KR20180105936A - 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물 및 이의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 여드름 균에 대하여 살균력을 갖는 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 함유하여 여드름 개선 효과가 우수하며, 장기간 사용 시에도 부작용이 없는 여드름 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Description

결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물 및 이의 제조방법 {Cosmetic composition for improving acne comprising cassia obtusifolia seed extract and pueraria lobata symbiosome extract and manufacturing method thereof}

본 발명은 여드름 균에 대해 우수한 살균력을 갖는 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 함유함으로써 여드름 개선 효과가 우수한 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

여드름은 주로 얼굴, 가슴, 등, 어깨 등에 발생하는 면포, 구진, 농포, 낭종 및 결절 형성을 특징으로 하는 모낭피지선의 만성 염증성 질환으로, 과거에는 주로 사춘기 청소년에게 나타났으나, 최근에는 환경오염, 약물 남용 등으로 인해 나이와 상관없이 발생하며, 발생 연령층이 매우 넓어지고 있다. 여드름의 정확한 생성원인은 아직까지 밝혀져 있지 않으며, 여러 인자의 상호작용에 의해 유발되는 것으로 알려져 있다.

일반적으로 여드름은 주로 남성호르몬인 안드로겐이 피지선을 자극하여 피지 분비를 촉진시킴으로써 피지량이 많아짐과 동시에 모공벽의 각질을 두텁게 하여 피지가 원할하게 배출되는 것을 막아 발생한다. 이렇듯 피지가 피부 표면으로 배출되지 못하고 모낭 내에 정체되면 모낭 내의 박테리아인 여드름 균(Propionibacterium acnes)이 번식하게 되며, 여드름 균은 피지의 지방분을 분해하여 유리지방산을 생성함으로써 모낭벽을 직접 자극하고, 여드름 균에 의해 분비된 여러 효소는 모낭 내 염증을 유발한다.

여드름은 처음에 면포를 형성하는 것으로 시작하며, 면포 상태에서 여드름균이 번식하면 염증 반응이 시작되면서 붉은색 여드름인 구진이 형성된다. 여기서 염증 반응이 더 진행되면 화농성 여드름인 농포를 형성하며, 농포가 피부 안에서 터지게 되면 여드름 주변에 더 많은 염증을 유발하여 손가락만 한 뾰루지인 결절로 악화된다.

여드름의 예방 및 치료는 구강 및 경피 투여의 방식으로 진행될 수 있으며, 현재 사용되고 있는 약물로는 erythromycin, isotretinoin, benzoyl peroxide, vitamin A acid, triclosan 및 azelaic acid 등이 있다. 그러나 상기 약물들은 구순염, 점막 건조감, 최기 형성작용, 기미, 혈전증 등의 부작용과 항생제 내성균주의 출현, 치료 중단시 재발되는 등의 문제점이 보고되고 있다. 한편, 약물 요법 외에 피부 박피술, 냉동치료 등의 외과적 치료나 자외선 조사와 같은 물리적 치료 요법 등이 있으나, 한 번 생기기 시작한 여드름은 흉터를 교정하기 매우 어려우며 고비용을 부담해야 하는 단점이 있다.

이러한 문제점을 해결하기 위해 안전성이 확보된 천연물로부터 신규 여드름 관련 유용물질의 개발이 요구되고 있으며, 국내의 경우 한방 생약기술을 바탕으로 천연물 유래 여드름 예방, 완화 및 치료에 대한 연구가 활발하게 진행되고 있다. 따라서, 본 발명에서는 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물에서 우수한 항여드름 균 활성을 확인하였으며, 이를 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

KR 10-1622104 B1

본 발명의 목적은 여드름 균에 대하여 살균력을 갖는 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 함유하여 여드름 개선 효과가 우수한 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명은 상기 목적을 달성하기 위하여,

(a) 결명자 및 갈근뿌리혹을 각각 수세 및 건조하여 분쇄하는 단계; (b) 추출 용매로 추출하는 단계; (c) 감압여과 하는 단계; (d) 여과액을 감압농축 하여 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 수득하는 단계; (e) 상기 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 혼합하는 단계;를 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다.

상기 추출 용매는 물, C₁ 내지 C₆의 알코올 또는 이들을 혼합한 혼합 용매인 것을 특징으로 한다.

상기 추출은 25℃ 내지 130℃에서 2시간 내지 24시간 동안 이루어지는 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

상기 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 1:0.5 내지 1:10 중량비로 혼합하는 것을 특징으로 한다.

상기 여드름은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 또는 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis) 균에 의해 발생되는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물은 항염 활성 및 여드름 균에 대한 항균력이 우수하며, 피부에 안전하여 장기간 사용 시에도 부작용이 없는 효과가 있다.

도 1은 본 발명의 실시예에 따른 농도별 섬유아세포 증식 활성에 대한 그래프이다.

이하, 본 발명에 따른 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 대해 구체적으로 설명한다.

본 발명에 따른 여드름 개선용 화장료 조성물의 제조방법은 (a) 결명자 및 갈근뿌리혹을 각각 수세 및 건조하여 분쇄하는 단계; (b) 추출 용매로 추출하는 단계; (c) 감압여과 하는 단계; (d) 여과액을 감압농축 하여 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 수득하는 단계; (e) 상기 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 혼합하는 단계;를 포함한다.

상기 결명자(Casssia tora L.)는 전국에 분포되어 있는 한해살이풀로, 양명, 양각, 마제결명, 초결명, 야녹두, 가녹두라고도 한다. 결명자는 완화작용을 하는 안트라퀴논 유도체가 함유되어 있어 변비에 효과가 있으며, 눈의 피로나 충혈을 낫게하고 야맹증이나 결막염, 백내장, 녹내장 등 안과질환에 응용된다. 또한 체내의 신진대사와 혈액순환을 왕성하게 하며, 이뇨작용에 의한 백혈구의 증가로 식균작용을 하여 부인병, 방광염, 임질, 심장병, 당뇨병, 복막염, 맹장염, 간염, 고혈압 등 각종 질환에 효능이 있다. 이 밖에도 혈압강화, 자궁수축작용, 피부진균 억제, 콜레스테롤 강하 등의 약리 효과가 있다.

상기 갈근뿌리혹(Pueraria lobata Ohwi)은 콩과 칡속에 속하는 칡의 뿌리혹으로, 성분으로는 이소플라보노이드, 트리테르페노이드 등이 있으며, 심혈관질환 및 당뇨의 치료에 사용된다. 이외에도 해열, 진정, 간보호, 항염증, 항응고, 항암작용 등의 효능이 있다.

상기 추출 용매는 물, C₁ 내지 C₆의 알코올 또는 이들을 혼합한 혼합 용매인 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 70% 에탄올일 수 있다.

상기 추출은 25℃ 내지 130℃에서 2시간 내지 24시간 동안 이루어지는 것이 바람직하며, 상기 범위을 벗어날 경우 추출 수율 및 효율이 낮아질 수 있다. 상기 추출은 상온추출 또는 열수추출일 수 있으며, 단회 혹은 복수회 수행할 수 있다.

상기 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 1:0.5 내지 1:10 중량비로 혼합하는 것이 바람직하다. 상기 혼합 비율을 벗어날 경우 여드름 개선 효과가 낮아질 수 있다.

또한, 본 발명은 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 포함한다.

상기 여드름은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 또는 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis) 균에 의해 발생되는 것이 바람직하다.

상기 화장료 조성물은 상기 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선 및 피부보습용 화장료 조성물로서, 그 형태는 제한되지 않는다. 즉, 본 발명의 화장료 조성물은 크림, 팩, 로션, 에센스, 화장수, 파운데이션 및 메이크업베이스 등 통상의 화장료 조성물 형태일 수 있으며, 상기 화장료 조성물은 화장료 분야에서 통상적으로 사용되는 담체와 함께 통상의 방법에 따라 제제화될 수 있다. 단위 화장료 조성물 중에 함유되는 상기 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물의 함량은 여드름의 발생 정도에 따라 상이할 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예를 통하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이에 제한되는 것은 아니다.

실시예 1

결명자 100 g과 70% 에탄올 2 L를 추출교반형 히팅맨틀에 넣어 70℃에서 3시간 동안 2회 추출한 후, 감압여과하였다. 상기에서 얻은 여과액을 70℃에서 감압농축하여 고형상의 결명자 추출물을 얻었다.

실시예 2

상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 상기 결명자 대신에 갈근뿌리혹을 사용하여 제조하였다.

실시예 3

상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 상기 결명자 대신에 결명자와 갈근뿌리혹을 1:1 중량비로 혼합한 혼합물을 사용하여 제조하였다.

실시예 4

상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 상기 결명자 대신에 결명자와 갈근뿌리혹을 1:0.1 중량비로 혼합한 혼합물을 사용하여 제조하였다.

실시예 5

상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 상기 결명자 대신에 결명자와 갈근뿌리혹을 1:20 중량비로 혼합한 혼합물을 사용하여 제조하였다.

비교예 1

상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 상기 결명자 대신에 고삼을 사용하여 제조하였다.

비교예 2

상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 상기 결명자 대신에 병풀을 사용하여 제조하였다.

시험예 1: 항산화 효능 분석 ( DPPH 라디칼 소거능 측정)

본 발명의 추출물의 항산화 효능을 확인하기 위해 DPPH 라디칼 소거능 측정 실험을 진행하였다. 안정한 free radical인 DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)는 517 nm에서 광흡수를 나타내는 보라색 화합물로서, 라디칼이 항산화물질로 인해 환원되면 고유의 보라색을 잃고 노란색으로 변하게 된다. 이를 통해 라디칼이 감소되는 정도를 분광광도계로 측정하여 항산화 효능을 측정할 수 있다.

0.1 mM DPPH 용액에 상기 실시예 1 내지 5와 상기 비교예 1 및 2를 각각 첨가하여 0.1%(w/v), 0.5%(w/v), 1%(w/v) 및 2%(w/v)의 농도가 되도록 한 후 voltex mixer로 10초간 진탕하고 암실에서 30분간 방치한 뒤 Elisa reader를 이용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군인 증류수의 흡광도를 기준으로 하여 DPPH 라디칼 소거능을 백분율로 나타내었으며, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

DPPH 라디칼 소거능(%) = {1-(A/B)}×100(%)

(A: 시료 첨가구의 흡광도 값, B: 증류수의 흡광도 값)

	0.1%	0.5%	1%	2%
실시예 1	53%	57%	87%	87%
실시예 2	21%	60%	79%	78%
실시예 3	88%	96%	95%	95%
실시예 4	67%	72%	89%	88%
실시예 5	62%	74%	85%	85%
비교예 1	21%	21%	27%	31%
비교예 2	9%	12%	19%	26%

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 상기 실시예 1 내지 5는 상기 비교예 1 및 2보다 모든 농도에서 항산화 활성이 높음을 알 수 있다. 또한 상기 실시예 1 및 2와 상기 비교예 1 및 2의 단일추출물보다 결명자와 갈근뿌리혹의 혼합추출물인 실시예 3 내지 5가 대체적으로 더 높은 항산화 활성을 나타내는 것을 알 수 있으며, 특히 실시예 3은 0.1%의 저농도에서도 88%의 우수한 항산화 활성을 보이는 것을 확인하였다. 이를 통해 결명자와 갈근뿌리혹의 혼합추출물의 혼합 비율이 항산화 효과에 영향을 주는 것을 확인할 수 있었으며, 1:1의 비율로 혼합되는 것이 우수한 항산화 효과를 보임을 알 수 있었다.

시험예 2: 여드름 개선 효능 분석

여드름 개선 효능을 확인하기 위해 원판 확산법(disc diffusion assay)을 이용하여 여드름 균에 대한 항균력을 분석하였으며, 여드름 균에 대한 최소저해농도를 측정하였다. 여드름 균은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)와 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis)를 대상으로 하였으며, 여드름 균 10 mL를 각각 액체 배지(GAM Broth, Gifu Anaerobic Medium Broth)에 접종하고 37℃에서 24시간씩 3회 계대배양하여 항균 활성 시험 균주로 사용하였다.

1) 여드름 균에 대한 항균 활성 측정

상기 각각의 시험 균주가 배양된 액체 배지에 paper disc를 담가 충분히 적신 후 꺼내었다. 상기 실시예 1 내지 5과 상기 비교예 1 및 2를 증류수와 혼합하여 농도별(0.01%, 0.25%, 0.5%, 1%, 2%(w/v))로 제조한 후 상기 paper disc에 20 μL씩 적하하였다. 그 후 37℃에서 24시간 배양하고 disc 주변에 생성된 균의 생육저해환(clear zone) 직경을 측정하여 항균 활성을 비교하였으며, 그 결과를 하기 표 2 및 3에 나타내었다. 음성대조군으로는 추출물 희석시 사용한 증류수를 사용하였다.

① 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes, P. acnes)

	생육저해환 직경(cm)
	0.01%	0.25%	0.5%	1%	2%
실시예 1	0	1.3	1.5	2.0	2.1
실시예 2	0	0	0	1.0	1.5
실시예 3	0	1.5	1.8	2.2	2.5
실시예 4	0	1.0	1.2	1.5	2.0
실시예 5	0	0.2	0.4	0.7	1.1
비교예 1	0	0	0	0	0
비교예 2	0	0	0	0	0

상기 표 2에서 보는 바와 같이, 여드름 균인 P. acnes에 대하여 상기 비교예 1 및 2는 항균 효능을 나타내지 않았으며, 상기 실시예 1 내지 4는 항균 효능을 나타내었다. 상기 실시예 3은 단일 추출물인 실시예 1 및 2보다 높은 항균 활성을 보였으며, 결명자 추출물과 갈근뿌리혹 추출물의 혼합 비율이 상이한 실시예 4 및 5에 비해서도 우수한 항균 활성을 보이는 것을 확인하였다.

② 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis, S. epidermidis)

	생육저해환 직경(cm)
	0.01%	0.25%	0.5%	1%	2%
실시예 1	0	1.0	1.4	1.7	1.9
실시예 2	0	0	0	0.8	1.2
실시예 3	0	1.3	1.6	1.9	2.3
실시예 4	0	0.9	1.2	1.5	1.8
실시예 5	0	0	0.2	0.4	0.7
비교예 1	0	0	0	0	0
비교예 2	0	0	0	0	0

상기 표 3에서 보는 바와 같이, 여드름 균인 S. epidermidis에 대하여 상기 비교예 1 및 2는 항균 효능을 나타내지 않았으며, 상기 실시예 3은 단일 추출물인 상기 실시예 1 및 2와 혼합 비율이 상이한 혼합 추출물인 실시예 4 및 5보다 높은 항균 활성을 보이는 것을 확인하였다. 이에 따라 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물의 혼합 비율이 여드름 균의 항균 활성에 대해 영향을 미치는 것을 확인할 수 있었으며, 1:1의 혼합비가 우수한 항균력을 나타냄을 알 수 있었다.

2) 여드름 균에 대한 최소저해농도 측정

상기 실시예 1 내지 5와 상기 비교예 1 및 2를 상기 액체 배지와 혼합하여 농도별(0.0039%, 0.0078%, 0.0156%, 0.03125%, 0.0625%(w/v))로 제조하였다. 시험관에 액체 배지를 각각 5 mL씩 넣고 상기 농도별로 제조한 시료를 각각 5 mL씩 첨가한 후 상기 액체 배지에서 배양된 시험 균주인 여드름 균 P. acnes 및 S. epidermidis 각각을 50 mL씩 접종하였다. 그 후 37℃에서 24시간 배양하고 균의 증식이 더 이상 이루어지지 않는 농도를 결정하여 최소저해농도(minimum inhibitory concentration, MIC)를 측정하였다. 그 결과, P. acnes 균주에 대한 최소저해농도는 0.0156%, S. epidermidis 균주에 대한 최소저해농도는 0.0082%로 나타났다.

시험예 3: 섬유아세포 증식 촉진 활성 분석 ( MTT assay)

섬유아세포주를 10% FBS(fetal bovine serum) DMEM 배지가 포함된 96 well plate에 hemocytometer를 이용하여 1×10⁴ cells/well의 농도로 동일하게 접종한 후 분주하여 48시간 배양하였다. 상기 실시예 3을 액체 배지의 배양액으로 농도별(0.001%, 0.005%, 0.01%, 0.05%, 0.1%(w/v))로 희석하여 상기 세포주에 처리한 후 24시간 동안 더 배양하였다. 배양이 완료된 후 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 용액 (2.5 mg/mL)을 50 mL 첨가하여 3시간 동안 추가 배양한 후 배양액을 전부 제거하였다. 각 well당 DMSO(dimethyl sulfoxide)를 1 mL씩 처리하여 교반한 후 96 well plate에서 100μL씩 취하여 ELISA reader를 이용하여 570 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과를 시료 무처리군 대비 백분율로 하기 표 4 및 도 1에 나타내었다.

대조군	실시예 3
	0.001%	0.005%	0.01%	0.05%	0.1%
100%	115%	139%	170%	197%	160%

상기 표 4 및 하기 도 1에 나타낸 바와 같이, 실시예 3의 농도가 증가함에 따라 섬유아세포의 증식도 활발함을 확인하였다.

본 발명을 완성하기 전에 본 발명의 추출물을 단독으로 사용하여 여러 균에 대한 살균효과를 확인하였다. 또한 본 발명의 추출물을 치료제에 적용하였을 경우 치료제의 물성에 큰 영향을 미치지 않으며 살균효과를 보임을 확인하였고, 임상실험을 진행한 결과, 여드름 치료 효과가 우수하며 장기간 반복 사용하여도 피부 부작용이 없음을 확인하였다.

이상, 본 발명을 예시적으로 설명하였으며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가지는 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 변형이 가능할 것이다. 따라서, 본 명세서에 개시된 실시예들은 본 발명을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시예에 의하여 본 발명의 사상과 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호범위는 아래의 청구범위에 의해서 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술은 본 발명의 권리범위에 포함하는 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (8)

1. (a) 결명자 및 갈근뿌리혹을 각각 수세 및 건조하여 분쇄하는 단계; (b) 추출 용매로 추출하는 단계; (c) 감압여과 하는 단계; (d) 여과액을 감압농축 하여 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 수득하는 단계; (e) 상기 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 혼합하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물의 제조방법
   
2. 제 1항에 있어서,
   상기 추출 용매는 물, C₁ 내지 C₆의 알코올 또는 이들을 혼합한 혼합 용매인 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물의 제조방법
   
3. 제 1항에 있어서,
   상기 추출은 25℃ 내지 130℃에서 2시간 내지 24시간 동안 이루어지는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물의 제조방법
   
4. 제 1항에 있어서,
   상기 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 1:0.5 내지 1:10 중량비로 혼합하는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물의 제조방법
   
5. 제 1항에 있어서,
   상기 여드름은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 또는 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis) 균에 의해 발생되는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물의 제조방법
   
6. 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물
   
7. 제 6항에 있어서,
   상기 결명자 추출물 및 갈근뿌리혹 추출물을 1:0.5 내지 1:10 중량비로 혼합하는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물
   
8. 제 6항에 있어서,
   상기 여드름은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 또는 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis) 균에 의해 발생되는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물

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