KR20140120903A

KR20140120903A - 여포 자극 호르몬수용체의 아고니스트로서 중수소화 티아졸리디논 유사체

Info

Publication number: KR20140120903A
Application number: KR20147021930A
Authority: KR
Inventors: 헨리 유; 마리앤느 도넬리
Original assignee: 메르크 파텐트 게엠베하
Priority date: 2012-02-08
Filing date: 2013-01-24
Publication date: 2014-10-14
Also published as: IL233983B; HK1201837A1; AU2013218368A1; MX2014009416A; EP2812320A1; CA2860489C; EP2812320B1; SG11201403540RA; WO2013117299A1; RU2014136334A; CN104114544A; ES2672326T3; IL233983A0; US20150111933A1; AU2013218368B2; BR112014019351A8; JP6386382B2; CA2860489A1; BR112014019351A2; JP2015511943A

Abstract

본 발명은 여포 자극 호르몬 수용체를 위한 아고니스트로서 중수소화 티아졸리디논 유사체 및, 생식 장애 치료를 위한 그들의 용도에 관한 것이다.

Description

여포 자극 호르몬수용체의 아고니스트로서 중수소화 티아졸리디논 유사체 {DEUTERATED THIAZOLIDINONE ANALOGUES AS AGONISTS FOR FOLLICLE STIMULATING HORMONE RECETOR}

본 발명은 여포자극호르몬 수용체의 아고니스트로서의 중수소화 티아졸리디논 유사체 및 생식 장애(fertility disorder) 치료에 대한 그들의 용도에 관한 것이다.

성선 자극 호르몬(Gonadotropin)은 신진대사, 온도 조절 및 생식 과정을 포함하는 다양한 신체적 기능에서 중요한 기능을 담당한다. 성선 자극 호르몬은 특이적 생식선 세포 타입에 작용하여 난소 및 고환 분화 및 스테로이드 합성(steroidogenesis)을 시작한다. 성선 자극 호르몬 FSH(여포 자극 호르몬)은 성선 자극 호르몬-방출 호르몬(releasing hormone) 및 에스트로겐 영향하에서 뇌하수체 전엽(anterior pituitary)로부터 방출되고, 임신 동안에 태반으로부터 방출된다. FSH는, 뇌하수체 내에서 또한 생성되는 황체 형성 호르몬 (LH) 및 갑상선 자극 호르몬(TSH), 및 태반 내에서 생성되는 융모성 성선 자극 호르몬(CG)와 구조적으로 유사성을 갖는 헤테로다이머릭 당단백질 호르몬이다. 여성에서, FSH는 여포 형성 및 성숙의 자극에 있어서, 중추적 역할을 하며, 게다가, 이것은 에스트로겐의 주된 호르몬 조절 분비물이며, 반면에 LH는 배란을 유도한다. 남성에 있어서, FSH는 세정관(seminiferous tubule)의 완전성(integrity)에 책임이 있고 세르톨리 세포(Sertoli cell)에 작용하여 배우자 형성(gametogenesis)을 지지한다.

호르몬들은 상대적으로 크고(28-38 kDa) 수용체 결합 특이성을 부여하는 뚜렷한 b-서브유니트에 비공유적으로 결합된 공통된 α-서브유니트로 구성된다. 이들 호르몬의 세포성 수용체는 고환 세르톨리 세포 및 난소 과립막 세포에 발현된다. FSH 수용체는 G 단백질 연관 류의 막 결합 수용체의 구성원인 것으로 알려져 있으며, 활성화될 때 아데니릴 시클라아제(adenyly cyclase)의 활성 증가를 자극한다. 이 결과, 세포 내 이차 메신저 아데노신 3', 5'-모노포스페이트(cAMP)의 준위를 증가시키게 되고, 이는 다시 스테로이드 합성 증가 및 분비를 일으킨다. 이들 수용체의 아미노산 시퀀스의 하이드로패티시티 플롯(Hydropathicity plot)은, 3개의 일반적인 도메인을 밝혔다: 아미노-말단 세포외 도메인으로 생각되는 하나의 친수성 아미노-말단 영역; 막관통 도메인으로 생각되는 막 주간 거리(membrane-spanning length)의 7개 소수성 세그먼트; 및 카르복시-말단 세포내 또는 세포질 도메인으로 생각되는, 전위 인산화 사이트(세린, 트레오닌, 및 티로신 잔기)를 포함하는 카르복시-말단 영역. 당단백질 호르몬 수용체 패밀리는, 호르몬 결합과 관련이 있는 커다란 크기의 친수성 아미노-말단 도메인에 의해, 다른 G 단백질 연관 수용체, 예를 들어 β-2-아드레날린, 로돕신, 및 물질 K(물질 K) 수용체와 구별된다.

미국에서는 연간, 치료가 필요한 잠재적인 후보자들인 2백4십만의 불임 커플들이 있다. 소변으로부터 추출되거나 재조합 DNA 기술로 생성된 FSH는 배란 유도 및 제어된 난소 과배란(hyperstimulation)을 위해 전문가에 의해 사용된 비경구적으로 투여된 제품이다. 배란 유도는 배란시키는 단일 여포를 얻는 직접적인 방법인 반면에, 제어된 난소 과배란은 다양한 인비트로 보조 생식 기술, 예를 들어 체외수정(in-vitro fertilization)에 사용하기 위하여 다중 난모세포(multiple oocyte)를 수확하는 것에 관한 것이다. FSH는 또한 남성 성선기능저하증(hypogonadism) 및 남성 불임, 예를 들어 정자 형성 실패와 같은 종류의 남성 불임 치료를 위해 임상적으로 사용된다.

여포 자극 호르몬수용체 (FSHR)는 난소 여포 성장 과정에서 매우 특이적 목표이며 난소에서 독점적으로 발현된다. 그러나, FSH의 사용은, 높은 가격, 경구 복용 제한, 전문의 광범위한 모니터링이 필요하므로 제한이 있다. 그러므로, 잠재적으로 경구 투여로 발전될 수 있는, FSH를 대신할 비펩티드성 작은 분자 대체물이 요구된다. 아고니스트 성질을 갖는 저 분자량 FSH 모방체는 국제출원 WO　2002/09706 및 WO　2010/136438뿐만 아니라 특허 US　6,653,338에 기재되어 있다. 선택적으로 FSHR을 활성화시키는 저분자량 호르몬 모방체가 여전히 필요하다.

추가적인 선행 문헌은 다음과 같다:

Peletier JC등은 매우 높게 치환된 감마-락탐 여포자극 호르몬 수용체 아고니스트의 제조를 개시한다(Bioorg. Med. Chem. 2005, 13: 5986-5995).

Wrobel J등은 여포-자극 호르몬수용체 아고니스트로서 5-알킬화된 티아졸리디논을 설명한다 (Bioorg. Med. Chem. 2006, 14: 5729-5741).

WO　02/09705은 여포 자극 호르몬 활성의 아고니스트로서 티아졸리디논에 관한 것이다.

WO　02/09706은 여포 자극 호르몬 활성의 아고니스트로서 새로운 티아졸리논에 관한 것이고, 다음 화합물을 개시하고 있다:

20페이지 표 1에 있다(이후 참조 화합물이라 한다).

그러나, 선행 기술은 상기 참조 화합물의 하나 이상의 수소(H)가 중수소(D)에 의해 치환되는 것에 대해서는 개시하고 있지 않다.

본 출원에서 참고 문헌을 인용하는 것은, 그 문헌이 본 출원의 관련 선행 기술이라고 인정하는 것은 아니다.

본 발명의 목적은 FSHR을 위한 아고니스트로서 중수소화 티아졸리디논 유사체를 제공하는 것이다.

일 태양에서 본 발명의 목적은 화학식 (I)에 따라 중수소화 티아졸리디논 유도체, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 모든 비의 이들의 혼합물을 제공하는 것에 의하여 놀랍게도 해결되었다:

여기서: 각 Y는 서로 독립적으로 "수소 (H), 중수소 (D)"로 이루어진 군으로부터 선택되며;

X 는 "S, 술폭시드"로 이루어진 군으로부터 선택되며;

R1, R2는 서로 독립적으로 수소 (H), 중수소 (D), 메틸, CH₂D, CHD₂, CD₃, 에틸, CHDCH₃, CHDCH₂D, CHDCHD₂, CHDCD₃, CD₂CH₃, CD₂CH₂D, CD₂CHD₂, CD₂CD₃로 이루어진 군으로부터 선택되며;

다만, 적어도 하나의 Y는 중수소 (D)이거나 R1, R2 중 적어도 하나는 적어도 하나의 중수소 (D)를 포함하며;

선택적으로, 적어도 하나의 탄소 원자는 서로 독립적으로 ¹³C에 의해 대체될 수 있다.

바람직한 일 실시예에서, 식(I)에 따른 중수소화 티아졸리디논 유도체, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 및 모든 비의 이들의 혼합물이 제공되며,

여기서:

적어도 하나의 탄소 원자는 ¹³C에 의해 대체된다.

바람직한 일 실시예에서, 상기 식(I)에 따른 화합물, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 및 모든 비의 이들의 혼합물이 제공되며,

여기서:

Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이다.

여기서:

Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅는 중수소 (D)이다.

바람직한 일 실시예에서, 상기 식(I) 및 상기 실시예에 따른 화합물, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 및 모든 비의 이들의 혼합물이 제공되고,

여기서:

Y₆, Y₇, Y₈, Y₉ 는 중수소 (D)이다.

여기서:

R₁ 및/또는 R₂는 CD₃이다.

여기서:

(a) Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈는 중수소 (D)이고 및 다른 Y는 수소 (H)이고 R₁, R₂ 중 어느 것도 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않거나; 또는

(b) Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈는 중수소(D)이고, 다른 Y는 수소 (H)이고 R₁, R₂ 중 하나는 CD₃ 이고, R₁, R₂ 중 다른 하나는 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않거나; 또는

(c) 모든 Y는 수소 (H)이고, R₁, R₂ 중 하나는 CD₃ 이고, R₁, R₂ 중 다른 하나는 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않거나; 또는

(d) Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅ 는 중수소 (D)이고 다른 Y는 수소 (H)이고 R₁, R₂ 중 어느 것도 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않거나; 또는

(e) 모든 Y는 수소 (H)이고 및 R₁, R₂ 둘 다 CD₃이거나; 또는

(f) Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅, Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이고 다른 Y는 수소 (H)이고, R₁, R₂ 중 어느 것도 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않거나;

또는

(g) Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅, Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이고 다른 Y는 수소 (H)이고 R₁, R₂ 중 하나는 CD₃이고 R₁, R₂ 중 다른 하나는 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않거나; 또는

(h) Y₆, Y₇, Y₈, Y₉, Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이고 다른 Y는 수소 (H)이고 R₁, R₂ 중 하나는 CD₃ 및 다른 R1, R2 중 하나는 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않고; 또는

(i) Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅, Y₆, Y₇, Y₈, Y₉, Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈는 중수소 (D)이고, 다른 Y는 수소 (H)이고, R₁, R₂ 모두 CD₃ 이고; 또는

(j) Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅, Y₆, Y₇, Y₈, Y₉, Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈는 중수소 (D)이고, 다른 Y는 수소 (H)이고 R1, R2 중 하나는 CD₃이고, 다른 R1, R2 중 하나는 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않는다.

다른 태양에서, 본 발명의 목적은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 및 모든 비의 이들의 혼합물을 제공하는 것에 의해 놀랍게도 해결되었다.

의심을 피하기 위하여, 만약 상기 설명된 화합물의 화학 명칭 및 화학적 구조가 실수로 대응되지 않는다면, 화학적 구조가 화합물을 명확하게 정의하는 것으로 간주된다.

모든 상기 포괄적 또는 분명하게 개시된 화합물들은, 여기 개시된 식(I)의 바람직한 실시예 및 화합물 1 내지 22를 포함하여 모두 이후 본 발명의 화합물이라 한다.

화합물, 특히 본 발명에 따른 화합물을 정의하기 위하여 여기 사용된 명명법은, 일반적으로 화학적 화합물, 특히 유기 화합물에 대한 IUPAC organisation의 규정을 근거로 한 것이다.

상세한 설명이나 청구범위에서 특별히 나타내지 않는다면, 상기 용어들은 본 발명의 상기 화합물의 설명을 위하여 다음 의미를 갖는다:

용어 "비치환"은 대응하는 라디칼, 기 또는 모이어티가 치환기가 없다는 것을 의미한다.

용어 "치환"은 대응하는 라디칼, 기 또는 모이어티가 하나 이상의 치환기를 갖는다는 것을 의미한다. 라디칼이 다수의 치환기를 갖는 경우, 및 다양한 치환기의 선택이 특정되는 경우에는 치환기는 서로 독립적으로 선택되며 동일할 필요는 없다.

본 발명의 목적을 위해서 약제학적 조성물에서와 같이 용어 "조성물"은, 활성 성분, 및 담체를 제조하는 불활성 성분뿐만 아니라 2개 이상의 성분들의 조합, 복합체 또는 응집물, 또는 하나 이상의 성분들의 해리, 또는 하나 이상의 성분들의 다른 종류의 반응 또는 상호 작용으로부터 직접적으로 또는 간접적으로 나타난 결과인 어떠한 제품이라도 포함하는 것으로 의도된 것이다. 따라서, 본 발명의 약제학적 조성물은 본 발명의 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 혼합하여 제조된 어떠한 조성물도 포함한다.

용어 화합물의 "투여" 및 "투여하는 것"의 의미는 본 발명의 화합물 또는 본 발명의 화합물의 프로드러그를 필요로 하는 개인에게 제공하는 것을 의미하는 것으로 이해되어야만 한다.

