출물의 조성은 중량부수로 계산하여, 음양곽 7-12 부, 단삼 0.5-3 부, 천산용 6.5-9 부, 넉줄고사리 1-5 부, 토사자 1-5 부이다.
설명해야 할 것은, 본 발명 원료에서 넉줄고사리 및 토사자는 자외선 분광광도계로 검출하고; 글루코사민 및 콘드로이틴 설페이트는 분광광도계로 흡광값을 검출하며; 콜라겐은 킬달 질소 및 아미노산 분석기로 검출하였다.
바람직하게, 상기 음양곽 복합물의 구체적인 제조 단계는 다음과 같다.
S1에서, 비율에 따라 음양곽, 단삼, 천산용, 넉줄고사리, 토사자를 칭량하고, 알코올 추출 공법으로 추출하며, 거대 다공성 수지로 정제하고, 농축, 분무 건조를 거쳐 한약 추출물을 얻는다.
S2에서, 단계 S1에서 얻은 각 한약 추출물을 글루코사민, 콜라겐, 콘드로이틴 설페이트와 혼합하고, 균일하게 교반하여 음양곽 복합물을 얻는다.
음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법에 있어서, 음양곽 복합물에 대한 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법은,
S1 크로마토그래피 조건 1 핑거프린트 아틀라스 검출:
크로마토그래피 컬럼은 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고;
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 구배 용리하며;
검출 파장은 210-270nm이고, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며;
구배 용리 조건:
시간, min
이동상 A%,
아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-5
5-20
95-80
5-15
20-30
80-70
15-35
30-50
70-50
35-40
50-60
50-40
40-50 60-80
40-20
50-60
80-100
20-0;
크로마토그래피 조건 2 제품 함량 검출:
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 아세토니트릴:물=30:70이고, 구배 용리하며;
검출 파장은 270nm이고, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
S2 시험품 제조:
조성물 1g을 정밀히 달아 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 500ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고, 여과하며, 여과액을 50ml으로 농축하고 방치한 다음 상청액을 취하며;
S3 표준품 용액 제조:
10mg 이카리인 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고 각각 0.0625 mg/ml, 0.125 mg/ml, 0.25 mg/ml, 0.5 mg/ml, 1.0 mg/ml이며, 크로마토그래피 조건 2에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며;
복합물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건 2에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 함량을 계산하며;
복합물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건 1에 따라 분석하여 핑거프린트 아틀라스를 얻는다.
바람직하게, 상기 음양곽 복합물의 핑거프린트 아틀라스는,
핑거프린트 아틀라스는 15개의 공통 피크를 포함하고, 각 피크의 상대 머무름 시간은 각각 (1)3.263, (2)16.857, (3)17.785, (4)20.299, (5)23.178, (6)23.747, (7)24.167, (8S)25.357, (9)27.064, (10)28.092, (11)37.908, (12)41.202, (13)53.441, (14)54.928, (15)58.238이다.
바람직하게, 상기 메탄올은 100% 메탄올 용액이다.
바람직하게, 상기 표준곡선의 도면은 농도를 횡좌표, 피크 면적을 종좌표로 한다.
상기 과제 해결 수단에 의하면, 선행기술에 비해 본 발명의 유익한 효과는 다음과 같다.
본 발명은 고성능 액상 크로마토그래피법을 이용한 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법을 구축하고, 본 발명의 과제 해결 수단은 검출 시간을 단축하고 비용을 감소하며, 검출하는 한약 성분이 전체 중량에서 차지하는 비율이 작은 경우에도 여전히 검출 데이터의 안정성 및 정확성을 보장할 수 있다. 핑거프린트 아틀라스와 함량 정량 검출을 결합하여 제품 품질을 더욱 신뢰할 수 있다.
본 발명은 처방에서 언급된 각 한약 추출물에 대해 품질 제어를 수행하고, 하나의 주요 지표 성분을 선택하여 함량 측정을 수행하며, 핑거프린트 아틀라스에서 3-4개의 주요 피크를 선택하여 핑거프린트 아틀라스의 양화를 수행하여, 사용된 추출물이 표준에 부합하도록 보장한다.
다음, 본 발명은 추출된 한약 성분을 기타 성분과 균일하게 혼합하고, 메탄올을 사용하여 제품에 대해 추출 및 농축하고, 농축된 샘플에 대해 고성능 액상 분석을 수행하여 1-2개의 한약 관련 지표 성분 함량을 측정하고 5-8개의 주요 피크를 선택하여 핑거프린트 아틀라스를 양화한다.
본 발명은 선행기술에서 한약 복합 제제의 함량 제어는 기본적으로 하나 또는 두 개의 지표 성분만 존재하고, 품질 제어가 단일하고 지표가 적기에 물질 기초가 풍부한 한약 조성물의 품질 상황을 종합적으로 반영하기 어려운 문제를 극복하고, 단계별 품질 제어를 통해 제품 품질의 변동을 감소하고, 품질의 안정을 보장하는 동시에 방법이 간단하고 별도의 의기 및 표준품 등이 필요없어 비용을 절약하고 실제 생산에 더 유리하다.
본 발명의 실시예 또는 선행기술의 과제 해결 수단을 보다 명확하게 설명하기 위하여, 이하에서는 실시예 또는 선행기술의 설명에 사용되는 첨부 도면을 간략히 소개한다. 자명한 것은, 아래에 설명되는 도면은 단지 본 발명의 실시예일 뿐이고, 당업자는 창의적인 노력 없이 제공된 도면에 따라 다른 도면을 획득할 수 있을 것이다.
도 1은 실시예 1에서 원료에 대해 검출한 이카리인의 함량 측정 표준곡선도이다.
도 2는 실시예 1에서 원료에 대해 검출한 탄시논 IIA의 함량 측정 표준곡선도이다.
도 3은 실시예 1에서 복합물에 대해 검출한 이카리인의 함량 측정 표준곡선도이다.
도 1은 실시예 1에서 원료에 대해 검출한 이카리인의 함량 측정 표준곡선도이다.
도 2는 실시예 1에서 원료에 대해 검출한 탄시논 IIA의 함량 측정 표준곡선도이다.
도 3은 실시예 1에서 복합물에 대해 검출한 이카리인의 함량 측정 표준곡선도이다.
이하, 본 발명의 실시예의 과제 해결 수단에 대해 명확하고 완전하게 설명할 것이며, 기술된 실시예는 본 발명의 모든 실시예가 아닌 일부 실시예에 불과함은 물론이다. 본 발명의 실시예에 기초하여, 당업자가 창의적인 노력 없이 획득한 다른 모든 실시예는 모두 본 발명의 보호 범위에 속할 것이다.
실시예 1:
본 발명의 실시예 1은 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법을 개시하고, 사용된 과제 해결 수단은 다음과 같다.
음양곽 복합물은 글루코사민 1200g, 콜라겐 400g, 콘드로이틴 설페이트 200g, 한약 추출물 350g의 원료로 이루어지고; 한약 추출물의 조성은 음양곽 153g, 단삼 11g, 천산용 153g, 넉줄고사리 16g, 토사자 17g이다.
(1) 한약 추출물에 대해 각각 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출을 수행한다.
S1 이카리인:
a 표준품 용액의 제조: 10mg 이카리인 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
b 추출물 샘플 용액의 제조: 음양곽 추출물 0.1g을 취하여 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 50ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고 여과하며 방치한 다음 상청액을 취하며;
c 함량 측정:
크로마토그래피 조건:
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 아세토니트릴:물=30:70이고, 등용매 용리하며;
검출 파장은 270nm이고, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
등용매 용리 조건:
시간, min
이동상 A%,
아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-15 30 70;
d 표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고, 각각 0.0625 mg/ml, 0.125 mg/ml, 0.25 mg/ml, 0.5 mg/ml, 1.0 mg/ml이며, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며; 추출물 샘플 용액을 취하고 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 아카리인 함량을 계산하고, 샘플 피크 면적 및 작성한 표준곡선에 따라 계산하여 얻은 이카리인 함량은 20.5%이다.
음양곽 추출물 핑거프린트 아틀라스 조건:
① 샘플제조: 0.1g 음양곽 추출물을 정밀히 달아 50ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키며, 30분 동안 초음파 처리하고, 실온에 방치하여, 정용, 여과, 농축, 멤버린 통과시킨다.
② 크로마토그래피 조건: 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고, 유속 1ml/min, 파장 269nm, 컬럼 온도 30℃, 주입 부피 10μl, 주입 횟수 1회이다.
| 시간/min | 0-17 | 17-35 | 35-65 | 65-70 | 70-85 |
| 아세토니트릴(%) | 15-23 | 23 | 23-50 | 50-15 | 15 |
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.99996이다.S2 탄시논 IIA:
a 표준품 용액의 제조: 6mg 탄시논 IIA 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
b 추출물 샘플 용액의 제조: 단삼 추출물 0.1g을 취하여 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 50ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고 여과하며 방치한 다음 상청액을 취하며;
c 함량 측정:
크로마토그래피 조건:
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 구배 용리하며;
검출 파장은 270nm이고, 컬럼 온도는 20℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
구배 용리 조건:
시간, min
이동상 A%,
아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-6
61
39
6-20
61-90
39-10
20-20.5
90-61
10-39
20.5-30
61
39;
d 표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고, 각각 0.0375 mg/ml, 0.075 mg/ml, 0.15 mg/ml, 0.3 mg/ml, 0.6 mg/ml이며, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며;
추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 탄시논 IIA 함량을 계산하고, 샘플 피크 면적 및 작성한 표준곡선에 따라 계산하여 얻은 탄시논 IIA 함량은 5.05%이다.
