KR20170063750A - 면역손상된 대상체의 백신 접종 - Google Patents

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Abstract

본원에는 스타틴 요법을 받고 있는 개체를 포함하여 면역손상된 개체에서 백신에 대한 면역 반응을 향상시키기 위한 방법이 개시된다. 관련된 제품들이 또한 제공된다.

Description

면역손상된 대상체의 백신 접종{VACCINATION OF IMMUNOCOMPROMISED SUBJECTS}
본 발명은 일반적으로 약물치료에 의해 또는 다른 이유로 면역손상된 개체에서 면역 반응을 향상시키는 것에 관한 것이다.
대상체에서 약물 또는 다른 이유에 의해 유도된 면역억제는 대상체의 효과적인 백신 접종을 이루는데 장애물이다. 개체는 예를 들면 면역억제와 관련된 질환 또는 장애, 연령 (예컨대 고령), 및 개체의 면역 반응을 억제하거나 그렇지 않으면 간섭하는 약물치료중이거나 의료적 과정이 진행중인 것을 포함하여, 다양한 이유로 면역손상될 수 있다는 것을 주지하는 것이 중요하다.
스타틴류, 비-스테로이드성 항-염증성 약물 (NSAID), 인터페론, 및 클로자핀 및 할로페리돌과 같은 특정 항정신병 약물을 포함하여, 특정 약물은 환자에게서 면역조절을 유발하는 원인인 것으로 나타났다. 그런 면역조절 효과는 환자에서 불리한 또는 원치 않는 면역억제, 특히 장기간 치료 양생법에 대한 면역억제를 포함한다.
스타틴은 효소 HMG-CoA 환원효소를 억제함으로써 콜레스테롤 수준을 낮추기 위하여 사용된 약물의 부류이다. 상승된 콜레스테롤 수준과 심혈관 질환의 위험 사이의 연관성 때문에 및 스타틴이 이런 위험을 낮출 수 있는 것을 보여주는 연구들 때문에, 스타틴은 대다수의 개체, 대부분 노인들에게 제공되었다 (Lewington S, Whitlock G, Clarke R, Sherliker P, Emberson J, Halsey J, Qizilbash N, Peto R, Collins R. (2007) "Blood cholesterol and vascular mortality by age, sex, and blood pressure: a meta-analysis of individual data from 61 prospective studies with 55,000 vascular deaths." Lancet 370 (9602):1829-39). 비록 스타틴 치료법의 일차 목표가 콜레스테롤을 낮추는 것이었지만, 이 약물 부류는 면역조절 및 항-염증 효과를 포함한 다른 효과를 가지는 것이 인지되었다 (Jain, M. K., & Ridker, P. M. (2005) "Anti-inflammatory effects of statins: clinical evidence and basic mechanisms." Nature Reviews Drug Discovery, 4(12):977-987).
노인 및 비-노인 집단 둘 다를 포함하여, 개체에 대한 스타틴 치료법의 이차 효과는, 대부분의 연구가 스타틴이 면역조절 효과를 유도할 수 있고 그런 효과가 복잡한 것으로 결론이 내려졌지만, 문헌에서는 다소 논란이 되어 왔다.
비-스테로이드성 항-염증성 약물 (NSAID)은 진통 (통증-가라앉힘) 및 해열 (열감소) 효과를 제공하고, 더 많은 용량으로는 항-염증 효과를 제공하는 약물의 부류이다. NSAID는 때로 또한 비스테로이드성 항-염증제/진통제 (NSAIA) 또는 비스테로이드성 항-염증 약물 (NSAIM)로 언급된다. 통증 관리의 중요성으로 인해, NSAID의 사용은 최근 수십년 동안 극적으로 증가되었다. 그러나, 모든 NSAID는 면역 반응의 잠재적으로 원치 않는 억제를 포함하여, 특정한 부작용에 대한 가능성을 갖는다.
인터페론 (IFN)은 병원체, 예컨대 바이러스, 박테리아, 기생충 또는 종양 세포의 존재에 대한 반응으로 숙주 세포에 의해 만들어지고 방출되는 신호화 단백질 그룹이다. 전형적인 시나리오에서, 바이러스-감염 세포는 인접한 세포들이 항-바이러스 방어를 고조시키는 것을 유발하는 인터페론을 방출할 것이다. 인터페론 베타-1a 및 인터페론 베타-1b는 다발성 경색, 자가면역 질환을 치료하고 제어하기 위해 사용된다. 이 치료는 재발-경감 다발성 경색에서의 발작을 감소시키고 이차적인 점진성 다발성 경색의 질환 진행 및 활성의 둔화에 효과적이다.
인터페론 치료법을 받은 환자들에 의해 보고된 가장 빈번한 역효과는 독감-유사 증상: 체온의 증가, 아픈 느낌, 피로, 두통, 근육통, 경련, 현기증, 머리숱이 적어짐 및 우울증이다. 주사 지점 상의 홍반, 통증 및 딱딱함이 또한 빈번하게 관찰된다. IFN 치료법은, 특히 호중구감소증을 통한 면역억제를 유발하고 흔치 않은 방식으로 나타나는 몇몇 감염을 초래할 수 있다. IFN 치료법은 또한 바이러스 감염, 예컨대 인플루엔자에 이어 이차 감염에 대한 증가된 민감성을 나타낼 수 있다. 그런 경우에, 일차 병원체 (예컨대 인플루엔자 바이러스) 및 이차 병원체 (예컨대 박테리아 감염)로 공동-감염된 환자는 이차 감염으로부터 합병증을 발달시킬 위험이 상승될 수 있다.
특정 항정신병 화합물은 대상체에서 면역억제를 포함하여 부작용을 유발하는 것으로 보고되었다.
인터페론 치료법은 몇몇 암에 대한 치료로서 사용된다 (화학요법 및 방사선요법과 함께) [26]. 이 치료는 혈액학적 악성종양; 겸상 적혈구 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 결절성 림프종, 및 피부의 T-세포 림프종을 포함하여 백혈병 및 림프종의 치료에 사용될 수 있다 [26]. 재발하는 흑색종에 걸린 환자들은 재조합 IFN-α2b를 받는다 [27]. B형 간염 및 C형 간염 둘 다 IFN-α로 처리되고, 자주 다른 항바이러스성 약물과 함께 사용된다 [28][29]. 인터페론으로 치료된 사람들 중 일부는 지속적인 바이러스학적 반응을 나타내고 간염 바이러스를 제거할 수 있다. 가장 해로운 스트레인-C형 간염 유전형 I 바이러스-은 현재 인터페론-α, 리바비린 및 최근에 승인된 프로테아제 억제제, 예컨대 2011년 5월에 승인된 텔라프레비어 (Telaprevir) (Incivek), 2011년 5월에 승인된 보세프레비어 (Boceprevir) (Victrelis) 또는 2013년 12월에 승인된 뉴클레오티드 유사체 중합효소 억제제 소포스부비어 (Sofosbuvir) (Sovaldi)의 치료기준 치료로 60 내지 80%의 성공률로 치료될 수 있다 [30]. 치료를 받은 환자들의 생검은 간 손상 및 간경변의 감소를 나타낸다. 일부 증거는 감염 후 즉시 인터페론을 제공하는 것은, 비록 신체적 증상이 C형 간염 감염 초기에는 드물기 때문에 감염의 조기 진단이 어렵지만, 만성 C형 간염을 예방할 수 있다는 것을 보여준다. IFN에 의한 만성 C형 간염의 제어는 감소된 간세포 암종과도 관련된다 [31].
인터페론 치료는 단순포진 바이러스 상피 각막염에 걸린 개체들에서 평가되었다. 국소적인 인터페론 치료법은, 특히 고농도로 사용될 때 효과적인 치료인 것으로 나타났다 [32]. 단독으로 또는 괴사조직제거와 함께 사용되는 인터페론은 뉴클레오시드 항바이러스제로서 효과적인 것으로 나타난다 [32]. 인터페론과 다른 뉴클레오시드 항바이러스제의 조합은 치유 과정에 박차를 가할 수 있다 [32].
전신적 치료법에 사용될 때, IFN은 대부분 근육내 주사에 의해 투여된다. 근육에 또는 피부 아래에의 IFN의 주사는 일반적으로 잘 허용된다. 가장 빈번한 역효과는 독감-유사 증상: 체온의 증가, 아픈 느낌, 피로, 두통, 근육통, 경련, 현기증, 머리숱이 적어짐 및 우울증이다. 주사 지점 상의 홍반, 통증 및 딱딱함 또한 빈번하게 관찰된다. IFN 치료법은, 특히 호중구감소증을 통한 면역억제를 유발하고 흔치 않은 방식으로 나타나는 몇몇 감염을 초래할 수 있다 [33].
오늘날까지, 이들 약물의 약물동역학과 그것들이 다양한 측면의 생체 내 면역 감염에 나타내는 조절성 효과 사이의 상호작용 및 그런 효과가 환자의 전체적인 건강 관리에 어떻게 고려되어야 하는지에 대해 합의된 것은 없었다.
현재 특정 백신 조성물 및/또는 백신 양생법이 면역체계가 손상된 개체에서 바람직한 면역반응을 향상시키기 위해 효과적으로 사용될 수 있는 것으로 발견되었다. 특히, 본 발명은 특정 치료법, 예컨대 스타틴 치료법에 대한 환자 집단이 백신에 대한 감소된 면역원성을 나타내고, 애주번트 첨가된 백신 (애주번트ed vaccine)(예컨대 수-중-유 에멀션으로 제형된 백신) 및/또는 고용량 항원의 사용이 그런 백신에 대한 면역반응을 회복시키거나 심지어 향상시킬 수 있다는 인식을 포함한다.
광범위한 의미로, 본 발명은 면역체계가 하나 이상의 이유로 손상되어 있는 대상체의 면역화를 기술한다. 따라서, 발명은 면역조절제 치료법 (예컨대 약물치료), 예컨대 스타틴 치료법, NSAID 치료법, 인터페론 치료법, 및/또는 항정신병약 치료법의 수령체를 포함하여, 특정 표적 집단을, (i) 애주번트 첨가된 및/또는 (ii) 고용량의 항원을 함유하는 백신 조성물을 유효량으로 대상체에 투여하여서, 애주번트가 첨가되지 않았거나 표준-용량의 동등한 백신과 비교하여, 대상체가 백신에 함유된 동일한 항원(들)에 대한 더 좋은 면역반응을 유도하게 됨으로써, 면역화시키는 방법을 제공한다. 발명에 따르면, 본원에 기술된 방법은 그렇지 않으면 불리한 면역억제를 유발하는 약물치료로 인해 백신에 대한 바람직한 면역반응을 생성하지 못하는 대상체들에게 특히 유익한 면역 보호를 제공할 수 있다.
따라서, 본 발명은 "위험한" 것으로 여겨지는 대상체의 백신 접종에 적합하다. 일부 구체예에서, 위험 기준은, 한정하는 것은 아니지만, 다음 중 임의의 확인된 병력이 있는 개체를 포함한다: 내분비 장애, 만성 심혈관 질환, 만성 폐 질환, 만성 신장 또는 간 질환, 신경학적 및 신경발달학적 상태, 혈액 장애, 대사 장애, 약해진 면역체계, 비만, 장기간 아스피린 치료법의 수용 및/또는 상기 열거된 치료법들 중 임의의 것. 일부 구체예에서, 위험 대상체는 일차 감염 후에 이차 감염을 발달시키기 더 쉬운 것과 공동-감염 (즉 일차 및 이차 감염)으로 인해 합병증을 발달시킬 고위험에 있는 것으로 특성화된다. 특정 이론에 의해 구속되는 것을 바라지는 않으나, 일차 감염, 예컨대 인플루엔자 감염은 사람을 면역억제로 인해 이차 감염에 대해 더 취약하게 만들 수 있는 것으로 여겨진다. 그 결과로서, 대상체는 비정형적으로 심각한 이차 감염을 발달시킬 수 있다. 일부 구체예에서, 이차 감염은 박테리아 감염, 예컨대 호흡기 감염, 피부 감염 등이다. 그러므로 발명은 그런 면역억제 효과를 애쥬번트, 고 용량 항원 또는 그것들의 조합을 함유하고 있는 보호성 인플루엔자 백신의 사용에 의해 대응하는 것을 보조하고, 계속해서 대상체의 면역체계를 이차 감염에 대해 보다 효과적으로 맞서 싸울 수 있게 북돋울 수 있다. 그러므로, 일부 구체예에서, 위험 대상체에서 인플루엔자 감염에 대한 더 좋은 보호는 대상체가 이차 감염으로부터 합병증을 발달시킬 가능성을 더 적게 제공한다.
일부 구체예에서, 발명은 백신 항원(들)에 대한 보호성 면역 반응을 유도하기 위하여 위험 대상체에게 유효량으로 인플루엔자 백신을 투여하는 방법을 제공한다. 바람직하게는, 그런 인플루엔자 백신은 애주번트 첨가된 백신이다. 대상체가 다중 용량 (예컨대 시동 (priming) 용량 및 추가 (booster) 용량)의 인플루엔자 면역화를 받는 상황에서, 보조 인플루엔자 백신을 1회 용량 이상으로, 임의의 순서로 투여하는 것이 가능하다. 예를 들어, 시동 용량은 애주번트가 첨가되지 않을 수 있는 한편, 후속되는 추가 용량은 애주번트가 첨가될 수 있으며, 또는 그 역이다.
일부 구체예에서, 발명은 면역억제-유발 요법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법, 인터페론 요법, 항전신병 요법 등)을 받은 대상체에게 인플루에자 백신을 백신 항원(들)에 대한 보호 면역 반응을 유도하기에 효과적인 양으로 투여하는 방법을 제공한다. 바람직하게, 그런 인플루엔자 백신은 애주번트 첨가된 백신이다. 대상체가 다중 용량 (예컨대 시동 용량 및 추가 용량)의 인플루엔자 면역화를 받는 상황에서, 보조 인플루엔자 백신을 1회 용량 이상으로, 임의의 순서로 투여하는 것이 가능하다. 예를 들어, 시동 용량은 애주번트가 첨가되지 않을 수 있는 한편, 후속되는 추가 용량은 애주번트가 첨가될 수 있으며, 또는 그 역이다.
발명은 추가로 면역억제-유발 요법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법, 인터페론 요법, 항정신병 요법, 등)을 받는 중인 대상체를 포함하여, 대상체에서 면역 반응을 향상시키기 위한 방법에서 사용하기 위한 백신 조성물에 관련된다. 발명의 일부 구체예에서, 그런 백신 조성물은 애주번트와 함께 제형된다. 바람직한 애주번트는 수-중-유 에멀션-기반 애주번트, 예컨대 스쿠알렌을 포함하는 것을 포함한다. 추가로 또는 다르게는, 발명의 백신 조성물은 고-용량 항원, 표준-용량 항원 또는 저-용량 항원을 포함할 수 있다. 관련된 키트가 또한 기술된다.
발명은 또한 스타틴-관련 환자에게 독감 백신, 특히 스타틴-치료된 환자, 바람직하게는 합성 스타틴으로 치료된 환자에게 애주번트 첨가된 또는 고-용량 독감 백신을 제공한다. 일부 구체예에서, 환자는 65세 이상이다. 대체 구체예에서, 환자는 65세 아래지만 18세 이상이다 (즉 18세와 64세 사이).
발명은 스타틴-치료된 환자에서 사용하기 위한 독감 백신, 특히 스타틴-치료된 환자, 바람직하게는 합성 스타틴으로 치료된 환자에서 사용하기 위한 애주번트 첨가된 또는 고 용량 독감 백신을 포함한다. 일부 구체예에서, 환자는 65세 이상이다. 대체 구체예에서, 환자는 65세 아래지만 18세 이상이다 (즉 18세와 64세 사이).
발명은 추가로 위험 대상체, 예컨대 스타틴-치료된 환자에서 독감을 예방하기 위한 독감 백신, 특히 스타틴-치료된 환자, 바람직하게는 합성 스타틴으로 치료된 환자에서 독감을 예방하기 위한 애주번트 첨가된 또는 고 용량 독감 백신을 포함한다. 일부 구체예에서, 환자는 65세 이상이다. 대체 구체예에서, 환자는 65세 아래지만 18세 이상이다 (즉 18세와 64세 사이).
발명은 또한 의약으로서 사용하기 위한 발명의 조성물을 제공하고, 스타틴-치료된 대상체, 바람직하게는 합성 스타틴으로 치료된 환자에서 면역 반응을 불러일으키기 위한 의약의 제조를 위해 사용되는 발명의 조성물의 용도를 제공한다. 일부 구체예에서, 환자는 65세 이상이다. 대체 구체예에서, 환자는 65세 아래지만 18세 이상이다 (즉 18세와 64세 사이).
발명은 추가로 애주번트 첨가된 또는 고-용량 독감 백신의 제조 방법을 제공하는데, 그로써 다음 단계들이 수행된다: 독감 바이러스를 계란에서 또는 적합한 세포주에서 성장시키는 단계; 바이러스를 수확하고 정제하는 단계, 선택적으로 바이러슨 분열되고 항원들이 분리되며; 선택적으로 바이러스 또는 항원을 제형하고 최종 백신으로서 충전하는 단계, 그로써 백신은 스타틴-치료된 환자, 바람직하게는 합성 스타틴으로 치료된 환자에서 사용된다. 일부 구체예에서, 환자는 65세 이상이다. 대체 구체예에서, 환자는 65세 아래지만 18세 이상이다 (즉 18세와 64세 사이).
애주번트가 본원에서 독감 항원과 함께 사용될 때, 백신의 항원 성분 및 애주번트 성분은 사전혼합되거나, 또는 다르게는 최종-사용자/건강 돌봄 제공자에 의해 투여전에 혼합되기 위해 별도의 용기로 제공될 수 있다. 항원 성분 및 애주번트 성분은 동일한 생성 부위에서 또는 상이한 생성 부위에서 생성될 수 있다. 발명의 한 측면은 애주번트 성분과 함께 키트 안으로 제형 및/또는 패키징하는 데 사용하기 위한 항원 성분(들)의 용도이고, 이때 키트는 스타틴-치료된 환자, 바람직하게는 합성 스타틴으로 치료된 환자에서 사용하기 위한 것이다. 발명의 다른 측면은 위험 환자, 예컨대 스타틴-치료된 환자, 바람직하게는 합성 스타틴으로 치료된 환자에서 사용하기 하여 항원 성분과 함께 키트 안으로 제형 및/또는 패키징하는 데 사용하기 위한 애주번트 성분의 용도이다. 일부 구체예에서, 환자는 65세 이상이다. 대체 구체예에서, 환자는 65세 아래지만 18세 이상이다 (즉 18세와 64세 사이).
많은 인자들이 대상체에서 면역 기능의 하나 이상의 측면의 손상을 유발하여 대상체가 면역손상이 되도록 할 수 있다. 특적 의약, 예컨대 스타틴류, NSAID, 인터페론 및 항정신병약들이 원치 않는 면역 조절을 유발하는 것으로 알려져 있다. 본 발명의 맥락에서, 구절 "면역억제-유발 요법"은 원치 않는 면역억제 효과를 특징으로 하는 부작용과 관련된 의학적 개재 (intervention) 또는 치료를 나타낸다. 그런 요법의 비-제한적 실례는 스타틴 요법, NSAID 요법, 인터페론 요법 및 항정신병약 요법 등을 포함한다.
스타틴은 고콜레스테롤혈증을 치료하기 위해 사용된 약물 부류이고 심혈관 질환의 위험을 감소시키기 위하여 빈번하게 사용된다. 그러나, 스타틴은 스타틴 요법 중인 사람들에서, 인플루엔자 백신을 포함하여 백신 반응에 영향을 줄 수 있을 특정 면역조절 효과를 나타내는 것으로 보고되었다. 유사하게, 특정 상태를 치료하거나 완화시키기 위하여 광범위하게 투여된 다른 약물들 또한 면역억제성 부작용과 관련된다.
본원에서 추가로 상세하게 설명되는 것처럼, 스타틴 요법 중이거나 끝난 개체들로부터 얻어진 애주번트 첨가된 대 애주번트 첨가되지 않은 인플루엔자 백신의 면역원성 측정은, 스타틴 요법을 받지 않은 대조 개체들과 비교하여, 스타틴을 받은 개체들에서 스타틴의 유의미한 면역억제 효과를 나타냈다. 아래에서 추가로 입증되는 것과 같이 (아래의 실시예 단원 참조), 백신 면역 반응에 대한 스타틴의 이런 면역억제 효과는 합성 스타틴에 대한 개체에서 특히 극적이다. 이들 효과는 애주번트 첨가된 및 애주번트 첨가되지 않은 백신 그룹 둘 다에서 볼 수 있다. 그러나, 현저하게, 백신 반응에 대한 스타틴 요법의 네거티브 영향이 애주번트 첨가된 백신 및/또는 고-용량의 항원 또는 항원들의 사용에 의해 적어도 부분적으로 상쇄될 수 있다.
따라서, 발명은 면역체계가 손상된, 예컨대 면역억제된 또는 면역억제를 발달시킬 위험이 있는 대상체에서 백신에 대한 면역 반응을 향상시키기 위한 방법을 제공한다. 그런 방법은 (i) 애주번트 첨가되었거나, (ii)하나 이상의 고-용량 항원을 함유하고 있는 백신 조성물을 그런 대상체에게, 백신에 대한 그들의 면역 반응을 향상시키기에 효과적인 양으로 투여하는 것을 포함한다.
면역조절 치료법
본원에서 사용되는 "면역조절 치료법"은 환자들에서 면역 반응의 조절을 유발하는 임의의 의학적 개재, 예컨대 약물처리를 나타낸다. 그런 조절 효과는 면역억제를 포함하는데, 그것은 백신에 대한 감소된 면역반응을 유발하여 치료법의 수령체가 감염 또는 관련된 질환에 더 민감해지게 만들 수 있다. 면역조절 치료법의 실례는 스타틴, 비-스테로이드성 항-염증성 약물 (NSAID), 인터페론, 항정신병약 등이다.
스타틴
본원에서 사용되는 스타틴은 일반적으로 HMG-CoA 환원효소 억제제로서 알려져 있는 약물의 부류를 나타내고 또한 동등한 생물학적 활성 (즉 HMG-CoA 환원효소 활성을 나타내는 능력)을 가지는 다른 화합물들을 포함한다. 본 발명에서 언급된 스타틴은 비-합성적 (예컨대 발효-유도된 또는 자연적으로 발생하는)이거나 합성일 수 있다. 비-합성적 스타틴의 비-제한적 실례는 프라바스타틴, 심바스타틴, 로바스타틴 및 메바스타틴을 포함한다. 합성 스타틴의 비-제한적 실례는 플루바스타틴, 아토르바스타틴, 세리바스타틴, 로수바스타틴 및 피타바스타틴을 포함한다. 임의의 스타틴이 조합하여, 동시에 또는 별도로 그러나 서로와 조합하여 사용될 수 있다. 스타틴은 또한 적어도 하나의 스타틴 및 적어도 하나의 비-스타틴 화합물을 포함하는 조합 제형으로서 투여될 수 있다. 스타틴-함유 생성물의 실례로는, 한정하는 것은 아니지만, ADVICOR® (나이아신 연장-방출 및 로바스타틴), CADUET ® (암로디핀 베실레이트/아트로바스타틴 칼슘), VYTORIN® (심바스타틴 및 에제티미브) 및 SIMCOR® (심바스타틴 나이아신 연장된 방출)을 포함한다.
"스타틴 치료법"은 그러므로 스타틴 또는 스타틴들이 투여되는 특정 상태와 무관하게, 단독의 또는 임의의 조합으로 하나 이상의 스타틴을 포함하는 양생법을 나타낸다. 일부 구체예에서, 스타틴 치료법은 적어도 하나의 합성 스타틴을 포함한다.
NSAID
비스테로이드성 항-염증성 약물, 보통 약칭하여 NSAID는 진통 (통증-가라앉힘) 및 해열 (열-감소) 효과를 제공하며, 고용량일 때 항-염증 효과를 제공하는 약물의 부류이다. NSAID는 그것의 화학적 구조 또는 작용 메커니즘을 기반으로 분류될 수 있다. 전형적으로, 오래된 NSAID는 오래 전에 작용 메커니즘이 유도되는 것이 알려졌고 이런 이유로 화학적 구조 또는 기원에 의해 분류되었다. 다른 한편으로 더 새로운 물질이 자주 작용 메커니즘에 의해 분류된다.
NSAID의 비-제한적 실례는 다음을 포함한다: 살리실레이트 (예컨대 아스피린 (아세틸살리실산), 다이플루니살 (DolobidTM), 살사레이트 (DisalcidTM) 및 콜린 마그네슘 트라이살리실레이트 (TrilisateTM)); 프로피온산 유도체 (예컨대 이부프로펜, 덱시부프로펜, 나프록센, 페노프로펜, 케토프로펜, 덱스케토프로펜, 플루르비프로펜, 옥사프로진 및 록소프로펜); 아세트산 유도체 (예컨대 인도메타신, 톨메틴, 설린닥, 에토돌락, 케토롤락, 다이클로페낙, 아세클로페낙 및 나부메톤); 에놀산 (옥시캄) 유도체 (예컨대 피록시캄, 멜록시캄, 네톡시캄, 드록시캄, 로르녹시캄 및 아이속시캄); 안트라닐산 유도체 (페나메이트) (예컨대 메페남산, 메클로페탐산, 플루페남산 및 톨페남산); 선택적 COX-2 억제제 (콕십) (예컨대 셀레콕십, 로페콕십, 발데콕십, 루미라콕십, 에토리콕십 및 피로콕십); 설폰아닐리드 (예컨대 니메설리드) 및 기타, 예컨대 리코펠론, H-하르파가지드 및 라이신 클로닉시네이트.
인터페론
시판중인 입수 가능한 치료용 인터페론의 비-제한적 실례는 다음을 포함한다: 인터페론 알파 2a (예컨대 로페론 A); 인터페론 알파 2b (인트론 A/레리페론/유니페론); 인간 백혈구 인터페론-알파 (HuIFN-알파-Le) (Multiferon); 인터페론 베타 1a, 액체 형태 (Rebif); 인터페론 베타 1a, 동결건조 형태 (Avonex); 인터페론 베타 1a, 생물 속 (Iran) (Cinnovex); 인터페론 베타 1b (베타세론/베타페론); 인터페론 감마 1b (Actimmune); 페길화된 (PEGylated) 인터페론 알파 2a (Pegasys); 페길화된 인터페론 알파 2a (Egypt) (Reiferon Retard); 페길화된 인터페론 알파 2b (PegIntron); 및 페길화된 인터페론 알파 2b 플러스 리바비린 (Canada) (Pegetron).
항정신병약 및 항우울제
면역억제를 유발할 수 있는 항정신병약 및/또는 항우울제의 비-제한적 실례는 다음을 포함한다: 클로자핀, 할로페리돌, 뿐만 아니라 세로토닌 수용체 및/또는 도파민 수용체의 억제제. 추가의 실례는, 한정하는 것은 아니지만, 다음을 포함한다: SB-258719 (GSK로부터 입수 가능한 중성 5HT7R 길항체), SB-258741 ("AFZ"; GSK로부터 입수 가능한 부분적인 역 5HT7R 아고니스트), SB-269970 (GSK로부터 입수 가능한 왕성한 5HT7R 역 아고니스트), 리스페리돈 (D1 및 D2 도파민 수용체의 길항체 및 5HT7 세로토닌 수용체의 역 아고니스트; 또한 H1 및 H2 히스타민 수용체의 역 아고니스트), 세르틴돌 (D2, 5-HT2A, 5-HT2C, 5-HT6, 5-HT7, D3, a1에 결합함); 지프라시돈 (D2, 5-HT2A, 5-HT1A, 5-HT1D, 5-HT2C, 5-HT7, D3, a1, NRI, SRI에 결합함), 록사핀 (D2, 5-HT2A, 5-HT6, G-HT7, D1, D4, a1, M1, H1, NRI에 결합함); 조테핀 (D2, 5-HT2A, 5-HT2C, 5-HT6, 5-HT7, D1, D3, D4, a1, H1, NRI에 결합함); 클로자핀 (D2, 5-HT2A, 5-HT1A, 5-HT3, 5-HT6, 5-HT7, D1, D3, D4, a1, a2, M1, H1에 결합함); 올란자핀 (D2, 5-HT2A, 5-HT2C, 5-HT3, 5-HT6, D1, D3, D4, D5, a1, M1-5, H1에 결합함), 퀘티아핀 (D2, 5-HT2A, 5-HT6, 5-HT7, a1, a2, H1에 결합함); 프로메타진 (5HT2a/c 세포토닌 수용체 및 도파민 D2 수용체에 대한 약한 친화성 내지 중간 친화성을 가진 H1 히스타민 수용체의 강력한 길항체; 또한 Na+ 채널의 차단제). 특정 이온 채널 차단제 또한 적합할 수 있다. 실례로는, 한정하는 것은 아니지만, 다음을 포함한다: 지질 수송 및 대사에 포함된 전압-의존성 Na+ 채널 및 콜린에스테라제의 억제제 및 차단제, 예컨대 다이부카인 (부틴에스테라제 억제제); 전압-게이트 L-형 칼슘 채널의 억제제 및 차단제 (예컨대 니모디핀); 아프리딘과 같은 나트륨 채널의 억제제 및 차단제 (부류 1b 항부정맥 막 안정화제), 아밀로리드 (상피 나트륨 채널 ENaC의 직접 차단제); 및 지연된 내부 정류기 칼륨 채널 및 L-형 칼슘 채널의 억제제 및 차단제, 예컨대 이부틸리드 헤미루마레이트 (부류 III 항부정맥제).
대상체
용어 "대상체", "환자" 및 "개체"는 본원에서 상호교환적으로 사용될 수 있다. 앞서 시사한 것과 같이, 본원에서 기술된 방법 및 조성물은 면역손상된 대상체 또는 면역억제를 발달시킬 위험이 있는 대상체들에 대해 유용하다. 기술된 방법 및 조성물은 특히 대상체를 감염에 대해 취약하게 만들 수 있는 특정 약물치료로 인해 면역손상되었거나 면역억제를 발달시킬 위험이 있는 대상체들에서 충분한 면역보호를 유도하는 데 유용하다.
그러므로, 발명의 맥락에서, 적합한 표적 집단은 특정 치료법, 특히 장기간 치료법을 받고 있는 대상체들을 포함한다. 이들은 대상체의 연령과 관계없이, 스타틴의 장기 사용을 포함하여, 스타틴 요법을 받고 있는 대상체를 포함한다. 이들은 또한 대상체의 연령과 관계없이, NSAID의 장기 사용을 포함하여, NSAID 요법을 받고 있는 대상체를 포함한다. 표적 집단은 또한 하나 이상의 그런 치료법을 받고 있는 대상들을 포함한다. 예를 들어, 대상체는 하나 이상의 스타틴 요법, 하나 이상의 NSAID 요법 또는 두 가지의조합을 받고 있을 수 있다.
개체의 면역체계가 적절하게 기능하지 않고 있을 대, 개체는 일반적으로 "면역손상"된 것으로 말할 수 있다. 그러므로, "면역손상된 대상체"는 임의의 숙주-관련된, 의학적-관련된 또는 약물학적 관련된 인자로 인해 적절한 면역 반응을 유도하는 능력이 감소된 대상체이다. 면역손상된 개체는 면역체계의 하나 이상의 손상 유형, 예컨대 면역억제 (예컨대 약해진 면역성), 면역결핍, 변경된 또는 과잉활성 면역체계, 자가면역, 또는 그것들의 임의의 조합을 나타낼 수 있다. 그러므로, 면역손상된 개체는 완전히 면역-유능한 상태가 아니다.
일부 집단 그룹에서, 대상체는 특정 질환 또는 장애에 관련된 것이 아니라, 연령-관련된 상태와 같이 정상적인 발달의 일부로서 면역손상될 수 있다. 예를 들어, 매우 어린 아동 (예컨대 유아) 및 고령자는 완전히 면역-유능한 상태가 아닌 것으로 간주될 수 있다. 발명에 따르면, 특별한 관심의 표적 집단은 최근에 면역조절제 요법 (예컨대 스타틴, NSAID 등을 받음)을 받았고 현재 면역조절제 요법 (예컨대 스타틴, NSAID 등을 받음) 중인 개체들, 뿐만 아니라 면역조절제 요법 (예컨 스타틴, NSAID 등을 받음), 예컨대 합성 스타틴을 포함하는 치료법을 막 시작하거나 시작하려고 계획 중인 개체들을 포함한다. 그런 환자들의 하위집단 중 어느 것이든 포괄적으로 "면역조절제 요법 중인", 예컨대 "스타틴 요법 중인" 것으로 말할 수 있다. 일부 구체예에서, 표적 집단은 적어도 하나의 합성 스타틴 중인 개체들을 포함하거나 그들로 구성된다.
일부 구체예에서, 대상체는 적어도 2일, 적어도 3일, 적어도 4일, 적어도 5일, 적어도 6일, 적어도 7일, 적어도 10일, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주, 적어도 6주, 적어도 8주, 적어도 12주, 또는 그 이상의 기간 동안 면역조절제 요법 중이었다 (및 계속해서 요법 중이다). 일부 구체예에서, 대상체는 상기와 같이 이미 면역조절제 요법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법 등) 중이었지만, 마지막 6주, 5주, 4주, 3주, 2주, 1 주, 6일, 5일, 4일, 3일 또는 2일 이내에 그런 요법을 중단하였다. 또 다른 구체예에서, 대상체는 아직 면역조절제 요법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법 등)을 닫지는 않았지만, 다음 날, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 10일, 2주, 3주, 4주, 5주 또는 6주 이내에 그런 치료법을 계획하고 있거나 막 시작하려 한다. 면역조절제 요법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법 등)의 장기간 또는 만성 사용은 적어도, 포괄적으로 4주의 기간을 나타낼 수 있다.
본 발명의 맥락에서, 대상체가 억제된 면역 반응을 포함하는 상태를 발달시킬 성향을 가졌거나 또는 대상체가 면역억제의 고조된 위험과 관련되었거나 손상된 면역체계를 가지는 것에 민감한 집단에 대한 특정 기준을 충족한다면 대상체는 "면역손상의 위험"이 있는 것으로 인지되어야 한다. 용어 "민감한"은 일반 집단에서 관찰되는 것보다 어떤 것, 즉 질환, 장애 또는 상태 (예컨대 예를 들면 손상된 면역 반응)에 대한 증가된 위험 및/또는 성향 (전형적으로 연령, 유전적 소인, 환경 인자, 개인적 이력 또는 그것들의 조합을 기준으로)을 가지는 것을 의미한다. 예를 들어, 면역조절제 요법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법 등)을 막 시작하려 하는 대상체는 면역억제의 위험이 있고 그러므로 백신에 대한 면역 반응을 추가로 끌어내기 위하여 본원에 기술된 방법으로부터 유익해질 수 있다.
대상체는 특정 기준을 기준으로 선택될 수 있다 (즉 표적 집단). 실례로서, 스타틴 수령체 중에서, 적어도 하나의 합성 스타틴과 관련된 개체들의 집단이 비-합성 스타틴과 관련된 개체들보다 면역억제의 위험이 더 높을 수 있다.
특정 질환 및 장애는 영향을 받은 개체에서 손상된 면역과 관련된 것으로 알려져 있다. 손상된 면역은 억제된 면역체계, 과잉활성 면역체계, 자가면역 또는 그것들의 임의의 조합을 포함할 수 있다. 면역억제는, 제한 없이, 일차 면역 결핍 및 이차 또는 후천적 면역 결핍을 포함한다. 일차 면역 결핍은 유전적 이상에 의해 유발될 수 있다. 이차 또는 후천적 면역 결핍은 통상적으로 특정 질환, 예컨대 AIDS, 뿐만 아니라 특정 약물, 예컨대 스타틴, NSAID, 화학요법 기관 이식 후 투여된 면역억제제로 인한 일시적인 후천적 면역 결핍과 관련된다. 개인의 면역체계는 또한 흡연, 알코올 소비 및 영양 불량을 포함한, 살아있는 특정 상태 또는 환경 인자에 의해 약해질 수 있다.
예를 들어, 표적 집단은 한 연령 그룹의 대상체들로, 예컨대 유아 및 고령자 대상체들로 구성될 수 있다. 본원에서 사용되는 "고령자 대상체"은 65세 이상 연령의 인간 개체이다. "유아"는 0 내지 12개월 (0은 출생이다) 사이, 예를 들면 0 내지 3개월 사이, 0 내지 6개월 사이, 0 내지 9개월 사이 및 6 내지 12개월 사이의 연령의 인간 개체이다. 일부 구체예에서, 표적 집단은 18 내지 65세 사이, 18 내지 60세 사이, 18 내지 55세 사이, 18 내지 50세 사이, 18 내지 45세 사이, 45 내지 65세 사이, 45 내지 60세 사이, 18 내지 24세 사이, 18 내지 35세 사이 등의 연령의 인간 대상체들로 구성될 수 있다. 그런 표적 집단 중 임의의 한 집단에서, 대상체는 추가로 적어도 하나의 위험 인자, 이를테면, 제한 없이 만성 또는 유전적 질환 또는 장애 및 약물치료/치료법과 관련될 수 있다.
일부 구체예에서, 적합한 대상체는 고령자가 아닌 대상체, 예컨대 65세 아래의 인간 개체이다. 다른 구체예에서, 대상체는 65세 아래지만 18세 이상이다. 그런 대상체들은 면역조절제 요법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법 등), 예를 들면 적어도 하나의 합성 스타틴을 포함한 스타틴 요법 중에 있을 수 있다.
