KR20150140145A - 곰보버섯 균사체 대량 생산을 위한 인공배양방법 - Google Patents

곰보버섯 균사체 대량 생산을 위한 인공배양방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 곰보버섯(Morchella esculenta) 균사체의 대량 생산을 위한 인공배양 방법에 관한 것으로, 구체적으로는 모종균 배지에 곰보버섯 모종균을 배양하는 단계; 배양한 곰보버섯 모종균을 고체배지에 배양하여 곰보버섯 원종균을 수득하는 단계; 및 수득한 곰보버섯 원종균을 배양액에 배양하여 곰보버섯의 균사체를 수득하는 단계를 포함하는 곰보버섯 균사체의 배양 방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 곰보버섯 균사체의 배양 방법은 생산량을 증진시켜, 종래의 곰보버섯 자실체를 채집하는데 따르는 자원의 고갈 및 생태계 파괴 문제를 해결한 효과를 보유하고 있다.
본 발명에 따른 곰보버섯 균사체의 배양 방법은 곰보버섯의 재배 기간을 단축한 효과 및 재배 비용을 감축한 효과를 보유하고 있다.

Description

곰보버섯 균사체 대량 생산을 위한 인공배양방법{A ARTIFICIAL CULTURE METHOD FOR MASS PRODUCING MYCELIUM OF MORCHELLA ESCULENTA}
본 발명은 곰보버섯(Morchella esculenta) 균사체의 대량 생산을 위한 인공배양방법에 관한 것으로, 구체적으로는 모종균 배지에 곰보버섯 모종균을 배양하는 단계; 배양한 곰보버섯 모종균을 고체배지에 배양하여 곰보버섯 원종균을 수득하는 단계; 및 수득한 곰보버섯 원종균을 배양액에 배양하여 곰보버섯의 균사체를 수득하는 단계를 포함하는 곰보버섯 균사체의 배양방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 곰보버섯 균사체의 배양 방법은 곰보버섯 모종균 및 원종균의 배양시 심부배양식으로 수행되는 것을 기술적 특징으로 하고 있다.
본 발명에 따른 곰보버섯 균사체의 배양 방법은 모종균 배지에 곰보버섯 모종균을 배양할시 온도 20~35℃ 및 pH 5~8의 조건에서 수행되는 것을 기술적 특징으로 하고 있다.
본 발명에 따른 곰보버섯 균사체의 배양 방법은 곰보버섯 원종균을 배양액에 배양하여 곰보버섯 균사체를 수득할시 통기 속도 0.1~0.4 vvm 및 교반 속도 50~300 rpm의 조건에서 수행되는 것을 기술적 특징으로 하고 있다.
본 발명에 따른 곰보버섯 균사체의 배양 방법은 생산량을 증진시켜, 종래의 곰보버섯 자실체를 채집하는데 따르는 자원의 고갈 및 생태계 파괴 문제를 해결한 효과를 보유하고 있다.
본 발명에 따른 곰보버섯 균사체의 배양 방법은 곰보버섯의 재배 기간을 단축한 효과 및 재배 비용을 감축한 효과를 보유하고 있다.
곰보버섯(Morchella esculenta)은 곰보버섯 속에 속하는 버섯으로써 세계적으로 매우 가치있는 희귀 식용균 중 하나이며, 단백질, 탄수화물, 비타민 및 아미노산을 함유하고 있다.
최근에는 곰보버섯의 약용 성분이 주목받고 있는데, 유기 게르마늄을 고농도 함유하고 있어 신장 기능 및 양기를 증진하며, 집중력을 증진하고 위장염, 소화불량 및 암에 관하여 치료 효능이 있는 것으로 보고되어 있다.
그러나 상기 나열한 곰보버섯의 이점에도 불구하고, 국내에는 곰보버섯이 널리 알려지지 않았다.
곰보버섯을 수득하는 기존의 방법으로는 곰보버섯의 야생 자실체를 채집하는 방법이 있다. 그러나 야생 자실체를 채집하는 방법은 자원이 고갈되고 생태계가 파괴되며, 대량의 물량 확보가 불가능하다는 단점이 있다.
곰보버섯을 수득하는 또다른 기존 방법으로는 곰보버섯 자실체로부터 균사체를 분리한 후 상기 균사체를 배양하여 재배하는 방법이 있다.
곰보버섯의 재배는 1880년대 영국, 미국 및 프랑스 등에서 시작되었으며, 1960년대 이후 미국 및 중국에서 곰보버섯 균사체의 배양 방법이 개발되어 상기 방법으로 생산된 균사체를 식품 및 의약품 제작에 이용하기 시작하였다.
그러나 균사체 배양 방법은 재배 기간이 길게 소요되며, 야생 자실체를 채집하는 방법과 동일하게 대량의 물량 확보가 불가능하다는 단점이 있다.
곰보버섯의 대량 재배에 있어서는 성공한 사례가 없으며, 국내에서의 곰보버섯의 재배에 관한 연구는 초기 단계에 불과하다. 따라서 국내외를 통틀어 곰보버섯을 대량 생산하는 방법에 관한 기술은 전무하다 할 수 있겠다.
이에 따라 본 출원인은 곰보버섯의 대량 재배를 위한 생산 방법을 제공할 수 있다고 판단하여 본 발명을 안출하였다.
본 발명과 관련된 선행 기술을 살펴보면, 대한민국 공개특허공보 제10-1992-0702604호에는 끓인 후 냉각한 곡류 혼합물에 목생 버섯 균사를 혼합하고 배양하는 방법에 관하여 기재되어 있으며, 대한민국 등록특허공보 제10-1206324호에는 경석을 포함하는 고체 매질에 균근성 버섯의 균사체를 배양하여 생산하는 방법에 관하여 기재되어 있다.
또한 대한민국 등록특허공보 제10-0071463호에는 균사체를 배양하여 원질에 접종한 후 영양원을 공급하였다가 상기 영양원을 제거하는 단계를 포함하는 모르첼라(곰보버섯)의 배양방법에 관하여 기재되어 있다.
상기 선행 문헌들은 곰보버섯의 재배 방법에 관하여 기재되어 있긴 하나, 본발명과 같이 모종균 및 원종균을 각각 상이한 제형의 배지에 단계적으로 배양함으로써 곰보버섯의 생산량을 증진한 효과를 보유하고 있지 않다.
대한민국 공개특허공보 제10-1992-0702604호 (1992. 10. 06) 대한민국 등록특허공보 제10-1206324호 (2012. 11. 23) 대한민국 등록특허공보 제10-0071463호 (1994. 03. 04)
본 발명의 목적은 생산량을 증진하여, 종래의 곰보버섯 자실체를 채집하는데 따르는 자원의 고갈 및 생태계 파괴 문제를 해결한 효과를 보유한 곰보버섯 균사체의 배양 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 목적은 곰보버섯의 재배 기간을 단축한 효과 및 재배 비용을 감축한 효과를 보유한 곰보버섯 균사체의 배양 방법을 제공하는 것이다.
본 발명은 모종균 배지에 곰보버섯(Morchella esculenta) 모종균을 배양하는 단계; 배양한 곰보버섯 모종균을 고체배지에 배양하여 곰보버섯 원종균을 수득하는 단계; 수득한 곰보버섯 원종균을 배양액에 배양하여 곰보버섯의 균사체를 수득하는 단계를 포함하는 곰보버섯 균사체의 배양 방법을 제공함으로써 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명은 모종균 배지에 곰보버섯 모종균을 배양할시 온도 20~35℃ 및 pH 5~8의 조건에서 수행되는 것을 기술적 특징으로 하는 곰보버섯 균사체의 배양 방법을 제공함으로써 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명은 곰보버섯 원종균을 배양액에 배양하여 곰보버섯 균사체를 수득할시 통기 속도 0.1~0.4 vvm 및 교반 속도 50~300 rpm의 조건에서 수행되는 것을 기술적 특징으로 하는 곰보버섯 균사체의 배양 방법을 제공함으로써 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명은 곰보버섯의 생산량을 증진하여, 종래의 곰보버섯 자실체를 채집하는데 따르는 자원의 고갈 및 생태계 파괴 문제를 해결한 효과를 보유하고 있다.
본 발명은 곰보버섯의 재배 기간을 단축한 효과 및 재배 비용을 감축한 효과를 보유하고 있다.
도 1은 5번 배지에서의 접종 초 곰보버섯 모종균의 생장 상태를 나타낸 사진이다.
도 2는 5번 배지에서의 배양 15일차 곰보버섯 모종균의 생장 상태를 나타낸 사진이다.
도 3은 3번 배지에서의 접종 초 곰보버섯 모종균의 생장 상태를 나타낸 사진이다.
도 4는 3번 배지에서의 배양 15일차 곰보버섯 모종균의 생장 상태를 나타낸 사진이다.
도 5는 5번 배지에서의 배양 14일차 곰보버섯 모종균을 10×2의 배율에서 관찰한 사진이다.
도 6은 5번 배지에서의 배양 14일차 곰보버섯 모종균을 10×5의 배율에서 관찰한 사진이다.
도 7은 5번 배지에서의 배양 14일차 곰보버섯 모종균을 10×5의 배율에서 관찰한 사진이다.
도 8은 5번 배지에서의 배양 14일차 곰보버섯 모종균을 10×5의 배율에서 관찰한 사진이다.
도 9는 참나무 발효톱밥과 기타 첨가물의 조성비를 각각 달리 하여 생장 속도를 비교한 사진이다. (왼쪽 기준, 1번 배지- 참나무 발효톱밥 85: 쌀겨 15/ 2번 배지- 참나무 발효톱밥 32.5: 참나무 톱밥 52.5: 쌀겨 15/ 3번 배지- 참나무 발효톱밥 32.5: 포플러나무 톱밥 52.5: 쌀겨 15)
도 10 내지 11은 곰보버섯 균사체의 포자를 현미경으로 관찰한 사진이다.
본 명세서 및 청구 범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 안 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
따라서 본 명세서에 기재된 실험예, 참조예 및 도면에 기술된 사항은 본 발명의 가장 바람직한 일 예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
실시예 1. 곰보버섯의 배양
(1) 모종균 배지를 제작하는 단계
영양원을 혼합하여 모종균 배지를 제작한다.
영양원은 감자 추출액, 통밀 추출액, 콩나물 추출액, 덱스트로스, 펩톤, 포도당 및 효모 추출물 등에서 1종 이상 선택되어 다양하게 첨가될 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다.
각 영양원이 첨가되는 중량비는 다양하게 설정될 수 있다.
배지의 온도 및 pH 등의 조건 역시 다양하게 설정될 수 있다. 바람직하게는 온도 20~30℃ 및 pH 5~10, 더욱 바람직하게는 온도 22~27℃ 및 pH 6~7로 설정될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
또한 안티폼(antifoam) 및 아가(agar) 등의 첨가제가 추가로 첨가될 수 있으며, 첨가제는 이에 한정되지 않는다.
(2) 모종균 배지에 곰보버섯 모종균을 배양하는 단계
모종균 배지에 곰보버섯 모종균을 배양한다.
(3) 고체 배지를 제작하는 단계
1) 고체 배지의 매질을 선정하는 단계
고체 매질은 톱밥, 볏짚, 왕겨 및 쌀겨 등에서 1종 이상 선택되어 다양하게 첨가될 수 있으며, 바람직하게는 톱밥을 사용할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
이 때 톱밥의 소재로는 참나무, 튤립나무, 뽕나무, 발효된 참나무, 발효된 튤립나무 및 소나무 등을 사용할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
2) 영양원을 첨가하는 단계
고체 배지에 영양원을 첨가한다.
영양원은 밀기울, 쌀겨, 대두박, 황설탕, CaCO3(탄산칼슘), KH2PO4(인산이수소칼륨) 및 염화암모늄(NH4Cl) 등에서 1종 이상 선택되어 다양하게 첨가될 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다.
각 영양원이 첨가되는 중량비는 다양하게 설정될 수 있으며, 배지의 온도 및 pH 등의 조건 역시 다양하게 설정될 수 있다.
또한 안티폼 및 아가 등의 첨가제가 추가로 첨가될 수 있으며, 첨가제는 이에 한정되지 않는다.
(4) 고체 배지에 곰보버섯 모종균을 배양하는 단계
고체 배지에 곰보버섯 모종균을 배양하여 곰보버섯 원종균을 수득한다.
(5) 배양액을 제작하는 단계
영양원을 혼합하여 곰보버섯 균사체 배양을 위한 배양액을 제작한다.
영양원으로는 황설탕, MgSO4, KH2PO4, 펩톤 및 대두박 등에서 1종 이상을 첨가할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
각 영양원이 첨가되는 중량비는 다양하게 설정될 수 있으며, 배지의 온도 및 pH 등의 조건 역시 다양하게 설정될 수 있다.
또한 안티폼 등의 첨가제가 추가로 첨가될 수 있으며, 첨가제는 이에 한정되지 않는다.
(6) 배양액에 곰보버섯 원종균을 배양하는 단계
배양액에 곰보버섯 원종균을 배양하여 곰보버섯 균사체를 수득한다.
실험예 1. 배지 조성에 따른 곰보버섯 모종균의 생장 속도 측정
(1) 실험 과정
곰보버섯 모종균의 생장성이 가장 우수한 배지 조성을 알아보기 위하여, 실시예 1에 기재된 모종균 배지 제작 과정으로 제작되었으되 배지의 성분을 각각 상이하게 조성한 7군에 곰보버섯 모종균을 배양한 후, 생장한 모종균의 지름 및 밀도를 측정하여 생장 속도를 확인하였다. 이 때 배양기의 온도를 25±1℃로 설정하였다.
곰보버섯 모종균의 배양은 12~14일간 수행되었다.
(2) 실험 결과
하단의 [표 1]은 배지 조성을 각각 상이하게 함에 따른 곰보버섯 모종균의 생장을 비교한 결과이다.
순번 배지 조성 성분 모종균
밀도		 모종균
지름(cm)
1 콩나물 추출액 500g, 황설탕 20g, 아가 20g 및 물 1L ++ 4.3
2 참나무톱밥 추출액 500g, 황설탕 20g, 아가 20g 및 물 1L ++ 4.7
3 감자 추출액 200g, 덱스트로스 20g, 아가 20g 및 물 1L(PDA) +++ 4.9
4 통밀 추출액 500g, 덱스트로스 20g, 아가 20g 및 물 1L +++ 5.2
5 감자 추출액 500g, 덱스트로스 20g, 아가 20g, 펩톤 1.0g 및 물 1L(PDAP) +++ 5.6
6 펩톤 1.0g, 포도당 20g, 아가 20g, KH2PO4 1.0g,
CaCO3 0.5g 및 물 1L		 +++ 4.7
7 펩톤 1.0g, 포도당 20g, 아가 20g, 효모 농축액 1.0g, KH2PO4 1.0g, CaCO3 0.5g 및 물 1L +++ 4.8
[표 1]을 토대로 하여 살펴보면, 곰보버섯 모종균은 1 내지 2번 배지와 비교할 때 덱스트로스가 조성에 포함된 3 내지 5번 배지와, 펩톤 및 포도당이 조성에 포함된 6 내지 7번 배지에서 밀도가 높고 지름이 큰 것으로 나타났으며, 특히 3 내지 5번 배지에서는 6 내지 7번 배지에서보다 모종균의 밀도가 더 높고 지름이 더 큰 것으로 나타났다.
또한 3 내지 5번 배지 중에서도 5번 배지(PDAP)에서는 곰보버섯 모종균의 밀도가 가장 높았으며, 모종균의 지름이 가장 컸다. 즉 5번 배지에서 생장 효율성이 가장 우수함을 확인할 수 있었다.
도 1은 5번 배지에서의 접종 초 곰보버섯 모종균의 생장 상태를 나타낸 사진이다.
도 2는 5번 배지에서의 배양 15일차 곰보버섯 모종균의 생장 상태를 나타낸 사진이다.
도 3은 3번 배지에서의 접종 초 곰보버섯 모종균의 생장 상태를 나타낸 사진이다.
도 4는 3번 배지에서의 배양 15일차 곰보버섯 모종균의 생장 상태를 나타낸 사진이다.
관찰 결과, 곰보버섯 모종균을 3번 배지보다 5번 배지에 배양시켰을시 배양이 더 효율적으로 수행된 것을 알 수 있었다.
도 5는 5번 배지에서의 배양 14일차 곰보버섯 모종균을 10×2의 배율에서 관찰한 사진이다.
도 6은 5번 배지에서의 배양 14일차 곰보버섯 모종균을 10×5의 배율에서 관찰한 사진이다.
도 7은 5번 배지에서의 배양 14일차 곰보버섯 모종균을 10×5의 배율에서 관찰한 사진이다.
도 8은 5번 배지에서의 배양 14일차 곰보버섯 모종균을 10×5의 배율에서 관찰한 사진이다.
또한 현미경으로 관찰한 결과, 곰보버섯 모종균을 5번 배지에 배양시켰을시배양이 약 80% 수행된 것을 알 수 있었다.
이로써 본 발명의 배양방법으로 배양한 곰보버섯 모종균의 생장 효율성이 우수하다는 결론을 도출할 수 있다.
실험예 2. 온도에 따른 곰보버섯 모종균의 생장 속도 측정
(1) 실험 과정
온도에 따른 곰보버섯 모종균의 생장성 측정을 위하여, 20, 28, 35 및 40℃로 배양 온도를 각각 달리 설정한 후, 생장한 모종균의 지름 및 밀도를 측정하여 각 온도에 따른 모종균의 생장 속도를 측정하였다.
실험예 1에서 곰보버섯이 가장 우수한 생장성을 보인 5번 배지(중량비: 감자 추출액 500g, 덱스트로스 20g, 아가 20g, 펩톤 1.0g 및 물 1L)에 곰보버섯 모종균을 배양하여 실험을 수행하였으며, 곰보버섯 모종균의 배양은 12~14일간 수행되었다.
(2) 실험 결과
하단의 [표 2]는 온도에 따른 곰보버섯 모종균의 생장을 나타낸 결과이다.
온도(℃) 20 24 28 35 40
지름(cm) 2.5 4.9 5.8 1.4 0
모종균 밀도 ++ +++ +++ ++ X
[표 2]를 토대로 하여 살펴보면, 곰보버섯 모종균의 생장 속도는 온도 20~35℃에서 높고, 24~28℃에서 가장 높으며, 40℃ 이상에서는 생장이 정지되는 것을 알 수 있었다.
실험예 3. 곰보버섯 모종균 생장 속도에 대한 pH 의 영향 측정
(1) 실험 과정
pH의 변화에 따른 곰보버섯 모종균의 생장성 측정을 위하여, 4.0, 5.0, 5.5, 6.0, 6.5, 7.0, 7.5, 8.0 및 9.0으로 pH를 각각 달리 설정한 후, 생장한 모종균의 지름 및 밀도를 측정하여 각 온도에 따른 모종균의 생장 속도를 측정하였다.
실험예 2에서와 동일하게, 실험예 1에서 가장 우수한 생장성을 보인 PDAP 배지에 곰보버섯 모종균을 배양하여 실험을 수행하였으며, 곰보버섯 모종균의 배양은 12~14일간 수행되었다.
pH 조절은 표준 방법으로 제작된 생물학적 완충용액을 사용하여 수행하였다.
(2) 실험 결과
하단의 [표 3]은 곰보버섯 모종균의 생장에 대한 pH의 영향을 나타낸 결과이다.
pH 4.0 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 9.0
밀도 + ++ ++ +++ +++ +++ ++ ++ +
[표 3]을 토대로 하여 살펴본 결과, 곰보버섯 모종균의 생장은 pH 4.0에서는 +, 5.0에서는 ++, 5.5에서는 ++, 6,0에서는 +++, 6.5에서는 +++, 7.0에서는 +++, 7.5에서는 ++, 8.0에서는 ++, 9.0에서는 +로 나타나, pH 5.0~8.0에서 곰보버섯 모종균의 생장이 비교적 우수함을 알 수 있었다.
실험예 4. 고체 배지 매질에 따른 곰보버섯 원종균의 생장 속도 비교
(1) 실험 과정
곰보버섯 모종균을 원종균으로 배양할시 가장 효과적으로 생장시킬 수 있는 배양 방법을 알아보기 위하여, 실시예 1에 기재된 원종균 배지 제작 과정으로 제작되었으되 참나무 톱밥, 참나무 발효톱밥, 튤립나무 톱밥 및 튤립나무 발효톱밥 등 매질을 각각 달리 한 고체 배지 5종을 제작하고, 각 고체 배지에서 생장한 곰보버섯 원종균의 지름 및 밀도를 측정하여 각 고체 배지 매질에 따른 원종균의 생장 속도를 측정하였다.
각 매질에 쌀겨, 밀기울, CaCO3 및 KH2PO4 등을 혼합한 후 플라스틱 통에 주입하고, pH 6.3±0.2 및 온도 25±1℃으로 조건을 설정하여 심부배양식으로 12~14일간 배양하였다.
(2) 실험 결과
하단의 [표 4]는 고체 배지 매질에 따른 곰보버섯 원종균의 생장 상태를 나타낸 결과이다.
순번 고체배지 성분비(%) 생장 상태
1 튤립나무 톱밥 80, 쌀겨 15, 밀기울 5, CaCO3 소량 및 KH2PO4 소량 +
2 참나무 톱밥 80, 쌀겨 15, 밀기울 5, CaCO3 소량 및 KH2PO4 소량 +
3 참나무 발효톱밥 80, 쌀겨 15, 밀기울 5, CaCO3 소량 및 KH2PO4 소량 ++
4 참나무 발효톱밥 60, 튤립나무 발효톱밥 25, 쌀겨 15, CaCO3 소량 및 KH2PO4 소량 +++
5 참나무 발효톱밥 60, 튤립나무 발효톱밥 25, 쌀겨 15, CaCO3 소량, KH2PO4 소량 및 NH4Cl 소량 +++
[표 4]를 토대로 하여 살펴보면, 곰보버섯 원종균의 생장 상태는 튤립나무 톱밥 배지 또는 참나무 톱밥 배지에서보다 참나무 발효톱밥 배지에서 상대적으로 더 우수하였으며, 참나무 발효톱밥과 튤립나무 톱밥이 60: 25의 조성비로 혼합된 배지에서 가장 우수하게 배양된 결과를 보였다.
도 9는 참나무 발효톱밥과 기타 첨가물의 조성비를 각각 달리 하여 생장 속도를 비교한 사진이다. (왼쪽 기준, 1번 배지- 참나무 발효톱밥 85: 쌀겨 15/ 2번 배지- 참나무 발효톱밥 32.5: 참나무 톱밥 52.5: 쌀겨 15/ 3번 배지- 참나무 발효톱밥 32.5: 포플러나무 톱밥 52.5: 쌀겨 15)
1번 배지에서는 곰보버섯의 균사가 생장한 것이 전혀 발견되지 않았으며, 2번 배지에서는 육안으로 식별이 용이하지 않을 정도로 곰보버섯의 균사가 미약하게 생장하였다.
3번 배지에서는 육안으로 식별이 충분히 가능할 정도로 곰보버섯의 균사가 생장하였음을 알 수 있다.
이로써 본 발명의 배양방법으로 배양된 곰보버섯 원종균의 생장 효율성이 우수하다는 결론을 도출할 수 있다.
실험예 5. 액체 배지 성분에 따른 곰보버섯 균사체의 생장 속도 비교
(1) 실험 과정
곰보버섯 원종균을 균사체로 배양할시 가장 효과적으로 생장시킬 수 있는 배양 방법을 알아보기 위하여, 실시예 1에 기재된 배양액 제작 과정으로 제작되었으되 황설탕, MgSO4, KH2PO4, 펩톤 및 대두박 등 조성 성분을 각각 달리 한 배양액 5종을 제작하고 각 배양액에서 생장한 곰보버섯 균사체의 지름 및 밀도를 측정하여 각 배양액에 따른 균사체의 생장 속도를 측정하였다.
각 배양액을 121℃에서 30분간 멸균한 후, 각 배양액 500mL씩에 실험예 4에 기재된 과정으로 배양된 곰보버섯 원종균을 5g씩 접종하고 통기 속도 0.1~0.4 vvm 및 교반 속도 50~300 rpm의 조건을 설정한 상태에서 심부배양식으로 5~7일간 배양하였다. 이 때 진탕이 동시수행되었다.
(2) 실험 결과
하단의 [표 5]는 액체 배지 성분에 따른 곰보버섯 균사체의 생장 상태를 나타낸 결과이다.
순번 배양액 조성 성분비(g/500mL) 상태
1 황설탕 10g, MgSO4 2g, KH2PO4 1g 및 펩톤 1g +
2 황설탕 15g, 대두박 1g, MgSO4 2.5g, KH2PO4 1.5g 및 펩톤 1g +
3 황설탕 20g, 대두박 3g, MgSO4 2.5g, KH2PO4 1.5g 및 펩톤 1g ++
4 황설탕 15g, 대두박 3g, MgSO4 2.5g, KH2PO4 1.5g 및 펩톤 1g ++
5 황설탕 20g, 대두박 3g, MgSO4 2.5g, KH2PO4 1.5g, 펩톤 1g,
안티폼(204) 1ml 및 NH4Cl 소량		 +++
[표 5]를 토대로 하여 살펴보면, 곰보버섯 균사체는 황설탕 15g 이상, 대두박 3g을 포함한 배지에서 우수한 생장을 보였으며, 특히 황설탕 20g, 대두박 3g, MgSO4 2.5g, KH2PO4 1.5g, 펩톤 1.0g, 안티폼 1ml 및 NH4Cl으로 조성된 배지에서 배양하였을 때 가장 우수한 생장을 보였다.
상기 배지에서 7일간 배양한 후, 16.7g/L의 높은 수득율로 곰보버섯 균사체를 얻었다.
도 10 내지 11은 곰보버섯 균사체의 포자를 현미경으로 관찰한 사진이다.
관찰 결과, 곰보버섯 균사체의 포자는 활성이 뛰어난 것을 확인할 수 있었다.
이로써 본 발명의 배양 방법으로 배양된 곰보버섯 균사체의 생장 효율성이 우수하다는 결론을 도출할 수 있다.

Claims (5)

  1. 모종균 배지에 곰보버섯(Morchella esculenta) 모종균을 배양하는 단계;
    배양한 곰보버섯 모종균을 고체배지에 배양하여 곰보버섯 원종균을 수득하는 단계; 및
    수득한 곰보버섯 원종균을 배양액에 배양하여 곰보버섯의 균사체를 수득하는 단계를 포함하는 곰보버섯 균사체의 배양 방법.
  2. 청구항 1에 있어서,
    상기 곰보버섯 모종균 및 원종균의 배양은 심부배양식으로 수행되는 것을 특징으로 하는, 곰보버섯 균사체의 배양 방법.
  3. 청구항 1에 있어서,
    상기 모종균 배지에 곰보버섯 모종균을 배양하는 단계는 온도 20~35℃ 및 pH 5~8의 조건에서 수행되는 것을 특징으로 하는, 곰보버섯 균사체의 배양 방법.
  4. 청구항 1에 있어서,
    상기 곰보버섯 원종균을 배양액에 배양하여 곰보버섯의 균사체를 수득하는 단계는 통기 속도 0.1~0.4 vvm 및 교반 속도 50~300 rpm의 조건에서 수행되는 것을 특징으로 하는, 곰보버섯 균사체의 배양 방법.
  5. 청구항 1에 있어서,
    상기 곰보버섯 배양 방법은 곰보버섯의 생산량을 증진하는 효과 및 곰보버섯의 재배 기간을 단축하는 효과를 보유하는 것을 특징으로 하는, 곰보버섯 균사체의 배양 방법.
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