KR20220004091A - 온열 손상 치료에서의 로도코커스 루버 생성물의 용도 - Google Patents

온열 손상 치료에서의 로도코커스 루버 생성물의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20220004091A
KR20220004091A KR1020217037350A KR20217037350A KR20220004091A KR 20220004091 A KR20220004091 A KR 20220004091A KR 1020217037350 A KR1020217037350 A KR 1020217037350A KR 20217037350 A KR20217037350 A KR 20217037350A KR 20220004091 A KR20220004091 A KR 20220004091A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
cell wall
rhodococcus
rhodococcus louver
weeks
product
Prior art date
Application number
KR1020217037350A
Other languages
English (en)
Inventor
보 가이
춘옌 도우
이 장
구오잉 장
Original Assignee
랴오닝 그레이티스트 바이오-파마슈티컬 컴퍼니 리미티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 랴오닝 그레이티스트 바이오-파마슈티컬 컴퍼니 리미티드 filed Critical 랴오닝 그레이티스트 바이오-파마슈티컬 컴퍼니 리미티드
Publication of KR20220004091A publication Critical patent/KR20220004091A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/365—Nocardia
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)

Abstract

본 발명은 온열 손상의 치료용 약물의 제조에서 로도코커스 루버의 세포벽 또는 세포벽 골격의 용도에 관한 것이다. 상기 온열 손상은 화상, 열탕화상(scald) 및 화학적 화상을 포함한다. 로도코커스 루버 생성물을 대상에 적용하는 것은 온열 손상에 우수한 치료 효과가 있고 부작용이 없다.

Description

온열 손상 치료에서의 로도코커스 루버 생성물의 용도
본 발명은 2019년 4월 25일에 출원된 특허 출원(출원 번호 CN 201910333119.3)을 우선권 주장하고, 이는 본원에 참조로 혼입된다.
본 발명은 의학, 미생물학 및 생물약학 분야에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 로도코커스 루버(Rhodococcus ruber) 및 이의 세포벽 성분, 제형, 약학 조성물 및 제조 방법, 및 온열 손상의 치료용 약제/의료 기기에서 로도코커스 루버 세포벽 성분의 용도에 관한 것이다.
로도코커스 루버는 그램-양성 박테리아이다. 일반적으로, 콜로니는 주황색-황색 또는 주황색-적색이고, 모양이 둥글고; 콜로니의 크기는 약 1 내지 2 mm이고; 세포 형태는 구형 또는 짧은 막대 모양이고; 이것은 일차 분지 균사체를 형성할 수 있고; 편모가 없다. 로도코커스 루버는 호기성 및 화학적 종속영양성이다.
현재, 연구자들은 로도코커스 루버에 대한 전체 유전자 서열분석을 수행하였다. 예를 들어, 판 신(Fan Xin) 등은 로도코커스 루버 SD3 균주의 전체 게놈을 서열분석하고, 생물정보학적 분석을 수행하였다. SD3 균주의 전체 게놈 길이는 약 5.37 Mb이고, GC 함량은 약 70.63%이고, 젠뱅크(GenBank) 수탁번호는 CP029146이다(문헌[Fan Xin, Whole-genome sequencing and expression analysis of heat shocking protein DnaK from Rhodococcus ruber SD3, Genomics and Applied Biology, January 2019]).
로도코커스 속은 유기 물질에 대한 강한 내성과 넓은 분해 스펙트럼으로 인해 다양한 생활 환경에 적응할 수 있다. 따라서, 로도코커스는 오염 정화, 유기 화합물 분해, 하수 처리 등의 분야에서 널리 사용된다. 현재, 로도코커스 루버의 주요 적용 분야는 환경 관리이다(CN 108862590 A, CN 107151635 A, CN 102250796 A, CN 1519312 A, CN 103627653 A, CN 101033454 A, CN 108130288 A, CN 104830738 A, CN 101619299 A, CN 103509833 A, CN 106434466 A, CN 101580808 A, CN 102604875 A, CN 103160491 A, CN 106591168 A, CN 106591172 A 및 CN 105820982 A 참고).
CN 109576180 A는 중국 광저우 판위 디스트릭트 근교 교외의 붉은 토양에서 선별한 박테리아 RDC-01을 개시한다. 16S rRNA 유전자 염기서열 분석 및 배양 특성 동정 결과, 균주는 로도코커스 루버로 동정되었다. 불활성화 후, 면역 보조제(immune adjuvant)로서 박테리아를 동물용 불활성화 백신에 첨가하였고, 동물의 항체 생산을 촉진할 수 있는 것으로 밝혀졌다.
외상 수술 분야에서, 항-감염 치료 원리는 온열 손상, 특히 화상 또는 열탕화상(scald)에 의해 야기되는 상처에 가장 빈번하게 사용된다. 피부 온열 손상의 치유는 다양한 사이토카인, 정맥 내피 세포, 섬유아세포, 각질세포 및 기타 다양한 인자들에 영향을 받는 복합적인 생물학적 과정이다.
그러나, 아직까지 로도코커스 루버를 인간의 의료 분야 적용에 사용한 사례는 보고된 바 없다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 단리된 로도코커스 루버가 제공된다.
본 발명의 일부 특정 양태에 따라, 2019년 3월 22일자로 중국 일반 미생물 균주 수집 센터(CGMCC)(중국 베이징 차오양 디스트릭트 웨스트 베이첸 로드 1-3, 중국 과학원 미생물학 연구소, 우편번호: 100101)에 수탁번호 CGMCC 17431로 기탁된 단리된 로도코커스 루버가 제공된다. 기탁은 특허 절차상 미생물기탁의 국제 승인에 관한 부다페스트 조약의 요건을 충족한다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 로도코커스 루버 및 이의 유도 생성물이 제공된다. 유도 생성물은 로도코커스 루버로부터 유래되고, 로도코커스 루버의 성분을 포함한다(예컨대, 단백질, 핵산, 지질, 세포벽 및 이의 성분, 탄수화물 또는 대사산물).
특정 양태에서, 단리된 로도코커스 루버 세포벽이 제공된다.
특정 양태에서, 단리된 로도코커스 루버 세포벽이 제공되고, 로도코커스 루버는 CGMCC 수탁번호 17431의 균주를 지칭한다.
특정 양태에서, 단리된 로도코커스 루버 세포벽 골격이 제공된다.
특정 양태에서, 단리된 로도코커스 루버 세포벽 골격이 제공되고, 로도코커스 루버는 CGMCC 수탁번호 17431의 균주를 지칭한다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 본 발명에 따른 로도코커스 루버 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격을 포함하는 약학 조성물이 제공된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 로도코커스 루버의 파쇄에 의해 수득된 생성물을 포함하는, 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물이 제공된다.
본 발명의 일부 다른 양태에 따라, 로도코커스 루버의 파쇄 및 정제(지질, 핵산 및 단백질의 제거)에 의해 수득된 생성물을 포함하는, 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물이 제공된다.
본 발명의 일부 다른 양태에 따라, 로도코커스 루버 세포벽을 포함하는, 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물이 제공된다.
본 발명의 일부 다른 양태에 따라, 로도코커스 루버 세포벽 골격을 포함하는, 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물이 제공된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 로도코커스 루버의 파쇄에 의해 수득된 생성물을 포함하는 약학 조성물 또는 의료 기기가 제공된다.
본 발명의 일부 다른 양태에 따라, 로도코커스 루버의 파쇄 및 정제(지질 및/또는 핵산 및/또는 단백질의 제거)에 의해 수득된 생성물을 포함하는 약학 조성물 또는 의료 기기가 제공된다.
본 발명의 일부 다른 양태에 따라, 로도코커스 루버 세포벽을 포함하는 약학 조성물 또는 의료 기기가 제공된다.
본 발명의 일부 다른 양태에 따라, 로도코커스 루버 세포벽 골격을 포함하는 약학 조성물 또는 의료 기기가 제공된다.
본 발명의 일부 다른 양태에 따라, 전술한 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물을 포함하는 약학 조성물 또는 의료 기기가 제공된다.
특정 양태에서, 약학 조성물은 약학적으로 허용되는 부형제를 추가로 포함한다.
약학 조성물의 일부 양태에서, 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물은 1 중량부이고, 약학적으로 허용되는 부형제는 100 내지 1,000 중량부(100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1,000 중량부), 바람직하게는 200 내지 500 중량부, 보다 바람직하게는 200 내지 300 중량부(예를 들어, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300 중량부, 및 임의의 상기 2개의 수 사이의 범위 내의 임의의 값)이다.
약학 조성물의 일부 다른 양태에서, 로도코커스 루버 세포벽은 1 중량부이고, 약학적으로 허용되는 부형제는 100 내지 1,000 중량부(100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1,000 중량부), 바람직하게는 200 내지 500 중량부, 보다 바람직하게는 200 내지 300 중량부(예를 들어, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300 중량부, 및 임의의 상기 2개의 수 사이의 범위 내의 임의의 값)이다.
상기 약학 조성물의 또 다른 양태에서, 로도코커스 루버 세포벽 골격은 1 중량부이고, 약학적으로 허용가능한 부형제는 100 내지 1,000 중량부(100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1,000 중량부), 바람직하게는 200 내지 500 중량부, 보다 바람직하게는 200 내지 300 중량부(예를 들어, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300 중량부, 및 임의의 상기 2개의 수 사이의 범위 내의 임의의 값)이다.
일부 양태에서, 약학 조성물은 액체(액체 제형)로서 제조될 수 있다.
일부 다른 양태에서, 약학 조성물은 고체(분말 제형 또는 동결건조 제형)로서 제조될 수 있다.
당업자는 본 발명의 약학 조성물의 경우, 액상 제형과 분말 제형(또는 동결건조 제형)이 서로 전환될 수 있고, 차이는 단지 수분 함량에만 있음을 이해한다. 분말 제형(또는 동결건조 제형)은 액체 제형으로부터 대부분의 또는 모든 물을 제거함으로써 수득된다. 액체 제형은 분말 제형(또는 동결건조 제형)을 용해(또는 재구성)시킴으로써 수득된다.
일부 양태에서, 약제 또는 약학 조성물은 연고, 크림, 유화액, 현탁액, 페이스트, 젤, 로션, 팅크제(tincture), 오일, 정제, 에어로졸, 스프레이, 도찰제(liniment), 분말 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 투여 형태로 제조되되, 상기 연고는 연질 연고, 고약 및 크림으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 양태에서, 투여 형태는 병반에 적용하기에 적합한 형태이다. 예를 들어, 스프레이, 연고, 로션, 드레싱 및 패치이다.
일부 양태에서, 약학적으로 허용되는 부형제는 비제한적으로 충전제, 안정화제, 향미제, 붕해제, 결합제 및 윤활제에 관한 것이다.
일부 양태에서, 약학적으로 허용되는 부형제는 예컨대 비제한적으로 덱스트란, 락토스, 미세결정질 셀룰로스, 트레할로스, 글리신, 자일리톨, 나트륨 카복시메틸 셀룰로스, 에리트리톨, 젤라틴, 마그네슘 스테아레이트, 추진제, 습윤제, 용매, 가용화제, 유화제, 산화방지제, pH 조절제 및 보존제이다.
일부 양태에서, 약학적으로 허용되는 부형제의 비제한적인 예는 또한 백색 바셀린, 카보머, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 나트륨 하이드록시메틸 셀룰로스, 키토산, 수크랄페이트 키토산, 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐 알코올, 나트륨 히알루로네이트, 다이메틸 에터, 테트라플루오로에탄, 하이드로플루오로알칸, 글리세린, 프로필렌 글리콜, 탈이온수, 주사용수, 증류수, 에탄올, 헥사데칸올, 옥타데칸올, p-아미노벤조산, 아세트아미드, 이소프로판올, 트윈, 폴리옥시에틸 수소화 피마자유, 스테아르산, 글리세릴 모노스테아레이트, 트라이글리세롤 모노스테아레이트, 수크로스 지방산 에스터, 수크로스 에스터, 수크로스 아세테이트 이소부티레이트, 소르비탄 트라이스테아레이트, 이소프로필 미리스테이트, 콜레스테롤, 스쿠알렌, 스쿠알란, n-부탄올, 에틸렌 글리콜, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 폴리글리세롤 에스터, 설파이트, 시스테인, 다이-tert-부틸 하이드록시톨루엔, 칼륨 소르베이트, 포스페이트 완충 용액, 트라이에탄올아민, 나트륨 하이드록사이드, 에틸렌다이아민, 라우릴아민, 나트륨 바이카보네이트, 염산, 니파인, 티머로살, 클로로크레졸, 트라이클로로부탄올, 벤조산 및 이들의 나트륨 염을 포함한다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 하기 단계를 포함하거나 이들로 이루어진, 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물의 제조 방법이 제공된다:
1) 로도코커스 루버를 제공하는 단계;
2) 임의적으로, 상기 로도코커스 루버를 배양하는 단계;
3) 임의적으로, 배양된 로도코커스 루버를 수집하는 단계;
4) 상기 배양된 로도코커스 루버를 파쇄하여 파쇄된 생성물을 수득하는 단계;
5.1) 임의적으로, 상기 파쇄된 생성물로부터 지질을 제거하는 단계;
5.2) 임의적으로, 상기 파쇄된 생성물로부터 핵산을 제거하는 단계;
5.3) 임의적으로, 상기 파쇄된 생성물로부터 단백질을 제거하는 단계;
5.4) 정제된 생성물을 수득하는 단계;
6) 임의적으로, 상기 정제된 생성물로부터 물을 제거하는 단계, 바람직하게는 동결건조에 의해 상기 정제된 생성물로부터 물을 제거하는 단계;
7) 임의적으로, 분취(aliquoting)를 수행하는 단계;
8) 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물을 수확하는 단계
(이때, 단계 5.1), 5.2) 및 5.3)은 순서가 상호교환되거나 병렬로 수행되고; 단계 6) 및 단계 7)은 순서가 상호교환되거나 병렬로 수행된다).
임의적으로, 필요에 따라, 단계 5)는 (예를 들어, 비이온성 계면활성제를 사용하여) 세포막을 제거하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
로도코커스 루버의 배양은 특정 배양 매질 및 배양 파라미터로 제한되지 않고, 당업자는 배양을 위한 주지되고 적합한 방법을 사용할 수 있고, 제조 규모에 따라서 배양 접시, 배양 플라스크 및 발효기를 사용할 수 있다.
로도코커스 루버의 파쇄의 경우, 목적은 세포 내에 존재하는 물질을 제거하는 것이므로, 초음파처리, 리소자임 및 기타 기술이 사용될 수 있다. 당업자는 그램-양성 박테리아의 파쇄에 적합한 임의의 공지된 또는 미래의 방법이 본 발명의 기술적 해결에 적합하다는 것을 이해한다.
당업자는, 후속 적용에 영향을 미치는 인자를 제조 단계에 도입하지 않도록, 활성 성분(세포벽 및 이의 성분)의 후속 적용(예컨대 외부 적용)에 따라 배양, 파쇄, 분리, 수집, 불순물 제거 및 분취를 위한 특정 매개변수 및 장비를 조정하는 능력을 갖는다.
일부 양태에서, 예컨대 유기 용매는 파쇄된 생성물로부터 지질을 제거하는 데 사용된다. 일부 양태에서, 예컨대 뉴클레아제는 파쇄된 생성물로부터 DNA 및 RNA를 제거하는 데 사용된다. 일부 양태에서, 예컨대 하이드롤라제는 파쇄된 생성물에서 단백질을 분해하는 데 사용된다. 일부 양태에서, 예컨대 계면활성제는 파쇄된 생성물로부터 세포막을 제거하는 데 사용된다.
일부 양태에서, 파쇄의 평균 입자 크기는 10 내지 1,000 nm이고; 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190 nm ± 10 nm가 언급될 수 있고, 상기 값 중 임의의 2개 사이의 범위가 언급할 수 있다. 입자 크기를 측정하기 위한 많은 방법이 존재한다(문헌[Hu Songqing et al., Modern technology of particle size measurement, Modern Chemical Industry, 2002, 22:1]).
일부 특정 양태에서, 파쇄의 평균 입자 크기는 10 내지 800 nm이다.
일부 다른 특정 양태에서, 파쇄의 평균 입자 크기는 10 내지 500 nm이다.
일부 특정 양태에서, 분취는 용기 내로의 분취 또는 고체 지지체 상으로의 분취를 지칭한다. 용기는 바이알, 튜브, 패키지, 백(bag), 플레이트, 앰풀, 주사 장치, 알루미늄-플라스틱 패키징, 드레싱 및 캡슐로 이루어진 군으로부터 선택된다.
예를 들어, 특정 양태에서, 분취는 바이알/앰풀로의 분취를 지칭한다. 용매는, 사용 직전에 바이알/앰풀에 첨가된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 본 발명의 제조 방법에 의해 수득된, 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물이 제공된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 본 발명의 제조 방법에 의해 수득된, 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물을 포함하는 약학 조성물 또는 의료 기기가 제공된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 온열 손상 치료에 사용되는 단리된 로도코커스 루버 세포벽이 제공된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 온열 손상 치료에 사용되는 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물이 제공된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 온열 손상 치료에 사용되는 약학 조성물 또는 의료 기기가 제공된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 온열 손상 치료에 있어서의 본 발명에 따른 로도코커스 루버 세포벽의 용도가 제공된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 온열 손상의 치료용 약제/의료 기기 제조에 있어서의 본 발명에 따른 로도코커스 루버 세포벽의 용도가 제공된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 온열 손상 치료에 있어서의 본 발명에 따른 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물의 용도가 제공되고; 온열 손상의 치료용 약제/의료 기기의 제조에 있어서의 본 발명에 따른 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물의 용도가 제공된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 온열 손상 치료에 있어서의 본 발명에 따른 약학 조성물의 용도가 제공된다.
일부 양태에서, 온열 손상은 화상, 열탕화상 및 화학적 화상으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
일부 양태에서, 온열 손상은 표피, 진피, 점막 및 피하 조직으로 이루어진 군으로부터 선택되는 조직과 관련될 수 있다.
