KR20220028612A - Cosmetic composition antimicroboal, antioxidation, whitening or anti-inflammation comprising artemisia capillaris thunberg and olive extract - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a cosmetic composition including an Artemisia campestris extract and an Olea europaea extract as active ingredients, which can prevent and alleviate skin damage by antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory activities. Also, provided can be a cosmetic composition which can exhibit an excellent antiseptic effect and excellent effects in skin aging prevention and alleviation, skin wrinkle alleviation, whitening, and skin inflammation alleviation.

Description

인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION ANTIMICROBOAL, ANTIOXIDATION, WHITENING OR ANTI-INFLAMMATION COMPRISING ARTEMISIA CAPILLARIS THUNBERG AND OLIVE EXTRACT}A cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening, and anti-inflammatory containing extracts of Injin mugwort and olive as active ingredients

본 발명은 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하여 항균, 항산화, 미백 및 항염증 효과를 나타내는 것으로, 방부 효과, 피부 노화 예방 및 개선, 피부 주름 개선, 미백, 피부 염증 개선이 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening, and anti-inflammatory comprising an extract of Injin mugwort and an olive extract as active ingredients. In more detail, a cosmetic composition with antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory effects by including ginseng mugwort extract and olive extract as active ingredients, and excellent antiseptic effect, skin aging prevention and improvement, skin wrinkle improvement, whitening, and skin inflammation improvement is about

피부는 인체의 가장 외부에 존재하는 기관으로 체내 수분을 보호하고 외부로부터의 침입인자를 막아 인체를 보호하는 필수적인 장벽 역할을 한다.As the most external organ of the human body, the skin acts as an essential barrier to protect the body by protecting moisture and blocking intrusion factors from the outside.

화장료는 일반적으로 피부를 청결하고 아름답게 하는 것이 목적이며, 이러한 목적을 수반하는 과정에서 피부를 깨끗, 촉촉하게 하고, 자외선을 차단하며, 공해 및 스트레스에 의한 체내 활성 산소 및 과산화물을 제거하여 피부의 노화를 지연하는 효과를 부여한다.Cosmetics generally aim to clean and beautify the skin, and in the process accompanying this purpose, it cleans and moisturizes the skin, blocks UV rays, and removes free radicals and peroxides from the body caused by pollution and stress to reduce skin aging. Gives the effect of delaying

화장료를 구성하고 있는 원료들은 대부분 미생물이 이용하기에 적합한 물질들이다. 더불어 최근에는 고 기능성 화장료를 개발하기 위해 동식물로부터 얻어진 천연물들을 많이 첨가함으로써 미생물에 의한 화장료의 오염 가능성이 더욱더 높아졌다.Most of the raw materials constituting cosmetics are substances suitable for use by microorganisms. In addition, in recent years, the possibility of contamination of cosmetics by microorganisms has increased by adding a lot of natural products obtained from animals and plants in order to develop high-functional cosmetics.

이에 따라 화장료에는 방부제가 첨가되고, 화장료에 사용되는 방부제는 소비자의 제품 중 그 효과를 나타내야 하며, 적합한 방부시스템이 설정되었는가 반드시 시험으로 증명되어야 한다.Accordingly, preservatives are added to cosmetics, and preservatives used in cosmetics must show their effectiveness among consumer products, and whether an appropriate preservative system is established must be proven by testing.

화장료가 미생물에 의해 오염되었을 때, 우리에게 주는 부정적 측면은 크게 두 가지로 나눌 수 있다. 첫 번째는 소비자의 건강에 미치는 위험성이고, 두 번째는 상품 가치의 하락이다. 미생물에 오염된 화장료을 피부에 도포할 경우 피부의 상처나 균열을 통해 유입된 미생물이 염증이나 각종 트러블을 일으킬 수 있다. 또한 미생물의 증식으로 인한 화장료의 물리적 변화(유화의 파괴 및 변취 등)를 가져와 상품의 가치를 하락시킬 수 있다. 따라서 화장료가 미생물에 오염되지 않도록 처방에서부터 제조, 포장에 이르기까지 발생할 수 있는 다양한 오염 원인들을 파악하고 대책을 세우는 것이 필요하다.When cosmetics are contaminated by microorganisms, the negative aspects they give us can be divided into two main categories. The first is the risk to consumer health, and the second is the decline in product value. When cosmetics contaminated with microorganisms are applied to the skin, microorganisms introduced through wounds or cracks on the skin may cause inflammation or various troubles. In addition, it may bring about physical changes (destruction of oil painting and odor, etc.) of cosmetics due to the growth of microorganisms, thereby reducing the value of the product. Therefore, it is necessary to identify various sources of contamination that may occur from prescription to manufacturing to packaging and to take countermeasures so that cosmetics are not contaminated with microorganisms.

화장료는 물, 오일, 보습제, 계면활성제, polymer, 천연물 등 미생물이 사용하기 좋은 성분들로 이루어져 있다. 화장료는 오랜 기간 동안 소비자에 의해 사용된다는 특성을 가지고 있으므로 다양한 미생물에 의한 변질을 방지하기 위한 적당한 방부제를 필요로 한다. 만약 미생물에 오염된 화장료를 사용하게 되면, 사용자에게 유해할 수 있으며, 면역력이 약한 사람에게는 병을 일으킬 수도 있다. 이와 같은 이유로 화장료는 각 제형의 특성에 따라 적합한 수준의 방부시스템이 설정되어야 한다.Cosmetics consist of ingredients that are good for microorganisms, such as water, oil, moisturizer, surfactant, polymer, and natural product. Cosmetics have the characteristic of being used by consumers for a long period of time, so an appropriate preservative is required to prevent deterioration by various microorganisms. If a cosmetic contaminated with microorganisms is used, it may be harmful to the user and may cause disease in those with weak immunity. For this reason, cosmetics should have a preservative system at an appropriate level according to the characteristics of each formulation.

피부의 노화는 크게 자연 노화와 외인성 노화로 구분할 수 있다. 외인성 노화는 주로 태양광선에 의해 영향을 받으며, 특히 자외선은 광노화(photo-aging)를 일으키는 것으로 잘 알려져 있다. 반면, 적외선은 체내에 열을 상승시켜 이로운 작용을 하는 것으로 알려져 있다.Skin aging can be broadly divided into natural aging and extrinsic aging. Extrinsic aging is mainly affected by sunlight, and in particular, ultraviolet rays are well known to cause photo-aging. On the other hand, infrared radiation is known to have a beneficial effect by increasing heat in the body.

피부노화의 원인 중에 하나는 산소에서 유래되는 과산화물 음이온 라디칼(superoxide anion radical), 히드록시 라디칼 (hydroxy radical), 일중항 산소(singlet oxygen) 및 과산화수소(H2O2) 등의 활성산소에 의해 야기되는 자유 라디칼 반응은 지질을 포함한 세포의 주요 거대 분자를 파괴시키며, 이들은 반응성이 강하고 세포 구성물질이나 세포막과 반응하여 이상대사를 초래한다고 알려져 있다. 이 같은 비정상적인 대사나 물리, 화학적인 외부자극에 대한 노출은 산화와 항산화의 불균형을 야기해 과산화나 생체 내 방어기구의 무기력화를 일으키고 단백질의 산화 및 변성 등을 초래하며 세포의 기능을 손상시키고, 결국 탄력 감소, 주름, 기미 및 주근깨 생성 등으로 특징 지워지는 피부 노화가 가속화된다(J. Soc., Cosmet. Sci. Kor., 23, pp75-132, 1997). One of the causes of skin aging is caused by active oxygen such as superoxide anion radical, hydroxy radical, singlet oxygen and hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) derived from oxygen. It is known that the free radical reaction destroys major macromolecules of cells including lipids, which are highly reactive and cause abnormal metabolism by reacting with cell components or cell membranes. Such abnormal metabolism or exposure to physical and chemical external stimuli causes an imbalance between oxidation and antioxidant, which causes peroxidation or incapacity of the body's defense mechanisms, causes oxidation and denaturation of proteins, and impairs cell functions. Eventually, skin aging is accelerated, which is characterized by reduced elasticity, wrinkles, melasma and freckle production (J. Soc., Cosmet. Sci. Kor., 23, pp75-132, 1997).

특히, 자연계에 서식하는 생명체의 노화와 질병의 많은 원인 중의 하나는 산화하는 대사 과정에서 발생하는 활성 산소(active oxygen)에서 찾을 수 있는데, 이들은 건강한 조직에서는 백혈구 등이 이를 이용하여 외부에서 침입한 각종 비-자기 물질들을 비 특이적으로 제거하는데 필수적인 물질이기도 하지만 주로 불포화 지방산이 풍부한 생체막에서는 자유 라디칼 반응에 관여함으로써 지질의 과산화를 일으키는 것으로 알려져 있다.In particular, one of the many causes of aging and diseases of living things living in the natural world can be found in active oxygen generated in the oxidative metabolic process. Although it is an essential material for non-specific removal of non-magnetic substances, it is known to cause peroxidation of lipids by participating in free radical reactions in biofilms mainly rich in unsaturated fatty acids.

일반 화장품, 의약품 및 식품의 원료로서 사용되는 활성산소 억제와 항산화 효과가 있는 물질이 알려져 있지만, 이는 합성품으로 장기간 인간의 피부에 적용할 경우에 안전성이 확보되지 않아 그 사용이 제한된다. Substances with active oxygen suppression and antioxidant effects that are used as raw materials for general cosmetics, pharmaceuticals and food are known, but their use is limited because they are synthetic products that do not ensure safety when applied to human skin for a long period of time.

천연물은 활성산소 억제 효과가 약한 것이 대부분이지만 사람의 피부에 대해서는 안전성이 보증된다.Most of the natural products have a weak inhibitory effect on free radicals, but safety is guaranteed for human skin.

따라서, 활성산소 억제 효과 및 항산화 효과가 강하고 사람의 피부에 대해 서도 또 다른 효과가 있는 물질이 희망된다. Therefore, there is a hope for a substance that has a strong active oxygen inhibitory effect and antioxidant effect and has another effect on human skin.

광 노화의 대표적인 조직학적 변화는 엘라스틴 섬유의 주성분인 엘라스틴의 축적이다. 정상적인 교원섬유와는 달리 광탄력소물질(solar elastotic material)은 거대분자로 구성되고 광에 의해 기능이 심각하게 손상되어 있다. A representative histological change of photoaging is the accumulation of elastin, the main component of elastin fibers. Unlike normal collagen fibers, solar elastotic material is composed of macromolecules and its function is severely damaged by light.

자외선에 노출된 피부세포에서 엘라스틴 유전자의 발현이 두드러지게 활성이 촉진되어 있으며, 엘라스틴 유전자의 발현은 자유 라디칼에 의해 유발된다고 한다. It is said that the expression of elastin gene is remarkably promoted in skin cells exposed to ultraviolet rays, and expression of elastin gene is induced by free radicals.

엘라스타제는 엘라스틴을 분해할 수 있는 지금까지 알려진 유일한 효소이며, 이에 대한 저해는 피부 노화를 근본적으로 줄여 줄 수 있다. 콜라겐의 분해는 주요인은 광에 의해서이다. Elastase is the only enzyme known so far that can break down elastin, and inhibition of it can fundamentally reduce skin aging. The main reason for the breakdown of collagen is by light.

광노화는 자외선에 의한 신호전달에 의해 시작되며, 이를 초기에 차단할 수 있는 항산화제나 단백질 분해효소의 발현억제효과를 지닌 레티노이드 및 단백질 저해제(inhibitor) 등에 의해 피부노화를 방지할 수 있으며 이들은 임상적으로 효과가 증명되고 있다. Photoaging is initiated by signal transduction by UV rays, and skin aging can be prevented by antioxidants or retinoids and protein inhibitors that inhibit the expression of proteolytic enzymes that can block it in the early stage, and these are clinically effective is being proven

피부노화 메커니즘을 살펴보면, 먼저 자외선이나 외부환경적 요인에 의해 활성산소나 자유 라디칼이 생성되며, 생성된 활성산소나, 자유 라디칼에 의해 세포막이 공격을 당하게 되어 피부는 염증(inflammation)이 일어나며, 염증화된 (inflammated) 조직은 생리학적 진행 메카니즘에 의해 단백질이나 유전자 물질 등을 파괴. 주름 등을 형성하는 피부노화가 일어난다.Looking at the mechanism of skin aging, first, active oxygen or free radicals are generated by ultraviolet rays or external environmental factors, and the cell membrane is attacked by the generated active oxygen or free radicals, causing inflammation and inflammation of the skin. Inflammated tissue destroys proteins or genetic materials by physiological mechanisms. Skin aging that forms wrinkles and the like occurs.

이에 피부노화 메커니즘에 관여되는 단계를 모두 억제, 막아 주는 것이 피부노화를 근본적으로 방지할 수 있는 방법에 해당될 것이다. Therefore, suppressing and blocking all steps involved in the skin aging mechanism would correspond to a method that can fundamentally prevent skin aging.

피부에 염증을 일으키는 인자로는 물리화학적 자극, 알러젠, 자외선, 산화 스트레스, 병원균 감염 그리고 이로 인해 이차적으로 생산된 염증관련 사이토카인, 케모카인 등이 있다.Factors that cause skin inflammation include physicochemical stimuli, allergens, ultraviolet rays, oxidative stress, pathogenic infection, and secondary inflammation-related cytokines and chemokines produced by this.

