KR20150003771A

KR20150003771A - 그렐린 수용체 효능제로서의 2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일 유도체의 l-말레이트 염 및 그의 결정질 형태

Info

Publication number: KR20150003771A
Application number: KR20147030325A
Authority: KR
Inventors: 애밋 비제이 엠바칸
Original assignee: 노파르티스 아게
Priority date: 2012-05-03
Filing date: 2013-05-02
Publication date: 2015-01-09
Also published as: PE20142443A1; CA2867043A1; EP2852591A1; MA20150428A1; CN104271579A; BR112014026210A2; CO7111286A2; AU2013255458A1; EA201491990A1; TW201348235A; IL235215A0; US20130296358A1; WO2013164790A1; TN2013000441A1; JP2015525202A; TN2014000400A1; AR093748A1; SG11201405810UA; CU20130159A7; PH12014502446A1

Abstract

본 발명은 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염, 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염 및 2-아미노-N-((R)-1-벤질옥시메틸-2-[(4S,5R)-4-플루오로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소에틸}2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염 및 그의 결정질 형태; 이러한 화합물을 포함하는 제약 조성물 및 그렐린 수용체에 의해 매개되는 장애 또는 질환의 치료를 위한 이러한 화합물에 관한 것이다.
<화학식 I>

Description

그렐린 수용체 효능제로서의 2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일 유도체의 L-말레이트 염 및 그의 결정질 형태 {L-MALATE SALT OF 2,7-DIAZA-SPIRO[4.5]DEC-7-YLE DERIVATIVES AND CRYSTALLINE FORMS THEREOF AS GHRELIN RECEPTOR AGONISTS}

본 발명은 3-스피로시클릭 피페리딘 유도체; 이러한 3-스피로시클릭 피페리딘 유도체의 제조 방법; 이러한 3-스피로시클릭 피페리딘 유도체를 임의로 하나 이상의 다른 제약 활성 화합물과 조합하여 포함하는 제약 조성물; 의약으로서의 하나 이상의 다른 제약 활성 화합물과 임의로 조합된 이러한 3-스피로시클릭 피페리딘 유도체; 위장 (GI) 운동장애를 특징으로 하는 장애/질환의 치료를 위한 하나 이상의 다른 제약 활성 화합물과 조합된 이러한 3-스피로시클릭 피페리딘 유도체; 및 위장 (GI) 운동장애를 특징으로 하는 장애/질환의 치료를 위한 제약 조성물 (의약)의 제조를 위한 이러한 3-스피로시클릭 피페리딘 유도체의 용도에 관한 것이다.

그렐린은 G 단백질-커플링된 수용체 (GPCR), 유형 1 성장 호르몬 분비촉진제 수용체 (hGHS-R1a)에 대한 내인성 리간드인 것으로 밝혀진 호르몬이다 (문헌 [Howard et al., Science, 1996, 273, 974-977]).

그렐린은 주로 위에서 합성된다 (문헌 [Kojima et al., Horm. Res., 2001, 56 (Suppl. 1), 93-97]). 그렐린의 수준은 단식 또는 연장된 음식물 제한에 대해 반응하여 상승하는 것으로 확인되었다 (문헌 [Nakazato et al., Nature, 2001, 409, 194-198]). 인간에서의 그렐린의 다수의 효과가 보고되었다 (예를 들어, 미국 특허 출원 US2008/0194672, 배경기술 섹션 참조).

그렐린은 위장 (GI) 운동성 (문헌 [Murray et al., Gastroenterology, 2003, 125, 1492-1502]) 및 변경된 GI 통과의 상태와 연관된 증상, 예컨대 위마비 (예를 들어, 문헌 [Tack et al., Aliment Pharmacol Ther, 2005, 22: 847-853]) 및 기능성 소화불량 (예를 들어, 문헌 [Akamizu et al., Eur J Endocrinol. 2008, 158, 491-498])을 개선하는 것으로 관찰되었다. 따라서, 그렐린 효능제는 감소되거나 제한된 GI 운동성과 연관된 상태의 치료에 유용할 수 있다.

그렐린은 성장 호르몬 (GH) 수준의 조절 (문헌 [Howard et al., Science, 1996, 273, 974-977; Kojima et al., Nature 1999, 402, 656-660]) 뿐만 아니라 식욕, 포만감 및 에너지 항상성의 조절 (문헌 [Cummings, Physiol Behav, 2006, 89, 71-84])을 비롯한 추가의 내분비 효과를 갖는 것으로 관찰되었다. 따라서, 그렐린 수용체 효능제는 GH 방출 및/또는 음식물 섭취의 조절이 유익할 수 있는 상태, 예를 들어 성장 지연, 근육 소모 장애 (예를 들어, 예를 들어 암, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 울혈성 심부전 (CHF), 신부전 또는 파킨슨병과 연관된 근육감소증 또는 악액질), 급성 외상 (예를 들어, 화상, 척수 손상, 고관절 골절, 두부 외상 및 대수술)으로부터의 식욕부진 및 회복, 또는 중대 질병과 같은 상태를 위한 치료제로서 유용할 수 있다 (문헌 [DeBoer, 2011, Mol Cell Endocrinol]).

따라서, 신규 그렐린 수용체 효능제를 제공하는 것이 본 발명의 목적이다.

WO 97/11697 (머크(Merck))은 성장 호르몬의 방출을 위한 3-스피로락탐, 3-스피로아미노, 3-스피로락톤 및 3-스피로벤조피란 피페리딘 및 피롤리딘을 기재하고 있다.

제1 측면에서, 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

<화학식 I>

상기 식에서

은 단일 결합 또는 이중 결합이고;

X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 (CH)이거나; 또는

X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 N이거나; 또는

X¹은 NR^x1이고, X²는 (CH)이거나; 또는

X¹은 NR^x1이고, X²는 N이거나; 또는

X¹은 N이고, X²는 C이고; 여기서 X¹이 N이고, X²가 C인 경우에, X¹ 및 X² 사이의 결합은 이중 결합이고;

n은 0 또는 1이고;

R^x1은 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

m은 1이고, p는 0이거나; 또는

m은 1이고, p는 1이거나; 또는

m은 2이고, p는 1이고;

Y는 NR¹ 또는 O이고;

R¹은 수소, C₁ _-6 알킬, -C₁ _- ₄알킬C(O)NR^1aR^1b, -C₁ _- ₄알킬C(O)OC_1- ₄알킬, -C₁ _- ₄알킬C(O)OC_1-4할로알킬, C₁ _- ₆할로알킬, C₃ _- ₆시클로알킬, -C₁ _- ₄알킬-5-6원 헤테로아릴, 히드록시C₁ _-6 알킬, C₁ _-6 알콕시 및 C₁ _-4 알콕시C₁ _-4 알킬로부터 선택되고;

여기서 5-6원 헤테로아릴은 비치환되거나 또는 할로겐 및 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환되고;

R^1a 및 R^1b는 독립적으로 수소, C₁ _-6 알킬 및 C₁ _-6 할로알킬로부터 선택되거나; 또는 R^1a 및 R^1b는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 0, 1 또는 2개의 추가의 헤테로원자를 함유하는 4-6원 헤테로시클릭 고리를 형성하고;

R^2a는

(i) -A-페닐;

(ii) -A-5-6원 헤테로아릴;

(iii) -A-4-6원 헤테로시클릴;

(iv) -A-C₅ _- ₆시클로알킬;

(v) -D-8-10원 융합된 비시클릭 고리계

로부터 선택되고;

여기서 페닐, 5-6원 헤테로아릴, 4-6원 헤테로시클릴, C₅ _- ₆시클로알킬 및 8-10원 융합된 비시클릭 고리계는 비치환되거나 또는 할로겐, 히드록시, C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시 및 C₁ _- ₆할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환되고;

A는 결합, -(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)-O-, -O-(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)-S-, -(CR^A1R^A2)-S(O)-, -(CR^A1R^A2)-S(O)₂-, -S-(CR^A1R^A2)-, -S(O)-(CR^A1R^A2)-, -S(O)₂-(CR^A1R^A2)-, -NR^A3-(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)-NR^A3- 및 -(CR^A1)=(CR^A1)-로부터 선택되고;

D는 결합, -O- 또는 -(CR^D1R^D2)-이고;

R^A1, R^A2 및 R^A3은 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;

R^D1 및 R^D2는 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;

R^2b는 수소 또는 C₁ _- ₄알킬이고;

R³ 및 R⁴는 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬 및 C₃ _- ₆시클로알킬로부터 선택되거나; 또는 R³ 및 R⁴는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 0, 1 또는 2개의 추가의 헤테로원자를 함유하는 4-6원 헤테로시클릭 고리를 형성하고; 상기 4-6원 헤테로시클릭 고리는 비치환되거나 또는 1 또는 2개의 할로겐 치환기로 치환되고;

R⁶ 및 R⁷은 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆히드록시알킬 및 C₁ _- ₆할로알킬로부터 선택되고;

R⁵는 페닐, 5-6원 헤테로아릴, C₃ _- ₆시클로알킬 및 4-6원 헤테로시클릴로부터 선택되고; 상기 페닐, 5-6원 헤테로아릴, C₃ _- ₆시클로알킬 및 4-6원 헤테로시클릴은 비치환되거나 또는 할로겐, C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시 및 C₁ _- ₆할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된다.

제2 측면에서, 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

<화학식 I>

상기 식에서

은 단일 결합 또는 이중 결합이고;

X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 (CH)이거나; 또는

X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 N이거나; 또는

X¹은 NR^x1이고, X²는 (CH)이거나; 또는

X¹은 NR^x1이고, X²는 N이거나; 또는

n은 0 또는 1이고;

R^x1은 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

Y는 NR¹ 또는 O이고;

R¹은 수소, C₁ _-6 알킬, -C₁ _- ₄알킬C(O)NR^1aR^1b, -C₁ _- ₄알킬C(O)OC_1- ₄알킬, -C₁ _-4 알킬C(O)OC_1-4 할로알킬, C₁ _-6 할로알킬, C₃ _-6 시클로알킬, 히드록시C₁ _-6 알킬, C₁ _-6 알콕시 및 C₁ _-4 알콕시C_1-4 알킬로부터 선택되고;

R^1a 및 R^1b는 독립적으로 수소, C₁ _-6 알킬 및 C₁ _-6 할로알킬로부터 선택되거나; 또는 R^1a 및 R^1b는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 4-6원 헤테로시클릭 고리를 형성하고;

R^2a는

(i) -A-페닐;

(ii) -A-5-6원 헤테로아릴;

(iii) -A-4-6원 헤테로시클릴;

(iv) -A-C₅ _- ₆시클로알킬;

(v) -D-8-10원 융합된 비시클릭 고리계

로부터 선택되고;

여기서 페닐, 5-6원 헤테로아릴, 4-6원 헤테로시클릴, C₅ _- ₆시클로알킬 및 8-10원 융합된 비시클릭 고리계는 비치환되거나 또는 할로겐, C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시 및 C₁ _- ₆할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환되고;

A는 결합, -(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)-O-, -O-(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)-S-; -S-(CR^A1R^A2)-, -NR^A3-(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)-NR^A3- 및 -(CR^A1)=(CR^A1)-로부터 선택되고;

D는 결합, -O- 또는 -(CR^D1R^D2)-이고;

R^2b는 수소 또는 C₁ _- ₄알킬이고;

R³ 및 R⁴는 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬 및 C₃ _- ₆시클로알킬로부터 선택되거나; 또는 R³ 및 R⁴는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 4-6원 헤테로시클릭 고리를 형성하고; 상기 4-6원 헤테로시클릭 고리는 비치환되거나 또는 1 또는 2개의 할로겐 치환기로 치환되고;

R⁶ 및 R⁷은 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆히드록시알킬 및 C₁ _- ₆할로알킬로부터 선택되거나; 또는 R⁶ 및 R⁷은 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 C₃ _- ₆시클로알킬을 형성하고, 상기 C₃ _- ₆시클로알킬은 비치환되거나 또는 1 또는 2개의 할로겐 치환기로 치환되거나; 또는 R⁶은 이것이 부착되어 있는 탄소 원자, R³, 및 R³이 부착되어 있는 질소와 함께 4-6원 헤테로시클릭 고리를 형성하고; 상기 4-6원 헤테로시클릭 고리는 비치환되거나 또는 1 또는 2개의 할로겐 치환기로 치환되고;

제3 측면에서, 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

<화학식 I>

상기 식에서

은 단일 결합 또는 이중 결합이고;

X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 (CH)이거나; 또는

X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 N이거나; 또는

X¹은 NR^x1이고, X²는 (CH)이거나; 또는

X¹은 NR^x1이고, X²는 N이거나; 또는

n은 0 또는 1이고;

R^x1은 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

Y는 NR¹ 또는 O이고;

R^2a는

(i) -A-페닐;

(ii) -A-5-6원 헤테로아릴;

(iii) -A-5-6원 헤테로시클릴;

(iv) -A-C₅ _- ₆시클로알킬;

(v) -D-8-10원 융합된 비시클릭 고리계

로부터 선택되고;

D는 결합, -O- 또는 -(CR^D1R^D2)-이고;

R^2b는 수소 또는 C₁ _- ₄알킬이고;

또 다른 측면에서, 의약으로서 사용하기 위한, 특히 그렐린 수용체에 의해 매개되는 장애 또는 질환의 치료를 위한 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물을 제공한다.

추가 측면에서, 그렐린 수용체에 의해 매개되는 장애 또는 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 그렐린 수용체에 의해 매개되는 장애 또는 질환을 치료하는 방법을 제공한다.

도 1은 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I의 X선 분말 회절 패턴을 예시한다.
도 2는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 II의 X선 분말 회절 패턴을 예시한다.
도 3은 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 III의 X선 분말 회절 패턴을 예시한다.
도 4는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 IV의 X선 분말 회절 패턴을 예시한다.
도 5는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I의 시차 주사 열량측정법 (DSC) 및 열중량 분석 (TGA)을 예시한다.
도 6은 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 II의 시차 주사 열량측정법 (DSC) 및 열중량 분석 (TGA)을 예시한다.
도 7은 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 III의 시차 주사 열량측정법 (DSC) 및 열중량 분석 (TGA)을 예시한다.
도 8은 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 IV의 열중량 분석 (TGA)을 예시한다.
도 9는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-((4S,5R)4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I의 X선 분말 회절 패턴을 예시한다.
도 10은 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-((4S,5R)-4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I의 시차 주사 열량측정법 (DSC) 및 열중량 분석 (TGA)을 예시한다.
도 11은 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I의 X선 분말 회절 패턴을 예시한다.
도 12는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 II의 X선 분말 회절 패턴을 예시한다.
도 13은 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I의 시차 주사 열량측정법 (DSC) 및 열중량 분석 (TGA)을 예시한다.
도 14는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 II의 시차 주사 열량측정법 (DSC) 및 열중량 분석 (TGA)을 예시한다.

<화학식 I>

상기 식에서

은 단일 결합 또는 이중 결합이고;

X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 (CH)이거나; 또는

X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 N이거나; 또는

X¹은 NR^x1이고, X²는 (CH)이거나; 또는

X¹은 NR^x1이고, X²는 N이거나; 또는

n은 0 또는 1이고;

R^x1은 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

m은 1이고, p는 0이거나; 또는

m은 1이고, p는 1이거나; 또는

m은 2이고, p는 1이고;

Y는 NR¹ 또는 O이고;

R¹은 수소, C₁ _- ₆알킬, -C₁ _- ₄알킬C(O)NR^1aR^1b, -C₁ _- ₄알킬C(O)OC_1- ₄알킬, -C₁ _- ₄알킬C(O)OC_1-4 할로알킬, C₁ _- ₆할로알킬, C₃ _- ₆시클로알킬, -C₁ _- ₄알킬-5-6원 헤테로아릴, 히드록시C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시 및 C₁ _- ₄알콕시C₁ _- ₄알킬로부터 선택되고;

여기서 5-6원 헤테로아릴은 비치환되거나 또는 할로겐 및 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환되고; R^1a 및 R^1b는 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬 및 C₁ _- ₆할로알킬로부터 선택되거나; 또는 R^1a 및 R^1b는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 0, 1 또는 2개의 추가의 헤테로원자를 함유하는 4-6원 헤테로시클릭 고리를 형성하고;

R^2a는

(i) -A-페닐;

(ii) -A-5-6원 헤테로아릴;

(iii) -A-4-6원 헤테로시클릴;

(iv) -A-C₅ _- ₆시클로알킬;

(v) -D-8-10원 융합된 비시클릭 고리계

로부터 선택되고;

D는 결합, -O- 또는 -(CR^D1R^D2)-이고;

R^A1, R^A2 및 R^A3은 독립적으로 수소, C₁ _-6 알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;

R^D1 및 R^D2는 독립적으로 수소, C₁ _-6 알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;

R^2b는 수소 또는 C₁ _-4 알킬이고;

R⁶ 및 R⁷은 독립적으로 수소, C₁ _-6 알킬, C₁ _-6 히드록시알킬 및 C₁ _-6 할로알킬로부터 선택되고;

용어 '할로겐'는 달리 언급되지 않는 한, 플루오로, 클로로, 브로모 또는 아이오도로부터 선택된 기를 기재하는 것으로 본원에 사용된다.

기 또는 기의 부분으로서 본원에 사용된 용어 'C₁ _- ₆알킬' 또는 'C₁ _- ₄알킬'은 1 내지 6개 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 선형 또는 분지형 포화 탄화수소 기를 지칭한다. 이러한 기의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 헥실 등을 포함한다. 특정한 구조가 명시되지 않을 경우, 용어 프로필, 부틸 등은 적절한 수의 탄소 원자를 갖는 모든 직쇄 및 분지쇄 형태를 포함하고, 예를 들어 프로필은 n-프로필 및 이소프로필을 포함한다.

본원에 사용된 용어 'C₁ _- ₆알콕시'는 -O-C₁ _- ₆알킬 기를 지칭하며, 여기서 C₁ _- ₆알킬은 본원에 정의된 바와 같다. 이러한 기의 예는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시 등을 포함한다. 알킬과 관련하여, 특정한 구조가 명시되지 않을 경우, 용어 프로폭시, 부톡시 등은 적절한 수의 탄소 원자를 갖는 모든 직쇄 및 분지쇄 형태를 포함하고, 예를 들어 프로폭시는 n-프로폭시 및 이소프로폭시를 포함한다.

본원에 사용된 용어 'C₁ _- ₆할로알킬' 또는 'C₁ _- ₄할로알킬'은 동일하거나 상이할 수 있는 1개 이상의 할로겐 기로 치환된 본원에 정의된 바와 같은 C₁ _- ₆알킬 또는 C_1-4알킬 기, 예를 들어 -CF₃, -CF₂H 또는 -CH₂CF₃을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 'C₃ _- ₆시클로알킬' 또는 'C₅ _- ₆시클로알킬'은 각각 3 내지 6개의 탄소 원자 또는 5-6개의 탄소 원자의 포화 모노시클릭 탄화수소 고리를 지칭한다. 이러한 기의 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실을 포함한다.

m이 1이고 p가 0인 경우에, 화학식 I의 화합물은 하기이다.

m이 1이고 p가 1인 경우에, 화학식 I의 화합물은 하기이다.

m이 2이고 p가 1인 경우에, 화학식 I의 화합물은 하기이다.

본원에 사용된 용어 히드록시C₁ _- ₆알킬은 1개의 히드록시 기로 치환된 본원에 정의된 바와 같은 C₁ _- ₆알킬 기, 예를 들어 -CH₂CH₂OH를 지칭한다.

용어 '5-6원 헤테로아릴'은 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 함유하는 5 또는 6원 방향족 고리계를 지칭한다. 이 경우에 5-원 헤테로아릴 고리의 예는 푸라닐, 피롤릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 트리아졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 티에닐, 피라졸릴 및 테트라졸릴을 포함한다. 6-원 헤테로아릴 고리의 예는 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐 및 트리아지닐을 포함한다.

용어 '4-6원 헤테로시클릭 고리' 또는 '4-6원 헤테로시클릴'은 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 함유하는 4, 5 또는 6원 포화 또는 부분 불포화 지방족 모노시클릭 고리를 지칭한다. 이러한 기의 적합한 예는 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 테트라히드로피라닐 및 티오모르폴리닐을 포함한다.

용어 '8 내지 10원 융합된 비시클릭 고리계'는 하기 고리계 인돌리닐, 인돌릴, 이소인돌리닐, 이소인돌릴, 인데닐, 벤조푸라닐, 벤조티오페닐, 인다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤조티아졸릴, 벤족사졸릴, 벤족사지닐, 벤조피라닐, 벤조티오피라닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 크로메닐, 신놀리닐, 프탈라지닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 나프티리디닐, 푸로피리디닐, 나프틸, 디히드로벤족사지닐, 디히드로크로메닐, 디히드로벤조디옥시닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 테트라히드로퀴녹살리닐, 테트라히드로나프탈레닐 디히드로벤조푸라닐, 디히드로벤조피라닐, 디히드로벤조티오피라닐, 디히드로벤조티오페닐, 디히드로디옥시노피리디닐, 디히드로인데닐, 디히드로피롤로피리디닐, 디히드로피롤로피리미디닐, 디히드로피롤로피라지닐, 디히드로피롤로피리다지닐, 피롤로피리디닐, 피롤로피라지닐, 피롤로피리다지닐, 피롤로피리미디닐, 푸로피리미디닐, 푸로피라지닐, 푸로피리다지닐, 티에노피리디닐, 티에노피라지닐, 티에노피리다지닐, 티에노피리미디닐, 피라졸로피리디닐, 피라졸로피라지닐, 피라졸로피리다지닐, 피라졸로피리미디닐, 이미다조피리디닐, 이미다조피라지닐, 이미다조피리다지닐, 이미다조피리미디닐, 티아졸로피리디닐, 티아졸로피라지닐, 티아졸로피리다지닐, 티아졸로피리미디닐, 옥사졸로피리디닐, 옥사졸로피라지닐, 옥사졸로피리다지닐, 옥사졸로피리미디닐, 피리도피라지닐, 피리도피리다지닐, 피리도피리미디닐, 피리도옥사지닐, 피라지노옥사지닐, 피리다지노옥사지닐, 피리미도옥사지닐, 디히드로피리도옥사지닐, 디히드로피라지노옥사지닐, 디히드로피리다지노옥사지닐, 디히드로피리미도옥사지닐, 디히드로피라노피리디닐, 디히드로피라노피라지닐, 디히드로피라노피리다지닐, 디히드로피리미디닐, 피라노피리디닐, 피라노피리미디닐, 피라노피라지닐, 피라노피리다지닐, 디히드로디옥시노피리디닐, 디히드로디옥시노피라지닐, 디히드로디옥시노피리다지닐, 디히드로디옥시노피리미디닐, 테트라히드로나프티리디닐, 테트라히드로피리도피리다지닐, 테트라히드로피리도피라지닐, 테트라히드로피리도피리미디닐, 테트라히드로피라지노피리다지닐, 테트라히드로프테리디닐, 테트라히드로피라지노피라지닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 테트라히드로신놀리닐, 테트라히드로퀴나졸리닐, 테트라히드로퀴녹살리닐, 티이노피리디닐, 티이노피라지닐, 티이노피리다지닐, 티이노피리미디닐, 디히드로티이노피리디닐, 디히드로티이노피라지닐, 디히드로티이노피리다지닐, 디히드로티이노피리미디닐, 디히드로푸로피리디닐, 디히드로푸로피라지닐, 디히드로푸로피리다지닐, 디히드로푸로피리미디닐, 디히드로티에노피리디닐, 디히드로티에노피라지닐, 디히드로티에노피리다지닐, 디히드로티에노피리미디닐, 디히드로시클로펜타피리디닐, 디히드로시클로펜타피라지닐, 디히드로시클로펜타피리다지닐, 디히드로시클로펜타피리미디닐, 퀴놀리노닐, 나프티리디노닐, 피리도피라지노닐, 피리도피리다지노닐 및 피리도피리미디노닐을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

본원에 사용된 용어 "1 내지 3개의 치환기로 치환된"은 1, 2 또는 3개의 치환기로 치환됨을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "1 내지 3개의 헤테로원자를 함유하는"은 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 함유함을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "다형체"는 동일한 화학적 조성을 갖지만 결정을 형성하는 분자, 원자 및/또는 이온의 공간 배열이 상이한 결정질 형태를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "용매화물"은 1개 이상의 용매 분자가 결정질 격자 구조에 혼입된 본 발명의 화합물 (그의 제약상 허용되는 염 포함)의 결정질 형태를 지칭한다. 이러한 용매 분자는 수용자에게 무해한 것으로 공지된, 제약 업계에서 흔히 사용되는 것들, 예를 들어 물, 에탄올 등이다. 용매화물 내 용매 분자는 규칙적 배열 및/또는 비-규칙적 배열로 존재할 수 있다. 용매화물은 화학량론적 또는 비-화학량론적 양의 용매 분자를 포함할 수 있다. 예를 들어, 비-화학량론적 양의 용매 분자를 갖는 용매화물은 용매화물로부터의 용매의 부분적 손실로 인해 생성될 수 있다. 용매화물은 결정질 격자 구조 내에 1개 초과의 화합물 분자를 포함하는 이량체 또는 올리고머로서 발생할 수 있다.

본원에 사용된 용어 "수화물"은 용매가 물인 본원에 정의된 바와 같은 용매화물을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "무정형"은 결정질이 아닌 분자, 원자 및/또는 이온의 고체 형태를 지칭한다. 무정형 고체는 명확한 X선 회절 패턴을 나타내지 않는다.

제1 측면의 한 실시양태 (i)에서, 화합물은 하기 화학식 Ia의 화합물이다.

<화학식 Ia>

상기 식에서, X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 (CH)이거나, 또는 X¹은 NR^x1이고, X²는 (CH)이다.

제1 측면의 한 실시양태 (ii)에서, 화합물은 하기 화학식 Ib의 화합물이다.

<화학식 Ib>

제1 측면의 한 실시양태 (iii)에서, 화합물은 하기 화학식 Ic의 화합물이다.

<화학식 Ic>

제1 측면의 한 실시양태 (iv)에서, 화합물은 하기 화학식 Id의 화합물이다.

<화학식 Id>

제1 측면의 한 실시양태 (v)에서, 화합물은 하기 화학식 Ie의 화합물이다.

<화학식 Ie>

제1 측면의 한 실시양태 (vi)에서, 화합물은 하기 화학식 If의 화합물이다.

<화학식 If>

상기 식에서, X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 (CH)이거나, 또는 X¹은 NR^x1이고, X²는 (CH)이다. 화학식 I의 화합물은 특히 화학식 If의 화합물이다.

제1 측면의 한 실시양태 (vii)에서, 화합물은 하기 화학식 Ig의 화합물이다.

<화학식 Ig>

제1 측면의 한 실시양태 (viii)에서, 화합물은 하기 화학식 Ih의 화합물이다.

<화학식 Ih>

제1, 제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (ix) 또는 제1 측면의 실시양태 (i) 또는 (viii)에서, Y는 NR¹이다.

제1 측면의 한 실시양태 (x) 또는 제1 측면의 실시양태 (i) 내지 (ix)에서, Y는 NR¹이고, R¹은 수소, C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆할로알킬, -C₁ _- ₄알킬C(O)NR^1aR^1b, -C₁ _-4 알킬C(O)OC_1- ₄알킬 및 -C₁ _- ₄알킬-5-6원 헤테로아릴로부터 선택되고, 여기서 5-6원 헤테로아릴은 비치환되거나 또는 할로겐 및 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된다.

제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xi) 또는 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (ix)에서, Y는 NR¹이고, R¹은 수소, C₁ _- ₆알킬, -C₁ _- ₄알킬C(O)NR^1aR^1b 및 -C₁ _-4 알킬C(O)OC_1- ₄알킬로부터 선택된다.

제1 측면의 한 실시양태 (xii) 또는 제1 측면의 실시양태 (i) 내지 (x)에서, Y는 NR¹이고, R¹은 수소, 메틸, 이소프로필, 에틸, 2,2-디메틸-프로필, 이소부틸, 2,2,2-트리플루오로에틸, 메틸이속사졸릴메틸, 옥사졸릴메틸 및 -(CH₂)C(O)N(CH₃)₂로부터 선택된다.

제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xiii) 또는 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (ix) 또는 (xi)에서, Y는 NR¹이고, R¹은 수소, 메틸, 이소프로필, 에틸, -(CH₂)C(O)N(CH₃)₂ 및 -(CH₂)C(O)O(CH₂)(CH₃)으로부터 선택된다.

제1, 제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xiv) 또는 적용가능한 경우에 제1, 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (i) 내지 (xiii)에서, X¹은 (CR^x1H)_n이고, n은 1이다.

제1, 제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xv) 또는 적용가능한 경우에 제1, 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (i) 내지 (xiv)에서, R^x1은 수소 및 C₁ _-6 알킬로부터 선택된다.

제1, 제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xvi) 또는 적용가능한 경우에 제1, 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (i) 내지 (xv)에서, R⁵는 페닐 및 피리디닐로부터 선택되고, 상기 페닐 또는 피리디닐은 비치환되거나 또는 할로겐 및 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된다.

제1 또는 제2 측면의 한 실시양태 (xvii) 또는 적용가능한 경우에 제1 또는 제2 측면의 실시양태 (i) 내지 (xvi)에서, R^2a는 -A-페닐, -A-5-6원 헤테로아릴, -A-4-6원 헤테로시클릴, -A-C₅ _- ₆시클로알킬 및 -D-8-10원 융합된 비시클릭 고리계로부터 선택되고, 상기 페닐, 5-6원 헤테로아릴, 4-6원 헤테로시클릴, C₅ _- ₆시클로알킬 및 8-10원 융합된 비시클릭 고리계는 비치환되거나 또는 C₁ _-6 알킬, C₁ _-6 알콕시 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된다.

제3 측면의 한 실시양태 (xviii) 또는 적용가능한 경우에 제3 측면의 실시양태 (ix) 내지 (xvi)에서, R^2a는 -A-페닐, -A-5-6원 헤테로아릴, -A-5-6원 헤테로시클릴, -A-C₅ _- ₆시클로알킬 및 -D-8-10원 융합된 비시클릭 고리계로부터 선택되고, 상기 페닐, 5-6원 헤테로아릴, 4-6원 헤테로시클릴, C₅ _- ₆시클로알킬 및 8-10원 융합된 비시클릭 고리계는 비치환되거나 또는 C₁ _-6 알킬, C₁ _-6 알콕시 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된다.

제3 측면의 한 실시양태 (xix) 또는 적용가능한 경우에 제3 측면의 실시양태 (ix) 내지 (xvi)에서, R^2a는 -A-페닐 및 -D-8-10원 융합된 비시클릭 고리계로부터 선택되고, 상기 페닐 및 8-10원 융합된 비시클릭 고리계는 비치환되거나 또는 C₁ _-6 알킬, C₁ _-6 알콕시 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된다.

제1 측면의 한 실시양태 (xx) 또는 적용가능한 경우에 제1 측면의 실시양태 (i) 내지 (xvii)에서, R^2a는 -A-페닐, -A-피리딜, -A-테트라히드로피라닐, -A-시클로헥실, -D-인돌릴 및 -D-디히드로인데닐로부터 선택되고, 상기 페닐, 피리딜, 테트라히드로피라닐, 시클로헥실, 디히드로인데닐 및 인돌릴 기는 비치환되거나 또는 C₁ _-6 알킬, C₁ _-6 알콕시 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된다.

제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xxi) 또는 적용가능한 경우에 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (ix) 내지 (xix)에서, R^2a는 -A-페닐 및 -D-인돌릴로부터 선택되고, 상기 페닐 및 인돌릴 기는 비치환되거나 또는 C₁ _-6 알킬, C₁ _-6 알콕시 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된다.

제1 측면의 한 실시양태 (xxii) 또는 적용가능한 경우에 제1 측면의 실시양태 (i) 내지 (xx)에서, R^2a는 -A-페닐, -A-파라-메틸페닐, -A-오르토-메틸페닐, -A-메타-메틸페닐, -A-메타-메톡시페닐, -A-파라-메톡시페닐, -A-파라-클로로페닐, -A-파라-플루오로페닐, -A-오르토,파라-디플루오로페닐, -A-메타,파라-디플루오로페닐, -A-시클로헥실, -A-테트라히드로-2H-피란-4-일, -A-피리딘-2-일, -A-피리딘-3-일, -D-디히드로인데닐, -D-1H-인돌-3-일 또는 -D-1-메틸-1H-인돌-3-일, 바람직하게는 -A-페닐이다.

제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xxiii) 또는 적용가능한 경우에 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (ix) 내지 (xxi)에서,

R^2a는

이고, R^2c는 수소, C₁ _-6 알킬, C₁ _-6 알콕시 및 할로겐으로부터 선택된다.

제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xxiv) 또는 적용가능한 경우에 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (ix) 내지 (xxi)에서,

R^2a는

이고, R^2d는 수소, C₁ _- ₄알킬 및 할로겐으로부터 선택된다.

제1 측면의 한 실시양태 (xxv) 또는 적용가능한 경우에 제1 측면의 실시양태 (i) 내지 (xxii)에서, -A-는 -(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)(CR^A1R^A2)-, -O-(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)-O-, -S-(CR^A1R^A2)-, 및 -(CR^A1)=(CR^A1)-이고; D는 결합이고; R^A1, R^A2는 둘 다 수소이다.

제1, 제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xxvi) 또는 적용가능한 경우에 제1, 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (i) 내지 (xxv)에서, R^2b는 수소 또는 메틸, 특히 수소이다.

제1, 제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xxvii) 또는 적용가능한 경우에 제1, 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (i) 내지 (xxvi)에서, R³ 및 R⁴는 둘 다 수소이다.

제1 측면의 한 실시양태 (xxviii) 또는 적용가능한 경우에 제1 측면의 실시양태 (i) 내지 (xxvii)에서, R⁶ 및 R⁷은 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬 및 C₁ _- ₆히드록시알킬로부터 선택된다.

제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xxix) 또는 적용가능한 경우에 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (ix) 내지 (xxvii)에서, R⁶ 및 R⁷은 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬 및 C₁ _- ₆할로알킬로부터 선택된다.

제1, 제2 또는 제3 측면의 한 실시양태 (xxx) 또는 적용가능한 경우에 제1, 제2 또는 제3 측면의 실시양태 (i) 내지 (xxix)에서, R⁶ 및 R⁷은 둘 다 메틸이다.

본 발명의 한 실시양태에서, 화합물은

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-옥소-1-(1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-이소프로필-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-클로로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((2R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1-메틸-1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일)프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-에틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1-메틸-1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸 프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-(2-(디메틸아미노)-2-옥소에틸)-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸-2-(메틸아미노) 프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

N-((2R)-3-(1H-인돌-3-일)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-아미노-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((2R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-5-페닐펜탄-2-일)프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((2R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-페닐부탄-2-일)프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(4-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(3-메톡시벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-5-페닐펜탄-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((2R)-1-(2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-3-(1-메틸-1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일)프로판아미드;

2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-[2-(2,2-디메틸-프로필)-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소-에틸}-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소부탄-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(1-(4-플루오로페닐)-2-메틸-3-옥소-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-(2-이소부틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-[4-(4-클로로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소-에틸}-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-(2-이소프로필-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-(3-메틸-4-옥소-1-페닐-2,3,7-트리아자-스피로[4.5]데스-1-엔-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-(3-메틸-4-옥소-1-페닐-1,3,7-트리아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-옥소-2-(1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-에틸]-2-메틸 프로피온아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-o-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((2R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(4-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일)프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(4-클로로벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-(피리딘-3-일)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(시클로헥실메톡시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(3-메틸-4-옥소-1-페닐-1,3,7-트리아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

N-((2R)-3-(1H-인돌-3-일)-1-(2-이소프로필-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-아미노-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-2-[4-(4-플루오로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-1-(4-에톡시-벤질옥시 메틸)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-(4-플루오로-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-(3,4-디플루오로-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-(2,4-디플루오로-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(2,4-디플루오로벤질옥시)-1-(4-(3,4-디플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(4-플루오로벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(3,5-디플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(3,4-디플루오로벤질옥시)-1-(4-(3,4-디플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(3,4-디플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-1-(4-(3,4-디플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(4-플루오로벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-(1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-(테트라히드로-2H-피란-4-일)부탄-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-((5-메틸이속사졸-3-일)메틸)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-(옥사졸-2-일메틸)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(2-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(4-플루오로벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

N-((2R)-3-(4-플루오로벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸-2-(메틸아미노)프로판아미드;

N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸-2-(메틸아미노)프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(3-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((R)-3-(2,3-디히드로-1H-인덴-2-일)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-5-페닐펜탄-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-4-시클로헥실-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소부탄-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((2R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(2-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일)프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-5-페닐펜트-4-엔-2-일)프로판아미드;

2-아미노-N-((S)-3-(벤질티오)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

N-((2R)-3-(4-플루오로벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸-2-(메틸아미노)프로판아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소부탄-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-3-(피리딘-2-일메톡시)프로판-2-일)프로판아미드;

2-아미노-N-((R)-3-(벤질옥시)-1-옥소-1-(1-옥소-4-페닐-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸부탄아미드;

N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(4-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸-2-(메틸아미노)프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-페녹시부탄-2-일)프로판아미드;

또는 그의 제약상 허용되는 염으로부터 선택된다.

본 발명의 한 실시양태에서, 화합물은 각각의 키랄 중심이 존재하는 경우에 (R) 또는 (S) 형태인 실시예 중 하나이다.

본 발명의 한 실시양태에서, 화합물은

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-((4S,5R)-4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R,3S)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소부탄-2-일)-2-메틸프로판아미드;

(R)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드;

(R)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드;

(S)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드;

(S)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-(4-플루오로-벤질옥시메틸)-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-[(R)-1-(4-플루오로-벤질옥시메틸)-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드;

2-아미노-N-((R)-3-(2,3-디히드로-1H-인덴-2-일)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((R,Z)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-5-페닐펜트-4-엔-2-일)프로판아미드;

2-아미노-N-((S)-3-(벤질티오)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-N-((2R,3S)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소부탄-2-일)-2-메틸프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((R)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-3-(피리딘-2-일메톡시)프로판-2-일)프로판아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((R)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-3-(피리딘-3-일메톡시)프로판-2-일)프로판아미드;

2-아미노-N-((R)-3-(벤질옥시)-1-옥소-1-((4S,5R)-1-옥소-4-페닐-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

(R)-2-아미노-N-((R)-3-(벤질옥시)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸부탄아미드;

2-아미노-2-메틸-N-((R)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-페녹시부탄-2-일)프로판아미드;

또는 그의 제약상 허용되는 염으로부터 선택된다.

또 다른 측면에서, 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.

R³ 및 R⁴가 수소인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 1에 따라 제조할 수 있다.

<반응식 1>

상기 식에서, R^2a, R^2b, R⁵, R⁶, R⁷, X¹, X², m, p 및 Y는 제1 측면에서와 같이 정의되거나, 또는 m 및 p는 둘 다 1이고, R^2a, R^2b, R⁵, R⁶, R⁷, X¹, X² 및 Y는 제2 또는 제3 측면에서와 같이 정의되고, P¹은 적합한 보호기, 예를 들어 BOC (tert-부톡시 카르보닐) 기를 나타낸다.

단계 (a)는 적합한 온도, 예컨대 실온에서 적합한 용매, 예컨대 DMF 중에서 적합한 아미드 커플링 시약, 예를 들어 ®T3P, 및 적합한 염기, 예컨대 DIPEA의 존재 하에 화학식 II의 화합물을 화학식 III의 화합물과 반응시키는 것을 수반한다.

단계 (b)는 당업계에 널리 공지된 적합한 보호기 P¹의 제거를 수반한다. 예를 들어, P¹이 BOC인 경우에, 화학식 IV의 화합물은 적합한 온도, 예컨대 실온에서 적합한 용매, 예를 들어 DCM 중에서 산성 조건 하에, 예를 들어 TFA의 첨가에 의해 처리된다.

X¹이 (CR^x1H)_n이고, n이 1이고, X²가 CH이고, Y가 NR¹인 화학식 III의 화합물은 하기 반응식 2에 따라 제조할 수 있다.

<반응식 2>

상기 식에서, R¹, R⁵, m, p 및 R^x1은 제1 측면에서와 같이 정의되거나, 또는 m 및 p는 둘 다 1이고, R¹, R⁵ 및 R^x1은 제2 또는 제3 측면에서와 같이 정의되고, P¹은 적합한 보호기, 예를 들어 BOC 기를 나타내고, L은 적합한 이탈기, 예를 들어 할로겐 기, 예컨대 클로로를 나타낸다.

단계 (a)는 적절한 저온에서 화학식 V의 화합물을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 적합한 염기, 예컨대 리튬 비스(트리메틸실릴) 아미드를 사용하여 탈양성자화하고, 이어서 형성된 음이온을 화학식 VI의 화합물로 켄칭하는 것을 수반한다.

단계 (b)는 적합한 온도, 예컨대 0℃에서 화학식 VII의 화합물을 적합한 용매, 예컨대 MeOH 중에서 적합한 환원제, 예컨대 붕소화니켈로 환원시키는 것을 수반한다.

단계 (c)는 화학식 VIII의 화합물을 적합한 용매, 예컨대 톨루엔 중에서 환류 하에 가열하여 고리화시키는 것을 수반한다.

단계 (d)는 적합한 온도, 예컨대 실온에서 화학식 IX의 화합물을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 적합한 염기, 예컨대 수소화나트륨을 사용하여 탈양성자화하고, 이어서 형성된 음이온을 화학식 X의 화합물로 켄칭하는 것을 수반한다.

단계 (e)는 당업계에 널리 공지된 적합한 보호기 P¹의 제거를 수반한다. 예를 들어, P¹이 BOC인 경우에, 화학식 XI의 화합물은 적합한 온도, 예컨대 실온에서 적합한 용매, 예를 들어 DCM 중에서 산성 조건 하에, 예를 들어 TFA의 첨가에 의해 처리된다.

X¹이 (CR^x1H)_n이고, n이 0이고, X²가 CH이고, Y가 NR¹인 화학식 III의 화합물은 하기 반응식 3에 따라 제조할 수 있다.

<반응식 3>

상기 식에서, R¹, R⁵ 및 m 및 p는 제1 측면에서와 같이 정의되거나, 또는 m 및 p는 둘 다 1이고, R¹ 및 R⁵는 제2 또는 제3 측면에서와 같이 정의되고, P¹은 적합한 보호기, 예를 들어 BOC 기를 나타내고, L은 적합한 이탈기, 예를 들어 할로겐 기, 예컨대 클로로를 나타낸다.

단계 (a)는 적합한 온도, 예컨대 -78℃에서 화학식 V의 화합물을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 적합한 염기, 예컨대 리튬 비스(트리메틸실릴) 아미드를 사용하여 탈양성자화하고, 이어서 형성된 음이온을 화학식 XIII의 화합물로 켄칭하는 것을 수반한다.

단계 (b)는 적합한 온도, 예컨대 실온에서 화학식 XIV의 화합물을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 적합한 염기, 예컨대 수소화나트륨으로 탈양성자화하고, 이어서 형성된 음이온을 화학식 X의 화합물로 켄칭하는 것을 수반한다.

단계 (c)는 당업계에 널리 공지된 적합한 보호기 P¹의 제거를 수반한다. 예를 들어, P¹이 BOC인 경우에, 화학식 XV의 화합물은 적합한 온도, 예컨대 실온에서 적합한 용매, 예를 들어 DCM 중에서 산성 조건 하에, 예를 들어 TFA의 첨가에 의해 처리된다.

화학식 II의 화합물은 공지된 절차에 따라 제조할 수 있다. 예를 들어, R^2a가 벤질옥시 또는 인돌릴인 경우에, WO1998/58949 (화이자(Pfizer))에 기재된 바와 같은 절차를 사용할 수 있다.

화학식 V, VI 및 XIII의 화합물은 상업적으로 입수가능하거나, 당업자에게 공지된 절차에 따라 제조할 수 있다.

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물은 입체이성질체로서 존재할 수 있다. 본원에 사용된 용어 "광학 이성질체" 또는 "입체이성질체"는 주어진 본 발명의 화합물에 대해 존재할 수 있는 다양한 입체 이성질체 배위 중 임의의 것을 지칭하며, 기하 이성질체를 포함한다. 치환기는 탄소 원자의 키랄 중심에 부착될 수 있는 것으로 이해된다. 용어 "키랄"은 그의 거울상 파트너에 비-중첩가능한 특성을 갖는 분자를 지칭하는 반면에, 용어 "비키랄"은 그의 거울상 파트너에 중첩가능한 분자를 지칭한다. 따라서, 본 발명은 화합물의 거울상이성질체, 부분입체이성질체 또는 라세미체를 포함한다. "거울상이성질체"는 서로 비-중첩가능한 거울상인 한 쌍의 입체이성질체이다. 한 쌍의 거울상이성질체의 1:1 혼합물은 "라세미" 혼합물이다. 상기 용어는 적절한 경우에 라세미 혼합물을 지정하는데 사용된다. "부분입체이성질체"는 2개 이상의 비대칭 원자를 가지고 있지만, 서로 거울상이 아닌 입체이성질체이다. 절대 입체화학은 칸-인골드-프렐로그(Cahn-Ingold-Prelog) R-S 시스템에 따라 명시된다. 화합물이 순수한 거울상이성질체인 경우에, 각 키랄 탄소에서의 입체화학은 R 또는 S에 의해 명시될 수 있다. 절대 배위가 공지되지 않은 분해된 화합물은, 이들이 나트륨 D 선의 파장에서 평면 편광을 회전시키는 방향 (우선성 또는 좌선성)에 따라 (+) 또는 (-)로 지정될 수 있다. 본원에 기재된 특정 화합물은 1개 이상의 비대칭 중심 또는 축을 함유하고, 따라서 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 및 절대 입체화학의 관점에서 (R)- 또는 (S)-로서 정의될 수 있는 다른 입체이성질체 형태를 생성할 수 있다.

출발 물질 및 절차의 선택에 따라, 화합물은 비대칭 탄소 원자의 개수에 의존하여, 가능한 이성질체 중 하나의 형태로, 또는 그의 혼합물로서, 예를 들어 순수한 광학 이성질체로서, 또는 이성질체 혼합물, 예컨대 라세미체 및 부분입체이성질체 혼합물로서 존재할 수 있다. 본 발명은 라세미 혼합물, 부분입체이성질체 혼합물 및 광학적으로 순수한 형태를 비롯한 모든 이러한 가능한 이성질체를 포함하는 것으로 의도된다. 광학 활성 (R)- 및 (S)- 이성질체는 키랄 합성단위체 또는 키랄 시약을 사용하여 제조될 수 있거나, 또는 통상의 기술을 사용하여 분해될 수 있다. 화합물이 이중 결합을 함유하는 경우에, 치환기는 E 또는 Z 배위로 배열될 수 있다. 화합물이 이치환된 시클로알킬을 함유하는 경우에, 시클로알킬 치환기는 시스- 또는 트랜스-배위를 가질 수 있다. 모든 호변이성질체 형태가 또한 포함되는 것으로 의도된다.

본원에 사용된 용어 "염" 또는 "염들"은 본 발명의 화합물의 산 부가염 또는 염기 부가염을 지칭한다. "염"은 특히 "제약상 허용되는 염"을 포함한다. 용어 "제약상 허용되는 염"은 전형적으로 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 못하지 않은, 본 발명의 화합물의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하는 염을 지칭한다. 다수의 경우에, 본 발명의 화합물은 아미노 및/또는 카르복실 기 또는 그와 유사한 기의 존재에 의해 산 및/또는 염기 염을 형성할 수 있다.

제약상 허용되는 산 부가염은 무기 산 및 유기 산으로 형성할 수 있고, 예를 들어, 아세테이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 브로마이드/히드로브로마이드, 비카르보네이트/카르보네이트, 비술페이트/술페이트, 캄포르술포네이트, 클로라이드/히드로클로라이드, 클로르테오필로네이트, 시트레이트, 에탄디술포네이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 히푸레이트, 히드로아이오다이드/아이오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 락토비오네이트, 라우릴술페이트, 말레이트, L-말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 만델레이트, 메실레이트, 메틸술페이트, 나프토에이트, 나프실레이트, 니코티네이트, 니트레이트, 옥타데카노에이트, 올레에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/수소 포스페이트/디히드로겐 포스페이트, 폴리갈락투로네이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 술포살리실레이트, 타르트레이트, 토실레이트 및 트리플루오로아세테이트 염이다.

염이 유도될 수 있는 무기 산은, 예를 들어 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산, 인산 등을 포함한다.

염이 유도될 수 있는 유기 산은, 예를 들어 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 톨루엔술폰산, 술포살리실산 등을 포함한다. 제약상 허용되는 염기 부가염은 무기 및 유기 염기로 형성할 수 있다.

염이 유도될 수 있는 무기 염기는, 예를 들어 암모늄 염 및 주기율표의 I 내지 XII족으로부터의 금속을 포함한다. 특정 실시양태에서, 염은 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 은, 아연 및 구리로부터 유도되고; 특히 적합한 염은 암모늄, 칼륨, 나트륨, 칼슘 및 마그네슘 염을 포함한다.

염이 유도될 수 있는 유기 염기는, 예를 들어 1급, 2급, 및 3급 아민, 자연 발생의 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 시클릭 아민, 염기성 이온 교환 수지 등을 포함한다. 특정 유기 아민은 이소프로필아민, 벤자틴, 콜리네이트, 디에탄올아민, 디에틸아민, 리신, 메글루민, 피페라진 및 트로메타민을 포함한다.

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물의 제약상 허용되는 염은 통상의 화학적 방법에 의해 염기성 또는 산성 모이어티로부터 합성할 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 이들 화합물의 유리 산 형태를 화학량론적 양의 적절한 염기 (예컨대, Na, Ca, Mg 또는 K 히드록시드, 카르보네이트, 비카르보네이트 등)와 반응시키거나, 또는 이들 화합물의 유리 염기 형태를 화학량론적 양의 적절한 산과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 이러한 반응은 전형적으로 물 또는 유기 용매, 또는 상기 둘의 혼합물 중에서 수행된다. 일반적으로, 실행가능한 경우에 비-수성 매질, 예컨대 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴의 사용이 바람직하다. 추가의 적합한 염의 목록은, 예를 들어 문헌 ["Remington's Pharmaceutical Sciences", 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); 및 in "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)]에서 찾아볼 수 있다.

본원에 주어진 임의의 화학식은 또한 화합물의 비표지된 형태 뿐만 아니라 동위원소 표지된 형태를 나타내는 것으로 의도된다. 동위원소 표지된 화합물은 1개 이상의 원자가 선택된 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자에 의해 대체된 것을 제외하고는 본원에 주어진 화학식에 의해 도시된 구조를 갖는다. 본 발명의 화합물 내로 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 플루오린 및 염소의 동위원소, 예컨대 각각 ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁸F, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ³⁶Cl, ¹²⁵I를 포함한다. 본 발명은 본원에 정의된 바와 같은 다양한 동위원소 표지된 화합물, 예를 들어 그 내부에 방사성 동위원소, 예컨대 ³H 및 ¹⁴C가 존재하는 화합물 또는 그 내부에 비-방사성 동위원소, 예컨대 ²H 및 ¹³C가 존재하는 화합물을 포함한다. 이러한 동위원소 표지된 화합물은 대사 연구 (¹⁴C 사용), 반응 동역학적 연구 (예를 들어, ²H 또는 ³H 사용), 검출 또는 영상화 기술, 예컨대 양전자 방출 단층촬영 (PET) 또는 단일-광자 방출 컴퓨터 단층촬영 (SPECT), 예컨대 약물 또는 기질 조직 분포 검정, 또는 환자의 방사성 치료에 유용하다. 특히, ¹⁸F 표지된 화합물은 PET 또는 SPECT 연구를 위해 특히 바람직할 수 있다. 동위원소-표지된 화학식 I의 화합물은 기존에 사용된 비-표지된 시약 대신에 적절한 동위원소-표지된 시약을 사용하여 당업자에게 공지된 통상의 기술에 의해 또는 첨부하는 실시예 및 제조예에 기재된 것과 유사한 방법에 의해 일반적으로 제조할 수 있다.

추가로, 보다 무거운 동위원소, 특히 중수소 (즉, ²H 또는 D)로의 치환은 보다 큰 대사 안정성, 예를 들어 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 요건 또는 치료 지수의 개선으로 인한 특정의 치료 이점을 제공할 수 있다. 이러한 문맥에서 중수소는 화학식 I의 화합물의 치환기로서 간주되는 것으로 이해된다. 이러한 보다 무거운 동위원소, 구체적으로 중수소의 농도는, 동위원소 농축 계수에 의해 규정될 수 있다. 본원에 사용된 용어 "동위원소 농축 계수"는 특정된 동위원소의 동위원소 존재비와 천연 존재비 사이의 비율을 의미한다. 본 발명의 화합물 내 치환기가 표시된 중수소인 경우에, 이러한 화합물은 각각의 지정된 중수소 원자에 대해 적어도 3500 (각각의 지정된 중수소 원자에서 52.5% 중수소 혼입), 적어도 4000 (60% 중수소 혼입), 적어도 4500 (67.5% 중수소 혼입), 적어도 5000 (75% 중수소 혼입), 적어도 5500 (82.5% 중수소 혼입), 적어도 6000 (90% 중수소 혼입), 적어도 6333.3 (95% 중수소 혼입), 적어도 6466.7 (97% 중수소 혼입), 적어도 6600 (99% 중수소 혼입) 또는 적어도 6633.3 (99.5% 중수소 혼입)의 동위원소 농축 계수를 갖는다.

본 발명에 따른 제약상 허용되는 용매화물은 결정화의 용매가 동위원소 치환될 수 있는 것들, 예를 들어 D₂O, d₆-아세톤, d₆-DMSO를 포함한다.

수소 결합에 대한 공여자 및/또는 수용자로서 작용할 수 있는 기를 함유하는 본 발명의 화합물, 즉 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물은 적합한 공-결정 형성제를 사용하여 공-결정을 형성할 수 있다. 이러한 공-결정은 공지된 공-결정 형성 절차에 의해 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물로부터 제조할 수 있다. 이러한 절차는 분쇄, 가열, 공-승화, 공-용융, 또는 용액 중에서 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물을 결정화 조건 하에 공-결정 형성제와 접촉시키고 이에 의해 형성된 공-결정을 단리시키는 것을 포함한다. 적합한 공-결정 형성제는 WO 2004/078163에 기재된 것들을 포함한다. 따라서, 본 발명은 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물을 포함하는 공-결정을 추가로 제공한다.

본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 담체"는 당업자에게 공지된 바와 같은 임의의 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 계면활성제, 항산화제, 보존제 (예를 들어, 항박테리아제, 항진균제), 등장화제, 흡수 지연제, 염, 보존제, 약물 안정화제, 결합제, 부형제, 붕해제, 윤활제, 감미제, 향미제, 염료 등 및 그의 조합을 포함한다 (예를 들어, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289- 1329] 참조). 임의의 통상의 담체가 활성 성분과 상용적이지 않은 경우를 제외하고는, 치료 또는 제약 조성물에서의 그의 사용이 고려된다.

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물에 대한 용어 "치료 유효량"은 대상체의 생물학적 또는 의학적 반응, 예를 들어 효소 또는 단백질 활성의 증가, 또는 증상의 완화, 상태의 경감, 질환 진행의 둔화 또는 지연, 또는 질환의 예방 등을 도출할 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물의 양을 지칭한다. 비제한적 실시양태에서, 용어 "치료 유효량"은 세포, 또는 조직, 또는 비-세포성 생물학적 물질, 또는 배지에 투여되는 경우에, 그렐린 수용체의 활성을 적어도 부분적으로 증가시키거나; 그렐린의 발현을 적어도 부분적으로 증가시키는데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "대상체"는 동물을 지칭한다. 전형적으로, 동물은 포유동물이다. 대상체는, 예를 들어 영장류 (예를 들어, 인간, 남성 또는 여성), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스, 어류, 조류 등을 또한 지칭한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 영장류이다. 또 다른 실시양태에서, 대상체는 인간이다.

본원에 사용된 용어 "억제하다", "억제" 또는 "억제하는"은 주어진 상태, 증상, 또는 장애, 또는 질환의 감소 또는 저해, 또는 생물학적 활성 또는 과정의 기저 활성에서의 유의한 감소를 지칭한다.

본원에 사용된, 임의의 질환 또는 장애에 대한 용어 "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 한 실시양태에서, 질환 또는 장애를 개선시키는 것 (즉, 질환 또는 그의 하나 이상의 임상적 증상의 발생을 둔화시키거나 또는 정지시키거나 또는 감소시키는 것)을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 환자에 의해 식별가능하지 않을 수 있는 것을 포함하는 하나 이상의 물리적 파라미터를 완화시키거나 또는 개선시키는 것을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 물리적으로 (예를 들어, 식별가능한 증상의 안정화), 생리학적으로 (예를 들어, 물리적 파라미터의 안정화) 또는 둘 다로 질환 또는 장애를 조절하는 것을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 질환 또는 장애의 발병 또는 발생 또는 진행을 예방하거나 또는 지연시키는 것을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이, 대상체가 치료로부터 생물학적으로, 의학적으로 또는 삶의 질에 있어 유익할 경우에, 이러한 대상체는 이러한 치료를 "필요로 한다".

본원에 사용된 바와 같은, 본 발명의 문맥에서 (특히 특허청구범위의 문맥에서) 사용된 단수 용어 및 유사한 용어는 본원에 달리 나타내거나 또는 문맥상 명백히 모순되지 않는 한, 단수형 및 복수형 둘 다를 포괄하는 것으로 해석되어야 한다.

본원에 기재된 모든 방법은 본원에 달리 나타내거나 또는 문맥상 명백히 모순되지 않는 한, 임의의 적합한 순서로 수행될 수 있다. 본원에 제공된 임의의 모든 예 또는 예시적인 어휘 (예를 들어, "예컨대")의 사용은 본 발명을 보다 잘 예시하기 위한 의도일 뿐, 달리 청구된 본 발명의 범위에 대한 제한을 제시하는 것은 아니다.

본 발명의 화합물(들)의 임의의 비대칭 원자 (예를 들어, 탄소 등)는 라세미로 또는 거울상이성질체적으로 풍부하게, 예를 들어 (R)-, (S)- 또는 (R,S)- 배위로 존재할 수 있다. 특정 실시양태에서, 각각의 비대칭 원자는 (R)- 또는 (S)- 배위에서 50% 이상의 거울상이성질체 과잉률, 60% 이상의 거울상이성질체 과잉률, 70% 이상의 거울상이성질체 과잉률, 80% 이상의 거울상이성질체 과잉률, 90% 이상의 거울상이성질체 과잉률, 95% 이상의 거울상이성질체 과잉률 또는 99% 이상의 거울상이성질체 과잉률을 갖는다. 불포화 이중 결합을 갖는 원자에서의 치환기는, 가능한 경우에, 시스- (Z)- 또는 트랜스- (E)- 형태로 존재할 수 있다.

따라서, 본원에 사용된 바와 같은 본 발명의 화합물은 가능한 이성질체, 회전이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체 또는 그의 혼합물 중 하나의 형태로, 예를 들어 실질적으로 순수한 기하 (시스 또는 트랜스) 이성질체, 부분입체이성질체, 광학 이성질체 (대장체), 라세미체 또는 그의 혼합물로서 존재할 수 있다.

임의의 생성된 이성질체의 혼합물은 구성성분의 물리화학적 차이에 기초하여, 예를 들어 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화에 의해 순수한 또는 실질적으로 순수한 기하 또는 광학 이성질체, 부분입체이성질체, 라세미체로 분리될 수 있다.

임의의 생성된 최종 생성물 또는 중간체의 라세미체는 공지된 방법에 의해, 예를 들어 광학 활성 산 또는 염기를 사용하여 수득한 그의 부분입체이성질체 염을 분리하고, 광학 활성 산성 또는 염기성 화합물을 유리시킴으로써 광학 대장체로 분해될 수 있다. 특히, 염기성 모이어티는 따라서, 예를 들어 광학 활성 산, 예를 들어 타르타르산, 디벤조일 타르타르산, 디아세틸 타르타르산, 디-O,O'-p-톨루오일 타르타르산, 만델산, 말산 또는 캄포르-10-술폰산과 형성된 염의 분별 결정화에 의해, 본 발명의 화합물을 그의 광학 대장체로 분해하는데 사용될 수 있다. 라세미 생성물은 키랄 크로마토그래피, 예를 들어 키랄 흡착제를 사용한 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 또한 분해될 수 있다.

또한, 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물 (그의 염 포함)은 또한 그의 수화물 형태로 수득될 수 있거나, 또는 그의 결정화에 사용된 다른 용매를 포함한다. 본 발명의 화합물은 본질적으로 또는 설계에 의해 제약상 허용되는 용매 (물 포함)와의 용매화물을 형성할 수 있으며; 따라서 본 발명은 용매화 및 비용매화 형태 둘 다를 포괄하는 것으로 의도된다. 본 발명의 화합물 (그의 염, 수화물 및 용매화물 포함)은 본질적으로 또는 설계에 의해 다형체를 형성할 수 있다.

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물은 그렐린 수용체 효능제이다. 따라서, 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물은 그렐린 또는 그렐린 수용체 효능제가 유익한 효과를 갖는 장애/질환의 치료에 유용할 수 있다.

따라서, 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물은 위장 (GI) 운동장애를 특징으로 하는 장애/질환의 치료에 유용할 수 있다 (문헌 [Sanger, Drug Discov Today, 2008, 13, 234-239; De Smet et al. Pharmacol Ther, 2009, 123, 207-22; Camilleri et al. Nat Rev Gastroenterol Hepatol, 2009, 6, 343-352]). 특히, 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물은 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양, 크론병 및 구토로부터 선택된 위장 (GI) 운동장애를 특징으로 하는 장애/질환의 치료에 유용할 수 있다. 그렐린 및 그렐린 수용체 효능제가 기능성 위장 질환에서의 운동장애 및 연관된 증상 둘 다에 유리한 치료 효과를 갖는 것으로 보고되어 있다 (문헌 [Murray et al. Gastroenterology, 2003, 125, 1492-1502; Tack et al. Aliment Pharmacol Ther, 2005, 22: 847-853; Akamizu et al. Eur J Endocrinol. 2008, 158, 491-498; Ejskaer et al. 2009 29, 1179-1187; Popescu et al. 2010, 53, 126-134; Ejskjaer et al. Neurogastroenterol Motil, 22, 1069-e281]).

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물은 또한 예를 들어 암, 울혈성 심부전, AIDS, 만성 간부전, 신부전, 파킨슨병 또는 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD) 및 연령-관련 노쇠 (즉, 근육감소증)에 기인한 근육 소모 장애, 예컨대 악액질 (문헌 [DeBoer, 2011 Mol Cell Endocrinol])의 치료; 급성 또는 만성 질병으로 인한 악액질 및 단백질 손실 (US 6194578)의 감소; 노화 또는 비만과 연관된 노쇠 (US 6194578)의 치료 또는 예방; 근육 강도 및 운동성 (US 6194578)의 개선; GH 결핍과 연관된 내분비 장애, 예를 들어 섬유근육통 (문헌 [Cuatrecasas, Pediatr Endocrinol Rev. 2009, 4, 529-533]), 알츠하이머병 (문헌 [Sevigny et al. 2008 71, 1702-1708]) 및 단신 / 왜소증 (문헌 [Pihoker et al. 1997, J Endocrinol, 155, 79-86])의 치료; 및 신경성 식욕부진을 비롯한 '섭식 장애' (문헌 [Hotta et al. 2009, 56, 1119-1128])의 치료에 유용할 수 있다.

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물은 또한 심혈관 질환의 치료 (예를 들어, 울혈성 심부전 (US6329342; US6194578)의 예방) 및 아테롬발생의 치료 (문헌 [Garcia and Korbonits, Curr Opin Pharmacol 2006, 6, 142-147; Cao et al. Trends Endocrinol Metab., 2006, 17, 13-15; Isgaard and Granata, Mol Cell Endocrinol 2011])에 대한 치료 이익을 제공하는 심장보호 효과를 가질 수 있다. 또한, 그렐린은 심근세포 및 내피 세포 아폽토시스를 억제하여 보호 효과를 갖고 (문헌 [Baldanzi et al. J Cell Biol, 2002, 159, 1029-1037]), 허혈-재관류 (I/R) 손상 동안 좌심실 (LV) 기능을 개선하는 (문헌 [Frascarelli et al. Basic Res Cardiol, 2003, 98, 401-405]) 것으로 나타났다. 심부전 (HF)을 갖는 래트에서, 그렐린은 LV 기능장애를 개선하고, 심장 악액질의 발생을 약화시키는 것으로 나타났다 (문헌 [Nagaya et al. Circulation, 2001, 104, 1430-1435]). 유사하게, 단기 연구에서, 그렐린은 만성 HF를 갖는 환자에서 심장 기능을 개선하고, 전신 혈관 저항성을 감소시키는 것으로 나타났다 (문헌 [Nagaya et al. Endocrinol Metab, 2001, 86, 5854-5859]). 혈관계에서, 그렐린은 혈관확장 효과 (문헌 [Nagaya et al. Am J Physiol Regul integr Comp Physiol, 2001, 280, R1483-R1487]) 및 아테롬성동맥경화증의 발생에 잠재적 중요성을 가질 수 있는 가능한 항염증 효과 (문헌 [Dixit et al. J Clin Invest, 2004, 114, 57-66])를 미치는 것으로 나타났다.

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물은 또한 패혈증 (문헌 [Chorny et al. 2008, J Immunol, 180, 8369-8377]) 및 연관된 손상, 예컨대 폐에 대한 손상 (문헌 [Wu et al., 2007, 176, 805-813])으로부터의 보호; 점막 손상 및 치유의 가속화, 예를 들어 산-유발 궤양화로부터의 위장관 보호 (문헌 [Ceranowicz et al. J Physiol Pharmacol, 60, 87-98]); 모발 성장의 자극 (EP1818061 A1); 종양 세포 성장의 억제 (문헌 [Gheo et al. J Endocrinol, 2000, 165, 139-146; Cassoni et al. J Clin Endocrinol, 2002, 143, 484-491]; 대수술 후 환자의 회복의 가속화 (US 6194578); 화상 환자의 회복의 가속화 (US 6194578); 대수술 후 단백질 이화 반응의 약화 (US 6194578); 항우울제와 조합한 의학적 절차를 겪는 환자의 중추 신경계 장애의 치료 (US 2002/0002137 A1); 골절 복구 및 연골 성장의 가속화 (US 6194578); 골다공증의 치료 또는 예방; 면역계의 자극; 상처 치유의 가속화 (US 6194578); 자궁내 성장 지연의 치료; 프라더-윌리 증후군, 터너 증후군 및 누난 증후군과 연관된 성장 지연의 치료; 정신분열증, 우울증 및 알츠하이머병의 치료; 폐 기능장애 및 호흡 의존증의 치료; 췌도모세포증을 비롯한 고인슐린혈증의 치료; 배란 유도를 위한 보조 치료; 흉선 기능의 연령-관련 저하의 예방; 피부 두께의 유지 (US 6194578); 수면 질의 개선 (US 6071926); 대사 항상성 또는 신장 항상성 (예를 들어, 노쇠한 중장년층에서, US 6194578); 혈당 조절의 개선 (US 6251902); 홍반성 루푸스 및 염증성 장 질환의 치료 (US 2002/0013320); 뿐만 아니라 골모세포의 자극을 위한 치료 잠재력을 가질 수 있다.

따라서, 본 발명은 제2 측면에서, 의약에 사용하기 위한 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물에 관한 것이다. 특히, 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물은 상기 및 하기 기재된 바와 같이 유익한 약리학적 특성을 갖는다. 본 발명은 따라서 이하를 제공한다:

ㆍ 제약으로서의 / 의약에 사용하기 위한 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물;

ㆍ 의약으로서의 / 의약으로서 사용하기 위한 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물;

ㆍ 그렐린 또는 그렐린 수용체 효능제가 유익한 효과를 갖는 장애/질환의 치료를 위한 / 그의 치료에 사용하기 위한 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물;

ㆍ 위장 (GI) 운동장애를 특징으로 하는 장애/질환의 치료를 위한 / 그의 치료에 사용하기 위한 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물;

ㆍ 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양 및 크론병, 및 구토로부터 선택된 장애 또는 질환의 치료를 위한 / 그의 치료에 사용하기 위한 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물;

ㆍ 위마비의 치료를 위한 / 그의 치료에 사용하기 위한 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물;

ㆍ 그렐린 또는 그렐린 수용체 효능제가 유익한 효과를 갖는 장애/질환의 치료에서의 의약의 제조를 위한 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물의 용도;

ㆍ 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양 및 크론병, 및 구토로부터 선택된 장애 또는 질환의 치료를 위한 의약의 제조를 위한, 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물의 용도;

ㆍ 그렐린 또는 그렐린 수용체 효능제가 유익한 효과를 갖는 하나 이상의 장애/질환의 치료를 위한 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물의 용도;

ㆍ 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양 및 크론병, 및 구토의 치료를 위한 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물의 용도;

ㆍ 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양 및 크론병, 및 구토로부터 선택된 장애 또는 질환의 치료를 위한 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물의 용도;

ㆍ 대상체에게 치료 유효량의 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물을 투여하는 단계를 포함하는, 그렐린 또는 그렐린 수용체 효능제가 유익한 효과를 갖는 장애/질환의 치료 방법;

ㆍ 대상체에게 치료 유효량의 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물을 투여하는 단계를 포함하는, 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양 및 크론병, 및 구토로부터 선택된 장애 또는 질환의 치료 방법;

ㆍ 대상체에게 치료 유효량의 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물을 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 그렐린 수용체 활성을 조절하는 방법;

의약으로서 사용되는 경우에, 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 통상적으로 제약 조성물로서 제제화된다. 따라서, 본 발명은 제3 측면에서, 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 제약 조성물은 특정한 투여 경로, 예컨대 경구 투여, 비경구 투여, 비강내, 설하 및 직장 투여 등, 특히 비강내 및 설하 투여를 위해 제제화될 수 있다. 또한, 본 발명의 제약 조성물은 고체 형태 (예컨대 비제한적으로 캡슐, 정제, 환제, 과립, 분말 또는 좌제) 또는 액체 형태 (예컨대 비제한적으로 용액, 현탁액 또는 에멀젼)로 제조될 수 있다. 제약 조성물은 멸균과 같은 통상적인 제약 작업에 적용될 수 있고/거나, 통상적인 불활성 희석제, 윤활제, 또는 완충제, 뿐만 아니라 아주반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제 및 완충제 등을 함유할 수 있다.

전형적으로, 제약 조성물은 활성 성분을

a) 희석제, 예를 들어, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로스 및/또는 글리신;

b) 윤활제, 예를 들어, 실리카, 활석, 스테아르산, 그의 마그네슘 또는 칼슘 염 및/또는 폴리에틸렌글리콜; 정제의 경우에 또한

c) 결합제, 예를 들어, 규산알루미늄마그네슘, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로스, 소듐 카르복시메틸셀룰로스 및/또는 폴리비닐피롤리돈; 원하는 경우에

d) 붕해제, 예를 들어, 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염 또는 발포성 혼합물; 및/또는

e) 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제

와 함께 포함하는 정제 또는 젤라틴 캡슐이다.

정제는 당업계에 공지된 방법에 따라 필름 코팅 또는 장용 코팅될 수 있다.

경구 투여에 적합한 조성물은 유효량의 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물을 정제, 로젠지, 수성 또는 유성 현탁액, 분산성 분말 또는 과립, 에멀젼, 경질 또는 연질 캡슐, 또는 시럽 또는 엘릭시르의 형태로 포함한다. 경구 사용을 위한 조성물은 제약 조성물의 제조에 대해 당업계에 공지된 임의의 방법에 따라 제조되며, 이러한 조성물은 제약상 우아하고 맛우수한 제제를 제공하기 위해 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 작용제를 함유할 수 있다. 정제는 활성 성분을 정제의 제조에 적합한 비독성의 제약상 허용되는 부형제와 혼합하여 함유할 수 있다. 이들 부형제는, 예를 들어 불활성 희석제, 예컨대 탄산칼슘, 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 또는 인산나트륨; 과립화제 및 붕해제, 예를 들어 옥수수 전분 또는 알긴산; 결합제, 예를 들어 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예를 들어 스테아르산마그네슘, 스테아르산 또는 활석이다. 정제는 코팅되지 않거나, 또는 공지된 기술에 의해 코팅되어 위장관에서의 붕해 및 흡수를 지연시켜 보다 장기간에 걸쳐 지속되는 작용을 제공한다. 예를 들어, 시간 지연 물질, 예컨대 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트가 사용될 수 있다. 경구 사용을 위한 제제는, 활성 성분이 불활성 고체 희석제, 예를 들어 탄산칼슘, 인산칼슘 또는 카올린과 혼합되어 있는 경질 젤라틴 캡슐로서, 또는 활성 성분이 물 또는 오일 매질, 예를 들어 땅콩 오일, 액상 파라핀 또는 올리브 오일과 혼합되어 있는 연질 젤라틴 캡슐로서 제공될 수 있다.

특정 주사가능한 조성물은 수성 등장성 용액 또는 현탁액이고, 좌제는 지방 에멀젼 또는 현탁액으로부터 유리하게 제조된다. 상기 조성물은 멸균될 수 있고/거나, 아주반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용해 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제를 함유할 수 있다. 또한, 이는 다른 치료상 유익한 물질도 함유할 수 있다. 상기 조성물은 각각 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제조되며, 약 0.1-75% 또는 약 1-50%의 활성 성분을 함유한다.

경피 적용에 적합한 조성물은 유효량의 본 발명의 화합물을 적합한 담체와 함께 포함한다. 경피 전달에 적합한 담체는 흡수가능한 약리학상 허용되는 용매를 포함하여 숙주의 피부를 통한 통과를 보조한다. 예를 들어, 경피 장치는 백킹 부재, 화합물을 임의로 담체와 함께 함유하는 저장소, 임의로 장기간에 걸쳐 제어되고 예정된 속도로 숙주의 피부에 화합물을 전달하기 위한 속도 제어 장벽, 및 장치가 피부에 부착되도록 하는 수단을 포함하는 붕대 형태이다.

예를 들어, 피부 및 눈으로의 국소 적용에 적합한 조성물은 수용액, 현탁액, 연고, 크림, 겔, 또는 예를 들어 에어로졸 등에 의한 전달을 위한 분무가능한 제제를 포함한다. 이러한 국소 전달 시스템은, 예를 들어 피부암의 치료를 위해, 예를 들어 예방적 사용을 위해 선 크림, 로션, 스프레이 등으로 피부 적용하기에 특히 적절할 것이다. 따라서, 이는 당업계에 널리 공지된 화장품을 비롯한 국소 제제에 사용하기에 특히 적합하다. 이러한 것은 가용화제, 안정화제, 장성 증진제, 완충제 및 보존제를 함유할 수 있다.

본원에 사용된 바와 같은 국소 적용은 또한 흡입 또는 비강내 적용에 관한 것일 수 있다. 이는 편리하게는 적합한 추진제를 사용하거나 사용하지 않고, 가압 용기, 펌프, 스프레이, 아토마이저 또는 네뷸라이저로부터의 건조 분말 흡입기 또는 에어로졸 스프레이 제제로부터 건조 분말의 형태로 (단독으로, 혼합물로서, 예를 들어 락토스와의 건조 블렌드로서, 또는 예를 들어 인지질과의 혼합 구성성분 입자로서) 전달될 수 있다.

본 발명은 활성 성분으로서 본 발명의 화합물을 포함하는 무수 제약 조성물 및 투여 형태를 추가로 제공하며, 이는 물이 특정 화합물의 분해를 용이하게 할 수 있기 때문이다.

본 발명의 무수 제약 조성물 및 투여 형태는 무수 또는 저수분 함유 성분 및 저수분 또는 저습도 조건을 사용하여 제조될 수 있다. 무수 제약 조성물은 그의 무수 속성이 유지되도록 제조 및 보관될 수 있다. 따라서, 무수 조성물은 이들이 적합한 규정 키트에 포함될 수 있도록 물에 대한 노출을 방지하는 것으로 공지된 물질을 사용하여 포장된다. 적합한 포장의 예는 기밀 호일, 플라스틱, 단위 투여 용기 (예를 들어, 바이알), 블리스터 팩 및 스트립 팩을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명은 활성 성분으로서의 본 발명의 화합물이 분해되는 속도를 감소시키는 하나 이상의 작용제를 포함하는 제약 조성물 및 투여 형태를 추가로 제공한다. 본원에 "안정화제"로서 지칭되는 이러한 작용제는 항산화제, 예컨대 아스코르브산, pH 완충제 또는 염 완충제 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명은 따라서

ㆍ 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물 및 하나 이상의 담체 / 부형제를 포함하는 제약 조성물;

ㆍ 치료 유효량의 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체 / 부형제를 포함하는 제약 조성물

을 제공한다.

본원에 정의된 바와 같은 치료는 단독 요법으로서 적용될 수 있거나, 또는 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물에 더하여 다른 활성 성분의 투여를 수반할 수 있다. 이러한 요법은 예를 들어, 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물과 조합하여, 하기 카테고리의 활성 성분 중 하나 이상을 포함할 수 있다:

도파민 D₂ 길항제, 예를 들어 돔페리돈, 메토클로프라미드 및 이토프리드;

5HT₄ 수용체 효능제, 예를 들어 시사프리드, 시니타프리드, 모사프리드, 렌자프리드, 프루칼로프리드, 테가세로드, 및 WO 2005068461, US 2005228014 및 WO 2005080389, US 2006100426, US 2006100236, US 2006135764, US 2005277671, WO 2005092882, WO 2005073222, JP 2005104896, JP 2005082508, WO 2005021539, JP 2004277319, JP 2004277318, WO 2004026869, EP 1362857에 기재된 화합물;

5HT₃ 효능제, 예를 들어 푸모세트라그;

CCK_A 수용체 길항제, 예를 들어 록시글루미드 및 덱스록시글루미드;

모틸린 수용체 효능제, 예를 들어 모틸린, 아틸모틸린, 에리트로마이신, 알렘시날, 미템시날, KOS-2187, 및 WO 2005060693에 기재된 화합물;

μ-오피오이드 길항제, 예를 들어 알비모판 및 메틸날트렉손;

오피오이드 효능제, 예를 들어 아시마돌린, 로페라미드 및 코데인;

CRF-1 수용체 길항제, 예를 들어 GSK876008, 및 WO 2004069257, WO 9940089, US 6844351, WO 2005013997, WO 2005014557, WO 2005023806, WO 2005026126, WO 2005028480, WO 2005044793, WO 2005051954, WO 2005051954, WO 2005115399, WO 2005028480, WO 2005023806, WO 2006044958, WO 2010015655 및 WO 2010015628에 기재된 화합물;

글루타메이트 수용체 길항제, 예를 들어 AZD9272, 및 WO 9902497, WO 2000020001, WO 200304758 및 WO 2005030723에 기재된 화합물;

뉴로키닌 수용체 길항제, 예를 들어 카소피탄트, 네파두트렌트, 사레두탄트, DNK-333, SLV-317, SLV321, SLV317, 및 EP 96-810237에 기재된 화합물;

5HT₃ 수용체 길항제, 예를 들어 알로세트론, 실란세트론, 라모세트론, 아자세트론, 온단세트론, 그라니세트론, 트로피세트론 및 DDP225;

히스타민 H₂ 길항제, 예를 들어 파모티딘, 시메티딘, 란티딘 및 니자티딘;

히스타민 H₄ 길항제, 예를 들어 JNJ7777120, JNJ10191584 및 US 2006111416, WO 2006050965, WO 2005092066, WO 2005054239, US 2005070550, US 2005070527, EP 1505064에 기재된 화합물;

양성자 펌프 억제제, 예를 들어 오메프라졸, 란소프라졸, 라베프라졸, 텐토프라졸, 판토프라졸, 에소메프라졸, 레바프라잔, 소라프라잔 및 AGN201904;

클로라이드 채널 활성화제, 예를 들어 루비프로스톤;

구아닐레이트 시클라제 활성화제, 예를 들어 리나클로티드;

무스카린성 길항제, 예를 들어 다리페나신, 솔리페나신, 아트로핀, 디시클로베린, 히코신 부틸 브로마이드, 프로판텔린, 옥시부티닌, 시메트로피움 브로마이드, 피나베리움 브로마이드 및 오틸로늄 브로마이드;

진정제, 예를 들어 메베베린, 티로프라미드, 알베린 및 페퍼민트 오일;

자극성 설사제, 예를 들어 비사코딜;

삼투성 설사제, 예를 들어 소르비톨, 락툴로스, 수산화마그네슘 및 포스페이트 완충 염수를 함유하는 활성탄;

변 연화제, 예를 들어 센나 농축물, 액상 파라핀 및 아라키스 오일;

흡수제 및 섬유 보충제, 예를 들어 벌크 섬유 완화제, 예컨대 겨, 메틸셀룰로스, 이스파굴라 껍질 및 스테르쿨리아;

제산제, 예를 들어 알루미늄, 마그네슘 및 칼슘 제산제, 시메티콘 및 알기네이트 함유 제제;

GI 이완제, 예를 들어 콜레스티라민 수지;

비스무트 화합물, 예를 들어 비스무트 서브살리실레이트;

바닐로이드 수용체 길항제, 예를 들어 WO 2002076946, WO 2004033435, WO 2005121116 및 WO 2005120510에 기재된 화합물;

항경련제, 예를 들어 카르바마제핀, 옥스카르베마제핀, 라모트리진, 가바펜틴 및 프레가발린;

NSAID, 예를 들어 아스피린, 아세토메타펜, 이부프로펜, 디클로페낙, 나프록센, 플루르비프로펜, 인도메타신, 피리콕삼, 케토프로펜, 술린닥 및 디플루니살;

COX-2 억제제, 예를 들어 셀레콕시브, 로페콕시브, 루미라콕시브, 발데콕시브, 에토리콕시브 및 WO 2004048314에 기재된 화합물;

오피에이트, 예를 들어 모르핀, 부프레노르핀, 디아모르핀, 디히드로코데인, 펜타닐 및 페티딘;

GABA_b 조절제, 예를 들어 라세미 및 (R)-바클로펜, AZD3355, XP19986, 및 WO 2006001750 및 WO 2004000856에 기재된 화합물;

CB 수용체 리간드, 예를 들어 WO 2002042248 및 WO 2003066603에 기재된 화합물;

칼슘 채널 차단제, 예를 들어 지코노티드, AGI0-003, PD-217014, 및 WO 2006038594, WO 2006030211 및 WO 2005068448에 기재된 화합물;

나트륨 채널 차단제, 예를 들어 라모트리진, 및 WO 2006023757, WO 2005097136, JP 2005206590 및 WO 2005047270에 기재된 화합물;

삼환계 항우울제, 예를 들어 클로미프라민, 아목사핀, 노르트리필린, 아미트립틸린, 이미프라민, 데시프라민, 독세핀, 트리미프라민 및 프로트리필린;

선택적 세로토닌 재흡수 억제제, 예를 들어 플루옥세틴, 파록세틴, 시타프롤람, 세르탈린, 플루복사민, 둘록세틴;

불안완화제, 예를 들어 밀나시프란, 티아넵틴, MCI-225 및 덱스토피소팜;

CGRP 길항제, 예를 들어 올세게판트 및 시졸리르틴;

5HT_1d 길항제, 예를 들어 알모트립탄, 엘레트립탄, 프로바트립탄, 나라트립탄, 리자트립탄, 수마트립탄 및 졸마트립탄;

브라디키닌 수용체 길항제, 예를 들어 WO 2000075107, WO 2002092556 및 WO 20050851298에 기재된 화합물.

제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물은 추가로 다른 약리학적 활성제와 조합하여 사용되어 위배출의 개선을 통한 공-의약의 흡수 또는 활성을 증진시킬 수 있는데, 예를 들어 항-편두통 약물, 예컨대 트립탄 (수마트립탄, 졸미트립탄, 아비트립탄, 리자트립탄 등) 또는 항-당뇨병 치료제 (예를 들어, 인슐린 분비촉진제 또는 증감제 등)의 노출 속도를 증진시킬 수 있다.

제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물은 위장 질환, 예컨대 GERD의 치료를 위해 양성자 펌프 억제제 (PPI), 예를 들어 에소메프라졸, 란소프라졸, 오메프라졸, 판토프라졸 및 라베프라졸, 히스타민 H2 수용체 차단제 (예컨대, 라니티딘, 파모티딘 및 시메티딘) 또는 제산제와 조합하여 추가로 사용될 수 있다.

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 그렐린 수용체 효능제는 또한 비만과 연관된 장애, 예컨대 고혈압, 고지혈증, 이상지혈증, 당뇨병, 수면 무호흡, 천식, 심장 장애, 아테롬성동맥경화증, 거대 및 미세 혈관 질환, 간 지방증, 암, 관절 장애 및 담낭 장애의 치료에 유용한 또 다른 치료제와 조합될 수 있다. 예를 들어, 화학식 I의 그렐린 수용체 조절제는 혈압을 강하시키거나 LDL:HDL의 비를 감소시키는 또 다른 치료제 또는 LDL-콜레스테롤의 순환 수준의 감소를 유발하는 작용제, 예컨대 HMG-CoA 리덕타제 (3-히드록시-3-메틸글루타릴 조효소 A 리덕타제)의 억제제와 조합하여 사용될 수 있다. 적합하게는, HMG-CoA 리덕타제 억제제는 스타틴이다. 본원에서, 용어 "콜레스테롤-강하제"는 또한 HMG-CoA 리덕타제 억제제의 화학적 변형물, 예컨대 활성 또는 불활성인지 여부에 관계 없이 에스테르, 전구약물 및 대사물을 포함한다. 당뇨병 환자에서, 본 발명의 화합물은 또한 미세혈관병증과 관련된 합병증을 치료하는데 사용되는 치료제와 조합될 수 있다.

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 그렐린 수용체 효능제는 비만 및 그의 연관된 합병증, 대사 증후군 및 제2형 당뇨병의 치료를 위해 다른 요법과 함께 사용될 수 있다. 이들은 비구아니드 약물 (예를 들어, 메트포르민), 인슐린 (합성 인슐린 유사체), 경구 항고혈당제 (이들은 식사 글루코스 조절제 및 α-글루코시다제 억제제로 나뉘어짐) 및 술포닐우레아, 예를 들어: 글리메피리드, 글리벤클라미드 (글리부리드), 글리클라지드, 글리피지드, 글리퀴돈, 클로로프로파미드, 톨부타미드, 아세토헥사미드, 글리코피라미드, 카르부타미드, 글리보누리드, 글리속세피드, 글리부티아졸, 글리부졸, 글리헥사미드, 글리미딘, 글리피나미드, 펜부타미드, 톨실아미드 및 톨라자미드를 포함하나, 이에 제한되지는 않을 것이다.

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 그렐린 수용체 효능제는 또한 회장 담즙산 수송 시스템의 억제제 (IBAT 억제제)와 조합하여 사용될 수 있다. 본 발명은 또한 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 그렐린 수용체 효능제를 담즙산 결합 수지와 조합하여 포함한다. 본 발명은 또한 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 그렐린 수용체 효능제를 담즙산 격리제, 예를 들어, 콜레스티폴 또는 콜레스티라민 또는 콜레스타겔과 조합하여 포함한다.

본 발명의 부가적 추가 측면에 따르면, 유효량의 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염을, 임의로 제약상 허용되는 희석제 또는 담체와 함께 투여하면서, 하기 CETP (콜레스테릴 에스테르 전달 단백질) 억제제; 콜레스테롤 흡수 길항제; MTP (마이크로솜 전달 단백질) 억제제; 서방성 및 조합 생성물을 포함하는 니코틴산 유도체; 피토스테롤 화합물 ; 프로부콜; 항응고제; 오메가-3 지방산; 또 다른 항비만 화합물, 예를 들어 시부트라민, 펜테르민, 오를리스타트, 부프로피온, 에페드린, 티록신; 항고혈압 화합물, 예를 들어 안지오텐신 전환 효소 (ACE) 억제제, 안지오텐신 II 수용체 길항제, 아드레날린성 차단제, 알파 아드레날린성 차단제, 베타 아드레날린성 차단제, 혼합 알파/베타 아드레날린성 차단제, 아드레날린성 자극제, 칼슘 채널 차단제, AT-I 차단제, 염분배설제, 이뇨제 또는 혈관확장제; CBl 수용체 길항제/역효능제; 멜라닌 농축 호르몬 (MCH) 조절제; 멜라노코르틴-4 수용체 효능제; NPY 수용체 조절제; 오렉신 수용체 조절제; 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제-1 억제제; 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제-2 억제제; 포스포이노시티드-의존성 단백질 키나제 (PDK) 조절제; 또는 핵 수용체, 예를 들어 LXR, FXR, RXR, GR, ERR[알파], [베타], PP ARa, [베타], [감마] 및 ROR알파의 조절제; 모노아민 전달-조절제, 예를 들어 선택적 세로토닌 재흡수 억제제 (SSRI), 노르아드레날린 재흡수 억제제 (NARI), 노르아드레날린-세로토닌 재흡수 억제제 (SNRI), 모노아민 옥시다제 억제제 (MAOI), 트리시클릭 항우울제 (TCA), 노르아드레날린성 및 특이적 세로토닌성 항우울제 (NaSSA); 항정신병제, 예를 들어 올란자핀 및 클로자핀; 세로토닌 수용체 조절제; 렙틴/렙틴 수용체 조절제; 그렐린/그렐린 수용체 조절제; DPP-IV 억제제, 예를 들어 삭사글립틴, 시타글립틴, 빌다글립틴 또는 알로글립틴; SGLT-2 억제제, 예를 들어 다파글리플로진; GLK 활성화제로부터 선택된 하나 이상의 작용제; 또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물, 상기 염의 용매화물 또는 전구약물과 임의로 제약상 허용되는 희석제 또는 담체와 함께, 환자에게 동시, 순차, 또는 별개 투여하는 것을 포함하는 조합 치료가 제공된다.

따라서, 본 발명은 제 4 측면에서, 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물 및 하나 이상의 추가의 활성 성분을 포함하는 조합물에 관한 것이다. 본 발명은 따라서

ㆍ 치료 유효량의 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물 및 하나 이상의 치료 활성제를 포함하는 조합물, 특히 제약 조합물;

ㆍ 치료 유효량의 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물; 치료 유효량(들)의 하나 이상의 조합 파트너; 하나 이상의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는, 동시 또는 순차 투여에 적합화된 조합 제약 조성물;

ㆍ (i) 제약으로서의, (ii) 그렐린 매개 질환의 치료에 사용하기 위한, (iii) 그렐린 매개 질환의 치료 방법에서의 본원에 정의된 바와 같은 조합 제약 조성물

을 제공한다.

본 발명의 부가적 추가 측면에 따르면, 치료 유효량의 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 그렐린 수용체 효능제를 임의로 제약상 허용되는 희석제 또는 담체와 함께 투여하면서, 초저칼로리 식이 (VLCD) 또는 저-칼로리 식이 (LCD)와 동시, 순차 또는 별개 투여하는 것을 포함하는 조합 치료가 제공된다.

따라서, 본 발명은 또한 유효량의 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물을 유효량의 본 조합에 기재된 다른 부류의 화합물 중 하나로부터의 화합물과의 동시, 순차 또는 별개 투여로 투여하는 것을 포함하는, 환자에서 비만 및 그의 연관된 합병증을 치료하는 방법을 제공한다.

코드 번호, 일반명 또는 상품명으로 확인되는 활성제의 구조는 표준 일람 ["The Merck Index"] 현행판 또는 데이터베이스, 예를 들어 페이턴츠 인터내셔널(Patents International) (예를 들어, IMS 월드 퍼블리케이션즈(IMS World Publications))로부터 입수할 수 있다.

제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물과 조합하여 사용될 수 있는 상기 언급된 화합물은 당업계에, 예컨대 상기 언급된 문헌에 기재된 바와 같이 제조 및 투여될 수 있다.

추가의 한 실시양태에서, 추가의 활성 성분은 호르몬 의약이다.

본 발명의 제약 조성물 또는 조합물은 전형적으로 약 50-70 kg의 대상체에 대해 약 1-1000 mg의 활성 성분(들), 또는 약 1-500 mg 또는 약 1-250 mg 또는 약 1-150 mg 또는 약 0.5-100 mg 또는 약 1-50 mg의 활성 성분의 단위 투여량일 수 있다. 화합물, 그의 제약 조성물 또는 조합물의 치료 유효 투여량은 대상체의 종, 체중, 연령 및 개별 상태, 치료할 장애 또는 질환 또는 그의 중증도에 따라 달라진다. 통상의 의사, 임상의 또는 수의사는 장애 또는 질환의 진행을 예방, 치료 또는 억제하는데 필요한 각각의 활성 성분의 유효량을 용이하게 결정할 수 있다.

상기 언급된 투여량 특성은, 유리하게는 포유동물, 예를 들어 마우스, 래트, 개, 원숭이, 또는 단리된 기관, 조직 및 이들의 표본을 사용하여 시험관내 및 생체내 시험에 의해 입증가능하다. 본 발명의 화합물은 용액, 예를 들어 수용액의 형태로 시험관내 적용될 수 있고, 경장으로, 비경구로, 유리하게는 정맥내로, 예를 들어 현탁액 또는 수용액으로 생체내 적용될 수 있다. 시험관내 투여량은 약 10^-3 몰 내지 10^-9 몰 농도의 범위일 수 있다. 생체내 치료 유효량은 투여 경로에 따라 약 0.1-500 mg/kg 또는 약 1-100 mg/kg의 범위일 수 있다.

본 발명에 따른 화합물의 활성은 하기 시험관내 및 생체내 방법에 의해 평가될 수 있다.

실험부

하기 실시예를 참조하여, 바람직한 실시양태의 화합물은 본원에 기재된 방법 또는 당업계에 공지된 다른 방법을 사용하여 합성된다.

바람직한 실시양태에 따른 유기 화합물이 호변이성질 현상을 나타낼 수 있음을 이해해야 한다. 본 명세서 내의 화학 구조가 가능한 호변이성질체 형태 중 1개만을 나타낼 수 있기 때문에, 바람직한 실시양태는 도시된 구조의 임의의 호변이성질체 형태를 포괄한다는 것을 이해해야 한다.

본 발명은 예시를 위해 본원에 제시된 실시양태로 제한되지 않으며, 그의 모든 이러한 형태를 상기 개시내용의 범주 내에 있도록 포괄하는 것으로 이해된다.

실시예

일반적 조건:

질량 스펙트럼을 전기분무 이온화를 사용한 LCMS 시스템 상에서 실행하였다. 이들은 애질런트(Agilent) 1100 HPLC/마이크로매스 플랫폼(Micromass Platform) 질량 분광계 조합이거나, 또는 SQD 질량 분광계를 구비한 워터스 액퀴티(Waters Acquity) UPLC였다. [M+H]⁺는 단일-동위원소 분자량을 지칭한다.

NMR 스펙트럼은 ICON-NMR을 사용한 개방 접근 브루커 아반스(Bruker AVANCE) 400 NMR 분광계 상에서 실행하였다. 스펙트럼을 298K에서 측정하고, 용매 피크를 사용하여 참조하였다.

XRPD 측정은 구리 Kα 방사선을 사용한 브루커 D8 GADDS 디스커버(Discover) 상에서 실행하였다. 파장: 1.54056 A (Cu); 발생기 설정: 40.00KV, 40.00mA; 단색기; 검출기: 하이-스타(HI-STAR); 프레임 크기: 1024 픽셀, 직접 빔 X: 513.5 픽셀, 직접 빔 Y: 515.50 픽셀; 샘플 검출기 거리 30.35cm, 2개의 프레임을 합체시킴. 2-5mg 양의 시험 화합물을 목적 슬라이드 상에 놓고, X선 빔의 중심에 두었다. 실험 방법: 2-세타 시작: 4.0 도; 2-세타 종료: 35.6 도; 통합 스텝사이즈: 0.05 도; 스텝 시간: 120 초; 온도: 실온

당업자는 X선 회절 패턴이 사용된 측정 조건에 따라 달라지는 측정 오차와 함께 얻어질 수 있음을 인지할 것이다. 특히, X선 회절 패턴의 강도가 사용된 측정 조건에 따라 변동될 수 있는 것으로 일반적으로 공지되어 있다. 상대 강도 또한 실험 조건에 따라 달라질 수 있고, 따라서 강도의 정확한 정도는 고려되지 않아야 함을 추가로 이해해야 한다. 추가로, 통상적인 X선 회절 패턴에 대한 회절각의 측정 오차는 전형적으로 약 5% 이하이고, 이러한 정도의 측정 오차가 상기 언급된 회절각에 부수되는 것으로 고려되어야 한다. 결과적으로, 본 발명의 결정 형태는 본원에 개시된 첨부 도면에 도시된 X선 회절 패턴과 완전히 동일한 X선 회절 패턴을 제공하는 결정 형태에 제한되지 않음을 이해해야 한다. 첨부된 도면에 개시된 바와 실질적으로 동일한 X선 회절 패턴을 제공하는 임의의 결정 형태가 본 발명의 범위 내에 있다. X선 회절 패턴의 실질적인 동일성을 확인하는 능력은 당업자의 이해 범위 내에 있다.

TGA 측정은 TA 기기 Q5000에서 실행하였다. TGA 온도기록도는 하기와 같이 기록하였다: 0.5-2mg의 시험 물질을 개방 샘플 팬으로 칭량하였다. 샘플을 가열로 상에 로딩하고, 온도를 30℃로 평형화하고, 25mL/분의 질소 흐름 하에 10℃/분의 가열 속도로 300℃로 가열하였다.

DSC 측정은 TA 기기 Q1000에서 실행하였다. 본원 전체에 걸쳐 달리 언급되지 않는 한, DSC 온도기록도는 하기와 같이 기록하였다: 0.5-2mg의 시험 물질을 폐쇄 샘플 팬으로 칭량하였다. 빈 샘플 팬을 참조로서 사용하였다. 장치의 온도를 약 40℃로 조정하고, 50mL/분의 질소 흐름 하에 10℃/분의 가열 속도로 300℃로 가열하였다. 기기를 99.9999% 이상 순수한 인듐을 사용하여 온도 및 엔탈피에 대해 조정하였다. 샘플 중량에 의해 표준화된 열 유량을 측정된 샘플 온도에 대하여 플롯팅하였다. 데이터를 와트/그램 ("W/g")의 단위로 보고하였다. 흡열 피크가 아래를 향하는 플롯이 만들어졌다. 흡열 용융 피크를 본 분석에서 외삽된 개시 온도, 피크 온도 및 융합 열에 대해 평가하였다.

하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것으로 의도되며, 이에 대한 제한으로서 해석되어서는 안된다. 온도는 섭씨 온도로 주어진다. 달리 언급되지 않는다면, 모든 증발을 감압 하에, 바람직하게는 약 15 mm Hg 내지 100 mm Hg (= 20-133 mbar) 사이에서 수행하였다. 최종 생성물, 중간체 및 출발 물질의 구조는 표준 분석 방법, 예를 들어 미량분석 및 분광학적 특성, 예를 들어 MS, IR, NMR에 의해 확인하였다. 사용된 약어는 당업계에 통상적인 것들이다. 정의되지 않은 경우에, 용어는 그의 일반적으로 허용되는 의미를 갖는다.

약어:

AA 아세트산암모늄

BOC 3급 부틸 카르복시

br 넓음

conc 진한

d 이중선

dd 이중선의 이중선

DBU 1.8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔

DCM 디클로로메탄

DEA 디에틸아민

DIPEA 디이소프로필에틸아민

DMF N,N-디메틸포름아미드

DMSO 디메틸술폭시드

DSC 시차 주사 열량측정법

EtOAc 에틸 아세테이트

EtOH 에탄올

h 시간

HCl 염산

HPLC 고압 액체 크로마토그래피

Int. 중간체

LCMS 액체 크로마토그래피 및 질량 분광측정법

LDA 리튬 디이소프로필아미드

LHMDS 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드

MeOH 메탄올

MS 질량 분광측정법

m 다중선

min 분

ml 밀리리터

m/z 질량 대 전하 비

NBS N-브로모숙신이미드

NH₄Cl 염화암모늄

NMR 핵 자기 공명

O/N 밤새

ppm 백만분율

PS 지지된 중합체

PE-AX PE-음이온 교환 (예를 들어, 바이오타지(Biotage)로부터의 이솔루트(Isolute)® PE-AX 칼럼)

RT 실온

Rf 체류 인자

Rt 체류 시간

s 단일선

SFC 초임계 유체 크로마토그래피

SCX-2 강한 양이온 교환 (예를 들어, 바이오타지로부터의 이솔루트® SCX-2 칼럼)

t 삼중선

®T3P 프로필포스폰산 무수물

TBME tert-부틸 메틸 에테르

TBSCl tert-부틸디메틸실릴 클로라이드

TEA 트리에틸아민

TFA 트리플루오로아세트산

TGA 열중량 분석

THF 테트라히드로푸란

TLC 박층 크로마토그래피

XRPD X선 분말 회절

하기 실시예를 참조하여, 바람직한 실시양태의 화합물을 본원에 기재된 방법 또는 당업계에 공지된 다른 방법을 사용하여 합성하였다.

바람직한 실시양태의 다양한 출발 물질, 중간체 및 화합물은 적절한 경우에 통상의 기술, 예컨대 침전, 여과, 결정화, 증발, 증류 및 크로마토그래피를 사용하여 단리 및 정제될 수 있다. 달리 언급되지 않는 한, 모든 출발 물질은 상업적 공급업체로부터 입수하여 추가 정제 없이 사용하였다. 염은 공지된 염-형성 절차에 의해 화합물로부터 제조될 수 있다.

달리 나타내지 않는 한, 분석용 HPLC 조건은 하기와 같다:

방법 LowpH_v002

칼럼 페노메넥스 제미니(Phenomenex Gemini) C18 50x4.6 mm, 3.0 μm

칼럼 온도 50℃

용리액 A: H₂O, B: 메탄올, 둘 다 0.1% TFA를 함유함

유량 1.0 ml/분

구배 2.0 분 내 5%에서 95% B, 0.2 분 95% B

방법 2minLC_v003

칼럼 워터스(Waters) BEH C18 50x2.1 mm, 1.7 μm

칼럼 온도 50℃

용리액 A: H₂O, B: 아세토니트릴, 둘 다 0.1% TFA를 함유함

유량 0.8 ml/분

구배 0.20분 5% B; 1.30분 내 5%에서 95% B, 0.25분 95% B

방법 LowpH_30_v001

칼럼 페노메넥스 제미니 C18 50x4.6 mm, 3.0 μm

칼럼 온도 40℃

용리액 A: H₂O, B: 아세토니트릴, 둘 다 0.1% TFA를 함유함

유량 1.2 ml/분

구배 2.0 분 내 30%에서 95% B, 0.2 분 95% B

방법 LowpH_30_v002

칼럼 페노메넥스 제미니 C18 50x4.6 mm, 3.0 μm

칼럼 온도 50℃

용리액 A: H₂O, B: 메탄올, 둘 다 0.1% TFA를 함유함

유량 1.0 mL/분

구배 2.0분 내 30%에서 95% B, 0.2분 95% B

방법 IC45MeOH_DEA

칼럼: 키랄팩 IC-H, 250x10 mm, 5 μm

이동상: 45% MeOH + 0.1%DEA/55% CO₂

검출: UV @ 220 nm

유량: 10 ml/분

방법 LUXC2_45MeOH_AA

칼럼: 페노메넥스 룩스-C2, 250x10 mm, 5 μm

이동상: 45% MeOH (20 mM 아세트산암모늄) /55% CO₂

검출: UV @ 220 nm

유량: 10 ml/분

방법 LUXC2_50MeOH_AA

칼럼: 페노메넥스 룩스 C2 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 50% 메탄올 + 20mM 아세트산암모늄 / 50% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 IC35MeOH_AA

칼럼: 키랄팩 IC, 250 x 10 mm, 5 μm (2개의 칼럼을 함께 연결함)

이동상: 35% 메탄올 + 20mM 아세트산암모늄/ 65% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 IC40MeOH_AA

칼럼: 키랄팩 IC, 250 x 10 mm, 5 μm (2개의 칼럼을 함께 연결함)

이동상: 40% 메탄올 + 20mM 아세트산암모늄 / 60% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 AD25MEOH_DEA

칼럼: 키랄팩 AD-H, 250 x 10 mm, 5 μm (2 칼럼을 함께 연결함)

이동상: 25% 메탄올 + 0.1% DEA / 75% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 IC35IPA_DEA

칼럼: 키랄팩 IC 250 x 10 mm, 5 μm (직렬상 2개의 칼럼)

이동상: 35% 메탄올 + 0.1%v/v DEA / 65% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 AD30IPA_AmmAc

칼럼: 키랄셀 AD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 30% 이소프로판올 + 20mM 아세트산암모늄 / 70% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 AD40IPA_AmmAc

칼럼: 키랄셀 AD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 40% 이소프로판올 + 20mM 아세트산암모늄 / 60% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD30MEOH_AA

칼럼: 키랄셀 OD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 30% 메탄올 + 20 mM 아세트산암모늄 / 70% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD30MEOH_AA_1

칼럼: OD-H 250 x 20 mm, 5 μm

이동상: 30% 메탄올 + 20 mM 아세트산암모늄 / 70% CO2

유량: 70 ml/분

방법 OD40MEOH_AA

칼럼: 키랄셀 OD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 40% 메탄올 + 0.1% DEA/ 60% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD50MeOH_AA

칼럼: 키랄셀 OD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 50% 메탄올 + 20 mM 아세트산암모늄)/ 50% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 AD45IPA_DEA

칼럼: 키랄셀 AD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 45% 이소프로판올 + 0.1%v/v DEA / 55% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD40IPA_AA

칼럼: 키랄셀 OD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 40% 이소프로판올 + 20mM 아세트산암모늄/ 60% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD30MEOH_DEA

칼럼: 키랄셀 OD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 30% 메탄올 + 0.1% v/v DEA/ 70% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD_35_MEOH_DEA

칼럼: 키랄팩 AD-3 150 x 2.1 mm, 3 μm

이동상: 5% 메탄올 + 0.1% v/v DEA/ 95% CO2

유량: 0.4 ml/분

검출: UV @ 220 nm 및 254 nm

방법 OD45MEOH_AA

칼럼: OD-H 4.6x100mm, 5 μm

이동상: 45% MeOH (20 mM 아세트산암모늄)/55% CO2

유량: 60ml/분

방법 OD45MEOH_AA_1

칼럼: OD-H 20 x 250 mm, 5 μm

이동상: 45% MeOH (20 mM 아세트산암모늄)/55% CO2

유량: 60 ml/분

방법: OJ15MEOH_AA

칼럼: 키랄셀 OJ-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 15% 메탄올 + 20mM 아세트산암모늄 / 85% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 AD50IPA_DEA

칼럼: 키랄셀 AD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 50% 이소프로판올 + 0.1%v/v DEA / 50% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD35IPA_AA

칼럼: 키랄셀 OD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 35% 2-프로판올 + 20mM 아세트산암모늄 / 65% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD40MeOH_DEA

칼럼: 키랄셀 OD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 40% 메탄올 + 0.1% DEA/ 60% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD25IPA_DEA

칼럼: 키랄셀 OD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 25% 이소프로판올 + 0.1% v/v DEA/ 75% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD30IPA_DEA

칼럼: 키랄셀 OD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 30% 이소프로판올 + 0.1% v/v DEA/ 70% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

방법 OD45IPA_DEA

칼럼: 키랄셀 OD-H 250 x 10 mm, 5 μm

이동상: 45% 이소프로판올 + 0.1% v/v DEA/ 55% CO2

유량: 10 ml/분

검출: UV @ 220 nm

최종 화합물의 제조

실시예 1.0(i) 및 1.0(ii)

부분입체이성질체 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 및 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드

단계 1: tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트

DMF (10 ml) 중 (R)-3-(벤질옥시)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸 프로판아미도)프로판산 (중간체 3A) (800 mg, 2.103 mmol) 및 (4R,5S)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 및 (4S,5R)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물 (중간체 1A) (514 mg, 2.103 mmol)을 포함하는 혼합물을 DIPEA (1.102 ml, 6.31 mmol) 및 ®T3P (DMF 중 아미드 커플링제 50%, 2.455 ml, 4.21 mmol)로 처리하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 물 (50 ml) 중에 현탁시키고, EtOAc (2 x 100 ml)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-100% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 백색 발포체로서 수득하였다.

단계 2: 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

DCM (15 ml) 중 tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (1.18 g, 1.945 mmol)를 TFA (7 ml, 91 mmol)로 처리하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 EtOAc (200 ml)와 포화 중탄산나트륨 용액 (100 ml) 사이에 분배하였다. 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 부분입체이성질체 혼합물로서 수득하였다;

하기 조건을 사용한 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 부분입체이성질체를 분리하여 이하 열거된 화합물을 수득하였다:

이동상: 45% MeOH + 20mM 아세트산암모늄/ 65% CO₂

칼럼: 키랄셀 OD-H, 250 x 10 mm id, 5 μm

검출: UV @ 220nm

유량: 10 ml/분

실시예 1.0(i) 제1 용리 피크 Rt = 3.31 분. 부분입체이성질체 1:

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드

실시예 1.0(ii) 제2 용리 피크 Rt = 7.31 분. 부분입체이성질체 2:

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드

실시예 1.0(i) 및 1.0(ii)의 입체화학은 X선 결정 구조 분석을 사용하여 지정하였다.

본 발명의 또 다른 실시양태에서, 실시예 1.0(ii), 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드의 화합물의 L-말레이트 염의 결정질 형태 I, II, III 및 IV, 및 상기 결정질 형태를 제조하는 방법이 제공된다. 개시된 결정질 L-말레이트 염 형태는 유리 염기 무정형 형태에 비해 가공 특성 및 물리화학적 특성에서 유의한 개선 (예를 들어, 보다 높은 융점, 증가된 수용해도)을 제공한다.

실시예 1.0(ii)의 화합물의 L-말레이트 염의 결정질 형태의 제조 방법:

방법 A:

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 20 mg을 바이알에 넣고, L-말산 5.6 mg을 첨가하였다. 에틸 아세테이트 500 uL를 첨가하고, 고체를 부드럽게 가온하여 용해시켰다. 결정은 실온에서 정치 시 나타나기 시작했고, 슬러리를 5-50℃에 걸쳐 온도 순환시켰다. 추가 400 uL의 에틸 아세테이트를 첨가한 다음, 액체를 원심분리 후 경사분리시켰다. 고체를 40℃에서 진공 오븐 하에 30 분 동안 건조시켰다. XRPD 패턴은 독특한 패턴을 갖는 결정질 고체를 나타내었다 (도 1).

결정질 형태 I을 용매화물로서 수득하였다.

방법 B:

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 20 mg을 바이알에 넣고, L-말산 5.6 mg을 첨가하였다. 아세톤 500 uL를 첨가하고, 고체를 부드럽게 가온하여 용해시켰다. 결정은 실온에서 정치 시 나타나기 시작했고, 슬러리를 5-50℃에 걸쳐 온도 순환시켰다. 추가 400 uL의 아세톤을 첨가한 다음, 액체를 원심분리 후 경사분리시켰다. 고체를 40℃에서 진공 오븐 하에 30 분 동안 건조시켰다. XRPD 패턴은 독특한 패턴을 갖는 결정질 고체를 나타내었다 (도 2). 결정질 형태 II를 수득하였다.

방법 C:

등몰량의 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 및 L-말산을 첨가하여 약 306 mg의 염이 형성되었고; 이어서 이것을 MeOH/BuOAc 중에 용해시켰다. 이어서, 형성된 고체를 100℃에서 2 시간 동안 진공 하에 여과에 의해 제거하여 백색 분말 220 mg을 수득하였다. 결정질 형태 III을 수득하였다 (도 3).

방법 D:

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 100 mg을 바이알에 넣고, L-말산 27.1 mg을 첨가하였다. 성분을 부드럽게 가온하면서 에틸 아세테이트 2 mL를 첨가하여 용해시켰다. 결정이 급속하게 나타나기 시작했다. 슬러리를 45℃에서 10 시간 동안 교반하였다. 이어서, 이것을 실온으로 냉각시키고, 결정에 추가의 에틸 아세테이트 2 mL를 첨가하였다. 이어서, 슬러리를 여과하고, 진공 하에 건조시켰다. XRPD 및 TGA 결과는 용매화물의 존재를 나타내었다. 고체를 추가로 60 분 동안 100℃에서 추가 건조시켰다. 결정질 탈용매화물을 약 97%의 순도로 단리시켰다. 결정질 형태 IV를 수득하였다 (도 4).

<표 A> 실시예 1.0(ii) L-말레이트 염 결정질 형태 I (방법 A)의 XRPD 데이터

오차 +/- 0.2°.

<표 B> 실시예 1.0(ii) 말레이트 염 결정질 형태 II (방법 B)의 XRPD 데이터

오차 +/- 0.2°.

<표 C> 실시예 1.0(ii) 말레이트 염 결정질 형태 III (방법 C)의 XRPD 데이터

오차 +/- 0.2°.

<표 D> 실시예 1.0(ii) 말레이트 염 결정질 형태 IV (방법 D)의 XRPD 데이터

오차 +/- 0.2°.

실시예 1.2

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-((4S,5R)-4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

단계 1: tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트

MeCN (4 mL) 중 (R)-3-벤질옥시-2-(2-tert-부톡시카르보닐아미노-2-메틸프로피오닐아미노)-프로피온산 (중간체 3A) (344 mg, 0.904 mmol) 및 4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 (270 mg, 0.904 mmol)의 교반 용액에 ®T3P의 용액 (EtOAc 중 50%) (1.055 ml, 1.807 mmol)을 실온에서 적가하였다. 생성된 무색 용액을 20 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 DCM (10 mL)으로 희석하였다. 수성 상을 분리하고, DCM (3 x 10 mL)을 사용하여 추출하고, 합한 유기 분획을 10% 시트르산 (10 mL)으로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시킨 다음, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (546 mg, 97%)를 백색 무정형 고체로서 수득하였다.

단계 2: 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

실온에서 DCM (5 mL) 중 tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (540 mg, 0.864 mmol)의 교반 용액에 TFA (0.666 ml, 8.64 mmol)를 적가하였다. 생성된 연황색 용액을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시킨 다음, 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 DCM (10 mL)으로 희석하였다. 수성 상을 분리하고, DCM (3 x 10 mL)을 사용하여 추출하고, 합한 유기 분획을 건조 (MgSO₄)시킨 다음, 감압 하에 농축시켜 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드를 무색 오일로서 수득하였다.

표제 화합물을 SFC 크로마토그래피에 의해 단리시켰다.

SFC Rt 5.75 분; 방법 AD25MEOH_DEA

절대 입체화학은 4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온의 X선에 의해 결정되었다.

본 발명의 또 다른 실시양태에서, 실시예 1.2, 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-((4S,5R)-4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드의 화합물의 L-말레이트 염의 결정질 형태 I, 및 상기 결정질 형태의 제조 방법이 제공된다. 개시된 결정질 L-말레이트 염 형태는 유리 염기 무정형 형태에 비해 가공 특성 및 물리화학적 특성에서 유의한 개선 (예를 들어, 보다 높은 융점, 증가된 수용해도)을 제공한다.

실시예 1.2의 화합물의 L-말레이트 염의 결정질 형태의 제조 방법:

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-((4S,5R)-4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 50 mg을 유리 바이알에 칭량하고, 12.8 mg L-말산 (반대이온)을 각각의 바이알에 칭량하였다. 이어서, 고체를 메탄올 0.2 mL 중에 용해시킨 다음, 이를 진공 하에 증발시켰다. 아세톤 500uL를 각각의 바이알에 첨가하였다. 이어서, 바이알을 5-35℃에 걸쳐 2 일 동안 온도 순환시켰다. 바이알로부터의 고체를 원심분리에 의해 단리시키고, 진공 하에 건조시킨 다음, 특성화하였다 (도 9).

<표 A> 실시예 1.2 L-말레이트 염 결정질 형태 I의 XRPD 데이터

오차 +/- 0.2°.

하기 표에 나타낸 실시예의 화합물 (표 1)은 실시예 1.0과 유사한 방법에 의해 중간체 3A, 3B, 3C, 3D, 3E, 3F, 3G, 3H, 3K, 4G, 3J 및 적절한 스피로피페리딘 (상업적으로 입수가능하거나 하기 기재된 제조예)으로부터, 또는 적절한 상업적으로 입수가능한 BOC 보호된 아미노산으로서 중간체 5A를 사용하여 (당업자에게 명백한 방식으로) 제조하였다.

<표 1>

실시예 1.9

2-아미노-N-[(R)-2-[4-(4-플루오로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-1-(1H-인돌-3-일메틸)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드의 부분입체이성질체 혼합물

단계 1: tert-부틸 1-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트

DMF (4 ml) 중 4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 (ASW 메드켐(MedChem)) (269 mg, 0.899 mmol), (R)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)-3-(1H-인돌-3-일)프로판산 (중간체 3C) (350 mg, 0.899 mmol) 및 DIPEA (0.628 ml, 3.59 mmol)을 포함하는 혼합물을 ®T3P (DMF 중 50%, 0.525 ml, 1.797 mmol)로 처리하고, 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (5 ml)로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 1% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 2: 2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

DCM (3 ml) 중 tert-부틸 1-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (312.3 mg, 0.493 mmol) (단계 1) 및 TFA (0.380 ml, 4.93 mmol)을 포함하는 혼합물을 실온에서 17 시간 동안 교반하였다. TFA (1mL, 13 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 3 시간 45 분 후, 용매를 진공 하에 제거하여 무색 오일을 수득하였다. 오일을 메탄올 (3 ml)로 용해시키고, 메탄올 중 2M NH₃ (70 ml)으로 용리하면서 10g SCX-2 카트리지를 통과시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 표제 화합물을 부분입체이성질체 혼합물로서 수득하였다.

실시예 1.10 및 1.11

실시예 1.9의 부분입체이성질체를 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 분리하여 실시예 1.10 및 1.11을 수득하였다.

실시예 1.10

2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드의 단일 부분입체이성질체

SFC 제2 용리 피크 Rt 7.13 분; 방법 AD30IPA_AmmAc

실시예 1.11

SFC 제1 용리 피크 Rt 3.6 분; 방법 AD30IPA_AmmAc

실시예 1.15

2-아미노-N-[(R)-2-[4-(4-플루오로-페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-1-(1-메틸-1H-인돌-3-일메틸)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드의 단일 부분입체이성질체

단계 1: tert-부틸 1-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1-메틸-1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트

아세토니트릴 (3 ml) 중 4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 (ASW 메드켐) (243 mg, 0.744 mmol), (R)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)-3-(1-메틸-1H-인돌-3-일)프로판산 (중간체 3D) (300 mg, 0.744 mmol) 및 DIPEA (0.519 ml, 2.97 mmol)을 포함하는 혼합물을 ®T3P (DMF 중 50%, 0.868 ml, 1.487 mmol)로 처리하고, 실온에서 19 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, EtOAc 중에 용해시키고, 물로 세척하였다. 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 2% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 2: 2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1-메틸-1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

DCM (3 ml) 중 tert-부틸 1-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1-메틸-1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (378 mg, 0.559 mmol) (단계 1) 및 TFA (0.431 ml, 5.59 mmol)를 포함하는 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여 무색 오일을 수득하였다. 오일을 메탄올 (3 ml)로 용해시키고, 메탄올 중 2M NH₃ (70 ml)으로 용리하면서 10g SCX-2 카트리지를 통과시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 표제 화합물을 부분입체이성질체 혼합물로서 수득하였다.

부분입체이성질체를 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 분리하여 2-아미노-N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(1-메틸-1H-인돌-3-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드의 단일 부분입체이성질체를 피크 1로서 수득하였다.

SFC 제1 용리 피크 Rt 3.57 분; 방법 OD30MeOH_AA

실시예 1.16

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-(2-(디메틸아미노)-2-옥소에틸)-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

단계1: tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-(2-(디메틸아미노)-2-옥소에틸)-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트

(4R,5S)-N,N-디메틸-2-(1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)아세트아미드 및 (4S,5R)-N,N-디메틸-2-(1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)아세트아미드의 라세미 혼합물 (중간체 1D) (193 mg; 0.612 mmol)을 아세토니트릴 (3 ml) 중에 가용화시켰다. (R)-3-벤질옥시-2-(2-tert-부톡시카르보닐아미노-2-메틸프로피오닐아미노)-프로피온산 (중간체 3A) (233 mg; 0.612 mmol)을 DIPEA (0.427ml; 2.448mmol) 및 ®T3P (EtOAc 중 50%) (0.714ml; 1.224mmol)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 에틸 아세테이트 중에 가용화시키고, 물 (3 x 50 ml)로 세척하였다. 유기부를 염수로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

단계 2: 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-(2-(디메틸아미노)-2-옥소에틸)-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-(2-(디메틸아미노)-2-옥소에틸)-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트의 부분입체이성질체 혼합물 (386mg; 0.569mmol)을 실온에서 디클로로메탄 (3ml) 중에 가용화시켰다. 트리플루오로아세트산 (439ul; 5.69mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 72 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 조 생성물을 메탄올 중에 용해시키고, 사전습윤화한 10g SCX-2 카트리지 상에 로딩하였다. 메탄올 (50 ml)을 카트리지에 통과시키고, 생성물을 메탄올 중 2M NH₃으로 용리시켰다. 암모니아 분획을 농축시켜 표제 화합물을 부분입체이성질체 혼합물로서 수득하였다. 부분입체이성질체를 키랄 SFC에 의해 분리하여 제2 피크를 수집하였다.

SFC 방법 OD50MeOH_AA, Rt 6.40 분

실시예 1.18 및 1.19

2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-[4-(4-플루오로-페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소-에틸}-2-메틸-프로피온아미드

단계 1: tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일 카르바메이트.

아세토니트릴 (3 ml) 중 4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 (ASW 메드켐) (258 mg, 0.789 mmol), (R)-3-벤질옥시-2-(2-tert-부톡시카르보닐아미노-2-메틸프로피오닐아미노)-프로피온산 (중간체 3A) (300 mg, 0.789 mmol) 및 DIPEA (0.551 ml, 3.15 mmol)을 포함하는 혼합물을 ®T3P (DMF 중 50%, 0.921 ml, 1.577 mmol)로 처리하고, 실온에서 19 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, EtOAc로 용해시키고, 물로 세척하였다. 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 2% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 2: 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

DCM (4 ml) 중 tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (378 mg, 0.579 mmol) (단계 1) 및 TFA (0.892 ml, 11.58 mmol)를 포함하는 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여 무색 오일을 수득하였다. 오일을 메탄올 (3 ml)로 용해시키고, 메탄올 중 2M NH₃ (70 ml)으로 용리하면서 10g SCX-2 카트리지를 통과시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 표제 화합물을 부분입체이성질체 혼합물로서 수득하였다.

부분입체이성질체를 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 분리하여 하기를 수득하였다:

실시예 1.18

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-이소프로필-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드의 단일 부분입체이성질체

SFC 제1 용리 피크 Rt 8.91 분; 방법 IC40MeOH_AA

실시예 1.19

SFC 제2 용리 피크 Rt 11.54 분; 방법 IC40MeOH_AA

실시예 1.32

2-아미노-2-메틸-N-((2R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-5-페닐펜탄-2-일)프로판아미드

단계 1: tert-부틸 2-메틸-1-((2R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-5-페닐펜탄-2-일아미노)-1-옥소프로판-2-일카르바메이트

표제 화합물을 실시예 2 단계 1에 기재된 절차에 따라 용매로서 ®T3P (EtOAc 중 50%) 및 CH₃CN을 사용하여 (R)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)-4-페닐펜탄산 (중간체 3F)을 사용하여 제조하였다.

단계 2: 2-아미노-2-메틸-N-((2R)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-5-페닐펜탄-2-일)프로판아미드의 부분입체이성질체 혼합물

표제 화합물을 실시예 2 단계 2에 기재된 절차에 따라 제조하였다.

부분입체이성질체를 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 분리하여 표제 화합물을 제1 용리 피크로서 수득하였다.

SFC 방법 LUXC2_45MeOH_AA, 제1 용리 피크 Rt = 5.38 분

실시예 1.53

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드.

단계 1: tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트.

DMF (5 ml) 중 (R)-3-벤질옥시-2-(2-tert-부톡시카르보닐아미노-2-메틸프로피오닐아미노)-프로피온산 (중간체 3A) (259 mg, 0.681 mmol)의 교반 용액에 중간체 1L (176 mg, 0.681 mmol) 및 DIPEA (476 μl, 2.72 mmol)에 이어서 DMF 중 ®T3P 50% (795 ul, 1.362 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 DCM (15 ml)에 첨가하고, 물 (15 ml)로 세척하였다. 합한 유기부를 포화 중탄산나트륨 용액 (15 ml), 염수 (2 x 15 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 농축시켜 조 생성물을 황색 오일로서 수득하였다. 조 물질을 실리카 크로마토그래피에 의해 30-100% 이소-헥산 / EtOAc로 용리시키면서 정제하였다. 관련 분획을 농축시켜 목적 생성물을 수득하였다.

단계 2: 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

DCM (3 ml) 중 tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (302 mg, 0.486 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 TFA (562 μl, 7.30 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 5 - 10℃에서 밤새 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 2M NaOH (2 ml)에 첨가하고, DCM (3 x 5 ml)으로 추출하였다. 추출물을 염수 (5 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 농축시켜 부분입체이성질체의 혼합물을 수득하였다. 목적 이성질체를 SFC 크로마토그래피로 단리시켰다.

SFC 방법 OD45MEOH_AA, 피크 2 Rt 3.4 분

본 발명의 또 다른 실시양태에서, 실시예 1.53, 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드의 화합물의 L-말레이트 염의 결정질 형태 I 및 II, 및 상기 결정질 형태의 제조 방법이 제공된다. 개시된 결정질 L-말레이트 염 형태는 유리 염기 무정형 형태에 비해 가공 특성 및 물리화학적 특성에서 유의한 개선 (예를 들어, 보다 높은 융점, 증가된 수용해도)을 제공한다.

실시예 1.53의 화합물의 L-말레이트 염의 결정질 형태의 제조 방법:

방법 A:

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 50 mg을 유리 바이알에 칭량하고, 12.8 mg L-말산 (반대이온)을 각각의 바이알에 칭량하였다. 이어서, 고체를 메탄올 0.2 mL 중에 용해시킨 다음, 이를 진공 하에 증발시켰다. 아세톤 500uL를 각각의 바이알에 첨가하였다. 이어서, 바이알을 5-35℃에 걸쳐 2 일 동안 온도 순환시켰다. 바이알로부터의 고체를 원심분리에 의해 단리시키고, 진공 하에 건조시킨 다음, 특성화하였다.

<표 A> 실시예 1.53 L-말레이트 염 결정질 형태 I의 XRPD 데이터

오차 +/- 0.2°.

방법 B:

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 250 mg을 유리 바이알에 칭량하고, 64.4 mg L-말산 (반대이온)을 각각의 바이알에 칭량하였다. 부틸 아세테이트 2mL를 각각의 바이알에 첨가하였다. 이어서, 바이알을 5-35℃에 걸쳐 2 일 동안 온도 순환시켰다. 바이알로부터의 고체를 원심분리에 의해 단리시키고, 진공 하에 건조시킨 다음, 특성화하였다.

<표 B> 실시예 1.53 L-말레이트 염 결정질 형태 II의 XRPD 데이터

오차 +/- 0.2°.

실시예 2.0(i), 2.0(ii) 및 2.0(iii)

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

단계 1: tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트

DMF (4 ml) 중 (R)-3-(벤질옥시)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸 프로판아미도)프로판산 (중간체 3A) (300 mg, 0.789 mmol), rac-2-메틸-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-1-온 (중간체 2A) (182 mg, 0.789 mmol) 및 DIPEA (0.551 ml, 3.15 mmol)를 포함하는 혼합물을 ®T3P (DMF 중 아미드 커플링제 50%, 0.460 ml, 1.577 mmol)로 처리하고, 실온에서 17 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (5 ml)로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 1% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 2: 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

DCM (3 ml) 중 tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (290.8 mg, 0.491 mmol) 및 TFA (0.378 ml, 4.91 mmol)를 포함하는 혼합물을 실온에서 90 분 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여 무색 오일을 수득하였다. 오일을 메탄올 (3 ml)로 용해시키고, 메탄올 중 2M NH₃ (70 ml)으로 용리시키면서 10g SCX2 카트리지를 통과시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 표제 화합물을 부분입체이성질체 혼합물로서 수득하였다.

실시예 2.0(i): 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드;

초임계 유체 크로마토그래피에 의한 부분입체이성질체의 분리.

실시예 2.0(ii):

제1 용리 피크 Rt = 3.45 분. 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드인 부분입체이성질체 1

실시예 2.0(iii):

제2 용리 피크 Rt = 6.76 분. 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드인 부분입체이성질체 2

실시예 3.0(i), 3.0(ii) 및 3.0(iii)

N-((2R)-3-(1H-인돌-3-일)-1-(2-이소프로필-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-아미노-2-메틸프로판아미드

단계 1: tert-부틸 1-((2R)-3-(1H-인돌-3-일)-1-(2-이소프로필-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트

DMF (4 ml) 중 2-이소프로필-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 (ASW 메드켐) (278 mg, 0.899 mmol), (R)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)-3-(1H-인돌-3-일)프로판산 (중간체 3C) (350 mg, 0.899 mmol) 및 DIPEA (0.628 ml, 3.59 mmol)를 포함하는 혼합물을 ®T3P (DMF 중 50%, 0.525 ml, 1.797 mmol)로 처리하고, 실온에서 2 시간 20 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (5 ml)로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 1% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 2: N-((2R)-3-(1H-인돌-3-일)-1-(2-이소프로필-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-아미노-2-메틸프로판아미드

DCM (5 ml) 중 tert-부틸 1-((2R)-3-(1H-인돌-3-일)-1-(2-이소프로필-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (450.21 mg, 0.699 mmol) (단계 1) 및 TFA (0.539 ml, 6.99 mmol)을 포함하는 혼합물을 실온에서 17 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여 자주색 오일을 수득하였다. 오일을 메탄올 (3 ml)로 용해시키고, 메탄올 중 2M NH₃ (70 ml)으로 용리시키면서 10g SCX-2 카트리지를 통과시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 표제 화합물을 부분입체이성질체 혼합물로서 수득하였다.

실시예 3.0(i):

실시예 3.0(ii):

제1 용리 피크 Rt = 3.83 분. N-((2R)-3-(1H-인돌-3-일)-1-(2-이소프로필-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-아미노-2-메틸프로판아미드인 부분입체이성질체 1

실시예 3.0(iii):

제2 용리 피크 Rt = 8.33 분. N-((2R)-3-(1H-인돌-3-일)-1-(2-이소프로필-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-아미노-2-메틸프로판아미드인 부분입체이성질체 2

실시예 4.0(i) 및 4.0(ii)

(R)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드 및 (R)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드

단계 1: 2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-메틸프로판산

MeCN (6 mL) 중 D-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-히드록시-2-메틸프로판산 (1 g, 4.56 mmol) 및 DBU (1.031 ml, 6.84 mmol)를 포함하는 혼합물을 0℃에서 MeCN (1 mL) 중 TBSCl (1.031 g, 6.84 mmol)로 한 방울씩 처리하였다. 생성된 무색 용액을 교반하고, 실온으로 밤새 가온하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 생성된 조 물질을 MeOH (4 mL), 6M NaOH 용액 (4 mL) 및 물 (4 mL)로 희석한 다음, 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 조 용액을 10% 시트르산 용액으로 중화시키고, DCM (20 mL)으로 추출하였다. 수성 상을 추가로 DCM (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기부를 물 (10 mL)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. 표제 화합물에 대한 정제는 수행하지 않았다.

단계 2: tert-부틸 (2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일카르바메이트

MeCN (20 mL) 중 (R)-3-(벤질옥시)-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)프로판산 (시그마-알드리치(Sigma-Aldrich)) (1.052 g, 3.56 mmol) 및 ®T3P (EtOAc 중 50%) (4.16 ml, 7.12 mmol)을 포함하는 혼합물을 DIPEA (2.488 ml, 14.25 mmol)로 한 방울씩 처리하였다. 생성된 용액을 실온에서 30 분 동안 교반한 다음, (4R,5S)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 및 (4S,5R)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물 (중간체 1A) (1 g, 3.56 mmol)을 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0.1M HCl (20 mL)로 희석하고, DCM (20 mL)으로 추출하였다. 수성 상을 추가로 DCM (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기부를 중탄산나트륨의 포화 용액 (20 mL), 물 (20 mL)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. 표제 화합물에 대한 정제는 수행하지 않았다.

단계 3: 7-((R)-2-아미노-3-(벤질옥시)프로파노일)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온

DCM (5 mL) 중 tert-부틸 (2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (500 mg, 0.959 mmol) 및 TFA (2.215 ml, 28.8 mmol)을 포함하는 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 이어서, 조 물질을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 중탄산나트륨의 포화 용액 (10 mL)으로 세척하였다. 수성 상을 추가로 DCM (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 감압 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. 표제 화합물에 대한 정제는 수행하지 않았다.

단계 4: tert-부틸 (4R)-7,10,10,11,11-펜타메틸-4-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르보닐)-6-옥소-1-페닐-2,9-디옥사-5-아자-10-실라도데칸-7-일카르바메이트

DMF (5 mL) 중 2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-메틸프로판산 (단계 1로부터의 중간체) (311 mg, 0.934 mmol) 및 DIPEA (0.652 ml, 3.73 mmol)를 포함하는 혼합물을 실온에서 ®T3P (EtOAc 중 50%)의 용액 (1.090 ml, 1.867 mmol)으로 한 방울씩 처리하였다. 생성된 용액을 15 분 동안 교반한 다음, DMF (1 mL) 중 7-((R)-2-아미노-3-(벤질옥시)프로파노일)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 (단계 3으로부터의 중간체) (500 mg, 0.934 mmol)을 실온에서 적가하였다. 반응 혼합물을 20 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0.1M HCl (10 mL)로 희석하고, DCM (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기부를 중탄산나트륨의 포화 용액 (10 mL), 염수 (10 mL), 물 (10 mL)로 세척하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 0-70% EtOAc/이소-헥산으로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 5: (2R)-2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-3-히드록시-2-메틸프로판아미드의 실시예 4.0(i) 부분입체이성질체 혼합물

tert-부틸 (4R)-7,10,10,11,11-펜타메틸-4-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르보닐)-6-옥소-1-페닐-2,9-디옥사-5-아자-10-실라도데칸-7-일카르바메이트 (단계 4로부터의 중간체) (140 mg, 0.190 mmol) 및 Et₂O 중 2M HCl (2.9 mL, 5.70 mmol)을 포함하는 혼합물을 물 (300 mg, 16.65 mmol)로 한 방울씩 처리하고, 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 생성된 조 물질을 진공 오븐 내에서 24 시간 동안 50℃에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다. 표제 화합물에 대한 정제는 수행하지 않았다.

실시예 4.0(ii)

제2 용리 피크 Rt 8.54 분. 부분입체이성질체 2: (R)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드 또는 (R)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드

실시예 5.0 (i) 및 5.0 (ii)

(S)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드 및 (S)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드

단계 1: (S)-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-메틸프로판산

MeCN (6 mL) 중 L-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-히드록시-2-메틸프로판산 (900 mg, 4.11 mmol) 및 DBU (0.928 ml, 6.16 mmol)를 포함하는 혼합물을 0℃에서 MeCN (1 mL) 중 TBSCl (928 mg, 6.16 mmol)로 한 방울씩 처리하였다. 생성된 무색 용액을 교반하고, 실온으로 밤새 가온하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다.

생성된 조 물질을 MeOH (4 mL), 6M NaOH 용액 (4 mL) 및 물 (4 mL)로 희석하였다. 조 용액을 10% 시트르산 용액으로 중화시키고, DCM (20 mL)으로 추출하였다. 수성 상을 추가로 DCM (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기부를 물 (10 mL)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. 표제 화합물에 대한 정제는 수행하지 않았다.

단계 2: tert-부틸 (4R)-7,10,10,11,11-펜타메틸-4-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르보닐)-6-옥소-1-페닐-2,9-디옥사-5-아자-10-실라도데칸-7-일카르바메이트

표제 화합물을 실시예 4와 유사하게 제조하였다.

단계 3: 실시예 5.0 (i) (2S)-2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-3-히드록시-2-메틸프로판아미드의 부분입체이성질체 혼합물

DCM (5 mL) 중 tert-부틸 (4R)-7,10,10,11,11-펜타메틸-4-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르보닐)-6-옥소-1-페닐-2,9-디옥사-5-아자-10-실라도데칸-7-일카르바메이트 (150 mg, 0.204 mmol) 및 Et₂0 중 2M HCl (3.05 ml, 6.11 mmol)을 포함하는 혼합물을 실온에서 물 (0.3 mL)로 한 방울씩 처리하였다. 생성된 무색 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 생성된 조 물질을 진공 오븐 내에서 실온에서 3일 동안 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 5.0(ii)

제2 용리 피크 Rt 4.88 분. 부분입체이성질체 2: (S)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드 또는 (S)-2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-3-히드록시-2-메틸-프로피온아미드

실시예 6.0(i) 및 6.0(ii)

부분입체이성질체 2-아미노-N-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 및 2-아미노-N-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드

실시예 6.0(i):

부분입체이성질체 2-아미노-N-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 또는 2-아미노-N-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 (부분입체이성질체 1)

단계 1: [(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-카르밤산 tert-부틸 에스테르의 부분입체이성질체

DMF (8 ml) 중 ((R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(4-메톡시-벤질옥시)-프로피온산 (중간체 4D) (350 mg, 1.08 mmol) 및 (4R,5S)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 히드로클로라이드 및 (4S,5R)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 히드로클로라이드의 라세미 혼합물 (중간체 1A) (302 mg, 1.076 mmol)을 포함하는 혼합물을 DIPEA (0.94 ml, 5.38 mmol) 및 ®T3P (DMF 중 아미드 커플링제 50%, 1.37 g, 2.15 mmol)로 처리하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (50 ml)로 희석한 다음, 물 (25 ml), NaHCO₃ 포화 수용액 (25 ml) 및 염수 (25 ml)로 세척하였다. 합한 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 35-100% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 개별 부분입체이성질체를 백색 고체로서 수득하였다:

부분입체이성질체 1, 제1 용리 화합물.

부분입체이성질체 2, 제2 용리 화합물.

단계 2: 7-[(R)-2-아미노-3-(4-메톡시-벤질옥시)-프로피오닐]-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온

1,4-디옥산 (2 ml) 중 [(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (부분입체이성질체 1) (168 mg, 0.308 mmol)의 용액을 물/얼음 조를 사용하여 8℃로 냉각시키고, 1,4-디옥산 (0.5 ml) 중 진한 황산 (0.049 ml, 0.91 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 72 시간 동안 동결기 내 -20℃에 두었다. 동결된 반응 혼합물을 2M 수성 탄산나트륨 용액 (10 ml)으로 켄칭하고, EtOAc (2 x 25 ml)로 추출하였다. 유기 상을 분리하고, 염수 (5 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 0-10% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 3: {1-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸카르바모일]-1-메틸-에틸}-카르밤산 9H-플루오렌-9-일메틸 에스테르

DMF (2 ml) 중 2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-2-메틸-프로피온산 [FMOC-AIB-OH] (시그마-알드리치) (39.3 mg, 0.12 mmol)의 용액을 DIPEA (0.04 ml, 0.23 mmol) 및 HATU (52.5 mg, 0.14 mmol)로 처리하였다. 생성된 용액을 10 분 동안 교반한 후, 7-[(R)-2-아미노-3-(4-메톡시-벤질옥시)-프로피오닐]-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온 (단계 2로부터의 중간체) (52 mg, 0.11 mmol)을 첨가하였다.

반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (25 ml)로 희석한 다음, 물 (10 ml) 및 염수 (5 ml)로 세척하였다. 합한 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 40-100% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 4: 2-아미노-N-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-(-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드

DCM (2 ml) 중 {1-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸카르바모일]-1-메틸-에틸}-카르밤산 9H-플루오렌-9-일메틸 에스테르 (70 mg, 0.09 mmol)의 용액을 피페리딘 (0.20 ml, 2.0 mmol)으로 처리하였다. 생성된 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 0-10% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 6.0(ii)

부분입체이성질체 2-아미노-N-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 또는 2-아미노-N-[(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 (부분입체이성질체 2)

표제 화합물을 실시예 6(i)과 유사한 방법에 의해 [(R)-1-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-카르밤산 tert-부틸 에스테르의 부분입체이성질체 2 (단계 1)로부터 제조하였다. 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 6.0(i) 및 실시예 6.0(ii)의 제조에 대한 대안적 절차로, 단계 1로부터의 부분입체이성질체 1 및 2는 단계 2-4에서 혼합물로서 제조할 수 있고, 표제 화합물의 부분입체이성질체 혼합물은 SFC 크로마토그래피에 의해 분리할 수 있다.

하기 표에 나타낸 실시예의 화합물 (표 2)은 실시예 6.0(i) 및 6.0(ii)와 유사한 방법에 의해 중간체 4D 및 적절한 스피로피페리딘 (상업적으로 입수가능하거나 하기 기재된 제조예)으로부터 제조하였다.

<표 2>

실시예 7.0

2-아미노-N-[(R)-1-(4-플루오로-벤질옥시메틸)-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 또는 2-아미노-N-[(R)-1-(4-플루오로-벤질옥시메틸)-2-((4R,5S)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 (부분입체이성질체 2)

단계 1: [(R)-1-(4-플루오로-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-카르밤산 tert-부틸 에스테르의 부분입체이성질체

DMF (6 ml) 중 (R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(4-플루오로-벤질옥시)-프로피온산 (중간체 4A) (357 mg, 1.14 mmol) 및 (4R,5S)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 및 (4S,5R)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물 (중간체 1A) (320 mg, 1.14 mmol)을 포함하는 혼합물을 DIPEA (0.99 ml, 5.38 mmol) 및 ®T3P (DMF 중 아미드 커플링제 50%, 1.45 g, 2.28 mmol)로 처리하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (50 ml)로 희석하고, 물 (25 ml), NaHCO₃ 포화 수용액 (25 ml) 및 염수 (25 ml)로 세척하였다. 합한 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 35-90% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 개별 부분입체이성질체를 백색 고체로서 수득하였다:

부분입체이성질체 1, 제1 용리 화합물.

부분입체이성질체 2, 제2 용리 화합물.

단계 2: 7-[(R)-2-아미노-3-(4-플루오로-벤질옥시)-프로피오닐]-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온

DCM (4 ml) 중 [(R)-1-(4-플루오로-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (단계 1로부터의 부분입체이성질체 2) (185 mg, 0.34 mmol)의 용액을 TFA (0.79 ml, 10.3 mmol)로 처리하였다. 생성된 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM (20 ml)으로 희석하고, 2M NaOH 수용액 (10 ml)으로 0℃에서 켄칭하였다. 유기 상을 분리하고, 염수 (5 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

단계 3: {1-[(R)-1-(4-플루오로-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸카르바모일]-1-메틸-에틸}-카르밤산 tert-부틸 에스테르

THF (4 ml)/물 (1 ml) 중 7-[(R)-2-아미노-3-(4-플루오로-벤질옥시)-프로피오닐]-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온 (130 mg, 0.3 mmol) (단계 2) 및 2-tert-부톡시카르보닐아미노-2-메틸-프로피온산 2,5-디옥소-피롤리딘-1-일 에스테르 (EP1486498A1 페이지 20에 기재된 합성) (89 mg, 0.3 mmol)의 용액을 TEA (0.12 ml, 0.89 mmol)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (25 ml)와 5% 시트르산 수용액 (10 ml) 사이에 분배하였다. 유기 상을 분리하고, 염수 (10 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 50-100% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 4: 2-아미노-N-[(R)-1-(4-플루오로-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드

DCM (2.5 ml) 중 {1-[(R)-1-(4-플루오로-벤질옥시메틸)-2-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸카르바모일]-1-메틸-에틸}-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (단계 3으로부터의 중간체) (154 mg, 0.24 mmol)의 용액을 빙조로 냉각시키고, TFA (0.57 ml, 7.4 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM (20 ml)으로 희석하고, 2M NaOH 수용액 (10 ml)으로 0℃에서 켄칭하였다. 유기 상을 분리하고, 염수 (5 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 0-2.5% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 7.1

N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(4-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸-2-(메틸아미노)프로판아미드의 단일 부분입체이성질체

단계 1: 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 2-(tert-부톡시카르보닐(메틸)아미노)-2-메틸프로파노에이트.

DCM (100 mL) 중 2-(tert-부톡시카르보닐(메틸)아미노)-2-메틸프로판산 (5 g), N-히드록시숙신아미드 (2.65 g)의 용액에 트리에틸아민 (6.42 mL) 및 EDC (4.41 g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 중탄산나트륨 (100 mL)으로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과한 다음, 농축시켜 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 2-(tert-부톡시카르보닐(메틸)아미노)-2-메틸프로파노에이트를 무색 오일 (5.1 g)로서 수득하였다.

단계 2: tert-부틸 1-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(4-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일(메틸)카르바메이트.

THF (3 ml) 중 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 2-(tert-부톡시카르보닐(메틸)아미노)-2-메틸프로파노에이트 (80 mg, 0.254 mmol) 및 7-((R)-2-아미노-3-(4-메틸벤질옥시)프로파노일)-4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 (115 mg, 0.254 mmol)에 DIPEA (0.044 ml, 0.254 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 물 (10 ml)로 희석하고, EtOAc (50 ml)로 추출하였다. 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 농축시켰다. 잔류물을 12g 실리카 카트리지에 적용하고, 이를 에틸 아세테이트로 용리시켰다. 적절한 분획을 합하고, 농축시켜 tert-부틸 1-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(4-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일(메틸)카르바메이트를 발포체로서 수득하였다.

단계 3: N-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(4-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸-2-(메틸아미노)프로판아미드

DCM (2 ml) 중 tert-부틸 1-((2R)-1-(4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-3-(4-메틸벤질옥시)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일(메틸)카르바메이트 (128 mg, 0.196 mmol)에 TFA (0.6 ml, 7.79 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 포화 중탄산나트륨 용액 (10 ml) 중에 현탁시키고, EtOAc (2 x 50 ml)로 추출하였다. 추출물을 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 DCM 중 20g 실리카 카트리지에 적용하고, 이를 5% MeOH/DCM [1% 수성 880 암모니아를 함유하는 10% MeOH/DCM으로부터 희석됨]으로 용리시켰다. 관련 분획을 합하고, 농축시켜 발포체를 수득하였다. 이를 40℃에서 진공 하에 밤새 건조시켜 표제 화합물을 유리로서 수득하였다.

7-((R)-2-아미노-3-(4-메틸 벤질옥시)프로파노일)-4-(4-플루오로페닐)-2-메틸-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온의 적절한 부분입체이성질체는 실시예 7.0과 유사하게 단리시킬 수 있다.

실시예 7.2

2-아미노-2-메틸-N-((R)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-페녹시부탄-2-일)프로판아미드

단계 1: tert-부틸 (R)-4-히드록시-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소부탄-2-일카르바메이트

2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 (100 mg; 0.409 mmol)을 아세토니트릴 (1.4 ml) 중에 가용화시켰다. (R)-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-4-히드록시부탄산 (90 mg; 0.409 mmol)을 첨가하고, 이어서 디이소프로필에틸아민 (0.286 ml; 1.637 mmol)을 첨가하였다. ®T3P (에틸 아세테이트 중 50% 용액) (0.478 ml; 0.819 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고; 유기부를 합하고, 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 암모니아를 함유하는 DCM 중 0-10% MeOH로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 (R)-4-히드록시-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소부탄-2-일카르바메이트를 수득하였다.

단계 2: tert-부틸 (R)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-페녹시부탄-2-일카르바메이트.

tert-부틸 (R)-4-히드록시-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소부탄-2-일카르바메이트 (111 mg; 0.249 mmol)을 THF (2.5 ml) 중에 가용화시켰다. 페놀 (24 mg; 0.249 mmol)을 첨가하고, 이어서 트리페닐포스핀 (98 mg; 0.374 mmol)을 첨가하였다. 용액을 0℃로 냉각시키고, 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.073 ml; 0.374 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고, 밤새 교반하였다. 용액을 진공 하에 농축시키고, 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 암모니아를 함유하는 DCM 중 0-10% MeOH로 용리시키면서 정제하였다. 화합물을 트리페닐포스핀 옥시드로 용리시키고, 후속 단계에 그대로 사용하였다.

단계 3: (4S,5R)-7-((R)-2-아미노-4-페녹시부타노일)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온.

tert-부틸 (R)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-페녹시부탄-2-일카르바메이트 (242 mg; 0.464 mmol)를 DCM (1 ml) 중에 가용화시켰다. TFA (0.894 ml; 11.60 mmol)를 첨가하고, 용액을 실온에서 20 분 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켰다. 잔류 오일을 메탄올 (3 ml)로 용해시키고, 메탄올 중 2M NH₃ (70 ml)으로 용리시키면서 10 g SCX-2 카트리지를 통과시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 (4S,5R)-7-((R)-2-아미노-4-페녹시부타노일)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온을 수득하였다.

단계 4: tert-부틸 2-메틸-1-((R)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-페녹시부탄-2-일아미노)-1-옥소프로판-2-일 카르바메이트.

(4S,5R)-7-((R)-2-아미노-4-페녹시부타노일)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 (55 mg; 0.130 mmol)을 아세토니트릴 (0.5 ml) 중에 가용화시켰다. 2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판산 (27 mg; 0.130 mmol)을 첨가하고, 이어서 디이소프로필에틸아민 (0.091 ml; 0.522 mmol)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 5 분 동안 교반한 후, ®T3P (에틸 아세테이트 중 50% 용액) (0.152 ml; 0.261 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반한 다음, 진공 하에 농축시키고, 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 암모니아를 함유하는 TBME 중 0-10% MeOH로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 2-메틸-1-((R)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-페녹시부탄-2-일아미노)-1-옥소프로판-2-일카르바메이트를 수득하였다.

단계 5: 2-아미노-2-메틸-N-((R)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-페녹시부탄-2-일)프로판아미드

tert-부틸 2-메틸-1-((R)-1-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소-4-페녹시부탄-2-일아미노)-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (38.7 mg; 0.064 mmol)를 DCM (0.5 ml) 중에 가용화시켰다. TFA (0.125 ml; 1.622 mmol)를 첨가하고, 용액을 실온에서 20 분 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켰다. 잔류 오일을 메탄올 (1 ml) 중에 용해시키고, 메탄올 중 2M NH₃ (4 ml)로 용리시키면서 1g SCX-2 카트리지를 통과시켰다. 증발시켜 표제 화합물을 수득하였다.

하기 표에 나타낸 실시예의 화합물 (표 3)은 실시예 7.0과 유사한 방법에 의해 상업적으로 입수가능한 BOC 보호된 아미노산, 또는 중간체 4E, 4F, 4G, 4H, 4I, 4J 또는 4K 및 적절한 스피로피페리딘 (상업적으로 입수가능하거나 하기 기재된 제조예)으로부터, 대안적으로 실시예 7.1과 유사하게 끝에서 두번째 단계에서 (R)-N-Boc-알파 에틸 알라닌 또는 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 2-(tert-부톡시카르보닐 (메틸)아미노)-2-메틸프로파노에이트와 커플링시켜 제조하였다.

<표 3>

실시예 8.0

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(7-메틸-6-옥소-9-페닐-2,7-디아자스피로[4.4]노난-2-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드의 부분입체이성질체

단계 1: tert-부틸 7-메틸-6-옥소-9-페닐-2,7-디아자스피로[4.4]노난-2-카르복실레이트

DMF (50 mL) 중 tert-부틸 6-옥소-9-페닐-2,7-디아자스피로[4.4]노난-2-카르복실레이트 (상업적으로 입수가능함) (1 g, 3.16 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고, 수소화나트륨 (126 mg, 3.16 mmol)으로 처리하였다. 반응물을 0℃에서 30 분 동안 교반되도록 하고, 아이오도메탄 (198 uL, 3.16 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하였다. 3 시간 30 분 후, 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, EtOAc (100 mL)로 추출하였다. 유기 상을 건조 (MgSO₄)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 TBME 중 0-10% MeOH로 용리시키면서 정제하여 하기 부분입체이성질체를 수득하였다:

부분입체이성질체 1:

피크 1:

부분입체이성질체 2:

피크 2:

단계 2: 2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.4]노난-1-온

DCM (10 mL) 중 tert-부틸 7-메틸-6-옥소-9-페닐-2,7-디아자스피로[4.4]노난-2-카르복실레이트 (부분입체이성질체 1, 단계 1) (488.3 mg, 1.48 mmol)의 용액을 TFA (2.3 mL, 29.6 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc 중에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다;

단계 3: tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(7-메틸-6-옥소-9-페닐-2,7-디아자스피로[4.4]노난-2-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트

DMF (5 mL) 중 (R)-3-(벤질옥시)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸 프로판아미도) 프로판산 (중간체 3A) (280 mg, 0.736 mmol) 및 2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.4]노난-1-온 (단계 2) (170 mg, 0.736 mmol)의 용액에 DIPEA (514 uL, 2.94)를 첨가하고, 이어서 ®T3P (DMF 중 아미드 커플링제 50%, 859 uL, 1.47 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 3 일에 걸쳐 교반하였다. 생성된 혼합물을 물 (50 ml)로 희석하고, EtOAc (2 x 100 ml)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 TBME:MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 4: 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(7-메틸-6-옥소-9-페닐-2,7-디아자스피로[4.4]노난-2-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드

DCM (4 mL) 중 tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(7-메틸-6-옥소-9-페닐-2,7-디아자스피로[4.4]노난-2-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (단계 3) (206.5 mg)의 용액을 TFA (537 uL, 6.97 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 일 동안 교반하였다. TFA의 추가 부분 (2 ml)을 첨가하고, 교반을 20 분 동안 계속하였다. 혼합물을 진공 하에 농축시켜 무색 오일을 수득하였다. 오일을 MeOH 중에 용해시키고, 사전습윤화한 (MeOH) 10g SCX-2 카트리지에 적용하였다. 칼럼을 MeOH (70 mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH 중 2M NH₃ (70 mL)으로 용리시켰다. 깨끗한 분획을 진공 하에 농축시켜 무색 오일을 수득하였다. 오일을 질량-지정 LC-MS에 의해 추가로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

실시예 9.0 및 9.0(i), 9.0(ii), 9.0(iii) 및 9.0(iv)

2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,8-디아자스피로[4.6]운데칸-8-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드의 부분입체이성질체 혼합물 및 분리된 부분입체이성질체

단계 1: 1-tert-부틸 4-메틸 아제판-1,4-디카르복실레이트

DCM (20 ml) 중 1-(tert-부톡시카르보닐)아제판-4-카르복실산 (1.0g; 4.11mmol)을 DIPEA (1.5ml, 8.22mmol)에 이어서 DCM (5 ml) 중 트리메틸옥소늄 테트라플루오로보레이트 (790mg, 5.34mmol)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기부를 분리하고, 수층을 추가로 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2: 1-tert-부틸 4-메틸 4-(2-니트로-1-페닐에틸)아제판-1,4-디카르복실레이트

THF (건조) (4 ml) 중 디이소프로필아민 (667ul, 4.68mmol)의 냉각된 (-78℃) 용액을 n-BuLi (헥산 중 1.6M) (2.93ml, 4.68mmol)로 처리하였다. 5 분 후, 혼합물을 실온으로 가온되도록 한 다음, -78℃로 재냉각시켰다. 이 혼합물을 THF (4 ml) 중 1-tert-부틸 4-메틸 아제판-1,4-디카르복실레이트 (단계 1) (927mg, 3.6mmol)의 냉각된 (-78℃) 용액에 적가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 40 분 동안 교반하였다. 이 혼합물에 THF (4 ml) 중 (E)-(2-니트로비닐)벤젠 (537mg; 3.6mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온으로 천천히 가온되도록 하였다. 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산/EtOAc에 이어서 이소-헥산 중 10-100% TBME로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 부분입체이성질체 혼합물로서 수득하였다.

단계 3: tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,8-디아자스피로[4.6]운데칸-8-카르복실레이트의 부분입체이성질체 혼합물

질소 하에 EtOH (15 ml) 중 NaBH₄ (570 mg, 15.03 mmol)를 20 분 동안 교반하고, MeOH (25 ml) 중 1-tert-부틸 4-메틸 4-(2-니트로-1-페닐에틸)아제판-1,4-디카르복실레이트 (단계 2) (1.079g, 2.504mmol) 및 NiCl₂ (595 mg, 2.504mmol)를 포함하는 냉각된 (빙조) 혼합물에 조금씩 (4 분취액) 첨가하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 포화 암모니아 용액을 첨가하고 (50 ml), 이어서 EtOAc (60 ml)를 첨가하였다. 혼합물을 진공 하에 감소시키고, 생성된 슬러리를 포화 암모니아 용액과 EtOAc 사이에 분배하였다. 유기부를 분리하고, 수층을 추가로 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 TBME 중 1-10% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 4: tert-부틸 2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,8-디아자스피로[4.6]운데칸-8-카르복실레이트의 부분입체이성질체 혼합물

질소 하에 THF (19.5 ml) 중 tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,8-디아자스피로[4.6]운데칸-8-카르복실레이트의 부분입체이성질체 혼합물 (단계 4) (669.5mg; 1.944mmol)을 얼음 / 염수 조에서 냉각시켰다. 1M LHMDS (2.5ml, 2.53mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 40 분 동안 교반하였다. 아이오도메탄 (182ul, 2.92mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온으로 밤새 천천히 가온되도록 하였다. 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 5: 2-메틸-4-페닐-2,8-디아자스피로[4.6]운데칸-1-온의 부분입체이성질체 혼합물

DCM (6 ml) 중 tert-부틸 2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,8-디아자스피로[4.6]운데칸-8-카르복실레이트의 부분입체이성질체 혼합물 (단계 4) (683.1mg; 1.906mmol)을 TFA (5.8ml, 76mmol)로 처리하고, 실온에서 10 분 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 조 생성물을 MeOH 중에 용해시키고, 사전습윤화한 (MeOH) 10g SCX-2 카트리지에 적용하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고, 생성물을 MeOH 중 2M NH₃으로 용리시켰다. 깨끗한 분획을 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다;

단계 6: tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,8-디아자스피로[4.6]운데칸-8-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트의 부분입체이성질체 혼합물

MeCN (2.58 ml) 중 2-메틸-4-페닐-2,8-디아자스피로[4.6]운데칸-1-온 (200mg; 0.774mmol)의 부분입체이성질체 혼합물을 (R)-3-(벤질옥시)-2-(2-(tert-부톡시 카르보닐아미노)-2-메틸 프로판아미도) 프로판산 (중간체 3A) (295mg; 0.774mmol)에 이어서 DIPEA (541ul; 3.10mmol)로 처리하였다. 5 분 동안 교반한 후, ®T3P (DMF 중 아미드 커플링제 50%, 904ul, 1.548mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 50-100% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 7: 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,8-디아자스피로[4.6]운데칸-8-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드의 부분입체이성질체

DCM (1.5 ml) 중 tert-부틸 1-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,8-디아자스피로[4.6]운데칸-8-일)-1-옥소프로판-2-일아미노)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트의 부분입체이성질체 혼합물 (단계 6) (309mg, 0.498mmol)을 TFA (1.5ml; 19.91mmol)로 처리하고, 실온에서 10 분 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 조 생성물을 MeOH 중에 용해시키고, 사전습윤화한 (MeOH) 10g SCX-2 카트리지에 적용하여다. 칼럼을 MeOH로 세척하고, 생성물을 MeOH 중 2M NH₃으로 용리시켰다. 깨끗한 분획을 진공 하에 농축시켜 표제 화합물 (실시예 9.0)을 수득하였다. 부분입체이성질체 혼합물을 SFC에 의해 분리하여 하기 화합물을 수득하였다:

실시예 9.0(i)

부분입체이성질체 1:

SFC 제1 용리 피크 Rt 3.4 분; 방법: 키랄팩 AS-H 250 x 10 mm, 5 um 이동상: 25% 이소프로판올 / 75% CO2

실시예 9.0(ii)

부분입체이성질체 2:

SFC 제2 용리 피크 Rt 6.05 분: 방법: 키랄팩 AS-H 250 x 10 mm, 5 um 이동상: 25% 이소프로판올 / 75% CO2

실시예 9.0(iii)

부분입체이성질체 3:

SFC 제3 용리 피크 Rt 12.5 분; 방법: 페노메넥스 룩스 C2 250 x 10 mm, 5 um (2개의 칼럼을 함께 연결함). 이동상: 50% MeOH+0.1% v/v DEA / 50% CO2

실시예 9.0(iv)

부분입체이성질체 4:

SFC 제4 용리 피크 Rt 14.5 분; 방법 페노메넥스 룩스 C2 250 x 10 mm, 5 um (2개의 칼럼을 함께 연결함) 이동상: 50% MeOH+0.1% v/v DEA / 50% CO2

중간체의 제조

중간체 1A

(4R,5S)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 및 (4S,5R)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물

단계 1: rac-1-tert-부틸 3-에틸 3-(2-니트로-1-페닐에틸)피페리딘-1,3-디카르복실레이트의 부분입체이성질체

THF (20 ml) 중 디이소프로필아민 (4.82 ml, 33.8 mmol)의 냉각된 (-78℃) 용액에 헥산 중 1.6M 부틸리튬 (21.13 ml, 33.8 mmol)을 적가하고, 생성된 혼합물을 0℃로 가온되도록 한 다음, -78℃로 다시 냉각시켰다. 이 혼합물을 THF (20 ml) 중 에틸-1-BOC-3-피페리딘카르복실레이트 (6.18 g, 24 mmol)에 -78℃에서 적가하고, -40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 -40℃에서 THF (20 ml) 중 트랜스-베타-니트로스티렌 (3.88 g, 26 mmol)의 용액으로 한 방울씩 처리하고, 1시간에 걸쳐 실온으로 가온되도록 하였다. 반응물을 NH₄Cl 용액 (200 ml)으로 켄칭하고, EtOAc (2 x 200 ml)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-24% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 개별 부분입체이성질체를 수득하였다:

부분입체이성질체 1:

부분입체이성질체 2:

단계 2: (4R,5S)-1-tert-부틸 3-에틸 3-(2-아미노-1-페닐에틸)피페리딘-1,3-디카르복실레이트 및 (4S,5R)-1-tert-부틸 3-에틸 3-(2-아미노-1-페닐에틸)피페리딘-1,3-디카르복실레이트의 라세미 혼합물

MeOH (50 ml) 중 부분입체이성질체 1의 라세미 혼합물 (단계 1) (3.4 g, 8.36 mmol)에 염화니켈 6수화물 (1.988 g, 8.36 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 빙조에서 냉각시켰다. 수소화붕소나트륨 (3.80 g, 100 mmol)을 첨가하고, 생성된 현탁액을 교반하고, 1시간에 걸쳐 실온으로 가온되도록 하였다. 반응물을 10% 암모니아 용액 (400 ml) 및 EtOAc (300 ml)로 켄칭하고, 현탁액이 용해될 때까지 실온에서 격렬히 교반하여 자주색 수용액을 수득하였다. 유기 용매를 제거하고, 수성부를 EtOAc (300 ml)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다;

단계 3: (4R,5S)-tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 및 (4S,5R)-tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트의 라세미 혼합물

톨루엔 (80 ml) 중 (4R,5S)-1-tert-부틸 3-에틸 3-(2-아미노-1-페닐에틸)피페리딘-1,3-디카르복실레이트 및 (4S,5R)-1-tert-부틸 3-에틸 3-(2-아미노-1-페닐에틸)피페리딘-1,3-디카르복실레이트의 라세미 혼합물 (3.5 g, 8.37 mmol)을 환류 하에 밤새 가열하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-100% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 분홍색 고체로서 수득하였다;

이 화합물의 상대 입체화학을 X선 결정학에 의해 결정하였다.

단계 4: (4R,5S)-tert-부틸 2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 및 (4S,5R)-tert-부틸 2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트의 라세미 혼합물

얼음/염수 조에서 냉각된 THF (80 ml) 중 (4R,5S)-tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 및 (4S,5R)-tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트의 라세미 혼합물 (2.72 g, 8.23 mmol)의 용액에 THF 중 1M LHMDS (10.70 ml, 10.70 mmol)를 적가하였다. 몇 분 동안 교반한 후, TBME 중 2M 아이오도메탄 (6.17 ml, 12.35 mmol)을 첨가하였다. 용액을 빙조로부터 제거하고, 4 시간에 걸쳐 실온으로 가온되도록 하였다. 반응물을 물 (200 ml)로 켄칭하고, EtOAc (2 x 200 ml)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-100% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다;

단계 5: (4R,5S)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 및 (4S,5R)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물

DCM (40 ml) 중 (4R,5S)-tert-부틸 2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 및 (4S,5R)-tert-부틸 2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트의 라세미 혼합물 (2.24 g, 6.50 mmol)에 TFA (20 ml, 260 mmol)를 첨가하고, 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 EtOAc (200 ml) 중에 용해시키고, 2M NaOH (100 ml)로 처리하였다. 유기부를 분리하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다;

중간체 1AA

(4R,5R)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 및 (4S,5S)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물

표제 화합물을 중간체 1A과 유사하게 제조하되, 부분입체이성질체 1 대신 단계 1에서 생성된 부분입체이성질체 2를 사용하여 제조하였다.

중간체 1B

에틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온

단계 1: tert-부틸 2-에틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트

tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (ASW 메드켐) (1 g, 3.03 mmol)를 THF (20 ml) 중에 질소의 분위기 하에 용해시켰다. 용액을 냉각 (얼음/염수 조)시키고, 수소화나트륨 (오일 중 60%) (0.133 g, 3.33 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 10 분 동안 교반하고, 아이오도에탄 (0.269 ml, 3.33 mmol)을 적가하였다. 빙조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 염수로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. 생성된 부분입체이성질체 혼합물을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2: 2-에틸-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온

tert-부틸 2-에틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (1.24 g, 3.46 mmol)를 DCM (15 ml) 중에 용해시키고, 1,4-디옥산 중 4M HCl (5 ml, 20.00 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 조 생성물을 메탄올 중에 용해시키고, 사전습윤화한 10g SCX-2 카트리지 상에 로딩하였다. 메탄올 (50 ml)을 카트리지에 통과시키고, 생성물을 메탄올 중 2M NH₃으로 용리시켜 표제 화합물을 부분입체이성질체 혼합물로서 수득하였다;

중간체 1C

(4R,5S)-2-(2,2-디메틸-프로필)-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온 및 (4S,5R)-2-(2,2-디메틸-프로필)-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물

단계 1: (4R,5S)-2-(2,2-디메틸-프로필)-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert 부틸 에스테르 및 (4S,5R)-2-(2,2-디메틸-프로필)-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert 부틸 에스테르의 라세미 혼합물

DMF (10 ml) 중 (4R,5S)-tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 및 (4S,5R)-tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트의 라세미 혼합물 (중간체 1A, 단계 3) (500 mg, 1.513 mmol)을 60℃에서 가열하였다. 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60%) (91 mg, 2.270 mmol)을 가열된 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 1 분 동안 교반한 다음, 네오펜틸 아이오다이드 (0.302 ml, 2.270 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60%) (91 mg, 2.270 mmol) 및 네오펜틸 아이오다이드 (0.302 ml, 2.270 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 밤새 교반하였다. 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60%) (91 mg, 2.270 mmol) 및 네오펜틸 아이오다이드 (0.302 ml, 2.270 mmol)를 추가로 첨가하였다. 반응물을 60℃에서 8 시간 동안 교반하였다. 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60%) (91 mg, 2.270 mmol) 및 네오펜틸 아이오다이드 (0.302 ml, 2.270 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 냉각시키고, 물 (100mL)로 켄칭하고, EtOAc (100mL)로 추출하였다. 유기부 추출물을 합하고, 물 (100ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-100% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 2: (4R,5S)-2-(2,2-디메틸-프로필)-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온 및 (4S,5R)-2-(2,2-디메틸-프로필)-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물

DCM (8 ml) 중 (4R,5S)-2-(2,2-디메틸-프로필)-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert 부틸 에스테르 및 (4S,5R)-2-(2,2-디메틸-프로필)-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert 부틸 에스테르의 라세미 혼합물 (518 mg, 1.293 mmol)의 용액에 TFA (4 ml, 51.9 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 포화 중탄산나트륨과 DCM 사이에 분배하였다. 수성 층을 DCM으로 추출하였다. 유기부를 합하고, 건조 (MgSO₄)시킨 다음, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

중간체 1D

(4R,5S)-N,N-디메틸-2-(1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)아세트아미드 및 (4S,5R)-N,N-디메틸-2-(1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)아세트아미드의 라세미 혼합물

표제 화합물을 중간체 1A와 유사하게, 아이오도메탄 (단계 4)을 2-클로로-N,N-디메틸아세트아미드로 대체하여 제조하였다;

중간체 1E

(4R,5S)-2-이소부틸-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온 및 (4S,5R)- 2-이소부틸-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물

단계 1: (4R,5S)-2-이소부틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert 부틸 에스테르 및 (4S,5R)-2-이소부틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert 부틸 에스테르의 라세미 혼합물

DMF (10 ml) 중 (4R,5S)-tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 및 (4S,5R)-tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트의 라세미 혼합물 (중간체 1A, 단계 3) (500 mg, 1.513 mmol)의 용액에 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60%) (91 mg, 2.270 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 10 분 동안 교반하였다. 1-아이오도-2-메틸프로판 (0.264 ml, 2.270 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60℃로 2 시간 동안 가열하였다. 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60%) (91 mg, 2.270 mmol)을 추가로 첨가하고, 혼합물을 밤새 가열하였다. 다음날 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60%) (91 mg, 2.270 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 가열하고, 추가의 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60%) (91 mg, 2.270 mmol)을 첨가하였다. 1-아이오도-2-메틸프로판 (0.264 ml, 2.270 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 추가로 1 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, EtOAc (100 mL)로 희석하고, 물 (100 mL)로 세척하였다. 유기 상을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-100% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 2: (4R,5S)-2-이소부틸-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온 및 (4S,5R)- 2-이소부틸-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물

DCM (6 ml) 중 (4R,5S)-2-이소부틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert 부틸 에스테르 및 (4S,5R)-2-이소부틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert 부틸 에스테르의 라세미 혼합물 (397 mg, 1.027 mmol)의 용액에 TFA (3 ml, 38.9 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 포화 중탄산나트륨과 DCM 사이에 분배하였다. 수성 층을 추가로 DCM으로 추출하였다. 유기부를 합하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

중간체 1F

2-메틸-4-페닐-2,3,7-트리아자-스피로[4.5]데스-3-엔-1-온의 라세미 혼합물.

단계 1: 3-벤조일-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르의 라세미 혼합물

피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르 (맨체스터 오가닉스(Manchester Organics)) (3g, 11.6mmol)을 THF (20ml) 중에 용해시키고, -78℃로 냉각시킨 후, THF 중 1M LiHMDS 용액 (11.6ml, 11.6mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온으로 30 분에 걸쳐 가온되도록 한 후, 다시 -78℃로 냉각시켰다. 벤조일 클로라이드 (1.5ml, 12.8mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5 시간 동안 실온으로 가온되도록 하였다. 용매 부피를 진공 하에 감소시킨 후, EtOAc (20ml)를 첨가하고, 순차적으로 포화 비카르브 용액 (20ml), 1M HCl 용액 (20ml) 및 염수 (20ml)로 세척하였다. 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-15% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 2: 4-옥소-1-페닐-2,3,7-트리아자-스피로[4.5]데스-1-엔-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 라세미 혼합물

EtOH (4ml) 중 3-벤조일-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르의 라세미 혼합물 (단계 1) (400mg, 1.1 mmol)의 용액에 히드라진 수화물 (166mg, 3.3mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반한 후, 마이크로웨이브에서 3 시간 동안 120℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, EtOAc (10ml) 중에 용해시키고, 염수 (20ml)로 세척하였다. 수성 상을 추가로 EtOAc (10ml)로 세척하였다. 유기부를 합하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-60% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 3: 3-메틸-4-옥소-1-페닐-2,3,7-트리아자-스피로[4.5]데스-1-엔-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 라세미 혼합물

-78℃에서 질소 하에 THF (3ml) 중 4-옥소-1-페닐-2,3,7-트리아자-스피로[4.5]데스-1-엔-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 라세미 혼합물 (150 mg, 0.45 mmol)의 용액에 THF 중 1M LiHMDS 용액 (0.55 ml, 0.55 mol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30 분 동안 실온으로 가온되도록 한 후, -78℃로 다시 냉각시키고, THF 용액 (0.45 ml, 0.9 mmol) 중 2M MeI를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온으로 가온되도록 하였다. 혼합물을 EtOAc (10 ml)로 희석하고, 염수 (20 ml)로 세척하였다. 수성 상을 추가의 EtOAc (10 ml)로 추출하였다. 유기부를 합하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-50% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 4: 2-메틸-4-페닐-2,3,7-트리아자-스피로[4.5]데스-3-엔-1-온의 라세미 혼합물

DCM (5ml) 중 3-메틸-4-옥소-1-페닐-2,3,7-트리아자-스피로[4.5]데스-1-엔-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 라세미 혼합물 (110mg, 0.32mmol)의 용액에 TFA (0.5ml)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 1g SCX-2 카트리지에 적용하였다. 불순물을 1:1 DCM:MeOH에 이어서 1:1 DCM:MeOH 중 0.05M 암모니아로 용리시켰다. 생성물을 1:1 DCM:MeOH 중 1M 암모니아로 용리시키고, 깨끗한 분획을 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. 표제 화합물에 대한 추가 정제는 수행하지 않았다.

중간체 1G

3-메틸-1-페닐-1,3,7-트리아자-스피로[4.5]데칸-4-온의 라세미 혼합물

단계 1: 3-시아노-3-페닐아미노-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 라세미 혼합물

아세트산 (10ml) 중 3-옥소-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (2.5g, 12.55mol) 및 아닐린 (1.28g, 13.8mmol)을 포함하는 용액을 질소 하에 실온에서 60 분 동안 교반하였다. 트리메틸실릴 시아나이드 (1.57ml, 12.55mmol)를 조심스럽게 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 추가로 90 분 동안 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 분쇄된 얼음 (50ml) 및 진한 수산화암모늄 (30ml)을 함유하는 급속하게 교반되는 플라스크에 10 분 동안 캐뉼라삽입하였고, 침전물이 생성되었다. 이 용액을 추가로 15 분 동안 교반되도록 하여 어떠한 HCN도 남아있지 않음을 확실히 한 후 EtOAc (150ml)를 첨가하여 침전물을 용해시켰다. 이어서, 유기부를 분리하고, 수층을 추가의 EtOAc (50ml)로 세척하였다. 유기부를 합하고, 염수 (100 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 오일을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-50% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 2: 3-카르바모일-3-페닐아미노-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 라세미 혼합물

DMSO (10 ml) 중 3-시아노-3-페닐아미노-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (1.1 g, 3.65 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (76 mg, 0.54 mmol) 및 과산화수소 (수용액 중 35%) (0.73 ml, 8.4 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 추가분의 탄산칼륨 (76 mg, 0.54 mmol) 및 과산화수소 (수용액 중 35%) (0.73 ml, 8.4 mmol)를 첨가하고, 교반을 24 시간 동안 계속하였다. 혼합물을 EtOAc (10ml)로 희석하고, 염수 (30 ml)로 세척하였다. 유기부를 분리하고, 수층을 EtOAc (10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-50% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 3: 4-옥소-1-페닐-1,3,7-트리아자-스피로[4.5]데스-2-엔-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 라세미 혼합물

톨루엔 (10 ml) 중 3-카르바모일-3-페닐아미노-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (300 mg, 0.94 mmol)의 용액에 트리에틸 오르토포르메이트 (0.47 ml, 2.8 mmol) 및 아세트산 (0.5 ml, 8.7 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 중탄산나트륨의 포화 용액 (25 ml)으로 세척하였다. 유기부를 분리하고, 수층을 EtOAc (10 ml)로 추출하였다. 유기부를 합하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 오일을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-50% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 4: 4-옥소-1-페닐-1,3,7-트리아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 라세미 혼합물

메탄올 (3 ml) 중 4-옥소-1-페닐-1,3,7-트리아자-스피로[4.5]데스-2-엔-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (130 mg, 0.39 mmol)의 용액에 수소화붕소나트륨 (22 mg, 0.59 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc (5 ml)로 용해시키고, 중탄산나트륨의 포화 용액 (10 ml)으로 세척하였다. 수성 상을 추가로 EtOAc (5 ml)로 추출하였다. 유기부를 합하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 오일을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-50% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 5: 3-메틸-4-옥소-1-페닐-1,3,7-트리아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 라세미 혼합물

질소 하에 건조 THF (3ml) 중 4-옥소-1-페닐-1,3,7-트리아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (130mg, 0.45mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시키고, THF 중 1M LHMDS (0.55ml, 0.55mol)로 처리하였다. 반응물을 30 분 동안 실온으로 가온되도록 한 후, -78℃로 다시 냉각시키고, THF 용액 (0.45ml, 0.9mmol) 중 2M MeI를 첨가하였다. 반응물을 밤새 실온으로 가온되도록 하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (10ml)로 희석하고, 염수 (20ml)로 세척하였다. 수성 상을 EtOAc (10ml)로 추출하였다. 유기부를 합하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-50% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

단계 6: 3-메틸-1-페닐-1,3,7-트리아자-스피로[4.5]데칸-4-온의 라세미 혼합물

DCM (5 ml) 중 3-메틸-4-옥소-1-페닐-1,3,7-트리아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (70 mg, 0.2 mmol)의 용액에 TFA (0.5 ml, 6.5 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 1g SCX-2 카트리지에 적용하였다. 불순물을 1:1 DCM:MeOH에 이어서 1:1 DCM:MeOH 중 0.05 M 암모니아로 용리시켰다. 생성물을 1:1 DCM:MeOH 중 1M 암모니아로 용리시켰다. 깨끗한 분획을 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. 표제 화합물에 대한 추가 정제는 수행하지 않았다.

중간체 1H

2-메틸-4-피리딘-3-일-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온의 부분입체이성질체

단계 1: 3-(2-니트로-1-피리딘-3-일-에틸)-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르 (4종의 입체이성질체의 혼합물)

THF (15 ml) 중 에틸-1-BOC-3-피페리딘카르복실레이트 (1.53 g, 10.20 mmol)의 냉각된 (-78℃) 용액에 헵탄, THF, 및 에틸벤젠 중 2M LDA (5.34 ml, 10.69 mmol)를 적가하고, 생성된 혼합물을 -40℃로 1시간에 걸쳐 가온되도록 한 다음, -78℃로 다시 냉각시켰다. DMF (5 ml) 중 3-(2-니트로에테닐)피리딘 (1.53 g, 10.20 mmol)의 용액을 적가하고, 반응 혼합물을 실온으로 1시간에 걸쳐 가온되도록 하였다. 반응물을 NH₄Cl 포화 수용액 (50 ml)으로 켄칭하고, EtOAc (200 ml)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 0-10% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다.

단계 2: 3-(2-아미노-1-피리딘-3-일-에틸)-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르 (4종의 입체이성질체의 혼합물)

MeOH (60 ml) 중 3-(2-니트로-1-피리딘-3-일-에틸)-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르 (2.92 g, 7.17 mmol)의 용액에 염화니켈 6수화물 (1.70 g, 7.17 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 빙조에서 냉각시켰다. 수소화붕소나트륨 (1.08 g, 28.7 mmol)을 30 분에 걸쳐 조금씩 첨가하고, 생성된 현탁액을 0℃에서 추가로 30 분 동안 교반하였다. 반응물을 포화 NH₄Cl 용액 (30 ml)으로 켄칭하고, MeOH을 진공 하에 제거하였다. 수성 잔류물을 EtOAc (2x50 ml) 및 DCM (2x50 ml)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3: 1-옥소-4-피리딘-3-일-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 부분입체이성질체

톨루엔 (21 ml) 중 3-(2-아미노-1-피리딘-3-일-에틸)-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르 (2.5 g, 6.6 mmol)의 용액을 환류 하에 밤새 가열하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 0-10% MeOH로 용리시키면서 정제하여 개별 부분입체이성질체를 백색 고체로서 수득하였다:

부분입체이성질체 1 [라세미 혼합물], 제1 용리 화합물.

부분입체이성질체 2 [라세미 혼합물], 제2 용리 화합물.

단계 4: 2-메틸-1-옥소-4-피리딘-3-일-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 라세미 혼합물 (부분입체이성질체 1로부터의 것)

THF (7 ml) 중 1-옥소-4-피리딘-3-일-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (부분입체이성질체 1) (343 mg, 1.03 mmol)의 냉각된 (-60℃) 용액에 THF 중 1M LHMDS (1.34 ml, 1.34 mmol)를 적가하였다. -60℃에서 1시간 동안 교반한 후, THF (1 ml) 중 아이오도메탄 (0.084 ml, 1.34 mmol)을 첨가하였다. 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 3 시간 동안 교반하였다. 추가 부분의 THF 중 1M LHMDS (0.75 ml, 0.75 mmol)를 냉각된 (-60℃) 반응 혼합물에 첨가하였다. 30 분 후, THF (0.5 ml) 중 아이오도메탄 (0.042 ml, 0.67 mmol)을 첨가하고, 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 NH₄Cl 포화 용액 (5 ml)으로 켄칭하고, EtOAc (2x25 ml)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM 중 0-5% MeOH로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다.

단계 5: 2-메틸-4-피리딘-3-일-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온의 라세미 혼합물 (부분입체이성질체 1로부터의 것)

DCM (5 ml) 중 2-메틸-1-옥소-4-피리딘-3-일-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-7-카르복실산 tert-부틸 에스테르 [부분입체이성질체 1로부터의 것] (200 mg, 0.58 mmol)의 용액을 빙조를 사용하여 냉각시키고, TFA (0.70 ml, 8.68 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM (20 ml)으로 희석하고 2M NaOH 용액 (8 ml)으로 0℃에서 켄칭하였다. 유기 상을 분리하고, 염수 (5 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다.

중간체 1I

라세미 4-(4-플루오로페닐)-2-((5-메틸이속사졸-3-일)메틸)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온

단계 1: tert-부틸 4-(4-플루오로페닐)-2-((5-메틸이속사졸-3-일)메틸)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트.

tert-부틸 4-(4-플루오로페닐)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (200mg; 0.574mmol)를 DMF (5ml) 중에 가용화시키고, 0℃로 냉각시켰다. 미네랄 오일 중 60% 수소화나트륨 분산액 (46mg, 1.148mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 45 분 동안 교반하였다. 3-(브로모메틸)-5-메틸이속사졸 (101 mg; 0.574mmol)을 DMF (0.7 ml) 중에 가용화시키고, 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 30 분 동안 교반한 다음, 실온으로 3 시간 동안 가온하였다. 혼합물을 물로 켄칭하고, EtOAc로 추출하였다. 유기부를 합하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 생성된 오일을 실리카 상에서 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 50-100% TBME로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 4-(4-플루오로페닐)-2-((5-메틸이속사졸-3-일)메틸)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트를 수득하였다.

단계 2: 4-(4-플루오로페닐)-2-((5-메틸이속사졸-3-일)메틸)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온

tert-부틸 4-(4-플루오로페닐)-2-((5-메틸이속사졸-3-일)메틸)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (243.6mg; 0.549mmol)를 DCM (1ml) 중에 가용화시켰다. 트리플루오로아세트산 (0.86ml; 11.14mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20 분 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켰다. 오일을 메탄올 (5 ml)을 사용하여 용해시키고, 메탄올 중 2M NH₃ (50 ml)으로 용리시키면서 10g SCX-2 카트리지를 통과시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

중간체 1J

라세미 4-(4-플루오로페닐)-2-(옥사졸-2-일메틸)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온

단계 1: tert-부틸 4-(4-플루오로페닐)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (226 mg; 0.649mmol)를 DMF (6.5 ml) 중에 가용화시키고, 빙조에서 냉각시켰다. 60% NaH 분산액 (78mg; 1.95 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 50 분 동안 교반하였다. 2-(클로로메틸)옥사졸 (79 ul; 0.649 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 밤새 실온으로 가온되도록 하였다. 용액을 물로 켄칭하고, EtOAc로 추출하고; 유기부를 합하고, 건조 (MgSO₄)시킨 다음, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 크로마토그래피에 의해 DCM 중 암모니아를 함유하는 1-10% MeOH의 구배 용매계를 사용하여 정제하였다. 적절한 분획을 합하고, 농축시켜 tert-부틸 4-(4-플루오로페닐)-2-(옥사졸-2-일 메틸)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (148 mg)를 수득하였다.

단계 2: tert-부틸 4-(4-플루오로페닐)-2-(옥사졸-2-일 메틸)-1-옥소-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (148mg; 0.345mmol)를 1ml DCM 중에 가용화시켰다. TFA (670ul; 8.61mmol)를 첨가하고, 용액을 실온에서 교반하였다. 20 분 후, 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 최소량의 MeOH 중에 가용화시켰다. 이것을 10g SCX2 카트리지에 적용하고, 이를 메탄올에 이어서 MeOH 중 2M 암모니아의 3 x 칼럼 부피로 용리시켰다. 암모니아성 분획을 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

중간체 1K

라세미 4-페닐-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 히드로클로라이드

단계 1: tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트

0℃로 냉각된 THF (13 ml) 중 tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (1g, 3.03mmol)를 수소화나트륨 (오일 중 60%) (4.54mmol, 0.182g)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 5 분 동안 교반하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 다시 냉각시키고, THF (2ml) 중 1,1,1-트리플루오로에틸 트리클로로메탄술포네이트 (0.547 ml, 3.33 mmol)로 한 방울씩 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 9 시간 동안 교반하였다. 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc로 추출하였다. 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 크로마토그래피에 의해 0-20% 에틸 아세테이트/이소-헥산으로 용리시키면서 정제하였다. 관련 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트를 수득하였다.

단계 2: 라세미 4-페닐-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 히드로클로라이드

DCM (10ml) 중 tert-부틸 1-옥소-4-페닐-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (0.874g, 2.119mmol)를 1,4-디옥산 중 4M HCl (4.5 ml, 0.018 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 9 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여 표제 화합물을 수득하였다.

중간체 1L

라세미 2-메틸-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온.

단계 1: tert-부틸 1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트

빙냉시키면서 질소 하의 DCM 중 4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 히드로클로라이드 (1.00g, 3.56 mmol)의 혼합물에 트리에틸아민 (685 ul, 4.91 mmol)에 이어서 디-tert-부틸 디카르보네이트 (1.07 g, 4.91 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 교반되도록 두어 밤새 실온으로 가온되도록 하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 백색 왁스상 고체 (2.06 g)를 수득하였다. 조 물질을 실리카 크로마토그래피에 의해 0-100 % 이소-헥산 / EtOAc로 용리시키면서 정제하였다. 대부분의 친지성 분획을 감압 하에 농축시켜 백색 고체 (333 mg)를 수득하였다.

단계 2: tert-부틸 2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트

질소 하에 -60℃에서 건조 THF (6 ml) 중 tert-부틸 1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (333 mg, 0.967 mmol)의 교반 용액에 THF 중 LiHMDS 1M (1.26 ml, 1.257 mmol)을 적가하고, 혼합물을 -60℃에서 1시간 동안 교반되도록 하였다. 그 후, 건조 THF (1 ml) 중 아이오도메탄의 용액 (79 ul, 1.257 mmol)을 -60℃에서 적가하고, 반응 혼합물을 -60℃에서 실온으로 1시간에 걸쳐 가온되도록 하였다. 실온에서 추가 3 시간 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 (25 ml)에 첨가하고, EtOAc (3 x 25 ml)로 추출하고, 합한 유기부를 염수 (25 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 오렌지색 오일로서 수득하였다. 조 물질을 실리카 크로마토그래피에 의해 20-80% 이소-헥산 / EtOAc로 용리시키면서 정제하였다. 적절한 분획을 합하고, 농축시켜 생성물을 황색 고체 (270 mg)로서 수득하였다.

단계 3: 2-메틸-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-온

5℃에서 DCM (5 ml) 중 tert-부틸 2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-카르복실레이트 (270 mg, 0.753 mmol)의 교반 용액에 TFA (870 ul, 11.30 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 5-10℃에서 1시간 동안 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 2M NaOH (5 ml)에 첨가하고, DCM (3 x 5 ml)으로 추출하였다. 유기부를 합하고, 염수 (5 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 농축시켜 조 생성물을 백색 고체 (176 mg)로서 수득하였다.

중간체 2A

2-메틸-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-1-온

단계 1: rac-tert-부틸 1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-카르복실레이트

THF/n-헵탄/에틸벤젠 중 2M LDA의 용액 (10.7 ml, 21.37 mmol)을 -78℃로 냉각시키고, THF (5mL) 중 1-tert-부틸 3-에틸 피페리딘-1,3-디카르복실레이트 (5 g, 19.43 mmol)의 용액을 적가하였다. 혼합물을 40 분 동안 교반하고, 10 분 동안 0℃로 가온되도록 하고, 다시 -78℃로 냉각시켰다. N-벤질리덴-1,1,1-트리메틸실란아미드 (2.63 ml, 21.37 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 3 시간 동안 교반되도록 하였다. 반응물을 물 (5 ml)로 켄칭하고, 생성된 용액을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출하였다. 유기부를 분리하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 실리카 (220g 칼럼) 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 20-70% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 2: rac-tert-부틸 2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-카르복실레이트

DMF (20 ml) 중 rac-tert-부틸 1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-카르복실레이트 (1.18 g, 3.73 mmol)의 교반 용액을 0℃로 냉각시키고, NaH (194 mg, 4.85 mmol)에 이어서 아이오도메탄 (303 ul, 4.85 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 실온으로 가온되도록 하였다. 5 시간 후, 반응물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다;

단계 3: rac-2-메틸-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-1-온

DCM (20 ml) 중 tert-부틸 2-메틸-1-옥소-3-페닐-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-카르복실레이트 (1.2 g, 3.63 mmol) 및 TFA (1.399 ml, 18.16 mmol)를 포함하는 용액을 실온에서 4 일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 생성된 조 생성물을 메탄올 (5 ml)로 용해시키고, 10g SCX-2 카트리지에 통과시켰다. 생성물을 메탄올 중 2M NH₃ (70 ml)으로 용리시키고, 관련 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다;

중간체 2B

3-(4-플루오로-페닐)-2-메틸-2,6-디아자-스피로[3.5]노난-1-온

단계 1: rac-1-(4-플루오로-페닐)-3-옥소-2,6-디아자-스피로[3.5]노난-6-카르복실산 tert-부틸 에스테르

THF 중 1M LHMDS의 용액 (8.55 mL, 8.55 mmol)을 -78℃로 냉각시키고, 이 혼합물에 THF (25mL) 중 4-플루오로벤즈알데히드 (839 ul, 7.77 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 50 분 동안 교반되도록 하고, 10 분 동안 0℃로 가온되도록 하고, 다시 -78℃로 냉각시켰다. 다른 플라스크에서, 1M LHMDS의 용액 (8.55 mL, 8.55 mmol)을 -78℃로 냉각시키고, THF (25mL) 중 피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르 (2 g, 7.77 mmol)의 용액을 적가하였다. 혼합물을 40 분 동안 교반되도록 하고, 10 분 동안 0℃로 가온되도록 하고, 다시 -78℃로 냉각시켰다. 온도를 0℃ 미만으로 유지하면서 트리메틸실릴렌아민의 용액을 엔올레이트 용액에 적가하였다. 첨가가 완결된 후, 반응물을 0℃에서 3 시간 동안 교반되도록 하고, 밤새 실온으로 가온되도록 하였다. 반응물을 물 (5 ml)로 켄칭하고, 생성된 용액을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출하였다. 유기부를 분리하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 실리카 (80 g 칼럼) 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 이소-헥산 중 0-100% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 2: rac-1-(4-플루오로-페닐)-2-메틸-3-옥소-2,6-디아자-스피로[3.5]노난-6-카르복실산 tert-부틸 에스테르

THF (15 ml) 중 rac-1-(4-플루오로-페닐)-3-옥소-2,6-디아자-스피로[3.5]노난-6-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (850 mg, 2.54 mmol)의 교반 용액을 THF 중 1M LHMDS (3.30 ml, 3.30 mmol)로 처리한 다음, 아이오도메탄 (0.238 ml, 3.81 mmol)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 교반하였다. 4 시간 후, 반응물을 물 (30mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다;

단계 3: rac-3-(4-플루오로-페닐)-2-메틸-2,6-디아자-스피로[3.5]노난-1-온

DCM (15 ml) 중 rac-1-(4-플루오로-페닐)-2-메틸-3-옥소-2,6-디아자-스피로[3.5]노난-6-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (830 mg, 2.38 mmol) 및 TFA (1 ml, 12.98 mmol)를 포함하는 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 생성된 조 생성물을 에틸 아세테이트로 용해시키고, 중탄산나트륨의 포화 용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다;

중간체 3A

(R)-3-벤질옥시-2-(2-tert-부톡시카르보닐아미노-2-메틸프로피오닐아미노)-프로피온산

표제 화합물을 WO 98/58949 페이지 88에 기재된 절차에 따라 제조하였다.

중간체 3B

(R)-3-벤질옥시-2-[2-(tert-부톡시카르보닐-메틸-아미노)-2-메틸-프로피오닐아미노]-프로피온산

표제 화합물을 WO99/08699 페이지 379에 기재된 절차에 따라 제조하였다.

중간체 3C

(R)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)-3-(1H-인돌-3-일)프로판산

표제 화합물을 WO 98/58949 페이지 70에 기재된 절차에 따라 제조하였다.

중간체 3D

(R)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)-3-(1-메틸-1H-인돌-3-일)프로판산

표제 화합물을 WO 96/38471 페이지 117에 기재된 절차에 따라 제조하였다.

중간체 3E

(R)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)-4-페닐부탄산

THF (16 ml)/물 (4 ml) 중 tert-부틸 1-(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (1 g, 3.52 mmol) (EP1486498A1 페이지 20에 기재된 절차에 따라 제조됨) 및 H-D-Homophe-OH (0.630 g, 3.52 mmol)를 포함하는 혼합물을 트리에틸아민 (1.471 ml, 10.55 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 9 시간 동안 교반하였다. THF를 진공 하에 제거하였다. 수용액을 추가로 물로 희석하고, 1M HCl을 사용하여 pH를 pH 2-3으로 조정하였다. 생성된 수성 상을 EtOAc로 추출하였다. 유기부를 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

중간체 3F

(R)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)-5-페닐펜탄산

표제 화합물을 WO/03087036 페이지 11의 실시예 6에 기재된 절차에 따라 제조하였다.

중간체 3G

(2R,3S)-3-(벤질옥시)-2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)부탄산

THF (40 ml)/물 (10 ml) 중 tert-부틸 1-(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)-2-메틸-1-옥소프로판-2-일카르바메이트 (1 g, 3.33 mmol) (EP1486498A1 페이지 20에 기재된 절차에 따라 제조됨) 및 (2R,3S)-2-아미노-3-(벤질옥시)부탄산 (0.697 g, 3.33 mmol)을 포함하는 혼합물을 TEA (1.392 ml, 9.99 mmol)로 처리하고, 50℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시키고, EtOAc (20 ml)를 첨가하였다. pH를 1M HCl을 사용하여 pH2로 조정하였다. 유기부를 분리하고, 수성 상을 EtOAc (30 ml)로 역추출하였다. 합한 유기부를 염수의 포화 용액 (50 ml)으로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM 중에 용해시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

중간체 3H

(R)-2-(2-tert-부톡시카르보닐아미노-2-메틸-프로피오닐아미노)-3-(4-메틸-벤질옥시)-프로피온산-벤질옥시)-프로피온산

1,4-디옥산 (6 ml) 중 (R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(4-메틸-벤질옥시)-프로피온산 (중간체 4B) (1.20 g, 3.88 mmol)의 용액을 물/빙조를 사용하여 10℃로 냉각시키고, 진한 황산 (0.41 ml, 7.76 mmol)을 적가하였다. 10℃에서 3 시간 동안 교반한 후, 혼합물을 TEA (2.97 ml, 21.33 mmol), 물 (2 ml) 및 2-tert-부톡시카르보닐아미노-2-메틸-프로피온산 2,5-디옥소-피롤리딘-1-일 에스테르 (EP1486498A1 페이지 20에 기재된 합성) (1.16 g, 3.88 mmol)로 순차적으로 처리하였다. 생성된 현탁액을 50℃로 가열하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 ml)와 물 (10 ml) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 유기 층을 추가로 2M NaOH 용액 (2 x 5 ml)으로 추출하였다. 합한 수성 층을 5% 시트르산 용액을 사용하여 산성화시키고, EtOAc (2 x 100 ml)로 역추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다.

중간체 3I

(R)-2-(2-tert-부톡시카르보닐아미노-2-메틸-프로피오닐아미노)-3-(4-클로로-벤질옥시)-프로피온산-벤질옥시)-프로피온산

표제 화합물을 (R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(4-클로로-벤질옥시)-프로피온산 (중간체 4C)으로부터 출발하여 중간체 3G에 대해 기재된 일반적 절차에 따라 제조하였다.

중간체 3J

(R)-2-(2-tert-부톡시카르보닐아미노-2-메틸-프로피오닐아미노)-3-시클로헥실메톡시-프로피온산

이소프로판올 (12 ml) 중 알루미나 상 5% 로듐 (80 mg) 및 (R)-3-벤질옥시-2-(2-tert-부톡시 카르보닐아미노-2-메틸-프로피오닐아미노)-프로피온산 (500 mg, 1.31 mmol) (중간체 3A)의 혼합물을 실온에서 수소 분위기 하에 밤새 교반하였다. 완결을 확실하게 하기 위해, 추가의 촉매 120 mg을 첨가하고, 반응물을 수소 분위기 하에 실온에서 추가로 5 시간 동안 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 셀라이트® (필터 물질)를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다.

중간체 3K

2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)-4-(테트라히드로-2H-피란-4-일)부탄산

THF (27 ml)/ 물 (6.7 ml) 중 메틸 2-아미노-4-(테트라히드로-2H-피란-4-일)부타노에이트 히드로클로라이드 (500 mg, 2.103 mmol)의 교반 용액에 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로파노에이트 (632 mg, 2.103 mmol)에 이어서 TEA (1.173 ml, 8.41 mmol)를 첨가하였다. 용액을 50℃로 가열하고, 6 시간 동안 교반하였다. 용매를 농축시키고, 잔류물을 EtOAc와 5% 시트르산 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 황색 검 (700 mg)을 수득하였다. 0℃로 냉각시킨 MeOH (10 ml)/ 물 (1.5 ml) 중의 검에 LiOH.H₂O (114 mg, 2.72 mmol)를 조금씩 첨가하고, 반응물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 EtOAc (5 ml)와 물 (10 ml) 사이에 분배하였다. 수성 층을 5% 시트르산 (10 ml, pH 3)을 사용하여 산성화시키고, EtOAc (2 x 25 ml)로 추출한 다음, 분리하고, 염수로 세척하였다. 이것을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 2-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로판아미도)-4-(테트라히드로-2H-피란-4-일)부탄산을 수득하였다.

중간체 4A

(R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(4-플루오로-벤질옥시)-프로피온산

DMF (25 ml) 중 N-BOC-D-세린 (2.00 g, 9.75 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 0℃로 냉각시키고, 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60%) (0.82 g, 20.47 mmol)을 15 분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 0℃에서 30 분 동안 교반한 후, DMF (5 ml) 중 4-플루오로벤질 브로마이드 (1.82 g, 9.75 mmol)를 첨가하였다. 빙조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 ml)와 물 (50 ml) 사이에 분배하였다. 수성 상을 분리하고, DCM (2 x 50 ml)으로 세척하였다. 유기 세척물을 폐기하였다. 수성 층을 5% 시트르산 수용액으로 산성화시키고, DCM (2 x 100 ml)으로 역추출하였다. 합한 유기부를 염수 (50 ml)로 세척하고, 건조 (MgSO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 연황색 오일로서 수득하였다.

하기 화합물, 즉 중간체 4C-4G를 적절한 출발 화합물에 대해 중간체 4A와 유사하게 제조하였다.

중간체 4B

(R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(4-메틸-벤질옥시)-프로피온산

표제 화합물을 N-BOC-D-세린 및 4-메틸벤질 브로마이드로부터 출발하여 연황색 오일로서 수득하였다.

중간체 4C

(R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(4-클로로-벤질옥시)-프로피온산

표제 화합물을 N-BOC-D-세린 및 4-클로로벤질 브로마이드로부터 출발하여 연황색 오일로서 수득하였다.

중간체 4D

(R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(4-메톡시-벤질옥시)-프로피온산

표제 화합물을 N-BOC-D-세린 및 4-메톡시벤질 브로마이드로부터 출발하여 연황색 오일로서 수득하였다.

중간체 4E

(R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(3,4-디플루오로-벤질옥시)-프로피온산

표제 화합물을 N-BOC-D-세린 및 3,4-디플루오로벤질 브로마이드로부터 출발하여 연황색 오일로서 수득하였다.

중간체 4F

(R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(2,4-디플루오로-벤질옥시)-프로피온산

표제 화합물을 N-BOC-D-세린 및 2,4-디플루오로벤질 브로마이드로부터 출발하여 연황색 오일로서 수득하였다.

중간체 4G

(R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(3-메톡시-벤질옥시)-프로피온산

표제 화합물을 N-BOC-D-세린 및 3-메톡시벤질 브로마이드로부터 출발하여 연황색 오일로서 수득하였다.

중간체 4H

(R)-2-tert-부톡시카르보닐아미노-3-(2-메틸-벤질옥시)-프로피온산

표제 화합물을 N-BOC-D-세린 및 2-메틸벤질 브로마이드로부터 출발하여 연황색 오일로서 수득하였다.

중간체 4I

(R)-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-(3-메틸벤질옥시)프로판산

표제 화합물을 N-BOC-D-세린 및 3-메틸벤질 브로마이드로부터 출발하여 연황색 오일로서 수득하였다.

중간체 4J

(R)-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-(피리딘-2-일메톡시)프로판산

표제 화합물을 문헌 [Bioorganic & Medicinal Chemistry (2005), 13(24), 6748-6762], 실시예 10a, 페이지 6753 (방법 A) 및 페이지 6758에 기재된 절차에 따라 제조하였다.

중간체 4K

(R)-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-(피리딘-3-일메톡시)프로판산

표제 화합물을 문헌 [Bioorganic & Medicinal Chemistry (2005), 13(24), 6748-6762], 실시예 10b, 페이지 6753 (방법 A) 및 페이지 6758에 기재된 절차에 따라 제조하였다.

중간체 5A

7-((R)-2-아미노-3-벤질옥시-프로피오닐)-2-메틸-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데칸-1-온

표제 화합물을 상업적으로 입수가능한 아미노산 및 스피로피페리딘으로부터 제조하였다.

생물학적 데이터

그렐린 수용체에 대한 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물의 친화도를 하기 검정에 의해 결정하였다. 제1, 제2 또는 제3 측면에 정의된 바와 같은 화합물을 본원에 기재된 바와 같은 형태로 사용하였다. 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물은 반드시 동일한 배치로부터의 것은 아니었다. 하나의 배치로 제조된 시험 화합물은 검정을 위해 다른 배치(들)와 조합될 수 있었다. 시험된 모든 화합물은 1회 이상 시험하였다.

세포 배양

인간 재조합 그렐린 수용체 (GHS-R1a)를 발현하는 차이니즈 햄스터 난소 (CHO-K1) 세포를 유로스크린(Euroscreen) (ES-410-C)으로부터 구입하였고, 글루타민을 함유하고 1% 열 불활성화 소 태아 혈청 (FCS), 100U/ml 페니실린, 100mg/l 스트렙토마이신 및 0.8g/l 게네티신으로 보충된 울트라CHO(UltraCHO) 배지 중에서 번식시켰다. 세포를 1:10 희석으로 1주에 2회 계대-배양하였다. 계대배양을 위해, 세포를 칼슘 및 마그네슘을 함유하지 않는 1x DPBS로 세척하고, 0.05% 트립신/EDTA로 10분 동안 트립신처리하고, 세포 배양 배지 중에 재현탁시켰다.

CHO TREx 세포를 인비트로젠(Invitrogen)으로부터 구입하고, 재조합 래트 GHS-R1a를 발현하도록 유도성 방식으로 (발현 유도제로서 테트라시클린 사용) 안정하게 형질전환시켰다. 세포를 글루타민, 10% 열 불활성화 FCS, 100U/ml 페니실린, 100mg/l 스트렙토마이신 및 10μg/ml 블라스티시딘을 함유하는 RPMI 1640 배지 중에서 배양하였다. 세포를 1:10 내지 1:30 희석으로 2 내지 3일마다 계대-배양하였다. 계대배양을 위해, 세포를 칼슘 및 마그네슘을 함유하지 않는 1x DPBS로 세척하고, 0.05% 트립신/EDTA로 2-3분 동안 트립신처리하고, FCS 함유 배지 중에 재현탁시켰다. 용액 중 세포를 원심분리 (900rpm, 3분)에 의해 농축시키고, DPBS로 세척하고, 다시 농축시키고, 세포 배양 배지 중에서 최종적으로 희석하였다. 래트 GHS-R1a의 발현을 실험 전 18-24시간 동안 테트라시클린 (각각 칼슘 및 cAMP 검정에 대해 1 및 3μg/ml)으로 유도하였다.

cAMP 검정

균질 시간-분해 형광 (HTRF) cAMP 동적 2 키트 (시스바이오 인터내셔널(Cisbio International), 프랑스)를 하기와 같이 사용하였다. CHO-hGHS-R1a 또는 CHO-rGHS-R1a 세포를 그라이너(Greiner) 백색 384-웰 고부피 플레이트 내 25μl 부피의 배양 배지 중에서 10,000개 세포/웰 (400,000개 세포/ml)로 시딩하고, 37℃/5% CO₂에서 밤새 (18-24시간) 인큐베이션하였다. 이어서, 배지를 제거하고, 6μl 검정 완충제 [HBSS, 10mM Hepes, 0.2% (w/v) BSA, 1.7mM IBMX, (pH7.4)]를 웰에 첨가하였다. 30μM까지의 용량 반응을 생성하기 위해, 100% (v/v) DMSO 중 10mM 화합물 원액을 우선 50% (v/v) DMSO 중에서 희석하고, 이어서 검정 완충제로 추가로 희석하였다. 이어서, 4μl의 2.5x 화합물 (최대 농도로서 30μM으로부터의 검정 완충제 중 9 포인트 로그 연속 희석으로서의 용량 반응)을 각 웰에 첨가하여 0.8% (v/v)의 최종 DMSO 검정 농도를 달성하였다. 0.1μM의 포르스콜린을 양성 대조군으로서 첨가하였다. 37℃/5% CO₂에서의 30분 (rGHS-R1a 세포주) 또는 60분 (hGHS-R1a 세포주) 인큐베이션 후, 5μl의 cAMP-d2 및 5μl의 항-cAMP 항체-크립테이트 (둘 다 용해 완충제 중에서 제조됨)를 플레이트에 첨가하고, 이어서 실온에서 1시간 인큐베이션하였다. 이 시간 동안, 세포에 의해 생성된 cAMP는 항-cAMP 항체-크립테이트 분자에 대해 cAMP-d2와 경쟁하였다. 이어서, 플레이트를 2개의 상이한 방출 파장 (620 및 650 nm)에서 페라스타르(Pherastar) 기기 (BMG, 독일) 상에서 판독하였다. 세포에 의해 생성된 내인성 cAMP의 수준의 증가는 FRET 형광 신호의 감소로 이어질 수 있으며, 그 반대도 가능하다. 임의적 형광 비 (665/620)의 변화로 제공된 값을 표준 곡선을 사용하여 cAMP 농도로 전환시켰으며, 이를 위한 시약은 키트로 공급되었다. 효능제의 EC₅₀ 값은 프리즘 5 소프트웨어 (그래프패드(GraphPad), USA)의 비선형 로지스틱 함수를 사용하여 계산하였다. Emax는 그렐린 반응 (이는 100%로 규정됨)에 대한 상대 값으로서 나타내었다.

칼슘 검정

세포를 희석하여 1x10⁶개 세포/ml를 달성하고, 384-웰 흑색 투명한 바닥 셀바인드(CellBind) 플레이트에 25000개 세포/웰 (25ul)로 시딩하고, 37℃/5% CO₂에서 밤새 인큐베이션하였다. 세포는 높은 품질의 검정을 보장하기 위해 검정 당일에 85-90% 전면성장률 (현미경 하에 확인)을 가질 것으로 예상되었다. 배지를 수동으로 제거하고, 프로베네시드 및 세척 염료가 없는 플루오(Fluo)-4 (칼슘 지시자, 인비트로젠 F36206)를 함유하는 40μl의 로딩 용액을 각 웰에 첨가하였다. 37℃에서 30분에 이어서 실온에서 추가의 30분 후, cpd를 웰에 첨가하였다. 30μM까지의 용량 반응을 생성하기 위해, 100% (v/v) DMSO 중 10mM 화합물 원액을 우선 50% (v/v) DMSO 중에서 희석하였다. 이어서, 완전 대수 용량 반응 (8 포인트)에서 목적하는 연속 희석을 검정 완충제 [1xHBSS, 20mM Hepes, 0.1% (w/v) BSA] 중에서 수행하여 2.5% (v/v) DMSO 및 5X 최종 화합물 농도를 수득하였다. 최종 검정 DMSO 농도는 0.5% (v/v)였다. 세포를 플루오-4 함유 용액으로 로딩한 후, 플레이트를 셀룩스(CellLux) 기기 (퍼킨 엘머(Perkin Elmer)) 상에서 판독하였다. 10μl의 5X 화합물을 첨가하고, 17초에 화합물을 첨가한 후 60초 동안 플레이트를 판독하도록 설정된 프로토콜을 사용하였다. 형광 여기는 494nm에서 발생하였고, 방출은 516nm에서 발생하였다. 효능제의 EC₅₀ 값은 프리즘 5 소프트웨어 (그래프패드, USA)의 비선형 로지스틱 함수를 사용하여 배경에 대해 자극 퍼센트 [(Max-Min)/Min]를 피팅함으로써 계산하였다. Emax는 MK-0677에 의해 유도된 Emax (100%로서 규정됨)의 값에 대한 상대 값으로서 나타내었는데, 이는 이 화합물이 그렐린과 동일한 Emax를 나타내기 때문이다.

하기 표 4는 상기 검정에서 결정된 바와 같은, 본원에 개시된 화합물 중 일부의 EC₅₀ 값을 열거하고 있다.

<표 4>

래트 안저 수축성 검정

수컷 스프라그 돌리 래트 (180-250g)를 경추 탈구에 의해 선별하고, 안저를 제거하였다. 각각의 안저를 크렙스 헨셀라이트(Krebs Henseleit) (KH) 완충제 침지된 해부 접시 상에 놓고, 긴 곡률을 따라 절단하여 평탄화된 시트를 형성하고, 그의 각각의 코너에 핀으로 고정시켰다. 4개의 인접한 세로축 스트립 (10 x 3mm)을 절단하고, 점막을 예리한 절개에 의해 제거하였다. 각각의 근육 스트립을 37℃에서 산소화된 KH를 함유하는 10ml 기관조에 올려놓았다. 각각의 스트립을 등척성 힘 변환기에 연결하고, 초기에는 5g 중량을 사용하여 보정하였다. 신호 (g 장력)를 증폭시키고, 반응을 랩차트(Labchart) 소프트웨어 (버전 5.0)를 실행하는 컴퓨터에 연결된 파워랩(Powerlab) 데이터 캡쳐 시스템에 의해 기록하였다. 조직을 30 분의 평형 기간 동안 또는 기준선 장력이 안정화될 때까지 1g 장력 하에 두었다. 이어서, 카르바콜 (CCh, 100nM)을 투여하여 각각의 표본의 최대 수축 반응을 확립하였다. 조직을 철저히 세척하고, 재평형화를 위해 30 분 동안 방치하였다. 그 다음, 근육 스트립에 전기장 자극 (EFS)을 가하였다. 60 초마다 2 초 동안 12V, 5Hz, 0.1msec 펄스 폭의 최대 EFS 펄스 열을 지속적인 전기적-자극된 위상 수축이 기록될 때까지 가하였다. 이어서, 지속적인 준최대 (EC₅₀ _-75) EFS 반응이 관찰될 때까지 전압을 1V 증분으로 감소시켰다. 그렐린 (100nM)을 투여하고, 최대 반응을 얻을 때까지 방치하였다. 이어서, 조직을 철저히 세척하고, 30분 동안 방치하였다. 일단 EFS-유도된 수축이 재안정화되면, 각각의 시험 화합물의 점진적 첨가량 (10nM-10μM)을 투여하였다. 기준선을 뺀 EFS-유도된 수축의 피크를 결정함으로써 개별 반응을 계산하였다. 이어서, 그렐린의 존재 하에서의 EFS 반응의 최대 증가를 계산하고 (100%로서 규정됨), 화합물 유도된 효과를 그렐린 반응에 대하여 나타냈다. 화합물에 대한 평균 EC50 값을 3종 이상의 상이한 동물로부터의 위 표본에 대해 얻은 데이터로부터 생성하였다.

하기 표 5는 상기 래트 안저 수축성 검정에서 결정된 바와 같은, 본원에 개시된 화합물 중 일부의 EC₅₀ 값을 열거하고 있다.

<표 5>

하기는 본 발명의 추가 실시양태이다.

실시양태 1: 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

<화학식 I>

상기 식에서

은 단일 결합 또는 이중 결합이고;

X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 (CH)이거나; 또는

X¹은 (CR^x1H)_n이고, X²는 N이거나; 또는

X¹은 NR^x1이고, X²는 (CH)이거나; 또는

X¹은 NR^x1이고, X²는 N이거나; 또는

n은 0 또는 1이고;

R^x1은 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

m은 1이고, p는 0이거나; 또는

m은 1이고, p는 1이거나; 또는

m은 2이고, p는 1이고;

Y는 NR¹ 또는 O이고;

R¹은 수소, C₁ _-6 알킬, -C₁ _- ₄알킬C(O)NR^1aR^1b, -C₁ _- ₄알킬C(O)OC_1- ₄알킬, -C_1-4알킬C(O)OC_1- ₄할로알킬, C₁ _- ₆할로알킬, C₃ _- ₆시클로알킬, -C₁ _- ₄알킬-5-6원 헤테로아릴, 히드록시C₁ _-6 알킬, C₁ _-6 알콕시 및 C₁ _-4 알콕시C₁ _-4 알킬로부터 선택되고;

R^1a 및 R^1b는 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬 및 C₁ _- ₆할로알킬로부터 선택되거나; 또는 R^1a 및 R^1b는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 0, 1 또는 2개의 추가의 헤테로원자를 함유하는 4-6원 헤테로시클릭 고리를 형성하고;

R^2a는

(i) -A-페닐;

(ii) -A-5-6원 헤테로아릴;

(iii) -A-4-6원 헤테로시클릴;

(iv) -A-C₅ _- ₆시클로알킬;

(v) -D-8-10원 융합된 비시클릭 고리계

로부터 선택되고;

D는 결합, -O- 또는 -(CR^D1R^D2)-이고;

R^2b는 수소 또는 C₁ _- ₄알킬이고;

실시양태 2: 실시양태 1에 있어서, Y가 NR¹인 화합물.

실시양태 3: 실시양태 1 또는 2에 있어서, Y가 NR¹이고, R¹이 수소, C₁ _- ₆알킬, C_1-6할로알킬, -C₁ _- ₄알킬C(O)NR^1aR^1b, -C₁ _- ₄알킬C(O)OC_1- ₄알킬 및 -C₁ _- ₄알킬-5-6원 헤테로아릴로부터 선택되고, 여기서 5-6원 헤테로아릴이 비치환되거나 또는 할로겐 및 C₁ _-6알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환되고, 예를 들어 R¹이 수소, C₁ _- ₆알킬, C₁ _-6 할로알킬, -C₁ _- ₄알킬C(O)NR^1aR^1b 및 -C₁ _- ₄알킬-5-6원 헤테로아릴로부터 선택되고, 여기서 5-6원 헤테로아릴이 비치환되거나 또는 할로겐 및 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된 것인 화합물.

실시양태 4: 실시양태 3에 있어서, R¹이 수소, 메틸, 이소프로필, 에틸, 2,2-디메틸-프로필, 이소부틸, 2,2,2-트리플루오로에틸, 메틸이속사졸릴메틸, 옥사졸릴메틸, -(CH₂)C(O)N(CH₃)₂, -(CH₂)C(O)O(CH₂)(CH₃) 및 -(CH₂)C(O)O(CH₃)으로부터 선택되고, 예를 들어 R¹이 수소, 메틸, 이소프로필, 에틸, 2,2-디메틸-프로필, 이소부틸, 2,2,2-트리플루오로에틸, 메틸이속사졸릴메틸, 옥사졸릴메틸 및 -(CH₂)C(O)N(CH₃)₂, 예컨대 수소 또는 메틸로부터 선택된 것인 화합물.

실시양태 5: 실시양태 1 내지 4 중 어느 한 실시양태에 있어서, X¹이 (CR^x1H)_n 또는 N이고, 예를 들어 X¹이 (CR^x1H)_n인 화합물.

실시양태 6: 실시양태 1 내지 5 중 어느 한 실시양태에 있어서, X¹이 (CR^x1H)_n이고, n이 0 또는 1이고, 예를 들어 n이 1인 화합물.

실시양태 7: 실시양태 6에 있어서, R^x1이 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택된 것인 화합물.

실시양태 8: 실시양태 7에 있어서, R^x1이 수소인 화합물.

실시양태 9: 실시양태 1 내지 8 중 어느 한 실시양태에 있어서, R⁵가 페닐 및 5-6원 헤테로아릴로부터 선택되고, 상기 페닐 또는 5-6원 헤테로아릴이 비치환되거나 또는 할로겐 및 C_1-6알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된 것인 화합물.

실시양태 10: 실시양태 9에 있어서, R⁵가 페닐 및 피리디닐로부터 선택되고, 상기 페닐 또는 피리디닐이 비치환되거나 또는 할로겐 및 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된 것인 화합물.

실시양태 11: 실시양태 10에 있어서, R⁵가 페닐 및 피리디닐로부터 선택되고, 상기 페닐 또는 피리디닐이 비치환되거나 또는 플루오로, 클로로 및 메틸로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개, 예를 들어 1 또는 2개의 치환기로 치환된 것인 화합물.

실시양태 12: 실시양태 11에 있어서, R⁵가 페닐이고, 상기 페닐이 비치환되거나 또는 플루오로, 클로로 및 메틸, 예컨대 4-플루오로, 4-클로로, 2-메틸, 4-메틸, 3,4-디플루오로, 3,3-디플루오로로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개, 예를 들어 1 또는 2개의 치환기로 치환되고, 특히 R⁵가 비치환된 페닐 또는 4-플루오로페닐 또는 4-메틸페닐인 화합물.

실시양태 13: 실시양태 1 내지 12 중 어느 한 실시양태에 있어서, 하기 화학식 Ia의 화합물인 화합물.

<화학식 Ia>

실시양태 14: 실시양태 1 내지 12 중 어느 한 실시양태에 있어서, 하기 화학식 Ib의 화합물인 화합물.

<화학식 Ib>

실시양태 15: 실시양태 1 내지 12 중 어느 한 실시양태에 있어서, 하기 화학식 Ic의 화합물인 화합물.

<화학식 Ic>

실시양태 16: 실시양태 1 내지 12 중 어느 한 실시양태에 있어서, 하기 화학식 Id의 화합물인 화합물.

<화학식 Id>

실시양태 17: 실시양태 1 내지 12 중 어느 한 실시양태에 있어서, 하기 화학식 Ie의 화합물인 화합물.

<화학식 Ie>

실시양태 18: 실시양태 1 내지 12 중 어느 한 실시양태에 있어서, 하기 화학식 If의 화합물인 화합물.

<화학식 If>

실시양태 19: 실시양태 1 내지 12 중 어느 한 실시양태에 있어서, 하기 화학식 Ig의 화합물인 화합물.

<화학식 Ig>

실시양태 20: 실시양태 1 내지 12 중 어느 한 실시양태에 있어서, 하기 화학식 Ih의 화합물인 화합물.

<화학식 Ih>

실시양태 21: 실시양태 1 내지 20 중 어느 한 실시양태에 있어서, R^2a가 -A-페닐, -A-5-6원 헤테로아릴, -A-4-6원 헤테로시클릴, -A-C₅ _- ₆시클로알킬 및 -D-8-10원 융합된 비시클릭 고리계로부터 선택되고, 상기 페닐, 5-6원 헤테로아릴, 4-6원 헤테로시클릴, C₅ _- ₆시클로알킬 및 8-10원 융합된 비시클릭 고리계가 비치환되거나 또는 C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된 것인 화합물.

실시양태 22: 실시양태 21에 있어서, R^2a가 -A-페닐, -A-피리딜, -A-테트라히드로피라닐, -A-시클로헥실, -D-디히드로인데닐 및 -D-인돌릴로부터 선택되고, 상기 페닐, 피리딜, 테트라히드로피라닐, 시클로헥실, 디히드로인데닐 및 인돌릴 기가 비치환되거나 또는 C₁ _- ₆알킬, C_1-6알콕시 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된 것인 화합물.

실시양태 23: 실시양태 1 내지 22 중 어느 한 실시양태에 있어서, R^2a가 -A-페닐, -A-파라-메틸페닐, -A-오르토-메틸페닐, -A-메타-메틸페닐, -A-메타-메톡시페닐, -A-파라-메톡시페닐, -A-파라-클로로페닐, -A-파라-플루오로페닐, -A-오르토,파라-디플루오로페닐, -A-메타,파라-디플루오로페닐, -A-시클로헥실, -A-테트라히드로-2H-피란-4-일, -A-피리딘-2-일, -A-피리딘-3-일, -D-디히드로인데닐, -D-1H-인돌-3-일 또는 -D-1-메틸-1H-인돌-3-일인 화합물.

실시양태 24: 실시양태 23에 있어서, R^2a가 -A-페닐인 화합물.

실시양태 25: 실시양태 1 내지 24 중 어느 한 실시양태에 있어서, -A-가 -(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)(CR^A1R^A2)-, -O-(CR^A1R^A2)-, -(CR^A1R^A2)-O-, -S-(CR^A1R^A2)-, 및 -(CR^A1)=(CR^A1)-로부터 선택되고, R^A1, R^A2가 둘 다 수소이고, 특히 -A-가 -O-CH₂인 화합물.

실시양태 26: 실시양태 1 내지 25 중 어느 한 실시양태에 있어서, -D-가 결합인 화합물.

실시양태 27: 실시양태 1 내지 26 중 어느 한 실시양태에 있어서, R^2b가 수소 또는 메틸인 화합물.

실시양태 28: 실시양태 1 내지 27 중 어느 한 실시양태에 있어서, R^2b가 수소인 화합물.

실시양태 29: 실시양태 1 내지 28 중 어느 한 실시양태에 있어서, R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소 및 C₁ _- ₆알킬, 예컨대 메틸로부터 선택되고, 특히 R³ 및 R⁴가 둘 다 수소인 화합물.

실시양태 30: 실시양태 1 내지 29 중 어느 한 실시양태에 있어서, R⁶ 및 R⁷이 독립적으로 수소, C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆할로알킬 및 C₁ _- ₆히드록시알킬, 예컨대 C₁ _- ₆알킬 및 C₁ _- ₆히드록시알킬로부터 선택된 것인 화합물.

실시양태 31: 실시양태 30에 있어서, R⁶ 및 R⁷이 둘 다 메틸인 화합물.

실시양태 32: 실시양태 1 내지 31 중 어느 한 실시양태에 있어서, m이 1이고, p가 1인, 특히 화학식 I의 화합물이 하기 화학식의 화합물인 화합물.

상기 식에서 X¹, X², Y, R^2a, R^2b, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ 및

은 실시양태 1 내지 31 중 어느 한 실시양태에 따라 정의된 바와 같다.

실시양태 33: 실시양태 32에 있어서, 화학식 I의 화합물이 하기 화학식의 화합물인 화합물.

상기 식에서 X¹, X², Y, R^2a, R^2b, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ 및

실시양태 34: 실시양태 1에 있어서,

또는 그의 제약상 허용되는 염

으로부터 선택된 것인 화합물.

실시양태 35: 치료 유효량의 실시양태 1 내지 34 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물 또는 염 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.

실시양태 36: 치료 유효량의 실시양태 1 내지 34 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물 또는 염 및 하나 이상의 치료 활성 공-작용제를 포함하는 조합물.

실시양태 37: 실시양태 36에 있어서, 제약 조합물인 조합물.

실시양태 38: 대상체에게 치료 유효량의 실시양태 1 내지 34 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 그렐린 수용체 활성을 조절하는 방법.

실시양태 39: 대상체에게 치료 유효량의 실시양태 1 내지 34 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 그렐린 수용체에 의해 매개되는 대상체에서의 장애 또는 질환을 치료하는 방법.

실시양태 40: 실시양태 38 또는 39에 있어서, 상기 장애 또는 질환이 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양 및 크론병, 및 구토로부터 선택되고, 대상체에게 치료 유효량의 본원에 정의된 바와 같은 제1, 제2 또는 제3 측면의 화합물을 투여하는 단계를 포함하는 것인 방법.

실시양태 41: 실시양태 1 내지 34 중 어느 한 실시양태에 있어서, 의약으로서 사용하기 위한 화합물.

실시양태 42: 실시양태 1 내지 34 중 어느 한 실시양태에 있어서, 그렐린 수용체에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 화합물.

실시양태 43: 실시양태 42에 있어서, 질환 또는 장애의 치료가 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양 및 크론병, 및 구토로부터 선택된 것인 화합물.

실시양태 44: 그렐린 수용체에 의해 매개되는 장애 또는 질환의 치료를 위한 의약의 제조에서의 실시양태 1 내지 34 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물의 용도.

실시양태 45: 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양 및 크론병, 및 구토로부터 선택된 장애 또는 질환의 치료를 위한 의약의 제조에서의 실시양태 1 내지 34 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물의 용도.

실시양태 46: 실시양태 1 내지 34 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물을 활성 성분으로서 포함하는, 그렐린 수용체에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료하기 위한 제약 조성물.

실시양태 47: 실시양태 46에 있어서, 상기 질환 또는 장애가 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양 및 크론병, 및 구토로부터 선택된 것인 제약 조성물.

실시양태 48: 실시양태 46 또는 47에 있어서, 상기 화합물이 실시양태 34의 화합물로부터 선택된 것인 제약 조성물.

실시양태 49: 하기 화학식 II의 화합물을 적합한 온도, 예컨대 실온에서 적합한 용매, 예컨대 DMF 중에서 적합한 아미드 커플링 시약, 예를 들어 ®T3P, 및 적합한 염기, 예컨대 DIPEA의 존재 하에 하기 화학식 III의 화합물과 반응시킨 다음, 보호기 P¹을 제거하여 화학식 I의 화합물을 수득하는 것을 포함하는, 실시양태 1의 정의에 따른 화학식 I의 화합물 또는 그의 염을 제조하는 방법.

<화학식 I>

상기 식에서 화학식 I의 화합물은 실시양태 1에 정의된 바와 같고,

<화학식 II>

상기 식에서 R^2a, R^2b, R⁶, R⁷은 실시양태 1에서와 같이 정의되고, P¹은 적합한 보호 기, 예를 들어 BOC (tert-부톡시 카르보닐) 기를 나타내고,

<화학식 III>

상기 식에서 R⁵, X¹, X², m, p 및 Y는 실시양태 1에서와 같이 정의된다.

실시양태 50: 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I.

실시양태 51: 실시양태 50에 있어서, 약 22℃의 온도에서 8.493 ± 0.2°, 15.574 ± 0.2°, 19.339 ± 0.2°, 20.842 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.

실시양태 52: 도 1에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 53: 도 5에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 54: 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 II.

실시양태 55: 실시양태 54에 있어서, 약 22℃의 온도에서 8.383 ± 0.2°, 11.724 ± 0.2°, 17.918 ± 0.2°, 19.237 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.

실시양태 56: 도 2에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 57: 도 6에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 58: 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 III.

실시양태 59: 실시양태 58에 있어서, 약 22℃의 온도에서 10.084 ± 0.2°, 16.209 ± 0.2°, 20.166 ± 0.2°, 22.325 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.

실시양태 60: 도 3에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 61: 도 7에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 62: 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 IV.

실시양태 63: 실시양태 62에 있어서, 약 22℃의 온도에서 10.039 ± 0.2°, 16.169 ± 0.2°, 17.333 ± 0.2°, 20.130 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.

실시양태 64: 도 4에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 65: 도 8에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 66: 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I.

실시양태 67: 실시양태 66에 있어서, 약 22℃의 온도에서 7.269 ± 0.2°, 9.550 ± 0.2°, 17.831 ± 0.2°, 20.723 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.

실시양태 68: 도 11에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 69: 도 13에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 70: 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 II.

실시양태 71: 실시양태 70에 있어서, 약 22℃의 온도에서 16.054 ± 0.2°, 20.312 ± 0.2°, 23.531 ± 0.2°, 26.532 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.

실시양태 72: 도 12에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 73: 도 14에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 74: 2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-[(4S,5R)-4-플루오로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소에틸}2-메틸프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I.

실시양태 75: 실시양태 74에 있어서, 약 22℃의 온도에서 8.767 ± 0.2°, 12.998 ± 0.2°, 17.354 ± 0.2°, 19.847 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.

실시양태 76: 도 8에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-[(4S,5R)-4-플루오로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소에틸}2-메틸프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 77: 도 9에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-[(4S,5R)-4-플루오로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소에틸}2-메틸프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.

실시양태 78: 실시양태 50 내지 53 중 어느 한 실시양태에 따른 결정질 형태 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.

실시양태 79: 실시양태 54 내지 57 중 어느 한 실시양태에 따른 결정질 형태 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.

실시양태 80: 실시양태 58 내지 61 중 어느 한 실시양태에 따른 결정질 형태 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.

실시양태 81: 실시양태 62 내지 65 중 어느 한 실시양태에 따른 결정질 형태 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.

실시양태 82: 실시양태 66 내지 69 중 어느 한 실시양태에 따른 결정질 형태 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.

실시양태 83: 실시양태 70 내지 73 중 어느 한 실시양태에 따른 결정질 형태 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.

실시양태 84: 실시양태 74 내지 77 중 어느 한 실시양태에 따른 결정질 형태 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.

Claims

2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염인 화합물.
2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I.
제2항에 있어서, 약 22℃의 온도에서 8.493 ± 0.2°, 15.574 ± 0.2°, 19.339 ± 0.2°, 20.842 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.
도 1에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
도 5에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 II.
제6항에 있어서, 약 22℃의 온도에서 8.383 ± 0.2°, 11.724 ± 0.2°, 17.918 ± 0.2°, 19.237 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.
도 2에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
도 6에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 III.
제10항에 있어서, 약 22℃의 온도에서 10.084 ± 0.2°, 16.209 ± 0.2°, 20.166 ± 0.2°, 22.325 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.
도 3에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
도 7에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 IV.
제14항에 있어서, 약 22℃의 온도에서 10.039 ± 0.2°, 16.169 ± 0.2°, 17.333 ± 0.2°, 20.130 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.
도 4에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
도 8에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-[(R)-1-벤질옥시메틸-2-((4S,5R)-2-메틸-1-옥소-4-페닐-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일)-2-옥소-에틸]-2-메틸-프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염인 화합물.
2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I.
제19항에 있어서, 약 22℃의 온도에서 7.269 ± 0.2°, 9.550 ± 0.2°, 17.831 ± 0.2°, 20.723 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.
도 11에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
도 13에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 II.
제23항에 있어서, 약 22℃의 온도에서 16.054 ± 0.2°, 20.312 ± 0.2°, 23.531 ± 0.2°, 26.532 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.
도 12에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
도 14에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-((2R)-3-(벤질옥시)-1-(2-메틸-1-옥소-4-p-톨릴-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)-1-옥소프로판-2-일)-2-메틸프로판아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-[(4S,5R)-4-플루오로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소에틸}2-메틸프로피온아미드 L-말레이트 염인 화합물.
2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-[(4S,5R)-4-플루오로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소에틸}2-메틸프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태 I.
제28항에 있어서, 약 22℃의 온도에서 8.767 ± 0.2°, 12.998 ± 0.2°, 17.354 ± 0.2°, 19.847 ± 0.2°로 이루어진 군으로부터 선택된 4개의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.
도 8에 제시된 X선 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 회절 스펙트럼을 갖는 2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-[(4S,5R)-4-플루오로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소에틸}2-메틸프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
도 9에 제시된 것과 실질적으로 동일한 열중량 분석 (TGA) 다이어그램을 갖는 2-아미노-N-{(R)-1-벤질옥시메틸-2-[(4S,5R)-4-플루오로-페닐)-2-메틸-1-옥소-2,7-디아자-스피로[4.5]데스-7-일]-2-옥소에틸}2-메틸프로피온아미드 L-말레이트 염의 결정질 형태.
제1항 내지 제31항 중 어느 한 항의 화합물 또는 결정질 형태 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 결정질 형태 또는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 그렐린 수용체에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
활성 성분으로서 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항의 화합물 또는 결정질 형태를 포함하는, 그렐린 수용체에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는데 사용하기 위한 제약 조성물.
제34항에 있어서, 질환 또는 장애가 위마비 (예를 들어, 당뇨병성, 특발성 또는 외과적 기원의 위마비), 장폐쇄증 (수술후 장폐쇄증 뿐만 아니라 약물-유발성, 허혈성, 감염성 및 염증성 기원의 장폐쇄증 포함), 기능성 소화불량, 단장 증후군, 변비, 예컨대 과민성 장 증후군 (IBS)의 저운동성 상태와 연관된 변비, 만성 장 가성-폐쇄, 소모 상태와 연관된 위 배출 지연, GERD, 위 궤양 및 크론병, 및 구토로부터 선택된 것인 제약 조성물.