KR20220023044A - 천연 복합성분을 함유하는 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물 및 그 제조 방법 - Google Patents

천연 복합성분을 함유하는 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물 및 그 제조 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물 및 그 제조 방법에 관한 것으로서, 구체적으로는 계내금 3-5 중량부, 괄루근 3-5 중량부, 백편두 4-6 중량부, 백자인 4-6 중량부, 치자 3-5 중량부, 연자육 3-5 중량부, 죽여 3-5 중량부 및 시벅턴 5-7 중량부를 포함하는 혼합물의 열수 추출물의 증류액을 포함함으로써 아세트알데히드와 알코올의 분해 능력이 탁월하고, 항산화 활성이 높으며, 세포 독성이 없고, 장기 보존 안정성이 우수하여 인체 자극을 유발할 수 있는 화학 방부제, 첨가제 등의 사용을 피할 수 있어 숙취의 예방 또는 해소에 사용하기 적합한 한방 조성물과 이의 제조 방법에 관한 것이다.

Description

천연 복합성분을 함유하는 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물 및 그 제조 방법 {HERBAL COMPOSITION FOR PREVENTING OR RELIEVING HANGOVER CONTAINING NATURAL COMPLEX COMPONENTS AND PREPARING METHOD THEREOF}
본 발명은 천연 복합성분을 함유하는 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물 및 그 제조 방법에 관한 것으로서, 구체적으로는 천연 복합성분을 함유하여 아세트알데히드와 알코올의 분해 능력이 탁월하고, 항산화 활성이 높으며, 세포 독성이 없고, 장기 보존 안정성이 우수하여 인체 자극을 유발할 수 있는 화학 방부제, 첨가제 등의 사용을 피할 수 있어 숙취의 예방 또는 해소에 사용하기 적합한 한방 조성물 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.
고대로부터 술은 인류 역사와 함께 하였으며, 약물 또는 기호식품으로서 현재 우리의 생활 속에서 애용되고 있다.
술의 주성분이 되는 알코올은 섭취 시 여러 가지 약리 작용을 나타내는데, 식욕증진, 혈액순환 원활, 체온 상승, 스트레스 해소, 수면 유도 등의 긍정적인 작용이 있는 반면 알코올에 대한 탐닉성, 습관성, 의존성을 가지게 되는 등의 부작용을 가지고 있다.
술은 위염, 위궤양, 알코올성 간염, 알코올성 지방간 등의 소화기계 문제뿐 아니라, 심근경색, 고혈압 등을 야기시키는 원인이 되기도 하며, 알코올성 치매, 알코올성 중독 등의 문제를 일으키는 원인물질로 작용하는 등 여러 가지 건강상의 문제를 일으킬 수 있다.
과도한 스트레스와 잘못된 음주 습관은 건강상의 문제뿐 아니라 각종 범죄 및 청소년 문제, 교통 사고 등의 원인으로 작용해 그에 따른 사회적, 경제적, 인적 피해를 야기시키고 있으므로 알코올의 적절한 사용이 요구되고 있다.
알코올은 간으로 흡수되어 대사되는데 주로 알코올을 분해하는 효소인 알코올 탈수소 효소(alcohol dehydrogenase; ADH)에 의한 경로에 의해 대사된다. 알코올은 ADH에 의해 아세트알데히드로 전환되며 이 아세트알데히드는 유독한 물질로 세포벽 손상 및 세포 괴사를 유발시키며 다량의 알코올을 섭취했을 때 나타나는 숙취현상도 유발할 수 있다.
아세트알데히드는 아세트알데히드를 분해하는 효소인 아세트알데히드 탈수소 효소(acetaldehyde dehydrogenase; ALDH)에 의해 아세테이트로 분해되고, 최종적으로 CO2와 H2O로 분해되거나, 에너지 생산을 위해 시트르산 사이클(citric acid cycle)로 들어가게 된다.
그러나 알코올을 과도하게 섭취했을 경우 알코올이 아세트알데히드와 NAD(nicotinamide adenine dinucleotide)로부터 생성된 NADH가 미토콘드리아로 들어가 간장내의 산화, 환원 균형을 파괴할 수 있다. 이로 인해 간에 콜레스테롤이 축적되고, 단백질 합성이 저하되어 지방간 및 고지혈증이 발생할 수 있다.