단삼 추출물 핑거프린트 아틀라스 조건:
① 크로마토그래피 조건: 0.1g 단삼 추출물을 정밀히 달아 50ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키며, 30분 동안 초음파 처리하고, 실온에 방치하여, 정용, 여과, 농축, 멤버린 통과시킨다.
② 크로마토그래피 조건: 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고, 유속 1ml/min, 파장 270nm, 컬럼 온도 실온, 주입 부피 10μl, 주입 횟수 1회이다.
| 시간/min | 0-20 | 20-50 | 50-52 | 52-62 |
| 아세토니트릴(%) | 20-60 | 60-80 | 80-20 | 20 |
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.998이다.S3 프로토디오신:
a 표준품 용액의 제조: 8mg 프로토디오신 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
b 추출물 샘플 용액의 제조: 천산용 추출물 0.1g을 취하여 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 50ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고 여과하며 방치한 다음 상청액을 취한다.
c 함량 측정:
크로마토그래피 조건:
옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고;
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 아세토니트릴:물=37:63이고, 등용매 용리하며;
검출 파장은 203nm, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
등용매 용리 조건:
시간, min
이동상 A%,
아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-10
37
63
표준품 용액 및 추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 원-포인트 법을 통해 프로토디오신의 함량을 계산하고; 원-포인트법에 따라 계산하여 얻은 프로토디오신 함량은 40.22%이다.
천산용 추출물 핑거프린트 아틀라스 조건:
① 크로마토그래피 조건: 0.1g 천산용 추출물을 정밀히 달아 50ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키며, 30분 동안 초음파 처리하고, 실온에 방치하여, 정용, 여과, 농축, 멤버린 통과시키고;
② 크로마토그래피 조건: 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고, 유속 1ml/min, 파장 210nm, 컬럼 온도 30℃, 주입 부피 10μl, 주입 횟수 1회이다.
| 시간/min | 0-10 | 10-20 | 20-40 | 40-55 | 55-65 | 65-70 | 70-80 |
| 아세토니트릴(%) | 20-25 | 25-35 | 35-80 | 80-100 | 100 | 100-20 | 20 |
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.9993이다. (2) 음양곽 복합물에 대해 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출을 수행한다.
S1 크로마토그래피 조건 1 핑거프린트 아틀라스 검출:
크로마토그래피 컬럼은 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고;
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 구배 용리하며;
검출 파장은 210-270nm이고, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며;
구배 용리 조건:
시간, min
이동상 A%,
아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-5
5-20
95-80
5-15
20-30
80-70
15-35
30-50
70-50
35-40
50-60
50-40
40-50 60-80
40-20
50-60
80-100
20-0;
크로마토그래피 조건 2 제품 함량 검출:
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 아세토니트릴:물=30:70이고, 구배 용리하며;
검출 파장은 270nm이고, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
S2 시험품 제조:
조성물 1g을 정밀히 달아 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 500ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고, 여과하며, 여과액을 50ml으로 농축하고 방치한 다음 상청액을 취하며;
S3 표준품 용액 제조:
10mg 이카리인 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고 각각 0.0625 mg/ml, 0.125 mg/ml, 0.25 mg/ml, 0.5 mg/ml, 1.0 mg/ml이며, 크로마토그래피 조건 2에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며;
복합물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건 2에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 함량을 계산하며;
복합물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건 1에 따라 분석하여 핑거프린트 아틀라스를 얻는다.
샘플 피크 면적 및 작성한 표준곡선에 따라 계산하여 얻은 이카리인 함량은 1.61%이다.
음양곽 복합물의 핑거프린트 아틀라스 검출:
핑거프린트 아틀라스는 15개의 공통 피크를 포함하고, 각 피크의 상대 머무름 시간은 각각 (1)3.263, (2)16.857, (3)17.785, (4)20.299, (5)23.178, (6)23.747, (7)24.167, (8S)25.357, (9)27.064, (10)28.092, (11)37.908, (12)41.202, (13)53.441, (14)54.928, (15)58.238이다.
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.994이다.
