KR20180126497A - 치환된 아미노퓨린 화합물, 이의 조성물, 및 그것에 의한 치료 방법 - Google Patents

Abstract

고형 종양 및 혈액 암을 포함하는 암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에서 제공되고, 상기 방법은 유효량의 식 (I)의 아미노퓨린 화합물, 및 그와 같은 화합물의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함한다.

Description

치환된 아미노퓨린 화합물, 이의 조성물, 및 그것에 의한 치료 방법

관련 출원에 대한 교차 참조

본원은 그 전문이 참고로 및 모든 목적을 위해 본 명세서에 편입되어 있는 미국 특허 가출원 번호 62/317,412(2016년 4월 1일 출원)을 우선권으로 주장한다.

분야

고형 종양 및 혈액 암을 포함하는 암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 본 명세서에서 기재된 특정 아미노퓨린 화합물의 유효량, 및 그와 같은 화합물의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함한다.

암은 주어진 정상 조직으로부터 유래된 비정상 세포의 수의 증가, 이들 비정상 세포에 의한 인접한 조직의 침습, 또는 영역 림프절 및 원위 부위로 악성 세포의 림프 또는 혈액-매개 확산 (전이)을 주로 특징으로 한다. 임상 데이터 및 분자 생물학적 연구는 암은 특정 조건 하에서 신조직형성으로 진행할 수 있는, 사소한 예비신생물성 변화로 시작하는 다단계 과정인 것을 나타낸다. 신생물성 병변은 특히 신생물성 세포가 숙주의 거나 그것을 특징으로 한다. 일 구현예에서, 상기 암은 표 3에서 제시된 암이다. 면역 감시를 벗어나는 조건 하에서 클론 같이 진화하여 침습, 성장, 전이 및 불균질성에 대해 증가하는 능력을 전개할 수 있다 (Roitt, I., Brostoff, J 및 Kale, D., Immunology, 17.1-17.12 (3rd ed., Mosby, St. Louis, Mo., 1993)).

암은 2012년에 820만 명의 사망자를 차지하는 전세계적인 사망의 주된 원인 중 하나이다. 연간 암 사례는 2012년의 1400만 건에서 향후 20년 내에 2200만 건으로 증가할 것으로 예상된다 (Cancer Fact sheet No 297, World Health Organization, February 2014, retrieved 10 June 2014 및 Globocan 2012, IARC 참조).

암 치료에 사용되는 현재의 약물은 매우 독성이 강하고 종종 비-특이적이다. 현재의 항암 요법 전략은 전형적으로 1차 및 전이성 종양을 수축시킬 수 있는 급속 증식 세포에 집중되고 있지만, 그와 같은 효과는 일반적으로 일시적이며 대부분의 전이암의 종양 재발이 빈번하게 발생한다. 실패에 대한 하나의 가능한 이유는 암 줄기 세포의 존재이다. 종양 내의 대부분의 세포와 달리, 암 줄기 세포는 명확한 화학요법에 저항성이고, 그리고 치료 후에 이들은 크게는 휴지기 특성의 그것의 줄기 세포-유사 거동과 그것의 약물 수송체의 풍부한 발현을 통해 종양에서의 모든 세포 유형을 재생할 수 있다.

의료 문헌에 상세히 기재된 방대하게 다양한 암이 있다. 일반적인 모집단이 나이 들고, 신규한 암이 발생하고, 그리고 민감한 모집단 (예를 들어, 에이즈에 감염되거나 과도하게 태양광에 노출된 사람)이 증가함에 따라, 암의 발병률은 계속 높아진다. 그러나, 암의 치료를 위한 선택사항은 제한적이다. 따라서 암 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있는 신규한 방법 및 조성물에 대한 엄청난 수요가 존재한다.

본원의 부문에서 임의의 참조문헌의 인용 또는 확인은 상기 참조문헌이 본원의 선행기술임을 인정하는 것으로 해석되지는 않아야 한다.

요약

본 명세서에서 제공된 방법에서 사용될 수 있는 그와 같은 아미노퓨린 화합물을 포함하는 조성물 (예를 들어 약제학적 조성물)을 포함하는 아미노퓨린 화합물 이 본 명세서에서 제공된다.

암, 특히 고형 종양 또는 혈액 암을 치료하는 방법이 본 명세서에서 제공된다. 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 본 명세서에서 기재된 바와 같이 암, 특히 고형 종양 또는 혈액 암을 치료 또는 예방하는 방법에서 사용될 수 있다. 본 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 유효량의 아미노퓨린 화합물 1을 투여하는 것을 포함한다. 암 전이를 치료 및 예방하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 제공된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 암 전이를 치료 및 예방하는 방법에서 사용될 수 있다. 추가로, 대상체에서 암 줄기 세포를 퇴치하는 방법이 본 명세서에서 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 제공된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 대상체에서 암 줄기 세포를 퇴치하는 방법에서 사용될 수 있다. 대상체에서 암 줄기 세포의 분화를 유도하는 방법이 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 제공된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 대상체에서 암 줄기 세포의 분화를 유도하는 방법에서 사용될 수 있다. 또 다른 측면에서, 대상체에서 암 줄기 세포사를 유도하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 제공된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 대상체에서 암 줄기 세포사를 유도하는 방법에서 사용될 수 있다.

본 명세서에서 기재된 아미노퓨린 화합물을 포함하는 약제학적 조성물을 사용하여 암, 특히 고형 종양 또는 혈액 암을 치료하는 방법이 본 명세서에 제공된다. 본 명세서에 제공된 아미노퓨린 화합물 약제학적 조성물은 암, 특히 고형 종양 또는 혈액 암을 치료 또는 예방하는 방법에서 사용될 수 있고, 본 명세서에서 기재된 바와 같이. 본 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 아미노퓨린 화합물 1을 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 암 전이를 치료 및 예방하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 제공된 바와 같은 아미노퓨린 화합물을 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에 제공된 아미노퓨린 화합물 약제학적 조성물은 암 전이를 치료 및 예방하는 방법에서 사용될 수 있다. 추가로, 대상체에서 암 줄기 세포를 퇴치하는 방법이 본 명세서에서 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 제공된 바와 같은 아미노퓨린 화합물을 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에 제공된 아미노퓨린 화합물 약제학적 조성물은 대상체에서 암 줄기 세포를 퇴치하는 방법에서 사용될 수 있다. 대상체에서 암 줄기 세포의 분화를 유도하는 방법이 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 제공된 바와 같은 아미노퓨린 화합물을 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에 제공된 아미노퓨린 화합물 약제학적 조성물은 대상체에서 암 줄기 세포의 분화를 유도하는 방법에서 사용될 수 있다. 또 다른 측면에서, 대상체에서 암 줄기 세포사를 유도하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 제공된 바와 같은 아미노퓨린 화합물을 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에 제공된 아미노퓨린 화합물 약제학적 조성물은 대상체에서 암 줄기 세포사를 유도하는 방법에서 사용될 수 있다.

본 명세서에 개시된 방법에 유용한 화합물은, 예를 들어, 표 1에서 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 입체이성질체, 거울상이성질체, 또는 동위이성질체 및 아미노퓨린 화합물의 약제학적 조성물이다.

본 구현예는 상세한 설명 및 비제한적인 구현예를 예시하는 것으로 의도된 실시예를 더 완전하게 참고로 이해될 수 있다.

도 1은 화합물 1 처리가 Colo 205 (mut BRAFV600E) 세포에서 ERK 기질 pRSK1 S380의 지속된 억제를 야기한다는 것을 도시한다. Colo 205 세포는 지시된 시간 동안 DMSO 또는 0.5 μM 화합물 1로 처리되었다. pRSK1 S380은 MSD 검정 (상단부)에 의해 측정되었다. DUSP4 및 DUSP6은 웨스턴 블랏팅 (하단부)에 의해 검출되었다.
도 2A-2I은 화합물 1이 Colo 205에서 MAP 키나제 신호전달 및 다운스트림 표적 유전자를 강력하게 억제한다는 것을 도시한다. 결장암 세포주 Colo 205 (BRAF V600E) 배양물은 2, 8 또는 24시간 동안 DMSO 또는 화합물 1의 증가하는 농도로 처리되었다. 도2A는 처리된 세포로부터 추출되고 DUSP4, DUSP6, 사이클린 D1, c-Myc, YAP 또는 β-액틴에 대한 항체를 사용하여 웨스턴 블랏에 의해 분석된 단백질을 예시한다. 도 2B-2C는 세포-대-CT 키트를 사용하여 추출된 RNA를 예시하고 정량적 PCR은 DUSP4, DUSP6, SPRY2, c-Myc 및 사이클린 D1에 대해 특이적인 프로브로 수행되었다.

-액틴에 대해 특이적인 프로브가 정규화를 위해 사용되었다. 도 2D-2I는 화합물 1 처리가 Colo 205 (mut BRAFV600E) 및 HT-29 (mut BRAFV600E) 세포에서 MAPK-유도된 mRNA 수준을 조절하는 것을 예시한다. Colo 205 또는 HT-29 세포는 6시간 동안 DMSO 또는 0.3 또는 1 μM 화합물 1로 처리되었다. mRNA는 MagMAX 총 RNA 단리 키트를 사용하여 추출되었고 정량적 PCR이 수행되었다.
도 3A는 화합물 1이 Colo 205에서 WNT/베타-카테닌 및 HIPPO/YAP 신호전달 경로 표적 유전자에 영향을 미치는 것을 예시한다. 결장암 세포주 Colo 205 (BRAF V600E) 배양물은 2, 8 또는 24시간 동안 DMSO 또는 화합물 1의 증가하는 농도로 처리되었다. RNA는 세포-대-CT 키트를 사용하여 추출되었고 정량적 PCR은 Axin2, CTGF, 및 AREG에 대해 특이적인 프로브로 수행되었다.

-액틴에 대해 특이적인 프로브가 정규화를 위해 사용되었다. 도 3B-3E는 화합물 1 처리가 Colo 205 (mut BRAFV600E) 및 HT-29 (mut BRAFV600E) 세포에서 YAP-유도된 mRNA 수준을 조절하는 것을 예시한다. Colo 205 또는 HT-29 세포는 6시간 동안 DMSO 또는 0.3 또는 1 μM 화합물 1로 처리되었다. RNA는 MagMAX 총 RNA 단리 키트를 사용하여 추출되었고 정량적 PCR이 수행되었다.
도 4A-4B는 화합물 1이 다중 암 세포주에서 PD-L1 수준을 하향-조절하는 것을 예시한다. 도 4A는 Hop66, Karpas-299, 및 LOX-IMVI에서 총 PD-L1의 웨스턴 블랏팅을 도시한다. 세포는 PD-L1, DUSP4 및 α-튜불린 또는 α-액틴의 발현 수준이 웨스턴 블랏에 의해 측정되기 전 지시된 시간 동안 화합물 1의 존재 또는 부재에서 배양되었다. 도 4B는 형광-활성화된 세포 정렬기 (FACS)로 PD-L1의 표면 염색을 예시한다. 세포는 48시간 동안 지시된 농도에서 DMSO 또는 화합물 1로 처리되고 그리고 PD-L1의 세포 표면 발현은 APC-표지된 항체 대 PD-L1로 FACS 분석을 사용하여 검출되었다 (클론 29E.1A3.; 캘리포니아 주 샌디에이고 소재의　BioLegend). PD-L1 양성 세포의 기하 평균은 FlowJo 10에 의해 결정되었다 (오리건 주　애슐랜드 소재의 Treestar).
도 5A-5B는 화합물 1-처리된 KARPAS-299 세포가 시험관내에서 초항원 (SEB)으로 자극된 PBMC-유래된 T 세포에 의해 IL-2 (도 5A) 및 IFNγ (도 5B)의 생산을 증가시키는 것을 예시한다. KARPAS-299 세포는 48시간 동안 지시된 농도에서 DMSO (D) 또는 화합물 1로 처리되었다. 건강한 공여체로부터 PBMC는 48시간 동안 20 ng/ml SEB로 또는 이것 없이 처리되었다. PBS로 세정 후, PBMC를 24시간 동안 암 세포와 같이 인큐베이션하고 그리고 상청액을 수집하여 MSD 검정을 사용하여 IL-2 및 IFNγ를 측정하였다. 도 5C는 IL-8의 수준에 대한 화합물 1 처리의 효과가 PBMC 배양 배지에서 결정되었다는 것을 도시한다. PBMC는 전혈로부터 단리되어 RPMI 배지 플러스 10% FBS에서 배양되었다. PBMC는 10 cm² 접시에서 밀리리터 당 1x10⁶으로 플레이팅되었다. PBMC는 0.1% DMSO 또는 0.5 μM 화합물 1로 처리되었다. 처리는 지정된 시점에서 수행되었다. PBMC를 펠렛화하여 웨스턴 블랏 분석을 위해 사용하였고 1 mL의 배양 배지를 IL-8 분석을 위해 취했다. IL-8 분석은 제조자의 지침에 따라 메소스케일 V-Plex 인간 IL-8 키트로 수행하였다. 화합물 1은 상이한 시점에서 IL-8 수준을 억제하는 것으로 나타났다.
도 6은 LOX-IMVI 이종이식 모델에서의 화합물 1의 항종양 활성을 예시한다. 암컷 SCID 마우스에 오른쪽 옆구리 안으로 1 x 10⁶ LOX-IMVI 종양 세포를 접종하였다. 처리 개시의 시점에서 마우스를 처리 그룹 (n=9/그룹)으로 무작위 추출하였다. 시험품 처리는 종양이 대략 240 mm³일 때인 13일째에 개시하였다.
도 7은 LOX IMVI 이종이식 모델에서 화합물 1의 항종양 활성을 예시한다. 암컷 중증 복합성 면역결핍된 (SCID) 마우스에 오른쪽 옆구리 안으로 1 x 10⁶ LOX-IMVI 종양 세포를 접종하였다. 처리 개시의 시점에서 마우스를 처리 그룹 (n=10/그룹)으로 무작위 추출하였다. 시험품 처리는 종양이 대략 300 mm³일 때인 13일째에 개시하였다. 억제 백분율은 마지막 연구 일에서의 비히클 대조군에 비교하여 계산되며, 처리 그룹에 대한 각각의 종양 부피 옆의 괄호 안에 있다. 점선은 투약의 개시시의 종양 부피이다.
도 8은 Colo 205 이종이식 모델에서 화합물 1의 항종양 활성을 예시한다. 암컷 SCID 마우스에 오른쪽 옆구리 안으로 2 x 10⁶ Colo 205 종양 세포를 접종하였다. 처리 개시의 시점에서 마우스를 처리 그룹 (n=10/그룹)으로 무작위 추출하였다. 시험품 처리는 종양이 대략 160 mm³일 때인 10일째에 개시하였다. 억제 백분율은 마지막 연구 일에서의 비히클 대조군에 비교하여 계산되며, 처리 그룹에 대한 각각의 종양 부피 옆의 괄호 안에 있다. 점선은 투약의 개시시의 종양 부피이다.
도 9는 Colo 205 이종이식 모델에서 화합물 1의 항종양 활성을 예시한다. 암컷 SCID 마우스에 오른쪽 옆구리 안으로 2 x 10⁶ Colo 205 종양 세포를 접종하였다. 처리 개시의 시점에서 마우스를 처리 그룹 (n=10/그룹)으로 무작위 추출하였다. 시험품 처리는 종양이 대략 130 또는 160 mm³일 때인 10일째에 개시하였다. 억제 백분율은 마지막 연구 일에서의 비히클 대조군에 비교하여 계산되며, 처리 그룹에 대한 각각의 종양 부피 옆의 괄호 안에 있다. 점선은 투약의 개시시의 종양 부피이다.
도 10A-10B는 PDX146 이종이식 모델에서 화합물 1의 항종양 활성을 예시한다. 암컷 NSG 마우스에 오른쪽 옆구리 안으로 세포 슬러리 내 25 μg의 PDX146 종양으로 접종하였다. 처리 개시의 시점에서 마우스를 처리 그룹 (n=8-10/그룹)으로 무작위 추출하였다. 시험품 처리는 종양이 대략 100 - 110 mm³일 때인 19일째에 개시하였다. 도 10A는 시간의 함수로서 종양 부피를 도시한다. 도 10B는 마지막 연구 일수인, 40일째에 개별 종양 부피를 도시한다. 억제 백분율은 마지막 연구 일에서의 비히클 대조군에 비교하여 계산되며, 처리 그룹에 대한 각각의 종양 부피 옆의 괄호 안에 있다. 점선은 투약의 개시시의 종양 부피이다. Camp = 캄프토사르.
도 11은 PDX146 이종이식 모델에서 연속 화합물 1 처리로의 종양 성장 지연을 예시한다. 암컷 NSG 마우스에 오른쪽 옆구리 안으로 세포 슬러리 내 25 μg의 PDX146 종양으로 접종하였다. 처리 개시의 시점에서 마우스를 처리 그룹 (n=8-10/그룹)으로 무작위 추출하였다. 시험품 처리는 종양이 대략 100 - 110 mm³일 때인 16일째에 개시하였다. 흑색 점선은 투약의 개시 시에서의 종양 부피이고 적색 점선은 비히클 대조군 그룹이 종결된 때인 43일째의 종양 부피이다.
도 12A-12D는 화합물 1의 단일 용량이 PDX146 이종이식 모델에서 MAPK, Wnt 및 Hippo 신호전달 경로에서의 바이오마커: 화합물 1로 처리된 PDX146 종양에서 MAPK, Wnt 및 히포 경로의 조절을 억제하는 것을 예시한다. 투약 후 지시된 시점에서 PDX146 종양으로부터 추출된 RNA에 대해 qRT-PCR 검정을 수행하였다. 데이터는 평균 ± 표준오차로 표현된다. P 값은 Dunnet의 post-hoc 분석으로 원-웨이 ANOVA로부터 유래된다.
도 13A-13D는 화합물 1이 단일 용량 투여에 따라 PDX146 종양으로부터 MAPK, Wnt 및 Hippo 신호전달 경로에서의 바이오마커: 화합물 1로 처리된 PDX146 종양에서 MAPK, Wnt 및 히포 경로의 조절을 억제하는 것을 예시한다. 투약 후 지시된 시점에서 PDX146 종양으로부터 추출된 RNA에 대해 qRT-PCR 검정을 수행하였다. YAP 데이터는 5 mg/kg 처리 그룹으로부터 종양의 웨스턴 블랏 분석으로부터 생성되고 그리고 YAP 대

-액틴 단백질 발현의 비로 표현된다. 데이터는 평균 ± 표준오차로 표현된다. P 값은 Dunnet의 post-hoc 분석으로 원-웨이 ANOVA로부터 유래된다.
도 14A-14D는 MAPK 신호전달 경로의 바이오마커인, 포스포-RSK (pRSK) 및 포스포-ERK (pERK) 단백질 수준이 화합물 1의 단일 용량 투여에 의해 조절된다는 것을 예시한다. 투약 후 지시된 시점에서 PDX146 종양으로부터 추출된 단백질에 대해 웨스턴 블랏 (pRSK) 또는 메소스케일 (pERK) 검정을 수행하였다. 포스포-RSK 데이터는 비히클 대조군의 %로 표현된다. 포스포-ERK 데이터는 평균 ± 표준오차로 표현된다.
도 15A-15B는 β-카테닌 돌연변이체 SW48 결장직장 이종이식 모델에서 화합물 1의 항종양 활성을 예시한다. 암컷 SCID 마우스에 오른쪽 옆구리 안으로 2 x 10⁶ SW48 종양 세포를 접종하였다. 처리 개시의 시점에서 마우스를 처리 그룹 (n=10/그룹)으로 무작위 추출하였다. 시험품 처리는 종양이 대략 110 및 105 mm³일 때 (각각 도 15A 및 도 15B)인 10일째에 개시하였다. 흑색 점선은 투약의 개시 시의 종양 부피이다. 좌측의 그래프는 용량-반응 연구이다 (그래프 A). 도 15B는 동물이 연구 과정 동안 약물에 대해 유지되는 진행 연구에 대한 시간을 예시한다 (그래프 B). 점선은 비히클 대조군 그룹이 종결된 때인 28일째의 종양 부피이다.
도 16은 동소이식 Hep3B2.1-7 간세포 암종 이종이식에서 항종양 활성을 예시한다. 암컷 SCID 마우스에 동물당 2 x 10⁶ Hep3B2.1-7 종양 세포로 동소이식으로 접종하였다. 접종 7일 후 동물을 체중을 기준으로 처리 그룹으로 무작위 추출하고 치료를 시작하였다 (연구 0일째). 위성 그룹의 비율 평가로 동물의 100 %에서 간에서 종양의 존재를 확인했다. 화합물 1은 21일 동안 QD로 경구로 투약되었다. 연구 종결 일째에, 종양을 제거하여 칭량하였다. 개별 종양을 칭량하고 각각의 그룹의 평균 종양 중량 ± SEM은 그래프로 표시된다. 억제 백분율은 비히클 대조군에 비교하여 계산되고 처리 그룹에 대한 각각의 종양 중량보다 높다. P 값은 Dunnet의 post-hoc 분석으로 원-웨이 ANOVA로부터 유래된다. *** = p<0.001. 화합물 1은 비히클 대조군이 비교하여 종양 중량에서 통계적으로 유의성 있는 감소를 나타냈다.
도 17은 C-Met 증폭된 간세포 암종 환자-유래된 이종이식 모델인, LI0612에서 화합물 1의 항종양 활성을 예시한다. 암컷 SCID 마우스에 오른쪽 옆구리 안으로 간세포 암종 PDX 모델 LI0612 종양 단편 (직경 2 - 4 mm)을 접종하였다. 처리 개시의 시점에서 마우스를 처리 그룹 (n=10/그룹)으로 무작위 추출하였다. 시험품 처리는 종양이 대략 150 mm³일 때인 18일째에 개시하였다. 종양 성장은 비히클 대조군 및 투약 기간에 걸쳐 화합물 1 처리 그룹에서 진행하였다. 30 mg/kg 처리로 상당한 종양 성장 억제 (TGI) (비히클 대조군에 비교하여, p=0.038)를 초래하는 화합물 1 투여로 성장 동력학에서의 변화가 인지되었다.
도 18은 화합물　1 처리에 대한 β-카테닌 돌연변이를 가지고 있는 세포주의 감수성을 도시하고 그리고 돌연변이된 β-카테닌을 갖는 세포주는 일반적으로 화합물 1 처리에 대해 보다 감수성이다는 것을 나타낸다.
도 19A-19E는 화합물 1로의 처리에 대한 세포주 감수성 및 내성을 예시한다. 도 19A-19C는 BRAF 및 CTNNB1 돌연변이를 함유하는 세포주는 야생형 BRAF 및 CTNNB1을 갖는 세포주보다 화합물 1로의 처리에 대해 더 감수성이다는 것을 나타낸다. 도 19D 및 도 19E는 RB 및 PI3K/PTEN 경로에 돌연변이를 갖는 세포주는 시험관내에서 화합물 1 처리에 대한 내성과 관련된다는 것을 나타낸다.
도 20은 화합물 1이 BRAF 및 CTNNB1 돌연변이체 세포주 SW48에서 MAPK, β-카테닌, 및 YAP을 조절한다는 것을 예시한다.
도 21A-21B는 화합물 1이 BRAF 및 CTNNB1 돌연변이체 세포주 SW48에서 MAPK, β-카테닌, 및 YAP에 의해 제어된 표적 유전자 발현을 조절한다는 것을 예시한다.
도 22는 화합물 1이 인간 기관지 상피 세포에서 Axin2 발현을 억제한다는 것을 예시한다. 유전자 발현은 24시간에서 측정되었다.
도 23A-23D는 화합물 1이 MEK 억제제 (트라메티닙) 및 ERK 억제제 (GDC0994)보다 더 높은 수준으로 β-카테닌 돌연변이체 세포의 콜로니 형성을 억제한다는 것을 예시한다. 도 23A는 SW48 (colo) 세포의 콜로니 형성의 억제를 도시한다. 도 23B는 HCT-116 (colo) 세포의 콜로니 형성의 억제를 도시한다.. 도 23C는 AGS (위) 세포의 콜로니 형성의 억제를 도시한다. 도 23D는 Hep3B (HCC) 세포의 콜로니 형성의 억제를 도시한다.
도 24는 MEK 억제제 트라메티닙에 대해 내성인 AGS 세포는 콜로니 형성 검정에서 화합물 1에 대해 감수성이다는 것을 예시한다.
도 25는 72시간 동안 화합물 1 및 트라메티닙으로 처리된 8xGTIIC-루시퍼라아제 WI38 VA13 세포에서 TEAD 리포터 활성을 도시한다. 루시퍼라아제 활성은 Bright Glo 루시퍼라아제 검정 (Promega)을 사용하여 분석하였다. 화합물 1은 24시간 검정에서 >10 μM의 평균 IC₅₀ 및 72시간 검정에서 1.85 μM의 평균 IC₅₀으로 TEAD 리포터 활성을 억제하였다 (3회 실험의 누적 데이터). 생존력은 3회 검정에 걸쳐 화합물 1에 의해 재현 가능하게 영향을 받지 않았다. 트라메티닙은 24 또는 72시간에서 TEAD 리포터 활성을 억제하지 않았다.

정의

"알킬" 기는 1 내지 10개의 탄소 원자, 전형적으로 1 내지 8개의 탄소, 또는 일부 구현예에서, 1 내지 6, 1 내지 4, 또는 2 내지 6개의 탄소 원자를 가지고 있는 포화된, 부분적으로 포화된, 또는 불포화된 직쇄 또는 분지형 비-환형 탄화수소 이다. 대표적인 알킬 기는 -메틸, -에틸, -n-프로필, -n-부틸, -n-펜틸 및 -n-헥실을 포함하고; 한편 포화된 분지형 알킬은 -이소프로필, -sec-부틸, -이소부틸, -tert-부틸, -이소펜틸, -네오펜틸, tert-펜틸, -2-메틸펜틸, -3-메틸펜틸, -4-메틸펜틸, -2,3-디메틸부틸 및 기타 동종의 것을 포함한다. 불포화된 알킬 기의 예는, 그 중에서도, 비제한적으로, 비닐, 알릴, -CH=CH(CH₃), -CH=C(CH₃)₂, -C(CH₃)=CH₂, -C(CH₃)=CH(CH₃), -C(CH₂CH₃)=CH₂, -C≡CH, -C≡C(CH₃), -C≡C(CH₂CH₃), -CH₂C≡CH, -CH₂C≡C(CH₃) 및 -CH₂C≡C(CH₂CH₃)를 포함한다. 알킬 그룹은 치환되거나 비치환될 수 있다. 본 명세서에 기재된 알킬기가 "치환된" 것이라고 할 때, 본 명세서에서 개시된 예시적인 화합물 및 구현예에서 발견된 것과 같은 임의의 치환체 또는 치환체들, 뿐만 아니라 할로겐 (클로로, 아이오도, 브로모, 또는 플루오로); 알킬; 하이드록실; 알콕시; 알콕시알킬; 아미노; 알킬아미노; 카복시; 니트로; 시아노; 티올; 티오에테르; 이민; 이미드; 아미딘; 구아니딘; 엔아민; 아미노카보닐; 아실아미노; 포스포네이트; 포스핀; 티오카보닐; 설피닐; 설폰; 설폰아미드; 케톤; 알데하이드; 에스테르; 우레아; 우레탄; 옥심; 하이드록실 아민; 알콕시아민; 아릴옥시아민, 아르알콕시아민; N-산화물; 하이드라진; 하이드라자이드; 하이드라존; 아자이드; 이소시아네이트; 이소티오시아네이트; 시아네이트; 티오시아네이트; B(OH)₂, 또는 O(알킬)아미노카보닐로 치환될 수 있다.

"사이클로알킬" 기는 1 내지 3개의 알킬 기 로 선택적으로 치환될 수 있는 단일 환형 고리 또는 다중 응축된 또는 브릿징된 고리를 갖는, 3 내지 10개의 탄소 원자의 포화된, 또는 부분적으로 포화된 환형 알킬 그룹이다. 일부 구현예에서, 사이클로알킬 그룹은 3 내지 8개의 고리 멤버를 가지며, 반면에 다른 구현예에서 고리 탄소 원자의 수는 3 내지 5, 3 내지 6, 또는 3 내지 7의 범위이다. 그와 같은 사이클로알킬 기는, 예로써, 단일 고리 구조 예컨대 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸, 1-메틸사이클로프로필, 2-메틸사이클로펜틸, 2-메틸사이클로옥틸, 및 기타 동종의 것, 또는 다중 또는 브릿징된 고리 구조 예컨대 1-바이사이클로[1.1.1]펜틸, 바이사이클로[2.1.1]헥실, 바이사이클로[2.2.1]헵틸, 바이사이클로[2.2.2]옥틸, 아다만틸 및 기타 동종의 것을 포함한다. 불포화 사이클로알킬 기의 예는 그 중에서도, 사이클로헥세닐, 사이클로펜테닐, 사이클로헥사디에닐, 부타디에닐, 펜타디에닐, 헥사디에닐을 포함한다. 사이클로알킬 그룹은 치환되거나 비치환될 수 있다. 그와 같은 치환된 사이클로알킬 기는, 예로써, 사이클로헥산올 및 기타 동종의 것을 포함한다.

"아릴" 기는 단일 고리 (예를 들어, 페닐) 또는 다중 축합 고리 (예를 들어, 나프틸 또는 안트릴)를 갖는 6 내지 14개의 탄소 원자의 방향족 탄소환형 그룹 이다. 일부 구현예에서, 아릴 기는 기들의 고리부에서 6-14개의 탄소를 함유하고, 다른 것은 6 내지 12 또는 심지어 6 내지 10개의 탄소 원자를 함유한다. 특정 아릴은 페닐, 바이페닐, 나프틸 및 기타 동종의 것을 포함한다. 아릴 그룹은 치환되거나 비치환될 수 있다. 어구 "아릴 기"는 또한, 융합 고리, 예컨대 융합된 방향족-지방족 고리계 (예를 들어, 인다닐, 테트라하이드로나프틸, 및 기타 동종의 것)를 함유하는 기를 포함한다.

"헤테로아릴" 기는 헤테로방향족 고리계 중 고리 원자로서 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 아릴 고리계 이고, 여기서 상기 원자의 나머지는 탄소 원자이다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴 기는 기의 고리부에서3 내지 6개의 고리 원자를 함유하고, 다른 것에서 6 내지 9 또는 심지어 6 내지 10개의 원자를 함유한다. 적합한 헤테로원자는 산소, 황 및 질소를 포함한다. 특정 구현예에서, 헤테로아릴 고리계는 단환형 또는 이환형. 비-제한적인 예는 비제한적으로, 하기를 포함한다: 기들 예컨대 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 벤즈이속사졸릴 (예를 들어, 벤조[d]이속사졸릴), 티아졸릴, 피롤릴, 피리다지닐, 피리미딜, 피라지닐, 티오페닐, 벤조티오페닐, 푸라닐, 벤조푸라닐, 인돌릴 (예를 들어, 인돌릴-2-오닐 또는 이소인돌린-1-오닐), 아자인돌릴 (피롤로피리딜 또는 1H-피롤로[2,3-b]피리딜), 인다졸릴, 벤즈이미다졸릴 (예를 들어, 1H-벤조[d]이미다졸릴), 이미다조피리딜 (예를 들어, 아자벤즈이미다졸릴 또는 1H-이미다조[4,5-b]피리딜), 피라졸로피리딜, 트리아졸로피리딜, 벤조트리아졸릴 (예를 들어, 1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸릴), 벤즈옥사졸릴 (예를 들어, 벤조[d]옥사졸릴), 벤조티아졸릴, 벤조티아디아졸릴, 이속사졸로피리딜, 티아나프탈레닐, 퓨리닐, 크산티닐, 아데니닐, 구아니닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐 (예를 들어, 3,4-디하이드로이소퀴놀린-1(2H)-오닐), 테트라하이드로퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 및 퀴나졸리닐 기.

