KR20200121196A - 컴파운드 k 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법 - Google Patents

컴파운드 k 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 컴파운드 K 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 생물전환 홍삼 제조 방법을 이용하는 경우, 홍삼의 컴파운드 K 함량을 유의하게 증가시켜 진세노사이드의 체내 흡수율을 크게 향상시킬 수 있다.

Description

컴파운드 K 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법{Method for Preparation of Bioconverted Red Ginseng with Enhanced compound K content}
본 발명은 컴파운드 K 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법에 관한 것이다.
인삼 및 홍삼 등이 함유하고있는 사포닌은 약리활성이 매우 우수하여 다른 식물에서 발견되는 사포닌과는 별개로 진세노사이드라고 부른다. 최근 연구결과로 약 30여종의 진세노사이드의 화학구조가 밝혀졌다. 진세노사이드는 담마란 (dammarane) 골격을 갖는 배당체에 화학구조상 R1, R2, R3 위치에 결합된 당의 종류 및 개수에 따라 디올계(PPD)와 트리올계(PPT)의 진세노사이드 등으로 분류된다.
가공과정 중 이러한 진세노사이드에 높은 압력을 가하거나 효소 첨가, 또는 가열할 경우, 당이 일부 떨어져 나가거나 새로운 이중결합이 생기면서 독특한 진세노사이드가 만들어진다. 따라서 인삼의 가공방법에 따라 여러 가지 유형의 진세노사이드가 함유된 제품들이 출시되고 있다.
인삼 사포닌이 체내에 흡수되기 위해서는 디올계 진세노사이드는 20(S)-프로토파낙사디올 20-O-β-D-글루코피라노사이드(20(S)-protopanaxadiol 20-O-β-D-glucopyranoside, FGM 1, 이하, '화합물 K'라 함)로, 그리고 트리올계 진세노사이드는 20(S)-프로토파낙사트리올 (20(S)-protopanaxatriol, FGM 4)로 분해된 후 체내에 흡수되면서 효능을 발휘하는데, 열이나 산, 압력, 소화효소 등에 의해서는 소량만이 전환되어 최종적으로 체내에 흡수될 뿐이다.
최근 연구결과에 따르면 인삼 사포닌이 이러한 최종산물로 전환할 때 장내미생물이 필요하다고 밝혀졌다. 경구 복용한 사포닌이 흡수되려면 장내 미생물에 의해 분해되어야 하는데 일반인들 중 인분을 조사해 추정한 연구에서 정상인 중 30%는 사포닌을 대사 할 수 있는 균이 전혀 없고, 비록 균이 있는 나머지 70% 중에도 대사 능력에 차이가 있어 디올계와 트리올계 사포닌을 모두 정상적으로 대사 할 수 있는 사람은 소수에 지나지 않는다.
이런 면에서 이미 외부에서 가공처리를 완료하여, 개인의 대사 기능에 관계없이 인삼의 유효성분을 흡수할 수 있는 형태로 전환시킴으로써, 누구나 효과를 볼 수 있는 컴파운드 K 고함량 인삼 및 홍삼 농축액을 개발하는 것은 매우 바람직하다고 볼 수 있다.
인삼의 사포닌 성분 중 상기 진세노사이드 컴파운드 K의 수율을 개선하기 위한 선행기술로서 한국등록특허 제10-1409761호(2014.06.13)에서는 3종의 효소를 혼합 사용하여 컴파운드 K로 전환시키는 방법을 게시한 바 있으나, 전환과정 중 Rd와 F2에서 전환이 정지되어 컴파운드 K의 전환율이 너무 낮았다. 한국공개특허 제10-2016-0076851호(2016.07.01)에서는 1종의 효소와 Cytolase PCL5를 혼합하여 컴파운드 K로 전환시키는 방법을 게시한 바 있으나 상기와 같은 전환과정에 관련한 이유로 컴파운드 K의 전환율이 낮았다.