여기 사용된 것처럼, 용어 "효과적인 함량"은, 예를 들어 연구자 또는 임상의에 의해 조사된 조직, 시스템, 동물 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 이끌어낼 약물 또는 약제학적 시약의 어떠한 함량을 의미한다. 게다가, 용어 "치료학적으로 효과적인 함량"은, 그러한 함량을 받지 못한 대응하는 대상과 비교하여 질병, 질환 또는 부작용의 개선된 치료, 치유, 예방 또는 완화, 또는 질병 또는 질환의 진행 속도의 감소 결과를 나타내는 어떠한 함량을 의미한다. 상기 용어는 또한 그 범위 내에 정상적인 생리학적 기능을 증가시키는 데 효과적인 함량을 포함한다.

본 발명의 화합물의 모든 스테레오아이소머는 혼합물 또는 순수 또는 실질적으로 순수한 형태로 고려된다. 본 발명의 화합물은 어떠한 탄소 원자들에서도 비대칭적 중심을 가질 수 있다. 결과적으로, 이들은 그들의 라세미체 형태, 순수한 엔안티오머 형태 및/또는 디아스테레오머 형태 또는 이들 엔안티오머 및/또는 디아스테레오머의 혼합물 형태로 존재할 수 있다. 이들 혼합물은 어떠한 원하는 혼합비의 스테레오아이소머를 가질 수도 있다.

그러므로, 예를 들어, 하나 이상의 키럴 센터를 갖고, 라세미체 또는 디아스테레오머 혼합물로 발생하는 본 발명의 화합물은 알려진 방법으로 그들의 광학적으로 순수한 아이소머, 즉 엔안티오머 또는 디아스테레오 혼합물로 분별될 수 있다. 본 발명의 화합물들의 분리는 키럴 또는 비키럴 상으로 컬럼 분리 또는 선택적으로 광학적으로 활성 용매로부터의 재결정화 또는 광학적으로 활성산 또는 염기의 사용 또는 예를 들어 광학적 활성 알코올과 같은 광학적으로 활성 시약으로 유도체화, 및 이어지는 라디칼의 제거로 일어날 수 있다.

본 발명의 화합물은 "순수한" E 또는 Z 아이소머로서 그들의 이중 결합 아이소머의 형태, 또는 이들 이중 결합 아이소머들의 혼합물 형태로 존재할 수도 있다.

가능한 경우, 본 발명의 화합물은 케토-엔올 토우토머와 같은 토우토머의 형태일 수도 있다.

본 발명의 화합물이 예를들어 에스테르, 카보네이트, 카바메이트, 우레아, 아미드 또는 포스페이트와 같은 원하는 프로드러그 어떠한 형태도 가능하며, 이 경우 실질적으로 생물학적으로 활성 형태는 단지 신진 대사를 통해서만 방출된다. 인비보에서 전환되어 생활성제(즉, 본 발명의 화합물)를 제공할 수 있는 어떠한 화합물도 본 발명의 기술적 사상의 범위 내에서 프로드러그이다.

프로드러그의 다양한 형태는 선행 기술에 잘 알려져 있으며, 예를 들어 다음에 설명되어 있다:

(i) Wermuth CG et al., Chapter 31: 671-696, The Practice of Medicinal Chemistry, Academic Press 1996;

(ii) Bundgaard H, Design of Prodrugs, Elsevier 1985; 및

(iii) Bundgaard H, Chapter 5: 131-191, A Textbook of Drug Design 및 Development, Harwood Academic Publishers 1991.

그러한 인용문헌은 여기 참조로서 통합되어 있다.

화학적 물질들은 신체 내에서 대사산물로 전환되어 원하는 생물학적 효과를 이끌어낼 것이며-일부 환경하에서는 보다 확실한 형태로 전환된다는 것이 더 알려져 있다.

본 발명의 어느 화합물로부터 신진 대사에 의해 인비보에서 전환된 어떠한 생물학적 활성 화합물도 본 발명의 기술적 사상의 범위 내의 대사산물이다.

본 발명의 화합물은, 만약 예를 들어 이차 또는 삼차아민과 같이 충분히 염기적인 기를 갖는다면, 무기 및 유기 산을 가지고 염으로 전환될 수 있다. 본 발명의 약제학적으로 허용가능한 염은 바람직하게는 염산, 브롬산, 요오드산, 황산, 인산 , 메탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 탄산, 포름산, 아세트산, 술포아세트산, 트리플루오로아세트산, 옥살산, 말론산, 말레산, 숙신산, 타르타르산, 라세미산, 말산, 엠본산(embonic acid), 만델산, 푸마르산, 젖산, 시트르산, 타우로콜린산(taurocholic acid), 글루타르산, 스테아르산, 글루탐산 또는 아스파르트산으로 형성된다. 형성된 염은, 그 중에서도 하이드로클로라이드, 클로라이드, 하이드로브로마이드, 브로마이드, 요오다이드, 설페이트, 포스페이트, 메탄술포네이트, 토실레이트, 카보네이트, 바이카보네이트, 포르메이트, 아세테이트, 술포아세테이트, 트리플레이트, 옥살레이트, 말론에이트, 말리에이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 말레이트, 엠보네이트, 만델레이트, 푸마레이트, 락테이트, 시트레이트, 글루타레이트, 스테아레이트, 아스파르테이트 및 글루타메이트가 있다. 본 발명의 화합물로부터 형성된 염의 화학양론은 또한 필수적 또는 비필수적 배수일 수 있다.

본 발명의 화합물은, 만약 이들이 예를 들어 카르복시, 술폰산, 인산 또는 페놀기와 같은 충분히 산성적 산을 포함한다면, 무기 및 유기 염기로 그들의 생리학적으로 인용된 염으로 전환될 수 있다. 적당한 무기 염기의 예는 암모늄, 소듐 히드록시드, 포타슘 히드록시드, 칼슘 히드록시드이고, 그리고 유기 염기들은 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 에틸렌디아민, t-부틸아민, t-옥틸아민, 데하이드로아비에틸아민(dehydroabietylethylamine), 시클로헥실아민, 디벤질에틸렌-디아민 및 리신이 있다. 본 발명의 화합물들로부터 형성된 염의 화학양론은 또한 필수적 또는 비필수적 배수일 수 있다.

본 발명의 화합물이 그들의 용매 화합물 형태일 수 있으며, 특히 예를 들어 용매로부터 또는 수성 용액으로부터 결정화에 의해 얻어질 수 있는 수화물의 형태일 수 있다. 또한, 하나, 둘, 세개 또는 어떠한 수의 용매 화합물 또는 물 분자들도 본 발명의 화합물과 결합하여 용매화합물 및 수화물을 제공할 수 있다.

용어에 의하면 "용매 화합물"은 수화물, 알코올레이트, 또는 다른 용매화합물의 결정화를 의미한다.

화학적 물질은 폴리모픽 형태 또는 변형이라고 하는 다른 차수 상태로 존재하는 고체들을 형성하는 것으로 알려져 있다. 폴리모픽 물질의 다양한 변형은 그들의 물리적 성질에서 크게 다를 수 있다. 본 발명의 화합물은 다양한 폴리모픽 형태로 존재할 수 있으며, 특정 변형은 또한 준안정상태일 수 있다. 본 발명의 폴리모픽 형태 이들 모두가 본 발명에 속하는 것으로 간주되는 것이다.

인간 및 래트(rat)에서 본 발명의 화합물의 배양 이후에, 간 마이크로솜 내인성 청소율(hepatic microsomes intrinsic clearance) (Clint)이 줄어들었다. 표 1에 나타난 바와 같이, 구체적으로 화합물 1 내지 20 및 22는 대조 화합물에 비하여 래트 간 마이크로솜에서 감소된 Clint가 나타났다. 화합물 1 내지 3, 4, 10, 19 및 22은 대조 화합물에 비하여 인간 간 마이크로솜에서 감소된 Clint를 나타내었다. 이것은 약물동력학 청소율에서 대응하는 감소 및 부피 분포에서 감소가 동반된다. 그러한 변화는 복용량 및 복용 주기를 줄일 수 있으며, 이는 결과적으로 보다 안전한 프로파일을 얻는다. 게다가, 본 발명의 화합물과 동일한 대사효소(예를 들어, CYP)에 의해 대사작용된 다른 약물들 사이의 약물동력학적 상호작용을 더 줄이는 것은, 대조 화합물에 비하여 증가된 안정성을 부여한다.

본 발명의 화합물은, 바람직하게는 유리한 생물학적 활성을 나타내며, 이는 세포 배양 기초 분석, 예를 들어 여기 설명된 것과 같은 분석 또는 선행문헌(cf. e.g. WO　2002/009706, 이는 참조로서 본 발명에 통합되어 있음)에서 쉽게 나타난다. 그러한 분석에서, 본 발명의 화합물은 바람직하게는 아고니스트 효과를 나타내고 야기시킨다. 본 발명의 화합물은 FSHR 아고니스트 활성을 갖는 것이 바람직하며, 이는 EC₅₀ 표준으로 표시되며, 1000 nM 미만, 보다 바람직하게는 500nM 미만이다. "EC₅₀"는 FSH로 얻어진 최대 반응의 50%가 얻어지는 화합물의 효과적인 농도이다.

여기 논의된 것처럼, 이들 신호전달 경로는 다양한 질병, 바람직하게는 생식 장애에 관련이 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 상기 신호 전달 경로와의 상호작용에 의해 상기 신호 전달 경로와 연관된 질병의 예방 및/또는 치료에 유용하다. 그러므로 본 발명은, 여기 설명된 신호 전달 경로, 보다 바람직하게는 FSHR-매개 신호 전달 경로의 조절자, 바람직하게는 아고니스트, 보다 바람직하게는 양성 앨로스테릭 조절자로서 본 발명의 화합물에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은, FSH와 경쟁적 상호작용 없이 세포내 수용체 도메인에 결합되는 것으로 가정되나, 이들은 그의 수용에서 FSH의 앨로스테릭 증진제로서 작용한다. 비경쟁적 상호작용은 본 발명의 화합물에 의해 나타난 아고니스트 활성의 성질을 의미하고, 여기서 화합물은 실질적으로 FSH를 FSHR에 결합시키는 정도를 감소시키지 않고 FSHR을 활성화시킨다.

본 발명의 방법은 인비트로 또는 인비보에서 수행될 수 있다. 본 발명에 따른 화합물로 하는 치료에 대한 특정 세포의 민감성은, 인비트로 시험에 의해 특히 결정될 수 있으며, 연구 또는 임상 응용분야의 어느 과정에서건 결정될 수 있다. 전형적으로 세포의 배양은 본 발명에 따른 화합물을 일정 기간동안 다양한 농도로 결합시키며, 일정 기간은 활성제가 FSHR 활성을 조절하게 하는데 충분한 시간을 말하며, 통상 한 시간 및 일 주일 사이이다. 인비트로에서 치료는 생체 검사 샘플 또는 세포주로부터 배양된 세포들을 사용하여 수행될 수 있다. 본 발명의 바람직한 태양에서, 여포 세포는 자극되어 성숙된다. 치료 후 남아있는 생존가능한 세포를 계수하고 더 가공한다.

일부 조 생성물을 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, n-헥산, 시클로헥산, 디클로로메탄, n-헵탄 또는 페트롤 에테르를 포함하는 용매 혼합물을 사용하여 각각 표준 크로마토그래피를 하였다.

제조 과정의 보다 상세한 설명을 위하여, 실시예 및 다음 바람직한 조건에서의 일반적인 설명을 참고한다.

본 발명의 화합물의 생리학적으로 허용가능한 염은 산 또는 염기를 가지고 설명된 반응에 의해 얻어진 본 발명의 화합물을 분리 및/또는 처리하는 것에 의해 얻어질 수 있다.

본 발명의 화합물 및 또는 이들을 제조하기 위한 출발 물질들은, 상기 반응에 적당하고 알려진 반응 조건하에서 실시예에 설명된 것과 같은 방법 또는 문헌에 설명된 것처럼 알려진 방법으로 제조된다(예를 들어, 표준 논문, 예를들어, Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg Thieme Verlag, Stuttgart; Organic Reactions, John Wiley & Sons, Inc., New York). 또한 알려진 변이체가 만들어져 사용될 수 있으나, 여기서 보다 상세하게 언급하지는 않는다.

필요하다면, 청구된 방법을 위한 출발 물질은, 또한 반응 혼합물로부터 이들을 분리하지 않고 그대로 형성될 수 있으나, 대신에 즉각적으로 이들을 본 발명의 화합물로 전환시킨다. 한편, 반응 단계별로 수행할 수 있다.

바람직하게, 화합물의 반응은 적당한 용매의 존재 내에서 수행되며, 이는 각 반응 조건하에서 불활성이 바람직하다. 적당한 용매의 예는 탄화수소, 예를들어 헥산, 석유 에테르, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌; 염소화 탄화수소, 예를 들어, 트리클로로에틸렌, 1,2-디클로로에탄, 테트라클로로메탄, 클로로포름 또는 디클로로메탄; 알코올, 예를 들어 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, n-프로판올, n-부탄올 또는 tert-부탄올; 에테르, 예를 들어 디에틸 에테르, 디이소프로필 에테르, 테트라하이드로푸란 (THF) 또는 디옥산; 글리콜 에테르, 예를 들어 에틸렌 글리콜 모노메틸 또는 모노에틸 에테르 또는 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르 (디글림); 케톤, 예를 들어 아세톤 또는 부타논; 아미드, 예를 들어 아세트아미드, 디메틸아세트아미드, 디메틸포름아미드 (DMF) 또는 N-메틸 피롤리디논 (NMP); 니트릴, 예를 들어 아세토니트릴; 술폭시드, 예를 들어 디메틸 술폭시드 (DMSO); 니트로 화합물, 예를 들어 니트로메탄 또는 니트로벤젠; 에스테르, 예를 들어, 에틸 아세테이트, 또는 상기 용매의 혼합물 또는 물과의 혼합물이 있다. 극성 용매가 일반적으로 바람직하다. 적당한 극성 용매의 예는 염소화 탄화수소, 알코올, 글리콜 에테르, 니트릴, 아미드 및 술폭시드 또는 이들의 혼합물이다. 보다 바람직한 것은 아미드, 특히 디메틸포름아미드 (DMF)이다.

상기 언급된 것처럼, 반응 온도는 약 -100℃ 및 300℃ 사이이고, 이는 반응 단계 및 사용된 조건에 달려있다.

반응 시간은 일반적으로 몇 분 및 몇 일 사이이며, 각 화합물의 반응성 및 각 반응 조건에 달려있다. 적당한 반응시간은 선행 문헌에서 알려진 방법, 예를 들어 반응 모니터링 등으로 용이하게 결정될 수 있다. 여기 주어진 반응 온도를 기초로, 적당한 반응 시간은 일반적으로 10min 및 48 시간 사이이다.

본 발명의 화합물의 염기는 산을 사용하여, 예를 들어 염기 및 산을 등가 함량으로, 바람직하게는 불활성 용매, 예를 들어 에탄올에서 반응시키고, 이어서 증발시켜 관련 산부가염으로 전환될 수 있다. 이 반응에 적당한 산은, 특히 생리학적으로 허용가능한 염을 만들 수 있는 것들이다. 그러므로 무기산, 예를 들어, 황산, 아황산, 디티온산, 질산, 수소화할로겐산, 예를 들어 염산 또는 브롬산, 인산, 예를 들어, 오르소인산, 술팜산, 추가로 유기산, 특히 앨리패틱, 앨리시클릭, 아르앨리패틱, 아로마틱 또는 헤테로시클릭 모노염기성 또는 다염기성 카르복실, 술폰산 또는 황산, 예를 들어 포름산, 아세트산, 프로피온산, 헥세인산, 옥탄산, 데칸산, 헥사데칸산, 옥타데칸산, 피발산, 디에틸아세트산, 말론산, 숙신산, 피멜린산, 푸마르산, 말레산, 젖산, 타르타르산, 말산, 시트르산, 글루콘산, 아스코르브산, 니코틴산, 이소니코틴산, 메탄- 또는 에탄술폰산, 에탄디술폰산, 2-히드록시에탄술폰산, 벤젠술폰산, 트리메톡시벤조산, 아다만탄카르복실 산, p-톨루엔술폰산, 글리콜 산, 엠본산, 클로로페녹시아세트산, 아스파르트산, 글루탐산, 프롤린, 글리옥실산, 팔미트산, 파라클로로페녹시이소부티르산, 시클로헥산카르복실 산, 글리코스 1-포스페이트, 나프탈렌모노- 및 -디술폰산 또는 라우릴황산을 사용할 수 있다.

생리학적으로 허용가능하지 않은 산과의 염, 예를 들어 피크르산염(picrate)은, 본 발명의 화합물을 분리 및/또는 정제하기 위하여 사용될 수 있다.

한편, 본 발명의 화합물은, 염기들(예를 들어 소듐 히드록시드, 포타슘 히드록시드, 소듐 카보네이트 또는 포타슘 카보네이트)을 사용하여, 대응하는 금속 염, 특히 알칼리 금속 염 또는 알칼리 토금속 염, 또는 대응하는 암모늄 염으로 전환될 수 있다. 적당한 염은 또한 치환된 암모늄염, 예를 들어 디메틸-, 디에틸- 및 디이소프로필암모늄 염, 모노에탄올-, 디에탄올- 및 디이소프로판올암모늄 염, 시클로헥실- 및 디시클로헥실암모늄 염, 디벤질에틸렌디암모늄 염이고, 또한, 예를 들어, 아르기닌 또는 리신과의 염이다.

원한다면, 본 발명의 화합물의 유리 염기는, 분자 내에 더 이상의 산성기가 존재하지 않을 정도로 오래 강염기, 예를 들어 소듐 히드록시드, 포타슘 히드록시드, 소듐 카보네이트 또는 포타슘 카보네이트로 처리하여 그들의 염으로부터 유리 될 수 있다. 본 발명의 화합물이 유리 산기를 갖는 경우에, 염 형성은 염기 처리로 유사하게 얻어질 수 있다. 적당한 염기는 일차, 이차 또는 삼차 아민 형태의 알칼리 금속 히드록시드, 알칼리 토금속 히드록시드 또는 유기 염기들이다.

여기 설명된 모든 반응 단계는 이후 선택적으로 하나 이상의 작업 과정 및/또는 분리 과정이 수행될 수 있다. 적당한 그런 과정은 선행 기술에 알려져 있으며, 예를 들어 표준 작업, 예를 들어 Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart)에 알려져 있다. 그러한 과정의 예는, 이에 한정되지는 않지만, 용매를 증발, 증류, 결정화, 분별 결정화, 추출 과정, 세척 과정, 침출(digesting) 과정, 여과 과정, 크로마토그래피, HPLC에 의한 크로마토그래피 및 건조 과정, 특히 진공 및/또는 가열된 온도에서의 건조 과정을 포함한다.

본 발명의 목적은 놀랍게도 본 발명의 적어도 하나의 화합물을 포함하는 약제를 제공하는 것에 의해 또 다른 관점에서 해소되었다.

본 발명의 목적은 생식 장애의 예방 또는 치료적 처치 및/또는 모니터링에 사용하기 위하여 본 발명의 적어도 하나의 화합물을 포함하는 약제를 제공하는 것에 의해 또 다른 관점에서 놀랍게도 해소되었다.

본 발명의 목적은 또한 식(I)에 따른 화합물 및/또는 그의 생리학적으로 허용가능한 염의 FSH 수용체의 조절, 특히 FSH의 존재하에서 FSH 수용체의 조절을 위한 용도이다. 용어 "조절"은 FSHR-매개 신호 전달에서의 어떤 변화를 나타내며, 이는 인식, 결합 및 활성화가 가능하게 하는 방법으로 FSHR 목표와 상호작용할 수 있는 특이적 발명 화합물의 작용에 기초한 것이다. 화합물은 FSHR에 대한 그러한 높은 친화력에 의해 특징되며, 이로 인하여 FSHR의 신뢰성 있는 결합 및 바람직하게는 양성적 앨로스테릭 조절을 보증한다. 보다 바람직하게는, 상기 물질은 모노-특이적이어서, 단일의 FSHR 목표와 독점적이면서 직접적인 인식을 보장한다. 본 발명의 내용에서, 용어 "인식"-이에 제한되지는 않음-은 특이적 화합물 및 목표 사이의 어떠한 상호작용, 특히 공유 또는 비공유 결합 또는 관련성, 예를 들어 공유 결합, 소수성/친수성 상호작용, 반데르바알스력, 이온 쌍, 수소 결합, 리간드-수용체 상호작용 등에 관한 것이다. 그러한 관련성은 또한 펩티드, 단백질 또는 뉴클레오티드 시퀀스와 같은 다른 분자의 존재들을 포함할 수 있다. 본 수용체/리간드-상호작용은 높은 친화성, 높은 선택성 및 다른 목표 분자에 대한 가교 반응성이 최소 또는 결핍된 것으로 치료될 대상에 건강하지 못하고 해로운 영향을 배제시키는 것으로 특징된다.

본 발명의 화합물은, 본 발명의 화합물 또는 다른 물질이 유용한 질병 또는 조건의 치료, 예방, 억제 또는 완화에서 하나 이상의 다른 물질(성분, 약물)과 조합하여 사용될 수 있다. 전형적으로 약물들의 조합은 약물 단독보다는 안전하고 효과적이거나, 또는 조합이 개별 약물의 추가적 성질을 기초로 기대되는 것보다 안전 또는 보다 효과적이다. 그러한 다른 약물들은, 본 발명의 화합물과 동시에 또는 연속해서 공통적으로 사용되는 함량으로 루트에 따라 투여될 수 있다. 발명의 화합물이 하나 이상의 다른 약물과 동시에 사용될 때, 그러한 다른 약물 및 본 발명의 화합물을 포함하는 조합 제품이 바람직하다. 그러나, 조합 치료법은 또한 본 발명의 화합물 및 하나 이상의 다른 약물을 다른 겹치기 스케줄로 투여하는 치료법을 포함한다. 다른 활성 성분들과 조합으로 사용될 때, 본 발명의 화합물 또는 다른 활성 성분 또는 둘 다는 각각이 단독으로 사용될 때보다 낮은 복용량으로 효과적으로 사용될 수도 있다는 것이 고려된다. 따라서, 본 발명의 약제학적 조성물은 하나 이상의 다른 활성 성분들을 본 발명의 화합물 외에 포함한다.

본 발명의 화합물은 잘 알려진 불임 유도제와 조합하는데 적당할 수 있다. 바람직하게는 다른 활성(약제학적) 성분은 FSH, α-FSH (Gonal F), β-FSH, LH, hMG 및 2-(4-(2-클로로-1,2-디페닐에테닐)-페녹시)-N,N-디에틸-에탄아민 시트레이트 (클로미펜 시트레이트)의 군으로부터 선택된다. 또 다른 배란 부가물(adjunct)이 관련 기술 분야의 통상의 기술자에게 알려져 있고 (cf. e.g. WO　2002/09706, 이것은 참조로서 여기에 통합되어 있음) 및 본 발명의 화합물과 함께 유용하다.

본 발명의 또 다른 관점에서, 상기 관점 및 실시예에 따른 약제가 제공되며, 여기서 그러한 약제는 적어도 하나의 추가적인 약물학적 활성 물질(약물, 성분)을 포함한다.

바람직한 일 실시예에서, 상기 적어도 하나의 약물학적으로 활성 성분은 여기 설명된 것과 같은 물질이다.

본 발명의 또 다른 태양에서, 상기 태양 및 실시예에 따른 약제가 제공되고, 여기서 상기 약제는 적어도 하나의 약물학적으로 활성 물질로 치료하기 전 및/또는 동안 및/또는 후에 적용된다.

바람직한 일 실시예에서, 상기 적어도 하나의 약물학적으로 활성 물질은 여기 설명된 것과 같은 물질이다.

본 발명의 또 다른 태양에서, 본 발명의 적어도 하나의 화합물의 치료학적으로 효과적인 함량을 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.

바람직한 일 실시예에서, 상기 약제학적 조성물은, 본 발명의 화합물외에 생리학적으로 허용가능한 부형제, 보조제, 아주반트, 희석제, 담체 및/또는 추가적 약제학적으로 활성 물질로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 추가적 화합물을 포함한다.

본 발명의 다른 태양에서, 약제학적 조성물은 여기 설명된 것과 같은 본 발명의 적어도 하나의 화합물, 본 발명의 화합물외에 적어도 하나의 약물학적으로 활성 물질; 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 것이 개시되어 있다.

본 발명의 추가 실시예는 상기 약제학적 조성물의 제조 방법이고, 본 발명에 따른 하나 이상의 화합물 및 본 발명에 따른 화합물외에 고체, 액체 또는 반액체 부형제, 보조제, 아주반트, 희석제, 담체 및 약제학적으로 활성 시약으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 화합물이 적당한 복용 형태로 전환되는 것에 특징이 있다.

본 발명의 또 다른 태양에서, 본 발명의 적어도 하나의 화합물 및/또는 여기 설명된 적어도 하나의 약제학적 조성물 및 본 발명의 화합물외에 추가로 적어도 하나의 약물학적으로 활성 물질을 치료학적으로 효과적인 함량으로 포함하는 키트가 제공된다.

본 발명의 다른 태양에서, 양성 앨로스테릭 방법으로 FSH 수용체를 조절하는 방법이 제공되고, 여기서 FSH 수용체를 발현시킬 수 있는 세포는 FSH 존재하에서 본 발명의 적어도 하나의 화합물 또는 이전에 설명된 적어도 하나의 약제학적 조성물과 접촉된다.

본 발명의 또 다른 태양에서, 생식장애 치료방법이 제공되며, 여기서 치료학적으로 효과적인 함량의 본 발명의 적어도 하나의 화합물 또는 이전에 설명된 적어도 하나의 약제학적 조성물을 그러한 치료가 필요한 포유류에 투여한다.

본 발명의 또 다른 태양에서, 인비트로 수정을 위한 방법이 제공되며, 다음 단계를 포함한다:

(a) 생식 장애 치료를 위한 상기 방법에 따라 포유류를 치료하는 단계,

(b) 상기 포유류로부터 난자를 수집하는 단계,

(c) 상기 난자를 수정시키는 단계, 및

(d) 상기 수정된 난자를 호스트 포유류에게 이식시키는 단계.

본 발명의 약제학적 조성물은 그들의 원하는 목적을 달성하는 어떠한 수단으로도 투여될 수 있다. 예를 들어, 투여는 경구, 비경구, 국부, 장, 정맥, 근육내, 흡입, 코, 관절내, 척수속(intraspinal), 경기관(transtracheal), 안구경유(transocular), 피하, 복강내(intraperitoneal), 경피, 또는 구강 경로를 통해 이루어질 수 있다. 교대로, 또는 동시에 경구 투여가 이루어질 수 있다. 투여된 복용량은 수혜자의 연령, 건강 및 체중, 있다면 동시 치료의 종류, 치료의 빈도 및 원하는 효과의 성질에 달려있다. 비경구적 투여가 바람직하다. 경구 투여가 특히 바람직하다.

