KR20170073638A

KR20170073638A - 글루카곤 및 glp-1 수용체의 공-효능제

Info

Publication number: KR20170073638A
Application number: KR1020177013556A
Authority: KR
Inventors: 폴 이. 캐링턴; 퀴아올린 뎅; 라비 나르건드; 아난단 팔라니; 토마스 조셉 터커; 쳉웨이 우; 엘리자베타 비안치; 페데리카 오르비에토; 안토넬로 페시
Original assignee: 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션
Priority date: 2014-10-24
Filing date: 2015-10-22
Publication date: 2017-06-28
Also published as: US20170360893A1; MX2017005280A; WO2016065090A1; BR112017008160A8; CA2964379A1; EP3209682B1; CO2017003832A2; CN107108715A; US20160114000A1; GT201700085A; AU2015335828B2; IL251741A0; JP6581656B2; TN2017000148A1; CA2964379C; AU2015335828A1; EP3209682A1; EP3825324A1; SV2017005425A; TW201625672A

Abstract

디펩티딜 펩티다제 IV (DPP-IV)에 의한 절단 및 불활성화에 저항성이 되도록 그리고 글루카곤의 펩티드 유사체가 글루카곤-유사 펩티드 1 (GLP-1) 수용체 및 글루카곤 (GCG) 수용체에서 상대적으로 균형 잡힌 효능제 활성을 가질 수 있게 하면서 상기 펩티드 유사체의 생체내 반감기를 증가시키도록 변형된, 글루카콘의 펩티드 유사체, 및 대사 장애, 예컨대 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH) 및 비만을 치료하기 위한 이러한 GLP-1 수용체/GCG 수용체 공-효능제의 용도가 기재되어 있다.

Description

글루카곤 및 GLP-1 수용체의 공-효능제 {CO-AGONISTS OF THE GLUCAGON AND GLP-1 RECEPTORS}

관련 출원의 상호 참조

발명의 배경

(1) 발명의 분야

본 발명은 디펩티딜 펩티다제 IV (DPP-IV)에 의한 절단 및 불활성화에 저항성이 되도록 그리고 글루카곤의 펩티드 유사체가 글루카곤-유사 펩티드 1 (GLP-1) 수용체 및 글루카곤 (GCG) 수용체에서 상대적으로 균형 잡힌 효능제 활성을 가질 수 있게 하면서 펩티드 유사체의 생체내 반감기를 증가시키도록 변형된, 글루카콘의 펩티드 유사체, 및 대사 장애, 예컨대 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH) 및 비만을 치료하기 위한 이러한 GLP-1 수용체/GCG 수용체 공-효능제의 용도에 관한 것이다.

(2) 관련 기술의 기재

프리-프로글루카곤(pre-proglucagon)은 상이한 조직에서 프로세싱되어, 글루코스 항상성, 인슐린 분비, 위 배출 및 장의 성장, 뿐만 아니라 식품 섭취의 조절을 포함한 다종다양한 생리 기능에 관여하는, 글루카곤, 글루카곤-유사 펩티드-1 (GLP-1), 글루카곤-유사 펩티드-2 (GLP-2) 및 옥신토모듈린 (OXM)을 포함한, 다수의 상이한 프로글루카곤-유래 펩티드를 형성하는 158개 아미노산 전구체 폴리펩티드이다. 글루카곤은 프리-프로글루카곤의 아미노산 33 내지 61에 상응하는 29-아미노산 펩티드이며, 한편 GLP-1은 프리-프로글루카곤의 아미노산 72 내지 108에 상응하는 37-아미노산 펩티드로서 생성된다. GLP-1 (7-36) 아미드 또는 GLP-1 (7-37) 산은 GLP-1 수용체에서 본질적으로 동등한 활성을 나타내는, GLP-1의 생물학적으로 강력한 형태이다.

저혈당 동안에, 혈당 수준이 정상 수준 미만으로 강하하는 경우, 글루카곤은 간에게 신호를 보내 글리코겐을 분해하고 글루코스를 방출하여, 혈당 수준이 정상 수준으로 상승하도록 한다. 저혈당은 당뇨병으로 인한 고혈당 (상승된 혈당 수준)이 있는 환자에서 인슐린 요법의 일반적인 부작용이다. 따라서, 글루코스 조절에서 글루카곤의 가장 인식된 역할은 인슐린의 작용을 상쇄하고 혈당 수준을 유지하는 것이다.

GLP-1은 글루카곤과 비교하여 상이한 생물학적 활성을 갖는다. 그의 작용은 인슐린 합성 및 분비의 자극, 글루카곤 분비의 억제, 및 식품 섭취의 억제를 포함한다. GLP-1은 당뇨병 환자에서 고혈당을 감소시키는 것으로 나타났다. GLP-1과 약 50% 아미노산 동일성을 공유하는 도마뱀 독액으로부터의 펩티드인 엑센딘(Exendin)-4는 GLP-1 수용체를 활성화시키며 마찬가지로 당뇨병 환자에서 고혈당을 감소시키는 것으로 나타났다.

GLP-1 및 엑센딘-4가 당뇨병 환자뿐만 아니라 비만을 앓고 있는 환자에게도 유익할 효과인, 식품 섭취를 감소시키고 체중 감소를 촉진할 수 있다는 증거가 또한 있다. 비만이 있는 환자는 당뇨병, 고혈압, 고지혈증, 심혈관 질환 및 근골격계 질환의 위험이 더 높다.

글루카곤은 글리코겐분해 및 글루코스신생합성의 자극을 통해 혈당을 증가시키는 그의 급성 능력으로 널리 인식되어 있는, GLP-1과 구조적으로 관련이 있는 펩티드 호르몬이다 (Jiang & Zhang, Am. J. Physio.l Endocrinol. Metab. 284: E671-E678 (2003)). 열 생성, 포만, 지방 분해, 지방산 산화 및 케톤 생성에서의 증가를 특징으로 하는 글루카곤 약리학의 만성 효과는 덜 인식되어 있다 (Habegger et al., Nat. Rev. Endocrinol. 6: 689-697 (2010)). 글루카곤의 반복 투여는 체중 저하를 동반하여, 설치류 대사의 개선을 가져오는 것으로 수십년 전에 처음 보고되었다 (Salter, Am. J. Clin. Nutr. 8: 535-539 (1960)). 그럼에도 불구하고, 특별히 T2DM과 같은 인슐린 저항성 상태에서, 고혈당의 내재된 위험은 이들 관찰의 인간 연구로의 번역을 복잡하게 하였다.

호르몬 옥신토모듈린 (OXM, 글루카곤-37)은 장 및 중추신경계 (CNS)에서의 프리프로글루카곤 프로세싱의 번역 후 생성물이며, 식품 섭취에 반응하여 소화관내 L-세포로부터 분비된다. 1983년에 발견되어, OXM은 식품 섭취 및 에너지 소비의 조절에 연루되어 왔다 (Jarrouse et al., Endocrinol. 115: 102-105 (1984); Schjoldager et al., Eur. J. Clin. Invest., 18: 499-503 (1988)). 래트에서 OXM의 중추 또는 말초 투여는 위 배출에 미치는 영향을 최소화하면서 단기간의 식품 섭취를 감소시킨다 (Dakin et al. Endocrinology, 142: 4244-4250 (2001), Dakin et al. Endocrinology, 145: 2687-2695 (2004)). 래트에서 OXM의 반복된 뇌실내 (intracerebroventricular) 투여는 쌍-급여(pair-fed) 동물과 비교하여 코어 온도의 상승 및 체중 증가의 감소를 결과하며, 이는 칼로리 섭취 및 에너지 소비 둘 다에 미치는 영향을 시사한다 (Dakin et al. Am. J.Physiol. Endocrinol. Metab., 283: E1173-E1177 (2002)).

관련 연구에서, OXM의 말초 투여는 단식-유도 및 암기(dark phase) 식품 섭취 둘 다를 용량 의존적으로 억제하였으나, GLP-1과는 달리, 위 배출에 어떤 영향도 미치지 않았다. OXM은 또한 궁상핵 (ARC)에서, 공복 그렐린의 수준을 감소시키고, c-fos 면역반응성을 감소시켰다. OXM의 반복된 7일간의 IP 투여는 래트에서 지방과다 및 체중 증가율을 감소시켰다 (문헌 [Dakin et al. Endocrinology, 145: 2687-2695 (2004)]을 참조한다).

마우스에서 OXM 작용의 연구에 의하면 비록 OXM이 글루카곤 (GCG) 및 GLP-1 수용체 둘 다를 활성화시킬 수 있긴 하지만, OXM의 식욕 억제 작용은 icv OXM이 글루카곤 수용체 녹아웃 마우스에서 식품 섭취를 억제하므로 GLP-1 수용체만을 필요로 하는 것으로 입증되었다. 그러나, OXM의 식욕 억제 효과는 GLP-1 수용체 녹아웃 마우스에 완전히 결여되어 있다. 더욱이, 엑센딘-4 (OXM이 아니라)는 마우스에서 에너지 소비를 조절한다. 따라서, OXM은 약리학적 농도로 사용되는 경우, GLP-1 수용체에서 약한 효능제인 것으로 보인다 (문헌 [Baggio et al., Gastroenterol. 127: 546-58 (2004)]을 참조한다). OXM은 고지방 식이를 급여한 마우스에서 글루코스 불내성을 개선시키고 (Dakin et al., Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 294: E142-E147 (2008)), GLP-1 수용체와 무관한 마우스에서 고유 심장 박동수를 증가시키는 (Sowden et al., Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 292: R962-R970 (2007)) 것으로 또한 밝혀졌다. OXM은 G알파를 통한 GLP-1 수용체 베타-아레스틴 동원 및 신호전달에 차등적으로 영향을 미치고 (Jorgensen et al., J. Pharma. Exp. Therapeut. 322: 148-154 (2007)), OXM의 말초 주사 후에 시상하부의 신경 세포 활성화에 차등적으로 영향을 미치는 (Choudhri et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 350: 298-306 (2006)) 것으로 또한 나타났다.

인간에서, 정상 체중의 건강한 대상체에서 OXM의 단일의 90분 정맥내 주입은 뷔페식에서 식품 섭취 및 기아 점수를 약 19% 감소시켰다. 누적 12시간 칼로리 섭취는 오심 또는 식품 기호성의 변화에 대한 어떤 보고 없이 약 11% 감소하였다 (Cohen et al., J. Clin. Endocrinol. Metab., 88: 4696-4701 (2003); Lykkegaard et al., ADA Scientific Sessions, Abstract #1506-P (2003)). 더 최근에는, 비만의 건강한 지원자 (BMI 약 33)에서 4주 기간에 걸쳐 OXM의 식전 주사는 치료 첫날에 칼로리 섭취의 유의한 감소 (약 25%)를 야기하였으며 이는 연구의 과정에 걸쳐 유지되었다 (4주 후에 35% 감소) (Wynne et al., Diabetes 54: 2390-2395 (2005)). 강한 체중 감소가 치료된 대상체 (1.9%, 위약으로 보정됨)에서 연구의 종료시에 관찰되었다. OXM의 혈장 수준은 주입 연구에서 관찰된 것과 유사하였다 (피크 농도 약 950 pM). OXM의 불량한 생체내 안정성 (혈장 t1/2 <12분)에 의해 필요하게 되는 비교적 높은 용량에도 불구하고 임의의 속성 내성의 부재 및 경미하고 일시적인 오심의 낮은 발생률 (약 3%)은 이 호르몬을 인간 검증 및 매력적인 내약성 프로파일 둘 다를 가진 소수의 비만 목표 중 하나가 되게 한다.

OXM은 매우 짧은 반감기를 가지며 세포 표면 디펩티딜 펩티다제 IV (DPP-IV)에 의해 급속히 불활성화된다 (Zhu et al., J. Biol. Chem. 278: 22418-22423 (2002)). 그러나, DPP-IV 억제제는 임상에서 중량 중립적이며, 이는 인간에서 체중 감소를 달성하기 위해서 초생리학적 수준의 OXM (900-1000 pM)이 필요할 수 있음을 시사한다. 인간에서 체중 감소를 유도하기 위한 OXM 펩티드 유사체는 공개된 국제 출원 번호 WO03/022304, WO2004/062685, WO2006/134340, 및 WO2010/096052의 목적이었다.

최근에, 두 개의 독립된 동시 논문은 상대적으로 균형 잡힌 GLP-1 수용체/GCG 수용체 공-효능제의 사용이 설치류 비만의 치료에서 순수 GLP1R 효능제에 비해 효능 및 안전성을 증진시키며, 동시에 혈당 제어를 개선시키는 것으로 보고하였다 (Day et al., Nat. Chem. Biol. 5: 749-757 (2009); Pocai et al., Diabetes 58: 2258-2266 (2009)). GLP-1과 함께 공회장의 L-세포에 의해 식후에 분비되는, 글루카곤에 대한 내인성 전구체인 옥신토모듈린 (OXM)을 사용한 성과는 관련된 유의성이 있다 (Holst, Regul. Pept. 93: 45-51 (2000); Drucker, Nat. Clin. Pract. Endocrinol. Metab. 1: 22-31 (2005)).

GLP-1 수용체 및 GCG 수용체에서 다양한 정도의 활성을 갖도록 변형된 글루카곤 펩티드 유사체 및 유도체가 공개된 국제 출원 번호 WO2008/1010017, WO2009/155258, WO2011/075393, WO2012/177444, 및 WO2012/177443에 개시되어 있다. 개시된 글루카곤 펩티드 유사체의 일부는 상기 국제출원들에서 GLP-1 수용체 및 GCG 수용체 둘 다에서 활성을 갖는 것으로 보고되었지만; GLP-1 수용체 및 GCG 수용체에서 상대적으로 균형 잡힌 활성 또는 효능을 갖는 공-효능제 펩티드가 여전히 필요하다.

발명의 간단한 개요

본 발명은 글루카곤 (GCG) 수용체 및 글루카곤-유사 펩티드 1 (GLP-1) 수용체의 효능제이며 수용체 둘 다에서 상대적으로 균형 잡힌 활성 또는 효능을 갖는 펩티드를 제공한다. 천연 글루카곤(native glucagon)은 보통 GLP-1 수용체에서 천연 GLP-1의 활성의 약 1%를 갖는다. 그러나, 본 발명의 GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제 펩티드는 GCG 수용체 및 GLP-1 수용체에서 상대적으로 균형 잡힌 활성 또는 효능을 갖는다. 특정한 측면에서, GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제 펩티드는 GCG 수용체에서 약 0.02 내지 약 1.04 nM의 EC₅₀ 및 GLP-1 수용체에서 약 0.03 내지 약 1.3 nM의 EC₅₀을 갖는다. 특정한 측면에서, GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제 펩티드는 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는다. 본원에서의 펩티드는 예컨대 당뇨병 (예를 들어, 1형 당뇨병, 2형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병), 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 및/또는 비만이지만 그에 제한되지 않는 대사 장애의 치료에 유용하다.

일반 실시양태에서, 본 발명의 GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제 펩티드는 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열 (서열식별번호(SEQ ID NO): 1)을 포함하되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린, L-알라닌, α-아미노이소부티르산 (Aib), 또는 1-아미노-시클로부탄 카르복실산으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체되고; 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 포함할 수 있고; 여기서 GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제 펩티드는 GCG 수용체 및 GLP-1 수용체에서 상대적으로 균형 잡힌 활성, 및 임의로, 존재할 경우 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 갖되, 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는다.

특정한 실시양태에서, 본 발명은 하기 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 제공한다.

HX₂QGTX₆TSDX₁₀SX₁₂YLX₁₅X₁₆RX₁₈AQDFVQWLX₂₇DT (서열식별번호: 20)

여기서 X₂는 D-세린, L-알라닌, α-아미노이소부티르산 (Aib), 또는 1-아미노-시클로부탄 카르복실산이고; X₆은 L-페닐알라닌, 파라-플루오로 페닐알라닌 또는 트레오-β-페닐세린이고; X₁₀은 L-리신 또는 파라-아미노메틸 페닐알라닌이고; X₁₂는 L-리신 또는 L-류신이고; X₁₅는 L-글루탐산 또는 L-류신이고; X₁₆은 L-알라닌, Aib, L-글루탐산, 또는 L-발린이고; X₁₈은 L-알라닌 또는 L-아르기닌이고; X₂₇은 L-류신, 메티오닌 술폰, 또는 L-노르류신이고; 위치 10에서의 아미노산은 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합되고; 그리고, 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는다.

특정한 실시양태에서, 펩티드는 서열식별번호: 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 또는 19의 아미노산 서열을 갖는다.

특정한 실시양태에서, 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는다.

특정한 실시양태에서, 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 0.88, 0.89, 0.90, 0.91, 0.92, 0.93, 0.94, 0.95, 0.96, 0.97, 0.98, 0.99, 1.00, 1.01, 1.02, 1.03, 1.04, 1.05, 1.06, 1.07, 1.08, 1.09, 또는 1.10의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는다.

본 발명은 하기 아미노산 서열을 갖는 펩티드 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물을 추가로 제공한다.

여기서 X₂는 D-세린, L-알라닌, α-아미노이소부티르산 (Aib), 또는 1-아미노-시클로부탄 카르복실산이고; X₆은 L-페닐알라닌, 파라-플루오로 페닐알라닌 또는 트레오-β-페닐세린이고;

X₁₀은 L-리신 또는 파라-아미노메틸 페닐알라닌이고; X₁₂는 L-리신 또는 L-류신이고; X₁₅는 L-글루탐산 또는 L-류신이고; X₁₆은 L-알라닌, Aib, L-글루탐산, 또는 L-발린이고; X₁₈은 L-알라닌 또는 L-아르기닌이고; X₂₇은 L-류신, 메티오닌 술폰, 또는 L-노르류신이고; 위치 10에서의 아미노산은 감마-글루탐산 스페이서 (γE) 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합되고; 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는다.

본 발명은 하기 아미노산 서열을 갖는 펩티드 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물을 추가로 제공한다.

X₁₀은 L-리신 또는 파라-아미노메틸 페닐알라닌이고; X₁₂는 L-리신 또는 L-류신이고; X₁₅는 L-글루탐산 또는 L-류신이고; X₁₆은 L-알라닌, Aib, L-글루탐산, 또는 L-발린이고; X₁₈은 L-알라닌 또는 L-아르기닌이고; X₂₇은 L-류신, 메티오닌 술폰, 또는 L-노르류신이고; 위치 10에서의 아미노산은 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합되고; 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는다.

본 발명은 서열식별번호: 1에 나타낸 아미노산 서열을 가지되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 포함하는 펩티드이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는 펩티드를 추가로 제공한다.