"헤테로사이클릴"은 방향족 (또한 일명 헤테로아릴) 또는 비-방향족 사이클로알킬이고, 여기서 고리 탄소 원자 중 1 내지 4개는 O, S 및 N로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자로 독립적으로 대체된다. 일부 구현예에서, 헤테로사이클릴 기는 3 내지10개의 고리 멤버를 포함하고, 반면에 다른 그와 같은 기는 3 내지 5, 3 내지 6, 또는 3 내지 8개의 고리 멤버를 갖는다. 헤테로사이클릴은 또한 임의의 고리 원자에서 (즉, 임의의 탄소 원자 또는 복소환형 고리의 헤테로원자에서) 다른 기에 결합될 수 있다. 헤테로사이클로알킬 그룹은 치환되거나 비치환될 수 있다. 헤테로사이클릴 기는 불포화된, 부분적으로 포화된 및 포화된 고리계, 예컨대, 예를 들어, 이미다졸릴, 이미다졸리닐 및 이미다졸리디닐 (예를 들어, 이미다졸리딘-4-온 또는 이미다졸리딘-2,4-디오닐) 기를 포함한다. 어구 헤테로사이클릴은 융합 고리 종을 포함하되, 이 종은 융합된 방향족 및 비-방향족기를 포함하는 것들, 예컨대, 예를 들어, 1-및 2-아미노테트랄린, 벤조트리아졸릴 (예를 들어, 1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸릴), 벤즈이미다졸릴 (예를 들어, 1H-벤조[d]이미다졸릴), 2,3-디하이드로벤조[l,4]디옥시닐, 및 벤조[l,3]디옥솔릴을 포함한다. 어구는 또한 헤테로원자를 함유하는 브릿징된 다환형 고리계 예컨대, 비제한적으로, 퀴누클리딜을 포함한다. 헤테로사이클릴 그룹의 대표적인 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 아지리디닐, 아제티딜, 아제파닐, 옥세타닐, 피롤리딜, 이미다졸리디닐 (예를 들어, 이미다졸리딘-4-오닐 또는 이미다졸리딘-2,4-디오닐), 피라졸리디닐, 티아졸리디닐, 테트라하이드로티오페닐, 테트라하이드로푸라닐, 디옥솔릴, 푸라닐, 티오페닐, 피롤릴, 피롤리닐, 이미다졸릴, 이미다졸리닐, 피라졸릴, 피라졸리닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 벤즈이속사졸릴 (예를 들어, 벤조[d]이속사졸릴), 티아졸릴, 티아졸리닐, 이소티아졸릴, 티아디아졸릴, 옥사디아졸릴, 피페리딜, 피페라지닐 (예를 들어, 피페라진-2-오닐), 모폴리닐, 티오모폴리닐, 테트라하이드로피라닐 (예를 들어, 테트라하이드로-2H-피라닐), 테트라하이드로티오피라닐, 옥사티아닐, 디옥실, 디티아닐, 피라닐, 피리딜, 피리미딜, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐, 디하이드로피리딜, 디하이드로디티이닐, 디하이드로디티오닐, 1,4-디옥사스피로[4.5]데카닐, 호모피페라지닐, 퀴누클리딜, 인돌릴 (예를 들어, 인돌릴-2-오닐 또는 이소인돌린-1-오닐), 인돌리닐, 이소인돌릴, 이소인돌리닐, 아자인돌릴 (피롤로피리딜 또는 1H-피롤로[2,3-b]피리딜), 인다졸릴, 인돌리지닐, 벤조트리아졸릴 (예를 들어 1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸릴), 벤즈이미다졸릴 (예를 들어, 1H-벤조[d]이미다졸릴 또는 1H-벤조[d]이미다졸-2(3H)-오닐), 벤조푸라닐, 벤조티오페닐, 벤조티아졸릴, 벤즈옥사디아졸릴, 벤즈옥사지닐, 벤조디티이닐, 벤족사티이닐, 벤조티아지닐, 벤즈옥사졸릴 (즉, 벤조[d]옥사졸릴), 벤조티아졸릴, 벤조티아디아졸릴, 벤조[l,3]디옥솔릴, 피라졸로피리딜 (예를 들어, 1H-피라졸로[3,4-b]피리딜, 1H-피라졸로[4,3-b]피리딜), 이미다조피리딜 (예를 들어, 아자벤즈이미다졸릴 또는 1H-이미다조[4,5-b]피리딜), 트리아졸로피리딜, 이속사졸로피리딜, 퓨리닐, 크산티닐, 아데니닐, 구아니닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐 (예를 들어, 3,4-디하이드로이소퀴놀린-1(2H)-오닐), 퀴놀리지닐, 퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 신놀리닐, 프탈라지닐, 나프티리디닐, 프테리디닐, 티아나프탈레닐, 디하이드로벤조티아지닐, 디하이드로벤조푸라닐, 디하이드로인돌릴, 디하이드로벤조디옥시닐, 테트라하이드로인돌릴, 테트라하이드로인다졸릴, 테트라하이드로벤즈이미다졸릴, 테트라하이드로벤조트리아졸릴, 테트라하이드로피롤로피리딜, 테트라하이드로피라졸로피리딜, 테트라하이드로이미다조피리딜, 테트라하이드로트리아졸로피리딜, 테트라하이드로피리미딘-2(1H)-온 및 테트라하이드로퀴놀리닐 기. 대표적인 비-방향족 헤테로사이클릴 기는 융합된 방향족기를 포함하는 융합 고리 종을 포함하지 않는다. 비-방향족 헤테로사이클릴 기의 예는 하기를 포함한다: 아지리디닐, 아제티딜, 아제파닐, 피롤리딜, 이미다졸리디닐 (예를 들어, 이미다졸리딘-4-오닐 또는 이미다졸리딘-2,4-디오닐), 피라졸리디닐, 티아졸리디닐, 테트라하이드로티오페닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리딜, 피페라지닐 (예를 들어, 피페라진-2-오닐), 모폴리닐, 티오모폴리닐, 테트라하이드로피라닐 (예를 들어, 테트라하이드로-2H-피라닐), 테트라하이드로티오피라닐, 옥사티아닐, 디티아닐, 1,4-디옥사스피로[4.5]데카닐, 호모피페라지닐, 퀴누클리딜, 또는 테트라하이드로피리미딘-2(1H)-온. 대표적인 치환된 헤테로사이클릴 기는 일치환되거나 그 최과로 치환되고, 그 예는 비제한적으로, 다양한 치환체 예컨대 아래에 열거된 것들로 2-, 3-, 4-, 5-, 또는 6-치환된, 또는 이치환된 피리딜 또는 모폴리닐 기이다.

"사이클로알킬알킬" 기는 식: -알킬-사이클로알킬의 라디칼이고, 여기서 알킬 및 사이클로알킬은 상기에 정의된 바와 같다. 치환된 사이클로알킬알킬 기는 알킬, 사이클로알킬, 또는 상기 기의 알킬 및 사이클로알킬부 둘 모두에서 치환될 수 있다. 대표적인 사이클로알킬알킬 기는 비제한적으로 메틸사이클로프로필, 메틸사이클로부틸, 메틸사이클로펜틸, 메틸사이클로헥실, 에틸사이클로프로필, 에틸사이클로부틸, 에틸사이클로펜틸, 에틸사이클로헥실, 프로필사이클로펜틸, 프로필사이클로헥실 및 기타 동종의 것을 포함한다.

"아르알킬" 기는 식: -알킬-아릴의 라디칼이고, 여기서 알킬 및 아릴은 상기에 정의되어 있다. 치환된 아르알킬 기는 기의 알킬, 아릴, 또는 알킬 및 아릴부 둘 모두에서 치환될 수 있다. 대표적인 아르알킬 기는 비제한적으로 벤질 및 펜에틸 기 및 융합된 (사이클로알킬아릴)알킬 기 예컨대 4-에틸-인다닐을 포함한다.

"헤테로사이클릴알킬" 기는 식: -알킬-헤테로사이클릴의 라디칼이고, 여기서 알킬 및 헤테로사이클릴은 상기에 정의되어 있다. 치환된 헤테로사이클릴알킬 기는 기의 알킬, 헤테로사이클릴, 또는 알킬 및 헤테로사이클릴부 둘 모두에서 치환될 수 있다. 대표적인 헤테로사이클릴알킬 기는 비제한적으로 4-에틸-모폴리닐, 4-프로필모폴리닐, 푸란-2-일 메틸, 푸란-3-일 메틸, 피리딘-3-일 메틸, 테트라하이드로푸란-2-일 에틸, 및 인돌-2-일 프로필을 포함한다.

"할로겐"은 클로로, 아이오도, 브로모, 또는 플루오로이다.

"하이드록시알킬" 기는 하나 이상의 하이드록시 기로 치환된 본 명세서에서 기재된 바와 같은 알킬기 이다.

"알콕시" 기는 -O-(알킬)이되, 여기서 알킬은 본 명세서에 정의되어 있다.

"알콕시알킬" 기는 -(알킬)-O-(알킬)이되, 여기서 알킬은 본 명세서에 정의되어 있다.

"아민" 기는 식: -NH₂의 라디칼이다.

"하이드록실 아민" 기는 식: -N(R^#)OH 또는 -NHOH의 라디칼이고, 여기서 R^#은 치환된 또는 비치환된 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬알킬, 아릴, 아르알킬, 헤테로사이클릴 또는 헤테로사이클릴알킬 기는 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"알콕시아민" 기는 식: -N(R^#)O-알킬 또는 -NHO-알킬의 라디칼이고, 여기서 R^# 및 알킬은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"아릴옥시아민" 기는 식: -N(R^#)O-아릴 또는 -NHO-아릴의 라디칼이고, 여기서 R^# 및 아릴은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"아르알콕시아민" 기는 식: -N(R^#)O-아르알킬 또는 -NHO-아르알킬의 라디칼이고, 여기서 R^# 및 아르알킬은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"알킬아민" 기는 의 라디칼이고 식: -NH-알킬 또는 -N(알킬)₂, 여기서 각각의 알킬은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"아미노카보닐" 기는 식: -C(=O)N(R^#)₂, -C(=O)NH(R^#) 또는 -C(=O)NH₂의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"아실아미노" 기는 식: -NHC(=O)(R^#) 또는 -N(알킬)C(=O)(R^#)의 라디칼이고, 여기서 각각의 알킬 및 R^#는 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"O(알킬)아미노카보닐" 기는 식: -O(알킬)C(=O)N(R^#)₂, -O(알킬)C(=O)NH(R^#) 또는 -O(알킬)C(=O)NH₂의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^# 및 알킬은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"N-산화물" 기는 식: -N⁺-O^-의 라디칼이다.

"카복시" 기는 식: -C(=O)OH의 라디칼이다.

"케톤" 기는 식: -C(=O)(R^#)의 라디칼이고, 여기서 R^#은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"알데하이드" 기는 식: -CH(=O)의 라디칼이다.

"에스테르" 기는 식: -C(=O)O(R^#) 또는 -OC(=O)(R^#)의 라디칼이고, 여기서 R^#은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"우레아" 기는 식: -N(알킬)C(=O)N(R^#)₂, -N(알킬)C(=O)NH(R^#), -N(알킬)C(=O)NH₂, -NHC(=O)N(R^#)₂, -NHC(=O)NH(R^#), 또는 -NHC(=O)NH₂ 의 라디칼이고 ^#, 여기서 각각의 알킬 및 R^#는 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"이민" 기는 식: -N=C(R^#)₂ 또는 -C(R^#)=N(R^#)의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"이미드" 기는 식: -C(=O)N(R#)C(=O)(R^#) 또는 -N((C=O)(R^#))₂의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"우레탄" 기는 식: -OC(=O)N(R^#)₂, -OC(=O)NH(R^#), -N(R^#)C(=O)O(R^#), 또는 -NHC(=O)O(R^#)의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"아미딘" 기는 식: -C(=N(R^#))N(R^#)₂, -C(=N(R^#))NH(R^#), -C(=N(R^#))NH₂, -C(=NH)N(R^#)₂, -C(=NH)NH(R^#), -C(=NH)NH₂, -N=C(R^#)N(R^#)₂, -N=C(R^#)NH(R^#), -N=C(R^#)NH₂, -N(R^#)C(R^#)=N(R^#), -NHC(R^#)=N(R^#), -N(R^#)C(R^#)=NH, 또는 -NHC(R^#)=NH의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"구아니딘" 기는 식: -N(R^#)C(=N(R^#))N(R^#)₂, -NHC(=N(R^#))N(R^#)₂, -N(R^#)C(=NH)N(R^#)₂, -N(R^#)C(=N(R^#))NH(R^#), -N(R^#)C(=N(R^#))NH₂, -NHC(=NH)N(R^#)₂, -NHC(=N(R^#))NH(R^#), -NHC(=N(R^#))NH₂, -NHC(=NH)NH(R^#), -NHC(=NH)NH₂, -N=C(N(R^#)₂)₂, -N=C(NH(R^#))₂, 또는 -N=C(NH₂)₂의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"엔아민" 기는 식: -N(R^#)C(R^#)=C(R^#)₂, -NHC(R^#)=C(R^#)₂, -C(N(R^#)₂)=C(R^#)₂, -C(NH(R^#))=C(R^#)₂, -C(NH₂)=C(R^#)₂, -C(R^#)=C(R^#)(N(R^#)₂), -C(R^#)=C(R^#)(NH(R^#)) 또는 -C(R^#)=C(R^#)(NH₂)의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"옥심" 기는 식: -C(=NO(R^#))(R^#), -C(=NOH)(R^#), -CH(=NO(R^#)), 또는 -CH(=NOH)의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"하이드라자이드" 기는 식: -C(=O)N(R^#)N(R^#)₂, -C(=O)NHN(R^#)₂, -C(=O)N(R^#)NH(R^#)_, -C(=O)N(R^#)NH₂, -C(=O)NHNH(R^#)₂, 또는 -C(=O)NHNH₂의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"하이드라진" 기는 식: -N(R^#)N(R^#)₂, -NHN(R^#)₂, -N(R^#)NH(R^#)_, -N(R^#)NH₂, -NHNH(R^#)₂, 또는 -NHNH₂의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"하이드라존" 기는 식: -C(=N-N(R^#)₂)(R^#)₂, -C(=N-NH(R^#))(R^#)₂, -C(=N-NH₂)(R^#)₂, -N(R^#)(N=C(R^#)₂), 또는 -NH(N=C(R^#)₂)의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"아자이드" 기는 식: -N₃의 라디칼이다.

"이소시아네이트" 기는 식: -N=C=O의 라디칼이다.

"이소티오시아네이트" 기는 식: -N=C=S의 라디칼이다.

"시아네이트" 기는 식: -OCN의 라디칼이다.

"티오시아네이트" 기는 식: -SCN의 라디칼이다.

"티오에테르" 기는 식; -S(R^#)의 라디칼이고, 여기서 R^#은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"티오카보닐" 기는 식: -C(=S)(R^#)의 라디칼이고, 여기서 R^#은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"설피닐" 기는 식: -S(=O)(R^#)의 라디칼이고, 여기서 R^#은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"설폰" 기는 식: -S(=O)₂(R^#)의 라디칼이고, 여기서 R^#은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"설포닐아미노" 기는 식: -NHSO₂(R^#) 또는 -N(알킬)SO₂(R^#)의 라디칼이고, 여기서 각각의 알킬 및 R^#는 본 명세서에 정의되어 있다.

"설폰아미드" 기는 식: -S(=O)₂N(R^#)₂, 또는 -S(=O)₂NH(R^#), 또는 -S(=O)₂NH₂의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"포스포네이트" 기는 식: -P(=O)(O(R^#))₂, -P(=O)(OH)₂, -OP(=O)(O(R^#))(R^#), 또는 -OP(=O)(OH)(R^#)의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

"포스핀" 기는 식: -P(R^#)₂의 라디칼이고, 여기서 각각의 R^#은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같다.

본 명세서에 기재된 기가, 알킬기는 예외로 하고, "치환된" 것이라 할 때, 임의의 적절한 치환체 또는 치환체들로 치환될 수 있다. 치환체의 예시는 하기이다: 본 명세서에서 개시된 예시적인 화합물 및 구현예에서 발견된 치환체들, 뿐만 아니라 할로겐 (클로로, 아이오도, 브로모, 또는 플루오로); 알킬; 하이드록실; 알콕시; 알콕시알킬; 아미노; 알킬아미노; 카복시; 니트로; 시아노; 티올; 티오에테르; 이민; 이미드; 아미딘; 구아니딘; 엔아민; 아미노카보닐; 아실아미노; 포스포네이트; 포스핀; 티오카보닐; 설피닐; 설폰; 설폰아미드; 케톤; 알데하이드; 에스테르; 우레아; 우레탄; 옥심; 하이드록실 아민; 알콕시아민; 아릴옥시아민, 아르알콕시아민; N-산화물; 하이드라진; 하이드라자이드; 하이드라존; 아자이드; 이소시아네이트; 이소티오시아네이트; 시아네이트; 티오시아네이트; 산소 (-O); B(OH)₂, O(알킬)아미노카보닐; 단환형 또는 융합된 또는 비-융합된 다환형일 수 있는 사이클로알킬 (예를 들어, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 또는 사이클로헥실), 또는 단환형 또는 융합된 또는 비-융합된 다환형일 수 있는 헤테로사이클릴 (예를 들어, 피롤리딜, 피페리딜, 피페라지닐, 모폴리닐, 또는 티아지닐); 단환형 또는 융합된 또는 비-융합된 다환형 아릴 또는 헤테로아릴 (예를 들어, 페닐, 나프틸, 피롤릴, 인돌릴, 푸라닐, 티오페닐, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 아크리디닐, 피라지닐, 피리다지닐, 피리미디닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조티오페닐, 또는 벤조푸라닐) 아릴옥시; 아르알킬옥시; 헤테로사이클릴옥시; 및 헤테로사이클릴 알콕시.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "아미노퓨린 화합물"은 식 (I)의 화합물 뿐만 아니라 추가로 본 명세서에서 제공된 구현예를 지칭한다. 일 구현예에서, "아미노퓨린 화합물"은 표 1에서 제시된 화합물이다. 일 구현예에서, "아미노퓨린 화합물"은 화합물 1의 식을 갖는 화합물이다. 용어 "아미노퓨린 화합물"은 본 명세서에서 제공된 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 동위이성질체, 및 입체이성질체이다.

"화합물 1"은 명칭: 시스-4-[2-{[(3S,4R)-3-플루오로옥산-4-일]아미노}-8-(2,4,6-트리클로로아닐리노)-9H-퓨린-9-일]-1-메틸사이클로헥산-1-카복사미드 및 having 대체 명칭 of; (1s,4s)-4-(2-(((3S,4R)-3-플루오로테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-8-((2,4,6-트리클로로페닐)아미노)-9H-퓨린-9-일)-1-메틸사이클로헥산카복사미드를 가지며; 그리고 아래에서 제공된 화합물 (그의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 동위이성질체, 및 입체이성질체 포함)을 지칭한다:

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용가능한 염(들)"은 무기 산 및 염기 및 유기 산 및 염기를 포함하는 약제학적으로 허용가능한 무독성 산 또는 염기로부터 제조된 염을 지칭한다. 식 (I)의 화합물의 적합한 약제학적으로 허용가능한 염기 부가 염은, 비제한적으로 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 칼륨, 나트륨 및 아연으로부터 제조된 금속 염 또는 라이신, N,N'-디벤질에틸렌디아민, 클로로프로카인, 콜린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 메글루민 (N-메틸-글루카민) 및 프로카인으로부터 제조된 유기 염을 포함한다. 적합한 무독성 산은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 무기 및 유기 산 예컨대 아세트산, 알긴산, 안트라닐산, 벤젠설폰산, 벤조산, 캄포르설폰산, 시트르산, 에텐설폰산, 포름산, 푸마르산, 푸로산, 갈락투론산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루탐산, 글라이콜산, 브롬화수소산, 염산, 이세티온산, 락트산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄설폰산, 뮤신산, 질산, 파모산, 판토텐산, 페닐아세트산, 인산, 프로피온산, 살리실산, 스테아르산, 석신산, 설파닐산, 황산, 타르타르산, 및 p-톨루엔설폰산. 특정 무독성 산은 염산, 브롬화수소산, 말레산, 인산, 황산, 및 메탄설폰산을 포함한다. 따라서 특정 염의 예는 하이드로클로라이드 및 메실레이트 염을 포함한다. 기타는 당해 분야에서 공지되어 있다: 참고 예를 들어, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18^th eds., Mack Publishing, Easton PA (1990) or Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19^th eds., Mack Publishing, Easton PA (1995).

본 명세서에서 사용된 바와 같이 그리고 달리 나타내지 않는 한, 용어 "입체이성질체" 또는 "입체이성질체적으로 순수한"이란, 화합물의 다른 입체이성질체가 실질적으로 없는 아미노퓨린 화합물의 하나의 입체이성질체를 의미한다. 예를 들어, 하나의 키랄 중심을 갖는 입체이성질체적으로 순수한 화합물은 화합물의 반대편 거울상이성질체가 실질적으로 없을 것이다. 2개의 키랄 중심을 갖는 입체이성질체적으로 순수한 화합물은 화합물의 다른 부분입체이성질체가 실질적으로 없을 것이다. 전형적인 입체이성질체적으로 순수한 화합물은 약 80중량 % 초과의 화합물의 하나의 입체이성질체 및 약 20중량 % 미만의 화합물의 다른 입체이성질체, 약 90중량 % 초과의 화합물의 하나의 입체이성질체 및 약 10중량 % 미만의 화합물의 다른 입체이성질체, 약 95중량 % 초과의 화합물의 하나의 입체이성질체 및 약 5중량 % 미만의 화합물의 다른 입체이성질체, 또는 약 97중량 % 초과의 화합물의 하나의 입체이성질체 및 약 3중량 % 미만의 화합물의 다른 입체이성질체를 포함한다. 아미노퓨린 화합물은 키랄 중심을 가질 수 있고, 라세미체, 개별 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체, 및 이들의 혼합물로서 생길 수 있다. 모든 그와 같은 이성질체 형태는 이들의 혼합물을 포함하여 본 명세서에 개시된 구현예 내에 포함된다.

입체이성질체적으로 순수한 형태의 그와 같은 아미노퓨린 화합물의 사용, 뿐만 아니라 상기 형태의 혼합물의 사용은, 본 명세서에서 개시된 구현예에 의해 포괄된다. 예를 들어, 특정 아미노퓨린 화합물의 동등 또는 비동등량의 거울상이성질체를 포함하는 혼합물은 본 명세서에서 개시된 방법 및 조성물에서 사용될 수 있다. 이들 이성질체는 비대칭으로 합성될 수 있거나 표준 기술 예컨대 키랄 칼럼 또는 키랄 분할제을 사용하여 분해될 수 있다. 참고, 예를 들어, Jacques, J., 등, Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley-Interscience, New York, 1981); Wilen, S. H., 등, Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E. L., Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); 및 Wilen, S. H., Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972).

아미노퓨린 화합물이 E 및 Z 이성질체, 또는 이들의 혼합물, 및 시스 및 트랜스 이성질체 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있는 것에 또한 주목해야 한다. 특정 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 E 또는 Z 이성질체로서 단리된다. 다른 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 E 및 Z 이성질체의 혼합물이다.

"호변이성질체"는 서로 평형 상태에 있는 화합물의 이성질체 형태를 지칭한다. 이성질체 형태의 농도는 화합물이 발견되는 환경에 의존할 수 있으며, 예를 들어, 화합물이 고체인지 또는 유기 또는 수용액인지 여부에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 수용액에서, 피라졸은 서로의 호변이성질체로 지칭되는 하기의 이성질체 형태를 나타낼 수 있다:

당해 분야의 숙련가에 의해 쉽게 이해되는 바와 같이, 다양한 작용기 및 다른 구조는 호변이성질체현상을 나타낼 수 있고 식 (I)의 화합물의 모든 호변이성질체는 본 발명의 범위 내이다.

또한 아미노퓨린 화합물은 원자 중 하나 이상에 비천연 비의 원자 동위원소를 함유할 수 있음에 유의해야 한다. 예를 들어, 화합물은 방사성 동위원소, 예를 들어 삼중수소 (³H), 요오드-125 (¹²⁵I), 황-35 (³⁵S), 또는 탄소-14 (¹⁴C)로 방사선표지될 수 있거나, 또는 예컨대 중수소 (²H), 탄소-13 (¹³C), 또는 질소-15 (¹⁵N)로 동위원소로 풍부해질 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, "동위이성질체"는 동위원소로 풍부한 화합물이다. 용어 "동위원소로 풍부한"은 그 원자의 천연 동위원소 조성 이외의 동위원소 조성을 갖는 원자를 지칭한다. "동위원소로 풍부한"은 또한 그 원자의 천연 동위원소 조성 이외의 동위원소 조성을 갖는 적어도 하나의 원자를 함유하는 화합물을 지칭할 수 있다. 용어 "동위원소 조성"은 주어진 원자에 존재하는 각각의 동위원소의 양을 지칭한다. 방사성표지 및 동위원소로 풍부한 화합물은 치료제, 예를 들어, 암 및 염증 치료제, 연구 시약, 예를 들어, 결합 검정 시약, 및 진단제, 예를 들어, 생체내 조영제로서 유용하다. 방사성이든 또는 아니든 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 모든 동위원소 변형은 본 명세서에서 제공된 구현예의 범위 내에 포괄되는 것으로 의도된다. 일부 구현예에서, 아미노퓨린 화합물의 동위이성질체가 제공되고, 예를 들어, 동위이성질체는 중수소, 탄소-13, 또는 질소-15 풍부한 아미노퓨린 화합물이다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이 "치료하는"은 전체적으로 또는 부분적으로, 장애, 질환 또는 병태, 또는 장애, 질환, 또는 병태와 관련된 증상 중 하나 이상의 경감, 또는 이들 증상의 추가의 진행 또는 악화를 늦추거나 중단하는 것, 또는 장애, 질환, 또는 증상 자체의 원인(들)을 경감하거나 또는 퇴치하는 것을 의미한다. 일 구현예에서, 장애는 암, 특히, 고형 종양 또는 혈액 암이다. 일부 구현예에서, "치료하는"은 전체적으로 또는 부분적으로, 암, 또는 암, 특히, 고형 종양 또는 혈액 암과 관련된 증상의 경감, 또는 이들 증상의 추가의 진행 또는 악화를 늦추거나 중단하는 것을 의미한다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이 "예방하는"은 전체적으로 또는 부분적으로, 암, 특히, 고형 종양 또는 혈액 암의 개시, 재발 또는 전이를 지연 및/또는 배제하거나; 대상체가 암, 특히, 고형 종양 또는 혈액 암을 획득하는 것을 금지하거나; 또는 암, 특히, 고형 종양 또는 혈액 암을 획득하는 대상체의 위험을 감소하는 방법을 의미한다.

아미노퓨린 화합물과 연관하여 용어 "유효량"은 본 명세서에서 개시된 바와 같이 암, 특히 고형 종양 또는 혈액 암 또는 이들의 증상을 치료 또는 예방할 수 있는 양을 의미한다. 예를 들어, 약제학적 조성물에서 아미노퓨린 화합물의 유효량은 원하는 효과를 발휘할 수 있는 수준; 예를 들어, 비경구 투여를 위한 단위 투약량으로 환자의 체중 1kg 당 약 0.005mg 내지 환자의 체중 1kg 당 약 100mg일 수 있다. 당해 분야의 숙련가에게 분명한 바와 같이, 본 명세서에 개시된 아미노퓨린 화합물의 유효량은 치료되는 징후의 중증도에 따라 변할 수 있는 것으로 예상된다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이 용어들 "환자" 및 "대상체"는 비제한적으로, 소, 원숭이, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 랫트, 토끼 또는 기니아 피그 같은 동물을 포함한 동물, 일 구현예에서 포유동물, 또 다른 구현예에서 인간을 포함한다. 일 구현예에서, 대상체는 암, 특히, 고형 종양 또는 혈액 암이 있거나 또는 걸릴 위험이 있거나 또는 이들의 증상이 있는 인간이다. 일 구현예에서, 환자는 표준 항암 요법에 대해 진행되거나 (또는 견딜 수 없었던) 또는 표준 항암 요법이 존재하지 않는 대상체를 포함하여, 조직학적으로 또는 세포학적으로-확인된 고형 종양 또는 혈액 암을 갖는 인간이다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 그리고 달리 구체화되지 않는 한, 용어들 "암"은 조절되지 않은 세포 성장을 전형적으로 특징으로 하는 포유동물에서 생리적 병태를 지칭하거나 기재한다. 암의 예는 고형 종양 및 혈액 암을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 암은 원발성 암이고, 다른 것들에서, 상기 암은 전이된다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이 "고형 종양"은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 방광암 (비제한적으로, 표층 방광암 포함), 유방암 (비제한적으로, 내강 B 유형, ER+, PR+ 및 Her2+ 유방암 포함), 중추신경계 암 (비제한적으로, 다형상 교모세포종 (GBM), 신경아교종, 수모세포종, 및 별아교세포종 포함), 결장직장암, 위장 암 (비제한적으로, 위암, 식도암, 및 직장암 포함), 내분비 암 (비제한적으로, 갑상선암, 및 부신 암 포함), 안암 (비제한적으로, 망막모세포종 포함), 여성 비뇨생식 암 (비제한적으로, 태반, 자궁, 외음부, 난소, 자궁경부의 암 포함), 두경부 암 (비제한적으로, 인두, 식도, 및 혀의 암 포함), 간암, 폐암 (비제한적으로, 비-소세포 폐암 (NSCLC), 소세포 폐암 (SCLC), 점액표피양, 기관지성, 편평상피 세포 암종 (SQCC), 및 역형성/NSCLC 포함), 피부암 (비제한적으로, 흑색종, 및 SQCC 포함), 연조직 암 (비제한적으로, 육종, 유잉 육종, 및 횡문근육종 포함), 골암 (비제한적으로, 육종, 유잉 육종, 및 골육종 포함), 편평상피 세포 암 (비제한적으로, 폐, 식도, 자궁경부, 및 두경부 암 포함), 췌장 암, 신장암 (비제한적으로, 신장 윌름스 종양 및 신장 세포 암종 포함), 및 전립선암. 일 구현예에서, 고형 종양은 삼중 음성 유방암 (TNBC)이 아니자. 일부 구현예에서, 고형 종양은 유방암, 결장암, 폐암 또는 방광암이다. 하나의 그와 같은 구현예에서, 고형 종양은 표층 방광암이다. 또 다른 것에서, 고형 종양은 폐 편평상피 세포 암종이다. 또 다른 구현예에서, 고형 종양은 내강 B 유형 유방암이다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이 "혈액 암"은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 백혈병 (비제한적으로, 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 골수 백혈병 (CML), 급성 T-세포 백혈병, B 세포 전구체 백혈병, 급성 전골수구성 백혈병 (APML), 형질 세포 백혈병, 골수단핵구성/T-ALL, B 골수단핵구성 백혈병, 적백혈병, 및 급성 골수 백혈병 (AML)), 림프종 (비제한적으로 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종 (NHL), 버킷 림프종 (BL), B 세포 림프종, 림프아구성 림프종, 여포성 림프종 (FL), 미만성 큰 B-세포 림프종 (DLBCL), 대세포 면역아세포성 림프종 포함), 및 다발성 골수종.