일부 양태에서, 온열 손상은 제1, 제2(표재성(superficial) 또는 심재성(deep)), 또는 제3 도의 손상일 수 있다.
본원에서, 온열 손상의 중증도는 제1 도, 표재성 제2 도, 심재성 제2 도 및 제 3도로 구분되는데, 이는 하기 4개 수준에 의한 3개의 도의 법칙에 따른다:
- 제1 도: 표피만 손상됨(국소적 홍화 및 부기);
- 제2 도: 진피 깊숙이 위치함(국소적 수포);
- 표재성 제2 도: 표피 배 층(germinal layer) 및 진피 유두 층(papillary layer)만 손상됨;
- 심재성 제2 도: 진피가 손상됨(피부 부속기관은 유지);
- 제3 도: 피부의 모든 층이 손상되어 심지어 피하 조직에 이르고, 근육 및 뼈 등까지 깊음.
특정 양태에서, 본 발명에 따른 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물/로도코커스 루버 세포벽/약학 조성물은 특히 심재성 제2 도 온열 손상 치료에 사용된다.
본 발명의 일부 양태에 따라, 약제(또는 의료 기기)의 제조에 있어서의 하기로부터 선택되는 어느 하나의 용도가 제공된다:
- 본 발명에 따른 로도코커스 루버,
- 본 발명에 따른 단리된 로도코커스 루버 세포벽,
- 본 발명에 따른 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물,
- 본 발명에 따른 약학 조성물.
일부 특정 양태에서, 약제는 온열 손상의 치료에 사용된다.
일부 특정 양태에서, 의료 기기(예컨대 드레싱, 패치, 붕대 및 필름 등)는 온열 손상 치료에 사용된다.
본 발명의 양태에 따라, 또한, 대상(병반)을 치료 유효량의 하기로부터 선택되는 어느 하나에 노출시키는 단계를 포함하는 온열 손상의 치료 방법이 제공된다:
- 본 발명에 따른 단리된 로도코커스 루버 세포벽,
- 본 발명에 따른 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물,
- 본 발명에 따른 약학 조성물,
- 본 발명에 따른 의료 기기.
일부 특정 양태에서, 약제(또는 의료 기기)는 병반의 면적 및 중증도에 따라 상이한 용량으로 상기 병반에 투여된다. 이의 예는 비제한적으로 하기와 같다:
- 로도코커스 루버 세포벽 골격을 포함하는 약제를 적용함; 또는
- 병반을 로도코커스 루버 세포벽 골격으로 함침된 패치(또는 필름 또는 거즈)로 덮음;
- 로도코커스 루버 세포벽 골격을 포함하는 동결건조된 분말을 병반에 직접 적용함; 또는
- 로도코커스 루버 세포벽 골격을 포함하는 연고/크림을 병반에 적용함.
약학 용액, 연고 및 분말이 대안으로 병반 상으로 적용될 수 있다.
각각의 투여의 용량에 있어서, 상이한 용량, 통상적으로 5 내지 800 μg/단위 용량/각각의 투여, 바람직하게는 10 내지 600 μg/단위 용량/각각의 투여로 환자의 병반의 면적 크기 및 중증도에 따라 사용된다.
일부 특정 양태에서, 평균 접촉 기간은 2일 내지 4개월 또는 그 이상 동안 지속된다. 구체적으로, 예를 들어, 2, 4, 6, 8, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60일; 다른 예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18주 또는 그 이상이 언급될 수 있다. 특정 양태에서, 활성 성분은 3 내지 5주 동안 대상에게 투여된다.
특정 양태에서, 투여는 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 빈도로 수행된다: 1일에 1 내지 3회, 2일에 1 내지 6회, 3일에 1 내지 9회, 1주에 1 내지 14회, 1개월에 1 내지 60회의 투여. 일부 양태에서, 활성 성분은 1일에 2회, 1일에 1회, 또는 2일에 1회 투여된다.
각각의 투여량에 있어서, 대상의 특정 병태에 따라 상이한 용량이 적용되고, 일반적으로 1 내지 1,000 μg/단위 용량/각각의 투여량; 구체적으로, 예컨대 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200 μg/단위 용량/각각의 투여 및 상기 값의 임의의 2개 사이의 범위이다.
일부 특정 양태에서, 본 발명에 따른 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물, 약학 조성물 또는 의료 기기는 병반 부위와 수분 내지 수시간, 예컨대 30분 내지 24시간 동안 접촉된다.
일부 특정 양태에서, 본 발명에 따른 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물, 약학 조성물 또는 의료 기기는 병반 부위와 1일 1회, 1일 2회 또는 2일 1회의 빈도로 병반과 접촉한다.
일부 양태에서, 전술한 치료 방법은 피부/점막 구조를 갖는 임의의 동물, 예컨대 비제한적으로 인간, 비-인간 영장류, 돼지, 소, 말, 양, 개, 고양이, 쥐 및 나비에 적용가능하다.
일부 특정 양태에서, 대상은 인간 이외의 동물, 예컨대 농장 동물, 반려 동물, 사역 동물, 관상용 동물 및 생산 동물이다.
특정 양태에서, 대상은 인간이다.
일부 특정 양태에서, 약제 또는 의료 기기의 유일한 치료(또는 예방) 활성 성분은, 특히 로도코커스 루버의 성분(예컨대, 단백질, 핵산, 지질, 세포벽 및 이의 성분, 탄수화물 또는 대사산물)을 포함하는, 로도코커스 루버로부터 유래된 생성물이고; 구체적으로, 로도코커스 루버 세포벽(더욱 바람직하게는 로도코커스 루버 세포벽 골격 또는 이의 성분)을 포함하는 생성물이다.
도 1은 로도코커스 루버의 콜로니 형태를 도시한 것이다.
도 2는 16S rRNA의 동정 결과를 도시한 것이다.
"단리"는 원래 성장 환경으로부터의 본 발명의 로도코커스 루버의 분리를 지칭한다.
당업자는 그램-양성 박테리아와 그램-음성 박테리아의 세포벽 구조가 상이함을 알고 있다. 구체적으로, 그램-양성 박테리아의 세포벽은 약 90% 펩티도글리칸과 약 10% 테이코산(통상적으로 당 에스터 또는 아미노산 에스터의 형태로 존재하는 알코올과 인산 분자에 의해 형성되는 중합체)을 포함하여 더 두껍다(통상적으로 20 내지 80 nm). 펩티도글리칸 층은 심지어 20개 층으로서 밀집되어 있다. 그러나, 그램-음성 박테리아의 세포벽은 그램-양성 박테리아보다 훨씬 얇고, 구조가 더 복잡하여 외막과 펩티도글리칸 층(통상적으로 2 내지 3 nm)으로 구분된다.
펩티도글리칸 층은 박테리아 세포벽의 독특한 성분이고, 헤테로폴리사카라이드의 유도체이다. 각각의 펩티도글리칸 단량체는 하기 3개의 부분을 포함한다: 당 단위(예를 들어, 2개 이상의 당 분자가 글리코사이드 결합에 의해 연결되어 펩티도글리칸의 프레임워크를 형성함), 펩티드 꼬리(N-아세틸무람산 분자에 연결된, 여러 아미노산을 연결함으로써 형성된 짧은 펩티드 쇄) 및 펩티드 가교(인접한 "펩티드 꼬리"를 가교결합하여 고강도 네트워크 구조를 형성함). 상이한 박테리아는 상이한 펩티드 가교, 펩티드 꼬리 및 가교결합 방식을 갖는다.
단리된 로도코커스 루버 세포벽 골격
본 발명에서, "단리된 로도코커스 루버 세포벽"은 완전한 세포벽 또는 불완전한 세포벽(예를 들어, 파쇄되거나 부분적으로 분해됨)으로 해석될 수 있다. 본 발명의 교시 하에, 당업자는 목적 활성을 나타내는 성분이 로도코커스 루버 세포벽(예를 들어, 세포벽 자체 또는 이의 성분)으로부터 유래함을 이해할 것이다. 따라서, 완전한 세포벽, 파쇄된 세포벽, 세포벽의 불완전 분해 생성물, 세포벽 성분, 세포벽 추출물 및 기타 다양한 형태가 임상 적용에 사용될 수 있고, 이들은 모두 본 발명의 범주에 포함된다.
세포벽 골격
세포벽의 주요 구조를 구성하는 성분이지만; 단순히 세포벽에서 가교결합된 네트워크형 실체를 나타내는 것으로 해석될 수 없고, 당업자는 가교결합된 네트워크형 실체 상으로 흡착되고, 이에 결합되고, 이에 의해 운반되는 다른 세포벽 성분이 제외되지 않음을 이해한다.
로도코커스 루버
본 발명의 양태에 사용된 로도코커스 루버는 로도코커스 속의 로도코커스 루버 종을 지칭하고, 특정 세포 균주로 제한되지 않는다.
비제한적인 예는 TOY7 균주(농업 환경 미생물 배양 컬렉션, 난징 농업 대학), CGMCC 4795, DSM 43338, CCTCC 2012035, CGMCC 16640 및 CGMCC 17431을 포함한다.
