KR20200064240A - A composition comprising supercritical fluid extract of Sargassum horneri having antioxidant and skin whitening effect - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to an antioxidant or skin-brightening cosmetic composition comprising, as an effective component, a Sargassum horneri extract prepared by a supercritical fluid extraction method, and more specifically, compared to Sargassum horneri extracts obtained by existing extraction techniques typically using solvents, the Sargassum horneri extract prepared by a sequencing batch supercritical extraction method is more effective in terms of antioxidant activity, tyrosinase inhibitory activity, and melanin formation, and thus can prevent skin aging and has enhanced skin-brightening effects. In addition, the sequencing batch supercritical extraction method of the present invention is conducted preferably at 30-100°C under 100-600 atm using carbon dioxide, or conducted using mixed fluid containing a cosolvent or an auxiliary solvent. The cosolvent is used in the supercritical fluid extraction method, in addition to carbon dioxide, and is preferably any one selected from among mixed fluids obtained by mixing one or more selected from among ethanol, methanol, water, ethyl acetate, hexane, and dimethyl ether. In addition, the extract of the present invention includes, not only the extracts obtained through the aforesaid extraction method, but also extracts obtained by common purification processes. For example, the Sargassum horneri extract, which is the effective component of the composition of the present invention, may be extracted using a solvent selected from the group consisting of water, anhydrous or hydrous lower alcohols having 1-4 carbon atoms, acetone, ethyl acetate, butyl acetate, and 1,3-butylene glycol. Also, mixed extracts prepared by extracting Sargassum horneri with the aforesaid solvents and combining the resulting extracts may be included in the range of the Sargassum horneri extract of the present invention.

Description

초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물 {A composition comprising supercritical fluid extract of Sargassum horneri having antioxidant and skin whitening effect}{A composition comprising supercritical fluid extract of Sargassum horneri having antioxidant and skin whitening effect} using supercritical fluid extraction method

본 발명은 초임계 유체 추출법에 의해 제조된 괭생이모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 연속 회분식 초임계추출법에 의해 제조된 괭생이모자반 추출물이 일반적으로 용매를 적용하는 기존의 추출방식에 의해 수득한 괭생이모자반 추출물에 비해 항산화, Tyrosinase 활성 저해 및 Melanin 생성을 억제하여 피부노화를 예방하고 피부미백 증진 효과를 가진다는 것을 확인하고, 이를 이용하여 고안된 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing an extract of Hoesengijaban prepared by supercritical fluid extraction as an active ingredient, and in particular, a Hoesengimojaban extract produced by a continuous batch supercritical extraction method is generally used. Compared with the extract of Hoeseng amoeba obtained by the conventional extraction method of applying a solvent, it is confirmed that it has anti-oxidation, inhibition of Tyrosinase activity and inhibition of Melanin production to prevent skin aging and enhance skin whitening, and is designed using this It relates to an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban using the critical fluid extraction method.

화장품의 기능은 청결과 미적 기능뿐만 아니라, 수분, 미세먼지, 공해 물질, 스트레스, 자외선, 기타 등의 외적인 요인과 면역세포의 기능저하, 세포 활성의 저하 등의 내적 요인에 기인한 자유 라디칼(Free Radical), 활성산소, 과산화물 등에 의한 단백질, 핵산, 세포막 지질 파괴 등의 피부 노화의 발생을 차단하거나 억제하는 것이다. The function of cosmetics is not only cleanliness and aesthetic function, but also free radicals due to external factors such as moisture, fine dust, pollutants, stress, ultraviolet rays, etc., and internal factors such as deterioration of immune cells and decrease in cell activity. Radical), which blocks or suppresses the occurrence of skin aging such as destruction of proteins, nucleic acids, and cell membrane lipids by free radicals and peroxides.

또한, 소비자의 고기능성 화장품에 대한 욕구를 충족시키기 위한 미백, 피부주름 개선 및 억제, 그리고 자외선 차단 기능을 갖는 화장품들이 계속해서 개발되고 있다. 그 중에서도 특히 피부미백과 노화를 방지에 대한 제품은 피부를 젊게 유지하려는 소비자들로부터 많은 관심을 받고 있다.In addition, cosmetics that have whitening, skin wrinkle improvement and suppression, and UV protection to meet consumers' desire for high-functional cosmetics are continuously being developed. Among them, products for skin whitening and anti-aging have attracted much attention from consumers who want to keep their skin young.

그 중에서도 미(美)에 대한 기준이 변화되면서 피부미백에 관한 관심사는 10대 부터 50, 60대 이상의 노년층, 남·녀 구분 없이 높아지고 있다. 피부미백은 피부를 희고 밝게 해주는 기능적인 표현으로, 과학적으로는 피부층에 멜라닌 색소의 생성을 억제함으로써 피부가 검게 변화되는 것을 완화시키는 효과이다. 멜라닌은 유해라디칼을 제거해주는 기능을 지니고 있어 일상생활에서 유해성에 장시간 노출되어 있는 현대인들의 피부손상을 보호해주는 역할을 해준다. Among them, as the standards for beauty have changed, interest in skin whitening has increased from teens to over 50s and over 60s, regardless of gender. Skin whitening is a functional expression that brightens and brightens the skin. Scientifically, it suppresses the production of melanin in the skin layer, thereby reducing the blackening of the skin. Melanin has a function of removing harmful radicals, thus protecting skin damage of modern people who have been exposed to harmful effects for a long time in their daily lives.

반면, 자외선에 과도하게 노출된 피부의 표피는 검게 변하여 흑갈색의 색소 침착 뿐 아니라 멜라닌 전구물질 등에 의한 독성을 나타내어 세포괴사 또는 사멸, 피부노화, 피부암, 기미, 주근깨, 색소침착 등을 유발하기도 한다.On the other hand, the epidermis of the skin that is excessively exposed to ultraviolet rays turns black to show the toxicity of melanin precursors as well as dark brown pigmentation, causing cell necrosis or death, skin aging, skin cancer, blemishes, freckles, and pigmentation.

멜라닌은 지구상에 존재하는 고분자의 흑갈색 색소로 일정량 이상의 자외선을 흡수하는 방식으로 자외선으로부터 피부를 보호해 준다. 이러한 멜라닌은 햇빛, 자외선 뿐 아니라 프로스타글라딘이나 에스트로겐 등에 의하여 생성되며 티로시나제(Tyrosinase) 효소 활성화에도 영향을 미친다. 티로시나제 활성은 기미 또는 주근깨 발생에 원인으로 작용하기도 한다.Melanin is a dark brown pigment of a polymer present on the earth, which protects the skin from ultraviolet rays by absorbing more than a certain amount of ultraviolet rays. The melanin is produced not only by sunlight and ultraviolet rays, but also by prostaglandin or estrogen, and also affects the activation of the tyrosinase enzyme. Tyrosinase activity may also cause blemishes or freckles.

이는 세포에 존재하는 타이로시나아제(Tyrosinase)에 의해 멜라노사이트라에서 L-타이로신(Tyrosine)이 산화되면서 3,4-다이하이드록시페닐알라닌(3,4-dihydroxyphenylalanine or L-DOPA)을 형성하게 되고, 이는 다시 도파퀴논(Dopaquinone)이라는 물질을 생성시키게 된다. 생성된 도파퀴논은 스스로 산화반응을 통하여 멜라닌을 합성하게 된다. It forms 3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) by oxidizing L-tyrosine in melanocytes by tyrosinase present in the cells. , Which in turn produces a substance called dopaquinone. The produced dopaquinone synthesizes melanin through an oxidation reaction itself.

따라서 자외선 증가와 노출시간이 길어짐에 따라 피부 내의 색소침착 및 피부노화를 예방하기 위하여 멜라닌 생성을 억제하기 위한 연구개발이 이루어져야 하며, 특히 천연물로부터 식품 및 의약품, 화장품에 사용되는 항산화 및 피부미백을 보이는 원료를 찾고자 하는 움직임이 현대 사회에서 더욱더 증가하고 있기 때문에 생체에 안전하고 기존의 항산화 및 미백활성 물질보다 더 우수한 물질의 개발이 절실히 요망되고 있다.Therefore, research and development must be conducted to suppress melanin production in order to prevent pigmentation and skin aging in the skin as the ultraviolet light increases and the exposure time increases, especially showing antioxidant and skin whitening used in food, medicine, and cosmetics from natural products. Since the movement to find raw materials is increasing in modern society, it is urgently desired to develop a material that is safe for living organisms and superior to existing antioxidant and whitening active materials.

한국 등록특허 제10-1772494호(2017.08.30.공고). "괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물 및 그 제조방법"Korean Registered Patent No. 10-1772494 (announced on August 30, 2017). "Whitening composition containing hoesaeng amethyst extract and its manufacturing method"

본 발명은 임계압력과 온도이상, 즉 초임계점 이상의 상태로 존재할 때 초임계 유체를 추출용매로 사용하여 간헐적 연속 회분식 초임계추출 시스템을 이용하여 효과적인 피부노화 예방 및 피부미백 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 초임계추출법에 의해 제조된 괭생이모자반 추출물을 수득하여 항산화 및 피부미백 효과가 우수하고 피부에 부작용이 없는 괭생이모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물을 제공하는데 목적이 있다.The present invention relates to a cosmetic composition excellent in effective skin aging prevention and skin whitening effect by using an intermittent continuous batch supercritical extraction system using a supercritical fluid as an extraction solvent when present at a critical pressure and temperature or higher, that is, a supercritical point or higher. In detail, it provides an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing an extract of Hoeseng amoebaban, which has excellent antioxidant and skin whitening effects, and has no side effects on skin by obtaining a Hoeseng amajaban extract produced by a supercritical extraction method. There is a purpose.

또한, 본 발명은 초임계추출을 통해 수득한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제공함으로써, 항산화 활성증진, Tyrosinase 활성 저해 및 Melanin 생성을 억제하여 피부노화를 예방하고 피부미백 증진 효과가 우수한 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물을 제공하는데 목적이 있다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition containing the extract of hoesam imovan obtained through supercritical extraction, which prevents skin aging by inhibiting antioxidant activity, inhibiting tyrosinase activity, and producing melanin, and has excellent skin whitening promoting effect. An object of the present invention is to provide an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban using the critical fluid extraction method.

상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 본 발명은 간헐적 연속 회분식 초임계추출법에 의하여 제조된 괭생이모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물을 제공한다.In order to solve the problems as described above, the present invention is an antioxidant containing the extract of hoejaengjaja using the supercritical fluid extraction method, characterized in that it contains an extract of hoejaengjajaban prepared by the intermittent continuous batch supercritical extraction method as an active ingredient or Provides a skin whitening cosmetic composition.

또한, 상기 연속 회분식 초임계추출법은 30 내지 100℃ 및 100 내지 600 기압에서 이산화탄소를 이용하여 실시되는 것을 특징으로 하는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the continuous batch supercritical extraction method provides an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban using a supercritical fluid extraction method characterized in that it is carried out using carbon dioxide at 30 to 100°C and 100 to 600 atmospheres. do.

또한, 상기 연속 회분식 초임계추출법은 이산화탄소에 추가적으로 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산 및 디에틸에테르 중에서 선택되는 어느 하나 또는 그 이상을 혼합한 혼합유체 중 어느 하나를 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the continuous batch supercritical extraction method is characterized in that, in addition to carbon dioxide, any one of a mixed fluid mixed with any one or more selected from ethanol, methanol, water, ethyl acetate, hexane and diethyl ether is used. It provides an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban using supercritical fluid extraction method.

또한, 상기 괭생이모자반 추출물의 함량은 상기 조성물의 총 중량에 대해서 0.0001 ~ 1 중량%인 것을 특징으로 하는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the content of the extract of hoesaengjapanja provides an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing hoesaengjajaban extract using a supercritical fluid extraction method, characterized in that it is 0.0001 to 1% by weight relative to the total weight of the composition.

또한, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스파운데이션, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 팩, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징포옴, 클렌징워터, 수분크림, 발효크림, 앰플, 샴푸, 린스, 스프레이 또는 파우더로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상으로 제형화되는 것을 특징으로 하는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the cosmetic composition is a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, soft lotion, nutrition lotion, nutrition cream , Massage cream, essence, pack, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, moisture cream, fermentation cream, ampoule, shampoo, conditioner, spray or powder It provides an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban using supercritical fluid extraction method.

상기와 같이 본 발명은 연속 회분식 초임계 추출법에 의해 제조된 괭생이모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 초임계추출법에 의해 제조된 괭생이모자반 추출물을 수득하여 항산화 및 피부미백 효과가 우수하고 피부에 부작용이 없는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물을 제공하는 효과가 있다.As described above, the present invention relates to an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing as an active ingredient, a hoesaengjaban extract produced by a continuous batch supercritical extraction method, and in detail, a hoesaengjajaban extract prepared by a supercritical extraction method. It has the effect of providing an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of Hoeseng aza using the supercritical fluid extraction method, which has excellent antioxidant and skin whitening effects and has no side effects on the skin.

또한, 본 발명은 괭생이모자반 초임계추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제공함으로써, 항산화 활성증진, Tyrosinase 활성 저해 및 Melanin 생성을 억제하여 항산화 및 피부미백효과가 우수한 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물을 제공하는 효과가 있다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition containing a supercritical extract of Hoeseng amethyceps, thereby inhibiting antioxidant activity, inhibiting Tyrosinase activity and inhibiting melanin production, and extracting Hoeseng Imoban extract using a supercritical fluid extraction method with excellent antioxidant and skin whitening effects. It has the effect of providing an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing.

도 1은 괭생이모자반의 추출법에 따른 DPPH 자유라디칼 소거활성을 나타낸 그래프이다.
도 2는 괭생이모자반의 추출법에 따른 Tyrosinase 억제 활성을 나타낸 그래프이다.
도 3은 괭생이모자반의 추출법에 따른 Melanin 생성 억제 활성을 나타낸 그래프이다.
1 is a graph showing the free radical scavenging activity of DPPH according to the extraction method of hoesaengjabanban.
Figure 2 is a graph showing the tyrosinase inhibitory activity according to the extraction method of hoesaengjabanban.
Figure 3 is a graph showing the inhibitory activity of melanin production according to the extraction method of hoesaengjabanban.

본 발명은 항산화 또는 피부미백 효과가 우수한 추출액을 확립하기 위한 추출법을 기초로 연구하였다. 그 결과, 초임계 유체 추출법을 통해 제조된 괭생이모자반 추출물이 항산화 활성증진, Tyrosinase 활성 저해 및 Melanin 생성을 억제하여 항산화 및 피부미백 효과를 나타냄을 확인하여 본 발명을 완성하였다.The present invention was studied based on an extraction method for establishing an extract excellent in antioxidant or skin whitening effects. As a result, the present invention was completed by confirming that the extract of Hoesengimojaban prepared through the supercritical fluid extraction method exhibits antioxidant and skin whitening effects by inhibiting antioxidant activity, inhibiting tyrosinase activity and producing melanin.

괭생이모자반(Sargassum horneri)은 갈조강 모자반목, 모자반과에 속하는 황갈색의 식물로 조하대에 군락을 형성하는 1년생의 해중림 구성해조이다. 주로 우리나라 동해안 및 남해안에 분포하고 있으며, 일본 해역 쪽으로 해류에 의해 일본 전 연안과 중국에도 보편적으로 분포하는 종이다. 특히, 다량의 fatty acid, omega-6, fucoidan, fucosterol, fucoxanthin 외에도 다양한 생리활성물질을 함유하고 있어 항산화, 항암, 항염, 저지질혈증 완화, 자외선차단, 항당뇨, 뼈의 신지대사, 오염방지 활성 등 다양한 효능활성을 지니고 있는 것으로 보고되고 있다.Sargassum horneri is a yellowish-brown plant belonging to the brown algae of the brown algae, the algae family, and is a year-round seaweed that forms a colony in the subtidal zone. It is mainly distributed in the east and south coasts of Korea, and is a species distributed universally in all coasts of Japan and China by currents toward the Japanese waters. In particular, it contains a large amount of fatty acids, omega-6, fucoidan, fucosterol, and fucoxanthin, as well as various physiologically active substances, so it has antioxidant, anti-cancer, anti-inflammatory, hypolipidemic, sunscreen, anti-diabetes, bone metabolism, and anti-pollution activity. It has been reported to have various efficacy activities.

특히, 다양한 해양생물의 특성과 유사하게 괭생이모자반의 경우 자외선과 건조한 환경속에서 조직과 세포의 손상에 대응할 수 있는 다양한 생체기작을 지니고 있어 자외선 차단 및 다당체로부터 보습성분을 생산하는 등 고부가가치의 기능성 소재로써 활용 가능성을 보이고 있으며, 육지생물이 아닌 해양자원에서 미래의 신소재를 활용한 사업이 지속적으로 늘어날 것으로 사료된다. In particular, similar to the characteristics of various marine organisms, hoejaengjapanja has a variety of biomechanisms that can respond to tissue and cell damage in a dry environment with ultraviolet rays, so it has high added value, such as blocking UV rays and producing moisturizing ingredients from polysaccharides. It is showing the possibility of utilization as a functional material, and it is thought that projects utilizing new materials of the future from marine resources, not land creatures, will continue to increase.

(shin YS. 2018. The research for cosmetic component about Algae complex including of Sargassum horneri and Enteromorpha prolifera extracts. The Korean Society of Cosmetics and Cosmetology. 8(2) : 135 - 147), (Hwang EK, Lee SJ, Ha DS and Park CS. 2016. Sargassum Golden Tides in the Shinan-gun and Jeju Island, Korea. Korean Journal of Fisheries and Aquatics Sciences. 49(5) : 689-693), (Li Y, Zhou C, Yan X, Zhang J, Xu J. 2016. Simultaneous analysis of ten phytohormones in Sargassum horneri by high-performance liquid chromatography with electrospray ionization tandem mass spectrometry. Journal of Separation Science. 1-10)(shin YS. 2018.The research for cosmetic component about Algae complex including of Sargassum horneri and Enteromorpha prolifera extracts.The Korean Society of Cosmetics and Cosmetology. 8(2): 135-147), (Hwang EK, Lee SJ, Ha DS and Park CS. 2016. Sargassum Golden Tides in the Shinan-gun and Jeju Island, Korea.Korean Journal of Fisheries and Aquatics Sciences. 49(5): 689-693), (Li Y, Zhou C, Yan X, Zhang J , Xu J. 2016.Simultaneous analysis of ten phytohormones in Sargassum horneri by high-performance liquid chromatography with electrospray ionization tandem mass spectrometry.Journal of Separation Science. 1-10)

초임계 유체는 기체가 고온 고압 조건에서 임계점에 도달하였을 때 갖는 액체 및 기체의 성질을 지니고 있으며 화학적으로 비극성 용매와 유사한 극성을 지니고 있다 (J. Chromatogr., 479, 200-205, 1998). 이러한 특성으로 인해 초임계 유체는 지용성 물질의 추출에 사용되고 있다. 초임계 유체를 이용한 예로는 토양에서 석유탄화 수소 화합물 및 폴리염소 화합물의 추출 (J. Chromatogr.A., 845, 357-363, 1999), 식용 지방 중 방향족 탄화수소 화합물의 추출 (J. Chromatogr.A., 882, 245-253, 2000), 우유 지질성분중 지용성 비타민의 추출 (J.Chromatogr.A., 874, 275-283, 2000) 등이 있다.Supercritical fluids have the properties of liquids and gases that the gas has when it reaches a critical point under high temperature and high pressure conditions, and chemically have a polarity similar to a non-polar solvent (J. Chromatogr., 479, 200-205, 1998). Due to these properties, supercritical fluids are used for extraction of fat-soluble materials. Examples using supercritical fluids include extraction of petroleum hydrocarbon compounds and polychlorine compounds from soil (J. Chromatogr.A., 845, 357-363, 1999), extraction of aromatic hydrocarbon compounds from edible fats (J. Chromatogr.A ., 882, 245-253, 2000), and extraction of fat-soluble vitamins from milk lipid components (J.Chromatogr.A., 874, 275-283, 2000).

본 발명은 괭생이모자반을 연속 회분식 초임계 추출법으로 추출하여 수득한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.The present invention is characterized in that it is an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban obtained by extracting hoesaengjabanja by continuous batch supercritical extraction method.

본 발명에서는 항산화 및 피부미백 효과와 유효성을 극대화시키기 위해서 연속 회분식 초임계 추출법을 사용하였으며, 또한 유효성분의 피부흡수 효율을 높여 항산화 및 피부미백 효과를 높이기 위해 본 발명에서는 괭생이모자반 초임계추출액을 항산화 및 피부미백 화장료 조성물로 사용하여 항산화 활성, Tyrosinase 활성 저해, Melanin 합성 억제를 통하여 효과를 극대화시켰다.In the present invention, a continuous batch supercritical extraction method was used in order to maximize the antioxidant and skin whitening effects and effectiveness, and in order to enhance the antioxidant and skin whitening effects by increasing the skin absorption efficiency of the active ingredients, in the present invention, the supercritical extract of Hoeseng's cap It was used as an antioxidant and skin whitening cosmetic composition to maximize the effect through antioxidant activity, inhibition of tyrosinase activity, and inhibition of melanin synthesis.

상기 괭생이모자반의 바람직한 건조 중량비는 괭생이모자반 5 내지 30 중량%가 되는 것이 바람직하며, 상기 연속 회분식 초임계 추출법을 적용하여 이산화탄소에 추가적으로 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산 및 디에틸에테르 중에서 선택되는 하나 또는 그 이상을 혼합한 혼합유체 중 어느 하나를 선택하여 사용하는 것이 바람직하다.The preferred dry weight ratio of the hoesan yibanban is preferably 5 to 30% by weight of the hoesaengjaban, by applying the continuous batch supercritical extraction method in addition to carbon dioxide in ethanol, methanol, water, ethyl acetate, hexane and diethyl ether It is preferable to use any one of the mixed fluids in which one or more selected ones are mixed.

본 발명의 추출된 시료는 이산화탄소를 함유하고 있으나 간헐적 연속 회분식 초임계추출시스템을 통해 초임계상의 이산화탄소는 기체로 전환되었다가 다시 응축기를 통과하면서 액화이산화탄소로 전환되는데 이는 분리조로 분리되어 재사용이 가능하고 추출물과 분리가 용이하다.The extracted sample of the present invention contains carbon dioxide, but through the intermittent continuous batch supercritical extraction system, the supercritical carbon dioxide is converted into gas and then converted into liquefied carbon dioxide by passing through a condenser, which can be reused as a separation tank. It is easy to separate from the extract.

추출의 원물인 괭생이모자반은 건조하여 사용하거나 그대로 사용할 수 있으며, 바람직하게는 자연건조 또는 열풍건조하여 사용하는 것이 적절하고, 가장 바람직하게는 열풍건조를 사용한다.The raw material of the extract, hoesaengjabanban, can be dried or used as it is. Preferably, it is appropriate to use it by natural drying or hot air drying, and most preferably by using hot air drying.

발명의 하기 특정 제조예를 참조하여 연속 회분식 초임계추출법에 의한 괭생이모자반 추출물의 제조방법을 설명하면 다음과 같다: 괭생이모자반 원물을 수분함량이 10% 이하로 열풍건조 한 뒤, 건조된 원물을 2 mm로 조분쇄한다.Referring to the following specific manufacturing example of the invention, a method for preparing the extract of the hoejaengjapan using the continuous batch supercritical extraction method is as follows: the haejajajajajaja raw material is dried after the hot air drying to less than 10% moisture content. Crushed to 2 mm.

분쇄된 원물을 초임계 추출용기에 투입하고 고압 펌프를 이용하여 이산화탄소에 일정한 압력이 유지되도록 일정한 온도를 가하여 초임계유체 상태를 유지시켜 목적물질의 추출을 통해 추출물을 받는다. 또는, 공용매 예를 들면, 에탄올을 이산화탄소의 보조용매로 사용하여 함께 공급하여 추출한다.The pulverized raw material is put into a supercritical extraction container and a supercritical fluid is maintained by applying a constant temperature to the carbon dioxide by using a high pressure pump to receive the extract through extraction of the target material. Alternatively, co-solvent, for example, ethanol is used as a co-solvent for carbon dioxide to supply and extract together.

본 발명의 바람직한 일 구현예에 따르면, 본 발명의 연속 회분식 초임계추출법은 바람직하게는 30 내지 100℃ 및 100 내지 600 기압에서 이산화탄소를 이용하여 수행되며, 보다 바람직하게는 40℃ 내지 70℃ 및 200 내지 500 기압 에서, 가장 바람직하게는 50℃ 및 400 기압에서 이산화탄소를 이용하여 수행한다.According to one preferred embodiment of the present invention, the continuous batch supercritical extraction method of the present invention is preferably performed using carbon dioxide at 30 to 100°C and 100 to 600 atm, more preferably 40 to 70°C and 200 From 500 to 500 atmospheres, most preferably at 50° C. and 400 atmospheres using carbon dioxide.

본 발명의 바람직한 일 구현예에 따르면, 본 발명의 연속 회분식 초임계 추출법은 이산화탄소에 추가적으로 공용매 또는 보조용매를 혼합한 혼합유체를 사용하여 수행한다.According to a preferred embodiment of the present invention, the continuous batch supercritical extraction method of the present invention is performed using a mixed fluid in which a co-solvent or a co-solvent is additionally mixed with carbon dioxide.

상기 공용매는 초임계 유체 추출법을 적용하여 이산화탄소에 추가적으로 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산 및 디에틸에테르 중에서 선택되는 하나 또는 그 이상을 혼합한 혼합유체 중 어느 하나를 선택하여 사용하는 것이 바람직하다.The co-solvent is preferably used by selecting any one of mixed fluids in which one or more selected from ethanol, methanol, water, ethyl acetate, hexane and diethyl ether is added to carbon dioxide by applying a supercritical fluid extraction method. .

바람직하게는 80% 내지 100% 에탄올이며, 가장 바람직하게는 95% 에탄올(또는 주정알코올)이다.It is preferably 80% to 100% ethanol, and most preferably 95% ethanol (or alcohol).

상기 혼합유체는 총 부피를 기준으로 하여 보조용매를 3 내지 40 부피% 포함하며, 가장 바람직하게는 10 부피% 포함한다.The mixed fluid contains 3 to 40% by volume of the co-solvent based on the total volume, and most preferably 10% by volume.

또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출법에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 본 발명의 조성물의 유효성분인 괭생이모자반은 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출하거나 괭생이모자반을 상기 용매를 이용하여 추출한 후, 이를 혼합하여 제조한 혼합추출물도 본 발명의 괭생이모자반 추출물에 범위로 포괄할 수 있다.In addition, the extract of the present invention includes not only the extract by the above-described extraction method, but also an extract that has been subjected to a conventional purification process. For example, the active ingredient of the composition of the present invention, hoesaengjaban, is a solvent selected from the group consisting of water, anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, acetone, ethyl acetate, butyl acetate and 1,3-butylene glycol. Extracted using or extracting hoesaengjaban using the above solvent, the mixed extract prepared by mixing it can also be covered in a range of hoesaengjaban extract of the present invention.

본 발명의 노루오줌 추출물은 감압농축기를 이용하여 농축진액의 성상을 나타내나 감압 증류, 동결 건조 또는 분무 건조 등의 추가과정을 수행함으로써 분말 상태로 제조될 수 있다.The roe-pee extract of the present invention may be prepared in a powder state by performing a further process such as distillation under reduced pressure, freeze drying or spray drying, but showing the properties of concentrated concentrate using a reduced pressure concentrator.

본 발명의 화장료 조성물은 항산화 활성을 증진시키고 tyrosinase 및 Melanin 생성을 억제하여 피부미백 효과를 증진시키며, 이와 같은 사실은 하기의 실시예에 명시되어 있다.The cosmetic composition of the present invention enhances antioxidant activity and inhibits tyrosinase and melanan production to enhance the skin whitening effect, and such facts are specified in the following examples.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 괭생이모자반을 초임계 유체 추출한 추출액 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 색소 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.The components included in the cosmetic composition of the present invention include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the extract obtained by supercritical fluid extraction of hoesan imijaban as an active ingredient, for example, antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments, pigments And conventional auxiliaries such as perfumes, and carriers.

본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 팩, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징포옴, 클렌징워터, 수분크림, 발효크림, 앰플, 샴푸, 린스, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, It can be formulated as an oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray, but is not limited thereto. More specifically, the formulation of flexible lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage cream, essence, pack, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, moisture cream, fermentation cream, ampoule, shampoo, rinse, spray or powder Can be manufactured.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, any one or more of animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, trakant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide as carrier components It can be used by selecting.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane /Propellant such as butane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 폴리옥시에칠렌 경화피마자유, 글리세롤, 글리세린, 지방족 에스테르, 페녹시에탄올, 트리에탄올아민, 폴리에틸렌 글리콜, 밀납, 폴리솔베이트 60, 솔비탄세스퀴오레이드, 파라핀, 소르비탄 스테아레이트, 친유형 모노스테아린산 글리세린, 스테아린산, 글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트, 카르복시폴리머, 시토스테롤, 폴리글리세릴 2-올레이트, 세라마이드, 콜레스테롤, 스테아레스-4, 디세틸포스페이트, 마카다미아 오일, 카르복시비닐폴리머, 산탄검 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizing agent or emulsifying agent is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, butyl Len glycol, 1,3-butyl glycol oil, polyoxyethylene cured castor oil, glycerol, glycerin, aliphatic esters, phenoxyethanol, triethanolamine, polyethylene glycol, beeswax, polysorbate 60, sorbitan sesquioleide, paraffin, Sorbitan stearate, lipophilic monostearic acid glycerin, stearic acid, glyceryl stearate/page-400 stearate, carboxypolymer, sitosterol, polyglyceryl 2-oleate, ceramide, cholesterol, steareth-4, disetyl phosphate , Macadamia oil, carboxyvinyl polymer, xanthan gum or any one or more of fatty acid esters of sorbitan.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올, 글리세린, 부틸렌글리콜 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 하이드록시에틸셀룰로오즈, 소디움히아루로네이트, 페녹시에탄올, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 스테아린산, 세틸알코올, 글리세릴모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트, 솔비탄세스퀴올레이트, 글리세릴모노스테아레이트 /글리세릴스테아레이트/폴리옥시에틸렌스테아레이트, 왁스, 파리핀, 스쿠알란, 카프릴릭 /카프릭트리글리세라이드, 카르복시비닐폴리머, 트리에탄올아민, 아가 또는 트라칸트 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, as a carrier component, liquid diluents such as water, ethanol, glycerin, butylene glycol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester Same suspension, microcrystalline cellulose, hydroxyethylcellulose, sodium hyaluronate, phenoxyethanol, aluminum metahydroxide, bentonite, stearic acid, cetyl alcohol, glyceryl monostearate, polyoxyethylene sorbitan monostearate , Sorbitan sesquioleate, glyceryl monostearate/glyceryl stearate/polyoxyethylene stearate, wax, parpin, squalane, caprylic/capric triglyceride, carboxyvinyl polymer, triethanolamine, agar or tra Any one or more of Kant can be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivatives, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide as a carrier component Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters can be selected and used.

이하, 본 발명의 제조예, 실시예, 비교예, 시험예 및 제형예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, it will be described in detail by the production examples, examples, comparative examples, test examples and formulation examples of the present invention.

하기 제조예, 실시예, 비교예, 시험예 및 제형예는 본 발명을 예시하는 것일뿐, 본 발명이 하기 제조예, 실시예, 비교예, 시험예 및 제형예에 한정되는 것이 아니다.The following Preparation Examples, Examples, Comparative Examples, Test Examples, and Formulation Examples are merely illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following Preparation Examples, Examples, Comparative Examples, Test Examples, and Formulation Examples.

[제조예] 유기용매 기법을 적용한 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물의 제조[Preparation Example] Preparation of Hoeseng Imojaban Extract Using Extraction Method Using Organic Solvent Technique

괭생이모자반을 정제수로 세척하고 건조한 다음 2 cm 이내로 세절하여 세절된 시료를 얻었다. 세절된 괭생이모자반이 1 kg/L가 되도록 50% 에틸알코올을 가하고 환류중탕 조건에서 60℃, 4시간동안 환류추출하고 냉침하였다. 그 후, 6 ㎛의 여과지(와트만(whatman) #3)로 여과한 후 회전식 감압농축 및 동결 건조하여 효능 평가 시에 사용하였다.The hoesaengjabanban was washed with purified water, dried, and then shredded within 2 cm to obtain a shredded sample. 50% ethyl alcohol was added so that the shredded hoejaengjapan was 1 kg/L, refluxed for 4 hours under reflux conditions, and cooled. After that, it was filtered with 6 μm filter paper (Whatman #3), and then rotary decompressed and freeze-dried to evaluate the efficacy.

[[ 실시예Example ] ] 초임계Supercritical 유체 추출법을 이용한 Using fluid extraction 괭생이모자반Aunt's Hat 추출물의 제조 Preparation of extract

괭생이모자반을 정제수로 세척하고 수분함량이 10% 이하로 유지되도록 건조한 다음 2 mm의 입자크기로 분쇄하여 시료를 얻었다.The hoesaengjabanban was washed with purified water, dried to maintain the moisture content of 10% or less, and then pulverized to a particle size of 2 mm to obtain a sample.

분쇄된 괭생이모자반 원물 1 kg을 투입하고 이산화탄소를 온도 50℃, 압력 400 기압의 조건이 되도록 준비한 뒤 30분간 등압을 유지하였다. 30분 후 초임계 보조용매로 95% 에탄올을 10 부피% 로 혼합하여 이산화탄소와 함께 120분간 흘려보냈다. 유속은 이산화탄소와 보조용매 각각 3 L/min, 0.3 L/min으로 설정하였으며, 보조용매 주입이 완료된 후 다시 120분간 이산화탄소만을 공급하여 총 270분 동안 추임계추출을 진행하고 추출액을 확보하였다. 확보된 추출액은 회전식 감압농축기를 사용하여 총 25.0 g의 초임계 괭생이모자반 추출물 을 확보하였다.1 kg of the raw material of the crushed hoejaengjapan was added, and the carbon dioxide was prepared to be at a temperature of 50° C. and a pressure of 400 atm, and the isostatic pressure was maintained for 30 minutes. After 30 minutes, 95% ethanol was mixed with 10% by volume as a supercritical co-solvent and flowed with carbon dioxide for 120 minutes. The flow rate was set to 3 L/min and 0.3 L/min, respectively, for the carbon dioxide and the co-solvent, and after the co-solvent injection was completed, only the carbon dioxide was supplied for 120 minutes to proceed with the extraction of the subcritical system for a total of 270 minutes and to obtain an extract. The obtained extract was obtained using a rotary decompression concentrator to obtain a total of 25.0 g of supercritical hoesaengjaban extract.

[[ 비교예Comparative example ] ] 열수추출법을Hot water extraction method 이용한 Used 괭생이Hoeseng 모자반추출물의 제조 Preparation of single-hat extract

괭생이모자반을 정제수로 세척하고 건조한 다음 2 cm 이내로 세절하여 세절된 시료를 얻었다. 세절된 괭생이모자반이 1 kg/L가 되도록 정제수를 가하고 환류중탕 조건에서 60℃, 4시간 동안 환류추출하고 냉침하였다. 그 후, 6 ㎛의 여과지(와트만(whatman) #3)로 여과한 후 회전식 감압농축 및 동결 건조하여 효능 평가 시에 사용하였다.The hoesaengjabanban was washed with purified water, dried, and then shredded within 2 cm to obtain a shredded sample. Purified water was added so that the shredded hoejaengjaban was 1 kg/L, reflux was extracted for 4 hours at 60°C under reflux and cold-cooled. After that, it was filtered with 6 μm filter paper (Whatman #3), and then rotary decompressed and freeze-dried to evaluate the efficacy.

[[ 시험예Test example 1] One] DPPHDPPH (2,2-(2,2- DiphenylDiphenyl -1--One- picrylhydrazylpicrylhydrazyl ) 라디칼 ) Radical 소거능Erasing ability

DPPH 라디칼에 대한 소거능은 각 용매별 분획물 40 ㎕와 1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl (DPPH)용액 160 ㎕를 가하여 잘 혼합한 후 암소에서 30분간 반응시킨 후 518 nm에서 흡광도를 측정하여 농도에 따른 DPPH 라디칼 소거능을 확인하였다. 시료 무 첨가군과 비교하여 자유라디칼 소거활성을 백분율로 나타냈다.The scavenging ability for DPPH radicals was well mixed by adding 40 µl of each solvent fraction and 160 µl of 1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl (DPPH) solution, reacted for 30 minutes in a cow, and measured the absorbance at 518 nm. The DPPH radical scavenging ability was confirmed. The free radical scavenging activity was expressed as a percentage compared to the sample-free group.

괭생이모자반Aunt's Hat 추출물에 의한 By extract DPPHDPPH 라디칼 Radical 소거능Erasing ability 확인 Confirm
구분

division
괭생이모자반 추출물 농도(㎍/㎖)Concentration of hoesaengjabanban extract(㎍/㎖)
00 1010 5050 100100 DPPH radical scavenging(%)DPPH radical scavenging(%) 실시예Example 00 12.48±0.8612.48±0.86 23.86±1.2523.86±1.25 47.12±0.8747.12±0.87 제조예Manufacturing example 00 8.68±0.418.68±0.41 16.02±0.6316.02±0.63 32.67±0.5632.67±0.56 비교예Comparative example 00 3.49±0.463.49±0.46 11.75±0.4511.75±0.45 21.83±0.5821.83±0.58 아스코르브산Ascorbic acid -- -- -- 68.17±0.6768.17±0.67

상기 표 1에서 보는 바와 같이, 본 발명의 실시예는 제조예와 비교예에서 제조된 괭생이모자반 추출물보다 DPPH 라디칼 소거능력이 우수한 것으로 확인되었다.As shown in Table 1, it was confirmed that the embodiment of the present invention has superior DPPH radical scavenging ability than the hoesin azaban extract prepared in Preparation Example and Comparative Example.

[[ 시험예Test example 2] 2] TyrosinaseTyrosinase 활성 저해 Active inhibition

티로시나제(Tyrosinase) 활성 저해실험은 해당물질의 멜라닌 활성 저해 효과를 확인하기 위한 실험으로 DOPA chrome을 비색법에 의해 측정하는 야기(Yagi) 등의 방법을 응용하여 측정하였다.Tyrosinase (Tyrosinase) activity inhibition experiment is to determine the effect of inhibiting the melanin activity of the corresponding material was measured by applying a method such as Yagi (Yagi) to measure the DOPA chrome by colorimetric method.

본 실험은 96-웰플레이트 내 0.1M 인산완충액(phosphate buffer pH6.5) 120 ㎕에 1.5mM L-티로신(L-Tyrosine) 용액 40 ㎕를 첨가하여 반응용액을 제조하였으며, 반응용액에 시료용액 10 ㎕을 넣은 후 5분간 반응시킨 후, 머쉬룸 티로시나제 (mushroom tyrosinase)(100 unit/㎖) 10 ㎕을 첨가하여 37℃에서 10분간 효소 반응을 진행하였다. 10분 경과 후 반응액 중에 생성된 도파크롬을 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 490 ㎚에서 측정하였으며, 시험결과에 대한 비교대상으로 알부틴(Arbutin)을 양성대조구로 동일 농도로 사용하였다.In this experiment, a reaction solution was prepared by adding 40 μl of a 1.5 mM L-Tyrosine solution to 120 μl of 0.1M phosphate buffer pH6.5 in a 96-well plate, and sample solution 10 to the reaction solution. After adding µl and reacting for 5 minutes, 10 µl of Mushroom tyrosinase (100 unit/ml) was added and enzyme reaction was performed at 37°C for 10 minutes. After 10 minutes, the dopachrome generated in the reaction solution was measured at 490 nm using a microplate counter, and Arbutin was used as a positive control in the same concentration as a comparison target for the test results.

[계산식 2][Calculation formula 2]

Figure pat00001
Figure pat00001

괭생이모자반Aunt's Hat 추출물에 의한 By extract 티로시나제Tyrosinase 활성 저해 확인 Active inhibition confirmation
구분

division
괭생이모자반 추출물 농도 (㎍/㎖)Concentration of hoesaengjabanban extract (㎍/㎖)
00 1010 50 50 100100 Tyrosinase inhibition rate(%) Tyrosinase inhibition rate (%) 실시예Example 00 18.24±0.8118.24±0.81 27.45±0.3527.45±0.35 42.57±0.6142.57±0.61 제조예Manufacturing example 00 16.50±0.5216.50±0.52 22.93±0.4122.93±0.41 29.83±0.9529.83±0.95 비교예Comparative example 00 7.45±0.637.45±0.63 12.36±0.6212.36±0.62 18.71±1.1218.71±1.12 알부틴Arbutin -- - - -- 48.75±0.6748.75±0.67

상기 표 2에서 보는 바와 같이, 본 발명의 실시예는 제조예와 비교예에서 제조된 괭생이모자반 추출물보다 티로시나제의 활성 억제율이 농도의존적으로 감소하는 경향을 확인할 수 있었다(동일 농도 대비).As shown in Table 2, the Examples of the present invention was able to confirm the tendency of the activity inhibitory rate of tyrosinase to decrease in a concentration-dependent manner than the extract of Hoeseng amoeba prepared in Preparation Examples and Comparative Examples (compared to the same concentration).

[시험예 3] Melanin contents 합성 억제[Test Example 3] Melanin contents synthesis inhibition

B16F10 마우스 멜라노마 세포를 6-웰플레이트에 3.5Х104세포/웰 농도로 분주하여 24시간 배양시킨 후, 각 웰에 α-MSH(melanocyte stimulating hormone)와 농도별로 제조한 실시예, 제조예, 비교예의 시료를 처리하였다. 48시간 배양한 후 인산완충액(phoshate buffer saline, PBS)으로 2회 세척하여 배지를 제거하고 부착된 세포는 E-P 튜브로 옮긴 후 원심 분리하여 배양세포 펠렛(pellet)을 얻었다. 침전된 B16F10 멜라노마 세포의 형상을 촬영하고, DMSO가 첨가된 1N NaOH용액을 60℃ 에서 1시간 동안 멜라닌을 용해시킨 후 96-웰플레이트에 200 ㎕씩 분주하여 405 nm 에서 흡광도를 측정하였다.B16F10 mouse melanoma cells were cultured in a 6-well plate at a concentration of 3.5Х10 4 cells/well for 24 hours, and then, each well was prepared according to the concentration of α-MSH (melanocyte stimulating hormone) and prepared, prepared, compared Example samples were processed. After incubation for 48 hours, the medium was removed by washing twice with phosphate buffer saline (PBS), and the attached cells were transferred to an EP tube and centrifuged to obtain culture cell pellets. The shape of the precipitated B16F10 melanoma cells was photographed, and 1N NaOH solution added with DMSO was dissolved in melanin at 60°C for 1 hour, and then 200 μl was dispensed in 96-well plates to measure absorbance at 405 nm.

괭생이모자반 추출물에 의한 멜라닌 생성 억제율 확인Confirmation of the inhibition rate of melanin production by hoesaengjabanban extract
구분

division
괭생이모자반 추출물 농도(㎍/㎖) Concentration of hoesaengjabanban extract(㎍/㎖)
00 1010 50 50 100100 Melanin inhibition rate(%)Melanin inhibition rate (%) 실시예Example 100 100 95.68±2.6195.68±2.61 88.63±2.5388.63±2.53 79.50±4.2479.50±4.24 제조예Manufacturing example 100100 98.45±2.1798.45±2.17 94.49±1.1294.49±1.12 90.40±1.0790.40±1.07 비교예Comparative example 100100 99.15±4.5899.15±4.58 98.02±4.8298.02±4.82 94.63±3.2994.63±3.29 알부틴Arbutin 100100 - - -- 82.54±3.2882.54±3.28

상기 표 3의 결과와 같이 실시예와 제조예에서는 농도의존적으로 멜라닌 합성을 저해시키는 것을 확인할 수 있었으며, 특히 실시예와 같이 초임 추출기법을 적용한 괭생이모자반 추출물에서 가장 우수한 멜라닌 합성 억제효과를 확인할 수 있었다. As shown in Table 3, in Examples and Preparation Examples, it was confirmed that melanin synthesis was inhibited in a concentration-dependent manner. In particular, as shown in Example, the best melanin synthesis inhibitory effect was obtained in the extract of Hoeseng amoeba japonica using the first-time extraction method. there was.

반면, 비교예인 열수로 추출한 괭생이모자반에서는 대조군인 알부틴(Arbutin)과 비교시 동일 농도대비 멜라닌 생성 억제율이 크지 않다는 것을 확인함에 따라 멜라닌 합성저해효과가 매우 낮은 것으로 확인되었다. On the other hand, it was confirmed that the melanin synthesis inhibitory effect was very low as compared with the control group, arbutin, which was extracted with hot water, which is a comparative example, did not have a large inhibition rate of melanin production compared to the same concentration.

[[ 제형예Formulation example 1] 본 발명의 1] of the present invention 초임계Supercritical 추출법을 적용한 Extraction 괭생이모자반Aunt's Hat 추출물을 함유하는 화장수의 제조 Preparation of lotion containing extracts

실시예의 괭생이모자반 추출물을 함유한 화장료 중 화장수(스킨로션)의 제형 예는 표 4와 같다.Examples of formulations of cosmetic lotion (skin lotion) in the cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban in Example are shown in Table 4.

괭생이모자반Aunt's Hat 추출물을 함유하는 화장수의 구성 Composition of lotion containing extract 번호number 원료 Raw material 함량(중량%)Content (% by weight) 1One 괭생이모자판 추출액(실시예) Hoeseng aunt's keyboard extract (Example) 0.01 0.01 22 글리세린 glycerin 3.0 3.0 33 부틸렌 글리콜 Butylene glycol 2.0 2.0 44 프로필렌 글리콜 Propylene glycol 2.0 2.0 55 폴리올시에틸렌 경화피자마유 Polyol ethylene hardened castor oil 1.0 1.0 66 에탄올 ethanol 10.0 10.0 77 트리에탄올아민 Triethanolamine 0.1 0.1 88 방부제 antiseptic 미량 a very small amount 99 색소 Coloring 미량 a very small amount 1010 향료 Spices 미량 a very small amount 1111 정제수 Purified water 잔량 Balance

상기 화장수를 제조하기 위하여, 표 4에 기재된 11번에 2, 3, 4 및 8번을 순서대로 투입하고 교반하여 용해시킨 후, 5번을 60 ℃ 정도 가열하여 용해시킨 후, 숙성시켰다.To prepare the lotion, 2, 3, 4, and 8 were sequentially added to No. 11 listed in Table 4, stirred and dissolved, and then heated and dissolved at No. 5 at about 60° C., followed by aging.

[[ 제형예Formulation example 2] 본 발명의 2] of the present invention 초임계Supercritical 추출 법을 적용한 Extraction 괭생이모자반Aunt's Hat 추출물을 함유하는 영양로션의 제조 Preparation of nutrient lotion containing extract

실시예의 괭생이모자반 추출물을 함유한 화장료 중 영양로션의 제형예는 표 5와 같다.Examples of the formulation of the nutritional lotion in the cosmetic composition containing the extract of hoesaengjajaban in Example are shown in Table 5.

괭생이모자반Aunt's Hat 추출물을 함유하는 Containing extracts 영양로션의Nutritional lotion 구성 Configuration 번호number 원료Raw material 함량(중량%) Content (% by weight) 1One 괭생이모자반 추출액(실시예)Hoeseng aunt's egg extract (Example) 0.01 0.01 22 밀납Wax 1.0 1.0 33 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.5 1.5 44 솔비탄 세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 0.5 0.5 55 유동 파라핀Floating paraffin 10.0 10.0 66 소르비탄 스테아레이트Sorbitan stearate 1.0 1.0 77 친유형 모노스테아린산 글리세린Lipophilic monostearate glycerin 0.5 0.5 88 스테아린산Stearic acid 1.5 1.5 99 글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트Glyceryl stearate/page-400 stearate 1.0 1.0 1010 프로필렌글리콜Propylene glycol 3.0 3.0 1111 카르복시폴리머Carboxy polymer 0.1 0.1 1212 트리에탄올아민Triethanolamine 0.2 0.2 1313 방부제antiseptic 미량 a very small amount 1414 색소Coloring 미량 a very small amount 1515 향료Spices 미량 a very small amount 1616 정제수Purified water 잔량 Balance

상기 영양로션을 제조하기 위하여, 표 5에 기재된 10, 11, 13 및 16번을 혼합 교반하면서 80 ~ 85 ℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 12번을 80 ~ 85 ℃ 사이로 가열 용해한 후 유화하였다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50 ℃까지 냉각한 뒤 15번을 투입하고 45 ℃까지 냉각한 뒤 14번을 투입하고 35 ℃에 1번을 투입하여 25 ℃까지 냉각한 뒤 숙성시켰다.In order to prepare the nutrient lotion, 10, 11, 13 and 16 listed in Table 5 were mixed and stirred, heated to between 80 and 85° C., added to the production unit, and then acted as emulsifiers to 2, 3, 4, 5, 6 , 7, 8, 9 and 12 were heat-dissolved between 80 and 85°C, and then emulsified. After the emulsification, the mixture was cooled to 50°C with stirring using a stirrer, and then added 15 times. After cooling to 45°C, 14 times were added, and once at 35°C, the mixture was cooled to 25°C and aged.

[제형예 3] 본 발명의 초임계 추출법을 적용한 괭생이모자반을 함유하는 발효크림의 제조[Formulation Example 3] Preparation of fermented cream containing hoesaengjaban using the supercritical extraction method of the present invention

실시예의 괭생이모자반 추출물을 함유한 화장료 중 크림의 제형예는 표 6과 같다.Table 6 shows an example of the formulation of the cream in the cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban in Example.

괭생이모자반Aunt's Hat 추출물을 함유하는 발효크림의 구성 Composition of fermented cream containing extract 번호number 원료 Raw material 함량(중량%)Content (% by weight) 1One 괭생이모자반 추출액(실시예)Hoeseng aunt's egg extract (Example) 0.01 0.01 22 글리세린glycerin 10.0 10.0 33 프로필렌글라이콜Propylene glycol 10.0 10.0 44 1,2-헥산디올1,2-hexanediol 2.0 2.0 55 세틸알코올Cetyl alcohol 1.5 1.5 66 카나우바왁스Carnauba wax 1.5 1.5 77 피피지-14부틸에터PPG-14 butyl ether 1.5 1.5 88 마이크로크리스탈린왁스Microcrystalline wax 0.5 0.5 99 폴리소르베이트Polysorbate 0.8 0.8 1010 피이지-100스테아레이트PG-100 Stearate 0.75 0.75 1111 글리세릴스테아레이트Glyceryl stearate 0.75 0.75 1212 폴리소르베이트60Polysorbate 60 0.5 0.5 1313 암모늄아크로일디메칠타우레이트/브이피코폴리머Ammonium acroyl dimethyl taurate / VP copolymer 0.3 0.3 1414 디소듐이디티에이Disodium LED 0.05 0.05 1515 정제수Purified water 잔량 Balance

상기 발효크림을 제조하기 위하여 표 6에 기재된 2, 3, 14 및 15번을 메인비커에 혼합 교반하면서 완전 용해시킨다. 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 및 12를 80℃까지 가온하여 원료들을 용해시키고 천천히 메인비커에 투입한다. 이를 교반하면서 유화시키고 13 및 15를 메인비커에 투입시켜 천천히 골고루 저어주면서 온도를 45℃까지 냉각시킨다. 그 후 1과 4를 메인비커에 투입시키고 호모믹서기로 5분간 교반한 후 25℃까지 냉각시켜 크림제조를 종료한다. In order to prepare the fermented cream, 2, 3, 14 and 15 listed in Table 6 are completely dissolved while mixing and stirring in the main beaker. 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 and 12 are heated to 80° C. to dissolve the raw materials and slowly added to the main beaker. This was emulsified while stirring, and 13 and 15 were added to the main beaker, stirring evenly and cooling the temperature to 45°C. Thereafter, 1 and 4 were added to the main beaker, stirred for 5 minutes with a homomixer, and then cooled to 25°C to finish cream production.

[[ 제형예Formulation example 4 ] 본 발명의 4] of the present invention 초임계Supercritical 추출법을 적용한 Extraction 괭생이모자반을Hoesaengjabanban 함유하는 에센스의 제조 Preparation of containing essence

실시예의 괭생이모자반 추출물을 함유한 화장료 중 에센스의 제형예는 표 7과 같다.Table 7 shows an example of the formulation of the essence in the cosmetic composition containing the extract of hoesaengjabanban of the embodiment.

괭생이모자반Aunt's Hat 추출물을 Extract 함유하는 함유하는Containing containing 에센스의 구성 Composition of essence 번호 number 원료Raw material 함량(중량%) Content (% by weight) 1One 괭생이모자반 추출액(실시예)Hoeseng aunt's egg extract (Example) 0.01 0.01 22 시토 스테롤Cito sterol 1.7 1.7 33 폴리글리세린 2-올레이트Polyglycerin 2-oleate 1.5 1.5 44 세라마이드Ceramide 0.7 0.7 55 스테아레스-4Steareth-4 1.2 1.2 66 콜레스테롤cholesterol 1.5 1.5 77 디세틸포스페이트Dicetyl phosphate 0.4 0.4 88 농글리세린Concentrated glycerin 5.0 5.0 99 마카다미아 오일Macadamia oil 15.0 15.0 1010 카르복시비닐폴리머Carboxyvinyl polymer 0.2 0.2 1111 산탄검Shotgun 0.2 0.2 1212 방부제antiseptic 미량 a very small amount 1313 향료Spices 미량 a very small amount 1414 정제수Purified water 잔량 Balance

상기 에센스를 제조하기 위하여 표 7에 기재된 2, 3, 4, 5 및 6번을 일정한 온도에서 균질화하여 제조되는 것을 비이온계 양친매성 지질이라 칭한다. 상기 비이온계 양친매성 지질과 1, 7, 8 및 14번을 혼합하고 일정한 온도에서 균질화하여 마이크로플루이다이져를 통과하고 이어 9번을 일정한 온도에서 서서히 접종하여 균 질화한 후 다시 마이크로플루이다이져에 재차 통과시켰다 그리고 10, 11, 12 및 13 번을 투입하여 분산시켜 안정화하고 숙성시켰다.To prepare the essence, those prepared by homogenizing 2, 3, 4, 5 and 6 in Table 7 at a constant temperature are referred to as nonionic amphiphilic lipids. The nonionic amphiphilic lipid was mixed with 1, 7, 8, and 14 and homogenized at a constant temperature to pass through the microfluidizer, followed by slowly inoculating the 9 at a constant temperature, homogenized, and then the microfluidizer again It was passed through again, and 10, 11, 12, and 13 were added to disperse to stabilize and aged.

본 발명은 초임계 유체 추출법에 의해 제조된 괭생이모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물을 위한 실시예에 불과한 것으로, 본 발명은 상기 실시예에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 수 있으며, 단지 본 실시예는 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.The present invention is only an example for an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing an extract of Hoeseng imijaban prepared by a supercritical fluid extraction method as an active ingredient, and the present invention is not limited to the above example but various different forms It can be implemented as, only this embodiment is to provide the complete disclosure of the present invention, and to provide those who have ordinary knowledge in the art to which the present invention pertains to the scope of the invention. It is only defined by the scope of the claims.

Claims (5)

간헐적 연속 회분식 초임계추출법에 의해 제조된 괭생이모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물.Antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban using supercritical fluid extraction method, characterized in that it contains hoesaengjajaban extract produced by the intermittent continuous batch supercritical extraction method as an active ingredient. 제1항에 있어서,
상기 연속 회분식 초임계추출법은 30 내지 100℃ 및 100 내지 600 기압에서 이산화탄소를 이용하여 실시되는 것을 특징으로 하는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물.
According to claim 1,
The continuous batch supercritical extraction method is an antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjajaban using a supercritical fluid extraction method, characterized in that carried out using carbon dioxide at 30 to 100 ℃ and 100 to 600 atmospheres.
제1항에 있어서,
상기 연속 회분식 초임계추출법은 이산화탄소에 추가적으로 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산 및 디에틸에테르 중에서 선택되는 어느 하나 또는 그 이상을 혼합한 혼합유체 중 어느 하나를 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물.
According to claim 1,
The continuous batch supercritical extraction method is characterized in that it is used by selecting any one of a mixed fluid mixed with any one or more selected from ethanol, methanol, water, ethyl acetate, hexane and diethyl ether in addition to carbon dioxide Antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban using the critical fluid extraction method.
제1항에 있어서,
상기 괭생이모자반 추출물의 함량은 상기 조성물의 총 중량에 대해서 0.0001 ~ 1 중량%인 것을 특징으로 하는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물.
According to claim 1,
Antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban using supercritical fluid extraction method, characterized in that the content of hoesaengjaban extract is 0.0001 to 1% by weight relative to the total weight of the composition.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스파운데이션, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 팩, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징포옴, 클렌징워터, 수분크림, 발효크림, 앰플, 샴푸, 린스, 스프레이 또는 파우더로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상으로 제형화되는 것을 특징으로 하는 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물.
According to claim 1,
The cosmetic composition is a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, flexible lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage Candles characterized by being formulated with any one or more selected from the group consisting of cream, essence, pack, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, moisture cream, fermentation cream, ampoule, shampoo, rinse, spray or powder Antioxidant or skin whitening cosmetic composition containing the extract of hoesaengjaban using the critical fluid extraction method.
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