실시예 2
본 발명의 실시예 2는 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법을 개시하고, 사용된 과제 해결 수단은 다음과 같다.
음양곽 복합물은 글루코사민 1200g, 콜라겐 400g, 콘드로이틴 설페이트 200g, 한약 추출물 350g의 원료로 이루어지고; 한약 추출물의 조성은 음양곽 165g, 단삼 10g, 천산용 144g, 넉줄고사리 16g, 토사자 15g이다.
(1) 한약 추출물에 대해 각각 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출을 수행한다.
S1 이카리인:
a 표준품 용액 제조;
b 추출물 샘플 용액 제조;
c 함량 측정:
표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고, 각각0.075 mg/ml, 0.15 mg/ml, 0.3 mg/ml, 0.6 mg/ml, 1.2 mg/ml이며, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며;
샘플 피크 면적 및 작성한 표준곡선에 따라 계산하여 얻은 이카리인 함량은 20.5%이다.
음양곽 추출물 핑거프린트 아틀라스:
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.9998이다.
S2 탄시논 IIA:
추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 탄시논 IIA 함량을 계산한다. 샘플 피크 면적 및 작성한 표준곡선에 따라 계산하여 얻은 탄시논 IIA 함량은 5.06%이다.
단삼 추출물 핑거프린트 아틀라스:
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.9991이다.
S3 프로토디오신:
표준품 용액 및 추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 원-포인트 법을 통해 프로토디오신의 함량을 계산한다. 원-포인트법에 따라 계산하여 얻은 프로토디오신 함량은 40.24%이다.
천산용 추출물 핑거프린트 아틀라스:
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.9995이다.
(2) 음양곽 복합물에 대해 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출을 수행한다
샘플 피크 면적 및 작성한 표준곡선에 따라 계산하여 얻은 이카리인 함량은 1.73%이다.
음양곽 복합물의 핑거프린트 아틀라스 검출:
핑거프린트 아틀라스는 15개의 공통 피크를 포함하고, 각 피크의 상대 머무름 시간은 각각 (1)3.271, (2)16.850, (3)17.792, (4)20.323, (5)23.181, (6)23.762, (7)24.190, (8S)25.362, (9)27.077, (10)28.012, (11)37.934, (12)41.216, (13)53.443, (14)54.939, (15)58.244이다.
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.99992이다.
실시예 3
본 발명의 실시예 3은 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법을 개시하고, 사용된 과제 해결 수단은 다음과 같다.
음양곽 복합물은 글루코사민 2400g, 콜라겐 800g, 콘드로이틴 설페이트 400g, 한약 추출물 700g의 원료로 이루어지고; 한약 추출물의 조성은 음양곽 245g, 단삼 35g, 천산용 315g, 넉줄고사리 35g, 토사자 70g이다.
(1) 한약 추출물에 대해 각각 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출을 수행한다.
S1 이카리인:
a 표준품 용액 제조;
b 추출물 샘플 용액 제조;
c 함량 측정:
표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고, 각각 0.075 mg/ml, 0.15 mg/ml, 0.3 mg/ml, 0.6 mg/ml, 1.2 mg/ml이며, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며;
샘플 피크 면적 및 작성한 표준곡선에 따라 계산하여 얻은 이카리인 함량은 20.3%이다.
음양곽 추출물 핑거프린트 아틀라스:
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.99999이다.
S2 탄시논 IIA:
추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 탄시논 IIA 함량을 계산한다. 샘플 피크 면적 및 작성한 표준곡선에 따라 계산하여 얻은 탄시논 IIA 함량은 5.07%이다.
단삼 추출물 핑거프린트 아틀라스:
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.992이다.
S3 프로토디오신:
표준품 용액 및 추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 원-포인트 법을 통해 프로토디오신의 함량을 계산한다. 원-포인트법에 따라 계산하여 얻은 프로토디오신 함량은 40.30%이다.
천산용 추출물 핑거프린트 아틀라스:
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.9989이다.
(2) 음양곽 복합물에 대해 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출을 수행한다
샘플 피크 면적 및 작성한 표준곡선에 따라 계산하여 얻은 이카리인 함량은 1.29%이다.
음양곽 복합물의 핑거프린트 아틀라스 검출:
핑거프린트 아틀라스는 15개의 공통 피크를 포함하고, 각 피크의 상대 머무름 시간은 각각 (1)3.263, (2)16.846, (3)17.782, (4)20.301, (5)23.174, (6)23.752, (7)24.183, (8S)25.359, (9)27.068, (10)28.012, (11)37.911, (12)41.206, (13)53.444, (14)54.935, (15)58.241이다.
