KR20210148866A

KR20210148866A - S-하이드록시클로로퀸을 사용한 홍반성 루푸스의 치료

Info

Publication number: KR20210148866A
Application number: KR1020210032341A
Authority: KR
Inventors: 젠 첸; 나이-텅 야오
Original assignee: 제노베이트 바이오테크놀로지 컴퍼니 리미티드
Priority date: 2020-05-31
Filing date: 2021-03-11
Publication date: 2021-12-08
Also published as: JP2021187831A; CN113730407A; EP3915562A1; US20210369699A1

Abstract

S-하이드록시클로로퀸(S-HCQ) 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 함유하는 약제 학적 조성물을 환자에게 투여하여 홍반성 루푸스를 치료하는, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법. 약제학적 조성물에는 R-하이드록시클로로퀸(R-HCQ)이 본질적으로 없다. 이 방법은 피부 홍반성 루푸스, 전신 홍반성 루푸스 및 동시 루푸스 신염이 있는 전신 홍반성 루푸스를 앓고 있는 환자의 치료에 효과적이다. 청구된 방법에서 S-HCQ의 투여는 R-HCQ 및 S-HCQ 및 R-HCQ의 등몰 혼합물에 비해 부작용, 특히 심장독성에 관한 부작용이 적다.

Description

S-하이드록시클로로퀸을 사용한 홍반성 루푸스의 치료{TREATMENT OF LUPUS ERYTHEMATOSUS USING S-HYDROXYCHLOROQUINE}

하이드록시클로로퀸(Hydroxychloroquine: "HCQ")은 플라스모듐 비백스(Plasmodium vivax)로 인한 말라리아를 치료하기 위한 세계 보건 기구 필수 의약품 모델 목록(World Health Organization Model List of essential medicines)에 포함되어 있다. 이 약물은 또한 만성 다형성 일광 발진뿐만 아니라, 류마티스성 질환, 예컨대 피부(즉, 원반형) 및 전신 홍반성 루푸스 및 류마티스 관절염에 대한 중요한 치료법이다.

HCQ는 2개의 광학 이성질체, 즉, (R)-(-)-이성질체("R-HCQ") 및 (S)-(+) 이성질체("S-HCQ")를 갖는다. 상기 상태를 치료하기 위해, 이들 두 이성질체는 라세미(50:50) 혼합물로서 투여된다.

HCQ의 장기간 및 고용량 투여는 흐린 시력을 유발할 수 있으며 몇몇 경우에는 망막, 각막 또는 황반을 손상시킬 수 있고, 일부 환자에서는 안구 조직에 축적으로 인해 시력 장애를 유발할 수 있다.

HCQ는 또한 심장독성인 것으로 알려져 있다. 심실간 전도 지연(즉, QRS 확대), Q파 대 T파(QT) 간격 연장(즉, 긴 QT 증후군), 다형심실빈맥(Torsades de pointes), 심실 부정맥, 저칼륨혈증, 및 저혈압을 유발할 수 있다.

장기 HCQ 요법으로 홍반성 루푸스 치료를 받고 있는 일부 환자에서는 급사를 초래할 수 있는 불응성 심실 부정맥을 동반한 후천성 긴 QT 증후군이 발생한 것으로 보고되었다.

홍반성 루푸스를 치료하기 위한 HCQ의 장기간 투여는 잠재적으로 치명적인 심장 부정맥이 발생할 위험에 대비하여 균형을 이루어야 한다.

상기 언급한 부작용 없이 피부 및 전신 홍반성 루푸스를 효과적으로 치료하기 위한 방법이 요구된다.

상기 요구를 충족시키기 위해, S-하이드록시클로로퀸(S-HCQ) 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 함유하는 약제학적 조성물로 홍반성 루푸스를 치료하는 방법이 제공된다. 약제학적 조성물에는 R-하이드록시클로로퀸(R-HCQ)이 본질적으로 없다.

