KR20190027226A - Artificial egg bag for rearing Oorencyrtus nezarae - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to an artificial egg bag for artificially breeding Ooencyrtus nezarae. In particular, the artificial egg bag of the present invention is characterized by the following: (i) the artificial egg bag has a sealed bag form, wherein two sheets of polypropylene films are attached to each other around edges thereof; (ii) artificial eggs, each having a semi-spherical form sized to a diameter of 2.0 to 2.5 mm and a height of 2.0 to 2.5 mm, are formed on an upper end of one sheet of the polypropylene films; (iii) artificial cultures containing haemolymph of larvae of Antheraea pernyi are distributed in an amount of 3 to 5 μl in each artificial egg; and (iii) surfaces of the artificial eggs are coated with abdominal extracts of soldier bugs. The artificial egg bag of the present invention may be used to artificially breed Ooencyrtus nezarae in large batches, thus sparing efforts put into naturally breeding Ooencyrtus nezarae using the eggs of soldier bugs as actual natural host eggs. Also, using the artificial egg bags in artificially breeding Ooencyrtus nezarae may serve to practically control Riptortus pedestris, which is a key pest of legumes and fruit trees.

Description

알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니 {Artificial egg bag for rearing Oorencyrtus nezarae}{Artificial egg bag for rearing Oorencyrtus nezarae}

본 발명은 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 인공사육하기 위한 인공알 주머니에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 노린재의 기생천적인 알깡충좀벌을 노린재 알을 자연숙주알로 사용하지 않고 인공적으로 대량 사육하기 위한 인공알 주머니에 관한 것이다. The present invention relates to artificial pouches for artificial breeding of O. vulnificus . More specifically, the present invention relates to artificial pouches for raising artificial poultry without using natural poultry eggs as natural host eggs, Artificial pouch.

노린재 중 국내 콩과작물 및 과수류에서 가장 큰 피해를 주는 톱다리개미허리노린재(Riptortus pedestris)는 이동성이 강하여 약제를 이용한 방제효과가 떨어진다(Lim, U.T. 2013. Korean J. Appl. Entomol. 52(4): 437-448). The dominant species of Riptortus pedestris , which causes the greatest damage in domestic soybean crops and edible meats , is low mobility and low efficacy using medicines (Lim, UT 2013. Korean J. Appl. Entomol. 52 (4 ): 437-448).

알깡충좀벌(Ooencyrtus nezarae)은 콩과 작물 및 과수(단감, 사과, 배 등)의 해충인 노린재류: 톱다리개미허리노린재(Riptortus pedestris), Anacanthocoris concoloratus, 꽈리허리노린재(A. sordidus), 게눈노린재(Chauliops fallax), 시골가시허리노린재(Cletus punctiger), C. rusticus, 알락수염노린재(Dolycoris baccarum), 점박이둥글노린재(Eysarcoris guttiger), 두점배허리노린재(Homoeocerus unipunctatus), 녹두허리노린재(H. marginiventris), 호리허리노린재(Leptocorisa chinensis), 무당알노린재(Megacopta punctatissimum), 풀색노린재(Nezara antennata), 남쪽풀색노린재(Nezara viridula), 가로줄노린재(Piezodorus hybneri), P. guildinii, 갈색날개노린재(Plautia stali)의 알기생봉(egg parasitoid)이다 (Lim, U.T. 2013. Korean J. Appl. Entomol. 52(4): 437-448). Ooencyrtus nezarae is a pest of beans, crops and fruits (persimmon, apple, pear, etc.): Riptortus pedestris , Anacanthocoris concoloratus , A. sordidus , ( Eg , Chauliops fallax , Cletus punctiger , C. rusticus , Dolycoris baccarum , Eysarcoris guttiger , Homoeocerus unipunctatus , H. marginiventris, ), Leptocorisa chinensis , Megacopta punctatissimum , Nezara antennata , Nezara viridula , Piezodorus hybneri , P. guildinii , and Plautia stali ) Egg parasitoid (Lim, UT 2013. Korean J. Appl. Entomol. 52 (4): 437-448).

알깡충좀벌(Ooencyrtus nezarae)은 일본과 한국에서 톱다리개미허리노린재의 개체군 밀도를 조절하는 중요한 천적으로 연구되어 왔고, 이 종을 이용하여 톱다리개미허리노린재의 방제가 강조되고 있다(Takasu, K. et al., 1992, Appl. Entomol. Zool. 27(1): 171-173; Paik, C.-H., et al., 2007a. Korean J. Appl. Entomol. 46(2): 275-280; Paik, C.-H., et al., 2007b, Korean J. Appl. Entomol. 46(2): 281-286; Alim, Md. A., et al., 2010, Journal of Asia-Pacific Entomology 13: 139-143). Ooencyrtus nezarae has been studied in Japan and Korea as an important nematode controlling the population density of the backbone ants, and emphasis has been placed on the control of the backbone antlers (Takasu, K Paol, C.-H., et al., 2007a., J. Appl. Entomol. 46 (2): 275-7, 280, Paik, C.-H., et al., 2007b, Korean J. Appl. Entomol. 46 (2): 281-286; Alim, Md. Entomology 13: 139-143).

깡충좀벌과에 속하는 알기생봉인 Ooencyrtus 속에 속하는 종들의 시험관내(in vitro)에서 인공알 및 인공배지를 이용한 인공사육에 관한 연구로 이탈리아에서는 재주나방류 일종인 Thaumetopoea pityocampa의 기생봉인 Ooencyrtus pityocampae를 사육한 결과 5마리의 성충을 얻을 수 있었으며(Masutti et al., 1993, Entomophaga. 38(3):327), 국내에서는 매미나방(Lymantria dispar)의 기생봉인 짚시알깡충좀벌(Ooencyrtus kuvanae)을 사육한 결과 최고 42.1%의 성충 우화율을 얻었다(Lee, H.-P., et al., 1994, Korean J. Entomol. 24(4): 311-316). Hop test of species belonging to the genus al wasps the Ooencyrtus belonging to the jombeol vitro (in vitro) from the result of raising the wasps in Ooencyrtus pityocampae of Thaumetopoea pityocampa feat nabangryu one kinds of a paper, Italy on artificial breeding using artificial Al and artificial media (5). In this study, it was found that the number of adult adults was significantly higher than that of the control group (Masutti et al., 1993, Entomophaga. 38 (3): 327), and the domestication of Lymantria dispar , Ooencyrtus kuvanae (Lee, H.-P., et al., 1994, Korean J. Entomol. 24 (4): 311-316).

한편, 일본에서는 톱다리개미허리노린재의 알에 산란된 알깡충좀벌의 알을 꺼내어 시험관내에서 인공배지를 이용하여 사육한 결과, 우유(cow milk) 25%, 달걀 난황(chicken egg yolk) 25%, 누에 혈림프 50%를 포함하는 배지에서 1령 유충 생존율 85.0%, 최종령 생존율 72.5%의 결과를 얻은 바 있다(Takasu, K. et al., 1992, Appl. Entomol. Zool. 27(1): 171-173).On the other hand, in Japan, eggs of egg-laying eggs that were scattered on the eggs of the back leg ants were taken out and grown in artificial medium in the test tube. As a result, milk (cow milk) 25%, chicken egg yolk 25% (1), and the final survival rate was 72.5% (Takasu, K. et al., 1992, Appl. Entomol. Zool. : 171-173).

그러나, 알깡충좀벌을 인공적으로 대량으로 증식하는 기술에 대한 보고는 아직까지 없다.However, there is no report yet on the artificially propagating technology of artificially propagating eggs.

이에 본 발명에서는 톱다리개미허리노린재의 기생천적인 알깡충좀벌을 자연 숙주를 이용하여 사육하는데 소모되는 많은 노력을 줄이고, 알깡충좀벌을 대량으로 인공사육함으로써 실제 방제목적에 응용할 수 있도록 할 수 있는 방법을 개발하기 위해 계속 연구를 진행하던 중 톱다리개미허리노린재 알을 사용하지 않으면서 알깡충좀벌을 인공적으로 대량 사육할 수 있는 인공알을 개발함으로써 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the present invention can reduce the effort of raising parasitic nematodes of the back leg ants, using a natural host, and can be applied to practical control purposes by artificially raising nematodes in large quantities The inventors of the present invention have completed the present invention by developing artificial eggs capable of artificially cultivating artificial larvae of the eggs in the absence of the artificial eggs of the back leg ants.

따라서, 본 발명에서 해결하고자 하는 기술적 과제는 노린재류의 기생천적인 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 자연숙주알을 사용하지 않으면서 인공적으로 대량 사육할 수 있는 인공알을 제공하기 위한 것이다.Accordingly, a technical problem to be solved by the present invention is to provide artificial eggs that can be artificially mass- cultured without using natural host eggs, which is a parasitic nematode of omnivores ( Oorencyrtus nezarae ).

또한, 본 발명에서 해결하고자 하는 다른 기술적 과제를 상기 인공알을 제조하는 방법을 제공하기 위한 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for producing artificial eggs.

상기한 기술적 과제를 해결하기 위하여, 본 발명에서는 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 인공사육하기 위한 인공알 주머니로서, (i) 2겹의 폴리프로필렌 필름의 가장자리가 맞붙어서 밀봉된 백-형태(bag-form)를 이루고, (ii) 상기 폴리프로필렌 필름 중 1겹의 폴리프로필렌 필름의 상단에 지름 2.0 내지 2.5mm 및 높이 2.0 내지 2.5mm 크기의 반구 형태의 인공알이 형성되어 있고, (iii) 상기 인공알 당 산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기 혈림프(haemolymph)를 포함하는 인공배지가 3 내지 5 ㎕의 양으로 분주되어 있으며, (iv) 상기 인공알의 표면에 노린재류의 복부 추출물이 도포되어 있는 것을 특징으로 하는 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니를 제공한다.In order to solve the above technical problems, the present invention provides an artificial egg bag for artificial breeding of Oerencyrtus nezarae , comprising: (i) a double-layered polypropylene film having edges sealed together to form a bag- (ii) a semi-spherical artificial egg having a diameter of 2.0 to 2.5 mm and a height of 2.0 to 2.5 mm is formed on the top of a single-layer polypropylene film of the polypropylene film, and (iii) An artificial medium containing an artificial egg Antheraea pernyi pupa haemolymph is dispensed in an amount of 3 to 5 μl, (iv) the artificial egg is coated with the abdomen extract of a yellowing substance It provides an artificial egg bag for artificial breeding of the eggs.

상기한 다른 기술적 과제를 해결하기 위하여, 본 발명에서는 하기 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니의 제조방법을 제공한다:According to another aspect of the present invention, there is provided a method of manufacturing an artificial egg bag for artificial breeding of an egg hopper, comprising the steps of:

(S1) 1겹의 폴리프로필렌 필름의 상단에 지름 2.0 내지 2.5mm 및 높이 2.0 내지 2.5mm 크기의 반구 형태의 인공알을 형성시키는 단계; (S1) forming hemispheric artificial eggs having a diameter of 2.0 to 2.5 mm and a height of 2.0 to 2.5 mm at the top of a single-layer polypropylene film;

(S2) 상기 인공알에 산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기 혈림프(haemolymph)를 포함하는 인공배지를 3 내지 5 ㎕의 양으로 분주하는 단계; (S2) dividing the artificial egg into an artificial medium containing an Antheraea pernyi papillary haemolymph in an amount of 3 to 5 μl;

(S3) 상기 인공알이 형성된 1겹의 폴리프로필렌 필름을 반으로 접어서 가장자리를 맞물리게 하거나 또는 다른 1겹의 폴리프로필렌 필름과 겹쳐 가장자리를 맞물리게 하고 밀봉시켜 백-형태(bag-form)를 형성하는 단계; 및(S3) folding the single-ply polypropylene film with the artificial eggs in half to engage the edges or overlapping the other single-ply polypropylene film to engage and seal the edges to form a bag-form ; And

(S4) 상기 인공알의 표면에 노린재류의 복부 추출물을 도포하는 단계.(S4) a step of applying abdomen extract of yellowing material to the surface of the artificial egg.

본 발명의 하나의 구현 예에 따르면, 상기 노린재류는 알깡충좀벌(Ooencyrtus nezarae)의 자연숙주로서 톱다리개미허리노린재(Riptortus pedestris), Anacanthocoris concoloratus, 꽈리허리노린재(A. sordidus), 게눈노린재(Chauliops fallax), 시골가시허리노린재(Cletus punctiger), C. rusticus, 알락수염노린재(Dolycoris baccarum), 점박이둥글노린재(Eysarcoris guttiger), 두점배허리노린재(Homoeocerus unipunctatus), 녹두허리노린재(H. marginiventris), 호리허리노린재(Leptocorisa chinensis), 무당알노린재(Megacopta punctatissimum), 풀색노린재(Nezara antennata), 남쪽풀색노린재(Nezara viridula), 가로줄노린재(Piezodorus hybneri), 풀색노린재(P. guildinii) 및 갈색날개노린재(Plautia stali)으로 이루어진 군으로부터 선택된 노린재류이다.According to one embodiment of the present invention, the nodule is a natural host of Ooencyrtus nezarae , such as Riptortus pedestris , Anacanthocoris concoloratus , A. sordidus , Chauliops fallax , Cletus punctiger , C. rusticus , Dolycoris baccarum , Eysarcoris guttiger , Homoeocerus unipunctatus , H. marginiventris , Leptocorisa chinensis , Megacopta punctatissimum , Nezara antennata , Nezara viridula , Piezodorus hybneri , P. guildinii , and brown wing nematode , Plautia stali ).

본 발명의 바람직한 구현 예에 따르면, 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니를 구성하는 폴리프로필렌 필름의 두께는 0.3 내지 0.5mm, 바람직하게는 0.4mm이며, 이에 특별한 제한은 없으나 폴리프로필렌에 인공알 형성시 필름이 찢어지지 않으면서 인공알을 형성할 수 있고, 인공알의 반구 모양이 그대로 유지될 수 있으면서 알깡충좀벌이 산란가능한 두께이면 어떠한 두께이든 사용될 수 있다.According to a preferred embodiment of the present invention, the thickness of the polypropylene film constituting the artificial nail bag for artificial breeding of the eggs is 0.3 to 0.5 mm, preferably 0.4 mm, The artificial egg can be formed without tearing the film when the egg is formed, the hemispherical shape of the artificial egg can be maintained as it is, and any thickness can be used as long as the eggshell can be scattered.

상기 인공알은 알깡충좀벌의 자연숙주인 노린재류의 알 크기와 유사하거나 노린재류의 알보다 조금 크게 제작할 수 있으며, 인공배지가 3 내지 5 ㎕의 양으로 분주될 수 있을 정도의 크기로 제작할 수 있다. 예를 들어, 지름(b) 2.0 내지 2.5mm 및 높이(a) 2.0 내지 2.5mm 크기, 바람직하게는 지름 2.2mm 및 높이 2.2mm로 제작할 수 있다(도 7 참조). The artificial egg may be made to have a size similar to that of the nymph or a natural host of the nymphs or slightly larger than those of the nymphs, and may be manufactured to a size such that the artificial medium can be dispensed in an amount of 3 to 5 μl. For example, it is possible to manufacture the bobbin having a diameter of 2.0 to 2.5 mm and a height of 2.0 to 2.5 mm, preferably 2.2 mm in diameter and 2.2 mm in height (see FIG. 7).

본 발명의 바람직한 구현 예에 따르면, 폴리프로필렌 필름 상에 끝이 둥근 쇠막대를 이용하여 상기 크기를 가지는 반구 형태의 인공알을 만들 수 있다. According to a preferred embodiment of the present invention, hemispherical artificial eggs having the above-mentioned size can be made by using an iron rod with a rounded end on a polypropylene film.

본 발명의 바람직한 구현 예에 따르면, 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니의 폴리프로필렌 필름에 형성된 인공알은 알깡충좀벌이 서로 방해없이 산란할 수 있을 정도의 간격을 두고 형성될 수 있으며, 예를 들어 폴리프로필렌 필름 상에 4 내지 6mm, 바람직하게는 5mm의 사이 간격을 두고 형성될 수 있다. According to a preferred embodiment of the present invention, the artificial eggs formed on the polypropylene film of the artificial egg bag for artificial feeding of the egg hopper can be formed at intervals enough to scatter eggs without interfering with each other, For example, 4 to 6 mm, preferably 5 mm, on the polypropylene film.

