KR20190122098A - 팽화 지황 추출물을 함유하는 항염증, 항산화 및 면역강화 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 팽화 지황(Rehmannia Glutinosa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증 또는 항산화용 조성물을 제공한다.
Description
본 발명은 팽화 지황(Rehmannia Glutinosa) 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것이다.
염증(inflammation)은 감염으로 인한 인체 조직손상을 막는 방어기전으로 발전, 발열, 통증과 같은 증상을 수반하며, 병원성 물질을 제거하고 조직의 재생을 통해 정상적인 구조와 기능을 회복시킨다.
그러나 항원이 제거되지 않거나, 내부물질이 원인이 되어 염증반응이 과도하게 혹은 지속적으로 야기되면 점막손상이 촉진되고, 신경퇴행성질환과 같은 각종 만성질환 및 암 등의 유발할 수 있다.
외부 자극으로 손상된 세포들은 염증 유발 사이토카인(pro-inflammatory cytokine) 및 케모카인(chemokine), 인터루킨(interleukine), 인터페론(interferon) 등의 다양한 생물학적 매개 물질을 분비하고, 혈관 확장에 의해 투과성이 증가하므로 항체, 보체, 혈장(plasma), 식균 세포들이 염증부위로 집중된다. 상기 현상은 홍반을 유발할 수 있다.
염증을 소실시키기 위해 염증원의 제거, 생체 반응 및 증상을 감소시키는 작용을 하는 약물을 항염증제라고 한다.
현재까지 항염의 목적으로 이용되고 있는 물질로는 비스테로이드계로 플루폐나믹산(flufenamic acid), 이부프로펜(ibuprofen), 벤지다민(benzydamine), 인도메타신(indomethacin) 등이 있고 스테로이드계통으로 프레드니솔론(prednisolone), 덱사메타손(dexamethasone) 등이 있다. 또한, 알란토인, 아즈엔, 하이드로코티손 등이 항염증에 효과가 있는 것으로 알려져 있으나, 안전성의 문제로 사용량이 제한되거나, 효과가 미미하여 실질적으로 염증 완화 효과를 기대할 수 없는 문제점이 있다.
본 발명자들은 천연물 유래의 항염 활성을 가진 물질을 찾고자 예의 노력한 결과, 가공 방법을 달리함으로써 생산성뿐만 아니라 항염증 및 항산화 활성을 증대시킬 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 전술한 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로, 본 발명의 목적은 천연물 유래의 성분을 함유하여 생체 안전성이 우수하며 염증성 질환의 치료 효과가 우수한 조성물, 및 이의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 측면에 따르면, 팽화 지황(Rehmannia Glutinosa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증 또는 항산화용 조성물이 제공된다.
일 실시예에서, 상기 지황은 650 내지 1000 kPa의 압력에서 팽화될 수 있다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 건강기능식품이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, a) 지황의 수분함량을 조절하는 단계; b) 상기 지황을 미리 정해진 압력에서 팽화하는 단계; 및 c) 추출하는 단계;를 포함하는 항염증 또는 항산화능이 증대된 지황 추출물의 제조방법이 제공된다.
일 실시예에 있어서, 상기 b) 단계에서 650 내지 1000 kPa의 압력에서 팽화할 수 있다.
본 발명에 따르면, 종래의 숙지황 제조방법과 비교하여 가공시간을 현저히 단축될 수 있을 뿐만 아니라, 항염 및 항산화 활성이 더욱 개선될 수 있다.
본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
도 1은 팽화 압력에 따른 건지황(상단) 및 증지황(하단)의 형태학적 변화를 나타낸 사진이다.
도 2는 팽화 압력에 따른 건지황 및 증지황의 추출 수율을 측정한 결과이다.
도 3은 팽화 압력에 따른 건지황 및 증지황의 항염증 활성을 측정한 결과이다.
도 4는 팽화 압력에 따른 건지황 및 증지황의 항산화 활성을 측정한 결과이다.
도 5는 팽화 압력에 따른 건지황 및 증지황의 면역증강 활성을 측정한 결과이다.
도 2는 팽화 압력에 따른 건지황 및 증지황의 추출 수율을 측정한 결과이다.
도 3은 팽화 압력에 따른 건지황 및 증지황의 항염증 활성을 측정한 결과이다.
도 4는 팽화 압력에 따른 건지황 및 증지황의 항산화 활성을 측정한 결과이다.
도 5는 팽화 압력에 따른 건지황 및 증지황의 면역증강 활성을 측정한 결과이다.
본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
수치 범위는 상기 범위에 정의된 수치를 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최대의 수치 제한은 낮은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 낮은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최소의 수치 제한은 더 높은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 높은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 수치 제한은 더 좁은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼, 더 넓은 수치 범위 내의 더 좋은 모든 수치 범위를 포함할 것이다.
이하, 본 발명의 실시예를 상세히 기술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 한정되지 아니함은 자명하다.
본 발명의 일 측면에 따른 팽화 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증 또는 항산화용 조성물이 제공된다.
본 발명자들은 종래의 숙지황을 제조함에 있어 많은 시간 및 비용이 소요되는 문제점을 해결하고자 신규한 지황 가공방법을 도출하였다.
상기 “팽화(Puffing)”는 고온·고압의 상태에서 압력을 갑자기 낮추어서 재료 중의 전분의 호화를 유도하고, 재료 내 수분의 제거와 함께 부피를 증가시키는 공법을 지칭한다.
상기 “지황”은 현삼과(Scrophulariaceae)의 다년생 숙근초로서 이용부위는 뿌리이며, 대부분 한약재로 이용된다. 상기 지황은 육색이 황적색을 띠며 뿌리가 굵고 긴 것이 상품으로 취급하고 있다. 대한약전 생약규격집에 의하면 '한약으로 제조된 생지황의 뿌리는 원주형∼방추형을 이루고 길이 5 내지 15 cm, 지름 8 내지 20 mm로 때로는 꺾이었거나 변형되어 있다.
지황의 분류는 다음과 같다.
1) 생지황 : 지황(Rehmannia glutinosa)의 신선한 뿌리이다.
2) 건지황 : 지황의 신선한 뿌리를 40∼50 ℃에서 건조하며 생지황 무게의 25∼30 % 정도가 된다.
3) 숙지황 : 생지황을 포제 가공한 것이다.
상기 생지황의 보혈, 강장, 해열약으로 빈혈이나 토혈, 허약증 등에 효능이 있다. 또한 상기 생지황은 강심, 지혈작용이 있어서 하혈, 자궁출혈 등에 사용하며, 결핵성 쇠약에 효과가 있고, 타박상에 외상약으로 사용한다. 상기 생지황은 일반적으로 동의보감의 처방인 '경옥고'를 제조하는 주원료 사용되고 있다.
상기 건지황은 생지황을 건조한 것으로 약성이 차서 소화장애를 유발하므로, 대부분 약술로 9번 찌고 말린(9증9포) 숙지황을 한약재로 사용하고 있다.
상기 숙지황은 약성을 따뜻하게 만들어 소화장애가 없으며 보혈, 강장, 강심, 당뇨병, 혈압강하, 해열 작용을 하며, 빈혈이나 토혈, 그리고 허약증에 효능이 있으며, 우리나라 기성한의서에 의한 처방약제로 '육미지 황탕'과 '십전대보탕'의 주약재로 사용된다.
상기 “추출물”은 용매와 추출재료를 특정 조건하에서 접촉시킴으로써 추출재료에 함유된 유효성분을 분리해낸 것으로, 상기 추출물은 팽화 지황에 대한 추출 공정에 의해 원료 내의 유효성분을 포함할 수 있다.
상기 “유효성분으로 포함하는”은 투여하고자 하는 개체에 대한 치료적 또는 예방적 효과를 제공하기에 충분한 팽화 지황을 포함하는 것을 의미하며, 팽화 지황은 인체에 대한 독성이 없으므로 당업자가 다양한 변수를 고려하여 양적 상한을 적절히 조정할 수 있다. 예컨대, 항염 활성, 면역증강 활성 및 항산화 활성 등을 나타낼 수 있는 정도의 유효량을 함유하는 것을 의미한다.
상기 “항염증”은 염증을 억제하는 작용을 의미하며, 염증반응의 조절은 매우 복잡한 것으로 알려져 있는데, 이는 생체 내 복구체계의 증강 및 손상을 감소시킨다. 그러나 반복되는 조직의 손상이나 재생에 의해 염증반응이 지속되면, 염증관련 세포에서 ROS와 RNS가 과다 생성되고 영구적인 유전자의 변형이 야기될 수 있다. 즉, ROS와 RNS는 생체 내 여러 가지 세포의 작용을 조절하는 염증 반응과 밀접하게 관련될 수 있다.
염증 과정 중에는 많은 양의 염증유도 사이토카인(proinflammatory cytokines), 아질산(nitric oxide, NO), 프로스타글란딘(prostaglandin E2, PGE2)이 유도성 일산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS)와 사이클로옥시게나아제(cyclooxygenase-2, COX-2)에 의해 생성된다. 상기 염증은 다양한 염증성 질환을 유발하는 원인으로써, 상기 지황 추출물은 우수한 항산화 활성 및 항염증 작용을 통해 염증성 질환에 대한 예방 및 개선 효과를 가질 수 있다.
상기 팽화 지황 추출물은 종래의 제조방법으로 제조된 9증9포 숙지황과 비교하여 염증성 사이토카인인 IL-6(Interleukin-6)의 활성을 동등한 수준으로 억제시킬 수 있다(도 3).
상기 “항산화”는 세포 내 대사 또는 자외선의 영향으로 인한 산화적 스트레스에 따라 반응성이 높은 자유 라디칼(free radical) 또는 활성 산소종(Reactive oxygen species, ROS)에 의한 세포의 산화를 억제하는 기능을 의미하며, 자유 라디칼 또는 활성 산소종을 제거하여 이로 인한 세포의 손상이 감소되는 것을 포함한다.
상기 팽화 지황 추출물은 종래의 제조방법으로 제조된 9증9포 숙지황과 비교하여 팽화 압력이 증가함에 비타민 C의 등가(Vitamin C equivalent)값이 현저하게 증가할 수 있다(도 4).
상기 “면역”은 생물체 내에서 병원체와 종양 세포 등을 탐지한 다음 죽임으로써 질병으로부터 생명체를 보호하는 기작을 말한다. 상기 면역기능은 내재면역(Innate immune)과 적응면역(adaptive immune) 기능이 있으며, 내재면역은 미생물들과 독소들이 체내로 진입하는 데 성공하였을 때 곧바로 작용하는 면역 기능으로 패턴 인식 수용체가 미생물들 사이에 널리 보존되어 있는 부분을 인지하여 외부의 미생물을 감지하는 방식으로 작용하거나, 손상된 세포들이 방출하는 경고성 신호를 같은 종류의 수용체가 이를 인지하여 미생물의 존재 사실을 감지하는 방식으로 작용한다. 상기 적응면역은 항원의 표식을 기억하는 기능을 의미하는 면역기억(immunological memory)을 비롯한 보다 강력한 면역 반응을 말하며 항원에 특이적이며 항원제시(antigen presentation) 과정을 통한 비자기항원의 인지를 필요로 한다.
상기 팽화 지황 추출물은 정상적인 대식세포에 시험물질을 처리하여 종양괴사인자(TNF-α)의 생성량을 측정한 결과 종래의 제조방법으로 제조된 9증9포 숙지황과 비교하여 면역 강화활성이 증대되었다(도5).
본 발명의 다른 측면은 팽화 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 “염증성 질환”은 각종 피부염, 알레르기, 전신성 홍반성 낭창, 망막염, 위염, 간염, 장염, 췌장염 또는 신장염일 수 있고, 상기 알레르기는 과민증(anaphylaxis), 알레르기성 비염(allergic rhinitis), 천식(asthma), 알레르기성 결막염, 알레르기성 피부염, 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 접촉성 피부염, 두드러기(urticaria), 곤충 알레르기, 식품 알레르기 및 약품 알레르기를 포함할 수 있다.
상기 “예방”은 병리학적 현상의 발생 빈도 또는 정도를 감소시키는 모든 행위를 의미한다. 예방은 완전할 수 있으며 또는 부분적일 수도 있다. 이 경우에는 개체 내의 염증에 의해 발생되는 증상이 상기 조성물을 사용 하지 않은 경우와 비교하여 감소하는 현상을 의미할 수 있다.
상기 “치료”는 치료하고자 하는 대상 또는 세포의 천연 과정을 변경시키기 위하여 임상적으로 개입하는 모든 행위를 의미하며, 임상 병리 상태가 진행되는 동안 또는 이를 예방하기 위하여 수행할 수 있다. 목적하는 치료 효과는 질병의 발생 또는 재발을 예방하거나, 증상을 완화시키거나, 질병에 따른 모든 직접 또는 간접적인 병리학적 결과를 저하시키거나, 전이를 예방하거나, 질병 진행 속도를 감소시키거나, 질병 상태를 경감 또는 일시적 완화시키거나, 예후를 개선시키는 것을 포함할 수 있다.
상기 팽화 지황 추출물은 화학 물질 등과 달리 천연물 유래의 물질을 그대로 이용하는 것이므로, 이의 섭취 내지 투여에 따른 치명적인 부작용이 최소화될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 발명의 용어 "약학적으로 허용 가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다.
약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 생리식염수, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록 시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유, 덱스트린, 칼슘카보네이트, 프로필렌글리콜 및 리퀴드 파라핀으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 통상의 담체, 부형제 또는 희석제 모두 사용 가능하다. 상기 성분들은 상기 유효성분인 팽화 지황 추출물에 독립적으로 또는 조합하여 추가될 수 있다.
또한, 상기 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제제화 하여 사용할 수 있다.
상기 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 팽화 지황 추출물과 이의 분획물들에 적어도 하나 이상의 부형제, 예컨대, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 또는 젤라틴 등을 혼합하여 조제할 수 있다. 상기 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제가 사용될 수도 있다.
상기 “분획물(fraction)”은 각종 구성성분 또는 혼합물로부터 각각의 성분 또는 특정의 그룹으로 분리하는 조작, 즉 크로마토그래피, 전기영동, 원심분리 등을 사용하여 분리된 각 성분 내지 그룹을 의미한다.
상기 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 사용될 수 있으며, 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
상기 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 사용될 수 있다. 상기 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르가 사용될 수 있다. 상기 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴이 사용될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 바람직하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 다른 측면은 팽화 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 건강기능식품을 제공한다.
즉, 상기 조성물은 약학 조성물 뿐만 아니라 식품 조성물일 수도 있다. 이러한 경우 상기 식품은 육류, 스낵류, 낙농제품, 음료수 등을 예시할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니며, 통상적인 건강기능식품을 모두 포함하는 개념으로 이해될 수 있다.
상기 건강기능식품은 건강기능식품에 관한 법률에 따른 인체에 유 용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, 상기 기능성은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미할 수 있다.
상기 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 상기 식품 첨가물은 다른 규정이 없는 한 식품의약품안전처에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 적합성 여부를 판단할 수 있다.
상기 식품 첨가물 공전에 기재된 품목은 예컨대 케톤류, 글리신, 구연산칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류를 들 수 있다.
상기 건강기능식품은 염증성 질환의 개선을 위한 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있으며, 예컨대, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성 보조 식품, 식품 첨가제 등에 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품은 염증성 질환의 개선을 목적으로, 전체 중량 대비 1.0 내지 10.0 중량%의 상기 조성물을 포함할 수 있다. 상기 조성물이 1.0 중량% 미만이면 염증성 질환의 개선 효과가 충분히 구현되지 않을 수 있고 10.0 중량% 초과이면 제품 본연의 품질이 구현되지 않거나 비용 효율이 저하될 수 있다.
또한, 상기 건강기능식품은 염증성 질환의 개선을 목적으로 정제, 과립, 분말, 캅셀, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조 및 가공될 수 있다.
구체적으로 상기 정제 형태의 건강기능식품은 팽화 지황 추출물 또는 이의 분획물, 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와의 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축 성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수 있으며, 필요에 따라 적당한 제피제로 제피할 수도 있다.
상기 캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질캅셀제는 통상의 경질캅셀에 가지 추출물 및 부형제 등의 첨가제와의 혼합물 또는 그의 입상물 또는 제피한 입상물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질캅셀제는 팽화 지황 추출물 또는 이의 분획물, 및 부형제 등의 첨가제와의 혼합물을 젤라틴 등 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 솔비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.
상기 환 형태의 건강기능식품은 팽화 지황 추출물 또는 이의 분획물, 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 적당한 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 적당한 제피제로 제피를, 또는 전분, 탈크 또는 적당한 물질로 환의를 입힐 수도 있다.
상기 과립형태의 건강기능식품은 팽화 지황 추출물 또는 이의 분획물, 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 적당한 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다
또한, 상기 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 교미제, 착향제 등에 대한 용어 정의는 당업계에 공지된 문헌에 기재된 것으로 그 기능 등이 동일 내지 유사한 것들을 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은 팽화 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
상기 화장료 조성물은 항염증 또는 항산화용일 수 있고, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 로션, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징 폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이, 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 통상의 방법에 의해 제형화될 수 있다. 피부 외용제의 제형화에 있어서 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있고, 화장료 조성물의 제형화에 있어서 International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed(The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995)에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있다.
구체적으로, 상기 화장료 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형으로 제조할 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등의 화장수; 훼이셜 로션, 바디로션 등의 유액; 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등의 크림; 에센스; 화장연고; 스프레이; 젤; 팩; 선 스크린; 메이크업 베이스; 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션; 파우더; 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일 등의 메이크업 제거제; 또는 클렌징 폼, 비누, 바디워시 등의 세정제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 상기 피부 외용제는, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 화장료 조성물은 각각의 제형에 있어서 상기 필수성분 외에 제형의 종류 또는 사용 목적 등에 따라 본 발명에 따른 목적을 저해하지 않는 범위 내에서 다른 성분들이 적절히 배합될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 통상적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있으며, 예컨대 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 허용 가능한 담체는 제형에 따라 달리할 수 있다. 예컨대, 연고, 페이스트, 크림 또는 젤로 제형화될 때 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 사용될 수 있다
상기 화장료 조성물은 파우더 또는 스프레이로 제형화될 때, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 사용될 수 있고, 스프레이의 경우 클로로플루오로히드로카본, 프로판, 부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 더 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 용액 또는 유탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 용매, 용해화제, 또는 유탁화제가 사용될 수 있고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-브틸글리콜 오일이 사용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 사용될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 현탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리 옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 사용될 수 있다.
상기 화장료 조성물이 비누로 제형화될 때, 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알코올, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 사용될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 최종 제품의 품질이나 기능에 따라 업계에서 통상적으로 사용되는 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉 쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 추가적으로 함유할 수 있다.
다만, 상기 보조제 및 그 혼합 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 영향을 미치지 않도록 적절히 선택할 수 있다.
본 발명의 다른 측면은 (a) 지황의 수분함량을 조절하는 단계; (b) 상기 지황을 미리 정해진 압력에서 팽화하는 단계; 및 (c) 추출하는 단계;를 포함하는 항염증 또는 항산화능이 증대된 지황 추출물의 제조방법을 제공한다.
종래의 숙지황 제조공정에 따르면, 상기 숙지황은 보통 술, 사인(공사인), 진피를 보료로 하여 속과 겉이 검게 되고 윤기가 흐르며 질이 부드럽고 연하며 점조하게 될 때까지 찌고 말리는 작업을 반복하여 제조된다. 이때, 찌고 말리는 작업을 1번 수행한 지황을 증지황이라고 한다.
「한약 생산학 각론(최성규, 신광출판사, 2009)」에서는 지황의 생뿌리 혹은 건지황을 찜통에 수증기로 찐 다음 약주를 묻혀 햇볕에 말린 후 다시 꿀물을 골고루 묻히고 약간 말린다. 이를 다시 찜솥에 찌고 말려 꿀물을 도포하는 과정을 9번 반복(9증9포)해서 숙지황을 만든다.
즉, 상기 팽화 지황 추출물은 종래의 숙지황 제조방법과 비교하여 가공시간을 현저하게 단축시킬 수 있을 뿐만 아니라, 품질은 동등하거나 높은 수준으로 유지할 수 있다.
상기 (a) 단계에서 지황의 종류에는 제한이 없으며, 이 기술분야에서 이용 가능한 지황은 어느 것이나 사용할 수 있으나, 구체적으로 건지황 또는 증지황을 사용할 수 있다.
상기 수분함량은 지황의 총 중량에 대하여 7 내지 13 중량%로 조절할 수 있다. 수분함량이 7 중량% 미만이거나 13 중량%를 초과하는 경우 팽화 효율이 저하될 수 있다.
상기 (a) 단계에서 지황을 35 내지 45 ℃의 열풍으로 건조하여 수분 함량을 조절할 수 있다. 상기 지황을 상대적으로 낮은 온도에서 건조함으로써 열에 의한 지황의 유효성분의 파괴 및 변화를 최소화 할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서 상기 (b) 단계 전에 지황에 쌀을 첨가하고 혼합하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 지황 및 쌀의 혼합비는 1 : 4 내지 1 : 8일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 지황을 쌀과 함께 팽화시킴으로써 팽화 효율이 증대될 수 있으며, 팽화 압력 및 온도 온도로 인한 지황의 유효성분 변성을 최소화할 수 있다. 또한, 상기 쌀은 고온, 고압의 팽화 조건에서 열을 차단해주는 가림막 역할을 함으로써, 지황이 탄화되는 것을 방지할 수 있다.
상기 팽화 방법은 직접팽화법 또는 간접팽화법이 사용될 수 있다. 간접팽화법을 이용한 제품으로는, 열과 전단응력을 이용한 압출성형제품으로 RTE(ready to eat) 씨리얼, 과자류, 육류 대체품, 사료 등이 있으며, 직접팽화법을 이용한 제품으로는 팝콘이나 쌀강정 등이 있다.
팽화가 일어나면, 재료 내에서 팽윤과 호화가 일어나 조직이 커지면서 다공성이 야기되고, 마이얄(Mailliard reaction) 반응이 일어나 갈변이 발생하고, 포름산, 아세트알데히드, 포름알데히드, 글리옥살 등의 휘발성 물질로 인해 풍미가 생성될 수 있다.
상기 (b) 단계는 팽화기에서 수행될 수 있으며, 상기 팽화기는 회전식 팽화기가 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 팽화기를 가열하여 팽화기의 압력이 650 내지 1000 kPa 에 도달하였을 때 팽화기의 뚜껑을 열어 팽화 반응을 진행할 수 있다.
구체적으로, 상기 팽화기를 가열하여 팽화기의 압력이 350 내지 550 kPa 에 도달하였을 때 팽화기의 압력을 150 내지 350 kPa로 낮춘 후, 다시 팽화기를 가열하여 팽화기의 압력이 650 내지 1000 kPa 에 도달하였을 때 팽화기의 뚜껑을 열어 팽화반응을 진행할 수 있다.
상기 팽화 압력이 650 kPa 미만이면 지황의 부피 팽창이 잘 일어나지 않는 문제점이 발생할 수 있고, 1000 kPa 초과이면 과도한 탄화로 인하여 품질이 저하될 수 있다.
상기 (c) 단계의 추출은 천연물로부터 추출물을 추출하는 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도, 압력의 조건 하에서 통상적인 용매를 사용하여 추출할 수 있다.
예컨대, 상기 팽화 지황 추출물은 물, 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 핵산, 디클로로메탄 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는 알코올을 사용할 수 있다.
또한, 상기 팽화 지황으로부터 추출물을 추출하는 방법은 가압 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 추출, 초음파 추출 등의 다양한 방법을 통하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는 가압 추출을 통하여 추출할 수 있으나, 이것으로 제한되는 것은 아니며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
상기 팽화 지황 추출물은 종래 숙지황 제조방법 대비 가공시간을 현저히 단축시킬 수 있을 뿐만 아니라, 항염 및 항산화 활성은 동등하거나 높은 수준으로 개선될 수 있다.
이하, 첨부된 도면을 참고하여 본 발명의 실시예에 관하여 상세히 서술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 제한되지 아니함은 자명하다.
제조예 1 : 팽화 지황의 제조
종래의 제조방법으로 제조한 건지황 및 증지황을 사용하였다.
상기 지황을 40 ℃의 열풍건조기를 이용하여, 수분 함량을 지황 총 중량에 대하여10 중량%로 조절하였다.
상기 지황과 쌀을 1 : 5의 중량비로 혼합하여 미리 예열된 회전식 팽화기(월출종합기계 제조)에 투입한 후, 프로판 가스 버너로 가열 시켜 압력이 490.4 kPa에 도달했을 때 팽화기의 밸브를 열어 294.3 kPa로 중간압을 배출시킨 후, 다시 가열하여 팽화기의 압력이 685.5, 784.5, 882.6 및 980.7 kPa에 도달했을 때 팽화기의 뚜껑을 개방하여 팽화하였다.
도 1을 참조하면, 건지황 및 증지황의 팽화 처리 후 외관상의 가장 큰 변화는 지황의 갈변과 조직의 다공질화, 부피의 팽창이었다.
팽화 압력이 증가할수록 갈변과 조직의 다공질화의 정도가 증가하였으며, 팽화 후에 지황의 부피가 약 3배 증가하였다.
실험예 1 : 팽화 지황의 추출 수율
본 발명에 따른 팽화 지황(실험군)과 팽화 처리를 하지 않은 지황(대조군, 0)을 이용하여 추출 수율을 비교하였다.
구체적으로는 상기 지황 150 g에 70 %(v/v) 에탄올(주정) 20배를 가한 뒤, 실온에서 80-100 rpm으로 30분간 교반하여 추출하였다.
킴블 필터링 플리스크(Kimble-filtering flask)에 펜넬(funnel)을 장착하고 여과지(Whatman No.2)를 사용하여 추출물을 여과하였다.
여과액을 미리 항량된 수기에 넣어 45 내지 50 ℃의 수온에서 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)를 사용하여 감압농축(BUCHI rotavapor R-124, BUCHI water bath B-481, Switzerland)하였으며, 105 ℃에서 24시간 건조 향량시킨 뒤 무게를 측정하여 원시료에 대한 백분율로 지황 농축액의 추출 수율을 계산하였다.
비팽화 실험군으로 종래의 제조방법으로 제조된 9증9포 숙지황을 사용하였다.
도 2를 참조하면, 비팽화 실험군의 추출 수율은 53 내지 57%, 대조군의 추출 수율은 56 내지 63%였으나, 팽화 지황(제조예 1)의 추출 수율은 57 내지 74 %로 현저히 증가하였다.
이는 팽화에 의한 조직의 다공질화로 인해 추출 용매의 침투용이성이 증가하였기 때문이며, 784.4 내지 882.6 kPa로 가압한 팽화 지황의 추출 수율이 가장 높은 수준으로 평가되었다.
실험예 2 : 항염 활성 시험
IL-6(interleukin-6)와 TNF-α(tumor necrosis factor-α)는 염증성 사이토카인으로 대식세포에 의해 주로 생산되며, 이러한 염증 관련 유전자들은 NF-κB에 의해 전사되는 것으로 보고되어 있다.
팽화 지황이 염증성 사이토카인을 조절하는 활성이 있는지 ELISA 방법을 이용하여 확인하였다.
먼저 Raw 264.7세포에 본 발명에 따른 팽화 지황(실험군)과 팽화 처리를 하지 않은 일반 건지황 및 증지황(대조군, 0)을 100 μg/mL 농도로 24시간 전처리하고 LPS 1 μg/mL를 24시간 처리한 후 상등액을 수거하였다.
ELISA 방법을 이용하여 IL-6의 양을 양적 샌드위치 효소-연결 면역분석 키트(BD, USA)를 이용하여 측정하였다.
무처리군으로 세포배지(DMEM)로 사용하였으며, 비팽화 실험군으로 종래의 제조방법으로 제조된 9증9포 숙지황을 사용하였다
도 3을 참조하면, 실험군은 비팽화 실험군을 비교하였을때 IL-6의 농도를 동등하거나 더 낮은 수준으로 감소시켰다.
상기 결과는 본 발명이 팽화 지황이 종래의 9증9포 숙지황과 비슷한 수준이거나 더욱 효과적으로 염증성 사이토카인을 조절할 수 있음을 시사한다.
실험예 3 : 항산화 활성 시험
ABTS 법을 이용하여 팽화지황 추출물의 ABTS radical 소거능을 측정하였다.
1.0 mM의 AAPH(2,2'-azobis-(2-amidinopropane)HCl)과 2.5 mM의 ABTS(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt)를 100mL의 PBS에 녹여 30분간 가열, 혼합하여 라디칼 용액을 제조하였다.
라디칼 용액을 실온에서 식힌 뒤 Acrodisc LC13 PVDF 0.45 μm 필터로 여과하였다.
fluorescent spectrophotometer(Biotek Instrument Inc., Winooski, VT, USA)로 734 nm파장에서 형광 세기(fluorescent intensity)를 측정하여 0.650±0.020의 흡광도 수준까지 PBS로 희석하였다. 측정 전까지 제조한 시약은 37℃에 보관하였다.
20 μL의 팽화 지황 추출물과 980 μL의 라디칼 용액을 혼합하여 10분간 반응시켰다.
팽화 지황 추출물의 ABTS 라디칼 소거능은 fluorescent spectrophotometer (Biotek Instrument Inc., Winooski, VT, USA) 734nm의 파장에서 형광 세기를 측정하였으며, 측정 결과는 비타민 C 등가(Vitamin C equivalent) 값으로 변환하였다.
무처리군으로 식염수(PBS)를 사용하였으며, 비팽화 실험군으로 종래의 제조방법으로 제조된 9증9포 숙지황을 사용하였다.
도 4를 참조하면, 실험군(제조예 1)은 팽화 압력이 증가할수록 비타민 C 등가값이 증대되었으며, 특히, 대조군 및 비팽화 실험군과 비교하여 항산화 활성이 더욱 우수한 수준으로 평가되었다.
실험예 4 : 면역 활성 시험
통상의 방법에 따라 5x104 농도의 RAW 264.7 세포에 각 추출물을 10 g/mL의 농도로 처리하였다.
24시간 후, 세포배양액을 300 x g의 조건에서 원심분리하여 상층액을 취하였다.
ELISA 방법을 이용하여 TNF-α 양을 양적 샌드위치 효소-연결 면역분석 키트(BD, USA)를 이용하여 측정하였다.
무처리군으로 세포배양액(DMEM)을 사용하였으며, 양성대조군으로 종래의 제조방법으로 제조된 9증9포 숙지황을 사용하였다.
도5를 참조하면, 비팽화 지황(팽화압력 0 kPa) 추출물과 비교하여 882.6 내지 980.7 kPa의 압력에서 수득한 팽화 지황 추출물의 면역강화 활성이 더욱 우수하였으며, 이는 종래 9증9포숙지황 추출물 대비 증진된 효능을 의미한다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (7)
- 팽화 지황(Rehmannia Glutinosa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증 또는 항산화용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 지황은 650 내지 1000 kPa의 압력에서 팽화된 항염증 또는 항산화용 조성물. - 제1항 또는 제2항의 조성물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제1항 또는 제2항의 조성물을 유효성분으로 포함하는 건강기능식품.
- 제1항 또는 제2항의 조성물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물.
- (a) 지황의 수분함량을 조절하는 단계;
(b) 상기 지황을 미리 정해진 압력에서 팽화하는 단계; 및
(c) 추출하는 단계;를 포함하는 항염증 또는 항산화능이 증대된 지황 추출물의 제조방법. - 제6항에 있어서,
상기 b) 단계에서 650 내지 1000 kPa의 압력에서 팽화하는 지황 추출물의 제조방법.
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