한국등록특허 제10-1409761호(2014.06.13.) 한국공개특허 제10-2016-0076851호(2016.07.01)
본 발명자들은 홍삼의 체내 대사율을 높이기 위해 컴파운드 K 함량이 증진된 홍삼을 개발하고자 예의 연구 노력하였다. 그 결과 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주의 배양액을 홍삼 추출물에 첨가하여 반응시키는 경우, 컴파운드 K 함량을 유의하게 증진 시킬 수 있음을 규명함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 목적은 컴파운드 K 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 컴파운드 K 함량이 증진된 생물전환 홍삼을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 홍삼 추출물에 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주의 배양액을 첨가하여 반응시키는 단계를 포함하는 컴파운드 K 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법을 제공한다.
본 발명자들은 홍삼의 체내 대사율을 높이기 위해 컴파운드K 함량이 증진된 홍삼을 개발하고자 예의 연구 노력하였다. 그 결과 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주를 홍삼 추출물에 첨가하여 반응시키는 경우, 컴파운드K 함량을 유의하게 증진 시킬 수 있음을 규명하였다.
본 발명의 일 실시예에서는 홍미삼을 사용하여 컴파운드K 증진 효과를 규명하였으나, 본 발명은 특정한 식물종의 특정 효능에 관한 것이 아닌 바, 진세노사이드를 함유하는 식물종에 대해 포괄적으로 적용될 수 있음이 자명하다.
본 발명에서의 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주(GenBank accession # LT595004.1)는 칸디다 (Candida) 속에 속하는 효모이고, 주로 자연발효를 통하여 빵을 만들 때 가장 많이 이용되는 균주로서 시중에서 용이하게 입수가 가능하다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 본 발명의 홍삼 추출물은 유기용매 추출물이다.
본 명세서에서 사용되는 용어 '추출물'은 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 홍삼 추출물은 추출 용매를 이용하여 얻은 조추출물 뿐만 아니라, 여기에 정제 과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것을 포함한다. 예컨대, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 다른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 홍삼 추출물에 포함된다.
본 발명에 이용되는 추출물은 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출, 초음파 추출 또는 당업계에 알려진 통상적인 추출방법을 통해 추출한 것이다. 본 발명의 구체예에서 본 발명의 추출물은 50℃ 이상, 55℃ 이상, 60℃ 이상, 65℃ 이상, 70℃ 이상, 또는 75℃ 이상의 유기 용매를 이용한 추출 방법을 통해 제조될 수 있으며, 보다 구체적으로 1시간 이상, 2시간 이상, 3시간 이상, 4시간 이상, 5시간 이상, 또는 6시간 이상 추출하는 과정을 통해 제조될 수 있다. 본 발명의 구체적인 일 실시예에서는 12시간 추출하는 방법을 사용하였으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 유기 용매는 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예들 들어, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올 및 노말-부탄올 등), 아세트산, 또는 이들의 혼합물이다. 구체적인 일 구현예에 따라 에탄올을 이용하여 홍삼 추출물을 제조할 수 있으며, 더욱 구체적으로 50% 에탄올을 이용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에 따른 추출물을 제조하기 위해, 추출에 사용되는 용매의 양은 사용되는 생약 성분인 홍삼의 양에 따라 적절하게 선택될 수 있다. 구체적으로 예를 들면, 추출물 제조에 이용되는 홍삼의 중량의 1배 내지 30배의 부피, 더욱 구체적으로 5배 내지 30배의 부피, 더욱 더 구체적으로 5배 내지 25배의 부피, 더욱 더 구체적으로 10배 내지 25배 부피, 더욱 더 구체적으로 15배 내지 25배 부피일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 제조 방법은 홍삼 추출물에 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주의 배양액을 첨가하여 반응시키는 단계 이전에 홍삼 추출물을 가공하는 다음 단계를 추가적으로 포함한다:
- 홍삼 추출물을 감압 농축하는 단계; 및
- 상기 농축 단계로부터 얻은 농축액을 희석하는 단계.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 감압 농축하는 단계는 홍삼 추출물을 20 내지 35 브릭스로 농축하는 것이다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 제조 방법은 상기 농축하는 단계의 실시 이전에 홍삼 추출물을 여과하는 단계를 추가적으로 더 포함한다. 본 구현예에서의 여과 단계는 미세한 현탁물이나 콜로이달 입자를 제거하기 위하여 실시되며, 구체적으로 퍼라이트(perlite) 여과를 이용할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 농축 단계로부터 얻은 농축액을 희석하는 단계는 본 발명의 홍삼추출물의 생리활성에 영향을 주지 않을 것으로 예상되는 어떠한 희석용매를 사용하여도 무방하고, 구체적으로 예를 들면, 정제수를 사용하여 희석할 수 있다. 일 구체예에서, 본 발명의 농축 단계로부터 얻은 농축액은 희석용매를 사용하여, 10브릭스(Brix) 이하가 되도록 희석할 수 있고, 보다 구체적으로 3브릭스 내지 7브릭스, 4브릭스 내지 6브릭스가 되도록 희석할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 희석 공정을 통해 얻어진 반응물에 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주를 첨가하여 생물전환 공정을 실시한다. 칸디다 밀러리 균주 배양액은 희석 공정을 통해 얻어진 반응물 100 중량부에 대하여 5 내지 30 중량부의 양으로 첨가할 수 있고, 보다 더 구체적으로는 10 내지 25 중량부, 더 구체적으로는 15 내지 25 중량부의 양을 첨가하여 반응시킬 수 있다. 상온 내지상온에 비해 비교적 높은 온도, 구체적으로 예를 들면, 15℃ 내지 50℃, 20℃ 내지 50℃, 25℃ 내지 50℃, 30℃ 내지 50℃, 35℃ 내지 50℃, 40℃ 내지 50℃, 43℃ 내지 47℃의 온도에서 반응을 시킬 수 있으며, 12시간 내지 수일 동안 생물 전환의 정도를 관찰해가면 반응시킬 수 있다. 보다 구체적으로 예를 들면, 1일 내지 5일 동안 반응시킬 수 있고, 보다 구체적으로 2일 내지 4일의 시간동안 반응 시킬 수 있다.
생물전환 공정 실시 이후, 수분 내지 수십분의 시간 동안 고온 처리하여 칸디다 밀러리 균주를 비롯한 각종 효소들을 불활성화 시킬 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 제조 방법은 홍삼 추출물에 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주의 배양액을 첨가하여 반응시키는 단계 이후에 다음 단계를 추가적으로 더 포함한다:
칸디다 밀러리 배양액 첨가 반응물을 가열하여 불활성화 시키는 단계; 및
불활성화된 추출 용액을 감압 농축하여 홍삼 농축액을 얻는 단계.
상술한 바와 같은 불활성화 단계의 실시에 의해 컴파운드K가 프로토파낙사디올(protopanaxadiol; PPD)로 전환되는 것을 방지할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 본 발명의 제조 방법은 ‘칸디다 밀러리 배양액 첨가 반응물을 가열하여 불활성화 시키는 단계’ 및 ‘불활성화된 추출 용액을 감압 농축하여 홍삼 농축액을 얻는 단계’사이에 다음의 실시 단계를 추가적으로 더 포함할 수 있다:
양조 효소를 추가적으로 첨가하여 반응시키는 단계; 및
양조 효소를 불활성화 시키는 단계.
본 명세서 상의 용어 “양조 효소”는 발효 공정에 의해 생산되는 주류의 생산 공정 상에 사용되는 효소를 의미하며, 보다 더 구체적으로는 저온 발효 공정 상에 사용될 수 있는 발효 효소들을 의미한다. 시판되는 양조 효소로서 Gluc Gin, Ginjou-koji, tome-koji 등을 구체적인 예로 들 수 있다.