피부 염증 반응의 일반적인 경로는 외부 자극으로부터 인체를 보호하기 위한 면역반응으로 염증반응 억제를 통한 염증의 조절이 치료의 주요 타겟이 되고 있다. 피부 염증의 병변에서 염증반응의 시작과 유지에는 피부림프구 관련 항원을 발현하는 T 세포나 호산구 등의 여러 염증세포가 병변에 침윤하는 과정에서 발생하는 사이토카인이나 케모카인이 관여하며 이와 관련된 수용체가 염증세포, 각질형성세포, 섬유아세포 등 여러 세포에 발현한다고 알려져 있다, 케모카인은 사이토카인의 한 군으로 현재 약 50여종 이상이 알려졌다. 이들은 조직이 염증반응을 일으키는 동안 그 부위에 적절한 면역세포를 끌어들이는 역할을 한다. 알러젠이나 자극원에 의해 피부가 자극되면 활성화된 랑게르한스 세포가 진피쪽으로 이동하게 되고 항원 자극을 받지 않은 naive T 세포에 항원을 전달하여 T 세포가 활성화된다. 한번 항원에 노출된 적이 있는 메모리 T 세포는 혈관을 따라 순환하다 병변 부위로 이동하여 보다 빠르게 활성화되어 효과적인 면역반응이 유도된다. 이러한 기전으로 설명되어지는 대표적인 피부질환인 알레르기 접촉피부염, 건선, 아토피 피부염 등은 T 세포가 매개하는 염증성 질환이다.The general pathway of the skin inflammatory response is an immune response to protect the human body from external stimuli, and the control of inflammation through inhibition of the inflammatory response is the main target of treatment. In the initiation and maintenance of the inflammatory response in skin inflammatory lesions, cytokines or chemokines generated during the infiltration of various inflammatory cells such as T cells or eosinophils expressing skin lymphocyte-related antigens into the lesion are involved, and related receptors are inflammatory cells , keratinocytes, fibroblasts, etc. are known to be expressed in various cells. Chemokines are a group of cytokines, and more than 50 types are currently known. They play a role in attracting appropriate immune cells to the site while the tissue undergoes an inflammatory response. When the skin is stimulated by an allergen or an irritant, the activated Langerhans cells move toward the dermis, and T cells are activated by delivering antigens to naive T cells that have not been stimulated. Memory T cells that have been exposed to an antigen once circulate along the blood vessels and migrate to the lesion site, where they are activated more rapidly, leading to an effective immune response. Representative skin diseases explained by this mechanism, such as allergic contact dermatitis, psoriasis, and atopic dermatitis, are inflammatory diseases mediated by T cells.

한편, 활성화된 헬퍼 T 세포는 B 세포를 자극하여 면역글로불린 E의 과다 생산을 유발한다. 면역글로불린 E는 자극, 홍반, 가려움과 같은 염증반응을 일으키고 비만세포를 자극하여 또 다른 염증경로인 COX(cyclooxygenase) 신호를 활성화한다. COX-1은 조직 내에서 내재적으로 일정하게 존재하는 반면, COX-2는 염증반응으로 유도되는데 다양한 자극에 의해 단기간 내에 급격히 발현되는 것으로 알려졌다. 대표적 염증인자인 COX-2의 발현 증가가 일산화질소(nitric oxide)의 생성에도 영향을 미치는 것으로 알려졌다.On the other hand, activated helper T cells stimulate B cells to cause overproduction of immunoglobulin E. Immunoglobulin E triggers inflammatory responses such as irritation, erythema, and itching, and activates cyclooxygenase (COX) signaling, which is another inflammatory pathway by stimulating mast cells. While COX-1 is intrinsically constant in tissues, COX-2 is induced by an inflammatory response and is known to be rapidly expressed within a short period of time by various stimuli. It is known that an increase in the expression of COX-2, a representative inflammatory factor, also affects the production of nitric oxide.

현재 염증성 피부질환 치료제로는 스테로이드 제제, 국소 면역억제제, 국소 항생제 및 항히스타민 등이 사용되고 있으나, 상피 약물제제를 장기적으로 사용하는 경우 살이 트는 팽창선조, 피부위축, 모세혈관 확장, 스테로이드성 여드름, 다모증, 자반 등의 부작용이 일어날 수 있다. 특히 스테로이드제를 광범위한 부위에 바르면 피부를 통해 약제가 전신적으로 흡수되어 소아의 경우 성장을 방해할 수 있고, 성인은 골다공증과 같은 전신적인 부작용이 발생할 수 있다.Currently, steroids, topical immunosuppressants, topical antibiotics, and antihistamines are used for the treatment of inflammatory skin diseases. Side effects such as purpura may occur. In particular, when steroids are applied to a wide area, the drug is systemically absorbed through the skin, which can impede growth in children and systemic side effects such as osteoporosis in adults.

따라서, 천연물질로부터 유래되어 부작용이 적어 인체에 안전하면서도 화장료 조성물에 방부 효과를 부여하고, 노화 예방과 미백 효과 및 염증성 피부질환 개선 효과가 우수한 조성물의 개발이 필요한 실정이다.Therefore, there is a need to develop a composition derived from natural substances that is safe for the human body with few side effects, imparts an antiseptic effect to the cosmetic composition, and is excellent in preventing aging, whitening and improving inflammatory skin diseases.

KR 10-2019-0012324 AKR 10-2019-0012324 A

본 발명의 목적은 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.SUMMARY OF THE INVENTION It is an object of the present invention to provide a cosmetic composition comprising an Injin mugwort extract and an olive extract as active ingredients.

본 발명의 다른 목적은 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효 성분으로 포함하여, 항균, 항산화, 미백 및 항염증 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.It is another object of the present invention to provide a cosmetic composition comprising Injin mugwort extract and olive extract as active ingredients, which exhibits antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory effects.

본 발명의 다른 목적은 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하여, 다양한 미생물에 대한 항균력 제공, 피부 노화 예방 및 개선, 피부 주름 개선, 미백 효과, 피부 염증 개선에 우수한 효과를 나타낼 수 있는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is a cosmetic composition that can provide antibacterial activity against various microorganisms, prevent and improve skin aging, improve skin wrinkles, whiten effect, and improve skin inflammation, including wormwood extract and olive extract as active ingredients is to provide

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물은 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효 성분으로 포함한다.In order to achieve the above object, the cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory according to an embodiment of the present invention includes Injin mugwort extract and olive extract as active ingredients.

상기 조성물은 아토피 피부염 및 지루성 피부염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 염증성 피부질환을 예방하는 것이다.The composition is to prevent inflammatory skin diseases selected from the group consisting of atopic dermatitis and seborrheic dermatitis.

상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출 용매를 이용하여 추출되며, 추출 후, 0.1몰 염산 에탄올 용액을 이용한 속실렛 정제와 65% 에탄올 수용액을 이용하여 정제된 것이다.The extract is extracted using an extraction solvent selected from the group consisting of water, alcohols having 1 to 6 carbon atoms, and mixtures thereof, and after extraction, Soxhlet purification using 0.1 mol hydrochloric acid ethanol solution and 65% ethanol solution purification it has become

상기 조성물은 대장균(Escherichia coil), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 칸디다 알비칸스(Candida albicans) 및 진균(Aspergillus brasiliensis)로 이루어진 군으로부터 선택되는 균을 효과적으로 제거하여 항균 및 방부 효과를 갖는 것이다.The composition effectively removes bacteria selected from the group consisting of Escherichia coil, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans and fungi (Aspergillus brasiliensis) to provide antibacterial and antiseptic properties will have an effect.

상기 조성물은 자유 라디칼 소거능 및 MDA(Malondialdehyde) 소거능을 통해 항산화 활성을 가지는 것이다.The composition has antioxidant activity through free radical scavenging ability and MDA (malondialdehyde) scavenging ability.

상기 조성물은 티로시나아제 저해능 및 멜라닌 생성 억제능을 통해 미백 효과를 나타내는 것이다.The composition exhibits a whitening effect through tyrosinase inhibitory ability and melanin production inhibitory ability.

본 발명의 다른 일 실시예에 따른 토너는 상기 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물을 유효성분으로 포함하여 제조한 것이다.The toner according to another embodiment of the present invention is prepared by including the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition as an active ingredient.

본 발명의 다른 일 실시예에 따른 에멀전은 상기 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물을 유효성분으로 포함하여 제조한 것이다.The emulsion according to another embodiment of the present invention is prepared by including the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition as an active ingredient.

이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 명세서에서, "예방" 이라 함은 피부를 보호하여 피부 노화 및 손상을 막거나, 억제하거나, 지연시키는 것을 말하며, "개선" 이라 함은 피부 노화 및 손상을 치유하거나, 완전히 치유하지 않아도 증상의 진전, 악화를 억제하여 손상의 진행을 멈춤 및 증상의 일부 혹은 전부를 치유의 방향으로 유도하는 것을 의미한다.As used herein, the term "prevention" refers to preventing, inhibiting, or delaying skin aging and damage by protecting the skin, and "improvement" refers to the treatment of skin aging and damage, or improvement of symptoms even without complete healing. It means to stop the progression of damage by suppressing tremor or exacerbation and to induce some or all of the symptoms in the direction of healing.

본 발명의 일 실시예에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물은 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효 성분으로 포함한다.The cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory according to an embodiment of the present invention includes an extract of ginseng mugwort and an olive extract as active ingredients.

인진쑥(Artemisia capillaris)은 우리나라에서 자생하는 식물로 국화과(compositae)의 다년생 초본 식물이며, 더위지기, 애탕쑥이라고도 불린다. 인진쑥은 주로 어린순이 사용되며, 항염, 항균, 항여드름, 항산화, 이뇨제, 황달 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 주요 성분으로는 폴리페놀의 일종인 클로로겐산(chlorogenic acid), 카페익산(caffeic acid)부터 정유 성분인 올레산(oleic acid), 리놀레산(linoleic acid)까지 다양한 성분들이 포함되어 있다.Artemisia capillaris (Artemisia capillaris) is a herbaceous perennial plant of the Compositae family, which is native to Korea. Injin mugwort mainly uses young shoots, and is known to be effective in anti-inflammatory, antibacterial, anti-acne, antioxidant, diuretic, and jaundice. The main components include various components from chlorogenic acid and caffeic acid, which are types of polyphenols, to oleic acid and linoleic acid, which are essential oil components.

올리브는 올리브 나무(olea europaea)의 열매로, 이탈리아를 비롯한 지중해 유역의 요리에서 많이 쓰이며 이들의 음식문화에서 매우 중요한 역할을 한다. 생올리브는 특유의 쓴맛이 있지만 일정 기간 동안 물이나 소금물 혹은 알칼리 용액에 절이면 쓴맛이 사라지고, 고유의 풍미가 살아나며 질감도 부드러워진다. 올리브오일로 더 잘 알려져 있지만 올리브만으로도 전채 요리나 곁들임 요리가 되며, 샐러드, 파스타, 피자 등에 넣기도 한다. 전체 열량의 80~85%가 지방이지만 대부분이 몸에 좋은 불포화 지방산으로, 항산화와 항염 성분이 풍부해 세계적인 건강식품으로 인정받고 있다.Olive is the fruit of the olive tree (olea europaea), and it is widely used in Italian and Mediterranean cuisines and plays a very important role in their food culture. Although raw olives have a characteristic bitter taste, if they are pickled in water, salt water, or alkaline solution for a certain period of time, the bitterness disappears, the inherent flavor is restored, and the texture becomes softer. Although better known as olive oil, the olives alone make an appetizer or side dish, and are also added to salads, pasta, and pizza. Although 80-85% of total calories are fat, most of them are unsaturated fatty acids that are good for the body.

또한, 올리브에는 비타민E 와 스쿠알렌, 불포화 지방산인 올레산이 들어 있어 노화 방지에도 효과적이며, 올리브 오일은 아젤릭산이 포함되어 있어 건성피부나 각질, 모발 등에 영양을 공급해 주고, 건성피부나 아토피성 피부에 좋은 효과를 주어 피부마사지 시 혈액순환을 촉진시키며, 올리브 오일에 함유된 불포화지방산으로 인하여 피부장벽 기능이 강화되어, 외부 유해환경에 대한 피부의 방어작용을 증가시켜 준다.In addition, olive contains vitamin E, squalene, and oleic acid, an unsaturated fatty acid, which is effective in preventing aging. It promotes blood circulation during skin massage, and the skin barrier function is strengthened due to the unsaturated fatty acids contained in olive oil, thereby increasing the skin's defense against harmful external environments.

상기 조성물은 아토피 피부염 및 지루성 피부염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 염증성 피부질환을 예방하는 것이다.The composition is to prevent inflammatory skin diseases selected from the group consisting of atopic dermatitis and seborrheic dermatitis.

아토피 피부염(atopic dermatitis)은 소양증, 피부 건조증, 습진 등을 동반하는 염증성 질환 또는 유전적, 환경적, 면역학적 원인으로 인하여 피부의 가장 바깥에 위치한 피부 보호벽인 각질층에 이상이 생겨서 발생하는 질환으로 건조한 기후에서는 더욱 심해지는 경향이 있다. 그러므로 아토피 피부염의 피부건조증을 개선을 위한 보습제의 사용과 피부장벽 기능의 회복력 증가는 아토피 피부염 치료에서 중요한 위치를 차지한다.Atopic dermatitis is an inflammatory disease accompanied by pruritus, dry skin, eczema, etc. In climate, it tends to be more severe. Therefore, the use of moisturizers to improve the dryness of the skin of atopic dermatitis and the increase in the recovery of the skin barrier function occupies an important position in the treatment of atopic dermatitis.

아토피 피부는 만성적으로 건조하므로 각종 자극에 의해 쉽게 습진이 유발되고, 소양감이 심하며, 반복적으로 재발되는 특징을 가지고 있다. 이러한 소양감과 습진은 피부 건조증에 의해 반복적으로 약화되며 적절한 관리를 하지 않으면 결국 태선화, 색소변화, 홍피증 등의 아급성, 만성병변으로 진행된다. 면역학적 이상과 동반하여 표재성 모낭염, 피틸로스포럼 모낭염, 전풍, 표재성 피부사상균증, 사마귀, 재발성 단순포진 등이 흔하다. 세균성 감염은 대개 코아귤라제 양성 포도상구균에 의하며, 주로 팔, 다리에 표재성의 소양감을 가진 모낭염 병변으로 나타나고, 심부조직의 농양 및 봉와 직염을 잘 동반하지는 않으나 심한 정도의 재발성 환상 습진병변에 동반되는 경우는 전신증상을 동반하는 재발성 봉와 직염을 일으킬 수 있다.Because atopic skin is chronically dry, eczema is easily induced by various stimuli, it has severe itching, and has the characteristics of repeated recurrence. These pruritus and eczema are repeatedly weakened by dry skin, and if not properly managed, eventually progress to subacute and chronic lesions such as lichenification, pigment change, and erythematosus. With immunological abnormalities, superficial folliculitis, phytilosporum folliculitis, epilepsy, superficial dermatophytosis, warts, and recurrent herpes simplex are common. Bacterial infections are usually caused by coagulase-positive Staphylococcus aureus, and mainly appear as folliculitis lesions with superficial pruritus on the arms and legs. In some cases, it can cause recurrent cellulitis with systemic symptoms.

지루성 피부염(Seborrhoeic dermatitis)은 피지의 분비가 많은 부위(머리, 이마, 겨드랑이 등)에 발생하기 쉬운 만성염증성 피부질환으로, 홍반(붉은 반점)과 가느다란 인설(비듬)이 흔하게 나타난다. 생후 3개월 이내, 그리고 40~70세 사이에 나타나기 쉬우며, 특히 성인 남자의 3~5%에서 발생하는 매우 흔한 질환이다.Seborrhoeic dermatitis is a chronic inflammatory skin disease that tends to occur in areas with a lot of sebum secretion (head, forehead, armpits, etc.). Erythema (red spots) and thin scales (dandruff) appear frequently. It tends to appear within the first 3 months of life and between the ages of 40 and 70, and is a very common disease, especially occurring in 3-5% of adult males.

상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출 용매를 이용하여 추출되며, 추출 후, 0.1몰 염산 에탄올 용액을 이용한 속실렛 정제와 65% 에탄올 수용액을 이용하여 정제된 것이다.The extract is extracted using an extraction solvent selected from the group consisting of water, alcohols having 1 to 6 carbon atoms, and mixtures thereof, and after extraction, Soxhlet purification using 0.1 mol hydrochloric acid ethanol solution and 65% ethanol solution purification it has become

상기 조성물은 대장균(Escherichia coil), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 칸디다 알비칸스(Candida albicans) 및 진균(Aspergillus brasiliensis)로 이루어진 군으로부터 선택되는 균을 효과적으로 제거하여 항균 및 방부 효과를 갖는 것이다.The composition effectively removes bacteria selected from the group consisting of Escherichia coil, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans and fungi (Aspergillus brasiliensis) to provide antibacterial and antiseptic properties will have an effect.

상기 조성물은 자유 라디칼 소거능 및 MDA(Malondialdehyde) 소거능을 통해 항산화 활성을 가지는 것이다.The composition has antioxidant activity through free radical scavenging ability and MDA (malondialdehyde) scavenging ability.

상기 조성물은 티로시나아제 저해능 및 멜라닌 생성 억제능을 통해 미백 효과를 나타내는 것이다.The composition exhibits a whitening effect through tyrosinase inhibitory ability and melanin production inhibitory ability.

상기 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물은 건조한 인진쑥 및 올리브를 분쇄한 분쇄물을 물, 에탄올, 메탄올 등과 같은 탄소수 1 내지 6의 알코올과 같은 극성 용매 또는 알코올과 물의 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 혼합 용매로 용출할 수 있으며, 보다 상세하게는 추출 용매로 물을 이용할 수 있다. 이때, 추출 온도는 10℃ 내지 100℃, 바람직하게는 80℃ 내지 90℃에서 추출한 추출물일 수 있다. The Injin mugwort extract and the olive extract are mixed with a polar solvent such as water, ethanol, and alcohol having 1 to 6 carbon atoms, such as water, ethanol, methanol, or the like, or a mixture of alcohol and water in a mixing ratio of 1:0.1 to 1:10. It may be eluted with a solvent, and more specifically, water may be used as an extraction solvent. At this time, the extraction temperature may be 10 ℃ to 100 ℃, preferably the extract extracted at 80 ℃ to 90 ℃.

상기 추출 용매는 시료의 중량 기준으로 2 내지 50배를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 10 내지 20배이다. 추출을 위해 시료는 추출 용매에서 침출을 위해 1 내지 72시간 동안 방치될 수 있으며, 상세하게는 4 내지 6시간 동안 방치될 수 있다.The extraction solvent may be used in an amount of 2 to 50 times, preferably 10 to 20 times, based on the weight of the sample. For extraction, the sample may be left for 1 to 72 hours for leaching in the extraction solvent, and specifically for 4 to 6 hours.

여과된 추출물을 진공 회전 농축기로 감압 농축하여 수득한 결과물일 수 있으나, 본 발명의 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물인 한, 이에 제한되지 않고, 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이의 조정제물 또는 정제물을 모두 포함한다.It may be a result obtained by concentrating the filtered extract under reduced pressure with a vacuum rotary concentrator, but is not limited thereto, as long as it is a cosmetic composition comprising the Injin mugwort extract and olive extract of the present invention as an active ingredient, the extract, a diluted or concentrated solution of the extract; All of the dried product obtained by drying the extract, and a crude product or purified product thereof are included.

이때 희석 용매로는 부틸렌글라이콜, 부탄다이올, 프로판다이올이 적합하다.At this time, as the dilution solvent, butylene glycol, butanediol, and propanediol are suitable.

상기 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물은 혹돌잎(Lithophyllum okamurai) 추출물을 추가로 포함한다.The antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition further comprises a Lithophyllum okamurai extract.

혹돌잎(Lithophyllum okamurai)은 홍조식물로 두께는 0.6mm 정도 되고, 작은 돌이나 그 밖의 물체 표면을 싸며, 혹 모양의 돌기를 내고 자란다. 온몸은 석회질로 덮여 있고 분홍색 또는 붉은색을 띤다. 원주상을 한 돌기가 가지에 해당되고, 그 끝은 둥글며 표면은 매끈하다. 한국에서는 제주와 남해안에서 채집된다.Lithophyllum okamurai (Lithophyllum okamurai) is a red plant with a thickness of about 0.6 mm, and grows by enveloping the surface of small stones or other objects and producing lump-shaped projections. The whole body is covered with calcareous and has a pink or red color. The columnar protrusion corresponds to the branch, and the tip is round and the surface is smooth. In Korea, it is collected from Jeju and the southern coast.

또한, 상기와 같은 해조류에 함유되어 있는 다당류는 알긴산(Alginic Acid)과 후코이단(Fucoidan)으로, 상기 알긴산(Alginic Acid)은 식이섬유의 일종으로 세포 내 신진대사를 활발하게 하여 피부와 모발을 건강하게 하며, 피부 속 콜라겐이나 엘라스틴과 같은 탄력세포의 형성을 도운다. 피부미네랄이라 불리는 아연이 풍부하여 여드름과 뾰루지와 같은 피부트러블을 없애는데 도움이 된다.In addition, the polysaccharides contained in seaweed as described above are alginic acid and fucoidan, and the alginic acid is a type of dietary fiber and activates intracellular metabolism to keep skin and hair healthy. It helps in the formation of elastic cells such as collagen and elastin in the skin. It is rich in zinc, which is called a skin mineral, which helps to get rid of skin problems such as acne and pimples.

상기 후코이단(Fucoidan)은 해조류가 파도, 햇빛으로부터 스스로를 보호하기 위하여 분비하는 물질로서 매우 탁월한 천연 보습제 역할을 하며, 최근 연구를 통해 후코이단은 세포의 활성을 도와 자외선으로부터 피부를 보호하는 효과가 확인되었다.The fucoidan (Fucoidan) is a substance secreted by seaweed to protect itself from waves and sunlight, and acts as a very excellent natural moisturizer. Through a recent study, fucoidan has been confirmed to have the effect of protecting the skin from UV rays by helping cells activate. .

상기 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물에 혹돌잎 추출물을 혼합하여 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물을 제조하며, 상기 혼합 사용에 따른 상승효과에 따라 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물만 사용한 경우에 비해 우수한 항균, 항산화 및 항염증 효과를 낼 수 있다.The antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition is prepared by mixing the Injin mugwort extract and the olive extract with the Hokdol leaf extract. According to the synergistic effect of the mixed use, superior antibacterial, It may have antioxidant and anti-inflammatory effects.

바람직하게 상기 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물은 인진쑥 추출물 100 중량부에 대하여, 올리브 추출물 100 중량부, 혹돌잎 추출물 40 내지 60 중량부로 포함할 수 있다. 상기 범위에 의하는 경우 각 추출물의 상호 작용에 의한 상승효과로 임계적 의의가 있는 정도의 상승효과가 발현되며, 상기 범위를 벗어나는 경우 상승효과가 급격히 저하되거나 거의 없게 된다.Preferably, the antibacterial, antioxidant, whitening, and anti-inflammatory cosmetic composition may include 100 parts by weight of olive extract and 40 to 60 parts by weight of extract of Hokdol leaf based on 100 parts by weight of Injin mugwort extract. In the case of the above range, a synergistic effect of critical significance is expressed as a synergistic effect due to the interaction of each extract, and when out of the above range, the synergistic effect is rapidly reduced or almost absent.

보다 바람직하게 본 발명에서는 항균, 항산화 및 항염증 효과 증진 및 기호성 향상을 위해, 검인 추출물 및 무루자(無漏子) 추출물을 추가로 포함할 수 있다.More preferably, in the present invention, in order to promote antibacterial, antioxidant and anti-inflammatory effects and to improve palatability, a gum extract and Muruza extract may be additionally included.

상기 검인은 가시연꽃의 종자로, 가시연꽃의 종자 성숙기에 채취하여 종자만을 꺼내어 햇볕에 말린 것을 의미한다. 상기 가시연꽃(Euryale ferox Salisb.)은 늪이나 연못에 자라는 일년초로 가시가 있으며 수염뿌리가 많이 나온다. 종자가 발아해서 나오는 잎은 작으나 점차 큰 잎이 나오며 표면에 주름이 진다. 꽃은 7 내지 8월 가시가 돋는 긴 꽃자루가 자라서 끝에 1개 달린다. 열매는 액과로 둥글며 종자는 육질 종의에 싸인다.The seal refers to the seeds of the prickly lotus flower, which are collected during the seed maturity period of the prickly lotus flower, and only the seeds are taken out and dried in the sun. The thorn lotus (Euryale ferox Salisb.) is an annual plant that grows in swamps or ponds and has thorns and many beard roots. The leaves that come out from the germination of seeds are small, but gradually large leaves come out and the surface is wrinkled. A flower grows from July to August with a long peduncle with thorns and hangs one at the end. Fruits are axillary, round, and seeds are wrapped in fleshy species.

상기 무루자는 소철(Cycas revoluta Thunb.)의 익은 종자 말린 것을 의미한다. 상기 소철은 공원이나 정원에 조경수로 식재하는 상록성 떨기나무 또는 작은큰키나무로 높이 1 내지 4m, 지름 20 내지 30cm이다. 줄기 껍질은 잎자국으로 둘러싸여 자란다. 잎은 줄기 끝에 모여 달리고 1회 깃꼴겹잎이며 작은잎은 선형이며 길이 8 내지 20cm, 폭 5 내지 8cm, 가장자리가 밋밋하며 약간 뒤로 말려 있다. 꽃은 6 내지 8월에 암수딴그루에 핀다. 수꽃차례는 줄기 끝에 곧게 서고 원기둥 모양이며 길이 50 내지 60cm, 폭 10 내지 13cm, 많은 비늘조각으로 되며 비늘조각 안에 수술대가 없는 꽃밥이 붙어 있다. 암꽃차례는 원줄기 끝에 둥글게 모여 달리며, 자루에 2 내지 8개의 배주가 어긋나서 붙고 위쪽에 황갈색 털이 빽빽하게 나 있다. 열매는 구과이며, 10월에 익는데 씨는 길이 4cm쯤이고, 붉은색이다. 우리나라 남부지방, 제주도 등에서 식재하며, 일본, 중국, 타이완 등 자생지에서는 해안가에 분포한다. 관상용으로 식재하고, 열매를 식용, 약용한다.The Muruza means dried seeds of cycad (Cycas revoluta Thunb.). The cycad is an evergreen shrub or small tall tree planted as a landscape tree in a park or garden, and has a height of 1 to 4 m and a diameter of 20 to 30 cm. The stem bark grows surrounded by leaf marks. The leaves are gathered at the tip of the stem, pinnately compound leaves once, and the small leaves are linear, 8 to 20 cm long, 5 to 8 cm wide, with flat edges and slightly curled backwards. Flowers bloom in the male and female trees in June to August. The male inflorescence stands upright at the end of the stem and is cylindrical, 50 to 60 cm long, 10 to 13 cm wide, and has many scale pieces. The female inflorescence is gathered and hung at the end of the main stem, and 2 to 8 ovules are alternately attached to the stem, and yellowish brown hairs are densely formed on the upper part. The fruits are coniferous, ripen in October, and the seeds are about 4cm long and red. It is planted in the southern regions of Korea and Jeju Island, and is distributed along the coast in its native areas such as Japan, China, and Taiwan. It is planted for ornamental purposes, and its fruits are edible and medicinal.

상기 검인 추출물 및 무루자 추출물을 추가로 포함할 경우, 복합 추출물로 구성함에 따라, 인진쑥 추출물, 올리브 추출물 및 혹돌잎 추출물만을 혼합으로 사용하는 경우에 비해, 항산화 및 항염증 효과를 동등 또는 상승시키고, 더 나이가 기호성 높은 조성물로 제공을 가능하게 한다.When the gum extract and Muruja extract are additionally included, the antioxidant and anti-inflammatory effects are equal to or increased compared to the case of using only the Injin mugwort extract, the olive extract, and the Hokdol leaf extract as a composite extract, The older makes it possible to provide a more palatable composition.

바람직하게 본 발명의 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물은 인진쑥 추출물 100 중량부에 대하여, 올리브 추출물 100 중량부, 혹돌잎 추출물 40 내지 60 중량부, 검인 추출물 10 내지 20 중량부 및 무루자 추출물 10 내지 20 중량부로 포함할 수 있다. 상기 범위에 의하는 경우 세포독성이 낮아 상대적으로 높은 농도에서 안정적으로 사용할 수 있는 장점이 있으며, 쑥 및 해조류 특유의 이취로 인한 떨어지는 기호도를 상승시킬 수 있다.Preferably, the cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory of the present invention contains 100 parts by weight of olive extract, 40 to 60 parts by weight of Hokdol leaf extract, 10 to 20 parts by weight of gum extract, and 10 to 20 parts by weight of Gumin extract, based on 100 parts by weight of Injin mugwort extract. 10 to 20 parts by weight of the extract may be included. According to the above range, there is an advantage that it can be used stably at a relatively high concentration due to low cytotoxicity, and it is possible to increase the falling preference due to the peculiar odor of mugwort and seaweed.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌증, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형, 수중유(O/W)형 또는 유중수(W/O)형의 제형 또는 연고로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, a solution, suspension, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing clenjeung, oil , powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, and spray may be formulated, but are not limited thereto. More specifically, flexible lotion, nourishing lotion, nourishing cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder formulation, oil-in-water (O/W) type or water-in-oil It may be prepared as a (W/O) type formulation or ointment.

또한, 필요에 따라 기능적 물질, 예컨대 미백제, 보습제, 항염증제, 항균제, 비타민, 자외선 차단제, 항생제, 여드름 방지제, 향수, 염료가 포함될 수도 있으며, 이들은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 양으로 본 발명에 따른 화장용 조성물에 포함될 수 있다.In addition, if necessary, functional substances such as whitening agents, moisturizing agents, anti-inflammatory agents, antibacterial agents, vitamins, sunscreen agents, antibiotics, anti-acne agents, perfumes, dyes may be included, and these may be included in an amount commonly used in the cosmetic field, and the cosmetic according to the present invention may be included in the composition.

본 발명의 다른 일 실시예에 따른 토너는 상기 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물을 유효성분으로 포함하여 제조한 것이다.The toner according to another embodiment of the present invention is prepared by including the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition as an active ingredient.

본 발명의 다른 일 실시예에 따른 에멀전은 상기 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물을 유효성분으로 포함하여 제조한 것이다.The emulsion according to another embodiment of the present invention is prepared by including the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition as an active ingredient.

상기 피부학적으로 허용된 담체는 정제수, 오일, 왁스, 지방산, 지방산 알코올, 지방산 에스테르, 계면활성제, 흡습제, 증점제, 항산화제, 점도 안정화제, 킬레이팅제, 완충제, 방부제, 저급 알코올 등이 포함될 수 있지만, 이에 한정되는 것은 아니며, 그 종류와 농도는 다양하고, 당업자가 본 발명의 범위 내에서 변경할 수 있는 부분을 포함한다.The dermatologically acceptable carrier may include purified water, oil, wax, fatty acid, fatty acid alcohol, fatty acid ester, surfactant, moisture absorbent, thickener, antioxidant, viscosity stabilizer, chelating agent, buffer, preservative, lower alcohol, etc. However, the present invention is not limited thereto, and the types and concentrations thereof vary, and include parts that those skilled in the art can change within the scope of the present invention.

본 발명의 화장료 조성물로부터 제조되는 화장품은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다.Cosmetics prepared from the cosmetic composition of the present invention can be prepared in the form of general emulsified formulations and solubilized formulations. Cosmetics with emulsified formulations include nutritional lotions, creams, and essences, and solubilized cosmetics include softened lotions.

상기 화장품은 본 발명의 추출물 이외에도 피부학적으로 허용된 매질 또는 기제를 함유함으로써 당업계에서 통상적으로 사용되는 국소 적용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.The cosmetic may be prepared in the form of an adjuvant that can be applied topically or systemically commonly used in the art by containing a dermatologically acceptable medium or base in addition to the extract of the present invention.

적합한 화장품의 제형으로는 예를 들면, 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱(conceal stick)의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.Suitable cosmetic formulations include, for example, solutions, gels, solid or kneaded dry products, emulsions obtained by dispersing an oily phase in an aqueous phase, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic (liposomes), non-ionic It may be provided in the form of a vesicular dispersant, cream, skin, lotion, powder, ointment, spray or in the form of a cone stick. In addition, it may be prepared in the form of a foam or an aerosol composition further containing a compressed propellant.

본 발명의 화장료 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 수렴화장수, 유연화장수, 영양화장수, 각종 크림, 에센스, 팩, 파운데이션 등과 같은 화장품류와 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트 또는 미용액 등이 있다. 구체적인 제형으로서는 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징 폼, 클렌징로션, 클 렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 또는 아이섀도 등의 제형을 포함한다.Products to which the cosmetic composition of the present invention can be added include, for example, cosmetics such as astringent lotion, softening lotion, nutrient lotion, various creams, essence, pack, foundation, etc. and cleansing, face wash, soap, treatment or liquid cosmetics etc. Specific formulations include skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisture lotion, nourishing lotion, massage cream, nourishing cream, moisture cream, hand cream, essence, nourishing essence, pack, soap, shampoo, cleansing foam. , cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, body cleanser, emulsion, press powder, loose powder, or eye shadow formulations.

본 발명의 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물에 의하면 항산화, 미백 및 항염증 활성을 통해, 피부 노화, 피부 주름, 미백 효과 및 피부 염증을 예방 및 개선할 수 있으며, 항균활성을 통해 화장품 또는 그에 포함되는 원료에 우수한 방부력을 제시해 줄 수 있다.According to the cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory comprising the extract of Injin mugwort extract and olive extract of the present invention as active ingredients, it prevents skin aging, skin wrinkles, whitening effect and skin inflammation through antioxidant, whitening and anti-inflammatory activities. And it can be improved, and it is possible to present excellent preservative power to cosmetics or raw materials contained therein through antibacterial activity.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 조성물을 농도별로 처리했을 때 DPPH 자유 라디칼 소거능에 대한 실험 결과이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 조성물을 농도별로 처리했을 때 MDA(Malondialdehyde) 소거능에 대한 실험 결과이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 조성물을 농도별로 처리했을 때 티로시나아제 소거능에 대한 실험 결과이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 조성물을 농도별로 처리했을 때 멜라닌 생성량에 대한 실험 결과이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 조성물의 일산화질소 및 프로스타글란딘의 소거능에 대한 실험 결과이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 조성물을 농도별로 처리했을 때 염증성 사이토카인의 양을 비교한 그래프이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 조성물을 농도별로 처리했을 때 인터루킨-6의 양을 비교한 그래프이다.
1 is an experimental result of DPPH free radical scavenging activity when the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory composition according to an embodiment of the present invention is treated by concentration.
2 is an experimental result of MDA (malondialdehyde) scavenging ability when the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory composition according to an embodiment of the present invention is treated by concentration.
3 is an experimental result for tyrosinase scavenging ability when the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory composition according to an embodiment of the present invention is treated by concentration.
4 is an experimental result for the amount of melanin produced when the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory composition according to an embodiment of the present invention is treated by concentration.
5 is an experimental result on the scavenging ability of nitric oxide and prostaglandins of the composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory according to an embodiment of the present invention.
6 is a graph comparing the amount of inflammatory cytokines when the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory composition according to an embodiment of the present invention is treated by concentration.
7 is a graph comparing the amount of interleukin-6 when the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory composition according to an embodiment of the present invention is treated by concentration.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail so that those of ordinary skill in the art can easily carry out the present invention. However, the present invention may be embodied in several different forms and is not limited to the embodiments described herein.

[제조예 1: 추출물의 제조][Preparation Example 1: Preparation of extract]

1. 인진쑥 추출물의 제조One. Preparation of Injin Mugwort Extract

인진쑥을 세척하고 건조한 뒤 이를 분쇄하였다. 상기 분쇄물을 물에 혼합하고 이를 6시간 동안 80 내지 90℃를 유지하고, 이를 냉각시킨 뒤 와트만 여과지로 여과한 후 그 여액을 70℃에서 감압농축 하여 1차 인진쑥 추출물 파우더를 수득 하였다. 이 인진쑥 추출물 파우더를 속실렛 장치에 넣고 0.1몰 염산 에탄올 수용액으로 환류 시켜 얻은 1차 정제 인진쑥 추출물 파우더를 다시 50℃로 가온 된 65% 에탄올 수용액에 넣어 용해 후 불순물은 와트만 여과지로 여과하였다. 여액은 10℃ 이하로 냉각하여 재결정된 물질을 60℃도에 진공건조 하여 최종적인 인진쑥 추출물(AE)을 제조하였다. After washing and drying Injin mugwort, it was pulverized. The pulverized product was mixed with water, maintained at 80 to 90° C. for 6 hours, cooled, filtered with Whatman filter paper, and the filtrate was concentrated under reduced pressure at 70° C. to obtain a primary Injin mugwort extract powder. This Injin mugwort extract powder was put in a Soxhlet apparatus and refluxed with 0.1 mol aqueous hydrochloric acid ethanol solution, and then the first purified Injin mugwort extract powder was again put in a 65% ethanol aqueous solution heated to 50° C. The filtrate was cooled to 10° C. or less, and the recrystallized material was vacuum-dried at 60° C. to prepare a final Injin mugwort extract (AE).

2. 올리브 추출물의 제조2. Preparation of Olive Extract

상기 인진쑥 추출물(AE)과 동일한 방법으로 올리브 추출물(OE)을 제조하였다.An olive extract (OE) was prepared in the same manner as the Injin mugwort extract (AE).

3. 인진쑥 추출물과 올리브 추출물의 혼합물 제조3. Preparation of a mixture of wormwood extract and olive extract

상기 제조된 인진쑥 추출물(AE) 및 올리브 추출물(OE)을 인진쑥 추출물(AE), 올리브 추출물(OE) 및 프로판다이올(Propanediol) 0.9/0.1/9의 비율로 혼합하여 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)을 제조하였다.Injin mugwort extract (AE) and olive extract (OE) prepared above were mixed with Injin mugwort extract (AE), olive extract (OE), and propanediol (Propanediol) at a ratio of 0.9/0.1/9 to effectively use Injin mugwort extract and olive extract A cosmetic composition (MX1) for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory including as a component was prepared.

[실험예 1: 조성물의 항균력에 의한 미생물의 생육 억제 효과 실험][Experimental Example 1: Experiment on the effect of inhibiting the growth of microorganisms by the antibacterial activity of the composition]

인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)에 대한 항균력을 측정하기 위해, 화장품 업계에서 주로 평가하는 세균 3종과 진균 2종을 표 1과 같이 선정하였으며, 여드름, 무좀, 비듬을 유발하는 균주를 표 2와 같이, 그리고 피부상 재균 뿐만 아니라 비뇨기과 및 성 관련 질환 원인 균주를 표 3과 같이 선정하여 시험을 진행하였다.In order to measure the antibacterial activity of a cosmetic composition (MX1) for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory containing ginseng mugwort extract and olive extract as active ingredients, 3 types of bacteria and 2 types of fungi, which are mainly evaluated in the cosmetic industry, are listed in Table 1 and They were selected together, and strains causing acne, athlete's foot, and dandruff were selected as shown in Table 2, and strains causative of urology and sexually related diseases as well as bacterial bacteria on the skin were selected as shown in Table 3 and tested.

균주명strain name strain numberstrain number 세균Germ Escherichia coilEscherichia coil ATCC 8739ATCC 8739 Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus ATCC 6538ATCC 6538 Pseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosa ATCC 9027ATCC 9027 진균fungus Candida albicansCandida albicans ATCC 10231ATCC 10231 Aspergillus brasillensisAspergillus brasillensis ATCC 16404ATCC 16404

균주명strain name strain numberstrain number Propionibacterium acnesPropionibacterium acnes ATCC 6919ATCC 6919 Malassezia furfurMalassezia furfur ATCC 14521ATCC 14521 Trichophyton mentagrophytesTrichophyton mentagrophytes ATCC 9533ATCC 9533

균주명strain name strain numberstrain number Gardnerella vaginalisGardnerella vaginalis ATCC 14019ATCC 14019 Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae ATCC 19424ATCC 19424 Chlamydia trachomatisChlamydia trachomatis ATCC VR-885ATCC VR-885 Ureaplasma urealyticumUreaplasma urealyticum ATCC 27618ATCC 27618 Ureaplasma parvumUreaplasma parvum ATCC 27815ATCC 27815 Mycoplasma genitaliumMycoplasma genitalium ATCC 33530ATCC 33530 Mycoplasma hominisMycoplasma hominis ATCC 23114ATCC 23114 Trichomonas vaginalisTrichomonas vaginalis ATCC 30001ATCC 30001 Treponema phagedenisTreponema phagedenis ATCC 27807ATCC 27807 Mycobacterium smegmatisMycobacterium smegmatis ATCC 19420ATCC 19420

선정된 균주를 이용하여 항균력을 측정하기 위해, MIC test를 진행하였다.In order to measure the antimicrobial activity using the selected strain, the MIC test was performed.

MIC는 minimal inhibitory concentration의 약자로서 세균의 발육을 억제할 수 있는 최소한의 항균제 농도를 의미한다. MIC is an abbreviation of minimal inhibitory concentration and means the minimum concentration of an antimicrobial agent that can inhibit the growth of bacteria.

시험을 위해 세균은 2×107 CFU/mL, 진균은 2×106 CFU/mL로 준비한다. Microtube에 시험하고자 하는 시료를 세균용, 진균용 따로 담아 세균용은 NB(nutrient broth)로 진균용은 PDB(potato dextrose broth)를 담아 확실히 섞어준다. 96 웰 플레이트의 맨 위 칸에 준비한 시료를 0.1 mL씩 넣어준다 (세균용과 진균용을 구분하여 넣어준다). For the test, prepare 2×10 7 CFU/mL for bacteria and 2×10 6 CFU/mL for fungi. Put the sample to be tested in the microtube separately for bacteria and fungi, and mix well with NB (nutrient broth) for bacteria and PDB (potato dextrose broth) for fungi. Add 0.1 mL of each prepared sample to the top compartment of the 96-well plate (separately insert for bacteria and fungi).

상기에서 준비한 균주를 96 웰 플레이트 전체에 0.1 mL씩 채운 후 맨 위칸부터 1/2씩 희석해준다. 이 때 아래칸은 시료와 희석하지 않고 균액만 두어 blank로 사용한다. 모든 과정이 끝나면 96 웰 플레이트를 37℃에서 배양한다. 결과 평가는 다음과 같다. 세균 3종의 확인은 18 ~ 24시간, C. albicans의 경우 32 ~ 56시간, A. brasillensis의 경우 36 ~ 72시간 후에 꺼내어 육안으로 혼탁도 여부를 측정하여 균의 성장 여부를 확인한다. 이 때, 최소저해농도는 혼탁도가 사라지는 시점의 농도로 설정하여 표기한다.After filling the entire 96-well plate with 0.1 mL of the strain prepared above, dilute by 1/2 from the top column. At this time, the lower compartment is used as a blank by placing only the bacterial solution without dilution with the sample. When all steps are completed, the 96-well plate is incubated at 37°C. The evaluation of the results is as follows. Three types of bacteria are checked after 18 to 24 hours, for C. albicans , after 32 to 56 hours, and for A. brasillensis , after 36 to 72 hours, and visually measure the turbidity to confirm the growth of the bacteria. At this time, the minimum inhibitory concentration is indicated by setting the concentration at the time when the turbidity disappears.

결과는 하기 표 4 내지 표 6과 같다. 표 4에 따르면, 본 조성물은 시험 균주 5종에 대해 0.5% ~ 1%의 농도에서 최소저해농도를 보임으로써, 균의 종류와 관계없이 균일한 항균력을 나타내는 것을 확인하였다. The results are shown in Tables 4 to 6 below. According to Table 4, the present composition showed a minimum inhibitory concentration at a concentration of 0.5% to 1% for 5 types of test strains, thereby confirming that it exhibits a uniform antimicrobial activity regardless of the type of bacteria.

No.No. SampleSample E.coliE. coli S.aureusS. aureus P.aeruginosaP. aeruginosa C.albicansC. albicans A.brasillensisA. brasillensis 1One 1,2-HD1,2-HD 1.01.0 2.02.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 22 MX1MX1 0.50.5 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0

(단위: %)(unit: %)

No.No. SampleSample P.acnesP.acnes M.furfurM.furfur T.MentagrophytesT. Mentagrophytes 1One 1,2-HD1,2-HD 2.02.0 2.02.0 2.02.0 22 MX1MX1 1.01.0 1.01.0 1.01.0

(단위: %)(unit: %)

No.No. Strainstrain MIC valueMIC value 1One Gardnerella vaginalisGardnerella vaginalis 1.01.0 22 Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae 0.50.5 33 Chlamydia trachomatisChlamydia trachomatis 1.01.0 44 Ureaplasma urealyticumUreaplasma urealyticum 1.01.0 55 Ureaplasma parvumUreaplasma parvum 1.01.0 66 Mycoplasma genitaliumMycoplasma genitalium 10.010.0 77 Mycoplasma hominisMycoplasma hominis 1.01.0 88 Trichomonas vaginalisTrichomonas vaginalis 0.50.5 99 Treponema phagedenisTreponema phagedenis 1.01.0 1010 Mycobacterium smegmatisMycobacterium smegmatis 0.50.5

(단위: %)(unit: %)

상기 표 5에 따르면, 본 조성물은 여드름, 무좀, 비듬을 유발하는 각각의 균주에 대해 1%의 농도에서 최소저해농도를 보였으며, 표 6에 따르면, 본 조성물은 비뇨기과 및 성 관련 질환 원인균주 각각에 대해서도 0.5% ~ 1.0%의 최소저해농도를 보임으로써, 피부상재균 뿐 아니라 다양한 병원성 균주에 대해서도 균일한 농도에서 항균력을 발휘하는 것을 확인하였다.According to Table 5, the composition showed the minimum inhibitory concentration at a concentration of 1% for each strain causing acne, athlete's foot, and dandruff. By showing a minimum inhibitory concentration of 0.5% to 1.0% for

상기 결과들은 화장품 업계에서 방부제로 가장 널리 쓰이는 1,2-hexanediol과 비교하여 평가하였으며, 대부분의 시험 균주들에 대해 1,2-hexanediol의 절반 정도 농도에서 동일한 수준의 항균력이 확인되었다. The above results were evaluated in comparison with 1,2-hexanediol, which is most widely used as a preservative in the cosmetic industry, and the same level of antibacterial activity was confirmed at about half the concentration of 1,2-hexanediol for most of the test strains.

따라서, 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물은 넓은 범위에서 우수한 항균력을 발휘함을 알 수 있다.Therefore, it can be seen that the cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory containing the extract of Injin mugwort extract and olive extract as active ingredients exhibits excellent antibacterial activity in a wide range.

[실험예 2: 조성물을 포함하는 화장품 제형의 방부력 효과 시험][Experimental Example 2: Test of antiseptic effect of cosmetic formulations containing compositions]

인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)을 포함하는 기본 제형 2종에 대한 방부력을 측정하기 위해, 화장품 업계에서 평가하는 세균 3종과 진균 2종을 상기 표 1과 같이 선정하여 방부력 시험을 진행하였다. 방부력 시험을 진행하기 위해 제조한 기본 제형 2가지는 하기 제형 예 1 및 제형 예 2와 같다.In order to measure the preservative power of two basic formulations including antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition (MX1) containing ginseng mugwort extract and olive extract as active ingredients, three types of bacteria evaluated by the cosmetic industry and Two types of fungi were selected as shown in Table 1, and a preservative force test was performed. The two basic formulations prepared to proceed with the preservative test are the same as Formulation Example 1 and Formulation Example 2 below.

제형 예 1. 토너Formulation Example 1. Toner

상기 토너를 하기 표 7의 조성 성분 및 조성비에 따라 통상적인 방법으로 제조하였다.The toner was prepared in a conventional manner according to the composition components and composition ratios in Table 7 below.

원료Raw material 함량(%)content(%) AA Disodium EDTADisodium EDTA 0.020.02 Cirtic acidcitric acid 0.030.03 Sodium citratesodium citrate 0.100.10 GlycerinGlycerin 2.002.00 WaterWater To 100To 100 BB PEG-60 Hydrogenated Casor OilPEG-60 Hydrogenated Casor Oil 0.100.10 PerfumePerfume 0.020.02 1,3-Butylene Glycol1,3-Butylene Glycol 2.002.00 CC MX1MX1 1.001.00

제형 예 2. 에멀전Formulation Example 2. Emulsion

상기 에멀전을 하기 표 8의 조성 성분 및 조성비에 따라 통상적인 방법으로 제조하였다.The emulsion was prepared in a conventional manner according to the composition components and composition ratios in Table 8 below.

원료Raw material 함량(%)content(%) AA Ammonium Acryloyldimethyltaurate/VP CopolymerAmmonium Acryloyldimethyltaurate/VP Copolymer 1.501.50 Caprylic/Capric TriglyceridesCaprylic/Capric Triglycerides 10.0010.00 BB Cetearyl Olivate/Sorbitan OlivateCetearyl Olivate/Sorbitan Olivate 5.005.00 WaterWater To 100To 100 CC MX1MX1 1.001.00

선정된 균주를 이용하여 방부력 시험을 진행하기 위해, 시험할 균주를 세균은 2×108 CFU/mL, 진균은 2×107 CFU/mL로 준비한다. 방부력을 평가하기 위한 시료를 정확하게 20.0g씩 멸균된 용기에 나누어 담는다. 이 때, 시료별로 시험 대상균의 수만큼 준비한다. 상기에서 준비한 접종 균을 20.0g씩 나누어 담은 용기에 0.2 mL씩 각각 접종한 후 접종 균액이 시료에 균일하게 분포할 수 있도록 잘 섞는다. 접종 후 25℃에서 4주 동안 배양하며, 매 1주 간격으로 시료 중 1g을 회수하여 희석액 9 mL에 혼합 후 단계 별 희석하여 생균수를 측정한다. 각 균 회수 시점 별 균감소는 아래 식에 따라 계산한다.In order to proceed with the antiseptic test using the selected strain, prepare the strain to be tested at 2×10 8 CFU/mL for bacteria and 2×10 7 CFU/mL for fungi. The sample for evaluating the preservative power is divided into sterilized containers by exactly 20.0 g. At this time, prepare as many as the number of test target bacteria for each sample. Inoculate 0.2 mL each in a container containing 20.0 g of the inoculated bacteria prepared above, and mix well so that the inoculated bacteria solution is uniformly distributed in the sample. After inoculation, incubate at 25°C for 4 weeks, collect 1 g of the sample at intervals of 1 week, mix it with 9 mL of diluent, and dilute step-by-step to measure the number of viable cells. The reduction in bacteria at each bacteria recovery time is calculated according to the formula below.

감소율: D0-DX/D0Х100(%)Decrease rate: D 0 -D X /D 0 Х100(%)

Log reduction: Log(D0)-Log(DX)Log reduction: Log(D 0 )-Log(D X )

D0: 접종균수 (CFU/g)D 0 : Number of inoculated bacteria (CFU/g)

DX: X주차에서 회수된 균수 (CFU/g)D X : Number of bacteria recovered at Week X (CFU/g)

판정 기준은 다음과 같다.The judging criteria are as follows.

[판정 기준][Criteria]

세균: 1주차에 99.9% 이상 감소 (Log reduction 3.0 이상), 이후 시험기간 동안 증식 없음Bacteria: Reduced by 99.9% or more in 1 week (Log reduction 3.0 or more), no growth during the test period thereafter

진균: 1주차에 90% 이상 감소 (Log reduction 1.0 이상), 이후 시험기간 동안 증식 없음Fungi: Reduced by more than 90% (Log reduction 1.0 or more) at the 1st week, no growth during the test period thereafter

결과는 하기 표 9 및 표 10과 같다. The results are shown in Tables 9 and 10 below.

0 d0 d 7 d7 d 14 d14 d 21 d21 d 28 d28 d BacteriaBacteria 2.36 x 106 2.36 x 10 6 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99% YeastYeast 1.50 x 105 1.50 x 10 5 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99% FungiFungi 1.93 x 105 1.93 x 10 5 99.98%99.98% 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99%

0 d0 d 7 d7 d 14 d14 d 21 d21 d 28 d28 d BacteriaBacteria 2.36 x 106 2.36 x 10 6 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99% YeastYeast 1.50 x 105 1.50 x 10 5 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99% FungiFungi 1.93 x 105 1.93 x 10 5 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99% 99.99%99.99%

상기 표 9 및 표 10에 따르면, 본 조성물을 포함하는 토너와 에멀전은 시험균주 5종에 대해 1주차 통과 기준에 부합하는 감소율을 보였으며, 이후 4주차까지 증식이 없는 것을 확인함으로써 제형의 형태나 균의 종류와 관계없이 고른 방부력을 나타내는 것을 알 수 있다.According to Tables 9 and 10, the toner and emulsion containing the present composition showed a reduction rate that met the pass criteria for the first week for 5 types of test strains, and thereafter, by confirming that there was no growth until the fourth week, the form of the formulation or It can be seen that it shows even antiseptic power regardless of the type of bacteria.

[실험예 3: 조성물의 항산화 효과 시험][Experimental Example 3: Antioxidant effect test of composition]

인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)의 항산화능을 확인하기 위해 자유 라디칼 소거능 평가 및 MDA(Malondialdehyde) 생성 감소능 평가를 하였다.In order to confirm the antioxidant activity of the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition (MX1) containing ginseng mugwort extract and olive extract as active ingredients, free radical scavenging activity and MDA (malondialdehyde) reduction activity were evaluated.

1. DPPH 자유 라디칼 소거능 평가 1. Evaluation of DPPH free radical scavenging ability

10 mg DPPH를 100 mL 메탄올(MeOH)에 용해시켜 100 ㎍/mL가 되도록 하였다. 본 조성물은 200 mg을 10 mL의 MeOH에 용해시킴으로써 제조한 후 단계적으로 희석하여 준비하였으며, 양성대조군으로써 자유 라디칼 소거능이 뛰어나다고 잘 알려진 Ascorbic acid를 설정하였다.10 mg DPPH was dissolved in 100 mL methanol (MeOH) to make 100 μg/mL. This composition was prepared by dissolving 200 mg in 10 mL of MeOH, and was prepared by dilution in stages, and ascorbic acid, which is well known for its excellent free radical scavenging ability, was set as a positive control.

1 mL의 DPPH를 각각의 용액에 첨가하고 용액을 어둡게 유지하고 정확한 30분 동안 정치시켰다. 각 용액의 UV 흡수는 517 nm에서 기록하였다. 반응을 37 ℃에서 30 분간 진행시키고 517 nm에서 마이크로플레이트 판독기로 흡광도를 모니터링 하였다. % 라디칼 소거 활성(% RSA)은 DMSO 함유 대조군과 비교하여 결정하였다. 라디칼 소거 활성(%)으로서의 DPPH에 의한 자유 라디칼의 소거는 다음과 같이 계산하였으며, 그 결과를 하기 도 1에 나타내었다.1 mL of DPPH was added to each solution and the solution was kept dark and allowed to stand for exactly 30 minutes. The UV absorption of each solution was recorded at 517 nm. The reaction was allowed to proceed at 37 °C for 30 min and the absorbance was monitored at 517 nm with a microplate reader. The % radical scavenging activity (% RSA) was determined compared to the DMSO containing control. The scavenging of free radicals by DPPH as a radical scavenging activity (%) was calculated as follows, and the results are shown in FIG. 1 below.

% RSA = (대조 흡광도 - 흡광도) X 100 / 대조 흡광도% RSA = (Control Absorbance - Absorbance) X 100 / Control Absorbance

도 1에 따르면, 조성물을 0.05% 부터 2%까지 사용하는 경우, 즉 함량이 증가될수록 DPPH 자유 라디칼 소거능이 향상되는 것을 확인하였다. According to FIG. 1, when the composition is used from 0.05% to 2%, that is, it was confirmed that the DPPH free radical scavenging ability is improved as the content is increased.

상기 실험 결과를 통해, 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)의 경우, DPPH 라디칼 소거능이 우수하여 항산화에 의한 노화 억제 작용이 우수하다고 할 수 있다.According to the experimental results, in the case of the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition (MX1) containing Injin mugwort extract and olive extract as active ingredients, DPPH radical scavenging ability is excellent, so it can be said that the anti-aging effect by antioxidant is excellent. can

2. MDA(Malondialdehyde) 소거능 평가 2. MDA (malondialdehyde) scavenging ability evaluation

MDA는 리놀레인산의 최종 산물로, 지질과산화 수준과 비례하여 발생한다. 불포화지방산은 생체내에서 효소반응에 의해 일정방향으로 산화되어서 물과 탄산가스가 된다. 한편, 비효소적자동산화의 경우에는 불포화지방산의 이중결합에 분자상의 산소가 직접 결합한 물질이 생긴다. 이것을 과산화지질이라고 일컫는다. 이 물질은 분자의 일부에 쌍이 아닌 전자가 생긴 상태(자유 라디칼)이므로 불안정하고 반응성이 매우 높다. 따라서 생체 내에서 생긴 과산화지질은 생체막계에 상해를 주고, 효소, 단백, 호르몬, 비타민 등을 실활 혹은 변성시켜 세포의 기능저하나 괴사를 야기하는 부작용을 가지고 있다. 임상적으로는 노화, 동맥경화증, 혈전증, 당뇨병, 피부질환, 호흡기질환, 간질환 등과의 관련성에 관해서 보고되어 있다. 염증 반응에 의해 활성산소가 생기면 지질 과산화(lipid peroxidation)가 진행되어 MAA protein이 분비되어 cytokine과 면역 반응을 악화시킨다고 알려져 있다.MDA is the final product of linoleic acid and occurs in proportion to the level of lipid peroxidation. Unsaturated fatty acids are oxidized in a certain direction by an enzymatic reaction in a living body to become water and carbon dioxide gas. On the other hand, in the case of non-enzymatic autoxidation, a substance in which molecular oxygen is directly bonded to the double bond of an unsaturated fatty acid is produced. This is called lipid peroxide. This material is unstable and highly reactive because it is a state in which unpaired electrons are created in part of a molecule (free radicals). Therefore, the lipid peroxide generated in the living body has the side effect of causing damage to the biological membrane system, inactivation or denaturation of enzymes, proteins, hormones, vitamins, etc., causing cell function deterioration or necrosis. Clinically, the relationship between aging, arteriosclerosis, thrombosis, diabetes, skin disease, respiratory disease, liver disease, etc. has been reported. It is known that when reactive oxygen species are generated by an inflammatory reaction, lipid peroxidation proceeds and MAA protein is secreted, which worsens cytokine and immune responses.

상기 조성물을 정제수로 단계별로 희석하여 준비한 후, 4 mL의 시료와 1 mL의 13% 리놀레인산을 중탕교반기를 이용하여 섞어주었다. 이후 2.5 mL의 thiobarbituric acid(TBA) 용액을 넣은 후 10분 동안 반응시킨 후, 25℃에서 5000g로 10분 동안 원심분리 하여 상등액을 분리하고, 이를 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 532 nm에서 흡광도를 측정하였다.After preparing the composition by diluting it step-by-step with purified water, 4 mL of the sample and 1 mL of 13% linoleic acid were mixed using a water bath stirrer. Thereafter, 2.5 mL of thiobarbituric acid (TBA) solution was added, reacted for 10 minutes, and centrifuged at 25° C. at 5000 g for 10 minutes to separate the supernatant, and the absorbance was measured at 532 nm using a microplate reader. .

MDA 농도는 하기 식에 의해 계산하였으며, 그 결과를 하기 도 2에 나타내었다.The MDA concentration was calculated by the following formula, and the results are shown in FIG. 2 below.

MDA contents (%) = 100 [(Ac - As)/Ac]MDA contents (%) = 100 [(A c - A s )/A c ]

Ac : 대조군 흡광도A c : control absorbance

As : 시료군 흡광도A s : absorbance of sample group

도 2에 따르면, 상기 조성물을 0.01% 부터 2%까지 사용하는 경우, 즉 함량이 증가될수록 MDA 생성 저해능이 높아지는 것을 확인하였다. According to FIG. 2, it was confirmed that when the composition was used from 0.01% to 2%, that is, the MDA production inhibitory ability increased as the content increased.

따라서 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)은 체내에서 발생한 자유 라디칼에 의한 지질과산화를 감소시켜 세포를 보호해 줌으로써, 항산화에 의한 노화 억제 작용이 우수하다고 할 수 있다.Therefore, the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition (MX1) containing ginseng mugwort extract and olive extract as active ingredients reduces lipid peroxidation caused by free radicals in the body and protects cells, thereby inhibiting aging by antioxidants. It can be said that the action is excellent.

[실험예 4: 조성물의 미백 효과 시험][Experimental Example 4: Test for whitening effect of the composition]

인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)의 미백 효과를 확인하기 위해 티로시나아제 저해능 및 멜라닌 생성 억제능 평가를 하였다.In order to confirm the whitening effect of the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition (MX1) containing Injin mugwort extract and olive extract as active ingredients, tyrosinase inhibitory ability and melanin production inhibitory ability were evaluated.

1. 티로시나아제 생성 억제1. Inhibition of tyrosinase production

티로시나아제는 멜라닌 생합성에 관여하는 효소로써, 본 실험에서는 기질인 티로신과 티로시나아제의 작용에 의해 생성되는 DOPA quinone의 최대 흡수파장인 490 nm을 이용하여 티로시나아제의 활성 저해능을 평가하였다. 실험에 사용된 Mushroom tyrosinase와 L-tyrosine은 미국 시그마알드리치사로부터 상업적으로 구매하여 측정하였다.Tyrosinase is an enzyme involved in melanin biosynthesis, and in this experiment, the activity inhibiting ability of tyrosinase was evaluated using the maximum absorption wavelength of 490 nm of DOPA quinone produced by the action of substrate tyrosine and tyrosinase. Mushroom tyrosinase and L-tyrosine used in the experiment were purchased commercially from Sigma-Aldrich in the US and measured.

실험에 앞서 양성대조군인 Kojic acid와 상기 조성물은 0.05M sodium phosphate buffer(pH 6.5)를 이용하여 적절한 농도로 희석하여 준비하였다. 96 웰 플레이트의 각 웰에 0.1 M Sodium phosphate buffer(pH 6.5) 220 ㎕, 시료 20 ㎕, 2,000 U/mL mushroom tyroinase 20 ㎕를 넣은 후, 37℃에서 5분간 전배양을 하였다.Prior to the experiment, Kojic acid as a positive control and the composition were prepared by diluting to an appropriate concentration using 0.05M sodium phosphate buffer (pH 6.5). After putting 220 μl of 0.1 M sodium phosphate buffer (pH 6.5), 20 μl of sample, and 20 μl of 2,000 U/mL mushroom tyroinase into each well of a 96-well plate, pre-culture was performed at 37° C. for 5 minutes.

이후 1.5 mM L-tyrosine을 40 ㎕씩 넣고, 37℃에서 10분간 반응시킨 후 마이크로플레이트 판독기를 이용하여 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.Then, 40 μl of 1.5 mM L-tyrosine was added, and after reacting at 37° C. for 10 minutes, absorbance was measured at 490 nm using a microplate reader.

티로시나아제의 저해율은 하기 식에 의해 계산하였으며, 그 결과를 하기 도 3에 나타내었다.The inhibition rate of tyrosinase was calculated by the following formula, and the results are shown in FIG. 3 below.

Tyrosinase inhibition (%) = {1- (standard / 시료의 흡광도 ÷ blank 흡광도)} × 100Tyrosinase inhibition (%) = {1- (standard / absorbance of sample ÷ absorbance of blank)} × 100

도 3에 따르면, 상기 조성물을 0.01% 부터 2%까지 사용하는 경우, 즉 함량이 증가될수록 티로시나아제 활성 저해능이 높아지는 것을 확인하였다. 또한 양성대조군인 Kojic acid 100 ㎍/mL과 비교하였을 때, 상기 조성물 1%의 농도에서 티로시나아제 활성 저해율이 비슷한 수준인 것으로 확인되었다.According to FIG. 3, it was confirmed that when the composition was used from 0.01% to 2%, that is, the tyrosinase activity inhibitory ability increased as the content increased. In addition, it was confirmed that the inhibition rate of tyrosinase activity at a concentration of 1% of the composition was at a similar level when compared with 100 μg/mL of Kojic acid, a positive control.

따라서 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)은 티로시나아제 저해능을 통해 멜라닌 생성을 저해하여 피부 미백에 우수한 효과가 있음을 알 수 있다.Therefore, it can be seen that the antibacterial, antioxidant, whitening, and anti-inflammatory cosmetic composition (MX1) containing the extract of ginseng mugwort and olive extract as active ingredients inhibits melanin production through tyrosinase inhibitory ability, thereby having an excellent effect on skin whitening.

2. B16F10 멜라닌 형성 세포에 의한 멜라닌 생성 억제2. Inhibition of melanogenesis by B16F10 melanocytes

B16F10 멜라닌 형성 세포는 마우스에서 유래한 세포주이며, 멜라닌이라는 흑색 색소를 분비하는 세포이다. 본 시험예에 사용된 B16F10 멜라닌 형성 세포는 ATCC(American Type Culture Collection)로부터 분양 받아 사용하였다.B16F10 melanin-forming cells are a cell line derived from a mouse, and are cells that secrete a black pigment called melanin. B16F10 melanin-forming cells used in this test example were pre-owned from ATCC (American Type Culture Collection) and used.

B16F10 멜라닌 형성 세포를 6웰 플레이트에 각 웰당 2×106 cells/mL 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 35℃ 배양기에서 상기 조성물을 0.01% 부터 0.1%까지 각각 첨가하여 배양하였다. 72시간 배양 후 세포를 트립신-EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid)로 떼어내고, 세포 수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄(Lotan)의 방법을 변형하여 실시하였다. 셀 펠릿을 PBS(phosphate buffer saline)로 1회 세척한 후 균질화 버퍼액(50 mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) 1 mL를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리하여 얻은 세포 여액에 1N NaOH를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해하고, 마이크로플레이트 판독기로 405 nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. 비교 실험을 위해 멜라닌 생성 억제 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 알부틴을 양성 대조군으로 사용하였다.B16F10 melanin-forming cells were aliquoted in a 6-well plate at a concentration of 2×10 6 cells/mL per well, and the cells were attached thereto and then cultured by adding 0.01% to 0.1% of the composition in an incubator at 35° C., respectively. After culturing for 72 hours, the cells were removed with trypsin-EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid), the number of cells was counted, and the cells were recovered by centrifugation. Quantification of intracellular melanin was carried out by modifying Lotan's method. After washing the cell pellet once with PBS (phosphate buffer saline), 1 mL of homogenization buffer solution (50 mM sodium phosphate, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) is added and vortexed for 5 minutes to disrupt the cells. did. To the cell filtrate obtained by centrifugation, 1N NaOH was added to dissolve the extracted melanin, the absorbance of melanin was measured at 405 nm with a microplate reader, and then melanin was quantified to measure the melanin production inhibition rate (%) of the sample. For a comparative experiment, arbutin, a substance known to have an inhibitory effect on melanogenesis, was used as a positive control.

B16F10 멜라닌 형성 세포의 멜라닌 생성 저해율(%)은 하기식에 의해 계산하였으며, 그 결과를 하기 도 4에 나타내었다.The inhibition rate (%) of melanin production of B16F10 melanin-forming cells was calculated by the following formula, and the results are shown in FIG. 4 below.

멜라닌 생성 저해율(%) = {(A-B)/A} X 100Melanogenesis inhibition rate (%) = {(A-B)/A} X 100

도 4에 따르면, 조성물을 0.01% 부터 0.1%까지 사용하는 경우, 즉 함량이 증가될수록 멜라닌 생성 저해능이 높아지는 것을 확인하였다.According to Figure 4, when the composition is used from 0.01% to 0.1%, that is, it was confirmed that the higher the content, the higher the melanin production inhibitory ability.

따라서 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)은 티로시나아제 저해능을 통해 멜라닌 생성을 저해하여 피부 미백에 우수한 효과가 있음을 알 수 있다.Therefore, it can be seen that the antibacterial, antioxidant, whitening, and anti-inflammatory cosmetic composition (MX1) containing the extract of ginseng mugwort and olive extract as active ingredients inhibits melanin production through tyrosinase inhibitory ability, thereby having an excellent effect on skin whitening.

[실험예 5: 조성물의 항산화 및 항염증 효과 시험][Experimental Example 5: Antioxidative and anti-inflammatory effect test of composition]

인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)의 피부 염증 억제 및 개선 효과를 확인하기 위해 항염 효과 평가를 하였다.The anti-inflammatory effect was evaluated to confirm the anti-inflammatory, anti-oxidative, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition (MX1) containing ginseng mugwort extract and olive extract as active ingredients (MX1) to suppress and improve skin inflammation.

1. LPS(Lipopolysaccharide) 유도 Nitric oxide 및 PGE2 생성 억제능1. LPS (Lipopolysaccharide)-induced Nitric oxide and PGE 2 production inhibitory ability

상기 조성물의 항염 활성 효과를 확인해보기 위해 대식세포를 이용하여 일산화질소(NO) 및 프로스타글란딘 E2(PGE2)의 생성에 대한 효과를 알아보았다. To check the anti-inflammatory effect of the composition, macrophages were used to examine the effect on the production of nitric oxide (NO) and prostaglandin E 2 (PGE 2 ).

대식세포는 외부로부터 침입한 세균이나 곰팡이를 탐식하기 위해 세포막에서 활성산소를 내뿜어서 이물질을 용해시킨다. 그러나, 대식세포의 활성이 지속적으로 증가하여 이러한 반응이 빈번해지고 활성산소의 분비량이 많아지면 활성산소가 세포 밖까지 유출되어 다른 혈관벽이나 조직을 공격하여 병에 걸리게 된다. 또한 프로스타글란딘 E2 또한 대식세포의 활성에 의해 발생되는 염증성 인자이며, 혈관확장, 기관지확장, 위산억제, 염증, 발열 등의 증상을 일으킨다. 이러한 대식세포의 특징을 이용하여 어떠한 물질의 항염 효능을 측정할 수 있다. 실험에 사용된 세포는 RAW264.7(Mouse macrophage)이며, 37℃, 5%의 CO2, 10%의 Fetal bovine serum(FBS, Lonza), 50 ㎍/mL의 streptomycin(Sigma)을 첨가한 Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM, Invitrogen)에서 배양하였다. 세포를 96 웰 플레이트에 1×105 cells/well의 농도로 넣어준 후, 37℃, 5%의 CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 배양한 세포의 배지를 제거하고 시료를 처리한 새 배지로 교환한 후 37℃, 5%의 CO2 배양기에서 30분 동안 전배양 하였다. 30분간 배양 후 LPS를 1 ㎍/mL이 되도록 처리하여 37℃, 5%의 CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 상층액을 100 ㎕씩 취하여 새 96 웰 플레이트에 옮긴 후, griess reagent A와 B를 1:1로 혼합한 후 100 ㎕씩 분주한다. Griess reagent를 처리한 즉시 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 540 nm에서 흡광도를 측정한다. 대식세포의 NO 생성율(%)은 하기식에 의해 계산하였으며, 그 결과를 하기 도 5에 나타내었다.Macrophages dissolve foreign substances by releasing active oxygen from the cell membrane in order to phagocytose bacteria or fungi that invaded from the outside. However, as the activity of macrophages continuously increases, this reaction becomes frequent and the amount of secretion of active oxygen increases, the active oxygen leaks out to the outside of the cell and attacks other blood vessel walls or tissues, resulting in disease. In addition, prostaglandin E 2 is also an inflammatory factor generated by the activity of macrophages, and causes symptoms such as vasodilation, bronchodilation, gastric acid suppression, inflammation, and fever. The anti-inflammatory efficacy of any substance can be measured by using the characteristics of these macrophages. The cells used in the experiment were RAW264.7 (Mouse macrophage), 37°C, 5% CO 2 , 10% Fetal bovine serum (FBS, Lonza), and 50 μg/mL of streptomycin (Sigma) added to Dulbecco's modified It was cultured in Eagle's medium (DMEM, Invitrogen). The cells were put into a 96-well plate at a concentration of 1×10 5 cells/well, and then cultured at 37° C., 5% CO 2 in an incubator for 24 hours. The culture medium was removed and the sample was replaced with a new medium, followed by pre-culture at 37° C., 5% CO 2 in an incubator for 30 minutes. After incubation for 30 minutes, LPS was treated to be 1 μg/mL and cultured at 37° C., 5% CO 2 in an incubator for 24 hours. After incubation, 100 μl of the supernatant is taken and transferred to a new 96-well plate. After mixing griess reagent A and B 1:1, 100 μl is dispensed. Immediately after treatment with Griess reagent, absorbance is measured at 540 nm using a microplate reader. The NO production rate (%) of macrophages was calculated by the following formula, and the results are shown in FIG. 5 below.

NO 생성량(%) = 시료첨가구의 흡광도/대조구의 흡광도 × 100NO production (%) = absorbance of sample addition / absorbance of control × 100

PGE2의 생성 또한 상기의 방법과 유사하게 진행하였다. 배양 후 상층액을 100 ㎕씩 취하여 새 96 웰 플레이트에 옮긴 후, 실험자의 성향 및 실험 환경을 고려하여 배양배지를 사용하여 10 ~ 20배 희석하였다. Anti-Mouse IgG plate의 NSB 웰에 배양배지를 100 ㎕ 넣고 Standard와 sample(희석한 상층액)을 각 웰에 100 ㎕씩 넣은 후, blank 웰을 제외한 모든 웰에 blue PGE2-AP conjugate를 50 ㎕씩 넣었다. NSB 웰에 배양배지를 50 ㎕를 넣고, blank와 NSB 웰을 제외한 모든 웰에 yellow PGE2 antibody를 50 ㎕씩 넣고, 상온(22~25℃) 조건에서 orbital shaker를 사용하여 500 rpm으로 2시간 동안 shaking하였다. 2시간 후 플레이트의 내용물을 버린 후 400 ㎕의 washing buffer로 3번 세척한 후 각 웰에 200 ㎕의 substrate solution을 넣고, 상온 (22~25℃)에서 45분간 배양하였다. 배양 후 각 웰에 50 ㎕의 stop solution을 넣고, 즉시 마이크로플레이트 판독기를 이용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대식세포의 PGE2 생성율(%)은 하기식에 의해 계산하였으며, 그 결과를 하기 도 5에 나타내었다.The production of PGE 2 was also performed in a similar manner to the above method. After culturing, 100 μl of the supernatant was taken and transferred to a new 96-well plate, and then diluted 10 to 20 times using a culture medium in consideration of the experimenter's tendency and the experimental environment. Put 100 μl of culture medium into the NSB well of the Anti-Mouse IgG plate, 100 μl of standard and sample (diluted supernatant) into each well, and 50 μl of blue PGE 2- AP conjugate into all wells except for the blank well. put each Put 50 μl of culture medium into the NSB well, 50 μl of yellow PGE 2 antibody into all wells except the blank and NSB well, and use an orbital shaker at room temperature (22-25° C.) for 2 hours at 500 rpm. was shaken. After 2 hours, the contents of the plate were discarded, washed 3 times with 400 μl of washing buffer, 200 μl of substrate solution was added to each well, and incubated at room temperature (22-25° C.) for 45 minutes. After incubation, 50 μl of stop solution was added to each well, and absorbance was immediately measured at 405 nm using a microplate reader. The PGE 2 production rate (%) of macrophages was calculated by the following formula, and the results are shown in FIG. 5 below.

Standard curve = 자연로그를 이용, y=A*ln(x) + B의 방정식을 얻는다.Standard curve = using the natural logarithm, we get the equation of y=A*ln(x) + B.

% bound = [(시료의 흡광도-NSB 흡광도)/(Blank 흡광도-NSB 흡광도)]*100% bound = [(absorbance of sample-NSB absorbance)/(Blank absorbance-NSB absorbance)]*100

위의 두 식을 이용하여, PGE2 생성량 = 희석배수*(e(%bound-B))/AUsing the above two equations, PGE 2 production amount = dilution factor *(e(%bound-B))/A

도 5에서 보는 바와 같이, 상기 조성물을 0.01% 부터 0.1%까지 사용하는 경우, 즉 함량이 증가될수록 NO 및 PGE2 생성이 감소되는 것을 확인하였다. As shown in Figure 5, when the composition is used from 0.01% to 0.1%, that is, as the content increases, it was confirmed that NO and PGE 2 production is reduced.

따라서 상기 조성물은 항원 등의 외부자극에 의해 발생되는 발열, 부종, 홍반 등의 염증 반응에 대해 우수한 항염 효과가 있음을 알 수 있다.Therefore, it can be seen that the composition has an excellent anti-inflammatory effect against inflammatory reactions such as fever, edema, and erythema caused by external stimuli such as antigen.

2. 자외선 조사에 의해 유도된 염증성 사이토카인 억제능2. Inhibitory ability of inflammatory cytokines induced by UV irradiation

상기 조성물의 항염 활성 효과를 확인해보기 위해 초기 염증성 분자 중 하나인 TNF-α, COX-2, IL-1b 생성에 대한 효과를 알아보았다. TNF-α와 같은 염증성 사이토카인(pro-inflammatory cytokine)의 형성은 포스포리파제 A2(phospholipase A2)의 활성으로 인해 아라키돈산(arachidonic acid)이 프로스타글란딘(prostaglandin)으로 바뀌는 과정 및 일산화질소(NO) 형성 과정으로 이어지게 된다. 실험에 사용된 세포는 HaCaT(Human Skin Keratinocytes cell line)이며 37℃, 5%의 CO2, 10%의 Fetal bovine serum(FBS, Lonza), 50 ㎍/mL의 streptomycin(Sigma)을 첨가한 Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM, Invitrogen)에서 배양하였다. 배양 후 1시간 동안 UV를 조사하여 세포에 스트레스를 주었다. 대조구로는 시료를 처리하지 않고 UV를 조사한 세포를 사용하였다. In order to confirm the anti-inflammatory effect of the composition, the effect on the production of TNF-α, COX-2, and IL-1b, which are one of the initial inflammatory molecules, was investigated. The formation of pro-inflammatory cytokines such as TNF-α is a process in which arachidonic acid is converted to prostaglandin and nitric oxide (NO) formation due to the activity of phospholipase A2. lead to the process. The cells used in the experiment were HaCaT (Human Skin Keratinocytes cell line), 37°C, 5% CO 2 , 10% Fetal bovine serum (FBS, Lonza), and Dulbecco's modified with 50 μg/mL streptomycin (Sigma) added. It was cultured in Eagle's medium (DMEM, Invitrogen). After incubation, the cells were stressed by UV irradiation for 1 hour. As a control, cells irradiated with UV without processing the sample were used.

RNA 분석을 위해 세포 내의 total RNA를 세포 배양으로부터 Trizol reagent(Invitrogen, USA)를 사용하여 추출하였다. RNA의 순도와 무결성은 A260nm/A280nm비율 측정을 통해 확인하였고, RNA 수율은 260nm에서 흡광도로 측정하였다.For RNA analysis, total RNA in cells was extracted from cell culture using Trizol reagent (Invitrogen, USA). The purity and integrity of RNA was confirmed by measuring the A260nm/A280nm ratio, and the RNA yield was measured by absorbance at 260nm.

cDNA합성은 3 ㎍의 total RNA를 Oligo dT 15(500 ng/㎕) primer, dNTP (10 mM), RTase inhibitor(40 U/㎕), Powerscript Ⅱ RTase(Clontech, USA)를 첨가하여 25℃에서 10분간 primer annealing, 42℃에서 60분간 cDNA를 합성하고 95℃에서 5분간 RTase denaturation 시켰다. PCR은 cDNA로부터 TNF-α, COX-2, IL-1b의 GAPDH를 증폭하기 위하여 cDNA 3 ㎕, 10X taq polymerase buffer 5 ㎕, 10 mM dNTP 2 ㎕, 10 pmol primer 각각 2 ㎕, taq polymerase 0.5 ㎕를 혼합하고 증류수를 더하여 50 ㎕로 조정한 후 증폭시켰다. 프라이어 서열은 표 11에 나타내었다. For cDNA synthesis, 3 μg of total RNA was added with Oligo dT 15 (500 ng/μl) primer, dNTP (10 mM), RTase inhibitor (40 U/μl), and Powerscript Ⅱ RTase (Clontech, USA) at 25°C for 10 Minute primer annealing, cDNA synthesis at 42°C for 60 minutes, and RTase denaturation at 95°C for 5 minutes. For PCR, 3 µl of cDNA, 5 µl of 10X taq polymerase buffer, 2 µl of 10 mM dNTP, 2 µl of 10 pmol primer, and 0.5 µl of taq polymerase were each added to amplify GAPDH of TNF-α, COX-2, and IL-1b from cDNA. After mixing and adding distilled water, the volume was adjusted to 50 μl and amplified. The fryer sequence is shown in Table 11.

PCR에 의하여 생성된 산물은 1% 아가로우스 겔(agarose gel)에서 전기 영동하여 image analyzer(UGEN, U:Genius)로 확인하였으며 각 밴드의 밀도는 밀도계측프로그램(Gene Tools from Syngene)을 이용하여 측정하였다. The product generated by PCR was electrophoresed on 1% agarose gel and confirmed with an image analyzer (UGEN, U:Genius), and the density of each band was measured using a density measuring program (Gene Tools from Syngene). measured.

GeneGene PrimerPrimer GAPDHGAPDH F: 5'- AAC GAA TTT GGT CGA ACA GC-3'F: 5'- AAC GAA TTT GGT CGA ACA GC-3' R: 5'- TGA GGA GGG ATT CAG TG-3'R: 5'-TGA GGA GGG ATT CAG TG-3' IL-1bIL-1b F: 5' - GTC TCT GAA TCA GAA ATC CTT CTA TC - 3'F: 5' - GTC TCT GAA TCA GAA ATC CTT CTA TC - 3' R: 5' - CAT GTC AAA TTT CAC TGC TTC ATC C - 3'R: 5' - CAT GTC AAA TTT CAC TGC TTC ATC C - 3' TNF-aTNF-a F: 5' - CAA AGT AGA CCT GCC CAG AC - 3'F: 5' - CAA AGT AGA CCT GCC CAG AC - 3' R: 5' - GAC CTC TCT CTA ATC AGC CC - 3'R: 5' - GAC CTC TCT CTA ATC AGC CC - 3' COX-2COX-2 F: 5' - GTC CCT GAG CAT CTA CGG TTT G - 3'F: 5' - GTC CCT GAG CAT CTA CGG TTT G - 3' R: 5' - CCC ATT CAG GAT GCT CCT GTT - 3'R: 5' - CCC ATT CAG GAT GCT CCT GTT - 3'

도 6에서 보는 바와 같이, 상기 조성물을 0.01% 부터 0.1%까지 사용하는 경우, 즉 함량이 증가될수록 염증성 사이토카인 발현의 억제가 월등하게 나타나는 양상을 보여, 높은 항염 효과를 가지는 것으로 나타났다.As shown in FIG. 6 , when the composition is used from 0.01% to 0.1%, that is, as the content increases, the inhibition of inflammatory cytokine expression is superior, indicating that it has a high anti-inflammatory effect.

따라서 상기 조성물은 다양한 외부자극(자외선, 항원 등)에 의해 발생되는 피부자극을 감소시킴으로써, 발열, 부종, 홍반 등의 염증 반응에 대해 우수한 항염 효과가 있음을 알 수 있다.Therefore, it can be seen that the composition has an excellent anti-inflammatory effect on inflammatory reactions such as fever, edema, and erythema by reducing skin irritation caused by various external stimuli (UV rays, antigens, etc.).

3. 자외선 조사에 의해 유도된 인터루킨-6 억제능3. Interleukin-6 inhibitory ability induced by UV irradiation

상기 조성물의 항염 활성 효과를 확인해보기 위해 염증성 분자 중 하나인 인터루킨-6(IL-6) 생성에 대한 효과를 알아보았다. 인터루킨-6는 발열 및 급성 염증반응을 매개하는 단백질이며, 아토피, 건선 등 각종 피부질환을 일으키는 원인으로 알려져 있다. 실험에 사용된 세포는 HaCaT(Human Skin Keratinocytes cell line)이며 37℃, 5%의 CO2, 10%의 Fetal bovine serum(FBS, Lonza), 50 ㎍/mL의 streptomycin(Sigma)을 첨가한 Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM, Invitrogen)에서 배양하였다. 세포를 96 웰 플레이트에 1×105 cells/well의 농도로 넣어준 후, 37℃, 5%의 CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 배양한 세포의 배지를 제거하고 시료를 처리한 새 배지로 교환한 후 37℃, 5%의 CO2 배양기에서 30분 동안 전배양 하였다. 배양 후 1시간 동안 UV를 조사하여 세포에 스트레스를 주었다. 대조구로는 시료를 처리하지 않고 UV를 조사한 세포를 사용하였다. 배양 후 상층액을 100 ㎕씩 취하여 새 96 웰 플레이트에 옮긴 후, Thermo Fisher사의 IL-6 Human ELISA Kit를 이용하여 실험을 수행하였다.In order to confirm the anti-inflammatory effect of the composition, the effect on the production of interleukin-6 (IL-6), which is one of the inflammatory molecules, was investigated. Interleukin-6 is a protein that mediates fever and acute inflammatory reactions, and is known to cause various skin diseases such as atopy and psoriasis. The cells used in the experiment were HaCaT (Human Skin Keratinocytes cell line), 37°C, 5% CO 2 , 10% Fetal bovine serum (FBS, Lonza), and Dulbecco's modified with 50 μg/mL streptomycin (Sigma) added. It was cultured in Eagle's medium (DMEM, Invitrogen). The cells were put into a 96-well plate at a concentration of 1×10 5 cells/well, and then cultured at 37° C., 5% CO 2 in an incubator for 24 hours. The culture medium was removed and the sample was replaced with a new medium, followed by pre-culture at 37° C., 5% CO 2 in an incubator for 30 minutes. After incubation, the cells were stressed by UV irradiation for 1 hour. As a control, cells irradiated with UV without processing the sample were used. After incubation, 100 μl of the supernatant was taken and transferred to a new 96-well plate, and the experiment was performed using the IL-6 Human ELISA Kit from Thermo Fisher.

도 7에서 보는 바와 같이, 상기 조성물을 0.01% 부터 0.1%까지 사용하는 경우, 즉 함량이 증가될수록 인터루킨-6 발현의 억제가 월등하게 나타나는 양상을 보여, 높은 항염 효과를 가지는 것으로 나타났다.As shown in FIG. 7 , when the composition was used from 0.01% to 0.1%, that is, as the content increased, the inhibition of interleukin-6 expression was superior, indicating that it had a high anti-inflammatory effect.

따라서 상기 조성물은 다양한 외부자극(자외선, 항원 등)에 의해 발생되는 피부자극을 감소시킴으로써, 발열, 부종, 홍반 등의 일반적인 염증 반응뿐 아니라 아토피와 같은 급성 염증 반응에 대해서도 우수한 항염 효과가 있음을 알 수 있다.Therefore, by reducing skin irritation caused by various external stimuli (ultraviolet rays, antigens, etc.), it is known that the composition has an excellent anti-inflammatory effect against not only general inflammatory reactions such as fever, edema, and erythema, but also acute inflammatory reactions such as atopy. can

[제조예 2: 복합 추출물의 제조][Preparation Example 2: Preparation of complex extract]

1. 복합 추출물의 제조One. Preparation of complex extracts

상기 제조예 1에서 제조된 인진쑥 추출물(AE)과 동일한 방법으로 혹돌잎 추출물(LE), 검인 추출물(FE) 및 무루자 추출물(GE)을 제조하였다.Hokdol leaf extract (LE), gum extract (FE) and Muruza extract (GE) were prepared in the same manner as the Injin mugwort extract (AE) prepared in Preparation Example 1.

2. 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물2. Cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory

상기 제조예 1에서 제조된 인진쑥 추출물(AE) 및 올리브 추출물(OE)을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물(MX1)과 동일한 방법으로 인진쑥 추출물(AE), 올리브 추출물(OE), 혹돌잎 추출물(LE), 검인 추출물(FE) 및 무루자 추출물(GE)을 하기 표 12과 같은 함량 범위로 혼합하여 항균, 항산화 미백 및 항염증용 화장료 조성물을 제조하였다.In the same manner as the antibacterial, antioxidant, whitening, and anti-inflammatory cosmetic composition (MX1) containing the extract (AE) and olive extract (OE) prepared in Preparation Example 1, the extract (AE) and olive extract (OE), Hokdol leaf extract (LE), gum extract (FE) and Muruza extract (GE) were mixed in the content range shown in Table 12 below to prepare antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic compositions.

MC1MC1 MC2MC2 MC3MC3 MC4MC4 MC5MC5 MC6MC6 AEAE 100100 100100 100100 100100 100100 100100 OEOE 100100 100100 100100 100100 100100 100100 LELE -- 3030 4040 5050 6060 7070 FEFE -- -- 55 1010 2020 3030 GEGE -- -- 55 1010 2020 3030

(단위: 중량부)(Unit: parts by weight)

[실험예 6: 복합 추출물의 항균, 항산화, 미백 및 항염증 효과 시험][Experimental Example 6: Antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory effect test of complex extract]

상시 실험예 1 내지 5에서 실시한 MX1의 실험과 동일한 실험을 진행한 후, 상기 제조예 2에 의하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 조성물(MC1 내지 MC6)의 효과 시험을 진행하였다.After performing the same experiment as that of MX1 conducted in Experimental Examples 1 to 5, the effect tests of the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory compositions (MC1 to MC6) according to Preparation Example 2 were conducted.

그 결과의 상대적인 비교를 위해, 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 혼합한 MC1의 효과를 지수 5로 두고, 복합 추출물 MC2 내지 MC6을 지수로 비교 평가하였으며, 그 결과를 하기 표 13에 나타내었다.For the relative comparison of the results, the effect of MC1 mixed with Injin mugwort extract and olive extract was set to an index of 5, and the composite extracts MC2 to MC6 were comparatively evaluated as an index, and the results are shown in Table 13 below.

지수가 높을수록 그 효과가 우수함을 의미한다.The higher the index, the better the effect.

MC1MC1 MC2MC2 MC3MC3 MC4MC4 MC5MC5 MC6MC6 항균 활성antibacterial activity 55 66 77 88 99 77 항산화 활성antioxidant activity 55 55 66 77 88 66 항염증 효과anti-inflammatory effect 55 66 66 77 77 66

(단위: 지수)(Unit: Index)

상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 혼합한 MC1 및 복합 추출물 MC2 내지 MC6에서 MC1과 동등 또는 우수한 효과를 나타내는 것을 확인하였으며, 복합 추출물(MC3 내지 MC6)의 경우 낮은 세포독성으로 안정성이 증가되면서 우수한 항균, 항산화, 미백 및 항염증 효과를 나타냈다.As shown in Table 3, it was confirmed that the MC1 and the complex extracts MC2 to MC6, which were mixed with the Injin mugwort extract and the olive extract, showed an effect equal to or superior to that of MC1, and the complex extract (MC3 to MC6) was stable due to low cytotoxicity. As it increased, it showed excellent antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory effects.

이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.Although preferred embodiments of the present invention have been described in detail above, the scope of the present invention is not limited thereto, and various modifications and improvements by those skilled in the art using the basic concept of the present invention as defined in the following claims are also provided. is within the scope of the

Claims (8)

인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는
항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물.
Contains Injin mugwort extract and olive extract as active ingredients.
A cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory.
제 1항에 있어서,
상기 조성물은 아토피 피부염 및 지루성 피부염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 염증성 피부질환을 예방하는 것인
항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The composition is to prevent inflammatory skin diseases selected from the group consisting of atopic dermatitis and seborrheic dermatitis
A cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory.
제 1항에 있어서,
상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출 용매를 이용하여 추출되며,
추출 후, 0.1몰 염산 에탄올 용액을 이용한 속실렛 정제와 65% 에탄올 수용액을 이용하여 정제된 것인
항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The extract is extracted using an extraction solvent selected from the group consisting of water, alcohols having 1 to 6 carbon atoms, and mixtures thereof,
After extraction, Soxhlet purification using 0.1 mol hydrochloric acid ethanol solution and 65% ethanol aqueous solution
A cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 대장균(Escherichia coil), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 칸디다 알비칸스(Candida albicans) 및 진균(Aspergillus brasiliensis)로 이루어진 군으로부터 선택되는 균을 효과적으로 제거하여 항균 및 방부 효과를 갖는 것인
항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The composition effectively removes bacteria selected from the group consisting of Escherichia coil, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans and fungi (Aspergillus brasiliensis) to provide antibacterial and antiseptic properties that has an effect
A cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 자유 라디칼 소거능 및 MDA(Malondialdehyde) 소거능을 통해 항산화 활성을 가지는 것인
항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The composition has antioxidant activity through free radical scavenging ability and MDA (malondialdehyde) scavenging ability
A cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 티로시나아제 저해능 및 멜라닌 생성 억제능을 통해 미백 효과를 나타내는 것인
항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The composition exhibits a whitening effect through tyrosinase inhibitory ability and melanin production inhibitory ability
A cosmetic composition for antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물을 포함하는
토너.
Claims 1 to 6, comprising the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition according to any one of claims
toner.
제 1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물을 포함하는
에멀전.
Claims 1 to 6, comprising the antibacterial, antioxidant, whitening and anti-inflammatory cosmetic composition according to any one of claims
emulsion.
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