KR20190067287A - Anti-aging and anti-allergic cosmetic compositon comprising the extract of the flower, root, callus and seed of Hibiscus syriacus L. as an active ingredient and preparation method of the same - Google Patents
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Abstract
Description
본 출원은 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨 등 각 부위의 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 항노화 및 항알러지용 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.The present application relates to an anti-aging and anti-allergic cosmetic composition containing a mixture of extracts of flowers, roots, callus, and seeds of Hibiscus japonica as an active ingredient, and a method for producing the same.
무궁화(Hibiscus syriacus L.)는 중국과 인디아(인도) 원산으로 전국에 심어 기르는 떨기나무로 세계적으로는 동아시아, 유럽 등지에 분포한다. 줄기는 곧추서며, 가지가 갈라지고, 높이는 2-3m다. 잎은 어긋나며, 난형, 넓은 난형, 3갈래로 얕게 갈라지고, 가장자리에 거친 톱니가 있다. 잎 양면에 털이 나며 꽃은 8-10월에 가지 위쪽의 잎겨드랑이에서 한 개씩 피며, 붉은 보라색 또는 흰색을 띤다. 꽃받침은 통 모양, 5갈래로 갈라진다. 꽃잎은 5장, 아래쪽이 서로 붙어 있다. 수술은 많고, 수술대가 붙어서 한 뭉치로 된다. 열매는 삭과이며, 둥근 난형, 익으면 5갈래로 갈라진다. 식용, 관상용, 약용으로 쓰인다는 기록이 있다. 무궁화 꽃은 화려하고, 다섯 개의 꽃잎이 기부에서 서로 붙어 있다. 흔히 흰색과 붉은 보라색인데 안쪽(꽃잎 윗면 기부)에 진한 붉은 자주색의 무늬가 있다. 황근(H. hamabo Siebold et Zucc.)에 비해서 자생식물이 아니라 심어 기르는 나무이며, 잎은 가장자리가 얕게 갈라지고, 꽃은 붉은색 또는 흰색으로서 노란색이 아니므로 구분된다. Hibiscus syriacus L. It is a bush that is planted in China and India (India), and is distributed throughout the world. It is distributed in East Asia and Europe. Stems stand upright, branches are split, height is 2-3m. Leaves are alternate phyllotaxis, ovate, broad ovate, shallowly divide into three branches, and have sharp serrations on the edge. The flowers are bloom on both sides of the leaf. The flowers bloom one on each side of the leaf on the upper branch in August-October, and they are reddish purple or white. Calyx is tubular, and is divided into 5 branches. There are 5 petals and the bottom is attached to each other. There are a lot of operations, and the operation table is attached to a bundle. The fruit is capsule, round ovate, ripe when divided into 5 branches. There is a record that it is used for edible, ornamental, and medicinal purposes. The Mugunghwa flower is gorgeous, and five petals are attached to each other at the donation. It is often white and red purple, with dark purplish reddish patterns on the inside (petal top base). It is not a native plant but a planted tree compared to H. hamabo Siebold et Zucc. The leaf is divided into shallow edges and the flower is red or white, not yellow.
피부는 외부 환경에 직접적으로 노출되는 신체 부위로서, 과도한 자외선이나 오염물질 등에 노출되면 홍반, 부종, 가려움 등의 피부자극 및 염증반응이 유발된다. 이러한 피부 트러블은 미관상 문제가 될 뿐만 아니라, 염증 반응과정에서 생성되는 물질들이 부수적으로 색소 침착을 일으키고, 피부 탄력섬유의 붕괴를 촉진시켜 피부 노화를 증가시키며 이러한 피부 손상은 활성산소(Reactive oxygen species,ROS)와 관련이 있다.Skin is a part of the body that is directly exposed to the external environment. Exposure to excessive ultraviolet rays or pollutants causes skin irritation such as erythema, edema, itching, and inflammatory reaction. These skin troubles not only become cosmetic problems but also cause secondary pigmentation of the substances generated during the inflammatory process and promote the collapse of the skin elastic fibers to increase skin aging. These skin injuries are caused by reactive oxygen species, ROS).
활성산소는 우리가 호흡하는 산소와는 완전히 다르게 불안정한 상태에 있는 산소로 세포를 파괴하거나 피부 진피층의 결합조직을 절단하거나 교차결합을 일으키므로 주름형성, 피부암, 세포 살상, 아토피성 피부염, 여드름 등 여러 가지 문제를 일으킨다. 인체에는 항산화 물질인 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(SOD), 카탈라아제, 비타민 E, 비타민 C, 유비퀴놀 등이 상기 활성산소를 제거하지만 나이와 자외선 및 스트레스에 의해 항산화 체계가 무력화되고 활성산소가 점차 증가해 피부노화를 일으킨다.Active oxygen is an unstable oxygen that is completely different from the oxygen we breathe. It destroys cells or breaks the connective tissues of the dermal layer of the skin or causes cross-linking, which can cause wrinkles, skin cancer, cell killing, atopic dermatitis, Causing problems. Superoxide dismutase (SOD), catalase, vitamin E, vitamin C, and ubiquinol remove the active oxygen, but the antioxidant system is inactivated by the age, ultraviolet rays and stress, and the active oxygen is gradually increased It causes skin aging.
염증은 해로운 주위 환경, 즉 세균과 같은 외부 이물질의 침입과 기계적 손상으로부터 생체를 보호하는 생리적인 반응이다. 이 염증반응은 여러 종류의 다핵형 백혈구(PMNs)의 증식을 유도하고 이 염증성 세포는 다양한 종류의 단백질 분해효소와 사이토카인을 분비함으로써 인체를 방어한다. 하지만, 과다 염증반응으로 인한 피부의 과도한 단백질분해효소의 생성은 세포 미결합조직의 손상을 입히고, 결합 조직의 손상은 피부의 탄력을 감소시켜 주름의 원인이 될 뿐 아니라, 세포의 재생 및 증식에도 나쁜 영향을 미친다.Inflammation is a physiological response that protects the body from harmful environmental conditions, such as intrusion of external foreign matter such as bacteria and mechanical damage. This inflammation induces the proliferation of several types of polynuclear leukocytes (PMNs), which defend the body by secreting various kinds of proteolytic enzymes and cytokines. However, the excessive production of proteolytic enzymes from the skin due to hyperinflammation causes damage to the non-connective tissues, and damage to the connective tissues reduces the elasticity of the skin to cause wrinkles as well as cell regeneration and proliferation It has a bad influence.
알러지는 면역 불균형에 의한 과민반응의 일종으로 항원(allergen)이라는 특정한 항원에 대하여 나타나는 반응으로 그 항원에 대해 특이적인 IgE 항체가 비만세포(mast cell)나 호염구(basophil)에 결합되어 유도되는 반응이다. 상기 IgE 항체에 의해 활성화된 비만세포나 호염구는 염증성 사이토카인과 프로스타글란딘 및 히스타민 등을 분비하여 혈관확장 및 염증반을을 일으켜 알러지성 아토피, 천식, 피부알러지 등을 일으킨다. 이러한 알러지 질환은 발병률이 크게 증가되어 그에 따른 질환 완화 및 예방에 대한 중요성이 부각되고 있다.Allergy is a type of hypersensitivity reaction caused by immune imbalance. It is a reaction that occurs to a specific antigen called allergen, and IgE antibody specific to the antigen is induced to bind to mast cell or basophil . The mast cells or basophils activated by the IgE antibody secrete inflammatory cytokines, prostaglandins, and histamines to cause vasodilation and inflammation, resulting in allergic atopy, asthma, and skin allergy. The incidence of such allergic diseases has been greatly increased, and the importance of mitigating and preventing diseases has been emphasized.
피부의 주름은 콜라겐이 고령화나 자외선 조사에 의한 광노화로 인하여 감소하고 피부의 두께가 얇아져 생성된다고 한다. 최근 피부 노화에 대한 연구가 진전되어 콜라겐의 피부에 대한 기능이 밝혀지고 있고,특히 콜라겐 합성 혹은 감소의 방지에 관한 연구 및 이에 기한 피부 강화용 화장료 조성물로 사용한 제품들이 출시되고 있다. The wrinkles of the skin are said to result from collagen being reduced due to aging and photoaging due to ultraviolet irradiation and skin thinning. Recently, research on skin aging has progressed and the function of collagen has been revealed. Especially, studies on prevention of collagen synthesis or reduction and products using cosmetic composition for skin reinforcement due to this have been put on the market.
무궁화는 인삼에 다량 함유된 것으로 알려진 사포나린, 말발산, 스테르쿨산, 탄닌산, 디하이드로스테로쿨산, 점액질 등이 포함되어 있고 특히 인체의 생리활성을 도울 수 있는 성분이 다량 함유된 것으로 보고되어 항노화 또는 다양한 기능성화장료 성분으로 활용하기 위한 연구가 진행되고 있다. 이러한 배경 하에 본 발명자들은 무궁화에서 채취한 다양한 부위, 즉 그의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨를 각 분리, 정선하여 추출하고 이들의 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화 및 항알러지 기능성 화장료 조성물을 개발하기 위하여 예의 연구 노력한 결과 본 출원을 완성하였다. Mugungwha is known to contain a large amount of ginseng saponarin, horse divergence, stearic acid, tannic acid, dihydrostroloic acid, mucilage, etc., and in particular, can help the body's physiological activity is reported to contain a large amount of ingredients Researches are being carried out to utilize them as antioxidants or various functional cosmetic ingredients. Under these circumstances, the inventors of the present invention have developed an anti-aging and anti-allergy functional cosmetic composition containing various extracts of flowers, roots, callus, As a result of effortful research, the present application has been completed.
본 발명 관련 선행기술로서 대한민국 등록특허 제10-1564430호와 등록특허 제10-1762750호가 있으나 이는 무궁화 자체의 추출물을 포함하는 화장료에 관한 것으로 그의 용도나 다른 부위의 혼합 조성물에 대한 개시가 없어 본 발명과는 이질적이다. 또한 대한민국 등록특허 10-1701476호가 있으나 이는 무궁화 추출물의 제조방법 및 그 추출물을 함유하는 식품에 관한 것으로, 본원 발명의 무궁화 식물의 각 부위의 추출물의 동량 배합비로 이루어진 혼합 추출물을 이용한 기능성 화장료 조성물의 용도는 상기 인용문헌 어디에도 개시되거나 암시된 바 없다.Korean Patent No. 10-1564430 and Registration No. 10-1762750 disclose a prior art related to the present invention. However, the present invention relates to a cosmetic composition containing an extract of Mugunghwa itself, And is heterogeneous. Also, Korean Patent No. 10-1701476 discloses a method for producing an extract of Mugunghwa and a food containing the extract, and the use of a functional cosmetic composition using a mixed extract comprising the same amount ratio of the extract of each part of the Mugungwha plant of the present invention Are neither disclosed nor suggested in any of the above citations.
본 출원의 목적은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물의 제조방법을 제공하는 데에 있다.The object of the present invention is to provide a method for producing a mixed extract of Hibiscus flowers, roots, callus and seeds.
본 출원의 다른 목적은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 제공하는 데에 있다.Another object of the present application is to provide a mixed extract of Hibiscus flowers, roots, callus and seeds.
본 출원의 또 다른 목적은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물의 용도 즉 상기 혼합물을 유효성분으로 함유하는 항노화 및 항알러지 기능성 화장료 조성물을 제공하는 데에 있다.Another object of the present invention is to provide an anti-aging and anti-allergic functional cosmetic composition containing the mixture of extracts of flowers, roots, callus and seeds of Mugunghwa as an active ingredient.
본 출원의 다른 목적 및 이점은 첨부한 청구범위 및 도면과 함께 하기의 상세한 설명에 의해 보다 명확해질 것이다. 본 명세서에 기재되지 않은 내용은 본 출원의 기술 분야 또는 유사 분야에서 숙련된 자이면 충분히 인식하고 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략한다.Other objects and advantages of the present application will become more apparent from the following detailed description together with the appended claims and drawings. The contents not described in this specification can be sufficiently recognized and inferred by those skilled in the art or similar fields of the present application, so that the description thereof will be omitted.
이하, 본 출원 내용에 대하여 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 출원에서 개시한 일 실시 양태의 설명 및 실시 형태는 공통된 사항에 대하여 다른 양태의 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 또한, 본 출원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 더불어, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 출원의 범주가 제한된다고 볼 수 없다. Hereinafter, the contents of the present application will be described in detail. On the other hand, the description and the embodiment of the embodiment disclosed in this application can be applied to the explanation and the embodiment of the other aspects with respect to the common matters. Also, all combinations of the various elements disclosed in this application fall within the scope of the present application. In addition, the scope of the present application is not limited by the specific description described below.
본 출원의 목적을 달성하기 위하여 일 양태로서 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 수득하는 것이 특징인 무궁화 혼합 추출물의 제조방법을 제공한다. 상기 제조방법은 무궁화 식물 각 부위, 즉, 꽃, 뿌리, 씨를 물, 에탄올, 메탄올, 부틸렌글리콜, 프로판디올 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 고온서 추출하여 추출물을 수득하는 단계와, 상기 각 부위별 추출물과 무궁화 캘러스 추출물을 동량의 배합비로 혼합하여 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 수득하는 단계를 포함하는 것이 특징인 무궁화 혼합 추출물의 제조방법이다. 무궁화 식물의 각 부위별 추출물과 무궁화 캘러스 추출물의 혼합은 상기 용매의 다양한 비율(W/W)을 이용하여 가능하나 바람직하게는 동량(W/W)으로 혼합할 수 있다. 또한, 상기 추출 온도는 50 내지 90℃의 범위가 사용될 수 있고 1 내지 4일간, 바람직하게는 60℃에서 1 내지 4일간 추출할 수 있다. 상기 혼합용매는 1:10 내지 1:100의 비율이 사용될 수 있으나 사용가능한 비율은 이에 제한되지 않는다.In order to accomplish the object of the present application, there is provided a method for preparing a mixed extract of Mugunghwa, which is characterized in that a mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of an asparagus plant is obtained as an embodiment. The method comprises the steps of extracting the various parts of the hibiscus, that is, flowers, roots and seeds at a high temperature using water, ethanol, methanol, butylene glycol, propanediol or a mixed solvent thereof to obtain an extract, And extracting the starch extract and mugunghwa callus extract at a blending ratio of the same amount to obtain a mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of Mugunghwa. Mixing of the extracts of each part of the plants and the extract of callus horseradish can be carried out using various ratios (W / W) of the above solvents, but preferably the same amount (W / W) can be mixed. The extraction temperature may be in the range of 50 to 90 캜 and may be extracted for 1 to 4 days, preferably at 60 캜 for 1 to 4 days. The mixed solvent may be used in a ratio of 1:10 to 1: 100, but the usable ratio is not limited thereto.
항노화는 피부에 있어서 항염, 항주름, 항산화를 포함하는 개념으로 각 NO 생산의 감소량, 콜라겐 생성량, ROS 생성의 감소량으로 측정할 수 있으나 사용하는 바이오 마커 및 측정 방법은 이에 제한되지 않는다. Anti-aging is a concept that includes anti-inflammation, anti-wrinkle, and antioxidant in skin, and can be measured by the amount of reduction of NO production, the amount of collagen production, and the amount of reduction of ROS production, but the biomarkers and measurement methods used are not limited thereto.
본 출원은 다른 양태로서 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 항노화 또는 항알러지용 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다. 본 출원 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 에센스,샴푸, 계면활성제 함유 클렌징, 토닉, 스케일링 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 구체적으로는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 유액, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징 폼, 클렌징워터, 팩, 헤어 에센스, 린스 등의 제형으로 제조될 수 있다. The present application provides a method for producing an anti-aging or anti-allergic cosmetic composition containing, as an active ingredient, a mixed extract of a flower, roots, callus, and seeds of Hibiscus as another embodiment. The present cosmetic composition can be formulated into a solution, a suspension, an emulsion, a paste, a gel, a cream, a lotion, an essence, a shampoo, a surfactant-containing cleansing, a tonic, a scaling and the like. More specifically, it can be manufactured by a formulation such as a soft lotion, a nutritional lotion, a nutritional liquid, a nutritional cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, a hair essence,
본 출원은 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 항노화 또는 항알러지 기능이 증대된 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 뛰어난 효과가 있다.The present application has an excellent effect of providing an anti-aging or anti-allergic function cosmetic composition comprising a mixed extract of flowers, roots, callus, and seeds of the herbivorous plant as an active ingredient and a method for producing the same.
도 1은 무궁화 씨 추출물의 항염 효능을 나타내는 그래프이다.
도 2는 무궁화 꽃 추출물의 항염 효능을 나타내는 그래프이다.
도 3은 무궁화 캘러스 추출물의 항염 효능을 나타내는 그래프이다.
도 4는 무궁화 뿌리 추출물의 항염 효능을 나타내는 그래프이다.
도 5는 무궁화 캘러스 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 나타내는 그래프이다.
도 6은 무궁화 꽃 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 나타내는 그래프이다.
도 7은 무궁화 뿌리 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 나타내는 그래프이다.
도 8은 무궁화 씨 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 나타내는 그래프이다.
도 9는 무궁화 꽃 추출물의 항산화 효능을 나타내는 그래프이다.
도 10은 도 9는 무궁화 캘러스 추출물의 항산화 효능을 나타내는 그래프이다.
도 11은 무궁화 씨 추출물의 항산화 효능을 나타내는 그래프이다.
도 12는 무궁화 뿌리 추출물의 항산화 효능을 나타내는 그래프이다.
도 13은 무궁화 뿌리 추출물의 항알러지 효능을 나타내는 그래프이다.
도 14는 무궁화 꽃 추출물의 항알러지 효능을 나타내는 그래프이다.
도 15는 무궁화 씨 추출물의 항알러지 효능을 나타내는 그래프이다.
도 16은 무궁화 캘러스 추출물의 항알러지 효능을 나타내는 그래프이다.
도 17은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물의 항산화 효능을 나타내는 그래프이다.
도 18은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물의 항알러지 효능을 나타내는 그래프이다.
도 19는 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 나타내는 그래프이다.
도 20은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물의 항염 효능을 나타내는 그래프이다.Fig. 1 is a graph showing the anti-inflammatory activity of Mugungwha seed extract.
FIG. 2 is a graph showing the anti-inflammatory effect of the Hibiscus flower extract.
Fig. 3 is a graph showing the anti-inflammatory activity of the extract of Mugunghwa callus.
Fig. 4 is a graph showing the anti-inflammatory activity of the extract of Aspergillus odorus.
FIG. 5 is a graph showing collagen production proliferative activity of Mugunghwa callus extract.
FIG. 6 is a graph showing collagen production proliferative activity of the Hibiscus flower extract. FIG.
FIG. 7 is a graph showing collagen production proliferative activity of hibiscus root extract. FIG.
8 is a graph showing collagen production proliferative activity of Mugungwha seed extract.
9 is a graph showing the antioxidant efficacy of the Hibiscus flower extract.
FIG. 10 is a graph showing the antioxidant effect of the extract of Mugungwha callus.
11 is a graph showing antioxidant efficacy of Mugungwha seed extract.
Fig. 12 is a graph showing antioxidant efficacy of Hibiscus roots extract.
FIG. 13 is a graph showing the anti-allergic effect of the extract of Aspergillus odorus.
14 is a graph showing the anti-allergic efficacy of the Hibiscus flower extract.
Fig. 15 is a graph showing the anti-allergic efficacy of Mugungwha seed extract.
FIG. 16 is a graph showing the anti-allergic effect of the callus extract of Mugungwha.
17 is a graph showing the antioxidant efficacy of mixed extracts of flowers, roots, callus and seeds of Mugungwha.
18 is a graph showing the anti-allergic efficacy of mixed extracts of flowers, roots, callus and seeds of Mugunghwa.
FIG. 19 is a graph showing collagen production proliferative activity of mixed extracts of flowers, roots, callus and seeds of Mugunghwa.
20 is a graph showing the anti-inflammatory activity of mixed extracts of flowers, roots, callus, and seeds of Mugunghwa.
이하, 본 출원에 따른 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 다만 본 출원의 하기 실시예는 본 출원의 일 예시에 불과하다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 첨부된 청구항에 제시된 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 명백할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail by way of examples according to the present application. However, the following embodiments of the present application are merely examples of the present application. It will be apparent to those skilled in the art that these embodiments are illustrative of the present invention and that the scope of the present invention, as set forth in the appended claims, is not limited by these examples. something to do.
실시예1. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물 및 이들의 혼합 추출물의 제조Example 1. Preparation of Flowers, Roots, Seeds and Callus Extracts of Mugunghwa Plants and Their Mixed Extracts
본 발명 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨의 추출물은 각 무궁화의 꽃, 뿌리, 씨를 물, 에탄올, 메탄올, 부틸렌글리콜, 프로판디올 또는 이들의 혼합용매에 1:10(W/W) 내지 1:100(W/W)의 비율로 1일 내지 4일 동안 60℃에서 추출하여 수득하였다. The extracts of flowers, roots and seeds of the present invention can be obtained by mixing 1: 10 (w / w) to 1: 1 (w / w) of flowers, roots and seeds of each hibiscus in water, ethanol, methanol, butylene glycol, propanediol, 100 (W / W) at 60 占 폚 for 1 to 4 days.
본 발명 무궁화 캘러스 추출물은 다음의 방법으로 수득하였다. 우선 무궁화 식물 종자를 배지에 치상하여 20~27℃(바람직하게는 22℃)의 온도 및 65~75%(바람직하게는 55~60%) 습도의 조건에서 암실 배양하여 발아를 유도하고, 발아된 무궁화 식물의 잎을 절단하여 IBA(indole-3-butyric acid), 수크로오스(Sucrose) 및 한천(Agar)을 함유한 MS 기본배지에 접종한 후 23~27℃에서 배양하여 캘러스를 유도하였다. 그 다음 배양된 무궁화 캘러스를 계대 배양을 통해 증식시키고, 증식된 무궁화 식물의 캘러스 배양물을 수확하여 수분을 제거한 후 45~55℃의 온도 조건에서 건조시켰다. 상기 건조된 무궁화 캘러스 배양물에 정제수(또는 용매)를 가하여 열수(또는 용매)추출하여 무궁화 캘러스 추출물을 수득하였다.The callus extract of the present invention was obtained by the following method. First, the seeds of Hibiscus are planted on a medium to induce germination by dark room culture at a temperature of 20 to 27 DEG C (preferably 22 DEG C) and a humidity of 65 to 75% (preferably 55 to 60%), Leafs of leaves of Mugunghwa plants were inoculated into MS basic medium containing indole-3-butyric acid (IBA), sucrose and agar and cultured at 23-27 ℃ to induce callus. Then, the cultured callus of callus was propagated through a subculture, and the callus cultures of the proliferated calli were harvested to remove moisture, followed by drying at a temperature of 45 to 55 ° C. Purified water (or a solvent) was added to the dried callus cultured product to extract hot water (or solvent) to obtain a callus extract.
상기 각 단계에서 수득한 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨의 각 부위의 추출물과 캘러스 추출물을 각 동량으로(W/W) 배합하여 이들의 혼합 추출물을 수득하였다.The extracts of flowers, roots and seeds of callus plants obtained in the above steps and callus extracts were mixed with each other in the same amount (W / W) to obtain a mixed extract thereof.
실험예 1. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물의 항염 효능 측정Experimental Example 1. Measurement of anti-inflammatory activity of flowers, roots, seeds and callus extracts of Hibiscus plants
본 발명 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물의 항염 효과를 측정하기 위하여 RAW 264.7 cell에 염증 유발 물질인 LPS를 처리한 후 염증 억제효과가 있는지를 평가하였다. 96-well plate에 well 당 2 x 105 cell이 되도록 분주한 다음 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하였다. 하루밤 배양한 다음 새로운 배지로 교환해주고 LPS(1ug/ml)와 추출물을 농도별로 투여하여 24시간 동안 배양하였다. 배양 후, 배지 상층액을 취해 13,000 rpm에서 3분 동안 원심 분리하여 상등액만 모은 후, Griess 시약과 1:1로 반응시키고 570nm에서 흡광도를 측정하였다.In order to determine the anti-inflammatory effect of the flowers, roots, seeds and callus extracts of the present invention, RAW 264.7 cells were treated with LPS, which is an inflammation inducing substance, Cells were seeded at 2 × 10 5 cells per well in a 96-well plate and cultured in a 5% CO2 incubator at 37 ° C for 24 hours. After overnight incubation, the cells were replaced with fresh medium. LPS (1 ug / ml) and extracts were added at different concentrations and cultured for 24 hours. After incubation, the supernatant was taken and centrifuged at 13,000 rpm for 3 minutes to collect the supernatant, reacted with Griess reagent 1: 1 and absorbance at 570 nm.
측정결과, 2%의 LPS 농도에서 각 무궁화 식물의 각 부위별 추출물의 항염 효능을 측정할 수 있었고 (도 1 내지 도 4), 구체적으로 무궁화 씨, 꽃, 캘러스, 뿌리의 추출물은 각 23%, 19%, 16%, 11%의 일산화질소(NO) 생성 억제의 항염 효능을 확인할 수 있었다. 본 발명에 따르는 무궁화 식물 각 부위 추출물 중 무궁화 씨 추출물의 항염 효능이 가장 우수한 것을 확인하였다. As a result of the measurement, the anti-inflammatory activity of each extract of each of the Mugunghwa plants was measured at 2% LPS concentration (Figs. 1 to 4). Specifically, extracts of Mugungwha, flower, callus and root were 23% The anti-inflammatory activity of inhibition of nitric oxide (NO) production by 19%, 16% and 11% was confirmed. It was confirmed that the extract of Mugungwha extract had the best anti-inflammatory activity among the extracts of each part of the Hibiscus plant according to the present invention.
실험예Experimental Example 2. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 2. The flowers, roots, seeds and 캘러스Callus 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능 측정 Measurement of collagen production proliferation of extract
피부 섬유아세포(HDFn)를 48 well 플레이트에 5ㅧ104 cells/well의 농도로 배양 배지 0.3 mL로 접종하여 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였다. 24시간 이후 무궁화 부위별 추출물을 농도별로 포함한 새로운 배지로 24시간 동안 배양하였다. 24시간 배양 이후 배양액을 모아서 enzymes-linked immunoassay kit (Takara사)를 이용하여 콜라겐 전구체의 C-말단의 양을 측정하였다. 또한, 콜라겐 용액 640 ng/mL을 이용하여 콜라겐 농도 0 ng-640 ng 사이의 standard curve를 얻어 배지에 있는 콜라겐 양을 계산하였다.Dermal fibroblasts (HDFn) were inoculated into 48-well plates at a concentration of 5 × 10 4 cells / well in 0.3 ml of culture medium and cultured at 37 ° C and 5% CO 2 . After 24 hours, the extracts of Mugungwha were cultured for 24 hours in a fresh medium containing the concentration of each extract. After culturing for 24 hours, the culture broth was collected and the amount of C-terminus of the collagen precursor was measured using an enzymes-linked immunoassay kit (Takara). In addition, a standard curve between collagen concentration of 0 ng and 640 ng was obtained using collagen solution 640 ng / mL, and the amount of collagen in the medium was calculated.
계산 결과, 2%의 추출물 농도에서 각 무궁화 식물 기관 부위별 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 확인할 수 있었고(각 도 5 내지 도 8), 특히 무궁화 캘러스, 꽃, 씨의 각 추출물은 각 20%, 11%, 5%의 콜라겐 생성 증식 효능을 확인할 수 있었다. 즉, 무궁화 식물 각 부위 추출물 중 무궁화 캘러스 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능이 가장 우수한 것을 확인하였다. As a result of the calculation, it was confirmed that collagen production proliferation effect of the extracts of the respective plant parts of Mugunghwa plants was observed at the extract concentration of 2% (Figs. 5 to 8). In particular, the extracts of Mugunghwa callus, flower, %, And 5%, respectively. In other words, it was confirmed that the extract of Mugunghwa callus extract showed the best proliferation of collagen.
실험예Experimental Example 3. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 3. Flowers, roots, seeds and 캘러스Callus 추출물의 항산화 효능 측정 Antioxidant efficacy of extract
본 발명 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물의 항산화 활성을 검정하기 위해 DCFH-DA(2'7'-dichloro flurescin0diacetate)를 이용하였다. 이를 위해 피부 섬유아세포(HDFn)를 DMEM(10% 혈청 및 1% 항생제 첨가) 배지에 현탁하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 well당 1x105 세포 수가 되도록 24시간 동안 배양하였다. 상기 단계에서 수득한 피부 섬유아세포에 무궁화 식물 각 부위별 추출물을 농도별로 처리하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 1시간 배양한 후 산화 스트레스 유발 물질인 H2O2 1mM 및 DCFH-DA 20M을 첨가한 후 excitation은 485nm, emission은 535nm 조건으로 DCFH-DA (2'7'-dichloro flurescinodiacetate) was used to test the antioxidative activity of flowers, roots, seeds and callus extracts of the present invention. For this purpose, dermal fibroblasts (HDFn) were suspended in DMEM (supplemented with 10% serum and 1% antibiotic) medium, and cultured for 24 hours at 37 ° C in a 5% CO 2 incubator for 1 × 10 5 cells per well. The extracts of each part of the Hibiscus japonica were added to the dermal fibroblasts obtained in the above step and cultured in a 5% CO 2 incubator at 37 ° C for 1 hour. Then, 1 mM of H 2 O 2 and 20 mM of DCFH-DA After the addition, the excitation was 485 nm and the emission was 535 nm.
spectrofluorophotomer를 이용하여 측정하였다. 시료를 넣지 않고 항산화 활성을 측정한 처리군은 대조군으로 이용하였고 항산화 활성은 하기 수학식1의 방법으로 계산하였다. 모든 실험은 3번 반복하여 실험하였다.spectrofluorophotomer. The antioxidant activity of the test group without the sample was used as a control group and the antioxidant activity was calculated by the following formula (1). All experiments were repeated 3 times.
[수학식 1][Equation 1]
활성산소종 저해율(%)= 대조군 OD-시료처치군 OD / 대조군 OD X 100Active oxygen species inhibition rate (%) = control OD-sample treatment group OD /
실험결과, 2%의 추출물 농도에서 각 무궁화 각 부위별 추출물의 항산화 효능을 확인하였고(각 도 9 내지 12), 그 중 무궁화 꽃, 캘러스의 추출물은 각 20%, 15%의 항산화 효능을 확인할 수 있었다. 본 발명에 따르면 무궁화 식물 각 부위별 추출물 중 무궁화 꽃 추출물의 항산화 효능이 가장 우수한 것을 확인하였다. As a result, the antioxidant activity of the extracts of each of the Mugunghwa extracts was confirmed at the extract concentration of 2% (FIGS. 9 to 12), and the antioxidative activities of the extracts of Mugungwha and callus were 20% and 15% there was. According to the present invention, it was confirmed that the antioxidant effect of the extract of Mugunghwa flower was the best among the extracts of each part of the cows.
실험예 4. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물의 항알러지 효능 측정Experimental Example 4. Measurement of anti-allergic activity of flowers, roots, seeds and callus extracts of Hibiscus plants
본 발명 무궁화 식물의 각 부위, 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물의 항알러지 효능을 검정하기 위해 RBL-2H3 cell을 10% FBS를 함유한 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)에 현탁시킨 후 24-well plate에 각 well당 2 x 105 cell이 들어가도록 처리하였다. 각 well당 100 ng/mL의 mouse monoclonal IgE로 감작시킨 후 5% CO2 incubator에서 24시간 동안 배양하였다. 세포를 well당 Tyrode buffer 500㎕를 사용하여 헹구어내고 농도별로 혼합 추출물을 처리한 후 37℃, 5% CO2 incubator에서 15분간 배양하고 1시간 동안 DNP-BSA 100ng/ml을 처리하였다. 상층액에 substrate (1mM p-nitrophenyl-N-acetyl-ㅯ-D-glucosaminide) 50㎕를 처리한 후 37℃, 5% CO2 incubator에서 1시간 동안 배양하고 ELISA reader를 사용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.RBL-2H3 cells were suspended in DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) containing 10% FBS to examine the antiallergic effect of each part of the present invention, flowers, roots, seeds and callus extracts in a 24-well plate To 2 x 10 5 cells per well. After sensitization with 100 ng / mL mouse monoclonal IgE per well, the cells were cultured in a 5% CO 2 incubator for 24 hours. Cells were rinsed with 500 μl of Tyrode buffer per well and treated with DNP-
측정결과, 2%의 추출물 농도에서 각 무궁화 부위별 추출물의 항알러지 효능을 확인할 수 있었고(각 도 13 내지 16), 그 중 무궁화 뿌리의 추출물은 27%의 항알러지 효과를 보여 항알러지 효능이 가장 우수한 것을 확인하였다. As a result of the measurement, the antiallergic efficacy of the extracts of the respective hibiscus parts at 2% extract concentration was confirmed (Figs. 13 to 16). Among them, the extract of hibiscus roots showed an antiallergic effect of 27% Excellent.
실험예 5. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물의 항염, 콜라겐 생성 증식, 항산화 및 항알러지 효능의 측정Experimental Example 5. Anti-inflammation, proliferation of collagen production, antioxidation and anti-allergic activity of mixed extracts of flowers, roots, callus and seeds of Hibiscus plants
상기 실시예 1에서 수득한 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 실험예 1 내지 4에 기재된 항염, 콜라겐 증식, 항산화 및 항알러지 효능 측정방법을 이용하여 각 기능을 평가하였다. 실험결과, 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물은 대조군에 비하여 25%의 항산화 효능(도 17), 20%의 항알러지 효능(도 18), 16%의 콜라겐 증식 효능(도 19), 21%의 항염 효능(도 20)을 각각 확인하였다. Each function was evaluated using the anti-inflammatory, collagen proliferation, antioxidant, and antiallergic activity measurement methods described in Experimental Examples 1 to 4, with mixed extracts of flowers, roots, callus and seeds obtained in Example 1 above. The results of the experiment showed that the mixed extracts of flowers, roots, callus and seeds of Mugungwha showed 25% antioxidant effect (FIG. 17), 20% antiallergic effect (FIG. 18), 16% collagen proliferation effect (FIG. 19) , And 21%, respectively (Fig. 20).
이하, 본 발명을 사용하기에 바람직하고 다양한 화장품 제형을 개시하지만 본 발명의 권리범위는 개시된 제형에 제한되지 않음은 물론이다.Hereinafter, various cosmetic formulations preferable for using the present invention are disclosed, but it goes without saying that the scope of right of the present invention is not limited to the disclosed formulations.
제조예1. 화장수Production Example 1 toilet water
본 발명 상기 실시예1에서 얻은 본 발명 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물(이하, 혼합 추출물)이 함유된 화장수를 하기 표1과 같이 제조하였다.The lotion containing the mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of the present invention (hereinafter referred to as mixed extract) obtained in Example 1 of the present invention was prepared as shown in Table 1 below.
제조예2. 로션Production Example 2 Lotion
본 발명 상기 실시예1에서 얻은 본 발명 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물(이하, 혼합 추출물)이 함유된 로션을 하기 표2와 같이 제조하였다.The lotion containing the mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of the present invention (hereinafter referred to as mixed extract) obtained in Example 1 of the present invention was prepared as shown in Table 2 below.
제조예3. 크림Production Example 3 cream
본 발명 상기 실시예1에서 얻은 본 발명 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물(이하, 혼합 추출물)이 함유된 크림을 하기 표3과 같이 제조하였다.The cream containing the mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of the present invention obtained in Example 1 of the present invention (hereinafter referred to as mixed extract) was prepared as shown in Table 3 below.
제조예4. 에센스 제조Production Example 4 Essence manufacturing
본 발명 상기 실시예1에서 얻은 본 발명 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물(이하, 혼합 추출물)이 함유된 에센스를 하기 표4와 같이 제조하였다.The essence containing the mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of the present invention (hereinafter, mixed extract) obtained in Example 1 of the present invention was prepared as shown in Table 4 below.
이상의 설명으로부터, 본 출원이 속하는 기술분야의 당업자는 본 출원이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 출원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 출원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.From the above description, it will be understood by those skilled in the art that the present invention may be embodied in other specific forms without departing from the spirit or essential characteristics thereof. In this regard, it should be understood that the embodiments described above are illustrative in all aspects and not restrictive. The scope of the present application is to be interpreted as being within the scope of the present application, all changes or modifications derived from the meaning and scope of the appended claims and from their equivalents rather than the detailed description.
본 발명은 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 각 추출물의 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 항노화 또는 항알러지용 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로 특히 크림이나 로션, 연고 등 다양한 제형의 화장품을 사용할 수 있는 뛰어난 효과가 있어 천연 화장품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.The present invention relates to an anti-aging or anti-allergic cosmetic composition comprising as an active ingredient a mixed extract of flowers, roots, callus and seed extracts of Hibiscus japonica, and a method of preparing the same. Especially, the present invention relates to cosmetic compositions of various formulations such as creams, lotions, Which is a very useful invention in the natural cosmetics industry.
Claims (6)
상기 단계에서 얻은 각 부위별 추출물과 무궁화 캘러스 추출물을 혼합하여 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 수득하는 단계를 포함하는 것이 특징인 무궁화 혼합 추출물의 제조방법
Extracting flowers, roots and seeds of each part of the hibiscus flower at 60 ° C using water, ethanol, methanol, butylene glycol, propanediol or a mixed solvent thereof to obtain an extract of each part;
The method comprising the step of mixing the extract of each part obtained in the above step with the extract of Mugunghwa callus to obtain a mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of Mugunghwa
2. The method according to claim 1, wherein the mixture of the extract of each part of the cow and the callus extract is mixed with the same ratio (W / W)
3. A mixed extract of Hibiscus ash extracted according to the method of claim 1 or 2.
An anti-aging functional cosmetic composition comprising the extract of claim 3 as an active ingredient
An anti-allergy functional cosmetic composition containing the extract of claim 3 as an active ingredient
The anti-aging or anti-allergy functional cosmetic composition according to claim 4 or 5, wherein the cosmetic composition is any one selected from the group consisting of lotion, lotion, cream and essence
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