유사도 계산 소프트웨어는 국가 약전 위원회에서 규정한 한약 크로마토그래피 핑거프린트 아틀라스 유사도 평가 시스템이고, 측정 결과, 표준 핑거프린트 아틀라스와의 유사도는 0.9991이다.
본 명세서에서 각 실시예는 점진적으로 설명되고, 각 실시예는 기타 실시예와의 차이점을 위주로 설명하며, 각 실시예 사이의 같거나 유사한 부분은 서로 참조 가능하다.
개시된 실시예에 대한 상술한 설명은 당업자가 본 발명을 실시하거나 사용할 수 있도록 하기 위함이다. 이런 실시예에 대한 다양한 수정은 당업자에게 자명한 것이며, 본문에 정의된 일반적인 원리는 본 발명의 사상 또는 범위를 벗어나지 않고 다른 실시예에서 구현될 수 있다. 따라서, 본 발명은 본문에 개시된 이런 실시예에 제한되도록 의도되지 않고, 본문에 개시된 원리 및 신규한 특징과 일치하는 가장 넓은 범위가 부여되어야 한다.
Claims (5)
- 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법에 있어서,
복합물 원료에 대한 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법은,
S1 이카리인:
a 표준품 용액의 제조: 10mg 이카리인 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용(定容)하며;
b 추출물 샘플 용액의 제조: 음양곽 추출물 0.1g을 취하여 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 50ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고 여과하며 방치한 다음 상청액을 취하며;
c 함량 측정:
크로마토그래피 조건:
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 아세토니트릴:물=30:70이고, 등용매 용리하며;
검출 파장은 270nm이고, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
등용매 용리 조건:
시간 min 이동상 A%, 아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-15 30 70;
d 표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며;
추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 아카리인 함량을 계산하고;
음양곽 추출물 핑거프린트 아틀라스 조건:
① 0.1g 음양곽 추출물을 정밀히 달아 50ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키며, 30분 동안 초음파 처리하고, 실온에 방치하여, 정용, 여과, 농축, 멤버린 통과시키고;
② 크로마토그래피 조건: 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고, 유속 1ml/min, 파장 269nm, 컬럼 온도 30℃, 주입 부피 10μl, 주입 횟수 1회이며;
시간(분)은 0-17, 17-35, 35-65, 65-70, 70-85이고;
아세토니트릴(%)은 15-23, 23, 23-50, 50-15, 15이며;
S2 탄시논 IIA는,
a 표준품 용액의 제조: 6mg 탄시논 IIA 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
b 추출물 샘플 용액의 제조: 단삼 추출물 0.1g을 취하여 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 50ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고 여과하며 방치한 다음 상청액을 취하며;
c 함량 측정:
크로마토그래피 조건:
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 구배 용리하고;
검출 파장은 270nm이고, 컬럼 온도는 20℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
구배 용리 조건:
시간, min 이동상 A%, 아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-6 61 39
6-20 61-90 39-10
20-20.5 90-61 10-39
20.5-30 61 39;
d 표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며;
추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 탄시논 IIA 함량을 계산하고;
단삼 추출물 핑거프린트 아틀라스 조건:
① 0.1g 단삼 추출물을 정밀히 달아 50ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키며, 30분 동안 초음파 처리하고, 실온에 방치하여, 정용, 여과, 농축, 멤버린 통과시키고;
② 크로마토그래피 조건: 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고, 유속 1ml/min, 파장 270nm, 컬럼 온도 실온, 주입 부피 10μl, 주입 횟수 1회이며;
시간(분)은 0-20, 20-50, 50-52, 52-62이고;
아세토니트릴(%)은 20-60, 60-80, 80-20, 20이며;
S3 프로토디오신:
a 표준품 용액의 제조: 8mg 프로토디오신 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
b 추출물 샘플 용액의 제조: 천산용 추출물 0.1g을 취하여 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 50ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고 여과하며 방치한 다음 상청액을 취하며;
c 함량 측정:
크로마토그래피 조건:
옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고;
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 아세토니트릴:물=37:63이고, 등용매 용리하며;
검출 파장은 203nm이고, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
등용매 용리 조건:
시간, min 이동상 A%, 아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-10 37 63;
표준품 용액 및 추출물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건에 따라 분석하며, 원-포인트 법을 통해 프로토디오신의 함량을 계산하고;
천산용 추출물 핑거프린트 아틀라스 조건:
① 0.1g 천산용 추출물을 정밀히 달아 50ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키며, 30분 동안 초음파 처리하고, 실온에 방치하여, 정용, 여과, 농축, 멤버린 통과시키고;
② 크로마토그래피 조건: 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고, 유속 1ml/min, 파장 210nm, 컬럼 온도 30℃, 주입 부피 10μl, 주입 횟수 1회이며;
시간(분)은 0-10, 10-20, 20-40, 40-55, 55-65, 65-70, 70-80이고;
아세토니트릴(%)은 20-25, 25-35, 35-80, 80-100, 100, 100-20, 20인 것을 특징으로 하는 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법.
