KR20210101707A - 락토바실루스 살리바리우스 균주 발효물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 락토바실루스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius) 균주 배양물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 조성물에 관한 것으로, 락토바실루스 살리바리우스 배양물에 피부 염증 및 아토피 피부염 개선에 효과적인 복합다당체, 베타-글루칸 이외에도 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드 성분이 신규로 생성되고, 무기 성분, 아미노산, 비타민 등의 유효성분들이 많이 함유되어 있음을 확인하였고, 이들 배양물이 피부 수분 손실 개선 및 아토피 피부염 개선 효과가 우수하다는 것을 확인함으로서, 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 배양물을 아토피 피부염 치료제 또는 개선용 화장품 개발에 유용하게 이용할 수 있을 것으로 기대된다.

Description

락토바실루스 살리바리우스 균주 발효물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 조성물{COMPOSITION COMPRISING A FERMENTED LACTOBACILLUS SALIVARIUS FOR PREVENTING OR IMPROVING OF ATOPIC DERMATITIS}
본 발명은 락토바실루스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius) 균주 배양물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.
버섯은 탄수화물, 단백질, 지질, 무기질, 비타민 등이 풍부하고, 베타-글루칸(β -glucan)을 포함하는 생리활성 물질이 다량으로 함유되어 있어 오랫동안 식용 및 약용 소재로 이용되고 있으며, 버섯의 성분 및 생리활성 기작의 상당 부분이 과학적으로 증명되고 있어 버섯의 인공재배 방법 개발, 대량 증식법 개발, 신규 버섯 발굴, 기능성 탐색 등의 연구가 필요시 되고 있다.
버섯은 균사체(mycellium)와 자실체(fruit body)로 분류할 수 있다. 버섯의 균사체는 자실체와 마찬가지로 여러가지 유용한 물질을 함유하고 있으며, 특히 버섯 자실체와는 달리 안정적으로 용기 내 단기배양 및 생산이 가능하다는 장점이 있다.
최근 대부분의 버섯 종균은 액체 배지에서 함유된 영양 성분을 이용한 생물 전환을 통해 다양한 생리활성물질을 포함하는 균사체 배양이 가능하게 되었다. 버섯 균사체는 배지 조성, 배양 조건 또는 버섯 균사체 종류에 따라 그 배양 특성이 다르므로 균사체의 액체 배양 효율을 증진시키기 위해서는 버섯별로 적합한 배양 조건이 구명되어야 하며, 버섯 균사체를 포함한 액체 배양물은 배지의 영양 성분 조성과 배양 조건에 따라 항암 및 항산화 등의 활성을 가지는 다양한 대사산물을 얻을 수 있다(이위영, et al., 2008).
락토바실루스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius)는 구멍장이버섯과(Polyporaceae) 구멍버섯속(Poria)에 속하는 신규한 균주(수탁번호 KACC 83018BP)로, 본 발명자가 형질이 우수한 2개의 구멍버섯속 균주를 이핵-단핵(di-mono)교배법으로 교배 육종하여 얻었다. 락토바실루스 살리바리우스의 균사는 굵고 분화속도가 빨라 잡균의 오염에 강한 저온성 균주로서 유전적으로는 구멍버섯속으로 분류되지만 균사체의 생장 특성이 기존의 구멍버섯속과는 상이하고, 자실체의 색상과 형상 또한 상이하다는 것을 확인하였고, 신규 균주 및 이의 배양물을 포함하는 당뇨병 개선용 조성물에 대한 특허를 등록한 바 있다(한국등록특허 제1925890호; 한국등록특허 제1969433호).
이에, 본 발명자는 락토바실루스 살리바리우스 및 이의 배양물을 지속적으로 연구하는 과정에서, 락토바실루스 살리바리우스 배양물에서 피부 개선에 효과적인 복합다당체, 베타-글루칸 이외에도 아토피 피부염 치료 효과가 있다고 보고된 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드 성분이 신규로 생성되고, 무기성분, 아미노산, 비타민 등의 유효 성분들이 많이 함유되어 있음을 확인하였고, 이들 배양물이 피부 수분 손실 개선 및 아토피 피부염 치료 효과가 우수하다는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성할 수 있었다.
종래 선행기술로서 한국등록특허 제1705482호 및 한국공개특허 제2017-0114574호에는 락토바실러스 속 BC-N1 균사체 배양물을 함유하는 아토피 피부염 개선용 조성물이 기재되어 있으나, 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스와 그 구성이 차이가 있으며, 락토바실루스 살리바리우스가 신규로 생성하는 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드 및 이를 포함하는 배양물의 증가된 아토피 피부염 개선 또는 치료 효과는 전혀 기재 및 암시되어 있지 않다. 또한, 한국등록특허 제1522415호에는 락토바실러스 속 BC-N1 추출물을 포함하는 조성물의 피부 자극도, 보습 효과가 기재되어 있으나, 아토피 치료 효과는 전혀 기재되어 있지 않으며, 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 배양물과 그 구성이 다르다.