또한 아세트알데히드는 젖산과 같은 피로물질의 축적을 유도하고, 비타민 활성화를 저해하여 혈중 비타민의 양을 감소시키며 소변 및 땀으로 다량의 수분과 각종 전해질을 체외로 방출하여 갈증, 두통, 무기력증 등을 유발할 수 있다.
숙취는 술을 마신 후에 나타나는 신체적, 정신적인 불쾌감을 총칭하는 것으로 객관적인 증상으로는 인식, 메스꺼움, 구토, 졸음, 두통, 운동 능력 저하, 혈액학적 변화, 호르몬의 변화 등의 현상을 말한다.
숙취의 원인은 아직 확실히 밝혀지지는 않았으나, 탈수, 알코올 및 알코올 대사물(아세트알데히드, 포름알데히드, 아세톤 등)의 독성 작용이나, 영양소 들의 흡수 장애로 인한 영양소 결핍 등의 다수 학술이 있는데, 최근에는 알코올의 대사 산물인 아세트알데히드, 아세톤 등에 의한 것이라고 보고된 바 있다(Tomita Y, Haseba T, Kurosu M, Watanabe T(1990). Arukoru Kenkyut Yakubutsu Ison. 25(2). 116-128; Tsukamoto S, Muto T. Nagoya T, Shimamura M, Saito T, Tainaka H.(1989). Alcohol Alcohol. 24(2).101~108).
따라서, 숙취 증상은 알코올과 아세트알데히드를 얼마나 효과적으로 분해할 수 있는지에 달려있다고 볼 수 있으며, 숙취의 해소는 항산화 효능과도 연관되어 있음이 보고된 바 있다(Hong YH. Effects of the herb mixture, DTS20, on oxidative stress and plasma alcoholic metabolites after alcohol consumption in healthy young men. Integr Med Res. 2016 Dec;5(4):309-316).
이러한 숙취를 해소하기 위한 제품에 대하여 소비자의 요구가 지속되고 있고, 다양한 분야에서 음주로 인한 숙취 경감을 위해서 연구와 실험이 이루어지고 있으며, 다양한 제품들이 시중에 판매 또는 새롭게 등장하고 있다.
대부분의 제품들이 생약 소재들을 비롯하여 다양한 물질을 이용하고 있으나, 사용량이 부족할 뿐만 아니라 최종 제품의 효능에 대해서도 객관적인 검증이 미흡하므로 제품에 대한 신뢰도가 전반적으로 낮다.
따라서 객관적으로 숙취해소 효능을 검증하고 소비자들의 신뢰를 확보할 뿐만 아니라 과다한 음주로 인한 사회적인 손실을 줄임으로써 건강한 생활에 도움을 줄 수 있는 제품의 개발이 절실히 요구되고 있다.
본 연구팀은 한방에서 사용되는 다양한 약재와 천연 소재들을 연구하고 실험하여, 천연 성분을 열수 추출 시 일정 온도 이상에서 휘발되는 증류성분을 냉각 회수하면 정유성분, 방향족성분 및 항산화성분이 풍부한 열수 증류 분획을 확보할 수 있다는 것을 발견하고, 숙취의 예방 또는 해소에 가장 좋은 효능을 나타내는 조성물을 배합함으로써 본 발명을 완성하였다.
이에, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 천연 복합성분을 함유하여 아세트알데히드와 알코올의 분해 능력이 탁월하고, 항산화 활성이 높으며, 부작용이 없어 숙취의 예방 또는 해소에 유용한 한방 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명이 해결하고자 하는 다른 과제는 위와 같은 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물을 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 기술적 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 과제를 해결하기 위한 본 발명의 일 실시예에 따른 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물은 계내금 3-5 중량부, 괄루근 3-5 중량부, 백편두 4-6 중량부, 백자인 4-6 중량부, 치자 3-5 중량부, 연자육 3-5 중량부, 죽여 3-5 중량부 및 시벅턴(Sea Buckthorn, 산자나무) 5-7 중량부를 포함하는 혼합물의 열수 추출물의 증류액을 포함한다.
또한, 상기 열수 추출물을, 상기 증류액 70-90 중량부 대비 10-30 중량부로 더 포함할 수 있다.
상기 과제를 해결하기 위한 본 발명의 다른 실시예에 따른 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물은 계내금 열수 추출물의 증류액 3-5 중량부, 괄루근 열수 추출물의 증류액 3-5 중량부, 백편두 열수 추출물의 증류액 4-6 중량부, 백자인 열수 추출물의 증류액 4-6 중량부, 치자 열수 추출물의 증류액 3-5 중량부, 연자육 열수 추출물의 증류액 3-5 중량부, 죽여 열수 추출물의 증류액 3-5 중량부 및 시벅턴 열수 추출물의 증류액 5-7 중량부를 포함한다.
상기 다른 과제를 해결하기 위한 본 발명의 일 실시예에 따른 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물의 제조 방법은 (a) 계내금 3-5 중량부, 괄루근 3-5 중량부, 백편두 4-6 중량부, 백자인 4-6 중량부, 치자 3-5 중량부, 연자육 3-5 중량부, 죽여 3-5 중량부 및 시벅턴 5-7 중량부를 포함하는 혼합물을 열수 추출하여 추출물을 얻는 단계, 및 (b) 상기 추출물을 가열하여 생성된 증기를 냉각시켜 증류액을 수득하는 단계를 포함한다.
또한, (c) 상기 가열 후 잔류한 추출물 10-30 중량부를 상기 증류액 70-90 중량부에 혼합하는 단계를 더 포함할 수 있다.
한편, 상기 (a) 단계는, 상기 계내금, 괄루근, 백편두, 백자인, 치자, 연자육, 죽여 및 시벅턴을 정제수에 투입하고 추출기를 사용하여 80-100 ℃로 8-48시간 동안 가열하는 단계, 및 상기 가열된 것을 여과하여 상기 추출물을 얻는 단계를 포함할 수 있다.
또한, 상기 (b) 단계는, 상기 추출물을 90-100 ℃로 가열하여 생성된 증기를 4-10 ℃의 냉각수관으로 액화시키는 단계, 및 상기 액화된 것을 8,000-14,000 rpm 및 2-8 ℃에서 10-50분간 원심분리하여 고형분을 제거하고 상등액을 취하여 상기 증류액을 수득하는 단계를 포함할 수 있다.
상기 다른 과제를 해결하기 위한 본 발명의 다른 실시예에 따른 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물의 제조 방법은 (a) 계내금, 괄루근, 백편두, 백자인, 치자, 연자육, 죽여 및 시벅턴을 각각 열수 추출하여 각각의 추출물을 얻는 단계, (b) 상기 각 추출물을 가열하여 생성된 증기를 냉각시켜 각각의 증류액을 수득하는 단계, 및 (c) 상기 계내금의 증류액 3-5 중량부, 괄루근의 증류액 3-5 중량부, 백편두의 증류액 4-6 중량부, 백자인의 증류액 4-6 중량부, 치자의 증류액 3-5 중량부, 연자육의 증류액 3-5 중량부, 죽여의 증류액 3-5 중량부 및 시벅턴의 증류액 5-7 중량부를 서로 혼합하는 단계를 포함한다.
한편, 상기 (a) 단계는, 상기 계내금, 괄루근, 백편두, 백자인, 치자, 연자육, 죽여 및 시벅턴 각각을 정제수에 투입하고 추출기를 사용하여 80-100 ℃로 8-48시간 동안 가열하는 단계, 및 상기 가열된 것을 여과하여 상기 각 추출물을 얻는 단계를 포함할 수 있다.
또한, 상기 (b) 단계는, 상기 각 추출물을 90-100 ℃로 가열하여 생성된 증기를 4-10 ℃의 냉각수관으로 액화시키는 단계, 및 상기 액화된 것을 8,000-14,000 rpm 및 2-8 ℃에서 10-50분간 원심분리하여 고형분을 제거하고 상등액을 취하여 상기 각 증류액을 수득하는 단계를 포함할 수 있다.
상기 실시예들에 따른 숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물의 제조 방법은 수득한 증류액을 한외 여과막 또는 크로마토그래피를 이용하여 추가적으로 정제하는 단계를 더 포함할 수 있다.
한편, 상술한 증류액 또는 상등액의 밀도는 약 1 kg/L, 즉 정제수의 밀도와 근사하거나 실질적으로 동일할 수 있다. 따라서, 상술한 증류액 또는 상등액의 함량 단위인 '중량부(parts by weight)'는 '부피부(parts by volume)'와 실질적으로 동일한 단위일 수 있다.
기타 실시예의 구체적인 사항들은 상세한 설명에 포함되어 있다.
본 발명의 실시예들에 따른 한방 조성물은 천연 복합성분을 함유하여 아세트알데히드와 알코올의 분해 능력이 탁월하고, 항산화 활성이 높으며, 세포 독성이 없고, 장기 보존 안정성이 우수하여 인체 자극을 유발할 수 있는 화학 방부제, 첨가제 등의 사용을 피할 수 있어, 숙취의 예방 또는 해소에 사용하기 적합하다.
본 발명의 실시예들에 따른 효과는 이상에서 예시된 내용에 의해 제한되지 않으며, 더욱 다양한 효과들이 본 명세서 내에 포함되어 있다.
도 1은 본 발명의 일 실험예에 따라 본 발명의 한방 조성물의 세포 독성을 평가한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 실험예에 따라 본 발명의 한방 조성물의 아세트알데히드 분해 활성을 평가한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실험예에 따라 본 발명의 한방 조성물의 알코올 분해 활성을 평가한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실험예에 따라 본 발명의 한방 조성물의 항산화 활성을 평가한 결과를 나타낸 그래프이다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
본 명세서에서 사용된 용어는 실시예들을 설명하기 위한 것이며 본 발명을 제한하고자 하는 것은 아니다. 본 명세서에서, '및/또는'은 언급된 아이템들의 각각 및 하나 이상의 모든 조합을 포함한다. 또, 단수형은 문구에서 특별히 언급하지 않는 한 복수형도 포함한다. 명세서에서 사용되는 '포함한다(comprises)' 및/또는 '포함하는(comprising)'은 언급된 구성요소 외에 하나 이상의 다른 구성요소의 존재 또는 추가를 배제하지 않는다. '-' 또는 '내지'를 사용하여 나타낸 수치 범위는 다른 언급이 없는 한 그 앞과 뒤에 기재된 값을 각각 하한과 상한으로서 포함하는 수치 범위를 나타낸다. '약' 또는 '대략'은 그 뒤에 기재된 값 또는 수치 범위의 20% 이내의 값 또는 수치 범위를 의미한다.
또한, 본 발명의 실시예의 구성 요소를 설명하는 데 있어서, 제1, 제2, A, B, (a), (b) 등의 용어를 사용할 수 있다. 이러한 용어는 그 구성 요소를 다른 구성 요소와 구별하기 위한 것일 뿐, 그 용어에 의해 해당 구성 요소의 본질이나 차례 또는 순서 등이 한정되지 않는다.
다른 정의가 없다면, 본 명세서에서 사용되는 모든 용어(기술 및 과학적 용어를 포함)는 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 공통적으로 이해될 수 있는 의미로 사용될 수 있을 것이다. 또 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 용어들은 명백하게 특별히 정의되어 있지 않는 한 이상적으로 또는 과도하게 해석되지 않는다.
그리고 본 발명의 실시예를 설명함에 있어, 관련된 공지 구성 또는 기능에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 실시예에 대한 이해를 방해한다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명은 생략한다.
본 명세서에서, '예방'이란 증상 또는 질환은 아직 없으나, 이러한 증상 또는 질환에 걸릴 수 있는 개체에서 증상 또는 질환의 발생을 억제하는 것을 의미한다.
본 명세서에서, '해소'란 개체에서 (a) 증상 또는 질환의 발전(악화)의 억제, (b) 증상 또는 질환의 경감 또는 개선, 또는 (c) 증상 또는 질환의 제거를 의미한다.
본 명세서에서, '개체'란 본 발명의 조성물을 투여하여 해소될 수 있는 증상을 가진 인간을 포함한 포유동물을 의미한다.
본 발명의 한방 조성물은 숙취의 예방 또는 해소 효능을 갖는 것으로서, 본 명세서에서 '숙취'란 알코올과 알코올의 대사산물인 아세트알데히드, 아세톤 등에 의해 유발되는 구토, 메스꺼움, 현기증, 갈증, 무기력함, 두통, 근육통, 기억단절, 속쓰림 등의 증상을 모두 포함하는 넓은 의미로 사용된다.
본 발명의 한방 조성물은 숙취의 원인 물질인 알코올과 아세트알데히드에 대한 분해 효소의 활성을 촉진하고 숙취 해소에 효능이 있는 것으로 알려진 항산화 활성을 높인다. 또한, 세포 독성이 없고 장기 보존 안정성이 우수하여 인체 자극을 유발할 수 있는 화학 방부제, 첨가제 등의 사용을 피할 수 있기 때문에, 숙취의 예방 또는 해소에 사용하기 적합하다.
본 발명의 한방 조성물은 액상 추출물, 농축 액상 추출물, 동결건조 분말, 분무건조 분말, 정제, 환제, 산제, 과립제, 분말제, 캡슐제 등의 복약 제형으로 제조될 수 있다. 이를 위해 상기 제형은 담체, 희석제, 부형제 및 첨가제 중 하나 이상을 포함할 수 있다.
상기 제형에 더 포함될 수 있는 첨가제로는, 천연 탄수화물, 향미제, 영양제, 비타민, 광물(전해질), 풍미제(합성 풍미제, 천연 풍미제 등), 착색제, 충진제, 팩트산 및 그의 염, 일간산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, PH조절제, 안정화제, 방부제, 산화 방지제, 글리세린, 알콜, 탄산화제 및 과육으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 성분을 들 수 있다.
상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다.
상기 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.
상기 담체, 부형제, 희석제 및 첨가제의 구체적인 예로는 이에 한정하는 것은 아니나, 락토스, 덱스트로즈, 슈크로즈, 솔비톨, 만니톨, 에리스리톨, 전분, 아카시아 고무, 인산칼슘, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 미세결정성 셀룰로즈, 폴리비닐키롤리돈, 셀룰로즈, 폴리비닐피로리돈, 메틸셀룰로즈, 물, 설탕시럽, 메틸 하이드록시 벤조에이트, 프로필하이드록시 벤조에이트, 활석, 스테아트산 마그네슘 및 미네랄 오일로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있다.
본 발명의 한방 조성물은 상기 제형 전체 조성에 대하여 0.005-95 wt%로 포함될 수 있다.
이하, 본 발명의 실시예들을 제조예와 실험예를 통해 상세하게 설명하나, 본 발명의 효과가 하기 실험예에 의해 제한되지 아니함은 자명하다.
제조예: 본 발명의 한방 조성물의 제조
실시예 1
계내금 40 g, 괄루근 40 g, 백편두 50 g, 백자인 50 g, 치자 40 g, 연자육 40 g, 죽여 40 g, 및 시벅턴 60 g의 한약재 원료들을 정제수로 충분히 세척한 후 혼합하였다. 정제수 20 L를 채운 열탕 증류기에 한약재 원료들을 투입하고 약 80-100 ℃로 30시간 동안 가열하여 열수 추출물을 얻었다. 추출에 사용된 한약재들은 여과하여 제거하고, 열수 추출물을 약 90-100 ℃로 가열하면서 약 4-10 ℃의 냉각수관을 이용하여 증류액을 획득하였다. 증류액을 12,000 rpm 및 4 ℃에서 30분간 원심분리하여 고형분을 제거하고 상등액을 취하여 한방 조성물을 제조하였다.
실시예 2
상기 실시예 1에서 가열 후 잔류한 열수 추출물 3 L를 상기 증류액 7 L와 혼합하여 원심분리한 점을 제외하고 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 한방 조성물을 제조하였다.
실시예 3
계내금, 괄루근, 백편두, 백자인, 치자, 연자육, 죽여 및 시벅턴의 한약재 원료들을 정제수로 충분히 세척한 후, 각 원료를 정제수 20 L를 채운 열탕 증류기에 별개로 투입하고 약 80-100 ℃로 30시간 동안 가열하여 각각의 열수 추출물을 얻었다. 추출에 사용된 한약재들은 여과하여 제거하고, 각 열수 추출물을 약 90-100 ℃로 가열하면서 약 4-10 ℃의 냉각수관을 이용하여 각각의 증류액을 획득하였다. 각 증류액을 12,000 rpm 및 4 ℃에서 30분간 원심분리하여 고형분을 제거하고 각각의 상등액을 취하였다. 계내금 상등액 0.4 L, 괄루근 상등액 0.4 L, 백편두 상등액 0.5 L, 백자인 상등액 0.5 L, 치자 상등액 0.4 L, 연자육 상등액 0.4 L, 죽여 상등액 0.4 L 및 시벅턴 상등액 0.6 L을 서로 혼합하여 한방 조성물을 제조하였다.
실험예 1: 세포 독성 평가
본 발명의 한방 조성물의 세포 독성을 다음과 같이 시험하였다.
96-well plate를 사용하여 1% FBS(Fetal bovine serum)를 포함하는 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) 배지에 인체 유래 세포인 인간 각질형성세포(human keratinocyte cell line, HaCaT)를 접종하여 배양하였다. 세포가 배양 접시에 60% 정도 차면 세럼이 들어있지 않은 배지로 바꾸어 16-24시간 배양한 후에 상기 실시예의 조성물을 포함한 배지로 교환해주었다. 48시간 뒤에 MTT(Tetrazolium-based colorimetric) 용액을 10%로 함유한 배지로 교환해주었다. 2-4시간 동안 배양한 뒤 배지를 제거하고 DMSO(Dimethyl sulfoxide)로 배양접시 밑에 남아있는 침전물을 녹여주었다. ELISA leader로 570 nm에서의 흡광도를 측정하고 평균값을 산출하였으며, 그 결과는 도 1과 같았다. 도 1 내지 4에서 D1, D1+E 및 D2는 각각 실시예 1 내지 3의 조성물을 의미한다.
도 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 한방 조성물은 인체 세포에 대한 독성을 나타내지 않는 안전한 추출물임을 알 수 있다.
실험예 2: 아세트알데히드의 분해 활성 평가
본 발명의 한방 조성물의 숙취 예방 및 해소 활성을 평가하는 방법 중 하나로서 아세트알데히드의 분해 능력, 즉 아세트알데히드 탈수소효소(Aldehyde dehydrogenase; ALDH)에 대한 활성을 측정하였다.
실험은 Bostian법에 의거하여 수행하였으며(Biotechnology. Letts. 19(7) : 651), 340 nm 흡광도에서 NADH의 생성속도를 지표로 하였다.
먼저, 1 M Tris-HCl buffer(pH 8.0) 20 ㎕, 20 nm NAD 10 ㎕, 10% 0.33 M 2-Mercaptoehanol 10 ㎕, 3M KCl 10 ㎕, 0.005M 아세트알데히드 10 ㎕, 증류수 110 ㎕를 96 well에 넣어 상온에서 5분간 안정화 시킨 후, 각 well에 상기 실시예 1 내지 3의 시료 20 ㎕를 넣고, 아세트알데히드 탈수소효소(Human S9, ALDH) 10 ㎕를 넣어서 총 200 ㎕가 되도록 조정하여 340 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 30 ℃에서 30분간 반응 후 흡광도 340 nm에서 NADH의 생성량을 측정하였다. 대조군으로서 시료를 첨가하지 않은 것의 흡광도를 동일한 방법으로 측정하였다.
아세트알데히드 탈수소효소(ALDH)의 활성 비율은 하기 식 1을 이용하여 산출하였다.
[식 1]
Figure pat00001
ALDH 활성 비율 산출 결과는 도 2와 같았으며, 실시예 1 내지 3의 한방 조성물 모두 대조군 대비 250% 이상의 ALDH 활성 효과를 나타냈기 때문에 우수한 아세트알데히드 분해 능력이 있음을 알 수 있다.
실험예 3: 알코올의 분해 활성 평가
본 발명의 한방 조성물의 숙취 예방 및 해소 활성을 평가하는 방법 중 하나로서 알코올의 분해 능력, 즉 알코올 탈수소효소(Alcohol dehydrogenase; ADH)에 대한 활성을 측정하였다.
실험은 Blandino법에 의거하여 수행하였으며(Biotechnology. Letts. 19(7) : 651), 340 nm 흡광도에서 NADH의 생성속도를 지표로 하였다.
먼저, 1 M Tris-HCl buffer(pH 8.0) 50㎕, 4 mM NAD 20 ㎕, 10% 에탄올 20 ㎕, 증류수 70 ㎕를 96 well에 넣어 상온에서 5분간 안정화한 후, 각 well에 상기 실시예 1 내지 3의 시료 20 ㎕를 넣고 1분간 안정화한 후, 알코올 탈수소효소(ADH) 20 ㎕를 넣어서 총 200 ㎕가 되도록 조정하여 340 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 30 ℃에서 30분간 반응 후 흡광도 340 nm에서 NADH의 생성량을 측정하였다. 대조군으로서 시료를 첨가하지 않은 것의 흡광도를 동일한 방법으로 측정하였다.
알코올 탈수소효소(ADH)의 활성 비율은 하기 식 2를 이용하여 산출하였다.
[식 2]
Figure pat00002
ADH 활성 비율 산출 결과는 도 3과 같았으며, 실시예 1 내지 3의 한방 조성물 모두 대조군 대비 300% 이상의 ADH 활성 효과를 나타냈기 때문에 우수한 알코올 분해 능력이 있음을 알 수 있다.
실험예 4: 항산화 활성 평가
숙취는 항산화 효과와 연관되어 있음이 보고된 바 있기 때문에(Hong YH. Effects of the herb mixture, DTS20, on oxidative stress and plasma alcoholic metabolites after alcohol consumption in healthy young men. Integr Med Res. 2016 Dec;5(4):309-316.), 본 발명의 한방 조성물의 숙취 예방 및 해소 활성을 평가하는 방법 중 하나로서 항산화 활성, 즉 산화질소(NO)의 소거능을 시험하였다.
10% FBS(fetal bovine serum)과 100 unit/ml의 페니실린 및 스트렙토마이신이 첨가된 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) 배지에 Raw 264.7 대식세포를 1×106 cell/ml의 농도로 96-well plate에 접종하고, 37 ℃, 5% CO2에서 하룻밤 동안 배양하였다. 다음날 배지를 제거하고 새로운 배지로 교환한 후, 상기 실시예 1 내지 3의 조성물을 50 μl씩 세포에 처리하였다. 30분간 CO2 인큐베이터에서 배양 후 50 μl(1 μg/ml)의 LPS(lipopolysaccharide)를 함유한 배지를 처리하고 인큐베이터(5% CO2, 37 ℃)에서 24시간 동안 배양하였다. 대조군으로서 PBS(phosphate buffered saline)를 사용하였다. Griess reagent I (NED solution)과 Griess reagent II (Sulfaniliamide solution)을 동량으로 혼합하여 넣은 후, 10분간 반응시킨 다음 microplate reader로 540 nm에서의 광밀도(optical density)를 측정하였다. 산화질소(NO)의 농도는 아질산나트륨 (Sodium Nitrate)의 표준곡선(0-100 μM)을 이용하여 계산하였다.
도 4에 나타난 바와 같이, 본 발명의 한방 조성물들은 LPS에 의해 촉진된 NO의 생성량을 30-40% 이상 감소시키는 우수한 항산화 활성을 갖기 때문에 숙취 예방 및 해소에 효과가 있음을 알 수 있다.
실험예 5: 장기 보존 안정성 평가
본 발명의 한방 조성물의 장기 보존 안정성을 평가하기 위해 다음과 같이 시험하였다.
상기 실시예의 조성물 0.1 ml을 Letheen agar에 도말하고 30 ℃에서 48시간 동안 방치하여 세균 번식 여부를 확인하였고, 상기 실시예의 조성물 0.1 ml을 Sabouraud Dextrose agar에 도말하고 25 ℃에서 72시간 동안 방치하여 진균 번식 여부를 확인하였다. 상기 실시예 조성물의 제조 직후와 방치 이후의 세균 및 진균의 존재를 확인하였다.
실험 결과, 상기 실시예 1 내지 3의 조성물들은 제조 직후 뿐만 아니라 방치 이후에도 세균과 진균이 번식하지 않았다. 이와 같이, 본 발명의 한방 조성물은 별도의 방부제 없이 상온에서 장기간 보관하여도 미생물이 번식하지 않아 장기 보관 안정성이 우수하기 때문에, 인체 자극을 유발할 수 있는 화학 방부제, 첨가제 등을 생략할 수 있다.
이상에서 본 발명의 실시예를 중심으로 설명하였으나 이는 단지 예시일 뿐 본 발명을 한정하는 것이 아니며, 본 발명이 속하는 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 실시예의 본질적인 특성을 벗어나지 않는 범위에서 이상에 예시되지 않은 여러 가지의 변형과 응용이 가능함을 알 수 있을 것이다. 예를 들어, 본 발명의 실시예에 구체적으로 나타난 각 구성 요소는 변형하여 실시할 수 있다. 그리고 이러한 변형과 응용에 관계된 차이점들은 첨부된 청구 범위에서 규정하는 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (10)

  1. 계내금 3-5 중량부, 괄루근 3-5 중량부, 백편두 4-6 중량부, 백자인 4-6 중량부, 치자 3-5 중량부, 연자육 3-5 중량부, 죽여 3-5 중량부 및 시벅턴 5-7 중량부를 포함하는 혼합물의 열수 추출물의 증류액을 포함하는
    숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물.
  2. 제1 항에 있어서,
    상기 열수 추출물을, 상기 증류액 70-90 중량부 대비 10-30 중량부로 더 포함하는
    숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물.
  3. 계내금 열수 추출물의 증류액 3-5 중량부, 괄루근 열수 추출물의 증류액 3-5 중량부, 백편두 열수 추출물의 증류액 4-6 중량부, 백자인 열수 추출물의 증류액 4-6 중량부, 치자 열수 추출물의 증류액 3-5 중량부, 연자육 열수 추출물의 증류액 3-5 중량부, 죽여 열수 추출물의 증류액 3-5 중량부 및 시벅턴 열수 추출물의 증류액 5-7 중량부를 포함하는
    숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물.
  4. (a) 계내금 3-5 중량부, 괄루근 3-5 중량부, 백편두 4-6 중량부, 백자인 4-6 중량부, 치자 3-5 중량부, 연자육 3-5 중량부, 죽여 3-5 중량부 및 시벅턴 5-7 중량부를 포함하는 혼합물을 열수 추출하여 추출물을 얻는 단계; 및
    (b) 상기 추출물을 가열하여 생성된 증기를 냉각시켜 증류액을 수득하는 단계를 포함하는
    숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물의 제조 방법.
  5. 제4 항에 있어서,
    (c) 상기 가열 후 잔류한 추출물 10-30 중량부를 상기 증류액 70-90 중량부에 혼합하는 단계를 더 포함하는
    숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물의 제조 방법.
  6. 제4 항에 있어서,
    상기 (a) 단계는,
    상기 계내금, 괄루근, 백편두, 백자인, 치자, 연자육, 죽여 및 시벅턴을 정제수에 투입하고 추출기를 사용하여 80-100 ℃로 8-48시간 동안 가열하는 단계; 및
    상기 가열된 것을 여과하여 상기 추출물을 얻는 단계를 포함하는
    숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물의 제조 방법.
  7. 제4 항에 있어서,
    상기 (b) 단계는,
    상기 추출물을 90-100 ℃로 가열하여 생성된 증기를 4-10 ℃의 냉각수관으로 액화시키는 단계; 및
    상기 액화된 것을 8,000-14,000 rpm 및 2-8 ℃에서 10-50분간 원심분리하여 고형분을 제거하고 상등액을 취하여 상기 증류액을 수득하는 단계를 포함하는
    숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물의 제조 방법.
  8. (a) 계내금, 괄루근, 백편두, 백자인, 치자, 연자육, 죽여 및 시벅턴을 각각 열수 추출하여 각각의 추출물을 얻는 단계;
    (b) 상기 각 추출물을 가열하여 생성된 증기를 냉각시켜 각각의 증류액을 수득하는 단계; 및
    (c) 상기 계내금의 증류액 3-5 중량부, 괄루근의 증류액 3-5 중량부, 백편두의 증류액 4-6 중량부, 백자인의 증류액 4-6 중량부, 치자의 증류액 3-5 중량부, 연자육의 증류액 3-5 중량부, 죽여의 증류액 3-5 중량부 및 시벅턴의 증류액 5-7 중량부를 서로 혼합하는 단계를 포함하는
    숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물의 제조 방법.
  9. 제8 항에 있어서,
    상기 (a) 단계는,
    상기 계내금, 괄루근, 백편두, 백자인, 치자, 연자육, 죽여 및 시벅턴 각각을 정제수에 투입하고 추출기를 사용하여 80-100 ℃로 8-48시간 동안 가열하는 단계; 및
    상기 가열된 것을 여과하여 상기 각 추출물을 얻는 단계를 포함하는
    숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물의 제조 방법.
  10. 제8 항에 있어서,
    상기 (b) 단계는,
    상기 각 추출물을 90-100 ℃로 가열하여 생성된 증기를 4-10 ℃의 냉각수관으로 액화시키는 단계; 및
    상기 액화된 것을 8,000-14,000 rpm 및 2-8 ℃에서 10-50분간 원심분리하여 고형분을 제거하고 상등액을 취하여 상기 각 증류액을 수득하는 단계를 포함하는
    숙취 예방 또는 해소용 한방 조성물의 제조 방법.
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