KR20180048712A - Tl1a에 특이적으로 결합하는 항체 - Google Patents
Tl1a에 특이적으로 결합하는 항체 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20180048712A KR20180048712A KR1020187007337A KR20187007337A KR20180048712A KR 20180048712 A KR20180048712 A KR 20180048712A KR 1020187007337 A KR1020187007337 A KR 1020187007337A KR 20187007337 A KR20187007337 A KR 20187007337A KR 20180048712 A KR20180048712 A KR 20180048712A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- seq
- acid sequence
- antibody
- amino acid
- variable region
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2875—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF/TNF superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
재조합 발현 변이체 항체로서, TL1A에 대하여 증진된 친화도를 갖고, 그리고 이들이 유래된 친계 항체에 비하여 증진된 효능을 갖는, 상기 재조합 발현 변이체 항체가 제공된다. 상기 항체는 TL1A와 사멸 수용체 3 (DR3) 간의 상호작용을 억제한다. 상기 항체 또는 이의 조성물은, 천식, COPD, 폐 섬유증, 낭포성 섬유증, 염증성 장 질환, 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환, 크론병, 대장염, 궤양성 대장염, 과민성 장 증후군, 호산구성 식도염, 아토피성 피부염, 습진, 경피증, 관절염, 또는 류마티스 관절염 중 하나 이상을 치료하는데 사용될 수 있다.
Description
관련 출원들에 대한 교차참조
본 특허 출원은 2015년 9월 18일 출원된 미국 임시 출원 번호 62/220,442의 우선권을 주장하며, 이의 내용은 그 전체가 모든 목적을 위해 참조로서 포함된다.
서열 목록에 관한 참조
본원은 2015년 9월 18일자에 생성되고 크기가 89,000 바이트인 텍스트 파일명 TL1A_ST25로서 전자 제출된 서열 목록을 포함한다. 상기 서열 목록은 본원에 참조로서 인용된다.
본 발명의 기술분야
본원의 개시내용은 일반적으로 항체 가공 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본원의 개시내용은 TL1A에 특이적으로 결합하고 TL1A와 사멸 수용체 3 (DR3) 간의 상호작용을 억제하는 변이체 항체에 관한 것이다. 일부 양태에서, 상기 항체는 또한 TL1A와 디코이 (decoy) 수용체 3 (DcR3) 간의 상호작용을 억제한다. 상기 항체는 변이체가 유래된 친계 항체에 비해 개선된 효능을 갖는다.
특허, 공개된 출원, 도서 수납 번호, 과학기술 논문 및 전문 분야 논문을 포함하는 다양한 공보는 본원 명세서 전반에 걸쳐 인용된다. 이들 인용된 공보 각각은 본원에서 이의 전문 및 모든 목적을 위해 참조로 인용된다.
TNF-유사 리간드 1A (TL1A, 동의어(syn.) TNF 슈퍼패밀리 구성원 15 (TNFSF15); TL1 및 VEGI)은 항원 제시 세포 (수지상 세포, B 세포 및 대식세포를 포함하는), CD4+ 및 CD8+ T 세포 및 내피 세포에 의해 발현되는 종양 괴사 인자 슈퍼패밀리의 구성원이다. TL1A는 세포 표면 상에 발현되거나 가용성 사이토카인으로서 분비될 수 있다. TL1A에 대한 수용체인 사멸 수용체 3 (DR3)은 CD4+ 및 CD8+ T 세포, NK 세포, NKT 세포 및 FOXP3+ 조절 T (Treg) 세포 및 2형 및 3형 선천성 림프 세포 (ILC2 및 ILC3)를 포함하는 다양한 세포에 의해 발현된다.
TL1A는 또한 디코이 수용체 (DcR3)에 결합할 수 있고 DR3의 경쟁적 억제제이다. DcR3은 또한 Fas-리간드 (Fas-L), 및 T-세포 (LIGHT) 상의 헤르페스 바이러스 진입 매개체에 결합하는 것에 대해 당단백질 D와 경쟁하는 림프독소형 유도성 단백질에 대한 디코이 수용체로서 작용한다. 따라서, DcR3은 여러 신호 형질도입 경로의 중요한 조절인자이다.
TL1A/DR3 신호 전달 경로는 인간 질환과 연관된 여러 생물학적 시스템에서 관련되어 있다. 예를 들어, TL1A는 면역력, 혈관형성 및 벽 조직의 항상성에서 역할을 수행하는 것으로 나타났다. DR3과 TL1A의 상호작용의 억제는 또한 실험 자가면역 뇌척수염 (EAE; 다발성 경화증 모델), 대장염, 궤양성 대장염, 크론병, 염증성 장 질환, 피부 질환, 천식 및 관절염과 같은 여러 면역-매개 병태에서 치료학적 이득을 촉진시키는 것으로 나타났다.
따라서, TL1A 활성을 억제하는 화합물은 예를 들어, 치료학적, 예방학적, 진단학적 및 예후적 사용을 위해 바람직할 수 있다.
하기를 포함하는 재조합 항체가 본원에 제공된다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3; 단, 상기 중쇄 가변 영역이 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함할 경우, 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하지 않는다.
일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 23의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 24의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 24의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
또한 하기를 포함하는 재조합 항체가 본원에 제공된다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 또는 서열 번호: 3 및 서열 번호: 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 단, 상기 중쇄 가변 영역이 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함할 경우, 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하지 않는다. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 60의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄. 일부 양태에서, 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 60의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 서열 번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄.
상기 재조합 항체는 바람직하게 전장이고 바람직하게 단클론성이다. 상기 재조합 항체는 하기를 갖는 항체에 비해 증진된 친화성으로 TL1A에 결합한다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 재조합 항체는 하기를 갖는 항체에 비해 증진된 효능을 갖는다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 10배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 12배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 13배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 15배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 20배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 25배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 27배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 40배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 효능의 배수-증진은 TF-1 세포에서 TL1A-유도된 카스파제 효능 검정에 따라 계측될 수 있다.
상기 재조합 항체는 인간 IgG1 중쇄 불변 영역, 인간 IgG2 중쇄 불변 영역, 또는 인간 IgG4 중쇄 불변 영역 또는 이의 임의의 동종이인자형 (allotype)을 포함할 수 있다. 인간 IgG1 중쇄 불변 영역은 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 42, 또는 서열 번호: 43 (인간 IgG1 ΔK), 또는 서열 번호: 44 (YTE를 갖는 인간 IgG1), 또는 서열 번호: 64 (YTE 및 ΔK를 갖는 인간 IgG1), 또는 서열 번호: 63 (L234A, L235A, G237A를 갖는 인간 IgG1), 또는 서열 번호: 62 (L234A, L235A, G237A, 및 ΔK를 갖는 인간 IgG1), 또는 서열 번호: 65 (L235A 및 G237A를 갖는 인간 IgG1), 또는 서열 번호: 66 (L235A, G237A 및 ΔK를 갖는 인간 IgG1). 인간 IgG2 중쇄 불변 영역은 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 67, 또는 서열 번호: 70 (인간 IgG2 ΔK), 또는 서열 번호: 71 (A330S, P331S를 갖는 인간 IgG2), 또는 서열 번호: 68 (A330S, P331S 및 ΔK를 갖는 인간 IgG2). 인간 IgG4 중쇄 IgG4 불변 영역은 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 45, 또는 서열 번호: 46 (S228P 및 ΔK를 갖는 인간 IgG4), 또는 서열 번호: 47 (S228P 및 YTE를 갖는 인간 IgG4), 또는 서열 번호: 69 (S228P, YTE 및 ΔK를 갖는 인간 IgG4). IgG4 중쇄는 안정화 치환 S228P 없이 (예를 들어, 단독의 YTE를 갖는 IgG4, 또는 YTE를 갖고 ΔK인 IgG4, 또는 단독의 ΔK인 IgG4) 사용될 수 있는 것으로 이해된다.
재조합 항체는 인간 람다 경쇄 불변 영역 또는 이의 동종이인자형을 포함할 수 있다. 인간 경쇄 람다 불변 영역은 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 48.
상기 재조합 항체는 인간 TL1A에 결합하고 비-인간 영장류의 TL1A, 또는 마우스, 랫트, 기니 피그, 고양이, 개, 토끼 또는 돼지와 같은 비-인간 포유동물의 TL1A에 결합할 수 있다.
상기 재조합 항체는 호흡기 질환을 치료하기 위한 방법, 위장관 질환을 치료하기 위한 방법, 피부 질환을 치료하는 방법 또는 관절염을 치료하는 방법에 사용될 수 있거나. 호흡기 질환, 위장관 질환, 피부 질환 또는 관절염의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있거나, 호흡기 질환, 위장관 질환, 피부 질환 또는 관절염의 치료를 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 것일 수 있다. 호흡기 질환은 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 폐 섬유증, 폐 사르코이드증, 알레르기 비염 또는 낭포성 섬유증 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 위장관 질환은 염증성 장 질환, 크론병, 대장염, 궤양성 대장염, 호산구성 식도염, 또는 과민성 장 증후군 또는 위장관 질환 또는 낭포성 섬유증과 관련된 병태 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 관절염은 류마티스성 관절염을 포함할 수 있다. 상기 피부 질환은 아토피성 피부염, 습진 및 경피증 중 하나 이상을 포함할 수 있다.
상기 치료를 필요로 하는 인간 대상체, 비-인간 영장류 대상체, 또는 비-인간 포유동물 대상체는 항체 또는 상기 항체를 포함하는 조성물로 치료될 수 있고, 예를 들어, 상기 항체 또는 이의 조성물을 상기 대상체에 투여함에 의해 치료될 수 있다. 투여는 비경구, 예를 들어, 피하 및/또는 정맥내일 수 있다.
상기 재조합 항체는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 표면 상에서 TL1A를 검출하기 위한 방법에서 사용될 수 있다. 상기 방법은 본원에 기재되거나 예시된 바와 같은 TL1A에 결합하는 항체를 대상체로부터 수득된 PBMC와 접촉시키는 단계 및 PBMC의 표면 상의 TL1A에 결합된 항체를 검출하는 단계를 포함한다. 상기 방법은 PBMC 상의 TL1A의 수준을 정량화하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 대상체로부터 PBMC를 수득하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
상기 재조합 항체는 혈청에서 TL1A를 검출하기 위한 방법에 사용될 수 있다 상기 방법은 본원에 기재되거나 예시된 바와 같은 TL1A에 결합하는 항체를 대상체로부터 수득된 혈청과 접촉시키는 단계, 및 상기 혈청 내 TL1A에 결합된 항체를 검출하는 단계를 포함한다. 상기 방법은 혈청 내 TL1A의 수준을 정량화하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 대상체로부터 수득된 혈액으로부터 혈청을 수득하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 대상체로부터 혈액을 수득하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역 중 하나 이상을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 상기 폴리뉴클레오티드는 중쇄 불변 영역 및/또는 경쇄 불변 영역을 추가로 암호화할 수 있다.
일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 51, 또는 서열 번호: 58를 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 50을 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 52, 또는 서열 번호: 59를 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 54를 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 55를 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 및 서열 번호: 56을 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 57을 포함하는 핵산 서열.
일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 49를 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 52를 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 53을 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 54를 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 55를 포함하는 핵산 서열. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함한다: 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 예를 들어, 서열 번호: 56를 포함하는 핵산 서열.
하나 이상의 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터가 제공된다. 하나 이상의 상기 폴리뉴클레오티드 또는 상기 벡터로 변형된 세포가 제공된다. 변형된 세포는 포유동물일 수 있고 바람직하게 CHO 세포, NS0 세포, 또는 HEK293 세포와 같은 포유동물 발현 숙주 세포이다.
도 1은 CDR1 또는 CDR2 영역에 만들어지거나 친계 항체 (320-179) 가변 중쇄의 CDR2에 인접한 선택된 아미노산 잔기에 제조된 단일 아미노산 치환 각각의 위치 및 식별점을 보여준다. 박스표시된 영역은 AbM 넘버링 시스템에 따른 CDR을 나타낸다.
도 2는 친계 항체 (320-179) 가변 경쇄의 CDR1 또는 CDR3 영역에 제조된 단일 아미노산 치환 각각의 위치 및 식별점을 보여준다. 박스 영역은 AbM 넘버링 시스템에 따른 CDR을 나타낸다.
도 3은 변이체 항-TL1A-항체 중쇄의 정렬을 보여준다.
도 4는 변이체 항-TL1A-결합 항체 경쇄의 정렬을 보여준다.
도 5는 SPR에 의해 측정된 바와 같은 변이체 항-TL1A 항체의 TL1A 해리 상의 비교를 보여준다.
도 6은 변이체 TL1A 항체를 사용한 TF-1 세포 카스파제 효능 검정의 결과를 보여준다.
도 7은 친계 항체, 320-179와 비교된, 다양한 TL1A 항체를 사용한 TF-1 세포 카스파제 효능 검정의 결과를 보여준다.
도 8은 항체 320-587이 여러 상이한 실험을 거친 다른 공개된 항-TL1A 항체와 비교하여 TF-1 세포 카스파제 효능 검정에서 우수한 TL1A 효능을 가짐을 보여준다.
도 9는 ELISA 포맷으로 측정된 바와 같이 이소형 대조군과 비교하여 TL1A의 DR3으로의 결합을 억제하는 다양한 항-TL1A 항체를 보여준다.
도 10은 친계 항체, 320-179가 TL1A의 DcR3으로의 결합을 억제하지 않고 변이체 항-TL1A 항체는 TL1A-DcR3 상호작용을 억제함을 보여준다.
도 11은 항체 320-587이 상이한 종의 TL1A와 교차 반응하고 이에 결합하며; 상기 항체는 시험된 모든 종으로부터 TL1A에 결합함을 보여준다.
도 12는 랫트 TNBS-유도된 대장염 모델에서 항체 320-587의 투여 결과를 보여주고, 항체가 대장염 증상을 상당히 완화시킴을 입증한다.
도 13은 항체 320-587이 ELISA 시험에서 면역 복합체로 자극된 인간 PBMC로부터 분비된 인간 TL1A를 검출함을 보여준다.
도 14는 항체 320-587이 유동 세포측정 시험에서, 이들의 표면상에 막 TL1A를 발현하는 인간 PBMC의 집단을 검출함을 보여준다.
도 15는 항체 320-587로 처리된 급성 OVA-유도된 천식을 갖는 랫트가 기관지폐포 세척액 (BALF)에서 상당히 감소된 호산구를 가짐을 보여준다.
도 16A 내지 16D는 항체 320-587로 처리된 급성 OVA-유도된 천식을 갖는 기니 피그의 치료가 (도 16A) BALF 호산구, (도 16B) BALF 대식세포, (도 16C) 초기 천식 반응 후 기도 과반응성, 및 (도 16D) 초기 천식 반응의 정도를 개선시킴을 보여준다.
도 17A 내지 17E는 항체 320-587로 처리된 만성 OVA-유도된 천식을 갖는 랫트의 치료가 (도 17A) BALF 호산구, (도 17B) BALF 대식세포, (도 17C) BALF IL-13, (도 17D) PAS 반응성에 의해 평가된 바와 같은 고블릿 세포 과다형성, 및 (도 17E) H&E 염색 섹션으로부터 평가된 바와 같은 점막 비후를 개선시킴을 보여준다.
도 18은 기도 폐쇄를 2배로 하기 위해 요구되는 난백알부민의 용량을 보여준다.
도 19는 항체 320-587로 처리된 TNBS-유도된 대장염을 갖는 랫트의 치료가 궤양 영역 섬유증을 개선시킴을 보여준다.
도 20A 내지 20E는 항체 320-587로 처리된, DNBS-유도된 대장염과 TNBS-유도된 대장염을 갖는 랫트의 비교 및 제7일 및 제14일 (도 20A) 결장 중량/길이 비율, (도 20B) 결장 섬유증, (도 20C) 결장 침윤, 및 (도 20D) 결장 손상에 대한 효과를 보여준다. 도 20E는 제7일 및 제14일에 궤양 영역의 대표적 섹션을 보여준다.
도 21A 내지 21C는 항체 320-587로 처리된 DSS-유도된 대장염을 갖는 랫트의 치료가 (도 21A) DSS 투여 동안에 중량 변화, (도 21B) DSS 투여 동안에 임상적 스코어링, 및 (도 21C) 결장 중량/길이 비율을 개선시킴을 보여준다.
도 22는 320-587 치료에 응답하여 TL1A-유도된 복강내 사이토카인에서의 변화를 보여준다.
도 2는 친계 항체 (320-179) 가변 경쇄의 CDR1 또는 CDR3 영역에 제조된 단일 아미노산 치환 각각의 위치 및 식별점을 보여준다. 박스 영역은 AbM 넘버링 시스템에 따른 CDR을 나타낸다.
도 3은 변이체 항-TL1A-항체 중쇄의 정렬을 보여준다.
도 4는 변이체 항-TL1A-결합 항체 경쇄의 정렬을 보여준다.
도 5는 SPR에 의해 측정된 바와 같은 변이체 항-TL1A 항체의 TL1A 해리 상의 비교를 보여준다.
도 6은 변이체 TL1A 항체를 사용한 TF-1 세포 카스파제 효능 검정의 결과를 보여준다.
도 7은 친계 항체, 320-179와 비교된, 다양한 TL1A 항체를 사용한 TF-1 세포 카스파제 효능 검정의 결과를 보여준다.
도 8은 항체 320-587이 여러 상이한 실험을 거친 다른 공개된 항-TL1A 항체와 비교하여 TF-1 세포 카스파제 효능 검정에서 우수한 TL1A 효능을 가짐을 보여준다.
도 9는 ELISA 포맷으로 측정된 바와 같이 이소형 대조군과 비교하여 TL1A의 DR3으로의 결합을 억제하는 다양한 항-TL1A 항체를 보여준다.
도 10은 친계 항체, 320-179가 TL1A의 DcR3으로의 결합을 억제하지 않고 변이체 항-TL1A 항체는 TL1A-DcR3 상호작용을 억제함을 보여준다.
도 11은 항체 320-587이 상이한 종의 TL1A와 교차 반응하고 이에 결합하며; 상기 항체는 시험된 모든 종으로부터 TL1A에 결합함을 보여준다.
도 12는 랫트 TNBS-유도된 대장염 모델에서 항체 320-587의 투여 결과를 보여주고, 항체가 대장염 증상을 상당히 완화시킴을 입증한다.
도 13은 항체 320-587이 ELISA 시험에서 면역 복합체로 자극된 인간 PBMC로부터 분비된 인간 TL1A를 검출함을 보여준다.
도 14는 항체 320-587이 유동 세포측정 시험에서, 이들의 표면상에 막 TL1A를 발현하는 인간 PBMC의 집단을 검출함을 보여준다.
도 15는 항체 320-587로 처리된 급성 OVA-유도된 천식을 갖는 랫트가 기관지폐포 세척액 (BALF)에서 상당히 감소된 호산구를 가짐을 보여준다.
도 16A 내지 16D는 항체 320-587로 처리된 급성 OVA-유도된 천식을 갖는 기니 피그의 치료가 (도 16A) BALF 호산구, (도 16B) BALF 대식세포, (도 16C) 초기 천식 반응 후 기도 과반응성, 및 (도 16D) 초기 천식 반응의 정도를 개선시킴을 보여준다.
도 17A 내지 17E는 항체 320-587로 처리된 만성 OVA-유도된 천식을 갖는 랫트의 치료가 (도 17A) BALF 호산구, (도 17B) BALF 대식세포, (도 17C) BALF IL-13, (도 17D) PAS 반응성에 의해 평가된 바와 같은 고블릿 세포 과다형성, 및 (도 17E) H&E 염색 섹션으로부터 평가된 바와 같은 점막 비후를 개선시킴을 보여준다.
도 18은 기도 폐쇄를 2배로 하기 위해 요구되는 난백알부민의 용량을 보여준다.
도 19는 항체 320-587로 처리된 TNBS-유도된 대장염을 갖는 랫트의 치료가 궤양 영역 섬유증을 개선시킴을 보여준다.
도 20A 내지 20E는 항체 320-587로 처리된, DNBS-유도된 대장염과 TNBS-유도된 대장염을 갖는 랫트의 비교 및 제7일 및 제14일 (도 20A) 결장 중량/길이 비율, (도 20B) 결장 섬유증, (도 20C) 결장 침윤, 및 (도 20D) 결장 손상에 대한 효과를 보여준다. 도 20E는 제7일 및 제14일에 궤양 영역의 대표적 섹션을 보여준다.
도 21A 내지 21C는 항체 320-587로 처리된 DSS-유도된 대장염을 갖는 랫트의 치료가 (도 21A) DSS 투여 동안에 중량 변화, (도 21B) DSS 투여 동안에 임상적 스코어링, 및 (도 21C) 결장 중량/길이 비율을 개선시킴을 보여준다.
도 22는 320-587 치료에 응답하여 TL1A-유도된 복강내 사이토카인에서의 변화를 보여준다.
개시내용 양상에 관한 다양한 용어는 명세서 및 청구항 전반에 걸쳐 사용된다. 상기 용어는 달리 지적되지 않는 경우 당업계에서의 이들의 통상적인 의미로 받아들여져야 한다. 다른 구체적으로 정의된 용어는 본원에 제공된 정의와 일관된 방식으로 해석되어야 한다.
용어 "대상체" 및 "환자"는 상호교환적으로 사용되고 임의의 동물을 포함한다. 포유동물이 바람직하고 반려 동물 (예를 들어, 고양이, 개) 및 농장 포유동물 (예를 들어, 돼지, 말, 소), 및 마우스, 토끼 및 랫트, 기니 피그 및 다른 설치류를 포함하는 설치류를 포함한다. 시노몰구스 원숭이와 같은 비-인간 영장류가 보다 바람직하고 인간이 매우 바람직하다.
항체와 같은 분자는 이것이 인간의 손에 의해 이의 천연 환경으로부터 변경되고/되거나 제거된 경우 "단리"되었다.
본원에 사용된 것으로서, 단수 형태("a," "an" 및 "the")는, 내용이 달리 명확하게 표지되지 않는 한 다수의 지시대상을 포함한다.
항체-항원 상호작용과 관련하여 "특이성"은 필연적으로 절대 지정이 아니라 항원-음성 세포와 비교하여 항원-양성 세포에 대한 항체의 선택성 정도를 의미하는 상대적 용어를 구성할 수 있다. 항원-양성 세포에 대한 항체의 특이성은 항체의 가변 영역 및 통상적으로 항체의 상보성 결정 영역 (CDR)에 의해 매개된다. 작제물은 항원-음성 세포와 비교하여 항원-양성 세포에 대해 약 100 내지 약 1000배 특이성을 가질 수 있다.
본원에 사용된 바와 같은 용어 "재조합"은 유전자 가공 또는 다르게는 연구소 조작에 의해 만들어진 유전자로부터의 발현을 포함한다.
본 개시 내용은, 변이체 항체가 TL1A에 특이적으로 결합하는, 항체 320-179의 재조합적으로 변경된 중쇄 및/또는 경쇄 가변 영역을 포함하는 변이체 항-TL1A 항체를 제공한다. 이들 320-179 변이체 항체는 DR3과 상호작용하는 TL1A의 능력을 억제하고 일부 양태에서 또한 DcR3과 상호작용하는 능력을 억제하고 추가로 TL1A와 DR3의 상호작용에 의해 유도된 신호 전달을 억제한다. 이들 항체는 항체 320-179와 비교하여 증진된 효능을 갖는다. 이들 항체는 항체 320-179와 비교하여 TL1A에 대해 증진된 친화성을 갖는다.
상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 10배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 12배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 13배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 15배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 20배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 25배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 27배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 상기 증진된 효능은 하기를 갖는 항체에 비해 적어도 약 40배 더 큰 효능을 가질 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 효능의 배수-증진은, 예를 들어, TF-1 세포 검정에서 TL1A-유도된 세포사멸에서의 카스파제 방출을 측정함에 의하여, 계측될 수 있다.
320-179 변이체 항체는 재조합 발현되고, 그리고 TL1A에 특이적으로 결합한다. 친계 항체, 320-179는 하기를 포함한다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 320-179 변이체 항체는 하기를 포함한다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 또는 서열 번호: 3 및 서열 번호: 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 단, 상기 중쇄 가변 영역이 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함할 경우, 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하지 않는다. 320-179 변이체 항체는 TL1A와 DR3의 상호작용을 억제할 수 있다. 320-179 변이체 항체는 항체 320-179에 비해 증진된 효능을 갖고/갖거나 항체 320-179에 비해 TL1A에 대해 증진된 친화성을 갖는다.
일부 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 매우 바람직한 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 및 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 매우 바람직한 양태에서, 320-179 변이체 항체는 하기를 포함하며: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역, 그리고 TL1A에 특이적으로 결합한다. 일부 양태에서, 서열 번호: 3의 중쇄 가변 영역은, 하기에 결합하며: 인간 IgG1(△K) 중쇄 불변 영역 (예컨대, 서열 번호: 43), 이로써 상기 중쇄는 서열 번호: 60을 포함하도록 한다. 일부 양태에서, 서열 번호: 4의 경쇄 가변 영역은, 하기에 결합하며: 람다 인간 경쇄 불변 영역 (예컨대, 서열 번호: 48), 이로써 상기 경쇄는 서열 번호: 61을 포함하도록 한다. 320-179 변이체 항체는 TL1A와 DR3의 상호작용을 억제할 수 있다. 변이체 항체는 항체 320-179에 비해 증진된 효능을 갖고/갖거나 항체 320-179에 비해 TL1A에 대해 증진된 친화성을 갖는다.
일부 양태에서, 320-179 변이체 항체는 재조합 발현되고 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3. 상기 항체는 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3. 양태에서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 경쇄 가변 영역은 바람직하게는 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하지 않는다. 이들 320-179 변이체 항체는 TL1A와 DR3의 상호작용을 억제할 수 있다. 이들 320-179 변이체 항체는 항체 320-179에 비해 증진된 효능을 갖고/갖거나 항체 320-179에 비해 TL1A에 대해 증진된 친화성을 갖는다.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 23의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 24의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 24의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 경쇄 가변 영역, 단, 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하지 않는다. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역 또는 경쇄. 경쇄 가변 영역은 람다 불변 영역을 추가로 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역, 및 중쇄 가변 영역, 단, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하지 않는다. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역, 및 중쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역, 및 중쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역, 및 중쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역, 및 중쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역, 및 중쇄 가변 영역. 일부 양태에서, 항체는 TL1A에 특이적으로 결합하며, 그리고 하기를 포함한다: 서열 번호: 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역, 및 중쇄 가변 영역, 단, 상기 경쇄 가변 영역이 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함할 경우, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하지 않는다. 중쇄 가변 영역은 본원에 기재되거나 예시된 임의의 IgG1, IgG2, 또는 IgG4 중쇄 불변 영역 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 불변 영역을 추가로 포함할 수 있다.
320-179-변이체 항체는 TL1A에 특이적으로 결합한다. 상기 항체는 인간 TL1A에 결합하고 시노몰구스 원숭이 TL1A, 마우스 TL1A, 랫트 TL1A, 기니 피그 TL1A, 고양이 TL1A, 개 TL1A, 돼지 TL1A, 또는 토끼 TL1A 중 하나 이상에 결합할 수 있다. 일부 양태에서, 항체는 예를 들어, 에피토프가 공유되는 경우 다수의 상이한 종의 TL1A에 결합할 수 있다. 일부 양태에서, 인간 TL1A는 하기를 포함한다: 서열 번호: 31, 서열 번호: 32, 또는 서열 번호: 33의 아미노산 서열. 일부 양태에서, 시노몰구스 원숭이 TL1A는 하기를 포함한다: 서열 번호: 34의 아미노산 서열. 일부 양태에서, 마우스 TL1A는 하기를 포함한다: 서열 번호: 35의 아미노산 서열. 일부 양태에서, 랫트 TL1A는 하기를 포함한다: 서열 번호: 36의 아미노산 서열. 일부 양태에서, 기니 피그 TL1A는 하기를 포함한다: 서열 번호: 37의 아미노산 서열. 일부 양태에서, 고양이 TL1A는 하기를 포함한다: 서열 번호: 38의 아미노산 서열. 일부 양태에서, 돼지 TL1A는 하기를 포함한다: 서열 번호: 39의 아미노산 서열. 일부 양태에서, 토끼 TL1A는 하기를 포함한다: 서열 번호: 40의 아미노산 서열. 일부 양태에서, 개 TL1A는 하기를 포함한다: 서열 번호: 41의 아미노산 서열.
320-179-변이체 항체는 KINEXA® 검정 (Sapidyne Instruments Inc., Boise, ID)과 같은 역학적 배제 검정에 따라 측정될 수 있는 평형 해리 상수 (KD)를 포함하는, TL1A에 대한 에피토프에 대해 결합 친화성을 갖는다.
역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 바람직하게는 약 1000 pM 미만이다. 일부 양태에서, 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 500 pM 미만, 약 400 pM 미만, 또는 약 300 pM 미만, 또는 약 200 pM 미만이다. 일부 바람직한 양태에서, 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 100 pm 미만이다.
역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 10 pM 내지 약 100 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 25 pM 내지 약 75 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 30 pM 내지 약 60 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 30 pM 내지 약 50 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 35 pM 내지 약 50 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 36 pM 내지 약 46 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 38 pM 내지 약 44 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 39 pM 내지 약 43 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 40 pM 내지 약 45 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 35 pM 내지 약 42 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 40 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 41 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정으로부터 계측된 TL1A 결합에 대한 KD 는 약 42 pM일 수 있다. 역학적 배제 검정은 불변 결합 상대로서 항체 분자 또는 TL1A 분자 및 적정제로서 다른 분자를 사용할 수 있다.
320-179-변이체 항-TL1A 항체는 바람직하게 TL1A-양성 세포에 결합할 수 있다. 항체는 약 100 nM 미만의 EC50 값으로 TL1A 양성 세포에 결합할 수 있다. 항체는 약 75 nM 미만의 EC50 값으로 TL1A 양성 세포에 결합할 수 있다. 항체는 약 50 nM 미만의 EC50 값으로 TL1A 양성 세포에 결합할 수 있다. 항체는 약 30 nM 미만의 EC50 값으로 TL1A 양성 세포에 결합할 수 있다. 항체는 약 25 nM 미만의 EC50 값으로 TL1A 양성 세포에 결합할 수 있다. 항체는 약 20 nM 미만의 EC50 값으로 TL1A 양성 세포에 결합할 수 있다. 항체는 약 18 nM 미만의 EC50 값으로 TL1A 양성 세포에 결합할 수 있다. 항체는 약 15 nM 미만의 EC50 값으로 TL1A 양성 세포에 결합할 수 있다. 항체는 약 13 nM 미만의 EC50 값으로 TL1A 양성 세포에 결합할 수 있다. 항체는 약 10 nM 미만의 EC50 값으로 TL1A 양성 세포에 결합할 수 있다.
320-179-변이체 항체는 바람직하게는 단클론성이고, 그리고 더욱 바람직하게는 2개 중쇄 및 2개 경쇄를 포함하는 전장 항체이다. 일부 양태에서, 상기 항체는 항원-결합 특이성을 보유하고 또한 바람직하게 320-179 친계 항체 분자 (예를 들어, TL1A에 대한)의 친화성 대부분 또는 모두를 보유하는 항체의 유도체 또는 단편 또는 부분을 포함한다. 예를 들어, 유도체는 적어도 하나의 가변 영역 (중쇄 또는 경쇄 가변 영역 중 하나)를 포함할 수 있다. 적합한 항체 유도체 및 단편의 다른 예는 제한 없이 다중에피토프 특이성을 갖는 항체, 이특이적 항체, 다중-특이적 항체, 디아바디, 단일쇄 분자, 및 FAb, F(Ab')2, Fd, Fabc, 및 Fv 분자, 단일쇄 (Sc) 항체, 단일쇄 Fv 항체 (scFv), 개별 항체 경쇄, 개별 항체 중쇄, 항체 쇄와 다른 분자 간의 융합, 중쇄 단량체 또는 이량체, 경쇄 단량체 또는 이량체, 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄로 이루어진 이량체 및 다른 다량체를 포함한다. 단일쇄 Fv 항체는 다가일 수 있다. 모든 항체 이소형은 항체 유도체, 단편 및 부분을 제조하기 위해 사용될 수 있다. 항체 유도체, 단편, 및/또는 부분은 임의의 세포 유형, 원핵세포 또는 진핵세포에 의해 재조합적으로 생성되고 발현될 수 있다.
전장 항체에서, 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역(본원에서 HCVR 또는 VH로 약술됨) 및 중쇄 불변 영역으로 구성된다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인 CH1, CH2 및 CH3로 구성된다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역(LCVR 또는 VL로 약술됨) 및 경쇄 불변 영역으로 구성된다. 경쇄 불변 영역은 1개의 도메인, CL로 구성된다. VH 및 VL 영역은 보다 보존된, 골격 영역(FR)으로 명명되는 영역이 산재된, 상보성 결정 영역(CDR)으로 명명되는 고가변성 영역으로 추가로 세분될 수 있다. 각각의 VH 및 VL은 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성되고 하기의 순서로 아미노-말단에서 카복시 말단으로 배열된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 전형적으로, 항체의 항원 결합 성질은 CDR 서열에 대한 변화에 의한 것 보다 FR 서열에 대한 변화에 의해 방해될 가능성이 적다. 면역글로불린 분자는 임의의 종류 (예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 부류 (예를 들어 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 하위 부류일 수 있다.
320-179-변이체 항체는 완전한 인간 항체이다. 완전한 인간 항체는 전체 분자가 인간 또는 다르게는 인간 기원이거나 항체의 인간 형태와 동일한 아미노산 서열을 포함하는 항체이다. 완전한 인간 항체는 예를 들어, 항체의 가변 영역을 암호화하는 인간 유전자가 재조합적으로 발현되는 경우, 인간 V 유전자 라이브러리로부터 수득된 것들을 포함한다. 완전한 인간 항체는 다른 유기체 (예를 들어, 마우스 및 이종마우스 기술) 또는 인간 항체를 암호화하는 유전자로 형질전환된 다른 유기체 기원의 세포에서 발현될 수 있다. 그럼에도 불구하고 완전한 인간 항체는 인간 서열에 의해 암호화되지 않은 아미노산 잔기, 예를 들어, 무작위 또는 부위 지시된 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 320-179-변이체 항체는 비-면역글로불린 유래된 단백질 골격을 포함할 수 있다. 예를 들면, 참조가 하기에 의하여 이루어질 수 있다: Ku & Schutz, 1995, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92: 6552-6556 (항원 결합을 위해 선택된 CDR을 생성하도록 무작위화된 2개의 루프를 갖는 4개의 나선 번들 단백질 시토크롬 b562를 기재함).
320-179-변이체 항체는 항체 활성 또는 안정성에 영향을 줄 수 있는 해독후 변형 또는 모이어티를 포함할 수 있다. 이들 변형 또는 모이어티는 메틸화된, 아세틸화된, 글리코실화된, 황산화된, 인산화된, 카복실화된, 및 아미드화된 모이어티 및 당업계에 널리 공지된 다른 모이어티를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 모이어티는 천연적으로 면역글로불린 분자상에서 통상적으로 발견되거나 원핵세포 및 진핵세포 발현 시스템을 포함하는 재조합 발현 시스템에 의해 항체로 부가되는 임의의 화학적 그룹 또는 그룹의 조합을 포함한다.
본원의 개시내용에 의해 고려되는 측쇄 변형의 예는 예를 들어, 알데하이드와의 반응에 의한 환원적 알킬화에 이어서 NaBH4 를 사용한 환원; 메틸아세트이미데이트를 사용한 아미드화; 아세트산 무수물을 사용한 아실화; 시아네이트를 사용한 아미노 그룹의 카바모일화; 2,4,6-트리니트로벤젠 설폰산 (TNBS)을 사용한 아미노 그룹의 트리니트로벤질화; 숙신산 무수물 및 테트라하이드로프탈산 무수물을 사용한 아미노 그룹의 아실화; 및 피리독살-5-포스페이트를 사용한 라이신의 피리독실화에 이어서 NaBH4 를 사용한 환원에 의한 아미노 그룹의 변형을 포함한다.
아르기닌 잔기의 구아니딘 그룹은 2,3-부탄디온, 페닐글리옥살 및 글리옥살과 같은 시약을 사용한 헤테로환계 응축 생성물의 형성에 의해 변형될 수 있다. 카복실 그룹은 O-아실이소우레아 형성을 통한 카보디이미드 활성화에 이어서 예를 들어, 상응하는 아미드로의 후속적 유도체화에 의해 변형될 수 있다. 설피드릴 그룹은 요오도아세트산 또는 요오도아세트아미드를 사용한 카복시메틸화; 시스테인산으로의 과포름산 산화; 다른 티올 화합물과 혼합된 디설파이드의 형성; 말레이미드, 말레산 무수물 또는 다른 치환된 말레이미드와의 반응; 4-클로로머큐리벤조에이트, 4-클로로머큐리페닐설폰산, 페닐머큐리 클로라이드, 2-클로로머큐리-4-니트로페놀 및 다른 머큐리얼을 사용한 머큐리얼 유도체의 형성; 알칼리 pH에서 시아네이트를 사용한 카바모일화와 같은 방법에 의해 변형될 수 있다. 트립토판 잔기는 예를 들어, N-브로모숙신이미드를 사용한 산화 또는 2-하이드록시-5-니트로벤질 브로마이드 또는 설페닐 할라이드를 사용한 인돌 고리의 알킬화에 의해 변형될 수 있다. 한편, 티로신 잔기들은 3-니트로티로신 유도체를 형성하기 위한 테트라니트로메탄을 사용한 질화에 의해 변경될 수 있다. 히스티딘 잔기의 이미다졸 고리의 변형은 요오도아세트산 유도체를 사용한 알킬화 또는 디에틸피로카보네이트를 사용한 N-카브에톡실화에 의해 성취될 수 있다.
320-179-변이체 항체는 제한 없이 IgG를 이화작용으로부터 보호하고 고혈청 항체 농도를 유지하는데 주요 역할을 하는 수용체인 신생아 Fc 수용체 (FcRn)와 항체의 상호작용을 조절하는 변형을 포함하는, 혈청 반감기 및 생분포를 조절하는 변형을 포함할 수 있다. 혈청 반감기 조절 변형은 IgG1, IgG2, 또는 IgG4의 Fc 영역에서 일어날 수 있고, 이는 미국 특허 번호 7,083,784에 기재된 바와 같이, M252Y/S254T/T256E ("YTE" 치환, EU 넘버링 시스템에 따른 넘버링을 사용한 (Edelman, G.M. et al. (1969) Proc. Natl. Acad. USA 63, 78-85))의 3중 치환을 포함한다. 기타 치환은 하기에서 발생할 수 있다: 위치 250 및 428, 참고: 예컨대, 미국 특허 번호 7,217,797, 뿐만 아니라 위치 307, 380 및 434, 참고: 예컨대, PCT 공보 번호 WO 00/042072. Fc 수용체로의 결합, 및 FcRn 결합 및 혈청 반감기를 포함하는, 이들 수용체에 의해 매개되는 후속적 기능을 조절하는 불변 도메인 아미노산 치환의 예는 하기에 기재되어 있다: 미국 공보 번호 2009/0142340, 2009/0068175, 및 2009/0092599. 임의의 부류의 항체는 이종성을 감소시키기 위해 누락되거나 제거된 중쇄 C-말단 라이신 (△K)을 가질 수 있다. 인간 IgG4에서 S228P (EU 넘버링)의 치환은 생체내 항체 Fab-아암 교환을 안정화시킬 수 있고 (문헌참조: Labrin et al. (2009) Nature Biotechnology 27:8; 767-773), 상기 치환은 YTE 및/또는 K 변형과 동시에 존재할 수 있다.
상기 320-179-변이체 항체는 인간 불변 도메인을 포함한다. 중쇄 불변 도메인은 바람직하게는 인간 IgG1, IgG2, 또는 IgG4 불변 도메인이다. 경쇄 불변 도메인은 바람직하게 인간 람다 불변 도메인이다. 적합한 인간 람다 도메인은 서열 번호: 48을 포함한다.
320-179 변이체 항체로 사용될 수 있는 인간 중쇄 IgG1 불변 영역은 하기 중으로부터 선택될 수 있다: 인간 IgG1 (서열 번호: 42), 인간 IgG1 (△K) (서열 번호: 43), 인간 IgG1 252Y/254T/256E (서열 번호: 44), 인간 IgG1 252Y/254T/256E (△K) (서열 번호: 64), 인간 IgG1 L234A/L235A/G237A (서열 번호: 63), 인간 IgG1 L234A/L235A/G237A (△K) (서열 번호: 62), 인간 IgG1 L235A/G237A (서열 번호: 65), 및 인간 IgG1 L235A/G237A (△K) (서열 번호: 66). 320-179 변이체 항체로 사용될 수 있는 인간 중쇄 IgG2 불변 영역은 하기 중으로부터 선택될 수 있다: (△K의 존재 또는 부재 하에서의) 인간 IgG2 (서열 번호: 67 및 서열 번호: 70), 및 (△K의 존재 또는 부재 하에서의) 인간 IgG2 A330S/P331S (서열 번호: 71 및 서열 번호: 68). 320-179 변이체 항체로 사용될 수 있는 인간 중쇄 IgG4 불변 영역은 하기 중으로부터 선택될 수 있다: 인간 IgG4 S228P (서열 번호: 45), 인간 IgG4 S228P (△K) (서열 번호: 46), 인간 IgG4 228P/252Y/254T/256E (서열 번호: 47), 및 인간 IgG4 228P/252Y/254T/256E (△K) (서열 번호: 69).
320-179-변이체 항체는 임의의 화학적 또는 생분자 모이어티에 표지되거나, 결합되거나 접합될 수 있다. 표지된 항체는 치료학적, 진단학적 또는 기본 연구 응용에서의 용도를 발견할 수 있다. 상기 표지/콘주게이트는 검출될 수 있고, 예를 들어, 형광색소, 전기화학발광 프로브, 양자점, 방사선표지, 효소, 형광 단백질, 발광 단백질 및 비오틴이 있다. 표지/콘주게이트는 화학치료제, 독소, 방사선동위원소 및 암 세포의 사멸과 같은 병태를 치료하기 위해 사용되는 기타 제제일 수 있다. 화학치료제는 항체가 사용될 목적을 위해 적합한 임의의 치료제일 수 있다.
항체는 단백질용해 절단을 차단하거나 활성 또는 안정성을 증진시키기 위해 공지된 보호/블록 그룹에 의해 유도체화될 수 있다.
항체 및 이들의 서브도메인 (예를 들어, FR 및 CDR)을 암호화하는 폴리뉴클레오티드 서열은 본원의 개시내용에서 특징화된다. 폴리뉴클레오티드는 RNA, DNA, cDNA, RNA 및 DNA의 하이브리드, RNA, DNA 또는 이의 하이브리드의 단일 가닥, 이중 가닥 또는 삼중 가닥을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 폴리뉴클레오티드는 본원에 기술되거나 예시된, 320-179 변이체 항체의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역을 암호화하는 핵산 서열을 포함할 수 있다. 폴리뉴클레오티드 서열의 상보체는 또한 본원의 개시내용 범위내에 있다.
폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함할 수 있다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역. 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 51의 핵산 서열.
폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함할 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역. 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 49의 핵산 서열.
폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함할 수 있다: 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 50의 핵산 서열.
폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함할 수 있다: 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 52의 핵산 서열.
폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함할 수 있다: 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 53의 핵산 서열.
폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함할 수 있다: 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 54의 핵산 서열.
폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함할 수 있다: 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 55의 핵산 서열.
폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함할 수 있다: 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 56의 핵산 서열.
폴리뉴클레오티드는 하기를 암호화하는 핵산 서열을 포함할 수 있다: 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 하기를 포함할 수 있다: 서열 번호: 57의 핵산 서열.
일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 항체 중쇄 가변 영역을 암호화하는 제1 핵산 서열 및 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 포함한다. 제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 51의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 50의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 51의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 52의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 51의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 54의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 51의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 55의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 51의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 56의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 51의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 57의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 49의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 52의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 49의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 53의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 49의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 54의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 49의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 55의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
제1 핵산 서열은 하기를 암호화할 수 있다: 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 49의 핵산 서열을 포함할 수 있으며, 그리고 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오티드는, 서열 번호: 56의 핵산 서열을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 항체 중쇄 가변 영역을 암호화하는 제1 핵산 서열 및 중쇄 불변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 포함한다. 바람직한 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 포함한다: 하기를 암호화하는 제1 핵산 서열: 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역, 및 하기를 암호화하는 제2 핵산 서열: 서열 번호: 43의 IgG1(△K) 중쇄 불변 영역, 예를 들어, 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 58의 핵산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제1 핵산 서열 및 경쇄 불변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 포함한다. 바람직한 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 하기를 포함한다: 하기를 암호화하는 제1 핵산 서열: 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역, 및 하기를 암호화하는 제2 핵산 서열: 서열 번호: 48의 람다 경쇄 불변 영역, 예를 들어, 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 59의 핵산 서열을 포함한다.
본원에 기재되거나 예시된 임의의 폴리뉴클레오티드는 벡터 내에 포함될 수 있다. 따라서, 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터는 본원의 개시내용의 일부로서 제공된다. 벡터는 발현 벡터일 수 있다. 따라서, 목적하는 폴리펩티드를 암호화하는 서열을 함유하는 재조합 발현 벡터가 제공된다. 발현 벡터는 이에 제한되지 않는 조절 서열, 선택 마커, 정제 태그 또는 폴리아데닐화 신호과 같은 하나 이상의 추가의 서열을 함유할 수 있다. 상기 조절 요소는 전사 프로모터, 인핸서, mRNA 리보솜 결합 부위 또는 전사 및 해독의 종결을 조절하는 서열을 포함할 수 있다.
발현 벡터, 특히 포유 동물 발현 벡터는 하기를 포함할 수 있다: 복제 원점과 같은 하나 이상의 비전사 요소, 발현될 유전자에 결합된 적절한 프로모터 및 인핸서, 다른 5 '또는 3' 비전사 플 랭킹 서열, 필요한 리보솜 결합 부위와 같은 5 '또는 3' 비번역 서열, 폴리아데닐화 부위, 스플라이스 공여체 및 수용체 부위, 또는 전사 종결 서열. 특정 숙주에서 복제하는 능력을 부여하는 복제 오리진이 또한 혼입될 수 있다.
벡터는 당업자에게 널리 공지된 광범위한 임의의 숙주 세포, 및 바람직하게 항체를 발현할 수 있는 숙주 세포를 변형시키기 위해 사용될 수 있다. 벡터는 제한없이 플라스미드, 파지미드, 코스미드, 박미드, 세균 인공 염색체 (BAC), 효소 인공 염색체 (YAC), 및 바쿨로바이러스, 및 다른 세균, 진핵 세균, 효모 및 바이러스 벡터를 포함한다. 적합한 숙주 세포는 제한 없이 공지되거나 제조된 CHO 세포, NS0 세포, HEK293 세포, 또는 임의의 무변성 진핵 세포주를 포함하고 또한 세균, 효모 및 곤충 세포를 포함한다.
항체는 또한 하이브리도마 세포; 당업계에 널리 공지되고 확립된 하이브리도마를 제조하기 위한 방법에 의해 생성될 수 있다.
본원의 개시내용은 또한 320-179 변이체 항체를 포함하는 조성물을 제공한다. 조성물은 본원에 기재되고/되거나 예시된 임의의 항체, 및 약제학적으로 허용가능한 담체와 같은 허용가능한 담체를 포함할 수 있다. 적합한 담체는 항체의 생물학적 활성을 방해하지 않고 바람직하게 이것이 투여되는 숙주에 독성이 아닌 임의의 매질을 포함한다. 조성물은 임의의 적합한 투여 형태로 대상체에게 투여하기 위해 제형화될 수 있다.
320-179 변이체 항체는 대상체에서 호흡기 질환, 위장관 질환, 관절염 또는 피부 질환을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 따라서, 본원의 개시내용은 치료 방법을 특징으로 한다. 일반적으로, 상기 방법은, 호흡기 질환, 위장관 질환, 관절염, 또는 피부 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하여, 이로써 상기 호흡기 질환, 위장관 질환, 관절염, 또는 피부 질환이 치료되도록 하는 단계를 포함한다. 320-179 변이체 항체는 본원에 기재되거나 예시된 임의의 항체를 포함할 수 있다. 투여는 상기 항체를 피하 투여하는 것을 포함할 수 있다. 투여는 상기 항체를 정맥내 투여하는 것을 포함할 수 있다. 대상체는 바람직하게는 인간이다. 대상체는 시노몰구스 원숭이와 같은 비-인간 영장류일 수 있거나 마우스, 랫트, 기니 피그, 고양이, 돼지, 토끼 또는 개와 같은 포유동물일 수 있다.
호흡기 질환이 치료되는 양태에서, 상기 방법은 호흡기 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 호흡기 질환은 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 폐 섬유증, 폐 사르코이드증, 알레르기 비염 또는 낭포성 섬유증 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 따라서, 예를 들어, 일부 양태에서, 상기 방법은 천식에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 천식이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 COPD에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 COPD가 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 폐 섬유증에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 폐 섬유증이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 폐 사르코이드증에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 폐 사르코이드증이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 알러지성 비염에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 알러지성 비염이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 낭포성 섬유증에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 낭포성 섬유증이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
위장관 질환이 치료되는 양태에서, 상기 방법은 위장관 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 위장관 질환은 하기 중 하나 이상을 포함할 수 있다: 염증성 장 질환 (IBD), 크론병, 대장염, 궤양성 대장염, 과민성 장 증후군 (IBS), 호산구성 식도염, 또는 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환 또는 병태. 따라서, 예를 들어, 일부 양태에서, 상기 방법은 IBD에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 IBD가 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 크론병에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 크론병이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 대장염에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 대장염이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 궤양성 대장염에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 궤양성 대장염이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 IBS에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 IBS가 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 호산구성 식도염에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 호산구성 식도염이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환 또는 병태에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환 또는 병태가 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
관절염이 치료되는 양태에서, 상기 방법은 관절염에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 관절염은 류마티스성 관절염을 포함할 수 있다. 따라서, 예를 들어, 일부 양태에서, 상기 방법은 류마티스 관절염에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 류마티스 관절염이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
피부 질환이 치료되는 양태에서, 상기 방법은 피부 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 상기 피부 질환은 아토피성 피부염, 습진 또는 경피증 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 따라서, 예를 들어, 일부 양태에서, 상기 방법은 아토피성 피부염에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 아토피성 피부염이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 습진에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 습진이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 경피증에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 경피증이 대상체에서 치료되도록 320-179 변이체 항체, 또는 이의 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본원에 기술되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 호흡기 질환의 치료에서 사용되기 위한 약제의 제조에서 사용될 수 있다. 본원에 기술되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 위장관 질환의 치료에서 사용되기 위한 약제의 제조에서 사용될 수 있다. 본원에 기술되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 관절염의 치료에서 사용되기 위한 약제의 제조에서 사용될 수 있다. 본원에 기술되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 피부 질환의 치료에서 사용되기 위한 약제의 제조에서 사용될 수 있다. 본원에서 기술되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 천식, COPD, 폐 섬유증, 폐 사르코이드증, 알러지성 비염, 낭포성 섬유증, 염증성 장 질환, 크론병, 대장염, 궤양성 대장염, 과민성 장 증후군, 호산구성 식도염, 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환 또는 병태, 관절염, 류마티스 관절염, 아토피성 피부염, 습진, 또는 경피증 중 임의의 하나의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에서 사용될 수 있다.
본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 호흡기 질환의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 위장관 질환의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 천식의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 피부 질환의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 COPD의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 폐 섬유증의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 폐 사르코이드증의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 알러지성 비염의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 낭포성 섬유증의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 염증성 장 질환의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 크론병의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 대장염의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 궤양성 대장염의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 호산구성 식도염의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환 또는 병태의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 과민성 장 증후군의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 류마티스 관절염의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 아토피성 피부염의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 습진의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다. 본원에 기재되거나 예시된 320-179 변이체 항체는 경피증의 치료에 사용하기 위한 것일 수 있다.
청구항 1 내지 19 중 어느 한 항의 항체를 대상체로부터 단리된 조직 샘플과 접촉시켜 항체-TL1A 복합체를 형성하고 상기 조직 샘플에서 상기 복합체를 검출하는 단계를 포함하는, 대상체로부터 단리된 조직 샘플에서 TL1A를 검출하기 위한 시험관내 방법이 본원에 제공된다.
320-179 변이체 항체는 예를 들어, 대상체로부터 수득된 조직 샘플에서 TL1A-양성 세포를 검출하기 위해 사용될 수 있다. 항체는 TL1A-양성 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC), 예를 들어, 대상체로부터 수득된 PBMC를 검출하기 위해 사용될 수 있다. 항체는 혈액 혈청에서 TL1A를 검출하기 위해 사용될 수 있다. 상기 방법은 생체내, 생체외, 시험관내 또는 동일계내에서 수행될 수 있다. 일반적으로, 상기 방법은 본원에 기재되거나 예시된 임의의 320-179 변이체 항체를 조직 또는 세포, 예를 들어, 대상체로부터 단리된 PBMC와 접촉시켜 항체-TL1A 복합체를 형성하고 상기 조직에서 또는 세포 상에서 상기 복합체를 검출하는 단계를 포함한다. 항체는 검출가능한 표지로 표지될 수 있다. 항체는 검출가능한 표지로 표지된 2차 항체로 검출될 수 있다. 조직은 생물학적 유체 예컨대 혈액 또는 혈청일 수 있거나 이를 포함할 수 있다. 조직은 호흡기 조직, 예컨대 폐 조직, 객담, 기관지폐포 세척액, 위장관 조직, 또는 위장관 세척액일 수 있거나 이를 포함할 수 있다. 조직은 피부 또는 표피 조직일 수 있거나 이를 포함할 수 있다. 조직은 몸체 내 임의의 관절의 조직일 수 있거나 이를 포함할 수 있다. 상기 방법은 대상체로부터 조직을 단리시키는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 예를 들어, 조직에서 TL1A의 수준을 정량하거나, TL1A-양성 세포의 수준을 정량하거나 세포 상에 TL1A의 수준을 정량시키거나 혈청에서 TL1A의 수준을 정량함에 의해 정량적일 수 있다.
개시내용은 또한 본원에 기술되거나 예시된 320-179 변이체 항체 중 임의의 것을 포함하는 키트를 특징으로 한다. 키트는 무엇보다 진단학적, 기본 연구 또는 치료학적 방법에 사용하기 위한 항체 및 다른 제제를 공급하기 위해 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 키트는 본원에 기재되거나 예시된 임의의 하나 이상의 320-179 변이체 항체, 및 호흡기 질환을 치료하기 위한 방법, 위장관 질환을 치료하기 위한 방법 또는 관절염을 치료하기 위한 방법에서 하나 이상의 항체를 사용하기 위한 설명서를 포함한다.
하기의 실시예는 보다 상세하게 본원의 개시내용을 설명하기 위해 제공된다. 이들은 본원의 개시내용을 설명하기 위한 것이지 이를 제한하고자 하는 것이 아니다.
실시예 1
재료 및 방법
이들 실시예에서 아미노산 위치는 카밧 넘버링 시스템에 따라 넘버링된다. CDR은 본원 전반에 걸쳐 CDR 한정 시스템의 AbM 방법에 따라 정의된다.
1.1. 변이체 번들의 생성. 항체 320-179의 중쇄- 및 경쇄 가변 영역 아미노산 서열 (서열 번호: 1 및 2 각각)은 점 변이체의 설계를 위한 주형으로서 사용되었다. 320-179는 사전에 하기에 기술되었다: 미국 공보 번호 2014/0255302 (VH는 서열 번호: 186이며, 그리고 VL은 서열 번호: 199임 (상기 공보중)) (320-179로서 (또한 C320-179로 기술됨)). 상기 항체는 유리한 생물리학적 성질을 갖고 TL1A의 강력한 억제제이며 낮게 예측된 면역원성 프로필을 가졌다.
320-179의 항체 변이체는 9개 대표적 아미노산 - A, S, Q, D, H, K, L, W, Y- 경쇄 CDR1 (CDR-L1), 경쇄 CDR3 (CDR-L3), 중쇄 CDR1 (CDR-H1) 및 중쇄 CDR2 (CDR-H2) 중 각 CDR 아미노산 위치 (AbM 명명법에 의하여 정의됨) 중 하나에서 하나씩- 의 군 중 하나를 치환함에 의하여 제조되었다. 항체 변이체는 또한 가변 중쇄에서 위치 59 및 60 및 가변 경쇄에서 위치 79에 A, S, Q, D, H, K, L, W, Y를 혼입시켜 제조하였다. 생성된 모든 단일 치환된 항체 변이체의 완전한 목록은 각각 도 1 (가변 중쇄) 및 도 2 (가변 경쇄)에 나타낸다.
1.2. 항체 발현 벡터의 작제. 가변 영역 변이체는 아미노산 서열을 합성 올리고뉴클레오티드의 어셈블리에 의해 후속적으로 새롭게 합성된 DNA 서열로 역-해독함에 의해 생성되었다. VH 변이체는 전장 항체 중쇄 (인간 IgG1 중쇄 CH1, 힌지, CH2 및 CH3 도메인) (예를 들어, UniProt No. P01857)를 제조하기 위해 인간 불변 영역을 함유하는 포유동물 발현 벡터에 서브클로닝하였다. 유사하게, VL 변이체는 전장 항체 람다 쇄 (SwissProt No. P0CG05.1)를 제조하기 위해 인간 람다 경쇄 불변 영역을 함유하는 포유동물 발현 벡터에 서브클로닝하였다. 일부 경우에, 전장 중쇄 및 별도로 경쇄는 DNA 서열로 역-해독되고 후속적으로 합성 올리고뉴클레오티드의 어셈블리에 의해 새롭게 합성되었다.
1.3. 항체 변이체의 발현. 항체는 항체 중쇄 및 경쇄를 EXPI293® 세포 (Life Technologies, Carlsbad, CA)로 동시 형질감염시킴에 의해 제조되었다. 형질감염 전날, 실험을 위해 요구되는 세포의 수를 계측하였다. 각각의 20 mL의 형질감염을 위해, 3.6 × 107 세포가 20 mL의 EXPI293® 발현 배지에 요구되었다. 형질감염 이전의 일에서, 세포를 0.9 × 106 생능 세포/mL의 밀도로 시딩하고, 200 rpm에서 회전하는 회전 교반기 상에서 공기 중 8% CO2 의 습화된 분위기 하에서 37° C에서 밤새 항온처리하였다. 형질감염 일에, 세포 수 및 생존능은 자동화된 세포 계수기를 사용하여 계측하였다. >98 % 생능 세포를 갖는 배양물만을 사용하였다. 각각의 20 mL의 형질감염을 위해, 지질-DNA 복합체는 OPTI-MEM® (Life Technologies, Carlsbad, CA) I 감소된 혈청 매질 (Cat. no. 31985-062) 중 10 ㎍의 중쇄 DNA 및 10 ㎍의 경쇄 DNA를 1.0 mL의 총 용적으로 희석시킴에 의해 제조하였다. 54 ㎕의 EXPIFECTAMINE® 293 시약 (Life Technologies, Carlsbad, CA)을 OPTI-MEM® I 매질 중에서 1.0 mL의 총 용적으로 희석시켰다. 바이엘 둘다는 약하게 혼합하고 실온에서 5분 동안 항온처리하였다. 항온처리 후, 상기 희석된 DNA를 희석된 EXPIFECTAMINE® 293 시약 및 DNA-EXPIFECTAMINE® 293 시약 혼합물과 혼합하고 실온에서 추가로 20분 동안 항온처리하여 DNA-EXPIFECTAMINE® 293 시약 복합체의 형성을 허용한다. 항온처리 후, 2 mL의 DNA-EXPIFECTAMINE® 293 시약 복합체를 각각의 50 mL 생물반응기 튜브 (TPP Techno Plastic Products AG)에 첨가하였다. 음성 대조군 튜브에, 2 mL의 OPTI-MEM® (Life Technologies, Carlsbad, CA) I 매질을 DNA-EXPIFECTAMINE® 293 시약 복합체 대신 첨가하였다. 세포는 200 rpm에서 회전하는 회전 교반기 상에서 공기 중 8 % CO2 의 습화된 대기와 함께 37℃에서 항온처리하였다. 대략적으로 형질감염 16-18 시간 후, 100 ㎕의 EXPIFECTAMINE® 293 형질감염 인핸서 1 및 1.0 mL의 EXPIFECTAMINE® 293 형질감염 인핸서 2를 각각의 생물반응기에 첨가하였다. 항체는 형질감염 대략 72시간 후 수거하였다.
1.4. 항체 변이체의 정제. 각각의 항체 변이체는 20 mL의 세포 배양물에서 EXPI293® 세포 중에 발현시켰다. 배양물은 20분 동안 3000 x g에서 50 mL의 팔콘 튜브에 회전 하강시키고 상청액은 0.22 ㎛의 필터 (Corning)를 사용하여 여과하였다. 상청액은 Gilson ASPEC GX274 로봇을 사용하여 정제하였다. 간략하게, 1.2 mL MABSELECT SURE® 단백질 A (GE Healthcare Bio-Sciences AB Uppsala, Sweden) 수지가 팩킹된 SPE 카트리지 (Agilent, 12131014)를 3 칼럼 용적의 1X PBS로 사전 평형화시켰다. 18 mL의 상청액은 칼럼 상에서 전개시킴에 이어서 4 ml 1X PBS로 세척하였다. 각각의 칼럼은 0.9 mL의 0.1 M 시트르산, pH 2.9로 미리 용출시켰다. 정제된 항체는 2 mL 0.1 M 시트르산, pH 2.9로 용출시켰다. 항체는 PD-10 칼럼 (GE Healthcare)을 사용하여 
PBS (59.5 mM KH2PO4, 7.3 mM Na2HPO4.2H2O, 145.4 mM NaCl (pH ~5.8))로 탈염시켰다.
1.5. SPR에 의해 계측 시 항체 발현 및 항원 결합. CM5 센서 칩 (GE Healthcare)을 사용하여, 단백질 A (Pierce)는 아민 커플링 키트 (GE Healthcare)를 사용하여 칩 표면에 커플링시켰다. 단백질 A는 BIACORE® T200을 사용하여 유동 세포 1 및 2 (또는 대안적으로 3 및 4) 상에 커플링시켰다. 항체 또는 대안적으로 정제된 항체를 함유하는 EXPI-293® 세포로부터의 상청액 (1.4에 기재된 바와 같이)을 유동 세포 2의 표면 상에 통과시키고, 완충제 (HBS-EP)은 유동 세포 1 상에 통과시켰다. 포획 단계 동안에 주사된 상청액 또는 정제된 단백질의 양 (및 농도)은 전개 간에 다양하고 표 3 내지 11의 표제에 특정되어 있다. 상청액 또는 정제된 항체의 주사 종료 시점에, 반응 단위의 변화를 측정하였다. 상기 값은 표 3 내지 11에서 포획 수준으로서 보고되었다. 항체가 TL1A에 결합되었는지 여부를 계측하기 위해, 상기 TL1A는 이어서 유동 세포 1 및 2 상에 통과시키고 반응 단위는 TL1A의 주사 종료 (결합 단계) 전에 측정하였다. 이러한 값은 표 3-11에서 TL1A 결합 수준 (초기)로서 표지된다. 상기 반응 단위는 해리 단계 종료 전에 측정하였다. 상기 값은 표 3-11에서 TL1A 결합 수준 (후기)으로서 표지하고 TL1A-항체 복합체의 해리 결과로서 칩의 표면으로부터 소실된 항체의 양의 척도이다. 센서그램은 2회 참조되었다 (유동 세포 2는 유동 세포 1 및 완충제 블랭크로부터 공제한다). 스크리닝할 다수의 항체 변이체가 있으므로 상이한 전개에 걸쳐 스크리닝하였다 (표 3-11). 각각의 경우에 (전개 3을 제외하고) 친계 항체, 320-179는 비교 목적을 위해 전개에 포함되었다. 각각의 전개에 사용되는 조건의 요약은 하기와 같다:
| 구동 # | 상청액 | 단백질 | 포획 수준 근사값 (RU) | 농도 TL1A 샘플 (ug/mL) | TL1A 결합 수준(초기) 시점 | TL1A 결합 수준(후기) 시점 | 주석 |
| 1 | x | 400 | 10 | 59 | 590 | 2 ug/mL로 희석된 항체, 가변적 포획 시간 | |
| 2 | x | 1000 | 10 | 44 | 220 | 구동 완충제로 희석된 상청액, 가변적 포획 시간 | |
| 2 | x | 400 | 10 | 44 | 590 | 2 ug/mL로 희석된 항체, 가변적 포획 시간 | |
| 3 | x | 가변적 | 10 | 59 | 590 | 구동 완충제로 희석된 상청액, 60 s 포획 | |
| 4 | x | 500 | 5 | 44 | 220 | 2 ug/mL로 구동 완충제로 희석된 항체 | |
| 5 | x | 100 | 5 | 44 | 220 | 구동 완충제로 희석된 상청액, | |
| 6 | x | 가변적 | 5 | 44 | 170 | 2 ug/mL로 구동 완충제로 희석되고 45 s 동안 포획된 항체 | |
| 7* | x | 400 | 5 | 44 | 220 | 약 2 ug/mL로 희석된 항체 | |
| 8 | x | 400 | 5 | 44 | 590 | 2 ug/mL로 희석된 항체, 가변적 포획 시간 | |
| 9 | x | 400 | 5 | 44 | 590 | 2 ug/mL로 희석된 항체, 가변적 포획 시간 |
* 이러한 전개는 Biacore® A100 상에서 수행하였다.
항-TL1A의 상이한 종 TL1A로의 결합은 또한 SPR을 사용하여 계측하였다. 항-TL1A 항체는 단백질 A의 표면 상에 포획하였다. 인간, 랫트, 마우스, 토끼, 기니 피그, 돼지, 고양이 또는 시노몰구스 원숭이로부터의 TL1A는 표면 및 측정된 반응 단위 상에 유동시켰다.
1.6. TL1A의 생산. 인간 TL1A는 N-말단 위치된 HIS 및 FLAG 태그와 함께 인간 TL1A의 세포외 도메인 (ECD)을 암호화하는 DNA 발현 작제물을 사용하여 포유동물 EXPI293® 발현 시스템에서 제조하였다. TL1A의 다른 종 형태는 공개적으로 열거된 데이터베이스 상의 서열 목록을 기준으로 제조하였다. 이들은 하기에 요약되어 있다:
| 종 TL1A | 공공 데이터베이스 참조 | 서열 번호: |
| 인간 | UniProt: O95150 | 31 |
| 시노몰구스 원숭이 | 서열 번호: 125 (하기 유래: 미국 공보 번호 2014/0255302 |
34 |
| 마우스 | UniProt: Q5UBV8 | 35 |
| 랫트 | UniProt: Q8K3Y7 | 36 |
| 기니 피그 | UniProt: H0VFN8 | 37 |
| 고양이 | NCBI: XP_003995828.1 | 38 |
| 돼지 | UniProt: I3LL00 | 39 |
| 토끼 | UniProt: G1T1T1 | 40 |
| 개 | UniProt: J9P221 | 41 |
분비된 TL1A 단백질을 함유하는 배양 상청액은 세포를 제거하기 위해 10분 동안 2000 x g에서 원심분리함에 의해 수거하였다. TL1A 단백질은 HISTRAP® HP 칼럼 (GE Healthcare)을 사용하여 상청액으로부터 정제하였다. 용출된 단백질은 HILOAD® 16/60 Superdex 200 상업용 등급 칼럼 (GE Healthcare)을 사용하여 PBS로 완충제 교환하였고 ~70 kDa 분획은 HILOAD® 26/60 SUPERDEX® 200 상업용 등급 칼럼 (GE Healthcare) 상에서 겔 여과에 의해 분리하였다.
1.7. TF-1 세포주 효능 검정. 항-TL1A 항체가 TL1A의 생물학적 활성을 기능적으로 중화시키는지 여부를 계측하기 위해, 항체는 TF-1 세포주에서 TL1A-유도된 세포 사멸을 중화시키는 능력에 대해 시험하였다. TF-1 인간 적백혈병 세포주 (ATCC: CRL-2003)는 표준 조건하의 배양 중에 유지시켰다. TF-1 세포 (7.5 x 104/웰)는 인간 TL1A 100 ng/ml 및 사이클로헥시미드 10 ㎍/ml와 블랙 측면 96-웰 플레이트 (Greiner)에서 항온처리하여 세포 사멸을 유도하였다. 10 ㎍/mL (66.7 nM) 이하의 농도에서 시험 항체를 상기 플레이트에 첨가하고 4 내지 5시간 동안 항온처리하였다. 세포 사멸의 유도는 이어서 제조업자의 설명서에 따라 균일한 카스파제 키트 (Roche)를 사용하여 평가하였다.
데이터는 최대 세포사멸 백분율 (TL1A 항체의 부재하에 인간 TL1A에 더하여 사이클로헥사미드에 의하여 달성된 세포사멸 수준)로서의 발현에 의하여 정규화되었다.
1.8. 리드 항체의 수용체 선택성. TL1A는 이의 동족 신호 전달 수용체, DR3, 및 TNF 패밀리 구성원 Fas-L 및 LIGHT에 대한 디코이 수용체로서 또한 작용하는 디코이 수용체, DcR3 둘다에 결합한다. 항체는 경쟁 ELISA에서 TL1A의 이의 수용체로의 결합을 억제하는 이들의 능력에 대해 평가하였다. DR3/Fc 키메라 (R&D Systems) 또는 DcR3/Fc 키메라 (R&D Systems)는 2 ㎍/ml의 농도에서 96-웰 플레이트 (Maxisorp, Nunc) 상에 코팅시켰다. 연속으로 희석된 시험 항체는 30분 동안 단일-부위 비오티닐화된 인간 TL1A 1 ㎍/ml와 예비 항온처리하고 이어서 DR3/Fc 또는 DcR3/Fc 코팅된 웰에 첨가하였다. 결합된 TL1A는 스트렙타비딘-호스래디쉬 퍼옥시다제 1:2000 (BD Pharmingen)을 사용하여 검출하였다. 데이터는 항-TL1A 항체의 부재하에 TL1A의 수용체로의 최대 결합의 %로서 표현함에 의해 정규화시켰다.
1.9. 역학적 배제 검정. 상기 검정은 평형을 방해하는 것 없이 결합 상대의 하나의 유리 농도를 측정한다. 용액은 용액 중 비변형된 단백질을 사용하여 오프-라인으로 제조할 수 있고 친화성 측정은 평형에 도달하였는지를 확신하기 위해 혼합으로부터 수일 후에 판독될 수 있다. 역학적 배제 검정에서, 하나의 반응물 (불변 결합 상대, 또는 CBP로 호칭되는)은 일정한 농도에서 유지시키고 다른 하나 (적정제로서 호칭되는)는 연속으로 희석시킨다. 역학적 배제 검정을 사용하여 항체-항원 상호작용의 해리 상수 (KD) 및 친화성을 계측할 수 있다. 전형적인 역학적 배제 검정에서, 적정제는 비드 (예를 들어, 세파로스 또는 PMMA 비드)에 고정화시키고 이를 사용하여 용액 중 유리된 CBP를 포획한다. 2차 표지된 프로브는 포획된 CBP의 양을 정량하기 위해 사용한다. 역학적 배제 검정은 하기에서 검토된다: Darling, RK et al. (2004) ASSAY and Drug Development Technol. 2(6):647-57.
성분을 배합하고 평형에 도달하도록 하였다. 이어서 역학적 배제 검정을 사용하여 CBP의 유리된 분획을 측정하였다. 다중 CBP 농도와의 평형 곡선은 KinExA® 프로 소프트웨어 (버젼 4.1.11, Sapidyne) 내 n-곡선 분석 도구를 사용하여 분석하여 활발한 KD 계측을 수득하였다. 인간 TL1A에 대한 320-587의 상호작용은 2개의 배향을 사용하여 조사하였다: (1) CBP는 320-587이고, 적정제는 TL1A이고, (2) CBP는 TL1A이고, 적정제는 320-587이다.
실시예 2
실험 결과
2.1. C320-179에 대한 균등하거나 개선된 오프-속도를 갖는 TL1A-결합 변이체를 선택한다. 항체 320-179의 변이체를 작제하고 상기된 바와 같이 발현시킨다. 각각의 변이체의 EXPI293® (Life Technologies Corp.) 상청액은 BIACORE® (GE Healthcare), 및 친계 항체 320-179의 것과 비교하여 수득된 데이터에 의해 평가하였다. 일부 실험에서 항체는 단백질 A 크로마토그래피를 사용하여 정제하였고 (1.4 참조) 정제된 항체는 BIACORE® (GE Healthcare) 실험에 사용하였다. 표 3-11은 조기 및 후기 시점에서 TL1A로의 결합과 함께 각각의 변이체의 발현 수준을 보여준다. 이후 전개 (표 10 및 11), 하나 초과의 아미노산 치환을 함유하는 항체 변이체를 시험하였다.
| SPR 실험 - 구동 1 - TL1A에 결합하는 항-TL1A 항체. *는 효능 검정 시험을 위해 선택된 항체를 표지한다. | |||||
| 항체 | 320-179에 대한 VH 치환 | 320-179에 대한 VL 치환 | 포획 수준 | TL1A 결합 수준 (초기) | TL1A 결합 수준 (후기) |
| 정제된 항체 | |||||
| 320-179 | 없음 | 없음 | 410 | 140 | 117 |
| 320-184* | 없음 | L79A | 414 | 141 | 118 |
| 320-185* | 없음 | L79S | 401 | 137 | 114 |
| 320-186* | 없음 | L79Q | 398 | 136 | 113 |
| 320-187* | 없음 | L79D | 388 | 134 | 112 |
| 320-188* | 없음 | L79H | 397 | 136 | 113 |
| 320-189* | 없음 | L79K | 393 | 130 | 107 |
| 320-190* | 없음 | L79W | 395 | 136 | 113 |
| 320-191* | 없음 | L79Y | 408 | 140 | 117 |
| SPR 실험 - 구동 2 - TL1A에 결합하는 항-TL1A 항체. *는 효능 검정 시험을 위해 선택된 항체를 표지한다. | ||||||||
| 항체 | 320-179에 대한 VH 치환 | 320-179에 대한 VL 치환 | 포획 수준 | TL1A 결합 수준 (초기) | TL1A 결합 수준 (후기) | 포획 수준 | TL1A 결합 수준 (초기) | TL1A 결합 수준 (후기) |
| 상청액 | 정제된 항체 | |||||||
| 320-179 | 없음 | 없음 | 1133 | 287 | 261 | 410 | 140 | 117 |
| 320-192 | 없음 | T24A | 960 | 238 | 218 | - | - | - |
| 320-193 | 없음 | T24S | 990 | 249 | 227 | 409 | 103 | 91 |
| 320-194 | 없음 | T24Q | 974 | 247 | 226 | 398 | 76 | 64 |
| 320-195 | 없음 | T24D | 992 | 249 | 227 | - | - | - |
| 320-196 | 없음 | T24H | 995 | 250 | 228 | - | - | - |
| 320-197 | 없음 | T24K | 1017 | 255 | 232 | 401 | 105 | 94 |
| 320-198* | 없음 | T24L | 1023 | 262 | 241 | - | - | - |
| 320-199 | 없음 | T24W | 1050 | 251 | 233 | 404 | 97 | 85 |
| 320-200 | 없음 | T24Y | 1027 | 251 | 231 | |||
| 320-201* | 없음 | S25A | 990 | 274 | 252 | 393 | 73 | 57 |
| 320-202* | 없음 | S25Q | 1034 | 234 | 214 | - | - | - |
| 320-203 | 없음 | S25D | 977 | 61 | 24 | 407 | 65 | 35 |
| 320-204 | 없음 | S25H | 1003 | 193 | 155 | - | - | - |
| 320-205* | 없음 | S25K | 1025 | 290 | 271 | 401 | 70 | 51 |
| 320-206 | 없음 | S25L | 1000 | 257 | 235 | - | - | - |
| 320-207* | 없음 | S25W | 1022 | 268 | 243 | - | - | - |
| 320-208 | 없음 | S25Y | 1034 | 222 | 199 | - | - | - |
| 320-209* | 없음 | S26A | 1007 | 222 | 200 | - | - | - |
| 320-210 | 없음 | S26Q | 1033 | 225 | 202 | - | - | - |
| 320-211* | 없음 | S26D | 1025 | 206 | 164 | 392 | 80 | 64 |
| 320-212 | 없음 | S26H | 1013 | 226 | 205 | - | - | - |
| 320-213* | 없음 | S26K | 1052 | 218 | 194 | 422 | 79 | 65 |
| 320-214 | 없음 | S26L | 1038 | 221 | 196 | - | - | - |
| 320-215 | 없음 | S26W | 1021 | 220 | 199 | - | - | - |
| 320-216 | 없음 | S26Y | 1010 | 171 | 147 | - | - | - |
| 320-217 | 없음 | S27A | 1076 | 258 | 235 | - | - | - |
| 320-218 | 없음 | S27Q | 1081 | 239 | 218 | 412 | 92 | 80 |
| 320-219* | 없음 | S27D | 1061 | 243 | 220 | - | - | - |
| 320-220 | 없음 | S27H | 1049 | 253 | 230 | - | - | - |
| 320-221 | 없음 | S27K | 1063 | 225 | 207 | 413 | 99 | 89 |
| 320-222 | 없음 | S27L | 1037 | 156 | 96 | - | - | - |
| 320-223 | 없음 | S27W | 1061 | 143 | 66 | - | - | - |
| 320-224 | 없음 | S27Y | 1055 | 198 | 153 | - | - | - |
| 320-225 | 없음 | S27aA | 1066 | 267 | 243 | - | - | - |
| 320-226* | 없음 | S27aQ | 1035 | 250 | 228 | - | - | - |
| 320-227 | 없음 | S27aD | 1022 | 242 | 218 | - | - | - |
| 320-228 | 없음 | S27aH | 1072 | 259 | 235 | - | - | - |
| 320-229* | 없음 | S27aK | 1057 | 268 | 251 | - | - | - |
| 320-230 | 없음 | S27aL | 1087 | 245 | 223 | - | - | - |
| 320-231 | 없음 | S27aW | 1078 | 271 | 243 | - | - | - |
| 320-232 | 없음 | S27aY | 1051 | 261 | 235 | - | - | - |
| 320-233 | 없음 | D27bA | 1118 | 255 | 235 | 409 | 48 | 16 |
| 320-234 | 없음 | D27bS | 1089 | 262 | 239 | - | - | - |
| 320-235 | 없음 | D27bQ | 1110 | 256 | 236 | - | - | - |
| 320-236 | 없음 | D27bH | 1085 | 254 | 232 | 415 | 5 | 6 |
| 320-237 | 없음 | D27bK | 1073 | 240 | 221 | 398 | 10 | 8 |
| 320-238 | 없음 | D27bL | 1106 | 221 | 191 | - | - | - |
| 320-239 | 없음 | D27bW | 1079 | 212 | 163 | - | - | - |
| 320-240 | 없음 | D27bY | 1089 | 230 | 196 | - | - | - |
| 320-241* | 없음 | I27cA | 1092 | 179 | 122 | - | - | - |
| 320-242 | 없음 | I27cS | 1076 | 124 | 49 | - | - | - |
| 320-243 | 없음 | I27cQ | 1065 | 71 | 26 | - | - | - |
| 320-244* | 없음 | I27cD | 1083 | 21 | 20 | - | - | - |
| 320-245* | 없음 | I27cH | 1084 | 59 | 26 | - | - | - |
| 320-246 | 없음 | I27cK | 1089 | 32 | 23 | - | - | - |
| 320-247 | 없음 | I27cL | 1078 | 205 | 162 | - | - | - |
| 320-248 | 없음 | I27cW | 1110 | 96 | 30 | - | - | - |
| 320-249 | 없음 | I27cY | 1096 | 77 | 28 | - | - | - |
| 320-250 | 없음 | G28A | 1104 | 180 | 115 | - | - | - |
| 320-251 | 없음 | G28S | 1085 | 134 | 50 | - | - | - |
| SPR 실험 - 구동 3 - TL1A에 결합하는 항-TL1A 항체. *는 효능 검정 시험을 위해 선택된 항체를 표지한다. | |||||
| 항체 | 320-179에 대한 VH 치환 | 320-179에 대한 VL 치환 | 포획 수준 | TL1A 결합 수준 (초기) | TL1A 결합 수준 (후기) |
| 상청액 | |||||
| 320-252 | 없음 | G28Q | 996 | 20 | 9 |
| 320-253 | 없음 | G28D | 1073 | 6 | 6 |
| 320-254 | 없음 | G28H | 1021 | 17 | 8 |
| 320-255 | 없음 | G28K | 842 | 24 | 8 |
| 320-256 | 없음 | G28L | 1055 | 30 | 10 |
| 320-257 | 없음 | G28W | 981 | 83 | 18 |
| 320-258 | 없음 | G28Y | 823 | 9 | 6 |
| 320-259 | 없음 | A29S | 824 | 194 | 179 |
| 320-260 | 없음 | A29Q | 836 | 182 | 165 |
| 320-261 | 없음 | A29D | 956 | 86 | 29 |
| 320-262 | 없음 | A29H | 891 | 209 | 190 |
| 320-263* | 없음 | A29K | 848 | 121 | 123 |
| 320-264 | 없음 | A29L | 831 | 199 | 184 |
| 320-265 | 없음 | A29W | 1057 | 168 | 69 |
| 320-266 | 없음 | A29Y | 934 | 218 | 192 |
| 320-267* | 없음 | G30A | 1148 | 299 | 297 |
| 320-268 | 없음 | G30S | 392 | 28 | 7 |
| 320-269 | 없음 | G30Q | 764 | 126 | 93 |
| 320-270 | 없음 | G30D | 511 | 9 | 5 |
| 320-271 | 없음 | G30H | 1067 | 106 | 30 |
| 320-272 | 없음 | G30K | 935 | 5 | 5 |
| 320-273 | 없음 | G30L | 710 | 4 | 4 |
| 320-274 | 없음 | G30W | 796 | 12 | 7 |
| 320-275 | 없음 | G30Y | 751 | 44 | 10 |
| 320-276 | 없음 | L31A | 1273 | 244 | 215 |
| 320-277* | 없음 | L31S | 1741 | 387 | 361 |
| 320-278* | 없음 | L31Q | 1696 | 389 | 374 |
| 320-279 | 없음 | L31D | 561 | 144 | 128 |
| 320-280* | 없음 | L31H | 881 | 228 | 211 |
| 320-281 | 없음 | L31K | 321 | 22 | 6 |
| 320-282 | 없음 | L31W | 811 | 75 | 16 |
| 320-283 | 없음 | L31Y | 317 | 2 | 3 |
| 320-284 | 없음 | G32A | 374 | 1 | 2 |
| 320-285 | 없음 | G32S | 400 | 1 | 2 |
| 320-286 | 없음 | G32Q | 576 | 1 | 4 |
| 320-287 | 없음 | G32D | 339 | 0 | 2 |
| 320-288 | 없음 | G32H | 422 | 1 | 3 |
| 320-289 | 없음 | G32K | 463 | 1 | 3 |
| 320-290 | 없음 | G32L | 361 | 1 | 2 |
| 320-291 | 없음 | G32W | 414 | 2 | 3 |
| 320-292 | 없음 | G32Y | 423 | 111 | 94 |
| 320-293 | 없음 | V33A | 421 | 104 | 86 |
| 320-294 | 없음 | V33S | 419 | 79 | 61 |
| 320-295 | 없음 | V33Q | 414 | 109 | 94 |
| 320-296 | 없음 | V33D | 428 | 118 | 104 |
| 320-297* | 없음 | V33H | 420 | 95 | 77 |
| 320-298 | 없음 | V33K | 416 | 114 | 100 |
| 320-299 | 없음 | V33L | 420 | 51 | 13 |
| 320-300 | 없음 | H34W | 417 | 111 | 95 |
| 320-301 | 없음 | H34Y | 456 | 108 | 96 |
| 320-302* | 없음 | H34A | 423 | 99 | 74 |
| 320-303 | 없음 | H34S | 408 | 71 | 32 |
| 320-304 | 없음 | H34Q | 401 | 103 | 82 |
| 320-305 | 없음 | H34D | 424 | 34 | 10 |
| 320-306 | 없음 | H34K | 452 | 147 | 133 |
| 320-307* | 없음 | H34L | 873 | 216 | 200 |
| 320-308 | 없음 | H34W | 458 | 106 | 73 |
| 320-309 | 없음 | H34Y | 255 | 47 | 40 |
| 320-310 | 없음 | Q89A | 348 | 70 | 62 |
| 320-311 | 없음 | Q89S | 0 | 0 | 0 |
| SPR 실험 - 구동 4 - TL1A에 결합하는 항-TL1A 항체. *는 효능 검정 시험을 위해 선택된 항체를 표지한다. | |||||
| 항체 | 320-179에 대한 VH 치환 | 320-179에 대한 VL 치환 | 포획 수준 | TL1A 결합 수준 (초기) | TL1A 결합 수준 (후기) |
| 정제된 항체 | |||||
| 320-179 | 없음 | 없음 | 616 | 177 | 163 |
| 320-312 | 없음 | Q89D | 529 | 10 | 10 |
| 320-313* | 없음 | Q89H | 502 | 141 | 132 |
| 320-314* | 없음 | Q89K | 598 | 165 | 158 |
| 320-315 | 없음 | Q89L | 515 | 85 | 82 |
| 320-316 | 없음 | Q89W | 535 | 65 | 62 |
| 320-317 | 없음 | Q89Y | 570 | 86 | 83 |
| 320-318* | 없음 | S90A | 578 | 160 | 149 |
| 320-319 | 없음 | S90Q | 523 | 18 | 14 |
| 320-320 | 없음 | S90D | 534 | 31 | 17 |
| 320-321 | 없음 | S90H | 491 | 16 | 13 |
| 320-322 | 없음 | S90K | 450 | 17 | 14 |
| 320-323 | 없음 | S90W | 490 | 14 | 13 |
| 320-324 | 없음 | S90Y | 528 | 13 | 12 |
| 320-325 | 없음 | Y91A | 491 | 95 | 83 |
| 320-326* | 없음 | Y91S | 550 | 126 | 120 |
| 320-327 | 없음 | Y91Q | 493 | 130 | 119 |
| 320-328* | 없음 | Y91H | 542 | 155 | 146 |
| 320-329 | 없음 | Y91K | 600 | 9 | 11 |
| 320-330 | 없음 | Y91L | 600 | 139 | 119 |
| 320-331* | 없음 | Y91W | 615 | 173 | 176 |
| 320-332 | 없음 | D92A | 531 | 66 | 44 |
| 320-333 | 없음 | D92S | 559 | 95 | 67 |
| 320-334 | 없음 | D92Q | 543 | 15 | 14 |
| 320-335 | 없음 | D92H | 581 | 15 | 14 |
| 320-336 | 없음 | D92K | 484 | 11 | 11 |
| 320-337 | 없음 | D92L | 475 | 21 | 15 |
| 320-338 | 없음 | D92W | 548 | 9 | 11 |
| 320-339 | 없음 | D92Y | 509 | 10 | 11 |
| 320-340 | 없음 | G93A | 548 | 145 | 132 |
| 320-341 | 없음 | G93S | 560 | 149 | 135 |
| 320-342 | 없음 | G93Q | 560 | 152 | 139 |
| 320-343 | 없음 | G93D | 545 | 121 | 90 |
| 320-344 | 없음 | G93H | 529 | 117 | 87 |
| 320-345* | 없음 | G93K | 637 | 163 | 154 |
| 320-346 | 없음 | G93L | 526 | 126 | 107 |
| 320-347 | 없음 | G93W | 560 | 149 | 130 |
| 320-348 | 없음 | G93Y | 541 | 144 | 127 |
| 320-349 | 없음 | T94A | 556 | 112 | 88 |
| 320-350 | 없음 | T94S | 502 | 130 | 118 |
| 320-351 | 없음 | T94Q | 553 | 112 | 83 |
| 320-352 | 없음 | T94D | 568 | 101 | 63 |
| 320-353 | 없음 | T94H | 558 | 97 | 73 |
| 320-354 | 없음 | T94K | 536 | 53 | 30 |
| 320-355 | 없음 | T94L | 526 | 102 | 76 |
| 320-356 | 없음 | T94W | 486 | 109 | 86 |
| 320-357 | 없음 | T94Y | 563 | 119 | 91 |
| 320-358 | 없음 | L95A | 501 | 82 | 50 |
| 320-359 | 없음 | L95S | 503 | 57 | 27 |
| 320-360 | 없음 | L95Q | 554 | 86 | 53 |
| 320-361* | 없음 | L95D | 477 | 12 | 11 |
| 320-362 | 없음 | L95H | 522 | 8 | 9 |
| 320-363 | 없음 | L95Y | 566 | 17 | 16 |
| 320-364 | 없음 | S95aA | 516 | 124 | 109 |
| 320-365 | 없음 | S95aQ | 536 | 141 | 128 |
| 320-366 | 없음 | S95aD | 487 | 62 | 31 |
| 320-367 | 없음 | S95aH | 595 | 119 | 116 |
| 320-368 | 없음 | S95aK | 602 | 50 | 26 |
| 320-369 | 없음 | S95aL | 503 | 89 | 60 |
| 320-370 | 없음 | S95aW | 570 | 66 | 39 |
| 320-371 | 없음 | S95aY | 576 | 92 | 70 |
| SPR 실험 - 구동 5 - TL1A에 결합하는 항-TL1A 항체. | |||||
| 항체 | 320-179에 대한 VH 치환 | 320-179에 대한 VL 치환 | 포획 수준 | TL1A 결합 수준 (초기) | TL1A 결합 수준 (후기) |
| 상청액 | |||||
| 320-179 | 없음 | 없음 | 83 | 11 | 10 |
| 320-372 | 없음 | A96S | 106 | 1 | 0 |
| 320-373 | 없음 | A96Q | 99 | -1 | -1 |
| 320-374 | 없음 | A96D | 98 | 1 | 0 |
| 320-375 | 없음 | A96H | 108 | -2 | -1 |
| 320-376 | 없음 | A96K | 98 | 3 | 1 |
| 320-377 | 없음 | A96L | 101 | -1 | -1 |
| 320-378 | 없음 | A96W | 105 | -1 | -1 |
| 320-379 | 없음 | A96Y | 105 | 3 | 1 |
| 320-380 | 없음 | L97A | 104 | 1 | 1 |
| 320-381 | 없음 | L97S | 97 | 3 | 1 |
| 320-382 | 없음 | L97Q | 106 | 0 | 0 |
| 320-383 | 없음 | L97D | 102 | 3 | 1 |
| 320-384 | 없음 | L97H | 98 | 3 | 2 |
| 320-385 | 없음 | L97K | 108 | 1 | 1 |
| 320-386 | 없음 | L97W | 104 | 1 | 0 |
| 320-387 | 없음 | L97Y | 97 | 11 | 10 |
| 320-388 | G26A | 없음 | 110 | 14 | 13 |
| 320-389 | G26S | 없음 | 105 | 12 | 11 |
| 320-390 | G26Q | 없음 | 100 | 12 | 11 |
| 320-391 | G26D | 없음 | 106 | 14 | 13 |
| 320-392 | G26H | 없음 | 109 | 12 | 11 |
| 320-393 | G26K | 없음 | 100 | 12 | 11 |
| 320-394 | G26L | 없음 | 106 | 13 | 12 |
| 320-395 | G26W | 없음 | 104 | 13 | 12 |
| 320-396 | G26Y | 없음 | 104 | 12 | 11 |
| 320-397 | Y27A | 없음 | 109 | 12 | 12 |
| 320-398 | Y27S | 없음 | 110 | 12 | 11 |
| 320-399 | Y27Q | 없음 | 105 | 10 | 10 |
| 320-400 | Y27D | 없음 | 106 | 11 | 11 |
| 320-401 | Y27H | 없음 | 100 | 11 | 10 |
| 320-402 | Y27L | 없음 | 98 | 11 | 10 |
| 320-403 | Y27W | 없음 | 84 | 11 | 10 |
| 320-404 | T28A | 없음 | 84 | 11 | 10 |
| 320-405 | T28S | 없음 | 79 | 10 | 9 |
| 320-406 | T28Q | 없음 | 82 | 8 | 7 |
| 320-407 | T28D | 없음 | 88 | 12 | 11 |
| 320-408 | T28H | 없음 | 81 | 13 | 12 |
| 320-409 | T28K | 없음 | 83 | 10 | 10 |
| 320-410 | T28L | 없음 | 86 | 11 | 10 |
| 320-411 | T28W | 없음 | 82 | 10 | 9 |
| 320-412 | T28Y | 없음 | 89 | 10 | 9 |
| 320-413 | F29A | 없음 | 89 | 9 | 8 |
| 320-414 | F29S | 없음 | 78 | 7 | 7 |
| 320-415 | F29Q | 없음 | 85 | 5 | 4 |
| 320-416 | F29D | 없음 | 81 | 9 | 8 |
| 320-417 | F29H | 없음 | 85 | 9 | 8 |
| 320-418 | F29K | 없음 | 85 | 10 | 9 |
| 320-419 | F29L | 없음 | 83 | 11 | 9 |
| 320-420 | F29W | 없음 | 85 | 11 | 10 |
| 320-421 | F28Y | 없음 | 81 | 9 | 8 |
| 320-422 | T30A | 없음 | 80 | 10 | 9 |
| 320-423 | T30S | 없음 | 86 | 10 | 10 |
| 320-424 | T30Q | 없음 | 86 | 11 | 10 |
| 320-425 | T30D | 없음 | 89 | 14 | 12 |
| 320-426 | T30H | 없음 | 84 | 10 | 9 |
| 320-427 | T30K | 없음 | 88 | 11 | 10 |
| 320-428 | T30L | 없음 | 88 | 11 | 10 |
| 320-429 | T30W | 없음 | 90 | 12 | 11 |
| 320-430 | T30Y | 없음 | 85 | 6 | 6 |
| 320-431 | S31A | 없음 | 85 | 6 | 6 |
| SPR 실험 - 구동 6 - TL1A에 결합하는 항-TL1A 항체. *는 효능 검정 시험을 위해 선택된 항체를 표지한다. | |||||
| 항체 | 320-179에 대한 VH 치환 | 320-179에 대한 VL 치환 | 포획 수준 | TL1A 결합 수준 (초기) | TL1A 결합 수준 (후기) |
| 정제된 항체 | |||||
| 320-179 | 없음 | 없음 | 449 | 111 | 102 |
| 320-432 | S31Q | 없음 | 466 | 116 | 106 |
| 320-433 | S31D | 없음 | 412 | 90 | 83 |
| 320-434 | S31K | 없음 | 473 | 125 | 113 |
| 320-435 | S31L | 없음 | 384 | 92 | 83 |
| 320-436 | S31W | 없음 | 525 | 129 | 118 |
| 320-437 | S31Y | 없음 | 501 | 119 | 109 |
| 320-438 | Y32A | 없음 | 468 | 126 | 116 |
| 320-439 | Y32S | 없음 | 464 | 119 | 108 |
| 320-440 | Y32Q | 없음 | 408 | 108 | 97 |
| 320-441 | Y32D | 없음 | 388 | 80 | 67 |
| 320-442 | Y32H | 없음 | 490 | 124 | 113 |
| 320-443* | Y32K | 없음 | 438 | 114 | 103 |
| 320-444 | Y32L | 없음 | 458 | 107 | 95 |
| 320-445* | Y32W | 없음 | 442 | 116 | 106 |
| 320-446 | D33A | 없음 | 469 | 18 | 8 |
| 320-447 | D33S | 없음 | 503 | 37 | 13 |
| 320-448 | D33Q | 없음 | 482 | 7 | 6 |
| 320-449 | D33H | 없음 | 483 | 76 | 59 |
| 320-450 | D33K | 없음 | 536 | 1 | 3 |
| 320-451 | D33L | 없음 | 497 | 19 | 8 |
| 320-452 | D33W | 없음 | 445 | 84 | 78 |
| 320-453 | D33Y | 없음 | 449 | 111 | 104 |
| 320-454 | I34A | 없음 | 189 | 43 | 37 |
| 320-455 | I34S | 없음 | 144 | 27 | 23 |
| 320-456 | I34Q | 없음 | 214 | 52 | 46 |
| 320-457 | I34D | 없음 | 55 | 6 | 4 |
| 320-458 | I34H | 없음 | 239 | 59 | 53 |
| 320-459 | I34K | 없음 | 93 | 20 | 17 |
| 320-460 | I34L | 없음 | 441 | 114 | 105 |
| 320-461 | I34W | 없음 | 465 | 87 | 82 |
| 320-462 | I34Y | 없음 | 373 | 58 | 52 |
| 320-463* | N35A | 없음 | 462 | 102 | 101 |
| 320-464* | N35S | 없음 | 600 | 130 | 124 |
| 320-465 | N35Q | 없음 | 476 | 92 | 78 |
| 320-466 | N35D | 없음 | 360 | 93 | 86 |
| 320-467 | N35H | 없음 | 350 | 44 | 24 |
| 320-468 | N35K | 없음 | 200 | 2 | 2 |
| 320-469 | N35L | 없음 | 315 | 69 | 61 |
| 320-470 | N35W | 없음 | 329 | 2 | 3 |
| 320-471 | N35Y | 없음 | 312 | 3 | 4 |
| 320-472 | 없음 | S90L | 467 | 23 | 10 |
| 320-473 | 없음 | Y91D | 453 | 69 | 55 |
| 320-474 | 없음 | L95K | 596 | 2 | 4 |
| 320-475 | 없음 | L95W | 727 | 8 | 8 |
| 320-476 | Y27K | 없음 | 560 | 128 | 118 |
| 320-477* | S31H | 없음 | 576 | 148 | 136 |
| 320-478 | A60L | 없음 | 379 | 85 | 77 |
| 320-479 | A60W | 없음 | 277 | 61 | 54 |
| 320-480 | A60Y | 없음 | 319 | 79 | 73 |
| 320-483 | W50A | 없음 | 492 | 4 | 6 |
| 320-484 | W50S | 없음 | 555 | 3 | 6 |
| 320-485 | W50Q | 없음 | 460 | 3 | 5 |
| 320-486 | W50D | 없음 | 178 | 1 | 2 |
| 320-487 | W50H | 없음 | 237 | 2 | 3 |
| 320-488 | W50K | 없음 | 293 | 1 | 2 |
| 320-489 | W50L | 없음 | 337 | 4 | 5 |
| 320-490 | W50Y | 없음 | 393 | 14 | 8 |
| 320-491 | L51S | 없음 | 356 | 85 | 76 |
| SPR 실험 - 구동 7 - TL1A에 결합하는 항-TL1A 항체. *는 효능 검정 시험을 위해 선택된 항체를 표지한다. | |||||
| 항체 | 320-179에 대한 VH 치환 | 320-179에 대한 VL 치환 | 포획 수준 | TL1A 결합 수준 (초기) | TL1A 결합 수준 (후기) |
| 정제된 항체 | |||||
| 320-179 | 없음 | 없음 | 301 | 61 | 56 |
| 320-492 | L51Q | 없음 | 439 | 89 | 82 |
| 320-493 | L51D | 없음 | 242 | 48 | 46 |
| 320-494 | L51H | 없음 | 811 | 150 | 138 |
| 320-495 | L51K | 없음 | 466 | 84 | 77 |
| 320-496 | L51W | 없음 | 581 | 93 | 87 |
| 320-497 | N52A | 없음 | 727 | 135 | 125 |
| 320-498 | N52S | 없음 | 485 | 90 | 82 |
| 320-499 | N52Q | 없음 | 551 | 122 | 113 |
| 320-500 | N52D | 없음 | 472 | 69 | 53 |
| 320-501 | N52H | 없음 | 533 | 118 | 108 |
| 320-502 | N52K | 없음 | 659 | 88 | 59 |
| 320-503 | N52W | 없음 | 484 | 41 | 6 |
| 320-504 | N52Y | 없음 | 500 | 88 | 65 |
| 320-505 | P52aA | 없음 | 570 | 118 | 110 |
| 320-506 | P52aS | 없음 | 444 | 97 | 89 |
| 320-507 | P52aQ | 없음 | 181 | 27 | 24 |
| 320-508 | P52aD | 없음 | 203 | 19 | 12 |
| 320-509 | P52aH | 없음 | 290 | 52 | 47 |
| 320-510 | P52aK | 없음 | 289 | 44 | 33 |
| 320-511 | P52aL | 없음 | 581 | 106 | 98 |
| 320-512 | P52aW | 없음 | 746 | 126 | 118 |
| 320-513 | P52aY | 없음 | 585 | 99 | 90 |
| 320-514 | N53A | 없음 | 516 | 96 | 88 |
| 320-515 | N53S | 없음 | 375 | 73 | 67 |
| 320-516 | N53Q | 없음 | 461 | 92 | 86 |
| 320-517 | N53D | 없음 | 493 | 55 | 50 |
| 320-518 | N53H | 없음 | 882 | 169 | 153 |
| 320-519 | N53K | 없음 | 993 | 217 | 196 |
| 320-520 | N53L | 없음 | 1016 | 174 | 162 |
| 320-521 | N53W | 없음 | 830 | 166 | 152 |
| 320-522 | N53Y | 없음 | 693 | 141 | 129 |
| 320-523 | S54A | 없음 | 476 | 88 | 82 |
| 320-524 | S54Q | 없음 | 292 | 55 | 49 |
| 320-525 | S54D | 없음 | 437 | 33 | 17 |
| 320-526 | S54H | 없음 | 672 | 134 | 124 |
| 320-527 | S54K | 없음 | 578 | 146 | 136 |
| 320-528 | S54L | 없음 | 829 | 121 | 108 |
| 320-529 | S54W | 없음 | 605 | 94 | 83 |
| 320-530 | S54Y | 없음 | 425 | 77 | 67 |
| 320-531 | G55A | 없음 | 331 | 66 | 61 |
| 320-532 | G55S | 없음 | 648 | 10 | 7 |
| 320-533 | G55Q | 없음 | 441 | 93 | 86 |
| 320-534 | G55D | 없음 | 647 | 109 | 102 |
| 320-535 | G55H | 없음 | 637 | 126 | 115 |
| 320-536 | G55K | 없음 | 553 | 115 | 105 |
| 320-537 | G55L | 없음 | 717 | 133 | 123 |
| 320-538 | G55W | 없음 | 318 | 54 | 49 |
| 320-539 | N56A | 없음 | 859 | 172 | 159 |
| 320-540 | N56S | 없음 | 500 | 100 | 92 |
| 320-541 | N56Q | 없음 | 504 | 94 | 84 |
| 320-542 | N56D | 없음 | 839 | 97 | 86 |
| 320-543 | N56H | 없음 | 597 | 138 | 126 |
| 320-544 | N56K | 없음 | 690 | 120 | 112 |
| 320-545 | N56L | 없음 | 518 | 109 | 100 |
| 320-546 | N56W | 없음 | 341 | 67 | 61 |
| 320-547* | N56Y | 없음 | 318 | 77 | 75 |
| 320-548 | T57A | 없음 | 335 | 74 | 68 |
| 320-549 | T57S | 없음 | 269 | 50 | 45 |
| 320-550 | T57Q | 없음 | 635 | 112 | 103 |
| 320-551 | T57D | 없음 | 280 | 44 | 36 |
| 320-552 | T57H | 없음 | 595 | 104 | 97 |
| 320-553 | T57K | 없음 | 494 | 84 | 78 |
| 320-554 | T57L | 없음 | 506 | 66 | 51 |
| 320-555 | T57W | 없음 | 674 | 62 | 30 |
| 320-556 | T57Y | 없음 | 634 | 100 | 90 |
| 320-557 | G58A | 없음 | 378 | 26 | 6 |
| 320-558 | G58S | 없음 | 463 | 3 | 2 |
| 320-559 | G58Q | 없음 | 535 | 9 | 5 |
| 320-560 | G58D | 없음 | 907 | 36 | 9 |
| 320-561 | G58H | 없음 | 539 | 14 | 6 |
| 320-562 | G58K | 없음 | 326 | 2 | 1 |
| 320-563 | G58L | 없음 | 258 | 2 | 2 |
| 320-564 | G58W | 없음 | 345 | 72 | 67 |
| 320-565 | G58Y | 없음 | 545 | 43 | 12 |
| 320-566 | Y59A | 없음 | 720 | 120 | 110 |
| 320-567 | Y59S | 없음 | 590 | 96 | 86 |
| 320-568 | Y59Q | 없음 | 688 | 115 | 107 |
| 320-569 | Y59D | 없음 | 408 | 79 | 73 |
| 320-570 | Y59H | 없음 | 435 | 79 | 72 |
| 320-571 | Y59K | 없음 | 394 | 78 | 72 |
| 320-572 | A60S | 없음 | 459 | 98 | 90 |
| 320-573 | A60Q | 없음 | 338 | 67 | 62 |
| 320-574 | A60D | 없음 | 693 | 140 | 130 |
| 320-575 | A60H | 없음 | 581 | 121 | 110 |
| 320-576 | A60K | 없음 | 479 | 90 | 83 |
| 320-577 | L51A | 없음 | 479 | 98 | 90 |
| 320-578 | L51Y | 없음 | 415 | 83 | 77 |
| 320-579 | N52L | 없음 | 214 | 46 | 41 |
| 320-580 | G55Y | 없음 | 261 | 51 | 47 |
| 320-581 | Y59L | 없음 | 337 | 70 | 65 |
| 320-582 | Y59W | 없음 | 453 | 67 | 52 |
| SPR 실험 - 구동 8 - TL1A에 결합하는 항-TL1A 항체. *는 효능 검정 시험을 위해 선택된 항체를 표지한다. | |||||
| 항체 | 320-179에 대한 VH 치환 | 320-179에 대한 VL 치환 | 포획 수준 | TL1A 결합 수준 (초기) | TL1A 결합 수준 (후기) |
| 정제된 항체 | |||||
| 320-179 | 없음 | 없음 | 402 | 98 | 86 |
| 320-583* | 없음 | G30A, Y91W | 404 | 108 | 103 |
| 320-584* | 없음 | L31S, Y91W | 399 | 103 | 98 |
| 320-585* | 없음 | L31Q, Y91W | 406 | 116 | 109 |
| 320-586* | 없음 | H34L, Y91W | 405 | 108 | 103 |
| 320-587* | N56Y | Y91W | 402 | 123 | 122 |
| 320-588* | N56Y | G30A | 409 | 128 | 123 |
| 320-589* | N56Y | L31S | 399 | 120 | 109 |
| 320-590* | N56Y | L31Q | 405 | 130 | 121 |
| 320-591* | N56Y | H34L | 399 | 132 | 124 |
| 320-592* | N56Y | G30A, Y91W | 408 | 128 | 129 |
| 320-593* | N56Y | L31S, Y91W | 405 | 126 | 124 |
| 320-594* | N56Y | L31Q, Y91W | 407 | 134 | 132 |
| 320-595* | N56Y | H34L, Y91W | 403 | 129 | 128 |
| SPR 실험 - 구동 9 - TL1A에 결합하는 항-TL1A 항체. *는 효능 검정 시험을 위해 선택된 항체를 표지한다. | |||||
| 항체 | 320-179에 대한 VH 치환 | 320-179에 대한 VL 치환 | 포획 수준 | TL1A 결합 수준 (초기) | TL1A 결합 수준 (후기) |
| 정제된 항체 | |||||
| 320-179 | 없음 | 없음 | 402 | 108 | 98 |
| 320-596 | 없음 | Y91F | 405 | 95 | 85 |
| 320-597 | 없음 | L31Q, Y91F | 401 | 115 | 105 |
| 320-598 | 없음 | H34L, Y91F | 403 | 112 | 101 |
| 320-599 | 없음 | L31S, Y91F | 411 | 113 | 103 |
| 320-600 | 없음 | G30A, Y91F | 399 | 111 | 104 |
| 320-601* | N56Y | Y91F | 409 | 121 | 120 |
| 320-602 | N56Y | L31Q, Y91F | 399 | 131 | 125 |
| 320-603 | N56Y | H34L, Y91F | 394 | 126 | 118 |
| 320-605 | N56Y | G30A, Y91F | 399 | 125 | 120 |
| 320-611* | N56Y | Y91W, G93K | 397 | 125 | 127 |
| 320-612 | 없음 | Y91W, G93Y | 400 | 126 | 120 |
| 320-613* | N56Y | Y91W, G93Y | 408 | 135 | 131 |
| 320-614 | N56Y | G93K | 401 | 122 | 111 |
| 320-615 | N56Y | G93Y | 393 | 113 | 108 |
| 320-616 | N56Y | G93A | 396 | 120 | 112 |
유사 범위에 있는 TL1A 결합 수준 (조기) 및 TL1A 결합 수준 (후기) 값 뿐만 아니라 320-179과 유사하거나 우수한 포획 수준을 갖는 항체는 효능 검정에 적용하였다. 이들 변이체는 표 3 내지 11에 음영으로 표지한다. 여러 항체에 대해 SPR로 측정된 바와 같은 오프-속도의 비교는 도 5에 나타낸다. 여러 항체들은 친계 항체 320-179의 것 보다 느린 속도로 해리된다.
2.2 세포 기반 검정에서 개선된 효능을 갖는 항-TL1A 항체. 개선된 오프-속도가 증진된 효능 정제된 항체와 서로 관련되는지를 평가하기 위해, 변이체는 TF-1 세포에서 TL1A 유도된 카스파제 활성 검정에서 전개하였다. 강력한 항체는 TL1A에 결합하고 DR3 수용체의 TL1A 활성화를 억제함에 의해 작용한다. 상기 수용체는 카스파제가 활성화되고 시판되는 시약을 사용하여 검출될 수 있는 세포 사멸 경로를 유발한다. 각각의 실험에서, 항체 변이체는 효능에서 배수 개선에 대해 320-179와 비교하였다. 결과가 표 12에 도시된다.
| TL1A는 TF-1 세포에서 카스파제 효능 검정을 유도하였다: 항-TL1A 항체에 의한 억제. | |||||
| 항체 | 320-179에 대한 VH 치환 | 320-179에 대한 VL 치환 | 항체 IC 50 (μg/mL) | 320-179 IC 50 ( μg /mL) | 배수 개선 |
| 320-184 | 없음 | L79A | 0.010 | 0.030 | 3 |
| 320-185 | 없음 | L79S | 0.020 | 0.030 | 2 |
| 320-186 | 없음 | L79Q | 0.030 | 0.030 | 1 |
| 320-187 | 없음 | L79D | 0.020 | 0.040 | 2 |
| 320-188 | 없음 | L79H | 0.010 | 0.040 | 4 |
| 320-189 | 없음 | L79K | 0.110 | 0.040 | 0 |
| 320-190 | 없음 | L79W | 0.020 | 0.040 | 2 |
| 320-191 | 없음 | L79Y | 0.020 | 0.040 | 2 |
| 320-198 | 없음 | T24L | 0.010 | 0.010 | 1 |
| 320-201 | 없음 | S25A | 0.005 | 0.010 | 2 |
| 320-202 | 없음 | S25Q | 0.010 | 0.010 | 1 |
| 320-205 | 없음 | S25K | 0.020 | 0.030 | 2 |
| 320-207 | 없음 | S25W | 0.007 | 0.020 | 3 |
| 320-209 | 없음 | S26A | 0.040 | 0.020 | 1 |
| 320-211 | 없음 | S26D | 0.010 | 0.030 | 3 |
| 320-213 | 없음 | S26K | 0.070 | 0.030 | 0 |
| 320-219 | 없음 | S27D | 0.020 | 0.030 | 2 |
| 320-226 | 없음 | S27aQ | 0.030 | 0.020 | 1 |
| 320-229 | 없음 | S27aK | 0.040 | 0.060 | 2 |
| 320-241 | 없음 | I27cA | 0.020 | 0.010 | 1 |
| 320-244 | 없음 | I27cD | 5.030 | 0.010 | 0 |
| 320-245 | 없음 | I27cH | 0.540 | 0.010 | 0 |
| 320-263 | 없음 | A29K | 0.003 | 0.010 | 3 |
| 320-267 | 없음 | G30A | 0.010 | 0.040 | 4 |
| 320-277 | 없음 | L31S | 0.003 | 0.010 | 3 |
| 320-278 | 없음 | L31Q | 0.010 | 0.020 | 2 |
| 320-280 | 없음 | L31H | 0.006 | 0.020 | 3 |
| 320-297 | 없음 | V33H | 0.005 | 0.020 | 4 |
| 320-302 | 없음 | H34A | 0.010 | 0.020 | 2 |
| 320-307 | 없음 | H34L | 0.010 | 0.040 | 4 |
| 320-313 | 없음 | Q89H | 0.020 | 0.030 | 2 |
| 320-314 | 없음 | Q89K | 0.020 | 0.030 | 2 |
| 320-318 | 없음 | S90A | 0.020 | 0.050 | 3 |
| 320-326 | 없음 | Y91S | 0.030 | 0.050 | 2 |
| 320-328 | 없음 | Y91H | 0.020 | 0.020 | 1 |
| 320-331 | 없음 | Y91W | 0.002 | 0.020 | 10 |
| 320-345 | 없음 | G93K | 0.020 | 0.010 | 1 |
| 320-361 | 없음 | L95D | 0.010 | 0.010 | 1 |
| 320-443 | Y32K | 없음 | 0.060 | 0.060 | 1 |
| 320-445 | Y32W | 없음 | 0.030 | 0.060 | 2 |
| 320-463 | N35A | 없음 | 0.020 | 0.050 | 3 |
| 320-464 | N35S | 없음 | 0.030 | 0.050 | 2 |
| 320-477 | S31H | 없음 | 0.030 | 0.040 | 1 |
| 320-547 | N56Y | 없음 | 0.004 | 0.040 | 10 |
| 320-583 | 없음 | G30A, Y91W | 0.003 | 0.080 | 27 |
| 320-584 | 없음 | L31S, Y91W | 0.008 | 0.080 | 10 |
| 320-585 | 없음 | L31Q, Y91W | 0.003 | 0.040 | 13 |
| 320-586 | 없음 | H34L, Y91W | 0.002 | 0.050 | 25 |
| 320-587 | N56Y | Y91W | 0.001 | 0.040 | 40 |
| 320-588 | N56Y | G30A | 0.004 | 0.020 | 5 |
| 320-589 | N56Y | L31S | 0.020 | 0.020 | 1 |
| 320-590 | N56Y | L31Q | 0.006 | 0.020 | 3 |
| 320-591 | N56Y | H34L | 0.002 | 0.020 | 10 |
| 320-592 | N56Y | G30A, Y91W | 0.003 | 0.020 | 7 |
| 320-593 | N56Y | L31S, Y91W | 0.004 | 0.060 | 15 |
| 320-594 | N56Y | L31Q, Y91W | 0.005 | 0.060 | 12 |
| 320-595 | N56Y | H34L, Y91W | 0.003 | 0.060 | 20 |
| 320-601 | N56Y | Y91F | 0.002 | 0.020 | 10 |
| 320-611 | N56Y | Y91W, G93K | 0.005 | 0.040 | 8 |
| 320-613 | N56Y | Y91W, G93Y | 0.010 | 0.040 | 4 |
** 효능에서 10배 초과 개선의 배수 개선을 갖는 여러 항체를 n=7 이하 검정에서 전개하였다. 결과는 상기 표에 나타낸 데이터와 일치하였다. 도 7은 320-179와 비교하여 개선된 효능을 갖는 여러 항체의 n=4 복제물을 보여준다.
표 12에서 및 도 6에서 입증된 바와 같이, 시험된 여러 단일 치환 항체는 320-179와 비교하여 우수한 효능을 가졌다. 모든 시험된 단일 치환 항체 변이체 중에, 2개는 320-179와 비교하는 경우 효능에서 10배 초과의 개선을 가졌다. 이들 변이체는 320-331 (가변 경쇄에서 Y91W 치환을 함유하는) 및 320-547 (가변 중쇄에서 N56Y 치환을 함유하는)이다 (도 6). 상기 결과는 항체 VH의 전형적 CDR3이 주로 항체 결합에 관여하기 때문에 예상치 않은 것이고 대조적으로, 식별된 N56Y 치환은 항체 VH의 CDR2에 있는 결합에 대해 상당한 영향을 미친다. VL로부터 Y91W 또는 효능을 개선시킨 다른 치환을 갖는 VH에서 별도로 N56Y를 혼입시켜 변이체를 제조하는 경우 고도로 강력한 항체가 수득되었다. Y91W VL 치환이 하나의 항체, 320-587로의 N56Y VH 치환과 조합되는 경우, 320-179와 비교하여 효능에서의 배수 개선은 40이었다. 도 7은 320-179와 비교하여 4개의 항체 320-587, 320-591, 320-592, 및 320-601의 효능 증가를 입증하는 4개의 상이한 반복 실험을 보여준다. 320-179와 비교하여 개선된 효능을 갖는 이들 항체의 서열은 도 3 (가변 중쇄) 및 도 4 (가변 경쇄)에 나타낸다.
다른 이전에 기재된 항-TL1A 항체와 비교되는 320-587의 효능 비교를 수행하였다. 이들 사전에 기술된 항체는 하기를 포함한다: 항체 1681N (하기에 기술됨: 미국 특허 번호 8,642,741 (VH는 서열 번호: 18이며; VL은 서열 번호: 26임), 항체 VH5/VL1 (하기에서 유래됨: 미국 공보 번호 2014/0308271 (VH는 서열 번호: 24이며; VL은 서열 번호: 17임), 인간화된 1B4 (하기에 기술됨: 미국 특허 번호 8,263,743 (VH는 서열 번호: 74이며; VL은 서열 번호: 75임) 및 320-168 (또한 C320-168로 지칭됨) (하기에 기술됨: 미국 공보 번호 2014/0255302A1 (VH는 서열 번호: 181이며; VL은 서열 번호: 194). 도 8은 320.587이 이들 이전에 기재된 항체와 비교하여 세포 기반 검정에서 보다 우수한 효능을 갖고 이는 기재된 가장 강력한 항-TL1A 항체가 되게 함을 보여준다.
2.3. DR3 및 DcR3 수용체 경쟁 검정. 320-179와 비교하여 증가된 효능을 나타내는 항체는 이의 동족 신호 전달 수용체, DR3, 또는 디코이 수용체, DcR3으로의 TL1A 결합을 억제하는 이들의 능력에 대해 스크리닝하였다. 시험된 모든 항-TL1A 항체는 이소형 대조군과 비교하는 경우 DR3으로의 TL1A 결합의 억제를 보여주었다 (도 9). 이것은 상기 항체가 TL1A-DR3 상호작용을 차단시킴에 의해 TL1A 활성을 억제함을 확인시켜 준다.
미국 공개 번호 제 2014/0255302A1호 (실시예 4)에 기재된 이전의 실험에서, 항체 320-179 (320-179)는 수용체 경쟁 검정에서 시험되었고 DR3으로의 TL1A의 결합을 선택적으로 억제하지만 DcR3으로의 결합을 억제하지 않는 것으로 나타났다 (도 10). 도 10에서 본원에 제공된 실험에서, 이것은 다시 320-179가 TL1A-DcR3 상호작용을 억제하지 않음을 보여준다. 이것은 시험된 개선된 항-TL1A 항체와는 대조적이다. 항체 320-587을 포함하는 TF-1 세포 검정에서 개선된 효능을 갖는 항체 (섹션 2.2에 기재된 바와 같이)는 일치되게 TL1A-DcR3 상호작용을 억제하였다.
요약하면, 친계 항체 320-179는 TL1A-DR3 상호작용을 억제할 수 있지만 TL1A-DcR3 상호작용을 억제하지 않는다. 개선된 효능을 갖는 몇몇 항체, 예컨대 320-267 (VH는 서열 번호: 1이며; VL은 서열 번호: 11임), 320-277 (VH는 서열 번호: 1임, VL은 서열 번호: 12임), 320-278 (VH는 서열 번호 1이며; VL은 서열 번호: 13임) 및 320-591 (VH는 서열 번호: 3이며, VL은 서열 번호: 9임)은 TL1a-DR3 상호작용을 억제하지만, TL1A-DcR3 상호작용은 억제하지 않는다. 320-331, 320-547, 320-583, 320-584, 320-585, 320-586, 320-587 및 이들 항체의 변이체와 같은 개선된 효능을 갖는 여러 항체는 TL1A-DR3 및 TL1A-DcR3 상호작용 둘다를 억제할 수 있다.
2.4. 320-587의 종 교차-반응성은 상이한 종으로부터 재조합적으로 생성된 TL1A에 결합하는 능력에 대해 시험되었다. 항체는 시험된 모든 종으로부터의 TL1A에 결합하였다 (도 11). 320-587의 인간, 랫트, 기니 피그, 개, 고양이, 시노몰구스 원숭이 TL1A로의 결합은 느린 해리 속도를 갖고 이는 고친화성 상호작용을 표지한다. 항체는 마우스 및 토끼 TL1A에 결합하고 신속한 해리 속도를 가졌다.
2.5. 질환의 하기 동물 모델에서 항-TL1A 항체를 시험하기 위한 임상전 효능 모델:
천식: 알레르겐 유도된 천식 - 설치류 (마우스, 랫트 또는 기니 피그)는 난백알부민 (OVA), 특히 닭 계란으로부터 유래된 OVA, + 알룸 (alum)의 피내 주사에 의해 감작화시키고 이어서 분무된 OVA의 에어로졸화에 의해 적어도 2주 후 유발하여 기도 과민성, 호산구의 유입 및 사이토카인의 증가된 생성을 포함하는 천식-유사 증상을 유발한다 (예컨대, Hylkema et al., 2002, Clin. Exp. Immunol. 129:390-96). 상기 모델은 증가된 기도 리모델링 및 섬유증 유도와 함께 보다 만성의 질환 프로필을 제공하기 위한 반복 유발에 의해 변형될 수 있다 (예컨대, Bos et al., 2007, Eur. Respir. J. 30:653-661). 집먼지 진드기와 같은 또 다른 알레르겐이 또한 사용될 수 있다 (예컨대, Lambert et al., 1998, Am. J. Respir. Crit. Care Med. 157:1991-9). 대안적으로, 비인간 영장류 (예를 들어, 시노몰구스 마카크)는 감작화될 수 있고 아스카리스 섬 (Ascaris suum)과 같은 환경적 항원으로 유발하여 기도 과민성, 호산구 유입 및 증가된 사이토카인 생성을 유도한다 (예컨대, Wegner et al., 1991, J. Allergy Clin. Immunol .87:835-41).
COPD: 연기 흡입-유도된 기도 염증 - 설치류 (마우스, 랫트 또는 기니 피그)는 적어도 4주 동안 1주에 3 내지 7회 담배 연기에 노출시켜 호중구의 폐 축적, 증가된 염증 사이토카인 생성, 폐 섬유증 및 폐 고혈압을 특징으로 하는 COPD와 유사한 폐 질환을 유발한다 (예컨대, Davis et al. (2012) PLoS One 7:e33304). 보다 중증 형태의 질환은 연기 노출 동안에 폐로의 반복적 세균 또는 바이러스 감염을 포함시킴에 의해 유도될 수 있다 (예컨대, Li et al. (2012) Biol. Pharm. Bull. 35:1752-60). 연기-유도된 COPD를 갖는 설치류는 항-TL1A 항체로 처리하고 치료 효능에 대해 스크리닝하였다.
폐 섬유증: 블레오마이신-유도된 폐 섬유증 - 설치류 (마우스, 랫트 또는 기니 피그)는 적어도 3주 동안 주당 1회 또는 2회 기관내/비강내 점적 또는 정맥내 주사함에 의해 블레오마이신으로 처리한다. 상기 처리는 유의미하고 무변성인 폐 섬유증을 유도한다 (예컨대, Pinart et al. (2009) Resp. Physiol. Neurobiol. 166:41-46). 블레오마이신-유도된 폐 섬유증을 갖는 설치류는 항-TL1A 항체로 처리하고 치료 효능에 대해 스크리닝하였다.
낭포성 섬유증: CFTR 녹아웃 흰담비 모델 - CFTR의 유전자 녹아웃 또는 공지된 질환 관련 돌연변이 (낭성 섬유증에서 원인이 되는 유전자)에 대해 동종접합성 흰담비는 자발적으로 기도의 점액 폐색, 무기폐, 간질 폐렴 및 진행성 폐 세균 군집화를 갖는 반복된 폐 감염을 특징으로 하는 낭성 섬유증형 질환을 발병한다 (예컨대, Sun et al. (2014) Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 50:502-12). CFTR-/- 흰담비는 항-TL1a 항체로 처리하고 치료 효능에 대해 스크리닝하였다.
과민성 장 증후군: 스트레스-유도된 내장 과민감성 - 스트레스는 하기 중 하나에 의하여 랫트에서 유도될 것이다: 신생아-모체 분리 (예컨대, Coutinho et al. (2002) Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 282:G307-16) 또는 성체의 구속 (예컨대, Shen et al. (2010) J. Neurogastroenterol. Motil. 16:281-90). 이것은 IBS 환자에서 관찰되는 것과 유사한 변화된 대장 운동 및 내장 과민성을 생성하는 것으로 예상된다. 스트레스화된 랫트는 항-TL1A 항체로 처리하고 치료 효능에 대해 스크리닝할 것이다.
류마티스 관절염: 콜라겐-유도된 관절염 - 설치류 (마우스, 랫트 또는 기니 피그)는 보조제 중에 콜라겐으로 면역화시키고 부스팅한다. 동물은 양측 발 종창 및 홍반, 관절 영역 및 관절 손상으로의 염증 침윤을 발병한다 (예컨대, Bendele et al. (1999) Toxicol. Pathol. 27:134-42). 콜라겐-유도된 관절염을 갖는 설치류는 항-TL1A 항체로 처리하고 치료 효능에 대해 스크리닝하였다.
호산구성 식도염: 비강내 아스퍼질러스 푸미가투스 (Aspergillus fumigatus)-유도된 호산구성 식도염. 에이. 푸미가티스의 반복적 비강내 점적에 노출된 마우스는 현저한 식도 호산구 증가증, 상피 이형성증 및 과다형성 및 유리된 호산구 과립을 발병한다 (예를 들어, Mishra et al. (2001) J. Clin. Invest. 107:83-90). 유사하게, 감작화된 기니 피그에서 2주 기간에 걸쳐 난백알부민으로의 반복적인 에어로졸 노출은 호산구 및 비만 세포 둘다의 상피층으로의 침윤과 함께 식도 호산구 증가증을 유발한다 (예컨대, Liu et al. (2015) Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 308:G482-488). 호산구성 식도염을 갖는 마우스 또는 기니 피그는 항-TL1A 항체로 처리하고 치료 효능에 대해 스크리닝하였다.
2.6. 개시내용의 TL1A 항체를 함유하는 샘플을 검출하는데 있어서 TL1A 항체의 용도는 인간 샘플에서 TL1A를 검출하기 위해 사용될 수 있다. 320-587은 ELISA 포맷에서 면역 복합체로 자극된 인간 PBMC로부터 분비된 인간 TL1A를 검출하기 위해 사용하였다 (도 13). 320-587은 또한 유동 세포측정 실험에서 이들의 표면 상에 막 TL1A를 발현하는 인간 PBMC의 집단을 검출하기 위해 사용하였다 (도 14).
2.7. 역학적 배제 검정에 의해 인간 TL1A로의 항-TL1A 항체 결합의 친화성 측정. CBP로서 320-587과 평형에 도달하는 시간: 먼저, 320-587/TL1A 상호작용에 대한 Kon 속도를 측정하였다. 간략하게, 용액은 320-587 및 TL1A를 혼합함에 의해 제조하였고, 분취액을 3시간에 걸쳐 다양한 시점에서 제거하였다. 유리된 320-587은 상기 용액을 20 ㎍/mL의 TL1A로 피복된 세파로스 비드가 팩킹된 칼럼 상에 통과시킴에 의해 포획하였다. 포획된 320-587은 Alexa Fluor® 647-콘주게이트된 항-인간 항체 (0.5 ㎍/mL)로 검출하였다. 상기 검정은 2회 반복하여 8.35 x 105 Ms-1 및 7.45 x 105 Ms- 1 의 Kon 속도를 산출하였고 평균 Kon 속도는 7.90 x 105 Ms- 1 이었다. 이어서 Kon 속도를 사용하여 Sapidyne 웹사이트 (www.Sapidyne.com) 상에서 제공된 이론적 결합 곡선 도구를 사용하여 320-587의 다양한 농도에서 평형에 도달하는데 요구되는 시간의 양을 평가하였다.
CBP로서 320-587을 사용한 KD 계측. CBP, 320-587은 검정 완충제 (1 mg/ml BSA로 보충된 DPBS)에서 15, 50 및 150 pM의 최종 농도로 희석하였다. 적정제, 인간 TL1A를 검정 완충제에서 희석하여 일련의 0.1, 0.3, 1, 3, 10, 30, 100, 300, 1000 및 3000 pM의 농도를 생성하였다. 상기 계측된 평형에 도달하는 시간을 사용하여, 50 또는 150 pM 320-587을 함유한 곡선이 3일 동안 25℃ 항온처리기에서 평형에 도달하도록 하였다. 15 pM 320-587을 함유하는 곡선은 3일 동안 25℃ 항온처리기에서 평형에 도달하도록 하였다. 평형 기간 후, 각각의 반응에서 320-587의 유리된 분획은 상기된 바와 같이 정량하였다. KD 값은 15, 50 및 150 pM 320-587과 함께 생성된 평형 곡선의 n-곡선 분석을 사용하여 계측하였다.
CBP로서 TL1A와 평형에 도달하는 시간: 상기 배향에서 평형에 도달하는 시간은 상기 2.8에서 기재된 바와 같이 결정된 320-587/TL1A 상호작용에 대한 Kon 을 사용하여 평가하였다. 이러한 포멧에서, 유리된 분획 TL1A은 상기 용액을 30 ㎍/mL의 320-587로 피복된 PMMA 비드가 팩킹된 칼럼 상에 통과시킴에 의해 포획하였다. 포획된 TL1A는 항 6x-his DyLight 650 항체 (0.75 ㎍/mL)를 사용하여 검출하였다. 상기 검정은 2회 반복하여 6.11 x 105 Ms-1 및 5.74 x 105 Ms- 1 의 Kon 속도를 산출하였고 평균 Kon 속도는 5.93 x 105 Ms-1 이었다.
CBP로서 TL1A로의 KD 계측: CBP, 인간 TL1A는 검정 완충제에서 30, 100 및 300 pM의 최종 농도로 희석하였다. 적정제 320-587은 검정 완충제에서 희석하여 일련의 0.05, 0.15, 0.5, 1.5, 5, 15, 50, 150, 500, 1500 및 5000 pM의 농도를 생성하였다.
상기 결정된 평형에 도달하는 시간을 사용하여 모든 곡선이 3일 동안 25℃ 항온처리기에서 평형에 도달하도록 하였다. 평형 기간 후, 각각의 반응에서 TL1A의 유리된 분획은 상기된 바와 같이 정량화하였다. KD 값은 30, 100 및 300 pM TL1A와 함께 생성된 평형 곡선의 n-곡선 분석을 사용하여 계측하였다.
상대적으로 낮은 % 오차 뿐만 아니라 우호적 합의가 2개의 KinExA 방법 간에 관찰되었다. CBP로서 320-587을 사용하여 계측된, 320-587과 TL1A의 상호작용에 대한 KD 값은 40.97 ± 8.33 pM (표 13)이었고, CBP로서 TL1A를 사용하여 수득된 KD 는 41.52 ± 13.5 pM이었다 (표 14).
| 친화도: CBP로서 TL1A; 320-587로 피복된 세파로스 비드. | ||
| 검정 번호: | K D (pM) | % 오차 |
| 1 | 40.43 | 4.57 |
| 2 | 52.03 | 5.61 |
| 3 | 46.31 | 4.76 |
| 4 | 32.42 | 3.74 |
| 5 | 33.66 | 3.9 |
| 평균 | 40.97 | |
| SD | 8.33 | |
| %CV | 20 | |
| 친화도: CBP로서 320-587; TL1A로 피복된 PMMA 비드. | ||
| 검정 번호: | K D (pM) | % 오차 |
| 1 | 33.39 | 5.33 |
| 2 | 57.1 | 5.51 |
| 3 | 34.07 | 3.9 |
| 평균 | 41.52 | |
| SD | 13.5 | |
| %CV | 33 | |
3.0. 항-TL1a 항체를 시험하기 위한 임상전 효능 모델.
3.0.1. 천식.
랫트에서 급성 난백알부민-유도된 천식. 브라운-노르웨이 랫트는 제0일에 OVA를 i.p. 주사함에 이어서 제35일 내지 제42일에 매일 OVA 에어로졸을 사용하여 유발시켜 감작화시켰다. 랫트는 14, 21, 28 및 35일째 항체 320-587 또는 비히클로 i.v. 주입에 의하여 처리하였다. 기관지폐포 세척액(BALF)는 제43일에서 전체 및 차등 세포에 대해 평가하였다. 처리는 BALF 호산구를 상당히 감소시키는 것으로 밝혀졌다 (도 15).
랫트에서 만성 난백알부민-유도된 천식. 랫트를 제0일 및 제7일에서 i.p. 주입에 의하여 OVA에 더하여 명반으로 감작시키고, 이후 제14일에 개시하여 제31일까지 3주 동안, 그리고 제37일 내지 제42일에 5일 연속으로 주당 2회 OVA 에어로졸로 유발하였다. 동물은 24, 29, 34 및 39일째 항체 320-587 또는 비히클을 i.v.로 처리하였다. BALF는 제43일에서 전체 및 차등 세포, 및 사이토카인의 패널에 대해 평가하였다. 폐 섹션은 헤마톡실린 및 에오신 (H&E), 및 과요오드산 쉬프 (PAS)로 염색시키고 다양한 병리에 대해 평가하였다. 320-587을 사용한 처리는 비히클과 비교하여 BALF 호산구 및 대식세포(도 17A 및 17B), BALF IL-4 및 IL-13 (도 17C), 고블릿 세포 과다형성 (도 17D) 및 기관지 상피 층의 두께 (도 17E)를 상당히 감소시켰다.
기니 피그에서의 급성 난백알부민-유도된 천식. 수컷 던킨 하틀리 기니 피그는 난백알부민으로 감작화시키고 이후 폐 기능 및 조기 및 후기 천식 반응을 측정하는 벌룬 카테터를 설치하기 위한 수술을 진행하였다. 제16, 20, 24 및 28일에, 동물은 항체 320-587 또는 비히클로 i.p.로 처리하였다. 난백알부민 (0.05-0.1 %) 에어로졸을 사용한 유발은 마지막 처리 30분 후에 수행하였다. 히스타민에 대한 기도 반응성 (AHR)은 유발 24시간 전, 유발 6시간 후 (조기 천식 반응 후 즉시) 및 유발 24시간 후 (후기 천식 반응후 즉시)에 측정하였다. 조기 및 후기 천식 반응의 특성 및 크기는 또한 전체 24시간에 걸쳐 폐 기능의 온라인 등록에 의해 기록하였다. 동물은 수행된 유발 및 기관지폐포세척 25시간 후 희생시켰다. BALF는 전체 및 차등 세포에 대해 평가하였다. 320-587을 사용한 처리는 비히클과 비교하여 BALF에서 호산구 및 대식세포 둘다를 감소시키고 (도 16A 및 16B) 조기 천식 반응 후 AHR (도 16C) 및 조기 천식 반응의 전체 규모를 완화시킨다 (도 16D).
기니 피그에서 만성 난백알부민-유도된 천식. 수컷 던킨 하틀리 기니 피그는 난백알부민에 감작화시키고 이후 4주 후에 12주 동안 주마다 난백알부민으로 유발시켰다. 난백알부민 유발 (0.05-0.5 %)는 기도 폐색이 관찰될 때까지 에어로졸화된 용액의 흡입에 의해 수행하였다. 동물은 난백알부민 유발의 8주에 시작하여 5일마다 항체 320-587 또는 비히클을 i.p.로 처리하였다. 히스타민에 대한 기도 반응성에 의한 기도 기능은 초기 유발 전, 최종 유발 24시간 전 및 최종 유발 6시간 후 측정하였다. 히스타민 유발에 의해 유도된 AHR에 대한 어떠한 효과가 관찰되지 않았지만, 항체 320-587은 점진적으로 증가하는 OVA 용량이 기도 폐색을 유도하기 위해 요구됨에 따라 OVA에 대한 알레르기 반응을 상당히 감소시켰다 (도 18).
기니 피그에서 급성 및 만성 천식 모델에서 관찰된 항체 치료학적 효과에서의 차이는 모델 자체의 함수인 것으로 사료된다. 만성 모델에서 AHR의 정도는 시간 경과에 따라 감소하고 따라서 처리에 덜 민감해지는 것으로 사료된다. 당업계에서, 급성 모델은 일반적으로 기도 반응성에 대한 화합물 효과를 관찰하기 위해 사용되고, 만성 모델은 일반적으로 기도 리모델링에 대한 화합물 효과를 관찰하기 위해 사용된다. 리모델링 평가는 계속한다. 그럼에도 불구하고, 항체가 알레르겐 반응에 대해 영향을 줌을 관찰하는 것은 놀랍다 - 항체가 상기 단계에서 절대 AHR (히스타민에 대한 반응)을 실질적으로 영향을 주지 않지만, 이것이 항원에 대한 직접적인 알레르기 반응을 상당히 감소시켰다.
3.0.2. 염증성 장 질환
랫트에서 TNBS-유도된 대장염: 랫트는 직장내 점적 투여에 의해 에탄올 중 단일 용량의 트리-니트로벤젠설폰산으로 처리하였다. 대조군 동물은 균등한 용량의 에탄올만을 투여받았다. 7일의 공백에 걸쳐, 동물은 염증 침윤 및 다양한 정도의 섬유증으로 결장의 궤양화를 특징으로 하는 병소 대장염을 발병하였다 (예컨대, Wirtz et al. (2007) Nat. Protoc. 2:541-546). 320-587 투여는 결장 두께 (도 12A), 접착의 수 및 중증도 (도 12B) 및 비히클 또는 이소형-매칭된 비관련 항체로 처리된 동물 (도 12D) 보다 상당히 약한 질환을 유도하는 협착의 수 및 중증도 (도 12C)를 포함하는 다중 질환 지표를 상당히 감소시켰다. 감소된 결장 섬유증 (도 19)은 또한 320.587 처리된 동물에서 관찰되었다.
랫트에서 DNBS-유도된 대장염에서 7 및 14일 후 질환의 비교. 대장염은 TNBS 대신 디니트로벤젠설폰산 (DNBS)을 사용하여 상기된 바와 같이 유도하고 DNBS 실험에 사용된 랫트는 위스타르 랫트이다. 동물은 제1일 및 제8일째 항체 320-587 또는 비히클을 i.v.로 처리하였다. 그룹은 2개의 시점 사이에서 비교되는, DNBS 7일 및 14일 후 대장염 및 질환 중증도에 대해 평가하였다. 항체 320-587을 사용한 처리는 제7일에 제한된 효과를 가졌지만 제14일까지 항체 320-587로 처리된 동물은 결장 중량 및 길이 (도 20A), 섬유증 (도 20B), 염증 침윤 (도 20C) 및 결장 손상 (도 20D)에서 상당한 개선을 보여주었다. 궤양 영역 결장의 대표적인 섹션 (도 20E)은 14일째 섬유증에서 손상 복구 및 감소 정도를 보여준다. 제7일 및 제14일 둘 모두에서, 비히클-처리된 동물은 장 구조물의 상당한 손실과 함께 광범위한 염증 침윤 및 섬유증을 보여주었다. 대조적으로, 320-587-처리된 동물은 7일째에 상당한 염증 침윤, 섬유증 및 장 구조물의 손실을 보여주었지만 이들 효과는 14일까지 크게 역전된다.
TNBS 및 DNBS 모델에서 관찰된 항체 치료학적 효과에서 관찰된 차이는 랫트 (DNBS에 대한 TNBS 대 위스타르에 대한 스프라그-돌리)의 상이한 종의 사용으로부터 발생하는 것으로 사료된다. 각각의 랫트 종은 면역학적 유발에 대한 이들의 반응에서 차이를 가져 이들 모델에서 이들의 반응의 역학은 상이한 것으로 사료된다. 또한, TNBS 및 DNBS는 구조적으로 상이하고 질환 상태에서 변화를 유도하는 것으로 사료된다.
랫트에서 만성 (21일) DSS-유도된 대장염. 7일 동안 음료수에서 5 % w/v의 농도에 이어서 추가로 14일 동안 음료수에서 2 % w/v의 농도에서 덱스트란 설페이트 나트륨 (DSS)을 랫트에 투여하였다. 동물은 설사, 확산 결장성 염증, 고블렛 세포 과다형성 및 크립트 상피 손상 및 궤양화를 나타냈다 (예컨대, Randhawa et al. (2014) Korean J. Physiol. Pharmacol. 18:279-88). 랫트는 제5일, 제12일 및 제19일에 항체 320-587 또는 비히클로 정맥내 주입에 의하여 처리하였다. 동물의 무게를 재고 매일 임상 질환 (설사 및 잠혈)에 대해 평가하고 결장 무게 및 길이는 21일째 평가하였다. 항체 320-587 처리는 무게 획득의 DSS-유도된 둔화를 상당히 역전시키고 (도 21A), 질환의 임상 징후를 완화시키고 (도 21B) 결장 무게 및 길이를 개선시켰다 (도 21C).
재조합 인간 TL1A에 의한 복강내 사이토카인의 유도. 재조합 마우스 TL1A의 복강내 주사는 IL-5와 같은 염증 사이토카인의 생성을 유도할 수 있다. 본 연구에서, 마우스에 단일 용량의 항체 320-587 또는 비히클을 투여하고 이어서 1시간 후 재조합 인간 TL1A (rhTL1A) 40 ㎍/마우스로 처리하였다. rhTL1A 투여 6시간 후, 복막 세척을 수행하고 복막 유체는 멀티플렉스 검정에 의해 사이토카인 및 케목킨에 대해 평가하였다. 항체 320-587을 사용한 처리는 사이토카인 G-CSF, IL-1b, IL-5, IL-6, IL-17, 및 케목킨 IP-10, KC, MCP-1, MIP-1a, MIP-1b, MIP-2의 복막 농도를 상당히 감소시켰다 (도 22).
상기 개시내용은 상기 기재되고 예시된 구현예에 제한되지 않지만 첨부된 청구항의 범위 내에서 변화하고 변형시킬 수 있다.
<110> Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd
<120> Antibodies that Specifically Bind to TL1A
<130> 185704-3019
<160> 71
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 119
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Leu Asn Pro Asn Ser Gly Asn Thr Gly Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Arg Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Val Pro Glu Thr Ala Ala Phe Glu Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 2
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Leu Gly Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 3
<211> 119
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 3
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Leu Asn Pro Asn Ser Gly Tyr Thr Gly Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Arg Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Val Pro Glu Thr Ala Ala Phe Glu Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 4
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 4
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Leu Gly Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Trp Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 5
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 5
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Ala
20 25 30
Leu Gly Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Trp Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 6
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 6
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Ser Gly Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Trp Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 7
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 7
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Gln Gly Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Trp Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 8
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 8
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Leu Gly Val Leu Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Trp Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 9
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 9
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Leu Gly Val Leu Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 10
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 10
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Leu Gly Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Phe Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 11
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 11
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Ala
20 25 30
Leu Gly Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 12
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 12
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Ser Gly Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 13
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 13
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Gln Gly Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 14
<211> 111
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<221> UNSURE
<222> (32)
<223> G or A
<220>
<221> UNSURE
<222> (33)
<223> L or S or Q
<220>
<221> UNSURE
<222> (36)
<223> H or L
<220>
<221> UNSURE
<222> (93)
<223> Y or F or W
<400> 14
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Xaa
20 25 30
Xaa Gly Val Xaa Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Xaa Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 15
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 15
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asp Ile Asn
1 5 10
<210> 16
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 16
Trp Leu Asn Pro Asn Ser Gly Asn Thr Gly
1 5 10
<210> 17
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 17
Glu Val Pro Glu Thr Ala Ala Phe Glu Tyr
1 5 10
<210> 18
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 18
Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly Leu Gly Val His
1 5 10
<210> 19
<211> 7
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 19
Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 20
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 20
Gln Ser Tyr Asp Gly Thr Leu Ser Ala Leu
1 5 10
<210> 21
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 21
Trp Leu Asn Pro Asn Ser Gly Tyr Thr Gly
1 5 10
<210> 22
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 22
Gln Ser Trp Asp Gly Thr Leu Ser Ala Leu
1 5 10
<210> 23
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 23
Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Ala Leu Gly Val His
1 5 10
<210> 24
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 24
Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly Ser Gly Val His
1 5 10
<210> 25
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 25
Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly Gln Gly Val His
1 5 10
<210> 26
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 26
Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly Leu Gly Val Leu
1 5 10
<210> 27
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 27
Gln Ser Phe Asp Gly Thr Leu Ser Ala Leu
1 5 10
<210> 28
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<221> UNSURE
<222> (8)
<223> N or Y
<400> 28
Trp Leu Asn Pro Asn Ser Gly Xaa Thr Gly
1 5 10
<210> 29
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<221> UNSURE
<222> (10)
<223> G or A
<220>
<221> UNSURE
<222> (11)
<223> L or S or Q
<220>
<221> UNSURE
<222> (14)
<223> H or L
<400> 29
Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Xaa Xaa Gly Val Xaa
1 5 10
<210> 30
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<221> UNSURE
<222> (3)
<223> Y or W or F
<400> 30
Gln Ser Xaa Asp Gly Thr Leu Ser Ala Leu
1 5 10
<210> 31
<211> 180
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 31
Leu Lys Gly Gln Glu Phe Ala Pro Ser His Gln Gln Val Tyr Ala Pro
1 5 10 15
Leu Arg Ala Asp Gly Asp Lys Pro Arg Ala His Leu Thr Val Val Arg
20 25 30
Gln Thr Pro Thr Gln His Phe Lys Asn Gln Phe Pro Ala Leu His Trp
35 40 45
Glu His Glu Leu Gly Leu Ala Phe Thr Lys Asn Arg Met Asn Tyr Thr
50 55 60
Asn Lys Phe Leu Leu Ile Pro Glu Ser Gly Asp Tyr Phe Ile Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Val Thr Phe Arg Gly Met Thr Ser Glu Cys Ser Glu Ile Arg Gln
85 90 95
Ala Gly Arg Pro Asn Lys Pro Asp Ser Ile Thr Val Val Ile Thr Lys
100 105 110
Val Thr Asp Ser Tyr Pro Glu Pro Thr Gln Leu Leu Met Gly Thr Lys
115 120 125
Ser Val Cys Glu Val Gly Ser Asn Trp Phe Gln Pro Ile Tyr Leu Gly
130 135 140
Ala Met Phe Ser Leu Gln Glu Gly Asp Lys Leu Met Val Asn Val Ser
145 150 155 160
Asp Ile Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly
165 170 175
Ala Phe Leu Leu
180
<210> 32
<211> 180
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 32
Leu Lys Gly Gln Glu Phe Ala Pro Ser His Gln Gln Val Tyr Ala Pro
1 5 10 15
Leu Arg Ala Asp Gly Asp Lys Pro Arg Ala His Leu Thr Val Val Arg
20 25 30
Gln Thr Pro Thr Gln His Phe Lys Asn Gln Phe Pro Ala Leu His Trp
35 40 45
Glu His Glu Leu Gly Leu Ala Phe Thr Lys Asn Arg Met Asn Tyr Thr
50 55 60
Asn Lys Phe Leu Leu Ile Pro Glu Ser Gly Asp Tyr Phe Ile Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Val Thr Phe Ala Gly Met Thr Ser Glu Cys Ser Glu Ile Arg Gln
85 90 95
Ala Gly Arg Pro Asn Lys Pro Asp Ser Ile Thr Val Val Ile Thr Lys
100 105 110
Val Thr Asp Ser Tyr Pro Glu Pro Thr Gln Leu Leu Met Gly Thr Lys
115 120 125
Ser Val Cys Glu Val Gly Ser Asn Trp Phe Gln Pro Ile Tyr Leu Gly
130 135 140
Ala Met Phe Ser Leu Gln Glu Gly Asp Lys Leu Met Val Asn Val Ser
145 150 155 160
Asp Ile Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly
165 170 175
Ala Phe Leu Leu
180
<210> 33
<211> 210
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 33
Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Ser His His His His His His
1 5 10 15
His His Gly Ser Gly Ser Leu Val Pro Arg Gly Ser Gly Ser Leu Lys
20 25 30
Gly Gln Glu Phe Ala Pro Ser His Gln Gln Val Tyr Ala Pro Leu Arg
35 40 45
Ala Asp Gly Asp Lys Pro Arg Ala His Leu Thr Val Val Arg Gln Thr
50 55 60
Pro Thr Gln His Phe Lys Asn Gln Phe Pro Ala Leu His Trp Glu His
65 70 75 80
Glu Leu Gly Leu Ala Phe Thr Lys Asn Arg Met Asn Tyr Thr Asn Lys
85 90 95
Phe Leu Leu Ile Pro Glu Ser Gly Asp Tyr Phe Ile Tyr Ser Gln Val
100 105 110
Thr Phe Arg Gly Met Thr Ser Glu Cys Ser Glu Ile Arg Gln Ala Gly
115 120 125
Arg Pro Asn Lys Pro Asp Ser Ile Thr Val Val Ile Thr Lys Val Thr
130 135 140
Asp Ser Tyr Pro Glu Pro Thr Gln Leu Leu Met Gly Thr Lys Ser Val
145 150 155 160
Cys Glu Val Gly Ser Asn Trp Phe Gln Pro Ile Tyr Leu Gly Ala Met
165 170 175
Phe Ser Leu Gln Glu Gly Asp Lys Leu Met Val Asn Val Ser Asp Ile
180 185 190
Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly Ala Phe
195 200 205
Leu Leu
210
<210> 34
<211> 180
<212> PRT
<213> Macaca fascicularis
<400> 34
Leu Lys Gly Gln Glu Phe Ala Pro Ser His Gln Gln Val Tyr Ala Pro
1 5 10 15
Leu Arg Ala Asp Gly Asp Lys Pro Arg Ala His Leu Thr Val Val Arg
20 25 30
Gln Thr Pro Thr Gln His Leu Lys Asn Gln Phe Pro Ala Leu His Trp
35 40 45
Glu His Glu Leu Gly Leu Ala Phe Thr Lys Asn Arg Met Asn Tyr Thr
50 55 60
Asn Lys Phe Leu Leu Ile Pro Glu Ser Gly Asp Tyr Phe Val Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Val Thr Phe Arg Gly Met Thr Ser Glu Cys Ser Glu Ile Arg Gln
85 90 95
Ala Gly Arg Pro Asn Lys Pro Asp Ser Ile Thr Val Val Ile Thr Lys
100 105 110
Val Thr Asp Ser Tyr Pro Glu Pro Thr Gln Leu Leu Met Gly Thr Lys
115 120 125
Ser Val Cys Glu Val Gly Ser Asn Trp Phe Gln Pro Ile Tyr Leu Gly
130 135 140
Ala Met Phe Ser Leu Gln Glu Gly Asp Lys Leu Met Val Asn Val Ser
145 150 155 160
Asp Ile Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly
165 170 175
Ala Phe Leu Leu
180
<210> 35
<211> 180
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 35
Leu Arg Ala Ile Thr Glu Glu Arg Ser Glu Pro Ser Pro Gln Gln Val
1 5 10 15
Tyr Ser Pro Pro Arg Gly Lys Pro Arg Ala His Leu Thr Ile Lys Lys
20 25 30
Gln Thr Pro Ala Pro His Leu Lys Asn Gln Leu Ser Ala Leu His Trp
35 40 45
Glu His Asp Leu Gly Met Ala Phe Thr Lys Asn Gly Met Lys Tyr Ile
50 55 60
Asn Lys Ser Leu Val Ile Pro Glu Ser Gly Asp Tyr Phe Ile Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Ile Thr Phe Arg Gly Thr Thr Ser Val Cys Gly Asp Ile Ser Arg
85 90 95
Gly Arg Arg Pro Asn Lys Pro Asp Ser Ile Thr Met Val Ile Thr Lys
100 105 110
Val Ala Asp Ser Tyr Pro Glu Pro Ala Arg Leu Leu Thr Gly Ser Lys
115 120 125
Ser Val Cys Glu Ile Ser Asn Asn Trp Phe Gln Ser Leu Tyr Leu Gly
130 135 140
Ala Thr Phe Ser Leu Glu Glu Gly Asp Arg Leu Met Val Asn Val Ser
145 150 155 160
Asp Ile Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly
165 170 175
Ala Phe Leu Leu
180
<210> 36
<211> 180
<212> PRT
<213> Rattus norvegicus
<400> 36
Phe Pro Thr Val Thr Glu Glu Arg Ser Ala Pro Ser Ala Gln Pro Val
1 5 10 15
Tyr Thr Pro Ser Arg Asp Lys Pro Lys Ala His Leu Thr Ile Met Arg
20 25 30
Gln Thr Pro Val Pro His Leu Lys Asn Glu Leu Ala Ala Leu His Trp
35 40 45
Glu Asn Asn Leu Gly Met Ala Phe Thr Lys Asn Arg Met Asn Tyr Thr
50 55 60
Asn Lys Phe Leu Val Ile Pro Glu Ser Gly Asp Tyr Phe Ile Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Ile Thr Phe Arg Gly Thr Thr Ser Glu Cys Gly Asp Ile Ser Arg
85 90 95
Val Arg Arg Pro Lys Lys Pro Asp Ser Ile Thr Val Val Ile Thr Lys
100 105 110
Val Ala Asp Ser Tyr Pro Glu Pro Ala His Leu Leu Thr Gly Thr Lys
115 120 125
Ser Val Cys Glu Ile Ser Ser Asn Trp Phe Gln Pro Ile Tyr Leu Gly
130 135 140
Ala Met Phe Ser Leu Glu Glu Gly Asp Arg Leu Met Val Asn Val Ser
145 150 155 160
Asp Ile Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly
165 170 175
Ala Phe Leu Ile
180
<210> 37
<211> 179
<212> PRT
<213> Cavia porcellus
<400> 37
Ile Asn Glu Gln Arg Phe Gly Pro Ser Tyr Gln Arg Val Tyr Thr Pro
1 5 10 15
Leu Arg Asp Asp Arg Asp Lys Pro Arg Ala His Leu Thr Val Val Arg
20 25 30
Gln Thr Pro Thr Gln His Leu Lys Asn Gln Phe Pro Ala Leu His Trp
35 40 45
Glu His Glu Leu Gly Leu Ala Phe Thr Lys Asn Arg Met Asn Tyr Thr
50 55 60
Asn Lys Phe Leu Val Ile Pro Glu Thr Gly Asp Tyr Phe Val Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Ile Thr Phe Arg Gly Thr Thr Ser Glu Cys Gly Ile Ser Pro Gly
85 90 95
Arg Gln Gln Asn Lys Pro Asp Ser Ile Phe Val Val Ile Thr Lys Val
100 105 110
Thr Asp Ser Tyr Pro Glu Pro Ser Gln Leu Leu Thr Gly Thr Lys Ser
115 120 125
Val Cys Glu Ile Ser Ser Asn Trp Phe Gln Pro Leu Tyr Leu Gly Ala
130 135 140
Met Phe Ser Leu Gln Glu Gly Asp Lys Leu Met Val Asn Val Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly Ala
165 170 175
Phe Leu Leu
<210> 38
<211> 180
<212> PRT
<213> Felis catus
<400> 38
Pro Lys Gly Arg Glu Phe Gly Pro Ser His Gln Arg Ala Tyr Thr Ser
1 5 10 15
Pro Gly Ala Gly Gly Asp Lys Pro Arg Ala His Leu Thr Val Val Arg
20 25 30
Gln Thr Pro Thr Gln Pro Leu Lys Asn Gln Phe Pro Ala Leu His Trp
35 40 45
Glu His Glu Leu Gly Leu Ala Phe Ile Lys Asn Arg Met Asn Tyr Thr
50 55 60
Asn Lys Phe Leu Val Ile Pro Glu Ser Gly Asp Tyr Phe Val Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Val Thr Phe Arg Gly Thr Thr Ser Glu Cys Gly Glu Ile Arg Gln
85 90 95
Gly Ser Arg Leu Asn Lys Pro Asp Ser Ile Ile Val Val Ile Thr Lys
100 105 110
Val Thr Asp Ser Tyr Pro Glu Pro Thr Gln Leu Leu Met Gly Thr Lys
115 120 125
Ser Val Cys Glu Val Gly Ser Asn Trp Phe Gln Pro Ile Tyr Leu Gly
130 135 140
Ala Met Phe Ser Leu Gln Glu Gly Asp Lys Leu Met Val Asn Val Ser
145 150 155 160
Asp Ile Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly
165 170 175
Ala Phe Leu Leu
180
<210> 39
<211> 180
<212> PRT
<213> Sus scrofa
<400> 39
Pro Lys Gly Gln Glu Leu Gly Pro Ser His Gln Arg Val Tyr Ala Pro
1 5 10 15
Pro Gly Ala Gly Arg Asp Lys Pro Arg Ala His Leu Thr Val Val Arg
20 25 30
Gln Thr Ser Thr Glu Pro Leu Lys Asn Gln Phe Pro Ala Leu His Trp
35 40 45
Glu His Glu Leu Gly Leu Ala Phe Thr Lys Asn Arg Met Asn Tyr Thr
50 55 60
Asn Lys Phe Leu Val Ile Pro Glu Ser Gly Asp Tyr Phe Ile Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Val Thr Phe Arg Gly Thr Thr Ser Glu Cys Gly Glu Ile Ser Gln
85 90 95
Glu Arg Arg Leu Asn Lys Pro Asp Ser Ile Ile Val Val Ile Thr Lys
100 105 110
Val Thr Asp Ser Tyr Pro Glu Pro Thr Gln Leu Leu Met Gly Thr Lys
115 120 125
Ser Val Cys Glu Ile Gly Ser Asn Trp Phe Gln Pro Ile Tyr Leu Gly
130 135 140
Ala Met Phe Ser Leu His Glu Gly Asp Lys Leu Met Val Asn Val Ser
145 150 155 160
Asp Ile Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly
165 170 175
Ala Phe Leu Leu
180
<210> 40
<211> 179
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 40
Leu Lys Gly Arg Glu Phe Gly Pro Ser Gln Gln Arg Ala Tyr Met Pro
1 5 10 15
Leu Arg Ala Asp Gly Asn Lys Pro Arg Ala His Leu Thr Ala Val Lys
20 25 30
Gln Thr Pro Thr Gln Pro Leu Arg Asn His Phe Pro Ala Leu His Trp
35 40 45
Glu His Glu Leu Gly Leu Ala Phe Thr Lys Asn Arg Met Asn Tyr Thr
50 55 60
Asn Lys Phe Leu Val Ile Pro Glu Ser Gly Asp Tyr Phe Val Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Val Thr Phe Arg Gly Thr Thr Ser Glu Cys Gly Val Ile Asn Gln
85 90 95
Arg Arg Arg Gln Thr Lys Pro Asp Ser Ile Val Val Val Ile Thr Lys
100 105 110
Val Thr Asp Asn Tyr Pro Glu Pro Ala Gln Leu Leu Thr Gly Thr Lys
115 120 125
Ser Val Cys Glu Met Gly Asn Trp Phe Gln Pro Ile Tyr Leu Gly Ala
130 135 140
Met Phe Ser Leu Glu Glu Gly Asp Lys Leu Met Val Asn Val Ser Asp
145 150 155 160
Val Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly Ala
165 170 175
Phe Leu Leu
<210> 41
<211> 180
<212> PRT
<213> Canis familiaris
<400> 41
Pro Lys Gly Gln Glu Phe Gly His Ser His Gln Arg Ala Tyr Ala Ser
1 5 10 15
Pro Arg Ala Gly Gly Asp Lys Pro Arg Ala His Leu Thr Val Val Arg
20 25 30
Gln Ser Pro Thr Gln Pro Leu Glu Ser Leu Phe Pro Ala Leu His Trp
35 40 45
Glu His Glu Leu Gly Leu Ala Phe Thr Lys Asn Arg Met Asn Tyr Thr
50 55 60
Asn Lys Phe Leu Val Ile Pro Glu Ser Gly Asp Tyr Phe Val Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Val Thr Phe Arg Gly Thr Thr Ser Glu Cys Gly Glu Ala Arg Gln
85 90 95
Gly Ser Arg Leu Asn Lys Pro Asp Ser Ile Ile Val Val Ile Thr Lys
100 105 110
Val Thr Asp Ser Tyr Pro Glu Pro Thr Gln Leu Leu Met Gly Thr Lys
115 120 125
Ser Val Cys Glu Val Gly Ser Asn Trp Phe Gln Pro Ile Tyr Leu Gly
130 135 140
Ala Met Phe Ser Leu Gln Glu Gly Asp Lys Leu Met Val Asn Val Ser
145 150 155 160
Asp Ile Ser Leu Val Asp Tyr Thr Lys Glu Asp Lys Thr Phe Phe Gly
165 170 175
Ala Phe Leu Leu
180
<210> 42
<211> 330
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 42
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 43
<211> 329
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 43
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
325
<210> 44
<211> 330
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 44
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 45
<211> 327
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 45
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 46
<211> 326
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 46
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly
325
<210> 47
<211> 327
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 47
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 48
<211> 105
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 48
Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu
1 5 10 15
Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe
20 25 30
Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val
35 40 45
Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys
50 55 60
Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser
65 70 75 80
His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu
85 90 95
Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 49
<211> 357
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 49
caggtgcagc tggtgcagtc tggggcggag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggata caccttcacc agttatgata tcaactgggt gcgacaggcc 120
cccggacaag ggcttgagtg gatgggatgg ctgaacccta acagtggtaa cacaggctat 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accgcagatc gttccaccag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagaagtg 300
cctgagacgg ccgcctttga gtactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 357
<210> 50
<211> 333
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 50
cagagcgtgc tgacacagcc tccatccgtg tctggcgccc ctggccagag agtgaccatc 60
agctgcacca gcagcagcag cgacatcgga gccggcctgg gcgtgcactg gtatcagcag 120
ctgcctggca ccgcccccaa gctgctgatc gagggctact acaaccggcc cagcggcgtg 180
cccgaccggt ttagcggcag caagagcggc accagcgcca gcctgacaat caccggcctg 240
ctgcccgagg acgagggcga ctactactgc cagagctacg acggcaccct gagcgccctg 300
ttcggcggag gcaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 51
<211> 357
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 51
caggtgcagc tggtgcagtc cggcgccgag gtgaagaaac ccggcgcctc cgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta caccttcacc tcctacgaca tcaactgggt gaggcaggcc 120
cccggccagg gcctggagtg gatgggctgg ctgaacccca actccggcta caccggctac 180
gcccagaagt tccagggcag ggtgaccatg accgccgaca ggtccacctc caccgcctac 240
atggagctgt ccagcctgag gtccgaggac accgccgtgt actattgcgc cagggaggtg 300
cccgagaccg ctgccttcga gtactggggc cagggcaccc tggtgaccgt gtccagc 357
<210> 52
<211> 333
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 52
cagagcgtgc tgacacagcc tccatccgtg tctggcgccc ctggccagag agtgaccatc 60
agctgcacca gcagcagcag cgacatcgga gccggcctgg gcgtgcactg gtatcagcag 120
ctgcctggca ccgcccccaa gctgctgatc gagggctact acaaccggcc cagcggcgtg 180
cccgaccggt ttagcggcag caagagcggc accagcgcca gcctgacaat caccggcctg 240
ctgcccgagg acgagggcga ctactactgc cagagctggg acggcaccct gagcgccctg 300
ttcggcggag gcaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 53
<211> 333
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 53
cagagcgtgc tgacacagcc tccatccgtg tctggcgccc ctggccagag agtgaccatc 60
agctgcacca gcagcagcag cgacatcgga gccgctctgg gcgtgcactg gtatcagcag 120
ctgcctggca ccgcccccaa gctgctgatc gagggctact acaaccggcc cagcggcgtg 180
cccgaccggt ttagcggcag caagagcggc accagcgcca gcctgacaat caccggcctg 240
ctgcccgagg acgagggcga ctactactgc cagagctggg acggcaccct gagcgccctg 300
ttcggcggag gcaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 54
<211> 333
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 54
cagagcgtgc tgacacagcc tccatccgtg tctggcgccc ctggccagag agtgaccatc 60
agctgcacca gcagcagcag cgacatcgga gccggcagcg gcgtgcactg gtatcagcag 120
ctgcctggca ccgcccccaa gctgctgatc gagggctact acaaccggcc cagcggcgtg 180
cccgaccggt ttagcggcag caagagcggc accagcgcca gcctgacaat caccggcctg 240
ctgcccgagg acgagggcga ctactactgc cagagctggg acggcaccct gagcgccctg 300
ttcggcggag gcaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 55
<211> 333
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 55
cagagcgtgc tgacacagcc tccatccgtg tctggcgccc ctggccagag agtgaccatc 60
agctgcacca gcagcagcag cgacatcgga gccggccagg gcgtgcactg gtatcagcag 120
ctgcctggca ccgcccccaa gctgctgatc gagggctact acaaccggcc cagcggcgtg 180
cccgaccggt ttagcggcag caagagcggc accagcgcca gcctgacaat caccggcctg 240
ctgcccgagg acgagggcga ctactactgc cagagctggg acggcaccct gagcgccctg 300
ttcggcggag gcaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 56
<211> 333
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 56
cagagcgtgc tgacacagcc tccatccgtg tctggcgccc ctggccagag agtgaccatc 60
agctgcacca gcagcagcag cgacatcgga gccggcctgg gcgtgctgtg gtatcagcag 120
ctgcctggca ccgcccccaa gctgctgatc gagggctact acaaccggcc cagcggcgtg 180
cccgaccggt ttagcggcag caagagcggc accagcgcca gcctgacaat caccggcctg 240
ctgcccgagg acgagggcga ctactactgc cagagctggg acggcaccct gagcgccctg 300
ttcggcggag gcaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 57
<211> 333
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 57
cagagcgtgc tgacacagcc tccatccgtg tctggcgccc ctggccagag agtgaccatc 60
agctgcacca gcagcagcag cgacatcgga gccggcctgg gcgtgcactg gtatcagcag 120
ctgcctggca ccgcccccaa gctgctgatc gagggctact acaaccggcc cagcggcgtg 180
cccgaccggt ttagcggcag caagagcggc accagcgcca gcctgacaat caccggcctg 240
ctgcccgagg acgagggcga ctactactgc cagagctttg acggcaccct gagcgccctg 300
ttcggcggag gcaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 58
<211> 1344
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 58
caggtgcagc tggtgcagtc cggcgccgag gtgaagaaac ccggcgcctc cgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta caccttcacc tcctacgaca tcaactgggt gaggcaggcc 120
cccggccagg gcctggagtg gatgggctgg ctgaacccca actccggcta caccggctac 180
gcccagaagt tccagggcag ggtgaccatg accgccgaca ggtccacctc caccgcctac 240
atggagctgt ccagcctgag gtccgaggac accgccgtgt actattgcgc cagggaggtg 300
cccgagaccg ctgccttcga gtactggggc cagggcaccc tggtgaccgt gtccagcgcc 360
tccaccaagg gccccagcgt gttccccctg gcccccagct ccaagtccac cagcggcgga 420
accgccgctc tgggctgcct ggtgaaggac tacttccccg agcccgtgac cgtgagctgg 480
aactccggcg ccctgacctc cggcgtgcac accttccccg ccgtgctgca gtccagcggc 540
ctgtactccc tgagctccgt ggtcaccgtg ccctcctcta gcctgggcac ccagacctac 600
atctgcaacg tgaaccacaa gccctccaac accaaggtgg acaaaaaggt ggagcccaag 660
tcctgcgaca agactcacac ctgtcctccc tgccccgccc ccgagctgct cggcggaccc 720
tccgtgttcc tgttcccacc caagcccaag gacaccctga tgatctccag gacccccgag 780
gtgacctgcg tggtcgtgga cgtgtcccac gaggaccctg aggtgaagtt caactggtac 840
gtggacggcg tggaggtgca caacgccaag accaagccca gggaggaaca gtacaactcc 900
acctaccggg tcgtgtccgt gctgaccgtc ctgcaccagg actggctgaa cggcaaggag 960
tacaagtgca aggtgtccaa caaggccctg cccgccccca tcgagaagac catctccaag 1020
gccaagggcc agcctcggga gccccaggtg tacacactgc ccccttccag ggacgagctg 1080
accaagaacc aggtgtccct gacctgtctg gtgaagggct tctacccctc cgacatcgcc 1140
gtggagtggg agtccaacgg ccagcccgag aacaattaca agaccacacc tcccgtcctg 1200
gactccgacg gctccttctt tctgtactcc aagctgaccg tggacaagtc caggtggcag 1260
caaggcaacg tgttctcctg ctccgtgatg cacgaggccc tgcacaacca ctacacccag 1320
aagtccctga gcctgtcccc cggc 1344
<210> 59
<211> 648
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 59
cagagcgtgc tgacacagcc tccatccgtg tctggcgccc ctggccagag agtgaccatc 60
agctgcacca gcagcagcag cgacatcgga gccggcctgg gcgtgcactg gtatcagcag 120
ctgcctggca ccgcccccaa gctgctgatc gagggctact acaaccggcc cagcggcgtg 180
cccgaccggt ttagcggcag caagagcggc accagcgcca gcctgacaat caccggcctg 240
ctgcccgagg acgagggcga ctactactgc cagagctggg acggcaccct gagcgccctg 300
ttcggcggag gcaccaagct gaccgtccta ggtcagccca aggccgctcc cagcgtgacc 360
ctgttccccc caagcagcga ggaactgcag gccaacaagg ccaccctggt gtgcctgatc 420
agcgacttct accctggggc cgtgaccgtg gcctggaagg ccgatagcag ccctgtgaag 480
gccggcgtgg aaaccaccac cccctccaag cagagcaaca acaaatacgc cgccagcagc 540
tacctgtccc tgacccccga gcagtggaag tcccaccggt cctacagctg ccaggtgaca 600
cacgagggca gcaccgtgga aaagaccgtg gcccccaccg agtgcagc 648
<210> 60
<211> 448
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 60
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Leu Asn Pro Asn Ser Gly Tyr Thr Gly Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Arg Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Val Pro Glu Thr Ala Ala Phe Glu Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
<210> 61
<211> 216
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 61
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Ser Ser Ser Ser Asp Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Leu Gly Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Glu Gly Tyr Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Trp Asp Gly Thr
85 90 95
Leu Ser Ala Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 62
<211> 329
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 62
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Ala Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
325
<210> 63
<211> 330
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 63
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Ala Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 64
<211> 329
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 64
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
325
<210> 65
<211> 330
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 65
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Ala Gly Ala Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 66
<211> 329
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 66
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Ala Gly Ala Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
325
<210> 67
<211> 326
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 67
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 68
<211> 325
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 68
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly
325
<210> 69
<211> 326
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 69
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly
325
<210> 70
<211> 325
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 70
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly
325
<210> 71
<211> 326
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 71
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
Claims (245)
- 재조합 항체로서,
서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR2; 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 CDR3; 서열 번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR1; 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR2; 및 서열 번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 CDR3을 포함하되,
단, 상기 중쇄 가변 영역이 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함할 경우, 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하지 않으며, 상기 항체는 TNF-유사 리간드 1A (TL1A)에 특이적으로 결합하고, 그리고 상기 항체는 사멸 수용체 3 (DR3)과 TL1A의 상호작용을 억제할 수 있는, 재조합 항체. - 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 경쇄 가변 영역 CDR1은 서열 번호: 23의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 경쇄 가변 영역 CDR1은 서열 번호: 24의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 경쇄 가변 영역 CDR1은 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 경쇄 가변 영역 CDR1은 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 경쇄 가변 영역 CDR1은 서열 번호: 24의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 경쇄 가변 영역 CDR1은 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 경쇄 가변 영역 CDR1은 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역 CDR2는 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역 CDR3은 서열 번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1 내지 12 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 단클론성 항체인, 재조합 항체.
- 청구항 1 내지 13 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간 IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 14에 있어서, 상기 인간 IgG1 중쇄 불변 영역이 하기를 포함하는, 재조합 항체: 서열 번호: 42, 서열 번호: 43, 서열 번호: 44, 서열 번호: 62, 서열 번호: 63, 서열 번호: 64, 서열 번호: 65, 또는 서열 번호: 66.
- 청구항 1 내지 13 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간 중쇄 IgG4 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 16에 있어서, 상기 인간 중쇄 IgG4 불변 영역이 하기를 포함하는, 재조합 항체: 서열 번호: 45, 서열 번호: 46, 서열 번호: 47, 또는 서열 번호: 69.
- 청구항 1 내지 13 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간 중쇄 IgG2 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 18에 있어서, 상기 인간 중쇄 IgG2 불변 영역이 하기를 포함하는, 재조합 항체: 서열 번호: 67, 서열 번호: 68, 서열 번호: 70, 또는 서열 번호: 71.
- 청구항 1 내지 19 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간 경쇄 람다 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 20에 있어서, 상기 인간 경쇄 람다 불변 영역이 서열 번호: 48을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 20에 있어서, 상기 항체는 서열 번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 1 내지 22 중 어느 한 항에 있어서, TL1A에 대한 상기 KD 는 역학적 배제 검정에 의하여 측정 시 약 30 pM 내지 약 60 pM인, 재조합 항체.
- 청구항 1 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, TL1A에 대한 상기 KD 는 역학적 배제 검정에 의하여 측정 시 약 35 pM 내지 약 50 pM인, 재조합 항체.
- 청구항 1 내지 24 중 어느 한 항에 있어서, TL1A에 대한 상기 KD 는 역학적 배제 검정에 의하여 측정 시 약 35 pM 내지 약 42 pM인, 재조합 항체.
- 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항에 있어서, 상기 TL1A가 비-인간 영장류 TL1A인, 재조합 항체.
- 청구항 26에 있어서, 상기 비-인간 영장류는 시노몰구스 원숭이인, 재조합 항체.
- 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항에 있어서, 상기 TL1A가 비-인간 포유동물 TL1A인, 재조합 항체.
- 청구항 28에 있어서, 상기 비-인간 포유동물은 마우스, 랫트, 토끼, 기니 피그, 고양이, 개, 또는 돼지인, 재조합 항체.
- 청구항 1 내지 29 중 어느 한 항의 재조합 항체 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 조성물.
- 호흡기 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 호흡기 질환을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 31에 있어서, 상기 호흡기 질환은, 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 폐 섬유증, 폐 사르코이드증, 알러지성 비염, 폐 섬유증, 또는 낭포성 섬유증인, 방법.
- 위장관 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 위장관 질환을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 33에 있어서, 상기 위장관 질환은, 염증성 장 질환, 크론병, 대장염, 궤양성 대장염, 호산구성 식도염, 과민성 장 증후군, 또는 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환인, 방법.
- 관절염에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 관절염을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 35에 있어서, 상기 관절염은 류마티스 관절염인, 방법.
- 피부 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 피부 질환을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 37에 있어서, 상기 피부 질환은 아토피성 피부염, 습진 또는 경피증인, 방법.
- 청구항 31 내지 38 중 어느 한 항에 있어서, 투여가 정맥내 투여 또는 피하 투여를 포함하는, 방법.
- 청구항 31 내지 청구항 38 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 인간인, 방법.
- 호흡기 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 천식의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- COPD의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 폐 사르코이드증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 알러지성 비염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 폐 섬유증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 낭포성 섬유증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 위장관 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 염증성 장 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 대장염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 궤양성 대장염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 호산구성 식도염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 과민성 장 증후군의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 크론병의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 관절염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 류마티스 관절염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 피부 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 아토피성 피부염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 습진의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 경피증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 천식, COPD, 폐 섬유증, 폐 사르코이드증, 알러지성 비염, 낭포성 섬유증, 염증성 장 질환, 대장염, 궤양성 대장염, 호산구성 식도염, 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환, 크론병, 과민성 장 증후군, 관절염, 류마티스 관절염, 아토피성 피부염, 습진, 또는 경피증 중 임의의 하나의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 재조합 항체의 용도.
- 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 표면 상에서 TL1A를 검출하기 위한 시험관내 방법으로서,
대상체로부터 단리된 PBMC와 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 항체를 접촉시키는 단계,
상기 PBMC의 표면 상에서 TL1A에 결합된 상기 항체를 검출하는 단계, 및
임의로, 상기 PBMC 상에서의 상기 TL1A의 수준을 정량화하는 단계를 포함하는, 방법. - 혈청 중 TL1A을 검출하기 위한 시험관내 방법으로서,
청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 항체를 대상체로부터 수득된 혈청과 접촉시키는 단계,
상기 혈청 중 TL1A에 결합된 상기 항체를 검출하는 단계,및
임의로, 상기 혈청 중 상기 TL1A의 수준을 정량화하는 단계를 포함하는, 방법. - 대상체로부터 단리된 조직 샘플에서 TL1A를 검출하기 위한 시험관내 방법으로서,
청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 항체를 대상체로부터 단리된 조직과 접촉시켜 항체-TL1A 복합체를 형성하는 단계, 및
상기 조직에서 상기 복합체를 검출하는 단계를 포함하는, 방법. - 청구항 65에 있어서, 상기 조직이 호흡기(respiratory tract) 조직을 포함하는, 방법.
- 청구항 65에 있어서, 상기 조직은 객담 또는 기관지폐포 세척액(bronchoalveolar lavage fluid)을 포함하는, 방법.
- 청구항 65에 있어서, 상기 조직이 위장관 조직을 포함하는, 방법.
- 청구항 65에 있어서, 상기 조직이 관절 조직을 포함하는, 방법.
- 청구항 65에 있어서, 상기 조직이 피부 조직을 포함하는, 방법.
- 청구항 65에 있어서, 상기 조직이 혈액을 포함하는, 방법.
- 청구항 65 내지 71 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체로부터 상기 조직 샘플을 단리시키는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 청구항 63 내지 청구항 72 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체가 인간인, 방법.
- 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항의 항체를 발현하는, 변형된 세포.
- 청구항 74에 있어서, 상기 세포가 포유동물 세포인, 변형된 세포.
- 청구항 75에 있어서, 상기 포유동물 세포가 차이니즈 햄스터 난소 세포인, 변형된 세포.
- 청구항 75에 있어서, 상기 포유동물 세포가 HEK 293 세포인, 변형된 세포.
- 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 78에 있어서, 상기 항체가 단클론성 항체인, 재조합 항체.
- 청구항 78 또는 79에 있어서, 상기 항체가 인간 IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 80에 있어서, 상기 인간 IgG1 중쇄 불변 영역이 하기를 포함하는, 재조합 항체: 서열 번호: 42, 서열 번호: 43, 서열 번호: 44, 서열 번호: 62, 서열 번호: 63, 서열 번호: 64, 서열 번호: 65, 또는 서열 번호: 66.
- 청구항 78 또는 79에 있어서, 상기 항체가 인간 IgG4 중쇄 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 82에 있어서, 상기 인간 중쇄 IgG4 불변 영역이 하기를 포함하는, 재조합 항체: 서열 번호: 45, 서열 번호: 46, 서열 번호: 47, 또는 서열 번호: 69.
- 청구항 78 또는 79에 있어서, 상기 항체가 인간 중쇄 IgG2 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 84에 있어서, 상기 인간 중쇄 IgG2 불변 영역이 하기를 포함하는, 재조합 항체: 서열 번호: 67, 서열 번호: 68, 서열 번호: 70, 또는 서열 번호: 71.
- 청구항 78 내지 85 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간 경쇄 람다 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 86에 있어서, 상기 인간 경쇄 람다 불변 영역이 서열 번호: 48을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 86에 있어서, 상기 재조합 항체는 서열 번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 80 또는 88에 있어서, 상기 재조합 항체는 서열 번호: 60의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항에 있어서, 상기 TL1A가 비-인간 영장류 TL1A인, 재조합 항체.
- 청구항 90에 있어서, 상기 비-인간 영장류는 시노몰구스 원숭이인, 재조합 항체.
- 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항에 있어서, 상기 TL1A가 비-인간 포유동물 TL1A인, 재조합 항체.
- 청구항 92에 있어서, 상기 비-인간 포유동물은 마우스, 랫트, 토끼, 기니 피그, 고양이, 개, 또는 돼지인, 재조합 항체.
- 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 조성물.
- 호흡기 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 호흡기 질환을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 95에 있어서, 상기 호흡기 질환은, 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 폐 섬유증, 폐 사르코이드증, 알러지성 비염, 또는 낭포성 섬유증인, 방법.
- 위장관 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 위장관 질환을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 80에 있어서, 상기 위장관 질환은, 염증성 장 질환, 대장염, 궤양성 대장염, 크론병, 호산구성 식도염, 과민성 장 증후군, 또는 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환인, 방법.
- 관절염에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 관절염을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 99에 있어서, 상기 관절염은 류마티스 관절염인, 방법.
- 피부 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 피부 질환을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 101에 있어서, 상기 피부 질환이 아토피성 피부염, 습진 또는 경피증인, 방법.