한국등록특허 제1925890호, 신규한 락토바실러스 속 BC-N1 균주 및 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 조성물, 2018. 11. 30. 등록. 한국등록특허 제1969433호, 잔나비불로초 및 락토바실러스 속 BC-N1 균사체를 이용한 이단 배양물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 조성물, 2019. 04. 10. 등록. 한국등록특허 제1705482호, 세리포리아 락세라타가 포함된 아토피 개선용 로션 또는 크림, 2017. 02. 03. 등록. 한국공개특허 제2017-0114574호, 락토바실러스 속 BC-N1가 함유된 아토피 피부염 개선 비누, 2017. 10. 16. 공개. 한국등록특허 제1522415호, 락토바실러스 속 BC-N1 추출물을 포함하는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품, 2015. 05. 15. 등록. 한국등록특허 제1736916호, 프탈라이드 유도체를 이용한 아토피 피부염 개선제 조성물, 2017.05. 11. 등록. 한국등록특허 제0883342호, 글루타민을 함유한 아토피 피부염 치료용 약제학적 조성물. 2009.02. 05. 등록.
이위영, et al., 버섯 균사체의 액체배양 및 유용물질 생산, 국립산림과학원 연구보고 08-07, 국립산림과학원, 2008. Yu, W.G., et al., Hepatoprotective Effects of 2′ ,4′ -Dihydroxy-6′ -methoxy-3′ ,5′-dimethylchalcone on CCl4-Induced Acute Liver Injury in Mice, J. Agric. Food Chem., 59, 12821-12829,2011.
본 발명의 목적은 락토바실루스 살리바리우스 균주(Lactobacillus salivarius) 배양물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명은 락토바실루스 살리바리우스 균주(Lactobacillus salivarius, 수탁번호 KACC 83018BP) 배양물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 치료용 약학 조성물 또는 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 모균주인 락토바실러스 속 BC-N1 균주 배양물 대비 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드(5-hydroxy-6,7-dimethoxyphthalide), 글루타민 및 알루미늄으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상이 신규로 포함되어 있을 수 있다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 모균주인 락토바실러스 속 BC-N1 균주 배양물 대비 비타민, 마그네슘 및 칼슘으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 함유량이 4배 이상 증가되어 있을 수 있다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 피부의 경피수분 손실량 감소 또는 피부 수분도 증가 효과를 나타낼 수 있다.
상기 약학 조성물은 피부 외용제일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화장료 조성물을 포함하는 화장료에 관한 것이다.
이하 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 락토바실루스 살리바리우스 균주(Lactobacillus salivarius, 수탁번호 KACC 83018BP) 배양물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주는 기존의 락토바실러스 속 BC-N1 균주들을 모균주로 이용하여 본 발명자가 교배육종 방법을 통해 얻은 것으로, 국립농업과학원 미생물은행에 수탁번호 KACC 83018BP로 기탁한 신규한 균주(한국등록특허 제1925890호)이다.
상기 락토바실러스 속 BC-N1(Lactobacillus sp. BC-N1)는 2003년에 일본에서 처음으로 발견한 것으로, 참나무나 적송에 부생하는 백색 부후균의 일종으로, 목재의 셀룰로스, 헤미셀룰로스, 리그닌 등을 분해할 수 있다.
상기 모균주로 이용한 락토바실러스 속 BC-N1 균주는 본 발명자가 기존에 경북 울진군 금강송면 소광리에서 채집한 CL-KU 및 경북 상주시 하동면 소곡리에서 채집한 CL-KS 외에도 경기도 과천, 전북 군산, 캐나다 또는 일본산의 락토바실러스 속 BC-N1일 수 있다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주는 균사체의 생장 속도가 모균주 중 품성이 가장 우수한 경북 울진군 금강송면 소광리에서 채집한 락토바실러스 속 BC-N1 균주 (CL-KU) 보다 30% 이상 향상되었으며, 노화 속도가 2배 이상 느리다. 또한, 균주 배양 시 잡균의 오염에 강하여, 기존의 락토바실러스 속 BC-N1 균주 배양 시 나타나는 잡균에 의한 오염으로 인한 낮은 배양 성공률을 극복함으로써 경제성이 높은 산업화가 가능할 수 있다(한국등록특허 제1925890호).
