KR20150029852A

KR20150029852A - 꾸지뽕 추출물 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 포함하는 성 호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 치료 또는 개선용 조성물

Info

Publication number: KR20150029852A
Application number: KR20130108771A
Authority: KR
Inventors: 정윤화; 김도희; 김미숙; 김성수; 노유헌; 이동진; 이영승; 이지원
Original assignee: 단국대학교 산학협력단
Priority date: 2013-09-10
Filing date: 2013-09-10
Publication date: 2015-03-19
Also published as: KR101660291B1

Abstract

본 발명은 (a) 꾸지뽕(Cudrania tricuspidata) 추출물; 또는 (b) 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 성 호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 남녀 성호르몬 전구체의 증가 및 생체활성형 성호르몬을 증가시키고, 남녀 호르몬 결핍 증상, 예컨대 갱년기 증상을 유의하게 개선시킨다.

Description

꾸지뽕 추출물 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 포함하는 성 호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 치료 또는 개선용 조성물{Composition for Preventing, Treating or Improving Sex Hormone-related Diseases or Symptoms comprising Extract from Cudrania tricuspidata or Mixture of Extract from Cudrania tricuspidata and Extract from Lepidium meyenii}

본 발명은 꾸지뽕 추출물 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 포함하는 성 호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.

갱년기란, 고전적으로 여성의 폐경기를 일컫는 용어로, 노화로 인해 성선 (난소)의 기능이 저하된 것을 말하며, 여성에게 국한되어 사용되는 것이 보통이었다. 하지만 여성의 폐경과 같은 가시적 변화는 아니더라도, 남성에서도 점진적인 남성 호르몬의 감소로 인한 남성갱년기 증후군의 개념이 대두되고 있으며, 이의 정식 용어는 2004년 제4차 국제남성노화학회(International Society for the Study of the Aging Male) 회의에서 결정된 ‘후기 발현 남성 성선기능저하증(late-onset hypogonadism, LOH)’과 함께 ‘가령성 테스토스테론결핍증후군(age-associated testosterone deciency syndrome, TDS)’을 같이 쓰도록 하였다. 남성갱년기증후군은 남성에서 연령이 증가하면서 경험하게 되는 전형적인 증상들과 혈청 테스토스론 결핍을 동반하는 임상적 및 생화학적 증후군으로 삶의 질이 의미 있게 손상될 수 있고 여러 신체기관의 기능에 부정적인 영향을 초래할 수 있다. 국내에서는 Park 등(Park MG et al. Aitude of Korean males toward late-onset hypogonadism: survey of males in their 40s and above. Korean J Androl 2007;25:26-31)이 ADAM(Androgen Deciency in Aging Male) 설문지의 한국어 번역본을 사용한 설문조사로 성욕 감퇴 및 발기력 저하를 주로 호소하는 40대 이상 남성의 비율을 64.6% 로 보고하여, 우리나라 중년 남성의 절반 이상이 남성갱년기 증상을 갖는 것으로 나타났다.

여성 갱년기란 내분비 증후군의 일종으로 난소 기능의 전반적이고 점진적인 감소가 일어나 생리적 기능 및 성 기능이 감소 내지 소실되는 과도기를 말하며, 갱년기의 한 과정으로 난소 기능의 정지 후에 일어나는 생리의 영구적인 정지인 폐경이 오게 된다. 폐경기에는 에스트로겐 생성의 감소, 난포자극호르 및 황체화호르몬의 상승 등 호르몬의 변화에 따라 급만성 증상이 나타날 수 있다. 즉, 초기증상으로 열성홍조, 야간 발한 등의 혈관 운동성 증상과 불안감, 집중력 감퇴, 우울증 등의 심리적 증상이 나타날 수 있으며, 폐경 수년 내에 나타나는 비뇨생식계 및 표피증상이, 폐경 수년 후에는 골다공증, 심장혈관 및 뇌혈관 등의 질환 등이 있을 수 있다.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.

본 발명자들은 남녀 성호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 치료 또는 개선 효과가 우수한 천연물을 개발하고자 노력하였다. 그 결과, 꾸지뽕 추출물이 남녀 성호르몬 전구체 증가와 활성형 남녀 성호르몬을 증가시키는 효과가 있으며, 마카 추출물과 혼합하여 적용하는 경우에 그 효과가 증대됨을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 성 호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 치료 또는 개선용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.

본 발명의 일 양태에 따르면, (a) 꾸지뽕(Cudrania tricuspidata) 추출물; 또는 (b) 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 성 호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 치료 또는 개선용 조성물을 제공한다.

본 발명자들은 남녀 성호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 치료 또는 개선 효과가 우수한 천연물을 개발하고자 노력하였다. 그 결과, 꾸지뽕 추출물이 남녀 성호르몬 전구체 증가와 활성형 남녀 성호르몬을 증가시키는 효과가 있으며, 마카 추출물과 혼합하여 적용하는 경우에 그 효과가 증대됨을 확인하였다.

본 발명의 조성물에서 이용되는 꾸지뽕 추출물 및/또는 마카 추출물은 꾸지뽕 또는 마카에 추출용매를 처리하여 수득하는 경우에는, 다양한 추출용매가 이용될 수 있다. 본 발명의 일 구현예에 따르면, 극성 용매 또는 비극성 용매를 이용할 수 있다. 극성 용매로서 적합한 것은, (i) 물, (ii) 알코올(바람직하게는, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올, 노말-부탄올, 1-펜탄올, 2-부톡시에탄올 또는 에틸렌글리콜), (iii) 아세트산, (iv) DMFO(dimethyl-formamide) 및 (v) DMSO(dimethyl sulfoxide)를 포함한다. 비극성 용매로서 적합한 것은, 아세톤, 아세토나이트릴, 에틸 아세테이트, 메틸 아세테이트, 플루오로알칸, 펜탄, 헥산, 2,2,4-트리메틸펜탄, 데칸, 사이클로헥산, 사이클로펜탄, 디이소부틸렌, 1-펜텐, 1-클로로부탄, 1-클로로펜탄, o-자일렌, 디이소프로필 에테르, 2-클로로프로판, 톨루엔, 1-클로로프로판, 클로로벤젠, 벤젠, 디에틸 에테르, 디에틸 설파이드, 클로로포름, 디클로로메탄, 1,2-디클로로에탄, 어닐린, 디에틸아민, 에테르, 사염화탄소 및 THF를 포함한다.

본 발명의 다른 구현예에 따르면, 본 발명에서 이용되는 추출용매는 (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, (d) 아세톤, (e) 에틸 아세테이트, (f) 클로로포름, (g) 부틸아세테이트, (h) 1,3-부틸렌글리콜, (i) 헥산 및 (j) 디에틸에테르를 포함한다. 본 발명의 특정 구현예에 따르면, 본 발명의 추출물은 물, 에탄올 또는 이의 조합을 꾸지뽕 또는 마카에 처리하여 수득한 것이다.

본 명세서에서 사용되는 용어 ‘추출물’은 상술한 바와 같이 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 꾸지뽕 추출물 또는 마카 추출물은 상술한 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함한다. 예컨대, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 꾸지뽕 추출물 또는 마카 추출물에 포함되는 것이다.

본 발명에서 이용되는 꾸지뽕 추출물 및/또는 마카 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

본 명세서에서 용어 ‘유효성분으로 포함하는’이란 하기의 꾸지뽕 추출물 및/또는 마카 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 본 발명은 천연식물재료인 마카로부터 추출한 조성물로서 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없으므로 꾸지뽕 추출물 및/또는 마카 추출물이 본 발명의 조성물에 포함된 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.

본 발명의 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물은 10:1 내지 1:10의 혼합비를 갖으며, 본 발명의 특정 구현예에 따르면, 9:1 내지 8:2의 혼합비이고, 본 발명의 다른 특정 구현예에 따르면, 7:3 내지 6:4의 혼합비를 갖는다.

본 발명은 남녀 성호르몬으로 대표되는 DHEA(Dehydroepiandrosterone) 패밀리(DHEA 및 DHEA-s), 테스토스테론[총 테스토스테론(TT), 자유 테스토스테론(FT) 및 생리활성형 테스토스테론(BT)], 에스트라디올[총 에스트라디올(TE), 자유 에스트라디올(FE) 및 생리활성형 에스트라디올(BE)], SHBG(Sex Hormone Binding Globulin)는 각각 서로 다른 영향을 미칠 뿐 아니라 각각 다른 다양한 생리활성을 가지고 있다. 본 발명의 상기 성호르몬의 안정적 조절을 통해서 성호르몬 관련 질환 및 증상의 개선 효능을 갖는 천연물을 개발하였다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 성 호르몬 관련 질환은 남성 갱년기 증후군, 여성 갱년기 증후군, 성기발육이상, 안드로젠 저항성 증후군, 생식선 기능 감퇴증, 칼만(Kallmann) 증후군, 클라인펠터 증후군(Klinefelter syndrome), 터너 증후군(Turner syndrome), 폐경, 고환 감퇴, 사춘기 지연, 조숙증, 월경 장애, 생식 장애, 무월경 또는 다낭성난소증후군이다.

본 발명의 다른 구현예에 따르면, 상기 성 호르몬 관련 증상은 불임, 탈모, 체중 증가, 우울증, 불안, 공황 발작, 불면증, 전립선 문제, 성적 향락 문제, 불규칙한 월경 주기 또는 성욕이다.

본 발명의 특정 구현예에 따르면, 상기 남성 갱년기 증후군은 관절 또는 근육의 통증, 골다공증, 다한증, 수면장애, 흥분, 신경과민, 정서불안, 무기력증, 피로, 근력 저하, 우울증, 정력 저하, 성욕 저하, 발기력 저하, 노화 또는 비뇨생식기 기능 저하이고, 상기 여성 갱년기 증후군은 안면홍조, 발한, 심장 불편감, 수면 문제, 우울증, 과민성, 불안감, 신체적 피로, 정신적 피로, 성적 문제, 배뇨 문제, 질 건조감, 관절 불편감 또는 근육 불편감이다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 꾸지뽕 추출물 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물은 혈중 DHEA, DHEA-s 및 SHBG 농도를 증가시키고, SHBG 농도는 감소시킨다. 또한, 꾸지뽕 추출물 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물은 혈중 테스토스테론 및 생체활성형 테스토스테론, 및 혈중 에스트라디올 및 생체활성형 에스트라디올의 농도를 증가시킨다.

본 발명의 다른 구현예에 따르면, 꾸지뽕 추출물 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물은 남성 갱년기와 노화를 나타내는 AMS(Aging Males' Symptom) 및 ADAM(Androgen Deficiency in Aging Males) 수치를 감소시키고, 여성 갱년기 및 노화를 나타내는 MRS (Menopause rating scale) 수치를 감소시킨다.

본 발명의 조성물은 약제학적 조성물로 제조될 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 (a) 상술한 본 발명의 꾸지뽕 추출물 및/또는 마카 추출물의 약제학적 유효량; 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물이다. 본 명세서에서 용어 “약제학적 유효량”은 상술한 꾸지뽕 추출물 및/또는 마카 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.

본 발명의 조성물이 약제학적 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여 방식으로 적용된다.

본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물의 일반적인 투여량은 성인 기준으로 0.001-1000 ㎎/kg 범위 내이다.

본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액, 시럽제 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 산제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 식품 조성물로 제공될 수 있다. 본 발명의 (a) 꾸지뽕 추출물; 또는 (b) 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 유효성분 포함하는 성 호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 개선 또는 치료용 조성물이 식품 조성물로 제조되는 경우, 유효성분으로서 백미 추출물뿐 만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 백미 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 두충 추출액, 대추 추출액, 감초 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.

본 발명의 (a) 꾸지뽕 추출물; 또는 (b) 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 성 호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방 또는 개선용 식품 조성물로 제조될 수 있다. 본 발명의 조성물이 기능성 식품 조성물로 제조되는 경우, 식품 제조 시 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분으로서 마카 추출물 이외에 향미제 또는 천연 탄수화물을 추가 성분으로 포함시킬 수 있다. 예를 들어, 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예컨대, 글루코오스, 프럭토오스 등); 디사카라이드(예컨대, 말토스, 수크로오스 등); 올리고당; 폴리사카라이드(예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등); 및 당알코올(예컨대, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등)을 포함한다. 향미제로서 천연 향미제(예컨대, 타우마린, 스테비아 추출물 등) 및 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)을 이용할 수 있다.

본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:

(a) 본 발명은 꾸지뽕(Cudrania tricuspidata) 추출물, 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 성 호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 치료 또는 개선용 조성물을 제공한다.

(b) 본 발명의 조성물은 남녀 성호르몬 전구체의 증가 및 생체활성형 성호르몬을 증가시킨다.

(c) 본 발명의 조성물은 남녀 호르몬 결핍 증상, 예컨대 갱년기 증상을 유의하게 개선시킨다.

도 1a 및 도 1b는 마우스 DHEA(도 1a) 및 DHEA-s(도 1b)의 분비에 대한 꾸지뽕 추출물, 마카 추출물, 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물의 영향을 측정한 결과를 나타낸다. ‘CTL’은 대조군, ‘C’는 꾸지뽕 추출물, ‘M’은 마카 추출물 및 ‘C+M’은 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 의미한다.
도 2는 마우스 혈중 SHBG(Sex Hormone-Binding Globulin)의 분비에 대한 꾸지뽕 추출물, 마카 추출물, 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물의 영향을 측정한 결과를 나타낸다. ‘CTL’은 대조군, ‘C’는 꾸지뽕 추출물, ‘M’은 마카 추출물 및 ‘C+M’은 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 의미한다.
도 3a 및 도 3b는 웅성 마우스 혈중 테스토스테론(도 3a) 및 활성형 테스토스테론(도 3b)의 분비에 대한 꾸지뽕 추출물, 마카 추출물, 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물의 영향을 측정한 결과를 나타낸다. ‘CTL’은 대조군, ‘C’는 꾸지뽕 추출물, ‘M’은 마카 추출물 및 ‘C+M’은 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 의미한다.
도 4a 및 도 4b는 자성 마우스 혈중 에스트라디올(estradiol, 도 4a) 및 활성형 에스트라디올(도 4b)의 분비에 대한 꾸지뽕 추출물, 마카 추출물, 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물의 영향을 측정한 결과를 나타낸다. ‘CTL’은 대조군, ‘C’는 꾸지뽕 추출물, ‘M’은 마카 추출물 및 ‘C+M’은 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 의미한다.
도 5는 만 40세 이상 중년 남성 60명의 꾸지뽕 추출물 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물 섭취 후 테스토스테론의 증가율에 대한 결과를 나타낸다. ‘CTL’은 대조군, ‘C’는 꾸지뽕 추출물 및 ‘C+M’은 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 의미한다.
도 6은 만 40세 이상 중년 여성 60명의 꾸지뽕 추출물 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물 섭취 후 에스트라디올의 증가율에 대한 결과를 나타낸다. ‘CTL’은 대조군, ‘C’는 꾸지뽕 추출물 및 ‘C+M’은 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 의미한다.
도 7은 꾸지뽕 추출물, 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물에 의하여 개선된 남성 갱년기 증상을 AMS(Aging Male's Symptom)을 통해 평가하여 정량화한 결과를 나타낸다. ‘C’는 꾸지뽕 추출물, ‘C+M’은 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물, ‘Placebo’는 대조군을 의미한다.
도 8은 꾸지뽕 추출물, 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물에 의하여 개선된 여성 갱년기 증상을 MRS(Menopause Rating Scale)을 통해 평가하여 정량화한 결과를 나타낸다. ‘C’는 꾸지뽕 추출물, ‘C+M’은 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물, ‘Placebo’는 대조군을 의미한다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

실시예 1: 꾸지뽕 추출물 또는 마카 추출물의 제조 및 혼합물의 제조

꾸지뽕(Cudrania tricuspidata) 추출물의 제조

꾸지뽕를 선별하여 분쇄한 뒤, 분쇄물 중량의 약 6배의 부피량(w/v)의 정제수를 용매로 하여 약 5시간 동안 열수추출방법으로 추출하고, 5배의 정제수를 가하여 2차 추출한다. 본 추출물을 바로 여과하여 진공농축한 후 덱스트린과 1:1로 혼합하여 분무건조하거나 동결건조하여 꾸지뽕 추출물을 수득하였다.

마카 추출물(Lepidium meyenii)의 제조

마카를 선별하여 분쇄한 뒤, 분쇄물 중량의 약 6배의 부피량(w/v%)의 정제수를 용매로 하여 4시간 이상 열수추출하고, 4배의 정제수를 가하여 2차 추출한다. 추출물을 여과포로 여과하고, 여액을 진공 농축한 후, 추출물과 덱스트린을 5:7로 혼합하여 분무건조하거나 동결건조하여 분말 추출물을 획득하였다.

꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물 제조

상기 실시예로부터 수득한 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물을 10:1 내지 1:10, 바람직하게는 9:1 내지 8:2, 보다 바람직하게는 7:3 내지 6:4의 비율로 혼합하여 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 제조한다.

시험예 1: 남성호르몬 및 정자 기능 증가 효과

성호르몬 전구체 DHEA, DHEA-s, 성호르몬 테스토스테론 및 에스트라디올의 증가 및 성호르몬 생체 활성억제 글로블린 SHBG의 감소

본 발명의 조성물이 혈중 남녀 성호르몬 전구체 DHEA(Dehydroepiandrosterone), DHEA-s, 성호르몬 테스토스테론(testosterone), 에스트라디올(estradiol) 및 성호르몬 생체 활성 억제 글로블린 SHBG(Sex Hormone-Binding Globulin) 혈중 농도에 대한 영향을 확인하여 남녀 성호르몬 조절 관련 질환 및 증상의 예방 또는 치료에 효과가 있는지를 확인하였다.

랫트 성호르몬 증가 효과

체중 250 g 내외의 스프라그-다우리(Sparague-Dawley) 계통의 랫트(Samtako, 대한민국)를 각각 대조군, 꾸지뽕 추출물, 마카 추출물 및 꾸지뽕 추출물과 마카 추출물의 혼합물을 섭취한 실험군으로 나누어 각각 랫트 10 마리씩 자성 5 마리 및 웅성 5 마리를 실험에 이용하였다. 사육기간 중에는 랫트 고형 사료와 증류수를 자유롭게 섭취하도록 하였고, 매일 오전 같은 시간에 생리식염수에 녹인 꾸지뽕 추출물, 또는 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물(6:4의 혼합비)을 각각 5 ㎎/㎏의 농도로 경구투여하고, 대조군은 동량의 생리식염수를 1개월 동안 경구투여 하였다. 마지막 경구투여 후 8시간 동안 절식시킨 후 에테르(ether) 마취 후 개복하여 복대정맥으로 혈액을 채취한 후, 헤파린(heparin) 처리된 튜브로 옮겨 담고 2,500 rpm(4℃)에서 15분 동안 원심분리를 실시하여 혈장을 분리하였다. 분리된 혈장을 대상으로 DHEA, DHEA-s, SHBG, 테스토스테론 및 에스트라디올 ELISA 키트(ADI-901-093, 065, 174; Enzo Life Sciences, 미국)를 이용하여 제조사의 매뉴얼에 따라 혈중 성호르몬 함량을 측정하였다.

결과는 평균과 표준편차로 나타내었으며 유의성 검증을 위해 통계처리는 스튜던트's t-테스트를 이용하였고, p<0.05 시에 유의한 것으로 간주하여 표시하였다. 그 결과를 도 1 내지 도 4에 나타내었다.

측정 결과, 도 1에서 확인할 수 있듯이, 꾸지뽕 추출물(C)과 마카 추추물(M)을 각각 섭취한 경우, 대조군(CTL)에 비해 각각 약 1.38 nmol/L 및 0.2 nmol/L 의 혈중 DHEA 수치가 증가하였고, DHEA-s의 수치는 각각 약 7.6 nmol/L 및 0.81 nmol/L 가량 증가하였다. 그리고 혼합물(C+M)을 섭취한 경우, DHEA 및 DHEA-s의 수치가 대조군에 비해 각각 2.1 nmol/L 및 15.01 nmol/L 정도로 통계적으로 유의하게 증가하였다.

또한 도 2의 결과에서 꾸지뽕 추출물(C)과 마카(M)을 각각 섭취한 경우, 대조군(CTL)에 비해 각각 약 2.0 nmol/L 및 0.2 nmol/L 가량 혈중 SHBG 농도가 감소하였고 혼합물(C+M)을 섭취한 경우, SHBG의 수치가 대조군에 비해서 약 2.8 nmol/L 가까이 통계적으로 유의하게 감소하였다.

도 3의 결과에서 꾸지뽕 추출물(C)과 마카(M)를 각각 섭취한 경우, 수컷 랫트에서 추출물을 처리하기 전에 비해서 혈중 테스토스테론의 수치는 각각 31% 및 -1% 가량 증가하였고 혈중 생리활성형 테스토스테론의 수치는 각각 약 42% 및 5% 증가하였다. 그리고 혼합물(C+M)을 섭취한 경우 혈중 테스토스테론과 생리활성형 테스토스테론의 수치는 각각 59% 및 61% 가까이 유의한 증가를 보였다.

도 4의 결과에서 꾸지뽕 추출물(C)과 마카(M)를 각각 섭취한 경우, 암컷 랫트에서 대조군(CTL)에 비해서 혈중 에스트라디올의 수치는 각각 29% 및 2% 가량 증가하였고 혈중 생리활성형 에스트라디올의 수치는 각각 약 38% 및 10% 증가하였다. 그리고 혼합물(C+M)을 섭취한 경우 혈중 에스트라디올과 생리활성형 에스트라디올의 수치는 각각 51% 및 55%로 유의한 증가를 보였다.

시험예 2: 인체시험을 통한 혈중 성호르몬 조절 효과

남녀 성인에서 본 발명의 조성물을 섭취하게 하여 섭취 전후 성호르몬 전구체 및 남녀 성호르몬의 혈중 농도 변화와 성호르몬 생리활성 억제 글로불린의 감소를 확인하여 발명 조성물의 성호르몬 조절 효과를 확인하였다.

연구 대상 및 기간

본 검사에 동의한 만 40세 이상 중년 남성 60명을 위약을 섭취한 대조군(placebo)과 본 발명의 꾸지뽕 추출물 또는 꾸지뽕 추출물과 마카 추출물의 혼합물(C+M; 7:3 혼합비)을 섭취한 실험군으로 각 20명씩 임의로 분류하여 4주 동안 위약 또는 실험약을 일일 500 mg 씩 섭취하도록 하였다. 또한 만 40세 이상 중년 여성 60명을 위와 같은 방식으로 임의로 분류하여 같은 방식으로 실험을 진행하였다. 섭취 전과 후에 ‘실험예 1’의 방법으로 혈중 성호르몬의 농도를 조사하여 본 조성물의 섭취로 인한 남녀 성호르몬 조절 평가를 실시하였다.

성인 남녀에서의 성호르몬 증가 효과

혈액은 섭취 전과 후에 동일한 시각인 오후 2시에 대조군 및 실험군 성인 남녀의 혈액을 팔 정맥으로 채취한 후, 헤파린 처리된 튜브로 옮겨 담고 2,500 rpm(4℃)에서 15분 동안 원심분리를 실시하여 혈장을 분리하였다. 분리된 혈장을 대상으로 테스토스테론, 에스트라디올 ELISA 키트(ADI-901-065, 174; Enzo Life Sciences, 미국)을 이용하여 제조사의 매뉴얼에 따라 혈중 성호르몬 함량을 측정하였다.

결과는 평균과 표준편차로 나타내었으며 유의성 검증을 위해 통계처리는 스튜던트's t-테스트를 이용하였으며, p<0.05 시에 유의한 것으로 간주하여 표시하였다. 그 결과를 도 5 및 도 6에 나타내었다.

측정 결과, 도 5에서 확인할 수 있듯이 꾸지뽕 추출물(C)을 섭취한 남성의 경우, 대조군(CTL)에 비해 약 15.1%의 혈중 테스토스테론 수치가 증가하였고, 혼합물(C+M)을 섭취한 경우, 혈중 테스토스테론의 수치가 대조군에 비해 23.4% 가까이 증가하였다.

또한 도 6의 결과에서 꾸지뽕 추출물(C)을 섭취한 여성의 경우, 대조군(CTL)에 비해 각각 약 17.7%의 혈중 에스트라디올 수치가 증가하였고, 혼합물(C+M)을 섭취한 경우, 혈중 에스트라디올의 수치가 대조군에 비해 26.7% 가까이 증가하였다.

시험예 3: 임상시험을 통한 남성 갱년기 예방 효과

남성에게 본 발명의 조성물을 섭취하게 하여 섭취 전후 남성 갱년기 평가 설문지를 통해 남성 호르몬 조절 이상에 의한 남성 갱년기 예방 및 치료 효과를 확인하였다.

연구 대상 및 기간

본 검사에 동의한 만 40세 이상 중년 남성 60명을 위약을 섭취한 대조군(placebo)과 본 발명의 꾸지뽕 추출물(C) 및 조성물의 혼합물(C+M; 6:4 혼합비)을 섭취한 실험군으로 각 20명씩 임의로 분류하여 4주 동안 위약 또는 실험약을 일일 500 mg씩 섭취하도록 하였다. 섭취 전과 후에 표 1의 검사지에 답하도록 하여 본 조성물의 섭취로 인한 남성 갱년기 평가를 실시하였다.

한글판 AMS ( Aging Males' Symptom ) 등급

1999년 Heinemann 등(Heinemann LAJ, Zimmermann T, Vermeulen A, Thiel C. A New 'Aging Male's Symptom'(AMS) Scale. The Aging Male 1992, 2:105-114.)이 독일어로 개발한 AMS 등급은 노화가 남성의 삶의 질에 미치는 영향을 객관적으로 평가하기 위해 고안된, 타당도와 신뢰도가 입증된 도구로, 한국판은 2003년 김세현의 번역판이 타당도와 신뢰도가 입증되었다(Daig I, Heinemann LA, Kim S, Leungwattanakij S, Badia X, Myon E, et al. e Aging Males' Symptoms (AMS) scale: review of its methodological characteristics. Health Qual Life Outcomes 2003;1:77.). 전체 17개의 문항으로 이루어져 있으며 모든 항목은 증상 없음(1점), 가벼움(2점), 보통(3점), 심함(4점) 및 매우 심함(5점)으로 정량화된다. 총점 27점 이상인 경우를 양성으로 판정하며, 증상 정도에 따라 17-26점은 없음(no), 27-36점은 경도(little), 37-49점은 중등도(moderate), 50점 이상을 중증(severe)으로 구분한다. AMS 17개 문항은 정신적, 신체적, 성적 요소의 3가지 세부 요소로 분류되는데, 문항 6-8, 11, 13번은 정신적 요소, 1-5, 9, 10번은 신체적 요소, 12, 14-17번은 성적 요소에 해당한다(표 1).

본 발명의 실험군 및 대조군의 AMS 결과는 표 2 및 도 7에 나타내었으며, 결과값은 평균과 표준편차로 기입하였고, 통계처리는 스튜던트 t-테스트를 이용하였으며, p<0.05 시에 유의한 것으로 간주하여 표시하였다.

시험 결과, 대조군의 AMS 점수가 섭취 전후 크게 차이가 없는 반면, 본 발명의 꾸지뽕 추출물(C) 섭취군은 섭취 전에 비하여 약 11점 감소하여 약 24% 의 남성 갱년기 증상 개선율을 보였고 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물 섭취군(C+M)은 섭취 전에 비해 AMS 점수가 약 21점 감소하여 약 49% 의 남성 갱년기 증상 개선율을 보였다. 이로써 본 발명의 조성물이 AMS 검사항목인 활력개선, 성욕, 정력, 발기개선, 수면개선, 정서안정 등 남성 노화로 인해 나타나는 갱년기 증상을 완화시킴을 확인하였다.

-	섭취 전 AMS 점수	접취 후 AMS 점수	갱년기증상 개선도 (%)
대조군(placebo)	44.33 ± 5.59	45.95 ± 7.76	97
꾸지뽕 추출물을 섭취한 실험군(C)	44.12 ± 4.75	32.63 ± 4.31 *	124
꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 섭취한 실험군(C+M)	42.53 ± 5.50	21.37 ± 3.85 *	149 *

시험예 4: 인체시험을 통한 여성 갱년기 예방 효과

여성에게 본 발명의 조성물을 섭취하게 하여 섭취 전후 여성 갱년기 평가 설문지를 통해 여성 호르몬 조절 이상에 의한 여성 갱년기 예방 및 치료 효과를 확인하였다.

연구 대상 및 기간

본 검사에 동의한 만 40세 이상 중년 여성 60명을 위약을 섭취한 대조군(placebo)과 본 발명의 꾸지뽕 추출물(C) 및 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물(C+M; 6:4 혼합비)을 각각 섭취한 실험군으로 각 20명씩 임의로 분류하여 8주 동안 위약 또는 실험약을 일일 500 ㎎ 씩 섭취하도록 하였다. 섭취 전과 후에 표 3의 검사지에 답하도록 하여 본 조성물의 섭취로 인한 여성 갱년기 평가를 실시하였다.

한글판 MRS( Menopause Rating Scale )

1953년 Kupperman등이 발표한 Kupperman index는 현재까지 여성 갱년기 증상과 관련한 연구에서 증상 평가 척도로서 가장 많이 사용되고 있는 자가 설문 검사 방식이다. 이 방식을 보완하여 1992년 Hildich 등이 보완하여 만든 것이 MENQOL(The menopause-specific quality of life questionnaire)이며 이것을 다시 1996년에 새롭게 보완하여 만든 측정법이 MRS이다. MRS는 전세계적으로 많은 연구들에 인용되면서 신뢰도와 타당성이 인정되고 있다. 신체증상, 정신증상, 비뇨생식기증상 등 총 11개 문항으로 구성되어 있으며 문항수가 적고 간편하여 편리하다는 장점을 가지고 있다. 다음 설문지가 실제 연구에 사용되고 있다(표 3).

총점을 계산하여 0-4점은 양호한 갱년기 상태로서 원만한 갱년기를 이야기하며 5-8점은 경미한 갱년기 상태로서 관리가 필요함을 보여준다. 9-15점은 중증도 갱년기 상태로서 갱년기 장애가 있으므로 전문가의 진단가 치료가 필요하다. 16점 이상은 심한 갱년기 상태로서 장기적인 계획과 치료가 매우 필요함을 나타내는 수치이다.

시험 결과, 대조군의 MRS 점수가 섭취 전후 크게 차이가 없는 반면, 본 발명의 꾸지뽕 추출물 섭취군은 섭취 전에 비해 MRS 점수가 약 4.3 점 감소하여 37%의 여성 갱년기 증상 개선율을 보였다. 또한 본 조성물의 꾸지뽕 추출물 마카 추출물의 혼합물 섭취군은 섭취 전에 비해 MRS 점수가 약 8.1점 감소하여 약 64%의 여성 갱년기 증상 개선율을 보였다. 이로써 본 발명의 조성물이 MRS 검사항목인 활력개선, 성욕, 수면문제, 신경안정, 비뇨기 문제, 관절문제, 우울감, 과민성, 질 건강 등 여성 노화로 인해 나타나는 여성 갱년기 증상을 완화시킴을 확인하였다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

(a) 꾸지뽕(Cudrania tricuspidata) 추출물; 또는 (b) 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 성 호르몬 관련 질환 또는 증상의 예방, 치료 또는 개선용 조성물.
상기 제 1 항에 있어서, 상기 성 호르몬 관련 질환은 남성 갱년기 증후군, 여성 갱년기 증후군, 성기발육이상, 안드로젠 저항성 증후군, 생식선 기능 감퇴증, 칼만(Kallmann) 증후군, 클라인펠터 증후군(Klinefelter syndrome), 터너 증후군(Turner syndrome), 폐경, 고환 감퇴, 사춘기 지연, 조숙증, 월경 장애, 생식 장애, 무월경 또는 다낭성난소증후군인 것을 특징으로 하는 조성물.
상기 제 1 항에 있어서, 상기 성 호르몬 관련 증상은 불임, 탈모, 체중 증가, 우울증, 불안, 공황 발작, 불면증, 전립선 문제, 성적 향락 문제, 불규칙한 월경 주기 또는 성욕인 것을 특징으로 하는 조성물.
제 2 항에 있어서, 상기 남성 갱년기 증후군은 관절 또는 근육의 통증, 골다공증, 다한증, 수면장애, 흥분, 신경과민, 정서불안, 무기력증, 피로, 근력 저하, 우울증, 정력 저하, 성욕 저하, 발기력 저하, 노화 또는 비뇨생식기 기능 저하인 것을 특징으로 하는 조성물.
제 2 항에 있어서, 상기 여성 갱년기 증후군은 안면홍조, 발한, 심장 불편감, 수면 문제, 우울증, 과민성, 불안감, 신체적 피로, 정신적 피로, 성적 문제, 배뇨 문제, 질 건조감, 관절 불편감 또는 근육 불편감인 것을 특징으로 하는 조성물.
상기 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 꾸지뽕 추출물 및 마카 추출물의 혼합물은 10:1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
상기 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 약제학적 조성물, 식품 조성물 또는 기능성 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.