KR20180048603A - 금속 및/또는 유리 라디칼 킬레이트화 모티프와 관련이 있고 카보닐 및 산화성 스트레스에 대해 활성인 이웃 자리 일차 다이아민 및 이의 용도 - Google Patents

금속 및/또는 유리 라디칼 킬레이트화 모티프와 관련이 있고 카보닐 및 산화성 스트레스에 대해 활성인 이웃 자리 일차 다이아민 및 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20180048603A
KR20180048603A KR1020187003531A KR20187003531A KR20180048603A KR 20180048603 A KR20180048603 A KR 20180048603A KR 1020187003531 A KR1020187003531 A KR 1020187003531A KR 20187003531 A KR20187003531 A KR 20187003531A KR 20180048603 A KR20180048603 A KR 20180048603A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
esi
nmr
ppm
mhz
Prior art date
Application number
KR1020187003531A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102633498B1 (ko
Inventor
노부미치 앙드헤 사사키
파스칼 소네
아녜스 불리에흐
엘로디 로호
Original Assignee
유니베흐시티 아미앵 피카르디 줄 베흔
상트흐 어스피탈리에 유니베흐시테
상뜨르 나쇼날 드 라 러쉐르쉬 샹띠피끄
인쎄름 (엥스띠뛰 나씨오날 드 라 쌍떼 에 드 라 흐쉐르슈 메디깔)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 유니베흐시티 아미앵 피카르디 줄 베흔, 상트흐 어스피탈리에 유니베흐시테, 상뜨르 나쇼날 드 라 러쉐르쉬 샹띠피끄, 인쎄름 (엥스띠뛰 나씨오날 드 라 쌍떼 에 드 라 흐쉐르슈 메디깔) filed Critical 유니베흐시티 아미앵 피카르디 줄 베흔
Publication of KR20180048603A publication Critical patent/KR20180048603A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102633498B1 publication Critical patent/KR102633498B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/10—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by doubly bound oxygen or sulphur atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/494—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom
    • A61K8/4953—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom containing pyrimidine ring derivatives, e.g. minoxidil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/02—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C07C233/09—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals with carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of an acyclic unsaturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/64—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C233/65—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/32—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C07C235/34—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/42—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/44—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C235/56—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/69—Two or more oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/18—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/182—Radicals derived from carboxylic acids
    • C07D295/185—Radicals derived from carboxylic acids from aliphatic carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/18—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/182—Radicals derived from carboxylic acids
    • C07D295/192—Radicals derived from carboxylic acids from aromatic carboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/322—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the nervous system or on mental function

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

본 발명은 약학, 화장품 또는 농식품 산업에서 화학식 I의 화합물:
Figure pct00124

및 이의 염뿐만 아니라 이의 용도에 에 관한 것이다.

Description

금속 및/또는 유리 라디칼 킬레이트화 모티프와 관련이 있고 카보닐 및 산화성 스트레스에 대해 활성인 이웃 자리 일차 다이아민 및 이의 용도
본 발명은 알파-옥소알데하이드(α-옥소알데하이드) 및 알파 알데하이드, 베타 불포화(α,β-불포화 알데하이드) 및 금속 킬레이터의 신규한 다이아민 유도체 스캐빈저뿐만 아니라 특히 AGE(최종 당화 산물(Advanced Glycation Endproducts)) 및/또는 ALE(최종 지질 과산화 산물(Advanced Lipid Peroxidation Endproducts))의 축적과 관련된 질환 또는 장애의 치료 및/또는 예방에서 이의 용도에 관한 것이다.
해당 과정과 지질 과산화 동안, 카본일 화합물이 생성되어 단백질(라이신, 아르기닌, 시스테인 등)의 친핵성 그룹과 반응하여 AGEs("Advanced Glycation Endproducts")(Pathologie, Biologie, 2006, 54, 405-419) 및 ALEs("Advanced Lipid Peroxidation Endproducts")(Br. J. Pharm., 2008, 153, 6-20)을 생산한다. 따라서, AGE는 쉬프 염기의 형성 이후, 이의 유리 아민 그룹의, 당질의 산화성 신진대사로부터 발생한, 예를 들어 글리옥살(GO), 메틸글리옥살(MGO) 및 데옥시글루코손(3-DG)과 같은 상이한 α-옥소알데하이드 유도체에 의한 아마도리 전위의 해로운 변형으로 나타난다(Diabetes Res. Clin. Practice 2013, 99, 261-271). 같은 방법으로 ALE는 특히 전이 금속(Cu2+, Fe3+)에 의해 유도된 산화 스트레스의 영향으로 다중불포화 지방산의 분해로부터 유래된 말론다이알데하이드(MDA), 아크롤레인, 4-하이드록시노네날(4-HNE) 또는 4-하이드록시-2-헥사날(4-HHE)와 같은 α,β-불포화 알데하이드에 이러한 아민 그룹이 1.2 또는 1.4 마이클 첨가된 후에 형성된다(Prog. Lipid Res., 2003, 42, 318-343 ). 또한, 이러한 독성 카보닐 유도체는 비 효소적 과정에 따라 DNA의 염기와 반응하여 가지형 또는 비 가지형 AGE/ALE를 제공할 수 있다. 반응성 카보닐 화합물을 D-락테이트, 글리콜레이트 또는 아세톨로 변형시키는(GSH) 의존성 글루타티온 글리옥살라제 시스템(글리옥살라제 I 및 II)과 같은 효소 해독 메커니즘이 존재하지만, 이의 오작동은 AGE의 축적을 일으킬 수 있다.
AGEs의 축적은 두 가지 중요한 생물학적 결과를 낳는다. 우선, 그들은 콜라겐, 렌즈 단백질, 피브로넥틴, 알부민 및 헤모글로빈과 같은 장수명 단백질에서 특히 관찰되는 단백질 가교 결합의 근원이 될 수 있다. 이와 같이 이 현상은 피부 조직의 다양한 오작동(피부 조직 또는 혈관 내피의 탄력성 상실, 피부의 색소 침착 등) 및 연령 관련 병변(백내장, 류마티스 등)의 출현에서 중요한 역할을 한다. 그런 후에, 산화성 스트레스는 염증 및 혈전 형성 반응의 발생뿐만 아니라 AGE와 이의 특정 수용체(RAGE) 사이의 상호작용을 통한 세포자멸사를 유리하게 만든다. 이러한 기전은 특히 죽상동맥경화증 및 심혈관 질환, 신병증, 망막증, 신경병증 등과 같은 당뇨병과 관련된 다양한 미세 합병증의 출현에 관여한다(Biofactors 2012, 38, 266-274; Int. Mol, Med., 2010, 26, 813-818; Mol.Messabolism, 2014, 3, 94-108). 그러나, 반응 산소종(ROS)의 과잉 생성과 당뇨병 환자에서 발견되는 항산화 세포 방어 시스템의 약화에 의해 유도된 산화성 불균형과 관련된 AGE의 축적은 또한 지질 과산화의 악화의 기원이 될 것이다(Chem Biol. Interact., 2008, 171, 251-271). 따라서 이 산화성 캐스케이드는 원래 LDL(저밀도 지단백질)의 아포지 단백질 B와 산화된 LDL의 생성에 관여하는 MDA 사이의 착물과 같은 ALE의 형성을 유사하게 일으킬 것이다. 후자는 일단 지방질 방울로 적재된 대식세포에 흡수 될 것이며, 죽상 플라크의 구성성분인 포말 세포로 변형될 것이다(Int. J. Mol, Med., 2010, 26, 813-818).
동일한 방식으로, 산화성 스트레스 및 지질 과산화의 악화 후에, 신경 단백질과 관련된 상당량의 ALE가 알츠하이머 병 및 파킨슨 병과 같은 신경 퇴행성 질환을 앓고 있는 환자에서 발견된다. 이와 같이, 알츠하이머 병의 경우 베타-아밀로이드 캐스케이드의 생리병리학적 모델은 질환의 주요 표지자 중 하나를 구성하는 β-아밀로이드 플라크의 축적이 유해한 산화성 캐스케이드의 기원이 될 수 있음을 증명하는 경향이 있다(Trends Mol. Med. 2001, 7, 548-554, Free Radic. Biol. Med., 2002, 32, 1050-1060). 실제로, 다양한 유전적 및 환경적 요인의 영향하에서, 아밀로이드 전구체 단백질(APP)의 β-세크레타제에 의한 절단은 α-세크레테아제를 포함하는 분해 경로의 손상에 우선하게 된다. 그런 후에 비 독성 Aβ 단량체가 형성되어 금속 이온에 의해 응집된 후, 산화 스트레스의 악화의 기원에서 β-아밀로이드 플라크 성분인 독성 올리고머로 변형된다(Chem. Eur. J., 2012 , 18, 15910-15920, Neurochem. Int., 2013, 62, 367-378). 결과적으로, 지질 과산화로 인한 α,β-불포화 알데하이드의 신경독성은 크게 치매의 발병과 크게 관련이 있을 것이다(Curr. Alzheimer Res., 2011, 8, 452-469). 후자 중에서, 단백질 또는 4-HNE의 시스테인, 히스티딘 및 라이신 잔기와 관련하여 가장 반응성인 화합물로 보이는 아크롤레인이 언급될 수 있다. 아크롤레인은 세포골격의 변화 및 알츠하이머병의 또 다른 중요한 표지자인 신경섬유 엉킴의 출현의 기원에서 ALE의 형성을 초래할 것이다. 그런 다음, 4-HNE는 특히 이온 채널에서 ALE를 형성한 후 신경 세포막에서 불안정화를 유도하고 마지막으로 세포자멸사의 기원에서 칼슘 불균형을 유도한다. 또한, 단백질의 라이신 잔기에 대한 MDA의 응축으로부터 유래된 ALE는 다이하이드로 피리딘 유도체의 형태로 확인될 수 있었고 피부 노화에 기여할 UV에 대한 피부 저항성 감소 그리고 아마도 피부의 암의 발달에 기여할 수 있었다(Mech. Aging Dev., 2001, 122, 735-755)에 영향을 미친다. 마지막으로, MDA는 또한 DNA의 염기, 특히 데옥시구아노신의 아민 작용에 대한 반응 후에 돌연변이 유발 인자로서 작용할 수 있으며, 따라서 특정 암의 발달에 유리하다(Toxicology, 2002, 181-182, 219-222). 그러나, DNA의 이러한 유형의 변형은 또한 MGO와 함께 부가물의 형태로 문헌에 기술되어있다(Chem. Res. Toxicol., 2005, 18, 1586-1592).
몇몇 항-AGE/ALE 제제는 문헌에서 이전에 기술되어 있다. 아미노구아니딘(Pimagedine)은 당뇨병 동물 모델에서 생체 외 및 생체 내에서 탁월한 MGO 스캐빈저인 것으로 입증되었다(Arch. Biochem. Biophys., 2003, 419, 31-40, Diabetes, 2012, 61, 549-559). 그러나 인간의 3기 임상 시험은 약한 혈장 보호 항산화제 특성과 간장 및 위장 부작용을 나타내는 결정적인 결과를 제공하지 못했다(Am. J. Nephrol., 2004, 4, 32-40). 이 분자에 대한 실험은 그렇게 포기되었다.
그러나 몇 가지 다른 화합물은 생체 외 및 생체 내에서 AGEs와 ALEs의 형성을 늦추는 데 효과가 있음을 보여주었다. 나가이 등(Bioorg. Med. Chem. 2009, 17, 2310-2320)은 예를 들어 피리독스아민(Pyridorin®), 2,3-다이아미노페나진, 티아민, 벤포티아민, TM-2002, 테닐세탐 및 LR-9, 20, 59, 74 및 90의 항-AGE 특성을 보고할뿐만 아니라 PTB("Phenacyl Thiazolium Bromide") 및 ALT-711이 AGEs와 ALEs를 파괴할 수 있다는 사실을 보고한다. 항-AGE 효과는 카르노신(Neurosci. Lett., 1997, 238, 135-13) 및 OPB-9195(J. Am. Soc. Nephrol., 2000, 11, 1719-1725)에 대해 기술되어있다. OPB-9195의 첫 번째 임상 시험은 결정적인 결과를 제공하지 못했고 주요 부작용의 발생 때문에 정지되야 하는 것에 유의한다(Pathologie, Biologie, 2006, 54, 405-419). 다른 분자에 대한 대부분의 연구는 임상 실험이 중지된 ALT-711을 제외하고 아직 실험 단계에 있다.
특허 출원 WO 2006/103274 A1 및 WO 2013/050721 A1은 이전에 사카키 등이 합성한 2,3-다이아미노프로피온산의 유도체뿐만 아니라 이의 항-AGE/ALE 특성을 기술한다.
이 다양한 연구가 주로 항-AGE 제제의 개발에 초점을 두었다는 점에 유의하는 것이 중요하다. 실제로, 잠재적인 항-ALE 인자의 개발에 관한 연구는 지금까지 거의 수행되지 않았다. 항-AGE/ALE 및 금속 킬레이터인 다능성 화합물의 설계는 아직까지 기술되지 않았다.
항-AGE/ALE 특성을 갖고 또한 바람직하게는 금속 킬레이트제인 신규 화합물에 대한 필요성이 여전히 존재한다.
본 발명자들은 알파-옥소알데하이드(α-옥소알데하이드) 및 알파 알데하이드, 베타-불포화(α, β-불포화 알데하이드) 및 금속 킬레이트화제의 신규 다이아민 유도체 스캐빈저 개발에 성공했다. 이러한 다중능 화합물은 카보닐 화합물의 스캐빈저 특성을 금속 킬레이트화 특성 및 항라디칼 특성과 조합하는 이점을 갖는다.
따라서, 본 발명은 약학, 농식품 또는 화장품 조성물에서 화학식 I의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 이들 화합물 또는 약학적으로 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.
제 1 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물:
Figure pct00001
및 특히 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이며,
여기서
n은 1 내지 6의 정수이며;
X는 CO 또는 CH2이며;
Y는 NR1R2 또는 R2 또는
Figure pct00002
이며;
R1은 H 또는 알킬 또는 알킬-아릴이며;
R2는 Z-L-R3이며;
Z는 존재하지 않거나, CO 또는 CH2이며;
L은 존재하지 않거나, CH=CH 또는 (CH2)m이며;
m은 1 내지 6의 정수이며;
R3는 적어도 하나의 OH기 및 OH, C1 내지 C4 알콕시 및 C1 내지 C4 알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 치환된 페닐이거나 R3는 적어도 하나의 OH기 및 가능하게는 OH, C1 내지 C4 알콕시 및 C1 내지 C4 알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 치환된 N-피리디논일이다.
하나의 비대칭 탄소 원자를 포함하는 화학식 I의 화합물은 2개의 거울상 이성질체의 형태로 존재한다. 이들 거울상 이성질체뿐만 아니라 라세미 혼합물을 포함하는 이의 혼합물이 본 발명의 일부이다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 약학, 화장품 또는 농식품 관점에서 허용가능한 본 발명에 따른 하나 이상의 화합물 또는 특히 약학적으로 허용가능한 염 및 적어도 하나의 부형제를 포함하는 약학적, 화장품 또는 농식품 조성물에 관한 것이다.
상기한 바와 같이, 본 발명의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염은 AGE(최종 당화 산물) 및/또는 ALE(최종 지질 과산화 산물)의 축적과 관련된 질환 또는 장애의 치료 및/또는 예방에서 특정 응용분야를 가진다.
본 발명의 내용 중에 포함되어 있다.
도 1은 연구된 다양한 화합물의 구조이다.
도 2는 MGO와 본 발명에 따른 화합물 사이의 부가물 형성의 동력학적 연구이다.
도 3은 37℃에서 15분 항온처리 한 후 MGO와 화합물 37a 사이에 적어도 3개 유형의 부가물이 형성되었다는 증거를 제공하는 질량 스펙트럼이다.
도 4는 MDA와 본 발명에 따른 화합물 사이의 부가물 형성의 동력학적 연구이다.
도 5는 37℃에서 5시간 항온처리 한 후 MDA와 화합물 37a 사이에 하나 이상의 부가물이 형성되었다는 증거를 제공하는 질량 스펙트럼이다.
도 6은 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5)에서 수행된 보정 곡선이다.
도 7은 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5) 및 MeOH 75/25의 혼합물에서 수행된 보정 곡선이다.
도 8은 본 발명에 따른 상이한 화합물의 Cu2+의 착물화 %의 농도에 따른 비교이다.
도 9는 Cu2+ 킬레이트화 특성에 대해 테스트된 화합물 37b와 관련된 두 화합물이다.
도 10은 화합물 37b의 Cu2+와 오직 하나의 유리 Cu2+ 킬레이트 말단을 갖는 2 개의 관련된 화합물의 착물화 %의 농도에 따른 비교이다.
도 11은 트롤록스의 보정 곡선(순 AUC 대 농도)이다. 도시된 값은 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터의 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 12는 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 트롤록스의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 13은 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 카르노신의 부존재(대조군) 또는 존재하에 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 14는 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 Dap-Pip의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 15는 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 29a의 부존재(대조군) 또는 존재하에 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터의 대표적인 실험을 구성하는 3 회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 16는 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 29b의 부존재 (대조군) 또는 존재하에 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터의 대표적인 실험을 구성하는 3 회의 평균±SEM으로 나타낸다.
도 17은 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 30a의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 나타낸다.
도 18은 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 30b의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 나타낸다.
도 19는 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 37a의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 20은 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 37b의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 21은 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 37c의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 22는 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 37d의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 23은 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 37f의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 24는 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 37i의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 25는 AAPH에 의해 유도된 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선이다. 도시된 값은 상이한 농도의 화합물 37j의 부존재(대조군) 또는 존재하에서 얻어진 결과에 관한 것이며, 수행된 3개의 독립적인 실험으로부터 대표적인 실험을 구성하는 3회의 평균±SEM으로 표현된다.
도 26은 10μM에서 본 발명에 따른 화합물의 항산화능(ORACFL)이다. 도시된 결과는 3회 수행된 3개의 독립적인 실험의 평균±SEM에 해당한다. * p <0.05; ** p <0.01; *** p <0.001 vs 트롤록스(스튜던트 t-테스트: p <0.05 인 경우, 차이가 유의하다고 여겨짐).
도 27은 Dap-Pip, 2nd 화합물의 항라디칼 특성의 평가이다.
도 28은 본 발명에 따른 화합물 29a의 항라디칼 특성의 평가이다.
도 29는 본 발명에 따른 화합물 29b의 항라디칼 특성의 평가이다.
도 30은 본 발명에 따른 화합물 30b의 항라디칼 특성의 평가이다.
도 31은 본 발명에 따른 화합물 37a의 항라디칼 특성의 평가이다.
도 32는 본 발명에 따른 화합물 37c의 항라디칼 특성의 평가이다.
도 33은 10μM의 농도에서 비타민 E, 2nd Dap-Pip 및 본 발명에 따른 다양한 화합물의 항라디칼 특성의 비교이다.
도 34는 1μM의 농도에서 비타민 E, 2nd Dap-Pip 및 본 발명에 따른 다양한 화합물의 항라디칼 특성의 비교이다.
도 35는 치료 24시간 후의 뮤린 내피 뇌 세포(bEnd.3)에 대한 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성의 연구이다. 세포의 생존력은 3회의 평균±표준 편차로 표현된다. (a) 화합물 29a, 29b, 30b, 37a 및 37c; (b) 화합물 30a 및 37b.
도 36은 치료 24시간 후 신경 세포로 치료된 쥐 갈색세포종 세포에 대한 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성의 연구이다. 세포의 생존력은 3회의 평균±표준 편차로 표현된다. (a) 화합물 29a, 29b, 30b, 37a 및 37c; (b) 화합물 30a 및 37b.
도 37은 치료 24시간 후 인간 섬유 아세포(MRC-5)에 대한 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성의 연구이다. 세포의 생존력은 3회의 평균±표준 편차로 표현된다. (a) 화합물 29a, 29b, 30b, 37a 및 37c; (b) 화합물 30a 및 37b.
도 38은 치료 48시간 후 뮤린 내피 뇌 세포(bEnd.3)에 대한 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성의 연구이다. 세포의 생존력은 3회의 평균±표준 편차로 표현된다. (a) 화합물 29a, 29b, 30b, 37a 및 37c; (b) 화합물 30a 및 37b.
도 39는 치료 48시간 후 신경 세포로 치료된 쥐 갈색세포종 세포(PC12)에 대한 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성의 연구이다. 세포의 생존력은 3회의 평균±표준 편차로 표현된다. (a) 화합물 29a, 29b, 30b, 37a 및 37c; (b) 화합물 30a 및 37b.
도 40은 치료 48시간 후 인간 섬유 아세포(MRC-5)에 대한 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성의 연구이다. 세포의 생존력은 3회의 평균±표준 편차로 표현된다. (a) 화합물 29a, 29b, 30b, 37a 및 37c; (b) 화합물 30a 및 37b.
도 41은 치료 24시간 후 신경 세포로 치료된 쥐 갈색세포종 세포(PC12)에 대한 본 발명에 따른 화합물(29a, 29b, 30a, 30b, 37a, 37b, 37c, 37d, 37f, 37i 및 37j)의 세포 독성의 연구이다. 세포의 생존력은 3회 수행된 3개의 독립적인 실험의 평균±SEM으로 표현된다.
도 42는 뮤린 내피 뇌 세포(bEnd.3)에 대한 화합물 30b의 항세포자멸사 특성의 평가이다. 세포 bEnd.3를 2mM의 MGO의 첨가 전에 10μM 또는 100μM의 30b로 30분간 전처리한 다음 24시간 동안 항온처리하였다. 세포의 세포자멸사는 3회의 평균±표준 편차로 표현된다.
도 43은 뮤린 내피 뇌 세포(bEnd.3)에 대한 화합물 37c의 항세포자멸사 특성의 평가이다. 세포 bEnd.3를 2mM의 MGO의 첨가 전에 10μM 또는 100μM의 37c로 30분간 전처리한 다음 24시간 동안 항온처리하였다. 세포의 세포자멸사는 3회의 평균±표준 편차로 표현된다.
도 44는 신경 세포로 치료된 쥐 갈색세포종 세포(PC12)에 대한 화합물 30b의 항세포자멸사 특성의 평가이다. 세포 PC12를 1mM의 MGO의 첨가 전에 10μM 또는 100μM의 37c로 30분간 전처리한 다음 24시간 동안 항온처리하였다. 세포의 세포자멸사는 3회의 평균±표준 편차로 표현된다.
도 45는 신경 세포로 치료된 쥐 갈색세포종 세포(PC12)에 대한 화합물 37c의 항세포자멸사 특성의 평가이다. 세포 PC12를 1mM의 MGO의 첨가 전에 10μM 또는 100μM의 37c로 30분간 전처리한 다음 24시간 동안 항온처리하였다. 세포의 세포자멸사는 3회의 평균±표준 편차로 표현된다.
도 46은 인간 섬유 아세포(MRC-5)에서의 화합물 37b의 항세포자멸사 특성의 평가이다. 세포 MRC-5를 2mM의 MGO의 첨가 전에 10μM 또는 100μM의 37b로 30분간 전처리한 다음 24시간 동안 항온처리하였다. 세포의 세포자멸사는 3회의 평균±표준 편차로 표현된다.
도 47은 인간 섬유 아세포(MRC-5)에서 화합물 37c의 항세포자멸사 특성의 평가이다. 세포 MRC-5를 2mM의 MGO의 첨가 전에 10μM 또는 100μM의 37c로 30분간 전처리한 다음 24시간 동안 항온처리하였다. 세포의 세포자멸사는 3회의 평균±표준 편차로 표현된다.
도 48은 신경 세포로 치료된 쥐 갈색세포종 세포(PC12)에 대한 화합물 37c의 항세포자멸사 특성의 평가이다. 세포 PC12를 1mM의 MGO의 첨가 전에 10μM 또는 100μM의 37C로 1시간 전처리한 다음 24시간 동안 항온처리하였다. 세포의 세포자멸사는 3회 수행된 3개의 독립적인 실험의 평균±SEM으로 표현되다. * p <0.05; ** p <0.01 vs 대조군(MGO로 처리하지 않은 세포)(스튜던트 t-테스트: p <0.05 인 경우, 그 차이는 유의하다고 여겨짐).
상기한 바와 같이, 본 발명은 약학적, 화장품 또는 농식품 관점에서 허용가능한 화학식 I의 화합물뿐만 아니라 특히 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다.
화학식 I의 화합물 및 이의 바람직한 염은 n, Y, R1, R2, Z, L, m 및 R3의 하나, 여럿 또는 각각이 다음 방식으로 정의된다:
n은 1 내지 4의 정수이며; 바람직하게는 n은 1, 2 또는 3이며; 더욱 바람직하게는 n은 2 또는 3이며;
Y는 NR1R2 또는 R2 또는
Figure pct00003
이며;
R1은 H, 메틸 또는 벤질이며; 바람직하게는 R1은 H 또는 메틸, 더욱 바람직하게는 R1은 H이며;
R2는 Z-L-R3이며;
Z는 CO 또는 CH2이며;
L은 존재하지 않거나, CH=CH 또는 (CH2)m이며; 바람직하게는 L은 존재하지 않거나, 트랜스-CH=CH 또는 (CH2)m이며;
m은 1 내지 6의 정수이며; 바람직하게는 1 내지 4의 정수이며, 더욱 바람직하게는 m은 1, 2 또는 3이며;
R3는 적어도 하나의 OH기 및 OH, C1 내지 C4 알콕시 및 C1 내지 C4 알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 치환된 페닐이거나 R3는 적어도 하나의 OH기 및 가능하게는 OH, C1 내지 C2 알콕시 및 C1 내지 C2 알킬, 바람직하게는 OH, 메톡시 및 메틸, 더욱 바람직하게는 OH 및 메톡시 또는 OH 및 메틸 또는 OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 치환된 N-피리디논일이고, 더욱 바람직하게는 R3은 다음으로부터 선택된다:
Figure pct00004
,
Figure pct00005
,
Figure pct00006
또는
Figure pct00007
.
한 특정 실시태양에서, 화학식 I의 화합물 및 이의 염은 R2가 다음으로부터 선택된 것이다:
Figure pct00008
Z는 CO 또는 CH2이다.
실제로, 어떤 이론에 묶이기를 바라지 않고, 발명자는 본 발명에 따른 화합물의 MGO 및 MDA 및 구리 킬레이트 능력을 갖는 부가물을 형성하는 능력이 다이아민 그룹의 수준에서 얻어지는 것이라고 생각한다. 병행하여, 본 발명에 따른 화합물의 철 킬레이트 능력 및 항라디칼 특성은 페룰산(4-하이드록시-3-메톡시페닐), 갈산(3,4,5-트라이하이드록시벤조일) 및 하이드록시피리디논으로부터 선택된다.
제 1 실시태양에서, 본 발명의 화합물은 하기 화학식 II:
Figure pct00009
의 화합물 및 특히 이의 약학적으로 허용가능한 염이며,
여기서 n과 Y는 화학식 I에 대해 위에서 정의한 바와 같다.
제 2 실시태양에서, 본 발명의 화합물은 화학식 III:
Figure pct00010
의 화합물 및 특히 이의 약학적으로 허용가능한 염이며,
여기서 n과 Y는 화학식 I에 대해 위에서 정의한 바와 같다.
제 3 실시태양에서, 본 발명의 화합물은 화학식 IV:
Figure pct00011
의 화합물 및 특히 이의 약학적으로 허용가능한 염이며,
여기서 n, X, R1, Z, L 및 R3는 화학식 I에 대해 위에서 정의한 바와 같다.
바람직한 화학식 IV의 화합물은 Z-L-R3가 다음으로부터 선택된 것이다:
Figure pct00012
여기서, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20 및 R21은 서로 독립적으로 H, OH, C1 내지 C4 알콕시 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 H, OH, C1 내지 C2 알콕시 및 C1 내지 C2 알킬, 바람직하게는 H, OH, 메톡시 및 메틸, 보다 바람직하게는 H, OH 및 메톡시; H 또는 OH 및 H, 메틸 또는 OH로부터 선택되며; R4, R5, R6, R7 및 R8의 적어도 하나, R9, R10, R11, R12 및 R13의 적어도 하나, R14, R15, R16 및 R17의 적어도 하나, R18, R19, R20 및 R21의 적어도 하나는 OH인 것을 조건으로 한다.
특히 바람직한 화학식 IV의 화합물은 Z-L-R3이 다음으로부터 선택된 것이다:
Figure pct00013
여기서 R5, R6, R9, R10, R11, R16, R17 및 R21은 서로 독립적으로 OH, C1 내지 C4 알콕시 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 OH, C1 내지 C2 알콕시 및 C1 내지 C2 알킬, 바람직하게는 OH, 메톡시 및 메틸, 보다 바람직하게는 OH 및 메톡시 또는 OH 및 메틸 또는 OH로부터 선택되며; R5 및 R6의 적어도 하나, R9, R10 및 R11의 적어도 하나, R16 및 R17의 적어도 하나 및 R21의 적어도 하나는 OH인 것을 조건으로 한다. 특히 유리한 화학식 IV의 화합물은
- R5 및 R6가 서로 독립적으로 OH 및 C1 내지 C4 알콕시, 바람직하게는 OH 및 C1 내지 C2 알콕시, 더욱 바람직하게는 OH 및 메톡시로부터 선택되며; 유리하게는 R5는 C1 내지 C4 알콕시, 바람직하게는 C1 내지 C2 알콕시, 더욱 바람직하게는 메톡시이며 R6은 OH이며;
- R9, R10 및 R11은 OH이며;
- R16 및 R17은 서로 독립적으로 OH 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 OH 및 C1 내지 C2 알킬, 더욱 바람직하게는 OH 및 메틸로부터 선택되며; 유리하게는 R16은 OH이며 R17은 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 C1 내지 C2, 더욱 바람직하게는 메틸이며;
- R21은 OH인 것이다.
한 실시태양에서, 화학식 IV의 화합물은 Z-L-R3이 다음으로부터 선택된 것이다:
Figure pct00014
여기서 R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20 및 R21은 서로 독립적으로 H, OH 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 H, OH 및 C1 내지 C2 알킬, 바람직하게는 H, OH 및 메틸로부터 선택되며; R14, R15, R16 및 R17의 적어도 하나 및 R18, R19, R20 및 R21의 적어도 하나는 OH인 것을 조건으로 한다. 유리하게는 Z-L-R3이 다음으로부터 선택된다:
Figure pct00015
여기서, R16, R17 및 R21은 서로 독립적으로 OH 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 OH 및 C1 내지 C2 알킬, 더욱 바람직하게는 OH 및 메틸로부터 선택되며, R16, R17 및 R21의 적어도 하나는 OH인 것을 조건으로 한다. 특히 유리한 화합물은
- R16 및 R17이 서로 독립적으로 OH 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 OH 및 C1 내지 C2 알킬, 더욱 바람직하게는 OH 및 메틸로부터 선택되며; 유리하게는 R16은 OH이며 R17은 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 C1 내지 C2 알킬, 더욱 바람직하게는 메틸이며;
- R21은 OH이다.
제 4 실시태양에서, 본 발명의 화합물은 화학식 V:
Figure pct00016
의 화합물 및 특히 이의 약학적으로 허용가능한 염이며,
여기서 n, X, Z, L 및 R3는 화학식 I에 대해 위에서 정의한 바와 같다.
특히 바람직한 화학식 V의 화합물은 Z-L-R3이 다음으로부터 선택된 것이다:
Figure pct00017
여기서, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20 및 R21은 서로 독립적으로 H, OH, C1 내지 C4 알콕시 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 H, OH, C1 내지 C2 알콕시 및 C1 내지 C2 알킬, 바람직하게는 H, OH, 메톡시 및 메틸, 보다 바람직하게는 H, OH 및 메톡시; H 또는 OH 및 H, 메틸 또는 OH로부터 선택되며; R4, R5, R6, R7 및 R8의 적어도 하나, R9, R10, R11, R12 및 R13의 적어도 하나, R14, R15, R16 및 R17의 적어도 하나, R18, R19, R20 및 R21의 적어도 하나는 OH인 것을 조건으로 한다.
특히 바람직한 화학식 V의 화합물은 Z-L-R3이 다음으로부터 선택된 것이다:
Figure pct00018
여기서 R5, R6, R9, R10, R11, R16, R17 및 R21은 서로 독립적으로 OH, C1 내지 C4 알콕시 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 OH, C1 내지 C2 알콕시 및 C1 내지 C2 알킬, 바람직하게는 OH, 메톡시 및 메틸, 보다 바람직하게는 OH 및 메톡시 또는 OH 및 메틸 또는 OH로부터 선택되며; R5 및 R6의 적어도 하나, R9, R10 및 R11의 적어도 하나, R16 및 R17의 적어도 하나 및 R21의 적어도 하나는 OH인 것을 조건으로 한다. 특히 유리한 화학식 IV의 화합물은
- R5 및 R6가 서로 독립적으로 OH 및 C1 내지 C4 알콕시, 바람직하게는 OH 및 C1 내지 C2 알콕시, 더욱 바람직하게는 OH 및 메톡시로부터 선택되며; 유리하게는 R5는 C1 내지 C4 알콕시, 바람직하게는 C1 내지 C2 알콕시, 더욱 바람직하게는 메톡시이며 R6은 OH이며;
- R9, R10 및 R11은 OH이며;
- R16 및 R17은 서로 독립적으로 OH 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 OH 및 C1 내지 C2 알킬, 더욱 바람직하게는 OH 및 메틸로부터 선택되며; 유리하게는 R16은 OH이며 R17은 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 C1 내지 C2, 더욱 바람직하게는 메틸이며;
- R21은 OH인 것이다.
한 실시태양에서, 화학식 V의 화합물은 Z-L-R3이 다음으로부터 선택된 것이다:
Figure pct00019
R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20 및 R21은 서로 독립적으로 H, OH 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 H, OH 및 C1 내지 C2 알킬, 바람직하게는 H, OH 및 메틸로부터 선택되며; R14, R15, R16 및 R17의 적어도 하나 및 R18, R19, R20 및 R21의 적어도 하나는 OH인 것을 조건으로 한다. 유리하게는 Z-L-R3이 다음으로부터 선택된다:
Figure pct00020
여기서, R16, R17 및 R21은 서로 독립적으로 OH 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 OH 및 C1 내지 C2 알킬, 더욱 바람직하게는 OH 및 메틸로부터 선택되며, R16, R17 및 R21의 적어도 하나는 OH인 것을 조건으로 한다. 특히 유리한 화합물은
- R16 및 R17이 서로 독립적으로 OH 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 OH 및 C1 내지 C2 알킬, 더욱 바람직하게는 OH 및 메틸로부터 선택되며; 유리하게는 R16은 OH이며 R17은 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 C1 내지 C2 알킬, 더욱 바람직하게는 메틸이며;
- R21은 OH이다.
제 5 실시태양에서, 본 발명의 화합물은 화학식 VI:
Figure pct00021
의 화합물 및 특히 이의 약학적으로 허용가능한 염이며,
여기서 n, X, L 및 R3는 화학식 I에 대해 위에서 정의한 바와 같다.
바람직한 화학식 VI의 화합물은 n이 1 또는 2이고, X가 CH2이며 및/또는 L-R3가 다음인 것이다:
Figure pct00022
여기서 R14, R15, R16 및 R17은 서로 독립적으로 H, OH 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 H, OH 및 C1 내지 C2 알킬, 바람직하게는 H, OH 및 메틸로부터 선택되며; R14, R15, R16 및 R17의 적어도 하나는 OH인 것으로 조건으로 한다. 유리하게는, L-R3는 다음으로부터 선택된다:
Figure pct00023
여기서 R16 및 R17은 서로 독립적으로 OH 및 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 OH 및 C1 내지 C2 알킬, 바람직하게는 OH 및 메틸로부터 선택되며; R16 및 R17의 적어도 하나는 OH인 것으로 조건으로 한다. 특히 유리한 화합물은 R16이 OH이고 R17이 C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 C1 내지 C2 알킬, 더욱 바람직하게는 메틸인 것이다.
본 발명의 특히 바람직한 화합물은 아래 표 1에 나열된 것이다.
구조 명칭
Figure pct00024
 (E)-4,5-다이아미노-1-(4-(3-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)아크릴로일)피페라진-1-일)펜탄-1-온
Figure pct00025
 (E)-N-(5,6-다이아미노헥실)-3-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)아크릴아마이드
Figure pct00026
 4,5-다이아미노-1-(4-(3,4,5-트라이하이드록시벤조일)피페라진-1-일)펜탄-1-온
Figure pct00027
 N-(5,6-다이아미노헥실)-3,4,5-
트라이하이드록시벤즈아마이드
Figure pct00028
 N-(4,5-다이아미노펜틸)-3-(3-하이드록시-2-옥소피리딘-1(2H)-일)프로판아마이드
Figure pct00029
 N-(5,6-다이아미노헥실)-3-(3-하이드록시-2-옥소피리딘-1(2H)-일)프로판아마이드
Figure pct00030
 4,5-다이아미노-N-(3-(3-하이드록시-2-옥소피리딘-1(2H)-일)프로필)펜탄아마이드
Figure pct00031
 1-(3-(4-(3,4-다이아미노부타노일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필)-3-하이드록시피리딘-2(1H)-온
Figure pct00032
 1-(2-(4-(4,5-다이아미노펜타노일)피페라진-1-일)-2-옥소에틸)-3-하이드록시피리딘-2(1H)-온
Figure pct00033
 1-(3-(4-(4,5-다이아미노펜타노일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필)-3-하이드록시피리딘-2(1H)-온
Figure pct00034
 N-(4,5-다이아미노펜틸)-2-(3-하이드록시-2-메틸-4-옥소피리딘-1(4H)-일)아세트아마이드
Figure pct00035
 N-(5,6-다이아미노헥실)-2-(3-하이드록시-2-메틸-4-옥소피리딘-1(4H)-일)아세트아마이드
Figure pct00036
 N-(5,6-다이아미노헥실)-3-(3-하이드록시-2-메틸-4-옥소피리딘-1(4H)-일)프로판아마이드
Figure pct00037
 4,5-다이아미노-N-(3-(3-하이드록시-2-메틸-4-옥소피리딘-1(4H)-일)프로필)펜탄아마이드
Figure pct00038
 1-(2-(4-(4,5-다이아미노펜타노일)피페라진-1-일)-2-옥소에틸)-3-하이드록시-2-메틸피리딘-4(1H)-온
Figure pct00039
 1-(3-(4-(4,5-다이아미노펜틸)피페라진-1-일)프로필)-3-하이드록시피리딘-2(1H)-온
Figure pct00040
 1-(3-((4,5-다이아미노펜틸)(메틸)아미노)프로필)-3-하이드록시피리딘-2(1H)-온
Figure pct00041
 1-(5,6-다이아미노헥실)-3-하이드록시-2-메틸피리딘-4(1H)-온
화학식 I의 화합물은 당업자에게 공지된 반응에 따라 제조될 수 있다. "실시 예"부분에 기재된 반응식은 가능한 합성 방법을 나타낸다.
α-옥소알데하이드 및/또는α,β-불포화 알데하이드를 제거할 수 있는 능력, 금속을 킬레이트화할 수 있는 능력 및 이의 항산화제 특성에 의해, 특히 약학적 및/또는 화장품 관점에서 허용가능한 본 발명의 화합물 및 이의 염은 약학 및/또는 화장품 산업에 응용분야를 갖는다.
두 번째 양태에서, 따라서, 본 발명은 의약으로서 사용하기 위한 본 발명의 화합물에 관한 것이다.
특히, 본 발명의 화합물은 최종 당화 산물(AGE) 및/또는 최종 지질 과산화 산물(ALE)의 축적과 관련된 질환 또는 장애의 치료 및/또는 예방에 유용하다.
이런 질환 또는 장애는 신경 퇴행성 질환, 산화성 및 카보닐 스트레스와 관련된 미세 및 거대 혈관 확장증, 당뇨병 관련 장애 및 연령 관련 병변을 포함한다.
한 특정 실시태양에서, 질환 또는 장애는 신경 퇴행성 질환, 특히 알츠하이머병 및 파킨슨병으로부터 선택된다.
다른 특정 실시태양에서, 질환 또는 장애는 죽상동맥경화증 유형의 산화성 및 카보닐 스트레스와 관련된 미세 및 거대 혈관 확장증으로부터 선택된다.
다른 특정 실시태양에서, 질환 또는 장애는 당뇨병 관련 질환, 특히 죽상동맥경화증, 망막증, 신병증, 신경병증, 미세 및 거대 혈관 확장증, 백내장, 아밀로이드증, 류마티스 장애 및 정맥류 및 동맥 궤양으로부터 선택된다.
다른 특정 실시태양에서, 질환 또는 장애는 예를 들어 백내장 및 류마티즘과 같은 연령 관련 병변으로부터 선택된다.
본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 환자에게 유효량의 본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 용매화물을 투여하는 단계를 포함하여 본 발명에 기재된 질환 및 상태를 치료하는 방법에 관한 것이다. 바람직하게는, 환자는 온혈 동물, 보다 바람직하게는 인간이다.
본 발명은 또한 하나 이상의 본 발명의 화합물 또는 이의 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 염 및 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 상기 부형제는 당업자에게 공지된 통상적인 부형제로부터 원하는 제형 및 투여 방식에 따라 선택된다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구, 설하, 피하, 근육 내, 정맥 내, 국소, 지방, 기관 내, 비강 내, 경피 또는 직장 경로로 투여하기 위한 약학적 조성물로부터 선택될 수 있다. 이러한 조성물에서, 상기 화학식 I의 활성 성분 또는 이의 약학적으로 허용가능한 용매화물은 상기 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하기 위해 동물 및 인간에게 치료 및/또는 예방을 위해 통상적인 약학적 부형제와의 혼합물로서 단위 투여 형태로 투여될 수 있다. 적합한 단위 투여 형태는 정제, 연질 및 경질 캡슐, 분말, 과립 및 경구용 용액 또는 현탁액과 같은 경구 투여 형태, 설하, 협측, 기관 내, 안내 내, 비강 내 투여 형태, 흡입, 국소, 경피, 피하, 근육 내 또는 정맥 내 투여 형태, 직장 투여 형태 및 임플란트를 포함한다. 국소 도포를 위해, 본 발명에 따른 화합물은 크림, 겔, 연고 또는 로션에 사용될 수 있다. 바람직한 실시태양에서, 이는 경구 투여용 약학적 조성물이다. 투여 방식에 따라 고체, 반고체 또는 액체 형태를 가질 수있는 이런 적합한 투여 형태는 당업자에게 일반적으로 공지되어 있으며 최근의 문헌 "Remington 's Pharmaceutical Sciences"을 참조한다.
AGEs의 축적은 일반적으로 피부 조직 또는 혈관 내피의 탄력성 상실 및 피부의 색소 침착과 같은 미용적 영향을 미치는 오작동과 관련이 있기 때문에(Dermatoendocrinol., 4, 259-270), 본 발명의 화합물은 화장품 조성물에서 활성 성분으로서 유용하다.
[정의]
이하의 정의 및 설명은 상세한 설명뿐만 아니라 청구항을 포함하는 본 출원에서 사용되는 용어 및 표현과 관련된다.
본 발명의 화합물의 설명을 위해, 사용된 용어 및 표현은 달리 언급되지 않는 한, 이하의 정의에 따라 해석되어야 한다.
단독으로 또는 다른 기의 일부로서 "알킬"이라는 용어는 화학식 CnH2n+1의 탄화수소 라디칼을 의미하며, 여기서 n은 1 이상의 정수이다.
"염"이라는 용어는 화학식 I의 화합물의 산 부가염을 의미한다. 이는 염산, 질산, 황산, 인산, 구연산, 포름산, 푸마르산, 말레산, 아세트산, 숙신산, 타르타르산, 메탄 설폰산, p-톨루엔 설폰산, 옥살산 및 이와 유사한 것을 포함한다.
화학식 I의 화합물에 대한 모든 언급은 또한 후자의 염을 나타낸다.
"환자"라는 용어는 의학적 치료를 기다리거나 받는 온혈 동물, 바람직하게는 인간을 의미한다.
"인간"이라는 용어는 두 성별 및 임의의 발달 단계(신생아, 영아, 청소년, 청소년 및 성인)의 대상을 의미한다. 한 실시태양에서, 인간은 청년 또는 성인, 바람직하게는 성인이다.
"치료하다" 및 "치료"라는 용어는 일반적 의미로 이해되어야 하며 병리학적 상태의 개선 및 폐기를 포함해야 한다.
"예방하다" 및 "예방"이란 용어는 환자가 질환이나 상태를 발현하는 것을 배제하거나 환자가 질환이나 상태를 발현시킬 위험을 감소시키는 것과 같이 질환 또는 상태 및 관련 증상의 출현을 피하거나 지연시키는 것을 의미한다.
용어 "치료학적 유효량" 또는 "유효량"은 투여되는 환자에게 바람직한 치료 또는 예방 결과를 달성하기에 충분한 활성 성분(화학식 I의 화합물)의 양을 의미한다.
"약학적으로 허용가능한"또는 "약학적 관점에서 허용가능한"이란 용어는 화합물 또는 구성요소가 환자에게 해롭지 않고, 약학적 조성물의 구성에서 다른 구성요소와 상용성이 있음을 의미한다.
"화장품으로 허용되는"이란 용어는 화합물 또는 구성요소가 사용자, 특히 사람에게 유해하지 않다는 것을 의미하며, 화장품 조성물의 구성에서 다른 구성요소와 상용성이 있음을 의미한다.
"농식품 관점에서 허용가능한"이란 용어는 화합물 또는 구성요소가 이의 섭취 동안 온혈 동물, 특히 인간에 해롭지 않으며 농식품 조성물의 구성에서 다른 구성요소와 상용성이 있음을 의미한다.
본 발명은 하기 실시예를 참조하여 보다 잘 이해될 것이다. 이 실시예는 본 발명의 특정 실시태양을 나타내며, 본 발명의 범위를 어떤 식으로든 제한하지 않는다. 수치는 실험 결과를 설명하기 위해 사용된다.
실시예
A. 합성
I) 장비 및 방법
다양한 반응 생성물을 시그마-알드리치(Lyons, France)에서 구입하여 추가 정제없이 사용하였다. TLC는 머크 60F254 실리카 플레이트에서 수행되었으며, 에탄올 95% 속 포스포몰리브덴 산을 사용하여 나타나기 전에 자외선(λ = 254 nm)에서 관찰하고 최대 착색될 때까지 가열하였다. 분취용 컬럼 크로마토그래피는 키엘셀겔(Kielselgel) 60 실리카겔(40-63μm)(Merck) 상에서 크로마토 그래프 기술을 통해 또는 순상 Reveleris®(Grace) 플래시 크로마토그래피 시스템을 사용하여 수행하였다.
NMR 분석은 Bruker AC300, 400 또는 600 장치에서 수행되었다. 화학적 이동은 내부 기준으로 사용되는 중수소화 용매에 대한 백만 분율(ppm)로 표현된다. 커플링 상수(J)는 헤르츠(Hz)로 표현되며 신호 다중도는 s(singulet), d(doublet), t(triplet), q(quadruplet) 및 m(mutliplet)으로 상징된다. 질량 스펙트럼은 포지티브 전자 분무 이온화 모드(ESI+)에서 MSs에 대한 Shimadzu LCMS-2020 장치 및 HRMSs에 대한 Micromass Q-TOF Ultima 장치에서 얻었다.
II) 본 발명에 따른 화합물의 합성
1-출발 다이아민 합성 단위체의 합성
a) 아스파라긴산과 글루탐산으로부터 유도된 유도체(반응식 1)
Figure pct00042
반응식 1: 아스파르트산 및 글루탐산으로부터 유도된 합성 단위체의 개발
* 화합물 1(Bioconjug. Chem., 2007, 18, 1625-1636) 및 2(J. Med. Chem., 2009 52, 4650-4656):
아스파르트산으로 시작하여 메틸 에스터를 수득하는 것을 가능하게 하는 합성(반응식 1)의 첫 번째 단계는 보이치홉스키 등(Bioconjugate Chem., 2007, 18, 1625-1636)에 의해 개발되었고, 이 경우에는 글루탐산으로 치환되었다.
* 화합물 3(WO 2013/030193 A1) 및 4(J. Med. Chem., 2009 52, 4650-4656):
울리버 등(Tetrahedron Lett., 2010, 51, 4147-4149) 및 모레 등(J. Med. Chem., 2009, 52, 4650-4656)은 메틸 에스터 1 및 2의 아민 그룹에 대해 사용된 t-부틸옥시 카보닐기에 의한 보호 조건을 각각 기술하였다.
* 화합물 5 및 6(J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1999, 2057-2060):
-15℃에서 Ar하에서 교반한 무수 THF(150 mL) 속 화합물 3 또는 4(38.3 내지 40.4 mmol)의 용액에 무수 THF(50 mL)에 용해된 트라이에틸아민(1.1 eq) 및 에틸 클로로포메이트(1.4 eq)를 연속적으로 적하하여 첨가한다. -15℃에서 30분 동안 교반하고, 25% 암모니아 용액(최종 부피가 16 mL 속 2.5-2.7 eq)을 -15℃에서 교반하고, 실온에서 18시간 동안 교반한 반응 매질 속에 주입한다. 그런 후에, THF를 감압하에 증발시키고, 목적 생성물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출한다. 유기상을 유기상을 KHSO4 1N 용액, 그런 후에 NaHCO3 10% 및 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시켜 백색 분말 형태의 유도체 5 또는 6을 각각 수득한다(68 또는 77%).
화합물 5: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm)　6.59 (s, 1H);　6.20 (s, 1H);　5.79-5.76 (s, 1H);　4.50-4.49 (m, 1H); 3.65 (s, 3H); 2.91 (dd, J = 16.9 Hz and J' = 4.8 Hz, 1H); 2.66 (dd, J = 18.7 Hz and J' = 5.7 Hz, 1H); 1.40 (s, 9H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　173.2; 171.9; 155.1; 80.1; 51.7; 49.9; 35.6; 27.9 (3C).
MS (ESI +): m/z = [M + H] 247.1; [M + Na] 269.1; [M + MeCN + Na] 310.1.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C10H18N2O5Na [M + Na] =　269.1113; found = 269.1103.
* 화합물 7 및 8:
-10℃에서 교반한 THF(100 mL) 속 화합물 5 또는 6(26.4-28.8 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 무수물(1.5 eq) 및 트라이에틸아민(3 eq)을 첨가한다 (Synth. Commun. , 2009, 39, 395-406). 그런 후에, 반응 매질을 동일한 온도에서 2 내지 4시간 동안 교반한다. 그런 후에, THF를 감압하에 증발시키고, 목적 생성물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출한다. 유기상을 KHSO4 1N 용액, 그런 후에 NaHCO3 10% 및 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시키고 CH2Cl2/MeOH 98:2 혼합물을 사용하여 실리카 컬럼상에서 정제 후, 또는 CH2Cl2/ MeOH 100:0 내지 90:10 구배를 사용하여 순상 플래시 크로마토그래피에 의한 정제 후 각각 유도체 7 또는 8을 황색 고체 형태로 수득한다.
화합물 7: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ(ppm): 5.61 (s, 1H); 4.90 (m, 1H); 3.75 (s, 3H); 2.86-2.82 (m, 2H); 1.39 (s, 9H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz) δ(ppm): 159.0; 117.9; 80.3; 52.6; 37.4; 28.4 (3C).
MS (ESI +): m/z = [M + H] 229.2; [M + MeCN + Na] 292.1; [2M + Na + H] 480.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C10H16N2O4Na [M + Na] = 251.1008; found = 251.1000.
화합물 8: 1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ(ppm) 5.41 (s, 1H);　4.62 (m, 1H); 3.67 (s, 3H); 2.53-2.46 (m, 2H); 2.13-2.10 (m, 2H); 1.41 (s, 9H).
13C NMR (CDCl3, 150 MHz): δ(ppm)　172.6; 154.5; 118.8; 81.2; 52.0; 41.6; 29.6; 28.2 (3C); 28.2.
MS (ESI +): m/z =　[M + H] 243.1; [M + Na] 265.1; [M + K] 281.0; [M + MeCN + Na] 306.1.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C11H18N2O4Na [M + Na] =　265.1164; found = 265.1159.
* 화합물 9 및 10:
0℃에서 교반한 메탄올(150 mL) 속 화합물 7 또는 8(15.3 내지 19.8 mmol)의 용액에 다이-t-부틸 다이카보네이트(2 eq) 및 NiCl2.6H2O(0.1 eq)를 첨가한다. 그런 후에, 수소화 붕소 나트륨(8 eq)을 1 시간에 걸쳐 소량 주입하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한다(Tetrahedron, 2003, 59, 5417-5423). 다이에틸렌트라이아민(2 eq)을 첨가하고 30분 내지 1시간 동안 다시 교반한 후, 메탄올을 감압하에 증발시키고, 목적 생성물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출한다. 유기상을 NaHCO3의 포화 용액, 그런 후에 NaCl로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시킨다. 그런 후에, 수득된 중간체 화합물을 THF/H2O 1:1 혼합물(40 mL)에 용해시키고, LiOH 4N(4 eq)의 수용액을 1시간 내지 1시간 30분 동안 교반한 매질에 주입한다. THF를 감압하에 증발시킨 후, 혼합물을 다이에틸 에터 또는 에틸 아세테이트에 넣고, 유기상에 잔류하는 메틸 에스터 및 다이-t-부틸 다이카보네이트를 제거하기 위해 10%의 Na2CO3 용액으로 알칼리화시킨다. 그런 후에, 6N HCl 용액을 사용하여 수성상을 산성화시키고, 그런 후에 다이에틸 에터 또는 에틸 아세테이트를 사용하여 목적 생성물을 추출한다. NaCl의 포화 용액으로 세척한 후, 최종적으로 유기상을 Na2SO4 상에서 건조시키고 감압하에 증발시켜 백색 분말의 형태로 유도체 9 또는 10을 각각 수득한다(50 또는 67%).
화합물 9: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 8.70-8.61 (s, 1H);　5.54-5.41 (s, 1H);　5.15 (s, 1H); 4.00-3.98 (m, 1H); 3.37-3.25 (m, 2H); 2.65-2.59 (m, 2H); 1.43 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　174.7; 174.6; 146.2 (2C); 79.9; 79.8; 48.0; 43.4; 36.4; 28.1 (6C).
MS (ESI +): m/z =　[M + H] 319.2; [M + Na] 341.2; [M + MeCN + Na] 382.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C14H26N2O6Na [M + Na] =　341.1689; found = 341.1676.
화합물 10: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 8.35-8.28 (s, 1H); 5.06 (s, 1H); 4.99-4.96 (s, 1H); 3.72-3.66 (m, 1H); 3.18-3.16 (m, 2H); 2.43-2.37 (m, 2H); 1.87-1.76 (m, 2H); 1.43 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　177.4; 156.8; 156.5; 79.6 (2C); 51.0; 44.6; 30.5; 28.3 (6C), 27.7.
MS (ESI +): m/z =　[M + Na] 355.9; [M + MeCN + Na] 396.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C15H28N2O6Na [M + Na] =　355.1845; found = 355.1855.
b) 오르니틴 및 리신의 유도체(반응식 2)
Figure pct00043
반응식 2: 오르니틴과 리으로부터 유도된 합성 단위체의 개발
* 화합물 11 및 12(기성품)
* 화합물 13 (WO 07/011623 A1) 및 화합물 14 (WO 00/64865 A1):
-10℃에서 교반하에 놓인 THF(50-150 mL) 속 화합물 11 또는 12(1 eq) (13.7-24.5 mmol)의 용액에 N-메틸 모르폴린(1.1 eq) 및 에틸 클로로포메이트(1.1 eq)을 연속적으로 첨가한다. -10℃에서 20분 동안 교반한 후, 25% 암모니아 용액(최종 부피가 최종적으로 16 mL 속 2.5 eq)을 4시간 동안 저장한 반응 매질에 주입한다. 그런 후에, THF를 감압하에 증발시키고, 목적 생성물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출한다. 유기상을 KHSO4 1N 용액, 그런 후에 NaHCO3 10% 및 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시키고 AcOEt/사이클로헥세인 20:80 혼합물을 사용하여 재결정화한 후 백색 분말 형태의 유도체 13 또는 14를 각각 수득한다(91 또는 80%)
* 화합물 15 및 16(WO 2000/64865 A1):
-10℃에서 교반한 THF(60-70 mL) 속 화합물 13 또는 14(8.1-10 mmol)의 용액에 트라이플루오로 아세트산 무수물(1.5 eq) 및 피리딘(3 eq)을 첨가한다. 그런 후에 반응 매질을 동일한 온도에서 2시간 동안 교반한다. 그런 후에, THF를 감압하에 증발시키고, 목적 생성물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출한다. 유기상을 KHSO4 1N 용액, 그런 후에 NaHCO3 10% 및 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시키고 AcOEt/사이클로헥세인 20:80 혼합물을 사용하여 재결정화한 후 백색 분말 형태의 유도체 15 또는 16을 각각 수득한다(99 또는 95%)
화합물 15: 1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ(ppm) 7.36-7.29 (m, 5H);　5.11 (s, 1H); 5.08 (s, 2H); 4.96 (s, 1H); 4.55 (m, 1H); 3.24-3.23 (m, 2H); 1.81-1.79 (m, 2H); 1.68-1.65 (m, 2H); 1.44 (s, 9H).
13C NMR (CDCl3, 150 MHz): δ(ppm) 156.6 (2C); 136.4; 128.5 (2C); 128.2; 128.1 (2C); 118.7; 79.1; 66.8; 42.0; 40.0; 29.6; 28.2 (3C); 26.1.
MS (ESI +): m/z =　[M + Na] 370.2; [2M + Na] 717.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C18H25N3O4Na [M + Na] =　370.1743; found = 370.1749.
* 화합물 17 및 18:
0℃에서 교반한 메탄올(60 내지 80 mL) 속 화합물 15 또는 16(8 내지 10 mmol)의 용액에 다이-t-부틸 다이카보네이트(2 eq) 및 NiCl2.6H2O(0.1 eq)을 첨가한다. 그런 후에, 수소화 붕소 나트륨(7 eq)을 30분 내지 1시간에 걸쳐 소량 주입하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한다. 다이에틸렌트라이아민(1 eq)을 첨가하고 30분 내지 1시간 동안 다시 교반한 후, 메탄올을 감압하에 증발시키고, 목적 생성물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출한다. 유기상을 NaHCO3의 포화 용액, 그런 후에 NaCl로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시켜 각각 백색 분말의 형태로 유도체 17 또는 18을 수득한다(92 또는 89%).
화합물 17: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.34-7.31 (m, 5H);　5.06 (s, 2H);　5.06 (s, 1H); 4.94 (s, 1H); 4.80-4.77 (s, 1H); 3.58 (m, 1H); 3.21-3.12 (m, 4H); 1.56-1.52 (m, 2H); 1.45-1.44 (m, 2H); 1.43 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　172.0; 156.9 (2C); 136.9; 128.8 (2C); 127.4 (3C); 79.7 (2C); 67.0; 51.5; 44.8; 41.1; 30.4; 28.7 (6C); 26.5.
MS (ESI +): m/z =　[M + H] 452.1; [M + Na] 474.0.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C23H37N3O6Na [M + Na] =　474.2580; found = 474.2560.
화합물 18: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.34-7.29 (m, 5H); 5.07 (s, 2H); 4.98-4.91 (s, 2H); 4.72 (s, 1H); 3.56 (m, 1H); 3.17-3.13 (m, 4H); 1.46-1.41 (m, 6H); 1.41 (m, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm) 176.3; 155.8 (2C); 136.0; 127.8 (2C); 127.4　(3C); 78.7 (2C); 65.9; 50.5; 43.9; 39.8; 31.6; 29.1; 27.7 (6C); 22.1.
MS (ESI +): m/z =　[M + H] 466.3; [M + Na] 488.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C24H39N3O6Na [M + Na] =　488.2737; found = 488.2730.
* 화합물 19 및 20:
메탄올(10-40mL) 속 화합물 17 또는 18(1.1-5.7 mmol)의 용액에 Pd/C(10% m/m)를 첨가한다. 반응 매질을 진공하에 놓고 실온에서 30분 동안 교반하고, 6시간 동안 H2의 흐름하에서 유지한다. 그런 다음, 이를 종이 상에서 여과하고 메탄올을 감압하에 증발시켜 백색 분말의 형태의 유도체 19 또는 20을 각각 수득한다(92 또는 100%).
화합물 19: 1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ(ppm) 4.98 (s, 1H); 4.96 (s, 1H); 3.56 (m, 1H); 3.18-3.12 (m, 2H); 2.74 (s, 2H); 2.74 (m, 2H); 1.48-1.43 (m, 4H); 1.41 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 150 MHz): δ(ppm)　156.7; 156.3; 79.3 (2C); 51.2; 44.7; 41.6; 30.1; 29.3; 28.4 (6C).
MS (ESI +): m/z = [M + H]　318.2; [M + Na] 340.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C15H31N3O4 [M + H] =　318.2393; found = 318.2379.
화합물 20: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm)　4.99 (s, 2H); 4.76-4.73 (s, 2H); 3.55 (m, 1H); 3.10 (m, 2H); 2.61-2.59 (m, 2H); 1.57 (m, 2H); 1.37 (m, 22H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　170.8; 167.9; 78.9 (2C); 51.0; 44.4; 41.5; 33.1; 32.4; 28.0 (6C); 22.7.
MS (ESI +): m/z =　[M + H]　332.2; [M + Na] 354.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C16H33N3O4 [M + H] =　332.2549; found = 332.2564.
2 - R a 또는 NR' a R b 그룹의 결합
a) 슈도-펩타이드 결합
α-방법 A(반응식 3)
Figure pct00044
반응식 3: R' a 또는 NR' a R b 그룹의 슈도-펩타이드 결합(방법 A)
* 제 1 단계: 다이클로로메테인 또는 1,4-다이옥세인(10-25 mL) 속 산 작용기를 갖는 유도체 10, 33a-b, 41a-b(0.4 내지 3.0 mmol)의 용액에, N-하이드록시숙신이미드(1.1 내지 1.5 eq) 및 DCC(1 내지 1.2 eq)를 연속적으로 첨가한다. 반응 매질을 실온에서 24시간 동안 교반한 후, 진공하에 여과한다. 그런 후에, 여액을 감압하에 증발시켜 산의 활성 중간체를 수득한다.
* 제 2 단계: 아민 유도체 20, 26, 27, 35 또는 42(1 내지 1.7 eq)를 다이클로로메테인(8 내지 30 mL)에 용해시키고 실온에서 30분 동안 트라이에틸아민(0 내지 4 eq)과 반응시킨다. 산의 활성화 중간체(1 eq)를 실온에서 18시간 동안 교반한 반응 매질에 주입한다. 그런 후에, 유기상을 HCl 1N, 그런 후에 NaHCO3 및 포화 NaCl의 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 마지막으로 감압하에 증발시키고 실리카 컬럼(95:5에서 CH2Cl2/MeOH 98:2)상에서 정제 후 화합물 21a-b, 22a-b, 23c-f 또는 23j를 수득한다(표 2).
β-방법 B(반응식 4)
Figure pct00045
반응식 4: R' a 그룹의 슈도-펩타이드 결합(방법 B)
0℃에서 교반한 다이클로로메테인, DMF 또는 THF(25-100 mL) 속 산 작용기 33b, 41a-b를 갖는 유도체(1-6.5 mmol)의 용액에, 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)-카보다이이미드 클로르하이드레이트(1.2 eq), 1-하이드록시벤조트라이아졸 모노하이드레이트(1.1-1.2 eq)를 연속적으로 첨가한다. 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 아민 유도체 19, 20 또는 27(1 eq)을 트라이에틸아민(1.2 eq)과 실온에서 4 내지 18시간 동안 교반한 반응 매질에 주입한다. DMF 또는 THF를 증발시키고 잔류물을 다이클로로메테인에 넣은 후, 유기상을 NaCl의 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에서 증발시키고 실리카 컬럼(AcOEt/사이클로헥세인 60:40 또는 AcOEt/MeOH 80:20) 상에서 정제 후 화합물 23a-b, 23g-1 또는 23k(51 내지 86%)를 수득한다(표 2).
화합물 21-23
화합물 n 1 X Y' R' a R b 수율(%)(방법) 외관
21a 2 CO
Figure pct00046
Figure pct00047
 비 존재 55 (A) 백색 분말
21b 3 CH2 N
Figure pct00048
 H 71 (A) 백색 분말
22a 2 CO
Figure pct00049
Figure pct00050
 비 존재 81 (A) 무색 오일
22b 3 CH2 N
Figure pct00051
 H 58 (A) 노란색 분말
23a 2 CH2 N
Figure pct00052
 H 92 (B) 갈색 분말
23b 3 CH2 N
Figure pct00053
 H 86 (B) 갈색 분말
23c 2 CO N
Figure pct00054
 H 68 (A) 백색 분말
23d 1 CO
Figure pct00055
Figure pct00056
 비 존재 39 (A) 갈색 분말
23e 2 CO
Figure pct00057
Figure pct00058
 비 존재 56 (A) 백색 분말
23f 2 CO
Figure pct00059
Figure pct00060
 비 존재 25 (A) 백색 분말
23g 2 CH2 N
Figure pct00061
 H 65 (B) 백색 분말
23h 3 CH2 N
Figure pct00062
 H 62 (B) 백색 분말
23i 3 CH2 N
Figure pct00063
 H 69 (B) 반죽성 백색 고체
23j 2 CO N
Figure pct00064
 H 60 (A) 노란색 분말
23k 2 CO
Figure pct00065
Figure pct00066
 비 존재 51 (B) 백색 분말
화합물 21a: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm)　7.63 (d, J = 15.0 Hz, 1H); 7.09 (dd, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 1.8 Hz, 1H); 6.99 (d, J = 1.8 Hz, 1H); 6.91 (d, J = 8.1 Hz, 1H); 6.67 (d, J = 15.3 Hz, 1H); 6.08 (s, 1H); 4.93 (s, 2H); 3.92 (s, 3H); 3.73-3.50 (m, 9H); 3.20 (t, J = 5.4 Hz, 2H); 2.45-2.39 (m, 2H); 1.86-1.80 (m, 2H); 1.42 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　170.8; 170.5; 165.5 (2C); 147.2; 146.4; 143.4; 127.1; 121.7; 114.4; 113.3; 109.5; 77.5 (2C); 55.6; 51.0; 44.8; 44.2 (2C); 41.3 (2C); 29.1; 27.9 (6C); 27.5.
MS (ESI +): m/z =　[M + H]　577.3; [M + Na] 599.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C29H44N4O8 [M + Na] =　599.3057; found = 599.3043.
화합물 21b: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm)　7.52 (d, J = 15.6 Hz, 1H); 7.02 (dd, J 1 = 8.1 Hz, J 2 = 1.8 Hz, 1H); 6.96 (d, J = 1.8 Hz, 1H); 6.87 (d, J = 8.1 Hz, 1H); 6.31 (d, J = 15.6 Hz, 1H); 6.28 (s, 1H); 5.01-4.99 (s, 1H); 4.84-4.82 (s, 1H); 3.86 (s, 3H); 3.59-3.58 (m, 1H); 3.34-3.33 (m, 2H); 3.16 (m, 2H); 1.57-1.55 (m, 2H); 1.42 (m, 22H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　167.4 (2C); 157.3; 148.3; 147.8; 141.6; 128.4; 122.9; 119.5; 115.8; 110.8; 80.4 (2C); 56.8; 52.2; 45.3; 39.9; 33.1; 30.6; 29.3 (6C); 23.7.
MS (ESI +): m/z =　[M + H]　508.2; [M + Na] 530.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C26H41N3O7Na [M + Na] =　530.2842; found = 530.2856.
화합물 22a: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.40-7.33 (m, 12H); 7.28-7.26 (m, 3H); 6.65 (s, 2H); 5.12 (s, 4H); 5.10 (s, 2H); 3.65-3.19 (m, 11H); 2.42-2.39 (m, 2H); 1.90-1.84 (m, 2H); 1.70-1.64 (m, 2H); 1.43 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　171.0; 169.9; 156.5; 156.2; 152.5 (2C); 139.7; 137.3; 136.5 (2C); 129.9; 128.4 (6C); 128.0; 127.8 (2C); 127.1 (6C); 107.1 (2C); 79.2 (2C); 75.0; 71.0 (2C); 51.2; 45.0 (2C); 44.4; 41.5 (2C); 33.7; 29.3; 28.2 (6C).
MS (ESI +): m/z = [M + H]　823.3; [M + Na] 845.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C47H58N4O9Na [M + Na] =　845.4101; found = 845.4138.
화합물 22b: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.38-7.28 (m, 12H); 7.28-7.26 (m, 3H); 7.17 (s, 2H); 6.62 (s, 1H); 5.13 (s, 4H); 5.09 (s, 2H); 4.97 (s, 1H); 4.78-4.75 (s, 1H); 3.63-3.62 (m, 1H); 3.40 (m, 2H); 3.20-3.18 (m, 2H); 1.62 (m, 2H); 1.46-1.44 (m, 22H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　167.2; 156.2 (2C); 152.8 (2C); 141.1; 137.6; 136.9 (2C); 130.3; 128.6 (6C); 128.3; 128.1 (2C); 127.7 (6C); 107.0 (2C); 79.6 (2C); 75.3 (2C); 71.5; 51.4; 44.2; 39.5; 32.1; 29.2; 28.5 (6C); 22.8.
MS (ESI +): m/z = [M - 3Bn + 3H + Na] 506.3; [M + H + Na] 777.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C44H55N3O8Na [M + Na] =　776.3887; found = 776.3905.
화합물 23a: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.38-7.28 (m, 5H); 7.22-7.19 (s, 1H); 7.08 (dd, J 1 = 6.9 Hz, J 2 = 1.5 Hz, 1H); 6.70 (dd, J 1 = 7.5 Hz, J 2 = 1.2 Hz, 1H); 6.04 (t, J = 7.2 Hz, 1H); 5.07-5.01 (s, 2H); 4.93-4.90 (s, 1H); 4.28-4.18 (m, 2H); 3.51-3.47 (m, 1H); 3.05-3.03 (m, 4H); 2.63　(t, J = 6.0 Hz, 2H); 2.27-1.40 (s, 9H); 1.38 (s, 9H); 1.32-1.17 (m, 4H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm) 169.7 (2C); 157.7; 156.1; 148.1; 135.4; 130.0; 128.1 (2C); 127.7; 127.2 (2C); 115.1; 104.4; 78.7 (2C); 70.3; 50.5; 46.5; 44.6; 38.6; 34.5; 29.4; 27.9 (6C); 25.0.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　573.2; [M + Na] 595.1.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C30H44N4O7Na [M + Na] =　595.3108; found = 595.3098.
화합물 23b: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.36-7.25 (m, 5H); 7.06 (dd, J 1 = 6.9 Hz, J 2 = 1.5 Hz, 1H); 6.99 (s, 1H); 6.66 (dd, J 1 = 7.5 Hz, J 2 = 1.5 Hz, 1H); 6.00 (t, J = 7.2 Hz, 1H); 5.00 (s, 1H); 5.00 (s, 2H); 4.83-4.80 (s, 1H); 4.21 (t, J = 6.3 Hz, 2H); 3.50-3.48 (m, 1H); 3.07-3.00 (m, 4H); 2.65 (t, J = 6.0 Hz, 2H); 1.38 (s, 18H); 1.33-1.23 (m, 6H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　170.1 (2C); 158.1 (2C); 148.5; 135.9; 130.3; 128.5 (2C); 128.1; 127.4 (2C); 115.6; 104.7; 79.2 (2C); 70.6; 51.1; 47.0; 44.6; 38.8; 35.0; 32.0; 28.9; 28.3 (6C); 22.7.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　587.5; [M + Na] 609.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C31H46N4O7Na [M + Na] =　609.3264; found = 609.3254.
화합물 23c: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.40 (s, 1H); 7.38-7.25 (m, 5H); 6.95 (d, J = 6.0 Hz, 1H); 6.67 (d, J = 6.8 Hz, 1H); 6.10 (t, J = 7.2 Hz, 1H); 5.40-5.23 (s, 2H); 5.03 (s, 2H); 4.00 (t, J = 5.1 Hz, 2H); 3.61-3.59 (m, 1H); 3.11 (m, 4H); 2.33-2.26 (m, 2H); 1.87-1.61 (m, 4H); 1.35 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　172.3 (2C); 156.4; 156.2; 148.2; 135.6; 128.5; 128.2 (2C); 128.0; 127.8 (2C); 115.5; 105.8; 79.0 (2C); 70.4; 50.9; 46.8; 44.2; 35.7; 32.6; 30.3; 28.8; 28.0 (6C).
MS (ESI +): m/z = [M + H]　573.5; [M + Na] 595.4.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C30H44N4O7Na [M + Na] =　595.3108; found = 595.3078.
화합물 23d: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.32-7.18 (m, 5H); 7.01 (d, J = 6.1 Hz, 1H); 6.56 (d, J = 5.4 Hz, 1H); 5.92 (t, J = 6.9 Hz, 1H); 5.62-5.60 (s, 1H); 5.03-4.97 (s, 1H); 4.97 (s, 2H); 4.14 (t, J = 6.3 Hz, 2H); 3.81-3.79 (m, 1H); 3.54-3.32 (m, 8H); 3.23-3.13 (m, 2H); 2.79 (t, J = 6.0 Hz, 2H); 2.57-2.38 (m, 2H); 1.30 (s, 18H). 13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm) 168.7; 168.6; 157.8; 156.2; 155.2; 142.0; 135.6; 129.8; 128.1 (2C); 127.5; 126.8 (2C); 115.1; 104.1, 79.1 (2C); 70.2; 48.6; 46.7; 44.8 (2C); 43.1; 41.0 (2C); 34.7; 31.2; 27.9 (6C). MS (ESI +): m/z = [M + H] 642.3; [M + Na] 664.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C33H47N5O8Na [M + Na] =　664.3322; found = 664.3322.
화합물 23e: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 7.38 (d, J = 7.1 Hz, 2H); 7.32 (t, J = 7.5 Hz, 2H); 7.26 (t, J = 7.8 Hz, 1H); 7.27 (m, 1H); 6.65 (d, J = 7.5 Hz, 1H); 6.05 (t, J = 7.0 Hz, 1H); 5.06 (s, 2H); 5.04-5.02 (s, 2H); 4.76-4.69 (m, 2H); 3.75-3.41 (m, 9H); 3.17-3.14 (m, 2H); 2.40-2.34 (m, 2H); 1.85-1.63 (m, 2H); 1.39 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm) 171.3; 165.6 (2C); 158.0; 156.1; 148.3; 135.9; 129.6; 128.5 (2C); 127.9; 127.2 (2C); 115.9; 104.8; 79.3 (2C); 70.7; 51.4; 49.2; 45.2; 44.8; 44.4; 42.0; 41.4; 29.7; 28.3　(6C); 27.8.
MS (ESI +): m/z = [M - Boc + 2H] 542.3; [M + H] 642.3; [M + Na] 664.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C33H47N5O8Na [M + Na] =　664.3322; found = 664.3324.
화합물 23f: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.42 (d, J = 6.6 Hz, 2H); 7.37-7.28 (m, 3H); 7.11 (d, J = 5.9 Hz, 1H); 6.65 (d, J = 6.2 Hz, 1H); 6.02 (t, J = 7.2 Hz, 1H); 5.08 (s, 2H); 4.94-4.93 (s, 2H); 4.24 (t, J = 6.3 Hz, 2H); 3.54-3.32 (m, 9H); 3.17 (t, J = 5.4 Hz, 2H); 2.89 (t, J = 6.3 Hz, 2H); 2.41-2.34 (m, 2H); 1.94-1.82 (m, 2H); 1.40 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm) 171.4 (2C); 158.6; 156.7; 149.1; 140.1; 138.2; 130.7; 128.9 (2C); 128.4; 127.7 (2C); 115.9; 104.9; 87.1; 87.0; 71.1; 51.8; 47.6; 45.9 (2C); 45.0; 41.9 (2C); 32.0; 30.1; 28.7 (6C); 28.3.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 656.3; [M + Na] 678.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C34H49N5O8Na [M + Na] =　678.3479; found = 678.3474.
화합물 23g: 1H NMR (CD3OD, 300 MHz): δ(ppm) 7.61 (d, J = 7.5 Hz, 1H); 7.41-7.31 (m, 5H); 6.46 (d, J = 7.5 Hz, 1H); 5.05 (s, 2H); 4.68 (s, 2H); 3.58-3.54 (m, 1H); 3.23-3.18 (m, 2H); 3.12-2.97 (m, 2H); 2.07 (s, 3H); 1.58-1.30 (m, 22H).
13C NMR (CD3OD, 75 MHz): δ(ppm) 175.6; 168.5; 163.7; 158.7; 147.3; 145.9; 143.0; 138.8; 130.4 (2C); 129.8 (2C); 129.6; 117.4; 80.4; 80.3; 75.0; 57.2; 52.2; 45.8; 40.9; 31.2; 29.1 (6C); 27.2; 13.3.
MS (ESI +): m/z = [M + Na] 595.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C30H44N4O7Na [M + Na] =　595.3108; found = 595.3121.
화합물 23h: 1H NMR (CD3OD, 300 MHz): δ(ppm) 7.62 (d, J = 7.2 Hz, 1H); 7.42-7.32 (m, 5H); 6.47 (d, J = 7.2 Hz, 1H); 5.06 (s, 2H); 4.68 (s, 2H); 3.56-3.54 (m, 1H); 3.23-3.18 (m, 2H); 3.14-2.98 (m, 2H); 2.08 (s, 3H); 1.49-1.35 (m, 24H).
13C NMR (CD3OD, 75 MHz): δ(ppm) 175.3; 168.2; 161.1; 158.7; 147.0; 145.6; 142.7; 138.5; 130.2 (2C); 129.5 (2C); 129.3; 117.1; 80.1; 80.0; 74.7; 56.9; 52.1; 45.5; 40.6; 33.1; 30.1; 28.9 (6C); 24.4; 13.0.
MS (ESI +): m/z = [M + Na] 609.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C31H46N4O7Na [M + Na] =　609.3264; found = 609.3271.
화합물 23i: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 7.70 (s, 1H); 7.37-7.30 (m, 6H); 6.28 (d, J = 5.6 Hz, 1H); 5.40 (s, 1H); 5.18 (s, 1H); 5.06 (s, 2H); 4.10-4.06 (m, 2H); 3.51-3.49 (m, 1H); 3.24-3.04 (m, 4H); 2.65-2.50 (m, 4H); 2.12 (s, 3H); 1.44-1.37 (m, 4H); 1.37 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm) 173.6; 169.1; 157.0; 156.4; 145.8; 141.6; 139.2; 137.2; 128.9; 128.4 (2C); 128.3 (2C); 116.9; 79.2 (2C); 72.9; 52.3; 50.1; 44.4; 39.1; 36.2; 35.0; 31.9; 28.4 (6C); 22.7; 12.4.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 601.3; [M + Na] 623.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C32H49N4O7 [M + H] =　601.3601; found = 601.3621.
화합물 23j: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.58-7.55 (s, 1H); 7.37-7.24 (m, 6H); 6.32 (d, J = 5.6 Hz, 1H); 5.47-5.45 (s, 2H); 5.08 (s, 2H); 3.80-3.77 (m, 2H); 3.54-3.53 (m, 1H); 3.24-3.10 (m, 4H); 2.22 (t, J = 4.9 Hz, 2H); 2.03 (s, 3H); 1.93-1.70 (m, 4H); 1.36 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm) 173.8; 173.3; 156.9 (2C); 146.3; 141.4; 139.0; 137.4; 129.0 (2C); 128.4 (2C); 128.2; 117.1; 79.6 (2C); 73.1; 51.9; 51.3; 44.4; 36.2; 32.9; 30.7; 29.2; 28.4 (6C), 12.4.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 587.3; [M + Na] 609.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C31H46N4O7Na [M + Na] =　609.3264; found = 609.3265.
화합물 23k: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 7.35-7.28 (m, 6H); 6.42 (d, J = 7.2 Hz, 1H); 5.17 (s, 2H); 5.03 (s, 2H); 4.83 (m, 2H); 3.60-3.42 (m, 9H); 3.19 (m, 2H); 2.43-2.37 (m, 2H); 2.04 (s, 3H); 1.88-1.67 (m, 2H); 1.43 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm) 173.1; 171.4; 164.5; 157.0; 156.3; 145.6; 144.1; 140.8; 137.6; 129.0 (2C); 128.7 (2C); 128.4; 116.3; 79.6 (2C); 73.8; 55.3; 51.6; 45.1; 44.7; 42.5; 41.7; 41.4; 29.7; 28.6 (6C); 28.0; 13.0.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 656.4; [M + Na] 678.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C34H49N5O8Na [M + Na] =　678.3479; found = 678.3464.
γ-아스파르트산과 글루탐산에서 나오는 합성 단위체와 피페라진의 결합(반응식 5)
Figure pct00067
반응식 5: 아스파르트산 및 글루탐산의 유도체와 피페라진의 결합
벤질 피페라진-1-카복실레이트는 t-부틸 4-벤질옥시카보닐피페라진-1-카복실 레이트에 의해 데너 등(WO 1998/04537 A1)에 의해 개발된 방법을 적용하여 합성 하였다. 이와 같이, t-부틸 피페라진-1-카복실레이트는 모우사 등(J. Med. Chem., 2010, 53, 6228-6239)에 의해 기술된 절차에 따라 수득한다. 그런 후에, 0℃에서 10분 동안 다이클로로메테인(50 mL) 속 트라이에틸아민(1.2 eq)과 반응시킨다 (18.8 mmol). 다이클로로메테인(30 mL) 속 벤질 클로로포메이트(1.2 eq)의 용액을 매질에 주입하고 실온에서 18시간 동안 교반한다. 다이클로로메테인을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트에서 넣는다. 유기상을 KHSO4 1M 및 NaHCO3 5%의 용액, 그런 후에 NaCl의 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 최종적으로 감압하에 증발시키고 실리카 컬럼(CH2Cl2/MeOH 99:1)상에서 정제 후 백색 분말의 형태의 t-부틸 4-벤질옥시카보닐피페라진-1-카복실레이트를 수득한다(87%). 이 중간체(10.9mmol)를 1,4-다이옥세인(20 eq) 속 기성품 4N HCl 용액의 존재하에서 1,4-다이옥세인(15mL)에 최종적으로 용해시킨다. 그런 후에, 반응 매질을 실온에서 45분 동안 교반한다. 1,4-다이옥세인을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에터 속에서 분쇄하여 진공하에서 여과 후 백색 분말 형태의 벤질 피페라진-1-카복실레이트를 수득한다(92%).
* 화합물 24 및 25:
제 1 단계: 다이클로로메테인(25-30 mL) 속 화합물 9 또는 10(3.1-4.5 mmol)의 용액에 N-하이드록시숙신이미드(1.2-1.5 eq) 및 DCC(1.1-1.2 eq)를 연속적으로 첨가한다. 반응 매질을 실온에서 1시간30분 내지 24시간 동안 교반하에 유지시킨 다음, 진공하에 여과한다. 그런 후에, 여과액을 감압하에 증발시켜 산의 활성 중간체를 수득한다.
제 2 단계: 벤질 피페라진-1-카복실레이트(1.2 eq)를 다이클로로메테인(40 mL)에 용해시키고 실온에서 30분 동안 트라이에틸아민(3 eq)과 반응시킨다. 산의 활성 중간체(1 eq)를 반응 매질에 주입한 다음 실온에서 15 내지 24시간 동안 교반한다. 그런 후에, 유기상을 1N HCl 용액, 이어서 NaHCO3 및 NaCl의 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시키고 실리카 컬럼(CH2Cl2/MeOH 98:2) 상에서 정제 후 화합물 24 또는 25를 백색 분말 형태로 수득 한다(77 또는 97%).
화합물 24: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm)　7.33 (m, 5H); 5.69 (s, 1H); 5.12 (s, 2H); 5.03 (s, 1H); 3.89 (m, 1H); 3.62-3.45 (m, 10H); 2.65-2.41 (m, 2H); 1.40 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　173.0; 163.7; 161.1; 147.7; 132.4; 128.9 (2C); 128.5; 128.3 (2C); 81.2 (2C); 67.8; 49.7; 45.9; 44.1 (2C); 41.8 (2C); 35.3; 28.7 (6C).
MS (ESI +): m/z = [M + H]　521.3; [M + Na] 543.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C26H40N4O7Na [M + Na] =　543.2795; found = 543.2794.
화합물 25: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm)　7.36-7.32 (m, 5H); 5.13 (s, 2H); 4.92 (s, 2H); 3.60-3.44 (m, 9H); 3.20-3.16 (m, 2H); 2.41-2.38 (m, 2H); 1.83-1.81 (m, 2H); 1.40 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　170.8; 164.1; 163.8; 154.7; 136.0; 128.2 (2C); 127.8; 127.6 (2C); 79.0 (2C); 67.1; 51.1; 44.8 (2C); 44.3; 43.4; 41.1 (2C); 29.2; 28.0 (6C); 27.5.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　535.3; [M + Na] 557.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C27H42N4O7Na [M + Na] =　557.2951; found = 557.2945.
* 화합물 26 및 27:
메탄올(8-30mL) 속 화합물 24 또는 25(0.7-2.7 mmol)의 용액에 Pd/C(10% m/m)를 첨가한다. 반응 매질을 진공하에 놓고 실온에서 30분 동안 교반하고, 6시간 동안 H2의 흐름하에서 유지한다. 그런 다음, 이를 종이 상에서 여과하고 메탄올을 감압하에 증발시켜 백색 분말의 형태의 유도체 26 또는 27을 각각 수득한다(100 또는 96%).
화합물 26: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.33 (s, 1H); 5.69-5.66 (s, 1H); 5.12 (s, 1H); 3.89-3.88 (m, 1H); 3.66-3.23 (m, 8H); 2.93-2.83 (m, 2H); 2.67-2.43 (m, 2H); 1.41 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　167.1; 157.5; 155.4; 79.1 (2C); 48.6; 45.0; 44.6; 43.1; 40.9; 34.8; 27.9 (6C).
MS (ESI +): m/z = [M + H]　387.3; [M + Na] 409.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C18H34N4O5Na [M + Na] =　409.2427; found = 409.2418.
화합물 27: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 5.13-5.09 (s, 2H); 3.56-3.52 (m, 3H); 3.39-3.36 (m, 2H); 3.15-3.12 (m, 2H); 2.80-2.76 (m, 4H); 2.37-2.31 (m, 2H); 1.81-1.63 (m, 2H); 1.37 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　170.8; 156.5; 156.2; 80.3; 79.1; 51.3; 46.0; 45.3; 44.5; 42.6; 41.5; 29.4; 28.2 (6C); 27.7.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　401.4; [M + Na] 423.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C19H36N4O5Na [M + Na] =　423.2583; found = 423.2573.
b) 페룰산 또는 갈산으로부터 유도된 그룹을 갖는 화합물
α-갈산에서 나오는 합성 단위체 R' a -OH의 제조
갈산으로부터 페놀기의 3중 O-벤질화는 (Carbohydr. Res., 2007, 342, 1510-1513)에 기술되어 있다.
β-갈산으로부터 오는 R' a 그룹의 탈벤질화(반응식 6)
Figure pct00068
반응식 6: 갈산으로부터 유래된 R' a 그룹의 탈벤질화
메탄올(20 mL) 속 화합물 22a 또는 22b(0.5 mmol)의 현탁액에 Pd/C(10% m/m)를 첨가한다. 반응 매질을 진공하에 놓고 실온에서 30분 동안 교반한 다음, H2의 흐름하에 6시간 동안 유지시킨다. 그런 후에, 이를 종이 상에서 여과하고, 메탄올을 감압하에 증발시켜 백색 분말 또는 오렌지색 오일의 형태로 유도체 28a 또는 28b(출발 물질과 반대로 메탄올에 가용성)를 각각 수득한다(99 또는 100%).
화합물 28a: 1H NMR (CD3OD, 400 MHz): δ(ppm)　6.45 (s, 2H); 3.59-3.43 (m, 8H); 3.32-3.31 (m, 1H); 3.06-3.01 (m, 2H); 2.47-2.45 (m, 2H); 2.01-1.70 (m, 2H); 1.43 (s, 18H).
13C NMR (CD3OD, 100 MHz): δ(ppm) 172.4; 171.9; 157.3 (2C); 157.0; 145.8 (2C); 135.3; 125.0; 106.3 (2C); 78.7 (2C); 50.5; 45.1 (2C); 43.8; 42.3 (2C); 33.5; 29.1; 27.4 (6C).
MS (ESI +): m/z = [M + H]　553.1; [M + Na] 575.1.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C26H40N4O9Na [M + Na] =　575.2693; found = 575.2719.
화합물 28b: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm)　7.25 (s, 3H); 6.84 (s, 2H); 5.43 (s, 1H); 5.24-5.21 (s, 2H); 3.15-3.04 (m, 5H); 1.41-1.35 (m, 22H); 1.20-1.16 (m, 2H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　168.4; 156.7; 156.4; 144.3 (2C); 135.7; 124.6; 106.9 (2C); 79.1 (2C); 50.7; 44.2; 39.5; 31.9; 29.2; 27.9 (6C); 22.6.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　484.2; [M + Na] 506.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C23H37N3O8Na [M + Na] =　506.2478; found = 506.2501.
γ-다이아민 그룹의 최종 탈보호(반응식 7)
Figure pct00069
반응식 7: 다이아민 그룹의 최종 탈보호
화합물 21a, 21b, 28a 또는 28b(0.3-0.4 mmol)를 1,4-다이옥세인(20 eq) 속 HCl 4N의 기성품 용액의 존재하에 1,4-다이옥세인(7-12 mL)에 용해시킨다. 그런 후에, 반응 매질을 실온에서 45분 동안 6시간 동안 교반한다. 1,4-다이옥세인을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에터에 분쇄한다. 진공하에 증발 후(고 흡습성 생성물), 수득된 침전물을 동결 건조하여 노란색 또는 베이지색 분말의 형태의 유도체 29a, 29b, 30a 또는 30b를 각각 수득한다(75, 66, 100 또는 57%).
화합물 29a: 1H NMR (d6-DMSO, 300 MHz): δ(ppm)　9.52 (s, 1H); 8.57 (s, 2H); 8.46 (s, 2H); 7.44 (d, J = 15.0 Hz, 1H); 7.33 (s, 1H); 7.10 (m, 2H); 6.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H); 3.83 (s, 3H); 3.71-3.45 (m, 9H); 3.12 (m, 2H); 2.60-2.58 (m, 2H); 1.89 (m, 2H).
13C NMR (d6-DMSO, 75 MHz): δ(ppm)　169.7; 165.0; 162.9; 148.5; 142.4; 126.4; 122.5; 115.3; 114.2; 111.2; 55.7; 48.7; 39.7 (5C); 28.1; 25.3.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　377.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C19H29N4O4 [M + H] =　377.2189; found = 377.2198.
화합물 29b: 1H NMR (d6-DMSO, 300 MHz): δ(ppm)　8.49 (s, 4H); 8.11-8.09 (s, 1H); 7.30 (d, J = 15.9 Hz, 1H); 7.11 (d, J = 1.8 Hz, 1H); 6.97 (dd, J 1 = 8.4 Hz and J 2 = 1.8 Hz, 1H); 6.79 (d, J = 8.1 Hz, 1H); 6.49 (d, J = 15.9 Hz, 1H); 3.78 (s, 3H); 3.42-3.39 (m, 1H); 3.17-3.05 (m, 4H); 1.64-1.62 (m, 2H); 1.46-1.40 (m, 4H).
13C NMR (d6-DMSO, 75 MHz): δ(ppm)　165.3; 148.2; 147.7; 138.7; 126.3; 121.4; 119.0; 115.6; 110.7; 55.4; 48.9; 38.1 (2C); 29.5; 28.6; 21.7.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　308.1.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C16H26N3O3 [M + H] =　308.1974; found = 308.1986.
화합물 30a: 1H NMR (d6-DMSO, 300 MHz): δ(ppm)　8.65 (s, 2H); 8.55 (s, 2H); 6.37 (s, 2H); 3.49-3.48 (m, 9H); 3.13 (m, 2H); 2.59 (t, J = 4.8 Hz, 2H); 1.90-1.88 (m, 2H).
13C NMR (d6-DMSO, 75 MHz): δ(ppm)　169.5; 169.3; 145.3 (2C); 134.5; 124.9; 106.3 (2C); 48.5; 40.0 (2C); 39.7; 38.3; 27.8; 25.0.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　352.9.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C16H25N4O5 [M + H] =　353.1825; found = 353.1813.
화합물 30b: 1H NMR (d6-DMSO, 300 MHz): δ(ppm)　8.47 (s, 4H); 8.11 (s, 1H); 6.82 (s, 2H); 3.24-3.07 (m, 5H); 1.65-1.35 (m, 6H).
13C NMR (d6-DMSO, 75 MHz): δ(ppm)　166.5; 145.4; 136.1; 125.0; 106.8 (2C); 49.0; 40.4 (2C); 29.6; 28.8; 21.8.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　284.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C13H22N3O4 [M + H] =　284.1610; found = 284.1612.
c) 하이드록시 피리디논 그룹을 갖는 화합물 22
α-합성 단위체 R' a -OH 및 R' a -NHR b 의 제조
* 3-벤질옥시피리딘-2-온 유형의 합성 단위체 R' a -OH 및 R' a -NHR b 의 제조(반응식 7):
Figure pct00070
반응식 7: 3-벤질옥시피리딘-2-온 유형의 합성 단위체 R' a -OH 및 R' a -NHR b 의 제조
* 화합물 31( Synthesis , 2011, 57-64):
아세토나이트릴(120 mL) 속 2,3-다이하이드록시피리딘(135 mmol)의 용액에 플루오르화 세슘(0.1 eq) 및 아크릴로나이트릴(3 eq)을 첨가한다 (Tetrahedron Lett., 2002, 43, 7379-7383; Synthesis, 2011, 57-64). 반응 매질을 환류하에 16시간 동안 가열한다. 그런 후에, 아세토나이트릴을 감압하에 증발시키고, 목적 생성물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출한다. 유기상을 Na2CO3 10% 용액, 이어서 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시키고 AcOEt/사이클로헥세인 50:50 혼합물에서 재결정 후 백색 분말 형태의 유도체 31을 수득한다(93%).
* 화합물 32( Synthesis , 2011, 57-64):
유도체 32는 2011년에 아루무감 등(Synthesis, 2011, 57-64)에 의해 기술된 합성에 따라 제조하였다.
* 화합물 33a(J. Med. Chem., 1990, 33, 1749-1755, Molecules, 2015, 20, 19393-19405):
제 1 단계: 2,3-다이하이드록시피리딘(50 mmol)을 에틸 브로모아세테이트(5 eq)에 첨가한다. 그런 후에, 반응 매질을 아르곤하에서 48시간 동안 환류하에 가열하고, 에틸 아세테이트에서 침전시키고 진공하에 여과시킨 후 원하는 생성물을 최종적으로 수득한다.
제 2 단계: MeOH/H2O 9:1 혼합물(150 mL) 속 상기 중간체(18 mmol)의 용액에 NaOH 10.5N(2 eq)을 첨가한다. 그런 후에, 반응 매질을 환류하에 30분 동안 가열한다. 그런 후에 벤질 클로라이드(2 eq)를 실온에서 30분에 걸쳐 적하하여 주입하고, 혼합물을 18시간 동안 환류하에 다시 가열한다. 진공하에서 여과하고 감압하에 메탄올을 증발시킨 후, 수성상을 다이클로로메테인을 사용하여 추출한 다음, 6N HCl을 사용하여 산성화시킨다. 최종 생성물을 다이클로로메테인을 사용하여 최종 추출한다. 유기상을 NaCl의 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 감압하에 증발시켜 백색 분말의 형태로 유도체 33a를 수득한다(36%).
* 화합물 33b:
물(20 mL/mmol) 속 화합물 32(1 eq)의 용액에 수산화 나트륨(12.5 eq)을 첨가한다. 그런 후에, 반응 매질을 환류하에 1 시간 동안 가열한 다음, 에틸 아세테이트를 사용하여 추출하여 나머지 원료를 제거한다. 그런 후에, 6N HCl 용액을 사용하여 수성상을 산성화시키고, 에틸 아세테이트를 사용하여 목적 화합물을 추출 한다. 유기상을 포화 NaCl 용액을 사용하여 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시켜 노란색 분말의 형태로 유도체 33을 수득한다(65%).
화합물 33b: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 7.43-7.32 (m, 5H); 7.25 (dd, J 1 = 6.9 Hz and J 2 = 1.5 Hz, 1H); 6.87 (dd, J 1 = 7.3 Hz and J 2 = 1.8 Hz, 1H); 6.09 (t, J = 7.2 Hz, 1H); 4.99 (s, 2H); 4.07 (t, J = 6.9 Hz, 2H); 2.65 (t, J = 6.9 Hz, 2H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　171.9; 156.5; 147.5; 136.2; 130.1; 128.0 (2C); 127.5; 127.4 (2C); 115.1; 103.4; 69.4; 45.0; 32.5.
MS (ESI +): m/z =　[M + H] 273.8.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C15H15NO4Na [M + Na] =　296.0899; found = 296.0893.
* 화합물 34:
0℃에서 교반하에 놓인 메탄올(80 mL) 속 화합물 32(7.9 mmol)의 용액에 다이-t-뷰틸 다이카보네이트(2 eq) 및 NiCl2.6H2O(0.1 eq)를 첨가한다. 그런 후에, 수소화 붕소 나트륨(7 eq)을 30분에 걸쳐 소량 주입하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한다. 다이에틸렌트라이아민(1 eq)을 첨가하고 1시간 동안 다시 교반한 후, 메탄올을 감압하에 증발시키고, 목적 생성물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출한다. 유기상을 NaHCO3의 포화 용액, 이어서 NaCl로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시켜 백색 분말의 형태로 유도체 34를 수득한다(84%).
화합물 34: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 7.33 (d, J = 7.6 Hz, 2H); 7.25 (t, J = 6.8 Hz, 2H); 7.19 (t, J = 6.8 Hz, 1H); 6.80 (d, J = 6.3 Hz, 1H); 6.55 (d, J = 7.4 Hz, 1H); 5.96 (t, J = 7.3 Hz, 1H); 5.49 (s, 1H); 5.01 (s, 2H); 3.95 (t, J = 6.3 Hz, 2H); 3.01-2.96 (m, 2H); 1.81-1.75 (m, 2H); 1.33 (s, 9H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　158.3; 155.9; 148.5; 135.8; 128.4; 128.3 (2C); 127.8; 127.1 (2C); 115.1; 105.2; 78.6; 70.5; 46.0; 36.3; 29.7; 28.3 (3C).
MS (ESI +): m/z =　[M + H]　358.9; [M + Na] 380.9.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C20H26N2O4Na [M + Na] =　381.1790; found = 381.1782.
* 화합물 35:
화합물 34(2.4mmol)를 1,4-다이옥세인(20 eq) 속 HCl 4N의 기성품 용액의 존재하에 1,4-다이옥세인(10mL)에 용해킨다. 그런 후에, 반응 매질을 실온에서 18시간 동안 교반한다. 1,4-다이옥세인을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에터에서 분쇄하고 진공하에서 여과 후, 베이지색 분말의 형태로 유도체 35를 수득한다(100%).
화합물 35: 1H NMR (d6-DMSO, 300 MHz): δ(ppm) 8.06-8.05 (s, 2H); 7.45-7.33 (m, 6H); 6.93 (d, J = 7.5 Hz, 1H); 6.18 (t, J = 7.2 Hz, 1H); 5.01 (s, 2H); 4.00 (t, J = 6.9 Hz, 2H); 2.75 (t, J = 7.2 Hz, 2H); 1.98-1.93 (m, 2H).
13C NMR (d6-DMSO, 75 MHz): δ(ppm)　175.1; 147.6; 136.1; 129.5; 128.0 (2C); 127.5 (3C); 115.3; 104.1; 69.4; 45.4; 35.9; 26.5.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　259.1; [M + H + MeCN] 300.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C15H19N2O2 [M + H] =　259.1436; found = 259.1447.
°화합물 39:
DMF(3 mL) 속 화합물 34(1.5 mmol)의 용액에 수소화나트륨(1.4 eq)을 첨가한다. 실온에서 10분간 교반한 후, 메틸 요오드(1.2 eq)를 주입하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한다(Org. Lett., 2014, 16, 3196-3199). 감압하에 DMF를 증발시킨 후, 잔류물을 에틸 아세테이트에 넣는다. 유기상을 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에서 증발시키고 실리카 칼럼(AcOEt/MeOH 50:50) 상에서 정제 후 황색 오일의 형태로 유도체 39를 수득한다(91%).
화합물 39: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 7.40 (d, J = 8.0 Hz, 2H); 7.31 (t, J = 8.5 Hz, 2H); 7.26 (t, J = 7.2 Hz, 1H); 6.93-6.86 (m, 1H); 6.61 (d, J 1 = 7.4 Hz and J 2 = 1.6 Hz, 1H); 5.99 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 5.07 (s, 2H); 3.92 (t, J = 7.2 Hz, 2H); 3.27 (m, 2H); 2.82 (s, 3H); 1.96 (t, J = 7.2 Hz, 2H); 1.41 (s, 9H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　158.2; 149.0; 136.4; 128.6 (2C); 128.0; 127.4 (2C); 115.5; 104.8; 79.6; 70.8; 47.8; 45.8; 34.1; 28.5 (3C); 27.1.
MS (ESI +): m/z =　[M + H]　373.2; [M + Na] 395.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C21H29N2O4 [M + H] =　373.2127; found = 373.2137.
* 3-벤질옥시-2-메틸피리딘-4-온 형태의 합성 단위체 R' a -OH 및 R' a -NHR b 의 제조(반응식 8):
Figure pct00071
반응식 8: 3-벤질옥시-2-메틸피리딘-4-온 형태의 합성 단위체 R' a -OH 및 R' a -NHR b 의 제조
°화합물 40(J. Med. Chem., 1998, 41, 3347-3359, J. Inorg. Biochem., 2000, 78, 303-311):
메탄올(80 mL) 속 말톨(79.3 mmol)의 용액에 10.5 N NaOH 용액(1.1 eq)을 첨가한다. 그런 후에, 반응 매질을 환류하에 30분 동안 가열한다. 벤질 클로라이드 (1.2 eq)를 실온에서 30분에 걸쳐 적하하여 주입하고 혼합물을 환류하에 18시간 동안 다시 가열한다. 진공 여과 후, 메탄올을 감압하에 증발시키고 잔류물을 물에 넣고, 다이클로로메테인을 사용하여 목적 생성물을 추출한다. 유기상을 5% NaOH 용액, 이어서 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시켜 유도체 40을 황색 오일의 형태로 수득한다(88%).
°화합물 41a(J. Heterocyclic Chem., 1994, 31, 947-56) 및 41b (J. Inorg. Biochem., 2000, 78, 303-311):
EtOH/H2O 1:1 혼합물 (100 mL) 중 NaOH (3 당량)의 용액에 화합물 40(18.5 mmol) 및 글리시네이트 나트륨 또는 β-알라닌(2 eq)을 첨가한다(Bioconjugate Chem. 2005, 16 , 1597-1609). 그런 후에, 반응 매질을 환류하에 18시간 동안 가열 한다. 진공하에서 에탄올의 증발 후, 잔류물을 물에 넣고 에틸 아세테이트를 사용하여 추출하여 잔류하는 원료를 제거한다. 그런 후에 수성상을 감압하에 농축시키고 HCl 6N의 용액을 사용하여 산성화시키고 침전, 진공 여과 및 물에 의한 세척 후 백색 분말의 형태로 최종적으로 유도체 41a 또는 41b를 수득한다(48 또는 45%).
°화합물 42(Dalton Trans., 2004, 3772-3781):
EtOH/H2O 1:1 혼합물(20 mL) 속 NaOH(0.5 eq)의 용액에 화합물 40(18.5 mmol) 및 1,3-다이아미노프로페인(1.1 eq)을 첨가한다. 그런 후에, 반응 매질을 환류하에 18시간 동안 가열한다. 진공하에서 에탄올의 증발 후, 수성상을 6N HCl을 사용하여 산성화시키고 에틸 아세테이트를 사용하여 추출하여 잔류하는 원료를 제거한다. 수성상을 NaOH 6N 용액을 사용하여 중화시키고, 에틸 아세테이트를 사용하여 목적 생성물을 추출한다. 유기상을 NaCl의 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 최종적으로 감압하에 증발시킨다. 1,4-다이옥세인(5 eq) 속 HCl 4N의 기성품 용액의 존재하에 1,4-다이옥세인(20 mL)에 실온에서 2시간 동안 중간 화합물을 교반하고 감압하에 증발시킨 후, 수득된 잔류물을 에터에서 분쇄하여 유도체 42를 백색 분말의 형태로 수득한다(48%).
β-"링커(linker)" 상에서 수행되는 다양한 약리작용
* 화합물 23f의 카보닐기의 환원(반응식 9):
Figure pct00072
반응식 9: 화합물 23f의 카보닐기의 환원
THF(100 mL) 속 화합물 23f(1 mmol)의 용액에 THF(5 eq) 속 보레인/다이메틸 설파이드 2M 착물 용액을 적하하여 첨가한다(J. Med. Chem., 2005, 48, 3891- 3902). 그런 후에, 반응 매질을 환류하에 2시간 동안 가열한다. 냉각 후, 보레인을 MeOH를 사용하여 제거하고 혼합물을 환류하에 18시간 동안 다시 가열한다. 진공하에서 MeOH의 증발 후, 잔류물을 EtOH/NaOH 1N 5:1 혼합물에 넣고 2시간 동안 환류한다. 에탄올 증발 후 에틸 아세테이트를 사용하여 수성상을 최종 추출한다. 유기상을 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압하에서 증발시키고 실리카 컬럼(AcOEt/MeOH 50:1) 상에서 정제 후 무색 오일 형태의 유도체 43를 수득한다(44%).
화합물 43: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 7.40 (d, J = 7.3 Hz, 2H); 7.32 (t, J = 7.2 Hz, 2H); 7.26 (t, J = 7.8 Hz, 1H); 6.93 (d, J = 6.8 Hz, 1H); 6.61 (d, J = 7.4 Hz, 1H); 5.96 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 5.27 (s, 3H); 5.08 (m, 2H); 4.98 (s, 1H); 3.99 (t, J = 6.8 Hz, 2H); 3.57 (m, 1H); 3.14 (m, 2H); 2.43-2.31 (m, 10H); 1.92 (t, J = 6.8 Hz, 2H); 1.54-1.52 (m, 2H); 1.40 (m, 20H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　158.5 (2C); 149.0; 136.8; 129.8; 128.7 (2C); 128.1; 127.5 (2C); 115.7; 104.5; 79.4 (2C); 70.9;　58.2; 54.8 (2C); 53.4; 53.0; 51.2; 48.2; 45.1; 30.7; 29.9; 28.6 (6C); 26.0; 23.2.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　628.3; [M + Na] 650.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C34H54N5O6 [M + H] =　628.4074; found = 628.4080.
* 화합물 23c의 N-메틸화 및 탈카보닐화 유사체의 제조(반응식 10):
Figure pct00073
반응식 10: 화합물 23c의 N-메틸화 및 탈카보닐화 유사체의 제조
°화합물 44
제 1 단계: 1,4-다이옥세인(20 eq) 속 4N HCl의 표준 용액의 존재하에 화합물 39(0.7 mmol)를 1,4-다이옥세인(2 mL)에 용해시킨다. 그런 후에, 반응 매질을 실온에서 6시간 동안 교반한다. 다이옥세인을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에터에서 분쇄하여 상응하는 암모니아 클로르하이드레이트를 침전물의 형태로 수득한다.
제 2 단계: 0℃에서 교반한 DMF(20 mL) 속 화합물 10(0.8 mmol)의 용액에 1- 에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)-카보다이미드클로르하이드레이트(1.2 eq), 1-하이드록시벤조트라이아졸 모노하이드레이트(1.1 eq)를 연속으로 첨가한다. 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 중간체 아민 유도체(1 eq)를 반응 매질 속 트라이에틸아민(1.2 eq)과 함께 주입한 후, 실온에서 18시간 동안 교반하에 유지시킨다. DMF를 증발시키고 잔류물을 에틸 아세테이트에 넣은 후, 유기상을 1N HCl, NaHCO3, 이어서 포화 NaCl의 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압하에 증발시키고 실리카 컬럼(AcOEt/MeOH 50:50) 상에서 정제 후 화합물 45(89%)를 수득 한다.
화합물 44: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 7.39 (d, J = 7.1 Hz, 2H); 7.31 (t, J = 7.6 Hz, 2H); 7.27-7.25 (m, 1H); 7.01 (d, J = 6.5 Hz, 1H); 6.61 (d, J = 7.5 Hz, 1H); 5.99 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 5.06 (s, 2H); 5.02 (m, 2H); 3.95-3.88 (m, 2H); 3.60-3.59 (m, 1H); 3.46-3.29 (m, 2H); 3.17-3.15 (m, 2H); 2.95 (s, 3H); 2.43-2.29 (m, 2H); 2.02-1.92 (m, 2H); 1.85-1.77 (m, 2H); 1.39 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　173.0; 158.4 (2C); 149.2; 136.6; 129.7; 128.8 (2C); 128.3; 127.6 (2C); 115.9; 104.9; 79.5; 79.4; 71.0;　51.7; 48.1; 45.3; 45.1; 35.4; 30.1; 28.6 (6C); 27.9; 27.0.
MS (ESI +): m/z = [M + Na] 609.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C31H46N4O7Na [M + Na] =　609.3264; found = 609.3268.
°화합물 45
THF(30 mL) 속 화합물 44(0.5 mmol)의 용액에 THF(2.5 eq) 속 보레인/다이메틸 설파이드 2M 착물 용액을 적하여 첨가한다. 그런 후에, 반응 매질을 환류하에 2시간 동안 가열한다. 냉각시킨 후, 보레인을 MeOH를 사용하여 제거하고 혼합물을 환류하에 18시간 동안 다시 가열한다. 진공하에서 MeOH의 증발 후, 잔류물을 EtOH/NaOH 1N 5:1 혼합물에 넣고 2시간 동안 환류시킨다. 에탄올 증발 후 에틸 아세테이트를 사용하여 수성상을 최종 추출한다. 유기상을 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 감압하에서 증발시키고 실리카 컬럼(AcOEt/MeOH 70:30) 상에서 정제 후 갈색 분말의 형태로 유도체 45를 수득한다(82%).
화합물 45: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 7.41 (d, J = 7.3 Hz, 2H); 7.33 (t, J = 6.7 Hz, 2H); 7.26 (t, J = 6.8 Hz, 1H); 6.94 (d, J = 6.9 Hz, 1H); 6.63 (d, J = 7.4 Hz, 1H); 6.00 (t, J = 7.2 Hz, 1H); 5.08 (s, 2H); 5.08 (s, 2H); 5.06-5.01 (m, 2H); 3.99 (t, J = 6.7 Hz, 2H); 3.58 (m, 1H); 3.16-3.15 (m, 2H); 2.37-2.30 (m, 4H); 2.17 (s, 3H); 1.92 (t, J = 7.1 Hz, 2H); 1.51-1.50 (m, 2H); 1.40 (m, 20H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　158.2 (2C); 149.0; 136.5; 129.6; 128.6 (2C); 128.0; 127.4 (2C); 115.7; 104.6; 79.3 (2C); 70.8;　57.2; 54.4; 51.3; 48.1; 45.0; 41.6; 30.7; 28.5 (6C); 23.4; 21.1.
MS (ESI +): m/z =　[M + H]　573.4; [M + Na] 595.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C31H49N4O6 [M + H] =　573.3652; found = 573.3664.
* 아마이드 기능이 없는 지방족 "링커" 담체의 제조(반응식 11):
Figure pct00074
반응식 11: 아마이드 기능이 없는 지방족 "링커" 담체의 제조
°화합물 46:
EtOH/H2O 1:1 혼합물(120 mL) 속 NaOH(0.5 eq)의 용액에 화합물 40(5.1 mmol) 및 화합물 20(0.7 eq)을 첨가한다. 그런 후에, 반응 매질을 환류하에 24시간 동안 가열한다(Dalton Trans., 2004, 3772-3781). 진공하에서 에탄올의 증발 후, 수성상을 6N HCl을 사용하여 중화시키고 에틸 아세테이트를 사용하여 추출한다. 유기상을 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 최종적으로 감압 하에서 증발시키고 실리카 컬럼(AcOEt/MeOH 90:10) 상에서 정제 후 황색 분말의 형태로 유도체 46을 수득한다(61%).
화합물 46: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 7.38 (d, J = 6.7 Hz, 2H); 7.32-7.26 (m, 3H); 7.16 (d, J = 7.5 Hz, 1H); 6.39 (d, J = 7.5 Hz, 1H); 5.03 (s, 2H); 4.95-4.93 (s, 2H); 3.71-3.76 (m, 2H); 3.59 (m, 1H); 3.14 (m, 2H); 2.06 (s, 3H); 1.66-1.55 (m, 2H); 1.40-1.35 (m, 22H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　173.5; 156.6 (2C); 146.4; 141.0; 138.3; 137.9; 129.3 (2C); 128.4 (2C); 128.1; 117.5; 79.7 (2C); 73.1;　53.9; 51.2; 44.7; 32.6; 30.9; 28.5 (6C); 23.0; 12.5.
MS (ESI +): m/z =　[M + H]　530.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C29H44N3O6 [M + H] =　530.3230; found = 530.3245.
γ-R' a 그룹의 탈벤질화(반응식 12)
Figure pct00075
반응식 12: R' a 그룹의 탈벤질화
메탄올(5 내지 40 mL) 속 화합물 23a-k, 43, 45 또는 46(0.2-1.6 mmol)의 용액에 Pd/C(10% m/m)를 첨가한다. 반응 매질을 진공하에 놓고, 실온에서 30분 동안 교반한 다음, H2의 흐름하에 6시간 동안 유지시킨다. 그런 후에, 여과하고, 메탄올을 감압하에 증발시켜 유도체 36a-n을 수득한다(60 내지 100%)(표 3).
화합물 36
화합물 n 1 X Y' R' a R b 수율(%) 외관
36a 2 CH2 N
Figure pct00076
 H 100 백색 분말
36b 3 CH2 N
Figure pct00077
 H 87 노란색 분말
36c 2 CO N
Figure pct00078
 H 100 갈색 오일
36d 1 CO
Figure pct00079
Figure pct00080
 비 존재 100 갈색 분말
36e 2 CO
Figure pct00081
Figure pct00082
 비 존재 95 백색 분말
36f 2 CO
Figure pct00083
Figure pct00084
 비 존재 82 갈색 분말
36g 2 CH2 N
Figure pct00085
 H 78 백색 분말
36h 3 CH2 N
Figure pct00086
 H 71 백색 분말
36i 3 CH2 N
Figure pct00087
 H 100 오렌지색 오일
36j 2 CO N
Figure pct00088
 H 60 백색 분말
36k 2 CO
Figure pct00089
Figure pct00090
 비 존재 100 백색 분말
36l 2 CH2
Figure pct00091
Figure pct00092
 비 존재 94 갈색 분말
36m 2 CH2 N
Figure pct00093
 CH3 96 갈색 분말
36n 1 CH2 CH2
Figure pct00094
 비 존재 91 갈색 분말
화합물 36a: 1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ(ppm) 6.95 (d, J = 6.7 Hz, 1H); 6.92 (s, 1H); 6.82 (d, J = 7.2 Hz, 1H); 6.14 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 5.18 (s, 1H); 5.04-5.03 (s, 1H); 4.25 (m, 2H); 3.56-3.54 (m, 1H); 3.17-3.16 (m, 2H); 3.09 (m, 2H); 2.68 (t, J = 6.4 Hz, 2H); 1.50-1.40 (m, 22H).
13C NMR (CDCl3, 150 MHz): δ(ppm)　170.3; 158.7; 157.0; 156.7; 146.7; 128.6; 115.2; 107.2; 79.7 (2C); 50.8; 47.3; 44.8; 39.5; 35.5; 29.9; 28.6 (6C); 25.7.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　483.3; [M + Na] 505.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C23H38N4O7Na [M + Na] =　505.2638; found = 505.2644.
화합물 36b: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm) 6.96 (dd, J 1 = 6.9 Hz and J 2 = 1.5 Hz, 1H); 6.80 (dd, J 1 = 7.4 Hz and J 2 = 1.5 Hz, 1H); 6.52-6.51 (s, 1H); 6.12 (t, J = 7.2 Hz, 1H); 5.04 (s, 1H); 4.88-4.86 (s, 1H); 4.26 (t, J = 6.3 Hz, 2H); 3.55-3.53 (m, 1H); 3.13-3.08 (m, 4H); 2.68 (t, J = 6.3 Hz, 2H); 1.79-1.50 (m, 2H); 1.40 (s, 18H); 1.35-1.23 (m, 4H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　169.7; 158.3 (2C); 146.2; 128.2; 114.6; 106.7; 79.5 (2C); 51.1; 46.9; 44.3; 38.8; 35.1; 31.9; 28.8; 28.2 (6C); 22.6.
MS (ESI +): m/z =　[M - 2Boc + 3H] 296.9; [M - Boc + 2H] 397.0; [M + H]　497.1; [M + Na] 519.1.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C24H40N4O7Na [M + Na] =　519.2795; found = 519.2801.
화합물 36c: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ(ppm)　7.34 (s, 1H); 6.89 (dd, J 1 = 6.9 Hz and J 2 = 1.2 Hz, 1H); 6.83 (d, J = 7.2 Hz, 1H); 6.19 (t, J = 6.9 Hz, 1H); 5.33-5.23 (s, 2H); 4.06 (t, J = 5.2 Hz, 2H); 3.67-3.64 (m, 1H); 3.28-3.17 (m, 4H); 2.30 (t, J = 7.2 Hz, 2H); 1.93 (t, J = 6.3 Hz, 2H); 1.95-1.60 (m, 2H); 1.40 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ(ppm)　173.3; 172.4; 158.6; 156.8; 146.5; 127.0; 114.6; 107.6; 79.4 (2C); 51.2; 47.1; 44.5; 35.9; 33.0; 29.3; 28.2 (6C); 25.4.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　483.4; [M + Na]　505.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C23H38N4O7Na [M + Na] =　505.2638; found = 505.2652.
화합물 36d: 1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ(ppm)　7.03-7.01 (m, 1H); 6.80 (d, J = 7.3 Hz, 1H); 6.10 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 5.66 (s, 1H); 4.98 (s, 1H); 4.27 (t, J = 7.1 Hz, 2H); 3.89 (m, 1H); 3.66-3.31 (m, 8H); 3.23-3.21 (m, 2H); 2.87-2.85 (m, 2H); 2.67-2.46 (m, 2H); 1.39 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 150 MHz): δ(ppm)　169.5; 169.0; 158.6; 157.0; 156.1; 146.5; 128.9; 115.1; 107.0; 79.8; 79.7; 49.5; 47.3; 45.8 (2C); 43.9; 41.8 (2C); 35.4; 32.1; 28.6 (6C).
MS (ESI +): m/z = [M - 2Boc + 3H] 352.1; [M - Boc + 2H] 452.2; [M + H] 552.2; [M + Na] 574.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C26H41N5O8Na [M + Na] = 574.2853; found = 574.2849.
화합물 36e: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 6.80 (d, J = 6.4 Hz, 2H); 6.18 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 5.06-4.99 (s, 2H); 4.85-4.71 (m, 2H); 3.86-3.38 (m, 9H); 3.21-3.15 (m, 2H); 2.46-2.32 (m, 2H); 1.92-1.64 (m, 2H); 1.40 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　171.6; 165.4; 158.9; 157.2; 156.6; 146.7; 128.1; 114.9; 107.2; 79.8 (2C); 51.6; 49.9; 45.2; 44.8; 42.5; 41.8; 41.5; 30.0; 28.6 (6C); 28.2.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 552.3; [M + Na] 574.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C26H41N5O8Na [M + Na] = 574.2853; found = 574.2832.
화합물 36f: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm)　7.01-7.00 (m, 1H); 7.76 (d, J = 7.1 Hz, 1H); 6.09 (t, J = 6.9 Hz, 1H); 5.04 (s, 2H); 4.23 (t, J = 5.9 Hz, 2H); 3.67-3.36 (m, 9H); 3.12 (m, 2H); 2.83 (m, 2H); 2.36-2.30 (m, 2H); 1.80-1.62 (m, 2H); 1.35 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　171.3; 169.0; 158.6; 156.7; 156.4; 146.5; 128.6; 114.8; 106.7; 79.3 (2C); 51.4; 47.1; 45.2; 44.4 (2C); 41.6 (2C); 31.7; 29.4; 28.4 (6C); 27.7. MS (ESI +): m/z = [M + H] 566.3; [M + Na] 588.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C27H43N5O8Na [M + Na] =　588.3009; found = 588.2980.
화합물 36g: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm)　7.49 (d, J = 4.8 Hz, 1H); 6.33 (d, J = 4.8 Hz, 1H); 4.70 (s, 2H); 3.53-3.51 (m, 1H); 3.19-3.17 (m, 2H); 3.07-2.91 (m, 2H); 2.26 (s, 3H); 1.56-1.44 (m, 4H); 1.42 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　169.9; 167.1; 157.3; 157.0; 145.5; 139.0; 131.9; 111.1; 78.6 (2C); 55.5; 50.5; 44.1; 39.2; 29.6; 27.4 (6C); 25.4; 10.7.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 483.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C23H38N4O7Na [M + Na]　= 505.2638; found = 505.2636.
화합물 36h: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm)　7.57 (d, J = 4.8 Hz, 1H); 6.41 (d, J = 4.8 Hz, 1H); 4.77 (s, 2H); 3.57 (m, 1H); 3.14-3.11 (m, 2H); 3.02-2.98 (m, 2H); 2.34 (s, 3H); 1.58-1.49 (m, 2H); 1.40 (s, 20H); 1.39-1.35 (m, 2H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　169.9; 167.1; 157.3; 157.0; 145.5; 139.0; 131.9; 111.1; 78.6 (2C); 55.5; 50.7; 44.0; 39.1; 31.6; 28.7; 27.4 (6C); 22.9; 10.7.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 497.3; [M + Na] 519.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C24H40N4O7Na [M + Na]　= 519.2795; found = 519.2789.
화합물 36i: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm)　7.56 (d, J = 7.2 Hz, 1H); 6.37 (d, J = 7.2 Hz, 1H); 4.37-4.33 (m, 2H); 3.53 (m, 1H); 3.13-3.07 (m, 2H); 3.00-2.95 (m, 2H); 2.64 (t, J = 6.5 Hz, 2H); 2.46 (s, 3H); 1.44 (s, 18H); 1.44-1.40 (m, 4H); 1.40-1.23 (m, 2H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　171.5; 170.8; 158.5; 158.2; 147.1; 139.0; 132.5; 112.5; 80.0 (2C); 51.4; 50.3; 45.4; 40.2; 37.6; 32.9; 30.0; 28.8 (6C); 24.3; 11.8.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 511.3; [M + Na] 533.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C25H42N4O7Na [M + Na] =　533.2951; found = 533.2935.
화합물 36j: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm)　7.39 (m, 2H); 6.31 (m, 1H); 5.40-5.33 (s, 2H); 3.95 (m, 2H); 3.55 (m, 1H); 3.40-3.13 (m, 4H); 2.35 (s, 3H); 2.24 (m, 2H); 1.96-1.60 (m, 4H), 1.40 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　174.2; 169.8; 157.7 (2C); 146.8; 137.5; 129.3; 111.6; 80.2 (2C); 52.2; 51.6; 44.9; 36.8; 33.5; 31.4; 30.2; 28.7 (6C); 12.1.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 497.2; [M + Na] 519.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C24H40N4O7Na [M + Na]　= 519.2795; found = 519.2795.
화합물 36k: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm)　7.26 (m, 1H); 6.35 (m, 1H); 5.98 (s, 2H); 5.13 (m, 2H); 4.88 (m, 1H); 3.67-3.66 (m, 8H); 3.14 (m, 2H); 2.35 (m, 2H); 2.17 (s, 3H); 1.80-1.63 (m, 2H), 1.40 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm)　171.6; 168.9; 164.5; 156.9 (2C); 142.8; 138.6; 128.5; 111.5; 79.6 (2C); 55.0; 50.7; 45.2; 44.9; 44.6; 42.1; 41.5; 29.9; 28.4 (6C); 28.1; 12.2.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 566.3; [M + Na] 588.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C27H43N5O8Na [M + Na]　= 588.3009; found = 588.3002.
화합물 36l: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 6.83 (d, J = 6.8 Hz, 1H); 6.76 (d, J = 7.3 Hz, 1H); 6.11 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 5.17-5.08 (s, 2H); 4.02 (t, J = 6.9 Hz, 2H); 3.56 (m, 1H); 3.15-3.12 (m, 4H); 2.91-2.83 (m, 6H); 2.57-2.56 (m, 2H); 2.12 (m, 2H); 1.80-1.78 (m, 2H); 1.37 (m, 22H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm) 159.0; 157.2; 156.3; 147.0; 127.4; 114.3; 107.1; 79.7 (2C); 56.9; 54.4; 51.1; 50.2 (2C); 48.4; 44.7 (2C); 30.1; 28.6 (6C); 27.3; 25.5; 21.2.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　538.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C27H48N5O6 [M + H] =　538.3605; found = 538.3611.
화합물 36m: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm) 6.85 (d, J = 6.6 Hz, 1H); 6.77 (dd, J 1 = 7.3 Hz and J 2 = 1.5Hz, 1H); 6.12 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 5.07 (s, 2H); 4.02-3.88 (m, 2H); 3.59 (m, 1H); 3.16 (m, 2H); 2.34-2.32 (m, 4H); 2.16 (s, 3H); 1.90 (t, J = 6.6 Hz, 2H); 1.51 (m, 4H); 1.41 (s, 18H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm) 159.3; 156.9 (2C); 147.1; 127.6; 113.7; 106.8; 79.5 (2C); 57.5; 54.5; 51.4; 48.3; 45.1; 42.0; 31.4; 28.6 (6C); 26.8; 24.4.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　483.4; [M + Na]　505.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C24H43N4O6 [M +] =　483.3183; found = 483.3172.
화합물 36n: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ(ppm)　7.86 (m, 1H); 7.03-7.02 (m, 2H); 5.19-5.10 (m, 2H); 4.19 (m, 2H); 3.59 (m, 1H); 3.13 (m, 2H); 2.51 (s, 3H); 1.84-1.78 (m, 2H); 1.39-1.38 (m, 22H).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ(ppm) 161.5; 157.1; 156.6; 144.5; 138.4; 137.5; 112.3; 79.6　(2C); 56.3; 51.2; 44.6; 32.3; 30.3; 28.6　(6C); 22.8; 12.8.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 440.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C22H38N3O6 [M + H]　= 440.2761; found = 440.2749.
δ-다이아민 그룹의 최종 탈보호(반응식 13)
Figure pct00095
반응식 13: 다이아민 그룹의 최종 탈보호
화합물 36a-n 또는 23b(0.2-1.7 mmol)를 1,4-다이옥세인(20 eq) 속 4N HCl 기성품 용액의 존재하에 1,4-다이옥세인(4-10 mL)에 용해시킨다. 그런 후에, 반응 매질을 실온에서 45분 동안 16시간 동안 교반한다. 다이옥세인을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에터에서 분쇄한다. 진공하에서 증발시킨 후 (고 흡습성 생성물), 수득된 침전물을 동결 건조시켜 37a-n 또는 38의 유도체를 수득한다(78 내지 100%)(표 4).
화합물 37 및 38
화합물 n 1 X Y' R' a R b 수율(%) 외관
37a 2 CH2 N
Figure pct00096
 H 100 노란색 분말
37b 3 CH2 N
Figure pct00097
 H 100 노란색 분말
37c 2 CO N
Figure pct00098
 H 93 백색 분말
37d 1 CO
Figure pct00099
Figure pct00100
 비 존재 88 백색 분말
37e 2 CO
Figure pct00101
Figure pct00102
 비 존재 100 베이지색 분말
37f 2 CO
Figure pct00103
Figure pct00104
 비 존재 100 노란색 분말
37g 2 CH2 N
Figure pct00105
 H 100 백색 분말
37h 3 CH2 N
Figure pct00106
 H 100 백색 분말
37i 3 CH2 N
Figure pct00107
 H 100 백색 분말
37j 2 CO N
Figure pct00108
 H 100 백색 분말
37k 2 CO
Figure pct00109
Figure pct00110
 비 존재 100 백색 분말
37l 2 CH2
Figure pct00111
Figure pct00112
 비 존재 78 백색 분말
37m 2 CH2 N
Figure pct00113
 CH3 87 백색 분말
37n 1 CH2 CH2
Figure pct00114
 비 존재 86 백색 분말
38 3 CH2 N
Figure pct00115
 H 100 오렌지색 분말
화합물 37a: 1H NMR (D2O, 400 MHz): δ(ppm) 7.16 (dd, J 1 = 6.8 Hz and J 2 = 1.4 Hz, 1H); 7.05 (dd, J 1 = 7.5 Hz and J 2 = 1.4 Hz, 1H); 6.41 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 4.30 (t, J = 6.4 Hz, 2H); 3.67-3.64 (m, 1H); 3.35-3.34 (m, 2H); 3.18 (t, J = 6.7 Hz, 2H); 2.72 (t, J = 6.4 Hz, 2H); 1.76-1.57 (m, 4H).
13C NMR (D2O, 100 MHz): δ(ppm)　173.3; 158.5; 145.5; 129.4; 118.8; 108.5; 49.0; 47.4; 40.9; 38.7; 35.3; 27.5; 24.1.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　283.1.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C13H23N4O3 [M + H] =　283.1770; found = 283.1765.
화합물 37b: 1H NMR (d6-DMSO, 300 MHz): δ(ppm)　8.59 (s, 4H); 8.10-8.07 (s, 1H); 7.08 (dd, J 1 = 6.9 Hz and J 2 = 1.5 Hz, 1H); 6.70 (dd, J 1 = 7.2 Hz and J 2 = 1.5 Hz, 1H); 6.07 (t, J = 7.2 Hz, 1H); 4.10 (t, J = 6.9 Hz, 2H); 3.40-3.38 (m, 1H); 3.09-3.00 (m, 4H); 2.53-2.49 (m, 2H); 1.63-1.58 (m, 2H); 1.19 (m, 4H).
13C NMR (d6-DMSO, 75 MHz): δ(ppm)　169.6; 157.8; 146.8; 128.6; 115.0; 105.4; 49.1; 45.9; 40.6; 38.2; 34.8; 29.7; 28.6; 21.9.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 296.9.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C14H25N4O3 [M + H] =　297.1927; found = 297.1914.
화합물 37c: 1H NMR (d6-DMSO, 300 MHz): δ(ppm)　8.63 (s, 2H); 8.54 (s, 2H); 8.30 (s, 1H); 7.20 (dd, J 1 = 6.8 Hz and J 2 = 1.5 Hz, 1H); 6.72 (dd, J 1 = 7.2 Hz and J 2 = 1.8 Hz, 1H); 6.11 (t, J = 6.9 Hz, 1H); 3.96-3.87 (m, 2H); 3.49-3.46 (m, 1H); 3.11-3.04 (m, 4H); 2.32-2.31 (m, 2H); 1.90-1.75 (m, 4H).
13C NMR (d6-DMSO, 75 MHz): δ(ppm)　171.2; 157.6; 146.6; 128.2; 114.8; 105.5; 48.7; 46.6; 40.3; 35.8; 30.8; 28.7; 26.1.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　283.0.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C13H23N4O3 [M + H] =　283.1810; found = 283.1800.
화합물 37d: 1H NMR (D2O, 400 MHz): δ(ppm)　7.20 (d, J = 6.4 Hz, 1H); 7.03 (d, J = 6.6 Hz, 1H); 6.39 (t, J = 6.9 Hz, 1H); 4.32-4.28 (m, 1H); 4.06-4.02 (m, 2H); 3.69-3.45 (m, 8H); 3.17-3.10 (m, 2H); 3.04-3.01 (m, 2H); 2.99-2.95 (m, 2H).
13C NMR (D2O, 100 MHz): δ(ppm)　172.8; 171.5; 168.8; 158.5; 129.5; 118.9; 108.3; 47.1; 45.5; 45.3; 44.7; 44.3; 41.5; 40.7; 33.2; 31.5.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 352.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C16H26N5O4 [M + H] = 352.1985; found = 352.1977.
화합물 37e: 1H NMR (D2O, 400 MHz): δ(ppm) 7.14-7.08 (m, 2H); 6.44 (m, 1H); 5.01 (s, 2H); 3.94-3.85 (m, 1H); 3.66 (m, 8H); 3.17 (m, 2H); 2.78-2.76 (m, 2H); 2.13-2.08 (m, 2H).
13C NMR (D2O, 100 MHz): δ(ppm)　172.5; 167.2; 158.7; 145.4; 130.1; 119.2; 108.3; 51.2; 49.2; 44.6; 44.1; 42.9; 41.7; 41.3; 28.5; 25.3.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 352.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C16H26N5O4 [M + H] = 352.1985; found = 352.1981.
화합물 37f: 1H NMR (D2O, 400 MHz): δ(ppm)　7.20 (d, J = 6.3 Hz, 1H); 7.03 (d, J = 6.4 Hz, 1H); 6.39 (t, J = 6.8 Hz, 1H); 4.30 (t, J = 6.3 Hz, 2H); 3.75-3.60 (m, 4H); 3.55-3.52 (m, 5H); 3.37-3.35 (m, 2H); 2.98-2.95 (m, 2H); 2.74-2.68 (m, 2H); 2.11-2.03 (m, 2H).
13C NMR (D2O, 100 MHz): δ(ppm)　172.7; 161.7; 158.8; 145.3; 129.5; 118.6; 108.3; 49.0; 47.0; 45.1; 44.4; 41.5; 41.2; 40.6; 31.4; 28.3; 25.2.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 366.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C17H28N5O4 [M + H] =　366.2146; found = 366.2134.
화합물 37g: 1H NMR (CD3OD, 400 MHz): δ(ppm)　8.22 (d, J = 5.8 Hz, 1H); 7.16 (d, J = 5.8 Hz, 1H); 5.29 (s, 2H); 3.66-3.61 (m, 1H); 3.35-3.31 (m, 4H); 2.53 (s, 3H); 1.90-1.73 (m, 4H).
13C NMR (CD3OD, 100 MHz): δ(ppm) 167.1; 160.7; 145.0; 144.3; 141.2; 111.5; 59.4; 51.0; 42.4; 40.1; 29.1; 26.2; 13.3.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 283.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C13H23N4O3 [M + H]　= 283.1770; found = 283.1772.
화합물 37h: 1H NMR (CD3OD, 400 MHz): δ(ppm)　8.15 (d, J = 6.8 Hz, 1H); 7.12 (d, J = 6.6 Hz, 1H); 5.22 (s, 2H); 3.58-3.56 (m, 1H); 3.29-3.25 (m, 4H); 2.48 (s, 3H); 1.81-1.73 (m, 2H); 1.62-1.49 (m, 4H).
13C NMR (CD3OD, 100 MHz): δ(ppm)　166.8; 160.4; 144.8; 143.9; 140.8; 111.4; 59.1; 50.9; 42.9; 40.3; 31.0; 29.7; 23.2; 12.9.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 297.2; [M + Na] 319.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C14H25N4O3 [M + H]　= 297.1927; found = 297.1913.
화합물 37i: 1H NMR (D2O, 400 MHz): δ(ppm)　7.97 (d, J = 6.6 Hz, 1H); 7.18 (d, J = 7.0 Hz, 1H); 4.68 (t, J = 6.4 Hz, 2H); 3.71-3.65 (m, 1H); 3.38-3.37 (m, 2H); 3.16 (t, J = 6.7 Hz, 2H); 3.08-3.04 (s, 1H); 2.88 (t, J = 6.5 Hz, 2H); 2.56 (s, 3H); 1.85-1.74 (m, 2H); 1.52-1.38 (m, 4H).
13C NMR (D2O, 100 MHz): δ(ppm)　171.3 (2C); 158.2; 142.4; 138.7; 110.9; 52.7; 49.2; 40.8; 38.9; 35.8; 29.6; 27.9; 21.6; 12.3.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 311.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C15H27N4O3 [M + H] =　311.2083; found = 311.2075.
화합물 37j: 1H NMR (D2O, 400 MHz): δ(ppm)　8.28 (d, J = 6.5 Hz, 1H); 7.13 (d, J = 6.5 Hz, 1H); 4.44 (m, 2H); 3.33-3.29 (m, 5H); 2.64 (s, 3H); 2.57 (m, 2H); 2.08-2.07 (m, 4H).
13C NMR (D2O, 100 MHz): δ(ppm)　174.9; 159.8; 145.2; 143.4; 139.4; 111.7; 55.7; 50.6; 41.9; 37.3; 32.2; 31.0; 27.1; 12.8.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 297.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C14H25N4O3 [M + H]　= 297.1927; found = 297.1931.
화합물 37k: 1H NMR (D2O, 400 MHz): δ(ppm)　8.01 (d, J = 6.8 Hz, 1H); 7.19 (d, J = 6.9 Hz, 1H); 5.53 (s, 2H); 3.72-3.55 (m, 9H); 3.41-3.39 (m, 2H); 2.81-2.75 (m, 2H); 2.47 (s, 3H); 2.16-2.08 (m, 2H).
13C NMR (D2O, 100 MHz): δ(ppm)　172.4; 165.2; 159.4; 143.4; 142.5; 139.9; 111.1; 57.2; 49.1; 44.5; 44.1; 42.2; 41.4; 40.7; 28.5; 25.3; 12.5.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 366.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C17H28N5O4 [M + H]　= 366.2141; found = 366.2133.
화합물 37l: 1H NMR (d6-DMSO, 400 MHz): δ(ppm) 6.83 (d, J = 6.8 Hz, 1H); 6.76 (d, J = 7.3 Hz, 1H); 6.11 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 5.17-5.08 (s, 2H); 4.02 (t, J = 6.9 Hz, 2H); 3.56 (m, 1H); 3.15-3.12 (m, 4H); 2.91-2.83 (m, 6H); 2.57-2.56 (m, 2H); 2.12 (m, 2H); 1.80-1.78 (m, 2H); 1.37 (m, 22H).
13C NMR (d6-DMSO, 100 MHz): δ(ppm) 159.0; 157.2; 156.3; 147.0; 127.4; 114.3; 107.1; 79.7 (2C); 56.9; 54.4; 51.1; 50.2 (2C); 48.4; 44.7 (2C); 30.1; 28.6 (6C); 27.3; 25.5; 21.2.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　338.3.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C17H32N5O2 [M + H] =　338.2556; found = 338.2552.
화합물 37m: 1H NMR (CD3OD, 400 MHz): δ(ppm) 7.49 (m, 1H); 7.14 (m, 1H); 6.60-6.59 (m, 1H); 4.34-4.30 (m, 2H); 3.82-3.78 (m, 1H); 3.40-3.34 (m, 4H); 3.31-3.26 (m, 2H); 2.95 (s, 3H); 2.35-2.31 (m, 2H); 2.03-1.91 (m, 4H).
13C NMR (CD3OD, 100 MHz): δ(ppm) 158.8; 147.8; 130.1; 121.2; 112.2; 56.8; 54.6; 50.3; 49.8; 42.1; 40.9; 28.5; 25.4; 21.2.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　283.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C14H27N4O2 [M +] =　283.2134; found = 283.2133.
화합물 37n: 1H NMR (CD3OD, 400 MHz): δ(ppm)　8.25 (d, J = 7.0 Hz, 1H); 7.13 (d, J = 6.9 Hz, 1H); 4.42 (t, J = 7.6 Hz, 2H); 3.64-3.61 (m, 1H); 3.31-3.27 (m, 2H); 2.64 (s, 3H); 1.93-1.82 (m, 4H); 1.57-1.56 (m, 2H).
13C NMR (CD3OD, 100 MHz): δ(ppm) 159.5; 145.0; 143.1; 139.6; 111.8; 57.4; 50.6; 42.0; 31.0; 30.7; 22.7; 12.7.
MS (ESI +): m/z = [M + H] 240.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C12H22N3O2 [M + H]　= 240.1712; found = 240.1713.
화합물 38: 1H NMR (CD3OD, 400 MHz): δ(ppm) 7.46 (s, 2H); 7.37-7.27 (m, 3H); 6.58 (m, 1H); 5.21 (m, 2H); 4.40 (m, 2H); 3.62 (m, 1H); 3.32-3.31 (m, 2H); 3.19 (m, 2H); 2.77 (m, 2H); 1.80 (m, 2H); 1.53 (m, 4H).
13C NMR (CD3OD, 100 MHz): δ(ppm) 171.4;157.1; 147.2; 135.7; 130.3; 128.6 (2C); 128.2; 127.8 (2C); 119.3; 109.5; 71.0; 49.6; 40.8; 38.5; 34.7; 32.4; 29.7; 28.3; 21.8.
MS (ESI +): m/z = [M + H]　387.2.
HRMS (ESI +): m/z calculated for C21H31N4O3 [M + H] =　387.2396; found = 387.2382.
B. 물리-화학적인 연구
I) HPLC 분석에 의한 본 발명에 따른 화합물(29a, 29b, 30a, 30b; 37a, 37b, 37c, 37d, 37f, 37i, 37j)과 α-옥소알데하이드 또는 α,β-불포화 알데하이드 사이의 부가물 형성의 평가
1-원리
테스트될 화합물을 MGO 또는 MDA의 존재하에 37℃에서 항온처리한다. MGO 또는 MDA에 의한 부가물의 형성에 대해 보고하고자 하는 동역학 연구는 HPLC 분석을 통해 수행된다.
2-방법
a) 용액 준비
테스트될 화합물(30μmol)을 PBS(1.5 mL)에 용해시킨다. 그런 후에, 물(250μmol) 속 40%의 MGO의 수용액(qsp 1.25mL)을 제조하고, 동시에 MDA 비스-(diOEt) -아세탈(250μmol)을 실온에서 1시간 동안 물(qsp 1.25 mL) 속 1N HCl(2 eq)의 용액과 반응시킨다. NaOH 0.05N의 수용액은 또한 반응 매질(5 mL)을 중화하는데 필요하다.
b) 37℃에서 혼합물의 항온처리
테스트될 화합물의 용액(625μL - 배지에서의 최종 농도 = 10mM)을 NaOH 0.05 N(0.5 mL)의 존재하에서 즉석으로 제조한 MGO 또는 MDA의 용액(즉, 배지에서 최종 농도가 125 mM - 20 mM)과 반응시킨다.
다양한 혼합물을 오븐에서 37℃에서 24시간 동안 항온처리한다.
c) HPLC를 통한 분석
각 혼합물(100μL)의 샘플링은 일정한 시간 간격(0.25; 0.5; 1; 5 및 24시간)으로 취해 반응을 정지시키기 위해 -20℃에서 저장한다. 실온에서 MeCN/H2O 98:2 혼합물로 희석한 후, 40℃에서 0.3 mL/min의 유속과 1μL의 주입량으로 용매 H2O + HCOOH 0.1%/MeCN + HCOOH 0.1%(2분 동안 98/2, 2분 동안 55/45 및 3분 동안 45/55)의 구배를 사용하여 워터 어퀴이티(Waters Acquity) 칼럼 상에서 분리 후 HPLC 분석을 Shimadzu LCMS-2020 장치(190 nm에서의 UV 크로마토그램 및 양성 전자 분사 이온화 모드(ESI +)에서 질량 스펙트럼) 상에서 수행된다("검출 모드: 스캔, 인터페이스 전압: 튜닝 파일, DL 전압: 100V, Q- 어레이 DC: 40V, Q-어레이 RF: 40 V"). 블랭크는 우선 스캐빈저가 없는 반응 매질을 함유하는 용액을 사용하여 수행된다. 그런 다음, 10mM의 유리 스캐빈저 용액을 음성 대조군으로 사용하고 참조로서 문헌의 카르노신을 사용한다. MGO 또는 MDA로 형성된 부가물의 비율(일반적으로, tR = 4.1 내지 6.8min)은 UV 스펙트럼 상의 대응하는 피크의 곡선 아래 면적의 측정 후(대표 샘플에 대해 수행된 측정) 잔존하는 유리 스캐빈저의 양에 비례하여 측정된다(일반적으로, tR = 0.8 내지 4.6 min).
3-결과 및 검토
a) MGO에 의한 부가물의 형성 평가(도 2)
우선, 유리 스캐빈저의 소멸은 2 세대 유도체(Dap-Pip 및 Dap-(nBu) Pip) 또는 카르노신보다 본 발명에 따른 신규한 화합물에 의해 훨씬 빠른 MGO를 갖는 다양한 부가물에 대해 유리한 것으로 관찰된다(도 2). 다이아민 기능에 대한 카보닐 그룹의 분리와 관련하여, MGO 스캐빈저로서의 신규한 일련의 다이아민 유도체의 증가된 유효성이 입증될 수 있었다. 하이드록시피리디논 그룹을 갖는 화합물 37a, 37b, 37c, 37f, 37i 및 37j는 하이드랄라진과 동등한 활성 및 15분의 항온처리 후 유리 스캐빈저의 거의 완전한 소멸과 함께 최고 반응성이 나타난다. 본 발명자는 피라진 사이클을 갖는 1:2 유형의 주요 부가물(AdB)의 관찰에 대한 빈번한 변화와 함께 두 분자의 MGO에 대한 스캐빈저 분자인 1:1 유형의 부가물(AdA); 1:2 유형의 부가물 B(AdB); 2:1 유형의 부가물 C(AdC)와의 3개의 유형의 가능한 부가물을 확인할 수 있었다(도 3). 최종적으로, 화합물 29a로 수득한 결과는 이 경우에 HPLC 분석 동안 유리 스캐빈저와 MGO를 갖는 부가물 사이의 분리를 얻을 수 없었기 때문에 그래픽으로 나타낼 수 없었다는 것에 유의한다(ND = 결정되지 않음). 그러나, 5시간의 반응 후에 유리 스캐빈저에 관한 AdB의 대다수 존재에 대한 추세가 형성되는 것으로 보인다.
b) MDA에 의한 부가물의 형성 평가(도 4)
특히 2,3-다이하이드로-1H-1,4-다이아제핀(부가물 D(AdD)) 사이클을 갖는 부가 생성물은 본 발명에 따른 모든 화합물에서 관찰된다(도 4 및 도 5). 유도체(30b, 37c, 37d, 37f, 37i 및 37j)는 1시간 후 MDA에 의한 부가물의 이점에 대해 테스트된 스캐빈저의 결과적인 소실을 동반한 최고 반응성이 있는 것으로 나타났다(부가물의 >81%). MGO와 마찬가지로, HPLC 분석 동안 유리 스캐빈저와 MDA에 의한 부가물 사이의 어떠한 분리를 발견할 수 없었기 때문에, 화합물 29a로 얻은 결과는 다시 그래픽으로 나타낼 수 없었다(ND = 결정되지 않음). 이 경우, 24시간의 반응 후에만 유리 스캐빈저에 관한 AdD의 대다수 존재에 대한 추세가 형성되는 것으로 보인다.
II) UV/가시광선 분광 광도법에 의한 본 발명에 따른 화합물((29a, 29b, 30a, 30b; 37a, 37b, 37c, 37d, 37f, 37i, 37j)의 Cu 2+ 의 평가
1-원리:
테스트할 화합물을 Cu2+의 존재하에 10분 동안 실온에서 항온처리한다. 유리 Cu2+의 잔량은 무렉사이드에 의한 착물화 후 결정된다(Int. J. Mol. Sci., 2009, 10, 5485-5497; Molecules, 2012, 17, 13457-13472). Cu2+/무렉사이드(오렌지색) 착물의 485nm에서 흡광도(A485) 및 유리 무렉사이드(핑크색)의 520nm에서 흡광도(A520)의 측정은 실제로 UV/가시 광선 분광 광도계로 측정한다. 유리 Cu2+의 잔여량은 미리 수득한 Cu2+의 농도에 따라 비율 A485/A520을 나타내는 직선 보정식을 사용하여 구한다. 이것으로부터 최종적으로 테스트된 화합물에 의한 Cu2+의 착물화율이 추론되었다.
2-방법:
a) 용액 제조
염산 1N의 용액을 사용하여 pH를 5로 조정한 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(qsp 200mL)을 먼저 제조한다. 그런 후에 0.5mM(20mL) 및 0.25mM(100mL)에서 CuSO4·5H2O의 용액을 이 완충액에서 수행하고, 첫 번째는 보정선을 얻는데 사용한다. 1mM의 무렉사이드의 수용액(10mL)뿐만 아니라 4.2mM의 테스트할 화합물의 원료 용액을 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M 또는 완충액 및 MeOH 75/25 혼합물(6.2mL) 에서 즉석으로 제조해야 한다.
b) RT에서 혼합물의 항온처리
다양한 농도의 테스트할 화합물을 용혈 튜브 속 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5)(표 5) 또는 완충액 및 MeOH 75/25 혼합물(표 6)에 분포한다. 그런 후에, 0.25mM의 CuSO4·5H2O 용액(1mL)을 첨가하고 이것을 실온에서 10분 동안 항온처리한다. 마지막으로, 1mM의 무렉사이드 수용액(0.1mL)을 주입하고 1분 동안 실온에서 다시 항온처리한다. 그런 후에 흡광도는 UV/가시광선 분광 광도법(V-650 JASCO spectrometer)에 의해 485nm(A485) 및 520nm(A520)에서 측정한다(3회 측정). Cu2+ 킬레이터로서 문헌의 참조인 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5)(2mL) 및 물(0.1mL)과 에틸렌다이아민(EDTA)을 함유하는 블랭크를 사용한다.
헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5)에서 테스트될 다양한 농도의 화합물의 제조
테스트될 화합물의 최종 농도(mM) 테스트될 화합물의 원료 용액의 부피(μL) 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5)의 부피(μL)
0 0 1000
0.02 10 990
0.05 25 975
0.08 40 960
0.10 50 950
0.20 100 900
0.50 250 750
1 500 500
2 1000 0
헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5) 및 MeOH 75/25 혼합물에서 테스트될 다양한 화합물의 제조
테스트될 화합물의 최종 농도(mM) 테스트될 화합물의 원료 용액의 부피(μL) 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5)의 부피(μL) MeOH의 부피(μL)
0 0 750 250
0.02 10 743 247
0.05 25 731 244
0.08 40 720 240
0.10 50 713 237
0.20 100 675 225
0.50 250 563 187
1 500 375 125
2 1000 0 0
보정선은 용혈 튜브 속 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5)(표 7) 또는 완충액 및 MeOH 75/25 혼합물(표 8)에 다양한 농도의 CuSO4·5H2O의 분포 후 미리 생성한다(3회 측정). 1mM(0.1mL)의 무렉사이드 수용액의 주입 후, 이를 1분 동안 실온에서 항온처리한 다음 UV/가시광선 분광 광도계로 흡광도를 최종적으로 485nm(A485) 및 520nm(A520)에서 측정한다.
보정 곡선의 생산을 위한 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5)에서 다양한 농도의 CuSO4·5H2O의 제조
CuSO4·5H2O의 최종 농도(mM) 0.5mM에서 CuSO4·5H2O의 용액 부피(μL) 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5)의 부피(μL)
0 0 2000
0.025 105 1895
0.050 210 1790
0.075 315 1685
0.100 420 1580
0.125 525 1475
보정 곡선의 생산을 위한 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5) 및 MeOH 75/25 혼합물에서 다양한 농도의 CuSO4·5H2O의 제조
CuSO4·5H2O의 최종 농도(mM) 0.5mM에서 CuSO4·5H2O의 용액 부피(μL) 헥사민 완충액 0.01M/KCl 0.01M(pH = 5)의 부피(μL) MeOH의 부피(μL)
0 0 1750 0.250
0.025 105 1645 0.250
0.050 210 1540 0.250
0.075 315 1435 0.250
0.100 420 1330 0.250
0.125 525 1225 0.250
3-결과 및 검토:
a) 보정 곡선
방정식이 테스트될 화합물에 의한 착물화 후에 유리 Cu2+의 잔량을 결정하고 최종적으로 Cu2+의 착화력을 평가할 수 있게 하는 직선이 얻어진다(도 6, 도 7).
b) 테스트된 화합물의 Cu2+ 킬레이트화 특성의 비교
우선, 본 발명에 따른 신규한 화합물은 2세대 유도체(Dap-Pip 및 Dap-(nBu) Pip)보다 우수한 Cu2+ 킬레이트제인 것으로 보인다(도 8). 화합물(30b, 37b, 37i 및 37j)은 화합물(30b)에 대한 착물 형성력이 문헌의 참조로서 사용된 EDA의 화합물과 가장 가까운 활성을 나타내는 것으로 밝혀졌다. 동일한 시리즈 내에서, 화합물 37a 및 37b(화합물 37a보다 나은 화합물 37b 착화제)의 Cu2+ 킬레이트화 특성의 비교는 예상대로 말단 다이아민 그룹을 갖는 탄소 사슬의 연장이 활성을 향상시키는 것으로 보이는 것으로 나타난다. 카보닐 작용기의 분리는 실제로 다이아민 그룹의 킬레이트화 능력을 잠재적으로 허용한다. 그러나, 탄소 사슬이 또한 리신으로부터 유도된 화합물 30b 및 37b로 수득된 결과와 관련하여 화합물 29b로 수득된 불량한 결과는 분자의 반대쪽에 주입된 페룰산, 갈산 또는 하이드록시피리디논으로부터 유래된 그룹의 Cu2+의 착물화에 결합된 개입을 시사한다. 이런 가설을 입증하기 위해서, 화합물 37b 및 오직 하나의 유리 Cu2+ 킬레이트화 말단을 갖는 2개의 관련 화합물(화합물 36b 및 화합물 38)의 의 Cu2+ 킬레이트화 특성을 비교하였다(도 9 및 도 10). 이와 같이, 다이아민 그룹(화합물 36b)의 손실은 본 발명에 따른 신규한 화합물의 Cu2+ 킬레이트화 활성에 실제로 필수적인 것으로 보이는 하이드록시피리디논 그룹(화합물 38)의 것과 반대로 거의 결과를 나타내지 않았다. 또한, 화합물 37c 및 화합물 37j를 사용하여 얻어진 결과의 비교는 3-하이드록시피리딘-2-온 모티프에 관한 3-하이드록시-2-메틸피리딘-4-온 모티브의 더욱 실질적인 Cu2+의 착물화 능력을 나타낸다. 마지막으로, 화합물 29a 및 29b로 수득된 나쁜 결과에 비추어, 페룰산으로부터 유도된 그룹은 Cu2+의 착물화 능력을 갖는 것으로 보이는데, 이는 가장 흥미로운 것이다.
III) ORAC 테스트("산소 라디칼 흡광도 용량")을 통한 본 발명에 따른 화합물(29a, 29b, 30a, 30b, 37a, 37b, 37c, 37d, 37f, 37i, 37j)의 항산화제 특성의 평가
1-원리:
본 발명에 따른 화합물의 항산화 특성은 플루오레세인(J. Agric. Food Chem., 2004 52, 48-54, J. Agric. Food Chem., 2005, 53, 4290-4302)을 사용하여 ORACFL 테스트를 사용하여 평가하였다. 이와 같이, 37℃에서 AAPH(2,2'-아조비스 (2-메틸프로피온아미딘)다이하이드로클로라이드)의 존재하에서 생성된 퍼옥사이드 라디컬은 이 형광 센서와 반응하여 비-형광 생성물을 생산한다. 그런 후에 테스트 화합물의 보호 효과는 시간 경과에 따른 플루오레세인의 형광의 감쇠 곡선을 따라 결정되고 항산화제의 부존재에 상응하는 대조군의 면적을 측정함으로써 결정될 수 있다.
비타민 E의 수용성 유사체인 트롤록스(6-하이드록시-2,5,7,8-테트라메틸크로 만-2-카복실산)는 트롤록스 당량(TE)의 μmol/테스트된 화합물의 μmol로 표현된 10μM에서 테스트된 화합물의 항산화능(ORACFL)을 계산하기 위한 기준으로 사용된다. 이 값은 다양한 농도의 트롤록스에 따른 곡선 아래의 면적을 생산하는 직선 보정식을 사용하여 얻어진다(Bioorg. Med. Chem., 2015, 23, 1135-1148)(도 11).
2-방법:
플루오레세인(FL) 용액(12nM, 150μL)을 검정 96-웰 플레이트(Dutscher, Brumath, France) 속에 주입한다. D-PBS에 용해된 테스트될 화합물(1-20μM; 25μL) 또는 트롤록스(1-50μM; 25μL)를 각 웰에 첨가한다. 최소 30분 동안 37℃에서 항온처리 동안 플레이트 평형 후, 라디칼 반응은 즉석에서 제조된 AAPH 용액(30 mM; 25μL)을 사용하여 개시된다. 형광(λEx: 485nm; λEm: 520nm)은 온도 제어 Tecan Infinite® 200 PRO 마이크로플레이트 리더를 사용하여 60 사이클 동안 매 90초마다 측정한다(3개의 독립적인 실험 동안 3회 실시한 측정).
3-결과 및 검토:
본 발명에 따른 화합물은 특히 카르노신에 대해 발견된 매우 낮은 활성과 비교하여 상당한 항산화제 능력(표 9: ORACFL≥ 1μmol TE/μmol)을 나타내었다. 또한, 페룰산, 갈산 또는 하이드록시피리니돈 모티프로부터 유래된 그룹의 도입은 2세대 Dap-Pip 유도체에 대해 발견된 활성의 부존재 측면에서 이들 항산화제 특성의 획득에 필수적으로 나타난다. 화합물 30b 및 37c은 그 자체로 가장 활성이 높은 것으로 입증되었고 따라서 이들 각각의 계열에서 선도자로서 유지될 것이다. 화합물 37c 및 37j로 수득된 결과의 비교는 이 경우에 3-하이드록시피리딘-2-온 모티프의 보다 우수한 항산화제 능력에 유리하다는 것을 유의한다.
10μM에서 본 발명에 따른 화합물의 항산화제 능력(ORACFL)(값은 3회 실시된 3개의 독립적인 실험의 평균±SEM("평균의 표준 오차")로 표현된다).
테스트된 화합물 ORACFL
(μmol TE/μmol)
트롤록스 1
카르노신 0.08±0.05
Dap-Pip 0
화합물 29a 2.05±0.23
화합물 29b 1.50±0.10
화합물 30a 0.89±0.10
화합물 30b 2.59±0.35
화합물 37a 0.58±0.02
화합물 37b 0.99±0.09
화합물 37c 1.03±0.03
화합물 37d 1.21±0.07
화합물 37f 1.96±0.24
화합물 37i 1.24±0.02
화합물 37j 1.01±0.06
C. 생체외 생물학적 평가
I) 본 발명에 따른 화합물(29a, 29b, 30a, 30b; 37a, 37b, 37c)의 항라디칼 특성의 생체외 평가
1-원리:
다양한 화합물의 항라디칼 특성은 저밀도 지단백질(LDLs)의 산화의 생체외 모델에서 지질 과산화의 억제에 의해 결정된다(Free Radic. Biol. Med., 1992, 13, 341-390). 지질 과산화는 LDLs에 존재하는 다중 불포화 지방산의 이중 결합의 자유 라디칼에 의한 공격에 의해 개시된다. 이는 CH2 그룹으로부터 수소 원자의 제거를 초래한다. 이러한 불안정한 라디칼은 보다 안정한 구성 즉 컨쥬케이트 다이엔을 생성하기 위해 재배열된다. 일단 개시되면, LDL의 산화는 자유 라디칼에 의해 생성 된 지질 과산화의 연쇄 반응이다. LDL의 생체외 산화는 자발적인 열 파괴 동안 자유 라디칼을 생성하는 수용성 화합물 2,2'-아조비스(2-메틸프로피온아미딘)다이하이드로클로라이드(AAPH)의 첨가에 의해 37℃에서 유도된다.
2-방법:
간단히 말하자면, 96-웰 플레이트에서 수행된 산화는 D-PBS(0.1 내지 100μM 최종 농도)에 용해된 테스트될 화합물의 20μL의 다양한 용액의 존재 또는 부존재하에서 ADL 160μL(100μg/mL)에서 D-PBS로 2mM의 AAPH 용액 20μL를 첨가함으로써 37℃에서 유도된다. AAPH를 첨가하지 않은 LDL만이 음성 대조군으로 사용된다. 각 산화는 이중으로 수행된다. 산화하는 동안, 컨쥬게이트 다이엔의 형성 후에 온도 조절 TECAN 분광 광도계를 사용하여 37℃에서 8시간 동안 234nm에서 10분 마다 광학 밀도를 측정한다. 이 생체외 모델에서 인정되는 강력한 항산화제인 비타민 E(α-토코페롤)를 기준 분자로 사용한다(J. Nutr. Biochem., 2012, 23, 845-51).
3-결과 및 검토:
2세대 Dap-Pip 유도체는 고농도(100μM)에서도 항라디칼 효과를 나타내지 않는다(도 27).
페룰산으로부터 유도된 화합물 29a 및 29b는 유사한 방식으로 거동한다(도 28 및 도 29). 사실, 결과는 이들 생성물이 25-100μM 범위에 대해 항산화제이지만 낮은 농도(0.1-10μM)에서는 산화 촉진제가 된다는 것을 보여준다.
갈산으로부터 유도된 화합물 30b는 50 내지 100μM의 농도에 대해 고도의 산화촉진제이지만, 가장 낮은 농도(0.1 내지 10μM)에서 매우 항산화된다(도 30).
하이드록시피리디논 그룹을 갖는 화합물 37a 및 37c는 유사한 방식으로 거동한다. 이것은 1 내지 100μM 범위의 농도에 대한 증가된 항산화 효과를 갖는다(도 31 및 도 32).
1 내지 10μM의 더 낮은 농도에서, 본 발명에 따른 화합물 30b, 37a 및 37c는 2세대 Dap-Pip 유도체 및 심지어 비타민 E의 것보다 높은 항라디칼 특성을 갖는다(도 33 및 도 34). 따라서, 이전의 관련 유도체뿐만 아니라 참조 생성물과 관련하여 3세대 항산화 화합물의 효과가 증명될 수 있었다.
화합물 30b의 다소 비정형적인 거동(저농도에서는 항산화제, 고농도에서는 친산화제)은 아직 연구되지 않았다. 반대로, 화합물 29a 및 29b의 프로파일(저농도에서 산화촉진제 및 고농도에서 항산화제)은 문헌(J. Agric. Food Chem., 2000, 48, 3597-3604; J. Agric. Food Chem., 2010, 58, 9273-9280)에 기재된 특정 최근 연구에서 반복될 수 있다.
결국, 하이드록시피리디논 그룹을 갖는 화합물 37a 및 37c는 약 1μM의 저농도에서 최상의 항산화 특성을 갖는 것으로 보인다.
II) 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성 연구
본 발명에 따른 화합물의 세포 독성 연구 및 항세포자멸사 특성의 평가를 위해 사용된 세포주는 본 발명에 따른 화합물의 화장품 또는 특히 죽상동맥경화증 및신경 퇴행성 질환의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 목적으로, 앞서 언급된 청구범위에 비추어 선택되었다. 이러한 다양한 연구는 인간 섬유 아세포(MRC-5), 뮤린 내피 뇌 세포(bEnd.3) 및 신경 세포로 치료된 쥐의 갈색세포종 세포(PC12)에 대해 수행될 수 있었다(Eur. J. Med. Chem., 2014, 83, 355-365; Chem. Biol. Interact., 2014, 224, 108-116; Neurochem. Int., 2013, 62, 620-625).
1-원리:
세포 생존력은 대사 활성 세포(CCK-8 kit, Sigma, Lyons, France)에 의한 테트라졸륨(WST-8)의 염의 전환 검출에 기초한 비색법에 의해 평가된다(Molecules, 2014, 19(8), 12048-12064; J. Pharmacol. Toxicol. Methods., 2007, 56(1), 58-62). 살아 있는 세포는 WST-8(2-(2-메톡시-4-나이트트로페닐)-3-(4-나이트로페닐)-5-(2,4-다이설포페닐)-2H-테트라졸륨), 일나트륨 염)을 1-메톡시 PMS(1-메톡시-5-메틸페나지늄 메틸 설페이트)의 존재하에 배양 배지에 직접 용해되는 오렌지색의 포르마잔으로 환원시키는 미토콘드리아 탈수소 효소를 가진다. 37℃에서 1시간 동안 배양한 후, 포르마잔의 흡광도를 450nm에서 측정한다. 흡광도는 살아있는 세포의 수에 직접적으로 비례한다.
2-방법:
간단히 말하면, 세포를 96 웰 플레이트에 하포화상태까지 적당한 배지 100 μL에 웰당 5.103 세포의 속도로 접종한다. 그런 다음 세포를 D-PBS로 세척하고, 24시간 및 48시간 동안 3회 테스트될 다양한 농도(10μM, 100μM)의 생성물로 치료한다. DMSO 10%로 양성 대조군을 수행한다. 그런 다음 CCK-8(10μL) 용액을 37℃에서 1시간 동안 배양하기 위해 각 웰에 첨가한다. 흡광도의 측정은 Perkin Elmer 2103 Envision® 마이크로 플레이트 리더를 사용하여 450 nm에서 실시한다.
세포의 생존력은 대표 실험을 형성하는 3회 또는 3회 실시된 3개의 독립적인 실험의 평균±표준 편차에 의해 대조군(처리되지 않은 세포)의 %로서 표현된다.
3-결과 및 검토:
치료 24시간 후 3개의 세포주(뮤린 내피 뇌 세포(bEnd.3), 신경 세포로 치료된 쥐 갈색세포종 세포(PC12) 및 및 인간 섬유 아세포(MRC-5))에 대한 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성 연구. 세포의 생존력은 치료되지 않은 세포의 백분율로 표현된다(100% 제어 조건).
세포주 bEnd.3 PC12 MRC-5
농도(μM) 10 100 10 100 10 100
대조군 100 100 100 100 100 100
Dap-Pip 123 103 114 120 125 128
화합물 29a 98 87 100 120 103 99
화합물 29b 92 86 108 112 106 102
화합물 30a 117 96 116 140 115 112
화합물 30b 93 99 110 82 98 101
화합물 37a 97 103 93 112 112 124
화합물 37b 126 115 138 124 113 113
화합물 37c 99 85 110 102 97 89
치료 48시간 후 3개의 세포주(뮤린 내피 뇌 세포(bEnd.3), 신경 세포로 치료된 쥐 갈색세포종 세포(PC12) 및 및 인간 섬유 아세포(MRC-5))에 대한 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성 연구. 세포의 생존력은 치료되지 않은 세포의 백분율로 표현된다(100% 제어 조건).
세포주 bEnd.3 PC12 MRC-5
농도(μM) 10 100 10 100 10 100
대조군 100 100 100 100 100 100
Dap-Pip 131 142 110 102 113 111
화합물 29a 90 83 94 87 104 103
화합물 29b 92 90 95 97 95 100
화합물 30a 95 108 96 113 101 103
화합물 30b 92 87 95 67 92 100
화합물 37a 99 93 96 99 107 105
화합물 37b 101 100 115 107 103 101
화합물 37c 86 84 91 94 94 90
이런 제 1 결과(대표적인 실험을 형성하는 3회 실시된 측정)에서 형성된 일반적인 경향은 치료 24시간(표 10, 도 35, 도 36, 도 37) 또는 치료 48시간(표 11, 도 38, 도 39, 도 40) 후 10 및 100μM에서 테스트된 3개의 세포주에서 본 발명에 따른 화합물의 낮은 세포 독성 및 심지어 세포 독성의 부존재를 밝혀준다. 그러나 특히 화합물 29a, 30b 및 37c에 대해 100μM의 고농도의 경우 덜 불만스러운 데이터가 나타난다. 화합물 30b는 PC12 세포(67% 대조군)에 대한 48시간 치료 후 및 100μM에서 세포 생존율의 무시할 수 없는 감소의 근원이다. 그러나, 이 세포 독성은 항라디칼 특성의 생체외 평가 동안 고농도에서 이미 관찰된 산화촉진 성질에 의해 설명될 수 있다(도 30). 결국, 비타민 E보다 높은 항라디칼 활성은 10μM 이하의 농도에서 가장 흥미로운 유도체에 대해 발견되었고, 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성에 대한 이런 첫 번째 결과는 매우 매우 고무적인 것으로 보인다(도 33, 도 34).
최종적으로, 본 발명에 따른 화합물의 세포 독성의 부재는 3회 실시된 3개의 독립적인 실험 동안 PC12 세포에 대한 24시간 치료 후 확인할 수 있었다(도 41).
III) 상이한 세포주에 대한 본 발명에 따른 화합물(29a, 29b, 30a, 30b; 37a, 37b, 37c)의 항세포자멸사 특성의 평가
1 원리:
세포자멸사는 세포 사망을 위한 본질적으로 프로그램된 세포 메커니즘으로 고도로 조절되며 생리학적 또는 병리학적 자극에 대한 유기체의 반응을 구성하여 세포의 생산과 제거 사이의 불균형을 일으킨다. 이 프로그램된 사망 메커니즘은 조직의 항상성을 유지하는 것을 가능하게 한다. 형태학적으로, 세포자멸사는 세포의 점진적인 수축에 해당하며, 염색질과 세포질의 응축, 그 이후의 세포 단편의 형성(internucleosomal fragmentation) 또는 세포자멸사체를 초래하는 DNA의 규칙적인 특징적인 단편화를 동반한다. 세포자멸사의 부적절한 조절은 암, 자가 면역, 알츠하이머병과 같은 많은 병리학적 상태에서 중요한 역할을 한다(The Lancet, 1993, 381, 1251-1254; Toxicol Pathol., 2007, 35(4), 495-516).
다양한 연구가 메틸글리옥살(MGO)이 많은 세포 유형에서 세포자멸사를 유도한다는 것이 밝혀졌습니다(The Lancet, 1993, 381, 1251-1254; Toxicol Pathol., 2007, 35(4), 495-516).
세포의 세포자멸사는 DNA에 대해 하나 및 히스톤에 대해 다른 하나를 가진 2개의 뮤린 단클론 항체를 사용하는 ELISA 방법에 의해 평가된다(ELISAPLUS Cell Death Detection kit, Roche, Meylan, France). 이 기술은 세포 용해물의 세포질 분획에서 단일- 및 올리고-뉴클레오솜을 특이적으로 측정하는 것을 가능하게 한다.
2-방법:
간단히 말하면, 세포를 96웰 또는 24웰 플레이트에 하포화상태에 도달할 때까지 적절한 배지에서 Bend.3 및 PC12의 경우 5.103 세포/웰의 속도 및 MRC5의 경우 75.103 세포/웰로 접종한다. 그런 다음 세포를 PBS로 세척한 후 테스트할 제품의 농도(10μM, 100μM)를 30분에서 1시간(세포 PC12와 Bend.3) 또는 1시간(세포 MRC5) 동안 3회 테스트될 다양한 농도의 생성물로 3회 치료한다. MGO(세포 PC12에 대해 1mM, 세포 Bend.3 및 MRC5에 대해 2mM)의 용액을 24시간 배양하기 위해 첨가한다. 각 세포 유형에 대한 MGO의 농도는 문헌 및 본 발명자가 수행한 세포 독성 테스트(CCK8)에 따라 선택하였다. 그런 후에 용해액을 실온에서 30분 동안 각 웰에 첨가한다. 세포 용해물을 200g에서 10분 동안 원심 분리한다. 그런 후에 20㎕의 세포 용해물을 공급업체가 기술한 절차에 따라 ELISA에 사용한다. 세포 용해물은 항히스톤 항체로 덮인 플레이트에 도포하여 DNA의 단편화를 볼 수 있게 한다. 그런 후에, 항-DNA 항체와 조합된 퍼옥시다제는 이의 기질, ABTS(2 암모늄 2,2'-아지노-비스 (3-에틸벤조티아졸린-6-술포네이트) 및 H2O2의 존재하에서 반응하여 이의 광학 밀도가 세포자멸사의 수준을 반응하는 녹색 유도체를 생산한다. 흡광도의 측정은 Perkin Elmer 2103 Envision® 마이크로 플레이트 리더를 사용하여 405nm에서 실시된다. 양성 대조군은 MGO 단독으로 수행된다.
세포의 세포자멸사는 대표 실험을 형성하는 3회의 평균±표준 편차 또는 3회로 수행되는 3개의 독립적인 실험으로 표현된다.
3-결과 및 검토:
화합물 30b 및 37c는 뮤린 내피 뇌 세포(bEnd.3)에서 MGO에 의한 세포자멸사 유도 후 10μM에서 시작하여 매우 흥미로운 항세포자멸사 특성을 나타내었다(도 42, 도 43). 따라서, 이들은 죽상동맥경화증의 치료 및/또는 예방에 본 발명에 따른 화합물을 사용할 목적으로 산화성 및 카보닐 스트레스에 관련된 유해한 세포 캐스케이드를 느리게 할 수 있는 것으로 보인다.
화합물 37c는 신경 세포로 처리된 쥐 갈색세포종 세포(PC12)에서 MGO에 의한 세포자멸사 유도 후 10μM에서 시작하여 매우 흥미로운 항세포자멸사 특성을 나타내었다(도 44, 도 45). 따라서, 본 발명에 따른 화합물을 신경 퇴행성 질환의 치료 및/또는 예방에 사용할 목적으로 산화성 및 카보닐 스트레스에 관련된 유해한 세포 캐스케이드를 느리게 할 수 있는 것으로 보인다. 화합물 30b의 경우, 이러한 경향은 100μM에서 확인된다.
화합물 37b 및 37c는 인간 섬유 아세포 (MRC-5)에서 MGO에 의한 세포자멸사 유도 후 100μM에서 유망한 항세포자멸사 특성을 갖는다(도 46, 도 47). 따라서, 이들은 피부의 조숙한 노화 방지를 위한 화장품 산업에서의 본 발명에 따른 화합물의 응용을 위해 산화성 및 카보닐 스트레스와 관련된 유해한 세포 캐스케이드를 느리게 할 수 있는 것으로 보인다.
마지막으로, 신경 세포로 치료된 쥐 갈색세포종 세포(PC12)에서 MGO에 의한 세포자멸사 유도 후 100μM에서의 화합물 37c의 항세포자멸사 특성은 3회의 독립적 인 실험에서 확인될 수 있었다(도 48).

Claims (20)

  1. 화학식 I의 화합물:
    Figure pct00116

    및 이의 염,
    여기서
    n은 1 내지 6의 정수이며;
    X는 CO 또는 CH2이며;
    Y는 NR1R2 또는 R2 또는
    Figure pct00117
    이며;
    R1은 H 또는 알킬 또는 알킬-아릴이며;
    R2는 Z-L-R3이며;
    Z는 존재하지 않거나, CO 또는 CH2이며;
    L은 존재하지 않거나, CH=CH 또는 (CH2)m이며;
    m은 1 내지 6의 정수이며;
    R3는 적어도 하나의 OH기 및 OH, C1 내지 C4 알콕시 및 C1 내지 C4 알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 치환된 페닐이거나 R3는 적어도 하나의 OH기 및 가능하게는 OH, C1 내지 C4 알콕시 및 C1 내지 C4 알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 치환된 N-피리디논일이다.
  2. 제 1 항에 있어서,
    화학식 II:
    Figure pct00118

    를 갖는 화합물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    화학식 III:
    Figure pct00119

    를 갖는 화합물.
  4. 제 1 항에 있어서,
    화학식 IV:
    Figure pct00120

    를 갖는 화합물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    화학식 V:
    Figure pct00121

    를 갖는 화합물.
  6. 제 4 항 또는 제 5 항에 있어서,
    Z-L-R3는 다음으로부터 선택되는 화합물:
    Figure pct00122

    여기서, R5, R6, R9, R10, R11, R16, R17 및 R21은 서로 독립적으로 OH, C1 내지 C4 알콕시 및 C1 내지 C4 알킬로부터 선택된다.
  7. 제 1 항에 있어서,
    화학식 VI:
    Figure pct00123

    를 갖는 화합물.
  8. 제 1 항에 있어서,
    (E)-4,5-다이아미노-1-(4-(3-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)아크릴로일)피페라진-1-일)펜탄-1-온
    (E)-N-(5,6-다이아미노헥실)-3-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)아크릴아마이드
    4,5-다이아미노-1-(4-(3,4,5-트라이하이드록시벤조일)피페라진-1-일)펜탄-1-온
    N-(5,6-다이아미노헥실)-3,4,5-트라이하이드록시벤즈아마이드
    N-(4,5-다이아미노펜틸)-3-(3-하이드록시-2-옥소피리딘-1(2H)-일)프로판아마이드
    N-(5,6-다이아미노헥실)-3-(3-하이드록시-2-옥소피리딘-1(2H)-일)프로판아마이드
    4,5-다이아미노-N-(3-(3-하이드록시-2-옥소피리딘-1(2H)-일)프로필)펜탄아마이드
    1-(3-(4-(3,4-다이아미노부타노일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필)-3-하이드록시피리딘-2(1H)-온
    1-(2-(4-(4,5-다이아미노펜타노일)피페라진-1-일)-2-옥소에틸)-3-하이드록시피리딘-2(1H)-온
    1-(3-(4-(4,5-다이아미노펜타노일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필)-3-하이드록시피리딘-2(1H)-온
    N-(4,5-다이아미노펜틸)-2-(3-하이드록시-2-메틸-4-옥소피리딘-1(4H)-일)아세트아마이드
    N-(5,6-다이아미노헥실)-2-(3-하이드록시-2-메틸-4-옥소피리딘-1(4H)-일)아세트아마이드
    N-(5,6-다이아미노헥실)-3-(3-하이드록시-2-메틸-4-옥소피리딘-1(4H)-일)프로판아마이드
    4,5-다이아미노-N-(3-(3-하이드록시-2-메틸-4-옥소피리딘-1(4H)-일)프로필)펜탄아마이드
    1-(2-(4-(4,5-다이아미노펜타노일)피페라진-1-일)-2-옥소에틸)-3-하이드록시-2-메틸피리딘-4(1H)-온
    1-(3-(4-(4,5-다이아미노펜틸)피페라진-1-일)프로필)-3-하이드록시피리딘-2(1H)-온
    1-(3-((4,5-다이아미노펜틸)(메틸)아미노)프로필)-3-하이드록시피리딘-2(1H)-온
    1-(5,6-다이아미노헥실)-3-하이드록시-2-메틸피리딘-4(1H)-온으로부터선택되는 화합물.
  9. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 따른 적어도 하나의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 용매화물 및 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학적 조성물.
  10. 의약으로 사용하기 위한 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 하나.
  11. 제 10 항에 있어서,
    최종 당화 산물 및/또는 최종 지질 과산화 산물의 축적과 관련된 질환 또는 장애의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 약학적으로 허용가능한 화합물 또는 염.
  12. 제 11 항에 있어서,
    신경 퇴행성 질환, 연령 관련 병변, 당뇨병 관련 장애 및 암의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 약학적으로 허용가능한 화합물 또는 염.
  13. 제 12 항에 있어서,
    신경 퇴행성 질환, 특히 알츠하이머병 및 파킨슨병의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 약학적으로 허용가능한 화합물 또는 염.
  14. 제 13 항에 있어서,
    알츠하이머병 또는 파킨슨병의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 약학적으로 허용가능한 화합물 또는 염.
  15. 제 12 항에 있어서,
    연령 관련 질환 및 병변의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 약학적으로 허용가능한 화합물 또는 염.
  16. 제 12 항에 있어서,
    당뇨병 관련 장애의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 약학적으로 허용가능한 화합물 또는 염.
  17. 제 16 항에 있어서,
    죽상동맥경화증, 망막증, 신병증, 신경병증, 미세 및 거대 혈관 확장증, 백내장, 아밀로이드증, 류마티스 장애 및 정맥류 및 동맥 궤양의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 약학적으로 허용가능한 화합물 또는 염.
  18. 활성 화장품 성분 또는 농식품 성분으로서 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
  19. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 화장품 조성물.
  20. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 농식품 조성물.
KR1020187003531A 2015-07-06 2016-07-06 금속 및/또는 유리 라디칼 킬레이트화 모티프와 관련이 있고 카보닐 및 산화성 스트레스에 대해 활성인 이웃 자리 일차 다이아민 및 이의 용도 KR102633498B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1556366A FR3038605B1 (fr) 2015-07-06 2015-07-06 Diamines primaires vicinales associees a des motifs chelateurs de metaux et/ou de radicaux libres, actives contre les stress carbonyle et oxydant et leur utilisation
FR1556366 2015-07-06
PCT/FR2016/051703 WO2017006048A1 (fr) 2015-07-06 2016-07-06 Diamines primaires vicinales associées à des motifs chélateurs de métaux et/ou de radicaux libres, actives contre les stress carbonylé et oxydant et leur utilisation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20180048603A true KR20180048603A (ko) 2018-05-10
KR102633498B1 KR102633498B1 (ko) 2024-02-05

Family

ID=54329717

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020187003531A KR102633498B1 (ko) 2015-07-06 2016-07-06 금속 및/또는 유리 라디칼 킬레이트화 모티프와 관련이 있고 카보닐 및 산화성 스트레스에 대해 활성인 이웃 자리 일차 다이아민 및 이의 용도

Country Status (11)

Country Link
US (1) US10464920B2 (ko)
EP (1) EP3319950B1 (ko)
JP (1) JP6879993B2 (ko)
KR (1) KR102633498B1 (ko)
CN (1) CN107922363B (ko)
DK (1) DK3319950T3 (ko)
ES (1) ES2903164T3 (ko)
FR (1) FR3038605B1 (ko)
HK (1) HK1247917A1 (ko)
PT (1) PT3319950T (ko)
WO (1) WO2017006048A1 (ko)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2583146B (en) * 2019-04-18 2021-08-11 Henkel IP & Holding GmbH Process for preparing cyanoacetates
CN113620831B (zh) * 2021-07-21 2023-09-05 天津大学 抑制淀粉样β蛋白聚集的小分子化合物和制备方法及其应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000074664A2 (en) * 1999-06-07 2000-12-14 Yeda Research And Development Co. Ltd. Novel iron chelators and pharmaceutical compositions comprising iron chelators for the treatment of neurodegenerative disorders
US20070155726A1 (en) * 2005-12-29 2007-07-05 Schering Aktiengesellschaft Diamine derivatives as inhibitors of leukotriene A4 hydrolase
US20100130506A1 (en) * 2007-12-10 2010-05-27 Novartis Ag Organic Compounds

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ29799A3 (cs) 1996-07-30 1999-06-16 Arris Pharmaceutical Corporation Disubstituovaná cyklická sloučenina, způsob její výroby, farmaceutický přípravek a způsob léčení onemocnění živočicha
AU4403000A (en) 1999-04-23 2000-11-10 Solvay Pharmaceuticals B.V. Monomers and oligourea peptidomimetics and process for the prepa ration thereof
FR2883873B1 (fr) * 2005-03-31 2009-07-10 Pharmamens Sarl Inhibiteurs d'age
MX2008000745A (es) 2005-07-15 2008-03-14 Schering Corp Derivados de quinazolina utiles en el tratamiento del cancer.
FR2981071B1 (fr) 2011-10-10 2014-02-07 Centre Nat Rech Scient Synthese versatile et stereospecifique d'acides amines gamma,delta-insatures par la reaction de wittig
FR2981073B1 (fr) 2011-10-07 2013-12-27 Pharmamens Composes piegeurs d'alpha-oxoaldehydes et d'aldehydes alpha, beta-insatures, compositions les contenant et leurs utilisations dans des traitements de maladies liees a l'accumulation des age et ale.

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000074664A2 (en) * 1999-06-07 2000-12-14 Yeda Research And Development Co. Ltd. Novel iron chelators and pharmaceutical compositions comprising iron chelators for the treatment of neurodegenerative disorders
US20070155726A1 (en) * 2005-12-29 2007-07-05 Schering Aktiengesellschaft Diamine derivatives as inhibitors of leukotriene A4 hydrolase
US20100130506A1 (en) * 2007-12-10 2010-05-27 Novartis Ag Organic Compounds

Also Published As

Publication number Publication date
FR3038605A1 (fr) 2017-01-13
CN107922363B (zh) 2022-05-27
FR3038605B1 (fr) 2018-08-24
DK3319950T3 (da) 2022-01-24
HK1247917A1 (zh) 2018-10-05
KR102633498B1 (ko) 2024-02-05
JP2018521067A (ja) 2018-08-02
ES2903164T3 (es) 2022-03-31
US10464920B2 (en) 2019-11-05
EP3319950A1 (fr) 2018-05-16
CN107922363A (zh) 2018-04-17
EP3319950B1 (fr) 2021-11-03
WO2017006048A1 (fr) 2017-01-12
JP6879993B2 (ja) 2021-06-02
PT3319950T (pt) 2022-01-25
US20180201602A1 (en) 2018-07-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6296985B2 (ja) うつ病及び神経障害性疼痛の治療における（２ｒ，６ｒ）−ヒドロキシノルケタミン、（ｓ）−デヒドロノルケタミン及び他の（ｒ，ｓ）−ケタミンの立体異性デヒドロ及びヒドロキシル化代謝生成物の使用
AU2018342089B2 (en) Novel USP7 inhibitors for treating multiple myeloma
JP2023051961A (ja) ヒドロキシ安息香酸誘導体、その方法および使用
JP2017521482A (ja) 神経保護効用のあるアマンタジン硝酸エステル化合物及びその調製と医療応用
WO1999054320A1 (de) Neue heterocyclisch substituierte amide mit cystein-protease hemmender wirkung
EP2382206B1 (en) Compounds and methods for the treatment of pain and other diseases
KR102633498B1 (ko) 금속 및/또는 유리 라디칼 킬레이트화 모티프와 관련이 있고 카보닐 및 산화성 스트레스에 대해 활성인 이웃 자리 일차 다이아민 및 이의 용도
US20100048545A1 (en) Compounds and Compositions for Use in the Prevention and Treatment of Disorders of Fat Metabolism and Obesity
Savić et al. Synthesis, characterization and ROS-mediated cytotoxic action of novel (S, S)-1, 3-propanediamine-N, N′-di-2-(3-cyclohexyl) propanoic acid and corresponding esters
HRP20040400A2 (en) 2-amino-thiazoline derivatives and their use as inhibitors of inducible no-synthase
US11434198B2 (en) Compounds and methods for the treatment of neurodegenerative diseases
JP2011231022A (ja) イミダゾロン誘導体
Lohou et al. Multifunctional diamine AGE/ALE inhibitors with potential therapeutical properties against Alzheimer's disease
AU2010268666A1 (en) Fluorinated derivatives of 3-Hydroxypyridin-4-ones
KR101088880B1 (ko) 케토-아미드 유도체, 그의 제조 방법 및 그를 포함하는 약제학적 조성물
EP3495372A1 (en) Boronated derivatives for the treatment of diseases and conditions associated to oxidative stress
EP3782990A1 (en) Mofezolac derivatives as multi-functions selective cox-1 inhibitors
WO2017201581A1 (en) Non-toxic iron chelators with neuroprotective potential
CN115724786A (zh) 酰胺烷二硫邻苯二甲酰亚胺类化合物、其制备方法和用途
ITBO20070618A1 (it) Composti organici utili per il trattamento di malattie neurodegenerative, loro utilizzazioni e metodo per la loro preparazione
Estrella et al. Chloroquine and chloroquinoline derivatives as models for the design of modulators of amyloid peptide precursor metabolism

Legal Events

Date Code Title Description
AMND Amendment
AMND Amendment
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant