KR20210061998A - 신규 죽염 및 그 제조 방법 - Google Patents

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KR20210061998A
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리앙 첸
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얄리 얀
루오리안 후앙
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항저우 유-메이트 테크놀로지 씨오, 엘티디.
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Abstract

기능성 식물염의 제조 방법에 있어서, 하나 또는 다수의 식물 추출물 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염과 균일하게 혼합하고, 800 ~ 1400 ℃의 고온에서 1회 또는 여러회에 걸쳐 베이킹하여, 상이한 색상, 상이한 공간 구조, 상이한 물리화학적 성질, 상이한 풍미 및 상이한 용도를 갖는 기능성 식물염을 형성한다.

Description

신규 죽염 및 그 제조 방법
본 발명은 식품 및 건강 식품 기술 분야에 관한 것으로, 구체적으로 기능성 식물염 및 그 제조 방법에 관한 것이며, 보다 구체적으로 죽염 및 그 제조 방법에 관한 것이다.
식물염은 식물 유기체로부터 추출된, 순수한 물리적 공정과 공법을 사용하여, 저 나트륨염과 다양한 미네랄 미량 원소 그룹에 부합되고, 다양한 원소 비율이 인체 요구에 부합되는 균형적인 염류를 의미하며, 인체의 미량 원소 균형, 기능 조절 및 신진대사와 건강에 대해 일정한 촉진 작용을 갖는 신규 식용염이다.
식물염의 주요 특징은, ① 식물을 주요 공급원으로 하고; ② 천연 저 나트륨염 및 천연 균형 염이며; ③ 다양한 유기 영양 물질과 생물학적 활성 성분이 풍부하고; ④ 가공 생산 과정에서 임의의 화학 합성 물질이 첨가되지 않으며; ⑤ 미네랄 원소 그룹의 부족 또는 불균형으로 인한 다양한 질환 및 관련 합병증에 대해 일정한 보조 치료 및 조절 효과가 있는 것이다. 예를 들어, 나트륨 민감성 고혈압, 제2형 당뇨병, 고지혈증, 심혈관 질환, 종양 및 몸체 면역 기능 장애 등 질환 및 합병증과 같은 질환에 명확한 치료 효과가 있다.
식물염(Plant-Salt)의 개념은 홍콩 예방의학연구원 원장 판한제(潘漢杰) 교수로부터 최초로 제기되어, 지속적으로 개선되고 개발되고 있다.
판한제(潘漢杰) 교수가 지적한데 의하면, 식물염의 효능은 원료 식물의 선택, 토양 재배 및 관개 수원의 활성 등과 매우 밀접한 관계를 갖는다. 식물염 공정은 중국에서 막 시작되었으며, 전망이 매우 광범위하다.
판한제(潘漢杰) 교수가 강조한데 의하면, 식물염의 생물학적 활성은 원료 식물 품종의 선택과 품종 조합 및 포함한 무기염 종류의 수, 원소의 함량 및 비율 관계 및 식물 관련의 생물학적 활성 성분 등 요소에 의해 결정되고; 식물염은 주요하게 저 나트륨 식이요법을 필요로 하는 사람, 몸체 미량 원소의 불균형 또는 부족으로 인한 몸체 기능 대사 장애, 기능 저하 및 기능이 손상받는 사람들을 대상으로 한다.
본 발명이 해결하고자 하는 기술적 문제는 기능성 식물염, 및 상기 기능성 식물염의 제조 방법을 제공하는 것이다.
본 발명에서, 상기 기능성 식물염은 죽염이고, 대나무 추출물을 식물성 원료로 하여 제조된 생성물을 의미한다.
본 발명의 제1 양태로, 기능성 식물염을 제공하는 바, 상기 기능성 식물염은 하나 또는 다수의 식물 추출물 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염과 균일하게 혼합하고, 800 ~ 1400 ℃의 고온에서 1회 또는 여러회에 걸쳐 베이킹하여 제조된다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 식물 추출물은 대나무 추출물이다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 식물 추출물은 대나무잎 추출물, 대나무 뿌리 추출물, 대나무 장대 추출물, 죽순 추출물, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 식물 추출물은 대나무잎 플라본, 대나무잎 폴리페놀, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 미세 염은 해염, 호염, 정염, 광염으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 미세 염은 조제된 해염이다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 기능성 식물염은 죽염이다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 물 추출물은 매화 추출물 및/또는 소나무 추출물을 더 포함한다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 미세 염은 식염이다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 기능성 식물염의 ΔL값은 28-50이고, 비교적 바람직하게는 35-50이다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 기능성 식물염의 ΔL값은 30-40이고, 비교적 바람직하게는 32-39이다.
본 발명의 제2 양태로, 본 발명의 제1 양태에 따른 기능성 식물염의 제조 방법을 제공하는 바, 하나 또는 다수의 식물 추출물 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염과 균일하게 혼합하고, 800 ~ 1400 ℃의 고온에서 1회 또는 여러회에 걸쳐 베이킹하여 기능성 식물염을 얻는 단계를 포함한다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 베이킹은 기계화 오븐에서 수행된다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 베이킹은 중간 주파수 용해로에서 수행된다.
본 발명의 제3 양태로, 하나 또는 다수의 본 발명의 제1 양태에 따른 기능성 식물염을 포함하는 식품 또는 약품 조성물을 제공한다.
본 발명의 제4 양태로, 약물 보조제, 건강 식품/음료, 기능성 식품/음료, 식탁용 조미소금, 요리용 소금, 특수 용도 화장품 또는 개인 케어 용품으로 이루어진 군으로부터 선택된 물질을 제조하는데 사용되는 본 발명의 제1 양태에 따른 기능성 식물염의 용도를 제공한다.
본 발명의 제5 양태로, 하나 또는 다수의 억제 유효량의 본 발명의 제1 양태에 따른 기능성 식물염을 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 트랜스아미나아제 활성 억제 방법을 제공한다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 트랜스아미나아제는 아스파르테이트 트랜스아미나아제(AST), 글루타메이트 트랜스아미나아제(ALT)로부터 선택된다.
본 발명의 범위 내에서, 본 발명의 상기 각 기술특징과 아래(예를 들어 실시예)에서 구체적으로 설명되는 각 기술특징 사이는 모두 서로 조합될 수 있으므로, 신규 또는 바람직한 기술적 해결수단을 구성함을 이해해야 한다. 편폭의 제한으로, 여기서 더이상 일일이 설명하지 않는다.
도 1은 실시예4에서 얻은 송염의 사진이다.
도 2는 실시예5에서 얻은 죽염의 사진이다.
도 3은 실시예6에서 얻은 매화염의 사진이다.
도 4는 실시예7에서 얻은 송염의 사진이다.
도 5는 실시예8에서 얻은 죽염의 사진이다.
도 6은 실시예9에서 얻은 매화염의 사진이다.
도 7은 상이한 배합 비율 및 상이한 공법 파라미터에서 얻은 식물염 사진이다.
도 8은 상이한 염의 현미경 사진이다.
도 9는 상이한 염의 SEM 결과이다.
도 10은 상이한 염의 TEM 결과이다.
도 11은 상이한 염의 XRD 결과이다.
도 12는 상이한 염의 전자혀 테스트 결과이다.
도 13은 상이한 염의 전자코 테스트 결과이다.
도 14는 각 그룹의 생쥐 간 조직 병리학적 절편의 형태학 관찰 결과이다.
도 15는 체외 티로시나아제(tyrosinase)(모노페놀라아제(Monophenolase))에 대한 상이한 농도의 염 용액의 억제 효과를 도시하고, **는 원염과 비교하여 실험 그룹에 극히 현저한 차이(p<0.01),n=3이 존재함을 나타낸다.
도 16은 체외 티로시나아제(디페놀라아제(diphenolase))에 대한 상이한 농도의 염 용액의 억제 효과를 도시하고, **는 원염과 비교하여 실험 그룹에 극히 현저한 차이(p<0.01),n=3이 존재함을 나타낸다.
도 17은 0.5 % 질량분율의 각 샘플이 B16 세포 이전에 미치는 영향을 도시하고, a-정상; b-원염; c-알부틴; d-송염; e-죽염; f-매화염이다.
도 18은 0.5 % 질량분율의 각 샘플이 B16 세포 주기에 미치는 영향을 도시하고, a-정상; b-원염; c-알부틴; d-송염; e-죽염; f-매화염이다.
도 19는 6.3.1중 실험 동물의 체중 변화도이다.
도 20은 6.3.2 중 실험 랫트의 혈압 변화이다.
본 발명자는 장기간의 심층적 연구를 통해, 사전 베이킹이 되지 않은 대나무 추출물과 원염의 혼합물을 원염 용해점보다 높은 온도(예를 들어 800 ~ 1400 ℃)에서 고온 처리를 수행하여, 우수한 생물학적 효과를 갖는 죽염을 예기치 않게 제조하였다. 상기 죽염의 제조 방법은 간단하고, 대규모로 대중화하기 용이하다. 이의 기초상에서, 발명자는 본 발명을 완료하였다.
용어
본 발명에서, 용어 “기능성 식물염”은 죽염이고, 대나무 추출물을 식물성 원료로 하여 제조된 생성물을 의미한다.
본 발명에서, 용어 “사전 베이킹이 되지 않은”은 상기 죽염을 제조하는 원료가 대나무 추출물과 원염의 직접 혼합물이고, 상기 혼합물이 기존의 죽염을 제조하는 저온(예를 들어, 800 ℃ 이하)에서의 사전 베이킹 처리를 1회 이상 거치지 않은 것을 의미한다.
본 발명에서, 용어 “식물 추출물”은 대나무 추출물이다.
대나무 추출물
상기 대나무 추출물은 대나무잎 추출물, 대나무 뿌리 추출물, 대나무 장대 추출물, 죽순 추출물, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
다른 바람직한 일례에서, 상기 대나무 추출물은 대나무잎 플라본, 대나무잎 폴리페놀, 대나무 뿌리 트리테르펜, 대나무 다당류(예를 들어, 대나무 뿌리 다당류), 죽순 스테롤, 죽순 아미노산 펩티드, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
죽염 및 그 제조 방법 및 용도
현재 널리 알려진 한국 죽염은 실제로 중국에서 공급된 것이다. 1300년 전, 차마고도의 사찰에 캐러밴이 머물고 있었는데, 밤에 마구간에 불이 나, 흰색의 식염과 염을 담은 용기(대나무 바구니)가 함께 회색 염 덩어리(죽 죽염의 배아 형태)로 태워졌는데, 승려들은 이를 사용하여 백성들의 소화 불량, 외상 지혈 및 소독 등에 사용하였는데 그 효과는 매우 현저하였고, 점차 확산되기 을 치료했습니다. 그 효과는 놀랍고 점차 확산되기 시작하였다. 지금에 이르기까지, 운남의 일부 사찰, 저장성의 일부 산간 지역에는 여전히 식염을 대나무 튜브에 넣고 스토브에 태워 먹는 사람들이 있다. 《본초강목》에도 식염을 도자기 그릇에 넣고 볶은 후 약으로 사용하는 기록이 있다. 민간 응용 역사 및 현대 과학 연구 결과에 따르면, 죽염은 일정한 항염, 항 알레르기, 항암, 항균, 비만 예방, 치아 보호, 항 위궤양, 간 보호, 노화 방지, 고혈압 예방, 혈액 산성화 방제, 당뇨병 개선, 관절염 치료, 면역력 강화 등 효능을 갖는다.
기존의 죽염 생산은 천일염을 원료로 사용하고, 신선한 남죽(즉 모죽) 튜브에 채우고 황토로 밀봉하며, 소나무를 연료로 사용하고 흙 가마에서 반복적으로 베이킹하여 만들어지는 것인데, 충진, 베이킹 횟수의 다소에 따라 품질과 등급을 나눈다. 90 % 구운 죽염은 즉 "충진-베이킹-냉각-분쇄-재충진"의 9번 순환을 반복하는데, 목적은 염이 신선한 대나무 튜브에 있는 유익한 성분을 더 많이 흡수하도록 하는 것이다. 마지막 베이킹 시, 소나무에 송지를 첨가하여, 베이킹 온도가 1300 ℃에 도달하도록 하고, 냉각한 후 청자색 염을 얻으며, 보라색 죽염이라고 지칭한다. 하나의 생산 주기는 약 1개월이 필요하다.
중국의 유명한 죽염 제조업체(저장 린안 싼허위안(三和園)는 기존의 베이킹 과정을 다음과 같이 설명한다. 즉, 100 ~ 300 ℃의 온도에서 수분을 제거하고, 300 ~ 800 ℃의 온도일 때 원염과 대나무 튜브 중 유기질을 소진될 때까지 연소시키며; 800 ~ 1200 ℃의 온도일 때 원염 중 일부 중금속 원소를 염화물 형태로 증류하고, 동시에 대나무 튜브와 황색 토양 중 미량 원소와 염화나트륨을 결합시키며; 1300 ℃ 이상의 고온에서 용융 상태의 식염을 추출하여 급속 냉각시키면 1개의 결정 격자가 변형되는데, 즉 죽염을 얻을 수 있다.
NaCl의 용해점은 801 ℃이고, 식염의 용융이 완료되는 온도는 적어도 약 900 ℃에 도달하여야 한다. 현재 시중에서 진정한 의미를 가진 인위적 식물염은 죽염만이 존재하고 있는데, 이는 대나무 튜브가 염을 담을 수 있는 용기로서 고온에서도 베이킹할 수 있으며, 대나무 튜브가 탄화되는 동시에 포함된 유익한 성분도 염에 용융되기 때문이다. 그러나 이러한 방식으로 흡수될 수 있는 대나무의 유효 성분은 매우 제한되며, 반복 순환이 필요한 바, 예를 들어 90 % 구운 죽염(보라색 죽염)은 9번 순환해야 한다. 동시에, 기존의 소나무를 연료로 하는 용광로는 일반적으로 약 800 ℃의 온도에 도달할 수 있으므로, 염이 최종적으로 용융되도록 하기 위해, 9번 째 베이킹 시 소나무 가지에 송지를 첨가하는 방법을 사용하여 1300 ℃ 이상이라고 주장하는 온도에 도달할 수 있도록 용광로 온도를 높인다(실제 측정 데이터 지원이 부족하며, 실질적으로 도달할 수 있는 온도는 약 900 ℃임).
기존의 죽염 생산의 주요 병목은, 첫째, 생산 주기가 길고, 노동 강도가 높으며, 생산 효율이 낮고; 둘째, 기계화 정도가 낮고, 생산 능력이 매우 제한되며, 생산 비용이 높으며; 셋째, 표준화 및 청결화 생산을 달성하기 어려우므로, 이로 인한 최대 문제는 대규모 산업화 생산을 달성하기 어렵다는 것이다. 지금에 이르기까지, 죽염은 항상 틈새 상품으로 더 많은 소비자에게 혜택을 줄 수 없다.