본 발명의 백-형태의 인공알 주머니는 상기 인공알이 형성된 1겹의 폴리프로필렌 필름을 반으로 접어서 가장자리를 맞물리게 하거나 또는 다른 1겹의 폴리프로필렌 필름과 겹쳐 가장자리를 맞물리게 하고 밀봉시켜 백-형태(bag-form)로 제작할 수 있다. 구체적으로 가로(c) 4 내지 6cm, 세로(d) 1 내지 3cm 및 높이(e) 0.2 내지 1cm의 크기, 바람직하게는 가로(c) 5cm, 세로(d) 2cm 및 높이(e) 0.5cm의 크기일 수 있으나(도 7 참조), 이에 특별한 제한은 없다. 이 때 하나의 백-형태의 인공알 주머니의 폴리프로필렌 상에는 10 내지 14개, 바람직하게는 12개의 인공알이 형성될 수 있다. The bag-shaped artificial egg bag of the present invention is obtained by folding a single-layered polypropylene film having the artificial egg in half in order to engage the edges or overlapping the other single-layered polypropylene film, bag-form. (C) 5 cm, a length (d) 2 cm, and a height (e) of 0.5 cm in the width (c) of 4 to 6 cm, the length (d) of 1 to 3 cm and the height (See FIG. 7), but there is no particular limitation thereto. At this time, artificial eggs of 10 to 14, preferably 12 artificial eggs may be formed on the polypropylene of one bag-shaped artificial nest.

본 발명에서는 인공알 주머니를 백-형태 형태로 밀봉시킴으로써 외부로부터의 곰팡이 등과 같은 미생물 오염을 방지할 수 있으며, 인공알에 분주된 인공배지가 외기에 의해 건조되는 것을 방지할 수 있다.In the present invention, microbial contamination such as fungi from the outside can be prevented by sealing the artificial egg bag in a bag-shaped form, and the artificial medium dispensed to the artificial egg can be prevented from being dried by the outside air.

본 발명의 바람직한 구현 예에 따르면, 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공배지는 산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기 추출물을 혈림프(haemolymph)로서 유효성분으로 포함하는 배지이며, 구체적으로 산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기 혈림프(haemolymph), 달걀 난황(Chicken yolk), 신생아용 분유(Infant formula), Neisenheimer 염 용액, 페니실린(Penicillin) 및 스트렙토마이신(Streptomycin)을 포함하는 것이 특징이다. According to a preferred embodiment of the present invention, an artificial medium for artificial breeding of eggs is an agar medium containing Antheraea pernyi pupa extract as an effective ingredient as haemolymph, specifically Antheraea pernyi It is characterized by containing pupae haemolymph, chicken yolk, infant formula, Neisenheimer salt solution, penicillin and streptomycin.

본 발명의 바람직한 실시양태에 따르면, 알깡충좀벌의 인공사육을 위한 인공배지는 인공알 당 3 내지 5 ㎕의 양, 바람직하게는 4 ㎕의 양으로 분주하며, 이러한 분주량은 알깡충좀벌의 알이 최대 7개까지 산란하는데 요구되는 양으로서 3 ㎕ 미만의 양으로 분주할 경우 알깡충좀벌 알이 산란하기에 부족하며, 5 ㎕ 초과의 양으로 분주할 경우 인공알 크기에 비하여 배지량이 많아 적절하지 않다. According to a preferred embodiment of the present invention, an artificial medium for artificial rearing of eggs is distributed in an amount of 3 to 5 μl, preferably 4 μl, per artificial egg, This is the amount required to scatter up to 7 eggs. When eggs are fed at an amount of less than 3 μl, it is not sufficient for eggs to be scattered. When the eggs are fed at an amount exceeding 5 μl, not.

본 발명의 바람직한 실시양태에 따르면, 알깡충좀벌의 자연숙주인 노린재류의 알을 사용하지 않고 노린재의 복부 추출물을 인공알에 도포함으로써 알깡충좀벌의 산란이 가능하며, 상기 노린재류의 복부 추출물은 노린재류 암컷의 복부를 떼어내어 유기용매에 60 내지 80시간 동안 침적시켜 추출할 수 있다. 이 때 유기용매로는 메탄올, 에탄올, 프로판올 또는 부탄올을 예로 들 수 있으며, 바람직하게는 에탄올을 사용할 수 있다. According to a preferred embodiment of the present invention, it is possible to scatter eggshell eggs by applying an abdominal extract of a yolk to a artificial egg without using eggs of an egg yolk, which is a natural host of the eggshell, and the abdomen extract of the yellow- Can be removed by immersing in the organic solvent for 60 to 80 hours. The organic solvent may be methanol, ethanol, propanol or butanol, preferably ethanol.

본 발명의 하나의 구체적인 실시양태에 따르면, 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알에 우화된 알깡충좀벌 암컷을 접종함으로써 알깡충좀벌의 인공산란을 유도할 수 있다.According to one specific embodiment of the present invention, artificial spawning of an egg-hopper beetle can be induced by inoculating an eggshell beetle larvae artificially foddered to artificially raise an egg beetle.

본 발명의 하나의 구체적인 실시양태에 따르면, 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 백-형태의 인공알 주머니에 인공알 주머니 2개당 우화한지 4일차 내지 6일차된 알깡충좀벌 암컷 15 내지 25마리, 바람직하게는 20마리를 접종하는 것을 특징으로 한다.According to one specific embodiment of the present invention, in a bag-shaped artificial egg bag for artificial feeding of egg hopper bees, 15 to 25 eggs of 4 to 6 days old alopecia areophilized per two artificial egg bags, preferably And 20 mice are inoculated.

본 발명의 하나의 구체적인 실시양태에 따르면, 인공알 주머니에 접종된 알깡충좀벌 암컷은 인공알을 이용하여 알깡충좀벌 알을 산란하고, 유충 및 번데기 단계를 거쳐 성충으로 발육될 수 있다. 구체적으로, 인공알 주머니에서 산란된 알깡충좀벌의 알 수는 인공알 주머니 2개당 평균 185개였으며, 이들이 부화하여 성충으로 발육되는 회수율은 평균 46.1%였으며, 발육기간은 알에서 유충까지 9-13일, 알에서 번데기까지는 16-20일이 소요되었는 바, 번데기 기간은 평균 7일이 걸리는 것으로 판단된다. 또한 인공알에서 수확된 성충의 성비는 숫컷:암컷이 1:1.64로 나타나 암컷이 숫컷에 비하여 대략 2배 정도 많은 것으로 나타났다. According to one specific embodiment of the present invention, eggshell eggs inoculated into artificial egg bags can be developed into adult eggs via artificial eggs by scattering eggs and larvae and pupa stages. Specifically, the average number of eggshell eggs scattered in artificial egg bags was 185 per artificial egg bags, and the average recovery rate of adult eggs was 46.1%, and development period ranged from eggs to larvae It took 16-20 days from work, egg to pupa, and it took 7 days on average. In addition, sex ratio of male adults harvested from artificial eggs was 1: 1.64 in male and female was almost twice as many as male.

상기한 바와 같은 본 발명에 따른 알깡충좀벌의 인공사육을 위한 인공알 주머니를 이용한 인공사육의 결과, 자연사육에 비하여 약 3-5일 정도 발육이 늦어졌고, 우화율도 46.1%로 자연숙주에서보다 절반정도 수준인 것으로 나타났지만, 노린재류의 알을 자연숙주 알로서 이용하지 않고도 이의 기생천적인 알깡충좀벌을 인공적으로 사육할 수 있다는 데에 큰 의미가 있다. 따라서, 이러한 인공알을 이용한 알깡충좀벌의 인공사육은 앞으로 농업현장에서 생물적 방제원으로 충분히 사용할 수 있을 것으로 전망된다. As a result of the above artificial raising using the artificial pouch for artificial breeding of the beetle according to the present invention, the development was delayed about 3-5 days compared to the natural breeding, and the emergence rate was 46.1% But it is meaningful to be able to artificially nurture the parasitic nematode, which is a parasitic nematode, without using the nematode eggs as natural host eggs. Therefore, it is expected that artificial rearing of the eggs of artificial eggs using these artificial eggs will be enough to be used as biological control agents in agricultural fields in the future.

한편, 본 발명에 따른 인공알 주머니에서 인공적으로 산란된 알깡충좀벌 알은 인공알 주머니에서 유충 및 번데기 단계를 거쳐 성충으로 우화될 수 있다. 인공알 주머니에서 알깡충좀벌이 성충으로 우화되면 인공알 주머니의 폴리프로필렌 필름의 밀봉된 부분을 열거나 절개하여 적용하고자 하는 콩과작물과 과수류에 인공사육된 알깔충좀벌을 살포하여 콩과작물 및 과수류의 해충인 노린재의 생물적 방제원으로 사용함으로써 노린재의 개체군 밀도를 조절할 수 있다. Meanwhile, artificially scattered eggshell eggs in artificial egg bags according to the present invention can be alienated into adult eggs through larval and pupa stages in artificial egg bags. When artificial eggs are grown into adults, they can be used to open or seal the sealed part of the artificial egg bag, spraying artificial reared artisanal beetles with soybeans, crops, It can be used as a biological control source of phosphorus, which is a pest of persimmon.

이와 같이, 본 발명에 따른 인공알 주머니를 이용하여 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 인공으로 대량 사육함으로써 노린재류의 알을 실제 자연숙주 알로 이용하여 자연 사육하는데 소모되는 많은 노력을 줄일 수 있다. 또한, 이러한 인공알을 이용하여 알깡충좀벌을 인공사육하여 콩과작물 및 과수류에서 가장 큰 피해를 주는 노린재류의 실질적인 방제원으로 사용할 수 있을 것으로 기대된다.As described above, by using the artificial egg bag according to the present invention, it is possible to reduce a lot of efforts for natural breeding by using artificial largemouth eggs as natural host eggs by artificially cultivating oerencyrtus nezarae . In addition, it is expected that artificial eggs will be used as a practical control agent for artificially infested birds, which are the most damaging to beans, crops, and oranges.

도 1은 콩 식물에서 톱다리개미허리노린재 (Riptortus pedestris)를 사육하는 사진이다.
도 2는 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 사육하는 사진이다.
도 3은 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)의 자연산란을 위한 자연숙주알인 톱다리개미허리노린재 (Riptortus pedestris) 알을 이용하는 과정을 보여주는 사진이다.
도 4는 자연숙주알을 이용한 알깡충좀벌의 산란능력을 측정한 그래프이다.
도 5는 산란시간에 따른 자연숙주알에서 알깡충좀벌의 누적산란수를 나타낸 그래프이다.
도 6은 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 인공사육하기 위한 인공알 주머니를 제조하는 공정을 도식화한 것이다.
도 7은 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 인공사육하기 위해 제조된 인공알 주머니를 도식화한 것이다.
도 8은 인공알을 이용한 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)의 산란에서 번데기 과정을 보여주는 사진이다.
Fig. 1 is a photograph showing the breeding of a sawtooth leg ( Riptortus pedestris ) in a soybean plant.
Fig. 2 is a picture showing the breeding of an oarencyrtus nezarae .
Fig. 3 is a photograph showing the process of using a natural host egg, Riptortus pedestris egg, for natural spawning of Oorencyrtus nezarae .
FIG. 4 is a graph showing the scattering ability of eggshell eggs using natural host eggs. FIG.
FIG. 5 is a graph showing the cumulative number of eggs scattered in the natural host eggs according to the scattering time. FIG.
FIG. 6 is a schematic view showing a process for producing artificial egg bags for artificial breeding of Oerencyrtus nezarae .
Fig. 7 is a schematic illustration of artificial egg bags prepared for artificial breeding of Oorencyrtus nezarae .
Fig. 8 is a photograph showing the process of pupaing in the spawning of an artificial egg ( Oorencyrtus nezarae ) using artificial eggs.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다. Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail to facilitate understanding of the present invention. However, the embodiments according to the present invention can be modified into various other forms, and the scope of the present invention should not be construed as being limited to the following embodiments. Embodiments of the invention are provided to more fully describe the present invention to those skilled in the art.

<실시예 1> 실험곤충 사육 Example 1 Experimental Insect Breeding

알깡충좀벌의 숙주가 되는 톱다리개미허리노린재는 사육실(26±1℃, 35-40% RH, L16:D8)에서 사육상(75x75x75cm) 내에 강낭콩을 먹이식물로 사용하고, 땅콩이나 메주콩 종자를 흡즙원으로 급여하면서 누대사육하여 숙주 알을 확보하였다. 도 1은 콩 식물에서 톱다리개미허리노린재 (Riptortus pedestris)를 사육하는 사진이다.The top leg ants, which are the hosts of the eggshells, are used as food plants in the forest (75 ± 75x75cm) at the feeding room (26 ± 1 ℃, 35-40% RH, L16: D8) The feed was fed while being fed as a feed source, and the host eggs were obtained. Fig. 1 is a photograph showing the appearance of a sawtooth leg ( Riptortus &lt; RTI ID = 0.0 &gt; pedestris ).

한편, 알깡충좀벌은 전라남도 순천시 순천대학교 주변 경작지에서 톱다리개미허리노린재의 알을 채집하여 기생된 알에서 우화하는 성충을 채집하였다. 윗면 뚜껑을 둥그렇게 망사천으로 처리한 플라스틱 사각케이지(7x7x10cm)에 숙주인 톱다리개미허리노린재 알을 넣고 채집한 알깡충좀벌 성충을 접종하여 항온항습 조건(25±1℃, 45% RH, L16:D8)에서 누대사육을 통해 실험에 필요한 밀도를 계속해서 유지시켰다. 도 2는 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 사육하는 사진이다. On the other hand, eggs were collected from the eggs of the back leg ants in the cultivation area around Sunchon University in Jeollanam - do, Jeollanam - do. (25 ± 1 ° C, 45% RH, L16) in a plastic square cage (7 × 7 × 10 cm) treated with a manganese sachet on top of the top cover and inoculated with eggshells, : D8), the densities required for the experiment were maintained throughout the incubation. Fig. 2 is a picture showing the breeding of an oarencyrtus nezarae .

<참조예 1> 알깡충좀벌의 자연숙주알을 이용한 산란 측정Reference Example 1: Scattering measurement using a natural host egg of a beetle

자연숙주의 알에서 알깡충좀벌의 산란능력을 알아보기 위해, 톱다리개미허리노린재 (Riptortus pedestris) 알(자연숙주알)을 수거하여 최대 2일 정도 냉동보관(4℃)한 후, 우화한지 12시간 이내의 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae) 암컷 10마리를 투여하여 매일 100개씩 자연숙주알을 갈아주면서 산란을 받았다(25 ± 1 ℃, 45 % RH, L 16 : D 8).In order to investigate the egg laying ability of natural host eggs, Riptortus pedestris eggs (natural host eggs) were collected and stored frozen (4 ℃) for up to 2 days. (25 ± 1 ° C, 45% RH, L 16: D 8) were fed with 10 female oocytes ( Oorencyrtus nezarae ) within a given hour.

도 3은 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)의 자연산란을 위한 자연숙주알인 톱다리개미허리노린재 (Riptortus pedestris)를 이용하는 과정을 보여주는 사진이다. 여기에서, A는 자연 산란에 이용하기 위한 톱다리개미허리노린재 자연숙주알(n=100)의 사진이고, B는 산란을 위해 자연숙주알을 이용하는 알깡충좀벌의 사진이다. Fig. 3 is a photograph showing the process of using a natural host egg, Riptortus pedestris , for natural spawning of Oorencyrtus nezarae . Here, A is a picture of a natural host egg (n = 100) of a sawtooth antler for use in natural spawning, and B is a photograph of an egg hopper using natural host eggs for spawning.

자연숙주알Natural host egg 암컷female 수컷cock gun 성비율
(♀ : ♂)
Sex ratio
(♀: ♂)
n = 10n = 10 2.90 ± 1.452.90 ± 1.45 1.60 ± 1.071.60 + 1.07 4.50 ± 2.07
(0 - 7)
4.50 ± 2.07
(0 - 7)
1.81 : 11.81: 1

상기 표 1에서 보듯이, 톱다리개미허리노린재의 자연숙주 알 1개당 알깡충좀벌의 산란수를 조사한 결과, 알 1개당 최대 7마리까지로 평균 4.50±2.07 마리가 성충으로 발육하였고, 그의 성비는 약 1:1.81로 암컷이 2배 정도 많이 우화하였다.As shown in Table 1, the number of laying eggs per natural host egg of the back leg ants was about 4.50 ± 2.07, up to 7 eggs per egg, 1: 1.81, and the female was twice as much alienated.

또한, 자연숙주알에서 알깡충좀벌의 산란능력을 알아보기 위해 톱다리개미허리노린재 알(자연숙주알)을 수거하여 최대 30일 정도 냉동보관(4℃)한 후, 우화한지 12시간 이내의 알깡충좀벌 암컷 10마리를 투여하여 매일 100개의 자연숙주알을 갈아주면서 산란을 받았다.In order to investigate the egg laying ability of natural host eggs, we collected the eggs from the back leg ants (natural host eggs) and frozen for up to 30 days (4 ℃) 10 eggs were given to the female, and 100 eggs were spawning every day.

도 4는 자연숙주알을 이용한 알깡충좀벌의 산란능력을 측정한 그래프이고, 도 5는 산란시간에 따른 자연숙주알에서 알깡충좀벌의 누적산란수를 나타낸 그래프이다. 여기에서 보듯이, 기생벌을 투여한 후 18일까지 산란이 이루어졌고, 1주일 이내에 총 산란수의 65%를 산란하였으며, 5-6일차에 가장 많이 산란하였다. 사육한 결과 총 254 마리(수컷 85마리, 암컷 169마리)의 성충이 우화하였으며, 그 성비는 1:1.99이었다. 또한, 암컷 1 마리의 누적산란수는 평균 25.4개로 확인되었다.FIG. 4 is a graph showing the scattering ability of eggshell eggs using natural host eggs, and FIG. 5 is a graph showing the cumulative eggshell count of eggshell eggs obtained from natural host eggs according to scattering time. As shown here, spawning occurred until the 18th day after parasitic administration, and 65% of the total number of eggs was scattered within one week, and the eggs were scattered the most during 5-6 days. A total of 254 adults (85 males and 169 females) were alive in the breeding, and the sex ratio was 1: 1.99. Cumulative number of eggs laid per female was 25.4 on average.

<실시예 1> 인공알을 이용한 알깡충좀벌의 사육 <Example 1> Breeding of an egg-hopper beetle using artificial eggs

(1) 인공배지 조성(1) Artificial medium composition

본 실험에서 사용된 인공배지의 조성은 문헌 (Lee, H.-P., et al., 1994, Korean J. Entomol. 24(4): 311-316)에 개시된 짚시알깡충좀벌(Ooencyrtus kuvanae) 인공사육시 사용했던 배지조성 내용을 기초로 하여 하기 표 2에 나타낸 조성으로 제조하되, 혈림프(haemolymph)로서 산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기를 사용하였다.The composition of the artificial medium used in this experiment are described in: gypsy seen hop jombeol (Ooencyrtus kuvanae) described in (Lee, H.-P., et al, 1994, Korean J. Entomol 24 (4).. 311-316) Antheraea pernyi pupa was used as a haemolymph according to the composition shown in Table 2 based on the contents of the medium used in artificial breeding.

혈림프로서 산누에나방 번데기를 60℃의 물에서 4분간 처리 후 추출하여 사용하였으며, 유충의 발생에 필요한 복합영양성분은 신생아용 분유를 사용하였다.As a hemolymph, the pupae were treated with water at 60 ℃ for 4 minutes and used. The compound nutrients required for the larval development were used for the infant formula.

성분ingredient 중량 (%)weight (%) 산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기 혈림프(haemolymph) Antheraea pernyi (haemolymph) 4040 달걀 난황 (Chicken yolk)Egg yolk (Chicken yolk) 2020 신생아용 분유(Infant formula)Infant formula 3030 Neisenheimer 염 용액Neisenheimer salt solution 1010 페니실린(Penicillin)Penicillin 400 units/㎖400 units / ml 스트렙토마이신(Streptomycin)Streptomycin 400 units/㎖400 units / ml

(2) 인공알 주머니 제조(2) Manufacture of artificial eggs

도 6은 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 인공사육하기 위한 인공알 주머니를 제조하는 공정을 도식화한 것이다. 여기에서, (100)은 1겹의 폴리프로필렌 필름이고, (10)은 인공알이고, (11)은 인공배지이고, (101)은 다른 1겹의 폴리프로필렌 필름이고, (12)는 밀봉된 형태를 나타내며, (102)는 인공시육 주머니이다.FIG. 6 is a schematic view showing a process for producing artificial egg bags for artificial breeding of Oerencyrtus nezarae . (10) is an artificial egg, (11) is an artificial medium, (101) is another single-layer polypropylene film, (12) is a sealed one (102) is an artificial hand pocket.

도 7은 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 인공사육하기 위해 제조된 인공알 주머니를 도식화한 것이다. 여기에서, a는 인공알의 반구 높이를 나타내고, b는 인공알의 지름을 나타낸다.Fig. 7 is a schematic illustration of artificial egg bags prepared for artificial breeding of Oorencyrtus nezarae . Here, a represents the hemisphere height of the artificial egg, and b represents the diameter of the artificial egg.

도 6 및 도 7을 참조로 설명하면, 0.4mm 두께의 폴리프로필렌 필름(100)상에 끝이 둥근 쇠막대를 이용하여 반구 형태의 인공알(2.2mm × H 2.2mm)(10)을 만들고, 인공알 사이 간격을 5mm로 하여 하나의 폴리프로필렌 필름(100) 상에 12개의 인공알(10)이 형성되도록 제작하였다. 하나의 인공알 당 인공배지(11)를 4㎕씩 분주하였다. 알깡충좀벌이 발육할 때 요구되는 산소를 공급해 주고, 외부로부터 곰팡이 등의 미생물 오염을 막기 위해서 백-형태는 가로 5cm x 세로 2cm x 높이 0.5cm의 크기로 비닐접착기를 이용하여 밀봉(12)된 형태로 만들었다. 인공알 주머니를 만드는 모든 공정은 잡균의 오염을 막기 위해 클린벤치 안에서 이루어졌다.6 and 7, hemispherical artificial eggs (2.2 mm × H 2.2 mm) 10 are formed on a polypropylene film 100 having a thickness of 0.4 mm by using an iron rod having a rounded end, And 12 artificial eggs (10) were formed on one polypropylene film (100) at intervals of 5 mm. One artificial alginate artificial medium (11) was dispensed in 4 mu l each. In order to supply the required oxygen for the development of the eggs and to prevent contamination of microorganisms such as fungi from the outside, the bag-type is sealed (12) with a size of 5cm x 2cm x 0.5cm in height using a vinyl adhesive . All processes for making artificial pouches were carried out in a clean bench to prevent contamination of germs.

(3) 산란유도물질 추출 및 도포(3) Extraction and application of scattering inducer

알깡충좀벌 성충이 인공알에 산란할 수 있도록 유도하기 위하여 톱다리개미허리노린재 암컷 100마리(약 3.7g)의 복부를 떼어내어 유기용매인 에탄올 2,000㎕에 넣고 72시간 침적시킨 후 추출하여 상기 폴리프로필렌 필름 상에 형성된 인공알에 모세관 피펫(capillary pipet)을 이용하여 1 알 등가량(egg equivalent)이 되는 용량으로 각각의 인공알 표면에 발라주었다.In order to induce the egg-laying larvae to scatter in the artificial eggs, 100 stomachs (about 3.7 g) of the dorsal flank of the dorsal flank were removed and placed in 2,000 쨉 l of ethanol as an organic solvent. After 72 hours of immersion, The artificial eggs formed on the propylene film were applied to each artificial egg surface with a capillary pipette at a volume equivalent to one egg equivalent.

(4) 인공알을 이용한 알깡충좀벌의 산란 (4) Spawning of eggshells using artificial eggs

상기 제작된 인공알이 형성된 백-형태(bag-form)의 인공알 주머니 2개당 우화한 지 각각 4일차, 5일차, 6일차 된 알깡충좀벌 암컷 20마리씩을 1일(24시간) 동안 노출시켜 산란율을 측정하였다. Four days, five days, and six days old twenty eggshells of each artificial egg bag produced in the bag-form artificial egg bags prepared above were exposed for 1 day (24 hours) The egg production rate was measured.

알깡충좀벌 암컷Females 백-형태
(12 인공알)
Back-form
(12 artificial eggs)
산란된 알
/백-형태
Scattered eggs
/ Back-form
산란된 알
/인공알
Scattered eggs
/ Artificial eggs
4일차 성충 (20마리)Fourth adult (20) 1차Primary 9292 7.67 ± 6.857.67 ± 6.85 2차 Secondary 106106 8.33 ± 5.838.33 + - 5.83 5일차 성충 (20마리)5th adult (20) 1차Primary 108108 9.00 ± 5.129.00 5.12 2차 Secondary 4646 3.83 ± 4.433.83 + - 4.43 6일차 성충 (20마리)6th adult (20) 1차Primary 117117 9.75 ± 6.559.75 + - 6.55 2차 Secondary 8686 7.17 ± 6.897.17 ± 6.89 평균Average 66 92.592.5 7.71 ± 6.127.71 6.12

상기 표 3에서 보듯이, 인공알에서 산란된 알 수는 백-형태 인공알 주머니 당 평균 92.5개였으며, 인공알 1개당 평균 7.71개였다.As shown in Table 3, the number of eggs scattered in the artificial eggs was 92.5 per bag-shaped artificial pouch and 7.71 in average per artificial egg.

인공알 하나에 산란한 알 수는 상기 참조예 1의 자연산란과 비교할 때 자연숙주의 알에서 산란한 4.5개보다 1.7배 정도 많이 산란하였으며, 이는 인공알의 크기(2.2mm × H 2.2mm)가 자연숙주의 알 크기(약 1.4 mm)보다 크기 때문에 많이 산란한 것으로 생각된다.The number of eggs scattered in one artificial egg was 1.7 times larger than the number of eggs scattered in natural host eggs compared with the natural egg scattering of Reference Example 1. The size of artificial eggs (2.2 mm × H 2.2 mm) It is thought to have been scattered a lot because it is larger than the egg size of natural host (about 1.4 mm).

도 8은 인공알을 이용한 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)의 산란에서 번데기 과정을 보여주는 사진이다. 여기에서, A는 알깡충좀벌의 인공알에서의 산란 사진이고, B는 알깡충좀벌 및 인공알 껍질의 폴리프로필렌 필름으로부터 돌출하는 알주머니 자루(egg stalk)를 보여주는 사진이고, C는 전번데기 단게에서의 용변을 보여주는 사진이고, D는 번데기 단계를 보여주는 사진이다.Fig. 8 is a photograph showing the process of pupaing in the spawning of an artificial egg ( Oorencyrtus nezarae ) using artificial eggs. Here, A is a photograph of a spawning egg in an artificial egg, B is a photograph showing an egg stalk protruding from a polypropylene film of an egg shell and artificial egg shell, And D is a photograph showing the pupa stage.

여기에서 보듯이, 알은 인공알로부터 주목할 만하게 돌출한 자루를 지닌 전형적인 깡충좀벌의 알이었다(도 8B). 유충의 생애동안 알껍질의 뒤쪽 끝에 부착되어 남아있으며, 생산된 허물이 여기에 축적된다. 전용단계에 도달하자마자 태변이 몇 개의 갈색-오렌지색 펠렛으로 배출되고, 곤충은 황백색으로 된다(도 8C). 탈피로 형성된 번데기는 처음에 회황색이며, 나중에 검게 변한다(도 8D).As can be seen, the egg was a typical beetle egg with a noticeably protruding sack from the artificial egg (Fig. 8B). It remains attached to the back end of the egg shell during the life of the larva, and the produced sludge accumulates here. Upon reaching the dedicated phase, the meconium is discharged into several brown-orange pellets and the insect turns yellowish white (FIG. 8C). The molted pupa is initially yellowish, and later turns black (FIG. 8D).

(5) 인공알 주머니를 이용한 알깡충좀벌의 발육(5) Development of egg-hopper beetle using artificial egg bag

상기 제작된 인공알이 형성된 백-형태(bag-form)의 인공알 주머니 2개당 우화한 지 각각 4일차, 5일차, 6일차된 알깡충좀벌 암컷 20마리씩을 노출시켜 1일(24시간) 동안 산란을 받은 후, 인공알 당 산란수, 발육한 유충수, 용화율, 성충의 우화율 및 그 성비를 조사하였다. 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다.Four days, five days, and six days after the emergence of two bag-shaped artificial pouches each having the artificial eggs prepared were exposed for 20 days each for 1 day (24 hours) After egg laying, the number of artificial egg per year, number of developed larval water, rate of solubilization, rate of adult emergence and sex ratio were investigated. The results are shown in Table 4 below.

알깡충좀벌 암컷Females 인공알에서 산란된 알수 An egg scattered in artificial eggs 유충수
(%)
Yoo
(%)
알에서 유충까지 기간(일)From eggs to larvae (days) 번데기수 (%)Number of pupae (%) 알에서 번데기까지 기간(일)From eggs to puppies Duration (days) 성충수
(%)
Adult Number
(%)
성비율
(♀ : ♂)
Sex ratio
(♀: ♂)
4일차 성충 (20)Fourth adult (20) 198198 128
(64.6%)
128
(64.6%)
9 - 139 - 13 104
(52.5%)
104
(52.5%)
16 - 2016 - 20 96
(48.5%)
96
(48.5%)
63 : 33 (1.91 : 1)63: 33 (1.91: 1)
5일차 성충 (20)5th day adult (20) 154154 110
(71.4%)
110
(71.4%)
9 - 139 - 13 79
(51.3%)
79
(51.3%)
16 - 2016 - 20 58
(37.7%)
58
(37.7%)
35 : 23 (1.52 : 1)35: 23 (1.52: 1)
6일차 성충 (20)6th day adult (20) 203203 130
(64.0%)
130
(64.0%)
9 - 139 - 13 109
(53.7%)
109
(53.7%)
16 - 2016 - 20 102 (50.2%)102 (50.2%) 61 : 41 (1.49 : 1)61: 41 (1.49: 1)
평균Average 185185 122.7 (66.3%)122.7 (66.3%) 9 - 139 - 13 97.3 (52.6%)97.3 (52.6%) 16 - 2016 - 20 85.3 (46.1%)85.3 (46.1%) 1.64 : 11.64: 1

상기 표 4에서 보듯이, 인공알에 산란된 알 수는 백-형태 2개당 평균 185개였으며, 이들은 부화하여 성충으로 회수율은 평균 46.1%였으며, 발육기간은 알에서 유충까지 9-13일, 알에서 번데기까지는 16-20일이 소요되었고, 번데기 기간은 평균 7일이 걸리는 것으로 판단된다. 또한 인공알에서 수확된 성충의 성비는 1:1.64로 상기 참조예 1에서의 자연숙주 알에서 성비인 1:1.81과 거의 유사하였다. As shown in Table 4, the average number of eggs scattered in artificial eggs was 185 per two bag-shaped eggs, and the recovery rate was 46.1% as an adult by hatching. The development period was 9-13 days from egg to larva To pupa was 16-20 days, and the period of pupa was 7 days on average. The sex ratio of adults harvested from artificial eggs was 1: 1.64, which was almost similar to the sex ratio of 1: 1.81 in the natural host eggs of Reference Example 1.

이와 관련하여, 문헌 (Takasu, K. et al., 1992, Appl. Entomol. Zool. 27(1): 171-173)에서는 자연숙주(톱다리개미허리노린재 알)에서 알깡충좀벌의 발육기간을 조사한 결과는 알기간 2일, 유충기간 4-5일, 번데기기간 7-8일로 알에서 우화까지 13-15일이 소요되고, 우화율이 96.3%로 나타난다고 보고되어 있으며, 본 실험에서 인공알에서 우화까지 16-20일이 소요되어 약 3-5일 정도의 발육이 늦어졌고, 우화율도 46.1%로 자연기주에서보다 절반정도 수준인 것을 확인할 수 있다.In this connection, the developmental period of the eggs in the natural host (sawtooth ankle) was studied in the literature (Takasu, K. et al., 1992, Appl. Entomol. Zool. 27 (1): 171-173) The results of this study are as follows: It takes 13-15 days from eggs to fables in the egg period of 2 days, 4-5 days of the larval stage, 7-8 days of the pupa, and the emergence rate is 96.3% To falconry takes about 16-20 days, so the development of about 3-5 days is delayed, and the allegorization rate is 46.1%, which is about half the level of natural host.

<실시예 2> 인공배지의 혈림프 종류에 따른 산란효과 측정<Example 2> Measurement of scattering effect according to hemolymph type of artificial medium

인공배지의 혈림프(haemolymph)의 종류에 따른 산란효과를 측정하기 위하여, 산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기, 밤나무산누에나방(Caligula japonica)의 번데기, 갈색거저리 종령유충, 톱다리개미허리노린재 종령유충에서 추출하여 배지를 조성한 후, 그들에 대한 산란수 및 발육양상을 비교하였다.In order to measure the scattering effect according to the type of haemolymph of the artificial medium, the pupa of Antheraea pernyi , the chrysalis of Caligula japonica , the brown dwarf larva, After culturing the medium, the number of eggs and their growth pattern were compared.

밤나무산누에나방의 번데기는 2015년 및 2016년 2년간 강원도 지역에 대발생하였고, 그 기간 중에 번데기를 채집하여 냉장보관한 후 혈림프를 추출하여 사용하였고, 산누에나방 번데기는 라오스 시장에서 대량으로 구매하여 추출액을 가져와 사용하였으며, 갈색거저리(Tenebrio molitor) 종령유충은 식용곤충으로 많이 사육되고 있기 때문에 쉽게 구입할 수 있었으며, 톱다리개미허리노린재 종령유충은 실험실에서 증식 중인 개체들을 사용하였다.The chrysanthemum chinensis was collected in Gangwon province for two years in 2015 and 2016. During the period, chrysanthemums were collected and refrigerated, and hemolymphs were extracted and used. In the Laos market, Extracts were taken and used. Tenebrio molitor species larvae were easily available because they were kept as edible insects. Sowing larvae were used in laboratory.

각각의 곤충에서 혈림프를 추출한 후 인공배지의 주요성분으로 하여 인공상육 주머니를 상기 실시예 1에와 동일한 방법으로 제작한 후, 알깡충좀벌 암컷 10마리를 5일간 투여하여 산란을 받아 사육을 실시하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다.After extracting hemolymph from each insect, the artificial pouch was prepared as the main component of the artificial medium in the same manner as in Example 1, and then 10 eggs were given for 5 days to lay eggs for breeding Respectively. The results are shown in Table 5 below.

혈림프(haemolymph)Haemolymph 산란된 알 수Scattered eggs 유충수
(%)
Yoo
(%)
알에서 유충까지 기간(일)From eggs to larvae (days) 번데기수 (%)Number of pupae (%) 알에서 번데기까지
기간(일)
From egg to pupa
Duration (days)
성충수
(%)
Adult Number
(%)
밤나무산누에나방(Caligula japonica)의 번데기Chrysalis of the chestnut Sanewan moth ( Caligula japonica ) 7575 57 (76.0%)57 (76.0%) 21.40 ± 1.2021.40 ± 1.20 5 (6.7%)5 (6.7%) 6.8 ± 0.746.8 ± 0.74 5
(6.7%)
5
(6.7%)
산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기 Antheraea moth ( Antheraea pernyi ) Pupa 113113 65 (57.5%)65 (57.5%) 10.44 ± 3.3710.44 + - 3.37 18 (15.9)18 (15.9) 5.5 ± 0.955.5 ± 0.95 18 (15.9%)18 (15.9%) 갈색거저리(Tenebrio molitor) 종령유충Brown duck ( Tenebrio molitor ) 33 00 ※ 부화되지 않음※ Not hatched 톱다리개미허리노린재 (Riptortus pedestris) 종령유충 Ripper ( Riptortus pedestris ) Species larva 00 -- ※ 산란이 관찰되지 않음※ No scattering observed

그 결과, 상기 표 5에서 보듯이, 톱다리개미허리노린재의 종령유충에서 추출한 혈림프를 이용한 인공알 주머니에서는 산란 유도 반응조차 보이지 않았으며, 갈색거저리 종령유충에서 추출한 혈림프를 이용한 인공알 주머니에서는 일부 알에서 산란이 이루어졌지만, 그 이상 발육이 진전되진 않았다. 초기 실험으로 밤나무산누에나방과 산누에나방 번데기에서 추출한 혈림프를 이용한 인공알 주머니에서는 알에서부터 발육을 시작하여 성충을 회수하였지만, 밤나무산누에나방의 경우는 알-유충기간이 상당히 길게 나타났고, 용화율도 상당히 떨어졌다. 산누에나방의 경우는 알에서 유충기간이 어느 정도 짧아졌고, 용화율도 개선되는 것을 확인할 수 있었다.As a result, as shown in Table 5, no spawning induction reaction was observed in the artificial egg bag using hemolymph extracted from the adult larva of the back leg antler, and in the artificial egg bag using hemolymph extracted from the brown goat egg larva Spawning was done on some eggs, but development did not progress any more. In the early experiments, the artificial pouches from the chimpanzee Sambroot moth and Sambrooki pupa were recovered from the eggs. However, in the case of the chestnut moth, the egg - larvae period was considerably long and the solubilization rate was considerably high fell. In the case of the moth, the larval period was shortened to some extent and the solubilization rate was improved.

<실시예 3> 자연숙주알 및 인공알에서 사육된 알깡충좀벌의 활력 비교&Lt; Example 3 > Comparison of vitality of eggshells raised in natural host eggs and artificial eggs

자연숙주알 및 인공알에서 사육된 알깡충좀벌 성충의 활력을 비교하기 위해 해부현미경(100X)을 이용하여 암수 각각 20마리에 대한 뒷다리 종아리마디의 길이(㎛)를 측정하여 비교하였다. 또한, 인공알에서 우화한 성충을 다시 자연숙주의 알 및 인공알에 접종하여 활력이 있는 알을 산란하는 지를 확인하였다. 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.The length (㎛) of hind leg calf nodes was measured and compared with 20 birds each using a dissecting microscope (100X) in order to compare the vitality of the eggshells raised in natural host eggs and artificial eggs. In addition, it was confirmed that adult eggs that were alienated from artificial eggs were inoculated again into natural host eggs and artificial eggs to spawn vigorous eggs. The results are shown in Table 6 below.

Number 암컷female 숫컷Male 인공알Artificial egg 2020 278.75 ± 38.21a278.75 ± 38.21a 262.15 ± 31.28a262.15 + - 31.28a 자연숙주알Natural host egg 2020 317.50 ± 42.57a317.50 ± 42.57a 255.50 ± 34.79a255.50 + - 34.79a

상기 표 6에서 보듯이, 인공알에서 우화한 암컷의 길이가 자연기주의 알(톱다리개미허리노린재(R. pedestris)의 알)에서 우화된 것보다 약간 짧았으나 유의차를 확인할 수는 없었으며, 수컷의 경우는 인공알이나 자연기주의 알에서 거의 차이가 없었다. 또한, 인공알에서 우화한 암컷성충을 다시 자연숙주의 알 및 인공알에 접종시킨 결과, 활력이 있는 알을 산란하였으며, 이들로부터 다시 새로운 성충을 얻을 수 있었다. 따라서 인공알에서 발육한 성충의 활력은 자연기주의 알에서 발육한 성충의 활력과 차이가 없다고 생각된다. As shown in Table 6, the length of females alienated from the artificial eggs was slightly shorter than that of the algae of the natural host ( R. pedestris ), but no significant difference was observed , And there was almost no difference in the eggs of artificial or natural host in males. As a result of inoculation of females grown in artificial eggs again on natural host eggs and artificial eggs, live eggs were scattered and new adults could be obtained from them. Therefore, it is considered that the vitality of the adults developed in the artificial eggs is not different from the vitality of the adults developed in the natural host eggs.

결과적으로 본 실험을 통해 노린재류의 유용한 알기생벌 천적인 알깡충좀벌을 인위적으로 대량 사육할 수 있는 바탕을 마련하였으며, 톱다리개미허리노린재 알을 실제 자연숙주 알로 이용하여 자연 사육하는데 소모되는 많은 노력을 줄일 수 있다. 또한, 이러한 인공알을 이용하여 알깡충좀벌을 인공사육하여 콩과작물 및 과수류에서 가장 큰 피해를 주는 톱다리개미허리노린재의 실질적인 방제원으로 사용할 수 있을 것으로 기대된다.As a result, this experiment has provided a basis for artificially raising alpine beetles, which are useful birds of parasitoids, as a useful source of nodules. Can be reduced. In addition, it is expected that artificial eggs will be used as a practical control agent for artisanal beetle, which is the biggest damage to beans, crops, and oranges.

100 : 폴리프로필렌 필름 1겹
101 : 폴리프로필렌 필름 다른 1겹
102 : 인공알 주머니
10 : 인공알
11: 인공배지
12 : 밀봉
100: one layer of polypropylene film
101: Another layer of polypropylene film
102: artificial egg pocket
10: Artificial eggs
11: Artificial badge
12: Sealing

Claims (8)

알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 인공사육하기 위한 인공알 주머니로서, (i) 2겹의 폴리프로필렌 필름의 가장자리가 맞붙어서 밀봉된 백-형태(bag-form)를 이루고, (ii) 상기 폴리프로필렌 필름 중 1겹의 폴리프로필렌 필름의 상단에 지름 2.0 내지 2.5mm 및 높이 2.0 내지 2.5mm 크기의 반구 형태의 인공알이 형성되어 있고, (iii) 상기 인공알 당 산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기 혈림프(haemolymph)를 포함하는 인공배지가 3 내지 5 ㎕의 양으로 분주되어 있으며, (iv) 상기 인공알의 표면에 노린재류의 복부 추출물이 도포되어 있는 것을 특징으로 하는 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니.An artificial nail for artificial breeding of O. vulgaris , comprising: (i) a two-ply polypropylene film having edges sealed to form a sealed bag-form; (ii) A semi-spherical artificial egg having a diameter of 2.0 to 2.5 mm and a height of 2.0 to 2.5 mm is formed on the top of a single-layer polypropylene film of the film, (iii) an artificial egg of Antheraea pernyi (iv) an artificial medium containing an artificial medium containing haemolymph is dispensed in an amount of 3 to 5 μl, and (iv) an artificial egg is coated on the surface of the artificial egg with an abdomen extract of artemisia. An egg pocket. 제 1 항에 있어서,
상기 노린재류가 톱다리개미허리노린재(Riptortus pedestris), Anacanthocoris concoloratus, 꽈리허리노린재(A. sordidus), 게눈노린재(Chauliops fallax), 시골가시허리노린재(Cletus punctiger), C. rusticus, 알락수염노린재(Dolycoris baccarum), 점박이둥글노린재(Eysarcoris guttiger), 두점배허리노린재(Homoeocerus unipunctatus), 녹두허리노린재(H. marginiventris), 호리허리노린재(Leptocorisa chinensis), 무당알노린재(Megacopta punctatissimum), 풀색노린재(Nezara antennata), 남쪽풀색노린재(Nezara viridula), 가로줄노린재(Piezodorus hybneri), 풀색노린재(P. guildinii) 및 갈색날개노린재(Plautia stali)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 노린재류인 것을 특징으로 하는 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니.
The method according to claim 1,
The above-mentioned barnyardgrass is selected from the group consisting of Riptortus pedestris , Anacanthocoris concoloratus , A. sordidus , Chauliops fallax , Cletus punctiger , C. rusticus , Dolycoris baccarum , Eysarcoris guttiger , Homoeocerus unipunctatus , H. marginiventris , Leptocorisa chinensis , Megacopta punctatissimum , Nezara antennata, ), southern pulsaek norinjae (Nezara viridula), horizontal lines norinjae (Piezodorus hybneri), pulsaek norinjae (P. guildinii) and brown wing norinjae (Plautia stali), the eggs hop jombeol, characterized in that one or more selected from the group consisting of artificial norinjaeryu Artificial pouch for breeding.
제 1 항에 있어서,
상기 폴리프로필렌 필름의 두께가 0.3 내지 0.5mm인 것을 특징으로 하는 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니.
The method according to claim 1,
Wherein the polypropylene film has a thickness of 0.3 to 0.5 mm.
제 1 항에 있어서,
상기 인공알이 폴리프로필렌 필름 상에 4 내지 6mm의 사이 간격으로 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니.
The method according to claim 1,
Characterized in that the artificial eggs are formed on the polypropylene film at intervals of 4 to 6 mm, in order to artificially cultivate the eggs.
제 1 항에 있어서,
상기 인공배지가 산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기 혈림프(haemolymph), 달걀 난황(Chicken yolk), 신생아용 분유(Infant formula), Neisenheimer 염 용액, 페니실린(Penicillin) 및 스트렙토마이신(Streptomycin)을 포함하는 것을 특징으로 하는 알깡충좀벌(Oorencyrtus nezarae)을 인공사육하기 위한 인공알 주머니.
The method according to claim 1,
Wherein said artificial medium comprises antheraea pernyi pupa haemolymph, chicken yolk, infant formula, Neisenheimer salt solution, penicillin and Streptomycin. Artificial egg pouch for artificial breeding of characteristic Oorencyrtus nezarae .
제 1 항에 있어서,
상기 노린재류의 복부 추출물이 노린재류 암컷의 복부를 떼어내어 유기용매에 60 내지 80시간 동안 침적시켜 추출한 것임을 특징으로 하는 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니.
The method according to claim 1,
Characterized in that the abdomen extract of the yellow marrow is taken out of the abdomen of the yellow marrow females and is extracted by immersing in an organic solvent for 60 to 80 hours so as to artificially cultivate an egg hopper.
제 1 항에 있어서,
상기 백-형태가 가로 4 내지 6cm, 세로 1 내지 3cm 및 높이 0.2 내지 1cm의 크기인 것을 특징으로 하는 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니.
The method according to claim 1,
Characterized in that the bag-form is 4 to 6 cm wide, 1 to 3 cm long and 0.2 to 1 cm high.
하기 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 따른 알깡충좀벌을 인공사육하기 위한 인공알 주머니의 제조방법:
(S1) 1겹의 폴리프로필렌 필름의 상단에 지름 2.0 내지 2.5mm 및 높이 2.0 내지 2.5mm 크기의 반구 형태의 인공알을 형성시키는 단계;
(S2) 상기 인공알에 산누에나방(Antheraea pernyi) 번데기 혈림프(haemolymph)를 포함하는 인공배지를 3 내지 5 ㎕의 양으로 분주하는 단계;
(S3) 상기 인공알이 형성된 1겹의 폴리프로필렌 필름을 반으로 접어서 가장자리를 맞물리게 하거나 또는 다른 1겹의 폴리프로필렌 필름과 겹쳐 가장자리를 맞물리게 하고 밀봉시켜 백-형태(bag-form)를 형성하는 단계; 및
(S4) 상기 인공알의 표면에 노린재류의 복부 추출물을 도포하는 단계.
A method for manufacturing an artificial egg bag for artificial breeding of an egg hopper according to any one of claims 1 to 7, comprising the steps of:
(S1) forming hemispheric artificial eggs having a diameter of 2.0 to 2.5 mm and a height of 2.0 to 2.5 mm at the top of one layer of the polypropylene film;
(S2) dividing the artificial egg into an artificial medium containing an Antheraea pernyi papillary haemolymph in an amount of 3 to 5 μl;
(S3) folding the single-ply polypropylene film with the artificial eggs in half to engage the edges or overlapping the other single-ply polypropylene film to engage and seal the edges to form a bag-form ; And
(S4) a step of applying abdomen extract of yellowing material to the surface of the artificial egg.
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