KR20210107083A - Cd44 표적화된 멀티 아암 콘쥬게이트 - Google Patents

Cd44 표적화된 멀티 아암 콘쥬게이트 Download PDF

Info

Publication number
KR20210107083A
KR20210107083A KR1020217023336A KR20217023336A KR20210107083A KR 20210107083 A KR20210107083 A KR 20210107083A KR 1020217023336 A KR1020217023336 A KR 1020217023336A KR 20217023336 A KR20217023336 A KR 20217023336A KR 20210107083 A KR20210107083 A KR 20210107083A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
cancer
poly
pharmaceutically acceptable
drug conjugate
Prior art date
Application number
KR1020217023336A
Other languages
English (en)
Inventor
지엔동 유엔
양칭 황
윤송 송
Original Assignee
브라이트제네 바이오-메디컬 테크놀로지 코., 엘티디.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 브라이트제네 바이오-메디컬 테크놀로지 코., 엘티디. filed Critical 브라이트제네 바이오-메디컬 테크놀로지 코., 엘티디.
Publication of KR20210107083A publication Critical patent/KR20210107083A/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/55—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being also a pharmacologically or therapeutically active agent, i.e. the entire conjugate being a codrug, i.e. a dimer, oligomer or polymer of pharmacologically or therapeutically active compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • C08G65/333—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing nitrogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • C08G65/333—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing nitrogen
    • C08G65/33396—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing nitrogen having oxygen in addition to nitrogen

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

CD44를 특이적으로 표적화할 수 있는 부류의 다분지 약물 콘쥬게이트(multi-branched drug conjugate)가 개시된다. 이러한 부류의 화합물은 CD44에 특이적으로 결합하고, 높은 CD44 발현을 갖는 종양 세포 및 조직을 표적화할 수 있으며, 이에 따라 표적 조직 중 콘쥬게이트의 농도가 높고, 이의 임상 치료 효과가 개선되며, 독성이 감소한다. 본 발명의 화합물은 위암, 췌장암, 소세포 폐암, 결장암, 유방암, 폐 선암, 간암, 비인두 암종, 악성 신경교종, 림프종, 신장 암종, 난소암, 두경부암, 편평 세포 암종 등을 포함하나 이에 한정되지 않는, 높은 CD44 발현을 갖는 모든 종양을 치료하기에 적합하다.

