KR20200011986A

KR20200011986A - 치환된 질소 함유 화합물

Info

Publication number: KR20200011986A
Application number: KR1020197038642A
Authority: KR
Inventors: 나브나트 드냐노바 야다브; 라지브 에스. 브하이드; 라제쉬 온카르다스 보라; 프라샨타 구나가; 마노란잔 판다; 엘든 스콧 프리스틀리; 제레미 리히터
Original assignee: 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Priority date: 2017-06-01
Filing date: 2018-05-31
Publication date: 2020-02-04
Also published as: ZA201908488B; PL3630752T3; HRP20211262T1; IL271036A; MY201325A; ES2981919T3; USRE49700E1; ES2885243T3; US20180346453A1; EP3630752A1; CL2019003486A1; KR102655318B1; MX2019014411A; JP2020522490A; CO2019013589A2; DK3630752T3; SI3630752T1; US20230124468A1; CY1124479T1; IL271036B

Abstract

화학식 (I)의 화합물 또는 그의 염이 개시되며, 여기서 R¹은 화학식 (II)이고; 각각의 W는 독립적으로 NR^1b 또는 O이고; Z는 결합 또는 CHR^1d이고; R¹, R², R^d, R^3a, R^3b, L¹, B, V, Y 및 n은 본원에 정의된다. 또한, ROMK의 억제제로서의 이러한 화합물을 사용하는 방법, 및 이러한 화합물을 포함하는 제약 조성물이 개시된다. 이들 화합물은 심혈관 질환을 치료하는데 유용하다.

Description

치환된 질소 함유 화합물

본 출원은 2018년 2월 6일에 출원된 인도 가출원 번호 201811004486 및 2017년 6월 1일에 출원된 인도 가출원 번호 201711019293의 이익을 청구하고, 그의 내용이 본원에 참조로 구체적으로 포함된다.

본 발명은 일반적으로 ROMK 채널 활성의 억제제로서 유용한 치환된 질소 함유 헤테로시클릭 화합물에 관한 것이다. 치환된 질소 함유 화합물, 이러한 화합물을 포함하는 조성물, 및 그의 사용 방법이 본원에 제공된다. 본 발명은 추가로 심혈관 질환을 포함한, ROMK 채널 활성과 관련된 상태의 치료에 유용한 본 발명에 따른 적어도 1종의 화합물을 함유하는 제약 조성물에 관한 것이다.

신장 외수질성 칼륨 (ROMK, Kir1.1) 채널은 신장 K⁺ 재순환 및 분비에서 주요 역할을 하는 약한 내향 정류성 K⁺ 채널이다 (Ho et al., Nature, 1993, 362, 31-38; Shuck et al., The Journal of Biological Chemistry, 1994, 269(39), 24261-24270; Lee and Hebert, American Journal of Physiology-Renal Physiology, 1995, 268(6), F1124-F1131; Lu et al., The Journal of Biological Chemistry, 2002, 277, 37881-37887; 및 Hebert et al., Physiological Reviews, 2005, 85:319-371). 네프론의 비후 상행각 (TAL)에서, ROMK 채널 활성은 Na⁺- K⁺- 2Cl^- (NKCC2) 공동수송체에 의한 Na 및 Cl 재흡수에 필요한 K⁺ 구배를 제공한다. 원위곡세관 (DCT) 및 피질 집합관 (CCD)에서, ROMK 채널은 K⁺를 위한 주요 분비 경로를 형성하고, 그 결과, 생리학적 조건 하에 K⁺ 항상성에서 중요한 역할을 한다 (Welling and Ho, American Journal of Physiology-Renal Physiology, 2009, 297(4): F849-F863).

다수의 증거들은 ROMK 채널 활성의 억제가 나트륨이뇨, 이뇨 및 혈압 감소를 발생시킨다는 것을 나타낸다. 따라서, ROMK 억제는 고혈압, 울혈성 심부전 또는 임의의 다른 부종성 질환 상태를 앓고 있는 환자에서 혈압 조절 및 이뇨의 신규 메카니즘을 제공할 수 있다. NKCC2 수송체의 활성은 TAL 영역에서 ROMK 활성과 밀접하게 관련되고, 인간에서 ROMK의 동형접합 기능 상실 돌연변이는 NKCC2 동형접합 돌연변이의 것과 매우 유사하지만 저칼슘혈증이 보다 경도인 질환 표현형 (신장 염 소모, 증가된 알도스테론 수준, 대사성 알칼리증, 혈압 감소)을 발생시킨다 (Simon et al., Nature Genetics, 1996, 14: 152-156). 또한, 프레이밍햄 심장 연구로부터 이형접합 ROMK 돌연변이를 갖는 것으로 확인된 인간은 감소된 혈압을 나타내었다 (Ji et al., Nature Genetics, 2008, 40(5): 592-599). 인간 유전학과 유사하게, 마우스 유전학도 또한 신장 내 Na⁺ 재흡수 및 전반적인 혈압 조절에서의 ROMK의 역할을 지지한다 (Lu et al., The Journal of Biological Chemistry, 2002, 277, 37881-37887; 및 Lorenz et al., The Journal of Biological Chemistry, 2002, 277: 37871-37880). 게다가, ROMK 채널의 약리학적 차단은 래트에서는 급성 투여 시에, 및 개에서는 급성 및 지속 투여 시 둘 다에 나트륨이뇨 및 이뇨를 유도하는 것으로 밝혀졌다 (Tang et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letter, 2013, 23: 5829-5832; Garcia et al., The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2014, 348: 153-164; Walsh et al., ACS Medicinal Chemistry Letters, 2015, 6: 747-752; 및 Dajee et al., Circulation, 2014, 130: A12397). ROMK 채널은 또한 네프론의 원위 부분에서의 순 K⁺ 분비의 조절에도 연루되기 때문에, 이러한 영역에서의 ROMK 억제는 루프 및 티아지드 이뇨제와 연관된 K⁺ 소모 및 저칼륨혈증을 완화시킬 것으로 여겨진다. 급성 또는 지속 (122일까지) ROMK 길항작용은 개에서 칼륨뇨증 또는 저칼륨혈증으로 이어지지 않는다 (Garcia et al., The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2014, 348: 153-164; Walsh et al., ACS Medicinal Chemistry Letters, 2015, 6: 747-752; Dajee et al., Circulation, 2014, 130: A12397). 종합하면, 이들 데이터는 ROMK의 억제가 현재 이용가능한 루프 이뇨제와 동등하거나 그보다 우수하면서 잠재적으로 저칼륨혈증 발생률이 보다 낮은 이뇨제 효능을 생성할 수 있다는 것을 시사한다.

WO 2015/095097은 ROMK의 억제제로서 유용한 화합물을 개시한다. ROMK의 억제제로서 유용한 화합물을 개시하는 다른 공개는 WO 2010/129379, WO 2010/136144, WO 2012/058116, WO 2012/058134, WO 2013/028474, WO 2013/039802, WO 2013/062892, WO 2013/062900, WO 2013/066714, WO 2013/066717, WO 2013/066718, WO 2013/090271, WO 2014/015495, WO 2014/018764, WO 2014/085210, WO 2014/099633, WO 2014/126944, WO 2014/150132, WO 2015/017305, WO 2015/065866, WO 2015/095097, WO 2015/100147, WO 2015/105736, WO 2016/008064, WO 2016/010801, WO 2016/010802, WO2016/060941, WO2016/065582, WO2016/065602, WO2016/065603, WO2016/069426, WO2016/069427, WO2016/069428, WO2016/069430, WO2016/091042, WO2016/122994, WO2016/127358, WO2016/130444, CN105693706 및 WO2016/091042를 포함한다.

ROMK의 억제를 수반하는 치료에 의해 이익을 얻을 것으로 고려되는 수많은 상태의 관점에서, ROMK를 억제할 수 있는 새로운 화합물 및 이들 화합물을 사용하는 방법이 광범위한 환자에게 실질적인 치료 이익을 제공해야 할 것이라는 것은 즉시 명백하다.

본 발명은 ROMK의 효과적인 억제제인 것으로 밝혀진 새로운 부류의 화합물에 관한 것이다.

본 발명은 ROMK의 억제제로서 유용하고, 심혈관 질환의 치료 및 이뇨 또는 나트륨이뇨의 촉진에 유용한 화학식 (I)의 화합물을 제공한다.

본 발명은 또한 제약상 허용되는 담체 및 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 염, 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 전구약물 중 적어도 1종을 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 제약상 허용되는 담체 및 본 발명의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 제약상 허용되는 염, 또는 용매화물 중 적어도 1종을 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 ROMK의 억제를 필요로 하는 숙주에게 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 염, 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 전구약물 중 적어도 1종을 투여하는 것을 포함하는, ROMK를 억제하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 심혈관 질환의 치료를 필요로 하는 숙주에게 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 염, 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 전구약물 중 적어도 1종을 투여하는 것을 포함하는, 심혈관 질환을 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 심혈관 질환의 치료를 필요로 하는 숙주에게 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 염, 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 전구약물 중 적어도 1종을, 단독으로 또는 본 발명의 다른 화합물과 조합하여, 또는 1종 이상의 다른 작용제(들)와 조합하여 투여하는 것을 포함하는, 심혈관 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 한 실시양태는 심혈관 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 특정한 심혈관 질환은 고혈압, 관상동맥 심장 질환, 졸중, 심부전, 수축기 심부전, 확장기 심부전, 당뇨병성 심부전, 급성-대상부전성 심부전, 수술후 용적 과부하, 특발성 부종, 폐고혈압, 폐동맥 고혈압, 심기능부전, 신증후군 및 급성 신장 기능부전을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

한 실시양태는 이뇨 또는 나트륨이뇨의 촉진을 위한 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 요법에 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 전구약물을 제공한다.

본 발명은 또한 심혈관 질환의 치료 또는 이뇨 또는 나트륨이뇨의 촉진을 위한 의약의 제조를 위한 본 발명의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 전구약물의 용도를 제공한다. 본 발명은 또한 화학식 (I)의 화합물 또는 제약 조성물을 화합물 또는 조성물을 사용하는 것에 대한 지침서와 함께 키트로 제공한다.

본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 전구약물을 제조하기 위한 방법 및 중간체를 제공한다.

본 발명의 이들 및 다른 특색은 하기 추가로 제시될 것이다.

본 발명의 제1 측면은 적어도 1종의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 염, 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 전구약물을 제공한다:

여기서

R¹은

이고;

각각의 W는 독립적으로 NR^1b 또는 O이고;

Z는 결합 또는 CHR^1d이고;

X는 독립적으로 N 또는 CR^1a이고, 여기서 X는 오직 0, 1, 또는 2개의 위치에서 N이고;

각각의 R^1a는 독립적으로 H, F, Cl, -OH, -CN, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_1-3 알콕시, 또는 C_1-3 플루오로알콕시이고;

각각의 R^1b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬이고;

R^1c는 독립적으로 H, 중수소, C_1-4 알킬, C_1-4 플루오로알킬, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;

R^1d는 H, C_1-3 알킬, C_1-4 플루오로알킬, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;

Y는 -C(R⁶)₂-, -C(R⁶)₂-C(R⁶)₂-, -C(=O)-, -C(=O)-C(R⁶)₂-, -C(R⁶)₂-C(=O)-, 또는 -SO₂-이고;

V는 -O-, -NR⁴-, -CR⁵R⁵-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, 또는 -C(=O)-이고; 여기서 V가 -O-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, 또는 -C(=O)-인 경우에, Y는 -SO₂-가 아니고, 여기서 V가 -O-, -S-, 또는 NR⁴인 경우에, Y는 C(R⁶)₂가 아니고, 여기서 V가 -S(O)-, -SO₂-, 또는 C(=O)-인 경우에, Y는 -C(=O)-, -C(=O)-C(R⁶)₂-가 아니고;

L¹은 -C(R)₂-, -C(=O)-, 또는 -C(R)₂-C(R)₂-이고; 여기서 R은 독립적으로 H, F, OH, C_1-3 알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3 플루오로알킬이고; 여기서 R이 질소 원자에 인접한 탄소 원자에 부착되어 있는 경우에 R은 -OH 또는 F가 아니고;

고리 B는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피라졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 피롤릴, 피라지닐, 옥사졸릴, 피리다지닐, 피롤리디닐, 또는 이미다졸리디닐이고;

R²는 C_6-10 아릴, 또는 N, O, 및 S로부터 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 5 내지 10원 헤테로사이클 고리이고, 헤테로사이클은 옥소 치환을 임의로 함유하고, 아릴 또는 헤테로사이클은 0-3개의 R^2a로 치환되고;

R^2a는 독립적으로 OH, =O, CN, 할로, C_1-4 알킬, C_1-4 듀테로알킬, C_1-4 플루오로알킬, C_1-4 알콕시, C_1-4 듀테로알콕시, C_1-4 플루오로알콕시, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 시클로알콕시, C(=O)N(R^4bR^4b), C(=O)C_1-4 알킬, SO₂R^e, NR^4bSO₂R^4b, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 6원 헤테로사이클이고, 헤테로사이클은 옥소 치환을 임의로 함유하고, 0-3개의 R^2b로 치환되고;

R^2b는 독립적으로 C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬이고;

R^3a는 H, 할로, OH, CN, C_1-3 알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 알콕시, 또는 C_3-6 시클로알킬이고, 여기서 V가 -O-, -NR⁴-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, 또는 -C(=O)-인 경우에, R^3a는 할로가 아니고, 여기서 V가 -O-, -NR⁴-, -S-인 경우에, R^3a는 OH, CN이 아니고;

R^3b는 H, =O, C_1-3 알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 알콕시, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;

R⁴는 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_2-3 히드록시알킬, CO₂R^4a, C(=O)R^4a, SO₂R^4a, C(=O)N(R^4bR^4b), SO₂N(R^4bR^4b), 또는 OH이고;

R^4a는 C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 10원 헤테로사이클이고, 아릴 또는 헤테로사이클은 0-3개의 R^4c로 치환되고;

R^4b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, N으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 10원 헤테로사이클이고;

대안적으로, 2개의 R^4b는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께, 결합되어 O, S, 및 N으로부터 선택된 추가의 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3 내지 6원 포화 고리를 형성하고;

R^4c는 독립적으로 H, F, Cl, 또는 C_1-3 알킬이고;

R⁵는 독립적으로 H, F, OH, C_1-3 알콕시, C_1-3 플루오로알콕시, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, NR^5bR^5b, 또는 O-R^5c이거나, 또는 2개의 R⁵는 =O이고; 여기서 1개의 R⁵가 F, OH 또는 NR^5bR^5b인 경우에, 다른 R⁵는 OH, 또는 NR^5bR^5b가 아니고;

R^5b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_3-6 시클로알킬, C(O)R^a, SO₂R^a, 또는 C(O)NR^bR^b이고;

대안적으로, 2개의 R^5b는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께, 결합되어 O, S, 또는 N으로부터 선택된 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3 내지 6원 포화 고리를 형성하고;

R^5c는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_3-6 시클로알킬, 또는 C(O)NR^bR^b이고;

R⁶은 독립적으로 H, OH, F, C_1-3 알킬, C_1-3 듀테로알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_1-3 알콕시, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 히드록시듀테로알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3 플루오로알콕시알킬, 또는 NR^6bR^6b이고; 여기서 1개의 탄소 원자 상의 1개의 R⁶이 F, OH 또는 NR^6bR^6b인 경우에, 동일한 탄소 원자 상의 다른 R⁶은 OH 또는 NR^6bR^6b가 아니고;

R^6b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_3-6 시클로알킬, C(O)R^a, SO₂R^a, 또는 C(O)NR^bR^b이고; 대안적으로, 2개의 R⁶은 이들이 부착되어 있는 동일한 원자와 함께 O, S, 및 N으로부터 선택된 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3 내지 6원 포화 고리를 형성할 수 있고;

R^a는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4-10원 헤테로사이클이고;

R^b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 10원 헤테로사이클이고;

대안적으로, 2개의 R^b는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께, 결합되어 O, S, 및 N으로부터 선택된 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3-6원 포화 고리를 형성하고;

각각의 R^d는 독립적으로 H, F, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 알콕시, C_1-3 플루오로알콕시, C_1-3 히드록시알킬, C_3-6 시클로알킬, 할로, OH, =O, CN, OCF₃, OCHF₂, CHF₂CF₃, 또는 C(O)NR^eR^e이고;

각각의 R^e는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_2-3 히드록시알킬, C_2-3 알콕시알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 10원 헤테로아릴이고;

대안적으로, 2개의 R^e는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께, 결합되어 O, S, 및 N으로부터 선택된 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3 내지 6원 포화 고리를 형성하고;

n은 0, 1, 또는 2이다.

본 발명의 또 다른 측면은 적어도 1종의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 염, 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 전구약물을 제공한다:

여기서

R¹은

이고;

각각의 W는 독립적으로 NR^1b 또는 O이고;

Z는 결합 또는 CHR^1d이고;

X는 N 또는 CR^1a이고, 여기서 X는 오직 0, 1, 또는 2개의 위치에서 N이고;

각각의 R^1b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;

R^1c는 H, C_1-4 알킬, C_1-4 플루오로알킬, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;

V는 -O-, -NR⁴-, -CR⁵R⁵-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, 또는 -C(=O)-이고; 여기서 V가 -O-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, 또는 -C(=O)-인 경우에, Y는 -SO₂가 아니고, 여기서 V가 -O-, -S-, 또는 NR⁴인 경우에, Y는 C(R⁶)₂가 아니고;

L¹은 -C(R)₂-, -C(=O)-, -C(R)₂-CH₂-, -CH₂-C(R)₂-, 또는 -C(R)₂-C(R)₂이고; 여기서 R은 독립적으로 수소, F, OH, C_1-3알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3플루오로알킬이고; 여기서 R이 질소 원자에 인접한 탄소 원자에 부착되어 있는 경우에 R은 -OH 또는 F가 아니고;

고리 B는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피라졸릴, 인돌릴, 인다졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 피라지닐, 옥사졸릴, 피리다지닐, 푸라닐, 티오페닐, 피롤릴, 트리아지닐, 아자인돌릴, 벤즈이미다졸릴, 벤족사졸릴, 벤조티아졸릴, 벤조푸라닐, 또는 벤조티오페닐이고;

R^2a는 독립적으로 OH, =O, CN, 할로, C_1-4 알킬, C_1-4 플루오로알킬, C_1-4 알콕시, C_1-4 플루오로알콕시, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 시클로알콕시, C(=O)N(R^4bR^4b), C(=O)C_1-4 알킬, SO₂R^e, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 6원 헤테로시클릴이고, 여기서 헤테로사이클은 0-3개의 R^2b로 치환되고;

R^2b는 독립적으로 C_1-3 알킬 C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬이고;

R^3a는 H, 할로, OH, CN, C_1-3알킬, C_1-3히드록시알킬, C_1-3플루오로알킬, C_1-3알콕시, C_3-6시클로알킬이고, 여기서 V가 -O-, -NR⁴-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, 또는 -C(=O)-인 경우에, R^3a는 할로가 아니고;

R^3b는 H, OH, CN, C_1-3알킬, C_1-3히드록시알킬, C_1-3플루오로알킬, C_1-3알콕시, C_3-6시클로알킬이고;

R⁴는 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_2-3 히드록시알킬, CO₂R^4a, C(=O)R^4a, SO₂R^4a, C(=O)N(R^4bR^4b), 또는 SO₂N(R^4bR^4b)이고;

R^4a는 C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, N으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4-10원 헤테로사이클이고, 아릴 또는 헤테로사이클은 0-3개의 R^4c로 치환되고;

R^4b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 -플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, N으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4-10원 헤테로사이클이고;

대안적으로, 2개의 R^4b는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께, 결합되어 O, S, 또는 N으로부터 선택된 추가의 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3-6원 포화 고리를 형성하고;

R^4c는 독립적으로 H, F, Cl, 또는 C_1-3 알킬이고;

R⁵는 독립적으로 H, F, OH, C_1-3 알콕시, C_1-3 플루오로알콕시, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, 또는 NR^5bR^5b이고;

대안적으로, 2개의 R^5b는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께, 결합되어 O, S, 또는 N으로부터 선택된 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3-6원 포화 고리를 형성하고;

R⁶은 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_1-3 듀테로알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_1-3 히드록실알킬, C_1-3 히드록시듀테로알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3 플루오로알콕시알킬이고;

대안적으로, 동일한 원자에 부착되어 있는 2개의 R⁶은 O, S, 또는 N으로부터 선택된 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3-6원 포화 고리를 형성할 수 있고;

R^a는 H, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, N으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4-10원 헤테로사이클이고;

R^b는 H, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, N으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4-10원 헤테로사이클이고;

각각의 R^d는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 알콕시, C_1-3 플루오로알콕시, C_2-3 히드록시알킬, 할로, OH, =O, CN, OCF₃, OCHF₂, CHF₂ 및 CF₃이고; 각각의 R^e는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 10원 헤테로아릴이고;

n은 0, 1, 또는 2이다.

본 발명의 또 다른 측면에서는 적어도 1종의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 염, 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 전구약물을 제공한다:

여기서

R¹은

이고;

각각의 W는 독립적으로 NR^1b 또는 O이고;

Z는 결합 또는 CHR^1d이고;

R^2a는 독립적으로 OH, =O, CN, 할로, C_1-4알킬, C_1-4 플루오로알킬, C_1-4 알콕시, C_1-4 플루오로알콕시, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 시클로알콕시, C(=O)N(R^4bR^4b), C(=O)C_1-4 알킬, SO₂R^e, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 6원 헤테로시클릴이고, 여기서 헤테로사이클은 0-3개의 R^2b로 치환되고;

R^4c는 독립적으로 H, F, Cl, 또는 C_1-3 알킬이고;

R⁶은 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_1-3 히드록실알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3 플루오로알콕시알킬이고;

n은 0, 1, 또는 2이다.

또 다른 측면에서,

R¹은

이고;

각각의 R^1a는 독립적으로 F, Cl, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, 및 C_3-6 시클로알킬로부터 선택되고;

R^1c는 H, 중수소, C_1-2 알킬, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;

n은 0, 1, 또는 2인

화학식 (I)의 화합물, 다른 실시양태 또는 측면 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물, 및 그의 염, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 호변이성질체, 제약상-허용되는 염, 수화물, 또는 용매화물이 개시된다.

또 다른 측면에서,

R²는 페닐, 피리디닐, 인돌릴, 인다졸릴, 벤조[d]옥사졸-오닐, 피라졸로[4,3-b]피리디닐, 피리딘-2-오닐, 피라졸릴, [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리디닐, 이미다조[1,2-b]피리다지닐, 피라지닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 티아졸릴, 티오페닐, 1,2,3-트리아졸릴, 벤조[d][1,2,3]트리아졸릴, [1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다지닐, 벤조[d]이미다졸릴, 이미다졸릴, 피라졸로[3,4-b]피리디닐, 피라졸로[3,4-c]피리디닐, 피라졸로[4,3-c]피리디닐, 피롤릴, 피롤로[2,3-b]피리디닐, 피롤로[2,3-c]피리디닐, 피롤로[3,2-b]피리디닐, 피롤로[3,2-c]피리디닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 테트라졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 옥사졸릴, 피리다지닐, 피리미디닐, 또는 벤조[d]옥사졸-2-오닐, 트리아졸릴, 옥사디아졸릴, 피롤로피리디닐이고, 각각은 0-3개의 R^2a로 치환된 것인

화학식 (I)의 화합물, 다른 실시양태 또는 측면 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물, 및 그의 염, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 호변이성질체, 제약상-허용되는 염, 수화물 또는 용매화물이 개시된다.

또 다른 측면에서,

고리 B는 피리디닐, 피리미디닐, 피라졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 이속사졸릴, 피라지닐, 옥사졸릴, 또는 피리다지닐인

또 다른 측면에서,

V는 -O-, -NR⁴-, -CR⁵R⁵-, 또는 -C(=O)-이고;

여기서 V가 -O-, 또는 NR⁴인 경우에, Y는 C(R⁶)₂가 아니고;

Y는 -C(R⁶)₂-, -C(R⁶)₂-C(R⁶)₂-, -C(=O)-, -C(=O)-C(R⁶)₂-, 또는 -C(R⁶)₂-C(=O)-이고;

L¹은 -C(R)₂-, -C(=O)-, 또는 -CH₂-C(R)₂-이고; 여기서 R은 독립적으로 수소, F, OH, C_1-3 알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3플루오로알킬로부터 선택된 것인

또 다른 측면에서,

R²는 페닐, 피리디닐, 인돌릴, 인다졸릴, 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐, 피라졸로[4,3-b]피리디닐, 피리딘-2(1H)-오닐, 피라졸릴, 피리미디닐, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리디닐, 이미다조[1,2-b]피리다지닐, 피라지닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 티오페닐, [1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다지닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 또는 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐이고, 각각은 0-3개의 R^2a로 치환되고;

R^2a는 OH, =O, CN, 할로, SO₂C_1-4 알킬, 0-1개의 R^2b로 치환된 옥사졸리딘-2-온이고;

R^2b는 C_1-3알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 알콕시, 또는 C_1-3 플루오로알콕시인

또 다른 측면에서,

R¹은

이고;

R^1a는 H 또는 -CH₃인

또 다른 측면에서,

고리 B는 피리디닐, 트리아졸릴, 티아졸릴, 옥사디아졸릴, 이미다졸릴, 또는 피라졸릴이고;

R²는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 또는 옥사디아졸릴이고, 각각은 0-3개의 R^2a로 치환된 것인

또 다른 측면에서,

V는 -O-, -NR⁴-, 또는 -CR⁵R⁵-이고;

Y는 -C(R⁶)₂-C(R⁶)₂- 또는 -C(R⁶)₂-이고;

L¹은 -C(R)₂-이고; 여기서 R은 독립적으로 수소, F, OH, C_1-3알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3플루오로알킬로부터 선택되고;

R⁶은 독립적으로 H, C_1-3-알킬, C_1-3-플루오로알킬, 또는 C_3-6-시클로알킬인

또 다른 측면에서,

R¹은

이고;

1개의 W는 NR^1b이고 다른 W는 O이고;

R^1b는 H, C_1-3 알킬, 또는 C_1-3 플루오로알킬이고;

R^1c는 H, C_1-2 알킬, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;

n은 0, 1, 또는 2인

또 다른 측면에서,

R²는 페닐, 피리디닐, 인돌릴, 인다졸릴, 벤조[d]옥사졸-오닐, 피라졸로[4,3-b]피리디닐, 피리딘-2-오닐, 1H-피라졸릴, [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리디닐, 이미다조[1,2-b]피리다지닐, 피라지닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 티아졸릴, 티오페닐, 1,2,3-트리아졸릴, 벤조[d][1,2,3]트리아졸릴, [1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다지닐, 벤조[d]이미다졸릴, 이미다졸릴, 피라졸로[3,4-b]피리디닐, 피라졸로[3,4-c]피리디닐, 피라졸로[4,3-c]피리디닐, 피롤릴, 피롤로[2,3-b]피리디닐, 피롤로[2,3-c]피리디닐, 피롤로[3,2-b]피리디닐, 피롤로[3,2-c]피리디닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 테트라졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 옥사졸릴, 피리다지닐, 피리미디닐, 또는 벤조[d]옥사졸-2-오닐이고, 각각은 0-3개의 R^2a로 치환된 것인

또 다른 측면에서,

고리 B는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피라졸릴, 인돌릴, 인다졸릴, 티아졸릴, 이미디졸릴, 피리디노닐, 1,2-디히드로-3H 피라졸-3-오닐, 1H-1,2,3-트리아졸릴, 피라지닐 또는 피리다지닐, 또는 옥사졸릴인

또 다른 측면에서,

고리 B는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피라졸릴, 인돌릴, 인다졸릴, 티아졸릴, 이미디졸릴, 피리디노닐, 1,2-디히드로-3H 피라졸-3-오닐, 1H-1,2,3-트리아졸릴, 2H-1,2,3-트리아졸릴, 피라지닐 또는 피리다지닐, 또는 옥사졸릴인

또 다른 측면에서,

고리 B는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피라졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 피롤릴, 피라지닐, 옥사졸릴, 피리다지닐, 피롤리디닐, 옥사졸로닐, 옥사졸리디노닐, 피라졸리노닐, 이미다졸리디닐, 이미다졸로닐, 피롤리디노닐, 피리미디노닐, 피리다지노닐, 또는 피리디노닐인

또 다른 측면에서,

고리 B는 피라졸릴, 트리아졸릴, 옥사디아졸릴, 이속사졸릴, 이미다졸릴, 또는 이미다졸로닐인

또 다른 측면에서,

V는 -O-, -NR⁴-, -CR⁵R⁵-, 또는 -C(=O)-이고;

여기서 V가 -O-, 또는 NR⁴인 경우에, Y는 C(R⁶)₂가 아니고;

L¹은 -C(R)₂-, -C(=O)-, 또는 -CH₂-C(R)₂-이고; 여기서 R은 독립적으로 수소, F, OH, C_1-3알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3플루오로알킬로부터 선택된 것인

또 다른 측면에서,

R²는 페닐, 피리디닐, 인돌릴, 인다졸릴, 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐, 1H-피라졸로[4,3-b]피리디닐, 피리딘-2(1H)-오닐, 1H-피라졸릴, [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리디닐, 이미다조[1,2-b]피리다지닐, 피라지닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 티오페닐, [1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다지닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 또는 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐이고, 각각은 0-3개의 R^2a로 치환되고;

또 다른 측면에서,

R^2a는 OH, =O, CN, 할로, C_1-4 알킬, SO₂C_1-4 알킬, 0-1개의 R^2b로 치환된 옥사졸리딘-2-온이고;

또 다른 측면에서,

R¹은

이고;

R^1a는 H 또는 -CH₃인

또 다른 측면에서,

고리 B는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 인돌릴, 또는 피라졸릴, 인다졸릴이고;

R²는 페닐, 인돌릴, 피리디닐, 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐, 피리딘-2(1H)-오닐, 또는 인다졸릴인

또 다른 측면에서,

V는 -O-, -NR⁴-, 또는 -CR⁵R⁵-이고;

Y는 -C(R⁶)₂-C(R⁶)₂-, -C(=O)-, -C(=O)-C(R⁶)₂-, 또는 -C(R⁶)₂-C(=O)-이고;

L¹은 -C(R)₂-, -C(=O)-, 또는 -CH₂-CH(R)-이고; 여기서 R은 독립적으로 수소, F, OH, C_1-3알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3플루오로알킬로부터 선택되고;

또 다른 측면에서,

V는 -O-, -NR⁴-, 또는 -CR⁵R⁵-이고;

Y는 -C(R⁶)₂-C(R⁶)₂-, 또는 -C(R⁶)₂-이고;

또 다른 측면에서,

R⁶은 독립적으로 H 또는 C_1-3 알킬이거나; 또는 R⁶은 독립적으로 H 또는 메틸이거나; 또는 R⁶은 메틸인

또 다른 측면에서,

R^2a는 OH, =O, CN, 할로, C_1-4알킬, C_1-4 플루오로알킬, C_1-4 알콕시, 또는 C_1-4 플루오로알콕시이고, 대안적으로, R^2a는 OH, =O, CN, 할로, SO₂C_1-4 알킬, 0-1개의 R^2b로 치환된 옥사졸리딘-2-온이고;

또 다른 측면에서,

R⁴는 H, C_1-3-알킬, CO₂R^4a, C(=O)R^4a, SO₂R^4a, C(=O)N(R^4bR^4b), SO₂N(R^4bR^4b)이고;

R^4a는 C_1-3-알킬, C_1-3-플루오로알킬, C_3-6-시클로알킬이고;

R^4b는 독립적으로 H, C_1-3-알킬, C_3-6-시클로알킬이고;

R⁵는 독립적으로 H, F, OH, C_1-3-알콕시, C_1-3-알킬, C_3-6-시클로알킬, NR^5bR^5b이고;

R^5b는 독립적으로 H, C_1-3-알킬, C_3-6-시클로알킬, C(O)R^a, SO₂R^a, 또는 C(O)NR^bR^b인

또 다른 측면에서,

R^4a는 C_1-3-알킬, C_1-3-플루오로알킬, C_3-6-시클로알킬이고;

R^4b는 독립적으로 H, C_1-3-알킬, C_3-6-시클로알킬이고;

R⁵는 독립적으로 H, F, OH, C_1-3-알킬인

또 다른 측면에서, 화학식 (I)의 화합물이

인 화학식 (I)의 화합물, 다른 실시양태 또는 측면 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물, 및 그의 염, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 호변이성질체, 제약상-허용되는 염, 수화물 또는 용매화물이 개시된다.

또 다른 측면에서,

R¹은

이고; R^1a는 H 또는 -CH₃이거나; 또는

R¹은

인

또 다른 측면에서,

R¹은

이고; R^1a는 H 또는 -CH₃이고; R^1c는 독립적으로 H 또는 중수소이거나; 또는

R¹은

이고, R^1c는 독립적으로 H 또는 중수소인

또 다른 측면에서,

R^3a 및 R^3b는 H인

또 다른 측면에서,

R¹은

인

또 다른 측면에서,

R¹은

이고;

R^1a는 H 또는 -CH₃이고; R^1b는 H 또는 -CH₃이고; L¹은 결합, -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH(CH₂OH)-, 또는 -CH(OH)CH₂-인

또 다른 측면에서,

R^1a는 H, F, C_1-3 알킬, 또는 CF₃이거나; 또는 R^1a는 H인

또 다른 측면에서,

각각의 R^1b는 독립적으로 H, 또는 C_1-3 알킬이거나; 또는 각각의 R^1b는 H인

또 다른 측면에서,

고리 B는

또 다른 측면에서,

고리 B는

또 다른 측면에서,

고리 B는

이고, 이들 중 임의의 것은 0-1개의 R^d로 치환된 것인

본 발명의 제9 측면에서,

고리 B는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 인돌릴, 피라졸릴, 또는 인다졸릴이고;

화학식 (I)의 화합물, 또는 다른 실시양태 또는 측면 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물, 및 그의 염, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 호변이성질체, 제약상-허용되는 염, 수화물 또는 용매화물이 개시된다.

본 발명의 제9 측면에서,

고리 B는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 인돌릴, 피라졸릴, 트리아졸릴 또는 인다졸릴이고;

화학식 (I)의 화합물, 또는 다른 실시양태 또는 측면 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물 및 그의 염, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 호변이성질체, 제약상-허용되는 염, 수화물 또는 용매화물이 개시된다.

본 발명의 또 다른 측면에서,

고리 B는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 이미다졸릴, 옥사디아졸릴, 피라졸릴, 또는 트리아졸릴인

화학식 (I)의 화합물, 다른 실시양태 또는 측면 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물, 그의 염, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 호변이성질체, 제약상-허용되는 염, 수화물 또는 용매화물이 개시된다.

본 발명의 또 다른 측면에서,

R²는 페닐, 이미다졸릴, 피리디닐, 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐, 피리딘-2(1H)-오닐, 피라지닐, 피라졸릴, 피라졸로피리미디닐, 피리미디닐, 티아졸릴, 티오페닐, 또는 트리아졸릴인

화학식 (I)의 화합물, 다른 실시양태 또는 측면 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물, 및 그의 염, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 호변이성질체, 제약상-허용되는 염, 수화물 또는 그의 용매화물이 개시된다.

또 다른 측면에서,

R^2a는 CN, 할로, 또는 C_1-4알킬인

또 다른 측면에서,

R^2a는 OH, =O, CN, 할로, C_1-4알킬, C_1-4 플루오로알킬, C_1-4 알콕시, C_1-4 플루오로알콕시, SO₂R^e, 또는 0-1개의 R^2b로 치환된 옥사졸리딘-2-온인

또 다른 측면에서,

R^2a는 독립적으로 OH, =O, CN, 할로, C_1-4 알킬, C_1-4 듀테로알킬, C_1-4 플루오로알킬, C_1-4 알콕시, C_1-4 듀테로알콕시, C_1-4 플루오로알콕시, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 시클로알콕시, C(=O)N(R^4bR^4b), C(=O)C_1-4 알킬, SO₂R^e, NR^4bSO₂R^4b, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 6원 헤테로사이클이고, 여기서 헤테로사이클은 옥소 치환을 임의로 함유하고, 0-3개의 R^2b로 치환되고;

대안적으로, 인접한 원자 상의 2개의 R^2a는 -O-CH₂-O-, 또는 -O-CF₂-O-를 형성하는 것인

또 다른 측면에서,

L¹은 -CH₂-, -C(=O)-, 또는 -CH₂-CH(R)-이고; 여기서 R은 독립적으로 수소, F, OH, C_1-3 알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3플루오로알킬로부터 선택되거나; 또는

L¹은 -CH₂-, -C(=O)-, 또는 -CH₂-CH(R)-이고; 여기서 R은 독립적으로 수소, 또는 OH로부터 선택되거나; 또는

L¹은 -CH₂-, 또는 -CH₂-CH₂-인

또 다른 측면에서, 화학식 (I)의 화합물이

또 다른 측면에서, 화학식 (I)의 화합물이

또 다른 측면에서, 화학식 (I)의 화합물이

또 다른 측면에서, 화학식 (I)의 화합물이

또 다른 측면에서,

R²는 페닐, 피리디닐, 인돌릴, 인다졸릴, 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐, 1H-피라졸로[4,3-b]피리디닐, 피리딘-2(1H)-오닐, 1H-피라졸릴, [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리디닐, 이미다조[1,2-b]피리다지닐, 피라지닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 티아졸릴, 티오페닐, 1H-1,2,3-트리아졸릴, 1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸릴, [1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다지닐, 1H-벤조[d]이미다졸릴, 1H-이미다졸릴, 1H-피라졸로[3,4-b]피리디닐, 1H-피라졸로[3,4-c]피리디닐, 1H-피라졸로[4,3-c]피리디닐, 1H-피롤릴, 1H-피롤로[2,3-b]피리디닐, 1H-피롤로[2,3-c]피리디닐, 1H-피롤로[3,2-b]피리디닐, 1H-피롤로[3,2-c]피리디닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 1H-테트라졸릴, 4H-1,2,4-트리아졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 옥사졸릴, 피리다지닐, 피리미디닐, 또는 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐이고, 각각은 0-3개의 R^2a로 치환된 것인

또 다른 측면에서,

R²는 페닐,

이고, 각각은 (원자가가 허용하는 바에 따라) 0-3개의 R^2a로 치환된 것인

또 다른 측면에서,

R²는 페닐,

또 다른 측면에서,

R²는 페닐,

또 다른 측면에서,

R²는 페닐,

이고, 각각은 (원자가가 허용하는 바에 따라) 0-2개의 R^2a로 치환된 것인

또 다른 측면에서, 화학식 (I)의 화합물, 또는 다른 실시예 또는 측면 중 임의의 것에 의해 기재된 화학식 (I)의 화합물 및 그의 염, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 호변이성질체, 제약상-허용되는 염, 수화물, 또는 용매화물이 개시되며, 여기서 화합물은 실시예로부터 선택된다.

또 다른 측면에서, 제약상 허용되는 담체 및 임의의 1종 이상의 화학식 (I)의 화합물, 또는 다른 실시양태 또는 측면 또는 실시예 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 제약 조성물이 개시된다.

또 다른 측면에서, ROMK의 억제에 의해 조정될 수 있는 1종 이상의 질환 또는 장애의 치료 또는 예방을 필요로 하는 환자에게 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물, 또는 다른 실시양태 또는 측면 또는 실시예 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물 중 적어도 1종을 투여하는 것을 포함하는, ROMK의 억제에 의해 조정될 수 있는 1종 이상의 질환 또는 장애의 치료 방법이 개시되며, 여기서 질환 또는 장애는 이뇨 또는 나트륨이뇨의 촉진에 의해 치료된다.

또 다른 측면에서, ROMK 억제에 의해 조정될 수 있는 1종 이상의 질환 또는 장애의 치료 또는 예방 방법이 개시되며, 여기서 실시양태 중 임의의 것의 화합물은 적어도 1종의 다른 유형의 치료제와 조합하여 투여된다.

또 다른 측면에서, 다발성 질환 또는 장애의 치료 또는 예방을 필요로 하는 환자에게 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물, 또는 다른 실시양태 또는 측면 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물 중 적어도 1종을 투여하는 것을 포함하는, 다발성 질환 또는 장애의 치료 또는 예방 방법이 개시되며, 여기서 질환 또는 장애는 이뇨 또는 나트륨이뇨의 촉진에 의해 치료되거나 또는 ROMK 연관 장애이다.

또 다른 측면에서, 질환 또는 장애의 치료 또는 예방 방법이 개시되며, 여기서 실시양태 중 임의의 것의 화합물은 적어도 1종의 다른 유형의 치료제와 조합하여 투여된다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 예시된 실시예 또는 그의 입체이성질체, 호변이성질체, 제약상 허용되는 염, 또는 용매화물로부터 선택되는 화합물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 실시예의 범주 내의 화합물의 임의의 하위세트 목록으로부터 선택되는 화합물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 이뇨 또는 나트륨이뇨를 필요로 하는 환자를 위한 고혈압 또는 심부전의 치료를 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 고혈압의 치료를 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 고혈압, 특발성 고혈압, 불응성 고혈압 및/또는 폐고혈압의 치료를 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 심부전의 치료를 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 부종, 심기능부전, 수축기 심부전, 확장기 심부전, 당뇨병성 심부전, 및/또는 급성-대상부전성 심부전의 치료를 제공한다.

본 발명은 그의 취지 또는 본질적인 속성으로부터 벗어나지 않으면서 다른 구체적 형태로 구현될 수 있다. 본 발명은 본원에 언급된 본 발명의 바람직한 측면의 모든 조합을 포괄한다. 본 발명의 임의의 및 모든 실시양태는 임의의 다른 실시양태 또는 실시양태들과 함께, 추가의 실시양태를 기재할 수 있는 것으로 이해된다. 또한, 실시양태의 각각의 개별 요소는 그 자체의 독립적 실시양태인 것으로 이해된다. 게다가, 한 실시양태의 임의의 요소는 임의의 실시양태로부터의 임의의 및 모든 다른 요소와 조합되어 추가의 실시양태를 기재하는 것으로 의도된다.

정의

본 발명의 특색 및 이점은 하기 상세한 설명을 읽으면 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 더 용이하게 이해될 수 있다. 명확성 이유로 인해, 상기에 기재되고 하기에 별개의 실시양태와 관련하여 기재된 본 발명의 특정 특색들은 또한 조합되어 단일 실시양태를 형성할 수 있는 것으로 인지되어야 한다. 반대로, 간결성 이유로 인해, 단일 실시양태와 관련하여 기재된 본 발명의 다양한 특색들은 또한 조합되어 그의 하위-조합을 형성할 수 있다. 본원에서 예시적이거나 바람직한 것으로 확인되는 실시양태는 예시적이도록 의도된 것이며 제한적이도록 의도된 것은 아니다.

본원에 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 단수에 대한 언급은 복수를 또한 포함할 수 있다. 예를 들어, 단수형은 하나, 또는 하나 이상을 지칭할 수 있다.

본원에 사용된 어구 "화합물"은 적어도 1종의 화합물을 지칭한다. 예를 들어, 화학식 (I)의 화합물은 화학식 (I)의 화합물; 및 2종 이상의 화학식 (I)의 화합물을 포함한다.

달리 나타내지 않는 한, 충족되지 않은 원자가를 갖는 임의의 헤테로원자는 원자가를 만족시키기에 충분한 수소 원자를 갖는 것으로 가정된다.

본원에 제시된 정의는 본원에 참조로 포함된 임의의 특허, 특허 출원 및/또는 특허 출원 공개에 제시된 정의보다 우선한다.

본 발명을 기재하기 위해 사용된 다양한 용어의 정의는 하기에 열거되어 있다. 이들 정의는 개별적으로 또는 더 큰 군의 일부로서 본 명세서 전반에 걸쳐 이들이 사용된 바와 같은 (달리 구체적 경우에 제한되지 않는 한) 용어에 적용된다.

본 명세서 전반에 걸쳐, 기 및 그의 치환기는 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 안정한 모이어티 및 화합물을 제공하도록 선택될 수 있다. 치환기 정의가 1개 초과의 치환기를 나타내는 경우에, 각각의 치환기는 독립적으로 다른 치환기(들)로부터 선택된다.

관련 기술분야에 사용되는 규정에 따르면,

는, 본원의 구조 화학식에서 코어 또는 백본 구조에 대한 모이어티 또는 치환기의 부착 지점인 결합을 도시하기 위해 사용된다.

본원에 사용된 용어 "할로" 및 "할로겐"은 F, Cl, Br, 및 I를 지칭한다.

용어 "시아노"는 기 -CN을 지칭한다.

용어 "아미노"는 기 -NH₂를 지칭한다.

용어 "옥소"는 기 =O를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "알킬"은, 예를 들어 1 내지 12개의 탄소 원자, 1 내지 6개의 탄소 원자, 및 1 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 분지쇄 및 직쇄 포화 지방족 탄화수소 기 둘 다를 지칭하고, C₁, C₂, C₃, 및 C₄ 알킬 기를 포함하는 것으로 의도된다. 알킬 기의 예는 메틸 (Me), 에틸 (Et), 프로필 (예를 들어, n-프로필 및 i-프로필), 부틸 (예를 들어, n-부틸, i-부틸, sec-부틸, 및 t-부틸), 및 펜틸 (예를 들어, n-펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸), n-헥실, 2-메틸펜틸, 2-에틸부틸, 3-메틸펜틸, 및 4-메틸펜틸을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 숫자가 기호 "C" 뒤의 아래첨자로 나타내어진 경우, 아래첨자는 특정한 기가 함유할 수 있는 탄소 원자의 수를 보다 구체적으로 정의한다. 예를 들어, "C_1-6 알킬"은 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 및 분지쇄 알킬 기를 나타낸다.

본원에 사용된 용어 "할로알킬"은 1개 이상의 할로겐 원자로 치환된 분지쇄 및 직쇄 포화 지방족 탄화수소 기 둘 다를 포함하는 것으로 의도된다. 예를 들어, "C_1-4 할로알킬"은 1개 이상의 할로겐 원자로 치환된 C₁, C₂, C₃, 및 C₄ 알킬 기를 포함하는 것으로 의도된다. 할로알킬 기의 대표적인 예는 -CF₃, -CCl₃, -CFCl₂, 및 -CH₂CF₃을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

본원에 사용된 용어 "플루오로알킬"은 1개 이상의 플루오린 원자로 치환된 분지쇄 및 직쇄 포화 지방족 탄화수소 기 둘 다를 포함하는 것으로 의도된다. 예를 들어, "C_1-4 플루오로알킬"은 1개 이상의 플루오린 원자로 치환된 C₁, C₂, C₃, 및 C₄ 알킬 기를 포함하는 것으로 의도된다. 플루오로알킬 기의 대표적인 예는 -CF₃ 및 -CH₂CF₃을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

용어 "히드록시알킬"은 1개 이상의 히드록실 기로 치환된 분지쇄 및 직쇄 포화 알킬 기 둘 다를 포함한다. 예를 들어, "히드록시알킬"은 -CH₂OH, -CH₂CH₂OH, 및 C_1-4 히드록시알킬을 포함한다.

본원에 사용된 용어 "시클로알킬"은 포화 고리 탄소 원자로부터의 1개의 수소 원자의 제거에 의해 비-방향족 모노시클릭 또는 폴리시클릭 탄화수소 분자로부터 유도된 기를 지칭한다. 시클로알킬 기의 대표적인 예는 시클로프로필, 시클로펜틸, 및 시클로헥실을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 숫자가 기호 "C" 뒤의 아래첨자로 나타내어진 경우, 아래첨자는 특정한 시클로알킬 기가 함유할 수 있는 탄소 원자의 수를 보다 구체적으로 정의한다. 예를 들어, "C_3-6 시클로알킬"은 3 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 시클로알킬 기를 나타낸다.

본원에 사용된 용어 "알콕시"는 산소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 알킬 기, 예를 들어 메톡시 기 (-OCH₃)를 지칭한다. 예를 들어, "C_1-3 알콕시"는 1 내지 3개의 탄소 원자를 갖는 알콕시 기를 나타낸다.

용어 "할로알콕시" 및 "-O(할로알킬)"은 산소 연결기 (-O-)를 통해 부착된, 상기 정의된 바와 같은 할로알킬 기를 나타낸다. 예를 들어, "C_1-4 할로알콕시"는 C₁, C₂, C₃, 및 C₄ 할로알콕시 기를 포함하는 것으로 의도된다.

용어 "플루오로알콕시" 및 "-O(플루오로알킬)"은 산소 연결기 (-O-)를 통해 부착된, 상기 정의된 바와 같은 플루오로알킬 기를 나타낸다. 예를 들어, "C_1-4 플루오로알콕시"는 C₁, C₂, C₃, 및 C₄ 플루오로알콕시 기를 포함하는 것으로 의도된다.

본원에 사용된 용어 "아릴"은 방향족 고리(들)를 함유하는 분자로부터 방향족 고리(들)에 결합된 1개의 수소를 제거함으로써 유도된, 4 내지 10 또는 6 내지 10개의 탄소 원자를 함유하는 원자단을 지칭한다. 2개 이상의 고리를 갖는 아릴 기는 오직 방향족 고리만을 포함해야 한다. 아릴 기의 대표적인 예는 페닐 및 나프틸을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 아릴 고리는 비치환될 수 있거나, 또는 원자가가 허용하는 바에 따라 1개 이상의 치환기를 함유할 수 있다.

본원에 사용된 용어 "벤질"은 수소 원자 중 1개가 페닐 기에 의해 대체된 메틸 기를 지칭한다. 페닐 고리는 비치환될 수 있거나 또는 원자가가 허용하는 바에 따라 1개 이상의 치환기를 함유할 수 있다.

용어 "헤테로원자"는 산소 (O), 황 (S), 및 질소 (N)를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "헤테로시클릴" 또는 "헤테로사이클"은 고리 중 적어도 1개가 적어도 1개의 헤테로원자 (O, S 또는 N)를 가지며 상기 헤테로원자 함유 고리가 O, S, 및 N으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 고리인 치환 및 비치환된 포화, 부분 포화, 및 방향족 3- 내지 7-원 모노시클릭 기, 7- 내지 11-원 비시클릭 기, 및 10- 내지 15-원 트리시클릭 기를 지칭한다. 헤테로원자를 함유하는 이러한 기의 각각의 고리는 1 또는 2개의 산소 또는 황 원자 및/또는 1 내지 4개의 질소 원자를 함유할 수 있으며, 단 각각의 고리 내의 헤테로원자의 총수는 4개 이하이고, 단 추가로 고리는 적어도 1개의 탄소 원자를 함유한다. 질소 및 황 원자는 임의로 산화될 수 있고, 질소 원자는 임의로 4급화될 수 있다. 비시클릭 및 트리시클릭 기를 완성하는 융합된 고리는 다른 헤테로 원자 또는 오직 탄소 원자만을 함유할 수 있고; 포화, 부분 포화, 또는 방향족일 수 있다. 헤테로시클로 기는 헤테로시클로 기 내의 임의의 이용가능한 질소 또는 탄소 원자에서 부착될 수 있다. 용어 "헤테로시클릴"은 "헤테로아릴" 기를 포함한다. 원자가가 허용하는 바에 따라, 상기 추가의 고리가 시클로알킬 또는 헤테로시클로인 경우에 이는 추가적으로 =O (옥소)로 임의로 치환된다.

용어 "헤테로아릴"은, 고리 중 적어도 1개 내에 적어도 1개의 헤테로원자 (O, S 또는 N)를 가지며 상기 헤테로원자-함유 고리가 바람직하게는 O, S, 및/또는 N으로부터 독립적으로 선택되는 1, 2, 또는 3개의 헤테로원자를 갖는 것인, 치환 및 비치환된 방향족 5- 또는 6-원 모노시클릭 기, 9- 또는 10-원 비시클릭 기, 및 11- 내지 14-원 트리시클릭 기를 지칭한다. 헤테로원자를 함유하는 헤테로아릴 기의 각각의 고리는 1 또는 2개의 산소 또는 황 원자 및/또는 1 내지 4개의 질소 원자를 함유할 수 있으며, 단 각각의 고리 내의 헤테로원자의 총수는 4개 이하이고, 각각의 고리는 적어도 1개의 탄소 원자를 갖는다. 비시클릭 기를 완성하는 융합된 고리는 방향족이고, 다른 헤테로원자 또는 오직 탄소 원자만을 함유할 수 있다. 질소 및 황 원자는 임의로 산화될 수 있고, 질소 원자는 임의로 4급화될 수 있다. 비시클릭 및 트리시클릭 헤테로아릴 기는 오직 방향족 고리만을 포함해야 한다. 헤테로아릴 기는 임의의 고리의 임의의 이용가능한 질소 또는 탄소 원자에서 부착될 수 있다. 헤테로아릴 고리계는 비치환될 수 있거나 또는 1개 이상의 치환기를 함유할 수 있다.

예시적인 모노시클릭 헤테로아릴 기는 피롤릴, 피라졸릴, 피라졸리닐, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 티아디아졸릴, 이소티아졸릴, 푸라닐, 티오페닐, 옥사디아졸릴, 피리디닐, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 및 트리아지닐을 포함한다.

예시적인 비시클릭 헤테로아릴 기는 인돌릴, 벤조티아졸릴, 벤조디옥솔릴, 벤족사졸릴, 벤조티에닐, 퀴놀리닐, 테트라히드로이소퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조피라닐, 인돌리지닐, 벤조푸라닐, 크로모닐, 쿠마리닐, 벤조피라닐, 신놀리닐, 퀴녹살리닐, 인다졸릴, 및 피롤로피리딜을 포함한다.

어구 "제약상 허용되는"은, 타당한 의학적 판단의 범주 내에서, 합리적인 이익/위험 비에 상응하여 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 이들 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여 형태를 지칭하는 것으로 본원에 사용된다.

화학식 (I)의 화합물은 무정형 고체 또는 결정질 고체로서 제공될 수 있다. 동결건조는 화학식 (I)의 화합물을 무정형 고체로서 제공하기 위해 사용될 수 있다.

화학식 (I)의 화합물의 용매화물 (예를 들어, 수화물)이 또한 본 발명의 범주 내에 있는 것으로 추가로 이해되어야 한다. 용어 "용매화물"은 화학식 (I)의 화합물과, 유기이든지 무기이든지 간에 1종 이상의 용매 분자의 물리적 회합을 의미한다. 이러한 물리적 회합은 수소 결합을 포함한다. 특정 경우에, 예를 들어 1개 이상의 용매 분자가 결정질 고체의 결정 격자에 혼입되는 경우에, 용매화물은 단리될 수 있을 것이다. "용매화물"은 용액 상 및 단리가능한 용매화물 둘 다를 포괄한다. 예시적인 용매화물은 수화물, 에탄올레이트, 메탄올레이트, 이소프로판올레이트, 아세토니트릴 용매화물, 및 에틸 아세테이트 용매화물을 포함한다. 용매화 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다.

다양한 형태의 전구약물이 관련 기술분야에 널리 공지되어 있고, 하기 문헌에 기재되어 있다:

a) The Practice of Medicinal Chemistry, Camille G. Wermuth et al., Ch 31, (Academic Press, 1996);

b) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985);

c) A Textbook of Drug Design and Development, P. Krogsgaard-Larson and H. Bundgaard, eds. Ch 5, pgs 113 - 191 (Harwood Academic Publishers, 1991); 및

d) Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism, Bernard Testa and Joachim M. Mayer, (Wiley-VCH, 2003).

또한, 화학식 (I)의 화합물을, 그의 제조에 후속하여 단리 및 정제하여 중량 기준으로 99% 이상의 양의 ("실질적으로 순수한") 화학식 (I)의 화합물을 함유하는 조성물을 수득할 수 있고, 이어서 이는 본원에 기재된 바와 같이 사용되거나 제제화된다. 이러한 "실질적으로 순수한" 화학식 (I)의 화합물은 또한 본원에서 본 발명의 일부로서 고려된다.

본원의 화학식 I 및/또는 실시예의 화합물은, 일부 경우에, 또한 본 발명의 범주 내에 있는 염을 형성할 수 있다. 본원의 화학식 I 및/또는 실시예의 화합물에 대한 언급은, 달리 나타내지 않는 한, 그의 염에 대한 언급을 포함하는 것으로 이해된다. 본원에 사용된 용어 "염(들)"은 무기 및/또는 유기 산 및 염기에 의해 형성된 산성 및/또는 염기성 염을 나타낸다. 쯔비터이온 (내재 또는 내부 염)은 본원에 사용된 용어 "염(들)" 내에 포함된다 (그리고 예를 들어 R 치환기가 산 모이어티 예컨대 카르복실 기를 포함하는 경우에 형성될 수 있다). 또한, 4급 암모늄 염 예컨대 알킬암모늄 염이 본원에 포함된다. 다른 염이 예를 들어 제조 동안 사용될 수 있는 단리 또는 정제 단계에서 유용할 지라도, 제약상 허용되는 (즉, 비-독성, 생리학상 허용되는) 염이 바람직하다. 화학식 I의 화합물의 염은, 예를 들어, 화합물 I를 소정량, 예컨대 등가량의 산 또는 염기와, 매질 예컨대 염이 침전하는 매질에서 또는 수용성 매질에서 반응시킨 후 동결건조시킴으로써 형성될 수 있다. 본원에 사용된 "제약상 허용되는 염"은 모 화합물이 그의 산 또는 염기 염을 제조함으로써 변형된 개시된 화합물의 유도체를 지칭한다. 제약상 허용되는 염의 예는 염기성 기 예컨대 아민의 무기 또는 유기 산 염; 및 산성 기 예컨대 카르복실산의 알칼리 또는 유기 염을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 제약상 허용되는 염은, 예를 들어 비-독성 무기 또는 유기 산으로부터 형성된 모 화합물의 통상적인 비-독성 염 또는 4급 암모늄 염을 포함한다. 예를 들어, 이러한 통상적인 비-독성 염은 무기 산 예컨대 염산, 브로민화수소산, 황산, 술팜산, 인산 및 질산으로부터 유도된 것; 및 유기 산 예컨대 아세트산, 프로피온산, 숙신산, 글리콜산, 스테아르산, 락트산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 파모산, 말레산, 히드록시말레산, 페닐아세트산, 글루탐산, 벤조산, 살리실산, 술파닐산, 2-아세톡시벤조산, 푸마르산, 톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 에탄 디술폰산, 옥살산 및 이세티온산 등으로부터 제조된 염을 포함한다.

"염기 부가염"은 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 않은 것이 아닌, 유리 산의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하는 염을 지칭한다. 이들 염은 무기 염기 또는 유기 염기를 유리 산에 첨가함으로써 제조된다. 무기 염기로부터 유도된 염은 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망가니즈, 알루미늄 염 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 한 측면에서, 무기 염은 암모늄, 나트륨, 칼륨, 칼슘 및 마그네슘 염이다. 유기 염기로부터 유도된 염은 1급, 2급 및 3급 아민, 치환된 아민, 예컨대 자연 발생 치환된 아민, 시클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 에탄올아민, 2-디메틸아미노에탄올, 2-디에틸아미노에탄올, 디시클로헥실아민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 히드라바민, 콜린, 베타인, 에틸렌디아민, 글루코사민, 메틸글루카민, 테오브로민, 퓨린, 피페라진, 피페리딘, N-에틸피페리딘, 폴리아민 수지 등의 염을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 또 다른 측면에서, 유기 염기는 이소프로필아민, 디에틸아민, 에탄올아민, 트리메틸아민, 디시클로헥실아민, 콜린 및 카페인이다.

"안정한 화합물" 및 "안정한 구조"는 반응 혼합물로부터 유용한 정도의 순도로의 단리, 및 효과적인 치료제로의 제제화를 견디기에 충분히 강건한 화합물을 나타내는 것으로 의도된다. 본 발명은 안정한 화합물을 구현하는 것으로 의도된다. 치환기 및/또는 가변기의 조합은, 이러한 조합이 안정한 화합물을 생성하는 경우에만 허용가능하다.

"치료 유효량"은 본 발명의 화합물 단독의 양 또는 청구된 화합물의 조합물의 양 또는 ROMK에 대한 억제제로서 작용하기에 효과적이거나 또는 심혈관 질환을 치료 또는 예방하는 데 효과적인 다른 활성 성분과 조합된 본 발명의 화합물의 양을 포함하는 것으로 의도된다.

또 다른 측면에서, ROMK 억제에 의해 조정될 수 있는 1종 이상의 질환 또는 장애의 치료 또는 예방을 필요로 하는 환자에게 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물, 또는 다른 실시양태 또는 측면 중 임의의 것에 의해 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물 중 적어도 1종을 투여하는 것을 포함하는, ROMK 억제에 의해 조정될 수 있는 1종 이상의 질환 또는 장애의 치료 또는 예방 방법이 개시되며, 여기서 질환 또는 장애는 이뇨 또는 나트륨이뇨의 촉진에 의해 치료된다.

또 다른 측면에서, 이뇨 또는 나트륨이뇨의 촉진에 의해 치료될 수 있는 1종 이상의 질환 또는 장애의 치료 방법이 개시되며, 여기서 심혈관 질환은 고혈압, 관상동맥 심장 질환, 졸중, 심부전, 수축기 심부전, 확장기 심부전, 당뇨병성 심부전, 급성-대상부전성 심부전, 수술후 용적 과부하, 특발성 부종, 폐고혈압, 폐동맥 고혈압, 불응성 고혈압 심기능부전, 신증후군, 및 급성 신장 기능부전을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

본원에 사용된 "치료하는" 또는 "치료"는 포유동물, 특히 인간에서의 질환-상태의 치료를 포함하고, (a) 포유동물에서, 특히 이러한 포유동물이 질환-상태에 대한 소인이 있지만 아직 그를 갖는 것으로 진단된 바 없는 경우에 질환-상태가 발생하는 것을 예방하는 것; (b) 질환-상태를 억제하는 것, 즉 그의 발전을 정지시키는 것; 및/또는 (c) 질환-상태를 완화시키는 것, 즉 질환 상태의 퇴행을 유발하는 것을 포함한다.

본 발명의 화합물은, 그 동위 원소가 이들의 천연 존재비로 발생하거나 또는 그의 천연 존재비보다 더 큰 수준으로 풍부화되는 경우에, 본 발명의 화합물에서 발생하는 원자의 모든 동위원소를 포함하는 것으로 의도된다. 동위원소는 동일한 원자 번호를 갖지만 상이한 질량수를 갖는 원자를 포함한다. 일반적 예로서 및 비제한적으로, 수소의 동위원소는 중수소 (D) 및 삼중수소 (T)를 포함한다. 탄소의 동위원소는 ¹³C 및 ¹⁴C를 포함한다. 예를 들어, 메틸 (-CH₃)은 중수소화 메틸 기 예컨대 -CD_3,-CHD₂, 또는 -CH₂D를 또한 포함한다.

화학식 (I)에 따른 화합물은 치료될 상태에 적합한 임의의 수단에 의해 투여될 수 있으며, 이는 부위-특이적 치료에 대한 필요 또는 전달될 화학식 (I) 화합물의 양에 따라 달라질 수 있다.

또한 본 발명 내에는, 화학식 (I)의 화합물 및 1종 이상의 비-독성 제약상 허용되는 담체 및/또는 희석제 및/또는 아주반트 (집합적으로 본원에서 "담체" 물질로 지칭됨) 및, 원하는 경우에, 다른 활성 성분을 포함하는 제약 조성물 부류가 포괄된다. 화학식 (I)의 화합물은 임의의 적합한 경로에 의해, 바람직하게는 이러한 경로에 적합화된 제약 조성물의 형태로, 및 의도된 치료에 효과적인 용량으로 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물 및 조성물은, 예를 들어 경구로, 점막으로, 또는 비경구로 예컨대 혈관내로, 정맥내로, 복강내로, 피하로, 근육내로, 및 흉골내로, 통상적인 제약상 허용되는 담체, 아주반트 및 비히클을 함유하는 투여 단위 제제로 투여될 수 있다. 예를 들어, 제약 담체는 만니톨 또는 락토스 및 미세결정질 셀룰로스의 혼합물을 함유할 수 있다. 혼합물은 추가의 성분 예컨대 윤활제, 예를 들어 스테아르산마그네슘 및 붕해제 예컨대 크로스포비돈을 함유할 수 있다. 담체 혼합물은 젤라틴 캡슐 내로 충전되거나 또는 정제로서 압축될 수 있다. 제약 조성물은, 예를 들어 경구 투여 형태 또는 주입으로서 투여될 수 있다.

경구 투여를 위해, 제약 조성물은, 예를 들어 정제, 캡슐, 액체 캡슐, 현탁액, 또는 액체 형태일 수 있다. 제약 조성물은 바람직하게는 특정한 양의 활성 성분을 함유하는 투여 단위의 형태로 제조된다. 예를 들어, 제약 조성물은 약 0.1 내지 1000 mg, 바람직하게는 약 0.25 내지 250 mg, 및 보다 바람직하게는 약 0.5 내지 100 mg 범위의 양의 활성 성분을 포함하는 정제 또는 캡슐로서 제공될 수 있다. 인간 또는 다른 포유동물에 적합한 1일 용량은 환자의 상태 및 다른 인자에 따라 광범위하게 달라질 수 있지만, 상용 방법을 사용하여 결정될 수 있다.

본원에서 고려되는 임의의 제약 조성물은, 예를 들어 임의의 허용되고 적합한 경구 제제를 통해 경구로 전달될 수 있다. 예시적인 경구 제제는, 예를 들어 정제, 트로키, 로젠지, 수성 및 유성 현탁액, 분산성 분말 또는 과립, 에멀젼, 경질 및 연질 캡슐, 액체 캡슐, 시럽 및 엘릭시르를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 경구 투여를 위해 의도되는 제약 조성물은 경구 투여를 위해 의도되는 제약 조성물을 제조하는 것에 대한 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법에 따라 제조될 수 있다. 제약상 맛우수한 제제를 제공하기 위해, 본 발명에 따른 제약 조성물은 감미제, 향미제, 착색제, 완화제, 항산화제, 및 보존제로부터 선택되는 적어도 1종의 작용제를 함유할 수 있다.

정제는, 예를 들어 화학식 (I)의 적어도 1종의 화합물을 정제의 제조에 적합한 적어도 1종의 비-독성 제약상 허용되는 부형제와 혼합함으로써 제조될 수 있다. 예시적인 부형제는, 예를 들어 불활성 희석제, 예컨대 예를 들어 탄산칼슘, 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 및 인산나트륨; 과립화제 및 붕해제, 예컨대 예를 들어 미세결정질 셀룰로스, 소듐 크로스카르멜로스, 옥수수 전분 및 알긴산; 결합제, 예컨대 예를 들어 전분, 젤라틴, 폴리비닐-피롤리돈 및 아카시아; 및 윤활제, 예컨대 예를 들어 스테아르산마그네슘, 스테아르산 및 활석을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 추가적으로, 정제는 비코팅되거나, 또는 불쾌한 맛이 나는 약물의 나쁜 맛을 차폐하거나 또는 위장관에서의 활성 성분의 붕해 및 흡수를 지연시켜 활성 성분의 효과를 보다 긴 기간 동안 지속시키기 위해 공지된 기술에 의해 코팅될 수 있다. 예시적인 수용성 맛 차폐 물질은 히드록시프로필-메틸셀룰로스 및 히드록시프로필-셀룰로스를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 예시적인 시간 지연 물질은 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트 부티레이트를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

경질 젤라틴 캡슐은, 예를 들어 화학식 (I)의 적어도 1종의 화합물을 적어도 1종의 불활성 고체 희석제, 예컨대, 예를 들어, 탄산칼슘; 인산칼슘; 및 카올린과 혼합함으로써 제조될 수 있다.

연질 젤라틴 캡슐은, 예를 들어 화학식 (I)의 적어도 1종의 화합물을 적어도 1종의 수용성 담체, 예컨대, 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜; 및 적어도 1종의 오일 매질, 예컨대, 예를 들어, 땅콩 오일, 액체 파라핀, 및 올리브 오일과 혼합함으로써 제조될 수 있다.

수성 현탁액은, 예를 들어 화학식 (I)의 적어도 1종의 화합물을 수성 현탁액의 제조에 적합한 적어도 1종의 부형제와 혼합함으로써 제조될 수 있다. 수성 현탁액의 제조에 적합한 예시적인 부형제는 예를 들어 현탁화제, 예컨대 예를 들어 소듐 카르복시메틸셀룰로스, 메틸셀룰로스, 히드록시프로필메틸-셀룰로스, 알긴산나트륨, 알긴산, 폴리비닐-피롤리돈, 트라가칸트 검 및 아카시아 검; 분산제 또는 습윤제, 예컨대 예를 들어 자연-발생 포스파티드, 예를 들어 레시틴; 알킬렌 옥시드와 지방산의 축합 생성물, 예컨대 예를 들어 폴리옥시에틸렌 스테아레이트; 에틸렌 옥시드와 장쇄 지방족 알콜의 축합 생성물, 예컨대 예를 들어 헵타데카에틸렌-옥시세탄올; 에틸렌 옥시드와 지방산 및 헥시톨로부터 유도된 부분 에스테르의 축합 생성물, 예컨대 예를 들어 폴리옥시에틸렌 소르비톨 모노올레에이트; 및 에틸렌 옥시드와 지방산 및 헥시톨 무수물로부터 유도된 부분 에스테르의 축합 생성물, 예컨대 예를 들어 폴리에틸렌 소르비탄 모노올레에이트를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 수성 현탁액은 또한 적어도 1종의 보존제, 예컨대, 예를 들어 에틸 및 n-프로필 p-히드록시벤조에이트; 적어도 1종의 착색제; 적어도 1종의 향미제; 및/또는 예를 들어 수크로스, 사카린, 및 아스파르탐을 포함하나 이에 제한되지는 않는 적어도 1종의 감미제를 함유할 수 있다.

유성 현탁액은, 예를 들어 화학식 (I)의 적어도 1종의 화합물을 식물성 오일, 예컨대, 예를 들어, 아라키스 오일; 올리브 오일; 참깨 오일; 및 코코넛 오일; 또는 미네랄 오일, 예컨대, 예를 들어, 액체 파라핀 중에 현탁시킴으로써 제조될 수 있다. 유성 현탁액은 또한 적어도 1종의 증점제, 예컨대, 예를 들어 밀랍; 경질 파라핀; 및 세틸 알콜을 함유할 수 있다. 맛우수한 유성 현탁액을 제공하기 위해, 상기에 이미 기재된 감미제 중 적어도 1종 및/또는 적어도 1종의 향미제가 유성 현탁액에 첨가될 수 있다. 유성 현탁액은, 예를 들어 항산화제, 예컨대, 예를 들어 부틸화 히드록시아니솔 및 알파-토코페롤을 포함하나 이에 제한되지는 않는 적어도 1종의 보존제를 추가로 함유할 수 있다.

분산성 분말 및 과립은, 예를 들어 화학식 (I)의 적어도 1종의 화합물을 적어도 1종의 분산제 및/또는 습윤제; 적어도 1종의 현탁화제; 및/또는 적어도 1종의 보존제와 혼합함으로써 제조될 수 있다. 적합한 분산제, 습윤제, 및 현탁화제는 상기에 이미 기재된 바와 같다. 예시적인 보존제는, 예를 들어 항산화제, 예를 들어 아스코르브산을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 또한, 분산성 분말 및 과립은, 예를 들어 감미제; 향미제; 및 착색제를 포함하나 이에 제한되지는 않는 적어도 1종의 부형제를 또한 함유할 수 있다.

화학식 (I)의 적어도 1종의 화합물의 에멀젼은 예를 들어 수중유 에멀젼으로서 제조될 수 있다. 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 에멀젼의 유성 상은 공지된 성분으로부터 공지된 방식으로 구성될 수 있다. 오일 상은, 예를 들어 식물성 오일, 예컨대, 예를 들어 올리브 오일 및 아라키스 오일; 미네랄 오일, 예컨대, 예를 들어 액체 파라핀; 및 그의 혼합물에 의해 제공될 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 상은 단지 유화제만을 포함할 수 있지만, 이는 적어도 1종의 유화제와 지방 또는 오일 또는 지방 및 오일 둘 다의 혼합물을 포함할 수 있다. 적합한 유화제는, 예를 들어 자연 발생 포스파티드, 예를 들어 대두 레시틴; 지방산 및 헥시톨 무수물로부터 유도된 에스테르 또는 부분 에스테르, 예컨대, 예를 들어 소르비탄 모노올레에이트; 및 부분 에스테르와 에틸렌 옥시드의 축합 생성물, 예컨대, 예를 들어 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 바람직하게는, 친수성 유화제는 안정화제로서 작용하는 친지성 유화제와 함께 포함된다. 또한 오일 및 지방 둘 다를 포함하는 것이 바람직하다. 이와 함께, 안정화제(들) 포함 또는 불포함 유화제(들)는 소위 유화 왁스를 구성하고, 왁스는 오일 및 지방과 함께, 크림 제제의 유성 분산 상을 형성하는 소위 유화 연고 베이스를 구성한다. 에멀젼은 또한 감미제, 향미제, 보존제, 및/또는 항산화제를 함유할 수 있다. 본 발명의 제제에 사용하기에 적합한 유화제 및 에멀젼 안정화제는 트윈(Tween) 60, 스팬(Span) 80, 세토스테아릴 알콜, 미리스틸 알콜, 글리세릴 모노스테아레이트, 소듐 라우릴 술페이트, 글리세릴 디스테아레이트를 단독으로 또는 왁스와 함께, 또는 관련 기술분야에 널리 공지된 다른 물질과 함께 포함한다.

화학식 (I)의 화합물은, 예를 들어 또한 임의의 제약상 허용되고 적합한 주사가능한 형태를 통해 정맥내로, 피하로 및/또는 근육내로 전달될 수 있다. 예시적인 주사가능한 형태는, 예를 들어 허용되는 비히클 및 용매, 예컨대, 예를 들어 물, 링거액, 및 등장성 염화나트륨 용액을 포함하는 멸균 수용액; 멸균 수중유 마이크로에멀젼; 및 수성 또는 유질 현탁액을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

비경구 투여를 위한 제제는 수성 또는 비-수성 등장성 멸균 주사 용액 또는 현탁액의 형태일 수 있다. 이들 용액 및 현탁액은 경구 투여를 위한 제제에 사용하기 위한 것으로 언급된 담체 또는 희석제 중 1종 이상을 사용하거나, 또는 다른 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용함으로써 멸균 분말 또는 과립으로부터 제조될 수 있다. 화합물은 물, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 에탄올, 옥수수 오일, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 참깨 오일, 벤질 알콜, 염화나트륨, 트라가칸트 검, 및/또는 다양한 완충제 중에 용해될 수 있다. 다른 아주반트 및 투여 방식이 제약 기술분야에 널리 및 광범위하게 공지되어 있다. 활성 성분은 또한 염수, 덱스트로스 또는 물을 포함한 적합한 담체, 또는 시클로덱스트린 (즉, 캅티솔(Captisol)), 공용매 가용화제 (즉, 프로필렌 글리콜) 또는 미셀 가용화제 (즉, 트윈 80)와의 조성물로서 주사에 의해 투여될 수 있다.

멸균 주사가능한 제제는 또한, 예를 들어, 1,3-부탄디올 중 용액으로서, 비-독성 비경구로 허용되는 희석제 또는 용매 중 멸균 주사가능한 용액 또는 현탁액일 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균 고정 오일이 용매 또는 현탁 매질로서 통상적으로 사용된다. 이러한 목적을 위해 합성 모노- 또는 디글리세리드를 포함한 임의의 무자극 고정 오일이 사용될 수 있다. 또한, 지방산, 예컨대 올레산이 주사제의 제조에 사용된다.

멸균 주사가능한 수중유 마이크로에멀젼은, 예를 들어 1) 화학식 (I)의 적어도 1종의 화합물을 유성 상, 예컨대, 예를 들어 대두 오일 및 레시틴의 혼합물 중에 용해시키고; 2) 화학식 (I) 함유 오일 상을 물 및 글리세롤 혼합물과 조합하고; 3) 조합물을 가공하여 마이크로에멀젼을 형성함으로써 제조될 수 있다.

멸균 수성 또는 유질 현탁액은 관련 기술분야에 이미 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다. 예를 들어, 멸균 수용액 또는 현탁액은 비-독성 비경구로 허용되는 희석제 또는 용매, 예컨대, 예를 들어 1,3-부탄 디올을 사용하여 제조될 수 있고; 멸균 유질 현탁액은 멸균 비-독성 허용되는 용매 또는 현탁 매질, 예컨대 예를 들어 멸균 고정 오일, 예를 들어 합성 모노- 또는 디글리세리드; 및 지방산, 예컨대, 예를 들어 올레산을 사용하여 제조될 수 있다.

본 발명의 제약 조성물에 사용될 수 있는 제약상 허용되는 담체, 아주반트 및 비히클은 이온 교환체, 알루미나, 스테아르산알루미늄, 레시틴, 자기-유화 약물 전달 시스템 (SEDDS) 예컨대 d-알파-토코페롤 폴리에틸렌글리콜 1000 숙시네이트, 제약 투여 형태에 사용되는 계면활성제 예컨대 트윈, 폴리에톡실화 피마자 오일 예컨대 크레모포르 계면활성제 (바스프(BASF)), 또는 다른 유사한 중합체 전달 매트릭스, 혈청 단백질, 예컨대 인간 혈청 알부민, 완충제 물질 예컨대 포스페이트, 글리신, 소르브산, 소르브산칼륨, 포화 식물성 지방산, 물, 염 또는 전해질의 부분 글리세리드 혼합물, 예컨대 프로타민 술페이트, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨, 아연 염, 콜로이드성 실리카, 삼규산마그네슘, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스-기재 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 카르복시메틸셀룰로스, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모 지방을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 시클로덱스트린, 예컨대 알파-, 베타- 및 감마-시클로덱스트린, 또는 화학적으로 변형된 유도체, 예컨대 히드록시알킬시클로덱스트린 (2- 및 3-히드록시프로필-시클로덱스트린 포함), 또는 다른 가용화된 유도체가 또한 본원에 기재된 화학식의 화합물의 전달을 증진시키는 데 유리하게 사용될 수 있다.

제약 조성물은 화학식 (I)의 화합물을 포함한 하나 이상의 단위 투여 형태를 함유할 수 있는 팩 또는 분배기 장치로 제공될 수 있다. 팩은 예를 들어, 금속 또는 플라스틱 호일, 예컨대 블리스터 팩을 포함할 수 있다. 팩 또는 분배기 장치에는 투여에 대한 지침서가 동반될 수 있다.

본 발명의 제약 활성 화합물은 인간 및 다른 포유동물을 포함한 환자에게 투여하기 위한 의약 작용제를 제조하기 위해 통상적인 약학 방법에 따라 가공될 수 있다. 제약 조성물은 통상적인 제약 작업, 예컨대 멸균에 적용될 수 있고/거나, 통상적인 아주반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제 및 완충제를 함유할 수 있다. 정제 및 환제는 추가적으로 장용 코팅을 갖는 것으로 제조될 수 있다. 이러한 조성물은 또한 아주반트, 예컨대 습윤제, 감미제, 향미제, 및 퍼퓸제를 포함할 수 있다.

본 발명의 화합물 및/또는 조성물을 사용하여 질환 상태를 치료하기 위해 투여되는 화합물의 양 및 투여 요법은 연령, 체중, 성별, 대상체의 의학적 상태, 질환의 유형, 질환의 중증도, 투여 경로 및 빈도, 및 사용되는 특정한 화합물을 포함한 다양한 인자에 따라 달라진다. 따라서, 투여 요법은 광범위하게 달라질 수 있지만, 표준 방법을 사용하여 상용적으로 결정될 수 있다. 약 0.001 내지 100 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 0.0025 내지 약 50 mg/kg 체중, 및 가장 바람직하게는 약 0.005 내지 10 mg/kg 체중의 1일 용량이 적절할 수 있다. 1일 용량은 1일에 1 내지 4회 용량으로 투여될 수 있다. 다른 투여 스케줄은 1주에 1회 용량 및 2일에 1회 용량 사이클을 포함한다.

치료 목적을 위해, 본 발명의 활성 화합물은 지시된 투여 경로에 적절한 1종 이상의 아주반트와 통상적으로 조합된다. 경구로 투여되는 경우에, 화합물은 락토스, 수크로스, 전분 분말, 알칸산의 셀룰로스 에스테르, 셀룰로스 알킬 에스테르, 활석, 스테아르산, 스테아르산마그네슘, 산화마그네슘, 인산 및 황산의 나트륨 및 칼슘 염, 젤라틴, 아카시아 검, 알긴산나트륨, 폴리비닐피롤리돈 및/또는 폴리비닐 알콜과 혼합된 다음, 편리한 투여를 위해 정제화 또는 캡슐화될 수 있다. 이러한 캡슐 또는 정제는, 히드록시프로필메틸 셀룰로스 중 활성 화합물의 분산액에 제공될 수 있는 바와 같이, 제어-방출 제제를 함유할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 화학식 (I)의 적어도 1종의 화합물 및 임의로 임의의 제약상 허용되는 담체, 아주반트, 및 비히클로부터 선택되는 추가의 작용제를 포함한다. 본 발명의 대안적 조성물은 본원에 기재된 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 전구약물, 및 제약상 허용되는 담체, 아주반트, 또는 비히클을 포함한다.

제약 조성물은 다른 치료제를 함유할 수 있고, 예를 들어 기술 예컨대 제약 제제 기술분야에 널리 공지된 것에 따라 통상적인 고체 또는 액체 비히클 또는 희석제, 뿐만 아니라 목적하는 투여 방식에 적절한 유형의 제약 첨가제 (예를 들어, 부형제, 결합제, 보존제, 안정화제, 및 향미제)를 사용함으로써 제제화될 수 있다.

본 발명은 또한 제조 물품을 포괄한다. 본원에 사용된 제조 물품은 키트 및 패키지를 포함하나 이에 제한되지는 않는 것으로 의도된다. 본 발명의 제조 물품은 (a) 제1 용기; (b) 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 형태를 포함하는 제1 치료제를 포함하는, 제1 용기 내에 배치된 제약 조성물; 및 (c) 제약 조성물이 심혈관 장애, 이뇨, 및/또는 나트륨이뇨의 치료에 사용될 수 있다는 것을 명시한 패키지 삽입물을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 패키지 삽입물은 제약 조성물이 심혈관 장애, 이뇨 및/또는 나트륨이뇨를 치료하기 위해 제2 치료제와 조합하여 (상기 정의된 바와 같음) 사용될 수 있다는 것을 명시한다. 제조 물품은 추가로 (d) 제2 용기를 포함할 수 있으며, 여기서 성분 (a) 및 (b)는 제2 용기 내에 배치되고, 성분 (c)는 제2 용기 내에 또는 그 외부에 배치된다. 제1 및 제2 용기 내에 배치된다는 것은 각각의 용기가 그의 경계 내에 항목을 보유한다는 것을 의미한다.

제1 용기는 제약 조성물을 보유하는 데 사용되는 리셉터클이다. 이러한 용기는 제조, 저장, 수송 및/또는 개별/벌크 판매를 위한 것일 수 있다. 제1 용기는 제약 제품의 제조, 보유, 저장 또는 분배를 위해 사용되는 병, 단지, 바이알, 플라스크, 시린지, 튜브 (예를 들어, 크림 제제용) 또는 임의의 다른 용기를 포함하는 것으로 의도된다.

제2 용기는 제1 용기 및 임의로 패키지 삽입물을 보유하는 데 사용되는 것이다. 제2 용기의 예는 박스 (예를 들어, 카드보드 또는 플라스틱), 크레이트, 카톤, 백 (예를 들어, 종이 또는 플라스틱 백), 파우치 및 봉지를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 패키지 삽입물은 테이프, 접착제, 스테이플 또는 또 다른 부착 방법을 통해 제1 용기의 외부에 물리적으로 부착될 수 있거나, 또는 제1 용기에 대한 임의의 물리적 부착 수단 없이 제2 용기의 내부에 놓일 수 있다. 대안적으로, 패키지 삽입물은 제2 용기의 외부에 배치된다. 제2 용기의 외부에 배치되는 경우에, 패키지 삽입물은 테이프, 접착제, 스테이플 또는 또 다른 부착 방법을 통해 물리적으로 부착되는 것이 바람직하다. 대안적으로, 이는 물리적으로 부착되지 않으면서 제2 용기의 외부에 인접해 있거나 또는 접촉되어 있을 수 있다.

패키지 삽입물은 제1 용기 내에 배치된 제약 조성물에 관한 정보를 열거한 라벨, 태그, 마커, 또는 다른 기입된 시트이다. 열거되는 정보는 통상적으로 제조 물품이 판매되는 지역을 관할하는 규제 기관 (예를 들어, 미국 식품 의약품국)에 의해 결정될 것이다. 바람직하게는, 패키지 삽입물은 제약 조성물이 승인받았음에 대한 표시를 구체적으로 열거한다. 패키지 삽입물은 사람이 그 안에 또는 그 위에 담긴 정보를 읽을 수 있는 임의의 물질로 제조될 수 있다. 바람직하게는, 패키지 삽입물은 그 위에 목적하는 정보가 형성 (예를 들어, 인쇄 또는 적용)된 인쇄가능한 물질 (예를 들어, 종이, 플라스틱, 카드보드, 호일, 접착성-이면 종이 또는 플라스틱)이다.

유용성

본 발명의 화합물은 ROMK의 활성을 억제한다. 따라서, 화학식 (I)의 화합물은 ROMK의 억제와 연관된 상태를 치료하는 데 유용성을 갖는다.

본원에 기재된 화합물은 신체로부터의 물 및 나트륨의 증가된 배설로부터 이익을 얻는 임의의 장애의 치료 및/또는 예방을 위해, 또는 이뇨 또는 나트륨이뇨를 필요로 하는 임의의 환자를 위해 의도된다. 구체적 장애는 임의의 형태의 고혈압 또는 심부전 (급성-대상부전성 및 만성, 확장기 및 수축기)을 포함할 것이다. 심부전 치료의 경우에, 화합물은 급성-대상부전성 심부전을 치료하여 부종 및 다른 증상을 감소시키고/거나 다른 부류의 이뇨제에 대한 내성을 극복하거나, 또는 병원 체류를 단축시키기 위해 사용될 것이다. 화합물은 또한 병원 퇴원 후, 또는 만성 요법 동안 급성-대상부전의 증상을 치료하고 그의 재발을 감소시키기 위해, 및 병원 입원 동안 심부전에 사용될 수 있다. 이뇨제 또는 나트륨이뇨제 또는 둘 다가 치료적 또는 예방적 이익을 가질 다른 장애는 수술후 용적 과부하, 특발성 부종을 포함한 임의의 부종성 상태, 폐동맥 고혈압을 포함한 폐고혈압, 심기능부전, 신증후군 및 급성 신장 기능부전을 포함한다.

본 발명에 따른 화합물은 다양한 인간 병의 치료 및/또는 예방에 유익하다. 본 발명에 따른 화합물은 표준 단독 요법으로서 또는 치료상 보다 큰 이익을 제공할 수 있는 다른 요법과 조합되어 유익할 수 있다. 본 발명의 화합물이 유익할 수 있는 병은 심혈관 질환; 및 이뇨 또는 나트륨이뇨의 촉진을 포함한다.

한 실시양태는 심혈관 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 특정한, 심혈관 질환은 고혈압, 관상동맥 심장 질환, 졸중, 심부전, 수축기 심부전, 확장기 심부전, 당뇨병성 심부전, 급성-대상부전성 심부전, 수술후 용적 과부하, 특발성 부종, 폐고혈압, 폐동맥 고혈압, 심기능부전, 신증후군, 및 급성 신장 기능부전을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 예를 들어, 장애를 치료하기 위한 치료 유효량은 본 발명의 실시양태의 방법으로 투여될 수 있다.

1종 이상의 추가의 약리학적 활성제는 임의의 다른 이뇨제 부류로부터의 임의의 다른 이뇨제 (티아지드, 루프, 칼륨-보존성, 삼투성, 탄산 안히드라제 억제제, 미네랄로코르티코이드 수용체 길항제), 아세틸콜린에스테라제 억제제, 안지오텐신 수용체 차단제, 중성 엔도펩티다제 억제제, 이중 안지오텐신 수용체 길항제 및 중성 엔도펩티다제 억제제, 알도스테론 길항제, 나트륨이뇨 펩티드, 칼슘 채널 차단제, 렐락신 또는 렐락신 모방체, 수축촉진제, 말초 혈관확장제 또는 미네랄로코르티코이드 수용체 길항제를 포함하며, 본원에 기재된 화합물과 조합하여 투여될 수 있다. 한 실시양태는 요법에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물을 제공한다. 본 발명의 실시양태에서, 요법에서의 사용은 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물의 투여를 포함할 수 있다.

본 발명은 또한 심혈관 질환의 치료를 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도를 제공한다. 본 발명의 실시양태에서, 의약의 제조를 위한 용도는 심혈관 질환의 치료를 위한 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물의 투여를 포함할 수 있다.

본 발명은 또한 이뇨 또는 나트륨이뇨의 촉진을 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도를 제공한다.

한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물은 탈륨 유동 검정에 의해 측정 시 ROMK 활성을 10 μM 미만, 예를 들어 0.001 내지 10 μM 미만의 IC₅₀ 값으로 억제한다. 바람직하게는, 화학식 (I)의 화합물은 ROMK 활성을 1 μM 미만, 예를 들어 0.001 내지 1 μM 미만의 IC₅₀ 값으로 억제한다. 다른 화합물은 ROMK 활성을 100 nM 이하, 예를 들어 1 내지 100 nM의 IC₅₀ 값으로 억제한다.

하기 "실시예" 섹션에 명시된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물의 예는 하기 기재된 검정 중 1종 이상에서 시험되었다.

제조 방법

하기는 사용된 기호의 정의이다.

합성

본 발명의 화합물의 제조에 적용가능할 수 있는 합성 방법의 특히 유용한 일람은 문헌 [Larock, R.C., Comprehensive Organic Transformations, VCH, New York (1989)]에서 찾아볼 수 있다. 바람직한 방법은 하기 기재된 방법을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 본원에 인용되는 모든 참고문헌은 그 전체 내용이 본원에 참조로 포함된다.

본 발명의 신규 화합물은 본 섹션에 기재된 반응 및 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 또한, 하기 기재된 합성 방법의 설명에서, 용매, 반응 분위기, 반응 온도, 실험 지속기간 및 후처리 절차의 선택을 포함한 모든 제안된 반응 조건은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 인식되어야 하는 그 반응에 대해 표준인 조건이도록 선택되는 것으로 이해되어야 한다. 반응 조건과 상용성인 치환기에 대한 제한은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 자명할 것이며, 이에 따라 대안적 방법이 사용되어야 한다.

또한, 본 분야의 임의의 합성 경로의 계획 시의 또 다른 주요 고려사항은 본 발명에 기재된 화합물에 존재하는 반응성 관능기의 보호에 사용되는 보호기의 신중한 선택인 것으로 인식될 것이다. 숙련된 실무자에 대한 많은 대안을 기재하고 있는 권위있는 설명은 그리니 (Greene) 등이다 (Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley and Sons (1991)).

반응식 1:

화학식 D의 중간체는 반응식 1에 따라 합성할 수 있다.

치환된 에폭시드 (A)는 적절한 아민과 반응시켜 (B)로 전환시켰다. B는 적절하게 치환된 알킬 아민 또는 알킬/아실할라이드과 함께 알킬화, 아실화 또는 미츠노부 반전 반응에 적용시켜 (C)를 생성하였다. 화합물 C는 Pd/C의 존재 하에 클로로에틸클로로포르메이트, TFA 또는 수소화를 사용하여 탈보호한 다음, 고리화하여 중간체 (D)를 생성하였다. 중간체 D (X = N)는 또한 적절하게 치환된 아릴 할라이드 (E)를 사용하여 대안적 경로에 의해 합성하고, E는 적절하게 치환된 할로 피라진의 스즈키 커플링을 사용하여 (F)로 전환시킨 다음, 팔라듐(II) 아세테이트의 존재 하에 수소 압력 하에 F를 환원시켜 중간체 (D)를 생성하였다.

반응식 2:

화학식 I의 중간체는 반응식 2에 따라 합성할 수 있다.

적절하게 치환된 아릴 할라이드 (E)는 N-보호 및 적절하게 치환된 피페리디논/피롤리디논의 존재 하에 C-H 활성화 반응에 적용시켜 H를 생성하였다. 화합물 H는 환원 및/또는 플루오린화에 적용시킨 다음, N-탈보호하여 화학식 (I)의 중간체를 생성하였다.

반응식 3:

화학식 K, L, N 및 O의 화합물은 반응식 3에 따라 합성할 수 있다.

알데히드 J 및 M은 문헌 절차에 따라 합성하고, J 및 M은 소듐 트리아세톡시보로히드라이드와 같은 보란 시약 및 적절하게 치환된 중간체 (D 또는 I)로 환원성 아미노화에 적용시켜 화학식 K, L, N 및 O의 화합물을 생성하였다.

반응식 4:

화학식 Q 및 R의 화합물은 반응식 4에 따라 합성할 수 있다.

중간체 P 및 C는 문헌 절차에 따라 합성하였다. 중간체 P 및 C는 탈보호에 적용시키고, 소듐 시아노보로히드라이드와 같은 보란 시약의 존재 하에 적절하게 치환된 알데히드 (J 또는 M)로 탈보호된 아민을 환원성 아미노화한 다음, 고리화하여 화학식 Q 및 R의 화합물을 생성하였다.

일반적 방법:

달리 나타낸 경우를 제외하고, 하기 방법을 작업 실시예에 사용하였다.

실시예의 특징화에 사용된 분석용 HPLC 및 HPLC/MS 방법:

역상 분석용 HPLC/MS는 워터스(Waters) ZMD 질량 분광계와 커플링된 시마즈(Shimadzu) LC10AS 시스템 또는 워터스 마이크로매스(Waters Micromass) ZQ 질량 분광계와 커플링된 워터스 액퀴티(Waters Aquity) 시스템 상에서 수행하였다. 키랄 분석용 LC는 베르게르(Berger) 분석용 SFC 기기 상에서 수행하였다.

방법 A: 아센티스 익스프레스(Ascentis Express) C18 (2.1 x 50 mm) 2.7 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴, 0.1% TFA; 용매 B: 95% 아세토니트릴, 5% 물, 0.1% TFA; 온도: 50℃; 구배: 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 1분 유지; 유량: 1.1 mL/분, UV 220 nm.

방법 B: 아센티스 익스프레스 C18 (2.1 x 50 mm) 2.7 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴, 10 mM 아세트산암모늄 포함; 용매 B: 95% 아세토니트릴, 5% 물, 10 mM 아세트산암모늄 포함; 온도: 50℃; 구배: 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 1분 유지; 유량: 1.1 mL/분, UV 220 nm.

방법 C: 선파이어(SunFire) C18 (4.6 x 150 mm) 5.0 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 구배: 15분에 걸쳐 50-100% B, 이어서 100% B에서 5분 유지; 유량: 1.1 mL/분, UV 220 nm.

방법 D: 키네텍스(Kinetex), XB C18 (2.6 μm x 75.3 mm); 용매 A: 98% 물, 2% 아세토니트릴 중 10 mM NH₄CO₂H; 용매 B: 2% 물, 98% 아세토니트릴 중 10 mM NH₄CO₂H, 구배: 4분에 걸쳐 20-100% B, 이어서 100% B에서 0.6분 유지; 유량: 1.1 mL/분, UV 220 nm.

방법 E: 선파이어 C18 (4.6 x 150 mm) 3.5 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 구배: 25분에 걸쳐 10-100% B, 이어서 100% B에서 5분 유지; 유량: 1.1 mL/분, UV 254 nm.

방법 F: 선파이어 C18 (4.6 x 150 mm) 3.5 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 구배: 18분에 걸쳐 10-100% 용매 B, 이어서 100% B에서 5분 유지; 유량: 1.1 mL/분, UV 220 nm.

방법 G: 엑스브리지 페닐(XBridge Phenyl) (4.6 x 150 mm) 3.5 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 구배: 18분에 걸쳐 10-100% 용매 B, 이어서 100% B에서 5분 유지; 유량: 1.1 mL/분, UV 220 nm.

방법 H: 조르박스(ZORBAX) SB C18 (4.6 x 50 mm) 5.0 마이크로미터; 용매 A: 98% 물, 2% 아세토니트릴 중 10 mM NH₄CO₂H; 용매 B: 2% 물, 98% 아세토니트릴 중 10 mM NH₄CO₂H, 구배: 4분에 걸쳐 30-100% B, 이어서 100% B에서 0.6분 유지; 유량: 1.0 mL/분, UV 220 nm.

방법 I: 액퀴티 BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴 중 10 mM 아세트산암모늄; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴 중 10 mM 아세트산암모늄, 구배: 1.1분에 걸쳐 20-90% B, 이어서 90% B에서 0.7분 유지; 유량: 0.5 mL/분, UV 220 nm.

방법 J: 키네텍스 XB-C18 (3 x 75 mm) 2.6 마이크로미터; 용매 A: 물 중 0.1% HCOOH; 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 1.1분에 걸쳐 20-90% B, 이어서 90% B에서 0.7분 유지; 유량: 0.5 mL/분, UV 220 nm.

방법 K: 키네텍스 C18 (2.1 x 50 mm) 2.6 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴 중 5 mM 아세트산암모늄; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴 중 5 mM 아세트산암모늄, 구배: 1.1분에 걸쳐 20-90% B, 이어서 90% B에서 0.6분 유지; 유량: 0.7 mL/분, UV 220 nm.

방법 L: 액퀴티 BEH C18 (3 x 50 mm) 1.7 마이크로미터; 용매 A: 물 중 0.1% TFA, 용매 B: ACN 중 0.1% TFA, 구배: 1.0분에 걸쳐 20-90% B, 이어서 90% B에서 0.6분 유지; 유량: 0.7 mL/분, UV 220 nm.

방법 M: 엑스브리지 페닐 (21.2 x 250 ID) 5 마이크로미터; 용매 A: 물 중 0.1% TFA, 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 1.0분에 걸쳐 5-25% B, 이어서 90% B에서 0.6분 유지; 유량: 0.7 mL/분, UV 220 nm.

방법 N: 조르박스 SB C18 (4.6 x 50 mm) 5.0 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴 중 0.1 % TFA; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴 중 0.1 % TFA, 구배: 3분에 걸쳐 0-100% B; 유량: 1.1 mL/분, UV 220 nm.

방법 O: 액퀴티 UPLC BEH C18 (3 x 50 mm) 1.7 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴 중 5 mM 아세트산암모늄; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴 중 5 mM 아세트산암모늄, 구배: 1.1분에 걸쳐 20-90% B, 이어서 90% B에서 0.6분 유지; 유량: 0.7 mL/분, UV 220 nm.

방법 P: 키네텍스 EVO C18 (4.6 x 100 mm) 2.6 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 구배: 11분에 걸쳐 20-100% B, 이어서 100% B에서 1.5분 유지; 유량: 1.0 mL/분, UV 300 nm.

방법 Q: 키네텍스 비페닐(Kinetex Biphenyl) (4.6 x 11 mm) 2.6 마이크로미터; 용매 A: 물 중 0.05% TFA; 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 11분에 걸쳐 20-100% B, 이어서 100% B에서 1.5분 유지; 유량: 1.0 mL/분, UV 300 nm.

방법 R: 엑스브리지 BEH XP C18 (2.1 x 50 mm) 2.5 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴 중 0.1 % TFA; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴 중 0.1 % TFA, 구배: 3분에 걸쳐 0-100% B; 유량: 1.1 mL/분, UV 220 nm.

방법 S: 엑스브리지 BEH XP C18 (2.1 x 50 mm) 2.5 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴 중 10 mM 아세트산암모늄; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴 중 10 mM 아세트산암모늄, 구배: 3분에 걸쳐 0-100% B; 유량: 1.1 mL/분, UV 220 nm.

방법 T: DAD-1 키네텍스 비페닐 (4.6 x 100 mm) 2.6 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 구배: 12.5분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 1.5분 유지; 유량: 1.0 mL/분, UV 300 nm.

방법 U: DAD-1 키네텍스 EVO C18 (4.6 x 100 mm) 2.6 마이크로미터; 용매 A: 95% 물, 5% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 용매 B: 5% 물, 95% 아세토니트릴, 0.05% TFA; 구배: 12.5분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 1.5분 유지; 유량: 1.0 mL/분, UV 300 nm.

SFC 및 키랄 순도 방법:

방법 I: 룩스 아밀로스(Lux Amylose) 2 (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; n-헥산:EtOH: 5:95 중 0.2% DEA, 유량: 2.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 270 nm.

방법 II: 키랄팩(Chiralpak) AS-H (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; n-헥산:EtOH: 5:95 중 0.2% DEA, 유량: 2.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 270 nm.

방법 III: 키랄팩 IE (250 x 4.6 mm) 5.0 마이크로미터; EtOH 중 0.2% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 220 nm.

방법 IV: 키랄셀(Chiralcel) IE (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; n-헥산:EtOH: 50:50 중 0.2% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 260 nm.

방법 V: 키랄팩 IB (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; EtOH 중 0.1% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 270 nm.

방법 VI: 키랄팩 ID (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; EtOH 중 0.1% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 254 nm.

방법 VII: 키랄팩 IF (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; EtOH 중 0.2% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 254 nm.

방법 VIII: 키랄팩 IA (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% DEA, 유량: 4.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 280 nm.

방법 IX: 키랄팩 ID (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; n-헥산:EtOH (10:90) 중 0.2% TEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 254 nm.

방법 X: 키랄셀 OJ-H (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% DEA, 유량: 4.0 mL/분, 온도: 30℃, UV: 296 nm.

방법 XI: 키랄팩 IC (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.1% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 254 nm.

방법 XII: 키랄팩 ADH (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH + IPA (1:1) 중 0.2% DEA, 유량: 1.2 mL/분, 온도: 25℃, UV: 233 nm.

방법 XIII: 키랄팩 AS-H (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% DEA, 유량: 1.2 mL/분, 온도: 23.3℃, UV: 271 nm.

방법 XIV: 키랄팩 IB (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 254 nm.

방법 XV: 키랄팩 ID (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 254 nm.

방법 XVI: 룩스 아밀로스 2 (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.1% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 254 nm.

방법 XVII: 키랄팩 IF (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 254 nm.

방법 XVIII: 키랄팩 IE (250 x 4.6 mm) 5.0 마이크로미터; MOH 중 0.2% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 220 nm.

방법 XIX: 룩스 셀룰로스 4 (250 x 4.6 mm) 5.0 마이크로미터; EtOH 중 0.1% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 220 nm.

방법 XX: 키랄셀 OD-H (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 220 nm.

방법 XXI: 키랄셀 OD-H (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 및 ACN (1:1) 중 0.2% NH₄OH, 유량: 4.0 mL/분, 온도: 30℃, UV: 290 nm.

방법 XXII: 룩스 셀룰로스 C2 (250 x 4.6 mm) 5.0 마이크로미터; MeOH 중 0.2 % DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 220 nm.

방법 XXIII: 페노메넥스 IC (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; EtOH 중 0.2% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 254 nm.

방법 XXIV: 웰크-1(R,R) (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.1% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 220 nm.

방법 XXV: 셀룰로스-4 (250 x 4.6 mm) 5.0 마이크로미터; ACN 중 0.1% DEA, 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 254 nm.

방법 XXVI: 키랄팩 IC (250 x 4.6 mm) 5.0 마이크로미터; ACN 중 0.2% 암모니아: MeOH (1:1) 유량: 1.0 mL/분, 온도: 25℃, UV: 220 nm

방법 XXVII: 키랄팩 IC (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH + ACN (1:1) 중 0.2% NH₄OH, 유량: 1.2 mL/분. 온도: 30℃, UV: 235 nm

방법 XXVIII: 룩스 셀룰로스-2 (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% NH₄OH, 유량: 1.2 mL/분. 온도: 30℃, UV: 240 nm

실시예의 특징화에 사용된 NMR:

NMR 스펙트럼을 하기와 같은 주파수에서 작동하는 브루커(Bruker) 또는 제올 푸리에(JEOL Fourier) 변환 분광계를 사용하여 수득하였다: ¹H NMR: 400 MHz 또는 300 MHz (브루커). ¹³C NMR: 100 MHz 또는 75 MHz (브루커). 스펙트럼 데이터는 하기 포맷으로 보고된다: 화학적 이동 (다중도, 커플링 상수, 및 수소의 수). 화학적 이동은 테트라메틸실란 내부 표준 (δ 단위, 테트라메틸실란 = 0 ppm)의 ppm 다운필드로 명시되고/거나 용매 피크를 참조하며, ¹H NMR 스펙트럼에서는 CD₂HSOCD₃에 대해 2.49ppm, CD₂HOD에 대해 3.30ppm, 및 CHCl₃에 대해 7.24ppm에서 나타나고, ¹³C NMR 스펙트럼에서는 CD₃SOCD₃에 대해 39.7ppm, CD₃OD에 대해 49.0ppm, 및 CDCl₃에 대해 77.0ppm에서 나타난다. 모든 ¹³C NMR 스펙트럼은 양성자 탈커플링되었다.

중간체 1-I: (R)-4-메틸-5-(옥시란-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 1-II: (S)-4-메틸-5-(옥시란-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

거울상이성질체 둘 다를 문헌 절차 (WO 2010/129379)에 따라 합성하였다.

중간체 2-I: (R)-4-메틸-5-(피페라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2-II: (S)-4-메틸-5-(피페라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2A: 5-브로모-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

문헌 절차 (PCT 국제 출원, 2015095097)에 따라 합성하였다.

중간체 2B: 4-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

디옥산 (200 mL) 중 중간체 2A (12.50 g, 55.10 mmol), 비스피나콜레이토디보론 (20.97 g, 83.00 mmol) 및 아세트산칼륨 (16.21 g, 165.00 mmol)의 용액을 질소로 20분 동안 탈기하였다. PdCl₂(dppf)₂CH₂Cl₂ (4.50 g, 5.51 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 다시 탈기한 다음, 100℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트(Celite)®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 n-헥산으로 세척하여 중간체 2B (8.55 g, 56.70%)를 흑색 고체로서 수득하였다. 화합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.28 - 1.43 (m, 12 H), 2.46 (s, 3 H), 5.41 (s, 2 H), 7.65 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.72 - 7.87 (m, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.43분, [M+H] 275.1.

중간체 2C: 4-메틸-5-(피라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

1,4-디옥산 (100 mL) 및 H₂O (20 mL)의 혼합물 중 2-클로로피라진 (7.94 g, 69.30 mmol), 중간체 2B (19.00 g, 69.30 mmol), 및 삼염기성 인산칼륨 (36.80 g, 173.00 mmol)의 용액을 질소로 10분 동안 탈기하였다. PdCl₂(dppf)₂CH₂Cl₂ (2.83 g, 3.47 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 다시 탈기한 다음, 100℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-330 g, 40% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 2C (13.00 g, 83.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.32 (s, 3 H), 5.50 (s, 2 H), 7.72 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.73 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 8.77 - 8.87 (m, 1 H), 8.91 (d, J = 2.0 Hz, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.06분, [M+H] 227.0.

중간체 2-I 및 2-II:

아세트산 (150 mL) 중 중간체 2C (13.00 g, 57.50 mmol)의 교반 용액에 아세트산팔라듐 (II) (1.94 g, 8.62 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 H₂ 기체 압력 (50 psi) 하에 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, MeOH로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 증발시키고, 라세미체를 MeOH + IPA 중 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) [키랄팩 ADH (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; 0.2% DEA (1:1), 유량: 1.2 mL/분. 온도: 23.8℃, UV: 235 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 2-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 2.98분)을 황색 반고체로서 수득하였다 (4.00 g, 30.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.32 (s, 3 H), 2.37 - 2.39 (m, 1 H), 2.57 - 2.68 (m, 2 H), 2.71 - 2.85 (m, 4 H), 2.91 (d, J = 11.55 Hz, 1 H), 3.94 (dd, J = 9.79, 2.76 Hz, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.64 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-H) 체류 시간 0.74분, [M+H] 233.0.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 3.00분, 99.0% ee.

SOR: [α]²⁵ D = - 52.00 (c 0.05, MeOH).

중간체 2-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 3.90분)을 황색 고체로서 수득하였다 (4.00 g, 30.00%).

LCMS (방법-H) 체류 시간 3.73분, [M+H] 233.0.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 3.73분, 100% ee.

SOR: [α]²⁵ D = + 62.00 (c 0.05, MeOH).

중간체 3-I: (R)-4-메틸-5-(모르폴린-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 3A-I: (R)-5-(2-(벤질(2-히드록시에틸)아미노)-1-히드록시에틸)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

에탄올 (5 mL) 중 중간체 1-I (1.00 g, 5.26 mmol)의 교반 용액에 2-(벤질아미노)에탄올 (0.75 mL, 5.26 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 85℃에서 48시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축시키고, 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 n-헥산 (50 mL)으로 세척하여 중간체 3A-I (1.20 g, 66.90%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.11 (s, 3 H), 2.56 - 2.72 (m, 4 H), 3.40 - 3.53 (m, 3 H), 3.72 (s, 2 H), 4.45 - 4.51 (m, 1 H), 4.98 (dd, J = 7.53, 4.52 Hz, 1 H), 5.27 - 5.37 (m, 2 H), 5.75 (s, 3 H), 7.18 - 7.34 (m, 3 H), 7.62 (s, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.48분, [M+H] 342.2.

중간체 3B-I: (R)-5-(4-벤질모르폴린-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

THF (25 mL) 중 중간체 3A-I (1.20 g, 3.51 mmol)의 용액에 트리-N-부틸포스핀 (1.42 g, 7.03 mmol)에 이어서 DIAD (0.82 mL, 4.22 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (40 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 55% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 3B-I (0.75 g, 66.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.18 - 2.22 (m, 3 H), 2.23 - 2.28 (m, 1 H), 2.51 - 2.56 (m, 1 H), 2.75 (d, J = 12.55 Hz, 1 H), 2.85 (d, J = 11.55 Hz, 1 H), 3.55 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 3.73 - 3.80 (m, 1 H), 3.99 (dd, J = 11.55, 2.01 Hz, 1 H), 4.82 (dd, J = 10.04, 2.51 Hz, 1 H), 5.38 (d, J = 2.01 Hz, 2 H), 7.24 - 7.29 (m, 1 H), 7.34 (d, J = 4.52 Hz, 4 H), 7.58 - 7.70 (m, 2 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.74분, [M+H] 324.2.

중간체 3-I:

에탄올 (50 mL) 중 중간체 3B-I (0.75 g, 2.32 mmol)의 용액을 질소로 2분 동안 퍼징하였다. 10% Pd/C (0.25 g, 2.32 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 H₂ 분위기 하에 주위 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물로 희석하고, 수성 NaHCO₃으로 중화시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (알루미나-24 g, 5% MeOH/DCM)에 의해 정제하여 중간체 3-I (0.25 g, 46.20%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.27 (s, 3 H), 2.45 (d, J = 2.51 Hz, 1 H), 2.77 - 2.81 (m, 2 H), 2.93 (dd, J = 12.55, 2.51 Hz, 1 H), 3.63 - 3.70 (m, 1 H), 3.90 - 3.95 (m, 1 H), 4.71 (dd, J = 10.04, 2.51 Hz, 1 H), 5.39 (d, J = 3.01 Hz, 2 H), 7.60 - 7.63 (m, 1 H), 7.66 - 7.69 (m, 1 H), (교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-H): 체류 시간 0.89분, [M+H] 234.2.

중간체 4: 5-(1-((1H-피라졸-4-일)메틸)-4,4-디플루오로피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 4A: tert-부틸-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트

톨루엔 (50 mL) 중 5-브로모-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온 (1.70 g, 7.53 mmol), tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트 (2.50 g, 12.55 mmol) 및 Cs₂CO₃ (4.91 g, 15.06 mmol)의 용액을 질소로 20분 동안 탈기하였다. PdCl₂(dtbpf) (0.81 g, 1.25 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 다시 탈기한 다음, 110℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 60% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 4A (0.90 g, 20.77%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.41 - 1.47 (m, 9 H), 2.21 (s, 3 H), 2.39 - 2.48 (m, 1 H), 2.65 - 2.76 (m, 1 H), 3.47 (br. s., 2 H), 4.04 - 4.21 (m, 3 H), 5.41 (d, J = 3.01 Hz, 2 H), 7.39 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.65 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.92분, [M+H₂0] 363.2

중간체 4B: tert-부틸 4,4-디플루오로-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-카르복실레이트

DCM (5 mL) 중 중간체 4A (0.05 g, 0.14 mmol)의 교반 용액에, 0℃에서 DAST (0.19 mL, 1.44 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (10 mL)로 희석하고, 수성 NaHCO₃ (10 mL)으로 중화시키고, DCM (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-12 g, 35% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 4B (0.02 g, 37.60%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 2.12 - 2.19 (m, 2 H), 2.22 (s, 3 H), 3.09 (br. s., 1 H), 3.37 - 3.44 (m, 1 H), 3.60 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 3.98 (d, J = 17.07 Hz, 1 H), 4.13 (br. s., 1 H), 5.43 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 7.58 (d, J = 7.03 Hz, 1 H), 7.70 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

¹⁹F NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm - 93.57, - 111.02.

LCMS (방법-H): 체류 시간 2.45분, [M+H] 368.2.

중간체 4C: 5-(4,4-디플루오로피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

0℃에서 DCM (25 mL) 중 중간체 4B (0.24 g, 0.65 mmol)에 디옥산 (5 mL, 1.14 mmol) 중 4N HCl의 용액을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시키고, 물 (10 mL)로 희석하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트 (2 x 20 mL)로 세척하고, 10% NaHCO₃ 용액으로 염기성화시키고, DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 4C (0.12 g, 68.70%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.94 - 2.12 (m, 2 H), 2.29 (s, 3 H), 2.76 (td, J = 12.93, 3.26 Hz, 1 H), 2.96 - 3.06 (m, 2 H), 3.14 (d, J = 12.05 Hz, 1 H), 3.51 - 3.63 (m, 1 H), 5.38 - 5.43 (m, 2 H), 7.52 - 7.57 (m, 1 H), 7.67 (d, J = 8.03 Hz, 1 H) (교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

¹⁹F NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm - 88.62, - 110.24.

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.34분, [M+H] 268.0.

중간체 4:

MeOH (2 mL) 중 중간체 4C (0.10 g, 0.37 mmol)의 용액에 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.030 g, 0.37 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 15분 동안 교반하였다. 이 혼합물에 NaCNBH₃ (0.071 g, 1.12 mmol)을 첨가하고, 교반을 12시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (15 mL)로 희석하고, DCM (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 생성된 잔류물을 디에틸 에테르 (20 mL)로 세척하여 중간체 4 (0.08 g, 61.60%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.08 - 2.18 (m, 2 H) 2.23 (s, 3 H) 2.76 (d, J = 11.04 Hz, 1 H) 2.86 (d, J = 11.55 Hz, 1 H) 3.45 (s, 2 H) 3.65 - 3.80 (m, 2 H) 4.78 (d, J = 8.03 Hz, 1 H) 5.33 - 5.43 (m, 2 H) 7.41 (br. s., 1 H) 7.52 - 7.71 (m, 3 H) 12.64 (br. s., 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.121분, [M+H] 348.2.

중간체 5-I: (R)-5-(4-((6-브로모피리딘-3-일)메틸)모르폴린-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 5-I (0.25 g, 72.30%)를 중간체 4의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모니코틴알데히드 (0.15 g, 0.85 mmol) 및 중간체 3-I로부터 출발하여 제조하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.68분, [M+H] 403.0.

화합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 또는 특징화 없이 사용하였다.

중간체 6: 6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

디옥산 (15 mL) 중 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (1.00 g, 10.40 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (2.05 g, 10.40 mmol)의 교반 용액에 K₂CO₃ (4.31 g, 31.20 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기한 다음, 아이오딘화구리 (I) (0.59 g, 3.12 mmol)을 첨가하고, 이어서 트랜스-N,N'-디메틸시클로헥산-1,2-디아민 (2.59 mL, 16.4 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 10분 동안 탈기 탈기하고, 마이크로웨이브 조사 하에 110℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하고, 유기 층을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 20-40% EtOAc/ n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 6 (1.15 g, 52.10%)을 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.62 (s, 3 H), 8.10 (s, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.95 (s, 1 H), 9.37 (s, 1 H), 9.98 (s, 1 H).

LCMS (방법-D), 체류 시간 1.68분, [M+H] 213.2.

중간체 7: 5-브로모-3-메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

문헌 절차 (PCT 국제 출원, 2010130773)에 따라 합성하였다.

중간체 8: 3-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

중간체 2A에 대해 기재된 것과 유사한 방식으로 중간체 7 (1.50 g, 6.44 mmol)을 사용하여 중간체 8 (1.30 g, 59.80%)을 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.31 (s, 12 H), 3.37 (s, 3 H), 7.34 (d, J = 7.93 Hz, 1 H), 7.41 - 7.54 (m, 2 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.79분, [M-H] 292.2 (물 부가물).

중간체 9: 6-(4-포르밀-5-메톡시-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 9A: 디메틸 2-((디메틸아미노)메틸렌)말로네이트

톨루엔 (100 mL) 중 디메틸 말로네이트 (10.00 g, 76.00 mmol)의 용액에 질소 분위기 하에 주위 온도에서 DMF-DMA (20.27 mL, 151.00 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켜 중간체 9A (13.00 g, 84.00%)를 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.92 - 3.07 (m, 6 H), 3.66 - 3.72 (br.s., 3 H), 3.74 - 3.79 (br.s., 3 H), 7.53 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.63분, [M+H] 188.2.

중간체 9B: 메틸 5-메톡시-1H-피라졸-4-카르복실레이트

EtOH (50 mL) 중 중간체 9A (13.00 g, 69.40 mmol)의 용액에 질소 분위기 하에 주위 온도에서 NH₂NH_2·2HCl (7.29 g, 69.40 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (250 mL) 중에 용해시키고, 포화 NaHCO₃ 용액 (0.5 L)으로 염기성화시켰다. 유기 층을 분리하고, 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-120 g, 45-50% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 9B (2.50 g, 13.14%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.67 (s, 3 H), 3.84 (s, 3 H), 8.11 (d, J = 2.27 Hz, 1 H), 12.56 (br. s., 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.48분, [M+H] 157.0.

중간체 9C: 메틸 1-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-5-메톡시-1H-피라졸-4-카르복실레이트

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 9B (2.50 g, 16.01 mmol)로부터 출발하여 중간체 9C (0.80 g, 15.42%)를 베이지색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.64 (s, 3 H), 3.87 (s, 3 H), 4.11 (s, 3 H), 7.81 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 8.57 (s, 1 H), 8.89 (s, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.81분, [M+H] 273.

중간체 9D: 1-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-5-메톡시-1H-피라졸-4-카르복실산

THF (25 mL) 중 중간체 9C (0.80 g, 2.94 mmol)의 용액에 (CH₃)₃SiOK (1.50 g, 11.75 mmol)를 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 16시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (80 mL)로 희석하고, 고체 시트르산으로 중화시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 80 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 9D (0.75 g, 61.30%)를 베이지색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.59 (s, 3 H), 4.00 (s, 3 H), 7.86 (s, 1 H), 8.78 (s, 1 H), 8.85 (s, 1 H), 12.37 - 12.91 (br. s, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 0.40분, [M+H] 259.5.

중간체 9E: 6-(4-(히드록시메틸)-5-메톡시-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

THF (15 mL) 중 중간체 9D (0.75 g, 2.90 mmol)의 용액에 질소 분위기 하에 TEA (1.21 mL, 8.71 mmol)에 이어서 이소부틸 클로로포르메이트 (0.76 mL, 5.81 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 소결된 유리 깔때기를 통해 여과하고, 여과물을 0℃로 냉각시키고, 물 (2 mL) 중 NaBH₄ (0.22 g, 5.81 mmol)의 용액으로 10분 동안 처리하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에 도달하도록 하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl (40 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 10% NaHCO₃ 용액 (30 mL)으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 9E (0.43 g, 53.30%)를 베이지색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.54 (s, 3 H), 3.96 (s, 3 H), 4.30 (d, J = 5.02 Hz, 2 H), 4.97 (t, J = 5.52 Hz, 1 H), 7.72 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.75 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.681분, [M+H] 245.0.

중간체 9:

DCM (30 mL) 중 중간체 9E (0.40 g, 1.64 mmol)의 용액에 질소 분위기 하에 주위 온도에서 데스-마르틴 퍼아이오디난 (1.39 g, 3.28 mmol)을 첨가하고, 교반을 20시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 DCM (50 mL)으로 희석하고, 10% NaHCO₃ (50 mL)을 첨가하였다. 유기 층을 분리하고, 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 9 (0.30 g, 68.10%)를 베이지색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.61 (s, 3 H), 4.05 (s, 3 H), 7.91 (s, 1 H), 8.90 (s, 1 H), 9.18 (s, 1 H), 9.85 (s, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 2.13분, [M+H] 243.0.

중간체 10: 6-브로모-4-시클로프로필니코티노니트릴

중간체 10A: 6-브로모-4-아이오도니코티노니트릴

THF (100 mL) 중 디이소프로필아민 (7.79 mL, 54.60 mmol)의 용액에 질소 분위기 하에 n-BuLi (21.86 mL, 54.60 mmol)을 -78℃에서 첨가하였다. 30분 후, THF (10 mL) 중 THF (20 mL) 중 6-브로모니코티노니트릴 (10.00 g, 54.6 mmol)에 이어서 아이오딘 (15.26 g, 60.10 mmol)을 첨가하고, 교반을 2시간 동안 계속하였다. 생성된 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl (40 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-80 g, 10-15% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 10A (6.50 g, 38.50%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.51 (s, 1 H), 8.76 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 10:

톨루엔 (10 mL) 및 물 (2 mL)의 혼합물 중 중간체 10A (0.60 g, 1.94 mmol)의 용액에 시클로프로필보론산 (0.20 g, 2.33 mmol)에 이어서 K₃PO₄ (0.82 g, 3.88 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 15분 동안 탈기하였다. 아세트산팔라듐 (II) (0.05 g, 0.19 mmol) 및 트리시클로헥실포스핀 (0.11 g, 0.39 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 10분 동안 다시 탈기하고, 마이크로웨이브에서 140℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-12 g, 15-20% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 10 (0.10 g, 23.08%)을 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.93 - 1.02 (m, 1 H), 1.04 - 1.13 (m, 1 H), 1.19 - 1.35 (m, 2 H), 2.05 - 2.21 (m, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 8.75 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.25분, [M+2H] 223.0.

중간체 11: 6-(4-포르밀-1H-이미다졸-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

DMF (10 mL) 중 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.50 g, 5.20 mmol) 및 6-클로로-4-메톡시니코티노니트릴 (1.05 g, 6.24 mmol)의 용액에 질소 분위기 하에 주위 온도에서 K₂CO₃ (1.08 g, 7.81 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 빙수 (30 mL)로 희석하였다. 생성된 침전물을 여과하고, 에탄올 (2 mL)로 세척하고 중간체 11 (0.30 g, 25.00%)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.13 (s, 3 H), 7.81 (s, 1 H), 8.83 (s, 2 H), 8.95 (d, J = 1.19 Hz, 1 H), 9.87 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.75분, [M+H] 229.1.

중간체 12-I: (R)-6-(4-(((2-히드록시-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)아미노)메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 12A-I: (R)-5-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

MeOH (40 mL) 중 중간체 1-I (1.00 g, 5.26 mmol)의 용액에, -10℃에서 과량의 암모니아 기체를 퍼징하고, 생성된 반응 혼합물을 밀봉된 튜브 중에서 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 에테르 (30 mL)로 세척하여 중간체 12A-I (0.75 g, 68.80%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.26 (s, 3 H), 2.52 - 2.56 (m, 1 H), 2.69 (dd, J = 13.05, 4.02 Hz, 1 H), 4.80 (dd, J = 8.03, 3.51 Hz, 1 H), 5.38 (d, J = 1.51 Hz, 3 H), 7.65 (s, 2 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-H): 체류 시간 0.54분, [M+H] 208.2.

중간체 12-I:

MeOH (5 mL) 중 중간체-6 (0.20 g, 0.94 mmol)의 용액에 아세트산 (0.08 mL, 1.42 mmol)에 이어서 중간체 12A-I (0.23 g, 1.13 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 10분 동안 교반하였다. 반응물에 NaCNBH₃ (0.18 g, 2.83 mmol)을 첨가하고, 교반을 12시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 10% NaHCO₃ 용액을 사용하여 염기성화시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 HPLC [루나 C18 (250 x 30ID) 5 마이크로미터; 용매 A: H₂O 중 0.1% TFA, 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 14분에 걸쳐 20-100, 유량: 25 mL/분, 체류 시간 11.16분, UV 220 nm]에 의해 정제하여 중간체 12-I (0.09 g, 22.86%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.28 (s, 3 H), 2.63 (s, 3 H), 2.77 - 2.67 (m, 1 H), 3.03 - 2.93 (m, 1 H), 3.62 (m, 2 H), 3.86 (d, J = 6.00 Hz, 2 H), 5.10 - 5.03 (m, 1 H), 5.25 (s, 2 H), 7.80 - 7.74 (m, 3 H), 7.95 (d, J = 0.80 Hz, 1 H), 8.49 (d, J = 0.80 Hz, 1 H), 8.59 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-H): 체류 시간 1.80분, [M+H] 404.2, 순도: 99.7%.

(방법-C): 체류 시간 10.54분, 순도: 99.70%.

키랄 순도 (방법-VI): 체류 시간 9.44분, 100% ee.

중간체 13-I: (R)-N-((1-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-일)메틸)-2-히드록시-N-(2-히드록시-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)아세트아미드

DCM (10 mL) 중 중간체 12-I (0.23 g, 0.57 mmol) 및 2-히드록시아세트산 (0.05 g, 0.57 mmol)의 교반 용액에 HATU (0.43 g, 1.14 mmol)에 이어서 DIPEA (0.29 mL, 1.71 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 밤새 교반하였다. 물 (30 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 이어서 이를 DCM (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-12 g, DCM 중 10-12% MeOH)에 의해 정제하여 중간체 13-I (0.15 g, 57.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.21 - 2.35 (m, 3 H), 2.58 (s, 3 H), 3.14 - 3.29 (m, 1 H), 3.37 - 3.68 (m, 1 H), 4.10 - 4.36 (m, 2 H), 4.41 - 4.78 (m, 3 H), 5.08 - 5.30 (m, 1 H), 5.31 - 5.45 (m, 2 H), 5.66 - 5.92 (m, 1 H), 7.61 - 7.77 (m, 2 H), 7.84 (s, 1 H), 7.94 - 8.02 (m, 1 H), 8.57 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.382분, [M+H] 462.1, 순도: 98.52%.

(방법-B): 체류 시간 1.372분, [M+H] 462.1, 순도: 99.62%.

중간체 14-I: (R)-5-(4-((1H-피라졸-4-일)메틸)모르폴린-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 4의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 3-I (2.00 g, 8.57 mmol)로부터 출발하여 중간체 14-I (0.75 g, 27.90%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.78 - 1.87 (m, 1 H), 2.11 - 2.20 (m, 1 H), 2.23 (s, 3 H), 2.76 (d, J = 11.04 Hz, 1 H), 2.86 (d, J = 11.55 Hz, 1 H), 3.45 (s, 2 H), 3.67 - 3.79 (m, 1 H), 3.97 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 4.78 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 5.38 (d, J = 2.01 Hz, 2 H), 7.41 (br. s., 1 H), 7.57 - 7.62 (m, 2 H), 7.64 - 7.69 (m, 1 H), 12.64 (br. s., 1 H).

LCMS/HPLC (방법-H): 체류 시간 0.767분, [M+H] 314.2.

중간체 15: 4-메톡시-6-(4-(2-옥소에틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

중간체 15A: 3-(디에톡시메틸)-2-에톡시테트라히드로푸란

FeCl₃ (0.02 g, 0.14 mmol)을 트리에톡시메탄 (23.26 g, 157.00 mmol)이 들은 플라스크에 첨가하고, 10℃로 냉각시켰다. 생성된 반응 혼합물을 동일한 온도에서 30분 동안 교반하고, 2,3-디히드로푸란 (10.00 g, 143.00 mmol)을 30분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 10℃에서 1시간 동안 교반하고, DCM (100 mL)으로 희석하고, 셀라이트®를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 중간체 15A (30.00 g, 96.00%)를 갈색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.09 - 1.29 (m, 9 H), 1.76 (dd, J = 12.55, 5.52 Hz, 1 H), 1.84 - 2.13 (m, 1 H), 2.29 - 2.57 (m, 1 H), 3.38 - 3.81 (m, 6 H), 3.82 - 4.14 (m, 2 H), 4.33 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), 4.88 - 5.09 (m, 1 H).

중간체 15B: 2-(1H-피라졸-4-일)에탄올

물 (50 mL) 및 에탄올 (25 mL)의 혼합물 중 NH₂NH_2·2HCl (18.75 g, 179.00 mmol)의 용액에 0℃에서 중간체 15A (30.00 g, 137.00 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 탄산나트륨 (30.00 g)을 반응 혼합물에 첨가하고, 감압 하에 증발 건조시켰다. 잔류물을 에탄올 (100 mL)로 세척하고, 증발시켜 중간체 15B (15.00 g, 92.00%)를 갈색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.78 (t, J = 6.38 Hz, 2 H), 3.72 (d, J = 7.25 Hz, 1 H), 3.77 - 3.88 (m, 2 H), 7.49 (s, 2 H), 9.52 - 10.74 (m, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.40분, [M+H] 113.0.

중간체 15C: 6-(4-(2-히드록시에틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

디옥산 (20 mL) 중 중간체 15B (0.50 g, 4.46 mmol) 및 6-브로모-4-메톡시니코티노니트릴 (0.95 g, 4.46 mmol)의 용액에 K₂CO₃ (1.54 g, 11.15 mmol) 및 XANTPHOS (0.52 g, 0.89 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기하였다. Pd₂(dba)₃(0.41 g, 0.45 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 다시 탈기한 다음, 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, DCM 중 2 - 2.5% MeOH)에 의해 정제하여 중간체 15C (0.40 g, 36.70%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.65 (t, J = 6.78 Hz, 2 H), 3.61 (td, J = 6.78, 5.02 Hz, 2 H), 4.10 (s, 3 H), 4.62 - 4.76 (m, 1 H), 7.58 (s, 1 H), 7.81 (s, 1 H), 8.47 (s, 1 H), 8.73 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.83분, [M+H] 245.3.

중간체 15:

DCM (10 mL) 중 중간체 15C (0.20 g, 0.82 mmol)의 교반 용액에 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.52 g, 1.23 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 10% NaHCO₃ (30 mL)으로 희석하고, DCM (3 x 25 mL)으로 추출하였다. 합한 추출물을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 15 (0.20 g, 45.32%)를 수득하였다. LCMS (방법-I): 체류 시간 0.95분, [M+H] 243.0. 화합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 또는 특징화 없이 사용하였다.

중간체 16: 6-(5-(클로로메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)니코티노니트릴

중간체 16A: 메틸 5-시아노피콜리네이트

MeOH (80 mL) 및 DMF (80 mL) 중 6-브로모니코티노니트릴 (3.00 g, 16.39 mmol)의 교반 용액에 PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ (2.68 g, 3.28 mmol) 및 TEA (5.71 mL, 41.00 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 CO (50 psi 압력)의 분위기 하에 60℃에서 14시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 수득된 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉- 40.00 g, 60% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 16A (2.25 g, 85.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.93 (s, 3 H), 8.20 (dd, J = 8.03, 1.00 Hz, 1 H), 8.54 (dd, J = 8.03, 2.01 Hz, 1 H), 9.09 - 9.25 (m, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.70분, [M+H] 163.1.

중간체 16B: 5-시아노피콜리노히드라지드

EtOH (50 mL) 중 중간체 16A (2.25 g, 13.88 mmol)의 교반 용액에 히드라진 수화물 (3.39 mL, 69.40 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 14시간 동안 교반한 다음, 주위 온도로 냉각시켰다. 생성된 침전물을 여과하고, EtOH (30 mL)로 세척하여 중간체 16B (1.90 g, 84.00%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.68 (d, J = 4.02 Hz, 2 H), 7.91 - 8.23 (m, 1 H), 8.42 - 8.61 (m, 1 H), 8.92 - 9.24 (m, 1 H), 10.21 (br. s., 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.45분, [M+H] 163.1.

중간체 16:

POCl₃ (15 mL) 중 중간체 16B (1.00 g, 6.17 mmol)의 교반 용액에 2-클로로아세트산 (0.58 g, 6.17 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 14시간 동안 환류한 다음, 주위 온도로 냉각시켰다. POCl₃을 감압 하에 증발시키고, 혼합물을 빙수 (100 mL)로 희석하였다. 산성 용액을 고체 NaHCO₃의 느린 첨가에 의해 염기성화시키고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 20% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 16 (0.25 g, 18.37%)을 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 5.20 (s, 2 H), 8.38 (dd, J = 8.53, 1.00 Hz, 1 H), 8.55 - 8.64 (m, 1 H), 9.24 (dd, J = 2.01, 1.00 Hz, 1 H).

(방법-I): 체류 시간 0.84분, [M+H] 221.4.

중간체 17: 6-(5-(클로로메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 17A: 메틸 5-시아노-4-메틸피콜리네이트

중간체 16A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (3.00 g, 15.23 mmol)로부터 출발하여 중간체 17A (1.05 g, 39.10%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.60 (s, 3 H), 3.92 (s, 3 H), 7.85 - 8.33 (m, 1 H), 9.04 (s, 1 H).

(방법-I): 체류 시간 0.76분, [M+H] 177.2.

중간체 17B: 5-시아노-4-메틸피콜리노히드라지드

중간체 16B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 17A (0.55 g, 3.12 mmol)로부터 출발하여 중간체 17B (0.45 g, 82.00%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.59 (s, 3 H), 4.67 (br. s., 2 H), 8.07 (s, 1 H), 8.74 - 9.05 (m, 1 H), 10.15 (br. s., 1 H).

(방법-I): 체류 시간 0.51분, [M+H] 177.2.

중간체 17:

중간체 16의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 17B (0.60 g, 3.41 mmol)로부터 출발하여 중간체 17 (0.20 g, 25.03%)을 황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.64 (s, 3 H), 5.20 (s, 2 H), 8.36 (s, 1 H), 9.13 (s, 1 H).

(방법-I): 체류 시간 0.93분, [M-H] 232.9.

중간체 18-I: tert-부틸 (R)-(2-아미노-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)카르바메이트

중간체 18A-II: (S)-5-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 12A-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 1-II (40.00 g, 210.00 mmol)로부터 출발하여 중간체 18A-II (40.00 g, 68.80%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.26 (s, 3 H), 2.52 - 2.56 (m, 1 H), 2.69 (dd, J = 13.05, 4.02 Hz, 1 H), 4.80 (dd, J = 8.03, 3.51 Hz, 1 H), 5.38 (d, J = 1.51 Hz, 3 H), 7.65 (s, 2 H). (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-H): 체류 시간 0.54분, [M+H] 208.2.

중간체 18B-II: tert-부틸 (S)-(2-히드록시-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)카르바메이트

DCM (400 mL) 중 중간체 18A-II (40.00 g, 145.00 mmol)의 교반 용액을 0℃로 냉각시켰다. TEA (60.50 mL, 434.00 mmol)에 이어서 BOC₂O (40.30 mL, 174.00 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 밤새 교반하고, 물 (200 mL)로 희석하고, DCM (3 x 200 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (150 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-750 g, 클로로포름 중 2% MeOH)에 의해 정제하여 중간체 18B-II: (48.00 g, 80.00%)을 무색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.35 (s, 9 H), 2.29 (s, 3 H), 2.96 (ddd, J = 13.70, 7.90, 6.00 Hz, 1 H), 3.20 - 3.06 (m, 1 H), 4.89 - 5.02 (m, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 5.54 (d, J = 4.50 Hz, 1 H), 6.89 (t, J = 5.80 Hz, 1 H), 7.66 (s, 2 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.93분, [M+H] 308.4.

중간체 18C-I: tert-부틸 (R)-(2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)카르바메이트

THF (800 mL) 중 중간체 18B-II (47.00 g, 113.00 mmol)의 교반 용액에 트리페닐포스핀 (65.30 g, 249.00 mmol)에 이어서 DIAD (39.60 mL, 204.00 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하고, 물 (1.5 L)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 500 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (300 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (레디셉 - 1.5 kg, 40% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 18C-I (50.00 g, 91.00%)를 무색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.19-1.33 (m, 9 H), 2.28 (s, 3 H), 3.63 (dt, J = 13.79, 5.57 Hz, 1 H), 3.94-4.15 (m, 1 H), 5.26-5.46 (m, 2 H), 5.65 (dd, J = 9.44, 4.15 Hz, 1 H), 7.23 (s, 1 H), 7.71 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 7.78-7.94 (m, 5 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.23분, [M+H] 437.2.

중간체 18-I:

MeOH (500 mL) 중 중간체 18C-I (40.00 g, 92.00 mmol)의 교반 용액에 히드라진 수화물 (44.80 mL, 916.00 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 60℃에서 14시간 동안 가열하고, 주위 온도로 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (200 mL)로 희석하였다. 생성된 고체를 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (레디셉 - 330 g, 2% MeOH/클로로포름)에 의해 정제하여 중간체 18-I (28.50 g, 91.00%)를 녹색빛 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.35 (s, 9 H), 1.87-2.01 (m, 2 H), 2.29 (s, 3 H), 2.85-2.97 (m, 1 H), 3.10 (dd, J = 12.30, 6.27 Hz, 1 H), 4.24-4.34 (m, 1 H), 5.37 (s, 2 H), 6.87-6.98 (m, 1 H), 7.64 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.75 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.84분, [M+H] 307.1.

중간체 19-I: (R)-N-(2-아미노-1-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)-2-클로로아세트아미드

중간체 19A-I: tert-부틸 (R)-(2-(2-클로로아세트아미도)-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)카르바메이트

0℃에서 DCM (20 mL) 중 중간체 18-I (0.50 g, 1.63 mmol)의 교반 용액에 TEA (0.68 mL, 4.90 mmol)에 이어서 클로로아세틸 클로라이드 (0.13 mL, 1.63 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 14시간 동안 교반하고, 물 (30 mL)로 희석하고, DCM (3 x 30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-12 g, 클로로포름 중 2% MeOH)에 의해 정제하여 중간체 19A-I (0.40 g, 64.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.34 (s, 9 H), 2.34 (s, 3 H), 3.15 - 3.26 (m, 2 H), 4.08 (s, 2 H), 5.25 (q, J = 7.36 Hz, 1 H), 5.34 - 5.45 (m, 2 H), 7.00 (t, J = 5.77 Hz, 1 H), 7.54 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.68 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.76 (d, J = 7.53 Hz, 1 H).

(방법-H): 체류 시간 1.53분, [M+H)] 383.0.

중간체 19-I:

DCM (10 mL) 중 중간체 19A-I (0.05 g, 0.13 mmol)의 교반 용액에 TFA (1.00 ml, 12.98 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시켰다. 잔류물을 MeCN (10 mL) 중에 용해시키고, 물 (0.3 mL) 및 Na₂CO₃ (0.07 g, 0.65 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 과량의 고체 탄산나트륨을 여과하였다. 여과물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 중간체 19-I (0.04 g, 95.00%)를 무색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.36 (s, 3 H), 3.04 - 3.27 (m, 2 H), 4.04 - 4.23 (m, 2 H), 5.37 - 5.53 (m, 3 H), 7.61 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.76 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.01 (br. s., 2 H), 8.91 (d, J = 8.53 Hz, 1 H).

(방법-I): 체류 시간 0.53분, [M-1] 281.3.

중간체 20: 6-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)니코틴알데히드

DMF (10 mL) 중 6-브로모니코틴알데히드 (1.25 g, 6.72 mmol)의 교반 용액에 K₂CO₃ (2.32 g, 16.80 mmol) 및 4-메틸-1H-이미다졸 (0.55 g, 6.72 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열한 다음, 주위 온도로 냉각시켰다. 반응물을 빙수 (30 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (2 x 75 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 0-100% EtOAc/n-헥산))에 의해 정제하여 중간체 20 (0.50 g, 39.70%)을 담갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.50 (s, 3 H), 7.76 (s, 1 H), 7.95 (dd, J = 6.00, 1.20 Hz, 1 H), 8.39 (dd, J = 6.60, 1.80 Hz, 1 H), 8.55 (d, 1.20 Hz, 1 H), 8.99 (s, 1 H), 10.08 (s, 1 H),

LCMS:(방법-H) 체류 시간 :1.03분, [M+1]: 188.0.

중간체 21: 1-(5-포르밀피리딘-2-일)-1H-이미다졸-4-카르보니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모니코틴알데히드 (1.00 g, 5.38 mmol) 및 1H-이미다졸-4-카르보니트릴로부터 출발하여 중간체 21 (0.40 g, 37.50%)을 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.11 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), 8.53 (dd, J = 8.28, 2.26 Hz, 1 H), 8.89 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 9.03 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 9.05 - 9.10 (m, 1 H), 10.14 (s, 1 H).

LCMS/HPLC: (방법-H) 체류 시간 0.85분, [M+1]: 199.2.

중간체 22: 6-(3-메틸-1H-1,2,4-트리아졸-1-일)니코틴알데히드

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모니코틴알데히드 (0.50 g, 2.69 mmol) 및 3-메틸-1H-1,2,4-트리아졸 (0.33 g, 4.03 mmol)로부터 출발하여 중간체 22 (0.30 g, 59.30%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.42 (s, 3 H), 7.99 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), 8.47 (dd, J = 8.53, 2.01 Hz, 1 H), 9.02 - 9.04 (m, 1 H), 9.37 (s, 1 H), 10.12 (s, 1 H).

LCMS/HPLC: (방법-H) 체류 시간 0.88분, [M+1]: 189.0.

중간체 23-I: (R)-5'-(((2-히드록시-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)아미노)메틸)-4-메톡시-[2,2'-비피리딘]-5-카르보니트릴

중간체 23A: 4-메톡시-6-(트리메틸스탄닐)니코티노니트릴

디옥산 (10 mL) 중 6-클로로-4-메톡시니코티노니트릴 (2.00 g, 11.86 mmol)의 용액을 질소로 20분 동안 탈기하였다. 헥사메틸이주석 (2.71 mL, 13.05 mmol) 및 1,1'- 비스(디-tert-부틸포스피노)페로센 팔라듐 (II) 클로라이드 (0.77 g, 1.19 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 10분 동안 다시 탈기하고, 100℃에서 12시간 동안 가열하고, 주위 온도로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 중간체 23A: (5.00 g, 39.50%)을 암색 오일로서 수득하였다. LCMS (방법-I): 체류 시간 1.26분, [M+H] 299.1. 화합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 또는 특징화 없이 사용하였다.

중간체 23B: 5'-포르밀-4-메톡시-[2,2'-비피리딘]-5-카르보니트릴

디옥산 (20 mL) 중 6-브로모니코틴알데히드 (1.10 g, 5.91 mmol) 및 중간체 23A (4.83 g, 6.51 mmol)의 용액을 질소로 20분 동안 탈기하였다. 교반 용액에 테트라키스트리페닐포스핀 팔라듐 (0.68 g, 0.59 mmol)에 이어서 아이오딘화구리 (I) (0.11 g, 0.59 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 다시 탈기하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열한 다음, 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 0-40% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 23B (1.60 g, 79.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.16 (s, 3 H), 8.22 (d, J = 14.35 Hz, 1 H), 8.46 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 8.55 - 8.72 (m, 1 H), 8.99 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 9.24 (s, 1 H), 10.20 (s, 1 H).

LCMS/HPLC: (방법 H) 체류 시간: 1.63분, [M+1]: 240.0.

중간체 23-I:

DCM (20 mL) 및 MeOH (6 mL)의 혼합물 중 중간체 23B (0.60 g, 1.75 mmol)의 용액에 12A-I (0.36 g, 1.75 mmol)에 이어서 AcOH (0.40 mL, 7.02 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 NaBH(CH₃CO₂)₃ (0.37 g, 1.75 mmol)을 첨가하였다. 교반하는을 12시간 동안 계속하였다. 이어서, 반응물을 물 (15 mL)로 희석하고, DCM (2 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC [시메트리 C8 (300 x 19 ID) 9 마이크로미터; 용매 A: 10 mM 아세트산암모늄, 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 21분에 걸쳐 0-100% B, 유량: 18 mL/분, 체류 시간 12.50분, UV 220 nm]에 의해 정제하여 중간체 23-I (0.10 g, 13.76%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.22 (s, 3 H), 2.58 - 2.71 (m, 2 H), 3.89 (s, 2 H), 4.12 (s,3 H), 5.04 (br. s., 1 H), 5.30 - 5.42 (m, 2 H), 5.52 (br. s., 1 H), 7.59 - 7.71 (m, 2 H), 7.94 (dd, J = 8.19, 2.32 Hz, 1 H), 8.15 (s, 1 H), 8.38 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 8.67 (s, 1 H), 8.91 (s, 1 H), (교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS/HPLC:(방법-D) 체류 시간: 1.70분, [M+1]: 431.0.

중간체 24: 4-메틸-6-(4-(옥시란-2-일)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴)

중간체 24A: 4-메틸-6-(1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸 (0.52 g, 7.61 mmol)로부터 출발하여 중간체 24A (0.85 g, 60.60%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.50 (s, 3 H), 6.65 (s, 1 H), 7.93 (s, 1 H), 8.02 (s, 1H), 8.66(s, 1 H), 8.85 (s, 1 H).

LCMS/HPLC: (방법-H) 체류 시간: 1.63분, [M+1]: 185.0.

중간체 24B: 6-(4-브로모-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

AcOH (3 mL) 중 AcOH (20 mL) 중 중간체 24A (0.85 g, 4.61 mmol)에 브로민 (0.59 mL, 11.54 mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수에 부은 다음, 포화 티오황산암모늄 (10 mL)을 첨가하였다. 수득된 침전물을 여과하고, 감압 하에 건조시켜 중간체 24B (1.12 g, 92.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.60 (s, 3 H), 8.02 (s, 1 H), 8.08(s, 1 H), 8.88(s, 2 H).

LCMS/HPLC: (방법-D) 체류 시간: 2.89분, [M+2]: 265.0.

중간체 24C: 4-메틸-6-(4-비닐-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

THF (25 mL) 중 중간체 24B (1.12 g, 4.37 mmol)의 교반 용액에 트리부틸비닐주석 (1.66 g, 5.25 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 질소로 15분 동안 탈기하였다. 트리페닐포스핀 (0.34 g, 1.31 mmol)에 이어서 아세트산팔라듐 (II) (0.15 g, 0.66 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 다시 탈기하였다. 생성된 반응 혼합물을 80℃에서 48시간 동안 가열한 다음, 주위 온도로 냉각시켰다. 반응물을 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 0-10% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 24C (0.80 g, 87.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.58 (s, 3 H), 5.76 (d, J = 17.70 Hz, 1 H), 5.23 (d, J = 11.10 Hz, 1 H), 6.61 - 6.71 (m, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 8.73 (s, 1 H), 8.85 (s, 1 H).

LCMS/HPLC: (방법-H) 체류 시간: 2.06분, [M+1]: 211.2.

중간체 24:

tert-부탄올 (10 mL) 및 물 (20 mL) 중 중간체 24C (0.40 g, 1.90 mmol)의 교반 용액에 NBS (0.40 g, 2.28 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 물 (5 mL) 중 NaOH (0.23 g, 5.71 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하고, 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 24 (0.30 g)를 수득하였다. LCMS: (방법-I) 체류 시간: 1.06분, [M+1]: 227.0. 화합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 또는 특징화 없이 사용하였다.

중간체 25-I: (R)-5-(4-((2-브로모티아졸-5-일)메틸)모르폴린-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 25A: (2-브로모티아졸-5-일)메탄올

THF (40 mL) 중 메틸 2-브로모티아졸-5-카르복실레이트 (2.00 g, 9.01 mmol)의 교반 용액에 LiBH₄ (1.96 g, 90 mmol)를 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 48시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 물 (50 mL)로 희석하고, DCM (3 x 75 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 0-35% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 25A (0.65 g, 37.20%)를 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.63 (d, J = 5.60 Hz, 2 H), 5.67 (d, J = 5.60 Hz, 1 H), 7.53 (s, 1 H).

LCMS: (방법-D) 체류 시간: 0.68분, [M+2]: 196.0.

중간체 25B: 2-브로모티아졸-5-카르브알데히드

9E로부터의 중간체 9의 제조의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하여 중간체 25A (0.60 g, 3.09 mmol)로부터 중간체 25B (0.38 g, 64.00%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.55 (s, 1 H), 10.00 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 25-I:

중간체 23-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 25B (0.18 g, 0.93 mmol) 및 중간체 3-I (0.22 g, 0.94 mmol)로부터 출발하여 중간체 25-I (0.35 g, 45.60%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.24 (s, 3 H), 2.27-2.36 (m, 1 H), 2.76 - 2.85 (m, 1 H), 2.89 - 2.95 (m, 1 H), 3.68 - 3.77 (m, 1 H), 3.78 (br. s., 2 H), 3.95 - 4.05 (m, 1 H), 4.64 (d, J = 5.02 Hz, 1 H), 4.76 - 4.85 (m, 1 H), 5.39 (d, J = 2.01 Hz, 2 H), 7.56 (s, 1 H) 7.59 - 7.63 (m, 1 H), 7.64 - 7.70 (m, 1 H).

LCMS: (방법-I) 체류 시간: 1.23분, [M+2]: 411.0.

중간체 26-I: (R)-5-(4-(2-브로모티아졸-5-카르보닐)모르폴린-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 26A: 2-브로모티아졸-5-카르복실산

THF (10 mL), MeOH (4 mL) 및 물 (2 mL) 중 메틸 2-브로모티아졸-5-카르복실레이트 (1.50 g, 6.75 mmol)의 교반 용액에 LiOH (0.81 g, 33.80 mmol)를 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 2시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (10 mL)로 희석하고, 2N HCl로 산성화시켰다. 고체 침전물을 여과하고, 감압 하에 건조시켜 중간체 26A (0.70 g, 49.80%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.21 (s, 1 H), 13.83 (br.s., 1 H).

LCMS: (방법-D) 체류 시간: 0.38분, [M+2]: 208.0.

중간체 26-I:

DCM (10 mL) 중 중간체 26A (0.40 g, 1.92 mmol) 및 중간체 3-I (0.45 g, 1.92 mmol)의 교반 용액에 TEA (0.80 mL, 5.77 mmol)에 이어서 프로필포스폰산 무수물 (1.22 g, 3.85 mmol)을 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 3시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, DCM (3 x 30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM/n-헥산으로 연화처리하여 중간체 26-I (0.80 g, 67.80%)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (방법-D) 체류 시간: 2.06분, [M+2]: 425.0.

중간체 27: 1-(5-포르밀티아졸-2-일)-1H-이미다졸-4-카르보니트릴

중간체 11의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 25B (0.20 g, 1.04 mmol)로부터 출발하여 중간체 27 (0.12 g, 37.80%)을 담갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.65 (s, 1 H), 8.80 (s, 1 H), 9.00 (s, 1 H), 10.06 (s, 1 H).

LCMS: (방법-D) 체류 시간: 0.96분, [M+1]: 205.0.

중간체 28: 6-(4-포르밀-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 28A: (1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메탄올

밀봉된 튜브에 들은 DMF (18 mL) 및 MeOH (0.50 mL)의 혼합물 중 프로프-2-인-1-올 (2.00 g, 35.70 mmol)의 용액에 주위 온도에서 TMS-N3 (7.10 mL, 53.50 mmol) 및 아이오딘화구리 (I) (0.34 g, 1.78 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 95℃에서 12시간 동안 가열하고, 주위 온도로 냉각시키고, DCM (100 mL)으로 희석하고, 셀라이트®를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 증발시켜 중간체 28A (3.30 g 93.00%)를 갈색 액체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.55 (d, J = 3.51 Hz, 2 H), 5.12 - 5.27 (m, 1 H), 7.70 (br. s., 1 H), 14.58 - 15.07 (br. s., 1 H).

GCMS: 체류 시간 9.36분, [M] 99.0.

화합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

중간체 28B: 6-(4-(히드록시메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 28A (1.00 g, 10.09 mmol)로부터 출발하여 중간체 28B (0.50 g, 20.95%)를 담갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.62 (s, 3 H), 4.67 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 5.49 - 5.54 (m, 1 H), 8.12 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 8.94 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.951분, [M+H] 216.2.

중간체 28:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 28B (1.40 g, 6.51 mmol)로부터 출발하여 중간체 28 (0.90 g, 64.20%)을 황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.67 (s, 3 H), 8.29 (s, 1 H), 8.79 (s, 1 H), 9.03 (s, 1 H), 10.21 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.32분, [M+H] 214.2.

중간체 29: 2-(3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]옥사졸-5-일)-2H-1,2,3-트리아졸-4-카르브알데히드

중간체 29A: 5-(4-(히드록시메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-3-메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 28A (1.50 g, 15.14 mmol)로부터 출발하여 중간체 29A (0.65 g, 13.78%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.42 (s, 3 H), 4.65 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 5.43 (t, J = 5.77 Hz, 1 H), 7.49 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), 7.75 (dd, J = 8.78, 2.26 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 2.26 Hz, 1 H), 8.02 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.04분, [M+H] 247.2.

중간체 29:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 29A (0.15 g, 0.60 mmol)로부터 출발하여 중간체 29 (0.12 g, 79.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.44 (s, 3 H), 7.57 (d, J = 8.78 Hz, 1 H), 7.88 (dd, J = 8.78, 2.26 Hz, 1 H), 7.99 (d, J = 2.26 Hz, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 10.18 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.687분, [M+H] 245.2.

중간체 30: 6-(4-포르밀-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴.

중간체 30A: 6-아지도-4-메틸니코티노니트릴.

DMF (10 mL) 중 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (2.00 g, 10.15 mmol)의 교반 용액에 아지드화나트륨 (1.32 g, 20.30 mmol)을 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 12시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (300 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 20-35% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 30A (0.87 g, 54.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.62 (d, J = 1.00 Hz, 3 H), 8.28 (t, J = 1.00 Hz, 1 H), 10.21 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.88분, [M+H] 160.2.

중간체 30B: 6-(4-(히드록시메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴.

중간체 28A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 30A (0.50 g, 3.14 mmol)로부터 출발하여 중간체 30B (0.21 g, 31.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.65 (s, 3 H), 4.63 (d, J = 6.53 Hz, 2 H), 5.33 - 5.39 (m, 1 H), 8.30 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 9.00 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.87분, [M+H] 216.2.

중간체 30:

중간체 9E로부터의 중간체 9의 제조의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 30B로부터 출발하여 중간체 30 (0.13 g, 65.60%)을 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.64 - 2.70 (m, 3 H), 8.39 (s, 1 H), 9.06 (s, 1 H), 9.58 (s, 1 H), 10.13 (s, 1 H).

LCMS (방법- D): 체류 시간 1.42분, [M+H] 214.2.

중간체 31: 6-(4-포르밀-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 31A: 6-아지도-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 30A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-클로로-4-메톡시니코티노니트릴 (2.00 g, 11.86 mmol)로부터 출발하여 중간체 31A (1.40 g, 67.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.10 (s, 3 H), 7.81 (s, 1 H), 7.89 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.79분, [M+H] 176.0.

중간체 31B: 6-(4-(히드록시메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 28A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 31A (1.30 g, 7.42 mmol)로부터 출발하여 중간체 31B (0.23 g, 13.40%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.15 - 4.19 (m, 3 H), 4.64 (s, 2 H), 7.89 (s, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.89 (s, 1 H), (교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.01분, [M+H] 232.2.

중간체 31:

중간체 9E로부터의 중간체 9의 제조의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 31B (0.20 g, 0.86 mmol로부터 출발하여 중간체 31 (0.12 g, 60.50%)을 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.19 (s, 3 H), 7.99 (s, 1 H), 8.96 (s, 1 H), 9.59 (s, 1 H), 10.14 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.1.42분, [M+H] 230.2.

중간체 32: 1-(3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]옥사졸-5-일)-1H-1,2,3-트리아졸-4-카르브알데히드

중간체 32A: 5-니트로벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

THF (50 mL) 중 2-아미노-4-니트로페놀 (5.00 g, 32.40 mmol)의 교반 용액에 70℃에서 CDI (6.84 g, 42.20 mmol)를 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 3시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (200 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (80 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 32A (5.50 g, 94.00%)를 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.49 (d, J = 8.69 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 2.27 Hz, 1 H), 8.02 (dd, J = 8.69, 2.27 Hz, 1 H). (교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-H): 체류 시간 0.69분, [M-H] 179.0.

중간체 32B: 3-메틸-5-니트로벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

DMSO (55 mL) 중 중간체 32A (5.00 g, 27.80 mmol)의 교반 용액에 K₂CO₃ (4.22 g, 30.50 mmol)에 이어서 메틸 아이오다이드 (5.21 mL, 83.00 mmol)를 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 12시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 빙수 (150 mL)로 희석하였다. 생성된 현탁액을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 형성된 고체를 여과하고, 감압 하에 건조시켜 중간체 32B (4.50 g, 83.00%)를 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.57 (d, J = 8.69 Hz, 1 H), 8.09 (dd, J = 8.69, 2.27 Hz, 1 H), 8 .21 (d, J = 2.64 Hz, 1 H), 3.43 (s, 3 H).

LCMS (방법- H): 체류 시간 1.23분, [M+H] 195.2.

중간체 32C: 5-아미노-3-메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온.

아세트산 (50 mL) 중 중간체 32B (1.80 g, 9.27 mmol)의 용액에 10% Pd/C (0.10 g, 0.93 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 수소 분위기 하에 주위 온도에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과한 다음, DCM 중 10% MeOH (20 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 증발시켜 중간체 32C (1.20 g, 80.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.23 (s, 3 H), 5.06 (br. s., 2 H), 6.28 (dd, J = 8.53, 2.51 Hz, 1 H), 6.37 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 6.95 (d, J = 8.53 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.59분, [M+H] 165.2.

중간체 32D: 5-아지도-3-메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

0℃에서 ACN (20 mL) 중 중간체 32C (1.50 g, 9.14 mmol)의 용액에 tert-부틸 니트라이트 (3.26 mL, 27.40 mmol)에 이어서 아지도트리메틸실란 (3.61 mL, 27.40 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 이를 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 32D (1.00 g, 57.20%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.34 (s, 3 H), 6.85 (dd, J = 8.53, 2.01 Hz, 1 H), 7.14 (d, J = 2.51 Hz, 1 H), 7.35 (d, J = 8.53 Hz, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 2.30분, [M+H] 191.2.

중간체 32E: 5-(4-(히드록시메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3-메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

t-부탄올 (8 mL) 및 물 (8 mL)의 혼합물 중 중간체 32D (1.30 g, 6.84 mmol) 및 프로프-2-인-1-올 (0.83 g, 6.84 mmol)의 교반 용액에 새로이 제조된 아스코르브산나트륨 (0.55 mL, 0.55 mmol)에 이어서 황산구리 (II) 5수화물의 1 M 용액 (0.014 g, 0.055 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 8시간 동안 교반하고, DCM (200 mL)으로 희석하고, 물 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 20-35% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 32E (1.40 g, 83.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.32 (s, 3 H), 4.62 (d, J = 5.67 Hz, 2 H), 5.35 (t, J = 5.67 Hz, 1 H), 7.52 (d, J = 8.69 Hz, 1 H), 7.65 (dd, J = 8.50, 2.08 Hz, 1 H), 7.89 (d, J = 2.27 Hz, 1 H), 8.67 (s, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 0.62분, [M+H] 247.0.

중간체 32:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 32E (1.30 g, 5.28 mmol)로부터 출발하여 중간체 32 (1.00 g, 78.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.41 (s, 3 H), 7.58 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 7.69 - 7.80 (m, 1 H), 7.98 (d, J = 2.27 Hz, 1 H), 9.55 (s, 1 H), 10.13 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.55분, [M+H] 245.0.

중간체 33: 1-(7-플루오로-3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]옥사졸-5-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 33A: 5-브로모-7-플루오로벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

THF (20 mL) 중 2-아미노-4-브로모-6-플루오로페놀 (2.00 g, 9.71 mmol) 및 CDI (1.73 g, 10.68 mmol)의 용액을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시키고, 물 (30 mL)로 희석하였다. 침전된 고체를 여과하고, 감압 하에 건조시켜 중간체 33A (2.00 g, 89.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆) δ 7.13 (d, J = 1.50 Hz, 1 H), 7.34 (dd, J = 10.00, 2.0 Hz, 1 H), 7.82 (br.s, 1 H).

LCMS: (방법-I) 체류 시간: 1.17분, [M+2]: 232.0.

중간체 33B: 5-브로모-7-플루오로-3-메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

중간체 32B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 33A (2.00 g, 8.62 mmol)로부터 출발하여 중간체 33B (1.90 g, 90.00%)를 흑색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400MHz, CDCl₃) δ 3.40 (s, 3 H), 6.94 (dd, J = 1.60, 0.90 Hz, 1 H), 7.10 (dd, J = 9.3, 1.8 Hz, 1 H).

LCMS: (방법-I) 체류 시간: 1.17분, [M+2]: 248.0.

중간체 33:

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 33B (0.50 g, 2.03 mmol) 및 피라졸-4-카르브알데히드 (0.49 g, 5.08 mmol)로부터 출발하여 중간체 33 (0.06 g, 11.30%)을 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.41 (s, 3 H), 7.73 (dd, J = 11.55, 2.01 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 8.32 (s, 1 H) 9.26 (s, 1 H), 9.93 (s, 1 H).

LCMS: (방법-L) 체류 시간: 0.95분, [M+1]: 262.0.

중간체 34: 1-(3,7-디메틸-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]옥사졸-5-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 34A: 4-브로모-2-메틸-6-니트로페놀

물 (25 mL) 중 4-브로모-2-메틸페놀 (3.00 g, 16.04 mmol)의 현탁액에 0℃에서 AcOH (1.84 mL, 32.10 mmol)에 이어서 질산 (3.58 mL, 80.00 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 0-15% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 34A (1.20 g, 30.00%)를 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.34 (s, 3 H), 8.38 (dd, J = 3.02, 0.76 Hz, 1 H), 8.59 (d, J = 3.02 Hz, 1 H), (교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D) 체류 시간: 2.93분, [M+2]: 234.0

중간체 34B: 2-아미노-4-브로모-6-메틸페놀

MeOH (25 mL) 중 염화주석 (II) (5.31 g, 28.00 mmol) 및 진한 HCl (6.00 mL, 197.00 mmol)의 용액에 중간체 34A (1.30 g, 5.60 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 14시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축시키고, 물 (100 mL)로 희석하였다. 혼합물을 포화 NaHCO₃을 사용하여 염기성화하고, 셀라이트®에 여과하고, 여과물을 DCM (2 x 75 ml)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 중간체 34B (0.90 g, 80.00%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.15 (s, 3 H), 4.83 (br. s., 2 H), 6.44 (d, J = 2.64 Hz, 1 H), 6.61 (d, J = 2.27 Hz, 1 H), 8.06 (br. s., 1 H).

LCMS: (방법-D) 체류 시간: 2.93분, [M+2]: 204.0

중간체 34C: 5-브로모-7-메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

중간체 33A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 34B (0.90 g, 4.45 mmol)로부터 출발하여 중간체 34C (0.85 g, 84.00%)를 담갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.28 (s, 3 H) 7.08 (d, J = 1.51 Hz, 1 H) 7.14 (s, 1 H), 11.80 (br.s., 1 H).

LCMS: (방법-D) 체류 시간: 2.93분, [M+2]: 230.0.

중간체 34D: 5-브로모-3,7-디메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

중간체 32B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 34C (0.95 g, 4.17 mmol)로부터 출발하여 중간체 34D (0.90 g, 89.00%)를 담갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.35 (s, 3 H), 3.37 (s, 3 H), 6.94 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 7.08 - 7.10 (m, 1 H).

LCMS: (방법-H) 체류 시간: 2.09분, [M+H₂O]: 260.0.

중간체 34:

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 34D (0.50 g, 2.07 mmol)로부터 출발하여 중간체 34 (0.08 g, 15.06%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.39 (s, 3 H), 3.38 (s, 3 H), 7.58 (s, 1 H), 7.70 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 9.19 (s, 1 H), 9.92 (s, 1 H).

LCMS: (방법-L) 체류 시간: 0.94분, [M+1]: 258.4.

중간체 35: 1-(7-메톡시-3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]옥사졸-5-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 35A: 4-브로모-2-메톡시-6-니트로페놀

디에틸 에테르 (30 mL) 및 물 (10 mL)의 혼합물 중 4-브로모-2-메톡시페놀 (4.50 g, 22.16 mmol)의 교반 용액에 질산 (1.19 mL, 26.6 mmol)을 5분에 걸쳐 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 30분 동안 교반하고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 0-20% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 35A (2.50 g, 45.50%)를 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.90 (s, 3 H), 7.43 (d, J = 2.51 Hz, 1 H), 7.60 - 7.64 (m, 1 H), 10.70 (br. s., 1 H).

LCMS: (방법 I) 체류 시간: 0.94분, [M+2]: 250.2.

중간체 35B: 2-아미노-4-브로모-6-메톡시페놀

중간체 34B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 35A (2.50 g, 10.08 mmol)로부터 출발하여 중간체 35B (1.50 g, 68.30%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.73 (s, 3 H), 4.79 (br. s., 2 H), 6.36 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 6.43 - 6.47 (m, 1 H), 8.34 (br. s., 1 H).

LCMS: (방법-D) 체류 시간: 1.51분, [M+2]: 220.0.

중간체 35C: 5-브로모-7-메톡시벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

중간체 33A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 35B (1.63 g, 7.48 mmol)로부터 출발하여 중간체 35C (1.50 g, 82.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.90 (s, 3 H), 6.89 (d, J = 1.13 Hz, 1 H), 7.01 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 11.80 (br. s., 1 H).

LCMS: (방법-D) 체류 시간: 1.79분, [M+2]: 246.0.

중간체 35D: 5-브로모-7-메톡시-3-메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

중간체 32B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 35C (1.50 g, 6.15 mmol)로부터 출발하여 중간체 35D (1.40 g, 88.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.31 (s, 3 H), 3.91 (s, 3 H), 7.06 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 7.19 (d, J = 1.13 Hz, 1 H).

LCMS: (방법-H) 체류 시간 1.84분, [M+H₂O]: 275.0.

중간체 35:

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 35D (0.50 g, 1.94 mmol)로부터 출발하여 중간체 35 (0.24 g, 45.30%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.34 (s, 3 H), 4.00 (s, 3 H), 7.42 (d, J = 1.89 Hz, 1 H), 7.51 (d, J = 1.89 Hz, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 9.28 (s, 1 H), 9.93 (s, 1 H).

LCMS: (방법-L) 체류 시간: 0.90분, [M+1]: 274.1.

중간체 36: 6-(4-포르밀-3-메틸-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 3-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.40 g, 3.63 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴로부터 출발하여 중간체 36 (0.21g, 25.60%)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.52 (s, 3 H), 2.6 (s, 3 H), 8.01 (s, 1 H), 8.90 (s, 1 H), 9.28 (s, 1 H), 10.00 (s, 1 H).

LCMS: (방법-H) 체류 시간 1.85분, [M+H] 227.0.

중간체 37: 6-(3-포르밀-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고1H-피라졸-3-카르브알데히드 (0.40 g, 4.16 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴로부터 출발하여 중간체 37 (0.27 g, 30.50%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.50 - 2.68 (s, 3 H), 7.20 - 7.22 (s, 1 H), 8.03 (s, 1 H), 8.09 - 8.17 (s, 1 H), 8.95 - 8.99 (s, 1 H), 10.48 (s, 1 H).

LCMS: (방법-I) 체류 시간 1.00분, [M+H] 213.0.

중간체 38-I: 5-((2R,6R)-6-(히드록시메틸)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 38A: 메틸 6-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피라진-2-카르복실레이트

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2B (8.74 g, 31.90 mmol) 및 6-클로로피라진-2-카르복실레이트 (5.00 g, 29.00 mmol)로부터 출발하여 중간체 38A (6.20 g, 75.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.34 (s, 3 H), 3.96 (s, 3 H), 5.52 (s, 2 H), 7.76 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 9.16 (s, 1 H), 9.26 (s, 1 H).

LCMS (방법-J): 체류 시간 1.15분, [M+H] 285.2.

중간체 38B: 메틸 6-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-2-카르복실레이트

중간체 2-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 38A (4.00 g, 14.07 mmol)로부터 출발하여 중간체 38B (4.00 g, 97.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.25 - 2.32 (m, 4 H), 2.54 - 2.62 (m, 1 H), 2.82 (d, J = 12.55 Hz, 1 H), 3.10 (d, J = 12.05 Hz, 1 H), 3.54 - 3.60 (m, 1 H), 3.70 (s, 3 H), 4.06 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 5.32 - 5.43 (m, 2 H), 7.62 - 7.71 (m, 1 H), 7.76 - 7.83 (m, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.49분, [M+H] 291.5.

중간체 38C: 1-(tert-부틸) 3-메틸 5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1,3-디카르복실레이트

중간체 18B-II의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 38B (3.50 g, 12.06 mmol)로부터 출발하여 중간체 38C (4.50 g, 95.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.31 - 1.51 (m, 9 H), 2.26 - 2.39 (m, 3 H), 2.74 - 2.95 (m, 1 H), 3.06 (br. s., 1 H), 3.58 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 3.72 (s, 3 H), 3.82 - 3.94 (m, 1 H), 4.03 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), 4.13 - 4.28 (m, 1 H), 5.38 - 5.46 (m, 2 H), 7.64 - 7.76 (m, 1 H), 7.82 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.17분, [M+H] 391.6.

중간체 38D-I, II, III 및 IV: tert-부틸 3-(히드록시메틸)-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-카르복실레이트

THF (50 mL) 및 EtOH (50 mL)의 혼합물 중 중간체 38C (6.20 g, 11.12 mmol)의 용액에 LiCl (0.94 g, 22.23 mmol) 및 NaBH₄ (0.84 g, 22.23 mmol)를 질소 분위기 하에 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 중탄산나트륨 (150 mL)의 10% 수용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC [선파이어 OBD (250 x 30 ID) 5 마이크로미터; 용매 A: 물 중 10 mM 아세트산암모늄물, 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 16분에 걸쳐 30-100% B, 유량: 25 mL/분]에 의해 정제하여 부분입체이성질체-I 및 II를 수득하였다. 부분입체이성질체-I를 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) [키랄팩 ADH (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% NH₄OH, 유량: 3.0 mL/분. 온도: 30℃, UV: 210 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 38D-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 2.67분)을 백색 고체로서 수득하였다 (1.10 g, 27.30%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 2.32 (s, 3 H), 2.78 (dd, J = 10.79, 3.26 Hz, 1 H), 3.37 - 3.43 (m, 3 H), 3.79 - 4.11 (m, 4 H), 4.73 (br. s., 1 H), 5.41 (s, 2 H), 7.69 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.97분, [M+H] 363.2.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 2.69분, 100% ee.

SOR: [α]²⁵ D = -26.00 (c 0.1, MeOH).

중간체 38D-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 3.72분)을 백색 고체로서 수득하였다 (1.10 g, 27.30%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 2.32 (s, 3 H), 2.78 (dq, J = 13.62, 2.99 Hz, 1 H), 3.38 - 3.44 (m, 3 H), 3.82 - 4.12 (m, 4 H), 4.74 (br. s., 1 H), 5.41 (s, 2 H), 7.69 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.97분, [M+H] 363.2.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 3.81분, 100% ee.

부분입체이성질체-II를 SFC [룩스셀룰로스-2 (250 x 21.5 mm) 5 마이크로미터; MeOH + ACN (1:1) 중 0.2% NH₄OH 유량: 3.0 g/분. 온도: 30℃, UV: 235 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 38D-III로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 6.64분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.25 g, 6.21%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.41 (s, 9 H), 2.26 - 2.37 (m, 3 H), 2.96 (br. s., 1 H), 3.39 (br. s., 2 H), 3.57 (d, J = 10.54 Hz, 2 H), 3.70 - 3.92 (m, 3 H), 4.67 (br. s., 1 H), 5.40 (s, 2 H), 7.68 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.84 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.92분, [M+H] 363.2.

키랄 순도 (방법-XIX): 체류 시간 6.69분, 100% ee.

SOR: [α]²⁵ D = + 26.00 (c 0.1, MeOH).

중간체 38D-IV로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 8.49분)을 백색 고체로서 수득하였다 (0.25 g, 6.21%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.41 (s, 9 H), 2.28 - 2.36 (m, 3 H), 2.96 (br. s., 1 H), 3.35 - 3.46 (m, 2 H), 3.58 (br. s., 3 H), 3.75 (d, J = 14.05 Hz, 1 H), 4.67 (t, J = 5.27 Hz, 2 H), 5.40 (s, 2 H), 7.68 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.84 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.92분, [M+H] 363.2.

키랄 순도 (방법-XIX): 체류 시간 8.62분, 100% ee.

중간체 38-I:

MeOH (50 mL) 중 중간체 38D-I (1.50 g, 4.14 mmol)에 디옥산 (20 mL, 80 mmol) 중 4 N HCl의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하고, 농축 건조시켰다. 잔류물을 MeOH (100 mL)로 희석하고, 0℃로 냉각시키고, 암모니아를 이에 5분 동안 퍼징하였다. 생성된 투명한 용액을 감압 하에 농축시켜 중간체 38-I (1.00 g, 92.00%)를 수득하였다. 화합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.31 (s, 3 H), 2.59 - 2.77 (m, 2 H), 2.82 - 2.95 (m, 2 H), 3.38 - 3.44 (m, 2 H), 3.73 (br. s., 1 H), 3.87 (d, J = 11.04 Hz, 1 H), 4.04 - 4.23 (m, 1 H), 5.41 (s, 2 H), 7.70 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.40분, [M+H] 263.2.

중간체 38-I의 입체화학을 결정하기 위해, 5-((2R,6R)-4-(4-브로모벤조일)-6-(히드록시메틸)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온을 문헌 절차 (US2002/156081A1, 2002)에 따라 제조하고, 절대 배위를 단결정 X선 회절 방법에 의해 측정하였다.

중간체 39-I: 5-(6-(히드록시메틸-d2)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 39A-I, II, III 및 IV: tert-부틸 3-(히드록시메틸-d2)-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-카르복실레이트

중간체 38A-I, II, III 및 IV의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 38C (1.40 gm, 2.51 mmol 및 NaBD₄ (0.21 g, 5.02 mmol)로부터 출발하여 중간체 39A-I, II, III 및 IV를 제조하였다. 조 잔류물을 정제용 HPLC [선파이어 OBD (250 x 30 ID) 5 마이크로미터; 용매 A: 물 중 10 mM 아세트산암모늄, 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 16분에 걸쳐 30-100% B, 유량: 25 mL/분]에 의해 정제하여 부분입체이성질체-I 및 II를 수득하였다. 부분입체이성질체-I를 SFC [키랄팩 ADH (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% NH₄OH, 유량: 3.0 g/분. 온도: 30℃, UV: 210 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 39A-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 2.67분)을 백색 고체로서 수득하였다 (0.20 g, 21.80%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.43 (s, 9 H), 2.33 (s, 3 H), 2.39 - 2.47 (m, 2 H), 2.65 - 2.81 (m, 2 H), 3.86 - 4.14 (m, 3 H), 4.72 (s, 1 H), 5.42 (s, 2 H), 7.70 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.97분, [M+H] 365.3.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 2.27분, 100% ee.

중간체 39A-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 3.72분)을 백색 고체로서 수득하였다 (0.20 g, 21.80%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.43 (s, 9 H), 2.33 (s, 3 H), 2.38 - 2.47 (m, 2 H), 2.67 - 2.83 (m, 2 H), 3.84 - 4.08 (m, 3 H), 4.69 - 4.75 (m, 1 H), 5.42 (s, 2 H), 7.70 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.97분, [M+H] 365.3.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 2.97분, 95.40% ee.

부분입체이성질체-II를 SFC [룩스셀룰로스-2 (250 x 21.5 mm) 5 마이크로미터; MeOH + ACN (1:1) 중 0.2% NH₄OH 유량: 70.0 g/분. 온도: 30℃, UV: 235 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 39A-III로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 6.59분)을 백색 고체로서 수득하였다 (0.05 g, 5.47%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 2.28 - 2.36 (m, 3 H), 2.64 - 2.74 (m, 2 H), 2.87 - 3.02 (m, 1 H), 3.18 (s, 2 H), 3.70 - 3.94 (m, 2 H), 4.26 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 5.42 (s, 2 H), 7.69 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.93분, [M+H] 365.3.

키랄 순도 (방법-XIX): 체류 시간 6.56분, 100% ee.

중간체 39A-IV로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 8.32분)을 백색 고체로서 수득하였다 (0.05 g, 5.47%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 2.28 - 2.37 (m, 3 H), 2.66 - 2.72 (m, 2 H), 2.87 - 3.02 (m, 1 H), 3.18 (s, 2 H), 3.70 - 3.94 (m, 2 H), 4.26 (d, J = 10.54 Hz, 1 H), 5.42 (s, 2 H), 7.69 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 7.53 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.93분, [M+H] 365.3.

키랄 순도 (방법-XIX): 체류 시간 8.32분, 98% ee.

중간체 39-I:

중간체 38-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 39A-I (0.20 g, 0.55 mmol)로부터 출발하여 중간체 39-I (0.13 g, 93.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.34 (s, 3 H), 2.57 - 2.69 (m, 2 H), 3.17 (d, J = 10.54 Hz, 1 H), 3.21 - 3.31 (m, 2 H), 4.59 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 4.96 (br. s., 1 H), 5.33 - 5.48 (m, 2 H), 7.70 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.80 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.39분, [M+H] 265.2.

중간체 40-I: 5-(6,6-디메틸피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 40A: 5-(2-브로모아세틸)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

유사한 문헌 절차 (WO2010/129379, A1, 2010)에 따라 합성하였다.

중간체 40B: 2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-2-옥소아세트알데히드

DMSO (15 mL) 및 물의 혼합물 (0.142 mL) 중 중간체 40A (2.65 g, 7.88 mmol)에 물 (0.018 mL, 0.158 mmol) 중 48% HBr의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 중탄산나트륨 (50 mL)의 10% 수용액으로 염기성화시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 40B (1.00 g, 43.50%)를 회백색 고체로서 수득하였다. 화합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.29 (s, 3 H), 5.54 (br. s., 2 H), 7.20 (dd, J = 8.07, 0.98 Hz, 1 H), 7.74 - 7.88 (m, 1 H), 7.95 (d, J = 8.31 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.82분, [M-H] 203.0.

중간체 40C: tert-부틸 3,3-디메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-카르복실레이트

THF (24 mL) 및 MeOH (6 mL)의 혼합물 중 중간체 40B (0.95 g, 3.72 mmol)의 용액에 2-메틸프로판-1,2-디아민 (0.33 g, 3.72 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. NaBH₄ (0.28 g, 7.44 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하였다. TEA (1.556 mL, 11.17 mmol)에 이어서 BOC₂O (0.864 mL, 3.72 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 14시간 동안 교반하고, 물 (100 mL)로 희석하고, DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉- 40 g, 50% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 라세미체 (1.10 g)를 수득하였다. 라세미체를 SFC [키랄팩 ADH (250 x 21.5 mm) 5 마이크로미터; MeOH + ACN 중 (1:1) 0.2% NH₄OH, 유량; 3.0 g /분. 온도: 30℃, UV: 235 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 40C-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 3.02분)을 백색 고체로서 수득하였다 (0.40 g, 29.80%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.13 (d, J = 16.56 Hz, 6 H), 1.37 - 1.48 (m, 9 H), 2.34 (s, 3 H), 2.64 - 2.77 (m, 2 H), 3.71 (br. s., 1 H), 3.97 (br. s., 1 H), 4.26 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 5.33 - 5.48 (m, 2 H), 7.70 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.83 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.61분, [M+H] 361.4.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 3.04분, 100% ee.

중간체 40C-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 4.42분)을 백색 고체로서 수득하였다 (0.40 g, 29.80%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.13 (d, J = 16.56 Hz, 6 H), 1.44 (s, 9 H), 2.30 - 2.40 (m, 3 H), 2.68 (d, J = 2.01 Hz, 2 H), 3.73 (br. s., 1 H), 3.94 (s, 1 H), 4.26 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 5.42 (s, 2 H), 7.70 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.83 (d, J = 8.03 Hz, 1 H) (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.61분, [M+H] 361.4.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 4.44분, 100% ee.

중간체 40-I:

중간체 38-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 40C-I (0.40 g, 1.11 mmol)로부터 출발하여 중간체 40-I (0.26 g, 90.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.06 (s, 3 H), 1.28 (s, 3 H), 2.42 (s, 3 H), 2.46 (dd, J = 12.01, 10.51 Hz, 1 H), 2.54 - 2.60 (m, 1 H), 2.64 - 2.71 (m, 1 H), 2.95 (dt, J = 12.01, 1.50 Hz, 1 H), 4.31 (dd, J = 10.51, 2.75 Hz, 1 H), 5.12 - 5.20 (m, 2 H), 7.63 - 7.70 (m, 1 H), 7.71 - 7.78 (m, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.47분, [M-H] 261.3.

중간체 41: 6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-2-메톡시니코티노니트릴

중간체 41A: 6-클로로-2-메톡시니코티노니트릴 및 중간체 41B: 2-클로로-6-메톡시니코티노니트릴

MeOH (10 mL) 중 2,6-디클로로니코티노니트릴 (0.50 g, 2.89 mmol)의 용액에 주위 온도에서 소듐 메톡시드 (0.62 g, 2.89 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시켰다. 잔류물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC [엑스브리지 페닐 (250 x 21.2 ID) 5 마이크로미터; 용매 A: 물 중 0.1% TFA, 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 20분에 걸쳐 0-100% B, 유량: 20 mL/분, UV 220 nm]에 의해 정제하였다. 중간체 41A로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 15.34분)을 백색 고체로서 수득하였다 (0.10 g, 19.70%).

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 4.08 (s, 3 H), 7.02 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 7.83 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.94분, [M+1H] 169.2.

중간체 41B로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 16.74분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.04 g, 1.64%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.95 (s, 3 H), 7.07 (s, 1 H), 8.29 (d, J = 8.53 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.89분, [M+1H] 169.2.

중간체 41A 및 41B를 단결정 X선 회절 방법의 구조에 의해 결정하였다.

중간체 41:

중간체 11의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 41A (0.16 g, 0.98 mmol)로부터 출발하여 중간체 41 (0.15 g, 62.20%)을 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.15 (s, 3 H), 7.65 - 7.67 (d, J = 6 Hz, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.45 - 8.47 (d, J = 6 Hz, 1 H), 9.44 (s, 1 H), 9.99 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 42: 2-(4-포르밀-1H-이미다졸-1-일)-4,6-디메틸피리미딘-5-카르보니트릴

중간체 42A: 5-브로모-4,6-디메틸피리미딘-2-아민

문헌 절차 (WO2011/103536 A1, 2011)에 따라 합성하였다.

중간체 42B: 2-아미노-4,6-디메틸피리미딘-5-카르보니트릴

DMF (50 mL) 중 중간체 42A (6.00 g, 29.70 mmol)의 용액에 시안화구리(I) (3.99 g, 44.55 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 180℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 물 (50 mL) 및 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 중간체 42B (3.00 g , 54.00%)를 수득하였다. 화합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.32-2.41 (m, 6 H), 7.533 (s, 2 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.72분, [M+H] 149.1.

중간체 42C: 2-브로모-4,6-디메틸피리미딘-5-카르보니트릴

0℃에서 아세토니트릴 (50 mL) 중 이소아밀 니트라이트 (4.91 mL, 36.4 mmol)의 용액에 구리(II)브로마이드 (8.14 g, 36.40 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 10분 동안 교반하고, 아세토니트릴 (10 mL) 중 중간체 42B (2.70 g, 18.22 mmol)를 첨가하고, 교반을 3시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉- 40 g, 10-20% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 42C (0.90 g, 23.90%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.50-2.63 (m, 6 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.692분, [M+H] 211.9.

중간체 42:

DMF (15 mL) 중 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.50 g, 5.20 mmol) 및 중간체 42C (1.10 g, 5.20 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (2.18 mL, 15.61 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 40% EtOAc/ n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 42 (0.25 g, 21.14% )를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.89-2.73 (s, 6 H), 8.80 (s, 2 H), 9.88 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.41분, [M+H] 228.2.

중간체 43: 2-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-4-메틸피리미딘-5-카르보니트릴

중간체 43A: (E)-2-((디메틸아미노)메틸렌)-3-옥소부탄니트릴

DMF (30 mL) 중 3-옥소부탄니트릴 (10.00 g, 120.00 mmol)의 용액에 DMF-DMA (19.34 mL, 144.00 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시키고, n-헥산 (200 mL)으로 희석시켰다. 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 43A (13.00 g, 78.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.17 (s, 3 H), 3.25 (s, 3 H), 3.29 (s, 3 H), 7.83 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.54분, [M+H] 139.2.

중간체 43B: 2-아미노-4-메틸피리미딘-5-카르보니트릴

EtOH (25 mL) 중 중간체 43A (12.00 g, 87.00 mmol)의 교반 용액에 구아니딘 카르보네이트 (31.30 g, 174.00 mmol) 및 아세트산나트륨 (21.37 g, 261.00 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 농축 건조시키고, n-헥산 (200 mL)으로 희석시켰다. 고체 침전물을 여과하고, EtOH (30 mL)로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 43B (9.50 g, 82.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.38 (s, 3 H), 7.62 (s, 2 H), 8.53 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.54분, [M+H] 135.1.

중간체 43C: 2-브로모-4-메틸피리미딘-5-카르보니트릴

THF (75 mL) 및 DMF (15 mL)의 혼합물 중 중간체 43B (5.00 g, 37.30 mmol)의 용액에 주위 온도에서 구리(II)브로마이드 (16.65 g, 74.50 mmol), 이소아밀 니트라이트 (7.53 ml, 55.9 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 환류하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, DCM (200 mL), 고체 침전물을 포함하는 감압 하에 농축 건조시키고, 희석을 여과하고, THF (200 mL)로 세척하였다. 합한 유기 여과물을 중탄산나트륨 (150 mL) 및 염수 (50 mL)의 10% 수용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-120 g, 0-15% EtOAc/ n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 43C (0.75 g, 10.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.65 (s, 3 H), 9.08 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.92분, [M+2H] 199.1.

중간체 43:

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 43C (0.30 g, 1.56 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.18 g, 1.89 mmol로부터 출발하여 중간체 43 (0.04 g, 14.00%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.66 (s, 3 H), 8.37 (s, 1 H), 9.31 (s, 1 H), 9.44 (s, 1 H), 10.00 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.74분, [M+H] 214.1.

중간체 44: 2-(4-포르밀-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메틸피리미딘-5-카르보니트릴

중간체 44A: 2-(4-(히드록시메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메틸피리미딘-5-카르보니트릴

DMF (10 mL) 중 (2H-1,2,3-트리아졸-4-일)메탄올 (0.75 g, 0.76 mmol)의 용액에 K₂CO₃ (1.08 g, 7.81 mmol), 중간체 43C (0.10 g, 0.50 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 44A (0.02 g, 18.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.75 (s, 3 H), 4.68 (s, 2 H), 8.22 (s, 1 H), 9.37 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.74분, [M-H] 215.1.

중간체 44:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 44A (0.25 g, 1.16 mmol) 및 데스-마르틴퍼아이오디난 (0.61 g, 1.44 mmol로부터 출발하여 중간체 44 (0.19 g, 77.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.80 (s, 3 H), 8.80 (s, 1 H), 9.42 (s, 1 H), 10.23 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.59분, [M+H] 215.1.

중간체 45: 2-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-4-메톡시피리미딘-5-카르보니트릴

중간체 45A: 2-클로로-4-메톡시피리미딘-5-카르보니트릴

문헌 절차 (US2015/291629 A1, 2015)에 따라 합성하였다.

중간체 45:

중간체 11의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 45A (0.20 g, 1.18 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.17 g, 1.77 mmol)로부터 출발하여 중간체 45 (0.15 g, 55.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.20 (s, 3 H), 8.38 (s, 1 H), 9.18 (s, 1 H), 9.48 (s, 1 H), 10.00 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.75분, [M+H] 230.1.

중간체 46: 2-(4-포르밀-1H-이미다졸-1-일)-4-메톡시피리미딘-5-카르보니트릴

중간체 11의 것과 유사한 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 45A (1.00 g, 5.90 mmol) 및 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (1.13 g, 11.79 mmol)로부터 출발하여 중간체 46 (0.75 g, 55.50%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.23 (s, 3 H), 8.84 (s, 1 H), 8.87 (s, 1 H), 9.19 (s, 1 H), 9.88 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.80분, [M+H] 230.2.

중간체 47: 6-(4-포르밀-1H-이미다졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (1.0 g, 5.08 mmol) 및 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.61 g, 6.34 mmol)로부터 출발하여 중간체 47 (0.10 g, 9.28%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.59 (s, 3 H), 8.17 (s, 1 H), 8.79 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.95 (s, 1 H), 9.86 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.73분, [M+H] 213.1.

중간체 48: 4-(4-포르밀-1H-이미다졸-1-일)-2-메톡시벤조니트릴

디옥산 (5 mL) 중 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (1.00 g, 10.41 mmol)의 교반 용액에 4-브로모-2-메톡시벤조니트릴 (2.20 g, 10.41 mmol), N,N- 디메틸글리신 (1.073 g, 10.41 mmol) 및 Cs₂CO₃ (3.39 g, 10.41 mmol)에 이어서 구리(I)아이오다이드 (1.98 g, 10.41 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 밀봉된 튜브 내에서 110℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 진공 하에 농축 건조시키고, 물 (40 mL)로 희석하고, DCM (2 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 48 (0.80 g, 33.80%)을 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.04 (s, 3 H), 7.56 (dd, J = 8.35, 1.95 Hz, 1 H), 7.66 (d, J = 1.44 Hz, 1 H), 7.97 (d, J = 8.41 Hz, 1 H), 8.67 - 8.72 (m, 1 H), 8.85 - 8.89 (m, 1 H), 9.84 - 9.87 (m, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.76분, [M+H] 228.1.

중간체 49: 1-(2-메틸피리딘-4-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 48의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-브로모-2-메틸피리딘 (1.00 g, 5.81 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.84 g, 8.72 mmol)로부터 출발하여 중간체 49 (0.50 g, 49.50%)를 회백색 고체로서 제조하였다. 화합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 또는 특징화 없이 사용하였다.

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.69분, [M+H] 188.2.

중간체 50: 2-(4,5-디메틸-1H-이미다졸-1-일)피리미딘-5-카르브알데히드

중간체 50A: 4,5-디메틸-1H-이미다졸

문헌 절차 (Angewandte Chemie, 49, (2010), 5322 - 5326)에 따라 합성하였다.

중간체 50:

아세토니트릴 (10 mL) 중 4,5-디메틸-1H-이미다졸 (0.15 g, 1.60 mmol)의 용액에 K₂CO₃ (0.44 g, 3.21 mmol), 2-브로모피리미딘-5-카르브알데히드 (0.20 g, 1.07 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 주위 온도에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (50 mL)로 희석하고, 셀라이트®를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 40% EtOAc/ n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 50 (0.18 g, 86.00%)을 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.13 (d, J = 0.49 Hz, 3 H), 2.16 (s, 3 H), 8.47 (s, 1 H), 9.27 (s, 2 H), 10.11 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 51-I: 4-메틸-5-((2R,6S)-6-메틸피페라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온4-메틸-5-(6-메틸피라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온 및 중간체 51-II: 4-메틸-5-((2S,6R)-6-메틸피페라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 51A: 4-메틸-5-(6-메틸피라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2B (20.00 g, 7.3.00 mmol) 및 2-클로로-6-메틸피라진 (9.38 g, 73.0 mmol)로부터 출발하여 중간체 51A (14.00 g, 80.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.23 (s, 3 H), 2.59 (s, 3 H) 5.50 (s, 2 H), 7.69 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 8.62 (s, 1 H), 8.69 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.41분, [M+H] 241.2.

중간체 51-I 및 51-II:

중간체 2-I 및 2-II의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 51A (10.00 g, 41.6 mmol)로부터 출발하여 중간체 51-I 및 51-II를 제조하였다. 라세미체를 SFC [키랄팩 IC (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH + ACN (1:1) 중 0.2% NH₄OH, 유량: 1.2 mL/분. 온도: 30℃, UV: 235 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 51-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 4.83분)을 갈색 고체로서 수득하였다 (3.50 g, 41.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.96 (d, J = 6.02 Hz, 3 H) 2.14 - 2.22 (m, 2 H) 2.29 (s, 3 H) 2.74 - 2.84 (m, 3 H) 4.02 (dd, J = 10.04, 2.51 Hz, 1 H) 5.38 (s, 2 H) 7.65 (d, J = 8.03 Hz, 1 H) 7.81 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.636분, [M+H] 247.2.

키랄 순도 (방법-XXVII): 체류 시간 4.86분, 99.30% ee.

SOR: [α]²⁵ D = - 38.00 (c 0.10, MeOH).

중간체 51-I의 입체화학을 결정하기 위해, 5-((2R,6S)-4-(3,5-디브로모벤조일)-6-메틸피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온을 문헌 절차 (WO2011/012896, 2011)에 따라 제조하고, 절대 배위를 단결정 X선 회절 방법에 의해 측정하였다. 중간체 51-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 6.12분)을 갈색 고체로서 수득하였다 (3.10 g, 36.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.97 (d, J = 6.02 Hz, 3 H), 2.12 - 2.26 (m, 2 H), 2.29 (s, 3 H), 2.74 - 2.84 (m, 3 H), 4.02 (dd, J = 10.04, 2.51 Hz, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.65 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.548분, [M+H] 247.2.

키랄 순도 (방법-XXVII): 체류 시간 5.96분, 96.00% ee.

SOR: [α]²⁵ D = + 32.00 (c 0.10, MeOH).

중간체 52-I: 5-((3R,4R)-4-히드록시피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온 히드로클로라이드

중간체 52A-I, II, III 및 IV: tert-부틸 4-히드록시-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-카르복실레이트

MeOH (100 mL) 중 중간체 4A (4.00 g, 11.58 mmol)의 용액에 NaBH₄ (1.46 g, 23.16 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (100 mL)로 희석시켰다. 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 부분입체이성질체-I (2.7 gm)를 수득하였다. 여과물을 DCM 중 10% MeOH (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 부분입체이성질체-II (0.8 g)를 수득하였다. 부분입체이성질체-I를 SFC [룩스 셀룰로스-2 (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% NH₄OH, 유량: 1.2 mL/분. 온도: 30℃, UV: 240 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 52A-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 3.98분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (1.20 g, 30.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 1.89 - 1.98 (m, 1 H), 2.29 (s, 3 H), 2.82 (d, J = 9.54 Hz, 3 H), 3.17 (d, J = 4.02 Hz, 1 H), 3.78 (br. s., 1 H), 3.95 (br. s., 2 H), 4.70 (br. s., 1 H), 5.40 (s, 2 H), 7.55 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.66 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

키랄 순도 (방법-XXVIII): 체류 시간 3.98분, 100% ee.

SOR: [α]²⁵ D = - 38.00 (c 0.1, MeOH).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 52A-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 5.85분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (1.30 g, 32.30%).

키랄 순도 (방법-XXVIII): 체류 시간 5.85분, 99.3% ee.

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

부분입체이성질체-II를 부분입체이성질체-I의 것과 유사한 SFC 방법을 사용하여 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 52A-III로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 8.61분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.20 g, 5.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.40 (s, 9 H), 1.64 - 1.82 (m, 2 H), 2.26 (s, 3 H), 3.06 (d, J = 11.04 Hz, 1 H), 3.17 (d, J = 5.52 Hz, 1 H), 3.52 (br. s., 1 H), 3.81 (br. s., 2 H), 3.97 (br. s., 1 H), 4.82 (br. s., 1 H), 5.39 (s, 2 H), 7.56 (br. s., 1 H), 7.59 - 7.65 (m, 1 H).

키랄 순도 (방법-XXVIII): 체류 시간 8.61분, 100% ee.

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 52A-IV로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 9.82분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.21 g, 5.20%).

키랄 순도 (방법-XXVIII): 체류 시간 9.82분, 97.80% ee.

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 52-I:

0℃에서 DCM (50 mL) 중 중간체 52A-I (1.20 g, 3.45 mmol)에 디옥산 (12.95 mL, 51.8 mmol) 중 4N HCl의 용액을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시키고, 디에틸에테르 (2 x 50 mL)로 세척하고, 감압 하에 건조시켜 중간체 52-I (0.90 g, 92.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.72 - 1.85 (m, 1 H), 2.08 (d, J =13.05 Hz, 1 H), 2.30 (s, 3 H), 3.08 (d, J = 9.04 Hz, 2 H), 3.12 - 3.20 (m, 2 H), 3.97 (br. s., 1 H), 4.99 (br. s., 1 H), 5.40 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 7.61 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.70 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.96 (br. s., 1 H), 9.05 (br. s., 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D) 체류 시간 0.395분, [M+H] 248.0.

중간체 52-I의 입체화학을 결정하기 위해, 5-((3R,4R)-1-(4-브로모벤조일)-4-히드록시피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온을 문헌 절차 (WO2011/012896, 2011)에 따라 제조하고, 절대 배위를 단결정 X선 회절 방법에 의해 측정하였다.

실시예 1-I: (R)-4-메틸-6-(4-((2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)모르폴리노)메틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

MeOH (1 mL) 중 중간체 6 (0.05 g, 0.23 mmol)의 용액에 중간체 3-I (0.05 g, 0.23 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 15분 동안 교반하였다. NaCNBH₃ (0.04 g, 0.71 mmol)을 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 12시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (15 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 HPLC [엑스브리지 C18 (19 x 150 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 0.1% TFA; 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 25분에 걸쳐 10-100% B, 유량: 15 mL/분, 체류 시간 1.60분, UV 220 nm]에 의해 정제하여 실시예 1-I (0.02 g, 17.10%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.86 - 1.96 (m, 1 H), 2.20 (s, 3 H), 2.23 - 2.29 (m, 1 H), 2.58 (s, 3 H), 2.81 (d, J = 11.74 Hz, 1 H), 2.92 (d, J = 11.49 Hz, 1 H), 3.56 (s, 2 H), 3.71 - 3.81 (m, 1 H), 3.99 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 4.81 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 5.38 (d, J = 4.89 Hz, 2 H), 7.57 - 7.63 (m, 1 H), 7.64 - 7.71 (m, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 8.83 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.25분, [M+H] 430.0, 순도: 100%.

(방법-B): 체류 시간 1.90분, [M+H] 430.0, 순도: 98.3%.

키랄 순도 (방법- I): 체류 시간 10.04분, 100% ee,

실시예 2-I: (R)-4-메틸-6-(4-((3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 6 (0.25 g, 1.17 mmol) 및 중간체 2-I로부터 출발하여 실시예 2-I (0.11 g, 21.36%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.79 (t, J = 10.29 Hz, 1 H), 2.03 - 2.18 (m, 1 H), 2.25 (s, 3 H), 2.66 - 2.67 (m, 4 H), 2.79 (t, J = 9.04 Hz, 2 H), 2.84 - 2.92 (m, 1 H), 2.94 - 3.05 (m, 1 H), 3.45 - 3.59 (m, 2 H), 4.06 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 5.36 (d, J = 1.51 Hz, 2 H), 7.63 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.76 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.85 (s, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 8.52 (s, 1 H), 8.82 (s, 1 H).

HPLC (방법-F): 체류 시간 5.62분, 순도: 98.55%.

(방법-G): 체류 시간 5.62분, 순도: 98.55%.

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.82분, [M+H] 429.0.

키랄 순도 (방법-VII): 체류 시간 4.29분, 100% ee.

실시예 3-1: (R)-3-메틸-5-(5-((2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)모르폴리노)메틸)피리딘-2-일)벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

중간체 2B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 8 (0.06 g, 0.24 mmol) 및 중간체 5-I로부터 출발하여 실시예 3-I (0.006 g, 5.13%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.99 (t, J = 10.76 Hz, 1 H), 2.23 (s, 3 H), 2.26 - 2.35 (m, 1 H), 2.79 (d, J = 11.25 Hz, 1 H), 2.90 (d, J = 10.52 Hz, 1 H), 3.42 (s, 3 H), 3.64 (s, 2 H), 3.74 - 3.83 (m, 1 H), 4.01 (d, J = 11.49 Hz, 1 H), 4.85 (d, J = 8.80 Hz, 1 H), 5.38 (d, J = 3.67 Hz, 2 H), 7.43 (d, J = 8.56 Hz, 1 H), 7.60 - 7.66 (m, 1 H), 7.66 - 7.71 (m, 1 H), 7.83 - 7.92 (m, 2 H), 7.96 (d, J = 1.47 Hz, 1 H), 8.01 (d, J = 8.56 Hz, 1 H), 8.61 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.21분, [M+H] 472.2, 순도: 100%.

(방법-B): 체류 시간 1.83분, [M+H] 472.2, 순도: 99.40%.

키랄 순도 (방법-XVIII): 체류 시간 24.29분, 100% ee.

실시예 4: 5-(4-((4,4-디플루오로-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)-3-메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

중간체 6에 대해 기재된 합성 프로토콜과 유사한 방식을 사용하여 중간체 4 (0.05 g, 0.15 mmol)를 사용하여 실시예 4 (0.01 g, 13.77%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.16 (br. s., 2 H), 2.29 (s, 3 H), 2.33 (s, 1 H), 2.65 - 2.73 (m, 1 H), 2.90 (br. s., 1 H), 3.01 (br. s., 1 H), 3.39 (s, 3 H), 3.63 (s, 2 H), 3.68 - 3.80 (m, 1 H), 5.40 (q, J = 15.41 Hz, 2 H), 7.41 (d, J = 8.56 Hz, 1 H), 7.56 (dd, J = 8.56, 2.20 Hz, 1 H), 7.62 - 7.68 (m, 2 H), 7.69 - 7.71 (m, 1 H), 7.74 (d, J = 2.20 Hz, 1 H), 8.44 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.29분, [M+H] 495.0, 순도: 94.70%.

(방법-B): 체류 시간 1.87분, [M+H] 495.1, 95.90%.

실시예 5: 6-(4-((4,4-디플루오로-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 6 (0.04 g, 0.19 mmol) 및 중간체 4C를 사용하여 실시예 1-I에 대해 기재된 합성 프로토콜과 유사한 방식으로 실시예 5 (0.01 g, 12.92%)를 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.34 (s, 3 H), 2.44 (br. s., 2 H), 2.66 (s, 3 H), 3.04 (d, J = 10.58 Hz, 1 H), 3.22 (t, J = 2.46 Hz, 1 H), 3.64 (t, J = 15.86 Hz, 2 H), 4.09 - 4.18 (m, 1 H), 4.20 - 4.40 (m, 2 H), 5.26 - 5.33 (m, 2 H), 7.48 (d, J = 8.69 Hz, 1 H), 7.80 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 8.62 (s, 1 H), 8.74 (s, 1 H).

¹⁹F NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm - 96.34, - 110.26.

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.375분, [M+H] 464.0, 순도: 95.80%.

(방법-B): 체류 시간 2.11분, [M+H] 464.0, 95.20%.

실시예 6-I: (R)-6-(5-메톡시-4-((3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 9 (0.05 g, 0.20 mmol) 및 중간체 2-I로부터 출발하여 실시예 6-I (0.02 g, 22.08%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.87 (t, J = 10.76 Hz, 1 H), 2.14 (s, 1 H), 2.26 (s, 3 H), 2.55 (s, 3 H), 2.80 (d, J = 10.76 Hz, 2 H), 2.85 - 2.93 (m, 1 H), 2.99 (d, J = 10.03 Hz, 1 H), 3.40 (s, 2 H), 3.95 (s, 3 H), 4.09 (d, J = 10.27 Hz, 1 H), 5.37 (s, 2 H), 7.64 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.73 - 7.78 (m, 2 H), 8.38 (s, 1 H), 8.74 (s, 1 H), (교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.31분, [M+H] 459, 순도: 100%.

(방법-B): 체류 시간 1.78분, [M+H] 459, 순도: 99.40%.

키랄 순도 (방법-XV): 체류 시간 9.83분, 82.80% ee.

실시예 7-I: (R)-4-메틸-5-(4-((1-(2-메틸티아졸-5-일)-1H-피라졸-4-일)메틸)모르폴린-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 14-I (0.10 g, 0.319 mmol)로부터 출발하여 실시예 7-I (0.02 g, 17.25%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.87 - 1.95 (m, 1H), 2.16 - 2.22 (m, 1 H), 2.24 (s, 3 H), 2.62 (s, 3 H), 2.80 (d, J = 11.00 Hz, 1 H), 2.91 (d, J = 11.74 Hz, 1 H), 3.49 (s, 2 H), 3.71 - 3.80 (m, 1 H), 3.99 (dd, J = 11.49, 2.20 Hz, 1 H), 4.81 (dd, J = 10.03, 2.20 Hz, 1 H), 5.33 - 5.44 (m, 2 H), 7.59 - 7.70 (m, 3 H), 7.86 (s, 1 H), 8.33 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.06분, [M+H] 411.1, 순도: 100%.

(방법-B): 체류 시간 1.52분, [M+H] 411.1, 순도: 99.60%.

키랄 순도 (방법-XVI): 체류 시간 11.36분, 100% ee.

실시예 8-1: (R)-4-시클로프로필-6-(4-((2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)모르폴리노)메틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 14-I (0.05 g, 0.16 mmol) 및 중간체 10 (0.05 g, 0.23 mmol)으로부터 출발하여 실시예 8-I (0.003g, 4.27%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.02 - 1.11 (m, 2 H), 1.26 - 1.40 (m, 2 H), 2.19 - 2.30 (m, 4 H), 3.61 (s, 2 H), 3.90 (d, J = 11.49 Hz, 2 H), 4.18 (d, J = 11.25 Hz, 4 H), 5.05 (br. s., 1 H), 5.33 - 5.52 (m, 2 H), 7.45 (s, 1 H), 7.63 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 7.74 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 8.72 - 8.90 (m, 2 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.40분, [M+H] 456.1, 순도: 100%.

(방법-B): 체류 시간 2.09분, [M+H] 456.1, 순도: 94.50%.

키랄 순도 (방법-V): 체류 시간 10.54분, 100% ee.

실시예 9-I: (R)-4-메틸-6-(4-((5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-2-옥소옥사졸리딘-3-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

DCM (5 mL) 중 중간체 12-I (0.06 g, 0.149 mmol)의 용액에 디피리딜-2-카르보네이트 (0.03 mg, 0.15 mmol), TEA (0.04 mL, 0.29 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC [엑스브리지 C18 (19 x 150 mm) 5-μm; 용매 A: 10 mM 아세트산암모늄, 용매 B: 메탄올, 구배: 20분에 걸쳐 15-57% B에 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분, 체류 시간 2.70분, UV 220 nm]에 의해 정제하여 실시예 9-I (0.13 g, 19.34%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) d ppm 2.23 (s, 3 H), 2.64 (s, 3 H), 4.10 (t, J = 9.04 Hz, 1 H), 4.28 - 4.53 (m, 3 H), 5.35 - 5.48 (m, 2 H), 5.97 (dd, J = 9.04, 7.03 Hz, 1 H), 7.55 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.74 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 7.89 (s, 1 H), 8.00 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 8.64 (s, 1 H), 8.85 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.69분, [M+H] 430.1, 순도: 95.30%.

(방법-B): 체류 시간 1.70분, [M+H] 430.1, 순도: 94.30%.

키랄 순도 (방법-X): 체류 시간 5.58분, 100% ee.

실시예 10-I: (R)-4-메틸-6-(4-((2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-5-옥소모르폴리노)메틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

THF (10 mL) 중 중간체 13-I (0.05 g, 0.11 mmol)의 교반 용액에 트리-n-부틸포스핀 (0.08 mL, 0.32 mmol)에 이어서 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.04 mL, 0.22 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하고, 물 (30 mL)로 희석하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (3 x 25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (25 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC [엑스브리지 페닐 (19 x 250 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 10 mM CH₃COONH₄-PH-4.5, 용매 B: 아세토니트릴; 구배: 24분에 걸쳐 40-65%; 유량: 17 mL/분, 체류 시간 11.24분, UV 254 nm]에 의해 정제하여 실시예 10-I (0.001 g, 2.50%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.29 (s, 3 H), 2.59 (s, 3 H), 3.36 - 3.46 (m, 1 H), 3.57 (dd, J = 12.23, 3.18 Hz, 1 H), 4.28 - 4.51 (m, 3 H), 4.60 (d, J = 14.92 Hz, 1 H), 5.29 (dd, J = 10.52, 3.42 Hz, 1 H), 5.34 - 5.50 (m, 2 H), 7.58 - 7.66 (m, 1 H), 7.67 - 7.76 (m, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 8.01 (s, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 8.85 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.67분, [M+H] 444.1, 순도: 100%.

(방법-B): 체류 시간 1.65분, [M+H] 444.1, 순도: 100%.

키랄 순도 (방법-I): 체류 시간 22.89분, 100% ee.

실시예 11-I: (R)-4-메톡시-6-(4-(2-(2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)모르폴리노)에틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 15 (0.07 g, 0.31 mmol) 및 중간체 3-I로부터 출발하여 실시예 11-I (0.05 g, 32.65%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.85 - 2.00 (m, 1 H), 2.22 - 2.33 (m, 3 H), 2.60 (br. s., 3 H), 2.71 (d, J = 5.87 Hz, 2 H), 2.89 (d, J = 11.98 Hz, 1 H), 2.99 (d, J = 11.49 Hz, 1 H), 3.75 (t, J = 11.13 Hz, 1 H), 4.00 (d, J = 10.03 Hz, 1 H), 4.10 (s, 3 H), 4.80 (d, J = 10.03 Hz, 1 H), 5.30 - 5.51 (m, 2 H), 7.58 (s, 1 H), 7.60 - 7.76 (m, 2 H), 7.84 (s, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.73 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.29분, [M+H] 460.1, 순도: 98.12%.

(방법-B): 체류 시간 1.95분, [M+H] 460.1, 순도: 97.20%.

키랄 순도 (방법-I): 체류 시간 10.17분, 100% ee.

실시예 12-I: (R)-6-(5-((2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)모르폴리노)메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)니코티노니트릴

ACN (5 mL) 중 중간체 16 (0.04 g, 0.18 mmol) 및 중간체 3-I (0.04 g, 0.18 mmol)의 교반 용액에 K₂CO₃ (0.07 g, 0.54 mmol)에 이어서 KI (0.003 g, 0.02 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 14시간 동안 교반하고, 물 (25 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 15 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (15 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 HPLC [엑스브리지 C18 (19 x 150 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 0.1% 트리플루오로아세트산; 용매 B: 아세토니트릴; 구배: 20분에 걸쳐 5-32%, 유량: 15 mL/분, 체류 시간 10.63분, UV 220 nm]에 의해 정제하여 실시예 12-I (0.058 g, 76.31%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.18 (t, J = 10.64 Hz, 1 H), 2.28 (s, 3 H), 2.39 - 2.48 (m, 1 H), 2.89 (d, J = 11.00 Hz, 1 H), 3.05 (d, J = 11.49 Hz, 1 H), 3.69 - 3.84 (m, 1 H), 3.96 - 4.12 (m, 3 H), 4.85 (dd, J = 9.90, 2.08 Hz, 1 H), 5.31 - 5.47 (m, 2 H), 7.57 - 7.63 (m, 1 H), 7.65 - 7.73 (m, 1 H), 8.35 (dd, J = 8.31, 0.98 Hz, 1 H), 8.57 (dd, J = 8.19, 2.08 Hz, 1 H), 9.23 (dd, J = 2.08, 0.86 Hz, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.26분, [M+H] 418.1, 순도: 100%.

(방법-B): 체류 시간 1.41분, [M+H] 418.0, 순도: 100%.

키랄 순도 (방법-VII): 체류 시간 17.41분, 100% ee.

실시예 13-I: (R)-4-메틸-6-(5-((3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)니코티노니트릴

실시예 12-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 17 (0.04 g, 0.17 mmol) 및 중간체 2-I로부터 출발하여 실시예 13-I (0.02 g, 21.80%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.00 - 2.10 (m, 1 H), 2.29 (s, 3 H), 2.63 (s, 4 H), 2.89 (t, J = 10.76 Hz, 4 H), 2.97 - 3.06 (m, 1 H), 4.00 (s, 2 H), 4.11 (d, J = 8.56 Hz, 1 H), 5.39 (s, 2 H), 7.65 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.77 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 8.32 (s, 1 H), 9.11 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.12분, [M+H] 431.1, 순도: 100%.

(방법-B): 체류 시간 1.66분, [M+H] 431.1, 순도: 99.56%.

키랄 순도 (방법-V): 체류 시간 8.77분, 100% ee.

실시예 14-I: (R)-4-메톡시-6-(4-((3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1H-이미다졸-1-일)니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 11 (0.25 g, 1.10 mmol) 및 중간체 2-I로부터 출발하여 실시예 14-I (0.10 g, 20.13%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.89 (br. s., 1 H), 2.19 (br. s., 1 H), 2.27 (s, 3 H), 2.81 - 3.05 (m, 5 H), 3.50 (s, 2 H), 4.03 - 4.14 (m, 4 H), 5.37 (s, 2 H), 7.59 (s, 1 H), 7.65 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.78 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 8.58 (d, J = 1.22 Hz, 1 H), 8.74 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 0.99분, [M+H] 445.1, 순도: 100%.

(방법-B): 체류 시간 1.28분, [M+H] 445.0, 순도: 99.56%.

키랄 순도 (방법-V): 체류 시간 7.10분, 84.55% ee.

실시예 15-I: (R)-4-메틸-6-(4-((3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-5-옥소피페라진-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 6 (0.03 g, 0.14 mmol) 및 중간체 19-I로부터 출발하여 실시예 15-I (0.008 g, 12.95%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.22 (s, 3 H), 2.41 (dd, J = 11.62, 6.24 Hz, 1 H), 2.56 (s, 3 H), 2.90 (dd, J = 11.98, 4.16 Hz, 1 H), 3.05 - 3.22 (m, 2 H), 3.47 - 3.65 (m, 2 H), 4.94 (br. s., 1 H), 5.21 - 5.34 (m, 1 H), 5.36 - 5.46 (m, 1 H), 7.56 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.68 - 7.80 (m, 2 H), 7.96 (s, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.76 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.23분, [M+H] 443.1, 순도: 96.48%.

(방법-B): 체류 시간 1.51분, [M+H] 443.1, 순도: 100%.

키랄 순도 (방법-V): 체류 시간 12.48분, 92% ee.

실시예 16-I: (R)-4-메틸-5-(4-((6-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)피리딘-3-일)메틸)모르폴린-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 23-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 20 (0.05 g, 0.26 mmol) 및 중간체 3-I로부터 출발하여 실시예 16-I (0.01 g, 9.26%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.17 (s, 3 H), 2.22 (s, 3 H), 2.23 - 2.36 (m, 2 H), 2.77 (d, J = 11.25 Hz, 1 H), 2.87 (d, J = 11.98 Hz, 1 H), 3.61 (s, 2 H), 3.69 - 3.85 (m, 1 H), 3.99 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 4.82 (d, J = 7.58 Hz, 1 H), 5.26 - 5.45 (m, 2 H), 7.54 - 7.75 (m, 4 H), 7.92 (dd, J = 8.31, 2.20 Hz, 1 H), 8.39 (s, 2 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 0.83분, [M+H] 405.1, 순도: 99.20%.

(방법-B): 체류 시간 1.56분, [M+H] 405.0, 순도: 95.99%.

키랄 순도 (방법-X): 체류 시간 12.55분, 96.10% ee

실시예 17-I: (R)-4-메톡시-5'-((5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-2-옥소옥사졸리딘-3-일)메틸)-[2,2'-비피리딘]-5-카르보니트릴

70℃에서 THF (20 mL) 중 중간체 23-I (0.15 g, 0.35 mmol)의 용액을 1,1'-카르보닐디이미다졸 (0.06 g, 0.38 mmol)에 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 물 (15 mL)로 희석하고, DCM (3 x 15 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 HPLC [인터실 ODS (250 x 10 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: H₂O 중 10 mM NH₄OAc, 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 14분에 걸쳐 20-65% , 유량: 17 mL/분 체류 시간 15.06분, UV 254 nm]에 의해 정제하여 실시예 17-I (0.02 g, 8.68%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.22 (s, 3 H), 4.03 - 4.07 (m, 2 H), 4.11(s,3 H), 4.51 (d, J = 16.00 Hz, 1 H), 4.62 (d, J = 16.00 Hz, 1 H), 5.22 - 5.48 (m, 2 H), 6.02 (t, J = 8.19 Hz, 1 H), 7.59 (d, J = 8.56 Hz, 1 H), 7.76 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.95 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 8.43 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 8.92 (s, 1 H).

LCMS/HPLC: (방법-A) 체류 시간:1.59분, [M+1]: 457.1, 순도: 100%. (방법-B) 체류 시간: 1.65분, [M+1]: 457.0, 순도: 100%.

키랄 순도 (방법-XVII): 체류 시간 6.39분, 100% ee

실시예 18-I: 6-(4-(1-히드록시-2-((R)-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)모르폴리노)에틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴 (부분입체이성질체-I & II)

EtOH (10 mL) 중 중간체 24 (0.12 g, 0.53 mmol)의 용액에 중간체 3-I (0.12 g, 0.53 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 85℃에서 48시간 동안 교반하였다. 에탄올을 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 HPLC [엑스브리지 페닐 (250 x 19 ID) 5 마이크로미터; 용매 A: 10 mM NH₄HCO₃-PH-9.5, 용매 B: 아세토니트릴; 구배: 15분에 걸쳐 0-62%; 유량: 16 mL/분, UV 254 nm]에 의해 정제하였다. 실시예 18-I Dia-I (부분입체이성질체-1)로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 15.33분)을 수득하였다 (0.009 g, 19.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.01 - 2.08 (m, 1 H), 2.25 (s, 3 H), 2.31 - 2.34 (m, 1 H), 2.36 (d, J = 3.01 Hz, 1 H), 2.58 (s, 3 H), 2.65 - 2.68 (m, 1 H) 2.85 (d, J = 10.80 Hz, 1 H), 3.07 (d, J = 10.80 Hz, 1 H), 3.72 - 3.80 (m, 1 H), 3.95 - 4.03 (m, 1 H), 4.79 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 4.85 (d, J = 6.53 Hz, 1 H), 5.22 (d, J = 5.02 Hz, 1 H), 5.39 (d, J,= 4.52 Hz, 2 H), 7.62 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.67 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 8.54 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.93분, [M+H] 460.1, 순도: 98.60%.

HPLC (방법-F): 체류 시간 5.12분, 순도: 99.14%.

(방법-G): 체류 시간 6.03분, 순도: 99.42%.

키랄 순도 (방법-X): 체류 시간 10.19분, 97.70% ee.

실시예 18-I Dia-II (부분입체이성질체-II)로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 17.02분)을 수득하였다 (0.008 g 16.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.01 - 2.08 (m, 1 H), 2.25 (s, 3 H), 2.31 - 2.34 (m, 1 H), 2.36 (d, J = 3.01 Hz, 1 H), 2.58 (s, 3 H), 2.65 - 2.68 (m, 1 H) 2.96 (t, J = ,11.80 Hz, 2 H), 3.72 - 3.80 (m, 1 H), 3.95 - 4.03 (m, 1 H), 4.79 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 4.85 (d, J = 6.53 Hz, 1 H), 5.22 (d, J = 5.02 Hz, 1 H), 5.39 (d, J,= 4.52 Hz, 2 H), 7.62 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.67 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 8.54 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.92분, [M+H] 460.1, 순도: 95.43%.

HPLC (방법-F): 체류 시간 5.11분, 순도: 90.01%.

(방법-G): 체류 시간 6.00분, 순도: 88.76%.

키랄 순도 (방법-X): 체류 시간 12.55분, 96.10% ee.

실시예 19-I: (R)-3-메틸-5-(5-((2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)모르폴리노)메틸)티아졸-2-일)벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

실시예 3-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 25-I (0.10 g, 0.12 mmol) 및 중간체 8로부터 출발하여 실시예 19-I (0.01 g, 16.97%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.94 - 2.07 (m, 1 H), 2.24 (s, 3 H), 2.28 - 2.37 (m, 1 H), 2.83 - 2.91 (m, 1 H), 2.96 (d, J = 11.74 Hz, 1 H), 3.42 (s, 3 H), 3.72 - 3.83 (m, 1 H), 3.87 (s, 2 H) 4.03 (d, J = 9.29 Hz, 1 H), 4.83 (s, 1 H), 5.38 (d, J = 2.45 Hz, 2 H), 7.44 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 7.67 (s, 1 H) 7.69 (s, 1 H) 7.70 (dd, J = 8.00 Hz, 1.60 Hz, 1 H), 7.75 (s, 1 H) 7.79 (d, J = 1.71 Hz, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.23분, [M+H] 478.1, 순도: 99.56%.

(방법-B): 체류 시간 1.89분, [M+H] 478.0, 순도: 99.59%.

키랄 순도 (방법-X): 체류 시간 9.67분, 100% ee.

실시예 20-I: (R)-3-메틸-5-(5-(2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)모르폴린-4-카르보닐)티아졸-2-일)벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

실시예 3-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 26-I (0.15 g, 0.35 mmol) 및 중간체 8로부터 출발하여 실시예 20-I (0.01 g, 5.29%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.08 (s, 3 H), 2.20 - 2.37 (m, 3 H), 3.43 (s, 3 H), 3.83 (dd, J = 11.49, 8.80 Hz, 1 H), 4.12 (d, J = 9.78 Hz, 1 H), 4.15 - 4.31(br. s., 1 H), 4.94 (d, J = 10.03 Hz, 1 H), 5.42 (br. s., 2 H), 7.49 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.66 - 7.83 (m, 3 H), 7.87 (d, J = 1.71 Hz, 1 H), 8.26 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.71분, [M+H] 492.1, 순도: 96.82%.

(방법-B): 체류 시간 1.73분, [M+H] 492.0, 순도: 97.44%.

키랄 순도 (방법-XVI): 체류 시간 3.40분, 100% ee.

실시예 21-I: (R)-1-(5-((3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)티아졸-2-일)-1H-이미다졸-4-카르보니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 27 (0.03 g, 0.17 mmol) 및 중간체 2-I로부터 출발하여 실시예 21-I (0.006 g, 9.11%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.84 - 2.00 (m, 1 H), 2.26 (s, 3 H), 2.78 - 2.94 (m, 4 H), 3.02 (d, J = 12.23 Hz, 1 H), 3.69 - 3.85 (m, 2 H), 4.07 (d, J = 8.56 Hz, 1 H), 5.27 - 5.41 (m, 2 H), 7.60 (s, 1 H), 7.66 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 7.77 (d, J = 7.58 Hz, 1 H), 8.64 (s, 1 H), 8.85 (s, 1 H), (교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.07분, [M+H] 421.1, 순도: 100%.

(방법-B): 체류 시간 1.32분, [M+H] 421.0, 순도: 100%.

키랄 순도 (방법-XVIII): 체류 시간 11.69분, 100% ee.

실시예 22-I: (R)-4-메틸-6-(4-((3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 28 (0.04 g, 0.19 mmol) 및 중간체 2-I (0.05 g, 0.206 mmol)로부터 출발하여 실시예 22-I (0.01 g, 10.83%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.87 - 1.95 (m, 1 H), 2.17 - 2.23 (m, 1 H), 2.26 (s, 3 H), 2.61 (s, 3 H), 2.80 - 3.03 (m, 4 H), 3.77 (s, 2 H), 4.10 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 5.37 (d, J = 2.45 Hz, 2 H), 7.65 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.77 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 8.11 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 8.92 (s, 1 H), (교환가능한 양성자가 존재함).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.15분, [M+H] 430, 순도: 96.70%.

(방법-B): 체류 시간 1.36분, [M+H] 430, 순도: 100%.

키랄 순도 (방법-XVIII): 체류 시간 26.46분, 100% ee.

실시예 23-I: (R)-4-메틸-6-(4-((3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 30 (0.04 g, 0.19 mmol) 및 중간체 2-I로부터 출발하여 실시예 23-I (0.008 g, 8.83%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.86 - 1.95 (m, 1 H), 2.15 - 2.29 (m, 4 H), 2.64 (s, 3 H), 2.81 - 3.03 (m, 4 H), 3.75 (s, 2 H), 4.09 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 5.32 - 5.43 (m, 2 H), 7.64 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 7.76 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.77 (s, 1 H), 8.98 (s, 1 H), (교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.43분, [M+H] 430.0, 순도: 98.88%, (방법-B): 체류 시간 1.23분, [M+H] 430.1, 순도: 98.70%.

키랄 순도 (방법- IX): 체류 시간 12.83분. 98.50% ee.

실시예 24-I: 메틸 (R)-4-((1-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-일)메틸)-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-카르복실레이트

0℃에서 DCM (3.00 mL) 중 실시예 2-I (0.03 g, 0.06 mmol)의 교반 용액에 TEA (0.03 mL, 0.18 mmol)에 이어서 메틸 클로로포르메이트 (4.52 μL, 0.06 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 18시간 동안 교반하고, 물 (15 mL)로 희석하고, DCM (3 x 15 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수 (15 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 HPLC [엑스브리지 C18 (19 x 150 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 10-mM 아세트산암모늄; 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 15분에 걸쳐 20-100% B, 유량: 15 mL/분, 체류 시간 2.80분, UV 220 nm]에 의해 정제하여 실시예 24-I (0.003 g, 9.15%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.19 (br. s., 1 H), 2.20 - 2.26 (m, 3 H), 2.46 (d, J = 4.89 Hz, 1 H), 2.56 (s, 3 H), 2.89 - 3.05 (m, 2 H), 3.43 - 3.54 (m, 2 H), 3.57 (s, 4 H), 3.87 (d, J = 11.98 Hz, 1 H), 5.25 - 5.33 (m, 1 H), 5.34 - 5.43 (m, 2 H), 7.69 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.76 (s, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 8.02 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.78 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-A): 체류 시간 1.26분, [M+H] 487.1, 순도: 98.94%.

(방법-B): 체류 시간 2.02분, [M+H] 487.1, 순도: 100%.

키랄 순도 (방법- X): 체류 시간 25.56분, 86.55% ee.

표 1의 실시예를 실시예 1 내지 24-I에서의 절차를 사용하여 합성하였다.

실시예 81-I: 6-(4-(((3R,5R)-3-(히드록시메틸)-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 38-I (0.35 g, 1.32 mmol) 및 중간체 6 (0.20 g, 0.94 mmol)로부터 출발하여 실시예 81-I (0.130 g, 30.10%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.73 (dt, J = 15.90, 10.15 Hz, 2 H), 2.26 (s, 3 H), 2.57 (s, 3 H), 2.82 (d, J = 10.03 Hz, 1 H), 2.88 - 3.02 (m, 2 H), 3.37 - 3.43 (m, 2 H), 3.53 (s, 2 H), 4.17 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 4.61 (br. s., 1 H), 5.37 (s, 2 H), 7.64 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.78 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.84 (s, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 8.82 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

HPLC (방법-U): 체류 시간 4.78분, 순도: 99.33%, (방법-T): 체류 시간 4.90분, 순도: 98.18%,

LCMS (방법 D): 체류 시간 1.66분, [M+H] 459.2.

키랄 순도 (방법-XIX): 체류 시간 11.50분, 100% ee.

실시예 82-I: 6-(4-((3,3-디메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메틸니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 40-I (0.30 g, 0.117 mmol) 및 중간체 28 (0.25 g, 0.117 mmol)로부터 출발하여 실시예 82-I (0.25 g, 46.60%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1.07 (s, 3 H), 1.32 (s, 3 H), 1.83 (t, J = 10.1 Hz, 1 H), 1.92 (d, J = 10.3 Hz, 1 H), 2.06 (br. s., 1 H), 2.29 (s, 3 H), 2.57 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 2.62 (s, 3 H), 2.88 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 3.79 - 3.70 (m, 2 H), 4.41 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 5.39 (s, 2 H), 7.66 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 7.80 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 8.94 (s, 1 H).

HPLC (방법-U): 체류 시간 4.84분, 순도: 96.03%, (방법-T): 체류 시간 6.27분, 순도: 97.15%,

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.15분, [M+H] 458.4.

키랄 순도 (방법-XV): 체류 시간 4.60분, 100% ee.

SOR: [α]²⁵ D = -30.00 (c 0.1, DMSO).

실시예 83-I: 4-메틸-6-(4-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 51-I (0.12 g, 0.49 mmol) 및 중간체 28 (0.102 g, 0.49 mmol)로부터 출발하여 실시예 83-I (0.045 g, 20.41%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.02 (d, J = 5.9 Hz, 3 H), 1.80 (br. s., 2 H), 2.27 (s, 3 H), 2.64 (s, 3 H), 2.84 (br. s., 2 H), 2.96 (br. s., 1 H), 3.75 (s, 2 H), 4.15 (br. s., 1 H), 5.45 - 5.30 (m, 2 H), 7.64 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.10 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.92 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

HPLC (방법-U): 체류 시간 6.50분, 순도: 97.70%.

(방법-T): 체류 시간 7.53분, 순도: 98.10%.

LCMS (방법-J): 체류 시간 1.86분, [M+H] 444.2, 순도: 99.60%. 키랄 순도 (방법-XIV): 체류 시간 7.27분, 100% ee.

실시예 84-I: 6-(4-(((3R,4R)-4-히드록시-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-일)메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 52-I (0.05 g, 0.49 mmol) 및 중간체 30 (0.04 g, 0.49 mmol로부터 출발하여 실시예 84-I (0.02 g, 20.68%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.62 (d, J = 6.8 Hz, 1 H), 1.92 (d, J = 10.5 Hz, 1 H), 2.18 -2.06 (m, 1 H), 2.25 (s, 4 H), 2.67 - 2.60 (m, 3 H), 2.80 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 2.94 (br. s., 1 H), 3.07(br. s., 1 H), 3.75 (br. s., 3 H), 4.56 (d, J = 5.1 Hz, 1 H), 5.46 - 5.26 (m, 2 H), 7.53 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.63 (d, J = 7.8 Hz,1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.77 (s, 1 H), 8.98 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-R): 체류 시간 0.89분, [M+H] 445.2, 순도: 95.00%, (방법-S): 체류 시간 1.20분, [M+H] 445.2, 순도: 100%.

키랄 순도 (방법-XVIII): 체류 시간 14.30분, 98.40% ee.

표 2의 실시예를 실시예 1-I 내지 24-I 및 81-I 내지 84-I에서의 절차를 사용하여 합성하였다.

중간체 53: 4-메틸-6-(트리메틸스탄닐)니코티노니트릴

중간체 23A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (1.00 g, 5.08 mmol)로부터 출발하여 중간체 53 (1.80 g, 조 물질)을 흑색 시럽으로서 제조하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.40분, [M+H] 283.1.

중간체 54-I: 5-((3R,4R)-1-((2-브로모티아졸-5-일)메틸)-4-히드록시피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 23-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 52-I (0.36 g, 1.30 mmol) 및 중간체 25B (0.25 g, 1.30 mmol)로부터 출발하여 중간체 54-I (0.30 g, 21.77%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.56 - 1.58 (m, 1 H), 1.89 - 1.90 (m, 1 H), 2.10 (br. S., 1 H), 2.20 - 2.22 (m, 4 H), 2.80 (br. S., 1 H), 2.90 (br. S., 1 H), 3.10 (br. S., 1 H), 3.80 - 3.85 (m, 3 H), 4.62 (br. S., 1 H), 5.25 - 5.27 (m, 2 H), 7.50 - 7.52 (m, 2 H), 7.70 (d, J = 8.00 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.01분, [M+H] 423.2.

중간체 55-I: 5-((2R,6S)-4-((2-브로모티아졸-5-일)메틸)-6-메틸피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 23-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 51-I (0.38 g, 1.56 mmol) 및 중간체 25B (0.30 g, 1.56 mmol)로부터 출발하여 중간체 55-I (0.40 g, 60.60%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.10 (s, 3 H), 1.80 (br. s, 2 H), 2.30 (s, 3 H), 2.80 (br. s, 2 H), 2.84 (br. s., 1 H), 3.85 (s, 2 H), 4.16 (br. s., 1 H), 5.37 (br. s., 2 H), 7.79 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.91 - 7.92 (m, 2 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.10분, [M+H] 422.2.

중간체 56: 1-(2-메톡시피리딘-4-일)-1H-이미다졸-4-카르브알데히드

중간체 11의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.51 g, 5.32 mmol) 및 4-브로모-2-메톡시피리딘 (1.00 g, 5.32 mmol)으로부터 출발하여 중간체 56 (0.20 g, 19.00%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.92 (s, 3 H), 7.36 (d, J = 1.60 Hz, 1 H), 7.48 - 7. 50 (m, 1 H), 8.31 (d, J = 6.00 Hz, 1 H), 8.32 (d, J = 1.20 Hz, 1 H), 8.71 (d, J = 6.00 Hz, 1 H), 9.82 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.08분, [M+H] 204.2.

중간체 57: 1-(2-(디플루오로메틸)피리딘-4-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 11의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.11 g, 1.15 mmol) 및 (4-브로모-2-(디플루오로메틸)피리딘 (0.20 g, 0.96 mmol)로부터 출발하여 중간체 57 (0.12 g, 55.90%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-S): 체류 시간 0.49분, [M+H] 224.3.

중간체 58: 1-(1-(디플루오로메틸)-2-옥소-1,2-디히드로피리딘-4-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 58A: 4-브로모-1-(디플루오로메틸)피리딘-2(1H)-온

ACN (100 mL) 중 4-브로모-2-클로로피리딘 (1.25 g, 6.72 mmol)의 용액에 NaHCO₃ (8.73 g, 10 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. MeCN (15 mL) 중 2,2-디플루오로-2-(플루오로술포닐)아세트산 (5.38 mL, 52.00 mmol)의 용액을 10분에 걸쳐 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 10% 수성 NaHCO₃으로 염기성화시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 58A (3.00 g, 25.80%)를 연황색 액체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz DMSO-d₆) δ ppm 6.6 (dd, J = 1.20, 3.20 Hz, 1 H), 7.56 (d, J = 3.20 Hz, 1 H), 7.75 (t, J = 5.60 Hz, 1 H), 7.8 (d, J = 3.20 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.64분 [M+H] 224.2.

중간체 58:

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.09 g, 0.89 mmol) 및 중간체 58A (0.20 g, 0.90 mmol)로부터 출발하여 중간체 58 (0.10 g, 50.00%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.73분 [M+H] 240.2.

중간체 59: (2-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)옥사졸-4-일)메틸 메탄술포네이트

중간체 59A: 에틸 2-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)옥사졸-4-카르복실레이트

톨루엔 (10 mL) 중 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (1.34 g, 7.09 mmol)의 용액에 에틸 옥사졸-4-카르복실레이트 (1.00 g, 7.09 mmol), Cs₂CO₃ (4.62 g, 14.17 mmol) 및 트리-o-톨릴포스핀 (0.21 g, 0.80 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 질소로 20분 동안 탈기하였다. Pd(OAc)₂ (0.16 g, 0.80 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 10분 동안 다시 탈기한 다음, 110℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 30% EtOAc/ n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 59A (0.25 g, 13.71%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.34 (t, J = 7.0 Hz, 3 H), 2.60 (s, 3 H), 4.34 (q, J = 7.00 Hz, 2 H), 8.31 (s, 1 H), 9.07 (s, 1 H), 9.10 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.99분, [M+H] 258.2.

중간체 59B: 6-(4-(히드록시메틸)옥사졸-2-일)-4-메틸니코티노니트릴

THF (10 mL) 중 중간체 59A (0.13 g, 0.51 mmol)의 용액에 DIBAL-H (2.10 mL, 2.53 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NH₄Cl (2 mL), 물의 포화 용액 (10 mL)으로 희석하고, DCM 중 10% MeOH (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 59B (0.06 g, 55.20%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.65 (s, 3 H), 4.49 (br. s., 2 H), 5.32 (br. s., 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 9.03 (s, 1 H).

LCMS (방법 D): 체류 시간 0.93분 [M+H] 216.2.

중간체 59:

DCM (10 mL) 중 중간체 59B (0.04 g, 0.19 mmol)의 용액에 TEA (0.08 mL, 0.56 mmol) 및 메실 클로라이드 (0.02 mL, 0.24 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 희석하고, DCM (2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 60-70% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 59 (0.04 g, 73.40%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.60 (s, 3 H), 3.23 (s, 3 H), 5.75 (s, 2 H), 8.25 (s, 1 H), 8.56 (s, 1 H), 9.06 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.65분, [M+H] 294.0.

중간체 60: 6-(5-포르밀옥사졸-2-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 60A: 에틸 2-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)옥사졸-5-카르복실레이트

중간체 59A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 에틸 옥사졸-5-카르복실레이트 (0.80 g, 5.67 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (1.11 g, 5.67 mmol)로부터 출발하여 중간체 60A (0.50 g, 34.30%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.34 (t, J = 7.00 Hz, 3 H), 2.60 (s, 3 H), 4.34 (q, J = 7.00 Hz, 2 H), 8.26 (s, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 9.10 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.26분, [M+H] 258.2.

중간체 60B: 6-(5-(히드록시메틸)옥사졸-2-일)-4-메틸니코티노니트릴.

THF (10 mL) 및 MeOH (2 mL)의 혼합물 중 중간체 60A (0.10 g, 0.34 mmol)의 용액에 0℃에서 NaBH₄ (0.05 g, 1.17 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, DCM 중 10% MeOH (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-4 g, 60-70% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 60B (0.04 g, 47.80%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.60 (s, 3 H), 5.65 (t, J = 5.60 Hz, 1 H), 5.85 - 5.99 (m, 1 H), 7.36 (s, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 9.03 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.70분, [M+H] 216.2.

중간체 60:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 60B (0.07 g, 0.32 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.18 g, 0.43 mmol)으로부터 출발하여 중간체 60 (0.06 g, 87.00%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.60분, [M+H] 214.2.

중간체 61: 1-(6-(디플루오로메틸)피리딘-3-일)-1H-이미다졸-4-카르브알데히드:

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-브로모-2-(디플루오로메틸)피리딘 (0.20 g, 0.96 mmol) 및 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.09 g, 0.96 mmol)로부터 출발하여 중간체 61 (0.03 g, 13.98%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.00 (t, J = 7.20 Hz, 1 H), 7.94 - 7.91 (m, 1 H), 8.44 - 8.41 (m, 1 H), 8.64 (s, 1 H), 9.85 (s, 1 H)), 8.80 (d, J = 1.60 Hz, 1 H), 9.16 (d, J = 3.20 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.66분 [M+H] 224.0.

중간체 62: 4-메틸-6-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)니코틴알데히드

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-메틸-1H-이미다졸 (0.24 g, 2.89 mmol) 및 6-클로로-4-메틸니코틴알데히드 (0.30 g, 1.93 mmol)로부터 출발하여 중간체 62 (0.21 g, 54.10%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.19 (d, J = 0.98 Hz, 3 H), 2.69 (s, 3 H), 7.75 (d, J = 1.22 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 8.53 (d, J = 1.22 Hz, 1 H), 8.85 (s, 1 H), 10.21 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.20분, [M+H] 202.2.

중간체 63: 2-메틸-6-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)니코틴알데히드

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-메틸-1H-이미다졸 (0.24 g, 2.89 mmol) 및 6-클로로-2-메틸니코틴알데히드 (0.30 g, 1.93 mmol)로부터 출발하여 중간체 63 (0.25 g, 64.40%)을 제조하였다.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.20분, [M+H] 202.2.

중간체 64: 5'-포르밀-4,6'-디메톡시-[2,2'-비피리딘]-5-카르보니트릴

중간체 64A: 6-클로로-2-메톡시니코틴알데히드

문헌 절차 (EP1405859 A1, 2004)에 따라 합성하였다.

중간체 64:

중간체 23B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 23A (0.62 g, 2.09 mmol) 및 중간체 64A (0.30 g, 1.75 mmol)로부터 출발하여 중간체 64 (0.15 g, 39.10%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.14 - 4.24 (m, 6 H), 8.15 - 8.22 (m, 2 H), 8.28 - 8.36 (m, 1 H), 8.95 - 9.01 (m, 1 H), 10.27 - 10.35 (m, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.603분, [M+H] 270.1.

중간체 65: 5-플루오로-6-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)니코틴알데히드

중간체 11의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-메틸-1H-이미다졸 (0.18 g, 2.20 mmol) 및 6-브로모-5-플루오로니코틴알데히드 (0.30 g, 1.47 mmol)로부터 출발하여 중간체 65 (0.18 g, 59.70%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.18 - 2.24 (m, 3 H), 7.63 - 7.72 (m, 1 H), 8.31 - 8.44 (m, 2 H), 8.87 - 8.92 (m, 1 H), 10.04 - 10.13 (m, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.16분, [M+H] 206.0.

중간체 66: 6-(4-포르밀-5-메틸-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 3-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.40 g, 3.63 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (0.54 g, 2.72 mmol)로부터 출발하여 중간체 66 (0.09 g, 14.60%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.15 (s, 3 H), 2.32 (s, 3 H), 7.89 - 7.94 (m, 1 H), 7.97 - 8.07 (m, 1 H), 8.38 - 8.46 (m, 1 H), 8.75 - 8.83 (m, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.14분, [M+H] 227.0.

중간체 67: 6-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)-4-(트리플루오로메틸)니코틴알데히드

중간체 67A: (6-클로로-4-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)메탄올

-78℃에서 톨루엔 (25 mL) 중 6-클로로-4-(트리플루오로메틸)니코티네이트 (2.00 g, 8.35 mmol)의 교반 용액에 톨루엔 중 1M DIBAL-H (12.52 mL, 12.52 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 -78℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl (40 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 75 mL)로 추출하였다.

합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 67A (2.20 g, 87.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.70 (s, 2 H), 5.65 - 5.77 (m, 1 H), 7.88 (s, 1 H), 8.76 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 67B: 6-클로로-4-(트리플루오로메틸)니코틴알데히드

중간체 9이 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 67A (1.30 g, 6.14 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (2.61 g, 6.14 mmol)으로부터 출발하여 중간체 67B (0.97 g, 75.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.16 (s, 1 H), 9.11 (s, 1 H), 10.24 (q, J = 1.71 Hz, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 67:

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 67B (0.30 g, 1.43 mmol) 및 4-메틸-1H-이미다졸 (0.17 g, 2.15 mmol)로부터 출발하여 중간체 67 (0.23 g, 47.20%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.72 - 3.76 (m, 3 H), 6.88 - 6.95 (m, 2 H), 7.10 - 7.17 (m, 2 H), 7.77 - 7.81 (m, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.05분, [M+H] 256.4.

중간체 68: 2-(4,5-디메틸-1H-이미다졸-1-일)피리미딘-5-카르브알데히드

중간체 68A: 4,5-디메틸-1H-이미다졸

문헌 절차 (Angewandte Chemie, 5322 -5326, 49, 2010)에 따라 합성하였다.

중간체 68:

ACN (20 mL) 중 2-브로모피리미딘-5-카르브알데히드 (0.20 g, 1.07 mmol)의 용액에 K₂CO₃ (443 mg, 3.21 mmol)에 이어서 중간체 68A (0.16 g, 1.60 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 50℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (30 mL)로 희석하고, 셀라이트®를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 증발시켜 중간체 68 (0.19 g, 86.00%)을 백색 고체로서 수득하였다.

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 69: 4-메톡시-6-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)니코틴알데히드

중간체 69A: 메틸 6-클로로-4-메톡시니코티네이트

문헌 절차 (US2015/166505 A1, 2015)에 따라 합성하였다.

중간체 69B: (6-클로로-4-메톡시피리딘-3-일)메탄올

DCM (30 mL) 중 중간체 69A (2.20 g, 10.91 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 헵탄 중 1M DIBAL-H (16.37 mL, 16.37 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl (40 mL)로 희석하고, DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 20% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 69B (1.20 g, 63.30%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.88 (s, 3 H) 4.46 (dd, J = 5.52, 1.00 Hz, 2 H), 5.19 (t, J = 5.77 Hz, 1 H), 7.11 (s, 1 H), 8.16 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.69분, [M+H] 174.4.

중간체 69C: 6-클로로-4-메톡시니코틴알데히드

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 69B (1.20 g, 6.91 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오도난 (2.93 g, 6.91 mmol)으로부터 출발하여 중간체 69C (0.75 g, 63.20%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.02 (s, 3 H), 7.45 (s, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 10.24 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.06분, [M+H] 172.2.

중간체 69:

중간체 68의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 69C (0.25 g, 1.46 mmol) 및 4-메틸-1H-이미다졸 (0.24 g, 2.91 mmol)로부터 출발하여 중간체 69 (0.12 g, 37.80%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.19 (s, 3 H), 4.09 (s, 3 H), 7.49 (s, 1 H), 7.81 (s, 1 H), 8.56 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 8.63 (s, 1 H), 10.23 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.89분, [M+H] 218.3.

중간체 70: 2-(5-(디플루오로메틸)-4-메틸-1H-이미다졸-1-일)피리미딘-5-카르브알데히드

중간체 70A: tert-부틸 5-포르밀-4-메틸-1H-이미다졸-1-카르복실레이트

중간체 18B-II의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-메틸-1H-이미다졸-5-카르브알데히드 (2.00 g, 18.16 mmol) 및 BOC₂O (5.06 mL, 21.80 mmol)로부터 출발하여 중간체 70A (2.80 g, 73.30%)를 백색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.07분, [M-56] 155.9.

중간체 70B: tert-부틸 5-(디플루오로메틸)-4-메틸-1H-이미다졸-1-카르복실레이트

중간체 4B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 70A (1.50 g, 7.14 mmol) 및 DAST (1.89 mL, 14.27 mmol)로부터 출발하여 중간체 70B (0.85 g, 51.30%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.58 (s, 9 H), 2.44 (t, J = 2.26 Hz, 3 H), 6.82 - 7.18 (m, 1 H), 8.19 (s, 1 H ).

화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 70C: 5-(디플루오로메틸)-4-메틸-1H-이미다졸

중간체 4C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 70B (0.85 g, 3.66 mmol)로부터 출발하여 중간체 70C (0.48 g, 99.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.38 (t, J = 2.08 Hz, 3 H), 7.06 - 7.52 (m, 1 H), 9.02 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.58분, [M+H] 133.4.

중간체 70:

중간체 68의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 70C (0.28 g, 1.68 mmol) 및 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.20 g, 1.40 mmol)로부터 출발하여 중간체 70 (0.10 g, 20.90%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.69 (t, J = 2.32 Hz, 3 H), 6.92 - 7.26 (m, 1 H), 8.62 (s, 1 H), 9.34 (s, 2 H), 10.15 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.50분, [M+H] 239.0.

중간체 71-I 및 71-II: 4-메틸-5-(3-메틸피페라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 71A: 4-메틸-5-(3-메틸피라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2B (5.00 g, 18.24 mmol) 및 2-클로로-3-메틸피라진 (2.81 g, 21.89 mmol)으로부터 출발하여 중간체 71A (3.00 g, 65.50%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.03 (s, 3 H), 2.32 (s, 3 H), 5.49 (s, 2 H), 7.51 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 8.56 - 8.64 (m, 2 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.77분, [M+H] 241.4.

중간체 71-I 및 71-II:

중간체 2-I 및 2-II의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 71A (10.00 g, 41.6 mmol)로부터 출발하여 중간체 71-I 및 71-II를 제조하였다. 라세미체를 SFC [키랄팩 AD-H (250 x 4.6 mm), 5 마이크로미터; MeOH + ACN (1:1) 중 0.2% NH₄OH, 유량: 1.2 mL/분. 온도: 27℃, UV: 235 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 71-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 3.37분)을 갈색 고체로서 수득하였다 (0.65 g, 21.13%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.7 (d, J = 6.02 Hz, 3 H), 2.14 - 2.22 (m, 2 H), 2.29 (s, 3 H), 2.74 - 2.84 (m, 3 H), 4.02 (dd, J = 10.04, 2.51 Hz, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.65 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.77분, [M+H] 241.4.

중간체 71-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 4.79분)을 갈색 고체로서 수득하였다 (1.20 g, 39.00%).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.77분, [M+H] 241.4.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.70 (d, J = 6.02 Hz, 3 H), 2.14 - 2.22 (m, 2 H), 2.29 (s, 3 H), 2.74 - 2.84 (m, 3 H), 4.02 (dd, J = 10.04, 2.51 Hz, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.65 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

중간체 72: 5-(4-히드록시-4-메틸피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 72A: tert-부틸 4-히드록시-4-메틸-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-카르복실레이트

THF (20 mL) 중 중간체 4A (1.80 g, 5.21 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 THF 중 3M 메틸마그네슘 클로라이드 (5.21 mL, 15.63 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl (40 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 20-40% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 72A (1.00 g, 53.10%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.94 (s, 3 H), 1.39 (s, 9 H), 1.59 (br. s., 2 H), 1.89 (s, 1 H), 2.27 (s, 3 H), 2.88 - 2.96 (m, 1 H), 3.52 - 3.65 (m, 1 H), 3.79 - 3.94 (m, 1 H), 4.61 - 4.72 (m, 1 H), 5.40 (s, 2 H), 7.61 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.82 - 7.93 (m, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.22분, [M+H] 362.2.

중간체 72:

중간체 19-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 72A (1.00 g, 2.77 mmol) 및 TFA (4 mL, 51.9 mmol)로부터 출발하여 중간체 72 (0.90 g, 87.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.95 (s, 3 H), 1.71 - 1.84 (m, 1 H), 1.87 - 1.96 (m, 1 H), 2.28 (s, 3 H), 2.96 - 3.02 (m, 1 H), 3.26 (br. s., 2 H), 3.37 (br. s., 2 H), 5.41 (d, J = 5.02 Hz, 2 H), 7.66 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.76 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O) 체류 시간 0.52분, [M+H] 262.2.

중간체 73-I: 5-(4-히드록시-5,5-디메틸피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온 히드로클로라이드 (부분입체이성질체-I:거울상이성질체-I)

중간체 73A: tert-부틸 3,3-디메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트

중간체 4A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2A (5.00 g, 22.02 mmol) 및 tert-부틸 3,3-디메틸-4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트 (10.01 g, 44.0 mmol)로부터 출발하여 중간체 73A (2.30 g, 28.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.01 - 1.07 (m, 3 H), 1.21 - 1.26 (m, 3 H), 1.46 (s, 9 H), 2.28 (s, 3 H), 2.11 - 2.18 (m, 4 H), 4.34 - 4.44 (m, 1 H), 5.35 - 5.44 (m, 2 H), 7.35 - 7.42 (m, 1 H), 7.60 - 7.70 (m, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.29분, [M+H] 374.6.

중간체 73B-I 및 73B-II: tert-부틸 4-히드록시-3,3-디메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-카르복실레이트

MeOH (20 mL) 중 중간체 73A (3.50 g, 9.37 mmol)의 교반 용액에 THF 중 2M LiBH₄ (4.69 mL, 9.37 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, DCM 중 10% MeOH (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC [선파이어 C18 (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; 물 중 10 mM 아세트산암모늄, 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 16분에 걸쳐 30-100% B, 유량: 25 mL/분 UV: 250 nm]에 의해 정제하여 부분입체이성질체-I 및 II를 수득하였다. 부분입체이성질체-I를 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) [키랄팩 AD-H (250 x 4.6 mm), 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% NH₄OH, 유량: 1.2 mL/분. 온도: 30℃, UV: 240 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 73B-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 4.17분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.75 g, 21.31%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.82 - 0.98 (m, 6 H), 1.41 (s, 9 H), 2.28 (s, 3 H), 2.61 - 2.85 (m, 2 H), 3.01 - 3.14 (m, 1 H), 3.54 - 3.69 (m, 1 H), 3.79 - 3.99 (m, 1 H), 4.53 - 4.67 (m, 1 H), 5.40 (s, 2 H), 7.59 (s, 1 H), 7.66 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.69분, [M-55] 320.2.

키랄 순도 (방법-XXXII): 체류 시간 4.3분, 100% ee.

중간체 73B-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 7.81분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.80 g, 22.73%).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.47분, [M-55] 320.2.

키랄 순도 (방법-XXXII): 체류 시간 8.43분, 99.50% ee.

중간체 73-I:

중간체 52-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 디옥산 중 중간체 73B-I (0.75 g, 1.20 mmol) 및 4N HCl (6 mL, 24.00 mmol)로부터 출발하여 중간체 73-I (0.60 g, 96.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.00 (s, 3 H), 1.12 (s, 3 H), 2.31 (s, 4 H), 2.92 - 3.02 (m, 1 H), 3.07 - 3.17 (m, 3 H), 3.42 - 3.49 (m, 1 H), 3.70 - 3.80 (m, 1 H), 4.81 - 4.91 (m, 1 H), 5.36 - 5.45 (m, 2 H), 7.61 - 7.67 (m, 1 H), 7.72 - 7.77 (m, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.53분, [M+H] 276.2.

중간체 74: 2-(4-포르밀-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4,6-디메틸피리미딘-5-카르보니트릴

중간체 74A: 2-(4-(히드록시메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4,6-디메틸피리미딘-5-카르보니트릴

중간체 42의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 28A (3.50 g, 35.30 mmol) 및 중간체 42C (7.49 g, 35.30 mmol)로부터 출발하여 중간체 74A (0.80 g, 9.84%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.68 - 2.76 (m, 6 H), 4.69 (s, 2 H), 8.21 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

중간체 74:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 74A (0.95 g, 4.13 mmol)로부터 출발하여 중간체 74 (0.81 g, 86.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.79 (s, 6 H), 8.79 (s, 1 H), 10.24 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.706분, [M+H] 229.0.

중간체 75: 5-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)옥사졸-2(3H)-온

중간체 75A: 에틸 2-옥소-3-트리틸-2,3-디히드로옥사졸-5-카르복실레이트

DCM (20 mL) 중 에틸 2-옥소-2,3-디히드로옥사졸-5-카르복실레이트 (1.50 g, 9.55 mmol, 상업용)의 교반 용액에 TEA (3.99 mL, 28.6 mmol)에 이어서 트리틸 클로라이드 (2.66 g, 9.55 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 주위 온도에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 10-20% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 75A (3.20 g, 84.00%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.22 (t, J = 7.10 Hz, 3 H), 4.22 (q, J = 7.10 Hz, 2 H), 7.22 - 7.42 (m, 15 H), 7.50 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 75B: 5-(히드록시메틸)-3-트리틸옥사졸-2(3H)-온

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 75A (3.20 g, 8.01 mmol)로부터 출발하여 중간체 75B (1.70 g, 59.40%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.15 (d, J = 4.79 Hz, 2 H), 5.24 (t, J = 5.04 Hz, 1 H), 6.63 (s, 1 H), 7.18 - 7.44 (m, 15 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 75C: 2-옥소-3-트리틸-2,3-디히드로옥사졸-5-카르브알데히드

중간체 9의 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 75B (1.7 g, 4.76 mmol)로부터 출발하여 중간체 75C (1.00 g, 59.20%)를 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.18 - 7.44 (m, 15 H), 8.167 (s, 1 H), 9.25 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 75D: 5-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-3-트리틸옥사졸-2(3H)-온

중간체 4의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 75C (0.50 g, 1.41 mmol) 및 중간체 51-I (0.45 g, 1.83 mmol)로부터 출발하여 중간체 75D (0.52 g, 63.10%)를 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.95 - 1.04 (m, 3 H), 1.64 - 1.79 (m, 2 H), 2.24 (s, 4 H), 2.61 - 2.74 (m, 3 H), 2.83 - 2.95 (m, 2 H), 5.41 (s, 2 H), 6.63 - 6.71 (m, 1 H), 7.13 - 7.38 (m, 15 H), 7.64 - 7.71 (m, 1 H), 7.74 - 7.82 (m, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 3.12, [M+H] 586.6.

중간체 75:

DCM (10 mL) 중 중간체 75D (0.52 g, 0.89 mmol)의 용액에 TFA (3 mL, 38.9 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시키고, 디에틸 에테르 (100 mL)로 희석하고, 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 (0.32 g, 64.25%)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.29 (d, J = 6.53 Hz, 3 H), 2.37 (s, 5 H), 3.02 - 3.14 (m, 2 H), 3.53 (d, J = 4.52 Hz, 2 H), 3.61 - 3.74 (m, 1 H), 4.74 - 4.83 (m, 1 H), 5.47 (d, J = 10.54 Hz, 2 H), 6.88 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 7.82 (s, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 10.49 - 10.56 (m, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.57분, [M+H] 344.4.

중간체 76: 1-(3-메틸-5-(2-옥소옥사졸리딘-3-일)페닐)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 76A: 2-클로로에틸 (3-브로모-5-메틸페닐)카르바메이트

THF (100 mL) 중 3-브로모-5-메틸아닐린 (5.00 g, 26.9 mmol)의 교반 용액에 K₂CO₃ (11.14 g, 81 mmol)에 이어서 2-클로로에틸 클로로포르메이트 (4.16 mL, 40.3 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 4시간 동안 환류하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 5% NaHCO₃ 용액 (100 mL)으로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 76A (7.00 g, 89.00%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.25 (s, 3 H), 3.81 - 3.95 (m, 2 H), 4.32 - 4.42 (m, 2 H), 7.04 (s, 1 H), 7.26 (s, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 9.96 (s, 1 H).

LCMS (방법-D ): 체류 시간 2.99분, [M+H] 291.0.

중간체 76B: 3-(3-브로모-5-메틸페닐)옥사졸리딘-2-온

THF (80 mL) 중 중간체 76A (7.00 g, 23.93 mmol)의 용액에 NaH (2.39 g, 59.80 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 50% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 76B (4.20 g, 68.50%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.32 (s, 3 H), 3.98 - 4.08 (m, 2 H), 4.41 - 4.49 (m, 2 H), 7.16 (s, 1 H), 7.29 - 7.36 (m, 1 H), 7.69 (t, J = 1.76 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D ): 체류 시간 2.37분, [M+H] 257.4.

중간체 76:

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 76B (0.96 g, 3.75 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.30 g, 3.12 mmol)로부터 출발하여 중간체 76 (0.06 g, 7.00%)을 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.25 - 2.43 (m, 3 H), 3.99 - 4.19 (m, 2 H), 4.31 - 4.53 (m, 2 H), 6.47 - 6.62 (m, 1 H), 7.06 - 7.14 (m, 1 H), 7.19 - 7.24 (m, 1 H), 7.41 - 7.58 (m, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 9.24 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.05분, [M+H] 272.3.

중간체 77: 6-(1H-1,2,4-트리아졸-1-일)니코틴알데히드

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모니코틴알데히드 (0.50 g, 2.69 mmol) 및 4H-1,2,4-트리아졸 (0.204 g, 2.96 mmol)로부터 출발하여 중간체 77 (0.3 g, 49.30%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.07 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 8.41 (br. s., 1 H), 8.51 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 9.07 (br. s., 1 H), 9.52 (br. s., 1 H), 10.15 (br. s., 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.62분, [M+H] 175.2.

중간체 78: 6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-4-이소프로폭시 니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-클로로-4-이소프로폭시니코티노니트릴 (0.61g, 3.12 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.30 g, 3.12 mmol)로부터 출발하여 중간체 78 (0.45g, 54.00%)을 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.36 (d, J = 6.05 Hz, 6 H), 5.09 - 5.16 (m, 1 H), 7.69 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 9.37 (d, J = 0.55 Hz, 1 H), 9.99 (s, 1 H).

LCMS (방법-J): 체류 시간 2.36분, [M+H] 257.2.

중간체 79: 1-(5-포르밀피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르복스아미드

중간체 79A: 2-클로로-5-(1,3-디옥솔란-2-일)피리딘 (중간체-I)

톨루엔 (100 mL) 중 6-클로로니코틴알데히드 (5.00 g, 35.30 mmol)의 교반 용액에 에탄-1,2-디올 (2.63 g, 42.4 mmol), p-TsOH (0.67 g, 3.53 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 딘-스타크 조건 하에 6시간 동안 환류하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 포화 NaHCO₃ (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하였다. 분리된 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 79A (5.50 g, 77.00%)를 황색 액체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.95 - 4.00 (m, 4 H), 5.85(s, 1H), 7.56 (m, J = 8.25, 0.43 Hz, 1 H), 7.91 (dd, J = 8.25, 2.45 Hz, 1 H), 8.48 (dd, J = 1.83, 0.49 Hz, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.85분, [M+H] 188.3.

중간체 79B: 에틸 1-(5-(1,3-디옥솔란-2-일)피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르복실레이트

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 79A (1.50 g, 8.08 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르복실레이트 (1.25 g, 8.89 mmol)로부터 출발하여 중간체 79B (0.80 g, 27.40%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.31 (t, J = 7.09 Hz, 3 H), 3.98 - 4.02 (m, 2 H), 4.08 - 4.13 (m, 2 H), 4.28 (q, J = 7.09 Hz, 2 H), 5.90 (s, 1 H), 8.01 (dd, J = 8.44, 0.60 Hz, 1 H), 8.08 - 8.11 (m, 1 H), 8.23 (d, J = 0.69 Hz, 1 H), 8.58 (d, J = 2.13 Hz, 1 H), 9.00 (d, J = 0.69 Hz, 1 H).

LCMS (방법-J): 체류 시간 2.39분, [M+H] 290.1.

중간체 79C: 1-(5-(1,3-디옥솔란-2-일)피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르복스아미드

EtOH (10 mL) 중 중간체 79B (0.35 g, 1.21 mmol)의 교반 용액에 수산화암모늄 (10 mL, 257 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 40시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 농축 건조시키고, 물 (20 mL)로 희석하고, DCM 중 10% MeOH (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 79C (0.20 g, 55.30%)를 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.98 - 4.03 (m, 2 H), 4.09 - 4.13 (m, 2 H), 5.90 (s, 1 H), 7.24 (br. s, 1 H), 7.84 (br. s, 1 H), 7.98 - 8.01 (m, 1 H), 8.09 (d, J = 2.14 Hz, 1 H), 8.15 (d, J = 0.55 Hz, 1 H), 8.57 (d, J = 2.02 Hz, 1 H), 9.15 (d, J = 0.61 Hz, 1 H).

LCMS (방법-J): 체류 시간 0.60분, [M+H] 261.1.

중간체 79:

톨루엔 (3 mL) 및 물 (0.5 mL)의 혼합물 중 중간체 79C (0.20 g, 0.77 mmol)의 교반 용액에 p-TsOH (0.22 g, 1.15 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시키고, 물 (30 mL)로 희석하고, 수득된 고체 침전물을 흡인 여과에 의해 단리시키고, 진공 하에 건조시켜 중간체 79 (0.120 g, 62.80%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.30 (br. s., 1 H), 7.88 (br. s., 1 H), 8.13 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), 8.22 (d, J = 0.69 Hz, 1 H), 8.46 (dd, J = 8.53, 2.20 Hz, 1 H), 9.05 (dd, J = 2.13, 0.69 Hz, 1 H), 9.24 (d, J = 0.69 Hz, 1 H), 10.12 (s, 1 H).

LCMS (방법-J): 체류 시간 0.60분, [M+H] 216.1.

중간체 80: 1-(5-포르밀피리딘-2-일)-1H-피라졸-3-카르보니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-3-카르보니트릴 (0.02 g, 2.96 mmol) 및 6-브로모니코틴알데히드 (0.05 g, 2.69 mmol)로부터 출발하여 중간체 80 (0.45 g, 84.00%)을 황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.53 (d, J = 2.40 Hz, 1 H), 8.19 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 8.49 - 8.52 (M, 1 H), 8.99 (d, J = 2.40 Hz, 1 H), 9.07 (d, J = 1.20 Hz, 1 H), 10.15 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.95분, [M+H] 199.0.

중간체 81: 4-에톡시-6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

중간체 81A: 6-클로로-4-에톡시니코티노니트릴

문헌 절차 (PCT 2016091042, 2016)에 따라 합성하였다.

중간체 81:

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 81A (0.30 g, 1.66 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르복실레이트 (0.20 g, 1.66 mmol)로부터 출발하여 중간체 81 (0.30 g, 41.70%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.40 (d, J = 7.20 Hz, 3 H), 4.40 (q, J = 7.20 Hz, 2 H), 8.38 (s, 1 H), 8.69 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 9.36 (s, 1 H), 9.98 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.12분, [M+H] 243.2.

중간체 82: 1-(3,4-디메틸-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]옥사졸-5-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 82A: 5-브로모-3,4-디메틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온

문헌 절차 (PCT2017/001991, 2017)에 따라 합성하였다.

중간체 82:

DMSO (5 mL) 중 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.25 g, 2.60 mmol) 및 중간체 82A (0.69 g, 2.86 mmol)의 교반 용액에 K₂CO₃ (0.90 g, 6.50 mmol)을 첨가하고, 질소로 5분 동안 탈기하였다. 생성된 반응 혼합물에 아이오딘화구리 (I) (0.25 g, 1.30 mmol)에 이어서 N,N-디메틸글리신 (0.13 g, 1.30 mmol)을 첨가하고, 110℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 물 (40 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 20-40% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 (0.35 g, 40.80%)을 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.39 (s, 3 H), 3.34 (s, 3 H), 7.42 (d, J = 1.89 Hz, 1 H), 7.51 (d, J = 1.89 Hz, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 9.28 (s, 1 H), 9.93 (s, 1 H).

LCMS: (방법-I) 체류 시간: 0.84분, [M+1]: 258.4.

중간체 83: 6-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)피리다진-3-카르브알데히드

중간체 83A: 에틸 6-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)피리다진-3-카르복실레이트

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-메틸-1H-이미다졸 (0.11 g, 1.34 mmol) 및 에틸 6-클로로피리다진-3-카르복실레이트 (0.20 g, 1.07 mmol)로부터 출발하여 중간체 83A (0.18 g, 72.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.38 (t, J = 7.12 Hz, 3 H), 2.22 (d, J = 0.94 Hz, 3 H), 4.41- 4.47 (m, 2 H), 7.86 (t, J = 1.19 Hz, 1 H), 8.28 (d, J = 9.20 Hz, 1 H), 8.30 (d, J = 8.80 Hz, 1 H), 8.64 (d, J = 1.32 Hz, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 83B: (6-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)피리다진-3-일)메탄올

THF (5 mL) 중 중간체 83A (0.10 g, 0.43 mmol)의 용액에 주위 온도에서 수소화붕소나트륨 (0.17 g, 0.43 mmol)을 첨가하였다. MeOH (0.2 mL)를 적가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 농축 건조시키고, 물 (10 mL)로 희석하고, DCM (2 x 25 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 83B (0.05 g, 61.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.20 (s, 3 H), 4.77 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 5.69 (t, J = 5.95 Hz, 1 H), 7.76 (s, 1 H), 7.89 (d, J = 9.07 Hz, 1 H), 8.13 (d, J = 9.11 Hz, 1 H), 8.51 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 83:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 83B (0.04 g, 0.21 mmol)로부터 출발하여 중간체 83 (0.04 g, 85.00%)을 제조하였다.

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 84: 6-(3-포르밀피롤리딘-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 84A: 6-(3-(히드록시메틸) 피롤리딘-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모-4-메톡시니코티노니트릴 (0.40 g, 1.88 mmol) 및 피롤리딘-3-일메탄올 (0.19 g, 1.88 mmol)로부터 출발하여 중간체 84A (0.30 g, 68.00%)를 제조하였다.

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.26분, [M+H] 234.2.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.90-1.92 (m, 1 H), 2.01-2.10 (m, 1 H), 2.32 - 2.35 (m, 1 H), 2.39 - 2.47 (m, 2 H), 2.52 - 2.54 (m, 3 H), 3.37 - 3.49 (m, 1H), 3.92 (s, 3 H) 4.73 - 4.78 (m, 1 H), 6.00 (s, 1 H), 8.26 (s, 1 H).

중간체 84:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 84A (0.05 g, 0.214 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.09 g, 0.214 mmol)로부터 출발하여 중간체 84 (0.05 g, 조 물질)를 제조하였다.

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.47분, [M+H] 232.1.

중간체 85: 6-(3-포르밀피롤리딘-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 85A: 6-(3-(히드록시메틸) 피롤리딘-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (0.40 g, 2.03 mmol) 및 피롤리딘-3-일메탄올 (0.20 g, 2.03 mmol)로부터 출발하여 중간체 85A (0.30 g, 25.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.70 - 1.80 (m, 1 H), 1.97 - 2.07 (m, 1H), 2.37 - 2.45 (m, 1 H), 2.55 - 2.58 (m, 1 H), 2.66 - 2.69 (m, 1 H), 2.90 (m, 1 H), 3.17 - 3.26 (m, 2 H), 3.38 (s, 1 H), 3.50 - 3.60 (m, 2 H), 4.74 (t, J = 4.98 Hz, 1 H), 6.46 (s, 1 H), 7.95 - 7.97 (m, 1 H), 8.37 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.30분, [M+H] 218.2.

중간체 85:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 85A (0.05 g, 0.230 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.10 g, 0.230 mmol로부터 출발하여 중간체 85 (0.50 g, 68.10%)를 제조하였다.

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 86: 6-(4-포르밀-2-옥소피롤리딘-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 86A: 메틸 1-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-5-옥소피롤리딘-3-카르복실레이트

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (0.50 g, 2.54 mmol) 및 메틸 5-옥소피롤리딘-3-카르복실레이트 (0.36 g, 2.54 mmol)로부터 출발하여 중간체 86A (0.50 g, 76.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.45-2.55 (m, 4 H), 2.82 - 3.00 (m, 2 H), 3.43 - 3.52 (m, 1 H), 3.65-3.72 (m, 2 H), 4.22 (m, 2 H), 8.34 (s, 1 H), 8.78 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.03분, [M+1] 260.1.

중간체 86B: 6-(4-(히드록시메틸)-2-옥소피롤리딘-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 86A (0.50 g, 1.93 mmol) 및 NaBH₄ (0.18 g, 4.82 mmol)로부터 출발하여 중간체 86B (0.10 g, 22.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.30 - 2.35 (m, 3 H), 2.70 - 2.80 (m, 2 H), 3.37 - 3.45 (m, 3 H), 3.75 - 3.85 (m, 1 H), 4.00 - 4.10 (m, 1 H), 4.80 - 4.90 (m, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.76 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.75분, [M+H] 232.1.

중간체 86:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 86B (0.08 g, 0.346 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.15 g, 0.346 mmol)로부터 출발하여 중간체 86 (0.08 g, 68.10%)을 제조하였다.

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.72분, [M+H] 230.2.

중간체 87: 6-(4-포르밀-2-옥소피롤리딘-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 87A: 메틸 1-(5-시아노-4-메톡시피리딘-2-일)-5-옥소피롤리딘-3-카르복실레이트

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모-4-메톡시니코티노니트릴 (0.50 g, 2.35 mmol) 및 메틸 5-옥소피롤리딘-3-카르복실레이트 (0.34 g, 2.35 mmol)로부터 출발하여 중간체 87A (0.50 g, 59.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.82 - 3.00 (m, 2 H), 3.43 - 3.52 (m, 1 H), 3.70 (m, 2 H), 3.90 (s,1 H), 4.00 (s, 3 H), 4.22 - 4.35 (m, 2 H), 8.12 (s, 1 H), 8.65 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.01분, [M+H] 276.9.

중간체 87B: 6-(4-(히드록시메틸)-2-옥소피롤리딘-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 87A (0.50 g, 1.82 mmol) 및 NaBH₄ (0.17 g, 4.54 mmol)로부터 출발하여 중간체 87B (0.20 g, 44.50%)를 제조하였다.

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.73분, [M+H] 248.0.

중간체 87:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 87B (0.18 g, 0.73 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.31 g, 0.73 mmol)로부터 출발하여 중간체 87 (0.15 g, 68.10%)을 제조하였다.

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.71분, [M+H] 246.1.

중간체 88: 6-(5-포르밀-2-옥소옥사졸리딘-3-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 88A: 5-(히드록시메틸) 옥사졸리딘-2-온

문헌 절차 (US2014/206677 A1, 2014)에 따라 합성하였다.

중간체 88B: 6-(5-(히드록시메틸)-2-옥소옥사졸리딘-3-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 88A (0.50 g, 4.27 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (0.72 g, 4.27 mmol)로부터 출발하여 중간체 88B (0.35 g, 35.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.45 (s, 3 H), 3.53 - 3.61 (m, 1 H), 3.66 - 3.73 (m, 1 H), 3.99 (dd, J = 10.38, 5.93 Hz, 1 H), 4.15 - 4.23 (m, 1 H), 4.72 - 4.79 (m, 1 H), 5.22 (t, J = 5.21 Hz, 1 H), 8.15 (s, 1 H), 8.75 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.82분, [M+1] 234.2.

중간체 88:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 88B (0.25 g, 1.07 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.57 g, 1.34 mmol)로부터 출발하여 중간체 88 (0.16 g, 64.00%)을 제조하였다.

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 89: 1-(5-(메틸술포닐)피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-브로모-5-(메틸술포닐)피리딘 (0.50 g, 2.12 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.20 g, 2.12 mmol)로부터 출발하여 중간체 89 (0.40 g, 75.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.43 - 3.90 (s, 3 H), 8.20 - 8.22 (m, 2 H), 8.40 (s, 1 H), 8.54 - 8.57 (m, 1 H), 9.00 - 9.04 (m, 1 H), 10.00 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.76분, [M+H] 252.1.

중간체 90: 2-(4-포르밀-1H-이미다졸-1-일)-4-메틸피리미딘-5-카르보니트릴

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 43C (0.62 g, 3.12 mmol) 및 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.25 g, 2.60 mmol)로부터 출발하여 중간체 90 (0.05 g, 9.00%)을 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.70 (s, 3 H), 8.80 (s, 2 H), 9.30 (s, 1 H), 9.80 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.76분, [M+H] 214.4.

중간체 91: 6'-(메틸술포닐)-[2, 3'-비피리딘]-5-카르브알데히드

중간체 91A: 2-(메틸술포닐)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘

중간체 2B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 5-브로모-2-(메틸술포닐)피리딘 (0.05 g, 0.21 mmol) 및 비스(피나콜레이토)디보론 (0.07 g, 0.26)로부터 출발하여 중간체 91A (0.05 g, 조 물질)를 제조하였다.

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.94분, [M+H] 284.2.

중간체 91:

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 91A (0.50 g, 1.77 mmol) 및 6-브로모니코틴알데히드 (0.33 g, 1.77 mmol)로부터 출발하여 중간체 91 (0.30 g, 64%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.94분, [M+H] 263.2.

중간체 92: 2-(4-포르밀-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메톡시피리미딘-5-카르보니트릴

중간체 92A: 2-(4-(히드록시메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메톡시피리미딘-5-카르보니트릴

중간체 42의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 45A (1.00 g, 5.90 mmol) 및 중간체 28A (0.88 g, 8.85 mmol)로부터 출발하여 중간체 92A (0.90 g, 65.70%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.18 (s, 3 H), 4.69 (d, J = 5.84 Hz, 2 H), 5.59 (t, J = 5.87 Hz, 1 H), 8.25 (s, 1 H), 9.18 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.60분, [M+H] 233.2.

중간체 92:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 92A (0.03 g, 5.90 mmol) 및 데스-마르틴퍼아이오디난 (0.06 g, 0.129 mmol)으로부터 출발하여 중간체 92 (0.02 g, 조 물질)를 제조하였다.

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 93: 6-(4-포르밀-3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 93A: 메틸 1-(5-시아노-4-메톡시피리딘-2-일)-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-클로로-4-메톡시니코티노니트릴 (4.27 g, 25.3 mmol) 및 메틸 2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트 (3.00 g, 21.11 mmol)로부터 출발하여 중간체 93A (4.20 g, 70.70%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.79 (s, 3 H), 4.03 (s, 3 H), 7.9 (s, 1 H), 8.32 (s, 1 H), 8.71 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.81분, [M+1] 275.

중간체 93B: 메틸 1-(5-시아노-4-메톡시피리딘-2-일)-3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트

DMF (5 mL) 중 중간체 93A (2.00 g, 7.29 mmol)의 교반 용액에 Cs₂CO₃ (4.75 g, 14.59 mmol)에 이어서 아이오도메탄 (0.91 mL, 14.6 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 12시간 동안 교반하였다. DMF를 감압 하에 증발시키고, 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하였다. 고체 침전물을 여과하고, 물 (50 mL), 디에틸 에테르 (50 mL)로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 93B (1.70 g, 81.00%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.44 (s, 3 H), 3.82 (s, 3 H), 4.04 (s, 3 H), 8.02 (s, 1 H), 8.24 (s, 1 H), 8.76 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.34분, [M+1] 289.2.

중간체 93C: 6-(4-(히드록시메틸)-3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 93B (1.00 g, 3.47 mmol) 및 NaBH₄ (0.26 g, 6.94 mmol)로부터 출발하여 중간체 93C (0.85 g, 92.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.24 (s, 3 H), 4.01 (s, 3 H), 4.36 (br.s, 2 H), 5.25 (br.s, 1 H), 7.29 (s, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.69 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.24분, [M+1] 261.

중간체 93:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 93C (0.20 g, 0.76 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.39 g, 0.92 mmol)로부터 출발하여 중간체 93 (0.100 g, 50.00%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.46 (s, 3 H), 4.01 (s, 3 H), 8.25 (s, 1 H), 8.54 (s, 1 H), 8.81 (s, 1 H), 9.52 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.91분, [M+1] 259.

중간체 94: 6-(4-포르밀-3-이소프로필-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 94A: 메틸 1-(5-시아노-4-메톡시피리딘-2-일)-3-이소프로필-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트

중간체 93B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 93A (1.00 g, 3.65 mmol) 및 2-아이오도프로판 (1.24 g, 7.29 mmol)로부터 출발하여 중간체 94A (0.48 g, 41.00%)를 황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.45 (d, J = 8.00 Hz, 6 H), 3.8 (s, 3 H), 4.04 (s, 3 H), 5.0 (t, J = 8.00 Hz, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 8.76 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.70분, [M+1] 317.2.

중간체 94B: 6-(4-(히드록시메틸)-3-이소프로필-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 94A (0.40 g, 1.26 mmol) 및 NaBH₄ (0.10 g, 2.53 mmol)로부터 출발하여 중간체 94B (0.35 g, 96.00%)를 황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.45 (d, J = 8.00 Hz, 6 H), 4.01 (s, 3 H), 4.26 - 4.35 (m, 3 H), 5.25 (br.s, 1 H), 7.28 (s, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.68 (s, 1 H),

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.9분, [M+1] 289.2.

중간체 94:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 94B (0.38 g, 1.32 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.67 g, 1.58 mmol)로부터 출발하여 중간체 94 (0.25 g, 49.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.45 (d, J = 8.00 Hz, 6 H), 4.01 (s, 3 H), 5.0 (t, J = 8.00 Hz, 1 H), 8.25 (s, 1 H), 8.61 (s, 1 H), 8.87 (s, 1 H), 9.45 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.3분, [M+1] 287.2.

중간체 95: 3-메틸-1-(2-메틸피리미딘-4-일)-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르브알데히드

중간체 95A: 메틸 1-(5-시아노-4-메톡시피리딘-2-일)-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트

DMF (30 mL) 중 메틸 2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트 (1.50 g, 10.55 mmol)의 용액에 4-클로로-2-메틸피리미딘 (1.63 g, 12.67 mmol)에 이어서 Cs₂CO₃ (6.88 g, 21.11 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (50 mL)로 희석하였다. 수득된 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 95A (1.20 g, 36.40%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.67 (s, 3 H), 3.82 (s, 3 H), 7.85 (s, 1 H), 8.3 (d, 6.0 Hz, 1 H), 8.6 (d, 6.0 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.06분, [M+1] 235.2.

중간체 95B: 메틸 3-메틸-1-(2-메틸피리미딘-4-일)-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트

중간체 93B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 95A (1.00 g, 4.27 mmol) 및 2-아이오도메탄 (0.5 mL, 8.54 mmol)로부터 출발하여 중간체 95B (0.50 g, 47.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.63 (s, 3 H), 3.42 (s, 3 H), 3.82 (s, 3 H), 8.04 (s, 1 H), 8.15 (d, J = 6.00 Hz, 1 H), 8.75 (d, J = 6.00 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.54분, [M+1] 249.2.

중간체 95C: 4-(히드록시메틸)-3-메틸-1-(2-메틸피리미딘-4-일)-1,3-디히드로-2H-이미다졸-2-온

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 95B (0.50 g, 2.014 mmol) 및 NaBH₄ (0.15 g, 4.03 mmol)로부터 출발하여 중간체 95C (0.20 g, 45.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.58 (s, 3 H), 3.22 (s, 3 H), 4.36 (d, 5.2 Hz, 2 H), 5.24 (s, 1 H), 7.3 (s, 1 H), 8.15 (d, J = 6.00 Hz, 1 H), 8.65 (d, J = 6.00 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.55분, [M+1] 221.5.

중간체 95:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 95C (0.20 g, 0.91 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.46 g, 1.09 mmol)로부터 출발하여 중간체 95 (0.13 g, 64.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.66 (s, 3 H), 3.45 (s, 3 H), 8.2 (d, 6.0 Hz, 1 H), 8.54 (s, 1 H), 8.81 (d, 6.0 Hz, 1 H), 9.54 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.08분, [M+1] 219.2.

중간체 96-I: 5-((2R,6S)-4-((6-브로모피리딘-3-일)메틸)-6-메틸피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

THF (20 mL) 중 6-브로모니코틴알데히드 (0.300 g, 1.61 mmol)의 교반 용액에 중간체 51-I (0.44 g, 1.77 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 계속해서 주위 온도에서 10분 동안 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (0.68 g, 3.23 mmol)를 첨가하고, 교반을 48시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 수성 NaHCO₃ (30 mL)으로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 65-70% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 96-I (0.32 g, 47.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.01 (d, J = 6.02 Hz, 3 H), 1.70 - 1.79 (m, 2 H), 2.24 (s, 3 H), 2.72 (t, J = 8.78 Hz, 2 H), 2.96 (td, J = 6.53, 3.01 Hz, 1 H), 3.52 (s, 2 H), 4.15 (dd, J = 10.04, 2.51 Hz, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.59 - 7.67 (m, 2 H), 7.68 - 7.72 (m, 1 H), 7.80 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.31 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.95분, [M+H] 417.

중간체 97: 5-((2R,6S)-4-((1H-1,2,4-트리아졸-3-일)메틸)-6-메틸피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 97A: 메틸 1-트리틸-1H-1,2,4-트리아졸-3-카르복실레이트

중간체 75A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-1,2,4-트리아졸-3-카르복실레이트 (5.00 g, 39.30 mmol) 및 트리틸 클로라이드 (13.16 g, 47.20 mmol)로부터 출발하여 중간체 97A (8.00 g, 45.10%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.83 (s, 3 H), 7.05 - 7.09 (m, 5 H), 7.40 - 7.42 (m, 10 H), 8.38 (s, 1 H),

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 97B: (1-트리틸-1H-1,2,4-트리아졸-3-일)메탄올

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 97A (2.00 g, 5.41 mmol) 및 NaBH₄ (0.60 g, 16.24 mmol)로부터 출발하여 중간체 97B (1.00 g, 50.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.45 (d, J = 6.02 Hz, 2 H), 5.30 (t, J = 6.02 Hz, 1 H), 7.05 - 7.09 (m, 5 H), 7.37 - 7.42 (m, 10 H), 8.04 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 97C: 1-트리틸-1H-1,2,4-트리아졸-3-카르브알데히드

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 97B (0.80 g, 2.34 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (2.00 g, 4.70 mmol)로부터 출발하여 중간체 97C (0.75 g, 90.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.05 - 7.09 (m, 5 H), 7.40 - 7.42 (m, 10 H), 8.38 (s, 1 H), 9.45 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 97D: 4-메틸-5-((2R,6S)-6-메틸-4-((1-트리틸-1H-1,2,4-트리아졸-3-일)메틸)피페라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 96-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 97C (0.75 g, 2.21 mmol) 및 중간체 51-I (0.60 g, 2.43 mmol)로부터 출발하여 중간체 97D (0.90 g, 71.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.98 (d, J = 6.28 Hz, 3 H), 1.69 - 1.86 (m, 2 H), 2.23 (s, 3 H), 2.68 - 2.78 (m, 2 H), 2.90 (br. s., 1 H), 3.60 (s, 2 H), 4.10 (d, J = 7.10 Hz, 1 H), 5.39 (s, 2 H), 7.01 - 7.07 (m, 6 H), 7.31 - 7.38 (m, 9 H), 7.64 - 7.69 (m, 1 H), 7.75 - 7.79 (m, 1 H), 8.04 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 4.045분, [M+H] 570.4.

중간체 97:

중간체 4C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 97D (1.00 g, 1.75 mmol) 및 디옥산 중 4M HCl (0.88 ml, 3.51 mmol)로부터 출발하여 중간체 97 (0.18 g, 28.20%)을 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.00 (d, J = 6.28 Hz, 3 H), 1.72 - 1.85 (m, 2 H), 2.25 (s, 3 H), 2.76 (d, J = 10.24 Hz, 2 H), 2.94 (br. s., 1 H), 3.62 (s, 2 H), 4.14 (d, J = 9.25 Hz, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.65 (d, J = 8.09 Hz, 1 H), 7.78 (d, J = 8.26 Hz, 1 H), 8.12 (br. s., 1 H), 13.9 (br. s., 1 H).

(1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.63분, [M+H] 328.2.

중간체 98: 6-(4-포르밀-1H-이미다졸-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.50 g, 5.20 mmol) 및 6-클로로-4-메톡시니코티노니트릴 (1.05 g, 6.24 mmol)로부터 출발하여 중간체 98 (0.30 g, 25.00%)을 제조하였다.

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.75분, [M+H] 229.1.

중간체 99: 6-(4-포르밀-5-메틸-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 99A: 에틸 5-메틸-2H-1,2,3-트리아졸-4-카르복실레이트

중간체 28A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 에틸 부트-2-이노에이트 (10.00 g, 89.00 mmol) 및 아지도트리메틸실란 (17.76 mL, 134.00 mmol)로부터 출발하여 중간체 99A (5.20 g, 35.70%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.31 (t, J = 7.09 Hz, 3 H), 2.51 (br. s., 3 H), 4.30 (q, J = 6.93 Hz, 2 H), 15.36 (br. s., 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.68분, [M+H] 156.2.

중간체 99B: 에틸 1-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-5-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-4-카르복실레이트 및 중간체 99C: 에틸 2-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-5-메틸-2H-1,2,3-트리아졸-4- 카르복실레이트

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 99A (5.00 g, 32.20 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (7.62 g, 38.70 mmol)로부터 출발하여 중간체 99B 및 99C를 제조하였다. 위치이성질체를 HPLC [YMC 트리아트 (250 x 20 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 10 mM NaHCO₃; 용매 B: 아세토니트릴:MeOH (1:1), 구배: 15분에 걸쳐 50-100% B, 유량: 20 mL/분, UV: 254]에 의해 개별 이성질체로 분리하였다. 중간체 99B로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 10.42분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.50 g, 5.50%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.33 - 1.38 (m, 3 H), 2.67 (s, 3 H), 2.83 (s, 3 H), 4.39 (q, J = 7.03 Hz, 2 H), 8.20 (s, 1 H), 9.07 (s, 1 H).

LCMS (방법-D ): 체류 시간 2.37분, [M+H] 272.0.

중간체 99C로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 11.65분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (3.10 g, 28.40%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.33 - 1.38 (m, 3 H), 2.56 (s, 3 H), 2.64 (s, 3 H), 4.39 (q, J = 7.03 Hz, 2 H), 8.18 (s, 1 H), 8.97 (s, 1 H).

LCMS (방법-D ): 체류 시간 2.45분, [M+H] 272.0.

중간체 99D: 6-(4-(히드록시메틸)-5-메틸-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 99C (0.60 g, 2.21 mmol) 및 NaBH₄ (0.17 g, 4.43 mmol)로부터 출발하여 중간체 99D (0.25 g, 48.80%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.39 (s, 3 H), 2.60 (s, 3 H), 4.62 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 5.39 (t, J = 5.77 Hz, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 8.89 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.16분, [M+H] 230.0.

중간체 99:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 99D (0.20 g, 0.87 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.74 g, 1.75 mmol)으로부터 출발하여 중간체 99 (0.25 g, 48.80%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.58 (s, 3 H), 2.66 (s, 3 H), 8.24 (s, 1 H), 9.01 (s, 1 H), 10.23 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.95분, [M-H] 226.1.

중간체 100: 6-(4-포르밀-5-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 100A: 6-(4-(히드록시메틸)-5-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 99B (0.40 g, 1.47 mmol) 및 NaBH₄ (0.11 g, 2.95 mmol)로부터 출발하여 중간체 100A (0.28 g, 71.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.59 (s, 3 H), 2.64 (s, 3 H), 4.55 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 5.19 (t, J = 5.77 Hz, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 9.0 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.22분, [M+H] 230.2.

중간체 100:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 100A (0.25 g, 1.09 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.70 g, 1.64 mmol)로부터 출발하여 중간체 100 (0.20 g, 56.00%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.66 (s, 3 H), 2.72 (s, 3 H), 8.24 (s, 1 H), 9.01 (s, 1 H), 10.28 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.97분, [M+H] 228.2.

중간체 101: 1-(2-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)에틸 메탄술포네이트

중간체 101A: 6-(4-(1-히드록시에틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 72A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 28 (0.80 g, 3.75 mmol)로부터 출발하여 중간체 101A (0.74 g, 80.00%)를 황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.48 (d, J = 6.53 Hz, 3 H), 2.62 (s, 3 H), 4.93 - 5.00 (m, 1 H), 5.58 (d, J = 5.02 Hz, 1 H), 8.10 - 8.11 (m, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 8.93 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.05분, [M+H] 230.0.

중간체 101:

중간체 59의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 101A (0.25 g, 1.09 mmol) 및 메실 클로라이드 (0.102 mL, 1.31 mmol)로부터 출발하여 중간체 101A (0.20 g, 56.70%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.78 (d, J = 6.80 Hz, 3 H), 2.64 (s, 3 H), 3.28 (s, 3 H), 6.03 (q, J = 6.80 Hz, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 8.97 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.56분, [M+H] 308.2.

중간체 102: 2-메틸-6-(트리메틸스탄닐)피리다진-3(2H)-온

중간체 102A: 6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온

DMF (10 mL) 중 6-클로로피리다진-3(2H)-온 (0.35 g, 2.68 mmol)의 교반 용액에 K₂CO₃ (0.93 g, 6.70 mmol)에 이어서 메틸아이오다이드 (0.20 mL, 3.22 mmol)를 첨가하고, 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 102A (0.25 g, 56.10%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 3.75 (s, 3 H), 6.92 (d, J = 9.76 Hz, 1 H), 7.19 (d, J = 9.76 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.66분, [M+1] 145.2.

중간체 102:

중간체 23A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 102A (0.10 g, 0.69 mmol) 및 1,1,1,2,2,2-헥사메틸디스탄난 (0.16 mL, 0.76 mmol)로부터 출발하여 중간체 102 (0.15 g, 조 물질)를 제조하였다.

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.30분, [M+1] 275.2.

중간체 103: 5-(5-(히드록시메틸)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온 (부분입체이성질체-I)

중간체 103A: 2-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)-5-클로로피라진

DCM (10 mL) 중 (5-클로로피라진-2-일)메탄올 (0.50 g, 3.46 mmol)의 교반 용액에 이미다졸 (0.94 g, 13.84 mmol)에 이어서 TBDMS-Cl (1.04 g, 6.92 mmol)을 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 12시간 동안 계속하였다. 생성된 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 희석하고, DCM (2 x 40 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 5-10% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 103A (0.85 g, 89.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.11 (s, 6 H), 0.91 (s, 9 H), 4.84 (s, 2 H), 8.50 (s, 1 H), 8.75 (d, J = 1.00 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 3.69분, [M+H] 259.

중간체 103B: 5-(5-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)피라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 103A (2.83 g, 10.94 mmol) 및 중간체 2B (3.00 g, 10.94 mmol)로부터 출발하여 중간체 103B (1.80 g, 44.0%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.15 (s, 6 H), 0.94 (s, 9 H), 2.33 (s, 3 H), 4.93 (s, 2 H), 5.50 (s, 2 H), 7.71 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.8 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 8.81 (s, 1 H), 8.84 (d, J = 1.51 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 3.78분, [M+H] 371.2.

중간체 103C 및 103D: 5-(5-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2-I 및 2-II의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 103B (2.30 g, 6.21 mmol)로부터 출발하여 중간체 103C 및 103D를 제조하였다. 2종의 부분입체이성질체를 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 5-10% EtOAc/n-헥산)로 분리하였다. 중간체 103C로서 나타내는 제1 용리 화합물을 황색 고체로서 수득하였다 (0.35 g, 30.40%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.06 (s, 6 H), 0.89 (s, 9 H), 2.29 (s, 3 H), 2.43 (br. s., 2 H), 2.73 - 2.75 (m, 1 H), 2.90 - 2.92 (m, 1 H), 3.02 - 3.07 (m, 1 H), 3.43 - 3.54 (m, 2 H), 3.88 - 3.93 (m, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.65 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.76 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D) 체류 시간 2.34분, [M+H] 377.3.

중간체 103D로서 나타내는 제2 용리 화합물을 무색 시럽으로서 수득하였다 (0.08 g, 7.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.08 (s, 6 H), 0.89 (s, 9 H), 2.26 (s, 1 H), 2.29 (s, 3 H), 2.55 - 2.68 (m, 1 H), 2.85 - 2.98 (m, 2 H), 3.78 (dd, J = 9.54, 7.03 Hz, 1 H), 3.90 - 3.99 (m, 3 H), 5.37 (s, 2 H), 7.65 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.84 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D) 체류 시간 2.61분, [M+H] 377.3.

중간체 103:

DCM (5 mL) 중 중간체 103C (0.15 g, 0.40 mmol)의 교반 용액에 디옥산 중 1.4 M HCl (0.011 mL, 0.362 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, 잔류물을 디에틸에테르 (2 x 10 mL)로 세척하였다. 수득된 고체를 ACN (3 mL) 중에 재용해시키고, K₂CO₃ (0.30 g)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 주위 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 103 (0.08 g, 79.00%)을 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.18 - 2.23 (m, 2 H), 2.30 (s, 3 H), 2.86 - 2.92 (m, 1 H), 2.99 - 3.04 (m, 1 H), 3.27 - 3.31 (m, 3 H), 3.89 - 3.93 (m, 1 H), 4.55 (s, 1 H), 5.39 (s, 2 H), 7.65 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 8.56 Hz, 1 H). (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.55분, [M+H] 263.2.

중간체 104: 6-(4-(클로로메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 104A: 6-(4-(히드록시메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 6 (0.50 g, 2.36 mmol) 및 NaBH₄ (0.09 g, 2.36 mmol)로부터 출발하여 중간체 104A (0.30 g, 41%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.6 (s, 3 H), 4.45 (d, J = 5.6 Hz, 2 H), 5.1 (t, J = 5.60 Hz, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 8.5 (s, 1 H), 8.85 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.33분, [M+H] 215.2.

중간체 104:

중간체 59의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 104A (0.20 g, 0.93 mmol) 및 메실 클로라이드 (0.087 mL, 1.120 mmol)로부터 출발하여 중간체 104 (0.02 g, 69.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.6 (s, 3 H), 4.8 (s, 2 H), 7.86 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 8.5 (s, 1 H), 8.85 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.24분, [M+ 2] 234.9.

중간체 105-I 및 105-II: 5-(6-(2-히드록시프로판-2-일)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 105A: 2-(6-클로로피라진-2-일)프로판-2-올

THF (50 mL) 중 메틸 6-클로로피라진-2-카르복실레이트 (2.50 g, 14.49 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 디에틸 에테르 중 메틸마그네슘 브로마이드 3M (12.07 mL, 36.2 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 0.40% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 105A (0.70 g, 28.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.44 (s, 6 H), 5.58 (br,s 1 H), 8.66 (s, 1 H), 8.86 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 105B: 5-(6-(2-히드록시프로판-2-일)피라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 105A (0.50 g, 2.92 mmol) 및 중간체 2B (0.80 g, 2.92 mmol)로부터 출발하여 중간체 105B (0.65 g, 78.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.51 (s, 6 H), 2.27 - 2.37 (m, 3 H), 5.50 (s, 2 H), 5.54 (s, 1 H), 7.71 - 7.77 (m, 1 H), 7.79 - 7.85 (m, 1 H), 8.77 (s, 1 H), 8.95 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.82분, [M+H] 285.1.

중간체 105-I 및 105-II:

중간체 2-I 및 2-II의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 105B (0.65 g, 2.28 mmol)로부터 출발하여 중간체 105-I 및 105-II를 제조하였다. 조 잔류물을 정제용 HPLC [룩스-셀룰로스 C5 (250 x 30 mm) 5 마이크로미터; 용매: 0.1% DEA + ACN: IPA(90:10), 구배: 17분에 걸쳐 100%, 유량: 30 mL/분, UV: 254]에 의해 정제하여 순수한 라세미체를 수득하였다. 라세미 혼합물을 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) [키랄팩 ADH (250 x 21 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% NH₄OH, 유량: 60.0 g/분. 온도: 30℃, UV: 235 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다.

중간체 105-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 5.16분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.04 g, 5.27%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.13 (d, J = 3.01 Hz, 6 H), 2.23 - 2.34 (m, 6 H), 2.55 - 2.72 (m, 2 H), 2.84 (t, J = 9.79 Hz, 2 H), 4.03 (d, J = 9.54 Hz, 1 H), 4.34 (s, 1 H), 5.39 (s, 2 H), 7.68 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.62분, [M+H] 291.2.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 3.89분, 100% ee.

중간체 105-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 6.50분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.04 g, 5.27%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.13 (d, J = 3.01 Hz, 6 H), 2.20 - 2.36 (m, 6 H), 2.57 - 2.70 (m, 2 H), 2.84 (t, J = 8.53 Hz, 2 H), 4.03 (d, J = 7.03 Hz, 1 H), 4.34 (s, 1 H), 5.39 (s, 2 H), 7.68 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.613분, [M+H] 291.2.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 4.94분, 100% ee.

중간체 106: 5-(4-히드록시피롤리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온 히드로클로라이드 (부분입체이성질체-I)

중간체 106A: tert-부틸 3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-4-옥소피롤리딘-1-카르복실레이트

중간체 4A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2A (5.00 g, 22.02 mmol) 및 tert-부틸 3-옥소피롤리딘-1-카르복실레이트 (6.93 g, 37.4 mmol)로부터 출발하여 중간체 106A (0.80 g, 10.96%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.27 - 1.59 (m, 9 H), 2.15 - 2.30 (m, 3 H), 3.62 (dd, J = 10.79, 8.78 Hz, 1 H), 3.80 - 3.91 (m, 1 H), 3.94 - 4.09 (m, 1 H), 4.22 - 4.33 (m, 1 H), 4.37 - 4.48 (m, 1 H), 5.32 - 5.41 (m, 2 H), 7.38 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.58 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.11분, [M-H] 330.3.

중간체 106B 및 106C: tert-부틸 3-히드록시-4-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피롤리딘-1-카르복실레이트

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 106A (0.80 g, 2.41 mmol) 및 NaBH₄ (0.18 g, 4.83 mmol)로부터 출발하여 중간체 106B 및 106C를 제조하였다. 2종의 부분입체이성질체를 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) [키랄팩 AD-H (250 x 21 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% NH₄OH, 유량: 70.0 g/분.온도: 30℃, UV: 240 nm]로 분리하였다.

중간체 106B로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 4.08분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.29 g, 36.00%).

¹H NMR: 부분입체이성질체 혼합물을 나타냈다.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.96분 및 2.02분, [(M-100)+H] 334.1.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 2.44분, 100% ee.

중간체 106C로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 7.31분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.30 g, 37.30%).

1H NMR: 부분입체이성질체 혼합물을 나타냈다.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.95분 및 2.02분, [(M-100)+H] 334.1.

키랄 순도 (방법-XII): 체류 시간 4.55분, 100% ee.

중간체 106:

중간체 52-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 106B (0.25 g, 0.75 mmol)로부터 출발하여 중간체 106 (0.20 g, 99.00%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.46분, [M+H] 234.1.

중간체 107: 5-(4-플루오로피롤리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온 히드로클로라이드

중간체 107A: tert-부틸 3-플루오로-4-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피롤리딘-1-카르복실레이트

중간체 4B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 106A (0.35 g, 1.05 mmol) 및 DAST (0.69 mL, 5.25 mmol)로부터 출발하여 중간체 107 (0.22 g, 조 물질)을 제조하였다.

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 107:

중간체 52-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 108A (0.25 g, 0.75 mmol)로부터 출발하여 중간체 107 (0.18 g, 99.00%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.47분 및 0.57분, [M+H] 216.5.

중간체 108: 6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-4-(트리플루오로메틸)니코티노니트릴

중간체 108A: 6-클로로-4-(트리플루오로메틸)니코티노니트릴

문헌 절차 (WO2006/68618 A1, 2006)에 따라 합성하였다.

중간체 108:

회백색 고체, 중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 107A (0.77 g, 3.75 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.30 g, 3.12 mmol)로부터 출발하여 중간체 108 (0.40 g, 48.10%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.35 (s, 1 H), 8.47 (s, 1 H), 9.37 (s, 1 H), 9.49 (s, 1 H), 10.02 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 109-I: (5R,8aR)-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)헥사히드로-3H-옥사졸로[3,4-a]피라진-3-온

중간체 109A-I: tert-부틸 (5R,8aR)-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-3-옥소테트라히드로-3H-옥사졸로[3,4-a]피라진-7(1H)-카르복실레이트

THF (20 mL) 중 중간체 38D-I (0.75 g, 2.07 mmol)의 교반 용액에 K₂CO₃ (0.86 g, 6.21 mmol)에 이어서 트리포스겐 (0.61 g, 2.07 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-12 g, 50% EtOAc / n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 109A-I (0.700 g, 87.00%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.15 - 1.23 (m, 9 H), 2.32 (s, 3 H), 2.96 (br. s., 1 H), 3.49 (dd, J = 12.00, 4.00 Hz, 1 H), 4.01 - 4.11 (m, 3 H), 4.44 - 4.50 (m, 1 H), 4.78 - 4.80 (m, 1 H), 5.15 (d, J = 5.00 Hz, 1 H), 5.35 - 5.41 (m, 2 H), 7.58 (d, J = 6.50 Hz, 1 H), 7.68 (d, J = 6.50 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.34분, [M+H] 389.2.

중간체 109-I:

중간체 4C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 109A-I (0.70 g, 1.80 mmol)로부터 출발하여 중간체 109-I (0.40 g, 77.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.29 - 2.38 (m, 3 H), 3.00 - 3.23 (m, 2 H), 3.34 - 3.44 (m, 1 H), 3.60 (br. s., 2 H), 3.90 - 4.07 (m, 1 H), 4.25 - 4.37 (m, 1 H), 4.43 - 4.54 (m, 1 H), 5.10 (dd, J = 11.55, 3.51 Hz, 1 H), 5.35 - 5.52 (m, 2 H), 7.61 - 7.67 (m, 1 H), 7.67 - 7.76 (m, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.5분, [M+H] 289.2.

중간체 110: 6-(5-포르밀이속사졸-3-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 110A: 6-포르밀-4-메틸니코티노니트릴

DMF (15 mL) 중 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (2.00 g, 10.15 mmol)의 교반 용액에 주위 온도에서 고체 Na₂CO₃ (1.08 g, 10.15 mmol)을 질소 분위기 하에서 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 탈기하고, tert-부틸 이소시아나이드 (1.01 g, 12.18 mmol), 1,4-비스(디페닐포스피노)부탄 (0.13 g, 0.30 mmol), 아세트산팔라듐 (II) (0.07 g, 0.30 mmol) 및 트리에틸실란 (1.18 g, 10.15 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 65℃로 5시간 동안 가열하고, 주위 온도로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 중간체 110A (0.30 g, 20.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.61 (s, 3 H), 8.01 (s, 1 H), 9.15 (s, 1 H), 10.01 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.45분, [M+H] 147.0.

중간체 110B: (E)-6-((히드록시이미노)메틸)-4-메틸니코티노니트릴

EtOH (10 mL) 중 중간체 110A (0.50 g, 3.00 mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 주위 온도에서 히드록실아민 히드로클로라이드 (0.26 g, 3.70 mmol) 및 아세트산나트륨 (0.30 g, 3.70 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 75℃로 25분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 물 (60 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM (5 mL)로 슬러리화하고 및 고체를 흡인 여과에 의해 수집하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 110B (0.30 g, 60.00%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.52 (s, 3 H), 7.86 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.92 (s, 1 H), 12.13 (s, 1 H).

LCMS (방법 H): 체류 시간 0.77분, [M+H] 162.2.

중간체 110C: 6-(5-(히드록시메틸)이속사졸-3-일)-4-메틸니코티노니트릴

DMF (10 mL) 중 중간체 110B (0.20 g, 1.24 mmol)의 용액에 N-클로로숙신이미드 (0.17 mg, 1.24 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 50℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 프로프-2-인-1-올 (0.07 g, 1.24 mmol)에 이어서 TEA (0.17 mL, 1.24 mmol)를 첨가하고, 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-12 g, 30% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 110C (0.08 g, 30.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.55 - 2.63 (m, 3 H), 4.67 (dd, J = 6.02, 1.00 Hz, 2 H), 5.76 (t, J = 6.02 Hz, 1 H), 6.95 (s, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 9.06 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.9분, [M+H] 216.0.

중간체 110:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 110C (0.08 g, 0.37 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.24 g, 0.56 mmol)로부터 출발하여 중간체 110 (0.75 g, 95.00%)을 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.50 - 2.51 (m, 3 H), 7.92 (s, 1 H), 8.27 (s, 1 H), 9.12 (s, 1 H), 9.99 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 111: 6-(4-포르밀-1H-이미다졸-1-일)-2,4-디메틸니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-클로로-2,4-디메틸니코티노니트릴 (0.20 g, 1.18 mmol) 및 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.12 g, 1.12 mmol)로부터 출발하여 중간체 111 (0.08 g, 29.50%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.55 - 2.61 (m, 3 H), 2.73 (s, 3 H), 7.98 (s, 1 H), 8.76 (d, J = 0.98 Hz, 1 H), 8.81 (d, J = 1.22 Hz, 1 H), 9.88 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.92분, [M+1] 227.5.

중간체 112: 6-(4-포르밀-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2,4-디메틸니코티노니트릴

중간체 112A: 6-(4-(히드록시메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2,4-디메틸니코티노니트릴 및 중간체 112B: 6-(4-(히드록시메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-2,4-디메틸니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 28A (1.00 g, 10.09 mmol) 및 6-클로로-2,4-디메틸니코티노니트릴 (1.85 g, 11.10 mmol)로부터 출발하여 중간체 112A 및 중간체 112B를 제조하였다. 중간체 112A로서 나타내는 제1 용리 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.30 g, 12.97%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.63 (s, 3 H), 2.74 (s, 3 H), 4.64 (d, J = 6.00 Hz, 2 H), 5.37 (t, J = 6.00 Hz, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.69 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.77분, [M+1] 230.4.

중간체 112B로서 나타내는 제2 용리 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.32 g, 13.83%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.59 (s, 3 H), 2.71 (s, 3 H), 4.67 (d, J = 6.00 Hz, 2 H), 5.53 (t, J = 6.00 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 8.16 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.74분, [M+1] 230.4.

중간체 112:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 112A (0.32 g, 1.40 mmol)로부터 출발하여 중간체 112 (0.30 g, 66.20%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.65 (s, 3 H), 2.76 (s, 3 H), 8.21 (s, 1 H), 9.56 (s, 1 H), 10.13 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.98분, [M-1] 228.4.

중간체 113: 6-(4-포르밀-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-2,4-디메틸니코티노니트릴

중간체 9의 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 112B (0.32 g, 1.40 mmol)로부터 출발하여 중간체 113 (0.40 g, 86.00%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.64 (s, 3 H), 2.76 (s, 3 H), 8.11 (s, 1 H), 8.77 (s, 1 H), 10.21 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.93분, [M+H] 228.4.

중간체 114: 6-(4-포르밀-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2-메톡시-4-메틸니코티노니트릴

중간체 114A: 6-클로로-2-메톡시-4-메틸니코티노니트릴 및 중간체 114B: 2-클로로-6-메톡시-4-메틸니코티노니트릴

MeOH (100 mL) 중 2,6-디클로로-4-메틸니코티노니트릴 (15.00 g, 80.00 mmol)의 교반 용액에 소듐 메톡시드 (14.89 mL, 80.00 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (300 mL)로 희석하고, DCM (3 x 250 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (200 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 SFC [칼럼: 룩스 셀룰로스-2 (50 x 250 mm) 5 마이크로미터; 10%의 IPA 중 0.2% DEA; 총 유량: 150 g/분; UV: 220nm]에 의해 정제하여 중간체 114A (5.50 g, 32.30%)를 회백색 고체로서 수득하였다 (체류 시간: 6.3분).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.46 (s, 3 H), 3.99 (s, 3 H), 7.27 (s, 1 H).

LCMS: (방법-I) 체류 시간: 1.22분, [M+1] 183.3.

중간체 114B (6.50 g, 40.40%)를 회백색 고체로서 수득하였다 (체류 시간: 5.8분).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.43 (s, 3 H), 3.91 (s, 3 H), 6.94 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.29분, [M+1] 183.4.

중간체 114C: 6-(4-(히드록시메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-2-메톡시-4-메틸니코티노니트릴 및 중간체 114D: 6-(4-(히드록시메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2-메톡시-4-메틸니코티노니트릴

중간체 114A (2.21 g, 12.11 mmol) 및 중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 28A (1.00 g, 10.09 mmol)로부터 출발하여 중간체 114C 및 중간체 114D를 제조하였다. 중간체 114C로서 나타내는 제1 용리 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.15 g, 5.45%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.56 (s, 3 H), 4.07 (s, 3 H), 4.67 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 5.51 (t, J = 5.77 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 8.16 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.82분, [M+1] 246.4.

중간체 114D로서 나타내는 제2 용리 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.25 g, 9.60%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.55 - 2.62 (m, 3 H), 4.05 - 4.15 (m, 3 H), 4.61 - 4.72 (m, 2 H), 5.38 (t, J = 5.77 Hz, 1 H), 7.83 (s, 1 H), 8.76 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.81분, [M+1] 246.4.

중간체 114:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 114D (0.23 g, 0.89 mmol)로부터 출발하여 중간체 114 (0.08 g, 36.90%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.67 (s, 3 H), 4.18 (s, 3 H), 7.86 (s, 1 H), 8.79 (s, 1 H), 10.21 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.03분, [M+1] 244.4.

중간체 115: 6-(4-포르밀-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-2-메톡시-4-메틸니코티노니트릴

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 114C (0.40 g, 1.63 mmol)로부터 출발하여 중간체 115 (0.38 g, 82.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.62 (s, 3 H), 4.11 (s, 3 H), 7.85 (s, 1 H), 8.78 (s, 1 H), 10.21 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.06분, [M+H] 244.0.

중간체 116-I 및 116-II: 4-메틸-5-(피페리딘-3-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 116A: 4-메틸-5-(피리딘-3-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2A (0.50 g, 2.20 mmol) 및 피리딘-3-일보론산 (0.27 g, 2.20 mmol)으로부터 출발하여 중간체 116A (0.42 g, 85.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 2.29 (s, 3 H), 5.45 (s, 2 H), 7.52 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 7.56 - 7.70 (m, 1 H), 7.83 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 7.93 (dt, J = 7.91, 1.82 Hz, 1 H), 8.46 - 8.76 (m, 2 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.71분, [M+H] 226.2.

중간체 116-I 및 116-II:

EtOH (50 mL) 중 중간체 116A (0.42 g, 1.87 mmol)의 용액에 HCl (0.57 mL, 18.65 mmol)을 첨가하고, 질소로 5분 동안 탈기하였다. 산화백금 (IV) (0.09 g, 0.37 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 H₂ 기체 분위기 하에 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, EtOH (40 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 증발시키고, 라세미체를 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) [키랄팩 IC (250 x 4.6 mm) 5.0 마이크로미터; MeOH 중 0.2% DEA, 유량: 1.6 mL/분, 온도: 25℃, UV: 220 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다.

중간체 116-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 8.18분)을 갈색 고체로서 수득하였다 (0.12 g, 27.80%).

¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 1.61 - 2.02 (m, 4 H), 2.26 - 2.47 (m, 3 H), 2.69 - 2.85 (m, 2 H), 3.02 - 3.26 (m, 3 H), 5.37 (s, 2 H), 7.29 - 7.60 (m, 1 H), 7.70 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.47분, [M+H] 232.2.

중간체 116-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 10.32분)을 갈색 고체로서 수득하였다 (0.08 g, 18.55%).

¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 1.62 - 1.79 (m, 2 H), 1.81 - 2.01 (m, 2 H), 2.23 - 2.43 (m, 3 H), 2.59 - 2.84 (m, 2 H), 2.95 - 3.24 (m, 3 H), 5.36 (s, 2 H), 7.49 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.68 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.52분, [M+H] 232.2.

중간체 117: 2-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)이소니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.05 g, 0.55 mmol) 및 2-브로모이소니코티노니트릴 (0.10 g, 0.55 mmol)로부터 출발하여 중간체 117 (0.03 g, 22.99%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.51 (dd, J = 4.88, 1.38 Hz, 1 H), 8.09 - 8.38 (m, 2 H), 8.64 (dd, J = 5.00, 0.75 Hz, 1 H), 9.08 (d, J = 0.75 Hz, 1 H), 10.02 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.42분, [M+H] 199.0.

중간체 118A 및 118B: 5-(5-히드록시피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 118C: 5-(5-메톡시피리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2A (3.12 g, 13.73 mmol) 및 (5-메톡시피리딘-3-일)보론산 (3.00 g, 19.62 mmol)로부터 출발하여 중간체 118C (1.30 g, 24.15%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.23 (s, 3 H), 3.89 (s, 3 H), 5.47 (s, 2 H), 7.38 - 7.47 (m, 1 H), 7.53 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 7.77 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.20 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 8.37 (d, J = 3.01 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.58분, [M+H] 256.2.

중간체 118D: 5-(5-히드록시피리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

AcOH 중 33% HBr (28.2 mL, 166 mmol) 중 중간체 118C (1.70 g, 6.66 mmol)의 용액을 120℃에서 20시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시키고, 중간체 118D (1.20 g, 31.40%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.71분, [M+H] 242.4.

중간체 118A 및 118B:

AcOH (100 mL) 중 중간체 118A (1.20 g, 4.97 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 탈기하였다. 산화백금 (IV) (0.01 mL, 0.50 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 H₂ 기체 압력 (50 psi) 하에 28시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, MeOH (40 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 증발시켰다. 2종의 부분입체이성질체를 HPLC [엑스테라 RP 18 (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 10 mM 중탄산암모늄, 용매 B: ACN + MeOH (1:1), 구배: 18분에 걸쳐 0-100% B, 유량: 1 mL/분, UV: 254 nm]로 분리하였다. 중간체 118A: Dia-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 10.33분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.20 g, 16.26%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.87 - 2.02 (m, 2 H), 2.18 - 2.36 (m, 3 H), 2.81 (d, J = 12.05 Hz, 1 H), 2.94 - 3.08 (m, 2 H), 3.17 (s, 2 H), 3.45 - 3.58 (m, 1 H), 4.69 (br. s., 1 H), 5.37 (s, 2 H), 6.66 (br. s., 1 H), 7.45 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.63 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.49분, [M+H] 248.1.

중간체 118B: Dia-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 12.13분)을 갈색 고체로서 수득하였다 (0.07 g, 5.69%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.75 (s, 2 H), 1.92 (s, 2 H), 2.28 - 2.38 (m., 4 H), 2.81 (d, J = 12.05 Hz, 1 H), 3.17 (s, 1 H), 3.61 - 4.21 (m, 2 H), 5.37 (br. s., 2 H), 6.65 (br. s., 1 H), 7.06 - 7.32 (m, 1 H), 7.38 - 7.95 (m, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.50분, [M+H] 248.2.

중간체 119A 및 119B: 5-(5-메톡시피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 118A 및 118B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 118C (1.27 g, 4.97 mmol)로부터 출발하여 중간체 119A 및 119B를 제조하였다. 2종의 부분입체이성질체를 HPLC [엑스테라 RP 18 (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 10 mM 중탄산암모늄, 용매 B: ACN + MeOH (1:1), 구배: 18분에 걸쳐 0-100% B, 유량: 1 mL/분, UV: 254 nm]로 분리하였다. 중간체 119A: Dia-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 14.48분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.20 g, 15.39%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.35 - 1.85 (m, 5 H), 2.16 - 2.38 (m, 4 H), 3.17 (s, 3 H), 4.09 (d, J = 9.54 Hz, 2 H), 4.46 (br. s., 1 H), 5.39 (d, J = 2.93 Hz, 2 H), 7.49 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 7.65 (d, J = 8.31 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.78분, [M+H] 262.2.

중간체 119B: Dia-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 17.38분)을 갈색 고체로서 수득하였다 (0.20 g, 15.39%).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.77분, [M+H] 262.2.

중간체 120: 2-(3,5-디메틸-4H-1,2,4-트리아졸-4-일)피리미딘-5-카르브알데히드

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-브로모피리미딘-5-카르브알데히드 (0.10 g, 0.54 mmol) 및 3,5-디메틸-4H-1,2,4-트리아졸 (0.05 g, 0.54 mmol)로부터 출발하여 중간체 120 (0.10 g 조 물질)을 제조하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.49분, [M+H] 204.4.

중간체 121: 2-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-3-메틸이소니코티노니트릴

중간체 121A: 4-시아노-3-메틸피리딘 1-옥시드

DCM (100 mL) 중 3-메틸이소니코티노니트릴 (5.00 g, 42.30 mmol)의 용액에 0℃에서 3-클로로퍼옥시벤조산 (14.61 g, 85.00 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 10% NaHCO₃ 용액을 사용하여 염기성화시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 75 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 121A (3.50 g, 61.30%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.38 (s, 3 H), 7.84 - 7.85 (d, J = 6.80 Hz, 1 H), 8.21 - 8.23 (dd, J = 1.20 Hz, 6.80 Hz, 1 H), 8.41 (s, 1H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.44분, [M+H] 135.2.

중간체 121B: 2-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-3-메틸이소니코티노니트릴

POCl₃ (48.6 mL, 52 mmol) 중 중간체 121A (3.5 g, 26.1 mmol)의 교반 용액을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 냉수 (50 mL)에 붓고, 10% NaHCO₃ 용액으로 염기성화시키고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-80 g, 0-20% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 121B (0.62 g, 15.57%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.41 - 2.83 (m, 3 H), 7.44 (d, J = 5.00 Hz, 1 H), 8.39 (dd, J = 5.00, 0.75 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.66분, [M+H] 153.2.

중간체 121:

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.03 g, 0.33 mmol) 및 중간체 121B (0.05 g, 0.33 mmol)로부터 출발하여 중간체 121 (0.03 g 30.25%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.56 - 2.69 (m, 3 H), 7.82 - 8.07 (m, 1 H), 8.12 - 8.40 (m, 1 H), 8.48 - 8.82 (m, 1 H), 8.90 - 9.29 (m, 1 H), 9.99 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.43분, [M+H] 213.2.

중간체 122-I: 5-(5-플루오로피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 122A: 에틸 (4-메톡시벤질)글리시네이트

DCM (250 mL) 중 (4-메톡시페닐)메탄아민 (19.05 mL, 146 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 TEA (20.32 mL, 146 mmol)에 이어서 에틸 브로모아세테이트 (16.13 mL, 146 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (250 mL)로 희석하고, DCM (3 x 250 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-220 g, 35-40% EtOAc/n-헥산))에 의해 정제하여 중간체 122A (21.00 g, 63.90%)를 연황색 액체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.22 - 1.30 (m, 3 H), 3.39 (s, 2 H), 3.74 (s, 2 H), 3.80 (s, 3 H), 4.19 (q, J = 7.03 Hz, 2 H), 6.68 - 6.96 (m, 2 H), 7.13 - 7.30 (m, 3 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.80분, [M+H] 224.0.

중간체 122B: 에틸 N-(4-메톡시벤질)-N-(2-옥소프로필)글리시네이트

EtOH (250 mL) 중 중간체 122A (21.00 g, 71.90 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 NaHCO₃ (11.29 g, 134 mmol)에 이어서 1-클로로프로판-2-온 (11.04 mL, 134 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, EtOH (50 mL)로 세척하고, 여과물을 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-220 g, 20% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 122B (21.00 g, 80.00%)를 연황색 액체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.26 (t, J = 7.25 Hz, 3 H), 2.12 (s, 3 H), 3.44 (s, 2 H), 3.49 (s, 2 H), 3.77 (s, 2 H), 3.80 (s, 3 H), 4.16 (q, J = 7.09 Hz, 2 H), 6.70 - 6.98 (m, 2 H), 7.26 (s, 2 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.19분, [M+H] 280.2.

중간체 122C: 1-(4-메톡시벤질)-5-옥소-1,2,5,6-테트라히드로피리딘-3-일 트리플루오로메탄술포네이트

THF (50 mL) 중 중간체 122B (16.30 g, 58.40 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 THF 중 1M 포타슘 tert-부톡시드 (58.4 mL, 58.4 mmol)에 이어서 2-[n,n-비스(트리플루오로메탄술포닐)아미노]-5-클로로피리딘 (22.91 g, 58.4 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NH₄Cl 용액 (50 mL)로 희석하고, 디에틸 에테르 (2 x 75 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-80 g, 12-15% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 122C (4.40 g, 20.64%)를 연황색 액체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 3.25 (s, 2 H), 3.47 (s, 2 H), 3.67 (s, 2 H), 3.71 - 4.02 (m, 3 H), 6.15 (t, J = 1.25 Hz, 1 H), 6.74 - 6.96 (m, 2 H), 7.12 - 7.24 (m, 2 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.81분, [M+H] 366.2.

중간체 122D: 1-(4-메톡시벤질)-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-1,6-디히드로피리딘-3(2H)-온

디옥산 (100 mL) 중 중간체 122C (4.20 g, 11.50 mmol)의 용액에 중간체 2B (3.15 g, 11.50 mmol)에 이어서 삼염기성 인산칼륨 (4.88 g, 22.99 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 아르곤으로 15분 동안 탈기하였다. PdCl₂(dppf)₂CH₂Cl₂ (0.47 g, 0.58 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (50 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 70% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 122D (3.20 g, 72.80%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.22 (s, 3 H), 3.31 (s, 2 H), 3.37 (s, 2 H), 3.68 (s, 2 H), 3.78 - 3.83 (m, 3 H), 5.08 - 5.34 (m, 2 H), 6.07 (t, J = 1.76 Hz, 1 H), 6.84 - 6.89 (m, 2 H), 7.22 - 7.24 (m, 1 H), 7.25 - 7.29 (m, 2 H), 7.76 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.39분, [M+H] 364.2.

중간체 122E 및 122F: 5-(5-히드록시-1-(4-메톡시벤질)피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

MeOH (50 mL) 중 중간체 122D (2.00 g, 5.50 mmol)의 용액에 니켈(II) 클로라이드 6수화물 (2.62 g, 11.01 mmol)에 이어서 NaBH₄ (0.416 g, 11.01 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시키고, CHCl₃ 중 10% NH₄Cl 용액 (50 mL)으로 희석하고, 10% MeOH (2 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 부분입체이성질체 혼합물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉 - 40 g, 10% MeOH/CHCl₃)로 분리하였다.

중간체 122E: Dia-I로서 나타내는 제1 용리 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.70 g, 34.60%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.59 - 1.80 (m, 4 H), 2.06 - 2.27 (m, 4 H), 3.39 - 3.60 (m, 4 H), 3.63 - 3.78 (s, 3 H), 3.82 (br. s., 1 H), 4.60 (d, J = 5.02 Hz, 1 H), 5.13 - 5.43 (m, 2 H), 6.88 (d, J = 9.04 Hz, 2 H), 7.13 - 7.36 (m, 2 H), 7.62 (s, 2 H).

LCMS (방법-J): 체류 시간 1.14분, [M+H] 368.1.

중간체 122F: Dia-II로서 나타내는 제2 용리 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.90 g, 44.50%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.39 (q, J = 12.05 Hz, 1 H), 1.70 - 1.97 (m, 3 H), 2.21 (s, 3 H), 2.63 - 2.82 (m, 1 H), 2.98 (d, J = 5.52 Hz, 1 H), 3.04 - 3.21 (m, 1 H), 3.38 - 3.56 (m, 3 H), 3.60 - 3.81 (m, 3 H), 4.82 (d, J = 5.02 Hz, 1 H), 5.36 (s, 2 H), 6.73 - 6.95 (m, 2 H), 7.21 (d, J = 9.04 Hz, 2 H), 7.45 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.63 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.93분, [M+H] 368.1.

중간체 122G-I 및 122G-II: 5-(5-플루오로-1-(4-메톡시벤질)피페리딘-3-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 4B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 122E (0.03 g, 0.33 mmol) 및 DAST (0.43 mL, 3.27 mmol)로부터 출발하여 중간체 122G-I 및 122G-II를 수득하였다. 라세미체를 SFC [키랄팩 AD-H (250 x 4.6 mm) 5.0 마이크로미터; ACN + MaOH (1:1) 중 0.2% NH₄OH, 유량: 70.0 g/분, 온도: 30℃, UV 230 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 122G-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 5.0분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.120 g, 20.00%).

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.57 (s, 1 H), 1.72 (t, J = 12.22 Hz, 1 H), 2.00 (t, J = 11.06 Hz, 1 H), 2.12 (td, J = 9.91, 5.28 Hz, 1 H), 2.24 (s, 2 H), 2.26 - 2.32 (m, 1 H), 2.36 (s, 1 H), 2.82 (d, J = 11.23 Hz, 1 H), 3.12 - 3.36 (m, 1 H), 3.50 - 3.63 (m, 2 H), 3.80 (s, 3 H), 4.65 - 4.89 (m, 1 H), 5.23 (s, 2 H), 6.81 - 6.89 (m, 2 H), 7.15 - 7.24 (m, 2 H), 7.41 (d, J = 7.93 Hz, 1 H), 7.73 (d, J = 7.93 Hz, 1 H).

¹⁹F NMR (300 MHz, CDCl₃) δ ppm -180.45.

LCMS (방법-D): 체류 시간 3.09분, [M+H] 370.2.

중간체 122G-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 7.0분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.110 g, 18.23%).

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.55 (br. s., 1 H), 1.61 - 1.81 (m, 1 H), 2.00 (t, J = 11.29 Hz, 1 H), 2.06 - 2.17 (m, 1 H), 2.24 (s, 2 H), 2.27 (br. s., 1 H), 2.35 (s, 1 H), 2.82 (d, J = 11.04 Hz, 1 H), 3.18 (br. s., 1 H), 3.32 (br. s., 1 H, 3.46 - 3.65 (m, 2 H), 3.80 (s, 2 H), 4.58 - 4.92 (m, 1 H), 5.15 - 5.28 (m, 2 H), 6.73 - 6.94 (m, 2 H), 7.11 - 7.24 (m, 2 H), 7.41 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.73 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.91분, [M+H] 370.5.

¹⁹F NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm -180.46.

중간체 122-I:

AcOH (10 mL) 중 중간체 122G-I (0.12 g, 0.33 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 퍼징하였다. 생성된 반응 혼합물을 H₂ 분위기 하에 주위 온도에서 12시간 동안 20% Pd(OH)₂/C (0.01 g, 0.06 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 교반하고, 셀라이트®를 통해 여과하고, EtOH (10 mL)로 세척하고, 여과물을 감압 하에 농축시키고, 수성 NaHCO₃ (20 mL)으로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 122-I (0.08 g, 95.00%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.22 (br. s., 1 H), 2.29 (s, 3 H), 2.31 (s, 1 H), 2.34 (br. s., 1 H), 2.37 (s, 1 H), 2.43 (s, 1 H), 2.82 (d, J = 12.55 Hz, 1 H), 3.10 (t, J = 10.79 Hz, 1 H), 3.24 (d, J = 12.55 Hz, 2 H), 4.48 - 4.77 (m, 1 H), 5.39 (s, 2 H), 7.54 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), 7.66 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

¹⁹F NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm -175.06.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.32분, [M+H] 250.2.

중간체 123-I, II, III 및 IV: 5-(6-(1-히드록시에틸)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 123A: 5-(6-(히드록시메틸)피라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2B (7.02 g, 25.60 mmol) 및 (6-클로로피라진-2-일)메탄올 (3.70 g, 25.60 mmol)로부터 출발하여 중간체 123A(6.00 g, 87.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.98 - 1.23 (m, 2 H), 2.24 - 2.36 (m, 3 H), 5.49 (s, 2 H), 7.42 - 7.60 (m, 1 H), 7.70 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.77 (d, J = 6.53 Hz, 2 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.92분, [M+H] 257.0.

중간체 123B: 6-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피라진-2-카르브알데히드

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 123A (8.00 g, 31.20 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (26.50 g, 62.40 mmol)로부터 출발하여 중간체 123B (4.40 g, 55.40%)를 제조하였다.

¹H (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.42 (s, 3 H), 5.37 (s, 2 H), 7.69 (d, J = 7.75 Hz, 1 H), 7.94 (d, J = 7.75 Hz, 1 H), 8.99 (s, 1 H), 9.21 (s, 1 H), 10.12 - 10.29 (m, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.18분, [M+H] 255.0.

중간체 123C: 5-(6-(1-히드록시에틸)피라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 72A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 123B (1.00 g, 3.93 mmol)로부터 출발하여 중간체 123C (0.95 g, 89.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.47 (d, J = 6.53 Hz, 3 H), 2.22 - 2.39 (m, 3 H), 4.90 (dd, J = 6.53, 4.52 Hz, 1 H), 5.51 (s, 2 H), 5.69 (d, J = 4.80 Hz, 1 H), 7.73 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.83 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.82 (s, 2 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.78분, [M+H] 271.2.

중간체 123-I, II,III 및 IV:

중간체 2-I 및 2-II의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 123C (0.90 g, 3.33 mmol)로부터 출발하여 중간체 123-I를 제조하였다. 라세미체를 SFC [키랄팩 IC (250 x 4.6 mm) 5.0 마이크로미터; ACN + MeOH (1:1) 중 0.2% NH₄OH, 유량: 4.0 mL/분, 온도: 30℃, UV: 235 nm]에 의해 4 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 123-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 12.40분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.08 g, 8.69%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.01 - 1.11 (m, 3 H), 1.56-1.76 (m, 2 H), 2.15 - 2.27 (m, 3 H), 2.29 - 2.36 (m, 3 H), 2.82 (d, J = 11.74 Hz, 2 H), 3.17 (s, 1 H), 4.00 (dd, J = 9.78, 2.45 Hz, 1 H), 4.66 (br. s., 1 H), 5.28 - 5.44 (m, 2 H), 7.67 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.75 - 7.89 (m, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.51분, [M+H] 277.2.

중간체 123-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 12.80분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.03 g, 3.26%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 0.98 - 1.17 (m, 3 H), 1.33 (dt, J = 13.76, 7.18 Hz, 1 H), 2.05 (s, 1 H), 2.12 - 2.25 (m, 2 H), 2.25 - 2.37 (m, 4 H), 2.75 - 2.92 (m, 2 H), 3.82 - 4.13 (m, 2 H), 4.51 - 4.72 (m, 1 H), 5.39 (s, 2 H), 7.56 - 7.72 (m, 1 H), 7.82 (dd, J = 7.95, 4.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.51분, [M+H] 277.2.

중간체 123-III로서 나타내는 제3 용리 화합물 (체류 시간 15.0분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.18 g, 19.56%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.96 - 1.15 (m, 3 H), 2.10 - 2.37 (m, 4 H), 2.59 - 2.72 (m, 1 H), 2.84 (d, J = 13.05 Hz, 1 H), 2.96 (d, J = 11.04 Hz, 1 H), 3.18 (s, 3 H), 3.45 - 3.61 (m, 1 H), 4.04 (dd, J = 9.79, 2.76 Hz, 1 H), 4.46 (br. s., 1 H), 5.19 - 5.49 (m, 2 H), 7.67 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.74 - 7.89 (m, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.59분, [M+H] 277.2.

중간체 123-IV로서 나타내는 제4 용리 화합물 (체류 시간 17.47분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.15 g, 16.30%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.09 (d, J = 6.02 Hz, 3 H), 2.21 (d, J = 11.55 Hz, 1 H), 2.26 - 2.34 (m, 3 H), 2.57 - 2.70 (m, 1 H), 2.83 (d, J = 12.05 Hz, 1 H), 2.95 (d, J = 10.04 Hz, 1 H), 3.17 (s, 3 H), 3.51 (d, J = 4.52 Hz, 1 H), 3.91 - 4.18 (m, 1 H), 4.46 (d, J = 4.02 Hz, 1 H), 5.27 - 5.48 (m, 2 H), 7.66 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 8.03 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.59분, [M+H] 277.2.

중간체 124: 5-(6-(디플루오로메틸)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 124A: 5-(6-(디플루오로메틸)피라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 4B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 123B (0.10 g, 0.39 mmol) 및 DAST (0.10 mL, 0.78 mmol)로부터 출발하여 중간체 124A (0.07 g, 64.40%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.39 (s, 3 H), 5.35 (s, 2 H), 6.46 - 6.98 (m, 1 H), 7.65 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 7.91 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.79 - 9.07 (m, 2 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.16분, [M+H] 277.2.

중간체 124:

중간체 2-I 및 2-II의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 124A (0.28 g, 1.01 mmol)로부터 출발하여 중간체 124 (0.30 g, 조 물질)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.94 - 1.05 (m, 1 H), 1.84 - 1.95 (m, 3 H), 2.15 - 2.40 (m, 2 H), 2.74 - 3.00 (m, 2 H), 3.06 - 3.22 (m, 2 H), 4.00 - 4.22 (m, 1 H), 5.27 - 5.43 (m, 2 H), 5.67 - 6.02 (m, 1 H), 7.57 - 7.73 (m, 1 H), 7.80 (dd, J = 8.03, 4.02 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.87분, [M+H] 283.2.

중간체 125: 1-(5-메틸피라진-2-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

DMF (50 mL) 중 2-클로로-5-메틸피라진 (2.00 g, 15.56 mmol)의 용액에 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (2.24 g, 23.34 mmol)에 이어서 Cs₂CO₃ (10.14 g, 31.10 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 75 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉 - 80 g, 0-100% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 125 (1.10 g, 37.10%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.58 (s, 3 H), 8.36 (s, 1 H), 8.54 (s, 1 H), 9.14 (s, 1 H), 9.31 (s, 1 H), 9.98 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.25분, [M+H] 189.2.

중간체 126: 1-(6-메톡시피리미딘-4-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-클로로-6-메톡시피리미딘 (2.00 g, 13.84 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (1.99 g, 20.75 mmol)로부터 출발하여 중간체 126 (1.50 g, 53.10%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.03 (s, 3 H), 7.30 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 9.37 (s, 1 H), 9.99 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.60분, [M+H] 205.2.

중간체 127: 1-(2-메톡시피리미딘-5-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.76 g, 7.94 mmol) 및 5-브로모-2-메톡시피리미딘 (1.00 g, 5.29 mmol)로부터 출발하여 중간체 127 (0.20 g, 18.51%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.99 (s, 3 H), 8.36 (s, 1 H), 9.14 (s, 2 H), 9.22 (s, 1 H), 9.94 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.0분, [M+H] 205.2.

중간체 128: 1-(2-메틸피리미딘-5-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.08 g, 0.87 mmol) 및 5-브로모-2-메틸피리미딘 (0.10 g, 0.58 mmol)로부터 출발하여 중간체 128 (0.02 g, 18.39%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.62 - 2.89 (m, 3 H), 8.39 (s, 1 H), 9.25 (s, 2 H), 9.34 (s, 1 H), 9.95 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.71분, [M+H] 189.2.

중간체 129: 6-(3-포르밀이속사졸-5-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 129A: 에틸 5-(트리부틸스탄닐)이속사졸-3-카르복실레이트

디에틸 에테르 (15 mL) 중 에틸 2-클로로-2-(히드록시이미노)아세테이트 (0.72 g, 4.76 mmol)의 용액에 트리부틸스탄닐아세틸렌 (0.92 mL, 3.17 mmol)에 이어서 TEA (0.88 mL, 6.35 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, 디에틸 에테르 (50 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 증발시켜 중간체 129A (0.60 g, 43.90%)를 연황색 액체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ ppm 0.76 - 0.95 (m, 12 H), 1.02 - 1.11 (m, 2 H), 1.13 - 1.24 (m, 3 H), 1.24 - 1.35 (m, 5 H), 1.37 - 1.47 (m, 4 H), 1.48 - 1.72 (m, 4 H), 4.27 - 4.58 (m, 2 H), 6.80 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.76분, [M+H] 432.2.

중간체 129B: 에틸 5-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)이속사졸-3-카르복실레이트

디옥산 (10 mL) 중 중간체 129A (0.06 g, 1.27 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (0.25 g, 1.27 mmol)의 교반 용액을 20분 동안 질소로 탈기하였다. 교반 용액에 비스(디-tert-부틸(4-디메틸아미노페닐)포스핀)디클로로팔라듐(II) (0.09 g, 0.13 mmol)을 첨가하고, 10분 동안 다시 탈기하였다. 생성된 반응 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 가열한 다음, 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하였다. 여과물을 수득하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 12-14% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 129B (0.07 g, 21.45%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.39 - 1.52 (m, 3 H), 2.55 - 2.81 (m, 3 H), 4.35 - 4.67 (m, 2 H), 7.42 (s, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 8.72 - 8.96 (m, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 2.71분, [M+1] 258.2.

중간체 129C: 6-(3-(히드록시메틸)이속사졸-5-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 129B (0.02 g, 0.58 mmol) 및 NaBH₄ (0.09 mg, 2.33 mmol)로부터 출발하여 중간체 129C (0.01 g, 71.70%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.55 - 2.64 (m, 3 H), 4.60 (br. s., 2 H), 5.61 (d, J = 4.02 Hz, 1 H), 7.40 - 7.66 (m, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 8.96 - 9.10 (m, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.79분, [M+H] 216.2.

중간체 129:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 129C (0.01 g, 0.46 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (26.5 g, 62.40 mmol)로부터 출발하여 중간체 129 (0.08 g, 55.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.01 - 2.20 (m, 3 H), 7.39 (s, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 8.89 (s, 1 H), 10.25 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.75분, [M+H] 214.0.

중간체 130-I: 5-((2R,6S)-4-((1H-이미다졸-4-일)메틸)-6-메틸피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조-푸란-1(3H)-온

중간체 130A: tert-부틸 4-포르밀-1H-이미다졸-1-카르복실레이트

THF (20 mL) 중 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (2.00 g, 20.81 mmol)의 교반 용액에 DMAP (0.64 g, 5.20 mmol) 및 TEA (5.80 ml, 41.60 mmol)에 이어서 Boc-무수물 (5.80 mL, 24.98 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (50 mL)로 희석하였다. 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 130A (2.50 g, 49.00%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.59 (s, 9 H), 8.37-8.39 (d, J = 5.40 Hz, 2 H), 9.80 (s., 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.00분, [M-56] 141.2.

중간체 130B-I: tert-부틸 4-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1H-이미다졸-1-카르복실레이트

중간체 4의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 51-I (1.30 g, 5.28 mmol) 및 중간체 130A (1.24 g, 6.33 mmol)로부터 출발하여 중간체 130B-I (0.8 g, 22.39%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 0.60 - 0.62 (d, J = 6.00 Hz, 3 H), 1.59 (s, 9 H), 1.37-1.43 (m, 2 H), 2.29-2.31(m, 2 H), 2.66 (s, 3 H), 2.94 (s, 2 H), 3.69-3.71 (m, 1 H), 4.71 (s, 2 H), 6.8 (s, 1 H), 7.05-7.07 (m,1 H), 7.12-7.14 (m, 1 H), 7.25 (s, 1 H), 7.51(s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.17분, [M+1] 427.3.

중간체 130-I:

중간체 38-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 130B-I (0.70 g, 1.64 mmol)로부터 출발하여 중간체 130-I (0.65 g, 99.90%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.40 (d, J = 6.60 Hz, 3 H), 2.39 (s, 3 H), 2.82 (m, 2 H), 2.98 (m, 1 H), 3.48 (s, 2 H), 3.97 (s, 2 H), 4.9 (br. s., 1 H), 5.40-5.53 (m, 2 H), 7.75 (s, 1 H), 7.81 (d, J = 7.80 Hz, 1 H), 8.23 (d, J = 8.10 Hz, 1 H), 9.1 (s, 1 H), 10.20 (b.s, 2 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.51분, [M+H] 327.4.

중간체 13I-I: (R)-6-(4-(((2-아미노-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)아미노)메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 131A-I: (R)-2-(2-아미노-1-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)이소인돌린-1,3-디온

중간체 19-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 18C-I (0.20 g, 0.458 mmol) 및 TFA (2 mL, 26.0 mmol)로부터 출발하여 중간체 131A-I (0.15 g, 97.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.33 - 2.37 (m, 3 H), 3.16 (dd, J = 13.05, 5.02 Hz, 1 H), 3.66 (dd, J = 13.05, 9.54 Hz, 1 H), 5.35 - 5.41 (m, 2 H), 5.50 (dd, J = 9.79, 5.27 Hz, 1 H), 7.70 (s, 1 H), 7.76 - 7.81 (m, 1 H), 7.82 - 7.89 (m, 4 H). (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.81분, [M+H] 337.3.

중간체 131B-I: (R)-6-(4-(((2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)-2-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)에틸)아미노)메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 4의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 131A-I (1.7 g, 3.03 mmol) 및 6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴 (0.98 g, 3.03 mmol)로부터 출발하여 중간체 131B-I (1.1 g, 45.60%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.27 - 2.36 (m, 3 H), 2.57 (s, 3 H), 3.13 (dd, J = 12.30, 5.27 Hz, 1 H), 3.63 - 3.75 (m, 3 H), 5.37 (d, J = 3.01 Hz, 2 H), 5.67 (dd, J = 10.04, 5.02 Hz, 1 H), 7.68 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.75 (s, 1 H), 7.81 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.84 (s, 4 H), 7.94 (s, 1 H), 8.43 (s, 1 H), 8.80 (s, 1 H).

(1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.46분, [M+H] 533.5.

중간체 131-I:

중간체 18-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 131B-I (0.13 g, 0.12 mmol) 및 히드라진 수화물 (0.06 mL, 1.22 mmol)로부터 출발하여 중간체 131-I (0.03 g, 51.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 2.15-2.29 (m, 5 H), 2.32 - 2.38 (m, 1 H), 2.57 (s, 3 H), 2.60 - 2.70 (m, 1 H), 3.17 (s, 1 H), 3.59 - 3.76 (m, 2 H), 4.31 (dd, J = 8.56, 4.16 Hz, 1 H), 5.35 (s, 2 H), 7.63 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.76 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.84 (s, 1 H), 7.97 (s, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.83 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-R): 체류 시간 0.98분, [M+H] 403.1, 순도: 98.53%.

(방법-S): 체류 시간 1.28분, [M+H] 403.1, 순도: 98.81%.

키랄 순도 (방법- XVIII): 체류 시간 5.86분, 100% ee.

중간체 132-I: (R)-5-(4-((5-브로모피리미딘-2-일)메틸)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 132A: 5-브로모-2-(브로모메틸)피리미딘

CCl₄ (40 mL) 중 5-브로모-2-메틸피리미딘 (5.00 g, 28.90 mmol)의 교반 용액에 AIBN (0.48 g, 2.89 mmol) 및 N-브로모숙신이미드 (5.14 g, 28.9 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 48시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시켰다. 고체 침전물을 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-80 g, 0-15% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 132A (1.05 g, 12.98%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.68 (s, 2 H), 9.03 (s, 2 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.03분, [M+1] 252.9.

중간체 132-I:

THF (20 mL) 중 중간체 123A (0.38 g, 1.63 mmol) 및 중간체 2-I (0.41 g, 1.63 mmol)의 교반 용액에 DIPEA (0.69 mL, 3.97 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 2-4% MeOH/CHCl₃)에 의해 정제하여 중간체 132-I (0.32 g, 28.40%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.89 - 2.06 (m, 1 H), 2.20 - 2.36 (m, 4 H), 2.74 - 3.01 (m, 4 H), 3.74 (s, 2 H), 4.01 - 4.13 (m, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.64 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.78 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 8.96 (s, 2 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.17분, [M+H] 405.0.

중간체 133: 6-(4-포르밀-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메톡시-2-메틸니코티노니트릴

중간체 133A: 비스(2,4,6-트리클로로페닐) 말로네이트

말론산 (20.00 g, 192.00 mmol), 2,4,6-트리클로로페놀 (76.00 g, 384.00 mmol) 및 POCl₃의 혼합물 (50 mL)을 12시간 동안 환류하였다. 반응 혼합물을 70℃로 냉각시키고, 빙수에 부었다. 고체 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 133A (70.30 g, 67.20%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 3.91 - 4.17 (m, 2 H), 7.33 - 7.59 (m, 4 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 133B: 4-히드록시-2-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르보니트릴

디글림 (75 mL) 중 3-아미노아크릴로니트릴 (10.25 g, 151.00 mmol) 및 중간체 133A (70.30 g, 152.00 mmol)의 혼합물을 120℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, Et₂O (40 mL)에 붓고, 여과하였다. 침전물을 Et₂O (15 mL)로 세척하여 중간체 133B (13.50 g, 59.70%)를 암갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.25 - 2.41 (m, 3 H), 5.49 (s, 1 H), 11.85 (br. s., 2 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.32분, [M+1] 151.3.

중간체 133C: 4,6-디클로로-2-메틸니코티노니트릴

POCl₃ (6.64 ml, 71.3 mmol) 중 중간체 133B (10.70 g, 71.30 mmol)의 교반 용액을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (200 mL)로 희석하고, 고체 Na₂CO₃로 염기성화시키고, 에틸 아세테이트 (3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-120 g, 0-5% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 133C (8.50 g, 57.40%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.69 (s, 3 H), 8.02 (s, 1 H).

LCMS: (방법-I): 체류 시간 1.16분, [M+1] 188.3.

중간체 133D: 6-클로로-4-메톡시-2-메틸니코티노니트릴 및 중간체 133E: 4-클로로-6-메톡시-2-메틸니코티노니트릴

중간체 114A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 133C (8.50 g, 45.40 mmol)로부터 출발하여 중간체 133D 및 중간체 133E를 수득하였다. 중간체 133D로서 나타내는 제1 용리 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다 (5.50 g, 66.30%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.57 (s, 3 H), 4.02 (s, 3 H), 7.35 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.99분, [M+1] 183.3.

중간체 133E로서 나타내는 제2 용리 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다 (1.50 g, 18.07%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.62 (s, 3 H) 3.94 (s, 3 H) 7.17 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.24분, [M+1] 183.3.

중간체 133F: 6-(4-(히드록시메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-메톡시-2-메틸니코티노니트릴 및 중간체 및 133G: 6-(4-(히드록시메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-메톡시-2-메틸니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 133D (1.84 g, 10.09 mmol) 및 중간체 28A (1.00 g, 10.09 mmol)로부터 출발하여 중간체 133F 및 중간체 133G를 제조하였다. 중간체 133F로서 나타내는 제1 용리 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.37 g, 10.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.65 (s, 3 H), 4.11 (s, 3 H), 4.68 (d, J = 5.02 Hz, 2 H), 5.55 (t, J = 5.77 Hz, 1 H), 7.56 (s, 1 H), 8.17 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.75분, [M+1] 246.1.

중간체 133G로서 나타내는 제2 용리 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.27 g, 9.33%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.67 (s, 3 H), 4.14 (s, 3 H), 4.64 (d, J = 4.02 Hz, 2 H), 5.27 - 5.42 (m, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 8.68 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.80분, [M+1] 246.1.

중간체 133:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 133F (0.38 g, 1.53 mmol)로부터 출발하여 중간체 133 (0.35 g, 94.00%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.70 (s, 3 H), 4.15 (s, 3 H), 7.73 (s, 1 H), 8.79 (s, 1 H), 10.22 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.92분, [M+H] 244.1.

중간체 134: 6-(4-포르밀-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-메톡시-2-메틸니코티노니트릴

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 133G (0.28 g, 1.12 mmol)로부터 출발하여 중간체 134 (0.26 g, 95.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.70 (s, 3 H), 4.17 (s, 3 H), 7.84 (s, 1 H), 9.56 (s, 1 H), 10.14 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.00분, [M-H] 242.1.

중간체 135: 1-(4-메톡시-1,3,5-트리아진-2-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (1.00 g, 10.41 mmol) 및 2-클로로-4-메톡시-1,3,5-트리아진 (1.52 g, 10.41 mmol)로부터 출발하여 중간체 135 (0.70 g, 32.80%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.11 (s, 3 H), 8.39 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 9.47 (s, 1 H), 10.01 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.62분, [M+H] 206.2.

중간체 136-I: 5-((2R,6R)-6-(히드록시메틸)-1-메틸피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 136A-I: tert-부틸 (3R,5R)-3-(히드록시메틸)-4-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-카르복실레이트

MeOH (15 mL) 중 중간체 38D-I (0.15 g, 0.41 mmol) 및 파라포름알데히드 (0.05 g, 1.63 mmol)의 교반 용액에 소듐 시아노보로히드라이드 (0.51 g, 8.16 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, DCM (3 x 30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 0-2% MeOH/CHCl₃)에 의해 정제하여 중간체 136A-I (0.15 g, 96.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (d, J = 2.20 Hz, 9 H), 1.98 (d, J = 2.20 Hz, 3 H), 2.20 (br. s., 1 H), 2.33 (br. s., 3 H), 2.61 - 2.80 (m, 3 H), 3.17 (dd, J = 5.26, 3.06 Hz, 1 H), 3.46 (d, J = 10.52 Hz, 2 H), 3.73 (br. s., 2 H), 4.11 (d, J = 5.38 Hz, 1 H), 4.71 (br. s., 1 H), 5.43 (br. s., 1 H), 7.72 (br. s., 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.06분, [M+H] 377.3.

중간체 136-I:

중간체 38-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 136A-I (1.00 g, 10.41 mmol) 및 디옥산 중 4M HCl (5 mL, 20.00 mmol)로부터 출발하여 중간체 136-I (0.10 g, 91.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.98 (s, 3 H), 2.33 (s, 3 H), 2.55 (br. s., 1 H), 2.77 (t, J = 11.86 Hz, 1 H), 2.90 (t, J = 11.98 Hz, 1 H), 3.07 - 3.21 (m, 2 H), 3.36 - 3.53 (m, 2 H), 3.63 - 3.75 (m, 1 H), 3.91 (d, J = 10.27 Hz, 1 H), 4.85 (t, J = 5.14 Hz, 1 H), 5.31 - 5.48 (m, 2 H), 7.73 (s, 2 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.46분, [M+H] 277.2.

중간체 137: 1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-1H-이미다졸-4-카르보니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (1.00 g, 5.38 mmol) 및 1H-이미다졸-4-카르보니트릴로부터 출발하여 중간체 137 (0.40 g, 37.50%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm, 8.90 (s, 2 H), 9.26 (s, 1 H), 10.11 (s, 1 H), 10.14 (s, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 0.91분, [M+1] 200.05.

중간체 138: 2-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)피리미딘-5-카르브알데히드

DMSO (20 mL) 중 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (3.00 g, 21.05 mmol)의 교반 용액에 K₂CO₃ (7.27 g, 52.60 mmol)에 이어서 4-메틸-1H-이미다졸 (2.59 g, 31.6 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 주위 온도에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙냉수 (50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 80% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 138 (1.40 g, 34.30%)을 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.20 (s, 3 H), 7.72 (t, J = 1.2 Hz 1 H), 8.56 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 9.26 (s, 2 H) 10.09 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.07분, [M+H] 189.1.

중간체 139: 1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-3-메틸-1H-피라졸-4-카르보니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.50 g, 3.51 mmol) 및 4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴 (0.41 g, 3.86 mmol)로부터 출발하여 중간체 139 (0.30 g, 40.10%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.30 (d, J = 1.00 Hz, 3 H), 8.65 (s, 1 H), 8.90 (s, 1 H), 9.36 (s, 1 H), 10.15 (s, 1 H).

LCMS (방법-D), 체류 시간 1.54분, [M+H] 214.0.

중간체 140: 6-(4-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)니코틴알데히드

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모니코틴알데히드 (0.50 g, 2.69 mmol) 및 4-메틸-1H-1,2,3-트리아졸 (0.38 g, 4.03 mmol)로부터 출발하여 중간체 140 (0.25 g, 46.70%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.31 - 2.40 (m, 3 H), 8.30 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), 8.44 - 8.54 (m, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 9.10 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 10.15 (s, 1 H).

LCMS: (방법-D) 체류 시간: 1.119분, [M+1]: 189.2.

중간체 141: 1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-1H-1, 2, 4-트리아졸-3-카르보니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.50 g, 2.69 mmol) 및 1H-1,2,4-트리아졸-3-카르보니트릴 (0.38 g, 4.03 mmol)로부터 출발하여 중간체 141 (0.25 g, 46.70%)을 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.14 - 81.6 (d, J = 8.80 Hz, 1 H), 9.13 (s, 2 H), 10.18 (s, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.27분, [M+H] 201.2.

중간체 142: 1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-3-메톡시-1H-피라졸-4-카르보니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모니코틴알데히드 (1.00 g, 5.42 mmol) 및 3-메톡시-1H-피라졸-4-카르보니트릴 (0.80 g, 6.50 mmol)로부터 출발하여 중간체 142 (1.15 g, 93.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.07 (s, 3 H), 7.95 - 8.00 (m, 1 H), 8.45 -8.48 (m, 2 H), 9.37 (s, 1 H), 10.11 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.21분, [M+H] 229.0.

중간체 143: 3-에틸-1-(5-포르밀피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르보니트릴

중간체 143A: ((E)-2-(에톡시메틸렌)-3-옥소펜탄니트릴

문헌 절차 (Australian Journal of Chemistry, 44, 1263 - 1273, 1991)에 따라 합성하였다.

중간체 143B: 3-에틸-1H-피라졸-4-카르보니트릴

EtOH (50 mL) 중 중간체 143A (5.00 g, 32.60 mmol)의 용액에 히드라진 수화물 (5.12 mL, 163 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 희석하고, DCM 중 10% MeOH (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 조 생성물을 콤비플래쉬 (레디셉-40 g, 50% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 143B (3.10 g, 78.00%)를 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.23 (t, J = 7.6 Hz, 3 H), 2.73 (q, J = 7.6 Hz, 2 H), 8.16 (s, 1 H), 13.4 (br. s, 1 H).

LCMS (방법-L), 체류 시간 0.75분, [M+H] 122.1.

중간체 143:

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 143B (0.19 g, 1.61 mmol) 및 6-브로모니코틴알데히드 (0.25 g, 1.34 mmol)로부터 출발하여 중간체 143 (0.22 g, 68.70%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.31 (t, J = 7.6 Hz, 3 H), 2.82 (q, J = 7.6 Hz, 2 H), 8.10 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 8.47(dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1 H), 9.03 (s, 1 H), 9.43 (s, 1 H), 10.12 (s, 1 H).

LCMS (방법-L), 체류 시간 1.18분, [M+H] 227.1.

중간체 144: 1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-3-메톡시-1H-피라졸-4-카르보니트릴

THF (10 mL) 중 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.25 g, 1.75 mmol)의 교반 용액에 3-메톡시-1H-피라졸-4-카르보니트릴 (0.32 g, 2.63 mmol)에 이어서 K₂CO₃ (0.36 g, 2.63 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 0-50% EtOAc/ n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 144 (0.24 g, 60.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.06 (s, 3 H), 9.29 (s, 1 H), 9.31 (s, 1 H), 9.45 (s, 1 H), 10.13 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 145: 3-에틸-1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르보니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 143B (0.32 g, 2.63 mmol) 및 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.25 g, 1.75 mmol)로부터 출발하여 중간체 145 (0.23 g, 57.70%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.31 (t, J = 7.6 Hz, 3 H), 2.82 (q, J = 3.6 Hz, 2 H), 9.34 (s, 2 H), 9.49 (s, 1 H), 10.14 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.55분, [M+18+H] 246.1.

중간체 146: 3-시클로프로필-1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르보니트릴

중간체 146A: 3-시클로프로필-1H-피라졸-4-카르보니트릴

문헌 절차 (PCT 국제 출원, 2015052264)에 따라 합성하였다.

중간체 144의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.25 g, 1.75 mmol) 및 중간체 146A (0.35 g, 2.63 mmol)로부터 출발하여 중간체 146 (0.22 g, 51.90%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.99 - 1.06 (m, 2 H), 1.12 (dt, J = 8.53, 3.01 Hz, 2 H), 2.00 - 2.20 (m, 1 H), 9.23 - 9.36 (m, 2 H), 9.46 (s, 1 H), 10.14 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.70분, [M+H] 240.2.

중간체 147: 3-(디플루오로메톡시)-1-(5-포르밀피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르보니트릴

중간체 147A: 1-(5-포르밀피리딘-2-일)-3-옥소-2,3-디히드로-1H-피라졸-4-카르보니트릴

DCM (25 mL) 중 중간체 142 (0.60 g, 2.63 mmol)의 용액에 0℃에서 BBr₃ (0.75 mL, 7.89 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (50 mL)로 희석하였다. 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 147A (0.80 g, 조 물질)를 수득하였다.

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.57분, [M+H] 294.1.

중간체 147:

DMF (10 mL) 중 중간체 147A (0.80 g, 2.71 mmol)의 교반 용액에 소듐 클로로디플루오로아세테이트 (0.62 g, 4.07 mmol)에 이어서 Cs₂CO₃ (2.65 g, 8.13 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 물 (30 mL)로 희석하였다. 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 12 (0.25 g, 16.41%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.33 - 7.86 (m, 1 H), 7.93 - 8.13 (m, 1 H), 8.33 - 8.63 (m, 1 H), 9.03 (dd, J = 17.32, 1.76 Hz, 1 H), 9.29 - 9.59 (m, 1 H), 10.12 (d, J = 9.54 Hz, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 2.20분, [M+H] 265.2.

중간체 148: 3-(디플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르보니트릴

중간체 148A: (E)-3-(디메틸아미노)아크릴로니트릴

1,4-디옥산 (30 mL) 중 2-시아노아세트산 (5.00 g, 58.8 mmol)의 용액에 DMF-DMA (8.66 mL, 64.7 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시켜 중간체 148A (5.90 g 조 물질)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.73 (s, 6 H) 6.89 (s, 1 H) 6.93 (s, 1 H).

중간체 148B: (Z)-2-((디메틸아미노)메틸렌)-4,4-디플루오로-3-옥소부탄니트릴

톨루엔 (20 mL) 중 중간체 148A (2.00 g, 20.81 mmol)의 용액을 0℃에서 TEA (5.80 mL, 41.6 mmol)에 이어서 2,2-디플루오로아세트산 (1.99 g, 20.81 mmol)에 첨가하였다. 이어서, 톨루엔 중 20% 포스겐 (10 mL, 22.89 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, 포화 NaHCO₃ (120 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 148B (1.70 g, 46.90%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.35 (s, 6 H), 6.31 - 6.75 (m, 1 H), 8.02 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.62분, [M-H] 175.3.

중간체 148:

중간체 143B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 148B (1.70 g, 9.76 mmol) 및 히드라진 수화물 (1.53 mL, 48.80 mmol)로부터 출발하여 중간체 148 (0.65 g, 32.60%)을 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 6.72 - 7.44 (m, 1 H), 8.63 (s, 1 H), 9.11 - 9.87 (m, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.28분, [M-H] 141.9.

중간체 149-I: (R)-5-(4-((2-클로로피리미딘-5-일)메틸)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 143B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2-I (0.27 g, 1.17 mmol) 및 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.20 g, 1.40 mmol)로부터 출발하여 중간체 149-I (0.38 g, 80.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.25 - 2.39 (m, 4 H), 2.95 (d, J = 11.98 Hz, 3 H), 3.52 - 3.67 (m, 1 H), 4.17 - 4.39 (m, 1 H), 4.46 - 4.75 (m, 2 H), 4.85 (d, J = 10.03 Hz, 1 H), 5.31 - 5.50 (m, 2 H), 7.67 - 7.81 (m, 1 H), 7.92 (d, J = 6.60 Hz, 1 H), 8.59 - 8.77 (m, 1 H), 8.85 (br. s., 2 H), 9.66 - 9.89 (m, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.91분, [M+H] 359.0.

중간체 150: 6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-4-모르폴리노니코티노니트릴

중간체 150A: 4-클로로-6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴 및 중간체 150B: 6-클로로-4-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4,6-디클로로니코티노니트릴 (2.50 g, 14.45 mmol) 및 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (1.26 g, 13.14 mmol)로부터 출발하여 중간체 150A 및 150B를 제조하였다. 중간체 150A로서 나타내는 제1 용리 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.60 g, 19.63%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.27 (s, 1 H), 8.41 (s, 1 H), 9.12 (s, 1 H), 9.39 (s, 1 H), 9.99 (s, 1 H).

중간체 150B로서 나타내는 제2 용리 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.40 g, 13.09%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.33 (s, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 9.05 (s, 1 H), 9.43 (s, 1 H), 9.99 (s, 1 H).

중간체 150:

THF (10 mL) 중 중간체 150A (0.15 g, 0.65 mmol)의 용액에 K₂CO₃ (0.22 mg, 1.61 mmol)에 이어서 모르폴린 (0.14 g, 1.61 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 150 (0.05 g, 37.00%)을 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.19 - 2.35 (m, 2 H), 2.41 (br. s., 2 H), 3.49 (s, 2 H), 3.77 (d, J = 4.52 Hz, 2 H), 7.40 (s, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.97 (br. s., 1 H), 8.47 (s, 1 H), 8.61 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.89분, [M+H] 284.0.

중간체 151: 6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-4-(피롤리딘-1-일)니코티노니트릴

중간체 150의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 150A (0.15 g, 0.65 mmol) 및 피롤리딘 (0.12 g, 1.61 mmol)로부터 출발하여 중간체 151 (0.08 g, 46.40%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.99 (dt, J = 6.27, 3.39 Hz, 4 H), 3.69 (br. s., 4 H), 7.11 (s, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 8.49 (s, 1 H), 9.26 (s, 1 H), 9.95 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.09분, [M+1] 268.4.

중간체 152: 1-(5-포르밀피리딘-2-일)-1H-1,2,3-트리아졸-4-카르보니트릴

중간체 152A: 메틸 6-아지도니코티네이트

DMF (30 mL) 중 메틸 6-플루오로니코티네이트 (9.00 g, 58.00 mmol)의 교반 용액에 아지드화나트륨 (3.77 g, 58.0 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (300 mL)로 희석하고, 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 152A (6.80 g, 65.80%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.96 (s, 3 H), 8.20 (dd, J = 9.35, 1.53 Hz, 1 H), 8.30 (m, J = 0.98 Hz, 1 H), 9.89 (t, J = 1.25 Hz, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.73분, [M+H] 179.1.

중간체 152B: 메틸 6-(4-(히드록시메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)니코티네이트

DMF (50 mL) 및 MeOH (12 mL)의 혼합물 중 중간체 152A (3.50 g, 19.65 mmol) 및 프로프-2-인-1-올 (3.30 g, 58.90 mmol)의 교반 용액에 아이오딘화구리 (I) (0.37 g, 1.96 mmol)을 첨가하고, 교반을 90℃에서 4시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 중간체 152B (4.50 g, 98.00%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.93 (s, 3 H), 4.64 (d, J = 5.32 Hz, 2 H), 5.38 (t, J = 5.69 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 8.56 Hz, 1 H), 8.57 (dd, J = 8.56, 2.20 Hz, 1 H), 8.74 (s, 1 H), 9.08 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.71분, [M+H] 235.1.

중간체 152C: 메틸 6-(4-포르밀-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)니코티네이트

아세톤 (100 mL) 중 중간체 152B (4.50 g, 11.91 mmol)의 용액에 이산화망가니즈 (10.36 g, 119 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시키고, DCM (250 mL)으로 희석하고, 셀라이트®를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 증발시켜 중간체 152C (1.90 g, 68.70%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.98 (s, 3 H), 8.36 (dd, J = 8.53, 0.76 Hz, 1 H), 9.08 - 9.10 (m, 1 H), 9.13 (dd, J = 2.20, 0.73 Hz, 1 H), 9.61 (s, 1 H), 10.15 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 152D: 메틸 6-(4-시아노-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)니코티네이트

피리딘 (10 mL) 및 아세트산 무수물 (10 mL)의 혼합물 중 중간체 152C (1.90 g, 5.73 mmol)의 교반 용액에 히드록실아민 히드로클로라이드 (0.59 g, 8.59 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시키고, NaHCO₃ 용액 (50 mL)으로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 152D (1.00 g, 76.00%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.94 (s, 3 H), 8.34 (d, J = 8.50 Hz, 1 H), 8.65 (dd, J = 8.56, 2.20 Hz, 1 H), 9.12 (d, J = 1.77 Hz, 1 H), 9.90 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.10분, [M+H] 230.1.

중간체 152E: 1-(5-(히드록시메틸)피리딘-2-일)-1H-1,2,3-트리아졸-4-카르보니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 152D (1.00 g, 2.79 mmol) 및 NaBH₄ (0.53 g, 13.96 mmol)로부터 출발하여 중간체 152E (0.45 g, 46.50%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.61 - 4.67 (m, 2 H), 5.53 (t, J = 5.59 Hz, 1 H), 8.06 - 8.17 (m, 2 H), 8.58 (m, 1 H), 9.79 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.81분, [M+H] 202.1.

중간체 152:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 152E (0.42 g, 1.21 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.51 g, 1.21 mmol)으로부터 출발하여 중간체 152 (0.18 g, 74.60%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.39 (d, J = 8.41 Hz, 1 H), 8.60 (dd, J = 8.44, 2.16 Hz, 1 H), 9.16 (dd, J = 2.13, 0.69 Hz, 1 H), 9.92 (s, 1 H), 10.19 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 153-I 및 153-II: 4-메틸-5-(5-메틸피페라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온.

중간체 153A: 5-(5-메틸피라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2B (7.46 g, 27.2 mmol) 및 2-클로로-5-메틸피라진 (3.50 g, 27.20 mmol)으로부터 출발하여 중간체 153A (3.20 g, 49.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.32 (s, 3 H), 2.60 (s, 3 H), 5.50 (s, 2 H), 7.70 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 8.71 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 8.77 (d, J = 1.51 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.22분, [M+H] 241.1.

중간체 153-I 및 153-II:

중간체 2-I 및 2-II의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 153A (3.20 g, 13.32 mmol)로부터 출발하여 중간체 153-I 및 153-II를 제조하였다. 라세미체를 SFC [키랄팩 AD-H (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH + ACN (1:1) 중 0.2% NH₄OH, 유량: 1.2 mL/분. 온도: 30℃, UV: 235 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 153-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 3.1분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.60 g, 25.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.96 (d, J = 6.36 Hz, 3 H), 2.30 (s, 3 H), 2.31 - 2.46 (m, 2 H), 2.66 - 2.74 (m, 1 H), 2.86 (dd, J = 11.74, 2.69 Hz, 1 H), 2.95 (dd, J = 10.88, 2.81 Hz, 1 H), 3.91 (dd, J = 9.90, 2.81 Hz, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.65 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.77 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.56분, [M+H] 247.2.

키랄 순도 (방법-XXXII): 체류 시간 3.11분, 97.10% ee.

중간체 153-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 4.5분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.55 g, 23.00%).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.38분, [M+H] 247.2.

키랄 순도 (방법-XXXII): 체류 시간 4.82분, 90.00% ee.

중간체 154-I: 5-((2R,6S)-1-히드록시-6-메틸피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 154A-I: tert-부틸 (3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-카르복실레이트

DCM (20 mL) 중 중간체 51-I (0.20 g, 0.81 mmol)의 교반 용액에 TEA (0.17 mL, 1.22 mmol)에 이어서 Boc-무수물 (0.23 mL, 0.97 mmol)을 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 2시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 10% NaOH 용액 (40 mL)으로 희석하고, DCM 중 10% MeOH (2 x 250 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24g, 35% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 154A-I (0.20 g, 71.10%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.05 (s, 3 H), 1.48 (s, 9 H), 2.33 (s, 4 H), 2.75 - 2.83 (m, 2 H), 3.82 - 3.92 (br. s., 1 H), 3.94 - 4.01 (m, 2 H), 5.42 (s, 2 H), 7.68 - 7.73 (m, 1 H), 7.80 - 7.86 (m, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.42분, [M+H] 347.2.

중간체 154B-I: tert-부틸 (3S,5R)-4-히드록시-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-카르복실레이트.

DCM (15 mL) 중 중간체 154A-I (0.20 g, 0.57 mmol)의 교반 용액에 m-CPBA (0.10 g, 0.57 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, 잔류물을 정제용 HPLC [YMC 트리아트 (150 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; 물 + ACN (1:1) 중 0.1% NH₄OH, 유량: 1.2 mL/분. 온도: 30℃, UV: 235 nm]에 의해 정제하여 중간체 154B-I (0.06 mg, 26.30%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.14 (d, J = 6.02 Hz, 3 H), 1.43 (s, 9 H), 2.26 - 2.36 (m, 3 H), 2.68 (d, J = 2.01 Hz, 2 H), 2.72 (br. s., 1 H), 3.80 (d, J = 10.54 Hz, 2 H), 3.93 (br. s., 1 H), 5.42 (s, 2 H), 7.68 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 8.01 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.44분, [M+H] 363.4.

중간체 154-I:

DCM (5 mL) 중 중간체 154B-I (0.03 g, 0.08 mmol)의 교반 용액에 디옥산 중 4M HCl (0.04 mL, 0.16 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르 (100 mL) 중에 용해시키고, 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 154-I (0.02 g, 89.00%)를 수득하였다.

LCMS (방법-P) 체류 시간 0.45분, [M+H] 263.4.

화합물을 추가 정제 또는 특징화 없이 직접 후속 단계에 사용하였다.

중간체 155: 4-포르밀-4'-메틸-2-옥소-2H-[1,2'-비피리딘]-5'-카르보니트릴.

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-히드록시이소니코틴알데히드 (0.50 g, 4.06 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (0.80 g, 4.06 mmol)로부터 출발하여 중간체 155 (0.25 g, 25.10%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.57 (s, 3 H) 6.63 - 6.66 (m, 1 H), 7.21 (d, J = 1.60 Hz, 1 H), 8.05 (t, J = 5.2 Hz, 2 H), 9.03 (s, 1 H), 9.95 (s,1 H),

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.44분, [M-H] 238.0.

중간체 156: 6-(4-포르밀-3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 156A: 메틸 1-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (4.16 g, 21.11 mmol) 및 메틸 2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트 (3.00 g, 21.11 mmol)로부터 출발하여 중간체 156A (4.30 g, 79.00%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.54 (s, 3 H), 3.79 (s, 3 H), 7.89 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.82 (s, 1 H), 11.52 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.88분, [M+1] 259.1.

중간체 156B: 메틸 1-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트

중간체 93B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 156A (1.10 g, 4.26 mmol) 및 아이오도메탄 (2.65 mL, 42.6 mmol)으로부터 출발하여 중간체 156B (1.15 g, 99.00%)를 암홍색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.58 (s, 3 H), 3.43 (s, 3 H), 3.81 (s, 3 H), 8.01 (s, 1 H), 8.42 (s, 1 H), 8.86 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.07분, [M+1] 273.5.

중간체 156C: 6-(4-(히드록시메틸)-3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 156B (1.30 g, 4.77 mmol) 및 NaBH₄ (0.90 g, 23.87 mmol)로부터 출발하여 중간체 156C (0.80 g, 69.00%)를 암홍색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.25 (s, 3 H), 3.24 (s, 3 H), 4.36 (br.s, 2 H), 5.25 (br.s, 1 H), 7.28 (s, 1 H), 8.45 (s, 1 H), 8.79 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.69분, [M+1] 245.4.

중간체 156:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 156C (1.50 g, 6.20 mmol)로부터 출발하여 중간체 156 (0.070 g, 조 물질)을 백색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.92분, [M+1] 243.5.

중간체 157: 6-(3-(디플루오로메틸)-4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 157A: (3-(디플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일)메탄올

중간체 67A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 에틸 3-(디플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복실레이트 (2.50 g, 13.15 mmol) 및 DIBAL-H (39.40 mL, 39.40 mmol)로부터 출발하여 중간체 157A (1.40 g, 71.90%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.48 (d, J = 5.02 Hz, 2 H), 4.96 (t, J = 5.27 Hz, 1 H), 6.77 - 7.15 (m, 1 H), 7.72 (s, 1 H), 13.06 (br. s., 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.394분, [M+H] 149.2.

중간체 157B: 3-(디플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 152C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 157A (1.00 g, 6.75 mmol) 및 이산화망가니즈 (1.17 g, 13.50 mmol)로부터 출발하여 중간체 157B (1.00 g, 50.70%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.01 - 7.38 (m, 1 H), 8.62 (s, 1 H), 9.94 (s, 1 H), 13.94 (br. s., 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 0.54분, [M-H] 145.0.

¹⁹F NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm -112.87.

중간체 157:

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 157B (0.25 g, 1.71 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (0.34 g, 1.711 mmol)로부터 출발하여 중간체 157 (0.50 g, 43.50%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.66 (s, 3 H), 7.30 - 7.41 (m, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.99 (s, 1 H), 9.50 (s, 1 H), 10.04 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.48분, [M-H] 261.0.

중간체 158: 6-(3-시클로프로필-4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 158A: (3-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)메탄올

중간체 157A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 에틸 3-시클로프로필-1H-피라졸-4-카르복실레이트 (5.00 g, 27.7 mmol)로부터 출발하여 중간체 158A (2.60 g, 67.10%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.78 - 0.90 (m, 4 H), 1.78 - 1.94 (m, 1 H), 4.37 (d, J = 5.14 Hz, 2 H), 4.65 (t, J = 5.26 Hz, 1 H), 7.24 - 7.43 (m, 1 H), 12.16 (br. s., 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 0.54분, [M+H] 208.2.

중간체 158B: 3-시클로프로필-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 157B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 158A (2.00 g, 14.48 mmol)로부터 출발하여 중간체 158B (1.20 g, 39.30%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.78 - 0.90 (m, 4 H), 2.08 - 2.14 (m, 1 H), 7.98 - 8.19 (m, 1 H), 9.90 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.57분, [M+H] 137.1.

중간체 158:

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고중간체 158B (0.03 g, 1.83 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (0.04 g, 1.836 mmol)로부터 출발하여 중간체 158 (0.03 g, 52.90%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.93 - 1.12 (m, 4 H), 2.50 - 2.52 (m, 1 H), 2.60 (s, 3 H), 7.94 (s, 1 H), 8.91 (s, 1 H), 9.27 (s, 1 H), 10.05 (s, 1 H).

LCMS (방법-H): 체류 시간 2.72분, [M+H] 253.1.

중간체 159: 1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.10 g, 0.70 mmol) 및 4-(트리플루오로메틸)-1H-이미다졸 (0.10 g, 0.77 mmol)로부터 출발하여 중간체 159 (0.10 g, 58.90%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.62 (t, J = 1.60 Hz, 1 H), 8.87 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 9.36 (s, 2 H), 10.16 (s, 1 H).

LCMS (방법-J): 체류 시간 1.80분, [M+H] 243.0.

중간체 160: 2-(4-포르밀-2-메틸-1H-이미다졸-1-일)-4-메톡시피리미딘-5-카르보니트릴

ACN (25 mL) 중 2-메틸-1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.24 g, 2.21 mmol)의 교반 용액에 2-클로로-4-메톡시피리미딘-5-카르보니트릴 (0.25 g, 1.47 mmol)에 이어서 K₂CO₃ (0.20 g, 1.47 mmol)을 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 1시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하였다. 고체 침전물을 여과하고, EtOH (2 mL)로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 160 (0.15 g, 조 물질)을 수득하였다.

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.81분, [M+H] 244.1.

중간체 161: 6-(4-포르밀-1H-이미다졸-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.50 g, 5.20 mmol) 및 6-클로로-4-메톡시니코티노니트릴 (1.05 g, 6.24 mmol)로부터 출발하여 중간체 161 (0.30 g, 25.00%)을 제조하였다.

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.75분, [M+H] 229.1.

중간체 162: 3-(4-(트리메틸스탄닐)피리딘-2-일)옥사졸리딘-2-온

중간체 162A: 3-(4-브로모피리딘-2-일)옥사졸리딘-2-온

THF (50 mL) 중 4-브로모피리딘-2-아민 (5.00 g, 28.90 mmol)의 교반 용액에 2-클로로에틸 클로로포르메이트 (4.47 mL, 43.30 mmol) 및 K₂CO₃ (11.98 g, 87.00 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 70℃로 10시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 10-20% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 162A (1.40 g, 20.00%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.13 - 4.20 (m, 2 H), 4.44 - 4.50 (m, 2 H), 7.41 (dd, J = 5.27, 1.76 Hz, 1 H), 8.29 (d, J = 5.52 Hz, 1 H), 8.30 (d, J = 1.51 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D), 체류 시간 1.86분, [M+H] 243.

중간체 162:

중간체 23A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 162A (0.15 g, 0.62 mmol)로부터 출발하여 중간체 162 (0.15 g, 조 물질)을 제조하였다.

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.30분, [M+1] 328.2.

중간체 163-I 및 163-II: 5-(피페라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온.

중간체 163A: 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

문헌 절차 (PCT 국제 출원, 2012037132)에 따라 합성하였다.

중간체 163B: 5-(피라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 163A (20.44 g, 79.00 mmol) 및 2-클로로피라진 (9.00 g, 79.00 mmol)로부터 출발하여 중간체 163B (3.20 g, 49.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 5.51 (s, 2 H), 8.00 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.35 (dd, J = 8.03, 1.51 Hz, 1 H), 8.44 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 8.72 (d, J = 2.51 Hz, 1 H), 8.81 (dd, J = 2.51, 1.51 Hz, 1 H), 9.38 (d, J = 1.51 Hz, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.11분, [M+H] 213.0.

중간체 163-I 및 163-II:

중간체 2-I 및 2-II의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 163B (5.50 g, 25.90 mmol)로부터 출발하여 중간체 163-I 및 163-II를 제조하였다. 라세미체를 SFC [룩스 아밀로스-2 (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; EtOH 중 0.4% DEA, 유량: 3.0 g/분. 온도: 30℃, UV: 230 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 163-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 1.8분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.50 g, 16.70%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.43 (d, J = 11.55 Hz, 1 H), 2.61 - 2.69 (m, 1 H), 2.72 - 2.86 (m, 2 H), 2.92 (d, J = 11.55 Hz, 2 H), 3.81 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.58 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.78 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.39분, [M+H] 219.1.

키랄 순도 (방법-XVI): 체류 시간 3.11분, 95.80% ee.

중간체 163-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 2.40분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.70 g, 23.30%).

LCMS (방법-D) 체류 시간 0.53분, [M+H] 219.1.

키랄 순도 (방법-XVI): 체류 시간 4.82분, 90.00% ee.

중간체 164-I 및 164-II: 4-메틸-5-((2R)-6-메틸모르폴린-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 164A-I: 5-((1R)-1-히드록시-2-((2-히드록시프로필)아미노)에틸)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

EtOH (150 mL) 중 중간체 1-I (10.00 g, 52.60 mmol)의 교반 용액에 1-아미노프로판-2-올 (11.85 g, 158.0 mmol)을 첨가하고, 교반을 50℃에서 16시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 디에틸 에테르 (50 mL)로 희석하였다. 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 164A-I (8.00 g, 57.40%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.96 - 1.05 (m, 3 H), 1.98 (br. s., 1 H), 2.26 (s, 3 H), 2.31 - 2.43 (m, 1 H), 2.55 - 2.69 (m, 1 H), 3.47 (br. s., 1 H), 4.46 (br. s., 1 H), 4.97 (br. s., 1 H), 5.38 (d, J = 2.01 Hz, 2 H), 5.42 (br. s., 1 H), 7.65 - 7.70 (m, 2 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.43분, [M+H] 266.5.

중간체 164-I 및 164-II:

물 중 63% HBr (50 mL, 921 mmol) 중 중간체 164A-I (5.00 g, 18.85 mmol)의 교반 용액을 90℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 10% NaOH 용액 (100 mL)으로 희석하고, DCM 중 10% MeOH (2 x 250 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 부분입체이성질체를 SFC [키랄팩 AD-H (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% NH₄OH, 유량: 4.0 g/분. 온도: 30℃, UV: 235 nm]에 의해 개별 이성질체로 분리하였다. 중간체 164-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 6.20분)을 수득하였다 (0.80 g, 32.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.15 (d, J = 6.02 Hz, 3 H), 2.28 (s, 3 H), 2.97 - 3.09 (m, 2 H), 3.32 (br. s., 2 H), 3.83 (ddd, J = 10.42, 6.15, 2.51 Hz, 1 H), 4.89 (dd, J = 10.29, 2.26 Hz, 1 H), 5.40 (d, J = 3.51 Hz, 2 H), 7.61 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.68 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D) 체류 시간 0.83분, [M+H] 248.2.

키랄 순도 (XXXII): 체류 시간 6.00분, 99.00% ee.

중간체 164-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 7.80분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (1.00 g, 40.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.15 (d, J = 6.02 Hz, 3 H), 2.28 (s, 3 H), 2.97 - 3.09 (m, 2 H), 3.32 (br. s., 2 H), 3.83 (ddd, J = 10.42, 6.15, 2.51 Hz, 1 H), 4.89 (dd, J = 10.29, 2.26 Hz, 1 H), 5.40 (d, J = 3.51 Hz, 2 H), 7.61 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.68 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D) 체류 시간 0.80분, [M+H] 248.2.

키랄 순도 (방법-XXXII): 체류 시간 7.62분, 95.00% ee.

중간체 165: 5-(4-((5-브로모피리딘-2-일)메틸)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온.

중간체 4의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2-I (0.19 g, 0.81 mmol) 및 5-브로모피콜린알데히드 (0.15 g, 0.81 mmol)로부터 출발하여 중간체 165 (0.18 g, 15.54%)를 제조하였다.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.416분, [M+2H] 404.0.

중간체 166: 2-(1H-1,2,4-트리아졸-1-일)피리미딘-5-카르브알데히드.

중간체 144의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.50 g, 3.51 mmol) 및 4H-1,2,4-트리아졸 (0.266 g, 3.86 mmol)로부터 출발하여 중간체 166 (0.30 g, 33.20%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.42 (s, 1 H), 9.38 (s, 2 H), 9.58 (s, 1 H), 10.16 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.43분, [M+H] 174.2.

중간체 167: 1-(5-포르밀피리딘-2-일)-4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모니코틴알데히드 (0.30 g, 1.61 mmol) 및 4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴 (0.19 g, 1.77 mmol)로부터 출발하여 중간체 167 (1.15 g, 52.10%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.25 (d, J = 1.00 Hz, 3 H), 8.15 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), 8.45 - 8.50 (m, 1 H), 8.83 (s, 1 H), 9.03 - 9.07 (m, 1 H), 10.14 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.164분, [M+H] 213.2.

중간체 168: 1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴

중간체 144의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.50 g, 3.51 mmol) 및 4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴 (0.41 g, 3.86 mmol)로부터 출발하여 중간체 168 (0.30 g, 40.10%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.23 (d, J = 1.00 Hz, 3 H), 8.85 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 8.90 (s, 1 H), 9.36 (s, 1 H), 10.15 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.54분, [M+H] 214.0.

중간체 169: 1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴

중간체 144의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.10 g, 0.70 mmol) 및 4-(트리플루오로메틸)-1H-이미다졸 (0.11 g, 0.77 mmol)로부터 출발하여 중간체 169 (0.10 g, 58.90%)를 제조하였다.

LCMS (방법-J): 체류 시간 1.80분, [M+H] 243.0.

중간체 170: 1-(5-포르밀피리딘-2-일)-4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모니코틴알데히드 (0.3 g, 1.61 mmol) 및 4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴 (0.19 g, 1.77 mmol)로부터 출발하여 중간체 170 (0.20 g, 58.40%)을 제조하였다.

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.16분, [M+H] 213.2.

중간체 171: 1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴

중간체 144의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴 (0.413 g, 3.86 mmol) 중 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.50 g, 3.51 mmol)로부터 출발하여 중간체 171 (0.30, 40.10%)을 제조하였다.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.54분, [M+H] 214.0.

중간체 172: 1-(5-포르밀피리미딘-2-일)-4-메틸-1H-피라졸-3-카르보니트릴

중간체 144의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 2-클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (0.10 g, 0.70 mmol) 및 4-(트리플루오로메틸)-1H-이미다졸 (0.10 g, 0.77 mmol)로부터 출발하여 중간체 172 (0.10 g, 58.90%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.62 (t, J = 1.6 Hz, 1 H), 8.87 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 9.36 (s, 2 H), 10.16 (s, 1 H).

LCMS (방법-J), 체류 시간 1.80분, [M+H] 243.0.

중간체 173: 6-(1H-1,2,4-트리아졸-1-일)니코틴알데히드.

중간체 138의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-브로모니코틴알데히드 (0.50 g, 2.69 mmol) 및 4H-1,2,4-트리아졸 (0.204 g, 2.96 mmol)로부터 출발하여 중간체 173 (0.30 g, 49.30%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.07 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 8.41 (br. s., 1 H), 8.51 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 9.07 (br. s., 1 H), 9.52 (br. s., 1 H), 10.15 (br. s., 1 H),

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.62분, [M+H] 175.2.

중간체 174-I: (R)-5-(4-((6-브로모피리딘-3-일)메틸)피페라진-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 4의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2-I (0.18 g, 0.77 mmol) 및 5-브로모피콜린알데히드 (0.12 g, 0.64 mmol)로부터 출발하여 중간체 174-I (0.22 g, 24.50%)를 제조하였다.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.02분, [M+2H] 404.4.

중간체 175: N-(3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-4-일)아세트아미드

중간체 175A: tert-부틸 4-아미노-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-카르복실레이트

MeOH (20 mL) 중 중간체 4A (0.20 g, 0.58 mmol)의 교반 용액에 아세트산암모늄 (0.13 g, 1.74 mmol)을 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 12시간 동안 계속하였다. 생성된 용액에, NaCNBH₄ (0.07 g, 1.16 mmol)을 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 8시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, NaHCO₃ (50 mL)의 포화 용액으로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르 (30 mL)에 녹이고, 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 175A (0.201 g, 99.10%)를 수득하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.91분, [M-H] 291.5.

화합물을 추가 정제 또는 특징화 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

중간체 175B: tert-부틸 4-아세트아미도-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-카르복실레이트

DCM (10 mL) 중 중간체 175A (0.18 g, 0.52 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 TEA (0.22 mL, 1.56 mmol)에 이어서 아세틸 클로라이드 (0.06 mL, 0.78 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고 DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르 (20 mL)에 녹이고, 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 175B (0.20 g, 99.00%)를 황색 고체로서 수득하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.19분, [M+1] 387.4.

중간체 175:

중간체 19-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 175B (0.15 g, 0.38 mmol) 및 TFA(0.300 mL, 3.86 mmol)로부터 출발하여 중간체 175 (0.160 g, 조 물질)를 황색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.38분, [M+1] 289.6.

중간체 176: 1-(6-메틸-4-(2-옥소옥사졸리딘-3-일)피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 176A: 1-(4-아미노-6-메틸피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (1.54 g, 16.04 mmol) 및 2-브로모-6-메틸피리딘-4-아민 (3.00 g, 16.04 mmol)으로부터 출발하여 중간체 176 (2.10 g, 64.70%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.31 (s, 3 H), 6.21 - 6.26 (m, 2 H), 6.97 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 7.62 (s, 1 H), 8.19 (s, 1 H), 9.15 (s, 1 H), 9.94 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.74분, [M+1] 203.4.

중간체 176B: 2-클로로에틸 (2-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-6-메틸피리딘-4-일)카르바메이트

중간체 76A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 176A (1.00 g, 4.95 mmol) 및 2-클로로에틸 카르보노클로리데이트 (0.70 mL, 6.43 mmol)로부터 출발하여 중간체 176B (1.10 g, 72.10%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.52 (s, 3 H), 3.90 - 3.93 (m, 2 H), 4.41 - 4.43 (m, 2 H), 7.33 (s, 1 H), 8.03 (s, 1 H), 8.26 (s, 1 H), 9.24 (s, 1 H), 9.96 (s, 1 H), 10.59 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.14분, [M+1] 309.2.

중간체 176:

중간체 76B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 176B (1.00 g, 3.24 mmol) 및 NaH (0.26 g, 6.48 mmol)로부터 출발하여 중간체 176 (0.60 g, 68.00%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.54 (s, 3 H), 4.14 (dd, J = 9.04, 7.03 Hz, 2 H), 4.52 (dd, J = 9.04, 7.03 Hz, 2 H), 7.35 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 8.20 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 8.29 (s, 1 H), 9.28 (s, 1 H), 9.97 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.90분, [M+1] 273.1.

중간체 177: 1-(6-(2-옥소옥사졸리딘-3-일)피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 177A: 1-(6-아미노피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (2.00 g, 20.81 mmol) 및 6-브로모피리딘-2-아민 (3.60 g, 20.81 mmol)으로부터 출발하여 중간체 177A (2.00 g, 51.10% )를 제조하였다.

LCMS (방법-I) 체류 시간 0.72분, [M+H] 189.4.

중간체 177B: 2-클로로에틸 (6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)피리딘-2-일)카르바메이트

중간체 76A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 177A (0.05 g, 0.27 mmol) 및 2-클로로에틸 카르보노클로리데이트 (0.04 mL, 0.35 mmol)로부터 출발하여 중간체 177B (0.09 g, 60.00%)를 황색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.06분, [M+1] 295.4.

중간체 177:

중간체 76B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 177B (0.08 g, 0.27 mmol) 및 NaH (0.02 g, 0.41 mmol)로부터 출발하여 중간체 177B (0.01 g, 99.90%)를 황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.20 - 4.41 (m, 2 H), 4.43 - 4.68 (m, 2 H), 7.69 (dd, J = 6.53, 2.01 Hz, 1 H), 7.87 - 8.16 (m, 2 H), 8.33 (s, 1 H), 9.32 (s, 1 H), 9.98 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.92분, [M+1] 259.2.

중간체 178: N-(6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)피리딘-2-일)-N-메틸메탄술폰아미드

중간체 178A: N-(6-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)피리딘-2-일)메탄술폰아미드

중간체 59의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 177A (0.40 g, 2.13 mmol) 및 메실-Cl (0.23 mL, 2.76 mmol)로부터 출발하여 중간체 178A (0.52 g 92.00%)를 황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.76 (s, 3 H), 7.82 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 8.14 (d, J = 9.04 Hz, 1 H), 8.25 - 8.32 (m, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 9.40 (s, 1 H), 10.00 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.94분, [M-1] 265.2.

중간체 178:

중간체 93B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 178A (0.20 g, 0.75 mmol) 및 아이오도메탄 (1.07 g, 7.51 mmol)로부터 출발하여 중간체 178 (0.150 g, 71.20%)을 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.10 (s, 3 H), 3.29 (s, 3 H), 7.48 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.77 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.08 (t, J = 8.03 Hz, 1 H), 8.34 (s, 1 H), 9.28 (s, 1 H), 10.00 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.93분, [M+1] 281.1.

중간체 179: 1-(4-(1,1-디옥시도이소티아졸리딘-2-일)-6-메틸피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 179A: 3-클로로-N-((3-클로로프로필)술포닐)-N-(2-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-6-메틸피리딘-4-일)프로판-1-술폰아미드

중간체 59의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 176A (0.40 g, 1.97 mmol) 및 3-클로로프로판-1-술포닐 클로라이드 (0.70 g, 3.96 mmol)로부터 출발하여 중간체 179A (0.85 g, 53.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.17 (t, J = 7.28 Hz, 4 H), 2.64 (s, 3 H), 3.71 - 3.82 (m, 4 H), 3.86 - 3.96 (m, 4 H), 7.62 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 7.88 (s, 1 H), 8.36 (s, 1 H), 9.35 (s, 1 H), 10.00 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.69분, [M+2H] 485.2.

중간체 179B: 3-클로로-N-(2-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)-6-메틸피리딘-4-일)프로판-1-술폰아미드

THF (15 mL) 중 중간체 179A (0.85 g, 1.76 mmol)의 용액에 NaH (0.141 g, 3.52 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 용액 (50 mL)으로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르 (30 mL)로 연화처리하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 179B (0.50 g, 83.00%)를 황색 고체로서 수득하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.11분, [M+H] 343.2.

중간체 179:

중간체 76B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 179B (0.50 g, 1.46 mmol) 및 NaH (0.12 g, 2.92 mmol)로부터 출발하여 중간체 179 (0.35 g, 79.54%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.40 - 2.49 (m, 3 H), 3.60 - 3.69 (m, 3 H), 3.83 - 3.92 (m, 3 H), 7.00 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 7.62 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 9.27 (s, 1 H), 9.97 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.13분, [M+H] 307.2.

중간체 180: (1-(2-메톡시피리딘-4-일)-5-옥소피롤리딘-3-일)메틸 메탄술포네이트

중간체 180A: 메틸 1-(2-메톡시피리딘-4-일)-5-옥소피롤리딘-3-카르복실레이트

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-브로모-2-메톡시피리딘 (1.31 g, 6.99 mmol) 및 메틸 5-옥소피롤리딘-3-카르복실레이트 (1.00 g, 6.99 mmol)로부터 출발하여 중간체 180A (1.50 g, 86.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.71 - 2.90 (m, 2 H), 3.69 (s, 3 H), 3.84 (s, 3 H), 3.97 (dd, J = 10.04, 5.52 Hz, 2 H), 4.03 - 4.13 (m, 1 H), 7.05 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 7.36 (dd, J = 6.02, 2.01 Hz, 1 H), 8.09 (d, J = 5.52 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I) 체류 시간 0.90분, [M+H] 251.4.

중간체 180B: 4-(히드록시메틸)-1-(2-메톡시피리딘-4-일)피롤리딘-2-온

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 180A (1.00 g, 4.00 mmol) 및 NaBH₄ (0.45 g, 11.99 mmol)로부터 출발하여 중간체 180B (0.85 g, 96.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 2.48 (dd, J = 16.56, 6.02 Hz, 1 H), 2.61 - 2.80 (m, 2 H), 3.55 - 3.69 (m, 2 H), 3.73 (dd, J = 10.04, 5.52 Hz, 1 H), 3.91 (s, 3 H), 4.00 (dd, J = 9.54, 8.03 Hz, 1 H), 7.14 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 7.25 - 7.47 (m, 1 H), 8.06 (d, J = 6.02 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-I ): 체류 시간 0.58분, [M+H] 223.3.

중간체 180:

중간체 59의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 180B (0.40 g, 1.80 mmol) 및 메실 클로라이드 (0.17 mL, 2.16 mmol)로부터 출발하여 중간체 180B (0.45 g, 83.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.44 (dd, J = 17.32, 6.78 Hz, 1 H), 2.69 - 2.80 (m, 1 H), 2.83 - 2.95 (m, 1 H), 3.02 - 3.14 (m, 1 H), 3.16 - 3.26 (m, 3 H), 3.64 (dd, J = 10.04, 6.02 Hz, 1 H), 3.84 (s, 3 H), 3.98 (dd, J = 10.04, 8.03 Hz, 1 H), 4.12 - 4.44 (m, 1 H), 7.05 (d, J = 1.51 Hz, 1 H), 7.24 - 7.54 (m, 1 H), 8.10 (d, J = 5.52 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.84분, [M+H] 301.3.

중간체 I81: (R)-5-(6,6-디메틸모르폴린-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 I81A-I: (R)-5-(1-히드록시-2-((2-히드록시-2-메틸프로필)아미노)에틸)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 164A-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 1-I (1.00 g, 5.26 mmol) 및 1-아미노-2-메틸프로판-2-올 (1.00 g, 11.22 mmol)로부터 출발하여 중간체 181A-I (1.00, 34.70%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.98 - 1.19 (m, 6 H), 2.21 - 2.32 (s, 3 H), 2.60 - 2.67 (m, 2 H), 2.70 - 2.75 (m, 2 H), 4.14 - 4.31 (m, 1 H), 4.97 - 5.12 (m, 1 H), 5.34 - 5.40 (m, 2 H), 5.42 - 5.48 (m,1 H), 7.53-7.80 (m, 2 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.57분, [M+H] 280.0.

중간체 I81B-I: (R)-5-(2-(벤질(2-히드록시-2-메틸프로필)아미노)-1-히드록시에틸)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 4의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 181A-I (2.00 g, 7.16 mmol) 및 벤즈알데히드 (0.91 g, 8.59 mmol)로부터 출발하여 중간체 181B-I (1.30 g, 38.30%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.78분, [M+1] 370.

중간체 I81C-I: (R)-5-(4-벤질-6,6-디메틸모르폴린-2-일)-4-메틸이소벤조푸란-1(3H)-온

중간체 164-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 181B-I (1.30 g, 3.52 mmol)로부터 출발하여 중간체 181C-I (0.45 g, 26.90%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.20 (s, 3 H), 1.43 (s, 3 H), 1.75 - 1.86 (m, 1 H), 1.88 - 2.01 (m, 1 H), 2.23 (s, 3 H), 2.56 - 2.70 (m, 1 H), 2.75 - 2.97 (m, 1 H), 3.43 - 3.66 (m, 2 H), 4.97 - 5.15 (m, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.33 - 7.35 (m, 5 H), 7.61 - 7.65 (m, 2 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.67분, [M+1] 352.4.

중간체 181-I:

MeOH (40 mL) 및 THF(10 mL)의 혼합물 중 중간체 181B-I (0.40 g, 1.14 mmol)의 용액을 질소로 2분 동안 퍼징하였다. 10% Pd/C (0.100 g, 0.09 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 H₂ 분위기 하에 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르 (50 mL)로 연화처리하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 181-I (0.350 g, 99.00%)를 연갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.17 (s, 3 H), 1.36 (s, 3 H), 2.35 (s, 3 H), 2.50 - 2.57 (m, 2 H), 2.68 - 2.71 (m, 1 H), 2.95 (dd, J = 12.80, 2.26 Hz, 1 H), 4.97 (dd, J = 10.54, 2.51 Hz, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 7.50 - 7.80 (m, 2 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.81분, [M+1] 262.4.

중간체 182: 1-(5-시아노-4-메톡시피리딘-2-일)-4-포르밀-N-메틸-1H-피라졸-3-카르복스아미드

중간체 182A: 에틸 1-(5-시아노-4-메톡시피리딘-2-일)-4-포르밀-1H-피라졸-3-카르복실레이트

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-클로로-4-메톡시니코티노니트릴 (1.00 g, 5.93 mmol) 및 에틸 4-포르밀-1H-피라졸-3-카르복실레이트 (1.49 g, 8.90 mmol)로부터 출발하여 중간체 182A (0.50 g, 21.05%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.35 (d, J = 7.60 Hz, 3 H), 4.18 (s, 3 H), 4.43 (q, J = 7.20 Hz, 2 H), 7.79 (s, 1 H), 8.88 (s, 1 H), 9.19 (s, 1 H), 10.26 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.11분, [M+1] 301.4.

중간체 182B: 1-(5-시아노-4-메톡시피리딘-2-일)-4-포르밀-1H-피라졸-3-카르복실산

물 (5 mL) 및 THF (15 mL)의 혼합물 중 중간체 182A (0.30 g, 0.99 mmol)의 용액에 LiOH (0.48 g, 1.99 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 주위 온도에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 물 (30 mL)로 희석하고, 1N HCl 용액으로 산성화시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 182B (0.30 g, 56.30%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.11 (s, 3 H), 7.65 (s, 1 H), 8.73 (s, 1 H), 9.09 (s, 1 H), (1 H 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.03분, [M+1] 273.1.

중간체 182:

DMF (10 mL) 중 중간체 182B (0.10 g, 0.37 mmol)의 교반 용액에 HATU (280 mg, 0.74 mmol), 메탄아민 HCl (0.12 g, 1.84 mmol)에 이어서 TEA (0.26 ml, 1.84 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 182 (0.20 g, 51.50%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.87분, [M+1] 286.4.

중간체 183: 1-(5-시아노-4-메톡시피리딘-2-일)-4-포르밀-1H-피라졸-3-카르복스아미드

중간체 182의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 182B (0.20 g, 0.74 mmol) 및 염화암모늄 (0.39 g, 7.35 mmol)로부터 출발하여 중간체 183 (0.30 g, 15.05%)을 갈색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.78분, [M+1] 272.

중간체 184: 6-(4-포르밀-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-(메톡시-d3)니코티노니트릴

중간체 184A: 6-클로로-4-(메톡시-d3) 니코티노니트릴

THF (10 mL) 중 CD₃OD (0.20 mL, 5.78 mmol) 및 NaH (0.116 g, 2.89 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 DMA (20 mL) 중 4,6-디클로로니코티노니트릴 (1.00 g, 5.78 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 75 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 0-100% EtOAc/n-헥산))에 의해 정제하여 중간체 184A (0.25 g, 25.20%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.26 (s, 1 H), 8.48 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.09분, [M+1] 173.1.

중간체 184B: 6-(4-(히드록시메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-4-(메톡시-d3)니코티노니트릴 및 중간체 184C: 6-(4-(히드록시메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-4-(메톡시-d3)니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 184A (0.22 g, 1.28 mmol) 및 중간체 28A (0.25 g, 2.56 mmol)로부터 출발하여 중간체 184B 및 184C를 제조하였다. 중간체 184B로서 나타내는 제1 용리 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.12 g, 40.00%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.68 (s, 2 H), 5.50 (s, 1 H), 7.71 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.85 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.70분, [M+1] 235.5.

중간체 184C로서 나타내는 제2 용리 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.06 g, 19.98%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.63 (s, 2 H), 5.40 (s, 1 H), 7.89 (s, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.90 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.70분, [M+1] 235.5.

중간체 184:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 184B (0.05 g, 0.21 mm) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.18 g, 0.43 mmol)으로부터 출발하여 중간체 184 (0.05 g, 99.90%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.01 (s, 1 H), 8.98 (s, 1 H), 9.61 (s, 1 H), 10.15 (s, 1 H).

LCMS: 화합물을 잘 이온화되지 않았다.

중간체 185: 6-(5-메틸-1,2,4-옥사디아졸-3-일)니코틴알데히드

중간체 185A: 메틸 6-((((1-아미노에틸)아미노)옥시)카르보닐)니코티네이트

DCM (30 mL) 중 5-(메톡시카르보닐)피콜린산 (0.60 g, 3.31 mmol)의 용액에 옥살릴 클로라이드 (0.580 mL, 6.62 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 THF (20 mL) 중에 재용해시키고, TEA (2.31 ml, 16.56 mmol)에 이어서 (E)-N'-히드록시아세트이미드아미드 (0.37 g, 4.97 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 0-100% EtOAc/n-헥산))에 의해 정제하여 중간체 185A (0.18 g, 22.72%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.83 (s, 3 H), 3.93 (s, 3 H), 6.47 (br.s, 2 H), 8.29 (dd, J = 0.80, 8.40 Hz, 1 H), 8.42 (dd, J = 2.00, 8.00 Hz, 1 H), 9.17 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.61분, [M+1] 238.1.

중간체 185B: 메틸 6-(3-메틸-1,2,4-옥사디아졸-5-일)니코티네이트

THF (15 mL) 중 중간체 185 (0.15 g, 0.63 mmol)의 교반 용액에 THF 중 TBAF의 1M 용액 (1.26 mL, 1.26 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-12 g, 0-40% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 185B (0.14 g, 100%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.59 (s, 3 H), 4.01 (s, 3 H), 8.26 (dd, J = 0.80, 8.40 Hz, 1 H), 8.49 (dd, J = 2.00, 8.00 Hz, 1 H), 9.38 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.93분, [M+1] 220.1.

중간체 185C: (6-(3-메틸-1,2,4-옥사디아졸-5-일)피리딘-3-일)메탄올

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 185B (0.12 g, 0.55 mmol) 및 NaBH₄ (0.04 g, 1.00 mmol)로부터 출발하여 중간체 185C (0.10 g, 96.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.44 (s, 3 H), 4.65 (d, J = 5.60, 2 H), 5.54 (d, J = 5.60 Hz, 1 H), 7.98 (d, J = 6.80 Hz, 1 H), 8.19 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 8.74 (s, 1 H).

LCMS (방법-I) 체류 시간 0.74분, [M-H] 192.2.

중간체 185:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 185C (0.07 g, 0.37 mm) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.31 g, 0.73 mmol)으로부터 출발하여 중간체 185 (0.10 g, 39.00%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-L): 체류 시간 0.78분, [M+1] 190.0.

중간체 186A 및 186B: tert-부틸 (5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-3-일)카르바메이트

중간체 186C: tert-부틸 (5-브로모피리딘-3-일)카르바메이트

톨루엔 (25 mL) 중 5-브로모니코틴산 HCl 염 (4.00 g, 19.80 mmol)의 교반 용액에 TEA (13.80 mL, 99 mmol)에 이어서 디페닐포스포릴 아지드 (6.54 g, 23.76 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 t-부탄올 (25 mL)의 첨가 후 100℃에서 18시간 동안 가열하였다. 생성된 반응 혼합물을 진공 하에 증발시키고, 10% NaHCO₃ 용액으로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 40-80% EtOAc/n-헥산))에 의해 정제하여 중간체 186C (4.00 g, 74.00%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.49 (s, 9 H), 8.17 (s, 1 H), 8.29 (d, J = 1.60 Hz, 1 H), 8.56 (d, J = 1.60 Hz, 1 H), 9.82 (s, 1 H).

LCMS (방법-L): 체류 시간 1.32분, [M+2] 274.7.

중간체 186D: tert-부틸 (5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피리딘-3-일)카르바메이트

디옥산 (100 mL) 및 물 (10 mL)의 혼합물 중 중간체 186C (4.00 g, 14.65 mmol)의 교반 용액에 중간체 2B (4.82 g, 17.57 mmol) 및 Cs₂CO₃ (9.54 g, 29.3 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 퍼징하고, Pd(Ph₃P)₄ (0.86 g, 0.73 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 18시간 동안 가열하고, 주위 온도로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 0-40% EtOAc/n-헥산))에 의해 정제하여 중간체 186D (5.00 g, 94.00%)를 담갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.49 (s, 9 H), 2.22 (s, 3 H), 5.47 (s, 2 H), 7.47 (d, J = 7.60 Hz, 1 H), 7.76 (d, J = 7.60 Hz, 1 H), 7.93(d, J = 2.00 Hz, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 8.65 (s, 1 H), (1 H 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.12분, [M+1] 341.5.

중간체 186A 및 186B:

중간체 118A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 186D (5.00 g, 14.69 mmol)로부터 출발하여 중간체 186을 갈색 고체로서 제조하였다. 2종의 부분입체이성질체를 SFC [키랄팩 ADH (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% NH₄OH, 유량:1.2 mL/분, 온도: 27℃, UV: 210 nm]로 분리하였다. 중간체 186A: Dia-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 4.08분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.15 g, 2.96%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.38 (s, 9 H), 1.45 -1.50 (m, 1 H), 1.81 - 1.96 (m, 1 H), 2.33 (s, 3 H), 2.40 - 2.45 (m, 2 H), 2.78 - 2.89 (m, 1 H), 2.94 - 3.11 (m, 2 H), 3.36 - 3.50 (m, 1 H), 5.37 (s, 2 H), 6.73 - 6.75 (m, 1 H), 7.38 ( d, J = 8.30 Hz, 1 H), 7.64 (d, J = 8.30 Hz, 1 H). (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.84분, [M+1] 347.6.

중간체 186B: Dia-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 7.99분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.12 g, 2.37%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.38 (s, 9 H), 1.45 -1.50 (m, 1 H), 1.81 - 1.96 (m, 1 H), 2.33 (s, 3 H), 2.40 - 2.45 (m, 2 H), 2.78 - 2.89 (m, 1 H), 2.94 - 3.11 (m, 2 H), 3.36 - 3.50 (m, 1 H), 5.37 (s, 2 H), 6.73-6.75 (m, 1 H), 7.38 ( d, J = 8.30 Hz, 1 H), 7.64 (d, J = 8.30 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.86분, [M+1] 347.6.

중간체 187: (5-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-1,2,4-옥사디아졸-3-일)메틸 메탄술포네이트

중간체 187A: 5-시아노-4-메틸피콜린산

중간체 182B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 메틸 5-시아노-4-메틸피콜리네이트 (1.00 g, 5.68 mmol) 및 LiOH (0.27 g, 11.35 mmol)로부터 출발하여 중간체 187A (0.70 g, 76.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.56 (s, 3 H), 8.07 (s, 1 H), 8.98 (s, 1 H), (1 H 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS: (방법-I) 체류 시간: 0.41분, [M+1]: 163.3.

중간체 187B: 에틸 5-(5-시아노-4-메틸피리딘-2-일)-1,2,4-옥사디아졸-3-카르복실레이트

EtOAc (25 mL) 중 중간체 187A (0.70 g, 4.32 mmol)의 교반 용액에 TEA (2.41 mL, 17.27 mmol), 에틸 (Z)-2-아미노-2-(히드록시이미노)아세테이트 (0.07 g, 5.18 mmol)에 이어서 1-프로판포스폰산 무수물 (5.49 g, 8.63 mmol)을 0℃에서 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 35% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 187B (0.50 g, 44.90%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.51 (t, J = 7.03 Hz, 3 H), 2.66 - 2.77 (s, 3 H), 4.59 (q, J = 7.36 Hz, 2 H), 8.39 (s, 1 H), 9.00 (s, 1 H).

LCMS (방법-I) 체류 시간 1.39분, [M+H] 259.3.

중간체 187C: 6-(3-(히드록시메틸)-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-4-메틸니코티노니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 187B (0.70 g, 2.71 mmol) 및 NaBH₄ (0.20 g, 5.42 mmol)로부터 출발하여 중간체 187C (0.25 g, 42.70%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.62 (s, 3 H), 4.67 (d, J = 4.60 Hz, 2 H), 5.83 (s, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 9.09 (s, 1 H).

LCMS (방법-I) 체류 시간 0.74분, [M-H] 217.0.

중간체 187:

중간체 59의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 187C (0.25 g, 1.16 mmol) 및 메실 클로라이드 (0.09 mL, 1.16 mmol)로부터 출발하여 중간체 187 (0.15 g, 6.61%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.37 (s, 3 H), 2.73 (s, 3 H), 5.01 (s, 2 H), 7.95 (s, 1 H), 8.76 (d, J = 4.80 Hz, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.08분, [M+1] 295.2.

중간체 188: 1'-메틸-6'-옥소-1',6'-디히드로-[2,3'-비피리딘]-5-카르브알데히드

중간체 188A: 1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온

중간체 2B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 (0.10 g, 0.53 mmol)으로부터 출발하여 중간체 188A (0.75 g, 60.00%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-H): 체류 시간 1.08분, [M+1] 252.2.

중간체 188:

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 188A (0.61 g, 3.27 mmol) 및 6-브로모니코틴알데히드로부터 출발하여 중간체 188 (0.25 g, 24.27%)을 갈색 고체로서 제조하였다.

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.55분, [M+1] 215.

중간체 189-I, II, III 및 IV: tert-부틸 3-(히드록시메틸)-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-카르복실레이트

중간체 189A: 메틸 5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)니코티네이트

중간체 2C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 2B (2.00 g, 7.30 mmol) 및 메틸 5-브로모니코티네이트 (1.50 g, 6.90 mmol)로부터 출발하여 중간체 189A (1.30 g, 63.00%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.25 (s, 3 H), 3.99 (s, 3 H), 5.33 (s, 2 H), 7.43(d, J = 7.60 Hz, 1 H), 7.86 (d, J = 7.60 Hz, 1 H), 8.29 (s, 1 H), 8.77 (s, 1 H), 9.29 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.68분, [M+1] 284.1.

중간체 189B: 메틸 5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-3-카르복실레이트

중간체 118A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 189A (1.30 g, 4.59 mmol)로부터 출발하여 중간체 189B (1.30 g, 98.00%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.97 - 2.06 (m, 1 H), 2.08 - 2.16 (m, 1 H), 2.30 (s, 3 H), 2.68 - 2.73 (m, 1 H), 2.75 - 2.81 (m, 1 H), 2.83 - 2.92 (m, 1 H), 2.97 - 3.08 (m, 1 H), 3.11 - 3.23 (m, 1 H), 3.28 - 3.35 (m, 1 H), 3.60 (s, 3 H), 5.36 (s, 2 H), 7.52 ( d, J = 8.00 Hz, 1 H ) 7.62 ( d, J = 8.00 Hz, 1 H ), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.65분, [M+1] 290.1.

중간체 189C: 1-(tert-부틸) 3-메틸 5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1,3-디카르복실레이트

중간체 154A-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 189B (1.30 g, 4.50 mmol)로부터 출발하여 중간체 189C (1.00 g, 70.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 1.97 - 2.06 (m, 1 H), 2.08 - 2.16 (m, 1 H), 2.30 (s, 3 H), 2.68 - 2.73 (m, 1 H), 2.75 - 2.81 (m, 1 H), 2.83 - 2.92 (m, 1 H), 2.97 - 3.08 (m, 1 H), 3.11 - 3.23 (m, 1 H), 3.28 - 3.35 (m, 1 H), 3.60 (s, 3 H), 5.36 (s, 2 H), 7.52 ( d, J = 8.00 Hz, 1 H ) 7.62 ( d, J = 8.00 Hz, 1 H ),

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.28분, [M+H] 390.3.

중간체 189-I, II, III 및 IV:

THF (20 mL) 중 중간체 189C (2.00 g, 5.14 mmol)의 교반 용액에 THF 중 LiBH₄의 2M 용액 (12.84 mL, 25.70 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, NH₄Cl (100 mL)의 10% 용액으로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 라세미체를 SFC [키랄팩 ADH (250 x 4.6 mm) 5 마이크로미터; MeOH 중 0.2% NH₄OH, 유량:1.2 mL/분, 온도: 27℃, UV: 210 nm]에 의해 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 중간체 189-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 6.12분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.12 g, 6.50%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 1.70 - 1.79 (m, 1 H), 1.77 (br. s., 1 H), 1.80 (br. s., 1 H), 2.29 (s, 3 H) 2.64 - 2.78 (m, 1 H), 2.98 (br. s., 1 H), 3.39 - 3.47 (m, 3 H), 4.00 (br. s., 1 H), 4.20 (br. s., 1 H), 4.70 (br. s., 1 H), 5.29 - 5.51 (m, 2 H), 7.48 ( d, J = 8.30 Hz, 1 H ), 7.65 ( d, J = 8.30 Hz, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.04분, [M+1] 362.4.

중간체 189-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 6.37분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.04 g, 2.16%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 1.70 - 1.79 (m, 1 H), 1.80-1.86 (m., 2 H), 2.32 (s, 3 H) 2.64 - 2.78 (m, 1 H), 2.96 - 2.99 (m., 1 H), 3.39 - 3.47 (m, 3 H), 3.82-3.90 (m., 1 H), 3.94 - 4.16 (m., 1 H), 4.63 (br. s., 1 H), 5.40 - 5.44 (m, 2 H), 7.48 ( d, J = 8.30 Hz, 1 H ), 7.65 ( d, J = 8.30 Hz, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.07분, [M+1] 362.4.

중간체 189-III로서 나타내는 제3 용리 화합물 (체류 시간 7.77분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.08 g, 4.33%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 1.77-1.92 (m., 3 H), 2.29 (s, 3 H) 2.64 - 2.78 (m, 1 H), 3.05 - 3.20 (m, 2 H), 3.42- 3.52 (m, 2 H), 3.80 - 4.00 (m, 2 H), 4.55 (br. s., 1 H), 5.4 (s, 2 H), 7.50 ( d, J = 8.30 Hz, 1 H ), 7.65 ( d, J = 8.30 Hz, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.04분, [M+1] 362.4.

중간체 189-IV로서 나타내는 제4 용리 화합물 (체류 시간 8.38분)을 연황색 고체로서 수득하였다 (0.03 g, 1.62%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 1.77 - 1.92 (m, 3 H), 2.29 (s, 3 H) 2.64 - 2.78 (m, 1 H), 3.05 - 3.20 (m, 2 H), 3.42 - 3.52 (m, 2 H), 3.80 - 4.00 (m., 2 H), 4.55 (br. s., 1 H), 5.4 (s, 2 H), 7.50 ( d, J = 8.30 Hz, 1 H ), 7.65 ( d, J = 8.30 Hz, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.07분, [M+1] 362.4.

중간체 190: 3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-4-일 메틸카르바메이트

중간체 190A: tert-부틸 3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-4-((메틸카르바모일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

THF (25 ml) 중 중간체 52A (0.30 g, 0.86 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 NaH (41.6 mg, 1.73 mmol)에 이어서 CDI (0.21 g, 1.30 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 10분 동안 교반하였다. 생성된 반응 혼합물에 메틸아민 히드로클로라이드 (0.23 g, 3.46 mmol)를 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 18시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 0-80% EtOAc/n-헥산))에 의해 정제하여 중간체 190A (0.15 g, 43.00%)를 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.42 (s, 9 H), 2.04 - 2.13 (m, 1 H), 2.30 (s, 3 H), 2.42 (s, 3 H), 2.77 - 3.17 (m, 3 H), 3.69 - 3.95 (m, 1 H), 3.98 - 4.19 (m, 2 H), 5.07 - 5.30 (m, 1 H), 5.40 (d, J = 5.02 Hz, 2 H), 6.57 - 6.90 (m, 1 H), 7.54 ( d, J = 8.53 Hz, 1 H), 7.68 (d, J = 8.53 Hz, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.16분, [M-56] 349.5.

중간체 190:

중간체 38-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 190A (0.15 g, 0.37 mmol)로부터 출발하여 중간체 190 (0.80 g, 0.55 mmol)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.04 - 2.13 (m, 1 H), 2.30 (s, 3 H), 2.42 (s, 3 H), 2.77 - 3.17 (m, 3 H), 3.69 - 3.95 (m, 1 H), 3.98 - 4.19 (m, 2 H), 5.07 - 5.30 (m, 1 H), 5.40 (d, J = 5.02 Hz, 2 H), 6.57 - 6.90 (m, 1 H), 7.54 ( d, J = 8.53 Hz, 1 H), 7.68 (d, J = 8.53 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.44분, [M+1] 305.5.

중간체 191: 4-(5-포르밀-2H-테트라졸-2-일)-2-메틸벤조니트릴

중간체 191A: 에틸 2-(4-시아노-3-메틸페닐)-2H-테트라졸-5-카르복실레이트

0℃에서 EtOH (10 mL) 및 물 (10 mL)의 혼합물 중 4-아미노-2-메틸벤조니트릴 (1.00 g, 7.57 mmol)의 교반 용액에 진한 HCl (4.60 mL, 151 mmol) 및 아질산나트륨 (1.04 g, 15.13 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. 또 다른 50 mL 둥근 바닥 플라스크에 EtOH (20 mL), 벤젠술포노히드라지드 (1.30 g, 7.57 mmol)에 이어서 에틸 2-옥소아세테이트 (1.545 g, 15.13 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 증발시켜 (에틸 (E)-2-(2-(페닐술포닐)히드라조노)아세테이트를 수득하였으며, 이를 피리딘 (12.24 mL, 15 mmol) 중에 용해시키고, 제1 세트의 반응 (디아조화)을 함유하는 반응 혼합물에 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 35-55% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 191A (0.15 g, 7.71%)를 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ ppm 1.48 (t, J = 7.20 Hz, 3 H), 2.71 (s, 3 H), 4.55 (q, J = 6.90 Hz, 2 H), 8.0 (d, J = 8.40 Hz, 1 H), 8.22 (m, 1 H) 8.33 (s, 1 H).

LCMS (방법-I) 체류 시간 1.60분, [M+H] 258.1.

중간체 191B: 4-(5-(히드록시메틸)-2H-테트라졸-2-일)-2-메틸벤조니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 출발 중간체 191A (0.15 g, 0.58 mmol)로부터 출발하여 중간체 191B (0.12 g, 83.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.50 (s, 3 H), 4.81 (d, J = 6.00 Hz, 2 H), 5.81 (t, J = 6.00 Hz, 1 H), 8.09 (s, 2 H) 8.25 (s, 1 H).

LCMS (방법-I) 체류 시간 0.97분, [M+H] 216.4.

중간체 191:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 191B (0.12 g, 0.56 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.35 g, 0.84 mmol)으로부터 출발하여 중간체 191 (0.08 g, 67.30%)을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.66 (s, 3 H), 8.11 - 8.16 (m, 1 H), 8.18 (d, J = 2.51 Hz, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 10.27 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.87분, [M-H] 212.0.

중간체 192: 1-(4-(2-옥소옥사졸리딘-3-일)피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 192A: 1-(4-아미노피리딘-2-일)-1H-피라졸-4-카르브알데히드

중간체 6의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 1H-피라졸-4-카르브알데히드 (0.80 g, 8.33 mmol) 및 2-브로모피리딘-4-아민 (1.44 g, 8.33 mmol)로부터 출발하여 중간체 192A (0.40 g, 26.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 6.49 - 6.53 (m, 3 H), 7.12 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 7.93 (d, J = 5.52 Hz, 1 H), 8.21 (d, J = 1.00 Hz, 1 H), 9.16 (s, 1 H), 9.93 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.73분, [M+H] 189.1.

중간체 192B: 2-클로로에틸 (2-(4-포르밀-1H-피라졸-1-일)피리딘-4-일)카르바메이트

중간체 76A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 192A (0.30 g, 1.60 mmol) 및 2-클로로에틸 클로로포르메이트 (0.27 g, 1.91 mmol)로부터 출발하여 중간체 192B (0.20 g, 43.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.89 - 3.93 (m, 2 H), 4.41 - 4.45 (m, 2 H), 7.47 (dd, J = 5.52, 2.01 Hz, 1 H), 8.22 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.36 (d, J = 6.02 Hz, 1 H), 9.27 (s, 1 H), 9.96 (s, 1 H), 10.66 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.92분, [M+H] 295.

중간체 192:

중간체 76B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 192B (0.15 g, 0.51 mmol) 및 NaH (0.02 g, 1.018 mmol)로부터 출발하여 중간체 192 (0.10 g, 56.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.16 (dd, J = 8.93, 6.97 Hz, 2 H), 4.50 - 4.55 (m, 2 H), 7.52 (dd, J = 5.75, 2.08 Hz, 1 H), 8.31 (s, 2 H), 8.47 (d, J = 5.87 Hz, 1 H), 9.31 (s, 1 H), 9.97 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.20분, [M+H] 259.1.

실시예 113-I: 4,4-메틸-6-(5-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)티아졸-2-일)니코티노니트릴.

중간체 23B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 55-I (0.20 g, 0.47 mmol) 및 중간체 53 (0.26 g, 0.98 mmol)로부터 출발하여 실시예 113-I (0.02 g, 32.30%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.20 (s, 3 H), 2.25 (s, 3 H), 2.50 (s, 3 H), 2.60 (br. s, 2 H), 2.84 (br. s., 2 H), 2.98 (br. s., 1 H), 3.71 - 3.96 (m, 2 H), 4.16 (br. s., 1 H), 5.37 (br. s., 2 H), 7.65 (m, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 8.19 (s, 1 H), 8.98 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS/HPLC (방법-S): 체류 시간 1.69분, [M+H] 460.2, 순도: 100%.

(방법-R): 체류 시간 1.25분, [M+H] 460.2, 순도: 96.09%.

실시예 114-I: 6-(4-((4-히드록시-4-메틸-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 72 (0.02 g, 0.919 mmol) 및 중간체 6 (0.02 g, 0.707 mmol)으로부터 출발하여 실시예 114-I를 제조하였다. 라세미체를 SFC [룩스셀룰로스-2 (250 x 21.5 mm) 5 마이크로미터; IPA + ACN (10:90) 중 0.1% DEA, 유량: 1.0 g/분. 온도: 30℃, UV: 235 nm]에 의해 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 실시예 114-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 7.34분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.01 g, 3.86%).

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.93 (s, 3 H), 1.62 (d, J = 13.2 Hz, 1 H), 1.79 (td, J = 12.80, 4.3 Hz, 1 H), 2.24 (s, 3 H), 2.46 -2.39 (m, 1H), 2.59 - 2.54 (m, 4 H), 2.64 - 2.60 (m, 1 H), 2.71 (d, J = 10.80 Hz, 1 H), 3.12 (dd, J = 11.20, 3.4 Hz, 1 H), 3.58 - 3.50 (m, 2 H), 4.34 (br. s., 1 H), 5.45 - 5.23 (m, 2 H), 7.58 (d, J = 7.80 Hz, 1 H), 7.88 - 7.75 (m, 2 H), 7.97 (s, 1 H), 8.52 (s, 1 H), 8.83 (s, 1 H).

HPLC/ LCMS (방법-R): 체류 시간 1.14분, [M+H] 458.2, 순도: 100%.

(방법-S): 체류 시간 1.46분, [M+H] 458.2, 순도: 100%.

키랄 순도 (방법-XXVIII): 체류 시간 7.34분, 100% ee.

실시예 115-I: 4-메틸-6-(4-((2-메틸-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 71-I (0.15 g, 0.61 mmol) 및 중간체 6 (0.10 g, 0.47 mmol)으로부터 출발하여 실시예 115-I (0.01g, 5.86%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.67 (d, J = 6.10 Hz, 3 H), 2.18 (s, 3 H), 2.58 (s, 3 H), 2.66 (d, J = 10.80 Hz, 1 H), 3.08 - 2.86 (m, 3 H), 3.17 (d, J = 5.10 Hz, 1 H), 3.61 (br. s., 2 H), 4.31 (br. s., 1 H), 5.35 (s, 2 H), 7.66 (s, 2 H), 7.90 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 8.56 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS/HPLC (방법-R): 체류 1.04분, [M+H] 443.2, 순도: 98.77%.

(방법-S): 체류 시간 1.46분, [M+H] 443.2, 순도: 98.63%.

키랄 순도 (방법-V): 체류 시간 7.99분, 97.93% ee.

실시예 116-I: 6-(4-((4-히드록시-3,3-디메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페리딘-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴

실시예 1-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 73-I (0.02 g, 0.92 mmol) 및 중간체 6 (0.03 g, 0.14 mmol)으로부터 출발하여 실시예 116-I (0.01 g, 15.60%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.90 (s, 3 H), 1.08 (s, 3 H), 1.24 (s, 1 H), 2.03(t, J = 11.10 Hz, 1 H), 2.26 (s, 3 H), 2.64 - 2.56 (m, 4 H), 2.78 (d, J = 10.30 Hz, 1 H), 3.29 (d, J = 4.20 Hz, 1 H), 3.54 - 3.38 (m, 3 H), 4.42 (d, J = 6.10 Hz, 1 H), 5.44 - 5.29 (m, 2 H), 7.53 (d, J = 8.30 Hz, 1 H), 7.63 (d, J = 7.80 Hz, 1 H), 7.84 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H).

HPLC/LCMS (방법-R): 체류 시간 1.12분, [M+H] 472.3, 순도: 96.20%.

(방법-S): 체류 시간 1.82분, [M+H] 472.3, 순도: 94.72%.

키랄 순도 (방법-V): 체류 시간 4.17분, 100% ee.

실시예 117-I: 4-메틸-6-(5-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-2-옥소옥사졸-3(2H)-일)니코티노니트릴

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 75 (0.07 g, 0.204 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (0.05 g, 0.245 mmol)로부터 출발하여 실시예 117-I (0.02 g, 21.10%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.04 (d, J = 6.10 Hz, 3 H), 1.24 (s, 1 H), 1.95 - 1.74 (m, 2 H), 2.30 (s, 3 H), 2.61 - 2.53 (m, 3 H), 2.83 (d, J = 10.3 Hz, 2 H), 2.96 (br. s., 1 H), 3.48 (s, 2 H), 4.16 (d, J = 9.00 Hz, 1 H), 5.46 - 5.30 (m, 2 H), 7.66 (d, J = 7.80 Hz, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.81 (d, J = 7.80 Hz, 1 H), 8.24 - 8.15 (m, 1 H), 8.84 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-R): 체류 시간 0.93분, [M+H] 460.2, 순도: 97.01%.

(방법-S): 체류 시간 1.42분, [M+H] 460.2, 순도: 95.11%.

실시예 118-I: (R)-4-메틸-6-(4-((4-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-2-옥소이미다졸리딘-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴

THF (10 mL) 중 중간체 131-I (0.05 g, 0.12 mmol)의 교반 용액에 TEA (0.03 mL, 0.25 mmol)에 이어서 CDI (0.03 g, 0.18 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 HPLC [엑스브리지 C18 (19 x 150 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 0.1% TFA; 용매 B: 아세토니트릴; 구배: 25분에 걸쳐 10-40% B, 유량: 15 mL/분, 체류 시간 13.72분, UV: 240 nm]에 의해 정제하여 실시예 118-I (0.012 g, 20.41%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.23 (s, 3 H), 2.57 (s, 3 H), 2.93 (dd, J = 8.93, 6.48 Hz, 1 H), 3.87 (t, J = 8.93 Hz, 1 H), 4.13 - 4.34 (m, 2 H), 5.06 (t, J = 7.09 Hz, 1 H), 5.31 - 5.45 (m, 2 H), 7.22 (s, 1 H), 7.56 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.71 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 7.97 (s, 1 H), 8.53 (s, 1 H), 8.83 (s, 1 H).

LCMS/HPLC (방법-S): 체류 시간 1.60분, [M+H] 429.1, 순도: 96.70%.

(방법-R): 체류 시간 1.61분, [M+H] 429.1, 순도: 97.92%.

키랄 순도 (방법-XVIII:): 체류 시간 13.72분, 95.00% ee.

실시예 119-I: (R)-4-메틸-6-(4-((4-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)-1,1-디옥시도-1,2,5-티아디아졸리딘-2-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)니코티노니트릴.

피리딘 (0.50 mL) 중 중간체 131-I (0.06 g, 0.15 mmol)의 교반 용액에 술파미드 (0.30 g, 0.30 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 125℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 HPLC [선파이어 OBD-C18 (30 x 250 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 10 mM 아세트산암모늄; 용매 B: 아세토니트릴; 구배: 12분에 걸쳐 20-50% B, 유량: 25 mL/분, 체류 시간 17.55분, UV: 240 nm]에 의해 정제하여 실시예 119-I (0.02 g, 24.55%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.25 (s, 3 H), 2.58 (s, 3 H), 2.94 (dd, J = 9.90, 7.70 Hz, 1 H), 3.92 - 4.08 (m, 2 H), 4.20 (d, J = 14.43 Hz, 1 H), 5.11 (q, J = 7.42 Hz, 1 H), 5.30 - 5.43 (m, 2 H), 7.65 - 7.78 (m, 2 H), 7.91 (s, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 8.14 (d, J = 7.09 Hz, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H),

LCMS/HPLC (방법-S): 체류 시간 1.42분, [M+H] 465.1, 순도: 100%.

(방법-R): 체류 시간 1.41분, [M+H] 465.1, 순도: 100%. [M+H] 465.1, 키랄 순도 (방법-XVIII): 체류 시간 17.55분, 97.25% ee.

실시예 120-I: 2-메틸-6-(5-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피리다진-3(2H)-온

중간체 23B의 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 96-I (0.15 g, 0.36 mmol) 및 중간체 102 (0.01 g, 0.36 mmol로부터 출발하여 실시예 120-I (0.02 g, 11.00%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.02 (d, J = 5.90 Hz, 3 H), 1.68 - 1.82 (m, 2 H), 2.23 (s, 3 H), 2.76 (t, J = 10.00 Hz, 2 H), 2.99 (br. s., 1 H), 3.52 - 3.65 (m, 2 H), 3.77 (s, 3 H), 4.17 (d, J = 9.00 Hz, 1 H), 5.27 - 5.46 (m, 2 H), 7.07 (d, J = 9.80 Hz, 1 H), 7.65 (d, J = 8.10 Hz, 1 H), 7.80 (d, J = 8.10 Hz, 1 H), 7.89 (dd, J = 8.20 Hz, 1.6 Hz, 1 H), 8.07 (d, J = 8.30 Hz, 1 H), 8.29 (d, J = 9.80 Hz, 1 H), 8.57 (br. s., 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS/HPLC (방법-S): 체류 시간 1.17분, [M+H] 446.2, 순도: 100%.

(방법-R): 체류 시간 0.60분, [M+H] 446.2, 순도: 99.60%.

키랄 순도 (방법- XI): 체류 시간 12.50분, 100% ee.

실시예 121-I: 4-메틸-6-(4-(1-((R)-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)에틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)니코티노니트릴 (Dia-I:Ena-I) 및 실시예 121-I: 4-메틸-6-(4-(1-((R)-3-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)에틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)니코티노니트릴 (Dia-II:Ena-I),

ACN (6 mL) 중 중간체 101 (0.100 g, 0.325 mmol)의 교반 용액에 중간체 2-I (0.08 g, 0.36 mmol)에 이어서 K₂CO₃ (0.09 g, 0.65 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 ACN (20 mL)으로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 HPLC [선파이어 OBD (250 x 30 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 10-mM 아세트산암모늄; 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 15.5분에 걸쳐 30-100% B, 체류 시간-12.07, UV: 254 nm]에 의해 정제하여 라세미체를 수득하였으며, 이를 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) [키랄팩 OJ-H (250 x 21 mm) 5 마이크로미터; MeOH + ACN (1:1) 중 0.2% NH₄OH, 유량: 70.0 mL/분. 온도: 30℃, UV: 290 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 실시예 121-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 5.9분)을 백색 고체로서 수득하였다 (0.02 g, 12.20%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.43 (d, J = 7.00 Hz, 3 H), 1.87 (t, J = 10.30 Hz, 1 H), 2.12 - 2.20 (m, 1 H), 2.26 (s, 3 H), 2.61 (s, 3 H), 2.75 (d, J = 11.00 Hz, 1 H), 2.83 - 2.92 (m, 2 H), 2.99 (br. s., 1 H), 4.07 (d, J = 7.00 Hz, 2 H), 5.37 (s, 2 H), 7.61 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.72 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 8.09 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 8.92 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

HPLC (방법-P): 체류 시간 7.92분, 순도: 97.9%.

(방법-Q): 체류 시간 6.98분, 순도: 98.0%.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.73분, [M+H] 444.2.

키랄 순도 (방법-XX): 체류 시간 4.79분, 99.5% ee.

실시예 121-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 7.70분)을 백색 고체로서 수득하였다 (0.02 g, 12.90%).

HPLC (방법-P): 체류 시간 7.83분, 순도: 98.20%.

(방법-Q): 체류 시간 7.02분, 순도: 98.8%.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.84분, [M+H] 444.2.

키랄 순도 (방법-XX): 체류 시간 6.34분, 98.60% ee.

실시예 122-I: 4-메틸-6-(3-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1H-1,2,4-트리아졸-1-일)니코티노니트릴

중간체 20의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 97 (0.03 g, 0.09 mmol) 및 6-브로모-4-메틸니코티노니트릴 (0.02 g, 0.110 mmol)로부터 출발하여 실시예 122-I (0.02 g, 28.40%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.21 -1.35 (m, 3 H), 2.37 (s, 3 H), 2.59 - 2.70 (m, 4 H), 3.14 - 3.26 (m, 3 H), 3.93 (s., 3 H), 4.78 (br. s., 1 H), 5.38 - 5.56 (m, 2 H), 7.80 (d, J = 7.80 Hz, 1 H), 7.87 (d, J = 7.80 Hz, 1 H), 7.93 - 8.00 (m, 1 H), 8.92 - 8.99 (m, 1 H), 9.59 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS/HPLC (방법-S): 체류 시간 1.86분, [M+H] 444.2, 순도: 96.60%.

(방법-R): 체류 시간 1.19분, [M+H] 444.2, 순도: 93.30%.

키랄 순도 (방법-VIII): 체류 시간 4.64분, 100% ee.

실시예 123-I: 6-(4-((2-(히드록시메틸)-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴 (Dia-I:Ena-I) 및 실시예 123-II: 6-(4-((2-(히드록시메틸)-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1H-피라졸-1-일)-4-메틸니코티노니트릴 (Dia-I:Ena-II)

ACN (5 mL) 중 103 (부분입체이성질체-I) (0.06 g, 0.23 mmol)의 용액에 중간체 104 (0.08 g, 0.34 mmol)에 이어서 K₂CO₃ (0.13 g, 0.91 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 60℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 ACN (20 mL)으로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 HPLC [인터실 ODS (250 x 20 mm) 5 마이크로미터; 용매 A: 10 mM 아세트산암모늄; 용매 B: 아세토니트릴, 구배: 16분에 걸쳐 20-100% B, 체류 시간: 11.8, UV: 220]에 의해 정제하여 라세미 혼합물을 수득하였으며, 이를 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) [룩스 아밀로스-2 (250 x 21 mm) 5 마이크로미터; MeOH + 아세토니트릴 (1:1) 중 0.2% NH₄OH, 유량: 70.0 mL/분. 온도: 30℃, UV: 240 nm]에 의해 2종의 개별 거울상이성질체로 분리하였다. 실시예 123-I로서 나타내는 제1 용리 화합물 (체류 시간 6.38)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.005 g, 4.60%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.84 - 1.90 (m, 1 H), 2.23 (s, 3 H), 2.58 (s, 4 H), 2.60 - 2.62 (m, 1 H), 2.75 (dd, J = 10.79, 2.26 Hz, 1 H), 3.13 (dd, J = 11.55, 3.01 Hz, 1 H), 3.44 - 3.49 (m, 1 H), 3.68 - 3.73 (m, 1 H), 3.78 - 3.83 (m, 1 H), 3.87 (d, J = 15.06 Hz, 1 H), 4.01 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 4.70 (t, J = 5.27 Hz, 1 H), 5.36 (s, 2 H), 7.59 - 7.63 (m, 1 H), 7.70 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.83 (s, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 8.53 (s, 1 H), 8.82 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

HPLC (방법-P): 체류 시간 9.77분, 순도: 98.80%.

(방법-Q): 체류 시간 7.95분, 순도: 97.0%.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.55분, [M+H] 459.2.

키랄 순도 (방법-XIII) 체류 시간 7.20분, 100% ee.

실시예 123-II로서 나타내는 제2 용리 화합물 (체류 시간 9.20분)을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.005 g, 4.60%).

HPLC (방법-P): 체류 시간 9.96분, 순도: 99.30%.

(방법-Q): 체류 시간 8.13분, 순도: 98.70%.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.55분, [M+H] 459.2.

키랄 순도 (방법-XIII ) 체류 시간 10.25분, 100% ee.

표 3의 실시예를 실시예 1-I 내지 24-I, 81-I 내지 84-I 및 113-I 내지 123-I의 절차를 사용하여 합성하였다.

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중간체 193: 6-(5-포르밀이속사졸-3-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 193A: 메틸 5-시아노-4-메톡시피콜리네이트

중간체 16A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 6-클로로-4-메톡시니코티노니트릴 (10.00 g, 59.30 mmol)로부터 출발하여 중간체 193A (6.00 g, 52.60%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.93 (s, 3 H), 4.11 (s, 3 H), 7.82 (s, 1 H), 8.94 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.79분, [M+H] 192.9.

중간체 193B: 6-(히드록시메틸)-4-메톡시니코티노니트릴

THF (50 mL) 및 EtOH (50 mL)의 혼합물 중 메틸 5-시아노-4-메톡시피콜리네이트 (3.00 g, 15.61 mmol)의 교반 용액에 염화칼슘 (4.33 g, 39.00 mmol)에 이어서 NaBH₄ (2.36 g, 62.40 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조시키고, NaHCO₃ (100 mL)의 포화 용액으로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 193B (1.80 g, 70.20%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.02 (s, 3 H), 4.60 (d, J = 3.00 Hz, 2 H), 5.72 (t, J = 3.50 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 8.71 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.56분, [M+H] 164.9.

중간체 193C: 6-포르밀-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 193B (1.80 g, 10.96 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (6.98 g, 16.45 mmol)로부터 출발하여 중간체 193C (1.70 g, 96.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.12 (s, 3 H), 7.70 (s, 1 H), 9.06 (s, 1 H), 9.99 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 193D: (E)-6-((히드록시이미노)메틸)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 110B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 193C (1.05 g, 6.48 mmol) 및 히드록실아민 히드로클로라이드 (0.54 g, 7.77 mmol)로부터 출발하여 중간체 193D (0.90 g, 78.00%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.04 (s, 3 H), 7.50 (s, 1 H), 8.11 (s, 1 H), 8.81 (s, 1 H), 12.14 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.73분, [M+H] 177.9.

중간체 193E: 6-(5-(히드록시메틸)이속사졸-3-일)-4-메톡시니코티노니트릴

중간체 110C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 193D (0.77 g, 3.75 mmol) 및 프로프-2-인-1-올 (0.14 g, 2.54 mmol)로부터 출발하여 중간체 193E (0.15 g, 25.50%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.12 (s, 3 H), 4.66 (d, J = 5.00 Hz, 2 H), 5.77 (t, J = 5.00 Hz, 1 H), 6.97 (s, 1 H), 7.79 (s, 1 H), 8.95 (s, 1 H).

LCMS (방법-I): 체류 시간 0.84분, [M+H] 232.0.

중간체 193:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 193E (0.19 g, 0.82 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.52 g, 1.23 mmol)으로부터 출발하여 중간체 193 (0.17 g, 90.00%)을 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.12 (s, 3 H), 7.94 (s, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 9.00 (s, 1 H), 9.99 (s, 1 H).

LCMS: 화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 194: 2-(1-(디플루오로메틸)-2-옥소-1,2-디히드로피리딘-4-일)-2H-1,2,3-트리아졸-4-카르브알데히드

중간체 194A: 1-(디플루오로메틸)-4-(4-(히드록시메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)피리딘-2(1H)-온

중간체 42의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 28A (0.13 g, 1.33 mmol) 및 중간체 58A (0.30 g, 1.33 mmol)로부터 출발하여 중간체 194A (0.20 g, 61.70%)를 회백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.62 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 5.42 (s, 1 H), 7.14 (d, J = 2.01 Hz, 1 H), 7.16 - 7.21 (m, 1 H), 7.85 - 8.04 (m, 1 H), 8.07 (d, J = 7.53 Hz, 1 H), 8.91 (s, 1 H).

¹⁹F NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm - 101.0.

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.54분, [M+H] 243.0.

중간체 194:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 194A (0.20 g, 0.82 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.70 g, 1.65 mmol)으로부터 출발하여 중간체 194 (0.08 g, 40.40%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.16 - 7.23 (m, 1 H), 7.24 - 7.27 (m, 1 H), 7.70 - 8.07 (m, 1 H), 8.12 - 8.18 (m, 1 H), 9.76 (s, 1 H), 10.13 (s, 1 H).

LCMS (방법-J): 체류 시간 0.98분, [M+H] 241.0.

중간체 195: 1-(2-(디플루오로메틸)피리미딘-4-일)-1H-이미다졸-4-카르브알데히드

중간체 195A: 4-클로로피리미딘-2-카르브알데히드

THF (5 mL) 중 4-클로로피리미딘-2-카르보니트릴 (0.25 g, 1.79 mmol)의 교반 용액에 헵탄 중 1M DIBAL-H (1.79 mL, 1.79 mmol)를 -78℃에서 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NH₄Cl의 포화 용액 (20 mL)으로 희석하고, DCM 중 10% MeOH (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 중간체 195A (0.100 g, 조 물질)을 수득하였다.

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.42분 [M+H] 143.2.

중간체 195B: 4-클로로-2-(디플루오로메틸)피리미딘

중간체 4B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 195A (1.70 g, 11.93 mmol) 및 DAST (3.15 mL, 23.85 mmol)로부터 출발하여 중간체 195B (0.80 g, 36.70%)를 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ ppm 6.44 - 6.80 (m, 1 H), 7.49 (d, J = 5.40 Hz, 1 H), 8.76 (d, J = 5.40 Hz, 1 H).

¹⁹F NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm -118.95.

화합물은 잘 이온화되지 않았다.

중간체 195:

1,4-디옥산 (5 mL) 중 중간체 195B (0.01 g, 0.06 mmol)의 교반 용액에 K₂CO₃ (0.02 g, 0.122 mmol)에 이어서 1H-이미다졸-4-카르브알데히드 (0.01 g, 0.09 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 증발시켜 중간체 195 (0.005 g, 36.70%)를 수득하였다.

LCMS (방법-D): 체류 시간 0.92분, [M+H] 225.2.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 6.54 - 6.81 (m, 1 H), 7.51 (m, 1 H), 8.40 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 8.58 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 9.02 (d, J = 5.6 Hz, 1 H), 10.01 (s, 1 H).

¹⁹F NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm -119.25.

중간체 196: 4-(5-포르밀-2H-테트라졸-2-일)-2-메톡시벤조니트릴

중간체 196A: 에틸 2-(4-시아노-3-메톡시페닐)-2H-테트라졸-5-카르복실레이트

중간체 191A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 4-아미노-2-메톡시벤조니트릴 (1.00 g, 6.75 mmol)로부터 출발하여 중간체 196A (0.15 g, 7.71%)를 갈색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.48 - 1.52 (t, J = 6.80 Hz, 3 H), 4.09 (s, 3 H), 4.56 - 4.62 (m, 2 H), 7.79 (d, J = 8.40 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 1.60 Hz, 1 H), 7.91 - 7.94 (m, 1 H).

LCMS (방법-I) 체류 시간 1.60분, [M+H] 274.2.

중간체 196B: 4-(5-(히드록시메틸)-2H-테트라졸-2-일)-2-메톡시벤조니트릴

중간체 60B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 196A (0.13 g, 0.48 mmol) 및 NaBH₄ (0.07 g, 1.90 mmol)로부터 출발하여 중간체 196B (0.06 g, 54.50%)를 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.07 (s, 3 H), 4.82 (d, J = 7.20 Hz, 2 H), 5.84 (t, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.80 - 7.86 (m, 2 H), 8.06 (m, 1 H).

LCMS (방법-I) 체류 시간 1.52분, [M+H] 232.2.

중간체 196:

중간체 9의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 196B (0.10 g, 0.43 mmol) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (0.37 g, 0.86 mmol)으로부터 출발하여 중간체 196 (0.95 g, 조 물질)을 제조하였다.

LCMS (방법-I): 체류 시간 1.29분, [M-H] 228.2.

중간체 197: (1-(5-시아노-4-메톡시피리딘-2-일)-3-메틸-2-옥소이미다졸리딘-4-일) 메틸 메탄술포네이트

중간체 197A: 6-(4-(히드록시메틸)-3-메틸-2-옥소이미다졸리딘-1-일)-4-메톡시니코티노니트릴

에틸 아세테이트 (20 mL) 중 중간체 93C (0.50 g, 1.92 mmol)의 용액을 질소로 2분 동안 퍼징하였다. 10% Pd/C (0.10 g, 0.96 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 H₂ 분위기 하에 주위 온도에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시켜 중간체 197A (0.25 g, 47.10%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.83 (s, 3 H), 3.46 - 3.53 (m, 1 H), 3.62 - 3.73 (m, 2 H), 3.79 (dd, J = 10.79, 5.27 Hz, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.97 - 4.04 (m, 1 H), 4.98 (t, J = 5.52 Hz, 1 H), 8.06 (s, 1 H), 8.54 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.22분, [M+H] 263.2.

중간체 197:

중간체 59의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 197A (0.20 g, 0.76 mmol) 및 메실 클로라이드 (0.07 mL, 0.91 mmol)로부터 출발하여 중간체 197 (0.24 g, 81.00%)을 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.87 (s, 3 H), 3.24 (s, 3 H), 3.80 (dd, J = 10.79, 4.77 Hz, 1 H), 3.94 (s, 3 H), 4.02 - 4.09 (m, 1 H), 4.10 - 4.16 (m, 1 H), 4.36 (dd, J = 11.04, 3.51 Hz, 1 H), 4.50 (dd, J = 11.04, 3.01 Hz, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 8.56 (s, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.69분, [M+H] 340.9.

중간체 198: 1-메틸-5-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1,3-디히드로-2H-이미다졸-2-온 TFA 염

중간체 198A: 1-(tert-부틸) 4-메틸 3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-1,4-디카르복실레이트

MeCN (25 mL) 중 메틸 2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트 (5.00 g, 35.20 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 K₂CO₃ (4.86 g, 35.20 mmol)에 이어서 BOC₂O (8.17 mL, 35.2 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 MeCN (50 mL)으로 희석하고, K₂CO₃ (14.55 g, 105.00 mmol), 아이오도메탄 (6.58 mL, 105.00 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 추가로 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 10-20% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 198A (3.70 g, 41.10%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.53 (s, 9 H), 3.30 (s, 3 H), 3.79 (s, 3 H), 7.40 (s, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.17분, [M-55] 201.2.

중간체 198B: 메틸 3-메틸-2-옥소-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트 TFA 염

0℃에서 DCM (20 mL) 중 중간체 198A (3.70 g, 14.44 mmol)의 교반 용액에 TFA (10 mL, 130 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르 (50 mL) 중에 용해시키고, 고체 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜 중간체 198B (0.22 g, 98.00%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.30 (s, 3 H), 3.37 (s, 3 H), 5.33 (br. s., 1 H), 7.38 (s, 1 H), 10.96 (br. s., 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.16분, [M+H] 156.9

중간체 198C: 메틸 3-메틸-2-옥소-1-트리틸-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-카르복실레이트

중간체 75A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 198B (2.00 g, 12.81 mmol) 및 트리틸 클로라이드 (4.29 g, 15.37 mmol)로부터 출발하여 중간체 198C (2.90 g, 56.80%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.27 (s, 3 H), 3.69 (s, 3 H), 7.11-7.40 (m, 16 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 3.28분, [M+H] 399.2.

중간체 198D: 4-(히드록시메틸)-3-메틸-1-트리틸-1,3-디히드로-2H-이미다졸-2-온

THF (40 mL) 중 중간체 198C (5.00 g, 12.55 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 THF 중 LiBH₄의 2M 용액 (18.82 mL, 37.6 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 50-80% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 198D (3.30 g, 71.00%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.06 (s, 3 H), 4.21 (d, J = 6.80, 2 H), 5.03 (t, J = 14.00, 1 H), 6.07 (s, 1 H), 7.09-7.17 (m, 6 H), 7.22 - 7.37 (m, 9 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.42분, [M+H] 371.2.

중간체 198E: (3-메틸-2-옥소-1-트리틸-2,3-디히드로-1H-이미다졸-4-일)메틸 메탄술포네이트

중간체 59의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 198D (2.00 g, 5.40 mmol) 및 메실-Cl (0.50 mL, 6.48 mmol)로부터 출발하여 중간체 198E (1.40 g 99.17%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.04-3.13 (s, 3 H), 3.16-3.28 (s, 3 H), 4.38 (s, 2 H), 6.67 (s, 1 H), 7.20-7.38 (m, 15 H).

LCMS: 화합물을 잘 이온화되지 않았다.

중간체 198F-I: 3-메틸-4-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1-트리틸-1,3-디히드로-2H-이미다졸-2-온

MeCN (40 mL) 중 중간체 51-I (0.50 g, 2.02 mmol)의 교반 용액에 중간체 198E (0.70 g, 1.56 mmol), 아이오딘화나트륨 (0.234 g, 1.561 mmol), K₂CO₃ (0.647 g, 4.68 mmol)에 이어서 4-메틸-1H-이미다졸 (0.18 g, 2.21 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 65℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트®를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 5-10% MeOH/CHCl₃)에 의해 정제하여 중간체 198F-I (0.30 g, 32.10%)를 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.98-1.11 (m, 3 H), 2.16 - 2.28 (m, 3 H), 2.34 - 2.47 (m, 1 H), 2.54 - 2.62 (m, 2 H), 2.63 - 2.79 (m, 3 H), 2.87 (br. s., 1 H), 3.09 (s, 3 H), 3.17 - 3.30 (m, 1 H), 4.04 (d, J = 14.00, 1 H), 5.42 (s, 2 H), 6.06 (s, 1 H), 7.10-7.32 (m, 15 H), 7.67 (d, J = 10.80, 1 H), 7.80 (d, J = 10.40, 1 H).

LCMS (방법-O): 체류 시간 1.87분, [M+H] 599.3.

중간체 198-I:

중간체 198B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 198F-I (1.00 g, 1.67 mmol) 및 TFA (5 mL, 64.90 mmol)로부터 출발하여 중간체 198-I (0.55 g 93.20%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.28 (d, J = 3.00, 3 H), 2.17 - 2.45 (m, 3 H), 2.96 - 3.26 (m, 5 H), 3.27 - 3.44 (m, 5 H), 4.70 (br.s., 1 H), 5.39 - 5.53 (m, 2 H), 6.32 (s, 1 H), 7.29-7.33 (m, 1 H), 7.79 - 7.91 (m, 2 H), 8.49 - 8.84 (m, 1H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-O): 체류 시간 0.57분, [M+H] 357.1.

실시예 266-I: 3-메틸-4-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일)피페라진-1-일)메틸)-1-(2-메틸피리딘-4-일)-1,3-디히드로-2H-이미다졸-2-온

중간체 15C의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 198-I (0.08 g, 0.23 mmol) 및 4-브로모-2-메틸피리딘 (0.05 g, 0.27 mmol)으로부터 출발하여 실시예 266-I (0.02 g, 18.73%)를 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.06 (d, J = 4.90 Hz, 3 H), 1.75 (br. s., 2 H), 2.27 (s, 3 H), 2.46 (s, 3 H), 2.87 (br. s., 2 H), 2.98 (br. s.,1 H), 3.28 (s, 2 H), 3.33 (s, 3 H), 4.18 (br. s., 1 H), 5.52 - 5.29 (m, 2 H), 7.18 (s, 1 H), 7.78 - 7.54 (m, 3 H), 7.82 (d, J = 8.10 Hz, 1 H), 8.40 (d, J = 5.40 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS/HPLC (방법-R): 체류 시간 0.83분, [M+H] 448.3, 순도: 97.78%.

(방법-S): 체류 시간 1.34분, [M+H] 448.3, 순도: 97.09%.

키랄 순도 (방법-XVIII:): 체류 시간 13.72분, 95.00% ee.

표 4의 실시예를 실시예 1-I 내지 24-I, 81-I 내지 84-I, 113-I 내지 123-I 및 266-I의 절차를 사용하여 합성하였다.

중간체 199-I: 4-메틸-5-((2R,6S)-6-메틸피페라진-2-일)이소벤조푸란-1(3H)-온-3,3-d2 TFA 염

중간체 199A-I: tert-부틸 (3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일-3-d)피페라진-1-카르복실레이트

THF (150 mL) 중 중간체 51-I (1.50 g, 4.33 mmol)의 교반 용액에 THF 중 1M LiHMDS (21.65 mL, 21.65 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 30분 동안 교반하였다. 생성된 반응 혼합물에 D₂O (5.09 mL, 281 mmol)를 첨가하고, 교반을 주위 온도에서 15분 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-40 g, 60-80% EtOAc/n-헥산)에 의해 정제하여 중간체 I99A-I (1.00 g, 33.20%)를 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.05 (s, 3 H), 1.42 (s, 9 H), 2.32 (s, 3 H), 2.42 (br s, 1 H), 2.70 - 2.88 (m, 2 H), 3.91 - 4.04 (m, 3 H), 5.37 - 5.44 (m, 1 H), 7.69 (d, J = 7.90 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 7.90 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.46분, [M+H] 348.2.

중간체 199B-I 및 199 C-I: tert-부틸 (3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일-3,3-d2)피페라진-1-카르복실레이트

중간체 199A-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 I99A-I (1.00 g, 2.89 mmol) 및 1M LiHMDS (14.39 mL, 14.39 mmol)로부터 출발하여 중간체 199B-I (0.40 g, 39.80%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.05 (s, 3 H), 1.42 (s, 9 H), 2.32 (s, 3 H), 2.42 (br s, 1 H), 2.70 - 2.88 (m, 2 H), 3.91 - 4.04 (m, 3 H), 7.69 (d, J = 7.90 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 7.90 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.47분, [M+H] 349.2.

모노-D 및 디-D (28:72)의 동위원소 비율을 ¹H NMR에 의해 측정하였다.

중간체 199A의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 I99B-I (0.40 g, 1.15 mmol) 및 1M LiHMDS (5.76 mL, 5.76 mmol)로부터 출발하여 중간체 199C-I (0.20 g, 19.88%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.05 (s, 3 H), 1.42 (s, 9 H), 2.32 (s, 3 H), 2.42 (br., s., 1 H), 2.70 - 2.88 (m, 2 H), 3.91 - 4.04 (m, 3 H), 7.69 (d, J = 7.90 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 7.90 Hz, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-D): 체류 시간 2.47분, [M+H] 349.2.

모노-D 및 디-D (17:83)의 동위원소 비율을 ¹H NMR에 의해 측정하였다.

중간체 199-I:

중간체 198B의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 199C-I (0.20 g, 0.57 mmol) 및 TFA (0.88 mL, 11.48 mmol)로부터 출발하여 중간체 199-I (0.18 g, 87.00%)를 연황색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.29 (d, J = 6.00 Hz, 3 H), 2.38 (s, 3 H), 3.0 - 3.20 (m, 2 H), 3.55 - 3.68 (m, 3 H), 4.86 (br., s., 1 H), 7.88 - 7.82 (m, 2 H), (2개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

LCMS (방법-J): 체류 시간 0.40분, [M+H] 249.2.

중간체 200-I: 4-메틸-6-(4-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일-3-d)피페라진-1-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)니코티노니트릴

-50℃에서 THF (10 mL) 중 실시예 83-I (0.10 g, 0.22 mmol)의 교반 용액에 THF 중 1M LiHMDS (1.13 mL, 1.13 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 동일한 온도에서 10분 동안 교반하였다. 생성된 반응 혼합물에 D₂O (2.0 mL, 113 mmol)를 첨가하고, 교반을 -50℃에서 10분 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (15 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (레디셉-24 g, 3-4% MeOH/DCM)에 의해 정제하여 중간체 200-I (0.045 g, 40.00%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.02 (d, J = 5.60 Hz, 3 H), 1.75 (m, 2 H ), 2.27 (s, 3 H), 2.38 - 2.41 (m, 2 H), 2.71 (s, 3 H), 2.75 - 2.86 (m, 2 H), 3.76 (s, 2 H), 4.05 - 4.29 (m, 1 H), 5.34 - 5.37 (m, 1 H), 7.50 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 7.80 (d, J = 8.00 Hz, 1 H), 8.07 - 8.26 (m, 2 H), 8.87 - 9.03 (m, 1 H).

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.15분, [M+H] 445.0.

모노-D 및 디-D (27:73)의 동위원소 비율을 ¹H NMR에 의해 측정하였다.

실시예 277-I: 4-메틸-6-(4-(((3S,5R)-3-메틸-5-(4-메틸-1-옥소-1,3-디히드로이소벤조푸란-5-일-3,3-d2)피페라진-1-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)니코티노니트릴

중간체 96-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 199-I (0.05 g, 0.188 mmol) 및 중간체 28 (0.04 g, 0.188 mmol)로부터 출발하여 실시예 277-I (0.01 g, 14.80%)를 백색 고체로서 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.02 (d, J = 5.60 Hz, 3 H), 1.75 - 1.88 (m, 2 H), 2.26 (s, 3 H), 2.61 (s, 3 H), 2.74 - 2.86 (m, 2 H), 2.92 - 3.04 (m, 1 H), 3.76 (s, 2 H), 4.14 - 4.18 (m, 1 H), 7.65 (d, J = 7.60 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 8.10 Hz, 1 H), 8.11 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.92 (s, 1 H), (1개의 교환가능한 양성자는 관찰되지 않음).

HPLC (방법-P): 체류 시간 7.71분, 순도: 98.20%, (방법-Q): 체류 시간 5.65분, 순도: 98.17%.

LCMS (방법 D): 체류 시간 1.93분, [M+H] 446.2.

실시예 277-I에 대한 대안적 절차:

중간체 199A-I의 것과 유사한 합성 프로토콜을 사용하고 중간체 200-I (0.04 g, 0.101 mmol) 및 1M LiHMDS (0.50 mL, 0.50 mmol)로부터 출발하여 실시예 277-I (0.001 g, 2.82%)를 백색 고체로서 제조하였다.

HPLC (방법-P): 체류 시간 7.49분, 순도: 92.50%, (방법-Q): 체류 시간 6.54분, 순도: 93.04%.

LCMS (방법-D): 체류 시간 1.84분, [M+H] 446.2.

키랄 순도 (방법-VIII): 체류 시간 4.99분, 100% ee.

모노-D 및 디-D (5:95)의 동위원소 비율을 ¹H NMR에 의해 측정하였다.

표 5의 실시예를 실시예 1-I 내지 24-I, 81-I 내지 84-I, 113-I 내지 123-I, 266-I 및 277-I의 절차를 사용하여 합성하였다.

생물학적 검정

본 발명의 화합물의 약리학적 특성은 다수의 생물학적 검정에 의해 확인할 수 있다. 하기 예시된 생물학적 검정은 본 발명의 화합물을 사용하여 수행하였다.

특정한 화합물에 대한 임의의 특정한 시험에 대해서 생성된 경우에, 1개 초과의 데이터 포인트가 표에서는 평균으로서 나타내어진다.

탈륨 유동 검정

용액 및 시약: 탈륨 유동 검정을 플룩소르(FluxOR) 키트 (F10017, 라이프 테크놀로지스(Life Technologies))를 사용하여 수행하였다. 로딩 완충제, 검정 완충제 및 자극 완충제를 키트 성분을 사용하여 제조하였다. HBSS (행크 평형 염 용액, Cat#14025-092)는 라이프 테크놀로지스로부터 개별적으로 구입하였다.

로딩 완충제 10 ml를 제조하기 위해: 플룩소르 염료 (DMSO 중 재구성됨) 10 μl를 먼저 파워로드 농축물 100 μl에 첨가한 다음, 이 혼합물을 프로베니시드 (100X) 100 μl와 함께 HBSS 9.79 ml에 첨가하였다. 플룩소르 클로라이드 무함유 완충제 (5X) 2 ml, 프로베니시드 (100X) 100 μl, 및 우아바인 (13.77 mM) 0.2 ml를 탈이온수 7.7 ml에 첨가하여 검정 완충제 (10 ml)를 제조하였다. 자극 완충제는 플룩소르 클로라이드 무함유 완충제 (탈이온수를 사용하여 1X로 희석됨) 중 15 mM Tl₂SO₄, 0.75 mM K₂SO₄로 구성되었다. 검정 플레이트에서 Tl₂SO₄ 및 K₂SO₄의 최종 농도는 각각 3 mM 및 0.15 mM이었다.

세포의 플레이팅 및 유도: CHO T-Rex hROMK (인간 K_ir1.1) 안정한 세포주를 10% FBS, 1% 페니실린-스트렙토마이신, 500 μg/ml 제오신 및 10 μg/ml 블라스티시딘이 보충된 햄 F12 배지에서 5% CO₂ 인큐베이터 내 37℃에서 유지하였다. 실험 하루 전날, 세포를 베르센 용액 (15040-066, 라이프 테크놀로지스)과 37℃에서 10분 동안 인큐베이션한 후 성장 배지를 첨가하여 해리시켰다. 세포 현탁액을 1200 rpm에서 5분 동안 원심분리하였다. 상청액을 폐기한 후, 세포를 신선한 성장 배지 중에 재현탁시키고, 혈구계를 사용하여 세포 농도를 결정하였다. 다음에, 독시시클린 0.5 μg/ml를 세포 현탁액에 첨가하여 hROMK 채널 발현을 유도하고, 세포 현탁액 50 μl (10,000개 세포/웰)를 폴리-D 리신 코팅된 384 웰 흑색, 광학적으로 투명한 바닥의 플레이트 (6007718, 퍼킨 엘머(Perkin Elmer))의 각 웰에 첨가하였다. 검정 플레이트를 5% CO₂ 인큐베이터 내 37℃에서 유지하였다.

검정 프로토콜: 실험 당일에, 배지를 제거하고, 로딩 완충제를 검정 플레이트에 첨가하였다 (30 μl/웰). 세포를 로딩 완충제 중에서 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 로딩 완충제를 검정 완충제 (30 μl/웰)로 대체한 후, 시험 화합물 또는 대조군을 첨가하였다. 세포를 화합물과 30분 동안 인큐베이션한 다음, 각각 488 및 525 nm의 여기 및 방출 파장으로의 형광 판독을 위해 플레이트를 플렉스스테이션(FlexStation) (몰레큘라 디바이시스(Molecular Devices)) 상에 장착하였다. 각 웰을 90초 동안 2초 간격으로 판독하고, 기준선 판독 20초 후에 자극 완충제를 첨가하였다. 최종 DMSO 농도는 검정 플레이트에서 0.5 또는 1%였다. 시험 화합물 대신 웰에 각각 DMSO 또는 표준 ROMK 억제제 3 μM을 첨가함으로써 양성 및 음성 대조군을 규정하였다.

데이터 분석: 자극 완충제 첨가 후 형광 증가의 기울기 (15초 기간에 걸침)를 소프트맥스 프로(SoftMax Pro)로부터 맞춤 제작 소프트웨어로 내보냈으며, 여기서 이를 % 억제로 전환하였다. 10-포인트 농도 반응 곡선을 사용하여 시험 화합물의 IC₅₀ 값을 추정하였다.

표 6에서의 데이터는 2개의 유효 숫자로 보고된다.

표 6

ROMK 수동 패치 클램프 검정

세포 배양 조건: 세포를 탈륨 유동 검정에 대한 것과 유사한 조건 하에 유지하였다. 실험 16-24시간 전에 독시시클린 0.6 μg/ml를 첨가하여 hROMK 채널 발현을 유도하였다. 실험 당일에, 베르센을 사용하여 세포를 해리시키고, 성장 배지 중에 재현탁시키고, 사용 15분 전에 커버슬립 상에 플레이팅하였다.

전기생리학: 세포가 플레이팅된 커버슬립을 135 NaCl, 5 KCl, 2 CaCl₂, 1 MgCl₂, 10 HEPES, 5 글루코스 (pH 7.4) (mM 단위)로 구성된 배스 용액으로 관류된 실험 챔버에 두었다. 135 KCl, 1 EGTA, 1 MgCl₂, 10 HEPES, 2 Na₂ATP (pH 7.3) (mM 단위)를 함유하는 용액으로 채워진 경우에 2-5 메가옴의 저항을 갖는 패치 피펫을 사용하여 기가실을 형성하였다. 피클램프(pClamp) 소프트웨어 (몰레큘라 디바이시스)에 의해 제어되는 액소패치(Axopatch) 200b 또는 멀티클램프(Multiclamp) 700b (몰레큘라 디바이시스) 증폭기를 사용하여 세포를 전세포 배열로 -75 mV에서 전압 클램핑하였다. 10초마다 -120 mV로 전압 스텝을 적용하여 전류를 기록하였다. 각각의 화합물에 대해, 최저 농도에서 출발하여 연속 방식으로 3-8분 동안 4-6가지 농도를 적용하였다. 실험 말미에, 2mM Ba²⁺를 함유하는 배스 용액으로 세포를 관류시켜 hROMK 전류의 기여를 절연시켰다.

데이터 분석: 원 전류 값 (대조군, 상이한 화합물 농도 및 Ba²⁺ 처리군에 대해 각각 5개 트레이스)을 클램프피트(Clampfit)로부터 마이크로소프트웨어 엑셀(Microsoft Excel)로 내보냈으며, 여기서 Ba²⁺를 적용한 후 잔류하는 전류를 원 전류에서 차감하여 hROMK 특이적 전류를 수득하였다. 이어서, 이들 hROMK 전류 값 (각각의 군에 대해 5개 트레이스의 평균)을 맞춤 제작 템플릿으로 불러들여 농도 반응 곡선을 생성하였으며, 이를 후속적으로 4 파라미터 방정식에 피팅시켜 시험 화합물의 IC₅₀ 값을 계산하였다.

표 7에서의 데이터는 2개의 유효 숫자로 보고된다.

표 7

hERG 수동 패치 클램프 검정

hERG 전기생리학 검정: 패치 클램프 기술을 사용하여 hERG 채널을 안정적으로 발현하는 HEK 293 세포 상에서 실험 화합물들을 hERG 활성에 대해 평가하였다. hERG 발현 세포가 플레이팅된 커버슬립을 실험 챔버에 두고, 실온에서 140 NaCl, 4 KCl, 1.8 CaCl₂, 1 MgCl₂, 10 글루코스, 10 HEPES (pH 7.4, NaOH) (mM 단위)로 구성된 용액으로 관류시켰다. 보로실리케이트 패치 피펫은 130 KCl, 1 MgCl₂, 1 CaCl₂, 10 EGTA, 10 HEPES, 5 ATP-K₂ (pH 7.2, KOH)를 함유하는 내부 용액으로 채워진 경우에 2-4 메가옴의 팁 저항을 가졌다. 피클램프 (액손 인스트루먼츠(Axon instruments), 캘리포니아주 유니온 시티) 소프트웨어에 의해 제어되는 액소패치 200B (액손 인스트루먼츠) 패치 클램프 증폭기를 사용하여 세포를 전세포 배열로 -80 mV에서 클램핑하였다. 기가실의 형성 시, 하기의 전압 프로토콜을 반복적으로 (0.05 Hz) 적용하고 테일 전류를 기록하였다: 2초 동안의 -80 mV에서 +20 mV로의 탈분극 단계 후, 테일 전류를 도출하기 위한 -65 mV (3초)로의 과분극 단계. 테일 전류의 안정화 후에 화합물을 적용하였다. 먼저, 세포외 용액 단독 (대조군)의 존재 하에, 및 후속적으로 증가하는 화합물 농도를 함유하는 세포외 용액에서, 테일 전류를 기록하였다. 각각의 화합물 농도를 2-5분 동안 적용하였다. 각각의 농도에서의 백분율 억제를 대조군 용액의 존재 하에 기록된 피크 테일 전류에 비한 피크 테일 전류의 감소로서 계산하였다. 데이터 분석은 맞춤 제작 템플릿에서 수행하였다. 상이한 농도에서의 퍼센트 억제를 플롯팅하여 농도 반응 곡선을 수득하였으며, 이를 후속적으로 4 파라미터 방정식에 피팅시켜 hERG IC₅₀ 값을 계산하였다.

본 발명의 일부 화합물을 hERG 검정에서 시험하였다. 바람직한 화합물은 낮은 hERG 억제 또는 높은 IC₅₀을 갖는다.

표 8

Claims

화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 염.

여기서
R¹은
이고;
각각의 W는 독립적으로 NR^1b 또는 O이고;
Z는 결합 또는 CHR^1d이고;
X는 독립적으로 N 또는 CR^1a이고, 여기서 X는 오직 0, 1, 또는 2개의 위치에서 N이고;
각각의 R^1a는 독립적으로 H, F, Cl, -OH, -CN, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_1-3 알콕시, 또는 C_1-3 플루오로알콕시이고;
각각의 R^1b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬이고;
R^1c는 독립적으로 H, 중수소, C_1-4 알킬, C_1-4 플루오로알킬, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;
R^1d는 H, C_1-3 알킬, C_1-4 플루오로알킬, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;
Y는 -C(R⁶)₂-, -C(R⁶)₂-C(R⁶)₂-, -C(O)-, -C(O)-C(R⁶)₂-, -C(R⁶)₂-C(O)-, 또는 -SO₂-이고;
V는 -O-, -NR⁴-, -CR⁵R⁵-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, 또는 -C(O)-이고; 여기서 V가 -O-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, 또는 -C(O)-인 경우에, Y는 -SO₂-가 아니고, 여기서 V가 -O-, -S-, 또는 NR⁴인 경우에, Y는 C(R⁶)₂가 아니고, 여기서 V가 -S(O)-, -SO₂-, 또는 C(=O)-인 경우에, Y는 -C(=O)-, -C(=O)-C(R⁶)₂-가 아니고;
L¹은 -C(R)₂-, -C(O)-, 또는 -C(R)₂-C(R)₂-이고; 여기서 R은 독립적으로 H, F, OH, C_1-3 알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3 플루오로알킬이고; 여기서 R이 질소 원자에 인접한 탄소 원자에 부착되어 있는 경우에 R은 -OH 또는 F가 아니고;
고리 B는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피라졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 피롤릴, 피라지닐, 옥사졸릴, 피리다지닐, 피롤리디닐, 또는 이미다졸리디닐이고;
R²는 C_6-10 아릴, 또는 N, O, 및 S로부터 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 5 내지 10원 헤테로사이클 고리이고, 헤테로사이클 고리는 옥소 치환을 임의로 함유하고, 아릴 또는 헤테로사이클 고리는 0-3개의 R^2a로 치환되고;
R^2a는 독립적으로 OH, =O, CN, 할로, C_1-4 알킬, C_1-4 듀테로알킬, C_1-4 플루오로알킬, C_1-4 알콕시, C_1-4 듀테로알콕시, C_1-4 플루오로알콕시, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 시클로알콕시, C(=O)NR^4bR^4b, C(=O)C_1-4 알킬, SO₂R^e, NR^4bSO₂R^4b, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 6원 헤테로사이클이고, 헤테로사이클은 옥소 치환을 임의로 함유하고, 0-3개의 R^2b로 치환되고;
R^2b는 독립적으로 C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_3-6 시클로알킬, 또는 C_3-6 플루오로시클로알킬이고;
R^3a는 H, 할로, OH, CN, C_1-3 알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 알콕시, 또는 C_3-6 시클로알킬이고, 여기서 V가 -O-, -NR⁴-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, 또는 -C(=O)-인 경우에, R^3a는 할로가 아니고, 여기서 V가 -O-, -NR⁴-, -S-인 경우에, R^3a는 OH, CN이 아니고;
R^3b는 H, =O, C_1-3 알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 알콕시, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;
R⁴는 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_2-3 히드록시알킬, CO₂R^4a, C(O)R^4a, SO₂R^4a, C(O)N(R^4bR^4b), SO₂N(R^4bR^4b), 또는 OH이고;
R^4a는 C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 10원 헤테로사이클이고, 아릴 또는 헤테로사이클은 0-3개의 R^4c로 치환되고;
R^4b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 10원 헤테로사이클이고;
대안적으로, 2개의 R^4b는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께, 결합되어 O, S, 및 N으로부터 선택된 추가의 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3 내지 6원 포화 고리를 형성하고;
R^4c는 독립적으로 H, F, Cl, 또는 C_1-3 알킬이고;
R⁵는 독립적으로 H, F, OH, C_1-3 알콕시, C_1-3 플루오로알콕시, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, NR^5bR^5b, O-R^5c이거나, 또는 2개의 R⁵는 =O이고; 여기서 1개의 R⁵가 F, OH 또는 NR^5bR^5b인 경우에, 다른 R⁵는 OH, 또는 NR^5bR^5b가 아니고;
R^5b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_3-6 시클로알킬, C(O)R^a, SO₂R^a, 또는 C(O)NR^bR^b이고;
대안적으로, 2개의 R^5b는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께, 결합되어 O, S, 또는 N으로부터 선택된 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3 내지 6원 포화 고리를 형성하고;
R^5c는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_3-6 시클로알킬, 또는 C(O)NR^bR^b이고;
R⁶은 독립적으로 H, OH, F, C_1-3 알킬, C_1-3 듀테로알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_1-3 알콕시, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 히드록시듀테로알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3 플루오로알콕시알킬, 또는 NR^6bR^6b이고; 여기서 1개의 탄소 원자 상의 1개의 R⁶이 F, OH 또는 NR^6bR^6b인 경우에, 동일한 탄소 원자 상의 다른 R⁶은 OH 또는 NR^6bR^6b가 아니고;
R^6b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_3-6 시클로알킬, C(O)R^a, SO₂R^a, 또는 C(O)NR^bR^b이고; 대안적으로, 2개의 R⁶은 이들이 부착되어 있는 동일한 원자와 함께 O, S, 및 N으로부터 선택된 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3 내지 6원 포화 고리를 형성할 수 있고;
R^a는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 10원 헤테로사이클이고;
R^b는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_3-6 플루오로시클로알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 10원 헤테로사이클이고;
대안적으로, 2개의 R^b는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께, 결합되어 O, S, 및 N으로부터 선택된 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3 내지 6원 포화 고리를 형성하고;
각각의 R^d는 독립적으로 H, F, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 알콕시, C_1-3 플루오로알콕시, C_1-3 히드록시알킬, C_3-6 시클로알킬, 할로, OH, =O, CN, OCF₃, OCHF₂, CHF₂CF₃, 또는 C(O)NR^eR^e이고;
각각의 R^e는 독립적으로 H, C_1-3 알킬, C_2-3 플루오로알킬, C_3-6 시클로알킬, C_2-3 히드록시알킬, C_2-3 알콕시알킬, C_6-10 아릴, 또는 O, S, 및 N으로부터 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 10원 헤테로아릴이고;
대안적으로, 2개의 R^e는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께, 결합되어 O, S, 또는 N으로부터 선택된 0-2개의 헤테로원자를 함유하는 3 내지 6원 포화 고리를 형성하고;
n은 0, 1, 또는 2이다.
제1항에 있어서,
R¹은
이고;
각각의 R^1a는 독립적으로 F, Cl, C_1-3 알킬, C_1-3 플루오로알킬, 및 C_3-6 시클로알킬로부터 선택되고;
R^1c는 독립적으로 H, 중수소, C_1-2 알킬, 또는 C_3-6 시클로알킬이고;
n은 0, 1, 또는 2인
화합물 또는 그의 염.
제1항 또는 제2항에 있어서,
R²는 페닐, 피리디닐, 인돌릴, 인다졸릴, 벤조[d]옥사졸-오닐, 피라졸로[4,3-b]피리디닐, 피리딘-2-오닐, 피라졸릴, [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리디닐, 이미다조[1,2-b]피리다지닐, 피라지닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 티아졸릴, 티오페닐, 1,2,3-트리아졸릴, 벤조[d][1,2,3]트리아졸릴, [1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다지닐, 벤조[d]이미다졸릴, 이미다졸릴, 피라졸로[3,4-b]피리디닐, 피라졸로[3,4-c]피리디닐, 피라졸로[4,3-c]피리디닐, 피롤릴, 피롤로[2,3-b]피리디닐, 피롤로[2,3-c]피리디닐, 피롤로[3,2-b]피리디닐, 피롤로[3,2-c]피리디닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 테트라졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 옥사졸릴, 피리다지닐, 피리미디닐, 또는 벤조[d]옥사졸-2-오닐, 트리아졸릴, 옥사디아졸릴, 또는 피롤로피리디닐이고, 각각은 0-3개의 R^2a로 치환된 것인 화합물 또는 그의 염.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
고리 B는 피리디닐, 피리미디닐, 피라졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 이속사졸릴, 피라지닐, 옥사졸릴, 또는 피리다지닐인 화합물 또는 그의 염.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
V는 -O-, -NR⁴-, -CR⁵R⁵-, 또는 -C(=O)-이고;
여기서 V가 -O-, 또는 NR⁴인 경우에, Y는 C(R⁶)₂가 아니고;
Y는 -C(R⁶)₂-, -C(R⁶)₂-C(R⁶)₂-, -C(=O)-, -C(=O)-C(R⁶)₂-, 또는 -C(R⁶)₂-C(O)-이고;
L¹은 -C(R)₂-, -C(O)-, 또는 -CH₂-C(R)₂-이고; 여기서 R은 독립적으로 수소, F, OH, C_1-3 알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3플루오로알킬로부터 선택된 것인
화합물 또는 그의 염.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
R²는 페닐, 피리디닐, 인돌릴, 인다졸릴, 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐, 피라졸로[4,3-b]피리디닐, 피리딘-2(1H)-오닐, 피라졸릴, 피리미디닐, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리디닐, 이미다조[1,2-b]피리다지닐, 피라지닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 티오페닐, [1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다지닐, 피라졸로[1,5-a]피리미디닐, 또는 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐이고, 각각은 0-3개의 R^2a로 치환되고;
R^2a는 OH, =O, CN, 할로, SO₂C_1-4 알킬, 0-1개의 R^2b로 치환된 옥사졸리딘-2-온이고;
R^2b는 C_1-3알킬, C_1-3 플루오로알킬, C_1-3 알콕시, 또는 C_1-3 플루오로알콕시인
화합물 또는 그의 염.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
R¹은
이고;
R^1a는 독립적으로 H 또는 -CH₃인
화합물 또는 그의 염.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
고리 B는 피리디닐, 트리아졸릴, 티아졸릴, 옥사디아졸릴, 이미다졸릴, 또는 피라졸릴이고;
R²는 페닐, 피리디닐, 피리미디닐, 벤조[d]옥사졸-2(3H)-오닐, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 또는 옥사디아졸릴이고, 각각은 0-3개의 R^2a로 치환된 것인
화합물 또는 그의 염.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
V는 -O-, -NR⁴-, 또는 -CR⁵R⁵-이고;
Y는 -C(R⁶)₂-C(R⁶)₂- 또는 -C(R⁶)₂-이고;
L¹은 -C(R)₂-이고; 여기서 R은 독립적으로 수소, F, OH, C_1-3 알킬, C_1-3 히드록시알킬, C_1-3 알콕시알킬, 또는 C_1-3 플루오로알킬이고;
R⁶은 독립적으로 H, C_1-3-알킬, C_1-3-플루오로알킬, 또는 C_3-6-시클로알킬인
화합물 또는 그의 염.
제1항에 있어서, 실시예로부터 선택되는 화합물 또는 그의 염.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 1종 이상의 화합물 또는 그의 염; 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 심혈관 질환을 치료하는 요법에 사용하기 위한 화합물.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 심혈관 질환의 치료에 사용하기 위한 화합물.
제13항에 있어서, 상기 질환이 고혈압, 관상동맥 심장 질환, 졸중, 심부전, 수축기 심부전, 확장기 심부전, 당뇨병성 심부전, 급성-대상부전성 심부전, 수술후 용적 과부하, 특발성 부종, 폐고혈압, 폐동맥 고혈압, 심기능부전, 신증후군, 및 급성 신장 기능부전으로부터 선택된 것인 화합물.
이뇨 또는 나트륨이뇨의 촉진에 사용하기 위한 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.