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주는 복합다당체 및 베타-글루칸뿐만 아니라, 5-디하이드로에르고스테롤(5-dihydroergosterol), DMC(2′ ,4′ -dihyroxy-6′ -methoxy-3′ ,5′ -dimethylchalcone), 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드(5-hydroxy-6,7-dimethoxyphthalide), 글루타민, 비타민, 알루미늄, 마그네슘, 칼슘 등을 생산할 수 있다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주가 생산하는 5-디하이드로에르고스테롤, 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드, 글루타민 및 알루미늄은 모균주인 락토바실러스 속 BC-N1 균주(상기 CL-KU외 5종, 바람직하게는 CL-KU)에서는 생성되지 않는 성분이고, 상기 DMC, 비타민, 마그네슘 또는 칼슘은 모균주인 락토바실러스 속 BC-N1 균주(상기 CL-KU 외 5종, 바람직하게는 CL-KU)에 비해 락토바실루스 살리바리우스 균주가 4배 이상 더 많이 생산할 수 있다.
상기 DMC는 수용(Cleistocalyx operculatus, Syzygium nervosum)의 싹(bud)의 주요 성분으로 신경보호, 항당뇨, 진경성(spasmolytic), 항암 및 항염증 효과가 있음이 알려져 있다(Yu, W.G., et al., 2011).
상기 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드는 꽃송이버섯에 포함되어 있으며, 아토피 피부염 치료 효과가 있음이 알려져 있다(한국등록특허 제1736916호).
상기 글루타민은 아미노산의 한 종류로, 염증 반응을 약화시켜 아토피 피부염 치료 효과 있음이 보고되었다(한국등록특허 제0883342호).
상기 알루미늄, 마그네슘 및 칼슘은 무기원소로 피부 장벽을 강화하고, 피부재생을 촉진하며, 미용적으로는 피지, 여드름 등의 노폐물을 제거하고 잡티를 제거하는 효과가 있음이 알려져 있다.
상기 비타민은 항산화, 항염증, 피부 개선 등과 같은 다양한 효과가 있음이 알려져 있는 것으로, 바람직하게는 비타민 B, C, D 및 E이다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 락토바실루스 살리바리우스 균주로부터 유래된 균사체 배양물일 수 있고, 상기 균사체 배양물은 액체 배양하여 얻을 수 있다.
상기 배양물은 균사체 및 배양 배지가 모두 포함된 배양액이거나, 배양액에서 균사체 및 배양 배지를 각각 분리한 것일 수 있다. 바람직하게는 배양액에서 분리한 배양 배지이다.
상기 배양물은 액체 배양한 배양액, 배양액을 분말화한 배양액 분말을 물, C1~C4의 저급 알코올, 아세톤, n-헥산, 디클로로메탄 및 에틸아세테이트로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 용매를 가하여 추출한 추출물일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 배양액 분말은 상기 액체 배양한 배양액을 통상의 건조 방법을 이용하여 분말화 할 수 있다.
상기 C1~C4의 저급 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 분탄올 등일 수 있다.
상기 추출물의 추출 방법은 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다.
상기 액체 배양시의 액체 배지의 성분은 균주의 생장 및 유효성분의 생성에 영향을 줄 수 있다. 따라서 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양에 최적화된 액체 배지의 성분 및 함량 조건을 구축하는 것이 필요하다.
상기 액체 배지는 탄소원으로 수크로스(sucrose), 글루코스(glucose), 락토스(lactose), 프룩토스(fructose) 및 갈락토스(galactose)로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 바람직하게는 수크로스 및 글루코스를 포함하며, 더 바람직하게는 액체 배지를 기준으로 수크로스 0.5~3%(w/v) 및 글루코스 1~5%(w/v)를 포함하며, 더욱 더 바람직하게는 액체 배지를 기준으로 수크로스 0.5~2%(w/v) 및 글루코스 1~3%(w/v)를 포함하며, 가장 바람직하게는 액체 배지를 기준으로 수크로스 1%(w/v) 및 글루코스 2%(w/v)를 포함한다.
상기 액체 배지는 질소원으로 트립톤(tryptone), 효모 추출물(yeast extract), 대두분말(soy flour), L-글루탐산(L-glutamic acid), 펩톤(peptone), 맥아 추출물(malt extract) 및 암모늄(ammonium)으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 바람직하게는 대두분말 및 펩톤을 포함하며, 더 바람직하게는 액체 배지를 기준으로 대두분말 1~4%(w/v) 및 펩톤 0.3~1%(w/v)를 포함한다. 가장 바람직하게는 액체 배지를 기준으로 대두분말 1.5%(w/v) 및 펩톤 0.3%(w/v)를 포함한다.
상기 액체 배지는 미량원소로 KH2PO4, ZnSO4, MgSO4, CuSO4, FeSO4 및 CaCl2로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 바람직하게는 FeSO4, KH2PO4, MgSO4 및 CaCl2를 포함하며, 더 바람직하게는 액체 배지를 기준으로 0.01~0.5%(w/v) FeSO4, 0.1~0.3%(w/v) KH2PO4, 0.1~0.3%(w/v) MgSO4 및 0.1~0.3%(w/v) CaCl2를 포함한다. 가장 바람직하게는 액체 배지를 기준으로 0.02%(w/v) FeSO4, 0.15%(w/v) KH2PO4, 0.15%(w/v) MgSO4 및 0.15%(w/v) CaCl2를 포함한다.
