KR20190028540A

KR20190028540A - Perk 억제제로서의 이소퀴놀린 유도체

Info

Publication number: KR20190028540A
Application number: KR1020197004836A
Authority: KR
Inventors: 제프리 악스텐; 라가바 레디 케시리; 라젠드라 크리스탐; 찬드레고우다 벤카테샤파
Original assignee: 글락소스미스클라인 인털렉츄얼 프로퍼티 디벨로프먼트 리미티드
Priority date: 2016-07-20
Filing date: 2017-07-18
Publication date: 2019-03-18
Also published as: CN109789135A; CA3031047A1; WO2018015879A1; JP2019521166A; BR112019001136A2; AU2017300123A1; EP3487503A1; US20190241573A1

Abstract

본 발명은 치환된 이소퀴놀린 유도체 및 그의 용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 화학식 (I)에 따른 화합물 및 질환 상태의 치료에서 화학식 (I)의 화합물의 용도에 관한 것이다:

여기서 R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ 및 X는 본원에 정의된 바와 같다.
본 발명의 화합물은 PERK의 억제제이며, 암, 전암성 증후군 및 활성화된 언폴딩된 단백질 반응 경로와 연관된 질환, 예컨대 알츠하이머병, 신경병증성 통증, 척수 손상, 외상성 뇌 손상, 허혈성 졸중, 졸중, 파킨슨병, 당뇨병, 대사 증후군, 대사 장애, 헌팅턴병, 크로이츠펠트-야콥병, 치명적 가족성 불면증, 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커 증후군, 및 관련된 프리온 질환, 근위축성 측삭 경화증, 진행성 핵상 마비, 심근경색, 심혈관 질환, 염증, 기관 섬유증, 만성 및 급성 간 질환, 지방간 질환, 간 지방증, 간 섬유증, 만성 및 급성 폐 질환, 폐 섬유증, 만성 및 급성 신장 질환, 신장 섬유증, 만성 외상성 뇌병증 (CTE), 신경변성, 치매, 전두측두엽 치매, 타우병증, 픽병, 니만-픽병, 아밀로이드증, 인지 장애, 아테롬성동맥경화증, 안구 질환, 부정맥의 치료에서, 기관 이식에서 및 이식을 위한 기관의 수송에서 유용할 수 있다. 따라서, 본 발명은 또한 본 발명의 화합물을 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 본 발명의 화합물을 포함하는 제약 조성물을 사용하여 PERK 활성을 억제하는 방법 및 그와 연관된 장애의 치료에 관한 것이다.

Description

PERK 억제제로서의 이소퀴놀린 유도체

본 발명은 단백질 키나제 R (PKR)-유사 ER 키나제, PERK의 활성의 억제제인 치환된 이소퀴놀린 유도체에 관한 것이다. 또한 본 발명은 이러한 화합물을 포함하는 제약 조성물 및, 암, 전암성 증후군 및 활성화된 언폴딩된 단백질 반응 경로와 연관된 질환/손상, 예컨대 알츠하이머병, 신경병증성 통증, 척수 손상, 외상성 뇌 손상, 허혈성 졸중, 졸중, 파킨슨병, 당뇨병, 대사 증후군, 대사 장애, 헌팅턴병, 크로이츠펠트-야콥병, 치명적 가족성 불면증, 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커 증후군, 및 관련된 프리온 질환, 근위축성 측삭 경화증, 진행성 핵상 마비, 심근경색, 심혈관 질환, 염증, 기관 섬유증, 만성 및 급성 간 질환, 지방간 질환, 간 지방증, 간 섬유증, 만성 및 급성 폐 질환, 폐 섬유증, 만성 및 급성 신장 질환, 신장 섬유증, 만성 외상성 뇌병증 (CTE), 신경변성, 치매, 전두측두엽 치매, 타우병증, 픽병, 니만-픽병, 아밀로이드증, 인지 장애, 아테롬성동맥경화증, 안구 질환, 부정맥의 치료에서, 기관 이식에서 및 이식을 위한 기관의 수송에서, 이러한 화합물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

언폴딩된 단백질 반응 (unfolded protein response, UPR)은 미스폴딩 또는 언폴딩된 단백질 또는 단백질 응집체의 존재로 인해 유발된 스트레스로부터 세포가 생존하도록 하는 신호 전달 경로이다 (Walter and Ron, 2011), (Hetz, 2012). 또한 내형질 세망 (ER)에서의 단백질 폴딩 및 성숙을 교란시키는 환경적 스트레스는 UPR의 활성화로 이어질 수 있다 (Feldman et al., 2005), (Koumenis and Wouters, 2006). UPR을 활성화시키는 스트레스 자극은 특히 저산소증, 단백질 글리코실화의 파괴 (글루코스 박탈), 내강 ER 칼슘의 고갈 또는 ER 산화환원 상태의 변화를 포함한다 (Ma and Hendershot, 2004), (Feldman et al., 2005). 이들 교란은 ER 산화환원 항상성의 파괴 및 언폴딩 또는 미스-폴딩된 단백질이 ER에 축적되는 것을 초래한다. 세포성 반응은 단백질 리-폴딩을 증진하기 위해 샤페론 단백질의 수준을 높이기 위한 전사 리프로그램화, 미스-폴딩된 단백질의 분해, 및 ER로 유입되는 클라이언트 단백질의 부담을 감소시키기 위한 전사 정지를 포함한다 (Ron, D. 2002), (Harding et al., 2002). 이들 경로는 또한 아폽토시스 조정에 의해 세포 생존 (Ma and Hendershot, 2004), (Feldman et al., 2005), 및 자가포식 (Rouschop et al. 2010)을 조절하고, 장기간의 ER 스트레스 조건에서 세포 사멸을 일으킬 수 있다 (Woehlbier and Hetz, 2011).

3개의 ER 막 단백질: 단백질 키나제 R (PKR)-유사 ER 키나제 [PERK, 또한 진핵 개시 인자 2A 키나제 3 (EIF2AK3), 췌장 ER 키나제 또는 췌장 eIF2α 키나제 (PEK)로도 공지되어있음], 이노시톨-요구 유전자 1 α/β (inositol-requiring gene 1 α/β, IRE1) 및 활성화 전사 인자 6 (activating transcription factor 6, ATF6)은 UPR의 1차 이펙터로서 확인된 바 있다 (Ma and Hendershot, 2004), (Hetz, 2012). 정상 조건 하에서는 이들 단백질은 그의 내강 센서 도메인에 대한 ER 샤페론 GRP78 (BiP)의 결합을 통해 불활성 상태로 유지된다. 언폴딩된 단백질이 ER에 축적되면 이들 센서로부터 GRP78의 방출로 이어져 이들 UPR 이펙터의 활성화를 초래한다 (Ma et al., 2002), (Hetz, 2012).

PERK는 ER 내강에 면하는 스트레스-감지 도메인, 막횡단 절편 및 세포질 키나제 도메인을 함유하는 유형 I ER 막 단백질이다 (Shi et al., 1998), (Harding et al., 1999), (Sood et al., 2000). PERK의 스트레스-감지 도메인으로부터의 GRP78의 방출은 다중 세린, 트레오닌 및 티로신 잔기에서의 올리고머화 및 자가인산화를 일으킨다 (Ma et al., 2001), (Su et al., 2008). PERK 녹아웃 마우스의 표현형은 췌장섬 세포의 손실로 인한 당뇨병, 골격 이상 및 성장 지연을 포함한다 (Harding et al., 2001), (Zhang et al., 2006), (Iida et al., 2007). 이들 특징은 PERK 유전자에서의 배선 돌연변이를 보유하는 월콧-랠리슨(Wolcott-Rallison) 증후군을 앓는 환자에서 나타난 것들과 유사하다 (Julier and Nicolino, 2010). PERK에 대한 주요 기질은 진핵 개시 인자 2α (eukaryotic initiation factor 2α, eIF2α)이고, PERK은 ER 스트레스 또는 ER 스트레스의 약리학적 유도인자 예컨대 탑시가르긴 및 튜니카마이신을 사용한 치료에 반응하여 세린-51에서 이를 인산화시킨다 (Marciniak et al., 2006). 또한 이 부위는 다른 자극에 반응하여 다른 EIF2AK 패밀리 구성원 [(일반 제어 비-억제 2 (general control non-derepressed 2, GCN2), PKR 및 헴-조절 키나제 (heme-regulated kinase, HRI)]에 의해 인산화된다.

eIF2α의 인산화는 eIF2 단백질 합성 복합체에서 GTP를 위한 GDP의 효율적 전환에 요구되는 구아닌 뉴클레오티드 교환 인자 (guanine nucleotide exchange factor, GEF) eIF2B의 억제제로 이를 변환한다. 그 결과, P-eIF2a에 의한 eIF2B의 억제는 번역 개시의 전반적인 감소 및 따라서 전체적인 단백질 합성의 감소를 야기한다 (Harding et al. 2002). 역설적으로, 특정한 mRNA의 번역은 UPR이 활성화되고 eIF2a가 인산화될 때 증진된다. 예를 들면, 전사 인자 ATF4는 정상의 전체적인 단백질 합성 동안 정상적으로는 ATF4 합성을 억제하는 5'-상류 오픈 리딩 프레임 (uORF)을 갖는다. 그러나, PERK이 스트레스 하에서 활성화되고 P-eIF2a가 eIF2B를 억제하는 경우, 3원 번역 복합체의 낮은 수준은 ATF4의 선택적인 증진된 번역을 허용한다 (Jackson et al. 2010). 따라서, ER 스트레스가 계속되는 경우, PERK 활성화는 ATF4 번역에서의 증가를 일으키고, 이는 하류 표적 유전자 예컨대 CHOP (전사 인자 C/EBP 상동 단백질)를 전사적으로 상향 조절한다. 이 전사 리프로그램화는 세포 생존 경로를 조정하고, 아폽토시스촉진 유전자의 유도로 이어질 수 있다.

PERK 및 UPR의 활성화는 인간 신경변성 상태 예컨대 알츠하이머병, 파킨슨병, 헌팅턴병, 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 진행성 핵상 마비 (PSP), 치매 및 크로이츠펠트-야콥병 (CJD)을 포함하는 프리온 질환과 연관된다 (Doyle et al. 2011), (Paschen 2004), (Salminen et al. 2009), (Stutzbach et al. 2013). 모든 이들 질환의 공통 특징은 기저 질환 병리생리상태, 뉴런 손실 및 인지 저하에 기여하는 것으로 판단되는, 기형의/미스폴딩된 또는 응집된 단백질 침전물 (예를 들면 타우 엉킴(tau tangle), 루이 소체, α-시뉴클레인, Aβ 플라크, 돌연변이체 프리온 단백질)의 존재이다 (Prusiner, 2012), (Doyle et al. 2011). 언폴딩 또는 미스폴딩된 단백질 스트레스를 견디는 세포 (예를 들면 뉴런)의 운명은 PERK의 통제 하에 있다. ER 스트레스를 견디는 세포는 단백질항상성을 복원하고 정상으로 돌아갈 수 있거나, 또는 스트레스를 이겨내기 어려운 경우, 지속된 PERK 활성화는 지속적 번역 억제로 인해 중요 단백질의 합성 불능과 함께 ATF4/CHOP 유발 자가포식을 통해 세포 사멸로 이어질 수 있다. 활성화 PERK 및 연관된 PERK 활성화의 생물학적 마커는 알츠하이머병 환자의 사후 뇌 조직 및 인간 프리온 질환에서 검출된다 (Ho et al. 2012), (Hoozemans et al., 2009) (Unterberger et al. 2006). 게다가, P-eIF2α (PERK 활성화의 산물)는 알츠하이머병 환자의 사후 뇌 조직에서의 BACE1의 수준과 상관관계가 있다 (O'Connor et al. 2008). 최근에, 소분자 PERK 억제제 GSK2606414는 신경보호 효과를 제공하고 프리온 감염된 마우스에서 질환의 임상 징후를 방지한다는 것이 밝혀졌고 (Moreno et al. 2013), 이는 UPR/PERK/eIF2α 경로의 유전자 조작으로부터 유도된 이전 결과와 일치한다 (Moreno et al. 2012). ALS (Kanekura et al., 2009 및 Nassif et al. 2010), 척수 손상 (Ohri et al. 2011) 및 외상성 뇌 손상 (Tajiri et al. 2004)에서의 경로의 관련성이 또한 보고되어 있다. 종합하면, 이들 데이터는 UPR 및 PERK이 광범위한 신경변성 질환의 임상적 진행 및 연관된 인지 장애를 정지시키거나 역전시키는 수단으로서 약물 개입의 유망한 교점을 나타낸다는 것을 제시한다.

종양 세포는 부적당한 혈액 공급 및 비정상적 혈관 기능으로 인해 그의 성장 동안 저산소증 및 영양 부족의 에피소드를 경험한다 (Brown and Wilson, 2004), (Blais and Bell, 2006). 따라서, 이들은 이들의 성장을 용이하게 하기 위해 활성 UPR 신호전달에 의존적일 가능성이 있다. 이와 일관되게, PERK-/-, XBP1-/- 및 ATF4-/- 마우스로부터 유래된 마우스 섬유모세포, 및 돌연변이 eIF2α를 발현하는 섬유모세포는 시험관내 저산소 조건 하에서 감소된 클론원성 성장 및 증가된 아폽토시스를 나타내고, 누드 마우스에 종양으로서 이식되었을 때 실질적으로 감소된 속도로 성장한다 (Koumenis et al., 2002), (Romero-Ramirez et al., 2004), (Bi et al., 2005). 키나제 활성이 결핍된 우성 음성 PERK를 보유하는 인간 종양 세포주는 또한 저산소증 하에 시험관내에서 증가된 아폽토시스를 나타내었고, 생체내에서 종양 성장을 약화시켰다 (Bi et al., 2005). 이들 연구에서, UPR의 활성화는 저산소 영역과 일치하는 종양 내 영역에서 관찰되었다. 이들 영역은 무손상 UPR 신호전달을 갖는 종양과 비교하여 보다 높은 속도의 아폽토시스를 나타내었다. 종양 성장을 촉진하는 데 있어서의 PERK의 역할을 지지하는 추가의 증거는, 인슐린-분비 베타 세포에서 SV40- T 항원을 발현하는 트랜스제닉 마우스에서 발생하는 인슐린종의 수, 크기 및 혈관분포가 야생형 대조군과 비교하여 PERK ^-/- 마우스에서 극도로 감소되었다는 관찰이다 (Gupta et al., 2009). UPR의 활성화는 또한 임상 시편에서도 관찰되었다. 자궁경부 암종, 교모세포종 (Bi et al., 2005), 폐암 (Jorgensen et al., 2008) 및 유방암 (Ameri et al., 2004), (Davies et al., 2008)으로부터 유래된 것들을 포함하는 인간 종양은 정상 조직과 비교하여 UPR에 관련된 단백질의 상승된 수준을 나타낸다. 따라서, PERK 및 UPR의 다른 성분의 활성을 차단하는 화합물에 의해 언폴딩된 단백질 반응을 억제하는 것은 항암제로서 유용성을 가지고 있을 것으로 예상된다. 최근에, 이 가설은 마우스에서 인간 종양 이종이식편의 성장을 억제하는 것을 나타낸 PERK의 2개의 소분자 억제제에 의해서 뒷받침되었다 (Axten et al. 2012 및 Atkins et al. 2013).

내형질 세망 항상성의 손실 및 미스폴딩된 단백질의 축적은 수많은 질환 상태의 원인이 될 수 있다 (Wek and Cavener 2007), (Zhang and Kaufman 2006). PERK의 억제제는 다양한 인간 질환 예컨대 알츠하이머병 및 전두측두엽 치매, 파킨슨병, 헌팅턴병, 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 진행성 핵상 마비 (PSP) 및 다른 타우병증 예컨대 만성 외상성 뇌병증 (CTE) (Nijholt, D. A., et al. 2012), (Lucke-Wold, B. P., et al. 2016), 척수 손상, 외상성 뇌 손상, 졸중, 크로이츠펠트-야콥병 (CJD) 및 관련된 프리온 질환, 예컨대 치명적 가족성 불면증 (FFI), 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커 증후군, 및 소멸 백색 물질 (VWM) 질환의 치료에 치료상 유용할 수 있다. PERK의 억제제는 또한 암, 특히 분비 세포 유형으로부터 유도된 것, 예컨대 췌장 및 신경내분비 암, 다발성 골수종의 효과적인 치료, 또는 종양 세포 사멸을 증진하기 위한 화학감작제로서 조합 용도에 유용할 수 있다. PERK 억제제는 또한 심근경색, 심혈관 질환, 아테롬성동맥경화증 (McAlpine et al., 2010, Civelek et al. 2009, Liu and Dudley 2016), 부정맥 및 신장 질환 (Dickhout et al., 2011, Cybulsky, A. V., et al. 2005)에 유용할 수 있다. PERK 억제제는 또한 줄기 세포 또는 기관 이식에서 기관의 손상을 방지하기 위해, 및 이식을 위한 기관의 수송에서 유용할 수 있다 (Inagi et al., 2014), (Cunard, 2015), (Dickhout et al., 2011), (van Galen, P., et al. (2014). PERK 억제제는 기저 병리상태 및 증상이 언폴딩된 단백질 반응의 조절이상과 연관된, 수많은 질환의 치료에서 다양한 유용성을 가지고 있을 것으로 예상된다.

참고문헌

본 발명의 목적은 PERK의 억제제인 신규 화합물을 제공하는 것이다.

본 발명의 목적은 또한 제약 담체 및 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 제약 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 목적은 또한 신경변성 질환, 암 및 활성화 언폴딩된 단백질 반응 경로와 연관된 다른 질환/손상 예컨대: 알츠하이머병, 신경병증성 통증, 척수 손상, 외상성 뇌 손상, 허혈성 졸중, 졸중, 파킨슨병, 당뇨병, 대사 증후군, 대사 장애, 헌팅턴병, 크로이츠펠트-야콥병, 치명적 가족성 불면증, 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커 증후군, 및 관련된 프리온 질환, 근위축성 측삭 경화증, 진행성 핵상 마비, 심근경색, 심혈관 질환, 염증, 기관 섬유증, 만성 및 급성 간 질환, 지방간 질환, 간 지방증, 간 섬유증, 만성 및 급성 폐 질환, 폐 섬유증, 만성 및 급성 신장 질환, 신장 섬유증, 만성 외상성 뇌병증 (CTE), 신경변성, 치매, 전두측두엽 치매, 타우병증, 픽병, 니만-픽병, 아밀로이드증, 인지 장애, 아테롬성동맥경화증, 안구 질환, 부정맥의 치료를 위해서, 기관 이식에서 및 이식을 위한 기관의 수송에서 신규 PERK 활성 억제제를 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공하는 것이다.

발명의 개요

본 발명은 치환된 이소퀴놀린 유도체, 그의 용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 화학식 I에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 그의 염 및 질환 상태의 치료에서의 화학식 (I)의 화합물의 용도에 관한 것이다:

여기서 R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ 및 X는 하기 정의된 바와 같다.

본 발명은 또한 화학식 (I)의 화합물이 PERK의 억제제로서 활성이라는 발견에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 암의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 암의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 알츠하이머병의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 알츠하이머병의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 파킨슨병의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 파킨슨병의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 근위축성 측삭 경화증의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 근위축성 측삭 경화증의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 헌팅턴병의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 헌팅턴병의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 크로이츠펠트-야콥병의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 크로이츠펠트-야콥병의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 진행성 핵상 마비 (PSP)의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 진행성 핵상 마비의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 치매의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 치매의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 척수 손상의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 척수 손상의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 외상성 뇌 손상의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 외상성 뇌 손상의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 허혈성 졸중의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 허혈성 졸중의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 당뇨병의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 당뇨병의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 (I)의 PERK 억제 화합물을 심근경색, 심혈관 질환, 아테롬성동맥경화증, 안구 질환, 및 부정맥으로부터 선택된 질환 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 질환 상태의 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 기관 이식에서 및 이식을 위한 기관의 수송에서 화학식 (I)의 화합물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

본 발명의 추가 측면에서, 본 발명의 PERK 억제 화합물을 제조하기에 유용한 신규 방법 및 신규 중간체가 제공된다.

제약 담체 및 본 발명의 방법에 유용한 화합물을 포함하는 제약 조성물이 본 발명에 포함된다.

또한, 본 발명의 PERK 억제 화합물을 추가의 활성 성분과 함께 공-투여하는 방법이 본 발명에 포함된다.

본 발명은 또한 의료 요법에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

본 발명은 또한 알츠하이머병의 치료에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

본 발명은 또한 파킨슨병의 치료에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

본 발명은 또한 근위축성 측삭 경화증의 치료에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

본 발명은 또한 헌팅턴병의 치료에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

본 발명은 또한 크로이츠펠트-야콥병의 치료에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

본 발명은 또한 진행성 핵상 마비 (PSP)의 치료에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

본 발명은 또한 치매의 치료에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

본 발명은 또한 척수 손상의 치료에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

본 발명은 또한 외상성 뇌 손상의 치료를 위한 의약의 제조에서의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한 당뇨병의 치료를 위한 의약의 제조에서의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한 심근경색, 심혈관 질환, 아테롬성동맥경화증, 안구 질환 및 부정맥으로부터 선택된 질환 상태의 치료를 위한 의약의 제조에서의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한 만성 외상성 뇌병증 (CTE)의 치료를 위한 의약의 제조에서의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한 기관 이식 및 이식을 위한 기관의 수송에 사용하기 위한 의약의 제조에서의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.

제약 담체, 및 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 제약 조성물이 본 발명에 포함된다.

본 발명은 또한 요법에 사용하기 위한, 상기 정의된 바와 같은 제약 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 한 실시양태는

a) 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및

b) ATF-4 조정 화합물

을 포함하는 조합물을 제공한다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 화학식 (I)의 화합물 및 본 발명의 방법에서의 화학식 (I)의 화합물 및 그의 염의 용도에 관한 것이다:

여기서,

R¹은

비시클로헤테로아릴,

치환된 비시클로헤테로아릴,

헤테로아릴, 및

치환된 헤테로아릴

로부터 선택되며,

여기서 상기 치환된 비시클로헤테로아릴 및 상기 치환된 헤테로아릴은 하기로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환되고:

플루오로,

클로로,

브로모,

아이오도,

C_1-6알킬,

플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬옥시, -OH, C_1-4알킬, 시클로알킬, -COOH, -CF₃, -NO₂, -NH₂ 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 C_1-6알킬,

-OH,

히드록시C_1-6알킬,

-COOH,

테트라졸,

시클로알킬,

옥소,

-OC_1-6알킬,

-CF₃,

-CF₂H,

-CFH₂,

-C_1-6알킬OC_1-4알킬,

-CONH₂,

-CON(H)C_1-3알킬,

디C_1-4알킬아미노C_1-4알킬,

아미노C_1-6알킬,

-CN,

헤테로시클로알킬,

C_1-4알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, 옥소, -NO₂, -NH₂ 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 치환된 헤테로시클로알킬,

-NO₂,

-NH₂,

-N(H)C_1-3알킬, 및

-N(C_1-3알킬)₂;

R²는

아릴,

플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, 시클로알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -CHF₂, -OCF₃, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 아릴,

헤테로아릴,

플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, 시클로알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -OCF₃, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 헤테로아릴,

비시클로헤테로아릴,

플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, 시클로알킬, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -CHF₂, -OCF₃, -CN, 및 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 비시클로헤테로아릴

로부터 선택되고;

R³, R⁴, R⁵ 및 R⁶은 각각 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, -CF₃, 및 -CH₃으로부터 선택되고;

R⁷은 수소, C_1-6알킬, 시클로알킬, 아미노C_1-6알킬, -CF₃, -CH₃, 플루오로, 클로로, 브로모 및 아이오도로부터 선택되고;

X는 O, S, C(=O), NR¹⁰⁰, CR²⁰⁰R³⁰⁰이고,

여기서 R¹⁰⁰은 수소, C_1-6알킬로부터 선택되고;

R²⁰⁰ 및 R³⁰⁰은 독립적으로 수소, -CH₃, -CF₃, -OH, -NH₂으로부터 선택되거나,

또는 R²⁰⁰ 및 R³⁰⁰은 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 3 또는 4원 시클로알킬을 나타낸다.

본 발명은 또한 화학식 (I)의 화합물의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물에서, X는 CR²⁰⁰R³⁰⁰이고, 여기서 R²⁰⁰ 및 R³⁰⁰은 수소 및 -CH₃으로부터 독립적으로 선택된다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물에서, X는 C(=O)이다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물에서, R¹은 치환된 피롤로[2,3-d]피리미딘이다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물에서, R¹은 치환된 피라졸로[3,4-d]피리미딘이다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물에서, R¹은 치환된 피롤로[3,2-c]피리딘이다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물에서, R²는

아릴, 및

플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, 시클로알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -CHF₂, -OCF₃, 및 -CN로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 아릴

로부터 선택된다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물에서, R⁷은 수소이다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물에서, R³, R⁵ 및 R⁶은 수소이다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물에서, R⁴는 플루오로이다.

화학식 (II)의 화합물 및 그의 염은 본 발명에 포함되며 본 발명의 방법에 사용된다:

여기서,

R¹¹은

비시클로헤테로아릴,

치환된 비시클로헤테로아릴,

헤테로아릴, 및

치환된 헤테로아릴

로부터 선택되며,

플루오로,

클로로,

브로모,

아이오도,

C_1-6알킬,

-OH,

히드록시C_1-6알킬,

-COOH,

테트라졸,

시클로알킬,

옥소,

-OC_1-6알킬,

-CF₃,

-CF₂H,

-CFH₂,

-C_1-6알킬OC_1-4알킬,

-CONH₂,

-CON(H)C_1-3알킬,

디C_1-4알킬아미노C_1-4알킬,

아미노C_1-6알킬,

-CN,

헤테로시클로알킬,

-NO₂,

-NH₂,

-N(H)C_1-3알킬, 및

-N(C_1-3알킬)₂;

R¹²는

아릴,

헤테로아릴,

비시클로헤테로아릴,

로부터 선택되고;

R¹³, R¹⁴, R¹⁵ 및 R¹⁶은 각각 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, -CF₃, 및 -CH₃로부터 선택되고;

R¹⁷은 수소, C_1-6알킬, 시클로알킬, 아미노C_1-6알킬, -CF₃, -CH₃, 플루오로, 클로로, 브로모 및 아이오도로부터 선택되고;

X¹은 O, S, C(=O), CR²⁵⁰R³⁵⁰이고,

R²⁵⁰ 및 R³⁵⁰은 독립적으로 수소, -CH₃, -CF₃, -OH, NH₂으로부터 선택되고

또는 R²⁵⁰ 및 R³⁵⁰은 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 3 또는 4원 시클로알킬을 나타낸다.

본 발명은 또한 화학식 (II)의 화합물의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

적합하게는, 화학식 (II)의 화합물에서, X¹은 CR²⁵⁰R³⁵⁰이고, 여기서 R²⁵⁰ 및 R³⁵⁰은 수소 및 -CH₃으로부터 독립적으로 선택된다.

적합하게는, 화학식 (II)의 화합물에서, X¹은 C(=O)이다.

적합하게는, 화학식 (II)의 화합물에서, R¹¹은 치환된 피롤로[2,3-d]피리미딘이다.

적합하게는, 화학식 (II)의 화합물에서, R¹¹은 치환된 피라졸로[3,4-d]피리미딘이다.

적합하게는, 화학식 (II)의 화합물에서, R¹¹은 치환된 피롤로[3,2-c]피리딘이다.

적합하게는, 화학식 (II)의 화합물에서, R¹²는

아릴, 및

플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, 시클로알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -CHF₂, -OCF₃, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 아릴

로부터 선택된다.

적합하게는, 화학식 (II)의 화합물에서, R¹⁷은 수소이다.

적합하게는, 화학식 (II)의 화합물에서, R¹³, R¹⁵ 및 R¹⁶은 수소이다.

적합하게는, 화학식 (II)의 화합물에서, R¹⁴는 플루오로이다.

화학식 (III)의 화합물 및 그의 염은 본 발명에 포함되며 본 발명의 방법에 사용된다:

여기서,

R²¹은

비시클로헤테로아릴, 및

치환된 비시클로헤테로아릴

로부터 선택되며,

여기서 상기 치환된 비시클로헤테로아릴은 하기로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환되고:

플루오로,

클로로,

브로모,

아이오도,

C_1-6알킬,

-OH,

히드록시C_1-6알킬,

-COOH,

테트라졸,

시클로알킬,

옥소,

-OC_1-6알킬,

-CF₃,

-CF₂H,

-CFH₂,

-C_1-6알킬OC_1-4알킬,

-CONH₂,

-CON(H)C_1-3알킬,

디C_1-4알킬아미노C_1-4알킬,

아미노C_1-6알킬,

-CN,

헤테로시클로알킬,

-NO₂,

-NH₂, -N(H)C_1-3알킬, 및

-N(C_1-3알킬)₂;

R²²는

아릴,

헤테로아릴,

비시클로헤테로아릴,

플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, 시클로알킬, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -CHF₂, -OCF₃, - CN, 및 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 비시클로헤테로아릴

로부터 선택되고;

R²³, R²⁴, R²⁵ 및 R²⁶은 각각 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, -CF₃, 및 -CH₃로부터 선택되고;

R²⁷은 수소, C_1-6알킬, 시클로알킬, -CF₃, -CH₃, 플루오로, 클로로, 브로모 및 아이오도 로부터 선택되고;

X²는 O, S, C(=O), CR²⁶⁰R³⁶⁰이고,

R²⁶⁰ 및 R³⁶⁰은 독립적으로 수소, -CH₃, -CF₃, -OH, -NH₂으로부터 선택되고,

또는 R²⁶⁰ 및 R³⁶⁰은 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 3 또는 4원 시클로알킬을 나타낸다.

본 발명은 또한 화학식 (III)의 화합물의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

적합하게는, 화학식 (III)의 화합물에서, X²는 CR²⁶⁰R³⁶⁰이고, 여기서 R²⁶⁰ 및 R³⁶⁰은 수소 및 -CH₃으로부터 독립적으로 선택된다.

적합하게는, 화학식 (III)의 화합물에서, X²는 C(=O)이다.

적합하게는, 화학식 (III)의 화합물에서, R²¹은 치환된 피롤로[2,3-d]피리미딘이다.

적합하게는, 화학식 (III)의 화합물에서, R²¹은 치환된 피라졸로[3,4-d]피리미딘이다.

적합하게는, 화학식 (III)의 화합물에서, R²¹은 치환된 피롤로[3,2-c]피리딘이다.

적합하게는, 화학식 (III)의 화합물에서, R²²는

아릴, 및

로부터 선택된다.

적합하게는, 화학식 (III)의 화합물에서, R²⁷은 수소이다.

적합하게는, 화학식 (III)의 화합물에서, R²³, R²⁵ 및 R²⁶은 수소이다.

적합하게는, 화학식 (III)의 화합물에서, R²⁴는 플루오로이다.

화학식 (IV)의 화합물 및 그의 염은 본 발명에 포함되며 본 발명의 방법에 사용된다:

여기서,

R³²는

아릴,

헤테로아릴,

비시클로헤테로아릴,

로부터 선택되고;

R³³, R³⁴, R³⁵ 및 R³⁶은 각각 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, -CF₃, 및 -CH₃로부터 선택되고;

R³⁷은 수소, C_1-6알킬, 시클로알킬, -CF₃, -CH₃, 플루오로, 클로로, 브로모 및 아이오도 로부터 선택되고;

R³⁸은 수소 및 -CH₃으로부터 선택되고;

R³⁹는

수소,

시클로알킬, C_1-6알킬, 및

플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬옥시, -OH, -CF₃, -COOH, -NO₂, -NH₂ 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 치환된 C_1-6알킬

로부터 선택되고;

X³은 O, S, C(=O), CR²⁷⁰R³⁷⁰이고,

R²⁷⁰ 및 R³⁷⁰은 독립적으로 수소, -CH₃, -CF₃, -OH, -NH₂으로부터 선택되거나,

또는 R²⁷⁰ 및 R³⁷⁰은 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 3 또는 4원 시클로알킬을 나타낸다.