본 발명의 양조 효소는 앞선 실시 단계들을 통해 얻어진 결과물 100 중량부를 기준으로 1 내지 10 중량부, 더 구체적으로는 2 내지 8 중량부, 보다 더 구체적으로는 3 내지 7 중량부, 보다 더 구체적으로는 4 내지 6 중량부를 추가하여 상온보다 비교적 높은 온도에서 반응 시킬 수 있다. 구체적으로 예를 들면, 25℃ 내지 55℃, 30℃ 내지 55℃, 35℃ 내지 55℃, 40℃ 내지 55℃, 45℃ 내지 55℃, 48℃ 내지 52℃의 온도에서 반응시킬 수 있다. 반응 시간은 30분 내지 수시간 정도가 적당하며, 구체적으로 예를 들면, 30분 내지 6시간, 더 구체적으로 1시간 내지 5시간, 보다 더 구체적으로 2시간 내지 4시간 동안 반응시킬 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 상술한 공정에 의해 얻어진 반응물을 감압 농축하여 보관하는 것이 바람직하다.
본 발명의 생물전환 홍삼 제조 방법의 구체적인 일 구현예는 다음 단계들을 포함한다:
(a) 홍삼에 유기용매를 첨가하여 홍삼 추출물을 제조하는 단계;
(b) 단계 (a)로부터 얻은 홍삼 추출물을 여과하는 단계;
(c) 단계 (b)로부터 얻은 여과액을 감압 농축하는 단계;
(d) 단계 (c)로부터 얻은 농축액을 희석하는 단계;
(e) 단계 (d)로부터 얻은 희석된 홍삼 추출물에 칸디다 밀러리(Candida milleri) 배양액을 첨가하여 반응시키는 단계;
(f) 단계 (e)로부터 얻은 반응액을 가열하여 불활성화 시키는 단계;
(g) 단계(f)로부터 얻은 반응액에 양조 효소를 첨가하여 반응시키는 단계;
(h) 단계 (g)로부터 얻은 반응액을 불활성화 시키는 단계; 및
(i) 단계(h)로부터 얻은 불활성화된 추출 용액을 감압 농축하여 홍삼 농축액을 얻는 단계.
본 발명의 다른 일 양태에 따르면, 본 발명은 상술한 생물전환 홍삼 제조 방법에 의해 제조된 생물전환 홍삼 추출물을 제공한다.
본 발명의 생물전환 홍삼 추출물은 생물전환 공정을 거치지 않은 홍삼 추출물에 비해 컴파운드K 함량이 비약적으로 증진된 상태이다.
본 발명의 생물전환 홍삼 추출물은 상술한 생물전환 홍삼 제조 방법에 의해 제조되는 바, 중복되는 내용을 원용하며, 본 명세서 기재의 과도한 복잡성을 피하기 위해 그 기재를 생략하도록 한다.
본 발명의 다른 일 양태에 따르면, 본 발명은 홍삼 추출물에 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주를 첨가하여 반응시키는 단계를 포함하는 홍삼 추출물의 컴파운드 K 함량 증진 방법을 제공한다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 홍삼 추출물의 컴파운드 K 함량 증진 방법은 홍삼 추출물에 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주의 배양액을 첨가하여 반응시키는 단계 이전에 홍삼 추출물을 가공하는 다음 단계를 추가적으로 포함한다:
- 홍삼 추출물을 감압 농축하는 단계; 및
- 상기 농축 단계로부터 얻은 농축액을 희석하는 단계.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 감압 농축하는 단계는 홍삼 추출물을 20 내지 35 브릭스로 농축하는 것이다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 홍삼 추출물의 컴파운드 K 함량 증진 방법은 상기 농축하는 단계의 실시 이전에 홍삼 추출물을 여과하는 단계를 추가적으로 더 포함한다. 본 구현예에서의 여과 단계는 미세한 현탁물이나 콜로이달 입자를 제거하기 위하여 실시되며, 구체적으로 퍼라이트(perlite) 여과를 이용할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 홍삼 추출물의 컴파운드 K 함량 증진 방법은 홍삼 추출물에 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주의 배양액을 첨가하여 반응시키는 단계 이후에 다음 단계를 추가적으로 더 포함한다:
칸디다 밀러리 배양액 첨가 반응물을 가열하여 불활성화 시키는 단계; 및
불활성화된 추출 용액을 감압 농축하여 홍삼 농축액을 얻는 단계.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 본 발명의 홍삼 추출물의 컴파운드 K 함량 증진 방법은 ‘칸디다 밀러리 배양액 첨가 반응물을 가열하여 불활성화 시키는 단계’ 및 ‘불활성화된 추출 용액을 감압 농축하여 홍삼 농축액을 얻는 단계’사이에 다음의 실시 단계를 추가적으로 더 포함할 수 있다:
양조 효소를 추가적으로 첨가하여 반응시키는 단계; 및
양조 효소를 불활성화 시키는 단계.
본 발명의 일 양태인 홍삼 추출물의 컴파운드 K 함량 증진 방법은 상술한 본 발명의 다른 일 양태인 컴파운드 K 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법과 동일한 실시 단계들을 포함하므로, 중복되는 내용을 원용하며, 본 명세서 기재의 과도한 복잡성을 피하기 위해 중복 기재를 생략하도록 한다.
본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:
(a) 본 발명은 컴파운드 K 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법을 제공한다.
(b) 본 발명은 컴파운드 K 함량이 증진된 생물전환 홍삼을 제공한다.
(c) 본 발명의 생물전환 홍삼 제조 방법을 이용하는 경우, 홍삼의 컴파운드 K 함량을 유의하게 증가시켜 진세노사이드의 체내 흡수율을 크게 향상 시킬 수 있다.
도 1은 본 발명의 생물전환 홍삼의 증진된 컴파운드 K 함량을 나타낸다.
도 2는 본 발명의 Candida Milleri 균주에 대한 NCBI BLAST 검색 결과를 나타낸다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실시예
실시예 1: 균주의 동정
대한민국 강원도 지역에서 채집한 산삼을 수집하였고, 각 산삼의 잔뿌리에 잔존하는 토양으로 현탁액을 만들어 각 군집체를 분리하고 각각의 배양액으로 β-glucosidase 활성도를 조사하는 과정을 반복하여 타 군집체에 비해 활성이 현저하게 높은 군집체를 선별하였다. 선정된 군집체는 16s 리보좀 DNA에 공통적으로 존재하는 염기서열을 이용하여 프라이머를 합성한 후 중합효소연쇄반응을 실시하였고 반응 생성물의 DNA 염기서열을 분석하여 NCBI BLAST 검색을 통해 Candida milleri (accession # LT595004.1)로 동정하였다.
실시예 2: 균주 배양액 제조
칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주를 30℃, 액체 배지(LB broth)에서 24시간 배양한 후, 원심분리를 통하여 상층액을 취하고, 이를 염석법, ammonium sulfate precipitation 을 통하여 침전된 단백질을 회수하여 다시 멸균된 PBS 버퍼에 녹인 후 얻은 반응액을 여과하여(pore size 0.22 μm) 배양액을 얻었다.
실시예 3: 홍삼의 컴파운드K 강화를 위한 생물전환공정
홍미삼(대한민국/금천) 50 kg에 식품원료로 사용할 수 있는 50% 주정 1,000 L를 첨가하여 70℃에서 12시간 동안 추출하여 추출물을 얻었다.
상기 추출물을 약 50℃로 냉각한 후 퍼라이트(perlite)를 이용하여 여과하였다. 상기 여과액을 30브릭스(Brix)로 감압농축하였다. 상기 감압농축액을 정제수를 첨가하여 5브릭스(Brix)가 되도록 희석하였다. 상기 희석액 100 중량부에 대해 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주의 배양액 20 중량부를 추가로 첨가하여 45℃ 에서 72시간 동안 반응시켰다.