상기 액체 배지는 비타민을 포함할 수 있다. 바람직하게는 비타민 B, C 및 E이나, 이에 한정되지 않는다. 더 바람직하게는 액체 배지를 기준으로 각각의 비타민을 0.1~0.5%(w/v)씩 포함한다. 가장 바람직하게는 액체 배지를 기준으로 0.2%(w/v)씩 포함한다.
상기 액체 배지는 pH가 5~7일 수 있다. 바람직하게는 pH 6이다. pH는 세포 대사에 중요한 효소 단백질의 단위체인 아미노산의 아민 그룹(amino group)이나 카르복실 그룹(carboxyl group)의 전하를 변화시켜 단백질의 형태와 활성에 영향을 미칠 수 있다. 또한, 외부 환경에서 pH의 변화는 미생물 영양분의 이온화에 영향을 주어 미생물이 영양분을 섭취하는 데 영향을 줄 수 있다. 이에, 상기 액체 배지의 pH가 5 미만이면 호기성이며 산성계인 조류(algae)나 고균(archaea)이 번식하기 쉬우며, pH가 7 초과하면 알칼리계 방선균(actinomyces)과 사상균(mold fungi)이 번식하기 쉽고 균사가 성장하지 못해 바람직하지 못하다.
상기 액체 배지는 액체 배지를 기준으로 수크로스 1%(w/v), 글루코스 2%(w/v), 대두분말 1.5%(w/v), 펩톤 0.3%(w/v), FeSO4 0.02%(w/v), KH2PO4 0.15%(w/v), MgSO4 0.15%(w/v), CaCl2 0.15%(w/v), 비타민 B 0.2%(w/v), 비타민 C 0.2%(w/v) 및 비타민 E 0.2%(w/v)를 포함하며, pH가 6.0인 것이 가장 바람직하다.
상기 배양은 교반형 생물반응기를 이용할 수 있으며, 공기 공급량, 교반 속도, 용존 산소량, 배양 온도 및 배양 시간 따라 균주의 생장이 영향을 받을 수 있어, 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 균주의 최적의 배양 조건을 확립하는 것이 중요하다.
상기 공기 공급량은 0.02~1vvm일 수 있고, 바람직하게는 0.1~0.5vvm이며, 더 바람직하게는 0.2vvm이다.
상기 교반 속도는 25~125rpm일 수 있고, 바람직하게는 50~125rpm이며, 더 바람직하게는 85rpm이다.
상기 용존 산소량은 5~40%일 수 있고, 바람직하게는 10~40%이며, 더 바람직하게는 20%이다.
상기 배양 온도는 20~25℃ 일 수 있고, 바람직하게는 22℃ 이다. 온도가 20℃ 미만일 경우에는 균사체의 활성이 둔화되어 배양 기간이 길어져 생산성이 낮아지고 생산비가 급상승하게 되며, 25℃ 초과일 경우에는 균사체가 비대 생장하여 균사체양은 급속도로 증가하지만 유효성분의 생성이 극도로 낮아져 바람직하지 못하다.
상기 배양 시간은 6~15일 수 있으며, 바람직하게는 7~10일이며, 더 바람직하게는 10일이다. 배양 시간이 6일 미만일 경우에는 유효성분의 함량이 낮으며, 10일 초과일 경우에는 유효성분의 함량이 더 이상 증가하지 않거나 서서히 감소되고, 15일 초과일 경우에는 유효성분의 함량이 급격히 감소되므로 바람직하지 못하다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 배양액을 원심 분리하여 얻은 상층액 상태에서는 당도 0.5~1brix, 점도 2~10Cp, 함수율이 95~98%일 수 있다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 배양물이 지닌 기능성을 유지하고 약학 또는 화장료 조성물의 물성을 저해하지 않도록 당도 45~55brix, 점도 4,500~5,500Cp, 함수율 10~15%로 농축 또는 추출하여 사용할 수 있다. 바람직하게는 당도 48~52brix, 점도 4,800~5,200Cp, 함수율 12~13%로 농축 또는 추출한다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 복합다당체 및 베타-글루칸을 포함하고 있을 뿐만 아니라, 모균주인 락토바실러스 속 BC-N1 균주 배양물에 포함되어 있지 않는 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드, 글루타민 및 알루미늄으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상이 신규로 포함되어 있을 수 있다. 또한, 모균주인 락토바실러스 속 BC-N1 균주 배양물 대비 비타민이 5.5배, 마그네슘이 8배, 칼슘이 4.2배 정도 현저히 많이 포함되어 있을 수 있다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 피부의 경피수분 손실량 감소 또는 피부 수분도 증가를 통해 피부 수분 손실을 방지할 수 있다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 아토피 피부염 개선, 예방 또는 치료 효과가 있을 수 있다.