Description

CD44 표적화된 멀티 아암 콘쥬게이트
본 발명은 일반적으로 멀티 아암 표적화 콘쥬게이트(multi-arm targeting conjugate)에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 CD44-표적화된 분자와 항암제가 상승 효과를 제공하는 멀티 아암 콘쥬게이트에 관한 것이다.
최근 몇년 동안, 악성 종양은 사망률과 이환율 둘 모두에서 분명한 상승 추세를 나타내왔으며, 인간 건강에 심각한 위협이 되고 있다.
CD44는 세포외 영역, 막관통 영역 및 막-근위 영역을 포함하여 광범위한 분포 및 다양한 분자 형태를 갖는 내재 막 당단백질의 그룹이다. CD44는 먼저 하이알루론산을 결합하여 세포내 신호전달 경로를 촉발하고, 결과적으로 배출, 전이 및 침입을 포함하는 일련의 세포 반응을 야기하는 I형 막관통 당단백질이다. 세포 접착 분자의 패밀리의 일원인 CD44는 세포들 간의 및 세포와 세포외 기질 간의 접착 및 결합을 조절하는 데 중요한 역할을 하는데, 이는 조직 구조의 온전성을 유지하는 데 매우 중요하다. CD44는 또한 세포내 신호를 전달하고, 종양 세포, 예컨대, 유방암 세포 및 대장암 세포의 발생, 활성 등을 조절할 수 있다. 현재, 다수 연구에 따르면, CD44는 종양의 발생, 발달, 침입, 및 전이와 밀접한 관련이 있고, 종양 발생의 초기 단계에 흔히 발현되며(여기서, 발현의 차이는 종양의 발달에 의해 더 유의해짐), 예를 들어, CD44는 일부 전암성 병변에서 발현되는 것으로 밝혀졌다.
용어 "CD44-표적화된 폴리펩티드"는 CD44를 표적화하고 이에 결합할 수 있는 폴리펩티드를 지칭한다. 전형적으로, "CD44-표적화된 폴리펩티드"는 다음 구조를 갖는 폴리펩티드를 포함한다: Ac-KPSSPPEE-NH2 및 Ac-NASAPPEE-NH2. 상기 언급된 두 폴리펩티드는 CD44의 링크 도메인의 일부와 특정 서열 상동성을 갖고, CD44를 표적화하고 이에 결합할 수 있다.
특히, Ac-KPSSPPEE-NH2의 구조를 갖는 폴리펩티드는 A6 폴리펩티드로도 불리고, A6의 구조는 하기와 같고:
Figure pct00001
Ac-NASAPPEE-NH2의 구조를 갖는 폴리펩티드는 하기와 같다:
Figure pct00002
.
제WO 2005028539호, 제WO 2010019233호, 제WO 2011063156호 및 제WO 2011063158호에는, 임상 3상 개발 중에 있으며 주로 전이성 유방암에 사용되는 Nektar Therapeutics로부터의 약물 nktr-102가 개시되어 있다. 이 약물은 개선된 약물 담지를 달성하기 위한 수용성 다분지 폴리머 전구약물이며 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00003
.
멀티 아암 PEG를 이리노테칸에 연결함으로써, 화합물은 항암 효과에 영향을 미치지 않으면서 증가된 수용성, 개선된 약물 담지, 및 감소된 부작용을 가질 수 있다. 그러나, 이 약물은 여전히 결점들을 갖는데, 예를 들어, 이는 불량한 표적화 능력을 갖고, 특정 암 세포에 대해 작용할 수 없으며, 암 세포를 사멸시킬 때 이는 또한 정상 세포의 특성에 영향을 미쳐 비교적 높은 유해 효과 발생률을 야기한다.
중국 특허 출원 제CN 108727583 A호에는, 높은 담지 능력을 나타내는 부류의 화합물이고, 표적 조직에서 콘쥬게이트의 농도가 높도록 표적화 능력을 갖는, 멀티 아암 폴리머-변형된 표적화 항암 콘쥬게이트가 개시되어 있다. 그러나, 악성 종양 세포의 구조, 기능 및 대사의 이상으로 인해, 세포는 무한으로 그리고 무질서한 방식으로 분열하고 증식할 수 있으며, 그에 따라 제거하기가 매우 어렵다. 그러므로, 제약 R & D에서는 보다 우수한 치료 효과를 갖는 항암 약물을 지속적으로 개발하는 것이 필요하다.
본 발명은 표적화 다분지 약물 콘쥬게이트(multi-branched drug conjugate)를 개시하며, 콘쥬게이트는 세 개 이상의 분지쇄를 갖고, 하기 화학식으로 표현될 수 있다:
[화학식 I]
Figure pct00004
상기 식에서, R은 유기 코어이고, POLY는 폴리머이고, L은 다가 링커이고, T는 표적화 분자이고, D는 활성제이고, q는 3 내지 8의 임의의 정수이다.
유기 코어, "R"
구조식 I에서, "R"은 1 개 내지 100 개의 원자를 갖는 유기 코어 기이다. 바람직하게는, R은 3 개 내지 50 개의 원자를 함유하고, 더욱 바람직하게는, R은 약 3 개 내지 30 개의 원자를 함유한다. R은, 사용되는 특별한 중심 분자에 따라, 모든 원자가 탄소 원자인 코어 기일 수 있거나, O, S, N 및 P와 같은 하나 이상의 헤테로원자를 선택적으로 함유할 수 있다. R은 선형, 분지형 또는 환형 코어 기일 수 있고, 적어도 3 개의 독립적인 폴리머 분지쇄를 갖는다. 구조식 I에서, "q"는 "R"의 폴리머 분지쇄의 수에 상응하는 수이다.
일부 특정 구현예에서, "R"은 3 개의 폴리머 분지쇄를 갖고, "R"은 바람직하게는
Figure pct00005
및
Figure pct00006
이다.
일부 특정 구현예에서, "R"은 4 개의 폴리머 분지쇄를 갖고, "R"은 바람직하게는
Figure pct00007
,
Figure pct00008
및
Figure pct00009
이다.
일부 특정 구현예에서, "R"은 6 개의 폴리머 분지쇄를 갖고, "R"은 바람직하게는
Figure pct00010
이다.
일부 특정 구현예에서, "R"은 8 개의 폴리머 분지쇄를 갖고, "R"은 바람직하게는
Figure pct00011
및
Figure pct00012
이다.
폴리머, "POLY"
구조식 I에서, "POLY"는 폴리머, 바람직하게는 수용성 폴리머이며, 임의의 수용성 폴리머는 본 발명의 콘쥬게이트를 형성하는 데 사용될 수 있다. 본 발명의 폴리머는 임의의 기하학적 형상 또는 형태일 수 있다. 대표적인 폴리머는 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 폴리(비닐피롤리돈), 폴리(하이드록시알킬 메타크릴레이트 아민), 폴리(하이드록시알킬 메타크릴레이트), 폴리(사카라이드), 폴리(α-하이드록시산), 폴리(아크릴산), 폴리(비닐 아세테이트), 폴리포스파진, 폴리옥사졸린 및 폴리(N-아크릴로일모르폴린)을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
전형적인 화합물에서, "POLY"는 폴리에틸렌 글리콜이며, 이는 선형, 분지형 및 포크형 형상 또는 형태를 포함하는 임의의 기하학적 형상 또는 형태일 수 있으며; 바람직하게는, 본 발명의 바람직한 "POLY"는 선형 폴리에틸렌 글리콜이며, 이는 전형적으로 하기와 같은 구조를 갖는다:
Figure pct00013
상기 식에서, "
Figure pct00014
"는 원자들 간의 부착을 나타내고, "&"로 표시된 산소 원자는 유기 코어 "R"에 부착된 원자이고, 여기서 k는 약 5 내지 500, 가장 바람직하게는 50 내지 200, 바람직하게는 101 내지 125의 범위이고, 더욱 바람직하게는 k는 113이다. 폴리머 분야에서 k는 폴리머의 분자량에 따른 폴리머의 중합도, 즉, 폴리머의 거대분자 사슬에 함유된 평균 반복 단위 수를 나타내고; 예를 들어, k가 113일 때, 거대분자 사슬에 함유된 평균 반복 단위 수는 113임이 당업자에게 인지되어야 한다. 폴리머의 거대분자 사슬에 함유되는 평균 반복 단위 수가 113일 때, 폴리머의 분자 사슬은 실제로 상이한 반복 단위 수를 함유할 수 있으며; 예를 들어, 폴리머의 상이한 분자 사슬은 실제로, 예를 들어, 100 개 내지 130 개의 반복 단위를 함유할 수 있다.
r은 1 내지 10의 임의의 정수이고; 더욱 바람직하게는, 본 발명의 "POLY"는
Figure pct00015
또는
Figure pct00016
이다.
본 발명의 POLY는 또한
Figure pct00017
등일 수 있다.
본 발명의 특정 구현예에서, "R"은 5 개의 탄소 원자를 갖는 유기 코어 기이고, 4 개의 폴리머 분지쇄에 부착될 수 있으며, 각 분지쇄는 선형 폴리에틸렌 글리콜 연결 아암을 포함한다.
구조식 I의 다분지 약물 콘쥬게이트의 특정 제조에서, 필요한 멀티 아암 폴리머, 즉, q개의 폴리머 아암
Figure pct00018
에 부착되는 R은 미리 제조되거나 구매될 수 있다.
특정 구현예에서, 멀티 아암 폴리머
Figure pct00019
는 3armPEG20K-SCM, 4armPEG20K-SCM 또는 8armPEG20K-SCM일 수 있고, 여기서
Figure pct00020
는 바람직하게는 약 20 kDa의 분자량을 갖는다. 표현 "약 20 kDa"는 20000 ± 2000의 분자량을 나타낸다.
본 발명의 실시예에서 사용되는 4arm-PEG20K-SCM은 하기와 같은 구조를 갖는다:
Figure pct00021
.
본 발명의 바람직한 구현예에서, "POLY"는 선형 폴리에틸렌 글리콜 연결 아암이고, 즉, 본 발명의 콘쥬게이트는 바람직하게는 하기와 같은 화합물이다:
Figure pct00022
.
본 발명에서, 다가 링커 L은 바람직하게는
Figure pct00023
이다.
상기 식에서, 기호 "*"는 표적화 분자 T에 대한 다가 링커 L의 부착점을 나타내고; "#"은 활성제 D에 대한 다가 링커 L의 부착점을 나타내고; "%"는 POLY에 대한 다가 링커 L의 부착점을 나타내고, 여기서 m은 1 내지 20의 임의의 정수이고, l 및 n은 독립적으로 1 내지 10의 임의의 정수이다. 가장 바람직하게는, l은 5이고, m은 3이고, n은 4이고, 즉, 본 발명의 바람직한 다가 링커 L은
Figure pct00024
이다.
D는 하기 화학식으로 표현되는 캄프토테신(camptothecin)계 약물이다:
Figure pct00025
.
R1 내지 R5는 서로 독립적으로 다음 기: 수소, 할로겐, 아실, 알킬, 치환된 알킬, 알콕시, 치환된 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 하이드록시, 시아노, 니트로, 아자이도, 아미도, 하이드라진, 아민, 치환된 아민, 하이드록시카르보닐, 알콕시카르보닐, 알콕시카르보닐옥시, 선택적으로 치환된 카르바모일옥시, 아릴술포닐옥시, 알킬술포닐옥시 및 R9C(O)O-로부터 선택되고, 여기서 R9는 할로겐, 아미노, 치환된 아미노, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클이고; R6은 H 또는 OR8이고; R8은 알킬, 알케닐, 사이클로알킬, 할로알킬 또는 하이드록시알킬이고; R7은 하이드록시, 아미노 또는 티올이다.
헤테로사이클은 바람직하게는 질소-함유 헤테로사이클, 더욱 바람직하게는 5 원 내지 6 원 질소-함유 헤테로사이클이다. 치환기를 갖는 상기 언급된 기와 관련하여, 이의 치환기는 하이드록시, 시아노, C1-C5 선형 또는 분지형 알킬, C3-C7 사이클로알킬, C1-C5 선형 또는 분지형 알콕시, 5 원 내지 6 원 헤테로사이클릴, 5 원 내지 12 원 아릴 또는 5 원 내지 12 원 헤테로아릴로부터 선택될 수 있고, 바람직하게는 5 원 내지 12 원 헤테로아릴 및 5 원 내지 6 원 헤테로사이클릴에서 헤테로원자는 질소 원자이다. 헤테로사이클은, 예를 들어, 피롤, 피페리딘 등일 수 있고, 5 원 내지 6 원 헤테로사이클릴은, 예를 들어, 피롤릴 또는 피페리디닐일 수 있고; 아릴은 페닐, 나프틸, 바이페닐 및 이의 유사체를 포함한다.
또한, 치환된 카르바모일옥시와 관련하여, 이의 치환기는 그것이 부착되는 N 원자와 함께 6-원 고리도 형성할 수 있으며, 6-원 고리는 상기 언급된 치환기도 가질 수 있다.
바람직하게는, D는 이리노테칸 또는 SN38이다.
이리노테칸은 하기와 같은 구조를 갖는다:
Figure pct00026
.
SN38은 하기와 같은 구조를 갖는다:
Figure pct00027
.
T는 CD44에 결합할 수 있는 "CD44-표적화된 폴리펩티드"인 표적화 분자이다. 전형적으로, "CD44-표적화된 폴리펩티드"는 하기 서열을 갖는 폴리펩티드를 포함한다:
Ac-KPSSPPEE-NH2; Ac-NASAPPEE-NH2; QETWFQNGWQGKNP; KEKWFENEWQGKNP; KEQWFGNRWHEGYR; 및 QIRQQPRDPPTETLELEVSPDPAS.
상기 언급된 폴리펩티드의 치환 변이형, 첨가 변이형 및 화학적-변형 유도체가 또한 포함된다.
T는 또한 제WO 99/05263호에 개시된 폴리펩티드, 즉, 다음 서열을 갖는 폴리펩티드, 또는 이의 치환 변이형, 첨가 변이형 및 화학적-변형 유도체일 수 있다: Lys-Pro-Ser-Ser-Pro-Pro-Glu-Glu(KPSSPPEE) 및 Asn-Ala-Ser-Ala-Pro-Pro-Glu-Glu(NASAPPEE). 또한, T는 제WO 2007141533호에 개시된 FKBP-L 폴리펩티드일 수 있다.
표적화 분자 T는 또한 CD44에 결합할 수 있는 단클론성 항체 또는 이의 천연 리간드일 수 있다. CD44에 결합할 수 있는 천연 리간드는 하이알루론산(HA), 오스테오폰틴(OPN), 세르글리신, 콜라겐, 피브로넥틴, 라미닌, 콘드로이틴 설페이트 C(CSC), 헤파란 설페이트(HS), 안키린, 갈렉틴-3, L-셀렉틴, P-셀렉틴, C-형 렉틴 및 아드레신을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 표적화 분자 T는 바람직하게는 Ac-KPSSPPEE-NH2 또는 Ac-NASAPPEE-NH2-이고, 두 폴리펩티드가 종결 NH2 말단을 통해 다가 링커 L에 연결된다.
본 발명의 특정 구현예에서, 구조식 I의 다분지 약물 콘쥬게이트는 하기와 같은 화합물 A, 화합물 B, 화합물 C, 및 화합물 D를 포함한다:
[화합물 A]
Figure pct00028
[화합물 B]
Figure pct00029
[화합물 C]
Figure pct00030
[화합물 D]
Figure pct00031
상기 식에서, 화합물 A, 화합물 B, 화합물 C 및 화합물 D의 분자 구조 중 각 k는 독립적으로 101 내지 125이고, 바람직하게는 각 k는 독립적으로 113이다.
본 발명의 특정 구현예에서, 구조식 I의 다분지 약물 콘쥬게이트는
[화합물 a]
Figure pct00032
(화합물 a에서, D는 이리노테칸이고, T는 A6, 즉, Ac-KPSSPPEE-NH2임);
[화합물 b]
Figure pct00033
(화합물 b에서, D는 이리노테칸이고, T는 Ac-NASAPPEE-NH2임);
[화합물 c]
Figure pct00034
(화합물 c에서, D는 SN38이고, T는 A6, 즉, Ac-KPSSPPEE-NH2임);
[화합물 d]
Figure pct00035
(화합물 d에서, D는 SN38이고, T는 Ac-NASAPPEE-NH2임)이다.
본 발명의 구현예에서, 구조식 I의 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제조하기 위한 방법은
활성제 D를 다가 링커 L에 연결하여 D-L 부분을 수득하는 단계;
D-L 부분을 멀티 아암 폴리머
Figure pct00036
에 연결하여
Figure pct00037
를 수득하는 단계; 및
Figure pct00038
를 표적화 분자 T에 연결하는 단계를 포함한다.
본 발명은 멀티 아암 폴리머로 변형된 표적화 항암 콘쥬게이트에 관한 것이며, 여기서 수용성 폴리머로의 변형은 콘쥬게이트의 수용성을 향상시킴으로써 약물 담지를 증가시킬 수 있고; 표적화 분자는 표적 조직 중 콘쥬게이트의 농도가 높도록 표적화 능력을 개선하고; L은 전체 콘쥬게이트가 유기적 완전체를 형성하도록 먼저 항암 약물에 표적화 분자를 연결하고 이후 표적화 분자와 항암 약물을 폴리머 아암에 연결하는 기능을 갖는 임의의 연결 링커이다. 본 발명의 콘쥬게이트는 전형적으로 전구약물이며, 활성제 D는 가수분해 또는 효소분해를 통해 모체로부터 방출되고 분리되어 생리적 활성을 발휘한다. 비콘쥬게이션된 약물에 비해, 본 발명의 콘쥬게이트는 더 강한 효과를 나타내며, 인간 또는 다른 동물의 체내에 더 풍부하다.
본 발명의 콘쥬게이트의 약학적으로 허용되는 염은 무기 염 및 유기 염을 포함하고, 전형적으로 니트레이트, 설페이트, 포스페이트, 하이드로플루오라이드, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로아이오다이드, 포르메이트, 락테이트, 벤조에이트, 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 디클로로아세테이트, 트리클로로아세테이트, 혼합된 클로로플루오로아세테이트, 시트레이트, 옥살레이트, 술포네이트, 메실레이트, 트리플루오로메실레이트, 헵탄술포네이트 등을 포함하고, 바람직하게는 하이드로클로라이드 및 아세테이트를 포함하고, 여기서 염은 의료 화학 분야에서 통상적인 수단에 의해 제조될 수 있다.
본 발명의 특정 구현예에서, 화합물 A, 화합물 B, 화합물 C 및 화합물 D의 염은 전형적으로 하이드로클로라이드 및 아세테이트를 포함하고, 여기서 하이드로클로라이드는 전형적으로 각 분지쇄가 1 개 또는 2 개의 염산 분자에 각각 결합되는 하이드로클로라이드이고, 아세테이트는 전형적으로 각 분지쇄가 1 개 또는 2 개의 아세트산 분자에 각각 결합되는 아세테이트이다.
화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d의 하이드로클로라이드는 전형적으로 각 분지쇄가 1 개 또는 2 개의 염산 분자에 각각 결합되는 하이드로클로라이드이고, 콘쥬게이트는 바람직하게는 4 개 또는 8 개의 분자를 함유하는 하이드로클로라이드이다.
화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d의 아세테이트는 전형적으로 각 분지쇄가 1 개 또는 2 개의 아세트산 분자에 각각 결합되는 아세테이트이고, 콘쥬게이트는 바람직하게는 4 개 또는 8 개의 분자를 함유하는 아세테이트이다.
본 발명의 화합물은 CD44에 특이적으로 결합할 수 있고, 높은 CD44 발현을 갖는 종양 세포 및 조직을 표적화할 수 있으며, 이에 따라 표적 조직 중 콘쥬게이트의 농도가 높고, 이의 임상 치료 효과가 개선되며, 독성이 감소한다.
본 발명의 화합물은 위암, 췌장암, 소세포 폐암, 결장암, 유방암, 폐 선암, 간암, 비인두 암종, 악성 신경교종, 림프종, 신장 암종, 난소암, 두경부암, 편평 세포 암종 등을 포함하나 이에 한정되지 않는, 높은 CD44 발현을 갖는 모든 종양을 치료하기에 적합하다.
본 발명은 또한 높은 CD44 발현을 갖는 종양을 치료하기 위한 방법을 제공하며, 본 방법은 본 발명에 의해 제공된 치료적 유효량의 구조식 I의 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 높은 CD44 발현을 갖는 종양을 앓고 있는 포유동물에게 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 포유동물은 인간을 포함한다.
본 발명은 또한 높은 CD44 발현을 갖는 종양을 치료하기 위한 방법을 제공하며, 본 방법은 치료적 유효량의 약학적 조성물을 높은 CD44 발현을 갖는 종양을 앓고 있는 포유동물에게 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 포유동물은 인간을 포함하고, 약학적 조성물은 구조식 I의 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함한다.
본 발명은 이하에서 상세하게 기술될 것이다. 그러나, 본 발명은 다수의 상이한 형태로 구체적으로 구현될 수 있고, 본원에 기재된 실시예로 제한되지 않아야 하며, 이들 실시예가 제공됨으로써 본 개시는 보다 완전하고 철저해질 것이다. 사용된 시약 및 원료는, 제조 방법이 제공된 것들을 제외하고, 상업적으로 입수 가능하다. 4armPEG20K-SCM은 Beijing Jenkem Technology Co., Ltd.로부터 구매된 것이고, 약 20 kDa의 분자량을 갖는다. 달리 정의되지 않는 한, 본원의 모든 과학 및 기술 용어는 청구항의 주제에 관한 분야의 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 의미와 동일한 의미를 갖는다.
4arm-PEG20K-SCM은 하기와 같은 구조를 갖는다:
Figure pct00039
.
용어
Figure pct00040
실시예 1
Figure pct00041
1. BP103a의 제조
250 ml 3-목 플라스크에, 18.20 g의 화합물 BP103a05 및 100 ml의 EA를 첨가하고; 화합물을 교반하면서 용해시키고, 혼합물을 이후 0℃까지 냉각시키고; 150 ml의 HCl/EA(3.5 M)를 첨가하고, 온도를 0℃에서 유지하고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 반응 용액을 건조 상태로 농축시키고, 메틸 3차-부틸 에테르를 첨가함으로써 슬러리화시키고, 여과하고; 여과 케이크를 TBME로 세척하고, 진공에서 건조시켜, 10.40 g의 BP103a를 백색 고형물로서 수득하였다.
2. BP103a07의 제조
100 mL 플라스크에, 3.00 g의 BP103a(1.0 eq), 4.02 g(1.0 eq)의 BP102c07, 40 ml의 DCM 및 4.0 ml의 DIEA(2.0 eq)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 교반하고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 유기 용매를 증발에 의해 제거하고; 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 처리하여, 6.4 g의 BP103a07을 오일로서 수득하였다.
3. BP103a08의 제조
200 ml 3-목 플라스크에, 9.00 g의 BP103a07(1.0 eq), 3.96 g의 HOSU(1.53 eq), 90 ml의 DCM 및 6.60 g의 EDC · HCl(1.53 eq)을 첨가하고, 실온에서 2 시간 동안 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 혼합물을 DCM으로 희석하고, 이후 50 mmol/L의 포타슘 디하이드로젠 포스페이트 수용액으로 2 회 세척하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켜, 5.93 g의 BP103a08을 무색 오일로서 수득하였다.
4. BP103a30의 제조
200 mL 플라스크에, 2.93 g의 화합물 NH2-Lys (Boc)-OH · HCl(1.0 eq), 60 ml의 물 및 2.00 g의 NaHCO3(2.0 eq)을 첨가하고; 60 ml의 DME 중 5.91 g의 BP103a08(1.0 eq)의 용액을 교반하면서 적가하고; 60 ml의 THF를 보충하고; 혼합물을 밤새 교반하고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 유기 용매를 증발에 의해 제거하고; 잔류물을 희석 염산으로 pH
Figure pct00042
3으로 조절하고, EA로 추출하고, 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켜, 4.50 g의 BP103a30을 무색 오일로서 수득하였다.
5. BP103a31의 제조
100 ml 3-목 플라스크에, 5.00 g의 BP103a30(1.0 eq), 1.40 g의 HOSU(1.53 eq), 50 ml의 DCM 및 2.33 g의 EDC · HCl(1.53 eq)을 첨가하고, 실온에서 2 시간 동안 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 혼합물을 DCM으로 희석하고, 이후 50 mmol/L의 포타슘 디하이드로젠 포스페이트 수용액으로 2 회 세척하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켜, 4.89 g의 BP103a31을 무색 오일로서 수득하였다.
실시예 2 중간체 Ac-KPSSPPEEC-NH2의 합성
Figure pct00043
Ac-KPSSPPEEC-NH2를 당업자에게 널리 공지된 Fmoc 고체상 합성 방법에 의해 합성하고; 링크-아미드 수지(Rink-amide Resin) 및 20%의 피페리딘/DMF를 사용함으로써 Fmoc를 제거하고; HOBT/DIC를 커플링 시약으로서 사용하고, DMF를 반응 용매로서 사용하고; 반응을 닌하이드린 검출법에 의해 모니터링하고; 다음의 보호된 아미노산을 수지에 순차적으로 커플링시키고: Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Pro-OH 및 Fmoc-Lys(Boc)-OH; 생성물을 아세트산 무수물 및 피리딘으로 아세틸화시키고, 이후 DMF, 메탄올 및 DCM으로 세척하고, 건조시키고; 세포용해 시약(TFA : 티오아니솔 : 페놀 : TIS = 85 : 5 : 5 : 5)을 첨가하고; 2 시간 동안 반응시킨 후, 혼합물을 얼음-냉각된 TBME를 사용하여 침전시키고, 원심분리하여, 미정제 Ac-KPSSPPEEC-NH2를 수득하였고, 이를 분취용-HPLC에 의해 정제한 후, 동결건조시켜, 순수한 생성물을 수득하였다.
실시예 3 중간체 Ac-NASAPPEEC-NH2의 합성
Figure pct00044
Ac-NASAPPEEC-NH2를 당업자에게 널리 공지된 Fmoc 고체상 합성 방법에 의해 합성하고; 링크-아미드 수지 및 20%의 피페리딘/DMF를 사용함으로써 Fmoc를 제거하고; HOBT/DIC를 커플링 시약으로서 사용하고, DMF를 반응 용매로서 사용하고; 반응을 닌하이드린 검출법에 의해 모니터링하고; 다음의 보호된 아미노산을 수지에 순차적으로 커플링시키고: Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Ala-OH 및 Fmoc-Asn(Trt)-OH; 생성물을 아세트산 무수물 및 피리딘으로 아세틸화시키고, 이후 DMF, 메탄올 및 DCM으로 세척하고, 건조시키고; 세포용해 시약(TFA : 티오아니솔 : 페놀 : TIS = 85 : 5 : 5 : 5)을 첨가하고; 2 시간 동안 반응시킨 후, 혼합물을 얼음-냉각된 TBME를 사용하여 침전시키고, 원심분리하여, 미정제 Ac-NASAPPEEC-NH2를 수득하였고, 이를 분취용-HPLC에 의해 정제한 후, 동결건조시켜, 순수한 생성물을 수득하였다.
실시예 4
Figure pct00045
1. BP143b02의 제조
250 mL 둥근 바닥 플라스크에, 3.50 g의 이리노테칸 하이드로클로라이드 삼수화물(1.0 eq) 및 52.5 ml의 DMF를 첨가하고, 60℃까지 가열하여 이를 용해시키고; 5 분 내지 10 분 후, DMF를 감압 하에 증발에 의해 제거하고; 300 ml의 n-헵탄을 첨가하고, 혼합물을 감압 하에 3 회 증류시키고, 회전 증발로 처리하고; 이후 105 ml의 DCM, 1.08 g의 Boc-Gly-OH(1.2 eq) 및 63 mg의 DMAP(0.1 eq)를 첨가하고; 10 ml의 DCM 중 1.59 g의 DCC(1.5 eq)의 용액을 적가하고, 혼합물을 20℃에서 4 시간 동안 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 혼합물을 여과하고, 원래 부피의 25%로 농축시키고, 120 ml의 IPA를 첨가하고; 용매의 75%를 증발에 의해 제거하고; 150 ml의 n-헵탄을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 여과하고, n-헵탄으로 2 회 세척하고, 건조시켜, 4.02 g의 BP143b02를 옅은 황색 고형물로서 수득하였다.
2. BP143b03의 제조
100 ml 3-목 플라스크에, 4.02 g의 BP143b02 및 50 ml의 DCM을 첨가하고, 화합물을 교반하면서 용해시키고; 이후 11.6 ml의 TFA를 적가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 150 ml의 아세토니트릴을 첨가하고; 120 ml의 용매를 감압 하에 증류하고, 잔류물을 320 ml의 TBME 용액에 붓고; 혼합물을 30 분 동안 교반하고, 여과하고; 여과 케이크를 TBME로 세척하여, 4.00 g의 BP143b03을 옅은 황색 고형물로서 수득하였다.
3. BP143b04의 제조
200 ml 3-목 플라스크에, 3.69 g의 BP143b03, 100 ml의 DCM, 3.21 g(1.05 eq)의 BP103a30, 2.7 ml의 DIEA(3.0 eq) 및 1.2 ml의 DEPC(1.5 eq)를 첨가하고, 실온에서 1 시간 동안 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 혼합물을 DCM으로 희석하고, 이후 물로 2 회 세척하고, 포화 염수로 1 회 세척하고, 건조시키고, 농축시키고, HPLC에 의해 정제한 후, 동결건조시켜, 1.85 g의 BP143b04를 옅은 황색 고형물로서 수득하였다.
4. BP143b05의 제조
50 mL 둥근 바닥 플라스크에, 1.20 g의 BP143b04 및 10 ml의 10% TFA/DCM을 첨가하고, 실온에서 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 생성물을 TBME에 붓고, 혼합물을 원심분리하고, 건조시켜, 210 mg의 화합물 BP143b05를 옅은 황색 고형물로서 수득하였다.
5. BP143b06의 제조
10 mL 둥근 바닥 플라스크에, 51 mg의 BP143b05(4.0 eq), 2 ml의 DCM, 11 ul의 TEA(8.0 eq) 및 201 mg의 4armPEG20K-SCM(1.0 eq)을 첨가하고, 실온에서 밤새 반응시키고, 농축시키고; 생성물을 TBME에 첨가하고, 혼합물을 원심분리하고, 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜, 85 mg의 화합물 BP143b06을 황녹색 고형물로서 수득하였다.
실시예 5
Figure pct00046
Figure pct00047
1. BP149a01의 제조
100 ml 3-목 플라스크에, 10.00 g의 화합물 SN38(1.0 eq) 및 110 ml의 DMSO를 첨가하고; 화합물을 용해시켜, 투명한 용액을 수득한 후, 5.56 g의 (Boc)2O(1.0 eq) 및 9.82 g의 DIEA(3.0 eq)를 첨가하고, 혼합물을 2 시간 동안 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 반응 용액을 정제수에 붓고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3 회 추출하고; 유기상을 합하고, 정제수 및 포화 염수로 세척하고, 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시켜 미백색 고형물을 수득하였고, 이를 메틸 3차-부틸 에테르의 첨가에 의해 슬러리화시키고, 여과하고, 건조시켜, 7.95 g의 화합물 BP149a01을 미백색 고형물로서 수득하였다.
2. BP149a02의 제조
250 mL 둥근 바닥 플라스크에, 7.95 g의 화합물 BP149a01(1.0 eq), 2.83 g의 Boc-Gly-OH(1.0 eq), 80 ml의 디클로로메탄 및 390 mg의 DMAP(0.2 eq)를 첨가하고; 20 ml의 DCM 중 5.00 g의 DCC(1.5 eq)의 용액을 적가하고, 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 혼합물을 여과하고, 모든 액체가 증발될 때까지 농축시키고; 30 ml의 IPA를 첨가하고, 용해시켜, 투명한 용액을 수득하고, 이후 200 ml의 n-헵탄을 첨가하고; 혼합물을 교반하고, 30 분 동안 슬러리화시키고, 여과하고, n-헵탄으로 2 회 세척하고, 건조시켜, 8.73 g의 화합물 BP149a02를 옅은 황색 고형물로서 수득하였다.
3. BP149a03의 제조
100 ml 3-목 플라스크에, 8.73 g의 화합물 BP149a02 및 40 ml의 DCM을 첨가하고; 화합물을 교반하면서 용해시키고, 혼합물을 이후 0℃까지 냉각시키고; 40 ml의 TFA를 적가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 반응 용액을 800 ml의 TBME 용액에 붓고, 혼합물을 30 분 동안 교반하고, 여과하고; 여과 케이크를 TBME로 세척하고, 진공에서 건조시켜, 4.95 g의 BP149a03을 옅은 황색 고형물로서 수득하였다.
4. BP149b01의 제조
200 ml 3-목 플라스크에, 2.3 g의 화합물 BP149a03, 45 ml의 DCM, 3.196 g의 화합물 BP103a31(1.05 eq) 및 1.75 ml의 TEA(3.0 eq)를 첨가하고, 실온에서 4 시간 동안 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 혼합물을 DCM으로 희석하고, 희석 염산으로 1 회 세척하고, 물로 2 회 세척하고, 포화 염수로 1 회 세척하고, 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켜, 미정제 생성물을 수득하였고, 이를 분취용-HPLC에 의해 정제하고, DCM으로 추출하고, 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시키고, 건조시켜, 2.20 g의 BP149b01을 옅은 황색 고형물로서 수득하였다.
5. BP149b02의 제조
200 ml 3-목 플라스크에, 2.0 g의 화합물 BP149b01 및 40 ml의 10% TFA/DCM을 첨가하고, 실온에서 반응시키고; TLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 생성물을 TBME에 붓고, 혼합물을 원심분리하고, 건조시켜, 1.75 g의 BP149b02를 옅은 황색 고형물로서 수득하였다.
6. BP149b03의 제조
200 ml 3-목 플라스크에, 4.08 g의 화합물 BP149b02(5.0 eq), 100 ml의 DMF, 1.96 g의 DIEA(20 eq) 및 16.05 g의 4armPEG20K-SCM(1.0 eq)을 첨가하고, 실온에서 2 시간 동안 반응시키고, 생성물을 1 L의 메틸 3차-부틸 에테르에 붓고; 혼합물을 30 분 동안 교반한 후, 여과하고, 건조시켜, 20.50 g의 미정제 생성물을 미백색 고형물로서 수득하였고, 이를 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜, 12.36 g의 순수한 BP149b03을 수득하였다.
실시예 6
Figure pct00048
실온에서, 100 ml 3-목 반응 플라스크에, 2.00 g(1.0 eq)의 BP143b06 및 35 ml의 PBS 용액을 pH = 7.0에서 첨가하고, 교반하면서 용해시켜, 투명한 용액을 수득하고; 0.45 g(5.0 eq)의 표적화 폴리펩티드 1(Ac-KPSSPPEEC-NH2)을 30 ml의 정제수에 용해시키고, 혼합물을 소듐 바이카르보네이트 용액에 의해 pH
Figure pct00049
6.5로 조절한 후, 반응 플라스크에 첨가하고; 0.5 시간 후, HPLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 생성물을 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜, 1.65 g의 순수한 화합물 a를 수득하였고, 이는 MALDI-TOF에 의해 검출한 경우 28810.73의 분자량을 가졌다.
실시예 7
Figure pct00050
실온에서, 100 ml 3-목 반응 플라스크에, 2.00 g(1.0 eq)의 BP143b06 및 35 ml의 PBS 용액을 pH = 7.0에서 첨가하고, 교반하면서 용해시켜, 투명한 용액을 수득하고; 0.38 g(5.0 eq)의 표적화 폴리펩티드 2(Ac-NASAPPEEC-NH2)를 30 ml의 정제수에 용해시키고, 혼합물을 소듐 바이카르보네이트 용액에 의해 pH
Figure pct00051
6.5로 조절한 후, 반응 플라스크에 첨가하고; 0.5 시간 후, HPLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 생성물을 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜, 1.42 g의 순수한 화합물 b를 수득하였고, 이는 MALDI-TOF에 의해 검출한 경우 28931.52의 분자량을 가졌다.
실시예 8
Figure pct00052
실온에서, 100 ml 3-목 반응 플라스크에, 2.00 g(1.0 eq)의 BP149b03 및 35 ml의 PBS 용액을 pH = 7.0에서 첨가하고, 교반하면서 용해시켜, 투명한 용액을 수득하고; 0.46 g(5.0 eq)의 표적화 폴리펩티드 1(Ac-KPSSPPEEC-NH2)을 30 ml의 정제수에 용해시키고, 혼합물을 소듐 바이카르보네이트 용액에 의해 pH
Figure pct00053
6.5로 조절한 후, 반응 플라스크에 첨가하고; 0.5 시간 후, HPLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 생성물을 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜, 1.45 g의 순수한 화합물 c를 수득하였고, 이는 MALDI-TOF에 의해 검출한 경우 28191.63의 분자량을 가졌다.
실시예 9
Figure pct00054
실온에서, 100 ml 3-목 반응 플라스크에, 2.00 g(1.0 eq)의 BP149b03 및 35 ml의 PBS 용액을 pH = 7.0에서 첨가하고, 교반하면서 용해시켜, 투명한 용액을 수득하고; 0.39 g(5.0 eq)의 표적화 폴리펩티드 2(Ac-NASAPPEEC-NH2)를 30 ml의 정제수에 용해시키고, 혼합물을 소듐 바이카르보네이트 용액에 의해 pH
Figure pct00055
6.5로 조절한 후, 반응 플라스크에 첨가하고; 0.5 시간 후, HPLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 생성물을 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜, 1.53 g의 순수한 화합물 d를 수득하였고, 이는 MALDI-TOF에 의해 검출한 경우 27982.32의 분자량을 가졌다.
실시예 10 비오틴-표지된 표적화 폴리펩티드 3의 합성
Figure pct00056
비오틴-표지된 표적화 폴리펩티드 3을 당업자에게 널리 공지된 Fmoc 고체상 합성 방법에 의해 합성하고; 링크-아미드 수지 및 20%의 피페리딘/DMF를 사용함으로써 Fmoc를 제거하고; HOBT/DIC를 커플링 시약으로서 사용하고, DMF를 반응 용매로서 사용하고; 반응을 닌하이드린 검출법에 의해 모니터링하고; 다음의 보호된 아미노산을 수지에 순차적으로 커플링시키고: Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Lys(Dde)-OH; Fmoc의 보호를 제거한 후, 생성물을 아세트산 무수물 및 피리딘으로 아세틸화시키고; DMF 중 하이드라진 수화물의 용액을 첨가하고, Dde 보호기를 제거하고; 생성물을 Fmoc-PEG3-OH 및 비오틴에 순차적으로 커플링시킨 후, DMF, 메탄올 및 DCM으로 세척하고, 건조시키고; 세포용해 시약(TFA : 티오아니솔 : 페놀 : EDT = 82.5 : 5 : 5 : 2.5 : 5)을 첨가하고; 2 시간 동안 반응시킨 후, 혼합물을 얼음-냉각된 TBME를 사용하여 침전시키고, 원심분리하여, 미정제 생성물을 수득하였고, 이를 분취용-HPLC에 의해 정제한 후, 동결건조시켜, 순수한 생성물을 수득하였다.
실시예 11 비오틴-표지된 표적화 폴리펩티드 4의 합성
Figure pct00057
비오틴-표지된 표적화 폴리펩티드 4를 당업자에게 널리 공지된 Fmoc 고체상 합성 방법에 의해 합성하고; 링크-아미드 수지 및 20%의 피페리딘/DMF를 사용함으로써 Fmoc를 제거하고; HOBT/DIC를 커플링 시약으로서 사용하고, DMF를 반응 용매로서 사용하고; 반응을 닌하이드린 검출법에 의해 모니터링하고; 다음의 보호된 아미노산을 수지에 순차적으로 커플링시키고: Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Lys(Dde)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH 및 Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH; Fmoc의 보호를 제거한 후, 생성물을 아세트산 무수물 및 피리딘으로 아세틸화시키고; DMF 중 하이드라진 수화물의 용액을 첨가하고, Dde 보호기를 제거하고; 생성물을 Fmoc-PEG3-OH 및 비오틴에 순차적으로 커플링시킨 후, DMF, 메탄올 및 DCM으로 세척하고, 건조시키고; 세포용해 시약(TFA : 티오아니솔 : 페놀 : EDT = 82.5 : 5 : 5 : 2.5 : 5)을 첨가하고; 2 시간 동안 반응시킨 후, 혼합물을 얼음-냉각된 TBME를 사용하여 침전시키고, 원심분리하여, 미정제 생성물을 수득하였고, 이를 분취용-HPLC에 의해 정제한 후, 동결건조시켜, 순수한 생성물을 수득하였다.
실시예 12 화합물 a-비오틴 콘쥬게이트의 제조
Figure pct00058
실온에서, 100 ml 3-목 반응 플라스크에, 2.00 g(1.0 eq)의 BP143b06 및 35 ml의 PBS 용액을 pH = 7.0에서 첨가하고, 교반하면서 용해시켜, 투명한 용액을 수득하고; 0.57 g(5.0 eq)의 비오틴-표지된 표적화 폴리펩티드 3을 30 ml의 정제수에 용해시키고, 혼합물을 소듐 바이카르보네이트 용액에 의해 pH
Figure pct00059
6.5로 조절한 후, 반응 플라스크에 첨가하고; 0.5 시간 후, HPLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 생성물을 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜, 1.24 g의 순수한 생성물을 수득하였고, 이는 MALDI-TOF에 의해 검출한 경우 30325.51의 분자량을 가졌다.
실시예 13 화합물 b-비오틴 콘쥬게이트의 제조
Figure pct00060
실온에서, 100 ml 3-목 반응 플라스크에, 2.00 g(1.0 eq)의 BP143b06 및 35 ml의 PBS 용액을 pH = 7.0에서 첨가하고, 교반하면서 용해시켜, 투명한 용액을 수득하고; 0.60 g(5.0 eq)의 비오틴-표지된 표적화 폴리펩티드 4를 30 ml의 정제수에 용해시키고, 혼합물을 소듐 바이카르보네이트 용액에 의해 pH
Figure pct00061
6.5로 조절한 후, 반응 플라스크에 첨가하고; 0.5 시간 후, HPLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 생성물을 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜, 1.33 g의 순수한 생성물을 수득하였고, 이는 MALDI-TOF에 의해 검출한 경우 30596.56의 분자량을 가졌다.
실시예 14 화합물 c-비오틴 콘쥬게이트의 제조
Figure pct00062
실온에서, 100 ml 3-목 반응 플라스크에, 2.00 g(1.0 eq)의 BP149b03 및 35 ml의 PBS 용액을 pH = 7.0에서 첨가하고, 교반하면서 용해시켜, 투명한 용액을 수득하고; 0.55 g(5.0 eq)의 비오틴-표지된 표적화 폴리펩티드 3을 30 ml의 정제수에 용해시키고, 혼합물을 소듐 바이카르보네이트 용액에 의해 pH
Figure pct00063
6.5로 조절한 후, 반응 플라스크에 첨가하고; 0.5 시간 후, HPLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 생성물을 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜, 1.26 g의 순수한 생성물을 수득하였고, 이는 MALDI-TOF에 의해 검출한 경우 30223.25의 분자량을 가졌다.
실시예 15 화합물 d-비오틴 콘쥬게이트의 제조
Figure pct00064
실온에서, 100 ml 3-목 반응 플라스크에, 2.00 g(1.0 eq)의 BP149b03 및 35 ml의 PBS 용액을 pH = 7.0에서 첨가하고, 교반하면서 용해시켜, 투명한 용액을 수득하고; 0.58 g(5.0 eq)의 비오틴-표지된 표적화 폴리펩티드 4를 30 ml의 정제수에 용해시키고, 혼합물을 소듐 바이카르보네이트 용액에 의해 pH
Figure pct00065
6.5로 조절한 후, 반응 플라스크에 첨가하고; 0.5 시간 후, HPLC로 반응이 완료되었음을 검출한 후, 생성물을 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜, 1.33 g의 순수한 생성물을 수득하였고, 이는 MALDI-TOF에 의해 검출한 경우 30491.18의 분자량을 가졌다.
실시예 16 CD44에 특이적으로 결합하는 본 발명의 화합물
1. 재료 및 방법
1.1 본 발명의 화합물의 비오틴-표지된 콘쥬게이트
화합물 a-비오틴 콘쥬게이트, 화합물 b-비오틴 콘쥬게이트, 화합물 c-비오틴 콘쥬게이트 및 화합물 d-비오틴 콘쥬게이트는 실험에서 각각 콘쥬게이트 a, 콘쥬게이트 b, 콘쥬게이트 c 및 콘쥬게이트 d로 지칭되고, 이들의 구조 및 이들에 대한 제조 방법은 실시예 10 내지 실시예 15에 나타나 있는 바와 같다.
1.2 세포 배양
McCoy's 5A 배양액에서 SKOV3 세포를 배양하였다. 세포 배양액에 10%의 FBS, 1000 U/ml의 페니실린, 100 μg/ml의 스트렙토마이신 및 4 mmol/L l-글루타민을 보충하였다.
1.3 SKOV3 세포에 대한 콘쥬게이트의 결합
5 mmol/L의 비스(술포숙신이미드)수베레이산염을 콘쥬게이트 a, 콘쥬게이트 b, 콘쥬게이트 c 및 콘쥬게이트 d(각각 얼음-냉각된 PBS에 용해시켜 100 μmol/L의 농도를 달성하였음)에 첨가하여 콘쥬게이트가 SKOV3 세포에 결합되게 하였다. 트리톤 X-100 세포용해 완충액을 첨가하고; 세포를 용해시킨 후, 원심분리하고; 상청액을 폴리비닐리덴 플루오라이드(PVDF) 막으로 옮기고, 웨스턴 블롯 분석으로 처리하였다. PVDF 막을 호스래디쉬 퍼옥시다제 콘쥬게이션된 스트렙타비딘(HRP-SA)과 인큐베이션하고, 콘쥬게이트로 가교된 단백질을 검출하였다. 항-CD44 단클론성 항체 DF1485 및 퍼옥시다제-표지된 당나귀 항-마우스 면역글로불린을 이용하여 웨스턴 블롯에 의해 CD44를 검출하였다. 새로 제형화된 화학발광 시약 및 Hypermax ECL 필름 노출을 검출에 이용하였다.
1.4 콘쥬게이트-표지된 단백질의 면역침강
콘쥬게이트로 가교된 SKOV3 세포를 트리톤 X-100에 의해 용해시키고, 실온에서 2 시간 동안 단백질 A 세파로스와 인큐베이션하고, 사전세척하고; 100 μg의 세척된 세포용해 완충액을 실온에서 밤새 2 μg의 DF1485(항-CD44 항체) 또는 뮤린 IgG1이 보충된 20 μL의 단백질 A 세파로스와 인큐베이션하였다. 세포용해 완충액으로 5 회 세척한 후, 혼합물을 SDS-PAGE 로딩 완충액에서 비등시키고, 면역침강된 단백질을 단백질 A 세파로스로부터 용출시켰다. 용출된 물질 및 5 μg의 초기 물질을 SDS-PAGE에 첨가하고, PVDF 막으로 옮긴 후, HRP-SA로 염색하였다.
2. 결과
SKOV3 세포는 콘쥬게이트에 결합한다. 세포로부터 제조된 용해물을 DF1485로 면역침강시켰다. 용출된 단백질 및 초기 용해물을 PAGE/블롯팅으로 처리하고, 여기서 각각 HRP-SA 염색을 이용하여 비오틴 표지를 검출하고, DF1485 염색을 이용하여 CD44를 검출하였다.
초기 용해물, 콘쥬게이트 및 HRP-SA가 반응 시스템에 포함되었을 때, 0 kDa 내지 250 kDa의 범위에서 다수의 비-특이적 밴드가 보였고; 초기 용해물 및 HRP-SA가 반응 시스템에 포함되었을 때, 0 kDa 내지 250 kDa의 범위에서 밴드가 보이지 않았으므로, 이는 HRP-SA가 콘쥬게이트-표지된 단백질을 특이적으로 염색한다는 것을 시사하였다. 면역침강된 단백질, 콘쥬게이트 및 HRP-SA가 반응 시스템에 포함되었을 때, 85 kDa에서 특이적 밴드가 보였고; 면역침강된 단백질 및 HRP-SA가 반응 시스템에 포함되었을 때, 0 kDa 내지 250 kDa의 범위에서 밴드가 보이지 않았으므로, 이는 약 85 kDa의 콘쥬게이트-표지된 단백질이 DF1485에 의해 특이적으로 침강되었음을 시사하였다. 초기 용해물과 비교할 때, 면역침강된 단백질에서 밴드의 염색 강도는 더 분명했는데, 이는 단백질이 항-CD44 면역침강을 통해 크게 풍부해졌음을 시사한다.
초기 용해물, 콘쥬게이트 및 DF1485가 반응 시스템에 포함되었을 때, 85 kDa에서 특이적 밴드가 보였고; 초기 용해물 및 DF1485가 반응 시스템에 포함되었을 때, 85 kDa에서 특이적 밴드가 보였고; 면역침강된 단백질, 콘쥬게이트 및 DF1485가 반응 시스템에 포함되었을 때, 85 kDa에서 특이적 밴드가 보였고; 면역침강된 단백질 및 DF1485가 반응 시스템에 포함되었을 때, 85 kDa에서 특이적 밴드가 보였으므로, 이는 85 kDa의 밴드가 CD44였고, CD44가 모든 샘플에 존재하였음을 시사하였다.
상기 결과는 본 발명의 화합물이 CD44에 특이적으로 결합하고, 높은 CD44 발현을 갖는 종양 세포 및 조직을 표적화할 수 있으며, 이에 따라 표적 조직 중 콘쥬게이트의 농도가 높고, 이의 임상 치료 효과가 개선되며, 독성이 감소한다는 것을 보여준다.
실시예 17 내지 실시예 21에서, 모든 동물 실험 작업은 동물 사용 및 관리에 대한 요건을 엄격히 따른다. 종양-관련 매개변수의 계산과 관련하여, 중국 CFDA로부터의 문헌("
Figure pct00066
Figure pct00067
[Technical Guidelines for Non-clinical Research of Cytotoxic Anti-tumor Drugs]"(2006년 11월))이 참조될 수 있고, 여기서 T/C% ≤ 40%, 및 통계 분석에 따른 P < 0.05는 유효하다는 것이 시사된다. 상대 종양 증식률이 낮을수록, 항-종양 효과는 우수하다.
종양 부피(TV)의 계산식은
Figure pct00068
이며,
상기 식에서, l은 종양의 장경(mm)을 나타내고; w는 종양의 단경(mm)을 나타낸다.
상대 종양 부피(RTV)의 계산식은 RTV=TVt/TVinitial이며,
상기 식에서, TVinitial은 군분류 및 투여 시의 측정된 종양 부피를 나타내고, TVt는 투여 중 각 측정 시의 종양 부피를 나타낸다.
상대 종양 증식률(T/C%)의 계산식은 T/C% 100% Х (RTVT/RTVC)이며,
상기 식에서, RTVT는 치료군의 RTV를 나타내고, RTVC는 용매 대조군의 RTV를 나타낸다.
종양 성장 저해 TGI(%)의 계산식은
Figure pct00069
이며,
상기 식에서, TVt(T)는 각 측정 시의 치료군의 종양 부피를 나타내고; TVinitial(T)는 군분류 및 투여 시의 치료군의 종양 부피를 나타내고; TVt(C)는 각 측정 시의 용매 대조군의 종양 부피를 나타내고; TVinitial(C)는 군분류 및 투여 시의 용매 대조군의 종양 부피를 나타낸다.
동물 체중의 저감율의 계산식은
동물 체중의 저감율 =
Figure pct00070
이며,
상기 식에서, BWt는 투여 중 각 측정 시의 동물의 체중을 나타내고, BWinitial은 군분류 및 투여 시의 동물의 체중을 나타낸다.
종양 중량 저해비 IR(%)의 계산식은
Figure pct00071
이며,
상기 식에서, WC는 대조군의 종양 중량을 나타내고, WT는 치료군의 종양 중량을 나타낸다.
Microsoft Office Excel 2007 소프트웨어로 시험 데이터를 계산하고, 관련 통계 처리를 수행하였다. 달리 명시되지 않는 한, 데이터를 평균 ± 표준 오차(평균 ± SE)로 표시하고, t-검정을 이용하여 군들 간에 데이터를 비교하고; P < 0.05를 통계적으로 유의한 것으로 간주하였다.
실험 동물: 암컷 BALB/c 누드 마우스(6 주령 내지 8 주령)에게 약 1 주 동안 정상적으로 식이를 공급하고; 수의학 검사 후, 신체 증후가 양호한 마우스를 이 실험을 위해 선택하였다. 군분류 전, 마우스를 마킹 펜을 이용하여 꼬리의 밑둥치에 표시하고, 군분류한 후, 각 마우스를 이표식(eartipping)에 의해 표시했다.
화합물 M, 화합물 a 및 화합물 b의 투여 제형의 제조: 약물을 각 투여 전 정확하게 칭량하고; 2.5 ml의 생리식염수를 첨가하고, 볼텍싱을 수행하여 약물을 완전히 용해시키고; 용액 중 이리노테칸의 유효 농도를 4.0 mg·mL-1로 했다.
화합물 c 및 화합물 d의 투여 제형의 제조: 약물을 각 투여 전 정확하게 칭량하고; 2.5 ml의 생리식염수를 첨가하고, 볼텍싱을 수행하여 약물을 완전히 용해시키고; 용액 중 SN38의 유효 농도를 4.0 mg·mL-1로 했다.
무작위 군분류: 마우스에 종양 세포를 접종하고, 종양 부피가 100 mm3 내지 300 mm3에 이를 때, 군 당 마우스를 6 마리로 하고 군들 간의 종양 부피 및 체중을 균일하게 하여, 6 개의 군으로 마우스를 난괴법에 따라 나누었다. 각 군의 평균 종양 부피와 모든 실험 동물들의 평균 종양 부피 간의 차이는 ± 10%를 초과하지 않았다.
실험을 시작한 후, 종양 직경을 주 2 회 측정하여 종양 부피를 계산하고, 또한 체중을 재고, 기록하였다.
실시예 17 내지 실시예 20에서 마우스에 대한 투여는 군분류 당일의 첫 번째 투여를 포함하였다. 군 1은 꼬리 정맥 주사에 의해 생리식염수를 투여한 용매 대조군이었다. 군 2 내지 군 6에는 꼬리 정맥 주사에 의해 시험 샘플인 화합물 M, 화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d를 각각 투여하였다.
실험 완료 후, 마우스를 안락사시키기(CO2) 전 체중을 재고, 종양 직경을 측정하였다. 종양 조직을 스트립핑하고, 칭량하고, RTV 및 T/C%를 계산하였다.
실시예에 포함된 대조 시험 샘플인 화합물 M은 중국 특허 출원 제CN 108727583 A호에 개시되어 있으며, 하기와 같은 구조를 갖는다:
Figure pct00072
.
실시예 17 누드 마우스에서 인간 유방암 MDA-MB-231의 이종이식 종양에 대한 본 발명의 화합물의 항-종양 약력학 실험
시험 샘플: 화합물 M, 화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d.
시약: DMEM 배양액, 소 태아 혈청(FBS), 트립신, 페니실린-스트렙토마이신 이중 항체 및 생리식염수.
이식 종양 균주: 중국 과학원(Chinese Academy of Sciences; CAS)의 배양물 보장 위원회(Type Culture Collection Committee)의 세포 은행으로부터 유래되고 본 발명자들의 실험실에서 액체 질소에 저온보존된 인간 유방암 MDA-MB-231.
세포 배양: MDA-MB-231 균주를 10% 소 태아 혈청 FBS(GIBCO, USA)를 함유하는 DMEM 배지(DMEM, USA)에 배양하고, 5% CO2로 37℃에서 인큐베이터에 배양하였다.
동물 모델의 제조: 누드 마우스에서 피하 이식 종양 모델을 세포 접종법을 이용하여 확립하고; 대수 증식기의 종양 세포를 수집하고, 계수하고, 1 Х PBS에 재현탁시키고, 세포 현탁액의 농도를 1 Х 107 개 세포/ml로 조절하였다. 1 ml 주사기(4-게이지 바늘)를 사용하여 누드 마우스의 오른쪽 등에 종양 세포를 피하 접종하였다(1 Х 106 개 세포/마우스).
투여 빈도 및 투여량: 각 군에 주 1 회로 총 3 회(QW Х 3) 투여하였고, 투여의 각 투여량은 6 mg·kg-1이었다(이리노테칸 또는 SN38로서 계산됨).
결과는 표 1에 나타나 있다.
Figure pct00073
실험 결과는 본 발명의 화합물이 누드 마우스에서 인간 유방암 MDA-MB-231의 이식 종양에 대하여 우수한 저해 효과를 갖고, 효과가 화합물 M의 효과보다 우수했다는 것을 보여준다.
실시예 18 누드 마우스에서 인간 위암 NCI-N87 세포주의 이식 종양 모델의 생체내 종양 성장에 대한 본 발명의 화합물의 저해 효과
시험 샘플: 화합물 M, 화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d.
시약: RPMI-1640 배양액, 소 태아 혈청(FBS), 트립신, 페니실린-스트렙토마이신 이중 항체 및 생리식염수.
이식 종양 균주: 중국 과학원(CAS)의 배양물 보장 위원회의 세포 은행으로부터 유래되고 본 발명자들의 실험실에서 액체 질소에 저온보존된 인간 위암 NCI-N87.
세포 배양: 5% CO2 및 37℃하에, NCI-N87 세포를 10% 소 태아 혈청을 함유하는 RPMI-1640 배양액에서 통상적으로 배양하고, 0.25% 트립신에 의한 분해로 처리하고, 계대시키고; 세포 성장에 따라, 세포를 1 : 2 내지 1 : 6의 계대비로 주 1 회 내지 2 회 계대시켰다.
동물 모델의 제조: 대수 증식기의 NCI-N87 세포를 수집하고, 계수하고, 무혈청 RPMI-1640 배지에 재현탁시키고, 세포의 농도를 5 Х 107 개 세포/mL로 조절하고; 세포를 균일하게 분산되도록 피펫팅한 후, 50 mL 원심분리관으로 옮기고, 이후에 이를 아이스 박스에 넣고; 세포 현탁액을 1 mL 주사기를 이용하여 흡인하고, 누드 마우스의 오른쪽 전방 겨드랑이로 피하 주사하고, 각 마우스에 100 μL(5 Х 106 개 세포/마우스)를 접종하여 누드 마우스에서 NCI-N87 이식 종양 모델을 확립하였다.
투여 빈도 및 투여량: 각 군에 주 1 회로 총 4 회(QW Х 4) 투여하였고, 투여의 각 투여량은 200 mg·kg-1이었다.
결과는 표 2에 나타나 있다:
Figure pct00074
실험 결과는 본 발명의 화합물이 누드 마우스에서 인간 위암 NCI-N87 세포주의 이식 종양 모델의 종양 성장에 대하여 우수한 저해 효과를 갖고, 효과가 화합물 M의 효과보다 우수했다는 것을 보여준다.
실시예 19 누드 마우스에서 HT-29 이식 종양 모델의 생체내 효능에 대한 평가
시험 샘플: 화합물 M, 화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d.
시약: McCoy's 5A 배양액, 소 태아 혈청(FBS), 트립신, 페니실린-스트렙토마이신 이중 항체, 주사용수, 생리식염수, 락트산, 및 소르비톨.
이식 종양 균주: 중국 과학원(CAS)의 배양물 보장 위원회의 세포 은행으로부터 유래되고 본 발명자들의 실험실에서 액체 질소에 저온보존된 인간 결장암 HT-29.
세포 배양: 5% CO2 및 37℃ 하에, HT-29 세포를 10% 소 태아 혈청을 함유하는 McCoy's 5A 배양액에서 통상적으로 배양하고, 0.25% 트립신에 의한 분해로 처리하고, 계대시키고; 세포 성장에 따라, 세포를 1 : 4 내지 1 : 6의 계대비로 주 2 회 내지 3 회 계대시켰다.
동물 모델의 제조: 대수 증식기의 HT-29 세포를 수집하고, 계수하고, 무혈청 McCoy's 5A 배지에 재현탁시키고, 세포의 농도를 4 Х 107 개 세포/mL로 조절하고; 세포를 균일하게 분산되도록 피펫팅한 후, 50 mL 원심분리관으로 옮기고, 이후에 이를 아이스 박스에 넣고; 세포 현탁액을 1 mL 주사기를 이용하여 흡인하고, 누드 마우스의 오른쪽 전방 겨드랑이로 피하 주사하고, 각 마우스에 100 μL(4 Х 106 개 세포/마우스)를 접종하여 누드 마우스에서 HT-29 이식 종양 모델을 확립하였다.
투여 빈도 및 투여량: 각 군에 주 1 회로 총 4 회(QW Х 4) 투여하였고, 투여의 각 투여량은 200 mg·kg-1이었다.
결과는 표 3에 나타나 있다:
Figure pct00075
실험 결과는 본 발명의 화합물이 누드 마우스에서 인간 결장암 HT-29 세포주의 이식 종양 모델의 생체내 종양 성장에 대하여 우수한 저해 효과를 갖고, 효과가 화합물 M의 효과보다 우수했다는 것을 보여준다.
실시예 20 누드 마우스에서 인간 췌장암 MIA Paca-2의 이종이식 모델에 대한 저해 효과
시험 샘플: 화합물 M, 화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d.
이식 종양 균주: 상하이 생물화학·세포생물학 연구소(Shanghai Institute of Biochemistry and Cell Biology), 중국 과학원으로부터 구매된 인간 췌장암 MIA Paca-2.
세포 배양: MIA Paca-2 세포를 10% 소 태아 혈청 FBS(GIBCO, USA) 및 2.5% HS를 함유하는 DMEM에서 배양하고; 세포를 5% CO2로 37℃에서 인큐베이터에 넣었다.
동물 모델의 제조: 누드 마우스에서 인간 췌장암 MIA Paca-2의 피하 이식 종양 모델을 세포 접종법을 이용하여 확립하고; 대수 증식기의 종양 세포를 수집하고, 계수하고, 1 Х PBS에 재현탁시키고, 세포 현탁액의 농도를 3 Х 107 개 세포/ml로 조절하였다. 1 ml 주사기(4-게이지 바늘)를 사용하여 누드 마우스의 오른쪽 등에 종양 세포를 피하 접종하였다(3 Х 106 개 세포/0.1 ml/마우스).
투여 빈도 및 투여량: 각 군에 주 1 회로 총 3 회(QW Х 3) 투여하였고, 투여의 각 투여량은 6 mg·kg-1이었다.
결과는 표 4에 나타나 있다:
Figure pct00076
실험 결과는 본 발명의 화합물이 누드 마우스에서 인간 췌장암 MIA Paca-2의 이식 종양에 대하여 우수한 저해 효과를 갖고, 효과가 화합물 M의 효과보다 우수했다는 것을 보여준다.
실시예 21 누드 마우스에서 인간 소세포 폐암 세포 NCI-H446의 이종이식 모델에 대한 저해 효과
시험 샘플: 이리노테칸, nktr-102, 화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d.
이리노테칸(벌크 약물)을 구매하였다. nktr-102에 대한 제조 방법은 하기를 포함한다:
실시예 4에서의 BP143b03(829 mg, 4.5 eq)을 250 mL 반응 플라스크에 첨가하고; DCM(50 mL) 및 트리에틸아민(221 mg, 9.0 eq)을 첨가하고, 용해시키고; 이후 4ARM-PEG20K-SCM(5.00 g, 1.0 eq)을 반응 플라스크에 첨가하였다. HPLC로 반응에 분명한 진행이 없었다는 것을 모니터링한 후, 약 20 ml의 DCM을 감압 하에 증류하고; 용액을 300 ml의 TBME에 붓고, 교반하고, 침전시키고, 여과하여, 5.4 g의 미정제 생성물을 수득하였고, 이를 분취용-HPLC에 의해 정제하고, 탈염하고, 희석 염산에 의해 약 pH 5 내지 6으로 조절하고, 동결건조시켜, 2.71 g의 nktr-102를 연녹색 분말로서 수득하였다.
이리노테칸의 투여 제형의 제조: 12.0 mg의 이리노테칸을 칭량하고; 0.15 ml의 1% 락트산을 첨가하고, 볼텍싱을 수행하여 약물을 완전히 용해시키고; 이후에 2.85 mL의 1% 소르비톨 수용액을 첨가하고, 혼합물을 볼텍싱하여 용액을 균일하게 혼합하였고, 여기서 1% 락트산 대 1% 소르비톨 수용액의 비를 약 5 : 95(v/v)로 하고, 이리노테칸의 유효 농도를 4.0 mg·mL-1로 했다.
nktr-102의 투여 제형의 제조: 101.5 mg의 nktr-102를 각 투여 전 정확하게 칭량하고; 2.5 mL의 생리식염수를 첨가하고, 볼텍싱을 수행하여 약물을 완전히 용해시키고; 용액 중 이리노테칸의 유효 농도를 4.0 mg·mL-1로 했다.
이식 종양 균주: 중국 과학원의 배양물 보장 위원회의 세포 은행으로부터 유래된 소세포 폐암 세포 NCI-H446.
세포 배양: 5% CO2, 37℃ 및 포화 습도 하에, NCI-H446 세포를 10% 소 태아 혈청을 함유하는 RPMI-1640 배양액에서 통상적으로 배양하고, 세포 성장에 따라, 세포를 0.25% 트립신에 의한 분해로 처리하고, 1 : 3 내지 1 : 4의 계대비로 주 2 회 내지 4 회 계대시켰다.
동물 모델의 제조: 누드 마우스에서 피하 이식 종양 모델을 세포 접종법을 이용하여 확립하고; 대수 증식기의 NCI-H446 세포를 수집하고, 계수하고, 50%의 RPMI-1640 및 50%의 매트리겔(Matrigel)을 함유하는 최소 배지에 재현탁시키고; 세포의 농도를 4 Х 107 개 세포/mL로 조절하고; 세포를 균일하게 분산되도록 피펫팅한 후, 50 mL 원심분리관으로 옮기고, 이후에 이를 아이스 박스에 넣고; 세포 현탁액을 적합한 주사기를 이용하여 흡인하고, 누드 마우스의 오른쪽 전방 겨드랑이로 피하 주사하고, 각 마우스에 200 μL(8 Х 106 개 세포/마우스)를 접종하여 누드 마우스에서 NCI-H446 이식 종양 모델을 확립하였다.
마우스에 대한 투여는 군분류 당일의 첫 번째 투여를 포함하였다. 군 1은 꼬리 정맥 주사에 의해 생리식염수를 투여한 용매 대조군이었다. 군 2 내지 군 7에 시험 샘플인 이리노테칸, nktr102, 화합물 M, 화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d를 꼬리 정맥 주사에 의해 각각 투여하고; 각 군에 주 1 회로 총 3 회(QW Х 3) 투여하였고, 투여의 각 투여량은 6 mg·kg-1이었다.
결과는 표 5에 나타나 있다:
Figure pct00077
실험 결과는 본 발명의 화합물이 누드 마우스에서 인간 소세포 폐암 NCI-H446의 이식 종양에 대하여 우수한 저해 효과를 갖고, 효과가 이리노테칸 및 nktr102의 효과보다 우수했다는 것을 보여준다.

Claims (17)

  1. 하기 구조식 I의 다분지 약물 콘쥬게이트(multi-branched drug conjugate) 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:
    [화학식 I]
    Figure pct00078

    (상기 식에서, R은 유기 코어이고, POLY는 폴리머이고, L은 다가 링커이고, T는 표적화 분자이고, D는 활성제이고, q는 3 내지 8의 임의의 정수이고, 여기서 D는 하기 화학식으로 표현되는 캄프토테신(camptothecin)계 약물이고:
    Figure pct00079

    상기 식에서, R1 내지 R5는 서로 독립적으로 다음 기: 수소, 할로겐, 아실, 알킬, 치환된 알킬, 알콕시, 치환된 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 하이드록시, 시아노, 니트로, 아자이도, 아미도, 하이드라진, 아민, 치환된 아민, 하이드록시카르보닐, 알콕시카르보닐, 알콕시카르보닐옥시, 선택적으로 치환된 카르바모일옥시, 아릴술포닐옥시, 알킬술포닐옥시 및 R9C(O)O-로부터 선택되고, 여기서 R9는 할로겐, 아미노, 치환된 아미노, 헤테로사이클 및 치환된 헤테로사이클이고; R6은 H 또는 OR8이고; R8은 알킬, 알케닐, 사이클로알킬, 할로알킬 또는 하이드록시알킬이고; R7은 하이드록시, 아미노 또는 티올이고;
    T는 CD44-표적화된 폴리펩티드임).
  2. 제1항에 있어서,
    [화학식 I]
    Figure pct00080

    상기 식에서, R은 유기 코어이고, POLY는 폴리머이고, L은 다가 링커이고, T는 표적화 분자이고, D는 활성제이고, q는 3 내지 8의 임의의 정수이고, 여기서 D는 하기 화학식으로 표현되는 캄프토테신계 약물이고:
    Figure pct00081

    상기 식에서, R1 내지 R5는 서로 독립적으로 다음 기: 수소, 할로겐, 아실, 알킬, 치환된 알킬, 알콕시, 치환된 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 하이드록시, 시아노, 니트로, 아자이도, 아미도, 하이드라진, 아민, 치환된 아민, 하이드록시카르보닐, 알콕시카르보닐, 알콕시카르보닐옥시, 카르바모일옥시, 아릴술포닐옥시 및 알킬술포닐옥시로부터 선택되고; R6은 H 또는 OR8이고; R8은 알킬, 알케닐, 사이클로알킬, 할로알킬 또는 하이드록시알킬이고; R7은 하이드록시이고;
    T는 CD44-표적화된 폴리펩티드인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, POLY는 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 폴리(비닐피롤리돈), 폴리(하이드록시알킬 메타크릴레이트 아민), 폴리(하이드록시알킬 메타크릴레이트), 폴리(사카라이드), 폴리(α-하이드록시산), 폴리(아크릴산), 폴리(비닐 아세테이트), 폴리포스파진, 폴리옥사졸린 또는 폴리(N-아크릴로일모르폴린)인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  4. 제3항에 있어서, POLY는
    Figure pct00082

    인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:
    (상기 식에서, k는 5 내지 500, 바람직하게는 50 내지 200이고, 가장 바람직하게는 k는 113이고; r은 1 내지 10의 임의의 정수이고; "&"로 표시된 산소 원자는 유기 코어 R에 부착된 원자이고; k는 평균 반복 단위 수를 나타냄).
  5. 제4항에 있어서,
    Figure pct00083

    인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  6. 제5항에 있어서, 다가 링커 L은
    Figure pct00084

    인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:
    (상기 식에서, 기호 "*"는 표적화 분자 T에 대한 다가 링커 L의 부착점을 나타내고, "#"은 활성제 D에 대한 다가 링커 L의 부착점을 나타내고, "%"는 POLY에 대한 다가 링커 L의 부착점을 나타내고, 여기서 m은 1 내지 20의 임의의 정수이고, l 및 n은 독립적으로 1 내지 10의 임의의 정수이고,
    바람직하게는, l은 5이고, m은 3이고, n은 4임).
  7. 제6항에 있어서, D는 이리노테칸 또는 SN38인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, T는 Ac-KPSSPPEE-NH2, Ac-NASAPPEE-NH2, 하이알루론산(HA), 오스테오폰틴(OPN), 세르글리신, 콜라겐, 피브로넥틴, 라미닌, 콘드로이틴 설페이트 C(CSC), 헤파란 설페이트(HS), 안키린, 갈렉틴-3, L-셀렉틴, P-셀렉틴, C-형 렉틴 또는 아드레신인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  9. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, T는 Ac-KPSSPPEE-NH2 또는 Ac-NASAPPEE-NH2, 및 이의 치환 변이형, 첨가 변이형 및 화학적-변형 유도체인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  10. 제8항에 있어서,
    [화합물 A]
    Figure pct00085

    [화합물 B]
    Figure pct00086

    [화합물 C]
    Figure pct00087

    [화합물 D]
    Figure pct00088

    인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:
    (상기 식에서, 화합물 A, 화합물 B, 화합물 C 및 화합물 D의 분자 구조 중 각 k는 독립적으로 101 내지 125이고, 바람직하게는 각 k는 독립적으로 113임).
  11. 제9항에 있어서,
    [화합물 a]
    Figure pct00089

    [화합물 b]
    Figure pct00090

    [화합물 c]
    Figure pct00091

    [화합물 d]
    Figure pct00092

    인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  12. 제11항에 있어서, 각 분지쇄가 1 개 또는 2 개의 염산 분자에 각각 결합되는, 화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d의 하이드로클로라이드이거나; 각 분지쇄가 1 개 또는 2 개의 아세트산 분자에 각각 결합되는, 화합물 a, 화합물 b, 화합물 c 및 화합물 d의 아세테이트인, 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  13. 높은 CD44 발현을 갖는 종양을 치료하기 위한 약물의 제조에서 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 다분지 약물 콘쥬게이트의 용도.
  14. 제13항에 있어서, 높은 CD44 발현을 갖는 종양은 위암, 췌장암, 소세포 폐암, 결장암, 유방암, 폐 선암, 간암, 비인두 암종, 악성 신경교종, 림프종, 신장 암종, 난소암, 두경부암 및 편평 세포 암종으로부터 선택되는, 용도.
  15. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 다분지 약물 콘쥬게이트 또는 약학적으로 허용되는 염, 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 약학적 조성물.
  16. 높은 CD44 발현을 갖는 종양을 치료하기 위한 약물의 제조에서 제15항에 따른 조성물의 용도.
  17. 제16항에 있어서, 높은 CD44 발현을 갖는 종양은 위암, 췌장암, 소세포 폐암, 결장암, 유방암, 폐 선암, 간암, 비인두 암종, 악성 신경교종, 림프종, 신장 암종, 난소암, 두경부암 및 편평 세포 암종으로부터 선택되는, 용도.
KR1020217023336A 2019-02-22 2020-02-17 Cd44 표적화된 멀티 아암 콘쥬게이트 KR20210107083A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910131331.1A CN111603567A (zh) 2019-02-22 2019-02-22 Cd44靶向多臂偶联物
CN201910131331.1 2019-02-22
PCT/CN2020/075578 WO2020169004A1 (zh) 2019-02-22 2020-02-17 Cd44靶向多臂偶联物

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20210107083A true KR20210107083A (ko) 2021-08-31

Family

ID=72143902

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020217023336A KR20210107083A (ko) 2019-02-22 2020-02-17 Cd44 표적화된 멀티 아암 콘쥬게이트

Country Status (9)

Country Link
US (1) US20220096644A1 (ko)
EP (1) EP3928797A4 (ko)
JP (1) JP7353378B2 (ko)
KR (1) KR20210107083A (ko)
CN (1) CN111603567A (ko)
AU (1) AU2020226475B2 (ko)
CA (1) CA3126574A1 (ko)
TW (2) TWI792468B (ko)
WO (1) WO2020169004A1 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11253603B2 (en) 2018-09-17 2022-02-22 The Children's Hospital Of Philadelphia Polymer-based macromolecular prodrugs

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5994309A (en) 1997-07-25 1999-11-30 Angstrom Pharmaceuticals, Inc. Anti-invasive and anti-angiogenic compositions and methods
WO2005028539A2 (en) 2003-09-17 2005-03-31 Nektar Therapeutics Al, Corporation Multi-arm polymer prodrugs
GB0611405D0 (en) 2006-06-09 2006-07-19 Univ Belfast FKBP-L: A novel inhibitor of angiogenesis
WO2010019233A1 (en) 2008-08-11 2010-02-18 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric alkanoate conjugates
WO2010102253A2 (en) * 2009-03-06 2010-09-10 Angstrom Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulation of cell migration
US20130143909A1 (en) 2009-11-18 2013-06-06 Nektar Therapeutics Acid Salt Forms of Polymer-Drug Conjugates and Alkoxylation Methods
EP2542253A4 (en) 2010-03-05 2013-08-21 Angstrom Pharmaceuticals Inc MODULATION OF AN INTERCELLULAR SIGNALING
JP6082903B2 (ja) 2011-04-29 2017-02-22 ケーシーアイ ライセンシング インク 創傷環境における治療因子の結合のためのアプタマー変性高分子材料
US20150079626A1 (en) 2013-03-19 2015-03-19 Lsip, Llc Method of obtaining a cell population containing cancer stem cells
US9636419B2 (en) * 2013-10-11 2017-05-02 The Universit of Kansas Targeting multiple receptors on a cell surface for specific cell targeting
CN105198966B (zh) * 2014-06-26 2019-06-21 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 GnRH类似物-细胞毒分子缀合物、其制备方法及用途
CN104906076B (zh) * 2015-07-03 2017-11-03 四川大学 程序化多重靶向的树状大分子组装体药物递送系统及其制备方法和应用
JP6761993B2 (ja) 2016-01-29 2020-09-30 公立大学法人大阪 プロテインキナーゼ阻害剤
CN108727583B (zh) * 2017-04-21 2022-03-22 高瑞耀业(北京)科技有限公司 多臂靶向抗癌偶联物
CA3058029A1 (en) * 2017-04-21 2018-10-25 Brightgene Bio-Medical Technology Co., Ltd. Multi-arm targeted anti-cancer conjugate

Also Published As

Publication number Publication date
TW202142263A (zh) 2021-11-16
EP3928797A4 (en) 2022-04-13
WO2020169004A1 (zh) 2020-08-27
JP2022521529A (ja) 2022-04-08
TWI792468B (zh) 2023-02-11
CN111603567A (zh) 2020-09-01
US20220096644A1 (en) 2022-03-31
EP3928797A1 (en) 2021-12-29
JP7353378B2 (ja) 2023-09-29
CA3126574A1 (en) 2020-08-27
TW202031296A (zh) 2020-09-01
TWI771652B (zh) 2022-07-21
AU2020226475B2 (en) 2023-02-16
AU2020226475A1 (en) 2021-08-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101394768B1 (ko) 캄토테신-세포 투과 펩티드 결합체 및 이를 포함하는 약학 조성물
KR101721865B1 (ko) 항암제의 전달을 위한 폴리머 시스템
KR20120057588A (ko) 가변 속도 방출 링커를 포함하는 폴리알 약물 접합체
JP2010526091A5 (ko)
CN106856656A (zh) 一种新型的稳定型抗体药物耦联物及其制备方法和用途
JP2010526091A (ja) 癌の処置のための生物学的な標的基の改変
AU2017265310B2 (en) Multi-arm polymeric targeting anti-cancer conjugate
EP3152223A1 (en) Peptide-drug conjugates
KR102279429B1 (ko) 멀티 암 표적 항암 콘쥬게이트
KR20220143908A (ko) 표적 전달 및 활성화의 면역 자극성 접합 복합체의 제조 및 용도
JP7353378B2 (ja) Ｃｄ４４標的化マルチアームコンジュゲート
BRPI0709447A2 (pt) conjugado, composição farmacêutica, uso e composto
CN108727583B (zh) 多臂靶向抗癌偶联物
CN106466485B (zh) 一种具有细胞内吞介导功能的靶向配体-药物偶联体
CN106632613B (zh) 与柯萨奇病毒腺病毒受体相关的亲和肽
CN109776787B (zh) 多臂靶向偶联物
WO2017131911A1 (en) Compositions and methods for sensitizing low responsive tumors to cancer therapy
CN108727582B (zh) 靶向抗癌偶联物
CN109771658B (zh) 靶向多臂偶联物
CN108727584B (zh) 抗癌偶联物
CN109776788B (zh) 叶酸受体靶向多臂偶联物
Wei et al. Supramolecular prodrug of SN38 based on endogenous albumin and SN38 prodrug modified with semaglutide side chain to improve the tumor distribution
EP3071238A1 (en) Conjugate comprising folic acid and indole-3-carbinol for medical use
CA3210473A1 (en) Branched linkers for antibody-drug conjugates and methods of use thereof

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal