KR20190118987A

KR20190118987A - 사데풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물

Info

Publication number: KR20190118987A
Application number: KR1020190107773A
Authority: KR
Inventors: 이대성; 최그레이스; 임미진; 이정민
Original assignee: 국립해양생물자원관
Priority date: 2019-08-30
Filing date: 2019-08-30
Publication date: 2019-10-21
Also published as: KR102093073B1

Abstract

본 발명은 사데풀 추출물을 활성성분으로 포함하는 항염증용 조성물을 제공하며, 상기 구성에 의하면 사데풀 추출물의 항염증 효과를 규명하고, 이를 이용하여 비누, 화장품 등의 제품에 응용함으로써 관련 산업의 확대 및 국민건강에 기여할 수 있는 사데풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물을 제공한다.

Description

사데풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물{ANTIINFLAMMATORY COMPOSITION COMPRISING EXTRACTS OF SONCHUS BRACHYOTUS}

본 발명은 사데풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 사데풀 추출물의 항염증 효과를 규명하고, 이를 이용하여 비누, 화장품 등의 제품에 응용함으로써 관련 산업의 확대 및 국민건강에 기여할 수 있는 사데풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물에 관한 것이다.

인체는 일생동안 많은 종류의 염증 질환에 시달린다. 특히 아토피성 피부염, 알러지성 피부염, 류마티스 관절염, 기관지 천식 등의 만성 난치성 염증 및 여드름은 현재까지 완치할 수 있는 치료법이 확립되어 있지 않기 때문에 이들 질환을 조절하고 치료할 수 있는 새로운 약물의 개발이 시급하다.

염증은 세포나 조직이 외부로부터의 자극에 대한 생체조직의 방어 반응의 하나로, 신경, 혈관, 조직, 혈액 등과 세포 반응을 일으키는데 그 정도가 지나칠 경우 결과적으로 가려움, 발열, 발적 등이나 통증, 조직 손상 등의 현상을 초래하기도 한다. 염증반응은 선천성 면역반응의 일부로 병원체에 특이적으로 존재하는 세포 표면의 패턴을 인식하는 것에서 부터 시작된다. 대식세포(macrophage)는 그런 특이적으로 존재하는 세포 표면을 가진 세포를 비자기로 인식하고 병원체에 부착한다. 염증의 발생 원인으로는 다양한 생화학적 현상이 관여하고 있으나, 특히 일산화질소(nitric oxide, NO)를 생성하는 효소인 일산화질소 생성효소(NO synthase, NOS)와 다양한 프로스타글란딘(prostaglandins, PGs)의 생합성을 매개하는 효소인 cyclooxygenase(COX)가 염증반응을 조절하는 중요한 매개체이다. 이와 같이 NO 및 PGs가 염증반응과 밀접하게 관련되어 있어, 이들의 생성과 생성에 관여하는 효소의 발현을 조절할 수 있는 물질이 염증질환의 예방 및 치료제로서 주목을 받고 있다. 현재까지 항염의 목적으로 이용되고 있는 물질은 비스테로이드계로서 이부프로펜(ibuprofen), 인도메타신(indomethacin) 등이 있고, 스테로이드계로는 프레드니솔론(prednisolone), 덱사메타손(dexamethasone)등이 있으며, 그 외에 신경 펩타이드 길항제, 브라디키닌 길항제, COX억제제 등이 제시되어 왔으나, 피부에 대한 안전성 면에서나 제제 배합시의 안정성 면에서 문제점을 안고 있어서, 그 사용이 제한되고 있다.

여드름이라고 불리워지는 피부질환은 폐쇄성 또는 개방성 면포, 구진, 농포, 낭종, 결절 등 다양한 피부병변을 나타내는 모낭피지선에 발생하는 피부 질환이다. 여드름의 발생요인으로는 피지분비의 증가, 모낭내 이상각화, 여드름균의 군락형성 등이 있다. 이러한 요인들은 복합적으로 작용하여 여드름 병변을 일으키게 된다. 즉, 남성호르몬 등의 분비항진에 의해 피지선의 기능이 항진되고 이에 따라 생성된 과잉의 피지가 모낭벽의 과각화를 초래해 모낭내에 정체되면 면포가 형성되는데 이 상태가 여드름 발병의 초기단계이다. 피지분비가 증가되고 모낭이 과각화됨에 따라 모낭 내에 정체된 피지가 모낭을 막아 공기의 순환을 차단하게 되면, 모낭내에 상주하는 혐기성 세균인 여드름균이 잘 자랄 수 있는 환경이 되어 여드름균이 과다 증식하게 된다. 이 때 여드름균은 지방분해효소와 화학주성인자를 분비하여 유리지방산을 만들어 백혈구가 모낭주위에 모이게 하며, 이들이 모낭벽을 자극하고 파괴하여 모낭 내용물이 진피내로 유출됨에 따라 초기의 비염증성 여드름이 염증성 여드름으로 진행되며, 화농성 여드름으로까지 악화된다.

일반적으로 여드름의 치료는 그 발생 원인을 억제함으로써 이루어진다. 그 중에서 전술한 여드름균을 제거함으로써 여드름을 치료하기 위해 사용되는 국소도포요법제로서는 벤조일퍼옥사이드(Benzoyl peroxide), 아젤레익산(Azelaic acid), 레티노익산(Retinoic acid), 살리실산(Salicylic acid), 설퍼(Sulfur), 국소도포 항생제 등을 들 수 있다. 그러나, 이러한 제제들은 소량만으로는 여드름균에 대해 충분한 항균효과를 나타내지 못할 뿐 아니라, 과량 도포 시 피부 발적 또는 피부 건조증 등의 부작용이 발생할 우려가 있는 등 문제점이 있다.

사데풀은 주로 한국, 일본, 중국, 러시아 등지의 간척지 습한 지역, 기수지역 등에 분포하는 국화(Compositae)과 Sonchus 속에 속하는 다년생 초본으로 본 발명자는 이를 이용하여 항염증 효과를 확인하고, 세정을 위한 비누 혹은 화장품 등에 활용할 경우 피부 트러블 개선을 위한 효과가 탁월함을 발견하고서 본 발명에 이르게 되었다.

본 발명은 상기한 바와 같은 종래기술이 가지는 문제를 해결하기 위해 안출된 것으로, 그 목적은 사데풀 추출물의 항염증 효과를 규명하고, 이를 이용하여 비누, 화장품 등의 제품에 응용함으로써 관련 산업의 확대 및 국민건강에 기여할 수 있는 사데풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물을 제공함에 있다.

상기한 바와 같은 본 발명의 기술적 과제는 다음과 같은 수단에 의해 달성되어진다.

(1) 사데풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물.

(2) 상기 (1)에 있어서, 상기 추출물은 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 항염증용 조성물.

(3) 상기 (2)에 있어서, 상기 추출물은 70% 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 항염증용 조성물.

(4) 상기 (1)의 조성물이 비누인 것을 특징으로 하는 항염증용 조성물.

(5) 상기 (1)의 조성물이 화장품인 것을 특징으로 하는 항염증용 조성물.

상기와 같이 본 발명에 의하면, 항염증 효과를 가지는 사데풀 추출물을 이용하여 비누 혹은 화장품을 제조함으로써, 관련 산업의 확대 및 국민건강에 기여할 수 있다.

도 1은 사데풀 추출물을 이용한 NO 저해활성 측정결과이다.
도 2는 사데풀 추출물을 이용한 PGE₂ 저해활성 측정결과이다.

이하 본 발명의 내용을 보다 상세하게 설명하면 다음과 같다.

본 발명에 따른 항염증용 조성물은 사데풀 추출물을 유효성분으로 함유한다.

본 발명에서 사데풀 추출물은 열수추출물, 에탄올 추출물 또는 물과 에탄올의 혼합물을 이용한 추출물, 또는 초임계추출물을 포함한다.

열수 추출물의 경우 1∼10배의 물을 가하여 1 내지 2기압, 80∼120℃하에 1∼12시간 추출하는 것이 바람직하다. 에탄올 추출물의 경우 50 내지 100% 에탄올로 이루어진 추출용매를 이용할 수 있고, 초임계 추출물은 에탄올을 추출용매로 하여 250 내지 350bar의 압력하에 수행되어질 수 있다. 본 발명에서 특히 바람직하게는 상기 추출물은 70% 에탄올 추출물로 한다.

본 발명의 조성물은 비누조성물로 제형화가 가능하며, 본 발명에서 비누조성물은 고형비누, 및 액상비누 모두를 포함하는 의미로 사용된다.

본 발명에서 비누의 원료는 다음과 같은 과정에 의해 얻을 수 있다.

상기 본 발명에 따라 얻을 수 있는 사데풀 추출물을 통상적으로 사용되는 비누베이스, 향료, 보습제 등과 함께 혼합하고, 이 혼합물을 전통적 수제 방식(나무 주걱으로 저어주는)으로 혼합한다. 이때, 사데풀 추출물의 함량은 특별히 한정되는 것은 아니지만, 0.1∼10중량% 정도일 수 있다.

상기 비누베이스는 지방산을 65∼68℃로 가열 용해한 후 82∼87℃에서 알칼리염을 첨가하여 비누화 반응을 실시하고, 상층부분만을 취하여 진한 소금물로 수회 세척한 후 이를 진공 건조하여 수분함량이 15% 정도가 되도록 하면 용이하게 얻을 수 있다.

이때, 상기 비누베이스로는 지방산계 비누베이스, 합성 계면활성제 비누베이스 또는 상기 지방산계 비누베이스와 합성계면활성제 비누베이스가 혼합된 것을 사용할 수 있다.

지방산계 비누베이스는 야자유, 팜유, 대두유, 피마자유, 올리브유, 팜핵유 등에서 선택되는 식물유와 우지, 돈지, 어유 등에서 선택되는 동물 유지를 단독 또는 혼합하여 이를 알칼리염과 비누화 반응을 통해 용이하게 얻을 수 있다. 합성 계면활성제 비누베이스로는 소듐라우릴설포네이트, 알킬벤젠설포네이트의 소듐염, 소듐코코일이세티오네이트, 아실글루타메이트의 알칼리금속염 등에서 선택되는 통상의 것을 사용할 수 있다. 또한 상기 지방산계 비누베이스와 합성계면활성제 비누베이스를 각각 혼합하여 사용할 수도 있다.

본 발명에 따른 비누 조성물은 상기 사데풀 추출물 이외에도 향료, 색소, 살균제, 소염제, 산화방지제, 방부제에서 선택된 것을 적어도 1종 이상 첨가할 수 있음은 물론이다.

상기와 같은 조성을 갖는 비누 조성물을 이용하여 통상의 방법으로 압축성형하게 되면 용이하게 비누를 제조할 수 있으며, 특히 본 발명에 따라 제조된 비누의 경우 미백, 노화방지, 보습 및 진정작용 등과 같은 피부보호 효과를 얻을 수 있다.

또한 본 발명에 따라 얻어지는 사데풀 추출물은 다양한 염증성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 화장품 조성물 혹은 약제학적 조성물에 다양하게 이용될 수 있다.

본 발명의 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 사데풀 추출물이외에 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하여, 예컨대 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.

본 발명의 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 계면활성제 함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 상용될 때에는 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오르히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톨실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

이하 본 발명의 내용을 실시예를 참조하여 보다 상세하게 설명하고자 하나 이들 실시예는 본 발명의 내용을 이해하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명의 권리범위가 한정되는 것으로 해석되어져서는 아니된다.

[실시예 1]

사데풀은 우리나라 강화군 석모도에서 채집하여 물을 이용하여 세척 후, -80℃에서 1일 동안 동결 보관하였다. 동결 보관한 시료는 동결건조기를 이용하여 4일간 건조하였다. 건조 시료는 분쇄기를 이용하여 분쇄하여 분말형태로 제조하였다. 분말형태의 건조시료에 70% 에탄올을 넣고 상온에서 1시간동안 초음파 추출기로 8회 반복 추출하였다. 각 추출 마다 여과지를 이용해 여과하였으며, 여과된 추출물은 감압 농축기를 이용하여 농축하였다. 농축된 시료는 완전한 건조를 위해 -80℃에서 1일 동안 동결 보관 후 4일 동안 동결건조기를 이용하여 건조하였다. 건조된 추출물은 분말형태로 만들어 실험에 사용하기 전까지 -80℃에서 동결 보관하였다.

[실시예 2] 비누의 제조

상기 실시예 1의 과정에 의해 얻은 사데풀 추출물 3중량%, 우지와 야자유에 가성소다를 첨가한 비누 베이스(수분함량 15%) 87 중량%, 향료 0.5 중량%, 보습제 0.5 중량%, 기포제 0.3 중량%, 글리세린 0.1중량%, 야자지방산 0.5중량%, 계면활성제 0.1중량%, 및 잔여량은 통상적으로 비누에 포함되는 물질을 배합하여 분쇄기로 미분하고 비누제조기를 이용하여 압출성형하여 비누를 제조하였다. 비교예 1은 실시예 2에서 사데풀 추출물을 첨가하지 않고 비누 베이스를 90중량%로 조성한 것을 제외하고는 동일한 과정에 의해 비누를 제조하였다.

[실시예 3] 비누의 제조

상기 실시예 1의 과정에 의해 얻은 사데풀 추출물 5중량%, 우지와 야자유에 가성소다를 첨가한 비누 베이스(수분함량 15%) 85 중량%, 향료 0.5 중량%, 보습제 0.5 중량%, 기포제 0.3 중량%, 글리세린 0.1중량%, 야자지방산 0.5중량%, 계면활성제 0.1중량%, 및 잔여량은 통상적으로 비누에 포함되는 물질을 배합하여 분쇄기로 미분하고 비누제조기를 이용하여 압출성형하여 비누를 제조하였다.

[실시예 4] 비누의 제조

상기 실시예 1의 과정에 의해 얻은 사데풀 추출물 10중량%, 우지와 야자유에 가성소다를 첨가한 비누 베이스(수분함량 15%) 80 중량%, 향료 0.5 중량%, 보습제 0.5 중량%, 기포제 0.3 중량%, 글리세린 0.1중량%, 야자지방산 0.5중량%, 계면활성제 0.1중량%, 및 잔여량은 통상적으로 비누에 포함되는 물질을 배합하여 분쇄기로 미분하고 비누제조기를 이용하여 압출성형하여 비누를 제조하였다.

[실시예 5] 크림의 제조

하기 표 1에 표시된 성분 및 함량으로 하기 실시예 5의 크림을 제조하였다. 비교예 2는 사데풀 추출물이 첨가되지 않은 것을 제외하고는 실시예 5와 동일하게 하였다.

조성(중량%)	함량
사데풀 추출물(실시예 2)	10
스테아린산	15
세탄올	1.0
수산화칼륨	0.7
글리세린	5.0
프로필렌글리콜	3
방부제	1.0
향	1.0
정제수	잔량

[실험예 1] NO 저해활성 측정

RAW 264.7 세포주를 대상으로 NO 저해활성을 측정하기 위해 매크로파지 세포수를 측정하여 24 well-plate에 10% FBS가 포함된 RPMI 1640 배지를 가하여 5% CO₂ 배양기에서 배양하였다. 해당 세포에 인위적으로 LPS를 처리하여 NO의 농도를 과량으로 유도한 다음, 사데풀 70% 에탄올 추출물을 100, 200, 300 ug/mL 농도로 처리하여 세포에서 분비한 NO의 농도를 Griess 시약을 활용하여 측정하였다. 추출물과 LPS가 처리된 세포를 24시간 배양 후 세포가 분비한 NO의 농도를 측정하기 위해 배양된 배지를 96-well plate에 100 μL씩 분주한 후 Giress 시약 100 μL를 넣어 암실에서 10분 동안 반응 시킨 후 540 nm 파장에서 측정하여 NO 농도를 측정하였다.

상기와 같이 세포 독성이 나타나지 않은 농도 범위의 사데풀 70% 에탄올 추출물의 NO 생성 억제 효과를 확인한 결과, 100, 200, 300 ug/ml 농도에서 88.65%, 68.37%, 22.90%로 300 ug/ml 농도에서 약 80%의 높은 억제율을 나타냈다(도 1).

[실험예 2] PGE₂ 저해활성 측정

RAW 264.7 세포주를 대상으로 PGE₂ 저해활성을 측정하기 위해 매크로파지 세포수를 측정하여 24 well-plate에 10% FBS가 포함된 RPMI 1640 배지를 가하여 5% CO₂ 배양기에서 배양하였다. 해당 세포에 인위적으로 LPS를 처리하여 PGE₂의 농도를 과량으로 유도한 다음, 사데풀 70% 에탄올 추출물을 100, 200, 300 ug/mL 농도로 처리하여 세포에서 분비한 PGE₂의 농도를 Enzyme-Linked Immunosorbant assay (ELISA) kit를 활용하여 측정하였다.

상기와 같이 세포 독성이 나타나지 않은 농도 범위의 사데풀 70% 에탄올 추출물의 PGE₂ 생성 억제 효과를 확인한 결과, 100, 200, 300 ug/ml 농도에서 51.84%, 40.04%, 12.11%로 300 ug/ml 농도에서 약 90%의 억제율을 나타냈다(도 2).

[실험예 3] 피부 자극 완화 효과 측정

일반적으로 피부에 자극을 주는 것으로 알려진 젖산(Lactic acid)에 의한 피부 자극을 본 발명에 의한 화합물 들이 얼마나 완화시키는지를 알아보았다. 여성 15명을 대상으로 피부상의 직경 1.2cm정도의 원형 부분에 상기 실시예 5 및 비교예 2의 크림을 각각 20ul씩 압설기(spatula)를 이용하여 50회씩 문질러 도포하였다.

이 때, 처음 2회는 조성물 도포 후 속에 여과지가 없는 힐탑 챔버(hill top chamber)에 얹은 후 접착제로 고정하여 폐쇄 조건을 만들어 주었다. 힐탑 챔버에 의한 챔버 반응이 있어 3회에서 8회까지의 조성물 도포 시에는 도포 직후 여과지를 얹어 주고 접착제를 이용하여 고정시켜 주었다. 23시간마다 한번씩 첩포하고, 첩포제거 1시간 후에 CTFA 가이드라인에 의거하여 검사하였다. 첩포 종료 후 4일째에는 지연형(delayed type)반응을 보기위하여 추가로 검사하였고 이를 결과에 반영하였다. 데이터는 맨 마지막 검사 결과를 이용하여 레빈 테스트의 등분산을 확인한 후 ANOVA를 통해 사후 검정(p<0.05)하여 비교하였다. 결과에 대한 판정은 0등급(-, 가시 반응 없음), 1등급(+, 약한 홍반), 2등급(++, 강한 홍반), 3등급(+++, 강한 홍반과 부종), 4등급(++++, 강한 홍반, 부종, 물집)로 구분하고, 결과는 하기 표 2에 표시하였다. 표 2에 표시된 결과는 자극에 대해 반응한 피검자의 반응지수를 횟수별로 모두 합하여 나타낸 값이다.

첩포 횟수	실시예 5	비교예 2
1	0	0
2	0	4
3	0	3
4	1	4
5	0	4
6	0	5
7	0	4
8	1	4
종료 후 4일째	1	6
합계	3	34

상기 표 2에 표시된 바와 같이, 비교예 2의 크림의 경우, 젖산에 의한 피부에 대한 자극 반응이 매우 높게 나타난 반면, 본 발명의 사데풀 추출물을 함유하는 실시예 5의 조성물은 젖산에 의한 피부 자극이 상대적으로 매우 낮아졌음을 알 수 있었다.

상기와 같이, 본 발명의 바람직한 실시 예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.

Claims

분말화한 사데풀의 동결건조시료를 70% 에탄올에 넣고 상온에서 초음파 추출기로 추출하고, 여과 및 감압농축한 시료를 동결건조하여 얻은 사데풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장품조성물.