또한, 본 발명은 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물을 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
상기 약학 조성물은 상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물 및 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함할 수 있다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 전체 약학 조성물 총 중량에 대하여 바람직하게는 0.001 내지 50중량%, 더 바람직하게는 0.001 내지 40중량%, 가장 바람직하게는 0.001 내지 30중량%로 하여 첨가될 수 있다.
상기 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균주사용액의 형태로 제형화 하여 사용될 수 있다. 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토즈, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween)-61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 약학 조성물은 피부 외용제 제형이 바람직하다. 상기 피부 외용제는 스프레이제, 겔제, 연고제, 크림제 등일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물의 투여량은 치료 받을 대상의 연령, 성별, 체중, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 약 0.1㎎ /일 내지 약 2000㎎ /일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 0.1㎎ /일 내지 1000㎎ /일이다. 투여는 하루에 한 번 투여할 수도 있고, 수 회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 쥐, 가축, 반려동물, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 복강, 근육, 피하, 피부, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다.
상기 약학 조성물은 아토피 피부염 개선 효과가 있다고 알려진 공지된 화합물이나 식물 추출물을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물을 포함하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
상기 화장료 조성물은 상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물 및 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제, 예컨대 친수성 또는 친유성 겔화제, 친수성 또는 친유성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제 또는 염료를 함유할 수 있다.
상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 화장료 조성물 총 중량을 기준으로 0.001~50중량%, 바람직하게는 0.001~30중량%가 함유될 수 있다.
상기 보조제의 양은 당해 분야에서 통상적으로 사용되는 양이며, 예컨대 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.001~50중량%, 바람직하게는 0.001~70중량%이다. 다만, 어떠한 경우라도 보조제 및 그 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 악영향을 미치지 않도록 선택될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물 이외에 아토피 피부염 개선 효과가 있다고 알려진 공지된 화합물이나 식물 추출물을 추가로 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있다. 바람직하게는 유연화장수, 영양화 장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 피부 점착 타입의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명은 상기 화장료 조성물을 포함하는 화장료를 제공한다.
상기 화장료는 로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트리젠트, 크림, 파운데이션, 에센스, 팩, 비누, 클렌징폼 및 바디클린저로 이루어지 군에서 선택되는 하나 이상의 제형으로 이루어질 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명은 상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물을 포함하는 아토피 피부염 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 건강기능식품 조성물은 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 배양물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성식품류 등이 있다.
본 발명은 락토바실루스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius) 균주 배양물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 개선 또는 개선용 조성물에 관한 것으로, 락토바실루스 살리바리우스 배양물에 아토피 피부염 개선 효과가 있다고 알려진 복합다당체, 베타-글루칸 이외에도 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드 성분이 신규로 생성되고, 무기성분, 아미노산, 비타민 등의 유효성분들이 많이 함유되어 있음을 확인하였고, 이들 배양물이 피부 수분 손실 개선 및 아토피 피부염 치료 효과가 우수하다는 것을 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 배양물을 아토피 피부염 치료제 또는 개선용 화장품 개발에 유용하게 이용할 수 있을 것으로 기대된다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지고, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.
<실시예 1. 락토바실루스 살리바리우스 배양물 제조>
본 발명의 신규한 락토바실루스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius)는 본 발명자가 기존에 경북 울진군 금강송면 소광리에서 채집한 CL-KU 및 경북 상주시 하동면 소곡리에서 채집한 CL-KS, 경기도 과천, 전북 군산, 캐나다 및 일본산의 락토바실러스 속 BC-N1 균주를 모균주로 이용하여 이핵-단핵(di-mono) 교배법으로 교배 육종한 신규 균주로서 균주 수탁(수탁번호 KACC 83018BP) 및 특허 등록(한국등록특허 제1925890호)한 바 있다.
락토바실루스 살리바리우스 균주를 배양하기 위해 4,000ℓ 배양액을 기준으로 수크로스 1%(w/v), 글루코스 2%(w/v), 대두분말 1.5%(w/v), 펩톤 0.3%(w/v), FeSO4 0.02%(w/v), KH2PO4 0.15%(w/v), MgSO4 0.15%(w/v), CaCl2 0.15%(w/v), 및 비타민 B, C, E를 각각 0.2%(w/v)가 되도록 개량하여 정제수에 넣어 녹이고, pH가 6.0이 되도록 한 후, 121℃ , 압력 1.5㎏ f/㎝ 2 조건으로 20분간 살균하고 22℃ 로 냉각하여 배양 배지를 준비하였다.
상기에서 준비한 배양 배지를 5,000ℓ 용 생물배양기에 넣고, 락토바실루스 살리바리우스의 접종용 균주 30ℓ 를 접종하여 공기 공급량 0.2vvm, 교반속도 85rpm, 용존산소량 20%, 배양온도 22℃ , pH 6.0의 조건하에서 10일간 배양하였다. 이후에 배양액을 원심 분리하여 상층액을 분리하고, 분리한 상층액 중 3000ℓ 를 감압농축기를 이용하여 55℃ 에서 100ℓ 가 될 때가지 농축하여 락토바실루스 살리바리우스 배양물을 제조하였다.