본 발명은 또한 화학식 (IV)의 화합물의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

적합하게는, 화학식 (IV)의 화합물에서, X³은 CR²⁷⁰R³⁷⁰이고, 여기서 R²⁷⁰ 및 R³⁷⁰은 수소 및 -CH₃으로부터 독립적으로 선택된다.

적합하게는, 화학식 (IV)의 화합물에서, X³은 C(=O)이다.

적합하게는, 화학식 (IV)의 화합물에서, R³²는

아릴, 및

로부터 선택된다.

적합하게는, 화학식 (IV)의 화합물에서, R³⁷은 수소이다.

적합하게는, 화학식 (IV)의 화합물에서, R³³, R³⁵ 및 R³⁶은 수소이다.

적합하게는, 화학식 (IV)의 화합물에서, R³⁴는 플루오로이다.

화학식 (V)의 화합물 및 그의 염은 본 발명에 포함되며 본 발명의 방법에 사용된다:

여기서,

R⁴¹은

수소,

시클로알킬,

헤테로시클로알킬,

C_1-6알킬, 및

로부터 선택되고;

R⁴²는

아릴,

헤테로아릴,

비시클로헤테로아릴,

로부터 선택되고;

R⁴³, R⁴⁴, R⁴⁵ 및 R⁴⁶은 각각 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, -CF₃, 및 -CH₃으로부터 선택되고;

R⁴⁷은 수소, C_1-6알킬, 시클로알킬, -CF₃, -CH₃, 플루오로, 클로로, 브로모 및 아이오도로부터 선택되고;

R⁴⁸은 수소 및 C_1-6알킬로부터 선택되고;

R⁴⁹는 수소 및 -CH₃으로부터 선택되고;

X⁴는 O, S, C(=O), CR²⁸⁰R³⁸⁰이고,

R²⁸⁰ 및 R³⁸⁰은 독립적으로 수소, -CH₃, -CF₃, -OH, -NH₂으로부터 선택되고,

또는 R²⁸⁰ 및 R³⁸⁰은 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 3 또는 4원 시클로알킬을 나타낸다.

본 발명은 또한 화학식 (V)의 화합물의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

적합하게는, 화학식 (V)의 화합물에서, X⁴는 CR²⁸⁰R³⁸⁰이고, 여기서 R²⁸⁰ 및 R³⁸⁰은 수소 및 -CH₃으로부터 독립적으로 선택된다.

적합하게는, 화학식 (V)의 화합물에서, X⁴는 C(=O)이다.

적합하게는, 화학식 (V)의 화합물에서, R⁴²는

아릴, 및

로부터 선택된다.

적합하게는, 화학식 (V)의 화합물에서, R⁴⁷은 수소이다.

적합하게는, 화학식 (V)의 화합물에서, R⁴³, R⁴⁵ 및 R⁴⁶은 수소이다.

적합하게는, 화학식 (IV)의 화합물에서, R⁴⁴는 플루오로이다.

본 발명의 신규 화합물에는 하기가 포함된다:

5-(3-벤질이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디메틸벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-벤질-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-(2,3-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

(7-(4-아미노-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올;

7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2,2-디플루오로시클로프로필)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

3-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-플루오로-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(옥세탄-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

(7-(4-아미노-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)이소퀴놀린-3-일)(3,5-디메틸페닐)메타논;

5-(3-(3,4-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(2,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(8-플루오로-3-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(8-플루오로-3-(3-(트리플루오로메틸)벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-(3-플루오로벤질)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-(4-플루오로벤질)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-(2,5-디메틸벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2,2,2-트리플루오로에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-이소프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-2,7-디메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

3-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-2-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

1-시클로프로필-3-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-((3,5-디플루오로페닐)(메톡시)메틸)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-(2-(2-아미노에톡시)에틸)-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-(2-아미노에틸)-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-(3-에티닐-5-플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-(2,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(1-메틸피페리딘-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2-모르폴리노에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(5-클로로-2-메틸벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-(2-메틸벤질)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(1-메틸아제티딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-(1-(3,5-디플루오로페닐)에틸)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-(2-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3-클로로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(2-클로로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-(3-플루오로-5-메틸벤질)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디클로로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2-(디메틸아미노)에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(8-플루오로-3-(3-플루오로벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3-클로로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로부틸-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3-클로로-2-플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-((5-플루오로피리딘-3-일)메틸)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-(시클로프로필메틸)-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2-메톡시에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-((3-메틸옥세탄-3-일)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-6-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민;

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-에틸-6-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민; 및

5-(3-(3-클로로-5-플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;

및 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 그의 염.

통상의 기술자는 제약상 허용되는 염을 포함하여, 화학식 (I)에 따른 화합물의 염이 제조될 수 있음을 인지할 것이다. 사실상, 본 발명의 특정 실시양태에서, 제약상-허용되는 염을 포함하여, 화학식 (I)에 따른 화합물의 염은 각각의 유리 화합물 또는 비염화 화합물에 비하여 바람직할 수 있다. 따라서, 추가로 본 발명은 제약상-허용되는 염을 포함하여, 화학식 (I)에 따른 화합물의 염에 관한 것이다.

제약상 허용되는 염을 포함하여, 본 발명의 화합물의 염은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 제조된다.

화학식 (I)에 따른 화합물은 1개 이상의 비대칭 중심 (또한, 키랄 중심으로 지칭됨)을 함유할 수 있고, 따라서 개별 거울상이성질체, 부분입체이성질체 또는 다른 입체이성질체 형태, 또는 이들의 혼합물로 존재할 수 있다. 키랄 중심, 예컨대 키랄 탄소 원자는 치환기 예컨대 알킬 기에 존재할 수 있다. 화학식 (I)의 화합물 또는 본원에 예시된 임의의 화학 구조에 존재하는 키랄 중심의 입체화학이 명시되지 않은 경우에, 구조는 모든 개별 입체이성질체 및 그의 모든 혼합물을 포괄하도록 의도된다. 따라서, 1개 이상의 키랄 중심을 함유하는 화학식 (I)에 따른 화합물은 라세미 혼합물, 거울상이성질체적으로 풍부한 혼합물로서, 또는 거울상이성질체적으로 순수한 개별 입체이성질체로서 사용될 수 있다.

화학식 (I)에 따른 화합물은 또한 이중 결합 또는 다른 기하학적 비대칭 중심을 포함할 수 있다. 화학식 (I), 또는 본원에 예시된 임의의 화학 구조에 존재하는 기하학적 비대칭 중심의 입체화학이 명시되지 않은 경우, 구조는 트랜스 (E) 기하 이성질체, 시스 (Z) 기하 이성질체, 및 모든 그의 혼합물을 포함하는 것으로 간주한다. 마찬가지로, 모든 호변이성질체 형태는 또한, 이러한 호변이성질체가 동등하게 존재하는지 또는 하나의 형태가 우세하게 존재하는지 여부에 관계없이, 화학식 (I)에 포함된다.

화학식 (I)의 화합물 또는 제약상 허용되는 염을 포함하는 그의 염은 고체 또는 액체 형태로 존재할 수 있다. 고체 상태에서, 본 발명의 화합물은 결정질 또는 비결정질 형태, 또는 그의 혼합물로 존재할 수 있다. 결정질 형태인 본 발명의 화합물에 대해, 통상의 기술자는 결정화 동안 결정질 격자 내로 용매 분자가 혼입된 제약상 허용되는 용매화물이 형성될 수 있음을 인지할 것이다. 결정질 격자 내로 혼입되는 용매가 물인 용매화물은 전형적으로 "수화물"로 지칭된다. 수화물은 화학량론적 수화물뿐만 아니라 가변량의 물을 함유하는 조성물을 포함한다.

통상의 기술자는 또한 그의 다양한 용매화물을 포함하여, 결정질 형태로 존재하는 화학식 (I)의 특정 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 염은 다형성 (즉, 상이한 결정질 구조로 발생하는 능력)을 나타낼 수 있다는 것을 인지할 것이다. 이들 상이한 결정질 형태는 전형적으로 "다형체"로 공지되어 있다. 다형체는 동일한 화학적 조성을 갖지만 패킹, 기하학적 배열, 및 결정질 고체 상태의 다른 서술적 특성이 상이하다. 따라서 다형체는 상이한 물리적 특성 예컨대 형상, 밀도, 경도, 변형성, 안정성, 및 용해 특성을 가질 수 있다. 다형체는 전형적으로 확인에 사용될 수 있는 상이한 융점, IR 스펙트럼, 및 X선 분말 회절 패턴을 나타낸다. 통상의 기술자는 상이한 다형체가, 예를 들어, 화합물을 제조하는 데 사용되는 반응 조건 또는 시약을 변화 또는 조정함으로써 제조될 수 있다는 것을 인지할 것이다. 예를 들어, 온도, 압력, 또는 용매에서의 변화는 다형체를 생성할 수 있다. 게다가, 1종의 다형체는 특정 조건 하에 또 다른 다형체로 자발적으로 전환될 수 있다. 본 발명은 모든 이러한 다형체를 포함한다.

정의

"알킬"은 특정한 개수의 "구성원 원자"를 갖는 탄화수소 쇄를 지칭한다. 예를 들면, C₁-C₆ 알킬은 1 내지 6개의 구성원 원자를 갖는 알킬 기를 지칭한다. 알킬 기는 포화, 불포화, 직쇄형 또는 분지형일 수 있다. 대표적인 분지형 알킬 기는 1, 2 또는 3개의 분지를 갖는다. 알킬은 메틸, 에틸, 에틸렌, 알키닐 (예컨대 에티닐), 프로필 (n-프로필 및 이소프로필), 부텐, 부틸 (n-부틸, 이소부틸, 및 t-부틸), 펜틸 및 헥실을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

"알콕시"는 -O-알킬 기를 지칭하는데, 여기서 "알킬"은 본원에 정의된 바와 같다. 예를 들어, C₁-C₄알콕시는 1 내지 4개의 구성원 원자를 갖는 알콕시 기를 지칭한다. 대표적인 분지형 알콕시 기는 1, 2 또는 3개의 분지를 갖는다. 이러한 기의 예는 메톡시, 에톡시, 프로폭시 및 부톡시를 포함한다.

"아릴"은 방향족 탄화수소 고리를 지칭한다. 아릴 기는 총 5 내지 14개의 고리 구성원 원자를 갖는 모노시클릭, 비시클릭, 및 트리시클릭 고리계이며, 여기서 적어도 1개의 고리계는 방향족이고 여기서 상기 계내의 각각의 고리는 3 내지 7개의 구성원 원자를 함유하고, 예컨대 페닐, 나프탈렌, 테트라히드로나프탈렌 및 비페닐이다. 적합하게는 아릴은 페닐이다.

"비시클로헤테로아릴"은 구성원 원자로서 1 내지 6개의 헤테로원자를 함유하는 방향족 고리 2개가 융합된 것을 지칭한다. 1개 초과의 헤테로원자를 함유하는 비시클로헤테로아릴 기는 상이한 헤테로원자를 함유할 수 있다. 비시클로헤테로아릴 고리는 6 내지 11개의 구성원 원자를 갖는다. 비시클로헤테로아릴은 하기를 포함한다: 1H-피롤로[3,2-c]피리딘, 1H-피라졸로[4,3-c]피리딘, 1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘, 1H-피롤로[2,3-d]피리미딘, 7H-피롤로[2,3-d]피리미딘, 티에노[3,2-c]피리딘, 티에노[2,3-d]피리미딘, 푸로[2,3-c]피리딘, 푸로[2,3-d]피리미딘, 피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민, 인돌릴, 이소인돌릴, 인돌리지닐, 인다졸릴, 퓨리닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 프테리디닐, 신놀리닐, 아자벤즈이미다졸릴, 테트라히드로벤즈이미다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 베노피라닐, 벤족사졸릴, 벤조푸라닐, 이소벤조푸라닐, 벤조티아졸릴, 벤조티에닐, 이미다조[4.5-c]피리딘, 이미다조[4.5-b]피리딘, 푸로피리디닐 및 나프티리디닐.

적합하게는 "비시클로헤테로아릴"은 하기를 포함한다: 1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘, 1H-피롤로[2,3-d]피리미딘, 7H-피롤로[2,3-d]피리미딘, 티에노[3,2-c]피리딘, 티에노[2,3-d]피리미딘, 푸로[2,3-c]피리딘, 인돌릴, 이소인돌릴, 인돌리지닐, 인다졸릴, 퓨리닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 프테리디닐, 신놀리닐, 아자벤즈이미다졸릴, 테트라히드로벤즈이미다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 베노피라닐, 벤족사졸릴, 벤조푸라닐, 이소벤조푸라닐, 벤조티아졸릴, 벤조티에닐, 이미다조[4.5-c]피리딘, 이미다조[4.5-b]피리딘, 푸로피리디닐 및 나프티리디닐. 적합하게는 1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘, 1H-피롤로[2,3-d]피리미딘, 티에노[3,2-c]피리딘, 티에노[2,3-d]피리미딘, 인다졸릴, 퀴놀리닐, 퀴나졸리닐 또는 벤조티아졸릴. 적합하게는 1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘, 티에노[2,3-d]피리미딘 또는 1H-피롤로[2,3-d]피리미딘. 적합하게는 1H-피롤로[2,3-d]피리미딘.

"시클로알킬"은, 달리 정의되지 않는 한, 3 내지 7개의 탄소 원자를 갖는 포화 또는 불포화 비 방향족 탄화수소 고리를 지칭한다. 시클로알킬 기는 모노시클릭 고리계이다. 예를 들면, C₃-C₇ 시클로알킬은 3 내지 7개의 구성원 원자를 갖는 시클로알킬 기를 지칭한다. 본원에 사용된 시클로알킬의 예는 하기를 포함한다: 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로부테닐, 시클로펜테닐, 시클로헥세닐 및 시클로헵틸.

"할로"는 할로겐 라디칼 플루오로, 클로로, 브로모 및 아이오도를 지칭한다.

"헤테로아릴"은 1 내지 7개의 탄소 원자를 함유하고 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 모노시클릭 방향족 4 내지 8원 고리를 지칭하되, 단, 탄소 원자의 수가 3일 때, 방향족 고리는 적어도 2개의 헤테로원자를 함유한다. 1개 초과의 헤테로원자를 함유하는 헤테로아릴 기는 상이한 헤테로원자를 함유할 수 있다. 헤테로아릴은 하기를 포함한다: 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 푸라닐, 푸라자닐, 티에닐, 트리아졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐, 테트라지닐. 적합하게는, "헤테로아릴"은 하기를 포함한다: 피라졸, 피롤, 이속사졸, 피리딘, 피리미딘, 피리다진 및 이미다졸.

"헤테로시클로알킬"은 4 내지 12개의 구성원 원자를 함유하는 포화 또는 불포화 비-방향족 고리를 지칭하며, 그 중 1 내지 11개는 탄소 원자이고 1 내지 6개는 헤테로원자이다. 1개 초과의 헤테로원자를 함유하는 헤테로시클로알킬 기는 상이한 헤테로원자를 함유할 수 있다. 헤테로시클로알킬 기는 아릴 고리 또는 3 내지 6개의 구성원 원자를 갖는 헤테로아릴 고리와 융합된 모노시클릭 고리 또는 모노시클릭 고리계이다. 헤테로시클로알킬은 하기를 포함한다: 피롤리디닐, 테트라히드로푸라닐, 디히드로푸라닐, 피라닐, 테트라히드로피라닐, 디히드로피라닐, 테트라히드로티에닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 옥세타닐, 티아졸리디닐, 피페리디닐, 호모피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티아모르폴리닐, 1,3-디옥솔라닐, 1,3-디옥사닐, 1,4-디옥사닐, 1,3-옥사티올라닐, 1,3-옥사티아닐, 1,3-디티아닐, 1,3-옥사졸리딘-2-온, 헥사히드로-1H-아제핀, 4,5,6,7-테트라히드로-1H-벤즈이미다졸, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라히드로-피리디닐 및 아제티디닐.

"헤테로원자"는 질소, 황 또는 산소 원자를 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이, 이들 과정, 반응식 및 실시예에 사용된 기호 및 규정은 현대 과학 문헌, 예를 들어 문헌 (Journal of the American Chemical Society 또는 Journal of Biological Chemistry)에 사용된 것들과 일치한다. 달리 나타내지 않는 한, 표준 단일-문자 또는 3-문자 약어가 일반적으로 L-배위인 것으로 추정되는 아미노산 잔기를 지정하는데 사용된다. 달리 나타내지 않는 한, 모든 출발 물질은 상업적 공급업체로부터 수득하고, 추가 정제 없이 사용하였다. 구체적으로, 하기 약어가 실시예 및 명세서 전반에 걸쳐 사용될 수 있다:

Ac (아세틸);

Ac₂O (아세트산 무수물);

ACN (아세토니트릴);

AIBN (아조비스(이소부티로니트릴));

BINAP (2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1'-비나프틸);

BMS (보란 - 디메틸 술피드 착물);

Bn (벤질);

Boc (tert-부톡시카르보닐);

Boc₂O (디-tert-부틸 디카르보네이트);

CSF (플루오린화세슘);

DCE (1,2-디클로로에탄);

DCM (디클로로메탄);

DDQ (2,3-디클로로-5,6-디시아노-1,4-벤조퀴논);

DMS (디메틸 술피드);

ATP (아데노신 트리포스페이트);

비스-피나콜레이토디보론 (4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비-1,3,2-디옥사보롤란);

BSA (소 혈청 알부민);

C18 (HPLC 고정상에서 규소 상의 18-탄소 알킬 기를 지칭함)

CH₃CN (아세토니트릴)

Cy (시클로헥실);

DIPEA (휘니그 염기, N-에틸-N-(1-메틸에틸)-2-프로판아민);

디옥산 (1,4-디옥산);

DMAP (4-디메틸아미노피리딘);

DME (1,2-디메톡시에탄);

DMF (N,N-디메틸포름아미드);

DMSO (디메틸술폭시드);

DPPA (디페닐 포스포릴 아지드);

EtOAc (에틸 아세테이트);

EtOH (에탄올);

Et₂O (디에틸 에테르);

HOAc (아세트산);

HPLC (고압 액체 크로마토그래피);

HMDS (헥사메틸디실라지드);

IPA (이소프로필 알콜);

LAH (수소화알루미늄리튬) ;

LDA (리튬 디이소프로필아미드) ;

LHMDS (리튬 헥사메틸디실라지드)

MeOH (메탄올);

MTBE (메틸 tert-부틸 에테르);

mCPBA (m-클로로퍼벤조산);

NaHMDS (소듐 헥사메틸디실라지드);

NBS (N-브로모숙신이미드);

Pd₂(dba)₃ (트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0);

Pd(dppf)Cl₂.DCM 착물([1,1′-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II).디클로로메탄 착물);

RPHPLC (역상 고압 액체 크로마토그래피);

RT (실온);

Sat. (포화)

SGC (실리카 겔 크로마토그래피);

SM (출발 물질);

TCL (박층 크로마토그래피);

TEA (트리에틸아민);

TFA (트리플루오로아세트산); 및

THF (테트라히드로푸란).

에테르에 대한 모든 언급은 디에틸 에테르에 대한 것이고, 염수는 NaCl의 포화 수용액을 지칭한다.

화합물 제조

화학식 (I)에 따른 화합물은 통상의 유기 합성 방법을 사용하여 제조된다. 적합한 합성 경로는 하기 일반 반응식에 도시되어 있다. 모든 출발 물질은 상업적으로 이용가능하거나, 또는 통상의 기술자에 의해 상업적으로 이용가능한 출발 물질로부터 용이하게 제조된다.

통상의 기술자는 본원에 기재된 치환기가 본원에 기재된 합성 방법과 상용성이 아닌 경우에, 치환기는 반응 조건에 대해 안정한 적합한 보호기로 보호될 수 있다는 것을 인지할 것이다. 보호기는 반응 순서 중 적합한 지점에서 제거되어 목적 중간체 또는 표적 화합물을 제공할 수 있다. 적합한 보호기, 및 이러한 적합한 보호기를 사용하여 상이한 치환기를 보호 및 탈보호하는 방법은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있으며; 그의 예는 문헌 (T. Greene and P. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis (4th ed.), John Wiley & Sons, NY (2006))에서 찾아볼 수 있다. 일부 경우에, 치환기는 사용되는 반응 조건 하에 반응성이도록 구체적으로 선택될 수 있다. 이들 환경 하에, 반응 조건은 선택된 치환기를 중간체 화합물로서 유용하거나 또는 표적 화합물에서 목적하는 치환기인 또 다른 치환기로 전환시킨다.

이소퀴놀린의 8-위치에 치환된 플루오린을 함유하는 본 발명의 화합물은 반응식 1에 따라 제조하였다. 염기의 존재 하에 치환된 벤즈알데히드 A를 O-메틸히드록실아민 히드로클로라이드와 반응시켜 상응하는 이민 B를 수득하고, 환원 후에 벤질 아민 C를 수득함으로써 치환된 벤질 아민 C를 제조하였다. C와 1,1-디메톡시프로판-2-온 C1의 환원성 아미노화에 의해 이치환된 아민 D를 수득하였다. 클로로술폰산과 반응시켜 D의 고리화를 수행하여 이소퀴놀린 E를 수득하였다. 메틸 이소퀴놀린 E의 라디칼 브로민화에 이어서 과아이오딘산나트륨과 반응시켜 이소퀴놀린 알데히드 G를 수득하였다. 일부 경우에, E의 브로민화는 메틸 기의 모노브로민화를 유도하고, 생성된 화합물을 추가로 NBS로 처리하여 디브로모 화합물 F로 전환시킬 수 있다. 이소퀴놀린 알데히드 G를 다양한 알킬/아릴 마그네슘 브로마이드와 반응시켜 중간체 H를 수득하였다. 보로네이트 에스테르 I로의 전환 후에, 비시클로헤테로아릴 브로마이드 J와의 팔라듐 촉매된 스즈키-미야우라 반응은 화합물 K를 생성하였다. 화합물 K를 티오닐 클로라이드로 처리하고 이어서 아연 아세트산을 사용한 할라이드의 환원에 의해 화합물 M을 생성하였고, 이는 본 발명의 화합물의 구조를 나타낸다. 비시클로헤테로아릴 브로마이드 J는 문헌 [J. Med. Chem., 2012, 55 (16), pp 7193-7207 및 J. Med. Chem., 2015, 58 (3), pp 1426-1441]에 기재된 절차에 따라 제조되었다.

반응식 1

화학식 M을 갖는 본 발명의 화합물은 반응식 2에서 기재된 바와 같이 중간체 G로부터 대안적 방법을 이용하여 제조될 수 있다. 알데히드 중간체 G를 토실 히드라진과 반응시켜 상응하는 토실 히드라존 유도체 G3을 수득하였다. 다양한 보론산/보로네이트 에스테르와의 통상의 중간체 G3의 탄소-탄소 결합 형성은 문헌 [Barluenga et al. (Nat. Chem. 2009, 1, 494-499)]에 보고된 방법에 따라, 염기 예컨대 탄산칼륨 또는 플루오린화세슘 또는 인산칼륨을 사용하여 유기 용매의 존재 하에 수행하여 중간체 T를 수득하였다. T의 보로네이트 에스테르 U로의 전환에 이어서 비시클로헤테로아릴 브로마이드 J와의 팔라듐 촉매된 스즈키-미야우라 반응에 의해 화학식 M의 본 발명의 화합물을 생성하였다.

반응식 2

대안적으로, 화학식 M을 갖는 본 발명의 화합물은 반응식 3에 따를 수 있다. 리튬화에 이어서 이산화탄소로 켄칭하여 1-브로모-2-플루오로-4-아이오도벤젠 N을 상응하는 산 O로 전환시키고, 그 후 메탄올의 존재 하에 티오닐 클로라이드로 처리하여 에스테르 P를 수득하였다. 에스테르를 알콜로 환원시키고, 이어서 스원-산화 조건을 이용하여 산화시켜 치환된 벤즈알데히드 R을 수득하였다. 벤즈알데히드 R을 t-부틸 이민 유도체 S로 전환시키고, 이를 아이오딘화구리 및 팔라듐(II)비스(트리페닐포스핀) 디클로라이드의 존재 하에, 치환된 벤질 아세틸렌 S1과 반응시켜 이소퀴놀린 중간체 T로 전환시켰다. 반응식 2에 기재된 바와 유사하게 보로네이트 에스테르 형성 및 스즈키 --미야우라 커플링을 수행하여 본 발명의 화합물 M을 수득하였다.

반응식 3

이소퀴놀린 상의 플루오린 없는 본 발명의 화합물은 반응식 4에 따라 제조될 수 있다. 황산 중 메탄올을 사용하여 카르복실산 V의 상응하는 에스테르로의 전환을 수행하였다. NBS를 사용한 V1의 고리 브로민화로 상응하는 브로모 화합물 V2를 수득하였다. 수소화붕소나트륨을 사용한 V2 에스테르의 알콜로의 환원에 이어서 스원 산화에 의해 상응하는 알데히드 V4를 수득하였다. 반응식 2에 기재된 바와 유사하게 알데히드 V4의 이민 V5로의 전환에 이어서 이소퀴놀린 형성 및 스즈키-미야우라 커플링에 의해 본 발명의 화합물 M을 수득하였다

반응식 4

대안적으로, 화학식 M1을 갖는 본 발명의 화합물은 하기 반응식 5에 따라 제조될 수 있다. 4-브로모프탈산 W1을 상응하는 디올 W2로 환원시켜 산화 후에 디알데히드 W3을 수득하였다. W3을 염기성 조건 하에 디에틸 2-아미노말로네이트 히드로클로라이드와 반응시켜 이소퀴놀린 중간체 W4를 수득하였다. W4를 형성하기 위한 반응은 위치이성질체의 혼합물을 생성하고, W4는 이로부터 단리되어 후속 반응에 사용된다. 이소퀴놀린 W4의 에스테르 기의 가수분해를 염기 예컨대 수산화리튬을 사용하여 수행하고, 생성된 산 W5를 웨인렙 아미드 W6으로 전환시켰다. 화합물 W6을 다양한 그리냐르 시약 Y와 반응시켜 케톤 W7을 수득하였다. 히드라진 수화물을 사용하여 케톤 기의 환원을 수행하여 중간체 V6을 수득하였다. 반응식 2에 기재된 바와 유사하게 보로네이트 에스테르 형성 및 스즈키-미야우라 커플링을 수행하여 본 발명의 화합물 M1을 수득하였다. 일부 실시예에서, W7를 보로네이트 에스테르로 전환시키고, 이어서 비시클로헤테로아릴 브로마이드 J와의 스즈키-미야우라 커플링에 의해 본 발명의 화합물 M1을 수득하였다.

반응식 5

반응식 6

이소퀴놀린의 알킬 치환을 갖는 본 발명의 실시예는 반응식 6에 따라 제조하였다. 이민 유도체 S를 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐의 존재 하에 S를 부트-2-인-1-올 S2와 반응시킴으로써 이소퀴놀린 중간체 S3으로 전환시켰다. 이소퀴놀린 알콜 S3을 산화제 예컨대 데스-마르틴 퍼아이오디난을 사용하여 알데히드로 전환시켰다.

사용 방법

화학식 (I)에 따른 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 PERK의 억제제이다. 이들 화합물은 기저 병리상태가 UPR 경로의 활성화에 기인하는 (그러나 제한되지 않는) 상태, 예를 들면, 신경변성 장애, 암, 심혈관 및 대사 질환의 치료에서 잠재적으로 유용하다. 따라서, 또 다른 측면에서 본 발명은 이러한 상태를 치료하는 방법에 관한 것이다.

적합하게는, 본 발명은 염증성 유방암, 관 암종 및 소엽성 암종을 포함하는 유방암을 치료하거나 또는 그의 중증도를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

적합하게는, 본 발명은 결장암을 치료하거나 또는 그의 중증도를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

적합하게는, 본 발명은 인슐린종, 선암종, 관 선암종, 선편평상피 암종, 선방 세포 암종 및 글루카곤종을 포함하는 췌장암을 치료하거나 또는 그의 중증도를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

적합하게는, 본 발명은 전이성 흑색종을 포함하는 흑색종을 비롯한 피부암을 치료하거나 또는 그의 중증도를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

적합하게는, 본 발명은 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 편평 세포 암종, 선암종 및 대세포 암종을 포함하는 폐암을 치료하거나 또는 그의 중증도를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

적합하게는 본 발명은 뇌암 (신경교종), 교모세포종, 성상세포종, 다형성 교모세포종, 바나얀-조나나 증후군, 코우덴병, 레르미트-두크로스 질환, 윌름 종양, 유잉 육종, 횡문근육종, 상의세포종, 수모세포종, 두경부암, 신장암, 간암, 흑색종, 난소암, 췌장암, 선암종, 관 선암종, 선편평상피 암종, 선방 세포 암종, 글루카곤종, 인슐린종, 전립선암, 육종, 골육종, 골의 거대 세포 종양, 갑상선암, 림프모구성 T 세포 백혈병, 만성 골수 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 모발상-세포 백혈병, 급성 림프모구성 백혈병, 급성 골수 백혈병, 만성 호중구성 백혈병, 급성 림프모구성 T 세포 백혈병, 형질세포종, 면역모세포성 대세포 백혈병, 외투 세포 백혈병, 다발성 골수종, 거핵모구성 백혈병, 다발성 골수종, 급성 거핵구성 백혈병, 전골수구성 백혈병, 적백혈병, 악성 림프종, 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 림프모구성 T 세포 림프종, 버킷 림프종, 여포성 림프종, 신경모세포종, 방광암, 요로상피암, 외음부암, 자궁경부암, 자궁내막암, 신암, 중피종, 식도암, 타액선암, 간세포성암, 위암, 비인두암, 협부암, 구강암, GIST (위장 기질 종양), 신경내분비 암 및 고환암으로 이루어진 군으로부터 선택된 암을 치료하거나 또는 그의 중증도를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

적합하게는 본 발명은 인간을 포함하는 포유동물에서 전암성 증후군을 치료하거나 또는 중증도를 감소시키는 방법에 관한 것이며, 전암성 증후군은 하기로부터 선택된다: 자궁경부 상피내 신생물, 의미 불명의 모노클로날 감마글로불린병증 (MGUS), 골수이형성 증후군, 재생불량성 빈혈, 자궁경부 병변, 피부 모반 (전흑색종), 전립선 상피내 (관내) 신생물 (PIN), 관 상피내 암종 (DCIS), 결장 폴립 및 중증 간염 또는 간경변증.

적합하게는 본 발명은 신경변성 질환/손상, 예컨대 알츠하이머병, 척수 손상, 외상성 뇌 손상, 허혈성 졸중, 졸중, 파킨슨병, 대사 증후군, 대사 장애, 헌팅턴병, 크로이츠펠트-야콥병, 치명적 가족성 불면증, 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커 증후군, 및 관련된 프리온 질환, 진행성 핵상 마비, 근위축성 측삭 경화증 및 하기를 포함하는 UPR 활성화와 연관된 다른 질환: 신경병증성 통증, 당뇨병, 심근경색, 심혈관 질환, 염증, 섬유증, 만성 및 급성 간 질환, 지방간 질환, 간 지방증, 간 섬유증, 만성 및 급성 폐 질환, 폐 섬유증, 만성 및 급성 신장 질환, 신장 섬유증, 만성 외상성 뇌병증 (CTE), 신경변성, 치매, 전두측두엽 치매, 타우병증, 픽병, 니만-픽병, 아밀로이드증, 인지 장애, 아테롬성동맥경화증, 안구 질환, 및 부정맥을 치료하거나 또는 중증도를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

적합하게는 본 발명은 기관 이식 동안 및 후에, 및 이식을 위한 기관의 수송에서 기관 손상을 방지하는 방법에 관한 것이다. 기관 이식 동안 및 후에 기관 손상을 방지하는 방법은 화학식 (I)의 화합물의 생체내 투여를 포함할 것이다. 이식을 위한 기관의 수송 동안 기관 손상을 방지하는 방법은 수송 동안 기관을 수용하는 용액에 화학식 (I)의 화합물을 첨가하는 것을 포함할 것이다.

본 발명의 화합물은 안구 질환의 치료와 관련된 혈관신생을 억제한다. (Nature Reviews Drug Discovery 4, 711-712 (September 2005)). 적합하게는, 본 발명은 안구 질환/혈관신생을 치료하거나 또는 중증도를 감소시키는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 방법의 실시양태에서, 혈관 누출을 포함하여 안구 질환의 장애는 하기와 같을 수 있다: 임의의 폐쇄성 또는 염증성 망막 혈관 질환에 있어서의 부종 또는 신생혈관화, 예컨대 홍채 혈관신생, 신생혈관 녹내장, 익상편, 혈관성 녹내장 여과포, 결막 유두종; 맥락막 신생혈관화, 예컨대 신생혈관성 연령-관련 황반 변성 (AMD), 근시, 선행 포도막염, 외상 또는 특발성; 황반 부종, 예컨대 수술후 황반 부종, 망막 및/또는 맥락막 염증을 비롯한 포도막염에 속발성인 황반 부종, 당뇨병에 속발성인 황반 부종, 및 망막혈관 폐쇄성 질환 (즉, 분지 및 중심 망막 정맥 폐쇄)에 속발성인 황반 부종; 당뇨병으로 인한 망막 신생혈관화, 예컨대 망막 정맥 폐쇄, 포도막염, 경동맥 질환으로부터의 안구 허혈성 증후군, 안구 또는 망막 동맥 폐쇄, 겸상 적혈구 망막병증, 다른 허혈성 또는 폐쇄성 신생혈관성 망막병증, 미숙아 망막병증, 또는 일스병; 및 유전 장애, 예컨대 폰히펠-린다우 증후군.

일부 실시양태에서, 신생혈관성 연령-관련 황반 변성은 습성 연령-관련 황반 변성이다. 다른 실시양태에서, 신생혈관성 연령-관련 황반 변성은 건성 연령-관련 황반 변성이고, 환자는 습성 연령-관련 황반 변성이 발병할 증가된 위험이 있는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 치료 방법은 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 (I)에 따른 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함한다.

본 발명은 또한 의료 요법, 특히 하기 질병에 대한 요법에서 사용하기 위한 화학식 (I)에 따른 화합물 또는 그의 제약상-허용되는 염을 제공한다: 암, 전암성 증후군, 알츠하이머병, 신경병증성 통증, 척수 손상, 외상성 뇌 손상, 허혈성 졸중, 졸중, 당뇨병, 파킨슨병, 대사 증후군, 대사 장애, 헌팅턴병, 크로이츠펠트-야콥병, 치명적 가족성 불면증, 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커 증후군, 및 관련된 프리온 질환, 근위축성 측삭 경화증, 진행성 핵상 마비, 심근경색, 심혈관 질환, 염증, 기관 섬유증, 만성 및 급성 간 질환, 지방간 질환, 간 지방증, 간 섬유증, 만성 및 급성 폐 질환, 폐 섬유증, 만성 및 급성 신장 질환, 신장 섬유증, 만성 외상성 뇌병증 (CTE), 신경변성, 치매, 전두측두엽 치매, 타우병증, 픽병, 니만-픽병, 아밀로이드증, 인지 장애, 아테롬성동맥경화증, 안구 질환, 부정맥의 치료에, 기관 이식에 및 이식을 위한 기관의 수송. 따라서, 추가의 측면에서, 본 발명은 화학식 (I)에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의, UPR 활성을 특징으로 하는 장애, 예컨대 암을 치료하기 위한 의약의 제조에 있어서의 용도에 관한 것이다.

본원에 사용된 용어 "치료하는" 및 그의 파생어는 예방 및 치료 요법을 의미한다. 예방 요법은, 예를 들어 대상체가 강력한 암 가족력을 갖는 경우 또는 높은 암 발생 위험이 있는 것으로 간주되는 경우, 또는 대상체가 발암물질에 노출된 바 있는 경우에 적절하다.

본원에 사용된 용어 "유효량" 및 그의 파생어는, 예를 들어 연구원 또는 임상의가 추구하고 있는 조직, 시스템, 동물 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 도출할 약물 또는 제약 작용제의 양을 의미한다. 추가로, 용어 "치료 유효량" 및 그의 파생어는 이러한 양을 복용하지 않은 상응하는 대상체와 비교하여 질환, 장애 또는 부작용의 개선된 치료, 치유, 예방 또는 완화, 또는 질환 또는 장애의 진행 속도의 감소를 유발하는 임의의 양을 의미한다. 상기 용어는 또한 정상적인 생리학적 기능을 증진시키기에 효과적인 양을 그의 범주 내에 포함한다.

본원에 사용된 "환자" 또는 "대상체"는 인간 또는 다른 동물을 지칭한다. 적합하게는, 환자 또는 대상체는 인간이다.

화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 전신 투여를 포함하여 임의의 적합한 투여 경로에 의해 투여될 수 있다. 전신 투여는 경구 투여 및 비경구 투여를 포함한다. 비경구 투여는 경장, 경피 또는 흡입에 의한 것 이외의 투여 경로를 지칭하며, 전형적으로 주사 또는 주입에 의한 것이다. 비경구 투여는 정맥내, 근육내 및 피하 주사 또는 주입을 포함한다.

화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 1회, 또는 다수의 용량이 주어진 기간 동안 다양한 시간 간격으로 투여되는 투여 요법에 따라 투여될 수 있다. 예를 들어, 용량은 1일에 1, 2, 3, 또는 4회 투여될 수 있다. 용량은 목적하는 치료 효과가 달성될 때까지 또는 목적하는 치료 효과를 유지하기 위해 무기한으로 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물에 적합한 투여 요법은 상기 화합물의 약동학적 특성, 예컨대 흡수, 분포 및 반감기에 따라 달라지며, 이는 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물에 대해 적합한 투여 요법은, 이러한 요법이 투여 지속기간을 포함하여, 통상의 기술자의 지식 및 숙련도 내에서 치료할 상태, 치료할 상태의 중증도, 치료할 환자의 연령 및 신체 상태, 치료할 환자의 의료 병력, 공동 요법의 성질, 목적하는 치료 효과 등의 요인에 따라 달라진다. 적합한 투여 요법이 투여 요법에 대한 개별 환자의 반응에 따라 또는 시간이 지나면서 개별 환자 요구가 변화함에 따라 주어진 조정을 필요로 할 수 있음이 추가로 통상의 기술자에 의해 이해될 것이다.

추가적으로, 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 전구약물로서 투여될 수 있다. 본원에 사용된 본 발명의 화합물의 "전구약물"은 환자에게 투여 시 결국 본 발명의 화합물을 생체내 유리시키는 화합물의 기능적 유도체이다. 본 발명의 화합물을 전구약물로서 투여하는 것은 통상의 기술자가 하기 중 하나 이상을 수행하는 것을 가능하도록 할 수 있다: (a) 생체내 화합물의 개시를 변형시키는 것; (b) 생체내 화합물의 작용 지속기간을 변형시키는 것; (c) 생체내 화합물의 수송 또는 분포를 변형시키는 것; (d) 생체내 화합물의 용해도를 변형시키는 것; 및 (e) 화합물이 당면하는 부작용 또는 다른 어려움을 극복하는 것. -COOH 또는 -OH 기가 존재하는 경우에, 용해도 또는 가수분해 특성을 변형시키기 위해 제약상 허용되는 에스테르, 예를 들어 -COOH에 대해 메틸, 에틸 등, -OH에 대해 아세테이트 말레에이트 등, 및 관련 기술분야에 공지된 에스테르가 이용될 수 있다.

화학식 (I)의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 암 또는 전암성 증후군의 치료에 유용하는 것을 알려져 있는 적어도 1종의 다른 활성제와 공-투여될 수 있다.

본원에 사용된 용어 "공-투여"는 본원에 기재된 바와 같이, 화학요법 및 방사선 치료를 포함한 암의 치료에 유용한 것으로 알려져 있는 추가의 활성제 또는 활성제들과 PERK 억제제 화합물의 동시 투여 또는 임의의 방식의 별도 순차 투여 중 어느 하나를 의미한다. 본원에 사용된 용어 추가의 활성제 또는 활성제들은 암 치료를 필요로 하는 환자에게 투여시에 유리한 특성을 나타내는 것으로 공지되거나 또는 이러한 특성이 입증된 임의의 화합물 또는 치료제를 포함한다. 바람직하게는, 투여가 동시적이지 않은 경우에, 화합물은 서로 근접하여 가까운 시간 내에 투여된다. 또한, 화합물들이 동일한 투여 형태로 투여되는지는 중요하지 않으며, 예를 들어 한 화합물은 주사에 의해 투여될 수 있고, 또 다른 화합물은 경구로 투여될 수 있다.

전형적으로, 치료할 감수성 종양에 대해 활성을 갖는 임의의 항신생물제가 본 발명에서의 암의 치료에서 공-투여될 수 있다. 이러한 작용제의 예는 문헌 (Cancer Principles and Practice of Oncology by V.T. Devita and S. Hellman (editors), 6th edition (February 15, 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishers)에서 찾아볼 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 어떤 작용제의 조합이 유용할 것인지를 약물 및 수반된 암의 특정한 특징에 기초하여 식별할 수 있을 것이다. 본 발명에 유용한 전형적인 항신생물제는 항미세관제, 예컨대 디테르페노이드 및 빈카 알칼로이드; 백금 배위 착물; 알킬화제, 예컨대 질소 머스타드, 옥사자포스포린, 알킬술포네이트, 니트로소우레아 및 트리아젠; 항생제, 예컨대 안트라시클린, 악티노마이신 및 블레오마이신; 토포이소머라제 II 억제제, 예컨대 에피포도필로톡신; 항대사물, 예컨대 퓨린 및 피리미딘 유사체 및 항-폴레이트 화합물; 토포이소머라제 I 억제제, 예컨대 캄프토테신; 호르몬 및 호르몬 유사체; 신호 전달 경로 억제제; 비-수용체 티로신 키나제 혈관신생 억제제; 면역요법제; 아폽토시스촉진제; 세포 주기 신호전달 억제제; 프로테아솜 억제제; 및 암 대사의 억제제를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명의 PERK 억제 화합물과 조합하여 사용하거나 공-투여하기 위한 추가의 활성 성분 또는 성분들 (항신생물제)의 예는 화학요법제이다.

적합하게는, 본 발명의 제약 활성 화합물은 2001년 12월 19일의 국제 출원일, 국제 공개 번호 WO02/059110 및 2002년 8월 1일의 국제 공개일을 갖는 국제 출원 번호 PCT/US01/49367 (그의 전체 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 개시 및 청구되어 있으며, 실시예 69의 화합물인 VEGFR 억제제, 적합하게는 5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤젠술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염, 적합하게는 모노히드로클로라이드 염과 조합되어 사용된다. 5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤젠술폰아미드는 국제 출원 번호 PCT/US01/49367에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다.

적합하게는, 5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤젠술폰아미드는 모노히드로클로라이드 염의 형태이다. 상기 염 형태는 2001년 12월 19일의 국제 출원일을 갖는 국제 출원 번호 PCT/US01/49367의 기재내용으로부터 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 제조될 수 있다.

5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤젠술폰아미드는 모노히드로클로라이드 염으로서 상업적으로 시판되고, 일반명 파조파닙 및 상표명 보트리엔트(Votrient)®로 공지되어 있다.

파조파닙은 암 및 안구 질환/혈관신생의 치료에 관련되어 있다. 적합하게는, 본 발명은 암 및 안구 질환/혈관신생, 적합하게는 연령-관련 황반 변성의 치료에 관한 것이며, 이 방법은 화학식 (I)의 화합물을 단독으로 또는 파조파닙과 조합하여 투여하는 것을 포함한다.

한 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 암 치료의 다른 치료 방법과 함께 사용될 수 있다. 특히, 항신생물 요법에서, 상기 언급된 것 이외의 다른 화학요법제, 호르몬제, 항체 작용제뿐만 아니라 수술 및/또는 방사선 치료와의 조합 요법이 고려된다.

한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 수술 및/또는 방사선요법이다.

한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 적어도 1종의 추가의 항신생물제이다.

추가 측면에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 적어도 1종의 항신생물제를 포함하는 조합물이 제공된다.

추가 측면에서, 요법에 사용하기 위한, 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 적어도 1종의 항신생물제를 포함하는 조합물이 제공된다.

추가 측면에서, 암 및/또는 전암성 증후군을 치료하는 데 사용하기 위한, 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 적어도 1종의 항신생물제를 포함하는 조합물이 제공된다.

추가 측면에서, 암 및/또는 전암성 증후군의 치료를 위한 의약의 제조에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 적어도 1종의 항신생물제를 포함하는 조합물의 용도가 제공된다.

추가 측면에서, 암의 치료를 필요로 하는 인간에게 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 적어도 1종의 항신생물제를 포함하는 조합물의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 암을 치료하는 방법이 제공된다.

추가 측면에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 적어도 1종의 추가의 치료제, 특히 적어도 1종의 항신생물제를 포함하는 조합물 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체, 희석제 및 부형제를 포함하는 제약 조성물이 제공된다.

치료될 감수성 종양에 대해 활성을 갖는 임의의 항신생물제가 조합되어 이용될 수 있다. 유용한 전형적인 항신생물제는 항미세관제 예컨대 디테르페노이드 및 빈카 알칼로이드; 백금 배위 착물; 알킬화제 예컨대 질소 머스타드, 옥사자포스포린, 알킬술포네이트, 니트로소우레아, 및 트리아젠; 항생제 예컨대 안트라시클린, 악티노마이신 및 블레오마이신; 토포이소머라제 II 억제제 예컨대 에피포도필로톡신; 항대사물 예컨대 퓨린 및 피리미딘 유사체 및 항-폴레이트 화합물; 토포이소머라제 I 억제제 예컨대 캄프토테신; 호르몬 및 호르몬 유사체; 신호 전달 경로 억제제; 비-수용체 티로신 혈관신생 억제제; 면역요법제; 아폽토시스촉진제; 세포 주기 신호전달 억제제; 면역-종양학 작용제 및 면역자극제를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

항미세관제 또는 항유사분열제:

항미세관제 또는 항유사분열제는 세포 주기의 M 기 또는 유사분열기 동안 종양 세포의 미세관에 대해 활성인 기 특이적 작용제이다. 항미세관제의 예는 디테르페노이드 및 빈카 알칼로이드를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

천연 공급원 유래의 디테르페노이드는 세포 주기의 G₂/M 기에서 작동하는 기 특이적 항암제이다. 디테르페노이드는 미세관의 β-튜불린 서브유닛을, 이러한 단백질과의 결합에 의해 안정화시키는 것으로 여겨진다. 이어서, 상기 단백질의 해체가 억제되어 유사분열이 정지되고 세포 사멸이 이어지는 것으로 보인다. 디테르페노이드의 예는 파클리탁셀 및 그의 유사체 도세탁셀을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

파클리탁셀은 (2R,3S)-N-벤조일-3-페닐이소세린을 갖는 5β,20-에폭시-1,2α,4,7β,10β,13α-헥사-히드록시탁스-11-엔-9-온 4,10-디아세테이트 2-벤조에이트 13-에스테르이며, 태평양주목 탁수스 브레비폴리아(Taxus brevifolia)로부터 단리된 천연 디테르펜 생성물이고, 주사액제 탁솔(TAXOL)®로서 상업적으로 입수가능하다. 이는 테르펜의 탁산 패밀리의 구성원이다. 파클리탁셀은 미국에서 불응성 난소암의 치료에서의 임상 용도 (문헌 [Markman et al., Yale Journal of Biology 및 Medicine, 64:583, 1991; McGuire et al., Ann. lntem, Med., 111:273,1989]) 및 유방암의 치료 (문헌 [Holmes et al., J. Nat. Cancer Inst., 83:1797,1991])에 대해 승인되었다. 피부에서의 신생물 (문헌 [Einzig et al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20:46]) 및 두경부 암종 (문헌 [Forastire et al., Sem. Oncol., 20:56, 1990])의 치료를 위한 잠재적 후보물질이다. 상기 화합물은 또한 다낭성 신장 질환 (문헌 [Woo et al., Nature, 368:750. 1994]), 폐암 및 말라리아의 치료에 대한 잠재력을 제시한다. 파클리탁셀을 사용하는 환자의 치료는 역치 농도 (50nM) 초과의 투여 지속기간과 관련된 골수 억제 (다중 세포 계통, 문헌 [Ignoff, R.J. et al., Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998])를 유발한다 (문헌 [Kearns, C.M. et al., Seminars in Oncology, 3(6) p.16-23, 1995]).

도세탁셀은 5β-20-에폭시-1,2α,4,7β,10β,13α-헥사히드록시탁스-11-엔-9-온 4-아세테이트 2-벤조에이트, 3수화물을 갖는 (2R,3S)-N-카르복시-3-페닐이소세린, N-tert-부틸 에스테르, 13-에스테르로, 주사액제 탁소테레(TAXOTERE®)로 상업적으로 입수가능하다. 도세탁셀은 유방암의 치료에 대해 지시된다. 도세탁셀은 유럽 주목의 침엽으로부터 추출된 천연 전구체, 10-데아세틸-바카틴 III을 사용하여 제조된 파클리탁셀 q.v.의 반합성 유도체이다.

빈카 알칼로이드는 페리윙클 식물로부터 유래한 기 특이적 항신생물제이다. 빈카 알칼로이드는 튜불린에 특이적으로 결합함으로써 세포 주기의 M 기 (유사분열)에서 작용한다. 결과적으로, 결합된 튜불린 분자는 미세관으로 중합될 수 없다. 유사분열은 중기에서 정지되어 세포 사멸이 이어지는 것으로 여겨진다. 빈카 알칼로이드의 예는 빈블라스틴, 빈크리스틴 및 비노렐빈을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

빈블라스틴, 빈카류코블라스틴 술페이트는 주사액으로서 벨반(VELBAN®)으로서 상업적으로 입수가능하다. 이는 다양한 고형 종양의 2차 요법으로서 가능한 적응증을 갖지만, 고환암 및 호지킨병을 포함한 다양한 림프종; 및 림프구성 및 조직구성 림프종의 치료에서 주로 지시된다. 골수억제가 빈블라스틴의 용량 제한 부작용이다.

빈크리스틴, 빈카류코블라스틴, 22-옥소-, 술페이트는 주사액으로서 온코빈(ONCOVIN®)으로서 상업적으로 입수가능하다. 빈크리스틴은 급성 백혈병의 치료에 대해 지시되며, 호지킨 및 비-호지킨 악성 림프종을 위한 치료 요법에 또한 유용하다. 탈모증 및 신경계 효과가 빈크리스틴의 가장 흔한 부작용이며, 보다 적은 정도로 골수억제 및 위장 점막염 효과가 발생한다.

비노렐빈 타르트레이트 (나벨빈(NAVELBINE®))의 주사액으로서 상업적으로 입수가능한 비노렐빈, 3',4'-디데히드로-4'-데옥시-C'-노르빈카류코블라스틴 [R-(R*,R*)-2,3-디히드록시부탄디오에이트 (1:2)(염)]은 반합성 빈카 알칼로이드이다. 비노렐빈은 다양한 고형 종양, 특히 비소세포 폐암, 진행성 유방암 및 호르몬 불응성 전립선암의 치료에서 단일 작용제로서 또는 다른 화학요법제, 예컨대 시스플라틴과 조합되어 지시된다. 골수억제가 비노렐빈의 가장 흔한 용량 제한 부작용이다.

백금 배위 착물:

백금 배위 착물은 DNA와 상호작용하는 비-기 특이적 항암제이다. 백금 착물은 종양 세포에 진입하고, 아쿠아화를 겪고, DNA와 가닥내 및 가닥간 가교를 형성하여 종양에 대해 유해한 생물학적 효과를 유발한다. 백금 배위 착물의 예는 옥살리플라틴, 시스플라틴 및 카르보플라틴을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

시스플라틴, 시스-디암민디클로로백금은 주사액으로서 플라티놀(PLATINOL®)로서 상업적으로 입수가능하다. 시스플라틴은 주로 전이성 고환암 및 난소암 및 진행성 방광암의 치료에서 지시된다.

카르보플라틴, 백금, 디암민 [1,1-시클로부탄-디카르복실레이트(2-)-O,O']는 주사액으로서 파라플라틴(PARAPLATIN®)으로서 상업적으로 입수가능하다. 카르보플라틴은 진행성 난소 암종의 1차 및 2차 치료에서 주로 지시된다.

알킬화제:

알킬화제는 비-기 항암 특이적 작용제 및 강한 친전자체이다. 전형적으로, 알킬화제는 알킬화에 의해 DNA 분자의 친핵성 모이어티 예컨대 포스페이트, 아미노, 술프히드릴, 히드록실, 카르복실 및 이미다졸 기를 통해 DNA에 대해 공유 연결을 형성한다. 이러한 알킬화는 핵산 기능을 방해하여 세포 사멸로 이어진다. 알킬화제의 예는 질소 머스타드 예컨대 시클로포스파미드, 멜팔란 및 클로람부실; 알킬 술포네이트 예컨대 부술판; 니트로소우레아 예컨대 카르무스틴; 및 트리아젠 예컨대 다카르바진을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

시클로포스파미드, 2-[비스(2-클로로에틸)아미노]테트라히드로-2H-1,3,2-옥사자포스포린 2-옥시드 1수화물은 시톡산(CYTOXAN®)으로서 주사액 또는 정제로서 상업적으로 입수가능하다. 시클로포스파미드는 악성 림프종, 다발성 골수종 및 백혈병의 치료에서 단일 작용제로서 또는 다른 화학요법제와 조합되어 지시된다.

멜팔란, 4-[비스(2-클로로에틸)아미노]-L-페닐알라닌은 알케란(ALKERAN®)으로서 주사액 또는 정제로서 상업적으로 입수가능하다. 멜팔란은 다발성 골수종 및 난소의 절제불가능한 상피 암종의 완화적 치료에 대해 지시된다. 골수 억제가 멜팔란의 가장 흔한 용량 제한 부작용이다.

클로람부실, 4-[비스(2-클로로에틸)아미노]벤젠부탄산은 류케란(LEUKERAN®) 정제로서 상업적으로 입수가능하다. 클로람부실은 만성 림프성 백혈병, 및 악성 림프종 예컨대 림프육종, 거대 여포성 림프종, 및 호지킨병의 완화적 치료에 대해 지시된다.

부술판, 1,4-부탄디올 디메탄술포네이트는 밀레란(MYLERAN®) 정제로서 상업적으로 입수가능하다. 부술판은 만성 골수 백혈병의 완화적 치료에 대해 지시된다.

카르무스틴, 1,3-[비스(2-클로로에틸)-1-니트로소우레아는 비-크뉴(Bi-CNU®)로서 동결건조된 물질의 단일 바이알로서 상업적으로 입수가능하다. 카르무스틴은 뇌 종양, 다발성 골수종, 호지킨병 및 비-호지킨 림프종을 위한 완화적 치료에 대해 단일 작용제로서 또는 다른 작용제와 조합되어 지시된다.

다카르바진, 5-(3,3-디메틸-1-트리아제노)-이미다졸-4-카르복스아미드는 DTIC-돔(DTIC-Dome®)으로서 물질의 단일 바이알로서 상업적으로 입수가능하다. 다카르바진은 전이성 악성 흑색종의 치료에 대해 지시되고 호지킨병의 2차 치료에 대해 다른 작용제와 조합되어 지시된다.

항생제성 항신생물제:

항생 항신생물제는 DNA와 결합 또는 그에 삽입되는 비-기 특이적 작용제이다. 전형적으로, 이러한 작용은 안정한 DNA 복합체 또는 가닥 파괴를 유발하며, 이는 핵산의 통상의 기능을 방해하여 세포 사멸로 이어진다. 항생제성 항신생물제의 예는 악티노마이신 예컨대 닥티노마이신, 안트로시클린 예컨대 다우노루비신 및 독소루비신; 및 블레오마이신을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

악티노마이신 D로도 공지된 닥티노마이신은 코스메겐(COSMEGEN®)으로서 주사가능한 형태로 상업적으로 입수가능하다. 닥티노마이신은 윌름스 종양 및 횡문근육종의 치료에 대해 지시된다.

다우노루비신, (8S-시스-)-8-아세틸-10-[(3-아미노-2,3,6-트리데옥시-α-L-릭소-헥소피라노실)-옥시]-7,8,9,10-테트라히드로-6,8,11-트리히드록시-1-메톡시-5,12 나프타센디온 히드로클로라이드는 다우녹솜(DAUNOXOME®)으로서 리포솜 주사가능한 형태로서 또는 세루비딘(CERUBIDINE®)으로서 주사가능한 형태로서 상업적으로 입수가능하다. 다우노루비신은 급성 비림프구성 백혈병 및 진행성 HIV 연관 카포시 육종의 치료에서 완화 유도에 대해 지시된다.

독소루비신, (8S,10S)-10-[(3-아미노-2,3,6-트리데옥시-α-L-릭소-헥소피라노실)옥시]-8-글리콜로일,7,8,9,10-테트라히드로-6,8,11-트리히드록시-1-메톡시-5,12 나프타센디온 히드로클로라이드는 루벡스(RUBEX®) 또는 아드리아마이신(ADRIAMYCIN RDF®)로서 주사가능한 형태로서 상업적으로 입수가능하다. 독소루비신은 급성 림프모구성 백혈병 및 급성 골수모구성 백혈병의 치료에 대해 주로 지시되지만, 또한 일부 고형 종양 및 림프종의 치료에 유용한 성분이다.

블레오마이신, 스트렙토미세스 베르티실루스(Streptomyces verticillus)의 균주로부터 단리된 세포독성 당펩티드 항생제의 혼합물은 블레녹산(BLENOXANE®)으로서 상업적으로 입수가능하다. 블레오마이신은 편평 세포 암종, 림프종 및 고환 암종의 완화적 치료로서 단일 작용제로서 또는 다른 작용제와 조합되어 지시된다.

토포이소머라제 II 억제제:

토포이소머라제 II 억제제는 에피포도필로톡신을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

에피포도필로톡신은 맨드레이크 식물로부터 유래한 기 특이적 항신생물제이다. 에피포도필로톡신은 전형적으로 토포이소머라제 II 및 DNA와 함께 3원 복합체를 형성하여 DNA 가닥 파괴를 유발함으로써 세포 주기의 S 및 G2 기에 있는 세포에 영향을 미친다. 가닥 파괴가 축적되고 세포 사멸이 이어진다. 에피포도필로톡신의 예는 에토포시드 및 테니포시드를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

에토포시드 (4'-데메틸-에피포도필로톡신 9[4,6-O-(R)-에틸리덴-β-D-글루코피라노시드])는 주사가능 용액 또는 캡슐로서 베페시드(VePESID)®로 상업적으로 입수가능하며, 보통 VP-16으로 알려져 있다. 에토포시드는 고환암 및 비소세포 폐암의 치료에서 단일 작용제로서 또는 다른 화학요법제와 조합되어 지시된다.

테니포시드 (4'-데메틸-에피포도필로톡신 9[4,6-O-(R)-테닐리덴-β-D-글루코피라노시드])는 주사가능 용액으로서 부몬(VUMON)®으로 상업적으로 입수가능하며, 보통 VM-26으로 알려져 있다. 테니포시드는 소아에서의 급성 백혈병의 치료에서 단일 작용제로서 또는 다른 화학요법제와 조합되어 지시된다.

항대사물 신생물제:

항대사물 신생물제는 DNA 합성을 억제하거나 또는 퓨린 또는 피리미딘 염기 합성을 억제하여 DNA 합성을 제한함으로써 세포 주기의 S 기 (DNA 합성)에서 작용하는 기 특이적 항신생물제이다. 결과적으로, S 기가 진행되지 않고 세포 사멸이 이어진다. 항대사물 항신생물제의 예는 플루오로우라실, 메토트렉세이트, 시타라빈, 메르캅토퓨린, 티오구아닌 및 겜시타빈을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

5-플루오로우라실, 5-플루오로-2,4-(1H,3H)피리미딘디온은 플루오로우라실로서 상업적으로 입수가능하다. 5-플루오로우라실의 투여는 티미딜레이트 합성의 억제로 이어지고, 또한 RNA 및 DNA 둘 다에 혼입된다. 그 결과는 전형적으로 세포 사멸이다. 5-플루오로우라실은 유방, 결장, 직장, 위 및 췌장 암종의 치료에서 단일 작용제로서 또는 다른 화학요법제와 조합되어 제시된다. 다른 플루오로피리미딘 유사체는 5-플루오로 데옥시우리딘 (플록수리딘) 및 5-플루오로데옥시우리딘 모노포스페이트를 포함한다.

시타라빈은 4-아미노-1-β-D-아라비노푸라노실-2(1H)-피리미디논이고, 시토사르-유(CYTOSAR-U)®로 상업적으로 입수가능하며, 일반적으로 Ara-C라고 공지되어 있다. 시타라빈은 시타라빈의 성장 중인 DNA 쇄 내로의 말단 혼입에 의해 DNA 쇄 신장을 억제함으로써 S 기에서 세포 기 특이성을 나타내는 것으로 여겨진다. 시타라빈은 급성 백혈병의 치료에서 단일 작용제로서 또는 다른 화학요법제와 조합되어 지시된다. 다른 시티딘 유사체는 5-아자시티딘 및 2',2'-디플루오로데옥시시티딘 (겜시타빈)을 포함한다.

메르캅토퓨린, 1,7-디히드로-6H-퓨린-6-티온 1수화물은 퓨린톨(PURINETHOL®)로서 상업적으로 입수가능하다. 메르캅토퓨린은 아직까지 상세불명의 메카니즘에 의해 DNA 합성을 억제함으로써 S 기에서 세포 기 특이성을 나타낸다. 메르캅토퓨린은 급성 백혈병의 치료에서 단일 작용제로서 또는 다른 화학요법제와 조합되어 지시된다. 유용한 메르캅토퓨린 유사체는 아자티오프린이다.

티오구아닌, 2-아미노-1,7-디히드로-6H-퓨린-6-티온은 타블로이드(TABLOID®)로서 상업적으로 입수가능하다. 티오구아닌은 아직까지 상세불명의 메카니즘에 의해 DNA 합성을 억제함으로써 S 기에서 세포 기 특이성을 나타낸다. 티오구아닌은 급성 백혈병의 치료에서 단일 작용제로서 또는 다른 화학요법제와 조합되어 지시된다. 다른 퓨린 유사체는 펜토스타틴, 에리트로히드록시노닐아데닌, 플루다라빈 포스페이트 및 클라드리빈을 포함한다.

겜시타빈, 2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 모노히드로클로라이드 (β-이성질체)는 겜자르(GEMZAR®)로서 상업적으로 입수가능하다. 겜시타빈은 S 기에서 및 G1/S 경계를 통한 세포 진행의 차단에 의해 세포 기 특이성을 나타낸다. 겜시타빈은 국부 진행성 비소세포 폐암의 치료에서 시스플라틴과 조합되어 지시되고, 국부 진행성 췌장암의 치료에서 단독으로 지시된다.

메토트렉세이트, N-[4[[(2,4-디아미노-6-프테리디닐)메틸]메틸아미노]벤조일]-L-글루탐산은 메토트렉세이트 소듐으로서 상업적으로 입수가능하다. 메토트렉세이트는 퓨린 뉴클레오티드 및 티미딜레이트의 합성에 필요한 디히드로폴산 리덕타제의 억제를 통해 DNA 합성, 복구 및/또는 복제를 억제함으로써 S 기에서 특이적으로 세포 기 효과를 나타낸다. 메토트렉세이트는 융모막암종, 수막 백혈병, 비-호지킨 림프종, 및 유방, 두부, 경부, 난소 및 방광 암종의 치료에서 단일 작용제로서 또는 다른 화학요법제와 조합되어 지시된다.

토포이소머라제 I 억제제:

캄프토테신 및 캄프토테신 유도체를 포함한 캄프토테신은 토포이소머라제 I 억제제로서 입수가능하거나 또는 개발 중이다. 캄프토테신 세포독성 활성은 그의 토포이소머라제 I 억제 활성과 관련되어 있는 것으로 여겨진다. 캄프토테신의 예는 이리노테칸, 토포테칸, 및 하기 기재된 7-(4-메틸피페라지노-메틸렌)-10,11-에틸렌디옥시-20-캄프토테신의 다양한 광학 형태를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

이리노테칸 HCl, (4S)-4,11-디에틸-4-히드록시-9-[(4-피페리디노피페리디노)카르보닐옥시]-1H-피라노[3',4',6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온 히드로클로라이드는 주사액 캄프토사르(CAMPTOSAR®)로서 상업적으로 입수가능하다. 이리노테칸은 그의 활성 대사물 SN-38과 함께 토포이소머라제 I - DNA 복합체에 대해 결합하는 캄프토테신의 유도체이다. 세포독성은 토포이소머라제 I : DNA : 이리노테칸의 상호작용 또는 복제 효소와의 SN-38 3원 복합체에 의해 초래된 복구불가능한 이중 가닥 파괴의 결과로서 발생하는 것으로 여겨진다. 이리노테칸은 결장 또는 직장의 전이성 암의 치료에 대해 지시된다.

토포테칸 HCl, (S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-4-에틸-4,9-디히드록시-1H-피라노[3',4',6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14-(4H,12H)-디온 모노히드로클로라이드는 주사액 하이캄틴(HYCAMTIN®)으로서 상업적으로 입수가능하다. 토포테칸은 토포이소머라제 I - DNA 복합체와 결합하고 DNA 분자의 비틀림 변형에 대해 반응하는 토포이소머라제 I에 의해 유발된 단일 가닥 파괴의 재라이게이션을 방지하는 캄프토테신의 유도체이다. 토포테칸은 난소암 및 소세포 폐암의 전이성 암종의 2차 치료에 대해 지시된다.

호르몬 및 호르몬 유사체:

호르몬 및 호르몬 유사체는 호르몬(들)과 암의 성장 및/또는 성장 결여 사이에 관계가 있는 암의 치료에 유용한 화합물이다. 암 치료에 유용한 호르몬 및 호르몬 유사체의 예는 아드레노코르티코스테로이드, 예컨대 프레드니손 및 프레드니솔론 (이는 소아에서 악성 림프종 및 급성 백혈병 치료에 유용함); 아미노글루테티미드 및 다른 아로마타제 억제제, 예컨대 아나스트로졸, 레트라졸, 보라졸, 및 엑세메스탄 (부신피질 암종, 및 에스트로겐 수용체 함유 호르몬 의존성 유방 암종의 치료에 유용함); 프로게스트린, 예컨대 메게스트롤 아세테이트 (호르몬 의존성 유방암 및 자궁내막 암종의 치료에 유용함); 에스트로겐, 안드로겐, 및 항안드로겐, 예컨대 플루타미드, 닐루타미드, 비칼루타미드, 시프로테론 아세테이트 및 5α-리덕타제, 예컨대 피나스테리드 및 두타스테리드 (전립선 암종 및 양성 전립선 비대증의 치료에 유용함); 항에스트로겐, 예컨대 타목시펜, 토레미펜, 랄록시펜, 드롤록시펜, 아이오독시펜, 뿐만 아니라 선택적 에스트로겐 수용체 조절제 (SERMS), 예컨대 미국 특허 번호 5,681,835, 5,877,219, 및 6,207,716에 기재된 것들 (호르몬 의존성 유방 암종 및 다른 감수성 암의 치료에 유용함); 및 전립선 암종의 치료를 위한 황체형성 호르몬 (LH) 및/또는 여포 자극 호르몬 (FSH)의 방출을 자극하는 고나도트로핀-방출 호르몬 (GnRH) 및 그의 유사체, 예를 들어 LHRH 효능제 및 길항제, 예컨대 고세렐린 아세테이트 및 류프롤리드를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

신호 전달 경로 억제제:

신호 전달 경로 억제제는 세포내 변화를 유발하는 화학적 과정을 차단 또는 억제하는 억제제이다. 본원에 사용된 이러한 변화는 세포 증식 또는 분화이다. 본 발명에 유용한 신호 전달 억제제는 수용체 티로신 키나제, 비-수용체 티로신 키나제, SH2/SH3도메인 차단제, 세린/트레오닌 키나제, 포스포티딜 이노시톨-3 키나제, 미오-이노시톨 신호전달, 및 Ras 종양유전자의 억제제를 포함한다.

여러 단백질 티로신 키나제는 세포 성장의 조절에 수반되는 다양한 단백질 내의 특정한 티로실 잔기의 인산화를 촉매한다. 이러한 단백질 티로신 키나제는 수용체 또는 비-수용체 키나제로서 광범위하게 분류될 수 있다.

수용체 티로신 키나제는, 세포외 리간드 결합 도메인, 막횡단 도메인, 및 티로신 키나제 도메인을 갖는 막횡단 단백질이다. 수용체 티로신 키나제는 세포 성장의 조절에 수반되며, 일반적으로 성장 인자 수용체로 명명된다. 예를 들어 과다발현 또는 돌연변이에 의한, 이들 키나제 중 다수의 부적절하거나 비제어된 활성화, 즉 이상 키나제 성장 인자 수용체 활성은 비제어된 세포 성장을 유발하는 것으로 제시되었다. 따라서, 이러한 키나제의 이상 활성은 악성 조직 성장와 연관되었다. 따라서, 이러한 키나제의 억제제는 암 치료 방법을 제공할 수 있다. 성장 인자 수용체는, 예를 들어 표피 성장 인자 수용체 (EGFr), 혈소판 유래 성장 인자 수용체 (PDGFr), erbB2, erbB4, ret, 혈관 내피 성장 인자 수용체 (VEGFr), 이뮤노글로불린-유사 및 표피 성장 인자 상동성 도메인을 갖는 티로신 키나제 (TIE-2), 인슐린 성장 인자-I (IGFI) 수용체, 대식세포 콜로니 자극 인자 (cfms), BTK, ckit, cmet, 섬유모세포 성장 인자 (FGF) 수용체, Trk 수용체 (TrkA, TrkB, 및 TrkC), 에프린 (eph) 수용체, 및 RET 원종양유전자를 포함한다. 여러 성장 수용체 억제제가 개발 중이며, 리간드 길항제, 항체, 티로신 키나제 억제제 및 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함한다. 성장 인자 수용체 기능을 억제하는 성장 인자 수용체 및 작용제는 예를 들어 문헌 [Kath, John C., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(6):803-818; Shawver et al. DDT Vol 2, No. 2 February 1997; 및 Lofts, F. J. et al., "Growth factor receptors as targets", New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, ed. Workman, Paul and Kerr, David, CRC press 1994, London]에 기재되어 있다.

성장 인자 수용체 키나제가 아닌 티로신 키나제는 비-수용체 티로신 키나제로 명명된다. 항암 약물의 표적 또는 잠재적 표적인, 본 발명에 유용한 비-수용체 티로신 키나제는 cSrc, Lck, Fyn, Yes, Jak, cAbl, FAK (국소 부착 키나제), 브루톤 티로신 키나제, 및 Bcr-Abl을 포함한다. 비-수용체 티로신 키나제 기능을 억제하는 이러한 비-수용체 키나제 및 작용제는 문헌 [Sinh, S. and Corey, S.J., (1999) Journal of Hematotherapy and Stem Cell Research 8 (5): 465 - 80; 및 Bolen, J.B., Brugge, J.S., (1997) Annual review of Immunology. 15: 371-404]에 기재되어 있다.

SH2/SH3 도메인 차단제는, PI3-K p85 서브유닛, Src 패밀리 키나제, 어댑터 분자 (Shc, Crk, Nck, Grb2) 및 Ras-GAP를 포함한 다양한 효소 또는 어댑터 단백질 내의 SH2 또는 SH3 도메인 결합을 방해하는 작용제이다. 항암 약물에 대한 표적으로서의 SH2/SH3 도메인은 문헌 [Smithgall, T.E. (1995), Journal of Pharmacological 및 Toxicological Methods. 34(3) 125-32]에 논의되어 있다.

Raf 키나제 (rafk), 미토겐 또는 세포외 조절 키나제 (MEK), 및 세포외 조절 키나제 (ERK)의 차단제; 및 PKC (알파, 베타, 감마, 엡실론, 뮤, 람다, 이오타, 제타)의 차단제를 포함한 단백질 키나제 C 패밀리 구성원 차단제를 포함하는, MAP 키나제 캐스케이드 차단제를 포함한 세린/트레오닌 키나제의 억제제. IkB 키나제 패밀리 (IKKa, IKKb), PKB 패밀리 키나제, akt 키나제 패밀리 구성원, 및 TGF 베타 수용체 키나제. 이러한 세린/트레오닌 키나제 및 억제제는 문헌 [Yamamoto, T., Taya, S., Kaibuchi, K., (1999), Journal of Biochemistry. 126 (5) 799-803; Brodt, P, Samani, A., and Navab, R. (2000), Biochemical Pharmacology, 60. 1101-1107; Massague, J., Weis-Garcia, F. (1996) Cancer Surveys. 27:41-64; Philip, P.A., and Harris, A.L. (1995), Cancer Treatment and Research. 78: 3-27, Lackey, K. et al. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, (10), 2000, 223-226; U.S. Patent number 6,268,391; 및 Martinez-Iacaci, L., et al., Int. J. Cancer (2000), 88(1), 44-52]에 기재되어 있다.

PI3-키나제, ATM, DNA-PK, 및 Ku의 차단제를 포함한 포스포티딜 이노시톨-3 키나제 패밀리 구성원의 억제제가 본 발명에 또한 유용하다. 이러한 키나제는 문헌 [Abraham, R.T. (1996), Current Opinion in Immunology. 8 (3) 412-8; Canman, C.E., Lim, D.S. (1998), Oncogene 17 (25) 3301-3308; Jackson, S.P. (1997), International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 29 (7):935-8; 및 Zhong, H. et al., Cancer res, (2000) 60(6), 1541-1545]에 논의되어 있다.

미오-이노시톨 신호전달 억제제 예컨대 포스포리파제 C 차단제 및 미오이노시톨 유사체가 본 발명에 또한 유용하다. 이러한 신호 억제제는 문헌 [Powis, G., and Kozikowski A., (1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy ed., Paul Workman and David Kerr, CRC press 1994, London]에 기재되어 있다.

신호 전달 경로 억제제의 또 다른 군은 Ras 종양유전자의 억제제이다. 이러한 억제제는 파르네실트랜스퍼라제, 게라닐-게라닐 트랜스퍼라제, 및 CAAX 프로테아제의 억제제 뿐만 아니라 안티센스 올리고뉴클레오티드, 리보자임 및 면역요법을 포함한다. 이러한 억제제는 야생형 돌연변이체 ras를 함유하는 세포에서 ras 활성화를 차단하여, 항증식제로서 작용하는 것으로 제시된 바 있다. Ras 종양유전자 억제는 문헌 [Scharovsky, O.G., Rozados, V.R., Gervasoni, S.I. Matar, P. (2000), Journal of Biomedical Science. 7(4) 292-8; Ashby, M.N. (1998), Current Opinion in Lipidology. 9 (2) 99 - 102; 및 BioChim. Biophys. Acta, (19899) 1423(3):19-30]에 논의되어 있다.

상기 언급된 바와 같이, 수용체 키나제 리간드 결합에 대한 항체 길항제는 또한 신호 전달 억제제로서 기능할 수 있다. 이러한 신호 전달 경로 억제제의 군은 수용체 티로신 키나제의 세포외 리간드 결합 도메인에 대한 인간화 항체의 사용을 포함한다. 예를 들어 임클론(Imclone) C225 EGFR 특이적 항체 (문헌 [Green, M.C. et al., Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors, Cancer Treat. Rev., (2000), 26(4), 269-286] 참조); 헤르셉틴(Herceptin®) erbB2 항체 (문헌 [Tyrosine Kinase Signalling in Breast cancer:erbB Family Receptor Tyrosine Kinases, Breast cancer Res., 2000, 2(3), 176-183] 참조); 및 2CB VEGFR2 특이적 항체 (문헌 [Brekken, R.A. et al., Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by a monoclonal Anti-VEGF antibody blocks tumor growth in mice, Cancer Res. (2000) 60, 5117-5124] 참조).

항혈관신생제:

(i) 비-수용체 MEK 혈관신생 억제제를 포함한 항혈관신생제가 또한 유용할 수 있다. 항혈관신생제, 예컨대 혈관 내피 성장 인자의 효과를 억제하는 것, (예를 들어 항-혈관 내피 세포 성장 인자 항체 베바시주맙 [아바스틴(Avastin™)]), 및 다른 메카니즘에 의해 작용하는 화합물 (예를 들어 리노미드, 인테그린 αvβ3 기능의 억제제, 엔도스타틴 및 안지오스타틴);

면역요법제:

면역치료 요법에 사용되는 작용제가 또한 화학식 (I)의 화합물과 조합하여 유용할 수 있다. 예를 들어 환자 종양 세포의 면역원성을 증가시키는 생체외 및 생체내 접근법, 예컨대 시토카인, 예컨대 인터류킨 2, 인터류킨 4 또는 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자를 사용한 형질감염, T-세포 무반응을 감소시키는 접근법, 형질감염된 면역 세포, 예컨대 시토카인-형질감염된 수지상 세포를 사용하는 접근법, 시토카인-형질감염된 종양 세포주를 사용하는 접근법, 및 항-이디오타입 항체를 사용하는 접근법을 포함하는 면역요법 접근법.

아폽토시스촉진제:

아폽토시스촉진 요법에 사용되는 작용제 (예를 들어, bcl-2 안티센스 올리고뉴클레오티드)가 또한 본 발명의 조합물에 사용될 수 있다.

세포 주기 신호전달 억제제

세포 주기 신호전달 억제제는 세포 주기의 제어에 수반되는 분자를 억제한다. 시클린 의존성 키나제 (CDK)로 칭하는 단백질 키나제의 패밀리, 및 그와 시클린으로 명명된 단백질의 패밀리와의 상호작용은 진핵 세포 주기를 통해 진행을 제어한다. 다양한 시클린/CDK 착물의 배위 활성화 및 불활성화가 세포 주기를 통한 정상적인 진행을 위해 필요하다. 세포 주기 신호전달의 여러 억제제가 개발 중이다. 예를 들어, CDK2, CDK4, 및 CDK6을 포함한 시클린 의존성 키나제 및 그에 대한 억제제는, 예를 들어 문헌 [Rosania et al., Exp. Opin. Ther. (2000) 10(2):215-230]에 기재되어 있다.

한 실시양태에서, 본 발명의 조합물은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 염 또는 용매화물, 및 항미세관제, 백금 배위 착물, 알킬화제, 항생제, 토포이소머라제 II 억제제, 항대사물, 토포이소머라제 I 억제제, 호르몬 및 호르몬 유사체, 신호 전달 경로 억제제, 비-수용체 티로신 MEK 혈관신생 억제제, 면역요법제, 아폽토시스촉진제 및 세포 주기 신호전달 억제제로부터 선택된 적어도 1종의 항신생물제를 포함한다.

한 실시양태에서, 본 발명의 조합물은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 염 또는 용매화물, 및 디테르페노이드 및 빈카 알칼로이드로부터 선택된 항미세관제인 적어도 1종의 항신생물제를 포함한다.

추가 실시양태에서, 적어도 1종의 항신생물제는 디테르페노이드이다.

추가 실시양태에서, 적어도 1종의 항신생물제는 빈카 알칼로이드이다.

한 실시양태에서, 본 발명의 조합물은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 염 또는 용매화물, 및 백금 배위 착물인 적어도 1종의 항신생물제를 포함한다.

추가 실시양태에서, 적어도 1종의 항신생물제는 파클리탁셀, 카르보플라틴, 또는 비노렐빈이다.

추가 실시양태에서, 적어도 1종의 항신생물제는 카르보플라틴이다.

추가 실시양태에서, 적어도 1종의 항신생물제는 비노렐빈이다.

추가 실시양태에서, 적어도 1종의 항신생물제는 파클리탁셀이다.

한 실시양태에서, 본 발명의 조합물은 화학식 (I)의 화합물 및 그의 염 또는 용매화물, 및 신호 전달 경로 억제제인 적어도 1종의 항신생물제를 포함한다.

추가 실시양태에서 신호 전달 경로 억제제는 성장 인자 수용체 키나제 VEGFR2, TIE2, PDGFR, BTK, erbB2, EGFr, IGFR-1, TrkA, TrkB, TrkC, 또는 c-fms의 억제제이다.

추가 실시양태에서 신호 전달 경로 억제제는 세린/트레오닌 키나제 rafk, akt, 또는 PKC-제타의 억제제이다.

추가 실시양태에서 신호 전달 경로 억제제는 키나제의 src 패밀리로부터 선택된 비-수용체 티로신 키나제의 억제제이다.

추가 실시양태에서 신호 전달 경로 억제제는 c-src의 억제제이다.

추가 실시양태에서 신호 전달 경로 억제제는 파르네실 트랜스퍼라제 및 게라닐게라닐 트랜스퍼라제의 억제제로부터 선택된 Ras 종양유전자의 억제제이다.

추가 실시양태에서 신호 전달 경로 억제제는 PI3K로 이루어진 군으로부터 선택된 세린/트레오닌 키나제의 억제제이다.

추가 실시양태에서 신호 전달 경로 억제제는 이중 EGFr/erbB2 억제제, 예를 들어 N-{3-클로로-4-[(3-플루오로벤질)옥시]페닐}-6-[5-({[2-(메탄술포닐)에틸]아미노}메틸)-2-푸릴]-4-퀴나졸린아민 (하기 구조)이다.

한 실시양태에서, 본 발명의 조합물은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 염 또는 용매화물 및 세포 주기 신호전달 억제제인 적어도 1종의 항신생물제를 포함한다.

추가 실시양태에서, 세포 주기 신호전달 억제제는 CDK2, CDK4 또는 CDK6의 억제제이다.

면역자극제:

본원에 사용된 "면역자극제"는 면역계를 자극할 수 있는 임의의 작용제를 지칭한다. 본원에 사용된 면역자극제는 백신 보조제, 예컨대 톨-유사 수용체 효능제, T-세포 체크포인트 차단제, 예컨대 PD-1 및 CTL4에 대한 mAb, 및 T-세포 체크포인트 효능제, 예컨대 OX-40 및 ICOS에 대한 효능제 mAb를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명에 의해 발명된 화학식 (I)의 화합물과 공-투여되거나 조합하여 사용하기 위한 추가의 활성 성분 또는 성분들 (항신생물제)의 추가적 예는 항-PD-L1 작용제이다.

항-PD-L1 항체 및 그의 제조 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다.

이러한 PD-L1에 대한 항체는 폴리클로날 또는 모노클로날, 및/또는 재조합 및/또는 인간화 항체일 수 있다.

예시적인 PD-L1 항체는 하기에 개시되어 있다:

미국 특허 번호 8,217,149; 12/633,339;

미국 특허 번호 8,383,796; 13/091,936;

미국 특허 번호 8,552,154; 13/120,406;

미국 특허 공개 번호 20110280877; 13/068337;

미국 특허 공개 번호 20130309250; 13/892671;

WO2013019906;

WO2013079174;

미국 출원 번호 13/511,538 (2012년 8월 7일에 출원됨), 이는 국제 출원 번호 PCT/US10/58007(2010년 출원됨)의 미국 국내 단계임;

및

미국 출원 번호 13/478,511 (2012년 5월 23일에 출원됨).

PD-L1 (CD274 또는 B7-H1으로도 언급됨)에 대한 추가의 예시적인 항체 및 사용 방법은 미국 특허 번호 7,943,743; US20130034559, WO2014055897, 미국 특허 번호 8,168,179; 및 미국 특허 번호 7,595,048에 개시되어 있다. PD-L1 항체는 암의 치료를 위한 면역조정제로서 개발 중이다.

한 실시양태에서, PD-L1에 대한 항체는 미국 특허 번호 8,217,149에 개시된 항체이다. 또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 미국 특허 번호 8,217,149에 개시된 항체의 CDR을 포함한다.

또 다른 실시양태에서, PD-L1에 대한 항체는 미국 출원 번호 13/511,538에 개시된 항체이다. 또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 미국 출원 번호 13/511,538에 개시된 항체의 CDR을 포함한다.

또 다른 실시양태에서, PD-L1에 대한 항체는 출원 번호 13/478,511에 개시된 항체이다. 또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 미국 출원 번호 13/478,511에 개시된 항체의 CDR을 포함한다.

한 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 BMS-936559 (MDX-1105)이다. 또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 MPDL3280A (RG7446)이다. 또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 MEDI4736이다.

본 발명에 의해 발명된 화학식 (I)의 화합물과 공-투여되거나 조합하여 사용하기 위한 추가의 활성 성분 또는 성분들 (항신생물제)의 추가적 예는 PD-1 길항제이다.

"PD-1 길항제"는 암 세포 상에서 발현되는 PD-L1이 면역 세포 (T 세포, B 세포 또는 NKT 세포) 상에서 발현되는 PD-1에 결합하는 것을 차단하고, 바람직하게는 또한 암 세포 상에서 발현되는 PD-L2가 면역-세포 발현 PD-1에 결합하는 것을 차단하는 임의의 화학적 화합물 또는 생물학적 분자를 의미한다. PD-1 및 그의 리간드에 대한 대안적 명칭 또는 동의어는, PD-1의 경우 PDCD1, PD1, CD279 및 SLEB2; PD-L1의 경우 PDCD1L1, PDL1, B7H1, B7-4, CD274 및 B7-H; 및 PD-L2의 경우 PDCD1L2, PDL2, B7-DC, Btdc 및 CD273을 포함한다. 인간 개체를 치료하고자 하는 본 발명의 측면 또는 실시양태 중 임의의 실시양태에서, PD-1 길항제는 인간 PD-L1이 인간 PD-1에 결합하는 것을 차단하고, 바람직하게는 인간 PD-L1 및 PD-L2 둘 다가 인간 PD-1에 결합하는 것을 차단한다. 인간 PD-1 아미노산 서열은 NCBI 로커스 번호 NP_005009에서 찾아볼 수 있다. 인간 PD-L1 및 PD-L2 아미노산 서열은 각각 NCBI 로커스 번호 NP_054862 및 NP_079515에서 찾아볼 수 있다.

본 발명의 측면 중 임의의 것에서 유용한 PD-1 길항제는 PD-1 또는 PD-L1에 특이적으로 결합하고, 바람직하게는 인간 PD-1 또는 인간 PD-L1에 특이적으로 결합하는, 모노클로날 항체 (mAb), 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다. 이러한 mAb는 인간 항체, 인간화 항체 또는 키메라 항체일 수 있으며, 인간 불변 영역을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 인간 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4 불변 영역으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 바람직한 실시양태에서, 인간 불변 영역은 IgG1 또는 IgG4 불변 영역이다. 일부 실시양태에서, 항원 결합 단편은 Fab, Fab'-SH, F(ab')2, scFv 및 Fv 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

인간 PD-1에 결합하며 본 발명의 다양한 측면 및 실시양태에서 유용한 mAb의 예는 US7488802, US7521051, US8008449, US8354509, US8168757, WO2004/004771, WO2004/072286, WO2004/056875, 및 US2011/0271358에 기재되어 있다.

본 발명의 임의의 측면 및 실시양태에서 PD-1 길항제로서 유용한 특이적 항-인간 PD-1 mAb는 하기를 포함한다: 문헌 [WHO Drug Information, Vol. 27, No. 2, pages 161-162 (2013)]에 기재된 구조를 가지며 도 6에 나타낸 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 포함하는 인간화된 IgG4 mAb인 MK-3475; 문헌 [WHO Drug Information, Vol. 27, No. 1, pages 68-69 (2013)]에 기재된 있는 구조를 가지며 도 7에 나타낸 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 포함하는 인간화된 IgG4 mAb인 니볼루맙; WO2008/156712에 기재된 인간화 항체 h409A11, h409A16 및 h409A17, 및 메드이뮨(Medimmune)에 의해 개발 중인 AMP-514.

본 발명의 측면 및 실시양태 중 임의의 것에서 유용한 다른 PD-1 길항제는 PD-1에 특이적으로 결합하고, 바람직하게는 인간 PD-1에 특이적으로 결합하는 이뮤노어드헤신, 예를 들어 불변 영역 예컨대 이뮤노글로불린 분자의 Fc 영역에 융합된 PD-L1 또는 PD-L2의 세포외 또는 PD-1 결합 부분을 함유하는 융합 단백질을 포함한다. PD-1에 특이적으로 결합하는 면역부착 분자의 예는 WO2010/027827 및 WO2011/066342에 기재되어 있다. 본 발명의 치료 방법, 의약 및 용도에서 PD-1 길항제로서 유용한 구체적 융합 단백질은, PD-L2-FC 융합 단백질이며 인간 PD-1에 결합하는 AMP-224 (B7-DCIg로도 공지됨)를 포함한다.

본 발명의 치료 방법, 의약 및 용도에 유용한, 인간 PD-L1에 결합하는 mAb의 다른 예는 WO2013/019906, W02010/077634 A1 및 US8383796에 기재되어 있다. 본 발명의 치료 방법, 의약 및 용도에서 PD-1 길항제로서 유용한 구체적 항-인간 PD-L1 mAb는 MPDL3280A, BMS-936559, MEDI4736, MSB0010718C를 포함한다.

키트루다(KEYTRUDA)/펨브롤리주맙은 머크(Merck)에 의해 폐암의 치료를 위해 상업적으로 입수가능한 항-PD-1 항체이다. 펨브롤리주맙의 아미노산 서열 및 사용 방법은 미국 특허 번호 8,168,757에 개시되어 있다.

옵디보(Opdivo)/니볼루맙은 면역강화 활성을 갖는 음성 면역조절 인간 세포 표면 수용체 PD-1 (프로그램화된 사멸-1 또는 프로그램화된 세포 사멸-1/PCD-1)에 대해 지시되는, 브리스톨 마이어스 스큅(Bristol Myers Squibb)에 의해 상업적으로 입수가능한 완전 인간 모노클로날 항체이다. 니볼루맙은 그의 리간드 PD-L1 및 PD-L2에 의해 Ig 슈퍼패밀리 막횡단 단백질인 PD-1에 결합하고, 그의 활성화를 차단하여, T-세포의 활성화 및 암 세포 또는 병원체에 대한 세포-매개 면역 반응을 유발한다. 활성화된 PD-1은 P13k/Akt 경로 활성화의 억제를 통해 T-세포 활성화 및 이펙터 기능을 음성적으로 조절한다. 니볼루맙의 다른 명칭은 BMS-936558, MDX-1106 및 ONO-4538를 포함한다. 니볼루맙에 대한 아미노산 서열 및 사용 방법 및 제조 방법은 미국 특허 번호 US 8,008,449에 개시되어 있다.

본 발명에 의해 발명된 화학식 (I)의 화합물과 공-투여되거나 조합하여 사용하기 위한 추가의 활성 성분 또는 성분들 (항신생물제)의 추가적 예는 면역-조정제이다.

본원에 사용된 "면역-조정제"는 면역계에 영향을 미치는 모노클로날 항체를 포함한 임의의 물질을 지칭한다. 본 발명의 ICOS 결합 단백질은 면역조정제로 간주될 수 있다. 면역조정제는 암의 치료를 위한 항신생물제로서 사용될 수 있다. 예를 들어, 면역조정제는 항-CTLA-4 항체 예컨대 이필리무맙 (예르보이(YERVOY)) 및 항-PD-1 항체 (옵디보/니볼루맙 및 키트루다/펨브롤리주맙)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 다른 면역조정제는 OX-40 항체, PD-L1 항체, LAG3 항체, TIM-3 항체, 41BB 항체 및 GITR 항체를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

예르보이 (이필리무맙)는 브리스톨 마이어스 스큅에 의해 상업적으로 입수가능한 완전 인간 CTLA-4 항체이다. 이필리무맙의 단백질 구조 및 사용 방법은 미국 특허 번호 6,984,720 및 7,605,238에서 기재되어 있다.

OX40으로도 공지되어 있는 CD134는, CD28과 달리, 휴지기 나이브 T 세포 상에서 구성적으로 발현되지 않는 TNFR-슈퍼패밀리 수용체의 구성원이다. OX40은 활성화 후 24 내지 72시간 후에 발현되는 2차 공동자극 분자이고; 그의 리간드, OX40L은 또한 휴지기 항원 제시 세포 상에서 발현되지 않지만, 그의 활성화 후에는 발현된다. OX40의 발현은 T 세포의 완전 활성화에 의존성이고; CD28의 부재 하에, OX40의 발현은 지연되고 4배 더 낮은 수준이다. OX-40 항체, OX-40 융합 단백질 및 그들을 사용하는 방법은 미국 특허 번호 US 7,504,101; US 7,758,852; US 7,858,765; US 7,550,140; US 7,960,515; WO2012027328; WO2013028231에 개시되어 있다.

본원에 사용된 용어 "톨-유사 수용체" (또는 "TLR")는 미생물 산물을 감지하고/거나 적응 면역 반응을 개시하는 단백질 또는 그의 단편의 톨-유사 수용체 패밀리의 구성원을 지칭한다. 한 실시양태에서, TLR은 수지상 세포 (DC)를 활성화시킨다. 톨-유사 수용체 (TLR)는 미생물 병원체를 인식하는 선천성 면역계의 센서로서 최초 확인된 패턴 인식 수용체의 패밀리이다. TLR인 종종 "PAMP" (병원체 연관 분자 패턴)로 지칭되는, 미생물 내 별개의 구조를 인식한다. TLR에 대한 리간드 결합은, 염증 및 면역에 관여하는 인자의 생산을 유도하는 세포내 신호전달 경호의 캐스케이드를 야기한다. 인간에서, 10종의 TLR이 확인되었다. 세포의 표면 상에 발현되는 TLR은 TLR-I, -2, -4, -5, 및 -6을 포함하며, 한편 TLR-3, -7/8, 및 -9는 ER 구획으로 발현된다. 인간 DC 하위세트는 별개의 TLR 발편 패턴에 기초하여 확인될 수 있다. 예로서, DC의 골수성 또는 "통상적인" 하위세트 (mDC)는 자극 시에 TLR 1-8을 발현시키고, 활성화 마커 (예를 들어 CD80, CD86, MHC 클래스 I 및 II, CCR7), 염증유발 시토카인, 및 케모카인의 캐스케이드를 유발한다. 이러한 자극 및 유발된 발현의 결과는, 항원-특이적 CD4+ 및 CD8+ T 세포 프라이밍이다. 이들 DC는, 항원을 흡수하여 항원을 적절한 형태로 T 세포에 제시하는 것에 대해 향상된 능력을 수득한다. 반면에, DC의 형질세포양 하위세트 (pDC)는 활성화 시에 단지 TLR7 및 TLR9만을 발현시키며, NK 세포 뿐만 아니라 T-세포의 활성화가 유발된다. 죽어가는 종양 세포는 DC 기능에 부정적인 영향을 미칠 수 있기 때문에, TLR 효능제를 사용하여 DC를 활성화시키는 것은 암의 치료에 대한 면역요법 접근법에서 항종양 면역을 프라이밍하는데 유익할 수 있는 것으로 시사되었다. 또한, 방사선 및 화학요법을 사용하는 유방암의 성공적인 치료는 TLR4 활성화를 필요로 하는 것으로 시사되었다.

관련 기술분야에 공지되어 있고 본 발명에서 용도를 발견한 TLR 효능제는 하기를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다: Pam3Cys, TLRI/2 효능제; CFA, TLR2 효능제; MALP2, TLR2 효능제; Pam2Cys, TLR2 효능제; FSL-I, TLR-2 효능제; Hib-OMPC, TLR-2 효능제; 폴리리보이노신산:폴리리보시티딜산 (폴리 I:C), TLR3 효능제; 폴리아데노신-폴리우리딜산 (폴리 AU), TLR3 효능제; 폴리-L-리신 및 카르복시메틸셀룰로스로 안정화된 폴리이노신산-폴리시티딜산 (힐토놀(Hiltonol)), TLR3 효능제; 박테리아성 플라젤린 TLR5 효능제; 이미퀴모드, TLR7 효능제; 레시퀴모드, TLR7/8 효능제; 록소리빈, TLR7/8 효능제; 및 비메틸화 CpG 디뉴클레오티드 (CpG-ODN), TLR9 효능제.

관련 기술분야에 공지되고 본 발명에 사용되는 추가의 TLR 효능제는, 시토카인 생산을 자극하고 대식세포를 활성화시키고 선천성 면역 반응을 촉진하고 면역화 동물에서 항체 생산을 증진시키기 위한 백신 아주반트 및 면역자극제로서 유용한 것으로 공지된, TLR4 수용체에 결합하는 아미노알킬 글루코사미니드 포스페이트 (AGP)를 추가로 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 자연 발생 TLR4 효능제의 예는 박테리아 LPS이다. 반합성 TLR4 효능제의 예는 모노포스포릴 지질 A (MPL)이다. AGP 및 TLR4를 통한 그의 면역 조절 효과는 특허 공개 예컨대 WO 2006/016997, WO 2001/090129 및/또는 미국 특허 번호 6,113,918에 개시되어 있고, 문헌에 보고된 바 있다. 추가의 AGP 유도체는 미국 특허 번호 7,129,219, 미국 특허 번호 6,525,028 및 미국 특허 번호 6,911,434에 개시되어 있다. 특정 AGP는 TLR4의 효능제로서 작용하며, 다른 것들은 TLR4 길항제로서 인식된다.

상기에 기재된 면역자극제 외에도, 본 발명의 조성물은, 그의 아주반트 본성 때문에, 면역계가 불활성화된 종양 세포(들)에 존재하는 암 항원에 반응하도록 자극할 수 있는 1종 이상의 추가적 물질을 추가로 포함할 수 있다. 이러한 아주반트는, 지질, 리포솜, 선천성 면역을 유도하는 불활성화된 박테리아 (예를 들어, 불활성화된 또는 감쇠된 리스테리아 모노시토게네스), (NOD)-유사 수용체 (NLR), 레티노산 유도성 유전자-기반 (RIG)-I-유사 수용체 (RLR), 및/또는 C-형 렉틴 수용체 (CLR)를 통해 선천성 면역 활성화를 매개하는 조성물을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. PAMP의 예는 지단백질, 리포폴리펩티드, 펩티도글리칸, 지모산, 리포폴리사카라이드, 네이세리아 포린, 플라젤린, 프로필린, 갈락토세라미드, 뮤라밀 디펩티드를 포함한다. 펩티도글리칸, 지단백질, 및 리포테이코산은 그람-양성의 세포벽 성분이다. 리포폴리사카라이드는 대부분의 박테리아에 의해 발현되며, MPL이 한 예이다. 플라젤린은 병원성 및 공생 박테리아에 의해 분비되는 박테리아 편모의 구조적 성분을 지칭한다. rt.-갈락토실세라미드 (rt.-GalCer)는 자연 킬러 T (NKT) 세포의 활성화제이다. 뮤라밀 디펩티드는 모든 박테리아에 대해 공통인 생물활성 펩티도글리칸 모티프이다.

TLR 효능제는, 그의 아주반트 품질 때문에, 다른 백신, 아주반트 및/또는 면역 조정제와 조합되어 바람직하게 사용되며, 다양한 조합으로 조합될 수 있다. 따라서, 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같이, STING에 결합하여 STING-의존성 TBKI 활성화, 및 DC 유도, 동원 및/또는 성숙을 자극하는 1종 이상의 시토카인을 발현하고 분비하는 불활성화된 종양 세포를 유도하는 본원에 기재된 화학식 (I)의 화합물은 치료 목적을 위해 1종 이상의 TLR 효능제와 함께 투여될 수 있다.

본 발명에 의해 발명된 화학식 (I)의 화합물과 공-투여되거나 조합하여 사용하기 위한 추가의 활성 성분 또는 성분들 (항신생물제)의 추가적 예는 ICOS에 대한 항체이다.

효능제 활성을 갖는 인간 ICOS에 대한 뮤린 항체의 CDR은 PCT/EP2012/055735 (WO2012/131004)에 제시되어 있다. ICOS에 대한 항체는 또한 WO 2008/137915, WO 2010/056804, EP 1374902, EP1374901 및 EP1125585에 개시되어 있다.

인돌아민 2,3-디옥시게나제 1 (IDO1)은, 조절 T 세포 생성을 촉진하고 이펙터 T 세포 활성화를 차단하여, 암 세포가 면역 감시를 피하도록 함으로써 종양 성장을 용이하게 하는 것에 의해 항종양 면역 반응을 조정하는 주요 면역억제 효소이다. (Lemos H, et al., Cancer Res. 2016 Apr 15;76(8):2076-81), (Munn DH, et at., Trends Immunol. 2016 Mar;37(3):193-207). 본 발명에 의해 발명된 화학식 (I)의 화합물과 공-투여되거나 조합하여 사용하기 위한 추가의 활성 성분 (항신생물제)은 IDO 억제제이다. 에파카도스타트, ((Z)-N-(3-브로모-4-플루오로페닐)-N'-히드록시-4-[2-(술파모일아미노)에틸아미노]-1,2,5-옥사디아졸-3-카르복스아미딘)은, 종양-연관 면역 억제를 역전시키고 효과적인 항종양 면역 반응을 회복시키는 IDO1 효소의 매우 강력한 선택적 경구 억제제이다. 에파카도스타트는 미국 특허 번호 8,034,953에 개시되어 있다.

본 발명에 의해 발명된 화학식 (I)의 화합물과 공-투여되거나 조합하여 사용하기 위한 추가의 활성 성분 또는 성분들 (항신생물제)의 추가적 예는 CD73 억제제 및 A2a 및 A2b 아데노신 길항제이다.

한 실시양태에서, 청구된 본 발명의 암 치료 방법은 화학식 (I)의 화합물 및/또는 그의 제약상 허용되는 염 및 적어도 1종의 항신생물제, 예컨대 항미세관제, 백금 배위 착물, 알킬화제, 항생제, 토포이소머라제 II 억제제, 항대사물, 토포이소머라제 I 억제제, 호르몬 및 호르몬 유사체, 신호 전달 경로 억제제, 비-수용체 티로신 키나제 혈관신생 억제제, 면역요법제, 아폽토시스 촉진제, 세포 주기 신호전달 억제제; 프로테아솜 억제제; 및 암 대사의 억제제로 이루어진 군으로부터 선택된 것의 공-투여를 포함한다.

한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물은 종양 세포 사멸을 증진시키기 위해 화학증감제로서 사용된다.

한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물은 종양 세포 사멸을 증진시키기 위해 화학증감제로서 조합하여 사용된다.

한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물은 ATF-4의 조정제와 조합하여 사용된다.

한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물은 활성화 언폴딩된 단백질 반응 경로와 연관된 질환/손상을 치료하기 위해 ATF-4의 조정제와 조합하여 사용된다.

한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물은 신경변성 질환을 치료하기 위해 ATF-4의 조정제와 조합하여 사용된다.

한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물은 암을 치료하기 위해 ATF-4의 조정제와 조합하여 사용된다.

한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물은 ISRIB인 ATF-4의 조정제, 또는 eIF2B에 결합하여 전반적 번역을 증진시키는 또 다른 화합물과 조합되어 사용된다.

ISRIB는 2014년 3월 14일의 국제 출원일, 국제 공개 번호 WO 2014/144952 및 2014년 9월 18일의 국제 공개일을 갖는 국제 출원 PCT/US2014/029568에 기재되어 있다.

본 발명의 한 실시양태는

a) 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및

b) ATF-4 조정 화합물

을 포함하는 조합물을 제공한다.

ATF-4 조정 화합물은 국제 공개 번호 WO 2014/144952에 기재된 검정에 의해 확인될 수 있다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 신경변성 질환/손상의 치료에 유용한 것으로 알려진 적어도 1종의 다른 활성제와 공-투여할 수 있다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 당뇨병의 치료에 유용한 것으로 알려진 적어도 1종의 다른 활성제와 공-투여할 수 있다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 심혈관 질환의 치료에 유용한 것으로 알려진 적어도 1종의 다른 활성제와 공-투여할 수 있다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 안구 질환의 치료에 유용한 것으로 알려진 적어도 1종의 다른 활성제와 공-투여할 수 있다.

적합하게는, 화학식 (I)의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 기관 이식 동안 및 후에, 및 이식을 위한 기관의 수송에서 기관 손상을 방지하는데 유용한 것으로 알려진 적어도 1종의 다른 활성제와 공-투여할 수 있다.

조성물

본 발명의 범주 내의 제약 활성 화합물은 이를 필요로 하는 포유동물, 특히 인간에서 PERK 억제제로서 유용하다.

본 발명은 따라서 암, 신경변성 및 PERK 억제를 요구하는 다른 상태를 치료하는 방법을 제공하며, 이는 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함한다. 화학식 (I)의 화합물은 또한 PERK 억제제로서 작용하는 그의 입증된 능력으로 인해 상기 명시된 질환 상태를 치료하는 방법을 제공한다. 약물은 이것이 필요한 환자에게 정맥내, 근육내, 경구, 국소, 피하, 경동맥, 피내, 안내 및 비경구를 포함하는 임의의 통상적인 투여 경로에 의해 투여될 수 있고, 이에 제한되지는 않는다. 적합하게는, PERK 억제제는 척수강내 또는 뇌실내 경로에 의해 직접 뇌에 전달되거나 연속적으로 PERK 억제제 약물을 방출하는 장치 또는 펌프 내의 적절한 해부학적 위치에 이식될 수 있다.

본 발명의 제약상 활성 화합물은 편리한 투여 형태 예컨대 캡슐, 정제 또는 주사용 제제로 혼입된다. 고체 또는 액체 제약 담체가 사용된다. 고체 담체는 전분, 락토스, 황산칼슘 2수화물, 테라 알바, 수크로스, 활석, 젤라틴, 한천, 펙틴, 아카시아, 스테아르산마그네슘 및 스테아르산을 포함한다. 액체 담체는 시럽, 땅콩 오일, 올리브 오일, 염수 및 물을 포함한다. 유사하게, 담체 또는 희석제는 임의의 장시간 방출 물질 예컨대 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트를 단독으로 또는 왁스와 함께 포함할 수 있다. 고체 담체의 양은 크게 가변적이나, 바람직하게는 투여 단위 당 약 25 mg 내지 약 1 g일 것이다. 액체 담체가 사용되는 경우에, 제제는 시럽, 엘릭시르, 에멀션, 연질 젤라틴 캡슐, 앰플과 같은 멸균 주사액, 또는 수성 또는 비수성 액체 현탁액의 형태일 것이다.

제약 조성물은 적절하게는, 성분들을 혼합, 과립화, 및 정제 형태의 경우에 필요에 따라 압축, 또는 혼합, 충전 및 용해시키는 것을 포함하는 제약 화학자의 하기 통상적인 기술에 따라 제조되어 목적하는 경구 또는 비경구 생성물을 제공한다.

상기 기재한 바와 같은 제약 투여량 단위 중 본 발명의 제약상 활성인 화합물의 용량은 바람직하게는 활성 화합물 0.001 - 500 mg/kg, 바람직하게는 0.001 - 100 mg/kg 범위로부터 선택된 효과있고 비독성인 양일 것이다. PERK 억제제를 필요로 하는 인간 환자를 치료하는 경우에, 선택된 용량은 바람직하게는 매일 1-6회 경구 또는 비경구로 투여된다. 비경구 투여의 바람직한 형태는 주사 및 연속 주입에 의한 국소, 직장, 경피 투여를 포함한다. 인간에게 투여하기 위한 경구 투여량 단위는 바람직하게는 0.05 내지 3500mg의 활성 화합물을 함유한다. 보다 낮은 투여량의 경구 투여가 바람직하다. 그러나, 환자에게 안전하고 편리한 경우에는 높은 투여량의 비경구 투여가 또한 이용될 수 있다.

투여될 최적 투여량은 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있으며, 사용되는 특정 PERK 억제제, 제제의 강도, 투여 방식, 및 질환 상태의 진행에 따라 달라질 것이다. 환자 연령, 체중, 식이 및 투여 시간을 비롯한, 치료될 특정 환자에 따른 추가의 인자는 투여량 조정이 필요할 것이다.

이식을 위한 기관의 수송에서 기관 손상을 방지하기 위해 투여되는 경우, 화학식 (I)의 화합물을 수송 동안 기관을 수용하는 용액에, 적합하게는 완충 용액 중으로 첨가한다.

인간을 포함하는 포유동물에서 PERK 억제 활성을 유도하는 본 발명의 방법은 이러한 활성을 필요로 하는 대상체에게 PERK 억제 유효량의 본 발명의 제약 활성 화합물을 투여하는 것을 포함한다.

본 발명은 또한 PERK 억제제로서 사용하기 위한 의약의 제조에서의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다.

본 발명은 또한 요법에서 사용하기 위한 의약의 제조에서의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다.

본 발명 또한 암, 전암성 증후군, 알츠하이머병, 신경병성 통증, 척수 손상, 외상성 뇌 손상, 허혈성 졸중, 졸중, 파킨슨병, 당뇨병, 대사 증후군, 대사 장애, 헌팅턴병, 크로이츠펠트-야콥병, 치명적 가족성 불면증, 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커 증후군, 관련된 프리온 질환, 근위축성 측삭 경화증, 진행성 핵상 마비, 심근경색, 심혈관 질환, 염증, 기관 섬유증, 만성 및 급성 간 질환, 지방간 질환, 간 지방증, 간 섬유증, 만성 및 급성 폐 질환, 폐 섬유증, 만성 및 급성 신장 질환, 신장 섬유증, 만성 외상성 뇌병증 (CTE), 신경변성, 치매, 전두측두엽 치매, 타우병증, 픽병, 니만-픽병, 아밀로이드증, 인지 장애, 아테롬성동맥경화증, 안구 질환, 및 부정맥의 치료를 위한 의약의 제조에서 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다.

본 발명은 또한 이식을 위한 기관의 수송 동안 기관 손상을 방지하는데 사용하기 위한 의약의 제조에서 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다.

본 발명은 또한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 PERK 억제제로서 사용하기 위한 제약 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명의 제약상 활성 화합물은 암을 치료하는 것으로 공지된 다른 화합물, 또는 PERK 억제제와 조합하여 사용하는 경우에 유용성을 갖는 것으로 공지된 화합물과 같은 추가의 활성 성분과 공-투여될 수 있다.

본 발명은 또한, 0.5 내지 1,000 mg의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 0.5 내지 1,000 mg의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

추가의 노력 없이도, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 상기 기재를 사용하여 본 발명을 그의 최대 범위로 활용할 수 있을 것으로 여겨진다. 따라서, 하기 실시예는 단지 예시적인 것으로만 해석되며, 어떠한 방식으로든 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 해석되지 않는다.

실시예

하기 실시예는 본 발명을 예시한다. 이들 실시예는 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않으나, 오히려 통상의 기술자에게 본 발명의 화합물, 조성물, 및 방법을 제조 및 사용하는 것에 대한 지침을 제공한다. 본 발명의 특정한 실시양태가 기재되어 있지만, 통상의 기술자는 본 발명의 취지 및 범주로부터 벗어나지 않으면서 다양한 변화 및 변형이 이루어질 수 있다는 것을 인지할 것이다.

실시예 1

5-(3-벤질이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

단계 1

MeOH (100 mL) 중 2-아이오도벤조산 (10.0 g, 40.32 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 H₂SO₄ (10 mL)를 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 90℃로 가온하고, 8시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 포화 중탄산나트륨으로 0℃에서 염기성화시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 150 mL)로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수 용액으로 세척하고, 이어서 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 메틸 2-아이오도벤조에이트를 무색 액체 (9.0 g, 85%)로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 3.93 (s, 3 H), 7.15 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.40 (t, J=7.2 Hz, 1H), 7.80 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J=8.0 Hz, 1H).

단계 2

아세트산 (10 mL) 중 메틸 2-아이오도벤조에이트 (5.0 g, 19.08 mmol, 1 당량) 및 NBS (3.73 g, 20.99 mmol, 1.1 당량)의 교반 용액에 H₂SO₄ (10 mL)를 20-40℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 88시간 동안 교반한 다음 50℃로 가열하고, 이를 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 10℃로 냉각시키고, 냉수 (40 mL)로 켄칭하고, DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 5% 중탄산나트륨 (2 x 50 mL), 10% Na₂SO₃ 용액 (50 mL), 및 물 (50 mL)로 세척하고, 이어서 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 메틸 5-브로모-2-아이오도벤조에이트를 조 생성물로서 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 헥산 중 10% 에틸 아세테이트로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 메틸 5-브로모-2-아이오도벤조에이트를 회백색 고체 (5 g, 77%)로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 3.94 (s, 3 H).7.26 - 7.29 (m, 1H), 7.83 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.93 (d, J=8.8 Hz, 1H).

단계 3

에탄올 (20 mL) 중 수소화붕소나트륨 (1.1 g, 14.7 mmol, 2 당량)의 교반 용액에 5℃에서 THF 중 메틸 5-브로모-2-아이오도벤조에이트 (10 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 질소 분위기 하에 18시간 동안 교반하였다. 수소화붕소나트륨 (0.84 g, 22 mmol, 1.5 당량)의 추가량을 첨가하고, 혼합물을 22시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 10 mL의 15% 시트르산으로 천천히 처리하였다. 반응 혼합물을 DCM (2 x 75 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 15% 수성 NaCl (100 mL)로 세척하고, 이어서 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 (5-브로모-2-아이오도페닐)메탄올 (4.5 g, 100%)을 백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.83 - 1.88 (m, 1 H), 4.63 (s, 2H), 7.12 (dd, J=2.8, 8.4 Hz, 1H), 7.62- 7.66 (m, 2H).

단계 4

DCM (25 mL) 중 옥살릴 클로라이드 (1.99 mL, 23.04 mmol, 1.6 당량)의 용액을 -70℃로 냉각시키고, DCM (25 mL) 중 DMSO (2.44 mL, 34.5 mmol, 2.4 당량)을 -70℃ 내지 -65℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 -70℃에서 10분 동안 질소 분위기 하에 교반한 다음, DCM (100 mL) 중 (5-브로모-2-아이오도페닐)메탄올 (4.55 g, 14.4 mmol, 1.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -65℃에서 15분 동안 교반하고, 트리에틸아민 (10 mL, 72 mmol, 5.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃로 가온되도록 하고, 1시간 동안 교반하였다. 물 (40 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하였다. 유기 층을 분리하고, 증발시켜 5-브로모-2-아이오도벤즈알데히드 (4.2 g, 93%)를 백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz,CDCl₃) δ ppm 7.45 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.81 (d, J=11.6 Hz, 1H), 7.98 (d, J=1.6 Hz, 1H), 9.97 (s, 1H).

단계 5

THF (20 mL) 중 5-브로모-2-아이오도벤즈알데히드 (4.2 g, 13.5 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 실온에서 t-부틸 아민 (4.26 mL, 40.6 mmol, 3.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 40시간 동안 교반하고, 진공 하에 증발시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 DCM (100 mL) 중에 용해시키고 H₂O (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 (E)-N-(5-브로모-2-아이오도벤질리덴)-2-메틸프로판-2-아민 (3.0 g, 조 물질)을 황색 유성 화합물로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.32 (s, 9H), 7.20 (dd, J=2.8, 8.4 Hz, 1H), 7.68 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.07 (d, J=2.4 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H).

단계 6

톨루엔 (20 mL) 중 (E)-N-(5-브로모-2-아이오도벤질리덴)-2-메틸프로판-2-아민 (1.0 g, 2.73 mmol,1 당량)의 교반 용액에 프로프-2-인-1-일벤젠 (0.38 g, 3.26 mmol, 1.2 당량)에 이어서 아이오딘화구리 (0.1 g, 0.54 mmol, 0.2 당량), 및 PdCl₂(PPh₃)₂ (0.058 g, 0.08 mmol, 0.03 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 추가의 아이오딘화구리 (0.065 g, 0.35 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 4시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 희석하고, 셀라이트로 여과하고, 여과물을 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 20% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수 생성물을 함유하는 분획을 증발시켜 3-벤질-7-브로모이소퀴놀린 (0.5 g, 61%)을 갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 298.0, 300.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 4.38 (s, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.32 (s, 4H), 7.40 (s, 1H), 7.60 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.72 (dd, J=1.2, 8.8 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 9.15 (s, 1H).

단계 7

1,4-디옥산 (10 mL) 중 3-벤질-7-브로모이소퀴놀린 (0.2 g, 0.67 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 비스(피나콜레이토)디보론 (0.17 g, 067 mmol, 1 당량), 및 아세트산칼륨 (0.19 g, 2.01 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂로 10분 동안 탈기하였다. PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ 부가물 (0.027 g, 0.033 mmol, 0.05 당량)을 첨가하고, 혼합물을 N₂로 추가로 5분 동안 탈기하였다. 반응 혼합물을 밀봉된 용기에서 3시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 5-브로모-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.15 g, 0.67 mmol, 1.0 당량), 포화 수성 NaHCO₃ (4 mL) 및 PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ 부가물 (0.027 g, 0.033 mmol, 0.05 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기하였다. 용기를 밀봉하고, 반응 혼합물을 12시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여과물을 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 DCM 중 3% 메탄올 중 혼합물로서 용리시켰다. 분획을 증발시켜 5-(3-벤질이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.09 g, 36%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 366 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.76 (s, 3H), 4.26 (s, 2H), 6.14 (br. s., 2H), 7.17 - 7.24 (m, 1H), 7.26 - 7.32 (m, 2H), 7.45(s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.83 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.95 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 9.25 (s, 1H).

실시예 2

5-(3-(3,5-디메틸벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

단계 1

THF (90 mL) 중 4-브로모프탈산 (9.0 g, 37.55 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 BH₃.DMS (35 mL, 375 mmol, 10 당량)을 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, MeOH로 천천히 켄칭한 다음, 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 1.5% MeOH:DCM로 용리시켰다. 생성물을 포함하는 분획을 증발시켜 (4-브로모-1,2-페닐렌)디메탄올을 백색 고체 (6.0 g, 75.9%)로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.45 (d, J=5.2 Hz, 2H), 4.51 (d, J=5.2 Hz, 2H), 5.12 (t, J=5.6 Hz, 1H), 5.20 (t, J=11.4 Hz, 1H), 7.31 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.40 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H).

단계 2

DCM (120 mL) 중 옥살릴 클로라이드 (14.2 mL, 165 mmol, 6.0 당량)의 용액을 -70℃로 냉각시키고, DMSO (11.7 mL, 165 mmol, 6.0 당량)을 -70℃ 내지 -65℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 -70℃에서 30분 동안 교반하였다. DCM (25 mL) 중 (4-브로모-1,2-페닐렌)디메탄올 (6.0 g, 27.64 mmol, 1.0 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 -65℃에서 2시간 동안 교반하였다. 트리에틸아민 (69 mL, 495 mmol, 17.5 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반되도록 한 다음, 물 (40 mL)로 처리하였다. 유기 층을 분리하고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 화합물을 8.0% EtOAc:헥산으로 용리시켰다. 생성물을 포함하는 분획을 증발시켜 (4-브로모-1,2-페닐렌)디메탄올 (5.0 g, 83.3%)을 연황색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.90 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 10.46 (s, 2H).

단계 3

실행 1; 에탄올 (20 mL) 중 4-브로모프탈알데히드 (1.6 g, 7.74 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 실온에서 디에틸 2-아미노말로네이트 히드로클로라이드 (1.63 g, 7.74 mmol, 1.0 당량) 및 소듐 에톡시드 (3.9 mL, 11.61 mmol, 1.5 당량)을 첨가하고, 혼합물을 질소 분위기 하에 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포화 염화암모늄으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다.

실행 2; 에탄올 (20 mL) 중 4-브로모프탈알데히드 (1.6 g, 7.74 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 실온에서 디에틸 2-아미노말로네이트 히드로클로라이드 (1.63 g, 7.74 mmol, 1.0 당량) 및 소듐 에톡시드 (3.9 mL, 11.61 mmol, 1.5 당량)을 첨가하고, 혼합물을 질소 분위기 하에 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포화 염화암모늄으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 실행 1 및 실행 2로부터의 조 생성물을 합하고, 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 15 -25% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 분획을 증발시켜 에틸 7-브로모이소퀴놀린-3-카르복실레이트 (1.2 g, 28%)를 갈색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.49 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 4.51 - 4.57 (m, 2H), 7.86 (s, 2H), 8.24 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 9.28 (s, 1H).

단계 4

MeOH: THF: H₂O (2:2:1) (35 mL) 중 에틸 7-브로모이소퀴놀린-3-카르복실레이트 (1.2 g, 4.28 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 0℃에서 LiOH 1수화물 (0.9 g, 21.42 mmol, 5 당량)을 첨가하고, 교반을 실온에서 0.5시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 증발시키고, 1N HCl로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 DCM 중 5% MeOH (3 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기부를 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 7-브로모이소퀴놀린-3-카르복실산 (1.0 g, 조 물질)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 252.0, 254.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.01 (dd, J=2.0, 8.8 Hz, 1H), 8.16 ((d, J=8.8 Hz, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 13.16 (br. s., 1H).

단계 5

DMF (20 mL) 중 7-브로모이소퀴놀린-3-카르복실산 (1.0 g, 3.96 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 N,O-디메틸히드록실아민 히드로클로라이드 (0.77 g, 7.93 mmol, 2 당량) 및 HATU (1.8 g, 4.76 mmol, 1.2 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반하였다. 트리에틸아민 (1.6 mL, 11.90 mmol, 3 당량)을 적가한 다음, 혼합물을 실온에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 켄칭하고, DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 1.2% MeOH:DCM으로 용리시켰다. 생성물을 포함하는 분획을 증발시켜 7-브로모-N-메톡시-N-메틸이소퀴놀린-3-카르복스아미드 (1.0 g, 90.9%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 295.0, 297.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.72 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 7.95 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 9.32 (s, 1H).

단계 6

질소 분위기 하에 THF (20 mL) 중 마그네슘 (0.048 g, 2.03 mmol, 1.2 당량)의 교반 현탁액에 1-브로모-3,5-디메틸벤젠 (0.37 g, 2.03 mmol, 1.2 당량)을 첨가하고, 약간의 아이오딘을 첨가하고, 반응물을 환류 하에 가열하고, 1시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시켰다. 별도의 둥근 바닥 플라스크에서, THF (20 mL) 중 7-브로모-N-메톡시-N-메틸이소퀴놀린-3-카르복스아미드 (0.5 g, 1.64 mmol, 1.0 당량)를 0℃로 냉각시키고, (3,5-디메틸페닐)브로민화마그네슘의 상기 용액을 적가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 25 mL)로 추출하였다. 합한 유기부를 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 (7-브로모이소퀴놀린-3-일)(3,5-디메틸페닐)메타논 (0.3 g, 55%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 340.0, 342.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.38 (s, 6H), 7.62 (s, 1H), 7.87 (s, 2H), 8.25 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 9.26 (s, 1H).

단계 7

실행1; 에틸렌 글리콜 (3 mL) 중 (7-브로모이소퀴놀린-3-일)(3,5-디메틸페닐)메타논 (0.05 g, 0.146 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 히드라진 수화물 (1.6 g, 31.96 mmol, 219 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 150℃로 가열하고, 40분 동안 교반하였다. 수산화칼륨 (분쇄됨) (0.6 g, 10.69 mmol, 73 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 180℃로 가열하고; 물을 딘-스타크 응축기를 사용하여 제거하였다. 반응 혼합물을 180℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 실온으로 냉각시켰다. 물 (30 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 디에틸 에테르 (2 x 15 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 7-브로모-3-(3,5-디메틸벤질)이소퀴놀린 (0.045 g, 조 물질)을 갈색 점착성 화합물로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 326.0, 328.1[M+H]⁺.

실행 2; 에틸렌 글리콜 (8 mL) 중 (7-브로모이소퀴놀린-3-일)(3,5-디메틸페닐)메타논 (0.2 g, 0.58 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 히드라진 수화물 (6.35 g, 127 mmol, 219 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 150℃로 가열하고, 40분 동안 교반하였다. 수산화칼륨 (분쇄됨) (2.37 g, 42.34 mmol, 73 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 180℃로 가열하고; 물을 딘-스타크 응축기를 사용하여 제거하였다. 이어서, 반응 혼합물을 2시간 동안 180℃에서 교반하고 실온으로 냉각시켰다. 물 (30 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 디에틸 에테르 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 실행 1 및 실행 2로부터의 조 생성물을 합하고, 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 14% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 생성물을 포함하는 분획을 증발시켜 7-브로모-3-(3,5-디메틸벤질)이소퀴놀린 (0.17 g, 71%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 326.0, 328.1[M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.28 (s, 6H), 4.21 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.92 (s, 1H),7.41(s,¹H), 7.61 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.70 (d, J=8.8 Hz, 1H) 8.09 (s, 1H), 9.14 (s, 1H).

단계 8

1,4-디옥산 (8 mL) 중 7-브로모-3-(3,5-디메틸벤질)이소퀴놀린 (0.16 g, 0.49 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 비스(피나콜레이토)디보론 (0.124 g, 0.49 mmol, 1 당량), 및 아세트산칼륨 (0.144 g, 1.47 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂로 10분 동안 탈기하였다. PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ 부가물 (0.02 g, 0.024 mmol, 0.05 당량)을 첨가하고, 혼합물을 N₂로 추가로 5분 동안 탈기하였다. 반응 혼합물을 밀봉된 용기에서 5시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 5-브로모-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.11 g, 0.49 mmol, 1.0 당량), 포화 수성 NaHCO₃ (3.2 mL) 및 PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ 부가물 (0.02 g, 0.024 mmol, 0.05 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 N₂로 5분 동안 탈기하였다. 용기를 밀봉하고, 반응 혼합물을 12시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 4% MeOH:DCM으로 용리시켰다. 분획을 증발시켜 5-(3-(3,5-디메틸벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.04 g, 21%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 394.2 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.21 (s, 6H), 3.76 (s, 3H), 4.13 (s, 2H), 6.15 (br. s., 2H), 6.81 (s, 1H), 6.91 (s, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.82 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.95 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 9.24 (s, 1H).

실시예 3:

5-(3-벤질-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

단계 1

THF (50 mL) 중 1-브로모-2-플루오로-4-아이오도벤젠 (5.0 g, 16.66 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LDA (8.3 mL, 16.66 mmol, 1.0 당량)을 -78℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, 드라이 아이스를 -78℃에서 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 가온되도록 하고 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 1N HCl로 켄칭하고, DCM 중 5%MeOH (3 x 60 mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤조산 (3.5 g, 61.4%)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 344.0, 346.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.53 (t, J=8.4 Hz, 1H), 7.65 (d, J=8.0 Hz, 1H), 14.18 (s,¹H).

단계 2

DCM (50 mL) 중 3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤조산 (3.3 g, 9.59 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 SOCl₂ (50 mL)를 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, MeOH (50 mL)를 첨가한 다음, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시키고, 포화 중탄산나트륨으로 0℃에서 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 150mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물, 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 메틸 2-아이오도벤조에이트를 무색 액체 (3.4 g, 99%)로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 3.91 (s, 3 H), 7.60 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 1H).

단계 3

실행 1; THF (10 mL) 중 메틸 3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤조에이트 (0.2 g, 0.55 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiBH₄ (0.55 mL, 1.11 mmol, 2.0 당량)을 -15℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 4시간 동안 교반하였다. 물 (5 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 화합물을 수득하였다.

실행 2; THF (30 mL) 중 메틸 3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤조에이트 (3.0 g, 8.35 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiBH₄ (8.35 mL, 16.7 mmol, 2.0 당량)을 -15℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 4시간 동안 교반하였다. 물 (50 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 실행1 및 실행 2로부터의 조 화합물을 혼합하고, 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 5% EtOAc:헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 (3-브로모-2-플루오로-6-아이오도페닐)메탄올 (1.61 g, 55%)을 백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.56 - 4.58 (m, 2H), 5.25 (t, J=5.2 Hz, 1H), 7.40 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J=8.4 Hz, 1H).

단계 4

DCM (15 mL) 중 옥살릴 클로라이드 (0.73 mL, 8.46 mmol, 2.0 당량)의 교반 용액을 -70℃로 냉각시키고, DMSO (0.72 mL, 34.5 mmol, 2.4 당량)을 -70℃ 내지 -65℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 -70℃에서 10분 동안 질소 분위기 하에 교반한 다음, DCM (10 mL) 중 (3-브로모-2-플루오로-6-아이오도페닐)메탄올 (1.4 g, 4.23 mmol, 1.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -65℃에서 15분 동안 교반하고, 트리에틸아민 (2.94 mL, 10.15mmol, 5.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃로 가온되도록 하고, 2시간 동안 교반하였다. 물 (10 mL)을 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온되도록 하였다. 유기 층을 분리하고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 5% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤즈알데히드 (1.3 g, 95%)을 백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ ppm 7.67 -7.71 (m, 1H), 7.82 (d, J=8.4 Hz, 1H), 9.92 (s, 1H).

단계 5

3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤즈알데히드(1.0 g, 3.04 mmol, 1.0 당량), 활성화된 분자체 (1.0 g), t-부틸 아민 (0.95 mL, 9.12mmol, 3.0 당량) 및 톨루엔 (10 mL)을 밀봉된 튜브에 녹이고, 100℃에서 24시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트로 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과물을 증발시켜 (E)-N-(3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤질리덴)-2-메틸프로판-2-아민 (0.9 g, 조 물질)을 유성 화합물로서 수득하였다.

단계 6

톨루엔 (10 mL) 중 (E)-N-(3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤질리덴)-2-메틸프로판-2-아민 (0.8 g, 2.08 mmol,1 당량)의 교반 용액에 프로프-2-인-1-일벤젠 (0.289 g, 2.49 mmol, 1.2 당량), 아이오딘화구리 (0.04 g, 0.208 mmol, 0.1 당량), 및 PdCl₂(PPh₃)₂ (0.044 g, 0.06 mmol, 0.03 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂ 하에 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 아이오딘화구리 (0.04 g, 0.208 mmol, 0.1 당량)의 추가량을 첨가하고, 반응 혼합물을 4시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 희석하고, 셀라이트 상에서 여과하였다. 여과물을 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 20% EtOAc: 헥산 중 혼합물로서 불순물과 용리시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 증발시켜 3-벤질-7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린 (0.13 g, 조 물질)을 갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 316,318 [M+H]⁺.

단계 7

1,4-디옥산 (10 mL) 중 3-벤질-7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린 (0.13 g, 0.411 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 비스(피나콜레이토)디보론 (0.10 g, 0.411 mmol, 1 당량), 및 아세트산칼륨 (0.12 g, 1.23 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂로 10분 동안 탈기하였다. PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ 부가물 (0.0167 g, 0.02 mmol, 0.05 당량)을 첨가하고, 혼합물을 N₂로 5분 동안 탈기하였다. 반응 혼합물을 밀봉된 용기에서 12시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 5-브로모-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.094 g, 0.411 mmol, 1.0 당량), 포화 수성 NaHCO₃ (3 mL) 및 PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ 부가물 (0.0167 g, 0.02 mmol, 0.05 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 N₂로 5분 동안 탈기하였다. 용기를 밀봉하고, 반응 혼합물을 8시간 동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 3% MeOH:DCM으로 용리시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 증발시켜 5-(3-벤질-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.012 g, 8%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 384.2 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.76 (s, 3H), 4.26 (s, 2H), 6.13 (br.s., 2H), 7.19 (t, J=6.8 Hz, 1H), 7.27 - 7.35 (m, 4H), 7.42 (s, 1H), 7.70 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.78 - 7.80 (m, 2H), 8.15 (s, 1H), 9.41 (s, 1H).

실시예 4

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

단계 1

실행 1: 3-브로모-2-플루오로벤즈알데히드 (5.0 g, 24.63 mmol, 1 당량)를 DCM (50 mL) 중 O-메틸 히드록실아민 히드로클로라이드 (2.4 g, 29.55 mmol, 1.2 당량) 및 피리딘 (7.9 mL, 98.52 mmol, 4 당량)의 교반 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 진공 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (100 - 200 실리카 겔, 80 g 칼럼)에 의해 이동상로서 헥산 중 10% EtOAc을 사용하여 정제하여 목적 생성물 (E)-3-브로모-2-플루오로벤즈알데히드 O-메틸 옥심을 무색 액체 (5.4 g, 94%)로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 232.0, 234.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 3.99 (s, 3 H), 7.02 (t, J = 8 Hz, 1 H), 7.52 - 7.57 (m, 1 H), 7.74 - 7.78 (m, 1 H), 8.27 (s, 1 H).

실행 2: 3-브로모-2-플루오로벤즈알데히드 (9.5 g, 46.79 mmol, 1 당량)를 DCM (100 mL) 중 O-메틸히드록실아민 히드로클로라이드 (4.68 g, 56.15 mmol, 1.2 당량) 및 피리딘 (15 mL, 187.19 mmol, 4 당량)의 교반 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 출발 물질이 소모된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (100 - 200 실리카 겔, 80 g 칼럼)에 의해 이동상로서 헥산 중 10% EtOAc을 사용하여 정제하여 목적 생성물 (E,Z)-3-브로모-2-플루오로벤즈알데히드 O-메틸 옥심을 무색 액체 (10.3 g, 94%)로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 232.0, 234.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 3.99 (s, 3 H), 7.02 (t, J = 8 Hz, 1 H), 7.52 - 7.57 (m, 1 H), 7.74 - 7.78 (m, 1 H), 8.27 (s, 1 H).

단계 2

실행 1: THF (10 mL) 중 (E,Z)-3-브로모-2-플루오로벤즈알데히드 O-메틸 옥심 (1.0 g, 4.31 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 0℃에서 보란 디메틸 술피드 착물 (4 mL, 43.10 mmol, 10 당량)을 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 소모된 후, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후, 메탄올을 적가하여 켄칭하였다. 디옥산 중 20% HCl (5 mL)을 이 반응 혼합물에 첨가하고, 이어서 이를 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 증발시켜 고체 생성물을 수득하였다. 고체 생성물을 n-펜탄 (10 mL) 및 에테르 (10 mL)로 연화처리하여 (3-브로모-2-플루오로페닐)메탄아민 히드로클로라이드를 회백색 고체 (0.9g, 87%)로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 204.0,206.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.07 (s, 2 H), 7.21 (t, J = 8 Hz, 1 H), 7.58 (s, 1 H), 7.67 - 7.74 (m, 1 H), 8.47 (br.s, 3 H).

실행2: THF (150 mL) 중 (E,Z)-3-브로모-2-플루오로벤즈알데히드 O-메틸 옥심 (14.3 g, 61.63 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 보란 디메틸 술피드 착물 (58 mL, 616.37 mmol, 10 당량)을 0℃에서 첨가하고, 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 소모된 후, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후, 메탄올을 적가하여 켄칭하였다. 디옥산 중 20% HCl (50 mL)을 반응 혼합물에 첨가한 다음, 이것을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 증발시켜 고체 생성물을 수득하였다. 고체 생성물을 n-펜탄 (50 mL) 및 에테르 (50 mL)로 연화처리하여 (3-브로모-2-플루오로페닐)메탄아민 히드로클로라이드를 회백색 고체 (14.2g, 96%)로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 204.0,206.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.06 (s, 2 H), 7.20 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.60 (t, J = 7.2 Hz, 1 H), 7.71(t, J = 7.2 Hz, 1 H), 8.59 (br.s, 3 H).

단계 3

DCE (150 mL) 중 (3-브로모-2-플루오로페닐)메탄아민 히드로클로라이드 (15.0 g, 62.5 mmol, 1 당량) 및 1,1-디메톡시프로판-2-온 (9.58 g, 81.25 mmol, 1.3 당량)의 교반 용액에 실온에서 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (17.22 g, 81.25 mmol, 1.3 당량)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 30% 수성 K₃PO₄ (pH=14)을 반응 혼합물에 첨가하고, 층을 분배하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 200 mL)로 추출하고, 유기부를 합하고, 염수 (100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 유기 용매를 농축시켜 N-(3-브로모-2-플루오로벤질)-1,1-디메톡시프로판-2-아민을 무색 액체 (19 g, 조 물질)로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 306.2, 308.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.94 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 1.89 (br.s, 1 H), 2.62 (t, J = 6 Hz, 1 H), 3.22 (s, 3 H), 3.25 (s, 3 H), 3.73 - 3.76 (m, 1 H), 3.80 - 3.84 (m, 1 H), 4.06 (d, J = 5.6 Hz, 1 H), 7.09 (t, J = 8 Hz, 1 H), 7.44 (t, J = 6.8 Hz, 1 H), 7.53(t, J = 7.2 Hz, 1 H).

단계 4

클로로황산 (42 mL, 620.91 mmol, 10 당량)의 교반 용액에 0℃에서 N-(3-브로모-2-플루오로벤질)-1,1-디메톡시프로판-2-아민 (19 g, 62.09 mmol, 1 당량)을 첨가한 다음, 혼합물을 100℃로 10분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 얼음으로 켄칭하고, 10% NaOH 용액으로 염기성화시키고, EtOAc (2 x 300 mL)로 추출하고, 유기부를 합한 다음, Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 유기 용매를 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 10% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 7-브로모-8-플루오로-3-메틸이소퀴놀린을 회백색 고체 (6.3 g, 42%)로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 240.0, 242.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.70 (s, 3 H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.46 (s, 1 H), 7.69 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 9.42 (s, 1 H).

단계 5

실행 1: CCl₄ (30 mL) 중 7-브로모-8-플루오로-3-메틸이소퀴놀린 (3 g, 12.50 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 실온에서 벤조일 퍼옥시드 (0.3 g, 1.25 mmol, 0.1 당량) 및 N-브로모숙신이미드 (4.45 g, 25.00 mmol, 2.0 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 5시간 동안 환류하였다. 출발 물질이 소모된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 여과하고, 여과물을 농축시켜 갈색 액체 (3.6 g, 조 물질)로서의 7-브로모-3-(브로모메틸)-8-플루오로이소퀴놀린 및 7-브로모-3-(디브로모메틸)-8-플루오로이소퀴놀린의 조 혼합물을 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 317.9, 319.9 [M+H]⁺ 모노 브로모 생성물 및 LC-MS (ES) m/z = 398.0,399.8 [M+H]⁺ 디 브로모 생성물.

실행 2: CCl₄ (30 mL) 중 7-브로모-8-플루오로-3-메틸이소퀴놀린 (2.9 g, 12.08 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 실온에서 벤조일 퍼옥시드 (0.29 g, 1.20 mmol, 0.1 당량) 및 N-브로모숙신이미드 (4.3 g, 24.16 mmol, 2.0 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 5시간 동안 환류하였다. 출발 물질이 소모된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 여과하고, 여과물을 농축시켜 7-브로모-3-(브로모메틸)-8-플루오로이소퀴놀린 및 7-브로모-3-(디브로모메틸)-8-플루오로이소퀴놀린의 조 혼합물을 갈색 액체 (3 g, 조 물질)로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 317.9, 319.9 [M+H]⁺ 모노 브로모 생성물 및 LC-MS (ES) m/z = 398.0,399.8 [M+H]⁺ 디 브로모 생성물.

단계 6

실행 1: DMF (30 mL) 중 7-브로모-3-(브로모메틸)-8-플루오로이소퀴놀린 및 7-브로모-3-(디브로모메틸)-8-플루오로이소퀴놀린 (3.6 g, 9.04 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 NaIO₄ (1.9 g, 9.04 mmol, 1 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 160℃에서 밤새 환류하였다. 출발 물질이 소모된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 빙수 (200 mL)로 희석하고, EtOAc (2 x 200 mL)로 추출하였다. 유기부를 합하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 유기 용매를 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 10% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린-3-카르브알데히드 (1.2 g, 조 물질)를 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 254.0, 256.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.72 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.89 - 7.92 (m, 1 H), 8.36 (s, 1 H), 9.64 (s, 1 H), 10.28 (s, 1 H).

실행2: DMF (30 mL) 중 7-브로모-3-(브로모메틸)-8-플루오로이소퀴놀린 및 7-브로모-3-(디브로모메틸)-8-플루오로이소퀴놀린 (3 g, 9.4 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 NaIO₄ (2 g, 9.4 mmol, 1 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 160℃에서 밤새 환류하였다. 출발 물질이 소모된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 빙수 (200 mL)로 희석하고, EtOAc (2 x 200 mL)로 추출하였다. 유기부를 합하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 유기 용매를 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 10% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린-3-카르브알데히드 (1.25 g, 52%)를 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 254.0, 256.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.72 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.86 - 7.92 (m, 1 H), 8.36 (s, 1 H), 9.64 (s, 1 H), 10.28 (s, 1 H).

단계 7

THF (20 mL) 중 7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린-3-카르브알데히드 (1.5 g, 5.9 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 THF 중 0.5 M (3,5-디플루오로페닐)브로민화마그네슘 (23 mL, 11.81 mmol, 2 당량)을 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 0℃의 포화 NH₄Cl (50 mL)로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하고, 유기부를 합하고, 염수 용액 (100 mL)으로 세척하였다. 유기 용매를 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 10% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 (7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 (1.25 g, 57%)를 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 368.0, 370.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 5.91 (d, J = 4 Hz, 1 H),6.49 (d, J = 4 Hz, 1 H), 7.04 (t, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.12 (d, J = 7.2 Hz, 2 H), 7.84 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 7.96(t, J = 8.4 Hz, 1 H), 8.11 (s, 1 H), 9.37 (s, 1 H).

단계 8

1,4-디옥산 (40 mL) 중 (7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 (1.25 g, 3.39 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 비스(피나콜레이토)디보론 (1.29 g, 5.09 mmol, 1.5 당량), 및 아세트산칼륨 (0.83 g, 8.49 mmol, 2.5 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂로 15분 동안 탈기하였다. PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ 부가물 (0.138 g, 0.16 mmol, 0.05 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밀봉된 용기에서 5시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여과물을 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피를 이용하여 정제하였다. 화합물을 20-50% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 (3,5-디플루오로페닐)(8-플루오로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린-3-일)메탄올을 담갈색 액체 (1.25 g, 조 물질)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 334.1 [M+H]⁺-82

단계 9

1,4-디옥산: 물 (30 mL: 10 mL) 중 (3,5-디플루오로페닐)(8-플루오로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린-3-일)메탄올 (1.25 g, 3.01 mmol, 1 당량), 5-브로모-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.68 g, 3.01 mmol, 1 당량) 및 인산칼륨 (1.27 g, 6.02 mmol, 2 당량)의 교반 용액에 Pd₂(dba)₃ (0.13 g, 0.15 mmol, 0.05 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 N₂로 5분 동안 탈기하였다. 트리-tert-부틸포스포늄 테트라플루오로보레이트 (0.08 g, 0.3 mmol, 0.1 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 추가로 5분 동안 탈기하였다. 바이알을 밀봉하고, 반응 혼합물을 100℃로 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 화합물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 실리카 겔 칼럼을 사용하여 정제하고, 화합물을 3% MeOH: DCM로 용리시키고, 순수한 분획을 증발시켜 담황색 액체로서 (7-(4-아미노-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 (0.6 g, 조 물질)을 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 436.1 [M+H]⁺.

단계 10

DCM (10 mL) 중 (7-(4-아미노-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 (0.6 g, 1.37 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 티오닐 클로라이드 (5 mL)를 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, DCM (100 mL)으로 희석하고, 포화 NaHCO₃ 및 염수 용액으로 세척하였다. 유기 용매를 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 2% MeOH: DCM으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 5-(3-(클로로(3,5-디플루오로페닐)메틸)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.3 g, 조 물질)을 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 454.1[M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.76 (s, 3H), 6.18 (br.s, 2H), 6.70 (s, 1H), 7.21 (t, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.35 (d, J = 7.2 Hz, 2 H), 7.44 (s, 1 H), 7.78 (t, J = 8 Hz, 1 H), 7.91 - 7.93 (m, 1 H), 8.15 (d, J = 4.8 Hz, 2 H), 9.48 (s, 1 H).

단계 11

NMP (10 mL) 및 AcOH (5 mL) 중 5-(3-(클로로(3,5-디플루오로페닐)메틸)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.3 g, 0.66 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 아연 분말 (0.64 g, 9.93 mmol, 15 당량)을 첨가하고, 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 포화 NaHCO₃ 용액으로 염기성화시켰다. EtOAc (200 mL)를 첨가하고, 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하였다. 유기 층을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 화합물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 실리카 겔 칼럼을 사용하여 정제하고, 화합물을 2% MeOH:DCM으로 용리시키고, 순수한 분획을 증발시켜 5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.045g, 16%)을 회백색로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 420.2 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.75 (s, 3H), 4.29 (s, 2H), 6.14 (br. s, 2H), 7.03 - 7.05 (m, 3H), 7.41 (s, 1H), 7.71 (t, J = 8 Hz, 1 H), 7.79 - 7.83 (m, 2 H), 8.14 (s, 1 H), 9.41 (s, 1 H).

실시예 5:

7-시클로프로필-5-(3-(2,3-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

단계 1a: 실행1: 실온에서 DCE (5 mL) 중 4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.25 g, 1.63 mmol, 1.0 당량), 시클로프로필 보론산 (0.28 g, 3.27 mmol, 2.0 당량), 및 탄산나트륨 (0.35 g, 3.27 mmol, 2.0 당량)의 교반 현탁액에 뜨거운 DCE 중 Cu(OAc)₂ (0.29 g, 1.63 mmol, 1.0 당량) 및 2, 2'-비피리딜 (0.25 g, 1.63 mmol, 1.0 당량)의 현탁액 (3 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃로 가열하고, 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 1N HCl을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 수성 상을 DCM (3 x 30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다.

실행2: 실온에서 DCE (30 mL) 중 4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (2.50 g, 16.27 mmol, 1.0 당량), 시클로프로필 보론산 (2.80 g, 32.552 mmol, 2.0 당량), 및 탄산나트륨 (3.45g, 32.55 mmol, 2.0 당량)의 교반 현탁액에 뜨거운 DCE 중 Cu(OAc)₂ (2.95 g, 16.27 mmol, 1.0 당량) 및 2, 2'-비피리딜 (2.54 g, 16.27 mmol, 1.0 당량)의 현탁액 (20 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃로 가열하고, 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 1N HCl을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 수성 상을 DCM (3 x 30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 헥산 중 12% EtOAc으로 용리시켰다. 순수 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 목적 생성물 4-클로로-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (1.85 g, 53%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 194.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.67 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 3.58 - 3.49 (m, 1H), 1.21 - 1.18 (m, 2H), 1.12 - 1.05 (s, 2H).

단계 1b: 0℃에서 DCM 중 4-클로로-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (1.85 g, 9.55 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 NBS (2.04 g, 11.47 mmol, 1.2 당량)를 천천히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반되도록 하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 물로 세척하였다. 유기 상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 헥산 중 12% EtOAc으로 용리시켰다. 순수한 생성물 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 목적 생성물 5-브로모-4-클로로-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (2.28 g, 88%)을 회백색 솜털모양 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 272.0, 274.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.66 (s, 1H), 72.8 (s, 1H), 3.54 - 3.48 (m, 1H), 1.28 - 1.16 (m, 2H), 1.09 - 1.05 (m, 2H).

단계 1c: 스테인레스강 오토클레이브 용기 (강철 용기)에 디옥산(10 mL) 중 5-브로모-4-클로로-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (2.28 g, 8.37 mmol, 1.0당량)의 용액에 25% 수성 NH₃ (40 mL)를 첨가하고, 용기를 닫고, 100℃로 밤새 가열하였다. 14시간 후, LCMS는 완전한 전환을 나타내었다. 반응 혼합물을 25℃로 냉각시키고, 현탁액을 여과하였다. 케이크를 물 (3 x 5 mL)에 이어서 펜탄 (10 ml)으로 세척하고, 진공 하에 완전히 건조시켜 목적 생성물 5-브로모-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (1.58 g, 75%)을 베이지색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 253.0, 255.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.09 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.64 (br. s., 2H), 3.52 - 3.45 (m, 1H), 0.98 - 0.92 (m, 4H).

단계 1

1,4-디옥산 (12 mL) 중 7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린-3-카르브알데히드 (0.5g, 1.96 mmol, 1.0 당량) 및 4-메틸벤젠술포노히드라지드 (0.40g, 2.16 mmol, 1.1 당량)의 용액을 80℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 탄산칼륨 (0.408g, 2.95 mmol, 1.5 당량) 및 (3,4-디플루오로페닐)보론산 (0.47 g, 2.95 mmol, 1.5당량)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 계를 95-100℃로 가열하고, 1.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 가온되도록 하고, 용매를 증발시켰다. 조 물질을 DCM과 포화 NaHCO₃ 사이에 분배하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성 상을 DCM으로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 NaHCO₃, 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 헥산 중 6% EtOAc으로 용리시켰다. 순수 생성물을 함유하는 수집된 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 목적 생성물 7-브로모-3-(3,4-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린 (0.20 g, 29%)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 352.0, 354.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 4.25 (s, 2H), 7.04 - 6.98 (m, 1H), 7.13 - 7.06 (m, 2H), 9.43 (s, 1H), 7.43 - 7.41 (m, 2H), 7.73 (t, J = 8.0 Hz, 1H).

단계 2

50mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 1,4-디옥산 12 mL 중 7-브로모-3-(3,4-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린 (0.19 g, 0.54 mmol, 1.0 당량), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (0.20 g, 081 mmol, 1.5 당량), 아세트산칼륨 (0.13 g, 1.35 mmol, 2.5 당량) 및 PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ 부가물 (22 mg, 0.03 mmol, 0.05 당량)의 혼합물을 아르곤 하에 5분 동안 탈기한 다음, 오일 조에서 100℃에서 12시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 셀라이트 패드를 DCM으로 세척하였다. 여과물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 헥산 중 9% EtOAc으로 용리시켰다. 순수 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 농축시켜 목적 생성물 3-(3,4-디플루오로벤질)-8-플루오로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린 (92 mg, 43%)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 318.1 [M+H]⁺-82. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.31 (s, 12H), 4.24 (s, 2H), 7.12 - 7.18 (m, 1H), 7.29 - 07.41 (m, 2H), 7.68 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.82 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 9.40 (s, 1H).

단계 3

디옥산 8mL 및 물 1.0 mL 중 3-(3,4-디플루오로벤질)-8-플루오로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린 (0.08 g, 0.21mmol, 1.0 당량), 5-브로모-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.4 g, 0.16 mmol, 0.8 당량), Pd₂(dba)₃ (10 mg, 0.01 mmol, 0.05 당량) 및 K₃PO₄ (0.09 g, 0.43 mmol, 2.0 당량)의 혼합물을 아르곤으로 5분 동안 버블링한 다음, 트리-(t-부틸)포스포늄 테트라플루오로보레이트 (6 mg, 0.02 mmol, 0.1 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 110℃로 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 셀라이트 패드를 DCM 중 5% MeOH로 세척하였다. 여과물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 DCM 중 2.5% MeOH으로 용리시켰다. 순수 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 농축시켜 목적 생성물 7-시클로프로필-5-(3-(2,3-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (41 mg, 43%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 446.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) 0.98 - 1.05 (m, 4H), 3.58 - 3.62 (m, 1H), 4.25 (s, 2H), 6.12 (br. s., 2H), 7.12 - 7.18 (m, 1H), 7.30 - 7.40 (m, 3H), 7.71 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.76 - 7.81 (m, 2H), 8.14 (s, 1H), 9.40 (s, 1H).

실시예 6:

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

단계 1

-78℃에서 THF (300 mL) 중 1-브로모-2-플루오로-4-아이오도벤젠 (25 g, 83.09 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 LDA (62 mL, 124.63 mmol, 1.5 당량) (THF/헵탄/에틸 벤젠 중 2M)을 적가하고, 생성된 혼합물을 동일한 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, THF (20 mL) 중 DMF (19.4 mL, 249.3mmol, 3.0 당량)의 용액을 적가하고, 동일한 온도에서 (-78℃) 이를 1-2시간 동안 교반하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 -78℃에서 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, 실온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 2개의 층을 분리하였다. 수성 상을 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하고, 합한 유기부를 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다.

반응을 기재된 바와 같이 3회 수행하고, 모든 실행으로부터 수득된 조 생성물을 합하고, 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 1-3% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 농축시켜 목적 생성물 3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤즈알데히드 (합한 수율 = 42.81 g, 69%; 불순한 분획은 농축하여 수확물-2를 수득하였다: 15 g, ~ 85% 순도)를 연황색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.67 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 9.91 (s, 1H).

단계 2:실행1: 0℃에서 물 (16 mL) 중 3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤즈알데히드 (21 g, 63.85 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 tert-부틸 아민 (20 mL, 191.55 mmol, 3.0 당량)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 증발시켜 과량의 tert-부틸 아민을 제거하였다. 조 반응 혼합물을 실행 2와 혼합하였다.

실행2: 0℃에서 물 (16 mL) 중 3-브로모-2-플루오로-6-아이오도벤즈알데히드 (21 g, 63.85 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 tert-부틸 아민 (20 mL, 191.55 mmol, 3.0 당량)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 증발시켜 과량의 tert-부틸 아민을 제거하였다. 실행 1 및 2로부터의 합한 조 혼합물을 EtOAc로 희석하였다. 유기 층을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 증발시켜 목적 화합물 1-(3-브로모-2-플루오로-6-아이오도페닐)-N-(tert-부틸)메탄이민 (48.03 g, 조 물질)을 황색 오일로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.24 (s, 9H), 7.47 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H).

단계 3

실행 1: Et₃N (300 mL) 중 1-(3-브로모-2-플루오로-6-아이오도페닐)-N-(tert-부틸) 메탄이민 (24.0 g, 62.5 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 3,3-디에톡시프로프-1-인 (9.9 mL, 68.75 mmol, 1.1 당량)을 첨가하고, 혼합물을 질소 하에 5분 동안 탈기하였다. 비스(트리페닐포스핀) 팔라듐(ii) 디클로라이드 (0.88 g, 1.25 mmol, 0.02 당량)을 첨가하고, 이어서 CuI (0.24 g, 1.25 mmol, 0.02 당량)을 첨가하고, 반응물을 55℃로 2시간 동안 가열하였다. 출발 물질의 소모를 TLC에 의해 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 침전물을 셀라이트를 통해 여과하고, 셀라이트 패드를 에테르 (2 x 25 mL)로 세척하였다. 여과물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 증발시켰다. 조 생성물을 DMF (250 mL) 중에 용해시키고, 질소 하에 5분 동안 탈기시키고, CuI (1.19 g, 6.25 mmol, 0.1 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃로 6시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하고, 포화 NH₄Cl 용액에 이어서 염수 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 목적 생성물 (31.06 g, 조 물질)을 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 328.0, 330.0 [M+H]⁺.

실행 2: Et₃N (300 mL) 중 1-(3-브로모-2-플루오로-6-아이오도페닐)-N-(tert-부틸) 메탄이민 (24.0 g, 62.5 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 3,3-디에톡시프로프-1-인 (9.9 mL, 68.75 mmol, 1.1 당량)을 첨가하고, 혼합물을 질소 하에 5분 동안 탈기하였다. 비스(트리페닐포스핀) 팔라듐(ii) 디클로라이드 (0.88 g, 1.25 mmol, 0.02 당량)를 첨가하고, 이어서 CuI (0.24 g, 1.25 mmol, 0.02 당량)을 첨가하고, 55℃로 2시간 동안 가열하였다. 출발 물질의 소모를 TLC에 의해 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 침전물을 셀라이트를 통해 여과하고, 셀라이트 패드를 에테르 (2 x 25 mL)로 세척하였다. 여과물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 증발시켰다. 조 생성물을 DMF (250 mL) 중에 용해시키고, 질소 하에 5분 동안 탈기시킨 다음, CuI (1.19 g, 6.25 mmol, 0.1 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃로 6시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하고, 포화 NH₄Cl 용액에 이어서 염수 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 목적 생성물을 수득하였다. 실행1 & 실행2로부터의 조 생성물을 합하고, 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 6% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜 목적 생성물 7-브로모 -3-(디에톡시메틸)-8-플루오로이소퀴놀린 (합한 수율 25.5 g, 62%)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 328.0, 330.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.28 (t, J = 7.2 Hz, 6H), 3.63 - 3.76 (m, 4H), 5.68 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.75 - 7.79 (m, 1H), 7.95 (s, 1H), 9.51 (s, 1H).

단계 4

아세톤: 물 (250 mL; 250 mL) 중 7-브로모-3-(디에톡시메틸)-8-플루오로이소퀴놀린 (25.0g, 76.18 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 실온에서 p-톨루엔 술폰산 (1.32 g, 7.62 mmol, 0.1 당량)을 첨가하고, 용액을 80℃로 가열하고 6시간 동안 교반하였다. TLC는 완전한 전환을 나타냈고, 반응 혼합물을 증발시켜 아세톤 을 완전히 제거하였다. 수성 상을 포화 NaHCO₃ 용액으로 염기성화시키고, 형성된 침전물을 DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 목적 생성물 7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린-3-카르브알데히드를 황색 고체 (13.98 g, 72%)로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 253.9, 255.9 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.08 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.15 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 8.60 (s, 1H), 9.63 (s, 1H), 10.17 (s, 1H).

단계 5

실행1: 1,4-디옥산 (60 mL) 중 7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린-3-카르브알데히드 (3.0g, 11.81 mmol, 1.0 당량) 및 4-메틸벤젠술포노히드라지드 (2.41 g, 12.99 mmol, 1.1 당량)의 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 인산칼륨 (3.76 g, 17.71mmol, 1.5 당량) 및 (3,4-디플루오로페닐)보론산 (3.73 g, 23.62 mmol, 2.0 당량)을 첨가하고, 110℃로 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온에 도달하도록 하고, 용매를 증발시켰다. 조 물질을 EtOAc와 포화 NaHCO₃ 사이에 분배하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성 상을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 NaHCO₃, 염수 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 6% EtOAc:Hex으로 용리시켰다. 순수 생성물을 함유하는 수집된 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 목적 생성물 7-브로모-3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린 (0.609 g, 15%)을 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 352.1, 354.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 4.27 (s, 2H), 6.65 - 6.70 (m, 1H), 6.82 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 7.43 - 7.45 (m, 2H), 7.72 - 7.76 (m, 1H), 9.48 (s, 1H).

실행2: 1,4-디옥산 (60 mL) 중 7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린-3-카르브알데히드 (3.0g, 11.81 mmol, 1.0 당량) 및 4-메틸벤젠술포노히드라지드 (2.41 g, 12.99 mmol, 1.1 당량)의 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 인산칼륨 (3.76 g, 17.71mmol, 1.5 당량) 및 (3,4-디플루오로페닐)보론산 (3.73 g, 23.62 mmol, 2.0 당량)을 첨가하고, 110℃로 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각되도록 하고, 용매를 증발시켰다. 조 물질을 EtOAc와 포화 NaHCO₃ 사이에 분배하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성 상을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 NaHCO₃, 염수 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 6% EtOAc:Hex으로 용리시켰다. 순수 생성물을 함유하는 수집된 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 목적 생성물 7-브로모-3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린 (0.52 g, 13%)을 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 352.1, 354.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 4.27 (s, 2H), 6.65 - 6.70 (m, 1H), 6.82 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 7.43 - 7.45 (m, 2H), 7.72 - 7.76 (m, 1H), 9.48 (s, 1H).

단계 6

1,4-디옥산 40 mL 중 7-브로모-3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린 (1.1 g, 3.12 mmol, 1.0 당량), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (1.03 g, 4.06 mmol, 1.3 당량), 아세트산칼륨 (0.92 g, 9.37 mmol, 3.0 당량) 및 PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ 부가물 (0.13 g, 0.16 mmol, 0.05 당량)의 혼합물을 아르곤 하에 5분 동안 탈기하고, 오일 조에서 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 셀라이트 패드를 DCM으로 세척하였다. 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 8% EtOAc:Hex으로 용리시켰다. 순수 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 농축시켜 목적 생성물 3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린 (0.39 g, 32%)을 백색 고체로서 수득하였다. 불순한 분획을 농축시켜 수확물-2 (0.36 g, ~ 60% 순도)를 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 318.1 [M+H]⁺-81. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.39 (s, 12H), 4.26 (s, 2H), 6.65 - 6.70 (m, 1H), 6.82 - 6.84 (m, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.89- 7.93 (m, 1H), 9.51 (s, 1H).

단계 7

디옥산 25 mL 및 물 1.0 mL 중 3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린 (0.3 g, 0.75 mmol, 1.0 당량), 5-브로모-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.145 g, 0.601 mmol, 0.8 당량), Pd₂(dba)₃ (0.036 g, 0.04 mmol, 0.05 당량) 및 K₃PO₄ (0.319 g, 1.50 mmol, 2.0 당량)의 혼합물을 아르곤 하에 5분 동안 탈기하고, 이어서 트리-(t-부틸)포스포늄 테트라플루오로보레이트 (0.022 g, 0.08 mmol, 0.1 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 셀라이트 패드를 5% MeOH: DCM으로 세척하였다. 여과물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 3% MeOH: DCM으로 용리시켰다. 순수 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 농축시켜 목적 생성물 (0.16 g, 49%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 434.2 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.38 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 4.22 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.29 (s, 2H), 6.13 (br. s., 2H), 7.01 - 7.08 (m, 3H), 7.49 (s, 1H), 7.73 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 9.42 (s, 1H).

실시예 7, 8, & 9

(7-(4-아미노-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 및 그의 거울상이성질체

단계 1

THF (40 mL) 중 5-브로모-7-시클로프로필-7H-피롤로 [2, 3-d] 피리미딘-4-아민 (3.0 g, 11.85 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 Boc 무수물 (6.8 mL, 29.6 mmol, 2.5 당량)에 이어서 DMAP (0.3 g, 2.3 mmol, 0.2 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 용매를 완전히 증발시키고, 조 물질을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 N,N-디(tert-부톡시카르보닐)₅-브로모-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (5g, 93.1% 수율)을 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 453.1, 455.10 [M+H] +. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.03 - 1.06 (m, 4H), 1.38 (s, 9H), 1.43 (s, 9H), 3.63 - 3.69 (m, 1H), 7.88 (s, 1H), 8.78 (s, 1H).

단계 2

1,4-디옥산 (40 mL) 중 N,N-디(tert-부톡시카르보닐)₅-브로모-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (4.0g, 8.83 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (5.1mL, 35.30mmol, 4 당량) 및 트리에틸아민 (5 mL, 35.30mmol, 4 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 5분 동안 탈기하였다. X-Phos (0.42 g, 0.8mmol, 0.1 당량)에 이어서 Pd₂(dba)₃ (0.8 g, 0.8mmol, 0.1 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 추가로 5분 동안 탈기하였다. 반응 혼합물을 100℃로 6시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 완전히 증발시켜 조 화합물을 수득하고 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 50% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 분획을 증발시켜 N,N-디(tert-부톡시카르보닐)₇-시클로프로필-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (3.3 g, 조 물질)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 401.2 [M+H]⁺-100.

단계 3

다중구 둥근 바닥 플라스크에 (7-브로모-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 (0.3 g, 0.814 mmol, 1.0 당량), N,N-디(tert-부톡시카르보닐)₇-시클로프로필-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.36 g, 0.73 mmol, 0.9 당량) 및 1,4-디옥산: 물 (16 mL: 4 mL) 중 인산칼륨 (0.345 g, 1.628 mmol, 2 당량)의 혼합물을 N₂로 15분 동안 버블링하였다. Pd₂(dba)₃ (0.037 g, 0.040 mmol, 0.05 당량) 및 트리-tert-부틸포스포늄테트라플루오로보레이트 (0.023 g, 0.0814 mmol, 0.1 당량)을 첨가하고, 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 셀라이트 층을 통해 여과하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 2.0% MeOH: DCM으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 N,N-디(tert-부톡시카르보닐 (7-(4-아미노-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 (0.4 g, 조 물질)을 점착성 화합물로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 662.2 [M+H]⁺.

단계 4

DCM(10 mL) 중 N,N-디(tert-부톡시카르보닐 (7-(4-아미노-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 (0.4 g, 0.60 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 트리플루오로 아세트산 (4 mL)을 -0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 증발시키고, 잔류물을 DCM 중에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 5% MeOH: DCM으로 용리시켰다. 생성물을 추가로 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 조건: 칼럼: 인테르실 ODA 3V (250 mm x 20 mm x 5mic), 이동상 (A): 물 중 0.1% 암모니아, 이동상 (B): ACN, 유량 19 mL/분. 순수한 분획을 증발시켜 (7-(4-아미노-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 (0.038 g,14%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 462.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm1.04 - 1.05 (m, 4H), 3.59(bs, 1H),5.94 (d,J = 4.0 Hz,¹H), 6.13 (bs, 2H),6.47 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 7.14 (d, J = 6.8 Hz, 2H),7.34 (s, 1H),7.73 (t, J = 7.8 Hz, 1H),7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H),8.09 (s, 1H), 8.14 (s, 1H),9.37 (s, 1H).HPLC: 99.56% 순도, HPLC에 의함 @242 nM.

단계 5

이성질체의 키랄 분리:

라세미 화합물 (7-(4-아미노-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 0.132 g을 키랄 정제용 HPLC 조건으로 분리하였다: 칼럼: 키랄팩 IC (250 mm x 20 mm x 5 mic); 이동상: n-헥산: EtOH, 0.1% DEA 함유 (50:50); 유량: 15.0 mL/분. 체류 시간 8.67분에서의 순수한 분획을 농축시켜 거울상이성질체 1을 회백색 고체 (0.026 g, 39% 수율)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 462.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.99 - 1.05 (m, 4H), 3.58 - 3.60 (m, 1H), 5.94 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.13 (br. s., 2H), 6.47 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.04 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.73 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.09 (s,,¹H), 8.14 (s, 1H), 9.37 (s, 1H): HPLC 분석 조건: 칼럼: 키랄팩 IC (250 mm x 4.6 mm x 5 mic); 이동상: n-헥산: EtOH, 0.1% DEA (50:50 포함); 유량: 1.0 mL/분; 99.99% 순도, 체류 시간 5.965분 @282 nm. 체류 시간 11.423분에서의 순수한 분획을 농축시켜 거울상이성질체 2를 회백색 고체 (0.028 g, 42% 수율)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 462.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.99 - 1.05 (m, 4H), 3.56 - 3.62 (m, 1H), 5.94 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.13 (br. s., 2H), 6.47 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.04 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.73 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 9.37 (s, 1H): HPLC 분석 조건: 칼럼: 키랄팩 IC (250 mm x 4.6 mm x 5 mic); 이동상: n-헥산: EtOH, 0.1% DEA 함유 (50:50); 유량: 1.0 mL/분; 98.53% 순도, 체류 시간 6.432분 (6.028분, 1.47% 거울상이성질체1) @282 nm

실시예 10:

7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

단계 1

실행 1; 클로로포름 (10 mL) 중 2-아미노-3-플루오로벤조산 (1.0 g, 6.45 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 0℃에서 적가 방식으로 클로로포름중 브로민 (0.36 mL, 70.9 mmol, 1.1 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 서서히 실온으로 가온되도록 하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 침전된 고체를 진공 하에 여과하였다. 잔류물을 DCM으로 완전히 세척하고, 진공 하에 건조시켜 2-아미노-5-브로모-3-플루오로벤조산 히드로 브로마이드를 회백색 고체 (2.5 g 조 물질)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 234.1, 236.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.8 - 6.4 (br.s), 7.48 - 7.51 (m,1H), 7.61 (s, 1H).

실행 2; 클로로포름 (70 mL) 중 2-아미노-3-플루오로벤조산 (6.9 g, 44.5 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 클로로포름 중 브로민 (2.5 mL, 48.96 mmol, 1.1 당량)을 적가 방식으로 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 서서히 실온으로 가온되도록 하고 밤새 교반하였다. 침전된 고체를 진공 하에 여과하였다. 잔류물을 DCM으로 완전히 세척하고, 진공 하에 건조시켜 2-아미노-5-브로모-3-플루오로벤조산 히드로 브로마이드를 회백색 고체 (12 g 조 물질)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 233.9, 235.9 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 5.8 - 6.8 (br.s), 7.46 - 7.49 (m,1H), 7.60 (s, 1H)

단계 2

실행 1; 황산 (2 mL) 중 2-아미노-5-브로모-3-플루오로벤조산 히드로 브로마이드 (2.5 g, 7.98 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 0℃에서 HCl (2 mL)을 첨가하였다. 물 (7 mL) 중 아질산나트륨 (0.55 g, 7.98 mmol, 1 당량)을 적가 방식으로 첨가하고, 1시간 동안 동일한 온도에서 교반하였다. 물 (8 mL) 중 아이오딘화칼륨 (2.65 g, 15.97 mmol, 2 당량)을 첨가하고, 실온에서 추가로 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 여과하였다. 잔류물을 완전히 물로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 5-브로모-3-플루오로-2-아이오도벤조산 (0.8 g, 30%)을 갈색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.65 (s, 1H), 7.71 - 7.73 (m,1H), 13.77 (s, 1H).

실행 2: 황산 (12 mL) 중 2-아미노-5-브로모-3-플루오로벤조산 히드로 브로마이드 (12 g, 38.33 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 0℃에서 HCl (12 mL)을 첨가하였다. 물 (10 mL) 중 아질산나트륨 (0.55 g, 38.33 mmol, 1 당량)을 적가 방식으로 첨가하고, 1시간 동안 동일한 온도에서 교반하였다. 물 (10 mL) 중 아이오딘화칼륨 (12.72 g, 76.67 mmol, 2 당량)을 여기에 첨가하고, 실온에서 추가로 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 여과하였다. 잔류물을 완전히 물로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 5-브로모-3-플루오로-2-아이오도벤조산 (6.5 g 조 물질)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 344.9, 346.9 [M+H]⁺.

단계 3

실행 1; THF 중 5-브로모-3-플루오로-2-아이오도벤조산 (0.8 g, 2.32 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액 (15 mL)에 0℃에서 보란-디메틸 술피드 착물 (1.1 mL, 11.6 mmol, 5 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 메탄올로 적가 방식으로 켄칭하고 완전히 증발시켜 조 (5-브로모-3-플루오로-2-아이오도페닐) 메탄올 (0.6 g 조 물질)을 회백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.42 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 5.64 (t, J= 6.0 Hz), 7.42 (s,1H), 7.46 - 7.48 (m, 1H).

실행 2: THF (50 mL) 중 5-브로모-3-플루오로-2-아이오도벤조산 ( 6 g, 17.44 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 0℃에서 보란-디메틸 술피드 착물 (6.6 mL, 87.2 mmol, 5 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 메탄올로 적가 방식으로 켄칭하고 완전히 증발시켜 조 (5-브로모-3-플루오로-2-아이오도페닐)메탄올 (3.8 g, 66.6%)을 회백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.42 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 5.64 (t, J= 6.0 Hz), 7.42 (s,1H), 7.45 - 7.47 (m, 1H).

단계 4

실행 1; DCM 중 (5-브로모-3-플루오로-2-아이오도페닐)메탄올 ( 0.2 g, 0.606 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액 (10 mL)에 이산화망가니즈 (0.37 g, 4.24 mmol, 7 당량)를 실온에서 첨가하고, 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 완전히 증발시켜 5-브로모-3-플루오로-2-아이오도벤즈알데히드 (0.16 g, 80.8%)를 회백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.72 (s,1H), 7.92 - 7.93 (m, 1H), 9.91 (s, 1H).

실행 2: DCM (40 mL) 중 (5-브로모-3-플루오로-2-아이오도페닐)메탄올 ( 3.6 g, 10.9 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 이산화망가니즈 (6.6 g, 76.3 mmol, 7 당량)를 실온에서 첨가하고, 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 완전히 증발시켜 5-브로모-3-플루오로-2-아이오도벤즈알데히드 (3.3 g, 92%)를 회백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.72 (s,1H), 7.92 - 7.93 (m, 1H), 9.91 (s, 1H).

단계 5

실행 1; 물 (0.12 mL) 중 5-브로모-3-플루오로-2-아이오도벤즈알데히드 (0.16 g, 0.48 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 2-메틸프로판-2-아민 (0.16 mL, 1.46 mmol, 3 당량)을 실온에서 첨가하고, 12시간 동안 교반하였다. 용매를 완전히 증발시키고, 조 물질을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 조 1-(5-브로모-3-플루오로-2-아이오도페닐)-N-(tert-부틸) 메탄이민 (0.2 g 조 물질)을 유성 화합물로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.25 (s, 9H), 7.68 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 8.33 (s, 1H).

실행 2: 물 (2.1 mL) 중 5-브로모-3-플루오로-2-아이오도벤즈알데히드 (2.8 g, 8.5 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 2-메틸프로판-2-아민 (2.7 mL, 25.6 mmol, 3 당량)을 실온에서 첨가하고, 12시간 동안 교반하였다. 용매를 완전히 증발시키고, 조 물질을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고 증발시켜 조 1-(5-브로모-3-플루오로-2-아이오도페닐)-N-(tert-부틸) 메탄이민 (3 g 조 물질)을 유성 화합물로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.25 (s, 9H), 7.65 - 7.68 (m,¹H), 7.73 - 7.74 (m, 1H), 8.34 (s, 1H).

단계 6

트리에틸아민 (20 mL) 중 1-(5-브로모-3-플루오로-2-아이오도페닐)-N-(tert-부틸) 메탄이민 (3 g, 7.8 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 3,3-디에톡시프로프-1-인 (1.2 g, 9.3 mmol, 1.2 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂ 기체로 퍼징하고, 비스(트리페닐포스핀) 팔라듐(II)디클로라이드 (0.11 g, 0.156 mmol, 0.02 당량)에 이어서 아이오딘화구리 (0.03 g, 0.156 mmol, 0.02 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂ 기체로 추가로 퍼징하고, 55℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여과물을 완전히 증발시켜 조 1-(5-브로모-2-(3,3-디에톡시프로프-1-인-1-일)-3-플루오로페닐)-N-(tert-부틸) 메탄이민 (3.0 g)을 점착성 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.15 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 1.23 (s, 9H), 3.57 - 3.61 (m, 2H), 3.66 - 3.70 (m, 2H), 5.63 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 8.53 (s, 1H).

단계 7

DMF 중 1-(5-브로모-2-(3,3-디에톡시프로프-1-인-1-일)-3-플루오로페닐)-N-(tert-부틸)메탄이민 (3 g, 7.8 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 아이오딘화구리 (0.15 g, 0.78 mmol, 0.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃로 6시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여과물을 물로 처리하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 30% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 7-브로모-3-(디에톡시메틸)-5-플루오로이소퀴놀린 (1.4 g, 56%)을 회백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.15 (t, J = 7.2 Hz, 6H), 3.60 (q, J = 7.2 Hz, 4H), 5.60 (s, 1H), 7.91 - 7.94 (m, 2H), 8.32 (s, 1H), 9.35 (s, 1H).

단계 8

아세톤: 물 (10 mL: 10 mL) 중 7-브로모-3-(디에톡시메틸)-5-플루오로이소퀴놀린 (1.4 g, 4.26 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 실온에서 p-톨루엔술폰산 (0.08 g, 0.426 mmol, 0.1 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃로 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 증발시켰다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO₃ 용액으로 중화시키고, DCM으로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 조 화합물을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 연화처리하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에 건조시켜 7-브로모-5-플루오로이소퀴놀린-3-카르브알데히드 (0.8 g, 74%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 254.0, 256.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.08 - 8.11 (m, 1H), 8.45 - 8.46 (m, 2H), 9.54 (s, 1H), 10.16 (s, 1H).

단계 9

실행 1; THF (5 mL) 중 7-브로모-5-플루오로이소퀴놀린-3-카르브알데히드 (0.05 g, 0.196 mmol, 및 1.0 당량)의 교반 용액에 적가 방식으로 3,5-디플루오로 페닐 브로민화마그네슘 (THF 중 0.5 M) (0.6 mL, 1.5 당량)을 실온에서 첨가하고, 50℃로 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 조 물질을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고 증발시켜 유성 화합물을 수득하였고 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 30% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 (7-브로모-5-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올 (0.025 g, 35%)을 유성 화합물로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 368.0, 370.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 5.91 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.02 - 7.06 (m, 1H), 7.12 - 7.14 (m, 2H), 7.91 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 9.28 (s, 1H).

실행 2; THF (25 mL) 중 7-브로모-5-플루오로이소퀴놀린-3-카르브알데히드 (0.65 g, 2.56 mmol, 및 1.0 당량)의 교반 용액에 적가 방식으로 3, 5 디플루오로 페닐 브로민화마그네슘 (THF 중 0.5 M) (7.7 mL, 1.5 당량)을 실온에서 첨가하고, 50℃로 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 조 물질을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고 증발시켜 유성 화합물을 수득하였고 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 30% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 분획을 증발시켜 (7-브로모-5-플루오로이소퀴놀린-3-일) (3,5-디플루오로페닐) 메탄올 (0.55 g 조 물질)을 유성 화합물로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 368.0, 370.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 5.91 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.02 - 7.06 (m, 1H), 7.12 - 7.14 (m, 2H), 7.89 - 7.92 (m, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 9.28 (s, 1H).

단계 10

실행 1; DCM (5 mL) 중 (7-브로모-5-플루오로이소퀴놀린-3-일) (3,5-디플루오로페닐) 메탄올 (0.025 g, 0.06 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 0℃에서 적가 방식으로 티오닐 클로라이드 (5 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 용매를 완전히 증발시키고 조 물질을 n-펜탄으로 연화처리하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에 건조시켜 7-브로모-3-(클로로 (3,5-디플루오로페닐) 메틸)-5-플루오로이소퀴놀린 (0.02 g 조 물질)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 385.9, 387.9 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 6.72 (s, 1H), 7.18 - 7.23 (m, 1H), 7.34 - 7.35 (m, 2H), 7.98 (d, J = 10 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 9.38 (s, 1H).

실행 2; DCM (10 mL) 중 (7-브로모-5-플루오로이소퀴놀린-3-일) (3,5-디플루오로페닐) 메탄올 (0.55 g, 1.49 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 0℃에서 적가 방식으로 티오닐 클로라이드 (10 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 용매를 완전히 증발시키고 조 물질을 n-펜탄으로 연화처리하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에 건조시켜 7-브로모-3-(클로로 (3,5-디플루오로페닐) 메틸)-5-플루오로이소퀴놀린 (0.58 g 조 물질)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 386.0, 388.0 [M+H] +. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 6.72 (s, 1H), 7.21 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.34 - 7.35 (m, 2H), 7.98 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 9.38 (s, 1H).

단계 11

실행 1; MeOH (5 mL) 중 7-브로모-3-(클로로(3,5-디플루오로페닐)메틸)-5-플루오로이소퀴놀린 (0.02 g, 0.05 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 0℃에서 아연 금속 가루 - 325 메쉬 (0.007 g, 0.05 mmol, 2.0 당량)에 이어서 염화암모늄 (0.006 mg, 0.05 mmol, 2.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 완전히 증발시켜 조 7-브로모-3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로이소퀴놀린 (0.02 g 조 물질)을 점착성 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 352.0, 354.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.28 (s, 2H), 7.01 - 7.06 (m, 3H), 7.85 - 7.93 (m, 2H), 8.26 (s, 1H), 9.31 (s, 1H).

실행 2; MeOH (20 mL) 중 7-브로모-3-(클로로(3,5-디플루오로페닐)메틸)-5-플루오로이소퀴놀린 (0.58 g, 1.5 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 0℃에서 아연 금속 가루 - 325 메쉬 ( 0.3 g, 4.5 mmol, 3.0 당량)에 이어서 염화암모늄 (0.24 mg, 4.5 mmol, 3.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 완전히 증발시켜 7-브로모-3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로이소퀴놀린 (0.26 g, 50%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 352.0, 354.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.28 (s, 2H), 7.01 - 7.06 (m, 3H), 7.85 (s, 1H), 7.87 - 7.89 (m, 1H), 8.25 (s, 1H), 9.30 (s, 1H).

단계 12

실행 1; 1,4-디옥산 중 7-브로모-3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로이소퀴놀린 (0.03 g, 0.08 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 비스(피나콜레이토)디보론 (0.025 g, 0.093 mmol, 1.1 당량) 및 아세트산칼륨 (0.025 g, 0.255 mmol, 3.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂로 5분 동안 퍼징하였다. PdCl₂(dppf)DCM (0.007 g, 0.008 mmol, 0.1 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 추가로 N₂로 5분 동안 퍼징하고, 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 완전히 증발시키고, 수득한 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 30% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 분획을 증발시켜 조 3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로-7-(4, 4, 5, 5-테트라메틸-1, 3,2-디옥사보롤란-2-일) 이소퀴놀린 (0.03 g 조 물질)을 점착성 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 400.1 [M+H]⁺.

실행 2; 1,4-디옥산 중 7-브로모-3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로이소퀴놀린 (0.23 g, 0.65 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 비스(피나콜레이토)디보론 (0.18 g, 0.718 mmol, 1.1 당량) 및 아세트산칼륨 (0.19 g, 1.96 mmol, 3.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂로 5분 동안 퍼징하였다. PdCl₂(dppf)DCM(0.53 g, 0.065 mmol, 0.1 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 추가로 N₂로 5분 동안 퍼징하고, 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 완전히 증발시키고, 수득한 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 30% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 분획을 증발시켜 3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로-7-(4, 4, 5, 5-테트라메틸-1, 3,2-디옥사보롤란-2-일) 이소퀴놀린 (0.14 g, 48.2%)을 점착성 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 400.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.32 (s, 12 H), 4.29 (s, 2H), 7.01 - 7.07 (m, 3H), 7.58 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 7.89 (s, 1H), 8.31(s, 1H), 9.43 (s, 1H).

단계 13

1,4-디옥산: H₂O (18 mL: 6 mL) 중 3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린 (0.14 g, 0.35 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 5-브로모-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.062 g, 0.024 mmol, 0.7 당량) 및 인산칼륨 (0.15 g, 0.07 mmol, 2.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂로 5분 동안 퍼징하고, Pd₂(dba)₃ (0.016 g, 0.017 mmol, 0.05 당량)에 이어서 P(t-Bu)₃HBF₄ (0.010 g, 0.035 mmol, 0.1 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂로 5분 동안 퍼징하고, 100℃로 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 완전히 증발시켜 조 생성물을 수득하였고 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 3% MeOH: DCM으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로 [2, 3-d] 피리미딘-4-아민 (0.06 g, 38.4%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 446.2 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.01 - 1.08 (m, 4 H), 3.58 - 3.62 (m, 1H), 4.29 (s, 2H), 6.26 (br.s, 2H), 7.01 - 7.06 (m, 3H), 7.46 (s, 1H), 7.69 (d, J = 10.8 Hz, 1 H), 7.86 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 8.17(s, 1H), 9.31 (s, 1H).

실시예 11:

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2,2-디플루오로시클로프로필)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

단계 1: 실온에서 THF의 교반 용액 (50 mL)에 n-BuLi을 10분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 황색 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 상기 용액을 -78℃로 냉각시키고, THF (30 mL) 중 4-메틸벤젠술포닐 클로라이드 (6.0 g, 31.57 mmol, 1.0 당량)를 10분에 걸쳐 -78℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고, 추가로 30분 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 n-헥산 중 10% EtOAc로 용리시키고, 비닐 4-메틸벤젠술포네이트 (2.0 g, 32%)를 무색 액체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm - 2.45 (s, 3H), 4.66-4.68 (m, 1H), 4.86-4.90 (m, 1H), 6.57-6.62 (m, 1H), 7.33-7.36 (m, 2H), 7.80 (d, J=8.0 Hz, 2H)

단계 2

비닐 4-메틸벤젠술포네이트 (1.1 g, 5.55 mmol, 1.0 당량), 플루오린화나트륨 (0.023 g, 0.55 mmol, 0.1 당량) 및 크실렌의 혼합물 (0.5 mL, 0.5 V)에 트리메틸실릴 2,2-디플루오로-2-(플루오로술포닐)아세테이트(8.3 g, 33.3 mmol, 6 당량)를 120℃에서 15분의 기간에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 n-헥산 중 10% EtOAc로 용리시켜 2,2-디플루오로시클로프로필 4-메틸벤젠술포네이트를 연갈색 액체로서 수득하였다 (0.85 g, 조 물질). ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm - 1.58-1.67 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 4.21-4.27 (m, 1H), 7.36-7.38 (m, 2H), 7.81-7.84 (m, 2H).

단계 3

DMF (15mL) 중 4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.52 g, 3.42 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 60% 수소화나트륨 (0.15 g, 3.76 mmol, 1.1 당량)을 0℃에서 첨가하고, 동일한 온도에서 15분 동안 교반하였다. DMF (3 mL) 중 2,2-디플루오로시클로프로필 4-메틸벤젠술포네이트 (0.85 g, 3.42 mmol, 1.0 당량)를 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수로 켄칭하였다. 조 물질을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 n-헥산 중 10% EtOAc로 용리시켜 4-클로로-7-(2,2-디플루오로시클로프로필)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 연황색 고체 (0.1 g, 13%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 230.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm -2.39 (m, 2H), 4.39-4.46 (m, 1H), 6.70 (d, J=3.2 Hz, 1H), 7.76 (d, J=3.6 Hz, 1H), 8.69 (s, 1H).

단계 4

DCM (5 mL) 중 4-클로로-7-(2,2-디플루오로시클로프로필)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.1 g, 0.43 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 0℃에서 NBS (0.077 g, 0.43 mmol, 1.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜 5-브로모-4-클로로-7-(2,2-디플루오로시클로프로필)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.11 g, 82%)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 308.0, 310.0 [M+H.]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm - 2.30-2.55 (m, 2H), 4.39-4.45 (m, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.73 (s, 1H)

단계 5

1,4-디옥산 (5 mL) 중 5-브로모-4-클로로-7-(2,2-디플루오로시클로프로필)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.1 g, 0.32 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 NH₄OH (5 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 오토클레이브 중에서 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 형성된 고체를 여과하여 5-브로모-7-(2,2-디플루오로시클로프로필)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.06 g, 65%)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 289.0, 291.0 [M+H.]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm - 2.24-2.43 (m, 2H), 4.19-4.26 (m, 1H), 6.77 (br.s, 2H), 7.45 (s, 1H), 8.12 (s, 1H).

단계 6

1,4-디옥산 (30 mL) 중 3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린 (0.075 g, 0.23 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 5-브로모-7-(2,2-디플루오로시클로프로필)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.055 g, 0.18 mmol, 0.8 당량), 인산삼칼륨 (0.1 g, 0.47 mmol, 2.0 당량) 및 물 (0.2mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N₂로 15분 동안 탈기하였다. Pd₂(dba)₃ (0.01 g, 0.011 mmol, 0.05 당량) 및 (tBut)₃HPBF₄ (0.006 g, 0.023 mmol, 0.1 당량)을 첨가하고, N₂로 추가로 5분 동안 탈기하였다. 반응 혼합물을 밀봉된 용기에서 10시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 화합물을 3% MeOH:DCM으로 용리시켜 5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2,2-디플루오로시클로프로필)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 회백색 고체로서 수득하였다 (0.03 g, 26%). LCMS (ES) m/z = 482.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm- 2.30-2.38 (m, 2H), 4.29-4.37 (m, 3H), 6.26 (br.s, 2H), 7.04-7.06 (m, 3H), 7.46 (s, 1H), 7.72 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.80-7.84 (m, 2H), 8.18 (s, 1H), 9.42 (s, 1H).

실시예 12:

3-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-플루오로-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-4-아민

단계 1

톨루엔 (120 ml) 중 2-클로로-5-플루오로-4-아이오도피리딘 (5 g, 19.42 mmol, 1 당량), tert-부틸 카르바메이트 (2.39 g, 20.4 mmol, 1.05 당량) 및 탄산세슘 (12.66g, 38.85 mmol, 2 당량)의 교반 용액을 N₂로 10분 동안 탈기하였다. Pd₂(dba)₃ (0.36 g, 0.39 mmol, 0.02 당량) 및 Xantphos (0.34 g, 0.58 mmol, 0.03 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 100℃에서 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트 층을 통해 여과하고, EtOAc (100 mL)로 세척하였다. 여과물을 물, 염수 용액으로 세척하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 40% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 tert-부틸 (2-클로로-5-플루오로피리딘-4-일)카르바메이트를 연황색 고체 (3.6 g, 75%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 247.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.47 (s, 9H), 7.98 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 9.95 (s, 1H).

단계 2

60% TFA/DCM (25 ml) 중 tert-부틸 (2-클로로-5-플루오로피리딘-4-일)카르바메이트 (3.5 g, 14.2 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 염기성화시키고, EtOAc (2 x 100ml)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 증발시켜 2-클로로-5-플루오로피리딘-4-아민을 연황색 고체 (1.9 g, 91.4%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 147.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 6.54 (s, 2H), 6.65 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 2.8 Hz, 1H).

단계 3

아세트산 (20 ml) 중 2-클로로-5-플루오로피리딘-4-아민 (1.9 g, 12.97 mmol, 1 당량) 및 아세트산나트륨 (2.13 g, 25.94 mmol, 2 당량)의 교반 용액에 아세트산 (5ml) 중 ICl (2.1 g, 12.97 mmol, 1 당량)을 첨가하고, 70℃에서 3시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 빙냉된 물에 붓고, EtOAc (2 x 100ml)로 추출하였다. 유기 층을 포화 중탄산나트륨 용액 및 10% 티오황산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 40% EtOAc:헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 2-클로로-5-플루오로-3-아이오도피리딘-4-아민을 담갈색 고체 (2.5 g, 70.6%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 272.9 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 6.63 (s, 2H), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H).

단계 4

DCM (60 ml) 중 에톡시에틴 (2.5 g, 35.7 mmol, 1 당량)의 교반 용액에, 0℃에서 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (5.69 ml, 39.2 mmol, 1.1 당량) 및 비스(시클로펜타디에닐)지르코늄(IV) 클로라이드 히드라이드 (0.55 g, 2.14 mmol, 0.06 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 셀라이트 층으로 토핑한 중성 알루미나 패드를 통해 여과하고, DCM (50ml)으로 세척하였다. 수득한 여과물을 진공 하에 증발시켜 조 (E)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란을 갈색 액체 (6.5 g)로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.25 (s, 12H), 1.25 - 1.29 (m, 3H), 3.81 - 3.91 (m, 2H), 4.43 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 14.8 Hz, 1H).

단계 5

아세토니트릴: 물 (3:2, 30ml: 20ml) 중 2-클로로-5-플루오로-3-아이오도피리딘-4-아민 (2 g, 7.34 mmol, 1 당량), (E)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (2.91 g, 14.62 mmol, 2 당량), 인산칼륨 (3.1g, 14. 62 mmol, 2 당량)의 교반 용액을 N₂로 10분 동안 탈기하였다. 아세트산팔라듐 (49. 4 mg, 0.22 mmol, 0.03 당량) 및 'S' phos (226 mg, 0.55 mmol, 0.075 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 110℃에서 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트 층을 통해 여과하고, EtOAc (100 mL)로 세척하였다. 여과물을 물, 염수 용액으로 세척하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 60% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 (E)-2-클로로-3-(2-에톡시비닐)-5-플루오로피리딘-4-아민을 연황색 고체 (1.4 g, 88%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 217.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.25 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 3.94 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 5.42 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 6.82 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 2.4 Hz, 1H).

단계 6

에탄올 (22ml) 및 농축.HCl (5ml) 중 (E)-2-클로로-3-(2-에톡시비닐)-5-플루오로피리딘-4-아민 (1.4 g, 6.46 mmol)의 교반 용액을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 수성 중탄산나트륨 용액으로 염기성화시켰다. 수용액을 EtOAc (5 x100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 40% EtOAc:헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 4-클로로-7-플루오로-1H-피롤로[3,2-c]피리딘을 연황색 고체 (0.9 g, 81.1%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 170.9 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 6.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.98 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 12.55 (s, 1H).

단계 7

DMF (10 ml) 중 4-클로로-7-플루오로-1H-피롤로[3,2-c]피리딘 (0.4 g, 2.34 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NBS (0.42 g, 2.34 mmol, 1 당량)을 첨가하고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트 (50 ml)로 희석하고, 물 (2 x 50 ml) 및 염수 용액으로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 증발시켜 3-브로모-4-클로로-7-플루오로-1H-피롤로[3,2-c]피리딘을 연황색 고체 (550 mg, 94.2%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 249.0, 250.0 [M+H]⁺.

단계 8

DMF (15 ml) 중 3-브로모-4-클로로-7-플루오로-1H-피롤로[3,2-c]피리딘 (540 mg, 2.16 mmol, 1 당량)의 교반 용액에, 0℃에서 수소화나트륨 (103.8 mg, 2.60 mmol, 1.2 당량)을 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. 메틸 아이오다이드 (0.2 ml, 3.25 mmol, 1.5 당량)를 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, EtOAc (2 x 25 ml)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 50% EtOAc:헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 3-브로모-4-클로로-7-플루오로-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘을 연황색 고체 (400 mg, 70.3%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 262.9, 264.9 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.95 (s, 3H), 7.82 (s, 1H), 8.04 (d, J = 3.2 Hz, 1H).

단계 9

디옥산:물 (21ml: 7 ml) 중 3-브로모-4-클로로-7-플루오로-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘 (160 mg, 0.61 mmol, 1 당량), 3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린 (266.6 mg, 0.67 mmol, 1.1 당량) 및 인산칼륨 (257.4 mg, 1.21 mmol, 2 당량)의 교반 용액을 N₂로 10분 동안 탈기하였다. Pd₂(dba)₃ (27.8 mg, 0.03 mmol, 0.05 당량) 및 P(t-Bu)₃HBF₄ (17.6 mg, 0.06 mmol, 0.1 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 110℃에서 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트 (25 ml)로 희석하고, 물 및 염수 용액으로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 화합물을 70% EtOAc: 헥산으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 7-(4-클로로-7-플루오로-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-3-일)-3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린을 연황색 고체 (240 mg, 86%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 456.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.07 (s, 3H), 4.30 (s, 2H), 7.00 - 7.12 (m, 3H), 7.74 - 7.84 (m, 3H), 7.86 (s, 1H), 8.07 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 9.44 (s, 1H).

단계 10

톨루엔 (20 ml) 중 7-(4-클로로-7-플루오로-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-3-일)-3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린 (220 mg, 0.48 mmol, 1 당량), tert디페닐메탄이민 (0.1 ml, 0.58 mmol, 1.2 당량) 및 소듐 tert-부톡시드 (92.8 mg, 0.96 mmol, 2 당량)의 교반 용액을 N₂로 10분 동안 탈기하였다. Pd₂(dba)₃ (22.1 mg, 0.024 mmol, 0.05 당량) 및 BINAP (45.1 mg, 0.072 mmol, 0.15 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 110℃에서 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트 (25ml)로 희석하고, 물 및 염수 용액으로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 펜탄으로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 조 N-(3-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-플루오로-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-4-일)-1,1-디페닐메탄이민 (400 mg)을 수득하였다. (LCMS (ES) m/z = 601.2 [M+H]⁺.

단계 11

메탄올 (25ml) 중 N-(3-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-플루오로-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-4-일)-1,1-디페닐메탄이민 (400 mg, 0.66 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NH₂OH.HCl (462.9 mg, 6.66 mmol, 10 당량)의 수용액 및 중탄산나트륨 (559.4 mg, 6.66 mmol, 10 당량)의 수용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 에틸아세테이트 (50 ml) 중에 용해시키고, 물 및 염수 용액으로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물을 3% MeOH: DCM으로 용리시켰다. 순수한 분획을 증발시켜 3-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-플루오로-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-4-아민을 연황색 고체 (45 mg, 15.5%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 437.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.96 (s, 3H), 4.30 (s, 2H), 5.04 (s, 2H), 7.02 - 7.08 (m, 3H), 7.44 (s, 1H), 7.57 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.72 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 9.43 (s, 1H).

실시예 13:

5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(옥세탄-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

단계 1

EtOH (60 mL) 중 2-(4,6-디클로로피리미딘-5-일)아세트알데히드 (1) (3.1g, 16.2 mmol, 1.0 당량) 및 2-아미노프로판-1,3-디올 (2) (3.69g, 37.3 mmol, 2.3 당량)의 교반 용액을 2시간 동안 환류하였다. 출발 물질의 소모가 완결된 후,, 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 DCM (150 mL) 중에 용해시켰다. DCM 층을 물 및 염수 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하고, 화합물을 DCM 중 5% MeOH로 용리시켜 2-(4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)프로판-1,3-디올 (2.29g, 59.7%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 228.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.05 - 3.01 (m, 1H), 3.27 - 3.20 (m, 1H), 3.66 - 3.55 (m, 3H), 4.05 - 3.94 (m, 2H), 5.00 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H).

단계 2

THF (50 mL) 중 2-(4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)프로판-1,3-디올 (3) (2.23g, 9.69 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 -78℃에서 nBuLi(THF 중 1.2 M) (8.8 mL, 10.6 mmol, 1.1 당량)을 첨가하고, 혼합물을 그 온도에서 2시간 동안 교반한 다음 THF (15 mL) 중 pTsCl (2.03g, 10.6 mmol, 1.1 당량)의 용액를 -78℃에서 첨가하고, 혼합물을 천천히 0℃로 가온되도록 하고, 2시간 동안 0℃에서 교반하였다. 그 후, 다시 nBuLi (THF 중 1.2 M) (8.8 mL, 10.6 mmol, 1.1 당량)을 0℃에서 첨가하고, 60℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc (3x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하고, 화합물을 20% EtOAc/헥산으로 용리시켰다. 순수한 화합물을 함유하는 분획을 농축시켜 4-클로로-7-(옥세탄-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.26g, 13%)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 210.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 5.02 - 4.97 (m, 4H), 5.96 - 5.89 (m, 1H), 6.75 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H).

단계 3

DCM (5 mL) 중 4-클로로-7-(옥세탄-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (4) (0.1g, 0.37 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 0℃에서 NBS (0.072g, 0.4 mmol, 1.1 당량)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 DCM (50mL)으로 희석하고, 물, 포화 NaHCO₃ 용액 및 염수 용액으로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 5-브로모-4-클로로-7-(옥세탄-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.1g, 조 물질)을 회백색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 287.9, 289.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 5.00 - 4.93 (m, 4H), 5.95 - 5..88 (m, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.66 (s, 1H).

단계 4

1,4-디옥산 (10 mL) 중 5-브로모-4-클로로-7-(옥세탄-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.25g, 0.86 mmol, 1.0 당량) 및 수성 NH₃(10 mL)을 강철 용기에 녹이고 반응 혼합물을 100℃로 가열하고, 15시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 소모된 후, 반응 혼합물을 농축시켜 5-브로모-7-(옥세탄-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 회백색 고체 (0.24g, 조 물질)로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 269.0, 271.0 [M+H]⁺.

단계 5

1,4-디옥산: 물 (4 mL: 1 mL) (20 mL) 중 3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린 (0.42 g, 1.07 mmol, 1.2 당량), 5-브로모-7-(옥세탄-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.24 g, 0.89 mmol, 1.0 당량) 및 인산칼륨 (0.37 g, 0.17 mmol, 2.0 당량)의 교반 용액을 N₂로 15분 동안 탈기한 다음, Pd₂(dba)₃ (0.041 g, 0.044 mmol, 0.05 당량), 트리-tert-부틸포스포늄 테트라플루오로보레이트 (0.025 g, 0.089 mmol, 0.1 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 추가로 5분 동안 탈기하였다. 반응 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 실리카겔 칼럼을 사용하여 정제하고, 화합물을 2% MeOH: DCM으로 용리시켰다. 순수한 화합물을 함유하는 분획을 농축시켜 5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(옥세탄-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.185g, 38%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 462.1 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.30 (s, 2H), 5.03 - 4.96 (m, 4H), 5.91 - 5.84 (m, 1H), 6.24 (bs, 2H), 7.05 (d, J = 8.0 Hz, 3H), 7.85 - 7.75 (m, 4H), 8.13 (s, 1H), 9.43 (s, 1H). HPLC: 99.33% 순도, 254 nM에서임.

실시예 14:

7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

단계 1

DMF 중 1-(3-브로모-2-플루오로-6-아이오도페닐)-N-(tert-부틸)메탄이민 및 부트-2-인-1-올의 교반 용액에 N₂분위기 하에 Na₂CO₃ 및 Pd(PPh₃)₄를 첨가한 다음, 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 3시간 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, EtOAc (3x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 실리카겔 칼럼을 사용하여 정제하고, 화합물을 40% EtOAc/헥산으로 용리시켰다. 화합물을 함유하는 분획을 농축시켜 (7-브로모-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린-3-일)메탄올 (0.9g, 12.9%)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 269.0, 271.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 4.77 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 5.20 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.99 - 7.90 (m, 2H), 9.28 (s, 1H).

단계 2

DCM (30 mL) 중 (7-브로모-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린-3-일)메탄올 (0.8g, 2.98 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 데스-마르틴 퍼아이오디난 (2.53g, 5.97 mmol, 2.0 당량)을 0℃에서 첨가하고, 3시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 반응 혼합물을 포화 NaHCO₃ 및 Na₂S₂O₃ 용액 (200mL)의 1:1 혼합물 용액에 붓고, 30분 동안 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 물 및 염수 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 실리카 겔 칼럼을 사용하여 정제하고, 화합물을 20% EtOAc/헥산으로 용리시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 농축시켜 7-브로모-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린-3-카르브알데히드를 회백색 고체 (0.41g, 52%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 267.0, 269.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.95 (s, 3H), 8.18 - 8.13 (m, 2H), 9.50 (s, 1H), 10.33 (s, 1H).

단계 3

1,4-디옥산 (30 mL) 중 7-브로모-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린-3-카르브알데히드 (0.4g, 1.5 mmol, 1.0 당량) 및 토실히드라진 (0.3 g, 1.64 mmol, 1.1 당량)의 교반 용액을 80℃로 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, (3,5-디플루오로페닐)보론산 (0.7 g, 4.47 mmol, 3.0 당량) 및 K₃PO₄ (0.63 g, 3.0 mmol, 2.0 당량)을 첨가하고, 혼합물을 110℃로 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(100mL)로 희석하고, 물, 포화 NaHCO₃ 용액 및 염수 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하고, 화합물을 10% EtOAc/헥산으로 용리시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 농축시켜 7-브로모-3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린 (0.25g, 45%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES) m/z = 366.0, 368.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.58 (s, 3H), 4.38 (s, 2H), 6.62 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 6.66 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.78 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 9.39 (s, 1H).

단계 4

1,4-디옥산: 물 (6 mL: 2 mL) 중 N,N-디(tert-부톡시카르보닐)₇-시클로프로필-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.19 g, 0.52 mmol, 1.0 당량), 7-브로모-3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린 (0.31 g, 0.62 mmol, 1.2 당량) 및 인산칼륨 (0.264 g, 1.24 mmol, 2.0 당량)의 교반 용액을 N₂로 15분 동안 탈기하였다. Pd₂(dba)₃ (0.028 g, 0.031 mmol, 0.05 당량), 및 트리-tert-부틸포스포늄 테트라플루오로보레이트 (0.018 g, 0.062 mmol, 0.1 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 추가로 5분 동안 탈기하였다. 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 실리카겔 칼럼을 사용하여 정제하였다. 생성물을 30% EtOAc/헥산으로 용리시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 농축시켜 N,N-디(tert-부톡시카르보닐)₇-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.22g, 55%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 660.3 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.05 (bs, 22H), 2.60 (s, 3H), 3.78 - 3.74 (m, 1H), 4.43 (s, 2H), 6.87 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.02 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 7.76 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 9.28 (s, 1H).

단계 5

DCM (10 mL) 중 N,N-디(tert-부톡시카르보닐)₇-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (0.22g, 0.33mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 디옥산 중 4M HCl (3 mL)을 0℃에서 첨가하고, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 소모가 완결된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 포화 NaHCO₃ 용액을 사용하여 pH~8로 조정하였다. 수득된 고체를 여과하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 건조시켜 7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 회백색 고체 (0.11g, 72%)로서 수득하였다. LCMS (ES) m/z = 460.2 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.05 - 1.02 (m, 4H), 2.61 (s, 3H), 3.62 - 3.58 (m, 1H), 4.04 (s, 2H), 6.18 (br.s., 2H), 6.92 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.04 - 6.98 (m, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.76 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 9.32 (s, 1H). HPLC: 99.46% 순도, 254 nM에서임.

화합물 15 내지 60을 일반적으로 반응식 1 내지 6 및 실시예 1 내지 14에 기재된 절차에 따라 제조하였다.

표 1.

실시예 61: PERK 효소 검정

본 발명의 화합물은 이전에 보고된 조건 (Axten et al. J. Med. Chem., 2012, 55, 7193-7207)을 변형하여 PERK 효소 억제 활성에 대해 검정을 수행하였다. 간략하게, 다양한 농도의 화합물 (최대 1% DMSO)을 GST-PERK 효소가 담긴 384-웰 플레이트 내에 분배하였다. ATP 및 비오틴-eIF2α를 첨가하고 60분 후에 반응을 켄칭하였다. 2시간 후, 형광 플레이트 판독기를 사용하여 억제를 측정하고 pIC50을 계산하였다. 화합물 1의 활성은 ATP 농도 = 5 μM에서 결정하였다. 화합물 2-20의 경우, PERK 활성은 ATP 농도 = 500 μM ATP에서 결정하였다.

실시예 62 - 캡슐 조성물

표준 경질 젤라틴 캡슐 2 피스를 하기 표 2에 제시된 비율의 성분으로 충전시켜 본 발명을 투여하기 위한 경구 투여 형태를 제조하였다.

표 2

실시예 63 - 주사가능한 비경구 조성물

물 중 10 부피%의 프로필렌 글리콜 중에 1.7 중량%의 5-(3-(3,5-디메틸벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (실시예 2의 화합물)을 교반하여 본 발명을 투여하기 위한 주사가능한 형태를 제조하였다.

실시예 64 정제 조성물

수크로스, 황산칼슘 2수화물 및 하기 표 3에 나타낸 바와 같은 PERK 억제제를 10% 젤라틴 용액과 나타낸 비율로 혼합하고 과립화하였다. 습윤 과립을 스크리닝하고, 건조시키고, 전분, 활석 및 스테아르산과 혼합한 다음, 스크리닝하고, 정제로 압축하였다.

표 3

생물학적 활성

상기 검정에서 본 발명의 화합물을 PERK에 대한 활성에 대해 시험하였다.

실시예 2 내지 60의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 실험 수행으로 평균 PERK 효소 (500 μM ATP) pIC50 값: PERK에 대해 > 5.4를 나타냈다. pIC50 < 5.4를 나타낸 실시예 15, 18, 19, 23, 25, 29 및 58 제외.

실시예 51의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 세트의 실험 수행으로 PERK에 대하여 8.5의 평균 PERK 효소 (500 μM ATP) pIC50 값을 나타냈다.

실시예 53의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 세트의 실험 수행으로 PERK에 대하여 6.2의 평균 PERK 효소 (500 μM ATP) pIC50 값을 나타냈다.

실시예 47의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 세트의 실험 수행으로 PERK에 대하여 5.8의 평균 PERK 효소 (500 μM ATP) pIC50 값을 나타냈다.

실시예 41의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 세트의 실험 수행으로 PERK에 대하여 7.0의 평균 PERK 효소 (500 μM ATP) pIC50 값을 나타냈다.

실시예 6의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 세트의 실험 수행으로 PERK에 대하여 6.8의 평균 PERK 효소 (500 μM ATP) pIC50 값을 나타냈다.

실시예 28의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 세트의 실험 수행으로 PERK에 대하여 5.6의 평균 PERK 효소 (500 μM ATP) pIC50 값을 나타냈다.

실시예 17의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 세트의 실험 수행으로 PERK에 대하여 6.0의 평균 PERK 효소 (500 μM ATP) pIC50 값을 나타냈다.

실시예 38의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 세트의 실험 수행으로 PERK에 대하여 7.9의 평균 PERK 효소 (500 μM ATP) pIC50 값을 나타냈다.

실시예 4의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 세트의 실험 수행으로 PERK에 대하여 6.6의 평균 PERK 효소 (500 μM ATP) pIC50 값을 나타냈다.

실시예 1의 화합물을 전체적으로 상기 PERK 효소 검정에 따라 시험하였고, 적어도 하나의 세트의 실험 수행으로 PERK에 대하여 7.8의 평균 PERK 효소 (5 μM ATP) pIC50 값을 나타냈다. (주의: 실시예 1의 화합물은 5 μM ATP에서 시험하였다).

본 발명의 바람직한 실시양태가 상기 예시되어 있으나, 본 발명은 본원에 개시된 정밀한 지침에 제한되지 않으며 하기 청구범위의 범주 내에 포함되는 모든 변형에 대한 권리를 보유하는 것으로 이해되어야 한다.

Claims

치료를 필요로 하는 포유동물에서 암, 전암성 증후군, 척수 손상, 외상성 뇌 손상, 허혈성 졸중, 졸중, 당뇨병, 대사 증후군, 대사 장애, 헌팅턴병, 크로이츠펠트-야콥병, 치명적 가족성 불면증, 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커 증후군, 및 관련된 프리온 질환, 근위축성 측삭 경화증, 진행성 핵상 마비, 심근경색, 심혈관 질환, 염증, 기관 섬유증, 만성 및 급성 간 질환, 지방간 질환, 간 지방증, 간 섬유증, 만성 및 급성 폐 질환, 폐 섬유증, 만성 및 급성 신장 질환, 신장 섬유증, 만성 외상성 뇌병증 (CTE), 신경변성, 치매, 전두측두엽 치매, 인지 장애, 아테롬성동맥경화증, 안구 질환, 부정맥으로부터 선택된 질환, 기관 이식에서 및 이식을 위한 기관의 수송에서의 치료 방법이며, 상기 치료를 필요로 하는 포유동물에게 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는 방법:

여기서,
R¹은
비시클로헤테로아릴,
치환된 비시클로헤테로아릴,
헤테로아릴, 및
치환된 헤테로아릴
로부터 선택되며,
여기서 상기 치환된 비시클로헤테로아릴 및 상기 치환된 헤테로아릴은 하기로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환되고:
플루오로,
클로로,
브로모,
아이오도,
C_1-6알킬,
플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬옥시, -OH, C_1-4알킬, 시클로알킬, -COOH, -CF₃, -NO₂, -NH₂ 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 C_1-6알킬,
-OH,
히드록시C_1-6알킬,
-COOH,
테트라졸,
시클로알킬,
옥소,
-OC_1-6알킬,
-CF₃,
-CF₂H,
-CFH₂,
-C_1-6알킬OC_1-4알킬,
-CONH₂,
-CON(H)C_1-3알킬,
디C_1-4알킬아미노C_1-4알킬,
아미노C_1-6알킬,
-CN,
헤테로시클로알킬,
C_1-4알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, 옥소, -NO₂, -NH₂ 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 치환된 헤테로시클로알킬,
-NO₂,
-NH₂,
-N(H)C_1-3알킬, 및
-N(C_1-3알킬)₂;
R²는
아릴,
플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, 시클로알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -CHF₂, -OCF₃, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 아릴,
헤테로아릴,
플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, 시클로알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -OCF₃, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 헤테로아릴,
비시클로헤테로아릴,
플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, 시클로알킬, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -CHF₂, -OCF₃, -CN, 및 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 비시클로헤테로아릴
로부터 선택되고;
R³, R⁴, R⁵ 및 R⁶은 각각 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, -CF₃, 및 -CH₃으로부터 선택되고;
R⁷은 수소, C_1-6알킬, 시클로알킬, 아미노C_1-6알킬 -CF₃, -CH₃, 플루오로, 클로로, 브로모 및 아이오도로부터 선택되고;
X는 O, S, C(=O), NR¹⁰⁰, CR²⁰⁰R³⁰⁰이고,
여기서 R¹⁰⁰은 수소, C_1-6알킬로부터 선택되고;
R²⁰⁰ 및 R³⁰⁰은 독립적으로 수소, -CH₃, -CF₃, -OH, 및 -NH₂으로부터 선택되거나,
또는 R²⁰⁰ 및 R³⁰⁰은 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 3 또는 4원 시클로알킬을 나타낸다.
제1항에 있어서, 포유동물이 인간인 방법.
PERK 활성의 억제를 필요로 하는 포유동물에게 치료 유효량의 제1항에 기재된 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 포유동물에서 PERK 활성을 억제하는 방법.
제3항에 있어서, 포유동물이 인간인 방법.
화학식 (II)에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:

여기서
R¹¹은
비시클로헤테로아릴,
치환된 비시클로헤테로아릴,
헤테로아릴, 및
치환된 헤테로아릴
로부터 선택되며,
여기서 상기 치환된 비시클로헤테로아릴 및 상기 치환된 헤테로아릴은 하기로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환되고:
플루오로,
클로로,
브로모,
아이오도,
C_1-6알킬,
플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬옥시, -OH, C_1-4알킬, 시클로알킬, -COOH, -CF₃, -NO₂, -NH₂ 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 C_1-6알킬,
-OH,
히드록시C_1-6알킬,
-COOH,
테트라졸,
시클로알킬,
옥소,
-OC_1-6알킬,
-CF₃,
-CF₂H,
-CFH₂,
-C_1-6알킬OC_1-4알킬,
-CONH₂,
-CON(H)C_1-3알킬,
디C_1-4알킬아미노C_1-4알킬,
아미노C_1-6알킬,
-CN,
헤테로시클로알킬,
C_1-4알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, 옥소, -NO₂, -NH₂ 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 치환된 헤테로시클로알킬,
-NO₂,
-NH₂,
-N(H)C_1-3알킬, 및
-N(C_1-3알킬)₂;
R¹²는
아릴,
플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, 시클로알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -CHF₂, -OCF₃, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 아릴,
헤테로아릴,
플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, 시클로알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -OCF₃, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 헤테로아릴,
비시클로헤테로아릴,
플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, 시클로알킬, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -CHF₂, -OCF₃, -CN, 및 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 비시클로헤테로아릴
로부터 선택되고;
R¹³, R¹⁴, R¹⁵ 및 R¹⁶은 각각 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, -CF₃, 및 -CH₃으로부터 선택되고;
R¹⁷은 수소, C_1-6알킬, 시클로알킬, 아미노C_1-6알킬, -CF₃, -CH₃, 플루오로, 클로로, 브로모 및 아이오도로부터 선택되고;
X는 O, S, C(=O), CR²⁵⁰R³⁵⁰이고,
R²⁵⁰ 및 R³⁵⁰은 독립적으로 수소, -CH₃, -CF₃, -OH, -NH₂로부터 선택되거나,
또는 R²⁵⁰ 및 R³⁵⁰은 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 3 또는 4원 시클로알킬을 나타낸다.
제5항에 있어서,
R¹²는
아릴, 및
플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, C_1-4알킬, 시클로알킬, C_1-4알킬옥시, -OH, -COOH, -CF₃, -C_1-4알킬OC_1-4알킬, -NO₂, -NH₂, -OC(H)F₂, -C(H)F₂, -OCH₂F, -CH₂F, -CHF₂, -OCF₃, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환기로 치환된 아릴
로부터 선택된 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제5항 또는 제6항에 있어서,
R¹¹은 치환된 피롤로[2,3-d]피리미딘, 치환된 피라졸로[3,4-d]피리미딘 및 치환된 피롤로[3,2-c]피리딘으로부터 선택된 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제5항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, R¹⁴는 플루오로인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제4항에 있어서,
5-(3-벤질이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디메틸벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-벤질-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(2,3-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(7-(4-아미노-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)-8-플루오로이소퀴놀린-3-일)(3,5-디플루오로페닐)메탄올;
7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-5-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2,2-디플루오로시클로프로필)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
3-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-플루오로-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(옥세탄-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로-4-메틸이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(7-(4-아미노-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)이소퀴놀린-3-일)(3,5-디메틸페닐)메타논;
5-(3-(3,4-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(2,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(8-플루오로-3-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(8-플루오로-3-(3-(트리플루오로메틸)벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-(3-플루오로벤질)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-(4-플루오로벤질)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(2,5-디메틸벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2,2,2-트리플루오로에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-이소프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-2,7-디메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
3-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-1-메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-2-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
1-시클로프로필-3-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-((3,5-디플루오로페닐)(메톡시)메틸)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-(2-(2-아미노에톡시)에틸)-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-(2-아미노에틸)-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(3-에티닐-5-플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(2,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(1-메틸피페리딘-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2-모르폴리노에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(5-클로로-2-메틸벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-(2-메틸벤질)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(1-메틸아제티딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(1-(3,5-디플루오로페닐)에틸)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-(2-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3-클로로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(2-클로로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-(3-플루오로-5-메틸벤질)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디클로로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2-(디메틸아미노)에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(8-플루오로-3-(3-플루오로벤질)이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3-클로로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로부틸-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3-클로로-2-플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(2,3-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(8-플루오로-3-((5-플루오로피리딘-3-일)메틸)이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-(시클로프로필메틸)-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-(2-메톡시에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-((3-메틸옥세탄-3-일)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
7-시클로프로필-5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-6-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민;
5-(3-(3,5-디플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-에틸-6-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민; 및
5-(3-(3-클로로-5-플루오로벤질)-8-플루오로이소퀴놀린-7-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민으로부터 선택된 화합물; 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제약상 허용되는 부형제와 회합시키는 것을 포함하는, 제약상 허용되는 부형제 및 유효량의 제5항 내지 제9항에 기재된 바와 같은 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 함유하는 제약 조성물의 제조 방법.
치료를 필요로 하는 포유동물에서 암, 전암성 증후군, 알츠하이머병, 척수 손상, 외상성 뇌 손상, 허혈성 졸중, 졸중, 파킨슨병, 당뇨병, 대사 증후군, 대사 장애, 헌팅턴병, 크로이츠펠트-야콥병, 치명적 가족성 불면증, 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커 증후군, 및 관련된 프리온 질환, 근위축성 측삭 경화증, 진행성 핵상 마비, 심근경색, 심혈관 질환, 염증, 기관 섬유증, 만성 및 급성 간 질환, 지방간 질환, 간 지방증, 간 섬유증, 만성 및 급성 폐 질환, 폐 섬유증, 만성 및 급성 신장 질환, 신장 섬유증, 만성 외상성 뇌병증 (CTE), 신경변성, 치매, 전두측두엽 치매, 타우병증, 픽병, 니만-픽병, 아밀로이드증, 인지 장애, 아테롬성동맥경화증, 안구 질환, 부정맥으로부터 선택된 질환, 기관 이식에서 및 이식을 위한 기관의 수송에서의 치료 방법이며, 상기 치료를 필요로 하는 포유동물에게 치료 유효량의 제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는 방법.
제12항에 있어서, 포유동물이 인간인 방법.
제13항에 있어서, 상기 암이 뇌암 (신경교종), 교모세포종, 성상세포종, 다형성 교모세포종, 바나얀-조나나 증후군, 코우덴병, 레르미트-두크로스병, 유방암, 결장암, 두경부암, 신장암, 폐암, 간암, 흑색종, 난소암, 췌장암, 선암종, 관 선암종, 선편평상피 암종, 선방 세포 암종, 글루카곤종, 인슐린종, 전립선암, 육종 및 갑상선암으로부터 선택된 것인 방법.
암을 치료하거나 암의 중증도를 감소시키기 위한 의약의 제조에서의, 제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 기재된 바와 같은 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
PERK 활성의 억제를 필요로 하는 포유동물에게 치료 유효량의 제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 포유동물에서 PERK 활성을 억제하는 방법.
제16항에 있어서, 포유동물이 인간인 방법.
암의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 암을 치료하는 방법이며, 상기 포유동물에게 치료 유효량의
a) 제1항의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및
b) 적어도 1종의 항신생물제
를 투여하는 것을 포함하는 방법.
제18항에 있어서, 적어도 1종의 항신생물제가 항미세관제, 백금 배위 착물, 알킬화제, 항생제, 토포이소머라제 II 억제제, 항대사물, 토포이소머라제 I 억제제, 호르몬 및 호르몬 유사체, 신호 전달 경로 억제제, 비수용체 티로신 키나제 혈관신생 억제제, 면역요법제, 아폽토시스촉진제, 세포 주기 신호전달 억제제, 프로테아솜 억제제, 및 암 대사의 억제제로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법.
요법에 사용하기 위한 제18항에 청구된 바와 같은 제약 조합물.
암의 치료에 유용한 의약의 제조에서의, 제18항에 청구된 바와 같은 제약 조합물의 용도.
제13항에 있어서, 상기 암이 유방암, 염증성 유방암, 관 암종, 소엽성 암종, 결장암, 췌장암, 인슐린종, 선암종, 관 선암종, 선편평상피 암종, 선방 세포 암종, 글루카곤종, 피부암, 흑색종, 전이성 흑색종, 폐암, 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 편평 세포 암종, 선암종, 대세포 암종, 뇌암 (신경교종), 교모세포종, 성상세포종, 다형성 교모세포종, 바나얀-조나나 증후군, 코우덴병, 레르미트-두크로스병, 윌름 종양, 유잉 육종, 횡문근육종, 상의세포종, 수모세포종, 두경부암, 신장암, 간암, 흑색종, 난소암, 췌장암, 선암종, 관 선암종, 선편평상피 암종, 선방 세포 암종, 글루카곤종, 인슐린종, 전립선암, 육종, 골육종, 골의 거대 세포 종양, 갑상선암,
림프모구성 T 세포 백혈병, 만성 골수 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 모발상-세포 백혈병, 급성 림프모구성 백혈병, 급성 골수 백혈병, 만성 호중구성 백혈병, 급성 림프모구성 T 세포 백혈병, 형질세포종, 면역모세포성 대세포 백혈병, 외투 세포 백혈병, 다발성 골수종, 거핵모구성 백혈병, 다발성 골수종, 급성 거핵구성 백혈병, 전골수구성 백혈병, 적백혈병,
악성 림프종, 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 림프모구성 T 세포 림프종, 버킷 림프종, 여포성 림프종,
신경모세포종, 방광암, 요로상피암, 외음부암, 자궁경부암, 자궁내막암, 신암, 중피종, 식도암, 타액선암, 간세포성암, 위암, 비인두암, 협부암, 구강암, GIST (위장 기질 종양), 신경내분비 암 및 고환암으로부터 선택된 것인 방법.
제13항에 있어서, 상기 전암성 증후군이 자궁경부 상피내 신생물, 의미 불명의 모노클로날 감마글로불린병증 (MGUS), 골수이형성 증후군, 재생불량성 빈혈, 자궁경부 병변, 피부 모반 (전흑색종), 전립선 상피내 (관내) 신생물 (PIN), 관 상피내 암종 (DCIS), 결장 폴립 및 중증 간염 또는 간경변증으로부터 선택된 것인 방법.
안구 질환의 치료를 필요로 하는 인간에게 치료 유효량의 제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 기재된 바와 같은 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 인간에서 안구 질환을 치료하거나 안구 질환의 중증도를 감소시키는 방법.
제24항에 있어서, 안구 질환이 홍채혈관신생; 신생혈관 녹내장; 익상편; 혈관성 녹내장 여과포; 결막 유두종; 연령-관련 황반 변성 (AMD), 근시, 선행 포도막염, 외상 또는 특발성과 연관된 맥락막 신생혈관화; 황반 부종; 당뇨병으로 인한 망막 신생혈관화; 연령-관련 황반 변성 (AMD); 황반 변성 (AMD); 경동맥 질환으로부터의 안구 허혈성 증후군; 안구 또는 망막 동맥 폐쇄; 겸상 적혈구 망막병증; 미숙아 망막병증; 일스병; 및 폰히펠-린다우 증후군으로부터 선택된 것인 방법.
제24항에 있어서, 안구 질환이 연령-관련 황반 변성 (AMD) 및 황반 변성으로부터 선택된 것인 방법.
신경변성의 치료를 필요로 하는 인간에게 치료 유효량의 제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 기재된 바와 같은 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 인간에서 신경변성을 치료하거나 신경변성의 중증도를 감소시키는 방법.
수송 동안 기관을 수용하는 용액에 제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 기재된 바와 같은 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 첨가하는 것을 포함하는, 이식을 위한 기관의 수송 동안 기관 손상을 방지하는 방법.
0.5 내지 1,000 mg의, 제1항 및 제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 0.5 내지 1,000 mg의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
a) 제1항에 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및
b) ATF-4 조정 화합물
을 포함하는 조합물.