로도코커스 루버의 동정
공지된 또는 미래의 미생물 동정 기술에 따라, 당업자는 박테리아의 균주에 대한 분류학적 동정을 수행할 수 있다. 예를 들어, 이용가능한 동정 기술은 형태학, 생리학 및 생화학적 특징, 16S rRNA 등을 포함한다. 당업자는 과학 및 기술의 발전에 따라 동정 기술이 상이한 방법을 포함함을 이해한다. 초기에는, 형태학적 및 생화학적 동정 방법이 주로 사용되었으나, 이러한 방법의 신뢰도는 높지 않다. 서열분석 기술의 도래 후, 당업자는 보다 신뢰할 수 있는 방식으로 박테리아 균주를 동정할 수 있다. 예를 들어, 16S rRNA의 DNA 서열이 97% 초과(포함)의 동일성을 갖는 것으로 동정될 때, 2개 박테리아는 동일한 종에 속하는 것으로 간주될 것이다(문헌[Hua Gougen et al., The taxonomy and application of Rhodococcus, Microbiology China, 2003: 30 (4)]). 로도코커스 루버에 관하여, 균주의 국제(또는 국가) 수집 당국에 기탁된 공지된 균주가 모델 균주로서 사용되고, 동정될 균주는 모델 균주와 비교된다.
투여 형태
본 발명의 약제 또는 약학 조성물 또는 활성 성분 또는 생성물은 비제한적으로 하기 형태로 제형화될 수 있다: 연고, 크림, 고약, 젤, 정제, 로션, 팅크제, 도찰제, 오일, 페이스트, 가루약, 분말, 스프레이, 에어로졸, 좌제, 패치, 현탁액, 경구 헹굼액, 협측 정제, 드레싱, 패치, 붕대, 필름 및 거즈.
제형 단위
본 발명의 약제 또는 약학 조성물 또는 활성 성분 또는 생성물은 제형 단위(또는 단위 용량)의 형태로 제형화될 수 있다.
일부 양태에서, 약제(또는 제형, 치료제 또는 의료 기기)의 단위 용량은 다음을 포함한다:
- 1 내지 1,000 μg의 로도코커스 루버 생성물; 또는
- 1 내지 1,000 μg의 로도코커스 루버 세포벽; 또는
- 1 내지 1,000 μg의 로도코커스 루버 세포벽 골격.
단위 용량의 특정 예는 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500 μg ± 10% 및 상기 값 중 임의의 2개 사이의 범위이다.
동물, 인간, 세포, 조직, 기관 또는 생물학적 샘플에 적용될 때 "투여하는", "투약하는", "제공하는" 및 "치료하는"은 동물, 인간, 세포, 조직, 기관 또는 생물학적 샘플과의 약제 또는 의료 기기의 접촉을 지칭한다.
"치료하다"는 치료될 대상(또는 이의 집단)에서 임상적으로 측정가능한 정도까지 하나 이상의 질병 증상을 완화(경감, 지연, 개선, 치유)하기 위하여 내용 또는 외용 약제(치료제, 활성 성분 또는 조성물)(예컨대, 본 발명에 따른 로도코커스 루버 세포벽 또는 약학 조성물) 또는 의료 기기를 대상에게 투여하는 것을 의미하고, 이때 대상은 하나 이상의 질병 또는 이의 증상을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 이에 걸리기 쉽다.
임의의 질병 증상을 효과적으로 완화시킬 수 있는 약제(치료제, 활성 성분 또는 조성물)의 양은 치료 유효량으로 지칭된다. 치료 유효량은 대상의 질병 상태, 연령 및 체중과 같은 다양한 인자에 따라 달라질 수 있다. 약제(치료제, 활성 성분 또는 조성물)가 단일 대상의 표적 질병 또는 이의 증상을 완화시키는 데 효과가 없을 수 있지만, 당업계에 공지된 임의의 통계적 시험 방법[예컨대, 만(Mann)과 휘트니(Whitney)에 따른 스튜던츠 검정(Student's t test), 카이-제곱 검정(chi-square test) 및 U 검정]에 따라 표적 질병 또는 이의 증상에 대해 통계적으로 유효함이 이해되어야 한다.
"임의적으로"는 상기 용어 뒤의 사건이 발생할 수 있지만, 필수적으로 발생하는 것은 아니고; 이는 상황에 따라 다름을 의미한다. 예를 들어, "임의적으로 분취를 수행하는"은 생성물이 분취될 수 있지만, 필수적으로 분취되지는 않고; 생성물이 분취되는지 여부는 기술 효과의 구현에 영향을 주지 않음을 의미한다.
단수 형태는, 명백히 언급되지 않는 한, 또한 복수 형태를 포함한다.
본 발명은 실시예, 제조예 및 시험예를 참조하여 하기에 추가로 설명된다. 그러나, 이러한 실시예, 제조예 및 시험예는 본 발명의 범주를 제한하지 않는다. 특정 조건이 특정되지 않는 경우, 작동은 통상적인 조건 및 원재료 공급자에 의해 추천된 조건에 따라 수행되어야 한다. 특정 공급원을 제공하지 않는 시약은 시장에서 구입한 통상적인 시약이다.
당업자는 특히, 특정 세포 균주가 하기 특정 실시예에 사용되지만, 기술적 효과의 구현이 특정 세포 균주에 의존하지 않고, 로도코커스 속에 속하는 임의의 종, 로도코커스 루버 종이 적용가능함을 이해한다.
실시예
실시예 1. 균주의 기탁
본 발명자들은 실험실-보존된 시드 균주를 2019년 3월 22일자로 중국 일반 미생물 균주 수집 센터(중국 베이징 차오양 디스트릭트 웨스트 베이첸 로드 1-3 소재)에 수탁번호 CGMCC 17431로 기탁하였다. 시험은 기탁된 균주가 생존하였음을 나타냈다.
실시예 2. 균주의 동정
1. 콜로니의 형태학적 특징의 시각적 관찰
균주를 글리세롤 한천 배지에서 30 내지 37℃(구체적으로, 32 내지 35℃)에서 12 내지 72시간(구체적으로, 36 내지 60시간, 예컨대 40 내지 50시간) 동안 배양하고, 다음을 관찰하였다(도 1):
- 콜로니가 뭉쳤고;
- 주황색-적색였고(빛의 영향, 배양 매질의 색상 등에 따라 약간 다름);
- 표면이 건조하고 주름지고 약간 광택이 있었고(배양 조건의 차이에 따라 약간 다름);
- 만지면 부서지기 쉬웠고;
- 콜로니 크기는 약 1 내지 2 mm였다(배양 조건의 차이에 따라 약간 다름).
2. 현미경 관찰
- 박테리아는 격벽을 갖는 분지 구조로 성장하고, 균사체를 형성하였고(배양 조건의 차이에 따라 약간 다름);
- 균사의 분열은 규칙적인 짧고 두꺼운 세포를 형성하였고(배양 조건의 차이에 따라 약간 다름);
- 4 내지 5일 배양 후, 박테리아는 짧은 막대 모양 또는 구형이 되었다(배양 조건의 차이에 따라 약간 다름).
3. 착색성
균주는 그램 염색 양성이었다.
4. 생화학적 반응
균주를 글리세롤 한천 경사 매질 상에서 30 내지 37℃(구체적으로, 32 내지 35℃)에서 12 내지 72시간(구체적으로, 36 내지 60시간, 예컨대 40 내지 50시간) 동안 배양하였다. 이어서, 배양물에 대해 하기 시험을 수행하였다.
4.1. 탄수화물로부터의 산 생산:
양성: 글리세린, 만니톨, 소르비톨, D-아라비톨, D-프룩토스 및 D-글루코스;
음성: 이노시톨, 이눌린, 락토스, 수크로스, 전분, 말토스, 글리코겐, 자일리톨, 글루코네이트, 트레할로스, 에리트리톨, 멜레지토스, 멜리비오스, 라피노세, 셀로비오스, 아미그달린, 젠티오비오스, 아도놀, 알부틴, D-아라비노스, L-아라비노스, α-메틸-D-글루코사이드, α-메틸-D-만노사이드, D-리보스, D-자일로스, L-자일로스, N-아세틸-글루코사민, D-터비오스, D-릭소스, β-메틸-D-자일로사이드, D-갈락토스, D-타가토스, D-푸코스, L-푸코스, D-만노스, L-소르보스, L-아라비니톨, L-람노스 및 2-케토-글루코네이트.
4.2. 효소 활성 측정(API ZYM):
양성: 알칼리성 포스파타제, 지질 에스터라제(C8), 리파제(C14), 류신 아라미나제, 발린 아라미나제, 시스틴 아라미나제, 트립신, 키모트립신, 산 포스파타제, 나프톨-AS-B1-포스포하이드롤라제 및 α-글루코시다제;
음성: N-아세틸-글루코사미니다제, 에스터라제(C4), β-갈락토시다제, β-우로니다제, β-글루코시다제, α-갈락토시다제, α-만노시다제 및 β-푸코시다제.
4.3. 니트레이트 환원 반응: 양성, 카탈라제: 양성, 티로시나제: 양성, 아밀라제: 음성, 옥시다제: 음성, 젤라틴 액화: 음성.
4.4. 유일한 탄소원:
바이올로그 젠(Biolog Gen) II 성장 실험: 글루쿠론아미드, β-하이드록시-DL 부티르산, D-프룩토스-6-포스페이트, α-D-글루코스, D-프룩토스, D-만니톨, D-아라비톨, D-소르비톨, 퀸산, γ-아미노부티르산, 시트르산, L-말산, 브로모석신산, 트윈 40, 프로피온산 및 아세트산에 대해 양성;
바이올로그 젠 III 화학적 민감도 실험: 다이메틸아민 테트라사이클린, 나트륨 테트라데실 설페이트, 리파마이신 SV, pH 5.0, 8% 나트륨 클로라이드, 린코마이신, 푸시드산, D-세린, 반코마이신, 테트라졸륨 바이올렛 및 테트라졸륨 블루에 대한 민감성; 나트륨 브로메이트, 1% 나트륨 락테이트, pH 6.0, 1 내지 4% 나트륨 클로라이드, 날리딕산, 리튬 클로라이드, 칼륨 텔루라이트, 아즈트레오남 및 나트륨 부티레이트에 대한 내성.
4.5. 16S rRNA 동정:
작업 시드 튜브로부터 단리된 15개의 균주 및 원래의 시드 튜브로부터 단리한 10개의 상이한 균주에 대해 게놈 추출, 16S rRNA 증폭 및 서열분석을 수행하였다. 총 25개 균주의 16S rRNA 유전자 동일성은 100%였다. 이는 25개의 균주가 동일한 종임을 의미한다(도 2).
또한, 기무라(Kimura)2-파라미터 알고리즘을 기반으로 구축된 이웃-접합 균주 계통수는 균주가 로도코커스 루버로서 분류됨을 나타냈다.
제조예
제조예 1. 배양 방법
1. 로도코커스 루버를 통상적인 미생물 생산 방법으로 배양할 수 있다.
2. 배양 방법은 고체 배양 또는 액체 배양일 수 있다(예컨대 플라스크 또는 발효조).
3. 배양 매질의 영양 공급원에 대한 특별한 제한은 없다. 배양 매질은 그램-양성 박테리아 배양에 통상적으로 사용되는 탄소원, 질소원 및 기타 영양원을 함유한다.
- 탄소원은 로도코커스 루버에 의해 소비될 수 있는 임의의 탄소원, 예를 들어 프룩토스, 글루코스 등일 수 있다.
- 질소 공급원: 브로스, 펩톤, 암모늄 염, 니트레이트 및 기타 유기 또는 무기 질소-함유 화합물일 수 있다.
- 기타 영양원: NaCl 및 포스페이트 등과 같은 일부 무기 염을 적절하게 첨가할 수 있다.
4. 배양 조건(온도, 시간 등)에 대한 엄격한 제한은 없다. 당업자는 예비 소규모 파일럿 시험 데이터를 기반으로 수율을 최대화하는 조건을 선택할 수 있다.
5. 일례로서, 하기 배양 조건을 사용하여 로도코커스 루버를 발효시켰다:
(1) 다음을 포함하는 배양 매질 조성물:
펩톤, 브로스, 나트륨 클로라이드, 포스페이트, 글리세린(및 임의적으로 고체 배양될 때 한천).
(2) 배양 방법의 파라미터:
작업 균주를 회수한 후, 고체 배양 매질에 3 내지 5일 동안 옮기고, 이어서 액체 배양(30 내지 37℃, 3 내지 5일 동안 유지)으로 옮겼다. 유가식 반연속 모드 또는 회분 모드를 사용할 수 있다. pH, 박테리아 밀도, 용존 산소 및 탄소원 소비를 배양하는 동안 모니터링하였다.
제조예 2. 박테리아 파쇄
제조예 1에서 수득한 박테리아를 수집하여 세포를 파쇄하였다(예를 들어, 비제한적으로 초음파처리에 의함). CN 101250490 A 또는 CN 101323865 A와 같은 당업계에 공지된 임의의 적절한 방법을 사용하여 박테리아를 파쇄할 수도 있다.
파쇄 상태는 현미경으로 검사하였다. 각각의 시야에 5개 초과의 온전한 박테리아가 존재하지 않아야 한다. 검사된 여러(10 내지 30개) 시야가 이러한 표준을 충족할 때 파쇄가 적격한 것으로 간주되었다.
제조예 3. 비-세포벽 성분의 제거
1. 핵산의 제거:
파쇄 후 수득된 생성물을 원심분리하였다. 수득한 침전물에 DNase와 RNase를 첨가하고, 효소 공급자가 권장하는 작업에 따라 핵산을 제거하였다.
2. 단백질 제거:
통상적으로 사용되는 프로테아제(예컨대, 트립신)를 침전물에 첨가하고, 효소 공급자가 권장하는 작업에 따라 단백질을 제거하였다.
3. 지질의 제거:
유기 시약(예를 들어, 비제한적으로 아세톤, 에터 및 에탄올 중 어느 하나 또는 이들의 조합)을 침전물에 첨가하고, 지질을 당업계의 통상적인 작업에 따라 제거하였다.
4. 세포막의 제거:
트리톤 X-100을 침전물에 첨가하고, 침전물을 당업계의 통상적인 작업에 따라 원심분리하여 수집하고, PBS로 세정하였다.
불순물을 제거하기 위한 상기 단계 중에서, 당업자가 단계의 순서를 조정하여 서로 호환되도록 할 수 있음이 이해되어야 한다. 비-세포벽 성분을 제거한 후, 침전물을 주사용수에서 재구성하고, 이어서 사용할 때까지 따로 두었다. 임의적으로, 세포벽 골격(주로 세포벽 골격 및 이의 성분을 포함함)의 저장 용액으로서 115℃에서 20 내지 30분 동안 멸균할 수 있다.
상기 방법 이외에도, 당업자는 또한 비-세포벽 성분의 제거를 위해 당업계에 공지된 또는 개발될 방법을 사용할 수 있고, 이의 예는 CN 105779326 A에 개시된 세포벽 성분의 추출 방법이다.
5. 수율
159개의 콜(Kolle) 플라스크에서 총 653 mL의 박테리아 액체(파쇄 후)를 수집하였다. 습윤 중량 수율은 138 g였고; 세포벽 골격 수율은 약 0.87 g/콜 플라스크였다.
제조예 4. 약학 조성물(의료 기기)의 제조 방법
1. 액체 조성물
부형제(예컨대, 덱스트란 40, 만니톨 또는 트레할로스)를 제조예 3에서 수득된 생성물에 첨가하였다. 생성된 생성물을 분취한 후 약학 조성물로 지칭하였다.
약학 조성물은 다양한 형태로 제형화될 수 있다
조성물 각각의 바이알의 용량 성분 및 양
조성물 1 2 mL 활성 성분 5 ㎍
덱스트란 40 15 mg
조성물 2 2 mL 활성 성분 10 ㎍
덱스트란 40 12 mg
조성물 3 2 mL 활성 성분 60 ㎍
덱스트란 40 15 mg
조성물 4 2 mL 활성 성분 120 ㎍
트레할로스 12 mg
조성물 5 2 mL 활성 성분 600 ㎍
트레할로스 36 mg
조성물 6 2 mL 활성 성분 100 ㎍
만니톨 12 mg
조성물 7 2 mL 활성 성분 800 ㎍
만니톨 36 mg
2. 동결건조 조성물
상기 1의 약학 조성물을 동결건조하여 동결건조 분말(각각 동결건조 조성물 1 내지 7로 넘버링됨)을 제조하였다.
3. 제형의 제조 방법
(1) 드레싱
상기 1의 약학 조성물(활성 성분 60 내지 120 μg, 예컨대 60 μg, 70 μg, 80 μg, 90 μg, 100 μg, 110 μg, 120 μg)을 드레싱(예컨대 멸균 거즈)에 코팅하여 외용 의료 기기를 제조하였다.
(2) 패치 또는 필름
필름을 당업계에 주지된 방법(예컨대 CN 201610605617.5, 201510614414.8, 200610200450.0, 201610511974.5, 201610471977.0 등에 개시된 방법)에 의해 제조하였다.
예컨대, 필름-형성 물질(폴리비닐 알코올, 카보머 및 하이드록시프로필 셀룰로스)을 물에 첨가하여 팽윤시켜 균질한 점성 액체를 형성하고; 상기 1의 약학 조성물(각각 조성물 1 내지 7)을 상기 점성 액체에 첨가하고 잘 혼합하고; 혼합물을 방치하여 기포를 제거하고; 기포가 없는 혼합된 점성 액체를 형성하여 소량의 파라핀으로 코팅된 주형에 주조하고 5 내지 20분 동안 건조시키고, 필름을 취하여 필요한 크기로 잘랐다.
(3) 젤
또한, 조성물은 젤 형태로 제형화될 수 있다. 예컨대, CN 200510028076.6에 개시된 방법을 참조하여, 조성물 3 및 에스터화제를 교반하고 용매에 용해시키고, 하이드록시알킬 셀룰로스를 첨가하여 팽윤시키고 계속하여 교반하여 젤을 형성한 후, 가교 결합제를 첨가하고 젤이 완전히 균질해질 때까지 계속하여 교반한다.
(4) 연고
또한, 피부에 대한 외용 연고의 제조 방법은 비제한적으로 CN 201610856428.5, 01133296.4, 1133297.2 및 문헌["Dosage Form and Formulation Design" (Chemical Industry Press 2009)]에 개시된 방법에서 찾을 수 있다.
4. 품질 검사(동결건조 조성물 3을 일례로서 취함).
Figure pct00001
시험예
1. 물질
1.1. 약물 및 주요 시약
- 시험 약물: 전술한 제조예에서 수득된 동결건조 조성물 3(60 μg 활성 성분/바이알);
- 대조용 약물: 칭 완 훙(Ching Wan Hung) 연고(톈진 다렌탕 징완홍 파바슈티칼스 컴퍼니 리미티드(Tianjin Darentang Jingwanhong Pharmaceutical Co., Ltd.), 의료 허가 번호 Z20023137, 사양 30 g/튜브);
비이트 헤어 리무벌 크림(Veet Hair Removal Cream)(레킷 벤키서(차이나) 컴퍼니 리미티드(Reckitt Benckiser(China) Co., Ltd.);
에터(시노팜 케미칼 리젠트 컴퍼니 리미티드(Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.).
1.2. 실험 동물
16마리의 클린(clean)-등급 쿤밍(Kunming) 마우스(28 내지 36 g 체중)를 랴오닝 창셩 바이오테크놀로지 컴퍼니 리미티드에 의해 인증 번호 211002300051326으로 제공받았다.
2. 실험 방법
2.1. 실험 설계
16마리의 군밍 마우스를 4개의 군으로 무작위 구분하되, 상기 각각의 4개의 군은 하기와 같았다:
1) 모델 군;
2) 비-파열 상처(unbroken wound) 처리군(로도코커스 루버 군);
3) 파열 상처(broken wound) 처리군;
4) 양성 대조군(대조용 약물).
2.2. 제2 도 열탕화상 마우스 모델의 제조
마우스를 환경에 적응시키고 1주 동안 사육하였다. 면도기로 마우스의 등쪽 피부를 면도한 후, 탈모 크림을 사용하여 모발을 제거하고(약 3.5 cm x 3.5 cm의 면적) 180초 동안 방치하였다. 탈모된 면적을 30 내지 40℃의 온수로 세척하고 탈지솜으로 닦아 건조시켰다.
탈모 후, 마우스를 통상 24시간 동안 사육하며 관찰하여 탈모된 부위에서 이상 병태, 예컨대 홍화, 염증 및 파열 피부가 없는 지 확인하였다. 24시간 후, 마우스를 에터로 마취시키고 실험대에 놓고, 실험 면적 내의 피부를 75% 에탄올로 소독하고, 열탕화상 모델을 구성하였다.
마우스를 열탕화상을 위한 장치(중앙에 1.5 cm 구멍이 있음)에 놓고 등쪽 탈모 피부가 상기 구멍 위치에 있게 하였다. 후방이 노출된 상기 1.5 cm 구멍을 75℃의 일정 온도의 물에서 12초 동안 유지시킴으로써, 약 1.5 cm의 직경의 둥근 형태의 열탕화상 상처가 생기게 하였다.
상처입은 마우스를 개별 케이지에서 사육하였고, 상처를 염수로 처리하고, 사료 및 증류수를 제공하고, 잠자리를 건조 및 청결하게 확보하고 통기가 잘되게 하였다. 상기 4개 수준의 3개의 도의 법칙에 따라, 상기 화상/열탕화상은 심재성 제2 등급인 것으로 확인되었다.
2.3. 군 분리 및 투여
투여를 열탕화상 24시간 후 시작하였다.
- 모델 군: 생리 식염수를 각각의 마우스의 피부의 열탕화상 상처에 매일 적용함;
- 비-파열 상처 처리군: 먼저, 성처를 생리 식염수로 처리한 후, 조성물 3을 매 동물마다 매일 외부 적용함(1개 바이알; 0.25 mL의 생리 식염수를 상기 바이알에 주입하여 동결건조 분말을 완전히 용해시키고, 이를 1.2 cm x 1.2 cm 거즈를 완전히 함침시키는데 사용하여 상처에 적용한 후, 의료용 둔감화 테이프(desensitization tape)에 의해 고정함);
- 파열 상처 처리군: 먼저, 성처를 생리 식염수로 처리하고 파열시킨 후, 조성물 3을 매 동물마다 매일 외부 적용함(1개 바이알; 0.25 mL의 생리 식염수를 상기 바이알에 주입하여 동결건조 분말을 완전히 용해시키고, 이를 1.2 cm x 1.2 cm 거즈를 완전히 함침시키는데 사용하여 상처에 적용한 후, 의료용 둔감화 테이프에 의해 고정함);
- 양성 대조군: 먼저, 상처를 생리 식염수로 처리한 후, 칭 완 훙 연고를 매 동물마다 매일 1회 외부 적용함.
상처 치유를 투여 1, 3, 7, 11 및 15일차에 관찰하였다.
3. 실험 관찰 및 지표 검출
3.1. 상처 치유 시간의 측정
각각의 군에 대해, 치유 시간을 측정하였다. 측정은 하기 기준을 포함한다:
- 치유됨: 상처 딱지가 열탕화상 부위에서 완전히 떨어져 나오고, 복구된 조직의 표면이 새 것이고 상대적으로 편평함;
- 기본 치유됨: 상처 딱지가 간헐적으로 떨어져 나오고, 새로 자란 조직의 표면이 아주 편평하지는 않고, 작은 면적에서 소량의 삼출물이 있지만 명확한 감염 병터(infection focus)는 없음;
- 감염됨: 명확한 홍화 및 부기가 상처 딱지 주위에 나타나고, 고름 및 궤양이 상처 딱지 아래에 있음.
3.2. 상처 치유율
마우스의 상처 치유를 투여 3, 7, 11 및 15일차에 관찰 및 기록하였다. 상처의 완전한 상피화 및 삼출물 부재를 상처의 완전 치유로서 간주하였다. 동시에, 상처를 홍화, 부기, 감염 등에 대해 관찰하였다. 각각의 시점에서의 상처 치유율을 계산하였다: 상처의 직경을 사진상 축척에 따라, 그래픽 처리 소프트웨어를 사용하여 취하고, 상처 면적을 계산하였다.
상처 치유율% = (원래 상처 면적 - 미치유된 상처 면적) / 원래 상처 면적 x 100%.
3.3. 통계적 방법
SPSS 17.0 통계 소프트웨어를 분석에 사용하였고, 1원-배치 분산분석(one-way ANOVA)을 군 간의 비교에 사용하였다. 취한 데이터를
Figure pct00002
±S로서 표시하였다. P < 0.05를 통계적으로 유의한 것으로 판단하였다.
4. 실험 결과
4.1. 일반적 관찰
모든 마우스는 상처가 치유될 때까지 생존하였고, 먹음, 마심, 정신 상태, 활동 등에 명확한 차이가 없었고, 감염의 징후가 없었다.
4.2. 상처 치유
4.2.1. 상처 치유 시간
마우스의 상처의 완전한 치유 및 상대적으로 편평한 조직 표면을 치유에 대한 기준으로서 간주하였다. 모델 군과 비교하여, 파열 상처 처리군 및 양성 대조군의 상처 치유 시간은 단축되었고, 차이는 P < 0.05로 통계적으로 유의하였다. 양성 대조군과 비교하여, 파열 성처 처리군의 치유 시간은 양성 대조군의 치유 시간보다 약간 더 빨랐고, 차이는 P < 0.05로 통계적으로 유의하였다.
Figure pct00003
4.2.2. 상처 치유율
모델을 수립한지 24시간 후, 투여를 시작하였다. 투여 전 치유 면적을 참조 면적으로서 설정하였다. 3, 7, 11 및 15일차에 상처 면적을 기록하고, 치유율을 계산하였다.
모델 군과 비교하여, 투여 7일차에 파열 상처 처리군의 치유율은 모델 군의 치유율보다 현저히 더 높아지기 시작하였고, 투여 11일차에 양성 대조군 및 비-파열 상처 처리군의 치유율도 모델 군의 치유율보다 높아지기 시작하였는데, 통계적 유의성은 P < 0.05였다. 양성 대조군과 비교하여, 투여 7일차에 파열 상처 처리군의 치유율은 양성 대조군의 치유율보다 높아지기 시작하였는데, 통계적 유의성은 P < 0.05였다.
Figure pct00004
4.2.3. 상처 치유 상태
파열 상처 처리군이 치유될 때, 상처는 상흔 과형성(scar hyperplasia)이 없었고 매끄러웠지만, 다른 군은 상이한 정도의 상흔 과형성을 나타낸 한편; 파열 상처 처리군의 성처 부위에서는 모발이 자라기 시작하였다.
요약하면, 마우스에서 심재성 제2 도의 치유 과정 동안, 로도코커스 루버 세포벽 골격은 치유율을 효과적으로 향상시키고 상처 치유 후 상흔의 형성을 감소시키는 한편, 모낭 및 피부의 기타 부속기관에 대해 상당한 복구 효과가 있다.
[수탁번호]
기탁기관명 : 중국 일반 미생물 균주 수집 센터(CGMCC)
수탁번호 : CGMCC 17431
수탁일자 : 2019.03.22
Sequence listing <110> Liaoning Greatest Bio-pharmaceutical Co., Ltd <120> USE OF RHODOCOCCUS RUBER PRODUCT IN TREATING THERMAL INJURY <130> 702038 <140> PCT/CN2020/086353 <141> 2020-04-23 <150> CN 201910333119.3 <151> 2019-04-24 <160> 1 <170> SIPOSequenceListing 1.0 <210> 1 <211> 1364 <212> DNA <213> Rhodococcus ruber <400> 1 ggttaggcca ccggcttcgg gtgttaccga ctttcatgac gtgacgggcg gtgtgtacaa 60 ggcccgggaa cgtattcacc gcagcgttgc tgatctgcga ttactagcga ctccgacttc 120 acggggtcga gttgcagacc ccgatccgaa ctgagaccgg ctttaaggga ttcgctccac 180 ctcgcggtat cgcagccctc tgtaccggcc attgtagcat gtgtgaagcc ctggacataa 240 ggggcatgat gacttgacgt cgtccccacc ttcctccgag ttgaccccgg cagtctcctg 300 cgagtcccca ccattacgtg ctggcaacac aggacaaggg ttgcgctcgt tgcgggactt 360 aacccaacat ctcacgacac gagctgacga cagccatgca ccacctgtac accgaccaca 420 agggaaaccc catctctggg gcggtccggt gtatgtcaaa cccaggtaag gttcttcgcg 480 ttgcatcgaa ttaatccaca tgctccgccg cttgtgcggg cccccgtcaa ttcctttgag 540 ttttagcctt gcggccgtac tccccaggcg gggcgcttaa tgcgttagct acggcacgga 600 tcccgtggaa ggaaacccac acctagcgcc caccgtttac ggcgtggact accagggtat 660 ctaatcctgt tcgctaccca cgctttcgct cctcagcgtc agttactgcc cagagacccg 720 ccttcgccac cggtgttcct cctgatatct gcgcatttca ccgctacacc aggaattcca 780 gtctcccctg cagtactcaa gtctgcccgt atcgcctgca agcccgcagt tgagctgcgg 840 gttttcacag acgacgcgac aaaccgccta cagctcttta cgcccagtaa ttccggacaa 900 cgctcgcacc ctacgtatta ccgcggctgc tggcacgtag ttggccggtg cttcttctgt 960 acctaccgtc acttgcgctt cgtcggtact gaaagaggtt tacaacccga aggccgtcat 1020 ccctcacgcg gcgtcgctgc atcaggcttg cgcccattgt gcaatattcc ccactgctgc 1080 ctcccgtagg agtctgggcc gtgtctcagt cccagtgtgg ccggtcgccc tctcaggccg 1140 gctacccgtc gtcgccttgg tgggccgtta ccccaccaac aagctgatag gccgcgggcc 1200 catcctgcac cggaaaacct ttccaccccg aacatgcatc ccgaggtcct atccggtatt 1260 agacccagtt tcccaggctt atcccgaagt gcagggcaga tcacccacgt gttactcacc 1320 cgttcgccac taatccaccc agcaagctgg cttcatcgtt cgac 1364

Claims (9)

  1. 온열 손상의 치료용 약제 제조에 있어서의 로도코커스 루버(Rhodococcus ruber) 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격의 용도.
  2. 제1항에 있어서,
    온열 손상이 화상, 열탕화상(scald) 및 화학적 화상으로 이루어진 군으로부터 선택되고,
    바람직하게는, 온열 손상이 표피, 상피, 점막 및 피하 조직으로 이루어진 군으로부터 선택되는 조직과 관련되고;
    바람직하게는, 온열 손상이 제1 도, 제2 도 및 제3 도로 이루어진 군으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 심재성 제2 도인, 용도.
  3. 제1항에 있어서,
    약제가 연고, 크림, 유화액, 현탁액, 페이스트, 젤, 로션, 팅크제(tincture), 오일, 정제, 에어로졸, 스프레이, 도찰제(liniment), 분말, 드레싱, 붕대, 필름, 패치 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 투여 형태인, 용도.
  4. 제1항에 있어서,
    약제가 1 내지 1,000 μg/단위 용량의 로도코커스 루버 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격을 포함하고;
    바람직하게는, 약제가 5 내지 800 μg/단위 용량의 로도코커스 루버 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격을 포함하고;
    보다 바람직하게는, 약제가 10 μg, 20 μg, 30 μg, 40 μg, 50 μg, 60 μg, 70 μg, 80 μg, 90 μg, 100 μg, 150 μg, 200 μg, 250 μg, 300 μg, 350 μg, 400 μg, 500 μg, 600 μg, 700 μg 또는 800 μg/단위 용량의 로도코커스 루버 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격을 포함하는, 용도.
  5. 제1항에 있어서,
    로도코커스 루버가 2019년 3월 22일자로 중국 일반 미생물 균주 수집 센터에 수탁번호 CGMCC 17431로 기탁된, 용도.
  6. 제1항에 있어서,
    약제가 약학적으로 허용되는 부형제를 추가로 포함하고;
    로도코커스 루버 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격이 1 중량부이고, 약학적으로 허용되는 부형제가 100 내지 1,000 중량부, 바람직하게는 200 내지 500 중량부, 보다 바람직하게는 200 내지 300 중량부이고;
    바람직하게는, 로도코커스 루버 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격이 1 중량부이고, 약학적으로 허용되는 부형제가 250 중량부이고;
    약제가 액체, 분말 제형 또는 동결건조 제형인, 용도.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    로도코커스 루버 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격이
    (1) 로도코커스 루버를 제공하는 단계;
    (2) 로도코커스 루버를 파쇄하여 파쇄된 생성물을 수득하는 단계;
    (3.1) 임의적으로, 상기 파쇄된 생성물로부터 지질을 제거하는 단계;
    (3.2) 임의적으로, 상기 파쇄된 생성물로부터 핵산을 제거하는 단계;
    (3.3) 임의적으로, 상기 파쇄된 생성물로부터 단백질을 제거하는 단계;
    (3.4) 로도코커스 루버 세포벽으로부터 유래된 생성물을 수득하는 단계;
    (4) 임의적으로, 상기 로도코커스 루버 세포벽으로부터 유래된 생성물로부터 물을 제거하는 단계, 바람직하게는 상기 로도코커스 루버 세포벽으로부터 유래된 생성물을 동결건조하는 단계; 및
    (5) 임의적으로, 분취(aliquoting)를 수행하는 단계
    를 포함하거나 상기 단계들로 이루어진 방법으로부터 수득되되,
    단계 (3.1), 단계 (3.2) 및 단계 (3.3)이 순서가 상호교환되거나 병렬로 수행되고,
    단계 (4) 및 단계 (5)가 순서가 상호교환되고,
    바람직하게는, 파쇄되는 평균 입자 크기가 10 내지 1,000 nm, 보다 바람직하게는 10 내지 800 nm, 보다 바람직하게는 10 nm, 20 nm, 30 nm, 40 nm, 50 nm, 60 nm, 70 nm, 80 nm, 90 nm, 100 nm, 110 nm, 120 nm, 130 nm, 140 nm, 150 nm, 160 nm, 170 nm, 180 nm, 190 nm, 200 nm, 250 nm, 270 nm, 300 nm, 320 nm, 350 nm, 370 nm, 400 nm, 420 nm, 450 nm, 470 nm 또는 500 nm이고,
    바람직하게는, 상기 분취가 용기 내로의 분취 또는 고체 지지체 상으로의 분취를 나타내고,
    상기 용기가 바이알, 튜브, 패키지, 백(bag), 플레이트, 앰풀, 주사 장치, 알루미늄-플라스틱 패키징, 드레싱 및 캡슐로 이루어진 군으로부터 선택되는,
    용도.
  8. 대상을 치료 유효량의 로도코커스 루버 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격과 접촉시키는 단계
    를 포함하는 온열 손상의 치료 방법으로서,
    로도코커스 루버 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격이 연고, 크림, 유화액, 현탁액, 페이스트, 젤, 로션, 팅크제, 오일, 정제, 에어로졸, 스프레이, 도찰제, 분말, 드레싱, 붕대, 필름, 패치 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 형태로 제형화되고,
    상기 접촉이 1일 2회, 1일 1회, 2일 1회, 2일 3회, 3일 1회 또는 1주 1회로 수행되고,
    상기 접촉이 각 투여마다 30분 내지 각 투여마다 24시간 동안 지속되고,
    상기 접촉이 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 7주, 8주, 9주, 10주, 11주, 12주, 13주, 14주, 15주, 16주, 17주, 18주 또는 그보다 오래 지속되고,
    온열 손상이 화상, 열탕화상 및 화학적 화상으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    바람직하게는, 온열 손상이 표피, 상피, 점막 및 피하 조직으로 이루어진 군으로부터 선택되는 조직과 관련되고;
    바람직하게는, 온열 손상이 제1 도, 제2 도 및 제3 도로 이루어진 군으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 심재성 제2 도인, 방법.
  9. 제8항에 있어서,
    로도코커스 루버 세포벽 또는 로도코커스 루버 세포벽 골격이
    (1) 로도코커스 루버를 제공하는 단계;
    (2) 로도코커스 루버를 파쇄하여 파쇄된 생성물을 수득하는 단계;
    (3.1) 임의적으로, 상기 파쇄된 생성물로부터 지질을 제거하는 단계;
    (3.2) 임의적으로, 상기 파쇄된 생성물로부터 핵산을 제거하는 단계;
    (3.3) 임의적으로, 상기 파쇄된 생성물로부터 단백질을 제거하는 단계;
    (3.4) 로도코커스 루버 세포벽으로부터 유래된 생성물을 수득하는 단계;
    (4) 임의적으로, 상기 로도코커스 루버 세포벽으로부터 유래된 생성물로부터 물을 제거하는 단계, 바람직하게는 상기 로도코커스 루버 세포벽으로부터 유래된 생성물을 동결건조하는 단계; 및
    (5) 임의적으로, 분취를 수행하는 단계
    를 포함하거나 상기 단계들로 이루어진 방법으로부터 수득되되,
    단계 (3.1), 단계 (3.2) 및 단계 (3.3)이 순서가 상호교환되거나 병렬로 수행되고,
    단계 (4) 및 단계 (5)의 순서가 상호교환되고,
    파쇄되는 평균 입자 크기가 10 내지 1,000 nm, 바람직하게는 10 내지 800 nm, 보다 바람직하게는 10 내지 500 nm이고,
    바람직하게는, 상기 분취가 용기 내로의 분취 또는 고체 지지체 상으로의 분취를 나타내고,
    상기 용기가 바이알, 튜브, 패키지, 백, 플레이트, 앰풀, 주사 장치, 알루미늄-플라스틱 패키징, 드레싱 및 캡슐로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
KR1020217037350A 2019-04-24 2020-04-23 온열 손상 치료에서의 로도코커스 루버 생성물의 용도 KR20220004091A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910333119 2019-04-24
CN201910333119.3 2019-04-24
PCT/CN2020/086353 WO2020216281A1 (zh) 2019-04-24 2020-04-23 赤红球菌产品在治疗热损伤中的用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220004091A true KR20220004091A (ko) 2022-01-11

Family

ID=81846665

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020217037350A KR20220004091A (ko) 2019-04-24 2020-04-23 온열 손상 치료에서의 로도코커스 루버 생성물의 용도

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20220175852A1 (ko)
EP (1) EP3960845A4 (ko)
JP (1) JP2022531109A (ko)
KR (1) KR20220004091A (ko)
CN (1) CN112218647B (ko)
WO (1) WO2020216281A1 (ko)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3913045A4 (en) * 2019-01-15 2022-12-28 Liaoning Greatest Bio-Pharmaceutical Co., Ltd. PRODUCT DERIVED FROM RHODOCOCCUS RUBER, AND PHARMACEUTICAL USE THEREOF
WO2022199453A1 (zh) * 2021-03-24 2022-09-29 辽宁格瑞仕特生物制药有限公司 赤红球菌产品在治疗放射病中的用途

Family Cites Families (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1094288A (zh) * 1993-04-23 1994-11-02 福建省微生物研究所 利用红色诺卡氏菌制造细胞壁骨架粉末的方法
US5534594A (en) 1994-12-05 1996-07-09 Rohm And Haas Company Preparation of butadiene-based impact modifiers
JP2002179575A (ja) * 2000-12-12 2002-06-26 Club Cosmetics Co Ltd 皮膚創傷治癒促進物質及び皮膚創傷治療用外用剤
JP2003052362A (ja) * 2001-08-10 2003-02-25 Club Cosmetics Co Ltd 血管内皮細胞増殖促進剤及び血管内皮細胞培養用組成物並びに創傷治癒剤
JP2003052366A (ja) * 2001-08-10 2003-02-25 Club Cosmetics Co Ltd ケラチノサイト増殖促進剤及びケラチノサイト培養用組成物並びに創傷治癒剤
CN1223673C (zh) 2003-01-23 2005-10-19 中国科学院微生物研究所 一种产生生物乳化剂和降解多环芳烃的赤红球菌Em及用途
CN100519737C (zh) 2006-04-29 2009-07-29 浙江工业大学 赤红球菌zjb-064及其应用
WO2007132790A1 (ja) * 2006-05-12 2007-11-22 National University Corporation Hokkaido University 細菌菌体成分を含む脂質膜を有するリポソーム
CN101209267B (zh) * 2006-12-29 2012-10-03 辽宁纳可佳生物制药有限公司 红色诺卡氏菌细胞壁骨架在制备治疗皮肤损伤和疮疡的药物中的用途
CN101250490A (zh) 2008-03-28 2008-08-27 天津科技大学 活酵母细胞衍生物的生产方法
CN101580808B (zh) 2008-05-15 2011-11-16 汕头大学 一株赤红球菌及其在降解烃类化合物中的应用
CN101323865B (zh) 2008-08-07 2012-07-18 山东省科学院能源研究所 微生物油脂分离提取方法
CN101619299B (zh) 2009-07-08 2012-07-04 天津科技大学 一种赤红球菌以及利用该菌制备5-氰基戊酰胺的方法
CN102250796B (zh) 2011-06-21 2013-11-06 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 一种赤红球菌和微生物菌剂及它们的应用
CN102604875B (zh) 2012-03-26 2014-12-10 江西师范大学 赤红球菌及其在降解苯酚污染物中的应用
CN103160491B (zh) 2013-04-15 2014-12-10 江西师范大学 赤红球菌sd3的诱变菌m1的固定化细胞及其在降解苯酚污染物中的应用
CN103509833B (zh) 2013-08-15 2016-04-06 天津科技大学 一种利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法
CN103627653B (zh) 2013-10-17 2016-01-20 浙江省环境保护科学设计研究院 一种赤红球菌菌株及其在含有机污染物的废水处理中的应用
CN105779326A (zh) 2014-12-25 2016-07-20 河南科技学院 化脓性链球菌细胞壁成分萃取方法
CN104830738B (zh) 2015-05-22 2017-09-15 厦门大学 一种赤红球菌及其在制备十溴联苯醚降解剂中的应用
CN106591168B (zh) 2016-02-02 2019-08-16 江苏南资环保科技有限公司 一种烟嘧磺隆降解赤红球菌ymhl-1及其应用
CN106591172B (zh) 2016-04-01 2019-11-29 江苏南资环保科技有限公司 一种赤红球菌pta-2及其固定化和应用
CN105820982B (zh) 2016-04-29 2019-06-28 河北省科学院生物研究所 一种赤红球菌xs-2、其生物菌剂及制备方法和应用
CN106434466B (zh) 2016-10-14 2019-10-18 天津科技大学 一种产生天然红色素的赤红球菌及其制备方法与应用
CN107151635B (zh) 2017-04-28 2020-02-18 中国农业科学院研究生院 一种能够降解邻苯二甲酸酯的赤红球菌及其应用
AU2018266546B2 (en) * 2017-05-07 2024-06-13 Locus Ip Company, Llc Cosmetic compositions for skin health and methods of using same
CN107233362B (zh) * 2017-06-16 2020-08-28 福建省山河药业有限公司 一种红色诺卡氏菌细胞壁骨架溶媒提取方法
CN108130288B (zh) 2017-12-15 2020-10-09 浙江工业大学 赤红球菌及其降解有机污染物的应用
CN108862590B (zh) 2018-08-03 2021-01-12 中国石油大学(北京) 一种降解丙烯腈废水cod的方法
CN109576180B (zh) 2018-12-17 2021-11-26 北京利昂盛生物技术有限公司 一株赤红球菌及其作为免疫佐剂在制备疫苗中的应用
EP3913045A4 (en) * 2019-01-15 2022-12-28 Liaoning Greatest Bio-Pharmaceutical Co., Ltd. PRODUCT DERIVED FROM RHODOCOCCUS RUBER, AND PHARMACEUTICAL USE THEREOF
EP3960190A4 (en) * 2019-04-24 2022-08-17 Liaoning Greatest Bio-Pharmaceutical Co., Ltd. USE OF NOCARDIA RUBRA CELL WALL SKELETON IN THE TREATMENT OF THERMAL BURNS

Also Published As

Publication number Publication date
EP3960845A1 (en) 2022-03-02
CN112218647B (zh) 2023-07-04
US20220175852A1 (en) 2022-06-09
EP3960845A4 (en) 2022-10-19
CN112218647A (zh) 2021-01-12
JP2022531109A (ja) 2022-07-06
WO2020216281A1 (zh) 2020-10-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111727048B (zh) 分离的赤红球菌细胞壁骨架在制备治疗单纯疱疹和/或带状疱疹的药物中的用途
CN111971054B (zh) 赤红球菌产品在治疗外阴白色病变中的用途
KR20220004091A (ko) 온열 손상 치료에서의 로도코커스 루버 생성물의 용도
WO2022199453A1 (zh) 赤红球菌产品在治疗放射病中的用途
KR20220004092A (ko) 온열 손상 치료에서의 노카르디아 루브라 세포벽 골격의 용도
CN115087729B (zh) 赤红球菌细胞壁骨架在再生医学中的用途