본원에서 사용되는 "면역 반응을 향상시키는"은 예를 들면 기술분야에 알려져 있는 또는 허용된 임의의 적합한 방법에 의해 측정되는 바, 면역원성을 개선시키거나 증대시키는 것을 포함할 수 있다. "향상된 면역 반응"은 한 가지 측정 또는 조합된 측정에서 면역 반응의 통계학적으로 유의미한 증대가 특정 기준을 충족하는 대상체들의 집단, 즉 표적 집단 중에서 관찰될 때 이루어진다. 표적 집단은 면역조절제 요법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법 등) 중인 개체들로 구성될 수 있다. 일부 구체예에서, 그런 집단의 하위세트는 예컨대 연령 그룹같이, 개체들의 특정 범주를 나타낼 수 있다. 구절 "면역 반응을 추가로 유도하는"은 대상체에서 앞서 시동된 면역 반응의 증대를 나타낼 수 있다.
애주번트
"애주번트 첨가된 백신"은 하나 이상의 애주번트를 포함한다. 따라서, 일부 구체예에서, 발명의 조성물은 그 조성물을 받은 환자에서 유도된 면역 반응 (체액성 및/또는 세포성)을 향상시키는 기능을 할 수 있는 애주번트를 포함한다. 유용한 애주번트로는, 한정하는 것은 아니지만 다음을 포함한다: 알루미늄 염-기반 애주번트 (예컨대 알루미늄 포스페이트 및 알루미늄 하이드록사이드), 톨 (Toll)-유사 수용체의 아고니스트 (예컨대 인간 TLR1 아고니스트, 인간 TLR2 아고니스트, 인간 TLR3 아고니스트, 인간 TLR4 아고니스트, 인간 TLR5 아고니스트, 인간 TLR6 아고니스트, 인간 TLR7 아고니스트, 인간 TLR8 아고니스트, 인간 TLR9 아고니스트, 및 인간 TLR10 아고니스트), 에멀션-기반 애주번트 및 바이러스-유사 입자-기반 애주번트, 예컨대 비로좀.
일부 구체예에서, 발명에 사용하기 위한 백신 애주번트는 수-중-유 에멀션을 포함한다.
수-중-유 에멀션은 특히 애주번트 첨가된 백신, 이를테면 바이러스 백신, 예컨대 인플루엔자 바이러스 백신에 사용하기에 적합한 것으로 밝혀졌다. 다양한 그런 에멀션이 알려져 있고, 그것들은 전형적으로 적어도 하나의 오일 및 적어도 하나의 계면활성제를 포함하는데, 오일(들)과 계면활성제(들)은 생체분해성 (대사 가능함) 및 생체적합성이다. 에멀션 중의 오일 방울들은 일반적으로 직경이 5 μm 미만이고, 이상적으로 에멀션 중의 대부분의 오일 방울은 마이크론-미만의 직경을 가지며 (예컨대 오일 방울 수의 적어도 90%가 마이크론-미만의 직경을 가짐), 이들 작은 크기는 안정한 에멀션을 제공하기 위해 미세유동화제로 이루어진다. 220 nm 미만 (예컨대 220 nm 미만, 200 nm 미만, 190 nm 미만, 180 nm 미만, 170 nm 미만, 160 nm 미만, 150 nm 미만, 140 nm 미만, 130 nm 미만, 120 nm 미만, 110 nm 미만, 100 nm 미만, 등)의 크기를 가진 방울들이 필터 멸균의 대상이 될 수 있기 때문에 바람직하다. 예를 들어, 적합한 수-중-유 에멀션은 평균 오일 방울 크기 범위가 약 100 내지 200 nm, 약 110 내지 200 nm, 약 120 내지 200 nm, 약 130 내지 200 nm, 약 140 내지 200 nm, 약 100 내지 190 nm, 100 내지 180 nm, 100 내지 170 nm, 100 내지 160 nm, 100 내지 150 nm, 130 내지 190 nm, 135 내지 185 nm, 140 내지 180 nm, 145 내지 175 nm, 또는 150 내지 170 nm인 것들을 포함한다.
에멀션은 동물 (예컨대 어류) 또는 식물 기원으로부터의 오일과 같은 오일을 포함할 수 있다. 식물성 오일에 대한 공급원으로는 땅콩류, 씨앗 및 곡물을 포함한다. 땅콩 기름, 대두유, 코코넛유, 및 올리브유가 가장 흔하게 이용되며, 땅콩 기름이 예시된다. 예컨대 호호바 콩으로부터 얻어지는 호호바 오일이 사용될 수 있다. 씨앗 기름은 홍화유, 면실유, 해바라기씨유, 참기름 등을 포함한다. 곡물 군에서는, 옥수수유가 가장 쉽게 이용될 수 있지만, 다른 곡물, 예컨대 밀, 귀리, 호밀, 쌀, 테프, 라이밀 등의 오일이 또한 사용될 수 있다. 씨앗 기름에서 자연적으로 발생하는 것이 아닌, 글리세롤 및 1,2-프로판다이올의 6 내지 10 탄소 지방산 에스테르가 땅콩 및 씨앗 기름으로부터 출발하는 적절한 물질의 가수분해, 분리 및 에스테르화에 의해 얻어질 수 있다. 포유류 젖으로부터의 지방 및 오일이 대사 가능하고 그러므로 본 발명의 실시에 사용될 수 있다. 분리, 정제, 비누화 및 동물 공급원으로부터 순수한 오일을 얻기 위해 필요한 다른 수단의 과정들은 기술분야에 잘 알려져 있다. 대부분의 어류는 쉽게 회수될 수 있는 대사 가능한 오일을 함유한다. 예를 들어, 대구 간유, 상어 간유 및 고래 오일, 예컨대 경랍 (spermaceti)은 본원에서 사용될 수 있는 여러 어류 오일을 예시한다. 많은 분지쇄 오일이 5-탄소 이소프렌 단위로 생화학적으로 합성되고 일반적으로 테르페노이드로 언급된다. 상어 간유는 본원에서 특히 바람직한, 스쿠알렌, 2,6,10,15,19,23-헥사메틸-2,6,10,14,18,22-테트라코사헥사엔으로 알려져 있는 분지된, 불포화 테르페노이드를 함유한다. 스쿠알렌에 대한 포화 유사체인 스쿠알란 또한 바람직한 오일이다. 스쿠알렌 및 스쿠알란을 포함한 어류 오일은 상업적 공급원으로부터 쉽게 입수 가능하거나 기술분야에 공지되어 있는 방법들에 의해 얻어질 수 있다. 다른 바람직한 오일은 토코페롤 (아래 참조)이다. 오일의 혼합물이 사용될 수 있다.
계면활성제는 그것의 'HLB' (친수기/친유기 균형)에 의해 분류될 수 있다. 발명의 바람직한 계면활성제는 적어도 10, 바람직하게는 적어도 15, 보다 바람직하게는 적어도 16의 HLB를 가진다. 발명은 한정하는 것은 아니지만, 다음을 포함하는 계면활성제들과 함께 사용될 수 있다: 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 계면활성제 (통상적으로 Tweens로 언급됨), 특히 폴리소르베이트 20 및 폴리소르베이트 80; DOWFAXTM 상표명으로 시판되는, 에틸렌 옥사이드 (EO), 프로필렌 옥사이드 (PO), 및/또는 부틸렌 옥사이드 (BO)의 공중합체, 예컨대 선형 EO/PO 블록 공중합체; 반복되는 에톡시 (옥시-1,2-에탄다이일) 기의 수가 달라질 수 있는 옥토시놀, 옥토시놀-9 (트리톤 X-100, 또는 t-옥틸페녹시폴리에톡시에탄올)이 특히 관심의 대상임; (옥틸페녹시)폴리에톨시에탄올 (IGEPAL CA-630/NP-40); 포스파티딜콜린 (레시틴)과 같은 인지질; 노닐페놀 에톡실레이트, 예컨대 TergitolTM NP 시리즈; 라우릴, 세틸, 스테아릴 및 올레일 알코올로부터 유도된 폴리옥시에틸렌 지방 에테르 (Brij 계면활성제로 알려져 있음), 예컨대 트라이에틸렌글리콜 모노라우릴 에테르 (Brij 30); 및 소르비탄 에스테르 (통상 SPAN으로 알려져 있음), 예컨대 소르비탄 트라이올레에이트 (Span 85) 및 소르비탄 모노라우레이트. 비-이온성 계면활성제가 바람직하다. 에멀션에 포함되기에 바람직한 계면활성제는 Tween 80 (폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트 또는 폴리소르베이트 80), Span 85 (소르비탄 트라이올레에이트), 레시틴 및 트리톤 X-100이다.
계면활성제의 혼합물, 예컨대 Tween 80/Span 85 혼합물이 사용될 수 있다. 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르, 예컨대 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트 (폴리소르베이트 80)과 옥토시놀, 예컨대 t-옥틸페녹시폴리에톡시에탄올 (트리톤 X-100)의 조합이 또한 적합하다. 다른 유용한 조합은 라우레쓰 9 플러스 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 및/또는 옥토시놀을 포함한다.
계면활성제들의 바람직한 양 (중량%)은 다음과 같다: 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 (예컨대 폴리소르베이트 80) 0.01 내지 1%, 특히 약 0.1%; 옥틸- 또는 노닐페녹시 폴리옥시에탄올 (예컨대 트리톤 X-100, 또는 트리톤 시리즈의 다른 계면활성제) 0.001 내지 0.1 %, 특히 0.005 내지 0.02%; 폴리옥시에틸렌 에테르 (예컨대 라우레쓰 9) 0.1 내지 20 %, 바람직하게는 0.1 내지 10 %, 특히 0.1 내지 1 % 또는 약 0.5%.
바람직한 에멀션 애주번트는 <1μm, 예컨대 <750 nm, <500 nm, <400 nm, <300 nm, <250 nm, <220 nm, <200 nm, <190 nm, <180 nm, <170 nm, <160 nm, <150 nm, 또는 그것보다 작은 평균 방울 크기를 가진다. 이들 방울 크기는 편리하게 미세유동화 및 적합한 여과와 같은 기법들에 의해 이루어질 수 있다 (예를 들면 국제 특허 공보: WO 2011/067669, WO 2011/067673 and WO 2011/067672 참조, 이것들의 내용은 본원에 포함됨).
아래에 발명에 유용한 구체적인 수-중-유 에멀션 애주번트의 실례들이 제시된다:
ㆍ 스쿠알렌, 폴리소르베이트 80 및 소르비탄 트라이올레에이트의 마이크론 미만 에멀션. 이들 세 가지 성분은 10:1:1의 부피비 또는 39:47:47의 중량비로 존재할 수 있다. 부피에 의한 에멀션의 조성은 약 5% 스쿠알렌, 약 0.5% 폴리소르베이트 80 및 약 0.5%의 소르비탄 트라이올레에이트일 수 있다. 중량 관점에서, 이들 비율은 4.3%> 스쿠알렌, 0.5%> 폴리소르베이트 80 및 0.48%> 소르비탄 트라이올레에이트가 된다. 이 애주번트는 앞서 기술된 것과 같이, "MF59"로 알려져 있다. MF59 에멀션은 유리하게도 완충제, 예컨대 시트레이트 이온, 예컨대 10 mM 나트륨 시트레이트 완충제를 포함할 수 있다.
ㆍ 스쿠알렌, 토코페롤 및 폴리소르베이트 80의 에멀션. 에멀션을 포스페이트 완충된 식염수를 포함할 수 있다. 또한 에멀션은 Span 85 (예컨대 1%>로) 및/또는 레시틴을 포함할 수 있다. 이들 에멀션은 2 내지 10%> 스쿠알렌, 2 내지 10%> 토코페롤 및 0.3 내지 3%> 폴리소르베이트 80을 가질 수 있고, 스쿠알렌:토코페롤의 중량비는 바람직하게는 <1인데, 이것이 보다 안정한 에멀션을 제공하기 때문이다. 스쿠알렌과 폴리소르베이트 80은 약 5:2의 부피비 또는 약 11:5의 중량비로 존재할 수 있다. 그러므로 세 가지 성분 (스쿠알렌, 토코페롤 및 폴리소르베이트 80)은 1068:1186:485 또는 약 55:61:25의 중량비로 존재할 수 있다. 한 가지 그런 에멀션 ("AS03")은 2%> 용액을 얻기 위하여 Tween 80을 PBS에 녹인 후, 이 용액 90 ml를 (5 g의 DL-a-토코페롤과 5 ml의 스쿠알렌)의 혼합물과 혼합한 다음, 그 혼합물을 미세유동화함으로써 만들어질 수 있다. 그 결과의 에멀션은 마이크론 미만, 예컨대 100 내지 250 nm, 바람직하게는 약 180 nm의 평균 직경을 가지는 오일 방울을 가질 수 있다. 에멀션은 또한 3-탈-O-아실화된 모노포스포릴 지질 A (3d-MPL)를 포함한다. 이 유형의 다른 유용한 에멀션은 인간 용량당, 0.5 내지 10 mg의 스쿠알렌, 0.5 내지 11 mg의 토코페롤 및 0.1 내지 14 mg의 폴리소르베이트 80을, 예컨대 상기 논의된 비율로 포함할 수 있다.
ㆍ 스쿠알렌, 토코페롤 및 트리톤 계면활성제 (예컨대 트리톤 X-100)의 에멀션. 에멀션은 또한 3d-MPL (아래 참조)을 포함할 수 있다. 그것은 완충제, 예컨대 포스페이트 완충제를 함유할 수 있다.
ㆍ 폴리소르베이트 (예컨대 폴리소르베이트 80), 트리톤 계면활성제 (예컨대 트리톤 X-100) 및 토코페롤 (예컨대 a-토코페롤 석시네이트)을 포함하는 에멀션. 에멀션은 이들 세 가지 성분을 약 75:11:10 (예컨대 750 μg/ml의 폴리소르베이트 80, 110 μg/ml의 트리톤 X-100 및 100 μg/ml의 a-토코페롤 석시네이트)의 질량비로 포함할 수 있고, 이들 농도는 항원으로부터의 이들 성분의 임의의 조합을 포함해야 한다. 에멀션은 또한 스쿠알렌을 포함할 수 있다. 에멀션은 또한 3d-MPL (아래 참조)을 포함할 수 있다. 수성 상은 포스페이트 완충제와 같은 완충제를 포함할 수 있다.
ㆍ 스쿠알란, 폴리소르베이트 80 및 폴록사머 401 ("플루로닉TM L121")의 에멀션. 에멀션은 포스페이트 완충된 식염수, pH 7.4에 제형될 수 있다. 이 에멀션은 무라밀 다이펩티드에 대한 유용한 전달 비히클이고, "SAF-1" 애주번트 (0.05-1% Thr-MDP, 5% 스쿠알란, 2.5% 플루로닉 L121 및 0.2% 폴리소르베이트 80)에서 트레오닐-MDP와 함께 사용될 수 있다. 그것은 또한 "AF" 애주번트 (5% 스쿠알란, 1.25% 플루로닉 L121 및 0.2%> 폴리소르베이트 80)에서처럼, Thr-MDP 없이 사용될 수 있다. 미세유동화가 바람직하다.
ㆍ 스쿠알렌, 수성 용매, 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르 친수성 비이온성 계면활성제 (예컨대 폴리옥시에틸렌 912) 세토스테아릴 에테르) 및 소수성 비이온성 계면활성제 (예컨대 소르비탄 에스테르 또는 만니드 에스테르, 예컨대 소르비탄 모노올레에이트 또는 'Span 80')를 포함하는 에멀션. 에멀션은 바람직하게는 열가역성이고 및/또는 적어도 90%의 크기가 200 nm 미만인 오일 방울 (부피로)을 가진다. 에멀션은 또한 알디톨; 저온보호제 (예컨대 당, 예컨대 도데실말토시드 및/또는 슈크로오스); 및/또는 알킬폴리글리코시드 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 에멀션은 TLR4 아고니스트를 포함할 수 있다. 그런 에멀션음 동결건조될 수 있다.
ㆍ 스쿠알렌, 폴록사머 105 및 Abil-Care의 에멀션. 애주번트 첨가된 백신 중의 이들 성분의 최종 농도 (중량)는 5% 스쿠알렌, 4% 폴록사머 105 (플루로닉 폴리올) 및 2% Abil-Care 85 (Bis-PEG/PPG-16/16 PEG/PPG-16/16 다이메티콘; 카프릴/카프르 트라이글리세리드)이다.
ㆍ 0.5 내지 50%의 오일, 0.1 내지 10%의 인지질 및 0.05 내지 5%의 비-이온성 계면활성제를 가지는 에멀션. 바람직한 인지질 성분은 포스파티딜콜린, 포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜세린, 포스파티딜이노시톨, 포스파티딜글리세롤, 포스파티드산, 스핑고미엘린 및 카르디오리핀이다. 마이크론 미만의 방울 크기가 유리하다.
ㆍ 비-대사 가능한 오일 (예컨대 가벼운 미네랄 오일) 및 적어도 하나의 계면활성제 (예컨대 레시틴, Tween 80 또는 Span 80)의 마이크론 미만의 수-중-유 에멀션. 첨가제, 예컨대 QuilA 사포닌, 콜레스테롤, 사포닌-친유성 컨쥬게이트 (예컨대 GPI-0100, 글루쿠론산의 카르복실기를 통한 데스아실사포닌에의 지방족 아민의 첨가에 의해 생성됨), 다이메티다이옥타데실암모늄 브로마이드 및/또는 N,N-다이옥타데실-N,N-비스 (2-하이드록시에틸)프로판다이아민이 포함될 수 있다.
ㆍ 사포닌 (예컨대 QuilA 및 QS21) 및 스테롤 (예컨대 콜레스테롤)이 나선형 미셸로서 회합되어 있는 에멀션.
ㆍ 미네랄 오일, 비-이온성 친유성 에톡실화된 지방 알코올 및 비-이온성 친수성 계면활성제 (예컨대 에톡실화된 지방 알코올 및/또는 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 블록 공중합체)를 포함하는 에멀션.
ㆍ 미네랄 오일, 비-이온성 친수성 에톡실화된 지방 알코올 및 비-이온성 친유성 계면활성제 (예컨대 에톡실화된 지방 알코올 및/또는 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 블록 공중합체)를 포함하는 에멀션.
일부 구체예에서 에멀션은 전달될 때 항원과 즉석에서 혼합될 수 있고, 그로써 애주번트 및 항원이 패키지된 또는 분배된 백신으로 별도로 유지될 수 있고, 사용시 최종 제형에 대해 준비될 수 있다. 다른 구체예에서 에멀션은 제조 동안 항원과 혼합되고, 그로써 조성물은 FLUADTM 제품에서처럼, 액체 애주번트 첨가 형태로 패키지된다. 항원은 일반적으로 수성 형태로 존재할 것이어서, 백신은 최종적으로 두 액체를 혼합함으로써 제조된다. 혼합을 위한 두 액체의 부피비는 달라질 수 있지만 (예컨대 5:1 내지 1:5 사이) 일반적으로는 약 1:1이다. 성분들의 농도가 특정 에멀션의 상기 설명에서 주어진 경우, 이들 농도는 희석되지 않은 조성물에 대해 전형적이고 항원 용액과의 혼합 후 농도는 따라서 감소할 것이다.
항원 및 애주번트가 혼합된 후에, 헤마글루티닌 항원을 일반적으로 수용액으로 유지되겠지만 오일/물 계면 주위로 스스로 분포할 것이다. 일반적으로, 헤마글루티닌이 에멀션의 오일 상 안으로 들어가는 일은 거의 없을 것이다.
조성물이 토코페롤을 포함하는 경우, α, β, γ, δ, ε 또는 ζ 토코페롤 중 어떤 것이라도 사용될 수 있지만 (단독으로 또는 조합하여), α-토코페롤이 바람직하다. 토코페롤은 여러 형태, 예컨대 상이한 염 및/또는 이성질체의 형태를 취할 수 있다. 염은 유기 염, 예컨대 석시네이트, 아세테이트, 니코티네이트 등을 포함한다. D-a-토코페롤 및 DL-a-토코페롤 둘 다 사용될 수 있다. 토코페롤은 유리하게도 고령 환자 (예컨대 60세 이상 또는 65세 이상)에서 사용하기 위한 백신에 포함되는데, 비타민 E가 이 환자 그룹의 면역 반응에 긍정적인 영향을 주는 것으로 보고되었기 때문이다. 그것들은 또한 에멀션의 안정화를 도울 수 있는 항산화 특성을 가진다. 바람직한 a-토코페롤은 DL-a-토코페롤이고, 이 토코페롤의 바람직한 염을 석시네이트이다. 석시네이트 염은 생체내에서 TNF-관련된 리간드와 협력하는 것으로 밝혀졌다. 더욱이, a-토코페롤 석시네이트는 인플루엔자 백신과 부합할 수 있고 수은 화합물의 대체물로서 유용한 보존제인 것으로 알려져 있다.
고-용량 백신
본 발명의 맥락에서, 고-용량 백신은 표준 용량 백신에 함유된 동일 항원의 양의 적어도 약 2배, 예를 들면 2-배, 3-배, 4-배, 5-배, 6-배, 7-배, 8-배, 9-배 및 10-배인 항원 (즉 면역원)을 함유하고 있는 백신을 나타내며, 다르게는 각각 2x, 3x, 4x, 5x, 6x, 7x, 8x, 9x 및 10x로 표시될 수 있다. 표준 용량 백신은 전형적으로 상업적으로 입수 가능한 것들로, 구체적으로 표지되거나 고-용량 또는 저-용량으로 판매되지 않는다. 인플루엔자 백신의 경우, 표준 용량은 스트레인 당 약 15 ｕg의 항원이다 (보다 상세한 설명에 대해서는 아래 참조).
인플루엔자 바이러스 항원
발명은 대상체를 면역시키기 위하여 인플루엔자 바이러스 항원, 전형적으로 헤마글루티닌을 포함하는 항원을 사용한다. 항원은 전형적으로 인플루엔자 비리온으로부터 제조될 것이지만, 대체물로서, 헤마글루티닌과 같은 항원이 재조합 숙주에서 (예컨대 배큘로바이러스 벡터를 사용하여 곤충 세포주에서) 발현되고 정제된 형태로 사용될 수 있다. 그러나, 일반적으로 항원은 비리온으로부터 유래될 것이다.
항원은 생 (live) 바이러스 또는, 보다 바람직하게는 비활성화된 바이러스의 형태를 취할 수 있다. 바이러스를 비활성화시키는 화학적 수단은 유효량의 하나 이상의 다음의 제제들로 처리하는 것을 포함한다: 계면활성제, 포름알데하이드, 포르말린, β-프로피오락톤, 또는 UV 광. 비활성화를 위한 추가의 화학적 수단은 메틸렌 블루, 프소랄렌, 카르복시풀러렌 (C60) 또는 그것들 중 임의의 조합으로 처리하는 것을 포함한다. 바이러스 비활성화의 다른 방법들은 기술분야에 공지되어 있는데, 예를 들면 바이나리 에틸아민, 아세틸 에틸렌이민 또는 감마 조사 (irradiation)가 있다. INFLEXALTM 제품은 전체 비리온 비활성화된 백신이다.
비활성화된 바이러스가 사용되는 경우, 백신은 전체 비리온, 분열된 비리온, 또는 정제된 표면 항원 (헤마글루티닌 및, 통상적으로는 또한 뉴라미니다제를 포함함)을 포함할 수 있다.
비활성화되었지만 전체 세포가 아닌 백신 (예컨대 분열된 바이러스 백신 또는 정제된 표면 항원 백신)은 이 항원 내에 위치한 추가의 T 세포 에피토프로부터 유익을 얻기 위해, 매트릭스 단백질을 포함할 수 있다. 그러므로, 헤마글루티닌 및 뉴라미니다제를 포함하는 비-전세포 백신 (특히 분열된 백신)은 추가로 M1 및/또는 M2 매트릭스 단백질을 포함할 수 있다. 핵단백질 또한 존재할 수 있다.
비리온은 바이러스-함유 유체로부터 다양한 방법에 의해 수확될 수 있다. 예를 들어, 정제 과정은 비리온을 파괴하기 위해 계면활성제를 포함하는 선형 수크로오스 구배 용액을 사용하는 구역 (zonal) 원심분리를 포함할 수 있다. 그런 다음 항원은 투석여과에 의한 선택적 희석 후에 정제될 수 있다.
분열된 비리온은 하위비리온 제제를 생성하기 위하여 정제된 비리온을 계면활성제 및/또는 용액으로 처리함으로써 얻어지고, '트윈-에테르' 분열 과정을 포함한다. 인플루엔자 바이러스의 분열 방법은 기술분야에 잘 알려져 있다. 바이러스의 분열은 전형적으로 감염성이든 또는 비-감염성이든 전체 바이러스를 파괴 농도의 분열제로 파괴 또는 단편화함으로써 수행된다. 파괴는 바이러스 단백질의 전체적인 또는 부분적인 가용화를 초래하여 바이러스의 통합성을 변경시킨다. 바람직한 분열제는 비-이온성 및 이온성 (예컨대 양이온성) 계면활성제이다. 적합한 분열제는, 한정하는 것은 아니지만, 에틸 에테르, 폴리소르베이트 80, 데옥시콜레이트, 트라이-N-부틸 포스페이트, 알킬글리코시드, 알킬티오글리코시드, 아실 당, 설포베타인, 베타인, 폴리옥시에틸렌알킬에테르, N,N-다이알킬-글루카미드, 헤카메그, 알킬페녹시-폴리에톡시에탄올, 사차 암모늄 화합물, 사르코실, CTAB (세틸 트라이메틸 암모늄 브로마이드), 트라이-N-부틸 포스페이트, 세타블론, 미리스틸트라이메틸암모늄 염, 리포펙틴, 리포펙타민, 및 DOT-MA, 옥틸- 또는 노닐페녹시 폴리옥시에탄올 (예컨대 트리톤 계면활성제, 예컨대 트리톤 X-100 또는 트리톤 N101), 노녹시놀 9 (NP9) Sympatens-NP/090), 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 (Tween 계면활성제), 폴리옥시에틸렌 에테르, 폴리옥시에틀렌 에스테르 등을 포함한다. 한 가지 유용한 분열 과정은 나트륨 데옥시콜레이트 및 포름알데하이드의 연속 효과를 사용하고, 분열은 초기 비리온 정제 동안에 (예컨대 수크로오스 밀도 구배 용액에서) 일어날 수 있다. 그러므로 분열 과정은 비리온-함유 물질의 정화 (비-비리온 물질을 제거하기 위함), 수확된 비리온의 농축 (예컨대 CaHP04 흡착과 같은 흡착 방법을 사용함), 전체 비리온의 비-비리온 물질로부터의 분리, 밀도 구배 원심분리 단계에서 분열제를 사용한 비리온의 분열 (예컨대 나트륨 데옥시콜레이트와 같은 분열제를 함유한 수크로오스 구배를 사용함), 및 그런 다음 원치 않은 물질을 제거하기 위한 여과 (예컨대 한외여과)를 포함할 수 있다. 분열된 비리온은 나트륨 포스페이트-완충된 등장성 염화나트륨 용액에 유용하게 재현탁될 수 있다. BEGRIVACTM, FLUARIXTM, FLUZONETM 및 FLUSHIELDTM 제품이 분열된 백신이다.
정제된 표면 항원 백신은 인플루엔자 표면 항원 헤마글루티닌 및, 전형적으로, 또한 뉴라미니다제를 포함한다. 정제된 형태로 이들 단백질을 제조하는 과정은 기술분야에 잘 알려져 있다. FLUVIRINTM, AGRIPPALTM 및 INFLUVACTM 제품은 하위유닛 백신이다.
비활성화된 인플루엔자 항원의 다른 형태는 비로좀 (핵산 유리 바이러스-유사 리포솜성 입자)이다. 비로좀은 계면활성제로 인플루엔자 바이러스의 가용화에 이어 뉴클레오캡시드의 제거 및 바이러스 당단백질을 함유한 막의 복원에 의해 제조될 수 있다. 비로좀을 제조하기 위한 대체 방법은 바이러스 막 당단백질을 과잉량의 인지질에 첨가하여 막에 바이러스 단백질을 가지는 리포좀을 얻는 것을 포함한다. 발명은 INFLEXAL VTM 제품에서처럼, 벌크 비로좀을 저장하기 위해 사용될 수 있다. 일부 구체예에서, 인플루엔자 항원은 비로좀의 형태가 아니다.
인플루엔자 바이러스는 약화될 수 있다. 인플루엔자 바이러스는 온도-민감성일 수 있다. 인플루엔자 바이러스는 저온-적응될 수 있다. 이들 세 가지 특징은 특히 생 바이러스를 백신 항원으로서 사용할 때 유용하다.
비활성화된 인플루엔자 백신과 관련하여 현재 활용할 수 있는 HA는 주요 면역원이고, 백신은 HA 수준, 전형적으로 SRID에 의해 측정된 HA 수준을 참조로 표준화된다. 기존의 백신은 전형적으로 스트레인당 약 15 ｕg의 HA를 함유하지만, 예컨대 아동에 대해, 또는 유행 상황에서, 또는 애주번트와 함께 사용될 때 더 적은 용량도 사용될 수 있다. 1/2 (예컨대 스트레인단 7.5 ｕg의 HA), 1/4 및 1/8과 같은 분획 용량이, 고용량 (예컨대 2x, 3x 또는 9x 용량)처럼 사용되었다.
그러므로, 본 발명의 백신은 약 0.1 내지 약 150 ｕg의 항원을 포함할 수 있다. 예를 들어, 인플루엔자 스트레인당 HA는 바람직하게는 스트레인당 0.1 내지 50 ｕg, 예컨대 0.1 내지 20 ｕg, 0.1 내지 15 ｕg, 0.1 내지 10 ｕg, 0.1 내지 7 ｕg, 0.5 내지 5 ｕg 등이다. 특정 용량은 스트레인당 예컨대 약 45 ｕg, 약 30 ｕg, 약 15 ｕg, 약 10 ｕg, 약 7.5 ｕg, 약 5 ｕg, 약 3.8 ｕg, 약 1.9 ｕg, 약 1.5 ｕg, 등을 포함한다.
생 백신에 대해, 용량은 HA 함량보다는 중간 조직 배양 감염성 용량 (TCID50)애 의해 측정되며, 스트레인당 06 내지 108 (바람직하게는 106.5 내지 107. 5)의 TCID50이 전형적이다.
본원에서 사용되는, "고용량 인플루엔자 백신"은 전형적으로 스트레인당 15 ｕg의 항원 (예컨대 HA)을 함유하는 표준-용량 백신과는 대조적으로, 스트레인당 약 30 ｕg 내지 150 ｕg의 항원 (예컨대 HA)을 함유할 수 있다. 그러므로, 일부 구체예에서, 고용량 백신은 스트레인당 약 30 ｕg, 약 35 ｕg, 약 40 ｕg, 약 45 ｕg, 약 50 ｕg, 약 55 ｕg, 약 60 ｕg, 약 65 ｕg, 약 70 ｕg, 약 75 ｕg, 약 80 ｕg, 약 85 ｕg, 약 90 ｕg 약 100 ｕg 약 110 ｕg 약 120 ｕg 약 130 ｕg 약 140 ｕg 약 150 ｕg의 항원을 함유한다.
다른 한편으로, "저용량 인플루엔자 백신"은 스트레인당 15 ｕg 미만, 예를 들면 약 12.5 ｕg, 약 10 ｕg, 약 7.5 ｕg, 약 5 ｕg, 약 4 ｕg, 약 3 ｕg, 약 2.5 ｕg의 항원 (예컨대 HA)을 함유하는 백신 조성물을 나타낸다. 일부 구체예에서, 고용량 백신, 표준-용량 백신 및 저용량 백신 중 어느 것이든지 애주번트 첨가될 수 있다.
백신에서 사용하기 위한 인플루엔자 바이러스 스트레인은 계절마다 변화한다. 현재의 유행기-사이에는, 백신은 전형적으로 두 개의 인플루엔자 A 스트레인 (H1N1 및 H3N2) 및 하나 또는 두 개의 인플루엔자 B 스트레인을 포함하고, 3가 또는 4가 백신이 발명과 사용하기에 전형적이다. 발명의 조성물은 인플루엔자 B 바이러스로부터의 항원을 포함하고 적어도 하나의 인플루엔자 A 바이러스로부터의 항원을 선택적으로 포함한다. 발명의 조성물은 인플루엔자 A 바이러스(들)로부터의 항원을 포함하고, 발명은 계절성 및/또는 유행하는 스트레인을 사용할 수 있다. 계절 및 백신에 포함된 항원의 본질에 따라, 발명은 하나 이상의 인플루엔자 A 바이러스 헤마글루티닌 하위유형 H1, H2, H3, H4, H5, H6, H7, H8, H9, H10, H11, H12, H13, H14, H15 또는 H16을 포함할 수 있다. 백신은 추가로 NA 하위유형 Nl, N2, N3, N4, N5, N6, N7, N8 또는 N9 중 어느 것으로부터의 뉴라미니다제를 포함할 수 있다.
발명은 그러므로 유행성 인플루엔자 A 바이러스 스트레인으로 사용될 수 있다. 유행성 스트레인의 특징은 다음과 같다: (a) 현재 순환하는 인간 스트레인의 헤마글루티닌과 비교하여 새로운 헤마글루티닌, 즉 10여년 동안 인간 집단에서 증명되지 않았던 것 (예컨대 H2), 또는 이전에 모든 인간 집단에서 볼 수 없었던 것 (예컨대 H5, H6 또는 H9, 일반적으로 조류 집단에서만 발견되었음)을 함유하여서, 백신 수령체 및 일반적인 인간 집단이 스트레인의 헤마글루티닌에 대해 면역학적으로 나이브하다; (b) 인간 집단에서 수평적으로 전염될 수 있다; 및 (c) 인간에 대해 병원성이다. 유행성 스트레인은, 한정하는 것은 아니지만, H2, H5, H7 또는 H9 하위유형 스트레인, 예컨대 H5N1, H5N3, H9N2, H2N2, H7N1 및 H7N7 스트레인을 포함한다. H5 하위유형 내에서, 바이러스는 많은 클레이드, 예컨대 클레이드 1 또는 클레이드 2로 나누어질 수 있다. 클레이드 2의 6개의 하위-클레이드가 구별되는 기하학적 분포를 가지는 하위-클레이드 1, 2 및 3으로 확인되었고 특히 인간 감염에서 그것들의 영향으로 인해 특히 관련성이 있다.
인플루엔자 B 바이러스는 현재 상이한 HA 하위유형을 나타내지 않지만, 인플루엔자 B 바이러스 스트레인은 두 개의 뚜렷한 계통으로 나누어진다. 이들 계통은 1980년대 후반에 드러났고 항원적으로 및/또는 유전학적으로 서로 구별될 수 있는 HA를 가진다. 현재의 인플루엔자 B 바이러스 스트레인은 B/Victoria/2/87-형 또는 B/Yamagata/16/88-형 중 어느 하나이다. 이들 스트레인은 통상 항원적으로 구별되지만, 아미노산 서열의 차이가 또한 두 계통을 구별짓기 위해 기술되었는데, 예컨대 B/Yamagata/16/88-형 스트레인은 자주 (그러나 늘 그런 것은 아님) 'Lee40' HA 서열과 관련하여 넘버링된 아미노산 잔기 164에 결실을 가지는 HA 단백질을 가진다. 발명은 어느 한 게통의 B 바이러스로부터의 항원, 또는 둘 다의 계통으로부터의 항원과 함께 사용될 수 있다.
백신이 하나 이상의 인플루엔자 스트레인을 포함하는 경우에, 상이한 스트레인들은 전형적으로 별도로 성장되고 바이러스가 수확되고 항원들이 제조된 후에 혼합된다. 그러므로 발명의 제조 과정은 하나 이상의 인플루엔자 스트레인으로부터의 항원들을 혼합하는 단계를 포함할 수 있다.
발명과 함께 사용된 인플루엔자 바이러스는 재집합 스트레인일 수 있고, 역 유전적 기법들에 의해 얻어질 수 있었다. 역 유전적 기법은 원하는 게놈 절편을 가진 인플루엔자 바이러스가 플라스미드를 사용하여 시험관내에서 제조되는 것을 허용한다. 전형적으로, 그것은 (a) 원하는 바이러스 RNA 분자를 코드화하는 DNA 분자를, 예컨대 poII 프로머터 또는 박테리오파지 RNA 중합효소 프로모터로부터, 및 (b) 바이러스 단백질을 코드화하는 DNA 분자를, 예컨대 poIII 프로모터로부터 발현시켜서 세포에서의 두 유형의 DNA의 발현이 완전한 무상 감염성 비리온의 조립을 유도하도록 하는 것을 포함한다. DNA는 바람직하게 모든 바이러스 RNA 및 단백질을 제공하지만, 또한 일부의 RNA 및 단백질을 제공하기 위하여 헬퍼 바이러스를 사용하는 것도 가능하다. 각각의 바이러스 RNA를 제조하기 위하여 별도의 플라스미드를 사용하는 플라스미드-기반 방법이 사용될 수 있고, 이들 방법은 또한 전부 또는 일부 (예컨대 PB1, PB2, PA 및 NP 단백질만)의 바이러스 단백질을 발현하기 위하여 플라스미드의 사용을 포함할 것이고, 이때 일부 방법에서는 12개까지의 플라스미드가 사용된다. 필요한 플라스미드의 수를 감소시키기 위하여, 최근의 접근법은 동일한 플라스미드 (예컨대 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 모두 8개의 인플루엔자 A vRNA 절편을 코드화하는 서열) 상의 복수의 RNA 중합효소 I 전사 카세트 (바이러스 RNA 합성을 위하여), 및 복수의 단백질-코딩 영역을 다른 플라스미드 (예컨대 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 모두 8개의 인플루엔자 A mRNA 전사물을 코드화하는 서열) 상의 RNA 중합효소 II 프로모터와 조합시킨다. 발명의 일부 구체예에서, 방법은 (a) 단일 플라스미드 상의 PB1, PB2 및 PA mRNA-코드화 영역; 및 (b) 단일 플라스미드 상의 모두 8개의 vRNA-코드화 절편을 포함한다. 한 플라스미드 상의 NA 및 HA 절편 및 다른 플라스미드 상의 6개의 다른 절편을 포함하는 것 또한 방법을 용이하게 할 수 있다.
바이러스 RNA 절편을 코드화하기 위하여 poII 프로모터를 사용하는 것에 대한 대안으로서, 박테리오파지 중합효소 프로모터를 사용하는 것이 가능하다. 예를 들어, SP6, T3 또는 T7 중합효소에 대한 프로모터가 편리하게 사용될 수 있다. poII 프로모터의 종-특이성 때문에, 박테리오파지 중합효소 프로모터는 많은 세포 유형에 대해 보다 편리할 수 있지만 (예컨대 MDCK), 세포는 또한 외인성 중합효소 효소를 코드화하는 플라스미드로 트랜스펙션될 수 있어야 한다.
다른 기법에서 단일 주형으로부터의 바이러스 RNA 및 발현 가능한 mRNA에 대해 동시에 코딩하기 위해 이중 poII 및 poIII 프로모터를 사용하는 것이 가능하다.
그러므로 인플루엔자 A 바이러스는 A/PR/8/34 바이러스로부터 하나 이상의 RNA 절편을 포함할 수 있다 (전형적으로 A/PR/8/34의 6 절편, HA 및 N절편은 백신 스트레인으로부터 유래함, 즉 6:2 재집합체). 또한 A/WSN/33 바이러스로부터, 또는 백신 제조를 위해 재집합체 바이러스를 제조하기에 유용한 다른 바이러스 스트레인으로부터 하나 이상의 RNA 절편을 포함할 수 있다. 인플루엔자 A 바이러스는 AA/6/60 인플루엔자 바이러스 (A/Ann Arbor/6/60)로부터 6개보다 적은 (예컨대 0, 1, 2, 3, 4 또는 5) 바이러스 절편을 포함할 수 있다. 인플루엔자 B 바이러스는 AA/1/66 인플루엔자 바이러스 (B/Ann Arbor/1/66)로부터 6개보다 적은 (예컨대 0, 1, 2, 3, 4 또는 5) 바이러스 절편을 포함할 수 있다. 전형적으로, 발명은 인간-대-인간 전염될 수 있는 스트레인에 대해 보호하고, 그로써 스트레인의 게놈은 보통 포유류 (예컨대 인간) 인플루엔자 바이러스에서 기원된 적어도 하나의 RNA 절편을 포함할 것이다. 조류 인플루엔자 바이러스에서 기원된 NS 절편도 포함할 수 있다.
그것의 항원이 조성물에 포함될 수 있는 스트레인들은 내성적인 유행성 스트레인을 포함하여, 항바이러스 요법에 대해 내성일 수 있다 (예컨대 오셀타미비르 및/또는 자나미비르에 대해 내성임).
발명과 함께 사용된 HA는 바이러스에서 발견되는 것과 같은 천연 HA일 수 있거나, 또는 변형될 수 있다. 예를 들어, 바이러스가 조류 종에서 고도로 병원성이 되는 것을 유발하는 것은 바로 결정기 (예컨대 HA1과 HA2 사이의 절단 부위 주변의 초-염기성 영역)를 제거하기 위해 HA를 변형하는 것으로 알려져 있는데, 왜냐하면 이들 결정기가 제거되지 않으면 바이러스가 계란에서 성장되는 것을 방해할 수 있기 때문이다.
항원의 공급원으로서 사용된 바이러스는 계란에서 (예컨대 특수한 병원체 없는 계란) 또는 세로 배양에서 성장될 수 있다. 인플루엔자 바이러스 성장에 대한 현재의 표준 방법은 유정란을 사용하며, 바이러스는 계란 내용물 (요막액)로부터 정제된다. 그러나 보다 최근에, 바이러스는 속도 및 환자 알레르기의 이유로 동물 세포 배양에서 성장되었는데, 이런 성장 방법이 바람직하다.
세포주는 전형적으로 포유류 기원의 것일 것이다. 적합한 포유류 기원의 세포로는, 한정하는 것은 아니지만, 햄스터, 소, 영장류 (인간 및 원숭이 포함) 및 개의 세포를 들 수 있지만, 영장류 세포의 사용은 바람직하지 않다. 다양한 세포 유형, 예컨대 신장 세포, 섬유아세포, 망막 세포, 폐 세포 등이 사용될 수 있다. 적합한 햄스터 세포의 실례는 BHK21 또는 HKCC의 이름을 갖고 있는 세포주이다. 적합한 원숭이 세포는 예컨대 아프리카 녹색 원숭이 세포, 예컨대 Vero 세포주에서와 같은 신장 세포이다. 적합한 개 세포는 CLDK 및 MDCK 세포주에서와 같이, 예컨대 신장 세포이다.
적합한 셀라인으로는, 한정하는 것은 아니지만, MDCK; CHO; CLDK; HKCC; 293T; BHK; Vero; MRC-5; PER.C6; FRhL2; WI-38; 등을 포함한다. 적합한 세포주는 예컨대 아메리칸 타입 셀 퀄춰 (ATCC) 콜렉션으로부터, Coriell Cell Repositories로부터, 또는 European Collection of Cell Cultures (ECACC)로부터 광범위하게 입수 가능하다. 예를 들어, ATCC는 다양한 상이한 Vero 세포를 카탈로그 번호 CCL-81, CCL-81.2, CRL-1586 및 CRL-1587 하에 공급하며, MDCK 세포를 카탈로그 번호 CCL-34 하에 공급한다. PER.C6은 ECACC로부터 기탁 번호 96022940 하에 입수할 수 있다.
가장 바람직한 세포주는 포유류-유사 글리코실화를 가지는 것들이다. 포유류 세포주에 대한 덜 바람직한 대체물로서, 바이러스가 오리 (예컨대 오리 망막) 또는 암닭으로부터 유도된 세포주를 포함한 조류 세포주에서 성장될 수 있다. 조류 세포주의 실례는 조류 배아 줄기세포 및 오리 망막 세포를 포함한다. 적합한 조류 배아 줄기세포는 닭의 배아 줄기세포로부터 유도된 EBx 세포주, EB45, EB14 및 EB 14-074를 포함한다. 닭의 배아 섬유아세포 (CEF) 또한 사용될 수 있다. 그러나, 조류 세포를 사용하는 것보다 포유류 세포의 사용은 백신이 조류 DNA 및 난단백질 (예컨대 오브알부민 및 오보뮤코이드)이 없을 수 있고 그로써 알레르기항원성이 감소되는 것을 의미한다.
인플루엔자 바이러스를 성장시키기 위해 가장 바람직한 세포주는 마딘 다비 (Madin Darby) 개 신장으로부터 유도된 MDCK 세포주이다. 원래의 MDCK 세포주는 ATCC로부터 CCL-34로서 입수 가능하지만, 이 세포주의 유도체 또한 사용될 수 있다. 예를 들어, MDCK 세포주는 현탁액 배양에서 성장하도록 적응되었다 ('MDCK 33016', DSM ACC 2219로서 기탁됨). 유사하게, 혈청-없는 배양에서 현탁액에서 성장하는 MDCK-유도된 세포주가 개발되었다 ('B-702', FERM BP-7449로서 기탁됨). 'MDCK-S' (ATCC PTA-6500), 'MDCK-SF101' (ATCC PTA-6501), 'MDCK-SF102' (ATCC PTA-6502) 및 'MDCK-SF103' (PTA-6503)을 포함하여, 비-종양원성 MDCK 세포주가 기술되어 있다. 이들 MDCL 세포주중 어느 것이든지 사용될 수 있다.
바이러스는 부착 배양 또는 현탁액 중에서 세포에서 성장할 수 있다. 미세담체 배양이 또한 사용될 수 있다. 그러므로 일부 구체예에서, 세포는 현탁액에서의 성장에 대해 적응될 수 있다.
세포주는 바람직하게는 혈청-없는 배양 배지에서 및/또는 단백질 없는 배지에서 성장될 수 있다. 배지는 인간 또는 동물 기원의 혈청으로부터의 첨가물이 없는 본 발명의 맥락에서 혈청-없는 배지로서 언급된다. 그런 배양에서 성장하는 세포는 자연적으로 단백질 자체를 함유하지만, 단백질-없는 배지는 세포의 증식이 단백질, 성장 인자, 다른 단백질 첨가물 및 비-혈청 단백질 없이 일어나지만, 선택적으로 바이러스 성장에 필요할 수 있는 트립신 또는 다른 프로테아제와 같은 단백질을 포함할 수 있는 배지를 의미하는 것으로 인지된다.
인플루엔자 바이러스 복제를 지지하는 세포주는 바이러스 복제 동안 바람직하게는 37℃ 아래에서 (예컨대 30 내지 36℃, 또는 약 30℃, 31℃, 32℃, 33℃, 34℃, 35℃, 36℃에서) 성장된다.
배양된 세포에서 인플루엔자 바이러스를 증식시키는 방법은 일반적으로 세포 배양을 성장된 스트레인의 접종물과 함께 접종하는 단계, 감염된 세포를 원하는 기간 동안, 예컨대 예를 들면 바이러스 역가 또는 항원 발현에 의해 측정된 것과 같이 (예컨대 접종 후 24 내지 168시간 동안) 바이러스 증식을 위해 배양하는 단계 및 증식된 바이러스를 수집하는 단계를 포함한다. 배양된 세포는 바이러스와 함께 1:500 내지 1:1, 바람직하게는 1:100 내지 1:5, 보다 바람직하게는 1:50 내지 1:10의 세포 비율로 접종된다 (PFU 또는 TCID50에 의해 측정됨). 바이러스는 세포의 현탁액에 첨가되거나 세포의 단층에 적용되고, 바이러스는 적어도 60분 동안, 그러나 통상적으로 300분 미만, 바람직하게는 90 내지 240분 동안 25℃ 내지 40℃에서, 바람직하게는 28℃ 내지 37℃에서 세포 상에 흡수된다. 감염된 세포 배양 (예컨대 단층)은 수확된 배양 상층액의 바이러스 함량을 증가시키기 위하여 냉동-해동에 의해 또는 효소적 작용에 의해 제거될 수 있다. 수확된 유체는 그런 다음 비활성화되거나 냉동 보관된다. 배양된 세포는 약 0.0001 내지 10, 바람직하게는 0.002 내지 5, 보다 바람직하게는 0.001 내지 2의 감염 다중도 ("m.o.i.")로 감염될 수 있다. 보다 바람직하게는, 세포는 약 0.01의 m.o.i로 감염된다. 감염된 세포는 감염 후 30 내지 60시간 후에 수확될 수 있다. 바람직하게는, 세포는 감염 후 34 내지 48시간 후에 수확될 수 있다. 보다 더 바람직하게는, 세포는 감염 후 38 내지 40시간 후에 수확될 수 있다. 프로테아제 (전형적으로 트립신)는 일반적으로 세포 배양 중에 첨가되어 바이러스 방출이 허용되고, 프로테아제는 배양 중에, 예컨대 접종 전에, 접종과 동시에 또는 접종 후에 임의의 적합한 단계에서 첨가될 수 있다.
바람직한 구체예에서, 특히 MDCK 세포를 사용할 때, 세포주는 40 집단-배가 수준 이상으로 마스터 제조용 세포 은행 (master working cell bank)으로부터 계대되지 않는다.
바이러스 접종물 및 바이러스 배양은 바람직하게는 단순 포진 바이러스, 호흡기 세포융합 바이러스, 파라인플루엔자 바이러스 3, SARS 코로나바이러스, 아데노바이러스, 리노바이러스, 레오바이러스, 폴리오마바이러스, 비르나바이러스, 시르코바이러스, 및/또는 파르보바이러스가 없다 (즉 그것들에 대해 시험될 것이고 그것들에 의한 오염에 대한 네거티브 결과가 제시된다). 단순 포진 바이러스의 부재가 특히 바람직하다.
바이러스가 세포주 상에서 성장되는 경우에는, 최종 백신 중의 잔여 세포주 DNA의 양을 최소화하기 위해, DNA의 임의의 종양형성 활성을 최소화하기 위하여 표준 실시된다.
그러므로 발명에 따라 제조된 백신 조성물은 바람직하게는 용량당 10 ng 미만 (바람직하게는 1 ng 미만, 보다 바람직하게는 100 pg 미만)의 잔여 숙주 세포 DNA를 함유하지만, 미량의 숙주 세포 DNA가 존재할 수 있다.
0.25 ml의 부피당 <10 ng (예컨대 <1 ng, <100 pg)의 숙주 세포 DNA를 함유하는 백신처럼, 15 ｕg의 헤마글루티닌 당 <10 ng (예컨대 <1 ng, <100 pg)의 숙주 세포 DNA를 함유하는 백신이 바람직하다.
0.5 ml의 부피당 <10 ng (예컨대 <1 ng, <100 pg)의 숙주 세포 DNA를 함유하는 백신처럼, 5 ｕg의 헤마글루티닌 당 <10 ng (예컨대 <1 ng, <100 pg)의 숙주 세포 DNA를 함유하는 백신이 보다 바람직하다.
임의의 잔여 숙주 세포 DNA의 평균 길이는 500 bp 미만, 예컨대 400 bp 미만, 300 bp 미만, 200 bp 미만, 100 bp 미만 등인 것이 바람직하다.
오염 DNA는 표준 정제 과정, 예컨대 크로마토그래피 등을 사용하여 백신 제조 동안 제거될 수 있다. 잔여 숙주 세포 DNA의 제거는 예컨대 DNase를 사용함으로써 뉴클레아제 처리에 의해 향상될 수 있다. 숙주 세포 DNA 오염을 감소시키기 위한 편리한 방법은, 처음에 바이러스가 성장하는 동안 사용될 수 있는 DNase (예컨대 벤조나제)를 사용하고, 다음으로 비리온이 파괴되는 동안 사용될 수 있는 양이온성 계면활성제 (예컨대 CTAB)가 사용되는 2-단계 처리를 포함하여, 문헌에 기술되어 있다. β-프로피오락톤 처리에 의해 제거가 또한 사용될 수 있다.
잔여 숙주 세포 DNA의 측정은 현재 생물학적 제제에 대한 기본적인 조절 필요조건이고 숙련된 사람의 정상적인 능력 내에 있다. DNA를 측정하기 위해 사용된 분석은 전형적으로 증명된 분석일 것이다. 증명된 분석의 수행 특징은 수학적 및 정량적 용어로 기술될 수 있고, 그것의 오류의 가능한 근원이 확인될 것이다. 분석은 일반적으로 정확도, 정밀도, 특이성과 같은 특징에 대해 시험될 것이다. 일단 분석이 보정되면 (예컨대 숙주 세포 DNA의 공지된 표준 양에 대해) 시험된 정량적 DNA 측정이 일상적으로 수행될 수 있다. DNA정량에 대한 3가지 주요 기법이 사용될 수 있다; 혼성화 방법, 예컨대 서던 블롯 또는 슬롯 블롯; 면역분석 방법, 예컨대 ThresholdTM 시스템; 및 정량적 PCR. 이들 방법은 모두 숙련된 사람에게는 친숙하지만, 각각의 방법의 정확한 특징, 예컨대 혼성화를 위한 프로브의 선택, 증폭을 위한 프라이머 및/또는 프로브의 선택 등은 의문의 숙주 세포에 따라 좌우될 수 있다. 분자 장치로부터의 ThresholdTM 시스템은 총 DNA의 피코그램 수준에 대한 정량적 분석이고, 생물약제학에서 오염 DNA의 수준을 모니터링하는 데 사용되었다. 전형적인 분석은 비오티닐화된 ssDNA 결합 단백질, 우레아제-컨쥬게이트된 항-ssDNA 항체 및 DNA 사이의 반응 복합체의 비-서열-특이적 형성을 포함한다. 모든 분석 성분은 제조업체로부터 활용 가능한 완전한 총 DNA 분석 키트에 포함된다. 다양한 상업적 제조업체들은 잔여 숙주 세포 DNA를 검출하기 위한 정량적 PCR 분석, 예컨대 AppTecTM Laboratory Services, BioRelianceTM, Althea Technologies, 등을 제공한다. 인간 바이러스 백신의 숙주 세포 DNA 오염을 측정하기 위한 화학발광 혼성화 분석 및 총 DNA ThresholdTM 시스템의 비교가 기술되었다.
약제학적 조성물
발명의 조성물은 약제학적으로 허용된다. 발명의 조성물은 백신을 포함한다. 발명의 조성물은 항원 및 애주번트에 더불어 성분들을 포함할 수 있는데, 예컨대 그것들은 전형적으로 기술분야에 잘 알려져 있는 하나 이상의 약제학적 담체(들) 및/또는 부형제(들)을 포함할 것이다.
조성물은 티오메르살 또는 2-페녹시에탄올과 같은 보존제를 포함할 수 있다. 그러나, 백신은 실질적으로 수은 물질이 없어야 하고 (예컨대 5 ｕg/ml 미만), 예컨대 티오메르살이 없어야 한다. 수은을 함유하지 않은 백신이 보다 바람직하고, a-토코페롤 석시네이트가 수은 화합물에 대한 대체물로서 포함될 수 있다. 보존제-유리 백신이 가장 바람직하다.
등장성을 제어하기 위하여, 나트륨 염과 같은 생리적 염을 포함하는 것이 바람직하다. 염화나트륨 (NaCl)이 바람직한데, 그것은 1 내지 20 mg/ml 사이로 존재할 수 있다. 존재할 수 있는 다른 염은 염화칼륨, 칼륨 2수소 포스페이트, 2나트륨 포스페이트 탈수화물, 마그네슘 클로라이드, 칼슘 클로라이드 등을 포함한다.
조성물은 일반적으로 200 mOsm/kg 내지 400 mOsm/kg, 바람직하게는 240 내지 360 mOsm/kg의 삼투압 농도를 가질 것이고, 보다 바람직하게는 290 내지 310 mOsm/kg의 범위 내에 속할 것이다. 삼투압 농도는 앞서 백신 접종에 의해 유발된 통증에 대한 영향을 갖지 않는 것으로 보고된 바 있지만, 그럼에도 불구하고 이 범위에서 삼투압 농도를 유지하는 것이 바람직하다.
조성물은 하나 이상의 완충젝를 포함할 수 있다. 전형적인 완충제는 포스페이트 완충제; 트리스 완충제; 보레이트 완충제; 석시네이트 완충제; 히스티딘 완충제 (특히 알루미늄 하이드록사이드 애주번트와 함께); 또는 시트레이트 완충제를 포함한다. 완충제는 전형적으로 5 내지 20 mM의 범위로 포함될 것이다.
조성물의 pH는 일반적으로 5.0 내지 8.1일 것이고, 보다 전형적으로는 6.0 내지 8.0, 예컨대 6.5 내지 7.5, 또는 7.0 내지 7.8일 것이다. 그러므로 발명의 제조 과정은 패키징 전에 벌크 백신의 pH를 조정하는 단계를 포함할 수 있다.
조성물은 바람직하게는 멸균이다. 조성물은 바람직하게는 비-발열성이고, 예컨대 용량당 <1 EU (내독소 유닛, 표준 척도), 바람직하게는 용량당 <0.1 EU를 함유한다. 조성물은 바람직하게는 글루텐이 없다.
발명의 조성물은 특히 분열 또는 표면 항원 백신에 대해 계면활성제, 예컨대 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 계면활성제 ("Tweens"로 알려짐), 옥토자이놀 (예컨대 옥토자이놀-9 (트리톤 X-100) 또는 t-옥틸페녹시폴리에톡시에탄올), 세틸 트라이메틸 암모늄 브로마이드 ("CTAB") 또는 나트륨 데옥시콜레이트를 포함할 수 있다. 계면활성제는 미량으로만 존재할 수 있다. 그러므로 백신은 옥토자이놀-10 및 폴리소르베이트 80의 각각을 1 mg/ml 미만을 포함할 수 있다. 미량의 다른 잔여 성분들은 항생물질일 수 있다 (예컨대 네오마이신, 카나마이신, 폴리믹신 B).
조성물은 단일한 면역화에 대한 물질을 포함할 수 있거나 또는 다중 면역화에 대한 물질을 포함할 수 있고, 그것은 또한 "다중용량" 키트로서 언급된다. 보존제의 포함은 다중용량 배열에서 바람직하다. 다중용량 조성물에 보존제를 포함하는 것에 대한 대체물로서 (또는 그에 더불어), 조성물은 물질의 제거를 위한 무균성 어댑터를 가지고 있는 용기에 함유될 수 있다.
인플루엔자 백신은 전형적으로 약 0.5 ml의 단위용량 부피 (단위 용량)로 투여되지만, 절반의 용량 (즉 약 0.25 ml)이 발명에 따라 아동에게 투여될 수 있다.
조성물 및 키트는 바람직하게는 2℃ 내지 8℃에서 보관된다. 그것들은 냉동되지 않아야 한다. 그것들은 이상적으로는 직사광이 없는 곳에서 유지되어야 한다.
조성물 중의 항원 및 에멀션은 전형적으로 혼합물로 존재하겠지만, 그것들은 초기에는 즉석 혼합을 위해 별도의 성분의 키트의 형태로 제공될 수 있다. 조성물은 일반적으로 대상체에 투여될 때 수성 형태일 것이다.
발명의 키트
발명의 조성물은 전달시, 즉석에서 제조될 수 있다. 그러므로 발명은 혼합할 준비가 되어 있는 다양한 성분들을 포함하는 키트를 제공한다. 키트는 애주번트와 항원이 사용할 때까지 별도로 유지되는 것을 허용한다.
성분들은 키트 내에서 서로 물리적으로 떨어져 있고, 이런 분리는 다양한 방법으로 이루어질 수 있다. 예를 들어, 두 가지 성분은 별도의 용기, 예컨대 바이알에 있을 수 있다. 두 바이알의 내용물은 그런 다음 예컨대 한 바이알의 내용물을 제거하고 그것을 다른 바이알에 첨가함으로써, 또는 두 바이알의 내용물을 별도로 제거하고 그것을 제3 용기에 혼합함으로써 혼합될 수 있다.
바람직한 배열에서, 키트 성분 중 하나는 주사기에 있고 다른 것은 바이알과 같은 용기에 있다. 주사기는 그것의 내용물을 혼합을 위해 제2 용기에 넣기 위해 사용될 수 있고 (예컨대 바늘을 사용하여), 그런 다음 혼합물은 주사기 안으로 흡인된다. 그런 다음 주사기의 혼합된 내용물은 환자에게, 전형적으로 새로운 멸균 바늘을 통해 투여될 수 있다. 주사기에 한 성분을 팩킹하는 것은 환자 투여를 위해 별도의 주사기를 사용하는 것에 대한 필요를 제거한다.
다른 바람직한 구체예에서, 두 개의 키트 성분들은 함께 보유되지만 주사기, 예컨대 이중-챔버 주사기에 별도로 보유된다. 그런 주사기가 작동될 때 (예컨대 환자에게 투여하는 동안), 두 개의 챔버의 내용물이 혼합된다. 이 배열은 사용할 때 별도의 혼합 단계에 대한 필요를 피하게 해준다.
키트 성분들은 일반적으로 수성 형태로 존재할 것이다. 일부 배열에서, 한 성분 (전형적으로 애주번트 성분보다는 항원 성분)은 건조 형태로 (예컨대 동결건조된 형태로) 존재하며, 이때 다른 성분은 수성 형태로 존재한다. 두 성분은 건조 성분을 재활성화하고 환자에게 투여하기 위한 수성 조성물을 얻기 위해 혼합될 수 있다. 동결건조된 성분은 전형적으로 주사기보다는 바이알 내에 위치할 것이다. 건조된 성분들은 락토오스, 수크로오스 또는 만니톨과 같은 안정화제, 뿐만 아니라 예컨대 락토오스/수크로오스 혼합물, 수크로오스/만니톨 혼합물 등과 같은 그것들의 혼합물을 포함할 수 있다. 한 가지 가능한 배열은 사전-충전된 주사기에 수성 애주번트 성분 및 바이알에 동결건조된 항원 성분을 사용한다.
조성물 또는 키트 성분들의 패키징
발명의 조성물에 적합한 용기 (또는 키트 성분)는 바이알, 주사기 (예컨대 일회용 주사기), 비강 분무기, 등을 포함한다. 이들 용기는 멸균되어야 한다.
조성물/성분이 용기, 예컨대 바이알에 위치한 경우, 그런 용기는 선택적으로 유리 또는 플라스틱 물질로 만들어진다. 일부 구체예에서, 그런 용기는 실리콘 첨가된 용기이다. 바이알은 바람직하게 조성물이 그것에 첨가되기 전에 멸균된다. 라텍스-민감성 환자에서의 문제점들을 피하기 위하여, 바이알은 바람직하게는 라텍스-없는 스톱퍼로 밀봉되고, 모든 패키징 물질에서 라텍스가 없는 것이 바람직하다. 바이알은 백신의 단일 용량을 포함할 수 있고, 또는 그것은 하나 이상의 용량, 예컨대 10 용량을 포함할 수 있다 (즉 "다중 용량" 바이알). 일부 구체예에서, 바이알은 무색 유리로 만들어진다.
바이알은 적응된 캡 (예컨대 Luer 자물쇠)을 가질 수 있어서 사전-충전된 주사기는 캡 안으로 삽입될 수 있고, 주사기의 내용물은 바이알 안으로 추진될 수 있으며 (예컨대 그 안의 동결건조된 물질을 복원하기 위하여), 바이알의 내용물은 주사기 안으로 다시 제거될 수 있다. 바이알로부터 주사기가 제거된 후, 바늘이 부착되고 조성물이 환자에게 투여될 수 있다. 캡은 바람직하게 밀봉 부분 또는 커버 내부에 위치하여서, 밀봉 부분 또는 커버가 캡이 접근할 수 있기 전에 제거되어야 한다. 바이알은 특히 다중 용량 바이알에 대해, 내용물의 무균 제거를 허용하는 캡을 가질 수 있다.
성분이 주사기 안으로 패키징되는 경우, 주사기는 그것에 부착된 바늘을 가질 수 있다. 만약 바늘이 부착되지 않는다면, 별도의 바늘이 조립 및 사용을 위해 주사기와 함께 공급될 수 있다. 그런 바늘은 덮개가 있을 수 있다. 안전바늘이 바람직하다. 1-인치 23-게이지, 1-인치 25-게이지 및 5/8-인치 25-게이지 바늘이 전형적이다. 주사기에는 롯트 번호, 인플루엔자 계절 및 내용물의 유효 기한이 인쇄될 수 있는 벗겨질 수 있는 라벨이 제공되어, 기록 보관을 용이하게 할 수 있다. 주사기의 플런저는 바람직하게 흡인되는 동안 플런저가 우연히 제거되는 것을 방지하기 위한 스톱퍼를 가진다. 주사기는 라텍스 고무 캡 및/또는 플런저를 가질 수 있다. 일회용 주사기는 단일 용량의 백신을 함유한다. 주사기는 일반적으로 바늘이 부착되기 전에 팁을 밀봉하기 위한 팁 캡을 가질 것이고, 팁 캡은 바람직하게는 부틸 고무로 만들어진다. 만약 주사기 및 바늘이 별도로 패키징되면 바늘은 바람직하게 부틸 고무 쉴드로 피팅된다. 유용한 주사기는 상표명 "Tip-Lok"TM 하에 시판되는 것들이다.
용기들은 절반의 용량 부피를 나타내기 위하여, 예컨대 아동에게의 전달을 용이하게 하기 위해 표시될 수 있다. 예를 들어, 0.5 ml 용량을 함유한 주사기는 0.25 ml 부피를 나타내는 표시를 가질 수 있다.
유리 용기 (예컨대 주사기 또는 바이알)가 사용되는 경우에, 소다 석회 유리로부터보다는 보로실리케이트 유리로부터 만들어진 용기를 사용하는 것이 바람직하다. 일부 구체예에서, 용기는 실리콘 첨가된 용기, 예컨대 실리콘 첨가된 유리 용기이다.
키트 또는 조성물이 백신의 상세한 설명, 예컨대 투여에 대한 설명, 백신 내 항원의 상세한 설명 등을 포함한 리플렛과 함께 패키징될 수 있다 (예컨대 동일한 박스에). 설명은 또한 예컨대 백신 접종 후 아나필락시스 반응 등의 경우에 쉽게 이용할 수 있는 아드레날린 용액을 유지하기 위한 경고를 함유할 수 있다.
치료 방법 및 백신의 투여
발명의 조성물은 인간 환자에 투여하기에 적합하고, 발명은 발명의 조성물을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자에서 면역 반응을 불러 일으키는 방법을 제공한다. 상기에서 기술된 것과 같이, 일부 구체예에서, 환자는 면역조절 치료법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법 등) 중인 면역손상된 개체이다.
이들 방법 및 용도는 일반적으로 항체 반응, 바람직하게는 보호성 항체 반응을 생성하기 위해 사용될 것이다. 인플루엔자 바이러스 백신 접종 후 항체 반응, 중화 능력 및 보호를 평가하는 방법들은 기술분야에 잘 알려져 있다. 인간 연구는 인간 인플루엔자 바이러스의 헤마글루티닌에 대한 항체 역가가 보호와 상관됨을 보여주었다 (약 30 내지 40의 혈청 샘플 적혈구 응집-억제 역가는 상동성 바이러스에 의한 감염으로부터 약 50% 보호를 제공한다). 항체 반응은 전형적으로 적혈구 응집 억제 (HI)에 의해, 미세중화 (Micro-NT)에 의해 및/또는 단일 방사상 용혈 (SRH)에 의해 측정되지만 임의의 다른 적합한 방법들이 사용될 수 있다. 그런 분석 기법은 기술분야에 잘 알려져 있다.
본원에서 사용되는 용어 "투여하는", "투여" 등은, 임의의 적합한 경로(들)에 의해 대상체의 신체에 국소적으로 또는 전신적으로 이용할 수 있는 약제학적 조성물 (예컨대 백신)을 만드는 것을 나타낸다. 발명의 조성물은 다양한 방법으로 투여될 수 있다. 가장 바람직한 면역화 경로는 근육내 주사 (예컨대 팔 또는 다리로의)에 의한 것이지만, 다른 이용 가능한 경로는 피하 주사, 비강 내, 경구, 점막, 점막경유, 비경구, 피내, 피부경유, 경피 등을 포함한다. 투여 경로의 보다 완전한 목록은 www.fda.gov/Drugs/DevelopmentApprovalProcess/FormsSubmissionRequirements/ElectronicSubmissions/DataStandardsManualmonographs/ucm071667.htm에서 찾아볼 수 있다.
발명의 바람직한 조성물은, 그것이 아동에게 투여될지라도, 각각의 인플루엔자 스트레인에 대한 성인 효능에 대한 1, 2 또는 3가지 CHMP 기준을 만족시킬 것이다. 이들 기준은 (1) >70% 혈청방어; (2) >40% 혈청변환 또는 유의미한 증가; 및/또는 (3) >2.5배의 GMT 증가이다. 고령자 (>65세)에서, 이들 기준은 (1) >60% 혈청방어; (2) >30% 혈청변환; 및/또는 (3)>2-배의 GMT 증가이다.
발명은 특히 A 및 B 바이러스 스트레인과 같은 상이한 인플루엔자 바이러스 스트레인에 대해 방어하는 면역 반응을 불러 일으키기에 유용하다.
본원에서 사용되는, 용어 "유효량" 및 "유효 용량"은 의도된 목적(들)을 만족시키기에 충분한, 즉 조직 또는 대상체에서 허용되는 유익/위험 비율로 원하는 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하는 화합물 또는 조성물의 양 또는 용량을 나타낸다. 예를 들어, 본 발명의 특정 구체예에서, 목적(들)은 대상체에서 원하는 면역 반응을 유도하거나 증대시키기 위한 것일 수 있다. 관련된 의도된 목적은 객관적이거나 (즉 일부 시험 또는 마커에 의해 측정 가능함) 주관적일 수 있다 (즉 대상체가 느낌 또는 효과의 암시를 제공함). 일부 구체예에서, 유효량은 특정 기준을 만족하는 대상체 집단에 투여될 때 (예를 들어 의학적 또는 치료 이력, 유전적 또는 연령 프로필 등에 의해 측정되는 바), 통계학적으로 유의미한 반응이 집단 중에서 얻어지는 양이다. 유효량은 통상적으로 다중 유닛 용량을 포함할 수 있는 투약 양생법으로 투여된다. 임의의 특정 약제학적 제제에 대해, 유효량 (및/또는 유효한 투약 양생법 내의 적절한 유닛 용량)은 예를 들면 투여 경로, 집단 프로필, 등등에 따라 달라질 수 있다. 기술분야에 통상적인 지식을 가진 사람들은 발명의 일부 구체예에서, 만약 긍정적 결과와 상관된 단위용량 양생법의 맥락에서 투여에 적절한 양을 함유한다면 유닛 단위용량은 유효량을 함유하는 것으로 간주될 수 있는 것이 인지될 것이다.
발명의 조성물을 사용한 치료는 단일 용량 스케줄 또는 다중 용량 스케줄에 의한 것일 수 있다. 그러므로, 임의의 특정 인플루엔자 계절에 (예컨대 주어진 12개월 기간에, 전형적으로 가을 또는 겨울에) 환자는 단일 용량의 발명의 조성물 또는 하나 이상의 용량 (예컨대 2 용량)의 발명의 조성물을 받을 수 있다. 치료가 둘 이상의 용량의 발명의 조성물의 투여를 포함하는 경우에, 각각의 용량은 일반적으로 실질적으로 동일한 시간에 주어질 것이다, 즉 그것들은 백신접종 센터에 동일한 방문 중에 투여되지 않을 것이다. 발명의 조성물의 연속적인 투여 사이의 시간은 전형적으로 적어도 n일이고, n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 42, 49, 56 또는 그 이상으로부터 선택된다. 전형적으로, 2 용량이 적어도 1주 (예컨대 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 6주, 약 8주, 약 12주, 약 16주, 등) 간격으로 투여된다. 두 용량이 25 내지 30일 (예컨대 28일) 간격으로 제공되는 것이 특히 유용하다. 용량들 사이의 시간은 전형적으로 6개월보다 길지 않을 것이다. 용량은 서로 약 4주 간격으로, 예컨대 0일에, 그런 다음 약 28일에 제공될 수 있다. 이런 방법으로 투약을 분리하는 것은 양호한 면역 반응을 제공하는 것으로 밝혀졌다.
발명의 조성물이 일차 면역화 스케줄에 사용되는 경우, 발명의 조성물을 사용하는 용량(들)에 이어 하나 이상의 추가 백신 (예컨대 1, 2, 3, 또는 그 이상의 추가 백신)의 투여가 이어진다. 시동과 추가 백신의 투여 사이의 적합한 시간은 일상적으로 결정될 수 있다. 시동 용량의 투여와 추가 백신의 투여 사이의 시간은 전형적으로 적어도 p개월이고, p는 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72 또는 그 이상으로부터 선택된다. 이상적으로, p는 9 이상이고, 9 내지 30의 범위 내에 있을 수 있다.
다중 용량 스케줄에서 다양한 용량이 동일한 또는 상이한 경로, 예컨대 비경구 시동 및 점막 추가, 점막 시동 및 비경구 추가 등에 의해 제공될 수 있다. 전형적으로, 반드시는 아니지만, 그것들은 동일한 경로에 의해 제공될 것이다. 발명에 의해 제조된 백신은 환자에게 다른 백신과 실질적으로 동일한 시간에 (예컨대 건강관리 전문의 또는 백신 접종 센터에의 동일한 의료적 상담 또는 방문 동안에), 예컨대 실질적으로 홍역 백신, 유행성 이하선염 백신, 풍진 백신, MMR 백신, 수두 백신, MMRV 백신, 디프테리아 백신, 파상풍 백신, 백일해 백신, DTP 백신, 컨쥬게이트된 H. 인플루엔자 타입 b 백신, 비활성화된 폴리오바이러스 백신, B형 간염 바이러스 백신, 수막염구균 컨쥬게이트 백신 (예컨대 4가 A-C-W135-Y 백신), 폐렴구균성 컨쥬게이트 백신 등과 동일한 시간에 투여될 수 있다.
유사하게, 발명의 백신은 환자에게 항바이러스 화합물, 특히 인플루엔자 바이러스에 대해 활성인 항바이러스 화합물 (예컨대 오셀타미비르 및/또는 자나미비르)와 실질적으로 동일한 시간에 (예컨대 건강관리 전문의 또는 백신 접종 센터에의 동일한 의료적 상담 또는 방문 동안에) 투여될 수 있다. 이들 항바이러스제는 뉴라미니다제 억제제, 예컨대 (3R,4R,5S)-4-아세틸아미노-5-아미노-3(l-에틸프로폭시)-l-사이클로헥센-l-카르복실산 또는 5-(아세틸아미노)-4-[(아미노이미노메틸)-아미노]-2,6-안하이드로-3,4,5-트라이데옥시-D-글리세로-D-갈락토논-2-엔온산, 및 그것의 에스테르 (예컨대 에틸 에스테르) 및 그것의 염 (예컨대 포스페이트 염)을 포함한다. 바람직한 항바이러스제는 오셀타미비르 포스페이트 (TAMIFLUTM)로도 알려져 있는 (3R,4R,5S)-4-아세틸아미노-5-아미노-3(l-에틸프로폭시)-l-사이클로헥센-l-카르복실산, 에틸 에스테르, 포스페이트 (1:1)이다.
스타틴 수령체에 대한 고용량 독감 백신
고용량 백신이 표적 집단의 대상체에게 투여되는 구체예에 대해, 그런 백신은 애주번트가 첨가되지 않은 백신일 수 있다. 일부 구체예에서, 본 발명의 표적 집단은 대상체의 연령에 관계없이, 면역조절제 치료법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법 등) 중인 인간 대상체를 나타내는 한편, 다른 구체예에서, 본 발명의 표적 집단은 면역조절제 치료법 (예컨대 스타틴 요법, NSAID 요법 등) 중이면서 또한 특정 연령 그룹, 예컨대 65세 이상의 연령; 18세와 64세 사이의 연령 등에 속한 인간 대상체를 나타낸다. 그런 대상체는 비-합성 스타틴, 합성 스타틴 또는 그것들의 조합을 포함하는 스타틴 요법 중에 있을 수 있다. 그런 집단 중 어느 것이든지 본원에 기술된 발명으로부터 유익을 얻을 수 있지만, 특히 합성 스타틴 요법 중인 대상체, 장기 스타틴 요법 중인 대상체 또는 둘 다에에게 유익할 수 있다.
고용량의 백신은 일가 및 다가 (예컨대 3가 및 4가) 인플루엔자 백신을 포함하고 고용량 (예컨대 50 ｕg, 60 ｕg, 70 ｕg, 80 ｕg, 90 ｕg)의 각각의 스트레인을 함유할 수 있다. 그런 백신 조성물은 적합한 항원(들)을 함유하는 주사 가능한 멸균 현탁액 (예컨대 0.5 mL)으로서 제형될 수 있다. 그런 조성물을 제조하기 위해 사용된 바이러스는 선택적으로 부화된 계란에서 제조될 수 있고, 선택적으로 비활성화될 수 있으며 (예컨대 포름알데하이드를 사용함), 선택적으로 분열될 수 있고 (예컨대 비이온성 계면활성제를 사용함), A/(H1N1)-형 스트레인, A/(H3N2)-형 스트레인 및 B 스트레인을 포함할 수 있다. 몇몇 실례를 제시하자면, A/California/7/2009 (H1N1), A/Victoria/210/2009 (H3N2), 및 B/Brisbane/60/2008 스트레인이 한 계절용으로 제형될 수 있는 한편, A/California/7/2009 (H1N1), A/Victoria/361/2011 (H3N2), 및 B/Texas/6/2011 (B/Wisconsin/1/2010-형 바이러스) 스트레인들은 다른 계절용으로 제형될 수 있다. 그런 백신 조성물은 선택적으로 사용준비가 되어 있는 주사기에 제공될 수 있고 (예컨대 0.5 mL) 스타틴 요법 중인 환자에게 델타모양의 구역에서 근육내로 (IM) 투여될 수 있다.
일반적 사항
청구범위를 포함한 명세서 전체를 통해서, 맥락이 허용하는 경우, 용어 "포함하는" 및 그것의 변용, 예컨대 "포함하다" 또는 "포함하는"은 반드시 임의의 다른 요소들 (예컨대 정수들)을 배제하지 않으면서 표시된 요소 (예컨대 정수) 또는 요소들 (예컨대 정수들)을 포함하는 것으로 해석되어야 한다.
용어 "실질적으로"는 "완전히"를 배제하지 않는다, 예컨대 Y가 "실질적으로 없는" 조성물은 완전히 Y가 없을 수 있다. 필요에 따라, 단어 "실질적으로"는 발명의 정의로부터 생략될 수 있다.
수치 n과 관련하여 용어 "약"은 특정 집단 내에서, 예컨대 통계학적 오차, 편차 또는 변화 내에서 전형적인 또는 허용되는 것으로 여겨지는 수치의 범위를 나타내며, 그것으로부터 관련된 데이터 세트가 특정 측정 또는 분석에 대해 얻어진다. 기술분야의 숙련자들은 쉽게 그런 범위를 이해할 수 있다. 예를 들어, 수치 n은 (n ± 1%), (n ± 1%), (n ± 2%), (n ± 3%), (n ± 4%), (n ± 5%), (n ± 6%), (n ± 7%), (n ± 8%), (n ± 9%), (n ± 10%), (n ± 11%), (n ± 12%), (n ± 13%), (n ± 14%), (n ± 15%), (n ± 16%), (n ± 17), (n ± 18%), (n ± 19%), (n ±20%) 등을 의미할 수 있다.
특수하게 명시되지 않는 한, 둘 이상의 성분의 혼합 단계를 포함하는 과정은 혼합의 어떠한 특수한 순서를 필요로 하지 않는다. 그러므로 성분들은 임의의 순서로 혼합될 수 있다. 3가지 성분이 있는 경우 두 성분이 서로 조합된 후, 그 조합이 제3 성분과 조합되는 등으로 혼합될 수 있다.
동물 (특히 소) 물질이 세포 배양에 사용되는 경우, 그것들은 전염성 해면상 뇌병증 (TSE)이 없는, 특히 소 해면상 뇌병증 (BSE)이 없는 공급원으로부터 얻어져야 한다. 전체적으로, 동물-유도된 물질이 전체적으로 없이 세포가 배양되는 것이 바람직하다.
화합물이 신체에 조성물의 일부로서 투여되는 경우에는 그 화합물은 드르게는 적합한 선구약물에 의해 대체될 수 있다.
세포 기질이 재분류 또는 역 유전학적 과정에 사용되는 경우, 예컨대 유럽 약전 일반 챕터 5.2.3., "Cell substrates for production of vaccines for human use"에서와 같이, 인간 백신 제조에 사용하기 위해 승인된 것이 바람직하다.
따라서, 본 발명은 한정하는 것은 아니지만, 다음의 구체예들을 포함한다:
1. 면역손상된 또는 면역억제의 위험이 있는 대상체를 선택하는 단계; 및
그 대상체에 애주번트, 고용량 항원 또는 그것들의 조합을 포함하는 백신을 대상체에서 백신에 대한 면역 반응을 향상시키기에 효과적인 양으로 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 면역 반응을 향상시키는 방법.
2. 대상체에 애주번트, 고용량 항원 또는 그것들의 조합을 포함하는 백신을 대상체에서 백신에 대한 면역 반응을 향상시키기에 효과적인 양으로 투여하는 단계를 포함하고,
대상체는 면역손상되거나 면역억제의 위험이 있는,
면역 반응을 향상시키는 방법.
3. 면역조절제 요법을 받고 있는 대상체에 백신을 백신 항원(들)에 대한 보호성 면역 반응을 유도하기에 효과적인 양으로 투여하는 방법.
4. 대상체에 약제학적 조성물을 대상체에서 면역 반응을 유도하기에 효과적인 양으로 투여하는 단계를 포함하는, 면역손상된 대상체의 치료 방법.
5. 면역조절제 요법을 받고 있는 대상체에서 면역 반응을 향상시키기 위한 방법에, 대상체에서 면역 반응을 향상시키기에 효과적인 양으로 사용하기 위한 조성물.
6. 면역조절제 요법 중인 환자에 대한 백신 조성물.
7. 면역조절제 요법 중인 환자에서 사용하기 위한 백신 조성물.
8. 면역조절제 요법 중인 환자에서 감염을 방지하기 위한 백신 조성물.
9. 면역손상된 대상체를 치료하기 위한 의약으로서 사용하기 위한 조성물.
10. 면역손상된 대상체에서 면역 반응을 일으키기 위한 의약의 제조를 위한 조성물의 용도.
11. 애주번트 첨가된 및/또는 고용량 백신의 제조 방법으로서, 백신은 면역손상된 대상체에서 사용하기 위한 것이다.
12. 대상체가 손상된 면역력과 관련된 상태를 가지는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
13. 대상체가 스타틴 요법, NSAID 요법, 또는 그것들의 조합된 요법을 받는 중인, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
14. 대상체가
65세 이상;
60세 이상;
45세 이상;
45세에서 64세 사이;
18세에서 64세 사이; 또는
유아인, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
15. 대상체가 손상된 면역력과 관련된 질환 또는 장애를 가지는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
16. 대상체가 면역조절제 요법 중에 있는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
17. 대상체가 적어도 1주 동안 치료법을 받았던, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
18. 대상체가 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주 또는 그 이상 동안 치료법을 받았던, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
18. 대상체가 현재 치료법을 받고 있지 않지만 지난 3개월 이내에 종결된 치료법을 받았던, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
19. 대상체가 현재 치료법을 받고 있지 않지만 다음 3개월 내에 치료법을 받을 스케줄이 있는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
20. 대상체가 스타틴 요법, NSAID 요법, 인터페론 요법, 항정신병약 및/또는 항우울제 요법, 또는 그것들의 임의의 조합을 받고 있는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
21. 스타틴 요법은 합성 스타틴, 비-합성 스타틴, 또는 그것들의 조합을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
22. 스타틴 요법은 프라바스타틴, 심바스타틴, 로바스타틴 및 메바스타틴, 플루바스타틴, 아토르바스타틴, 세리바스타틴, 로수바스타틴 및 피타바스타틴으로 구성되는 군으로부터 선택된 스타틴을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
23. 스타틴 요법이 플루바스타틴, 아토르바스타틴, 세리바스타틴, 로수바스타틴 및 피타바스타틴으로 구성되는 군으로부터 선택된 합성 스타틴을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
24. NSAID 요법이 다음 중 하나 이상을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도:
살리실레이트 (예컨대 아스피린 (아세틸살리실산), 다이플루니살 (DolobidTM), 살사레이트 (DisalcidTM) 및 콜린 마그네슘 트라이살리실레이트 (TrilisateTM)); 프로피온산 유도체 (예컨대 이부프로펜, 덱시부프로펜, 나프록센, 페노프로펜, 케토프로펜, 덱스케토프로펜, 플루르비프로펜, 옥사프로진 및 록소프로펜); 아세트산 유도체 (예컨대 인도메타신, 톨메틴, 설린닥, 에토돌락, 케토롤락, 다이클로페낙, 아세클로페낙 및 나부메톤); 에놀산 (옥시캄) 유도체 (예컨대 피록시캄, 멜록시캄, 네톡시캄, 드록시캄, 로르녹시캄 및 아이속시캄); 안트라닐산 유도체 (페나메이트) (예컨대 메페남산, 메클로페탐산, 플루페남산 및 톨페남산); 선택적 COX-2 억제제 (콕십) (예컨대 셀레콕십, 로페콕십, 발데콕십, 루미라콕십, 에토리콕십 및 피로콕십); 설폰아닐리드 (예컨대 니메설리드) 및 기타, 예컨대 리코펠론, H-하르파가지드 및 라이신 클로닉시네이트.
25. 조성물이 애주번트를 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
26. 조성물이 계면활성제를 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
27. 조성물이 수-중-유 에멀션을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
28. 조성물이 알루미늄 염 애주번트를 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
29. 조성물이 알루미늄 포스페이트 애주번트 및/또는 알루미늄 하이드록사이드 애주번트를 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
30. 조성물이 TLR 아고니스트를 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
31. 조성물이 비로좀을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
32. 조성물이 스쿠알렌을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
33. 조성물이 폴리소르베이트를 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
34. 조성물이 스쿠알렌, 폴리소르베이트 80 및 소르비탄 트라이올레에이트를 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
35. 조성물이 중량으로 약 4.3% 스쿠알렌, 약 0.5% 폴리소르베이트 80 및 약 0.48% 소르비탄 트라이올레에이트를 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
36. 조성물이 백신이거나 백신을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
37. 조성물이 항원이거나 항원을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
38. 조성물이 고-용량 항원, 표준-용량 항원 또는 저-용량 항원이거나 그것을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
39. 조성물이 표준-용량 항원의 1/8과 10-배 사이의 양을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
40. 조성물이 표준-용량 항원의 2-배 내지 10-배 사이의 양을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
41. 조성물이 애주번트를 함유하지 않는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
42. 조성물이 수-중-유 에멀션 애주번트를 함유하지 않는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
43. 조성물이 인플루엔자 백신인, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
44. 조성물이 다가의 인플루엔자 백신인, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
45. 인플루엔자 백신이 스트레인당 약 30 ｕg 내지 약 150 ｕg의 항원을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
46. 인플루엔자 백신이 스트레인당 약 60 ｕg의 항원을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
47. 인플루엔자 백신이 H1N1 스트레인, H3N2 스트레인, B 스트레인 또는 그것들의 임의의 조합을 포함하는, 선행하는 구체예들 중 임의의 한 구체예의 조성물, 방법 또는 용도.
실시예
상기에서 언급한 것과 같이, 스타틴 요법은 면역체계에 대한 이차 효과와 관련되었다. 이들 효과는 면역조절 및 항-염증성 효과를 포함한다. 일상적으로 스타틴을 취하는 많은 환자들이 고령자이고 고령자는 인플루엔자의 합병증의 위험이 더 높기 때문에 (Thompson, W. W., Shay, D. K., Weintraub, E., Brammer, L., Cox, N., Anderson, L. J., & Fukuda, K. (2003). Mortality associated with influenza and respiratory syncytial virus in the United States. Jama, 289(2):179-186), 본 발명자들은 인플루엔자 백신에 대한 면역 반응에 미치는 스타틴 요법의 영향을 평가하기 위하여 고령자에서 애주번트 첨가된 및 애주번트가 첨가되지 않은 인플루엔자 백신의 대규모 비교용 면역원성 연구로부터의 데이터를 이용하였다.
본 발명자들은 백신 접종에 대한 면역 반응에 미치는 스타틴 요법의 영향을 평가하기 위하여 환즈들에서 애주번트 첨가된 대 애주번트가 첨가되지 않은 인플루엔자 백신의 비교 실험으로부터 입수할 수 있는 면역원성 측정을 활용하였다. 전체적으로, 5,000명 이상의 실험 참가자에 대한 데이터를 분석을 위해 활용할 수 있었다. 만성 스타틴 요법 중인 및 요법이 끝난 개체들에서 인플루엔자 H1N1, H3N2 및 B 스트레인에 대한 HAI 기하학적 평균 역가의 비교는 스타틴 수령체에서의 역가가 각각 38%, 67% 및 38%였고, 스타틴을 받지 않은 개체들에서보다 스타틴 수령체에서 더 낮았음을 보여주었다. 백신 면역 반응에 대한 이런 면역억제 효과는 특히 합성 스타틴을 받은 개체에서 극적이었다. 이들 효과는 애주번트 첨가된 및 애주번트가 첨가되지 않은 백신 그룹 둘 다에서 볼 수 있었다. 그러나, 애주번트 첨가된 백신 그룹의 역가가 더 높았기 때문에, 백신 반응에 대한 스타틴 요법의 영향은 적어도 부분적으로는 애주번트 첨가된 백신의 사용에 의하여 상쇄되었다. 이들 결과는 고령자에서의 백신 용법 권장뿐 아니라 미래의 임상 실험 디자인 둘 다에 대해서 함축적 의미를 갖는다.
방법
2009년에서 2010년 및 2010년에서 2011년의 인플루엔자 계절 동안, 콜롬비아, 파나마, 필리핀 및 미국에서 65세 이상의 14,000명 이상의 성인에서 MF-59 애주번트 첨가된 3가 인플루엔자 백신 ("aTIV") 및 애주번트가 첨가되지 않은 TIV의 안전성 및 면역원성을 비교하는 무작위의, 제어된, 관찰자-맹검 임상 실험을 수행하였다 (Frey SE, Aplasca-De Los Reyes MR, Reynales H, Bermal NN, Nicolay U, Narasimhan V, Forleo-Neto E, and Arora AK. Comparison of the Safety and Immunogenicity of an MF-59 Adjuvanted with a Non-Adjuvanted seasonal influenza vaccine in Elderly Subjects. Vaccine in press). 이 평가의 일부로서, 스타틴 사용에 대한 정보를 수집하였고 이것을 비교 분석에서 잠재적인 교란요인으로서 간주하였다.
혈액 샘플을 백신 접종하는 날 및 계절적으로 적절한 인플루엔자 백신을 수령한 후 28일에 얻었다. 표준 방법론을 사용하여 HAI 역가를 측정하였다 (Murphy, B. R., Phelan, M. A., Nelson, D. L., Yarchoan, R., Tierney, E. L., Alling, D. W., & Chanock, R. M. (1981). Hemagglutinin-specific enzyme-linked immunosorbent assay for antibodies to influenza A and B viruses. Journal of clinical microbiology, 13(3): 554-560).
본 발명자들의 현재 사후분석의 목적에 대해서는, 환자들을 만약 그들이 백신 접조을 받기 전 28일 이상 동안 및 백신 접종 후 22일 동안 약물치료를 받았다면 스타틴 요법 중에 있는 것으로 분류하였다. 이 시간 창 동안 스타틴을 받지 않은 개체들은 대조표준으로 간주하였다. 어느 쪽의 그룹에도 맞지 않았던 소수의 개인은 분석으로부터 누락시켰다. 환자들을 추가로 합성 또는 자연 발생적인 스타틴 중 어느 것을 받고 있는지에 대해 추가로 계층화하였다.
그런 다음 백신 상동성 인플루엔자 A 스트레인 H1N1 (California), H3N2 (Perth) 및 인플루엔자 B (Brisbane)에 대한 기하학적 평균 역가 (GMT) 및 GMT 비율을 스타틴과 대조 그룹 사이에서 비교하였다. 조정된 비교에서, ANCOVA 분석은 다음의 변수들을 포함하였다: 백신 그룹 (aTIV, TIV), -28일 내지 22일의 스타틴 사용자 (예/아니오), 고위험 상황 (예/아니오), 성별, 로그-사전-백신 접종 역가 및 연령 (둘 다 연속적인 변수임). 백신 유형과 스타틴 사이의 상호작용의 평가 및 면역 반응에 미치는 스타틴의 영향에 대한 백신 유형의 영향이 드러나지 않았기 때문에 (p>0.05), 스타틴 수령체와 대조표준에서의 GMT의 비율을 조합된 연구 그룹에 대해 계산하였다.
결과
MF-59 애주번트 첨가된 TIV 그룹 ("aTIV")에서 3479명과 애주번트가 첨가되지 않은 TIV 그룹 ("TIV")에서 3482명, 총 6961명의 대상체는 분석을 위해 활용할 수 있는 22일 HAI 역가를 나타냈다. 종합적으로, 2798 및 2786 aTIV 및 TIV 수령체가 각각 대조표준이었고 681 및 696 개체가 각각 스타틴 사용자의 정의를 충족하는 것으로 측정되었다. 스타틴 사용자 중에서, aTIV의 76% 및 TIV의 74%의 스타틴 사용자가 발효 유도된 스타틴 (프라바스타틴, 심바스타틴, 로바스타틴, 아디보코르)을 받았고 나머지가 합성 스타틴 (플루바스타틴, 아토르바스타틴, 로수바스타틴)을 받았다. 전체적으로 스타틴 사용자의 75%가 고위험 의학적 상태를 가진 것으로 여겨졌다. 가장 흔한 범주는 COPD가 이어지는 근원적인 신경학적 질환, 천식, 울혈성 심부전, 신기능부전 및 간질환이었다 (표 1). 전체적으로, 스타틴 사용자의 55% 및 대조표준의 68%가 남성이었고 대조표준의 74% 및 스타틴 사용자의 67%가 65 내지 75세의 연령이었으며 나머지는 75세보다 많은 연령이었다. 3가지 인플루엔자 백신 스트레인에 대한 HAI GMT의 결과를 아래 2개의 표에서 나타내는데, 1일의 비율은 연령, 위험군 및 백신에 대해 조정된 것이고 22일의 비율 또한 예비-역가에 대해 조정되었다.
각 그룹에서의 동반-이환율
공-이환율 스타틴 없음 스타틴 요법 일 - 22일 내지 28일
aTIV
(N=2798) 		TIV
(N=2786) 		aTIV
(N=681) 		TIV
(N=696)
천식 120 (4%) 112 (4%) 42 (6%) 43 (6%)
CHF 46 (2%) 46 (2%) 31(5%) 33 (5%)
COPD 105 (4%) 113 (4%) 66 (10%) 61 (9%)
Hepatic disease 9 (<1%) 9 (<1%) 4 (<1%) 4 (<1%)
Neurological? 591 (21%) 576 (21%) 485 (71%) 469 (67%)
Renal insufficiency 28 (1%) 27 (<1%) 21 (3%) 30 (4%)
3가지 인플루엔자 스트레인의 각각에 대한 스타틴 사용 및 백신 그룹에 의한 GMT 역가
인플루엔자 스트레인 경과일 스타틴 없는 그룹 스타틴 그룹
aTIV TIV aTIV TIV
H1N1 California 09 1 n 2797 2784 681 696
GMT 12 12 22 24
95% CI 12-13 11-12 19-24 21-26
Ratio ST -/ST+
(95% CI) 		0.62 (0.57-0.67)
22 n 2797 2786 681 696
GMT 196 140 170 129
95% CI 185-206 133-148 155-188 117-142
Ratio ST -/ST+
(95% CI) 		1.38 ( 1.27-1.50)
H3N2 Perth 09 1 n 2797 2784 681 696
GMT 50 49 47 44
95% CI 47-53 46-52 42-52 40-49
Ratio ST -/ST+
(95% CI) 		1.13 (1.02 - 1.25)
22 n 2797 2785 681 696
GMT 669 421 356 209
95% CI 638-701 402-441 324-392 190-230
Ratio ST -/ST+
(95% CI) 		1.67 (1.54-1.80)
B Brisbane 08 1 n 2798 2786 681 696
GMT 9.6 9.4 16 17
95% CI 9.2-9.9 9.1-9.8 15-18 15-18
Ratio ST -/ST+
(95% CI) 		0.68 (0.64-0.72)
22 n 2798 2786 681 696
GMT 50 43 48 40
95% CI 47-52 41-46 44-52 37-44
Ratio ST -/ST+
(95% CI) 		1.38 (1.28-1.49)
두 개의 표에서 알 수 있는 것과 같이, 전체적인 예비-역가는 3가지 스트레인의 각각에 대한 각각의 백신 그룹에서 동일하였다. 드러나, 스타틴 요법 중의 개인들은 H1N1 및 인플루엔자 B에 대해 더 높은 예비-역가를 가졌던 반면, 인플루엔자 H3N2에 대해서는 그것과 반대였다. 백신 접종 후 22일의 역가는 3가지 모든 항원에 대해 aTIV에서 상당히 더 높았다. 스타틴 수령체를 백신 유형과 관계없이 대조표준과 비교하는 분석에서, GMT 역가 비율은 H1N1에 대한 대조표준에서 38% 더 높았고, H3N2에 대해서는 67% 더 높았으며 인플루엔자 B에 대해서는 38% 더 높았는데, 이것은 연령, 고위험군 상황, 예비-DURR 및 수령한 백신의 유형에 대한 조정에도 불구하고 3가지 모든 항원에 대해 스타틴 수령체에서 면역원성의 뚜렷한 감소를 나타냈다. 유사한 데이터를 인플루엔자 B의 이종성 스트레인 (Malaysia), 및 H3N2 (Brisbane 및 Wisconsin)에 대해 시험했을 때 얻었다 (데이터는 제시하지 않음).
스타틴 유형에 의해 계층화된 결과를 표 3에 나타낸다.
22일째에 평가된 백신 반응에 미치는 스트레인 유형의 영향
상동성 스트레인 ST -/ 발효 ST +
비율
(95% CI)		 ST -/합성 ST +
비율
(95% CI)		 발효 / 합성 비율
(95% CI)
B Brisbane 08 1.32 (1.21-1.43) 1.59 (1.39-1.81) 1.21 (1.05-1.39)
H1N1 California 09 1.31 (1.20-1.44) 1.62 (1.40-1.87) 1.23 (1.05-1.44)
H3N2 Perth 09 1.59 (1.46-1.73) 1.91 (1.68-2.19) 1.20 (1.04-1.39)
발효 유도된 스타틴을 받은 환자들이 합성 스타틴을 받은 환자들보다 높은 역가를 나타냈고, 그것은 후자가 인플루엔자 백신 반응에 대하여 더 큰 면역억제 효과를 나타냈음을 가리킨다. 유사한 통계학적으로 유의미하지 않은 경향을 또한 이종성 스트레인에 대한 실험에서 볼 수 있었다.
논의
개발도상국 내에서, 기대수명은 개발도상국에서의 고령자 집단의 비율이 증가함에 따라 꾸준히 증가하고 있다 (Mathers, C. D., Sadana, R., Salomon, J. A., Murray, C. J., & Lopez, A. D. (2001). Healthy life expectancy in 191 countries, 1999. The Lancet, 357(9269):1685-1691). 그런 개선은 백신 접종 및 스타틴과 같은 약물처리를 포함한 공중건강 척도에 기인하였다 (www.who.int/bulletin/volumes/86/2/07-040089/en/accessed July 16, 2014). 스타틴은 고콜레스테롤혈증의 치료를 위해 성인 및 노인에서 광범위하게 사용된다. 본 발명자들은 이 부류의 약물, 특히 합성적으로 유도된 스타틴이 평가된 집단에서 애주번트 첨가된 및 애주번트가 첨가되지 않은 인플루엔자 백신 둘 다에 대한 면역 반응을 극적으로 억제하는 것을 밝혔다. 놀랍게도, 3개의 스트레인 중 2개에 대해, 애주번트 첨가된 백신은 이런 면역억제 효과를 적어도 상쇄할 수 있었다. 시험된 H3N2 스타틴에 대해, 애주번트 첨가된 백신 역가는 TIV에 대한 역가보다 높았던 한편, 스타틴 수령체에서의 역가는 애주번트가 첨가되지 않은 백신을 받은 대조표준에서보다 aTIV 후에 더 낮았다.
노인 및 특정 약물치료, 특히 장기간 요법 중인 사람들을 포함하여, 고위험 집단에서 건강 개입의 점점 더 복잡해지는 본질로 인해, 그런 개입들 간의 잠재적 상호작용을 평가하는 것이 중요할 것이다.
본 발명자들의 결과는 젊은 성인에서 A형 간염 백신과 파상풍 변독소에 대한 백신 면역 반응에 미치는 스타틴의 영향의 연구와 직접적으로 대조된다. Seigrist 등의 연구에서, 대상체의 평균 연령은 24세였다. 이 연구에서 건강한 대상체들은 무작위로 아토르바스틴 또는 위약을 받았다. A형 간염 백신에 대한 반응을 백신 수령후 28일에 평가하였다. 두 그룹 사이에 면역 반응의 차이는 볼 수 없었다. 그러나, 스타틴 수령체가 백신 접종시 만성 요법 중이었던 본 발명자들의 연구와 대조적으로, 이 A형 간염 연구에서, 연구 참가자들은 백신 접종하는 날까지 스타틴 요법을 시작하지 않았다는 것을 주지하는 것이 중요하다 (Packard RS, Schlegel S, Senouf D, Burger F, Sigaud P, Perneger T, Seigrist CA, and Mach F. Atorvastin Treatment and Vaccination Efficacy. J Clin Pharmacology 2007, 47:1022-1027). 다른 연구에서, Brantly 등은 건강한 자원자에게서 파상풍 변독소에 대한 반응을 평가하였다. A형 간염 연구와 유사하게, 건강한 연구 참여자들은 무작위로 아토르바스틴 또는 위약을 받았고 백신 접종하는 날 약물치료를 시작하였다. 놀랍게도, 스타틴 그룹으로 배정된 이 연구의 연구 참여자들은 3배 더 높은 항-TT IgG 수준을 나타냈다 (Lee PY, Sumpia PO, Byars JA, Kelly KM, Zhuang H, Shuster JS, Theriaque DW, Segal MS, Reeves WH, and Brantly ML. Short-term atorvastin treatment enhances specific antibody production following tetanus toxoid vaccination in healthy volunteers. Vaccine 2006, 24: 4035-4040). 이들 연구와 본 발명자들이 여기서 보고한 결과 사이의 두 가지 분명한 차이는 본 발명자들의 연구 그룹의 훨씬 더 높은 연령과 파상풍 변독소 및 A형 간염 연구에서 참여자들이 백신 접종할 때 만성적으로 스타틴에 노출되지 않았다는 사실이다. 물론 이들 인자 중 하나 또는 둘 다가 상반된 연구 결과에 기여한다. 그러나, 대부분의 스타틴 사용자가 장기간 약물치료를 받고 있기 때문에, 이들 두 연구의 결과는 기본적인 스타틴 요법의 영향을 평가하기 위해 제한된 유용성을 가진다.
노인에서 인플루엔자 백신 유효성의 연구는 차선 수준의 유효성을 나타냈다. Monto에 의한 노인전문요양 환자들에서의 연구에서, 백신접종은 인플루엔자 유사 빌병에 대해 33%였고 폐렴에 대해서는 43%였다 (Monto, A. S., Hornbuckle, K., & Ohmit, S. E. (2001). Influenza vaccine effectiveness among elderly nursing home residents: a cohort study. American journal of epidemiology, 154(2), 155-160). 1970년대와 1980년대 사이에 대규모로 수행된 20개의 관찰 연구로부터의 데이터를 사용하는 앞선 메타-분석에서, Gross는 호흡기 질병의 예방에 대해서 55%의 백신 효율 (95% CI, 39% 내지 68%), 폐렴의 예방에 대해 53% (CI, 35% 내지 66%), 입원 방지에 대해 50% (CI, 28% 내지 65%) 및 사망 예방에 대해 68% (CI, 56% 내지 76%)의 더 높은 모아진 산정치를 밝혔다 (Gross, P. A., Hermogenes, A. W., Sacks, H. S., Lau, J., & Levandowski, R. A. (1995). The efficacy of influenza vaccine in elderly personsA meta-analysis and review of the literature. Annals of Internal medicine, 123(7), 518-527). 관심의 대상은 스타틴 사용이 덜 통상적일 때 예년의 호흡기 질병 및 폐렴에 대한 효율의 산정치가 보다 최근의 연구에서의 산정치보다 더 높다는 것이다. 본원에서 개시된 분석의 관점에서, 또한 이들 차이가 상이한 인플루엔자 스트레인 및 다른 집단 인자들로 인한 것이라는 것이 가능하다.
스타틴은 그것의 면역억제 효과가 기준 염증성 상태보다 더 낮을 것이기 때문에, 폐렴 및 그로써 폐렴의 심각성 예방에 부가 제제로서 간주되었다. COPD에서 스타틴 사용의 관찰 연구는 스타틴 사용자에서 폐렴 또는 감염 악화 후에 30% 내지 50%의 사망률의 감소를 보고하였다 (Young R, Hopkins RJ. Statin Use in Pneumonia. The American Journal of Medicine, Volume 126, Issue 7, e11 - e12). 다른 연구들은 폐렴 및 패혈증 위험에 대한 스타틴의 영향을 밝히지 못하였다 (Yende S, Milbrandt EB, Kellum JA, Kong L, Delude RL, Weissfeld LA and Angus DC. Understanding the potential role of statins in pneumonia and sepsis. Critical Care Medicine 2011, 39(8):1871-1878). Fedson은 노인에서의 폐렴의 치료에서 치료제로서 스타틴을 고려할 것을 권장하였다 (Fedson, D. S. (2013). Treating influenza with statins and other immunomodulatory agents. Antiviral research, 99(3), 417-435). 논평에서 그는 시스템 생물학자들이 인플루엔자의 치료에서 스타틴과 같은 면역조절제의 사용을 제시한 한편으로, 이 접근법의 무작위적인 임상 실험은 이것의 기본적인 사용을 선행해야 한다고 진술하였다. Fedson은 마찬가지로, 특히 심각한 질환이 수개월이나 백신 유효성을 선행하는 유행병에서, 스타틴을 염증 및 따라서 질환의 심각성을 감소시키기 위한 잠재적 제제로서 평가하는 것이 고려되어야 한다고 지적한다 (Fedson, D. S. (2013). How will physicians respond to the next influenza pandemic?. Clinical infectious diseases, cit695).
면역체계 및 따라서 백신 반응뿐 아니라 질환 위험에 미치는 스타틴의 영향은 분명히 복잡하다. 스타틴의 면역억제 효과는 급성 질환 상태에서는 바람직할 수 있는 한편, 동일한 효과가 백신 반응에 영향을 미칠 때에는 해로울 수 있다. 본 발명자들은 시험 집단에서 인플루엔자 백신에 대한 면역 반응에 대한 장기간 스타틴 사용의 극적인 효과를 보았다. 이런 네거티브 효과는 인플루엔자 백신의 영향을 받은 집단의 면역원성 및 유효성을 평가할 때 및 약물-유도된 면역억제에 대응하기 위하여 그런 대상체들의 집단에서 잠재적으로 애주번트 첨가된 백신 및/또는 고용량 백신의 우선적인 사용을 고려함에 있어서 고려되어야 한다.
상기 개별적인 단원들에서 언급된 본 발명의 다양한 특징 및 구체예들은, 필요에 따라, 다른 단원에, 준용하여 적용된다. 따라서 한 단원에서 명시된 특징들은 필요에 따라 다른 단원에서 명시된 특징들과 조합될 수 있다.
기술분야의 숙련자들은 하나 이상의 기본적인 실험을 사용하여, 본원에 기술된 발명의 특정 구체예들에 대한 많은 동등물을 인지하게 되거나, 또는 확인할 수 있을 것이다. 그런 동등물은 이어지는 청구범위에 의해 포함되는 것으로 의도된다.

Claims (14)

  1. 대상체에서 면역 반응을 향상시키기 위한 백신으로서,
    백신은 (a) 애주번트; (b) 고용량 항원; 또는 (a)와 (b)의 조합을 포함하고; 및,
    대상체는 스타틴 요법 중인, 백신.
  2. 제1 항에 있어서, 애주번트는 알루미늄 염 애주번트 또는 수-중-유 에멀션 애주번트인 것을 특징으로 하는 백신.
  3. 제1 항 또는 제2 항에 있어서, 수-중-유 에멀션 애주번트는 스쿠알렌을 포함하고; 및 선택적으로 수-중-유 에멀션 애주번트는 계면활성제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 백신.
  4. 제1 항 내지 제3 항 중 어느 한 항에 있어서, 수-중-유 애주번트는 스쿠알렌, 폴리소르베이트 80 및 소르비탄 트라이올레에이트를 포함하고,
    수-중-유 애주번트는 선택적으로 중량으로 약 4.3%의 스쿠알렌, 약 0.5%의 폴리소르베이트 80 및 약 0.48%의 소르비탄 트라이올레에이트를 포함하는 것을 특징으로 하는 백신.
  5. 제1 항 내지 제4 항 중 어느 한 항에 있어서, 백신은 표준 용량 항원의 1/8 내지 10-배의 양, 선택적으로 표준 용량 항원의 2-배 내지 10-배의 양을 포함하는 것을 특징으로 하는 백신.
  6. 제1 항 내지 제5 항 중 어느 한 항에 있어서, 백신은 인플루엔자 백신이고, 인플루엔자 백신은 선택적으로 다가의 인플루엔자 백신인 것을 특징으로 하는 백신.
  7. 제5 항 또는 제6 항에 있어서, 인플루엔자 백신은 스트레인당 약 30 μg 내지 약 150 μg의 항원, 선택적으로 스트레인당 약 60 μg의 항원을 포함하는 것을 특징으로 하는 백신.
  8. 제6 항 또는 제7 항에 있어서, 인플루엔자 백신은 H1N1 스트레인, H3N2 스트레인, B 스트레인 또는 그것들의 임의의 조합을 포함하는 것을 특징으로 하는 백신.
  9. 제1 항 내지 제8 항 중 어느 한 항에 있어서, 백신은 수-중-유 에멀션 애주번트를 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 백신.
  10. 제1 항 내지 제9 항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는
    a) 현재 스타틴 요법중이며, 이때 선택적으로 대상체는 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주 또는 그 이상 동안 스타틴 요법을 받았거나;
    b) 현재 스타틴 요법을 받지 않지만 최근 3개월 이내에 종결된 스타틴 요법을 받았거나; 또는
    c) 현재 스타틴 요법을 받지 않지만 다음 3개월 안에 스타틴 요법을 받기로 계획되어 있는 것을 특징으로 하는 백신.
  11. 제1 항 내지 제10 항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는
    a) 65세 이상이거나;
    b) 60세 이상이거나;
    c) 45 내지 64세의 연령이거나; 또는
    d) 18 내지 64세의 연령인 것을 특징으로 하는 백신.
  12. 제1 항 내지 제11 항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 손상된 면역력과 관련된 질환 또는 장애를 가지는 것을 특징으로 하는 백신.
  13. 제1 항 내지 제12 항 중 어느 한 항에 있어서, 스타틴 요법은 합성 스타틴, 비-합성 스타틴 또는 그것들의 조합을 포함하고,
    선택적으로 스타틴 요법은 프라바스타틴, 심바스타틴, 로바스타틴 및 메바스타틴, 플루바스타틴, 아토르바스타틴, 세리바스타틴, 로수바스타틴 및 피타바스타틴으로 구성되는 군으로부터 선택된 스타틴을 포함하는 것을 특징으로 하는 백신.
  14. 제13 항에 있어서, 스타틴 요법은 플루바스타틴, 아토르바스타틴, 세리바스타틴, 로수바스타틴 및 피타바스타틴으로 구성되는 군으로부터 선택된 합성 스타틴을 포함하는 것을 특징으로 하는 백신.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11707520B2 (en) * 2005-11-03 2023-07-25 Seqirus UK Limited Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
CN113679831B (zh) * 2021-08-17 2023-07-28 四川大学 一种注射用水包油型乳剂黏膜疫苗及其制备方法和应用
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE027837T2 (en) 2005-03-23 2016-11-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Adjuvant use of influenza virus and oil-in-water emulsion to induce CD4 T-cell and / or enhanced B-cell cellular response
WO2007129290A1 (en) * 2006-05-04 2007-11-15 Prendergast Patrick T Statins for the treatment of viral influenza infections
AU2010212550B2 (en) 2009-02-10 2016-03-10 Seqirus UK Limited Influenza vaccines with reduced amounts of squalene
KR101523215B1 (ko) 2009-12-03 2015-05-27 노파르티스 아게 에멀션 미세 액화 및/또는 균질화 동안 성분들의 순환
CN104688687A (zh) 2009-12-03 2015-06-10 诺华股份有限公司 疫苗佐剂制备中的亲水过滤
BR112012013426B8 (pt) 2009-12-03 2021-05-25 Novartis Ag métodos para a fabricação de uma emulsão de óleo-em-água, para preparar uma composição de vacina e para preparar um kit de vacina
MX2013012593A (es) * 2011-04-29 2014-08-21 Selecta Biosciences Inc Nanoportadores sintéticos tolerogénicos para reducir las respuestas de anticuerpos.
JP2014040396A (ja) * 2012-08-23 2014-03-06 Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute 脂質異常症治療薬を含有するアジュバント組成物
EP2742952A1 (en) * 2012-12-17 2014-06-18 Eurocine Vaccines AB Influenza vaccine composition

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