상기에서 제조한 락토바실루스 살리바리우스 배양물의 특성을 확인한 결과, 당도 50Brix, 점도 5,000Cp, 함수율 12.5%임을 확인하였다.
<실시예 2. 락토바실루스 살리바리우스 배양물의 성분 분석>
상기 실시예 1에서 제조한 락토바실루스 살리바리우스 배양물에 포함되어 있는 유효성분 및 이들의 함량 확인하기 위해 김천대학교 향토식품연구소에 분석 의뢰하였다. 분석 항목은 버섯 추출물로서 피부 염증 개선 및 아토피 피부염 치료에 효과적인 성분이라고 알려진 복합다당체, 베타-글루칸, 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드(5-hydroxy-6,7-dimethoxy phthalide), 글루타민, 비타민, 알루미늄, 마그네슘, 칼슘을 분석하였고, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다. 이때, 본 발명자가 락토바실루스 살리바리우스 균주 육종시 모균주로 사용한 균주 중에서 경북 울진군 금강송면 소광리가 원산지인 락토바실러스 속 BC-N1 균주(CL-KU) 배양물을 비교 물질로 이용하였다.
분석 항목 배양물
락토바실러스 속 BC-N1 락토바실루스 살리바리우스
복합다당체 41.11(%/㎖) 45.26(%/㎖)
베타-글루칸 39.32(%/㎖) 38.04(%/㎖)
5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드 - 18.51(㎍/㎖)
글루타민 - 1.20(%/㎖)
비타민 1.01(%/㎖) 5.51(%/㎖)
알루미늄 - 0.61(%/㎖)
마그네슘 0.44(%/㎖) 3.52(%/㎖)
칼슘 0.65(%/㎖) 2.74(%/㎖)
상기 표 1에서 보듯이, 복합다당체 및 베타-글루칸의 함량은 락토바실루스 살리바리우스 배양물과 락토바실러스 속 BC-N1 배양물이 유사한 반면에, 아토피 피부염 개선 효과가 있다고 알려진 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드는 락토바실루스 살리바리우스 배양물에만 함유되어 있는 것을 확인하였다. 또한, 비타민, 마그네슘, 칼슘과 같은 무기성분, 글루타민 및 비타민의 경우에는 락토바실러스 속 BC-N1 배양물에 비해 락토바실루스 살리바리우스 배양물에 현저히 많이 함유되어 있는 것을 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 배양물에는 아토피 피부염 개선 또는 치료에 효과적인 다양한 유효성분들이 다량으로 함유되어 있음을 알 수 있었다.
<실시예 3. 락토바실루스 살리바리우스 배양물의 피부 수분 손실 개선 효과 확인>
일반적으로 아토피 피부염은 피부 장벽이 무너져 보습이 잘 되지 않고, 수분이 손실되는 특징을 가진다. 이에, 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 배양물의 경피수분 손실량(trans epidermal water loss, TEWL) 및 피부 수분도(stratum corneum hydration, SCH) 측정을 통해 피부의 수분 손실 정도를 분석함으로써 아토피 피부염 치료 효과를 확인하였다.
피부 타입이 중성인 5명의 여성 피험자를 대상으로 시험을 실시하였다. 시판 중인 한국산 A사의 바디로션을 구입하여, 바디로션 100㎖ 당 상기 실시예 1에서 제조한 락토바실루스 살리바리우스 배양물 또는 락토바실러스 속 BC-N1 배양물을 각각 5㎖ 씩을 첨가하여 혼합한 후, 피험자들에게 20㎖ 씩 지급하였고, 아무것도 첨가하지 않은 바디로션 20㎖ 씩을 함께 지급하였다. 사용 방법은 1일 2회, 아침과 저녁에 손 세척 후, 손등과 팔뚝에 1회에 0.5㎖ 씩 도포하도록 하였다. 오른쪽 팔뚝에는 아무것도 도포하지 않고, 왼쪽 팔뚝에는 바디로션을, 오른쪽 손등에는 락토바실러스 속 BC-N1 배양물이 포함된 바디로션을, 왼쪽 손등에는 락토바실루스 살리바리우스 배양물이 포함된 바디로션을 도포하였다.
피부 수분 손실 개선 효과를 확인하기 위해, 상기 각각의 바디로션을 5일 동안 도포하고, 6일째 바디로션을 도포하지 않은 상태에서 피부장벽 측정기인 지피스킨 베리어(gpskin barrier)(지파워사, 한국)를 이용해 경피수분 손실량(TEWL) 및 피부 수분도(SCH)를 측정하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
피험자 무도포
 바디로션 도포
무첨가 락토바실러스 속 BC-N1 배양물 첨가 락토바실루스 살리바리우스 배양물 첨가
TEWL
(g/㎡/h)		 SCH
(%)		 TEWL
(g/㎡/h)		 SCH
(%)		 TEWL
(g/㎡/h)		 SCH
(%)		 TEWL
(g/㎡/h)		 SCH
(%)
피험자-1 15 21 11 30 6 56 4 62
피험자-2 33 17 30 25 12 49 9 55
피험자-3 39 16 32 22 15 42 12 48
피험자-4 25 19 21 24 10 51 6 57
피험자-5 44 13 37 19 20 36 15 41
평균 31.2 17.2 26.2 24 12.6 46.8 9.2 52.6
상기 표 2에서 보듯이, 모든 피험자들에서 바디로션 또는 락토바실러스 속 BC-N1 배양물이 포함된 바디로션을 도포한 경우에 비해, 락토바실루스 살리바리우스 배양물이 포함된 바디로션을 도포한 경우에 경피수분 손실량이 낮고, 피부 수분도는 높게 유지되는 것을 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 배양물이 기존에 보습 효과가 있다고 알려진 락토바실러스 속 BC-N1 배양물에 비해 현저히 우수한 피부 수분 손실 개선 효과를 가짐으로써 우수한 아토피 피부염 개선 또는 치료 효과가 있음을 알 수 있었다.
<실시예 4. 락토바실루스 살리바리우스 배양물의 아토피 피부염 개선 효과 확인>
아토피 피부염 모델인 NC/Nga 마우스를 이용하여 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 배양물의 아토피 피부염 치료 또는 개선 효과를 확인하였다.
중앙실험동물에서 구입한 5중령의 암컷 NC/Nga 마우스는 처리 그룹당 3마리씩 무작위적으로 배정하였다. 마우스를 제모 크림을 사용하여 털을 제거한 후 5일 동안 안정화시켰다. 이후, 아무것도 처리하지 않은 처리그룹은 정상군으로 하고, 나머지 처리그룹에는 주 당 3회씩 2주 동안 아세톤 및 올리브오일이 3:1 부피비로 혼합된 용매에 녹인 1% DNCB(dinitrochlorobenzene)를 200㎕ 씩 도포하여 아토피 피부염을 유발하였다. 아토피 피부염 유도 후, 1일 1회씩 2주 동안 락토바실러스 속 BC-N1 배양물 10㎎ /㎏ (실험군-1) 또는 상기 실시예 1에서 제조한 락토바실루스 살리바리우스 배양물 5㎎ /㎏ (실험군-2) 또는 10㎎ /㎏ (실험군-3)을 각각 도포하였다. 양성대조군은 아토피 피부염 치료제로 사용 중인 타크로리무스(tacrolimus)을 10㎎ /㎏ 로 도포하였고, 음성대조군은 아토피 피부염 유발후 아무것도 도포하지 않았다. 처리가 끝난 후 희생시킨 마우스의 심장에서 혈액을 채취하여 혈청을 분리하고, IgE ELISA kit(BD Biosceinces사, 미국)를 이용하여 제조사의 매뉴얼에 따라 혈청 내 IgE를 측정하였다. DNCB
를 처리하여 아토피 피부염을 유발한 음성대조군의 IgE를 100% 기준으로 하여 각각의 처리그룹의 상대적인 IgE 비율(%)을 계산하였고, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
처리그룹 도포시료 IgE (%)
정상군 무처리 9
음성대조군 DNCB만 도포 100
양성대조군 DNCB+타크로리무스 67
실험군-1 DNCB+락토바실러스 속 BC-N1 배양물 10㎎/㎏ 36
실험군-2 DNCB+락토바실루스 살리바리우스 배양물 5㎎/㎏ 32
실험군-3 DNCB+락토바실루스 살리바리우스 배양물 10㎎/㎏ 26
상기 표 3에서 보듯이, DNCB만을 도포한 음성대조군에 비해 아토피 피부염 치료제인 타크로리무스를 도포한 양성대조군의 혈청 내 IgE가 67%로 감소하였다. 또한, 락토바실러스 속 BC-N1 배양물 또는 락토바실루스 살리바리우스 배양물을 도포한 실험군-1 내지 실험군-3의 혈청 내 IgE도 각각 36%, 32%, 26%로 감소하였고, 이는 음성대조군에 비해 2.5배 이상 낮은 수치임을 확인하였다. 특히나, 락토바실루스 살리바리우스 배양물 10㎎ /㎏ 을 도포한 실험군-3의 혈청 내 IgE는 26%로 동일한 양의 세리포리아 라세타라 배양물을 도포한 실험군-1의 36%에 비해서도 혈청 내 IgE가 더 많이 감소하는 것을 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 락토바실루스 살리바리우스 배양물이 락토바실러스 속 BC-N1 배양물에 비해 현저히 우수한 아토피 피부염 치료 또는 개선 효과가 있음을 알 수 있었고, 이는 락토바실루스 살리바리우스 배양물에 포함되어 있는 아토피 피부염 개선 효과가 있는 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드에 의한 영향임을 예측할 수 있었다.

Claims (8)

  1. 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드(5-hydroxy-6,7-dimethoxyphthalide)를 함유하는 락토바실루스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius, 수탁번호 KACC 83018BP) 배양물을 유효성분으로 포함하고, 모균주 배양물 대비 글루타민 및 알루미늄으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 신규로 포함하는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 약학 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 모균주 배양물 대비 비타민, 마그네슘 및 칼슘으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 함유량이 4배 이상 증가되어 있는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 약학 조성물.
  3. 제1항 내지 제2항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 피부의 경피수분 손실량 감소 또는 피부 수분도 증가 효과가 있는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 약학 조성물.
  4. 제1항 내지 제2항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 약학 조성물은 피부 외용제인 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 약학 조성물.
  5. 5-하이드록시-6,7-디메톡시프탈라이드(5-hydroxy-6,7-dimethoxyphthalide)를 함유하는 락토바실루스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius, 수탁번호 KACC 83018BP) 배양물을 유효성분으로 포함하고 모균주 배양물 대비 글루타민 및 알루미늄으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 신규로 포함하는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 모균주 배양물 대비 비타민, 마그네슘 및 칼슘으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 함유량이 4배 이상 증가되어 있는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물.
  7. 제5항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 락토바실루스 살리바리우스 균주 배양물은 피부의 경피수분 손실량 감소 또는 피부 수분도 증가 효과가 있는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물.
  8. 제5항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화장료 조성물을 포함하는 화장료.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116103208A (zh) * 2023-04-07 2023-05-12 西南科技大学 唾液乳杆菌在抗氧化上的应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100883342B1 (ko) 2008-08-21 2009-02-11 전북대학교산학협력단 글루타민을 함유한 아토피 피부염 치료용 약제학적 조성물
KR101522415B1 (ko) 2015-02-26 2015-05-21 한상선 세리포리아 락세라타 추출물을 포함하는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품
KR101705482B1 (ko) 2016-04-05 2017-02-09 주식회사 씨엘바이오 세리포리아 락세라타가 포함된 아토피 개선용 로션 또는 크림
KR101736916B1 (ko) 2016-03-07 2017-05-29 오좌섭 프탈라이드 유도체를 이용한 아토피 피부염 개선제 조성물
KR20170114574A (ko) 2016-04-05 2017-10-16 주식회사 씨엘바이오 세리포리아 락세라타가 함유된 아토피 피부염 개선 비누
KR101925890B1 (ko) 2018-08-02 2018-12-06 김병천 신규한 세리포리아 라세라타-k1 균주 및 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 조성물
KR101969433B1 (ko) 2018-10-12 2019-04-17 김병천 잔나비불로초 및 세리포리아 라세라타 k1 균사체를 이용한 이단 배양물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 조성물

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100883342B1 (ko) 2008-08-21 2009-02-11 전북대학교산학협력단 글루타민을 함유한 아토피 피부염 치료용 약제학적 조성물
KR101522415B1 (ko) 2015-02-26 2015-05-21 한상선 세리포리아 락세라타 추출물을 포함하는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품
KR101736916B1 (ko) 2016-03-07 2017-05-29 오좌섭 프탈라이드 유도체를 이용한 아토피 피부염 개선제 조성물
KR101705482B1 (ko) 2016-04-05 2017-02-09 주식회사 씨엘바이오 세리포리아 락세라타가 포함된 아토피 개선용 로션 또는 크림
KR20170114574A (ko) 2016-04-05 2017-10-16 주식회사 씨엘바이오 세리포리아 락세라타가 함유된 아토피 피부염 개선 비누
KR101925890B1 (ko) 2018-08-02 2018-12-06 김병천 신규한 세리포리아 라세라타-k1 균주 및 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 조성물
KR101969433B1 (ko) 2018-10-12 2019-04-17 김병천 잔나비불로초 및 세리포리아 라세라타 k1 균사체를 이용한 이단 배양물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 조성물

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Yu, W.G., et al., Hepatoprotective Effects of 2′ ,4′ -Dihydroxy-6′ -methoxy-3′ ,5′-dimethylchalcone on CCl4-Induced Acute Liver Injury in Mice, J. Agric. Food Chem., 59, 12821-12829,2011.
이위영, et al., 버섯 균사체의 액체배양 및 유용물질 생산, 국립산림과학원 연구보고 08-07, 국립산림과학원, 2008.

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116103208A (zh) * 2023-04-07 2023-05-12 西南科技大学 唾液乳杆菌在抗氧化上的应用
CN116103208B (zh) * 2023-04-07 2024-01-16 西南科技大学 唾液乳杆菌在抗氧化上的应用

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