- 제1항에 있어서,
상기 음양곽 복합물은 중량부로 계산하여, 글루코사민 1.2 부, 콜라겐 0.4 부, 콘드로이틴 설페이트 0.2 부, 한약 추출물 0.35 부의 원료로 이루어지고;
상기 한약 추출물의 조성은 중량부수로 계산하여, 음양곽 7-12 부, 단삼 0.5-3 부, 천산용 6.5-9 부, 넉줄고사리 1-5 부, 토사자 1-5 부인 것을 특징으로 하는 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법.
- 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법에 있어서,
음양곽 복합물에 대한 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법은,
S1 크로마토그래피 조건 1 핑거프린트 아틀라스 검출:
크로마토그래피 컬럼은 옥타데실실란 결합 실리카겔을 충전제로 사용하고;
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 구배 용리하며;
검출 파장은 210-270nm이고, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며;
구배 용리 조건:
시간, min 이동상 A%, 아세토니트릴 이동상 B%, 물
0-5 5-20 95-80
5-15 20-30 80-70
15-35 30-50 70-50
35-40 50-60 50-40
40-50 60-80 40-20
50-60 80-100 20-0;
크로마토그래피 조건 2 제품 함량 검출:
이동상 A는 아세토니트릴이고, 이동상 B는 물이며, 아세토니트릴:물=30:70이고, 구배 용리하며;
검출 파장은 270nm이고, 컬럼 온도는 30℃이며, 유속은 1ml/min이고, 주입량은 10μl이며, 주입 횟수는 2회이고;
S2 시험품 제조:
조성물 1g을 정밀히 달아 마개가 있는 삼각플라스크에 넣고, 메탄올 500ml을 가하여 칭량한 후, 30분 동안 초음파 처리하고, 다시 칭량한 후, 손실된 중량만큼 메탄올을 보충하여, 잘 흔들고, 여과하며, 여과액을 50ml으로 농축하고 방치한 다음 상청액을 취하며;
S3 표준품 용액 제조:
10mg 이카리인 표준품을 취하고 10ml 메스플라스크에서 메탄올을 가하여 용해시키고 정용하며;
표준곡선 작성: 1/2 구배로 표준품 용액을 희석하여 5개의 농도 구배를 얻고 각각 0.0625 mg/ml, 0.125 mg/ml, 0.25 mg/ml, 0.5 mg/ml, 1.0 mg/ml이며, 크로마토그래피 조건 2에 따라 분석하여 표준곡선을 그리며;
복합물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건 2에 따라 분석하며, 표준곡선을 통해 함량을 계산하며;
복합물 샘플 용액을 취하고, 크로마토그래피 조건 1에 따라 분석하여 핑거프린트 아틀라스를 얻는 것을 특징으로 하는 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법.
- 제3항에 있어서,
상기 음양곽 복합물의 핑거프린트 아틀라스는,
핑거프린트 아틀라스는 15개의 공통 피크(common peak)를 포함하고, 각 피크의 상대 머무름 시간은 각각 (1)3.263, (2)16.857, (3)17.785, (4)20.299, (5)23.178, (6)23.747, (7)24.167, (8S)25.357, (9)27.064, (10)28.092, (11)37.908, (12)41.202, (13)53.441, (14)54.928, (15)58.238인 것을 특징으로 하는 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 메탄올은 100% 메탄올 용액인 것을 특징으로 하는 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910943748.8 | 2019-09-30 | ||
| CN201910943748.8A CN110501445B (zh) | 2019-09-30 | 2019-09-30 | 一种淫羊藿复合物产品质量控制及指纹图谱检测方法 |
| PCT/CN2019/111795 WO2021062889A1 (zh) | 2019-09-30 | 2019-10-18 | 一种淫羊藿复合物产品质量控制及指纹图谱检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20220062380A true KR20220062380A (ko) | 2022-05-16 |
Family
ID=68593156
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020227012281A KR20220062380A (ko) | 2019-09-30 | 2019-10-18 | 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20220062380A (ko) |
| CN (1) | CN110501445B (ko) |
| AU (1) | AU2019468883B2 (ko) |
| WO (1) | WO2021062889A1 (ko) |
Families Citing this family (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111474276B (zh) * | 2020-05-08 | 2022-02-25 | 亚宝药业集团股份有限公司 | 一种健阳片制剂的质量控制方法 |