상기 반응액을 약 90℃에서 20분 동안 가열하여 칸디다 밀러리(Candida milleri)의 배양액 및 각종 효소들을 불활성화 시켰다.
불활성화 된 반응액에 Gluc gin(제조사: Higuchi Moyashi, 효소종류: Pectinase and Arabinase, 효소생산 미생물: Aspergillus niger var) 5 중량부를 추가하여 약 50℃에서 180분 동안 반응시킨다.
미생물에 의한 오염 및 보관의 용이성을 위하여, 상기 유산균이 불활성화된 반응액을 약 70 브릭스(Brix)가 되도록 감압 농축하였다.
실시예 4 : 생물전환공정에 따른 컴파운드 K 함량 평가
상술한 제조 공정에 의해 제조된 컴파운드 K 함량이 강화된 홍삼농축액과 생물전환공정을 거치지 않은 홍삼농축액을 각각 메탄올 (MeOH)로 100배 희석하여 아래 표와 같은 조건으로 HPLC를 수행하였고, 컴파운드 K 함량을 비교하였다.
Column Kromasil 100-5-C18
Analytical time 70 min.
Mobile phase Water:Acetonitrile (80:20~50:50)
Detection wavelength 203 nm
그 결과, 생물전환공정을 진행하지 않은 홍삼농축액에서는 컴파운드 K가 확인되지 않았고, 상술한 생물전환공정을 거친 홍삼농축액에서는 17.1 mg/g의 컴파운드 K 함량이 확인되었다.

Claims (10)

  1. 홍삼 추출물에 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주를 첨가하여 반응시키는 단계를 포함하는 컴파운드 K 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 홍삼 추출물은 유기용매 추출물인 것을 특징으로 하는 생물전환 홍삼 제조 방법.
  3. 제 2 항에 있어서, 상기 유기용매는 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세트산, 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 생물전환 홍삼 제조 방법.
  4. 제 1 항에 있어서, 상기 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주를 첨가하여 반응시키는 단계 이전에 홍삼 추출물을 가공하는 다음 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 생물전환 홍삼 제조 방법:
    홍삼 추출물을 감압 농축하는 단계; 및
    상기 농축 단계로부터 얻은 농축액을 희석하는 단계.
  5. 제 4 항에 있어서, 상기 감압 농축하는 단계는 홍삼 추출물을 20 내지 35 브릭스로 농축하는 것을 특징으로 하는 생물전환 홍삼 제조 방법.
  6. 제 4 항에 있어서, 상기 농축하는 단계의 실시 이전에 홍삼 추출물을 여과하는 단계를 추가적으로 더 포함하는 생물전환 홍삼 제조 방법.
  7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주를 첨가하여 반응시키는 단계 이후에 다음 단계를 추가적으로 더 포함하는 생물전환 홍삼 제조 방법:
    칸디다 밀러리 배양액 첨가 반응물을 가열하여 불활성화시키는 단계; 및
    불활성화된 추출 용액을 감압 농축하여 홍삼 농축액을 얻는 단계.
  8. 제 7 항에 있어서, 상기 불활성화시키는 단계 및 홍삼 농축액을 얻는 단계 사이에 다음의 실시 단계를 추가적으로 더 포함하는 생물전환 홍삼 제조 방법:
    양조 효소를 추가적으로 첨가하여 반응시키는 단계; 및
    양조 효소를 불활성화 시키는 단계.
  9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 따른 제조 방법에 의해 제조된 생물전환 홍삼 추출물.
  10. 홍삼 추출물에 칸디다 밀러리(Candida milleri) 균주를 첨가하여 반응시키는 단계를 포함하는 홍삼 추출물의 컴파운드 K 함량 증진 방법.
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