암의 문맥에서, 억제는 그 중에서도 질환 진행의 억제, 종양 성장의 억제, 원발성 종양의 감소, 종양-관련된 증상의 완화, 종양 분비 인자 (종양 분비 호르몬, 예컨대 카르시노이드 증후군에 기여하는 것들을 포함함)의 억제, 1차 또는 2차 종양의 지연된 발현, 1차 또는 2차 종양의 느려진 전개, 1차 또는 2차 종양의 감소된 발생, 질환의 2차 영향의 느려진 또는 감소된 중증도, 억제된 종양 성장 및 종양의 퇴행, 증가된 진행 시간 (TTP), 증가된 무진행 생존 (PFS), 증가된 전반적인 생존 (OS)에 의해 평가될 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이 OS는 치료 개시로부터 임의의 원인으로 사망할 때까지의 시간을 의미한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이 TTP는 치료 개시로부터 종양 진행까지의 시간을 의미한다; TTP는 사망을 포함하지 않는다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, PFS는 치료 개시로부터 종양 진행 또는 사망까지의 시간을 의미한다. 일 구현예에서, PFS 비는 카플란-마이어 추정을 사용하여 계산될 것이다. 극단적인 경우, 완전한 억제는, 본 명세서에서 예방 또는 화학예방으로 지칭된다. 이 문맥에서, 용어 "예방"은 임상적으로 명백한 암의 개시를 전적으로 예방하거나 전임상적으로 암의 명백한 단계의 개시를 예방하는 것을 포함한다. 또한 악성 세포로의 전환의 예방 또는 악성 세포로의 전암성 세포의 진행을 정지 또는 퇴행시키는 것도 이 정의에 포괄되도록 의도된다. 이것은 암이 전개될 위험에 있는 이들의 예방적 치료를 포함한다.

특정 구현예에서, 림프종의 치료는, 아래에 표시된 반응 및 종점 정의를 사용하여, 비-호지킨 림프종 (NHL)에 대한 국제 워크숍 기준 (IWC)에 의해 평가될 수 있다 (Cheson BD, Pfistner B, Juweid, ME, et. al. Revised Response Criteria for Malignant Lymphoma. J. Clin. Oncol: 2007: (25) 579-586 참고):

일 구현예에서, 림프종에 대한 종점은 임상 이득의 증거이다. 임상 이득은 삶의 질의 개선, 또는 환자 증상, 수혈 요건, 빈번한 감염 또는 기타 파라미터에서 감소를 반영할 수 있다. 림프종-관련 증상의 재발 또는 진행까지 시간이 또한 이 종점에 사용될 수 있다.

특정 구현예에서, 림프종의 치료는, 아래에 표시된 반응 및 종점 정의를 사용하여, 비-호지킨 림프종 (NHL)에 대한 국제 워크숍 기준 (IWC)에 의해 평가될 수 있다 (Cheson BD, Pfistner B, Juweid, ME, et. al. Revised Response Criteria for Malignant Lymphoma. J. Clin. Oncol: 2007: (25) 579-586 참고):

일 구현예에서, 림프종에 대한 종점은 임상 이득의 증거이다. 임상 이득은 삶의 질의 개선, 또는 환자 증상, 수혈 요건, 빈번한 감염 또는 기타 파라미터에서 감소를 반영할 수 있다. 림프종-관련 증상의 재발 또는 진행까지 시간이 또한 이 종점에 사용될 수 있다.

특정 구현예에서, CLL의 치료는, 그 안에 그리고 특히 표시된 반응 및 종점 정의를 사용하여 CLL에 대한 국제 워크숍 기준에 의해 평가될 수 있다 (Hallek M, Cheson BD, Catovsky D, 등 Guidelines for the diagnosis and treatment of chronic lymphocytic leukemia: a report from the International Workshop on Chronic Lymphocytic Leukemia updating the National Cancer Institute-Working Group 1996 guidelines. Blood, 2008; (111) 12: 5446-5456 참조):

특정 구현예에서, 다발성 골수종의 치료는, 아래에 표시된 반응 및 종점 정의를 사용하여 다발성 골수종 (IURC)에 대한 국제적 균일한 반응 기준에 의해 평가될 수 있다 (Durie BGM, Harousseau J-L, Miguel JS, 등 International uniform response criteria for multiple myeloma. Leukemia, 2006; (10) 10: 1-7 참조):

특정 구현예에서, 암의 치료는 고형 종양에서 반응 평가 기준 (RECIST 1.1)에 의해 평가될 수 있다 (Thereasse P., 등 New Guidelines to Evaluate the Response to Treatment in Solid Tumors. J. of the National Cancer Institute; 2000; (92) 205-216 및 Eisenhauer E.A., Therasse P., Bogaerts J., 등 New response evaluation criteria in solid tumours: Revised RECIST guideline (version 1.1). European J. Cancer; 2009; (45) 228-247 참조). 신규한 병변의 발현이 있거나 없는 표적 및 비-표적 병변에서 종양 반응의 모든 가능한 조합에 대한 전반적인 반응은 아래와 같다:

표적 병변의 평가에 관하여, 완전한 반응 (CR)은 모든 표적 병변의 소멸이고, 부분적인 반응 (PR)은 기준선을 가장 긴 직경을 합한 것을 기준으로 취할 때 표적 병변의 가장 긴 직경의 합에서 적어도 30% 감소이고, 진행성 질환 (PD)은 최소를 치료가 개시된 이래로 기록된 가장 긴 직경을 합한 것을 기준으로 취할 때 표적 병변의 가장 긴 직경의 합에서 적어도 20% 증가 또는 하나 이상의 신규한 병변의 발현이고 안정적인 질환 (SD)은 최소를 치료가 개시된 이래로 가장 긴 직경을 합한 것을 기준으로 취할 때, 부분적인 반응의 자격을 얻기에 충분한 수축도 아니고 진행성 질환의 자격을 얻기에 충분한 증가도 아니다.

비-표적 병변의 평가에 관하여, 완전한 반응 (CR)은 모든 비-표적 병변의 소멸 및 종양 마커 수준의 정상화이다; 불완전한 반응/안정적인 질환 (SD)은 하나 이상의 비-표적 병변(들)의 지속 및/또는 정상 한계 이상으로 종양 마커 수준의 유지이고, 그리고 진행성 질환 (PD)은 하나 이상의 신규한 병변의 발현 및/또는 현존하는 비-표적 병변의 명백한 진행이다.

아래에 기재된 절차, 규약, 및 정의는 고-등급 신경아교종에 대한 반응 기준에 관해 신경-종양학 (RANO) 작업군에 대한 반응 평가로부터의 권고를 수행하기 위한 안내를 제공한다 (Wen P., Macdonald, DR., Reardon, DA., 등 Updated response assessment criteria for high-grade gliomas: Response assessment in neuro-oncology working group. J Clin Oncol 2010; 28: 1963-1972). 시점 반응 (TPR) 기준을 위한 RANO 기준에 대한 1차 변형은 글루코코르티코이드 용량에서의 변화를 정의하기 위한 조작 규약의 추가 및 객관적인 방사선학적 평가에 초점을 맞추기 위한 대상체의 임상 악화 요소의 제거를 포함할 수 있다. 기준선 MRI 스캔은 화합물 치료를 시작하거나 또는 재-시작하기 전에 수술 후 휴지기가 끝날 때 수행된 평가로 정의된다. 기준선 MRI는 완전한 반응 (CR) 및 부분적인 반응 (PR)을 평가하는 기준으로 사용된다. 반면에, 기준선에서 또는 후속적인 평가에서 수득된 최소 SPD (수직 직경의 곱의 합)는 최저점 평가로 지정될 것이고 진행을 결정하기 위한 기준으로 이용될 것이다. 임의의 프로토콜-정의된 MRI 스캔에 앞서 5일 동안, 대상체는 글루코코르티코이드를 투여받지 않거나 글루코코르티코이드의 안정적인 용량을 유지한다. 안정적인 용량은 MRI 스캔에 앞서 5 연속일 동안 동일한 1일 용량으로 정의된다. 만일 처방된 글루코코르티코이드 용량이 기준선 스캔 5일 전에 변화된다면, 상기에 기재된 기준을 충족하는 글루코코르티코이드 사용으로 신규한 기준선 스캔이 요구된다. 하기 정의가 사용될 것이다.

측정가능한 병변: 측정가능한 병변은 2-차원적으로 측정될 수 있는 대조-강화 병변이다. 측정은 최대의 향상한 종양 직경 (가장 긴 직경, LD로도 공지됨)으로 이루어 진다. 최대 수직 직경은 동일한 이미지 상에서 측정된다. 2-차원 측정의 십자선은 교차해야 하며 이들 직경의 곱이 계산될 것이다.

최소 직경: 섹션이 1mm 건너 뛰기로 5mm인 T1-계량된 이미지. 측정가능한 병변의 최소 LD는 5mm x 5mm로 설정된다. 표적 병변으로 함입 및/또는 지정을 위해 더 큰 직경이 요구될 수 있다. 기준선 후, 측정을 위한 최소 요건보다 더 작아지거나 더 이상 2-차원 측정에 적합하지 않게 되는 표적 병변은 5mm 미만의 각각의 직경에 대해 5mm의 디폴트 값으로 기록될 것이다. 사라지는 병변은 0mm x 0mm로 기록될 것이다.

다중심 병변: 다중심 (연속성과는 대조적임)으로 간주되는 병변은 2개 (또는 그 초과)의 병변 사이에 정상 개입 뇌 조직이 있는 병변이다. 별개의 증진의 초점인 다중심 병변의 경우, 접근법은 함입 기준을 충족하는 각각의 향상한 병변을 별도로 측정하는 것이다. 2개 (또는 그 초과)의 병변 사이에 정상 뇌 조직이 없다면, 이들은 동일한 병변으로 간주될 것이다.

측정불가능한 병변: 상기에서 정의된 바와 같은 측정가능한 질환에 대한 기준을 충족시키지 않는 모든 병변은 측정가능하지 않은 병변뿐만 아니라 모든 향상하지 않고 다른 진정으로 측정불가능한 병변으로 간주될 것이다. 측정불가능한 병변은 지정된 최소 직경보다 적은 (즉, 5mm x 5mm보다 적은) 향상, 향상하지 않은 병변 (예를 들어, T1-계량된 후-대비, T2-계량된, 또는 유체-감쇠 역전 회복(FLAIR) 이미지 상에서 관찰된 바와 같음), 출혈성 또는 현저한 낭포성 또는 괴저성 병변, 및 연수막성 종양의 병소를 포함한다. 출혈성 병변은 종종 향상하는 종양으로 오인될 수 있는 고유 T1-계량된 고강도를 가지고, 이러한 이유로, 사전-대비 T1-계량된 이미지가 검사되어 기준선 또는 간격 아-급성 출혈을 배제할 수 있다.

기준선에서, 병변은 아래와 같이 분류될 것이다: 표적 병변: 대상체의 질환을 대표하는, 적어도 10mm × 5mm로 각각 측정되는 최대 5개의 측정가능한 병변이 표적 병변으로 선택될 수 있다; 비-표적 병변: 모든 측정불가능한 병변 (질량 영향 및 T2/FLAIR 발견을 포함함) 및 표적 병변으로 선택되지 않은 임의의 측정가능한 병변을 포함하는 모든 다른 병변. 기준선에서, 표적 병변은 측정가능한 병변에 대한 정의에서 기재된 바와 같이 측정되어야 하고 모든 표적 병변의 SPD가 결정되어야 한다. 모든 다른 병변의 존재는 문서로 기록되어야 한다. 모든 치료 후 평가에서, 표적 및 비-표적 병변으로서 병변의 기준선 분류는 유지될 것이며, 병변은 문서로 기록되어 경시적으로 일관된 방식으로 기재될 것이다 (예를 들어, 원 문서 및 eCRFs에 동일한 순서로 기록됨). 모든 측정가능한 및 측정불가능한 병변은 변경사항을 해석하는데 있어 어려움을 줄이기 위해 연구의 지속기간 동안 기준선에서와 동일한 기술 (예를 들어, 대상체는 동일한 MRI 스캐너 상에 또는 적어도 동일한 자석 강도로 이미지화 되어야 함)을 사용하여 평가되어야 한다. 각각의 평가에서, 표적 병변이 측정될 것이고 SPD가 계산된다. 비-표적 병변은 정성적으로 평가될 것이며, 신규한 병변이 있다면, 별도로 문서로 기록될 것이다. 각각의 평가에서, 표적 병변, 비-표적 병변, 및 신규한 병변에 대한 시점 반응이 결정될 것이다. 종양 진행은 병변의 하위집단만 평가하더라도 확립될 수 있다. 그러나, 진행이 관측되지 않는 한, 객관적인 상태 (안정적인 질환, PR 또는 CR)는 모든 병변이 평가될 때에만 결정될 수 있다.

CR 및 PR의 전반적인 시점 반응에 대한 확인 평가는 다음 계획된 평가에서 수행될 것이지만, 스캔이 < 28일의 간격일 경우 확인이 수행되지 않을 수 있다. 확인 요건을 포함하는 최상의 반응은 일련의 시점에서 유래될 것이다.

아미노퓨린 화합물

하기 식 (I)을 갖는 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 입체이성질체, 거울상이성질체, 및 동위이성질체가 본 명세서에서 제공된다:

식 중:

R¹은 치환된 또는 비치환된 C_1-8 알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 비-방향족 헤테로사이클릴이고;

R²은 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고; 그리고

R³은 하나 이상의 할로겐으로 치환되고, 선택적으로, 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, CN, 및 -OR' 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 추가로 치환된 페닐이고, 여기서 각각의 R'은 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다.

일부 구현예에서, 본 화합물은 하기가 아니다: 4-[2-[(1-메틸에틸)아미노]-8-[(2,4,6-트리플루오로페닐)아미노]-9H-퓨린-9-일]-시스-사이클로헥산카복사미드

또는 4-[8-[(2,4-디플루오로페닐)아미노]-2-[(트랜스-4-하이드록시사이클로헥실)아미노]-9H-퓨린-9-일]-시스-사이클로헥산카복사미드

일 구현예에서, 본 화합물은 식 (II)의 화합물이다:

일부 구현예 또는 식 (I)의 화합물에서, R¹은 치환된 또는 비치환된 C_1-8 알킬이다. 일부 구현예에서, R¹은 치환된 또는 비치환된 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, sec-부틸, 이소부틸, tert-부틸, n-펜틸, 2-메틸펜틸, 3-메틸펜틸, 이소펜틸, 또는 네오펜틸이다. 일부 구현예에서, R¹은 할로겐 및 OR로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 치환되고, 여기서 각각의 R은 독립적으로 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다. 예를 들어, R¹은 F, OH, 및 OCH₃ 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 치환된다. 일부 구현예에서, R¹은 에틸, 이소프로필, 이소부틸, tert-부틸, CH₂CH₂F_, CH₂CHF₂, CH₂CF₃, CH₂CH(CH₃)OH, CH₂CH(CH₃)OCH₃, CH(CH₃)CH₂OH, CH(CH₃)CH₂OCH₃, CH₂C(F₂)CH₂OH, CH₂C(F₂)CH₂OCH₃, CH(CF₃)CH₂OH, CH(CF₃)CH₂OCH₃, CH(CH₂OH)CH₂CH₃, CH(CH₂OCH₃)CH₂CH₃, CH₂C(CH₃)₂CH₂OH, 또는 CH₂C(CH₃)₂CH₂OCH₃이다. 예를 들어, R¹은 이소프로필, 이소부틸, tert-부틸, CH₂CF₃, CH₂CH(CH₃)OH, CH(CH₃)CH₂OH, CH(CH₃)CH₂OCH₃, CH₂C(F₂)CH₂OH, CH(CF₃)CH₂OH, CH(CH₂OH)CH₂CH₃, 또는 CH₂C(CH₃)₂CH₂OH이다.

일 구현예에서, R¹은 이소프로필, CH(CH₃)CH₂OH, 또는 CH(CH₂OH)CH₂CH₃이다. 일부 구현예에서, R¹은 (S)-2-프로판-1-올이다:

일부 구현예에서, R¹은 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬이다. 일부 구현예에서, R¹은 치환된 또는 비치환된 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 또는 사이클로헵틸이다. 일부 구현예에서, R¹은 할로겐, 또는, SO₂R', 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 및 치환된 또는 비치환된 헤테로사이클릴 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 치환되고, 여기서 각각의 R은 독립적으로 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고, 그리고 각각의 R’은 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다. 일부 구현예에서, R¹은 F, OH, OCH₃, SO₂CH₃, 메틸, 및 치환된 또는 비치환된 5-원 헤테로사이클릴, 예를 들어, 피롤리딘디오닐, 또는 옥사디아졸릴 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 치환된다. 일부 다른 구현예에서, R¹은 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 또는 사이클로헵틸이고, 이는 F, OH, OCH₃, SO₂CH₃, 메틸, 피롤리딘디오닐, 및 옥사디아졸릴로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로부터 선택적으로 치환된다. 일부 구현예에서, R¹는

식 중,

각각의 R^1a은 독립적으로 F, OH, OCH₃, SO₂CH₃, 또는 메틸이고;

R^1b은 H 또는 CH₃이고;

그리고 a는 0 내지 4이다.

일부 구현예에서, R¹은 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬알킬이다. 일부 구현예에서, R¹은 치환된 또는 비치환된 (C_1-3 알킬)-(C_1-8 사이클로알킬)이고, 예를 들어, R¹은 치환된 또는 비치환된 CH₂-사이클로프로필, CH₂-사이클로부틸, CH₂-사이클로펜틸, CH₂-사이클로헥실, 또는 CH₂-사이클로헵틸이다. 일부 구현예에서, R¹은 (C_1-3 알킬)OR 또는 OR 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 치환되고, 여기서 각각의 R은 독립적으로 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다. 예를 들어, R¹은 CH₂-사이클로프로필, CH₂-사이클로부틸, CH₂-사이클로펜틸, 또는 CH₂-사이클로헥실이고, 이는 하나 이상의 CH₂OH 또는 OH로 선택적으로 치환된다.

일부 구현예에서, R¹은 치환된 또는 비치환된 비-방향족 헤테로사이클릴이다. 일부 구현예에서, R¹은 치환된 또는 비치환된 옥세타닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로-티오피란디옥사이드, 피페리딜, 옥세파닐, 또는 옥사스피로헵틸이다. 일부 구현예에서, R¹은 할로겐, 또는, SO₂R⁴, C(=O)R⁵, C(=O)OR⁶, C(=O)NRR⁷, 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 치환된 또는 비치환된 아릴, 치환된 또는 비치환된 헤테로아릴, 치환된 또는 비치환된 알킬아릴로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 치환되고, 여기서 각각의 R은 독립적으로 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고; R⁴은 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 아릴; R⁵은 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고; R⁶은 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬이고; 그리고 R⁷은 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 아릴이다. 예를 들어, R¹은 옥세타닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로-티오피란디옥사이드, 피페리딜, 옥세파닐, 또는 옥사스피로헵틸이되, 이는 F, OH, SO₂CH₃, SO₂-토실, C(=O)CH₃, C(=O)OCH₃, C(=O)O-tert-부틸, C(=O)O-이소프로필, C(=O)NHCH₃, C(=O)NH-페닐, 메틸, 에틸, 이소프로필, CH₂OH, 페닐, 피리딜, 또는 벤질 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로부터 선택적으로 치환된다. 일 구현예에서, R¹은 하기이다:

또는

여기서 각각의 R^1c은 독립적으로 F, OH, 메틸, 또는 CH₂OH이고;

그리고 c는 0 내지 3이다.

일부 그와 같은 구현예에서, R^1c은 F 또는 메틸이고, 그리고 c는 1 또는 2이다.

식 (I)의 화합물의 일부 구현예에서, R²는 H이다. 다른 것들에서, R²은 CH₃이다.

식 (I)의 화합물의 일부 구현예에서, R³은 오르토-할로겐 치환된 페닐이다. 일 구현예에서 R³은 o-플루오로 또는 o-클로로 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, 페닐은 추가로 파라 치환되고, 예를 들어, 페닐은 p-클로로, p-브로모, p-플루오로, p-CN, p-메틸, p-CF₃, 또는 p-OCH₃ 로 추가로 치환된다. 다른 구현예에서, R³은 파라-할로겐 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, R³은 p-플루오로 또는 p-클로로 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, 페닐은 추가로 오르토 치환되고, 예를 들어, 페닐은 o-클로로, o-플루오로, 또는 o-메틸 로 추가로 치환된다. 다른 구현예에서, R³은 파라-CN 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, 페닐은 추가로 오르토 치환되고, 예를 들어, 페닐은 o-클로로, 또는 o-플루오로 로 추가로 치환된다. 또 다른 구현예에서, R³은 오르토, 오르토-디할로겐 치환된 페닐이다. 일 구현예에서 R³은 o,o-디플루오로 또는 o,o-디클로로 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, 페닐은 추가로 파라 치환되고, 예를 들어, 페닐은 p-클로로, p-브로모, p-플루오로, p-CN, p-메틸, p-CF₃, 또는 p-OCH₃ 로 추가로 치환된다. 또 다른 구현예에서, R³은 오르토, 파라-디할로겐 치환된 페닐이다. 일 구현예에서 R³은 o,p-디플루오로 치환된 페닐 또는 o,p-디클로로 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, 페닐은 추가로 오르토 치환되고, 예를 들어, 페닐은 o-클로로, o-플루오로, 또는 o-메틸 로 추가로 치환된다. 또 다른 구현예에서, R³은 2,4,6-트리할로젼 치환된 페닐이다. 일 구현예에서 R³은 2,4,6-트리플루오로 치환된 페닐, 4-클로로-2,6-디플루오로 치환된 페닐, 또는 2,4,6-트리클로로 치환된 페닐이다. 또 다른 구현예에서, R³은 오르토-할로겐, 파라-CN 치환된 페닐이다. 일 구현예에서 R³은 o-플루오로-p-CN 치환된 페닐, 또는 o-클로로-파라-CN 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, 페닐은 추가로 오르토 치환되고, 예를 들어, 페닐은 o-클로로, 또는 o-플루오로 로 추가로 치환된다.

본 명세서에서 제공된 추가 구현예는 상기에 제시된 특정 구현예 중 하나 이상의 조합을 포함한다.

아미노퓨린 화합물을 제조하는 방법

아미노퓨린 화합물은 종래의 유기 합성 및 상업적으로 입수가능한 개시 물질을 사용하여 제조될 수 있다. 예로써 및 비제한적으로, 식 (I)의 아미노퓨린 화합물은 아래에 기재된 바와 같이, 또는 아래의 반응식 1에서, 뿐만 아니라 본 명세서에서 제시된 실시예에서 설명된 바와 같이 제조될 수 있다: 미국 특허 번호 7,723,340, 미국 특허 번호 8,158,635, 및 U.S. 특허 출원 번호 14/874,513. 당해 분야의 숙련가가 원하는 생성물에 도달하기 위해 설명적인 반응식 및 실시예에서 제시된 절차를 어떻게 변형하는지 알고 있음에 유의해야 한다.

반응식 1

반응식 1에서 나타낸 바와 같이, 식 (I)의 화합물(여기서 R¹, R² 및 R³는 본 명세서에서 정의된 바와 같음)은, 적절하게 유도된 니트로피리미딘(여기서 Hal¹은 Cl이고, 그리고 Hal²은 Cl임)으로부터 개시하여 제조될 수 있다. 염기, 예컨대, 예를 들어, DIEA, TEA, 또는 피리딘의 존재에서, 용매, 예를 들어, DCM 또는 THF에서, 감소된 온도 (예를 들어, -78 ℃)에서 디할로겐화된 니트로피리미딘을 적절한 4-아미노사이클로헥산-1-카복사미드 유도체로 처리함으로써, 사이클로헥실아미드 측쇄가 편입되었다. 염기, 예컨대 DIEA, TEA, 또는 피리딘의 존재에서, 용매 예컨대 DCM, THF, 디옥산 또는 DMF에서, 고온 (예를 들어 25 - 80 ℃)에서 R¹NH₂로 상기 생성물을 처리하여, R¹ 측쇄가 편입되었다. 촉매 예컨대 Pd/C의 존재에서, 용매, 예컨대 MeOH 또는 에틸 아세테이트에서 예를 들어 수소를 사용하여 니트로 모이어티를 환원시켜, 아미노피리미딘 유도체를 제공했다. 아미노피리미딘 유도체는 용매, 예컨대 THF, DMF, NMP, 디옥산, 또는 EtOH에서 R³NCS로 처리되어, (선택적으로 단리된) 티오우레아 유도체를 얻었고, 이것은 용매, 예를 들어, THF, 디옥산, NMP 또는 DMF에서, 선택적으로 고온 (예를 들어, 40- 80 ℃)에서 예를 들어, EDC 또는 DIC를 사용하여 고리화되어, 식 (I)의 화합물을 제공했다.

반응식 2

대안적으로, 반응식 2에서 나타낸 바와 같이, 식 (I)의 화합물(여기서 R¹, R² 및 R³는 본 명세서에서 정의된 바와 같고, 및 R^#은 C_1-2 알킬임)은, 이전과 같이, 적절하게 유도된 니트로피리미딘(여기서 Hal¹은 Cl이고, 그리고 Hal²은 Cl임)으로부터 개시하여 제조될 수 있다. 염기, 예컨대 DIEA, TEA 또는 피리딘의 존재에서, 용매, 예컨대 DCM 또는 THF에서, 감소된 온도 (예를 들어, -78 ℃)에서 적절한 4-아미노사이클로헥산-1-카복실레이트 알킬 에스테르 유도체에 의한 디할로겐화된 니트로피리미딘의 처리로, 사이클로헥실알킬 에스테르 측쇄가 편입되었다. 염기, 예컨대 DIEA, TEA, 또는 피리딘의 존재에서, 용매 예컨대 DCM, THF, 디옥산 또는 DMF에서, 고온 (예를 들어 25- 80 ℃)에서 R¹NH₂에 의한 상기 생성물의 처리로, R¹ 측쇄가 편입되었다. 예를 들어 수소 촉매 예컨대 Pd/C의 존재에서, 용매, 예컨대 MeOH 또는 에틸 아세테이트에서 예를 들어 수소를 사용하여 니트로 모이어티를 환원시켜, 아미노피리미딘 유도체를 제공했다. 아미노피리미딘 유도체는, 용매, 예컨대 THF, DMF, NMP, 디옥산, 또는 EtOH에서 R³NCS로 처리되어, (선택적으로 단리된) 티오우레아 유도체를 얻었다, 이것은, 용매, 예를 들어, THF, NMP, 디옥산, 또는 DMF에서, 선택적으로 고온 (예를 들어, 40 ℃ 내지 80 ℃)에서 예를 들어, EDC 또는 DIC를 사용하여 고리화되어, 유도된 디아미노퓨린 유도체를 제공했다. 용매 (예컨대 수성 THF, MeOH, 또는 EtOH)에서, 선택적으로 고온 (예를 들어, 40 - 80 ℃)에서 염기 (예컨대 수산화리튬, 수산화나트륨, 또는 수산화칼륨)를 사용하여 알킬 에스테르를 비누화하고, 이어서 커플링제 (예컨대, 예를 들어, HATU, CDI, HBTU, EDC, 선택적으로 HOBt, 또는 에틸 클로로포르메이트와 함께) 및 염기 (예컨대 DIEA, TEA, 피리딘, DBU, 또는 NMM)의 존재에서, 용매, 예를 들어, DMF에서 NH₄Cl에 의한 처리를 통해 아미드가 형성되어, 식 (I)의 화합물을 제공했다.

반응식 3

제3 접근법에서, 식 (I)의 화합물(여기서 R¹, R² 및 R³는 본 명세서에서 정의된 바와 같이, 및 P은 고형 지지체, 예컨대 수지임)은, 이전과 같이, 적절하게 유도된 니트로피리미딘(여기서 Hal¹은 Cl이고, 그리고 Hal²은 Cl임)으로부터 개시하여 제조될 수 있다. 염기, 예컨대 DIEA, TEA 또는 피리딘의 존재에서, 용매, 예컨대 DCM 또는 THF에서, 감소된 온도 (예를 들어, -78 ℃)에서 적절한 4-아미노사이클로헥산-1-카복실레이트 유도체에 의한 디할로겐화된 니트로피리미딘의 처리로, 사이클로헥실알킬 카복실레이트 측쇄가 편입되었다. 염기, 예컨대 DIEA, TEA, 또는 피리딘의 존재에서, 용매 예컨대 DCM, THF, 디옥산 또는 DMF에서, 고온 (예를 들어 25 - 80 ℃)에서 R¹NH₂에 의한 상기 생성물의 처리로, R¹ 측쇄가 편입되었다. 이러한 중간체는 용매, 예를 들어 DMF에서, 고온, 예를 들어 50 ℃에서 커플링제 (예를 들어, HATU, CDI, HBTU, EDC를, 선택적으로 HOBt, 또는 에틸 클로로포르메이트)와 함께 사용하여 고형 지지체, 예컨대 폴리머 수지 (예를 들어, Rink-H 수지)에 커플링되었다. 용매 (예컨대 DMF/MeOH 혼합물)에서 환원제 (예컨대 크로뮴(II) 염화물)에 의한 수지-결합된 중간체의 처리로, 니트로 기가 환원되었다. 수득한 아민 모이어티는 용매, 예를 들어, EtOH에서, 고온, 예를 들어, 40 ℃ 내지 60 ℃에서 R³NCS와 반응되어, 티오우레아 유도체 중간체를 제공했다. 이러한 중간체는, 용매, 예를 들어, THF, NMP, 디옥산, 또는 DMF에서, 선택적으로 고온 (예를 들어, 40 ℃ 내지 80 ℃)에서 예를 들어, EDC 또는 DIC를 사용하여 고리화되어, to provide the 수지-결합된 디아미노퓨린 유도체를 제공했다. 마지막으로, 산 처리 (예를 들어, 용매 예컨대 DCM 중 TFA 에 의한 처리)로, 수지로부터 식 (I)의 화합물이 절단되었다.

사용 방법

아미노퓨린 화합물은 동물 또는 인간의 병태를 치료, 예방 또는 개선하기 위한 의약품으로서 유용성을 갖는다. 따라서, 본 명세서에서 제공된 바와 같은 모든 방법에서 사용될 수 있는 아미노퓨린 화합물 및 이의 약제학적 조성물이 본 명세서에서 제공된다. 특히, 본 명세서에서 제공된 바와 같은 아미노퓨린 화합물은 암의 치료 또는 예방에 사용된다. 본 명세서에서 제공된 본 방법은 유효량의 하나 이상의 아미노퓨린 화합물(들)의 유효량을 그것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에서 기재된 방법은 또한 약제학적 조성물, 예컨대 아래에 제공된 것들에 의한 치료를 포함하는 것으로 이해해야 하고, 상기 약제학적 조성물은 본 명세서에서 기재된 아미노퓨린 화합물 및 선택적으로 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함한다.

또 다른 측면에서, 암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 암은 고형 종양 또는 혈액 종양이다. 일부 구현예에서, 상기 암은 흑색종이 아니다.

일부 구현예에서, 고형 종양은 흑색종, 결장직장암, 위암, 두경부 암, 갑상선암, 방광암, CNS 암, 폐암, 췌장암, 및 연조직 암이다. 일 구현예에서, 고형 종양은 내분비 암, 방광암, 유방암, 자궁경부암, 결장암, 십이지장 암, 신경아교종, 헤드 및 목 암, 신장암, 간암, 폐암 (예를 들어 비-소세포 폐암 NSCLC), 식도암, 갑상선암, 또는 췌장암이다.

다른 구현예에서, 상기 암은 방광암, 유방암 (예를 들어 여성 양성, 여성 음성, 또는 EGFR 양성), CNS 암 (신경교세포종, 및 신경아교종 포함), 결장암, 위장 암 (예를 들어, 위암, 및 결장암), 내분비 암 (예를 들어, 갑상선암, 또는 부신 암), 여성 유전성 암 (예를 들어, 자궁경부암, 난소 투명 세포 암, 외음부 암, 자궁 암, 또는 난소 암), 두경부 암, 조혈 암 (예를 들어, 백혈병 또는 골수종), 신장암, 간암, 폐암 (예를 들어, NSCLC, 또는 SCLC), 흑색종, 췌장 암, 전립선암, 또는 연조직 암 (예를 들어, 육종, 또는 골육종)이다.

또 다른 구현예에서, 상기 암은 방광암, 유방암 (예를 들어 여성 양성, 여성 음성, 또는 EGFR 양성), CNS 암 (예를 들어, 신경아교종, 또는 신경교세포종), 결장암, 위장 암 (예를 들어, 위암), 내분비 암 (예를 들어, 갑상선암 또는 부신 암), 여성 유전성 암 (예를 들어, 자궁, 자궁경부, 난소 투명 세포, 또는 외음부의 암), 두경부 암, 조혈 암 (예를 들어, 백혈병 또는 골수종), 신장암, 간암, 폐암 (예를 들어, NSCLC, 또는 SCLC), 흑색종, 췌장 암, 전립선암, 또는 연조직 암 (예를 들어, 육종 또는 골육종)이다.

또 다른 구현예에서, 상기 암은 표 3에서 제시된 암이다.

간세포 암종 (HCC)을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다.

결장직장암 (CRC), 흑색종, 위암, HCC, 폐암, 췌장암, 백혈병, 또는 다발성 골수종을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, CRC, 위, 또는 HCC은 β-카테닌 돌연변이를 특징으로 하는 암이다. 결장직장암 (CRC), 위암, HCC, 폐암, 췌장암, 백혈병, 및 다발성 골수종을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다.

또 다른 구현예에서 백혈병을 치료하는 방법이 본 명세서에서 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 백혈병은 만성 골수성 백혈병 (CML)일 수 있다. 또 다른 구현예에서, 백혈병은 급성 골수성 백혈병 (AML)이다. 일 구현예에서, 백혈병은 FLT-3 돌연변이된 AML이다.

또 다른 구현예에서 림프종을 치료하는 방법이 본 명세서에서 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 림프종은 버킷 림프종일 수 있다. 일 구현예에서, 백혈병은 호지킨 림프종이다. 또 다른 구현예에서, 백혈병은 B-세포 림프종이다. 또 다른 구현예에서, 백혈병은 T-세포 림프종이다. 또 다른 구현예에서, 림프종은 원발성 삼출 림프종 (PEL)이다.

(화합물 1에 의해 예시된) 아미노퓨린 화합물은 다양한 암 세포주에서 항-증식성 활성을 나타낸다. (표 3) 이들 암 세포주에서의 항-증식성 활성은, 아미노퓨린 화합물이 조혈 및 고형 종양을 포함하는 암의 치료에 유용하다는 것을 나타낸다. 일 구현예에서, 조혈 및 고형 종양은 하기로부터 선택된다: 방광암, 유방암, CNS 암 (예를 들어, 신경교세포종, 수모세포종 및 신경아교종), 결장암, 십이지장 암, 내분비 암 (예를 들어, 갑상선암 및 부신 암), 여성 비뇨생식 암 (예를 들어, 자궁 암, 자궁경부암, 난소 암 및 외음부 암), 두경부 암 (예를 들어, 식도암), 조혈 및 림프양 암 (예를 들어, 림프종, 백혈병, 및 골수종), 신장암, 간암, 폐암 (예를 들어, NSCLC 및 SCLC), 췌장 암, 전립선암, 피부암 (예를 들어, 흑색종 및 암종), 연조직 암 (예를 들어, 육종 및 골육종), 위암, 및 고환 암. 일 구현예에서, 조혈 및 고형 종양은 하기로부터 선택된다: 방광암, 유방암, CNS 암 (예를 들어, 신경교세포종, 수모세포종 및 신경아교종), 결장암, 십이지장 암, 내분비 암 (예를 들어, 갑상선암 및 부신 암), 여성 비뇨생식 암 (예를 들어, 자궁 암, 자궁경부암, 및 외음부 암), 두경부 암, 조혈 및 림프양 암 (예를 들어, 림프종, 백혈병, 및 골수종), 신장암, 간암, 폐암 (예를 들어, NSCLC 및 SCLC), 췌장 암, 전립선암, 피부암 (예를 들어, 흑색종 및 암종), 연조직 암 (예를 들어, 육종 및 골육종), 위암, 및 고환 암. 일 구현예에서, 상기 암은 HCC이다. 일 구현예에서, 상기 암은 위암이다. 일 구현예에서, 상기 암은 CRC이다. 그와 같은 암은 β-카테닌 돌연변이를 특징으로 할 수 있다. 또 다른 구현예에서, 그와 같은 암은 BRAF 돌연변이를 특징으로 할 수 있다. 또 다른 구현예에서, 그와 같은 암은 β-카테닌 돌연변이 및 BRAF 돌연변이 둘 모두를 갖는 것을 특징으로 한다.

또 다른 구현예에서, (화합물 1에 의해 예시된) 아미노퓨린 화합물은 다양한 암 세포주에서 세포자멸사를 유도한다. 세포자멸사의 유도는, 아미노퓨린 화합물이 조혈 및 고형 종양을 포함하는 암의 치료에서 유용하다는 것을 나타낸다. 일 구현예에서, 조혈 및 고형 종양은 하기 로부터 선택된다: 방광암, 유방암, CNS 암 (예를 들어, 신경교세포종, 및 신경아교종), 결장암, 십이지장 암, 내분비 암 (예를 들어, 갑상선암 및 부신 암), 여성 비뇨생식 암 (예를 들어, 자궁 암, 자궁경부암, 난소 암 및 외음부 암), 두경부 암 (예를 들어, 식도암), 조혈 및 림프양 암 (예를 들어, 림프종, 백혈병, 및 골수종), 신장암, 간암, 폐암 (예를 들어, NSCLC 및 SCLC), 췌장 암, 전립선암, 피부암 (예를 들어, 흑색종 및 암종), 연조직 암 (예를 들어, 육종 및 골육종), 위암, 및 고환 암. 일 구현예에서, 조혈 및 고형 종양은 하기로부터 선택된다: 방광암, 유방암, CNS 암 (예를 들어, 신경교세포종, 및 신경아교종), 결장암, 십이지장 암, 내분비 암 (예를 들어, 갑상선암 및 부신 암), 여성 비뇨생식 암 (예를 들어, 외음부 암), 두경부 암 (예를 들어, 식도암), 조혈 및 림프양 암 (예를 들어, 림프종, 및 백혈병), 신장암, 간암, 폐암 (예를 들어, NSCLC 및 SCLC), 췌장 암, 전립선암, 피부암 (예를 들어, 흑색종), 연조직 암 (예를 들어, 육종 및 골육종), 위암, 및 고환 암. 일 구현예에서, 조혈 및 고형 종양은 하기로부터 선택된다: 방광암, 유방암, CNS 암 (예를 들어, 수모세포종, 신경교세포종, 및 신경아교종), 결장암, 십이지장 암, 내분비 암 (예를 들어, 갑상선암 및 부신 암), 여성 비뇨생식 암 (예를 들어, 태반 암, 자궁 암, 자궁경부암, 난소 암 및 외음부 암), 두경부 암 (예를 들어, 식도암), 조혈 및 림프양 암 (예를 들어, 림프종, 백혈병, 및 골수종), 신장암, 간암, 폐암 (예를 들어, NSCLC 및 SCLC), 췌장 암, 전립선암, 피부암 (예를 들어, 흑색종 및 암종), 연조직 암 (예를 들어, 육종 및 골육종), 위암, 및 고환 암.

BRAF 돌연변이 및/또는 베타-카테닌 돌연변이 (대안적으로 CTNNB1 돌연변이로 칭함)를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 상기 암은 BRAF 돌연변이를 특징으로 한다. 또 다른 구현예에서, 상기 암은 베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 한다. 또 다른 구현예에서, 상기 암은 활성화된 베타-카테닌 경로를 특징으로 한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 상기 암은 BRAF 돌연변이를 특징으로 하는 CRC 또는 흑색종이다. 다른 구현예에서, 상기 암은 EGFR 돌연변이 또는 증가된 EGFR 활성을 추가로 포함하는 베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 하는 CRC (예를 들어, 활성화된 베타-카테닌 경로 및 EGFR 돌연변이를 특징으로 하는 CRC, 또는 활성화된 베타-카테닌 경로 및 증가된 EGFR 활성을 특징으로 하는 CRC)이다. 또 다른 구현예에서, 상기 암은 KRAS 돌연변이를 추가로 포함하는 베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 하는 위암 (즉 활성화된 베타-카테닌 경로 및 KRAS 돌연변이를 특징으로 하는 위암)이다. 또 다른 구현예에서 상기 암은 활성화된 베타-카테닌 경로를 특징으로 하는 HCC이다. 일부 그와 같은 구현예에서, BRAF 돌연변이는 BRAF V660E이다. 다른 구현예에서, BRAF 돌연변이는 BRAF V600E, BRAF T119S, 또는 BRAF G596R 중 하나 이상이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 베타-카테닌 돌연변이는 베타-카테닌 S33Y, G34E, S45del, 또는 S33C 중 하나 이상이다. 일부 그와 같은 구현예에서, EGFR 돌연변이는 EGFR E282K, G719S, P753S, 또는 V1011M 중 하나 이상이다. 일부 그와 같은 구현예에서, KRAS 돌연변이는 A146T, G12C, G12D, G12V, G13D, 또는 Q61L이다.

베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 하는 CRC를 치료하는 방법이 본 명세서에 제공되되, 상기 베타-카테닌 돌연변이는 베타-카테닌 S33Y, G34E, S45del, 또는 S33C 중 하나 이상이고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 화합물 1이다. EGFR 돌연변이 또는 증가된 EGFR 활성을 추가로 포함하는 베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 하는 CRC를 치료하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 베타-카테닌 돌연변이는 베타-카테닌 S33Y, G34E, S45del, 또는 S33C 중 하나 이상이고, 그리고 상기 EGFR 돌연변이는 EGFR E282K, G719S, P753S, 또는 V1011M 중 하나 이상이고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 화합물 1이다.

PD-L1을 발현시키는 암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, PD-L1 발현 암은 흑색종, 폐암, 신장 세포 암종 (RCC), 또는 HCC이다.

BRAF 돌연변이를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, BRAF 돌연변이를 특징으로 하는 암은 CRC, 갑상선암, 흑색종 또는 폐암이다. 일부 그와 같은 구현예에서, BRAF 돌연변이를 특징으로 하는 암은 CRC, 갑상선암, 또는 폐암이다. 일부 그와 같은 구현예에서, BRAF 돌연변이는 BRAF V660E이다. 다른 구현예에서, BRAF 돌연변이는 BRAF V600E, BRAF T119S, 또는 BRAF G596R 중 하나 이상이다.

NRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, NRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암은 흑색종이다.

KRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, KRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암은 CRC, 췌장 암 또는 폐암이다. KRAS 돌연변이는 상기에 기재된 바와 같은 KRAS 돌연변이일 수 있다.

베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 활성화된 베타-카테닌 경로를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 하는 암은 CRC, 위암, HCC 또는 육종이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 활성화된 베타-카테닌 경로를 특징으로 하는 암은 CRC, 위암, HCC 또는 육종이다. 베타-카테닌 돌연변이는 본 명세서에서 기재된 바와 같은 돌연변이일 수 있다.

간세포 암종 (HCC)을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, HCC은 베타-카테닌 돌연변이 및/또는 증가된 YAP 발현을 특징으로 한다. 일부 그와 같은 구현예에서, HCC은 활성화된 베타-카테닌 경로 및/또는 증가된 YAP 증폭 발현을 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 증가된 YAP 발현은 증폭 또는 돌연변이로 인한 것이다.

결장직장암 (CRC)을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, CRC은 BRAF 돌연변이 및/또는 베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 한다. 일부 그와 같은 구현예에서, CRC은 BRAF 돌연변이 및/또는 활성화된 베타-카테닌 경로를 특징으로 한다.

위암을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 위암은 베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 위암은 활성화된 베타-카테닌 활성화를 특징으로 한다. 베타-카테닌 돌연변이는 본 명세서에서 기재된 바와 같은 돌연변이일 수 있다.

흑색종을 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 흑색종은 BRAF 돌연변이 및/또는 NRAS 돌연변이를 특징으로 한다.

C-Met 증폭된 간세포 암종 (HCC)를 치료 또는 예방하는 방법이 본 명세서에 또한 제공된다. 일 구현예에서, 상기 방법은 본 명세서에서 기재된 아미노퓨린 화합물의 유효량을 C-Met 증폭된 HCC을 가지고 있는 대상체에게 투여함으로써 C-Met 증폭된 HCC를 치료하는 것을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 상기 방법은는 본 명세서에서 기재된 아미노퓨린 화합물의 예방적 양을 C-Met 증폭된 HCC을 가지고 있는 대상체에게 투여함으로써, C-Met 증폭된 HCC를 예방하는 것을 포함한다.

유전자 돌연변이를 특징으로 하는 암을 가지고 있는 환자에서 아미노퓨린 화합물에 의한 치료에 대한 반응을 예측하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 BRAF, NRAS, KRAS, 및/또는 CTNNB1로부터 선택된 하나 이상의 유전자의 유전자 서열을 얻는 단계; c) 상기 유전자 서열(들)을 상기 생물학적 야생형 샘플의 유전자 서열(들)과 비교하는 단계를 포함하되; 여기서 상기 돌연변이의 존재는 상기 환자의 암의 아미노퓨린 화합물 치료에 대한 반응의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다.

유전자 돌연변이를 특징으로 하는 암을 가지고 있는 환자의 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능을 예측하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 BRAF, NAS, KRAS, 및/또는 CTNNB1로부터 선택된 하나 이상의 유전자의 유전자 서열(들)을 얻는 단계; c) 상기 유전자 서열(들)을 상기 생물학적 야생형 샘플의 유전자 서열(들)과 비교하는 단계를 포함하되; 여기서 상기 돌연변이의 존재는 상기 환자에 대한 상기 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다.

일부 구현예에서, 암 전이를 치료 및 예방하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 암은 전이암, 특히, 전이성 고형 종양 또는 전이성 혈액성 암이고, 여기서 상기 고형 종양 및 혈액성 암은 본 명세서에서 기재된 바와 같다. 다른 구현예에서, 암 전이를 치료 및 예방하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다.

또 다른 측면에서, 대상체에서 암 줄기 세포를 퇴치하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다.

또 다른 측면에서, 대상체에서 암 줄기 세포의 분화를 유도하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 다른 구현예에서, 대상체에서 암 줄기 세포사를 유도하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 상기 암은 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양 또는 혈액 암이다.

일 구현예에서, 환자에서 완전한 반응, 부분적인 반응 또는 안정적인 질환의 고형 종양에서의 반응 평가 기준 (RECIST 1.1)을 달성하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을, 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 카플란-마이어 추정으로 결정시, 무진행 생존율을 증가시키는 방법이 본 명세서에 제공된다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

일 구현예에서, 환자에서 진행성 질환의 고형 종양에서의 반응 평가 기준 (RECIST 1.1)를 예방 또는 지연시키는 방법이 본 명세서에서 제공되고, 상기 방법은 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서 진행성 질환의 예방 또는 지연은 전치료와 비교하여 예를 들어, -30% 내지 +20%의 상기 표적 병변의 전반적인 크기의 변화를 특징으로 하거나 그것에 의해 달성된다. 또 다른 구현예에서, 상기 표적 병변의 크기의 변화는 전치료와 비교하여 표적 병변 크기에서 30% 초과의 전반적인 크기의 감소, 예를 들어, 50% 초과의 감소이다. 또 다른 것에서, 예방은 전치료와 비교하여 비-표적 병변의 크기 또는 진행의 감소를 특징으로 하거나 그것에 의해 달성된다. 일 구현예에서, 예방은 전치료와 비교하여 표적 병변의 수의 감소 에 의해 달성되거나 그것을 특징으로 한다. 또 다른 것에서, 예방은 전치료와 비교하여 비-표적 병변의 수 또는 품질의 감소 에 의해 달성되거나 그것을 특징으로 한다. 일 구현예에서, 예방은 전치료와 비교하여 표적 병변의 부재 또는 사라짐에 의해 달성되거나 그것을 특징으로 한다. 또 다른 것에서, 예방은 전치료와 비교하여 비-표적 병변의 부재 또는 사라짐에 의해 달성되거나 그것을 특징으로 한다. 또 다른 구현예에서, 예방은 전치료와 비교하여 신규 병변에 의해 달성되거나 그것을 특징으로 한다. 또 다른 구현예에서, 예방은 전치료와 비교된 질환 진행의 임상 징후 또는 증상, 예컨대 암-관련된 악액질 또는 증가된 통증의 예방에 의해 달성되그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

특정 구현예에서, 전치료와 비교하여 환자에서 표적 병변의 크기를 감소시키는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

특정 구현예에서, 전치료와 비교하여 환자에서 비-표적 병변의 크기를 감소시키는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

특정 구현예에서, 전치료와 비교하여 환자에서 표적 병변의 수의 감소를 달성하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

특정 구현예에서, 전치료와 비교하여 환자에서 비-표적 병변의 수의 감소를 달성하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을, 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

특정 구현예에서, 환자에서 모든 표적 병변의 사라짐을 달성하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

특정 구현예에서, 환자에서 모든 비-표적 병변의 사라짐을 달성하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

특정 구현예에서, 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을, 암, 특히 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 상기 치료는 고형 종양에서의 반응 평가 기준(RECIST 1.1)으로 결정시, 완전한 반응, 부분적인 반응 또는 안정적인 질환을 생기게 한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

특정 구현예에서, 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을, 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 상기 치료는 전치료와 비교하여, 표적 병변 크기의 감소, 비-표적 병변 크기의 감소 및/또는 신규한 표적 및/또는 비-표적 병변의 부재를 초래한다. 일 구현예에서, 상기 암은 표 3에서 제시된 암이다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

특정 구현예에서, 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을, 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 상기 치료는 임상 진행, 예컨대 암-관련된 악액질 또는 증가된 통증 의 예방 또는 지연을 초래한다.

또 다른 구현예에서, 제공된 환자의 NHL에 대한 International Workshop Criteria (IWC) (참조 Cheson BD, Pfistner B, Juweid, ME, 등 Revised Response Criteria for Malignant Lymphoma. J. Clin. Oncol: 2007: (25) 579-586)을 특징으로 하는 치료 방법을 유도하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을, 암, 특히 혈액 암 예컨대 본 명세서에서 기재된 바와 같은 림프종을 가지고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 환자에서 NHL에 대해 International Workshop Criteria (IWC)로 결정시, 완전한 차도, 부분적인 차도 또는 안정적인 질환을 달성하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 혈액 암 예컨대 본 명세서에서 기재된 바와 같은 림프종을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 환자에서 NHL에 대해 International Workshop Criteria (IWC)로 결정시, 전반적인 생존, 무진행 생존, 무사고 생존, 진행 시간, 무질환 생존 또는 무림프종 생존의 증가를 달성하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 혈액 암 예컨대 본 명세서에서 기재된 바와 같은 림프종을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

또 다른 구현예에서, 환자의 다발성 골수종 (IURC)에 대한 International Uniform Response Criteria (참조 Durie BGM, Harousseau J-L, Miguel JS, 등 International uniform response criteria for multiple myeloma. Leukemia, 2006; (10) 10: 1-7) 로 평가된 치료 방법을 유도하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 다발성 골수종을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 환자에서 다발성 골수종에 대한 International Uniform Response Criteria (IURC)로 결정시, 엄격한 완전한 반응, 완전한 반응, 아주 양호한 부분적인 반응, 또는 부분적인 반응을 달성하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 다발성 골수종을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 환자에서 전반적인 생존, 무진행 생존, 무사고 생존, 진행 시간, 또는 무질환 생존 의 증가를 달성하는 방법이 본 명세서 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 다발성 골수종을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

또 다른 구현예에서, 환자의 GBM에 대한 Response Assessment for Neuro-Oncology (RANO) Working Group (참조 Wen P., Macdonald, DR., Reardon, DA., 등 Updated response assessment criteria for high-grade gliomas: Response assessment in neuro-oncology working group. J. Clin. Oncol. 2010; 28: 1963-1972) 로 평가된 치료 방법을 유도하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 다형상 교모세포종 (GBM)을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, RANO는 GBM 유형에서 효능 평가가능한 대상체에 대한 치료 1일째로부터 6개월에서 대상체 무진행의 비율을 확립하기 위해 사용될 것이다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

또 다른 구현예에서, 환자의 Eastern Cooperative Oncology Group Performance Status (ECOG)를 개선하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을, 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양 또는 혈액 암을 가지고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

또 다른 구현예에서, 환자의 Positron Emission Tomography (PET) 결과에 의해 평가된 치료 방법을 유도하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양 또는 혈액 암을 가지고 있는 환자에게 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 특정 구현예에서, 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양 또는 혈액 암을 치료하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을, 암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같이 고형 종양 또는 혈액 암을 가지고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 상기 치료는 예를 들어, PET 이미지형성으로 측정시, 종양 대사성 활성의 감소를 초래한다. 그와 같은 방법은 적용가능하고, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 치료하는 방법에 추가될 수 있다.

본 명세서에서 기재된 방법의 일부 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 본 명세서에서 기재된 바와 같은 화합물이다. 일 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 식 (I)의 화합물이다. 또 다른 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 표 1로부터의 화합물이다. 일 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 분자식 C₂₄H₂₇N₇O₂FCl₃을 갖는 본 명세서에서 제시된 아미노퓨린 화합물이다. 일 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 (1s,4s)-4-(2-(((3S,4R)-3-플루오로테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-8-((2,4,6-트리클로로페닐)아미노)-9H-퓨린-9-일)-1-메틸사이클로헥산-1-카복사미드, 대안적으로 명명된 시스-4-[2-{[(3S,4R)-3-플루오로옥산-4-일]아미노}-8-(2,4,6-트리클로로아닐리노)-9H-퓨린-9-일]-1-메틸사이클로헥산-1-카복사미드 (화합물 1)이다.

암, 특히 본 명세서에서 기재된 바와 같은 고형 종양 또는 혈액 암이 이전에 치료되었던 환자, 뿐만 아니라 이전에 치료되지 않았던 환자를 치료하는 방법이 본 명세서에 또한 제공횐다. 일 구현예에서, 상기 암은 표 3에서 제공되 암이다. 그와 같은 암은 표 1에서 제시된 화합물 및/또는 화합물 1을 포함하는 본 명세서에서 기재된 아미노퓨린 화합물을 사용하여 치료될 수 있다. 암이 있는 환자가 이종 임상 징후 및 가변 임상 결과를 가지고 있기 때문에, 환자에 대해 주어진 치료는 남성/여성 예후에 따라 변할 수 있다. 숙련된 임상의는 과도한 실험과정 없이, 암을 가지고 있는 개별 환자를 치료하기 위해 효과적으로 사용될 수 있는 특정 2차 제제, 수술의 유형, 및 비-약물 기반 표준 요법의 유형을 쉽게 결정할 것이다.

바이오마커

일 구현예에서, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 가지고 있는 대상체에서 바이오마커의 수준을 조절하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을, 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 바이오마커의 조절은 상기 대상체의 생물학적 샘플에서, 예컨대 순환 혈액, 피부 생검, 종양 생검, 순환 종양 세포, 모발, 및/또는 소변에서 평가된다. 일 구현예에서, 생물학적 샘플은 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)이다. 그와 같은 구현예에서, 바이오마커 조절의 양은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 투여 전 및 후에 바이오마커의 양의 비교에 의해 평가된다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 감소이다. 일부 다른 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 증가이다.

일부 구현예에서, 바이오마커는 ERK, RSK1, DUSP4, DUSP5, DUSP6, BMF, EFNA1, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, GJA1, IL-8, cMyc, 사이클린 D1, YAP, SPRY2, SPRY4, Axin2, CTGF, AREG, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1, MAFF, CITED2, ELF3, 또는 PD-L1이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 ERK 및 RSK1 중 하나 이상의 인산화 수준의 감소의 측정에 의해 측정된다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 감소이다. 일부 다른 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 증가이다.

일부 구현예에서, 바이오마커는 DUSP4, DUSP6, 사이클린 D1, c-Myc, SPRY2, 및 YAP 중 하나 이상이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 DUSP4, DUSP6, 사이클린 D1, c-Myc, 및 YAP 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 감소 의 측정에 의해 측정된다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 DUSP4, DUSP6, SPRY2, c-Myc 및 사이클린 D1 중 하나 이상 의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 감소의 측정에 의해 측정된다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 감소이다.

일부 구현예에서, 바이오마커는 DUSP4, DUSP6, 사이클린 D1, c-Myc, SPRY2, 및 YAP 중 하나 이상이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 DUSP4, DUSP6, 사이클린 D1, c-Myc, 및 YAP 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 감소 의 측정에 의해 측정된다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 DUSP4, DUSP6, SPRY2, c-Myc 및 사이클린 D1 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 감소의 측정에 의해 측정된다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 감소이다.

일부 구현예에서, 바이오마커는 DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, SPRY2, 및 SPRY4 중 하나 이상이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, SPRY2, 및 SPRY4 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 감소의 측정에 의해 측정된다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 감소이다.

일부 구현예에서, 바이오마커는 BMF 및 EFNA 중 하나 이상이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 BMF 및 EFNA1 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 증가의 측정에 의해 측정된다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 증가이다.

일부 구현예에서, 바이오마커는 GJA1이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 GJA1중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 조절의 측정에 의해 측정된다. 일부 그와 같은 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 감소이다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 증가이다.

일부 구현예에서, 바이오마커는 Axin2, CTGF, Cur61 및 AREG 중 하나 이상이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 Axin2, CTGF, 및 AREG 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 감소의 측정에 의해 측정된다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 감소이다.

일부 구현예에서, 바이오마커는 CYR61, CXCL1, HAS2, HES1 및 MAFF 중 하나 이상이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 CYR61, CXCL1, HAS2, HES1 및 MAFF 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 감소의 측정에 의해 측정된다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 감소이다.

일부 구현예에서, 바이오마커는 CITED2 및 ELF3 중 하나 이상이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 조절은 CITED2 및 ELF3중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 증가의 측정에 의해 측정된다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 증가이다.

일부 구현예에서, 바이오마커는 PD-L1. 일부 구현예에서, 바이오마커의 수준의 조절은 PD-L1의 세포 표면 발현 수준의 감소이다. 일부 구현예에서, 바이오마커의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 감소이다.

또 다른 구현예에서, 바이오마커는 IFNγ 또는 IL-2. 일부 그와 같은 구현예에서, 바이오마커의 수준의 조절은 IFNγ 또는 IL-2의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 증가이다. 일부 그와 같은 구현예에서, IFNγ 또는 IL-2 의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 증가이다.

또 다른 구현예에서, 바이오마커는 IL-8이다. 일부 그와 같은 구현예에서, 바이오마커의 수준의 조절은 IL-8의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 감소이다. 일부 그와 같은 구현예에서, IL-8 의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 조절은 기준선 수준과 비교하여 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99%, 또는 약 100%의 감소이다.

일 구현예에서, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 가지고 있는 대상체에서 ERK 및/또는 RSK1의 인산화를 억제하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 인산화의 억제는 상기 대상체의 생물학적 샘플에서, 예컨대 순환 혈액 및/또는 종양 세포, 피부 생검 및/또는 종양 생검 또는 흡입에서 평가된다. 그와 같은 구현예에서, 인산화의 억제의 양은 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 투여 전 및 후에 포스포- ERK 및/또는 RSK1의 양의 비교에 의해 평가된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 가지고 있는 대상체에서 ERK 및/또는 RSK1의 인산화의 억제를 측정하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 본 명세서에 제공된 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 상기 대상체에서 인산화된 ERK 및/또는 RSK1의 양을 측정하는 단계, 및 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량의 투여 전에 인산화된 ERK 및/또는 RSK의 양을 상기 대상체의 양과 비교하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 암을 가지고 있는 대상체의 생물학적 샘플에서 ERK 및/또는 RSK1 의 인산화를 억제하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 본 명세서에 제공된 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 단계 및 본 명세서에서 제공된 상기 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 투여 전 및 후에 수득된 대상체의 생물학적 샘플에서 인산화된 ERK 및/또는 RSK1의 양을 비교하는 단계를 포함하고, 여기서 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 투여 후에 수득된 생물학적 샘플에서의 인산화된 ERK 및/또는 RSK1의 양에 대해 본 명세서에서 제공된 상기 아미노퓨린 화합물의 투여 후에 수득된 생물학적 샘플에서의 더 적은 인산화된 ERK 및/또는 RSK1은 억제를 나타낸다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자가 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물 에 민감한 지를 결정하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물을 투여하는 단계 및 ERK 및/또는 RSK1 인산화가 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 상기 환자에의 투여 전 및 후에 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 인산화된 ERK 및/또는 RSK1의 양을 측정함으로써 상기 환자에서 억제되는지 여부를 결정하는 단계를 포함하고, 여기서 ERK 및/또는 RSK1 인산화의 억제는, 상기 환자가 상기 아미노퓨린 화합물에 민감하다는 것을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자에서 ERK 및/또는 RSK1의 인산화의 억제에 의해 치료가능한 암을 치료하기 위해 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 결정하는 방법이 본 명세서에서 또한 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 가변 용량의 상기 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물을 투여하는 단계 및 아미노퓨린 화합물의 각 용량의 상기 환자에의 투여 전 및 후에 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 인산화된 ERK 및/또는 RSK1의 양을 측정함으로써 상기 아미노퓨린 화합물의 각각의 용량 또는 이의 약제학적 조성물로부터 수득한 상기 환자에서의 ERK 및/또는 RSK1 인산화 억제의 양을 결정하는 단계를 포함하고, 여기서 적어도 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50% 또는 약 50% 초과까지의 ERK 및/또는 RSK1 인산화의 억제는 아미노퓨린 화합물의 유효량에 해당한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

암을 가지고 있는 환자에서 아미노퓨린 화합물에 의한 치료에 대한 반응을 예측하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다: a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 DUSP4, DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, cMyc, 사이클린 D1, YAP, SPRY2, SPRY4, Axin2, CTGF, AREG, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1, 및 MAFF 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 얻는 단계; c) 상기 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 생물학적 야생형 샘플의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준과 비교하는 단계; 여기서 상기 환자의 생물학적 시험 샘플에서 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준은 상기 생물학적 야생형 샘플에 비해 감소되고, 상기 환자의 암의 아미노퓨린 화합물 치료에 대한 반응의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

암을 가지고 있는 환자의 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능을 예측하는 방법이 또한 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다: a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 DUSP4, DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, cMyc, 사이클린 D1, YAP, SPRY2, SPRY4, Axin2, CTGF, AREG, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1, 및 MAFF 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 얻는 단계; c) 상기 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 생물학적 야생형 샘플의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준과 비교하는 단계; 여기서 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 감소는 상기 환자에 대한 상기 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자가 아미노퓨린 화합물에 민감한 지를 결정하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물을 투여하는 단계 및 DUSP4, DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, cMyc, 사이클린 D1, YAP, SPRY2, SPRY4, Axin2, CTGF, AREG, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1, 및 MAFF 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준이, 아미노퓨린 화합물의 상기 환자에의 투여 전 및 후에, 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 DUSP4, DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, cMyc, 사이클린 D1, YAP, SPRY2, SPRY4, Axin2, CTGF, AREG, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1, 및 MAFF 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양을 측정하여 상기 환자에서 억제되는 지 여부를 결정하는 단계를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자에서 DUSP4, DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, cMyc, 사이클린 D1, YAP, SPRY2, SPRY4, Axin2, CTGF, AREG, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1, 및 MAFF 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 억제에 의해 치료가능한 암을 치료하기 위해 아미노퓨린 화합물의 유효량을 결정하는 방법이 또한 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물의 가변 용량을 투여하는 단계 및 아미노퓨린 화합물의 각 용량의 상기 환자에의 투여 전 및 후에, 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 DUSP4, DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, cMyc, 사이클린 D1, YAP, SPRY2, SPRY4, Axin2, CTGF, AREG, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1, 및 MAFF 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양을 측정하여 상기 아미노퓨린 화합물의 각각의 용량으로부터 생긴, 상기 환자에서 DUSP4, DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, cMyc, 사이클린 D1, YAP, SPRY2, SPRY4, Axin2, CTGF, AREG, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1, 및 MAFF 억제 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양을 결정하는 단계를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

암을 가지고 있는 환자에서 아미노퓨린 화합물에 의한 치료에 대한 반응을 예측하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다: a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 BMF, EFNA1, CITED2, 및 ELF3 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 얻는 단계; c) 상기 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 생물학적 야생형 샘플의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준과 비교하는 단계; 여기서 상기 생물학적 야생형 샘플에 대한 상기 환자의 생물학적 시험 샘플에서의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 증가는, 상기 환자의 암의 아미노퓨린 화합물 치료에 대한 반응의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

암을 가지고 있는 환자의 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능을 예측하는 방법이 또한 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다: a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 BMF, EFNA1, CITED2, 및 ELF3 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 얻는 단계; c) 상기 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 생물학적 야생형 샘플의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준과 비교하는 단계; 여기서 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 증가는 상기 환자에 대한 상기 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자가 아미노퓨린 화합물에 민감한 지를 결정하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물을 투여하는 단계 및 BMF, EFNA1, CITED2, 및 ELF3 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준이 아미노퓨린 화합물의 상기 환자에의 투여 전 및 후에 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 BMF, EFNA1, CITED2, 및 ELF3 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양을 측정함으로써 상기 환자에서 증가되는 지 여부를 결정하는 단계를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자에서 BMF, EFNA1, CITED2, 및 ELF3 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 증가에 의해 치료가능한 암의 치료를 위한 아미노퓨린 화합물의 유효량을 결정하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물의 가변 용량을 투여하는 단계, 및 아미노퓨린 화합물의 각 용량의 상기 환자에의 투여 전 및 후에, 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 BMF, EFNA1, CITED2, 및 ELF3 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양을 측정하여 상기 아미노퓨린 화합물의 각각의 용량으로부터 얻은 상기 환자에서 BMF, EFNA1, CITED2, 및 ELF3 중 하나 이상의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양의 증가를 결정하는 단계를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

암을 가지고 있는 환자에서 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적 조성물에 의한 치료에 대한 반응을 예측하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다: a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 상기 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 얻는 단계; c) 상기 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 생물학적 야생형 샘플의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준과 비교하는 단계; 여기서 상기 환자의 생물학적 시험 샘플의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준은 상기 생물학적 야생형 샘플에 비해 감소하고, 상기 환자의 암의 아미노퓨린 화합물 치료에 대한 반응의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

암을 가지고 있는 환자의 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능을 예측하는 방법이 또한 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다: a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 상기 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 얻는 단계; c) 상기 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 생물학적 야생형 샘플의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준과 비교하는 단계; 여기서 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 감소는 상기 환자에 대한 상기 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자가 아미노퓨린 화합물에 민감한 지를 결정하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물을 투여하는 단계 및 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준이 아미노퓨린 화합물의 상기 환자에의 투여 전 및 후에 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양을 측정함으로써 상기 환자에서 억제되는지 여부를 결정하는 단계를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자에서 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 억제로 치료가능한 암의 치료를 위한, 아미노퓨린 화합물의 유효량을 결정하는 방법 이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물의 가변 용량을 투여하는 단계 및 아미노퓨린 화합물의 각 용량의 상기 환자에의 투여 전 및 후에, 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양을 측정함으로써 상기 아미노퓨린 화합물의 각각의 용량 으로부터 얻은, 환자에서 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양의 억제를 결정하는 단계를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

암을 가지고 있는 환자에서 아미노퓨린 화합물에 의한 치료에 대한 반응을 예측하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다: a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 상기 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 얻는 단계; c) 상기 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 생물학적 야생형 샘플의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준과 비교하는 단계; 여기서 상기 생물학적 야생형 샘플에 대한 상기 환자의 생물학적 시험 샘플에서의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 증가는, 상기 환자의 암의 아미노퓨린 화합물 치료에 대한 반응의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

암을 가지고 있는 환자의 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능을 예측하는 방법이 또한 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다: a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 상기 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 얻는 단계; c) 상기 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준을 생물학적 야생형 샘플의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준과 비교하는 단계; 여기서 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 증가는 상기 환자에 대한 상기 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자가 아미노퓨린 화합물에 민감한 지를 결정하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물을 투여하는 단계 및 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준이 아미노퓨린 화합물의 상기 환자에의 투여 전 및 후에 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양을 측정함으로써 상기 환자에서 증가되는 지 여부를 결정하는 단계를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자에서 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 증가로 치료가능한 암의 치료를 위해 아미노퓨린 화합물의 유효량을 결정하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물의 가변 용량을 투여하는 단계, 및 아미노퓨린 화합물의 각 용량의 상기 환자에의 투여 전 및 후에, 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양을 측정함으로써 상기 아미노퓨린 화합물의 각각의 용량으로부터 얻은 상기 환자에서 GJA1의 mRNA 및/또는 단백질 발현 수준의 양 증가를 결정하는 단계를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

암을 가지고 있는 환자에서 아미노퓨린 화합물에 의한 치료에 대한 반응을 예측하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다: a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 상기 PD-L1의 세포 표면 발현 수준을 얻는 단계; c) 상기 PD-L1의 세포 표면 발현 수준을 생물학적 야생형 샘플의 PD-L1의 세포 표면 발현 수준과 비교하는 단계; 여기서 PD-L1의 세포 표면 발현 수준의 감소 상기 환자의 암의 아미노퓨린 화합물 치료에 대한 반응의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

암을 가지고 있는 환자의 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능을 예측하는 방법이 또한 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다: a) 상기 환자의 암으로부터 생물학적 시험 샘플을 얻는 단계; b) 상기 생물학적 시험 샘플에서 상기 PD-L1의 세포 표면 발현 수준을 얻는 단계; c) 상기 PD-L1의 세포 표면 발현 수준을 생물학적 야생형 샘플의 PD-L1의 세포 표면 발현 수준과 비교하는 단계; 여기서 PD-L1의 세포 표면 발현 수준의 감소는 상기 환자에 대한 상기 아미노퓨린 화합물 치료의 치료 효능의 증가된 가능성을 나타낸다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자가 아미노퓨린 화합물에 민감한 지를 결정하는 방법이 본 명세서에 또한 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물을 투여하는 단계 및 PD-L1의 세포 표면 발현 수준이 아미노퓨린 화합물의 상기 환자에의 투여 전 및 후에 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 PD-L1의 세포 표면 발현 수준의 양을 측정함으로써 상기 환자에서 억제되는 지 여부를 결정하는 단계를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

환자에서 PD-L1의 세포 표면 발현 수준까지 치료가능한 암의 치료를 위해 아미노퓨린 화합물의 유효량을 결정하는 방법이 또한 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 상기 환자에게 상기 아미노퓨린 화합물의 가변 용량을 투여하는 단계 및 아미노퓨린 화합물의 각 용량의 상기 환자에의 투여 전 및 후에 상기 환자로부터의 생물학적 샘플에서 PD-L1의 세포 표면 발현 수준의 양을 측정함으로써 상기 아미노퓨린 화합물의 각각의 용량으로부터 얻은 상기 환자에서 PD-L1 억제의 세포 표면 발현 수준의 양을 결정하는 단계를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, 본 방법은 추가로, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 아미노퓨린 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 생물학적 샘플은 종양 생검이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 PBMC이다. 또 다른 구현예에서, 생물학적 샘플은 순환 종양 세포이다.

병용 요법

본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 또한 본 명세서에 기재된 암의 치료 및/또는 예방에서 유용한 다른 치료제와 조합되거나 함께 사용될 수 있다.

일 구현예에서, 암을 치료, 예방, 또는 관리하는 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 환자에게 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물을, 하나 이상의 제2 활성제와 함께, 그리고 선택적으로 방사선 요법, 수혈, 또는 수술과 함께 투여하는 것을 포함한다. 제2 활성제의 예는 본 명세서에서 개시되어 있다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "조합하여"은 1 초과 개의 요법 (예를 들어, 하나 이상의 예방적 및/또는 치료제)의 사용을 포함한다. 그러나, 용어 "조합하여"의 사용은, 요법 (예를 들어, 예방적 및/또는 치료제)이 질환 또는 장애를 가지고 있는 환자에게 투여되는 순서를 제한하지 않는다. 제1 요법 (예를 들어, 예방적 또는 치료제 예컨대 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은, 제2 요법 (예를 들어, 예방 또는 치료제)의 상기 대상체에의 투여 (예를 들어, 5 분, 15 분, 30 분, 45 분, 1 시간, 2 시간, 4개의 시간, 6 시간, 12 시간, 24 시간, 48 시간, 72 시간, 96 시간, 1 주, 2 주, 3 주, 4개의 주, 5 주, 6 주, 8 주, 또는 12 주 전에), 그것과 함께 또는 그 후에 (예를 들어, 5 분, 15 분, 30 분, 45 분, 1 시간, 2 시간, 4개의 시간, 6 시간, 12 시간, 24 시간, 48 시간, 72 시간, 96 시간, 1 주, 2 주, 3 주, 4개의 주, 5 주, 6 주, 8 주, 또는 12 주 후에) 투여될 수 있다. 삼중 요법이 본 명세서에서 또한 고려된다.

본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물 및 하나 이상의 제2 활성제의 환자에의 투여는 동일 또는 상이한 투여 경로에 의해 동시에 또는 순차적으로 발생할 수 있다. 특정 활성제를 위해 이용된 특정 투여 경로의 적합성은 활성제 자체 (예를 들어, 혈류에 들어가기 전에 분해없이 경구로 투여될 수 있느지 여부) 및 치료되고 있는 암에 좌우될 것이다.

아미노퓨린 화합물의 투여 경로는 제2 요법의 투여 경로와는 독립적이다. 따라서, 이들 구현예에 따라, 아미노퓨린 화합물은 투여된 정맥내로 투여되고, 제2 요법은 하기에 의해 투여될 수 있다: 경구로, 비경구로, 복강내로, 정맥내로, 동맥내로, 경피로, 설하로, 근육내로, 직장으로, 경협으로, 비강내로, 리포좀으로, 흡입을 통해, 질로, 안구내, 카테터 또는 스텐트에 의한 국부 전달을 통해, 피하로, 지방질내로, 관절내로, 척추강내로, 또는 서방형 투약 형태로. 일 구현예에서, 아미노퓨린 화합물 및 제2 요법은 동일한 투여 방식, 예를 들어, 경구로 투여된다. 또 다른 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 하나의 투여 방식, 예를 들어, 경구로 투여되고, 반면에 제2 제제 (항암제)은 또 다른 투여 방식, 예를 들어, IV에 의해 투여된다.

일 구현예에서, 제2 활성제는 예를 들어, 경구로, 정맥내로 또는 피하로, 그리고 매일 1회 또는 2회 약 1 내지 약 1000 mg, 약 5 내지 약 500 mg, 약 10 내지 약 350 mg, 약 50 내지 약 200 mg, 약 1 내지 약 100 mg, 약 1 내지 약 200 mg, 약 1 내지 약 300 mg, 약 1 내지 약 400 mg, 또는 약 1 내지 약 500 mg의 양으로 투여된다. 제2 활성제의 특정 양은 특정 제제 사용된, 치료 또는 관리되고 있는 질환의 유형, 질환의 중증도 및 단계, 및 환자에게 동시에 투여된 본 명세서에서 기재된 아미노퓨린 화합물 및 임의의 선택적인 추가의 활성제의 양에 좌우될 것이다. 일 구현예에서, 본 명세서에 기재된 투약량은 인간 환자를 위한 것이다.

하나 이상의 제2 활성 성분 또는 제제는 본 명세서에서 제공된 방법 및 조성물에서 아미노퓨린 화합물과 함께 사용될 수 있다. 제2 활성제는 대분자 (예를 들어, 단백질) 또는 소분자 (예를 들어, 합성 무기, 유기금속, 또는 유기 분자)일 수 있다.

대분자 활성제의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 조혈 성장 인자, 사이토카인, 및 단클론성 및 다클론성 항체, 특히, 암 항원에 대한 치료 항체. 전형적인 대분자 활성제는 생물학적 분자, 예컨대 자연 발생 또는 합성 또는 재조합 단백질이다. 본 명세서에 제공된 본 방법 및 조성물에서 특히 유용한 단백질은 시험관내 또는 생체내에서 조혈 전구체 세포 림프구형성 세포의 생존 및/또는 증식을 자극하는 단백질을 포함한다. 다른 유용한 단백질은 시험관내 또는 생체내 에서 세포에서 수임된 조혈 선조의 분할 및 분화를 자극한다. 특정 단백질은, 비제한적으로 하기를 포함한다: 인터류킨, 예컨대 IL-2 (재조합 IL-2 ("rIL2") 및 카나리폭스 IL-2 포함), IL-10, IL-12, 및 IL-18; 인터페론, 예컨대 인터페론 알파-2a, 인터페론 알파-2b, 인터페론 알파-n1, 인터페론 알파-n3, 인터페론 베타-Ia, 및 인터페론 감마-I b; GM-CF 및 GM-CSF; 및 EPO.

특정 구현예에서, GM-CSF, G-CSF, SCF 또는 EPO은 약 1 내지 약 750 mg/m²/1일, 약 25 내지 약 500 mg/m²/1일, 약 50 내지 약 250 mg/m²/1일, 또는 약 50 내지 약 200 mg/m²/1일 범위의 양으로4 또는 6 주 사이클 내에 약 5일 동안 피하로 투여된다. 특정 구현예에서, GM-CSF은 2시간에 걸쳐 장맥내로 약 60 내지 약 500 mcg/m² 또는 피하로 약 5 내지 약 12 mcg/m²/1일 의 양으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, G-CSF는 초기에 약 1 mcg/kg/1일의 양으로 피하로 투여될 수 있고 총 과립구 수의 상승에 따라 조정될 수 있다. G-CSF의 유지 용량은 피하로 약 300 (더 작은 환자에서) 또는 480 mcg의 양으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, EPO는 10,000 단위의 양으로 주당 3회 피하로 투여될 수 있다.

본 방법 및 조성물에서 사용될 수 있는 특정 단백질은, 비제한적으로 하기를 포함한다: 필그라스팀, 사르그라모스팀, 및 재조합 EPO.

재조합 및 돌연변이된 형태의 GM-CSF은 하기에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다: U.S. 특허 번호 5,391,485; 5,393,870; 및 5,229,496; 이들 모두는 본 명세서에 참고로 편입되어 있다. 재조합 및 돌연변이된 형태의 G-CSF은 하기에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다: U.S. 특허 번호 4,810,643; 4,999,291; 5,528,823; 및 5,580,755; 이들의 전체는 본 명세서에 참고로 편입되어 있다.

또한 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물과 함께 사용하기 위해 원상태, 자연 발생, 및 재조합 단백질이 제공된다. 기반이 되는 단백질의 약리적 활성의 적어도 일부는 생체내에서 나타내는 자연 발생 단백질의 돌연변이체 및 유도체 (예를 들어, 변형된 형태)가 또한 포함된다. 돌연변이체의 예는, 비제한적으로, 자연 발생 형태의 단백질에서 상응하는 잔기가 상이한 하나 이상의 아미노산 잔기를 갖는 단백질을 포함한다. 또한 용어 "돌연변이체"란, 그것의 자연 발생 형태 (예를 들어, 비당화된 형태)로 정상적으로 존재하는 탄수화물 모이어티 가 없는 단백질이다. 유도체의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 페길화된 유도체 및 융합 단백질, 예컨대 IgG1 또는 IgG3를 단백질 또는 관심 단백질의 활성부에 융합시켜 형성된 단백질. 참고, 예를 들어, Penichet, M.L. and Morrison, S.L., J. Immunol. Methods 248:91-101 (2001).

명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물과 함께 사용될 수 있는 항체는 단클론성 및 다클론성 항체를 포함한다. 항체의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 트라스투주맙, 리툭시맙, 베바시주맙, 페르투주맙, 토시투모맙, 에드레콜로맙, 및 G250. 아미노퓨린 화합물은 또한 항-TNF-α 항체, 및/또는 항-EGFR 항체, 예컨대, 예를 들어, 세툭시맙 또는 파니투무맙과 조합될 수 있거나 그것과 함께 사용될 수 있다.

본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물과 함께 사용될 수 있는 항체는 면역 관문 억제제, 예컨대, 항-CTLA4, 항-PD1, 항-PD-L1, 항-Tim-3, 항-Lag-3 항체를 포함한다. 일부 그와 같은 구현예에서, PD-1 또는 PD-L1 항체는, 예를 들어, 아벨루맙, 더발루맙, MEDI0680, 아테졸리주맙, BMS-936559, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, 또는 PDR-001이다. 하나의 그와 같은 구현예에서, 항-Lag-3 항체은 BMS-986016이다.

본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물과 함께 사용될 수 있는 추가 항체는 항-RSPO 항체를 포함한다.

대분자 활성제는 항-암 백신의 형태로 투여될 수 있다. 예를 들어, 사이토카인 예컨대 IL-2, G-CSF, 및 GM-CSF을 분비하거나 그 분비를 야기하는 백신은 제공된 방법 및 약제학적 조성물에서 사용될 수 있다. 참고, 예를 들어, Emens, L.A., 등, Curr. Opinion Mol. Ther. 3(1):77-84 (2001).

소분자인 제2 활성제는 또한 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물의 투여과 관련된 역효과를 경감시키기 위해 사용될 수 있다. 그러나, 일부 대분자처럼, 많은 사람들은, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물과 함께 (예를 들어, 전, 후 또는 동시에) 투여될 때 부가 또는 상승 효과를 제공할 수 있는 것으로 믿는다. 소분자 제2 활성제의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 항암제, 항생제, 면역억제성 제제, 및 스테로이드.

특정 구현예에서, 제2 제제는 BRAF 억제제, HSP 억제제, 프로테아솜 억제제, FLT3 억제제, MEK 억제제, PI3K 억제제, EGFR 억제제, 면역조절 화합물, 또는 TOR 키나제 억제제이다. 일부 그와 같은 구현예에서, BRAF 억제제는 소라페닙, 다브라페닙, 엔코라페닙, 또는 베무라페닙이다. 일부 그와 같은 구현예에서, HSP 억제제는 젤다나마이신, 가미트리닙, 루미네스핍, 또는 라디시콜이다. 일부 구현예에서, 프로테아솜 억제제는 보르테조밉, 카르필조밉, 익사조밉, 디설피람, 오프로조밉, 델란조밉, 또는 익사조밉이다. 다른 구현예에서, FLT3 억제제는 퀴자르티닙, 미도스타우린, 소라페닙, 수니티닙, 또는 레스타우르티닙이다. 일부 그와 같은 구현예에서, MEK 억제제는 트라메티닙, 코비메티닙, 비니메티닙, 셀루메티닙, PD-325901, CI-1040 (PD184352) 또는 TAK-733이다. 일부 다른 구현예에서, PI3K 억제제는 AT7867, AZD 8055, BX-912, 실미타세르팁, 픽틸리십, MK-2206, 또는 필라랄리십이다. 또 다른 구현예에서, EGFR 억제제는 게피티닙, 에를로티닙, 아파티닙, 오시머티닙 (Tagrisso), 로실레티닙, 또는 라파티닙이다. 일부 다른 구현예에서, TOR 키나제 억제제는 CC-115, CC-223, OSI-027, AZD8055, 사파니세르팁, 닥톨리십, BGT226, 복스탈리십 (SAR-245409), 아피톨리십, 오미팔리십 (GSK-2126458), PF-04691502, 게다콜리십 또는 PP242이다. 일부 구현예에서, 면역조절 화합물은 탈리도마이드, 레날리도마이드, 포말리도마이드, CC-220, 또는 CC-122이다.

본 명세서에 기재된 방법 또는 조성물 내에서 사용된 추가 항암제의 예는, 비제한적으로 하기를 포함한다: 아시비신; 아클라루비신; 아코다졸 하이드로클로라이드; 아크로닌; 아도젤레신; 알데스류킨; 알트레타민; 암보마이신; 아메탄트론 아세테이트; 암사크린; 아나스트로졸; 안트라마이신; 아스파라기나제; 아스페를린; 아자시티딘; 아제테파; 아조토마이신; 바티마스테이트; 벤조데파; 바이칼루타마이드; 비스안트렌 하이드로클로라이드; 바이스나파이드 디메실레이트; 바이젤레신; 블레오마이신 설페이트; 브레퀴나르 나트륨; 브로피리민; 부설판; 칵티노마이신; 칼루스테론; 카라세마이드; 카르베티머; 카보플라틴; 카무스틴; 카루비신 하이드로클로라이드; 카르젤레신; 세데핀골; 셀레콕십 (COX-2 억제제); 클로르암부실; 사이롤레마이신; 시스플라틴; 클라드리빈; 클로파라빈; 크리스나톨 메실레이트; 사이클로포스파마이드; 아라비녹실시토신; 다카바진; 다브라페닙; 닥티노마이신; 다우노루비신 하이드로클로라이드; 데시타빈; 덱소르파플라틴; 데자구아닌; 데자구아닌 메실레이트; 디아지쿠온; 도세탁셀; 독소루비신; 독소루비신 하이드로클로라이드; 드롤록시펜; 드롤록시펜 시트레이트; 드로모스타놀론 프로피오네이트; 두아조마이신; 데다트렉세이트; 에플로니틴 하이드로클로라이드; 엘사미트루신; 엔로플라틴; 엔프로메이트; 에피프로피딘; 에피루비신 하이드로클로라이드; 에르불로졸; 에소루비신 하이드로클로라이드; 에스트라무스틴; 에스트라무스틴 포스페이트 나트륨; 에타니다졸; 에토포시드; 에토포시드 포스페이트; 에토프린; 파드로졸 하이드로클로라이드; 파자라빈; 펜레티나이드; 플록수리딘; 플루다라빈 포스페이트; 플루오로우라실; 플루로시타빈; 포스퀴돈; 포스트리에신 나트륨; 젬시타빈; 젬시타빈 하이드로클로라이드; 하이드록시우레아; 이다루비신 하이드로클로라이드; 이포스파마이드; 일모포신; 이프로플라틴; 이리노테칸; 이리노테칸 하이드로클로라이드; 란레오타이드 아세테이트; 레트로졸; 류프롤라이드 아세테이트; 리아로졸 하이드로클로라이드; 로메트렉솔 나트륨; 로무스틴; 로소크산트론 하이드로클로라이드; 마소프로콜; 메이탄신; 메클로르에타민 하이드로클로라이드; 메게스트롤 아세테이트; 멜렌게스트롤 아세테이트; 멜팔란; 메노가릴; 메르캅토퓨린; 메토트렉세이트; 메토트렉세이트 나트륨; 메토프린; 메투레데파; 미틴도마이드; 미토카르신; 미토크로민; 미토길린; 미토말신; 미토마이신; 미토스페르; 미토탄; 미톡산트론 하이드로클로라이드; 마이코페놀산; 노코다졸; 노갈라마이신; 오마세탁신; 오르마플라틴; 옥시수란; 파클리탁셀; 결합된 주사가능 현탁액, 알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®); 페가스파르가스; 펠리오마이신; 펜타무스틴; 페플로마이신 설페이트; 페르포스파마이드; 피포브로만; 피포설판; 파이록산트론 하이드로클로라이드; 플리카마이신; 플로메스탄; 포르피머 나트륨; 포르피로마이신; 프레드니무스틴; 프로카바진 하이드로클로라이드; 퓨로마이신; 퓨로마이신 하이드로클로라이드; 피라조퓨린; 리보프린; 사핀골; 사핀골 하이드로클로라이드; 세무스틴; 심트라젠; 소라페닙; 스파르포세이트 나트륨; 스파르소마이신; 스피로게르마늄 하이드로클로라이드; 스피로무스틴; 스피로플라틴; 스트렙토니그린; 스트렙토조신; 설로페누르; 탈리소마이신; 테코갈란 나트륨; 도세탁셀; 테가푸르; 텔록산트론 하이드로클로라이드; 테모포르핀; 테니포시드; 테록시론; 테스토락톤; 티아미프린; 티오구아닌; 티오테파; 티아조퓨린; 티라파자민; 토레미펜 시트레이트; 트레스톨론 아세테이트; 트리시리빈 포스페이트; 트리메트렉세이트; 트리메트렉세이트 글루쿠로네이트; 트립토렐린; 투불로졸 하이드로클로라이드; 우라실 머스타드; 우레데파; 바프레오타이드; 베무라페닙; 베르테포르핀; 빈블라스틴 설페이트; 빈크리스틴 설페이트; 빈데신; 빈데신 설페이트; 비네피딘 설페이트; 빈글리시네이트 설페이트; 빈류로신 설페이트; 비노렐빈 타르트레이트; 빈로시딘 설페이트; 빈졸리딘 설페이트; 보로졸; 제니플라틴; 지노스타틴; 및 조루비신 하이드로클로라이드.

본 방법 또는 조성물 내에 포함될 다른 항암 약물은, 비제한적으로 하기를 포함한다: 20-에피-1,25 디하이드록시비타민 D3; 5-에티닐우라실; 아비라테론; 아클라루비신; 아실풀벤; 아데사이펜올; 아도젤레신; 알데스류킨; ALL-TK 길항제; 알트레타민; 암바무스틴; 아미녹스; 아미포스틴; 아미노레벌린산; 암루비신; 암사크린; 아나그렐라이드; 아나스트로졸; 안드로그라폴라이드; 혈관신생 억제제; 길항제 D; 길항제 G; 안타렐릭스; 항-등쪽화 골 형태형성 단백질-1; 안티안드로겐, 전립선 암종; 항에스트로겐; 안티네오플라스톤; 안티센스 올리고뉴클레오타이드; 아파이디콜린 글리시네이트; 세포자멸사 유전자 조절물질; 세포자멸사 조절자; 아퓨린산; ara-CDP-DL-PTBA; 아르기닌 데아미나제; 아설라크라인; 아타메스탄; 아트리무스틴; 악시나스타틴 1; 악시나스타틴 2; 악시나스타틴 3; 아자세트론; 아자톡신; 아자티로신; 박카틴 III 유도체; 발라놀; 바티마스테이트; BCR/ABL 길항제; 벤조클로린; 벤조일스타우로스포린; 베타 락탐 유도체; 베타-알레틴; 베타클라마이신 B; 베툴린산; bFGF 억제제; 바이칼루타마이드; 비스안트렌; 비스아지리디닐스페르민; 바이스나파이드; 비스트라텐 A; 바이젤레신; 브레플레이트; 브로피리민; 부도티테인; 부티오닌 설폭시민; 칼시포트리올; 칼포스틴 C; 캄프토테신 유도체; 카페시타빈; 카복사미드-아미노-트리아졸; 카복시아미도트리아졸; 카레스트 M3; 연골 유래된 억제제; 카르젤레신; 카세인 키나제 억제제 (ICOS); 카스타노스페리민; 세크로핀 B; 세트로렐릭스; 클로를린스; 클로로퀴녹살린 설폰아미드; 시카프로스트; 시스-포르피린; 클라드리빈; 클로마이펜 유사체; 클로트리마졸; 콜리스마이신 A; 콜리스마이신 B; 콤브레타스타틴 A4; 콤브레타스타틴 유사체; 코나게닌; 크람베스시딘 816; 크리스나톨; 크립토파이신 8; 크립토파이신 A 유도체; 큐라신 A; 사이클로펜트안트라퀴논; 사이클로플라탐; 사이페마이신; 사이타라빈 옥포스페이트; 세포용해 인자; 사이토스타틴; 다클릭시맙; 데시타빈; 데하이드로디뎀닌 B; 데슬로렐린; 덱사메타손; 덱시포스파마이드; 덱스라족산; 덱스베라파밀; 디아지쿠온; 디뎀닌 B; 디독스; 디에틸노르스페르민; 디하이드로-5-아자시티딘; 디하이드로탁솔, 9-; 디옥사마이신; 디페닐 스피로무스틴; 도세탁셀; 도코사놀; 돌라세트론; 독시플루리딘; 독소루비신; 드롤록시펜; 드로나비놀; 듀오카르마이신 SA; 엡셀렌; 에코무스틴; 에델포신; 에드레콜로맙; 에플로니틴; 엘레멘; 에미테푸르; 에피루비신; 에프리스테라이드; 에스트라무스틴 유사체; 에스트로겐 효능제; 에스트로겐 길항제; 에타니다졸; 에토포시드 포스페이트; 엑세메스탄; 파드로졸; 파자라빈; 펜레티나이드; 필그라스팀; 피나스테라이드; 플라보피리돌; 플레즈엘라스틴; 플루아스테론; 플루다라빈; 플루오로다우노루니신 하이드로클로라이드; 포르페니멕스; 포르메스탄; 포스트리에신; 포테무스틴; 가돌리늄 텍사파이린; 갈륨 니트레이트; 갈로시타빈; 가니렐릭스; 젤라티나제 억제제; 젬시타빈; 글루타티온 억제제; 헵설팜; 헤레굴린; 헥사메틸렌 비스아세트아미드; 하이페리신; 이반드론산; 이다루비신; 이독시펜; 이드라만톤; 일모포신; 일로마스타트; 이마티닙; 이미퀴모드; 면역증대 펩타이드; 인슐린-유사 성장 인자-1 수용체 억제제; 인터페론 효능제; 인터페론; 인터류킨; 아이오벤구안; 아이오도독소루비신; 아이포메아놀, 4-; 아이로플락트; 아이르소글라딘; 아이소벤가졸; 아이소호모할리콘드린 B; 이타세트론; 자스플라키놀라이드; 카할라리드 F; 라멜라린-N 트리아세테이트; 란레오타이드; 레이나마이신; 레노그라스팀; 렌티난 설페이트; 렙톨스타틴; 레트로졸; 백혈병 억제 인자; 백혈구 알파 인터페론; 류프롤라이드+에스트로겐+프로게스테론; 류프로렐린; 레바미솔; 리아로졸; 선형 폴리아민 유사체; 친유성 이당류 펩타이드; 친유성 백금 화합물; 리쏘클린아미드 7; 로바플라틴; 롬브리신; 로메트렉솔; 로니다민; 로소크산트론; 록소리빈; 루르토테칸; 루테튬 텍사파이린; 라이소필린; 분해적 펩타이드; 마이탄신; 만노스타틴 A; 마리마스타트; 마소프로콜; 마스핀; 마트릴라이신 억제제; 매트릭스 메탈로프로테이나제 억제제; 메노가릴; 메르바론; 메테렐린; 메티오니나제; 메토클로프라마이드; MIF 억제제; 미페프리스톤; 밀테포신; 미리모스팀; 미토구아존; 미토락톨; 미토마이신 유사체; 미토나파이드; 미토톡신 섬유아세포 성장 인자-사포린; 미톡산트론; 모파로텐; 몰그라모스팀; 세툭시맙, 인간 융모막 성선자극호르몬; 모노포스포릴 지질 A+마이코박테리움 세포벽 sk; 모피다몰; 머스타드 항암제; 마이카퍼옥사이드 B; 마이코박테리아 세포 벽 추출물; 마이리아포론; N-아세틸디날린; N-치환된 벤즈아미드; 나파렐린; 나그레스트립; 날록손+펜타조신; 나파빈; 나프테르핀; 나르토그라스팀; 네다플라틴; 네모루비신; 네리드론산; 닐루타마이드; 니사마이신; 산화질소 모듈레이터; 산화질소 산화방지제; 니트룰린; 오블리메르센; O⁶-벤질구아닌; 옥트레오타이드; 오키세논; 올리고뉴클레오타이드; 오나프리스톤; 온단세트론; 온단세트론; 오라신; 경구 사이토카인 유도물질; 오르마플라틴; 오사테론; 옥살리플라틴; 옥사우노마이신; 파클리탁셀; 파클리탁셀 유사체; 파클리탁셀 유도체; 결합된 주사가능 현탁액, 알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®); 팔라우아민; 팔미토일라이족신; 팔미드론산; 파낙시트리올; 파노미펜; 파라박틴; 파젤립틴; 페가스파르가스; 펠데신; 펜토산 폴리설페이트 나트륨; 펜토스타틴; 펜트로졸; 퍼플루브론; 페르포스파마이드; 페릴릴 알코올; 펜아지노마이신; 페닐아세테이트; 포스파타제 억제제; 피시바닐; 필로카르핀 하이드로클로라이드; 피라루비신; 피리트렉심; 플라세틴 A; 플라세틴 B; 플라스미노겐 활성제 억제제; 백금 착물; 백금 화합물; 백금-트리아민 복합체; 포르피머 나트륨; 포르피로마이신; 프레드니손; 프로필 비스-아크리돈; 프로스타글란딘 J2; 프로테아솜 억제제; 단백질 A-기반 면역 조절제; 단백질 키나제 C 억제제, 미세조류; 단백질 티로신 포스파타제 억제제; 퓨린 뉴클레오사이드 포스포릴라제 억제제; 퓨르퓨린스; 피라졸로아크리딘; 피리독실화된 헤모글로빈 폴리옥시에틸렌 콘주게이트; raf 길항제; 랄티트렉세드; 라모세트론; ras 파르네실 단백질 전달효소 억제제; ras 억제제; ras-갭 억제제; 레텔립틴 데메틸화된; 레늄 Re 186 에티드로네이트; 라이족신; 리보자임; RII 레틴아미드; 로히투카인; 로무르타이드; 로퀴니멕스; 부비기논 B1; 루복실; 사핀골; 사인토핀; sar무스틴; 사르코파이톨 A; 사르그라모스팀; Sdi 1 모방체; 세무스틴; 노화 유래된 억제제 1; 센스 올리고뉴클레오타이드; 신호 형질도입 억제제; 시조피란; 소부족산; 나트륨 보로캅테이트; 나트륨 페닐아세테이트; 솔베롤; 소마토메딘 결합 단백질; 소네르민; 스파르포스산; 스피카마이신 D; 스피로무스틴; 스플레노펜틴; 스펀지스타틴 1; 스쿠알라민; 스티피아미드; 스트로멜라이신 억제제; 설피노신; 초활성 혈관활성 장관 펩타이드 길항제; 수리다스타; 수라민; 스와인소닌; 탈리무스틴; 타목시펜 메티오다이드; 타우로무스틴; 타자로텐; 테코갈란 나트륨; 테가푸르; 텔루라피릴륨; 텔로머라제 억제제; 테모포르핀; 테니포시드; 테트라클로로데카옥사이드; 테트라조민; 탈리블라스틴; 티오코랄린; 트롬보포이에틴; 트롬보포이에틴 모방체; 티말파신; 티모포이에틴 수용체 효능제; 티모트리난; 갑상선 자극 호르몬; 주석 에틸 에티오퓨르퓨린; 티라파자민; 티타노센 이염화물; 탑센틴; 토레미펜; 번역 억제제; 트레티노인; 트리아세틸우리딘; 트리시리빈; 트리메트렉세이트; 트립토렐린; 트로피세트론; 투로스테라이드; 티로신 키나제 억제제; 타이르포스틴; UBC 억제제; 우베니멕스; 비뇨생식동-유래된 성장 억제 인자; 우로키나제 수용체 길항제; 바프레오타이드; 바리올린 B; 벨라레솔; 베라민; 베르딘; 베르테포르핀; 비노렐빈; 빈크살틴; 비탁신; 보로졸; 조노테론; 제니플라틴; 질라스코르브; 및 지노스타틴 스티말라머.

본 방법 또는 조성물에서 특히 유용한 특정 제2 활성제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 리툭시맙, 오블리메르센, 인플릭시맙, 도세탁셀, 셀레콕십, 멜팔란, 덱사메타손, 스테로이드, 젬시타빈, 시스플라티넘, 테모졸로마이드, 에토포시드, 사이클로포스파마이드, 테모다르, 카보플라틴, 프로카바진, 카무스틴, 타목시펜, 토포테칸, 메토트렉세이트, 게피티닙, 파클리탁셀, 플루오로우라실, 류코보린, 이리노테칸, 카페시타빈, 인터페론 알파, 페길화된 인터페론 알파, 시스플라틴, 티오테파, 플루다라빈, 카보플라틴, 리포좀 다우노루비신, 사이타라빈, 빈블라스틴, IL-2, GM-CSF, 다카바진, 비노렐빈, 졸레드론산, 팔미트로네이트, 클라리트로마이신, 부설판, 프레드니손, 비스포스포네이트, 삼산화 비소, 빈크리스틴, 독소루비신, 강시클로비르, 에스트라무스틴 인산나트륨, 클리노릴, 및 에토포시드.

본 방법 또는 조성물에서 특히 유용한 다른 특정 제2 활성제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 소라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, 트라메티닙, 코비메티닙, 비니메티닙, 셀루메티닙, PD-325901, CI-1040 (PD184352), TAK-733, AT7867, AZD 8055, BX-912, 실미타세르팁, 픽틸리십, MK-2206, 필라랄리십, 게피티닙, 에를로티닙, 라파티닙, 오시머티닙, CC-115, CC-223, OSI-027, AZD8055, 사파니세르팁, 닥톨리십, BGT226, 복스탈리십, 아피톨리십, 오미팔리십, PF-04691502, 게다콜리십, PP242, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 또는 CC-122.

본 방법 또는 조성물에서 특히 유용한 다른 특정 제2 활성제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 아벨루맙, 더발루맙, MEDI0680, 아테졸리주맙, BMS-936559, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, PDR-001, 소라페닙, 세툭시맙, 파니투무맙, 에를로티닙, 트라메티닙, 트라스투주맙, CC-223, CC-122 또는 라파티닙.

본 명세서에서 제공된 방법의 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물과 병용한 제2 활성제의 사용은 당해 기술 분야의 종자자에 의해 적절한 것으로 간주되는 바와 같이 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물의 투여 동안에 또는 직후에 변형 또는 지연될 수 있다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물이 단독으로 또는 다른 요법과 함께 투여된 대상체는, 적절할 때 항구토제, 골수 성장 인자, 및 혈액 제제의 수혈을 포함하는 지지적 관리를 수용할 수 있다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물이 투여된 대상체는 당해 기술 분야의 종사자의 판단에 따라 제2 활성제로서 성장 인자가 투여될 수 있다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 젬시타빈, 시스플라티넘, 5-플루오로우라실, 미토마이신, 메토트렉세이트, 빈블라스틴, 독소루비신, 카보플라틴, 티오테파, 파클리탁셀, 결합된 주사가능 현탁액-알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®), 또는 도세탁셀과 함께 국소적으로 진전된 또는 전이성 요상피 암종을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 아래와 같은 제2 활성 성분과 함께 투여된다: 재발한 또는 진행성 뇌종양 또는 재발성 신경교세포종을 가지고 있는 소아 환자에 대한 테모졸로마이드; 재발한 또는 진행성 CNS 암에 대한 셀레콕십, 에토포시드 및 사이클로포스파마이드; 재발성 또는 진행성 수막종, 악성 수막종, 혈관주위세포종, 다중 뇌 전이, 재발한 뇌종양, 또는 새로 진단된 다형상 교모세포종을 가지고 있는 환자에 대한 테모졸로마이드; 재발성 교모세포종을 가지고 있는 환자에 대한 이리노테칸; 뇌간 신경아교종을 가지고 있는 소아 환자에 대한 카보플라틴; 진행성 악성 신경아교종을 가지고 있는 소아 환자에 대한 프로카바진; 열악한 예후 악성 뇌종양, 새로 진단된 또는 재발성 다형상 교모세포종을 가지고 있는 환자에 대한 사이클로포스파마이드; 고등급 재발성 악성 신경아교종에 대한 카무스틴; 역형성 별아교세포종에 대한 테모졸로마이드 및 타목시펜; 또는 신경아교종, 교모세포종, 역형성 별아교세포종 또는 역형성 희소돌기아교세포종에 대한 토포테칸.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 메토트렉세이트, 사이클로포스파마이드, 5-플루오로우라실, 에버롤리무스, 파클리탁셀, 결합된 주사가능 현탁액-알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®), 라파티닙, 트라스투주맙, 팔미드로네이트 디나트륨, 에리불린 메실레이트, 에버롤리무스, 젬시타빈, 팔보시클립, 익사베필론, 아도-트라스투주맙 엠탄신, 페르투주맙, 티오테파, 방향화효소 억제제, 엑세메스탄, 선택적 에스트로겐 모듈레이터, 에스트로겐 수용체 길항제, 안트라사이클린, 엠탄신, 및/또는 펙시다티닙과 함께 전이성 유방암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 테모졸로마이드, 독소루비신, 에버롤리무스, 플루오로우라실, 5-플루오로우라실, 또는 스트렙토조신과 함께 신경내분비 종양을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 메토트렉세이트, 젬시타빈, 시스플라틴, 세툭시맙, 5-플루오로우라실, 블레오마이신, 도세탁셀 또는 카보플라틴과 함께 재발성 또는 전이성 두경부암을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 일 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 세툭시맙과 함께 두경부암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 젬시타빈, 파클리탁셀, 결합된 주사가능 현탁액-알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®), 5-플루오로우라실, 에버롤리무스, 이리노테칸, 미토마이신 C, 수니티닙 또는 에를로티닙과 함께 췌장암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 게티피닙, 에를로티닙, 옥살리플라틴, 5-플루오로우라실, 이리노테칸, 카페시타빈, 세툭시맙, 라무시루맙, 파니투무맙, 베바시주맙, 류코보린 칼슘, 론서프, 레고라페닙, ziv-아플리베르셉트, 트라메티닙, 파클리탁셀, 결합된 주사가능 현탁액-알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®), 및/또는 도세탁셀과 함께 결장암을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 베바시주맙, 이리노테칸 하이드로클로라이드, 카페시타빈, 세툭시맙, 라무시루맙, 옥살리플라틴, 세툭시맙, 플루오로우라실, 류코보린 칼슘, 트리플루리딘 및 티피라실 하이드로클로라이드, 파니투무맙, 레고라페닙, 또는 ziv-아플리베르셉트 과 함께 결장암을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 EGFR 억제제 (예를 들어 세툭시맙 또는 에를로티닙) 및/또는 BRAF 억제제 (예를 들어, 소라페닙, 다브라페닙, 또는 베무라페닙) 과 함께 결장암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 카페시타빈, 세툭시맙, 에를로티닙, 트라메티닙, 및/또는 베무라페닙과 함께 난치성 결장직장암을 가지고 있는 환자 또는 1차 요법에 실패하거나 결장 또는 직장 선암종에서 열악한 성능을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 EGFR 억제제 (예를 들어 세툭시맙 또는 에를로티닙) 및 BRAF 억제제 (예를 들어, 소라페닙, 다브라페닙, 또는 베무라페닙) 과 함께 난치성 결장직장암을 가지고 있는 환자 또는 1차 요법에 실패하거나 결장 또는 직장 선암종에서 열악한 성능을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 항-RSPO 항체와 함께 난치성 결장직장암을 가지고 있는 환자 또는 1차 요법에 실패하거나 결장 또는 직장 선암종에서 열악한 성능을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 플루오로우라실, 류코보린, 트라메티닙 및/또는 이리노테칸과 함께 IIIa 내지 IV기 결장직장암을 가지고 있는 환자 또는 전이성 결장직장암이 이전에 치료되었던 환자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은, EGFR 억제제 (예를 들어 세툭시맙 또는 에를로티닙) 및 BRAF 억제제 (예를 들어, 소라페닙, 다브라페닙, 또는 베무라페닙) 과 함께 IIIa 내지 IV기 결장직장암을 가지고 있는 환자 또는 전이성 결장직장암이 이전에 치료되었던 환자에게 투여된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 카페시타빈, 젤로다, 트라메티닙, 옥살리플라틴 및/또는 이리노테칸 과 함께 난치성 결장직장암을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은, EGFR 억제제 (예를 들어 세툭시맙 또는 에를로티닙) 및 BRAF 억제제 (예를 들어, 소라페닙, 다브라페닙, 또는 베무라페닙) 과 함께 난치성 결장직장암을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 카페시타빈, 트라메티닙, 및/또는 이리노테칸과 함께 난치성 결장직장암 또는 절제불가능 또는 전이성 결장직장 암종을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은, EGFR 억제제 (예를 들어 세툭시맙 또는 에를로티닙) 및 BRAF 억제제 (예를 들어, 소라페닙, 다브라페닙, 또는 베무라페닙) 과 함께 난치성 결장직장암 또는 절제불가능 또는 전이성 결장직장 암종을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 단독으로 또는 인터페론 알파, 5-플루오로우라실/류코보린 또는 카페시타빈과 함께 절제불가능 또는 전이성 간세포 암종을 가지고 있는 환자에게 투여되거나; 또는 시스플라틴 및 티오테파, 또는 소라페닙과 함께 원발성 또는 전이성 간암을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 단독으로 또는 소라페닙, 수니티닙, 에를로티닙, 및/또는 시롤리무스과 함께 절제불가능 또는 전이성 간세포 암종을 가지고 있는 환자에게 투여되거나; 또는 소라페닙, 수니티닙, 에를로티닙, 및/또는 라파마이신과 함께 원발성 또는 전이성 간암을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은, 면역 관문 억제제 (예를 들어, 항-CTLA4, 항-PD1, 항-PD-L1, 항-Tim-3, 또는 항-Lag-3 항체) 또는 BRAF 억제제 (예를 들어, 소라페닙, 다브라페닙, 또는 베무라페닙) 과 함께 1차, 절제불가능, 또는 전이성 간암을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 일부 그와 같은 구현예에서, 항-PD-1 또는 항-PD-L1 항체은 아벨루맙, 더발루맙, MEDI0680, 아테졸리주맙, BMS-936559, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, 또는 PDR-001이다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 투여된 단독으로 또는 레날리도마이드, 포말리도마이드 또는 CC-122과 함께 1차, 절제불가능 또는 전이성 간세포 암종을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 단독으로 또는 CC-223과 함께 1차, 절제불가능 또는 전이성 간세포 암종을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 시스플라틴/5-플루오로우라실, 라무시루맙, 도세탁셀, 독소루비신 하이드로클로라이드, 플루오로우라실 주사, 트라스투주맙, 및/또는 미토마이신 C과 함께 위 (위) 암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 면역 관문 억제제 (예를 들어, 항-CTLA4, 항-PD1, 항-PD-L1, 항-Tim-3, 또는 항-Lag-3 항체) 및/또는 BRAF 억제제 (예를 들어, 소라페닙, 다브라페닙, 또는 베무라페닙)과 함께 다양한 유형 또는 단계의 흑색종을 가지고 있는 환자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 알데스류킨, 코비메티닙, 다브라페닙, 다카바진, IL-2, 탈리모젠 라헤파레프벡, 재조합 인터페론 알파-2b, 이필리무맙, 펨브롤리주맙, 라파티닙, 트라메티닙, 니볼루맙, 페그인터페론알파-2b, 알데스류킨, 다브라페닙, 및/또는 베무라페닙과 함께 다양한 유형 또는 단계의 흑색종을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 독소루비신, 파클리탁셀, 결합된 주사가능 현탁액-알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®), 빈블라스틴 또는 페길화된 인터페론 알파과 함께 카포시 육종을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 메토트렉세이트, 메클로르에타민 하이드로클로라이드, 아파티닙 디말레에이트, 페메트렉세드, 베바시주맙, 카보플라틴, 시스플라틴, 세리티닙, 크리조티닙, 라무시루맙, 펨브롤리주맙, 도세탁셀, 비노렐빈 타르트레이트, 젬시타빈, 파클리탁셀, 결합된 주사가능 현탁액-알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®), 에를로티닙, 게피티닙, 및/또는 이리노테칸과 함께 비-소세포 폐암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 카보플라틴 및 이리노테칸과 함께 비-소세포 폐암 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 도세탁셀과 함께 이전에 으로 처리하고 카보플라틴/에토포시드 및 방사선요법으로 이전에 치료되었던 비-소세포 폐암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 카보플라틴 및/또는 도세탁셀, 또는 카보플라틴, 파실리탁셀, 결합된 주사가능 현탁액-알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®), 및/또는 흉부 방사선요법과 함께 비-소세포 폐암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 도세탁셀과 함께 IIIB기 또는 IV 비-소세포 폐암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 오블리메르센, 메토트렉세이트, 메클로르에타민 하이드로클로라이드, 에토포시드, 토포테칸 또는 독소루비신과 함께 소세포 폐암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물 및 도세탁솔은 carbo/VP 16 및 방사선요법으로 이전에 치료되었던 소세포 폐암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은, 카보플라틴, 독소루비신, 젬시타빈, 시스플라틴, 카페시타빈, 파클리탁셀, 결합된 주사가능 현탁액-알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®), 덱사메타손, 아바스틴, 사이클로포스파마이드, 토포테칸, 올라파립, 티오테파, 또는 이들의 조합물과 함께 다양한 유형 또는 단계의 난소암 예컨대 복막 암종, 유두상 장액 암종, 난치성 난소암 또는 재발성 난소암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은, 카페시타빈, 5-플루오로우라실 플러스 류코보린, 젬시타빈, 이리노테칸 플러스 젬시타빈, 사이클로포스파마이드, 빈크리스틴, 덱사메타손, GM-CSF, 셀레콕십, 강시클로비르, 파클리탁셀, 결합된 주사가능 현탁액-알부민용 파클리탁셀 단백질-결합된 입자 (ABRAXANE®), 도세탁셀, 에스트라무스틴, 덴드레온, 아비라테론, 바이칼루타마이드, 카바지탁셀, 데가렐릭스, 엔잘루타마이드, 고세렐린, 류프롤라이드 아세테이트, 미톡산트론 하이드로클로라이드, 프레드니손, 시푸류셀-T, 라듐 223 이염화물, 또는 이들의 조합물과 함께 다양한 유형 또는 단계의 전립선암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은, 카페시타빈, IFN, 타목시펜, IL-2, GM-CSF, 셀레콕십, 또는 이들의 조합물 과 함께 다양한 유형 또는 단계의 신장 세포 암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 IFN, 닥티노마이신, 독소루비신, 이마티닙 메실레이트, 파조파닙, 하이드로클로라이드, 트라벡테딘, COX-2 억제제 예컨대 셀레콕십, 및/또는 설린닥 과 함께 다양한 유형 또는 단계의 부인과, 자궁 또는 연조직 육종 암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 셀레콕십, 에토포시드, 사이클로포스파마이드, 도세탁셀, 아페시타빈, IFN, 타목시펜, IL-2, GM-CSF, 또는 이들의 조합물과 함께 다양한 유형 또는 단계의 고형 종양을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 투여된 단독으로 또는 비노렐빈과 함께 악성 중피종, 또는 늑막 이식물 또는 악성 중피종 증후군을 갖는 IIIB기 비-소세포 폐암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 나비토클락스, 베네토클락스 및/또는 오바토클락스과 함께 림프종 및 다른 혈액 암을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 삼산화 비소, 플루다라빈, 카보플라틴, 다우노루비신, 사이클로포스파마이드, 사이타라빈, 독소루비신, 이다루비신, 미톡산트론 하이드로클로라이드, 티오구아닌, 빈크리스틴, 및/또는 토포테칸과 함께 난치성 또는 재발한 또는 고위험 급성 골수 백혈병을 포함하는 급성 골수 백혈병을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 리포좀 다우노루비신, 토포테칸 및/또는 사이타라빈과 함께 이롭지 않은 핵형 급성 골수아세포 백혈병을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 단독으로 또는 제2 활성 성분 예컨대 빈블라스틴 또는 플루다라빈, 클로르암부실, 블레오마이신, 브렌툭시맙 베도틴, 카무스틴, 클로르암부실, 사이클로포스파마이드, 다카바진, 독소루비신, 로무스틴, 메클로르에타민 하이드로클로라이드, 프레드니손, 프로카바진 하이드로클로라이드 또는 빈크리스틴과 함께 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 피부 T-세포 림프종, 피부 B-세포 림프종, 미만성 큰 B-세포 림프종 또는 재발한 또는 난치성 저등급 여포성 림프종을 비제한적으로 포함하는 다양한 유형의 림프종을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 덱사메타손, 졸레드론산, 파미드트로네이트, GM-CSF, 클라리트로마이신, 빈블라스틴, 멜팔란, 부설판, 사이클로포스파마이드, IFN, 프레드니손, 비스포스포네이트, 셀레콕십, 삼산화 비소, 페그인터페론알파-2b, 빈크리스틴, 카무스틴, 보르테조밉, 카르필조밉, 독소루비신, 파노비노스타트, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 탈리도마이드, 플레릭사포르 또는 이들의 조합물 과 함께 다양한 유형 또는 단계의 다발성 골수종을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 키메라성 항원 수용체 (CAR) T-세포와 함께 다양한 유형 또는 단계의 다발성 골수종을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 독소루비신, 빈크리스틴 및/또는 덱사메타손 과 함께 재발한 또는 난치성 다발성 골수종을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 셀레콕십, 에토포시드, 사이클로포스파마이드, 도세탁셀, 카페시타빈, IFN, 타목시펜, IL-2, GM-CSF, 또는 이들의 조합물과 함께 경피증 또는 피부 혈관염을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

환자에게 안전하게 그리고 효과적으로 투여될 수 있는 항암 약물 또는 제제의 투약량을 증가시키는 방법이 본 명세서에 또한 포함되고, 상기 방법은 상기 환자 (예를 들어, 인간)에게 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 이러한 방법에 의해 유익할 수 있는 환자는 피부, 피하 조직, 림프절, 뇌, 폐, 간, 뼈, 장, 결장, 심장, 췌장, 부신, 신장, 전립선, 유방, 결장직장, 또는 이들의 조합의 특정 암을 치료하기 위해 항암 약물과 관련된 역효과를 앓을 수 있는 환자이다. 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물의 투여는 항암 약물의 양을 달리 제한하는 중증도인 역효과를 경감 또는 감소시킨다.

일 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 항암 약물의 환자에의 투여와 관련된 역효과의 발생 전, 동안 또는 그 후에 약 0.1 내지 약 150 mg, 약 1 내지 약 100 mg, 약 2 내지 약 50 mg, 또는 약 1 내지 약 10 mg 범위의 양으로 매일 투여된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 항암 약물과 관련된 역효과 예컨대 비제한적으로 혈전색전증, 호중구감소증 또는 혈소판감소증을 피하기 위해 특정 제제 예컨대 헤파린, 아스피린, 쿠마딘, 항-인자 Xa, 또는 G-CSF와 함께 투여된다.

일 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 항암 약물, 항-염증제, 항히스타민제, 항생제, 및 스테로이드를 비제한적으로 포함하는 추가의 활성 성분과 함께 혈관신생과 관련되거나 그것을 특징으로 하는 질환 및 장애을 가지고 있는 환자에게 투여된다.

또 다른 구현예에서, 암을 치료, 예방 및/또는 관리하는 방법이 본 명세서에 포함되고, 상기 방법은 암을 치료, 예방 또는 관리하기 위해 현재 사용되고 있는 수술, 면역요법, 생물학적 요법, 방사선 요법, 또는 다른 비-약물 기반 요법을 비제한적으로 포함하는 종래의 요법 (예를 들어 전, 동안, 또는 후)과 함께 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에서 제공된 화합물 및 종래의 요법의 병용은 특정 환자에서 예상외로 효과적인 특유의 치료 레지멘을 제공할 수 있다. 이론에 의한 제한됨 없이, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물이 종래의 요법와 동시에 주어질 때 부가 또는 상승 효과를 제공할 수 있는 것으로 믿는다.

본 명세서의 다른 곳에서 논의된 바와 같이, 수술, 화학요법, 방사선 요법, 호르몬 요법, 생물학적 요법 및 면역요법을 비제한적으로 포함하는 종래의 요법과 관련된 부정적인 또는 원하지 않는 효과를 감소, 치료 및/또는 예방하는 방법이 본 명세서에 포함된다. 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물 및 다른 활성 성분은 종래의 요법과 관련된 역효과의 발생 전, 동안 또는 그 후에 환자에게 투여될 수 있다.

주기 요법

특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 예방제 또는 치료제는 주기적으로 환자에게 투여된다. 주기 요법은 활성제 일정한 기간 동안 활성제의 투여, 이어서 일정한 기간 동안 휴지, 및 이러한 순차적인 투여의 반복을 수반한다. 주기 요법은 요법 중 하나 이상에 대한 내성 발달을 감소시키고, 요법 중 하나의 부작용을 피하거나 감소시키거나/시키고, 치료의 효능을 향상시킬 수 있다.

결과적으로, 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 약 1주 또는 2 주의 휴지기와 함께 4 내지 6 주 사이클로 단일 또는 분할 용량으로 매일 투여된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 28일 주기의 1 내지 10 연속 일 동안 매일, 그 다음 28 일 주기의 휴지 동안 투여 없는 휴지기로 단일 또는 분할 용량으로 투여된다. 주기 방법은 추가로, 투약 사이클의 빈도, 수, 및 길이가 증가되는 것을 허용한다. 따라서, 특정 구현예에서 단독으로 투여될 때가 전형적인 것보다 더 많은 사이클 동안 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물의 투여가 본 명세서에서 포함된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은, 제2 활성 성분이 또한 투여되지 않은 환자에서 용량-제한 독성을 전형적으로 야기하는 더 큰 수의 사이클 동안 투여된다.

일 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 매일 그리고 계속해서 3 또는 4 주 동안 약 0.1 내지 약 150 mg/1일의 용량으로 이어서 1 또는 2 주의 중단으로 투여된다.

또 다른 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물은 정맥내로 투여되고 제2 활성 성분은 경구로 투여되되, 아미노퓨린 화합물은4 내지 6 주의 사이클 동안, 제2 활성 성분 전에 30 내지 60 분 동안 투여된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물 및 제2 활성 성분의 조합은 사이클 마다 약 90 분에 걸쳐 정맥내 주입으로 투여된다. 특정 구현예에서, 하나의 사이클은 3 내지 4 주 동안 매일 및 그 다음 1 또는 2 주 휴지로 약 0.1 내지 약 150 mg/1일의 본 명세서에서 제공된 아미노퓨린 화합물 및 약 50 내지 약 200 mg/m²/1일의 제2 활성 성분의 투여를 포함한다. 특정 구현예에서, 조합 치료가 환자에게 투여되는 사이클의 수는 약 1 내지 약 24 사이클, 약 2 내지 약 16 사이클, 또는 약 4 내지 약 3 사이클의 범위이다.

약제학적 조성물 및 투여 경로

아미노퓨린 화합물은 종래의 형태의 제제, 예컨대 캡슐, 마이크로캡슐, 정제, 과립, 분말, 트로키, 알약, 좌약, 주사, 현탁액, 시럽, 패치, 크림, 로션, 연고, 겔, 스프레이, 용액 및 에멀젼으로 경구로, 국소적으로 또는 비경구로 대상체에게 투여될 수 있다. 적합한 제형은 종래의, 유기 또는 무기 첨가제를 사용하여 통상적으로 이용된 방법에 의해 제조될 수 있고, 상기 첨가제의 예는 다음과 같다: 부형제 (예를 들어, 수크로스, 전분, 만니톨, 소르비톨, 락토스, 글루코스, 셀룰로스, 탈크, 인산칼슘 또는 탈산칼슘), 결합제 (예를 들어, 셀룰로스, 메틸셀룰로스, 하이드록시메틸셀룰로스, 폴리프로폴리피롤리돈, 폴리비닐피롤리돈, 젤라틴, 아라비아검, 폴리에틸렌글리콜, 수크로스 또는 전분), 붕해제 (예를 들어, 전분, 카복시메틸셀룰로스, 하이드록시프로필전분, 저급 치환된 하이드록시프로필셀룰로스, 중탄산나트륨, 인산칼슘 또는 칼슘 시트레이트), 윤활제 (예를 들어, 스테아르산마그네슘, 경질 무수 규산, 탈크 또는 나트륨 라우릴 설페이트), 풍미제 (예를 들어, 시트르산, 멘톨, 글리신 또는 오렌지 분말), 보존제 (예를 들어, 나트륨 벤조에이트, 아황산수소나트륨, 메틸파라벤 또는 프로필파라벤), 안정화제 (예를 들어, 시트르산, 나트륨 시트레이트 또는 아세트산), 현탁화제 (예를 들어, 메틸셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈 또는 알루미늄 스테아레이트), 분산제 (예를 들어, 하이드록시프로필메틸셀룰로스), 희석제 (예를 들어, 물), 및 기재 왁스 (예를 들어, 코코아 버터, 백색 바셀린 또는 폴리에틸렌 글리콜). 약제학적 조성물 중 아미노퓨린 화합물의 유효량은 원하는 효과를 발휘하는 수준; 예를 들어, 경구 및 비경구 투여 모두에 대해 약 0.005 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 10 mg/대상체의 체중 kg의 단위 투약량일 수 있다.

대상체에게 투여될 아미노퓨린 화합물의 용량은 오히려 널리 가변성이 있고, 건강-관리 종사자의 판단에 좌우될 수 있다. 일반적으로, 아미노퓨린 화합물은 약 0.005 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 10 mg/대상체의 체중 kg의 용량으로1 내지 4회/1일 투여될 수 있지만, 상기 투약량은 상기 대상체의 연령, 체중 및 의료 병태 및 투여의 유형에 따라 적절하게 변할 수 있다. 일 구현예에서, 용량은 약 0.01 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 10 mg/대상체의 체중 kg, 약 0.1 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 10 mg/대상체의 체중 kg, 약 1 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 10 mg/대상체의 체중 kg 또는 약 1 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 5 mg/대상체의 체중 kg이다. 일 구현예에서, 1회 용량은 1일 기준으로 주어진다. 임의의 주어진 경우에, 투여된 아미노퓨린 화합물의 양은 활성 성분의 용해도, 사용된 제형 및 투여 경로와 같은 인자에 좌우될 것이다. 일 구현예에서, 국소 농도의 적용은 세포내 노출 또는 약 0.01 - 10 μM의 농도를 제공한다.

또 다른 구현예에서, 질환 또는 장애의 치료 또는 예방 방법이 본 명세서에 제공되고, 상기 방법은 약 1 mg/1일 내지 약 1000 mg/1일, 약 1 mg/1일 내지 약 750 mg/1일, 약 1 mg/1일 내지 약 500 mg/1일, 약 1 mg/1일 내지 약 250 mg/1일 또는 약 100 mg/1일 내지 약 1000 mg/1일의 아미노퓨린 화합물을 그것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.

또 다른 구현예에서, 약 1 mg 내지 1000 mg, 약 5 mg 내지 약 1000 mg, 약 10 mg 내지 약 1000 mg, 약 25 mg 내지 약 1000 mg, 약 50 mg 내지 약 1000 mg, 약 100 mg 내지 약 1000 mg, 또는 약 250 mg 내지 약 1000 mg의 아미노퓨린 화합물을 포함하는 단위 투약 제형이 본 명세서에 제공된다.

아미노퓨린 화합물은 매일 1회, 2회, 3, 4 또는 그 초과로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 600 mg 이하의 용량이 1일 1회 용량으로서 투여되고 600 mg 초과의 용량이 총 1일 용량의 이분의 일과 동등한 양으로 매일 2회 투여된다.

아미노퓨린 화합물은 편리를 이유로 경구로 투여될 수 있다. 일 구현예에서, 경구로 투여될 때, 아미노퓨린 화합물은 식사 및 물과 함께 투여된다. 또 다른 구현예에서, 아미노퓨린 화합물은 물 또는 쥬스 (예를 들어, 사과 쥬스 또는 오렌지 쥬스)에서 분산되고 현탁액으로서 경구로 투여된다.

아미노퓨린 화합물은 또한 진피내로, 근육내로, 복강내로, 경피로, 정맥내로, 피하로, 비강내로, 경막외로, 설하로, 뇌내로, 질내로, 경피로, 직장으로, 점막으로, 흡입으로, 또는 귀, 코, 눈, 또는 피부에 국소적으로 투여될 수 있다. 투여 방식은 건강-관리 종사자의 재향 하에서 있고, 의료 병태의 부위에 부분적으로 좌우될 수 있다.

일 구현예에서, 추가의 캐리어, 부형제 또는 비히클 없이 아미노퓨린 화합물을 함유하는 캡슐이 본 명세서에 제공된다.

또 다른 구현예에서, 유효량의 아미노퓨린 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 캐리어 또는 비히클을 포함하는 조성물이 본 명세서에서 제공되고, 여기서 약제학적으로 허용가능한 캐리어 또는 비히클은 부형제, 희석제, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 일 구현예에서, 본 조성물은 약제학적 조성물이다.

본 조성물은 정제, 씹을 수 있는 정제, 캡슐, 용액, 비경구 용액, 트로키, 좌약 및 현탁액 및 기타 동종의 것의 형태일 수 있다. 본 조성물은 단일 정제 또는 캡슐 또는 편리한 용적의 액체일 수 있는 투약량 단위로 1일 용량, 또는 1일 용량의 편리한 분획을 함유하도록 제형화될 수 있다. 일 구현예에서, 용액은 수용성 염, 예컨대 하이드로클로라이드 염으로부터 제조된다. 일반적으로, 모든 조성물은 약제학적 화학에서 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다. 캡슐은 아미노퓨린 화합물을 적합한 캐리어 또는 희석제과 혼합하고 적절한 양의 상기 혼합물을 캡슐 내에 충전함으로써 제조될 수 있다. 통상적인 캐리어 및 희석제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 불활성 분말화된 서브스턴스 예컨대 많은 상이한 종류의 전분, 분말화된 셀룰로스, 특히 결정성 및 미세결정성 셀룰로스, 당류 예컨대 푸룩토스, 만니톨 및 수크로스, 곡물 가루 및 유사한 식용 분말.

정제는 직접적인 압축, 습식 과립화, 또는 건조 과립화에 의해 제조될 수 있다. 그것의 제형은 일반적으로 희석제, 결합제, 윤활제 및 붕해제 뿐만 아니라 본 화합물을 편입한다. 전형적인 희석제는, 예를 들어, 다양한 유형의 전분, 락토스, 만니톨, 카올린, 인산칼슘 또는 설페이트, 무기 염 예컨대 염화나트륨 및 분말화된 당을 포함한다. 분말화된 셀룰로스 유도체가 또한 유용하다. 전형적인 정제 결합제는 서브스턴스 예컨대 전분, 젤라틴 및 당류 예컨대 락토스, 푸룩토스, 글루코스 및 기타 동종의 것이다. 천연 및 합성 검이 또한 편리하고, 아카시아, 알기네이트, 메틸셀룰로스, 폴리비닐피롤리딘 및 기타 동종의 것을 포함한다. 폴리에틸렌 글리콜, 에틸셀룰로스 및 왁스는 또한 결합제로서 쓰일 수 있다.

윤활제는 염료에서 점착으로부터 천공 및 정제를 예방하기 위해 정제 제형에서 필요할 수 있다. 윤활제는 탈크, 마그네슘 및 칼슘 스테아레이트, 스테아르산 및 수소화된 식물성 오일 같은 미끄러운 고체로부터 선택될 수 있다. 정제 붕해제는 젖게 되는 경우 팽윤하여 정제를 파괴하고 화합물을 방출시키는 서브스턴스이다. 이들은 전분, 점토, 셀룰로스, 알긴 및 검을 포함한다. 더 상세하게는, 옥수수 및 감자 전분, 메틸셀룰로스, 한천, 벤토나이트, 목재 셀룰로스, 분말화된 천연 스펀지, 양이온교환 수지, 알긴산, 구아르 검, 사이트루스 펄프 및 카복시메틸 셀룰로스, 뿐만 아니라 나트륨 라우릴 설페이트는, 예를 들어, 사용될 수 있다. 정제는 풍미제 및 밀봉제로서 당으로, 또는 막-형성 보호 제제로 코팅되어 정제의 용해 특성을 변형시킬 수 있다. 조성물은 또한, 예를 들어, 제형에서 서브스턴스 예컨대 만니톨을 사용함으로써, 씹을 수 있는 정제로서 제형화될 수 있다.

좌약으로서 아미노퓨린 화합물을 투여하는 것을 원하는 경우, 전형적인 기제는 사용될 수 있다. 코코아 버터는, 그것의 용융점을 약간 상승시키기 위해 왁스의 첨가에 의해 변형될 수 있는, 전통적 좌약 기제이다. 특히, 다양한 분자량의 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 수-혼화성 좌약 기제는 널리 사용중이다.

아미노퓨린 화합물의 효과는 적절한 제형에 의해 지연 또는 연장될 수 있다. 예를 들어, 아미노퓨린 화합물의 느리게 가용성 펠렛은 정제 또는 캡슐에서, 또는 서방출 이식가능 디바이스로서 제조 및 편입될 수 있다. 기술은 또한 몇 개의 상이한 용해 속도의 펠렛 제조 그리고 펠렛의 혼합물로 캡슐 충전을 포함한다. 정제 또는 캡슐은 예측가능한 기간 동안 용해를 견디는 필름으로 코팅될 수 있다. 심지어 비경구 제제는 혈청에서 느리게 분산하게 하는 유성 또는 에멀젼화된 비히클에서 아미노퓨린 화합물을 용해 또는 현탁시킴으로써, 지속적으로 제조될 수 있다.

실시예

하기 예는 예시로서, 비제한적으로 제시된다. 화합물은, 입체화학용 칸-인골드-프렐로그 규칙을 지원받아, 화학 구조에 대하여 체계적인 명칭을 생성하는, Chemdraw Ultra 9.0 (Cambridgesoft)에서 제공된 자동 명칭 생성 도구를 사용하여 명명된다.

세포 검정

다중화된 세포독성 검정 . 세포는 37 °C에서 5% CO₂의 가습된 분위기에서 RPMI1640, 10% FBS, 2 mM L-알라닐-L-글루타민, 1 mM Na 피루베이트 또는 특별한 배지에서 성장된다. 세포는 384-웰 플레이트에 씨딩되고 37 °C에서 5% CO₂의 가습된 분위기에 인큐베이션된다. 화합물은 세포 씨딩 24 시간 후 첨가된다. 동시에, 타임 제로 미처리된 세포 플레이트는 생성된다. 72 시간 인큐베이션 기간 후, 세포는 고정되고 형광적으로 표지된 항체 및 핵 염료로 염색되어 핵, 세포자멸적 세포 및 유사분열 세포의 가시화를 허용한다. 세포자멸적 세포는 항-활성 카스파제-3 항체를 사용하여 검출된다. 유사분열 세포는 항 포스포-히스톤-3 항체를 사용하여 검출된다. 화합물은 3.16-배 연속으로 희석되고 10 μM의 최고 시험 농도로부터 0.1% DMSO의 최종 검정 농도에서 10 농도에 대해 분석된다. 자동화 형광 현미경검사는 Molecular Devices ImageXpress Micro XL 고-함량 이미저를 사용하여 수행되었고, 이미지는 4X 대물렌즈로 수집되었다.

데이터 분석. 16-비트 TIFF 이미지는 획득되고 MetaXpress 5.1.0.41 소프트웨어로 분석된다. 세포 증식은 편입된 핵 염료의 신호 강도에 의해 측정된다. 세포 증식 검정 출력은 상대 세포수로서 지칭된다. 세포 증식 종점을 결정하기 위해, 세포 증식 데이터 출력은 하기 식을 사용하여 대조군의 백분율 (POC)로 전환된다:

POC = 상대 세포수 (화합물 웰들)/상대 세포수 (비히클 웰들)x100

상대 세포수 IC₅₀은 DMSO 대조군에 비해 최대 가능한 반응의 50%에서 시험 화합물 농도이다. GI₅₀은 관측된 성장을 절반만큼 감소시키는데 필요한 농도이다. 이것은 미처리된 세포에서 성장과 웰에서 씨딩된 세포의 수 사이 중간 수준으로 성장을 억제시키는 농도 (타임 제로 값)이다. IC₅₀ 값은 에스자형 4개의 지점, 4개의 파라미터 1-부위 용량 반응 모델에 데이터를 맞추기 위해 비선형 회귀를 사용하여 계산된다:

y (맞춤) = A + [(B - A)/(1 + ((C/x) ^ D))].

활성화된 카스파제-3 마커는 세포를 초기 내지 후기 단계 세포자멸사로 표지화한다. 카스파제-3 신호에서 5-배수 (Cal_X5) 유도를 야기시키는 시험 화합물의 농도는 상당한 세포자멸사 유도를 나타낸다. DMSO 대조군과 비교하여 화합물에 의한 카스파제 3의 최대 유도는 최대 배수 변화로서 보고된다.

(화합물 1에 의해 예시된) 아미노퓨린 화합물은 다양한 암 세포주에서 항-증식성 활성을 갖기 위해 보여주거나 보여질 것이다. 이들 암 세포주에서의 항-증식성 활성은 아미노퓨린 화합물이, 흑색종, 결장직장암, 위암, 두경부 암, 갑상선암, 방광암, CNS 암, 폐암, 췌장암, 및 연조직 암에 의해 예시된 바와 같이, 고형 종양을 포함하는, 암의 치료에서 유용할 수 있다는 것을 나타낸다.

또 다른 구현예에서, (화합물 1에 의해 예시된) 아미노퓨린 화합물은 다양한 암 세포주에서 세포자멸사를 유도하기 위해 보여주거나 보여질 것이다. 세포자멸사의 유도는 아미노퓨린 화합물이, 방광암, 유방암, CNS 암 (신경교세포종 및 신경아교종 포함), 결장암, 위장 암 (예를 들어, 위암 또는 결장암), 내분비 암 (예를 들어, 갑상선암 또는 부신 암), 여성 유전성 암 (예를 들어, 자궁경부암 또는 난소 투명 세포 암, 외음부 암, 자궁 암, 또는 난소 암), 두경부 암, 조혈 암 (예를 들어, 백혈병 또는 골수종), 신장암, 간암, 폐 (예를 들어, NSCLC 또는 SCLC), 흑색종, 췌장 암, 전립선암, 또는 연조직 암 (예를 들어, 육종 또는 골육종)에 의해 예시된 바와 같이, 고형 종양을 포함하는, 암의 치료에서 유용할 수 있다는 것을 나타낸다.

또 다른 구현예에서, (화합물 1에 의해 예시된) 아미노퓨린 화합물은 다양한 암 세포주에서 G1/S 정지를 야기시키기 위해 보여주거나 보여질 것이다. 이들 암 세포주에서 G1/S 정지 야기는 아미노퓨린 화합물이 방광암, 유방암, CNS 암 (예를 들어, 신경아교종 또는 신경교세포종), 결장암, 위장 암 (예를 들어, 위암), 내분비 암 (예를 들어, 갑상선암 또는 부신 암), 여성 유전성 암 (예를 들어, 자궁 암, 자궁경부암, 난소 투명 세포 암, 또는 외음부 암), 두경부 암, 조혈 암 (예를 들어, 백혈병 또는 골수종), 신장암, 간암, 폐암 (예를 들어, NSCLC 또는 SCLC), 흑색종, 췌장 암, 전립선암, 또는 연조직 암 (육종 또는 골육종)에 의해 예시된 바와 같이, 고형 종양을 포함하는, 암의 치료에서 유용할 수 있다는 것을 나타낸다.

다중화된 세포독성 검정 . 또 다른 실험에서, 세포는 37　°C에서 5% CO₂의 가습된 분위기에서 RPMI1640, 10% FBS, 2 mM L-알라닐-L-글루타민, 1 mM Na 피루베이트 또는 특별한 배지에서 성장되었다. 세포는 384-웰 플레이트에서 씨딩되었고 37 °C에서 5% CO₂의 가습된 분위기에서 인큐베이션되었다. 화합물은 세포 씨딩 24 시간 후 첨가되었다. 동시에, 타임 제로 미처리된 세포 플레이트는 생성되었다. 72 시간 인큐베이션 기간 후, 세포는 고정되었고 형광적으로 표지된 항체 및 핵 염료로 염색되어 핵, 세포자멸적 세포 및 유사분열 세포의 가시화를 허용하였다. 세포자멸적 세포는 항-활성 카스파제-3 항체를 사용하여 검출되었다. 유사분열 세포는 항 포스포-히스톤-3 항체를 사용하여 검출되었다. 화합물은 3.16-배 연속으로 희석되었고 10 μM의 최고 시험 농도로부터 0.1% DMSO의 최종 검정 농도에서 10 농도에 대해 분석되었다. 자동화 형광 현미경검사는 Molecular Devices ImageXpress Micro XL 고-함량 이미저를 사용하여 수행되었고, 이미지는 4X 대물렌즈로 수집되었다.

데이터 분석. 16-비트 TIFF 이미지는 획득되었고 MetaXpress 5.1.0.41 소프트웨어로 분석되었다. 세포 증식은 편입된 핵 염료의 신호 강도에 의해 측정되었다. 세포 증식 검정 출력은 상대 세포수로서 지칭되었다. 세포 증식 종점을 결정하기 위해, 세포 증식 데이터 출력은 하기 식을 이용하여 대조군의 백분율 (POC)로 전환되었다:

POC = 상대 세포수 (화합물 웰들)/상대 세포수 (비히클 웰들)x100

상대 세포수 IC₅₀은 DMSO 대조군에 비해 최대 가능한 반응의 50%에서 시험 화합물 농도이었다. GI₅₀은 관측된 성장을 절반만큼 감소시키는데 필요한 농도를 지칭한다. 이것은 미처리된 세포에서 성장과 웰에서 씨딩된 세포의 수 사이 중간 수준으로 성장을 억제시키는 농도 (타임 제로 값)이다. IC₅₀ 값은 에스자형 4개의 지점, 4개의 파라미터 1-부위 용량 반응 모델에 데이터를 맞추기 위해 비선형 회귀를 사용하여 계산되었다:

y (맞춤) = A + [(B - A)/(1 + ((C/x) ^ D))].

활성화된 카스파제-3 마커는 세포를 초기 내지 후기 단계 세포자멸사로 표지화한다. 카스파제-3 신호에서 2-배 (Cal-X2) 또는 5-배수 (Cal_X5) 유도를 야기시키는 시험 화합물의 농도는 상당한 세포자멸사 유도를 나타낸다. DMSO 대조군과 비교하여 화합물에 의한 카스파제 3의 최대 유도는 최대 배수 변화로서 보고된다.

HCC 증식에서 효과. HCC 세포주는 72시간 동안 화합물 1의 증가 농도 또는 DMSO로 처리되었다. 구체적으로, 디메틸 설폭사이드 (DMSO)내 다양한 농도에서 화합물 1은 청각 분배기 (EDC ATS-100)을 통해 비어있는 384-웰 플레이트 속에 스팟팅되었다. 화합물 1은 10-지점 연속 희석 방식 (3-배 희석)으로 2중으로 플레이트 내에 스팟팅되었다. 화합물 1로 스팟팅된 플레이트의 복제물은 상이한 세포주로 사용을 위하여 제조되었다. 화합물 플레이트 복제후, 모든 플레이트는 밀봉되었고 (Agilent ThermoLoc) 최대 1 개월 동안 -20 ℃에서 저장되었다. 시험을 위하여 준비된 경우, 플레이트는 냉동고로부터 제거되었고, 해동되었고, 시험 세포의 첨가 직전에 개봉되었다.

시험에 앞서, 세포는 배양 플라스크에서 성장 및 팽창되어 개시 물질의 충분한 양을 제공하였다. 세포는 적절한 밀도로 희석되었고 화합물-스팟팅된 384-웰 플레이트에 직접적으로 첨가되었다. 세포는 72시간 동안 37 °C/5% CO₂에서 성장하게 되었다. 화합물이 첨가된 경우 시간(t₀)에서, 초기 세포 수는 생존 세포에서 존재하는 ATP에 의해 생성된 발광의 수준을 정량화시킴으로써 생존력 검정 (Cell Titer-Glo)를 통해 평가되었다. 72 시간 후, 화합물-처리된 세포의 세포 생존력은 Cell Titer-Glo 및 발광 측정을 통해 평가되었다. 화합물 1에 세포자멸적 반응은 처리된 세포 및 DMSO 대조군 세포에서 카스파제 3 및 카스파제 7 (카스파제 3/7-Glo)의 활성 정량화에 의해 평가되었다.

GI ₅₀ 및 IC ₅₀ 값의 결정. 4 파라미터 기호논리 모델 (에스자형 용량-반응 모델)은 화합물의 GI₅₀ 값을 결정하는데 사용되었다.

y = (A+ ((B-A)/ (1+ ((C/x)^D))))

A = Y_Min

B = Y_Max

C = EC₅₀

D = 힐 슬로프

GI₅₀은 Y = (Y_Max+Yt ₀ )/2 경우 화합물의 농도이다

IC₅₀은 Y = DMSO 대조군의 50% 경우 화합물의 농도이다

Y = 발광 단위로서 측정된 세포 생존력

t₀ = 화합물이 첨가된 경우 시간

증식 및 세포자멸사는 CellTiter-Glo 및 카스파제 3/7-Glo를 사용하여 측정되었다. CalX2 값은 화합물 1이 DMSO 대조군에 비교된 절단된 카스파제 3/7의 2-배수 증가를 유도하는 최저 농도이다. 증식 및 세포자멸사 데이터는 3 실험의 평균이다.

화합물 1은 증식을 억제시키고 다중 HCC 주에서 세포자멸사를 유도한다.

64 암 세포주의 패널에 걸친 항-증식성 활성. 세포는 72시간 동안 화합물 1의 증가 농도 또는 DMSO로 처리되었다. 증식은 기재된 바와 같이 CellTiter-Glo를 사용하여 측정되었다. 결과는 표 5에서 보여진다.

화합물 1은 CRC, 흑색종, 위암, HCC, 폐암, 췌장암, 백혈병, 및 다발성 골수종으로부터 유래된 다중 암 세포주의 증식을 억제시키기 위해 보여졌다.

BRAF 돌연변이체 및 베타-카테닌 돌연변이체 또는 활성 암 세포주에서 항-증식성 및 세포자멸적 활성 . 평가된 5 세포주에서 BRAF, CTNNB1, KRAS, 및 EGFR의 돌연변이 상태는 공공 데이터 (COSMIC 및 CCLE)에 기반되었고 내부적으로 확인되었다. β-카테닌 상태는 일시적 형질감염에 의해 최상부 플래시 리포터 시스템을 사용하여 평가되었다. Fop 플래시 리포터에 대한 최상부 플래시 리포터의 비가 2 초과인 것처럼 세포주는 β-카테닌 활성으로서 정의되었다. N/A: 이용불가능. Colo 205 (BRAF V600E)에서 형질감염 효율은 이러한 접근법을 사용하여 그것의 β-카테닌 활성을 접근하기에 너무 낮았다. 5 세포주에서 화합물 1의 항증식성 및 세포자멸적 활성은 상기에 기재된 바와 같이 측정되었다.

화합물 1은 증식을 강력하게 억제시키고, BRAF 돌연변이체 CRC, BRAF 돌연변이체 흑색종, 베타-카테닌 돌연변이체/EGFR 돌연변이체 CRC (즉 베타-카테닌 활성/EGFR 돌연변이체 CRC), 베타-카테닌 돌연변이체/KRAS 돌연변이체 위암 (즉 베타-카테닌 활성/KRAS 돌연변이체 위암), 및 HCC를 포함하는, 양쪽 BRAF 돌연변이체 및 베타-카테닌 돌연변이체 또는 활성 암 세포주에서 세포자멸사를 유도한다.

종양발생 경로 억제. MAPK 신호전달에서 효과 . 암 세포는 96-웰 조직 배양판에서 25,000 세포/웰의 밀도로 씨딩되었고 밤새 CO₂ 인큐베이터에서 37 °C에 인큐베이션되었다. 2시간 동안 37 °C에서 화합물 1로 처리 후, 세포는 중간규모 세포용해 버퍼로 용해되었고 각각의 용해물에서 pRSK S380 수준은 중간규모 ELISA 기술을 통해 측정되었다.

결론. 화합물 1은 다중 암 세포주에서 pRSK1을 강력하게 억제시켰다 (표 7).

시간 경과 실험에서, Colo-205 암 세포는 다양한 기간 동안 0.5 μM 화합물 1로 처리되었다. pRSK S380에서 화합물 1의 효과는 기재된 바와 같이 측정되었다. 다른 MAPK 경로 마커 (DUSP4 및 DUSP6)에서 화합물 1의 효과는 특정 항체로 웨스턴 블랏팅을 통해 측정되었다. 도 1에서 시간 경과 데이터는 화합물 1이 하기 ERK 표적의 지속된 억제 (최대 72 시간)을 야기시킨다는 것을 나타낸다: pRSK1, DUSP4 및 DUSP6. BRAF 억제제 (BRAFi)는 BRAF 돌연변이체 CRC 주에서 지속된 ERK 억제를 야기시키지 않는다 (Corcoran 등, Cancer Discov. 2012, 2:227-35). ERKdml 충분한 및 지속된 억제는 BRAF 돌연변이체 흑색종 (Bollag 등, Nat Rev Drug Disc. 2012; 11, 873-886) 및 CRC 환자 (Corcoran 등, Cancer Discov. 2012, 2:227-35)에서 BRAFi 및 MEK 억제제 (MEKi)의 임상 효능에 중요한 것처럼 보인다. BRAFi에 의한 ERK의 지속된 억제의 부족은 BRAF 돌연변이체 CRC 환자에서 BRAFi의 임상 활성의 부족에 기여할 수 있다. 화합물 1에 의한 ERK의 지속된 억제는 BRAF 돌연변이체 CRC 환자에서 BRAFi에 대해 장점을 제공할 수 있다.

MAPK 신호전달을 억제시키기 위한 화합물 1의 능력은 DUSP4 및 DUSP6 단백질 발현 결정에 의해 평가되었다. 결장암 세포주 Colo 205 (BRAF V600E) 배양물은 2, 8 또는 24 시간 동안 화합물 1의 증가 농도 또는 DMSO로 처리되었다. 단백질은 처리된 세포로부터 추출되었고 DUSP4, DUSP6, 사이클린 D1, c-Myc, YAP 또는

-액틴에 대한 항체를 사용하여 웨스턴 블랏에 의해 분석되었다. RNAs는 Cell-To-CT 키트를 사용하여 추출되었고 정량적 PCR은 DUSP4, DUSP6, SPRY2, c-Myc 및 사이클린 D1에 특정한 프로브로 수행되었다.

-액틴에 특정한 프로브는 정규화를 위하여 사용되었다.

Colo 205 (BRAF V600E)에서, DUSP4 및 DUSP6은 2 시간만큼 일찍 화합물 1에 의해 상당히 감소되었고 감소는 24 시간 내내 지속되었다 (도 2A). 화합물 1 처리는, 강력한 ERK 억제와 일치하는, Colo 205에서 농도-의존 방식으로 SPRY2 전사의 감소로 이어졌다 (도 2B). 양쪽 표준적 Wnt 및 MAPK 신호전달의 다운스트림인, 사이클린 D1 및 c-Myc의 수준은 평가되었다. 화합물 1은 Colo 205 세포에서 사이클린 D1 및 c-Myc RNA 및 단백질 수준을 상당히 감소시켰다 (도 2A-2C). 화합물 1 처리는 Colo 205에서 24 시간에 감소된 YAP 단백질을 초래하였다 (도 2A). 종합하면, 우리 세포 데이터는 강한, 지속된 MAPK 경로 억제와 일치한다.

MAPK 신호전달을 억제시키기 위한 화합물 1의 능력을 추가로 평가하기 위해, RNA 발현은 추가의 MAPK 표적 (BMF, DUSP5, DUSP6, EFNA1, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, GJA1, IL-8, SPRY2, 및 SPRY4)가 평가되었다. (BRAF V600E 돌연변이를 특징으로 하는) 결장암 세포주 Colo 205 및 (BRAF V600E 돌연변이를 특징으로 하는) HT-29의 배양물은 6시간 동안 0.3 또는 1 μM에서 DMSO 또는 화합물 1로 처리되었다. RNAs는 MagMAX 총 RNA 단리 키트를 사용하여 추출되었고 정량적 PCR은 BMF, DUSP5, DUSP6, EFNA1, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, GJA1, IL-8, SPRY2, SPRY4에 특정한 프로브로 수행되었다. 18S rRNA에 특정한 프로브는 정규화를 위하여 사용되었다.

양쪽 세포주에서, DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, SPRY2, SPRY4의 mRNA 수준은, ERK 억제와 일치하는, 화합물 1에 의해 감소되었다 (도 2D-2I). GJA1의 mRNA 수준이 Colo205 세포에서 감소되고 HT29에서 증가되는 발견은 화합물 1이 Colo205에서 세포독성이고 HT29에서 세포증식억제성이라는 우리의 발견에 관련될 수 있다. 화합물 1 처리는 Colo 205 및 HT-29에서 6 시간에 BMF 및 EFNA1의 증가된 mRNA 수준을 초래하였다. 종합하면, 우리 세포 데이터는 MAPK 경로 억제와 일치한다.

베타-카테닌 및 YAP 신호전달에서 효과. 화합물 1에 의해 베타-카테닌 및 YAP 표적 유전자에 대한 세포 활성은 평가되었다. 결장암 세포주 Colo 205 (BRAF V600E) 배양물은 2, 8 또는 24 시간 동안 화합물 1의 증가 농도 또는 DMSO로 처리되었다. RNAs는 Cell-To-CT 키트를 사용하여 추출되었고 정량적 PCR은 Axin2, CTGF, 및 AREG에 특정한 프로브로 수행되었다. β-액틴에 특정한 프로브는 정규화를 위하여 사용되었다.

화합물 1 처리는 증가된 Axin2 RNA로 이어졌다 (도 3A). 화합물 1은 2, 8 및 24 시간에 Colo 205 (BRAF V600E)에서 Hippo/YAP 표적 유전자 (CTGF, AREG)의 발현을 상당히 감소시켰다 (도 3A). 종합하면, 이들 데이터는 화합물 1이 Wnt 신호전달에 영향을 주고 Colo 205 암 세포에서 Hippo 신호전달을 차단한다는 것을 시사한다.

화합물 1에 의해 추가의 YAP 표적 유전자에 대한 세포 활성은 평가되었다 (도 3B-3E). 결장암 세포주 Colo 205 및 HT-29의 배양물은 6시간 동안 0.3 또는 1 μM에서 DMSO 또는 화합물 1로 처리되었다. RNAs는 MagMAX 총 RNA 단리 키트를 사용하여 추출되었고 정량적 PCR은 CYR61, CITED2, CXCL1, ELF3, HAS2, HES1, 및 MAFF에 특정한 프로브로 수행되었다. 18S rRNA에 특정한 프로브는 정규화를 위하여 사용되었다.

양쪽 세포주에서, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1 및 MAFF의 mRNA 수준은 화합물 1에 의해 감소되었다. CYR61 mRNA 수준이 HT29가 아닌 Colo205 세포에서 감소된다는 것 그리고 CITED2의 mRNA 수준이 Colo205가 아닌 HT29에서 증가되는 발견은 화합물 1이 Colo205에서 세포독성이고 HT29에서 세포증식억제성이라는 우리 발견에 관련될 수 있다. 화합물 1 처리는 Colo 205 및 HT-29에서 6 시간에 CITED2 및 ELF3 mRNA에 대하여 증가된 mRNA 수준을 초래하였다. (도 3B) 종합하면, 우리 세포 데이터는 YAP 경로 억제와 일치한다.

베타-카테닌 돌연변이를 갖는 세포주에서 감수성의 평가. β-카테닌 돌연변이를 가지고 있는 세포주에서 화합물 1의 효과는 평가되었다. (도 18 및 도 19A-19B). 화합물 1은 돌연변이된 β-카테닌을 가진 세포주에 대한 효능을 보여주었다. 그와 같은 세포주는 돌연변이된 β-카테닌을 특징으로 하는 암이 화합물 1로 처리에 더욱 감수성인 것을 입증한다. 화합물 1은 도 20에서 나타낸 바와 같이 BRAF 및 CTNNB1 돌연변이체 세포주에서 β-카테닌, 및 YAP를 조절하기 위해 추가로 보여졌다. 화합물 1은 또한 도 21A 및 도 21B에서 제공된 바와 같이 BRAF 및 CTNNB1 돌연변이체 세포주에서 MAPK, β-카테닌, 및 YAP에 의해 제어된 표적 유전자 발현을 조절한다.

웨스턴 블랏. MAPK, WNT/β-카테닌, 및 Hippo/YAP 경로 마커의 화합물 1 조절은 표준 웨스턴 블랏팅에 의해 평가되었다. LOX-IMVI, SW48, 및 Colo-205 세포는 250,000 세포/웰의 밀도로 6-웰 플레이트에서 분주되었고 밤새 부착하게 되었다. 화합물 1은 2, 8, 및 24 시간의 지속기간 동안 0.03, 0.1, 0.3, 1, 및 3 μM의 농도로 세포에 첨가되었다. 세포는 수확되었고 RIPA 완충액 (50 mM 트리스-HCl, pH 7.4, 150 mM 염화나트륨 [NaCl], 0.25% 데옥시콜산, 1% Nonidet P-40, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산 [EDTA], 프로테아제 및 포스파타제 억제제)에서 용해되었다. 세포 용해물은 나트륨 도데실 설페이트 (SDS)-샘플 완충액에서 가열되었고 조건당 40　μg의 세포 용해물은 겔상에 장입되었고 SDS 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 (PAGE)를 사용하여 분리되었다. 단백질은 니트로셀룰로스 막에 전달되었고, 항 DUSP4, DUSP6, cMyc, 사이클린 D1, YAP, AXIN2, HDAC5 (포스포 S498), 및 β-액틴 항체로 면역블랏팅되었다. 막은 Licor Odyssey 시스템에서 스캐닝되었다.

정량적 폴리머라제 연쇄 반응. MAPK, WNT/β-카테닌, 및 Hippo/YAP 경로 유전자의 화합물 1 조절은 실시간 (RT)-qPCR에 의해 평가되었다. 라이실 옥시다제 IMVI, SW48, 및 Colo-205 세포는 20,000 세포/웰의 밀도로 96-웰 플레이트에 분주되었고 밤새 부착하게 되었다. 화합물 1은 2, 8, 및 24 시간의 지속기간 동안 1 nM 내지 10 μM의 절반 로그 농도로 세포에 첨가되었다. 세포는 생성물 매뉴얼에 따라 TaqMan 유전자 발현 Cell-to-CT 키트를 사용하여 수확되었다. 다음으로, RT-PCR은 수행되었고 수득한 cDNA는 ViiA7 실시간 PCR 시스템 (Thermo Fisher Scientific)상의 qPCR 반응에서 사용되었다. TaqMan 프로브는 DUSP4, DUSP6, SPRY2, MYC, CCND1, AXIN2, CTGF, Cyr61, AREG, 및 ACTB 유전자에서 변화를 모니터링하는데 사용되었다. 모든 유전자는 ACTB 발현에 정규화되었고 DMSO-단독 대조군의 백분율로서 보고되었다.

