KR20190012715A - Park7, apex1 및 s1pr1 단백질을 포함하는 혈관질환 진단용 바이오마커 - Google Patents

Park7, apex1 및 s1pr1 단백질을 포함하는 혈관질환 진단용 바이오마커 Download PDF

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이강파
백수지
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Abstract

본 발명은 PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질을 포함하는 혈관질환 진단용 바이오마커, 이를 이용한 혈관질환 진단용 키트, 혈관질환 진단을 위한 정보 제공 방법 및 혈관질환 예방 또는 치료용 물질을 스크리닝하는 방법에 관한 것이다.

Description

PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질을 포함하는 혈관질환 진단용 바이오마커 {A biomarker for diagnosis of a vascular disease comprising PARK7, APEX1 and S1PR1 protein}
본 발명은 PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질을 포함하는 혈관질환 진단용 바이오마커, 이를 이용한 혈관질환 진단용 키트, 혈관질환 진단을 위한 정보 제공 방법 및 혈관질환 예방 또는 치료용 물질을 스크리닝하는 방법에 관한 것이다.
심혈관질환은 최근 유병율이 증가하고 있으며 국내 4대 중증질환 중 하나로 분류되고 있다. 발병 시 적기에 치료하지 않으면 사망에 이르거나 심각한 휴유증을 동반하는 특징을 지닌 질병이다. 본 질병은 발병된 이후 스탠트 삽입술 및 혈관내 풍선주입 확장술로 병증을 제어하고 있으나, 다음과 같은 다양한 요인으로 혈관질병진단 바이오마커의 개발이 요구된다. 첫째, 혈관질병의 진행과정을 진단하는 방법으로는 환자의 극심한 고통의 호소나 혈관조형술의 수행결과로만 그동안 진단되어 온 것을 원인으로, 현재의 치료를 요하는 환자수의 증가가 필연적이며, 시술 후에도 혈관 재협착에 대한 정확한 진단마커의 부재가 본 발병의 필요성을 제시하고 있다. 둘째, 혈관치료를 위한 시술 후 환자의 60%가 혈관 재협착의 위험에 노출되어 있는바 임상에서는 질병을 예후 및 예측하는 기술의 개발이 시급한 실정이다. 다음으로, 혈관질병의 약물요법은 혈전 용해제, 항응고제인 헤파린, 혈소판저해제인 아스피린, β-차단제, 칼슘길항제, 질산염(nitrate), ACE저해제, 동맥경화치료제 등을 사용한 치료방법으로 선택하고 있는 것은 신약개발 부분에서 정확한 약물치료제의 부재를 시사하고 있다. 국내제약사가 혈관질병을 대상으로 한 신약을 개발하는데 있어 최고의 어려움이라 할 수 있는 것은 혈관질병 환자에게 적용되는 정확하고, 민감도 높은 진단마커의 부재가 원인이라 할 수 있다. 따라서 혈관내 동맥경화반의 형성을 사전에 예방하거나 치료와 더불어 조기 진단할 수 있는 연구가 중요하다.
그러나, 아직까지 이러한 혈관질병의 발병과 진행과정에 대해서는 다양한 가설과 증명방법을 통해 연구되고 있으나, 질병진행과정의 명확한 기전에 대해서 알려진 바가 없는데 단일 기전이라기보다는 여러가지 복합인자가 작용하는 것으로 생각된다. 특히, 관상동맥 주변에서 급성기에 만들어진 다양한 종류의 원인으로 혈관평활근세포의 증식 및 이주능의 증가는 동맥경화반의 과형성 기전을 초래하여, 말초혈관을 막아 미세혈관 혈류의 흐름을 방해한다는 가설이 널리 인정되고 있다. 본 발명에서 제시하는 PARK7 단백질의 부재는 혈관평활근세포의 증식과 이주능력을 급속히 향상시킴으로서 혈관질병을 과속화 시키는데, 이때에는 혈관내 활성산소종의 증가로 APEX1의 핵내유입을 증가시키고, S1PR1 수용체를 과잉 생성시키는 결과를 도출하는 것을 확인한 바를 활용하여 진단체계를 구축하고자 한다. 바람직하게는 단백질부재만의 효과보다 Angiotensin II와 같은 유도제를 투약하여, 단백질의변화도를 분석하여 본 발명에 제시하는 3개의단백질의 변화도를 분석하고, 그 결과를 확인한 바를 혈관질병의 다중마커로서의 역할로 규명하였다.
또한, 본 단백질의 이동경로는 extracellular signal-regulated kinase 1/2(ERK1/2)와 p38 mitogen-activated protein kinases(MAPK)의 인산화 경로를 통하여 혈관평활근세포의 증식과 이주능을 향상시키는데, 본 발명의 예시에서도 단백질 인산화 반응을 통해 확인하였다. 이에, 본 발명자들은 환자의 혈관질병 진행과정 상 정확한 진단을 위해서 상기의 3개의 단백질을 이용한 예후 및 예측 바이오마커 및 신약개발 유효성 평가 지표를 개발하고자 다음의 예시에 대한 노력을 기울인 결과 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 하나의 목적은, PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질을 포함하는 혈관질환 진단용 마커를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은, PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 핵산서열에 특이적으로 결합하는 검출시약을 포함하는 혈관질환 진단용 키트를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은, 하기의 단계를 포함하는 혈관질환 진단을 위한 정보 제공 방법을 제공하는 것이다.
(a) 개체로부터 분리된 생물학적 시료에서 상기의 바이오마커의 발현수준을 측정하는 단계; 및
(b) 상기 (a) 단계의 PARK7의 발현수준을 정상 대조군의 발현수준과 비교하여 정상 대조군의 발현수준보다 낮은 경우; 또는 APEX1 또는 S1PR1 의 발현수준을 정상 대조군의 발현수준과 비교하여 정상 대조군의 발현수준보다 높은 경우에 혈관질환 환자로 진단하는 단계.
본 발명의 다른 목적은, 하기의 단계를 포함하는 혈관질환의 예방 또는 치료용 물질을 스크리닝 하는 방법을 제공한다.
(a) 혈관질환 환자로부터 분리된 생물학적 시료에 후보물질을 처리하는 단계;
(b) 상기 (a) 단계에서 상기의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성을 측정하거나 상기 바이오마커를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계;
(c) 상기 (b) 단계의 PARK7의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 높거나, 상기 PARK7의 바이오마커를 암호화하는 유전자의 발현 수준이 후보물질 처리전보다 높거나, APEX1 또는 S1PR1의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 낮거나, 상기 APEX1 또는 S1PR1의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 낮은 경우 혈관질환 예방 또는 치료용 물질로 판단하는 단계.
본 발명의 하나의 목적은, PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질을 포함하는 혈관질환 진단용 바이오마커를 제공하는 것이다.
본 발명의 상기 혈관질환은 동맥경화증, 심부전증, 고혈압성 심장질환, 부정맥, 선천성 심장질환, 심근경색증, 협심증, 뇌졸중, 동맥경화반 및 말초현관질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 질병을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 목적은, PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 핵산서열에 특이적으로 결합하는 검출시약을 포함하는 혈관질환 진단용 키트를 제공하는 것이다.
본 발명의 상기 단백질에 특이적으로 결합하는 검출시약은 항체, 항체 단편 및 앱타머로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상이고, 상기 단백질을 암호화하는 유전자의 핵산서열에 특이적으로 결합하는 검출시약은 프라이머(primer), 프로브(probe) 및 안티센스 뉴클레오티드(anti-sense nucleotide)로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 다른 목적은, 하기의 단계를 포함하는 혈관질환 진단을 위한 정보 제공 방법을 제공하는 것이다.
(a) 개체로부터 분리된 생물학적 시료에서 상기의 바이오마커의 발현수준을 측정하는 단계; 및
(b) 상기 (a) 단계의 PARK7의 발현수준을 정상 대조군의 발현수준과 비교하여 정상 대조군의 발현수준보다 낮은 경우; 또는 APEX1 또는 S1PR1 의 발현수준을 정상 대조군의 발현수준과 비교하여 정상 대조군의 발현수준보다 높은 경우에 혈관질환 환자로 진단하는 단계.
본 발명의 다른 목적은, 하기의 단계를 포함하는 혈관질환의 예방 또는 치료용 물질을 스크리닝 하는 방법을 제공한다.
(a) 혈관질환 환자로부터 분리된 생물학적 시료에 후보물질을 처리하는 단계;
(b) 상기 (a) 단계에서 제1항의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성을 측정하거나 상기 바이오마커를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계;
(c) 상기 (b) 단계의 PARK7의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 높거나, 상기 PARK7의 바이오마커를 암호화하는 유전자의 발현 수준이 후보물질 처리전보다 높거나, APEX1 또는 S1PR1의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 낮거나, 상기 APEX1 또는 S1PR1의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 낮은 경우 혈관질환 예방 또는 치료용 물질로 판단하는 단계.
본 발명에 따라 PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질 혈관질환에 대한 바이오 마커로 이용하게 됨에 따라, 기존 혈관 조영술로만 진단이 가능하던 혈관질병발병 및 동맥경화반 형성에 대하여 경제적으로 빠른 시간내에 진단이 가능해진다. 또한 상기의 다중마커를 활용하여 임상진단 및 신약개발 유효성 평가에 활용도를 증가시킬 수 있다.
도 1은 동맥경화반 형성에서의 PARK7, APEX1 그리고 S1PR1의 주요 경로- 동맥경화반을 형성하는 상기 단백질의 발현의 경로의 모식도이다.
도 2는 PARK7 부재 시 혈관평활근세포의 이주능력증가의 평가를 나타내는 결과이다.
도 3은 PARK7 부재 시 S1P 수용체 변화 분석를 나타내는 결과이다.
도 4는 PARK 과발현 시 S1P 수용체 변화를 나타내는 결과이다.
도 5은 소동물 혈관 내 PARK7 부재 시 동맥경화반 형성과 수용체 변화분석을 나타내는 결과이다.
도 6은 PARK 부재 시 S1P 수용체 변화 혈관평활근세포주의 Kinase 단백질의 변화를 나타내는 결과이다.
도 7은 PARK 부재 시 S1P 수용체 변화와 APEX1이 후생유전학적 조절을 통한 S1PR1 발현 조절을 나타내는 결과이다.
도 8은 AngII 처리에 의한 APEX1의 핵내 이동 증명을 나타내는 결과이다.
도 9은 AngII 처리에 따른 동맥경화반 형성평가를 나타내는 결과이다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
상술한 바와 같이, 혈관평활근세포의 증식과 이주능력과 관련된 혈관질환에 관한 PARK7, APEX1 및 S1PR1의 역할에 대해서는 밝혀진 바가 없다. 이러한 배경 하에 본 발명자들은 혈관질환을 진단할 수 있는 신규 바이오마커를 탐색하던 중 PARK7 단백질의 부재시 혈관평활근세포의 증식과 이주능력을 급속히 향상하는 것을 확인하였고, 또한, PARK7 단백질의 부재시 S1PR1의 발현이 증가하고, APEX1의 부재시 S1PR1도 발현이 감소하는 되는 것을 확인하였고, 이를 통해 혈관질환을 진단할 수 있는 신규 바이오마커로서 PARK7, APEX1 및 S1PR1의 가능성을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질을 포함하는 혈관질환 진단용 바이오마커를 제공한다.
본원에 따른 마커는 핵산 또는 단백질 수준을 검출하여 혈관질환의 진단에 사용될 수 있다.
본 발명의 상기 혈관질환은 동맥경화증, 심부전증, 고혈압성 심장질환, 부정맥, 선천성 심장질환, 심근경색증, 협심증, 뇌졸중, 동맥경화반 및 말초현관질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 질병을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 핵산서열에 특이적으로 결합하는 검출시약을 포함하는 혈관질환 진단용 키트로 제공 될 수 있다.
본 발명의 상기 단백질에 특이적으로 결합하는 검출시약은 항체, 항체 단편 및 앱타머로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상이고, 상기 단백질을 암호화하는 유전자의 핵산서열에 특이적으로 결합하는 검출시약은 프라이머(primer), 프로브(probe) 및 안티센스 뉴클레오티드(anti-sense nucleotide)로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.
본 발명은 또한 하기의 단계를 포함하는 혈관질환의 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법을 제공할 수 있다.
(a) 개체로부터 분리된 생물학적 시료에서 상기의 바이오마커의 발현수준을 측정하는 단계; 및
(b) 상기 (a) 단계의 PARK7의 발현수준을 정상 대조군의 발현수준과 비교하여 정상 대조군의 발현수준보다 낮은 경우; 또는 APEX1 또는 S1PR1 의 발현수준을 정상 대조군의 발현수준과 비교하여 정상 대조군의 발현수준보다 높은 경우에 혈관질환 환자로 진단하는 단계.
본원에서 검출이란, 정량 및/또는 정성 분석을 포함하는 것으로, 존재, 부존재의 검출 및 발현량 검출을 포함하는 것으로 이러한 방법은 당업계에 공지되어 있으며, 당업자라면 본원의 실시를 위해 적절한 방법을 선택할 수 있을 것이다.
본원에서 생물학적 시료란, 바이오마커 검출이 가능한 하나 이상의 성분을 포함하는 물질 또는 물질의 혼합물을 일컫는 것으로 생물체, 특히 인간 유래의 세포, 조직 또는 체액, 예를 들면 전혈, 뇨, 혈장, 및 혈청을 포함하나 이로 제한하는 것은 아니다. 또한 생물체에서 직접적으로 유래된 것은 물론 인비트로에서 배양된 세포 또는 조직을 포함한다. 본원에 따른 혈관질환 마커의 검출을 위해 다양한 시료가 사용될 수 있으나, 이로 제한하는 것은 아니다.
이러한 본원에 따른 혈관질환 진단용 마커는 이의 기능적 특징 및/또는 항원적 특징에 기반을 둔 것이다. 단백질을 활성, 기능 또는 단백질을 코딩하는 핵산, 특히 mRNA 및/또는 단백질 수준(level)에서 특이적으로 상호작용하는 제제를 사용하여 검출될 수 있다.
분석용 키트는 다양한 검출방법을 사용하여 시료 중의 바이오마커를
분석할 수 있다. 일 실시예에서는 ELISA 분석, 딥스틱 래피드 키트(dip stick rapid kit) 분석, MRM 분석, 마이크로어레이, 유전자증폭, 또는 면역분석 등 과 같은 분석이 사용된다.
또한 구체적 검출 방법에 따라 다양한 검출시약을 포함할 수 있으며, 예를 들면 핵산 및/또는 단백질 수준(농도)의 검출 시약, 및/또는 핵산 및 /또는 단백질 존재여부 검출 시약을 포함할 수 있다. 일 실시예에서, 본원에 따른 바이오 마커의 핵산서열 (바이오마커를 코딩하는 유전자), 상기 핵산서열에 상보적인 핵산서열, 상기 핵산서열의 단편, 또는 상기 핵산서열에 의해 코딩되는 단백질을 특이적으로 인식하는 항체, 항체단편, 앱타머(aptamer), 아비머(avidity multimer) 또는 펩티도모방체(peptidomimetics)를 포함한다. 다른 구현예에서는 웨스턴블랏, ELISA, 방사선면역분석, 면역확산법, 면역 전기영동, 조직 면역염색, 면역침전 분석법, 보체 고정 분석법, FACS, 질량분석, 또는 단백질 마이크로어레이용 시약을 포함한다. 또 다른 실시예에서는 모노클로날 항체, 폴리클로날 항체, 기질, 앱타머, 아비머, 펩티도모방체, 수용체, 리간드 또는 보조인자인를 포함한다. 또 다른 실시예에서는 역전사 중합효소연쇄반응, 경쟁적 중합효소연쇄반응, Nuclease 보호 분석(RNase, S1 nuclease assay), in situ 교잡법, DNA 마이크로어레이 또는 노던블랏에 사용되는 시약을 포함한다. 또 다른 실시예에서는 본원에 따른 각 마커에 특이적인 프라미어, 프로브, 또는 안티센스 뉴클레오티드를 포함한다.
본 발명의 일실시예에 따르면 본 발명의 바이오마커 또는 이를 코딩하는 유전자 유래의 mRNA와 특이적으로 결합하는 결합제제 또는 결합제제를 포함하는 어레이가 사용된다.
또 다른 실시예에서는 ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay), RIA (Radio Immuno Assay) 등과 같은 샌드위치 방식의 면역분석법이 사용 될 수 있다. 이러한 방법은 고상의 기질 예를 들면 글라스, 플라스틱 (예를 들면 폴리스티렌), 폴리사카라이드, 나일론 또는 나이트로셀룰로스로 제작된 비드, 막, 슬라이드 또는 마이크로타이터플레이트에 결합된 제1 항체에 생물학적 시료를 추가한 후, 직접 또는 간접 검출이 가능한 표지물질 예를 들면 3H 또는 125I와 같은 방사선 물질, 형광물질, 화학발광물질, 햅텐, 바이오틴, 디그옥시제닌 등으로 표지되거나 또는 기질과의 작용을 통해 발색 또는 발광이 가능한 호스래디쉬 퍼옥시다제, 알칼라인 포스파타제, 말레이트 데하이드로게나아제와 같은 효소와 컨쥬게이션된 항체와의 결합을 통해 단백질은 정성 또는 정량적으로 검출 할 수 있다.
기타 다른 면역 반응 기반의 방법의 사용될 수 있으며 다른 구현예 에서는 항원 항체 결합을 통해 마커를 간단하게 검출할 수 있는 Ouchterlony 플레이트, 웨스턴블랏, Crossed IE, Rocket IE, Fused Rocket IE, Affinity IE와 같은 면역 전기영동 (Immuno Electrophoresis)이 사용될 수 있다. 이러한 방법에 사용되는 시약 또는 물질은 공지된 것으로서, 예를 들면 항원-항체반응, 상기 마커에 특이적으로 결합하는 기질, 핵산 또는 펩타이드 앱타머, 상기 마커와 특이적으로 상호작용하는 수용체 또는 리간드 또는 보조인자와의 반응을 통해 검출될 수 있거나, 또는 질량분석기를 이용할 수 있다. 상기 본원의 마커와 특이적으로 상호작용 또는 결합하는 시약 또는 물질은 칩 방식 또는 나노입자(nanoparticle)와 함께 사용될 수 있다. 상술한 면역분석 과정에 의한 최종적인 시그널의 세기를 분석하여 즉, 정상 시료와의 시그널 대조를 수행함으로써, 질환 발생 여부를 진단할 수 있다.
본원의 각 마커는 핵산 수준 특히 mRNA 수준에서의 정량적 및/또는 정성적 검출을 통해 혈관질환의 진단에 사용될 수 있다. 공지된 다양한 방법 이 사용될 수 있다. 예를 들면 RNA 수준에서의 검출, 발현량 또는 패턴의 검출을 위해 역전사 중합효소연쇄반응(RT-PCR)/중합효소연쇄반응, 경쟁적 RT-PCR, 실시간 RT-PCR, Nuclease 보호 분석(NPA) 예를 들면 RNase, S1 nuclease 분석, in situ 교
잡법, DNA 마이크로어레이 또는 칩 또는 노던블랏 등을 이용한 방식이 사용될 수 있으며, 이러한 분석법은 공지된 것이며, 또한 시중의 키트를 사용하여 수행될 수 있으며, 당업자라면 본원의 실시를 위해 적절한 것을 선택할 수 있을 것이다. 예를들면 노던블랏은 세포에 존재하는 전사체의 크기를 알 수 있으며, 다양한 프로브를 사용할 수 있는 장점이 있으며, NPA는 다중 마커 분석에 유용하며, in situ 교잡법은 mRNA와 같은 전사체의 세포 또는 조직내 위치 파악에 용이하며, 역전사 중합효소연쇄반응은 적은 양의 시료 검출에 유용하다.
상기 mRNA의 존재 여부와 그 양 또는 패턴을 RT-PCR로 측정하기 위한 방법에서 검출시약으로, 예를 들면 본원 마커의 mRNA에 특이적인 프로브 및/또는 프라이머쌍를 포함한다. “프라이머”또는 “프로브”는 주형과 상보적으로 결합할 수 있고 역전사효소 또는 DNA 중합효소가 주형의 복제를 개시할 수 있도록 하는 자유 3말단 수산화기(free 3' hydroxyl group)를 가지는 핵산 서열을 의미한다. 본원에 사용되는 상기 검출 시약은 신호검출을 위해 상술한 바와 같은 발색, 발광 또는 형광물질과 같은 것으로 표지될 수 있다. 일구현예에서는 mRNA 검출을 위해 노던블랏 또는 역전사 PCR (중합효소연쇄반응)이 사용된다. 후자의 경우 검체의 RNA를 특히 mRNA를 분리한 후, 이로부터 cDNA를 합성 한 후, 특정 프라이머, 또는 프라이머 및 프로브의 조합을 사용하여, 검체 중의 특정 유전자를 검출하는 것으로, 특정 유전자의 존재/부존재 또는 발현량을 결정할 수 있는 방법이다.
본 발명은 또한 (a) 혈관질환 환자로부터 분리된 생물학적 시료에 후보물질을 처리하는 단계; (b) 상기 (a) 단계에서 제1항의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성을 측정하거나 상기 바이오마커를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; (c) 상기 (b) 단계의 PARK7의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 높거나, 상기 PARK7의 바이오마커를 암호화하는 유전자의 발현 수준이 후보물질 처리전보다 높거나, APEX1 또는 S1PR1의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 낮거나, 상기 APEX1 또는 S1PR1의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 낮은 경우 혈관질환 예방 또는 치료용 물질로 판단하는 단계; 를 포함하는 혈관질환 예방 또는 치료용 물질을 스크리닝 하는 방법을 제공할 수 있다.
본원의 방법에 사용되는 후보물질은 본원에 따른 바이오마커 단백질 또는 이의 유전자의 발현을 조절할 것으로 기대되는 물질로, 예를 들면 약물의 스크리닝 목적을 위해서는 화합물은 저분자량의 치료효과를 갖는 것이 사용될 수 있다. 예를 들면 중량이 400 Da, 600 Da 또는 800 Da과 같은 약 1000 Da 내외의 화합물이 사용될 수 있다. 목적에 따라 이러한 화합물은 화합물 라이브러리의 일부를 구성할 수 있으며, 라이브러리를 구성하는 화합물의 숫자도 수십개부터 수백만개까지 다양하다. 이러한 화합물 라이브러리는 펩타이드, 펩토이드 및 기타 환형 또는 선형의 올리고머성 화합물, 및 주형을 기본으로 하는 저분자 화합물, 예컨대 벤조디아제핀, 하이단토인, 바이아릴, 카보사이클 및 폴리사이클 화합물 (예컨대 나프탈렌, 페노티아진, 아크리딘, 스테로이드 등), 카보하이드레이트 및 아미노산 유도체, 디하이드로피리딘, 벤즈하이드릴 및 헤테로사이클 (예컨대 트리아진, 인돌, 티아졸리딘 등)을 포함하는 것일 수 있으나, 이는 단지 예시적인 것으로 이로 한정되는 것은 아니다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예사흔 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1] 혈관평활근세포에서 PARK7의 부재로 인한 S1P 수용체 경로를 통한 이주능 확인
본 실시예는 대조군을 PARK7의 부재가 없는 세포(WT)와 시험군으로 PARK7의 부재가 일어난 혈관평활근세포(KO)로 설정하였다. 또한, S1PR1의 억제제 W146와 S1PR2의 억제제JTE013를 사용하여 혈관 평활근세포의 이주능을 확인하였다. 그 결과, S1P에 의한 이주능은 WT에 비해 KO에서 확연하게 증가 하는 것을 확인 할 수 있었다(도 1A). 또한, W146, JTE013을 처리한 결과에서는 S1PR1의 억제제를 사용하였을 때 이주능이 감소가 된 것을 확인 할 수가 있었다. 이는 혈관평활근세포의 이주능은 S1PR1을 통한다는 것을 확인한 결과이다.
[실시예 2] PARK7의 부재를 통한 S1PR1의 단백질 및 mRNA 변화분석
실시예 1에서 진행한 대조군과 실험군에서 S1PR1의 단백질 발현양을 웨스턴 블롯(도 3A)과 형관면역염색법을 이용하여 확인하였다(도 3D). 또한, mRNA 발현 양은 중합효소연쇄반응(PCR)을 이용하여 분석하였다(도 3B, C). 그 결과, 실험군(KO)에서 S1PR1의 발현양이 대조군(WT)에 비해 증가하였고, 반면에 S1PR2의 양은 감소된 결과를 나타내었다.
[실시예 3] PARK7의 과발현유도를 통한 S1PR1의 mRNA 변화분석
상기 실시예 2의 결과가 PARK7의 존재유무에 따른 것인가를 재확인하기 위해, 실험군(KO)에 PARK7 유전자를 전기 주입법을 이용하여 세포로 도입후 과발현을 시켰다. 이후, 도입유전자를 통한 S1PR1의 mRNA의 발현확인은 PCR법을 사용하였다. 그 결과, 과발현된 PARK7은 S1PR1의 발현양을 감소시켰다. 실시예 2번과 상기 결과로부터, PARK7단백질의 존재 유무에 따라 S1PR1의 발현양이 조절 된다는 것을 확인한 결과이다(도 4).
[실시예 4] 소동물 혈관내 PARK7의 부재가 동맥경화반 형성과 S1PR1의 변화에 미치는 영향분석
동맥경화반유발은 mouse의 경동맥의 손상 4주 경과 후 기점에서 분석하였고, 조직면역학적 분석을 통해 수용체의 발현을 확인 한 결과 실시예 1,2,3의 결과와 동일한 결과를 확인하였다(도 5).
[실시예 5] PARK7의 부재에 따른 MAPKs 변화 확인
혈관질병은 kinase의 활성화에 의해 혈관평활근세포의 이주능이 증가된다고 알려져 있다. 이를 바탕으로, 혈관 평활근세포를 웰(well)당 1x106개의 세포들을 이용하였고, 단백질의 발현은 western blot을 이용하여 p38, ERK1/2의 양을 확인하였다. 그 결과, W146에 의해 phospho-p38 MAPK와 phospho-ERK1/2의 발현이 감소하는 것을 확인하였고 반대로, JTE013에 의해서는 kinase의 발현이 억제가 되지 않은 것을 확인하였다. 이는 분자수준의 PARK7-S1PR1-MAPK 경로를 통한 혈관질환 발생을 제시한다.
[실시예 6] PARK7의 부재와 AngII 처리가 후생유전학적 변화에 미치는 영향
S1PR1 수용체가 히스톤 단백질의 후생학적조절에 기인 한 것인지를 확인하기 위해, S1PR1(372~245) 및 S1PR2(366~136) 프로모터 영역에 대한 히스톤 아세틸화 및 HDAC 디아세틸레이즈를 평가하였다. 그 결과, S1PR1 프로모터 영역에 대한 히스톤 H3은 PARK7 부재가 WT보다 높았고, HDAC1은 KO에서 낮게 나왔다. S1PR1 프로모터에서의 반응과 일관되게, S1PR2 프로모터 영역에 대한 히스톤 H3 아세틸화 및 HDAC1은 각각 반대로 나타났다. 더욱이 혈관질병을 유발하는 angiotensin II는 APEX1를 핵내로 전달하고(실시예 7) 해당 단백질이 S1PR1의 유전자정보를 조작하는 결과를 확인하였다.
[실시예 7] AngII에 의한 APEX1의 핵내 이동 확인
혈관평활근세포에서 angiotensin II를 처리하였을 때, APEX1의 핵내 이동을 확인하였다. 그 결과, angiotensin II에 의해, 핵안의 APEX1의 발현양이 증가하고, 세포질 안의 APEX1의 양이 감소하였다(도 8A). APEX1의 부재 유무에 따라 S1PR1의 단백질 변화량을 확인하기 위하여, APEX1의 부재를 실행하였고, 그 결과, S1PR1의 발현양이 감소 된 것을 확인하였다. 이는 APEX1의 유무 또한, S1PR1의 발현양을 조절 하는 것을 제시한다.
[실시예 8] AngII처리에 따른 동맥경화반 형성 확인
1x106 cells/well의 혈관평활근세포를 boyden chamber를 이용하여 AngII에 의한 혈관평활근세포의 이주능을 확인하였다. 이 결과를 토대로, angiotensin II에 의한 이주가 혈관평활근세포에서 AT-1 및 S1PR1의 억제제에 의해 이주능에 영향을 받을 수 있을 것을 평가한바 S1PR1의 억제제인 W146, 항산화제 Tempol, AT1 receptor억제제 losartan이 혈관 평활근세포의 이주능을 억제함을 확인하였다. angiotensin II 유발 혈관질병동물모델에서 3주간 투약된 조직 내 S1PR1 및 APEX1, H3 acetylation을 확인하였다. 상기의 결과는, angiotensin II를 처리 그룹은 양성대조군인 injury 유도군 한 군에 비해 S1PR1의 양이 증가하였고 APEX1, H3 acetylation의 단백질 발현이 증가 한 것을 확인하였다(도 9).
이상으로 본 발명 내용의 특정부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 것은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (6)

  1. PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질을 포함하는 혈관질환 진단용 바이오마커.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 혈관질환은 동맥경화증, 심부전증, 고혈압성 심장질환, 부정맥, 선천성 심장질환, 심근경색증, 협심증, 뇌졸중 및 말초현관질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 질병을 포함하는, 혈관질환 진단용 바이오마커.
  3. PARK7, APEX1 및 S1PR1 단백질으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 핵산서열에 특이적으로 결합하는 검출시약을 포함하는 혈관질환 진단용 키트.
  4. 제3항에 있어서, 상기 단백질에 특이적으로 결합하는 검출시약은 항체, 항체 단편 및 앱타머로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상이고, 상기 단백질를 암호화하는 유전자의 핵산서열에 특이적으로 결합하는 검출시약은 프라이머(primer), 프로브(probe) 및 안티센스 뉴클레오티드(anti-sense nucleotide)로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 혈관질환 진단용 키트.
  5. (a) 개체로부터 분리된 생물학적 시료에서 제1항의 바이오마커의 발현수준을 측정하는 단계; 및
    (b) 상기 (a) 단계의 PARK7의 발현수준을 정상 대조군의 발현수준과 비교하여 정상 대조군의 발현수준보다 낮은 경우; 또는 APEX1 또는 S1PR1 의 발현수준을 정상 대조군의 발현수준과 비교하여 정상 대조군의 발현수준보다 높은 경우에 혈관질환 환자로 진단하는 단계;
    를 포함하는 혈관질환의 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법.
  6. (a) 혈관질환 환자로부터 분리된 생물학적 시료에 후보물질을 처리하는 단계;
    (b) 상기 (a) 단계에서 제1항의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성을 측정하거나 상기 바이오마커를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계;
    (c) 상기 (b) 단계의 PARK7의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 높거나, 상기 PARK7의 바이오마커를 암호화하는 유전자의 발현 수준이 후보물질 처리전보다 높거나, APEX1 또는 S1PR1의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 낮거나, 상기 APEX1 또는 S1PR1의 바이오마커의 발현 수준 또는 활성이 후보물질 처리 전보다 낮은 경우 혈관질환 예방 또는 치료용 물질로 판단하는 단계;
    를 포함하는 혈관질환의 예방 또는 치료용 물질을 스크리닝 하는 방법.
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KR102200475B1 (ko) * 2019-07-31 2021-01-08 한국과학기술연구원 알코올 사용 장애의 진단용 조성물, 키트 및 이를 이용한 알코올 사용 장애의 진단을 위한 스핑고신 １-인산염 수용체 １의 검출 방법
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