이러한 상황에서, R-HCQ가 "본질적으로 없는(essentially free)" S-HCQ를 함유하는 약제학적 조성물은 R-HCQ에 비해 거울상이성질체적 과량(enantiomeric excess)의 S-HCQ를 99% 이상 포함한다. 따라서, R-HCQ가 본질적으로 없는 약제학적 조성물은 S-HCQ의 거울상이성질체적 과량이 99%, 99.1%, 99.2%, 99.3%, 99.4%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8%, 99.9% 및 100%인 조성물을 포함한다.

이 방법은 전신성 홍반성 루푸스 및 피부 홍반성 루푸스 모두를 치료하는 데 효과적이다. 동시 루푸스 신염이 있는 전신 홍반성 루푸스를 앓고 있는 환자도 이 방법에 의해 치료될 수 있다.

청구된 방법에서 S-HCQ의 투여는 R-HCQ, 및 S-HCQ와 R-HCQ의 등몰 혼합물, 즉, HCQ에 비해, 특히 심장독성에 관한 부작용이 적다.

본 발명의 여러 실시형태의 세부사항은 이하의 상세한 설명 및 도면 모두에서 제시된다. 본 발명의 다른 특징, 목적 및 장점은 상세한 설명 및 첨부된 청구 범위로부터 명백해질 것이다. 마지막으로, 본 명세서에 인용된 모든 간행물 및 특허 문서는 그 전체가 참조에 의해 포함된다.

이하의 상세한 설명은 첨부 도면을 참조한다:
도 1A는 비히클 처리된 MRL/lpr 마우스 또는 20㎎/㎏ 일일 용량의 하이드록시클로로퀸(GVX 170), S-하이드록시클로로퀸(GVX 171) 또는 R-하이드록시클로로퀸(GVX172)으로 처리된 MRL/lpr 마우스에 대한 체중 대 시간의 플롯이다. 비히클 처리군은 n=15이고, 각 처리군은 n=14이다.
도 1B는 비히클 처리된 MRL/lpr 마우스 또는 40㎎/㎏ 일일 용량의 하이드록시클로로퀸, S-하이드록시클로로퀸 또는 R-하이드록시클로로퀸으로 처리된 MRL/lpr 마우스에 대한 체중 대 시간의 플롯이다. 도면 부호 및 처리당 마우스 수는 도 1A에서와 같다.
도 2A는 비히클 또는 20㎎/㎏의 표시된 화합물로 매일 처리된 MRL/lpr 마우스의 캐플란-마이어(Kaplan-Meier) 생존율 플롯이다. 도면 부호 및 처리당 마우스 수는 도 1A에서와 같다.
도 2B는 비히클 또는 40㎎/㎏의 표시된 화합물로 매일 처리된 MRL/lpr 마우스의 캐플란-마이어 생존율 플롯이다. 도면 부호 및 처리당 마우스 수는 도 1A에서와 같다.
도 3A는 비히클, 또는 20㎎/㎏ 또는 40㎎/㎏의 표시된 화합물로 매일 처리된 MRL/lpr 마우스의 처리 개시 후 경과일에 대한 평균 피부 병변 점수의 플롯이다. 도면 부호 및 처리당 마우스 수는 도 1A에서와 같다.
도 3B는 표시된 대조군 및 20㎎/㎏ 처리군에 대한 제68일부터 제111일까지의 평균 피부 병변 점수를 나타낸 막대 그래프이다. 도면 부호 및 처리당 마우스 수는 도 1A에서와 같다. ** = t-시험에 의해 p<0.005에서 비히클 군과 유의적으로 차이가 있음.
도 3C는 표시된 대조군 및 40㎎/㎏ 처리군에 대한 제68일부터 제111일까지의 평균 피부 병변 점수를 나타낸 막대 그래프이다. 도면 부호 및 처리당 마우스 수는 도 1A에서와 같다. ** = t-시험에 의해 p<0.005에서 비히클 군과 유의적으로 차이가 있음.
도 4A는 비히클 또는 표시된 약물/투여량으로 처리된 MRL/lpr 마우스의 혈장 내 혈액 요소 질소(BUN) 수치를 보여주는 막대 그래프이다. 도면 부호 및 처리당 마우스 수는 도 1A에서와 같다. * = t-시험에 의해 p<0.05에서 비히클 군과 유의적으로 차이가 있음.
도 4B는 비히클 또는 표시된 약물/투여량으로 처리된 MRL/lpr 마우스의 혈장 중 크레아티닌 수치를 보여주는 막대 그래프이다. 도면 부호 및 처리당 마우스 수는 도 1A에서와 같다. * = t-시험에 의해 p<0.05에서 비히클 군과 유의적으로 차이가 있음; ** = t-시험에 의해 p<0.01에서 비히클 군과 유의적으로 차이가 있음.

상기에 요약된 바와 같이, S-HCQ 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 함유하되, R-HCQ가 본질적으로 없는 약제학적 조성물을 영향을 받은 대상체에게 투여함으로써 홍반성 루푸스를 치료하는 방법이 제공된다.

S-HCQ를 함유하고 R-HCQ가 본질적으로 없는 약제학적 조성물은 R-HCQ인 백분율을 뺀 S-HCQ인, 조성물 중 S-HCQ와 R-HCQ의 총량의 백분율로서 정의된, 99% 이상의 거울상이성질체적 과량으로 S-HCQ를 포함한다. 예를 들어, 99%의 거울상이성질체적 과량으로 S-HCQ를 갖는 본 발명의 약제학적 조성물은 조성물 중 S-HCQ + R-HCQ의 총 중량을 기준으로, 99.5 중량% S-HCQ 및 0.5 중량% R-HCQ를 함유한다. R-HCQ가 본질적으로 없는 약제학적 조성물은 99%, 99.1%, 99.2%, 99.3%, 99.4%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8%, 99.9% 및 100%인 거울상이성질체적 과량의 S-HCQ를 가질 수 있다.

상기 거울상이성질체적 과량을 갖는 S-HCQ 제제는 미국 임시 특허 출원 일련 번호 63/013,219 및 미국 특허 5,314,894에 제시된 방법에 의해 제조될 수 있다.

약제학적 조성물에서 S-HCQ는 유리 염기 형태 또는 약제학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 염은 황산염, 인산염 및 염산염일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 약제학적 조성물의 특정 예에서, S-HCQ는 황산염이다.

치료 방법을 수행하기 위해, 홍반성 루푸스를 앓고 있는 대상체에게 S-HCQ 100㎎ 내지 800㎎(예컨대, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700 및 800㎎)의 1일 용량에 상응하는 약제학적 조성물의 양이 투여된다. 특정 방법에서는 1일당 200㎎의 S-HCQ가 투여된다.

상기 방법에서, 약제학적 조성물은 과립, 정제, 캡슐, 알약, 분말, 용액, 현탁액 또는 시럽의 형태일 수 있다. 예시적인 약제학적 조성물은 경구 투여용 알약 형태이다.

과립, 정제, 캡슐, 알약, 분말, 용액, 현탁액 및 시럽의 제조는 미국 특허 출원 공개 2018/0194719에 기재된 것과 같은 통상적인 기술에 의해 이루어질 수 있다.

상기 언급된 바와 같이, 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함한다. 약제학적으로 허용 가능한 부형제는 결합제, 희석제, 계면활성제, 붕해제, 윤활제/활택제, 및 착색제를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는, 투여조제의 약제학적 기술분야에서 사용되는 임의의 생리학적 불활성 부형제일 수 있다. 특정 부형제는 미국 특허 출원 공개 2008/020634에 기술된 것일 수 있다.

전술한 방법은 전신 홍반성 루푸스 또는 피부 홍반성 루푸스를 앓고 있는 대상체를 치료하는데 사용될 수 있다. 동시 루푸스 신염이 있는 전신 홍반성 루푸스를 갖는 개체의 치료도 본 발명의 범위 내에 있다.

추가 설명 없이, 본 기술분야의 기술자는 본 명세서의 개시내용에 기초하여 본 개시내용을 최대한 활용할 수 있을 것으로 사료된다. 따라서, 다음의 특정 실시예는 단지 설명적이며, 본 개시내용의 나머지 부분을 어떤 식으로든지 제한하는 것이 아닌 것으로 해석되어야 한다. 본 명세서에 인용된 모든 간행물 및 특허 문헌은 그 전체가 참조에 의해 포함된다.

실시예

실시예 1: 포볼 미리스테이트 아세테이트(Phorbol Myristate Acetate)/아이오노마이신(Ionomycin)-자극된 PBMC에 의한 IL-17 합성에 대한 HCQ, S-HCQ 및 R-HCQ의 효과

하이드록시클로로퀸(HCQ) 및 이의 순수 광학 이성질체 S-하이드록시클로로퀸(S-HCQ; 99.0%의 거울상이성질체적 과량) 및 R-하이드록시클로로퀸(R-HCQ; 98.3%의 거울상이성질체적 과량)이 포볼 미리스테이트 아세테이트(PMA) 및 아이오노마이신에 의해 자극된 인간 말초혈액 단핵 세포(PBMC)에서 인터루킨 17(IL-17) 생산을 저해하는 효능을 결정하기 위해, 시험관내 약력학 검정으로 시험하였다.

인간 PBMC는 ATCC®(PCS-800-011™)에서 구입하여 공급자가 제안한 대로 해동하였다. 세포는 10% 소 태아 혈청(Gibco, 10437-028), 10mM HEPES(Gibco, 15630-080), 및 100 U/㎖ 페니실린/스트렙토마이신(Gibco, 15140-122)이 보충된 RPMI-1640 배지(Gibco, 11875-093)에서 5% CO₂와 함께 37℃에서 배양하였다.

PBMC는 96-웰 둥근 바닥 마이크로플레이트(Corning, 7007)의 각 웰에 10⁶ 세포/㎖의 밀도로 접종한 다음, 각각 에탄올에 용해된 25μM, 50μM, 또는 100μM HCQ, S-HCQ, 또는 R-HCQ의 존재 및 부재 하에 25 ng/㎖ PMA 및 1 ㎍/㎖ 아이오노마이신으로 자극하였다. 배양 배지 중 에탄올의 최종 농도는 0.75%였다. 5μM 메틸프레드니솔론으로 처리된 PBMC는 양성 대조군으로 사용하였다.

48시간 또는 72시간 동안 항온배양한 후, 세포 배양 상청액을 수집하여 분석할 때까지 -80℃에서 보관하였다. PMA/아이오노마이신으로 자극된 PBMC에 의해 유도된 IL-17의 수치는 인간 IL-17 Quantikine ELISA Kit(R&D system, D1700)를 제품 정보에 따라 사용하여 분석하였다. 결과는 하기 표 1에 나타낸다.

PMA/아이오노마이신-자극된 PBMC에 의해 생성된 IL-17의 수치는 각 HCQ, S-HCQ 및 R-HCQ의 존재 하에 48시간 또는 72시간 동안 배양했을 때 용량 의존적 방식으로 저해되었다. HCQ, S-HCQ 또는 R-HCQ에 의한 IL-17 저해의 절대 IC₅₀은 50 내지 100μM 사이였다. PBMC에서 PMA/아이오노마이신에 의해 유도된 IL-17 생산에 대한 HCQ, S-HCQ 및 R-HCQ의 저해율 사이에는 최소 20% 포인트와 같은 큰 차이가 없었다.

실시예 2: 약력학

HCQ, S-HCQ 및 R-HCQ의 약력학은 인간 피부 홍반성 루푸스 모델인 MRL/lpr 마우스에서 조사하였다(문헌[Furukawa et al., 1996, J. Invest. Dermatol. 107; 95-100; Furukawa et al., 2009, Autoimmun. Rev. 8: 495-499; 및 Shimomatsu et al., 2016, Mod. Rheumatol. 26: 744-748] 참조). 8주령 MRL/lpr 마우스는 Jackson Laboratory(미국 메인주)에서 구입하였고, 일정한 온도 및 습도 제어 하에 12시간 명암 주기로 유지시켰다. 동물에게 물과 음식은 무제한으로 제공하였다. 사용된 S-HCQ 및 R-HCQ는 상기 실시예 1에 설정된 거울상이성질체적 과량이었다.

14 내지 15마리의 마우스 군은 약 15주령부터 비히클(PBS 중 10% EtOH), 저용량(20㎎/㎏) 또는 고용량(40㎎/㎏) HCQ, S-HCQ, 또는 R-HCQ로 처리하였다. 비히클 군 및 저용량 군의 마우스에게는 15주부터 31주까지 16주 동안 매일 1회 경구 처리하였다. 고용량 군의 마우스에게는 15주부터 29주까지 14주 동안 매일 1회 경구 처리하였다. 투약량은 10 ㎖/㎏으로 일정하게 유지시켰다.

처리된 MRL/lpr 마우스의 체중

비히클 또는 20㎎/㎏ HCQ, S-HCQ 또는 R-HCQ로 처리한 MRL/lpr 마우스는 0 일(최초 투약일)부터 111일까지 매주 1회 체중을 측정하였다. 40㎎/㎏ 군의 동물은 0일부터 90일까지 매일 체중을 측정하였다. 비히클과 모든 20㎎/㎏ 군 사이(도 1A 참조), 및 비히클과 모든 40㎎/㎏ 군(도 1B 참조) 사이에 평균 체중은 뚜렷한 차이가 관찰되지 않았다.

처리된 MRL/lpr 마우스의 생존율

살아 있는 마우스 및 죽은 마우스의 수는 15주령의 투약 첫날부터 매일 기록하였다. 생존율은 투약을 시작한 후 10 내지 11주(70 내지 80일)에 관찰하였다.

결과는 도 2A 및 도 2B에 나타낸다. 관찰 기간 동안 S-HCQ로 처리된 마우스는 20㎎/㎏(도 2A) 및 40㎎/㎏(도 2B) 투약군 모두에서 비히클, HCQ 및 R-HCQ로 처리된 마우스에 비해 더 높은 생존 분율을 나타내었다.

처리된 MRL/lpr 마우스의 피부 병변

MRL/lpr 마우스의 염증 및 피부 병변은 이전에 설명된 채점 척도를 사용하여 등쪽 목, 이마, 주둥이 및 귀 영역에서 주당 2회 채점하였다(문헌[Keil et al., 2016, Arthritis Res. Ther. 18: 243] 참조). 간단히 설명하면, 피부 병변이 없는 동물은 0점으로 채점하였고, 발적과 함께 최소 탈모 및 소수의 산발적 병변이 있는 동물은 1점으로 채점하였고, 적은 침범 부위와 발적, 딱지 및 탈모가 있는 동물은 2점으로 채점하였다.

1차 투약 후, 비히클 및 저용량 군의 경우에는 제68일부터 제111일까지, 고용량 군의 경우에는 제68일부터 제90일까지 각 군의 피부 병변의 평균 점수를 플로팅하였고, 도 3A에 나타낸다. 데이터는 20㎎/㎏ 및 40㎎/㎏ 둘 모두에서 S-HCQ 처리가 비히클 및 HCQ 및 R-HCQ 처리에 비해 MRL/lpr 마우스의 피부 염증 및 병변의 발현을 감소시키는데 있어서 더 우수하다는 것을 보여준다.

데이터는 전체 시험 기간 동안 각 처리에 대한 평균 피부 병변 점수를 비교하여 재분석하였다. 최초 투약 후 제68일부터 제111일까지의 피부 병변 점수는 비히클 및 저용량 군에서 평균을 내었고, 도 3B에 나타낸 바와 같이 비교되었다. 최초 투약 후 제68일부터 제90일까지의 피부 병변 점수는 비히클 및 고용량 군에서 평균을 내었고, 도 3C에 도시된 바와 같이 비교되었다. S-HCQ만이 저용량 및 고용량 모두에서 시험 기간 동안 피부 병변 점수를 현저하게 감소시켰다.

결과는 S-HCQ가 MRL/lpr 마우스에서 루푸스 유사 피부 병변의 자발적인 발생을 감소시키는데 있어서 다른 시험된 처리들보다 우수하다는 것을 나타내었다.

혈액 요소 질소 및 크레아티닌 농도

연구 종료 시 수집한 혈액 샘플에서 혈장을 준비하였다. 혈액 요소 질소(BUN) 수치 및 크레아티닌 농도는 FUJI DRI-CHEM 4000i 기기를 제조업체의 지시에 따라 사용하여 분석하였다. 상승된 BUN 및 크레아티닌 수치는 손상된 신장 기능을 나타낸다. 결과는 도 4A 및 도 4B에 나타낸다.

BUN 수치는 다른 어떤 처리를 받은 동물에 비해 40㎎/㎏의 S-HCQ로 처리된 MRL/lpr 마우스에서 현저히 낮았다. 도 4A 참조.

크레아티닌 농도를 살펴보면, HCQ(20㎎/㎏) 및 R-HCQ(20㎎/㎏ 및 40㎎/㎏)로 처리된 마우스에서 더 낮았다. 도 4B 참조. 크레아티닌 농도의 가장 현저한 감소는 40㎎/㎏ S-HCQ로 처리된 동물에서 관찰되었다. 상기 참조.

실시예 3: 시험관내 심장독성 분석

HCQ, S-HCQ 및 R-HCQ의 예측된 심장독성은 hERG(human ether-a-go-go-related gene) 전압 의존성 칼륨 채널의 활성을 저해하는 이들 약물의 능력을 결정함으로써 조사하였다. 약물에 의한 생체내 hERG의 저해는 후천적 긴 QT 증후군을 초래할 수 있으며, 이는 종종 다형심실빈맥, 심장 부정맥 및 급사를 초래한다. 이 연구에 사용된 S-HCQ 및 R-HCQ는 각각 99.8% 및 98.3%의 거울상이성질체적 과량을 갖고 있었다.

통상적인 패치 클램프(patch-clamp) 기술을 사용하여 hERG에 대한 저해 효과를 결정하였다. 인간 hERG cDNA에 의해 안정적으로 형질감염된 인간 배아 신장 세포(HEK-293)를 콜라겐-코팅된 35-mm 세포 배양 접시에 낮은 밀도로 1 내지 7일 동안 평판배양하였다. 단세포 패치 클램프 기록을 위해, 세포내 용액은 130mM KCl, 10mM NaCl, 1mM㎎Cl₂, 10mM EGTA, 5mM㎎ATP 및 10mM HEPES(KOH를 사용하여 pH를 7.2로 조정)를 함유하였다. 세포외 용액은 무세포 용액(mM): 137mM NaCl, 4mM KCl, 1.8mM CaCl₂, 1mM㎎Cl₂, 10mM D(+)-글루코스 및 10mM HEPES(NaOH를 사용하여 pH를 7.4로 조정)를 함유하였다. 모든 측정은 실온에서 수행하였다.

HCQ, S-HCQ, R-HCQ는 0.3μM, 1μM, 3μM, 10μM 및 30μM의 농도로 세포외 용액에 첨가하였다. 또한, 이들 농도에서 HCQ보다 더 심각한 부작용이 있는 것으로 알려진 클로로퀸 이인산염(CQ)도 시험하였다. 확인된 hERG 저해제인 시사프라이드(Cisapride)를 양성 대조군으로서 사용하였다.

세포 포획 후, hERG 채널을 비활성화하기 위해 -80㎷의 유지 전위(holding potential)를 +40㎷까지 4초 동안 스테핑하는 것을 수반하는 펄스 프로토콜을 수행하였다. 그 다음, 막 전압을 다시 -50㎷로 4초 동안 스테핑(stepping)하여 유지 전위로 돌아가기 전에 테일(tail) 전류를 유발하였다. 이 순서를 20초의 펄스간 간격을 두고 반복하였다. 전압 프로토콜은 화합물 첨가 전(음성 대조군) 및 시험 화합물, 즉, HCQ, S-HCQ, R-HCQ, CQ 또는 시사프라이드(양성 대조군)를 첨가한 후 시작하여 실험 내내 적용하였다. 유발된 피크 테일 전류 진폭은 실험 전반에 걸쳐 지속적으로 모니터하였다. 각 화합물은 저농도에서 고농도로 5분 동안 동일한 세포에 순차적으로 적용하였다.

hERG 채널의 저해율은 화합물 적용 전후의 테일 전류 진폭을 비교하여 계산하였고, 전류 차이는 대조군에 대해 정규화하였다. hERG 피크 테일 전류의 진폭은 -50㎷로 스테핑 시의 테일 전류를 측정하여 계산하였다. 전류는 각 화합물의 첨가 전 및 후에 측정하였다. 개별 세포 결과는 각각의 비히클 대조군에 대해 정규화하였고 결과는 평균화하였다. 저해율 값은 각 시험 화합물에 대한 IC₅₀을 계산하는데 사용하였다. 이 검정에서 화합물의 IC₅₀값이 높을수록 hERG의 저해제로서 덜 효과적이므로 예상되는 심장독성은 더 낮다.

결과는 HCQ, R-HCQ, 및 CQ의 IC₅₀이 각각 4.84μM, 4.20μM, 및 0.98μM이었음을 보여주었다. CQ는 HCQ 및 R-HCQ보다 hERG 기능의 더욱 효과적인 저해제였으므로, 생체내 부작용을 예측하는 데 있어서 시험관내 심장독성 검정의 능력을 확인시켜준다.

이외로, S-HCQ의 IC₅₀은 10.96μM이었다. 가장 높은 IC₅₀값을 갖는 S-HCQ는 시험된 hERG의 가장 덜 효과적인 저해제이다. 따라서, S-HCQ는 시험된 화합물 중 생체내 가장 적은 심장독성을 가질 것으로 예상될 것이다.

상기 실시예를 요약해보면, 시험관내 약력학 연구(실시예 1)에 의해 밝혀진 S-HCQ와 R-HCQ 간에는 놀라운 차이가 없었다.

이에 반해, MRL/lpr 마우스에서의 생체내 약력학 연구(실시예 2)는 S-HCQ 처리가 더 높은 생존 분율 및 루푸스 유사 피부 병변의 더 낮은 빈도를 초래하였음을 보여주었다. 또한, 혈장 내 BUN 및 크레아티닌 농도는 40㎎/㎏의 S-HCQ로 처리된 동물 중 MRL/lpr 마우스에서 가장 현저하게 감소하였고, 이것은 이 화합물이 신장 기능에 더 보호적임을 보여준다. 이러한 결과는 루푸스 환자, 특히 동시 루푸스 신염 환자를 치료하는데 있어서 HCQ 및 R-HCQ보다 S-HCQ가 유리하다는 강력한 근거를 제공한다.

마지막으로, S-HCQ는 시험된 약물 중 심장독성이 가장 적었으며(실시예 3), 이것은 루푸스 환자를 치료하는데 있어서 HCQ 및 R-HCQ보다 S-HCQ를 선택하는 것에 대한 위에서 언급한 근거를 강화시켜 준다.

일부는 상기 인용된 것인 이하의 참고문헌은 이용분야의 배경을 더 잘 이해하는 데 사용될 수 있다:

Chhonker et al. 2018, J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 1072: 320-327.

Furukawa et al. 1996, J Invest Dermatol. 107(1): 95-100.

Furukawa et al. 2009, Autoimmun Rev. 8(6): 495-9.

Jiang et al. 2007, J Immunol. 178(11): 7422-31.

Keil et al. 2016, Arthritis Res Ther. 18(1): 243.

Knight et al. 2015, Ann Rheum Dis. 74(12): 2199-206.

Rupanagudi et al. 2015, Ann Rheum Dis. 74(2): 452-63.

Shimomatsu et al. 2016, Mod Rheumatol. 26(5): 744-8.

Vugmeyster et al. 2010, MAbs. 2(3): 335-46.

상기 참고문헌의 내용은 그 전체가 여기에 참고로 포함된다.

다른 실시형태

본 명세서에 개시된 모든 특징은 임의의 조합으로 조합될 수 있다. 본 명세서에 개시된 각각의 특징은 동일하거나 동등하거나 유사한 목적을 제공하는 대안적 특징으로 대체될 수 있다. 달리 명시적으로 언급되지 않는 한, 개시된 각 특징은 일반적인 일련의 동등하거나 유사한 특징의 예일 뿐이다.

이상의 상세한 설명으로부터 본 기술분야의 기술자는 본 발명의 본질적인 특징을 용이하게 확인할 수 있으며, 본 발명의 사상 및 범위를 벗어남이 없이 다양한 사용법 및 조건에 적합하도록 본 발명의 다양한 변경 및 수정이 이루어질 수 있다. 따라서, 다른 실시형태도 이하 청구범위의 범위 내에 있다.

Claims

홍반성 루푸스를 치료하는 방법으로서,
홍반성 루푸스의 치료를 필요로 하는 대상체를 확인하고, S-하이드록시클로로퀸 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 함유하는 약제학적 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하되, 상기 약제학적 조성물에는 R-하이드록시클로로퀸이 본질적으로 없는, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 S-하이드록시클로로퀸은 약제학적으로 허용 가능한 염 형태인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제2항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용 가능한 염은 염산염, 황산염 또는 인산염인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 대상체에게 투여되는 S-하이드록시클로로퀸의 용량이 1일당 100㎎ 내지 800㎎인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제4항에 있어서, 상기 용량은 1일당 200㎎인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 과립, 정제, 캡슐, 알약, 분말, 용액, 현탁액 또는 시럽의 형태인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 홍반성 루푸스는 전신 홍반성 루푸스인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제7항에 있어서, 상기 S-하이드록시클로로퀸은 약제학적으로 허용 가능한 염 형태인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제8항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용 가능한 염은 염산염, 황산염 또는 인산염인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제7항에 있어서, 상기 대상체에게 투여되는 S-하이드록시클로로퀸의 용량이 1일당 100㎎ 내지 800㎎인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제10항에 있어서, 상기 용량은 1일당 200㎎인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제7항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 과립, 정제, 캡슐, 알약, 분말, 용액, 현탁액 또는 시럽의 형태인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제7항에 있어서, 상기 대상체는 루푸스 신염을 앓고 있는, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제13항에 있어서, 상기 S-하이드록시클로로퀸은 약제학적으로 허용 가능한 염 형태인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제14항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용 가능한 염은 염산염, 황산염 또는 인산염 인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제13항에 있어서, 상기 대상체에게 투여되는 S-하이드록시클로로퀸의 용량이 1일당 100㎎ 내지 800㎎인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제16항에 있어서, 상기 용량은 1일당 200㎎인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제13항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 과립, 정제, 캡슐, 알약, 분말, 용액, 현탁액 또는 시럽의 형태인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 홍반성 루푸스는 피부 홍반성 루푸스인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제19항에 있어서, 상기 S-하이드록시클로로퀸은 약제학적으로 허용 가능한 염 형태인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제20항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용 가능한 염은 염산염, 황산염 또는 인산염 인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제19항에 있어서, 상기 대상체에게 투여되는 S-하이드록시클로로퀸의 용량이 1일당 100㎎ 내지 800㎎인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제22항에 있어서, 상기 용량은 1일당 200㎎인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.
제19항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 과립, 정제, 캡슐, 알약, 분말, 용액, 현탁액 또는 시럽의 형태인, 홍반성 루푸스를 치료하는 방법.