유전자 발현 분석: 인간 기관지 상피 세포는 BEpiCM 성장 배지내 T-150 플라스크에서 배양되었고 80% 밀집도를 달성하게 되었다. 세포는 24시간 동안 BEpiCM 배지에서 150,000 세포/웰로 12-웰 플라스틱 배양판에서 분주되었다. 24-시간 인큐베이션 후, 세포는 30 분 동안 0.1, 1, 10 uM로 대조군, 화합물 1로서 디메틸 설폭사이드 (DMSO)로 처리되었다. 세포는 그 다음 24시간 동안 (포스페이트 완충 식염수 [PBS]에서 제형화된) 100 ng/ml 재조합 Wnt3a, (PBS에서 제형화된) 350 pM RSPO3 또는 Wnt3 및 RSPO3의 조합으로 자극되었다. 리보핵산 (RNA)는 제조자의 지침에 따라 Qiagen Rneasy Mini 키트를 사용하여 단리되었다. Axin2 및 유전자 발현은 역전사 폴리머라제 연쇄 반응 (RT-PCR) Taq-Man 검정을 사용하여 결정되었다. 정량적 PCR (qPCR)은 SuperScript® III 1-단계 RT-PCR 시스템을 사용하여 수행되었고 Viia 7 실시간 PCR 시스템에서 운영되었다. 데이터는 글리세르알데하이드 3-포스페이트 탈수소효소로 정규화되었다. 화합물 1은 인간 기관지 상피 세포에서 Axin2 발현을 억제시킨다. 유전자 발현은 24 시간에서 측정되었다. 이들 결과로부터 화합물 1이 인간 기관지 상피 세포에서 Axin2 발현을 억제시킨다는 것이 알려졌다. (도 22).

장기간 콜로니 검정. 화합물 1은 장기간 콜로니 형성 검정을 통해 암 세포의 콜로니 형성을 억제시키기 위한 그것의 능력에 대하여 평가되었다. 세포 및 화합물은 96-웰 플레이트에 첨가되었고 콜로니의 형성을 위하여 최대 8 주 동안 모니터링되었다. 화합물 및 배지는 검정의 과정 전반에 걸쳐 매 1 주 보충되었다. 콜로니 형성은 IncuCyte ZOOM 시스템에서 4x로 이미지형성을 통해 검출되었다. 화합물 1은 MEK 억제제 (트라메티닙) 및 ERK 억제제 (GDC0994)보다 더 큰 수준에서 β-카테닌 돌연변이체 세포의 콜로니 형성의 억제를 실증하였다. SW48 (결장) 세포, HCT-116 (결장) 세포, AGS (위) 세포, 및 Hep3B (HCC) 세포는 화합물 1로 처리되었고 MEK 억제제 또는 ERK 억제제로의 처리로 보여진 것보다 더 큰 수준의 억제를 보여주었다. (도 23A-23D). 화합물 1은 트라메티닙으로 MEK 억제제 처리에 저항성인 AGS 세포의 콜로니 형성을 놀랍게도 억제시킨다는 것이 추가로 알려졌다. 그와 같은 결과는 본 명세서에서 기재된 아미노퓨린 화합물, 예컨대 화합물 1이 다른 치료에 저항성인 암 치료에서 유용할 수 있다는 것을 시사한다.

면역조절 효과의 평가. 화합물 1의 효과는 PD-L1 발현 수준에서 평가되었다. 세포는 지시된 시간 동안 화합물 1의 존재 또는 부재 하에 배양된 후 PD-L1, DUSP4 및 α-튜불린 또는 α-액틴의 발현 수준이 웨스턴 블랏에 의해 측정되었다. PD-L1의 표면 수준을 검출하기 위해, 세포는 48시간 동안 지시된 농도로 DMSO 또는 화합물 1로 처리되었고 PD-L1의 세포 표면 발현은 PD-L1 (클론 29E.1A3.; BioLegend, San Diego, CA)에 APC-표지된 항체로 유세포측정 분석 (FACS)를 사용하여 검출되었다. PD-L1 양성 세포의 기하 평균은 FlowJo 10 (Treestar, Ashland, OR)에 의해 결정되었다.

결론. 화합물 1은 HOP62, KARPAS-299, 및 LOX-IMVI (BRAF V600E)를 포함하는 다중 암 세포에서 PD-L1 발현을 직접적으로 억제시킨다 (도 4A). FACS 분석은 표면 PD-L1 수준이 또한 다중 암 세포주에서 화합물 1에 의해 억제되는 것을 나타낸다 (도 4B).

PD-L1의 화합물 1 하향-조절이 T 세포 활성화를 향상시키는지는 결정하기 위해, 화합물-처리된 KARPAS-299 암 세포는 슈퍼 항원 (SEB)의 저농도로 자극된 PBMC-유래된 T 세포로 공-배양되었다. KARPAS-299 세포는 48시간 동안 지시된 농도로 DMSO (D) 또는 화합물 1로 처리되었다. 건강한 공여체로부터 PBMC는 48시간 동안 20 ng/ml SEB로 또는 없이 처리되었다. PBS로 세정 후, PBMCs는 24시간 동안 암 세포로 인큐베이션되었고 상청액은 수집되어 중간규모 검정을 사용하여 IL-2 및 IFNγ를 측정하였다.

IL-2 및 IFNγ의 상청액 수준은 T 세포 활성화의 기능성 마커로서 사용되었다. SEB의 부재 하에, 화합물-1-처리된 KARPAS-299 세포로 공-배양된 PBMC는 IL-2 또는 IFNγ를 거의 생산하지 못했다. 저농도의 SEB (20 ng/ml)의 존재 하에, PBMC로 공-배양된 화합물 1-처리된 암 세포는 양쪽 IL-2 및 IFNγ 생산의 증가된 수준을 실증하였다 (도 5A-5B). 화합물 1-처리된 암 세포에서 IL-2 및 IFNγ의 증가된 수준은 항-PD-L1 (Biolegend로부터 Ultra-LEAFTM)의 처리로 관측된 수준과 유사하였다.

IL-8의 수준에서 화합물 1 처리의 효과는 PBMC 배양 배지에서 결정되었다. PBMCs는 전혈로부터 단리되었고 RPMI 배지 플러스 10% FBS에서 배양되었다. PBMCs는 10 cm² 접시에서 1x10⁶/밀리리터로 분주되었다. PBMCs는 0.1% DMSO 또는 0.5 μM 화합물 1로 처리되었다. 처리는 지정된 시점에서 기록되었다. 배양 배지 (1mL)는 IL-8 분석에 사용되었다. IL-8 분석은 제조자의 지침에 따라 중간규모 V-Plex 인간 IL-8 키트로 수행되었다. 화합물 1은 상이한 시점에서 IL-8 수준을 억제시키는 것으로 알려졌다 (도 5C).

TEAD 리포터 검정. TEAD 리포터 활성은 YAP/TAZ 반응성 합성 프로모터 구동 루시퍼라아제 발현 (8xGTIIC-루시퍼라아제) 안정적으로 발현시키는 WI38 VA13 세포를 사용하여 분석되었다. 10,000 세포/웰은 백색-벽이 있는 96-웰 플레이트에서 씨딩되었고 밤새 정치되었다. 16-20 시간 후, 세포는 화합물로 처리되었고 TEAD 리포터 활성은 제조자 지침에 따라 Bright Glo 루시퍼라아제 검정 (Promega)를 사용하여24 또는 72 시간 후에 측정되었다. 이러한 검정은 화합물 1에 대하여 3회 그리고 트라메티닙에 대하여 2회 수행되었다. 참고 도 25.

생존력 검정. 8xGTIIC-루시퍼라아제를 발현시키는 병렬적으로 10,000 WI38 VA13 세포는 흑색-벽이 있는 96-웰 플레이트의 각각의 웰에서 씨딩되었다. 16-20 시간 후 세포는 24 또는 72 시간 동안 화합물로 처리되었다. 이때 혈청 및 화합물 함유 배지는 제거되었고 100 μl 무혈청 배지 및 100 μl 세포 Titer Fluor (Promega) 로 대체되었다. 플레이트는 판독 형광 출력 전 2시간 동안 37 °C에서 인큐베이션되었다. 이러한 검정은 살아있는-세포 프로테아제 활성의 측정에 기반된다. 생존력 검정은 TEAD 리포터에서 화합물의 임의의 효과가 생존력에서 화합물 효과의 결과가 아니었음을 확인하기 위해 수행되었다. 이러한 검정은 화합물 1에 대하여 3회 그리고 트라메티닙에 대하여 2회 수행되었다.

결론. 이들 데이터는 화합물 1로 처리가 T 세포 활성화를 강력하게 할 것을 시사하는 추가의 치료 가설을 제공한다. 시험관내 데이터는 화합물 1이 핵심 종양발생 경로 예컨대 MAPK 경로의 억제 그리고 종양 미세환경에서 면역 관문 분자 PD-L1 발현의 하향-조절에 의해 암 세포에 대한 T 세포 면역력을 향상시킬 수 있다는 것을 시사한다. PD-L1 (예를 들어, 흑색종, 폐, RCC, 또는 HCC)의 높은 수준을 발현시키는 암 유형은 따라서 화합물 1에 감수성일 수 있다.

동물 모델

이종이식 모델. 이종이식 모델 연구를 위하여 인간 암 세포주는 SCID (중증 복합성 면역결핍) 마우스에 주사되었다. 암 세포주는 시험관내 배양물에서 번식되었다. 종양 보유 동물은 마우스에 정확하게 결정된 세포 수의 주사에 의해 생성되었다. 동물의 접종 이후, 종양은 무작위화에 앞서 특정 크기로 성장하게 되었다. 사전-결정된 크기 사이 범위의 마우스 보유 이종이식 종양은 함께 풀링되었고 다양한 처리 그룹으로 무작위화되었다. 전형적인 효능 연구 설계는 종양-보유 마우스에 다양한 용량 수준으로 하나 이상의 화합물 투여를 포함하였다. 추가로, 참조 화학치료제 (양성 대조군) 및 음성 대조군은 유사하게 투여되었고 유지되었다. 종양 측정 및 체중은 연구의 과정 내내 얻어졌다.

마우스는 흡입된 이소플루란으로 마취되었고 그 다음 26-게이지 바늘이 구비된 멸균된 1 mL 주사기를 사용하여 PBS내 0.1 mL의 단일 세포 현탁액으로 우측 뒷다리 위 피하로 LOX-IMVI 종양 세포로 접종되었다. 동물의 접종 이후, 종양은 마우스의 무작위화에 앞서 대략 75-125 mm³로 또는 일부 경우에 250-400 mm³로 성장하게 되었다. 각각의 동물의 종양은 측정되었고 적절한 범위에서 종양을 가진 동물은 연구에서 포함되었다. 연구 풀로부터 동물은 그 다음 다양한 우리에 무작위로 분포되었고 우리는 비히클, 양성 대조군, 또는 시험품 그룹으로 무작위로 배정되었다. 모든 마우스는 우측 귀에 금속 귀 태그로 태깅되었다. 전형적인 그룹은 8-10 동물로 구성되었다. 전형적인 이종이식 연구를 위하여, 종양을 보유하는 SCID 마우스는 무작위 추출되었고, 예를 들어, 비제한적으로, qd, q2d, q3d, q5d, q7d 및 bid를 포함하는, 상이한 용량 스케줄링으로 100 mg/kg 내지 0.1 mg/kg 범위의 화합물로 투약되었다. 마우스는 1-4 주 동안 투약되었다. 종양은 캘리퍼스를 사용하여 매주 2회 측정되었고 종양 부피는 W² x L / 2의 식을 사용하여 계산되었다.

이들 연구의 목적은 세포주-유래된 이종이식 모델, LOX-IMVI (흑색종) 및 Colo205 (결장직장) 및 PDX1994060146 (환자-유래된 이종이식 [PDX146]) 결장직장 이종이식 모델에서 화합물 1의 효능을 시험하는 것이었다. 이들 모델이 선택된 것은 이들이 V600E BRAF 돌연변이를 갖기 때문이다. 추가의 PK/PD 분석은 PDX146 이종이식 모델에서 경로 바이오마커의 화합물 1-매개된 억제를 시험하기 위해 수행되었다.

LOX-IMVI 피하 흑색종 이종이식 모델 . 이 연구의 목적은 LOX-IMVI 흑색종 이종이식 모델에서 화합물 1의 효능을 확인하는 것이었다. 화합물 1의 2개의 용량 수준 (15 및 30 mg/kg)을 시험하는 LOX-IMVI 이종이식 모델에서 하나의 연구 (도 6)은 비히클 대조군에 비교하여 상당한 종양 부피 감소를 실증하였다 (양쪽 용량 수준에 대하여 p<0.001). 종양 퇴화는 양쪽 용량 수준에 대하여 9 동물 중 9마리에서 관측되었고 각각의 그룹으로부터 9 동물 중 1마리는 연구 마지막에 무종양이었다.

별개의 실험에서, 화합물 1은 0.2, 1, 5, 10, 및 15 mg/kg으로 8 일 동안 경구로, QD 투여되었다. 용량-의존적 항종양 활성은 LOX-IMVI 이종이식 모델에서 화합물 1 처리로 관측되었다 (도 7). 종양 퇴화는 10 및 15 mg/kg 용량 수준에서 관측되었다.

Colo 205 피하 결장직장 이종이식 모델 . 이들 연구의 목적은 Colo 205 결장직장암 이종이식 모델에서 화합물 1의 효능을 시험하는 것, 그리고 매일 2회 투약 (BID)가 항종양 활성에서 영향을 주었는지를 결정하는 것이었다. 제1 실험에서 화합물 1은 0.2, 1, 5, 10, 및 15 mg/kg으로 15 일 동안 경구로, QD 투여되었다. 용량-의존적 항종양 활성은 Colo 205 이종이식 모델에서 화합물 1 처리로 관측되었다 (도 8). 스케줄링 연구는 BID 투약이 화합물 1의 항종양 활성을 증가시켰는지를 결정하기 위해 수행되었다. 용량-의존적 항종양 활성은 Colo 205 이종이식 모델에서 화합물 1 처리로 관측되었다 (도 9).

PDX1994060146 피하 결장직장 환자-유래된 이종이식 모델. 이들 연구의 목적은 PDX1994060146 (PDX146) 결장직장암 이종이식 모델에서 화합물 1의 효능을 시험하는 것 그리고 BID 투약이 항종양 활성에 영향을 주었는지를 결정하는 것이었다. 진행 시간 (TTP) 연구는 종양 성장에서 더 긴 처리 지속기간의 효과를 결정하기 위해 수행되었다.

제1 실험에서 화합물 1은 22 일 동안 BID 5 및 15 mg/kg 또는1, 5, 및 15 mg/kg으로 경구로, QD 투여되었다. 용량-의존적 항종양 활성은 PDX146 이종이식 모델에서 화합물 1 처리로 관측되었다 (도 10A-10B). 15 mg/kg BID 투약은 15 mg/kg QD의 투여에 비교하여 화합물 1의 항종양 활성을 증가시키는 것처럼 보였다.

TTP 연구에서, 화합물 1은 49-77 일 동안 경구로, 1, 5, 및 15 mg/kg BID 투여되었다. 화합물 1 처리 그룹은 그룹 평균이 대략 1200 mm³의 예정된 종점 또는 연구 종결에 도달한 때까지 연구의 지속기간 내내 투약되었다. 종양 성장 지연 (TGD)는 (43일째) 비히클 대조군 그룹의 종결과 화합물 1 처리 그룹 사이 시간으로서 계산되었다. TGD는 1, 5 및 15 mg/kg 처리 그룹, 각각에 대하여 8, 12 및 >37 일이었다. (도 11)

3 상이한 경로, MAPK, Wnt, 및 Hippo의 활성을 나타내는 바이오마커는 PDX146 이종이식 모델에서 억제되었다. 이들 경로 바이오마커의 지속된 억제는 24 시간 내내 관측되었다.

β-카테닌 돌연변이체 SW48 결장직장 이종이식 모델에서 화합물 1의 항종양 활성. 암컷 SCID 마우스는 오른쪽 옆구리에 2 x 10⁶ SW48 종양 세포로 접종되었다. 마우스는 처리 개시의 시간에서 처리 그룹 (n=10/그룹)으로 무작위 추출되었다. 시험품 처리는 종양이 대략 110 및 105 mm³이었던 경우 10 일째 개시하였다. (참조 도 15A-15B.) 흑색 점선은 투약의 개시에서 종양 부피이다. 좌측에서 그래프는 용량-반응 연구이다. 우측에서 그래프는 동물이 연구의 과정 동안 약물에서 유지되었던 진행 시간 연구이다. 점선은 비히클 대조군 그룹이 종결되었던 경우 28일째 종양 부피이다.

동소이식 Hep3B2.1-7 간세포 암종 이종이식에서 항종양 활성. 암컷 SCID 마우스는 동물당 2 x 10⁶ Hep3B2.1-7 종양 세포로 동소이식으로 접종되었다. 접종 7 일 후 동물은 착수된 처리 (연구 일 0) 및 체중에 기반하여 처리 그룹으로 무작위 추출되었다. 위성 그룹의 생착률 평가는 동물의 100%로 간에서 종양의 존재를 확인하였다. 화합물 1로 처리는 개시되었고 화합물 1은 21 일 동안 경구로, QD 투약되었다. 이 모델로 기대된 상당한 평균 체중 감소는 비히클 대조군 그룹에서 관측되었다. 15 mg/kg 화합물 1로 처리된 동물은 최소 체중 감소를 보여주었고 상당한 평균 체중 증가는 30 mg/kg 화합물 1 처리 그룹에서 관측되었다. 연구 종결의 날에, 종양은 제거되었고 칭량되었다. 각각의 그룹의 개별 종양 중량 및 평균 종양 중량 ± SEM은 플롯팅되었다 (도 16). 퍼센트 억제는 비히클 대조군에 비해 계산되었다. P 값은 던넷 후-hoc 분석으로 1-원 ANOVA에서 유래되었다. *** = p<0.001.

C-Met 증폭된 간세포 암종 환자-유래된 이종이식 모델, LI0612에서 화합물 1의 항종양 활성. 암컷 SCID 마우스는 오른쪽 옆구리에 간세포 암종 PDX 모델 LI0612 종양 단편 (2 - 4 mm 직경)으로 접종되었다. 마우스는 처리 개시의 시간에 처리 그룹 (n=10/그룹)으로 무작위 추출되었다. 시험품 처리는 종양이 대략 150 mm³ 크기였던 경우 18 일째 개시하였다. 종양 성장은 투약 기간 동안 비히클 대조군 및 화합물 1 처리 그룹에서 진행하였다. 성장 동력학에서 변화는 30 mg/kg 처리로 상당한 종양 성장 억제 (TGI)를 초래하는 화합물 1 투여로 언급되었다 (p=0.038, 비히클 대조군에 비교됨). 참고 도 17.

BRAF 돌연변이체 환자-유래된 이종이식 모델에서 약동학적/약력학적 데이터. 화합물 1에 의해 억제되는 공지된 키나제 (ERK 1/2, NLK 및 SIK)에 기반하여, 화합물 처리의 영향은 이종이식된 마우스로부터 PDX146 종양에서 MAPK, β-카테닌 및 히포 경로 바이오마커에서 평가되었다. 종양-보유 마우스 (종양은 ~400 mm³이었다)는 1 또는 5 mg/kg 화합물 1의 단일 용량으로 처리되었다. 종양 조직은 투약후 1, 2, 4, 8, 및 24 시간에서 수집되었다.

MAPK 경로의 조절은 종양 DUSP4, DUSP6 및 Sprouty (SPRY2) mRNA 수준 및 pRSK 및 pERK 단백질 수준의 시험에 의해 평가되었다. DUSP6 mRNA 수준은 투약 2 시간후 시작하는 화합물 처리로 상당히 감소되었고 양쪽 용량 수준에서 24 시간 내내 여전히 억제되었다 (도 12A). 유사한 패턴은 DUSP4 및 SPRY2 mRNA 수준으로 관측되었다 (도 13A-13B). 포스포-RSK (pRSK) 및 포스포-ERK (pERK) 단백질 수준은 용량- 및 시간-의존 방식으로 화합물 1 처리에 의해 조절되었다 (도 14A-14D). 양쪽 MAPK 및 Wnt 신호전달 경로의 다운스트림인, cMyc (도 12B) 및 사이클린 D1 (도 13C)의 수준은 화합물 1 처리로 억제되었다. 화합물 1 처리는 Wnt 표적 유전자, Axin2를 상향조절시켰다. 양쪽 용량 수준에서 화합물 1로 처리는 투약 24 시간 후 Axin2 mRNA 수준에서 유의미한 증가를 실증하였다. AREG (히포 경로에서 다운스트림 표적 유전자) mRNA 수준의 지속된 억제는 24 시간 내내 관측되었다. 추가로 화합물 1은 시간-의존 방식 (통계적으로 유의미하지 않음 (참조 도 13D)에서 YAP 단백질 수준을 억제시켰고, 이는 MAPK 억제의 결과로서 간접적인 효과 또는 SIK 억제 및 히포 경로 조절 때문일 수 있다.

이들 데이터는 화합물 1이, 단일 용량 투여 이후 이러한 BRAF 돌연변이체 결장직장 PDX 모델에서, 3 상이한 경로, MAPK, Wnt 및 Hippo에 영향을 준다는 것을 시사한다.

결론: 상당한 용량-의존적 항종양 활성은 모든 3 BRAF 돌연변이체 이종이식 모델에서 관측되었다 (참조 도 15A-15B, 도 16, 및 도17). 종양 퇴화는 모델에 걸쳐 화합물 1 처리로 관측되었고 PDX146 모델에서 장기간 처리로 상당한 성장 지연이 있었다.

환자 풍부 및 종양 징후. 화합물 1의 시험관내 및 생체내 데이터에 기반하여, 환자 풍부 가설 및 종양 징후는 표 8 및 표 9에서 설명된다.

수많은 참조문헌은 인용되어 왔고, 그것의 개시내용은 본 명세서에 참고로 그 전문이 편입된다.

본 발명이 개시된 구현예와 관련하여 기재되어 왔어도, 당해 분야의 숙련가는 상기 상세한 특정 예 및 연구가 본 발명의 설명적일 뿐이라는 것을 쉽게 인정할 것이다. 다양한 변형이 본 발명의 사상에서 이탈 없이 될 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 따라서, 본 발명은 하기 청구항으로만 제한된다.

Claims (36)

1. 고형 종양 또는 혈액 암을 치료 또는 예방하는 방법으로서, 상기 고형 종양 또는 혈액 암을 가지고 있는 대상체에게 유효량의 식 (I)의 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 입체이성질체, 거울상이성질체, 또는 동위이성질체를 투여하는 것을 포함하는, 방법:
   

   

   
   식 중:
   R¹은 치환된 또는 비치환된 C_1-8 알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 비-방향족 헤테로사이클릴이고;
   R²은 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고; 그리고
   R³은 하나 이상의 할로겐으로 치환되고, 선택적으로, 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, CN, 및 -OR'로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 추가로 치환된 페닐이고, 여기서 각각의 R'은 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다.
2. 청구항 1에 있어서, 상기 식 (I)의 화합물은 표 1 로부터 선택되는, 방법.
3. 청구항 1에 있어서, 상기 고형 종양은 흑색종, 결장직장암, 위암, 두경부 암, 갑상선암, 방광암, CNS 암, 폐암, 췌장암, 또는 연조직 암인, 방법.
4. 청구항 1에 있어서, 상기 암은 방광암, 유방암, CNS 암, 결장암, 위장 암, 내분비 암, 여성 유전성 암, 두경부 암, 조혈 암, 신장암, 간암, 폐암, 흑색종, 췌장 암, 전립선암, 또는 연조직 암인, 방법.
5. 청구항 1에 있어서, 상기 암은 신경아교종, 신경교세포종, 위암, 갑상선암, 부신 암, 자궁, 자궁경부, 난소 투명 세포, 또는 외음부의 암, 백혈병, 골수종, NSCLC, SCLC, 육종 또는 골육종인, 방법.
6. 청구항 1에 있어서, 상기 암은 간세포 암종 (HCC)인, 방법.
7. 청구항 1에 있어서, 상기 암은 결장직장암 (CRC), 흑색종, 위암, 간세포 암종 (HCC), 폐암, 췌장암, 백혈병, 또는 다발성 골수종인, 방법.
8. 청구항 1 내지 7 중 어느 한 항에 있어서, 상기 암은 PD-L1을 발현시키는 암인, 방법.
9. 청구항 8에 있어서, 상기 PD-L1 발현 암은 흑색종, 폐암, 신장 세포 암종 (RCC), 또는 HCC인, 방법.
10. BRAF 돌연변이를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법으로서, BRAF 돌연변이를 특징으로 하는 암을 가지고 있는 대상체에게 유효량의 식 (I)의 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 입체이성질체, 거울상이성질체, 또는 동위이성질체를 투여하는 것을 포함하는, 방법:
    

    

    
    식 중:
    R¹은 치환된 또는 비치환된 C_1-8 알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 비-방향족 헤테로사이클릴이고;
    R²은 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고; 그리고
    R³은 하나 이상의 할로겐으로 치환되고, 선택적으로, 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, CN, 및 -OR' 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 추가로 치환된 페닐이고, 여기서 각각의 R'은 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다.
11. 청구항 10에 있어서, 상기 BRAF 돌연변이를 특징으로 하는 암은 CRC, 갑상선암, 흑색종 또는 폐암인, 방법.
12. 청구항 10에 있어서, 상기 BRAF 돌연변이는 BRAF V660E인, 방법.
13. NRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법으로서, NRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암을 가지고 있는 대상체에게 유효량의 식 (I)의 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 입체이성질체, 거울상이성질체, 또는 동위이성질체를 투여하는 것을 포함하는, 방법:
    

    

    
    식 중:
    R¹은 치환된 또는 비치환된 C_1-8 알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 비-방향족 헤테로사이클릴이고;
    R²은 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고; 그리고
    R³은 하나 이상의 할로겐으로 치환되고, 선택적으로, 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, CN, 및 -OR' 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 추가로 치환된 페닐이고, 여기서 각각의 R'은 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다.
14. 청구항 13에 있어서, 상기 NRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암은 흑색종인, 방법.
15. KRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법으로서, KRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암을 가지고 있는 대상체에게 유효량의 식 (I)의 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 입체이성질체, 거울상이성질체, 또는 동위이성질체를 투여하는 것을 포함하는, 방법:
    

    

    
    식 중:
    R¹은 치환된 또는 비치환된 C_1-8 알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 비-방향족 헤테로사이클릴이고;
    R²은 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고; 그리고
    R³은 하나 이상의 할로겐으로 치환되고, 선택적으로, 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, CN, 및 -OR' 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 추가로 치환된 페닐이고, 여기서 각각의 R'은 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다.
16. 청구항 15에 있어서, 상기 KRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암은 CRC, 췌장 암 또는 폐암인, 방법.
17. 베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법으로서, 베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 하는 암을 가지고 있는 대상체에게 유효량의 식 (I)의 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 입체이성질체, 거울상이성질체, 또는 동위이성질체를 투여하는 것을 포함하는, 방법:
    

    

    
    식 중:
    R¹은 치환된 또는 비치환된 C_1-8 알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 비-방향족 헤테로사이클릴이고;
    R²은 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고; 그리고
    R³은 하나 이상의 할로겐으로 치환되고, 선택적으로, 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, CN, 및 -OR' 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 추가로 치환된 페닐이고, 여기서 각각의 R'은 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다.
18. 청구항 17에 있어서, 상기 베타-카테닌 돌연변이는 베타-카테닌 S33Y, G34E, S45del, 또는 S33C 중 하나 이상인, 방법.
19. 청구항 17에 있어서, 상기 베타-카테닌 돌연변이를 특징으로 하는 암은 CRC, 위암, HCC 또는 육종인, 방법.
20. 활성화된 베타-카테닌 경로를 특징으로 하는 암을 치료 또는 예방하는 방법으로서, 활성화된 베타-카테닌 경로를 특징으로 하는 암을 가지고 있는 대상체에게 유효량의 식 (I)의 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 입체이성질체, 거울상이성질체, 또는 동위이성질체을 투여하는 것을 포함하는, 방법:
    

    

    
    식 중:
    R¹은 치환된 또는 비치환된 C_1-8 알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 비-방향족 헤테로사이클릴이고;
    R²은 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고; 그리고
    R³은 하나 이상의 할로겐으로 치환되고, 선택적으로, 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, CN, 및 -OR' 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 추가로 치환된 페닐이고, 여기서 각각의 R'은 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다.
21. 청구항 19에 있어서, 상기 베타-카테닌 경로를 특징으로 하는 암은 CRC, 위암, 간세포 암종 또는 육종인, 방법.
22. 청구항 17 내지 21 중 어느 한 항에 있어서, 상기 암은 간세포 암종, 위암, 흑색종인, 방법.
23. 청구항 22에 있어서, 상기 HCC은 베타-카테닌 돌연변이 및/또는 증가된 YAP 발현을 특징으로 한다.
24. 청구항 17 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, EGFR 돌연변이 또는 증가된 EGFR 활성을 추가로 포함하는, 방법.
25. 청구항 24에 있어서, 상기 EGFR 돌연변이는 EGFR E282K, G719S, P753S, 또는 V1011M 중 하나 이상인, 방법.
26. 청구항 17 내지 25 중 어느 한 항에 있어서, BRAF 돌연변이를 추가로 포함하는, 방법.
27. 청구항 26에 있어서, 상기 BRAF 돌연변이는 BRAF V660E, BRAF T119S, 또는 BRAF G596R 돌연변이를 포함하는, 방법.
28. 청구항 27에 있어서, 상기 BRAF 돌연변이는 BRAF V660E를 포함하는, 방법.
29. 청구항 17 내지 28 중 어느 한 항에 있어서, 상기 흑색종은 BRAF 돌연변이 및/또는 NRAS 돌연변이를 특징으로 하는, 방법.
30. 암을 가지고 있는 대상체에서 바이오마커의 수준을 조절하는 방법으로서, 상기 대상체에게 유효량의 식 (I)의 아미노퓨린 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 입체이성질체, 거울상이성질체, 및 동위이성질체를 투여하는 것을 포함하는, 방법:
    

    

    
    식 중:
    R¹은 치환된 또는 비치환된 C_1-8 알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 비-방향족 헤테로사이클릴이고;
    R²은 H 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이고; 그리고
    R³은 하나 이상의 할로겐으로 치환되고, 선택적으로, 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, CN, 및 -OR' 로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 추가로 치환된 페닐이고, 여기서 각각의 R'은 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬이다.
31. 청구항 30에 있어서, 상기 바이오마커의 조절은 순환 혈액, 피부 생검, 종양 생검, 순환 종양 세포, 모발, 또는 소변으로부터 선택된 상기 대상체의 생물학적 샘플에서 평가되는, 방법.
32. 청구항 30에 있어서, 상기 바이오마커는 ERK, RSK1, DUSP4, DUSP5, DUSP6, BMF, EFNA1, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, GJA1, IL-8, cMyc, 사이클린 D1, YAP, SPRY2, SPRY4, Axin2, CTGF, AREG, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1, MAFF, CITED2, ELF3, 또는 PD-L1인, 방법.
33. 청구항 30에 있어서, 상기 조절은 ERK 및 RSK1 중 하나 이상의 인산화 수준의 감소의 측정에 의해 측정되는, 방법.
34. 청구항 27에 있어서, 상기 조절은 DUSP4, DUSP5, DUSP6, EGR1, ETV5, FOS, FOSL1, IL-8, cMyc, 사이클린 D1, YAP, SPRY2, SPRY4, Axin2, CTGF, AREG, CYR61, CXCL1, HAS2, HES1, 및 MAFF 중 하나 이상의 mRNA 또는 단백질 발현 수준의 감소의 측정에 의해 측정되는, 방법.
35. 청구항 30에 있어서, 상기 조절은 BMF, EFNA1, CITED2, 및 ELF3 중 하나 이상의 mRNA 또는 단백질 발현 수준의 증가의 측정에 의해 측정되는, 방법.
36. 청구항 1 내지 35 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아미노퓨린 화합물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물로서 투여되는, 방법.
    

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