KR101566589B1 - 진세노사이드 f2의 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효 홍삼 추출물 - Google Patents

진세노사이드 f2의 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효 홍삼 추출물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 홍삼 추출물의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 홍삼 추출물을 제공한다.
본 발명의 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물의 제조 방법은 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물이 대량생산에 용이하게 적용될 수 있으며, 상기 방법에 의해 추출된 추출물은 진세노사이드 F2의 함량이 크게 증가됨으로써 우수한 항염 및 항소양 활성을 통해 약학 조성물, 건강 기능식품 조성물로 이용가능성이 높다.

Description

진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효 홍삼 추출물 {Method for producing fermented red ginseng with increased Ginsenoside F2 contents and fermented red ginseng extract produced by the same method}
본 발명은 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효 홍삼 추출물에 관한 것이다.
인삼(Panax ginseng C.A. Meyer. Ginseng radix)은 오갈피나무과 (Araliaceae) 인삼속(Panax)에 속하는 다년생 초본류로서, 오래 전부터 한방에서는 약용으로 사용되어 왔으며, 현대에 이르러서는 자양강장, 항암 등의 각종 약리작용으로 인해 세계적으로 가장 우수한 건강식품으로 평가받고 있다.
인삼의 대표적인 종의 예로는, 아시아 극동 지역(북위 33 ~ 48 : 한국, 북만주, 러시아 일부)에 자생하며, 약효가 매우 우수한 고려인삼(Panax ginseng C.A.Meyer); 미국, 캐나다에서 자생 및 재배하고 있는 미국삼(Panax quinquefolium L.); 중국 운남성 동남부로부터 광서성 서남부 지역에서 야생 또는 재배하고 있는 전칠삼(Panax notoginseng F.H.Chen); 및, 일본, 중국 서남부, 네팔에 이르기까지 분포되어 있는 죽절삼(Panax japonicus C.A.Meyer) 등이 있다.
인삼의 유효성분으로 인삼 사포닌이 알려져 있는데, 인삼 사포닌은 비당부의 구조에 따라 프로토파낙사디올(protopanaxadiol, PPD계), 프로토파낙사트리올 (protopanaxatriol, PPT)계 및 올레아난(oleanane)계 사포닌으로 분류된다. 이 중 PPD와 PPT계는 인삼 특유의 사포닌으로 면역력 강화, 항암 효과 등의 강력한 효능을 가진 것으로 알려져 있다. 이러한 인삼의 화학성분들은 각각 효능을 지니기도 하지만 여러 성분들의 조합이 특정한 의약용도에 대하여 현저히 뛰어난 효능을 나타내기도 하는 것으로 보고되어 있다.
한편, 인삼의 가공방법에 따라 인삼에 존재하지 않는 새로운 성분이 생성되며, 인삼에 비해서 항산화작용을 비롯한 여러 가지 생리활성에 대해서 보다 우수한 효과를 나타내는 새로운 가공 인삼을 개발할 수 있다.
특히, 홍삼은 수삼을 장기간 저장할 목적으로 수증기로 2시간 내지 3시간 정도 찐 다음 말리는 과정, 즉 수삼의 전분이 호화되는 수치과정을 거치면서 수삼 표피의 색이 붉게 되기 때문에 홍삼이라 불린다. 이에 홍삼은 수삼에서는 발견되지 않은 특유성분인 말톨(Maltol)이 생성된다.
그 중에서도 발효 홍삼은 미생물 및 효소를 이용한 발효를 통해 특정성분을 강화시킨 가공 인삼으로서, 면역력 강화에 도움이 된다고 하여 많은 제품이 쏟아져 나오고 있다.
지금까지 연구된 바에 의하면, 인삼에 존재하는 활성성분은 대체로 인삼사포닌(ginsenoside)이라고 알려져 있는데, 인삼사포닌은 트리터펜(triterpene)인 비당부(protopanaxadiol 또는 protopanaxatriol)의 R1, R2, R3의 알콜성 OH기에 글루코스, 람노스, 자일로스, 아라비노스와 같은 당류가 에스테르 결합된 구조를 갖는 화합물로서, 현재까지 30종 이상이 밝혀져 있으며, 항암작용, 항당뇨작용, 중추신경 억제작용, 동맥경화 및 고혈압의 예방, 간기능 촉진 및 숙취제거 효과, 항피로 및 항스트레스 작용, 항산화작용, 항염 활성, 단백질합성 촉진작용, 면역 증강작용 등의 약리활성 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다. 그 중 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re 등의 일반사포닌(일차 생성물질)은 인삼이나 산삼의 생체 내에 가장 많이 함유돼 있는 있으며, 인체에 바로 흡수되지 않고, 그 중 일부가 장내 세균총이나 체내효소에 의해 분해되어 진세노사이드 F1, F2, Rg3, compound-K 등과 같은 특이사포닌(이차 대사물질)으로 성분전환이 이루어진 연후에야 비로소 흡수돼 그 효능이 발현되며, 항염 및 항소양의 약리활성 효과가 매우 우수한 것으로 보고된다.
지금까지 인삼 사포닌을 저분자화 시키는 방법으로는 산처리 및 알칼리처리, 열처리, 미생물 및 효소에 의한 변환 방법 등이 보고되어 있다. 산처리의 경우 R-form과 S-form의 이성질체를 생성하고 수율이 낮아 단일산물을 얻는데 어려움이 있고, 알칼리처리 방법은 산에 의한 가수분해보다 부산물의 생성이 적으나 S-form만 생성하는 특징이 있으며, 높은 온도나 강염기 조건에서만 진행되어 수율이 좋지 않다. 열처리 방법은 오래 전부터 사용해왔던 홍삼을 만드는 방법으로써, 온도를 이용해 당의 가수분해 및 측쇄 반응에 작용하여 백삼에 없던 성분이 열처리를 통해 특정 성분으로 증가하는 것을 확인 할 수 있지만, 열처리로 전환하여 얻어지는 사포닌이 다양하지 않고, 중간산물을 회수하기 어려운 단점이 있다.
그러나, 현재까지도 홍삼의 다양한 약효성분이 인체 내로 용이하게 흡수되도록 하며 또한 홍삼 내 포함하고 있는 홍삼 성분 함량(조사포닌)을 향상시킬 수 있는 발효 홍삼에 대한 기술 개발에 대한 필요성은 계속적으로 요구되고 있어, 새로운 발효방법을 이용한 발효 홍삼의 제조방법에 대해 계속 연구되고 있다.
대한민국 등록특허 제10-1017378호 (2009.12.30 공개)
본 발명은 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조 방법과 상기 제조방법으로 제조된 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물을 제공하고자 한다.
상기한 과제를 달성하기 위하여, 본 발명자들은 효소적 방법에 의해 홍삼 에 포함되어 있는 Rg3, Rg5, Rh2, Rh3 등의 희유 사포닌과 Rg2, Rg4, Rh1, Rh4 등의 고활성 사포닌을 유지하면서, 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조할 수 있는 방법을 개발할 목적으로 미생물에서 분리한 효소인 베타 글루코시다제(β-Glucosidase)를 사용하여 연구를 수행하였다. 그 결과, 베타글루코시다제를 이용하여 홍삼으로부터 고수율로 진세노사이드 F2를 생성할 수 있는 특정 용매 조건, 온도 조건 및 pH 조건을 확립하여 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명은 진세노이드 F2 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조방법으로써,
(a) 베타 글루코시다제(β-Glucosidase) 효소, 홍삼, 및 추출용매를 혼합하는 단계;
(b) 상기 (a) 단계의 혼합물을 35℃ 내지 65℃에서 12시간 내지 48시간 동안 베타 글루코시다제 효소와 반응시키는 단계를 포함하는 진세노이드 F2 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조방법을 제공한다.
본발명의 제조 방법은 베타 글루코시다제(β-Glucosidase) 효소, 홍삼, 및 추출용매를 혼합하는 단계를 포함한다.
본 발명에서, 베타 글루코시다제 효소는 사포닌 분해능을 가지며 홍삼에 처리하여 본 발명의 특정 온도 및 발효 조건에 의해 진세노사이드 F2를 다량 함유하는 홍삼 발효 추출물을 생성할 수 있다.
본 발명의 베타글루코시다제 효소는 바람직하게 아스퍼질러스 속(Aspergillus sp .)에서 유래될 수 있으며, 보다 바람직하게 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 유래의 베타 글루코시다제 효소일 수 있다. 보다 더 바람직하게 농촌진흥청 농업유전자원정보센터에 기탁된 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 40280, 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 41018, 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 42589, 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 43547, 또는 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 44333 중 선택된 어느 하나 이상의 균주로부터 분리된 것일 수 있다.
본 발명의 홍삼은 홍삼, 홍삼 분말, 홍삼 추출액을 모두 포함하는 개념이고, 당 분야에서 통상적으로 입수할 수 있는 홍삼이라면 어느 것을 사용하여도 무방하며, 상업적으로 판매되는 홍삼을 사용할 수도 있다.
본 발명에서 추출 용매는 통상적으로 사용되는 수성용매, 유기용매를 단독 또는 이들을 혼합하여 사용할 수 있다.
상기 용매는 바람직하게, 물, 메탄올, 에탄올, 아세토니트릴 또는 이들의 혼합용매일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 물을 사용할 수 있다.
상기 물과 메탄올, 에탄올 또는 아세토니트릴를 혼합하여 사용할 경우, 물과 메탄올, 에탄올 또는 아세토니트릴의 비율이 2:1 내지 9.5:1의 부피비로 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명에서, 베타-글루코스다제 효소는 홍삼에 대하여, 1:3 내지 1:10 중량비로 혼합하는 것이 바람직하며, 산업적으로 이용가능한 대량 생산 조건 하에서는 1:3 내지 1:7 중량비로 혼합하는 것이 바람직하고 예로, 1:5 중량비로 혼합할 수 있다.
본 발명의 제조방법은 상기 (a) 단계의 혼합물을 35℃ 내지 65℃에서 12시간 내지 48시간 동안 베타 글루코시다제 효소와 반응시키는 단계를 포함한다.
본 발명에서 베타 글루코시다제에 의한 효소 반응의 반응 온도는 35℃ 내지 65℃인 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 상기 물 용매 하에 50℃ 내지 60 ℃에서 반응하는 것이 바람직하다.
본 발명에서, 베타 글루코시다제에 의한 효소 반응의 반응 pH는 6 내지 9이며, 더욱 바람직하게는 6.5 내지 8.5인 것이 바람직하다.
상기 효소 반응의 시간은 효소의 활성이 유지되는 동안이라면 특별히 제한을 받지 않으나, 효소 반응 시간이 1 시간 내지 72 시간일 수 있으며, 바람직하게는 12 시간 내지 48 시간일 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 효소 반응 후 10 분 내지 1 시간 동안 80℃ 내지 100℃에서 가열하여 효소 반응을 종료시키는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명은 또한, 본 분야의 통상의 여과, 추출, 건조 방법에 따라, 발효 홍삼 추출물에 주정을 첨가하여 베타글루코시다제를 침전하여 여과하거나 원심분리하고, 추출액을 농축 건조시켜 건조된 발효 홍삼 추출물을 제조하는 단계를 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 발효 추출물을 원심분리시켜서 상등액과 침전물로 분리하고, 상기 원심분리에 의한 침전물에 40 내지 70% 주정을 가하여 환류 추출하여 얻은 추출물 및 원심분리에 의한 상등액을 함께 농축하여 농축액을 얻은 후, 상기 농축액에 말토덱스트린을 첨가 후 분무건조 하는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명은 또한 상기 제조방법으로 제조된 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물을 제공할 수 있다.
본 발명의 진세노사이드 F2 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물은 진세노사이드 F2를 홍삼 추출물 총 중량에 대하여 0.3 내지 0.5 중량%로 함유하고 있으며, 이로 인하여 기존의 일반적인 홍삼 추출물과 대비하여, 항염 및 항소양 효과가 월등하다.
이에 따라, 본 발명의 진세노사이드 F2 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물은 진세노사이드를 홍삼 추출물은 항염 및 항소양 활성을 가지는 약학조성물로 이용될수 있다.
또한, 본 발명의 진세노사이드 F2 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물은 진세노사이드를 홍삼 추출물은 항염 및 항소양 활성을 가지는 건강 기능식품으로 이용될 수 있다.
본 발명의 진세노사이드 F2 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물을 포함하는 약학적 조성물, 또는 건강기능 식품은 각각의 사용 목적에 맞게 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형, 멸균 주사용액의 주사제 등 다양한 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며, 경구 투여하거나 정맥 내, 복강 내, 피하, 직장, 국소 투여 등을 포함한 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다.
본 발명은 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물의 제조 방법을 제공하며, 이는 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물의 대량생산에 용이하게 적용될 수 있으며, 상기 방법에 의해 추출된 추출물은 진세노사이드 F2의 함량이 크게 증가됨으로써 우수한 항염 및 항소양 활성을 통해 약학 조성물, 건강 기능식품 조성물로 이용가능성이 높다.
도 1은 온도 조건에 따른 발효 홍삼 추출물의 진세노사이드 F2 함량을 나타내는 도이다.
도 2는 pH 조건에 따른 발효 홍삼 추출물의 진세노사이드 F2 함량을 나타내는 도이다.
도 3은 대량 반응 조건 하에서 발효 홍삼 추출물의 진세노사이드 F2 함량 증가를 나타내는 박층 크로마토그래피 분석 결과를 나타내는 도이다.
도 4는 본 발명의 진세노사이드 F2가 증가된 발효 홍삼 추출물 제조방법의 흐름도를 나타내는 도이다.
도 5는 본 발명의 진세노사이드 F2가 증가된 발효 홍삼 추출물 제조방법에 의해 제조된 발효 홍삼 추출물의 분무건조 후 생성물을 나타내는 도이다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
< 실시예 1> 아스퍼질러스 나이거( Aspergillus niger )로부터 베타글루코시다 제 분리
농촌진흥청 농업유전자원정보센터에 기탁된 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 40280, 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 41018, 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 42589, 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 43547, 또는 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 44333 균주 각각을 PDB (Potato Dextrose Broth) 액체 배지에서 30℃로 3일간 배양하였다. 그 후, 배양액을 7,000 rpm 속도로 10분간 원심 분리하여 상등액과 침전물을 분리하고, 상등액을 제거하였다. 침전물을 0.1M potassium phosphate buffer로 현탁 시켰으며, 현탁액을 초음파로 파쇄하였다. 파쇄물을 12,000 rpm의 속도로 5분간 원심 분리하여 상등액과 침전물로 분리 후 효소를 포함한 상등액을 취하였으며, 이를 동결건조하여 각각의 아스퍼질러스 나이거 균주로부터 분리된 베타글루코시다제 효소를 얻었다.
< 실시예 2> 진세노사이드의 전환에 대한 용매 조건의 확인
홍삼 분말은 ㈜한국인삼공사에서 제공받아 사용하였다.
상기 실시예 1의 방법으로 분리된 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger)(KACC 41018)의 베타-글루코시다제 효소와 다이올계 사포닌인 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd 등이 함유된 홍삼 분말의 반응 시에, 진세노사이드 F2 생성을 위한 최적의 용매 조건을 확인하였다.
베타-글루코시다제 효소 0.5g 및 홍삼 분말 2.5g을 물(pH 7.0), 메탄올, 에탄올, 아세토니트릴(ACN) 및 이들의 혼합 용매의 30mL에 용해시키고, 55℃ 내지 60℃ 반응조에서 교반(80 rpm)하면서 24시간동안 반응시켰다. 반응물을 역상 고속액체크로마토그래피를 이용하여 분석하였으며, 그 결과를 표 1 및 표 2에 나타내었다. 표 1 및 표 2는 총 5 종류의 진세노사이드 성분에 대한 고속액체크로마토그래피의 피크 면적값(% Area)은 각 성분의 함량%를 나타낸다.
표 1 및 표 2에 나타낸 바와 같이, 물, 메탄올, 에탄올 용매, 물과 에탄올, 메탄올 또는 아세토니트릴의 혼합용매에서 모두 10% 이상의 진세노사이드 F2가 검출되는 것을 확인하였으며, 특히 물 용매 하에서 진세노사이드 F2의 함량이 가장 높게 나타나는 것을 확인할 수 있었다.
[표 1]
Figure 112013106480782-pat00001
[표 2]
Figure 112013106480782-pat00002
< 실시예 3> 온도 조건에 따른 진세노사이드의 전환
홍삼 분말은 ㈜한국인삼공사에서 제공받아 사용하였다.
상기 실시예 1의 방법으로 분리된 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger)(KACC 41018)의 베타-글루코시다제 효소와 다이올계 사포닌인 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd 등이 함유된 홍삼 분말의 반응 시에, 진세노사이드 F2 생성을 위한 최적의 온도 조건을 확인하였다.
베타-글루코시다제 효소 0.5g과 홍삼 분말 2.5g을 물 (pH 7.0) 30mL에 용해시키고, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100℃의 반응조에서 교반(80 rpm)하면서 24시간 동안 반응시켰다. 반응물을 역상 고속액체크로마토그래피를 이용하여 분석하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 50℃ 내지 60℃의 온도에서 반응하였을 때, 진세노사이드 F2의 함량이 가장 높은 수준을 보이는 것을 확인할 수 있었다.
< 실시예 4> pH 조건에 따른 진세노사이드의 전환
홍삼 분말은 ㈜한국인삼공사에서 제공받아 사용하였다.
상기 실시예 1의 방법으로 분리된 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger)(KACC 41018)의 베타-글루코시다제 효소와 다이올계 사포닌인 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd 등이 함유된 홍삼 분말의 반응 시에, 진세노사이드 F2 생성을 위한 최적의 pH 조건을 확인하였다.
베타-글루코시다제 효소 0.5g과 홍삼 분말 2.5g을 pH 3.0, 4.0, 5.0, 6.0, 7.0, 8.0, 9.0, 또는 10.0의 수성 용액(물) 30mL에 용해시키고 50℃의 반응조에서 교반(80 rpm)하면서 24 시간동안 반응시켰다. 반응물을 역상 고속액체크로마토그래피를 이용하여 분석하였으며, 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타낸 바와 같이, pH 7.0 내지 8.0에서 진세노사이드 F2의 함량이 가장 높음을 확인할 수 있었다.
< 실시예 5> 발효 대량 반응 조건 확립 및 진세노사이드의 전환 확인
상기 실시예 1의 방법으로 분리된 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger)(KACC 41018)의 베타-글루코시다제 효소 5kg과 홍삼 분말 25kg을 물(pH 7.0) 30mL에 용해시키고, 55 내지 60℃ 반응조에서 교반(80 rpm)하면서 24시간 반응시켰다.
박층 크로마토그래피에 의해 주기적으로 진세노사이드 생성 여부를 확인하면서, 기질이 완전히 소실되거나 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 것을 확인한 후에, 발효기에서 80 ℃ 내지 100℃로 30분간 가열하여 반응을 종료시켰다.
그 결과를 도 3 및 표 3에 나타내었다.
표 3은 총 13 종류의 진세노사이드 성분에 대한 고속액체크로마토그래피의 피크 면적값(% Area)은 각 성분의 함량%를 나타낸다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 효소 반응 후 홍삼 분말의 진세노사이드 F2의 함량이 크게 증가하였다. 또한, 표 3에 나타낸 바와 같이, 효소 반응 후 홍삼 분말의 진세노사이드 F2의 함량이 35% 이상 증가하였고, Rb1, Rb2, Rd 등은 거의 소멸되었으며, Re. Rg1, Rg2, Compound-K, Rh1 등의 특이 사포닌의 농도가 함께 증가하였다.
[표 3]
Figure 112013106480782-pat00003
< 실시예 6> 반응 후 처리 조건 확립
원심분리를 통해 반응생성물을 상등액과 침전물을 분리 후, 상등액은 30 내지 50 브릭스로 농축(A)을 하였다. 그 후, 침전물 중량의 10배의 50% 주정을 첨가하고 85℃에서 4시간 동안 환류 추출을 하였다. 추출 후, 추출물은 원심분리기를 이용하여 분리하고 상등액은 30 내지 50 브릭스로 농축(B)을 하고, 농축액 A와 B를 혼합하여 30 브릭스로 농축을 하였다. 그런 다음 농축액 대한 30%의 말토덱스트린을 첨가하여 1 시간 교반(80 rpm) 후 분무건조를 하였다. 분무 건조된 생성물은 도 5에 나타내었으며, 최종 농축액의 함량은 하기 표 4와 같다.
표 4에 나타낸 바와 같이, 최종 농축액 C의 Batch 결과를 종합한 결과, 진세노사이드 F2의 함량이 균일하게 35% 이상 증가한 것을 확인할 수 있었다. 함량을 계산한 결과, 발효 추출물에 있어서 진세노사이드 F2의 함량은 대략 4.21±0.48 mg/g 로 나타내었다.
[표 4]
Figure 112013106480782-pat00004

Claims (8)

  1. 진세노이드 F2 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조 방법으로서,
    (a) 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) KACC 41018 균주로부터 분리된 베타 글루코시다제(β-Glucosidase) 효소, 홍삼, 및 물을 혼합하는 단계; 및
    (b) 상기 (a)단계의 혼합물을 35 ℃ 내지 65 ℃ 및 pH 6.5 내지 8.5에서 12 시간 내지 48 시간 동안 베타 글루코시다제 효소와 반응시키는 단계를 포함하는 진세노사이드 F2 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 삭제
  6. 제1항에 있어서, 상기 (b)단계의 효소 반응 후 10 분 내지 1 시간 동안 80 ℃ 내지 100℃에서 가열하여 효소 반응을 종료시키는 단계를 더 포함하는 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조방법.
  7. 제6항에 있어서, 효소 반응 종료 후 여과, 농축 및 건조시키는 단계를 더 포함하는 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조방법.
  8. 제1항, 제6항 및 제7항 중 선택된 어느 한 항에 따른 제조방법으로 제조된 진세노사이드 F2의 함량이 증가된 발효 홍삼 추출물.
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