특정한 측면에서, 위치 16에서의 세린은 D-알라닌 또는 L-알라닌으로 대체되고, 위치 18에서의 아르기닌은 L-알라닌으로 대체되고, 위치 27에서의 메티오닌은 L-류신으로 대체되고, 위치 29에서의 아스파라긴은 L-류신으로 대체되거나, 그의 조합이다.

특정한 측면에서, 위치 16에서의 세린은 D-알라닌 또는 L-알라닌으로 대체되고, 위치 18에서의 아르기닌은 L-알라닌으로 대체되고, 위치 27에서의 메티오닌은 L-류신으로 대체되고, 위치 29에서의 아스파라긴은 L-류신으로 대체된다.

본 발명은 (i) 서열식별번호: 1에 나타낸 바와 같되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 갖는 펩티드, 및 (ii) 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는, 조성물을 추가로 제공한다.

특정한 측면에서, 위치 16에서의 세린은 L-알라닌으로 대체되고, 위치 18에서의 아르기닌은 L-알라닌으로 대체되고, 위치 27에서의 메티오닌은 L-류신으로 대체되고, 위치 28에서의 아스파라긴은 L-아스파르트산으로 대체되거나, 그의 조합이다.

본 발명은 (i) 서열식별번호: 1에 나타낸 바와 같되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 갖는 펩티드, 및 (ii) 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는, 제약 조성물을 추가로 제공한다.

본 발명은 대사성 질환 환자에게 유효량의 상기 언급된 펩티드 중 어느 하나의 펩티드를 투여하여 상기 환자에서 대사성 질환을 치료하는 것을 포함하는, 대사성 질환 환자를 치료하는 방법을 추가로 제공한다.

본 발명은 대사성 질환 환자에게 유효량의 상기 언급된 조성물 중의 조성물을 투여하여 상기 환자에서 대사성 질환을 치료하는 것을 포함하는, 대사성 질환 환자를 치료하는 방법을 추가로 제공한다.

특정한 측면에서, 대사성 질환은 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만이다.

특정한 측면에서, 당뇨병은 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병이다.

특정한 측면에서, 환자는 하나 초과의 대사성 질환, 예를 들어, 당뇨병 및 NASH, NAFLD, 또는 비만; 비만 및 NASH 또는 NAFLD; 당뇨병, NASH, 및 비만; 당뇨병, NAFLD, 및 비만; 또는 당뇨병 및 비만을 갖는다.

본 발명은 대사성 질환을 치료하기 위한 위한 의약을 제조하기 위한 상기 언급된 펩티드 중 어느 한 펩티드의 용도를 추가로 제공한다.

본 발명은 대사성 질환을 치료하기 위한 위한 의약을 제조하기 위한 상기 언급된 조성물 중 어느 한 조성물의 용도를 추가로 제공한다.

특정한 측면에서, 의약은 하나 초과의 대사성 질환, 예를 들어, 당뇨병 및 NASH, NAFLD, 또는 비만; 비만 및 NASH 또는 NAFLD; 당뇨병, NASH, 및 비만; 당뇨병, NAFLD, 및 비만; 또는 당뇨병 및 비만의 치료용이다.

본원에 개시된 화합물의 특정한 측면에서 C-말단 보호 기는 아미드 또는 에스테르일 수 있다. 예를 들어, C-말단 아미노산의 카르복실산은 전하-중성 기, 예컨대 아미드 또는 에스테르로 대체된다.

환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하기 위해 환자 또는 개체에게 유효량의, 공-효능제 펩티드를 포함하는 상기 언급된 조성물 중 어느 한 조성물을 투여하는 것 및 환자 또는 개체에게 유효량의, 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하는 방법이 추가로 제공된다.

특정한 측면에서, 공-효능제 펩티드를 포함하는 조성물은 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물이 투여되기 전에 별개로 투여된다. 또 다른 측면에서, 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물은 공-효능제 펩티드를 포함하는 조성물이 투여되기 전에 별개로 투여된다. 또 다른 측면에서, 공-효능제 펩티드를 포함하는 조성물은 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물이 투여되는 것과 동시에 투여된다.

특정한 측면에서, 인슐린 유사체는 인슐린 데테미르(detemir), 인슐린 글라르긴, 인슐린 레베미르, 인슐린 글루리신, 또는 인슐린 리스프로이다.

본 발명은 상기 언급된 펩티드 중 어느 한 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물을 추가로 제공한다.

본 발명은 대사성 질환을 치료하기 위한, 상기 언급된 펩티드 중 어느 한 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 용도를 추가로 제공한다.

특정한 측면에서, 대사성 질환은 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만이다. 추가 측면에서, 당뇨병은 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병이다.

본 발명은 대사성 질환을 치료하기 위한 위한 의약을 제조하기 위한, 상기 언급된 펩티드 중 어느 한 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 용도를 추가로 제공한다.

추가 실시양태에서, 본 발명의 GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제 펩티드는 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열 (서열식별번호: 1)로 이루어지나, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린, L-알라닌, α-아미노이소부티르산 (Aib), 또는 1-아미노-시클로부탄 카르복실산으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체되고; 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 포함할 수 있고; 여기서 GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제 펩티드는 GCG 수용체 및 GLP-1 수용체에서 상대적으로 균형 잡힌 활성, 및 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 갖되, 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는다.

특정한 실시양태에서, 본 발명은 하기 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 제공한다.

본 발명은 하기 아미노산 서열을 갖는 펩티드 및, 제약상 허용되는 담체로 이루어진 조성물을 추가로 제공한다.

본 발명은 하기 아미노산 서열을 갖는 펩티드 및, 제약상 허용되는 담체로 이루어진 제약 조성물을 추가로 제공한다.

본 발명은 서열식별번호: 1에 나타낸 아미노산 서열을 가지되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환으로 이루어진 펩티드이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는 펩티드를 추가로 제공한다.

본 발명은 (i) 서열식별번호: 1에 나타낸 바와 같되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환으로 이루어진 펩티드, 및 (ii) 제약상 허용되는 담체로 이루어진 조성물이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되, 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는, 조성물을 추가로 제공한다.

본 발명은 (i) 서열식별번호: 1에 나타낸 바와 같되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환으로 이루어진 펩티드, 및 (ii) 제약상 허용되는 담체로 이루어진 제약 조성물이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는, 제약 조성물을 추가로 제공한다.

본 발명은 비만 대사성 질환 환자에게 유효량의 상기 언급된 펩티드 중 어느 하나의 펩티드를 투여하여 상기 환자에서 비만 대사성 질환을 치료하는 것으로 이루어진, 비만 대사성 질환 환자를 치료하는 방법을 추가로 제공한다.

본 발명은 비만 대사성 질환 환자에게 유효량의 상기 언급된 조성물 중의 조성물을 투여하여 상기 환자에서 비만 대사성 질환을 치료하는 것으로 이루어진, 비만 대사성 질환 환자를 치료하는 방법을 추가로 제공한다.

본 발명은 비만 대사성 질환을 치료하기 위한 위한 의약을 제조하기 위한, 상기 언급된 펩티드 중 어느 한 펩티드의 용도를 추가로 제공한다.

본 발명은 비만 대사성 질환을 치료하기 위한 위한 의약을 제조하기 위한, 상기 언급된 조성물 중 어느 한 조성물의 용도를 추가로 제공한다.

특정한 측면에서, 당뇨병은 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병.

환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하기 위해 환자 또는 개체에게 유효량의, 공-효능제 펩티드로 이루어진 상기 언급된 조성물 중 어느 한 조성물을 투여하는 것 및 환자 또는 개체에게 유효량의, 인슐린 또는 인슐린 유사체로 이루어진 조성물을 투여하는 것으로 이루어진, 환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하는 방법이 추가로 제공된다.

특정한 측면에서, 공-효능제 펩티드로 이루어진 조성물은 인슐린 또는 인슐린 유사체로 이루어진 조성물이 투여되기 전에 별개로 투여된다. 또 다른 측면에서, 인슐린 또는 인슐린 유사체로 이루어진 조성물은 공-효능제 펩티드로 이루어진 조성물이 투여되기 전에 별개로 투여된다. 또 다른 측면에서, 공-효능제 펩티드로 이루어진 조성물은 인슐린 또는 인슐린 유사체로 이루어진 조성물이 투여되는 것과 동시에 투여된다.

특정한 측면에서, 인슐린 유사체는 인슐린 데테미르, 인슐린 글라르긴, 인슐린 레베미르, 인슐린 글루리신, 또는 인슐린 리스프로이다.

본 발명은 상기 언급된 펩티드 중 어느 한 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체로 이루어진 조성물을 추가로 제공한다.

본 발명은 대사성 질환을 치료하기 위한, 상기 언급된 펩티드 중 어느 한 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체로 이루어진 조성물의 용도를 추가로 제공한다.

본 발명은 대사성 질환을 치료하기 위한 위한 의약을 제조하기 위한, 상기 언급된 펩티드 중 어느 한 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체로 이루어진 조성물의 용도를 추가로 제공한다.

정의

본원에 사용된 바와 같은 용어 "약"은 명시된 값 또는 값의 범위보다 10%까지 크거나 작음을 의미하지만, 임의의 값 또는 값의 범위를 단지 이러한 더 넓은 정의로 지정하려는 의도는 아니다. 용어 "약"이 선행하는 각각의 값 또는 값의 범위는 또한 명시된 절대 값 또는 값의 범위의 실시양태를 포함하려는 의도이다.

용어 "개체"는 인간 및 반려 동물 또는 가축, 예컨대 개, 고양이, 말 등을 포함하려는 의도다. 따라서, 본원에 개시된 바와 같은 화합물 또는 하나 이상의 공-효능제 펩티드를 포함하는 조성물은 고양이 및 개에서 비만 및 비만-관련 장애를 치료 또는 예방하는 데 또한 유용하다. 그와 같이, 용어 "포유동물"은 인간 및 반련 동물, 예컨대 고양이 및 개를 포함한다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "제약상 허용되는 담체"는 개체에게 투여하기에 적합한 임의의 담체, 예를 들어 인산염 완충 식염수, 물, 에멀젼, 예컨대 유/수 또는 수/유 에멀젼, 및 다양한 유형의 습윤제를 포함하나 그에 제한되지 않는 표준 제약 담체 중 어느 한 담체를 포함한다. 상기 용어는 또한 미국 연방 정부의 규제 기관에 의해 승인되거나 인간을 포함한 동물에서 사용하기 위한 미국 약전에 열거된 작용제 중 어느 한 작용제를 포함한다. 일반적으로 "제약상 허용되는 담체"는 연방 정부 또는 주정부의 규제 기관에 의해 승인되거나 동물, 보다 특히 인간에서 사용하기 위한 미국 약전 또는 다른 일반적으로 인정되는 약전에 열거된, 활성 성분 (들)의 생물학적 활성의 유효성을 저해하지 않는 비독성 물질을 의미한다. 용어 "담체"는 치료제가 이와 함께 투여되는 희석제, 아주반트, 부형제, 또는 비히클을 지칭하며, 물 및 오일과 같은 멸균 액체를 포함하나, 그에 제한되지 않는다. 담체의 특성은 투여 경로에 따라 달라질 것이다.

본원에 사용된 바와 같이 용어 "제약상 허용되는 염"은 모 화합물의 생물학적 활성을 보유하고 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 않은 것이 아닌 화합물의 염을 지칭한다. 본원에 개시된 많은 화합물은 아미노 및 카르복실 기 또는 이들과 유사한 기의 존재에 의해 산 및/또는 염기 염을 형성할 수 있다. 제약상 허용되는 염기 부가 염은 무기 및 유기 염기로부터 제조될 수 있다. 무기 염기로부터 유래된 염은 단지 예로서 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘 및 마그네슘 염을 포함한다. 유기 염기로부터 유래된 염은 1급, 2급 및 3급 아민의 염을 포함하나, 그에 제한되지 않는다.

제약상 허용되는 염은 무기 또는 유기 염기 및 무기 또는 유기 산을 포함한 제약상 허용되는 비독성 염기 또는 산으로부터 제조될 수 있다. 무기 염기로부터 유래된 염은 알루미늄, 암모늄, 칼슘, 구리, 제2철, 제1철, 리튬, 마그네슘, 망가니즈 염, 제1망가니즈, 칼륨, 나트륨, 아연 등을 포함한다. 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 칼륨, 및 나트륨 염이 특히 바람직하다. 제약상 허용되는 유기 비독성 염기로부터 유래된 염은 1급, 2급, 및 3급 아민, 치환된 아민 (자연 발생 치환된 아민 포함), 시클릭 아민, 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대 아르기닌, 베타인, 카페인, 콜린, N,N'-디벤질에틸렌디아민, 디에틸아민, 2-디에틸아미노에탄올, 2-디메틸아미노에탄올, 에탄올아민, 에틸렌디아민, N-에틸-모르폴린, N-에틸피페리딘, 글루카민, 글루코사민, 히스티딘, 히드라바민, 이소프로필아민, 리신, 메틸글루카민, 모르폴린, 피페라진, 피페리딘, 폴리아민 수지, 프로카인, 푸린, 트레오브로민, 트리에틸아민, 트리메틸아민, 트리프로필아민, 트로메타민 등의 염을 포함한다. 용어 "제약상 허용되는 염"은 용해도 또는 가수분해 특성을 변형시키기 위한 투여 형태로서 사용될 수 있거나 지속 방출 또는 프로드럭 제제에서 사용될 수 있는, 모든 허용되는 염, 예컨대 아세테이트, 락토비오네이트, 벤젠술포네이트, 라우레이트, 벤조에이트, 말레이트, 비카르보네이트, 말레에이트, 비술페이트, 만델레이트, 비타르트레이트, 메실레이트, 보레이트, 메틸브로마이드, 브로마이드, 메틸니트레이트, 칼슘 에데테이트, 메틸술페이트, 캄실레이트, 무케이트, 카르보네이트, 냅실레이트, 클로라이드, 니트레이트, 클라불라네이트, N-메틸글루카민, 시트레이트, 암모늄 염, 디히드로클로라이드, 올레에이트, 에데테이트, 옥살레이트, 에디실레이트, 파모에이트 (엠보네이트), 에스톨레이트, 팔미테이트, 에실레이트, 판토테네이트, 푸마레이트, 포스페이트/디포스페이트, 글루셉테이트, 폴리갈락투로네이트, 글루코네이트, 살리실레이트, 글루타메이트, 스테아레이트, 글리콜릴아르사닐레이트, 술페이트, 헥실레소르시네이트, 수바세테이트, 히드라바민, 숙시네이트, 히드로브로마이드, 타네이트, 히드로클로라이드, 타르트레이트, 히드록시나프토에이트, 테오클레이트, 아이오다이드, 토실레이트, 이소티오네이트, 트리에티오디드, 락테이트, 파노에이트, 발레레이트 등을 추가로 포함한다. 본원에 사용된 바와 같이, 본원에 개시된 공-효능제 펩티드에 대한 언급은 공-효능제 펩티드 또는 펩티드들 및 1종 이상의 제약상 허용되는 염을 포함하는 실시양태를 또한 포함하려는 의도임이 이해될 것이다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "치료하는"은 특정 장애 또는 병태의 예방, 또는 특정 장애 또는 병태와 연관된 증상의 완화 및/또는 상기 증상의 예방 또는 퇴치를 포함한다. 예를 들어, 본원에 사용된 바와 같이 용어 "당뇨병을 치료하는"은 일반적으로 혈당 수준을 정상 수준의 방향으로 변경하는 것을 지칭할 것이며 주어진 상황에 따라 혈당 수준을 증가 또는 감소시키는 것을 포함할 수 있다.

본원에 사용된 바와 같이 "유효"량 또는 "치료학적 유효량"은 의미 있는 환자 이익, 즉 관련 질병의 치료, 치유, 예방 또는 개선, 또는 그러한 병태의 치료, 치유, 예방 또는 개선의 비율 증가를 나타내는 데 충분한 제약 조성물 또는 방법의 각각의 활성 성분의 총량을 의미한다. 이는 비독성이지만 원하는 효과를 제공하기에 충분한 공-효능제 펩티드 또는 펩티드들의 양을 지칭한다. 예를 들어, 한 바람직한 효과는 정상에 더 가까운 혈당 수준의 변화에 의해 측정되는 바와 같이, 고혈당의 예방 또는 치료, 또는 예를 들어 체중 감소에 의해 측정되는 바와 같이, 체중 감소를 유도하고/거나 체중 증가를 예방하거나, 체중 증가를 예방 또는 감소시키거나, 체지방 분포를 정상화시킴에 의한 비만의 치료일 것이다. "효과적"인 양은 개체의 연령 및 일반적인 상태, 투여 방식 등에 따라 환자마다 다를 것이다. 따라서 정확한 "유효량"을 항상 구체화할 수 있는 것은 아니다. 그러나, 임의의 개체의 경우에 적절한 "유효"량은 통상적인 실험을 사용하여 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있다. 단독으로 투여되는 개개의 활성 성분에 적용되는 경우, 상기 용어는 그 성분만을 지칭한다. 조합물에 적용되는 경우, 상기 용어는 조합하여, 순차적으로, 또는 동시에 투여되는지 여부와 상관없이 치료 효과를 결과하는 활성 성분의 조합된 양을 지칭한다.

용어, "비경구"는 소화관을 통하지 않고 일부 다른 경로, 예를 들어, 피하, 근육내, 척수내, 또는 정맥내에 의한 것을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "펩티드"는 3개 이상의 아미노산 및 전형적으로 100개 미만의 아미노산의 쇄를 포함하며, 여기서 아미노산은 자연 발생 또는 코딩된 또는 비-자연 발생 또는 코딩되지 않은 아미노산이다. 비-자연발생 아미노산은 생체 내에서 자연적으로 발생하지 않지만 그럼에도 불구하고 본원에 기재된 펩티드 구조에 혼입될 수 있는 아미노산을 지칭한다. 본원에 사용된 바와 같은 "코딩되지 않은"은 하기 20개의 아미노산 중 어느 한 아미노산의 L-이성질체가 아닌 아미노산을 지칭한다: Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, He, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp, Tyr. 본원에 사용된 바와 같은 "코딩된"은 하기 20개의 아미노산 중 어느 한 아미노산의 L-이성질체인 아미노산을 지칭한다: Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, He, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp, Tyr. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 펩티드 및 변이형 펩티드는 서열식별번호: 1 (이는 29개의 아미노산 길이이다)과 대략 동일한 길이, 예를 들어 25-35개 아미노산 길이이다. 예시적 길이는 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 또는 50개의 아미노산 길이를 포함한다.

전형적으로, 폴리펩티드 및 단백질은 "펩티드"의 것보다 큰 중합체 길이를 갖는다.

유사하게, "위치 28"에 대한 본원에서의 언급은 하나의 아미노산이 서열식별번호: 1의 N-말단 앞에 첨가되어 있는 글루카곤 유사체의 경우에 상응하는 위치 29를 의미할 것이다. 본원에 사용된 바와 같이 "아미노산 변형"은 (i) 서열식별번호: 1의 아미노산을 상이한 아미노산 (자연 발생 또는 코딩된 또는 코딩되지 않은 또는 비-자연 발생 아미노산)으로 치환 또는 대체하는 것, (ii) 서열식별번호: 1에 아미노산 (자연 발생 또는 코딩된 또는 코딩되지 않은 또는 비-자연 발생 아미노산)의 첨가 또는 (iii) 서열식별번호: 1의 하나 이상의 아미노산의 결실을 지칭한다.

아미노산 "변형"은 하나의 아미노산을 또 다른 아미노산으로 삽입, 결실 또는 치환하는 것을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환 또는 대체는 보존적 아미노산 치환, 예를 들어 위치 2, 5, 7, 10, 11, 12, 13, 14, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 24, 27, 28 또는 29의 하나 이상에서 아미노산의 보존적 치환이다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "보존적 아미노산 치환"은 하나의 아미노산을 유사한 특성, 예를 들어, 크기, 전하, 소수성, 친수성, 및/또는 방향성(aromaticity)을 가진 또 다른 아미노산으로 대체하는 것이며, 하기 다섯 가지 군 중 하나 내에서 교환을 포함한다:

I. 작은 지방족, 비극성 또는 약간 극성 잔기:

Ala, Ser, Thr, Pro, Gly;

II. 극성, 음으로 하전된 잔기, 및 그의 아미드 및 에스테르:

Asp, Asn, Glu, Gln, 시스테산 및 호모시스테산;

III. 극성, 양으로 하전된 잔기:

His, Arg, Lys; 오르니틴 (Orn)

IV. 대형, 지방족, 비극성 잔기:

Met, Leu, He, Val, Cys, 노르류신 (Nle), 호모시스테인

V. 대형, 방향족 잔기:

Phe, Tyr, Trp, 아세틸 페닐알라닌

일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 보존적 아미노산 치환이 아니며, 예를 들어, 비보존적 아미노산 치환이다.

본원에 사용된 바와 같이 용어 "하전된 아미노산" 또는 "하전된 잔기"는 생리학적 pH에서 수용액에서 음으로 하전된 (즉, 탈양성자화된) 또는 양으로 하전된 (즉, 양성자화된) 측쇄를 포함하는 아미노산을 지칭한다. 예를 들어 음으로 하전된 아미노산은 아스파르트산, 글루탐산, 시스테산, 호모시스테산, 및 호모글루탐산을 포함하며, 한편 양으로 하전된 아미노산은 아르기닌, 리신 및 히스티딘을 포함한다. 하전된 아미노산은 20개의 코딩된 아미노산, 뿐만 아니라 비전형적인 또는 비-자연 발생 또는 코딩되지 않은 아미노산 중에서 하전된 아미노산을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이 용어 "산성 아미노산"은 예를 들어, 카르복실산 또는 술폰산 기를 포함한 (아미노산의 카르복실산 이외의) 제2 산성 모이어티를 포함하는 아미노산을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "아실화 아미노산"는 그것이 생성되는 수단 (예를 들어, 아미노산을 펩티드에 혼입하기 전에 아실화, 또는 펩티드에 혼입한 후에 아실화)에 상관없이, 자연 발생 아미노산에 대해 비-천연성인 아실 기를 포함하는 아미노산을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이 용어 "알킬화된 아미노산"은 그것이 생성되는 수단에 상관없이, 자연 발생 아미노산에 대해 비-천연성인 알킬 기를 포함하는 아미노산을 지칭한다. 따라서, 본 개시의 아실화된 아미노산 및 알킬화된 아미노산은 코딩되지 않은 아미노산이다.

본원에 사용된 바와 같이, 제2 수용체에 비해 제1 수용체에 대한 분자의 용어 "선택성"은 하기 비를 의미한다: 제1 수용체에서의 분자의 EC₅₀으로 나눠진 제2 수용체에서의 분자의 EC₅₀. 예를 들어, 제1 수용체에서 1 nM의 EC50 및 제2 수용체에서 100 nM의 EC₅₀을 갖는 분자는 제2 수용체에 비해 제1 수용체에 대해 100배의 선택성을 갖는다.

본원에 사용된 바와 같이 용어 "천연 글루카곤"은 서열식별번호: 1의 서열로 이루어진 펩티드를 지칭하고, 용어 "천연 GLP-1"은 GLP-1 (7-36) 아미드, GLP-1 (7-37) 산 또는 이들 두 화합물의 혼합물을 지정하는 일반 용어이다.

본원에 사용된 바와 같이, 분자의 "글루카곤 효능" 또는 "천연 글루카곤과 비교한 효능"은 글루카곤 수용체에서의 천연 글루카곤의 EC₅₀으로 나눠진 글루카곤 수용체에서의 분자의 EC₅₀의 역비를 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이, 분자의 "GLP-1 효능" 또는 "천연 GLP-1과 비교한 효능"은 GLP-1 수용체에서의 천연 GLP-1의 EC₅₀으로 나눠진 GLP-1 수용체에서의 분자의 EC₅₀의 역비를 지칭한다.

도 1은 실시예 18에 상세히 열거된 바와 같이, 비히클 대조군 또는 1일 용량의 서열식별번호: 6 내지 11의 펩티드로 처리된 식이-유도 비만 (DIO) 마우스의 누적 체중 변화 (그램)의 그래프를 나타낸다.
도 2는 실시예 19에 상세히 열거된 바와 같이, 1일 용량의 서열식별번호: 6 내지 11의 펩티드로 처리된 DIO 마우스의 비히클 처리 대조군에 비한 누적 체중 변화 (%)의 그래프를 나타낸다.
도 3은 실시예 20에 상세히 열거된 바와 같이, 비히클 대조군 또는 특정 용량의 서열식별번호: 6 내지 11의 펩티드로 처리된 DIO 마우스의 식품 섭취의 누적 변화 (0일에 비한 식품 섭취의 퍼센트 변화로서 표시됨)의 그래프를 나타낸다.
도 4는 실시예 21에 상세히 열거된 바와 같이, 비히클 대조군 또는 특정 용량의 서열식별번호: 6 내지 11의 펩티드로 처리된 DIO 마우스의 기저 글루코스 (mg/dL)의 그래프를 나타낸다.

발명의 상세한 설명

본 개시는 GLP-1 수용체 (GLP-1) 및 글루카곤 (GCG) 수용체 둘 다에서 활성을 나타내는 펩티드 및 변이형 펩티드를 제공한다. 이와 관련하여, 본 개시는 GLP-l 수용체/GCG 수용체 공-효능제 펩티드를 제공한다. 예시적 실시양태에서, 현재 개시된 펩티드 및 변이형 펩티드는 천연 인간 글루카곤 (서열식별번호: 1)과 비교하여, GCG 수용체 및 GLP-1 수용체에서 상대적으로 균형 잡힌 활성 또는 효능을 나타낸다.

예시적 실시양태에서, 본원에 기재된 펩티드 및 변이형 펩티드는 천연 글루카곤 또는 천연 GLP-1에 비해 특성, 예컨대 더 큰 안정성, 더 큰 용해도, 순환에서의 연장된 반감기, 지연된 작용 개시, 연장된 작용 지속 기간, 약화된 피크 (예를 들어, 비교적 감소된 평균 피크 혈장 농도), 및 프로테아제, 예컨대 DPP-IV에 대한 개선된 저항성에서 다른 개선을 나타낸다.

본원에 개시된 펩티드 서열 중 어느 한 서열의 접합체, 융합 단백질 및 다합체가 또한 고려된다.

글루카곤은 글리코겐분해 및 글루코스신생합성의 자극을 통해 혈당을 증가시키는 그의 급성 능력으로 널리 인식되는, GLP-1과 구조적으로 관련이 있는 펩티드 호르몬이다. 글루카곤의 투여가 체중을 저하시키는 것을 포함하여 설치류 대사의 개선을 가져오는 것으로 60여년 전에 처음 보고되었지만 (Salter, Am. J. Clin. Nutr. 8: 535-539 (1960)), 이들 결과는, 특별히 인슐린-저항성 2형 당뇨병 환자에서, 특히 고혈당의 내재된 위험성으로 인해, 인간에서 비만 치료를 위한 요법에서 글루카곤의 사용으로 번역되지는 않았다.

균형 잡힌 GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제의 사용이 설치류 비만의 치료에서, 순수 GLP-1 수용체 효능제에 비해 효능 및 안전성을 증진시키며, 동시에 혈당 제어를 개선시키는 것으로 보고되었다 (Day et al., Nat. Chem. Biol. 5: 749-757 (2009); Pocai et al., Diabetes 58: 2258-2266 (2009)). 옥신토모듈린 (OXM)은 GLP-1과 함께 공회장의 L-세포에 의해 식후에 분비되는, 글루카곤에 대한 내인성 전구체이며, 비교적 낮은 효능에서 불구하고 GLP-1 수용체 및 글루카곤 수용체에서 균형 잡힌 공-효능제인 것으로 나타났다 (Holst, Regul. Pept. 93: 45-51 (2000); Drucker, J. Nat. Clin. Pract. Endocrinol. Metab. 1: 22-31 (2005); Baldissera et al., Regul. Pept. 21: 151-166 (1988); Gros et al., Endocrinol. 133: 631-638 (1993); Pocai et al., 상기에 언급한 문헌). 비만 대상체에서 4주 임상 연구에 의하면 OXM의 반복된 피하 투여가 양호한 내약성을 나타내어 상당한 체중 감소를 초래하고, 부수적으로 식품 섭취가 감소함을 입증하였다 (Wynne et al., Diabetes 54: 2390-2395 (2005)).

문헌 [Day et al., Peptide Sci. 98: 443-450 (2012)]은 두 수용체에 대한 뮤린 수용체 효능이 다른 공-효능제의 패밀리를 사용하여 비만 마우스에서 GCG 수용체-매개 고혈당을 예방하는 데 GLP-1 수용체 균형의 중요성을 보고하였지만, 상기 문헌은 본원에 개시된 공-효능제 펩티드의 균형 잡힌 효능 또는 활성을 갖는 공-효능제 펩티드를 개시하지 않는다.

대조적으로, 본 발명의 GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제 펩티드는 GCG 수용체 및 GLP-1 수용체에서 상대적으로 균형 잡힌 활성 또는 효능을 갖는다. 본 발명은 서열식별번호: 1에 나타낸 아미노산 서열을 가지되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 포함하는 펩티드이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는 펩티드를 제공한다. 특정한 측면에서, 펩티드는 0.88, 0.89, 0.90, 0.91, 0.92, 0.93, 0.94, 0.95, 0.96, 0.97, 0.98, 0.99, 1.00, 1.01, 1.02, 1.03, 1.04, 1.05, 1.06, 1.07, 1.08, 1.09, 또는 1.10의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는다.

본 발명은 하기 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 추가로 제공한다

X₁₀은 L-리신 또는 파라-아미노메틸 페닐알라닌이고; X₁₂는 L-리신 또는 L-류신이고;

X₁₅는 L-글루탐산 또는 L-류신이고; X₁₆은 L-알라닌, Aib, L-글루탐산, 또는 L-발린이고;

X₁₈은 L-알라닌 또는 L-아르기닌이고; X₂₇은 L-류신, 메티오닌 술폰, 또는 L-노르류신이고; 위치 10에서의 아미노산은 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합되고; 그리고, 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖는 펩티드를 포함하지 않는다. 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는다. 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 0.88, 0.89, 0.90, 0.91, 0.92, 0.93, 0.94, 0.95, 0.96, 0.97, 0.98, 0.99, 1.00, 1.01, 1.02, 1.03, 1.04, 1.05, 1.06, 1.07, 1.08, 1.09, 또는 1.10의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는다.

본 발명은 하기 아미노산 서열을 포함하거나 그로 이루어진 펩티드를 추가로 제공한다.

본 발명의 펩티드의 예는 표 1에 나타냈다.

실시예에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제 펩티드는 GCG 수용체에서 약 0.02 내지 약 1.04 nM의 EC₅₀ 및 GLP-1 수용체에서 약 0.03 내지 약 1.3 nM의 EC₅₀을 갖는다. 특정한 측면에서, GCG 수용체/GLP-1 수용체 공-효능제 펩티드는 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는다. 따라서, 본 발명은 GCG 수용체 활성화와 연관된 고혈당 위험을 완화시키면서 체중 감소를 위한 최적의 치료 프로파일을 나타내는, GLP-1 수용체 및 GCG 수용체에 대한 상대적으로 균형 잡힌 효능제 활성 또는 효능을 가진 펩티드를 제공한다.

본 발명은 서열식별번호: 1에 나타낸 아미노산 서열을 가지되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 포함하는 1종 이상의 펩티드, 및 제약상 허용되는 담체를 포함하거나 그로 이루어진 조성물이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되, 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는, 조성물을 제공한다. 특정한 측면에서, 펩티드는 0.88, 0.89, 0.90, 0.91, 0.92, 0.93, 0.94, 0.95, 0.96, 0.97, 0.98, 0.99, 1.00, 1.01, 1.02, 1.03, 1.04, 1.05, 1.06, 1.07, 1.08, 1.09, 또는 1.10의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는다.

본 발명은 하기 아미노산 서열, 및 제약상 허용되는 담체를 포함하거나 그로 이루어진 펩티드를 추가로 제공한다.

본 발명은 (i) 서열식별번호: 1에 나타낸 바와 같되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 갖거나 그로 이루어진 펩티드, 및 (ii) 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되, 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는, 조성물을 추가로 제공한다.

본 발명은 표 1에 나타낸 1종 이상의 펩티드 및 제약상 허용되는 담체를 포함하거나 그로 이루어진 조성물을 추가로 포함한다.

제약 조성물

개체에서 대사 장애를 치료하기 위한, 치료 유효량의, 본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드를 포함하는 제약 조성물이 추가로 제공된다. 이러한 장애는 비만, 대사 증후군 또는 증후군 X, 제II형 당뇨병, 당뇨병의 합병증, 예컨대 망막병증, 고혈압, 이상지질혈증, 심혈관 질환, 담석, 골관절염, 및 특정 형태의 암을 포함하나, 그에 제한되지 않는다. 본원에서의 비만-관련 장애는 비만과 연관되거나, 비만에 의해 유발되거나, 비만으로 인한 것이다.

"비만"은 체지방이 과다하게 존재하는 상태이다. 비만의 조작적 정의는, 제곱미터 단위의 신장당 체중 (kg/m2)으로서 계산된 체질량지수 (BMI)를 기준으로 한다. "비만"은 다른 건강한 대상체가 체질량 지수 (BMI)가 30 kg/m2 이상인 상태, 또는 적어도 하나의 동반질병이 있는 대상체가 BMI가 27 kg/m2 이상인 상태를 지칭한다. "비만 대상체"는 체질량 지수 (BMI)가 30 kg/m2 이상인 다른 건강한 대상체 또는 BMI가 27 kg/m2 이상인 적어도 하나의 동반질병이 있는 대상체이다. "비만 위험이 있는 대상체"는 BMI가 25 kg/m2 내지 30 kg/m2 미만인 다른 건강한 대상체 또는 BMI가 25 kg/m2 내지 27 kg/m2 미만인 적어도 하나의 동반질병이 있는 대상체이다.

비만과 연관된 위험 증가는 아시아인에서 체질량 지수 (BMI)가 더 낮을 때 발생한다. 일본을 포함한 아시아 국가에서, "비만"은 체중 감소를 필요로 하거나 체중 감소에 의해 개선될 적어도 하나의 비만-유도 또는 비만-관련 동반질병이 있는 대상체가 BMI가 25 kg/m2 이상인 상태를 지칭한다. 일본을 포함한 아시아 국가에서, "비만 대상체"는, 체중 감소를 필요로 하거나 체중 감소에 의해 개선될 적어도 하나의 비만-유도 또는 비만-관련 동반질병이 있으며, BMI가 25 kg/m2 이상인 대상체를 지칭한다. 아시아 국가에서, "비만 위험이 있는 대상체"는 BMI가 23 kg/m2 초과 내지 25 kg/m2 미만인 대상체이다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "비만"은 비만의 상기 정의를 모두 포함하려는 의도이다.

비만-유도 또는 비만-관련 동반질병은 당뇨병, 비-인슐린 의존성 진성 당뇨병 - 2형, 내당능 장애, 공복 혈당 장애, 인슐린 저항 증후군, 이상지질혈증, 고혈압, 고요산혈증, 통풍, 관상 동맥 질환, 심근 경색, 협심증, 수면 무호흡 증후군, 피크위크 증후군(Pickwickian syndrome), 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 지방간; 뇌 경색, 뇌 혈전증, 일과성 허혈성 발작, 정형외과적 장애, 변형 관절염, 요통증, 월경 이상 및 불임을 포함하나 그에 제한되지 않는다. 특히, 동반질병은 고혈압, 고지혈증, 이상지질혈증, 글루코스 불내성, 심혈관 질환, 수면 무호흡증, 진성 당뇨병, 및 다른 비만-관련 병태를 포함한다.

(비만 및 비만-관련 장애의) "치료"는 비만 대상체의 체중을 감소 또는 유지하기 위해 본 발명의 화합물을 투여하는 것을 지칭한다. 치료의 한 결과는 본 발명의 화합물의 투여 직전에 그 대상체의 체중에 비해 비만 대상체의 체중을 감소시키는 것일 수 있다. 치료의 또 다른 결과는 식이 요법, 운동, 또는 약물요법의 결과로서 이미 감량된 체중의 체중 회복을 예방하는 것일 수 있다. 치료의 또 다른 결과는 비만-관련 질환의 발생 및/또는 중증도를 감소시키는 것일 수 있다. 치료는 이를 필요로 하는 환자에서 총 식품 섭취의 감소, 또는 식이, 예컨대 탄수화물 또는 지방의 특정 성분의 섭취 감소; 및/또는 영양 흡수의 억제; 및/또는 대사율 감소의 억제를 포함하여 대상체에 의한 식품 또는 칼로리 섭취의 감소; 및 체중 감소를 적절하게 결과할 수 있다. 치료는 대사율의 변경, 예컨대, 대사율의 감소의 억제라기 보다는 또는 그에 더하여, 대사율의 증가; 및/또는 체중 감소로 인해 보통 생성되는 대사 저항성의 최소화를 또한 결과할 수 있다.

(비만 및 비만-관련 장애)의 "예방"은 비만의 위험이 있는 대상체의 체중을 감소 또는 유지하기 위해 본 발명의 화합물을 투여하는 것을 지칭한다. 예방의 한 결과는 본 발명의 화합물의 투여 직전에 그 대상체의 체중에 비해 비만의 위험이 있는 대상체의 체중을 감소시키는 것일 수 있다. 예방의 또 다른 결과는 식이 요법, 운동, 또는 약물요법의 결과로서 이미 감량된 체중의 체중 회복을 예방하는 것일 수 있다. 예방의 또 다른 결과는 비만의 위험이 있는 대상체에서 비만이 발병하기 전에 치료를 받으면 비만이 발생하지 못하도록 하는 것일 수 있다. 예방의 또 다른 결과는 비만의 위험이 있는 대상체에서 비만이 발병하기 전에 치료를 받으면 비만-관련 장애의 발생 및/또는 중증도를 감소시키는 것일 수 있다. 더욱이, 이미 비만한 대상체에서 치료가 시작되면, 이러한 치료는 예컨대 동맥경화증, 제II형 당뇨병, 다낭성 난소 질환, 심혈관 질환, 골관절염, 피부 장애, 고혈압, 인슐린 저항성, 고콜레스테롤혈증, 고중성지방혈증 및 담석증이나 그에 제한되지 않는 비만-관련 장애의 발생, 진행 또는 중증도를 예방할 수 있다.

본원에서의 비만-관련 장애는 비만과 연관되거나, 비만에 의해 유발되거나, 비만으로 인한 것이다. 비만-관련 장애의 예는 과식 및 폭식증, 고혈압, 당뇨병, 상승된 혈장 인슐린 농도 및 인슐린 저항성, 이상지질혈증, 고지혈증, 자궁내막암, 유방암, 전립선암 및 결장암, 골관절염, 폐쇄성 수면 무호흡증, 담석증, 담석, 심장 질환, 이상 심장 리듬 및 부정맥, 심근 경색, 울혈성 심부전, 관상동맥 심장 질환, 돌연사, 뇌졸중, 다낭성 난소 질환, 두개인두종, 프라더 윌리 증후군(Prader-Willi Syndrome), 프롤리히 증후군(Frohlich's syndrome), GH-결핍성 대상체, 정상 변이 저신장, 터너 증후군(Turner's syndrome), 및 감소된 대사 활성 또는 총 제지방 질량의 백분율로서 휴식기 에너지 소비의 감소를 나타내는 다른 병리학적 상태, 예를 들어, 급성 림프모구 백혈병을 가진 어린이를 포함한다. 비만-관련 장애의 추가 예는 대사 증후군 (증후군 X로도 공지됨), 인슐린 저항 증후군, 성기능 및 생식 기능 장애, 예컨대 불임, 남성의 성선기능저하증 및 여성의 다모증, 위장 운동 장애, 예컨대 비만-관련 위식도 역류, 호흡기 장애, 예컨대 비만-저환기 증후군 (피크위크 증후군), 심혈관 장애, 염증, 예컨대 혈관계의 전신성 염증, 동맥경화증, 고콜레스테롤혈증, 고요산혈증, 하부 요통, 담낭 질환, 통풍 및 신장암이다. 본 발명의 화합물은 비만의 2차 결과의 위험을 감소시키는 데, 예컨대 좌심실 비대의 위험을 감소시키는 데 또한 유용하다.

용어 "당뇨병"은, 본원에 사용된 바와 같이, 인슐린-의존성 진성 당뇨병 (IDDM, 제I형 당뇨병으로도 공지됨) 및 비-인슐린-의존성 진성 당뇨병 (NIDDM, 제II형 당뇨병으로도 공지됨)을 둘 다 포함한다. 제I형 당뇨병, 또는 인슐린-의존성 당뇨병은 글루코스 이용을 조절하는 호르몬인 인슐린의 절대 결핍의 결과이다. 제II형 당뇨병, 또는 인슐린-비의존성 당뇨병 (즉, 비-인슐린-의존성 진성 당뇨병)은 인슐린의 정상 수준 또는 심지어 상승된 수준에 직면하여 종종 나타나며 조직이 인슐린에 적절하게 반응하지 못하는 결과로 보인다. 제II형 당뇨병 환자의 대부분은 또한 비만이다. 본 발명의 화합물은 제I형 및 제II형 당뇨병 둘 다를 치료하는 데 유용하다. 화합물은 제II형 당뇨병을 치료하는 데 특별히 효과적이다. 본 발명의 화합물은 임신성 진성 당뇨병을 치료 및/또는 예방하는 데 또한 유용하다.

본원에 그 전문이 포함되는 미국 특허 번호 6,852,690은 비당뇨병 환자에게 영양 유효량의 1종 이상의 영양소 또는 그의 임의의 조합 및 1종 이상의 인슐린 자극성((insulinotropic) 펩티드를 포함하는 제제를 투여하는 것을 포함하는, 영양소의 대사를 향상시키는 방법을 개시한다. 여기에 개시된 공-효능제 펩티드는 인슐린 자극성이며 글루코스 대사 장애, 예컨대 인슐린 저항성이 있으나 명시적인 당뇨병은 없는 환자, 뿐만 아니라 어떤 이유로든 소화관을 통해 영양을 수령할 수 없는 환자에게 투여할 수 있다. 이러한 환자는 수술 환자, 혼수상태 환자, 쇼크 상태에 있는 환자, 위장 질환이 있는 환자, 소화성 호르몬 질환이 있는 환자 등을 포함한다. 특히, 비만 환자, 죽상동맥경화증 환자, 혈관 질환 환자, 임신성 당뇨병이 있는 환자, 간 질환, 예컨대 간경변이 있는 환자, 말단 비대증이 있는 환자, 글루코르티코이드 과량, 예컨대 코르티솔 치료 또는 쿠싱(Cushing)병이 있는 환자, 활성화된 역조절성 호르몬을 가진 환자는 예컨대 외상, 사고 및 수술 등 후에 발생할 것이고, 고중성지질혈증이 있는 환자 및 만성 췌장염이 있는 환자는 환자가 저혈당 또는 고혈당을 겪게 하지 않으면서 본 발명에 따라 쉽고 적절하게 영양분을 공급받을 수 있다. 특히, 이러한 환자에게 투여하는 것은 그의 혈장 글루코스를 혈중 글루코스 1 데시리터 당 약 160 내지 180 밀리그램의 소위 신장 역치 미만으로 유지하면서 가능한 한 신속하게 환자에게 영양 및 칼로리 요구를 전달하는 요법을 제공하는 것을 목표로 한다. 비록 신장 역치 바로 아래의 글루코스 수준을 갖지 않는 정상적인 환자도 상기 기재된 바와 같이 본 발명에 따라 치료될 수 있긴 하지만, 글루코스 대사 장애가 있는 환자, 예컨대 혈장 글루코스 수준이 신장 역치 바로 위에 있는 고혈당증 환자가 또한 그들의 병태에 적합한 요법을 발견한다. 특히, 간헐적 간격으로 신장 역치 미만의 고혈당의 정도를 가진 이러한 환자는 다음 요법 중 어느 한 요법에 따라 영양소에 더하여 인슐린 자극성 펩티드의 조합 치료를 받을 수 있다. 이러한 고혈당증을 앓고 있지 않은 정상적인 환자는 본원에 개시된 펩티드 유사체를 사용하여 치료할 수 있다.

본원에 개시된 공-효능제 펩티드는 제약상 허용되는 담체와 조합시 제약 조성물에서 사용될 수 있다. 이러한 조성물은 치료 유효량의 본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드 및 제약상 허용되는 담체를 포함한다. 이러한 조성물은 (본원에 개시된 공-효능제 펩티드 및 담체 이외에) 희석제, 충전제, 염, 완충제, 안정화제, 가용화제, 및 관련 기술분야에 널리 공지된 다른 물질로 또한 구성될 수 있다. 본원에 개시된 공-효능제 펩티드를 포함하는 조성물은, 필요에 따라, 염이 제약상 허용되는 한, 염의 형태로 투여될 수 있다. 염은 합성 유기 화학의 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 표준 절차를 사용하여 제조될 수 있다. 본원에 개시된 공-효능제 펩티드는 다합체 (예를 들어, 이질이합체 또는 동질이합체) 또는 그 자체 또는 다른 펩티드와 복합체를 형성할 수 있다. 결과적으로, 본 발명의 제약 조성물은 이러한 다합체 또는 복합된 형태로 본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드를 포함할 수 있다.

약리학적 조성물은 본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드; 본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드 및 대사 장애를 치료하기 위한 1종 이상의 다른 작용제를 포함할 수 있거나, 본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드를 포함하는 약리학적 조성물은 대사 장애를 치료하기 위한 작용제를 포함하는 약리학적 조성물과 공동으로 사용될 수 있다. 이러한 장애는 비만, 대사 증후군 또는 증후군 X, 제II형 당뇨병, 당뇨병의 합병증, 고혈압, 이상지질혈증, 심혈관 질환, 담석, 골관절염, 및 특정 형태의 암을 포함하나, 그에 제한되지 않는다.

약리학적 조성물이 대사 장애를 치료하기 위한 또 다른 작용제를 포함하거나, 치료가 대사 장애를 치료하기 위한 작용제를 포함하는 제2 약리학적 조성물을 포함하는 경우, 작용제는 카나비노이드 (CB1) 수용체 길항제, 글루카곤 유사 펩티드 1 (GLP-1) 수용체 효능제, 글루카곤 수용체 길항제, 리파제 억제제, 렙틴, 테트라히드로립스타틴, 2,4-디니트로페놀, 아카르보스, 시부트라민, 펜타민, 지방 흡수 차단제, 심바스타틴, 메바스타틴, 에제티미브, 아토르바스타틴, 시타글립틴, 메트포르민, 오를리스타트, 큐넥사, 토피라메이트, 날트렉손, 부프리오피온, 펜테르민, 로사르탄, 로사르탄과 히드로클로로티아지드 등을 포함하나, 그에 제한되지 않는다.

본원에 기재된 바와 같은 공-효능제 펩티드와 조합하여 개별적으로 또는 동일한 제약 조성물로 투여될 수 있는 다른 활성 성분의 예는 다음을 포함하나, 그에 제한되지 않는다:

(1) 다른 디펩티딜 펩티다제-IV (DPP-4) 억제제 (예를 들어, 시타글립틴, 알로글립틴, 리나글립틴, 빌다글립틴, 삭사글립틴 및 오마리글립틴);

(2) 인슐린 감작제, 예를 들어 (i) PPARγ 효능제, 예컨대 글리타존 (예를 들어 피오글리타존, AMG 131, MBX2044, 미토글리타존, 로베글리타존, IDR-105, 로시글리타존, 및 발라글리타존), 및 다른 PPAR 리간드, 예를 들어 (1) PPARα/γ 이중 효능제 (예를 들어, ZYH2, ZYH1, GFT505, 치글리타자르, 무라글리타자르, 알레글리타자르, 소델글리타자르, 및 나베글리타자르); (2) PPARα 효능제, 예컨대 페노피브르산 유도체 (예를 들어, 겜피브로질, 클로피브레이트, 시프로피브레이트, 페노피브레이트, 베자피브레이트), (3) 선택적 PPARγ 조정제 (SPPARγM's), (예를 들어, 예컨대 WO 02/060388, WO 02/08188, WO 2004/019869, WO 2004/020409, WO 2004/020408, 및 WO 2004/066963에 개시된 것들); 및 (4) PPARγ 부분 효능제; (ii) 비구아니드, 예컨대 메트포르민 및 그의 제약상 허용되는 염, 특히, 메트포르민 히드로클로라이드, 및 그의 연장-방출 제제, 예컨대 글루메트자(Glumetza)™, 포르타메트(Fortamet)™, 및 글루코파지(Glucophage)XR™; 및 (iii) 단백질 티로신 포스파타제-1B (PTP-1B) 억제제 (예를 들어, ISIS-113715 및 TTP814); (3) 인슐린 또는 인슐린 유사체　 (예를 들어, 인슐린 데테미르, 인슐린 글루리신, 인슐린 데글루덱, 인슐린 글라르긴, 인슐린 리스프로 및 각각의 흡입가능한 제제);

(4) 렙틴 및 렙틴 유도체 및 효능제;

(5) 아밀린 및 아밀린 유사체 (예를 들어, 프람린티드);

(6) 술포닐우레아 및 비-술포닐우레아 인슐린 분비촉진제 (예를 들어, 톨부타미드, 글리부리드, 글리피지드, 글리메피리드, 미티글리니드, 메글리티니드, 나테글리니드 및 레파글리니드);

(7) α-글루코시다제 억제제 (예를 들어, 아카르보스, 보글리보스 및 미글리톨);

(8) 글루카곤 수용체 길항제 (예를 들어, 예컨대 WO 98/04528, WO 99/01423, WO 00/39088, 및 WO 00/69810에 개시된 것들);

(9) 인크레틴 모방제, 예컨대 GLP-1, GLP-1 유사체, 유도체, 및 모방제; 및 GLP-1 수용체 효능제 (예를 들어, 둘라글루티드, 세마글루티드, 알비글루티드, 엑세나티드, 리라글루티드, 릭시세나티드, 타스포글루티드, CJC-1131, 및 BIM-51077, 그의 비내, 경피, 및 주 1회 제제 포함);

(10) LDL 콜레스테롤 저하제, 예컨대 (i) HMG-CoA 환원효소 억제제 (예를 들어, 심바스타틴, 로바스타틴, 프라바스타틴, 크리바스타틴, 플루바스타틴, 아토르바스타틴, 피타바스타틴 및 로수바스타틴), (ii) 담즙산 격리제 (예를 들어,　콜레스틸란, 콜레스티미드, 콜레세발람 히드로클로라이드, 콜레스티폴, 콜레스티라민, 및 가교결합된 덱스트란의 디알킬아미노알킬 유도체), (iii) 콜레스테롤 흡수의 억제제, (예를 들어, 에제티미브), 및 (iv) 아실 CoA:콜레스테롤 아실트랜스퍼라제 억제제, (예를 들어, 아바시미브);

(11) HDL-상승 약물, (예를 들어, 니아신 및 니코틴산 수용체 효능제, 및 그의 연장-방출 형태; MK-524A (이는 니아신 연장-방출 및 DP-1 길항제 MK-524의 조합물임));

(12) 항비만 화합물;

(13) 염증성 병태에 사용하기 위한 작용제, 예컨대 아스피린, 비스테로이드 성 항염증 약물 또는 NSAID, 글루코코르티코이드, 및 선택적 시클로옥시게나제-2 또는 COX-2 억제제;

(14) 항고혈압제, 예컨대 ACE 억제제 (예를 들어, 리시노프필, 에날라프릴, 라미프릴, 캅토프릴, 퀴나프릴, 및 탄돌라프릴), A-II 수용체 차단제 (예를 들어, 로사르탄, 칸데사르탄, 이르베사르탄, 올메사르탄 메독소밀, 발사르탄, 텔미사르탄, 및 에프로사르탄), 레닌 억제제 (예를 들어, 알리스키렌), 베타 차단제, 및 칼슘 채널 차단제;

(15) 글루코키나제 활성화제 (GKA) (예를 들어, AZD6370);

(16) 11β-히드록시스테로이드 데히드로게나제 유형 1의 억제제, (예를 들어, 예컨대 미국 특허 번호 6,730,690에 개시된 것들, 및 LY-2523199);

(17) CETP 억제제 (예를 들어, 아나세트라핍, 및 토르세트라핍);

(18) 프럭토스 1,6-비스포스파타제의 억제제, (예를 들어, 예컨대 미국 특허 번호 6,054,587; 6,110,903; 6,284,748; 6,399,782; 및 6,489,476에 개시된 것들 );

(19) 아세틸 CoA 카르복실라제-1 또는 2 (ACC1 또는 ACC2)의 억제제;

(20) AMP-활성화 단백질 키나제 (AMPK) 활성화제;

(21) G-단백질-커플링된 수용체의 다른 효능제: (i) GPR-109, (ii) GPR-119 (예를 들어, MBX2982 및 PSN821), 및 (iii) GPR-40 (예를 들어, TAK875, 5-[4-[[(1R)-4-[6-(3-히드록시-3-메틸부톡시)-2-메틸피리딘-3-일]-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일]옥시]페닐]이소티아졸-3-올 1-옥시드, 5-(4-((3-(2,6-디메틸-4-(3-(메틸술포닐)프로톡시)페닐)페닐)메톡시)페닐)이소, 5-(4-((3-(2-메틸-6-(3-히드록시프로톡시)피리딘-3-일)-2-메틸페닐)메톡시)페닐)이소티아졸-3-올 1-옥시드, 및 5-[4-[[3-[4-(3-아미노프로톡시)-2,6-디메틸페닐]페닐]메톡시]페닐]이소티아졸-3-올 1-옥시드);

(22) SSTR3 길항제 (예를 들어, 예컨대 WO 2009/001836에 개시된 것들);

(23) 뉴로메딘 U 수용체 효능제 (예를 들어, 예컨대 뉴로메딘 S (NMS)를 포함하나 그에 제한되지 않는, WO 2009/042053에 개시된 것들);

(24) SCD 억제제;

(25) GPR-105 길항제 (예를 들어, 예컨대 WO 2009/000087에 개시된 것들);

(26) SGLT 억제제 (예를 들어, ASP1941, SGLT-3, 엠파글리플로진, 다파글리플로진, 카나글리플로진, BI-10773, PF-04971729, 레모글로플로진, TS-071, 토포글리플로진, 이프라글리플로진, 및 LX-4211);

(27) 아실 보조효소 A:디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제 1 및 2 (DGAT-1 및 DGAT-2)의 억제제;

(28) 지방산 합성 효소의 억제제;

(29) 아실 보조효소 A:모노아실글리세롤 아실트랜스퍼라제 1 및 2 (MGAT-1 및 MGAT-2)의 억제제;

(30) TGR5 수용체의 효능제 (GPBAR1, BG37, GPCR19, GPR131, 및 M-BAR로도 공지됨);

(31) 회장 담즙산 수송체 억제제;

(32) PACAP, PACAP 모방제, 및 PACAP 수용체 3 효능제;

(33) PPAR 효능제;

(34) 단백질 티로신 포스파타제-1B (PTP-1B) 억제제;

(35) IL-1b 항체, (예를 들어, XOMA052 및 카나키누맙); 및

(36) 브로모크립틴 메실레이트 및 그의 급속-방출 제제.

메트포르민 히드로클로라이드, 피오글리타존, 로시글리타존, 심바스타틴, 아토르바스타틴, 또는 술포닐우레아가 특히 관심이다.　　

본원에 개시된 바와 같은 화합물과 조합될 수 있는 항비만 화합물은 토피라메이트; 조니스아미드; 날트렉손; 펜테르민; 부프로피온; 부프로피온과 날트렉손의 조합물; 부프로피온과 조니스아미드의 조합물; 토피라메이트와 펜테르민의 조합물; 펜플루라민; 덱스펜플루라민; 시부트라민; 리파제 억제제, 예컨대 오를리스타트 및 세틸리스타트; 멜라노코르틴 수용체 효능제, 특히, 멜라노코르틴-4 수용체 효능제; CCK-1 효능제; 멜라닌-농축 호르몬 (MCH) 수용체 길항제; 신경펩티드 Y₁또는 Y₅ 길항제 (예컨대 MK-0557); CB1 수용체 역 효능제 및 길항제 (예컨대 리모나반트 및 타라나반트); β₃ 아드레날린작용성 수용체 효능제; 그렐린 길항제; 봄베신 수용체 효능제 (예컨대 봄베신 수용체 아류형-3 효능제); 및 5-히드록시트립타민-2c (5-HT2c) 효능제, 예컨대 로르카세린을 포함한다.　 본 발명의 화합물과 조합될 수 있는 항비만 화합물의 검토를 위해 문헌 [Chaki et al., "Recent advances in feeding suppressing agents: potential therapeutic strategy for the treatment of obesity," Expert Opin. Ther. Patents, 11: 1677-1692 (2001)]; [Spanswick and Lee, "Emerging antiobesity drugs," Expert Opin. Emerging Drugs, 8: 217-237 (2003)]; [Fernandez-Lopez, et al., "Pharmacological Approaches for the Treatment of Obesity," Drugs, 62: 915-944 (2002); 및 Gadde, et al., "Combination pharmaceutical therapies for obesity," Exp. Opin. Pharmacother., 10: 921-925 (2009)]을 참조한다.

본 발명의 또 다른 측면에서, 하기 작용제 중 1종 이상을 포함하는 제약 조성물이 개시된다:

(a)　 본원에 개시된 바와 같은 화합물, 예를 들어 본원에 개시된 바와 같은 1종의 또는 공-효능제이며 여기서 각각의 공-효능제는 독립적으로 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드일 수 있되, 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는, 화합물;

(b)　다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 화합물:

(1) 다른 디펩티딜 펩티다제-IV (DPP-4) 억제제;

(2) 인슐린 감작제, 예를 들어 (i) PPARγ 효능제, 예컨대 글리타존 (예를 들어 AMG 131, MBX2044, 미토글리타존, 로베글리타존, IDR-105, 피오글리타존, 로시글리타존, 및 발라글리타존) 및 다른 PPAR 리간드, 예를 들어 (1) PPARα/γ 이중 효능제, 예컨대 ZYH1, YYH2, 치글리타자르, GFT505, 무라글리타자르, 알레글리타자르, 소델글리타자르, 및 나베글리타자르, (2) PPARα 효능제, 예컨대 페노피브르산 유도체 (예를 들어, 겜피브로질, 클로피브레이트, 시프로피브레이트, 페노피브레이트 및 베자피브레이트), (3) 선택적 PPARγ 조정제 (SPPARγM's), 및 (4) PPARγ 부분 효능제; (ii) 비구아니드, 예컨대 메트포르민 및 그의 제약상 허용되는 염, 특히, 메트포르민 히드로클로라이드, 및 그의 연장-방출 제제, 예컨대 글루메트자®, 포르타메트®, 및 글루코파지XR®; (iii) 단백질 티로신 포스파타제-1B (PTP-1B) 억제제, 예컨대 ISI-113715, 및 TTP814;

(3) 술포닐우레아 및 비-술포닐우레아 인슐린 분비촉진제, (예를 들어, 톨부타미드, 글리부리드, 글리피지드, 글리메피리드, 미티글리니드, 및 메글리티니드, 예컨대 나테글리니드 및 레파글리니드);

(4) α-글루코시다제 억제제 (예를 들어, 아카르보스, 보글리보스 및 미글리톨);

(5) 글루카곤 수용체 길항제;

(6) LDL 콜레스테롤 저하제, 예컨대 (i) HMG-CoA 환원효소 억제제 (예를 들어, 로바스타틴, 심바스타틴, 프라바스타틴, 세리바스타틴, 플루바스타틴, 아토르바스타틴, 피타바스타틴, 및 로수바스타틴), (ii) 담즙산 격리제 (예를 들어, 콜레스틸란, 콜레스티라민, 콜레스티미드, 콜레세벨람 히드로클로라이드, 콜레스티폴, 및 가교결합된 덱스트란의 디알킬아미노알킬 유도체), (iii) 콜레스테롤 흡수의 억제제, (예를 들어, 에제티미브), 및 (iv) 아실 CoA:콜레스테롤 아실트랜스퍼라제 억제제 (예를 들어, 아바시미브);

(7) HDL-상승 약물, 예컨대 니아신 또는 그의 염 및 그의 연장-방출 형태; MK-524A (이는 니아신 연장-방출 및 DP-1 길항제 MK-524의 조합물임); 및 니코틴산 수용체 효능제;

(8) 항비만 화합물;

(9) 염증성 병태에 사용하기 위한 작용제, 예컨대 아스피린, 비스테로이드 성 항염증 약물 (NSAID), 글루코코르티코이드, 및 선택적 시클로옥시게나제-2 (COX-2) 억제제;

(10) 항고혈압제, 예컨대 ACE 억제제 (예를 들어, 에날라프릴, 리시노프필, 라미프릴, 캅토프릴, 퀴나프릴, 및 탄돌라프릴), A-II 수용체 차단제 (예를 들어, 로사르탄, 칸데사르탄, 이르베사르탄, 올메사르탄 메독소밀, 발사르탄, 텔미사르탄, 및 에프로사르탄), 레닌 억제제 (예를 들어, 알리스키렌), 베타 차단제 (예를 들어, 칼슘 채널 차단제);

(11) 글루코키나제 활성화제 (GKA) (예를 들어, AZD6370);

(12) 11β-히드록시스테로이드 데히드로게나제 유형 1의 억제제, (예를 들어, 예컨대 미국 특허 번호 6,730,690; WO 03/104207; 및 WO 04/058741에 개시된 것들);

(13) 콜레스테릴 에스테르 전달 단백질 (CETP)의 억제제, (예를 들어, 토르세트라핍 및 MK-0859);

(14) 프럭토스 1,6-비스포스파타제의 억제제 (예를 들어, 예컨대 미국 특허 번호 6,054,587; 6,110,903; 6,284,748; 6,399,782; 및 6,489,476에 개시된 것들);

(15) 아세틸 CoA 카르복실라제-1 또는 2 (ACC1 또는 ACC2)의 억제제;

(16) AMP-활성화 단백질 키나제 (AMPK) 활성화제;

(17) G-단백질-커플링된 수용체의 효능제: (i) GPR-109, (ii) GPR-119 (예를 들어, MBX2982, 및 PSN821), 및 (iii) GPR-40 (예를 들어, TAK875, 5-[4-[[(1R)-4-[6-(3-히드록시-3-메틸부톡시)-2-메틸피리딘-3-일]-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일]옥시]페닐]이소티아졸-3-올 1-옥시드, 5-(4-((3-(2,6-디메틸-4-(3-(메틸술포닐)프로톡시)페닐)페닐)메톡시)페닐)이소, 5-(4-((3-(2-메틸-6-(3-히드록시프로톡시)피리딘-3-일)-2-메틸페닐)메톡시)페닐)이소티아졸-3-올 1-옥시드, 및 5-[4-[[3-[4-(3-아미노프로톡시)-2,6-디메틸페닐]페닐]메톡시]페닐]이소티아졸-3-올 1-옥시드);

(18) SSTR3 길항제 (예를 들어, 예컨대 WO 2009/011836에 개시된 것들);

(19) 뉴로메딘 U 수용체 효능제 (예를 들어, 예컨대 뉴로메딘 S (NMS)를 포함하나 그에 제한되지 않는, WO 2009/042053에 개시된 것들);

(20) 스테아로일-보조효소 A 델타-9 불포화효소 (SCD)의 억제제;

(21) GPR-105 길항제 (예를 들어, 예컨대 WO 2009/000087에 개시된 것들);

(22) 글루코스 섭취의 억제제, 예컨대 소듐-글루코스 수송체 (SGLT) 억제제 및 그의 다양한 이소형태, 예컨대 SGLT-1; SGLT-2 (예를 들어, ASP1941, TS071, BI10773, 토포글리플로진, LX4211, 카나글리플로진, 다파글리플로진 및 레모글리플로진; 및 SGLT-3);

(23) 아실 보조효소 A:디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제 1 및 2 (DGAT-1 및 DGAT-2)의 억제제;

(24) 지방산 합성 효소의 억제제;

(25) 아실 보조효소 A:모노아실글리세롤 아실트랜스퍼라제 1 및 2 (MGAT-1 및 MGAT-2)의 억제제;

(26) TGR5 수용체의 효능제 (GPBAR1, BG37, GPCR19, GPR131, 및 M-BAR로도 공지됨);

(28) 브로모크립틴 메실레이트 및 그의 급속-방출 제제, 및

(29) IL-1b 항체 (예를 들어, XOMA052, 및 카나키누맙); 및

(c) 제약상 허용되는 담체.

본 발명의 공-효능제 펩티드가 1종 이상의 다른 약물, 펩티드 또는 단백질과 동시에 사용되는 경우, 본 발명의 공-효능제 펩티드 이외에 이러한 다른 약물, 펩티드 또는 단백질을 함유하는 제약 조성물이 제공될 수 있다. 따라서, 본 발명의 제약 조성물은 본 발명의 공-효능제 펩티드 이외에 1종 이상의 다른 활성 성분을 또한 함유하는 것들을 포함한다.　

본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드를 포함하는 약리학적 조성물을 개체에게 투여하는 방법은 피내, 근육내, 복강내, 정맥내, 피하, 비내, 경막외 및 경구 경로를 포함하나, 그에 제한되지 않는다. 조성물은 임의의 편리한 경로에 의해, 예를 들어 주입 또는 볼루스 주사에 의해, 상피 또는 점막 피부 라이닝 (예를 들어, 구강 점막, 직장 및 장 점막 등), 안구 등을 통한 흡수에 의해 투여될 수 있고, 다른 생물학적 활성제과 함께 투여될 수 있다. 투여는 전신 또는 국소일 수 있다. 또한, 뇌실내(intraventricular) 및 척수강내 주사를 포함한 임의의 적합한 경로에 의해 중추 신경계에 조성물을 투여하는 것이 유리할 수 있다. 뇌실내 주입은 저장소 (예를 들어, 옴마야(Ommaya) 저장소)에 부착된 뇌실내 카테터에 의해 촉진될 수 있다. 폐 투여는 흡입기 또는 분무기, 및 에어로졸화제를 가진 제제의 사용에 의해 또한 사용될 수 있다. 치료를 필요로 하는 영역에 국소적으로 본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드를 투여하는 것이 또한 바람직할 수 있으며; 이것은, 예를 들어, 제한 없이, 수술 동안에 국소 주입, 국소 적용에 의해, 주사, 카테터, 좌약, 또는 임플란트에 의해 달성될 수 있다.

리포솜, 미세입자, 마이크로캡슐; 미니셀; 중합체; 캡슐; 정제 등 내에서의 캡슐화를 포함하나 그에 제한되지 않는 다양한 전달 시스템이 공지되어 있으며, 본원에 개시된 공-효능제 펩티드를 투여하는 데 사용될 수 있다. 한 실시 양태에서, 본원에 개시된 공-효능제 펩티드는 소포, 특히 리포솜 내에서 전달될 수 있다. 리포솜 내에서, 본원에 개시된 공-효능제 펩티드는, 다른 제약상 허용되는 담체 이외에, 수용액 중 미셀, 불용성 단일층, 액정, 또는 층상 층으로서 응집된 형태로 존재하는 양친매성 물질과 함께 합해진다. 리포솜 제제에 적합한 지질은 모노글리세리드, 디글리세리드, 술파티드, 리소레시틴, 인지질, 사포닌, 담즙산 등을 제한없이 포함한다. 이러한 리포솜 제제의 제조는, 예를 들어, 미국 특허 번호 4,837,028 및 미국 특허 번호 4,737,323에 개시된 바와 같이, 관련 기술분야의 기술 수준 내에 있다. 또 다른 실시양태에서, 본원에 개시된 공-효능제 펩티드는 다음을 포함하나 그에 제한되지 않는 제어 방출 시스템에서 전달될 수 있다: 전달 펌프 (예를 들어, 문헌 [Saudek, et al., New Engl. J. Med. 321: 574 (1989)]을 참조한다]) 및 반투과성 중합체 물질 (예를 들어, 문헌 [Howard, et al., J. Neurosurg. 71: 105 (1989)]을 참조한다). 게다가, 제어 방출 시스템은 치료 표적 (예를 들어, 뇌)의 근처에 배치할 수 있으므로, 전신 용량의 분획만을 필요로 한다. 예를 들어, 문헌 [Goodson, In: Medical Applications of Controlled Release, 1984. (CRC Press, Bocca Raton, Fla.)]을 참조한다.

특정 질환 또는 병태의 치료에서 효과적일 본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드를 포함하는 조성물의 양은 장애 또는 병태의 성질에 따라 달라질 것이며, 표준 임상 기술에 의해 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있다. 게다가, 최적의 용량 범위를 확인하는 데 도움이 되도록 시험관내 검정을 임의로 사용할 수 있다. 제제에 사용되는 정확한 용량은 투여 경로, 및 질환 또는 장애의 전반적인 심각성에 따라 또한 달라질 것이, 의사의 판단 및 각각의 환자의 상황에 따라 결정되어야 한다. 궁극적으로 주치의는 각각의 개개 환자를 치료하는 조성물의 양을 결정할 것이다. 처음에는, 주치의가 저용량의 조성물을 투여하고 환자의 반응을 관찰할 것이다. 최적의 치료 효과가 환자에게 얻어질 때까지 더 큰 용량의 조성물을 투여할 수 있으며, 그 시점에서 그 투여량은 더 이상 증가되지 않는다. 일반적으로, 1일 용량 범위는, 단일 또는 분할 용량으로, 포유동물의 체중 kg 당 약 0.001 mg 내지 약 100 mg, 바람직하게는 kg 당 0.01 mg 내지 약 50 mg, 가장 바람직하게는 kg 당 0.1 내지 10 mg의 범위 내에 있다. 다른 한편으로는, 일부 경우에 이들 한계치를 벗어난 투여량을 사용할 수 있다. 그러나, 본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드를 포함하는 조성물의 정맥내 투여에 적합한 투여량 범위는 일반적으로 킬로그램 (Kg) 체중당 약 5-500 마이크로그램 (μg)의 활성 화합물이다. 비내 투여에 적합한 투여량 범위는 일반적으로 약 0.01 pg/kg 체중 내지 1 mg/kg 체중이다. 유효 용량은 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유래된 용량-반응 곡선으로부터 추정할 수 있다. 좌제는 일반적으로 활성 성분을 0.5 중량% 내지 10중량%의 범위로 함유하며; 경구 제제는 바람직하게는 10% 내지 95%의 활성 성분을 함유한다. 궁극적으로 주치의는 본 발명의 본원에 개시된 1종 이상의 공-효능제 펩티드를 포함하는 조성물을 사용하여 적절한 치료 지속기간을 결정할 것이다. 투여량은 개개 환자의 연령, 체중 및 반응에 따라 또한 달라질 것입니다.

본원에 개시된 공-효능제 펩티드 및 제약 조성물의 성분 중 1종 이상으로 채워진 하나 이상의 용기를 포함하는, 제약 팩 또는 키트가 추가로 제공된다. 인간 투여를 위한 제조, 사용 또는 판매의 기관에 의한 승인을 반영하는, 약제 또는 생물학적 생성물의 제조, 사용 또는 판매를 규제하는 정부 기관이 지정한 형태의 고지가 이러한 용기(들)와 임의로 연관되어 있을 수 있다.

따라서, 본 발명은 추가로 (i) 서열식별번호: 1에 나타낸 아미노산 서열을 갖되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환으로 이루어진 펩티드, 및 (ii) 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는, 제약 조성물을 제공한다.

본 발명은 비만 대사성 질환 환자에게 유효량의 상기 언급된 펩티드 중 어느 하나의 펩티드를 투여하여 상기 환자에서 비만 대사성 질환을 치료하는 것을 포함하는, 비만 대사성 질환 환자를 치료하는 방법을 추가로 제공한다.

본 발명은 비만 대사성 질환 환자에게 유효량의 상기 언급된 조성물 중의 조성물을 투여하여 상기 환자에서 비만 대사성 질환을 치료하는 것을 포함하는, 비만 대사성 질환 환자를 치료하는 방법을 추가로 제공한다.

하기 실시예는 본 발명의 추가 이해를 증진시키고자 하는 것이다.

실시예 1

공-효능제 펩티드 1: His¹-D-Ser²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ala-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 6)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 심포니 프로테인 테크놀로지즈 인크(Symphony Protein Technologies Inc) 장치 상에서 링크(Rink)-아미드 PEG-PS 수지, 챔피언(Champion) (바이오서치 테크놀로지즈(Biosearch Technologies) (150 μmol, 로딩 0.28 mmol/g)) 상에서 합성하였다.

모든 아미노산을 DMF 중 0.3M HOBt (히드록시벤조트리아졸)의 용액 중 0.3 M 농도로 용해시켰다. 아실화 반응을 수지 미함유 아미노 기에 대해 5배 과량의 활성화 아미노산으로 1시간 동안 수행하였다. 아미노산을 등몰량의 HATU (O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트) 및 NMP 중 2배 몰 과량의 DIEA (디이소프로필에틸아민) 용액 2M으로 활성화시켰다.

45분의 이중 아실화 반응을 His¹에서 Trp²⁵으로 수행하였다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스(Waters) 델타(Delta)-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 30%B에서 30%B, 20분에 걸쳐 60%B에서 60%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 수율 21%, 95% 순도.

최종 펩티드를 용매로서 H2O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B)를 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스(Acquity Waters) 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하고, 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 또한 특성화하였다 (Mw 실측치: 3695.60 Da; Mw 기대치: 3696.12 Da).

실시예 2

공-효능제 펩티드 2: His¹-D-Ser²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Val-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 7)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 서열식별번호: 6/ 실시예 1에 대해 이전에 보고된 바와 같이 합성하였다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스 델타-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 30%B에서 30%B, 20분에 걸쳐 50%B에서 50%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 수율 16%, 95% 순도.

최종 펩티드를 용매로서 H2O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B)를 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하고, 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 또한 특성화하였다 (Mw 실측치: 3723.70 Da; Mw 기대치: 3724.18 Da).

실시예 3

공-효능제 펩티드 3: His¹-D-Ser²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Val-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 8)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 공-효능제 펩티드 1에 대해 이전에 보고된 바와 같이 합성하였다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스 델타-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 30%B에서 30%B, 20분에 걸쳐 30%B에서 60%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 수율 20%, >90% 순도.

최종 펩티드를 용매로서 H2O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B) 및 하기 구배: 4분 내에 35%에서 65%B, 유량 0.4 mL/분을 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하였다. 펩티드를 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 특성화하였다 (Mw 실측치: 3852.80 Da; Mw 기대치: 3853.29 Da).

실시예 4

공-효능제 펩티드 4: His¹-Aib²-Val-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp¹⁵-Aib¹⁶-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp²⁵-Leu-Nle-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 9)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 Fmoc/t-Bu 화학을 사용하는 표준 고체상 펩티드 합성 (SPPS)에 의해 합성하였다. 어셈블리를 심포니 (프로테인 테크놀로지즈) 펩티드 합성기 상에서 링크-아미드 PEG-PS 수지, 챔피언 (바이오서치 테크놀로지즈, 0.28 mmol/g) 상에서 수행하였다.

모든 아미노산을 DMF 중 0.3M HOBt (히드록시벤조트리아졸)의 용액 중 0.3 M 농도로 용해시켰다. 아실화 반응을 수지 미함유 아미노 기에 대해 5배 과량의 활성화 아미노산으로 45분 동안 수행하였다. 아미노산을 등몰량의 HATU (O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트) 및 NMP 중 2배 몰 과량의 DIEA (디이소프로필에틸아민) 용액 2M으로 활성화시켰다. 이중 아실화 반응을 His¹에서 Trp²⁵으로 수행하였다. 고체상에서의 펩티드 어셈블리 동안에, 측쇄 보호 기는 다음과 같았다: Asp, γGlu, Ser, Thr 및 Tyr의 경우 tert-부틸; Gln 및 His의 경우 트리틸; Lys, Trp의 경우 tert-부톡시-카르보닐; 및 Arg의 경우 2,2,4,6,7-펜타메틸디히드로벤조푸란-5-술포닐. 위치 10에서의 Lys는 Dde-Lys (Fmoc)-OH로서 도입되어 ε-아미노 기의 Fmoc 탈보호 후 Lys¹⁰의 어셈블리 직후에 측쇄 유도체화를 달성하도록 하였다. Dde-Lys¹⁰ 측쇄를 DIPC 및 HOAt로 활성화된 팔미트 산 및 2개의 Fmoc-Glu-OtBu 잔기의 수동 커플링에 의해 지방산 및 링커로 유도체화하였다. Dde 보호 기를 DMF 중 2% 히드라진의 용액으로 처리하여 제거하고, 서열 어셈블리를 계속하여 잔기 1-9를 포함시켰다. 건조한 펩티드-수지를 실온에서 2시간 동안 88% TFA, 5% 페놀, 2% 트리이소프로필실란 및 5% 물로 처리하여 보호 기 탈보호 및 수지로부터의 절단을 수득하였다. 용액을 여과하여 수지를 제거하고 조 펩티드 용액을 냉 메틸 tert-부틸 에테르 (50 mL의 메틸 tert-부틸 에테르에 대해 대략 4 mL 펩티드 용액)에서 침전시켰다. 펩티드 펠렛을 냉 메틸 tert-부틸 에테르에서 2회 재현탁/세척/원심분리하였다. 펩티드 펠렛을 진공하에 건조시킨 다음에 물/아세토니트릴에 용해시킨 다음에 동결 건조시켰다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스 델타-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 30%B에서 30%B, 20분에 걸쳐 30%B에서 50%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 수율 20%, >90% 순도.

최종 펩티드를 용매로서 H2O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B) 및 하기 구배: 1분에 걸쳐 35%에서 35%, 35에서 65%B 4분 내에, 유량 0.4 mL/분을 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하였다. 펩티드를 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 특성화하였다 (Mw 실측치: Da 3807.9; Mw 기대치: Da 3808.29).

실시예 5

공-효능제 펩티드 5: His¹-D-Ser²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ala-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 10)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 Fmoc/t-Bu 화학을 사용하는 표준 고체상 펩티드 합성 (SPPS)에 의해 합성하였다. 어셈블리를 APEX 396 펩티드 합성기 상에서 링크-아미드 PS 수지 (150 μmol, 로딩 0.47 mmol/g) 상에서 수행하였다.

모든 아미노산을 DMF 중 0.5M HOBt (히드록시벤조트리아졸)의 용액 중 0.5 M 농도로 용해시켰다. 아실화 반응을 수지 미함유 아미노 기에 대해 5배 과량의 활성화 아미노산으로 45분 동안 수행하였다. 아미노산을 등몰량의 HATU (O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트) 및 NMP 중 2배 몰 과량의 DIEA (디이소프로필에틸아민) 용액 2M으로 활성화시켰다.

이중 아실화 반응을 His¹, D-Ser², Phe²², Val²³ 상에서 수행하였다. 고체상에서의 펩티드 어셈블리 동안에, 측쇄 보호 기는 다음과 같았다: Asp, Ser, D-Ser, Thr 및 Tyr의 경우 tert-부틸; Gln 및 His의 경우 트리틸; Lys, Trp의 경우 tert-부톡시-카르보닐; 및 Arg의 경우 2,2,4,6,7-펜타메틸디히드로벤조푸란-5-술포닐. 위치 10에서의 Lys는 직교 Alloc (알릴옥시카르보닐) 보호 기에 의해 보호되었다.

N-말단 잔기를 Boc-His(Trt)-OH로서 아실화하였다. 고체상 위에서의 펩티드 어셈블리의 끝에서, Alloc 보호 기를 Lys¹⁰으로부터 제거하고 DIPC 및 HOAt로 활성화된 팔미트산 및 Fmoc-Glu-OtBu 잔기의 수동 커플링에 의해 측쇄 유도체화를 수행하였다. 건조한 펩티드-수지를 실온에서 2시간 동안 88% TFA, 5% 페놀, 2% 트리이소프로필실란 및 5% 물로 처리하여 보호 기 탈보호 및 수지로부터의 절단을 수득하였다. 용액을 여과하여 수지를 제거하고 조 펩티드 용액을 냉 메틸 tert-부틸 에테르 (50 mL의 메틸 tert-부틸 에테르에 대해 대략 4 mL 펩티드 용액)에서 침전시켰다. 펩티드 펠렛을 냉 메틸 tert-부틸 에테르에서 2회 재현탁/세척/원심분리하였다. 펩티드 펠렛을 진공하에 건조시킨 다음에 물/아세토니트릴에 용해시킨 다음에 동결 건조시켰다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스 델타-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 35%B에서 35%B, 20분에 걸쳐 35%B에서 55%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 수율 30%, 95% 순도.

최종 펩티드를 용매로서 H2O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B)를 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 및 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 특성화하였다 (Mw 실측치: 3824.4 Da; Mw 기대치: 3825.24 Da).

실시예 6

비교군 공-효능제 펩티드 6: His¹-D-Ser²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 11)는 미국 공개 출원 번호 20120288511에서의 서열식별번호: 66 또는 미국 공개 출원 번호 20140221283에서의 서열식별번호: 19와 서열식별번호: 66 및 서열식별번호: 19에서 Lys¹⁰이 γGlu-C₁₆에 접합되는 것을 제외하고 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 미국 공개 출원 번호 20120288511 및 20140221283은 그 전문이 본원에 포함되며 공-효능제 펩티드 6을 본질적으로 상기 출원에 기재된 바와 같이 합성하였다.

실시예 7

공-효능제 펩티드 7: Ac-His¹-Ala²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp¹⁵-Glu¹⁶-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp²⁵-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 12)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 링크-아미드 PEG-AM 수지, (켐임펙스(Chemimpex), 0.47 mmol/g) 상에서 공-효능제 펩티드 1에 대해 이전에 보고된 바와 같이 합성하였다. N-말단 잔기를 고체상 위에서의 펩티드 어셈블리의 끝에서 아세트산 무수물로 아실화하였다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스 델타-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 25%B에서 25%B, 20분에 걸쳐 25%B에서 55%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 수율 27%, >90% 순도.

최종 펩티드를 용매로서 H₂O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B) 및 하기 구배: 1분에 걸쳐 30%에서 30%, 4분 내에 30에서 70%B, 유량 0.4 mL/분을 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하였다. 펩티드를 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 특성화하였다 (Mw 실측치: 3909.31Da; Mw 기대치: 3907.8 Da).

실시예 8

공-효능제 펩티드 8: His¹-D-Ser²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu¹⁵-Ala¹⁶-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp²⁵-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 13)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 Fmoc/t-Bu 화학을 사용하는 표준 고체상 펩티드 합성 (SPPS)에 의해 합성하였다. 어셈블리를 링크-아미드 PEG-AM 수지 (켐임펙스, 0.47 mmol/g) 상에서 또는 링크-아미드 PEG-PS 수지, 챔피언 (바이오서치 테크놀로지즈, 0.28 mmol/g) 상에서 오버추어(Overture) 펩티드 합성기 상에서 수행하였다. 아실화는 활성화제로서 HATU/DIPEA 및 45분 반응 시간을 사용하여 수행하였다. 모든 서열에 대해 이중 아실화 반응을 수행하였다. 위치 10에서의 Lys는 직교 Alloc (알릴옥시카르보닐) 보호 기에 의해 보호되었다. N-말단 잔기를 Boc로서 보호하였다. 고체상 위에서의 펩티드 어셈블리의 끝에서, Alloc 보호 기를 Lys¹⁰으로부터 제거하고 DIPC 및 HOAt로 활성화된 팔미트산 및 Fmoc-Glu-OtBu 잔기의 수동 커플링에 의해 측쇄 유도체화를 수행하였다. 건조한 펩티드-수지를 실온에서 2시간 동안 88% TFA, 5% 페놀, 2% 트리이소프로필실란 및 5% 물로 처리하여 보호 기 탈보호 및 수지로부터의 절단을 수득하였다. 용액을 여과하여 수지를 제거하고 조 펩티드 용액을 냉 메틸 tert-부틸 에테르 (50 mL의 메틸 tert-부틸 에테르에 대해 대략 4 mL 펩티드 용액)에서 침전시켰다. 펩티드 펠렛을 냉 메틸 tert-부틸 에테르에서 2회 재현탁/세척/원심분리하였다. 펩티드 펠렛을 진공하에 건조시킨 다음에 물/아세토니트릴에 용해시킨 다음에 동결 건조시켰다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스 델타-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 35%B에서 35%B, 20분에 걸쳐 35%B에서 55%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 수율 20%, >90% 순도. 최종 펩티드를 용매로서 H₂O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B)를 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하였다. 펩티드를 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 특성화하였다 (Mw 실측치: 3839.10 Da; Mw 기대치: 3839.26 Da).

실시예 9

공-효능제 펩티드 9: His¹-D-Ser²-Val-Gly-Thr-pFF⁶-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp¹⁵-Glu¹⁶-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp²⁵-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 14)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 공-효능제 펩티드 4에 대해 이전에 보고된 바와 같이 합성하였다. 이중 아실화 반응을 His¹, D-Ser², Val³, Gly⁴, Thr⁵, Thr⁷,Phe²², Val²³ 상에서 수행하였다. Fmoc-p-플루오로-페닐알라닌-COOH (Fmoc-pFF-OH)를 DIPC 및 HOAt로 활성화된 수동 커플링에 의해 어셈블리하였다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스 델타-Pak^TM C_-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 30%B에서 30%B, 20분에 걸쳐 30%B에서 50%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 수율은 10%이었고, 순도는 90% 초과이었다. 최종 펩티드를 용매로서 H₂O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B)를 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하였다. 펩티드를 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 특성화하였다 (Mw 실측치: 3900.80 Da; Mw 기대치: 3901.26 Da).

실시예 10

공-효능제 펩티드 10: His¹-D-Ser²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp¹⁵-Glu¹⁶-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp²⁵-Leu-Met₂(O)-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 15)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 공-효능제 펩티드 4에 대해 이전에 보고된 바와 같이 합성하였다. 이중 아실화 반응을 His¹, D-Ser², Gln³, Gly⁴, Thr⁵, Phe⁶, Thr⁷,Phe²², Val²³ 상에서 수행하였다. Fmoc-메티오닌-술폰-COOH를 DIPC 및 HOAt로 활성화된 수동 커플링에 의해 어셈블리하였다. 조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스 델타-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 30%B에서 30%B, 20분에 걸쳐 30%B에서 50%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 수율은 15%이었고, 순도는 >90% 순도이었다. 최종 펩티드를 용매로서 H₂O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B)를 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하였다. 펩티드를 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 특성화하였다 (Mw 실측치: 3932.70 Da; Mw 기대치: 3933.31 Da).

실시예 11

공-효능제 펩티드 11: His¹-D-Ser²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Leu-Tyr-Leu-Asp-Glu¹⁶-Arg-Ala¹⁸-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp²⁵-Leu-Leu-Asp-Thr-NH₂ (서열식별번호: 16)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

합성은 고체 지지체 상에 선형 펩티드 서열의 어셈블리로 시작한 후에, 위치 10에 리신을 γ글루탐산-γ글루탐산-팔미트산의 3-잔기 서열로 분지하였다. 그 다음에, 완성된 펩티딜 수지를 TFA 용액에서 절단하였다. RP-HPLC 정제 후에, 0.15 mmol의 수지로부터 15 mg의 표제 화합물을 수득하였다.

우리는 CEM 리버티(Liberty) 펩티드 합성기 (CEM 코포레이션(Corp.) 노쓰캐롤나이나주 매튜스) 상에서 표준 고체상 Fmoc/t-Bu 화학을 사용하엿다. 제1 아미노산 트레오닌을 MBHA 폴리스티렌 수지 (0.21 mmol/g 로딩, 인디애나주 미드웨스트 바이오테크(Midwest Biotech)로부터, 로트 번호 S16130) 상에서 Fmoc-Thr (tBu)로서 로딩하였다. 슈도프롤린 디펩티드 Fmoc-PheThr (ΦMe,ΦMe)를 위치 6 및 7에 적용하였다. 위치 10 리신 측쇄는 ivDde 기 [1-(4,4-디메틸-2,6-디옥소시클로헥스-1-일리덴)이소발레릴]에 의해 보호되었다. 다른 표준 측쇄 보호 기는 다음과 같았다: 글루타민의 경우 트리틸 기; 트립토판 및 히스티딘의 경우 tert-부톡시-카르보닐 기; 글루탐산, γ-글루탐산, 아스파르트산, 세린 및 D-세린, 트레오닌, 및 티로신의 경우 tert-부틸 기; 아르기닌의 경우 pbf 기 (2,2,4,6,7-펜타메틸디히드로벤조푸란-5-술포닐).

아실화는 수지 미함유 아미노 기에 대해 5-6 당량의 아미노산으로 수행하였 다. 싱글-커플을, 더블-커플이 적용되는 Arg¹⁷, Ala¹⁹, 및 Thr²⁹ 위치를 제외하고, 모든 위치에 적용하였다. Fmoc-아미노산을 2 등몰량의 DIEA (N,N-디이소프로필에틸아민)의 존재하에 등몰량의 HATU [2-(1H-9-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸-아미눔 헥사플루오로포스페이트]로 활성화시켰다. Fmoc 탈보호를 DMF 중 20% 피페리딘에서 수행하였다. 리신 10에서의 ivDde의 제거는 5%의 히드라진 DMF 용액에서 각각 1분 2회 수동으로 수행하였다. 팔미트산을 45분 동안 10 등몰량의 DIPC (N,N '-디이소프로필카르보디이미드) 및 HOAt (1-히드록시-7-아자벤조트리아졸)의 존재하에 서열에 수동으로 커플링시켰다.

완성된 수지를 3시간 동안 TFA 용액 (88% TFA/ 5% 페놀/ 2% 트리이소프로필실란/ 5% 물)에 의해 절단하였다. 절단 동안에, 수지를 여과하고 매시간 TFA 용액을 보충하였다. 그 다음에 우리는 TFA 용액을 합하고 상기 용액을 회전 증발기 상에서 응축하였다. 펩티드를 침전시키기 위해, 50 ml의 빙냉 디에틸 에테르를 TFA 잔류물에 첨가하였다. 침전된 펩티드를 원심분리에 의해 펠렛화한 다음에, 펠렛을 빙냉 디에틸 에테르로 2회 세척하여 유기 스캐빈저를 제거하였다. 최종 펠렛을 건조시키고, 물 중 30% 아세트산에 재현탁시키고, 동결-건조시켰다. 건조된 조 펩티드를 물/아세토니트릴에 재용해시켰다. 그 다음에, 조 펩티드를 두 번째로 동결-건조시켜 트립토판 잔기의 불완전 탈카르복실화로 인한 불순물을 제거하였다.

조 펩티드를 0.1% 트리플루오로아세트산의 존재하에 물/아세토니트릴 구배로 페노메넥스 쥬피터(Phenomenex Jupiter) C4 칼럼 (250 x 21.2 mm, 10μ, 300A, 카탈로그 번호 00G-4168-P0-AX)을 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 정제된 펩티드를 LCMS에 의해 특성화하였다. 정제된 펩티드에 대해 측정된 단일 동위 원소 질량은 3868.98 Da (서열-예측 질량은 3868.3 Da이다)이었다.

LC-MS를 UPLC-MS 시스템 (워터스 액쿼티) 상에서 수득하였다; 칼럼: 워터스 BEH 130 C18 액쿼티 1.0x50 mm, 1.7um; 구배: 1.6분에 걸쳐 10-99% B 선형 구배, 0.4분 내에 1%B로 되돌아옴. A/B 완충제 시스템 (A= 물 중 0.1% TFA; B=아세토니트릴 중 0.1% TFA); 유량: 0.3 mL/분; 온도: 50C; UV 파장: 215 nm; 주입 부피: 0.5 ul; 매스 스캔: 500-1500 m/z, 0.2초; 전압: 모세관 (Kv)-3.25; Con (V)-27; 추출 (V)-3; RF 렌즈 (V)-0.3; 기체 흐름 (L/hr): 탈용매화-597; 콘(Cone)-30; 온도 (C): 공급원 온도-100; 탈용매화 온도-350.

실시예 12

공-효능제 펩티드 12: His¹-D-Ser²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-pAF¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp¹⁵-Ala¹⁶-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp²⁵-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 17) (여기서 pAF는 파라-아미노메틸 페닐알라닌이다)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 공-효능제 펩티드 4에 대해 이전에 보고된 바와 같이 합성하였다. 이중 아실화 반응을 His¹, D-Ser², Val³, Gly⁴, Thr⁵, Phe⁶, Thr⁷,Phe²², Val²³ 상에서 수행하였다. 위치 10에서 Dde로 직교 보호된 Fmoc-파라-아미노메틸 페닐알라닌-COOH (실시예 15 참조)를 DIPC 및 HOAt로 활성화된 수동 커플링에 의해 어셈블리하였다. 어셈블리의 끝에서 Dde 보호 기를 DMF 중 2% 히드라진의 용액으로 처리하여 제거하고 DIPC 및 HOAt로 활성화된 팔미트 산 및 2개의 Fmoc-Glu-OtBu 잔기의 수동 커플링에 의해 지방산 및 링커로 측쇄 유도체화를 수행하였다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스 델타-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 30%B에서 30%B, 20분에 걸쳐 30%B에서55%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 수율 10%, >90% 순도.

최종 펩티드를 용매로서 H2O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B) 및 하기 구배: 4분 내에 35에서 55% B, 유량 0.4 mL/분을 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하였다. 펩티드를 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 특성화하였다 (Mw 실측치: 3873.10 Da; Mw 기대치: 3873.28 Da)

실시예 13

공-효능제 펩티드 13: His¹-아미노-1시클로부탄²-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp¹⁵-Glu¹⁶-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp²⁵-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 18)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 서열식별번호: 9/ 실시예 4에 대해 이전에 보고된 바와 같이 합성하였다. 이중 아실화 반응을 His¹, D-Ser², Gln³, Gly⁴, Thr⁵, Phe⁶, Thr⁷,Phe²², Val²³상에서 수행하였다. Fmoc-아미노-1-시클로부탄 카르복실산을 DIPC 및 HOAt로 활성화된 수동 커플링에 의해 어셈블리하였다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg)를 정제용 워터스 델타-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 35%B에서 35%B, 20분에 걸쳐 35%B에서 50%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 최종 펩티드를 용매로서 H2O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B)를 사용하여, 45℃에서 BEH300 C4 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하였다. 수율은 18%이었고, 순도는 >90%이었다. 펩티드를 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 특성화하였다 (Mw 실측치: 3893.40 Da; Mw 기대치: 3893.31 Da).

실시예 14

공-효능제 펩티드 14: His¹-D-Ser-Gln-Gly-Thr-tβP-Thr-Ser-Asp-Lys¹⁰(γGlu-γGlu-C₁₆)-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp¹⁵-Glu¹⁶-Arg-Ala-Ala-Gln-Asp-Phe²²-Val²³-Gln-Trp²⁵-Leu-Leu-Asp-Thr-CONH₂ (서열식별번호: 19) (여기서 tβP= 트레오-β-페닐세린이다)의 합성에 관한 절차는 다음과 같았다.

펩티드를 공-효능제 펩티드 4에 대해 이전에 보고된 바와 같이 합성하였다. 이중 아실화 반응을 His¹, D-Ser², Gln³, Gly⁴, Thr⁵, Phe⁶, Thr⁷,Phe²², Val²³ 상에서 수행하였다. tβP를 DIPC 및 HOAt로 활성화된 수동 커플링에 의해 어셈블리하였다.

조 펩티드 (3 ml의 DMSO 중 130 mg) (여기서 합성에서 사용된 라세미 tβP로 인해 2개의 이성질체가 존재한다)를 정제용 워터스 델타-PakTM C-4 카트리지 (40 x 200 mm, 15 μm, 300Å)를 사용하고 용리액으로서 (A) 물 중 0.1% TFA 및 (B) 아세토니트릴 중 0.1% TFA를 사용하여 역상 HPLC에 의해 정제하였다. 용리액 B의 하기 구배를 사용하였다: 5분에 걸쳐 35%B에서 35%B, 20분에 걸쳐 35%B에서 45%B-80%B, 유량 80 mL/분, 파장 214 nm. 2개의 이성질체는 상이한 용리 시간으로 정제용 시행에서 분리되었다. 더 짧은 체류 시간 t= 12.45를 갖는 가장 친수성인 이성질체를 용매로서 H2O, 0.1% TFA (A) 및 CH3CN, 0.1% TFA (B) 및 하기 구배: 20분 내에 20에서 60% B, 유량 0.4 mL/분을 사용하여, 45℃에서 BEH300 C18 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 no. L-005472682로 확인하였다. 생성물을 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 또한 특성화하였다. 수율 12%, >90% 순도 (Mw 실측치: 3899.3 Da; Mw 기대치: 3899.27 Da).

실시예 15

Fmoc-4-(Dde-아미노메틸)-페닐알라닌의 합성은 다음과 같았다.

Fmoc-4-(Boc-아미노메틸)-페닐알라닌을 1시간 동안 DCM/TFA 2/1에서 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 디에틸 에테르로 처리하여 백색 고체를 수득하였다. 수득된 조 물질을 EtOH (19 mM)에 용해시키고, DIPEA (5 당량) 및 디메돈 (1.1 당량)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 60℃에서 3시간 후에, 용액을 TFA로 PH 4로 산성화하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 AcOEt로 처리하고 HCl 1N으로 세척하였다. 유기 상을 염수로 세척하고 Na₂SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 감압하에 제거하고, 최종 생성물을 황색 고체로서 수득하였다.

최종 화합물을 용매로서 H₂O, 0.1% TFA (A) 및 CH₃CN, 0.1% TFA (B) 및 하기 구배: 1분 내에 10%에서 10%B, 4분 내에 10%B 내지 90%B, 유량 0.4 mL/분을 사용하여, 45℃에서 BEH300 C18 액쿼티 워터스 2.1x100 mm, 1.7 μm으로, 액쿼티 UPLC 워터스 크로마토그래피 상에서 특성화하였다. 보호된 아미노산을 액쿼티 SQ 검출기 상에서 전자분무 질량 분석법에 의해 특성화하였다 (Mw 실측치: 581.5 Da; Mw 기대치: 580.67 Da).

실시예 16

cAMP 프로토콜은 다음과 같았다.

펩티드를 100% DMSO에 용해시키고 순차적으로 희석하여 11점 적정을 생성시켰다. 그 다음에 펩티드 용액을 384-웰 검정 플레이트 (150 nL/웰)로 옮겼다. 인간 GLP-1R 또는 인간 GCGR을 발현하는 검정 준비용 동결 세포를 DMEM/F12 배지 (깁코(GIBCO)), 10% FBS (깁코), 1x P/S (깁코), 800 μg/mL 제네티신 (깁코), 및 300 μg/mL 히그로마이신 (인비트로겐(Invitrogen))으로 이루어진 성장 배지에 현탁시켰다. 그 다음에 세포를 PBS (깁코), 7.5% BSA (퍼킨 엘머(Perkin Elmer)), 100 μM RO 20-1724 (시그마(Sigma)), 및 20% 인간 혈청 (MP 바이오메디칼(Biomedical))으로 이루어진 검정 완충제에 희석하였다. 그 다음에 세포 현탁액 (15 μL)을 펩티드 용액 (인간 GCGR의 경우 30,000개 세포/웰; GLP1R의 경우 20,000개 세포/웰)을 함유하는 검정 플레이트에 첨가하였다. 세포를 암실에서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. cAMP의 생성을 히트헌터(HitHunter)TM cAMPXS 키트 (디스커버(Discover)X)를 사용하여 측정하였다. 그 다음에 ED 완충제 (20 μL)를 각각의 웰에 첨가하고 플레이트를 암실에서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 후속적으로, EA 완충제 (20 μL)를 각각의 웰에 첨가하고, 플레이트를 암실에서 실온에서 1-18 시간 동안 인큐베이션하였다. 엔비젼(EnVision) 멀티레이블( Multilabel) 플레이트 판독기 (퍼킨 엘머)를 사용하여 발광을 측정하였다. EC₅₀ 값은 ADA 데이터 분석기 소프트웨어를 사용하여 계산하였다. 결과를 표 2에 나타냈다.

실시예 17

식이 유도 비만 (DIO) 마우스는 항비만 화합물의 효능 연구에서 인간의 대용으로서 오랫동안 사용되어 왔다. 비만 화합물의 연구에서 이러한 마우스로부터 수득된 결과는 인간으로 번역될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Nilsson et al. Acta Pharmacologia Sinica 33: 173-181 (2012)]을 참조하며, 이 문헌은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다). 따라서, DIO 마우스는 비만을 치료하기 위한 화합물의 효능을 시험하기 위해 인간의 유용한 대용이다.

실시예 18, 19, 20, 및 21에서 연구를 위해, 식이 유도 비만 (DIO) 마우스 (계통 C57Bl6/NTac; 고지방 식이 20주, 약 47 g)를 1군당 8마리의 군으로 나누었고 각각의 군의 초기 평균 체중, 식품 섭취 및 기저 글루코스를 펩티드 투여 전에 일치시켰다. 각각의 군의 마우스를 7 내지 10일 동안 특정 용량의 공-효능제 펩티드 또는 비히클 대조군으로 매일 피하 주사하였다. 이 연구에서 시험된 펩티드는 3 nmol/kg 내지 25 nmol/kg로 다양하게 한 용량으로 공-효능제 펩티드 1, 2, 3, 4, 5, 및 6 (서열식별번호: 6, 7, 8, 9, 10, 및 11, 각각)이었다. 체중, 식품 섭취 및 기저 글루코스를 치료 동안 주기적으로 측정하였다. 모든 펩티드는 필적하는 약물동태학 특성 및 유사한 혈장 단백질 결합을 갖는다.

실시예 18

본 발명의 특정 펩티드의 생체내 효과는 20주 동안 고지방 식이를 유지하고 약 47 그램의 초기 체중을 갖는 식이-유도 비만 (DIO) 마우스 (계통 C57Bl6/NTac)에서 시험하였다. 마우스에 비히클 대조군 또는 특정 용량의 펩티드를 매일 9일 동안 투여하였다. 이 연구에서 펩티드는 9 nmol/kg의 용량으로 투여되는 서열식별번호: 6, 7, 8, 9, 10 및 11의 펩티드를 포함하였다. 서열식별번호: 9의 펩티드를 9 및 25 nmol/kg의 용량으로 투여하였다. 누적 체중 변화 (그램)는 3일째를 제외하고 연구의 각각의 날에 측정하였다. 결과는 도 1에 나타냈으며 평균 ± SEM으로서 표시하였다. 이 연구에서 시험된 펩티드 각각은 마우스의 비히클 처리 군과 비교하여 연구의 과정에 걸쳐 유의한 (p<0.05 대 비히클, 2원 분산분석(ANOVA)) 체중 감소를 나타냈다. 연구의 9일째, 9 nmol/kg의 서열식별번호: 7 및 9의 펩티드를 투여한 마우스는 대략 3 그램의 체중 감소를 보였으며, 한편 25 nmol/kg 용량의 서열식별번호: 9의 펩티드는 10.5 그램의 체중 감소를 야기하였다. 9 nmol/kg의 서열식별번호: 8 및 6의 펩티드를 투여한 마우스는 각각 8 및 10.5 그램의 체중 감소를 보였다. 9 nmol/kg의 서열식별번호: 10 및 11의 펩티드를 투여한 마우스는 각각 대략 13 그램의 체중 감소를 보였다.

실시예 19

DIO 마우스 (계통 C57Bl6/NTac)에서 제2 연구에서 각각의 펩티드의 용량을 다양하게 하였다 - 서열식별번호: 6 내지 11의 펩티드 각각을 용량 9 nmol/kg으로 투여하였다. 게다가, 서열식별번호: 8의 펩티드를 15 nmol/kg으로 투여하였으며, 한편 서열식별번호: 10 및 11의 펩티드를 3 nmol/kg으로 투여하였다. 체중을 매일 8일 동안 측정하였고 체중 변화는 비히클에 비해 퍼센트로 표시하였다 (도 2). 9 nmol/kg 용량의 서열식별번호: 7 또는 9의 펩티드를 투여한 마우스는 각각 대략 20% 또는 17%의 체중 감소를 보인 9 nmol/kg 용량의 서열식별번호: 6 또는 8의 펩티드를 투여한 마우스와 비교하여 대략 5% 체중 감소를 보였다. 15 nmol/kg 용량의 서열식별번호: 8의 펩티드를 투여한 마우스는 대략 25%의 체중 감소를 보였다. 용량 3 nmol/kg 서열식별번호: 10의 펩티드를 투여한 마우스는 대략 17%의 체중 감소를 보였으며, 한편 3 nmol/kg 용량의 서열식별번호: 11의 펩티드를 투여한 마우스는 어떤 체중 감소 효능도 보이지 않았다.

실시예 20

도 3에 나타낸 바와 같이, 9 nmol/kg의 서열식별번호: 6 내지 11의 펩티드를 투여한 DIO 마우스 (계통 C57Bl6/NTac)는, 서열식별번호: 7의 펩티드를 제외하고, 8일간의 투여 후에 누적 식품 섭취에서 유의한 감소를 보였다 (*p<0.05, **p<0.01 ***p<0.001 대 비히클, 1원 분산분석, 던의 다중 비교(Dunn's multiple comparisons)). 3 nmol/kg의 서열식별번호: 10의 펩티드를 투여한 마우스는 식품 섭취의 유의한 억제를 또한 보였으며, 한편 3 nmol/kg의 서열식별번호: 11의 펩티드를 투여한 마우스는 식품 섭취에 어떤 변화도 보이지 않았다.

실시예 21

누적 체중 변화 이외에, DIO 마우스 (계통 C57Bl6/NTac)의 주변 글루코스(ambient glucose) 수준을 연구 기간 내내 주기적으로 측정하였다. 도 4에 나타낸 바와 같이, 서열식별번호: 9의 펩티드를 용량 25 nmol/kg으로 투여한 마우스는 비히클 처리 대조군 마우스와 비교하여 투여 제2일까지 주변 글루코스의 유의한 감소를 나타냈다 (-75 mg/dL, ***p<0.001 대 비히클, 2원 분산분석, 던네트(Dunnett's) 다중 비교). 9 nmol/kg의 서열식별번호: 10 및 11의 펩티드를 투여한 마우스는 주변 글루코스의 유사한 감소를 나타냈다. 9 nmol/kg의 서열식별번호: 6의 펩티드를 투여한 마우스는 투여 7일까지 주변 글루코스의 유의한 감소를 나타냈다 (-60 mg/dL, *p<0.05 대 비히클). 9 nmol/kg의 서열식별번호: 8의 펩티드를 투여한 마우스는 9일까지 주변 글루코스의 유의한 감소를 나타냈다 (-72 mg/dL, **p<0.01 대 비히클, 2원 분산분석). 9 nmol/kg의 서열식별번호: 7 또는 9의 펩티드를 투여한 마우스는 9일간의 투여 후에 주변 글루코스에서 유의한 변화를 보이지 않았다.

본 발명은 설명된 실시양태를 참조하여 본원에 기재되었지만, 본 발명은 그에 제한되지 않는다는 것을 이해하여야 한다. 본원의 교시 내용에 접근하는 관련 기술분야의 통상의 기술자는 본 발명의 범위 내에서 추가의 수정 및 실시양태를 인식할 것이다. 따라서, 본 발명은 여기에 첨부된 청구범위에 의해서만 제한된다.

SEQUENCE LISTING <110> Merck Sharp & Dohme Corp. Bianchi, Elisabetta Carrington, Paul E Deng, Qiaolin Nargund, Ravi Orvieto, Federica Palani, Anandan Pessi, Antonello Tucjer, Thomas J Wu, Chengwei <120> CO-AGONISTS OF THE GLUCAGON AND GLP-1 RECEPTORS <130> 23848 <150> 62/068,157 <151> 2014-10-24 <150> 62/208,869 <151> 2015-08-24 <160> 35 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 29 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 His Ser Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Ser 1 5 10 15 Arg Arg Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Met Asn Thr 20 25 <210> 2 <211> 30 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg 20 25 30 <210> 3 <211> 37 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 His Ser Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Ser 1 5 10 15 Arg Arg Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Met Asn Thr Lys Arg Asn 20 25 30 Arg Asn Asn Ile Ala 35 <210> 4 <211> 39 <212> PRT <213> Heloderma suspectum <400> 4 His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu 1 5 10 15 Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser 20 25 30 Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser 35 <210> 5 <211> 33 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 5 His Ala Asp Gly Ser Phe Ser Asp Glu Met Asn Thr Ile Leu Asp Asn 1 5 10 15 Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Asn Trp Leu Ile Gln Thr Lys Ile Thr 20 25 30 Asp <210> 6 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist Peptide 1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via a gamme-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 6 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Ala 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 7 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via a gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 7 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Val 1 5 10 15 Arg Arg Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 8 <211> 29 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via a gamma-Glue gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 8 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Val 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 9 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Co-agonist peptide 4 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> misc_feature <222> (16)..(16) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (27)..(27) <223> Xaa = noreleucine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 9 His Xaa Val Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Xaa 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Xaa Asp Thr 20 25 <210> 10 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 5 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 10 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Ala 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 11 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 6 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 11 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 12 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 7 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> N-terminal acetyl group <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 12 His Ala Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 13 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 8 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 13 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Glu Ala 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 14 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 9 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa = p-fluoro phenylalanine (pFF) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 14 His Xaa Gln Gly Thr Xaa Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 15 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 10 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (27)..(27) <223> Xaa = methionine sulfone <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 15 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Xaa Asp Thr 20 25 <210> 16 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 11 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 16 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Leu Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 17 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 12 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa = para-aminomethyl phenylalanine (pAF) conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 17 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Xaa Ser Lys Tyr Leu Asp Ala 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 18 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 13 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = 1-amino-1-cyclobutane carboxylate <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 18 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 19 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 14 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa = threo-beta-phenylalanine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glue spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amide <400> 19 His Xaa Gln Gly Thr Xaa Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 20 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 15 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Optional N-terminal acetyl group <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine, L-Alanine, aib, or 1-amino-cyclobutane carboylix acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa = L-Phenylalanine, p-fluoro phenylalanine, or threo-beta-phenylalanine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu spacer or Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa = Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu spacer, Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer, or pAF conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (12)..(12) <223> Xaa = L-Lysine or L-Leucine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (15)..(15) <223> Xaa = L-Glutamic acid, L-Leucine, or L-Aspartic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> Xaa =aib, L-Alanine, L-Glutamic acid, or L-Valine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (18)..(18) <223> Xaa = L-Alanine or L-Arginine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (27)..(27) <223> Xaa = L-Leucine, methionine sulfone, or L-norleucine (Nle) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 20 His Xaa Gln Gly Thr Xaa Thr Ser Asp Xaa Ser Xaa Tyr Leu Xaa Xaa 1 5 10 15 Arg Xaa Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Xaa Asp Thr 20 25 <210> 21 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Comparative peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> C-terminal amidation <400> 21 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 22 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> C0-agonist peptide 16 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 22 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Ala 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 23 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 17 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 23 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Val 1 5 10 15 Arg Arg Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 24 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 18 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 24 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Val 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 25 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 19 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (aib) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (aib) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (27)..(27) <223> Xaa = L-norleucine (Nle) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 25 His Xaa Val Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Xaa 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Xaa Asp Thr 20 25 <210> 26 <211> 29 <212> PRT <213> artificial <220> <223> Co-agonist peptide 20 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 26 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Ala 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 27 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 21 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 27 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 28 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 22 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> N-terminal acetyl group <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 28 His Ala Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 29 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 23 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optioanl C-terminal amide or ester <400> 29 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Glu Ala 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 30 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 24 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa = p-fluoro phenylalanine (pFF) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 30 His Xaa Gln Gly Thr Xaa Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 31 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 25 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma--Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (27)..(27) <223> Xaa = methionine sulfone <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 31 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Xaa Asp Thr 20 25 <210> 32 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 26 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 32 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Leu Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 33 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> C0oagonist peptide 27 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa = para-aminomethyl phenylalanine 9pAF) conjugaed to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 33 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Xaa Ser Lys Tyr Leu Asp Ala 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 34 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 28 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = 1-amino-1-cyclobutane carboxylic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 34 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25 <210> 35 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Co-agonist peptide 29 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Serine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa = threo-beta-phenylserine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Lysine conjugated to C16 via gamma-Glu gamma-Glu spacer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> Optional C-terminal amide or ester <400> 35 His Xaa Gln Gly Thr Xaa Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr 20 25

Claims

하기 아미노산 서열을 포함하는 펩티드.
HX₂QGTX₆TSDX₁₀SX₁₂YLX₁₅X₁₆RX₁₈AQDFVQWLX₂₇DT (서열식별번호: 20)
여기서 X₂는 D-세린, L-알라닌, α-아미노이소부티르산 (Aib), 또는 1-아미노-시클로부탄 카르복실산이고;
X₆은 L-페닐알라닌, 파라-플루오로 페닐알라닌 또는 트레오-β-페닐세린이고;
X₁₀은 L-리신 또는 파라-아미노메틸 페닐알라닌이고;
X₁₂는 L-리신 또는 L-류신이고;
X₁₅는 L-글루탐산, L-류신, 또는 L-아스파르트산이고;
X₁₆은 L-알라닌, Aib, L-글루탐산, 또는 L-발린이고;
X₁₈은 L-알라닌 또는 L-아르기닌이고;
X₂₇은 L-류신, 메티오닌 술폰, 또는 L-노르류신이고;
위치 10에서의 아미노산은 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합되고;
펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는다.
제1항에 있어서, 서열식별번호: 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 또는 19의 아미노산 서열을 갖는 펩티드.
제1항에 있어서, 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는 펩티드.
제1항에 있어서, 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 0.88, 0.89, 0.90, 0.91, 0.92, 0.93, 0.94, 0.95, 0.96, 0.97, 0.98, 0.99, 1.00, 1.01, 1.02, 1.03, 1.04, 1.05, 1.06, 1.07, 1.08, 1.09, 또는 1.10의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는 펩티드.
하기 아미노산 서열을 갖는 펩티드 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물.
HX₂QGTX₆TSDX₁₀SX₁₂YLX₁₅X₁₆RX₁₈AQDFVQWLX₂₇DT (서열식별번호: 20)
여기서 X₂는 D-세린, L-알라닌, α-아미노이소부티르산 (Aib), 또는 1-아미노-시클로부탄 카르복실산이고;
X₆은 L-페닐알라닌, 파라-플루오로 페닐알라닌 또는 트레오-β-페닐세린이고;
X₁₀은 L-리신 또는 파라-아미노메틸 페닐알라닌이고;
X₁₂는 L-리신 또는 L-류신이고;
X₁₅는 L-글루탐산, L-류신, 또는 L-아스파르트산이고;
X₁₆은 L-알라닌, Aib, L-글루탐산, 또는 L-발린이고;
X₁₈은 L-알라닌 또는 L-아르기닌이고;
X₂₇은 L-류신, 메티오닌 술폰, 또는 L-노르류신이고;
위치 10에서의 아미노산은 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합되고;
펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되;
단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는다.
제5항에 있어서, 펩티드가 서열식별번호: 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 또는 19의 아미노산 서열을 갖는 것인 조성물.
제5항에 있어서, 펩티드가 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는 것인 조성물.
제5항에 있어서, 펩티드가 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 0.88, 0.89, 0.90, 0.91, 0.92, 0.93, 0.94, 0.95, 0.96, 0.97, 0.98, 0.99, 1.00, 1.01, 1.02, 1.03, 1.04, 1.05, 1.06, 1.07, 1.08, 1.09, 또는 1.10의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는 것인 조성물.
서열식별번호: 1에 나타낸 아미노산 서열을 가지되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 포함하는 펩티드이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하는, 펩티드.
제9항에 있어서, 위치 16에서의 세린이 L-알라닌으로 대체된 것인 펩티드.
제9항에 있어서, 위치 18에서의 아르기닌이 L-알라닌으로 대체된 것인 펩티드.
제9항에 있어서, 위치 27에서의 메티오닌이 L-류신으로 대체된 것인 펩티드.
제9항에 있어서, 위치 28에서의 아스파라긴이 L-아스파르트산으로 대체된 것인 펩티드.
제9항에 있어서, 위치 16에서의 세린이 L-알라닌으로 대체되고, 위치 18에서의 아르기닌이 L-알라닌으로 대체되고, 위치 27에서의 메티오닌이 L-류신으로 대체되고, 위치 28에서의 아스파라긴이 L-아스파르트산으로 대체된 것인 펩티드.
(i) 서열식별번호: 1에 나타낸 아미노산 서열을 가지되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 포함하는 펩티드, 및 (ii) 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하는, 조성물.
제15항에 있어서, 펩티드의 위치 16에서의 세린이 L-알라닌으로 대체된 것인 조성물.
제15항에 있어서, 펩티드의 위치 18에서의 아르기닌이 L-알라닌으로 대체된 것인 조성물.
제15항에 있어서, 펩티드의 위치 27에서의 메티오닌이 L-류신으로 대체된 것인 조성물.
제15항에 있어서, 펩티드의 위치 28에서의 아스파라긴이 L-아스파르트산으로 대체된 것인 조성물.
제15항에 있어서, 펩티드의 위치 16에서의 세린이 L-알라닌으로 대체되고, 펩티드의 위치 18에서의 아르기닌이 L-알라닌으로 대체되고, 펩티드의 위치 27에서의 메티오닌이 L-류신으로 대체되고, 펩티드의 위치 28에서의 아스파라긴이 L-아스파르트산으로 대체된 것인 조성물.
대사성 질환을 가진 환자 또는 개체에게 유효량의 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제9항, 제10항, 제11항, 제12항, 제13항, 또는 제14항의 펩티드를 투여하여 상기 환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하는 것을 포함하는, 대사성 질환을 가진 환자 또는 개체를 치료하는 방법.
제21항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 방법.
대사성 질환 환자 또는 개체에게 유효량의 제5항, 제6항, 제7항, 제8항, 제15항, 제16항, 제17항, 제18항, 제19항, 또는 제20항의 조성물을 투여하여 상기 환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하는 것을 포함하는, 대사성 질환 환자 또는 개체를 치료하는 방법.
제23항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 방법.
제22항 또는 제24항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 방법.
대사성 질환을 치료하기 위한 의약을 제조하기 위한 제1항, 제2항, 제3항, 또는 제4항의 펩티드의 용도.
제26항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제27항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
대사성 질환을 치료하기 위한 의약을 제조하기 위한, 제5항, 제6항, 제7항, 또는 제8항의 조성물의 용도.
제29항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제30항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
대사성 질환을 치료하기 위한 의약을 제조하기 위한, 제9항, 제10항, 제11항, 제12항, 제13항, 또는 제14항의 펩티드의 용도.
제32항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제33항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
대사성 질환을 치료하기 위한 의약을 제조하기 위한, 제15항, 제16항, 제17항, 제18항, 제19항, 또는 제20항의 조성물의 용도.
제35항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제36항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하기 위해 환자 또는 개체에게 유효량의, 제5항, 제6항, 제7항, 제8항, 제15항, 제16항, 제17항, 제18항, 제19항, 또는 제20항의 펩티드를 포함하는 조성물을 투여하는 것 및 환자 또는 개체에게 유효량의, 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하는 방법.
제38항에 있어서, 펩티드를 포함하는 조성물을 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물을 투여하기 전 시점에 투여하는 방법.
제38항에 있어서, 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물을 펩티드를 포함하는 조성물을 투여하기 전 시점에 투여하는 방법.
제38항에 있어서, 펩티드를 포함하는 조성물을 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물을 투여하는 것과 동시에 투여하는 방법.
제38항에 있어서, 인슐린 유사체가 인슐린 데테미르, 인슐린 글라르긴, 인슐린 레베미르, 인슐린 글루리신, 또는 인슐린 리스프로인 방법.
제38항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제43항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제9항, 제10항, 제11항, 제12항, 제13항, 또는 제14항의 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물.
대사성 질환을 치료하기 위한, 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제9항, 제10항, 제11항, 제12항, 제13항, 또는 제14항의 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 용도.
제46항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제47항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
대사성 질환을 치료하기 위한 위한 의약을 제조하기 위한, 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제9항, 제10항, 제11항, 제12항, 제13항, 또는 제14항의 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 용도.
제49항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제50항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
하기 아미노산 서열로 이루어진 펩티드.
HX₂QGTX₆TSDX₁₀SX₁₂YLX₁₅X₁₆RX₁₈AQDFVQWLX₂₇DT (서열식별번호: 20)
여기서 X₂는 D-세린, L-알라닌, α-아미노이소부티르산 (Aib), 또는 1-아미노-시클로부탄 카르복실산이고;
X₆은 L-페닐알라닌, 파라-플루오로 페닐알라닌 또는 트레오-β-페닐세린이고;
X₁₀은 L-리신 또는 파라-아미노메틸 페닐알라닌이고;
X₁₂는 L-리신 또는 L-류신이고;
X₁₅는 L-글루탐산, L-류신, 또는 L-아스파르트산이고;
X₁₆은 L-알라닌, Aib, L-글루탐산, 또는 L-발린이고;
X₁₈은 L-알라닌 또는 L-아르기닌이고;
X₂₇은 L-류신, 메티오닌 술폰, 또는 L-노르류신이고;
위치 10에서의 아미노산은 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합되고; 그리고,
펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되; 단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는다.
제52항에 있어서, 서열식별번호: 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 또는 19의 아미노산 서열을 갖는 펩티드.
제52항에 있어서, 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는 펩티드.
제52항에 있어서, 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 0.88, 0.89, 0.90, 0.91, 0.92, 0.93, 0.94, 0.95, 0.96, 0.97, 0.98, 0.99, 1.00, 1.01, 1.02, 1.03, 1.04, 1.05, 1.06, 1.07, 1.08, 1.09, 또는 1.10의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는 펩티드.
하기 아미노산 서열을 갖는 펩티드 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물.
HX₂QGTX₆TSDX₁₀SX₁₂YLX₁₅X₁₆RX₁₈AQDFVQWLX₂₇DT (서열식별번호: 20)
여기서 X₂는 D-세린, L-알라닌, α-아미노이소부티르산 (Aib), 또는 1-아미노-시클로부탄 카르복실산이고;
X₆은 L-페닐알라닌, 파라-플루오로 페닐알라닌 또는 트레오-β-페닐세린이고;
X₁₀은 L-리신 또는 파라-아미노메틸 페닐알라닌이고;
X₁₂는 L-리신 또는 L-류신이고;
X₁₅는 L-글루탐산, L-류신, 또는 L-아스파르트산이고;
X₁₆은 L-알라닌, Aib, L-글루탐산, 또는 L-발린이고;
X₁₈은 L-알라닌 또는 L-아르기닌이고;
X₂₇은 L-류신, 메티오닌 술폰, 또는 L-노르류신이고;
위치 10에서의 아미노산은 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합되고;
펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하되;
단, 펩티드는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 갖지 않는다.
제56항에 있어서, 펩티드가 서열식별번호: 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 또는 19의 아미노산 서열을 갖는 것인 조성물.
제56항에 있어서, 펩티드가 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는 것인 조성물.
제56항에 있어서, 펩티드가 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 0.88, 0.89, 0.90, 0.91, 0.92, 0.93, 0.94, 0.95, 0.96, 0.97, 0.98, 0.99, 1.00, 1.01, 1.02, 1.03, 1.04, 1.05, 1.06, 1.07, 1.08, 1.09, 또는 1.10의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖는 것인 조성물.
서열식별번호: 1에 나타낸 아미노산 서열을 가지되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 포함하는 펩티드이며; 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하는, 펩티드.
제60항에 있어서, 위치 16에서의 세린이 L-알라닌으로 대체된 것인 펩티드.
제60항에 있어서, 위치 18에서의 아르기닌이 L-알라닌으로 대체된 것인 펩티드.
제60항에 있어서, 위치 27에서의 메티오닌이 L-류신으로 대체된 것인 펩티드.
제60항에 있어서, 위치 28에서의 아스파라긴이 L-아스파르트산으로 대체된 것인 펩티드.
제60항에 있어서, 위치 16에서의 세린이 L-알라닌으로 대체되고, 위치 18에서의 아르기닌이 L-알라닌으로 대체되고, 위치 27에서의 메티오닌이 L-류신으로 대체되고, 위치 28에서의 아스파라긴이 L-아스파르트산으로 대체된 것인 펩티드.
서열식별번호: 1에 나타낸 아미노산 서열을 가지되, 여기서 위치 2에서의 L-세린은 D-세린으로 대체되고; 위치 10에서의 티로신은 (i) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 L-리신 또는 (ii) 감마-글루탐산 (γE) 스페이서 또는 감마-글루탐산-감마-글루탐산 디펩티드 (γEγE) 스페이서 중 어느 하나에 의해 팔미토일 기에 접합된 파라-아미노메틸 페닐알라닌으로 대체된 천연 인간 글루카곤의 아미노산 서열; 및 최대 6개의 추가의 아미노산 치환을 포함하는 펩티드, 및 (ii) 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물이며, 여기서 펩티드는 글루카곤 수용체 및 GLP-1 수용체의 공-효능제이고 약 0.88 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.25, 약 0.90 내지 약 1.10, 약 0.90 내지 약 1.00, 또는 약 1.0±0.12의 GLP-1 수용체에서의 EC₅₀에 대한 글루카곤 수용체에서의 EC₅₀의 비를 갖고, 여기서 펩티드는 임의로, 존재할 경우, 펩티드의 C-말단 카르복시 기에 연결되는 보호 기를 포함하는, 조성물.
제66항에 있어서, 펩티드의 위치 16에서의 세린이 L-알라닌으로 대체된 것인 조성물.
제66항에 있어서, 펩티드의 위치 18에서의 아르기닌이 L-알라닌으로 대체된 것인 조성물.
제66항에 있어서, 펩티드의 위치 27에서의 메티오닌이 L-류신으로 대체된 것인 조성물.
제66항에 있어서, 펩티드의 위치 28에서의 아스파라긴이 L-아스파르트산으로 대체된 것인 조성물.
제66항에 있어서, 펩티드의 위치 16에서의 세린이 L-알라닌으로 대체되고, 펩티드의 위치 18에서의 아르기닌이 L-알라닌으로 대체되고, 펩티드의 위치 27에서의 메티오닌 L-류신으로 대체되고, 펩티드의 위치 28에서의 아스파라긴이 L-아스파르트산으로 대체된 것인 조성물.
대사성 질환을 가진 환자 또는 개체에게 유효량의 제52항, 제53항, 제54항, 제55항, 제56항, 제60항, 제61항, 제62항, 제63항, 제64항, 또는 제65항의 펩티드를 투여하여 상기 환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하는 것을 포함하는, 대사성 질환을 가진 환자 또는 개체를 치료하는 방법.
제72항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 방법.
대사성 질환 환자 또는 개체에게 유효량의 제56항, 제57항, 제58항, 제59항, 제66항, 제67항, 제68항, 제69항, 제70항, 또는 제71항의 조성물을 투여하여 상기 환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하는 것을 포함하는, 대사성 질환 환자 또는 개체를 치료하는 방법.
제74항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 방법.
제72항 또는 제74항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 방법.
대사성 질환을 치료하기 위한 의약을 제조하기 위한, 제52항, 제53항, 제54항, 또는 제55항의 펩티드의 용도.
제77항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제78항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
대사성 질환을 치료하기 위한 의약을 제조하기 위한, 제56항, 제57항, 제58항, 또는 제59항의 조성물의 용도.
제80항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제81항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
대사성 질환을 치료하기 위한 의약을 제조하기 위한, 제60항, 제61항, 제62항, 제63항, 제64항, 또는 제65항의 펩티드의 용도.
제83항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제84항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
대사성 질환을 치료하기 위한 의약을 제조하기 위한, 제66항, 제67항, 제68항, 제69항, 제70항, 또는 제71항의 조성물의 용도.
제86항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제87항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하기 위해 환자 또는 개체에게 유효량의, 제56항, 제57항, 제58항, 제59항, 제66항, 제67항, 제68항, 제69항, 제70항, 또는 제71항의 펩티드를 포함하는 조성물을 투여하는 것 및 환자 또는 개체에게 유효량의, 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 환자 또는 개체에서 대사성 질환을 치료하는 방법.
제89항에 있어서, 펩티드를 포함하는 조성물을 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물을 투여하기 전 시점에 투여하는 방법.
제89항에 있어서, 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물을 펩티드를 포함하는 조성물을 투여하기 전 시점에 투여하는 방법.
제89항에 있어서, 펩티드를 포함하는 조성물을 인슐린 또는 인슐린 유사체를 포함하는 조성물을 투여하는 것과 동시에 투여하는 방법.
제89항에 있어서, 인슐린 유사체가 인슐린 데테미르, 인슐린 글라르긴, 인슐린 레베미르, 인슐린 글루리신, 또는 인슐린 리스프로인 방법.
제89항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제94항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
제52항, 제53항, 제54항, 제55항, 제56항, 제60항, 제61항, 제62항, 제63항, 제64항, 또는 제65항의 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물.
대사성 질환을 치료하기 위한, 제52항, 제53항, 제54항, 제55항, 제56항, 제60항, 제61항, 제62항, 제63항, 제64항, 또는 제65항의 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 용도.
제97항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제98항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.
대사성 질환을 치료하기 위한 위한 의약을 제조하기 위한, 제52항, 제53항, 제54항, 제55항, 제56항, 제60항, 제61항, 제62항, 제63항, 제64항, 또는 제65항의 펩티드; 인슐린 또는 인슐린 유사체; 및, 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 용도.
제100항에 있어서, 대사성 질환이 당뇨병, 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD), 비알콜성 지방간염 (NASH), 또는 비만인 용도.
제101항에 있어서, 당뇨병이 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 또는 임신성 당뇨병인 용도.