| CN112089786A (zh) * | 2020-10-19 | 2020-12-18 | 琛蓝(美国)营养制品股份有限公司 | 一种具有多功效的中药复方组合物及其在药物制剂中的应用 |
| CN113176366A (zh) * | 2021-05-08 | 2021-07-27 | 宁夏医科大学 | 基于谱效关系的二精方多糖及黄酮类成分的评价方法 |
| CN113376271A (zh) * | 2021-05-26 | 2021-09-10 | 华东理工大学 | 一种基于lc-ms的生物样品中壳寡糖的高灵敏度检测分析方法 |
| CN113295801B (zh) * | 2021-06-04 | 2023-04-25 | 国家烟草质量监督检验中心 | 一种植物源性食物中氟砜灵的测定方法 |
| CN113588808B (zh) * | 2021-06-25 | 2023-02-28 | 西安千禾药业股份有限公司 | 一种同时检测血平胶囊中多种有效成分的含量测定方法 |
| CN113281439B (zh) * | 2021-07-25 | 2021-11-26 | 江西汇仁药业股份有限公司 | 肾宝片的质量控制检测方法 |
| CN113759036B (zh) * | 2021-08-10 | 2023-09-08 | 北京康仁堂药业有限公司 | 一种绵萆薢中原薯蓣皂苷的含量测定方法 |
| CN113720931B (zh) * | 2021-08-19 | 2023-10-20 | 遂昌县森林王中药材专业合作社 | 一种三叶青药材的质量评价方法 |
| CN113960234B (zh) * | 2021-09-18 | 2023-04-07 | 北京康仁堂药业有限公司 | 一种白前及白前配方颗粒的质量控制方法 |
| CN114740114B (zh) * | 2022-04-14 | 2023-05-26 | 广西特色作物研究院 | 一种鉴定极低需冷量桃种质资源的方法 |
| CN115184483B (zh) * | 2022-06-08 | 2024-05-03 | 浙江工业大学 | 一种中药活性成分的二维筛选方法 |
| CN115236218A (zh) * | 2022-06-17 | 2022-10-25 | 上海市食品药品检验研究院 | 一种基于hplc-cad的检测化妆品中玻色因的方法 |
| CN115032318B (zh) * | 2022-06-28 | 2024-07-05 | 中国食品药品检定研究院 | 一种检测3-(n-亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法 |
| CN115266976B (zh) * | 2022-07-25 | 2023-05-16 | 山东步长制药股份有限公司 | 一种参仙升脉口服液超高效液相检测方法 |
| CN115372507A (zh) * | 2022-08-11 | 2022-11-22 | 包头钢铁（集团）有限责任公司 | 一种内标法测定洗油中α-甲基萘β-甲基萘的方法 |
| CN115436529A (zh) * | 2022-10-17 | 2022-12-06 | 上海中医药大学附属龙华医院 | 一种复方健脾补肾制剂hplc指纹图谱的构建方法及标准指纹图谱 |
| CN115728413A (zh) * | 2022-11-09 | 2023-03-03 | 内蒙古帕默康创医疗仪器有限公司 | 舍曲林血药浓度的定量分析方法 |
| CN115963207B (zh) * | 2023-01-10 | 2024-08-02 | 佳木斯大学 | 一种利用极性化合物的溶解能的反相色谱定性鉴别方法 |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1958002B (zh) * | 2005-10-31 | 2012-09-05 | 海南制药厂有限公司 | 一种胆木注射液的质量检测方法 |
| CN101011480B (zh) * | 2007-02-13 | 2011-08-31 | 美晨集团股份有限公司 | 一种用指纹图谱技术检测补肾强身片质量的方法 |
| WO2009057756A1 (ja) * | 2007-11-02 | 2009-05-07 | Hamamatsu Foundation For Science And Technology Promotion | チャフロサイド高含有茶葉およびその製造方法 |
| CN101623305B (zh) * | 2008-07-10 | 2012-05-30 | 中国中医科学院中药研究所 | 一种道地药材研究模型的构建方法及其用途 |
| CN103424498B (zh) * | 2012-05-25 | 2015-05-06 | 丽珠集团利民制药厂 | 一种清毒安肾胶囊指纹图谱的建立方法及其应用 |
| CN102749348B (zh) * | 2012-06-18 | 2014-06-11 | 河南省科高植物天然产物开发工程技术有限公司 | 一种鉴别药用植物中活性成分组的方法 |
| CN103969356B (zh) * | 2013-02-02 | 2016-06-29 | 西安世纪盛康药业有限公司 | 一种丹参药材的指纹图谱的鉴别方法 |
| CN103536678B (zh) * | 2013-11-13 | 2015-01-21 | 刘文莲 | 一种治疗产后少乳的中药组合物 |
| CN104820049B (zh) * | 2015-03-17 | 2016-06-08 | 中山市中智药业集团有限公司 | 淫羊藿破壁饮片的指纹图谱共有模式构建及其质量检测方法 |
| CN104777253A (zh) * | 2015-04-17 | 2015-07-15 | 国药控股深圳中药有限公司 | 一种冠心丹参胶囊指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 |
| CN108645946A (zh) * | 2018-05-11 | 2018-10-12 | 中国人民解放军新疆军区药品仪器检验所 | 莲威阿纳其颗粒的综合质量评价方法 |
| CN108896681B (zh) * | 2018-06-20 | 2020-10-02 | 山东省分析测试中心 | 一种安神补脑液多指标定量指纹图谱建立方法及其应用 |
| CN109470801A (zh) * | 2019-01-03 | 2019-03-15 | 江苏师范大学 | 一种穿山龙高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱和应用 |
-
2019
- 2019-09-30 CN CN201910943748.8A patent/CN110501445B/zh active Active
- 2019-10-18 WO PCT/CN2019/111795 patent/WO2021062889A1/zh active Application Filing
- 2019-10-18 KR KR1020227012281A patent/KR20220062380A/ko not_active Application Discontinuation
- 2019-10-18 AU AU2019468883A patent/AU2019468883B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110501445B (zh) | 2020-12-01 |
| CN110501445A (zh) | 2019-11-26 |
| AU2019468883B2 (en) | 2022-09-08 |
| WO2021062889A1 (zh) | 2021-04-08 |
| AU2019468883A1 (en) | 2021-06-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR20220062380A (ko) | 음양곽 복합물 제품 품질 제어 및 핑거프린트 아틀라스 검출 방법 | |
| US11525815B2 (en) | Method for product quality control and fingerprint detection of epimedium brevicornu complex | |
| Margolis et al. | Stabilization of ascorbic acid in human plasma, and its liquid-chromatographic measurement. | |
| WO2021184637A1 (zh) | 桔贝合剂 hplc 指纹图谱的建立方法 | |
| CN102072846B (zh) | 复方氨基酸（8）维生素（11）胶囊的质量检测方法 | |
| CN109239230B (zh) | 多种维生素制剂的杂质分析方法 | |
| US20190025265A1 (en) | Method for identifying grape seed extract authenticity using hplc fingerprint spectrum | |
| CN110187041B (zh) | 一种痰热清注射液指纹图谱的建立方法 | |
| CN107561172B (zh) | 一种同时检测营养素软胶囊中多种维生素含量的方法 | |
| CN101216466B (zh) | 枸杞hplc指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 | |
| CN107991399A (zh) | 一种同时测定复方丹参提取物或相关药材中31种成分的方法 | |
| CN110568099B (zh) | 五加参归芪精制剂的指纹图谱构建方法及多指标成分同步含量测定方法 | |
| CN110057950B (zh) | 一种基于检测波长切换的蒲地蓝消炎片hplc指纹图谱的构建方法 | |
| Yue-ling et al. | HPLC determination of quercetin in three plant drugs from genus sedum and conjecture of the best harvest time | |
| CN113433232A (zh) | 一种测定人参属中药中人参皂苷含量的方法 | |
| Chen et al. | Micellar electrokinetic chromatography fingerprinting combined with chemometrics as an efficient strategy for evaluating the quality consistency and predicting the antioxidant activity of Lianqiao Baidu pills | |
| CN112578066B (zh) | 一种紫菀样品的质量评价方法 | |
| CN108982736B (zh) | 一种消毒散口服液hplc指纹图谱的建立方法 | |
| CN108072717B (zh) | 一种精氨酸溶液的检测方法 | |
| CN110412162B (zh) | 白香丹胶囊的hplc特征图谱的构建方法及白香丹胶囊的质量检测方法 | |
| CN115508467B (zh) | 一种含有红花药物制剂的指纹图谱检测方法 | |
| CN109900827B (zh) | 基于一测多评法鉴别制何首乌的方法 | |
| CN102998386A (zh) | 一种用高效液相色谱测定白芍愈伤组织中白芍双苷的方法 | |
| CN108508119B (zh) | 芦根提取物的鉴别方法 | |
| CN117288870B (zh) | 蚁灵口服液指纹图谱的建立方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal |