KR20170079322A - 셀레늄을 함유한 계종버섯 재배방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 물속에 껍질을 깐 감자, 보리, 포도당, 우무를 압축 탈수하여 건조 시킨 한천, 황산마그네슘, 수용성 인상수소칼륨, 펩톤을 혼합하여 가열하여 용해 시켜 끈적끈적한 상태로 만드는 모종배양액을 제조하는 단계 1; 상기 단계 1에서 얻는 모종배양액을 시험관에 집어 넣고, 시험관의 입구를 막는 모종배양액을 시험관에 넣는 단계 2; 상기 단계 2의 모종배양액이 들어있는 시험관을 고압멸균기에 넣고 가열하여 잡균을 죽도록 모종배양액이 들어있는 시험관을 멸균하는 단계 3; 상기 단계 3의 시험관에 접종삽으로 미리 구비해둔 포자상태의 모종을 대략 1㎤ 퍼내 중간부분에 접종시키는 멸균된 시험된 내부에 포자상태의 모종을 접종하는 단계 4; 상기 단계 4의 모종이 접정된 시험관을 배양실로 옮기고 배양실 내부 온도는 섭씨 23도 정도로 유지하여 배양 1주일 후 균사가 싹트도록 하는 단계인 접종된 모종을 배양하는 단계 5; 상기 단계 5에서 배양된 모종을 옮겨 심어 원종으로 증식하기 위해 나뭇가지균종을 제조하는 단계 6; 톱밥, 흰설탕, 경탄산칼륨, 물을 혼합하여 배양재료를 배양재료를 얻고, 상기 배양재료를 원종비닐주머니에 일부 채운후, 상기 단계 6의 나뭇가지종을 원종비닐주머니에 채워 배양시킬 수 있도록 하는 단계인 나뭇가지종을 이용하여 원종배양기를 제조하는 단계 7; 단계 5에서 배양된 모종을 단계 7의 원종비닐주머니에 접종하고 후 원종이 접종된 원종비닐주머니는 배양실로 옮기고, 배양실의 온도를 22∼25℃, 상대 습도 약 60%를 유지하여 한달 후 균사가 싹트도록 하는 단계인 원종배양기에 배양된 모종을 옮겨심어 원종으로 배양하는 단계 8; 단계 8에서 증식된 원종을 다시 증식시키고, 계종버섯에 실질적으로 영양을 공급하는 공급원으로서 계종버섯 자실체에 셀레늄을 함유시키며 자실체에 필수 영양소를 공급하도록 하는 준비단계인 배양되어 증식된 원종을 다시 증식시키는 재배종배양기를 제조하는 단계 9; 단계 9의 재배종배양기를 고압멸균기에서 멸균하는 단계 10; 단계 10의 재배종배양기를 재배종비닐주머니에 옮겨 심어 30 ~ 40일 동안 원종이 다 자라 재배종이 될때까지 키우는 단계 11; 및 단계 11의 원종을 온도와 습도 조절이 가능하도록 비닐하우스와 같은 재배실의 흙속에 옮겨 심어 25 ~ 35일 동안 키워 재배종이 자실체를 갖는 완전한 계종버섯으로 키우는 단계 12;을 포함하여 이루어진 것을 특징으로 하는 셀레늄을 함유한 계종버섯 재배방법에 관한 것이다.

Description

셀레늄을 함유한 계종버섯 재배방법{Cultivation method of termite mushroom of using selenium}

본 발명은 계종버섯 재배방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 항암기능이 우수한 셀레늄을 자실체에 함유시킨 셀레늄을 함유한 계종버섯 재배방법에 관한 것이다.

계종버섯(Termitomyces, Termite Mushroom)은 엽록소가 없기 때문에 생존하기 위해서 직간접으로 녹색식물이나 그 밖의 기존유기물의 양분에 의존할 수밖에 없다. 그러므로 어디든 유기질 양분이 있는 곳에서 돋아날 수 있기 때문에 그 종류도 많을 뿐만 아니라 그 생활 방식도 다양하다. 동충하초와 같이 곤충이나 벌레에 기생하는 것은 물론 아프리카의 흰개미는 스스로 자기들 배설물 더미에 버섯을 재배하여, 그 균사를 유충의 먹이로 사용하다가, 유충이 성충이 되면 버섯이 돋아나게 함으로써 공생관계를 유지한다고 한다. 이 버섯은 반드시 흰개미가 사는 곳에서 자라기 때문에 사람들은 이 버섯을 흰개미버섯이라고도 한다.

그 흰개미는 특별한 종류의 개미인데 나무를 소화할 수 없어서 나무를 자기들 둥지로 끌고 들어가 쏠아 씹어서 버섯에게 주어 버섯이 자라도록 아주 조심스럽게 돕는다고 한다. 왜냐하면 그 버섯의 균사는 그들의 유일한 먹이이기 때문이다.

버섯은 자라면서 흰개미들이 나무를 소화할 수 있도록 만들어준다. 이렇게 흰개미와 버섯이 공생관계를 이루어 서로 돕고 살아가는 것이다. 이 버섯이 자라는 아프리카에서는 희고 커다란 계종버섯을 사람들이 채취하여 즐겨 먹는다고 한다. 커다란 버섯 한 송이만 채취하여도 한 가족이 모두 먹을 수 있다. 사실상 아프리카 잠비아에서 발견된 가장 큰 버섯으로 기록될 정도인데, 그 버섯 갓의 크기가 55cm나 되고 그 무게가 2.5kg(약 6파운드 반)이라고 한다. 그리고 보면 버섯 재배는 인간들만이 하는 것이 아니고 이미 오래전부터 흰개미들이 먼저 재배해 왔던 것이다.

계종버섯은 현재 중국에서는 '삼팔고'라고 불리고 있으며 버섯 중에 으뜸으로 치고 있고, 그 중에서도 검은 '삼팔고'는 최상 등급으로 치고있다.

이 버섯은 고대 중국의 황실에 진상품으로 역사적 기록에 의하면 명/청 황제들이 '삼팔고' 버섯을 즐겨 먹었다고 기록되어 있으며, 지금도 중국 최고의 특급호텔에서만 제한적으로 맛볼 수 있는데 이 버섯을 한번 먹어본 사람은 이 맛을 잊지 못할 정도로 진미중에 하나로 극찬 받고 있다.

야생 '삼팔고버섯'은 매우 보기드문 희귀한 버섯으로 반드시 흰개미집과 같이 공생해야 하기 때문에 일명 '흰개미 버섯'이라고도 불린다. 흰개미집은 땅속에 묻혀져 있으며 우기때 잠시 빗물이 흰개미집 주위의 토양에 침투해야만 '삼팔고'의 원사체가 밖으로 생장할 수 있다고 한다. 그리고 '삼팔고'의 성장 환경은 극도로 까다로롭고 조금이라도 오염이 되면 즉시 괴사하여 썩어버리기 때문에 희귀한 식재료라고 할 수 있다.

특히, 삼팔고의 약용 가치는 인삼의 3배, 영지의 2.5배, 동충하초의 1.5배로 우리 인체에 필요한 8종의 아니미노산이 함유되어 있는 것으로 알려져 있다.

중국 명나라 이시진이 저술한 약학서 '본초강목'에는 계종버섯이 위장에 이롭고 정신을 맑게 하며, 치질 치료와 자양, 해독, 장암, 위암을 예방하고, 혈당을 낮취줘 면역력을 높여주는 효과가 있는 것으로 기록되어 있다.

계종버섯은 "다당체" 라는 물질이 다량으로 함유되어 있는데, 이 "다당체"는 지구상의 부패물을 처리하여 흙으로 돌아가게 만드는 작용을 하는 것으로 알려져 있다.

즉, 유기물을 무기물로 바꾸어 흙으로 되돌려 버리는 것으로 버섯을 복용하면 그 성분에 의해서 부패물이 분해 작용을 한다는 것인데, 이런 작용을 하는 것은 지구상에서 식물에는 버섯, 동물에는 흰개미, 그리고 토양의 미생물로 세가지 뿐이다. 그러므로 암세포는 사람의 세포가 부패한 상태라고 볼 수 있기 때문에 “다당체”가 많이 함유되어있는 버섯을 복용하면 그 성분에 의해서 부패물인 “암세포”가 분해 작용을 하므로 항암효과 또한 높은 것으로 알려져 있다.

셀레늄(selenium, Se)은 체내의 여러 가지 작용에 필수적인 미량 무기질이며 항산화 물질이다. 셀레늄은 강력한 항산화력으로 세포막 손상을 일으키는 과산화수소와 같은 활성산소를 제거하여 신체 조직의 노화와 변성을 막아 주거나 그 속도를 지연시킨다. 즉 셀레늄은 신체 내에서 생성된 과산화수소를 분해하여 과산화수소에 의한 손상을 방지하는 효소인 글루타싸이온 퍼옥시데이즈(glutathione peroxidase)의 성분으로 존재한다. 산화를 방지하는 항산화(抗酸化) 영양소에는 셀레늄을 비롯하여 비타민 A, C, E와 플라보노이드(flavonoid) 등이 있다.

셀레늄의 항산화 작용은 해독 작용과 면역 기능을 증진시키고 자외선, X선, 방사선의 피해를 경감시켜 암, 간 질환, 신장병, 관절염 등을 예방하고 치료하는 데 작용한다. 체내에 공급되는 셀레늄의 많은 양이 고환과 전립선에 집중되어 남성의 건강한 생식 기능을 유지하게 하며 수정 확률을 높인다.

셀레늄 의존 효소들은 지방의 과산화를 감소시키고 프로스타글란딘으로 알려진 세포 신호분자의 대사에 영향을 미쳐 심혈관 질환의 위험을 줄일 수 있다. 그러나 여러 연구들에서 셀레늄과 심혈관 질환 위험 간의 명백한 반비례 관계는 발견되지 않았다. 즉 셀레늄 농도가 낮은 집단이 심혈관 질환으로 사망이 증가한다는 연구결과가 있는 반면에 다른 연구에서는 혈청 셀레늄 농도에 따라 분류하였을 때 뇌졸중에 의한 사망에서만 의미 있는 차이가 있었다. 또한 셀레늄은 비타민 E와 함께 심장의 기능을 강화시켜 협심증, 부정맥, 심근경색, 허혈성 심장병 등을 예방한다고 알려져 있다.

당뇨병 환자의 혈중 셀레늄치(値)는 낮다. 이에 당뇨병 환자에게 셀레늄을 보충하면 산화 스트레스가 감소되는 것으로 알려져 있다. 셀레늄과 비타민 C, 비타민 E는 서로 상승 작용을 한다.

셀레늄 흡수율은 50∼100% 정도이며 식품 내에 유기 셀레늄으로 공급되면 거의 완전히 흡수되나 무기 셀레늄의 흡수는 여러 인자의 영향을 받는다. 체내 셀레늄 함량은 소변을 통한 배설을 통해 조절한다.

일상의 식사에서 부족한 셀레늄을 보충할 목적으로 섭취하는 건강기능식품의 기능성은 항산화 영양소로서 비타민 E와 함께 체내에서 지질의 산화를 방지하고 세포막을 보호해 준다.

신체의 방어 물질이라고 할 수 있는 셀레늄이 결핍되면 활성 산소의 피해를 받아 신체 내장 기능이 저하된다. 임신 말기에 셀레늄이 결핍되면 유산, 조산, 사산의 우려가 있고 신생아의 경우 모체에서 공급받지 못하면 성장과 발달에 문제를 일으킬 수 있다.

셀레늄 결핍의 증세는 근육통, 근육 소모, 심근증 등이다. 심근증은 심장근육의 손상에 의해 발생하는 심장 질환이다. 주로 어린이와 가임기 여성에게 심근증을 보이는 케산병(Keshan disease)은 전적으로 셀레늄 부족으로 인하여 발병한다고는 볼 수 없으나, 혈액과 머리카락의 셀레늄 함량이 낮은 것과 관련이 있다.

셀레늄은 필수 미량 영양소이므로 고용량을 섭취하면 독성을 나타낼 수 있다. 셀레늄 독성의 가장 흔한 증상은 머리카락과 손톱이 부스러지고 소실되며 복통, 설사, 구토 등 위장 장애, 피부 발진, 피로감, 신경계 이상 등이 나타날 수 있다.

한국인 영양섭취기준에서 성인 남녀의 셀레늄 1일 권장섭취량은 50㎍이고, 상한섭취량은 400㎍이다. 셀레늄의 좋은 급원은 동물 간(肝), 육류, 생선, 곡류, 달걀 등이며 과일과 채소류에는 셀레늄이 매우 적게 함유되어 있다.

이와 같이 계종버섯은 항암효과가 높은 것으로 알려고 있고, 셀레늄은 신체 방어물질이라고 할 수 있는 여러 가지 기능이 있는데, 셀레늄은 동물 간, 육류, 생선, 달갈 등에 상대적으로 많이 함유하고 있지만 그 함유량도 절대치로 계산해보면 미량이고, 과일과 채소류에는 매우 적게 함유되어 있어서 인위적으로 쉽게 섭취할 수 있는 비타민 성분과 달리 셀레늄은 필요량을 인위적으로 쉽게 섭취하기 어려운 문제점이 있었다.

대한민국 공개특허 10-2002-0059554호(2002.07.13) 대한민국 공개특허 10-2005-0080111호(2005.08.11) 대한민국 등록특허 10-1182998호(2012.09.07) 대한민국 등록특허 10-1381711호(2014.03.31)

본 발명은 전술한 바와 같은 문제점을 해결하기 위한 것으로, 항암효과가 우수한 계종버섯을 재배할때 버섯발육에 필요한 영양분은 균사가 기주에 기생하여 그 속에 있는 여러 유기물질을 효소의 힘으로 분해하여 섭취하므로 이 과정에서 셀레늄을 흡수할 수 있도록 하여 자실체에 셀레늄을 함유시킴으로써 계종버섯을 섭취하면 계종버섯이 가지고 있는 함암효과를 비롯한 인체에 유익한 성분과 신체 방어물질인 셀레늄을 동시에 얻을 수 있는 셀레늄을 함유한 계종버섯 재배방법을 제공하고자 한다.

본 발명은 물속에 껍질을 깐 감자, 보리, 포도당, 우무를 압축 탈수하여 건조 시킨 한천, 황산마그네슘, 수용성 인상수소칼륨, 펩톤을 혼합하여 가열하여 용해 시켜 끈적끈적한 상태로 만드는 모종배양액을 제조하는 단계 1; 상기 단계 1에서 얻는 모종배양액을 시험관에 집어 넣고, 시험관의 입구를 막는 모종배양액을 시험관에 넣는 단계 2; 상기 단계 2의 모종배양액이 들어있는 시험관을 고압멸균기에 넣고 가열하여 잡균을 죽도록 모종배양액이 들어있는 시험관을 멸균하는 단계 3; 상기 단계 3의 시험관에 접종삽으로 미리 구비해둔 포자상태의 모종을 대략 1㎤ 퍼내 중간부분에 접종시키는 멸균된 시험된 내부에 포자상태의 모종을 접종하는 단계 4; 상기 단계 4의 모종이 접정된 시험관을 배양실로 옮기고 배양실 내부 온도는 섭씨 23도 정도로 유지하여 배양 1주일 후 균사가 싹트도록 하는 단계인 접종된 모종을 배양하는 단계 5; 상기 단계 5에서 배양된 모종을 옮겨 심어 원종으로 증식하기 위해 나뭇가지균종을 제조하는 단계 6; 톱밥, 흰설탕, 경탄산칼륨, 물을 혼합하여 배양재료를 배양재료를 얻고, 상기 배양재료를 원종비닐주머니에 일부 채운후, 상기 단계 6의 나뭇가지종을 원종비닐주머니에 채워 배양시킬 수 있도록 하는 단계인 나뭇가지종을 이용하여 원종배양기를 제조하는 단계 7; 단계 5에서 배양된 모종을 단계 7의 원종비닐주머니에 접종하고 후 원종이 접종된 원종비닐주머니는 배양실로 옮기고, 배양실의 온도를 22∼25℃, 상대 습도 약 60%를 유지하여 한달 후 균사가 싹트도록 하는 단계인 원종배양기에 배양된 모종을 옮겨심어 원종으로 배양하는 단계 8; 단계 8에서 증식된 원종을 다시 증식시키고, 계종버섯에 실질적으로 영양을 공급하는 공급원으로서 계종버섯 자실체에 셀레늄을 함유시키며 자실체에 필수 영양소를 공급하도록 하는 준비단계인 배양되어 증식된 원종을 다시 증식시키는 재배종배양기를 제조하는 단계 9; 단계 9의 재배종배양기를 고압멸균기에서 멸균하는 단계 10; 단계 10의 재배종배양기를 재배종비닐주머니에 옮겨 심어 30 ~ 40일 동안 원종이 다 자라 재배종이 될때까지 키우는 단계 11; 및 단계 11의 원종을 온도와 습도 조절이 가능하도록 비닐하우스와 같은 재배실의 흙속에 옮겨 심어 25 ~ 35일 동안 키워 재배종이 자실체를 갖는 완전한 계종버섯으로 키우는 단계 12;을 포함하여 이루어진 것을 특징으로 하는 계종버섯 재배방법을 제공한다.

상기 단계 6의 나뭇가지균종은, 석회를 이용하여 물의 PH 농도을 8∼9 사이로 맞추고, 물속에 백양나무나 활엽수 줄기를 집어넣은 후 여과 망을 올려 잘 잡고 그 위에 벽돌과 같은 무거운 것을 올려 상기 줄기가 물속에서 뜨는 것을 방지하고 석회수가 충분히 상기 줄기에 충분히 베어 들도록 한 다음 줄기를 석회수에 24 시간동안 담궈 놓아 석회수가 충분히 베어들게 한후 상기 석회수에 밀기울을 석회수양의 1/5 정도 혼합하여 줄기의 영양을 증가시키고 밀기울이 혼합된 석회수에 싱기 줄기를 버무려 줄기의 표면 전체에 밀기울이 골고루 달라붙도록 하여 이루어지는 것을 특징으로 하고, 상기 단계 9의 재배종배양기는, 면 60wt%, 밀기울 18wt%, 옥수수가루 8wt%, 옥수수심 4wt%, 콩 5wt%, 포도당 3wt%, 석회 2wt%를 혼합하고, 혼합된 재료의 수분함량이 65% 정도 될때까지 물을 첨가하여 15일 동안 발효시킨 후 그 재료들을 직경이 10cm, 길이가 30cm 재배종비닐주머니에 채워 넣어 만들어지는 것을 특징으로 하며, 상기 단계 11은, 모종을 배양시켜 증식시킨 원종을 재배종배양기에 옮겨심고, 원종으로 배양된 원종비닐주머니를 비닐부준을 벗겨주고, 비닐부분을 벗겨내면 나뭇가지종균과 배양재료들이 엉겨붙어 있으므로, 이를 여러 조각으로 부수어 재배종비닐주머니에 집어 넣어 접종이 완료되면 재배종비닐주머니를 배양실에 집어넣어 20 ~ 25℃ , 습도는 60 ~ 70%을 유지하여 30 ~ 40일 동안 배양하여 자실체가 생기기 전 상태인 재배종을 될때까지 키우는 것을 특징으로 하고, 상기 단계 12는, 재배종비닐주머니에서 비닐 부분을 벗겨낸 균방을 온도와 습도 조절이 가능하도록 비닐하우스와 같은 재배실의 흙속에 옮겨 심되, 균방을 재배실의 평탄한 바닥에 세우고 균방의 상단만 보이게 흙을 덮은 후, 그 위에 3 ~ 5cm 정도의 초탄토를 뿌리며, 상기 흙의 PH 5.5 ~ 5.7 를 유지할 수 있도록 하고, 재배실 온도는 25 ~ 30℃ 이며, 습도는 90%를 유지하여, 재배실에서 25일 정도 지나면 버섯이 흙 밖으로 자라나오면, 재배실의 밤낮 온도 차이를 8 ~ 10℃ 정도 나도록 낮에 27℃ 이면 밤에는 17℃로 하여 자실체의 분화가 잘되도록 하는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따르면, 그동안 인공재배가 까다로워 상업적인 생산이 힘들었던 계종버섯을 간단하고 체계적인 방법으로 대량생산이 가능하도록 하였고, 계종버섯의 유익한 성분과 셀레늄의 유익한 효과를 동시에 얻을 수 있다.

본 발명은 물속에 껍질을 깐 감자, 보리, 포도당, 우무를 압축 탈수하여 건조 시킨 한천, 황산마그네슘, 수용성 인상수소칼륨, 펩톤을 혼합하여 가열하여 용해 시켜 끈적끈적한 상태로 만드는 모종배양액을 제조하는 단계 1; 상기 단계 1에서 얻는 모종배양액을 시험관에 집어 넣고, 시험관의 입구를 막는 모종배양액을 시험관에 넣는 단계 2; 상기 단계 2의 모종배양액이 들어있는 시험관을 고압멸균기에 넣고 가열하여 잡균을 죽도록 모종배양액이 들어있는 시험관을 멸균하는 단계 3; 상기 단계 3의 시험관에 접종삽으로 미리 구비해둔 포자상태의 모종을 대략 1㎤ 퍼내 중간부분에 접종시키는 멸균된 시험된 내부에 포자상태의 모종을 접종하는 단계 4; 상기 단계 4의 모종이 접정된 시험관을 배양실로 옮기고 배양실 내부 온도는 섭씨 23도 정도로 유지하여 배양 1주일 후 균사가 싹트도록 하는 단계인 접종된 모종을 배양하는 단계 5; 상기 단계 5에서 배양된 모종을 옮겨 심어 원종으로 증식하기 위해 나뭇가지균종을 제조하는 단계 6; 톱밥, 흰설탕, 경탄산칼륨, 물을 혼합하여 배양재료를 배양재료를 얻고, 상기 배양재료를 원종비닐주머니에 일부 채운후, 상기 단계 6의 나뭇가지종을 원종비닐주머니에 채워 배양시킬 수 있도록 하는 단계인 나뭇가지종을 이용하여 원종배양기를 제조하는 단계 7; 단계 5에서 배양된 모종을 단계 7의 원종비닐주머니에 접종하고 후 원종이 접종된 원종비닐주머니는 배양실로 옮기고, 배양실의 온도를 22∼25℃, 상대 습도 약 60%를 유지하여 한달 후 균사가 싹트도록 하는 단계인 원종배양기에 배양된 모종을 옮겨심어 원종으로 배양하는 단계 8; 단계 8에서 증식된 원종을 다시 증식시키고, 계종버섯에 실질적으로 영양을 공급하는 공급원으로서 계종버섯 자실체에 셀레늄을 함유시키며 자실체에 필수 영양소를 공급하도록 하는 준비단계인 배양되어 증식된 원종을 다시 증식시키는 재배종배양기를 제조하는 단계 9; 단계 9의 재배종배양기를 고압멸균기에서 멸균하는 단계 10; 단계 10의 재배종배양기를 재배종비닐주머니에 옮겨 심어 30 ~ 40일 동안 원종이 다 자라 재배종이 될때까지 키우는 단계 11; 및 단계 11의 원종을 온도와 습도 조절이 가능하도록 비닐하우스와 같은 재배실의 흙속에 옮겨 심어 25 ~ 35일 동안 키워 재배종이 자실체를 갖는 완전한 계종버섯으로 키우는 단계 12;을 포함하여 이루어진다.

본 발명에 따른 셀레늄을 함유한 계종버섯 재배방법의 일실시예를 설명하면 다음과 같다.

● 모종배양액을 제조하는 단계 1

표 1과 같이, 물 1000㎖에 껍질을 깐 감자 200g, 맥피 100g, 포도당 20g, 우무를 압축 탈수하여 건조 시킨 한천 20g, 황산마그네슘 0.5g, 수용성인산수소칼륨 2g, 펩톤 5g을 혼합한다.

감자는 껍질을 깐 것을 사용하고, 맥피는 밀을 껍질채 빻은 가루를 사용하며, 펩톤은 천연단백질이 펩신에 의해 부분적으로 가수 분해 해서 생기는 혼합체를 의미한다.

감자, 맥피, 포도당, 한천, 황산마그네슘, 수용성 인산수소칼륨, 펩톤, 물을 가열용기에 집어 넣고 용기 밑에서 직화로 가열하여 끓는점까지 가열한다.

끓는점까지 가열되면 그때 부터는 약한불로 40 ~ 50분 동안 더 가열하여 물과 다른 재료들을 합합 무게가 1000㎖ 정도가 될 때까지 증발시킨다. 이때 용기의 뚜껑은 개방된 상태이고 재료들이 가열됨에 따라 물러지고 용해되면서 끈적끈적 해지는데, 용기의 달라붙지 않도록 계속 저어준다.

● 모종배양액을 시험관에 넣는 단계 2

단계 1에서 얻는 모종배양액을 길이가 20cm 이고, 직경이 2cm 시험관에 집어 넣는다. 모종배양액의 온도가 45∼40℃ 이하로 내려가면 굳기 때문에 그 이하로 냉각되기 전에 시험관에 넣어야 합니다. 모종배양액은 시험관 길이의 1/4만 채운다.

시험관에 모종배양액을 채운 뒤에는 시험관의 입구를 면 솜을 이용해서 손으로 돌리면서 막는다.

● 모종배양액이 들어있는 시험관을 멸균하는 단계 3

10개 정도의 시험관을 모아 신문지에 함 모둠으로 싼다. 신문지는 멸균 중 생기는 물기를 방지할 수 있다. 신문지로 싼 시험관을 고물줄로 묶는다. 이는 멸균중 고압멸균기에 올려놓은 시험관이 옆으로 쓸러지는 방지할 수 있다. 고압멸균기는 압력을 가하면서 가열할 수 있는 것을 의미하는데, 모종배양액이 들어있는 시험관을 고압멸균기에 넣고 압력이 0.1 파스칼로 30분 동안 멸균한다. 이 정도의 압력에서 온도는 120℃ 정도이다.

멸균된 시험관을 꺼내어 냉각시키면 모종배양액이 냉각되면서 굳는다. 이때 시험관을 수평에서 20°정도의 각도로 앞 부분이 들리게 비스듬히 눕혀 냉각시킨다. 이는 배양액이 시험관내에서 펼쳐진 상태로 굳게 하기 위한 것이다.

● 멸균된 시험된 내부에 포자상태의 모종을 접종하는 단계 4

모종접종은 무균 상태에서 포자상태의 모종을 모종배양기에 이식하는 것이다.

준비단계로서 무균상태인 깨끗한 작업대를 구비한다. 알코올램프, 알코올 솜, 접종 삽, 접종갈퀴, 접종 전에 접종을 할 사람의 손을 75% 알코올로 소독한다.접종삽은 알코올램프에 불을 붙여서 수초동안 멸균한다. 접종삽은 티스푼과 같은 것으로, 젖가락 같이 가늘고 길다란 막대 끝에 폭이 1cm 정도인 삽이 형성된 것이다. 접종전에 시험관의 입구 부분을 알코올램프에 수초 가열하여 잡균을 제거하고 시험관 입구의 솜을 빼냅니다. 접종삽으로 미리 구비해둔 포자상태의 모종을 대략 1㎤ 퍼내 모종배양기 중간부분에 접종시킨다. 시험관 속의 모종배양액은 옆으로 펼쳐진 상태로 굳어 있으므로 그 위로 모종삽을 통과시켜 가운데 부분에 부어 놓음으로서 접종된다. 접종이 끝나면 시험관 입구를 솜으로 막는다.

● 접종된 모종을 배양하는 단계 5

모종이 접정된 시험관을 배양실로 옮긴다. 배양실 내부 온도는 섭씨 23도 정도로 유지한다. 정상적인 상황에서 배양 1주일 후 균사가 싹튼다. 균사가 싹튼 후 더 이상 접종을 할 필요가 없는 상황이면 배양한 균사를 냉장고에 넣어 균사가 노화되는 것을 막는다. 이렇게 모종을 얻었으면 다음으로 모종을 원종으로 키워야 한다. 모종균사를 원종배양기에 넣어 확대 번식시켜 원종을 배양해 낸다. 원종을 키우는데에는 일반적으로 사용되는 나뭇가지균종 배양기에 접종하는 방법을 이용한다.

● 배양된 모종을 옮겨 심어 원종으로 증식하기 위해 나뭇가지종을 제조하는 단계 6

백양나무, 활엽수의 나무줄기들로 나뭇가지균종을 만들어 냅니다. 이것은 흑피계종버섯의 영양을 증가시키고 버섯이 나는 시간을 앞당겨 줄뿐 아니라 버섯이 계속 나게 한다.

나뭇가지균종 배양기 제조하기 위해서는 먼저 나뭇가지를 가공처리 해야 한다.가공처리 하는 방법은 다음과 같다.

석회를 이용하여 물의 PH 농도을 8∼9 사이로 맞춘다. 물속에 나뭇가지균종을 집어넣는다. 여과 망을 올려 잘 잡고 그 위에 벽돌과 같은 무거운 것을 올려 나뭇가지균종이 물속에서 뜨는 것을 방지하고 석회수가 충분히 나뭇가지균종에 충분히 베어 들도록 한다. 나뭇가지균종은 24시간 담궈 놓아야 석회수가 충분히 베어든다. 담궈 놓은 후에 밀기울을 석회수양의 1/5 정도 혼합한다. 이 과정은 나뭇가지균종의 영양을 증가시키기 위한 것이다. 밀기울이 혼합된 나뭇가지균종을 살살 버무리면 나뭇가지균종의 표면 전체에 밀기울이 골고루 달라붙어 있는 상태가 된다.

● 나뭇가지균종을 이용하여 원종배양기를 제조하는 단계 7

톱밥 39wt%, 흰설탕 0.1wt%, 경탄산칼륨 1wt%, 물 약 65wt%를 혼합하여 배양재료를 얻는다.

직경 10cm, 길이 30cm의 원종비닐주머니를 준비한다. 준비된 배양재료를 원종비닐주머니의 1/5 정도 채운다. 원종비닐주머니에 나뭇가지균종을 채워 넣는다. 나뭇가지균종은 원종비닐주머니 공간의 1/2 정도를 골고루 채운다. 나뭇가지균종을 채운후 나머지 공간의 90%를 다시 배양재료로 채운다. 즉 원종비닐주머니의 상단 부분에만 빈 공간이 형성되고 나머지는 나뭇가지균종과 배양재료가 채워진 상태이다. 나뭇가지균종과 배양재료가 채워진 원종비닐주머니의 입구를 마개로 막는다. 마개에는 다수의 통기공이 형성되어 있어서 원종비닐주머니 내부와 공기가 유통될 수 있도록 한다. 또한 원종비닐주머니의 바닥에도 다수의 통기공을 형성하여 공기가 유통될 수 있도록 한다.

이와 같이 나뭇가지균종과 배양재료가 채워지고 입구가 마개로 막힌 원종비닐주머니를 고온멸균기에 넣고 고압으로 가열한다. 이때 멸균실의 압력은 0.1파스칼 정도이고 온도는 120℃ 정도이다. 멸균이 끝나면 원종비닐주머니를 꺼내어 냉각시킨다.

● 원종배양기에 배양된 모종을 옮겨심어 원종으로 배양하는 단계 8

원종 접종도 무균상태에서 작업한다. 이식하기 전 소독과정은 모종접종방식과 동일하다. 소독이 끝나면 시험관 속의 모종을 1㎤ 가량 떠 원종비닐주머니의 마개를 열고 집어넣는다. 그리고 바로 마개로 입구를 막아준다. 접종을 끝낸 후 원종이 접종된 원종비닐주머니는 배양실로 옮긴다. 원종비닐주머니는 배양실에 옮겨 놓는다. 원종배양이 이루어지는 동안 실내 온도 섭씨 22∼25℃, 상대 습도 약 60%를 유지한다. 이런 온,습도에서 균사의 성장속도가 제일 빠르다. 1달 후 균사가 싹이 트기 시작한다. 일반적으로 모종을 원종으로 배양할 때는 실내 온도와 빛만 신경 써주면 된다. 이밖에 매일 하루에 30분씩 세 번 환풍기을 돌려 환기를 해준다. 균사가 자란 후에는 관리자는 수시로 원종비닐주머니를 검사해야 한다. 감염된 원종비닐주머니는 다른 원종비닐주머니에 영향을 끼치지 않도록 즉시 폐기 처분해 준다. 여기서 원종비닐주머니는 원종비닐주머니 안에서 배양되는 균사를 의미한다.

● 배양되어 증식된 원종을 다시 증식시키는 재배종배양기를 제조하는 단계 9

재배종배양기는 계종버섯에 실질적으로 영양을 공급하는 공급원으로서 계종버섯 자실체에 셀레늄을 다량 함유시키기 위해서는 재배종배양기에 셀레늄 성분을 다량 함유시켜야 한다. 자실체에 필수 영양소를 공급하면서 셀레늄이 다량 함유되도록 셀레늄이 다량 함유된 몇 가지의 식물성 재료를 이용하여 재배종 배양기를 제조한다.

면 60wt%, 밀기울 18wt, 옥수수가루 8wt, 옥수수심 4wt%, 콩 5wt%, 포도당 3wt%, 석회 2wt%을 혼합하고, 혼합된 재료의 수분함량이 65% 정도 될때까지 물을 첨가하여 15일 동안 발효시킨다. 혼합하여 발효시킨 재료들을 직경이 10cm, 길이가 30cm 재배종비닐주머니에 채워 넣는다. 재배종비닐주머니 용량의 80% 정도를 재료들을 채워 넣는다.

● 재배종배양기를 멸균하는 단계 10

재료를 채워 넣은 재배종비닐주머니는 고압멸균기에서 압력 0.1 파스칼로 멸균한다. 이때 온도는 120℃ 정도이다. 멸균된 재배종비닐주머니는 꺼낸 후 식으면 접종이 가능한 상태가 된다.

● 재배종배양기에 증식된 원종을 옮겨심어 원종이 다 자라 재배종이 될때까지 키우는 재배종배양 단계 11

모종을 배양시켜 증식시킨 원종을 재배종배양기에 옮겨심는다. 원종으로 배영된 원종비닐주머니를 비닐부준을 벗겨된다. 비닐부분을 벗겨내면 나뭇가지종균과배양재료들이 엉겨붙어 있으므로, 이를 여러 조각으로 부수어 재배종비닐주머니에 집어 넣는다. 재배종비닐주머니는 공간의 80%만 배양재료로 채워져 있을 뿐만 아니라, 배양재료들 사이에도 공극이 많아 나뭇가지균종이나 여러 조각으로 부순 원종을 박아 넣을 수 있다. 이와 같이 재배종비닐주머니에 원종비닐주머니를 벗내내고 얻은 나뭇가지균종과 원종 덩어리를 채워 넣고 마개를 덮으면 재배종으로 배양하기 위한 접종이 완료된다. 접종된 재배종비닐주머니를 배양실에 집어 30 ~ 40일 동안 배양하면 자실체가 생기기 전 상태인 재배종이 된다. 이때 배양실 온도는 20 ~ 25℃ , 습도는 60 ~ 70%을 유지한다.

재배종을 자실체를 갖는 완전한 계종버섯으로 키우는 단계 12

배양이 완료되면 재배종비닐주머니에서 비닐 부분을 벗겨낸 균방을 온도와 습도 조절이 가능하도록 비닐하우스와 같은 재배실의 흙속에 옮겨 심는다. 균방은 재배종비닐주머니에서 비닐 부분을 벗겨내고 남은 부분을 의미한다. 균방을 평탄한 바닥에 세우고 균방의 상단반 살짝 보일정도로 흙을 덮는다. 흙을 덮은 후에는 그 위에 3 ~ 5cm 정도의 초탄토를 뿌린다. 이때 흙의 PH 5.5 ~ 5.7 를 유지할 수 있도록 하고, 재배실 온도는 25 ~ 30℃ 이며, 습도는 90%를 유지해야 한다.

재배실에서 25일 정도 지나면 버섯이 흙 밖으로 자라나온다. 이때 부터는 재배실의 밤낮 온도 차이를 8 ~ 10℃ 정도 나게 한다. 즉 낮에 27℃ 이면 밤에는 17 ℃ 이다. 이와 같은 일교차는 자실체의 분화에 좋은 영향을 주기 때문이다. 흙 밖으로 자라나온 계종버섯은 3 ~ 5일 후 수확한다.

재배종이 자실체를 갖는 완전한 계종버섯으로 성장할 때, 흙이나 초탄토를 통해 영향을 공급받기는 하지만, 영양의 상당 부분은 균방을 통해서 공급받고, 균방은 셀레늄 성분이 다량 함유된 재료들로 이루어져 있어 자실체에 다량의 셀레늄이 함유된다. 즉 셀레늄 성분이 다량 함유된 계종버섯을 얻게 된다.

Claims (5)

1. 물 속에 껍질을 깐 감자, 보리, 포도당, 우무를 압축 탈수하여 건조 시킨 한천, 황산마그네슘, 수용성 인상수소칼륨, 펩톤을 혼합하여 가열하여 용해 시켜 끈적끈적한 상태로 만드는 모종배양액을 제조하는 단계 1;
   상기 단계 1에서 얻는 모종배양액을 시험관에 집어 넣고, 시험관의 입구를 막는 모종배양액을 시험관에 넣는 단계 2;
   상기 단계 2의 모종배양액이 들어있는 시험관을 고압멸균기에 넣고 가열하여 잡균을 죽도록 모종배양액이 들어있는 시험관을 멸균하는 단계 3;
   상기 단계 3의 시험관에 접종삽으로 미리 구비해둔 포자상태의 모종을 대략 1㎤ 퍼내 중간부분에 접종시키는 멸균된 시험된 내부에 포자상태의 모종을 접종하는 단계 4;
   상기 단계 4의 모종이 접정된 시험관을 배양실로 옮기고 배양실 내부 온도는 섭씨 23도 정도로 유지하여 배양 1주일 후 균사가 싹트도록 하는 단계인 접종된 모종을 배양하는 단계 5;
   상기 단계 5에서 배양된 모종을 옮겨 심어 원종으로 증식하기 위해 나뭇가지균종을 제조하는 단계 6;
   톱밥, 흰설탕, 경탄산칼륨, 물을 혼합하여 배양재료를 배양재료를 얻고, 상기 배양재료를 원종비닐주머니에 일부 채운후, 상기 단계 6의 나뭇가지종을 원종비닐주머니에 채워 배양시킬 수 있도록 하는 단계인 나뭇가지종을 이용하여 원종배양기를 제조하는 단계 7;
   단계 5에서 배양된 모종을 단계 7의 원종비닐주머니에 접종하고 후 원종이 접종된 원종비닐주머니는 배양실로 옮기고, 배양실의 온도를 22∼25℃, 상대 습도 60%를 유지하여 한달 후 균사가 싹트도록 하는 단계인 원종배양기에 배양된 모종을 옮겨심어 원종으로 배양하는 단계 8;
   단계 8에서 증식된 원종을 다시 증식시키고, 계종버섯에 실질적으로 영양을 공급하는 공급원으로서 계종버섯 자실체에 셀레늄을 함유시키며 자실체에 필수 영양소를 공급하도록 하는 준비단계인 배양되어 증식된 원종을 다시 증식시키는 재배종배양기를 제조하는 단계 9;
   단계 9의 재배종배양기를 고압멸균기에서 멸균하는 단계 10;
   단계 10의 재배종배양기를 재배종비닐주머니에 옮겨 심어 30 ~ 40일 동안 원종이 다 자라 재배종이 될때까지 키우는 단계 11; 및
   단계 11의 원종을 온도와 습도 조절이 가능하도록 비닐하우스와 같은 재배실의 흙속에 옮겨 심어 25 ~ 35일 동안 키워 재배종이 자실체를 갖는 완전한 계종버섯으로 키우는 단계 12;
   을 포함하여 이루어진 것을 특징으로 하는 셀레늄을 함유한 계종버섯 제배방법.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 단계 6의 나뭇가지균종은
   석회를 이용하여 물의 PH 농도을 8∼9 사이로 맞추고, 물속에 백양나무나 활엽수 줄기를 집어넣은 후 여과 망을 올려 잘 잡고 그 위에 벽돌과 같은 무거운 것을 올려 상기 줄기가 물속에서 뜨는 것을 방지하고 석회수가 충분히 상기 줄기에 충분히 베어 들도록 한 다음 줄기를 석회수에 24 시간동안 담궈 놓아 석회수가 충분히 베어들게 한후 상기 석회수에 밀기울을 석회수양의 1/5 정도 혼합하여 줄기의 영양을 증가시키고 밀기울이 혼합된 석회수에 싱기 줄기를 버무려 줄기의 표면 전체에 밀기울이 골고루 달라붙도록 하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 셀레늄을 함유한 계종버섯 제배방법.
   
3. 제1항에 있어서,
   상기 단계 9의 재배종배양기는
   면 60wt%, 밀기울 18wt%, 옥수수가루 8wt%, 옥수수심 4wt%, 콩 5wt%, 포도당 3wt%, 석회 2wt%를 혼합하고, 혼합된 재료의 수분함량이 65% 정도 될때까지 물을 첨가하여 15일 동안 발효시킨 후 그 재료들을 직경이 10cm, 길이가 30cm 재배종비닐주머니에 채워 넣어 만들어지는 것을 특징으로 하는 셀레늄을 함유한 계종버섯 재배방법.
   
4. 제1항에 있어서,
   상기 단계 11은
   모종을 배양시켜 증식시킨 원종을 재배종배양기에 옮겨심고, 원종으로 배양된 원종비닐주머니를 비닐부준을 벗겨주고, 비닐부분을 벗겨내면 나뭇가지종균과 배양재료들이 엉겨붙어 있으므로, 이를 여러 조각으로 부수어 재배종비닐주머니에 집어 넣어 접종이 완료되면 재배종비닐주머니를 배양실에 집어넣어 20 ~ 25℃ , 습도는 60 ~ 70%을 유지하여 30 ~ 40일 동안 배양하여 자실체가 생기기 전 상태인 재배종을 될때까지 키우는 것을 특징으로 하는 셀레늄이 함유된 계종버섯 재배방법.
   
5. 제1항에 있어서,
   상기 단계 12는
   재배종비닐주머니에서 비닐 부분을 벗겨낸 균방을 온도와 습도 조절이 가능하도록 비닐하우스와 같은 재배실의 흙속에 옮겨 심되, 균방을 재배실의 평탄한 바닥에 세우고 균방의 상단만 보이게 흙을 덮은 후, 그 위에 3 ~ 5cm 정도의 초탄토를 뿌리며, 상기 흙의 PH 5.5 ~ 5.7 를 유지할 수 있도록 하고, 재배실 온도는 25 ~ 30℃ 이며, 습도는 90%를 유지하여, 재배실에서 25일 정도 지나면 버섯이 흙 밖으로 자라나오면, 재배실의 밤낮 온도 차이를 8 ~ 10℃ 정도 나도록 낮에 27℃ 이면 밤에는 17℃로 하여 자실체의 분화가 잘되도록 하는 것을 특징으로 하는 셀레늄을 함유한 계종버섯 제배방법.