- 청구항 95 내지 102 중 어느 한 항에 있어서, 투여가 정맥내 투여 또는 피하 투여를 포함하는, 방법.
- 호흡기 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 천식의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- COPD 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 폐 사르코이드증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 알러지성 비염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 폐 섬유증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 낭포성 섬유증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 위장관 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 염증성 장 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 대장염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 궤양성 대장염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 호산구성 식도염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 과민성 장 증후군의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 크론병의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 관절염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 류마티스 관절염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 피부 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 아토피성 피부염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 습진의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 경피증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 천식, COPD, 폐 섬유증, 폐 사르코이드증, 알러지성 비염, 낭포성 섬유증, 염증성 장 질환, 대장염, 궤양성 대장염, 호산구성 식도염, 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환, 크론병, 과민성 장 증후군, 관절염, 류마티스 관절염, 아토피성 피부염, 습진, 또는 경피증 중 임의의 하나의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 재조합 항체의 용도.
- 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 표면 상에서 TL1A를 검출하기 위한 시험관내 방법으로서,
대상체로부터 단리된 PBMC와 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 항체를 접촉시키는 단계,
상기 PBMC의 표면 상에서 TL1A에 결합된 상기 항체를 검출하는 단계, 및
임의로, 상기 PBMC 상에서의 상기 TL1A의 수준을 정량화하는 단계를 포함하는, 방법. - 혈청 중 TL1A을 검출하기 위한 시험관내 방법으로서,
청구항 78 내지 89 중 어느 항에 따른 항체를 대상체로부터 수득된 혈청과 접촉시키는 단계,
상기 혈청 중 TL1A에 결합된 상기 항체를 검출하는 단계, 및
임의로, 상기 혈청 중 상기 TL1A의 수준을 정량화하는 단계를 포함하는, 방법. - 대상체로부터 단리된 조직 샘플에서 TL1A를 검출하기 위한 시험관내 방법으로서,
청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 항체를 대상체로부터 단리된 조직과 접촉시켜 항체-TL1A 복합체를 형성하는 단계, 및
상기 조직에서 상기 복합체를 검출하는 단계를 포함하는, 방법. - 청구항 128에 있어서, 상기 조직은 호흡기 조직, 객담, 또는 기관지폐포 세척액을 포함하는, 방법.
- 청구항 128에 있어서, 상기 조직이 위장관 조직을 포함하는, 방법.
- 청구항 128에 있어서, 상기 조직이 관절 조직을 포함하는, 방법.
- 청구항 128에 있어서, 상기 조직이 피부 조직을 포함하는, 방법.
- 청구항 128에 있어서, 상기 조직이 혈액을 포함하는, 방법.
- 청구항 128 내지 133 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체로부터 상기 조직 샘플을 단리시키는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
- 청구항 126 내지 청구항 134 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체가 인간인, 방법.
- 청구항 78 내지 89 중 어느 한 항의 항체를 발현하는, 변형된 세포.
- 청구항 136에 있어서, 상기 세포가 포유동물 세포인, 변형된 세포.
- 청구항 137에 있어서, 상기 포유동물 세포가 차이니즈 햄스터 난소 세포인, 변형된 세포.
- 청구항 137에 있어서, 상기 포유동물 세포가 HEK 293 세포인, 변형된 세포.
- 재조합 항체로서,
서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 또는 서열 번호: 3 및 서열 번호: 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하되,
단, 상기 중쇄 가변 영역이 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함할 경우, 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하지 않으며, 상기 항체는 TNF-유사 리간드 1a (TL1A)에 특이적으로 결합하고, 그리고 상기 항체는 사멸 수용체 3 (DR3)과 TL1A의 상호작용을 억제할 수 있는, 재조합 항체. - 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140 내지 151 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 단클론성 항체인, 재조합 항체.
- 청구항 140 내지 152 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간 IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 153에 있어서, 상기 인간 IgG1 중쇄 불변 영역이 하기를 포함하는, 재조합 항체: 서열 번호: 42, 서열 번호: 43, 서열 번호: 44, 서열 번호: 62, 서열 번호: 63, 서열 번호: 64, 서열 번호: 65, 또는 서열 번호: 66.
- 청구항 140 내지 152 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간 중쇄 IgG4 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체,
- 청구항 155에 있어서, 상기 인간 중쇄 IgG4 불변 영역이 하기를 포함하는, 재조합 항체: 서열 번호: 45, 서열 번호: 46, 서열 번호: 47, 또는 서열 번호: 69.
- 청구항 140 내지 152 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간 중쇄 IgG2 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체,
- 청구항 157에 있어서, 상기 인간 중쇄 IgG2 불변 영역이 하기를 포함하는, 재조합 항체: 서열 번호: 67, 서열 번호: 68, 서열 번호: 70, 또는 서열 번호: 71.
- 청구항 140 내지 158 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간 경쇄 람다 불변 영역을 포함하는, 재조합 항체,
- 청구항 159에 있어서, 상기 인간 경쇄 람다 불변 영역이 서열 번호: 48을 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 159에 있어서, 상기 항체는 서열 번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 재조합 항체.
- 청구항 140 내지 161 중 어느 한 항에 있어서, TL1A에 대한 상기 KD 는 역학적 배제 검정에 의하여 측정 시 약 30 pM 내지 약 60 pM인, 재조합 항체.
- 청구항 140 내지 162 중 어느 한 항에 있어서, TL1A에 대한 상기 KD 는 역학적 배제 검정에 의하여 측정 시 약 35 pM 내지 약 50 pM인, 재조합 항체.
- 청구항 140 내지 163 중 어느 한 항에 있어서, TL1A에 대한 상기 KD 는 역학적 배제 검정에 의하여 측정 시 약 35 pM 내지 약 42 pM인, 재조합 항체.
- 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항에 있어서, 상기 TL1A가 비-인간 포유동물 TL1A인, 재조합 항체.
- 청구항 165에 있어서, 상기 비-인간 포유동물은 마우스, 랫트, 토끼, 기니 피그, 고양이, 개, 또는 돼지인, 재조합 항체,
- 청구항 140 내지 166 중 어느 한 항의 재조합 항체 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 조성물.
- 호흡기 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 호흡기 질환을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 168에 있어서, 상기 호흡기 질환은, 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 폐 섬유증, 폐 사르코이드증, 알러지성 비염, 또는 낭포성 섬유증인, 방법.
- 위장관 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 위장관 질환을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 170에 있어서, 상기 위장관 질환은, 염증성 장 질환, 대장염, 궤양성 대장염, 크론병, 호산구성 식도염, 과민성 장 증후군, 또는 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환인, 방법.
- 관절염에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 관절염을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 172에 있어서, 상기 관절염은 류마티스 관절염인, 방법.
- 피부 질환에 대한 치료를 필요로 하는 대상체에게 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 피부 질환을 치료하기 위한 방법.
- 청구항 174에 있어서, 상기 피부 질환이 아토피성 피부염, 습진 또는 경피증인, 방법.
- 청구항 168 내지 175 중 어느 한 항에 있어서, 투여가 정맥내 투여 또는 피하 투여를 포함하는, 방법.
- 호흡기 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 천식의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- COPD의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 폐 사르코이드증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 알러지성 비염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 폐 섬유증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 낭포성 섬유증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 위장관 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 염증성 장 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 대장염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 궤양성 대장염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 호산구성 식도염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 과민성 장 증후군의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 크론병의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 관절염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 류마티스 관절염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 피부 질환의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 아토피성 피부염의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 습진의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 경피증의 치료에 사용하기 위한, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체.
- 천식, COPD, 폐 섬유증, 폐 사르코이드증, 알러지성 비염, 낭포성 섬유증, 염증성 장 질환, 대장염, 궤양성 대장염, 호산구성 식도염, 낭포성 섬유증과 연관된 위장관 질환, 크론병, 과민성 장 증후군, 관절염, 류마티스 관절염, 아토피성 피부염, 습진, 또는 경피증 중 임의의 하나의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 재조합 항체의 용도.
- 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 표면 상에서 TL1A를 검출하기 위한 시험관내 방법으로서,
대상체로부터 단리된 PBMC와 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 항체를 접촉시키는 단계,
상기 PBMC의 표면 상에서 TL1A에 결합된 상기 항체를 검출하는 단계, 및
임의로, 상기 PBMC 상에서의 상기 TL1A의 수준을 정량화하는 단계를 포함하는, 방법. - 혈청 중 TL1A을 검출하기 위한 시험관내 방법으로서,
청구항 140 내지 164 중 어느 항에 따른 항체를 대상체로부터 수득된 혈청과 접촉시키는 단계,
상기 혈청 중 TL1A에 결합된 상기 항체를 검출하는 단계, 및
임의로, 상기 혈청 중 상기 TL1A의 수준을 정량화하는 단계를 포함하는, 방법. - 대상체로부터 단리된 조직 샘플에서 TL1A를 검출하기 위한 시험관내 방법으로서,
청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 항체를 대상체로부터 단리된 조직과 접촉시켜 항체-TL1A 복합체를 형성하는 단계, 및
상기 조직에서 상기 복합체를 검출하는 단계를 포함하는, 방법. - 청구항 201에 있어서, 상기 조직은 호흡기 조직, 객담, 또는 기관지폐포 세척액을 포함하는, 방법.
- 청구항 201에 있어서, 상기 조직이 위장관 조직을 포함하는, 방법.
- 청구항 201에 있어서, 상기 조직이 관절 조직을 포함하는, 방법.
- 청구항 201에 있어서, 상기 조직이 피부 조직을 포함하는, 방법.
- 청구항 201에 있어서, 상기 조직이 혈액을 포함하는, 방법.
- 청구항 201 내지 206 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체로부터 상기 조직 샘플을 단리시키는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
- 청구항 140 내지 164 중 어느 한 항의 항체를 발현하는, 변형된 세포.
- 청구항 208에 있어서, 상기 세포가 포유동물 세포인, 변형된 세포.
- 청구항 209에 있어서, 상기 포유동물 세포가 차이니즈 햄스터 난소 세포인, 변형된 세포.
- 청구항 209에 있어서, 상기 포유동물 세포가 HEK293 세포인, 변형된 세포.
- 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역을 암호화하는 핵산 서열을 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 212에 있어서, 상기 핵산 서열이 서열 번호: 51을 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 212에 있어서, 상기 핵산 서열이 서열 번호: 58을 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 212 또는 213에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 214에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 50을 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 212 내지 214 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 217에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 52를 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 217에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 59를 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 212 또는 213에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 220에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 54를 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 212 또는 213에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 222에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 55를 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 212 또는 213에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 224에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 56을 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 212 또는 213에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 226에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 57을 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄 가변 영역을 암호화하는 핵산 서열을 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 228에 있어서, 상기 핵산 서열이 서열 번호: 49를 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 228 또는 229에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 230에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 52를 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 228 또는 229에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 232에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 53을 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 228 또는 229에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 234에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 54를 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 228 또는 229에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 236에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 55를 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 228 또는 229에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 제2 핵산 서열을 추가로 갖는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 238에 있어서, 상기 제2 핵산 서열이 서열 번호: 56을 포함하는, 폴리뉴클레오티드.
- 청구항 212 내지 239 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 벡터.
- 청구항 240의 벡터를 포함하는, 변형된 세포.
- 청구항 241에 있어서, 상기 변형된 세포가 포유동물 세포인, 변형된 세포.
- 청구항 242에 있어서, 상기 포유동물 세포가 차이니즈 햄스터 난소 세포인, 변형된 세포.
- 청구항 242에 있어서, 상기 포유동물 세포가 HEK293 세포인, 변형된 세포.
- 청구항 75, 209, 또는 242 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포유동물 세포가 NS0 세포인, 변형된 세포.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201562220442P | 2015-09-18 | 2015-09-18 | |
| US62/220,442 | 2015-09-18 | ||
| PCT/US2016/052040 WO2017049024A1 (en) | 2015-09-18 | 2016-09-16 | Antibodies that specifically bind to tl1a |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20180048712A true KR20180048712A (ko) | 2018-05-10 |
| KR101998535B1 KR101998535B1 (ko) | 2019-07-09 |
Family
ID=57043002
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020187007337A KR101998535B1 (ko) | 2015-09-18 | 2016-09-16 | Tl1a에 특이적으로 결합하는 항체 |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US10138296B2 (ko) |
| EP (2) | EP3350223B1 (ko) |
| JP (2) | JP7013366B2 (ko) |
| KR (1) | KR101998535B1 (ko) |
| CN (1) | CN108137693B (ko) |
| AR (1) | AR106055A1 (ko) |
| AU (2) | AU2016323460B2 (ko) |
| BR (2) | BR112018005407A8 (ko) |
| CA (1) | CA2997015A1 (ko) |
| CL (1) | CL2018000711A1 (ko) |
| CO (1) | CO2018003736A2 (ko) |
| CY (1) | CY1123499T1 (ko) |
| DK (1) | DK3350223T3 (ko) |
| EA (1) | EA201890756A1 (ko) |
| ES (1) | ES2810751T3 (ko) |
| HK (2) | HK1251002A1 (ko) |
| HR (1) | HRP20201323T1 (ko) |
| HU (1) | HUE051496T2 (ko) |
| IL (1) | IL257761B2 (ko) |
| LT (1) | LT3350223T (ko) |
| MA (2) | MA52643A (ko) |
| MD (1) | MD3350223T2 (ko) |
| MX (1) | MX2018003185A (ko) |
| PE (1) | PE20181080A1 (ko) |
| PH (1) | PH12018500580A1 (ko) |
| PL (1) | PL3350223T3 (ko) |
| PT (1) | PT3350223T (ko) |
| RS (1) | RS60703B1 (ko) |
| SI (1) | SI3350223T1 (ko) |
| TW (1) | TWI703158B (ko) |
| UA (1) | UA125284C2 (ko) |
| WO (1) | WO2017049024A1 (ko) |
| ZA (1) | ZA201801427B (ko) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20110229471A1 (en) | 2008-11-26 | 2011-09-22 | Cedars-Sinai Medical Center | Methods of determining responsiveness to anti-tnf alpha therapy in inflammatory bowel disease |
| BR122020013379B1 (pt) | 2011-09-30 | 2023-01-03 | Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd | Anticorpos contra tl1a e seus usos |
| EP2978440B1 (en) | 2013-03-27 | 2019-10-02 | Cedars-Sinai Medical Center | Treating fibrosis by inhibiting tl1a and diagnosing fibrosis by detecting il31ra |
| US10316083B2 (en) | 2013-07-19 | 2019-06-11 | Cedars-Sinai Medical Center | Signature of TL1A (TNFSF15) signaling pathway |
| TWI703158B (zh) | 2015-09-18 | 2020-09-01 | 美商希佛隆公司 | 特異性結合tl1a之抗體 |
| AU2016364992B2 (en) * | 2015-12-04 | 2021-12-09 | University Of Iowa Research Foundation | Apparatus, systems and methods for predicting, screening and monitoring of encephalopathy / delirium |
| EP3430172A4 (en) | 2016-03-17 | 2019-08-21 | Cedars-Sinai Medical Center | METHOD FOR DIAGNOSIS OF INFLAMMATORY ENDURANCE THROUGH RNASET2 |
| US10322174B2 (en) | 2016-10-26 | 2019-06-18 | Cedars-Sinai Medical Center | Neutralizing anti-TL1A monoclonal antibodies |
| EP3784699A4 (en) | 2018-04-25 | 2022-04-13 | Prometheus Biosciences, Inc. | OPTIMIZED ANTI-TL1A ANTIBODIES |
| KR20220103721A (ko) | 2019-10-24 | 2022-07-22 | 프로메테우스 바이오사이언시즈, 인크. | Tnf 유사 리간드 1a(tl1a)에 대한 인간화 항체 및 그의 용도 |
| WO2024026386A1 (en) | 2022-07-27 | 2024-02-01 | Cephalon Llc | Anti-tl1a antibody formulations |
| WO2024026395A1 (en) | 2022-07-27 | 2024-02-01 | Cephalon Llc | Anti-tl1a antibodies for the treatment of ulcerative colitis and crohn's disease |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013044298A1 (en) * | 2011-09-30 | 2013-04-04 | Cephalon Australia Pty Ltd | Antibodies against tl1a and uses thereof |
Family Cites Families (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7820798B2 (en) | 1994-11-07 | 2010-10-26 | Human Genome Sciences, Inc. | Tumor necrosis factor-gamma |
| US7597886B2 (en) | 1994-11-07 | 2009-10-06 | Human Genome Sciences, Inc. | Tumor necrosis factor-gamma |
| CN1237076C (zh) | 1999-01-15 | 2006-01-18 | 杰南技术公司 | 具有改变的效应功能的多肽变体 |
| US6548062B2 (en) * | 2000-02-29 | 2003-04-15 | Cephalon, Inc. | Method of treating cancer with anti-neurotrophin agents |
| EP1355919B1 (en) | 2000-12-12 | 2010-11-24 | MedImmune, LLC | Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof |
| US7317091B2 (en) | 2002-03-01 | 2008-01-08 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
| US20040132101A1 (en) | 2002-09-27 | 2004-07-08 | Xencor | Optimized Fc variants and methods for their generation |
| US7217797B2 (en) | 2002-10-15 | 2007-05-15 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
| CA2536086C (en) | 2003-08-20 | 2013-03-19 | University Of Miami | Inhibition of dr3 in the treatment of allergic lung inflammation |
| CA2560742A1 (en) | 2004-03-23 | 2005-10-06 | Biogen Idec Ma Inc. | Receptor coupling agents and therapeutic uses thereof |
| GB0521621D0 (en) * | 2005-10-24 | 2005-11-30 | Domantis Ltd | Tumor necrosis factor receptor 1 antagonists for treating respiratory diseases |
| US20090317388A1 (en) | 2005-05-25 | 2009-12-24 | Linda Burkly | Tl1a in treatment of disease |
| DK1919954T3 (en) | 2005-08-30 | 2017-01-30 | Univ Miami | Immune modulating tumor necrosis factor receptor (TNFR25) - agonists, antagonists and immunotoxins |
| WO2007076465A2 (en) | 2005-12-23 | 2007-07-05 | Diadexus, Inc. | Cln248 antibody compositions and methods of use |
| US20110217310A1 (en) | 2007-01-10 | 2011-09-08 | Siegel Richard M | Blockade of tl1a-dr3 interactions to ameliorate t cell mediated disease pathology |
| WO2008106451A2 (en) | 2007-02-26 | 2008-09-04 | Cedars-Sinai Medical Center | Methods of using single nucleotide polymorphisms in the tl1a gene to predict or diagnose inflammatory bowel disease |
| CA2705292C (en) | 2007-11-13 | 2016-06-21 | Teva Biopharmaceuticals Usa, Inc. | Humanized antibodies against tl1a |
| WO2010118210A1 (en) | 2009-04-08 | 2010-10-14 | Cedars-Sinai Medical Center | Methods of predicting complication and surgery in crohn's disease |
| WO2011080314A2 (en) | 2009-12-31 | 2011-07-07 | Deutsches Krebsforschungszentrum | Novel modulators of trail signalling |
| JO3375B1 (ar) | 2010-11-08 | 2019-03-13 | Regeneron Pharma | أجسام مضادة بشرية للجين a1 الشبيه بعامل النخر الورمي (tl1a) |
| MX2013013329A (es) | 2011-05-20 | 2014-04-16 | Us Government | Bloqueo de interacciones de factor de necrosis tumoral como ligando 1a - receptor de muerte 3 (tl1a-dr3) para mejorar la patologia mediada por las celulas t y los anticuerpos para los mismos. |
| AP2015008605A0 (en) * | 2013-01-02 | 2015-07-31 | Glenmark Pharmaceuticals Sa | Antibodies that bind to tl1a and their uses |
| EP2978440B1 (en) | 2013-03-27 | 2019-10-02 | Cedars-Sinai Medical Center | Treating fibrosis by inhibiting tl1a and diagnosing fibrosis by detecting il31ra |
| CN105307676A (zh) * | 2013-04-05 | 2016-02-03 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 抗il-4抗体和双特异性抗体及其用途 |
| US20160096885A1 (en) | 2013-05-17 | 2016-04-07 | Cedars-Sinal Medical Center | Distinct effects of ifn-gamma and il-17 on tl1a modulated inflammation and fibrosis |
| US10316083B2 (en) | 2013-07-19 | 2019-06-11 | Cedars-Sinai Medical Center | Signature of TL1A (TNFSF15) signaling pathway |
| EP3041580A4 (en) | 2013-09-06 | 2017-05-03 | Cedars-Sinai Medical Center | Systems, devices and methods for anti-tl1a therapy |
| SG10201810298VA (en) | 2013-11-13 | 2018-12-28 | Pfizer | Tumor necrosis factor-like ligand 1a specific antibodies and compositions and uses thereof |
| PT3283499T (pt) | 2015-04-15 | 2022-08-23 | Biosearch Tech Inc | Sondas de extintor dual |
| TWI703158B (zh) | 2015-09-18 | 2020-09-01 | 美商希佛隆公司 | 特異性結合tl1a之抗體 |
| CR20180365A (es) | 2015-12-16 | 2018-09-28 | Amgen Inc | PROTEÍNAS DE UNIÓN AL ANTÍGENO BISPECÍFICO DE ANTI-TL1A/ANTI-TNF-a Y SUS USOS |
-
2016
- 2016-09-14 TW TW105130075A patent/TWI703158B/zh active
- 2016-09-16 DK DK16774750.0T patent/DK3350223T3/da active
- 2016-09-16 KR KR1020187007337A patent/KR101998535B1/ko active IP Right Grant
- 2016-09-16 HU HUE16774750A patent/HUE051496T2/hu unknown
- 2016-09-16 LT LTEP16774750.0T patent/LT3350223T/lt unknown
- 2016-09-16 SI SI201630885T patent/SI3350223T1/sl unknown
- 2016-09-16 EA EA201890756A patent/EA201890756A1/ru unknown
- 2016-09-16 BR BR112018005407A patent/BR112018005407A8/pt active Search and Examination
- 2016-09-16 EP EP16774750.0A patent/EP3350223B1/en active Active
- 2016-09-16 AR ARP160102834A patent/AR106055A1/es unknown
- 2016-09-16 MA MA052643A patent/MA52643A/fr unknown
- 2016-09-16 PE PE2018000398A patent/PE20181080A1/es unknown
- 2016-09-16 UA UAA201804192A patent/UA125284C2/uk unknown
- 2016-09-16 CA CA2997015A patent/CA2997015A1/en active Pending
- 2016-09-16 PT PT167747500T patent/PT3350223T/pt unknown
- 2016-09-16 CN CN201680053598.8A patent/CN108137693B/zh active Active
- 2016-09-16 US US15/267,213 patent/US10138296B2/en active Active
- 2016-09-16 AU AU2016323460A patent/AU2016323460B2/en active Active
- 2016-09-16 EP EP20151834.7A patent/EP3693393A1/en active Pending
- 2016-09-16 ES ES16774750T patent/ES2810751T3/es active Active
- 2016-09-16 MA MA42825A patent/MA42825B1/fr unknown
- 2016-09-16 MX MX2018003185A patent/MX2018003185A/es unknown
- 2016-09-16 IL IL257761A patent/IL257761B2/en unknown
- 2016-09-16 BR BR122021002400A patent/BR122021002400A8/pt unknown
- 2016-09-16 WO PCT/US2016/052040 patent/WO2017049024A1/en active Application Filing
- 2016-09-16 RS RS20200983A patent/RS60703B1/sr unknown
- 2016-09-16 PL PL16774750T patent/PL3350223T3/pl unknown
- 2016-09-16 JP JP2018512167A patent/JP7013366B2/ja active Active
- 2016-09-16 MD MDE20180714T patent/MD3350223T2/ro unknown
-
2018
- 2018-02-28 ZA ZA2018/01427A patent/ZA201801427B/en unknown
- 2018-03-16 CL CL2018000711A patent/CL2018000711A1/es unknown
- 2018-03-16 PH PH12018500580A patent/PH12018500580A1/en unknown
- 2018-04-09 CO CONC2018/0003736A patent/CO2018003736A2/es unknown
- 2018-08-15 HK HK18110481.5A patent/HK1251002A1/zh unknown
- 2018-10-18 US US16/164,509 patent/US11220549B2/en active Active
- 2018-11-30 HK HK18115365.5A patent/HK1256300A1/zh unknown
-
2020
- 2020-08-17 CY CY20201100767T patent/CY1123499T1/el unknown
- 2020-08-25 HR HRP20201323TT patent/HRP20201323T1/hr unknown
-
2021
- 2021-11-30 US US17/538,530 patent/US20220185902A1/en active Pending
-
2022
- 2022-01-17 JP JP2022005039A patent/JP7341259B2/ja active Active
-
2023
- 2023-06-01 AU AU2023203440A patent/AU2023203440A1/en active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013044298A1 (en) * | 2011-09-30 | 2013-04-04 | Cephalon Australia Pty Ltd | Antibodies against tl1a and uses thereof |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101998535B1 (ko) | Tl1a에 특이적으로 결합하는 항체 | |
| JP6548696B2 (ja) | ヒト抗ｉｌ−３３中和モノクローナル抗体 | |
| JP7155126B2 (ja) | ヒトｉｌ－１５に特異的に結合する抗体及びその使用 | |
| US11840573B2 (en) | CD131 binding proteins and uses thereof | |
| AU2019342180B2 (en) | Anti-CXCL13 antibodies for treating autoimmune diseases and cancer | |
| TW201536806A (zh) | 新穎抗人類ｔｓｌｐ受體抗體 | |
| CN116761821B (zh) | 抗par-2抗体及其使用方法 | |
| KR20190002644A (ko) | FcγRIIA에 특이적인 결합 분자 및 이의 용도 | |
| JP6501650B2 (ja) | ヒト抗ｉｌ−３３中和モノクローナル抗体 | |
| JP2023541627A (ja) | Ｉｌ１ｒａｐに結合する抗体及びその使用 | |
| WO2017122666A1 (ja) | 抗Ｍｙｌ９抗体 | |
| EA042971B1 (ru) | Антитела, которые специфически связываются с tl1a | |
| RU2773927C2 (ru) | Cd131-связывающие белки и их применения |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| A302 | Request for accelerated examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |