KR20190104334A - 헤테로사이클릭 화합물 및 이의 용도 - Google Patents

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Abstract

화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물이 본원에 개시되어 있다. 또한, 상기 헤테로사이클릭 화합물 중 하나를 함유하는 약제학적 조성물이 개시되어 있다. 조혈모세포(hematopoietic stem cells, HSC) 및 내피 전구세포(endothelial progenitor cells, EPC)를 말초 혈액 순환에 동원하고, 조직 손상, 암, 염증성 질환 및 자가면역질환을 치료하기 위해 상기 헤테로사이클릭 화합물 중 하나를 사용하는 방법이 또한 개시되어 있다.

Description

헤테로사이클릭 화합물 및 이의 용도
케모카인(chemokine)은 다양한 종류의 단핵세포의 트래피킹(trafficking)을 조절한다. 케모카인은 이의 N 말단에 보존된 시스테인 잔기의 위치에 기초하여 4개의 서브패밀리, 즉 CC, CXC, CX3C 및 C로 분류된다.
67개의 아미노산 잔기로 구성된 CXC 케모카인인 기질세포 유래 인자 1(stromal-derived factor-1)(SDF-1 또는 CXCL12)은 골수, 중추신경계 및 말초에서 주로 발현된다. CXCL12는 여러 종류의 줄기세포 표면에 7개의 막 통과 부위(transmembrane domains)를 가진 G 단백질 결합 수용체인 4 CXC 케모카인 수용체(CXCR4)에 대해 특이적 리간드 역할을 한다. CXCR4/CXCL12 축은 암 전이, 줄기세포 호밍(homing), 트래피킹 및 동원(mobilization) 조절에 중요한 역할을 한다. CXCR4와 CXCL12 사이의 상호작용은 HIV(참조: Schols et al., J. Exp. Med.　186:1383-1388 (1997); Wu et al., J. Med. Chem. 58:1452-1465 (2015)), 류마티스성 관절염(참조: Lenoir et al., J. Immunol. 172:7136-7143 (2004)), 천식(참조: Gonzalo et al., J. Immunol. 165:499-508 (2000)) 및 종양 전이(참조: Mueller et al., Nature. 410:50-56 (2001); Liang et al., Cancer Res. 65:967-971 (2005))와 같은 여러 병리학적 상태의 원인이 된다.
CXCR4와 CXCL12 사이의 상호작용을 방해하는 CXCR4 길항제는 조혈모세포(hematopoietic stem cells, HSC), 내피 전구세포(endothelial progenitor cells, EPC) 및 중간엽줄기세포를 비롯한 다양한 유형의 단핵세포를 골수에서 말초 혈액으로 동원할 수 있다. 예를 들어, CXCR4 길항제 AMD3100(플레릭사포르, plerixafor)은 비호지킨 림프종 또는 다발성 골수종과 같은 혈액 악성종양 환자를 돕기 위해 말초 혈액 줄기세포(peripheral blood stem cell, PBSC) 이식에 임상적으로 사용되었다. PBSC 이식은 건강한 줄기세포, 특히 CXCR4+/CD34+ 조혈모세포가 CXCR4 길항제를 이용한 처리시 수집을 위해 골수에서 말초 혈액으로 동원된 다음 방사선요법이나 화학요법 치료 후 암환자에게 자가 이식되어 상기 환자의 면역 체계를 빠르게 회복시키는 일반적인 의료 절차이다.
CXCR4와 CXCL12 사이의 상호작용을 방해하는 화합물은 조직 손상(참조: Lin et al., J. Invest. Dermatol. 134:2458-2468 (2014)), 염증성 질환(참조: Lukacs et al., Am. J. Pathol. 160:1353-1360 (2002)), 허혈성 질환(참조: Huang et al., Stroke.　44:190-197 (2013); Wu et al., J. Med. Chem. 58:2315-2325 (2015); Wu et al., Cell Transplantation. in press (2017)), 암(참조: Chen et al., Hepatology.　59:1435-1447 (2014)) 및 자가면역질환(참조: Matthys et al., J. Immunol.　167:4686-4692 (2001))을 포함한 다양한 질환의 치료에 사용될 수 있다.
CXCR4와 CXCL12 사이의 상호작용을 효과적으로 방해할 수 있는 새로운 화합물을 개발할 필요가 있다.
요약
본 발명은 특정한 헤테로사이클릭 화합물이 CXCR4에 효과적으로 결합하여 CXCR4와 CXCL12 사이의 상호작용을 방해할 수 있다는 예기치 않은 발견에 기초한다.
한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure pct00001
위의 화학식 I에서, R1 및 R2는 각각 독립적으로 H, 할로, NO2, CN, NH2, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; 또는 R1 및 R2는 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께 C5-10 사이클로알킬, C3-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, C5-10 사이클로알킬, C3-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 할로, NO2, CN, NH2, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, 아릴, 헤테로아릴 또는 C(O)ORa로 임의로 치환되고, 여기서 Ra는 H, C1-10 알킬, C3-10 사이클로알킬, C3-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R3 및 R4는 각각 독립적으로
Figure pct00002
또는
Figure pct00003
이고, 여기서 R5는 H, C1-6 알킬, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 알킬, 헤테로아릴 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1-6 알킬, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 알킬, 헤테로아릴 알킬, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 할로, 니트로, 시아노, 아미노, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴로 임의로 치환되고; R6은 결실(deleted), H, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 하이드록시, 하이드록시 C1-6 알킬, 할로, 니트로, 시아노 또는 아미노로 임의로 치환되고; R7은 H, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 하이드록시, 하이드록시 C1-6 알킬, 할로, 니트로, 시아노, 아미노, 아미노 C1-6 알킬, 아미노 C3-10 사이클로알킬, 아미노 C1-10 헤테로사이클로알킬, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴로 임의로 치환되고; A 및 B는 각각 독립적으로 C 또는 N이고; D, E 및 F는 각각 독립적으로 C, N, O 또는 S이고; L1 및 L2는 각각 독립적으로 헤테로아릴, C1-10 헤테로사이클로알킬 또는 NRd이고, 여기서 Rd는 H 또는 C(O)(CH2)2CHNH2CO2Re이고, Re는 H, C1-6 알킬, C3-10 사이클로알킬, C3-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; m, n 및 o는 각각 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; R8 및 R9는 각각 독립적으로 H, C1-6 알킬, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1-6 알킬, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 C(O)ORf로 임의로 치환되고, 여기서 Rf는 H, C1-10 알킬, C3-20 사이클로알킬, C3-20 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; 또는 R8 및 R9는 이들이 결합된 질소원자와 함께 C3-10 헤테로사이클로알킬이고; L3은 C1-6 알킬이고; 또는 L3은 R8 또는 R9 및 이들이 결합된 질소원자와 함께 C4-10 헤테로사이클로알킬 또는 헤테로아릴이고; R10은 H, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 또는
Figure pct00004
이고, 여기서 L4는 결실 또는 C1-6 알킬아미노이고; L5는 C1-6 알킬, C1-6 알킬아미노 또는 디-C1-6 알킬아미노이고; R11은 하이드록실 또는 C1-6 알킬아미노이고, 상기 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, C1-6 알킬아미노, 디-C1-6 알킬아미노, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 하이드록실, 아미노, C(O)OR12 또는 P(O)(OR13)2로 임의로 치환되고, 여기서 R12 및 R13은 각각 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이다.
본원에서 용어 "알킬"은 -CH3 또는 분지형 -C3H7과 같은 포화된 선형 또는 분 지형 탄화수소 잔기를 말한다. 용어 "사이클로알킬"은 사이클로헥실, 사이클로헥센-3-일 또는 아다만틸과 같은 비방향족, 모노사이클릭, 바이사이클릭, 트리사이클릭 또는 테트라사이클릭 탄화수소 잔기를 가리킨다. 용어 "알콕시"는 -O-알킬 라디칼을 말한다. 알콕시의 예는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, 이소-부톡시, sec-부톡시 및 tert-부톡시를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 용어 "헤테로사이클로알킬"은 4-테트라하이드로피라닐 또는 4-피라닐과 같은 하나 이상의 환 헤테로원자(예: N, O 또는 S)를 갖는 비방향족, 모노사이클릭, 바이사이클릭, 트리사이클릭 또는 테트라사이클릭 잔기를 가리킨다. 용어 "아릴"은 하나 이상의 방향족 환을 갖는 탄화수소 잔기를 의미한다. 아릴의 예는 페닐(Ph), 페닐렌, 나프틸, 나프틸렌, 피레닐, 안트릴 및 페난트릴을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 용어 "헤테로아릴"은 하나 이상의 헤테로원자(예: N, O 또는 S)를 함유하는 하나 이상의 방향족 환을 갖는 잔기를 나타낸다. 헤테로아릴의 예는 푸릴, 푸릴렌, 플루오레닐, 피롤릴, 티에닐, 옥사졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리딜, 피리미디닐, 퀴나졸리닐, 퀴놀릴, 이소퀴놀릴 및 인돌릴을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 용어 "아릴 알킬"은 하나 이상의 아릴 그룹으로 치환된 알킬을 말한다. 아릴 알킬의 예는 벤질(Bn) 및 1-나프틸메틸을 포함한다. 용어 "헤테로아릴 알킬"은 하나 이상의 헤테로아릴 그룹으로 치환된 알킬을 지칭한다. 헤테로아릴 알킬의 예는 2-푸라닐-메틸 및 2-티에닐메틸을 포함한다. 용어 "아미노 알킬"또는 "알킬아미노"는 하나 이상의 아미노 그룹으로 치환된 알킬을 나타낸다. 아미노 알킬 또는 알킬아미노의 예는 아미노메틸 및 2-아미노에틸을 포함한다. 용어 "디알킬아미노"는 2개의 알킬 그룹으로 치환된 아미노 그룹을 말한다. 디알킬아미노의 예는 1,1-디메틸아미노 및 1-메틸-1-에틸아미노를 포함한다. 용어 "아미노 사이클로알킬"은 하나 이상의 아미노 그룹으로 치환된 사이클로알킬을 나타낸다. 아미노 사이클로알킬의 예는 아미노 사이클로프로필 및 아미노 사이클로펜틸을 포함한다. 용어 "아미노 헤테로사이클로알킬"은 하나 이상의 아미노 그룹으로 치환된 헤테로사이클로알킬을 가리킨다. 아미노 헤테로사이클로알킬의 예는 아미노 피롤리디닐 및 아미노 피페리디닐을 포함한다. 용어 "하이드록실 알킬"은 하나 이상의 하이드록실 그룹으로 치환된 알킬을 의미한다. 하이드록실 알킬의 예는 하이드록실 메틸 및 하이드록실 에틸을 포함한다.
본원에 언급된 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴 알킬 및 헤테로아릴 알킬은 달리 특정되지 않는 한 치환된 잔기 및 비치환된 잔기를 모두 포함한다. 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴상의 가능한 치환기는 C1-10 알킬, C2-10 알케닐, C2-10 알키닐, C3-20 사이클로알킬, C3-20 사이클로알케닐, C1-20 헤테로사이클로알킬, C1-20 헤테로사이클로알케닐, C1-10 알콕시, 아릴, 아릴옥시, 헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 아미노, C1-10 알킬아미노, C1-20 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노, 하이드록실, 할로겐, 티오, C1-10 알킬티오, 아릴티오, C1-10 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아실아미노, 아미노아실, 아미노티오아실, 아미디노, 구아니딘, 우레이도, 시아노, 니트로, 아실, 티오아실, 아실옥시, 카복실 및 카복실 에스테르를 포함한다. 한편, 알킬상의 가능한 치환기는 C1-10 알킬, C2-10 알케닐 및 C2-10 알키닐을 제외한 상기 언급된 치환기 모두를 포함한다. 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 또한 서로 융합될 수 있다.
위에 기재된 헤테로사이클릭 화합물은 화합물 자체 및, 해당되는 경우, 그의 염, 전구약물 및 용매화물을 포함한다. 예를 들어, 염은 음이온과 헤테로사이클릭 화합물상의 양전하를 띤 그룹(예: 아미노) 사이에서 형성될 수 있다. 적합한 음이온은 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 설페이트, 니트레이트, 포스페이트, 시트레이트, 메탄설포네이트, 트리플루오로아세테이트, 아세테이트, 말레이트, 토실레이트, 타르트레이트, 푸마레이트, 글루타메이트, 글루쿠로네이트, 락테이트, 글루타레이트 및 말레에이트를 포함한다. 마찬가지로, 염은 또한 양이온과 헤테로사이클릭 화합물상의 음전하를 띤 그룹(예: 카복실레이트) 사이에서 형성될 수 있다. 적합한 양이온은 나트륨 이온, 칼륨 이온, 마그네슘 이온, 칼슘 이온, 및 테트라메틸암모늄 이온과 같은 암모늄 양이온을 포함한다. 헤테로사이클릭 화합물은 또한 4급 질소원자를 함유하는 염을 포함한다. 전구약물의 예는 대상체에게 투여시 활성 헤테로사이클릭 화합물을 제공할 수 있는 에스테르 및 다른 약제학적으로 허용되는 유도체를 포함한다. 용매화물은 활성 헤테로사이클릭 화합물과 약제학적으로 허용되는 용매 사이에서 형성된 복합체를 지칭한다. 약제학적으로 허용되는 용매의 예는 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 아세테이트, 아세트산 및 에탄올아민을 포함한다.
헤테로사이클릭 화합물은 시스 또는 트랜스 이성질체 형태로서 존재할 수 있는 비방향족 이중결합을 함유할 수 있다. 이러한 이성질체 형태가 고려된다.
본 발명의 또 다른 측면은 조혈모세포(HSC) 및 내피 전구세포(EPC)를 말초 순환(peripheral circulation)에 동원하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 HSC 및 EPC를 유효량의 하나 이상의 상기 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물과 접촉시키는 것을 포함한다.
본 발명의 추가적인 측면은 조직 손상, 암, 염증성 질환 및 자가면역질환을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 유효량의 하나 이상의 상기 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 조직 손상의 예는 신경퇴행성 질환, 망막 색소 상피 기능장애, 심장 및 심근 경색, 허혈성 질환(예: 허혈성 뇌졸중 및 사지 허혈), 상처, 골절, 췌장 손상, 신장 손상, 장 손상 및 폐 손상을 포함한다. 암의 예는 급성 골수성 백혈병, 비소세포 폐암, 다발성 골수종 및 췌장암을 포함한다. 염증성 질환의 예는 염증성 장질환, 알러지성 천식 및 안구 포도막염을 포함한다. 전형적인 자가면역질환은 류마티스성 관절염이다.
특정 예에서, 상기 방법은 신장 손상(예: 급성 신장 손상)을 치료하기 위해 수행된다. 상기 방법은 신장 손상으로 고통받는 대상체에게 유효량의 하나 이상의 상기 헤테로사이클릭 화합물을 투여하는 것을 포함한다.
또한, 하나 이상의 상기 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물을 함유하는 약제학적 조성물이 본 발명의 범위 내에 있다. 상기 약제학적 조성물은 조직 손상(예: 급성 신장 손상), 암, 염증성 질환 및 자가면역질환을 치료하는 데 사용될 수 있다.
본 발명은 또한 조직 손상(예: 급성 신장 손상), 암, 염증성 질환 및 자가면역질환을 치료하기 위한 약제 제조용의 하나 이상의 상기 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물의 용도를 특징으로 한다.
용어 "치료하는" 또는 "치료"는 전술한 질환이나 그러한 질환의 증상을 갖고 있거나 그러한 질환에 걸리기 쉬운 대상체에게 치료 효과를 부여하기 위해, 예를 들어, 상기한 질환, 그러한 질환의 증상 또는 그러한 질환에 대한 경향을 치료, 완화, 변경, 좌우, 개선 또는 예방하기 위해 하나 이상의 상기 헤테로사이클릭 화합물을 투여하는 것을 의미한다. "유효량"은 치료 효과를 부여하는데 필요한 활성 화합물의 양을 의미한다. 유효량은 치료되는 질환의 유형, 투여 경로, 부형제 사용 및 다른 치료법과의 병용 가능성에 따라 당업자에 의해 인정되는 대로 달라질 것이다.