적당한 복용 형태는, 이에 한정되지는 않지만, 캡슐, 정제, 펠렛, 드라제, 반고체, 분말, 과립, 좌약, 연고, 크림, 로션, 흡입제, 주사제, 습포제, 겔, 테이프, 점안액, 용액, 시럽, 에어로졸, 서스펜션, 에멀젼을 포함하며, 이는 예를 들어 이하 설명된 것과 같은 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다:

정제: 활성 성분/들 및 보조제의 혼합, 상기 혼합물을 정제로 압축(직접적인 압축), 선택적으로 압축전에 혼합물의 일부를 과립화함.

캡슐: 활성 성분/들 및 보조제를 혼합하여 유동가능한 분말을 얻고, 선택적으로 분말을 과립화하고, 분말/ 과립을 개방 캡슐에 충진하고, 캡슐을 캡핑함.

반고체 (연고, 겔, 크림): 활성 성분/들을 수성 또는 지방성 담체에 용해/분산; 이어서 수성/지방성 상을 보완적인 지방/수성상과 혼합하고, 균질화함(크림만).

좌약 (직장 및 질): 활성 성분/들을 가열로 액화된 담체에 용해/분산 (직장: 담체 물질 보통 왁스; 질: 담체 보통 가열된 겔화제 용액), 상기 혼합물을 좌약 형태로 캐스팅하고, 상기 기포로부터 좌약 어닐링 및 인출함.

에어로졸: 프로펠런트에 활성제/들을 용해/분산시키고, 상기 혼합물을 분무기내로 병입함.

일반적으로, 약제학적 조성물 및/또는 약제학적 제제의 생산을 위한 비화학적 루트는, 그러한 치료가 필요한 환자에게 투여하기에 적당한 복용 형태로 본 발명의 하나 이상의 화합물을 전달하는, 당해 기술분야에서 잘 알려진 적당한 기계적 수단으로 가공하는 단계를 포함한다. 보통, 본 발명의 하나 이상의 화합물을 그러한 복용 형태로 이송하는 것은 담체, 부형제, 보조제 및 본 발명의 화합물외의 약제학적 활성 성분으로 이루어진 군으로부터 선택된, 하나 이상의 화합물을 추가하는 것을 포함한다. 적당한 가공 단계는, 이에 한정되지는 않지만, 각각의 활성 및 비활성 성분을 조합, 밀링, 혼합, 과립화, 용해, 분산, 균질화, 캐스팅 및/또는 압축하는 것을 포함한다. 상기 가공 단계를 수행하는 기계적 수단은 공지되어 있으며, 예를 들어 Ullmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry, 5th Edition에 개시되어 있다. 이와 관련하여, 활성 성분은 바람직하게는 본 발명의 적어도 하나의 화합물 및 본 발명의 화합물외의 하나 이상의 추가적인 화합물이며, 이는 귀한 약제학적 성질을 나타내며, 바람직하게는 본 발명의 화합물 외에 이들 약제학적 활성제이고, 여기 개시되어 있다.

경구용으로 특히 적당한 것은 정제, 필, 코팅된 정제, 캡슐, 분말, 과립, 시럽, 쥬스 또는 드롭스이고, 직장용으로 적당한 것은 좌약이고, 비경구용으로 적당한 것은 용액, 바람직하게는 오일계 또는 수성 용액, 추가로 서스펜션, 에멀젼, 또는 임플란트이고, 국부용으로 적당한 것은 연고, 크림 또는 분말이다. 본 발명의 화합물은 또한 동결 건조될 수 있고, 얻어진 동결건조품은, 예를 들어 주사제 제제의 제조를 위해 사용될 수 있다. 나타낸 제제는 멸균되거나 및/또는 윤활제, 방부제, 안정화제 및/또는 습윤제, 유화제, 삼투압 수정용 염, 완충 물질, 염료, 향료및/또는 다수의 추가 활성 성분, 예를 들어 하나 이상의 비타민과 같은 보조제를 포함한다.

적당한 부형제는 유기 또는 무기 물질이고, 이는 경장(예를 들어 경구), 비경구 또는 국부 투여에 적당하며, 본 발명의 화합물과 반응하지 않고, 예를 들어 물, 식물성 오일, 벤질알코올, 알킬렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 글리세롤 트리아세테이트, 젤라틴, 탄수화물, 예를들어, 락토스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨 또는 전분(옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분), 셀룰로오스 제제 및/또는 칼슘 포스페이트, 예를 들어 트리 칼슘포스페이트 또는 칼슘 히드로겐포스페이트, 마그네슘 스테아레이트, 탈크, 젤라틴, 트래거캔스, 메틸 셀룰로오스, 히드록시프로필메틸 셀룰로오스, 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈 및/또는 바세린이 있다.

필요하다면, 붕해제가 첨가될 수 있고, 상기 언급된 전분 및 또는 카르복시 메틸-전분, 가교된 폴리비닐 피롤리돈, 아가 또는 알긴산 또는 이들의 염, 예를 들어 소듐 알지네이트가 있다. 보조제는, 이에 한정되지 않으나, 흐름 조절제 및 윤활제, 예를 들어 실리카, 탈크, 스테아르산 또는 이들의 염, 예를 들어 마그네슘 스테아레이트 또는 칼슘 스테아레이트, 및/또는 폴리에틸렌글리콜을 포함한다. 드라제 코어는 적당한 코팅층을 갖게 제공되며, 이는 원한다면 위액에 내성이 있다. 이 목적을 위하여, 농축된 사카라이드 용액이 사용될 수 있으며, 이는 선택적으로 아라비아검, 탈크, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜 및/또는 티타늄 디옥시드, 래커(lacquer) 용액 및 적당한 유기 용매 또는 용매 혼합물을 포함할 수 있다. 위산에 내성이 있는 코팅층을 제공하기 위하여 또는 장기간 활성하는 장점을 부여하는 복용 형태를 제공하기 위하여, 정제 드라제 또는 필은 내부 복용 및 외부 복용 성분을 포함하고, 후자는 전자 위에 봉투 형태로 포함될 수 있다. 이 두 가지 성분은 장 층(enteric layer)에 의해 분리될 수 있고, 이는 위 내에서 붕해에 저항하게 하여 내부 성분이 십이지장(duodenum) 안으로 온전히 통과될 수 있거나 또는 방출이 지연되게 할 수 있다. 다양한 물질이 그러한 장층 또는 코팅층용으로 사용될 수 있으며, 다수의 폴리머산, 및 폴리머산과, 셀락, 아시틸알코올, 적당한 셀룰로오스 제제의 용액, 예를 들어 아세틸-셀룰로오스 프탈레이트, 셀룰로오스 아세테이트 또는 히드록시프로필메틸-셀룰로오스 프탈레이트와 같은 물질과의 혼합물을 포함하는 그러한 물질이 사용된다. 염료 물건 또는 안료가 정제 또는 드라제 코팅, 예를 들어 활성 화합물 복용량의 조합을 특징화하기 위하여 또는 확인용으로 추가될 수 있다.

적당한 담체 물질은 경장 (e.g. 경구) 또는 비경구 투여 또는 국부 적용에 적당하고 새로운 화합물과 반응하지 않는 유기 또는 무기 물질이며, 예를 들어 물, 식물성 오일, 벤질 알코올, 폴리에틸렌 글리콜, 젤라틴, 락토스 또는 전분과 같은 탄수화물, 마그네슘 스테아레이트, 탈크 및 석유 젤리이다. 특히, 정제, 코팅된 정제, 캡슐, 시럽, 서스펜션, 드롭스 또는 좌약이 경장 투여, 용액, 바람직하게는 오일성 또는 수성 용액을 위해 사용되고, 추가로 서스펜션, 에멀젼 또는 임플란트가 비경구 투여를 위해 사용되고, 연고, 크림 또는 분말이 국부 적용을 위해 사용된다. 본 발명의 화합물은 또한 동결건조될 수 있고 얻어진 동결 건조물은, 예를 들어 주사 제제의 제조를 위해 사용될 수 있다.

표시된 제제는 멸균되거나 및/또는 윤활제, 방부제, 안정화제 및/또는 습윤제, 유화제, 삼투압에 영향을 미치는 염, 완충 물질, 착색제, 향료 및/또는 분무화제와 같은 부형제를 포함할 수 있다. 이들은, 만약 원한다면 하나 이상의 추가 활성 화합물, 예를 들어 하나 이상의 비타민을 포함할 수 있다.

경구적으로 사용될 수 있는 다른 약제학적 제제가 제라틴으로 제조된 푸쉬피트(push-fit) 캡슐뿐만 아니라 젤라틴, 및 글리세롤 또는 소르비톨과 같은 가소제로 제조된 연질의 밀봉 캡슐을 포함한다. 푸쉬피트 캡슐은 과립 형태로 활성 화합물을 포함할 수 있으며, 이는 락토스와 같은 필러, 전분과 같은 바인더, 및/또는 탈크 또는 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제 및, 선택적으로 안정화제와 혼합될 수도 있다. 연질 캡슐에서, 상기 활성 화합물은 바람직하게는 적당한 액체, 예를 들어 지방성 오일, 또는 액체 파라핀 내에서 용해 또는 현탁된다. 추가로, 안정화제가 추가될 수 있다.

본 발명의 새로운 조성물이 경구적으로 투여되기 위하여 포함될 수 있는 액체 형태는 수성 용액, 적당하게 향료화된 시럽, 수성 또는 오일 서스펜션, 및 먹을 수 있는 오일, 예를 들어 목화씨 오일, 참깨 오일, 코코넛 오일 또는 땅콩 오일을 포함하는 향료화된 에멀젼뿐만 아니라 엘릭시르 및 유사한 약제학적 비이클을 포함한다. 수성 서스펜션을 위한 적당한 분산 또는 현탁제는 합성 또는 천연 검, 예를 들어 트래거캔스, 아카시아, 알지네이트, 덱스트란, 소듐 카르복시메틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 폴리비닐-피롤리돈 또는 젤라틴을 포함한다.

비경구 투여에 적당한 제형은 물-용해성 형태, 예를 들어 물-용해성 염 및 알칼리 용액 내의 활성 화합물의 수성 용액을 포함한다. 게다가, 적당한 오일성 주사액 서스펜션으로서 활성 화합물의 서스펜션이 투여될 수도 있다. 적당한 동결건조 용매 또는 비이클은 지방성 오일, 예를 들어 참깨 오일, 또는 합성 지방산 에스테르, 예를 들어 에틸 올리에이트 또는 트리글리세라이드 또는 폴리에틸렌 글리콜-400(화합물들은 PEG-400에서 용해성이다)을 포함한다.

수성 주사액 서스펜션은 서스펜션의 점도를 증가시키는 물질, 예를 들어 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스, 소르비톨, 및/또는 덱스트란을 포함하는 물질을 포함하는 물질을 포함할 수도 있으며, 선택적으로 상기 서스펜션은 또한 안정화제를 포함할 수도 있다.

흡입 스프레이로서 투여를 위하여, 활성 성분이 프로펠런트 가스 또는 프로펠런트 가스 혼합물(예를 들어 CO₂ 또는 클로로플루오로카본)에 용해 또는 현탁되어 있는 스프레이를 사용할 수 있다. 활성 성분은 마이크로화된 형태로 유리하게 사용될 수 있으며, 이 경우 하나 이상의 추가적 생리학적으로 허용가능한 용매가, 예를 들어 예탄올이 존재할 수 있다. 흡입 용액은 종래 흡입기의 도움으로 투여될 수 있다.

직장적으로 사용될 수 있는 가능한 약제학적 제제는 예를 들어 좌약을 포함하며, 이는 하나 이상의 활성 화합물과 좌제 기제(suppository base)와의 조합으로 이루어진다. 적당한 좌제 기제는, 예를 들어 천연 또는 합성의 트리글리세라이드, 또는 파라핀 탄화수소들이다. 게다가, 활성 화합물과 기제의 조합으로 이루어진 젤라틴 직장 캡슐을 또한 사용할 수 있다. 가능한 기제 물질은, 예를 들어, 액체 트리글리세라이드, 폴리에틸렌 글리콜, 또는 파라핀 탄화수소를 포함한다.

약제에 사용하기 위하여, 본 발명의 화합물은 약제학적으로 허용가능한 염의 형태일 것이다. 그러나 다른 염은 본 발명의 화합물 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염의 제제에서 유용할 수도 있다. 본 발명의 화합물의 적당한 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어 본 발명에 따른 화합물의 용액을 염산, 황산, 메탄술폰산, 푸마르산, 말레산, 숙신산, 아세트산, 벤조산, 옥살산, 시트르산, 타르타르산, 탄산 또는 인산과 같은 약제학적으로 허용가능한 산의 용액과 혼합하여 형성될 수 있는 산부가염을 포함한다. 게다가, 본 발명의 화합물이 산성 모이어티를 갖는 경우에는, 이들의 적당한 약제학적으로 허용가능한 염은 알칼리 금속 염, e.g. 소듐 또는 포타슘 염; 알칼리 토금속 염, e.g. 칼슘 또는 마그네슘 염; 및 적당한 유기 염기, 예를 들어 사차 암모늄 염으로 형성된 염을 포함한다.

약제학적 제제는 인간 및 수의학에서 약제로서 사용될 수 있다. 여기 사용된 용어 "효과적인 함량"은, 약물 또는 약제학적 시약의 함량이 연구자 또는 임상의에 의해 조사된 대상인 조직, 계, 동물 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 유도할 함량을 의미한다. 게다가 용어 "치료학적으로 효과적인 함량"은 그러한 함량을 수용하지 않는 대응하는 대상에 비하여 질병, 질환 또는 부작용의 개선된 치료, 치유, 예방 또는 완화, 또는 질병 또는 질환의 진전 속도의 감소 결과를 가져오는 어떠한 함량을 의미한다. 상기 용어는 또한 정상의 생리학적 기능을 증가시키는데 효과적인 함량도 이 범위 내에 포함한다. 본 발명의 하나 이상의 화합물의 효과적인 함량은 전문가에게 알려져 있으며, 또한 공지된 표준 방법으로 용이하게 결정될 수 있다.

본 발명의 화합물 및 추가적인 활성 물질은 일반적으로 상업적 제제와 유사하게 투여된다. 통상, 복용 단위당 0.0005　mg 및 1000　mg 사이, 바람직하게는 0.005　mg 및 500　mg의 사이 및 특히 0.5　mg 및 100　mg의 사이 범위에 놓이는 것이 치료학적으로 효과적이다. 상기 매일 복용량은 바람직하게는 체중의 약 0.001　mg/kg 및 10 mg/kg 사이이다.

당업자들은 복용량 준위가 특정 화합물의 기능, 증후의 심각도 및 부작용에 대한 대상의 민감도에 따라 변화할 수 있다는 것을 용이하게 인식할 것이다. 그러한 화합물들 중 일부는 다른 것보다 강하다. 주어진 화합물에 대한 바람직한 복용량은 다양한 수단에 의해 당해 기술분야의 전문가에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 바람직한 수단은 주어진 화합물의 생리학적 성능을 측정하는 것이다.

본 발명의 목적을 위하여, 모든 포유류 종들은 포함되는 것으로 간주된다. 바람직한 일 실시예에서, 그러한 포유류는 "영장류, 인간, 설치류, 말과, 소과, 개과, 고양이과, 집안 동물, 소, 가축, 애완동물, 카우, 양, 돼지, 염소, 말, 조랑말, 당나귀, 버새(hinny), 노새(mule), 토끼(hare), 토끼(rabbit), 고양이, 개, 기니피그, 햄스터, 랫, 마우스"로 이루어진 군으로부터 선택된다. 보다 바람직하게는, 그러한 포유류는 인간이다. 동물 모델은, 실험적 조사를 위해 인간 질환 치료를 위한 모델을 제공한다는 것이 흥미롭다.

그러나 개인 환자들의 특정 복용량은 다중 인자, 예를 들어 사용된 특정 화합물의 효능, 연령, 체중, 건강의 일반 상태, 성별, 식성 종류, 투여 시간 및 루트, 배출 속도, 투여되는 투여 종류 및 복용 형태, 약제학적 조합 및 치료법과 관련된 특정 질환의 심각도에 따라 달려있다. 개인 환자를 위한 특이한 치료적 복용량은 일정한 실험, 예를 들어 치료적 처치를 충고하거나 처치하는 의사 또는 내과의에 의해 일정한 실험으로 용이하게 결정될 수 있다.

많은 질환의 경우에, 대상 화합물 치료에 대한 특정 세포의 민감도는 인비트로 테스트로 결정될 수 있다. 전형적으로, 세포 배양은 활성 시약이 관련 반응을 나타내게 하는데 충분한 시간 동안 농도를 변화시키면서 대상 화합물과 조합되며, 통상 약 1시간 및 1주일 사이이다. 인비트로 테스트를 위하여, 생체 검사 샘플의 배양 세포가 사용될 수 있다.

추가적인 상세한 설명없이도, 당해 기술자의 전문가는 가장 넓은 범위로 상기 설명을 사용할 수 있을 것이다. 바람직한 실시예는 그러므로 단지 설명적 내용 개시로 간주되어야만 하며, 이는 어떤 방법으로도 절대적으로 제한하지 않는다.

상기 및 이하, 모든 온도는 ℃로 표시된다. 다음 실시예에서, 종래 워크업은, 용매가 제거되고, 필요하다면 물이 추가되고, pH는 필요하다면 2 및 10 사이로 조절되고, 이는 목적 생성물의 구성에 따라 달라지며, 상기 혼합물은 에틸아세테이트 또는 디클로로메탄으로 추출되고, 상기 상들은 분리되고, 유기 상은 포화된 NaHCO₃ 용액, 필요하다면 물 및 포화된 NaCl 용액 으로 세척되고, 필요하다면 물 및 포화된 NaCl 용액로 세척되고, 소듐 설페이트로 건조, 여과 및 증발되고, 상기 생성물은 실리카 겔 상에서 크로마토그래피, 제조성 HPLC 및/또는 결정화에 의해 정제된다. 정제된 화합물은 필요하다면 동결건조된다.

모든 인용문헌들의 내용은 그들 전체로서 참조로서 통합되어 있다. 본 발명은 그러나, 이에 제한되는 것 없이 다음 실시예의 수단으로 보다 상세하게 설명된다.

실시예

분석 실험의 표준 설명

¹H NMR은, 내적 기준으로서 중수소화 용매의 잔사 신호를 사용하여 Joel 400 MHz 분광기에 기록되었다. 화학적 이동(δ)이 잔사 용매 신호에 비례하여 ppm으로 보고된다(δ= 2.49 ppm, 1H NMR, DMSO-d ₆). ¹H NMR 데이터는, 다음과 같이 보고된다: 화학적 이동(다중도, 결합상수, 및 수소의 수). 다중도는 다음과 같이 약어로 표시된다: s (일중항), d (이중항), t (삼중항), q (사중항), m (다중항), br (브로드).

LCMS 방법:

컬럼: Xbridge C8, 4.6x50mm 5um

이동상 A: 물 +0.1%TFA

이동상 B: ACN +0.1%TFA

그래디언트: 5-95%B, 3.5 minute 동안

흐름 속도: 0.8 mL/min

파장 254nm

질량 스캔: 100-900 Da

실시예 1: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2- d ₄-2-(4-히드록시-3-메톡시페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

단계 1:

유사한 과정이 WO　02/09705 & WO　02/09706에 설명되어 있다.

4-(페닐에티닐)벤즈알데히드 (2.8 g, 13.6 mmol, 1 eq)가 용해된 MeCN (240 ml) 용액에 (S)-2-메르캅토숙신산 (6.12 g, 40.8 mmol, 3 eq) 및 3-아미노벤즈아미드 (1.85 g, 13.6 mmol, 1 eq)을 첨가하였다. 반응물을 3일 동안 83℃에서 교반하였다. 반응물을 냉각 및 여과하여 고체를 얻었다. 상기 고체를 포화된 Na₂CO₃로 pH=8~9로 조절하고 에틸 아세테이트 (50 ml* 3)으로 추출했다. 상기 물 상은 4H HCl으로 pH=3~4으로 조절하고 여과하여 고체를 얻었다. 상기 고체는 EtOH (10 ml) 및 MeCN (10 ml)으로 세척하여 밝은 노란색 고체로서 목적 화합물을 얻었다(3 g, 51.7%).

단계 2:

유사한 과정이 WO　02/09705 & WO　02/09706에 설명되어 있다.

2-((2S,5S)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-5-일)아세트산 (2.5 g, 5.58 mmol, 1 eq)이 용해된 THF (127.5 ml) 용액에 DBU (8.5 g, 55.8 mmol, 10eq) 및 MeOH (12.75 ml)를 첨가하였다. 반응물을 70℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 냉각시키고 증발시켰다. 잔사는 에틸 아세테이트 및 1N HCl에 넣고 여과하였다. 여액을 1N HCl, 브라인으로 세척하고, Na₂SO₄으로 건조하고, 여과 및 증발시켜 고체(1.7 g)를 얻었다. 고체는 MeCN로부터 결정화되어 2-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-5-일)아세트산 (0.6 g, 24 %)을 얻었다.

단계 3: [(2S,5R)-3-(3-카르바모일-페닐)-4-옥소-2-(4-페닐에티닐-페닐)-티아졸리딘-5-일]-아세트산 (50.00 mg; 0.11 mmol; 1.00 eq.)이 용해된 디클로로메탄(2.00 ml; 31.20 mmol; 284.87 eq.)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.02 ml; 0.13 mmol; 1.20 eq.), 2-(4-히드록시-3- 메톡시페닐 )에틸-1,1,2,2- d ₄ -아민 HCl (25.02 mg , 0.12 mmol , 1.1 eq .) 및 2,4,6-트리프로필-1,3,5,2,4,6-트리옥사트리포스피네인 2,4,6-트리옥시드 (0.05 ml; 0.16 mmol; 1.50 eq.)을 첨가하였다. 상기 반응물을, RT에서 5h 동안 교반하였다. 원하는 생성물은 플래쉬크로마토그래피 (10g, 실리카 겔, 0 내지 20% MeOH/DCM, 7CV) 에 의해 분리되어, 백색 고체로서 생성물을 얻었다(35.2mg, 53%).

¹H NMR (500 MHz, cd₃od) δ 7.81 (s, 1H), 7.67 (d, J = 7.5, 1H), 7.51 - 7.25 (m, 11H), 6.77 (s, 1H), 6.73 - 6.57 (m, 2H), 6.42 (s, 1H), 4.50 (dd, J = 8.4, 3.9, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.10 (dd, J = 15.2, 4.0, 1H), 2.89 (dd, J = 15.2, 8.5, 1H). m/z: 609 ; 610 [M+H]⁺

실시예 2: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3,4-디메톡시페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2- d ₄-2-(4-히드록시-3-메톡시페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드 (실시예 1) (25.00 mg; 0.04 mmol; 1.00 eq.)이 용해된 아세톤 (1.00 ml; 13.62 mmol; 332.16 eq.)에 포타슘 카보네이트 (0.04 g; 0.27 mmol; 6.50 eq.), 및 디메틸 설페이트 (0.18 ㎕; 0.008 mmol; 0.04 eq.)을 첨가하였다. 상기 반응물을 RT에서 밤새 교반하였다. 원하는 생성물은 플래쉬크로마토그래피 (10g, KPNH, 0 내지 20% MeOH/DCM)에 의해 분리되어 백색 고체로서 생성물(8.9mg, 35%)을 얻었다.

¹H NMR (500 MHz, cd₃od) δ7.83 - 7.78 (m, 1H), 7.69 - 7.64 (m, 1H), 7.50 - 7.30 (m, 11H), 6.81 (dd, J = 5.0, 3.1, 2H), 6.74 (dd, J = 8.2, 2.0, 1H), 6.42 (s, 1H), 4.53 - 4.47 (m, 1H), 3.76 (t, J = 4.6, 6H), 3.10 (dd, J = 15.3, 4.1, 1H), 2.89 (dd, J = 15.3, 8.5, 1H).

m/z: 624 ; 625 [M+H]⁺

실시예 3: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-메톡시-4-(메톡시-d ₃)페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 2와 유사한 방법으로, 생성물은, 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2- d ₄-2-(4-히드록시-3-메톡시페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드 (35.00 mg; 0.06 mmol; 1.00 eq.) 및 디메틸 설페이트-d ₆ (2.92 ㎕; 0.03 mmol; 0.50 eq.)로부터 얻었다. 반응물은 RT에서 밤새 교반하였다. 원하는 생성물은, 플래쉬크로마토그래피 (10g, KPNH, 0 내지 20% MeOH/DCM)로 분리되어 백색 고체로서 생성물(22.3mg, 63%)을 얻었다.

¹H NMR (500 MHz, cd₃od)δ7.83 - 7.79 (m, 1H), 7.70 - 7.65 (m, 1H), 7.48 - 7.30 (m, 11H), 6.83 - 6.77 (m, 2H), 6.74 (dd, J = 8.2, 2.0, 1H), 6.42 (s, 1H), 4.53 - 4.47 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.10 (dd, J = 15.2, 4.1, 1H), 2.89 (dd, J = 15.3, 8.5, 1H).

m/z: 626 ; 627 [M+H]⁺

실시예 4: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-에톡시-4-메톡시페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 1과 유사한 방법으로, [(2S,5R)-3-(3-카르바모일-페닐)-4-옥소-2-(4-페닐에티닐-페닐)-티아졸리딘-5-일]-아세트산 (50.00 mg; 0.11 mmol; 1.00 eq.) 및 2-(3-에톡시-4-메톡시페닐)에틸-1,1,2,2-d ₄-아민 HCl (28.40 mg; 0.12 mmol; 1.10 eq.)로부터 생성물이 얻어졌다. 분리된 44.2mg (63%)의 목적 화합물이 백색 고체로서 얻어졌다.

¹H NMR (500 MHz, cd₃od) δ 7.81 (s, 1H), 7.67 (d, J = 7.6, 1H), 7.50 - 7.29 (m, 11H), 6.87 - 6.69 (m, 3H), 6.42 (s, 1H), 4.50 (dd, J = 8.4, 3.9, 1H), 3.99 (dt, J = 12.3, 6.2, 2H), 3.80 - 3.71 (m, 3H), 3.09 (dd, J = 15.2, 3.8, 1H), 2.90 (dd, J = 15.3, 8.4, 1H), 1.38 - 1.25 (m, 3H).

m/z: 637 ; 638 [M+H]⁺

실시예 5: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-에톡시-4-(메톡시-d ₃)페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 1와 유사한 방법으로, [(2S,5R)-3-(3-카르바모일-페닐)-4-옥소-2-(4-페닐에티닐-페닐)-티아졸리딘-5-일]-아세트산 (50.00 mg; 0.11 mmol; 1.00 eq.) 및 2-(3-에톡시-4-메톡시-d ₃-페닐)에틸-1,1,2,2-d ₄-아민 HCl ((28.77 mg; 0.12 mmol; 1.10 eq.)로부터 생성물이 얻어졌다. 54.2 mg (77%)의 목적 화합물이 백색 고체로서 얻어졌다.

¹H NMR (500 MHz, cd₃od) δ7.83 - 7.79 (m, 1H), 7.69 - 7.65 (m, 1H), 7.50 - 7.26 (m, 11H), 6.80 (dd, J = 8.4, 5.0, 2H), 6.74 (dd, J = 8.1, 2.0, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.52 - 4.46 (m, 1H), 4.02 - 3.94 (m, 2H), 3.09 (dd, J = 15.3, 4.0, 1H), 2.90 (dd, J = 15.3, 8.4, 1H), 1.33 (t, J = 7.0, 3H).

m/z: 640 ; 641 [M+H]⁺

실시예 6: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((2-(3-에톡시-4-(메톡시-d ₃)페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 3와 유사한 방법으로, 3-[(2S,5R)-5-{[2-(3-에톡시-4-히드록시-페닐)-에틸카르바모일]-메틸}-4-옥소-2-(4-페닐에티닐-페닐)-티아졸리딘-3-일]-벤즈아미드 (50.00 mg; 0.08 mmol; 1.00 eq.) 및 디메틸 설페이트-d ₆ (4.10 ?; 0.04 mmol; 0.50 eq.)로부터 생성물이 얻어졌다. 28.9mg (56%)의 목적 화합물은 백색 고체로서 얻어졌다.

¹H NMR (500 MHz, cd₃od) δ7.84 - 7.79 (m, 1H), 7.69 - 7.64 (m, 1H), 7.49 - 7.29 (m, 11H), 6.79 (dd, J = 7.5, 5.0, 2H), 6.74 (dd, J = 8.1, 2.0, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.51 - 4.47 (m, 1H), 4.01 - 3.93 (m, 2H), 3.46 - 3.39 (m, 2H), 3.09 (dd, J = 15.3, 4.0, 1H), 2.90 (dd, J = 15.3, 8.4, 1H), 2.76 - 2.69 (m, 2H), 1.35 - 1.30 (m, 3H).

m/z: 636 ; 637 [M+H]⁺

실시예 7: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((2-(3,4-디메톡시페닐-d ₆l)에틸)아미노)에틸)-2-(4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 3과 유사한 방법으로, 3-[(2S,5R)-5-{[2-(3,4-디히드록시-페닐)-에틸카르바모일]-메틸}-4-옥소-2-(4-페닐에티닐-페닐)-티아졸리딘-3-일]-벤즈아미드 (10.00 mg; 0.02 mmol; 1.00 eq.), 및 디메틸 설페이트-d ₆ (3.44㎕; 0.03 mmol; 2.00 eq.)으로부터 생성물이 얻어졌다. 4.3 mg (41%)의 목적 화합물이 백색 고체로 얻어졌다.

¹H NMR (400 MHz, MeOD)δ7.83 (s, 1H), 7.70 (d, J = 7.5, 1H), 7.53 - 7.32 (m, 11H), 6.82 (d, J = 4.4, 2H), 6.77 (d, J = 8.2, 1H), 6.44 (s, 1H), 4.52 (dd, J = 8.4, 4.0, 1H), 3.46 (t, J = 7.1, 2H), 3.13 (dd, J = 15.3, 4.1, 1H), 2.92 (dd, J = 15.3, 8.5, 1H), 2.77 (t, J = 7.1, 2H).

m/z: 625 ; 626 [M+H]⁺

실시예 8: 3-((2S,5R)-5-(2-((3-에톡시-4-메톡시펜에틸)아미노)-2-옥소에틸)-4-옥소-2-(4-((페닐-d ₅)에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

단계 1: 4-브로모벤즈알데히드 (750.00 mg; 4.05 mmol; 1.00 eq.)에, 아연 클로라이드 (55.25 mg; 0.41 mmol; 0.10 eq.), bis(tri-tert-부틸포스핀)팔라듐(0) (41.43 mg; 0.08 mmol; 0.02 eq.), THF (1.00 ml; 12.34 mmol; 3.04 eq.), 디이소프로필아민 (0.13 ml; 0.92 mmol; 0.23 eq.)을 첨가하였다. 이후 페닐- d ₅-아세틸렌 (477.85 mg; 4.46 mmol; 1.10 eq.)를 첨가하였다. 반응물을 RT에서 밤새 교반하였다. 원하는 생성물을 플래쉬크로마토그래피 (0 내지 20% EtOAC/Hex, 10 CV)으로 여과하여 분리하였다. 206 mg (24%)의 목적 생성물을 밝은 노란색 고체로 얻었다.

단계 2: 실시예 1 단계 1& 2와 유사한 방법으로, 2-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐-d ₅-에티닐)페닐)티아졸리딘-5-일)아세트산이 4-(페닐-d ₅-에티닐)벤즈알데히드 (206mg, 0.98mmol), (S)-2-메르캅토-숙신산 (439.23 mg; 2.93 mmol; 3.00 eq.) 및 3-아미노벤즈아미드 (132.76 mg; 0.98 mmol; 1.00 eq.)으로부터 얻어졌다. 최종 생성물은 제조용 HPLC으로 분리되었다(131mg, 10% 수율, 2 단계 걸침).

¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ7.83 (s, 1H), 7.70 (d, J = 7.3, 1H), 7.43 (dt, J = 14.3, 7.8, 6H), 6.90 - 6.70 (m, 3H), 6.44 (s, 1H), 4.52 (dd, J = 8.2, 3.8, 1H), 4.02 (dd, J = 14.0, 6.9, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.46 (t, J = 7.1, 2H), 3.12 (dd, J = 15.5, 4.4, 1H), 2.92 (dd, J = 15.5, 8.3, 1H), 2.76 (t, J = 7.1, 2H), 1.35 (dd, J = 16.1, 9.1, 3H).

m/z: 638 ; 639 [M+H]⁺

실시예 9: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-에톡시-4-메톡시페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-((페닐-d ₅)에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 1과 유사한 방법으로, 3-[(2S,5R)-5-{[2-(3,4-디히드록시-페닐)-에틸카르바모일]-메틸}-4-옥소-2-(4-페닐- d ₅-에티닐-페닐)-티아졸리딘-3-일]-벤즈아미드 (25.00 mg; 0.05 mmol; 1.00 eq.) 및 2-(3-에톡시-4-메톡시-페닐)에틸-1,1,2,2- d ₄-아민 HCl (11.87mg, 0.06mmol, 1.1 eq.)으로부터 생성물을 얻었다. 목적 생성물(24.5 mg, 70%)이 백색 고체로 얻어졌다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃)δ7.72 (s, 1H), 7.59 (d, J = 7.3, 1H), 7.38 (ddd, J = 15.1, 14.3, 8.4, 5H), 6.91 - 6.60 (m, 3H), 6.21 (s, 1H), 5.83 (s, 1H), 4.48 (dd, J = 7.7, 4.6, 1H), 4.08 (dd, J = 13.7, 6.7, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.17 (dd, J = 15.4, 4.5, 1H), 2.81 (dd, J = 15.4, 8.3, 1H), 1.45 (t, J = 7.0, 3H).

m/z: 642 ; 643 [M+H]⁺

실시예 10: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-에톡시-4-메톡시-d ₃-페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-((페닐-d ₅)에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 1과 유사한 방법으로, 2-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐-d ₅-에티닐)페닐)티아졸리딘-5-일)아세트산 (25.00 mg; 0.05 mmol; 1.00 eq.) 및 2-(3-에톡시-4-메톡시- d ₃-페닐)에틸-1,1,2,2- d ₄-아민 HCl (12.05mg, 0.06mmol, 1.1 eq.)로부터 생성물이 얻어졌다. 29.10 mg의 목적 생성물(83.2%)이 백색 고체로서 얻어졌다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃)δ7.72 (s, 1H), 7.59 (d, J = 7.3, 1H), 7.45 7.30 (m, 5H), 6.81 (d, J = 8.6, 1H), 6.74 (dd, J = 5.7, 2.0, 2H), 6.21 (s, 1H), 5.83 (s, 1H), 4.48 (dd, J = 8.2, 4.4, 1H), 4.08 (dd, J = 14.4, 7.3, 2H), 3.17 (dd, J = 15.4, 4.5, 1H), 2.81 (dd, J = 15.4, 8.3, 1H), 1.45 (t, J = 7.0, 3H).

m/z: 645 ; 646 [M+H]⁺

실시예 11: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-에톡시-4-히드록시페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-((페닐-d ₅)에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 1와 유사한 방법으로, 2-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐-d ₅-에티닐)페닐)티아졸리딘-5-일)아세트산 (16.6 mg; 0.04 mmol; 1.00 eq.), 및 2-(3-에톡시-4-히드록시페닐)에틸-1,1,2,2- d ₄-아민 HCl (8.22mg, 0.06mmol, 1.1 eq.)로부터 생성물이 얻어졌다. 2.5 mg (10%)의 목적 생성물이 백색 고체로서 얻어졌다.

¹H NMR (400 MHz, MeOD)δ 7.83 (s, 1H), 7.70 (d, J = 7.4, 1H), 7.49 7.38 (m, 6H), 7.11 (dd, J = 8.1, 1.6, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.78 (dd, J = 8.2, 2.0, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.53 (dd, J = 7.9, 4.5, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.11 (d, J = 4.0, 1H), 2.92 (dd, J = 15.3, 8.4, 1H).

m/z: 614 ; 615 [M+H]⁺

실시예 12: 3-((2S,5R)-5-(2-((3,4-디히드록시펜에틸)아미노)-2-옥소에틸)-4-옥소-2-(4-((2,3,4,5,6-페닐-d ₅)에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 1과 유사한 방법으로, 32-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐-d ₅-에티닐)페닐)티아졸리딘-5-일)아세트산 (16.6 mg; 0.04 mmol; 1.00 eq.), 및 4-(2-아미노-에틸)-벤젠-1,2-디올 (6.06mg, 0.04 mmol, 1.1 eq.)으로부터 생성물이 얻어졌다. 목적 화합물이 (2.7 mg, 10%)의 백색 고체로서 얻어졌다.

¹H NMR (400 MHz, MeOD)δ 7.82 (s, 1H), 7.70 (d, J = 7.3, 1H), 7.55 7.29 (m, 6H), 7.08 (d, J = 8.0, 1H), 6.86 (dd, J = 25.6, 8.1, 1H), 6.68 (dd, J = 8.2, 1.9, 1H), 6.44 (s, 1H), 4.53 (dd, J = 8.3, 4.0, 1H), 3.44 (qd, J = 13.6, 7.5, 2H), 3.14 (dd, J = 15.2, 4.2, 1H), 2.91 (dd, J = 15.3, 8.5, 1H), 2.81 - 2.70 (m, 2H).

m/z: 596 ; 597 [M+H]⁺

실시예 13: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-에톡시-4-메톡스-d ₃-y페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-((페닐-d ₅)에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 3와 유사한 방법으로, 실시예 11 (55mg, 0.09 mmol, 1 eq.) 및 디메틸 설페이트- d ₅ (4.55㎕; 0.04 mmol; 0.50 eq.)의 생성물로부터 생성물이 얻어졌다. 26 mg (39%)의 목적 생성물이 백색 고체로 얻어졌다.

¹H NMR (400 MHz, MeOD)δ7.83 (d, J = 1.8, 1H), 7.70 (dt, J = 7.4, 1.5, 1H), 7.44 (ddd, J = 19.0, 11.4, 6.5, 6H), 6.83 (dd, J = 5.0, 3.1, 2H), 6.77 (dd, J = 8.2, 1.9, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.53 (dd, J = 8.2, 3.8, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.13 (dd, J = 15.3, 4.1, 1H), 2.92 (dd, J = 15.3, 8.5, 1H).

m/z: 631 ; 632 [M+H]⁺

실시예 14: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-에톡시-4-메톡시페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(2,3,5,6-d ₄-4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

단계 1: 4-클로로벤즈알데히드-2,3,5,6-d ₄ (1.00 g; 6.92 mmol; 1.00 eq.)에 세슘 카보네이트 (4506.86 mg; 13.83 mmol; 2.00 eq.), 2-디시클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필비페닐 (659.40 mg; 1.38 mmol; 0.20 eq.) 및 MeCN (60.00 ml; 1148.76 mmol; 166.10 eq.)을 첨가하였다. 이후, 페닐아세틸렌 (1.12 ml; 10.24 mmol; 1.48 eq.)을 첨가하고 반응 혼합물을 진공/질소로 3번 플러쉬하였다. 이후 디클로로비스(아세토니트릴)팔라듐 (II) (179.42 mg; 0.69 mmol; 0.10 eq.)을 첨가하고 추가로 진공/질소 플러쉬를 하였다. 반응물을 예열된 오일 배스 (83℃)에 넣고 5시간 동안 가열하였다. 생성물은 플래쉬크로마토그래피 (실리카 겔, 100g 컬럼, DCM/헥산)로 분리하였다.

단계 2: 실시예 1 단계 1&2과 유사한 방법으로, 2, 2-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐-에티닐)페닐- d ₄)티아졸리딘-5-일)아세트산을 4-(페닐-에티닐)벤즈알데히드-2,3,,5,6-d ₄ (386 mg, 1.84 mmol), S)-2-메르캅토-숙신산 (826.95 mg; 5.51 mmol; 3.00 eq.) 및 3-아미노벤즈아미드 (249.95 mg; 1.84 mmol; 1.00 eq.)로부터 얻었다. 최종 생성물을 제조용 HPLC. (27 mg, 5% 수율, 2 단계에 걸침)로 분리하였다.

단계 3: 실시예 1과 유사한 방법으로, 2, 2-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐-에티닐)페닐-d ₄)티아졸리딘-5-일)아세트산 (13 mg, 0.02mmol), 및 2-(3-에톡시-4-메톡시페닐)에틸-1,1,2,2- d ₄-아민 HCl (5.87mg, 0.02mmol, 1.1 eq.)로부터 생성물을 얻었다. 6.3 mg (43%)의 목적을 백색 고체로 얻었다.

¹H NMR (400 MHz, MeOD)δ7.83 (d, J = 1.7, 1H), 7.73 - 7.63 (m, 1H), 7.54 - 7.27 (m, 7H), 6.88 - 6.72 (m, 3H), 6.44 (d, J = 0.8, 1H), 4.52 (dd, J = 8.2, 3.9, 1H), 4.07 - 3.95 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.12 (dd, J = 15.3, 4.1, 1H), 2.92 (dd, J = 15.3, 8.4, 1H), 1.35 (t, J = 7.0, 3H).

m/z: 641 ; 642 [M+H]⁺

실시예 15: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-에톡시-4-메톡시-d ₃-페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(2,3,5,6-d ₄-4-(페닐에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

실시예 1와 유사한 방법으로, 2, 2-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐-에티닐)페닐-d ₄)티아졸리딘-5-일)아세트산 (13 mg, 0.02mmol), 및 2-(3-에톡시-4-메톡시-d ₃-페닐)에틸-1,1,2,2-d ₄-아민 HCl (5.87mg, 0.02mmol, 1.1 eq.)으로부터 생성물이 얻어졌다. 목적 화합물은 백색 고체로서 얻어졌다(8.5 mg 58%).

¹H NMR (400 MHz, MeOD)δ7.83 (t, J = 1.7, 1H), 7.70 (dt, J = 7.4, 1.5, 1H), 7.51 - 7.33 (m, 7H), 6.82 (dd, J = 7.0, 5.1, 2H), 6.77 (dd, J = 8.1, 2.0, 1H), 6.44 (d, J = 0.9, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 4.06 - 3.97 (m, 2H), 3.12 (dd, J = 15.3, 4.1, 1H), 2.92 (dd, J = 15.3, 8.4, 1H), 1.36 (t, J = 7.0, 3H).

m/z: 644 ; 645 [M+H]⁺

실시예 16: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-에톡시-4-메톡시-d ₃-페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(2,3,5,6-d ₄-4-(페닐에티닐)페닐-d ₅)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

단계 1: 실시예 14와 유사한 방법으로, 단계 1, 4-(페닐-d ₅-에티닐)벤즈알데히드-2,3,4,6-d ₄가 4-클로로벤즈알데히드-2,3,5,6-d ₄ (2.79 g; 19.30 mmol; 1.00 eq.), 및 에티닐-벤젠-d ₅ (3.10 g; 28.93 mmol; 1.50 eq.)로부터 얻어졌다. 분리된 3.16 g (76%)의 4-(페닐-d ₅-에티닐)벤즈알데히드-2,3,5,6-d ₄을 오프화이트 고체로서 얻어졌다.

단계 2: 실시예 1와 유사한 방법으로, 단계 1&2, 2-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐-d ₅-에티닐)페닐- d ₄)티아졸리딘-5-일)아세트산이 4-(페닐-d ₅-에티닐)벤즈알데히드-2,3,5,6-d ₄ (2.00 g; 9.29 mmol; 1.00 eq.), (S)-2-메르캅토-숙신산 (4.18 g; 27.87 mmol; 3.00 eq.) 및 3-아미노벤즈아미드 (1.26 g; 9.29 mmol; 1.00 eq.)로부터 얻어졌다. 최종 생성물은 제조용 HPLC. (276 mg, 10% 수율, 2 단계 걸침)에 의해 얻어졌다.

단계 3: 실시예 1와 유사한 방법으로, 생성물이 2-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐-d ₅-에티닐)페닐- d ₄)티아졸리딘-5-일)아세트산 (60 mg, 0.13 mmol), 및 2-(3-에톡시-4-메톡시-d ₃-페닐)에틸-1,1,2,2-d ₄-아민 HCl (33.85 mg, 0.14 mmol, 1.1 eq.)로부터 얻어졌다. 60 mg (72%)의 목적 화합물이 백색 고체로서 얻어졌다.

¹H NMR (400 MHz, MeOD)δ7.83 (s, 1H), 7.70 (d, J = 7.5, 1H), 7.50 - 7.35 (m, 2H), 6.79 (ddd, J = 10.1, 9.0, 5.1, 3H), 6.44 (s, 1H), 4.52 (dd, J = 8.3, 4.0, 1H), 4.01 (q, J = 7.0, 2H), 3.12 (dd, J = 15.3, 4.1, 1H), 2.92 (dd, J = 15.3, 8.4, 1H), 1.35 (t, J = 7.0, 3H).

m/z: 649 ; 650 [M+H]⁺

실시예 17: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3,4-디메톡시-d ₆-페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(2,3,5,6-d ₄-4-(페닐에티닐)페닐-d ₅)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

단계 1: 실시예 1와 유사한 방법으로, 생성물이 2-((2S,5R)-3-(3-카르바모일페닐)-4-옥소-2-(4-(페닐-d ₅-에티닐)페닐-d ₄)티아졸리딘-5-일)아세트산 (50 mg, 0.11 mmol) 및 2-(3,4-디히드록시)에틸-1,1,2,2-d ₄-아민 HCl (22.8 mg, 0.12 mmol, 1.1 eq.)으로부터 얻어졌다. 분리된 6 mg (9%)의 생성물이 백색 고체로 얻어졌다.

단계 2: 실시예 3와 유사한 방법으로, 생성물이 실시예 17 단계 1 의 생성물(6 mg, 0.01 mmol) 및 디메틸 설페이트-d ₆ (0.5 ㎕; 0.005 mmol; 0.50 eq.)로부터 얻어졌다. 분리된 3.2 mg (52%)의 목적 생성물이 백색 고체로서 얻어졌다.

¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.83 (d, J = 1.7, 1H), 7.70 (d, J = 7.5, 1H), 7.43 (dt, J = 15.4, 4.8, 2H), 6.83 (dd, J = 5.0, 3.1, 2H), 6.77 (dd, J = 8.2, 1.9, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.53 (dd, J = 8.4, 4.0, 1H), 3.12 (dd, J = 15.3, 4.1, 1H), 2.92 (dd, J = 15.3, 8.5, 1H).

m/z: 638 ; 639 [M+H]⁺

실시예 18:

실시예 17의 생성물(100.00 mg; 0.16 mmol; 1.00 eq.)이 용해된 MeCN (3.80 ml; 72.75 mmol; 464.79 eq.) 및 물 (0.20 ml; 11.10 mmol; 70.92 eq.) (10:1)에 1 mL 용액의 1-클로로메틸-4-플루오로-1,4-디아조니아비시클로[2.2.2]옥탄 bis(테트라플루오로보레이트) (66.54 mg; 0.19 mmol; 1.20 eq.)이 용해된 MeCN (2mL) 및 물 (0.2mL)을 첨가하였다. 상기 반응물을 RT에서 30 min 동안 교반하였다. 생성물을 제조용 HPLC (40% ACN/60% 물에서 5min 동안, 이후 최대 60% ACN/40% 물에서 20min 동안, 254nm, 0.1%TFA)으로 분리하였다. 36 mg (30%)의 목적 생성물을 백색 고체로서 얻어졌다. 술폭시드에서의 입체 화학이 임의적으로 할당되었다.

¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ7.85 (s, 1H), 7.68 (d, J = 7.5, 1H), 7.48 - 7.35 (m, 2H), 6.93 - 6.84 (m, 2H), 6.79 (dd, J = 8.1, 1.9, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.55 (dd, J = 10.6, 3.8, 1H), 3.23 (dd, J = 16.8, 3.8, 1H), 3.02 (dd, J = 16.7, 10.7, 1H).

m/z: 654 ; 655 [M+H]⁺

실시예 19:

실시예 17의 생성물 (80.00 mg; 0.13 mmol; 1.00 eq.)이 용해된 디클로로메탄 (2mL)에 3-클로로퍼벤조산 (28.06 mg; 0.13 mmol; 1.00 eq.)이 첨가되었다. 상기 반응물을 RT에서 1h 동안 교반하였다. 생성물이 제조용 HPLC (40 내지 65% ACN/물, 20 min 동안, 0.1% TFA)으로 분리하였다. 46.2 mg (48%)의 목적 생성물이 백색 고체로서 얻어졌다. 술폭시드에서 입체화학은 임의적으로 얻어졌다.

¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.07 (s, 1H), 7.79 (d, J = 7.9, 1H), 7.71 (d, J = 9.4, 1H), 7.53 (t, J = 8.0, 1H), 6.86 (dd, J = 7.0, 5.1, 2H), 6.77 (dd, J = 8.1, 2.0, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.41 (dd, J = 10.5, 4.0, 1H), 3.17 - 3.10 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 16.8, 10.5, 1H).

m/z: 654 ; 655 [M+H]⁺

실시예 20 및 21:

실시예 20 실시예 21

실시예 16의 생성물 (45.00 mg; 0.07 mmol; 1.00 eq.)이 용해된 디클로로메탄에 3클로로퍼벤조산 (15.52 mg; 0.07 mmol; 1.00 eq.)을 첨가하였다. 상기 반응물이 RT에서 4h 동안 교반하였다. 생성물은 제조용 HPLC (40 내지 65% ACN/물, 20 min 동안, 0.1% TFA)에 의해 정제되었다. 실시예 20의 생성물이 53%에서 용리되었다. 분리된 3.7 mg의 실시예 20 (7%)이 백색 고체로서 얻어졌다. 실시예 21의 생성물이, 55%에서 용리되었다. 10.6 mg (20%)의 실시예 21 생성물이 백색 고체로서 얻어졌다. 술폭시드에서의 입체 화학이 임의적으로 할당되었다.

실시예 20:

¹H NMR (500 MHz, cd₃od) δ 7.86 (d, J = 14.5, 1H), 7.67 (d, J = 8.0, 1H), 7.58 - 7.23 (m, 2H), 7.07 - 6.68 (m, 3H), 6.54 (s, 1H), 4.54 (d, J = 7.0, 1H), 4.06 (q, J = 6.8, 2H), 3.24 - 3.08 (m, 1H), 3.00 (dd, J = 16.8, 10.9, 1H), 1.38 (t, J = 7.0, 3H).

m/z: 654 ; 655 [M+H]⁺

실시예 21:

¹H NMR (500 MHz, cd₃od)δ 8.06 (s, 1H), 7.74 (dd, J = 34.9, 8.1, 2H), 7.51 (t, J = 7.9, 1H), 6.97 - 6.68 (m, 3H), 6.40 (s, 1H), 4.39 (dd, J = 10.5, 3.9, 1H), 4.05 (q, J = 7.0, 2H), 3.18 - 3.02 (m, 1H), 2.89 (dd, J = 16.8, 10.6, 1H), 1.43 - 1.23 (m, 3H).

m/z: 654 ; 655 [M+H]⁺

실시예 22: 3-((2S,5R)-4-옥소-5-(2-옥소-2-((1,1,2,2-d ₄-2-(3-에톡시-4-메톡시페닐)에틸)아미노)에틸)-2-(4-((페닐)에티닐)페닐)티아졸리딘-3-일)벤즈아미드

단계 1: [(2S,5R)-3-(3-카르바모일-페닐)-4-옥소-2-(4-페닐에티닐-페닐)-티아졸리딘-5-일]-아세트산 (150.00 mg; 0.33 mmol; 1.00 eq.)이 용해된 톨루엔(1.00 ml)에, N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (0.06 ml; 0.33 mmol; 1.00 eq.), 디페닐 아지도포스페이트 (0.08 ml; 0.38 mmol; 1.15 eq.) 및 2-메틸프로판-2-올(1.00 ml)이 첨가되었다. 혼합물을 5 시간 동안 100℃로 가열하였다. 반응물을 냉각, 농축 및 플래쉬크로마토그래피 (실리카 겔 10g, 0 내지 5% MeOH/EtOAc)로 정제하였다. 분리된 91 mg의 [(2S,5R)-3-(3-카르바모일-페닐)-4-옥소-2-(4-페닐에티닐-페닐)-티아졸리딘-5-일메틸]-카르밤 산 tert-부틸 에스테르 (53%)가 오프화이트 고체로서 얻어졌다.

단계 2: [(2S,5R)-3-(3-카르바모일-페닐)-4-옥소-2-(4-페닐에티닐-페닐)-티아졸리딘-5-일메틸]-카르밤 산 tert-부틸 에스테르 (90.00 mg; 0.17 mmol; 1.00 eq.)이 용해된 디클로로메탄 (1.00 ml)에, 트리플루오로아세트산 (50.00㎕ ; 0.67 mmol; 3.93 eq.)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성물을 플래쉬크로마토그래피 (KPNH, 10g, 0 내지 20% MeOH/DCM)으로 정제하였다. 분리된 53 mg의 3-[(2S,5R)-5-아미노메틸-4-옥소-2-(4-페닐에티닐-페닐)-티아졸리딘-3-일]-벤즈아미드 (77%)가 백색 고체로서 얻어졌다.

단계 3: 3-[(2S,5R)-5-아미노메틸-4-옥소-2-(4-페닐에티닐-페닐)-티아졸리딘-3-일]-벤즈아미드 (30.00 mg; 0.07 mmol; 1.00 eq.)이 용해된 DCM (2.00 ml; 31.20 mmol; 444.63 eq.)에, 3-(3-에톡시-4-메톡시페닐)프로파노익-2,2,3,3-d ₄ 산 (19.22 mg, 0.08 mmol, 1.1 eq.), N,N-디이소프로필에틸아민 (0.01 ml; 0.08 mmol; 1.20 eq.) 및 2,4,6-트리프로필-1,3,5,2,4,6-트리옥사트리포스피네인 2,4,6-트리옥시드 (0.03 ml; 0.11 mmol; 1.50 eq.)을 첨가하였다. 반응물이 RT에서 1h 동안 교반하였다. 생성물이 플래쉬크로마토그래피 (KPNH, 0 내지 20% MeOH/DCM)에 의해 정제되었다. 목적 생성물이 백색 고체(30.1 mg 68%)로서 얻어졌다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃)δ 7.73 (s, 1H), 7.66 (d, J = 7.9, 1H), 7.52 (dd, J = 12.3, 5.4, 2H), 7.44 (d, J = 8.3, 2H), 7.36 (dd, J = 5.8, 2.6, 3H), 7.27 - 7.19 (m, 3H), 6.83 (d, J = 8.8, 1H), 6.80 - 6.74 (m, 2H), 6.45 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.14 - 4.03 (m, 3H), 4.02 - 3.95 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.53 (d, J = 12.7, 1H), 1.42 (t, J = 7.0, 3H).

m/z: 637 ; 638 [M+H]⁺

CHO FSHR 세포 + EC ₂₀ FSH 에서 시클릭 AMP 생성의 EC ₅₀

2500 Cho-FSHR-LUC-1-1-43 세포들을 웰당 5㎕ 의 페놀 레드 프리 DMEM/F12 + 1% FBS에 플레이팅하였다. 세포들을 384웰, 백색 고체 낮은 부피 플레이트 (Greiner 784075)에 Multidrop으로 플레이팅하였다. 세포를 100 ㎕의 2X EC₂₀ FSH/IBMX가 용해된 DMEM/F12 + 0.1 % BSA)를 Multidrop으로 2㎕의 시험 화합물이 스팸프된 384 웰 플레이트 (화합물은 1:50로 희석됨)에 첨가하여 분석하였다. 최종 FSH농도가 0.265 pM이고, 최종 IBMX 농도가 200μM이었다. 화합물 플레이트 맵은 다음과 같다: 컬럼 1: 2㎕의 DMSO; 컬럼 2: 2㎕의 DMSO; 컬럼 3-12 및 13-24: 2 ㎕의 시험 화합물로서, 1:4로 100% DMSO에서 희석되거나, 또는 2㎕의 FSH가, 1:4로 DMEM/F12+0.1% BSA에서 희석됨. FSH에 대한 출발 농도는 50 nM (최종 농도는 0.5 nM임)이었다. 게다가, 컬럼 23은 최종 농도 0.5 nM로 2㎕의 EC₁₀₀ FSH 참조 (100X) (DMEM/F12 + 0.1% BSA에서 희석됨)를 포함하고, 및 컬럼 24는 2㎕의 1 mM AS707664/2 참조 화합물 2를 포함하였다. 5㎕의 화합물 + EC₂₀ FSH 혼합물을 셀 플레이트(1:2로 5㎕의 세포 매체에서 희석됨)로 이송하였다. 상기 플레이트는 37℃에서 1h 동안 배양되었다. 10㎕의 혼합된 HTRF (CisBio # 62AM4PEC) 시약이 웰당 첨가되었고 실온에서 1h 동안 배양되었다. 상기 플레이트는 cAMP HTRF - 낮은 부피의 384 웰 프로토콜을 사용하여 Envision에서 해독되었다. 계산된 형광비(665 nm / 620 nm)가 판독되었다.

결과들은 표 1에 나타내었다.

내인성 청소율 ( Clint ) 분석 프로토콜:

기기장치

Tecan Genesis workstation (RSP 150/8)은, 미립체적 배양(microsomal incubation)을 수행하기 위하여 사용되었다. 분석은 ABSciex API3000 mass 분광기에 결합된 Waters ACQUITY UPLC 시스템을 사용하여 수행하였다. 데이터 분석은 Assay Explorer (Symyx)을 사용하여 수행하였다.

UPLC 조건

컬럼　: Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50mm, 1.7 um (물)

이동상　: A = 0.1 % 포름산이 용해된 물

B = 아세토니트릴

그래디언트: 시간 %A %B

초기 90 10

0.47 5 95

0.65 5 95

0.66 90 10

흐름 속도: 0.750 mL/min

검출: ESI, MRM

주사: 10 uL

컬럼 온도: 50℃

화학물질

1 mM MgCl₂을 포함하는0.1 M 포타슘 포스페이트 완충액 pH 7.4

15 mM NADPH이 용해된 포스페이트 완충액

4.4 mg 단백질/mL 간 마이크로솜이 용해된 포스페이트 완충액

아세토니트릴 20% DMSO이 용해된 물

미립체적 배양

12 시험 및 2 참조 화합물로 이루어지는 각 실험예. 참조 화합물은 칵테일로서 배양된다.

시험 화합물의 희석액을 10 mM DMSO stock 용액으로부터 2 단계로 수행되었다.

첫번째로 4 ㎕ stock 용액을 196 ㎕의 20% DMSO이 용해된 포타슘 포스페이트 완충액 pH 7.4에 첨가하였다. 두 번째 단계로 10 ㎕의 첫번째 희석액을 1890㎕ 포타슘 포스페이트 완충액 및 100㎕ 내부 표준 용액에 첨가하여 최종 농도의 0.8 μM이 되게 하였다.

100㎕의 최종 화합물 희석액을 96 딥 웰 플레이트로 나누었다. 12.5㎕ 간 마이크로솜을 각 웰(0.5 mg/mL 최종 단백질 농도)에 첨가하고 샘플을 5 min동안 37℃에서 800 rpm 교반으로 예비배양하였다.

예비배양 후, 250㎕ 차가운 아세토니트릴을 상기 0 min 샘플에 첨가하여 반응을 방지하였다. 이에 따라서, 12.5㎕ NADPH 용액을, 코펙터없는 0 min 및 30 min 대조군을 제외한 모든 웰에 첨가하여 배양을 시작하고, 여기서 NADPH가 포스페이트 완충액으로 치환되었다.

배양은 각 웰에 250㎕ 차가운 아세토니트릴을 첨가한 후 5, 10, 20 및 30 min 후에 멈추었다.

종결된 샘플을 이후 4℃에서 1h 동안 4000g에서 원심분리하였다. 100㎕의 상층액을 분석을 위하여 96웰 플레이트에 옮겼다.

데이터 분석

각 화합물의 대사 안정성이 시간에 따라 LC-MS/MS 피크에서의 변화를 측정하여 결정되었다. Assay Explorer software를 사용하여 자동적으로 기울어짐의 기울기 k를 계산하였다. 각 화합물의 내인성 청소율 (Clint)은 이후 다음 식에 따라 계산되었다:

Clint (㎕/min/mg 단백질) = k 1000 /단백질 농도.

결과의 분류

결과들은 표 1에 나타낸다.

화합물	cAMP 생성물의 EC ₅₀ [ nM (% effect )]	Clint (인간/ 래트 ) [㎕/ min / mg 단백질]
참조 화합물	0.3 (98)	182/120
1	0.87 (99)	67/31
2	1.9 (97)	106/24
3	1.7 (97)	111/29
4	0.7 (99)	191/51
5	0.8 (99)	168/45
6	0.7 (96)	208/56
7	0.5 (99)	184/44
8	1.7 (99)	188/54
9	0.3 (97)	181/31
10	0.3 (98)	161/23
11	335 (99)
12	220 (99)
13	1.3 (97)
14	2 (99)	492/95
15	0.6 (99)
16	0.7 (100)
17	0.9 (100)
18	0.7 (101)
19	101 (100)	127/61
20	25 (103)	35/18
21	113 (103)	351/241
22	349 (101)	46/11

Claims

식 (I)에 따른 중수소화 티아졸리디논 유도체, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 모든 비의 이들의 혼합물:

여기서:
각 Y는 서로 독립적으로 수소 (H), 중수소 (D)로 이루어진 군으로부터 선택되며;
X는 S, 술폭시드로 이루어진 군으로부터 선택되며;
R1, R2는 서로 독립적으로 수소 (H), 중수소 (D), 메틸, CH₂D, CHD₂, CD₃, 에틸, CHDCH₃, CHDCH₂D, CHDCHD₂, CHDCD₃, CD₂CH₃, CD₂CH₂D, CD₂CHD₂, CD₂CD₃로 이루어진 군으로부터 선택되며;
단, 적어도 하나의 Y가 중수소 (D)이거나 또는 적어도 R1, R2 중 하나는 적어도 하나의 중수소 (D)을 포함하며;
선택적으로, 적어도 하나의 탄소 원자는 서로 독립적으로 ¹³C으로 대체된다.
제1항에 있어서,
여기서 적어도 하나의 탄소 원자는 ¹³C에 의해 대체되는 것인,
중수소화 티아졸리디논 유도체, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 모든 비의 이들의 혼합물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)인,
중수소화 티아졸리디논 유도체, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 모든 비의 이들의 혼합물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅가 중수소 (D)인,
중수소화 티아졸리디논 유도체, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 모든 비의 이들의 혼합물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
Y₆, Y₇, Y₈, Y₉ 가 중수소 (D)인,
중수소화 티아졸리디논 유도체, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 모든 비의 이들의 혼합물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
R₁ 및/또는 R₂ 는 CD₃인,
중수소화 티아졸리디논 유도체, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 모든 비의 이들의 혼합물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 다음으로 정의된, 중수소화 티아졸리디논 유도체, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 모든 비의 이들의 혼합물:
(a) Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이고, 다른 Y가 수소 (H)이고, R1, R2 중 어느 하나도 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않고; 또는
(b) Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이고 다른 Y는 수소 (H)이고, R1, R2 중 하나는 CD₃ 이고, 다른 R1, R2 중 하나는 하나 이상의 중수소 (D)을 포함하지 않고; 또는
(c) 모든 Y은 수소 (H)이고, R1, R2 중 하나는 CD₃이고, R1, R2 중 다른 하나는 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않고; 또는
(d) Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅는 중수소 (D)이고 다른 Y는 수소 (H)이고, R1, R2 중 어느 하나도 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않고; 또는
(e) 모든 Y는 수소 (H)이고 R₁, R₂ 모두는 CD₃ 이고; 또는
(f) Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅, Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이고, 다른 Y는 수소 (H)이고, R1, R2 중 어느 하나도 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않고; 또는
(g) Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅, Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이고, 다른 Y는 수소 (H)이고, R1, R2 중 하나는 CD₃ 이고, R1, R2 중 다른 하나는 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않고; 또는
(h) Y₆, Y₇, Y₈, Y₉, Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이고, 다른 Y는 수소 (H)이고, R1, R2 중 하나는 CD₃ 이고, R1, R2 중 다른 하나는 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않고; 또는
(i) Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅, Y₆, Y₇, Y₈, Y₉, Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이고, 다른 Y는 수소 (H)이고, R₁, R₂ 둘 다 CD₃이고; 또는
(j) Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, Y₅, Y₆, Y₇, Y₈, Y₉, Y₁₅, Y₁₆, Y₁₇, Y₁₈ 는 중수소 (D)이고, 다른 Y는 수소 (H)이고, R1, R2 중 하나는 CD₃ 이고, R1, R2 중 다른 하나는 하나 이상의 중수소 (D)를 포함하지 않는다.
다음 군으로부터 선택된, 중수소화 티아졸리디논 유도체, 중수소화 티아졸리디논 유도체, 이들의 생리학적으로 허용가능한 염, 용매 화합물, 토우토머 및 스테레오아이소머, 모든 비의 이들의 혼합물:
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 적어도 하나의 화합물을 포함하는 약제.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 적어도 하나의 화합물을 포함하고, 생식 장애의 예방 또는 치료적 치료 및/또는 모니터링에서 사용되기 위한 약제.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 적어도 하나의 화합물의 치료적으로 효과적인 함량, 선택적으로 생리학적으로 허용가능한 부형제, 보조제, 아주반트, 희석제, 담체 및/또는 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 화합물 외에 추가적 약제학적으로 활성 물질을 더 포함하는 약제학적 조성물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 적어도 하나의 화합물의 치료학적으로 유효한 함량 및/또는 제11항에 따른 적어도 하나의 약제학적 조성물 및 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 화합물외 적어도 하나의 약물학적 활성물질을 치료학적으로 유효한 함량으로 더 포함하는 키트.
양성 앨로스테릭 방법으로 FSH 수용체를 조절하는 방법이고, 여기서 FSH 수용체를 발현할 수 있는 세포를 FSH 존재하에서 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 적어도 하나의 화합물 또는 제11항에 따른 적어도 하나의 약제학적 조성물과 접촉시킨, FSH 수용체를 조절하는 방법.
생식 장애 치료 방법이고, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 적어도 하나의 화합물 또는 제11항에 따른 적어도 하나의 약제학적 조성물을 치료학적으로 유효한 함량으로 그러한 치료가 필요한 포유류에 투여하는 생식 장애 치료방법.
다음 단계를 포함하는 인비트로 수정 방법:
(a) 제14항의 방법에 따라 포유류를 치료하는 단계,
(b) 상기 포유류로부터 난자를 수집하는 단계,
(c) 상기 난자를 수정하는 단계, 및
(d) 호스트 포유류 내로 상기 수정된 난자를 이식시키는 단계.