KR20140095167A - 호노키올 및 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

호노키올 및 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 호노키올 및 마그놀올을 유효성분으로 하고 상기 호노키올 및 마그놀올을 1 : 1.5 내지 1 : 3 중량비로 함유하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물, 및 지방간 질환 개선용 건강기능식품에 관한 것이다. 본 발명은 호노키올과 마그놀올을 특정 조성비로 함유함으로써 중성지방 축적을 낮춰 지방간 질환 예방 또는 치료에 효과적인 약학 조성물이나 건강기능식품을 제공한다.

Description

호노키올 및 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 조성물 {Pharmaceutical composition for the prevention or treatment of fatty liver diseases comprising honokiol and magnolol as an effective ingredient}
본 발명은 호노키올 및 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
지방간은 만성적인 음주벽, 과식에 의한 비만증과 당뇨병이 주요 원인으로 꼽히며, 그밖에 독성이 강한 약제의 복용, 임신중에 항생제를 잘못 복용하였을 경우, 어린아이에게서의 발열성 감염질환이 있을 경우에 해열목적으로 아스피린을 함부로 남용하였을 경우에도 지방간은 생길 수 있다.
이러한 지방간은 면역상태 등의 신체적 여건이 좋으면 간세포의 재생으로 쉽게 회복되지만 그렇지 못할 경우에는 간세포 속의 지방 덩어리가 커지면서 핵을 포함한 세포의 중요한 구성성분이 한쪽으로 밀려 간세포의 기능이 저하되며, 세포내에 축적된 지방으로 인하여 팽창된 간세포들이 간세포 사이에 있는 미세혈관과 임파선을 압박하여 간내의 혈액과 임파액의 순환에 장애가 생기게 되고, 간세포는 산소와 영양공급을 적절히 받을 수 없어 간기능이 저하되며, 간경변증까지 진행될 수가 있다.
한편 후박(Magnolia cortex)에는 일본후박나무(Magnolia obovata Thunberg), 중국후박나무(Magnolia officinale Rehder et Wils) 및 왕후박나무(Machilus thunbergii Sieb. et Zucc)가 있으며, 후박나무의 성분으로는 β-유데스몰(β-eudesmol), 마그놀올(magnolol), 호노키올(honokiol), 마그노쿠라린(magnocurarine), 탄닌(tannin) 등이 있으며, 상기 성분 중 마그놀올(magnolol) 및 호노키올(honokiol)은 클로로헥시딘과 같은 기존의 항생물질보다 더욱 안전하고 뛰어난 항생 효과를 가진다는 사실이 입증된 바 있다(대한민국 특허공개 제1999-1000001호).
대한민국 등록특허 제0919625호에서는 호노키올을 주요 유효성분으로 함유하는 후박 추출물 또는 후박 추출정제물이 지방간 질환 치료제의 성분으로 사용될 수 있고, 대한민국 등록특허 제0895500호에서는 후박에서 분리, 정제된 호노키올이 지방간 질환 치료제의 성분으로 사용될 수 있음을 밝히고 있으나, 상기 호노키올이 마그놀올과 특정 조성비로 혼합되었을 때 중성지방 축적 억제 효과가 현저히 증진된다는 사실은 밝혀진 바 없다.
본 발명은 호노키올과 마그놀올을 특정 조성비로 함유함으로써 중성지방 축적을 낮춰 지방간 질환 예방 또는 치료에 효과적인 약학 조성물이나 건강기능식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 호노키올 및 마그놀올을 유효성분으로 하고, 상기 호노키올 및 마그놀올을 1 : 1.5 내지 1 : 3 중량비로 함유하는 것을 특징으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 호노키올 및 마그놀올은 각각 합성되거나 분리, 정제된 단품을 상기 조성비로 혼합할 수 있고, 후박(Magnolia cortex)에서 상기 조성비를 가지도록 추출방법이나 조건을 조절하여 제조될 수 있다. 바람직하게는 상기 호노키올 및 마그놀올을 건조고형분 기준으로 호노키올 3 내지 20 중량% 및 마그놀올 5 내지 30 중량%를 함유하는 후박(Magnolia cortex) 추출물에서 유래된 것을 사용한다.
본 발명의 후박 추출물 제조에 사용되는 후박은 일본후박나무(Magnolia obovata Thunberg), 중국후박나무(Magnolia officinale Rehder et Wils), 왕후박나무(Machilus thunbergii Sieb. et Zucc)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하며, 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다.
또한 본 발명의 약학 조성물은 호노키올과 마그놀올을 1 : 1.5 내지 1 : 3 중량비, 바람직하게는 1 : 1.8 내지 1 : 2.4 중량비로 함유하는 것으로, 호노키올 함량이 상기 상한치 또는 하한치 범위를 벗어나는 경우에는 지방축적 억제 활성이 저하된다.
본 발명의 후박 추출물을 얻기 위해서는 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 후박을 추출한 후, 에틸아세테이트, 클로로포름, 헥산 또는 이들 혼합물로 추출한 분획물인 것이 바람직하다. 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것이 더욱 바람직하며, 에탄올인 것이 가장 바람직하다. 추출시 건조된 후박을 세절한 후 물, 알코올 또는 이의 혼합물을 후박 무게의 2배 내지 10배를 첨가하여 추출하는 것이 바람직하고, 3배 내지 5배를 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출온도는 30℃ 내지 100℃인 것이 바람직하며, 80℃ 내지 100℃인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출시간은 1시간 내지 5시간인 것이 바람직하며, 2시간 내지 3시간인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출방법은 냉침, 초음파 추출 또는 환류 냉각 추출방법이 모두 이용가능하며, 환류 냉각 추출방법을 이용하는 것이 바람직하다. 추출 회수는 1회 내지 5회인 것이 바람직하며, 4회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
또한 본 발명에 따른 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구제 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화되어 사용할 수 있고, 제형화를 위하여 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다.
상기 담체 또는, 부형제 또는 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리게이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 포함한 다양한 화합물 혹은 혼합물을 들 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 중량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조할 수 있다.
경구 투여를 위한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘보네이트, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 제조할 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용할 수 있다.
경구를 위한 액상 제제로는 현탁액, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용하는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수용성제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등을 사용할 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤젤라틴 등을 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은 지방간 질환 치료 효과를 발휘하기 위해서 단위 제형당 상기 호노키올 및 마그놀올이 50 내지 500 mg, 바람직하게는 100 내지 300 mg 함유된다.
또한 본 발명에 따른 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서는 1일 0.0001 내지 2,000 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 2,000 mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한 번 투여할 수도 있고, 수회 나누어서 투여할 수도 있다. 다만, 상기 투여량에 의해서 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명에 따른 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유 동물에 다양한 경로로 투여할 수 있다. 투여의 모든 방식은 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해서 투여할 수 있다.
또한, 본 발명은 지방간 질환 개선용 건강기능식품일 수 있다. 본 발명에 따른 추출물을 건강기능식품의 첨가물로 사용하는 경우 본 발명에 따른 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 예방, 건강 또는 치료 등의 각 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있다.
건강기능식품의 제형은 산제, 과립제, 환, 정제, 캡슐제의 형태뿐만 아니라 일반 식품 또는 음료의 형태 어느 것이나 가능하다.
상기 식품의 종류에는 특별히 제한은 없고, 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸콜렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함할 수 있다.
일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명에 따른 추출물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가할 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 또한 본 발명은 천연물로부터의 추출물을 이용하는 점에서 안전성 면에서 문제가 없으므로 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품 중 음료는 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명에 따른 음료 100 mL당 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g일 수 있다.
상기 외에 본 발명에 따른 간 기능 개선용 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제를 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 수면 개선용 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 제한되지 않으나 본 발명의 건강기능식품 100 중량부 대비 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명의 약학 조성물이나 건강기능식품은 호노키올과 마그놀올을 특정 조성비로 함유함으로써 중성지방 축적을 낮춰 지방간 질환 예방 또는 치료로 이용될 수 있다.
본 발명의 실험예에서 시료 1 내지 4의 상대적인 지방 축적비율을 나타낸 그래프이다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
제조예: 호노키올 및 마그놀올 조성비가 다른 후박 추출물의 제조
경동시장에서 구입한 건조 후박을 1 kg에 물 또는 에탄올 8 L를 가하여 100℃에서 3시간 동안 환류냉각 추출한 후 여과하여 감압농축기(EYELA사, N-1000, 일본)로 감압농축하여 건조된 추출물을 수득하여 물 1L에 현탁시킨 후 동량의 에틸아세테이트, 클로로포름 또는 헥산 및 에틸아세테이트 1:1 부피비 혼합용매로 분배하여 감압농축한 후 각각의 후박 추출물을 얻었다.
상기 후박 추출물의 수율을 표 1에 기재하고, 호노키올 및 마그놀올의 함량을 Agilent Eclipse Plus C18 HPLC column (4.6 x 250 mm, 5㎛), 이동상으로 물 : 아세토니트릴 : 아세트산무수물을 50 : 50 : 1 부피비로 혼합하여 이용하여 유속 1.5 mL/min, UV 289 nm에서 검출하여 HPLC방법으로 측정하여 표 1에 나타내었다.
구분 수율
(%)		 호노키올
(중량%)		 마그놀올
(중량%)		 호노키올:마그놀올
(중량비)
시료1 1.5 1.15 6.35 1:5.52
시료2 7.0 10.70 23.70 1:2.21
시료3 5.6 17.82 29.87 1:1.67
시료4 6.7 25.23 16.97 1:0.67
실험예: 지방축적 억제효능 비교
[H4IIEC3 세포 배양]
설치류 간암세포인 H4IIEC3 세포는 ATTC(American Type Culture Collection)사에서 구입하여 사용하였다. H4IIEC3 세포는 10% FBS, 100 U/ml 페니실린, 100 mg/ml 스트렙토마이신이 포함된 RPMI1640 배지로 배양하였다. 세포는 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였고 배양된 세포는 96-웰에 일정한 수의 세포를 분주하여 실험하였다.
96-웰에 세포를 1 ml (1×104/ml)씩 분주한 후 세포가 96-웰에 완전히 붙어 세포의 모양을 제대로 갖출 때까지 12~16시간 이상 CO2 세포배양기 안에서 안정화시켰다. 다음으로 상기 세포에 에탄올 처리를 하였다. 구체적으로 에탄올 처리로는 50mM의 에탄올을 세포에 처리하거나 에탄올과 시료 1 내지 4의 후박 추출물 5 ㎍/ml을 각각 넣고 48시간 처리하였다.
[지방축적 억제 효능 측정]
4%의 파라포름알데히드 용액으로 30분 동안 세포를 고정시킨 후 Nile red 용액(1 mg/ml in DMSO)을 최종농도가 1μg/ml이 되도록 넣어주었다. 지방축적의 억제효능에 대한 판정은 Nile red 처리 5분 후에 에탄올에 의하여 축적된 지방에 의하여 변화되는 Nile red의 형광세기를 형광 현미경으로 관찰하거나 microplate 분석기로 480nm/580nm 파장에서 측정하여 정량화 하였다. [McMillian., et al. Nile Red binding to HepG2 cells: an improved assay for in vitro studies of hepatosteatosis. In. Vitr. Mol. Toxicol. 14, 2001].
도 1에 나타낸 바와 같이, 에탄올 단독 처리군(EtOH)에서 대조군에 비해 278%의 지방축적을 나타내었고, 호노키올 및 마그놀올의 중량비가 1 : 1.5 내지 1 : 3 중량비 범위 이내인 시료 2 및 3에서는 각각 118 % 및 135 %로서 지방축적이 현저히 억제되었음을 확인할 수 있었고, 시료 1 및 4는 각각 230 % 및 204 % 지방이 축적되어 지방축적 억제 활성은 있었으나, 시료 2 및 3에 비해서는 현저히 낮은 활성을 확인할 수 있었다.
하기에 본 발명의 추출물을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1: 산제의 제조
시료 2의 추출물 20 mg
유당수화물 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
제제예 2: 정제의 제조
시료 3의 추출물 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당수화물 100mg
스테아르산마그네슘 2mg
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
제제예 3: 캅셀제의 제조
시료 2의 추출물 10 mg
미결정셀룰로오스 3 mg
유당수화물 14.8 mg
스테아르산마그네슘 0.2 mg
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캅셀제의 제조방법에 따라서 젤라틴캡슐에 충전하여 캅셀제를 제조하였다.
제제예 4: 주사제의 제조
시료 3의 추출물 10mg
만니톨 180mg
주사용 멸균 증류수 2974 mg
인산일수소나트륨 26 mg
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 주사제의 제조방법에 따라 1앰플당(2mL) 상기의 성분 함량으로 제조하였다.
제제예 5: 액제의 제조
시료 3의 추출물 20 mg
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
레몬향 적량
상기의 성분을 통상의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 정제수를 가하여 전체 100mL로 조절한 후 멸균시켜 갈색병에 충진하여 액제를 제조한다.
제제예 6: 건강기능식품의 제조
시료 3의 추출물 1000 mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예 7: 건강음료의 제조
시료 3의 추출물 100 ㎎
비타민 C 15 g
비타민 E(분말) 100 g
젖산철 19.75 g
산화아연 3.5 g
니코틴산아미드 3.5 g
비타민 A 0.2 g
비타민 B1 0.25 g
비타민 B2 0.3g
정제수 정량
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 l 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (5)

  1. 호노키올 및 마그놀올을 유효성분으로 하고, 상기 호노키올 및 마그놀올을 1 : 1.5 내지 1 : 3 중량비로 함유하는 것을 특징으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 호노키올 및 마그놀올은 후박(Magnolia cortex)에서 추출된 것을 특징으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  3. 제 2 항에 있어서, 상기 호노키올 및 마그놀올은 건조고형분 기준으로 호노키올 3 내지 20 중량% 및 마그놀올 5 내지 30 중량%를 함유하는 후박(Magnolia cortex) 추출물에서 유래된 것을 특징으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 단위 제형당 상기 호노키올 및 마그놀올이 50 내지 500 mg 함유되는 것을 특징으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  5. 호노키올 및 마그놀올을 유효성분으로 하고, 상기 호노키올 및 마그놀올을 1 : 1.5 내지 1 : 3 중량비로 함유하는 것을 특징으로 하는 지방간 질환 개선용 건강기능식품.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20170012169A (ko) 2015-07-24 2017-02-02 김병용 경구용 복합제제
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