본 발명의 방법을 실시하기 위해, 하나 이상의 상기 헤테로사이클릭 화합물을 갖는 조성물을 비경구, 경구, 비내, 직장, 국소 또는 구강으로 투여할 수 있다. 본원에서 사용된 용어 "비경구"는 피하, 피부내, 정맥내, 복강내, 근육내, 관절내, 동맥내, 활막내, 흉골내, 척수강내, 병변내 또는 두개내 주입뿐만 아니라 임의의 적합한 주입 기술을 의미한다.
멸균 주사 조성물은 1,3-부탄디올 중의 용액과 같은 비독성의 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매로 된 용액 또는 현탁액일 수 있다. 허용되는 비히클 및 용매로는 만니톨, 물, 링거 용액 및 등장성 염화나트륨 용액이 사용될 수 있다. 또한, 용매 또는 현탁 매질로서 통상적으로 고정유(fixed oils)(예: 합성 모노글리세라이드 또는 디글리세라이드)가 사용된다. 올레산과 같은 지방산 및 이의 글리세라이드 유도체가 올리브 오일 및 피마자유와 같은 천연의 약제학적으로 허용되는 오일, 특히 이들의 폴리옥시에틸화된 형태로서 주사제의 제조에 유용하다. 이들 오일 용액 또는 현탁액은 또한 장쇄 알콜 희석제 또는 분산제, 카복시메틸 셀룰로스 또는 유사한 분산제를 함유할 수 있다. Tweens 및 Spans와 같은 다른 통상적으로 사용되는 계면활성제, 또는 약제학적으로 허용되는 고체, 액체 또는 다른 투여 형태의 제조에 통상적으로 사용되는 다른 유사한 유화제 또는 생체이용률 개선제 또한 제형화를 위해 사용될 수 있다.
경구 투여용 조성물은 캡슐, 정제, 유화액 및 수성 현탁액, 분산액 및 용액을 포함하는 임의의 경구적으로 허용되는 투여 형태일 수 있다. 정제의 경우, 일반적으로 사용되는 담체는 락토스 및 옥수수 전분을 포함한다. 윤활제, 예를 들어, 마그네슘 스테아레이트도 전형적으로 첨가된다. 캡슐 형태의 경구 투여를 위해, 유용한 희석제는 락토스 및 건조 옥수수 전분을 포함한다. 수성 현탁액 또는 유화액을 경구 투여하는 경우, 활성 성분은 유화제 또는 현탁제와 혼합된 유상에 현탁되거나 용해될 수 있다. 원하는 경우, 특정 감미료, 향미제 또는 착색제를 첨가할 수 있다.
비강 에어로졸 또는 흡입 조성물은 약제학적 제형 분야에 널리 공지된 기술에 따라 제조될 수 있다. 예를 들어, 이러한 조성물은 임의의 적합한 방부제나 흡수 촉진제(예: 벤질 알콜) 또는 임의의 가용화제나 분산제(예: 플루오로카본)를 사용하여 식염수 중 용액으로서 제조될 수 있다.
하나 이상의 상기 헤테로사이클릭 화합물을 갖는 조성물은 또한 직장 투여 용 좌제 형태로 투여될 수 있다.
상기 약제학적 조성물 중의 담체는 상기 조성물의 활성 성분과 양립할 수 있고 (바람직하게는 활성 성분을 안정화시킬 수 있고) 치료될 대상체에게 해롭지 않다는 점에서 "허용가능"한 것이어야 한다. 하나 이상의 가용화제가 활성 1,5-디페닐-펜타-1,4-디엔-3-온 화합물의 전달을 위한 약제학적 부형제로서 사용될 수 있다. 다른 담체의 예는 콜로이드성 산화규소, 마그네슘 스테아레이트, 셀룰로스, 나트륨 라우릴 설페이트 및 D&C 옐로 # 10을 포함한다.
본 발명의 하나 이상의 양태의 세부 사항은 아래에 설명한다. 본 발명의 다른 특징, 목적 및 이점은 상세한 설명 및 청구범위로부터 명백할 것이다.
하기 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물이 상세하게 개시된다:
[화학식 I]
Figure pct00005
위의 화학식 I에서, R1 내지 R4는 위의 요약 부분에서 정의된 것과 같다.
화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물의 한 하위세트는 R1 및 R2가 각각 독립적으로 H, NH2, C1-6 알킬, 또는 C1-6 알킬 또는 C(O)ORa로 임의로 치환된 C1-10 헤테로사이클로알킬(예: 모르폴린, 피페리딘 또는 피페라진)이고, 여기서 Ra는 H 또는 C1-10 알킬인 화합물을 포함한다. 이 하위세트의 예시적인 화합물은 R1 및 R2가 각각 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬인 화합물; 및 R1 및 R2가 각각 독립적으로 H, NH2, 또는 C1-6 알킬 또는 C(O)ORa로 임의로 치환된 C1-10 헤테로사이클로알킬인 화합물을 포함한다.
본 발명의 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물의 다른 하위세트는 R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께 아릴 또는 헤테로아릴인 화합물을 포함한다. 이 하위세트의 예시적인 화합물은 R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
Figure pct00006
인 화합물을 포함한다.
본 발명의 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물의 또 다른 하위세트는 R3 및 R4가 각각 독립적으로
Figure pct00007
또는
Figure pct00008
이고, 여기서 R5는 H이고; R6은 결실이고; m, n 및 o는 각각 독립적으로 1, 2, 3 또는 4이고; L1 및 L2는 각각 NRd인 화합물을 포함한다. 이 하위세트에서 화합물은 A 및 B 각각으로서 C를 가질 수 있고, D, E 및 F 각각으로서 C, N 또는 S를 가질 수 있다. 또한 상기 화합물에서 R1 및 R2는 각각 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬(예를 들어, R1은 H이고 R2는 C1-6 알킬)일 수 있고; 또는 R1 및 R2는 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께 아릴 또는 헤테로아릴일 수 있다. 예를 들어, 이 하위세트는 R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
Figure pct00009
인 화합물을 포함한다.
상기 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물의 추가의 하위세트는 R3이
Figure pct00010
이고, R4가
Figure pct00011
이고, 여기서 R5는 H이고; R6은 결실이고; m, n 및 o는 각각 독립적으로 1, 2, 3 또는 4이고; L1 및 L2는 각각 NRd인 화합물을 포함한다. 이 하위세트에서 화합물은 R1 및 R2가 각각 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬(예를 들어, R1은 H이고 R2는 C1-6 알킬)일 수 있고; 또는 R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께 아릴 또는 헤테로아릴일 수 있다. 예를 들어, 이 하위세트는 R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
Figure pct00012
인 화합물을 포함한다. 특히, 상기 화합물은 R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
Figure pct00013
일 수 있다. 상기 화합물은 또한 A 및 B 각각으로서 C를 가질 수 있고, D, E 및 F 각각으로서 C, N 또는 S를 가질 수 있다. 또한, 이 하위세트에서 화합물은 L3이 R8 또는 R9 및 이들이 결합된 질소원자와 함께 C4-10 헤테로사이클로알킬일 수 있고; R10은 H 또는
Figure pct00014
일 수 있다. 이 하위세트의 화합물은 R8이 H일 수 있고, L3이 R9 및 이들이 결합된 질소원자와 함께 C4-10 헤테로사이클로알킬일 수 있다. 이 하위세트의 예시적인 화합물은 R1이 H이고 R2가 C1-6 알킬이거나, R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
Figure pct00015
이고; R10이
Figure pct00016
이고; A 및 B가 각각 C이고; D, E 및 F가 각각 독립적으로 C, N 또는 S이다.
또한 본 발명 내에는 조직 손상(예: 급성 신장 손상), 암, 염증성 질환 및 자가면역질환을 치료하기 위한 하나 이상의 상기 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물을 함유하는 약제학적 조성물이 있다.
본 발명은 또한 조직 손상(예: 급성 신장 손상), 암, 염증성 질환 및 자가면역질환을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 유효량의 화학식 I의 화합물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.
상기 화학식 I의 헤테로사이클릭 화합물은 당해 분야에 널리 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다. 예를 들어, 문헌(R. Larock, Comprehensive Organic Transformations (2nd Ed., VCH Publishers 1999); P. G. M. Wuts and T. W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis (4th Ed., John Wiley and Sons 2007); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis (John Wiley and Sons 1994); L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis (2nd ed., John Wiley and Sons 2009); 및 G. J. Yu et al., J. Med. Chem. 2008, 51, 6044-6054)을 참고한다.
본원에 언급된 화합물은 비방향족 이중결합 및 하나 이상의 비대칭 중심을 함유할 수 있다. 따라서, 이들은 라세미체 또는 라세미 혼합물, 단일 거울상이성질체, 개별 부분입체이성질체, 부분입체이성질체 혼합물, 또는 시스 또는 트랜스 이성질체 형태로 존재할 수 있다. 이러한 모든 이성질체 형태가 고려된다.
이와 같이 제조된 화학식 I의 화합물은 CXCL12와 CXCR4의 결합을 억제하는 효능에 대해, 예를 들어, 하기 실시예 2에 기재된 방사성 리간드 결합 분석과 같은 시험관내 분석법을 사용하여 초기에 스크리닝할 수 있다. 상기 화합물은 포유 동물에서 조혈모세포 동원을 증진시키는 효능에 대해, 생체내 분석, 예를 들어, 콜로니 형성 분석을 사용하여 추후 평가될 수 있다. 선택된 화합물은 조직 손상(예: 급성 신장 손상), 암, 염증성 질환 및 자가면역질환의 치료에서의 효능을 확인하기 위해 추가로 시험할 수 있다. 예를 들어, 화합물은 허혈성 급성 신장 손상을 갖는 동물(예: 마우스)에 투여될 수 있고, 그 치료 효과가 평가된다. 결과에 기초하여, 적절한 투여량 범위 및 투여 경로를 결정할 수 있다.
추가의 상세한 설명없이, 당업자는 위의 설명에 기초하여 본 발명을 최대한 활용할 수 있다고 여겨진다. 따라서, 하기 특정 실시예는 단지 예시적인 것으로 해석되어야 하며, 본 발명의 나머지 부분을 어떤 식으로든 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다. 본원에 인용된 모든 간행물은 참고로 포함된다.
바로 아래에 화학식 I의 86개의 예시적인 화합물의 구조가 제시되어 있다. 이러한 화합물의 제조방법 및 제조된 화합물에 대한 분석 데이터는 하기 실시예 1에 기재되어 있다. 이들 화합물을 시험하기 위한 절차는 아래 실시예 2 내지 5에 기재되어 있다.
Figure pct00017
Figure pct00018
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
Figure pct00022
Figure pct00023
.
위의 86개의 예시 화합물을 합성하는데 사용되는 13개의 측쇄, 즉 측쇄 S-I 내지 S-XIII의 제조방법을 아래에 기술한다. 모든 측쇄는 다른 방식으로 제조되었다. 측쇄 화합물 S-I 내지 S-XIII의 구조를 아래에 나타낸다:
Figure pct00024
Figure pct00025
.
S-I의 제조
측쇄 S-I을 아래 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00026
질소 대기하에 톨루엔 중의 프탈산 무수물(10.00g), 아미노아세트알데히드(7.81g) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(13.09g)의 용액을 120℃에서 16시간 동안 가열한 후, NH4Cl(수성)(100mL, 2M)로 ?칭시켰다. 수성 상을 에틸 아세테이트(3×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한(crude) 잔사 S-I-I을 수득하였다(15.49g, 수율: 98%).
질소 대기하에 EtOH/H2O(20mL/40mL) 중의 S-I-I(15.49g)의 용액에 HCl(수성)(120mL, 6N)을 첨가하였다. 이 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열한 후 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트(3×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 NaHCO3(수성) 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 잔사 S-I-II를 수득하였다(6.26g, 수율: 50%).
5 내지 10℃에서 디클로로메탄(100mL) 중의 S-I-II(6.26g) 및 TEA(10.04g)의 용액에 하이드록실아민 하이드로클로라이드(2.53g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 다음 NH4Cl(수성)(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 수성 상을 CH2Cl2(2×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 NaHCO3(수성) 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-I-III을 수득하였다(4.01g, 수율: 59%).
DMF(100mL) 중의 S-I-III(4.01g) 및 N-클로로석신이미드(2.75g)의 용액을 50℃에서 5시간 동안 가열한 다음 물에 부었다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-I-IV를 수득하였다(3.64g, 수율: 78%).
Figure pct00027
질소 대기하에 0℃에서 디클로로메탄(20mL) 중의 4-펜틴-1-올(0.30g)의 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 퍼요오디난(1.66g)을 첨가하였다. 이 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반한 후, NaHCO3(수성)(50mL, 2M) 및 나트륨 티오설페이트(Na2S2O3)(수성)(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 수성 상을 디클로로메탄(3×50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 S-I-V를 수득하였다(0.26g, 수율: 87%).
MeOH(30mL) 중의 S-I-V(0.26g)의 자석 교반된 용액에 N-사이클로헥실-1,3-프로판디아민(0.54g)을 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반한 후, NaBH4(0.24g)를 상기 혼합물에 천천히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 추가로 15시간 동안 교반한 다음 NH4Cl(수성)(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 이 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 CH2Cl2(2×150mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 자석 교반된 여액에 Boc2O 무수물(0.84g)을 한꺼번에 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 다음 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(2:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-I-VI을 수득하였다(0.48g, 수율: 2단계에 걸쳐 36%).
Figure pct00028
질소 대기하에 클로로포름(30mL) 중의 S-I-IV(0.27g), S-I-VI(0.48g) 및 트리에틸아민(0.34g)의 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반한 다음 NH4Cl(수성)(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 수성 상을 CH2Cl2(3×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(4:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 화합물 S-I-VII을 수득하였다(0.09g, 수율: 13%).
MeOH/CH2Cl2(20mL/20mL) 중의 S-I-VII(0.09g) 및 하이드라진 일수화물(0.02g)의 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-I을 수득하였다(0.07g, 수율: 98%).
S-II의 제조
측쇄 S-II를 아래 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00029
0℃에서 아세토니트릴(100mL) 중의 N-사이클로헥실-1,3-프로판디아민(4.22g) 및 K2CO3(7.09g)의 용액에 에틸 4-브로모부티레이트(5.00g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 물에 부었다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. S-II-I의 자석 교반된 여액에 Boc2O 무수물(11.11g)을 한꺼번에 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(4:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-II-II를 수득하였다(3.60g, 수율: 2단계에 걸쳐 30%).
질소 대기하에 THF(30mL) 중의 S-II-II(3.60g)의 용액에 H2O(10mL) 중의 KOH(2.14g)의 용액을 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후, HCl(수성)(38mL, 1N)로 산성화시켰다. 수성 상을 에틸 아세테이트(3×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 잔사 S-II-III을 수득하였다(3.36g, 수율: 99%).
0℃에서 THF(30mL) 중의 S-II-III(3.36g) 및 TEA(1.16g)의 용액에 에틸 클로로포르메이트(1.00g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 0℃에서 5시간 동안 교반한 후, 0℃에서 NH4OH(수성)(50mL, 2M)를 상기 혼합물에 천천히 첨가한 다음 25℃에서 15시간 더 교반하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(2×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 S-II-IV를 수득하였다(2.94g, 수율: 88%).
이소프로필 알콜(25mL) 중의 S-II-IV(2.94g) 및 1,3-디클로로아세톤(1.10g)의 용액을 100℃에서 15시간 동안 가열한 후 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(4:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 S-II-V를 수득하였다(0.70g, 수율: 20%).
DMF(20mL) 중의 S-II-V(0.70g) 및 프탈이미드 칼륨염(1.27g)의 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 물에 부었다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(2×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(4:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 S-II-VI을 수득하였다(0.28g, 수율: 33%).
MeOH/CH2Cl2(20mL/20mL) 중의 S-II-VI(0.28g) 및 하이드라진 일수화물(0.04g)의 용액을 25℃에서 15시간 동안 가열한 다음 물에 부었다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-II를 수득하였다(0.19g, 수율: 86%).
S-III의 제조
측쇄 S-III을 아래 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00030
0℃에서 DCM(300mL) 및 EtOH(35mL) 중의 나트륨 에톡사이드(1.0mL, EtOH 중 4.4M)의 자석 교반된 용액에 디클로로아세토니트릴(50.1g)을 45분에 걸쳐 첨가하였다. 이 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물에 L-시스테인 에틸 에스테르 하이드로클로라이드(84.51g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 물(50mL)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 농축시킨 다음, 잔사를 디클로로메탄(3×50mL)으로 추출하였다. 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. DCM(500mL) 중의 상기 잔사 및 DIPEA(119mL)의 용액을 50℃에서 15시간 동안 교반한 후 NH4Cl(수성)(500mL, 2M)로 ?칭시켰다. 분리된 수성 상을 DCM(2×100mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 이어서, 여액을 농축시켜 조악한 S-III-I을 수득하였다(93.62g, 수율: 100%).
DMF(500mL) 중의 S-III-I(93.62g) 및 나트륨 아지드(148.12g)의 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 NH4Cl(수성)(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 생성된 용액을 Et2O(3×50mL)로 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 S-III-II를 수득하였다(77.11g, 수율: 80%).
THF(1820mL) 중의 S-III-II(77.11g), 트리페닐포스핀(96.02g) 및 물(20mL)의 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×500mL)로 추출하였다. 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 MeOH/NH4OH(수성)(9:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 아미노 산물을 수득하였다. 5 내지 10℃에서 디클로로메탄(1000mL) 중의 아미노 산물과 NaHCO3(수성)(400mL, 2N)의 혼합물에 벤질 클로로포르메이트(49.13g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 후 수성 NH4Cl(수성)(400mL, 2M)로 ?칭시켰다. 수성 상을 디클로로메탄(3×400mL)으로 추출하였다. 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(3:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-III-III을 수득하였다(74.35g, 수율: 2단계에 걸쳐 64%).
-78℃에서 무수 CH2Cl2(100mL) 중의 S-III-III(7.02g)의 용액에 DIBAL-H(28.5mL, 톨루엔 중 1.0M)를 첨가하였다. 이 혼합물을 -78℃에서 2시간 동안 교반한 다음, -78℃에서 메탄올(15mL)로 ?칭시켰다. HCl(수성)(80mL, 1N)을 상기 혼합물에 첨가하고 이 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 분리된 수성 층을 디클로로메탄(2×100mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 이어서 여액을 농축시켜 조악한 S-III-IV를 수득하였다. 톨루엔(100mL) 중의 S-III-IV 및 트리페닐포스포라닐리덴아세트알데히드(4.38g)의 현탁액을 80℃에서 5시간 동안 가열한 다음 물(100mL)에 부었다. 수성 상을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 이어서, 여액을 농축시켜 조악한 S-III-V를 수득하였다(5.28g, 수율: 2단계에 걸쳐 80%).
CH2Cl2(50mL) 중의 S-III-V(6.02g), N-사이클로헥실-1,3-프로판디아민(3.12g) 및 MgSO4(4.82g)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반한 후, 여과하고 농축시켰다. 5 내지 10℃에서 MeOH(40mL) 중의 상기 잔사의 용액에 NaBH4(1.11g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 격렬하게 교반한 다음 H2O에 부었다. 생성된 혼합물을 농축시킨 다음, 잔사를 CH2Cl2(2×150mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액에 Boc2O 무수물(8.72g) 및 TEA(5mL)를 한꺼번에 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(3:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-III-VI을 수득하였다(7.72g, 수율: 2단계에 걸쳐 60%).
에탄올(200mL) 중의 S-III-VI(7.72g) 및 Pd/C(0.77g)의 용액을 H2(가스)하에 25℃에서 5시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과한 다음 농축시켜 생성물 S-III을 수득하였다(5.51g, 수율: 90%).
S-IV의 제조
측쇄 S-IV는 S-III을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 하기 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00031
S-V의 제조
측쇄 S-V를 하기 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00032
5 내지 10℃에서 EtOH(100mL) 중의 아미노아세토니트릴 하이드로클로라이드 염(5.02g) 및 TEA(16.38g)의 용액에 무수 THF(20mL) 중의 2-니트로벤젠 설포닐 클로라이드(11.43g)의 용액을 5분에 걸쳐 적가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 잔사를 물에 붓고, 혼합물을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 S-V-I을 수득하였다(9.43g, 수율: 72%).
MeOH(50mL) 중의 S-V-I(4.49g) 및 NH2OH(5.02g, H2O 중 50% w/w)의 용액을 40℃에서 1시간 동안 가열한 후 농축시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 S-V-II를 수득하였다(4.14g, 수율: 81%).
무수 THF(120mL) 중의 S-V-II(10.02g), S-II-III(24.32g), EDCI(10.50g) 및 DMAP(6.71g)의 용액을 25℃에서 6시간 동안 교반한 다음 물에 부었다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×120mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 NaHCO3(수성) 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(9:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-V-III을 수득하였다(12.02g, 수율: 47%).
톨루엔(30mL) 중의 S-V-III(5.00g)의 용액을 120℃에서 8시간 동안 가열한 다음 물에 부었다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(3:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 S-V-IV를 수득하였다(2.03g, 수율: 42%).
무수 THF(40mL) 중의 S-V-IV(5.56g), 티오페놀(0.9mL) 및 Cs2CO3(7.95g)의 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반한 다음 물에 부었다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 MeOH/NH4OH(9:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 S-V를 수득하였다(2.80g, 수율: 69%).
S-VI의 제조
측쇄 S-VI을 하기 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00033
질소 대기하에 에탄올(420mL) 중의 S-II-II(42.05g) 및 하이드라진 일수화물(31.31g)의 용액을 70℃에서 15시간 동안 가열한 후 농축시켰다. 잔사를 MeOH/DCM(1/19)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-VI-I을 수득하였다(25.30g, 수율: 62%).
Figure pct00034
질소 대기하에 5 내지 10℃에서 THF/H2O(200mL/400mL) 중의 아미노아세토니트릴 하이드로클로라이드(25.27g) 및 K2CO3(109.80g)의 용액에 벤질 클로로포르메이트(45.22g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 후, NH4Cl(수성)(100mL, 2M)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×200mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-VI-II를 수득하였다(46.88g, 수율: 90%).
메탄올(3mL) 중의 S-VI-II(7.01g)의 용액에 HCl(50mL, 에테르 중 2N)을 적가 하였다. 이 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반한 후 여과하였다. 여과된 케이크를 건조시켜 S-VI-III을 수득하였다(8.02g, 수율: 98%).
Figure pct00035
ACN(80mL) 중의 S-VI-I(3.71g) 및 S-VI-III(8.02g)의 용액을 60℃에서 48시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 S-VI-IV를 수득하였다(3.20g, 수율: 63%).
EtOH(20mL) 중의 S-VI-IV(3.20g) 및 Pd/C(0.32g)의 용액을 H2(가스)하에 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고 농축시켜 S-VI을 수득하였다(2.15g, 수율: 85%).
S-VII의 제조
측쇄 S-VII을 하기 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00036
질소 대기하에 5 내지 10℃에서 에탄올(600mL) 중의 글리신 에틸 에스테르 하이드로클로라이드(29.81g) 및 트리에틸아민(64.74g)의 용액에 테트라하이드로푸란(600mL) 중의 2-니트로벤젠 설포닐 클로라이드(47.22g)의 용액을 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 다음 농축시켰다. 잔사를 물에 붓고 생성 된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×500mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-VII-I을 수득하였다(54.22g, 수율: 88%).
질소 대기하에 MeOH/THF(300mL/300mL) 중의 화합물 S-VII-I(54.22g)의 자석 교반된 용액에 H2O(100mL) 중의 KOH(31.63g)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후, 4N HCl 수용액(140mL)으로 산성화시켰다. 생성 된 혼합물을 농축시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(3×300mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-VII-II를 수득하였다(39.10g, 수율: 80%).
Figure pct00037
질소 대기하에 25℃에서 디클로로메탄(120mL) 중의 S-VII-II(6.10g)의 자석 교반된 용액에 EDCI(4.93g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반 한 후, 디클로로메탄(20mL) 중의 화합물 S-VI-I(8.23g)의 용액에 한꺼번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가로 6시간 동안 교반한 다음 물에 부었다. 생성된 혼합물을 디클로로메탄(2×50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 MeOH/DCM(1/19)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-VII-III을 수득하였다(8.52g, 수율: 68%).
디클로로메탄(200mL) 중의 화합물 S-VII-III(8.52g)의 자석 교반된 용액에 라웨슨 시약(6.90g)을 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 다음 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-VII-IV를 수득하였다(4.85g, 수율: 57%).
질소 대기하에 25℃에서 아세토니트릴(120mL) 중의 S-VII-IV(6.40g), 탄산세슘(5.97g) 및 티오페놀(2.02g)의 용액을 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 잔사를 물에 붓고, 이어서 수성층을 디클로로메탄(3×120mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 MeOH/NH4OH(9:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-VII을 수득하였다(4.55g, 수율: 97%).
S-VIII의 제조
측쇄 S-VIII을 하기 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00038
질소 대기하에 5 내지 10℃에서 THF(94mL) 중의 LAH(1.14g)의 용액에 S-II-II(4.72g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반한 후 염화암모늄(NH4Cl)(수성)(5.7mL, 2M)으로 ?칭시켰다. 무수 황산나트륨(5.71g)을 첨가한 후, 생성된 혼합물을 25℃에서 추가로 1시간 동안 교반한 후 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-VIII-I을 수득하였다(3.85g, 수율: 90%).
5 내지 10℃에서 디클로로메탄(180mL) 중의 S-VIII-I(3.85g) 및 TEA(2.02g)의 용액에 MsCl(1.14g)을 적가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 다음 NH4Cl(수성)로 ?칭시켰다. 수성 상을 CH2Cl2(2×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 NaHCO3(수성) 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-VIII-II를 수득하였다(3.64g, 수율: 80%).
Figure pct00039
5 내지 10℃에서 무수 THF(200mL) 중의 히스타민(1.02g) 및 트리에틸아민(2.01g)의 용액에 무수 THF(5mL) 중의 2-니트로벤젠 설포닐 클로라이드(2.21g)의 용액을 5분에 걸쳐 적가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 다음 농축시켰다. 잔사를 물에 붓고 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-VIII-III을 수득하였다(1.61g, 수율: 60%).
DMF(30mL) 중의 S-VIII-III(1.61g), K2CO3(3.73g) 및 S-VIII-II(4.01g)의 용액을 80℃에서 15시간 동안 가열한 다음 물에 부었다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 MeOH/DCM(1/19)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-VIII-IV를 수득하였다(0.76g, 수율: 20%).
질소 대기하에 25℃에서 아세토니트릴(15mL) 중의 S-VIII-IV(0.76g), 탄산세슘(0.41g) 및 티오페놀(0.18g)의 용액을 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 잔사를 물에 붓고 생성된 혼합물을 디클로로메탄(3×50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 MeOH/NH4OH(9:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-VIII을 수득하였다(0.51g, 수율: 91%).
S-VIIII의 제조
측쇄 S-VIIII을 하기 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00040
-78℃에서 무수 CH2Cl2(160mL) 중의 S-VIIII-I(10.02g)의 용액에 DIBAL-H(70mL, 톨루엔 중 1.0M)를 첨가하였다. 이 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반한 다음, -78℃에서 메탄올(100mL)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고 여액을 농축시켜 조악한 S-VIIII-II를 수득하였다. 톨루엔(160mL) 중의 (에톡시카보닐메틸리덴)트리페닐포스포란(6.91g) 및 S-VIIII-II의 현탁액을 80℃에서 2시간 동안 가열한 다음 물(100mL)에 부었다. 수성 상을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 S-VIIII-III을 수득하였다. MeOH(210mL) 중의 화합물 S-VIIII-III 및 NaBH4(3.22g)의 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후, NH4Cl(수성)(100mL, 2M)로 ?칭시켰다. 이 혼합물을 농축시키고, 잔사를 디클로로메탄(3×100mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 S-VIIII-IV를 수득하였다(3.51g, 수율: 3단계에 걸쳐 39%).
DCM(160mL) 중의 S-VIIII-IV(3.5g), 이미다졸(1.81g) 및 TBDMSCl(2.38g)의 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반한 다음 물에 부었다. 수성 상을 디클로로메탄(3×100mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 S-VIIII-V를 수득하였다. 0℃에서 MeOH(70mL) 중의 S-VIIII-V의 용액에 NiCl2(18mg) 및 NaBH4(1.06g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 후, NH4Cl(수성)(1mL, 2M)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고 여액을 농축시켜 조악한 S-VIIII-VI을 수득하였다. 0℃에서 THF(70mL) 중의 S-VIIII-VI의 용액에 LAH(1.06g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 다음 NaOH(수성)(4mL, 10% w/w)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 S-VIIII-VII을 수득하였다(2.03g, 수율: 3단계에 걸쳐 43%).
질소 대기하에 0℃에서 디클로로메탄(28mL) 중의 S-VIIII-VII(2.03g)의 용액에 데스-마틴 퍼요오디난(2.51g)을 첨가하였다. 이 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 다음 NaHCO3(수성)(30mL, 2M) 및 Na2S2O3(수성)(30mL, 2M)로 ?칭시켰다. 수 성 상을 디클로로메탄(3×100mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 S-VIIII-VIII을 수득하였다. 디클로로메탄(28mL) 중의 S-VIIII-VIII, N-사이클로헥실-1,3-프로판디아민(1.07g) 및 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드(2.43g)의 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반한 다음 NaHCO3(수성)(30mL, 2M)에 부었다. 수성 층을 CH2Cl2(2×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 자석 교반된 여액 및 TEA(1.41g)에 Boc2O 무수물(3.26g)을 한꺼번에 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(3:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-VIIII-VIIII를 수득하였다(2.27g, 수율: 2단계에 걸쳐 57%).
THF(16mL) 중의 화합물 S-VIIII-VIIII(2.27g) 및 TBAF(4.9mL, THF 중 1M)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반한 후 NaHCO3(수성)(30mL, 2M)에 부었다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(2×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 S-VIIII-X을 얻었다. 0℃에서 무수 THF(15mL) 중의 S-VIIII-X, 프탈이미드(0.51g) 및 PPh3(0.91g)의 용액에 무수 THF(1.5mL) 중의 DEAD(0.72g)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 질소하에 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. MeOH(20mL) 중의 상기 잔사 및 하이드라진 일수화물(0.8mL)의 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 여과하였다. 여액을 농축시키고, 생성된 잔사를 MeOH/NH4OH(9:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 S-VIIII를 수득하였다(1.71g, 수율: 2단계에 걸쳐 90%).
S-X의 제조
측쇄 S-X을 하기 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00041
에탄올(3mL) 중의 S-VI-II(10.02g)의 용액에 HCl(50mL, 에테르 중 2N)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반한 후 여과하였다. 여과된 케이크를 감압하에 건조시켜 S-X-I을 수득하였다(8.02g, 수율: 64%).
Figure pct00042
n-BuOH(80mL) 중의 S-VI-I(4.22g), CH3CO2K(4.13g) 및 S-X-I(4.73g)의 용액을 80℃에서 1시간 동안, 이어서 125℃에서 16시간 동안 교반한 다음 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1/1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 S-X-II를 수득하였다(2.76g, 수율: 30%).
EtOH(20mL) 중의 S-X-II(1.82g) 및 10% Pd/C(0.18g)의 용액을 H2(가스)하에 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고 농축시켜 S-X을 수득하였다(1.20g, 수율: 84%).
S-XI 및 S-XII의 제조
측쇄 S-XI 및 S-XII를 하기 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00043
질소 대기하에 75℃에서 IPA/H2O(300mL/600mL) 중의 S-VI-II(37.10g), 나트륨 아지드(31.73g) 및 브롬화아연(30.75g)의 용액을 15시간 동안 교반하였다. 모든 고체가 용해될 때까지 상기 혼합물에 HCl(수성)(4M)을 실온에서 천천히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×200mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 생성물 S-XI-I을 수득하였다(43.22g, 수율: 95%).
5 내지 10℃에서 CH2Cl2/MeOH(320mL/32mL) 용매 중의 S-XI-I(17.10g) 및 TEA(29.65g)의 용액에 아크롤레인(16.43g)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반한 다음, NH4Cl(수성)(50mL)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 농축시킨 다음, 잔사를 CH2Cl2(3×200mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 NaHCO3(수성) 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 MeOH/DCM(1/32)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 S-XI-II와 S-XII-I의 혼합 생성물을 수득하였다(16.90g, 수율: 80%).
질소 대기하에 MeOH(250mL) 중의 S-XI-II와 S-XII-I(25.10g)의 혼합물에 N-(3-아미노프로필)사이클로헥실아민(16.26g)을 첨가하였다. 이 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, NaBH4(2.78g)를 상기 혼합물에 서서히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반한 후, NH4Cl(수성)로 ?칭시켰다. 이 혼합물을 농축시키고, 잔사를 디클로로메탄(3×150mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 NaHCO3(수성) 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액에 Boc2O 무수물(45.44g)을 한꺼번에 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-XI-III(12.82g, 수율: 2단계에 걸쳐 24%) 및 S-XII-II(11.20g, 수율: 2단계에 걸쳐 21%)를 수득하였다.
2-프로판올(158mL) 중의 S-XI-III(15.80g) 및 10% Pd/C(1.58g)의 용액을 H2(가스)하에 60℃에서 15시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고 여액을 감압하에 농축시켜 생성물 S-XI을 수득하였다(12.10g, 수율: 97%).
2-프로판올(112mL) 중의 S-XII-II(11.20g) 및 10% Pd/C(1.12g)의 용액을 H2(가스)하에 60℃에서 15시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고 여액을 감압하에 농축시켜 생성물 S-XII를 수득하였다(8.37g, 수율: 95%).
S-XIII의 제조
측쇄 S-XIII을 하기 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00044
0℃에서 CH2Cl2(100mL) 중의 S-X-I(10.02g)의 용액에 KOH(수성)(100mL, 2.4% w/w)를 첨가하였다. 이 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반한 후 디클로로메탄(3×50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. n-BuOH(100mL) 중의 상기 잔사, 포르모하이드라지드(formohydrazide)(3.31g) 및 CH3CO2K(3.33g)의 용액을 80℃에서 1시간 동안, 이어서 125℃에서 16시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1/1)로 결정화하여 S-XIII-I을 수득하였다(7.21g, 수율: 73%).
-10℃에서 MeOH(20mL) 용매 중의 S-XIII-I(4.05g) 및 TEA(0.8mL)의 용액에 아크롤레인(2mL)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -10℃에서 3시간 동안 교반한 후 NH4Cl(수성)(50mL)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 농축시킨 다음, 잔사를 에틸 아세테이트(3×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 NaHCO3(수성) 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 MeOH/에틸 아세테이트(1:10)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 S-XIII-II를 수득하였다(2.08g, 수율: 42%).
질소 대기하에 0℃에서 MeOH(20mL) 중의 S-XIII-II(2.08g)의 혼합물에 N-(3-아미노프로필)사이클로헥실아민(1.6mL)을 첨가하였다. 이 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, NaBH4(0.45g)를 상기 혼합물에 천천히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반한 후, NH4Cl(수성)로 ?칭시켰다. 이 혼합물을 농축시키고, 잔사를 디클로로메탄(3×150mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 NaHCO3(수성) 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액에 Boc2O 무수물(1.58g)을 한꺼번에 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1:2)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 S-XIII-III을 수득하였다(2.42g, 수율: 2단계에 걸쳐 54%).
EtOH(20mL) 중의 S-XIII-III(5.41g) 및 10% Pd/C(0.54g)의 용액을 H2(가스)하에 25℃에서 15시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고 여액을 감압하에 농축시켜 생성물 S-XIII을 수득하였다(3.69g, 수율: 87%).
화합물 1 내지 86을 제조하기 위한 출발 물질, 즉 2,4-디클로로 헤테로사이클릭 유도체가 아래에 제공된다.
Figure pct00045
아래 실시예 1에 나타낸 바와 같이 화학식 I의 특정 화합물을 합성하기 위해 수행된 합성 경로가 아래에 제시된다. 2개의 할로 그룹을 함유하는 화합물 A는 아미노 화합물 R4-H와 반응하여 화합물 B를 생성하고, 이는 다른 아미노 화합물 R3-H (R4-H와 같을 수 있음)와 반응하여 화합물 C, 즉 화학식 I의 화합물을 제공한다.
Figure pct00046
이렇게 합성된 화합물은 컬럼 크로마토그래피, 고압 액체 크로마토그래피 또는 재결정화와 같은 방법으로 정제하였다.
위에 기재된 합성에서 사용된 중간체는 상업적으로 입수가능하거나 당업계에 공지된 방법으로 제조될 수 있다. 상기 방법은 상기 화합물의 합성을 용이하게 하기 위해 필요한 경우 적절한 보호 그룹을 첨가하거나 제거하기 위해 본원에서 구체적으로 기술된 단계 전 또는 후에 추가 단계를 포함할 수도 있다. 또한, 다양한 합성 단계가 원하는 화합물을 얻기 위해 다른 배열 또는 순서로 수행될 수 있다.
모든 화학물질과 용매는 상업용 공급업체에서 구입하여 수령한 대로 사용했다. 모든 반응은 무수 질소 대기하에서 수행하였다. Merck 60 F254 실리카겔 유리판(5×10cm)을 사용하여 TLC로 반응을 모니터링하고; 자외선 조사(254nm)하에 또는 포스포몰리브덴산 시약(Aldrich)으로 분무한 다음 80℃에서 가열하여 구역을 시각적으로 검출하였다. 모든 플래시 컬럼 크로마토그래피는 Merck Kieselgel 60, No. 9385, 230-400mesh ASTM 실리카겔 고정상으로 수행하였다. 프로톤(1H) 핵자기공명 스펙트럼을 Varian Mercury-300 또는 Varian Mercury-400 분광기로 측정하였다. 화학적 이동은 용매 피크의 공명에 비례하여 델타(δ) 스케일에서 백만분율(ppm)로 기록되었다. 다음의 약어가 커플링을 설명하기 위해 사용되었다: s = 단일항(singlet); d = 이중항(doublet); t = 삼중항(triplet); q = 사중항(quartet); quin = 오중항(quintet); br = 브로드(broad); 및 m = 다중항(multiplet). LCMS 데이터는 Agilent MSD-1100 ESI-MS/MS, Agilent 1200 시리즈 LC/MSD VL 및 Waters Acquity UPLC-ESI-MS/MS 시스템으로 측정하였다.
실시예 1: 화합물 1 내지 86의 합성
화합물 1 내지 86은 아래에 개시된 출발 물질 및 측쇄 화합물을 조합하여 합성하였다:
화합물 1의 제조
아래에 중간체 1-I 및 1-II를 통해 화합물 1을 합성하는 반응식이 제시되어있다.
Figure pct00047
질소 대기하에 25℃에서 THF(30mL) 중의 2,4-디클로로-퀴나졸린(1.01g), 4-아미노-피페리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르(1.05g) 및 트리에틸아민(1.01g)의 용액을 15시간 동안 교반한 후 수성 NH4Cl(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 화합물 1-I을 수득하였다(1.31g, 수율: 71%).
1-펜탄올(1.4mL) 중의 화합물 1-I(120.1mg) 및 S-I(160.2mg)의 용액을 마이크로파 방사를 사용하여 120℃에서 15분 동안 가열한 후 농축시켰다. 이로써 수득 된 잔사를 MeOH/DCM(1/32)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 화합물 1-II를 수득하였다(150.1mg, 수율: 55%).
디클로로메탄(6mL) 중의 화합물 1-II(150.1mg)의 용액에 1N HCl/디에틸 에테르(3mL) 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후, 농축시켜 화합물 1의 하이드로클로라이드 염을 수득하였다(98.6mg, 수율: 86%). 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.04 (d, 1H), 7.83 (dd, 1H), 7.49-7.43 (m, 2H), 6.38 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.46 (m, 1H), 3.58 (m, 2H), 3.25-3.13 (m, 8H), 2.93 (t, 2H), 2.21-2.03 (m, 8H), 1.99-1.81 (m, 4H), 1.69 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 521.5 (M+1).
화합물 2의 제조
화합물 2는 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.07 (d, 1H), 7.87-7.80 (m, 2H), 7.51-7.43 (m, 2H), 4.69 (s, 2H), 4.58 (m, 1H), 3.56 (m, 2H), 3.20-3.02 (m, 8H), 2.96 (t, 2H), 2.33 (m, 2H), 2.21-2.03 (m, 6H), 2.01-1.81 (m, 4H), 1.70 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 521.5 (M+1).
화합물 3의 제조
화합물 3은 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.01 (d, 1H), 7.79 (dd, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.46-7.39 (m, 2H), 4.81 (s, 2H), 4.38 (m, 1H), 3.56 (m, 2H), 3.20-3.02 (m, 8H), 2.61 (t, 2H), 2.21-2.02 (m, 6H), 2.00-1.80 (m, 6H), 1.67 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 537.5 (M+1).
화합물 4의 제조
화합물 4는 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.06 (d, 1H), 7.84 (dd, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.24 (s, 1H), 5.03 (s, 2H), 4.42 (m, 1H), 3.56 (m, 2H), 3.20-3.01 (m, 8H), 2.87 (t, 2H), 2.18-2.02 (m, 8H), 1.96-1.79 (m, 4H), 1.69 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 521.5 (M+1).
화합물 5의 제조
화합물 5는 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.05 (d, 1H), 7.83 (dd, 1H), 7.48-7.42 (m, 2H), 4.89 (s, 2H), 4.48 (m, 1H), 3.60 (m, 2H), 3.28-3.08 (m, 10H), 2.30-2.02 (m, 8H), 2.00-1.80 (m, 4H), 1.69 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 522.5 (M+1).
화합물 6의 제조
화합물 6은 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.08 (d, 1H), 7.86 (m, 1H), 7.53-7.45 (m, 2H), 4.58 (m, 1H), 4.38 (s, 2H), 3.60 (m, 2H), 3.24-3.12 (m, 8H), 2.49 (t, 2H), 2.39 (m, 2H), 2.14-1.80 (m, 10H), 1.69 (m, 1H), 1.40-1.16 (m, 6H); EI-MS: 522.5 (M+1).
화합물 7의 제조
화합물 7은 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.07 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.53-7.45 (m, 2H), 5.13 (s, 2H), 4.40 (m, 1H), 3.58 (m, 2H), 3.30-3.11 (m, 10H), 2.24-2.02 (m, 8H), 2.00-1.82 (m, 4H), 1.69 (m, 1H), 1.40-1.16 (m, 6H); EI-MS: 538.5 (M+1).
화합물 8의 제조
화합물 8은 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.80 (s, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.82 (dd, 1H), 7.50-7.40 (m, 3H), 4.58 (m, 1H), 4.20 (t, 2H), 3.90 (t, 2H), 3.64 (m, 2H), 3.32-3.10 (m, 8H), 2.95 (m, 2H), 2.38 (m, 2H), 2.19-2.00 (m, 6H), 1.97-1.62 (m, 7H), 1.42-1.17 (m, 6H); EI-MS: 548.5 (M+1).
화합물 9의 제조
화합물 9는 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.05 (d, 1H), 7.83 (dd, 1H), 7.48-7.44 (m, 2H), 6.33 (s, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.45 (m, 1H), 3.54 (m, 2H), 3.20-3.06 (m, 8H), 2.80 (t, 2H), 2.20-2.02 (m, 8H), 2.00-1.80 (m, 4H), 1.69 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 520.5 (M+1).
화합물 10의 제조
화합물 10은 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.02 (d, 1H), 7.82 (dd, 1H), 7.47-7.44 (m, 2H), 4.90 (s, 2H), 4.36 (m, 1H), 3.57 (m, 2H), 3.22-3.08 (m, 8H), 2.97 (t, 2H), 2.20-2.02 (m, 8H), 2.00-1.80 (m, 4H), 1.69 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 521.5 (M+1).
화합물 11의 제조
화합물 11은 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.57 (s, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.85 (m, 1H), 7.53-7.44 (m, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.43 (m, 1H), 4.37 (t, 2H), 3.57 (m, 2H), 3.21-3.04 (m, 8H), 2.28 (m, 2H), 2.20-2.01 (m, 6H), 1.98-1.80 (m, 4H), 1.69 (m, 1H), 1.40-1.16 (m, 6H); EI-MS: 521.5 (M+1).
화합물 12의 제조
화합물 12는 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 508.5 (M+1).
화합물 13의 제조
화합물 13은 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.08 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.54-7.46 (m, 2H), 5.08 (s, 2H), 4.47 (m, 1H), 3.59 (m, 2H), 3.26-3.15 (m, 10H), 2.45 (m, 2H), 2.21-2.01 (m, 6H), 1.99-1.81 (m, 4H), 1.71 (m, 1H), 1.39-1.17 (m, 6H); EI-MS: 522.5 (M+1).
화합물 14의 제조
화합물 14는 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 522.5 (M+1).
화합물 15의 제조
아래에 중간체 15-I 및 15-II를 통해 화합물 15를 합성하는 반응식이 제시되어 있다.
Figure pct00048
질소 대기하에 25℃에서 THF(100mL) 중의 2,4-디클로로-6-메틸피리미딘(5.00g), 4-아미노-피페리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르(8.36g) 및 TEA(4.64g)의 용액을 15시간 동안 교반한 후 수성 NH4Cl(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(3:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 화합물 15-I을 수득하였다(4.75g, 수율: 47%).
1-펜탄올(1.4mL) 중의 15-I(70.2mg) 및 S-I(110.3mg)의 용액을 140℃에서 4시간 동안 가열한 후 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 MeOH/DCM(1/32)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 화합물 15-II를 수득하였다(100.1mg, 수율: 59%).
디클로로메탄(4mL) 중의 화합물 15-II(100.1mg)의 용액에 1N HCl/디에틸 에테르(2mL)의 용액을 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 다음 농축시켜 화합물 15의 하이드로클로라이드 염을 수득하였다(67.8mg, 수율: 89%). 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 6.33 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.16 (m, 1H), 3.49 (m, 2H), 3.27-3.07 (m, 8H), 2.93 (t, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.19-1.99 (m, 8H), 1.87 (m, 2H), 1.79-1.64 (m, 3H), 1.42-1.17 (m, 6H); EI-MS: 485.5 (M+1).
화합물 16의 제조
화합물 16은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.78 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.27 (m, 1H), 3.49 (m, 2H), 3.22-3.14 (m, 8H), 2.95 (t, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.20-2.04 (m, 8H), 1.90-1.77 (m, 4H), 1.64 (m, 1H), 1.40-1.16 (m, 6H); EI-MS: 485.5 (M+1).
화합물 17의 제조
화합물 17은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.31 (s, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.11 (m, 1H), 3.43 (m, 2H), 3.21-3.00 (m, 8H), 2.88 (t, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.18-1.99 (m, 8H), 1.85 (m, 2H), 1.76-1.62 (m, 3H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 501.5 (M+1).
화합물 18의 제조
화합물 18은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.71 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.72 (s, 2H), 4.15 (m, 1H), 3.46 (m, 2H), 3.23-3.03 (m, 8H), 2.61 (t, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.18-1.96 (m, 8H), 1.86 (m, 2H), 1.79-1.64 (m, 3H), 1.41-1.18 (m, 6H); EI-MS: 485.5 (M+1).
화합물 19의 제조
화합물 19는 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.96 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.15 (m, 1H), 3.50 (m, 2H), 3.24-3.08 (m, 10H), 2.28 (s, 3H), 2.26-2.03 (m, 8H), 1.87 (m, 2H), 1.80-1.63 (m, 3H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 486.4 (M+1).
화합물 20의 제조
화합물 20은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 6.00 (s, 1H), 4.25 (s, 2H), 4.17 (m, 1H), 3.50 (m, 2H), 3.25-3.06 (m, 10H), 2.29 (s, 3H), 2.26-2.02 (m, 8H), 1.90-1.73 (m, 4H), 1.68 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 486.4 (M+1).
화합물 21의 제조
화합물 21은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.98 (s, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.16 (m, 1H), 3.47 (m, 2H), 3.28-3.06 (m, 10H), 2.29 (s, 3H), 2.25-1.97 (m, 8H), 1.87 (m, 2H), 1.78-1.62 (m, 3H), 1.40-1.16 (m, 6H); EI-MS: 502.5 (M+1).
화합물 22의 제조
화합물 22는 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.74 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.39-4.25 (m, 3H), 3.80 (m, 2H), 3.54 (m, 2H), 3.27-3.05 (m, 10H), 2.29 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.19-2.02 (m, 4H), 2.00-1.79 (m, 8H), 1.70 (m, 1H), 1.42-1.17 (m, 6H); EI-MS: 512.5 (M+1).
화합물 23의 제조
화합물 23은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.96 (s, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.13 (m, 1H), 3.49 (m, 2H), 3.28-3.09 (m, 10H), 2.45 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.19-2.00 (m, 6H), 1.87 (m, 2H), 1.79-1.64 (m, 3H), 1.42-1.16 (m, 6H); EI-MS: 486.4 (M+1).
화합물 24의 제조
화합물 24는 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.95 (s, 1H), 4.75 (s, 2H), 4.03 (m, 1H), 3.46 (m, 2H), 3.22-3.01 (m, 8H), 2.91 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.20-2.02 (m, 6H), 1.93 (m, 2H), 1.86 (m, 2H), 1.77-1.62 (m, 3H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 485.4 (M+1).
화합물 25의 제조
화합물 25는 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 6.01 (s, 1H), 5.03 (s, 2H), 4.09 (m, 1H), 3.48 (m, 2H), 3.26-3.04 (m, 10H), 2.60 (q, 2H), 2.24-1.96 (m, 9H), 1.84 (m, 2H), 1.70 (m, 2H), 1.41-1.13 (m, 9H); EI-MS: 516.5 (M+1).
화합물 26의 제조
화합물 26은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.98 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.14 (m, 1H), 3.46 (m, 2H), 3.22-3.12 (m, 10H), 2.58 (q, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.20-2.02 (m, 6H), 1.88 (m, 2H), 1.80-1.66 (m, 3H), 1.41-1.13 (m, 9H); EI-MS: 500.5 (M+1).
화합물 27의 제조
화합물 27은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.98 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.06 (m, 1H), 3.47 (m, 2H), 3.28-3.02 (m, 8H), 2.93 (m, 2H), 2.58 (q, 2H), 2.20-1.96 (m, 8H), 1.87 (m, 2H), 1.69 (m, 3H), 1.41-1.13 (m, 9H); EI-MS: 499.5 (M+1).
화합물 28의 제조
화합물 28은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 6.38 (br s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.72 (s, 2H), 4.16 (m, 1H), 3.48 (m, 2H), 3.21-3.04 (m, 8H), 2.82 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.17-2.00 (m, 8H), 1.87 (m, 2H), 1.77-1.64 (m, 3H), 1.42-1.17 (m, 6H); EI-MS: 484.5 (M+1).
화합물 29의 제조
아래에 중간체 29-I 내지 29-IV를 통해 화합물 29를 합성하는 반응식이 제시되어 있다.
Figure pct00049
질소 대기하에 25℃에서 THF(30mL) 중의 2,4-디클로로-퀴나졸린(1.02g), 1-(4-아미노-피페리딘-1-일)-2,2,2-트리플루오로-에탄온의 하이드로클로라이드 염(1.21g) 및 TEA(1.02g)의 용액을 15시간 동안 교반한 후, 수성 NH4Cl(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 화합물 29-I을 수득하였다(1.37g, 수율: 75%).
1-펜탄올(2mL) 중의 화합물 29-I(0.26g) 및 S-I(0.36g)의 용액을 마이크로파 방사를 사용하여 120℃에서 15분 동안 가열한 후 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 MeOH/DCM(1:32)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 화합물 29-II를 수득하였다(0.29g, 수율: 49%).
질소 대기하에 MeOH/THF(2.6mL/2.6mL) 중의 화합물 29-II(0.29g)의 자석 교반된 용액에 H2O(0.52mL) 중의 KOH(0.05g)의 용액을 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 디클로로메탄(3×50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 화합물 29-III을 수득하였다(0.24g, 수율: 94%).
질소 대기하에 25℃에서 디클로로메탄(20mL) 중의 2-tert-부톡시카보닐아미노-펜탄디산 1-tert-부틸 에스테르(300.2mg)의 자석 교반된 용액에 EDCI(120.3mg) 및 HOBt(96.2mg)를 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반한 후, 디클로로메탄(10mL) 중의 29-III(240.2mg)의 용액을 한꺼번에 상기 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가로 6시간 동안 교반한 다음 물에 부었다. 생성된 혼합물을 디클로로메탄(2×50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 MeOH/DCM(1:19)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 29-IV를 수득하였다(170.1mg, 수율: 51%).
디클로로메탄/1,4-디옥산(3.4mL/3.4mL) 중의 29-IV(170.1mg)의 용액에 4N HCl/디옥산(0.85mL) 용액을 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반하고 농축시켜 화합물 29의 하이드로클로라이드 염을 수득하였다(115.7mg, 수율: 90%). 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.98 (d, 1H), 7.79 (t, 1H), 7.47-7.38 (m, 2H), 6.36 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.45 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.06-3.96 (m, 2H), 3.30 (m, 1H), 3.26-3.12 (m, 6H), 2.93 (m, 2H), 2.80 (m, 1H), 2.72 (m, 2H), 2.22 (m, 2H), 2.16-1.79 (m, 10H), 1.66 (m, 2H), 1.51 (m, 1H), 1.39-1.15 (m, 6H); EI-MS: 650.5 (M+1).
화합물 30의 제조
화합물 30은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.94 (m, 1H), 7.82-7.71 (m, 2H), 7.42-7.42 (m, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.48-4.40 (m, 2H), 4.08-3.99 (m, 2H), 3.30-3.06 (m, 7H), 2.93 (m, 2H), 2.84 (m, 1H), 2.72 (m, 2H), 2.23-1.98 (m, 9H), 1.90-1.79 (m, 3H), 1.67 (m, 2H), 1.56 (m, 1H), 1.41-1.15 (m, 6H); EI-MS: 650.5 (M+1).
화합물 31의 제조
화합물 31은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.97 (d, 1H), 7.78 (t, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.44-7.38 (m, 2H), 5.15 (d, 1H), 5.11 (d, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.14 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 3.21-3.04 (m, 7H), 2.94 (m, 2H), 2.75-2.66 (m, 3H), 2.25 (m, 2H), 2.19-1.78 (m, 10H), 1.67 (m, 2H), 1.49 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 666.5 (M+1).
화합물 32의 제조
화합물 32는 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.00 (d, 1H), 7.81 (t, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.46-7.41 (m, 2H), 4.81 (s, 2H), 4.46 (m, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.08-3.99 (m, 2H), 3.23 (m, 1H), 3.18-3.04 (m, 6H), 2.78-2.73 (m, 3H), 2.62 (m, 2H), 2.24 (m, 2H), 2.11-1.78 (m, 10H), 1.64 (m, 2H), 1.53 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 650.5 (M+1).
화합물 33의 제조
화합물 33은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.01 (d, 1H), 7.82 (t, 1H), 7.47-7.42 (m, 2H), 4.81 (s, 2H), 4.50 (m, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.04-3.96 (m, 2H), 3.26-3.12 (m, 9H), 2.83 (m, 1H), 2.71 (m, 2H), 2.24-2.18 (m, 4H), 2.17-1.81 (m, 8H), 1.68 (m, 2H), 1.53 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 651.5 (M+1).
화합물 34의 제조
화합물 34는 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.00 (d, 1H), 7.80 (t, 1H), 7.46-7.38 (m, 2H), 4.56-4.42 (m, 2H), 4.33 (s, 2H), 4.06-4.00 (m, 2H), 3.27 (m, 1H), 3.20-3.10 (m, 6H), 2.86 (m, 1H), 2.72 (m, 2H), 2.47 (m, 2H), 2.24-1.98 (m, 9H), 1.86-1.58 (m, 6H), 1.40-1.14 (m, 6H); EI-MS: 651.5 (M+1).
화합물 35의 제조
화합물 35는 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.01 (d, 1H), 7.83 (t, 1H), 7.49-7.43 (m, 2H), 5.11 (d, 1H), 5.07 (d, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.32 (m, 1H), 4.06-3.98 (m, 2H), 3.36-3.12 (m, 9H), 2.72-2.66 (m, 3H), 2.24-2.04 (m, 8H), 1.98-1.76 (m, 4H), 1.66 (m, 2H), 1.53 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 667.5 (M+1).
화합물 36의 제조
화합물 36은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.74 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.83 (t, 1H), 7.51-7.39 (m, 3H), 4.57-4.41 (m, 2H), 4.17 (m, 2H), 4.15-4.02 (m, 2H), 3.91 (m, 2H), 3.35-3.12 (m, 7H), 3.01-2.81 (m, 3H), 2.77 (m, 2H), 2.31-2.03 (m, 8H), 1.99-1.60 (m, 9H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 677.6 (M+1).
화합물 37의 제조
화합물 37은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.02 (d, 1H), 7.83 (t, 1H), 7.51-7.41 (m, 2H), 5.07 (d, 1H), 5.03 (d, 1H), 4.47 (m, 1H), 4.37 (m, 1H), 4.07-3.96 (m, 2H), 3.35-3.12 (m, 9H), 2.87 (m, 1H), 2.73 (m, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.23 (m, 2H), 2.17-2.01 (m, 4H), 2.00-1.80 (m, 4H), 1.68 (m, 2H), 1.57 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 651.5 (M+1).
화합물 38의 제조
화합물 38은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.95 (d, 1H), 7.42 (t, 1H), 7.42-7.38 (m, 2H), 4.92 (d, 1H), 4.87 (d, 1H), 4.41 (m, 1H), 4.22 (m, 1H), 4.11 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.22-3.08 (m, 7H), 2.99 (t, 2H), 2.75 (m, 2H), 2.62 (m, 1H), 2.30-2.00 (m, 8H), 1.99-1.72 (m, 4H), 1.67 (m, 2H), 1.49 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 650.6 (M+1).
화합물 39의 제조
아래에 중간체 39-I 내지 39-V를 통해 화합물 39를 합성하는 반응식이 제시되어 있다.
Figure pct00050
질소 대기하에 25℃에서 THF(30mL) 중의 2,4-디클로로-6-메틸피리미딘(0.82g), 1-(4-아미노-피페리딘-1-일)-2,2,2-트리플루오로-에탄온의 하이드로클로라이드 염(1.21g) 및 TEA(1.02g)의 용액을 15시간 동안 교반한 다음, 수성 NH4Cl(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(1:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 화합물 39-I을 수득하였다(1.07g, 수율: 66%).
1-펜탄올(2mL) 중의 화합물 39-I(0.24g) 및 S-I(0.36g)의 용액을 마이크로파 방사를 사용하여 120℃에서 15분 동안 가열한 후 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 MeOH/DCM(1:32)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 화합물 39-II를 수득하였다(0.33g, 수율: 57%).
질소 대기하에 MeOH/THF(2.6mL/2.6mL) 중의 화합물 39-II(0.33g)의 자석 교반된 용액에 H2O(0.52mL) 중의 KOH(0.05g)의 용액을 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 디클로로메탄(3×50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 화합물 39-III을 수득하였다(0.23g, 수율: 79%).
질소 대기하에 25℃에서 디클로로메탄(20mL) 중의 3-(tert-부톡시카보닐-에톡시카보닐메틸-아미노)-프로피온산(280.1mg)의 자석 교반된 용액에 EDCI(116.4mg) 및 HOBt(92.5mg)를 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반한 후, 디클로로메탄(20mL) 중의 39-III(232.8mg)의 용액을 한꺼번에 상기 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가로 6시간 동안 교반한 다음 물에 부었다. 생성된 혼합물을 디클로로메탄(2×50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 MeOH/DCM(1:19)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 39-IV를 수득하였다(231.4mg, 수율: 72%).
질소 대기하에 THF(30mL) 중의 화합물 39-IV(231.4mg)의 용액에 LiOH(수성)(1mL, 1N) 용액을 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후, NH4Cl(수성)(20mL, 2M)로 ?칭시켰다. 수성 상을 에틸 아세테이트(3×50mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 농축시켜 조악한 잔사 39-V를 수득하였다(200.4mg, 수율: 89%).
디클로로메탄/1,4-디옥산(4mL/4mL) 중의 39-V(200.4mg)의 용액에 4N HCl/디 옥산(1mL) 용액을 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반하고 농축시켜 화합물 39의 하이드로클로라이드 염을 수득하였다(154.7mg, 수율: 98%). 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 6.34 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 4.73 (d, 1H), 4.65 (d, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.88 (m, 1H), 3.41 (t, 2H), 3.31-3.12 (m, 7H), 3.00-2.82 (m, 5H), 2.30 (s, 3H), 2.18-2.00 (m, 7H), 1.98-1.77 (m, 4H), 1.70 (m, 1H), 1.53 (m, 1H), 1.46-1.16 (m, 6H); EI-MS: 614.5 (M+1).
화합물 40의 제조
화합물 40은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.78 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.58 (d, 1H), 4.52 (d, 1H), 4.32-4.20 (m, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.92 (m, 1H), 3.44 (m, 2H), 3.36-3.12 (m, 7H), 3.04-2.90 (m, 5H), 2.26 (s, 3H), 2.21-1.80 (m, 10H), 1.69 (m, 1H), 1.57 (m, 1H), 1.46 (m, 1H),1.40-1.16 (m, 6H); EI-MS: 614.5 (M+1).
화합물 41의 제조
화합물 41은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.39 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.00 (d, 1H), 4.92 (d, 1H), 4.22 (m, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.93 (s, 2H), 3.84 (m, 1H), 3.41 (t, 2H), 3.22-3.10 (m, 7H), 2.96 (t, 2H), 2.91 (t, 2H), 2.83 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.18-2.03 (m, 7H), 1.93-1.80 (m, 3H), 1.70 (m, 2H), 1.50 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 632.5 (M+1).
화합물 42의 제조
화합물 42는 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.71 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 4.74 (d, 1H), 4.67 (d, 1H), 4.27 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.93 (m, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.42 (m, 2H), 3.26-3.04 (m, 7H), 2.97 (m, 2H), 2.90 (m, 1H), 2.63 (t, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.19-1.78 (m, 11H), 1.69 (m, 1H), 1.53 (m, 1H), 1.42-1.17 (m, 6H); EI-MS: 614.5 (M+1).
화합물 43의 제조
화합물 43은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.93 (s, 1H), 4.80 (d, 1H), 4.73 (d, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.08 (m, 1H), 3.89 (m, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.41 (t, 2H), 3.30-3.10 (m, 9H), 2.98 (t, 2H), 2.91 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.25-2.04 (m, 7H), 1.98-1.78 (m, 4H), 1.68 (m, 1H), 1.54 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 615.5 (M+1).
화합물 44의 제조
화합물 44는 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.98 (s, 1H), 4.38-4.20 (m, 4H), 3.92 (m, 1H), 3.84 (s, 2H), 3.42 (t, 2H), 3.38-3.16 (m, 7H), 3.06 (m, 1H), 2.99 (t, 2H), 2.51 (t, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.22-2.01 (m, 7H), 1.97-1.81 (m, 3H), 1.70 (m, 1H), 1.62-1.43 (m, 2H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 615.5 (M+1).
화합물 45의 제조
화합물 45는 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.94 (s, 1H), 5.04 (d, 1H), 4.95 (d, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.96-3.84 (m, 3H), 3.41 (t, 2H), 3.28-3.16 (m, 9H), 2.98 (t, 2H), 2.83 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.24-2.04 (m, 7H), 1.92-1.80 (m, 3H), 1.70 (m, 2H), 1.51 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 631.5 (M+1).
화합물 46의 제조
화합물 46은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.94 (s, 1H), 4.99 (d, 1H), 4.92 (d, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.93 (s, 2H), 3.90 (m, 1H), 3.43 (t, 2H), 3.31-3.15 (m, 9H), 2.99 (t, 2H), 2.92 (m, 1H), 2.47 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.19-2.03 (m, 5H), 1.92-1.80 (m, 3H), 1.71 (m, 2H), 1.53 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 615.5 (M+1).
화합물 47의 제조
아래에 중간체 47-I 내지 47-III을 통해 화합물 47을 합성하는 반응식이 제시되어 있다.
Figure pct00051
질소 대기하에 아세토니트릴(50mL) 중의 화합물 29-III(241mg) 및 K2CO3(241mg)의 자석 교반된 용액에 2-(2-브로모-에틸)-이소인돌-1,3-디온(135mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 15시간 동안 교반한 후, NH4Cl(수성)(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 생성된 혼합물을 디클로로메탄(3×100mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 MeOH/DCM(1:19)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 47-I을 수득하였다(215mg, 수율: 72%).
5℃에서 메탄올(5mL) 중의 화합물 47-I(215mg)의 교반된 용액에 85% NH2NH2·H2O(40mg)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반한 후 농축시켰다. 잔사를 K2CO3(수성)(50mL, 10% w/w)에 붓고 혼합물을 CH2Cl2(3×100mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득한 잔사를 MeOH/NH4OH(9:1)를 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 47-II를 수득하였다(182.3mg, 수율: 99%).
질소 대기하에 25℃에서 디클로로메탄(50mL) 중의 4-tert-부톡시카보닐아미노-4-[2-(디에톡시-포스포릴)-에틸카바모일]-부티르산(300.6mg)의 자석 교반된 용액에 EDCI(91.2mg) 및 HOBt(72.9mg)를 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반한 후, 디클로로메탄(10mL) 중의 화합물 47-II(182.3mg)의 용액을 한꺼번에 상기 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가로 6시간 동안 교반한 다음 물에 부었다. 생성된 혼합물을 디클로로메탄(2×50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 MeOH/DCM(1:19)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 47-III을 수득하였다(241.2mg, 수율: 87%).
디클로로메탄(15mL) 중의 화합물 47-III(241.2mg)의 용액에 TMSBr(0.8mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반하고 농축시켜 화합물 47의 하이드로브로마이드 염을 수득하였다(175.3mg, 수율: 81%). 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.97 (d, 1H), 7.79 (dd, 1H), 7.42-7.36 (m, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.42 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 3.81 (m, 2H), 3.69 (m, 2H), 3.52 (m, 2H), 3.40 (m, 2H), 3.30-3.10 (m, 8H), 2.94 (t, 2H), 2.50 (m, 2H), 2.24-1.93 (m, 14H), 1.85 (m, 2H), 1.68 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 800.5 (M+1).
화합물 48의 제조
화합물 48은 화합물 47을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.02 (d, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.80 (dd, 1H), 7.48-7.40 (m, 2H), 4.68 (s, 2H), 4.59 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.82 (m, 2H), 3.67 (m, 2H), 3.52 (m, 2H), 3.38 (m, 2H), 3.31-3.14 (m, 8H), 2.97 (t, 2H), 2.50 (m, 2H), 2.39 (m, 2H), 2.23-2.01 (m, 12H), 1.85 (m, 2H), 1.68 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 800.5 (M+1).
화합물 49의 제조
화합물 49는 화합물 47을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.02 (d, 1H), 7.81 (dd, 1H), 7.48-7.40 (m, 2H), 7.24 (s, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.42 (m, 1H), 3.99 (m, 1H), 3.69 (m, 2H), 3.65 (m, 2H), 3.54 (m, 1H), 3.45 (m, 1H), 3.34 (m, 2H), 3.20-3.04 (m, 8H), 2.87 (t, 2H), 2.47 (m, 2H), 2.24-1.97 (m, 12H), 1.92-1.80 (m, 4H), 1.68 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 816.5 (M+1).
화합물 50의 제조
화합물 50은 화합물 47을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.00 (d, 1H), 7.80 (dd, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.46-7.40 (m, 2H), 4.82 (s, 2H), 4.40 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 3.73 (m, 2H), 3.67 (m, 2H), 3.54 (m, 1H), 3.43 (m, 1H), 3.38 (m, 2H), 3.22-3.08 (m, 8H), 2.62 (t, 2H), 2.48 (m, 2H), 2.25-1.96 (m, 14H), 1.84 (m, 2H), 1.68 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 800.6 (M+1).
화합물 51의 제조
화합물 51은 화합물 47을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.07 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.54-7.46 (m, 2H), 5.01 (s, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.84 (m, 2H), 3.69 (m, 2H), 3.51 (m, 2H), 3.41 (m, 2H), 3.36-3.02 (m, 10H), 2.51 (m, 2H), 2.32-1.96 (m, 14H), 1.87 (m, 2H), 1.69 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 801.6 (M+1).
화합물 52의 제조
화합물 52는 화합물 47을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.07 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.55-7.43 (m, 2H), 5.17 (s, 2H), 4.69 (t, 2H), 4.46 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 3.82 (m, 2H), 3.69 (m, 2H), 3.56-3.12 (m, 12H), 2.53-2.38 (m, 4H), 2.32-1.80 (m, 14H), 1.69 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 801.6 (M+1).
화합물 53의 제조
화합물 53은 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 523.5 (M+1).
화합물 54의 제조
화합물 54는 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.02 (d, 1H), 7.83 (t, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.50-7.42 (m, 2H), 4.82 (s, 2H), 4.47 (m, 1H), 4.40-4.24 (m, 2H), 4.06 (m, 1H), 3.25 (m, 1H), 3.20-3.04 (m, 6H), 2.80 (m, 1H), 2.70-2.60 (m, 4H), 2.20-1.78 (m, 9H), 1.92-1.80 (m, 3H), 1.71 (m, 2H), 1.53 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 651.5 (M+1).
화합물 55의 제조
아래에 중간체 55-I 내지 55-III을 통해 화합물 55를 합성하는 반응식이 제시되어 있다.
Figure pct00052
에틸 아세테이트(100mL) 중의 2,6-디클로로퓨린(10g)의 자석 교반된 용액에 p-톨루엔설폰산 일수화물(0.08g)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 질소 대기하에 50℃로 가열하고 3,4-디하이드로-2H-피란(7.5mL)을 2시간에 걸쳐 첨가하였다. 이 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반하고 여과하여 조악한 고체를 얻었다. 이 고체를 n-헥산/에틸 아세테이트(1:1)로 세척하여 화합물 55-I을 수득하였다(14.4g, 수율: 100%).
질소 대기하에 에틸 아세테이트(35mL) 중의 화합물 55-I(0.65g)의 자석 교반된 용액에 화합물 S-XI(1.15g) 및 TEA(0.75g)를 첨가하였다. 이 혼합물을 50℃로 4시간 동안 가열하고, 25℃로 냉각시킨 다음 수성 NH4Cl(50mL, 2M)로 ?칭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트(3×100mL)로 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 MeOH/DCM(1:9)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 담황색 고체로서 화합물 55-II를 수득하였다(1.16g, 수율: 68%).
1-펜탄올(6mL) 중의 화합물 55-II(1.05g) 및 피페라진(1.00g)의 용액을 100℃에서 15시간 동안 가열한 후 농축시켰다. 이로써 수득된 잔사를 MeOH/DCM(1:1)을 사용하여 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 화합물 55-III을 수득하였다(0.67g, 수율: 60%).
디클로로메탄(10.6mL) 중의 화합물 55-III(264mg)의 용액에 1N HCl/디에틸 에테르(5.3mL) 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하고 농축시켜 화합물 55의 하이드로클로라이드 염을 수득하였다(204mg, 수율: 94%). EI-MS: 498.5 (M+1).
화합물 56의 제조
화합물 56은 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 528.5 (M+1).
화합물 57의 제조
화합물 57은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 473.5 (M+1).
화합물 58의 제조
화합물 58은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 472.5 (M+1).
화합물 59의 제조
화합물 59는 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.02 (d, 1H), 7.83 (t, 1H), 7.46-7.41 (m, 2H), 5.10 (d, 1H), 5.02 (m, 1H), 4.47 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.34-3.12 (m, 9H), 2.84 (m, 1H), 2.69 (t, 2H), 2.58 (t, 2H), 2.47 (m, 2H), 2.17-2.00 (m, 7H), 1.94-1.80 (m, 3H), 1.71 (m, 2H), 1.51 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 665.6 (M+1).
화합물 60의 제조
화합물 60은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 767.6 (M+1).
화합물 61의 제조
화합물 61은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.03 (d, 1H), 7.84 (t, 1H), 7.51-7.45 (m, 2H), 5.11 (d, 1H), 5.02 (d, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.01-3.83 (m, 3H), 3.45 (t, 2H), 3.31-3.11 (m, 7H), 3.02 (t, 2H), 2.95-2.81 (m, 3H), 2.48 (m, 2H), 2.15-1.97 (m, 5H), 1.92-1.81 (m, 3H), 1.71 (m, 2H), 1.57 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 651.5 (M+1).
화합물 62의 제조
화합물 62는 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.93 (s, 1H), 4.99 (d, 1H), 4.92 (d, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.34-3.14 (m, 11H), 2.90 (m, 1H), 2.66 (t, 2H), 2.47 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.19-2.00 (m, 7H), 1.94-1.81 (m, 3H), 1.71 (m, 2H), 1.51 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 629.5 (M+1).
화합물 63의 제조
화합물 63은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.95 (s, 1H), 4.98 (d, 1H), 4.91 (d, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.98-3.86 (m, 3H), 3.43 (t, 2H), 3.38-3.18 (m, 9H), 2.99 (t, 2H), 2.92 (m, 1H), 2.59 (q, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.32-1.64 (m, 10H), 1.52 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 9H); EI-MS: 629.5 (M+1).
화합물 64의 제조
화합물 64는 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.94 (s, 1H), 4.99 (d, 1H), 4.92 (d, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.99-3.84 (m, 3H), 3.34-3.14 (m, 11H), 2.89 (m, 1H), 2.65 (t, 2H), 2.58 (q, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.19-2.00 (m, 7H), 1.94-1.81 (m, 3H), 1.70 (m, 2H), 1.51 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 9H); EI-MS: 643.6 (M+1).
화합물 65의 제조
화합물 65는 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.94 (s, 1H), 4.98 (d, 1H), 4.93 (d, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.12-4.01 (m, 2H), 3.93 (m, 1H), 3.30-3.14 (m, 9H), 2.90 (m, 1H), 2.72 (m, 2H), 2.58 (q, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.26-2.05 (m, 7H), 1.92-1.82 (m, 3H), 1.69 (m, 2H), 1.51 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 9H); EI-MS: 629.5 (M+1).
화합물 66의 제조
화합물 66은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.94 (s, 1H), 4.82 (s, 2H), 4.28 (m, 1H), 4.10-3.83 (m, 3H), 3.18-3.12 (m, 7H), 2.95 (m, 2H), 2.83 (m, 1H), 2.71 (m, 2H), 2.58 (q, 2H), 2.26-2.04 (m, 9H), 1.94-1.78 (m, 3H), 1.69 (m, 2H), 1.50 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 9H); EI-MS: 628.5 (M+1).
화합물 67의 제조
화합물 67은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.04 (d, 1H), 7.86 (t, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 5.12 (s, 2H), 4.70 (t, 2H), 4.47 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 4.12-4.01 (m, 2H), 3.31-3.13 (m, 7H), 2.86 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.43 (m, 2H), 2.28 (m, 2H), 2.17-2.04 (m, 4H), 1.95-1.80 (m, 4H), 1.71 (m, 2H), 1.57 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 651.5 (M+1).
화합물 68의 제조
화합물 68은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.04 (d, 1H), 7.84 (t, 1H), 7.51-7.42 (m, 2H), 5.15 (s, 2H), 4.69 (t, 2H), 4.49 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.01-3.90 (m, 3H), 3.44 (t, 2H), 3.36-3.13 (m, 7H), 3.02 (t, 2H), 2.90 (m, 1H), 2.43 (m, 2H), 2.18-2.05 (m, 4H), 1.94-1.81 (m, 4H), 1.71 (m, 2H), 1.58 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 651.5 (M+1).
화합물 69의 제조
화합물 69는 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.95 (s, 1H), 5.02 (d, 1H), 5.00 (d, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.09-3.86 (m, 3H), 3.30-3.12 (m, 9H), 2.85 (m, 1H), 2.70 (m, 2H), 2.58 (q, 2H), 2.28-2.05 (m, 9H), 1.92-1.80 (m, 3H), 1.70 (m, 2H), 1.50 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 9H); EI-MS: 645.5 (M+1).
화합물 70의 제조
화합물 70은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 5.96 (s, 1H), 5.05 (d, 1H), 4.97 (d, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.98-3.84 (m, 3H), 3.43 (t, 2H), 3.32-3.13 (m, 9H), 2.99 (t, 2H), 2.86 (m, 1H), 2.58 (q, 2H), 2.28-2.04 (m, 7H), 1.92-1.80 (m, 3H), 1.71 (m, 2H), 1.52 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 9H); EI-MS: 645.5 (M+1).
화합물 71의 제조
화합물 71은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 8.67 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.36 (t, 2H), 4.10 (m, 1H), 3.44 (m, 2H), 3.21-3.02 (m, 8H), 2.32 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.19-1.98 (m, 6H), 1.84 (m, 2H), 1.79-1.60 (m, 3H), 1.42-1.16 (m, 6H); EI-MS: 485.6 (M+1).
화합물 72의 제조
화합물 72는 화합물 1을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 492.6 (M+1).
화합물 73의 제조
화합물 73은 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 7.66 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.41 (s, 2H), 4.05 (m, 1H), 3.45 (m, 2H), 3.28- 3.03 (m, 6H), 2.29 (s, 3H), 2.18-1.96 (m, 6H), 1.86 (m, 2H), 1.79-1.60 (m, 3H), 1.41-1.18 (m, 6H); EI-MS: 456.6 (M+1).
화합물 74의 제조
화합물 74는 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 8.21 (s, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.08 (m, 1H), 3.49 (m, 2H), 3.21-3.06 (m, 10H), 2.43 (m, 2H), 2.19-2.00 (m, 7H), 1.90-1.62 (m, 7H), 1.42-1.16 (m, 6H); EI-MS: 540.7 (M+1).
화합물 75의 제조
화합물 75는 화합물 15를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 486.6 (M+1).
화합물 76의 제조
화합물 76은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 7.94 (d, 1H), 7.76 (t, 1H), 7.42-7.36 (m, 2H), 6.52 (s, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.41 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 4.08 (m, 1H), 3.99 (m, 1H), 3.22-3.06 (m, 7H), 2.86 (t, 2H), 2.80-2.66 (m, 3H), 2.22 (m, 2H), 2.16-2.00 (m, 6H), 1.99-1.59 (m, 4H),1.66 (m, 2H), 1.49 (m, 1H), 1.39-1.15 (m, 6H); EI-MS: 649.6 (M+1).
화합물 77의 제조
화합물 77은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 8.65 (s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.76 (t, 1H), 7.41-7.34 (m, 2H), 4.80 (m, 2H), 4.44 (m, 1H), 4.37 (t, 2H), 4.25 (m, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.99 (m, 1H), 3.25-3.02 (m, 7H), 2.77 (m, 1H), 2.73 (m, 2H), 2.31-2.20 (m, 4H), 2.17-2.01 (m, 4H), 2.00-1.80 (m, 4H), 1.68 (m, 2H), 1.57 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 650.6 (M+1).
화합물 78의 제조
화합물 78은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 7.93 (d, 1H), 7.77 (t, 1H), 7.41-7.35 (m, 2H), 5.05 (d, 1H), 4.97 (d, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.19 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.58 (m, 2H), 3.31-3.06 (m, 9H), 2.98 (m, 2H), 2.81 (m, 1H), 2.55-2.38 (m, 4H), 2.22-1.77 (m, 12H), 1.71 (m, 2H), 1.57 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 691.6 (M+1).
화합물 79의 제조
화합물 79는 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 8.02 (d, 1H), 7.83 (t, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.50-7.42 (m, 2H), 5.09 (m, 2H), 4.44 (s, 2H), 4.40 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 4.08-3.99 (m, 2H), 3.23-3.04 (m, 5H), 2.78-2.73 (m, 3H), 2.22 (m, 2H), 2.18-2.00 (m, 4H), 1.94-1.70 (m, 4H), 1.64 (m, 2H), 1.53 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 621.7 (M+1).
화합물 80의 제조
화합물 80은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 7.92 (d, 1H), 7.74 (t, 1H), 7.41-7.35 (m, 2H), 5.00 (m, 2H), 4.43 (m, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.02-3.95 (m, 2H), 3.42 (m, 2H), 3.31-3.06 (m, 9H), 2.99 (m, 2H), 2.81 (m, 1H), 2.42 (m, 2H), 2.14-2.00 (m, 5H), 1.98-1.60 (m, 8H), 1.53 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H), 0.99 (d, 6H); EI-MS: 707.7 (M+1).
화합물 81의 제조
화합물 81은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 8.76 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.77 (m, 2H), 4.39 (t, 2H), 4.22 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.84 (m, 1H), 3.43 (t, 2H), 3.24-3.08 (m, 7H), 2.97 (t, 2H), 2.87 (m, 1H), 2.31 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.19-2.03 (m, 5H), 1.92-1.61 (m, 5H), 1.53 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 614.6 (M+1).
화합물 82의 제조
화합물 82는 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 641.7 (M+1).
화합물 83의 제조
화합물 83은 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 585.6 (M+1).
화합물 84의 제조
화합물 84는 화합물 47을 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. EI-MS: 788.6 (M+1).
화합물 85의 제조
화합물 85는 화합물 39를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 7.45 (s, 1H), 4.92 (m, 2H), 4.40 (m, 1H), 4.16 (m, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.91 (m, 1H), 3.42 (t, 2H), 3.25-3.10 (m, 9H), 2.99 (t, 2H), 2.76 (m, 1H), 2.44 (m, 2H), 2.19-2.03 (m, 4H), 1.96 (s, 3H), 1.92-1.61 (m, 6H), 1.53 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 6H); EI-MS: 615.6 (M+1).
화합물 86의 제조
화합물 86은 화합물 29를 제조하는데 사용된 것과 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 7.44 (s, 1H), 4.92 (m, 2H), 4.40 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 3.26-3.10 (m, 9H), 2.80-2.64 (m, 3H), 2.41 (m, 2H), 2.22 (m, 2H), 2.16-2.02 (m, 4H), 1.95 (s, 3H), 1.90-1.60 (m, 6H), 1.51 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H); EI-MS: 615.6 (M+1).
실시예 2: 인간 CXCR4-형질감염된 HEK293 세포에서의 방사성 리간드 결합의 억제
화학식 I의 화합물과 인간 CXCL12 사이의 결합 경쟁을 아래 기재한 바와 같은 방사성 리간드 결합 분석을 사용하여 평가하였다.
40μL의 분석 완충액(50mM HEPES-NaOH, pH 7.4, 100mM NaCl, 5mM MgCl2, 1mM CaCl2, 0.5% 소 혈청 알부민) 중의 인간 CXCR4-형질감염된 HEK293 세포로부터 제조 된 멤브레인(2 내지 4㎍)을 분석 플레이트(Costar Corning, Cambridge, MA)에서 20μL의 방사성 표지된 125I-CXCL12(0.16nM) 및 20μL의 시험 화합물과 함께 배양하였다. 30℃에서 60분 후, 생성된 반응 혼합물을 96-웰 GF/B 필터 플레이트(Millipore Corp., Billerica, MA)로 옮겨 배양을 종결시키고 매니폴드를 통해 여과하였다. 상기 플레이트를 100μL의 얼음 냉각된 세척 완충액(50mM HEPES-NaOH, pH 7.4, 100mM NaCl)으로 4회 세척하였다. 필터에 결합된 방사능을 Topcount(PerkinElmer Inc., Waltham, MA)로 측정하였다.
예상치 않게 125I-CXCL12의 CXCR4에 대한 결합을 50% 억제하는데 필요한 25개의 시험 화합물의 농도(IC50)는 50nM 미만이고 33개의 시험 화합물의 IC50 값은 50 내지 100nM이며 28개의 시험 화합물의 IC50 값은 100 내지 1000nM인 것으로 관찰되었다. 보다 구체적으로, 50nM 미만의 IC50 값을 나타내는 화합물 목록은 화합물 1 내지 7, 9, 12, 13, 15 내지 19, 21, 23, 25, 28 내지 30, 40, 42, 59 및 75를 포함하고; 50 내지 100nM의 IC50 값을 나타내는 화합물 목록은 화합물 8, 10, 11, 14, 20, 22, 24, 26, 27, 31 내지 35, 37 내지 39, 43, 45 내지 50, 58, 61, 62, 66, 72, 73, 76, 78 및 82를 포함하며; 100 내지 1000nM의 IC50 값을 나타내는 화합물 목록은 화합물 36, 41, 44, 51 내지 57, 60, 63 내지 65, 67 내지 71, 74, 77, 79 내지 81 및 83 내지 86을 포함한다.
이러한 결과는 화학식 I의 화합물이 CXCR4에 대해 높은 결합 친화력을 갖는다는 것을 나타낸다.
실시예 3: 림프모구 백혈병(lymphoblastic leukemia) 세포에서의 화학주성(chemotaxis)의 억제
화학식 I의 화합물에 대한 암세포의 반응을 아래 나타낸 바와 같은 화학주성 분석을 사용하여 평가하였다.
10% 소 혈청 알부민이 보충된 RPMI(Roswell Park Memorial Institute) 1640 배지 중의 T 세포 급성 림프모구 백혈병(CCRF-CEM) 세포를 250μL의 시험 화합물과 함께 배양하였다. Millicell Hanging Cell Culture Inserts(구멍 크기 5μm; 24-웰 플레이트; Millipore, Bedford, MA, USA)를 이용하여 분석을 수행하였다. 37℃에서 10분 후, 시험 화합물로 미리 배양한 세포 250μL를 2.5×105 세포/웰의 밀도로 상기 인서트의 상부 챔버에 웰마다 플레이팅하였다. CXCL12(10nM) 및 시험 화합물을 함유하는 300μL/웰 배지를 상기 인서트의 하부 챔버에 플레이팅하였다. 37℃에서 2.5시간 후, 두 챔버 내의 세포를 유동 세포계측기(Guava Technologies, Hayward, CA, USA)로 측정하였다.
39개의 시험 화합물은 예상외로 화학주성을 50% 억제하는데 필요한 농도(EC50)가 50nM 미만의 값을 나타내고, 4개의 시험 화합물은 50 내지 150nM의 EC50 값을 나타내는 것으로 관찰되었다. 보다 구체적으로, 50nM 미만의 EC50 값을 나타내는 화합물 목록은 화합물 1 내지 8, 10, 13 내지 18, 20 내지 24, 26, 29 내지 32, 35, 37 내지 42, 45, 47 내지 49, 59, 61 및 62를 포함하고; 50 내지 150nM의 EC50 값을 나타내는 화합물 목록은 화합물 33, 34, 46 및 50을 포함한다.
이러한 결과는 화학식 I의 화합물이 특정 암세포의 화학주성을 억제하는데 높은 효능을 갖는다는 것을 가리킨다.
실시예 4: 마우스에서의 줄기세포의 동원에 대한 영향
화학식 I의 38개의 화합물을 시험하여 하기와 같이 줄기세포/전구세포 동원 증진의 효능을 평가하였다. 이들 38개의 화합물 목록은 화합물 1 내지 3, 13, 15, 17, 24, 26, 29 내지 31, 33, 35, 36, 38 내지 43, 45, 46, 49, 50, 54, 59 내지 68, 76, 78 및 83을 포함한다.
38개의 화합물 각각을 식염수에 용해시켜 용액을 형성시켰다. 이 용액을 C57BL/6 수컷 마우스(National Laboratory Animal Center, Taipei, Taiwan)에 피하투여하였다. 식염수로 처리한 마우스를 대조군으로 사용하였다. 피하 주사 2시간 후 전혈을 채취하고 다음 항체로 표지하였다: (i) APC 접합된 항-CXCR4(클론 2B11; eBioscience), (ii) FITC 접합된 항-CD34(클론 RAM34; eBioscience), (iii) PE 접합된 항-CD133(클론 13A4; eBioscience), (iv) 항-c-키트(클론 2B8; eBioscience), (v) 항-Sca-1(클론 D7; eBioscience), (vi) 항-리니지(anti-linage)(Mouse Hematopoietic Lineage Biotin Panel, eBioscience) 및 (vii) 스트렙타비딘(Streptavidin) PE-Cy7(eBioscience). 조혈모세포(CD34+)와 내피 전구세포(CD133+)를 항체 표면 염색 및 유동 세포계측법(Guava Technologies, Hayward, CA, USA)을 사용하여 정량화하였다.
예기치 않게, 이들 38개의 화합물은 말초 혈액으로의 CD34+ 조혈모세포(최대 3.7배)와 CD133+ 내피 전구세포(최대 4.5배)의 동원을 식염수 대조군과 비교하여 유의하게 증진시켰다. 또한, G-CSF와 조합된 4개의 시험 화합물, 즉 화합물 40, 45, 49 및 50은 예상치 못하게 CFU-GM 수의 현저한 증가에 의해 입증된 바와 같이 조혈모세포를 상승적으로 동원하는 것으로 밝혀졌다.
이러한 결과는 화학식 I의 화합물이 줄기세포/전구세포 동원 증진에 높은 효능을 갖는다는 것을 나타낸다.
실시예 5: 래트에서의 신장의 허혈-재관류 손상의 치료
허혈-재관류 손상을 치료에서 화학식 I의 5개의 화합물의 효능을 급성 신장 손상 모델, 허혈성 뇌졸중 모델 및 사지 허혈 모델 모두를 사용하여 평가하였다. 이들 5개의 화합물은 화합물 13, 35, 40, 45 및 46이다.
급성 신장 손상(acute kidney injury, AKI) 모델에서, 상기 5개의 화합물 각각을 식염수에 용해시켜 용액을 형성시켰다. 이 용액을 수컷 스프라그 돌리(Sprague-Dawley) 래트(National Laboratory Animal Center, Taipei, Taiwan)에 6mg/kg의 투여량으로 피하 투여하였다. 피하 주사 40분 후, 상기 래트에서 양측 신장 정맥 및 동맥을 1시간 동안 클램핑한 후 혈관 클립을 풀어 24시간 재관류시킴으로써 AKI를 유도하였다. AKI 유도 후 24시간 째에 전혈을 수집하였다. FUJI DRI-CHEM 3500s 분석기(Fujifilm, Tokyo, Japan)를 사용하여 신장 손상시 증가하는 두 가지 마커, 즉 혈액 요소성 질소(blood urea nitrogen, BUN)와 혈청 크레아티닌(Scr)을 측정하였다. 식염수로 처리한 비-AKI 래트 및 AKI 래트를 대조군으로 사용하였다.
예상치 않게 상기 시험 화합물을 투여한 AKI 래트는 BUN 및 Scr 수준이 식염수 처리된 AKI 래트에서 유도된 BUN 및 Scr 수준의 각각 11 내지 25% 및 10 내지 56%인 것으로 관찰되었다. 보다 구체적으로, 화합물 13, 35, 40, 45 및 46을 투여한 AKI 래트는 BUN 수준이 식염수 처리된 AKI 래트에서 유도된 BUN 수준의 각각 25%, 15%, 20%, 11% 및 22%였고; Scr 수준은 식염수 처리된 AKI 래트에서 유도된 Scr 수준의 각각 56%, 22%, 36%, 10% 및 22%였다.
이러한 결과는 화학식 I의 화합물이 신장 손상 치료에 높은 효능을 갖는다는 것을 나타낸다.
실시예 6: 마우스에서의 간세포암종(hepatocellular carcinoma, HCC)의 치료
HCC의 치료에서 화학식 I의 화합물, 즉 화합물 42의 효능을 다음과 같이 동종 마우스 모델을 사용하여 평가하였다.
C3H 마우스 유래 HCC 세포주 HCA-1을 사용하였다. HCA-1 세포는 C3H 마우스에 10일 동안 정위적으로(orthotopically) 이식되었다. 이 마우스를 2주 동안 매일 소라페닙(sorafenib)(간세포암종 치료용 저분자 약물; 40mg/kg)으로 처리하거나 대조군으로서 비히클(PBS) 단독으로 처리했다. Alzet 삼투압 펌프(DURECT Corporation, Cupertino, CA)를 사용하여 소라페닙으로 처리된 마우스에 시험 화합물, 예를 들어 AMD3100(10mg/kg/일) 및 화합물 42(10mg/kg/일)를 각각 2주 동안 연속적으로 투여하였다.
종양 크기가 약 400㎣(대조군)에서 약 250㎣(대조군)로 감소된 소라페닙과 조합된 AMD3100에 비해, 화합물 42 및 소라페닙으로 처리된 마우스는 예기치 않게 종양 크기가 약 400㎣(대조군)에서 약 50㎣로 감소된 것으로 관찰되었다. 중요하게도, 화합물 42로 처리된 동물에서 유의한 체중 감소는 관찰되지 않았다.
이러한 결과는 화합물 42가 AMD3100에 비해 HCC의 치료에서 예기치 않게 더 높은 효능을 나타냄을 가리킨다.
실시예 7: 마우스에서의 경미한 외상성 뇌손상의 치료
뇌내 손상으로도 알려진 외상성 뇌손상(traumatic brain injury,　TBI)은 외력이 뇌를 손상시킬 때 발생한다. 이는 중증도, 메커니즘 또는 기타 특징(예를 들어, 특정 위치 또는 널리 퍼진 영역에서의 발생)에 따라 분류될 수 있다. TBI는 신체적, 인지적, 사회적, 정서적 및 행동적 증상을 유발한다.
경미한 외상성 뇌손상(mTBI) 치료에서 화학식 I의 화합물, 즉 화합물 42의 효능을 하기와 같이 마우스 mTBI 모델을 사용하여 평가하였다.
경미한 외상성 뇌손상(mTBI) 모델
성체 CD1 마우스를 12시간 암(오후 7시에서 오전 7시) 및 12시간 명(오전 7시에서 오후 7시) 주기로 수용하였다. 마우스를 이소플루란(isoflurane)으로 마취시켰다. mTBI는 30g의 금속 발사체를 측두골(오른쪽 귀 앞쪽)에 떨어뜨려 수행하였다. 마취된 마우스를 옆으로 뉘었다. 금속관(내경 13mm)을 머리 위에 수직으로 놓고 금속 발사체를 80cm 높이에서 상기 관 아래로 떨어뜨려 오른쪽 귀 앞쪽의 두개골의 측두엽 부위에 맞춘다. 막대 모양의 발사체는 중추낙하 지점에서 외부 손상없이 두개골과 매끄럽게 접촉할 수 있도록 끝이 약간 둥근 금속으로 만들어졌다. 스폰지 고정 패드(길이: 4 내지 5인치, 너비: 2.7인치, 높이: 1.8인치)를 사용하여 손상 동안에 머리가 움직이도록 했다. mTBI 약 5분 후에, 마우스를 화합물 42 또는 비히클(식염수)로 처리하였다. 대조군(비-mTBI) 동물은 이소플루란을 투여받지만 mTBI는 투여받지 않았다.
운동 행태 측정
손상 및 마취로부터의 회복 후 15분 및 5일에, 마우스를 개별적으로 24시간(12시간 명 및 12시간 암/하루) 동안 운동 행동 챔버(Accuscan, Columbus, OH)에 두었다. 2.5cm 간격으로 떨어진 16개의 수평 적외선 센서와 8개의 수직 적외선 센서가 있는 챔버에 먹이와 물을 지속적으로 제공하였다. 각각의 마우스를 42×42×31cm의 플렉시글라스 개방 상자에 넣었다. 예를 들어, 문헌(Airavaara et al., J Comp Neurol, 2009, 515:116-124)을 참고한다. 운동 능력은 상기 동물에 의해 끊긴 광선의 수와 순서에 의해 측정되었다. 4가지의 운동 매개변수, 즉 수평 활동, 총 이동 거리, 수직 활동 및 수직 시간을 기록하였다.
정량적 역전사-PCR(quantitative reverse transcription-PCR, qRTPCR)
각 마우스의 대뇌 피질을 qRTPCR 분석을 위해 mTBI 후 5일째에 수집하였다. 예를 들어, 문헌(Luo et al., Ann Neurol, 2009, 65:520-530; Luo et al., Ann Neurol, 2013, 65:520-530; 및 Shen et al., J Neurosci Res, 2009, 87:545-555)을 참고한다. TRIZOL 시약(Life Technologies, # 15596-026)을 사용하여 총 RNA를 분리하고 RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit(Thermo Scientific, # K1622)를 사용하여 1μg의 총 RNA에서 cDNA를 합성했다. IBA1(# Rn00574125_g1)을 특이적으로 검출하기 위한 TaqMan Gene Expression Assays(프라이머 및 프로브 세트)를 Thermo Scientific에서 구입했다. 기준 유전자에 대한 정량적 RT-PCR에 사용되는 프라이머 프로브는 다음과 같다: 베타 액틴 정방향 프라이머(5'-CATTGCTGACAGGATGCAGAAGG); 역방향 프라이머(5'-TGCTGGAAGGTGGACAGTGAGG); GAPDH 정방향 프라이머(5'-CATCACTGCCACCCAGAAGACTG); 역방향 프라이머(5'-ATGCCAGTGAGCTTCCCGTTCAG). TaqMan Fast Advanced Master Mix(Life Technologies, # 4444557) 및 Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System을 사용하여 정량적 실시간 PCR(qRT-PCR)을 수행했다. 정확한 계산을 위해 특정 유전자 특이적 증폭 효율을 갖는 수정된 델타-델타-Ct 알고리즘으로 내인성 기준 유전자(베타-액틴 + GAPDH)에 비례하여 표적 유전자 IBA1의 발현 및 정상화를 계산하였다. 모든 실험이 중복 실험하였다.
결과
문헌(참조: Shen et al., Clinical Proteomics, 2014, 11:11)에 보고된 바와 같이 성체 CD1 마우스를 이소플루란으로 마취시키고 mTBI을 유도하였다. mTBI 후에 화합물 42 또는 비히클을 전신 투여하였다. 화합물 42를 이용한 조기 후처리는 mTBI 후 운동 능력을 유의하게 개선시켰다. 손상된 피질에서의 염증 마커인 이온화된 칼슘 결합 아답터 분자 1(ionized calcium-binding adapter molecule 1, IBA1)의 발현을 qRTPCR로 조사하였다. 화합물 42를 사용한 처리가 mTBI 뇌에서 IBA1 발현을 유의하게 감소시키는 것으로 관찰되었다.
보다 구체적으로, 22마리의 마우스를 두 그룹, 즉 비히클로 처리한 mTBI 마우스 그룹(n = 14)과 화합물 42(3mg/kg, n = 8)로 처리한 mTBI 마우스 그룹으로 나누었다. 손상 후 15분부터 시작하여 24시간 동안 3시간 마다 행동을 분석했다. 비-mTBI 마우스와 비교하여 mTBI 마우스에서 모든 운동 능력의 현저한 감소가 관찰되었다(p<0.001, 양방향 분산 분석 또는 ANOVA). 3mg/kg의 투여량의 화합물 42로 처리하면 mTBI 마우스에서의 수직 활동(p = 0.009, F1,140 = 6.969); 및 수직 이동 시간(p = 0.007, F1,140 = 8.662)이 현저히 개선되었다.
또한, 15마리의 마우스를 사용하여 신경염증에 대한 화합물 42의 효과를 평가하였으며, 여기서 7마리의 마우스는 비히클을 투여하고 8마리의 마우스는 3mg/kg의 투여량으로 화합물 42로 처리하였다. 대뇌 피질은 mTBI 후 5일에 수집하였다. 신경염증 마커 IBA1 및 참조 유전자(GAPDH 액틴 및 베타-액틴)의 발현을 qRTPCR 분석을 위해 측정하였다. 병변 측 피질에서의 IBA1(GAPDH 액틴) 및 IBA1(베타-액틴)의 발현이 화합물 42로 처리된 mTBI 마우스에서 유의하게 억제됨이 관찰되었다(p = 0.030, t-테스트).
mTBI의 마우스 모델에서 화합물 42에 의한 신경보호 효과의 결과는 화합물 42가 경미한 외상성 뇌손상의 치료에 효과적이라는 것을 나타낸다.
실시예 8: 래트에서의 심근 경색에 대한 영향
래트 허혈성 심근 경색 모델에서 화학식 I의 화합물, 즉 화합물 42의 심근 경색 보호 효능을 다음과 같이 평가하였다.
수컷 SD 래트(각각 400 내지 500g)는 수술을 시행하기 30분 전에 5mg/kg의 화합물 42 또는 동일 용량의 식염수(그룹당 n = 18 내지 20)로 단일 피하 주사하였다. 이 수술에서 30분 동안의 허혈 기간 동안 6-0 나일론 봉합을 사용하여 좌전하행지(left anterior descending artery, LAD)를 일시적으로 결찰하였다. 24시간 후 각각의 래트를 마취시키고 LAD를 다시 결찰하였다. 2mL의 5% Evan's Blue를 꼬리 정맥에 주입하고 2분간 관류하였다. 심장을 즉시 절제하고 식염수로 씻고 -80℃에서 동결시킨 다음 반쯤 얼려진 상태로 2mm 두께로 절단했다. 이어서, 절편들을 37℃에서 10분 동안 1% 트리-페닐테트라졸륨 클로라이드 용액에서 배양하고 10% 포르말린에 고정시켰다. 염색 후 경색 크기를 기록했다. 수술 유도된 허혈/재관류 전에 화합물 42로 처리하면 허혈성 손상에 대해 심장이 크게 보호되는 것으로 관찰되었다.
이 결과는 화합물 42가 래트에서 심근 경색을 보호하는데 효과적이라는 것을 나타낸다.
다른 양태
본 명세서에 개시된 모든 특징은 임의의 조합으로 조합될 수 있다. 본 명세서에 개시된 각각의 특징은 동일하거나 동등하거나 유사한 목적을 위한 대안적인 특징으로 대체될 수 있다. 따라서, 달리 명시적으로 언급되지 않는 한, 개시된 각 특징은 동등하거나 유사한 특징의 일반적인 일련의 일례에 불과하다.
상기 설명으로부터, 당업자는 본 발명의 본질적인 특성을 쉽게 확인할 수 있으며, 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않고 다양한 용도 및 조건에 적응시키기 위해 본 발명을 다양하게 변형 및 수정할 수 있다. 따라서, 다른 양태들 또한 아래의 청구항들의 범위 내에 있다.
참고문헌:
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Claims (36)

  1. 하기 화학식 I의 화합물:
    [화학식 I]
    Figure pct00053

    위의 화학식 I에서,
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 H, 할로, NO2, CN, NH2, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; 또는 R1 및 R2는 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께 C5-10 사이클로알킬, C3-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로 알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, C5-10 사이클로알킬, C3-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 할로, NO2, CN, NH2, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, 아릴, 헤테로아릴 또는 C(O)ORa로 임의로 치환되고, 여기서 Ra는 H, C1-10 알킬, C3-10 사이클로알킬, C3-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R3 및 R4는 각각 독립적으로
    Figure pct00054
    또는
    Figure pct00055
    이고,
    여기서, R5는 H, C1-6 알킬, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 알킬, 헤테로아릴 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1-6 알킬, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 알킬, 헤테로아릴 알킬, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 할로, 니트로, 시아노, 아미노, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴로 임의로 치환되고;
    R6은 결실(deleted), H, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 하이드록시, 하이드록시 C1-6 알킬, 할로, 니트로, 시아노 또는 아미노로 임의로 치환되고;
    R7은 H, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 하이드록시, 하이드록시 C1-6 알킬, 할로, 니트로, 시아노, 아미노, 아미노 C1-6 알킬, 아미노 C3-10 사이클로알킬, 아미노 C1-10 헤테로사이클로알킬, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴로 임의로 치환되고;
    A 및 B는 각각 독립적으로 C 또는 N이고;;
    D, E 및 F는 각각 독립적으로 C, N, O 또는 S이고;;
    L1 및 L2는 각각 독립적으로 헤테로아릴, C1-10 헤테로사이클로알킬 또는 NRd이고, 여기서 Rd는 H 또는 C(O)(CH2)2CHNH2CO2Re이고, Re는 H, C1-6 알킬, C3-10 사이클로알킬, C3-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    m, n 및 o는 각각 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고;
    R8 및 R9는 각각 독립적으로 H, C1-6 알킬, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1-6 알킬, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 C(O)ORf로 임의로 치환되고, 여기서 Rf는 H, C1-10 알킬, C3-20 사이클로알킬, C3-20 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; 또는 R8 및 R9는 이들이 결합된 질소원자와 함께 C3-10 헤테로사이클로알킬이고;
    L3은 C1-6 알킬이고; 또는 L3은 R8 또는 R9 및 이들이 결합된 질소원자와 함께 C4-10 헤테로사이클로알킬 또는 헤테로아릴이고;
    R10은 H, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 또는
    Figure pct00056
    이고, 여기서 L4는 결실 또는 C1-6 알킬아미노이고; L5는 C1-6 알킬, C1-6 알킬아미노 또는 디-C1-6 알킬아미노이고; R11은 하이드록실 또는 C1-6 알킬아미노이고, 상기 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-10 사이클로알킬, C1-10 헤테로사이클로알킬, C1-6 알킬아미노, 디-C1-6 알킬아미노, 아릴 및 헤테로아릴 각각은 하이드록실, 아미노, C(O)OR12 또는 P(O)(OR13)2로 임의로 치환되고, 여기서 R12 및 R13은 각각 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이다.
  2. 제1항에 있어서, R1 및 R2가 각각 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬인, 화학식 I의 화합물.
  3. 제1항에 있어서, R1 및 R2가 각각 독립적으로 H, NH2, 또는 C1-6 알킬 또는 C(O)ORa로 임의로 치환된 C1-10 헤테로사이클로알킬이고, 여기서 Ra는 H 또는 C1-10 알킬인, 화학식 I의 화합물.
  4. 제1항에 있어서, R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께 아릴 또는 헤테로아릴인, 화학식 I의 화합물.
  5. 제4항에 있어서, R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
    Figure pct00057
    인, 화학식 I의 화합물.
  6. 제1항에 있어서, R3 및 R4가 각각 독립적으로
    Figure pct00058
    또는
    Figure pct00059
    이고, 여기서 R5는 H이고; R6은 결실이고; m, n 및 o는 각각 독립적으로 1, 2, 3 또는 4이고; L1 및 L2는 각각 NRd인, 화학식 I의 화합물.
  7. 제6항에 있어서, A 및 B가 각각 C이고, D, E 및 F가 각각 독립적으로 C, N 또는 S인, 화학식 I의 화합물.
  8. 제6항에 있어서, R1 및 R2가 각각 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬인, 화학식 I의 화합물.
  9. 제8항에 있어서, R1이 H이고 R2가 C1-6 알킬인, 화학식 I의 화합물.
  10. 제6항에 있어서, R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께 아릴 또는 헤테로아릴인, 화학식 I의 화합물.
  11. 제10항에 있어서, R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
    Figure pct00060
    인, 화학식 I의 화합물.
  12. 제1항에 있어서, R3이
    Figure pct00061
    이고, R4가
    Figure pct00062
    이고, 여기서 R5는 H이고; R6은 결실이고; m, n 및 o는 각각 독립적으로 1, 2, 3 또는 4이고; L1 및 L2는 각각 NRd인, 화학식 I의 화합물.
  13. 제12항에 있어서, R1 및 R2가 각각 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬인, 화학식 I의 화합물.
  14. 제13항에 있어서, R1이 H이고 R2가 C1-6 알킬인, 화학식 I의 화합물.
  15. 제12항에 있어서, R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께 아릴 또는 헤테로아릴인, 화학식 I의 화합물.
  16. 제15항에 있어서, R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
    Figure pct00063
    인, 화학식 I의 화합물.
  17. 제16항에 있어서, R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
    Figure pct00064
    인, 화학식 I의 화합물.
  18. 제16항에 있어서, A 및 B가 각각 C이고, D, E 및 F가 각각 독립적으로 C, N 또는 S인, 화학식 I의 화합물.
  19. 제12항에 있어서, L3이 R8 또는 R9 및 이들이 결합된 질소원자와 함께 C4-10 헤테로사이클로알킬인, 화학식 I의 화합물.
  20. 제19항에 있어서, R8이 H이고, L3이 R9 및 이들이 결합된 질소원자와 함께 C4-10 헤테로사이클로알킬인, 화학식 I의 화합물.
  21. 제20항에 있어서, R1이 H이고 R2가 C1-6 알킬인, 화학식 I의 화합물.
  22. 제20항에 있어서, R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
    Figure pct00065
    인, 화학식 I의 화합물.
  23. 제22항에 있어서, A 및 B가 각각 C이고, D, E 및 F가 각각 독립적으로 C, N 또는 S인, 화학식 I의 화합물.
  24. 제20항에 있어서, R10이 H 또는
    Figure pct00066
    인, 화학식 I의 화합물.
  25. 제24항에 있어서, R1이 H이고 R2가 C1-6 알킬이거나, R1 및 R2가 이들이 결합된 2개의 탄소원자와 함께
    Figure pct00067
    이고; R10이
    Figure pct00068
    이고; A 및 B가 각각 C이고, D, E 및 F가 각각 독립적으로 C, N 또는 S인, 화학식 I의 화합물.
  26. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 아래 화합물 중 하나인, 화학식 I의 화합물:
    Figure pct00069

    Figure pct00070
    Figure pct00071

    Figure pct00072

    Figure pct00073

    Figure pct00074

    Figure pct00075
    .
  27. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 아래 화합물 중 하나인, 화학식 I의 화합물:
    Figure pct00076
    .
  28. 제1항의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
  29. 조혈모세포(hematopoietic stem cells, HSC) 및 내피 전구세포(endothelial progenitor cells, EPC)를 유효량의 제1항의 화합물과 접촉시키는 것을 포함하는, HSC 및 EPC를 말초 순환(peripheral circulation)에 동원하는 방법.
  30. 유효량의 제1항의 화합물을 이를 필요로 하는 대상체에 투여하는 것을 포함하는, 암, 염증성 질환 또는 자가면역질환을 치료하거나 조직 손상을 치료 또는 예방하는 방법.
  31. 제30항에 있어서, 상기 방법이 조직 손상을 치료 또는 예방하기 위해 수행되고, 상기 조직 손상은 신경퇴행성 질환, 망막 색소 상피 기능장애, 심장 및 심근 경색, 허혈성 질환, 상처, 골절, 췌장 손상, 신장 손상, 장 손상 또는 폐 손상인 방법.
  32. 제30항에 있어서, 상기 방법이 암을 치료하기 위해 수행되고, 상기 암은 간세포암종, 급성 골수성 백혈병, 비소세포 폐암, 다발성 골수종 또는 췌장암인 방법.
  33. 제30항에 있어서, 상기 방법이 염증성 질환을 치료하기 위해 수행되고, 상기 염증성 질환은 염증성 장질환, 알러기성 천식 또는 안구 포도막염인 방법.
  34. 제30항에 있어서, 상기 방법이 자가면역질환을 치료하기 위해 수행되고, 상기 자가면역질환은 류마티스성 관절염인 방법.
  35. 제31항에 있어서, 상기 조직 손상이 신장 손상 또는 심근 경색인 방법.
  36. 제31항에 있어서, 상기 조직 손상이 허혈성 질환이고, 상기 허혈성 질환은 허혈성 뇌졸중, 경미한 외상성 뇌손상 또는 사지 허혈인 방법.
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