본 발명은 기능성 식물염 및 이의 제조 방법과 용도를 개시하며, 식품, 조미품, 일상용 화학품 및 약품 등 분야에 관한 것으로, 목적은 천연적이고 안전적이며 영양가를 가지고 다중 생물학 건강 관리 효능을 갖는 식물염을 제공하는 것이다. 이의 핵심은 중간 주파수 제련 기술 또는 저항 가열 기술을 사용하여, 상이한 종류, 상이한 공급원의 식물 추출물을 식용염과 일정한 질량 비율(0 ~ 40 %)에 따라 균일하게 혼합한 후 중간 주파수 용해로 또는 저항로에 넣고, 상압에서 800 ~ 1400 ℃의 온도로 가열하여 제련시키며, 냉각한 후 결정화함으로써 상이한 색상, 상이한 물리화학적 성질, 상이한 결정 격자 구조, 상이한 풍미 및 상이한 용도를 갖는 식물염 계열을 얻는 것이다. 이의 현저한 특징은, 염용액이 약 산성에서 강 알칼리성으로 변하고, 색상이 흰색에서 회색, 옅은 회색, 연분홍색, 자홍색 및 밝은 파란색 등 상이한 색상으로 변하여, 맑고 투명하며 깨끗한 외관을 나타내고, 또한 연한 유황 냄새가 나며; 염의 단위 격자 크기가 원염에 비해 더 작고, 원소가 더 풍부하게 조성되는데 여기서 칼륨 함량은 약 100배 증가하고 칼슘은 약 7배 증가하며 다른 유익한 원소도 현저하게 증가하는 것이다. 기능성 식물염의 건강 효능은 미백, 간 보호, 건위, 해독, 항염, 항 알레르기, 구강 세정, 고혈압 예방, 편두통 치료, 장암 억제를 포함하지만 이에 한정되지 않고, 식품, 음료, 조미품, 건강 관리 식품, 약품, 일상용 화학품, 개인 케어 용품 등에 광범위하게 적용될 수 있으며, 전망이 매우 광범위하다. 염화나트륨 결정 격자의 용해점이 801 ℃이므로, 식염이 완전히 제련되어야 하는 온도는 적어도 약 900 ℃이어야 하는데, 기존의 용광로는 일반적으로 상기 온도 요구를 충족시킬 수 없다. 중간 주파수 제련 및 저항 가열은 전기에너지를 열에너지로 효과적으로 전환할 수 있는 2가지 기술로, 900 ~ 1700 ℃ 사이의 제련 온도에 빠르게 도달할 수 있어, 생산 효율이 높고, 기계화, 자동화, 규모화, 표준화 및 청결화 생산을 구현할 수 있다. 동시에, 식물 추출물의 종류, 첨가 비율, 제련 온도, 보온 시간, 및 온도 상승 및 하강 속도를 제어하여 상이한 색상, 안정된 성능, 우수한 품질, 표준화 가능한 품질을 갖는 기능성 식물염 계열을 얻을 수 있다.
본 발명은 중간 주파수 제련 기술 또는 저항 가열 기술을 창의적으로 적용하며, 식염과 상이한 식물 추출물을 혼합한 후, 800 ~ 1400 ℃의 고온 하에서 제련하여, 상이한 색상, 상이한 결정 격자 구조, 상이한 물리화학적 지표, 상이한 풍미, 상이한 용도를 갖는 기능성 식물염 계열을 형성한다.
중간 주파수 제련은 흔히 사용되는 금속 정련 수단으로, 50 Hz의 전원 주파수 교류 전류를 중간 주파수(300 ~ 1000 Hz)로 전환하고, 3상 전원 주파수 교류 전류를 직류 전류로 정류한 다음, 직류 전류를 조정 가능한 중간 주파수 전류로 변환하여, 커패시턴스와 감응 코일을 통해 흐르는 중간 주파수 교류 전류를 공급하고, 감응 코일에서 고밀도의 자력선을 생성하며, 자기 전도 용기(예를 들어, 흑연 실리콘 카바이드 도가니)를 통해 빠르게 고온이 생성되어 재료(즉 염과 추출물의 혼합물)를 가열하여 이가 제련되도록 한다. 중간 주파수 제련 기술은 짧은 시간 내에 필요한 제련 온도에 도달하여, 생산 효율을 크게 향상시킬 수 있다.
저항 가열 기술은 저항체를 통해 전기에너지를 열에너지로 전환하여, 재료를 빠르게 가열하는 것이다. 중국의 현재 상용 저항로는 주로 몰리브덴 로드, 실리콘 로드 또는 탄소 로드를 가열 요소로 사용하며, 최고 용광로 온도는 1700 ℃에 도달할 수 있다. 저항 가열 기술은 가열 시간, 온도, 온도 가열 속도 등을 제어하여 공법 파라미터를 정밀하게 제어하고 제품을 표준화할 수 있다.
식물성 화학 물질(즉 식물 2차 대사산물)로도 지칭되는 식물 추출물은 다양한 기술 수단을 사용하여 다양한 과일, 채소, 화훼, 중초약, 약용 및 식용 식물, 신규 리소스 식품으로부터 추출하고 분리 및 정제하여 얻은 상이한 정밀도 제제 및 특징적인 단량체 화합물을 의미하는 바, 예를 들어, 매화, 대나무, 국화, 소나무, 연꽃, 차, 석류, 해당, 식용균, 조류 등으로부터 공급된 추출물이다.
조류 추출물의 원료는 해조류(예를 들어, 다시마, 미역, 양서채 등)일 수 있고, 남조류, 녹조류, 클로렐라와 같은 담수 또는 바다 담수 양식 조류일 수도 있으며; 식용균 추출물은 표고버섯, 버섯, 팽이버섯, 망태버섯, 양송이, 목이버섯, 흰목이버섯, 노루궁뎅이버섯, 영지, 송로, 그물버섯 및 이의 가공 잔여물(예를 들어, 표고버섯 자루)의 추출물을 포함하고; 미생물로부터의 추출물은 맥주 효모, 제빵 효모와 같은 다양한 효모의 추출물(효모 추출물이라고도 지칭됨)을 포함한다.
본 발명의 주요 기술 특징은, 중간 주파수 제련 기술 또는 저항 가열 기술을 사용하여, 상이한 공급원의 식물 추출물과 식염을 0 ~ 40 %의 비율로 혼합한 후(추출물 분말은 식염 입자의 표면에 균일하게 흡착됨), 상압에서 800 ~ 1400 ℃의 온도로 가열하여 함께 제련한 다음, 냉각 후 재결정하여 상이한 색상, 상이한 결정 격자 구조, 상이한 물리화학적 지표, 상이한 풍미 및 상이한 용도를 갖는 기능성 식물염 계열을 얻는 것이다. 식물 추출물의 공급원 및 이의 유효 성분, 첨가 비율, 제련 파라미터 등이 상이함에 따라 얻은 신규 식물염 계열은 미백, 간 보호, 건위, 해독, 항염, 항 알레르기, 구강 세정, 고혈압 예방, 편두통 치료, 장암 억제 등 다중 기능을 가지며, 식품, 음료, 조미품, 건강 관리 식품, 약품, 일상용 화학품, 개인 케어 용품 등 분야에 광범위하게 적용될 수 있다.
본 발명의 대체적인 공법 과정 및 공법 파라미터는 하기와 같다.
0 ~ 40 %의 질량비(바람직하게는 5 ~ 25 %)에 따라, 식물 추출물 분말과 식염을 균일하게 혼합한다.
이상 혼합 재료를 자기 전도 도가니에 넣어 중간 주파수 용해로에 넣고, 온도를 가열하기 시작하며, 온도 상승 속도는 1 ~ 200 ℃/min이거나; 이상 혼합 재료를 커런덤 도가니에 넣어 저항로에 넣고, 온도를 가열하기 시작하며, 온도 상승 속도는 1 ~ 20 ℃/min이다.
상압에서 800 ~ 1400 ℃ 사이의 특정 온도로 가열하고 0 ~ 6 시간 동안 보온시킨다.
재료를 꺼내어, 자연적으로 또는 제어적으로 냉각시킨다.
냉각 결정 후, 분쇄, 체질하여 제품을 얻는다.
가열 온도는 수요에 따라 800 ~ 1400 ℃ 사이의 하나 또는 다수의 구간 내로 설정할 수 있다.
이상 혼합-용융-재결정-냉각-분쇄의 과정은 1회 또는 여러회 수행할 수 있다.
(1) 본 발명에 관련된 원료 식염(원염이라고도 지칭됨)은, 해염, 호염, 정염, 광염일 수 있고, 바람직하게는 조제된 해염(즉 천일염)이다.
(2) 본 발명에서 제공된 기능성 식물염은, 식물 추출물의 공급원, 첨가 비율, 제련 온도 등 파라미터가 상이함에 따라, 구체적으로 다음과 같은 건강 효과를 나타낼 수 있다. 비 대나무류의 기능성 식물염(예를 들어, 송염, 매화염)의 건강 효능은 미백, 간 보호, 고혈압 예방을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 이의 적용 분야는 식품, 음료, 조미품, 건강 관리 식품, 약품, 일상용 화학품 및 개인 케어 용품 등이다.
(3) 이밖에, 본 발명의 중간 주파수 제련 기술 및 저항 가열 기술은 또한 식염 가공에 직접 사용할 수 있으며, 즉 제조 과정에서 임의의 식물 추출물 또는 다른 외래물질을 첨가하지 않고, 원염을 식용 안전성이 보다 높고 외관이 맑고 투명하며 깨끗한 구운 소금으로 전환한다.
본 발명의 돌출적인 장점은, 중간 주파수 제련 기술 또는 저항 가열 기술을 사용하여, 원염을 임의의 공급원, 임의의 비율의 식물 추출물(분말)과 혼합하여, 정확하게 설정된 온도 구간 내에서 융합한 후 재결정할 수 있으며, 1회 또는 여러회의 베이킹을 통해 특수 생물학 효능을 갖는 염 제품을 얻고, 기계화, 자동화, 표준화, 청결화의 대규모 산업화 생산을 구현할 수 있는 것이다. 본 발명은 송염 및 매화염을 대표로 하는 비 대나무 계열의 식물 기능성 염을 만들었는데, 이는 식염 산업(특히 중간 및 고급 염 제품 시장)에 대한 혁신이며, 인류 전체의 건강 사업에 대해 매우 중요한 의미를 갖는다.
상기 기술적 문제를 해결하기 위해, 본 발명은 기능성 식물염의 제조 방법은,
하나 또는 다수의 식물 추출물 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염과 균일하게 혼합하고, 800 ~ 1400 ℃의 고온 하에서 1회 또는 여러회에 걸쳐 베이킹하여, 기능성 식물염을 얻는 단계를 포함한다.
본 발명의 기능성 식물염의 제조 방법의 개선으로서,
상기 식물 추출물 분말이 한 종류일 경우,
한 종류의 식물 추출물 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염과 균일하게 혼합하고, 800 ~ 1400 ℃의 고온 하에서 1회 베이킹하여 기능성 식물염을 얻는다.
본 발명의 기능성 식물염의 제조 방법의 추가 개선으로서,
상기 식물 추출물 분말이 다양(적어도 2가지)할 경우,
다양한 식물 추출물 분말을 균일하게 혼합한 후, 혼합 분말을 얻고;
얻은 혼합 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염과 균일하게 혼합하고, 800 ~ 1400 ℃의 고온 하에서 1회 베이킹하여 기능성 식물염을 얻는다.
본 발명의 기능성 식물염의 제조 방법의 추가 개선으로서,
상기 식물 추출물 분말이 다양(적어도 2가지)할 경우,
단계 S1에서, 한 종류의 식물 추출물 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염과 균일하게 혼합하고, 800 ~ 1400 ℃의 고온에서 베이킹하면서 일정한 시간 보온시킨다.
단계 S2에서, 단계 S1에서의 800 ~ 1400 ℃의 온도에서 일정한 시간 보온하여 얻은 물질을 꺼내고, 분쇄한 후 그중에 다시 다른 한 종류의 식물 추출물 분말을 넣고, 모든 식물 추출물 분말의 베이킹이 완료될 때까지 단계 S1과 단계 S2를 반복하여(주의: 이때 원래 온도 또는 더 높은 온도에서 계속하여 베이킹함), 기능성 식물염을 얻는다.
상기 기술적 문제를 해결하기 위해, 본 발명은 상기 제조 방법으로 제조된 기능성 식물염을 더 제공한다.
상기 기술적 문제를 해결하기 위해, 본 발명은,
약물 보조제, 건강 식품/음료, 기능성 식품/음료, 식탁용 조미소금, 요리용 소금, 특수 용도 화장품 또는 개인 케어 용품에 사용되는 기능성 식물염의 용도를 더 제공한다.
본 발명에 따른 기능성 식물염의 특징은, 중간 주파수 제련 기술 또는 저항 가열(옴 가열이라고도 지칭됨) 기술을 사용하여, 상이한 공급원의 대나무 추출물과 식염을 일정한 비율로 균일하게 혼합한 후, 상압에서 800 ~ 1400 ℃ 사이에서 제련하고, 냉각 후 재결정하는 것이며, 얻은 신규 죽염은 식품, 음료, 조미품, 건강 관리 식품, 약품, 일상용 화학품, 개인 케어 용품 등에 광범위하게 적용될 수 있다. 본 발명에서 최초로 만든 송염 및 매화염을 대표로 하는 비 대나무 식물 기능성 염은 죽염과 동일한 생물학적 효과를 갖는 외에, 고혈압 예방, 미백, 간 보호 등 다양한 효과를 더 갖는다.
대나무 추출물의 종류, 공급원 및 이의 유효 성분, 첨가 비율, 베이킹 공법 파라미터 등이 상이함에 따라, 상이한 색상, 상이한 결정 격자 구조, 상이한 물리화학적 지표, 상이한 풍미 및 상이한 용도의 신규 죽염을 얻고, 그 제품의 돌출적인 특징과 공통성은, 염용액이 약 산성에서 강 알칼리성으로 변하고, 색상이 흰색에서 회색, 옅은 회색, 연분홍색, 자홍색 및 밝은 파란색 등 상이한 색상으로 변하여, 맑고 투명하며 깨끗한 외관을 나타내고, 또한 연한 유황 냄새가 나며; 염의 단위 격자 크기가 원염에 비해 더 작고, 원소가 더 풍부하게 조성되는데 여기서 칼륨 함량은 약 100배 증가하고 칼슘은 약 7배 증가하며 다른 유익한 원소도 현저하게 증가하는 것이다.
상기 중간 주파수 제련 기술은, 50 Hz의 전원 주파수 교류 전류를 중간 주파수(300 ~ 1000 Hz)로 전환하고, 3상 전원 주파수 교류 전류를 직류 전류로 정류한 다음, 직류 전류를 조정 가능한 중간 주파수 전류로 변환하여, 커패시턴스와 감응 코일을 통해 흐르는 중간 주파수 교류 전류를 공급하고, 감응 코일에서 고밀도의 자력선을 생성하며, 자기 전도 용기(예를 들어, 흑연 실리콘 카바이드 도가니)를 통해 빠르게 고온이 생성되어 재료(즉 염과 추출물의 혼합물)를 가열하여 이가 용융되도록 한다. 짧은 시간 내에 제련 온도에 빠르게 도달하여, 생산 효율을 크게 향상시킬 수 있다.
구체적인 공법 및 파라미터는 하기와 같다.
0 ~ 40 %의 질량비(바람직하게는 5 ~ 25 %)에 따라, 상이한 식물 추출물 분말과 식염을 균일하게 혼합한다.
이상 혼합 재료를 자기 전도 도가니에 넣어 중간 주파수 용해로에 넣고, 온도를 가열하기 시작하며, 온도 상승 속도는 20 ~ 100 ℃/min이다.
상압에서 800 ~ 1400 ℃ 사이의 특정 온도 구간에서 가열하고 0 ~ 6 시간 동안 보온시킨다.
용융된 재료를 꺼내어, 자연적으로 또는 제어적으로 냉각시킨다.
냉각 결정 후, 분쇄, 체질하여 제품을 얻는다.
제련 온도는 수요에 따라 800 ~ 1400 ℃ 사이의 하나 또는 다수의 구간 내로 설정할 수 있다.
이상 혼합-용융-냉각-재결정-분쇄의 과정은 1회 또는 여러회 수행할 수 있다.
저항 가열(옴 가열이라고도 지칭됨) 기술은, 전기에너지를 열에너지로 전환하여 재료를 빠르게 가열하는 것이다. 저항로 및 화염로에 비해, 열 효율이 높고, 온도 제어가 쉬우며, 직접 가열과 간접 가열 두 가지 방식으로 나뉜다. 현재 대부분 저항로는 간접 가열을 사용하고, 기기에는 전기 발열체로 불리는 전기-열 변환을 구현하는 저항 소자가 장착되어 있으며, 이를 통해 열에너지를 가공할 재료로 전달한다. 일반적인 전기 발열체는 실리콘 카바이드 로드 및 몰리브덴 디실리사이드 로드가 있으며, 여기서 실리콘 카바이드 로드의 온도는 1400 ℃에 도달할 수 있고, 실리콘 몰리브덴 로드는 1700 ℃에 도달할 수 있다.
구체적인 공법 및 파라미터는 하기와 같다.
0 ~ 40 %의 질량비(바람직하게는 5 ~ 25 %)에 따라, 상이한 식물 추출물 분말과 식염을 균일하게 혼합한다.
이상 혼합 재료를 커런덤 도가니에 넣어 저항로에 넣고, 온도를 가열하기 시작하며, 온도 상승 속도는 1 ~ 20 ℃/min이다.
상압에서 800 ~ 1400 ℃ 사이의 특정 온도로 가열하고 0 ~ 6 시간 동안 보온시킨다.
재료를 꺼내어, 자연적으로 또는 제어적으로 냉각시킨다.
냉각 결정 후, 분쇄, 체질하여 제품을 얻는다.
제련 온도는 수요에 따라 800 ~ 1400 ℃ 사이의 하나 또는 다수의 구간 내로 설정할 수 있다.
이상 혼합-용융-재결정-냉각-분쇄의 과정은 1회 또는 여러회 수행할 수 있다.
상기 식물 추출물은 식물성 화학 물질, 즉 식물의 2차 대사산물로도 지칭된다. 다양한 과일, 채소, 화훼, 중초약, 약용 및 식용 식물, 식물의 신규 리소스 식품으로부터 공급된 식물 추출물, 고정밀도 제제 및 단량체 화합물을 포함하는 바, 예를 들어, 대나무, 매화, 소나무, 차, 연꽃, 국화, 석류, 해당, 식용균, 조류 추출물 등이다. 동일한 식물의 공급원은 상이한 부위의 추출물일 수 있는 바, 예를 들어 대나무 추출물은 대나무잎 추출물(예를 들어, 대나무잎 플라본(flavone), 대나무잎 폴리페놀), 대나무 뿌리 추출물(예를 들어, 대나무 뿌리 트리테르펜(triterpene), 대나무 뿌리 다당), 대나무 장대 추출물, 죽순 추출물(예를 들어, 죽순 스테롤(sterol), 죽순 아미노산 펩티드)을 포함하고, 매화 추출물은 매실 추출물, 매화꽃 추출물, 매화잎 추출물, 매화가지 추출물, 매화뿌리 추출물, 매화 씨 추출물을 포함하며, 소나무 추출물은 솔잎 추출물, 소나무 껍질 추출물, 송화분 추출물을 포함한다.
식물 추출물 종류와 공급원이 상이함에 따라, 식물 기능성 염을 대나무와 비 대나무의 두 가지 큰 계열로 나눈다. 대나무 추출물 계열로 얻은 염은 대나무 기능성 염으로 분류되고, 대나무 이외의 공급원에서 얻은 염은 비 대나무 기능성 염으로 통칭하는 바, 조류, 버섯류(식용균) 및 미생물로부터 공급된 추출물(또는 추출물이라 지칭됨)로 제조된 기능성 염을 포함한다.
상기 식염 원료(즉 원염)은, 해염, 호염, 정염, 광염일 수 있고, 바람직하게는 조제된 해염(천일염으로 지칭되기도 함)일 수 있다.
상기 비 대나무 기능성 염의 건강 효능은 고혈압 예방, 미백, 간 보호를 포함하지만 이에 한정되지 않는다.
상기 기능성 식물염의 적용 분야는 식품, 음료, 조미품, 건강 관리 식품, 약품, 일상용 화학품 및 개인 케어 용품을 포함한다.
본 발명의 중간 주파수 제련 기술 또는 저항 가열 기술은 또한 식염(즉 식물 추출물 또는 임의의 다른 외래물질을 첨가하지 않음)을 직접 가공하여, 이를 식용 안전성이 더 높은 구운 소금으로 전환할 수 있다.
본 발명은 종래의 기술에 비해, 하기와 같은 기술 이점을 갖는다.
본 발명에 의해 제조된 기능성 식물염의 구체적인 생물학 기능은, 항균, 항염, 항 바이러스; 간 및 신장 보호, 신경 및 위 진정, 알코올 해독 및 배출, 지혈 및 치질 제거; 편두통 치료, 과민성 비염, 인간 잇몸 섬유아세포에 대한 항염 효과, 다이어트 기능, 구강 건강 보호, 결장암 억제, 항돌연변이 및 체외 항암 효과 증가, HepG2 인간 간암 세포의 항돌연변이 활성 및 체외 항암 효과, 신경세포 아폽토시스 예방 등을 포함한다. 이밖에, 인체 표피세포의 침투성을 향상시키는데 도움을 주며, 일상 화학품 중 피부 관리 인자가 더 좋은 효과를 일으키도록 도움을 준다.
본 발명에 의해 제조된 기능성 식물염의 구체적인 용도는, 약물 보조제; 건강 식품/음료; 기능성 식품/음료; 식탁용 조미소금,요리용 소금; 특수 용도 화장품, 개인 케어 용품(스킨 크림, 파운데이션, 비누, 마스크 팩, 치약, 구강 세정제, 샴푸, 목욕염 등)을 포함하고; 최종 제품의 형태는 분말, 캡슐, 정제, 과립제, 발포성 정제, 탕제, 유제, 스프레이 등일 수 있다.
아래 구체적인 실시예를 결부하여 본 발명을 더 설명한다. 이러한 실시예는 단지 본 발명을 설명하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 한정하려는 것이 아님을 이해해야 한다. 아래 실시예에서 구체적인 조건을 설명하지 않은 실험 방법은 일반적으로 일반 조건 또는 제조업체에서 권장하는 조건에 따른다. 달리 설명되지 않는 한, 백분율과 부수는 중량에 따라 계산된다.
달리 정의되지 않는 한, 본문에 사용된 모든 전문 용어 및 과학 용어는 본 기술분야의 기술자가 숙지한 의미와 동일하다. 이밖에, 기재된 내용과 유사하거나 동등한 임의의 방법 및 재료는 본 발명의 방법에 적용될 수 있다. 본문에 따른 비교적 바람직한 구현 방법과 재료는 단지 시범으로만 사용된다.
일반 원료 및 기기
대나무잎 플라본: 갈색 분말, 저장 성스(聖氏)바이오텍 유한회사(안지(安吉))에서 구입되고, 총 플라본 함량은 24.8 %임;
죽순 스테롤: 저장 대학교 바이오 시스템 공학 및 식품 과학원의 "천연 제품 및 인체 건강" 연구 센터에서 제공된 황색 분말로, 총 스테롤 함량은 25 %임;
대나무 뿌리 트리테르펜: 저장 대학교 바이오 시스템 공학 및 식품 과학원의 "천연 제품 및 인체 건강" 연구 센터에서 제공된 황녹색 분말로, 총 트리테르페노이드-사포닌 함량은 45 %임;
죽순 아미노산 펩티드: 저장 대학교 바이오 시스템 공학 및 식품 과학원의 "천연 제품 및 인체 건강" 연구 센터에서 제공된 회색 분말로, 총 아미노산 함량은 21 %임;
대나무 다당류: 후난 청부진룽(城步錦龍) 농업 및 임업 과학기술유한책임회사에서 제공된 회백색 분말로, 다당류 함량은 40 %이다.
솔잎 추출물: 갈색 분말, 산시 칭야(淸雅)바이오텍 유한회사에서 구입됨;
매화가지 추출물: 황색 분말, 항저우 유메이터(尤美特)바이오텍 유한회사에 의해 제공됨;
원염(천일염):산둥 웨이팡에서 공급되고, 실제 측정된 NaCl 함량은 93.36 %임;
중간 주파수 용해로: 가열 소자는 적동 감응 코일이고, 도가니는 자기 전도의 흑연 실리콘 카바이드 도가니임;
관형 저항로: 가열 소자는 실리콘 카바이드 로드이다.
실시예1, 기능성 식물염의 제조 방법은 하기와 같은 단계를 포함한다.
1. 식물 추출물 분말을 얻는 단계:
상기 식물 추출물은 다양한 과일, 채소, 식용 화훼, 중초약, 약용 및 식용 식물의 식물 추출물, 및 식물로부터 공급된 신규 리로스 식품 등을 포함하지만 이에 한정되지 않으며, 예를 들어, 대나무, 매화, 소나무, 차, 연꽃, 국화, 석류, 해당, 식용균, 조류 추출물이다.
동일한 식물 공급원은 상이한 부위의 추출물일 수 있는 바, 예를 들어 대나무 추출물은 대나무잎 추출물(예를 들어, 대나무잎 플라본(flavone), 대나무잎 폴리페놀), 대나무 뿌리 추출물, 대나무 장대 추출물, 죽순 추출물을 포함하고, 매화 추출물은 매화꽃 추출물, 매실 추출물, 매화잎 추출물, 매화가지 추출물, 매화뿌리 추출물을 포함하며, 소나무 추출물은 솔잎 추출물, 소나무 껍질 추출물, 송화분 추출물을 포함한다.
2. 단계 1 에서 얻은 식물 추출물 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염과 균일하게 혼합하여, 혼합물을 얻는 단계:
얻은 혼합물을 특수 용기 내에 넣고, 중간 주파수 용해로(또는 다른 기계화 오븐)에서, 일정한 온도 상승 속도로 800 ~ 1400 ℃의 온도로 가열하여, 기능성 식물염을 얻는다.
상기 미세 염의 공급원은 해염, 호염, 정염, 광염일 수 있고, 바람직하게는 조제된 해염일 수 있다.
상기 %는 질량비이다.
실시예2, 실시예1의 식물 추출물 분말을 적어도 2가지 식물 추출물 분말로 변경하고, 즉 적어도 2가지 식물 추출물 분말을 임의의 비율로 균일하게 혼합한 후, 혼합 분말을 얻으며; 혼합 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염(체질)과 균일하게 혼합하여 혼합물을 얻고; 나머지는 실시예1과 동일하다.
실시예3, 실시예1의 식물 추출물 분말을 적어도 2가지 식물 추출물 분말(그 중 하나는 대나무 추출물임)로 변경하는 구체적인 단계는 하기와 같다.
1. 하나의 식물 추출물 분말과 미세 염을 균일하게 혼합하여 혼합물을 얻는다.
2. 얻은 혼합물을 특수 용기 내에 넣고, 중간 주파수 용해로(또는 다른 기계화 오븐)에서, 일정한 온도 상승 속도로 800 ~ 1400 ℃의 온도로 가열하고, 일정한 시간 보온시켜 결과물을 얻는다.
3. 단계2의 800 ~ 1400 ℃의 온도에서 일정한 시간 보온한 결과물을 추출하고, 분쇄한 후 다시 이에 다른 하나의 식물 추출물 분말을 첨가하며, 식물 추출물 분말 베이킹이 완료될 때까지 단계1 내지 단계 3을 반복하여(주의: 이때 원래 온도 또는 더 높은 온도에서 계속하여 베이킹함), 기능성 식물염을 얻는다.
주의: 상기 사용된 식물 추출물 분말의 총 첨가량은 1 % ~ 40 %(질량비)이다.
종합해보면, 본 발명의 기능성 식물염은 식물 추출물을 첨가한 후 1회에 베이킹하여 완료할 수도 있고, 여러회에 걸쳐 첨가하고 단계를 나누어 베이킹을 완료할 수도 있다.
본 발명에서 제공된 기능성 식물염은, 고온 제련 과정에서, 상이한 식물 추출물 중 상이한 광물질 원소의 침투로 인해, 원소 조성 및 NaCl 결정 격자, 결정체 구성에 모두 현저한 변화가 발생하였다. 상이한 첨가 비율 및 베이킹 방식에 따라, 회색, 자색, 분홍색, 흰색, 파란색, 청녹색 등과 같은 상이한 색상이 나타나고; 5 % 염 수용액의 pH값은 원료 염의 6-7에서 8-12로 상승하였으며; NaCl 총량은 감소되고, 다른 원소(특히 다양한 미량 원소) 함량은 증가하였으며; 입맛은 단순한 짠맛으로부터 진하고 풍부한 짠맛 및 단맛으로 변하였고, 일반적으로 썩은 송화단 맛이 난다.
예를 들어, 소나무, 대나무, 매화 추출물을 첨가한 후 얻은 “송염”, “죽염” 및 “매화염”은 추출물의 공급원, 화학 조성 및 첨가량이 상이하고, 또한 베이킹 횟수 및 공법 파라미터가 상이함으로 인해, 얻은 식물염의 물리화학적 성질, 외관 색상, 풍미 및 입맛에 현저한 차이가 존재하며, 이에 따른 생물학적 효과도 상이하다.
기능성 식물염의 구체적인 생물학 기능은, 항균, 항염, 항 바이러스; 간 및 신장 보호, 신경 및 위 진정, 알코올 해독 및 배출, 지혈 및 치질 제거; 편두통 치료, 과민성 비염, 인간 잇몸 섬유아세포에 대한 항염 효과, 다이어트 기능, 구강 건강 보호, 결장암 억제, 항돌연변이 및 체외 항암 효과 증가, HepG2 인간 간암 세포의 항돌연변이 활성 및 체외 항암 효과, 신경세포 아폽토시스 예방 등을 포함한다. 이밖에, 인체 표피세포의 침투성을 향상시키는데 도움을 주며, 일상 화학품 중 피부 관리 인자가 더 좋은 효과를 일으키도록 도움을 준다.
기능성 식물염의 구체적인 용도는, 약물 보조제; 건강 식품/음료; 기능성 식품/음료; 식탁용 조미소금,요리용 소금; 특수 용도 화장품, 및 개인 케어 용품(스킨 크림, 파운데이션, 비누, 마스크 팩, 치약, 구강 세정제, 샴푸, 목욕염 등)으로서 사용되는 경우를 포함하고; 최종 제품의 형태는 분말, 캡슐, 정제, 과립제, 발포성 정제, 탕제, 유제, 스프레이 등일 수 있다.
종합해보면, 본 발명은 기능성 식물염의 제조 방법을 제공하며, 상이한 식물 추출물과 식염을 일정한 비율로 균일하게 혼합한 후, 800 ~ 1400 ℃의 고온에서 1회 또는 여러회에 걸쳐 베이킹하여, 상이한 색상, 상이한 공간 구조, 상이한 물리화학적 성질, 상이한 풍미 및 상이한 용도를 갖는 기능성 식물염을 형성한다. 본 발명에 의해 제조된 기능성 식물염은 건강 관리 효과를 가질 뿐만 아니라, 인체 표피세포의 침투성을 향상시키는데 도움을 주며, 일상 화학품 중 피부 관리 인자가 더 좋은 효과를 일으키도록 도움을 주고, 약물 보조제, 건강 식품/음료, 기능성 식품/음료, 식탁용 조미소금, 요리용 소금, 특수 용도 화장품 또는 케어 용품에 사용될 수 있다.
실시예4, 식물성 기능성 염-송염의 제조(중간 주파수 제련)
6.0 g의 솔잎 추출물과 24.0 g의 원염을 각각 칭량하여, 균일하게 혼합한 후 자기 전도 도가니에 넣어, 중간 주파수 용해로에 넣고, 상압에서 100 ℃/min의 온도 상승 속도로 1000 ℃의 온도까지 상승시키며, 1000 ℃의 온도에서 1시간 동안 보온한 후 꺼내어 자연적으로 냉각시켜, 분홍색을 띈 보라색의 송염(코드는 Plum Salt임)을 얻고, 이의 색상과 외관은 도 1에 도시된 바와 같다.
실시예5, 식물성 기능성 염-신규 보라색 죽염의 제조(중간 주파수 제련)
10 g의 대나무잎 추출물과 40 g의 원염을 각각 칭량하여, 균일하게 혼합한 후 자기 전도 도가니에 넣어, 중간 주파수 용해로에 넣고,상압에서 100 ℃/min의 온도 상승 속도로 900 ℃의 온도까지 상승시키며 1.5시간 동안 보온한 후 꺼내어 자연적으로 냉각시키고, 냉각 후 분쇄하여 신규 보라색 죽염을 얻으며, 이의 색상과 외관은 도 2에 도시된 바와 같다.
실시예6, 식물성 기능성 염-매화염의 제조(중간 주파수 제련)
5.0 g의 매화가지 추출물과 25.0 g의 원염을 각각 칭량하여, 균일하게 혼합한 후 자기 전도 도가니에 넣어, 중간 주파수 용해로에 넣고,상압에서 100 ℃/min의 온도 상승 속도로 1300 ℃의 온도까지 상승시키며, 1300 ℃의 온도에서 1시간 동안 보온한 후 꺼내어 자연적으로 냉각시켜, 파란색의 매화염(Plum Salt로 표기함)을 얻고, 이의 색상과 외관은 도 3에 도시된 바와 같다.
실시예7, 식물성 기능성 염-송염의 제조(저항 가열)
4.0 g의 솔잎 추출물과 26.0 g의 원염을 각각 칭량하여, 균일하게 혼합한 후 자기 전도 도가니에 넣어,관형 저항로에 넣고,상압에서 100 ℃/min의 온도 상승 속도로 1100 ℃의 온도까지 상승시키며, 1100 ℃의 온도에서 2시간 동안 보온한 후 꺼내어 자연적으로 냉각시켜, 분홍색을 띈 보락색의 송염을 얻고, 이의 색상과 외관은 도 4에 도시된 바와 같다.
실시예8, 식물성 기능성 염-신규 보라색 죽염의 제조(저항 가열)
15 g의 대나무잎 추출물과 35 g의 원염을 각각 칭량하여, 균일하게 혼합한 후 커런덤 도가니에 넣어,관형 로에 넣고,상압에서 10 ℃/min의 온도 상승 속도로 950 ℃의 온도까지 상승시키며, 2.5시간 동안 보온한 후 꺼내어 자연적으로 냉각시키고, 냉각 후 분쇄하여 보락색의 죽염을 얻으며, 이의 색상과 외관은 도 5에 도시된 바와 같다.
실시예9, 식물성 기능성 염-매화염의 제조(저항 가열)
8.0 g의 매화가지 추출물과 22.0 g의 원염을 각각 칭량하여, 균일하게 혼합한 후 커런덤 도가니에 넣어,관형 저항로에 넣고,상압에서 10 ℃/min의 온도 상승 속도로 1250 ℃의 온도까지 상승시키며, 1250 ℃의 온도에서 1.5시간 동안 보온한 후 꺼내어 자연적으로 냉각시켜, 파란색의 매화염을 얻고, 이의 색상과 외관은 도 6에 도시된 바와 같다.
성능 테스트(실험에서 소나무, 대나무, 매화염은 각각 실시예4, 5, 6에서 얻은 샘플임)
실험1, 식물 기능성 염 및 이의 대조품의 물리화학적 성질 분석
1.1 색차 분석
식물 추출물의 종류, 첨가 비율, 제련 온도, 보온 시간 및 온도 상승 속도는 모두 최종 제품의 색상 및 외관에 직접적인 영향을 미친다. 도 7에 도시된 5 ~ 35 %의 상이한 식물 추출물을 첨가한 원염에 대해, 상압에서 800 ~ 1400 ℃의 온도에서 1 ~ 2시간 동안 고온 제련한 후, 실시예4에서 얻은 송염, 실시예5에서 얻은 죽염 및 실시예6에서 얻은 매화염의 외관은 각각 회색, 옅은 회색, 연분홍색, 청자색 및 밝은 파란색 등 상이한 색상을 나타낼 수 있다. 동시에, 도 7에서 보다시피, 임의의 외래물질을 첨가하지 않은 원염에 대해 800 ~ 900 ℃의 온도에서 1 ~ 2시간 동안 고온 제련한 후 얻은 구운 소금의 투명도는 더 높고, 색상도 더 밝다.
비색계는 일반적인 광전 적분식 색채 측정기이며, 인간의 눈 감색 원리를 모방하여, 적색, 녹색, 청색의 3가지 색상을 인식할 수 있는 광수신기를 사용하고, 기기 내부의 표준 광원을 이용하여 테스트될 물체를 조사하며, 각각이 감지하는 광전류를 확대하여 처리하고, 전체 가시광 파장 범위 내에서 1회의 적분 측정을 수행하여, 투과 또는 반사된 물체 색상의 삼색 자극값 및 색도 좌표를 얻음으로써, 이 색상의 신호를 획득하고, 시스템을 통해 테스트될 샘플 사이의 색상 차이값을 제공한다.
비색계로 측정한 주요 지표는 L*, a*, b*를 포함한다. 여기서,
L*은 샘플의 밝기를 나타내며 수치가 클수록 더 밝다는 것을 의미한다.
a *는 적색-녹색 방향을 대표하며, “+”는 적색에 편향되고, “-”는 녹색에 편향되는 것을 나타낸다.
b *는 청색-황색 위상을 대표하며, “+”는 황색에 편향되고, “-”는 청색에 편향되는 것을 나타낸다.
ΔL값은 샘플값과 기준점의 차이값을 나타내고; Δa은 샘플의 a*값과 기준점의 차이값을 나타내며, 샘플의 적색-녹색 값을 더 잘 나타낼 수 있다.
본 발명에서, 기준점은 표준 샘플의 값을 의미하고, 본 발명은 표준 화이트 보드를 표준 샘플로 사용한다.
표 1은 상이한 식물 기능성 염의 색차 분석 데이터 요약이다. 보다시피, 원염 및 구운 소금의 ΔL값은 각각 84.18±0.25 및 82.83±3.47이고, 흰색에 근접하는 것을 나타내며; 다른 식물 기능성 염의 ΔL값은 25 ~ 50 사이에 있고, 가장 어두운 것은 인산 죽염이고 가장 밝은 것은 매화염이다.
Figure pct00001
1.2 pH의 변화
음식의 pH값은 인체 환경의 산-알칼리 균형 유지에 중요한 영향을 미치므로 산성 음식과 알칼리성 음식으로 나뉜다. 현대 사회에서 대중의 음식 구조는 보편적으로 산성에 가까우며, 시간이 지남에 따라 산성 체질로 형성되어, 면역력 저하와 아건강 상태를 초래한다. 0.2 ~ 5 % 농도(w/v)에서 상이한 염 샘플의 pH값을 측정하면, 표 2에 표시된 바와 같다.
1 % 및 이하 농도의 원염 용액은 약 산성(pH<7)을 나타내며, 베이킹 후 현저하게 상승하고; 모든 식물 기능성 염 용액은 0.2 % 농도에서도 강 알칼리성(pH>9)을 나타내며, 원염과 비교할 경우, 매우 현저한 차이를 나타낸다(p<0.001). 이는, 원염이 식물 추출물과 융합된 후 대량의 알칼리 금속 원소가 NaCl의 결정 격자 구조에 유입되거나 그 표면에 부착된다는 것을 의미한다.
Figure pct00002
1.3 전도율의 변화
0.2 ~ 5 % 농도(w/v)에서 상이한 샘플의 전도율 데이터를 측정하면, 표 3에 표시된 바와 같다. 보다시피, 인체가 견딜 수 있는 염 용액 농도(<1.0 %)에서, 본 발명의 식물 기능성 염과 원염의 전도율은 현저한 차이가 없다.
Figure pct00003
1.4 원자 에너지 스펙트럼 분석
원자 에너지 스펙트럼은 촬영된 재료의 표면 형태를 스캔할뿐만 아니라 재료 표면의 다양한 원소와 그 상대적 함량도 검출할 수 있다. 본 발명에 의해 제조된 식물 기능성 염과 이의 대조 샘플(입자)을 원자 에너지 분광계(일본 히타치(Hitachi)회사, SU-8010) 아래에 배치하여 샘플 표층의 미세 영역 포인트, 선, 면의 원소 정성, 반정량 및 정량적 분석(검출 한계는 0.5 %)을 수행하였으며, 결과는 표 4에 표시된 바와 같다.
Figure pct00004
1.5 원소 조성 분석
원소 검출은 시안 궈랜(國聯) 품질검출기술 주식유한회사에 의뢰하여 수행되었으며, 결과는 표 5를 참조한다.
염의 주요 성분은 염화나트륨이고, 이밖에 소량의 다른 광물질 원소를 더 함유한다. 정제 정도가 높은 염일수록, 염화나트륨 함량은 더 높고, 다른 영양 원소는 더 적어, 인체 건강에 불리하다.
칼륨 원소는 세포 내 삼투압과 체액 산-알칼리 균형을 조절할 수 있고, 세포 내 당과 단백질의 대사에 참여하여, 신경 건강 유지, 정상적인 심장 박동 유지, 뇌졸중 예방 및 정상적인 근육 수축에 도움이 된다. 높은 나트륨염을 섭취하여 고혈합으로 이어지는 경우, 칼륨염 또는 칼륨이 풍부한 음식은 혈압을 낮추는 효과를 갖는다.
마그네슘은 인체 세포 내의 주요 양이온으로, 칼륨 이온 및 칼슘 이온의 수송에 영향을 미치고 신호 전달을 조절하며 에너지 대사, 단백질 및 핵산 합성에 참여하고 또한 촉매 효소를 활성화하고 억제할 수 있다.
인은 유전 물질 핵산을 조성하는 기본 성분 중 하나이며, 동시에 인과 칼슘은 뼈와 치아에 중요한 구성 물질이다. 인은 체내 ATP 대사의 균형을 유지하고 체내 산-알칼리 균형을 조절하며 체내 에너지 대사에 참여할 수 있다.
망간은 SOD의 보효소로, 이의 결핍은 신경 무력증을 유발하고 지적 발달에 영향을 미칠 수 있으며, 동시에 인슐린 합성 및 분비를 감소시키고 당 대사에 영향을 미친다.
몰리브덴은 인체에 필수적인 미량 원소로, 동물 체내 간, 장에서 크산틴 산화효소(xanthine oxidase)와 알데히드류 산화효소의 기본 성분 중 하나이며, 헤파린 아황산염산화효소(Heparin sulfite oxidase)의 구성 성분이기도 하다. 연구 결과, 몰리브덴은 또한 상당한 충치 예방 효과가 있으며, 요로 결석 형성에 강력한 억제 효과가 있어, 인체에 몰리브덴이 결핍하면 신장 결석을 쉽게 초래한다.
바나듐은 인체에 필수적인 미량 원소로, 일반적으로 콜레스테롤 축적 방지, 혈당 저하, 혈압 저하, 충치 예방, 적혈구 생성에 도움을 주는 것으로 간주할 수 있다.
셀레늄은 인체에 필수적인 중요한 미량 원소로, 중국 영양학회는 셀레늄을 인체의 15가지 필수 영양소 중 하나로 선정하고 있으며, 일반적으로 셀레늄은 면역력, 노화, 생식 기능과 밀접한 관련이 있어, 셀레늄 결핍은 케샨병(Keshandisease)의 주요 원인으로 간주할 수 있다.
크롬은 또한 필수적인 미량 영양 원소로, 모든 인슐린 조절 활동에서 중요한 역할을 하며, 중요한 혈당 조절제이다. 동시에, 크롬의 결핍은 근시 형성과 일정한 관계가 있다.
실리콘은 주로 뼈, 폐, 림프절, 췌장, 부신, 손톱, 모발에 집중되어 있으며, 대동맥, 기관, 힘줄, 뼈 및 피부와 같은 결합 조직에서 가장 높은 함량을 가지고, 인간의 뼈 건강에 특수한 의미를 갖는다. 그러나 산업 발전과 생활 방식의 변화로 인해 실리콘은 현대인의 체내에 종종 부족하다.
상이한 염 샘플의 원소 검출 결과로부터 보다시피, 식물 기능성 염과 원염(및 그 구운 소금)은 매우 현저한 차이가 존재한다. 소나무, 대나무, 매화염의 칼륨 함량은 극히 현저하게 증가하는데, 특히 실시예2, 3에서 얻은 신규 죽염 중 칼륨 원소는 원염의 100배 이상에 달하며, 종래의 공법으로 생산된 인산 죽염에 비해 14.9 % 높았다. 죽염(신규 것과 오래된 것 2가 샘플을 포함함)의 마그네슘, 철, 니켈, 아연, 몰리브덴 및 바나듐의 함량은 원염과 다른 식물염에 비해 현저하게 높았으며, 신기술로 얻은 송염과 매화염에서 셀레늄이 더 검출되었다. 모든 샘플에서, 매화염은 다른 샘플에 비해 훨씬 높은 요오드(28 mg/kg), 붕소(26.6 mg/kg), 인(424 mg/kg), 크롬(4 mg/kg)을 가지며, 죽염 다음으로 높은 망간 함량(18 mg/kg)을 갖는다. 식물염의 실리콘 함량은 원염 및 구운 소금에 비해 현저하게 높으며, 신규 공법의 죽염은 기존에 생산된 인산 죽염에 비해 높다. 동시에, 송염과 매화염에서 셀레늄 원소가 더 검출되었다.
죽염에는 일정한 양의 황화물이 더 존재하며, 전형적인 썩은 송화단 냄새가 난다. 황화수소는 다양한 신경 보호 효과를 가지며, 중국 내외의 대량의 실험에 의해 확인되었고, 주로 항 신경 염증성 반응, 항산화 스트레스 손상 및 항 산소 결핍 허혈성 신경 손상을 포함하며, 신경세포의 가소성을 증가시킬 수 있어, 해마 뉴런의 아폽토시스를 감소시킨다.
또한, 특히 언급해야 할 것은, 800 ℃ 이상의 고온 제련 후, 염의 식용 안전성이 크게 향상되며, 구운 소금은 원염에 비해, 중금속(납, 비소, 수은)의 함량이 크게 감소된다, 동시에, 원염 중 다른 유해 성분(예를 들어, 유기 플라스틱 미립자 등)도 완전히 제거된다.
Figure pct00005
비고: 인 원소 검출 제한은 20 mg/kg이고; 몰리브덴, 안티몬, 셀레늄, 주석, 총 비소 원소 검출 제한은 0.01 mg/kg이며; 카드뮴, *게르마늄 원소 검출 제한은 0.001mg/kg이고; 탈륨 원소 검출 제한은 0.0001mg/kg이다.
실험2, 식물 기능성 염 및 이의 대조품의 미세 구조 및 결정 격자 구조 분석
2.1 샘플 외관의 현미경 사진
실체 현미경(장난파이(江南牌) SE220)으로 대안 렌즈 10배, 대물 렌즈 5배 조건에서 촬영하여 얻은 식물 기능성 염 입자의 샘플 외관은 도 8에 도시된 바와 같다.
도 8로부터 보다시피, 원염과 구운 소금은 기본적으로 흰색을 나타내며, 입자 표면은 비교적 매끄럽고, 외형은 정연하다. 송염, 죽염 및 매화염은 상이한 색상을 나타내고, 결정체 배열 차이가 비교적 크며, 더 광택감이 있다. 본 발명에서 제조된 신규 제품 죽염과 인산 죽염의 색상은 비교적 근접하지만, 죽염의 색상이 더 순수하여 더 투명하고 깨끗해보이며, 인산 죽염은 불순물이 비교적 많다.
2.2 주사전자 현미경의 관찰 결과
독일 Carl Zeiss Microscopy GmbH 회사에서 출시된 GeminiSEM 300 주사전자 현미경을 사용하여 실시예의 식물 기능성 염에 대해 형태학적 특성화를 수행한다. 각각 상이한 샘플 입자를 전자현미경으로 관찰하여 도 9를 얻는다. 원염과 구운 소금 표면은 매끄럽고, 부착물이 많지 않다. 본 발명에 의해 제조된 식물 기능성 염 표면은 고구마 형상을 나타내며, 또한 대량의 작은 입자물질이 입자 표면에 부착되어 있다.
2.3 투과 전자 현미경의 관찰 결과
상이한 염 샘플을 무수에탄올(5 %,w/v)에 현탁하고, 일본 JEOL 회사의 JEM-1230 투과 전자 현미경(Transmission Electron Microscope,TEM)으로 실시예에서 얻은 식물 기능성 염 입자에 대한 형태학적 특성화를 수행한다. 실시예4, 5, 6에서 제조된 송염, 대나무, 매화를 대표로 하는 식물 기능성 염의 투과 전자 현미경 사진은 도 10에 도시된 바와 같으며, 원염 형상은 비교저거 정연하고, 염화나트륨 입방체 규칙 구조를 나타내고, 식물 기능성 염은 구체적인 규칙이 없으며, 주변에 일부 미세입자가 부착되어 있다.
2.4 X선 회절 분석 결과
실시예4에서 얻은 송염, 실시예5에서 얻은 죽염, 실시예6에서 얻은 매화염 및 이의 대조 샘플을 분말(100메쉬체를 통과함)로 연마하고, 독일 Bruker 회사에서 생산한 X선 회절계(Bruker D8 Advance)로 분석하였다. 결정체는 원자의 규칙적인 배열에 의해 형성된 단위 격자로 조성되므로, 상이한 원자에 의해 산란된 이러한 X선 회절은 서로 간섭하여, 특정된 방향에서 강한 X선 회절을 생성하고, 공간 분포에서 회절선의 방위 및 강도는 결정체 구조와 밀접한 관계가 있으며, 각각의 결정체에 의해 생성된 회절 패턴은 모두 상기 결정체 내부의 원자 분배 규칙을 반영한다. 샘플에 대해 위상 분석, 단위 격자 파라미터 측정, 및 이의 회절선 강도 분석을 수행할 수 있다.
2.2.1결정체 구조 분석
위상 분석은 금속에서 가장 많이 사용되는 X선 회절 측면으로, 정성 분석과 정량 분석으로 나뉜다. 전자는 재료에 대해 측정한 격자 평면 간격과 회절 강도를 표준 위상의 회절 데이터와 비교하여, 재료에 존재하는 위상을 결정한다. 정확한 단위 격자 파라미터 데이터는 물질의 상이한 샘플 사이의 구조상에서의 미세한 차이, 또는 외부 물리적 및 화학적 요소의 작용하에 생성된 결정체의 구조의 미세한 변화를 반영할 수 있다. 실시예에서 얻은 식물 기능성 염의 여러 가지 위상의 단위 격자 파라미터는 하기와 같다.
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
2.2.2 X선 회절 그래프 및 시뮬레이션한 결정체 구조도
단위 격자 파라미터를 통해 상이한 염 샘플의 단위 격자 그래프를 시뮬레이션한다. 도 11로부터 보다시피, 원염은 비교적 정연하고 입방체를 나타내며, 송염의 양단은 비교적 뾰족하고, 죽염은 비교적 둥글며, 매화염은 8면체의 원뿔 모양을 나타내는데, 이는 원염과 상이한 식물 추출물이 고온 제련 후, 결정체 구조에 매우 큰 변화가 발생하였다는 것을 설명한다.
실험3, 식물 기능성 염 및 이의 대조품의 감각 기관 성능 테스트
전자혀는 사람의 혀를 시뮬레이션하여 테스트할 샘플에 대해 분석하고 식별 및 판단하여 얻은 데이터를 다변량 통계 방법으로 처리하여 샘플의 전체 품질 정보를 신속하게 반영하고 샘플의 식별 및 분류를 구현하는 것이다. 다중 센서 어레이를 기반으로, 샘플의 전체적인 특성 반응 신호를 감지하고 샘플에 대해 시뮬레이션 식별 및 정량적 정성 분석을 수행하는 검출 기술이다. 주로 미각 센서 어레이, 신호 수집 시스템 및 모드 식별 시스템 세 부분으로 구성된다.
냄새 스캐너로 지칭되는 전자코는 20세기 90년대에 개발된 식품의 신속한 검출을 위한 신규 기기이다. 특정 센서 및 모드 식별 시스템으로 테스트될 샘플의 전체 정보를 신속하게 제공하고, 샘플의 암시적 특징을 지시한다. 선택적 전기 화학적 센서 어레이와 적절한 식별 방법으로 구성된 기기로, 단순하고 복잡한 냄새를 식별할 수 있으며 인간의 감각 기관과 일치한 평가를 받는 결과를 얻을 수 있다.
변별도 지수(Discrimination index, DI)는 전자혀 및 전자코로 샘플의 전체적인 구별 효과를 판정하는 하나의 균형 지표이고, 그 값의 범위는 [-100, +100]이다. -100,0은 샘플의 미각과 후각을 구별할 수 없음을 의미하고; +100은 효과적으로 구별할 수 있음을 의미하며, 그 값이 100에 가까울수록 구별 효과가 더 좋다는 것을 의미한다.
3.1 전자혀로 얻은 미각 형질
실시예에서 얻은 식물 기능성 염을 10 % 용액으로 제조하고, 전자혀(Smartongue,Isensogroup 회사)로 그 미각 차이를 검출한다.
도 12로부터 보다시피, 전자혀의 DI값은 99.57에 도달하는데, 이는 식물 기능성 염이 미각 상에서 현저한 차이가 존재하는 것을 의미하므로 확실하게 구별할 수 있다. 주성분1(PC1)의 기어율은 78.26 %로, 주성분2(PC2)에 비해 훨씬 크다. 가로 좌표에서의 거리가 멀수록, 그 차이성이 더 크다는 것을 나타낸다. 실시예4에서 얻은 송염/실시예5에서 얻은 죽염 및 인산 죽염의 가로 좌표 거리는 비교적 가까운데, 이는 양자의 맛이 비교적 근접하고, 모두 원염 및 실시예6에서 얻은 매화염과 현저한 차이가 있다는 것을 나타낸다.
3.2 전자코로 얻은 후각 형질
전자코는 14개의 센서를 통해 상이한 샘플의 냄새 신호를 수집하고, 다시 소프트웨어 처리를 통해 데이터에 대한 주성분 분석을 수행하여, 실시예에서 얻은 식물 기능성 염을 10 % 용액으로 제조하고, 전자코(iNose, Isensogroup 회사)로 그 미각 차이를 검출하는데, 도 13에 도시된 바와 같다. 즉 샘플에서 가장 많은 정보를 차지하는 2가지 주성분을 각각 가로 좌표 PC1과 세로 좌표 PC2로 사용하면, 주성분1(PC1)의 기어율은99.80 %로 주성분2에 비해 훨씬 크므로, 가로 좌표에서 2가지 샘플 데이터의 거리가 멀수록 그 차이가 더 커지는 것을 의미하는데, 도면에서 식물 기능성 염 사이의 가로 좌표는 매우 가까운데 이는 본 발명에서 얻은 3가지 식물염이 후각 상에서 볼 때 비교적 근접하다는 것을 의미한다. 종래의 방법으로 제조된 죽염(인산 죽염)의 냄새는 원염과 비교적 근접하다. 이밖에, 표 4의 원자 에너지 스펙트럼 분석 결과에 따르면, 죽염 표면에 유황 원소가 있는 것이 발견되었으며, 따라서 이는 희미한 황화수소 냄새를 가지며, 다른 염의 유황 원소는 검출 한계에 도달한 것으로 해석할 수 있다.
실험4, 식물 기능성 염의 간 보호 효과에 관한 동물 시험
4.1동물 그룹화 및 실험 설계
4.1.1실험 동물 및 그룹화
5주령의 SPF급 C57BL/6 건강한 수컷 생쥐 45마리를 취하고, 적응되게 1주일 배양한 후 9개 그룹으로 임의로 나누며, 실험 설계 및 용량 구성은 표 9에 표시된 바와 같다. 정상적인 대조군(1#)이 일반 사료를 사용하는 외, 나머지 8개 그룹은 무염 기초 사료를 사용하였다. 투여 단계에서, 세계 보건기구(WHO)에서 권장하는 1인당 일일 식염 섭취량 5 g과 표준 동물의 등가 용량 환산법에 따라 생쥐의 경구 투여량을 얻고, 1# 그룹을 제외한 외, 각 위관 샘플에는 4 % NaCl이 포함되어 있으며, 하루에 한번씩 연속 21일 위관한다. 사육 환경 온도는 (22±2) ℃이고 상대 습도는 50 ~ 70 %이다.
Figure pct00009
*시험 데이터의 비교 가능성을 확보하기 위해, 정상 대조군2# 및 모델 그룹3#의 음식 중 염은 순수한 NaCl이다.
4.1.2 급성 간 손상 모델링
마지막 투여 1시간 후, 모델 대조군 및 시험 그룹(3# ~ 9#)의 생쥐에 0.1 %의 CCl4 올리브 오일 용액을 복강 내 주사하고, CCl4 용량은 10 mL/kg.BW이며, 정상 대조군(1# ~ 2#)에는 같은 부피의 올리브 오일을 공급하고 밤새 금식한다.
4.1.3 샘플 수집 및 생화학적 지표 측정
CCl4 올리브 오일 용액을 16시간 주입한 후, 척추 탈구로 생쥐를 죽이고, 즉시 안구를 뽑아 혈액을 채취함과 동시에 생쥐를 해부하여 간장을 취한다.
혈액 샘플을 3500 r/min으로 10분 동안 원심 분리한 후, 혈액 생화학 적 지표의 검출을 위해 상부 혈청을 추출한다. 완전한 간장을 꺼낸 후, 0.4 g의 간장 조직 1부를 잘라 PBS(pH=7.4)가 들어있는 냉동 보존 튜브에 균질화하고 나머지 간장 조직은 냉동 보존 튜브에 넣어 -80 ℃의 온도의 냉장고에 보관한다. 잘라낸 0.4 g의 간장을 균질화한 후 초저온 원심 분리기에 넣어 원심 분리(4000 r/min, 20 min)하고, 상청액을 취하여 말론디알데히드(MDA) 및 글루타티온(GSH)의 함량 및 총 슈퍼옥시드 디스무타아제(T-SOD), 글루타티온 퍼옥시다아제(GSH-Px)의 활성을 측정(쿠마시 브릴리언트 블루 방법(Coomassie brilliant blue method))한다.
4.1.4 간 조직의 병리학적 관찰
각 그룹의 실험쥐의 동일한 부위의 간 조직을 취하여, 차가운 생리식염수로 깨끗하게 세척한 후, 중성 포르말린으로 고정시키고, 4 μm 파라핀 절편을 만들고 HE로 염색하여, 현미경으로 그 형태학적 변화를 관찰한다.
4.1.5 실험 데이터 처리
실험 데이터는 모두 평균값±표준 오차(x±s)로 표시하고, 데이터는 등분산에 의해 검사되고; 그룹 간의 데이터는 단일 요소 분산 분석으로 비교한다. SPSS19.0 통계 소프트웨어의 단일 요소 분산 분석(ANOVA) 중 Duncan 검사에 의해 유의성을 분석하였으며, P<0.05는 차이가 현저하고, P<0.01은 차이가 극히 현저하다는 것을 의미한다.
4.2 결과 및 분석
4.2.1식물 기능성 염이 실험 생쥐 체중에 미치는 영향
21일 간의 시험 주기 내에서, 각 실험 그룹의 생쥐의 체질량은 사양 시간에 따라 연장되고, 체질량은 현저한 차이를 나타내지 않았으며(P>0.05), 각 그룹의 생쥐 털은 매끄럽고, 임상 활동이 정상이며, 건강 상태가 양호한 것을 관찰하였는데, 이는 상이한 식염 샘플의 섭취는 생쥐의 임상 표현에 영향을 미치지 않는다는 것을 설명한다. 시험 주기에서 각 그룹의 실험쥐의 체질량 경우는 표 10을 참조한다.
Figure pct00010
주의: 동일한 열의 둘둘 사이에 글자가 완전히 상이하면, 양자 사이에 현저한 차이가 존재한다(P<0.05).
4.2.2 식물 기능성 염이 화학적 간 손상 생쥐 혈청 중 트랜스아미나아제 활성에 미치는 영향
표 11로부터 보다시피, 모델 그룹(3#)의 생쥐 혈청 글루타메이트 트랜스아미나아제(ALT) 및 아스파르테이트 트랜스아미나아제(AST) 활성은 정상 대조군(2# 및 1#)(P<0.01)보다 극히 현저하게 높은데, 이는 모델링이 성공되었다는 것을 의미한다.
표 11로부터 보다시피, 3가지 식물 기능성 염은 모두 혈청 트랜스아미나아제의 활성을 감소시키는 정도가 상이한 반면 원염은 거의 효과가 없다. 모델 그룹에 비해, 3가지 식물 기능성 염은 ALT 활성 증가를 매우 현저하게 억제(P<0.01)하였으며; AST 활성 증가 억제에서 송염(P<0.01)은 다른 2가지 샘플(P<0.05)보다 더 현저하고; CCl4로 인해 급성 간 손상을 받은 생쥐 혈청 트랜스아미나아제의 급속한 증가에 대한 송염의 억제 효과는 죽염 및 매화염에 비해 우수하다. 이는 죽염, 송염 및 매화염이 일정한 간 보호 효능을 갖고 있음을 의미한다. 그러나, 양성 약물 대조군(비페닐디에스테르)은 비록 ALT 활성을 억제하는 가장 강력한 효능을 갖고 있지만, AST에 대해서는 효과가 없다. 시중 판매되는 인산 보라색 죽염도 원염과 마찬가지로, 급성 화학적 간 손상 생쥐 혈청 중 트랜스아미나아제 활성에 대해 억제 효과를 나타내지 않는다.
Figure pct00011
주의: 동일한 열의 둘둘 사이에 글자가 완전히 상이하면, 양자 사이에 현저한 차이가 존재한다(P<0.05).
모델 대조군(3#) 및 NaCl 대조군(2#)의 비교에서, #은 P<0.01을 의미하고;
각 시험 그룹(4# ~ 9#) 및 모델 대조군(3#)의 비교에서, *은 P<0.01을 의미한다.
4.2. 3식물 기능성 염이 화학적 간 손상 생쥐의 산화 스트레스 지표에 미치는 영향
실험 동물이 화학 독성물질의 공격을 받았을 때, 급성 간 손상의 중요한 특성화는 MDA 함량 증가, GSH 수준 감소, SOD 활성 감소 등이며, 간장 조직 막지질의 과산화와 함께 강력한 산화 스트레스 반응이 생성된다.
표 12의 데이터 결과, 마찬가지로 무염 사료를 섭취하고 동시에 4 % 순수 NaCl을 위관 투여한 2개의 그룹(2# 및 3#)이 CCl4로 모델링된 후, 각 산화 스트레스 지표는 모두 현저한 변화가 발생하였으며, 특히 GSH 및 MDA 수준은 극히 현저하게 변화되었는데(P<0.01), 이는 CCl4의 위관 투여 후 동물의 간장이 확실히 손상되었음을 의미한다.
표 12로부터 보다시피, 3가지 식물 기능성 염은 손상된 간장의 GSH 함량을 일정한 정도로 증가시킬 수 있으며, 여기서 매화염은 극히 현저한 증가 효과를 나타내고; 모두 손상된 간장의 MDA 함량을 감소시킬 수 있으며, 매화염(P<0.01)의 효과가 가장 강하고, 다음으로 인산 보라색 죽염 및 송염(P<0.01)이 강하며; 비페닐디에스테르 그룹도 GSH 증가와 MDA 함량 감소 효과를 나타내었으나, 그 효과는 매화염에 비해 좋지 않다. 손상된 간장 내인성 항산화 효소 활성을 증가시키는 분야에서, 3가지 식물 기능성 염은 모두 일정한 효과를 나타내며, 여기서 죽염은 동시에 T-SOD 활성에 현저한 영향을 미친다(P<0.05).
Figure pct00012
주의: 동일한 열의 둘둘 사이에 글자가 완전히 상이하면, 양자 사이에 현저한 차이가 존재한다(P<0.05).
모델 대조군(3#) 및 NaCl 대조군(2#)의 비교에서, #은 P<0.01을 의미하고;
각 시험 그룹(4# ~ 9#) 및 모델 대조군(3#)의 비교에서, *은 P<0.01을 의미한다.
4.2.4 실험 동물의 간장 손상 및 그 복원의 조직 병리학적 관찰
도 14는 식물 기능성 염이 실험 생쥐의 간장 조직 병리학에 미치는 영향을 도시한다(×400). 1#과 2#은 정상 생쥐의 간 조직으로, 간세포삭이 정연하게 배열되어 있고 세포 경계가 명확하며 세포 핵형은 정상적이고 뚜렷한 이상이 없는 것을 알 수 있다. 3# NaCl 모델 그룹의 간세포삭은 무질서하게 배열되어 있고 세포 핵형이 뚜렷하게 변화하며 중앙 정맥에 대량의 세포가 침윤되어 있다. 4#비페닐디에스테르 그룹의 간세포삭은 비교적 명확하게 배열되어 있고 세포 핵형은 정상이며 소량의 액포가 변성되었는데 이는 비페닐디에스테르 적환이 급성 간 손상에 치료 효과가 있음을 나타낸다. 5# 인산 보라색 죽염 그룹의 간세포삭은 비교적 명확하게 배열되어 있고 세포 핵형은 정상이며 소량의 액포 및 수분 샘플이 변성되었다. 6# 원염 대조군의 간세포삭은 무질서하게 배열되어 있고 세포 핵형은 현저하게 변화되었으며 중앙 정맥에 대량의 세포가 침윤되어 있다. 7# 죽염 시험 그룹의 간세포삭은 비교적 명확하게 배열되어 있고 세포 경계가 명확하며 세포 핵형은 정상이고 소량의 액포가 변성되었다. 8# 매화염 시험 그룹의 간세포삭은 명확하게 배열되어 있고 세포 핵형은 정상이며 소량의 액포가 변성되었다. 9# 송염 시험 그룹의 간세포삭은 비교적 명확하게 배열되어 있고 세포 핵형은 정상이며 소량의 액포가 변성되었고 중앙 정맥에 소량의 세포가 침윤되어 있다. 간장 조직의 병리학적 절편의 형태학 검사 결과, 죽염, 송염, 매화염은 모두 CCl4로 인한 생쥐의 급성 간 손상에 일정한 보호 효과를 갖는다는 것을 알 수 있다.
4.3 결론
중국은 세계에서 가장 큰 간 질환 국가로, 2020년까지 만성 간 환자가 4억 5천만 명에 이를 것으로 예상된다. 간 질환의 높은 발생률은 주로 음식 공급원, 식수, 식습관 및 요식업과 관련이 있다. 중국인의 식용염은 주로 해염에서 공급되며, 천일염(원염)은 해수의 농축액으로 해수의 모든 오염 물질이 남아있을 수 있어 식품 안전에 일정한 위험이 따른다. 본 연구 결과에 의하면, 원염을 섭취한 실험 쥐의 간장에서 GSH 수준은 동일한 용량의 순수 NaCl을 섭취한 그룹에 비해 현저히 낮았는데, 이는 원염 중에 실로 일부 간장에 해로운 위해 요소가 존재하여 간장의 산화 스트레스를 초래할 수 있음을 의미한다. 최종 결과에 의하면, 종래의 방법으로 베이킹한 죽염이 죽통에서 흡수한 유효 성분은 제한되며, 그 간 보호 효능은 본 발명에서 제공된 소나무, 대나무, 매화염보다 좋지 않다.
실험5, 식물 기능성 염의 미백 효능 연구
5.1 재료, 시약 및 기기
생쥐B16 흑색종 세포, 중국과학원 상하이 세포생물학 연구소; RPMI-1640 배양액, 미국 Gibco회사; 소 태아 혈청, 미국 ThermoFisher 회사; 트립신, 페니실린-스트렙토마이신 용액, 인산염 완충용액(PBS), AR, 항저우 커이(科易)바이오텍유한회사; 레보도파(levodopa, L-DOPA), 티로신, 티로시나아제(25 KU,≥500 u/mg), AR,베이징 쒀라이바오(索萊寶) 유한회사; 테트라메틸아졸릴블루(MTT, 염색 용액 질량분율은 5g/L임), 베이징 레이건(雷根)바이오텍유한회사; TritonX-100, -알부틴, 디메틸설폭사이드(DMSO),AR,상하이 아라딩(阿拉丁)시약 유한회사.
Eon 마이크로플레이트리더, 미국 BioTek 회사; LDZX-50KBS 수직 오토 클레이브, 상하이 선안(申安) 의료 기기 공장; CP-ST50A형 이산화탄소 배양상자, 창사 창진(長錦)과학기술유한회사; SW-CJ-F 울트라 클린 작업대, 상하이 보쉰(博迅) 실업유한회사; CKX41 도립 현미경, 일본 OLYMPUS 광학산업주식회사; BDFACSCaLIBUR 유세포 분석기, 미국 BD 회사.
5.2 실험 방법
5.2.1체외 티로시나아제 억제율 측정
티로신을 티로시나아제 모노페놀라아제 활성을 측정하기 위한 기질로, L-DOPA를 티로시나아제 디페놀라아제 활성을 측정하기 위한 기질로 하고, Huang 등의 방법을 참조하여 티로시나아제의 활성을 측정한다. 우선 원염, 구운 소금, 송염, 죽염, 매화염을 PBS 용액을 사용하여 0.2 %, 1 %, 5 %, 10 %의 질량분율의 염 용액으로 제조하고, 표에 따라 상이한 농도의 샘플 용액, 0.1 mol/L의 pH 6.8의 PBS 용액 및 1.0 mmol/L의 티로신 또는 L-DOPA를 정확하게 차례대로 흡수하고, 충분하게 혼합한 후 25 ℃의 수욕에서 10분 동안 부화한 다음, 상응한 870 u/mg 티로시나아제 용액을 넣어, 10분 후 475 nm 부분에서 각 반응 용액의 흡광값을 측정한다. 억제율은 하기 식에 따라 계산한다.
티로시나아제 모노페놀라아제/디페놀라아제 억제율/ %=[1-(A3-A4)/(A1-A2)]×100
Figure pct00013
5.2.2 B16 세포 증식률의 측정
MTT 법을 사용하여 B16 세포 증식률을 측정하며, 원염을 음성 대조로 하고, -알부틴 및 한국 죽염을 양성 대조로 한다. 대수 성장기의 B16 세포를 선택하여 96웰 플레이트에 연결하고 부착 후 원래 배지를 버리고 준비된 0.25 %, 0.50 %, 0.75 % 및 1 %의 질량분율의 원염, 송염, 죽염, 매화염, -알부틴 및 한국 죽염을 함유한 배지를 넣어 37 ℃,5 % CO2 조건에서 48시간 동안 배양한다. 측정 4시간 전에 꺼내어, 웰 당 20 μL MTT(5 mg/mL) 용액을 넣고, CO2 배양상자에 넣어 37 ℃,5 % CO2 환경에서 4시간 동안 부화한 다음, 배지와 MTT를 버리고, 각 웰에 150 μL DMSO를 넣어, 잔류의 MTT-메티오닌 결정을 용해시키고, 10분 동안 진탕하며, 샘플을 첨가하지 않고 배양한 세포를 대조로 하고, PBS를 공백으로 한다. 마이크로플레이트리더로 570 nm에서 각 웰의 흡광값을 측정한다. 세포 증식률은 하기 식에 따라 계산한다.
세포 증식률/ %=(OD570(실험)-OD570(공백))/(OD570(대조)-OD570(공백))×100
5.2.3 B16 세포 내 티로시나아제 활성의 측정
도파 산화법을 사용하여 B16 세포 내 티로시나아제 활성을 측정한다. B16 세포를 96웰 플레이트에 연결하고 부착 후 원래 배지를 버리고, 각 샘플이 함유된 배지를 넣어 48시간 동안 배양한다. 작용 시간에 도달한 각 그룹의 세포 배양액을 부어 PBS 완충 용액으로 2회 세척하고, 웰 당 1 & 질량분율의 Triton-X100 수용액 50 μL를 넣은 다음, 신속하게 -80 ℃의 냉장고에 넣어 30분 동안 냉동 보관하고, 꺼낸 후 37 ℃의 온도에서 융화시켜 세포가 완전히 파열되도록 하며, 웰 당 10 μL L-DOPA 용액(10 g/L)을 넣고, 샘플을 첨가하지 않고 배양한 세포를 대조로 하고, PBS를 공백으로 하며, 37 ℃의 온도에서 2시간 동안 반응시켜, 마이크로플레이트리더로 475 nm에서 각 웰의 OD값을 측정한다. 하기 식에 따라 세포 내 티로시나아제 활성을 계산한다.
세포 내 티로시나아제 활성/ %=(OD475(실험)-OD475(공백))/(OD475(대조)-OD475(공백))/세포 증식률×100
5.2.4 B16 세포 전이 측정
대수 성장기의 B16 세포를 선택하여, 세포 농도를 4×105 개/mL로 조정하고, 2 mL를 취하여 6웰 플레이트에 연결하며, 세포가 바닥부에서 약 60 %를 덮을 때, 원래 배지를 버리고, 10 μL를 취하여 피펫 건(Pipette gun) 헤드로 각 웰 바닥부에 직선을 그리고(한번 조작), PBS로 떨어진 세포를 가볍게 세척하며, 다시 0.5 % 질량분율의 원염, 송염, 죽염, 매화염, 알부틴으로 배합된 배지를 계속하여 48시간 동안 배양한 후, 현미경에서 세포의 성장 상태 및 전이 경우를 관찰하고, 샘플을 첨가하지 않고 배양한 세포를 대조로 한다.
5.2.5 B16 세포 주기의 측정
6웰 플레이트에서 B16 세포가 부착되도록 한 후, 0.5 %의 각 샘플이 함유된 배지를 넣어 배양하고, 각 그룹에 3개 병렬로 공백 대조군을 설정하여 각각 48시간 동안 배양한다. 배양이 종료된 후 세포를 수집하고, PBS로 세척한 후 상청액을 제거하며, 차가운 70 % 에탄올 용액 500 μL를 넣어 하룻밤 동안 고정한 다음, 원심분리하여 잔류의 에탄올을 흡수한다. 세포 침전에 RnaseA 용액 100 μL를 넣고, 세포를 재현탁하며, 37 ℃의 온도에서 30분 동안 수용한 후, 다시 400 μL PI 염색 용액을 넣어 균일하게 혼합한 다음, 4 ℃의 어두운 곳에서 30분 동안 부화하여, 유세포 튜브로 이동시켜 기계로 검출한다.
5.2.6 실험 데이터 처리
Origin9를 사용하여 실험 데이터를 처리하며, 계산 결과는 평균값±표준 편차(Mean±SD)로 나타나고, SPSS 21 단일 요소 분산 분석(ANOVA) 중 Duncan을 사용하여 유의성 검사를 수행한다.
5.3 결과 분석
5.3.1 체외 티로시나아제에 대한 식물염의 억제 활성
티로신을 기질로 사용하는 경우, 티로시나아제는 이를 도파로 촉매하여 멜라닌을 더 생성할 수 있으며, 상기 과정은 주로 티로시나아제의 모노페놀라아제 활성을 발휘한다. 티로시나아제 모노페놀라아제 활성에 대한 다양한 염 용액의 억제 효과는 도 15에 도시된 바와 같다. 도 15로부터 보다시피, 원염은 0.2 ~ 10.0 %의 농도 범위에서 티로시나아제에 대해 현저한 효과를 나타내지 않았다. 구운 소금은 5.0 % 농도에서 티로시나아제에 가장 큰 영향을 미치지만 억제율은 10 %보다 높지 않다. 송염과 죽염은 티로시나아제 활성에 현저한 영향을 미치며, 농도 효과 관계를 나타내고, 질량분율이 0.2 ~ 5.0 % 일 경우, 염 농도의 증가에 따라 티로시나아제에 대한 억제율이 점점 크며, 5.0 %일 때 억제율은 94 % 이상에 달하고, 10 %일 때 억제율은 기본적으로 변하지 않는다. 송염 및 죽염에 비해, 매화염은 저농도(0.2 %, 1 %)에서 티로시나아제에 대한 억제율이 비교적 낮고, 농도가 5.0 %보다 클 때 억제율은 신속하게 증가하며, 티로시나아제에 대한 10 %의 매화염 용액의 억제율은 73.2 %로, 동일한 농도의 송염, 죽염 용액에 비해 그 효과는 낙후하다.
도파를 기질로 사용하는 경우, 티로시나아제는 이를 도파퀴논(dopaquinone)으로 촉매하여 멜라닌을 더 생성할 수 있으며, 상기 과정은 주로 티로시나아제 디페놀라아제 활성을 발휘한다. 티로시나아제 디페놀라아제 활성에 대한 다양한 염 용액의 억제율은 도 16에 도시된 바와 같다. 도면으로부터 보다시피, 티로시나아제 모노페놀라아제에 대한 억제율과 비교해보면, 티로시나아제 디페놀라아제에 대한 원염 및 구운 소금의 억제율은 현저하게 증가하고, 일정한 농도 효과 관계를 가지지만, 최대 억제율은 30 %를 초과하지 않는다. 송염, 죽염의 티로시나아제 디페놀라아제 억제는 모노페놀라아제 억제 효과와 유사하고, 고농도(5.0 %, 10.0 %)의 매화염 용액의 디페놀라아제 억제율은 동일한 농도의 송염 및 죽염 용액과 차이가 크지 않으며, 5 %일 때 억제율은 92 %에 도달할 수 있다. 식물염은 원염에 비해, 그 칼륨, 철, 마그네슘, 칼슘 등 금속 원소 함량이 비교적 많아, 티로시나아제의 단백질 구조에 대해 일정한 영향을 미칠 수 있음으로써, 그 활성을 억제한다.
5.3.2 식물 기능성 염이 B16 세포 증식 효과에 미치는 영향
Figure pct00014
주의: 상이한 자모는 동일한 농도에서 현저한 차이를 나타낸다(p<0.05),n=6.
멜라닌은 멜라닌 세포에 의해 생성되며 일반적으로 멜라닌 세포의 증식을 억제하면 멜라닌 생성을 감소시킬 수 있다. 상이한 농도의 샘플에서 생쥐 B16 멜라닌 세포의 증식률은 표 14에 표시된 바와 같다. 표 14에서 보다시피, 0.25 % 농도 이상의 다양한 염 용액은 B16 세포의 성장을 억제하고, 염 농도가 증가함에 따라 세포 증식률이 감소되며, 0.75 %일 때 각 염 제품의 그룹별 세포 증식률은 차이가 크지 않고, 1 %의 염 용액은 세포 성장에 심각한 영향을 미치며 증식률은 10 %보다 낮다. 저농도(0.25 %, 0.5 %) 범위 내에서, 송염, 죽염, 매화염 및 한국 죽염의 B16 세포 증식률은 원염에 비해 낮지 않으므로, 원염과 비교할 때, 식물염은 B16 세포에 대해 별도의 현저한 세포 독성이 없고, 0.5 %의 송염, 죽염, 매화염 중 세포 증식률은 원염에 비해 훨씬 높은데, 이는 이 몇 가지 식물염이 NaCl 환경의 B16에 대해 일저한 보호 효과가 있다는 것을 설명한다. 양성 대조의 알부틴 그룹의 세포 증식률은 농도와 거의 관계가 없었으며 모두 약 70 %이다.
5.3.3 식물염이 B16세포 내 티로시나아제 활성에 미치는 영향
티로시나아제는 B16 세포에서 멜라닌 합성을 위한 주요 속도 제한 효소이며, 효소 활성은 멜라닌 생성에 영향을 미치는 중요한 요소이자 기능 인자의 미백 효능을 측정하는 중요한 지표이다. 표 15에서 보다시피, 각 샘플은 B16 세포의 티로시나아제 활성에 일정한 영향을 미치며, 그 세포 내 티로시나아제 활성은 현저하게 감소되고 일정한 농도 효과 관계나타낸다. 그 중 원염에 비해 송염, 죽염, 한국 죽염의 각 그룹의 세포 티로시나아제 활성은 비교적 높은데, 이는 B16 세포 티로시나아제에 대한 이러한 식물염의 억제 효과가 원염보다 좋지 않음을 설명하고, 각각의 농도에서 매화염의 세포 티로시나아제 활성은 원염에 비해 작은데, 이는 매화염이 B16 세포의 티로시나아제 활성을 현저하게 감소시킬 수 있고, 그 효과가 각 그룹의 시험 물질보다 우수하다는 것을 설명한다. 양성 대조의 알부틴 그룹의 세포 티로시나아제 활성은 동일한 농도의 염 샘플 그룹에 비해 높다.
Figure pct00015
주의: 상이한 자모는 동일한 농도에서 현저한 차이를 나타낸다(p<0.05),n=6.
5.3.4 B16 세포 전이에 대한 식물염의 효과
종양 세포의 중요한 특징은 증식 과정에서 확산 및 전이가 가능하며, 전이도를 통해 그 확산 기능을 판단할 수 있다는 것이다. 도 17에서 보다시피, 정상 그룹(a)의 B16 세포는 48시간 배양 후 선을 그은 영역은 기본적으로 치유되었는데, 이는 그 전이 기능이 매우 강하다는 것을 설명한다. 시험 물질의 질량분율이 0.5 %인 경우, 원염(b)의 영향을 받은 B16 세포는 선을 그은 영역에서 일부만 유입되었는데, 이는 원염이 세포 전이에 대해 일정한 억제 효과가 있음을 설명한다. 송염(d), 죽염(e), 매화염(f)의 영향을 받은 세포에서, 선을 그은 영역에 세포가 기본상 유입되지 않았는데 이는 이 3가지 식물염이 B16 세포의 전이를 현저하게 억제할 수 있고, 그 효과도 원염에 비해 강하다는 것을 설명한다. 알부틴(c)은 B16 세포의 전이율에 대해 일정한 억제 효과를 나타내지만, 그 효과는 식물염에 비해 좋지 않다.
5.3.5 식물염이 B16 세포 주기에 미치는 영향
세포 주기는 세포 분열이 종료되어서부터 다음 세포 분열이 종료될 때까지의 과정을 가리키며, G0/G1기(DNA 합성 이전기), S기(DNA 복제기), G2기(DNA 복제가 완료되어서부터 유사분열이 시작되기 이전까지), M기(세포 분열이 시작되어서부터 종료될 때까지)의 4개 단계로 나뉜다. 상이한 주기의 세포에서 DNA 함량은 상이하고, 형광 염료 PI를 사용하여 세포 DNA를 염색하고 유세포 분석기에서 형광 강도를 측정하여, 상이한 주기 단계에서 세포의 분포를 연구할 수 있어 세포의 증식 경우를 이해한다. 표 16에서 보다시피, 원염 및 알부틴 그룹 및 정상 그룹의 G0/G1기, S기에서 세포 분포는 현저한 차이를 나타내지 않았고, 송염, 죽염 및 매화염 그룹의 S기와 G2/M기에서 분포 비율은 현저하게 증가하였으며, G0/G1기에서 비교적 적게 분포되었다. S기와 G2/M기의 총 합은 DNA 복제와 유사 분열 과정에서 세포의 비율을 대표하며 세포의 증식 기능을 나타낼 수 있는데, 결과, 송염과 죽염 그룹의 세포 증식 기능이 비교적 양호하고, 매화염이 그 다음으로 양호하며, 나머지 각 그룹의 증식 기능은 현저한 변화를 나타내지 않았다. MTT 결과, 각 시험 물질은 B16 세포 그룹의 증식에 대해 일정한 억제 효과를 나타내며, 세포 주기 연구에 따르면, 생존된 세포의 증식 기능이 더 양호하였는데, 시험 물질 처리는 일부 세포의 사멸을 초래할 수 있고, 일부의 내성 세포에 대해서는 증식 촉진 효과를 갖는 것으로 추측된다.
Figure pct00016
주의: 상이한 자모는 동일한 세포 주기에서 현저한 차이를 나타낸다(p<0.05),n=3.
5.4결론
본 발명에서 제공된 송염, 죽염, 매화염은 3가지 대표적인 식물 기능성 염으로서, 체외 티로시나아제의 모노페놀라아제 활성 및 디페놀라아제 활성에 대해 농도 의존적 억제 효과를 나타내며, 샘플 농도가 10 %일 경우, 티로시나아제 모노페놀라아제의 억제율은 각각 97.8 %, 94.2 %, 73.3 %에 도달하고; 농도가 5 %일 경우, 디페놀라아제의 억제율은 각각 99.9 %, 93.0 %, 92.0 %에 도달한다. 식물 기능성 염은 B16 세포의 증식에 일정한 억제 효과가 있지만 원염에 비해 현저한 세포 독성이 없다. 매화염은 B16 세포 내 티로시나아제 활성을 현저하게 감소시킬 수 있고, 0.75 % 매화염 배지에서 B16 세포 티로시나아제 활성은 단지 6.07 %에 불과하다. 동시에 식물 기능성 염은 B16 세포의 횡방향 전이를 현저하게 억제할 수 있지만, 세포 주기에 영향을 미쳐 그 증식을 억제하지는 않는다. 식물 기능성 염은 체외 및 세포 내 티로시나아제 무기 억제제로서, 그 억제 효과는 양호하므로, 과일 야채의 신선 유지제 및 인체 미백 기능 성분으로서 고려할 수 있다.
실험6, 식물 기능성 염의 고혈압 예방의 동물 시험 연구
6.1실험 동물 공급원 및 그룹화 경우
실험 동물: 수컷 랫트 SD 쥐, 13 ~ 14주령, 무게 약 200 g. 적응되게 1주일 사육한 후, 정상 염 사료를 섭취한 대조군, 정상 염수 무염 사료를 위관 투여한 대조군, 고염 모델 그룹, 실험 그룹(소나무, 대나무, 매화 식물 기능성 염), 양성 대조군(펠로디핀(felodipine) 완충정제) 등 8개 그룹으로 임의로 나누며, 각 그룹에 4마리씩 있고, 실험 설계 및 용량 구성은 표 17에 표시된 바와 같다. 실험 기간 동안,단일 케이지에서 사육하고, 사육 온도는 25 ℃이며, 습도는 30 %이고, 매주 임상 증상을 관찰하였다. 투여 단계에서 랫트의 일일 고염분 섭취량은 4000 mg/kg(염분 함량 8 %의 식단에 해당됨)이고, 정수를 자유로 마시는 전제 하에서, 각 샘플과 대조 샘플을 상응한 농도의 용액으로 구성하여, 2 mL/100 g의 죽염수, 송염수 및 매화염수 등을 매일 랫트에게 경구 투여한다. 정상 대조군(1#)에 일반 사료를 사용한 외, 나머지 8개 그룹은 모두 무염 기초 사료를 사용하였다.
Figure pct00017
*시험 데이터의 비교 가능성을 확보하기 위해, 식염 함량 0.3 %의 일반 사료를 자유로 마신 그룹(그룹 1#)과, 동일한 질량의 원염 수용액을 경구 위관 투여하고, 동시에 무염 사료를 섭취한 대조군(그룹 2#)에 대해, 위관 투여 방식으로 섭취한 염과 사료를 섭취한 염이 랫트에 미치는 영향을 비교한다.
** 고염 사료 그룹의 첨가량은 문헌을 참조하고, 사료에 8 %의 염을 첨가하여 위관 농도로 환산한다.
6.2 시험 정황
4일에 1회씩 혈압과 체중을 측정하고, 27일간 지속한다. 마지막 한번의 위관 투여 후, 물로 금식하고, 대사 케이지에 24시간 넣어 요액을 수집한다. 종료 후 마취제를 복강 주사하여, 심장에서 채혈한 후 랫트를 죽인다.
6.3 시험 결과
6.3.1 실험 랫트의 체중 변화
실험 24일 내 각 그룹의 동물 체중에는 현저한 차이가 나타나지 않았으며, 위관 투여, 고염 섭취는 체중에 대해 현저한 영향을 미치지 않는다.
Figure pct00018
일반 사료(그룹 1)와 위관 투여한 일반 원염(그룹 2)을 비교하면, △는 p<0.05를 나타내고, △△는 p<0.01을 나타낸다.
고염 시험 그룹(그룹 3)과 원염 정상 그룹(그룹 2)을 비교하면, #는 p<0.05를 나타내고, ##는 p<0.01을 나타낸다.
각 고염 시험 그룹(그룹 4 ~ 8)과 고염 시험 그룹(그룹 3)을 비교하면, *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타낸다.
6.3.2 실험 랫트의 수축기 혈압의 변화
높은 용량의 염을 위관 투여한 20일째, 고염 실험 그룹3과 일반 원염 그룹2는 이미 현저한 차이를 나타냈는데, 이는 높은 용량의 염을 경구 투여하면 고혈압을 초래하여, 실험 모델링을 성공할 수 있다는 것을 설명한다. 실험 그룹에서 보다시피, 24일째, 실시예에서 얻은 소나무, 대나무, 매화 식물 기능성 염 그룹은 원염 그룹과 현저한 차이를 형성하는데, 이는 본 실시예에서 제조된 식물 기능성 염을 섭취하면 고혈압 예방 효과가 있다는 것을 설명한다. 유의해야 할 것은, 식물염 중 매화염의 혈압 저하 효과가 가장 현저하며, 저염 섭취와 현저한 차이를 나타내지 않았는데, 매화염의 특수한 물리화학적 구조 및 원소 함량과 관계가 있을 수 있다.
Figure pct00019
일반 사료(그룹 1)와 위관 투여한 일반 원염(그룹 2)을 비교하면, △는 p<0.05를 나타내고, △△는 p<0.01을 나타낸다.
고염 시험 그룹(그룹 3)과 원염 정상 그룹(그룹 2)을 비교하면, #는 p<0.05를 나타내고, ##는 p<0.01을 나타낸다.
각 고염 시험 그룹(그룹 4 ~ 8)과 고염 시험 그룹(그룹 3)을 비교하면, *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타낸다.
6.3.3 실험 랫트의 24시간 동안의 소변량 변화
일반 사료 및 일반 원염 그룹은 현저한 차이가 나타나지 않았는데, 이는 위관 투여가 소변량에 현저한 영향을 미치지 않는다는 것을 설명한다. 고농도의 염수 섭취로 인해 식수량이 증가하므로, 고염 그룹의 소변량은 정상 식염 그룹에 비해 현저하게 높다. 그러나 식물 기능성 염에서, 죽염의 소변량은 다른 그룹에 비해 현저하게 높고, 원염 그룹과 현저한 차이를 형성하는데, 이는 죽염이 현저한 이뇨 효과를 갖고 있음을 설명한다. 유의해야 할 것은, 죽염 그룹의 소변량은 양성 대조에 비해 높고, 펠로디핀은 선택적 칼슘 이온 길항제로서, 주로 세동맥 평활근 세포 외 칼슘의 유입을 억제하며, 나트륨 뇨 배설 촉진 작용과 이뇨 작용을 갖는다. 결과, 죽염의 이뇨 효과가 가장 현저하다.
Figure pct00020
일반 사료(그룹 1)와 위관 투여한 일반 원염(그룹 2)을 비교하면, △는 p<0.05를 나타내고, △△는 p<0.01을 나타낸다.
고염 시험 그룹(그룹 3)과 원염 정상 그룹(그룹 2)을 비교하면, #는 p<0.05를 나타내고, ##는 p<0.01을 나타낸다.
각 고염 시험 그룹(그룹 4 ~ 8)과 고염 시험 그룹(그룹 3)을 비교하면, *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타낸다.
6.3.4 실험 랫트 혈청 생화학적 지표의 분석 결과
(1) 간 기능
알라닌 아미노 전달효소(ALT)는 인체 단백질 신진대사에 참여하는 효소이며, 간장 병리적 변화 정도를 나타내는 중요한 지표이다. ALT는 체내에서 단백질 아미노산의 전환을 촉진할 수 있으며, 간장 세포에서 함량이 가장 많다. 조직 기관에 병리적 변화가 발생할 경우, 그 중의 ALT를 혈액으로 방출시켜 혈청 ALT 함량이 증가되도록 한다. 정상 랫트에 비해, 고염 그룹의 랫트 혈청 내 ALT가 현저하게 증가하는데 이는 간장이 어느 정도 손상되었음을 설명한다.
아스파르테이트 트랜스아미나아제(AST)는 심근, 간 및 신장 조직의 손상 정도를 이해하는데 도움이 된다. AST는 인체의 다양한 조직에 존재하며, 심근에서 함량이 가장 많고 그 다음으로 간장에서 함량이 많다. 심장과 간세포가 괴사되면, m-AST가 미토콘드리아에서 방출되어 혈청 내 AST를 증가시킨다. 고염 그룹의 랫트 혈청 내 AST는 현저하게 증가하는데, 이는 고농도의 염 섭취 후 간장이 어느 정도 손상되었음을 설명한다.
알칼리인산분해효소(ALP)는 인체의 간장, 뼈, 장, 신장 및 태반 등 조직에 널리 분포되며, 간장을 통해 담즙 외부로 배출되고, 주로 뼈, 간담도계 질환의 진단 및 감별 진단에 사용되며, ALP 병리적 증가는 뼈, 간담 질환과 밀접한 관계가 있다. 각 그룹의 ALP 함량에는 현저한 차이가 나타나지 않았는데, 이는 1개월 이내에 고염 음식 섭취는 ALP에 거의 영향을 미치지 않음을 설명한다.
Figure pct00021
일반 사료(그룹 1)와 위관 투여한 일반 원염(그룹 2)을 비교하면, △는 p<0.05를 나타내고, △△는 p<0.01을 나타낸다.
고염 시험 그룹(그룹 3)과 원염 정상 그룹(그룹 2)을 비교하면, #는 p<0.05를 나타내고, ##는 p<0.01을 나타낸다.
각 고염 시험 그룹(그룹 4 ~ 8)과 고염 시험 그룹(그룹 3)을 비교하면, *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타낸다.
(2) 신장 기능
요소 질소(BUN)는 혈장에 있는 단백질 이외의 질소 함유 화합물로서, 사구체에서 여과되어 체외로 배출된다. 신장 기능이 대상부전일 경우, BUN이 증가한다. 임상적으로, 사구체 여과 기능을 판단하는 지표로 사용된다. 크레아티닌(CRea)은 체내 근육 조직 대사의 산물로, 주로 사구체 여과에 의해 모두 체외로 배출되며, 신장 기능이 부전일 경우, 크레아티닌은 체내에 축적되어 인체에 유해한 독소로 되며; 혈액 속의 모든 요산이 사구체에서 여과될 때, 소변을 처리하는 신장의 비정상적인 기능이 혈액 요산(UA) 함량을 증가시킨다. 표에서 보다시피, 1개월 이내에 각 그룹의 지표는 현저한 차이를 나타내지 았았는데, 고염 식이 시간이 너무 짧았을 가능성이 있다.
Figure pct00022
일반 사료(그룹 1)와 위관 투여한 일반 원염(그룹 2)을 비교하면, △는 p<0.05를 나타내고, △△는 p<0.01을 나타낸다.
고염 시험 그룹(그룹 3)과 원염 정상 그룹(그룹 2)을 비교하면, #는 p<0.05를 나타내고, ##는 p<0.01을 나타낸다.
각 고염 시험 그룹(그룹 4 ~ 8)과 고염 시험 그룹(그룹 3)을 비교하면, *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타낸다.
(3) 심근 기능
골격근, 심근, 평활근에서 크레아틴키나아제(CK) 함량이 많고, 주로 세포질과 미토콘드리아에 존재하며, 세포 내 에너지 이동, 근육 수축, ATP 재생과 직접적으로 관련된 중요한 키나아제이다. 크레아틴키나아제 활성 측정은 골격근 질환 및 심근 질환 진단에 사용할 수 있다. 병리학적 증가는, 심근 경색, 바이러스성 심근염, 피부 근염, 근이영양증, 심낭염, 뇌 혈관의 우발적 파열 등에서 나타난다. 표에서 보다시피, 고농도 염의 섭취는 CK 함량에 현저한 영향을 미치며, 1개월 이상의 고염 식이는 심근 기능에 일정한 영향을 미칠 수 있다. 그러나 유의해야 할 것은, 송염 CK 함량의 유의성은 고염 그룹에 비해 낮았는데, 이는 송염이 심근 손상을 예방할 수 있는 잠재력을 갖고 있음을 설명한다.
젖산탈수소효소(LDH)는 거의 모든 조직에 존재하며, 심장, 골격근 및 신장에서 가장 풍부하고, 심근 질환 진단에 사용될 수 있다. 젖산탈수소효소 증가는, 주로 심근 경색, 간염, 악성 종양, 폐경색, 백혈병, 용혈성 빈혈, 신장 질환, 진행성 근육 위축 등에서 나타난다. 고염 식이의 CK 및 LDH 함량은 정상 염 식이 그룹에 비해 낮았는데, 고염 식이가 심근 기능을 손상시킨다는 것을 더 설명한다.
Figure pct00023
일반 사료(그룹 1)와 위관 투여한 일반 원염(그룹 2)을 비교하면, △는 p<0.05를 나타내고, △△는 p<0.01을 나타낸다.
고염 시험 그룹(그룹 3)과 원염 정상 그룹(그룹 2)을 비교하면, #는 p<0.05를 나타내고, ##는 p<0.01을 나타낸다.
각 고염 시험 그룹(그룹 4 ~ 8)과 고염 시험 그룹(그룹 3)을 비교하면, *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타낸다.
(4) 혈청 이온 함량
1개월의 실험 결과, 혈청 내 각 이온 농도 차이는 크지 않다.
Figure pct00024
일반 사료(그룹 1)와 위관 투여한 일반 원염(그룹 2)을 비교하면, △는 p<0.05를 나타내고, △△는 p<0.01을 나타낸다.
고염 시험 그룹(그룹 3)과 원염 정상 그룹(그룹 2)을 비교하면, #는 p<0.05를 나타내고, ##는 p<0.01을 나타낸다.
각 고염 시험 그룹(그룹 4 ~ 8)과 고염 시험 그룹(그룹 3)을 비교하면, *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타낸다.
6.3.5 실험 랫트의 소변 지표 분석 결과
(1) 총 배설량
소변 크레아티닌(CRea)은 주로 혈액에서 공급되고, 사구체에 의해 여과된 후 소변을 통해 체외로 배출되며, 신 세뇨관은 기본적으로 흡수하지 않고 매우 적게 배출한다. 신장 문제가 발생하면 소변 크레아티닌 함량에 변화가 발생한다. 정상 소변에는 소량의 소분자 단백질(U-TP)이 포함되어 있고, 소변의 단백질이 증가하면 단백뇨가 형성되며, 단백뇨는 신장 질환의 일반적인 증상이고, 전신 질환에서도 단백뇨가 발생할 수 있다. 소변 미세 알부민(U-ALB)은 중요한 혈장 단백질 중 하나로서, 정상적인 상황에서 알부민은 분자량이 크고 사구체 기저막을 통과할 수 없다. 질환이 진행되는 동안 사구체 기저막이 손상되어 투과성을 변화시켜 알부민의 배출을 초래함으로써 소변으로 유입되어, 소변 알부민의 농도가 지속적으로 상승하도록 한다. 표에서 보다시피, 1개월의 고염 식이는 SD 랫트의 U-TP와 U-ALB의 함량에 현저한 차이를 나타내는데, 이는 신장 기능이 손상되었음을 설명하지만, 혈청 신장 지표 및 소변 내 CRea 함량은 현저한 변화가 나타나지 았는데, 이는 1개월의 고염 식이의 영향이 강하지 않음을 설명하지만, 장기간의 고염 식이는 신장에 손상 줄 수 있다. 유의해야 할 것은, 송염 U-TP 수준의 유의성은 고염 그룹에 비해 낮고, 양성 대조와 상응한데, 이는 송염도 신장 기능을 보호하는 효과를 갖고 있음을 설명한다.
Figure pct00025
일반 사료(그룹 1)와 위관 투여한 일반 원염(그룹 2)을 비교하면, △는 p<0.05를 나타내고, △△는 p<0.01을 나타낸다.
고염 시험 그룹(그룹 3)과 원염 정상 그룹(그룹 2)을 비교하면, #는 p<0.05를 나타내고, ##는 p<0.01을 나타낸다.
각 고염 시험 그룹(그룹 4 ~ 8)과 고염 시험 그룹(그룹 3)을 비교하면, *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타낸다.
(2) 소변 중 칼슘, 인, 마그네슘, 나트륨, 염소 및 칼륨 이온의 배설량
Na와 Cl 이온의 함량 증가하는 외에, 고염 그룹 내 K, Ca, P 함량은 현저하게 증가했으며, 죽염 중 P 원소가 비교적 뚜렷하다. 식물염 분석에서, 원염 및 구운 소금 P 원소는 검출되지 않았고, 소나무, 대나무, 매화염은 각각 71.8, 45.3, 424 mg/kg으로 검출되었다. 식물 기능성 염의 물리화학적 지표에서 보다시피, 그 원소 함량은 원염 및 구운 소금에 비해 현저하게 많았지만, 그 소변 배설량은 현저한 차이를 나타내지 않았는데, 이는 시물 기능성 염에서 풍부한 원소는 체내에 흡수된다는 것을 설명한다.
Figure pct00026
일반 사료(그룹 1)와 위관 투여한 일반 원염(그룹 2)을 비교하면, △는 p<0.05를 나타내고, △△는 p<0.01을 나타낸다.
고염 시험 그룹(그룹 3)과 원염 정상 그룹(그룹 2)을 비교하면, #는 p<0.05를 나타내고, ##는 p<0.01을 나타낸다.
각 고염 시험 그룹(그룹 4 ~ 8)과 고염 시험 그룹(그룹 3)을 비교하면, *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타낸다.
6.4 결론
SD 쥐의 고혈압 예방 시험에서 일반 염과 구운 소금은 현저한 차이를 나타내지 않았는데, 이는 마찬가지로 본 발명에 의해 제조된, 식물 추출물이 첨가되지 않은 구운 소금에 특별한 생물학적 효능이 없음을 설명한다.
수컷 SD 랫트는 1개월의 고염 식이 후, 원염을 섭취한 후 수축기 혈압이 현저하게 상승하였으며, 간, 신장, 심근 기능이 현저하게 손상되었다. 본 발명의 식물 기능성 염을 섭취한 실험 동물의 혈압은 원염에 비해 현저하게 낮았는데, 이는 일반 식용염을 대체하고, 고혈압을 예방하는 잠재력을 갖고 있음을 나타낸다.
본 발명에서 언급된 모든 문헌은 각각의 문헌이 참조로서 독립적으로 인용되는 바와 같이 모두 참조로서 본 발명에 인용된다. 이밖에, 이해해야 할 것은, 본 발명의 상기 교시 내용을 열독한 이후, 본 기술분야의 기술자는 본 발명에 대해 다양한 변동 또는 수정을 수행할 수 있으며, 이러한 등가 형태는 본 발명의 첨부된 청구보호범위에 포함된다.

Claims (13)

  1. 기능성 식물염으로서,
    상기 기능성 식물염은 하나 또는 다수의 식물 추출물 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염과 균일하게 혼합하고, 800 ~ 1400 ℃의 고온에서 1회 또는 여러회에 걸쳐 베이킹하여 제조되고;
    상기 식물 추출물은 대나무 추출물이며;
    균일하게 혼합하여 얻은 전술한 혼합물은 사전 베이킹이 되지 않은 혼합물이고, 상기 “사전 베이킹이 되지 않은”은 상기 식물염을 제조하는 원료가 대나무 추출물과 원염의 직접 혼합물이고, 상기 혼합물이 기존의 죽염을 제조하는 저온 사전 베이킹 처리를 1회 이상 거치지 않은 것을 의미하며;
    상기 베이킹은 기계화 오븐 또는 중간 주파수 용해로에서 수행되는 것을 특징으로 하는 기능성 식물염.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 저온은 800 ℃ 이하인 것을 특징으로 하는 기능성 식물염.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 식물 추출물은 대나무잎 추출물은 대나무잎 추출물, 대나무 뿌리 추출물, 대나무 장대 추출물, 죽순 추출물, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 기능성 식물염.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 식물 추출물은 대나무잎 플라본, 대나무잎 폴리페놀, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 기능성 식물염.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 미세 염은 해염, 호염, 정염, 광염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 기능성 식물염.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 미세 염은 조제된 해염인 것을 특징으로 하는 기능성 식물염.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 기능성 식물염은 죽염인 것을 특징으로 하는 기능성 식물염.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 식물 추출물은 매화 추출물 및/또는 소나무 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 기능성 식물염.
  9. 제1항에 따른 기능성 식물염의 제조 방법으로서,
    하나 또는 다수의 식물 추출물 분말을 1 % ~ 40 %의 첨가량에 따라 미세 염과 균일하게 혼합하고, 800 ~ 1400 ℃의 고온에서 1회 또는 여러회에 걸쳐 베이킹하여 기능성 식물염을 얻는 단계를 포함하고;
    상기 식물 추출물은 대나무 추출물이며;
    균일하게 혼합하여 얻은 전술한 혼합물은 사전 베이킹이 되지 않은 혼합물이고, 상기 “사전 베이킹이 되지 않은”은 상기 식물염을 제조하는 원료가 대나무 추출물과 원염의 직접 혼합물이고, 상기 혼합물이 기존의 죽염을 제조하는 저온 사전 베이킹 처리를 1회 또는 여러회에 거치지 않은 것을 의미하며;
    상기 베이킹은 기계화 오븐 또는 중간 주파수 용해로에서 수행되는 것을 특징으로 하는 기능성 식물염의 제조 방법.
  10. 제9항에 있어서,
    상기 베이킹은 기계화 오븐에서 수행되는 것을 특징으로 하는 기능성 식물염의 제조 방법.
  11. 제9항에 있어서,
    상기 베이킹은 중간 주파수 용해로에서 수행되는 것을 특징으로 하는 기능성 식물염의 제조 방법.
  12. 식품 또는 약품 조성물로서,
    하나 또는 다수의 제1항에 따른 기능성 식물염을 포함하는 것을 특징으로 하는 식품 또는 약품 조성물.
  13. 제1항에 따른 기능성 식물염의 용도로서,
    약물 보조제, 건강 식품/음료, 기능성 식품/음료, 식탁용 조미소금, 요리용 소금, 특수 용도 화장품 또는 개인 케어 용품으로 이루어진 군으로부터 선택된 물질을 제조하는데 사용되는 것을 특징으로 하는 기능성 식물염의 용도.
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