KR20180031025A - 약물 전달을 위한 다중 리간드 제제 - Google Patents

약물 전달을 위한 다중 리간드 제제 Download PDF

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KR20180031025A
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조셉 이. 페인
파드마나브 치브쿨라
스티븐 피. 타니스
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아크투루스 쎄라퓨틱스, 인크.
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Abstract

본 명세서에서 화학식 I, II, 또는 III의 구조를 갖는 화합물; 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 약제학적 조성물; 및 화합물의 제조 방법이 기재되되, R은 이중가닥 RNA 분자를 포함하고, L1, L2 및 L3은 독립적으로 각각의 경우에 대해 탄수화물, 콜레스테릴 또는 펩타이드로 이루어진 군으로부터 선택된 리간드를 포함한다.

Description

약물 전달을 위한 다중 리간드 제제
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2015년 7월 31일자로 출원된 미국 특허 출원 제62/199,577호의 유익을 주장하며, 이 기초출원의 내용은 본 명세서에 그의 전문이 참고로 포함된다.
기술분야
생물학적으로 활성인, 치료 분자의 세포내 전달을 용이하게 하는 분자 제제가 기재된다. 분자 제제는 생물학적으로 활성인 분자 및 적어도 2개의 리간드에 공유 결합된 합성 C4 또는 C6 환식 아미노트라이올로 이루어진다. 분자 제제는 표적화된 세포에 대한 리간드의 입체 특이적 제시에 적합하다. 분자 제제를 포함하는 약제학적 조성물은 치료적 유효량의 생물학적으로 활성인 분자를 환자의 세포 내로 전달하는 데 유용하다.
대상체에 대한 치료적 화합물의 전달은 그의 치료 효과에 중요하며, 보통 표적화된 세포 및 조직에 도달하는 화합물의 제한된 능력에 의해 방해된다. 다양한 전달 수단에 의해 조직의 표적화된 세포에 유입되는 이러한 화합물의 개선은 중요하다.
환자 조직에 대한 효과적인 표적화가 종종 달성되지 않는 생물학적으로 활성인 분자의 예는 면역글로불린 단백질, 폴리뉴클레오타이드, 예컨대 게놈 DNA, cDNA, mRNA 및 siRNA, 안티센스 폴리뉴클레오타이드; 및 다수의 저분자량 화합물, 합성 또는 천연 유래, 예컨대 펩타이드 호르몬 및 항체를 포함하는 수많은 단백질을 포함한다.
생체내 세포에 대한 효율적인 전달은 생물학적으로 활성인 분자에 표적화 리간드를 접합시킴으로써 제공되는 것과 같은 특정 표적화를 필요로 한다. 표적화 리간드는 필요한 표적 세포 또는 조직에서 수용체 결합을 보조함으로써 특이성을 제공한다. 표적화 리간드는 또한 막 수용체에 결합된 생물학적으로 활성인 분자가 막 구조의 함입을 통해 막에 의해 또는 세포막에 의한 전달 시스템의 융합에 의해 둘러싸이는 표적 부위에서 수용체-매개 내포작용을 매개할 수 있다. 수용체-매개 내포작용 시스템의 예는 갈락토스, 만노스, 만노스-6-인산염과 같은 당; 또는 트랜스페린, 아시알로당단백질, 비타민 B12, 인슐린 및 상피세포 성장인자와 같은 펩타이드 및 단백질을 인식하는 것이다.
간 세포 상의 아시알로당단백질 수용체(ASGP-R)는 단백질 상에서 β-연결된 갈락토스 또는 N-아세틸갈락토사민(GalNAc) 잔기에 결합하는 그의 능력에 기반하여 동정되고, 특성규명되었다. ASGP-R은 그것을 간세포 및 간세포암 세포에 대한 수용체-매개 약물 전달을 위한 잠재적 표적으로 만드는 특징인 내포 작용에 의해 세포의 혈장막을 가로질러 거대 분자를 유입한 다양한 다량체를 형성하는 ASGR1 및 ASGR2 서브유닛으로 이루어진다. 몇몇 GalNAc 분자로 이루어진 다가 리간드는 나노몰 친화도를 달성할 수 있다. 다가 리간드 당 사이의 간격 및 배향은 결합에 영향을 미친다. 친유성 리간드, 예컨대 콜레스테롤 또는 지방산은 혈장 단백질 결합 및 결과적으로 순환 반감기를 향상시키고, 혈장 단백질, 예컨대 리포단백질에 결합할 수 있다. 이들 리간드는 또한 대응하는 리포단백질 수용체를 발현시키는 특정 조직 내 흡수를 증가시킬 수 있다.
수용체-특이적 다중 리간드 전달 제제 및 생활성 분자의 생체내 전달을 개선시키기 위한 그의 제조 방법에 대한 궁극적인 필요가 남아있다.
본 명세서에 기재된 것의 일 양상은 하기 화학식 I, II 또는 III의 아미노트라이올로 이루어진 화합물이다:
Figure pct00001
식 중, R은 생물학적으로 활성인 분자를 포함하고, L1, L2 및 L3은 독립적으로 각각의 경우에 대해 탄수화물, 폴리펩타이드, 또는 친유성기로 이루어진 군으로부터 선택된 리간드를 포함한다. 화학식 I의 아미노트라이올은 하기 화학식 Ia, Ib 또는 Ic의 구조를 가질 수 있다:
Figure pct00002
.
화학식 II의 아미노트라이올은 하기 화학식 IIa의 구조를 가질 수 있다:
Figure pct00003
.
화학식 III의 아미노트라이올은 하기 화학식 IIIa, IIIb 또는 IIIc의 구조를 가질 수 있다:
Figure pct00004
.
생물학적으로 활성인 분자는 바람직하게는 치료 분자이며, 더 바람직하게는 분자량이 1000 달톤 미만인 항체, 폴리뉴클레오타이드, 호르몬, 항생제 또는 약물로부터 선택된다. 가장 바람직하게는, 생물학적으로 활성인 분자는 RNA 분자이다. RNA 분자는 센스 및 안티센스 가닥으로 이루어질 수 있다. 아미노트라이올은 센스 가닥의 3'-말단, 센스 가닥의 5'-말단, 안티센스 가닥의 3'-말단 또는 센스 가닥의 5'-말단에 공유 부착될 수 있다. RNA 분자는 변형된 뉴클레오타이드, 예를 들어, 적어도 하나의 UNA를 포함할 수 있다.
R은 바람직하게는 구조 -O-Ρ(Z')(Z")-O-를 갖는 인산염 모이어티를 추가로 포함하되, Z' 및 Z"는 독립적으로 각각의 경우에 대해 O 또는 S이고, 인산염 모이어티는 RNA 분자의 3'-말단 또는 5'-말단에 공유 부착된다. R, L1, L2 또는 L3 중 하나 이상은 바람직하게는 하기 구조를 포함하는 링커를 추가로 포함한다:
-(A-B1-Z)n-D1- 또는
-D1-B1-D1'-E-D2'-B2-D2-
식 중,
A, D1, D1', D2, D2'는 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), NHC(O), CH2, CH2NH 또는 CH2O이고;
B1 및 B2는 각각의 경우에 대해 없거나, 알킬렌, 치환된 알킬렌이되, 하나 이상의 메틸렌은 O, S, S(O), SO2, N(RN), C(R')=C(R"), C≡C 또는 C(O) 중 하나 이상에 의해 중단되거나 또는 종결될 수 있되, R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, C1-C6 알킬, OH, SH 또는 N(RN)2이고, RN은 각각의 경우에 대해 독립적으로 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 뷰틸 또는 벤질이며;
Z는 없거나, NH, O, S, CH2, C(O)O, C(O)NH, NHCH(Ra)C(O), C(O)CH(Ra)NH, CO, CH=NO 또는 헤테로사이클릴이되, Ra는 H 또는 아미노산 측쇄이고;
E는 -CH2N(EL)CH2-이되, EL은 -D3-B3-D3'-Rx이고, D3 및 D3'는 각각 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), OC(O)O, NHC(O), NHC(O)NH, NHC(O)O, CH2, CH2NH 또는 CH2O이고, Rx는 콜레스테릴 또는 양이온성 지질이며; 그리고
n은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다.
상기 기재한 R, L1, L2 또는 L3 중 하나 이상의 링커는 하기 화학식 IV, V 또는 VI의 아미노트라이올을 추가로 포함할 수 있다:
Figure pct00005
식 중, L4, L5, L6 및 L7은 독립적으로 각각의 경우에 대해 하기 구조를 포함한다:
-(A-B1-Z)n-D1- 또는
-D1-B1-D1'-E-D2'-B2-D2-
식 중,
A, D1, D1', D2, D2'는 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), NHC(O), CH2, CH2NH 또는 CH2O이고;
B1 및 B2는 각각의 경우에 대해 없거나, 알킬렌, 치환된 알킬렌이되, 하나 이상의 메틸렌은 O, S, S(O), SO2, N(RN), C(R')=C(R"), C≡C 또는 C(O) 중 하나 이상에 의해 중단되거나 또는 종결될 수 있고, R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, C1-C6 알킬, OH, SH 또는 N(RN)2이며, RN은 각각의 경우에 대해 독립적으로 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 뷰틸 또는 벤질이고;
Z는 없거나, NH, O, S, CH2, C(O)O, C(O)NH, NHCH(Ra)C(O), C(O)CH(Ra)NH, CO, CH=NO 또는 헤테로사이클릴이되, Ra는 H 또는 아미노산 측쇄이며;
E는 -CH2N(EL)CH2-이되, EL은 -D3-B3-D3'-Rx이고, D3 및 D3'은 각각 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), OC(O)O, NHC(O), NHC(O)NH, NHC(O)O, CH2, CH2NH 또는 CH2O이고, Rx는 콜레스테릴 또는 양이온성 지질이며; 그리고
n은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다.
L1, L2 및 L3 중 하나 이상은 친유성기를 포함할 수 있다. 친유성기는 콜레스테롤, 콜산, 아다만탄 아세트산, 1-파이렌 뷰티르산, 다이하이드로테스토스테론, 1,3-비스-O(헥사데실)글리세롤, 게라닐옥시헥실기, 헥사데실글리세롤, 보르네올, 멘톨, 1,3-프로판다이올, 헵타데실기, 팔미트산, 미리스트산, O-3-(올레오일)리토콜산, O-3-(올레오일)콜렌산, 다이메톡시트라이틸, 및 페녹사진으로부터 선택된다. 바람직한 친유성기는 콜레스테릴, 예를 들어, 콜레스테롤이다.
L1, L2 및 L3 중 하나 이상은 탄수화물을 포함한다. 탄수화물은 바람직하게는 N-아세틸-갈락토사민(GalNAc), 알로스, 알트로스, 아라비노스, 클라디노스, 에리트로스, 에리트룰로스, 프럭토스, D-푸시톨, L-푸시톨, 푸코사민, 푸코스, 푸쿨로스, 갈락토사민, D-갈락토사미니톨, 갈락토스, 글루코사민, N-아세틸-글루코사민, 글루코사미니톨, 글루코스, 글루코스-6-인산염, 굴로스 글리세르알데하이드, L-글리세로-D-만노스-헵토스, 글리세롤, 글리세론, 굴로스, 이도스, 릭소스, 만노스아민, 만노스, 만노스-6-인산염, 사이코스, 퀴노보스, 퀴노보사민, 람니톨, 람노사민, 람노스, 리보스, 리불로스, 세도헵툴로스, 솔보스, 타가토스, 탈로스, 타르타르산, 트레오스, 자일로스 및 자일루로스로부터 선택되는 단당류이다. 단당류는 바람직하게는 D- 또는 L 입체배치이다. 바람직하게는, 탄수화물은 GalNAc 또는 D-갈락토스이다.
단당류는 데옥시당, 아미노당, 티오당, 셀레노당, 텔루로당, 아자당, 이미노당, 포스파노당, 포스파당, C-치환된 단당류, 불포화 단당류, 알디톨, 알돈산, 케토알돈산, 유론산 또는 알다르산으로부터 선택될 수 있다.
탄수화물은 아베쿠오스, 아크라보스, 아뉴세토스, 아밀로펙틴, 아밀로스, 아피오스, 아르카노스, 아스카릴로스, 아스코르브산, 보이비노스, 셀로비오스, 셀로비오스, 셀룰로스, 차코트리오스, 찰코스, 키틴, 콜리토스, 사이클로덱스트린, 사이마로스, 덱스트린, 2-데옥시리보스, 2데옥시글루코스, 디기노스, 디기탈로스, 디기톡소스, 에발로스, 에베미트로스, 프럭토올리고당, 갈토-올리고당, 겐티아노스, 겐티오비오스, 글루칸, 글루코겐, 글리코겐, 하마멜로스, 헤파린, 인슐린, 아이소레보글루코스논, 아이소말토스, 아이소말토트리오스, 아이소파노스, 코지비오스, 락토스, 락토사민, 락토스다이아민, 라미나르아비오스, 레보글루코산, 레보글루코스논, β-말토스, 말트리오스, 만난-올리고당, 만난트리오스, 멜레지토스, 멜리비오스, 뮤람산, 마이카로스, 마이시노스, 뉴라민산, 니게로스, 노지리마이신, 노비오스, 올레안드로스, 파노스, 파라토스, 플란테오스, 프리메베로스, 라피노스, 로디노스, 루티노스, 사르멘토스, 세도헵툴로스, 세도헵툴로산, 솔라트리오스, 소포로스, 스타키오스, 스트렙토스, 수크로스, 암-트레할로스, 트레할로사민, 투라노스, 티벨로스, 자일로비오스, 또는 움벨리페로스를 포함하는 이당류, 삼당류 또는 다당류일 수 있다.
L1, L2 및/또는 L3은 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 폴리펩타이드는 세포의 수용체에 대한 리간드일 수 있고, 예를 들어, 아르기닐글리실아스파르트산(RGD) 또는 트랜스페린의 TfR-결합 도메인을 포함하는 트랜스페린 수용체(TfR)에 대한 리간드이다. 폴리펩타이드는 항체일 수 있다.
L1, L2 및 L3은 독립적으로 하기로 이루어진 링커를 포함할 수 있다:
-(A-B-Z)n-D-,
식 중,
A 및 D는 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), NHC(O), CH2, CH2NH 또는 CH2O이고;
B는 없거나, 알킬렌, 치환된 알킬렌이되, 하나 이상의 메틸렌은 O, S, S(O), SO2, N(RN), C(R')=C(R"), C≡C 또는 C(O) 중 하나 이상에 의해 중단되거나 또는 종결될 수 있되, R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, C1-C6 알킬, OH, SH 또는 N(RN)2이고, RN은 각각의 경우에 대해 독립적으로 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 뷰틸, 또는 벤질이며;
Z는 없거나, NH, O, S, CH2, C(O)O, C(O)NH, NHCH(Ra)C(O), C(O)CH(Ra)NH, CO, CH=NO, 또는 헤테로사이클릴이되, Ra는 H 또는 아미노산 측쇄이고; 그리고
n은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20이다.
L2 또는 L3, 또는 둘 다는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 링커를 포함할 수 있다. 바람직하게는, L2, 또는 L3, 또는 둘 다는 아마이드 결합을 포함하는 링커를 포함한다. 더 바람직하게는, L2 또는 L3, 또는 둘 다는 -O(CH2)4(CO)NH(CH2)3NH(CO)(CH2)2O-를 포함하는 링커를 포함하고, 리간드는 GalNAc이다. 바람직하게는, L1은 -O(CH2)10O-을 포함하는 링커를 포함하고, 리간드는 콜레스테롤이다. 가장 바람직하게는 L1은 -O(CH2)10O-를 포함하는 링커를 포함하고, L1 리간드는 콜레스테롤이고, L2와 L3은 둘 다 -O(CH2)4(CO)NH(CH2)3NH(CO)(CH2)2O-를 포함하는 링커를 포함하며, 관련된 리간드는 GalNAc이다.
본 설명의 다른 양상은 하기 화학식 45로 나타내는 다중 리간드 화합물의 제조 방법이며:
Figure pct00006
;
상기 방법은 하기 단계들을 포함한다:
i. 하기 아미노트라이올 화합물을 하기 친유성기 42와 반응시키는 단계:
Figure pct00007
Figure pct00008
;
ii. 단계 i의 생성물로부터 하이드록실 보호기를 제거하는 단계;
iii. NaOH 중에서 단계 ii의 생성물을 (CHCH)COO-t-뷰틸과 반응시키는 단계;
iv. 단계 iii의 생성물에 아미노 보호기를 첨가하는 단계;
v. 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카보다이이미드-하이드로클로라이드(EDC) 및 하이드록시 벤조트라이아졸(HOBT)을 이용하여 단계 iv의 생성물을 BocN(CH2)3NH2와 반응시키는 단계;
vi. EDC, HOBT 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민을 이용하여 단계 v의 생성물을 하기 GalNAc 산과 반응시키는 단계:
Figure pct00009
.
상기 방법을 위한 출발 물질은 바람직하게는 화학식 1, 5, 또는 9의 구조를 갖는 아미노트라이올이다:
Figure pct00010
.
설명의 다른 양상은 하기 화학식 53의 다중 리간드 화합물의 제조 방법이며:
Figure pct00011
;
상기 방법은 하기 단계들을 포함한다
i. 하기 아미노트라이올 화합물을 n-Bu4NF와 반응시키는 단계:
Figure pct00012
;
ii. 단계 i의 생성물을 CH3C(OCH3)2CH3 및 p-톨루엔설폰산과 반응시키는 단계,
iii. 단계 ii의 생성물을 LiBH4와 반응시키는 단계,
iv. 단계 iii의 생성물을 하기 친유성기 42와 반응시키는 단계:
Figure pct00013
;
v. 단계 iv의 생성물로부터 하이드록실 보호기를 제거하는 단계;
vi. NaOH 중에서 단계 v의 생성물을 (CHCH)COO-t-뷰틸과 반응시키는 단계;
vii. vi의 생성물에 아미노 보호기를 첨가하는 단계;
viii. EDC 및 HOBT를 이용하여 단계 viii의 생성물을 BocN(CH2)3NH2와 반응시키는 단계;
ix. EDC, HOBT 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민을 이용하여 단계 ix의 생성물을 하기 GalNAc 산과 반응시키는 단계:
Figure pct00014
.
상기 방법은 바람직하게는 하기 화학식 13, 19 또는 30의 구조를 갖는 아미노트라이올 화합물에 의해 시작된다:
Figure pct00015
.
설명의 다른 양상은 하기 화학식 45에 나타낸 다중 리간드 화합물의 제조 방법이며:
Figure pct00016
,
상기 방법은 하기 단계들을 포함한다:
i. 하기 화학식 38을 갖는 아미노트라이올 화합물을 하기 친유성기 42와 반응시키는 단계:
Figure pct00017
Figure pct00018
;
ii. 단계 i의 생성물로부터 하이드록실 보호기를 제거하는 단계;
iii. NaOH 중에서 단계 ii의 생성물을 (CHCH)COO-t-뷰틸과 반응시키는 단계;
iv. 단계 iii의 생성물에 아미노 보호기를 첨가하는 단계;
v. EDC 및 HOBT를 이용하여 단계 iv의 생성물을 BocN(CH2)3NH2와 반응시키는 단계;
vi. EDC, HOBT 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민을 이용하여 단계 v의 생성물을 하기 GalNAc 산과 반응시키는 단계:
Figure pct00019
.
설명의 다른 양상은 하기 화학식 I, II, 또는 III의 아미노트라이올로 이루어진 화합물을 포함하는 약제학적 조성물이다:
Figure pct00020
R은 치료 분자를 포함하고, L1, L2 및 L3은 독립적으로 각각의 경우에 대해 탄수화물, 폴리펩타이드, 또는 친유성기로 이루어진 군으로부터 선택된 리간드를 포함한다. 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 반대이온 또는 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함할 수 있다. 바람직하게는, 치료 분자는 RNA, 더 바람직하게는 이중-가닥 siRNA이다. 이중-가닥 siRNA는 UNA를 포함할 수 있다. 바람직하게는 L2 및 L3 리간드는 탄수화물, 가장 바람직하게는, GalNAc 또는 갈락토스이다.
본 설명의 다른 양상은 하기 화학식 I, II 또는 III의 아미노트라이올로 이루어진 화합물을 포함하는 치료적 유효량의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 질환을 치료하는 방법이다:
Figure pct00021
식 중, R은 치료 분자를 포함하고, L1, L2 및 L3은 독립적으로 각각의 경우에 대해 탄수화물, 폴리펩타이드 또는 친유성기로 이루어진 군으로부터 선택된 리간드를 포함한다. 상기 화합물은 표적 유전자, 예를 들어, 인자 VII, Eg5, PCSK9, TPX2, apoB, SAA, TTR, RSV, PDGF 베타, Erb-B, Src, CRK, GRB2, RAS, MEKK, JNK, RAF, Erk1/2, PCNA (p21), MYB, JUN, FOS, BCL-2, 사이클린 D, VEGF, EGFR, 사이클린 A, 사이클린 E, WNT-1, 베타-카테닌, c-MET, PKC, NFKB, STAT3, 서비빈, Her2/Neu, 토포아이소머라제 I, 또는 토포아이소머라제 II 알파; 또는 p73의 돌연변이체 유전자, p21(WAFl/CIP1), p27(KIP1), PPMID, RAS, 카베올린 I, MIB I, MTAI, M68, 또는 p53 종양 억제유전자의 발현을 넉다운시키는 RNA를 포함할 수 있다. 약제학적 조성물은 바람직하게는 피하로 투여된다.
도 1은 화학식 IIIa의 아미노트라이올의 합성을 도시한 도면.
도 2는 화학식 IIIb의 아미노트라이올의 합성을 도시한 도면.
도 3은 화학식 IIIc의 아미노트라이올의 합성을 도시한 도면.
도 4는 화학식 Ia의 아미노트라이올의 합성을 도시한 도면.
도 5는 화학식 Ib의 아미노트라이올의 합성을 도시한 도면.
도 6은 화학식 Ib의 아미노트라이올의 합성을 도시한 도면.
도 7은 화학식 Ic의 아미노트라이올의 합성을 도시한 도면.
도 8은 화합물 1의 합성을 도시한 도면.
도 9는 화합물 5의 합성을 도시한 도면.
도 10은 화합물 9의 합성을 도시한 도면.
도 11은 중간체 5 내지 7의 합성을 도시한 도면.
도 12는 중간체 5 내지 7의 가수분해 산물을 도시한 도면.
도 13은 화학식 IIa의 아미노트라이올의 합성을 도시한 도면.
도 14는 콜레스테롤-링커 단편 42의 제조를 도시한 도면.
도 15는 아제티딘계/콜레스테롤 접합체 45의 합성을 도시한 도면.
도 16은 아제티딘계/콜레스테롤 접합체 48의 합성을 도시한 도면.
도 17은 아제티딘계/콜레스테롤 접합체 51의 합성을 도시한 도면.
도 18은 피페리딘계/콜레스테롤 접합체 54의 합성을 도시한 도면.
도 19는 피페리딘계/콜레스테롤 접합체 57의 합성을 도시한 도면.
도 20은 피페리딘계/콜레스테롤 접합체 60의 합성을 도시한 도면.
도 21은 피페리딘계/콜레스테롤 접합체 63의 합성을 도시한 도면.
도 22는 사이클로헥산계/콜레스테롤 접합체 66의 합성을 도시한 도면.
도 23은 도 15 내지 도 22에 대해 초기 콜레스테롤 부가물의 접합체 45, 48, 51, 54, 57, 60, 63 및 66으로의 전환을 위해 이용한 남아있는 단계들을 도시한 도면.
도 24a는 도 15 내지 도 17의 아제타딘계/콜레스테롤 접합체에 RNA를 도입하는 용액상 합성을 도시한 도면.
도 24b는 도 24a에 나타낸 용액상 합성을 계속해서 도시한 도면.
도 25a는 도 15 내지 도 17의 아제타딘계/콜레스테롤 접합체에 RNA를 도입하는 고체상 합성을 도시한 도면.
도 25b는 도 25A에 나타낸 고체상 합성을 계속해서 도시한 도면.
본 명세서에 기재되는 것은 피하 투여 후에 대상체 신체에서 표적 세포에 대한 치료 분자의 전달을 위한 다중 리간드이다.
다중 리간드 제제는 공유적으로 접합된 치환체로서 치료 분자를 포함한다. 바람직한 치료 분자는 생물학적으로 활성인 폴리뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드, 예컨대 게놈 DNA의 단편, mRNA, mRNA(cDNA)의 DNA 복제물, 이중-가닥 짧은 간섭 RNA(siRNA), 부분적으로 이중-가닥 짧은 헤어핀 RNA(shRNA), 단일 가닥 안티센스 RNA, 또는 마이크로RNA(miRNA)이다. 더 바람직하게는 치료 분자는 siRNA의 한 가닥의 서열에 대해 상보성인 mRNA를 암호화하는 표적 유전자를 발현시키는 세포 내로 유입 시 mRNA 기능을 방해함으로써 표적 유전자의 발현을 넉다운시킬 수 있는 siRNA이다. 올리고뉴클레오타이드는 길이가 10 내지 10,000개의 뉴클레오타이드(nt), 10 내지 1,000개의 nt, 10 내지 500개의 nt, 바람직하게는 15 내지 100개의 nt, 가장 바람직하게는 15 내지 35개의 nt일 수 있다.
다중 리간드 제제는 또한 리간드의 세트를 포함한다. 생화학 및 약리학에서, 리간드는 생물학적 목적을 제공하는 생체분자와 복합체를 형성하는 물질이다. 단백질-리간드 결합에서, 리간드는 보통 표적 단백질에 대한 부위에 결합하는 단일-촉발 분자이다. 결합은 분자간 힘, 예컨대 이온 결합, 수소 결합 및 반데르 발스 힘에 의해 생긴다. 도킹(docking)(회합)은 보통 반전 가능하며(해리), 해리 상수(KD)에 의해 특성규명된다. KD 값은 리간드와 수용체 사이의 결합(친화도) 강도에 반비례하며, 따라서 KD 값이 작을수록, 수용체에 대한 리간드의 친화도는 더 크다. 리간드는 기질, 저해제, 활성제 및 신경전달물질을 포함한다. 리간드 결합은 수용체 결합 부위의 절반이 점유되는 리간드의 농도(IC50으로 알려짐)에 관해 종종 특성 규명되는데, 이는 해리 상수와 관련되지만, 해리 상수와는 상이하다. 하나 초과의 리간드를 소유함으로써, 다중 리간드 제제는 단일 리간드 단독보다 훨씬 더 강하게 결합한다(즉, 더 낮은 값의 KD를 가진다). 다중 리간드 제제의 친화도 증가는 단일-리간드보다 실질적으로 더 크다.
본 명세서에 기재된 다중 리간드 제제는 하기 화학식 I, II, 또는 III의 아미노트라이올로 이루어진 화합물이다:
Figure pct00022
식 중, R은 생물학적으로 활성인 분자를 포함하고, L1, L2 및 L3은 독립적으로 각각의 경우에 대해 탄수화물, 폴리펩타이드 또는 친유성기로 이루어진 군으로부터 선택된 리간드를 포함한다.
화학식 I의 아미노트라이올은 하기 화학식 Ia, Ib, 또는 Ic의 구조를 가질 수 있다:
Figure pct00023
.
화학식 II의 아미노트라이올은 하기 화학식 IIa의 구조를 가질 수 있다:
Figure pct00024
.
화학식 III의 아미노트라이올은 하기 화학식 IIIa, IIIb, 또는 IIIc의 구조를 가질 수 있다:
Figure pct00025
.
생물학적으로 활성인 분자는 바람직하게는 치료 분자이며, 더 바람직하게는 분자량이 1000 달톤 미만인 항체, 폴리뉴클레오타이드, 호르몬, 항생제 또는 약물로부터 선택된다. 가장 바람직하게는, 생물학적으로 활성인 분자는 RNA 분자이다. RNA 분자는 센스 및 안티센스 가닥으로 이루어질 수 있다. 아미노트라이올은 센스 가닥의 3'-말단, 센스 가닥의 5'-말단, 안티센스 가닥의 3'-말단 또는 센스 가닥의 5'-말단에 공유 부착될 수 있다. RNA 분자는 변형된 뉴클레오타이드, 예를 들어, 적어도 하나의 UNA를 포함할 수 있다.
R은 바람직하게는 구조 -O-Ρ(Z')(Z")-O-를 갖는 인산염 모이어티를 추가로 포함하되, Z' 및 Z"는 독립적으로 각각의 경우에 대해 O 또는 S이고, 인산염 모이어티는 RNA 분자의 3'-말단 또는 5'-말단에 공유 부착된다. R, L1, L2 또는 L3 중 하나 이상은 바람직하게는 하기 구조를 포함하는 링커를 추가로 포함한다
-(A-B1-Z)n-D1- 또는
-D1-B1-D1'-E-D2'-B2-D2-
식 중,
A, D1, D1', D2, D2'는 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), NHC(O), CH2, CH2NH 또는 CH2O이고;
B1 및 B2는 각각의 경우에 대해 없거나, 알킬렌, 치환된 알킬렌이되, 하나 이상의 메틸렌은 O, S, S(O), SO2, N(RN), C(R')=C(R"), C≡C, 또는 C(O) 중 하나 이상에 의해 중단되거나 또는 종결될 수 있되, R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, C1-C6 알킬, OH, SH 또는 N(RN)2이고, RN은 각각의 경우에 대해 독립적으로 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 뷰틸, 또는 벤질이며;
Z는 없거나, NH, O, S, CH2, C(O)O, C(O)NH, NHCH(Ra)C(O), C(O)CH(Ra)NH, CO, CH=NO, 또는 헤테로사이클릴이되, Ra는 H 또는 아미노산 측쇄이고;
E는 -CH2N(EL)CH2-이되, EL은 -D3-B3-D3'-Rx이고, D3 및 D3'은 각각 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), OC(O)O, NHC(O), NHC(O)NH, NHC(O)O, CH2, CH2NH 또는 CH2O이고, Rx는 콜레스테릴 또는 양이온성 지질이며; 그리고
n은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다.
링커는 하기 화학식 IV, V 또는 VI의 아미노트라이올을 추가로 포함할 수 있다:
Figure pct00026
식 중, L4, L5, L6 및 L7은 독립적으로 각각의 경우에 대해 하기 구조를 포함한다:
-(A-B1-Z)n-D1- 또는
-D1-B1-D1'-E-D2'-B2-D2-
식 중,
A, D1, D1', D2, D2'는 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), NHC(O), CH2, CH2NH 또는 CH2O이고;
B1 및 B2는 각각의 경우에 대해 없거나, 알킬렌, 치환된 알킬렌이되, 하나 이상의 메틸렌은 O, S, S(O), SO2, N(RN), C(R')=C(R"), C≡C, 또는 C(O) 중 하나 이상에 의해 중단되거나 또는 종결될 수 있되, R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, C1-C6 알킬, OH, SH, 또는 N(RN)2이고, RN은 각각의 경우에 대해 독립적으로 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 뷰틸 또는 벤질이며;
Z는 없거나, NH, O, S, CH2, C(O)O, C(O)NH, NHCH(Ra)C(O), C(O)CH(Ra)NH, CO, CH=NO, 또는 헤테로사이클릴이되, Ra는 H 또는 아미노산 측쇄이고;
E는 -CH2N(EL)CH2-이되, EL은 -D3-B3-D3'-Rx이고, D3 및 D3'는 각각 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), OC(O)O, NHC(O), NHC(O)NH, NHC(O)O, CH2, CH2NH 또는 CH2O이며, Rx는 콜레스테릴 또는 양이온성 지질이고; 그리고
n은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다.
L1, L2 및 L3 중 하나 이상은 친유성기를 포함할 수 있다. 친유성기는 콜레스테롤, 콜산, 아다만탄 아세트산, 1-파이렌 뷰티르산, 다이하이드로테스토스테론, 1,3-비스-O(헥사데실)글리세롤, 게라닐옥시헥실기, 헥사데실글리세롤, 보르네올, 멘톨, 1,3-프로판다이올, 헵타데실, 팔미트산, 미리스트산, O-3-(올레오일)리토콜산, O-3-(올레오일)콜렌산, 다이메톡시트라이틸 및 페녹사진으로부터 선택된다. 바람직한 친유성기는 콜레스테릴, 예를 들어, 콜레스테롤이다.
L1, L2 및 L3 중 하나 이상은 탄수화물을 포함한다. 탄수화물은 바람직하게는 GalNAc, 알로스, 알트로스, 아라비노스, 클라디노스, 에리트로스, 에리트룰로스, 프럭토스, D-푸시톨, L-푸시톨, 푸코사민, 푸코스, 푸쿨로스, 갈락토사민, D-갈락토사미니톨, 갈락토스, 글루코사민, N-아세틸-글루코사민, 글루코사미니톨, 글루코스, 글루코스-6-인산염, 굴로스 글리세르알데하이드, L-글리세로-D-만노스-헵토스, 글리세롤, 글리세론, 굴로스, 이도스, 릭소스, 만노스아민, 만노스, 만노스-6-인산염, 사이코스, 퀴노보스, 퀴노보사민, 람니톨, 람노사민, 람노스, 리보스, 리불로스, 세도헵툴로스, 솔보스, 타가토스, 탈로스, 타르타르산, 트레오스, 자일로스 및 자일루로스로부터 선택되는 단당류이다. 단당류는 바람직하게는 D- 또는 L 입체배치이다. 단당류는 데옥시당, 아미노당, 티오당, 셀레노당, 텔루로당, 아자당, 이미노당, 포스파노당, 포스파당, C-치환된 단당류, 불포화 단당류, 알디톨, 알돈산, 케토알돈산, 유론산, 또는 알다르산으로부터 선택될 수 있다. 탄수화물은 아베쿠오스, 아크라보스, 아뉴세토스, 아밀로펙틴, 아밀로스, 아피오스, 아르카노스, 아스카릴로스, 아스코르브산, 보이비노스, 셀로비오스, 셀로비오스, 셀룰로스, 차코트리오스, 찰코스, 키틴, 콜리토스, 사이클로덱스트린, 사이마로스, 덱스트린, 2-데옥시리보스, 2데옥시글루코스, 디기노스, 디기탈로스, 디기톡소스, 에발로스, 에베미트로스, 프럭토올리고당, 갈토-올리고당, 겐티아노스, 겐티오비오스, 글루칸, 글루코겐, 글리코겐, 하마멜로스, 헤파린, 인슐린, 아이소레보글루코스논, 아이소말토스, 아이소말토트리오스, 아이소파노스, 코지비오스, 락토스, 락토사민, 락토스다이아민, 라미나르아비오스, 레보글루코산, 레보글루코스논, β-말토스, 말트리오스, 만난-올리고당, 만난트리오스, 멜레지토스, 멜리비오스, 뮤람산, 마이카로스, 마이시노스, 뉴라민산, 니게로스, 노지리마이신, 노비오스, 올레안드로스, 파노스, 파라토스, 플란테오스, 프리메베로스, 라피노스, 로디노스, 루티노스, 사르멘토스, 세도헵툴로스, 세도헵툴로산, 솔라트리오스, 소포로스, 스타키오스, 스트렙토스, 수크로스, 암-트레할로스, 트레할로사민, 투라노스, 티벨로스, 자일로비오스, 또는 움벨리페로스를 포함하는 이당류, 삼당류 또는 다당류일 수 있다. 바람직하게는, 탄수화물은 GalNAc 또는 D-갈락토스이다.
L1, L2 및/또는 L3은 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 폴리펩타이드는 세포의 수용체에 대한 리간드일 수 있고, 예를 들어, 트랜스페린의 TfR-결합 도메인을 포함하는 TfR에 대한 RGD 또는 리간드이다. 폴리펩타이드는 항체일 수 있다.
L1, L2 및 L3은 독립적으로 하기로 이루어진 링커를 포함할 수 있다:
-(A-B-Z)n-D-
식 중,
A 및 D는 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), NHC(O), CH2, CH2NH 또는 CH2O이고;
B는 없거나, 알킬렌, 치환된 알킬렌이되, 하나 이상의 메틸렌은 O, S, S(O), SO2, N(RN), C(R')=C(R"), C≡C 또는 C(O) 중 하나 이상에 의해 중단되거나 또는 종결될 수 있되, R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, C1-C6 알킬, OH, SH 또는 N(RN)2이고, RN은 각각의 경우에 대해 독립적으로 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 뷰틸, 또는 벤질이며;
Z는 없거나, NH, O, S, CH2, C(O)O, C(O)NH, NHCH(Ra)C(O), C(O)CH(Ra)NH, CO, CH=NO, 또는 헤테로사이클릴이되, Ra는 H 또는 아미노산 측쇄이고; 그리고
n은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20이다.
L2 또는 L3, 또는 둘 다는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 링커를 포함할 수 있다. 바람직하게는, L2, 또는 L3, 또는 둘 다는 아마이드 결합을 포함하는 링커를 포함한다. 더 바람직하게는, L2 또는 L3, 또는 둘 다는 -O(CH2)4(CO)NH(CH2)3NH(CO)(CH2)2O-를 포함하는 링커를 포함하고, 리간드는 GalNAc이다. 바람직하게는, L1은 -O(CH2)10O-을 포함하는 링커를 포함하고, 리간드는 콜레스테롤이다. 가장 바람직하게는 L1은 -O(CH2)10O-를 포함하는 링커를 포함하고, L1 리간드는 콜레스테롤이고, L2와 L3은 둘 다 -O(CH2)4(CO)NH(CH2)3NH(CO)(CH2)2O-를 포함하는 링커를 포함하며, 관련된 리간드는 GalNAc이다.
정의
"적어도 하나"는 하나 이상(예를 들어, 1 내지 3, 1 내지 2, 또는 1)을 의미한다.
"조성물"은 구체화된 양으로 구체화된 성분을 포함하는 생성물뿐만 아니라 구체화된 양으로 구체화된 성분의 조합물로부터 직접적으로 또는 간접적으로 생성되는 임의의 생성물을 포함한다.
본 발명의 치료 방법에서 다른 의약과 함께 화학식 1, I 및 II의 화합물의 투여를 기재하기 위해 사용되는 "조합하여"는 화학식 1, I 및 II의 화합물과 다른 의약이 별개의 투약 형태로 순차적으로 또는 동시에 투여되거나, 동일한 투약 형태로 동시에 투여된다는 것을 의미한다.
"포유류"는 인간 또는 다른 포유류를 의미하거나, 또는 인간을 의미한다.
"환자"는 인간과 다른 포유류를 둘 다, 바람직하게는 인간을 포함한다.
"알킬"은 포화 또는 불포하된, 직선형 또는 분지형, 탄화수소쇄이다. 다양한 실시형태에서, 알킬기는 1 내지 18개의 탄소 원자를 가지고, 즉, C1-C18 기이거나, 또는 C1-Cl2 기, C1-C6 기 또는 C1-C4 기이다. 독립적으로, 다양한 실시형태에서, 알킬기는 0개의 분지(즉, 직쇄임), 1개의 분지, 2개의 분지 또는 2개 초과의 분지를 가진다. "알케닐"은 1개의 이중 결합, 2개의 이중 결합, 2개 초과의 이중 결합을 가질 수 있는 불포화 알킬이다. "알킨알"은 1개의 삼중 결합, 2개의 삼중 결합, 또는 2개 초과의 삼중 결합을 가질 수 있는 불포화 알킬이다. 알킬 쇄는 1개의 치환체(즉, 알킬기는 단일 치환됨), 또는 1 내지 2개의 치환체, 또는 1 내지 3개의 치환체, 또는 1 내지 4개의 치환체로 선택적으로 치환될 수 있다. 치환체는 하이드록시, 아미노, 알킬아미노, 보론일, 카복시, 나이트로, 사이아노 등으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 알킬기가 하나 이상의 헤테로원자를 혼입할 때, 알킬기는 본 명세서에서 헤테로알킬기로서 지칭된다. 알킬기 상의 치환체가 탄화수소이면, 얻어진 기는 단순히 치환된 알킬로서 지칭된다. 다양한 양상에서, 치환체를 포함하는 알킬기는 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 또는 7개 미만의 탄소를 가진다.
"저급 알킬"은 쇄 내에서 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 기를 의미하며, 이 쇄는 직선형 또는 분지형일 수 있다. 적합한 알킬기의 비제한적 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 아이소프로필, n-뷰틸, t-뷰틸, n-펜틸 및 헥실을 포함한다.
"알콕시"는 알킬-O-기를 의미하되, 알킬은 상기 정의한 바와 같다. 알콕시기의 비제한적 예는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 아이소프로폭시, n-뷰톡시 및 헵톡시를 포함한다. 모 모이어티에 대한 결합은 에터 산소를 통한다.
"알콕시알킬"은 알콕시 및 알킬이 앞서 기재한 바와 같은 알콕시-알킬기를 의미한다. 바람직한 알콕시알킬은 저급 알킬기를 포함한다. 모 모이어티에 대한 결합은 알킬을 통한다.
"알킬아릴"은 알킬-아릴-기를 의미하며, 이때 알킬 및 아릴은 앞서 기재된 바와 같다. 바람직한 알킬아릴은 저급 알킬기를 포함한다. 모 모이어티에 대한 결합은 아릴을 통한다.
"아미노알킬"은 알킬기를 통해 모 모이어티에 결합된 NH2-알킬-기를 의미하되, 알킬은 상기 나타낸 바와 같다.
"카복시알킬"은 알킬기를 통해 모 모이어티에 결합된 HOOC-알킬-기를 의미한다.
"상업적으로 입수 가능한 화학물질" 및 본 명세서에 제시된 실시예에서 사용되는 화학물질은 표준 상업적 공급원으로부터 얻을 수 있다.
"화학적 문헌에 기재된 화합물"은 당업자에게 공지된 화학적 화합물 및 화학적 반응에 관한 참고문헌 및 데이터베이스를 통해 동정될 수 있다. 본 명세서에 개시된 화합물의 제조에서 유용한 반응물의 합성을 상술하거나, 또는 본 명세서에 개시된 화합물의 제조를 기재하는 항목에 대한 언급을 제공하는 적합한 참고문헌 및 조약은, 예를 들어, 문헌[Wagner, SYNTHETIC ORGANIC CHEMISTRY, John Wiley, NY, 1953; Sandler, ORGANIC FUNCTIONAL GROUP PREPARATIONS, 2nd Ed., Academic Press, NY, 1983; House, MODERN SYNTHETIC REACTIONS, 2nd Ed., WA Benjamin, Menlo Park, CA, 1972; Glichrist, HEYEROCYCLIC CHEMISTRY, 2nd Ed. John Wiley and Sons, NY, 1992; March, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY: REACTIONS, MECHANISMS AND STRUCTURE, 5th Ed., Wiley Interscience, NY, 2001]을 포함한다.
"할로"는 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도기를 의미한다. 플루오로, 클로로 또는 브로모가 바람직하며, 플루오로 및 클로로가 더 바람직하다.
"할로겐"은 플루오린, 염소, 브로민 또는 요오드를 의미한다. 플루오린, 염소 및 브로민이 바람직하다.
"헤테로알킬"은 탄소 및 적어도 하나의 헤테로원자를 함유하는 포화 또는 불포화, 직선형 또는 분지형 쇄이다. 헤테로알킬기는, 다양한 실시형태에서 1개의 헤테로원자, 또는 1 또는 2개의 헤테로원자, 또는 1, 2 또는 3개의 헤테로원자, 또는 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 가질 수 있다. 일 양상에서, 헤테로알킬쇄는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 또는 18개(즉, 1 내지 18개) 구성원 원자(탄소 및 헤테로원자)를 함유하고, 다양한 실시형태에서 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12개(1 내지 12개), 또는 1 내지 6, 또는 1 내지 4개의 구성원 원자를 함유한다. 독립적으로, 다양한 실시형태에서, 헤테로알킬은 분지가 없거나(즉, 직선형 쇄임), 1개의 분지, 2개의 분지 또는 2개 초과의 분자를 가진다. 독립적으로, 일 실시형태에서, 헤테로알킬기는 포화된다. 다른 실시형태에서, 헤테로알킬기는 불포화된다. 다양한 실시형태에서, 불포화된 헤테로알킬기는 1개의 이중 결합, 2개의 이중 결합, 2개 초과의 이중 결합, 및/또는 1개의 삼중 결합, 2개의 삼중 결합, 또는 2개 초과의 삼중 결합을 가질 수 있다. 헤테로알킬쇄는 치환되거나 또는 비치환될 수 있다. 일 실시형태에서, 헤테로알킬쇄는 비치환된다. 다른 실시형태에서, 헤테로알킬쇄는 치환된다. 치환된 헤테로알킬쇄는 1개의 치환체를 가질 수 있거나(즉, 단일치환됨) 또는, 예를 들어, 1 내지 2개의 치환체, 또는 1 내지 3개의 치환체, 또는 1 내지 4개의 치환체를 가질 수 있다. 예시적인 헤테로알킬 치환체는 에스터(-C(O)OR) 및 카보닐(-C(O)-)을 포함한다.
"하이드록시알킬"은 HO-알킬-기를 의미하며, 이때 알킬은 앞서 정의된다. 바람직한 하이드록시알킬은 저급 알킬을 포함한다. 적합한 하이드록시알킬기의 비제한적 예는 하이드록시메틸 및 2-하이드록시 에틸을 포함한다.
"수화물"은 용매화물이되, 용매 분자는 H2O이다.
"친유성 분자" 및 "지질"은 지방산의 에스터를 포함하고, 수 중에서 불용성이지만, 다수의 유기 용매 중에서 가용성인 것을 특징으로 하는 유기 화합물을 의미한다. 지질은 보통 적어도 3가지 부류로 나뉘어진다: (1) 지방 및 오일뿐만 아니라 왁스를 포함하는 "단순 지질"; (2) 인지질 및 당지질을 포함하는 "화합물 지질"; 및 (3) "유도 지질", 예컨대 스테로이드.
"용매화물"은 본 개시내용의 화합물의 하나 이상의 용매 분자와의 물리적 회합을 의미한다. 이 물리적 회합은 수소 결합을 포함하여, 다양한 정도의 이온 및 공유 결합을 수반한다. 특정 예에서, 용매화물은, 예를 들어 하나 이상의 용매 분자가 결정질 고체의 결정 격자 내에 혼입될 때, 단리될 것이다. "용매화물"은 용액상과 단리 가능한 용매화물을 둘 다 포함한다. 적합한 용매화물의 비제한적 예는 에탄올레이트, 메탄올레이트 등을 포함한다.
"캡슐화된 지질"은 치료적 핵산, 예컨대 전체 캡슐화, 부분적 캡슐화, 또는 둘 다에 의한 mRNA를 제공하는 지질 입자를 의미할 수 있다. 바람직한 실시형태에서, 핵산(예를 들어, mRNA)은 지질 입자에서 완전히 캡슐화된다.
"지질 접합체"는 지질 입자의 응집을 저해하는 접합된 지질을 의미한다. 이러한 지질 접합체는 PEG-지질 접합체, 예를 들어, 다이알킬옥시프로필에 접합된 PEG(예를 들어, PEG-DAA 접합체), 다이아실글리세롤에 결합된 PEG(예를 들어, PEG-DAG 접합체), 콜레스테롤에 접합된 PEG, 포스파티딜에탄올아민에 결합된 PEG, 및 세라마이드에 접합된 PEG, 양이온성 PEG 지질, 폴리옥사졸린(POZ)-지질 접합체, 폴리아마이드 올리고머(예를 들어, ATTA-지질 접합체) 및 이들의 혼합물을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. PEG 또는 POZ는 지질에 직접적으로 접합될 수 있거나 또는 링커 모이어티를 통해 지질에 연결될 수 있다. 예를 들어, 비-에스터-함유 링커 모이어티 및 에스터-함유 링커 모이어티를 포함하는, 지질에 PEG 또는 POZ를 결합시키는 데 적합한 임의의 링커 모이어티가 사용될 수 있다. 특정 바람직한 실시형태에서, 비-에스터-함유 링커 모이어티, 예컨대 아마이드 또는 카바메이트가 사용된다.
용어 "치환된"은 수소 이외의 구체화된 기로의 치환, 또는 하나 이상의 기, 모이어티 또는 동일 또는 상이할 수 있는 라디칼로의 치환을 의미하며, 각각, 예를 들어 독립적으로 선택된다.
본 명세서에서 사용되는 "뉴클레오타이드"는 천연 염기(표준) 및 당업계에 잘 공지된 변형된 염기를 포함하는 것으로 당업계에서 인식되는 것이다. 이러한 염기는 뉴클레오타이드 당 모이어티의 1' 위치에 일반적으로 위치된다. 뉴클레오타이드는 일반적으로 염기, 당 및 인산염기를 포함한다. 뉴클레오타이드는 비변형일 수 있거나 또는 당, 인산염 및/또는 염기 모이어티에서 변형될 수 있다(또한 뉴클레오타이드 유사체, 변형된 뉴클레오타이드, 비천연 뉴클레오타이드, 비표준 뉴클레오타이드 및 기타와 상호 호환적으로 지칭됨). 핵산 분자 내로 도입될 수 있는 염기 변형의 일부 비제한적 예는 이노신, 퓨린, 피리딘-4-온, 피리딘-2-온, 페닐, 슈도유라실, 2,4,6-트라이메톡시 벤젠, 3-메틸 유라실, 다이하이드로유리딘, 나프틸, 아미노페닐, 5-알킬사이티딘(예를 들어, 5-메틸사이티딘), 5-알킬유리딘(예를 들어, 리보티미딘), 5-할로유리딘(예를 들어, 5-브로모유리딘) 또는 6-아자피리미딘 또는 6-알킬피리미딘(예를 들어, 6-메틸유리딘), 프로핀 및 기타를 포함한다. 본 양상에서 "변형된 염기"는 위치 1'에서 아데닌, 구아닌, 사이토신 및 유라실 이외의 뉴클레오타이드 염기 또는 그들의 동등물을 의미한다.
"핵산"은 단일- 또는 이중-가닥 형태에서 데옥시리보뉴클레오타이드 또는 리보뉴클레오타이드 및 이들의 중합체를 지칭한다. 상기 용어는 합성, 천연 유래, 및 비천연 유래이며, 기준 핵산과 유사한 결합 특성을 갖고, 기준 뉴클레오타이드와 유사한 방식으로 대사되는 공지된 뉴클레오타이드 유사체 또는 변형된 골격 잔기 또는 결합을 포함하는 핵산을 포함한다. 이러한 유사체의 예는 포스포로티오에이트, 포스포르아미데이트, 메틸 포스포네이트, 키랄-메틸 포스포네이트, 2'-O-메틸 리보뉴클레오타이드, 펩타이드-핵산(PNA)을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
"RNA"는 적어도 하나의 리보뉴클레오타이드 잔기를 포함하는 분자를 의미한다. "리보뉴클레오타이드"는 β-D-리보-퓨라노스 모이어티, 또는 비환식 유사체의 2' 위치에서 하이드록실기를 갖는 뉴클레오타이드를 의미하며, 여기서 β-D-리보-퓨라노스의 C2'-C3' 결합은 없다(UNA). 상기 용어는 이중-가닥 RNA, 단일-가닥 RNA, 단리된 RNA, 예컨대 부분적으로 정제된 RNA, 본질적으로 순수한 RNA, 합성 RNA, 재조합적으로 생성된 RNA뿐만 아니라 하나 이상의 뉴클레오타이드의 첨가, 결실, 치환 및/또는 변경에 의헤 천연 유래 RNA와 상이한 변경된 RNA를 포함한다. 이러한 변경은 간섭 RNA의 말단(들)에 대한 또는 내부로, 예를 들어 RNA의 하나 이상의 뉴클레오타이드에서 비-뉴클레오타이드 물질의 첨가를 포함한다. 본 발명의 RNA 분자에서 뉴클레오타이드는 또한 비표준 뉴클레오타이드, 예컨대 비천연 유래 뉴클레오타이드 또는 화학적으로 합성된 뉴클레오타이드 또는 데옥시뉴클레오타이드를 포함할 수 있다. 이들 변경된 RNA는 유사체 또는 천연 유래 RNA의 유사체로서 지칭될 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "리보핵산" 및 "RNA"는 siRNA, 안티센스 RNA, 단일 가닥 RNA, 마이크로RNA, mRNA, 비암호 RNA 및 다가 RNA를 포함하는, 적어도 하나의 리보뉴클레오타이드 잔기를 포함하는 분자를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같은 상보성 뉴클레오타이드 염기는 서로 수소 결합을 형성하는 뉴클레오타이드 염기의 쌍이다. RNA에서 아데닌(A)은 티민(T)과 또는 유라실(U)과 짝지어지고, 구아닌(G)은 사이토신(C)과 짝지어진다. 핵산의 상보성 세그먼트 또는 가닥은 서로 혼성화한다(수소 결합에 의해 결합됨). "상보성"은 핵산이 전통적인 왓슨-크릭(Watson-Crick)에 의해 또는 다른 비전통적 결합 방식에 의해 다른 핵산 서열과 수소 결합(들)을 형성할 수 있다는 것을 의미한다.
"안티센스 핵산"은 RNA-RNA 또는 RNA-DNA 또는 RNA-PNA(단백질 핵산) 상호작용에 의해 RNA를 표적화하도록 결합하고, 표적 RNA의 활성을 변경시키는 비효소 핵산 분자를 의미한다. 전형적으로, 안티센스 분자는 안티센스 분자의 단일 인접 서열을 따라서 표적 서열에 대해 상보성이다. 그러나, 특정 실시형태에서, 안티센스 분자는 기질 분자가 루프를 형성하도록 기질에 결합할 수 있고/있거나, 안티센스 분자는 안티센스 분자가 루프를 형성하도록 결합할 수 있다. 따라서, 안티센스 분자는 2개의 (또는 심지어 더 많은) 비인접 기질 서열에 대해 상보성일 수 있거나 또는 안티센스 분자의 2개의(또는 심지어 더 많은) 비인접 서열 부분은 표적 서열에 또는 둘 다에 대해 상보성일 수 있다. 추가로, 안티센스 DNA는 DNA-RNA 상호작용에 의해 RNA를 표적화하기 위해 사용되고, 이에 의해 이중나선에서 표적 RNA를 분해시키는 RNase H를 활성화시킬 수 있다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 표적 RNA의 RNA 분해효소 H 절단을 활성화시킬 수 있는 하나 이상의 RNA 분해효소 H 활성화 영역을 포함할 수 있다. 안티센스 DNA는 단일 가닥 DNA 발현 벡터 또는 이의 동등물의 사용을 통해 화학적으로 합성되거나 또는 발현될 수 있다. "안티센스 RNA"는 표적 유전자 mRNA에 대한 결합에 의해 RNAi를 유도할 수 있는 표적 유전자 mRNA에 대해 상보성인 서열을 갖는 RNA 가닥이다. "안티센스 RNA"는 표적 유전자 mRNA에 대해 상보성인 서열을 갖고, 표적 유전자 mRNA에 대한 결합에 의해 RNAi를 유도하는 것으로 생각되는 RNA 가닥이다. "센스 RNA"는 안티센스 RNA에 대새 상보성인 서열을 가지고, 그의 상보성 안티센스 RNA로 어닐링되어 iNA를 형성한다. 이들 안티센스 및 센스 RNA는 통상적으로 RNA 합성기를 이용하여 합성되었다.
마이크로RNA(miRNA)는 유전자 발현을 조절하는 길이가 21 내지 23개의 뉴클레오타이드인 단일-가닥 RNA 분자이며, miRNA는 DNA로부터 전사되지만, 단백질로 번역되지 않는 유전자(비암호 RNA)에 의해 암호화되고; 대신에, 그들은 pri-miRNA로서 알려진 1차 전사체로부터 프레-miRNA로 불리는 짧은 줄기-루프 구조로 그리고 최종적으로 기능성 miRNA로 가공된다. 성숙 miRNA 분자는 하나 이상의 전령 RNA(mRNA) 분자에 대해 부분적으로 상보성이며, 그들의 주된 기능은 유전자 발현을 하향조절하는 것이다.
본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "작은 간섭 RNA(siRNA)"는 때때로 짧은 간섭 RNA 또는 침묵 RNA로서 알려져 있으며, 생물학에서 다양한 역할을 하는 이중-가닥 RNA 분자의 부류, 길이가 16개 내지 40개인 뉴클레오타이드를 지칭하기 위해 사용된다. 가장 현저하게는, siRNA는 RNA 간섭(RNAi) 경로에 수반되며, 이는 특정 유전자의 발현을 방해한다. RNAi 경로에서의 그들의 역할에 추가로, siRNA는 또한 RNAi-관련 경로에서, 예를 들어, 항바이러스 메커니즘으로서 또는 게놈의 염색질 구조의 성형에서 작용하며; 이들 경로의 복잡성은 이제서야 설명된다.
본 명세서에서 사용되는 용어 RNAi는 세포 내에서 RNA-유도 침묵 복합체(RISC)에 의해 제어되고, 짧은 이중-가닥 RNA 분자에 의해 개시되는 RNA-의존적 유전자 침묵 과정을 지칭하며, 그들은 촉매적 RISC 성분 아르고노트(argonaute)와 상호작용한다. 이중-가닥 RNA 또는 RNA-유사 iNA 또는 siRNA가 외인성일 때(RNA 게놈을 갖는 바이러스에 의한 감염으로부터 초래되거나 또는 형질감염된 iNA 또는 siRNA로부터 초래), RNA 또는 iNA는 세포질 내로 직접 유입되고, 효소 다이서(dicer)에 의해 짧은 단편으로 절단된다. 개시 dsRNA는 또한 게놈 내 RNA-암호 유전자로부터 발현된 프레-마이크로RNA에서와 같이 내인성(세포 내에서 유래)일 수 있다. 이러한 유전자로부터의 1차 전사체는 처음에 핵 내에서 프레-miRNA의 특징적 줄기-루프 구조를 형성하도록 가공되고, 이어서, 세포질에 수송되어 다이서에 의해 절단되게 된다. 따라서, 두 dsRNA 경로(외인성 및 내인성)는 RISC 복합체에서 만난다. RNA-유도 침묵 복합체(RISC)의 활성 성분은 아르고노트 단백질로 불리는 엔도뉴클레아제인데, 이는 그들의 결합된 siRNA 또는 iNA에 대해 상보성인 표적 mRNA 가닥을 절단한다. 다이서에 의해 생성된 단편은 이중 가닥이기 때문에, 그들은 이론에서 각각 기능성 siRNA 또는 iNA를 생성할 수 있었다. 그러나, 가이드 가닥으로서 알려진 두 가닥 중 하나만이 아르고노트 단백질에 결합하고, 유전자 침묵을 지시한다. 다른 항-가이드 가닥 또는 패신저(passenger) 가닥은 RISC 활성화 동안 분해된다.
또한 본 개시내용의 화합물의 다형체는 본 개시내용의 범위 내이다(즉, 화학식 I의 화합물의 다형체는 본 개시내용의 범주 내이다).
본 화합물(화합물의 염, 용매화물 및 프로드러그뿐만 아니라 프로드러그의 염 및 용매화물을 포함)의 모든 입체이성질체(예를 들어, 기하학적 이성질체, 광학 이성질체 등), 예컨대 거울상 이성질체 형태를 포함하는 다양한 치환체 상의 비대칭 탄소로 인해 존재할 수 있는 것(비대칭 탄소가 없을 때 조차 존재할 수 있는 것), 회전 이성질체 형태, 아트로프 이성질체 및 부분입체이성질체 형태가 본 개시내용의 범주 내에서 상정된다. 본 개시내용의 화합물의 개개 입체이성질체는, 예를 들어, 다른 이성질체가 실질적으로 없을 수 있거나, 또는, 예를 들어, 라세미체로서 또는 모든 다른, 또는 다른 선택된, 입체이성질체와 혼합될 수 있다. 본 명세서의 화합물의 키랄 중심은 S 또는 R 입체배치를 가질 수 있다. 용어 "염", "용매화물" 등의 사용은 개시된 화합물의 거울상 이성질체, 입체이성질체, 회전 이성질체, 호변 이성질체, 라세미체 또는 프로드러그의 염 및 용매화물에 동일하게 적용되는 것으로 의도된다.
화학치료제(항신생물제)로서 사용될 수 있는 화합물의 부류는 알킬화제, 항대사물질, 천연 생성물 및 그들의 유도체, 호르몬 및 스테로이드(합성 유사체를 포함), 및 합성물을 포함한다. 이들 부류 내의 화합물의 예를 이하에 제공한다.
합성 공정
설명의 다른 양상은 하기 화학식 45로 나타내는 다중 리간드 화합물의 제조 공정이며:
Figure pct00027
상기 공정은 하기 단계들을 포함한다:
i. 하기 아미노트라이올 화합물을 하기 친유성기 42와 반응시키는 단계:
Figure pct00028
Figure pct00029
;
ii. 단계 i의 생성물로부터 하이드록실 보호기를 제거하는 단계;
iii. NaOH 중에서 단계 ii의 생성물을 (CHCH)COO-t-뷰틸과 반응시키는 단계;
iv. 단계 iii의 생성물에 아미노 보호기를 첨가하는 단계;
v. EDC 및 HOBT를 이용하여 단계 iv의 생성물을 BocN(CH2)3NH2와 반응시키는 단계;
vi. EDC, HOBT 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민을 이용하여 단계 v의 생성물을 하기 GalNAc 산과 반응시키는 단계:
Figure pct00030
.
상기 공정을 위한 출발 물질은 바람직하게는 화학식 1, 5, 또는 9의 구조를 갖는 아미노트라이올이다:
Figure pct00031
.
설명의 다른 양상은 하기 화학식 53으로 나타내는 다중 리간드 화합물의 제조 공정이며:
Figure pct00032
;
상기 공정은 하기 단계들을 포함한다:
i. 아미노트라이올 화합물을 n-Bu4NF와 반응시키는 단계:
Figure pct00033
;
ii. 단계 i의 생성물을 CH3C(OCH3)2CH3 및 p-톨루엔설폰산과 반응시키는 단계;
iii. 단계 ii의 생성물을 LiBH4와 반응시키는 단계;
iv. 단계 iii의 생성물을 하기 친유성기 42와 반응시키는 단계:
Figure pct00034
;
v. 단계 iv의 생성물로부터 하이드록실 보호기를 제거하는 단계;
vi. NaOH 중에서 단계 v의 생성물을 (CHCH)COO-t-뷰틸과 반응시키는 단계;
vii. vi의 생성물에 아미노 보호기를 첨가하는 단계;
viii. EDC 및 HOBT를 이용하여 단계 viii의 생성물을 BocN(CH2)3NH2와 반응시키는 단계;
ix. EDC 및 HOBT 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민을 이용하여 단계 ix의 생성물을 하기 GalNAc 산과 반응시키는 단계:
Figure pct00035
.
상기 공정은 바람직하게는 하기 화학식 13, 19, 또는 30의 구조를 갖는 아미노트라이올 화합물에 의해 시작된다:
Figure pct00036
설명의 다른 양상은 하기 화학식 45로 나타내는 다중 리간드 화합물의 제조 공정이며:
Figure pct00037
;
상기 공정은 하기 단계들을 포함한다:
i. 하기 화학식 38을 갖는 아미노트라이올 화합물을 하기 친유성기 42와 반응시키는 단계:
Figure pct00038
Figure pct00039
;
ii. 단계 i의 생성물로부터 하이드록실 보호기를 제거하는 단계;
iii. NaOH 중에서 단계 ii의 생성물을 (CHCH)COO-t-뷰틸과 반응시키는 단계;
iv. 단계 iii의 생성물에 아미노 보호기를 첨가하는 단계;
v. EDC 및 HOBT를 이용하여 단계 iv의 생성물을 BocN(CH2)3NH2와 반응시키는 단계;
vi. EDC, HOBT 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민을 이용하여 단계 v의 생성물을 하기 GalNAc 산과 반응시키는 단계:
Figure pct00040
.
투여를 위한 조성물 및 제형
본 명세서의 설명의 다른 양상은 하기 화학식 I, II, 또는 III의 아미노트라이올로 이루어진 화합물을 포함하는 약제학적 조성물이다:
Figure pct00041
.
R은 치료 분자를 포함하고, L1, L2 및 L3은 독립적으로 각각의 경우에 대해 탄수화물, 폴리펩타이드 또는 친유성기로 이루어진 군으로부터 선택된 리간드를 포함한다. 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 반대이온 또는 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함할 수 있다. 바람직하게는, 치료 분자는 RNA, 더 바람직하게는 이중-가닥 siRNA이다. 이중-가닥 siRNA는 UNA를 포함할 수 있다. 바람직하게는 L2 및 L3 리간드는 탄수화물, 가장 바람직하게는, 1'-O-(N-아세틸-D-갈락토실아민) 또는 1'-O-(D-갈락토스)이다.
본 명세서 설명의 조성물은 다양한 경로에 의해, 예를 들어 정맥내, 비경구, 복강내 또는 국소 경로를 통한 전신 전달을 달성하기 위해 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, siRNA는 세포내로, 예를 들어 표적 조직, 예컨대 폐 또는 간의 세포에서, 또는 염증 조직에서 전달될 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 생체내 siRNA의 전달 방법을 제공한다. 핵산-지질 조성물은 대상체에게 정맥내로, 피하로 또는 복강내로 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 포유류 대상체의 폐에 대해 간섭 RNA의 생체내 전달을 위한 방법을 제공한다.
본 개시내용의 조성물 및 방법은 대상체에게 경구, 직장, 질, 비강내, 폐내 또는 경피 또는 진피 전달을 포함하는 다양한 점막 투여 방식에 의해, 또는 눈, 귀, 피부 또는 다른 점막면에 대한 국소 전달에 의해 투여될 수 있다. 본 개시내용의 일부 양상에서, 점막 조직층은 상피 세포층을 포함한다. 상피 세포는 폐, 기관, 기관지, 폐포, 비강, 협측, 상피, 또는 위장일 수 있다. 본 개시내용의 조성물은 통상적인 액추에이터, 예컨대 기계적 분무 장치뿐만 아니라 가압, 전기적으로 작동되는 또는 다른 유형의 액추에이터를 이용하여 투여될 수 있다. 상기 조성물은 바람직하게는 주사에 의해 피하로 투여된다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 조성물을 함유하는 용액 및 폐, 점막 또는 비강내 스프레이 또는 에어로졸용 액추에이터를 포함하는 약제학적 제품이다.
본 개시내용의 조성물의 투약 형태는 점적 또는 에멀전 형태로, 또는 에어로졸 형태로 액체일 수 있다.
본 개시내용의 조성물의 투약 형태는 고체일 수 있는데, 이는 투여 전에 액체로 재구성될 수 있다. 상기 고체는 분말로서 투여될 수 있다. 상기 고체는 캡슐, 정제 또는 겔의 형태일 수 있다.
생물학적으로 활성인 제제는 활성제 및 임의의 요망되는 첨가제를 분산시키는 능력을 갖는 친수성 화합물을 포함할 수 있는 베이스 또는 비히클 중에서 분산될 수 있다. 베이스는 폴리카복실산 또는 이의 염의 공중합체, 카복실 무수물(예를 들어, 말레산 무수물)과 다른 단량체(예를 들어, 메틸(메트)아크릴레이트, 아크릴산 등), 친수성 비닐 중합체, 예컨대 폴리비닐 아세테이트, 폴리비닐 알코올, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스 유도체, 예컨대 하이드록시메틸셀룰로스, 하이드록시프로필셀룰로스 등 및 천연 중합체, 예컨대 키토산, 콜라겐, 알긴산나트륨, 젤라틴, 하이알루론산 및 이들의 비독성 금속염을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 다양한 적합한 담체로부터 선택될 수 있다. 종종, 생분해성 중합체, 예를 들어, 폴리락트산, 폴리(락트산-글리콜산) 공중합체, 폴리하이드록시뷰티르산, 폴리(하이드록시뷰티르산-글리콜산) 공중합체 및 이들의 혼합물은 베이스 또는 담체로서 선택된다. 대안적으로 또는 추가적으로, 합성 지방산 에스터, 예컨대 폴리글리세린 지방산 에스터, 수크로스 지방산 에스터 등은 담체로서 사용될 수 있다. 친수성 중합체 및 다른 담체는 단독으로 또는 조합하여 사용될 수 있고, 향상된 구조적 완전함은 부분적 결정화, 이온 결합, 가교 등에 의해 담체에 전해질 수 있다. 담체는 유체 또는 점막에 대한 직접적인 전달을 위해 점성 용액, 겔, 페이스트, 분말, 마이크로스피어 및 필름을 포함하는 다양한 형태로 제공될 수 있다. 이 내용에서 선택된 담체의 용도는 생물학적으로 활성인 제제 흡수의 촉진을 초래할 수 있다.
점막, 비강 또는 폐 전달을 위한 제형은 베이스 또는 부형제로서 친수성의 저분자량 화합물을 함유할 수 있다. 이러한 친수성 저분자량 화합물은 활성제가 흡수되는 신체 표면에 대해 베이스를 통해 수용성 활성제, 예컨대 생리적으로 활성인 펩타이드 또는 단백질이 확산될 수 있는 계대 배지를 제공한다. 친수성 저분자량 화합물은 선택적으로 점막 또는 투여 분위기로부터 수분을 흡수하고, 수용성 활성 펩타이드를 용해시킨다. 친수성 저분자량 화합물의 분자량은 3,000 내지 10,000 달톤이다. 친수성 저분자량 화합물의 예는 수크로스, 만니톨, 락토스, L-아라비노스, D-에리트로스, D-리보스, D-자일로스, D-만노스, D-갈락토스, 락툴로스, 셀로비오스, 겐티비오스, 글리세린, 폴리에틸렌 글리콜 및 이들의 혼합물을 포함하는 폴리올 화합물, 예컨대 올리고당, 이당류 및 단당류를 포함한다. 친수성 저분자량 화합물의 추가적인 예는 N-메틸피롤리돈, 알코올(예를 들어, 올리고비닐 알코올, 에탄올, 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 등) 및 이들의 혼합물을 포함한다.
본 개시내용의 조성물은 대안적으로 생리적 조건에 근접하는데 필요한 약제학적으로 허용 가능한 담체 물질, 예컨대 pH 조절 및 완충제, 등장성 조절제 및 습윤제, 예를 들어, 아세트산나트륨, 락트산나트륨, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화칼슘, 솔비탄 모노라우레이트, 트라이에탄올아민 올레이트, 및 이들의 혼합물을 함유할 수 있다. 고체 조성물에 대해, 예를 들어, 약제학적 등급의 만니톨, 락토스, 전분, 스테아르산마그네슘, 사카린나트륨, 탤컴, 셀룰로스, 글루코스, 수크로스, 탄산마그네슘 등을 포함하는 통상적인 비독성의 약제학적으로 허용 가능한 담체가 사용될 수 있다.
본 명세서의 설명의 특정 실시형태에서, 생물학적으로 활성인 제제는 시간 방출 제형으로, 예를 들어 서방출 중합체를 포함하는 조성물로 투여될 수 있다. 활성제는 빠른 방출에 대해 보호하는 담체, 예를 들어, 제어 방출 비히클, 예컨대 중합체, 마이크로 캡슐화된 전달 시스템 또는 생접착 겔과 함께 제조될 수 있다. 본 개시내용의 다양한 조성물에서 활성제의 연장된 전달은 흡수를 지연시키는 조성물 제제, 예를 들어 알루미늄 모노스테아레이트 하이드로겔 및 젤라틴 중에 포함함으로써 유발될 수 있다.
본 명세서 설명의 다른 양상은 하기 화학식 I, II 또는 III의 아미노트라이올로 이루어진 화합물을 포함하는 치료적 유효량의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 질환을 치료하는 방법이다:
Figure pct00042
식 중, R은 치료 분자를 포함하고, L1, L2 및 L3은 독립적으로 각각의 경우에 대해 탄수화물, 폴리펩타이드, 또는 친유성기로 이루어진 군으로부터 선택된 리간드를 포함한다. 상기 화합물은 인자 VII, Eg5, PCSK9, TPX2, apoB, SAA, TTR, RSV, PDGF 베타 유전자, Erb-B 유전자, Src 유전자, CRK 유전자, GRB2 유전자, RAS 유전자, MEKK 유전자, JNK 유전자, RAF 유전자, Erk1/2 유전자, PCNA(p21) 유전자, MYB 유전자, JUN 유전자, FOS 유전자, BCL-2 유전자, 사이클린 D 유전자, VEGF 유전자, EGFR 유전자, 사이클린 A 유전자, 사이클린 E 유전자, WNT-1 유전자, 베타-카테닌 유전자, c-MET 유전자, PKC 유전자, NFKB 유전자, STAT3 유전자, 서비빈 유전자, Her2/Neu 유전자, 토포아이소머라제 I 유전자, 토포아이소머라제 II 알파 유전자, p73 유전자의 돌연변이, p21(WAFl/CIP1) 유전자의 돌연변이, p27(KIP1) 유전자의 돌연변이, PPM1D 유전자의 돌연변이, RAS 유전자의 돌연변이, 카베올린 I 유전자의 돌연변이, MIB I 유전자의 돌연변이, MTAI 유전자의 돌연변이, M68 유전자의 돌연변이, 종양 억제유전자의 돌연변이, 및 p53 종양 억제유전자의 돌연변이로 이루어진 군으로부터 선택된 표적 유전자의 발현을 넉다운시키는 RNA를 포함할 수 있다. 약제학적 조성물은 바람직하게는 피하로 투여된다.
본 개시내용은 특정 실시형태와 관련하여 기재되었고, 다수의 상세한 설명이 예시의 목적을 위해 제시되었지만, 본 개시내용이 추가적인 실시형태를 포함한다는 것과, 본 명세서에 기재된 일부 상세한 설명은 본 개시내용으로부터 벗어나는 일 없이 상당히 변화될 수 있다는 것은 당업자에게 명확할 것이다. 본 개시내용은 이러한 추가적인 실시형태, 변형 및 동등물을 포함한다. 특히, 본 개시내용은 다양한 예시적 성분 및 실시예의 특징, 용어 또는 구성요소의 임의의 조합을 포함한다.
실시예
본 명세서에 기재된 아미노트라이올은 선택적 스테로이드/링커 부착을 위한 수단을 제공한다. 상기 화학식 Ia, Ib, Ic, II, IIIa, IIIb 및 IIIc의 완전히 탈보호된 화합물은 도 1 내지 도 7에 나타내는 식 (1) 내지 (7)에서 기재하는 방법에 의해 용이하게 합성된다. 화합물 1, 5, 9, 13, 19 및 30은 반응을 위해 유리되는 단일 -OH 모이어티를 갖는 분화된 보호 작용기, 또는 반응을 위해 단일 -OH가 유리되도록 보호 작용기를 조작하는 기회를 얻는다. 이는 식 (1) 내지 (7)에서 기재하는 바와 같은 L1, L2 및 L3 모이어티를 선택적으로 도입하기 위한 기회를 제공한다. L1은 콜레스테릴 치환체이고, L2 및 L3은 GalNAc이다.
실시예 1
Figure pct00043
화학식 IIIa의 아미노트라이올은 도 1의 식 (1)에 나타낸 방법에 따른 반응에 의해 합성된다.
식 (1)에 대한 출발 물질인 화합물 1은 문헌[Lee, 2012, J Org Chem, 77:3082-98]에 기재된 도 8에 나타낸 방법에 따라 제조한다. 공지된 에폭시아세토나이드로 출발하여, 상기 방법은 (2R,3S,4S)-3-하이드록시아제티딘을 제공하였다. 시약 및 조건은 다음과 같다: (a) NaN3, NH4Cl, 2-메톡시에탄올, 물 9:1, 환류; (b) NaH, 벤질 브로마이드, TBAI, THF, 실온, 1시간; (c) LiAlH4, THF; (d) 염화토실, 트라이에틸아민, CH2Cl2, 실온; (e) 2N HCl: 메탄올, 40℃; (f) TBSCl, 트라이에틸아민, DMAP, CH2Cl2; (g) PPh3, DIAD, CH2Cl2, 실온; (h) Na, 나프탈렌, DME, -60℃; (i) 알데하이드(뷰티르알데하이드 또는 노닐 알데하이드), 트라이아세톡시보로하이드라이드 나트륨, ClCH2CH2Cl, 실온; (j) TBAF, THF, 실온; (k) PdCl2, H2, 메탄올.
실시예 2
Figure pct00044
화학식 IIIb의 아미노트라이올을 도 2의 식 (2)에 나타낸 방법에 따라 합성한다.
식 (2)에 대한 출발 물질인 화합물 5는 문헌[Lee]에 기재된 도 9에 나타낸 방법에 따라 제조한다. 4-원 이미노 당의 합성은 L-글리세르알데하이드 아세토나이드에 비티히 반응(Wittig reaction)을 실시함으로써 시작되어, (a) 벤젠 중에서 카브에톡시메틸렌-트라이페닐포스포란을 이용하여, 환류시킨 다음에 (b) -78℃ 내지 0℃에서 CH2Cl2 중의 다이아이소뷰틸알루미늄 하이드라이드(DIBAL-H) 환원으로 알릴 알코올을 제공한다. 쿠멘 하이드로퍼옥사이드, (+)-다이아이소프로필 L-타르타르산염(DIPT), 티타늄 테트라아이소프로폭사이드(Ti(OiPr)4), 3Å 몰레큘러 시브, CH2Cl2, -40℃를 이용하는 샤플리스 에폭시화(Sharpless epoxidation)(c), 및 실온에서 1시간 동안 테트라하이드로퓨란(THF) 중에서 NaH, 벤질 브로마이드, 테트라뷰틸암모늄 아이오다이드(TBAI)와의 반응 (d)에 의한 하이드록실기의 보호는 에폭사이드를 제공한다. 에폭사이드는 환류 하에, 메톡시에탄올:물 9:1 중의 NH4Cl2와 함께 아자이드화나트륨을 이용하여 개방되고 (e), 2차 하이드록실기는 실온에서 1시간 동안 (f) NaH, 벤질 브로마이드, TBAI, THF에 의해 벤질화되어 벤질에터를 수득한다. 아자이드기는 (g) THF 중의 LiAlH4로 환원시키고 나서, 얻어진 아미노기는 (h) 트라이에틸아민 및 CH2Cl2 중의 염화토실과 반응되어 토실레이트를 형성한다. 중간체의 아세토나이드 보호기를 40℃에서 (i) 2N HCl:메탄올 중에서 제거하고 나서, 1차 알코올을 (j) t-뷰틸다이메틸실릴 클로라이드(TBSCl), 트라이에틸아민, 4-다이메틸아미노피리딘(DMAP), CH2Cl2 중에서 실릴 에터(33)로 전환시킨다. 4-원 고리에 대한 고리 폐쇄는 미츠노부(Mitsunobu) 반응 (k) 트라이페닐-포스핀, 다이아이소프로필 아조다이카복실레이트(DIAD), CH2Cl2, 실온에 의해 달성되고, 그 다음에 N-토실기 (l) -60℃에서 Na, 나프탈렌, 다이메톡시 에탄(DME)에 의한 N-토실기의 환원성 제거로 아제티딘을 제공한다. 아제티딘에 (m) 실온에서 트라이아세톡시보로하이드라이드 나트륨, ClCH2CH2Cl 중에서 뷰티르알데하이드 및 노닐 알데하이드를 이용하는 환원적 아마이드화를 실시한 다음, (n) 실온에서 테트라-n-뷰틸암모늄 플루오라이드(TBAF), THF로 탈실릴화하여 중간체를 얻는다. 메탄올 중에서 (o) PdCl2 및 수소에 의한 벤질 보호기의 수소화분해로 표적화된 4-원(2R,4R)-3-하이드록시아제티딘을 수득한다.
실시예 3
Figure pct00045
화학식 IIIc의 아미노트라이올을 도 3의 식 (3)에 나타낸 방법에 따라 합성한다.
식 (3)에 대한 출발 물질인 화합물 9를 문헌[Lee]에 기재된 도 10에 나타낸 방법에 따라 제조한다. 시약 및 조건: (a) NaN3, NH4Cl, 2-메톡시에탄올, 물 9:1, 환류; (b) NaH, 벤질 브로마이드, TBAI, THF, 실온, 1시간; (c) LiAlH4, THF; (d) 염화토실, 트라이에틸아민, CH2Cl2, 실온; (e) 2N HCl: 메탄올, 40℃; (f) TBSCl, 트라이에틸아민, DMAP, CH2Cl2; (g) PPh3, DIAD, CH2Cl2, 실온; (h) Na, 나프탈렌, DME, -60℃; (i) 알데하이드(뷰티르알데하이드 또는 노닐 알데하이드), 트라이아세톡시보로하이드라이드 나트륨, ClCH2CH2Cl, 실온; (j) TBAF, THF, 실온; (k) PdCl2, 수소, 메탄올.
실시예 4
Figure pct00046
화학식 Ia의 아미노트라이올을 도 4에 나타낸 방법 식 (4) 방법에 따라 합성한다.
식 (4)에 대한 출발 물질인 화합물 13을 도 11 및 12에 나타내는 대로 문헌[Lohse, 2000, J Chem Soc Perkin Trans, 1:659-65에 기재한 바와 같이 제조한다. 도 12의 3가지 중요한 중간체 5 내지 7의 합성은 도 11에 나타낸 방법에 따른다. 합성을 위한 출발 물질은 다이-tert-뷰틸 파이로카보네이트로 보호된 상업적으로 입수 가능한 에틸 4-옥소피페리딘-3-카복실레이트 하이드로클로라이드이다. 리튬 다이아이소프로필아마이드(LDA)에 의한 처리는 더 반응성의 5-위치에서 2-(트라이메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(SEM-Cl)에 의해 선택적으로 알킬화될 수 있는 2음이온을 생성한다. 보호기의 완전한 제거는 CH2Cl2 중에서 50% TFA와의 반응 생성물을 처음 처리한 다음, 도 12에 나타내는 방법에 따라 4M 염산 중의 수성 가수분해에 의해 화합물을 제공한다. LiBH4에 의해 에스터 작용기를 처음 환원시킨 다음, 보호기의 제거에 의해 두 번째 일련의 유도체를 제조한다. 3가지 비스하이드록시메틸 화합물은 또한 중요한 중간체의 입체배치의 정확한 배정을 위한 증거로서 작용하였다.
실시예 5
Figure pct00047
화학식 Ib의 각각의 이성질체의 아미노트라이올을 도 5 및 도 6에서 각각 나타낸 바와 같은 식 (5) 및 (6)의 방법에 따라 합성한다. 식 (5) 및 (6)의 출발 물질인 화합물 19를 로제(Lohse) 방법을 이용하여 실시예 4에 기재한 바와 같이 제조한다.
실시예 6
Figure pct00048
화학식 Ic의 아미노트라이올을 도 7에 나타낸 바와 같이 식 (7)의 방법에 따라 합성한다. 식 (7)의 출발 물질인 화합물 30은 로제의 방법을 이용하여 실시예 4에 기재한 바와 같이 제조한다.
실시예 7
Figure pct00049
화학식 IIa의 화합물을 도 13의 식(8)에 나타낸 방법에 따라 합성한다. 식(8)의 출발 물질인 화합물 36은 문헌[Lichtenthaler, 1968, Chem Ber, 101: 1815-18 및 Zen, 1969, Bull Chem Soc Japan, 42: 1761-62]에 기재된 바와 같이 비수성 조건 하에서 나이트로에탄올 (OH(CH2)2)NO2)를 이용하는 글루타르알데하이드(CHO(CH2)3CHO)의 고리화에 의해 제조한다.
실시예 8
더 강성의, 입체화학적으로 그리고 입체적으로 정해진 아미노트라이올 대체를 위해 표준 GalNAc 모티프에서의 변형을 사용하여 표준 2-아미노, 2-하이드록시메틸-1,3-프로판다이올 모티프를 교환한다. 본 명세서에서, 테터된 콜레스테롤 단편은 스테로이드 모이어티에 의해 얻어진 세포-특이성을 위한 설명의 틀 내의 아미노트라이올의 예로서 포함된다.
Figure pct00050
식 (1) 내지 (7)의 화합물 1, 5, 9, 13, 19 및 30은 반응에 대해 단일 -OH 모이어티가 자유로운 차별화된 보호 작용기, 또는 단일 -OH가 반응에 대해 자유롭게 되도록 보호 작용기를 조작할 기회를 얻는다. 이는 도 1 내지 7에 나타내는 L1, L2 및 L3 모이어티를 선택적으로 도입하는 기회를 제공한다.
쇄 이용 가능성에 기반하여 콜레스테롤 모이어티와 아미노트라이올 사이의 테터를 위해 10개 탄소의 쇄 길이를 선택하였다. 이는 다이올이 매우 흔하고 비스-친전자성 종으로 상당히 용이하게 전환될 수 있기 때문에 일어난다. 콜레스테롤을 KOH/THF 중에서 BrCH2(CH2)8CH2Br과 반응시키기 위해 문헌[Wang, 2013, Chemistry Asian J, 8: 101-07 및 Wang, 2012, J Mater Chem, 22:7529-36]의 방법을 이용하여 도 14에 나타낸 공정에 의해, 또는 NaOH/DMF 또는 THF를 이용하여 문헌[Wang, 2011, Steroids, 76:204-09 및 Jensen, 2012, J Liposome Res, 22:295-305]의 방법에 의해 콜레스테롤-테터 모이어티 42를 생성한다.
실시예 9
스테로이드 변형/변경된 아미노트라이올 GalNAc 동질체의 합성은 상기 기재한 바와 같은 그리고 본 명세서에서 도 15에 나타낸 반응에 따라 합성한 화합물에서 나타낸 단일 반응점을 잘 받아들인다. 별도로 보호된 아제티딘 아미노트라이올 1로 시작하여, 실릴 절단(nBu4NF) 다음에 콜레스테롤-링커 단편 42의 도입(NaH, THF 또는 DMF)은 43을 제공한다. 벤질 에터 절단(아미노트라이올의 제조에서 상기 알 수 있는 바와 같이: 수소 Pd/C)은 이전에 차단된 1차 및 2차-OH 기(44)를 노출시키는데, 이는 도 23에서 약술되는 화학을 적용한 후에 45의 제조를 허용한다.
유사하게 아제티딘 기반, 삼중보호된 아미노트라이올 5(도 16) 및 9(도 17)를 반응시켜 스테로이드-접합 GalNAc 유사체 48(도 16) 및 51(도 17)을 제공한다.
실시예 10
피페리딘 기반/콜레스테롤 접합체의 합성을 도 18, 도 19, 도 20 및 도 21에 나타낸다. 단일-보호된 다이올 13(도 18)을 탈보호시키고(nBu4NF), 다이올을 대응하는 아세토나이드로 보호하여 14를 얻는다. 에스터(LiBH4)의 환원은 알코올을 제공하는데, 이는 42에 의해 알킬화되어 52를 제공할 수 있다. 수성 TFA를 이용하여 케탈 및 BOC 기를 제거하여 53을 얻는데, 이는 도 23에 기재한 화학의 적용 후에 목적으로 하는 54를 야기한다. 화합물 19(도 19)를 환원시키고 나서, 케탈화하여 21을 제공하는데, 이는 57의 구성을 야기한다. 19가 nBu4NF에 의해 처음 탈보호될 때 대안의 위치화학은 19로부터 실현되어(도 20) 아세토나이트로서 보호 후에 25를 제공한다. SEM 에터의 탈보호(nBu4NF)는 알코올을 제공하는데 이는 42에 의한 알킬화 후에 58을 제공한다. 케탈 및 BOC 기는 수성 TFA에 의해 제거되어 59를 수득하는데 이는 도 23에서 기재된 화학의 적용 후에 목적으로 하는 60을 야기한다(도 20). 단일-보호된 피페리딘-다이올 30(도 21)을 환원시키고, 다이올을 아세토나이트로서 보호하여 32를 제공한다. 42에 의한 SEM-탈보호 및 알킬화로 61을 제공한다. 수성 TFA에 의한 처리는 케탈 및 BOC기를 절단하여 62를 얻고, 이는 도 23의 화학의 적용 후에 목적으로 하는 63을 제공한다.
실시예 11
사이클로헥산계 콜레스테롤 접합체의 합성을 도 22에 나타낸다. 아세토나이트 38은 42에 의해 알킬화되어 64를 제공한다. 케탈 및 BOC 기를 수성 TFA를 이용하여 제거하여 65를 수득하는데, 이는 도 23에 기재한 화학의 적용 후에 목적으로 하는 66을 야기한다.
실시예 12
아미노트라이올 접합체에 RNA를 도입하는 용액상 합성을 도 24a 및 도 24b에 나타낸다. 수소 및 팔라듐에 의해 아미노-보호기를 제거한다. 얻어진 아미노기를 글루타르산 무수물 및 트라이에틸아민과 반응시켜 아마이드 결합 및 유리 카복실을 생성한다. 이 생성물을 퍼플루오로페닐 2,2,2-트라이플루오로아세테이트와 반응시켜 펜타플루오로페닐 이탈기를 갖는 에스터를 생성한다. 이 생성물을 5-아미노펜틸 메틸포스포네이트와 반응시켜 핵산과의 결합을 위한 유리 인산염기를 갖는 아미노트라이올 접합체를 생성한다.
아미노트라이올 접합체에 RNA를 도입하는 고체상 합성을 도 25a 및 도 25b에 나타낸다. 아미노-보호기를 H2 및 팔라듐에 의해 제거한다. 얻어진 아미노기를 글루타르산 무수물 및 트라이에틸아민과 반응시켜 아마이드 결합 및 유리 카복실을 생성한다. 고체상 핵산 합성기와의 반응을 위해 이 생성물을 제조한다.

Claims (36)

  1. 하기 화학식 I, II 또는 III의 아미노트라이올로 이루어진 화합물:
    Figure pct00051

    식 중, R은 생물학적으로 활성인 분자를 포함하고, L1, L2 및 L3은 독립적으로 각각의 경우에 대해 탄수화물, 폴리펩타이드 또는 친유성기로 이루어진 군으로부터 선택된 리간드를 포함한다.
  2. 제1항에 있어서, 하기 화학식 Ia, Ib 또는 Ic의 구조를 갖는, 화합물:
    Figure pct00052
    .
  3. 제1항에 있어서, 하기 화학식 IIa의 구조를 갖는, 화합물:
    Figure pct00053
    .
  4. 제1항에 있어서, 하기 화학식 IIIa, IIIb 또는 IIIc의 구조를 갖는, 화합물:
    Figure pct00054
    .
  5. 제1항에 있어서, 상기 생물학적으로 활성인 분자는 치료 분자인, 화합물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 치료 분자는 분자량이 1000 달톤 미만인 항체, 폴리뉴클레오타이드, 호르몬, 항생제 또는 약물로부터 선택되는, 화합물.
  7. 제5항에 있어서, 상기 생물학적으로 활성인 분자는 RNA 분자인, 화합물.
  8. 제7항에 있어서, 상기 RNA 분자는 센스 및 안티센스 가닥으로 이루어진, 화합물.
  9. 제8항에 있어서, 상기 아미노트라이올은 센스 가닥의 3'-말단, 센스 가닥의 5'-말단, 안티센스 가닥의 3'-말단 또는 센스 가닥의 5'-말단에 공유 부착되는, 화합물.
  10. 제1항에 있어서, R, L1, L2 또는 L3 중 하나 이상은 하기 구조를 포함하는 링커를 더 포함하는, 화합물:
    -(A-B1-Z)n-D1- 또는
    -D1-B1-D1'-E-D2'-B2-D2-
    식 중,
    A, D1, D1', D2, D2'는 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), NHC(O), CH2, CH2NH 또는 CH2O이고;
    B1 및 B2는 각각의 경우에 대해 없거나, 알킬렌, 치환된 알킬렌이되, 하나 이상의 메틸렌은 O, S, S(O), SO2, N(RN), C(R')=C(R"), C≡C 또는 C(O) 중 하나 이상에 의해 중단되거나 또는 종결될 수 있되, R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, C1-C6 알킬, OH, SH 또는 N(RN)2이고, RN은 각각의 경우에 대해 독립적으로 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 뷰틸 또는 벤질이며;
    Z는 없거나, NH, O, S, CH2, C(O)O, C(O)NH, NHCH(Ra)C(O), C(O)CH(Ra)NH, CO, CH=NO 또는 헤테로사이클릴이되, Ra는 H 또는 아미노산 측쇄이고;
    E는 -CH2N(EL)CH2-이되, EL은 -D3-B3-D3'-Rx이고, D3 및 D3'는 각각 독립적으로 각각의 경우에 대해 없거나, CO, NH, O, S, OC(O), OC(O)O, NHC(O), NHC(O)NH, NHC(O)O, CH2, CH2NH 또는 CH2O이고, Rx는 콜레스테릴 또는 양이온성 지질이며; 그리고
    n은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다.
  11. 제1항에 있어서, 상기 하나 이상의 L1, L2 및 L3은 친유성기를 포함하는, 화합물.
  12. 제11항에 있어서, 상기 친유성기는 콜레스테릴, 콜산, 아다만탄 아세트산, 1-파이렌 뷰티르산, 다이하이드로테스토스테론, 1,3-비스-O(헥사데실)글리세롤, 게라닐옥시헥실, 헥사데실글리세롤, 보르네올, 멘톨, 1,3-프로판다이올, 헵타데실, 팔미트산, 미리스트산, O-3-(올레오일)리토콜산, O-3-(올레오일)콜렌산, 다이메톡시트라이틸 및 페녹사진으로부터 선택되는, 화합물.
  13. 제1항에 있어서, L1, L2 및 L3 중 하나 이상은 탄수화물을 포함하는, 화합물.
  14. 제13항에 있어서, 상기 탄수화물은 알로스, 알트로스, 아라비노스, 클라디노스, 에리트로스, 에리트룰로스, 프럭토스, D-푸시톨, L-푸시톨, 푸코사민, 푸코스, 푸쿨로스, 갈락토사민, D-갈락토사미니톨, N-아세틸-갈락토사민(GalNAc), 갈락토스, 글루코사민, N-아세틸-글루코사민, 글루코사미니톨, 글루코스, 글루코스-6-인산염, 굴로스 글리세르알데하이드, L-글리세로-D-만노스-헵토스, 글리세롤, 글리세론, 굴로스, 이도스, 릭소스, 만노스아민, 만노스, 만노스-6-인산염, 사이코스, 퀴노보스, 퀴노보사민, 람니톨, 람노사민, 람노스, 리보스, 리불로스, 세도헵툴로스, 솔보스, 타가토스, 탈로스, 타르타르산, 트레오스, 자일로스 및 자일루로스로부터 선택된 단당류인, 화합물.
  15. 제14항에 있어서, 상기 단당류는 데옥시당, 아미노당, 티오당, 셀레노당, 텔루로당, 아자당, 이미노당, 포스파노당, 포스파당, C-치환된 단당류, 불포화 단당류, 알디톨, 알돈산, 케토알돈산, 유론산, 또는 알다르산으로부터 선택된, 화합물.
  16. 제13항에 있어서, 상기 탄수화물은 아베쿠오스, 아크라보스, 아뉴세토스, 아밀로펙틴, 아밀로스, 아피오스, 아르카노스, 아스카릴로스, 아스코르브산, 보이비노스, 셀로비오스, 셀로비오스, 셀룰로스, 차코트리오스, 찰코스, 키틴, 콜리토스, 사이클로덱스트린, 사이마로스, 덱스트린, 2-데옥시리보스, 2데옥시글루코스, 디기노스, 디기탈로스, 디기톡소스, 에발로스, 에베미트로스, 프럭토올리고당, 갈토-올리고당, 겐티아노스, 겐티오비오스, 글루칸, 글루코겐, 글리코겐, 하마멜로스, 헤파린, 인슐린, 아이소레보글루코스논, 아이소말토스, 아이소말토트리오스, 아이소파노스, 코지비오스, 락토스, 락토사민, 락토스다이아민, 라미나르아비오스, 레보글루코산, 레보글루코스논, β-말토스, 말트리오스, 만난-올리고당, 만난트리오스, 멜레지토스, 멜리비오스, 뮤람산, 마이카로스, 마이시노스, 뉴라민산, 니게로스, 노지리마이신, 노비오스, 올레안드로스, 파노스, 파라토스, 플란테오스, 프리메베로스, 라피노스, 로디노스, 루티노스, 사르멘토스, 세도헵툴로스, 세도헵툴로산, 솔라트리오스, 소포로스, 스타키오스, 스트렙토스, 수크로스, 암-트레할로스, 트레할로사민, 투라노스, 티벨로스, 자일로비오스, 또는 움벨리페로스를 포함하는 이당류, 삼당류 또는 다당류인, 화합물.
  17. 제14항에 있어서, 상기 탄수화물은 GalNAc 또는 갈락토스인, 화합물.
  18. 제1항에 있어서, L1, L2 및/또는 L3은 폴리펩타이드를 포함하는, 화합물.
  19. 제18항에 있어서, 상기 폴리펩타이드는 세포의 수용체에 대한 리간드인, 화합물.
  20. 제1항에 있어서, L2 또는 L3, 또는 둘 다는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 링커를 포함하는, 화합물.
  21. 제1항에 있어서, L2 또는 L3, 또는 둘 다는 아마이드 결합을 포함하는 링커를 포함하는, 화합물.
  22. 제1항에 있어서, L2 또는 L3, 또는 둘 다는 -O(CH2)4(CO)NH(CH2)3NH(CO)(CH2)2O-를 포함하는 링커를 포함하고, 상기 리간드는 GalNAc인, 화합물.
  23. 제1항에 있어서, L1은 -O(CH2)10O-를 포함하는 링커를 포함하고, 상기 리간드는 콜레스테롤인, 화합물.
  24. 제1항의 화합물의 제조 방법으로서, 상기 화합물은 하기 화학식 45의 다중 리간드 화합물로 이루어지되:
    Figure pct00055
    ,
    상기 방법은 하기 i 내지 vi 단계를 포함하는, 제조 방법:
    i. 하기 구조의 아미노트라이올 화합물을 하기 친유성기 42와 반응시키는 단계:
    Figure pct00056

    Figure pct00057
    ;
    ii. 단계 i의 생성물로부터 하이드록실 보호기를 제거하는 단계;
    iii. NaOH 중에서 단계 ii의 생성물을 (CHCH)COO-t-뷰틸과 반응시키는 단계;
    iv. 단계 iii의 생성물에 아미노 보호기를 첨가하는 단계;
    v 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카보다이이미드-하이드로클로라이드(EDC) 및 하이드록시 벤조트라이아졸(HOBT)을 이용하여 단계 iv의 생성물을 BocN(CH2)3NH2와 반응시키는 단계;
    vi. EDC, HOBT 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민을 이용하여 단계 v의 생성물을 하기 GalNAc 산과 반응시키는 단계:
    Figure pct00058
    .
  25. 제24항에 있어서, 상기 아미노트라이올 화합물은 하기 화학식 1, 5 또는 9의 화합물로 이루어진, 제조 방법:
    Figure pct00059
    .
  26. 제1항에 있어서, 상기 화합물은 하기 화학식 53의 다중 리간드 화합물로 이루어지되:
    Figure pct00060
    ,
    하기 i 내지 ix 단계를 포함하는, 제조 방법:
    i. 하기 구조를 갖는 아미노트라이올 화합물을 n-Bu4NF와 반응시키는 단계:
    Figure pct00061
    ;
    ii. 단계 i의 생성물을 CH3C(OCH3)2CH3 및 p-톨루엔설폰산과 반응시키는 단계;
    iii. 단계 ii의 생성물을 LiBH4와 반응시키는 단계;
    iv. 단계 iii의 생성물을 하기 친유성기 42와 반응시키는 단계:
    Figure pct00062
    ;
    v. 단계 v의 생성물로부터 하이드록실 보호기를 제거하는 단계;
    vi. NaOH 중에서 단계 v의 생성물을 (CHCH)COO-t-뷰틸과 반응시키는 단계;
    vii. vi의 생성물에 아미노 보호기를 첨가하는 단계;
    viii. 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카보다이이미드-하이드로클로라이드(EDC) 및 하이드록시 벤조트라이아졸(HOBT)을 이용하여 단계 viii의 생성물을 BocN(CH2)3NH2와 반응시키는 단계;
    ix. EDC, HOBT 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민을 이용하여 단계 ix의 생성물을 하기 GalNAc 산과 반응시키는 단계를 포함하는, 제조 방법.
    Figure pct00063
  27. 제26항에 있어서, 상기 아미노트라이올 화합물은 하기 화학식 13, 19 또는 30의 화합물로 이루어진, 제조 방법.
    Figure pct00064
  28. 제1항에 있어서, 상기 화합물은 하기 화학식 45의 다중 리간드 화합물로 이루어지되:
    Figure pct00065
    ,
    하기 i 내지 vi 단계를 포함하는, 제조 방법:
    i. 하기 화학식 38을 갖는 아미노트라이올 화합물을 하기 친유성기 42와 반응시키는 단계:
    Figure pct00066

    Figure pct00067
    ;
    ii. 단계 i의 생성물로부터 하이드록실 보호기를 제거하는 단계;
    iii. NaOH 중에서 단계 ii의 생성물을 (CHCH)COO-t-뷰틸과 반응시키는 단계;
    iv. 단계 iii의 생성물에 아미노 보호기를 첨가하는 단계;
    v. 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카보다이이미드-하이드로클로라이드(EDC) 및 하이드록시 벤조트라이아졸(HOBT)을 이용하여 단계 iv의 생성물을 BocN(CH2)3NH2와 반응시키는 단계;
    vi. EDC, HOBT 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민을 이용하여 단계 v의 생성물을 하기 GalNAc 산과 반응시키는 단계:
    Figure pct00068
    .
  29. 제1항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
  30. 제29항에 있어서, 약제학적으로 허용 가능한 반대이온 또는 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 더 포함하는, 약제학적 조성물.
  31. 제29항에 있어서, 상기 치료 분자는 RNA인, 약제학적 조성물.
  32. 제29항에 있어서, 상기 리간드는 탄수화물인, 약제학적 조성물.
  33. 제32항에 있어서, 상기 탄수화물은 GalNAc 또는 갈락토스인, 약제학적 조성물.
  34. 질환을 치료하는 데 사용하기 위한 제1항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물로서, 상기 약제학적 조성물은 질환의 치료가 필요한 대상체에게 투여하기에 적합한, 약제학적 조성물.
  35. 제34항에 있어서, 상기 생물학적으로 활성인 분자는 RNA 분자인, 약제학적 조성물.
  36. 제34항에 있어서, 상기 조성물은 피하 투여에 적합한, 약제학적 조성물.
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Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11672757B2 (en) 2017-06-28 2023-06-13 University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education Hot melt extrusion for pharmaceutical vaginal film products
WO2019172286A1 (ja) 2018-03-09 2019-09-12 第一三共株式会社 糖原病Ｉａ型治療薬
CN109529113B (zh) * 2018-10-24 2021-03-02 温州医科大学 低免疫源性骨缺损部位填充材料及其制备方法
EP4299750A2 (en) 2018-12-06 2024-01-03 Arcturus Therapeutics, Inc. Compositions and methods for treating ornithine transcarbamylase deficiency
US20220305108A1 (en) 2019-06-20 2022-09-29 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Lipid nanoparticle or liposome delivery of hepatitis b virus (hbv) vaccines
WO2021049504A1 (ja) 2019-09-10 2021-03-18 第一三共株式会社 肝臓送達用ＧａｌＮＡｃ－オリゴヌクレオチドコンジュゲートおよび製造方法
TW202245809A (zh) 2020-12-18 2022-12-01 美商詹森藥物公司 用於治療b型肝炎病毒感染之組合療法
CN117836006A (zh) * 2021-08-04 2024-04-05 和博医药有限公司 用于递送治疗活性剂的配体缀合物
IL309505A (en) 2021-09-03 2024-02-01 CureVac SE Lipid nanoparticles for nucleic acid delivery
WO2023073228A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 CureVac SE Improved circular rna for expressing therapeutic proteins
WO2023144330A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 CureVac SE Nucleic acid encoded transcription factor inhibitors
WO2023218420A1 (en) 2022-05-13 2023-11-16 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Mrna compositions for inducing latent hiv-1 reversal
WO2023227608A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Glaxosmithkline Biologicals Sa Nucleic acid based vaccine encoding an escherichia coli fimh antigenic polypeptide
WO2023233290A1 (en) 2022-05-31 2023-12-07 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Rnai agents targeting pd-l1
CN115487168A (zh) * 2022-09-27 2022-12-20 浙江大学 一种基于含氮杂环胆固醇衍生物的脂质纳米颗粒及其应用

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7851615B2 (en) * 2003-04-17 2010-12-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipophilic conjugated iRNA agents
AU2008333811B2 (en) 2007-12-04 2014-05-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Carbohydrate conjugates as delivery agents for oligonucleotides
KR102205886B1 (ko) 2009-06-10 2021-01-21 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 향상된 지질 조성물
KR20120050429A (ko) 2009-06-15 2012-05-18 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 Ｐｃｓｋ9 유전자를 표적으로 하는 지질 제형된 ｄｓｒｎａ
EP3301177B1 (en) 2011-11-18 2020-03-25 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Rnai agents, compositions and methods of use thereof for treating transthyretin (ttr) associated diseases
CN110003066B (zh) 2013-11-18 2021-09-03 阿克丘勒斯治疗公司 用于rna递送的可电离的阳离子脂质
EP3077006B1 (en) * 2013-12-05 2020-08-19 Wu, Nian Polymer-carbohydrate conjugates for drug delivery technology

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