KR20140074912A - 피롤로피라진 키나아제 억제제 - Google Patents

Abstract

본 발명은, JAK 및 SYK를 억제하여 자가면역성 및 염증성 질환의 치료에 유용한 하기 화학식 I의 신규한 피롤로피라진 유도체의 용도에 관한 것이다:

I
상기 식에서, 변수들은 본원에 정의된 바와 같다.

Description

피롤로피라진 키나아제 억제제{PYRROLOPYRAZINE KINASE INHIBITORS}

본 발명은, JAK 및 SYK 억제제이고 JAK3를 선택적으로 억제하여 자가면역성 및 염증성 질환의 치료에 유용한 신규한 피롤로피라진 유도체에 관한 것이다. 본 출원은, 2011년 5월 18일에 출원된 미국 특허 출원 제 13/110062 호, 2011년 5월 18일에 출원된 미국 특허 출원 제 13/11005 호, 2011년 3월 4일에 출원된 미국 특허 출원 제 13/040310 호, 2011년 3월 3일에 출원된 미국 특허 출원 제 13/039433 호, 2009년 2월 20일에 출원된 미국 특허 출원 제 12/378,837 호, 2009년 2월 20일에 출원된 미국 특허 출원 제 12/378,869 호, 2009년 2월 20일에 출원된 미국 특허 출원 제 12/378,971 호, 2009년 2월 20일에 출원된 미국 특허 출원 제 12/378,977 호, 및 2009년 2월 20일에 출원된 미국 특허 출원 제 12/378,978 호와 관련되며, 이들 특허 출원의 개시내용을 본원에 참고로 인용한다.

JAK(야누스 키나아제; Janus Kinase)는, JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2를 포함하는 세포질 단백질 타이로신 키나아제 계열이다. 각각의 JAK는 개별적인 사이토카인 수용체의 세포질 내 부분과 우선적으로 결합한다(문헌[Annu. Rev. Immunol. 16 (1998), pp. 293-322] 참조).

JAK/STAT 신호전달은 알레르기, 천식, 자가면역성 질환, 예컨대 이식(동종이식) 거부반응, 류마티스성 관절염, 근위축성 측삭 경화증 및 다발성 경화증과 같은 다수의 비정상적 면역 응답성에서의 매개뿐만 아니라 고형 및 혈액학적 악성 종양, 예컨대 백혈병 및 림프종에서 중요하다.

동물 연구들은 JAK3가 B 및 T 림프구 성숙화에서 중요한 역할을 할 뿐만 아니라, T 세포의 기능을 유지하는데 본질적으로 JAK3가 필요하다는 것을 시사했다. 이러한 신규한 메커니즘을 통한 면역 활성의 조절은 이식 거부반응 및 자가면역성 질환과 같은 T 세포 증식성 장애의 치료에 유용한 것으로 판명될 수 있다.

JAK3 억제제는 장기 이식, 이종 장기 이식, 루푸스, 다발성 경화증, 류마티스성 관절염, 건선, 유형 I 당뇨병 및 당뇨병 합병증, 암, 천식, 아토피성 피부염, 자가면역성 갑상선 장애, 궤양성 대장염, 크론병, 알츠하이머병, 백혈병, 및 면역억제가 필요한 기타 증상들에 대한 면역억제제로서의 유용한 요법이다.

SYK(비장 타이로신 키나아제)는 BCR 신호전달을 통한 B-세포 활성화에 핵심적인 비-수용체 타이로신 키나아제이다. SYK는 인산화된 BCR에 결합시 활성화되고, 이에 따라 BCR 활성화 후 초기 신호전달 이벤트가 개시된다. SYK 결핍 마우스는 B-세포 발생에서의 조기 차단이 나타난다(문헌[Cheng et al., Nature 378: 303, 1995] 및 문헌[Turner et al., Nature 378: 298, 1995] 참고). 따라서, 세포에서의 SYK 효소 활성의 억제가, 자가 항체 생산에 대한 그의 효과를 통해 자가면역성 질환에 대한 치료법으로서 제안된다.

SYK가 천식을 비롯한 알레르기 장애에 연루되어 있음이 시사되었다(문헌[Wong et al., Expert Opin Investig Drugs 13:743, 2004]에서 개요함). 따라서, SYK의 소분자 억제제는 천식을 비롯한 알레르기-유도된 염증성 질환의 치료에 유용할 것이다.

JAK 및/또는 SYK 경로의 조절을 수반하는 치료로 이득을 볼 것으로 여겨지는 다수의 증상의 견지에서, JAK 및/또는 SYK 경로를 조절하는 신규한 화합물 및 상기 화합물을 이용하는 방법이 광범위한 환자들에게 실질적인 치료적 이점을 제공할 것이라는 것은 자명하다. 본원에서는, JAK 및/또는 SYK 경로의 표적화 또는 JAK 또는 SYK 키나아제(특히, JAK3)의 억제가 자가면역성 및 염증성 질환에 대해 치료적으로 유용한 증상 치료법으로 사용하기 위한 신규한 피롤로피라진 유도체가 제공된다.

본원에 제공되는 신규한 피롤로피라진 유도체는 JAK3 및/또는 SYK 경로를 선택적으로 억제하며, 자가면역성 및 염증성 질환의 치료에 유용하다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 JAK3 및 SYK를 억제할 수 있다. 더욱이, 본 발명의 화합물은 JAK3 및 JAK2를 억제할 수 있으며, 이때 바람직한 화합물은 JAK 키나아제의 JAK3에 대해 선택적이며, 자가면역성 및 염증성 질환의 치료에 유용한 신규한 피롤로피라진 유도체이다. 마찬가지로, 본 발명의 화합물은 JAK3 및 JAK1을 억제할 수 있으며, 이때 바람직한 화합물은 JAK 키나아제의 JAK3에 대해 선택적이며, 자가면역성 및 염증성 질환의 치료에 유용한 신규한 피롤로피라진 유도체이다. 특히, 화학식 I의 화합물의 피롤로피라진 코어에서 떼어낸 이환형 헤테로아릴 측쇄(변수 Q로 나타냄)는 이러한 분자에 예상치 못하게 증가된 JAK 키나아제의 JAK3 및/또는 SYK에 대한 선택성을 부여한다. 피롤로피라진 코어에서 떼어낸 아미노-연결된 측쇄(-C(=O)NRR')(이는, 피롤로피라진 코어 상의 동일한 위치에서 아미노 측쇄가 아닌 측쇄를 갖는 피롤로피라진 화합물에 비해 화학식 I의 화합물에 예상치 못한 강력함을 제공함)와 조합시, 화학식 I의 화합물은 JAK 키나아제의 JAK3 및/또는 SYK에 대해 예상치 못하게 강력하며 또한 선택적이다.

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:

I

상기 식에서,

R은 H이고; R'는 저급 알콕시 또는

이거나;

R 및 R'는 함께, 임의적으로 -CN으로 치환되는 헤테로사이클로알킬을 형성하고;

R¹은 H 또는 R^1a이고;

R^1a는 저급 알킬, 사이클로알킬, 저급 알콕실, 하이드록시 저급 알킬, 또는 저급 할로알킬이고; R^1'는 H 또는 저급 알킬이거나;

R^1a 및 R^1'는 함께, 임의적으로 하나 이상의 R^1"로 치환되는, 헤테로사이클로알킬, 사이클로알킬, 인단-1-일, 페닐 또는 헤테로아릴을 형성하고;

R^1"는 각각 독립적으로 하이드록시, 아미노, 옥소, 저급 알킬, -C(=O)NH₂, -CN, 저급 할로알킬, 벤질, 시아노 저급 알킬, 또는 -NHC(=O)OC(CH₃)₃이고;

R²는 H, 하이드록시, -CN, -C(=O)NH₂, -C(=O)OH, -C(=O)OC(CH₃)₃, R^2a, 또는 R^2b이고;

R^2a는, 임의적으로 하나 이상의 R^2a'로 치환되는, 저급 알킬, 페닐, 페닐 저급 알킬, 사이클로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 저급 알킬, 헤테로아릴 저급 알킬, 페닐 저급 알콕시 또는 저급 알콕시이고;

R^2a'는 각각 독립적으로 하이드록시, -CN, 아미노, 저급 알킬 설폰일아미노, 저급 알콕시, 할로, 저급 알킬, 시아노 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알킬 설폰일, 옥소, 할로 저급 알콕시, 사이클로알킬 또는 -C(=O)OCH₃이고;

R^2b는 -C(=O)R³ 또는 -CH₂C(=O)R³이고;

R³는, 임의적으로 하나 이상의 R^3'로 치환되는 헤테로사이클로알킬이고;

R^3'는 각각 독립적으로 -CN, 할로, 저급 알킬, 또는 저급 알킬 설폰일이고;

Q는, 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는, 5,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템, 6,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템, 5,5-이환형 헤테로아릴 고리 시스템, 6,5-이환형 헤테로아릴 고리 시스템 또는 5,7-이환형 헤테로아릴 고리 시스템이고;

Q^a는 각각 독립적으로 할로, -CN, 하이드록시, 또는 -(CH₂)_nC(=O)Q^a'이고;

Q^a'는 각각 독립적으로 하이드록시, 아미노, 또는 임의적으로 하나 이상의 Q^a"로 치환되는 헤테로사이클로알킬이고;

Q^a"는 각각 독립적으로 저급 알킬 또는 저급 할로알킬이고;

n은 1, 2, 또는 3이고;

Q^b는 각각 독립적으로, 임의적으로 하나 이상의 Q^b'로 치환되는, 저급 알킬, 사이클로알킬, 저급 알콕시, 페녹시, 저급 알킬 설폰일, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 저급 알킬 또는 헤테로아릴 저급 알킬이고;

Q^b'는 각각 독립적으로 하이드록시, 할로, -CN, 아미노, 헤테로사이클로알킬, 저급 알킬, 벤질, 또는 저급 알킬 설폰일이다.

정의

본원에서 하나의 개체는 하나 이상의 개체를 지칭한다. 예를 들어, 하나의 화합물은 하나 이상의 화합물 또는 적어도 하나의 화합물을 지칭한다. 본원에서 "하나", "하나 이상" 및 "적어도 하나"라는 용어는 상호교환적으로 사용될 수 있다.

본원 명세서에서 전이구 또는 청구항의 본문에 사용된 "포함하다" 및 "포함하는"이라는 용어는, 개방-종지형 의미로 해석되어야 한다. 즉, 상기 용어는, "적어도 ~을 갖는" 또는 "적어도 ~을 포함하는"이라는 표현과 동의어로 해석되어야 한다. 공정의 문맥에서 "포함하는"이라는 용어는, 상기 공정이 적어도 인용된 단계를 포함하지만 추가적인 단계도 포함할 수 있음을 의미한다. 화합물 또는 조성물의 문맥에서 "포함하는"이라는 용어는, 화합물 또는 조성물이 적어도 인용된 특징 또는 성분을 포함하지만, 추가적인 특징 또는 성분도 포함할 수 있음을 의미한다.

본원에서 달리 언급하지 않는 한, "또는"이라는 용어는, "양자택일"의 "배타적" 의미가 아니라 "및/또는"의 "포괄적인" 의미로 사용된다.

본원에서 "독립적으로"라는 용어는, 동일한 화합물 내의 동일하거나 상이한 정의를 갖는 변수의 존재 또는 부재와 상관없이, 변수가 임의의 하나의 경우에 적용됨을 지시하는데 사용된다. 따라서, R"가 2회 존재하고 이들이 "독립적으로 탄소 또는 질소"로 정의되는 화합물에서는, 2개의 R"가 둘 다 탄소이거나, 2개의 R"가 둘 다 질소이거나, 하나의 R"은 탄소이고 나머지는 질소일 수 있다.

본 발명에서 사용되거나 또는 청구되는 화합물을 묘사하고 설명하는 임의의 잔기 또는 화학식에서 임의의 변수(예를 들어, X, X' 또는 Q)가 1회보다 많이 나타나는 경우, 각 경우에 있어서 이러한 변수의 정의는 매 경우에 독립적이다. 또한, 치환기들 및/또는 변수들의 조합은 상기 화합물이 안정한 화합물을 제공할 때에만 허용된다.

결합의 말단에서의 "*" 또는 결합을 관통하여 도시된 "

" 기호는 각각 하나의 작용기 또는 다른 화학적 잔기가 분자의 나머지(이는 분자의 일부임)에 대해 부착되는 지점을 지칭한다. 따라서, 예컨대 R⁴가

또는

인 MeC(=O)OR⁴는

이다.

고리 시스템 내로 도시된 결합(별개의 정점에서 연결된 결합과는 상반됨)은 결합이 임의의 적합한 고리 원자에 부착될 수 있음을 나타낸다.

본원에서 "임의적" 또는 "임의적으로"라는 용어는, 후속적으로 기술된 사건 또는 상황이 필수적이지는 않지만 발생할 수 있고, 이러한 기재가 사건 또는 상황이 발생한 경우 및 발생하지 않은 경우를 포함함을 의미한다. 예컨대, "임의적으로 치환되는"은 임의적으로 치환되는 잔기가 수소 또는 치환기를 포함할 수 있음을 의미한다.

본원에서 "함께 이환형 고리 시스템을 형성한다"라는 표현은, 결합되어 이환형 고리 시스템을 형성함을 의미하며, 이때 각각의 고리는 4 내지 7개의 탄소 원자, 또는 4 내지 7개의 탄소 및 헤테로원자로 이루어질 수 있고, 포화되거나 불포화될 수 있다.

본원에서 "약"이라는 용어는, 대략, 근처의, 개략적으로 또는 대충을 의미하는 것으로 사용된다. "약"이라는 용어가 수치 범위와 함께 사용되는 경우, 이는 개시된 수치 범위 위 및 아래로 경계를 확장함으로써 범위를 변경한다. 일반적으로, "약"이라는 용어는, 본원에서 수치값을 언급한 값의 상하로 20%의 제곱편차로 변경하기 위해 이용된다.

본원에 기술된 정의가 더해져 화학적으로 관련된 조합, 예컨대 "헤테로알킬아릴", "할로알킬헤테로아릴", "아릴알킬헤테로사이클일", "알킬카보닐", "알콕시알킬", "사이클로알킬알킬" 등을 형성할 수 있다. "알킬"이라는 용어가 "페닐알킬" 또는 "하이드록시알킬"에서와 같이 다른 용어 뒤에서 접미사로서 사용되는 경우, 이는 다른 구체적으로 명명된 기로부터 선택되는 1 또는 2개의 치환기로 치환되는 알킬 기(상기 정의된 바와 같음)를 지칭한다. 따라서, 예컨대, "페닐알킬"은 1 또는 2개의 페닐 치환기를 갖는 알킬 기를 지칭하고, 이에 따라 벤질, 페닐에틸 및 바이페닐을 포함한다. "알킬아미노알킬"은 1 또는 2개의 알킬아미노 치환기를 갖는 알킬 기이다. "하이드록시알킬"은 2-하이드록시에틸, 2-하이드록시프로필, 1-(하이드록시메틸)-2-메틸프로필, 2-하이드록시부틸, 2,3-다이하이드록시부틸, 2-(하이드록시메틸), 3-하이드록시프로필 등을 포함한다. 따라서, 본원에서 "하이드록시알킬"이라는 용어는, 하기 정의된 헤테로알킬 기의 부분 집합을 정의하기 위해 사용된다. "-(아르)알킬"이라는 용어는, 비치환된 알킬 또는 아르알킬 기를 지칭한다. "(헤테로)아릴" 또는 "(헤트)아릴"이라는 용어는 아릴 또는 헤테로아릴 기를 지칭한다.

화학식 I의 화합물은 호변이성질성을 나타낼 수 있다. 호변이성질성 화합물은 2개 이상의 상호전환가능한 종으로서 존재할 수 있다. 양성자성(prototropic) 호변이성질체는 2개의 원자 사이에 공유 결합된 수소 원자의 이동으로부터 유래한다. 호변이성질체는 일반적으로 평형상태로 존재하고, 개별적인 호변이성질체를 단리하기 위한 시도는 통상적으로 혼합물을 생성하며, 이 혼합물의 화학적 및 물리적 특성은 화합물들의 혼합물과 일치한다. 평형의 위치는 분자 내의 화학적 특징에 의존한다. 예를 들어, 많은 지방족 알데하이드 및 케톤, 예컨대 아세트알데하이드에서는 케토 형태가 우세한 반면, 페놀에서는 에놀 형태가 우세하다. 통상적인 양성자성 호변이성질체는 케토/에놀(

), 아마이드/이미드산(

) 및 아미딘(

) 호변이성질체를 포함한다. 이들 중 2개의 후자는 특히 헤테로아릴 및 헤테로환형 고리에서 통상적이며, 본 발명은 상기 화합물의 모든 호변이성질체 형태를 포괄한다.

본원에 사용된 기술적 및 과학적 용어는 달리 정의되지 않는 한 본 발명이 속하는 분야의 숙련자에 의해 통상적으로 이해되는 의미를 갖는다. 당업자에게 공지된 다양한 방법론 및 물질을 본원에 참고한다. 약리학의 일반적인 원리를 설명하는 표준 참고 문헌은 문헌[Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th Ed., McGraw Hill Companies Inc., New York (2001)]을 포함한다. 당업자에게 공지된 임의의 적합한 물질 및/또는 방법을 본 발명의 실시에 이용할 수 있다. 그러나, 바람직한 물질 및 방법은 기술된다. 하기 명세서 및 실시예에 참고된 물질, 시약 등은 달리 지시되지 않는 한 상업적인 공급원으로부터 입수가능하다.

본원에서 "아실"이라는 용어는, 구조식 -C(=O)R의 기(이때, R은 수소 또는 본원에 정의된 바와 같은 저급 알킬임)를 나타낸다. 본원에서 "알킬카보닐"이라는 용어는, 구조식 C(=O)R의 기(이때, R은 본원에 정의된 알킬임)를 나타낸다. "C_{1 -6} 아실"이라는 용어는, 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 기 -C(=O)R을 지칭한다. 본원에서 "아릴카보닐"이라는 용어는, 구조식 C(=O)R의 기(이때, R은 아릴 기임)를 의미하고, 본원에서 "벤조일"이라는 용어는, R이 페닐인 "아릴카보닐" 기이다.

본원에서 "알킬"이라는 용어는, 1 내지 10개의 탄소 원자를 함유하는 포화된 1가 비분지쇄 또는 분지쇄 탄화수소 잔기를 나타낸다. "저급 알킬"이라는 용어는, 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 잔기를 나타낸다. 본원에서 "C_{1 -10} 알킬"이라는 용어는, 1 내지 10개의 탄소로 이루어진 알킬을 지칭한다. 알킬 기의 예는, 비제한적으로 저급 알킬 기, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, i-프로필, n-부틸, i-부틸, t-부틸 또는 펜틸, 아이소펜틸, 네오펜틸, 헥실, 헵틸 및 옥틸을 포함하며, 이들은 임의적으로 완전히 또는 부분적으로 중수소치환된다.

"알킬"이라는 용어가 "페닐알킬" 또는 "하이드록시알킬"에서와 같이 다른 용어에 후행하는 접미사로서 사용되는 경우, 이는 다른 구체적으로-지칭된 기로부터 선택되는 1 또는 2개의 치환기에 의해 치환되는 알킬 기(상기 정의된 바와 같음)를 지칭하는 것으로 의도된다. 따라서, 예컨대 "페닐알킬"은 R'R"- 라디칼을 나타내되, 이때 R'는 페닐 라디칼이고, R"는 본원에 정의된 바와 같은 알킬렌 라디칼이며, 이때 상기 페닐알킬 잔기의 부착점은 알킬렌 라디칼 상에 존재하는 것으로 이해된다. 아릴알킬 라디칼의 예는, 비제한적으로 벤질, 페닐에틸, 3-페닐프로필을 포함한다. "아릴알킬" 또는 "아르알킬"이라는 용어는, R'가 아릴 라디칼인 것을 제외하고는 유사하게 해석된다. "헤테로아릴 알킬" 또는 "헤테로아릴알킬"이라는 용어는, R'가 임의적으로 아릴 또는 헤테로아릴 라디칼인 것을 제외하고는 유사하게 해석된다.

본원에서 "할로 알킬"이라는 용어는, 1, 2, 3개 또는 그 이상의 수소 원자가 할로겐으로 치환되는 비분지쇄 또는 분지쇄 알킬기(상기 정의된 바와 같음)를 의미한다. "저급 할로 알킬"이라는 용어는, 1, 2, 3개 또는 그 이상의 수소 원자가 할로겐으로 치환되고 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 잔기를 의미한다. 그 예는 1-플루오로메틸, 1-클로로메틸, 1-브로모메틸, 1-요오도메틸, 다이플루오로메틸, 트라이플루오로메틸, 트라이클로로메틸, 트라이브로모메틸, 트라이요오도메틸, 1-플루오로 에틸, 1-클로로에틸, 1-브로모에틸, 1-요오도에틸, 2-플루오로에틸, 2-클로로에틸, 2-브로모에틸, 2-요오도에틸, 2,2-다이클로로 에틸, 3-브로모프로필 또는 2,2,2-트라이플루오로에틸이다.

본원에서 "알킬렌"이라는 용어는, 달리 언급되지 않는 한, 탄소수 1 내지 10의 2가 포화된 선형 탄화수소 라디칼(예를 들어, (CH₂)_n), 또는 탄소수 2 내지 10의 분지형 포화된 2가 탄화수소(예를 들어, -CHMe- 또는 -CH₂CH(i-Pr)CH₂-)를 지칭한다. 메틸렌의 경우를 제외하고, 알킬렌기의 개방 원자가(open valence) 전자는 동일한 원자에 결합되지 않는다. 알킬렌 라디칼의 예는, 비제한적으로 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 2- 메틸-프로필렌, 1,1-다이메틸-에틸렌, 부틸렌, 2-에틸부틸렌을 포함한다.

본원에서 "알콕시"라는 용어는, -O-알킬기(이때, 알킬은 상기 정의된 바와 같음), 예컨대 메톡시, 에톡시, n-프로필옥시, i-프로필옥시, n-부틸옥시, i-부틸옥시, t-부틸옥시, 펜틸옥시, 헥실옥시(이들의 이성질체 포함)를 의미한다. 본원에서 "저급 알콕시"라는 용어는, "저급 알킬" 기(상기 정의된 바와 같음)를 갖는 알콕시기를 지칭하며, 임의적으로 완전히 또는 부분적으로 중수소치환된다.

본원에서 "하이드록시알킬"이라는 용어는, 상이한 탄소 원자 상의 1 내지 3개의 수소 원자가 하이드록실기로 대체된 알킬 라디칼을 의미한다.

본원에서 "사이클로알킬"이라는 용어는, 3 내지 8개의 탄소 원자를 함유하는 포화된 탄소환형 고리를 지칭하며, 즉 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸 또는 사이클로옥틸이다. 본원에서 "C_{3 -7} 사이클로알킬"이라는 용어는, 탄소환형 고리에서 3 내지 7개의 탄소로 이루어진 사이클로알킬을 지칭한다.

본원에서 "사이클로알켄일"이라는 용어는, 달리 언급하지 않는 한, 5 내지 7개의 탄소 원자를 함유하고 고리 내에 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 부분적으로 불포화된 탄소환형을 지칭한다. 예를 들어, "C_5-6 사이클로 알켄일"은, 5 또는 6개의 구성 원자를 갖는 사이클로알켄일 기를 지칭한다. 특정 실시양태에서, 사이클로알켄일 기는 고리 내에 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는다. 다른 실시양태에서, 사이클로알켄일 기는 고리 내에 하나보다 많은 탄소-탄소 이중 결합을 갖는다. 그러나, 사이클로알켄일 고리는 방향족이 아니다. 사이클로알켄일 기는 임의적으로 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다. 사이클로알켄일의 예는 비제한적으로, 사이클로펜텐일 및 사이클로헥센일을 포함한다.

본원에서 "할로겐" 또는 "할로"라는 용어는, 불소, 염소, 브롬 또는 요오드를 의미한다.

본원에서 "아미노"라는 용어는, -NR₂(이때, 각각의 R 기는 독립적으로 H 또는 저급 알킬(본원에 정의된 바와 같음)임)를 포함한다. 아미노 기의 예는 다이메틸 아미노, 메틸 아미노 및 NH₂를 포함한다.

본원에서 "아릴"이라는 용어는, 일환형 또는 이환형("바이아릴"로도 지칭됨)의 치환되거나 비치환되는 탄소환형 방향족 기를 의미한다. 아릴 기의 예는 페닐, 나프틸 등이다.

본원에서 "헤테로아릴"이라는 용어는, 1개 이상의 N, O 또는 S 헤테로원자를 포함하고 나머지 고리 원자는 탄소인, 고리마다 4 내지 8개의 원자를 포함하는 1개 이상의 방향족 고리를 가진 5 내지 18개의 고리 원자의 일환형, 이환형 또는 삼환형 라디칼을 의미하고, 헤테로아릴 라디칼의 부착 지점은 방향족 고리 위에 있을 것으로 이해될 것이다. 당업자에게 널리 공지된 바와 같이, 헤테로아릴 고리는 그의 모든 탄소 대응물에 비해 방향족 특징을 덜 갖는다. 따라서, 본 발명의 목적을 위해서는, 헤테로아릴기는 단지 소정의 방향족 특징만 가지면 된다. 헤테로아릴 잔기의 예는, 5 또는 6개의 고리 원자 및 1 내지 3개의 헤테로원자를 가진 일환형 방향족 헤테로환을 포함하며, 비제한적으로, 임의적으로 하이드록시, 시아노, 알킬, 알콕시, 티오, 저급 할로알콕시, 알킬티오, 할로, 할로알킬, 알킬설핀일, 알킬설폰일, 할로겐, 아미노, 알킬아미노, 다이알킬아미노, 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 다이알킬아미노알킬, 나이트로, 알콕시카보닐, 카밤오일, 알킬카밤오일, 다이알킬카밤오일, 아릴카밤오일, 알킬카보닐아미노 및 아릴카보닐아미노로부터 선택되는 하나 이상의 치환기, 바람직하게는 1개 또는 2개의 치환기로 치환될 수 있는 피리딘일, 피리미딘일, 피라진일, 피롤일, 피라졸일, 이미다졸일, 인돌일 옥사졸일, 아이속사졸일, 티아졸일, 아이소티아졸일, 트라이아졸린일, 트라이아졸일, 티오페닐, 퓨란일, 티아다이아졸일 및 옥사다이아졸린일을 포함한다. 이환형 잔기의 예는, 비제한적으로 퀴놀린일, 인다졸일, 아이소퀴놀린일, 벤조퓨릴, 벤조티오페닐, 벤즈옥사졸, 벤즈아이속사졸, 벤조티아졸, 피롤로피리딘일, 피롤로피라진일, 1H-피롤로[2,3-b]피리딘, 및 벤즈아이소티아졸을 포함한다.

본원에서 "5,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템"이라는 용어는, 하나 이상의 N, O 또는 S 헤테로원자를 함유하고 나머지 원자는 탄소이며 부분적으로 포화되거나 불포화된 5,6-이환형 고리 시스템을 나타내며, 헤테로아릴 고리 시스템의 부착 지점은 5원 고리 상일 것으로 이해된다. 그 예는, 비제한적으로 1H-인다졸-3-일, 4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일, 1H-인돌-3-일, 5,6,7,8-테트라하이드로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일, 이미다조[1,5-a]피리딘-1-일, 인다졸-1-일, 1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-3-일, 1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일, 이미다조[1,2-a]피리딘-3-일, 2-옥시-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일 및 벤조이미다졸-1-일을 포함하며, 이들 각각은 임의적으로 치환될 수 있다.

본원에서 "6,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템"이라는 용어는, 하나 이상의 N, O 또는 S 헤테로원자를 함유하고 나머지 원자는 탄소이며 부분적으로 포화되거나 불포화된 6,6-이환형 고리 시스템을 나타내며, 헤테로아릴 고리 시스템의 부착 지점은, 하나 이상의 N, O, 또는 S 헤테로원자를 함유하는 6원 고리 상일 것으로 이해된다. 그 예는, 비제한적으로 아이소퀴놀린-1-일 및 아이소퀴놀린-8-일을 포함하며, 이들 각각은 임의적으로 치환될 수 있다.

본원에서 "5,5-이환형 헤테로아릴 고리 시스템"이라는 용어는, 하나 이상의 N, O 또는 S 헤테로원자를 함유하고 나머지 원자는 탄소이며 부분적으로 포화되거나 불포화된 5,5-이환형 고리 시스템을 나타내며, 헤테로아릴 고리 시스템의 부착 지점은, 하나 이상의 N, O, 또는 S 헤테로원자를 함유하는 5원 고리 상일 것으로 이해된다. 그 예는, 비제한적으로 1H-티에노[3,2-c]피라졸-3-일, 1,4,5,6-테트라하이드로-사이클로펜타피라졸-3-일, 및 5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타피라졸-1-일을 포함하며, 이들 각각은 임의적으로 치환될 수 있다.

본원에서 "5,7-이환형 헤테로아릴 고리 시스템"이라는 용어는, 하나 이상의 N, O 또는 S 헤테로원자를 함유하고 나머지 원자는 탄소이며 부분적으로 포화되거나 불포화된 5,7-이환형 고리 시스템을 나타내며, 헤테로아릴 고리 시스템의 부착 지점은, 하나 이상의 N, O, 또는 S 헤테로원자를 함유하는 5원 고리 상일 것으로 이해된다. 그 예는, 비제한적으로 1,4,5,6,7,8-헥사하이드로-사이클로헵타피라졸-3-일을 포함하며, 이들 각각은 임의적으로 치환될 수 있다.

본원에서 "6,5-이환형 헤테로아릴 고리 시스템"이라는 용어는, 하나 이상의 N, O 또는 S 헤테로원자를 함유하고 나머지 원자는 탄소이며 부분적으로 포화되거나 불포화된 6,5-이환형 고리 시스템을 나타내며, 헤테로아릴 고리 시스템의 부착 지점은, 임의적으로 하나 이상의 N, O, 또는 S 헤테로원자를 함유하는 6원 고리 상일 것으로 이해된다. 그 예는 비제한적으로 1H-인돌-7-일, 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-7-일, 1H-인다졸-4-일, 및 1H-인다졸-7-일을 포함하며, 이들 각각은 임의적으로 치환될 수 있다.

본원에서 "헤테로사이클로알킬", "헤테로사이클일" 또는 "헤테로환"이라는 용어는, 하나 이상의 고리 탄소 원자 및 하나 이상의 고리 헤테로원자(N, O 또는 S(=O)_0-2로부터 선택됨)를 포함하는, 고리당 하나 이상의 고리, 바람직하게는 1개 또는 2개의 고리, 또는 3개 내지 8개의 원자로 이루어진 1가의 포화된 환형 라디칼을 지칭하며, 이때 부착 지점은 탄소 원자 또는 헤테로원자를 통해서일 수 있으며, 달리 언급되지 않는 한, 상기 라디칼은 임의적으로, 하이드록시, 옥소, 시아노, 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 할로알콕시, 알킬티오, 할로, 할로알킬, 하이드록시알킬, 나이트로, 알콕시카보닐, 아미노, 알킬아미노, 알킬설폰일, 아릴설폰일, 알킬아미노설폰일, 아릴아미노설폰일, 알킬설폰일아미노, 아릴설폰일아미노, 알킬아미노카보닐, 아릴아미노카보닐, 알킬카보닐아미노, 및 아릴카보닐아미노로부터 선택되는 하나 이상의 치환기, 바람직하게는 1개 또는 2개, 또는 3개의 치환기로 독립적으로 치환될 수 있다. 헤테로환형 라디칼의 예는, 비제한적으로 아제티딘일, 피롤리딘일, 헥사하이드로아제핀일, 옥세탄일, 테트라하이드로퓨란일, 테트라하이드로티오페닐, 옥사졸리딘일, 티아졸리딘일, 아이속사졸리딘일, 피롤리딘일, 모폴린일, 피페라진일, 피페리딘일, 아이소인돌린일, 다이하이드로아이소퀴놀린일, 테트라하이드로피란일, 테트라하이드로카볼린일, 이미다졸린일, 티오모폴린일, 퀴뉴클리딘일 및 이미다졸린일을 포함한다.

본원에서 "장기 거부반응"이라는 용어는, 혈관성 및/또는 비-혈관성(예를 들어, 골수, 이자섬 세포) 이식 환경에서의 급성 동종이식 또는 이종이식 거부반응 및 만성 동종이식 또는 이종이식 거부반응을 포함한다.

본원에서 "부형제"라는 용어는, 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로나 또는 그밖에도 바람직하지 않은 것이 아닌 화합물을 지칭하고, 수의학적 용도뿐만 아니라 인간 약학적 용도에 허용가능한 부형제를 포함한다. 본 발명의 화합물은 단독으로 투여될 수 있으나, 일반적으로는 의도하는 투여 경로 및 표준 약학적 실시를 감안하여 선택되는 하나 이상의 적합한 약학적 부형제, 희석제 또는 담체와 혼합되어 투여된다.

"약학적으로 허용가능한"이란, 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로나 또는 그밖에도 바람직하지 않은 것이 아닌, 약학적 조성물 제조에 유용한 것을 의미하고, 수의학적 용도뿐만 아니라 인간 약학적 용도로 허용가능한 것이 포함된다.

활성 성분의 "약학적으로 허용가능한 염" 형태는 또한, 비-염 형태에서는 부재하는, 활성 성분에 대한 바람직한 약물동태학적 특성을 초기에 부여할 수 있고, 심지어는 신체에서의 그의 치료 활성과 관련하여 활성 성분의 약물동태학에 긍정적으로 영향을 줄 수도 있다. 화합물의 "약학적으로 허용가능한 염"이라는 어구는, 약학적으로 허용되고 본 발명의 바람직한 약학적 활성을 보유하는 염을 의미한다. 상기 염은 하기를 포함한다: (1) 무기산(예컨대, 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등)으로 형성된 산 부가 염; 또는 유기산(예컨대, 아세트산, 프로피온산, 헥산산사이클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 석신산, 말산, 말레산, 퓨마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-하이드록시벤조일)벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 1,2-에탄-다이설폰산, 2-하이드록시에탄설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄포어설폰산, 4-메틸바이사이클로[2.2.2]-옥트-2-엔-1-카복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로피온산, 트라이메틸아세트산, 3급 부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 하이드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산 등)으로 형성된 산 부가 염; 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산 양성자가 금속 이온(예컨대, 알칼리 금속 이온, 알칼리 토금속 이온 또는 알루미늄 이온)으로 대체될 때 형성되는 염; 또는 유기 염기(예컨대, 에탄올아민, 다이에탄올아민, 트라이에탄올아민, 트라이메트아민, N-메틸글루코아민 등)와 배위될 때 형성되는 염.

JAK3 및/또는 SYK 의 억제제

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:

I

상기 식에서,

R은 H이고;

R'는 저급 알콕시 또는

이거나;

R 및 R'는 함께, 임의적으로 -CN으로 치환되는 헤테로사이클로알킬을 형성하고;

R¹은 H 또는 R^1a이고;

R^1a는 저급 알킬, 사이클로알킬, 저급 알콕실, 하이드록시 저급 알킬, 또는 저급 할로알킬이고;

R^1'는 H 또는 저급 알킬이거나;

R^1a 및 R^1'는 함께, 임의적으로 하나 이상의 R^1"로 치환되는, 헤테로사이클로알킬, 사이클로알킬, 인단-1-일, 페닐 또는 헤테로아릴을 형성하고;

R^1"는 각각 독립적으로 하이드록시, 아미노, 옥소, 저급 알킬, -C(=O)NH₂, -CN, 저급 할로알킬, 벤질, 시아노 저급 알킬, 또는 -NHC(=O)OC(CH₃)₃이고;

R²는 H, 하이드록시, -CN, -C(=O)NH₂, -C(=O)OH, -C(=O)OC(CH₃)₃, R^2a, 또는 R^2b이고;

R^2a는, 임의적으로 하나 이상의 R^2a'로 치환되는, 저급 알킬, 페닐, 페닐 저급 알킬, 사이클로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 저급 알킬, 헤테로아릴 저급 알킬, 페닐 저급 알콕시 또는 저급 알콕시이고;

R^2a'는 각각 독립적으로 하이드록시, -CN, 아미노, 저급 알킬 설폰일아미노, 저급 알콕시, 할로, 저급 알킬, 시아노 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알킬 설폰일, 옥소, 할로 저급 알콕시, 사이클로알킬 또는 -C(=O)OCH₃이고;

R^2b는 -C(=O)R³ 또는 -CH₂C(=O)R³이고;

R³는, 임의적으로 하나 이상의 R^3'로 치환되는 헤테로사이클로알킬이고;

R^3'는 각각 독립적으로 -CN, 할로, 저급 알킬, 또는 저급 알킬 설폰일이고;

Q는, 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는, 5,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템, 6,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템, 5,5-이환형 헤테로아릴 고리 시스템, 6,5-이환형 헤테로아릴 고리 시스템 또는 5,7-이환형 헤테로아릴 고리 시스템이고;

Q^a는 각각 독립적으로 할로, -CN, 하이드록시, 또는 -(CH₂)_nC(=O)Q^a' 이고;

Q^a'는 각각 독립적으로 하이드록시, 아미노, 또는 임의적으로 하나 이상의 Q^a"로 치환되는 헤테로사이클로알킬이고;

Q^a"는 각각 독립적으로 저급 알킬 또는 저급 할로알킬이고;

n은 1, 2, 또는 3이고;

Q^b는 각각 독립적으로, 임의적으로 하나 이상의 Q^b'로 치환되는, 저급 알킬, 사이클로알킬, 저급 알콕시, 페녹시, 저급 알킬 설폰일, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 저급 알킬 또는 헤테로아릴 저급 알킬이고;

Q^b'는 각각 독립적으로 하이드록시, 할로, -CN, 아미노, 헤테로사이클로알킬, 저급 알킬, 벤질, 또는 저급 알킬 설폰일이다.

본 발명은 R이 H인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R'가

인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 H이고 R'가

인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R^1'가 H 또는 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R^1'가 H 또는 저급 알킬이고, R이 H이고, R'가

인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R¹이 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R¹이 저급 알킬이고, R^1'가 H 또는 저급 알킬이고, R이 H이고, R'가

인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R¹ 및 R^1'가 둘 다 H인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 H이고, R'가

이고, R¹ 및 R^1'가 둘 다 H인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R²가 -C(=O)R³인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R²가 -C(=O)R³이고, R¹이 저급 알킬이고, R^1'가 H 또는 저급 알킬이고, R이 H이고 R'가

인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R²가 임의적으로 하나 이상의 R^2a'로 치환되는 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R²가 임의적으로 하나 이상의 R^2a'로 치환되는 저급 알킬이고, R¹이 저급 알킬이고, R^1'가 H 또는 저급 알킬이고, R이 H이고, R'가

인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Q가 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는 5,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Q가 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는 5,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템이고, R²가 임의적으로 하나 이상의 R^2a'로 치환되는 저급 알킬이고, R¹이 저급 알킬이고, R^1'가 H 또는 저급 알킬이고, R이 H이고, R'가

인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Q가 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는 인다졸-3-일인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Q^a가 할로 또는 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Q가 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는 인다졸-3-일이고, Q^a가 할로 또는 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Q^b가 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Q가 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는 인다졸-3-일이고, Q^a가 할로 또는 저급 알킬이고, Q^b가 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R^1a 및 R^1'가 함께, 임의적으로 하나 이상의 R^{1 "}로 치환되는, 헤테로사이클로알킬 또는 사이클로알킬을 형성하는 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R^1a 및 R^1'가 함께, 임의적으로 하나 이상의 R^{1 "}로 치환되는, 헤테로사이클로알킬 또는 사이클로알킬을 형성하고, Q가 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는 인다졸-3-일이고, Q^a가 할로 또는 저급 알킬이고, Q^b가 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R^{1 "}가 아미노 또는 -CN인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R^{1 "}가 아미노 또는 -CN이고, R^1a 및 R^1'가 함께, 임의적으로 하나 이상의 R^{1 "}로 치환되는, 헤테로사이클로알킬 또는 사이클로알킬을 형성하고, Q가 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는 인다졸-3-일이고, Q^a가 할로 또는 저급 알킬이고, Q^b가 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R²가 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R²가 저급 알킬이고, R^{1 "}가 아미노 또는 -CN이고, R^1a 및 R^1'가 함께, 임의적으로 하나 이상의 R^{1 "}로 치환되는, 헤테로사이클로알킬 또는 사이클로알킬을 형성하고, Q가 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는 인다졸-3-일이고, Q^a가 할로 또는 저급 알킬이고, Q^b가 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 하기 표 1에 열거되는 화합물들로부터 선택되는 화합물을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 염증성 또는 자가면역성 증상 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학치료제, 항-증식제, 항-염증제, 면역 조절제, 면역 억제제, 신경영양 인자, 심혈관 질환 치료제, 당뇨병 치료제, 및 면역결핍 장애 치료제로부터 선택되는 추가적인 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함하는 상기 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 류마티스성 관절염 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 천식 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 염증성 증상 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 T-세포 증식성 장애 억제 방법을 제공한다.

본 발명은, 상기 증식성 장애가 암인 상기 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 B-세포 증식성 장애 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 루푸스, 다발성 경화증, 류마티스성 관절염, 건선, 유형 I 당뇨병, 장기 이식 또는 이종 기관 이식으로부터의 합병증, 당뇨병, 암, 천식, 아토피성 피부염, 자가면역성 갑상선 질환, 궤양성 대장염, 크론병, 알츠하이머병, 및 백혈병을 비롯한 면역 장애 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 혈관성 또는 비-혈관성 이식의 장기 거부반응(급성 동종이식 또는 이종이식 거부반응 및 만성 동종이식 또는 이종이식 거부반응 포함)의 모든 형태를 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 투여하는 것을 포함하는 JAK3 활성의 억제 방법을 제공하며, 이때 상기 화합물은 JAK3 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 50 μM 이하의 IC₅₀을 나타낸다.

본 발명은, 상기 화합물이 JAK3 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 100 nM 이하의 IC₅₀을 나타내는 상기 방법을 제공한다.

본 발명은, 상기 화합물이 JAK3 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 10 nM 이하의 IC₅₀을 나타내는 상기 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 투여하는 것을 포함하는 SYK 활성의 억제 방법을 제공하며, 이때 상기 화합물은 SYK 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 50 μM 이하의 IC₅₀을 나타낸다.

본 발명은, 상기 화합물이 SYK 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 100 nM 이하의 IC₅₀을 나타내는 상기 방법을 제공한다.

본 발명은, 상기 화합물이 SYK 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 10 nM 이하의 IC₅₀을 나타내는 상기 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물과 조합된 치료 효과량의 항-염증성 화합물을 이를 필요로 하는 환자에게 동시 투여하는 것을 포함하는 염증성 증상의 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물과 조합된 치료 효과량의 면역억제 화합물을 이를 필요로 하는 환자에게 동시 투여하는 것을 포함하는 염증성 증상의 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된 화학식 I의 화합물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.

본 발명은, 화학치료제, 항-증식제, 항-염증제, 면역 조절제, 면역 억제제, 신경영양 인자, 심혈관 질환 치료제, 당뇨병 치료제, 및 면역결핍 장애 치료제로부터 선택되는 추가적인 치료제를 추가로 포함하는 상기 조성물을 제공한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물의 제조 방법을 제공한다.

본 발명은 염증성 장애의 치료를 위한 약제의 제조에서의 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 자가면역 장애의 치료를 위한 약제의 제조에서의 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 관절염 또는 천식 치료를 위한 약제의 제조에서의 청구항 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 본원에서 전술된 바와 같은 발명을 제공한다.

화합물

본 발명에 의해 포괄되고 본 발명의 범주 이내인 대표적인 화합물의 예가 하기 표에 제공된다. 당업자가 본 발명을 보다 명확히 이해하고 실행할 수 있도록 하기 위해 하기 예 및 그에 따른 제조 방법이 제공된다. 이것이 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 간주되어서는 안되며, 단지 본 발명을 예시하고 대표하는 것으로 간주되어야 한다.

일반적으로, 본원에 사용된 명명법은 IUPAC 체계화 명명법의 생성을 위한 바일슈타인 인스티튜트(Beilstein Institute) 컴퓨터화된 시스템인 오토놈(AUTONOM, 상표명) v.4.0에 기초한다. 도시된 구조와 그 구조에 제시된 명칭이 불일치하는 경우, 도시된 구조 쪽에 좀더 무게를 두어야 한다. 또한, 구조의 입체화학 또는 구조의 일부가 예를 들어 볼드체로 또는 점선으로 지시되지 않는 경우, 이러한 구조 또는 구조의 일부는 모든 입체 이성질체를 포괄하는 것으로 해석되어야 한다.

하기 표 1은 화학식 I에 따른 예시적인 화합물을 도시한 것이다.

[표 1]

합성

일반 반응식

[반응식 1]

[반응식 2]

[반응식 3]

[반응식 4]

절차 1.

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

방법 A

단계 1

(2-브로모-7-하이드록시메틸-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)-메탄올

1,4-다이옥산 (100 mL) 중의 2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진 (5.0 g, 25.2 mmol)의 부분 현탁액에 2.0 M 수성 NaOH (25 mL, 50.0 mmol) 및 37% 수성 폼알데하이드 (19 mL, 252 mmol)를 가했다. 이 어두운색 균질 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 유기물을 감압 하에 증발시켰다. 수성 층을 1.0 M HCl으로 중화시키고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 농축하여, 2.6 g의 오렌지색 고체를 수득하였다. 정치 시, 수성 층으로부터 진갈색 침전물이 형성되었다. 침전물을 여과에 의해 수집하고, 건조하였다. 뜨거운 10% MeOH/EtOAc (3 x 200 mL)로 갈색 고체를 추출하였다. 추출물들을 합치고, 증발시켜, 추가로 3.05 g의 오렌지색 고체를 수득하였다. 총 수율은 5.65 g (87%)의 (2-브로모-7-하이드록시메틸-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)-메탄올이었다.

단계 2

(2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일)-메탄올

THF (150 mL) 중의 (2-브로모-7-하이드록시메틸-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)-메탄올 (5.65 g, 21.9 mmol)의 현탁액에 2.0 M NaOH (33 mL, 66 mmol) 수용액을 가했다. 이 균질 반응 혼합물을 밤새도록 교반하고, 이어서 유기물을 감압 하에 제거하였다. 수성 잔사를 1.0 M 수성 HCl으로 pH 4가 되게 하였다. 생성 침전물을 여과를 통해 수집하고, H₂O로 세척하여, 3.68 g의 황색 고체를 수득하였다. 여액을 EtOAc (2x)로 추출하고, 유기물을 감압 하에 농축하여, 추가로 0.92 g의 황색 고체를 수득하였다. 총 수율은 4.60 g (92%)의 (2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일)-메탄올이었다.

단계 3

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

진한 H₂SO₄ (2.3 mL)을 CrO₃ (2.67 g)에 조심스럽게 가하고, 이어서 10 mL의 H₂O로 희석하여, 존스(Jones) 시약의 모액(2.67 M)을 제조하였다. 아세톤 (300 mL) 중의 (2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일)-메탄올 (4.6 g, 20.1 mmol)의 부분 현탁액에 존스 시약 (9 mL, 24.0 mmol)을 천천히 가했다. 첨가 동안, 출발 물질이 점진적으로 용해되었으며, 진녹색 침전물이 형성되었다. 이 반응 혼합물을 15분 동안 교반하고, 이어서 i-PrOH (2 mL)로 켄칭하고, 셀라이트 상에서 여과하고, 아세톤으로 세척하였다. 여액을 농축하여, 4.76 g의 2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 황색-오렌지색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다. 0℃에서, DMF (50 mL) 중의 상기 고체의 용액에 NaH (미네랄 오일 중의 60%, 1.2 g, 30.1 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 0℃로 다시 냉각하고, 2-(트라이메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드 (4.3 mL, 24.1 mmol)를 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하고, 이어서 H₂O로 켄칭하고, EtOAc (3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 H₂O (3x) 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 SiO₂ 크로마토그래피 (20% 내지 30% EtOAc/헥산)로 정제하여, 3.82 g (53%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 황색 고체로서 단리하였다.

방법 B

단계 1

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진

건조된 환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진 (5.0 g, 25.2 mmol)을 DMF (50 mL)에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 나트륨 하이드라이드 (미네랄 오일 중의 60% 분산액, 1.22 g, 30.6 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 15분 동안 교반하고, 이어서 0℃로 다시 냉각하고, SEM-Cl (5.4 mL, 30.4 mmol)을 천천히 가했다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 50 mL의 물로 켄칭하고, 150 mL의 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 30 mL의 물로 2회 및 30 mL의 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 약 20 g의 SiO₂ 상에 흡수시키고, EtOAc/헥산 (구배: 0 내지 15% EtOAc)을 사용하여 200 g의 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 처리하였다. 생성물을 함유하는 모든 분획을 합치고, 농축하여, 6.61 g (80%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진을 연황색 오일로서 수득하였으며, 이는 점차 고화되었다.

단계 2

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진 (6.58 g, 20.0 mmol)을 클로로폼 (펜텐 안정화됨, 120 mL)에 용해시키고, 클로로메틸렌다이메틸이미늄 클로라이드 (10.3 g, 80.2 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 통해 질소 기체의 정상 스트림을 버블링하면서, 이 반응 혼합물을 환류 하에 8시간 동안 교반하였다. 이 진갈색 용액을 실온으로 냉각하고, 밤새도록 교반하였다. 이 반응 혼합물을 약 100 mL의 포화된 NaHCO₃-용액 (주의: 발열성)으로 조심스럽게 켄칭하고, 이어서 200 mL의 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 약 20 g의 SiO₂ 상에 흡수시키고, EtOAc/헥산 (구배: 0 내지 25% EtOAc)을 사용하여 200 g의 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 처리하였다. 생성물을 함유하는 모든 분획을 합치고, 농축하여, 5.92 g (83%)의, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드와 2-클로로-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드의 약 3:1 혼합물을 황색 고체로서 수득하였다.

절차 2.

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드 (3.11 g, 8.74 mmol)를 다이옥산 (120 mL) 및 H₂O (30 mL)에 용해시키고, 이 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 여기에 설팜산 (5.09 g, 52.4 mmol)을 가하고, 이어서 H₂O (75 mL) 중의 나트륨 클로라이트 (1.28 g, 11.4 mmol) 및 인산 이수소 칼륨 (14.3 g, 104.9 mmol)의 용액을 첨가 깔때기를 통해 15분에 걸쳐 가했다. 이 혼합물을 2시간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 생성된 황색 고체를 여과하고, H₂O 및 헥산으로 세척하고, 건조하였다. 이어서, 여액을 EtOAc로 추출하고, 합친 유기물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 추가의 생성물을 수득하였다. 총 3.71 g의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 황색 고체로서 수득하였다.

절차 3.

2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 메틸 에스터

단계 1

2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

40℃에서, 200 mL의 아세톤 중의 (2-브로모-7-하이드록시메틸-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)-메탄올 (0.525 g, 2.03 mmol)의 교반된 용액에 물 (3 ml) 중의 CrO₃ (0.832 g, 8.32 mmol) 및 H₂SO₄ (1.32 g, 13.4 mmol)의 용액을 가했다. 이어서, 이 반응물을 40℃에서 16시간 동안 교반하고, 이어서 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 40℃에서 감압 하에 증발시켜, 2-브로모-5H-피롤로 [2,3-b]피라진-7-카복실산 (0.527 g)을 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 메틸 에스터

실온에서, 50 mL의 메탄올 중의 2-브로모-5H-피롤로 [2,3-b]피라진-7-카복실산 (0.527 g, 2.18 mmol)의 교반된 용액에 H₂SO₄ (1.5 mL)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 환류 하에 16시간 동안 교반하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 이어서 잔사를 5 mL의 물에 현탁시키고, pH 7이 될 때까지 고체 NaHCO₃으로 처리하였다. 이 용액을 에틸 아세테이트 (90 mL)로 추출하고, 이어서 유기물을 물 (20 mL) 및 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하고, 이를 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 200 내지 300 메쉬, 석유 에터와 에틸 아세테이트의 혼합물 (1:1, 부피비)로 용리)로 정제하여, 2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 메틸 에스터 (0.24 g, 43 %)를 백색 고체로서 수득하였다.

약학 조성물 및 투여

본 발명의 화합물은 광범위한 경구 투여 형태 및 담체에 제형화될 수 있다. 경구 투여는, 정제, 코팅된 정제, 당의정, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 에멀션, 시럽 또는 현탁액의 형태일 수 있다. 본 발명의 화합물은, 다른 투여 경로들 중 특히, 연속(정맥내 드립) 국소 비경구, 근육내, 정맥내, 피하, 경피(침투 증강제를 포함할 수 있음), 협측, 비강, 흡입 및 좌제를 포함하는 기타 투여 경로로 투여될 때 효과적이다. 바람직한 투여 방식은 일반적으로, 활성 성분에 대한 환자의 반응 및 고통의 정도에 따라 조정될 수 있는 편리한 일일 투여량 요법을 이용하는 경구식이다.

본 발명의 화합물뿐만 아니라 그의 약학적으로 이용가능한 염은, 하나 이상의 통상적인 부형제, 담체 또는 희석제와 함께, 약학 조성물 및 단위 투여량의 형태일 수 있다. 약학 조성물 및 단위 투여량 형태는, 추가적인 활성 화합물 또는 주성분(principles)의 존재 또는 부재 하에, 통상적인 비율의 통상적인 성분들로 이루어질 수 있고, 단위 투여량 형태는 사용하기로 의도된 일일 투여량 범위에 상응하는 임의의 적합한 치료 효과량의 활성 성분을 포함할 수 있다. 약학 조성물은, 정제 또는 충전된 캡슐, 반고형제, 분말, 서방성 제형과 같은 고체로; 용액, 현탁액, 에멀션, 엘릭서 또는 경구용의 충전된 캡슐과 같은 액체로; 직장 내 또는 질내 투여용의 좌제의 형태로; 또는 비경구적 용도를 위한 멸균 주사 용액의 형태로 사용될 수 있다. 전형적인 제제는 약 5 중량% 내지 약 95 중량%의 활성 화합물 또는 화합물들을 포함할 것이다. "제제" 또는 "투여 형태"라는 용어는, 활성 성분의 고체 및 액체 제형 둘 다를 포함하는 것으로 의도되며, 당업자는 활성 성분이 표적 장기 또는 조직에 따라 또한 목적하는 투여량 및 약동학적 파라미터에 따라 상이한 제제로 존재할 수 있음을 인지할 것이다.

고체 형태 제제는, 분말, 정제, 필, 캡슐, 샤쉐, 좌제 및 분산가능한 과립을 포함한다. 고체 담체는, 희석제, 향미제, 가용화제, 윤활제, 현탁제, 결합제, 보존제, 정제 붕해제 또는 캡슐화 물질로서도 작용할 수 있는 하나 이상의 성분일 수 있다. 분말에서, 담체는 일반적으로, 미분된 활성 성분과 함께 혼합물을 이루는 미분된 고체이다. 정제에서, 활성 성분은 일반적으로 적합한 비율로 필요한 결합 용량을 가진 담체와 혼합되고, 원하는 모양 및 크기로 압착된다. 적합한 담체는, 비제한적으로 마그네슘 카보네이트, 마그네슘 스테아레이트, 활석, 당, 락토오스, 펙틴, 덱스트린, 전분, 젤라틴, 트래거캔트, 메틸셀룰로스, 나트륨 카복시메틸셀룰로스, 저융점 왁스, 코코아 버터 등을 포함한다. 고체 형태 제제는, 활성 성분에 추가하여, 색소, 향미제, 안정화제, 완충제, 인공 및 천연 감미제, 분산제, 증점제, 가용화제 등을 포함할 수 있다.

액체 제형이 또한 경구 투여에 적합하고, 이는 에멀션, 시럽, 엘릭서, 수용액, 수성 현탁액을 포함하는 액체 제형을 포함한다. 이는, 사용 직전에 액체 형태 제제로 변환시키려는 의도의 고체 형태 제제를 포함한다. 에멀션은 용액, 예를 들어 프로필렌 글리콜 수용액으로 제조될 수 있거나, 또는 레시틴, 소르비탄 모노올레에이트 또는 아카시아와 같은 에멀션화제를 포함할 수 있다. 수용액은, 활성 성분을 물에 용해시키고 적합한 색소, 향미제, 안정화제 및 증점제를 첨가하여 제조될 수 있다. 수성 현탁액은, 미분된 활성 성분을 천연 또는 합성 검, 수지, 메틸 셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스 및 기타 널리 공지된 현탁제와 같은 점성질 물질과 함께 물에 분산시켜 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물은 비경구 투여용(예를 들어, 주사, 예를 들어 볼루스 주사 또는 연속 주입에 의한 투여)으로 제형화될 수 있고, 앰플, 사전-충전된 주사기, 소용량 주입물, 또는 보존제가 첨가된 다중-투여 용기에 단위 투여량 형태로 제공될 수 있다. 상기 조성물은, 오일성 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액, 또는 에멀션의 형태로, 예를 들어 수성 폴리에틸렌 글리콜 중의 용액과 같은 형태를 취할 수 있다. 오일성 또는 비수성 담체, 희석제, 용매 또는 비히클의 예는, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일(예를 들어, 올리브 오일) 및 주사가능한 유기 에스터(예를 들어, 에틸 올레에이트)를 포함하고, 보존제, 습윤제, 에멀션화제 또는 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제형 보조제를 포함할 수 있다. 다르게는, 활성 성분은 멸균 고체의 무균 분리에 의해 또는 적합한 비히클(예컨대, 멸균되고 발열원이 없는 물)을 이용하여 사용하기 전에 구성하기 위한 용액으로부터의 동결건조에 의해 수득되는 분말 형태일 수 있다.

본 발명의 화합물은 피부에 바르는 연고, 크림 또는 로션으로서, 또는 경피 패치로서 국소 투여용으로 제형화 될 수 있다. 연고 및 크림은, 예를 들어 적합한 증점제 및/또는 겔화제를 첨가하여 수성 또는 오일성 염기를 이용하여 제형화될 수 있다. 로션은 수성 또는 오일성 염기를 이용해 제형화될 수 있고, 또한 일반적으로 하나 이상의 에멀션화제, 안정화제, 분산제, 현탁제, 증점제 또는 착색제를 포함할 것이다. 구강에서의 국소 투여에 적합한 제형은, 풍미화된 베이스(일반적으로, 수크로오스 및 아카시아) 또는 트래거캔트 중에 활성 성분을 함유하는 로젠지; 비활성 베이스(젤라틴과 글리세린 또는 수크로스와 아카시아) 중에 활성 성분을 함유하는 향정(pastille); 및 적합한 액체 담체에 활성 성분을 함유하는 구강 세정제를 포함한다.

본 발명의 화합물은 좌제 투여용으로 제형화될 수 있다. 지방산 글리세라이드 또는 코코아 버터의 혼합물과 같은 저융점 왁스를 먼저 용융시키고, 활성 성분을, 예를 들어 교반하면서 균일하게 분산시킨다. 이어서, 용융된 균질 혼합물은 통상적인 크기의 성형 틀에 부어 냉각하고, 고형화시킨다.

본 발명의 화합물은 질내 투여용으로 제형화될 수 있다. 활성 성분에 추가하여 상기 담체들을 포함하는 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포제 또는 스프레이가 당분야에서 적당한 것으로 공지되어 있다.

본 발명의 화합물은 비강 투여용으로 제형화될 수 있다. 용액 또는 현탁액은 통상적인 수단, 예를 들어 점적기, 피펫 또는 스프레이를 이용하는 통상적인 수단에 의해 비강으로 직접 적용된다. 제형은 단일 또는 다중 투여량 형태로 제공될 수 있다. 점적기 또는 피펫의 후자의 경우, 이는 적당한 사전-결정된 부피의 용액 또는 현탁액을 환자에게 투여하여 달성될 수 있다. 스프레이의 경우, 이는 예를 들어 계량 분무 스프레이 펌프(metering atomizing spray pump)를 수단으로 하여 달성될 수 있다.

본 발명의 화합물은 비강내 투여를 비롯한, 특히 호흡기에 대한 에어로졸 투여용으로 제형화될 수 있다. 상기 화합물은 일반적으로, 예를 들어 5 마이크론 이하 정도의 작은 입자 크기를 갖는다. 상기 입자 크기는, 당분야에 공지된 수단, 예를 들어 마이크로화(micronization)에 의해 수득될 수 있다. 활성 성분은 클로로플루오로 탄소(CFC), 예를 들어 다이클로로다이플루오로메탄, 트라이클로로플루오로메탄 또는 다이클로로테트라플루오로에탄, 또는 이산화탄소 또는 기타 적합한 기체와 같은 적합한 추진체를 이용한 압축 팩에 제공된다. 에어로졸은 또한 통상적으로 레시틴과 같은 계면활성제를 포함할 수 있다. 약물의 투여량은 계량된 밸브로 제어될 수 있다. 다르게는, 활성 성분은 드라이 분말, 예를 들어 락토오스, 전분, 전분 유도체, 예컨대 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스 및 폴리비닐피롤리딘(PVP)과 같은 적합한 분말 베이스 중의 화합물의 분말 믹스의 형태로 제공될 수 있다. 분말 담체는 비강에서 겔을 형성할 것이다. 분말 조성물은, 흡입기에 의해 분말이 투여될 수 있는, 예컨대 젤라틴 또는 블리스터 팩의 캡슐 또는 카트리지 내에 단위 투여량 형태로 제시될 수 있다.

필요한 경우, 상기 제형은 활성 성분의 지속 또는 제어 방출 투여를 위해 맞춰진 장용 코팅을 이용해 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 경피 또는 피하 약물 전달 장치 내에 제형화될 수 있다. 상기 전달 시스템은 화합물의 지속 방출이 필요할 때 및 치료 요법에 대한 환자의 준수가 중요할 때 유리하다. 경피 전달 시스템에서의 화합물들은 종종 피부-접착성 고체 지지체에 결합된다. 관심대상의 화합물들은 또한 침투 증강제, 예를 들어, 아존(1-도데실아자-사이클로헵탄-2-온)과 병용될 수 있다. 지속 방출 전달 시스템은 수술에 의해 또는 주사에 의해 피하 층으로 피하삽입된다. 피하 이식물은 지용성 막, 예를 들어 실리콘 고무 또는 생분해성 중합체, 예를 들어 폴리아세트산에 화합물을 봉입시킨다.

약학적 담체, 희석제 및 부형제와 함께하는 적합한 제형은 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, edited by E.W. Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania]에 기술되어 있다. 숙련된 제형 과학자는 본 발명의 조성물을, 불안정하게 하거나 또는 그의 치료 활성에 지장을 주지 않으면서도, 특별한 투여 경로를 위한 다양한 제형을 제공하기 위해 명세서의 교시에 따라 제형을 개질할 수 있다.

본 발명의 화합물을 물 또는 기타 비히클에 더욱 가용성이 되도록 하기 위한 개질은, 예를 들어 약간의 개질(염 제형화, 에스터화 등)로 쉽게 달성될 수 있고, 이는 당업자에게 널리 공지되어 있다. 본 발명의 화합물의 약동학적 특성을 환자에게 최대한의 이익을 제공하도록 조정하기 위한 특별한 화합물의 투여 경로 및 투여 요법을 개질하는 것도 당업자에게 널리 공지되어 있다.

본원에서 "치료 효과량"이라는 용어는, 개인에서 질환의 증상을 감소시키기 위해 필요한 양을 의미한다. 투여량은 각각의 특별한 경우에서 개인의 필요요건에 맞춰질 것이다. 해당 투여량은, 치료할 질환의 심각성, 환자의 연령 및 일반적인 건강 상태, 환자가 처방받는 중인 기타 의약, 투여 경로 및 형태 및 관련 의료진의 선호성 및 경험과 같은 많은 인자들에 좌우되는 광범위한 한계 내에서 다양할 수 있다. 경구 투여용으로, 1일 당 약 0.01 내지 약 1000 mg/체중 kg의 매일 투여량이 단독 요법 및/또는 병용 요법에서 적당할 수 있다. 바람직한 매일 투여량은, 1일 당 약 0.1 내지 약 500 mg/체중 kg이고, 더욱 바람직하게는 0.1 내지 약 100 mg/체중 kg이고, 가장 바람직하게는 1.0 내지 약 10 mg/체중 kg이다. 따라서, 70 kg 성인에 대한 투여에 대해서는 투여량 범위는 1일 당 약 7 mg 내지 0.7 g이다. 매일 투여량은 단일 투여량으로, 또는 일반적으로 1일 당 1 내지 5회 투여량으로 분할 투여량으로 투여될 수 있다. 일반적으로, 치료는 화합물의 최적 투여량 미만의 소량 투여량으로 개시된다. 이후, 개별 환자에 대한 최적 효과에 도달할 때까지, 투여량은 조금씩 증가된다. 본원에 기재된 질환 치료에서 당업자는, 지나친 실험과정 없이도, 개인의 지식, 경험 및 본 출원의 개시내용을 바탕으로, 주어진 질환 및 환자를 위한 본 발명의 화합물의 치료 효과량을 가늠할 수 있을 것이다.

약학적 제제는 바람직하게는 단위 투여량 형태이다. 상기 형태에서, 제제는 적당량의 활성 성분을 포함하는 단위 투여량으로 분할되어 있다. 단위 투여량 형태는, 개별적 분량의 제제를 포함하도록 포장된 제제, 예컨대 바이알 또는 앰플에 포장된 정제, 캡슐 분말일 수 있다. 또한, 단위 투여량 형태는 캡슐, 정제, 샤쉐 또는 로젠지 자체일 수 있거나, 또는 적당한 개수의 포장된 형태의 것일 수 있다.

징후 및 치료 방법

본 발명은 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 염증성 또는 자가면역성 증상 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학치료제, 항-증식제, 항-염증제, 면역 조절제, 면역 억제제, 신경영양 인자, 심혈관 질환 치료제, 당뇨병 치료제, 및 면역결핍 장애 치료제로부터 선택되는 추가적인 치료제를 추가로 포함하는 상기 방법을 제공한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 류마티스성 관절염 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 천식 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 염증성 증상 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 T-세포 증식성 장애 억제 방법을 제공한다.

본 발명은, 상기 증식성 장애가 암인 상기 방법을 제공한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 B-세포 증식성 장애 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 루푸스, 다발성 경화증, 류마티스성 관절염, 건선, 유형 I 당뇨병, 장기 이식 또는 이종 기관 이식으로부터의 합병증, 당뇨병, 암, 천식, 아토피성 피부염, 자가면역성 갑상선 질환, 궤양성 대장염, 크론병, 알츠하이머병, 및 백혈병을 비롯한 면역 장애 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 혈관성 또는 비-혈관성 이식의 장기 거부반응(급성 동종이식 또는 이종이식 거부반응 및 만성 동종이식 또는 이종이식 거부반응 포함)의 모든 형태를 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 투여하는 것을 포함하는 JAK3 활성 억제 방법을 제공하며, 이때 상기 화합물은 JAK3 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 50 μM 이하의 IC₅₀을 나타낸다.

본 발명은, 상기 화합물이 JAK3 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 100 nM 이하의 IC₅₀을 나타내는 상기 방법을 제공한다.

본 발명은, 상기 화합물이 JAK3 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 10 nM 이하의 IC₅₀을 나타내는 상기 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 투여하는 것을 포함하는 SYK 활성의 억제 방법을 제공하며, 이때 상기 화합물은 SYK 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 50 μM 이하의 IC₅₀을 나타낸다.

본 발명은, 상기 화합물이 SYK 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 100 nM 이하의 IC₅₀을 나타내는 상기 방법을 제공한다.

본 발명은, 상기 화합물이 SYK 활성의 시험관내 생화학적 분석에서 10 nM 이하의 IC₅₀을 나타내는 상기 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물과 조합된 치료 효과량의 항-염증성 화합물을 이를 필요로 하는 환자에게 동시 투여하는 것을 포함하는 염증성 증상의 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 화학식 I의 화합물과 조합된 치료 효과량의 면역억제 화합물을 이를 필요로 하는 환자에게 동시 투여하는 것을 포함하는 염증성 증상의 치료 방법을 제공한다.

[실시예]

하기 실시예는 본 발명의 범주 이내인 화합물의 제조 방법 및 생물학적 평가 방법을 예시한다. 일반적으로, 이 섹션에 사용되는 명명법은 상기 언급된 바와 같은 오토놈(상표명) v.4.0에 기초하거나, 다르게는 켐드로우(ChemDraw)에 기초한다. 이러한 실시예 및 제조 방법은 당업자가 본 발명을 보다 명확히 이해하고 실시할 수 있도록 제공된다. 이들이 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 간주되어서는 안되며, 단지 본 발명을 예시하고 대표하는 것으로 간주되어야 한다.

약어

통상적으로 사용되는 약어는 다음을 포함한다: 아세틸 (Ac), 아조-비스-아이소부티릴나이트릴 (AIBN), 기압 (Atm), 9-보라바이사이클로[3.3.1]노난 (9-BBN 또는 BBN), 3급-부톡시카보닐 (Boc), 다이-3급-부틸 파이로카보네이트 또는 boc 무수물 (BOC₂O), 벤질 (Bn), 부틸 (Bu), 화학 초록 등록 번호 (CASRN), 벤질옥시카보닐 (CBZ 또는 Z), 카보닐 다이이미다졸(CDI), 1,4-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥탄 (DABCO), 다이에틸아미노황 트라이플루오라이드 (DAST), 다이벤질리덴아세톤 (dba), 1,5-다이아자바이사이클로[4.3.0]노느-5-엔 (DBN), 1,8-다이아자바이사이클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU), N,N'-다이사이클로헥실카보다이이미드 (DCC), 1,2-다이클로로에탄 (DCE), 다이클로로메탄 (DCM), 다이에틸 아조다이카복실레이트 (DEAD), 다이-아이소-프로필아조다이카복실레이트 (DIAD), 다이-아이소-부틸알루미늄하이드라이드 (DIBAL 또는 DIBAL-H), 다이-아이소-프로필에틸아민 (DIPEA), N,N-다이메틸 아세트아마이드 (DMA), 4-N,N-다이메틸아미노피리딘 (DMAP), N,N-다이메틸폼아마이드 (DMF), 다이메틸 설폭사이드 (DMSO), 1,1'-비스-(다이페닐포스피노)에탄 (dppe), 1,1'-비스-(다이페닐포스피노)페로센 (dppf), 1-(3-다이메틸아미노프로필)-3-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드 (EDCI), 에틸 (Et), 에틸 아세테이트 (EtOAc), 에탄올 (EtOH), 2-에톡시-2H-퀴놀린-1-카복실산 에틸 에스터 (EEDQ), 다이에틸 에터 (Et₂O), O-(7-아자벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 헥사플루오로포스페이트 아세트산 (HATU), 아세트산 (HOAc), 1-N-하이드록시벤조트라이아졸(HOBt), 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC), 아이소-프로판올 (IPA), 리튬 헥사메틸 다이실라잔 (LiHMDS), 메탄올 (MeOH), 융점 (mp 또는 MP), MeSO₂- (메실 또는 Ms), 메틸 (Me), 아세토나이트릴 (MeCN), m-클로로과벤조산 (MCPBA), 질량 스펙트럼 (ms 또는 MS), 메틸 t-부틸 에터 (MTBE), N-브로모석신이미드 (NBS), N-카복시무수물 (NCA), N-클로로석신이미드 (NCS), N-메틸모폴린 (NMM), N-메틸피롤리돈 (NMP), 피리디늄 클로로크로메이트 (PCC), 피리디늄 다이크로메이트 (PDC), 페닐 (Ph), 프로필 (Pr), 아이소-프로필 (i-Pr), 평방 인치 당 파운드 (psi), 피리딘 (pyr), 실온 (rt 또는 RT), 2-(트라이메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드 (SEMCl), 3급-부틸다이메틸실릴 또는 t-BuMe₂Si (TBDMS), 트라이에틸아민 (TEA 또는 Et₃N), 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 1-옥실 (TEMPO), 트라이플레이트 또는 CF₃SO₂- (Tf), 트라이플루오로아세트산 (TFA), 1,1'-비스-2,2,6,6-테트라메틸헵탄-2,6-다이온 (TMHD), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 테트라플루오로보레이트 (TBTU), 박막 크로마토그래피 (TLC), 테트라하이드로퓨란 (THF), 트라이메틸실릴 또는 Me₃Si (TMS), p-톨루엔설폰산 일수화물 (TsOH 또는 pTsOH), 4-Me-C₆H₄SO₂- 또는 토실 (Ts), N-우레탄-N-카복시무수물 (UNCA). 접두사 노말(n), 아이소(i-), 2급(s-), 3급(t-) 및 네오를 포함하는 통상적인 명칭은 알킬 잔기와 함께 사용되는 경우 그의 통상적인 의미를 갖는다. 문헌(J. Rigaudy 및 D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.)을 참고한다.

제조예

실시예 1

2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

3-요오도-1H-인다졸

50 mL 환저 플라스크 내에서, 인다졸(0.80 g, 6.8 mmol)을 DMF(14 mL)에 용해시켰다. 요오드(3.4 g, 13.5 mmol) 및 이어서 수산화 칼륨(1.47 g, 26.2 mmol)을 가했다. 이 어두운색 반응 혼합물을 실온에서 1.25시간 동안 교반하고, 이어서 10% 수성 NaHSO₃으로 켄칭하고, 다이에틸 에터(2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 1.65 g(95%)의 3-요오도-1H-인다졸을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

3-요오도-1-메틸-1H-인다졸

50 mL 환저 플라스크 내에서, 3-요오도-1H-인다졸(1.0 g, 3.9 mmol)을 THF(12 ml)에 용해시키고, 이 용액을 0℃로 냉각하였다. 칼륨 3급-부톡사이드(612 mg, 5.45 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 0℃에서 1.25시간 동안 교반하였다. 메틸 요오다이드(0.29 ml, 4.64 mmol)를 적가하고, 이어서 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배 0 내지 10% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 863 mg(86%)의 3-요오도-1-메틸-1H-인다졸을 황색 오일로서 수득하였다.

단계 3

1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸

3-요오도-1-메틸-1H-인다졸(0.15 g, 0.58 mmol)을 THF(3 ml)에 용해시키고, 이 용액을 NaCl/빙욕을 사용하여 -16℃로 냉각하였다. 여기에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중의 2.0M, 0.32 ml, 0.64 mmol)를 적가하고, 이 반응 혼합물을 -16℃에서 15분 동안 교반하였다. 트라이부틸클로로스탠난(0.18 ml, 0.66 mmol)을 천천히 가하고, 이 반응 혼합물을 1.5시간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 이 반응 혼합물을 포화된 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(0.5% 트라이에틸아민, 구배 0 내지 5% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 224 mg(92%)의 1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 4

[(R)-2-(4-시아노피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, Boc-D-사이클로프로필글라이신(1.80 g, 8.36 mmol) 및 피페리딘-4-카보나이트릴(1.2 g, 10.9 mmol)을 DMF(30 ml)에 용해시켰다. HATU(3.5 g, 9.2 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(2.3 ml, 13.2 mmol)을 가하고, 이 황색 용액을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터(2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 2.72 g(95%)의 [(R)-2-(4-시아노피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 5

1-((R)-2-아미노-2-사이클로프로필-아세틸)-피페리딘-4-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트

환저 플라스크 내에서, [(R)-2-(4-시아노피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터(2.71 g, 7.93 mmol)를 다이클로로메탄(50 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, 트라이플루오로아세트산(18 ml, 234 mmol)을 천천히 가했다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 농축하여, 1-((R)-2-아미노-2-사이클로프로필-아세틸)-피페리딘-4-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 6

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 1-((R)-2-아미노-2-사이클로프로필-아세틸)-피페리딘-4-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트(5.19 g, 7.27 mmol)를 DMF(25 ml)에 용해시키고, N,N-다이아이소프로필에틸아민(8.5 ml, 48.7 mmol)을 가했다. 이어서, 2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2.20 g, 5.91 mmol)(약 2:1 Br:Cl) 및 HATU(2.47 g, 6.5 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터(2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배 0 내지 80% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 3.0 g의 회백색 거품을 수득하였다. SFC 크로마토그래피(키랄팩(chiralpak) IA-H 2x25 칼럼, 40% MeOH)로 처리하여, 1.71 g(52%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 흰색 거품으로서 수득하고, 779 mg(26%)의 2-클로로-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 회백색 거품으로서 수득하였다.

단계 7

2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

건조된 환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드(0.12 g, 0.21 mmol) 및 1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸(117 mg, 0.28 mmol)을 DMF(2 ml)에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(13 mg, 0.011 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(9 mg, 0.047 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 80℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터(2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 2회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂(0.5% NH₄OH)(구배 0 내지 3% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 161 mg의 2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 오일로서 수득하였다.

단계 8

2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드(0.158 g, 0.193 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산(0.6 ml, 7.8 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1 ml)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민(0.8 ml, 11.7 mmol)을 가했다. 이 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂(0.5% NH₄OH)(구배 0 내지 4% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하고, 이어서 에틸 아세테이트로 마쇄하여, 31 mg(32%)의 2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 1에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 인다졸을 6-클로로-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 3

2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 1에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 인다졸을 5-클로로-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

6-클로로-3-요오도-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 6-클로로-1H-인다졸 (90 mg, 0.59 mmol)을 DMF (1.4 mL)에 용해시켰다. 요오드 (300 mg, 1.18 mmol) 및 이어서 수산화 칼륨 (128 mg, 2.28 mmol)을 가했다. 이 어두운색 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 10% 수성 NaHSO₃으로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 169 mg (98%)의 6-클로로-3-요오도-1H-인다졸을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

단계 2

6-클로로-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 6-클로로-3-요오도-1H-인다졸 (167 mg, 0.57 mmol)을 THF (2 ml)에 용해시키고, 이 용액을 0℃로 냉각하였다. 칼륨 3급-부톡사이드 (90 mg, 0.80 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 0℃에서 1.25시간 동안 교반하였다. 메틸 요오다이드 (0.045 ml, 0.72 mmol)를 적가하고, 이어서 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 5% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 110 mg (63%)의 6-클로로-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

6-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸

6-클로로-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸 (108 mg, 0.35 mmol)을 THF (2 ml)에 용해시키고, 이 용액을 NaCl/빙욕을 사용하여 -16℃로 냉각하였다. 여기에 아이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF 중의 2.0M, 0.20 ml, 0.40 mmol)를 적가하고, 이 반응 혼합물을 -16℃에서 15분 동안 교반하였다. 트라이부틸클로로스탠난 (0.11 ml, 0.40 mmol)을 천천히 가하고, 이 반응 혼합물을 1.5시간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 이 반응 혼합물을 포화된 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 6-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸을 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 4

[(R)-2-(3-시아노아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, Boc-D-알라닌 (500 mg, 2.64 mmol), 아제티딘-3-카보나이트릴 하이드로클로라이드 (376 mg, 3.17 mmol), HOBT (445 mg, 2.91 mmol) 및 HATU (1.11 g, 2.91 mmol)를 합쳤다. 이어서, DMF (5 mL) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (1.38 mL, 7.93 mmol)을 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc (3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물 (3x)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 SiO₂ 크로마토그래피 (50% 내지 100% EtOAc/헥산)로 정제하여, 493 mg (74%)의 [(R)-2-(3-시아노아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 5

1-((R)-2-아미노-프로피온일)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트

CH₂Cl₂ (20 mL) 중의 [(R)-2-(3-시아노아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (860 mg, 3.4 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 (4.0 mL)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, 1-((R)-2-아미노-프로피온일)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 연한 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 6

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1.05 g, 2.82 mmol) (약 3:1 Br:Cl), 1-((R)-2-아미노-프로피온일)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트 (900 mg, 3.37 mmol), 및 HATU (1.18 g, 3.1 mmol)를 합쳤다. 이어서, DMF (10 mL) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (1.48 mL, 8.46 mmol)을 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc (3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물 (3x)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 SiO₂ 크로마토그래피 (30% 내지 100% EtOAc/헥산)로 정제하여, 1.19 g (83%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 거품형 고체로서 수득하였다 (Br 화합물과 Cl 화합물의 약 3:1 혼합물).

단계 7

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (0.135 g, 0.27 mmol) 및 6-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탄일-1H-인다졸 (단계 3으로부터의 조질, 342 mg, 0.38 mmol)을 DMF (2.4 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0) (16 mg, 0.014 mmol) 및 구리(I) 요오다이드 (11 mg, 0.058 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 90℃로 3시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 2.5% MeOH)을 사용하여 크로마토그래피로 정제하여, 157 mg (90%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 8

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (154 mg, 0.23 mmol)를 다이클로로메탄 (1.2 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.72 ml, 9.35 mmol)을 가했다. 이 오렌지색 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1.2 ml)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (1.0 ml, 14.8 mmol)을 가했다. 이 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, (뜨거운) 물, 에틸 아세테이트 및 다이클로로메탄으로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 37 mg (33%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 분말로서 수득하였다.

실시예 5.

2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 4에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-클로로-1H-인다졸을 5-클로로-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 6.

2-(5,6-다이클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 5에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-클로로-1H-인다졸을 5,6-다이클로로-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 7.

2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 5에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-클로로-1H-인다졸을 인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 8.

2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드

단계 1

[(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크에 Boc-D-3급-류신 (2.5 g, 10.8 mmol), HOBT (4.2 g, 24.9 mmol), EDC (4.77 g, 24.9 mmol) 및 피페리딘-4-카보나이트릴 (2.98 g, 27.0 mmol)을 넣었다. 이어서, DMF (50 mL) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (10.7 ml, 61.6 mmol)을 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 10% 시트르산으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 10% 시트르산으로 2회, 포화된 LiCl로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 MgSO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 3.4 g (97%)의 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 베이지색 거품형 고체로서 수득하였다.

단계 2

1-((R)-2-아미노-3,3-다이메틸-부티릴)-피페리딘-4-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트

CH₂Cl₂ (60 mL) 중의 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (3.4 g, 10.5 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 (20 mL)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 농축하여, 1-((R)-2-아미노-3,3-다이메틸-부티릴)-피페리딘-4-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드

플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1.6 g, 4.3 mmol), 1-((R)-2-아미노-3,3-다이메틸-부티릴)-피페리딘-4-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트 (단계 2로부터의 조질), EDC (1.89 g, 9.9 mmol) 및 HOBt (1.67 g, 9.9 mmol)을 합쳤다. 여기에 DMF (40 mL) 및 이어서 i-Pr₂NEt (5.2 mL, 30.1 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 EtOAc 및 10% 시트르산 중에 취하고, 유기 층을 10% 시트르산, 포화된 NaHCO₃, 포화된 LiCl 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (40% 내지 100% EtOAc/헥산)로 정제하여, 1.46g (59%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드를 베이지색 거품형 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드 (150 mg, 0.26 mmol) 및 5-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸 (372 mg, 0.45 mmol)을 DMF (2.4 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0) (15 mg, 0.013 mmol) 및 구리(I) 요오다이드 (10 mg, 0.053 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 90℃로 3.5시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 2% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 137 mg (80%)의 2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드를 황색 오일로서 단리하였다.

단계 5

2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드 (0.158 g, 0.193 mmol)를 다이클로로메탄 (1 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.6 ml, 7.8 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1 ml)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.8 ml, 11.7 mmol)을 가했다. 이 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 100% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 26 mg (24%)의 2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 9.

2-(6-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

6-브로모-1-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 6-브로모-1H-인다졸 (0.70 g, 3.55 mmol)을 DMF (7.5 ml)에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 나트륨 하이드라이드 (미네랄 오일 중의 60% 분산액, 172 mg, 4.3 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 30분 동안 교반하고, 이어서 0℃로 다시 냉각하고, SEM-Cl (0.76 ml, 4.28 mmol)을 천천히 가했다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하였다. 1.5시간 후, 이 반응물을 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 10% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 802 mg (69%)의 6-브로모-1-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-1H-인다졸을 연황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

6-사이클로프로필-1-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-1H-인다졸

환저 플라스크에 6-브로모-1-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-1H-인다졸 (0.80 g, 2.44 mmol), 사이클로프로필보론산 (377 mg, 4.39 mmol), 팔라듐(II) 아세테이트 (28 mg, 0.125 mmol), 제3 인산 칼륨 (1.04 g, 4.88 mmol), 톨루엔 (9 ml) 및 물 (0.9 ml)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 100℃로 밤새도록 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 5% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 670 mg (90%)의 6-사이클로프로필-1-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-1H-인다졸을 연황색 오일로서 수득하였다.

단계 3

6-사이클로프로필-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 6-사이클로프로필-1-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-1H-인다졸 (668 mg, 2.2 mmol)을 다이클로로메탄 (12 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (6.5 ml, 84.4 mmol)을 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 2.25시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (12 ml)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (9.0 ml, 133 mmol)을 가했다. 이 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 25% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 317 mg (91%)의 6-사이클로프로필-1H-인다졸을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 1에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 인다졸을 6-사이클로프로필-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 10.

2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 1에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 인다졸을 4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 11.

2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드

단계 1

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드

환저 플라스크에 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (150 mg, 0.40 mmol), HOBT (68 mg, 0.44 mmol) 및 EDC (85 mg, 0.44 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (1.8 ml) 및 이어서 (S)-3,3-다이메틸부탄-2-아민 (0.10 ml, 0.73 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.11 ml, 0.63 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 20% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 97 mg (50%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드를 연갈색 오일로서 수득하였다.

단계 2

2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드 (94 mg, 0.21 mmol) 및 5-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탄일-1H-인다졸 (367 mg, 0.40 mmol)을 DMF (1.9 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0) (12 mg, 0.010 mmol) 및 구리(I) 요오다이드 (8 mg, 0.042 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 90℃로 3.5시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 40% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 92 mg (82%)의 2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드 (90 mg, 0.17 mmol)를 다이클로로메탄 (0.8 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.5 ml, 6.6 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.8 ml)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.7 ml, 9.9 mmol)을 가했다. 이 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 60 mg (83%)의 2-(5-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 12.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드

단계 1

((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

0℃에서, THF (100 mL) 중의 Boc-D-알라닌 메틸 에스터 (5.00 g, 24.6 mmol)의 용액에 메틸 마그네슘 브로마이드 (Et₂O 중의 3.0 M, 28.7 mL, 86.1 mmol)를 천천히 가했다. 생성된 백색 슬러리를 0℃에서 1시간 동안 및 이어서 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, H₂O로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 4.93 g (99%)의 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 무색 점성 오일로서 수득하였다.

단계 2

(R)-3-아미노-2-메틸-부탄-2-올 하이드로클로라이드

((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (4.93 g, 24.2 mmol)를 1.0 M HCl (150 mL)에 용해시키고, 50℃에서 4시간 동안 교반하였다. 이를 농축하여, 4.01 g의 (R)-3-아미노-2-메틸-부탄-2-올 하이드로클로라이드를 연갈색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드

플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3.25 g, 8.74 mmol), (R)-3-아미노-2-메틸-부탄-2-올 하이드로클로라이드 (3.05 g, 21.9 mmol), EDC (3.85 g, 20.1 mmol) 및 HOBt (2.72 g, 20.1 mmol)을 합쳤다. 이어서, DMF (50 mL) 및 이어서 i-Pr₂NEt (4.87 mL, 28.0 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 감압 하에 농축하였다. 잔사를 SiO₂ 크로마토그래피 (20 내지 100% EtOAc/헥산)로 정제하여, 2.40 g (60%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드 (120 mg, 0.26 mmol) 및 6-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탄일-1H-인다졸 (319 mg, 0.42 mmol)을 DMF (2.5 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0) (16 mg, 0.014 mmol) 및 구리(I) 요오다이드 (10 mg, 0.053 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 90℃로 밤새도록 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 2% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 122 mg (86%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드 (121 mg, 0.22 mmol)를 다이클로로메탄 (1 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.7 ml, 9.0 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1 ml)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.9 ml, 13.3 mmol)을 가했다. 이 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 53 mg (58%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 13.

2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-[1-하이드록시-메트-(Z)-일리덴]-4,4-다이메틸-사이클로헥산온

건조된 환저 플라스크에 나트륨 하이드라이드 (미네랄 오일 중의 60% 분산액, 475 mg, 11.9 mmol) 및 다이에틸 에터 (24 ml)를 넣었다. 이 반응물을 0℃로 냉각하고, 에탄올 (0.06 ml, 1.03 mmol)을 적가하였다. 이 현탁액을 0℃에서 20분 동안 교반하고, 이어서 다이에틸 에터 (3 ml) 중의 4,4-다이메틸사이클로헥산온 (1.50 g, 11.9 mmol) 및 에틸 포메이트 (1.45 ml, 17.8 mmol)의 용액을 15분에 걸쳐 적가하였다. 이 황색 용액을 0℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 천천히 실온으로 밤새도록 가온하였다. 여기에 에탄올 (0.24 ml)을 가하고, 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터로 추출하였다. pH 2가 될 때까지 수성 층을 6M HCl으로 산성화시키고, 이어서 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 1.30 g (71%)의 2-[1-하이드록시-메트-(Z)-일리덴]-4,4-다이메틸-사이클로헥산온을 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 2

5,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

100 ml 환저 플라스크 내에서, 2-[1-하이드록시-메트-(Z)-일리덴]-4,4-다이메틸-사이클로헥산온 (1.30 g, 8.43 mmol)을 메탄올 (8.5 ml)에 용해시켰다. 여기에 하이드라진 (0.27 ml, 8.43 mmol)을 매우 천천히 가했으며, 이는 발열 반응이었다. 이 반응 혼합물을 실온에서 50분 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 석유 에터로 마쇄하여, 1.05 g (83%)의 5,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸을 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 3

3-요오도-5,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 5,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 (0.50 g, 3.33 mmol)을 DMF (7 mL)에 용해시켰다. 여기에 요오드 (1.69 g, 6.66 mmol) 및 이어서 수산화 칼륨 (723 mg, 12.9 mmol)을 가했다. 이 어두운색 반응 혼합물을 실온에서 1.25시간 동안 교반하였다. 추가의 요오드 (1.69 g, 6.66 mmol) 및 수산화 칼륨 (723 mg, 12.9 mmol)을 가하고, 이 진갈색 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 10% 수성 NaHSO₃ 용액으로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, EtOAc/헥산 (구배 0 내지 20% EtOAc)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 645 mg (70%)의 3-요오도-5,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

3-요오도-1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 3-요오도-5,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 (642 mg, 2.33 mmol)을 THF (8.5 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, 칼륨 3급-부톡사이드 (365 mg, 3.26 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 40분 동안 교반하고, 이어서 메틸 요오다이드 (0.18 ml, 2.88 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 15% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 497 mg (74%)의 3-요오도-1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 5

1,5,5-트라이메틸-3-트라이부틸스탠난일-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 3-요오도-1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 (140 mg, 0.48 mmol)을 THF (3 ml)에 용해시켰다. 이 무색 용액을 -16℃로 냉각하고 (NaCl/빙욕), 아이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF 중의 2.0M, 0.27 ml, 0.54 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탠난 (0.15 ml, 0.55 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 1.5시간에 걸쳐 가온하고, 이어서 포화된 NH₄Cl으로 켄칭하고, 물로 희석하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 1,5,5-트라이메틸-3-트라이부틸스탠난일-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸을 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 6

5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (130 mg, 0.26 mmol) 및 1,5,5-트라이메틸-3-(트라이부틸스탄일)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 (375 mg, 0.41 mmol)을 DMF (2.4 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0) (15 mg, 0.013 mmol) 및 구리(I) 요오다이드 (10 mg, 0.053 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 90℃로 2.5시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 5% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 113 mg (75%)의 5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 거품으로서 수득하였다.

단계 7

2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (112 mg, 0.19 mmol)를 다이클로로메탄 (0.9 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.6 ml, 7.5 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.9 ml)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.8 ml, 11.4 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 47 mg (51%)의 2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 분말로서 수득하였다.

실시예 14.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드 (400 mg, 1.12 mmol) 및 6-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탄일-1H-인다졸 (1.11 g, 1.7 mmol)을 DMF (10 mL)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0) (65 mg, 0.056 mmol) 및 구리(I) 요오다이드 (43 mg, 0.23 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 80℃로 밤새도록 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, EtOAc/헥산 (구배 0 내지 30% EtOAc)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 416 mg (84%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드 (412 mg, 0.93 mmol)를 1,4-다이옥산 (15 ml) 및 물 (3 ml)에 현탁시켰다. 이 현탁액을 0℃로 냉각하고, 설팜산 (543 mg, 5.59 mmol)을 가했다. 이어서, 물 (9 ml) 중의 나트륨 클로라이트 (80%, 137 mg, 1.21 mmol) 및 인산 이수소 칼륨 (1.52 g, 11.2 mmol)의 용액을 적가 깔때기를 통해 약 20분에 걸쳐 가했다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. THF (15 ml)를 가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 추가로 3시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 희석하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산으로 마쇄하여, 358 mg (84%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 연황색 분말로서 수득하였다.

단계 3

[(R)-2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크에 Boc-D-알라닌 (400 mg, 2.11 mmol), 3,3-다이플루오로아제티딘 하이드로클로라이드 (383 mg, 2.96 mmol), HOBT (356 mg, 2.33 mmol) 및 EDC (446 mg, 2.33 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (9 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (1.0 ml, 5.73 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 509 mg (91%)의 [(R)-2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

(R)-2-아미노-1-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로판-1-온

5 ml 초음파 바이알에 [(R)-2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (170 mg, 0.64 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로에탄올 (2.4 ml, 32.9 mmol)을 넣었다. 이 바이알을 아르곤으로 플러쉬시키고, 밀봉하고, 초음파 조사 하에 150℃로 3시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 농축하여, 102 mg (97%)의 (R)-2-아미노-1-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로판-1-온을 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 5

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (110 mg, 0.24 mmol), (R)-2-아미노-1-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로판-1-온 (98 mg, 0.60 mmol), HOBT (41 mg, 0.27 mmol) 및 EDC (51 mg, 0.27 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (1.1 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.10 ml, 0.57 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 50% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 89 mg (61%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 6

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (88 mg, 0.146 mmol)를 다이클로로메탄 (0.7 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.45 ml, 5.84 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.7 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.6 ml, 8.74 mmol)을 가했다. 이 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 45 mg (62%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-메탄설폰일-피페리딘-3-일)-아마이드

단계 1

(R)-3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (120 mg, 0.26 mmol), (R)-3급-부틸 3-아미노피페리딘-1-카복실레이트 (80 mg, 0.40 mmol), HOBT (45 mg, 0.29 mmol) 및 EDC (56 mg, 0.29 mmol)를 채웠다. 여기에 DMF (1.2 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.10 ml, 0.57 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 50% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 139 mg (83%)의 (R)-3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (R)-피페리딘-3-일아마이드

환저 플라스크 내에서, (R)-3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터 (138 mg, 0.22 mmol)를 메탄올 (2 ml)에 현탁시켰다. 이 반응물을 0℃로 냉각하고, 아세틸 클로라이드 (0.30 ml, 4.22 mmol)를 10분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 연황색 현탁액을 실온에서 50분 동안 교반하였다. 여기에 THF (1 ml) 및 메탄올 (1 ml)을 가하고, 실온에서 1시간 동안 계속 교반하고, 이어서 용매를 실온에서 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄에 현탁시키고, 포화된 Na₂CO₃-용액으로 세척하였다. 수성 층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 105 mg (90%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (R)-피페리딘-3-일아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-메탄설폰일-피페리딘-3-일)-아마이드

0℃에서, 다이클로로메탄 (1.5 ml) 중의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (R)-피페리딘-3-일아마이드 (104 mg, 0.19 mmol)의 용액에 트라이에틸아민 (0.04 ml, 0.29 mmol) 및 이어서 메탄설폰일 클로라이드 (0.02 ml, 0.26 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 4% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하고, 이어서 에틸 아세테이트로 마쇄하여, 106 mg (89%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-메탄설폰일-피페리딘-3-일)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-메탄설폰일-피페리딘-3-일)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-메탄설폰일-피페리딘-3-일)-아마이드 (103 mg, 0.167 mmol)를 다이클로로메탄 (0.8 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.5 ml, 6.6 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.8 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.67 ml, 9.92 mmol)을 가했다. 생성된 연황색 현탁액을 실온에서 45분 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 이 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 54 mg (63%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-메탄설폰일-피페리딘-3-일)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 16.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-사이클로프로필-에틸)-아마이드

실시예 14의 단계 5 및 6에 개시된 절차에 따라, 단계 5에서 (R)-2-아미노-1-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로판-1-온을 (R)-1-사이클로프로필에틸아민으로 대체하여 제조하였다.

실시예 17.

2-(6-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 4에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-클로로-1H-인다졸을 6-사이클로프로필-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 18.

2-(1-메틸-6-트라이플루오로메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 4에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-클로로-1H-인다졸을 6-트라이플루오로메틸-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 19.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-피페리딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드

실시예 14의 단계 5 및 6에 개시된 절차에 따라, 단계 5에서 (R)-2-아미노-1-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로판-1-온을 1-((R)-2-아미노-3,3-다이메틸-부티릴)-피페리딘-4-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트로 대체하여 제조하였다.

실시예 20.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-시아노-아제티딘-1-카보닐)-프로필]-아마이드

단계 1

[(R)-1-(3-시아노-아제티딘-1-카보닐)-프로필]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, Boc-D-2-아미노부티르산 (400 mg, 1.97 mmol) 및 아제티딘-3-카보나이트릴 하이드로클로라이드 (373 mg, 3.15 mmol)를 DMF (9 ml)에 용해시켰다. 여기에 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (1.0 ml, 5.73 mmol) 및 이어서 HATU (823 mg, 2.16 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 410 mg (70%)의 [(R)-1-(3-시아노-아제티딘-1-카보닐)-프로필]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

1-((R)-2-아미노-부티릴)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트

다이클로로메탄 (4 ml) 중의 [(R)-1-(3-시아노-아제티딘-1-카보닐)-프로필]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (200 mg, 0.67 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 (1.8 ml, 23.4 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, 1-((R)-2-아미노-부티릴)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-시아노-아제티딘-1-카보닐)-프로필]-아마이드

실시예 14의 단계 5 및 6에 개시된 절차에 따라, 단계 5에서 (R)-2-아미노-1-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로판-1-온을 1-((R)-2-아미노-부티릴)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트로 대체하여 제조하였다.

실시예 21.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, Boc-D-사이클로프로필글라이신 (500 mg, 2.32 mmol) 및 아제티딘-3-카보나이트릴 하이드로클로라이드 (441 mg, 3.72 mmol)를 DMF (10 mL)에 용해시켰다. 여기에 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (1.2 ml, 6.87 mmol) 및 이어서 HATU (972 mg, 2.56 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 석유 에터로 마쇄하여, 384 mg (59%)의 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

1-((R)-2-아미노-2-사이클로프로필-아세틸)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트

다이클로로메탄 (4 ml) 중의 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (190 mg, 0.69 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 (1.8 ml, 23.4 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, 1-((R)-2-아미노-2-사이클로프로필-아세틸)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 14의 단계 5 및 6에 개시된 절차에 따라, 단계 5에서 (R)-2-아미노-1-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로판-1-온을 1-((R)-2-아미노-2-사이클로프로필-아세틸)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트로 대체하여 제조하였다.

실시예 22.

2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 4에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-클로로-1H-인다졸을 6-시아노-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 23.

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

6-클로로-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 6-클로로-3-요오도-1H-인다졸 (250 mg, 0.85 mmol)을 THF (5 ml)에 용해시키고, 나트륨 하이드라이드 (미네랄 오일 중의 60% 분산액, 41 mg, 1.03 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 -16℃로 냉각하고 (NaCl/빙욕), 아이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF 중의 2.0 M, 0.52 ml, 1.04 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 -16℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 추가의 아이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF 중의 2.0 M (0.14 ml, 0.28 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 -16℃에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탠난 (0.28 ml, 1.03 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 2.5시간에 걸쳐 실온으로 가온하고, 이어서 포화된 NH₄Cl-용액으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 6-클로로-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (190 mg, 0.37 mmol) 및 6-클로로-3-트라이부틸스탄일-1H-인다졸 (단계 1로부터의 조질, 619 mg, 0.70 mmol)을 DMF (3.4 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0) (22 mg, 0.019 mmol) 및 구리(I) 요오다이드 (15 mg, 0.079 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 90℃로 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 3% MeOH)를 사용하여 크로마토그래피로 처리하고, 이어서 다이에틸 에터/에틸 아세테이트로 마쇄하여, 159 mg (73%)의 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연갈색 분말로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (65 mg, 0.112 mmol)를 다이클로로메탄 (0.6 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.35 ml, 4.5 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.6 ml)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.46 ml, 6.8 mmol)을 가했다. 이 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 30 mg (59%)의 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 24.

2-[6-클로로-1-(2-메톡시-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-[6-클로로-1-(2-메톡시-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (90 mg, 0.155 mmol)를 DMF (1 ml)에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 나트륨 하이드라이드 (미네랄 오일 중의 60% 분산액, 8 mg, 0.20 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 1-브로모-2-메톡시에탄 (22 μl, 0.23 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온에서 밤새도록 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 3% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 51 mg (52%)의 2-[6-클로로-1-(2-메톡시-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 거품으로서 수득하였다.

단계 2

2-[6-클로로-1-(2-메톡시-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-[6-클로로-1-(2-메톡시-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (50 mg, 0.079 mmol)를 다이클로로메탄 (0.5 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.25 ml, 3.24 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.5 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.32 ml, 4.74 mmol)을 가했다. 이 반응물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 19 mg (48%)의 2-[6-클로로-1-(2-메톡시-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 25.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-페닐에틸)-아마이드

실시예 14의 단계 5 및 6에 개시된 절차에 따라, 단계 5에서 (R)-2-아미노-1-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로판-1-온을 (R)-1-페닐에틸아민으로 대체하여 제조하였다.

실시예 26.

2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 4에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-클로로-1H-인다졸을 4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 27.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-메틸-2-(2-옥사-6-아자-스피로[3.3]헵트-6-일)-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 14의 단계 3 내지 6에 개시된 절차에 따라, 단계 3에서 3,3-다이플루오로아제티딘 하이드로클로라이드를 2-옥사-6-아자-스피로[3.3]헵탄 옥살레이트로 대체하여 제조하였다.

실시예 28.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-메틸-2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-아마이드

실시예 14의 단계 3 내지 6에 개시된 절차에 따라, 단계 3에서 3,3-다이플루오로아제티딘 하이드로클로라이드를 모폴린으로 대체하여 제조하였다.

실시예 29.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인돌-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1H-인돌-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

바이알에 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (158 mg, 0.31 mmol), 3급-부틸 6-클로로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인돌-1-카복실레이트 (176 mg, 0.47 mmol) 및 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0) (18.0 mg, 0.016 mmol)을 넣었다. 이 바이알을 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 1,2-다이메톡시에탄 (1.8 ml) 및 수성 2 M 나트륨 카보네이트 (0.47 ml, 0.940 mmol)를 가했다. 이 바이알을 밀봉하고, 이 반응물을 오일 욕 중에서 90℃로 밤새도록 교반하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 3% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 93 mg (52%) 2-(6-클로로-1H-인돌-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연녹색 거품으로서 단리하였다. 또한, 소량의 불순한 6-클로로-3-[7-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸카바모일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-인돌-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 연갈색 고체로서 단리하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인돌-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1H-인돌-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (90 mg, 0.156 mmol)를 DMF (1 ml)에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 나트륨 하이드라이드 (미네랄 오일 중의 60% 분산액, 8 mg, 0.20 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 메틸 요오다이드 (10 μl, 0.16 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 2% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 56 mg (61%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인돌-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 거품으로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인돌-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인돌-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (54 mg, 0.091 mmol)를 다이클로로메탄 (0.5 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.28 ml, 3.63 mmol)을 가했다. 이 진적색 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.5 ml)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.37 ml, 5.48 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 28 mg (63%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인돌-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

실시예 30.

2-(6-클로로-5-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 4에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-클로로-1H-인다졸을 6-클로로-5-플루오로-1H-인다졸로 대체하여 제조하였다.

실시예 31.

2-(6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

(5-메틸-피리딘-2-일)-메틸아민

건조된 환저 플라스크 내에서, 5-메틸-피리딘-2-카보나이트릴 (1.0 g, 8.46 mmol)을 THF (45 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, 리튬 알루미늄 하이드라이드 (THF 중의 1.0 M, 25 ml, 25.0 mmol)를 20분에 걸쳐 적가하였다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 나트륨 설페이트 십수화물을 조심스럽게 가했다. 기체 발생이 멈췄을 때 빙욕을 제거하고, 나트륨 설페이트를 가하고, 이 혼합물을 실온에서 30분 동안 격렬히 교반하였다. 이 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고, 에틸 아세테이트, 다이클로로메탄, 및 메탄올로 세척하였다. 여액을 농축하여, (5-메틸-피리딘-2-일)-메틸아민을 갈색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 2

N-(5-메틸-피리딘-2-일메틸)-폼아마이드

환저 플라스크 내에서, (5-메틸-피리딘-2-일)-메틸아민 (단계 1로부터의 조질)을 88% 폼산 (6.0 ml, 156 mmol)에 용해시켰다. 이 진갈색 용액을 오일 욕 내에서 밤새도록 환류 하에 교반하였다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 25% 수성 암모늄 하이드록사이드를 가하여, 조심스럽게 pH를 8로 조절하였다. 이 혼합물을 물로 희석하고, 수성 층을 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, N-(5-메틸-피리딘-2-일메틸)-폼아마이드를 진갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘

환저 플라스크 내에서, N-(5-메틸-피리딘-2-일메틸)-폼아마이드 (단계 2로부터의 조질)를 톨루엔 (30 ml)에 용해시키고, 인 옥시클로라이드 (1.2 ml, 12.9 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 100℃로 밤새도록 교반하고, 이어서 0℃로 냉각하고, 얼음으로 조심스럽게 켄칭하였다. 25% 암모늄 하이드록사이드 수용액을 약 pH 9가 될 때까지 가했다. 이 혼합물을 물로 희석하고, 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, EtOAc/헥산 (구배 0 내지 80% EtOAc)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 386 mg (41%, 3 단계)의 6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘을 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 4

1-요오도-6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘

환저 플라스크 내에서, 중탄산 나트륨 (215 mg, 2.56 mmol)을 물 (0.6 ml) 및 에탄올 (1.2 ml)에 현탁시켰다. 여기에 6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘 (90 mg, 0.68 mmol) 및 이어서 요오드 (242 mg, 0.95 mmol)를 가했다. 이 진갈색 현탁액을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 10% Na₂S₂O₃-용액으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 30% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 99 mg (56%)의 1-요오도-6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘을 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 5

6-메틸-1-트라이부틸스탠난일-이미다조[1,5-a]피리딘

환저 플라스크 내에서, 1-요오도-6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘 (97 mg, 0.38 mmol)을 THF (3 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 -16℃로 냉각하고 (NaCl/빙욕), 아이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF 중의 2.0M 용액, 0.23 ml, 0.46 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탠난 (0.12 ml, 0.44 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 이어서 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 6-메틸-1-트라이부틸스탠난일-이미다조[1,5-a]피리딘 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 6

2-(6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (100 mg, 0.20 mmol) 및 6-메틸-1-트라이부틸스탄일-이미다조[1,5-a]피리딘 (단계 5로부터의 조질, 307 mg, 0.36 mmol)을 DMF (1.8 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐 (0) (12 mg, 0.010 mmol) 및 구리 (I) 요오다이드 (8 mg, 0.042 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 90℃로 밤새도록 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 3% MeOH)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 98 mg (89%)의 2-(6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 오일로서 수득하였다.

단계 7

2-(6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (92 mg, 0.165 mmol)를 다이클로로메탄 (0.8 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.5 ml, 6.6 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.8 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.67 ml, 9.9 mmol)을 가했다. 이 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 48 mg (65%)의 2-(6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

실시예 32.

2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

(5-플루오로-피리딘-2-일)-메틸아민

파(Parr) 압력 병 내에서, 2-시아노-5-플루오로피리딘 (2.0 g, 16.4 mmol)을 에탄올 (60 ml)에 용해시켰다. Pd/C(10% Pd (습윤), 574 mg, 5.39 mmol) 및 이어서 진한 HCl (4.6 ml, 56.0 mmol)을 가했다. 이 병을 파(Parr) 수소 발생기 상에 놓고, 45 psi의 수소 분위기 하에 3.5시간 동안 진탕하였다. 이 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 메탄올로 세척하였다. 여액을 농축하여, 연갈색 고체를 수득하였다. 이 고체를 다이클로로메탄 중에 취하고, 0℃로 냉각하고, 포화된 수성 NaHCO₃으로 염기성화시켰다. 수성 층을 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하고, 합친 유기물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 558 mg (27%)의 (5-플루오로-피리딘-2-일)-메틸아민을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 2

N-(5-플루오로-피리딘-2-일메틸)-폼아마이드

환저 플라스크 내에서, (5-플루오로-피리딘-2-일)메틸아민 (557 mg, 4.42 mmol)을 88% 폼산 (3.6 ml, 82.6 mmol)에 용해시켰다. 이 갈색 용액을 오일 욕 내에서 밤새도록 환류 하에 교반하였다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 25% 수성 암모늄 하이드록사이드를 가하여 조심스럽게 pH 9로 조절하였다. 이 혼합물을 물로 희석하고, 수성 층을 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 614 mg (90%)의 N-(5-플루오로-피리딘-2-일메틸)-폼아마이드를 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘

환저 플라스크 내에서, N-(5-플루오로-피리딘-2-일메틸)-폼아마이드 (612 mg, 3.97 mmol)를 톨루엔 (16 ml)에 용해시키고, 인 옥시클로라이드 (0.68 ml, 7.3 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 100℃로 4시간 동안 교반하고, 이어서 0℃로 냉각하고, 얼음으로 조심스럽게 켄칭하였다. 약 pH 9가 될 때까지 수성 25% 암모늄 하이드록사이드를 가했다. 이 혼합물을 물로 희석하고, 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 517 mg (96%)의 6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘을 연갈색 오일로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 31의 단계 4 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 4에서 6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘을 6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘으로 대체하여 제조하였다.

실시예 33.

2-(6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

(3,5-다이플루오로-피리딘-2-일)-메틸아민

파 압력 병 내에서, 2-시아노-3,5-다이플루오로피리딘 (1.0 g, 7.14 mmol)을 에탄올 (30 ml)에 용해시켰다. Pd/C(10% Pd (습윤), 250 mg, 2.35 mmol) 및 이어서 진한 HCl (2.0 ml, 24.4 mmol)을 가했다. 이 병을 파 수소 발생기 상에 놓고, 45 psi의 수소 분위기 하에 3.5시간 동안 진탕하였다. 이 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 메탄올로 세척하였다. 여액을 농축하여, 연갈색 고체를 수득하였다. 이 고체를 다이클로로메탄 중에 취하고, 0℃로 냉각하고, 포화된 수성 NaHCO₃으로 염기성화시켰다. 수성 층을 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하고, 합친 유기물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 662 mg (64%)의 (3,5-다이플루오로-피리딘-2-일)-메틸아민을 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 2

N-(3,5-다이플루오로-피리딘-2-일메틸)-폼아마이드

환저 플라스크 내에서, (3,5-다이플루오로-피리딘-2-일)메틸아민 (660 mg, 4.58 mmol)을 88% 폼산 (3.6 ml, 82.6 mmol)에 용해시켰다. 이 갈색 용액을 오일 욕 내에서 밤새도록 환류 하에 교반하였다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 25% 수성 암모늄 하이드록사이드를 가하여, 조심스럽게 pH 8로 조절하였다. 이 혼합물을 물로 희석하고, 수성 층을 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. NMR은 생성물에 대해 약 50% 비율의 출발 물질을 나타냈다. 이 혼합물을 동일한 반응 조건으로 다시 처리하였다. 분리정제 후, 657 mg의 갈색 오일을 단리하였으며, 이는 NMR로 결정시 3:1 비의 N-(3,5-다이플루오로-피리딘-2-일메틸)-폼아마이드 대 출발 물질로 나타났다. 이 생성물을 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘

환저 플라스크 내에서, N-(3,5-다이플루오로-피리딘-2-일메틸)-폼아마이드 (단계 2로부터의 조질)를 톨루엔 (14 ml)에 용해시키고, 인 옥시클로라이드 (0.65 ml, 7.0 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 100℃로 3.5시간 동안 교반하고, 이어서 0℃로 냉각하고, 얼음으로 조심스럽게 켄칭하였다. 약 pH 9가 될 때까지 수성 25% 암모늄 하이드록사이드를 가했다. 이 혼합물을 물로 희석하고, 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, EtOAc/헥산 (구배 0 내지 60% EtOAc)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 319 mg (45%, 2 단계)의 6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 31의 단계 4 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 4에서 6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘을 6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘으로 대체하여 제조하였다.

실시예 34.

2-(6-플루오로-3-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

(5-플루오로-피리딘-2-일)-메틸아민 다이하이드로클로라이드

파 압력 병 내에서, 2-시아노-5-플루오로피리딘 (1.0 g, 8.2 mmol)을 에탄올 (30 ml)에 용해시켰다. Pd/C(10% Pd (습윤), 290 mg, 2.73 mmol) 및 이어서 이어서 진한 HCl (2.3 ml, 28.0 mmol)을 가했다. 이 병을 파 수소 발생기 상에 놓고, 45 psi의 수소 분위기 하에 4시간 동안 진탕하였다. 이 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 메탄올로 세척하였다. 여액을 농축하여, 1.61 g (99%)의 (5-플루오로-피리딘-2-일)-메틸아민 다이하이드로클로라이드를 연황색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 2

N-(5-플루오로-피리딘-2-일메틸)-아세트아마이드

환저 플라스크 내에서, (5-플루오로피리딘-2-일)메틸아민 다이하이드로클로라이드 (800 mg, 4.0 mmol)를 THF (15 ml)에 현탁시켰다. 이 현탁액을 0℃로 냉각하고, 트라이에틸아민 (1.75 ml, 12.6 mmol)을 가하고, 이어서 아세틸 클로라이드 (0.30 ml, 4.22 mmol)를 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 654 mg (97%)의 N-(5-플루오로-피리딘-2-일메틸)-아세트아마이드를 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

6-플루오로-3-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘

환저 플라스크 내에서, N-(5-플루오로-피리딘-2-일메틸)-아세트아마이드 (653 mg, 3.88 mmol)를 톨루엔 (19 ml)에 용해시키고, 인 옥시클로라이드 (0.66 ml, 7.1 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 100℃로 밤새도록 교반하고, 이어서 0℃로 냉각하고, 얼음으로 조심스럽게 켄칭하였다. 약 pH 9가 될 때까지 수성 25% 암모늄 하이드록사이드를 가했다. 이 혼합물을 물로 희석하고, 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 70% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 255 mg (44%)의 6-플루오로-3-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-3-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 31의 단계 4 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 4에서 6-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘을 6-플루오로-3-메틸-이미다조[1,5-a]피리딘으로 대체하여 제조하였다.

실시예 35.

2-(6-플루오로-3-하이드록시메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

N-(5-플루오로-피리딘-2-일메틸)-옥살람산 메틸 에스터

환저 플라스크 내에서, (5-플루오로피리딘-2-일)메틸아민 다이하이드로클로라이드 (800 mg, 4.0 mmol)를 THF (15 ml)에 현탁시켰다. 이 현탁액을 0℃로 냉각하고, 트라이에틸아민 (1.75 ml, 12.6 mmol)을 가하고, 이어서 메틸 옥살일 클로라이드 (0.40 ml, 4.18 mmol)를 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, N-(5-플루오로-피리딘-2-일메틸)-옥살람산 메틸 에스터를 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 2

6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-3-카복실산 메틸 에스터

환저 플라스크 내에서, N-(5-플루오로-피리딘-2-일메틸)-옥살람산 메틸 에스터 (단계 1로부터의 조질)를 톨루엔 (8 ml)에 용해시키고, 인 옥시클로라이드 (1.5 ml, 16.1 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 105℃로 밤새도록 교반하고, 이어서 0℃로 냉각하고, 얼음으로 조심스럽게 켄칭하였다. 약 pH 9가 될 때까지 수성 25% 암모늄 하이드록사이드를 가했다. 이 혼합물을 물로 희석하고, 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, EtOAc/헥산 (구배 0 내지 50% EtOAc)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 230 mg (31%, 2 단계)의 6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-3-카복실산 메틸 에스터를 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 3

(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-3-일)-메탄올

환저 플라스크 내에서, 6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-3-카복실산 메틸 에스터 (223 mg, 1.15 mmol)를 THF (7 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, 리튬 알루미늄 하이드라이드 (THF 중의 1.0 M, 1.4 ml, 1.4 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 나트륨 설페이트 십수화물을 조심스럽게 가했다. 기체 발생이 멈췄을 때, 빙욕을 제거하고, 나트륨 설페이트를 가하고, 이 혼합물을 실온에서 30분 동안 격렬히 교반하였다. 이 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고, 에틸 아세테이트 및 메탄올로 세척하였다. 여액을 농축하여, 225 mg의 (6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-3-일)-메탄올을 갈색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 4

(6-플루오로-1-요오도-이미다조[1,5-a]피리딘-3-일)-메탄올

환저 플라스크 내에서, (6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-3-일)-메탄올 (225 mg, 1.15 mmol)을 에탄올 (2 ml) 및 물 (1 ml)에 용해시켰다. 여기에 중탄산 나트륨 (341 mg, 4.06 mmol) 및 이어서 요오드 (383 mg, 1.51 mmol)를 가했다. 이 진갈색 현탁액을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 10% Na₂S₂O₃-용액으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, EtOAc/헥산 (구배 0 내지 40% EtOAc)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 157 mg (50%, 2 단계)의 (6-플루오로-1-요오도-이미다조[1,5-a]피리딘-3-일)-메탄올을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 5

(6-플루오로-1-트라이부틸스탠난일-이미다조[1,5-a]피리딘-3-일)-메탄올

환저 플라스크 내에서, (6-플루오로-1-요오도-이미다조[1,5-a]피리딘-3-일)-메탄올 (156 mg, 0.53 mmol)을 THF (4 ml)에 용해시켰다. 나트륨 하이드라이드 (미네랄 오일 중의 60% 분산액, 26 mg, 0.65 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 -16℃로 냉각하고 (NaCl/빙욕), 아이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF 중의 2.0 M, 0.32 ml, 0.64 mmol)를 적가하였다. 이 반응물을 -16℃에서 25분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탠난 (0.17 ml, 0.63 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, (6-플루오로-1-트라이부틸스탠난일-이미다조[1,5-a]피리딘-3-일)-메탄올을 갈색 반고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 6

2-(6-플루오로-3-하이드록시메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (100 mg, 0.20 mmol) 및 (6-플루오로-1-트라이부틸스탠난일-이미다조[1,5-a]피리딘-3-일)-메탄올 (단계 5로부터의 조질)을 DMF (2 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐 (0) (12 mg, 0.010 mmol) 및 구리 (I) 요오다이드 (8 mg, 0.042 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 90℃로 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 3% MeOH)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 83 mg (71%)의 2-(6-플루오로-3-하이드록시메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 7

2-(6-플루오로-3-하이드록시메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-3-하이드록시메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (82 mg, 0.138 mmol)를 다이클로로메탄 (0.7 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.43 ml, 5.6 mmol)을 가했다. 이 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.7 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.56 ml, 8.3 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이클로로메탄으로 희석하였다. 생성 침전물을 여과하고, 물 및 다이클로로메탄으로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 46 mg (68%)의 2-(6-플루오로-3-하이드록시메틸-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

실시예 36.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((1R,3R)-3-시아노-사이클로펜틸)-아마이드

단계 1

((1R,3R)-3-카바모일-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, (1R,3R)-N-Boc-1-아미노사이클로펜탄-3-카복실산 (300 mg, 1.31 mmol) 및 암모늄 클로라이드 (210 mg, 3.93 mmol)를 DMF (6 ml)에 현탁시켰다. HATU (547 mg, 1.44 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.80 ml, 4.58 mmol)을 가하고, 이 황색 현탁액을 실온에서 72시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 97 mg (33%)의 ((1R,3R)-3-카바모일-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

((1R,3R)-3-시아노-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, ((1R,3R)-3-카바모일-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (96 mg, 0.42 mmol)를 THF (2.5 ml)에 현탁시켰다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 트라이에틸아민 (0.28 ml, 2.01 mmol) 및 이어서 트라이플루오로아세트산 무수물 (0.095 ml, 0.67 mmol)을 가했다. 이 균질 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 합친 유기 상을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, ((1R,3R)-3-시아노-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 회백색 왁스형 고체로서 수득하였으며, 이는 소량의 불순물로서 일부 트라이에틸아민 트라이플루오로아세테이트를 함유하였다. 이 물질을 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

(1R,3R)-3-아미노-사이클로펜탄카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트

환저 플라스크 내에서, ((1R,3R)-3-시아노-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (단계 2로부터의 조질)를 다이클로로메탄 (2.5 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, 트라이플루오로아세트산 (1.1 ml, 14.3 mmol)을 천천히 가했다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, (1R,3R)-3-아미노-사이클로펜탄카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((1R,3R)-3-시아노-사이클로펜틸)-아마이드

실시예 14의 단계 5 및 6에 개시된 절차에 따라, 단계 5에서 (R)-2-아미노-1-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로판-1-온을 (1R,3R)-3-아미노-사이클로펜탄카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트로 대체하여 제조하였다.

실시예 37.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-아미노-사이클로펜틸)-아마이드

단계 1

(3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (300 mg, 0.66 mmol) 및 (3-아미노사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸에스터 하이드로클로라이드 (233 mg, 0.98 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (3 ml) 및 이어서 HATU (274 mg, 0.72 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.30 ml, 1.72 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 추가의 DMF (2 ml)를 가하고, 이 연황색 현탁액을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 물을 가하고, 생성 현탁액을 여과하고, 물 및 석유 에터로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 413 mg (99%)의 (3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 회백색 분말로서 수득하였다. 단리된 생성물은 NMR 분석시 미지의 상대적 입체화학의 단일 부분입체이성질체인 것으로 결정되었다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-아미노-사이클로펜틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, (3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (80 mg, 0.125 mmol)를 다이클로로메탄 (0.7 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.4 ml, 5.0 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 3.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.7 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.5 ml, 7.5 mmol)을 가했다. 이 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 40 mg (74%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-아미노-사이클로펜틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단리된 생성물은 NMR 분석시 미지의 상대적 입체화학의 단일 부분입체이성질체인 것으로 결정되었다.

실시예 38.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-메탄설폰일아미노-사이클로펜틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-아미노-사이클로펜틸)-아마이드 하이드로클로라이드

환저 플라스크 내에서, (3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (150 mg, 0.23 mmol)를 메탄올 (2 ml)에 현탁시켰다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 아세틸 클로라이드 (0.33 ml, 4.64 mmol)를 적가하였다. 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 용매를 실온에서 증발시키고, 잔사를 고진공 하에 건조하여, 147 mg (98%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-아미노-사이클로펜틸)-아마이드 하이드로클로라이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-메탄설폰일아미노-사이클로펜틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-아미노-사이클로펜틸)-아마이드 하이드로클로라이드 (145 mg, 0.23 mmol)를 다이클로로메탄 (2.5 ml)에 현탁시켰다. 이 현탁액을 0℃로 냉각하고, 트라이에틸아민 (0.10 ml, 0.72 mmol) 및 이어서 메탄설폰일 클로라이드 (0.02 ml, 0.26 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 합친 유기 상을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 5% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 111 mg (79%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-메탄설폰일아미노-사이클로펜틸)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-메탄설폰일아미노-사이클로펜틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-메탄설폰일아미노-사이클로펜틸)-아마이드 (109 mg, 0.176 mmol)를 다이클로로메탄 (0.9 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.54 ml, 7.0 mmol)을 가했다. 이 오렌지색 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.9 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.7 ml, 10.5 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 76 mg (88%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (3-메탄설폰일아미노-사이클로펜틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 39.

2-(3-클로로-6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

환저 플라스크 내에서, 6-플루오로-1-트라이부틸스탄일-이미다조[1,5-a]피리딘 (577 mg, 0.81 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드 (210 mg, 0.59 mmol)를 DMF (5 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐 (0) (33 mg, 0.029 mmol) 및 구리 (I) 요오다이드 (22 mg, 0.12 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 80℃로 4시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하였다. 물을 가하고, 생성 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 256 mg (95%)의 2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(3-클로로-6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드 (254 mg, 0.55 mmol)를 THF (10 ml) 및 물 (2 ml)에 현탁시켰다. 이 현탁액을 0℃로 냉각하고, 설팜산 (324 mg, 3.33 mmol)을 가했다. 이어서, 물 (6 ml) 중의 나트륨 클로라이트 (80%, 88 mg, 0.78 mmol) 및 인산 이수소 칼륨 (907 mg, 6.67 mmol)의 용액을 10분에 걸쳐 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 희석하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 헥산으로 마쇄하여, 184 mg의 2-(3-클로로-6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 연녹색 분말로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(3-클로로-6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

환저 플라스크에 2-(3-클로로-6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (90 mg, 0.16 mmol) 및 (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드 (40 mg, 0.32 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (1 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.1 ml, 0.57 mmol) 및 HATU (71 mg, 0.19 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물을 가했다. 생성 현탁액을 여과하고, 물 및 석유 에터로 세척하였다. 이 갈색 분말을 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 2% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 37 mg (44%)의 2-(3-클로로-6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(3-클로로-6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(3-클로로-6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드 (36 mg, 0.068 mmol)를 다이클로로메탄 (0.4 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.22 ml, 2.86 mmol)을 가했다. 이 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.4 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.3 ml, 4.3 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 21 mg (77%)의 2-(3-클로로-6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

실시예 40.

2-(6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (120 mg, 0.32 mmol) 및 (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드 (61 mg, 0.49 mmol)를 합쳤다. 여기에 DMF (1.5 mL) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.15 mL, 0.86 mmol) 및 HATU (135 mg, 0.36 mmol)를 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물을 가했다. 생성 현탁액을 여과하고, 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 129 mg (90%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드 (125 mg, 0.28 mmol) 및 6,8-다이플루오로-1-트라이부틸스탄일-이미다조[1,5-a]피리딘 (458 mg, 0.62 mmol)을 DMF (2.5 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐 (0) (17 mg, 0.015 mmol) 및 구리 (I) 요오다이드 (11 mg, 0.058 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 90℃로 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 3% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 2회 처리하여, 136 mg (89%)의 2-(6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드 (134 mg, 0.25 mmol)를 다이클로로메탄 (1.2 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.75 ml, 9.8 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1.2 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (1.0 ml, 14.8 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 74 mg (78%)의 2-(6,8-다이플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

실시예 41.

2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 40의 단계 2 및 3에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 6,8-다이플루오로-1-트라이부틸스탄일-이미다조[1,5-a]피리딘을 6-플루오로-1-트라이부틸스탄일-이미다조[1,5-a]피리딘으로 대체하여 제조하였다.

실시예 42.

2-(6-플루오로-3-메탄설폰일-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

6-플루오로-2H-이미다조[1,5-a]피리딘-3-티온

환저 플라스크 내에서, (5-플루오로피리딘-2-일)메틸아민 다이하이드로클로라이드 (600 mg, 3.0 mmol)를 메탄올 (16 ml)에 현탁시켰다. 여기에 트라이에틸아민 (1.4 ml, 10.0 mmol) 및 이어서 이황화 탄소 (1.4 ml, 23.2 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 환류 하에 밤새도록 교반하고 (오일 욕 온도 = 75℃), 이어서 실온으로 냉각하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄과 물 사이에 분배하였다. 수성 층을 다이클로로메탄으로 추출하고, 이어서 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, EtOAc/헥산 (구배 0 내지 60% EtOAc)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 169 mg (33%)의 6-플루오로-2H-이미다조[1,5-a]피리딘-3-티온을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

단계 2

6-플루오로-3-메틸설판일-이미다조[1,5-a]피리딘

환저 플라스크 내에서, 6-플루오로-2H-이미다조[1,5-a]피리딘-3-티온 (158 mg, 0.94 mmol)을 메탄올 (1 ml)에 현탁시키고, 나트륨 메톡사이드 (MeOH 중의 0.5 M, 2.0 ml, 1.0 mmol)를 적가하였다. 이 반응물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 메틸 요오다이드 (0.07 ml, 1.12 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄과 물 사이에 분배하였다. 수성 층을 다이클로로메탄으로 추출하고, 이어서 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 179 mg의 6-플루오로-3-메틸설판일-이미다조[1,5-a]피리딘을 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

6-플루오로-1-요오도-3-메틸설판일-이미다조[1,5-a]피리딘

환저 플라스크 내에서, 6-플루오로-3-메틸설판일-이미다조[1,5-a]피리딘 (178 mg, 0.88 mmol)을 에탄올 (1.6 ml)에 용해시켰다. 여기에 물 (0.8 ml), 중탄산 나트륨 (278 mg, 3.31 mmol) 및 요오드 (312 mg, 1.23 mmol)를 가했다. 이 진갈색 현탁액을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 10% 수성 Na₂S₂O₃ 으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 10% 수성 Na₂S₂O₃, 물, 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, EtOAc/헥산 (구배 0 내지 10% EtOAc)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 110 mg (41%)의 6-플루오로-1-요오도-3-메틸설판일-이미다조[1,5-a]피리딘을 갈색 고체로서 수득하였다.

단계 4

6-플루오로-3-메틸설판일-1-트라이부틸스탠난일-이미다조[1,5-a]피리딘

환저 플라스크 내에서, 6-플루오로-1-요오도-3-메틸설판일-이미다조[1,5-a]피리딘 (109 mg, 0.35 mmol)을 THF (3 ml)에 용해시켰다. 이 연갈색 용액을 -16℃로 냉각하고 (NaCl/빙욕), 아이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF 중의 2.0 M, 0.21 ml, 0.42 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탠난 (0.11 ml, 0.40 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 이어서 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 6-플루오로-3-메틸설판일-1-트라이부틸스탠난일-이미다조[1,5-a]피리딘을 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-3-메틸설판일-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (100 mg, 0.20 mmol) 및 6-플루오로-3-메틸설판일-1-트라이부틸스탠난일-이미다조[1,5-a]피리딘 (단계 4로부터의 조질)을 DMF (2 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐 (0) (12 mg, 0.010 mmol) 및 구리 (I) 요오다이드 (8 mg, 0.042 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 80℃로 밤새도록 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 2.5% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 109 mg (82%)의 2-(6-플루오로-3-메틸설판일-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 갈색 오일로서 수득하였다.

단계 6

2-(6-플루오로-3-메탄설폰일-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-3-메틸설판일-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (105 mg, 0.155 mmol)를 다이클로로메탄 (4 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, m-CPBA (75%, 79 mg, 0.343 mmol)를 가했다. 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 추가로 m-CPBA (75%, 36 mg, 0.155 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 10% Na₂S₂O₃ 수용액(3 ml)을 가하고, 이 2상 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 희석하고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 포화된 수성 NaHCO₃으로 세척하였다. 수성 층을 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 합친 유기 상을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 2.5% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 25 mg (25%)의 2-(6-플루오로-3-메탄설폰일-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연갈색 오일로서 수득하였다.

단계 7

2-(6-플루오로-3-메탄설폰일-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-3-메탄설폰일-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (0.024 g, 37.5 μmol, 당량: 1.00)를 다이클로로메탄 (0.3 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.12 ml, 1.6 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올/암모늄 하이드록사이드 (60:10:1) (3.5 ml)에 재용해시켰다. 이 용액을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 7% MeOH)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 6 mg (30%)의 2-(6-플루오로-3-메탄설폰일-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 43.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-시아노-아제티딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드

단계 1

[(R)-1-(3-시아노-아제티딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크에 Boc-D-3급-류신 (300 mg, 1.3 mmol) 및 아제티딘-3-카보나이트릴 하이드로클로라이드 (231 mg, 1.95 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (6 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.68 ml, 3.9 mmol) 및 HATU (543 mg, 1.43 mmol)를 넣었다. 이 연황색 용액을 실온에서 48시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 458 mg의 [(R)-1-(3-시아노-아제티딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 연황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

1-((R)-2-아미노-3,3-다이메틸-부티릴)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트

0℃에서, 다이클로로메탄 (3 ml) 중의 [(R)-1-(3-시아노-아제티딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (180 mg, 0.49 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 (1.2 ml, 15.6 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, 1-((R)-2-아미노-3,3-다이메틸-부티릴)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-시아노-아제티딘-1-카보닐)-2,2-다이메틸-프로필]-아마이드

실시예 14의 단계 5 및 6에 개시된 절차에 따라, 단계 5에서 (R)-2-아미노-1-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로판-1-온을 1-((R)-2-아미노-3,3-다이메틸-부티릴)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트로 대체하여 제조하였다.

실시예 44.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드

단계 1

((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

0℃에서, THF (100 mL) 중의 Boc-D-알라닌 메틸 에스터 (5.00 g, 24.6 mmol)의 용액에 메틸 마그네슘 브로마이드 (Et₂O 중의 3.0 M, 28.7 mL, 86.1 mmol)를 천천히 가했다. 생성된 백색 슬러리를 0℃에서 1시간 동안 및 이어서 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, H₂O로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 4.93 g (99%)의 ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 무색 점성 오일로서 수득하였다.

단계 2

((R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

건조된 환저 플라스크 내에서, ((R)-2-하이드록시-1,2-다이메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (534 mg, 2.36 mmol)를 다이클로로메탄 (22 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 -76℃로 냉각하고, DAST (0.34 ml, 2.57 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 -76℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 포화된 수성 NaHCO₃ (5 mL)으로 켄칭하고, 실온으로 가온하고, 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 534 mg의 ((R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

(R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필아민 하이드로클로라이드

((R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (140 mg, 0.61 mmol)를 MeOH (10 mL) 중의 1.0 M HCl 용액에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 농축하여, (R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필아민 하이드로클로라이드를 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드

10 ml 환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (120 mg, 0.27 mmol) 및 (R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필아민 하이드로클로라이드 (단계 3으로부터의 조질, 155 mg, 0.55 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (1.2ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.20 ml, 1.15 mmol) 및 HATU (114 mg, 0.30 mmol)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 물을 가하고, 생성 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 95 mg (66%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드를 연갈색 분말로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드 (93 mg, 0.176 mmol)를 다이클로로메탄 (0.9 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.54 ml, 7.0 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.9 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.7 ml, 10.5 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 6% MeOH)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하고, 이어서 에틸 아세테이트로 마쇄하여, 34 mg (46%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2-플루오로-1,2-다이메틸-프로필)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 45.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (120 mg, 0.27 mmol)을 DMF (1.2 ml)에 용해시켰다. 여기에 (S)-3,3-다이메틸부탄-2-아민 (0.25 ml, 1.84 mmol) 및 이어서 HATU (114 mg, 0.30 mmol)를 가하고, 이 황색 용액을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 물을 가하고, 생성 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 104 mg (73%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드 (102 mg, 0.194 mmol)를 다이클로로메탄 (0.9 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.6 ml, 7.8 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.9 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.8 ml, 11.7 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 이 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 52 mg (64%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1,2,2-트라이메틸-프로필)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 46.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-아마이드

단계 1

(시스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터 및 (트랜스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

건조된 환저 플라스크 내에서, N-1-Boc-아미노-3-사이클로펜텐 (1.0 g, 5.46 mmol)을 THF (7 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, 보란 테트라하이드로퓨란 착체 (THF 중의 1.0M, 6.0 ml, 6.0 mmol)를 적가하였다. 이 반응물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 밤새도록 가온하였다. 이 혼합물을 0℃로 다시 냉각하고, 물 (2 ml)을 가했다. 이어서, 10% 수성 수산화 나트륨 (8 ml, 20.0 mmol)을 적가하고, 이어서 과산화수소 (물 중의 30% 용액, 5.0 ml, 49 mmol)를 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 60% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 330 mg (30%)의 (시스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 무색 오일로서 수득하였다.

또한, 99 mg (9%)의 (트랜스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 백색 고체로서 단리하였다.

단계 2

시스-3-아미노-사이클로펜탄올 트라이플루오로아세테이트

환저 플라스크 내에서, (시스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (320 mg, 1.59 mmol)를 다이클로로메탄 (10 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (3.6 ml, 46.7 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, 시스-3-아미노-사이클로펜탄올 트라이플루오로아세테이트를 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 시스-3-아미노-사이클로펜탄올 트라이플루오로아세테이트 (단계 2로부터의 조질)를 DMF (1.2 ml)에 용해시키고, N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.40 ml, 2.3 mmol)을 가했다. 이어서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (120 mg, 0.27 mmol) 및 HATU (114 mg, 0.30 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 4% MeOH)을 사용하여 크로마토그래피로 처리하여, 50 mg (35%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-아마이드 (49 mg, 0.093 mmol)를 다이클로로메탄 (0.5 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.3 ml, 3.8 mmol)을 가했다. 이 오렌지색 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.5 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.4 ml, 5.7 mmol)을 가했다. 이 연황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 침전물을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 29 mg (75%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 47.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (트랜스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-아마이드

실시예 46에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 (시스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 (트랜스-3-하이드록시-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터로 대체하여 제조하였다.

실시예 48.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

단계 1

2-메틸-프로판-2-설핀산 1-옥사졸-2-일-메트-(E)-일리덴아마이드

환저 플라스크 내에서, 옥사졸-2-카브알데하이드 (300 mg, 3.09 mmol)를 THF (7 ml)에 용해시키고, 2-메틸프로판-2-설핀아마이드 (450 mg, 3.71 mmol) 및 티타늄(IV) 에톡사이드 (1.3 ml, 6.18 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 염수 (2 ml)를 적가하여 천천히 켄칭하였으며, 이로써 두꺼운 황색 침전물이 형성되었다. 이 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 실온에서 10분 동안 격렬히 교반하였다. 이 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 30% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 419 mg (68%)의 2-메틸-프로판-2-설핀산 1-옥사졸-2-일-메트-(E)-일리덴아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-메틸-프로판-2-설핀산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-메틸-프로판-2-설핀산 1-옥사졸-2-일-메트-(E)-일리덴아마이드 (414 mg, 2.07 mmol)를 다이클로로메탄 (7 ml)에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 메틸마그네슘 브로마이드 (다이에틸 에터 중의 3.0 M, 0.76 ml, 2.28 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 453 mg (96%)의 2-메틸-프로판-2-설핀산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 황색 오일로서 수득하였다.

단계 3

1-옥사졸-2-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드

환저 플라스크 내에서, 2-메틸-프로판-2-설핀산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드 (449 mg, 1.97 mmol)를 메탄올 (3.5 ml)에 용해시키고, 염화수소 (1,4-다이옥산 중의 4.0 M, 1.0 ml, 4.0 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하고, 이어서 농축하여, 417 mg의 1-옥사졸-2-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드를 오렌지색 왁스형 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (100 mg, 0.22 mmol) 및 1-옥사졸-2-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드 (91 mg, 0.39 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (1 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.25 ml, 1.43 mmol) 및 HATU (92 mg, 0.24 mmol)를 가했다. 이 연황색 용액을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 물을 가하고, 생성 현탁액을 여과하였다. 이 고체를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 108 mg (90%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드 (106 mg, 0.192 mmol)를 다이클로로메탄 (0.9 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.6 ml, 7.7 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.9 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.8 ml, 11.7 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 66 mg (82%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 49.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (210 mg, 0.48 mmol) 및 1-옥사졸-2-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드 (198 mg, 0.86 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (2.2 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.55 ml, 3.15 mmol) 및 HATU (199 mg, 0.52 mmol)를 가했다. 이 연황색 용액을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 물을 가하고, 생성 현탁액을 여과하였다. 이 고체를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 248 mg (97%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드 (64 mg, 0.12 mmol)를 다이클로로메탄 (0.6 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.4 ml, 5.0 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.6 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.5 ml, 7.3 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 33 mg (65%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 50.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드 및 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드 (182 mg, 0.34 mmol)의 라세미 시료를 키랄 SFC 크로마토그래피로 처리하였다. 용리제로서 30% EtOH/CO₂를 사용하여 웰크(WHELK)-O1 R,R 칼럼으로 거울상이성질체들의 분리를 달성하였다. 76 mg (42%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하고, 72 mg (40%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드 (75 mg, 0.14 mmol)를 다이클로로메탄 (0.7 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.45 ml, 5.6 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.7 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.6 ml, 8.4 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 23 mg (39%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 51.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

실시예 50에 따라, 단계 2에서 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드로 대체하여 제조하였다.

실시예 52.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-4-일-에틸)-아마이드

단계 1

2-메틸-프로판-2-설핀산 1-옥사졸-4-일-메트-(E)-일리덴아마이드

환저 플라스크 내에서, 옥사졸-4-카브알데하이드 (300 mg, 3.09 mmol)를 THF (7 ml)에 용해시키고, 2-메틸프로판-2-설핀아마이드 (450 mg, 3.71 mmol) 및 티타늄(IV) 에톡사이드 (1.3 ml, 6.18 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 염수 (2 ml)를 적가하여 천천히 켄칭하였으며, 이로써 두꺼운 연황색 침전이 형성되었다. 이 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 실온에서 30분 동안 격렬히 교반하였다. 이 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 40% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 552 mg (89%)의 2-메틸-프로판-2-설핀산 1-옥사졸-4-일-메트-(E)-일리덴아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-메틸-프로판-2-설핀산 (1-옥사졸-4-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-메틸-프로판-2-설핀산 1-옥사졸-4-일-메트-(E)-일리덴아마이드 (548 mg, 2.74 mmol)를 다이클로로메탄 (9 ml)에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 메틸마그네슘 브로마이드 (다이에틸 에터 중의 3.0 M, 1.0 ml, 3.0 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 588 mg의 2-메틸-프로판-2-설핀산 (1-옥사졸-4-일-에틸)-아마이드를 연황색 오일로서 수득하였다.

단계 3

1-옥사졸-4-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드

환저 플라스크 내에서, 2-메틸-프로판-2-설핀산 (1-옥사졸-4-일-에틸)-아마이드 (585 mg, 2.57 mmol)를 메탄올 (4.5 ml)에 용해시키고, 염화수소 (1,4-다이옥산 중의 4.0 M, 1.3 ml, 5.2 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하고, 이어서 농축하여, 1-옥사졸-4-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드를 점성의 오렌지색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-4-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (100 mg, 0.23 mmol) 및 1-옥사졸-2-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드 (단계 3으로부터의 조질, 90 mg, 0.41 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (1.1 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.26 ml, 1.49 mmol) 및 HATU (95 mg, 0.25 mmol)를 가했다. 이 연황색 용액을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 물을 가하고, 생성 현탁액을 여과하였다. 이 고체를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 113 mg (93%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-4-일-에틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-4-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-4-일-에틸)-아마이드 (110 mg, 0.205 mmol)를 다이클로로메탄 (1 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.63 ml, 8.2 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.83 ml, 12.3 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 58 mg (70%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-4-일-에틸)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 53.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-아이속사졸-3-일-에틸)-아마이드

단계 1

2-메틸-프로판-2-설핀산 1-아이속사졸-3-일-메트-(E)-일리덴아마이드

환저 플라스크 내에서, 아이속사졸-3-카브알데하이드 (300 mg, 3.09 mmol)를 THF (7 ml)에 용해시키고, 2-메틸프로판-2-설핀아마이드 (450 mg, 3.71 mmol) 및 티타늄(IV) 에톡사이드 (1.3 ml, 6.18 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 염수 (2 ml)를 적가하여 천천히 켄칭하였으며, 이로써 두꺼운 황색 침전물이 형성되었다. 이 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 실온에서 10분 동안 격렬히 교반하고, 이 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 20% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 585 mg (95%)의 2-메틸-프로판-2-설핀산 1-아이속사졸-3-일-메트-(E)-일리덴아마이드를 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

2-메틸-프로판-2-설핀산 (1-아이속사졸-3-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-메틸-프로판-2-설핀산 1-아이속사졸-3-일-메트-(E)-일리덴아마이드 (584 mg, 2.92 mmol)를 다이클로로메탄 (10 ml)에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 메틸마그네슘 브로마이드 (다이에틸 에터 중의 3.0 M, 1.1 ml, 3.3 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 655 mg의 2-메틸-프로판-2-설핀산 (1-아이속사졸-3-일-에틸)-아마이드를 무색 오일로서 수득하였다.

단계 3

1-아이속사졸-3-일-에틸아민 하이드로클로라이드

환저 플라스크 내에서, 2-메틸-프로판-2-설핀산 (1-아이속사졸-3-일-에틸)-아마이드 (652 mg, 2.71 mmol)를 메탄올 (5 ml)에 용해시키고, 염화수소 (1,4-다이옥산 중의 4.0 M, 1.4 ml, 5.6 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하고, 이어서 농축하여, 1-아이속사졸-3-일-에틸아민 하이드로클로라이드를 회백색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-아이속사졸-3-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (100 mg, 0.23 mmol) 및 1-아이속사졸-3-일-에틸아민 하이드로클로라이드 (단계 3으로부터의 조질, 81 mg, 0.41 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (1.1 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.26 ml, 1.49 mmol) 및 HATU (95 mg, 0.25 mmol)를 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 여기에 물을 가하고, 생성 현탁액을 여과하였다. 고체를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 115 mg (95%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-아이속사졸-3-일-에틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-아이속사졸-3-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-아이속사졸-3-일-에틸)-아마이드 (113 mg, 0.211 mmol)를 다이클로로메탄 (1.1 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.65 ml, 8.4 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1.1 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.86 ml, 12.7 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 46 mg (54%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-아이속사졸-3-일-에틸)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 54.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(5-메틸-아이속사졸-3-일)-에틸]-아마이드

실시예 53에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 아이속사졸-3-카브알데하이드를 5-메틸-아이속사졸-3-카브알데하이드로 대체하여 제조하였다.

실시예 55.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-아이속사졸-5-일-에틸)-아마이드

단계 1

아이속사졸-5-일-메탄올

환저 플라스크 내에서, 아이속사졸-5-카복실산 (1.0 g, 8.84 mmol)을 THF (35 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, 트라이에틸아민 (1.4 ml, 10.0 mmol) 및 이어서 에틸 클로로포메이트 (0.94 ml, 9.8 mmol)를 가했다. 후자를 첨가시, 두꺼운 침전물이 형성되었다. 이 현탁액을 0℃에서 15분 동안 교반하고, 이어서 물 (14 ml) 중의 나트륨 보로하이드라이드 (1.00 g, 26.5 mmol)의 용액을 피펫을 통해 분획들로 나누어 가했다. 격렬한 기체 발생이 관찰되었다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물 및 포화된 수성 NH₄Cl으로 희석하고, 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 50% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 513 mg (59%)의 아이속사졸-5-일-메탄올을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

아이속사졸-5-카브알데하이드

환저 플라스크 내에서, 아이속사졸-5-일-메탄올 (511 mg, 5.16 mmol)을 다이클로로메탄 (30 ml)에 용해시켰다. 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난 (2.3 g, 5.41 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 10% 수성 Na₂S₂O₃ 및 포화된 수성 NaHCO₃의 1:1 용액 50 mL로 켄칭하고, 이어서 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 유기 층을 포화된 수성 NaHCO₃, 물 및 염수로 세척하였다. 수성 층을 다이클로로메탄으로 역추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 40% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 226 mg (45%)의 아이속사졸-5-카브알데하이드를 무색 오일로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-아이속사졸-5-일-에틸)-아마이드

실시예 53에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 아이속사졸-3-카브알데하이드를 아이속사졸-5-카브알데하이드로 대체하여 제조하였다.

실시예 56.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필)-아마이드

단계 1

[(R)-1-(메톡시-메틸-카바모일)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크에 Boc-D-알라닌 (1.0 g, 5.29 mmol) 및 N,O-다이메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드 (670 mg, 6.87 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (12 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (2.4 ml, 13.7 mmol) 및 HATU (2.21 g, 5.81 mmol)를 가했다. 이 황색 현탁액을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 석유 에터를 가했다. 생성 현탁액을 여과하고, 물 및 석유 에터로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 1.05 g (85%)의 [(R)-1-(메톡시-메틸-카바모일)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 백색 분말로서 수득하였다.

단계 2

((R)-1-메틸-2-옥소-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, [(R)-1-(메톡시-메틸-카바모일)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (3.00 g, 12.9 mmol)를 THF (100 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 -16℃로 냉각하고 (NaCl/빙욕), 메틸마그네슘 브로마이드 (다이에틸 에터 중의 3.0 M, 12.0 ml, 36.0 mmol)를 20분에 걸쳐 적가하였다. 첨가 후, 이 반응 혼합물을 실온으로 밤새도록 천천히 가온하였다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 포화된 수성 NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 20% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 2.21 g (91%)의 ((R)-1-메틸-2-옥소-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, ((R)-1-메틸-2-옥소-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (300 mg, 1.6 mmol)를 다이클로로메탄 (15 ml)에 용해시켰다. DAST (0.64 ml, 4.84 mmol)를 실온에서 적가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 환류 하에 7시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 15 mL의 포화된 수성 NaHCO₃으로 켄칭하고, 이어서 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 5% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 152 mg (45%)의 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

(R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필아민 트라이플루오로아세테이트

환저 플라스크 내에서, ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (148 mg, 0.71 mmol)를 다이클로로메탄 (3 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (1.6 ml, 20.8 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, (R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필아민 트라이플루오로아세테이트를 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, (R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필아민 트라이플루오로아세테이트 (단계 4로부터의 조질)를 DMF (1.2 ml)에 용해시키고, N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.5 ml, 2.86 mmol)을 가했다. 이어서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (110 mg, 0.25 mmol) 및 이어서 HATU (104 mg, 0.27 mmol)를 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 물을 가하고, 이 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 108 mg (81%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 6

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필)-아마이드 (105 mg, 197 mmol)를 다이클로로메탄 (1 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.6 ml, 7.9 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.8 ml, 11.8 mmol)을 가했다. 이 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 48 mg (61%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-프로필)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 57.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-시아노메틸-사이클로펜틸)-아마이드

단계 1

3-옥소-2-아자-바이사이클로[2.2.1]헵트5-엔-2-카복실산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, 2-아자바이사이클로[2.2.1]헵트5-엔-3-온 (1.0 g, 9.16 mmol)을 THF (10 ml)에 현탁시키고, 트라이에틸아민 (1.9 ml, 13.6 mmol) 다이-3급-부틸 다이카보네이트 (2.4 g, 11.0 mmol) 및 4-다이메틸아미노피리딘 (112 mg, 0.92 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 30% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 1.79g (93%)의 3-옥소-2-아자-바이사이클로[2.2.1]헵트5-엔-2-카복실산 3급-부틸 에스터를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

3-옥소-2-아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실산 3급-부틸 에스터

파 압력 병 내에서, 3-옥소-2-아자-바이사이클로[2.2.1]헵트5-엔-2-카복실산 3급-부틸 에스터 (1.77 g, 8.46 mmol)를 메탄올 (12 ml)에 용해시키고, 10% Pd/C (습윤, 170 mg, 0.16 mmol)을 조심스럽게 가했다. 이 병을 파 수소 발생기 상에 놓고, 40 psi의 수소 분위기 하에 2시간 동안 진탕하였다. 이 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 메탄올/에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 농축하여, 1.88 g의 3-옥소-2-아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실산 3급-부틸 에스터를 연회색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

(시스-3-하이드록시메틸-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, 3-옥소-2-아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실산 3급-부틸 에스터 (단계 2로부터의 조질, 1.87 g)를 THF (20 ml) 및 물 (2 ml)에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 나트륨 보로하이드라이드 (301 mg, 7.97 mmol)를 가했다. 이 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 나트륨 보로하이드라이드 (301 mg, 7.97 mmol)의 제 2 분획을 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 7.5시간 동안 교반하고, 이어서 나트륨 보로하이드라이드 (602 mg, 15.94 mmol)의 제 3 분획을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 나트륨 보로하이드라이드 (602 mg, 15.94 mmol)의 제 4 분획을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 0℃로 냉각하고, 1M HCl로 조심스럽게 켄칭하였다. 기체 발생이 멈췄을 때 (pH = 약 6), 이 혼합물을 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 60% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 1.73 g (95%, 2 단계)의 (시스-3-하이드록시메틸-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

메탄설폰산 (시스)-3-3급-부톡시카보닐아미노-사이클로펜틸메틸 에스터

환저 플라스크 내에서, (시스-3-하이드록시메틸-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (500 mg, 2.21 mmol)를 다이클로로메탄 (5 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, 트라이에틸아민 (0.40 ml, 2.87 mmol) 및 이어서 메탄설폰일 클로라이드 (0.20 ml, 2.57 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 45분 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 780 mg의 메탄설폰산 (시스)-3-3급-부톡시카보닐아미노-사이클로펜틸메틸 에스터를 연한 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 5

(시스-3-시아노메틸-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, 메탄설폰산 (시스)-3-3급-부톡시카보닐아미노-사이클로펜틸메틸 에스터 (단계 4로부터의 조질, 779 mg)를 DMF (5 ml)에 용해시켰다. 칼륨 시아나이드 (277 mg, 4.25 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 80℃에서 밤새도록 교반하였다. 나트륨 시아나이드 (104 mg, 2.12 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 80℃에서 48시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 30% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 190 mg (38%, 2 단계)의 (시스-3-시아노메틸-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 연황색 오일로서 수득하였다.

단계 6

(시스-3-아미노-사이클로펜틸)-아세토나이트릴 트라이플루오로아세테이트

환저 플라스크 내에서, (시스-3-시아노메틸-사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (188 mg, 0.84 mmol)를 다이클로로메탄 (5 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (2.0 ml, 26.0 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, (시스-3-아미노-사이클로펜틸)-아세토나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 7

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-시아노메틸-사이클로펜틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, (시스-3-아미노-사이클로펜틸)-아세토나이트릴 트라이플루오로아세테이트 (단계 6으로부터의 조질)를 DMF (1.3 ml)에 용해시키고, N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.65 ml, 3.72 mmol)을 가했다. 이어서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (110 mg, 0.25 mmol) 및 HATU (104 mg, 0.27 mmol)를 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 여기에 물 및 석유 에터를 가하고, 생성 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 128 mg (94%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-시아노메틸-사이클로펜틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 8

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-시아노메틸-사이클로펜틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-시아노메틸-사이클로펜틸)-아마이드 (126 mg, 0.23 mmol)를 다이클로로메탄 (1.2 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.7 ml, 9.2 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1.2 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.93 ml, 13.8 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1.25시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 75 mg (74%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-시아노메틸-사이클로펜틸)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 58.

2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

단계 1

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크에 2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (300 mg, 0.81 mmol) 및 1-옥사졸-2-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드 (244 mg, 1.0 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (4 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.9 ml, 5.15 mmol) 및 HATU (337 mg, 0.89 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 석유 에터로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 268 mg (71%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드 (268 mg)의 라세미 시료를 SFC 크로마토그래피로 처리하였다. 용리제로서 20% MeOH/CO₂를 사용하여 다이셀(DAICEL) OD 3x25 칼럼으로 거울상이성질체의 분리를 달성하였다. 152 mg (57%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하고, 85 mg (32%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((S)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드 (148 mg, 0.32 mmol) 및 6-플루오로-1-트라이부틸스탄일-이미다조[1,5-a]피리딘 (380 mg, 0.45 mmol)을 DMF (3 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐 (0) (19 mg, 0.016 mmol) 및 구리 (I) 요오다이드 (13 mg, 0.068 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 80℃로 밤새도록 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 2% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 109 mg (66%)의 2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드 (107 mg, 0.205 mmol)를 다이클로로메탄 (1.1 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.64 ml, 8.3 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1.1 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.84 ml, 12.4 mmol)을 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 76 mg (90%)의 2-(6-플루오로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-옥사졸-2-일-에틸)-아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

실시예 59.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-부틸]-아마이드

단계 1

[(R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-부틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크에 Boc-D-노르발린 (300 mg, 1.38 mmol) 및 3-플루오로아제티딘 하이드로클로라이드 (216 mg, 1.93 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (6 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.65 ml, 3.72 mmol) 및 HATU (578 mg, 1.52 mmol)를 넣었다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 417 mg의 [(R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-부틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

(R)-2-아미노-1-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-펜탄-1-온 트라이플루오로아세테이트

환저 플라스크 내에서, [(R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-부틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (200 mg, 0.66 mmol)를 다이클로로메탄 (4 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (1.6 ml, 20.8 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, (R)-2-아미노-1-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-펜탄-1-온 트라이플루오로아세테이트를 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-부틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, (R)-2-아미노-1-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-펜탄-1-온 트라이플루오로아세테이트 (단계 2로부터의 조질)를 DMF (1.5 ml)에 용해시키고, N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.60 ml, 3.44 mmol)을 가했다. 이어서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (110 mg, 0.25 mmol) 및 HATU (104 mg, 0.27 mmol)를 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 석유 에터로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 128 mg (86%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-부틸]-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-부틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-부틸]-아마이드 (126 mg, 0.21 mmol)를 다이클로로메탄 (1.1 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.65 ml, 8.4 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1.1 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.85 ml, 12.7 mmol)을 가했다. 이 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 49 mg (50%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-부틸]-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 60.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4,5-다이하이드로-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드

단계 1

[(R)-1-(2-하이드록시-에틸카바모일)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, Boc-D-알라닌 (1.0 g, 5.29 mmol)을 THF (40 ml)에 용해시키고, 1,1'-카보닐다이이미다졸(1.03 g, 6.34 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 60℃에서 45분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 에탄올아민 (3.2 ml, 52.9 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 1 M 수성 HCl (15 ml)으로 켄칭하고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 1 M 수성 HCl, 물 및 염수로 세척하였다. 수성 층을 다이클로로메탄 (2x)으로 역추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 1.11 g (90%)의 [(R)-1-(2-하이드록시-에틸카바모일)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

(R)-2-아미노-N-(2-하이드록시-에틸)-프로피온아마이드 트라이플루오로아세테이트

환저 플라스크 내에서, [(R)-1-(2-하이드록시-에틸카바모일)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (180 mg, 0.78 mmol)를 다이클로로메탄 (5 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (1.8 ml, 23.4 mmol)을 천천히 가했다. 이 연황색 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, (R)-2-아미노-N-(2-하이드록시-에틸)-프로피온아마이드 트라이플루오로아세테이트를 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2-하이드록시-에틸카바모일)-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, (R)-2-아미노-N-(2-하이드록시-에틸)-프로피온아마이드 트라이플루오로아세테이트 (단계 2로부터의 조질)를 DMF (2 ml)에 용해시키고, N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.70 ml, 4.0 mmol)을 가했다. 이어서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (170 mg, 0.39 mmol) 및 이어서 HATU (161 mg, 0.42 mmol)를 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 석유 에터로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 100% EtOAc) 및 MeOH/EtOAc (구배 0 내지 10% MeOH)를 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 127 mg (59%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2-하이드록시-에틸카바모일)-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4,5-다이하이드로-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2-하이드록시-에틸카바모일)-에틸]-아마이드 (126 mg, 0.23 mmol)를 다이클로로메탄 (2.2 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 -76℃로 냉각하고, DAST (45 μl, 0.34 mmol)를 가했다. 이 연황색 반응 혼합물을 -76℃에서 6시간 동안 교반하고, 이어서 무수 탄산 칼륨 (64 mg, 0.46 mmol)를 한번에 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 포화된 수성 NaHCO₃으로 켄칭하고, 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 90% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 86 mg (71%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4,5-다이하이드로-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4,5-다이하이드로-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드

소형 바이알 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4,5-다이하이드로-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드 (85 mg, 0.16 mmol)를 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (THF 중의 1.0 M, 1.6 ml, 1.6 mmol)에 용해시켰다. 이 황색 반응 혼합물을 60℃에서 밤새도록 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 5% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 27 mg (40%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4,5-다이하이드로-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 61.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필)-아마이드

단계 1

((R)-1-메틸-2-옥소-3-페닐-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, [(R)-1-(메톡시-메틸-카바모일)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (300 mg, 1.29 mmol)를 THF (8 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 -16℃로 냉각하고 (NaCl/빙욕), 벤질마그네슘 클로라이드 (다이에틸 에터 중의 1.0 M, 3.8 ml, 3.8 mmol)를 적가하였다. 첨가 후, 이 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고, 5.5시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 20% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 353 mg (99%)의 ((R)-1-메틸-2-옥소-3-페닐-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

건조된 환저 플라스크 내에서, ((R)-1-메틸-2-옥소-3-페닐-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (171 mg, 0.65 mmol)를 다이클로로메탄 (0.3 ml)에 용해시켰다. DAST (0.26 ml, 1.97 mmol)를 실온에서 적가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 이 반응 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고, 5 mL의 포화된 수성 NaHCO₃으로 천천히 켄칭하였다. 수성 층을 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 5% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 95 mg (51%)의 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

(R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필아민 트라이플루오로아세테이트

환저 플라스크 내에서, ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터 (92 mg, 0.32 mmol)를 다이클로로메탄 (2 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.75 ml, 9.73 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, (R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필아민 트라이플루오로아세테이트를 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, (R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필아민 트라이플루오로아세테이트 (단계 3으로부터의 조질)를 DMF (1.1 ml)에 용해시키고, N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.25 ml, 1.43 mmol)을 가했다. 이어서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (100 mg, 23 mmol) 및 이어서 HATU (95 mg, 0.25 mmol)를 가했다. 이 황색 반응물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 석유 에터로 마쇄하여, 136 mg (94%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필)-아마이드 (133 mg, 0.21 mmol)를 다이클로로메탄 (1.1 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.64 ml, 8.3 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1.1 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.84 ml, 12.4 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 5% EtOAc/다이에틸 에터로 마쇄하여, 73 mg (70%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-2,2-다이플루오로-1-메틸-3-페닐-프로필)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 62.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드

단계 1

2-((R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-프로피온일아미노)-3-하이드록시-프로피온산 메틸 에스터

환저 플라스크에 Boc-D-알라닌 (600 mg, 3.17 mmol) 및 DL-세린 메틸 에스터 하이드로클로라이드 (691 mg, 4.44 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (12 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (1.5 ml, 8.6 mmol) 및 HATU (1.33 g, 3.49 mmol)를 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 422 mg (41%)의 2-((R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-프로피온일아미노)-3-하이드록시-프로피온산 메틸 에스터를 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

2-((R)-1-3급-부톡시카보닐아미노-에틸)-4,5-다이하이드로-옥사졸-4-카복실산 메틸 에스터

환저 플라스크 내에서, 2-((R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-프로피온일아미노)-3-하이드록시-프로피온산 메틸 에스터 (419 mg, 1.3 mmol)를 다이클로로메탄 (1.1 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 -76℃로 냉각하고, DAST (0.20 ml, 1.51 mmol)를 적가하였다. 이 연황색 용액을 -76℃에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 무수 탄산 칼륨 (269 mg, 1.95 mmol)을 한꺼번에 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 포화된 수성 NaHCO₃으로 켄칭하고, 다이클로로메탄 (3x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 339 mg (91%)의 2-((R)-1-3급-부톡시카보닐아미노-에틸)-4,5-다이하이드로-옥사졸-4-카복실산 메틸 에스터를 갈색 오일로서 수득하였다.

단계 3

2-((R)-1-3급-부톡시카보닐아미노-에틸)-옥사졸-4-카복실산 메틸 에스터

환저 플라스크 내에서, 2-((R)-1-3급-부톡시카보닐아미노-에틸)-4,5-다이하이드로-옥사졸-4-카복실산 메틸 에스터 (337 mg, 1.18 mmol)를 다이클로로메탄 (1.1 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 -16℃로 냉각하고 (NaCl/빙욕), DBU (0.35 ml, 2.32 mmol)를 가했다. 5분 후, 브로모트라이클로로메탄 (0.13 ml, 1.33 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 천천히 실온으로 가온하고, 4일 동안 교반하였다. 이 반응물을 0.1 M 수성 HCl으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 30% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 152 mg (48%)의 2-((R)-1-3급-부톡시카보닐아미노-에틸)-옥사졸-4-카복실산 메틸 에스터를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

[(R)-1-(4-하이드록시메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, 2-((R)-1-3급-부톡시카보닐아미노-에틸)-옥사졸-4-카복실산 메틸 에스터 (151 mg, 0.56 mmol)를 THF (4 ml)에 용해시켰다. 이 연황색 용액을 0℃로 냉각하고, 리튬 알루미늄 하이드라이드 (THF 중의 1.0 M, 0.60 ml, 0.60 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 나트륨 설페이트 십수화물을 조심스럽게 가했다. 기체 발생이 멈췄을 때, 빙욕을 제거하고, 나트륨 설페이트를 가하고, 이 혼합물을 실온에서 30분 동안 격렬히 교반하였다. 이 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고, 에틸 아세테이트/메탄올로 세척하였다. 여액을 농축하여, 140 mg (93%)의 [(R)-1-(4-하이드록시메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 5

[2-((R)-1-아미노-에틸)-옥사졸-4-일]-메탄올 트라이플루오로아세테이트

환저 플라스크 내에서, [(R)-1-(4-하이드록시메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터 (137 mg, 0.51 mmol)를 다이클로로메탄 (3 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (1.2 ml, 15.6 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하여, [2-((R)-1-아미노-에틸)-옥사졸-4-일]-메탄올 트라이플루오로아세테이트를 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 6

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-하이드록시메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, [2-((R)-1-아미노-에틸)-옥사졸-4-일]-메탄올 트라이플루오로아세테이트 (단계 5로부터의 조질)를 DMF (1.5 ml)에 용해시키고, N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.70 ml, 4.0 mmol)을 가했다. 이어서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (140 mg, 0.32 mmol) 및 이어서 HATU (133 mg, 0.35 mmol)를 가했다. 이 반응물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 100% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 118 mg (66%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-하이드록시메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드를 연갈색 거품으로서 수득하였다.

단계 7

메탄설폰산 2-((R)-1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-옥사졸-4-일메틸 에스터

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-하이드록시메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드 (115 mg, 0.20 mmol)를 다이클로로메탄 (1 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, 트라이에틸아민 (0.04 ml, 0.29 mmol) 및 메탄설폰일 클로라이드 (19 μl, 0.24 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 147 mg의 메탄설폰산 2-((R)-1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-옥사졸-4-일메틸 에스터를 황색 거품으로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 8

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 메탄설폰산 2-((R)-1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-옥사졸-4-일메틸 에스터 (146 mg, 0.18 mmol)를 DMF (0.5 ml)에 용해시켰다. 나트륨 시아나이드 (27 mg, 0.55 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 80℃에서 밤새도록 교반하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 60% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 37 mg (36%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드를 황색 고체로서 단리하였다.

단계 9

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드 (36 mg, 0.063 mmol)를 다이클로로메탄 (0.4 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.20 ml, 2.6 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.4 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.26 ml, 3.8 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 18 mg (65%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노메틸-옥사졸-2-일)-에틸]-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 63.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(S)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드

단계 1

(S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-퓨란-2-일-메트-(E)-일리덴아마이드

환저 플라스크 내에서, 퓨란-2-카브알데하이드 (800 mg, 8.33 mmol)를 THF (20 ml)에 용해시키고, (S)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드 (1.21 g, 10.0 mmol) 및 티타늄(IV) 에톡사이드 (3.5 ml, 16.7 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하고, 이어서 염수 (5 ml)를 적가하여 천천히 켄칭하였으며, 이로써 두꺼운 침전물이 형성되었다. 이 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 실온에서 15분 동안 격렬히 교반하였다. 이 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 25% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 1.48 g (89%)의 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-퓨란-2-일-메트-(E)-일리덴아마이드를 연황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

(S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 ((R)-1-퓨란-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-퓨란-2-일-메트-(E)-일리덴아마이드 (500 mg, 2.51 mmol)를 다이클로로메탄 (10 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 -76℃로 냉각하고, 메틸마그네슘 브로마이드 (다이에틸 에터 중의 3.0 M, 1.0 ml, 3.00 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 -76℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 1.5시간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 이 반응 혼합물을 -76℃로 다시 냉각하고, 메틸마그네슘 브로마이드 의 제2 분획(다이에틸 에터 중의 3.0 M, 1.0 ml, 3.00 mmol)을 적가하였다. 이 반응 혼합물을 -76℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 3시간에 걸쳐 가온하였다. 이 반응 혼합물을 -76℃로 다시 냉각하고, 메틸마그네슘 브로마이드 의 제3 분획(다이에틸 에터 중의 3.0 M, 0.5 ml, 1.5 mmol)을 적가하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 밤새도록 천천히 가온하고, 이어서 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 515 mg (91%)의 황색 고체를 수득하였다. NMR 분석은, 부분입체이성질체와 주요 부분입체이성질체(문헌 상관관계에 기초하여 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 ((R)-1-퓨란-2-일-에틸)-아마이드로 지정됨)의 9:1 혼합물(80% de)을 나타냈다.

단계 3

(R)-1-퓨란-2-일-에틸아민 하이드로클로라이드

환저 플라스크 내에서, (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 ((R)-1-퓨란-2-일-에틸)-아마이드 (514 mg, 2.27 mmol)를 메탄올 (4 ml)에 용해시키고, 염화수소 (1,4-다이옥산 중의 4.0 M, 1.2 ml, 4.8 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하고, 이어서 농축하여, 416 mg의 (R)-1-퓨란-2-일-에틸아민 하이드로클로라이드를 진갈색 왁스형 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-퓨란-2-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (300 mg, 0.68 mmol) 및 (R)-1-퓨란-2-일-에틸아민 하이드로클로라이드 (416 mg, 1.55 mmol)를 넣었다. 여기에 DMF (3.5 ml) 및 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (0.85 ml, 4.87 mmol) 및 HATU (284 mg, 0.75 mmol)를 가했다. 이 반응물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물 및 석유 에터를 가했다. 생성 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 338 mg (88%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-퓨란-2-일-에틸)-아마이드를 연갈색 분말로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 ((R)-1-퓨란-2-일-에틸)-아마이드 (370 mg, 0.66 mmol)를 메탄올 (6 ml) 및 에틸 아세테이트 (2 ml)에 용해시켰다.

이 플라스크를 아르곤으로 플러쉬시키고, 이어서 20% Pd(OH)₂/C (50% 물, 100 mg, 0.71 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 수소 분위기 하에 (풍선), 실온에서 48시간 동안 교반하고, 이어서 셀라이트 상에서 여과하고, 다이클로로메탄/에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH (구배 0 내지 2.5% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 300 mg (86%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 6

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(S)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드 및 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(R)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드 (300 mg, 0.56 mmol)의 시료를 키랄 SFC 크로마토그래피로 처리하였다. 용리액으로서 45% MeOH/CO₂ (0.2% 트라이에틸아민 첨가)을 사용하여 웰크(WHELK)-O1 R,R 3x25 칼럼으로 부분입체이성질체의 분리를 달성하였다. 163 mg (54%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(S)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하고, 38 mg (13%) 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(R)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 7

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(S)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(S)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드 (152 mg, 0.28 mmol)를 다이클로로메탄 (1.4 ml)에 용해키시고, 트라이플루오로아세트산 (0.87 ml, 11.3 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (1.4 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (1.2 ml, 17.8 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 고진공 하에 건조하여, 46 mg (40%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(S)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 64.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(R)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드

실시예 63의 단계 7에 따라, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(S)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드를 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-(R)-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드로 대체하여 제조하였다.

실시예 65.

2-(5-하이드록시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

단계 1

5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 5-하이드록시-1H-인다졸 (700 mg, 5.22 mmol)을 DMF (15 ml)에 용해시키고, TBDMS-Cl (865 mg, 5.74 mmol) 및 이미다졸(426 mg, 6.26 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 30% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 1.21 g (93%)의 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1H-인다졸을 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-3-요오도-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1H-인다졸 (1.20 g, 4.83 mmol)을 DMF (12 ml)에 용해시켰다. 여기에 요오드 (2.45 g, 9.66 mmol) 및 이어서 탄산 칼륨 (2.58 g, 18.7 mmol)을 가했다. 이 어두운색 현탁액을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 10% 수성 NaHSO₃으로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 10% 수성 NaHSO₃으로 1회, 물로 3회, 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 1.65 g (91%)의 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-3-요오도-1H-인다졸을 진갈색 거품으로서 수득하였다.

단계 3

5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-3-요오도-1H-인다졸 (1.65 g, 4.41 mmol)을 THF (16 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각하고, 칼륨 3급-부톡사이드 (697 mg, 6.22 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 메틸 요오다이드 (0.38 ml, 6.08 mmol)를 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 4.5시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 10% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 770 mg (45%)의 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸 (140 mg, 0.36 mmol)을 THF (2 ml)에 용해시켰다. 이 용액을 -16℃로 냉각하고 (NaCl/빙욕), 아이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF 중의 2.0 M, 0.22 ml, 0.44 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탠난 (0.11 ml, 0.41 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 1.5시간에 걸쳐 가온하고, 이어서 포화된 수성 NH₄Cl으로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸을 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 5

2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 (100 mg, 0.24 mmol) 및 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸 (단계 4로부터의 조질)을 DMF (2 ml)에 용해시켰다. 이 플라스크를 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐 (0) (14 mg, 0.012 mmol) 및 구리 (I) 요오다이드 (10 mg, 0.053 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 30% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 처리하여, 104 mg (72%)의 2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 6

2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 (100 mg, 0.168 mmol)를 다이클로로메탄 (0.8 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.52 ml, 6.75 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.8 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.68 ml, 10.1 mmol)을 가했다. 이 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트로 마쇄하여, 55 mg (70%)의 2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

단계 7

2-(5-하이드록시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 (50 mg, 0.108 mmol)를 THF (1.2 ml)에 현탁시키고, 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (THF 중의 1.0 M, 0.11 ml, 110 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 이 고체를 뜨거운 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 이어서 고진공 하에 건조하여, 33 mg (83%)의 2-(5-하이드록시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

실시예 66.

2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

5 ml 초음파 바이알에 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드 (252 mg, 0.45 mmol), 나트륨 요오다이드 (112 mg, 0.75 mmol) 및 구리(I) 요오다이드 (8 mg, 0.04 mmol)를 넣었다. 이 바이알을 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 이어서 톨루엔 (0.4 ml) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민 (0.015 ml, 0.095 mmol)을 시린지를 통해 가했다. 이 바이알을 밀봉하고, 이 반응 혼합물을 오일 욕 중에서 110℃로 22시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 5-클로로-1H-인다졸 (57 mg, 0.37 mmol) 및 제3 인산 칼륨 (167 mg, 0.79 mmol)을 가했다. 이 바이알을 다시 배기하고, 아르곤을 재충전하고, 밀봉하고, 오일 욕 중에서 110℃로 19시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂ (0.5% NH₄OH) (구배 0 내지 2.5% MeOH)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 53 mg (22%)의 2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 오일로서 수득하고, 76 mg (33%)의 2-요오도-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드 (51 mg, 0.08 mmol)를 다이클로로메탄 (0.5 ml)에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산 (0.25 ml, 3.24 mmol)을 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄 (0.5 ml)에 용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.33 ml, 4.89 mmol)을 가했다. 이 반응물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc (2 x 30 ml)로 추출하였다. 합친 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산 (구배 0 내지 100% EtOAc)을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하고, 이어서 EtOAc/헥산 (1:1)으로 마쇄하여, 22 mg (52%)의 2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 67.

2-(5,6-다이클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

4,5-다이클로로-2-메틸아닐린

MeOH (25 ml), 물 (25 ml) 및 THF (10 ml) 중의 1,2-다이클로로-4-메틸-5-나이트로벤젠 (2.0 g, 9.71 mmol)의 부분 현탁액에, NH₄Cl (5.19 g, 97.1 mmol) 및 이어서 철 분말 (2.71 g, 48.5 mmol)을 가했다. 이 비균질 반응 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 부흐너(Buchner) 깔때기 상에서 여과하고, MeOH로 세척하였다. 여액을 물 및 포화된 수성 NaHCO₃로 희석하고, 이어서 CH₂Cl₂ (3x)으로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 1.69 g (99%)의 4,5-다이클로로-2-메틸아닐린을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

5,6-다이클로로-1H-인다졸

0℃에서, CHCl₃ (25 ml) 중의 4,5-다이클로로-2-메틸아닐린 (1.69 g, 9.6 mmol)의 용액에 아세트산 무수물 (2.09 ml, 22.1 mmol)을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 두꺼운 백색 침전물이 점차 형성되었다. 칼륨 아세테이트 (283 mg, 2.88 mmol)를 가하고, 이어서 아이소아밀 나이트라이트 (2.78 ml, 20.6 mmol)를 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 밤새도록 가열 환류시켰다. 이 비균질 진오렌지색 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 농축하였다. 물 (10 mL)을 가하고, 이 혼합물을 재농축하여, 오렌지색 고체를 수득하였다. 이 고체를 진한 HCl (15 mL)에 현탁시키고, 60℃에서 2시간 동안 가열하고, 이어서 0℃로 냉각하고, 50% NaOH로 중화시켰다. EtOAc로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 오렌지색 고체를 수득하였다. 이 고체를 THF/MeOH (1:1, 25 mL)에 용해시키고, 10% NaOH (3 mL)을 가했다. 이 진고동색 반응 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반하고, 이어서 1.0 M HCl으로 중화시키고, 물로 희석하였다. 이 혼합물을 EtOAc (2 x)로 추출하고, 이어서 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, 30% 내지 50% EtOAc/헥산을 사용하여 크로마토그래피로 정제하여, 1.50 g (84%)의 5,6-다이클로로-1H-인다졸을 연오렌지색 고체로서 수득하였다.

단계 3

5,6-다이클로로-3-요오도-1H-인다졸

실온에서, DMF (8 ml) 중의 5,6-다이클로로-1H-인다졸 (0.50 g, 2.67 mmol)의 용액에 수산화 칼륨 (450 mg, 8.02 mmol) 및 요오드 (1.02 g, 4.01 mmol)를 가했다. 이 고동색 반응 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하고, 이어서 10% 수성 Na₂S₂O₃으로 켄칭하고, 물로 희석하였다. 이 혼합물을 EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물 (3x)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 827 mg (99%)의 5,6-다이클로로-3-요오도-1H-인다졸을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

5,6-다이클로로-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸

0℃에서, THF (8 ml) 중의 5,6-다이클로로-3-요오도-1H-인다졸 (820 mg, 2.62 mmol)의 용액에 KOt-Bu (412 mg, 3.67 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 요오도메탄 (0.23 ml, 3.67 mmol)을 가했다. 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온하고, 1.5시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 조질 잔사를 실리카 겔 상에 흡수시키고, 20% 내지 30% EtOAc/헥산을 사용하여 크로마토그래피로 정제하여, 585 mg (68%)의 5,6-다이클로로-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸을 연황색 고체로서 수득하였다.

소량의 5,6-다이클로로-3-요오도-2-메틸-1H-인다졸 위치 이성질체도 관찰되었으나, 단리하지 않았다.

단계 5

5,6-다이클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸

-10℃ (얼음/아세톤)에서, THF (3 mL) 중의 5,6-다이클로로-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸 (150 mg, 0.44 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF 중의 2.0 M, 0.26 mL, 0.52 mmol)를 천천히 가했다. 이 연황색 비균질 반응 혼합물을 -10℃에서 15분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탠난 (0.14 mL, 0.52 mmol)을 적가하였다. -10℃에서 30분 동안 및 이어서 실온에서 1시간 동안 계속 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 5,6-다이클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탠난일-1H-인다졸을 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.

단계 6

2-(5,6-다이클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

DMF (2 mL) 중의 5,6-다이클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탄일-1H-인다졸 (단계 5로부터의 조질, 218 mg, 0.44 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드 (125 mg, 0.22 mmol)의 용액에 Pd(PPh₃)₄ (12.9 mg, 0.011 mmol) 및 구리(I) 요오다이드 (8 mg, 0.044 mmol)를 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 90℃에서 1.5시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물 (3x) 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 조질 잔사를 50% 내지 100% EtOAc/헥산을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 130 mg (86%)의 2-(5,6-다이클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 거품형 고체로서 단리하였다.

단계 7

2-(5,6-다이클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂ (4 mL) 중의 2-(5,6-다이클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드 (130 mg, 0.19 mmol)의 용액에 TFA (2.0 mL, 26.0 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 CH₂Cl₂ (4 mL)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.4 mL, 5.92 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, CH₂Cl₂ (3x)으로 추출하였다. 합친 유기물을 농축하였다. 잔사를 0% 내지 4% MeOH/CH₂Cl₂ (0.5% NH₄OH)을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하고, 이어서 Et₂O로 마쇄하여, 백색 고체를 수득하였다. 이 고체를 MeOH/EtOAc로부터 재결정화함으로써 추가로 정제하여, 22 mg의 2-(5,6-다이클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 68.

2-(5,6-다이클로로인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-요오도-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

5 mL 초음파 바이알에 구리(I) 요오다이드 (5 mg, 0.027 mmol), 나트륨 요오다이드 (120 mg, 0.80 mmol), 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드 (150 mg, 0.27 mmol), 1,4-다이옥산 (1 mL) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민 (8 mg, 0.054 mmol)을 넣었다. 이 바이알을 질소의 스트림으로 퍼지하고, 이어서 밀봉하고, 오일 욕 중에서 110℃로 20시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 포화된 수성 NH₄OH (3 mL)으로 켄칭하고, 이어서 물로 희석하고, CH₂Cl₂으로 추출하였다. 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 50% 내지 80% EtOAc/헥산을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 130 mg (80%)의 2-요오도-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 오렌지색 거품형 고체로서 단리하였다.

단계 2

2-(5,6-다이클로로-인다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

5 mL 초음파 바이알에 구리(I) 요오다이드 (6 mg, 0.033 mmol), K₃PO₄ (146 mg, 0.69 mmol), 5,6-다이클로로-1H-인다졸 (74 mg, 0.39 mmol), 2-요오도-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드 (200 mg, 0.33 mmol), 톨루엔 (1.2 mL), 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민 (9 mg, 0.066 mmol)을 넣었다. 이 바이알을 질소의 스트림으로 퍼지하고, 이어서 밀봉하고, 오일 욕 중에서 110℃로 48시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, EtOAc로 희석하고, 이어서 부흐너 깔때기 상에서 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축하고, 생성 잔사를 0% 내지 2% MeOH/CH₂Cl₂ (0.5% NH₄OH)을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 215 mg (98%)의 2-(5,6-다이클로로-인다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 거품으로서 수득하였다.

단계 3

2-(5,6-다이클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂ (4 mL) 중의 2-(5,6-다이클로로-인다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드 (220 mg, 0.33 mmol)의 용액에 TFA (2.0 mL, 26.0 mmol)를 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 CH₂Cl₂ (4 mL)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.4 mL, 5.92 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, CH₂Cl₂(3x)으로 추출하였다. 합친 유기물을 농축하고, 잔사를 0% 내지 5% MeOH/CH₂Cl₂ (0.5% NH₄OH)을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하고, 이어서 Et₂O으로 마쇄하여, 95 mg (54%)의 2-(5,6-다이클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(4-시아노-피페리딘-1-일)-1-사이클로프로필-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 69.

2-(5-클로로인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-요오도-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

5 mL 초음파 바이알에 구리(I) 요오다이드 (6 mg, 0.03 mmol), 나트륨 요오다이드 (133 mg, 0.89 mmol), 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (150 mg, 0.30 mmol), 1,4-다이옥산 (1 mL) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민 (9 mg, 0.06 mmol)을 넣었다. 이 바이알을 질소의 스트림으로 퍼지하고, 이어서 밀봉하고, 오일 욕 중에서 110℃로 48시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 포화된 수성 NH₄OH (3 mL)으로 켄칭하고, 이어서 물로 희석하고, CH₂Cl₂으로 추출하였다. 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 2-요오도-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 고동색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

5 mL 초음파 바이알에 구리(I) 요오다이드 (6 mg, 0.033 mmol), K₃PO₄ (132 mg, 0.62 mmol), 5-클로로-1H-인다졸 (54 mg, 0.36 mmol), 2-요오도-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (164 mg, 0.30 mmol), 톨루엔 (1.2 mL), 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민 (9 mg, 0.066 mmol)을 넣었다. 이 바이알을 질소의 스트림으로 퍼지하고, 이어서 밀봉하고, 오일 욕 중에서 110℃로 24시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, EtOAc로 희석하고, 이어서 부흐너 깔때기 상에서 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축하고, 생성 잔사를 50% 내지 80% EtOAc/헥산을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 100 mg (58%)의 2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 거품으로서 수득하였다.

단계 3

2-(5-클로로인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂ (4 mL) 중의 2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (100 mg, 0.17 mmol)의 용액에 TFA (2.0 mL, 26.0 mmol)를 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 CH₂Cl₂ (4 mL)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.4 mL, 5.92 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, CH₂Cl₂ (3x)으로 추출하였다. 합친 유기물을 농축하고, 잔사를 EtOAc로 마쇄하여, 45 mg (58%)의 2-(5-클로로인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 70.

2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-[1-하이드록시-메트-(Z)-일리덴]-5,5-다이메틸-사이클로헥산온

0℃에서, 다이에틸 에터 (25 mL) 중의 나트륨 하이드라이드 (미네랄 오일 중의 60% 분산액, 475 mg, 11.9 mmol)의 현탁액에 에탄올 (0.06 ml, 1.03 mmol)을 적가하였다. 이 회색 현탁액을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. 다이에틸 에터 (3 mL) 중의 3,3-다이메틸사이클로헥산온 (1.50 g, 11.9 mmol) 및 에틸 포메이트 (1.45 ml, 17.8 mmol)의 용액을 10분에 걸쳐 적가하였다. 이 황색 비균질 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 여기에 에탄올 (1 mL)을 가하고, 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물 (25 mL)로 켄칭하였다. 층들을 분리하고, 수성 상을 다이에틸 에터로 세척하였다. pH 2가 될 때까지 수성 층을 1M HCl으로 산성화하고, 이어서 다이에틸 에터 (2x)로 추출하였다. 합친 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 1.64 g (90%)의 2-[1-하이드록시-메트-(Z)-일리덴]-5,5-다이메틸-사이클로헥산온을 연황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

6,6-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

MeOH (10 mL) 중의 2-[1-하이드록시-메트-(Z)-일리덴]-5,5-다이메틸-사이클로헥산온 (1.64 g, 10.6 mmol)의 용액에 하이드라진 (0.33 mL, 10.6 mmol)을 적가하였다. 이 발열성 반응을 간헐적인 빙욕의 사용으로 제어하였다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 CH₂Cl₂에 용해시키고, 물로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 1.53 g (96%)의 6,6-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

3-요오도-6,6-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

실온에서, DMF (8 mL) 중의 6,6-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 (0.50 g, 3.33 mmol)의 용액에, 분말화된 수산화 칼륨 (560 mg, 10.0 mmol) 및 요오드 (1.69 g, 6.66 mmol)를 가했다. 이 고동색 반응 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하고, 이어서 10% 수성 Na₂S₂O₃으로 켄칭하고, 물로 희석하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물 (3x)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하여, 920 mg (99%)의 3-요오도-6,6-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸을 연황색 왁스형 고체로서 수득하였다.

단계 4

3-요오도-1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 및 3-요오도-2,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-인다졸

0℃에서, THF (8 mL) 중의 3-요오도-6,6-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 (919 mg, 3.33 mmol)의 용액에 KOt-Bu (523 mg, 4.66 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 요오도메탄 (0.29 mL, 4.66 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온하고, 1.5시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 SiO₂ 상에 흡수시키고, 10% 내지 20% EtOAc/헥산을 사용하여 크로마토그래피로 정제하여, 523 mg (54%)의 3-요오도-1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸을 무색 오일로서 수득하였다.

또한, 160 mg (17%)의 3-요오도-2,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-인다졸을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 5

1,6,6-트라이메틸-3-트라이부틸스탠난일-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

0℃에서, THF (3 mL) 중의 3-요오도-1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 (0.150 g, 0.49 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF 중의 2.0 M) (0.30 mL, 0.59 mmol)를 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탠난 (0.16 mL, 0.59 mmol)을 적가하였다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 0% 내지 10% EtOAc/헥산 (0.5% Et₃N)을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 116 mg (52%)의 1,6,6-트라이메틸-3-트라이부틸스탠난일-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 6

5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

DMF (2 mL) 중의 1,6,6-트라이메틸-3-트라이부틸스탄일-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 (110 mg, 0.24 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (95 mg, 0.19 mmol)의 용액에 Pd(PPh₃)₄ (11 mg, 0.01 mmol) 및 구리(I) 요오다이드 (7 mg, 0.037 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 밤새도록 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc (2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물 (3x) 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 이 조질 갈색 오일을 0% 내지 3% MeOH/CH₂Cl₂을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 43 mg (38%)의 5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연한 오렌지색 거품으로서 수득하였다.

단계 7

2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂ (3 mL) 중의 5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 (40 mg, 0.068 mmol)의 용액에 TFA (1.5 mL, 19.5 mmol)를 가했다. 이 황색 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 CH₂Cl₂ (3 mL)에 재용해시키고, 에틸렌다이아민 (0.3 mL, 4.44 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, CH₂Cl₂ (3x)으로 추출하였다. 합친 유기물을 농축하여, 황색 오일성 고체를 수득하였다. 이를 EtOAc/Et₂O로 마쇄하여, 17 mg (55%)의 2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 71.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메탄설폰일-아제티딘-3-일)-에틸]-아마이드

단계 1

3-{[(E)-2-메틸-프로판-2-설핀일이미노]-메틸}-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

무수 CH₂Cl₂(10 mL) 중 3-폼일-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(1.0 g, 5.4 mmol) 및 2-메틸프로판-2-설핀아마이드(654 mg, 5.4 mmol)의 용액에 무수 CuSO₄(1.9 g, 11.9 mmol)를 첨가하였다. 이종 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 셀라이트 상에서 여과시키고, CH₂Cl₂로 세정하였다. 여액을 농축시키고, 생성된 잔류물을 SiO₂에서 흡수시키고, 20% 내지 40% EtOAc/헥산을 사용하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1.26 g(81%)의 3-{[(E)-2-메틸-프로판-2-설핀일이미노]-메틸}-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

3-[1-(2-메틸-프로판-2-설핀일아미노)-에틸]-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

0℃에서 CH₂Cl₂(4 mL) 중 3-{[(E)-2-메틸-프로판-2-설핀일이미노]-메틸}-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(0.25 g, 0.87 mmol)의 용액에 메틸마그네슘 브로마이드(Et₂O 중 3.0 M, 0.35 mL, 1.04 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 포화 수성 NH₄Cl로 켄칭하고, 물로 희석하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 273 mg의 3-[1-(2-메틸-프로판-2-설핀일아미노)-에틸]-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 회백색 거품형 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

3-(1-아미노-에틸)-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

0℃에서 MeOH 중 3-[1-(2-메틸-프로판-2-설핀일아미노)-에틸]-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(단계 2로부터의 조질물, 264 mg, 0.87 mmol)의 용액에 다이옥산(0.28 mL, 1.13 mmol) 중 4.0 M HCl을 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 포화 수성 NaHCO₃로 켄칭하고, 물로 희석하고, CH₂Cl₂(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 3-(1-아미노-에틸)-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 진한 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

3-(1-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

DMF(2 mL) 중 3-(1-아미노-에틸)-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(단계 3로부터의 조질물, 63 mg, 0.31 mmol)의 용액에 N,N-다이아이소프로필에틸아민(69 μL, 0.39 mmol), 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(120 mg, 0.26 mmol), 및 HATU(110 mg, 0.29 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 물로 켄칭하고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x) 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 30% 내지 60% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 158 mg(94%)의 3-(1-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 백색 거품으로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-아제티딘-3-일-에틸)-아마이드 하이드로클로라이드

0℃에서 MeOH(4 mL) 중 3-(1-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(150 mg, 0.23 mmol)의 용액에 아세틸 클로라이드(0.33 mL, 4.69 mmol)를 5 분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반함에 따라, 점차 진한 침전물이 형성되었다. 용매를 실온에서 증발시키고, 잔류물을 고진공 하에 건조시켜 145 mg의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-아제티딘-3-일-에틸)-아마이드 하이드로클로라이드를 황색 고체로서 단리하였다.

단계 6

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메탄설폰일-아제티딘-3-일)-에틸]-아마이드

0℃에서 CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-아제티딘-3-일-에틸)-아마이드 하이드로클로라이드(65 mg, 0.11 mmol)의 현탁액에 트라이에틸아민(47 μL, 0.33 mmol), 이어서 메탄설폰일 클로라이드(10 μL, 0.12 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30 분 동안, 그 후 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응을 물로 켄칭시키고, CH₂Cl₂로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 0% 내지 5% MeOH/CH₂Cl₂(0.5% NH₄OH)를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 35 mg(50%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메탄설폰일-아제티딘-3-일)-에틸]-아마이드를 담황색 고체로서 수득하였다.

단계 7

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메탄설폰일-아제티딘-3-일)-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메탄설폰일-아제티딘-3-일)-에틸]-아마이드(30 mg, 0.049 mmol)의 용액에 TFA(0.3 mL, 3.89 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂(2 mL) 중에 재용해시키고, 에틸렌다이아민(0.3 mL, 4.49 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, MeOH/CH₂Cl₂(1:9)로 추출하였다. 유기 층을 물로 세척하고, 수성물을 CH₂Cl₂로 역추출하였다. 합친 유기물을 농축시키고, 잔류물을 MeOH/EtOAc/Et₂O로 마쇄하여 15 mg(63%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메탄설폰일-아제티딘-3-일)-에틸]-아마이드를 담황색 고체로서 수득하였다.

실시예 72.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-3-옥소-3-피롤리딘-1-일-프로필)-아마이드

단계 1

((R)-1-메틸-3-옥소-3-피롤리딘-1-일-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

DMF(2 mL) 중 (R)-3-3급-부톡시카보닐아미노-부티르산(150 mg, 0.74 mmol) 및 HATU(309 mg, 0.81 mmol)의 용액에 피롤리딘(0.19 mL, 2.21 mmol)을 첨가하였다. 생성된 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x) 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 ((R)-1-메틸-3-옥소-3-피롤리딘-1-일-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

(R)-3-아미노-1-피롤리딘-1-일-부탄-1-온 트라이플루오로아세테이트

CH₂Cl₂(5 mL) 중 ((R)-1-메틸-3-옥소-3-피롤리딘-1-일-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터(단계 1로부터의 조질물, 189 mg, 0.74 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(2.0 mL, 27.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켜 (R)-3-아미노-1-피롤리딘-1-일-부탄-1-온 트라이플루오로아세테이트를 담황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-3-옥소-3-피롤리딘-1-일-프로필)-아마이드

DMF(2 mL) 중 (R)-3-아미노-1-피롤리딘-1-일-부탄-1-온 트라이플루오로아세테이트(단계 2로부터의 조질물, 118 mg, 0.44 mmol)의 용액에 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.19 mL, 1.09 mmol), 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.22 mmol), 및 HATU(91 mg, 0.24 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 물로 켄칭하고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x) 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 125 mg(96%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-3-옥소-3-피롤리딘-1-일-프로필)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-3-옥소-3-피롤리딘-1-일-프로필)-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-3-옥소-3-피롤리딘-1-일-프로필)-아마이드(125 mg, 0.21 mmol)의 용액에 TFA(0.5 mL, 6.49 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂(2 mL) 중에 재용해시키고, 에틸렌다이아민(0.4 mL, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭하였다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물 및 EtOAc로 세척하였다. 고체를 10%MeOH/CH₂Cl₂ 중에 용해시키고, 물로 세척하였다. 수성 층을 CH₂Cl₂로 역추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 64 mg(66%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-3-옥소-3-피롤리딘-1-일-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 73.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드

단계 1

시스-3-하이드록시-사이클로부탄카보나이트릴

3-옥소사이클로부탄카보나이트릴을 문헌[Elend, D.; Fengas, D.; Fray, J. M. Synthetic Communications, 2005, 35, 657]에 따라 제조하였다. 0℃에서 MeOH(25 mL) 중 3-옥소사이클로부탄카보나이트릴(600 mg, 6.31 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(263 mg, 6.94 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 물 및 염수로 켄칭시키고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 500 mg(82%)의 시스-3-하이드록시-사이클로부탄카보나이트릴을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

시스-3-(3급-부틸다이메틸실란일옥시)-사이클로부탄카보나이트릴

DMF(3 mL) 중 시스-3-하이드록시-사이클로부탄카보나이트릴(500 mg, 5.15 mmol)의 용액에 실온에서 이미다졸(876 mg, 12.9 mmol), 이어서 TBDMS-Cl(854 mg, 5.66 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 0% 내지 10% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 890 mg(82%)의 시스-3-(3급-부틸다이메틸실란일옥시)-사이클로부탄카보나이트릴을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 3

시스-3-(3급-부틸다이메틸실란일옥시)-사이클로부탄카브알데하이드

-70℃에서 CH₂Cl₂(25 mL) 중 시스-3-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)사이클로부탄카보나이트릴(0.89 g, 4.21 mmol)의 용액에 DIBAL-H(1.05 mL, 5.89 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 2.5 시간 동안 교반하였고, 이때 온도는 점진적으로 0℃로 증가되었다. 흐린 반응 혼합물을 MeOH(1 mL)로 켄칭시킨 후, CH₂Cl₂(20mL)로 희석하고, 포화 수성 Na+K+ 타르트레이트(25mL)를 첨가하였다. 2상 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 격렬하게 교반하였다. 층들을 분리시키고, 수성 상을 CH₂Cl₂(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 시스-3-(3급-부틸다이메틸실란일옥시)-사이클로부탄카브알데하이드를 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-메틸-프로판-2-설핀산 1-[시스-3-(3급-부틸다이메틸실란일옥시)-사이클로부틸]-메트-(E)-일리덴아마이드

무수 CH₂Cl₂(10 mL) 중 시스-3-(3급-부틸다이메틸실란일옥시)-사이클로부탄카브알데하이드(단계 3로부터의 조질물, 900 mg, 4.2 mmol) 및 2-메틸프로판-2-설핀아마이드(509 mg, 4.2 mmol)의 용액에 무수 CuSO₄(1.47 g, 9.24 mmol)를 첨가하였다. 이종 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 셀라이트 상에서 여과시키고, CH₂Cl₂로 세정하였다. 여액을 SiO₂ 로 흡수시키고, 0% 내지 20% EtOAc/헥산을 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 642 mg(48%)의 2-메틸-프로판-2-설핀산 1-[시스-3-(3급-부틸다이메틸실란일옥시)-사이클로부틸]-메트-(E)-일리덴아마이드를 무색 오일로서 단리시켰다.

단계 5

2-메틸-프로판-2-설핀산 {1-[시스-3-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-사이클로부틸]-에틸}-아마이드

0℃에서 CH₂Cl₂(10 mL) 중 2-메틸-프로판-2-설핀산 1-[시스-3-(3급-부틸다이메틸실란일옥시)-사이클로부틸]-메트-(E)-일리덴아마이드(640 mg, 2.02 mmol)의 용액에 메틸마그네슘 브로마이드(Et₂O 중 3.0 M, 1.14 mL, 3.43 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 포화 수성 NH₄Cl로 켄칭시키고, 물로 희석하고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 685 mg의 2-메틸-프로판-2-설핀산 {1-[시스-3-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-사이클로부틸]-에틸}-아마이드를 회백색 왁스질 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 6

시스-3-(1-아미노에틸)-사이클로부탄올 하이드로클로라이드

MeOH(3 mL) 중 2-메틸-프로판-2-설핀산 {1-[시스-3-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-사이클로부틸]-에틸}-아마이드(200 mg, 0.60 mmol)의 용액에 염화수소(1,4-다이옥산 중 4.0M, 0.30 mL, 1.2 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20 분 동안 교반시킨 후, 농축시켜 시스-3-(1-아미노에틸)-사이클로부탄올 하이드로클로라이드를 회백색 반고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 7

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드

DMF(2 mL) 중 시스-3-(1-아미노에틸)-사이클로부탄올 하이드로클로라이드(단계 6으로부터의 조질물, 91 mg, 0.60 mmol)의 용액에 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.24 mL, 1.36 mmol), 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(120 mg, 0.27 mmol), 및 HATU(114 mg, 0.30 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 물로 켄칭하고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x) 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 담황색 고체로 농축시켰다. EtOAc/Et₂O로 마쇄하여 108 mg(74%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 8

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드(60 mg, 0.11 mmol)의 용액에 TFA(1 mL, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 밝은 주황색 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂(2 mL) 중에 재용해시키고, 에틸렌 다이아민(0.4 mL, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, CH₂Cl₂로 희석하였다. 매우 미세한 침전물이 형성되었고, 이를 여과에 의해 수집하였다. 이 고체를 MeOH/CH₂Cl₂(200 mL)에 취하고, 다시 여과하고, MeOH/CH₂Cl₂로 세정하였다. 여액을 농축시키고, EtOAc/MeOH로 마쇄하여 28 mg(62%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 74.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-시아노사이클로부틸)-에틸]-아마이드

단계 1

메탄설폰산 시스-3-(1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-사이클로부틸 에스터

0℃에서 CH₂Cl₂(3 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드(100 mg, 0.19 mmol)의 부분 현탁액에 트라이에틸아민(39 μL, 0.28 mmol), 이어서 메탄설폰일 클로라이드(16 μL, 0.21 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 메탄설폰산 시스-3-(1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-사이클로부틸 에스터를 회백색 거품으로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-시아노-사이클로부틸)-에틸]-아마이드

실온에서 DMSO(1.5 mL) 중 메탄설폰산 시스-3-(1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-사이클로부틸 에스터(단계 1로부터의 조질물, 114 mg, 0.19 mmol)의 용액에 칼륨 사이아나이드(48 mg, 0.74 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 2.5 시간 동안 가열하였다. 18-크라운-6(10 mg, 0.04 mmol)을 첨가하고, 80℃에서 2 시간 동안, 그 후 100℃에서 밤새 가열을 계속하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, 물로 켄칭시키고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x) 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 30% 내지 50% EtOAc/헥산을 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 46 mg(45%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-시아노-사이클로부틸)-에틸]-아마이드를 황색 거품으로서 단리하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-시아노사이클로부틸)-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-시아노-사이클로부틸)-에틸]-아마이드(44 mg, 0.08 mmol)의 용액에 TFA(1 mL, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 밝은 주황색 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂(2 mL) 중에 재용해시키고, 에틸렌 다이아민(0.4 mL, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, 5% MeOH/CH₂Cl₂(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 농축시키고, 잔류물을 EtOAc로 마쇄하여 19 mg(57%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-시아노사이클로부틸)-에틸]-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 75.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드

단계 1

4-니트로벤조산 트랜스-3-(1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-사이클로부틸 에스터

THF(4 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드(200 mg, 0.37 mmol)의 용액에 4-니트로벤조산(124 mg, 0.74 mmol) 및 트라이페닐포스핀(204 mg, 0.78 mmol)을 첨가하였다. 그 후, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 다이에틸 아조다이카복실레이트(123 μL, 0.78 mmol)를 적가하였다. 반응을 실온에서 밤새 교반시킨 후, CH₂Cl₂(25 mL)로 희석하고, 1.0 M 수성 NaOH로 세척하였다. 수성 상을 CH₂Cl₂로 역추출한 후, 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 SiO₂에서 흡수시키고, 20% 내지 80% EtOAc/헥산을 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 250 mg(98%)의 4-니트로벤조산 트랜스-3-(1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-사이클로부틸 에스터를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드

THF(12 mL) 중 4-니트로벤조산 트랜스-3-(1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-사이클로부틸 에스터(250 mg, 0.36 mmol)의 현탁액에 10% 수성 나트륨 하이드록사이드(0.44 mL, 1.09 mmol), 물(1 mL), 및 MeOH(2 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시킨 후, 물로 희석하고, CH₂Cl₂(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 30% 내지 80% EtOAc/헥산을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 140 mg(72%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드(50 mg, 0.09 mmol)의 용액에 TFA(1 mL, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 밝은 주황색 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂(2 mL) 중에 재용해시키고, 에틸렌 다이아민(0.4 mL, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, 5% MeOH/CH₂Cl₂(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 농축시키고, EtOAc로 마쇄하여 19 mg(50%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 76.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-시아노사이클로부틸)-에틸]-아마이드

단계 1

메탄설폰산 트랜스-3-(1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-사이클로부틸 에스터

0℃에서 CH₂Cl₂(3 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(트랜스-3-하이드록시-사이클로부틸)-에틸]-아마이드(85 mg, 0.16 mmol)의 부분 현탁액에 트라이에틸아민(33 μL, 0.24 mmol), 이어서 메탄설폰일 클로라이드(14 μL, 0.18 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 메탄설폰산 트랜스-3-(1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-사이클로부틸 에스터를 회백색 거품으로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-시아노-사이클로부틸)-에틸]-아마이드

실온에서 DMSO(1.5 mL) 중 메탄설폰산 트랜스-3-(1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-에틸)-사이클로부틸 에스터(단계 1로부터의 조질물, 97 mg, 0.16 mmol)의 용액에 칼륨 사이아나이드(41 mg, 0.63 mmol) 및 18-크라운-6(8 mg, 0.03 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열한 후, 실온으로 냉각시키고, 물로 켄칭시키고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x) 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 20% 내지 50% EtOAc/헥산을 사용하여 크로마토그래피로 정제하여 34 mg(40%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-시아노-사이클로부틸)-에틸]-아마이드를 황색 거품으로서 단리하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-시아노사이클로부틸)-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-시아노-사이클로부틸)-에틸]-아마이드(34 mg, 0.06 mmol)의 용액에 TFA(1 mL, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 밝은 주황색 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂(2 mL) 중에 재용해시키고, 에틸렌 다이아민(0.4 mL, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 직접 농촉시키고 50% 내지 100% EtOAc/헥산 -> 5% MeOH/EtOAc를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 15 mg(58%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(시스-3-시아노사이클로부틸)-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 77.

2-아이소퀴놀린-1-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-아이소퀴놀린-1-일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

톨루엔(2 mL) 중 헥사메틸다이틴(90 mg, 0.28 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(100 mg, 0.20 mmol)의 용액에 Pd(Ph₃P)₄(23 mg, 0.02 mmol)를 첨가하였다. 질소 가스 스트림을 약하게 15 분 동안 반응 혼합물에 버블링시킨 후, 95℃로 가열하였다. 1.5 시간 후 1-요오도아이소퀴놀린(50 mg, 0.20 mmol) 및 Pd(Ph₃P)₄(23 mg, 0.02 mmol)을 고체로서 한 분획으로 첨가하였다. 95℃에서 1.5 시간 동안 가열을 계속하고, 추가의 1-요오도아이소퀴놀린(25 mg, 0.10 mmol), DMF(0.5 mL) 및 구리 (I) 요오다이드(5 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 95℃에서 밤새 가열하였다. 추가의 1-요오도퀴놀린(25 mg, 0.10 mmol) 및 Pd(Ph₃P)₄(23 mg, 0.02 mmol)을 첨가하고, 8 시간 동안 가열을 계속하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, 물로 켄칭시키고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x) 및 염수로 세척하고, 그 후 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 30% 내지 80% EtOAc/헥산을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 52 mg(48%)의 2-아이소퀴놀린-1-일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 거품으로서 수득하였다.

단계 2

2-아이소퀴놀린-1-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-아이소퀴놀린-1-일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(52 mg, 0.094 mmol)의 용액에 TFA(1 mL, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂(2 mL) 중에 재용해시키고, 에틸렌 다이아민(0.4 mL, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, CH₂Cl₂로 추출하였다. 합친 유기물을 농축시키고, 잔류물을, 0% 내지 5% MeOH/CH₂Cl₂(0.5% NH₄OH)를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 17 mg(43%)의 2-아이소퀴놀린-1-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 78.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-피리딘-2-일-에틸)-아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

(R)-2-메틸-프로판-2-설핀산((R)-1-피리딘-2-일-에틸)-아마이드

문헌[Kuduk, et. al. Tetrahedron Lett. 2004, 45, 6641]에 개시된 절차에 따라 표제 화합물을 피리딘-2-카복스알데하이드로부터 제조하였다. 생성물을, NMR로 판정 시 R_SR 부분입체이성질체에 친향적인 10:1 혼합물로서 수득하고, 이는 상기 문헌과 일치하였다.

단계 2

(R)-1-피리딘-2-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드

MeOH(12 mL) 중 (R)-2-메틸-프로판-2-설핀산((R)-1-피리딘-2-일-에틸)-아마이드(1.10 g, 4.86 mmol)의 용액에 다이옥산 중 4.0 M 염화수소(3.04 mL, 12.1 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시킨 후, 농축시키고, 고진공 하에 건조시켜 1.0 g의 (R)-1-피리딘-2-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

출발 물질의 10:1 부분입체이성질체 비(dr)을 기준으로 82% 거울상초과량(ee)으로 추정됨.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-피리딘-2-일-에틸)-아마이드

DMF(2 mL) 중 (R)-1-피리딘-2-일-에틸아민 다이하이드로클로라이드(66 mg, 0.34 mmol)의 용액에 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.20 mL, 1.13 mmol), 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.23 mmol), 및 HATU(95 mg, 0.25 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 물로 켄칭하고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x) 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 117 mg(95%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-피리딘-2-일-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-피리딘-2-일-에틸)-아마이드 하이드로클로라이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-피리딘-2-일-에틸)-아마이드(117 mg, 0.21 mmol)의 용액에 TFA(1 mL, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 밝은 주황색 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂(2 mL) 중에 재용해시키고, 에틸렌 다이아민(0.5 mL, 7.50 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반시킨 후, 50% 내지 100% EtOAc/헥산 -> 5% MeOH/EtOAc를 사용하여 직접 크로마토그래피하였다. 이와 같이 단리된 백색 고체를 EtOAc로 마쇄한 후, CH₂Cl₂ 및 MeOH(1:1, 6 mL) 중에 현탁시켰다. MeOH(2 당량) 중 1.0M HCl을 첨가하여 완전 용해시켰다. 그 용액을 농축시키고, 고진공 하에 건조시켜 67 mg(69%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-피리딘-2-일-에틸)-아마이드 하이드로클로라이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 79.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸]-아마이드

단계 1

(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-메탄올

0℃에서 THF(20 mL) 중 4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-카복실산(500 mg, 2.62 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(0.40 mL, 2.88 mmol), 이어서 에틸 클로로폼에이트(0.28 mL, 2.88 mmol)를 첨가하였다. 굵은 백색 침전물이 형성되었다. 반응 혼합물을 0℃에서 15 분 동안 교반시킨 후, 물(5 mL) 중 나트륨 보로하이드라이드(297 mg, 7.85 mmol)의 용액을 파이펫으로 천천히 첨가하였다. 격렬한 가스 분출이 관찰되었고, 모든 고체가 용해되었다. 반응을 0℃에서 10 분 동안 교반시킨 후, 실온으로 가온시키고, 1 시간 동안 교반하였다. 반응을 물로 희석하고, CH₂Cl₂(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 20% 내지 50% EtOAc/헥산을 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 296 mg(64%)의 (4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-메탄올을 무색 오일로서 수득하고, 이를 실온 미만으로 냉각시켰다.

단계 2

4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-카브알데하이드

실온에서 CH₂Cl₂(15 mL) 중 (4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-메탄올(290 mg, 1.64 mmol)의 용액에 데쓰-마틴 페리오디난(764 mg, 1.8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 포화 수성 NaHCO₃(10 mL) 및 10% 수성 Na₂S₂O₃(10 mL)로 켄칭하였다. 2상 혼합물을 CH₂Cl₂ 로 희석하고, 10 분 동안 격렬하게 교반하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 CH₂Cl₂로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 300 mg의 4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-카브알데하이드를 담황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

(R)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-메트-(E)-일리덴아마이드

CH₂Cl₂(10 mL) 중 4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-카브알데하이드(287 mg, 1.64 mmol) 및 (R)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드(209 mg, 1.72 mmol)의 용액에 무수 구리 (II) 설페이트(576 mg, 3.61 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 부크너 펀넬(Buchner funnel) 상에서 여과하고, CH₂Cl₂로 세정하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 SiO₂ 상에 흡수시키고, 20% 내지 40% EtOAc/헥산을 사용하는 크로마토그래피로 여과시켜 340 mg(75%)의 (R)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-메트-(E)-일리덴아마이드를 담황색 오일로서 수득하였다.

단계 4

(R)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸]-아마이드

-78℃에서 THF(5 mL) 중 (R)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-메트-(E)-일리덴아마이드(0.34 g, 1.22 mmol)의 용액에 메틸마그네슘 브로마이드(Et₂O 중 3.0 M)(0.73 mL, 2.2 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 냉 포화 수성 NH₄Cl로 켄칭하였다. 혼합물을 실온으로 가온시키고, 물로 희석하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. NMR 분석은 약 8:1의 부분입체이성질체들의 혼합물을 나타내었다. 잔류물을 50% 내지 100% EtOAc/헥산을 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 225 mg(63%)의 (R)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸]-아마이드를 무색 오일로서 수득하였다.

수득된 단일 부분입체이성질체를 선행 문헌[Kuduk, et. al. Tetrahedron Lett. 2004, 45, 6641]에 기초하여 R_SR로서 지정하였다.

단계 5

(R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸아민 다이하이드로클로라이드

MeOH(4 mL) 중 (R)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸]-아마이드(225 mg, 0.76 mmol)의 용액에 다이옥산(0.48 mL, 1.9 mmol) 중 4.0 M 염화수소를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시킨 후, 농축시키고, 고진공 하에 건조시켜 225 mg의 (R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸아민 다이하이드로클로라이드를 점성의 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 6

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸]-아마이드

DMF(2 mL) 중 (R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸아민 다이하이드로클로라이드(89 mg, 0.34 mmol)의 용액에 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.20 mL, 1.13 mmol), 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.23 mmol), 및 HATU(95 mg, 0.25 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 물로 켄칭하고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x) 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 122 mg(88%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 7

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(3 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸]-아마이드(122 mg, 0.20 mmol)의 용액에 TFA(1 mL, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 밝은 주황색 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂(3 mL) 중에 재용해시키고, 에틸렌 다이아민(0.5 mL, 7.50 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, 5% MeOH/CH₂Cl₂(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 농축시키고, MeOH/CH₂Cl₂로 마쇄하여 65 mg(68%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-트라이플루오로메틸-피리딘-2-일)-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 단리하였다.

실시예 80.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

(R)-2-메틸-프로판-2-설핀산(E)-에틸리덴아마이드

플라스크에서 (R)-2-메틸-프로판-2-설핀산 아마이드(4.00 g, 33.0 mmol)를 CH₂Cl₂(14.0 mL) 중에 용해시켰다. 아세트알데하이드(16.7 mL, 297 mmol), MgSO₄(11.9 g, 99.0 mmol) 및 피리디늄 토실레이트(415 mg, 1.65 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하고, 여과하고, 농축시켜 5.21 g의 (R)-2-메틸-프로판-2-설핀산(E)-에틸리덴아마이드를 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

(R)-2-메틸-프로판-2-설핀산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드

플라스크에서, 아이소부티로나이트릴(6.39 g, 92.4 mmol)을 다이에틸 에터(190 mL) 중에 용해시키고, -78℃에서 냉각시켰다. NaHMDS(THF 중 1.0 M, 99.0 mL, 99.0 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 -78℃에서 교반하였다. THF(50.0 mL) 중 (R)-2-메틸-프로판-2-설핀산(E)-에틸리덴아마이드(단계 1로부터의 조질물, 5.21 g, 33.0 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 2 시간 동안 교반시킨 후 실온으로 밤새 가온시켰다. 반응 혼합물을 포화 수성 암모늄 클로라이드로 켄칭하고, EtOAc로써 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 SiO₂ 크로마토그래피(20-100% EtOAc/헥산)로 정제하여 2.93 g(41%)의 (R)-2-메틸-프로판-2-설핀산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드를 연황색 오일로서 수득하였다.

단계 3

(S)-3-아미노-2,2-다이메틸-부티로나이트릴 하이드로클로라이드

(R)-2-메틸-프로판-2-설핀산(2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드(2.93 g, 13.6 mmol)를 MeOH 중에 용해시키고, HCl(1,4-다이옥산 중 4.0 M, 6.8 mL, 27.2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켜 1.90 g(94%)의 (S)-3-아미노-2,2-다이메틸-부티로나이트릴 하이드로클로라이드를 백색 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드

플라스크에서 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1.10 g, 2.95 mmol), (S)-3-아미노-2,2-다이메틸-부티로나이트릴 하이드로클로라이드(439 mg, 2.95 mmol), EDC(1.3 g, 6.8 mmol) 및 HOBt(1.15 g, 6.8 mmol)를 합쳤다. DMF(27 mL)를 첨가한 후, i-Pr₂NEt(3.6 mL, 20.7 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc로써 추출하였다. 유기물을 10% 시트르산, 포화 NaHCO₃, 포화 LiCl, 및 포화 NaCl로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 SiO₂ 크로마토그래피(50-100% EtOAc/헥산)로 정제하여 1.32 g(96%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드

DMF(1.5 mL) 중 6-3급-부틸-1-메틸-3-트라이부틸스태닐-1H-인다졸(222 mg, 0.49 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드(110 mg, 0.24 mmol)의 용액에 Pd(PPh₃)₄(14 mg, 0.012 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(9 mg, 0.05 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼징한 후, 80℃에서 2 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시키고, 포화 NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 포화 LiCl 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 20% 내지 50% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 120 mg(92%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드를 백색 분말로서 단리하였다.

단계 6

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드(120 mg, 0.22 mmol)의 용액에 TFA(0.75 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 10:90:0.5 MeOH/CH₂Cl₂/NH₄OH(3 mL)에 재용해시키고, 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 10% MeOH/CH₂Cl₂에 취하고, 물을 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집한 후, EtOAc로 마쇄하여 77 mg(84%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노-1,2,2-트라이메틸-에틸)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 81.

2-(6-3급-부틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

5-3급-부틸-2-메틸아닐린

MeOH(80 ml) 중 4-3급-부틸-1-메틸-2-니트로벤젠(3.58 g, 18.5 mmol)의 용액에 탄소 상 10% Pd(습윤, 358 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 분위기(벌룬) 하에 4 시간 동안 교반시킨 후, 셀라이트 상에서 여과시키고, EtOAc로 세정하였다. 여액을 농축시켜 2.48 g(82%)의 5-3급-부틸-2-메틸아닐린을 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

6-3급-부틸-1H-인다졸

0℃에서 CHCl₃(40 ml) 중 5-3급-부틸-2-메틸아닐린(2.48 g, 15.2 mmol)의 용액에 아세트산 무수물(3.3 ml, 34.9 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 1 시간 동안 교반하였다. 칼륨 아세테이트(446 mg, 4.55 mmol)를 첨가한 후, 아이소아밀 나이트라이트(4.4 ml, 32.6 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 온도에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc 중에 용해시키고, 물, 포화 NaHCO₃ 및 염수로써 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 THF/MeOH(1:1, 40 mL) 중에 용해시키고, 10% NaOH(4.5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반시킨 후, 1.0 M HCl로 중화시키고, 물로 희석하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 20% 내지 50% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 1.02 g(39%)의 6-3급-부틸-1H-인다졸을 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

6-3급-부틸-3-요오도-1H-인다졸

실온에서 DMF(20 ml) 중 6-3급-부틸-1H-인다졸(1.02 g, 5.84 mmol)의 용액에 칼륨 하이드록사이드(983 mg, 17.5 mmol) 및 요오드(2.22 g, 8.76 mmol)를 첨가하였다. 고동색 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 10% 수성 Na₂S₂O₃로써 켄칭하고, 물로 희석하였다. 혼합물을 EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물, 포화 LiCl, 및 포화 NaCl로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 1.92 g 6-3급-부틸-3-요오도-1H-인다졸을 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 4

6-3급-부틸-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸

0℃에서 THF(8 ml) 중 6-3급-부틸 -3-요오도-1H-인다졸(820 mg, 2.73 mmol)의 용액에 KOt-Bu(429 mg, 3.82 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 요오도메탄(0.24 ml, 3.82 mmol)을 첨가하였다. 0℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 실온으로 가온시키고, 1.5 시간 동안 교반하였다. 반응을 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 10% 내지 50% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 592 mg(69%)의 6-3급-부틸-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸을 백색 고체로서 수득하였다.

소량의 6-3급-부틸-3-요오도-2-메틸-1H-인다졸 구조이성질체가 또한 관찰되었지만, 단리되지 않았다.

단계 5

6-3급-부틸-1-메틸-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸

0℃에서 THF(3 mL) 중 6-3급-부틸-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸(150 mg, 0.45 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 0.27 mL, 0.54 mmol)를 천천히 첨가하였다. 밝은 황색 이종 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 트라이부틸클로로스태난(0.15 mL, 0.54 mmol)을 적가하였다. 0℃에서 20 분 동안, 그 후 실온에서 3 시간 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 6-3급-부틸-1-메틸-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸을 점성 황색 오일로서 수득하고, 이를 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 6

2-(6-3급-부틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

DMF(1.5 mL) 중 6-3급-부틸-1-메틸-3-트라이부틸스태닐-1H-인다졸(단계 5로부터의 조질물, 217 mg, 0.45 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(125 mg, 0.25 mmol)의 용액에 Pd(PPh₃)₄(14 mg, 0.012 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(9 mg, 0.05 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼징한 후, 80℃에서 1.5 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시키고, 포화 NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 포화 LiCl 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 129 mg(85%)의 2-(6-3급-부틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 단리하였다.

단계 7

2-(6-3급-부틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-3급-부틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(129 mg, 0.21 mmol)의 용액에 TFA(0.75 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반시킨 후 농축시켰다. 잔류물을 10:90:0.5 MeOH/CH₂Cl₂/NH₄OH(3 mL) 중에 재용해시키고, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을, 0% 내지 5% MeOH/EtOAc를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 74 mg(73%)의 2-(6-3급-부틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 82.

2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 81, 단계 3 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 3의 6-3급-부틸-1H-인다졸 대신에 6-메틸-1H-인다졸을 사용하여 제조하였다.

실시예 83.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 81, 단계 3 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 3의 6-3급-부틸-1H-인다졸 대신에 6-플루오로-1H-인다졸을 사용하여 제조하였다.

실시예 84.

2-(6-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 81, 단계 3 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 3의 6-3급-부틸-1H-인다졸 대신에 6-메톡시-1H-인다졸을 사용하여 제조하였다.

실시예 85.

2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

6-클로로-1-에틸-3-요오도-1H-인다졸

0℃에서 THF(12 ml) 중 6-클로로-3-요오도-1H-인다졸(913 mg, 3.28 mmol)의 용액에 KOt-Bu(429 mg, 3.82 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 요오도에탄(0.37 ml, 4.6 mmol)을 첨가하였다. 0℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 실온으로 가온시키고, 48 시간 동안 교반하였다. 반응을 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 10% 내지 50% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 622 mg(62%)의 6-클로로-1-에틸-3-요오도-1H-인다졸을 백색 분말로서 수득하였다.

또한 174 mg(17%)의 6-클로로-2-에틸-3-요오도-2H-인다졸을 소량의 보다 극성의 구조이성질체로서 단리하였다.

단계 2

6-클로로-1-에틸-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸

0℃에서 THF(3 mL) 중 6-클로로-1-에틸-3-요오도-1H-인다졸(150 mg, 0.47 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 0.28 mL, 0.56 mmol)를 천천히 첨가하였다. 밝은 황색 이종 반응 혼합물을 0℃에서 20 분 동안 교반시킨 후 트라이부틸클로로스태난(0.15 mL, 0.56 mmol)을 적가하였다. 0℃에서 20 분 동안, 그 후 실온에서 2 시간 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 동일 반응을 동일 스케일로 한번 더 반복하였다. 2회 수행으로부터의 잔류물을 합치고, 10% 내지 50% EtOAc/헵탄(0.5%Et₃N)을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 128 mg(29%)의 6-클로로-1-에틸-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

DMF(1.5 mL) 중 6-클로로-1-에틸-3-트라이부틸스태닐-1H-인다졸(125 mg, 0.27 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(125 mg, 0.25 mmol)의 용액에 Pd(PPh₃)₄(14 mg, 0.012 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(9 mg, 0.05 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼징한 후, 80℃에서 0.5 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시키고, 포화 NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 포화 LiCl 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 156 mg의 2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 무색 점성 오일로서 단리하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(150 mg, 0.25 mmol)의 용액에 TFA(0.75 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 10:90:0.5 MeOH/CH₂Cl₂/NH₄OH(3 mL) 중에 재용해시키고, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을, 0% 내지 5% MeOH/EtOAc를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하고, 이어서 MeOH로 마쇄하여 88 mg(75%)의 2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 분말로서 수득하였다.

실시예 86.

2-(6,7-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

6,7-다이플루오로-1H-인다졸

초음파 바이알에서 2,3,4-트라이플루오로벤즈알데하이드(1.5 g, 9.4 mmol)를 1,4-다이옥산(6 mL) 중에 용해시키고, 하이드라진(6 mL, 191 mmol)을 첨가하였다. 상기 바이알을 밀봉시키고, 30분 동안 150℃에서 초음파 조사 하에 가열시켰다. 반응을 물로 켄칭시키고, EtOAc로써 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 20% 내지 50% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 664 mg(46%)의 6,7-다이플루오로-1H-인다졸을 연갈색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(6,7-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 81, 단계 3 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 3의 6-3급-부틸-1H-인다졸 대신에 6,7-다이플루오로-1H-인다졸을 사용하여 제조하였다.

실시예 87.

2-(6-에틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

6-비닐-1H-인다졸

톨루엔(18 ml) 및 1,2-다이메톡시에탄(6 ml) 중 6-브로모-1H-인다졸(600 mg, 3.05 mmol)의 현탁액에 트라이부틸(비닐)주석(1.33 ml, 4.57 mmol) 및 PdCl₂(PPh₃)₂(214 mg, 0.31 mmol)을 첨가하였다. 반응을 아르곤으로 퍼징한 후, 환류 온도에서 3 시간 동안 가열하였다. 추가의 트라이부틸(비닐)주석(0.66 ml, 2.28 mmol) 및 PdCl₂(PPh₃)₂(107 mg, 0.15 mmol)를 첨가하고, 1시간 동안 가열을 계속하였다. 동일 반응을 추가의 6-브로모-1H-인다졸(200 mg, 1.02 mmol) 배취 상에서 수행하고, 2개의 조질 배취를 합쳤다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 5% 내지 50% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 350 mg(60%)의 6-비닐-1H-인다졸을 황색 고체로서 단리하였다.

단계 2

6-에틸-1H-인다졸

MeOH(24 ml) 중 6-비닐-1H-인다졸(350 mg, 2.42 mmol)의 용액에 탄소 상 10% Pd(습윤, 443 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 분위기(벌룬) 하에 2.5 시간 동안 교반시킨 후, 셀라이트 상에서 여과시키고, EtOAc로 세정하였다. 여액을 농축시켜 305 mg(86%)의 6-에틸-1H-인다졸을 백색 반고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-에틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 81, 단계 3 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 3의 6-3급-부틸-1H-인다졸 대신에 6-에틸-1H-인다졸을 사용하여 제조하였다.

실시예 88.

2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

4,6-다이플루오로-1H-인다졸

1,2-다이메톡시에탄(10 mL) 중 2,4,6-트라이플루오로벤즈알데하이드(0.80 g, 5.0 mmol)의 용액에 칼륨 카보네이트(1.04 g, 7.5 mmol) 및 O-메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(438 mg, 5.25 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 5 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시키고, 여과하고, 다이클로로메탄으로 세정하였다. 여액을 농축시켰다. 잔류물을 1,2-다이메톡시에탄(10 mL) 중에 용해시키고, 하이드라진(0.17 mL, 5.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 1.5 시간 동안 가열하였다. 추가의 하이드라진(0.17 mL, 5.5 mmol)을 첨가하고, 30분 동안 가열을 계속 하였다. 그 반응을 실온으로 냉각시키고, 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 포화 LiCl 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 20% 내지 50% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 358 mg(47%)의 4,6-다이플루오로-1H-인다졸을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 81, 단계 3 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 3의 6-3급-부틸-1H-인다졸 대신에 4,6-다이플루오로-1H-인다졸을 사용하여 제조하였다.

실시예 89.

2-(1,6-다이메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-클로로-6-메틸피리딘-3-카브알데하이드

-78℃에서 다이클로로메탄(40 mL) 중 2-클로로-6-메틸니코티노나이트릴(2.0 g, 13.1 mmol)의 용액에 DIBAL-H(2.92 mL, 16.4 mmol)를 적가하였다. -78℃에서 5 분 동안 반응을 교반시킨 후, 실온으로 가온시키고, 6 시간 동안 교반하였다. 반응을 1N HCl(40 mL)로 조심스럽게 켄칭하고, 혼합물을 환류 온도에서 30분 동안 가열하였다. 냉각 후, 반응물을 수성 10% NaOH로써 염기성으로 만들고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 1.98 g(97%)의 2-클로로-6-메틸피리딘-3-카브알데하이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

6-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘

초음파 바이알에서 2-클로로-6-메틸피리딘-3-카브알데하이드(1.98 g, 12.7 mmol)를 1,4-다이옥산(12 mL) 중에 용해시키고, 하이드라진(6.0 mL, 191 mmol)을 첨가하였다. 그 바이알을 밀봉하고, 1 시간 동안 150℃에서 초음파 조사 하에 가열하였다. 반응을 물로 켄칭시키고, EtOAc로써 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 863 mg(41%)의 6-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(1,6-다이메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 81, 단계 3 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 3의 6-3급-부틸-1H-인다졸 대신에 6-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘을 사용하여 제조하였다.

실시예 90.

2-[6-클로로-1-(2-하이드록시-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-{6-클로로-1-[2-(테트라하이드로-파이란-2-일옥시)-에틸]-1H-인다졸-3-일}-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(실시예 23 참조, 120 mg, 0.21 mmol)를 DMF(1.3 ml) 중에 용해시켰다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60% 분산액, 10 mg, 0.25 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 2-(2-브로모에톡시)테트라하이드로-2H-파이란(47 μL, 0.31 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안, 그 후 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭시키고, 에틸 아세테이트(2x)로 추출하였다. 합친 유기 층들을 물, 포화 LiCl, 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 138 mg(94%)의 2-{6-클로로-1-[2-(테트라하이드로-파이란-2-일옥시)-에틸]-1H-인다졸-3-일}-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 점성의 황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

2-[6-클로로-1-(2-하이드록시-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-{6-클로로-1-[2-(테트라하이드로-파이란-2-일옥시)-에틸]-1H-인다졸-3-일}-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(138 mg, 0.20 mmol)의 용액에 TFA(0.75 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 10:90:0.5 MeOH/CH₂Cl₂/NH₄OH(3 mL) 중에 재용해시키고, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을, 0% 내지 10% MeOH/CH₂Cl₂를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 63 mg(65%)의 2-[6-클로로-1-(2-하이드록시-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 91.

2-(6-클로로-1-아이소프로필-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 90에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 2-(2-브로모에톡시)테트라하이드로-2H-파이란 대신에 2-브로모프로판을 사용하여 제조하였다.

실시예 92.

2-[6-클로로-1-프로필-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-(1-알릴-6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(실시예 23 참조, 396 mg, 0.68 mmol)를 DMF(4.5 ml) 중에 용해시켰다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60% 분산액, 33 mg, 0.83 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 20 분 동안 교반시킨 후 알릴 브로마이드(65 μL, 0.75 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 20 분 동안, 그 후 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭시키고, 에틸 아세테이트(2x)로 추출하였다. 합친 유기 층들을 물, 포화 LiCl, 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 388 mg(92%)의 2-(1-알릴-6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연황색 거품으로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-프로필-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

MeOH(6 ml) 중 2-(1-알릴-6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(50 mg, 0.08 mmol)의 용액에 탄소 상 10% Pd(습윤, 17 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 분위기(벌룬) 하에 1.5 시간 동안 교반시킨 후, 셀라이트 상에서 여과시키고, EtOAc로 세정하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 38 mg(76%)의 2-(6-클로로-1-프로필-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 점성의 무색 오일로서 수득하였다.

단계 3

2-[6-클로로-1-프로필-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(1.5 mL) 중 2-(6-클로로-1-프로필-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(38 mg, 0.06 mmol)의 용액에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 10:90:0.5 MeOH/CH₂Cl₂/NH₄OH(3 mL) 중에 재용해시키고, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을, 0% 내지 10% MeOH/CH₂Cl₂를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 10 mg(32%)의 2-[6-클로로-1-프로필-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 93.

2-(6-클로로-1-시아노메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 90에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 2-(2-브로모에톡시)테트라하이드로-2H-파이란 대신에 2-요오도아세토나이트릴을 사용하여 제조하였다.

실시예 94.

2-[6-클로로-1-(2,3-다이하이드록시-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

메탄설폰산 2,2-다이메틸-[1,3]다이옥솔란-4-일메틸 에스터

0℃에서 다이클로로메탄(60 ml) 중 (2,2-다이메틸-[1,3]다이옥솔란-4-일)-메탄올(1.25 g, 9.46 mmol) 및 트라이에틸아민(9.2 ml, 66.2 mmol)의 용액에 메탄설폰일 클로라이드(2.2 ml, 28.4 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, 수성 층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 합친 유기물을 10% 시트르산, 포화 NaHCO₃, 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 메탄설폰산 2,2-다이메틸-[1,3]다이옥솔란-4-일메틸 에스터를 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-[6-클로로-1-(2,2-다이메틸-[1,3]다이옥솔란-4-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(실시예 23 참조, 120 mg, 0.21 mmol)를 DMF(1.3 ml) 중에 용해시켰다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60% 분산액, 12 mg, 0.31 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시킨 후, DMF(0.5 ml) 중 메탄설폰산 2,2-다이메틸-[1,3]다이옥솔란-4-일메틸 에스터(131 mg, 0.62 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안, 그 후 실온에서 48 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭시키고, 에틸 아세테이트(2x)로 추출하였다. 합친 유기 층들을 물, 포화 LiCl, 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 2-[6-클로로-1-(2,2-다이메틸-[1,3]다이옥솔란-4-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 연갈색 점성 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-[6-클로로-1-(2,3-다이하이드록시-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(3 mL) 중 2-[6-클로로-1-(2,2-다이메틸-[1,3]다이옥솔란-4-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(단계 2로부터의 조질물)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 48 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 10:90:0.5 MeOH/CH₂Cl₂/NH₄OH(3 mL) 중에 재용해시키고, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을, 0% 내지 10% MeOH/CH₂Cl₂를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 22 mg(20%, 2개 단계)의 2-[6-클로로-1-(2,3-다이하이드록시-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 95.

2-[6-클로로-1-(2-하이드록시-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-(2-브로모-1-메틸-에톡시)-테트라하이드로-2H-파이란

0℃에서 다이클로로메탄(50 ml) 중 1-브로모프로판-2-올(1.25 g, 9.0 mmol) 및 3,4-다이하이드로-2H-파이란(2.04 ml, 22.5 mmol)의 용액에 p-톨루엔설폰산 모노하이드레이트(85 mg, 0.45 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 15 분 동안 교반시킨 후, 실온으로 가온시키고, 2 시간 동안 교반하였다. 반응을 EtOAc로 희석하고, 물, 포화 NaHCO₃, 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 2-(2-브로모-1-메틸-에톡시)-테트라하이드로-2H-파이란을 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-[6-클로로-1-(2-하이드록시-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 90에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 2-(2-브로모에톡시)테트라하이드로-2H-파이란 대신에 2-(2-브로모-1-메틸-에톡시)-테트라하이드로-2H-파이란을 사용하여 제조하였다.

실시예 96.

2-[6-클로로-1-(3-하이드록시-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-(3-브로모프로폭시)-테트라하이드로-2H-파이란

0℃에서 다이클로로메탄(50 ml) 중 3-브로모프로판-1-올(1.25 g, 9.0 mmol) 및 3,4-다이하이드로-2H-파이란(2.04 ml, 22.5 mmol)의 용액에 p-톨루엔설폰산 모노하이드레이트(85 mg, 0.45 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 15 분 동안 교반시킨 후, 실온으로 가온시키고, 2 시간 동안 교반하였다. 반응을 EtOAc로 희석하고, 물, 포화 NaHCO₃, 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 2-(3-브로모프로폭시)-테트라하이드로-2H-파이란을 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-[6-클로로-1-(3-하이드록시-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 90에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 2-(2-브로모에톡시)테트라하이드로-2H-파이란 대신에 2-(3-브로모프로폭시)-테트라하이드로-2H-파이란을 사용하여 제조하였다.

실시예 97.

2-(4,6-다이클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2,4,6-트라이클로로벤즈알데하이드

2,4,6-트라이클로로벤즈알데하이드를 문헌[Synthesis 2008, 279]에 개시된 절차에 따라 제조하였다. -78℃에서 THF(200 ml) 중 1,3,5-트라이클로로벤젠(10.0 g, 55.1 mmol)의 용액에 n-BuLi(헥산 중 1.6 M, 34.4 ml, 55.1 mmol)을 20 분에 걸쳐 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반시킨 후, DMF(7.5 ml, 96.4 mmol)를 적가하였다. 반응을 -78℃에서 추가 1.5 시간 동안 교반시킨 후, 3 N HCl(200 ml)로써 켄칭하고, 실온으로 가온시켰다. 혼합물을 EtOAc로써 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 10.7 g(93%)의 2,4,6-트라이클로로벤즈알데하이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

4,6-다이클로로-1H-인다졸

초음파 바이알에서 2,4,6-트라이클로로벤즈알데하이드(4.0 g, 19.1 mmol)를 1,4-다이옥산(8 mL) 중에 용해시키고, 하이드라진(7.2 mL, 229 mmol)을 첨가하였다. 그 바이알을 밀봉하고, 160℃에서 30분 동안 초음파 조사 하에 가열하였다. 반응을 물로 켄칭시키고, EtOAc로써 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 1.38 g(38%)의 4,6-다이클로로-1H-인다졸을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(4,6-다이클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 81, 단계 3 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 3의 6-3급-부틸-1H-인다졸 대신에 4,6-다이클로로-1H-인다졸을 사용하여 제조하였다.

실시예 98.

2-(1-메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

1-피라졸로[4,3-b]피리딘-1-일-에탄온

0℃에서 CHCl₃(24 ml) 중 3-아미노-2-메틸피리딘(1.0 g, 9.25 mmol)의 용액에 아세트산 무수물(2.0 ml, 21.3 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 1 시간 동안 교반하였다. 칼륨 아세테이트(272 mg, 2.77 mmol)를 첨가하고, 이어서 아이소아밀 나이트라이트(2.7 ml, 19.9 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 온도에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc 중에 용해시키고, 물, 포화 NaHCO₃ 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 20% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 973 mg(65%)의 1-피라졸로[4,3-b]피리딘-1-일-에탄온을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

1H-피라졸로[4,3-b]피리딘

피라졸로[4,3-b]피리딘-1-일-에탄온(973 mg, 6.04 mmol)을 THF/MeOH(1:1, 16 mL) 중에 용해시키고, 10% NaOH(1.8 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시킨 후, 1.0 M HCl로 중화시키고, 물로 희석하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 687 mg(96%)의 1H-피라졸로[4,3-b]피리딘을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(1-메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 81, 단계 3 내지 7에 개시된 절차에 따라, 단계 3의 6-3급-부틸-1H-인다졸 대신에 1H-피라졸로[4,3-b]피리딘을 사용하여 제조하였다.

실시예 99.

2-(1-메틸-1H-티에노[3,2-c]피라졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

N-벤즈하이드릴리덴-N'-[1-(3-브로모-티오펜-2-일)-메트-(E)-일리덴]-하이드라진

EtOH(90 mL) 중 3-브로모티오펜-2-카브알데하이드(5.57 g, 29.2 mmol)의 용액에 (다이페닐메틸렌)하이드라진(6.3 g, 32.1 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 65℃에서 4 시간 동안 가열한 후, 농축시켰다. 잔류물을, 10% 내지 20% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 11 g의 N-벤즈하이드릴리덴-N'-[1-(3-브로모-티오펜-2-일)-메트-(E)-일리덴]-하이드라진을 점성의 황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

N-벤즈하이드릴리덴-N'-[2-(벤즈하이드릴리덴-하이드라조노메틸)-티오펜-3-일]-하이드라진

톨루엔(200 mL) 중 N-벤즈하이드릴리덴-N'-[1-(3-브로모-티오펜-2-일)-메트-(E)-일리덴]-하이드라진(10.8 g, 29.2 mmol)의 용액에 (다이페닐메틸렌)하이드라진(6.9 g, 35.1 mmol), 세슘 카보네이트(16.2 g, 49.7 mmol), Pd(OAc)₂(1.31 g, 5.85 mol), 및 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센(2.43 g, 4.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 8.5 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하고, 셀라이트 상에서 여과시키고, EtOAc로 세정하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을, 10% 내지 20% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 12.8 g의 N-벤즈하이드릴리덴-N'-[2-(벤즈하이드릴리덴-하이드라조노메틸)-티오펜-3-일]-하이드라진을 점성의 갈색 오일로서 수득하였다.

단계 3

1H-티에노[3,2-c]피라졸

EtOH(300 mL) 중 N-벤즈하이드릴리덴-N'-[2-(벤즈하이드릴리덴-하이드라조노메틸)-티오펜-3-일]-하이드라진(12.8 g, 26.4 mmol)의 용액에 진한 HCl(150 mL)을 첨가하였다. 진한 적색 반응 혼합물을 85℃에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 실온으로 냉각시키고, 물로 희석하고, Na₂CO₃로 중화시켰다. 혼합물을 EtOAc로써 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 20% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 2.0 g(60%)의 1H-티에노[3,2-c]피라졸을 갈색 고체로서 수득하였다. NMR은 1H 및 2H 호변이성체의 혼합물을 보이는 것으로 나타났다:

단계 4

3-요오도-1H-티에노[3,2-c]피라졸

실온에서 DMF(65 ml) 중 1H-티에노[3,2-c]피라졸(1.0 g, 8.05 mmol)의 용액에 칼륨 하이드록사이드(1.36 g, 24.2 mmol) 및 요오드(3.07 g, 12.1 mmol)를 첨가하였다. 고동색의 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 10% 수성 Na₂S₂O₃로 켄칭하고, 물로 희석하였다. 혼합물을 EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물, 포화 LiCl, 및 포화 NaCl로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 2.0 g(99%)의 3-요오도-1H-티에노[3,2-c]피라졸을 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 5

3-요오도-1-메틸-1H-티에노[3,2-c]피라졸

0℃에서 THF(7 ml) 중 3-요오도-1H-티에노[3,2-c]피라졸(500 mg, 2.0 mmol)의 용액에 KOt-Bu(314 mg, 2.8 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 요오도메탄(0.17 ml, 2.8 mmol)을 첨가하였다. 0℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 실온으로 가온시키고, 1.5 시간 동안 교반하였다. 반응을 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 20% 내지 50% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 292 mg(55%)의 3-요오도-1-메틸-1H-티에노[3,2-c]피라졸을 점성의 연갈색 오일로서 수득하였다.

또한 141 mg(27%)의 3-요오도-2-메틸-2H-티에노[3,2-c]피라졸을 회백색 고체로서 단리하였다.

단계 6

1-메틸-3-트라이부틸스태난일-1H-티에노[3,2-c]피라졸

-15℃에서 THF(6 mL) 중 3-요오도-1-메틸-1H-티에노[3,2-c]피라졸(290 mg, 1.10 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 0.66 mL, 1.32 mmol)를 천천히 첨가하였다. 밝은 황색 이종 반응 혼합물을 -15℃에서 20 분 동안 교반시킨 후, 트라이부틸클로로스태난(0.36 mL, 1.32 mmol)을 적가하였다. -15℃에서 20 분 동안, 그 후 실온에서 2 시간 동안 교반을 계속 하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 10% 내지 20% EtOAc/헵탄(0.5% Et₃N)을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 298 mg(63%)의 1-메틸-3-트라이부틸스태난일-1H-티에노[3,2-c]피라졸을 담황색 오일로서 수득하였다.

단계 7

2-(1-메틸-1H-티에노[3,2-c]피라졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

DMF(1.2 mL) 중 1-메틸-3-트라이부틸스태난일-1H-티에노[3,2-c]피라졸(111 mg, 0.26 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(120 mg, 0.24 mmol)의 용액에 Pd(PPh₃)₄(14 mg, 0.012 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(9 mg, 0.05 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼징한 후, 80℃에서 1.5 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시키고, 포화 NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 포화 LiCl 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 131 mg(98%)의 2-(1-메틸-1H-티에노[3,2-c]피라졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 8

2-(1-메틸-1H-티에노[3,2-c]피라졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(1-메틸-1H-티에노[3,2-c]피라졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(131 mg, 0.23 mmol)의 용액에 TFA(0.75 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 10:90:0.5 MeOH/CH₂Cl₂/NH₄OH(3 mL) 중에 재용해시키고, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을, 0% 내지 10% MeOH/CH₂Cl₂를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 83 mg(83%)의 2-(1-메틸-1H-티에노[3,2-c]피라졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 100.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(1-시아노-사이클로펜틸)-에틸]-아마이드

단계 1

(S)-2-메틸-프로판-2-설핀산(E)-에틸리덴아마이드

플라스크에서 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 아마이드(1.50 g, 12.4 mmol)를 CH₂Cl₂(6 mL) 중에 용해시켰다. 아세트알데하이드(6.25 mL, 111 mmol), MgSO₄ (4.47 g, 37.1 mmol) 및 피리디늄 토실레이트(156 mg, 0.62 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하고, 여과하고, 농축시켜 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산(E)-에틸리덴아마이드를 담적색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

(S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(R)-1-(1-시아노-사이클로펜틸)-에틸]-아마이드

플라스크에서, 사이클로펜탄카보나이트릴(3.53 g, 37.1 mmol)을 THF(40 mL) 중에 용해시키고, -78℃에서 냉각시켰다. LiHMDS(THF 중 1.0 M, 41 mL, 41 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 -78℃에서 교반하였다. THF(10 mL) 중 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산(E)-에틸리덴아마이드(단계 1로부터의 조질물, 1.82 g, 12.4 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 2 시간 동안 교반시킨 후 실온으로 밤새 가온시켰다. 반응 혼합물을 포화 수성 암모늄 클로라이드로 켄칭하고, EtOAc로써 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 SiO₂ 크로마토그래피(50-100% EtOAc/헵탄)로 정제하여 1.96 g(65%)의 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(R)-1-(1-시아노-사이클로펜틸)-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

1-((R)-1-아미노-에틸)-사이클로펜탄카보나이트릴 하이드로클로라이드

(S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(R)-1-(1-시아노-사이클로펜틸)-에틸]-아마이드(1.96 g, 8.07 mmol)를 MeOH(16 mL) 중에 용해시키고, HCl(1,4-다이옥산 중 4.0 M, 4.0 mL, 16.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시킨 후, 농축시켜 1-((R)-1-아미노-에틸)-사이클로펜탄카보나이트릴 하이드로클로라이드를 회백색 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(1-시아노-사이클로펜틸)-에틸]-아마이드

플라스크에서 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(120 mg, 0.27 mmol), 1-((R)-1-아미노-에틸)-사이클로펜탄카보나이트릴 하이드로클로라이드(48 mg, 0.27 mmol), EDC(120 mg, 0.63 mmol) 및 HOBt(106 g, 0.63 mmol)를 합쳤다. DMF(3 mL)를 첨가한 후, i-Pr₂NEt(0.28 mL, 1.63 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc로써 추출하였다. 유기물을 10% 시트르산, 포화 NaHCO₃, 포화 LiCl, 및 포화 NaCl으로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 SiO₂ 크로마토그래피(20-100% EtOAc/헵탄)로 정제하여 140 mg(92%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(1-시아노-사이클로펜틸)-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(1-시아노-사이클로펜틸)-에틸]-아마이드

CH₂Cl₂(2 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(1-시아노-사이클로펜틸)-에틸]-아마이드(140 mg, 0.25 mmol)의 용액에 TFA(0.75 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반시킨 후 농축시켰다. 잔류물을 10:90:0.5 MeOH/CH₂Cl₂/NH₄OH(3 mL) 중에 재용해시키고, 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을, 0% 내지 5% MeOH/EtOAc를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 92 mg(86%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(1-시아노-사이클로펜틸)-에틸]-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 101.

2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

단계 1

4,6-다이플루오로-3-요오도-1H-인다졸

실온에서 DMF(60 ml) 중 4,6-다이플루오로-1H-인다졸(1.16 g, 7.53 mmol)의 용액에 칼륨 하이드록사이드(1.27 g, 22.6 mmol) 및 요오드(2.87 g, 11.3 mmol)를 첨가하였다. 고동색의 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반시킨 후, 10% 수성 Na₂S₂O₃로 켄칭하고, 물로 희석하였다. 혼합물을 EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물, 포화 LiCl, 및 포화 NaCl로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 2.18 g의 4,6-다이플루오로-3-요오도-1H-인다졸을 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 2

4,6-다이플루오로-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸

0℃에서 THF(45 mL) 중 4,6-다이플루오로-3-요오도-1H-인다졸(2.11 g, 7.53 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 362 mg, 9.04 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10 분 동안 교반시킨 후, -10℃로 냉각시키고, 이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 4.52 mL, 9.04 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 트라이부틸클로로스태난(2.66 mL, 9.8 mmol)을 적가하였다. -10℃에서 20 분 동안, 그 후 실온에서 3 시간 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH₄Cl로 켄칭한 후, 물로 희석하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 10% 내지 20% EtOAc/헵탄(0.5% Et₃N)을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 1.94 g(58%)의 4,6-다이플루오로-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸을 점성의 담황색 오일로서 수득하였다.

단계 3

2-(4,6-다이플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

환저 플라스크에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(1.56 g, 4.38 mmol) 및 4,6-다이플루오로-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸(1.94 g, 4.38 mmol)을 DMF(40 mL) 중에 용해시키고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(253 mg, 0.22 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(167 mg, 0.88 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼징하고, 실온에서 4 시간 동안 교반시킨 후, 80℃에서 1 시간 동안 가열하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, 포화 NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 포화 LiCl 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 50% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 1.89 g의 2-(4,6-다이플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 갈색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

0℃에서 DMF(9 ml) 중 2-(4,6-다이플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(890 mg, 2.1 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 279 mg, 2.49 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 10 분 동안 교반시킨 후, 요오도메탄(0.18 ml, 2.9 mmol)을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 실온에서 30분 동안. 반응을 포화 NH₄Cl로 켄칭하고, 물로 희석하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 포화 LiCl 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 20% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 226 mg(22%)의 2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

0℃에서 1,4-다이옥산(15 ml) 및 물(3 ml) 중 2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(226 mg, 0.51 mmol)의 용액에 설팜산(297 mg, 3.06 mmol)을 첨가하였다. 그 후, 물(12 ml) 중 나트륨 클로라이트(80%, 75 mg, 0.66 mmol) 및 칼륨 다이하이드로젠 포스페이트(834 mg, 6.13 mmol)의 용액을 약 15분에 걸쳐 적하 펀넬을 통해 첨가하였다. 첨가 완료 후, 빙욕을 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기 층들을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 230 mg(98%)의 2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 연황색 분말로서 수득하였다.

단계 6

2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

DMF 중 2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(75 mg, 0.16 mmol), HOBt(63 mg, 0.38 mmol) 및 EDC(72 mg, 0.38 mmol)의 용액에 아이소프로필아민(84 μL, 0.98 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반한 후, 추가의 HOBt, EDC, 및 아이소프로필아민을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 다이아이소프로필에틸아민(170 μL, 0.98 mmol)을 첨가하였다. 반응을 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기 층들을 10% 시트르산으로 세척하고, 포화 NaHCO₃, 포화 LiCl, 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 20% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하여 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 30 mg(37%)의 2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 7

2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

CH₂Cl₂(1.5 mL) 중 2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(30 mg, 0.06 mmol)의 용액에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반시킨 후 농축시켰다. 잔류물을 10:90:0.5 MeOH/CH₂Cl₂/NH₄OH(3 mL) 중에 재용해시키고, 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을, 0% 내지 5% MeOH/EtOAc를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 18 mg(82%)의 2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다. MS (M+Na)⁺ = 393;

실시예 102.

2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

단계 1

6-플루오로-3-요오도-1H-인다졸

실온에서 DMF(150 ml) 중 6-플루오로-1H-인다졸(5.50 g, 40.4 mmol)의 용액에 칼륨 하이드록사이드(6.8 g, 121 mmol) 및 요오드(15.4 g, 60.6 mmol)를 첨가하였다. 고동색의 반응 혼합물을 실온에서 8 시간 동안 교반한 후, 10% 수성 Na₂S₂O₃로 켄칭하고, 물로 희석하였다. 혼합물을 EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물, 포화 LiCl, 및 포화 NaCl로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 8.6 g(81%)의 6-플루오로-3-요오도-1H-인다졸을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

6-플루오로-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸

0℃에서 THF(200 mL) 중 6-플루오로-3-요오도-1H-인다졸(8.6 g, 32.8 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 1.58 g, 39.4 mmol)를 천천히 분획 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10 분 동안 교반한 후, -10℃로 냉각시키고, 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 19.7 mL, 39.4 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 추가의 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 8.2 mL, 16.4 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 트라이부틸클로로스태난(11.6 mL, 42.7 mmol)을 천천히 첨가하였다. -10℃에서 20 분 동안, 그 후 실온에서 3 시간 동안 교반을 계속 하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH₄Cl을 켄칭한 후, 물로 희석하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 10% 내지 20% EtOAc/헵탄(0.5% Et₃N)을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 6.53 g(47%)의 6-플루오로-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸을 점성의 연갈색 오일로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

환저 플라스크에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(5.47 g, 15.4 mmol) 및 6-플루오로-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸(6.53 g, 15.4 mmol)을 DMF(140 mL) 중에 용해시키고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(888 mg, 0.76 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(585 mg, 3.07 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼징한 후, 80℃에서 1 시간 동안 가열하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, 포화 NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 포화 LiCl 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을 EtOAc로부터 재결정하여 3.74 g의 백색 고체를 수득하였다. 모액을 50% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 추가의 1.75 g 백색 고체를 수득하였다. 전체 수율은 5.49 g(87%)의 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

초음파 바이알에서 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(300 mg, 0.73 mmol)를 DMF(5 ml) 중에 용해시키고, 세슘 카보네이트(714 mg, 2.19 mmol) 및 3-요오도옥세탄(200 mg, 1.08 mmol)을 첨가하였다. 그 바이알을 밀봉시키고, 100℃에서 초음파 조사 하에 2 시간 동안 가열하였다. 반응을 냉각시키고, 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 포화 LiCl 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 20% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 295 mg(86%)의 2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

0℃에서 1,4-다이옥산(20 ml) 및 물(4 ml) 중 2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(293 mg, 0.63 mmol)의 용액에 설팜산(365 mg, 3.76 mmol)을 첨가하였다. 그 후, 물(16 ml) 중 나트륨 클로라이트(80%, 92 mg, 0.82 mmol) 및 칼륨 다이하이드로젠 포스페이트(1.02 g, 7.52 mmol)의 용액을 약 15 분에 걸쳐 첨가하였다. 첨가 완료 후, 빙욕을 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. THF(20 ml)를 첨가하고, 2시간 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 합친 유기 층들을 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 340 mg의 2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 6

2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

DMF(3 ml) 중 2-(4,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(115 mg, 0.23 mmol), HOBt(92 mg, 0.55 mmol) 및 EDC(105 mg, 0.55 mmol)의 용액에 아이소프로필아민(41 μL, 0.48 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.17 ml, 0.95 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기 층들을 10% 시트르산으로 세척하고, 포화 NaHCO₃, 포화 LiCl, 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 20% 내지 100% EtOAc/헵탄을 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 98 mg(78%)의 2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 7

2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

CH₂Cl₂(1.5 mL) 중 2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(98 mg, 0.18 mmol)의 용액에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 10:90:0.5 MeOH/CH₂Cl₂/NH₄OH(3 mL) 중에 재용해시키고, 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 물과 10%MeOH/CH₂Cl₂ 사이에 분배시켰다. 수성 층을 10%MeOH/CH₂Cl₂(3x)로 추출하였다. 합친 유기물을 농축시키고, 잔류물을, 0% 내지 5% MeOH/CH₂Cl₂(0.5%NH₄OH)를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 30 mg(41%)의 2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 103.

2-(6-플루오로-1-옥세탄-3-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 102, 단계 6 및 7에 개시된 절차에 따라, 단계 6의 아이소프로필아민 대신에 (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 104.

2-(1-아제티딘-3-일-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

단계 1

2-[1-(1-벤즈하이드릴-아제티딘-3-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

초음파 바이알에서 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(300 mg, 0.73 mmol)를 DMF(6 ml) 중에 용해시키고, 세슘 카보네이트(713 mg, 2.19 mmol) 및 메탄설폰산 1-벤즈하이드릴-아제티딘-3-일 에스터(347 mg, 1.09 mmol)를 첨가하였다. 그 바이알을 밀봉시키고, 3 시간 동안 100℃에서 초음파 반응기에서 가열하였다. 반응을 냉각시키고, 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 잔류물을, 20% 내지 30% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 176 mg(38%)의 2-[1-(1-벤즈하이드릴-아제티딘-3-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 오렌지색 거품으로서 수득하였다.

단계 2

2-[1-(1-벤즈하이드릴-아제티딘-3-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

0℃에서 1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(2 mL) 중 2-[1-(1-벤즈하이드릴-아제티딘-3-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(170 mg, 0.27 mmol)의 용액에 설팜산(157 mg, 1.61 mmol)을 첨가하였다. 그 후, 물(4 mL) 중 NaClO₂(43 mg, 0.37 mmol) 및 KH₂PO₄(439 mg, 3.22 mmol)의 용액을 5분에 걸쳐 적가하였다. 빙욕을 제거하고, 황색의 흐린 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 물로 희석하고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기 층들을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 페트롤륨 에터로 마쇄하여 45 mg(26%)의 2-[1-(1-벤즈하이드릴-아제티딘-3-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 연황색 고체로서 단리하였다.

단계 3

2-[1-(1-벤즈하이드릴-아제티딘-3-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

DMF(2 mL) 중 2-[1-(1-벤즈하이드릴-아제티딘-3-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(130 mg, 0.20 mmol)의 용액에 HATU(84 mg, 0.22 mmol) 및 아이소프로필아민(86 μL, 1.00 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(2x)로 추출하였다. 합친 유기물을 물(3x) 및 염수로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을, 50% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 74 mg(54%)의 2-[1-(1-벤즈하이드릴-아제티딘-3-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 회백색 거품형 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(1-아제티딘-3-일-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

환저 플라스크에서 암모늄 폼에이트(135 mg, 2.15 mmol)를 MeOH(1.5 mL) 중에 용해시켰다. 이 용액을 THF(1.5 mL) 중 2-[1-(1-벤즈하이드릴-아제티딘-3-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(74 mg, 0.107 mmol)의 용액에 첨가하고, 이는 백색 침전물의 형성을 유발하였다. 이 슬러리를 피펫을 통해 MeOH(1 mL) 중 탄소 상 10% 팔라듐(습윤, 23 mg)을 함유하는 압력 튜브로 이동시켰다. 그 튜브를 밀봉시키고, 50℃에서 4 시간 동안 가열한 후, 실온으로 밤새 냉각시켰다. 혼합물을 셀라이트 상에서 여과시키고, CH₂Cl₂로 세정하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 SiO₂에서 흡수시키고, 0% 내지 10% MeOH/CH₂Cl₂(0.5% NH₄OH)로써 크로마토그래피하여 38 mg(68%)의 2-(1-아제티딘-3-일-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 담황색 거품형 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-(1-아제티딘-3-일-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

CH₂Cl₂(1 mL) 중 2-(1-아제티딘-3-일-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(36 mg, 0.69 mmol)의 용액에 TFA(0.5 mL, 6.5 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂(1 mL) 중에 재용해시키고, 에틸렌 다이아민(0.2 mL, 3.00 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반시킨 후, 물로 켄칭시키고, 5% MeOH/CH₂Cl₂(3x)로 추출하였다. 합친 유기 층들을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc로 마쇄하여 17 mg(63%)의 2-(1-아제티딘-3-일-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 담황색 분말로서 수득하였다.

실시예 105.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메탄설폰일-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메탄설폰일-1-메틸-에틸)-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.175 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(84 mg, 0.26 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.076 ml, 0.44 mmol)을 아세토나이트릴(1.75 ml) 중에 용해시켰다. (R)-1-(메틸설폰일)프로판-2-아민 하이드로클로라이드(36 mg, 0.21 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하고, 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제(에틸 아세테이트/헥산)하여 65 mg(64%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메탄설폰일-1-메틸-에틸)-아마이드를 수득하였다. (M+H)⁺ = 578.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메탄설폰일-1-메틸-에틸)-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메탄설폰일-1-메틸-에틸)-아마이드(65 mg, 0.113 mmol)를 다이클로로메탄(0.8 ml) 중에 용해시킨 후, 빙욕에서 교반하였다. 트라이플루오로아세트산(0.4 ml)을 천천히 첨가하고, 빙욕을 제거하였다. 반응을 실온에서 3 시간 동안 교반시킨 후, 빙욕에서 냉각시켰다. 나트륨 바이카보네이트 용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 무수 에탄올(7 ml) 중에 용해시키고, 나트륨 아세테이트(185 mg, 2.25 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 20 시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응을 냉각시키고, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 증발시켜 잔류물을 수득하였다. 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)로 정제한 후, 18.6 mg(37%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메탄설폰일-1-메틸-에틸)-아마이드를 수득하였다.

실시예 106.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 사이클로펜틸아마이드

실시예 105에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (R)-1-(메틸설폰일)프로판-2-아민 하이드로클로라이드 대신 사이클로펜틸아민을 사용하여 제조하였다.

실시예 107.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(테트라하이드로퓨란-3-일)-아마이드

실시예 105에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (R)-1-(메틸설폰일)프로판-2-아민 하이드로클로라이드 대신 테트라하이드로퓨란-3-일아민 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 108.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.175 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(84 mg, 0.26 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.076 ml, 0.44 mmol)을 아세토나이트릴(1.75 ml) 중에 용해시켰다. 아이소프로필아민(0.018 ml, 0.21 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하고, 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 45 mg(52%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 수득하였다. (M+H)⁺ = 500.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(45 mg, 0.09 mmol)를 다이클로로메탄(0.9 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.3 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 반응을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(2 ml) 중에 용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.36 ml, 5.4 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과해 내고, 물로 세정하고, 고진공 하에 건조시켜 21 mg(81%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 수득하였다.

실시예 109.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 에틸아마이드

실시예 108에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 아이소프로필아민 대신 에틸아민을 사용하여 제조하였다.

실시예 110.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 사이클로헥실아마이드

실시예 108에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 아이소프로필아민 대신 사이클로헥실아민을 사용하여 제조하였다.

실시예 111.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(테트라하이드로-파이란-3-일)-아마이드

실시예 108에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 아이소프로필아민 대신 테트라하이드로-2H-파이란-3-일아민 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 112.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(테트라하이드로-파이란-4-일)-아마이드

실시예 108에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 아이소프로필아민 대신 테트라하이드로-2H-파이란-4-일아민 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 113.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1,1-다이옥소-테트라하이드로-티오펜-3-일)-아마이드

실시예 108에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 아이소프로필아민 대신 1,1-다이옥소-테트라하이드로-티오펜-3-일아민(WO2008033562 A2에 기재된 바와 같이 제조됨)을 사용하여 제조하였다.

실시예 114.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-2,2-다이메틸-프로필)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-2,2-다이메틸-프로필)-아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.18 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(87 mg, 0.27 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.16 ml, 0.91 mmol)을 아세토나이트릴(1.8 ml) 중에 용해시켰다. 3-아미노-2,2-다이메틸프로판-1-올(22 mg, 0.22 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하고, 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 85 mg(89%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-2,2-다이메틸-프로필)-아마이드를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 549.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-2,2-다이메틸-프로필)-아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-2,2-다이메틸-프로필)-아마이드(82 mg, 0.156 mmol)를 다이클로로메탄(1.1 ml) 중에 현탁시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.5 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(1.6 ml) 중에 용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.63 ml, 9.3 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하고, 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)로 정제하여 39 mg(63%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-2,2-다이메틸-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 115.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2,2-다이메틸-프로필)-아마이드

실시예 114에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 3-아미노-2,2-다이메틸프로판-1-올 대신에 2,2-다이메틸프로필아민을 사용하여 제조하였다.

실시예 116.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소부틸-아마이드

실시예 114에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 3-아미노-2,2-다이메틸프로판-1-올 대신에 아이소부틸아민을 사용하여 제조하였다.

실시예 117.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 사이클로프로필메틸 -아마이드

실시예 114에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 3-아미노-2,2-다이메틸프로판-1-올 대신에 사이클로프로필메틸아민을 사용하여 제조하였다.

실시예 118.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

[(R)-2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

(R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-프로피온산(1.0 g, 5.3 mmol), 1-(3-(다이메틸아미노)-프로필)-3-에틸카보다이이미드(2.33 g, 12.2 mmol) 및 하이드록시벤조트라이아졸(1.64 g, 12.2 mmol)을 DMF(50 ml) 중에 용해시켰다. (S)-3-플루오로피롤리딘 하이드로클로라이드(1.66 g, 13.2 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(2.95 ml, 16.9 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트를 첨가하고, 그 용액을 10% 시트르산 용액으로 3회 세척하였다. 유기 층을 나트륨 바이카보네이트 용액으로 세척하고, 그 후 이를 에틸 아세테이트로 4회 역추출하였다. 그 후 합친 유기 층들을 리튬 클로라이드 용액, 나트륨 클로라이드 용액으로 추가로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 그 용액을 농축시켜 1.3 g(94%)의 [(R)-2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다.

단계 2

(R)-2-아미노-1-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-프로판-1-온 트라이플루오로아세테이트

[(R)-2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터(43 mg, 0.127 mmol)를 다이클로로메탄(1.6 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.8 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 증발시키고, 고진공 하에 건조시켜 (R)-2-아미노-1-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-프로판-1-온 트라이플루오로아세테이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

(R)-2-아미노-1-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-프로판-1-온 트라이플루오로아세테이트(단계 2로부터의 조질물)를 아세토나이트릴(4 ml) 중에 용해시키고, 그 후 여기에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(60 mg, 0.13 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(63 mg, 0.197 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.092 ml, 0.52 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 한번 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제하여 55 mg(70%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 수득하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(54 mg, 0.09 mmol)를 다이클로로메탄(0.9 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.45 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2.5 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(0.9 ml) 중에 현탁시켰다. 에틸렌다이아민(0.36 ml, 5.4 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과해 내고, 물로 세정하고, 고진공 하에 건조시켜 24 mg(58%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 수득하였다.

실시예 119.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 118에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-3-플루오로피롤리딘 하이드로클로라이드 대신에 (R)-3-플루오로-피롤리딘 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 120.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 118에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-3-플루오로피롤리딘 하이드로클로라이드 대신에 3-플루오로-아제티딘 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 121.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

단계 1

[(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

단계 1

(R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-프로피온산(1.0 g, 5.3 mmol), 1-(3-(다이메틸아미노)-프로필)-3-에틸카보다이이미드(2.33 g, 12.2 mmol) 및 하이드록시벤조트라이아졸(1.64 g, 12.2 mmol)을 DMF(50 ml) 중에 용해시켰다. (R)-3-플루오로피롤리딘 하이드로클로라이드(1.66 g, 13.2 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(2.95 ml, 16.9 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트를 첨가하고, 그 용액을 10% 시트르산 용액으로 3회 세척하였다. 유기 층을 나트륨 바이카보네이트 용액으로 세척하고, 그 후 이를 에틸 아세테이트로 4회 역추출하였다. 그 후 합친 유기 층들을 리튬 클로라이드 용액, 나트륨 클로라이드 용액으로 추가로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 그 용액을 농축시켜 1.3 g(94%)의 [(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다.

단계 2

[(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

[(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터(50 mg, 0.19 mmol)를 다이에틸 에터(0.8 ml) 중에 용해시키고, 얼음/물 욕에서 교반하였다. 리튬 알루미늄 하이드라이드(다이에틸 에터 중 1.0 M, 0.38 ml, 0.38 mmol)를 적가하였다. 반응을 0℃에서 교반하고, TLC로 모니터링하였다. 반응이 완료된 것으로 판정 시에, 물(15 μL), 그 후 10% 나트륨 하이드록사이드 용액(23 μL), 그 후 물(45 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시킨 후, 여과시켰다. 여액을 증발시켜 47 mg(99%)의 [(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다.

단계 3

(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸아민 비스트라이플루오로아세테이트

[(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터(48 mg, 0.185 mmol)를 다이클로르메탄(1.2 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.74 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 증발시켜 (R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸아민 비스트라이플루오로아세테이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸아민 비스트라이플루오로아세테이트(단계 3로부터의 조질물)를 아세토나이트릴(4 ml) 중에 용해시키고, 그 후 여기에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(65 mg, 0.14 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(68 mg, 0.21 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.12 ml, 0.71 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 한번 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 65 mg(78%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드를 수득하였다. (M+H)⁺ = 586.

단계 5

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드(65 mg, 0.11 mmol)를 다이클로로메탄(0.7 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.4 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(1.1 ml) 중에 현탁시켰다. 에틸렌다이아민(0.45 ml, 6.65 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 33 mg(65%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((R)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드를 수득하였다.

실시예 122.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

실시예 121에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (R)-3-플루오로피롤리딘 하이드로클로라이드 대신에 (S)-3-플루오로피롤리딘 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 123.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

실시예 121에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (R)-3-플루오로피롤리딘 하이드로클로라이드 대신에 3-플루오로-아제티딘 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 124.

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸

4-클로로-2,6-다이플루오로-벤즈알데하이드(15 g, 85 mmol)를 1,2-다이메톡시에탄(170 ml) 중에 용해시켰다. 그 후 O-메틸-하이드록실아민 하이드로클로라이드(7.1 g, 85 mmol) 및 칼륨 카보네이트(12.9 g, 93.5 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 35℃에서 24 시간 동안 교반하였다. 반응을 여과하고, 다이클로로메탄으로 세정하고, 증발시키고, DMF(170 ml) 중에 재용해시켰다. 하이드라진(2.9 ml 93.5 mmol)을 첨가하고, 반응을 100℃에서 1 시간 동안 교반시켰다. 냉각 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 물 및 나트륨 클로라이드 용액으로 세척한 후, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜 고체를 수득하고, 이를 실리카 겔 크로마토그래피(다이에틸 에터/헥산)로 정제하여 7 g(49%)의 6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸을 수득하였다. (M+H)⁺ = 171.

단계 2

6-클로로-4-플루오로-3-요오도-1H-인다졸

6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸(7.6 g, 44.6 mmol)을 DMF(110 ml) 중에 용해시켰다. 요오드(22.6 g, 89.1 mmol)를 첨가하고, 이어서 칼륨 하이드록사이드(9.5 g, 169 mmol)를 첨가하였다. 반응을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 물, 1 M 나트륨 티오설페이트 용액 및 다이에틸 에터를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에터로 한번 더 추출하였다. 유기 층들을 물 및 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 그 후 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜 11.16 g(85%)의 6-클로로-4-플루오로-3-요오도-1H-인다졸을 연갈색 고체로서 수득하였다. (M-H)^- = 295.

단계 3

6-클로로-4-플루오로-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸

6-클로로-4-플루오로-3-요오도-1H-인다졸(10.1 g, 34.1 mmol)을 THF(170 ml) 중에 용해시켰다. 반응 플라스크를 수욕에서 교반하고, 나트륨 하이드라이드(60% 분산액, 1.64 g, 40.9mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 15 분 동안 교반한 후, 얼음/염 욕에서 -15℃로 냉각시켰다. 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 20.6 ml, 41.2 mmol)를 적가하였다. 40 분 후, 트라이부틸주석 클로라이드(11.6 ml, 42.6 mmol)를 천천히 첨가하고, 반응을 실온으로 가온시켰다. 추가 2 시간 교반 후, 암모늄 클로라이드 용액 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 한번 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜 6-클로로-4-플루오로-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸을 오일로서 수득하고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 4

2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(7.6 g, 18.6 mmol) 및 6-클로로-4-플루오로-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸(단계 3로부터의 조질물)을 DMF(180 ml) 중에 용해시키고, Ar 가스로 퍼징하였다. 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(1.07 g, 0.93 mmol), 그 후 구리 요오다이드(707 mg, 3.71 mmol)를 첨가하고, 플라스크를 막고, 90℃ 오일 욕에서 20 시간 동안 교반하였다. 반응을 냉각시키고, 물, 에틸 아세테이트 및 나트륨 바이카보네이트 용액을 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 물 및 나트륨 클로라이드 용액으로 세척한 후, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하고, 이어서 다이에틸 에터/헥산으로 마쇄하여 3.9 g(47%)의 2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 수득하였다. (M+H)⁺ = 446.

단계 5

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(0.5 g, 1.12 mmol)를 DMF(5.6 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 나트륨 하이드라이드(60% 분산액, 67 mg, 1.68 mmol)를 조심스럽게 첨가하였다. 혼합물을 10 분 동안 교반한 후, 요오도메탄(84 μL, 1.35 mmol)을 첨가하고, 반응을 실온으로 가온시키고, 18 시간 동안 교반하였다. 물 및 에틸 아세테이트를 반응에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 물 및 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후 남아 있는 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/다이클로로메탄)으로 정제하여 257 mg(50%)의 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 수득하였다. (M+H)⁺ = 460.

단계 6

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(255 mg, 0.55 mmol)를 THF(8.3 ml) 및 물(2.8 ml) 중에 용해시켰다. 설팜산(517 mg, 5.3 mmol)을 첨가하였다. 반응 플라스크를 얼음/물 욕에서 냉각시키고, 물(8 ml) 중 나트륨 클로라이트(104 mg, 1.15 mmol) 및 칼륨 포스페이트 모노베이직(1.45 g, 10.6 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 1 시간 후 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물에 부었다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 한번 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 물 및 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜 270 mg의 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 연황색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 476.

단계 7

1-((R)-2-아미노-프로피오닐)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트

[(R)-2-(3-시아노아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터(47 mg, 0.185 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.5 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 증발시키고, 고진공 하에 건조시켜 1-((R)-2-아미노-프로피오닐)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 8

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

1-((R)-2-아미노-프로피오닐)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트(단계 7로부터의 조질물)를 아세토나이트릴(2 ml) 중에 용해시키고, 그 후 여기에 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.168 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(81 mg, 0.252 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.15 ml, 0.84 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 한번 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 84 mg(82%)의 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 633.

단계 9

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(84 mg, 0.137 mmol)를 다이클로로메탄(2 ml) 중에 현탁시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.9 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔류물을 다이클로로메탄(1.4 ml) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.55 ml, 8.25 mmol)을 첨가하였다. 반응을 8 시간 교반하였다. 물을 첨가하여 흐린 혼합물을 수득하고, 이를 에틸 아세테이트로 8회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과해 내고, 10% 메탄올/다이클로로메탄으로 세정하고, 증발시켜 잔류물을 수득하였다. 이것을 수성 층에 나타난 고체와 합쳤다. 합친 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 32 mg(48%)의 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 수득하였다.

실시예 125.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-(3-시아노-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

단계 1

[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일]-(2-메틸-아지리딘-1-일)-메탄온

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.218 mmol)을 다이클로로메탄(2.2 ml) 중에 현탁시켰다. 4-다이메틸아미노피리딘(5.3 mg, 0.044 mmol), N,N-다이아이소프로필에틸아민(76 μL, 0.44 mmol), 그 후 1-(3-(다이메틸아미노)-프로필)-3-에틸카보다이이미드(84 mg, 0.44 mmol)를 첨가하였다. 그 용액을 5 분 동안 교반한 후, 빙욕에서 냉각시켰다. 2-메틸아지리딘(23 μL, 0.33 mmol)을 첨가하고, 반응을 실온으로 가온시켰다. TLC에 의해 완료된 것으로 판정될 때까지 교반을 계속한 후, 물, 묽은 HCl 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 한번 더 추출하고, 합친 유기 층들을 나트륨 바이카보네이트 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제하여 70 mg(64%)의 [2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일]-(2-메틸-아지리딘-1-일)-메탄온을 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-(3-시아노-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일]-(2-메틸-아지리딘-1-일)-메탄온(70 mg, 0.14 mmol)를 1:1의 THF: 아세토나이트릴(1.5 ml) 중에 용해시켰다. 3-시아노피롤리딘 하이드로클로라이드(28 mg, 0.21 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(37 μL, 0.21 mmol)을 첨가하고, 반응을 120℃에서 2 시간 동안 초음파 반응기에서 가열하였다. 추가의 0.5 당량의 3-시아노피롤리딘 하이드로클로라이드 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민을 첨가하고, 가열을 2회 더 반복하였다. 그 후 물 및 에틸 아세테이트를 냉각된 용액에 첨가하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하고, 합친 유기물을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시킨 후 조질 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/다이클로로메탄)으로 정제하여 21 mg(25%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-(3-시아노-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드를 수득하였다. (M+H)⁺ = 593.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-(3-시아노-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-(3-시아노-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드(37 mg, 0.062 mmol)를 다이클로로메탄(0.8 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.4 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(1.2 ml) 중에 용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.25 ml, 3.7 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 15 mg(52%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-(3-시아노-피롤리딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드를 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 463; mp = 206-209℃.

실시예 126.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

단계 1

(R)-2-메틸-1-(4-나이트로-벤젠설폰일)-아지리딘

4-나이트로벤젠-1-설폰일 클로라이드(6.9 g, 31 mmol)를 아세토나이트릴(8 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 교반하였다. 피리딘(5 ml) 중 (R)-2-아미노프로판-1-올(1 g, 13.3 mmol)의 용액을 천천히 첨가하고, 반응을 2 시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트(25 ml) 및 물(10 ml)을 첨가하고, 반응을 10 분 동안 교반하였다. 층들을 분리시키고, 유기 층을 1M 시트르산 용액으로 2회 세척하고, 물로 1회 세척하였다. 유기 층을 10℃로 냉각시키고, 7 ml의 물을 첨가한 후, N,N-다이아이소프로필에틸아민(3.7 ml, 21.3 mmol)을 적가하였다. 1 시간 동안 교반한 후 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합친 유기물을 1M 시트르산 용액으로 2회 및 물로 2회 세척하였다. 그 후 아이소프로판올(70 ml)을 첨가하고, 용매를 천천히 증발시켜 대부분의 아이소프로판올을 남겼다. 아이소프로판올로부터의 결정화 후에 (R)-2-메틸-1-(4-나이트로-벤젠설폰일)-아지리딘 2.2 g(69%)을 수득하였다.

단계 2

N-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-4-나이트로-벤젠설폰아마이드

(R)-2-메틸-1-(4-나이트로-벤젠설폰일)-아지리딘(0.2 g, 0.83 mmol)를 THF(1 ml) 중에 용해시켰다. 3-시아노아제티디닌 하이드로클로라이드(117 mg, 0.99 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.2 ml, 1.16 mmol)을 첨가하고, 반응을 64 시간 동안 교반하였다. 그 후 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하고, 합친 유기물을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제하여 133 mg(49%)의 N-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-4-나이트로-벤젠설폰아마이드를 수득하였다. (M+H)⁺ = 325.

단계 3

N-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-4-나이트로-벤젠설폰아마이드

N-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-4-나이트로-벤젠설폰아마이드(133 mg, 0.41 mmol)를 DMF(2 ml) 중에 용해시켰다. 다이-3급-부틸다이카보네이트(98 mg, 0.45 mmol) 및 4-다이메틸아미노피리딘(55 mg, 0.45 mmol)을 첨가하고, 반응을 6 시간 동안 교반하였다. 그 후 티오펜올(63 μL, 0.615 mmol) 및 칼륨 카보네이트(170 mg, 1.23 mmol)를 첨가하고, 반응을 16 시간 동안 0℃에서 정치시켰다. 물, 나트륨 하이드록사이드 용액 및 에틸 아세테이트를 이후에 첨가하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 한번 더 추출하고, 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제하여 75 mg(76%)의 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다. (M+H)⁺ = 240.

단계 4

1-((R)-2-아미노-프로필)-아제티딘-3-카보나이트릴 비스트라이플루오로아세테이트

[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터(35 mg, 0.146 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.45 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 증발시키고, 고진공 하에 건조시켜 1-((R)-2-아미노-프로필)-아제티딘-3-카보나이트릴 비스트라이플루오로아세테이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 5

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

1-((R)-2-아미노-프로필)-아제티딘-3-카보나이트릴 비스트라이플루오로아세테이트(단계 4로부터의 조질물)를 아세토나이트릴(1.5 ml) 중에 용해시키고, 그 후 여기에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(60 mg, 0.132 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(70 mg, 0.22 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.13 ml, 0.73 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 한번 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 58 mg(64%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드를 수득하였다. (M+H)⁺ = 579.

단계 6

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드(58 mg, 0.10 mmol)를 다이클로로메탄(1.4 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.6 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(1 ml) 중에 용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.40 ml, 6.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 29 mg(64%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-에틸]-아마이드를 수득하였다.

실시예 127.

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

단계 1

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(59 mg, 0.124 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(60 mg, 0.186 mmol), N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.11 ml, 0.62 mmol) 및 아이소프로필아민(11 μL, 0.124 mmol)을 아세토나이트릴(1.3 ml) 중에 함께 첨가하였다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제하여 46 mg(72%)의 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 수득하였다. (M+H)⁺ = 517.

단계 2

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(46 mg, 0.09 mmol)를 다이클로로메탄(1.2 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.6 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(1 ml) 중에 용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.36 ml, 5.3 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과해 내고, 물, 다이에틸 에터 및 에틸 아세테이트로 세정하고, 한쪽에 치워 놓았다. 유기 여액을 분리시키고, 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 상기에서 수집된 침전물과 합쳤다. 고체를 고진공 하에 건조시켜 34 mg(98%)의 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 수득하였다.

실시예 128.

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(100 mg, 0.22 mmol)를 DMF(0.5 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 나트륨 하이드라이드(60% 분산액, 22 mg, 0.56 mmol)를 조심스럽게 첨가하였다. 혼합물을 10 분 동안 교반한 후, 다이메틸아미노에틸 클로라이드 하이드로클로라이드(36 mg, 0.25 mmol) 및 칼륨 요오다이드(4 mg, 0.022 mmol)를 첨가하고, 반응을 실온으로 가온시킨 후, 50℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 물 및 에틸 아세테이트를 반응에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 물 및 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 46 mg(40%)의 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 수득하였다. (M+H)⁺ = 517.

단계 2

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(46 mg, 0.09 mmol)를 THF(1.3 ml) 및 물(0.4 ml) 중에 용해시키고, 설팜산(83 mg, 0.85 mmol)을 첨가하였다. 물(1.4 ml) 중 나트륨 클로라이트(17 mg, 0.185 mmol) 및 칼륨 포스페이트 모노베이직(232 mg, 1.7 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 1 시간 후 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물에 부었다. pH를 6으로 조정하고, 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 5회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켜 53 mg의 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 수득하였다.

단계 3

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(50 mg, 0.094 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(45 mg, 0.14 mmol), N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.08 ml, 0.47 mmol) 및 아이소프로필아민(10 μL, 0.11 mmol)을 함께 아세토나이트릴(1 ml) 중에 첨가하였다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 35 mg(65%)의 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 수득하였다.

단계 4

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 하이드로클로라이드

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(35 mg, 0.06 mmol)를 다이클로로메탄(1.6 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.8 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(1 ml) 중에 용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.25 ml, 3.7 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하였다. 이와 같이 단리된 생성물을 메탄올/다이클로로메탄 중에 용해시키고, 4 당량의 1,4-다이옥산 중 4 M HCl로 처리하였다. 용매를 증발시켜 고체를 수득하고, 이를 고진공 하에 건조시켜 18 mg(62%)의 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 하이드로클로라이드를 수득하였다.

실시예 129.

2-[6-클로로-4-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(139 mg, 0.31 mmol)를 THF(4.7 ml) 및 물(1.6 ml) 중에 용해시키고, 설팜산(291 mg, 3.0 mmol)을 첨가하였다. 물(1.4 ml) 중 나트륨 클로라이트(17 mg, 0.185 mmol) 및 칼륨 포스페이트 모노베이직(232 mg, 1.7 mmol)을 천천히 첨가하였다. 1 시간 후 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물에 부었다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 한번 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켜 136 mg의 2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(140 mg, 0.30 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(146 mg, 0.46 mmol), N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.27 ml, 1.52 mmol) 및 아이소프로필아민(31 μL, 0.36 mmol)을 함께 아세토나이트릴(1 ml) 중에 첨가하였다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 77 mg(51%)의 2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 수득하였다.

단계 3

2-[6-클로로-4-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(77 mg, 0.15 mmol)를 DMF(2.5 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 나트륨 하이드라이드(60% 분산액, 8 mg, 0.20 mmol)를 조심스럽게 첨가하였다. 혼합물을 15 분 동안 교반한 후, 추가의 나트륨 하이드라이드(60% 분산액, 10 mg, 0.25 mmol) 및 4-(2-브로모에틸)모폴린 하이드로클로라이드(42 mg, 0.18 mmol)를 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온시키고, 밤새 교반하였다. 물, 나트륨 바이카보네이트 용액 및 에틸 아세테이트를 반응에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기 층들을 물 및 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 66 mg(70%)의 2-[6-클로로-4-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 수득하였다.

단계 4

2-[6-클로로-4-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 하이드로클로라이드

2-[6-클로로-4-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(66 mg, 0.107 mmol)를 다이클로로메탄(1.4 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.7 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(1 ml) 중에 용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.43 ml, 6.4 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하였다. 이와 같이 단리된 생성물을 메탄올/다이클로로메탄 중에 용해시키고, 2 당량의 1,4-다이옥산 중 4 M HCl로 처리하였다. 용매를 증발시켜 고체를 수득하고, 이를 고진공 하에 건조시켜 40 mg(72%)의 2-[6-클로로-4-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 하이드로클로라이드를 수득하였다.

실시예 130.

2-[6-클로로-1-(3-다이메틸아미노-프로필)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

실시예 128에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 다이메틸아미노에틸 클로라이드 하이드로클로라이드 대신 다이메틸아미노프로필 클로라이드 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다. 최종 생성물의 염은 단계 4에서 형성되지 않았다.

실시예 131.

2-[6-클로로-1-(3-다이메틸아미노-프로필)-4-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 하이드로클로라이드

실시예 128에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 다이메틸아미노에틸 클로라이드 하이드로클로라이드 대신 다이메틸아미노프로필 클로라이드 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 132.

2-[6-클로로-4-플루오로-1-(3-모폴린-4-일-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드 하이드로클로라이드

실시예 128에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 다이메틸아미노프로필 클로라이드 하이드로클로라이드 대신 4-(3-클로로프로필)모폴린을 사용하여 제조하였다.

MS: (M+H)⁺ = 500; mp = 282-285℃.

실시예 133.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-아마이드

단계 1

((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

단계 1

R-(-)-2-아미노프로판-1-올(2.0 g, 26.6 mmol)를 다이클로로메탄(133 ml) 중에 용해시키고, 다이-3급-부틸다이카보네이트(11.6 g, 53.3 mmol)를 분획 첨가하였다. 반응을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 물을 첨가하고, 수성 층을 다이클로로메탄으로 1회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 4.0 g(85%)의 ((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 198.

단계 2

메탄설폰산(R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-프로필 에스터

((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터(0.5 g, 2.85 mmol)를 다이클로로메탄(14 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 교반하였다. N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.75 ml, 4.28 mmol), 그 후 메탄설폰일 클로라이드(0.27 ml, 3.4 mmol)를 천천히 첨가하고, 반응을 16 시간에 걸쳐 실온으로 가온시켰다. 암모늄 클로라이드 용액을 상기 반응에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합친 유기물을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발시켜 0.73 g의 메탄설폰산(R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-프로필 에스터를 왁스질 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

1H-피라졸(70 mg, 1.03 mmol)를 DMF(5 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60% 분산액, 41 mg, 1.03 mmol)를 첨가하고, 반응을 15 분 동안 교반하였다. 메탄설폰산(R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-프로필 에스터(200 mg, 0.79 mmol)를 이후 첨가하고, 혼합물을 50℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하고, 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 129 mg(72%)의 ((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다. (M+H)⁺ = 226.

단계 4

(R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸아민 트라이플루오로아세테이트

((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터(49 mg, 0.22 mmol)를 다이클로로메탄(2.4 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(1.2 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 증발시키고, 고진공 하에 건조시켜 (R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸아민 트라이플루오로아세테이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-아마이드

(R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸아민 트라이플루오로아세테이트(단계 4로부터의 조질물)를 아세토나이트릴(1.8 ml) 중에 용해시키고, 그 후 여기에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.18 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(87 mg, 0.27 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.16 ml, 0.91 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 89 mg(81%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-아마이드를 수득하였다.

단계 6

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-아마이드(86 mg, 0.16 mmol)를 다이클로로메탄(2.2 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(1 ml) 중에 용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.63 ml, 9.4 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과해 내고, 물 및 다이에틸 에터로 세정하고, 고진공 하에 건조시켜 37 mg(57%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-아마이드를 수득하였다.

실시예 134.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-이미다졸-1-일-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 133에 개시된 절차에 따라, 단계 3에서 1H-피라졸 대신 1H-이미다졸을 사용하고, 단계 5의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 대신 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산을 사용하여 제조하였다.

실시예 135.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-프로필)-아마이드

단계 1

((S)-2-하이드록시-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

(S)-1-아미노프로판-2-올(1.0 g, 13.3 mmol)를 다이클로로메탄(67 ml) 중에 용해시키고, 다이-3급-부틸다이카보네이트(5.8 g, 26.6 mmol)를 분획 첨가하였다. 반응을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 암모늄 클로라이드 용액 및 물을 첨가하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 2.35 g(99%)의 ((S)-2-하이드록시-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다.

단계 2

((S)-2-메톡시-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

((S)-2-하이드록시-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터(0.25 g, 1.43 mmol)를 아세토나이트릴(14 ml) 및 요오도메탄(1.78 ml, 28.5 mmol) 중에 용해시키고, 그 후 산화은(0.53 g, 2.28 mmol; 문헌[Org . Syn . Coll . Vol . VII, p.386]에서와 같이 제조됨)을 첨가하였다. 반응 플라스크를 덮어 광으로부터 보호하고, 반응을 환류 온도에서 24 시간 동안 가열하였다. 추가의 요오도메탄(1.8 ml) 및 산화은(0.26 g)을 첨가하고, 표준 역상 LC/MS에 의해 반응이 완료된 것으로 판정될 때까지 가열을 계속하였다. 반응 혼합물을 규조토를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세정하였다. 증발 후 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제하여 85 mg(32%)의 ((S)-2-메톡시-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 212.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-프로필)-아마이드

실시예 133, 단계 4 내지 6에 개시된 절차에 따라, 단계 4의 ((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터 대신 ((S)-2-메톡시-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 사용하여 제조하였다. MS: (M+H)⁺ = 383; mp = 269-271℃.

실시예 136.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-시아노-2-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

((R)-2-카바모일-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

(R)-3-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-메틸프로판산(465 mg, 2.3 mmol)를 다이클로로메탄(11 ml) 중에 용해시켰다. 4-다이메틸아미노피리딘(280 mg, 2.3 mmol) 및 1-(3-다이메틸아미노프로필)-3-에틸카보다이이미드(877 mg, 4.58 mmol)를 첨가하고, 이어서 N-하이드록시석신이미드(290 mg, 2.52 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 4 시간 동안 교반한 후, 진한 암모늄 하이드록사이드(1.6 ml)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 20 분 동안 교반한 후, 수성 HCl 및 에틸 아세테이트를 첨가하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 6회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 바이카보네이트 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 335 mg(72%)의 ((R)-2-카바모일-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 225.

단계 2

((R)-2-시아노-2-메틸-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

((R)-2-카바모일-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터(50 mg, 0.247 mmol)를 THF(1.4 ml) 중에 용해시켰다. 피리딘(40 μL, 0.49 mmol), 그 후 트라이플루오로아세트산 무수물(42 μL, 0.30 mmol)을 적가하였다. 반응을 실온에서 1 시간 동안 교반한 후, 추가의 피리딘(40 μL, 0.49 mmol) 및 트라이플루오로아세트산 무수물(42 μL, 0.30 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 16 시간 동안 교반한 후, 물, 나트륨 카보네이트 용액 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기 층들을 물 및 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 40 mg(87%)의 ((R)-2-시아노-2-메틸-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 207.

단계 3

(R)-3-아미노-2-메틸-프로피오나이트릴 트라이플루오로아세테이트

((R)-2-시아노-2-메틸-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터(42 mg, 0.23 mmol)를 다이클로로메탄(1.2 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.7 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 증발시키고, 고진공 하에 건조시켜 (R)-3-아미노-2-메틸-프로피오나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-시아노-2-메틸-에틸)-아마이드

(R)-3-아미노-2-메틸-프로피오나이트릴 트라이플루오로아세테이트(단계 3로부터의 조질물)를 아세토나이트릴(2.8 ml) 중에 용해시키고, 그 후 여기에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.18 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(70 mg, 0.22 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.11 ml, 0.63 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 추가의 O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(50 mg, 0.16 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.11 ml, 0.63 mmol)을 첨가하고, 24 시간 동안 교반을 계속하였다. 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 33 mg(36%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-시아노-2-메틸-에틸)-아마이드를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 530.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메틸-2-피라졸-1-일-에틸)-아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-시아노-2-메틸-에틸)-아마이드(32 mg, 0.06 mmol)를 다이클로로메탄(1.6 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.8 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 2.5 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(1 ml) 중에 용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.26 ml, 3.8 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 5 mg(20%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-시아노-2-메틸-에틸)-아마이드를 수득하였다.

실시예 137.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-카바모일-프로필)-아마이드

실시예 136, 단계 5로부터 추가 생성물(3 mg, 12%)로서 단리하였다.

실시예 138.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(S)-N-(테트라하이드로-파이란-3-일)-아마이드

단계 1

(S)-2-3급-부톡시카보닐아미노-펜탄다이오산 다이에틸 에스터

(S)-1,5-다이에톡시-1,5-다이옥소펜탄-2-아민 하이드로클로라이드(1.0 g, 4.17 mmol)를 다이클로로메탄(10 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이에틸아민(0.58 ml, 4.17 mmol)을 첨가하고, 이어서 다이-3급-부틸다이카보네이트(1.09 g, 5.0 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16 시간에 걸쳐 실온으로 가온시켰다. 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 한번 더 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제하여 1.11 g(87%)의 (S)-2-3급-부톡시카보닐아미노-펜탄다이오산 다이에틸 에스터를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 326.

단계 2

((S)-4-하이드록시-1-하이드록시메틸-부틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

리튬 보로하이드라이드(THF 중 2.0 M, 4.12 ml, 8.24 mmol)를 빙욕에서 냉각시키고, THF(5.5 ml) 중 (S)-2-3급-부톡시카보닐아미노-펜탄다이오산 다이에틸 에스터(0.5 g, 1.65 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응을 실온으로 가온시키고, 16 시간 교반하였다. 메탄올을 반응 혼합물에 매우 천천히 첨가하였다. 지연된 격렬한 가스 분출이 가라 앉은 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 5회 추출하고, 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 0.3 g(83%)의 ((S)-4-하이드록시-1-하이드록시메틸-부틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 242.

단계 3

(S)-(테트라하이드로-파이란-3-일)-카르밤산 3급-부틸 에스터

((S)-4-하이드록시-1-하이드록시메틸-부틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터(100 mg, 0.46 mmol)를 따뜻한 벤젠(1.5 ml) 중에 용해시켰다. 시아노메틸렌트라이부틸포스포란(165 mg, 0.68 mmol)을 첨가하고, 반응 용기를 밀봉시키고, 100℃에서 24 시간 동안 교반하였다. 반응을 냉각시키고, 증발시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제하여 64 mg(69%)의 (S)-(테트라하이드로-파이란-3-일)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 224.

단계 4

(S)-(테트라하이드로-파이란-3-일)아민 트라이플루오로아세테이트

(S)-(테트라하이드로-파이란-3-일)-카르밤산 3급-부틸 에스터(42 mg, 0.21 mmol)를 다이클로로메탄(2.2 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(1.2 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 증발시키고, 고진공 하에 건조시켜 (S)-(테트라하이드로-파이란-3-일)아민 트라이플루오로아세테이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 5

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(S)-N-(테트라하이드로-파이란-3-일)-아마이드

(S)-(테트라하이드로-파이란-3-일)아민 트라이플루오로아세테이트(단계 4로부터의 조질물)를 아세토나이트릴(1.8 ml) 중에 용해시키고, 그 후 여기에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.175 mmol), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(84 mg, 0.26 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.15 ml, 0.87 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 추가의 O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(50 mg, 0.16 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.11 ml, 0.63 mmol)을 첨가하고, 24 시간 동안 교반을 계속하였다. 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 증발 후, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제하여 55 mg(58%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(S)-N-(테트라하이드로-파이란-3-일)-아마이드를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 563.

단계 6

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(S)-N-(테트라하이드로-파이란-3-일)-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(S)-N-(테트라하이드로-파이란-3-일)-아마이드(55 mg, 0.10 mmol)를 다이클로로메탄(1.2 ml) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.6 ml)을 천천히 첨가하고, 반응을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응물을 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(1 ml) 중에 용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.41 ml, 6.1 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 물, 그 후 에틸 아세테이트를 혼합물에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)으로 정제하여 30 mg(71%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(S)-N-(테트라하이드로-파이란-3-일)-아마이드를 수득하였다.

실시예 139.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(R)-N-(테트라하이드로-파이란-3-일)-아마이드

단계 1

(R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-펜탄다이오산 다이메틸 에스터

(R)-2-3급-부틸옥시카보닐아미노)펜탄다이오산(1.0g, 4.04 mmol)을 톨루엔(31.5 ml) 및 메탄올(9 ml) 중에 용해시켰다. 그 용액을 빙욕에서 교반하고, TMS-다이아조메탄(다이에틸 에터 중 2.0 M, 16.2 ml, 32.4 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응을 교반하면서 16 시간에 걸쳐 실온으로 가온시켰다. 반응 혼합물을 증발시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제하여 0.95 g(85%)의 (R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-펜탄다이오산 다이메틸 에스터를 수득하였다. (M+Na)⁺ = 298.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(R)-N-(테트라하이드로-파이란-3-일)-아마이드

실시예 138, 단계 2 내지 6에 개시된 절차에 따라, 단계 2의 (S)-2-3급-부톡시카보닐아미노-펜탄다이오산 다이에틸 에스터 대신 (R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-펜탄다이오산 다이메틸 에스터를 사용하여 제조하였다.

실시예 140.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-사이클로프로필-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-사이클로프로필-에틸)-아마이드

(S)-1-사이클로프로필에탄아민(32 mg, 0.373 mmol), 3 ml의 다이클로로메탄, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(77 mg, 0.169 mmol), 4-다이메틸아미노피리딘(21 mg, 0.169 mmol) 및 N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(71 mg, 0.371 mmol)의 용액을 18 시간 동안 교반한 후, 농축시켜 회백색 고체를 수득하였다. 고체를 10 ml의 에틸 아세테이트와 10 ml의 10% 시트르산 용액 사이에 분배시켰다. 유기 층을 10 ml의 물, 10 ml의 10% NaOH 용액, 10 ml의 물, 및 10 ml의 포화 수성 NaCl 용액으로 순차적으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 70 mg(80%)의 조질 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-사이클로프로필-에틸)-아마이드를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS: (M+Na)⁺ = 547.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-사이클로프로필-에틸)-아마이드

조질 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-사이클로프로필-에틸)-아마이드(70 mg, 0.134 mmol), 2 ml의 다이클로로메탄 및 2 ml의 트라이플루오로아세트산의 용액을 1 시간 교반한 후, 농축시켜 황색 고체를 수득하였다. 그 고체를 2 ml의 다이클로로메탄 및 1 ml의 에틸렌다이아민 중에 용해시키고, 황색 용액을 30 분 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하였다. 생성된 침전물을 부흐너 여과로 단리시키고, 물, 그 후 다이클로로메탄으로 잘 세정하고, 공기 중에서, 그 후 진공에서 건조시켜 33 mg(56%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3b]피라진-7-카복실산((S)-1-사이클로프로필-에틸)-아마이드를 담황색 고체로서 수득하였다.

실시예 141.

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-사이클로프로필-에틸)-아마이드

실시예 140에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 대신 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 사용하여 제조하였다.

실시예 142.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 140에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-1-사이클로프로필에탄아민 대신 (S)-3-아미노부탄나이트릴을 사용하여 제조하였다.

실시예 143.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-아미노-에틸)-아마이드 트라이플루오로아세테이트

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1H-이미다졸-2-일)-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(205 mg, 0.447 mmol), 1 ml의 N,N-다이메틸포름아마이드 및 O-(7-아자벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(208 mg, 0.548 mmol)의 용액을 10 분 동안 교반하였다. 그 용액에 갓 그라인딩한 2-아미노이미다졸 설페이트(62 mg, 0.468 mmol) 및 다이아이소프로필에틸아민(0.39 mL, 2.2 mmol)을 첨가하였다. 플라스크를 70℃로 가열하고, 흐린 황색 용액을 18.5 시간 교반하고, 이 동안에 백색 침전물이 형성되었다. 혼합물을 냉각시킨 후, 20 ml의 물로 처리하였다. 침전물을 부흐너 여과로 단리시키고, 물로 잘 세정하고, 공기 중에서, 그 후 진공에서 건조시켜 177 mg의 불순한 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1H-이미다졸-2-일)-아마이드를 담황색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 523.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-아미노-에틸)-아마이드 트라이플루오로아세테이트

단계 1로부터의 불순한 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1H-이미다졸-2-일)-아마이드(175 mg, 0.334 mmol), 2 ml의 다이클로로메탄, 및 2 ml의 트라이플루오로아세트산의 용액을 1 시간 교반한 후, 농축시켜 오렌지색 오일을 수득하였다. 그 오일에 5 ml의 다이클로로메탄 및 1 ml의 에틸렌 다이아민을 첨가하였다. 황색 현탁액을 30 분 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 침전물을 부흐너 여과로 단리시키고, 물 및 다이클로로메탄으로 잘 세정하고, 공기 중에서, 그 후 진공에서 건조시켜 109 mg의 황갈색 고체를 수득하였다. 그 고체를 15 ml의 비등 메탄올 중에서 마쇄하고, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 고체를 부흐너 여과로 단리시키고, 메탄올로 잘 세정하고, 공기 건조시켜 53 mg의 황갈색 고체를 수득하였다. 그 고체를 2 ml의 메탄올 및 1 ml의 메탄올 중 1.0 M HCl 용액으로 처리하였다. 고체를 10 ml의 다이에틸 에터로 침전시키고, 부흐너 여과로 단리시키고, 공기 중에서, 그 후 진공에서 건조시켜 45 mg의 오렌지색 고체를 수득하였다. 역상 고성능 액체 크로마토그래피(C-18 2x10 cm 컬럼, 선형 구배로 25 ml/분으로 (A) 0.05% TFA/물(B) 0.05% TFA/아세토나이트릴로 용리)로 최종 정제하여 2종의 생성물을 트라이플루오로아세테이트 염으로서 수득하였다: 7 mg(4%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1H-이미다졸-2-일)-아마이드 트라이플루오로아세테이트

를 담황색 고체(제 2 피크)로서 수득하고, 0.016 g(10%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-아미노-에틸)-아마이드 트라이플루오로아세테이트

를 백색 고체(제 1 피크)로서 수득하였다.

실시예 144.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-4-하이드록시-사이클로헥실)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-4-하이드록시-사이클로헥실)아마이드

100 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.150 g, 0.295 mmol), EDC(61 mg, 0.32 mmol), DIEA(52 μL, 0.295 mmol)를 다이클로로메탄(3 ml)과 합쳐 황색 용액을 수득하였다. 30분 동안 교반한 후 트랜스-4-아미노사이클로헥산올(48 mg, 0.42 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반한 후, 다이클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 0% 내지 5% DCM 중 MeOH)로 정제하고, 에틸 아세테이트로부터 재결정화시켜 60 mg의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-4-하이드록시-사이클로헥실)아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 555.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-4-하이드록시-사이클로헥실)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-4-하이드록시-사이클로헥실)아마이드(60 mg, 0.108 mmol)를 다이클로로메탄(3 mL) 중에 용해시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.2 mL, 2.6 mmol)을 첨가하고, 오렌지색 반응 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 추가의 트라이플루오로아세트산(0.7 mL)을 첨가하고, 반응을 추가 5 시간 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(3 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.20 mL, 2.96 mmol)을 첨가하였다. 연황색 반응 혼합물을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 물, 다이클로로메탄, 에틸 아세테이트, 및 헥산으로 순차적으로 세척하여 28 mg(60%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-4-하이드록시-사이클로헥실)아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 145.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-4-아미노-사이클로헥실)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-4-아미노-사이클로헥실)아마이드

20 mL 신틸레이션 바이알에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.10 g, 0.22 mmol), 2-(1H-벤조[d][1,2,3]트라이아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸아이소우로늄 헥사플루오로포스페이트(91 mg, 0.24 mmol), 1H-벤조[d][1,2,3]트라이아졸-1-올(33 mg, 0.240 mmol), 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(38 μL, 0.22 mmol)을 DMF(4 ml)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 45 분 동안 교반하였다. 20 mL 환저 플라스크에서, 시스-사이클로헥산-1,4-다이아민(249 mg, 2.18 mmol)를 0.4 mL DMF 중에 용해시켜 무색 용액을 수득하였다. 카복실산 반응 혼합물을 아민 용액에 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(약 50 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO₃(3 x 25 mL) 및 H₂O(3 x 25 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을, 0% 내지 10% DCM 중 MeOH와 0.1% NH₄OH를 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 86 mg의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-4-아미노-사이클로헥실)아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 554.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-4-아미노-사이클로헥실)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-4-아미노-사이클로헥실)아마이드(85 mg, 0.153 mmol)를 다이클로로메탄(8 mL) 중에 용해시켰다. 트라이플루오로아세트산(2.5 mL, 32.4 mmol)을 첨가하고, 오렌지색 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(8 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(1 mL, 14.8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 물, 다이클로로메탄, 에틸 아세테이트, 및 헥산으로 순차적으로 세척하여 61 mg(93%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-4-아미노-사이클로헥실)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 146.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-4-아미노-사이클로헥실)-아마이드

실시예 2에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 트랜스-사이클로헥산-1,4-다이아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 33 mg(68%)로서 단리되었다.

실시예 147.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-옥소-사이클로헥실)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-사이클로헥실)아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.10 g, 0.22 mmol), 3-아미노사이클로헥산올(시스 및 트랜스의 혼합물) (45 mg, 0.39 mmol), HBTU(0.10 g, 0.26 mmol), 및 HOBT(0.03 g, 0.26 mmol)를 충전시켰다. 그 후 DMF(1.0 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.07 ml, 0.26 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 및 물로 1회 세척하였다. 합친 수성 층들을 EtOAc(25 mL)으로 역추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을, EtOAc/헥산(구배: 0-100% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 106 mg의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-사이클로헥실)아마이드를 회백색 거품으로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 556.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-사이클로헥실)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-사이클로헥실)아마이드(106 mg, 0.19 mmol)를 다이클로로메탄(3 mL) 중에 용해시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.2 mL, 2.6 mmol)을 첨가하고, 오렌지색 반응 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 추가의 트라이플루오로아세트산(0.7 mL)을 첨가하고, 반응을 추가 5 시간 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(3 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.20 mL, 2.96 mmol)을 첨가하였다. 연황색 반응 혼합물을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 물, 다이클로로메탄, 에틸 아세테이트, 및 헥산으로 순차적으로 세척하여 74 mg(91%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-사이클로헥실)-아마이드를 백색 고체로서 시스 및 트랜스 이성질체의 2:1 혼합물(미지정)로서 수득하였다. MS: [M+Na] 447.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-옥소-사이클로헥실)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-사이클로헥실) 아마이드(22 mg, 0.052 mmol) 및 다이클로로메탄(5 mL)을 충전시켰다. 데쓰-마틴 페리오디난(34.0 mg, 0.08 mmol)을 상기 반응 혼합물에 1 분획 첨가하였다. 반응 혼합물을 Ar 하에 위치시키고, 2 시간 동안 실온에서 교반하였다. DMF(1.5 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 추가 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로써 100 mL로 희석하고, 포화 NaHCO₃(3x20 mL)로 세척하였다. 조질 백색 침전물을 여과하고, 보관하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 조질 고체를 수득하였다. 합친 조질 고체를 EtOAc(1 x 20 mL)로 마쇄한 후, MeOH/다이클로로메탄(구배: 0%-5% MeOH)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 6 mg(27%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-옥소-사이클로헥실)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 148 및 149.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-하이드록시-사이클로헥실)-아마이드 및 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-3-하이드록시-사이클로헥실)-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-사이클로헥실)-아마이드(실시예 147, 단계 2)의 샘플을 MeOH/다이클로로메탄(구배: 0%-10% MeOH와 0.1% NH₄OH)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 8 mg의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-하이드록시-사이클로헥실)-아마이드

를 수득하고, 3 mg의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-3-하이드록시-사이클로헥실)-아마이드

를 수득하였다.

실시예 150.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-페닐-에틸)-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 d,l-암페타민 설페이트를 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 연황색 고체 31 mg(67%)로서 단리하였다.

실시예 151.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,3S)-3-하이드록시-사이클로펜틸)-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 (1S,3R)-3-아미노사이클로펜탄올을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 연황색 고체 26 mg(97%)로서 단리하였다.

실시예 152.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 1-메톡시프로판-2-아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 연황색 고체 28 mg(69%)로서 단리하였다.

실시예 153.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-메틸-사이클로헥실)-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 2-메틸사이클로헥실아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 부분입체이성질체들의 2:3 혼합물로 연황색 고체 39 mg(58%)로서 단리하였다.

실시예 154.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 1-(테트라하이드로퓨란-2-일)에틸아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체로서 이성질체들의 혼합물 36 mg(71%)로서 단리되었다.

실시예 155.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-카바모일-사이클로헥실)-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 트랜스-3-아미노사이클로헥산카복스아마이드 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 4.5 mg(29%)로서 단리되었다.

실시예 156.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-시아노-사이클로헥실)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-카바모일-사이클로헥실)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.15 g, 0.33 mmol), 트랜스-3-아미노사이클로헥산카복스아마이드 하이드로클로라이드(88 mg, 0.49 mmol), HBTU(155 mg, 0.41 mmol), 및 HOBT(49 mg, 0.41 mmol)를 충전시켰다. 그 후 DMF(1.0 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.17 mL, 0.97 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 및 물로 1회 세척하였다. 합친 수성 층들을 EtOAc(25 mL)으로 역추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을, EtOAc/헥산(구배: 0-100% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 119 mg(62%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-카바모일-사이클로헥실)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+Na]⁺ = 604.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-시아노-사이클로헥실)-아마이드

25 mL 배형(pear-shaped) 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-카바모일-사이클로헥실)-아마이드(72 mg, 0.124 mmol)를 피리딘(412 μL)과 합쳐 회백색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 냉각시키고, 트라이플루오로아세트산 무수물(피리딘 중 0.71 M, 26 μL, 0.18 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 후, 농축시켰다. 잔류물을, EtOAc/헥산(구배: 0-50% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 27 mg(39%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-시아노-사이클로헥실)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-시아노-사이클로헥실)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-시아노-사이클로헥실)-아마이드(48 mg, 0.085 mmol)를 다이클로로메탄(3 mL) 중에 용해시켰다. 트라이플루오로아세트산(1.2 mL, 15.6 mmol)을 첨가하고, 오렌지색 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(3 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.50 mL, 7.4 mmol)을 첨가하였다. 연황색 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 물, 에틸 아세테이트, 및 헥산으로 순차적으로 세척하여 35 mg(95%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-3-시아노-사이클로헥실)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 157.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(R)-인단-1-일아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4-다이아민 대신 (R)-2,3-다이하이드로-1H-인덴-1-아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 15 mg(21%)로서 단리되었다.

실시예 158.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-4-하이드록시-사이클로헥실)-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 시스-4-아미노사이클로헥산올 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 연황색 고체 47 mg(91%)로서 단리하였다.

실시예 159.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.15 g, 0.33 mmol), (R)-2-아미노프로판-1-올(49 mg, 0.66 mmol), HBTU(155 mg, 0.41 mmol), 및 HOBT(58 mg, 0.49 mmol)를 충전시켰다. 그 후 DMF(1.1 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.17 mL, 0.97 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 및 물로 1회 세척하였다. 합친 수성 층들을 EtOAc(25 mL)으로 역추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을, EtOAc/헥산(구배: 0-60% EtOAc)을 사용하는 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 110 mg(65%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 515.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드(70 mg, 0.136 mmol), 산화은(51 mg, 0.22 mmol) 및 메틸 요오다이드(100 μL, 1.6 mmol)를 MeCN과 합쳐 흑색 현탁액을 수득하였다. 환저 플라스크를 포일로 래핑하여 광을 차단하였다. 그 시스템을 모래 욕에 위치시키고, 교반하면서 40℃로 가열하였다. 그 온도를 2 일 동안 유지시켰다. 냉각 시에, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과시켰다. 여액을 농축시켰다. 조질 물질을, EtOAc/헥산(구배: 0% - 40% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 32 mg(45%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. [M+Na]⁺ = 551.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

밀봉된 25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(32 mg, 0.061 mmol) 및 TFA(0.9 ml, 11.7 mmol)를 다이클로로메탄(3 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 출발 물질이 소모될 때까지(2.5 h) 실온에서 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(3 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(300 μL, 4.44 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(1:1 다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 14 mg(59%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 160.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2,2,2-트라이플루오로-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 1,1,1-트라이플루오로프로판-2-아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 연황색 고체 25 mg(68%)로서 단리하였다.

실시예 161.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.10 g, 0.22 mmol), (R)-2-아미노부탄-1-올(65 mg, 0.73 mmol), HBTU(108 mg, 0.28 mmol), 및 HOBT(44 mg, 0.28 mmol)를 충전시켰다. 그 후 DMF(1 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.11 mL, 0.66 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 및 물로 1회 세척하였다. 합친 수성 층들을 EtOAc(25 mL)으로 역추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을, EtOAc/헥산(구배: 0-50% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 70 mg(61%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드

밀봉된 25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드(34 mg, 0.064 mmol) 및 TFA(0.6 ml, 7.8 mmol)를 다이클로로메탄(2 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(2 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(420 μL, 6.3 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(1:1 다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 8 mg(30%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 162.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

25 mL 반응 튜브에서, NaH(미네랄 오일 중 60 %, 20 mg, 0.50 mmol)를 DMF(0.2 ml)와 합쳐 회색 현탁액을 수득하였다. 반응을 아르곤 하에 위치시키고, DMF(1 ml) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드(161 mg, 0.30 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 후, 요오도메탄(23 μL, 0.37 mmol)을 첨가하였다. 반응을 18 시간 동안 교반한 후, 암모늄 클로라이드 수용액(5 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(3x10 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층들을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 EtOAc/헥산(구배: 0% 내지 40% EtOAc)를 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 25 mg(15%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3b]피라진-7-카복실산((R)-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

밀봉된 25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드(40 mg, 0.074 mmol) 및 TFA(0.9 ml, 11.7 mmol)를 다이클로로메탄(3 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(3 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(500 μL, 7.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(11:1:1 고온 헵탄/다이클로로메탄/EtOAc)로 정제하여 21 mg(69%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 163.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(5-하이드록시-1,5-다이메틸-헥실)-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 6-아미노-2-메틸헵탄-2-올 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 백색 고체 23 mg(35%)로서 단리하였다.

실시예 164.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.20 g, 0.44 mmol), (S)-2-아미노프로판-1-올(0.10 ml, 1.31 mmol), HBTU(331 mg, 0.87 mmol), 및 HOBT(134 mg, 0.87 mmol)를 채웠다. 그 후 DMF(1 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.31 mL, 1.75 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 및 물로 1회 세척하였다. 합친 수성 층들을 EtOAc(25 mL)으로 역추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헥산(구배: 0-100% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 149 mg(66%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드

밀봉된 25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드(41 mg, 0.080 mmol) 및 TFA(0.6 ml, 7.8 mmol)를 다이클로로메탄(2 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 출발 물질이 소모될 때까지(2.5 h) 실온에서 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(2 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(400 μL, 5.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(9:1 다이클로로메탄/MeOH)로 정제하여 11 mg(36%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 165.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드(44 mg, 0.085 mmol)를 THF(0.85 ml) 중에 용해시켜 무색 용액을 수득하였다. 반응을 빙욕에서 냉각시켰다. 분쇄된 KOH(64 mg, 1.14 mmol), 촉매성 18-크라운-6, 및 요오도메탄(9 μL, 0.147 mmol)을 순차적으로 냉각된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하고, 이후 빙욕을 제거하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 다이클로로메탄(10 mL)으로 희석하고, 수성 암모늄 클로라이드(10 mL), 물(10 mL), 및 포화 나트륨 바이카보네이트(10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 EtOAc/헵탄(구배: 0% - 100% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 22 mg(49%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+Na]⁺ = 551.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

밀봉된 25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(32 mg, 0.061 mmol) 및 TFA(1.2 ml, 15.6 mmol)를 다이클로로메탄(4 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 출발 물질이 소모될 때까지(2.5 h) 실온에서 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(2 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(300 μL, 4.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(9:1 다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 22 mg(93%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 166.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-메톡시-1-메톡시메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1-하이드록시메틸-에틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.20 g, 0.44 mmol), 2-아미노프로판-1,3-다이올(119 mg, 1.31 mmol), HBTU(331 mg, 0.87 mmol), 및 HOBT(134 mg, 0.87 mmol)을 충전시켰다. 그 후 DMF(1 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.31 mL, 1.75 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 및 물로 1회 세척하였다. 합친 수성 층들을 EtOAc(25 mL)으로 역추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헥산(구배: 0-100% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 157 mg(68%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1-하이드록시메틸-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+Na]⁺ = 552.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-메톡시-1-메톡시메틸-에틸)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1-하이드록시메틸-에틸)-아마이드(60 mg, 0.113 mmol)를 THF(2.5 ml) 중에 용해시켰다. 반응을 빙욕에서 냉각시키고, 분쇄된 KOH(76 mg, 1.35 mmol), 18-크라운-6(15 mg, 0.057 mmol), 및 요오도메탄(18 μL, 0.28 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하고, 이후 빙욕을 제거하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 다이클로로메탄(10 mL)으로 희석하고, 물(10 mL) 및 포화 나트륨 바이카보네이트(10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 EtOAc/헵탄(구배: 0% - 100% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 53 mg(84%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-메톡시-1-메톡시메틸-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 559.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-메톡시-1-메톡시메틸-에틸)-아마이드

밀봉된 25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-메톡시-1-메톡시메틸-에틸)-아마이드(40 mg, 0.071 mmol) 및 TFA(0.6 ml, 7.8 mmol)를 다이클로로메탄(2 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 출발 물질이 소모될 때까지(2.5 h) 실온에서 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(2 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(400 μL, 5.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(헥산/다이클로로메탄/EtOAc)로 정제하여 19 mg(62%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-메톡시-1-메톡시메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 167.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-3-시아노-사이클로헥실)-아마이드

단계 1:

(시스-3-카바모일-사이클로헥실)-카르밤산 3급-부틸 에스터

100 mL 환저 플라스크에서 시스-3-(3급-부톡시카보닐아미노)-사이클로헥산카복실산(2.26 g, 9.29 mmol)을 THF(15 mL) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 아세톤-드라이아이스 욕에서 -10℃로 냉각시켰다. 냉각된 현탁액에, 그 온도가 유지되도록 TEA(2.6 mL, 18.7 mmol), 이어서 에틸 클로로폼에이트(1.03 mL, 10.7 mmol)를 천천히 첨가하였다. 냉각 욕을 첨가 시에 제거하고, 반응을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -10℃로 냉각시키고, NH₄OH(2.17 mL, 55.7 mmol)를 천천히 첨가하였다. 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 침전물을 여과에 의해 수집하였다. 침전물을 물로 세척하고, 50℃에서 진공에서 건조시켜 1.67 g(74%)의 (시스-3-카바모일-사이클로헥실)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2:

시스-(3-시아노-사이클로헥실)-카르밤산 3급-부틸 에스터

25 mL 환저 플라스크에서 (시스-3-카바모일-사이클로헥실)-카르밤산 3급-부틸 에스터(1.00 g, 4.13 mmol)를 다이클로르메탄(7 mL) 중에 현탁시켰다. 그 현탁액을 아세톤-드라이아이스 욕에서 -10℃로 냉각시켰다. 냉각된 현탁액에, 그 온도가 유지되도록 트라이에틸아민(1.15 mL, 8.25 mmol), 이어서 TFAA(0.62 mL, 4.39 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 그 온도에서 3 시간 동안 교반한 후, 물 및 다이클로로메탄으로 희석하였다. 유기 층을 물로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 0% 내지 60% 헵탄 중 EtOAc)로 정제하여 0.803 g(87%)의 시스-(3-시아노-사이클로헥실)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 백색 결정질 고체로서 수득하였다.

단계 3:

시스-3-아미노-사이클로헥산카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트

25 mL 환저 플라스크에서, 시스-(3-시아노-사이클로헥실)-카르밤산 3급-부틸 에스터(212 mg, 0.945 mmol)를 다이클로로메탄(3 ml)과 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 트라이플루오로아세트산(0.9 mL, 11.7 mmol)을 첨가하여 황색 용액을 수득하고, 이를 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 톨루엔과 공비혼합시켜 321 mg의 시스-3-아미노-사이클로헥산카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 조질 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-3-시아노-사이클로헥실)-아마이드

실시예 2에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 시스-3-아미노사이클로헥산카보나이트릴 트라이플루오르아세테이트를 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 37 mg(74%)로서 단리되었다.

실시예 168.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2,2,2-트라이플루오로-에틸)-피페리딘-3-일]-아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

[(R)-1-(2,2,2-트라이플루오로-에틸)-피페리딘-3-일]-카르밤산 3급-부틸 에스터

25 mL 환저 플라스크에서, (R)-피페리딘-3-일-카르밤산 3급-부틸 에스터(1.00 g, 4.99 mmol) 및 DIPEA(0.96 mL, 5.49 mmol)를 다이클로로메탄(20 ml)과 합쳤다. 반응 혼합물을 아르곤 분위기 하에 위치시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 1,1,1-트라이플루오로-2-(트라이플루오로메틸설폰일)에탄(1.19 g, 5.49 mmol) 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시켰다. 18 시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 다이클로르메탄으로 희석하고, 물, 포화 바이카보네이트, 및 염수로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 0% 내지 70% 헵탄 중 EtOAc)로 정제하여 1.20 g(85%)의 [(R)-1-(2,2,2-트라이플루오로-에틸)-피페리딘-3-일]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 백색 결정질 고체로서 수득하였다.

단계 2:

(R)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-아민 다이하이드로클로라이드

250 mL 환저 플라스크에서, [(R)-1-(2,2,2-트라이플루오로-에틸)-피페리딘-3-일]-카르밤산 3급-부틸 에스터(1.20 g, 4.25 mmol)를 MeOH(100 ml)와 합쳐 무색 현탁액을 수득하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 위치시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 아세틸 클로라이드(6.04 ml, 85.0 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 5℃에서 추가 10 분 동안 교반한 후, 실온으로 가온시켰다. 실온에서 17 시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축 건조시켜 1.10 g(정량적)의 (R)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-아민 다이하이드로클로라이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2,2,2-트라이플루오로-에틸)-피페리딘-3-일]-아마이드 하이드로클로라이드

실시예 2에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 (R)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-아민 다이하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 HCl(1,4-다이옥산 중 4.0 M)로 처리하여 오렌지색 고체 32 mg(46%)로서 그 염을 단리시켰다.

실시예 169.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-아미노-사이클로헥실)-아마이드 하이드로클로라이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 사이클로헥산-1,3-다이아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 HCl(1,4-다이옥산 중 4.0 M)로 처리하여 황색 고체(부분입체이성질체들의 혼합물), 34 mg(56%)로서 그 염을 단리시켰다.

실시예 170.

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.39 g, 0.84 mmol), (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드(253 mg, 2.0 mmol), HBTU(457 mg, 1.27 mmol), 및 HOBT(125 mg, 0.93 mmol)를 충전시켰다. 그 후 DMF(2 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.59 mL, 3.38 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 및 물로 1회 세척하였다. 합친 수성 층들을 EtOAc(25 mL)로 역추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헵탄(구배: 0-100% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 401 mg(89%)의 2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 533.

단계 2

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

50 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-4-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(120 mg, 0.225 mmol) 및 DMF(0.45 ml)를 충전시켜 연황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 아르곤 분위기 하에 위치시키고, 0℃ 욕에서 냉각시켰다. NaH(미네랄 오일 중 60%, 23 mg, 0.575 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 10 분 동안 및 실온에서 10 분 동안 교반한 후, 다시 냉각 욕에 놓고, 요오도메탄(21 μL, 0.34 mmol)을 첨가하였다. 반응을 0℃에서 10 분 동안 교반한 후, 그 욕을 제거하고, 실온에서 추가 18 시간 동안 교반을 계속하였다. 반응을 물로 켄칭시키고, 침전물을 여과에 의해 수집하였다. 조질 물질을 EtOAc/헵탄(구배: 0-100% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 41 mg(33%)의 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 547.

단계 3

2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(40 mg, 0.073 mmol) 및 TFA(0.60 ml, 7.8 mmol)를 다이클로로메탄(2 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(2 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.40 ml, 5.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 17 mg(55%)의 2-(6-클로로-4-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 171.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-에톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 (S)-1-에톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 백색 고체 35 mg(68%)로서 단리하였다.

실시예 172.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1-메틸-프로필)-아마이드

실시예 145에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 시스-사이클로헥산-1,4,다이아민 대신 3-아미노부탄-2-올을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체(부분입체이성질체들의 혼합물) 22 mg(73%)로서 단리되었다.

실시예 173.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

실시예 166에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 2-아미노프로판-1,3-다이올 대신 (S)-2-아미노부탄-1-올을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 20 mg(70%)로서 단리되었다.

실시예 174.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

[(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

25 mL 환저 플라스크에 (R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-3-메톡시-프로피온산(0.40 g, 1.82 mmol), 3-플루오로아제티딘 하이드로클로라이드(204 mg, 1.82 mmol), HBTU(989 mg, 2.74 mmol), 및 HOBt(375 mg, 2.74 mmol)를 충전하였다. 그 후 DMF(3.6 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(1.27 mL, 7.3 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 및 물로 1회 세척하였다. 합친 수성 층들을 EtOAc(25 mL)으로 역추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헵탄(구배: 0-50% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 267 mg(53%)의 [(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

(R)-2-아미노-1-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-3-메톡시-프로판-1-온 트라이플루오로아세테이트

25 mL 환저 플라스크에서, [(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터(265 mg, 0.96 mmol)를 다이클로로메탄(5 ml) 중에 용해시켰다. 반응을 0℃로 냉각시키고, 트라이플루오로아세트산(1.5 ml, 19.5 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 농축시켜 (R)-2-아미노-1-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-3-메톡시-프로판-1-온 트라이플루오로아세테이트를 점성의 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

10 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(75 mg, 0.16 mmol), (R)-2-아미노-1-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-3-메톡시-프로판-1-온 트라이플루오로아세테이트(63 mg, 0.21 mmol), 및 HATU(63 mg, 0.21 mmol)를 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(1 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.55 mL, 3.15 mmol)을 첨가하였다. 연황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭하였다. 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헵탄(구배: 5-90% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 47 mg(47%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 616.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(47 mg, 0.076 mmol) 및 TFA(1.2 ml, 15.6 mmol)를 다이클로로메탄(4 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(4 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.36 ml, 5.3 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 24 mg(64%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 175.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

25 mL 환저 플라스크에 (R)-2-3급-부톡시카보닐아미노-3-메톡시-프로피온산(0.475 g, 2.17 mmol), 아제티딘-3-카보나이트릴 하이드로클로라이드(314 mg, 2.65 mmol) 및 HATU(832 mg, 2.19 mmol)를 충전시켰다. 그 후 DMF(3.6 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(1.5 mL, 8.67 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭시키고, EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 및 물로 1회 세척하였다. 합친 수성 층들을 EtOAc(25 mL)으로 역추출하였다. 합친 유기 층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헵탄(구배: 0-100% EtOAc)을 사용하는 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 288 mg(47%)의 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 점성의 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

1-((R)-2-아미노-3-메톡시-프로피오닐)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트

25 mL 환저 플라스크에서, [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터(286 mg, 1.00 mmol)를 다이클로로메탄(4 ml) 중에 용해시켰다. 반응을 0℃로 냉각시키고, 트라이플루오로아세트산(1.2 ml, 15.6 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 농축시켜 1-((R)-2-아미노-3-메톡시-프로피오닐)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 점성의 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

10 mL 환저 플라스크에 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(50 mg, 0.11 mmol), 1-((R)-2-아미노-3-메톡시-프로피오닐)-아제티딘-3-카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트(42 mg, 0.14 mmol), 및 HATU(42 mg, 0.11 mmol)를 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(1 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.19 mL, 1.1 mmol)을 첨가하였다. 연황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭하였다. 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헵탄(구배: 5-90% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 44 mg(63%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 623.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(44 mg, 0.071 mmol) 및 TFA(1.8 ml, 23.4 mmol)를 다이클로로메탄(6 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(4 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.30 ml, 4.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(고온 다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 21 mg(59%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메톡시메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 176.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1-메틸-프로필)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.226 mmol), (2R,3R)-2-아미노부탄-1,3-다이올(25 mg, 0.24 mmol), 및 HATU(90 mg, 0.24 mmol)를 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(2 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.10 mL, 0.57 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3x)로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 1:1 헵탄/다이클로로메탄을 사용한 마쇄에 의해 정제하여 115 mg(96%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 529.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드(30 mg, 0.057 mmol) 및 TFA(0.3 ml, 3.9 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(1 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.10 ml, 1.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(고온 다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 9 mg(40%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 177.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드(81 mg, 0.152 mmol)를 THF(1.5 ml) 중에 용해시켜 무색 용액을 수득하였다. 반응을 빙욕에서 냉각시키고, 분쇄된 KOH(86 mg, 1.52 mmol), 18-크라운-6(40 mg, 0.152 mmol), 및 요오도메탄(10 μL, 0.152 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하고, 이후 빙욕을 제거하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 다이클로로메탄(10 mL)으로 희석하고, 수성 암모늄 클로라이드(10 mL), 물(10 mL), 및 포화 나트륨 바이카보네이트(10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 EtOAc/헵탄(구배: 0% - 60% EtOAc)를 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 30 mg(36%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드(30 mg, 0.055 mmol) 및 TFA(0.3 ml, 3.9 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(1 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.26 ml, 3.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(고온 다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 11 mg(47%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2R)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 178.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2급-부틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2급-부틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(50 mg, 0.11 mmol), (S)-부탄-2-아민(9 mg, 0.12 mmol), 및 HATU(45 mg, 0.12 mmol)을 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(1 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.09 mL, 0.55 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3x)로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헵탄(구배: 0-50% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 40 mg(71%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2급-부틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. [M+Na]⁺ = 519.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2급-부틸)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2급-부틸)-아마이드(40 mg, 0.080 mmol) 및 TFA(0.9 ml, 11.7 mmol)를 다이클로로메탄(3 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(3 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.38 ml, 5.6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(고온 다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 19 mg(67%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2급-부틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 179.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메톡시메틸-3-메틸-부틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-하이드록시메틸-3-메틸-부틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.226 mmol), (S)-2-아미노-4-메틸펜탄-1-올(28 mg, 0.24 mmol), 및 HATU(90 mg, 0.24 mmol)를 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(2 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.13 mL, 0.77 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3x)로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 73 mg(59%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-하이드록시메틸-3-메틸-부틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 541.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메톡시메틸-3-메틸-부틸)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-하이드록시메틸-3-메틸-부틸)-아마이드(73 mg, 0.135 mmol)를 THF(1.4 ml) 중에 용해시켜 무색 용액을 수득하였다. 반응을 빙욕에서 냉각시키고, 분쇄된 KOH(76 mg, 1.35 mmol), 18-크라운-6(36 mg, 0.135 mmol), 및 요오도메탄(9 μL, 0.135 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하고, 이후 빙욕을 제거하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 다이클로로메탄(10 mL)으로 희석하고, 수성 암모늄 클로라이드(10 mL), 물(10 mL), 및 포화 나트륨 바이카보네이트(10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 EtOAc/헵탄(구배: 0% - 70% EtOAc)를 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 38 mg(50%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메톡시메틸-3-메틸-부틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메톡시메틸-3-메틸-부틸)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메톡시메틸-3-메틸-부틸)-아마이드(35 mg, 0.063 mmol) 및 TFA(0.6 ml, 7.8 mmol)를 다이클로로메탄(2 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(1 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.32 ml, 4.7 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(고온 다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 16 mg(60%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메톡시메틸-3-메틸-부틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 180.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2급-부틸)-아마이드

실시예 178에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-부탄-2-아민 대신 (R)-부탄-2-아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 17 mg(82%)로서 단리되었다.

실시예 181.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 178에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-부탄-2-아민 대신 (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 27 mg(73%)로서 단리되었다.

실시예 182.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메틸-2-트라이듀테로메톡시-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(115 mg, 0.26 mmol), (S)-2-아미노프로판-1-올(0.21 μL, 0.27 mmol), 및 HATU(104 mg, 0.27 mmol)를 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(2 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.2 mL, 1.12 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭하고, EtOAc(3x)로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 76 mg(57%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메틸-2-트라이듀테로메톡시-에틸)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드(70 mg, 0.14 mmol)를 THF(1.4 ml) 중에 용해시켜 무색 용액을 수득하였다. 반응을 빙욕에서 냉각시키고, 분쇄된 KOH(91 mg, 1.62 mmol), 18-크라운-6(44 mg, 0.166 mmol), 및 요오도트라이듀테로메탄(9 μL, 0.147 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하고, 이후 빙욕을 제거하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 다이클로로메탄(10 mL)으로 희석하고, 수성 암모늄 클로라이드(10 mL), 물(10 mL), 및 포화 나트륨 바이카보네이트(10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 EtOAc/헵탄(구배: 5% - 60% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 38 mg(53%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메틸-2-트라이듀테로메톡시-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+Na]⁺ = 538.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메틸-2-트라이듀테로메톡시-에틸)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메틸-2-트라이듀테로메톡시-에틸)-아마이드(38 mg, 0.074 mmol) 및 TFA(0.5 ml, 6.5 mmol)를 다이클로로메탄(1.5 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(1 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.10 ml, 1.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 27 mg(96%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메틸-2-트라이듀테로메톡시-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 183.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-1,3-다이메틸-부틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-1,3-다이메틸-부틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(98 mg, 0.22 mmol), 4-아미노-2-메틸펜탄-2-올[US 2003/0171584 A1에 따라 제조됨](27 mg, 0.23 mmol), 및 HATU(89 mg, 0.23 mmol)를 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(2 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.2 mL, 1.12 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, EtOAc로 희석하고, 물(3x)로 세척하였다. 유기 층을 합치고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헵탄(구배: 5-90% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 75 mg(63%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-1,3-다이메틸-부틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 541.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-1,3-다이메틸-부틸)-아마이드

125 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-1,3-다이메틸-부틸)-아마이드(25 mg, 0.046 mmol), 세슘 플루오라이드(70 mg, 0.46 mmol) 및 18-크라운-6(12 mg, 0.046 mmol)를 아세토나이트릴과 합쳐 회백색 현탁액을 수득하였다. 반응을 환류 온도에서 72 시간 동안 교반하였다. 매우 과량의 CsF 및 18-크라운-6을 첨가하고, 반응을 추가의 24 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 물 중에 현탁시키고, 여과에 의해 수집한 후, 1:2 다이클로로메탄/헵탄으로 마쇄하여 4 mg(21%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-하이드록시-1,3-다이메틸-부틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 184.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-부틸)-아마이드

실시예 178에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-부탄-2-아민 대신 1-메틸-부틸아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 연황색 고체 25 mg(96%)로서 단리하였다.

실시예 185.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3,3,3-트라이플루오로-1-메틸-프로필)-아마이드

단계 1

3,3,3-트라이플루오로-1-메틸-프로필아민 하이드로클로라이드

아민 염을 문헌[Gassen, K.-R; Kirmse, W. Chem . Ber., 1986, 119, 2233-2248]에 개시된 절차에 따라 제조하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3,3,3-트라이플루오로-1-메틸-프로필)-아마이드

실시예 178에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-부탄-2-아민 대신 3,3,3-트라이플루오로-1-메틸-프로필아민 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 16 mg(38%)로서 단리되었다.

실시예 186.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-사이클로프로필-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-메틸-프로판-2-설핀산 [2-사이클로프로필-1-메틸-에트-(E)-일리덴]-아마이드

아르곤 분위기 하에 25 mL 환저 플라스크에 THF(1.45 mL) 중 Ti(OEt)4(테크니컬 등급, 0.37 mL, 1.4 mmol) 및 1-사이클로프로필프로판-2-온(79.0 mg, 0.81 mmol)을 첨가하였다. 그 후 2-메틸프로판-2-설핀아마이드(88.7 mg, 0.73 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 가열 환류시켰다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 빠르게 교반하면서 염수(1.7 mL)에 부었다. 생성된 현탁액을 셀라이트 패드를 통해 여과시켰다. 여액을 감압 하에 농축시켜 조질 2-메틸-프로판-2-설핀산 [2-사이클로프로필-1-메틸-에트-(E)-일리덴]-아마이드를 수득하고, 이를 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 2

2-메틸-프로판-2-설핀산(2-사이클로프로필-1-메틸-에틸)-아마이드

아르곤 분위기 하에 25 mL 환저 플라스크에 2-메틸-프로판-2-설핀산 [2-사이클로프로필-1-메틸-에트-(E)-일리덴]-아마이드(120 mg, 0.596 mmol) 및 다이클로로메탄(2 ml)을 충전시켰다. 반응 혼합물을 -78℃ 욕에서 냉각시켰다. DIBAL-H(0.80 ml, 0.800 mmol)를 천천히 적가하였다. 반응 혼합물을 45 분 동안 교반한 후, 냉각 욕을 제거하였다. 반응 혼합물을 15 분 동안 실온에서 교반하고, 그 후 반응 혼합물을 다시 냉각 욕에 놓았다. 반응을 MeOH(0.08 mL, 1.98 mmol)로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 다이클로로메탄(8 mL) 및 1.0 M 수성 Na⁺K⁺ 타르트레이트 용액(5 mL)으로 희석하였다. 실온에서 밤새 교반 후, 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 농축시켜 50 mg의 2-메틸-프로판-2-설핀산(2-사이클로프로필-1-메틸-에틸)-아마이드를 수득하고, 이를 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.

단계 3

2-사이클로프로필-1-메틸-에틸아민 하이드로클로라이드

MeOH(10 mL)을 함유하는 냉각된(5℃) 50 mL 환저 플라스크에 아세틸 클로라이드(0.10 mL, 1.41 mmol)를 천천히 첨가하였다. 그 용액을 30분 동안 교반하였다. 갓 제조된 MeOH 중 HCl을 2-메틸-프로판-2-설핀산(2-사이클로프로필-1-메틸-에틸)-아마이드(50 mg, 0.25 mmol)를 함유하는 환저 플라스크에 옮겼다. 30분 동안 실온에서 교반 후, 반응 혼합물을 농축시켜 2-사이클로프로필-1-메틸-에틸아민 하이드로클로라이드를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS: [M+H]⁺ = 100.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-사이클로프로필-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 178에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-부탄-2-아민 대신 2-사이클로프로필-1-메틸-에틸아민 하이드로클로라이드을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 연황색 니들 9 mg(28%)로서 단리하였다.

실시예 187.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1,3-다이메틸-부틸)-아마이드

실시예 178에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-부탄-2-아민 대신 1,3-다이메틸-부틸아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 연황색 니들 24 mg(76%)로서 단리하였다.

실시예 188.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(102 mg, 0.23 mmol), (2R,3S)-2-아미노부탄-1,3-다이올(34 mg, 0.32 mmol), 및 HATU(97 mg, 0.25 mmol)를 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(6 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.25 mL, 1.43 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3x)로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헵탄(구배: 5-100% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 100 mg(82%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+Na]⁺ = 551.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드 및 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-메톡시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

압력 튜브에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-하이드록시메틸-프로필)-아마이드(93 mg, 0.176 mmol), 산화은(83 mg, 0.36 mmol) 및 메틸 요오다이드(200 μL, 3.2 mmol)를 아세토나이트릴과 합쳐 흑색 현탁액을 수득하였다. 상기 튜브를 포일로 래핑하여 광을 차단하였다. 그 시스템을 모래 욕에 위치시키고, 교반하면서 40℃로 가열하였다. 그 온도를 21 시간 동안 유지시켰다. 냉각 시에, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과시켰다. 여액을 농축시켰다. 조질 물질을 EtOAc/헥산(구배: 15% - 90% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 45 mg(47%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드를 연황색 고체 ([M+H]⁺ = 543)로서 및 20 mg(20%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-메톡시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드를 백색 고체([M+H]⁺ = 557)로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드(44 mg, 0.081 mmol) 및 TFA(0.3 ml, 3.9 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(1 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.15 ml, 2.2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(고온 다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 15 mg(46%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 189.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

실시예 188, 단계 3에 개시된 절차에 따라, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-하이드록시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드 대신 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-메톡시-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드를 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 백색 고체 11 mg(81%)로서 단리하였다.

실시예 190.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-하이드록시-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드

실시예 178에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-부탄-2-아민 대신 2-아미노-2-(테트라하이드로퓨란-2-일)에탄올을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체(부분입체이성질체들의 혼합물) 10 mg(59%)로서 단리되었다.

실시예 191.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-메톡시-1-(테트라하이드로-퓨란-2-일)-에틸]-아마이드

실시예 179에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-2-아미노-4-메틸펜탄-1-올 대신 2-아미노-2-(테트라하이드로퓨란-2-일)에탄올을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체(부분입체이성질체들의 1:1 혼합물), 12 mg(53%)로서 단리되었다.

실시예 192.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-3-메탄설폰일-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-하이드록시메틸-3-메틸설판일-프로필)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.23 mmol), (S)-2-아미노-4-(메틸티오)부탄-1-올(32 mg, 0.24 mmol), 및 HATU(90 mg, 0.24 mmol)를 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(4 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.19 mL, 1.1 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3x)로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헵탄(구배: 5-50% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 105 mg(83%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-하이드록시메틸-3-메틸설판일-프로필)-아마이드를 회백색 거품으로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 559.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-하이드록시메틸-3-메탄설폰일-프로필)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-하이드록시메틸-3-메틸설판일-프로필)-아마이드(105 mg, 0.188 mmol)를 다이클로로메탄(2 ml)과 합쳐 회백색 용액을 수득하였다. 그 용액을 빙욕을 사용하여 5℃로 냉각시켰다. 다이클로로메탄(2 ml) 중 mCPBA(87 mg, 0.388 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 그 후 20 방울의 MeOH를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 다이클로로메탄으로 희석하고, 나트륨 바이카보네이트(2x15 mL) 포화 용액으로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켜 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-하이드록시메틸-3-메탄설폰일-프로필)-아마이드를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메톡시메틸-3-메탄설폰일-프로필)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-하이드록시메틸-3-메탄설폰일-프로필)-아마이드(102 mg, 0.173 mmol)를 THF(1.9 ml) 중에 용해시켜 무색 용액을 수득하였다. 반응을 빙욕에서 냉각시키고, 분쇄된 KOH(97 mg, 1.73 mmol), 18-크라운-6(46 mg, 0.173 mmol), 및 요오도메탄(11 μL, 0.173 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하고, 이후 빙욕을 제거하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 다이클로로메탄(10 mL)으로 희석하고, 수성 암모늄 클로라이드(10 mL), 물(10 mL), 및 포화 나트륨 바이카보네이트(10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 EtOAc/헵탄(구배: 0% - 60% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 30 mg(29%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메톡시메틸-3-메탄설폰일-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+Na]⁺ = 627).

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-3-메탄설폰일-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-1-메톡시메틸-3-메탄설폰일-프로필)-아마이드(35 mg, 0.058 mmol) 및 TFA(0.5 ml, 6.5 mmol)를 다이클로로메탄(1.5 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(1 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.19 ml, 2.8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 12 mg(44%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-3-메탄설폰일-1-메톡시메틸-프로필)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 193.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-다이플루오로메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-다이플루오로메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

25 mL 압력 튜브에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드(60 mg, 0.12 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(14 mg, 0.070 mmol)를 아세토나이트릴(3 mL)과 합쳐 연황색 현탁액을 수득하였다. 혼합물을 탈기시키고, 아르곤 하에 위치시켰다. 반응 혼합물을 모래 욕에서 50 ℃로 가열하였다. 2,2-다이플루오로-2-(플루오로설폰일)아세트산(12 μL, 0.112 mmol)을 천천히 적가하여 연황색 용액을 수득하였다. 반응을 추가 5 분 동안 교반하였다. 반응을 물로 켄칭시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합친 유기물을 물, 포화 나트륨 바이카보네이트, 및 염수로 순차적으로 세척한 후, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피(구배: 0% 내지 50% 헥산 중 EtOAc)로 정제하여 12 mg(18%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-다이플루오로메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 549.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-다이플루오로메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-다이플루오로메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(10 mg, 0.018 mmol) 및 TFA(0.5 ml, 6.5 mmol)를 다이클로로메탄(1.5 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(1 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(30 μL, 0.46 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(다이클로로메탄)로 정제하여 2 mg(32%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-다이플루오로메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 194.

2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

5-사이클로프로필-1-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-1H-인다졸

250 ml 2구 환저 플라스크에 5-브로모-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-인다졸(2.5 g, 7.64 mmol), 사이클로프로필보론산(1.18 g, 13.7 mmol), 팔라듐 (II) 아세테이트(85.7 mg, 0.38 mmol), 트라이사이클로헥실포스핀(214 mg, 0.764 mmol), 칼륨 포스페이트 트라이베이직(3.24 g, 15.3 mmol), 톨루엔(40 ml) 및 물(4 ml)을 충전시켰다. 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 그 후 EtOAc(100 ml) 및 물(20 ml)로 희석하였다. 혼합물을 EtOAc(100 mL)로 추출하였다. 유기 층들을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 SiO₂에서 흡수시키고, EtOAc/CH₂Cl₂(구배: 0-10% EtOAc)를 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 1.7 g(77%)의 5-사이클로프로필-1-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-1H-인다졸을 연황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

5-사이클로프로필-1H-인다졸

1 L 환저 플라스크에서, 5-사이클로프로필-1-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-1H-인다졸(1.7 g, 5.89 mmol)를 다이클로로메탄(292 mL) 및 트라이플루오로아세트산(194 mL)의 용액 중에 용해시켰다. 실온에서 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(24.2 mL, 5.89 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 물(50 mL)에 붓고, EtOAc(2x100 mL)로 추출하였다. 유기 층들을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 1 g의 5-사이클로프로필-1H-인다졸을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS: [M+H]⁺ = 299

단계 3

5-사이클로프로필-1-메틸-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸

실시예 1, 단계 1 내지 3에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 인다졸 대신 5-사이클로프로필-1H-인다졸을 사용하여 제조하였다.

단계 4

2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

실시예 14, 단계 1 및 2에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 6-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸 대신 5-사이클로프로필-1-메틸-3-트라이부틸스태난일-1H-인다졸을 사용하여 제조하였다.

단계 5

2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

25 mL 환저 플라스크에 2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(70 mg, 0.15 mmol), (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드(21 mg, 0.16 mmol), 및 HATU(63 mg, 0.16 mmol)를 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(2 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.08 mL, 0.45 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 물로 켄칭하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3x)로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조질 물질을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피(구배: 헵탄 중 15% 내지 100% EtOAc)로 정제하여 34 mg(42%)의 2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 535.

단계 6

2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

10 mL 환저 플라스크에서, 2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(34 mg, 0.065 mmol) 및 TFA(0.5 ml, 6.5 mmol)를 다이클로로메탄(1.5 ml)과 합쳐 오렌지 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조질 고체를 다이클로로메탄(1.5 mL) 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(0.11 ml, 1.6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 잔류물을 물로 침전시켰다. 현탁액을 1 시간 동안 교반하고, 조질 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조질 고체를 마쇄(다이클로로메탄/헵탄)로 정제하여 10 mg(38%)의 2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 195.

2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

실시예 194, 단계 5 및 6에 개시된 절차에 따라, 단계 5의 (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드 대신 아이소프로필아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 18 mg(62%)로서 단리되었다.

실시예 196.

2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

실시예 194, 단계 5 및 6에 개시된 절차에 따라, 단계 5의 (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드 대신 2-아미노-2-메틸프로판-1-올을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 25 mg(55%)로서 단리되었다.

실시예 197.

2-(5-사이클로프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

실시예 194, 단계 5 및 6에 개시된 절차에 따라, 단계 5의 (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드 대신 3급-부틸아민을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물은 회백색 고체 25 mg(79%)로서 단리되었다.

실시예 198.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(1R,2R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-2-하이드록시-프로필]-아마이드

단계 1

[(1R,2R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-2-하이드록시-프로필]-카르밤산 9H-플루오렌-9-일메틸 에스터

25 mL 환저 플라스크에 (2R,3R)-2-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카보닐아미노)-3-하이드록시부탄산(184 mg, 0.54 mmol), 3-플루오로아제티딘 하이드로클로라이드(66 mg, 0.59 mmol), 및 HATU(242 mg, 0.64 mmol)를 충전시켰다. 그 후 아세토나이트릴(1.1 mL), 이어서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.20 mL, 1.1 mmol) 및 N-메틸모폴린(0.05 mL, 0.45 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 농축시켰다. 조질 고체를 EtOAc/헵탄(구배: 10-80% EtOAc)을 사용하여 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여 112 mg(52%)의 [(1R,2R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-2-하이드록시-프로필]-카르밤산 9H-플루오렌-9-일메틸 에스터를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]⁺ = 399.

단계 2:

(2R,3R)-2-아미노-1-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-3-하이드록시-부탄-1-온

25 mL 환저 플라스크에서, [(1R,2R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-2-하이드록시-프로필]-카르밤산 9H-플루오렌-9-일메틸 에스터(112 mg, 0.28 mmol) 및 다이에틸아민(0.29 ml, 2.81 mmol)를 아세토나이트릴(6 ml)과 합쳐 백색 현탁액을 수득하였다. 반응을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 농축 건조시켜 (2R,3R)-2-아미노-1-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-3-하이드록시-부탄-1-온을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(1R,2R)-1-(3-플루오로-아제티딘-1-카보닐)-2-하이드록시-프로필]-아마이드

실시예 178에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 (S)-부탄-2-아민 대신 (2R,3R)-2-아미노-1-(3-플루오로-아제티딘-1-일)-3-하이드록시-부탄-1-온을 사용하여 제조하였다. 최종 화합물을 백색 고체 31 mg(63%)로서 단리하였다.

실시예 199.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드

단계 1

2-메틸-프로판-2-설핀산 1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-메트-(E)-일리덴아마이드

25 mL 바이알에서, 쿠프릭 설페이트(1.96 g, 12.3 mmol), 1-메틸-1H-이미다졸-2-카브알데하이드(450 mg, 4.09 mmol) 및 2-메틸프로판-2-설핀아마이드(594 mg, 4.9 mmol)를 다이클로로메탄(2 ml)과 합쳐 연청색 현탁액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 15 동안 교반한 후, 셀라이트를 통해 여과하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 용리하는 실리카 겔을 통해 다시 여과하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켜 670 mg(76%)의 2-메틸-프로판-2-설핀산 1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-메트-(E)-일리덴아마이드를 오일로서 수득하였다.

단계 2

2-메틸-프로판-2-설핀산 [1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드

250 mL 환저 플라스크에서, 2-메틸-프로판-2-설핀산 1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-메트-(E)-일리덴아마이드(670 mg, 3.14 mmol)를 THF와 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 에터 중 메틸마그네슘 브로마이드(3.0 M, 5.24 ml, 15.7 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응을 0℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH₄Cl로 희석하였다. 수성 층을 다이클로로메탄(2 x 100 mL)으로 역추출하였다. 수성 층을 EtOAc(1 x 125 mL)으로 역추출하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켜 700 mg(92%)의 2-메틸-프로판-2-설핀산 [1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드를 단일 부분입체이성질체로서 수득하였다.

단계 3

1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸아민 다이하이드로클로라이드

250 mL 환저 플라스크에서, 2-메틸-프로판-2-설핀산 [1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드(700 mg, 3.05 mmol)를 0℃에서 메탄올과 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 염화수소(1,4-다이옥산 중 4.0 M, 10 ml, 40.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반한 후, 진공에서 농축시켜 1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸아민 다이하이드로클로라이드를 수득하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드

20 mL 신틸레이션 바이알에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(400 mg, 0.87 mmol), 1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸아민 다이하이드로클로라이드(219 mg, 1.75 mmol), HBTU(431 mg, 1.14 mmol), HOBt(153 mg, 1.14 mmol) 및 DIPEA(0.31 ml, 1.75 mmol)를 DMF(6 ml)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO₃(3 x 25 mL) 및 H₂O(3 x 25 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 4 g, 0% 내지 10% DCM 중 MeOH와 0.1% NH₄OH))로 정제하여 300 mg(61%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드를 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 566.

단계 5

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드(300 mg, 0.531 mol)를 TFA:DCM의 4:6 용액(142 mL) 중에 용해시켰다. 실온에서 밤새 교반한 후, 휘발물질을 감압 하에 제거하였다. 그 후 조질 물질을 다이클로로메탄 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(319 mg, 5.31 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 침전물을 여과에 의해 수집하여 100 mg(43%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 200.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드

20 mL 신틸레이션 바이알에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(400 mg, 0.87 mmol), D-알라닌올(131 mg, 1.75 mmol), HBTU(431 mg, 1.14 mmol), HOBt(153 mg, 1.14 mmol) 및 DIPEA(0.31 ml, 1.75 mmol)를 DMF(6 ml)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO₃(3 x 25 mL) 및 H₂O(3 x 25 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 4 g, 0% 내지 10% DCM 중 MeOH와 0.1% NH₄OH)로 정제하여 250 mg(56%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 516.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드(35 mg, 0.068 mol)를 TFA:DCM의 4:6 용액(10 mL) 중에 용해시켰다. 실온에서 밤새 교반한 후, 휘발물질을 감압 하에 제거하였다. 그 후 조질 물질을 다이클로로메탄 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(41 mg, 0.68 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 침전물을 여과에 의해 수집하여 15 mg(57%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 201.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-2-하이드록시-1-메틸-프로필)-아마이드

단계 1

트랜스-3-아미노-부탄-2-올

20 mL 초음파 바이알에 암모니아(7.87 g, 10 ml, 462 mmol), 시스-2,3-다이메틸옥시란(1.0 g, 13.9 mmol) 및 아이소프로필 알콜(3 ml)을 첨가하였다. 그 바이알을 캡핑하고, 초음파 장치에서 160℃에서 1 시간 동안 가열하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, 용매를 증발시켜 1.24 g의 트랜스-3-아미노-부탄-2-올을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-2-하이드록시-1-메틸-프로필)-아마이드

20 mL 신틸레이션 바이알에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(120 mg, 0.26 mmol), 트랜스-3-아미노부탄-2-올(47 mg, 0.524 mmol), HBTU(129 mg, 0.341 mmol), HOBt(46 mg, 0.341 mmol) 및 DIPEA(169 mg, 1.31 mmol)를 DMF(1.8 ml)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO₃(3 x 25 mL) 및 H₂O(3 x 25 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 4 g, 0% 내지 10% DCM 중 MeOH와 0.1% NH₄OH)로 정제하여 127 mg(91%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-2-하이드록시-1-메틸-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 530.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-2-하이드록시-1-메틸-프로필)-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-2-하이드록시-1-메틸-프로필)-아마이드(120 mg, 0.227 mol)를 TFA:DCM의 4:6 용액(34 mL) 중에 용해시켰다. 실온에서 밤새 교반한 후, 휘발물질을 감압 하에 제거하였다. 그 후 조질 물질을 다이클로로메탄 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(136 mg, 2.27 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 물을 첨가하고, 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하여 77 mg(85%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(트랜스-2-하이드록시-1-메틸-프로필)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 202.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-페녹시-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-페녹시-에틸)-아마이드

100 mL 환저 플라스크에서, HBTU(78 mg, 0.21 mmol), 후니히스 염기(0.14 ml, 0.79 mmol) 및 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(70 mg, 0.16 mmol)을 DMF(3 ml)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 1-페녹시프로판-2-아민(48 mg, 0.32 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하였다. 반응 혼합물을 50 mL 포화 NaHCO₃ 에 붓고, EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, 물(2 x 50 mL)로 처리한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 81 mg(89%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-페녹시-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 575.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-페녹시-에틸)-아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-페녹시-에틸)-아마이드(80 mg, 0.139 mol)를 TFA:DCM의 4:6 용액(6.5 mL) 중에 용해시켰다. 실온에서 밤새 교반한 후, 휘발물질을 감압 하에 제거하였다. 그 후 조질 물질을 다이클로로메탄 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(837 mg, 13.9 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 물을 첨가하고, 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하여 35 mg(57%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-페녹시-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 203.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-하이드록시-1-메틸-2-(테트라하이드로-파이란-4-일)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 A)

단계 1

2-나이트로-1-(테트라하이드로-파이란-4-일)-프로판-1-올

100 mL 환저 플라스크에서, 나이트로에탄(1.42 ml, 26.3 mmol) 및 테트라하이드로-2H-파이란-4-카브알데하이드(1.0 g, 8.76 mmol)를 THF(5 ml) 및 3급-부탄올과 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 칼륨 3급-부톡사이드(197 mg, 1.75 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 실온에서 30 분 동안 교반 후, 반응 혼합물을 EtOAc 및 물로 희석하였다. 유기 상을 분리시키고, 건조시키고, 증발시켜 1.3 g(79%)의 조질 2-나이트로-1-(테트라하이드로-파이란-4-일)-프로판-1-올을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

2-아미노-1-(테트라하이드로-파이란-4-일)-프로판-1-올

2-나이트로-1-(테트라하이드로-파이란-4-일)-프로판-1-올(1.3 g, 6.87 mmol)를 에탄올(55 mL) 중에 용해시키고, 1 기압의 수소 하에 탄소 상 팔라듐(0.2 g)으로 처리하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 팔라듐을 여과해 내고, 감압 하에 용매를 감소시켜 1.0 g(91%)의 2-아미노-1-(테트라하이드로-파이란-4-일)-프로판-1-올을 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 160.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-하이드록시-1-메틸-2-(테트라하이드로-파이란-4-일)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 A 및 부분입체이성질체 B)

100 mL 환저 플라스크에서, HBTU(112 mg, 0.29 mmol), 후니히스 염기(0.20 ml, 1.13 mmol) 및 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.23 mmol)를 DMF(3.0 ml)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 2-아미노-1-(테트라하이드로-2H-파이란-4-일)프로판-1-올(72 mg, 0.45 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하였다. 반응 혼합물을 50 mL 포화 NaHCO₃에 붓고, EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층들을 합치고, H₂O(2 x 50 mL)로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 조질 물질을 수득하였다. 생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 80 g, 20% 내지 50% 헥산 중 EtOAc)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-하이드록시-1-메틸-2-(테트라하이드로-파이란-4-일)-에틸]-아마이드를 두 종의 별개의 부분입체이성질체(자의적으로 지명함)로 수득하였다. 부분입체이성질체 A(30 mg, 22%)

를 백색 분말로서 수득하고, 부분입체이성질체 B(70 mg, 53%)

를 백색 분말로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-하이드록시-1-메틸-2-(테트라하이드로-파이란-4-일)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 A)

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-하이드록시-1-메틸-2-(테트라하이드로-파이란-4-일)-에틸]-아마이드, 부분입체이성질체 A(26 mg, 0.034 mmol)를 TFA:DCM의 4:6 용액(5.7 mL) 중에 용해시켰다. 실온에서 밤새 교반한 후, 휘발물질을 감압 하에 제거하였다. 그 후 조질 물질을 다이클로로메탄 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(206 mg, 3.43 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 물을 첨가하고, 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하여 13 mg(83%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-하이드록시-1-메틸-2-(테트라하이드로-파이란-4-일)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 A)를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 204.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-하이드록시-1-메틸-2-(테트라하이드로-파이란-4-일)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 B)

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-하이드록시-1-메틸-2-(테트라하이드로-파이란-4-일)-에틸]-아마이드, 부분입체이성질체 B(70 mg, 0.120 mmol)를 TFA:DCM의 4:6 용액(5.7 mL) 중에 용해시켰다. 실온에서 밤새 교반한 후, 휘발물질을 감압 하에 제거하였다. 그 후 조질 물질을 다이클로로메탄 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(722 mg, 12 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 물을 첨가하고, 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하여 30 mg(55%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [2-하이드록시-1-메틸-2-(테트라하이드로-파이란-4-일)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 B)를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 205.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-3-시아노-1-메틸-프로필)-아마이드

단계 1

((R)-3-시아노-1-메틸-알릴)-카르밤산 3급-부틸 에스터

20 mL 신틸레이션 바이알에서, ((R)-1-메틸-2-옥소-에틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터(2.5 g, 14.4 mmol) 및 (트라이페닐포스포란일리덴)아세토나이트릴(6.52 g, 21.7 mmol)을 다이클로로메탄(20 mL) 중에 혼합하고, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시켜 조질 물질을 수득하고, 이를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 구배 n-헥산 에틸 아세테이트)로 정제하여 1.8 g(63%)의 ((R)-3-시아노-1-메틸-알릴)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 3:1 부분입체선택도(E:Z)로 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

((R)-3-시아노-1-메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터

250 mL 환저 플라스크에서, 탄소 상 팔라듐(150 mg) 및 3:1의 E:Z 올레핀 ((R)-3-시아노-1-메틸-알릴)-카르밤산 3급-부틸 에스터(375 mg, 1.91 mmol)의 혼합물을 에탄올과 합쳐 흑색 현탁액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 16 시간 동안 수소 벌룬 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켜 250 mg(66%)의 ((R)-3-시아노-1-메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

(R)-4-아미노펜탄나이트릴 트라이플루오로아세테이트

100 mL 환저 플라스크에서, ((R)-3-시아노-1-메틸-프로필)-카르밤산 3급-부틸 에스터(158 mg, 0.80 mmol)를 TFA(2 ml) 및 다이클로로메탄(8 mL)과 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 15 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시켜 53 mg(68%)의 (R)-4-아미노펜탄나이트릴 트라이플루오로아세테이트를 수득하고, 이를 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-3-시아노-1-메틸-프로필)-아마이드

20 mL 신틸레이션 바이알에서, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(120 mg, 0.26 mmol), (R)-4-아미노펜탄나이트릴 트라이플루오로아세테이트(51 mg, 0.524 mmol), HBTU(129 mg, 0.341 mmol), HOBt(46 mg, 0.341 mmol) 및 DIPEA(169 mg, 1.31 mmol)를 DMF(1.8 ml)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO₃(3 x 25 mL) 및 H₂O(3 x 25 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 4 g, 0% 내지 10% DCM 중 MeOH와 0.1% NH₄OH)로 정제하여 99 mg(70%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-3-시아노-1-메틸-프로필)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 539.

단계 5

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-3-시아노-1-메틸-프로필)-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-3-시아노-1-메틸-프로필)-아마이드(120 mg, 0.223 mmol)를 TFA:DCM의 4:6 용액(57 mL) 중에 용해시켰다. 실온에서 밤새 교반한 후, 휘발물질을 감압 하에 제거하였다. 그 후 조질 물질을 다이클로로메탄 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(134 mg, 2.23 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 물을 첨가하고, 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하여 45 mg(49%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-3-시아노-1-메틸-프로필)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 408.

실시예 206.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 A)

단계 1

[(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터(부분입체이성질체 A 및 부분입체이성질체 B)

0℃에서 DMSO를 트라이메틸설포늄 요오다이드(1.79 g, 8.15 mmol) 및 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 326 mg, 8.15 mmol)로 첨가하였다. 그 후 DMSO 중 ((R)-3-시아노-1-메틸-알릴)-카르밤산 3급-부틸 에스터의 3:1의 E:Z 혼합물(0.4 g, 2.04 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 밤새 가온되도록 놓아 두었다. 반응을 실온에서 2 일 동안 교반한 후, 물 및 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기 층들을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 80 g, 20% 내지 50% 헥산 중 EtOAc)로 정제하여 [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 2종의 구별되는 부분입체이성질체(자의적으로 지명함)로서 수득하였다. 부분입체이성질체 A(250 mg, 58%)를 무색 오일로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 211. 부분입체이성질체 B(130 mg, 30%)를 백색 분말로서 수득하였다. MS: (M+Na)⁺ = 233.

단계 2

2-((R)-1-아미노-에틸)-사이클로프로판카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트(부분입체이성질체 A)

100 mL 환저 플라스크에서, [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터, 부분입체이성질체 A(250 mg, 1.19 mmol)를 TFA(2 ml) 및 다이클로로메탄(8 mL) 중에 용해시켰다. 반응 혼합물을 25℃에서 15 시간 동안 교반하고, 휘발물질을 감압 하에 제거하여 2-((R)-1-아미노-에틸)-사이클로프로판카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트(부분입체이성질체 A)를 수득하고, 이를 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 A)

2-((R)-1-아미노-에틸)-사이클로프로판카보나이트릴 트라이플루오로아세테이트, 부분입체이성질체 A(단계 2로부터의 조질물)를 1-하이드록시벤조트라이아졸(153 mg, 1.14 mmol), 2-(1H-벤조[d][1,2,3]트라이아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸아이소우로늄 헥사플루오로포스페이트(V) (662 mg, 1.75 mmol,), DIPEA(0.76 ml, 4.37 mmol), 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(400 mg, 0.87 mmol) 및 DMF(6.0 ml)로 처리하여 연황색 용액을 수득하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 유기 층들을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 헵탄 중 EtOAc 구배)로 정제하여 210 mg(44%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 A)를 무색 오일로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 551.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 A)

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-아마이드, 부분입체이성질체 A(210 mg, 0.382 mmol)를 TFA:DCM의 4:6 용액(57 mL) 중에 용해시켰다. 실온에서 밤새 교반한 후, 휘발물질을 감압 하에 제거하였다. 그 후 조질 물질을 다이클로로메탄 중에 용해시키고, 에틸렌다이아민(229 mg, 3.82 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 물을 첨가하고, 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하여 140 mg(87%)의 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 A)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 207.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-아마이드(부분입체이성질체 B)

실시예 206, 단계 2 내지 4에 개시된 절차에 따라, 단계 2의 [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터, 부분입체이성질체 A 대신 [(R)-1-(2-시아노-사이클로프로필)-에틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터, 부분입체이성질체 B를 사용하여 제조하였다. 생성물을 연황색 고체로서 단리하였다.

실시예 208.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(4-브로모-페닐)-사이클로프로필]-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(4-브로모-페닐)-사이클로프로필]-아마이드

DMF(5 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(150 mg, 0.34 mmol)의 교반된 현탁액에 실온에서 질소 분위기 하에 HATU(258 mg, 0.68 mmol) 및 1-(4-브로모-페닐)-사이클로프로판아민(108 mg, 0.51 mmol), 이어서 DIPEA(0.24 mL, 1.36 mmol)를 첨가하였다. 생성된 연황색 용액을 15 시간 동안 교반하고, 이 시점에서 TLC 분석(Hex:EA, 1:1, R_f = 0.5)은 새로운 스팟의 존재를 지시하였다. 그 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 유기 화합물을 EtOAc(3 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 추출물을 염수 용액으로 세척한 후, 무수 MgSO₄ 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조질 생성물을 수득하고, 이를 10 분 내에 헥산(0-60%) 중 EtOAc로 용리하고 ISCO 컬럼 크로마토그래피(40 g)를 사용하여 정제하였다. 목적 분획들을 합치고, 용매를 진공 하에 건조시켜 197 mg(91%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(4-브로모-페닐)-사이클로프로필]-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(4-브로모-페닐)-사이클로프로필]-아마이드

실온에서 THF(3 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(4-브로모-페닐)-사이클로프로필]-아마이드(50 mg, 0.078 mmol)의 교반된 용액에 TBAF(THF 중 1.0 M, 1.18 mL, 1.18 mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 연갈색 용액을 85℃로 가열하고, 3 시간 동안 교반하고, 이 시점에서 TLC 분석(EA, R_f = 0.3)은 출발 물질의 부존재를 지시하였다. 그 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 3 ml의 아세톤 및 9 ml의 포화 나트륨 바이카보네이트 용액을 첨가하고, 생성된 현탁액을 1 시간 동안 교반하였다. 그 반응 현탁액을 물로 희석하고, 유기 화합물을 EtOAc(3 x 25 mL)로 추출하고, 합친 추출물을 염수 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 진공 하에 용매를 제거하여 조질 고체를 수득하고, 이를 가열하면서 아세토나이트릴 중에 용해시켰다. 생성된 녹색 용액을 15 시간 동안 냉장고에 보관하고, 고체를 여과에 의해 수집하고, 아세토나이트릴로 세척하였다. 공기 중에서 건조시킨 후, 25 mg(63%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(4-브로모-페닐)-사이클로프로필]-아마이드를 회백색 고체로서 단리하였다.

실시예 209.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(3-브로모-페닐)-사이클로부틸]-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(3-브로모-페닐)-사이클로부틸]-아마이드

DMF(5 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(200 mg, 0.45 mmol)의 교반된 현탁액에 실온에서 질소 분위기 하에 HATU(344 mg, 0.91 mmol) 및 1-(3-브로모-페닐)-사이클로부탄아민 하이드로클로라이드(178 mg, 0.68 mmol), 이어서 DIPEA(0.40 mL, 2.26 mmol)를 첨가하였다. 생성된 연황색 용액을 15 시간 동안 교반하고, 이 시점에서 TLC 분석(Hex:EA, 1:1, R_f = 0.5)은 새로운 스팟의 존재를 지시하였다. 그 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 유기 화합물을 EtOAc(3 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 추출물을 염수 용액으로 세척한 후, 무수 MgSO₄ 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조질 생성물을 수득하고, 이를 10분 내에 헥산(0-60%) 중 EtOAc로 용리하고 ISCO 컬럼 크로마토그래피(40 g)를 사용하여 정제하였다. 목적 분획들을 합치고, 용매를 진공 하에 건조시켜 234 mg(80%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(3-브로모-페닐)-사이클로부틸]-아마이드를 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(3-브로모-페닐)-사이클로부틸]-아마이드

다이클로로메탄(3 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(3-브로모-페닐)-사이클로부틸]-아마이드(50 mg, 0.077 mmol)의 연갈색 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 과량의 TFA(1.2 mL, 15.4 mmol)를 첨가하였다. 생성된 연갈색 용액을 4 시간 동안 교반하고, 이 시점에서 TLC 분석 (EA, R_f = 0.35)은 출발 물질의 부존재를 지시하였다. 그 후, 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 톨루엔으로 공비혼합시켜 연갈색 고체를 수득하였다. 그 후, 이 고체를 실온에서 질소 분위기 하에 과량의 메탄올(3 mL) 중 트라이에틸아민(1.07 mL, 7.7 mmol)으로 처리하였다. 생성된 현탁액을 15 시간 동안 교반하고, 그 후 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 아세토나이트릴로 마쇄하고, 고체를 여과에 의해 수집하고, 아세토나이트릴로 세척하였다. 공기 중에서 건조시킨 후, 15 mg(38%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(3-브로모-페닐)-사이클로부틸]-아마이드를 연황색 고체로서 단리하였다.

실시예 210.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(4-브로모-페닐)-사이클로부틸]-아마이드

실시예 209에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 1-(3-브로모-페닐)-사이클로부탄아민 하이드로클로라이드 대신 1-(4-브로모-페닐)-사이클로부탄아민 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 211.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-브로모-페닐)-2,2,2-트라이플루오로-에틸]-아마이드

실시예 209에 개시된 절차에 따라, 단계 1의 1-(3-브로모-페닐)-사이클로부탄아민 하이드로클로라이드 대신 (R)-1-(4-브로모-페닐)-2,2,2-트라이플루오로에탄아민을 사용하여 제조하였다.

실시예 212.

2-(5,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

3-브로모-5,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸

실온에서 N-메틸피롤리딘(20 mL) 중 3-브로모-5,6-다이플루오로-1H-인다졸(1.0 g, 4.29 mmol) 및 칼륨 카보네이트(4.15 g, 30.0 mmol)의 연갈색 현탁액에 요오도메탄(0.81 mL, 12.9 mmol)을 첨가하였다. 생성된 진한 갈색 용액을 15 시간 동안 교반하고, 실온에서 질소 분위기 하에 첨가하고, 이 시점에서 TLC(2:1, Hex:EA, Rf = 0.6, 메이저 및 0.4, 마이너)는 목적 화합물의 존재를 지시하였다. 반응을 물(약 100 mL)로 희석하고, 유기 화합물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 합친 추출물을 염수 용액으로 세척하였다. MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여액을 농축시켜 조질 연갈색 고체를 수득하고, 이를 헥산(1 분), 0-15% 헥산 중 EA(2 분), 15-40% 헥산 중 EA(15 분)로 용리하고 ISCO(80 g) 컬럼을 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 746 mg(70%)의 3-브로모-5,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸을 백색 고체로서 및 186 mg(18%)의 3-브로모-5,6-다이플루오로-2-메틸-2H-인다졸을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2.0 g, 5.37 mmol), (S)-1-메톡시프로판-2-아민(718 mg, 8.06 mmol), 및 HATU(4.09 g, 10.7 mmol)의 혼합물에 실온에서 질소 분위기 하에 DMF(20 mL) 및 DIPEA(3.75 mL, 21.5 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 15 시간 동안 실온에서 교반하고, 이 시점에서 LCMS 분석 및 TLC(1:1, Hex:EA, Rf = 0.4) 시스템은 목적 화합물의 존재를 지시하였다. 반응을 물(약100 mL)로 희석하고, 유기 화합물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 합친 추출물을 염수 용액으로 세척하였다. MgSO₄ 상에서 건조시킨 후, 여액을 농축시켜 조질 연갈색 고체(약 4.1 g)를 수득하고, 이를 헥산(1 분), 0-30% 헥산 중 EA(2 분), 30-60% 헥산 중 EA(15 분)로 용리하고 ISCO(120 g) 컬럼을 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 1.9 g(80%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(5,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

-5℃ 에서(얼음/아세톤) THF(3 mL, 증류됨) 중 3-브로모-5,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸(247 mg, 1.00 mmol)의 무색 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 0.715 mL, 1.43 mmol)의 용액을 3 내지 5 분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 매우 연한 황색 용액을 2 시간 동안 0℃에서 교반하고, 이 시점에서 가수분해된 분취물의 TLC 분석(Hex:EA, 2:1, Rf = 0.5 신규 스팟, R_f = 0.65, SM)은 보다 극성의 스팟을 나타내었지만, 출발 물질 또한 존재함을 나타내었다. 투명한 연황색 용액을 실온으로 천천히 가온시켰다. 이 기간 동안 황색 현탁액이 형성되고, 이를 추가 3 시간 동안 교반하여 반응을 완료시켰다. 그 후, THF(3 mL) 중 아연 클로라이드(273 mg, 2.0 mmol) (무수 ZnCl₂를 힛 건으로 가열하여 고 진공 하에 용융시킨 후, THF 중에 용해시키기 전에 실온으로 냉각시킴)의 용액을 실온에서 황색 현탁액에 첨가하였다. 생성된 연황색 현탁액을 10 분 동안 교반하였다.

별개의 단구 25 mL 환저 플라스크에서, 비스-(다이벤질리덴아세톤)-팔라듐(29 mg, 0.050 mmol) 및 트라이-오르토-톨일 포스핀(61 mg, 0.20 mmol)을 충전시키고, 플라스크를 질소 가스로 퍼징하였다. THF(1 mL)를 첨가하고, 생성된 연갈색 현탁액을 5 분 동안 교반한 후, 실온에서 질소 분위기 하에 THF(2 mL) 중 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(111 mg, 0.25 mmol)를 첨가하였다. 그 후, 상기 제조된 황색 아연 현탁액을 이 혼합물에 첨가하였다. 첨가 동안, 이것이 연갈색 용액으로 변하고, 그 후 60 ℃로 가열하고, 15 시간 동안 교반하고, 이 시점에서, 가수분해된 반응 혼합물의 TLC 분석(Hex:EA, 1:1, R_f = 0.5 및 SM에서 0.55)은 새로운 스팟의 존재를 지시하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, 포화 암모늄 클로라이드 용액 및 EtOAc로 희석하였다. 2개의 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc로써 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수 용액으로 세척하고, 무수 MgSO₄ 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조질 생성물을 수득하고, 이를 헥산(1 분), 0-25% 헥산 중 EA(2 분), 25-60% 헥산 중 EA(10 분), 60-100% 헥산 중 EA(2 분), 및 순수 EA(5 분)으로 용리하고 ISCO(40 g) 컬럼을 사용하는 크로마토그래피로 정제하였다. 목적 분획들을 합치고, 용매를 진공 하에 건조시켜 57 mg(43%)의 2-(5,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(5,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

THF(3 mL) 중 2-(5,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(52 mg, 0.098 mmol)의 교반된 용액에 실온에서 TBAF(THF 중 1.0 M, 1.96 mL, 1.96 mmol) 용액을 첨가하였다. 생성된 연갈색 용액을 85℃로 가열하고, 3 시간 동안 교반하고, 이 시점에서 TLC 분석(EA, R_f = 0.3)은 출발 물질의 부존재를 지시하였다. 그 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 3 ml의 아세톤 및 9 ml의 포화 나트륨 바이카보네이트 용액을 첨가하고, 생성된 현탁액을 2 시간 동안 교반하였다. 그 반응 현탁액을 물로 희석하고, 유기 화합물을 EtOAc(3x)로 추출하고, 합친 추출물을 물 및 염수 용액으로 세척한 후, MgSO₄ 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 진공 하에 용매를 제거하여 조질 생성물을 수득하고, 이를 고온 아세토나이트릴 중에 용해시켰다. EtOAc를 첨가하고, 그 용액을 15 시간 동안 냉장고에 보관하였다. 생성된 고체를 여과에 의해 수집하고, 아세토나이트릴로 세척하고, 공기 건조시켜 15 mg의 회백색 고체를 수득하였다. 모액을 다이클로로메탄(1 분), 다이클로로메탄 중 0-100%(다이클로로메탄 중 10% 메탄올)(5 분), 및 다이클로로메탄 중 10% 메탄올(5 분)로 용리하고 ISCO(40g) 컬럼을 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 추가의 10 mg의 연황색 고체를 수득하였다. 전체적으로, 25 mg(64%)의 2-(5,6-다이플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 단리하였다.

실시예 213.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-벤질-피롤리딘-3-일)-아마이드

단계 1

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-벤질-피롤리딘-3-일)-아마이드

100 ml 환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1.0 g, 2.69 mmol)을 다이클로로메탄(3 ml)과 합하여 황색 용액을 수득하였다. (R)-1-벤질피롤리딘-3-아민(710 mg, 4.03 mmol)을 첨가하고, 이어서 DIEA(1.88 ml, 10.7 mmol)를 첨가하였다. 이 투명한 용액에 HATU(2.04 g, 5.37 mmol)를 첨가하고, 이 혼합물에 DMF(4 ml)를 첨가하였다. 이 반응물을 질소하에 밤새 교반하고, 이어서 농축하고, 물(100 ml)과 EtOAc(100 ml) 사이에 분배하였다. 수층을 EtOAc(50 ml)로 세척하고, 이어서 합한 유기물을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 이 조질물을 EtOAc에 용해시키고 실리카 겔 상에 지지하고, 헥산 중 0% 내지 100% EtOAc를 사용하는 플래시 크로마토그래피(120 g 실리사이클)로 정제하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하여, 1.38 g(97%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-벤질-피롤리딘-3-일)-아마이드를 약간의 적색/갈색 색조를 띠는 투명한 점성 반고체로서 수득하였다. LCMS(M+H)⁺ = 530.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-벤질-피롤리딘-3-일)-아마이드

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-벤질-피롤리딘-3-일)-아마이드(1.32 g, 2.49 mmol)를 함유하는 40 ml 바이알 내에, DMF(25 ml) 중 6-플루오로-1-메틸-3-트라이부틸스탄닐-1H-인다졸(1.20 g, 2.73 mmol)의 용액을 첨가하였다. 바이알을 질소로 재충전하고 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(159 mg, 0.14 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(107 mg, 0.56 mmol)를 첨가하였다. 바이알을 다시 질소로 재충전하고, 이어서 밀봉하고, 이 반응 혼합물을 열 블록에서 80℃로 4시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, EtOAc/헥산(100/30 ml)으로 희석하고, 물(100 ml)로 세척하였다. 수층을 EtOAc/헥산(100/30 ml)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 이 조질물을 헥산 중 20% 내지 100% EtOAc를 사용하는 플래시 크로마토그래피(120 g 아날로직스)로 정제하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하여, 1.02 g(62%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-벤질-피롤리딘-3-일)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS(M+H)⁺ = 600.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-벤질-피롤리딘-3-일)-아마이드

THF(1 ml)에 용해된 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-벤질-피롤리딘-3-일)-아마이드(51 mg, 0.085 mmol)를 함유하는 20 ml 바이알에, TBAF(THF 중 1.0 M, 1.0 ml, 1.0 mmol)를 첨가하였다. 바이알을 질소로 재충전하고, 이어서 밀봉하고, 열 블록에서 80℃로 3시간 동안 방치하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 아세톤(2 ml) 및 포화 NaHCO₃(20 ml)으로 켄칭하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 이어서 EtOAc로 추출하고, 유기물을 염수로 세척하였다. 수성을 다시 EtOAc로 추출하고, 유기물을 염수로 세척하였다. 유기물을 합하고 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 조질물을 MeOH 및 EtOAc에 용해시키고 셀라이트 상에 지지하고, 다이클로로메탄 중 0% 내지 10% MeOH 내지 EtOAc 중 10% MeOH를 사용하는 플래시 크로마토그래피(4 g 실리사이클)로 정제하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하였다. 고체를 다이클로로메탄, Et₂O 및 헥산으로 마쇄하여, 11 mg(29%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-벤질-피롤리딘-3-일)-아마이드를 백색 고체로서 단리하였다.

실시예 214.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-시아노메틸-피롤리딘-3-일)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(R)-피롤리딘-3-일아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-벤질-피롤리딘-3-일)-아마이드(530 mg, 0.88 mmol) 및 양성자 스폰지(132 mg, 0.62 mmol)를 함유하는 100 ml 환저 플라스크 내에, 1,2-다이클로로에탄(20 ml)을 첨가하였다. 투명한 용액을 질소하에 교반하고 빙욕에서 10분 동안 냉각하였다. 이 용액에 1-클로로에틸 클로로포름에이트(0.19 ml, 1.77 mmol)를 첨가하였다. 이 반응물을 빙욕에서 5분 동안 교반하고, 빙욕을 제거하고, 이 반응물을 실온으로 20분 동안 가온하였다. 이 반응물을 오일욕에 넣고 85℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 밤새 냉각하고 농축하였다. 잔사를 메탄올(20 ml)에 현탁하고 3시간 동안 환류 가열하고, 이어서 열로부터 제거하고 실온으로 냉각하였다. 냉각 동안 침전된 일부 생성물을 여과 제거하고 메탄올로 세척하였다. 잔여 생성물을 모액으로부터 회수하였다. 액체를 농축하고 에틸 아세테이트에 현탁하고 수성 나트륨 바이카보네이트로 세척하였다. 고체를 갖는 수용액을 다이클로로메탄으로 4회 추출하였다. 유기층을 합하고 염수(100 ml)로 세척하고, 마그네슘 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하고 에틸 아세테이트 및 헥산의 혼합물로부터 건조시켰다. 조질물을 비등 에틸 아세테이트(20 ml)에 현탁하고, 냉각하고, 여과하고, 에틸 아세테이트 및 헥산으로 세척하여, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(R)-피롤리딘-3-일아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. 이 물질을 반응물로부터 침전된 생성물과 합하고 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS:(M+H)⁺ = 510.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-시아노메틸-피롤리딘-3-일)-아마이드

단계 1로부터의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(R)-피롤리딘-3-일아마이드를 트라이에틸아민 및 브로모-아세토니트릴이 첨가된 다이클로로메탄에 용해하였다. 이 반응물을 농축하고 다이클로로메탄 및 헥산의 혼합물로부터 건조시켰다. 조질물을 다이클로로메탄, 테트라하이드로퓨란 및 메탄올의 혼합물에서 용해시키고 실리카 겔 상에 지지하고, 다이클로로메탄(0.5% Et₃N) 중 0% 내지 10% MeOH를 사용하는 플래시 크로마토그래피(4 g 실리사이클)로 정제하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하였다. 수득된 고체를 Et₂O 및 헥산으로 마쇄하였다. 고체를 버리고 모액을 농축하여, 220 mg(45%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-시아노메틸-피롤리딘-3-일)-아마이드를 백색 고체(220 mg, 45% 수율)로서 수득하였다. LCMS(M+H)⁺ = 549.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-시아노메틸-피롤리딘-3-일)-아마이드

THF(5 ml)에 현탁된 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-시아노메틸-피롤리딘-3-일)-아마이드(216 mg, 0.394 mmol)를 함유하는 100 ml 환저 플라스크 내에, TBAF(THF 중 1.0 M, 5.0 ml, 5.0 mmol)를 첨가하였다. 바이알을 질소로 재충전하고, 이어서 밀봉하고, 오일욕에서 85℃로 2시간 동안 가열하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 아세톤(5 ml) 및 포화 NaHCO₃(10 ml)으로 켄칭하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 희석하고 EtOAc로 추출하였다. 염수를 첨가하고 수층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 조질 고체를 Et₂O, EtOAc 및 헥산으로 마쇄하여, 54 mg(33%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-시아노메틸-피롤리딘-3-일)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 215.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-브로모-페닐)-에틸]-아마이드

실시예 208에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 1-(4-브로모-페닐)-사이클로프로판아민 대신에 (R)-1-(3-브로모페닐)에탄아민을 사용하여 제조하였다.

실시예 216.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-브로모-페닐)-에틸]-아마이드

실시예 208에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 1-(4-브로모-페닐)-사이클로프로판아민 대신에 (R)-1-(4-브로모페닐)에탄아민을 사용하여 제조하였다.

실시예 217.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-시아노-페닐)-에틸]-아마이드

실시예 208에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 1-(4-브로모-페닐)-사이클로프로판아민 대신에 (R)-1-(3-시아노페닐)에탄아민을 사용하여 제조하였다.

실시예 218.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-페닐)-에틸]-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-페닐)-에틸]-아마이드

20 ml 초음파 바이알 내에, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-브로모-페닐)-에틸]-아마이드(62 mg, 0.10 mmol), 구리(I) 시아나이드(18 mg, 0.20 mmol) 및 N-메틸-피롤리딘온(6 ml)(HPLC 등급, 4Å 분말 분자체로 건조됨)을 첨가하였다. 생성된 용액을 질소로 퍼징하고, 이어서 바이알을 밀봉하고, 오일욕에서 200℃로 가열하였다. 2.5시간 후 이 반응물을 실온으로 17시간에 걸쳐서 냉각시켰다. 이 반응물을 2개 바이알로 분리하고 각각의 바이알을 독립적으로 초음파 반응기에서 200 내지 230℃로 2.5시간 동안 가열하였다. 반응물을 합하고 물(50 ml)로 희석하고, 에틸 아세테이트(50 ml)로 2회 추출하였다(염수(5 ml)를 투명한 상에 첨가하였다). 유기층을 염수(25 ml)로 세척하고, 합하고 마그네슘 설페이트로 건조하고, 여과하고, 질소의 스트림하에 추가로 건조시켰다. 조질 갈색 고체를 헥산 중 0% 내지 60% EtOAc를 사용하는 플래시 크로마토그래피(4 g 실리사이클)로 정제하였다. 적절한 분획을 합하고 다이클로로메탄 및 헥산의 혼합물로부터 건조시켜, 32 mg(56%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-페닐)-에틸]-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-페닐)-에틸]-아마이드

THF(1 ml)에 용해된 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-페닐)-에틸]-아마이드(32 mg, 0.056 mmol)를 함유하는 환저 플라스크 내에, TBAF(THF 중 1.0 M, 1.0 ml, 1.0 mmol)를 첨가하였다. 플라스크를 질소로 재충전하고, 이어서 밀봉하고 오일욕에서 85℃로 2시간 동안 방치하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 아세톤(2 ml) 및 포화 NaHCO₃(4 ml)으로 켄칭하였다. 이 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 희석하고 EtOAc로 추출하였다. 염수를 첨가하고 수층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 조질 고체를 다이클로로메탄 중 0% 내지 7.5% MeOH를 사용하는 플래시 크로마토그래피(4 g 실리사이클)로 정제하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하여, 4 mg(19%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(4-시아노-페닐)-에틸]-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS(M+H)⁺ = 440;

실시예 219.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸)-아마이드(176 mg, 0.35 mmol)를 함유하는 100 ml 환저 플라스크에 질소하에 THF(4 ml)를 첨가하고, 이 혼합물을 빙욕에서 냉각하였다. 이 혼합물에 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드(THF 중 1.0 M, 1.06 ml, 1.06 mmol)를 적가하여 투명한 적색 용액을 생성하였다. 30분 후 이 반응물을 빙욕으로부터 제거하고 실온으로 1시간에 걸쳐서 가온하였다. 이 반응물이 짙은 갈색/녹색이 되도록 2-브로모아세토니트릴(0.10 ml, 1.44 mmol)을 적가하였다. 3시간 후, 추가 2-브로모아세토니트릴(0.10 ml, 1.44 mmol)을 첨가하고 이 반응물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 이 반응물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다(염수를 투명한 현탁액에 첨가하였다). 유기층을 염수로 세척하고, 합하고 마그네슘 설페이트로 건조하고, 여과하고 갈색 반고체로 농축하였다. 조질 물질을 0% 내지 75% 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피(12 g 아날로직스)로 정제하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하여, 57 mg(30%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

THF(1 ml)에 용해된 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(55 mg, 0.102 mmol)를 함유하는 환저 플라스크 내에, TBAF(THF 중 1.0 M, 1.0 ml, 1.0 mmol)를 첨가하였다. 플라스크를 질소로 재충전하고, 이어서 밀봉하고 오일욕에서 85℃로 2시간 동안 방치하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 아세톤(2 ml) 및 포화 NaHCO₃(4 ml)으로 켄칭하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 희석하고 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 조질 고체를 다이클로로메탄 중 0% 내지 10% MeOH를 사용하는 플래시 크로마토그래피(4 g 실리사이클)로 정제하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하였다. 고체를 Et₂O로 마쇄하여, 7 mg(16%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-시아노메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(7 mg, 16%)를 연갈색 고체로서 수득하였다.

실시예 220.

2-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

3-요오드이미다조[1,2-a]피리딘

1 L 3목 플라스크 내에서, -50℃에서 THF 중 이미다조[1,2-a]피리딘(4.1 g, 34.7 mmol)을 부틸리튬(14.6 ml, 36.4 mmol)으로 처리하였다. THF(50 ml) 중 N-요오드숙신이미드(8.59 g, 38.2 mmol)를 천천히 첨가하고 온도를 0℃까지 증가시켰다. 이를 물 및 헥산으로 희석하였다. 유기층을 10% 염수/물로 2회 세척하고, MgSO₄로 건조하고 증발시켜 고체를 수득하였다. 이 고체를 THF/DCM에 용해하고 플래시 크로마토그래피(80 내지 100% 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 목적 이성질체 3-요오드이미다조[1,2-a]피리딘을 수득하였다.

단계 2

3-트라이부틸스탄난일-이미다조[1,2-a]피리딘

100 ml 3목 플라스크 내에서, -5℃에서 3-요오드이미다조[1,2-a]피리딘(0.9 g, 3.69 mmol)을 아세톤/빙욕을 사용하여 THF(50 ml)에 용해하였다. 아이소프로필마그네슘 클로라이드(1.3 M, 2.84 ml, 3.69 mmol)를 주사기를 통해 첨가하였고 연백색 현탁액이 형성되었다. 0.5시간 후, 트라이부틸클로로스탄난(1.15 g, 0.95 μL, 3.69 mmol)을 첨가하였다. 이를 20℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 헥산(100 ml)으로 희석하고, 암모늄 클로라이드의 포화 용액으로 켄칭하고, 유기물을 50% 염수/물로 세척하였다. 유기층을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하여 3-트라이부틸스탄난일-이미다조[1,2-a]피리딘을 오일로서 수득하였다.

단계 3

2-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]아마이드(110 mg, 0.22 mmol)를 DMF 중 3-트라이부틸스탄난일-이미다조[1,2-a]피리딘(159 mg, 0.39 mmol)(10분 동안 질소로 살포되어 있음)과 합하였다. 이 반응물에 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(25 mg, 0.022 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 70 내지 80℃로 3시간 동안 가열하였다. 모든 용매를 고진공 증발하에 제거하고, 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 2-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 수득하였다. LCMS:(M+H)⁺ = 544.

단계 4

2-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

2-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 기재된 2 단계 과정(TFA 후 수성 염기)을 사용하여 탈보호한 후 크로마토그래피하여 2-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 수득하였다.

실시예 221.

2-(7-클로로-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 220에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 이미다조[1,2-a]피리딘 대신에 7-클로로-이미다조[1,2-a]피리딘을 사용하여 제조하였다. LCMS:(M+H)⁺ = 448.

실시예 222.

2-(7-시아노-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

3-요오드-이미다조[1,2-a]피리딘-7-카보니트릴

50 ml 환저 플라스크 내에서, 이미다조[1,2-a]피리딘-7-카보니트릴(1.1 g, 7.68 mmol) 및 N-요오드숙신이미드(2.07 g, 9.22 mmol)를 DMF(50 ml)와 합하여 무색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 20℃에서 유지하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(150 ml), THF(50 ml) 및 5% 나트륨 티오설페이트(300 ml)로 희석하고 잘 진탕하였다. 수층을 에틸 아세테이트(1 x 100 ml)로 재추출하였다. 유기층을 합하고 물 및 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조하고 증발시켰다. 조질 물질을 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 60% 내지 80% 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 3-요오드-이미다조[1,2-a]피리딘-7-카보니트릴을 수득하였다.

단계 2

2-(7-시아노-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(100 mg, 0.196 mmol) 및 헥사메틸주석(72 mg, 0.22 mmol)을 질소 살포된 톨루엔 용액(5 ml)에 혼합하였다. 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(19.5 mg, 0.17 mmol)을 첨가하고, 이 용액을 95℃로 2시간 동안 가열하였다. 이 반응물을 냉각하고, 3-요오드-이미다조[1,2-a]피리딘-7-카보니트릴(54 mg, 0.2 mmol)을 추가 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(20 mg, 0.02 mmol)과 첨가하였다. 이 혼합물을 100℃에서 14시간 동안 가열하고, 냉각하고 실리카 겔 크로마토그래피로 직접 정제하여 2-(7-시아노-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 수득하였다.

단계 3

2-(7-시아노-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

기재된 2 단계 과정(TFA 후 수성 염기)을 사용하여 표준 탈보호하여 고체를 수득하고, 이를 크로마토그래피로 정제하여 2-(7-시아노-이미다조[1,2-a]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 수득하였다.

실시예 223.

2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진 및 2-(6-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진

75 ml 3목 플라스크 내에서, 나트륨 하이드라이드(60% 분산, 134 mg, 3.35 mmol) 및 6-클로로-1H-벤조[d]이미다졸(511 mg, 3.35 mmol)을 NMP(15 ml)와 합하여 연갈색 용액을 수득하였다. 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진(1.0 g, 3.05 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 135℃로 가열하고 15시간 동안 교반하였다. 반응물을 냉각하고, 50% 물/염수에 붓고 50% 에틸 아세테이트/헥산으로 추출하였다. 조질 물질을 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산 중 40% 내지 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 2개의 위치이성질체를 수득하였다: 2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진

및 2-(6-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진

단계 2

2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

5℃에서 DMF의 용액을 포스포릴 트라이클로라이드(483 mg, 3.2 mmol)로 0.5시간 동안 처리하였다. 2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진(210 mg, 0.52 mmol)을 첨가하고 혼합물을 65 내지 70℃에서 7시간 동안 교반하였다. 반응물을 냉각하고 NaHCO₃(수성)으로 켄칭하고, 이어서 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 유기물을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조시켰다. 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 수득하였다. LCMS:(M+H)⁺ = 428.

단계 3

2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

50 ml 환저 플라스크 내에서, 설팜산(187 mg, 1.54 mmol) 및 2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(110 mg, 0.26 mmol)를 다이옥산(6 ml)과 합하여 회백색 현탁액을 수득하였다. 반응 혼합물을 5℃로 냉각하고 물(2 ml) 중 나트륨 클로라이트(30.2 mg, 0.33 mmol) 및 칼륨 이수소 포스페이트(35.0 mg, 0.26 mmol)의 용액을 주사기를 통해 5분에 걸쳐서 적가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 EtOAc(25 ml)로 희석하고 50% 염수/물로 세척하였다. 수층을 EtOAc(15 ml)로 재추출하였다. 유기층을 합하고 염수로 세척하고 MgSO₄로 건조시켰다. 용매를 증발시켜, 90 mg(79%)의 2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 444.

단계 4

2-(5-클로로-2- 벤조이미다졸-1-일)-5-(트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

5 ml 복숭아형 플라스크 내에서, 2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(40 mg, 0.09 mmol, (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드(12.0 mg, 0.135 mmol) 및 HATU(51 mg, 0.135 mmol)를 DMF(3 ml) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.22 ml, 1.26 mmol)과 합하였다. 이 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조하고 농축하여 2-(5-클로로-2-벤조이미다졸-1-일)-5-(트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 수득하였다.

단계 5

2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실온에서 2-(5-클로로-2-벤조이미다졸-1-일)-5-(트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(40 mg, 0.078 mmol)를 다이클로로메탄(2 ml)에 용해하고, TFA(1.5 ml)를 첨가하였다. 반응물을 4시간 동안 교반하고, 이어서 모든 용매를 증발시키고 잔사를 고진공하에 건조시켰다. 조질 물질을 메탄올에 용해하고 트라이에틸아민(0.5 ml)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 14시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고 잔사를 10% THF/EtOAc(20 ml)에 현탁하고, 50% 에틸 아세테이트/헥산(25 ml)으로 희석하고 물 및 염수로 세척하고, 건조하고 증발시켰다. 잔사를 에터로 마쇄하고 여과하여, 22 mg(73%)의 2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 224.

2-(6-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 223, 단계 2 내지 5에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진 대신에 2-(6-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진을 사용하여 제조하였다.

실시예 225.

2-(5-클로로-벤조이미다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 223, 단계 4 내지 5에 개시된 절차에 따라, 단계 4에서 (S)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드 대신에 1-((R)-2-아미노-프로피온일)-아제티딘-3-카보니트릴 트라이플루오로아세테이트를 사용하여 제조하였다.

실시예 226.

(6-클로로-3-{7-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸카바모일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}-인다졸-1-일)-아세트산

단계 1

{6-클로로-3-[7-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸카바모일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-인다졸-1-일}-아세트산 3급-부틸 에스터

20 ml 복숭아형 플라스크 내에서, 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(80 mg, 0.14 mmol)를 THF(3 ml)와 합하여 연황색 용액을 수득하였다. 이 용액을 0℃로 냉각하고 칼륨 3급-부톡사이드(19 mg, 0.17 mmol)를 첨가하였다. 이를 0℃에서 30분 동안 교반하고 3급-부틸 2-브로모아세테이트(22 μL, 0.14 mmol)를 적가하고, 반응물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl 및 물로 희석하고, 이어서 Et₂O(2 x 30 ml)로 추출하였다. 합한 유기물을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 조질 잔사를 SiO₂ 크로마토그래피(5% 내지 80 % EtOAc/CH₂Cl₂)로 정제하여, 35 mg(37%)의 {6-클로로-3-[7-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸카바모일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-인다졸-1-일}-아세트산 3급-부틸 에스터를 거품형 고체로서 단리하였다. MS:(M+H)⁺ = 694.

단계 2

(6-클로로-3-{7-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸카바모일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}-인다졸-1-일)-아세트산

5 ml 복숭아형 플라스크 내에서, {6-클로로-3-[7-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸카바모일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-인다졸-1-일}-아세트산 3급-부틸 에스터(30 mg, 0.043 mmol)를 CH₂Cl₂(1 ml)와 합하여 연황색 용액을 수득하였다. TFA(0.10 ml, 1.3 mmol)를 첨가하고 이 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축하고 CH₂Cl₂에 재용해하였다. 에틸렌다이아민(88 μL, 1.3 mmol)을 적가하고 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 물에 용해하고, 이를 밤새 동결건조시켰다. 황색 왁스형 고체를 물에 현탁하고 여과하고, 물로 세척하고, 이어서 고진공에서 건조시켜, 8 mg(32%)의 (6-클로로-3-{7-[(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸카바모일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}-인다졸-1-일)-아세트산을 황색 고체로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 507.

실시예 227.

2-(6-클로로-1-다이메틸카바모일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 226에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 3급-부틸 2-브로모아세테이트 대신에 2-클로로-N,N-다이메틸아세트아마이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 228.

2-[6-클로로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 226에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 3급-부틸 2-브로모아세테이트 대신에 2-클로로-1-모폴리노에탄온을 사용하여 제조하였다.

실시예 229.

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

단계 1

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

10 ml 복숭아형 플라스크 내에서, 0℃에서 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(280 mg, 0.48 mmol)를 DMF(8 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 70 mg, 1.74 mmol)를 첨가하고 반응물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 다이메틸아미노에틸 브로마이드 하이드로브로마이드(169 mg, 0.73 mmol)를 첨가하고 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온시키고 2시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 염수(5 ml) 및 물(10 ml)로 켄칭하고, 이어서 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 건조하고 SiO₂ 크로마토그래피(0% 내지 10% MeOH/CH₂Cl₂)로 정제하여, 135 mg(43%)의 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 거품형 고체로서 단리하였다. MS:(M+H)⁺ = 651.

단계 2

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

10 ml 복숭아형 플라스크 내에서, 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드(130 mg, 0.20 mmol)를 CH₂Cl₂(1 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. TFA(0.24 ml, 3.2 mmol)를 첨가하고 이 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축하고 CH₂Cl₂에 재용해하였다. 에틸렌다이아민(0.33 ml, 5.0 mmol)을 적가하고 이 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 냉수에 현탁하고 여과하고, 물로 세척하고 이어서 고진공에서 건조시켜, 70 mg(64%)의 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 230.

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 하이드로클로라이드

10 ml 복숭아형 플라스크 내에서, 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 하이드로클로라이드(40 mg, 0.077 mmol)를 HCl(다이옥산 중 4 N)(0.2 ml, 0.80 mmol)과 합하여 현탁액을 수득하였다. 물을 첨가하였고, 이는 황색 페이스트성(pasty) 현탁액이 되었다. Et₂O를 첨가하고, 혼합물을 교반하고 유기층을 디켄팅하였다. 이를 5회(5 x 8 ml) 반복하였다. 황색 고체를 여과하고 Et₂O로 세척하고 고진공하에 건조시켜, 35 mg(85%)의 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드 하이드로클로라이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 231.

2-[6-클로로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 229에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 다이메틸아미노에틸 브로마이드 하이드로브로마이드 대신에 4-(2-브로모에틸)모폴린을 사용하여 제조하였다.

실시예 232.

2-[6-클로로-1-(2-피리딘-2-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 229에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 다이메틸아미노에틸 브로마이드 하이드로브로마이드 대신에 2-(2-브로모에틸)피리딘 하이드로브로마이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 233.

2-(6-클로로-1-피리딘-2-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-2-(3-시아노-아제티딘-1-일)-1-메틸-2-옥소-에틸]-아마이드

실시예 229에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 다이메틸아미노에틸 브로마이드 하이드로브로마이드 대신에 2-(클로로메틸)피리딘 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 234.

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

6-클로로-3-트라이부틸스탄닐-1H-인다졸(1.04 g, 2.35 mmol), 구리(I) 요오다이드(17 mg, 0.09 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(400 mg, 0.90 mmol)를 DMF(6 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 혼합물을 질소로 버블링하여 10분 동안 탈기하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(52 mg, 0.045 mmol)을 첨가하고 반응물을 질소하에 90℃에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 다이에틸 에터(60 ml)로 희석하고 물 및 염수로 세척하였다. 유기층을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 조질 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0.5% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 10% 메탄올)로 정제하여, 300 mg(65%)의 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 거품형 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺=516.

단계 2

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

0℃에서 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(80 mg, 0.16 mmol)를 DMF(8 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 19 mg, 0.47 mmol)를 첨가하고 반응물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 다이메틸아미노에틸 브로마이드 하이드로브로마이드(54 mg, 0.23 mmol)를 첨가하고 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온에서 가온시키고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수(5 ml) 및 물(10 ml)로 켄칭하고, 이어서 에틸 아세테이트(2 x 30 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 건조하고 진공에서 농축하였다. 조질 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 내지 10 % 메탄올)로 정제하여, 50 mg(55%)의 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 거품형 고체로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 587.

단계 3

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(50 mg, 0.085 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)과 합하고 트라이플루오로아세트산(0.19 ml, 2.56 mmol)을 첨가하였다. 2시간 동안 교반한 후 반응 혼합물을 진공에서 농축하고 잔사를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하였다. 에틸렌다이아민(0.17 ml, 2.56 mmol)을 첨가하였다. 20분 동안 교반한 후 반응물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 물(2 ml)로 마쇄하였다. 침전물을 여과하고, 물로 세척하고 건조시켜, 30 mg(73%)의 2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 235.

2-(6-클로로-1-피리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 234, 단계 2 내지 3에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 다이메틸아미노에틸 브로마이드 하이드로브로마이드 대신에 3-(클로로메틸)피리딘 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 236.

2-[6-클로로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 234, 단계 2 내지 3에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 다이메틸아미노에틸 브로마이드 하이드로브로마이드 대신에 4-(2-브로모에틸)모폴린 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 237.

2-[6-플루오로-1-(6-모폴린-4-일-피리딘-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

6-플루오로-3-트라이부틸스탄닐-1H-인다졸(1.10 g, 2.59 mmol), 구리(I) 요오다이드(24 mg, 0.13 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(560 mg, 1.26 mmol)를 DMF(6 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 혼합물을 질소로 버블링하여 10분 동안 탈기하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(73 mg, 0.06 mmol)을 첨가하고 반응물을 질소하에 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 다이에틸 에터(60 ml)로 희석하고 물 및 염수로 세척하였다. 유기층을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 조질 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(0.5% 암모늄 하이드록사이드와 함께 다이클로로메탄 중 0 내지 10% 메탄올)로 정제하여, 580 mg(92%)의 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 499.

단계 2

2-[6-플루오로-1-(6-모폴린-4-일-피리딘-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

0℃에서 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(80 mg, 0.16 mmol)를 DMF(8 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 19 mg, 0.48 mmol)를 첨가하고 반응물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 4-(5-(클로로메틸)피리딘-2-일)모폴린 하이드로클로라이드(60 mg, 0.24 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수(5 ml) 및 물(10 ml)로 켄칭하고 에틸 아세테이트(2 x 30 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 건조하고 진공에서 농축하였다. 조질 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 내지 10% 메탄올)로 정제하여, 58 mg(53%)의 2-[6-플루오로-1-(6-모폴린-4-일-피리딘-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 거품형 고체로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 675.

단계 3

2-[6-플루오로-1-(6-모폴린-4-일-피리딘-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

2-[6-플루오로-1-(6-모폴린-4-일-피리딘-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드(50 mg, 0.074 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)과 합하고 트라이플루오로아세트산(0.17 ml, 2.22 mmol)을 첨가하였다. 2시간 동안 교반한 후 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하고 에틸렌다이아민(0.15 ml, 2.22 mmol)을 첨가하였다. 20분 후 반응 혼합물을 진공에서 농축하고 잔사를 물(2 ml)로 마쇄하였다. 침전물을 여과하고, 물로 세척하고 건조시켜, 33 mg(77%)의 2-[6-플루오로-1-(6-모폴린-4-일-피리딘-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 238.

2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 237, 단계 2 내지 3에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 4-(5-(클로로메틸)피리딘-2-일)모폴린 하이드로클로라이드 대신에 4-(2-브로모에틸)모폴린 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 239.

2-[1-(2-다이메틸아미노-에틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 237, 단계 2 내지 3에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 4-(5-(클로로메틸)피리딘-2-일)모폴린 하이드로클로라이드 대신에 다이메틸아미노에틸 브로마이드 하이드로브로마이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 240.

2-(6-플루오로-1-피리딘-2-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 237, 단계 2 내지 3에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 4-(5-(클로로메틸)피리딘-2-일)모폴린 하이드로클로라이드 대신에 2-(클로로메틸)피리딘 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 241.

2-(6-플루오로-1-피리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 237, 단계 2 내지 3에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 4-(5-(클로로메틸)피리딘-2-일)모폴린 하이드로클로라이드 대신에 3-(클로로메틸)피리딘 하이드로클로라이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 242.

2-[6-플루오로-1-(2-피롤리딘-1-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 237, 단계 2 내지 3에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 4-(5-(클로로메틸)피리딘-2-일)모폴린 하이드로클로라이드 대신에 1-(2-브로모에틸)피롤리딘을 사용하여 제조하였다.

실시예 243.

2-{6-플루오로-1-[2-((S)-3-플루오로-피롤리딘-1-일)-에틸]-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 237, 단계 2 내지 3에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 4-(5-(클로로메틸)피리딘-2-일)모폴린 하이드로클로라이드 대신에 (S)-1-(2-클로로에틸)-3-플루오로피롤리딘을 사용하여 제조하였다.

실시예 244.

2-[6-플루오로-1-(2-피라졸-1-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((S)-2-메톡시-1-메틸-에틸)-아마이드

실시예 237, 단계 2 내지 3에 개시된 절차에 따라, 단계 2에서 4-(5-(클로로메틸)피리딘-2-일)모폴린 하이드로클로라이드 대신에 1-(2-브로모에틸)-1H-피라졸을 사용하여 제조하였다.

실시예 245.

2-[6-클로로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드

단계 1

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드

2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(300 mg, 0.81 mmol), 1-(피리딘-3-일)에탄아민(148 mg, 1.21 mmol) 및 DIPEA(0.42 ml, 2.42 mmol)를 DMF(5 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 이어서 HATU(306 mg, 0.81 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수로 희석하고 에틸 아세테이트(2 x 30 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하여, 350 mg(91%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드를 황색 오일로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 477.

단계 2

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드

6-클로로-3-트라이부틸스탄닐-1H-인다졸(584 mg, 1.32 mmol), 구리(I) 요오다이드(14 mg, 0.074 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드(350 mg, 0.74 mmol)를 DMF(6 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 혼합물을 10분 동안 질소로 탈기하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(42 mg, 0.037 mmol)을 첨가하고 반응물을 질소하에 90℃에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 에터(60 ml)로 희석하고 물 및 염수로 세척하였다. 유기층을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0.5% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 3% 메탄올)로 정제하여, 203 mg(48%)의 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드를 거품형 고체로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 549.

단계 3

2-[6-클로로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드

0℃에서 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드(100 mg, 0.18 mmol)를 DMF(2 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 22 mg, 0.55 mmol)를 첨가하고 반응물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 4-(2-브로모에틸)모폴린 하이드로클로라이드(63 mg, 0.27 mmol)를 첨가하고 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수(5 ml) 및 물(10 ml)로 켄칭하고 에틸 아세테이트(2 x 30 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고 진공에서 농축하였다. 조질 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 내지 10% 메탄올)로 정제하여, 40 mg(33%)의 2-[6-클로로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드를 거품형 고체로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 662.

단계 4

2-[6-클로로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드

2-[6-클로로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드(50 mg, 0.076 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)과 합하고 트라이플루오로아세트산(0.17 ml, 2.27 mmol)을 첨가하였다. 2시간 동안 교반한 후 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하고 에틸렌다이아민(0.15 ml, 2.27 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 20분 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하고 잔사를 물(2 ml)로 마쇄하였다. 침전물을 여과하고, 물로 세척하고 건조시켜, 29 mg(68%)의 2-[6-클로로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 246.

2-[6-클로로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드

실시예 245, 단계 3 내지 4에 개시된 절차에 따라, 단계 3에서 4-(2-브로모에틸)모폴린 하이드로클로라이드 대신에 2-브로모-N,N-다이메틸에탄아민 하이드로브로마이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 247.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-3-일-에틸)-아마이드

실시예 245, 단계 3 내지 4에 개시된 절차에 따라, 단계 3에서 4-(2-브로모에틸)모폴린 하이드로클로라이드 대신에 요오드메탄을 사용하여 제조하였다. MS:(M+H)⁺ = 431.

실시예 248.

2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드

단계 1

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드

2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(320 mg, 0.86 mmol), 1-(피리딘-4-일)에탄아민(105 mg, 0.86 mmol) 및 DIPEA(449 mg, 2.58 mmol)를 DMF(5 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. HATU(327 mg, 0.86 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수로 희석하고 에틸 아세테이트(3 x 20 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고 진공에서 여과하고 농축하여, 380 mg(93%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드를 적색 오일로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 477.

단계 2

2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드

6-플루오로-3-트라이부틸스탄닐-1H-인다졸(0.48 g, 1.13 mmol), 구리(I) 요오다이드(16 mg, 0.084 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드(400 mg, 0.84 mmol)를 DMF(6 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 혼합물을 10분 동안 탈기하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(45 mg, 0.039 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소하에 90℃에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 에터(60 ml)로 희석하고 물 및 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0.5% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 3% 메탄올)로 정제하여, 390 mg(87%)의 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 532.

단계 3

2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드

0℃에서 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드(100 mg, 0.19 mmol)를 DMF(2 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 23 mg, 0.56 mmol)를 첨가하고 반응물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 4-(2-브로모에틸)모폴린 하이드로클로라이드(55 mg, 0.28 mmol)를 첨가하고 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하고, 이어서 염수(5 ml) 및 물(10 ml)로 켄칭하고 에틸 아세테이트(2 x 30 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 조질 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 내지 10% 메탄올)로 정제하여, 70 mg(58%)의 2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드를 거품형 고체로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 645.

단계 4

2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드

2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드(70 mg, 0.11 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)과 합하고, 이어서 트라이플루오로아세트산(0.24 ml, 3.26 mmol)을 첨가하였다. 2시간 동안 교반한 후 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하고 에틸렌다이아민(0.22 ml, 3.26 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 20분 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, 이어서 CH₂Cl₂(2 x 20 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하여, 26 mg(44%)의 2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 249.

2-[6-플루오로-1-(2-다이메틸아미노-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-피리딘-4-일-에틸)-아마이드

실시예 248, 단계 3 내지 4에 개시된 절차에 따라, 단계 3에서 4-(2-브로모에틸)모폴린 하이드로클로라이드 대신에 2-브로모-N,N-다이메틸에탄아민 하이드로브로마이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 250.

2-[6-플루오로-1-(2-피롤리딘-1-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드

단계 1

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드

2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(300 mg, 0.81 mmol), 1-(피리딘-2-일)프로판-2-아민(165 mg, 1.21 mmol) 및 DIPEA(312 mg, 2.42 mmol)을 DMF(5 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. HATU(306 mg, 0.81 mmol)를 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 염수로 희석하고 에틸 아세테이트(2 x 30 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 내지 5% 메탄올)로 정제하여, 360 mg(86%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드를 황색 오일로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 491.

단계 2

2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드

6-플루오로-3-트라이부틸스탄닐-1H-인다졸(0.20 g, 0.47 mmol), 구리(I) 요오다이드(12 mg, 0.06 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드(200 mg, 0.41 mmol)를 DMF(6 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 혼합물을 10분 동안 질소로 탈기하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(23 mg, 0.02 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 90℃에서 질소하에 15시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 에터(60 ml)로 희석하고 물 및 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0.5% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 3% 메탄올)로 정제하여, 136 mg(61%)의 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드를 거품형 고체로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 546.

단계 3

2-[6-플루오로-1-(2-피롤리딘-1-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드

0℃에서 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드(70 mg, 0.13 mmol)를 DMF(2 ml)와 합하여 황색 용액을 수득하였다. 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 14 mg, 0.385 mmol)를 첨가하고, 반응물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 1-(2-브로모에틸) 피롤리딘 하이드로클로라이드(41 mg, 0.19 mmol)를 첨가하고 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하고, 이어서 염수(5 ml) 및 물(10 ml)로 켄칭하고 에틸 아세테이트(2 x 30 ml)로 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 내지 10% 메탄올)로 정제하여, 75 mg(91%)의 2-[6-플루오로-1-(2-피롤리딘-1-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드를 거품형 고체로서 수득하였다. MS:(M+H)⁺ = 643.

단계 4

2-[6-플루오로-1-(2-피롤리딘-1-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드

2-[6-플루오로-1-(2-피롤리딘-1-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드(75 mg, 0.117 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)과 합하고, 이어서 트라이플루오로아세트산(0.26 ml, 3.50 mmol)을 첨가하였다. 2시간 동안 교반한 후 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하고, 에틸렌다이아민(0.23 ml, 3.50 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하고 잔사를 물(2 ml)로 마쇄하였다. 침전물을 여과하고, 물로 세척하고 건조시켜, 26 mg(41%)의 2-[6-플루오로-1-(2-피롤리딘-1-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-메틸-2-피리딘-2-일-에틸)-아마이드를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 251.

2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

5 ml 초음파 바이알을 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(300 mg, 0.73 mmol), 4-(2-클로로아세틸)모폴린(0.19 ml, 1.46 mmol), 세슘 카보네이트(713 mg, 2.19 mmol) 및 DMF(3.3 ml)로 채웠다. 바이알을 아르곤으로 플러싱하고 밀봉하고 초음파 반응기에서 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 유기층을 물로 2 회 및 염수로 1 회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배 0 내지 70% EtOAc)을 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 268 mg(68%)의 2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드를 황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

50 ml 환저 플라스크 내에서, 2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(265 mg, 0.49 mmol)를 THF(10 ml) 및 물(2 ml)에 용해하였다. 황색 용액을 0℃로 냉각하고 설팜산(287 mg, 2.95 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 물(6 ml) 중 나트륨 클로라이트(80%, 76 mg, 0.67 mmol) 및 칼륨 이수소 포스페이트(803 mg, 5.9 mmol)의 용액을 피펫을 통해 적가하였다. 적가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 헥산/에틸 아세테이트로 마쇄하여, 259 mg(95%)의 2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 연황색 분말로서 수득하였다.

단계 3

2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

15 ml 환저 플라스크 내에서, 2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(110 mg, 0.20 mmol)을 THF(3 ml)에 현탁하고, 1,1'-카보닐다이이미다졸(39 mg, 0.24 mmol)을 첨가하였다. 모든 고체가 용해되는 시간 동안 연황색 현탁액을 60℃에서 45분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 3급-부틸아민(0.20 ml, 1.9 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 80% EtOAc)을 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 84 mg(70%)의 2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(81 mg, 0.13 mmol)를 다이클로로메탄(0.7 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.41 ml, 5.32 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(0.7 ml)에 용해하고 에틸렌다이아민(0.54 ml, 8.00 mmol)을 첨가하였다. 이 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하고 고진공하에 건조시켜, 38 mg(60%)의 2-[6-플루오로-1-(2-모폴린-4-일-2-옥소-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 252.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-옥세탄-3-일-에틸)-아마이드

단계 1

옥세탄-3-카브알데하이드

50 ml 환저 플라스크 내에서, 옥세탄-3-일메탄올(330 mg, 3.75 mmol)을 다이클로로메탄(16 ml)에 용해하였다. 피리디늄 클로로크로메이트(888 mg, 4.12 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 짙은 갈색 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고 다이클로로메탄으로 헹궜다. 여액을 실온에서 농축하여, 옥세탄-3-카브알데하이드를 짙은 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

(S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-옥세탄-3-일-메트-(E)-일리덴아마이드

환저 플라스크 내에서, 옥세탄-3-카브알데하이드(452 mg, 3.15 mmol)를 다이클로로메탄(18 ml)에 용해하고, (S)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드(435 mg, 3.59 mmol) 및 무수 구리(II) 설페이트(1.11 g, 6.93 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하고, 이어서 유리 미세섬유 필터를 통해 여과하고, 다이클로로메탄으로 헹궜다. 여액을 농축하고 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 30% EtOAc)을 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 173 mg(29%)의 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-옥세탄-3-일-메트-(E)-일리덴아마이드를 무색 오일로서 수득하였다.

단계 3

(S)- 2-메틸-프로판-2-설핀산((R)-1-옥세탄-3-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-옥세탄-3-일-메트-(E)-일리덴아마이드(172 mg, 0.91 mmol)를 다이클로로메탄(3.6 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 -76℃로 냉각하고, 메틸마그네슘 브로마이드(다이에틸 에터 중 3.0 M, 0.91 ml, 2.73 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 -76℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 밤새 천천히 가온하였다. 반응물을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, 이어서 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하여, 143 mg(77%)의 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산((R)-1-옥세탄-3-일-에틸)-아마이드를 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

(R)-1-옥세탄-3-일-에틸아민

환저 플라스크 내에서, (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산((R)-1-옥세탄-3-일-에틸)-아마이드(142 mg, 0.69 mmol)를 메탄올(3 ml)에 용해하였다. 담황색 용액을 0℃로 냉각하고, 수소 클로라이드(1,4-다이옥산 중 4.0 M, 0.24 ml, 0.96 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 포화 수성 NaHCO₃으로 켄칭하고, 다이클로로메탄으로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하여 (R)-1-옥세탄-3-일-에틸아민을 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-옥세탄-3-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크를 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.23 mmol) 및 (R)-1-옥세탄-3-일-에틸아민(120 mg, 0.59 mmol)으로 채웠다. DMF(1 ml)를 첨가한 후 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.16 ml, 0.92 mmol) 및 HATU(95 mg, 0.25 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 60% EtOAc)을 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 31 mg(26%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-옥세탄-3-일-에틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-옥세탄-3-일-에틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-옥세탄-3-일-에틸)-아마이드(29 mg, 0.055 mmol)를 테트라부틸암모늄 플루오라이드(THF 중 1.0 M, 0.56 ml, 0.56 mmol)에 용해하였다. 연갈색 반응 혼합물을 70℃에서 4시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 MeOH/CH₂Cl₂(0.5% NH₄OH)(구배: 0 내지 5% MeOH)를 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 14 mg(64%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((R)-1-옥세탄-3-일-에틸)-아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다. 광학 순도를 키랄 HPLC에 의해 60% ee로 측정하였다.

실시예 253

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드

단계 1

(S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-메트-(E)-일리덴아마이드

50 ml 환저 플라스크 내에서, 3-(트라이플루오로메톡시)벤즈알데하이드(400 mg, 2.1 mmol)를 다이클로로메탄(12 ml)에 용해하고, (S)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드(281 mg, 2.31 mmol) 및 무수 구리(II) 설페이트(739 mg, 4.63 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 유리 미세섬유 필터를 통해 여과하고, 다이클로로메탄으로 헹궜다. 여액을 농축하고 잔사를 EtOAc/헥산(구배 0 내지 20% EtOAc)을 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 430 mg(70%)의 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-메트-(E)-일리덴아마이드를 연황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

(S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(R)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드 및 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-메트-(E)-일리덴아마이드(424 mg, 1.45 mmol)를 THF(2.9 ml)에 용해하였다. 연황색 용액을 -76℃로 냉각하고 메틸마그네슘 브로마이드(다이에틸 에터 중 3.0 M, 0.86 ml, 2.58 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 밤새 천천히 가온시키고, 이어서 포화 수성 NH₄Cl로 켄칭하고 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 10% EtOAc)를 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 225 mg(50%)의 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(R)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드를 무색 오일로서 수득하였다.

또한 161 mg(36%)의 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드를 무색 오일로서 단리하였다.

단계 3

(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸아민 하이드로클로라이드

25 ml 환저 플라스크 내에서, (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드(157 mg, 0.51 mmol)를 메탄올(1 ml)에 용해하고 수소 클로라이드(1,4-다이옥산 중 4.0 M, 0.26 ml, 1.04 mmol)를 적가하였다. 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 이어서 농축하여 (S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸아민 하이드로클로라이드를 회백색 왁스형 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드

10 ml 환저 플라스크를 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.23 mmol) 및 (S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸아민 하이드로클로라이드(155 mg, 0.45 mmol)로 채웠다. DMF(1.1 ml)를 첨가한 후 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.28 ml, 1.6 mmol) 및 HATU(95 mg, 0.25 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 물 및 석유 에터를 첨가하였다. 생성된 회백색 침전물을 여과로 수집하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공하에 건조시켜, 126 mg(89%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드

10 ml 환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드(123 mg, 0.196 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하고 트라이플루오로아세트산(0.6 ml, 7.9 mmol)을 첨가하였다. 연황색 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하고 에틸렌다이아민(0.80 ml, 11.8 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하고 수집된 고체를 고진공하에 건조시켜, 56 mg(57%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 254.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(R)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드

실시예 253, 단계 3 내지 5에 개시된 절차에 따라, 단계 3에서 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(S)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드 대신에 (S)-2-메틸-프로판-2-설핀산 [(R)-1-(3-트라이플루오로메톡시-페닐)-에틸]-아마이드를 사용하여 제조하였다.

실시예 255.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-사이클로부틸]-아마이드

단계 1

1-3급-부톡시카보닐아미노-사이클로부탄카복실산 에틸 에스터

DMF(13 ml) 중 에틸 1-아미노-1-사이클로부탄-카복실레이트 하이드로클로라이드(1.20 g, 6.67 mmol)의 용액에 다이-3급-부틸다이카보네이트(1.61 g, 7.35 mmol)를 첨가하였다. 트라이에틸아민(1.12 ml, 8.04 mmol)을 적가하고 반응 혼합물을 실온에서 3.5시간 동안 교반하고, 이어서 물 및 다이에틸 에터를 첨가하였다. 수층을 다이에틸 에터로 추출하였다. 합한 유기층을 1.0 M HCl, 물 및 염수로 세척하고, 이어서 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하여, 1.58 g(97%)의 1-3급-부톡시카보닐아미노-사이클로부탄카복실산 에틸 에스터를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

[1-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-사이클로부틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터

100 ml 3목 환저 플라스크 내에서, 1-3급-부톡시카보닐아미노-사이클로부탄카복실산 에틸 에스터(700 mg, 3.05 mmol)를 THF(22 ml)에 용해하였다. 용액을 0℃로 냉각하고 메틸마그네슘 브로마이드(Et₂O 중 3.0 M, 4.0 ml, 12.0 mmol)를 15분에 걸쳐서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 밤새 천천히 가온시켰다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고 포화 수성 NH₄Cl로 켄칭하고, 이어서 1.0 M 수성 HCl로 희석하고 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 H₂O 및 염수로 세척하고, 이어서 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 20% EtOAc)를 사용하는 24 g의 SiO₂ 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 492 mg(70%)의 [1-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-사이클로부틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터를 담황색 오일로서 수득하였다.

단계 3

2-(1-아미노-사이클로부틸)-프로판-2-올 트라이플루오로아세테이트

25 ml 환저 플라스크 내에서, [1-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-사이클로부틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터(150 mg, 0.65 mmol)를 다이클로로메탄(3.8 ml)에 용해하고 트라이플루오로아세트산(1.5 ml, 19.5 mmol)을 천천히 첨가하였다. 담황색 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고 이어서 농축하여 2-(1-아미노-사이클로부틸)-프로판-2-올 트라이플루오로아세테이트를 연갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-사이클로부틸]-아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(1-아미노-사이클로부틸)-프로판-2-올 트라이플루오로아세테이트(214 mg, 0.62 mmol)를 DMF(1.2 ml) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.44 ml, 2.52 mmol)에 용해하였다. 이어서 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(110 mg, 0.25 mmol) 및 HATU(104 mg, 0.27 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 물 및 석유 에터를 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과로 수집하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공하에 건조시켜, 142 mg(98%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-사이클로부틸]-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-사이클로부틸]-아마이드

10 ml 환저 플라스크 내에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-사이클로부틸]-아마이드(140 mg, 0.24 mmol)를 다이클로로메탄(1.2 ml)에 용해하고 트라이플루오로아세트산(0.75 ml, 9.7 mmol)을 첨가하였다. 주황색 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1.2 ml)에 용해하고 에틸렌다이아민(1.0 ml, 14.8 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 이어서 고진공하에 건조시켜, 67 mg(63%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [1-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-사이클로부틸]-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 256.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-하이드록시메틸-사이클로부틸)-아마이드

단계 1

(1-하이드록시메틸-사이클로부틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

15 ml 환저 플라스크 내에서, 1-3급-부톡시카보닐아미노-사이클로부탄카복실산 에틸 에스터(180 mg, 0.74 mmol)를 THF(4 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 0℃로 냉각하고 리튬 알루미늄 하이드라이드(THF 중 1.0 M, 0.78 ml, 0.78 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 나트륨 설페이트 데카하이드레이트를 조심스럽게 첨가하였다. 가스 방출이 끝난 후, 빙욕을 제거하고, 나트륨 설페이트를 첨가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고 에틸 아세테이트/메탄올로 헹궜다. 여액을 농축하여 (1-하이드록시메틸-사이클로부틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 회백색 왁스형 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1-하이드록시메틸-사이클로부틸)-아마이드

실시예 255, 단계 3 내지 5에 개시된 절차에 따라, 단계 3에서 [1-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-사이클로부틸]-카르밤산 3급-부틸 에스터 대신에 (1-하이드록시메틸-사이클로부틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 사용하여 제조하였다.

실시예 257.

2-(6-플루오로-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

4-{6-플루오로-3-[7-폼일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-인다졸-1-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

초음파 바이알을 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(182 mg, 0.44 mmol), 3급-부틸 4-브로모피페리딘-1-카복실레이트(234 mg, 0.89 mmol), 세슘 카보네이트(432 mg, 1.33 mmol) 및 DMF(2 ml)로 채웠다. 바이알을 아르곤으로 플러싱하고 밀봉하고, 초음파 반응기에서 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응물을 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 30% EtOAc)을 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 108 mg(41%)의 4-{6-플루오로-3-[7-폼일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-인다졸-1-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-[1-(1-3급-부톡시카보닐-피페리딘-4-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

50 ml 환저 플라스크 내에서, 4-{6-플루오로-3-[7-폼일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-인다졸-1-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(190 mg, 0.32 mmol)를 THF(7 ml) 및 물(1.4 ml)에 용해하였다. 연황색 용액을 0℃로 냉각하고 설팜산(186 mg, 1.92 mmol)을 첨가하였다. 이어서 물(4.2 ml) 중 나트륨 클로라이트(80%, 50 mg, 0.44 mmol) 및 칼륨 이수소 포스페이트(522 mg, 3.83 mmol)의 용액을 피펫을 통해 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 물로 희석하고 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 헥산으로 마쇄하여, 176 mg(90%)의 2-[1-(1-3급-부톡시카보닐-피페리딘-4-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 연황색 분말로서 수득하였다.

단계 3

2-[1-(1-3급-부톡시카보닐-피페리딘-4-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

10 ml 환저 플라스크 내에서, 2-[1-(1-3급-부톡시카보닐-피페리딘-4-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(85 mg, 0.14 mmol)을 DMF(1.5 ml)에 용해하고, 3급-부틸아민(0.06 ml, 0.57 mmol) 및 HATU(59 mg, 0.155 mmol)를 첨가하였다. 연황색 현탁액을 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 물 및 석유 에터를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 물 및 석유 에터로 세척하고, 이어서 고진공하에 건조시켰다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 30% EtOAc)을 사용하는 8 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 47 mg(51%)의 2-[1-(1-3급-부톡시카보닐-피페리딘-4-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

10 ml 환저 플라스크 내에서, 2-[1-(1-3급-부톡시카보닐-피페리딘-4-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(46 mg, 0.069 mmol)를 다이클로로메탄(0.4 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.22 ml, 2.86 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(0.4 ml)에 현탁하고, 에틸렌다이아민(0.28 ml, 4.15 mmol)을 첨가하였다. 연황색 현탁액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 에틸 아세테이트로 희석하였다. 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 이어서 고진공하에 건조시켜, 27 mg(85%)의 2-(6-플루오로-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 258.

2-(6-플루오로-1-피롤리딘-3-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3-메탄설폰일옥시-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

50 ml 환저 플라스크 내에서, 3-하이드록시피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(300 mg, 1.6 mmol)를 다이클로로메탄(912 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 0℃로 냉각하고 트라이에틸아민(0.34 ml, 2.44 mmol) 및 메탄설폰일 클로라이드(0.14 ml, 1.8 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 다이클로로메탄으로 2회 추출하였다. 유기층을 합하고 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하여 3-메탄설폰일옥시-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-피롤리딘-3-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

실시예 257에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 3급-부틸 4-브로모피페리딘-1-카복실레이트 대신에 3-메탄설폰일옥시-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 사용하여 제조하였다.

실시예 259.

2-(1-메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

100 ml 환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1.00 g, 2.69 mmol)을 DMF(6 ml)에 용해하였다. 3급-부틸아민(1.7 ml, 16.2 mmol)을 첨가한 후 HATU(1.12 g, 2.95 mmol)를 첨가하였다. 황색 현탁액을 실온에서 72시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 다이에틸 에터와 EtOAc의 혼합물로 추출하였다. 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 합하고 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 석유 에터로 마쇄하여, 989 mg(86%)의 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(1-메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(110 mg, 0.26 mmol) 및 1-메틸-3-트라이부틸스탄닐-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘(실시예 98 참조; 340 mg, 0.40 mmol)을 DMF(2.4 ml)에 용해하였다. 반응 혼합물을 증발시키고 아르곤으로 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(15 mg, 0.013 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(10 mg, 0.053 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 70% EtOAc)을 사용하는 12 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여, 51 mg(41%)의 2-(1-메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(1-메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

10 ml 환저 플라스크 내에서, 2-(1-메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(49 mg, 0.102 mmol)을 다이클로로메탄(0.6 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.32 ml, 4.15 mmol)을 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(0.6 ml)에 용해하고, 에틸렌다이아민(0.42 ml, 6.22 mmol)을 첨가하였다. 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 생성물을 고진공하에 건조시켜, 23 mg(64%)의 2-(1-메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 260.

2-(5-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3-요오드-1H-인다졸-5-카보니트릴

25 ml 환저 플라스크 내에서, 1H-인다졸-5-카보니트릴(400 mg, 2.79 mmol)을 DMF(7 ml)에 용해하였다. 칼륨 하이드록사이드(607 mg, 10.8 mmol)를 첨가한 후 요오드(1.42 g, 5.59 mmol)를 첨가하였다. 짙은 갈색 현탁액을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 10% 수성 NaHSO₃으로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고 여과하고 농축하여, 396 mg(53%)의 3-요오드-1H-인다졸-5-카보니트릴을 연황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

3-요오드-1-메틸-1H-인다졸-5-카보니트릴

환저 플라스크 내에서, 3-요오드-1H-인다졸-5-카보니트릴(391 mg, 1.45 mmol)을 THF(5.3 ml)에 용해하였다. 연황색 용액을 0℃로 냉각하고 칼륨 3급-부톡사이드(230 mg, 2.05 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 요오드메탄(0.12 ml, 1.92 mmol)을 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고 여과하고 농축하여, 384 mg(93%)의 연황색 고체를 수득하였다. 조질 생성물의 NMR 분석 결과 3-요오드-1-메틸-1H-인다졸-5-카보니트릴(주)과 3-요오드-2-메틸-2H-인다졸-5-카보니트릴(부)의 약 5:1 혼합물을 나타내었다. 혼합물을 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸-5-카보니트릴

환저 플라스크 내에서, 3-요오드-1-메틸-1H-인다졸-5-카보니트릴(383 mg, 1.35 mmol)을 THF(10 ml)에 부분적으로 용해하였다. 연황색 현탁액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고, 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 0.82 ml, 1.64 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 30분 동안 교반하고 이어서 트라이부틸클로로스탄난(0.43 ml, 1.59 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 포화 수성 NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하여 1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸-5-카보니트릴을 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(5-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

50 ml 환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(300 mg, 0.70 mmol) 및 1-메틸-3-트라이부틸스탄닐-1H-인다졸-5-카보니트릴(단계 3으로부터의 조질물, 847 mg, 1.14 mmol)을 DMF(6.6 ml)에 용해하였다. 반응 혼합물을 증발시키고 아르곤으로 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(41 mg, 0.036 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(27 mg, 0.14 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하고 이어서 실온으로 냉각하고, 물 및 다이에틸 에터를 첨가하였다. 생성된 갈색 침전물을 여과를 통해 수집하고, 물 및 다이에틸 에터로 세척하였다. 갈색 분말을 실리카 겔 상에서 흡착하고 MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH(구배: 0 내지 2% MeOH)를 사용하여 크로마토그래피 정제하여, 254 mg(72%)의 2-(5-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-(5-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(5-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(80 mg, 0.16 mmol)를 다이클로로메탄(0.8 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.5 ml, 6.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(0.8 ml)에 현탁하고 에틸렌다이아민(0.65 ml, 9.63 mmol)을 첨가하였다. 연황색 현탁액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하였다. 수집된 생성물을 고진공하에 건조시켜, 43 mg(73%)의 2-(5-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

실시예 261.

2-(5-다이플루오로메톡시-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

5-다이플루오로메톡시-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 5-다이플루오로메톡시-3-요오드-1H-인다졸(200 mg, 0.6 mmol)을 THF(3.6 ml)에 용해하고, 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 64 mg, 1.6 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 0.46 ml, 0.920 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탄난(0.22 ml, 0.81 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고 1 시간 동안 교반하고, 이어서 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하여 5-다이플루오로메톡시-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-(5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(200 mg, 0.47 mmol) 및 5-다이플루오로메톡시-3-트라이부틸스탄닐-1H-인다졸(단계 1로부터의 조질물, 509 mg, 0.59 mmol)을 DMF(3.2 ml)에 용해하였다. 반응 혼합물을 증발시키고 아르곤으로 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(27.0 mg, 0.023 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(18 mg, 0.095 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고 에틸 아세테이트/다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 3회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 상에 흡수하고 EtOAc/다이클로로메탄(구배: 0 내지 30% EtOAc)으로 크로마토그래피하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하고 잔사를 다이에틸 에터로 마쇄하여, 158 mg(64%)의 2-(5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 3

4-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

압력 튜브를 2-(5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(180 mg, 0.34 mmol), 3급-부틸 4-브로모피페리딘-1-카복실레이트(179 mg, 0.68 mmol), 세슘 카보네이트(332 mg, 1.02 mmol) 및 DMF(1.5 ml)로 채웠다. 이 튜브를 아르곤으로 플러싱하고 밀봉하고 100℃로 오일욕에서 밤새 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고 추가 3급-부틸 4-브로모피페리딘-1-카복실레이트(179 mg, 0.68 mmol) 및 세슘 카보네이트(332 mg, 1.02 mmol)를 첨가하였다. 이 튜브를 다시 아르곤으로 플러싱하고 밀봉하고 100℃로 오일욕에서 6 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 30% EtOAc)을 사용하는 25 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 197 mg(81%)의 4-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(5-다이플루오로메톡시-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 4-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(65 mg, 0.091 mmol)를 다이클로로메탄(0.5 ml)에 용해하고 트라이플루오로아세트산(0.28 ml, 3.63 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(0.5 ml)에 용해하고, 에틸렌다이아민(0.37 ml, 5.48 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하였다. 수집된 생성물을 고진공하에 건조시켜, 37 mg(80%)의 2-(5-다이플루오로메톡시-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 262.

4-[3-(7-3급-부틸카바모일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일]-부티르산

단계 1

4-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일}-부티르산 메틸 에스터

초음파 바이알을 2-(5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(100 mg, 0.19 mmol), 메틸 4-브로모부타노에이트(69 mg, 0.38 mmol), 세슘 카보네이트(184 mg, 0.57 mmol) 및 DMF(0.85 ml)로 채웠다. 바이알을 아르곤으로 플러싱하고 밀봉하고 초음파 반응기에서 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응물을 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 30% EtOAc)을 사용하는 12 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 99 mg(83%)의 4-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일}-부티르산 메틸 에스터를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

4-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일}-부티르산

환저 플라스크 내에서, 4-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일}-부티르산 메틸 에스터(98 mg, 0.155 mmol)를 THF(1.1 ml), 메탄올(1.1 ml) 및 물(1.1 ml)에 현탁하였다. 이어서 수성 1.0 M 리튬 하이드록사이드(0.80 ml, 0.80 mmol)를 첨가하였다. 연황색 현탁액을 75℃에서 8 시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고 밤새 교반하였다. 반응물을 물로 희석하고 pH가 약 2가 될 때까지 1 M HCl로 산성화하고 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 유기층을 합하고 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 다이에틸 에터로 마쇄하여, 81 mg(85%)의 4-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일}-부티르산을 갈색 분말로서 수득하였다.

단계 3

4-[3-(7-3급-부틸카바모일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일]-부티르산

환저 플라스크 내에서, 4-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일}-부티르산(80 mg, 0.13 mmol)을 다이클로로메탄(0.7 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.40 ml, 5.2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(0.7 ml)에 용해하고, 에틸렌다이아민(0.53 ml, 7.85 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 희석하고, 1 M HCl, 이어서 HCl로 pH 약 4까지 산성화하였다. 생성된 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 생성물을 고진공하에 건조시켜, 27 mg(41%)의 4-[3-(7-3급-부틸카바모일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일]-부티르산을 갈색 분말로서 수득하였다.

실시예 263.

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-피페리딘-4-일)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

2-(5-다이플루오로메톡시-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드 하이드로클로라이드

환저 플라스크 내에서, 4-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(102 mg, 0.143 mmol)를 메탄올(1.4 ml)에 현탁하였다. 현탁액을 0℃로 냉각하고 아세틸 클로라이드(0.20 ml, 2.81 mmol)를 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 용매를 실온에서 증발하고 잔사를 고진공하에 건조시켜, 92 mg(99%)의 2-(5-다이플루오로메톡시-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드 하이드로클로라이드를 황색 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-피페리딘-4-일)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(5-다이플루오로메톡시-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드 하이드로클로라이드(91 mg, 0.14 mmol)를 1,2-다이클로로에탄(1.5 ml)에 현탁하고, 트라이에틸아민(0.03 ml, 0.22 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 실온으로 교반하고, 이어서 포름알데하이드(37% 수용액, 13 μL, 0.175 mmol) 및 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(119 mg, 0.56 mmol)를 첨가하였다. 황색 현탁액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 포화 수성 NaHCO₃으로 켄칭하고 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 유기층을 합하고 나트륨 설페이트로 건조하고 여과하고 농축하여, 2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-피페리딘-4-일)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 황색 거품으로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-피페리딘-4-일)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

10 ml 환저 플라스크 내에서, 2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-피페리딘-4-일)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(단계 2로부터의 조질물, 103 mg, 0.131 mmol)를 다이클로로메탄(0.7 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.40 ml, 5.2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(0.7 ml)에 현탁하고, 에틸렌다이아민(0.53 ml, 7.85 mmol)을 첨가하였다. 연황색 현탁액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하였다. 수집된 생성물을 고진공하에 건조시켜, 57 mg(83%)의 2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-피페리딘-4-일)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 264.

2-(5-다이플루오로메톡시-1-피리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

2-(5-다이플루오로메톡시-1-피리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

25 ml 환저 플라스크 내에서, 2-(5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(120 mg, 0.23 mmol)를 DMF(1.7 ml)에 용해하였다. 연황색 용액을 0℃로 냉각하고 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 37 mg, 0.93 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 15분 동안 교반하고, 이어서 3-(브로모메틸)피리딘 하이드로브로마이드(91 mg, 0.36 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 석유 에터로 희석하였다. 현탁액을 여과하고, 물 및 석유 에터로 세척하고 수집된 생성물을 고진공하에 건조시켜, 126 mg(90%)의 2-(5-다이플루오로메톡시-1-피리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(5-다이플루오로메톡시-1-피리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(5-다이플루오로메톡시-1-피리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(124 mg, 0.20 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.62 ml, 8.05 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하고, 에틸렌다이아민(0.81 ml, 12.0 mmol)을 첨가하였다. 황색 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 몇 방울의 에틸 아세테이트를 함유하는 소량의 다이에틸 에터로 마쇄하여, 83 mg(80%)의 2-(5-다이플루오로메톡시-1-피리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 265.

2-(5-다이플루오로메톡시-1-피롤리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3-메탄설폰일옥시메틸-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크 내에서, 3-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(120 mg, 0.60 mmol)를 다이클로로메탄(4.4 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 0℃로 냉각하고 트라이에틸아민(0.13 ml, 0.93 mmol) 및 메탄설폰일 클로라이드(0.05 ml, 0.64 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 다이클로로메탄으로 2회 추출하였다. 유기층을 합하고 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하여, 3-메탄설폰일옥시메틸-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

3-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일메틸}-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크를 2-(5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(120 mg, 0.23 mmol), 3-메탄설폰일옥시메틸-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(단계 1로부터의 조질물, 215 mg, 0.54 mmol), 세슘 카보네이트(258 mg, 0.79 mmol) 및 DMF(1 ml)로 채웠다. 반응 혼합물을 110℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 40% EtOAc)을 사용하는 12 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하고 잔사를 석유 에터로 마쇄하여, 138 mg(86%)의 3-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일메틸}-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 연황색 분말로서 수득하였다.

단계 3

2-(5-다이플루오로메톡시-1-피롤리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 3-{3-[7-3급-부틸카바모일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일메틸}-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(134 mg, 0.188 mmol)를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.58 ml, 7.53 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1 ml)에 용해하고, 에틸렌다이아민(0.76 ml, 11.3 mmol)을 첨가하였다. 연황색 용액을 실온에서 45분 동안 교반하고, 이어서 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 이어서 고진공하에 건조시켜, 33 mg(35%)의 2-(5-다이플루오로메톡시-1-피롤리딘-3-일메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 266.

2-(7-하이드록시메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

(1H-인다졸-7-일)-메탄올

환저 플라스크 내에서, 에틸 1H-인다졸-7-카복실레이트(600 mg, 3.15 mmol)를 THF(16 ml)에 용해하였다. 연황색 용액을 0℃로 냉각하고 리튬 알루미늄 하이드라이드(THF 중 1.0 M, 3.8 ml, 3.8 mmol)를 적가하였다. 밝은 황색 반응 혼합물을 0℃에서 1.25시간 동안 교반하고, 이어서 나트륨 설페이트 데카하이드레이트를 조심스럽게 첨가하였다. 가스 방출이 끝날 때, 빙욕을 제거하고, 나트륨 설페이트를 첨가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고 에틸 아세테이트/메탄올로 헹궜다. 여액을 농축하여 (1H-인다졸-7-일)-메탄올을 연황색 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

(3-요오드-1H-인다졸-7-일)-메탄올

환저 플라스크 내에서, (1H-인다졸-7-일)-메탄올(572 mg, 3.09 mmol)을 DMF(8 ml)에 용해하고, 칼륨 하이드록사이드(671 mg, 12.0 mmol) 및 요오드(1.57 g, 6.18 mmol)를 첨가하였다. 짙은 갈색 현탁액을 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 수성 10% Na₂S₂O₃으로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하여, 433 mg(51%)의 (3-요오드-1H-인다졸-7-일)-메탄올을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

7-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-3-요오드-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, (3-요오드-1H-인다졸-7-일)-메탄올(317 mg, 1.16 mmol)을 DMF(3.6 ml)에 용해하고, 이미다졸(197 mg, 2.89 mmol) 및 3급-부틸다이메틸실릴 클로라이드(192 mg, 1.27 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 72시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 5% EtOAc)을 사용하는 12 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 357 mg(80%)의 7-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-3-요오드-1H-인다졸을 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

7-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 7-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-3-요오드-1H-인다졸(200 mg, 0.52 mmol)을 THF(2.8 ml)에 용해하고, 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 25 mg, 0.63 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고, 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 0.36 ml, 0.72 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탄난(0.16 ml, 0.59 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 포화 수성 NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고 여과하고 농축하여, 7-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 5

2-[7-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

25 ml 환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(180 mg, 0.42 mmol) 및 7-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸(단계 4로부터의 조질물, 462 mg, 0.50 mmol)을 DMF(2.8 ml)에 용해하였다. 반응 혼합물을 증발시키고, 아르곤으로 재충전하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(25 mg, 0.022 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(16 mg, 0.084 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 30% EtOAc)을 사용하는 25 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 86 mg(34%)의 2-[7-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 6

2-(7-하이드록시메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-[7-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(85 mg, 0.14 mmol)를 THF(0.7 ml)에 용해하고, 테트라부틸암모늄 플루오라이드(THF 중 1.0 M, 1.4 ml, 1.4 mmol)를 적가하였다. 연갈색 용액을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 70℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 위에 흡수시키고, MeOH/CH₂Cl₂/0.5% NH₄OH(구배: 0 내지 10% MeOH)로 크로마토그래피하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하고 잔사를 몇 방울의 메탄올을 함유하는 에틸 아세테이트로 마쇄하여, 21 mg(41%)의 2-(7-하이드록시메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 267.

2-(6-플루오로-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-아미노-사이클로펜틸)-아마이드

단계 1

4-{3-[7-(3-3급-부톡시카보닐아미노-사이클로펜틸카바모일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-6-플루오로-인다졸-1-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터

10 ml 환저 플라스크를 2-[1-(1-3급-부톡시카보닐-피페리딘-4-일)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(85 mg, 0.14 mmol) 및 (3-아미노사이클로펜틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터 하이드로클로라이드(50 mg, 0.21 mmol)로 채웠다. 이어서, DMF(1 ml)를 첨가한 후 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.07 ml, 0.40 mmol) 및 HATU(59 mg, 0.155 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 50% EtOAc)을 사용하는 12 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 121 mg(99%)의 4-{3-[7-(3-3급-부톡시카보닐아미노-사이클로펜틸카바모일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-6-플루오로-인다졸-1-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터를 연황색 오일로서 수득하였다. 단리된 생성물은 NMR 분석에 의해 공지되지 않은 상대적인 입체화학의 단일 부분입체이성질체로 측정되었다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-아미노-사이클로펜틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, 4-{3-[7-(3-3급-부톡시카보닐아미노-사이클로펜틸카바모일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일]-6-플루오로-인다졸-1-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(113 mg, 0.13 mmol)를 다이클로로메탄(0.7 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.40 ml, 5.2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(0.7 ml)에 용해하고, 에틸렌다이아민(0.52 ml, 7.7 mmol)을 첨가하였다. 연황색 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 이어서 고진공하에 건조시켜, 43 mg(73%)의 2-(6-플루오로-1-피페리딘-4-일-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-아미노-사이클로펜틸)-아마이드를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 268.

2-[7-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

2-(1H-인다졸-7-일)-프로판-2-올

50 ml 환저 플라스크 내에서, 에틸 1H-인다졸-7-카복실레이트(350 mg, 1.84 mmol)를 THF(10 ml)에 용해하였다. 황색 용액을 0℃로 냉각하고 메틸마그네슘 브로마이드(다이에틸 에터 중 3.0 M, 2.2 ml, 6.6 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 포화 수성 NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 50% EtOAc)을 사용하는 12 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 225 mg(69%)의 2-(1H-인다졸-7-일)-프로판-2-올을 황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

2-(3-요오드-1H-인다졸-7-일)-프로판-2-올

환저 플라스크 내에서, 2-(1H-인다졸-7-일)-프로판-2-올(204 mg, 1.16 mmol)을 DMF(3 ml)에 용해하고, 요오드(588 mg, 2.32 mmol) 및 칼륨 하이드록사이드(251 mg, 4.48 mmol)를 첨가하였다. 짙은 갈색 현탁액을 실온에서 5시간 동안 교반하고, 이어서 10% 수성 NaHSO₃으로 켄칭하고, 다이에틸 에터와 EtOAc의 혼합물로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고 여과하고 농축하여, 2-(3-요오드-1H-인다졸-7-일)-프로판-2-올을 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

3-요오드-7-(1-메틸-1-트라이메틸실란일옥시-에틸)-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 2-(3-요오드-1H-인다졸-7-일)-프로판-2-올(단계 2로부터의 조질물, 479 mg, 1.11 mmol)을 DMF(3.2 ml)에 용해하고, 이미다졸(189 mg, 2.77 mmol) 및 트라이메틸실릴 클로라이드(0.17 ml, 1.33 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하여, 383 mg(88%)의 3-요오드-7-(1-메틸-1-트라이메틸실란일옥시-에틸)-1H-인다졸을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-[7-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

실시예 266, 단계 4 내지 6에 개시된 절차에 따라, 단계 4에서 7-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-3-요오드-1H-인다졸 대신에 3-요오드-7-(1-메틸-1-트라이메틸실란일옥시-에틸)-1H-인다졸을 사용하여 제조하였다.

실시예 269.

2-[5-(1-하이드록시-에틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

단계 1

2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(300 mg, 0.73 mmol) 및 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸(실시예 273, 665 mg, 0.82 mmol)을 DMF(4.8 ml)에 용해하였다. 반응 혼합물을 증발시키고, 아르곤으로 재충전하고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(42 mg, 0.036 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(28 mg, 0.147 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고 석유 에터로 희석하였다. 생성된 현탁액을 여과하고, 고체를 물, 석유 에터 및 최소량의 다이에틸 에터로 세척하고, 이어서 고진공하에 건조시켜, 426 mg(92%)의 2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 갈색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(5-하이드록시메틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(425 mg, 0.66 mmol)를 THF(6 ml)에 용해하였다. 연황색 용액을 0℃로 냉각하고 테트라부틸암모늄 플루오라이드(THF 중 1.0 M, 0.24 ml, 0.240 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 2시간에 걸쳐서 천천히 가온하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이에틸 에터로 마쇄하여, 2-(5-하이드록시메틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 황색 분말로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-(5-폼일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(5-하이드록시메틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(단계 2로부터의 조질물, 476 mg, 0.625 mmol)를 다이클로로메탄(3.2 ml)에 용해하고, 데스-마틴 퍼요오디난(292 mg, 0.688 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 이어서 10% 수성 Na₂S₂O₃와 포화 수성 NaHCO₃의 1:1 혼합물(10 ml)로 켄칭하고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 포화 수성 NaHCO₃으로 세척하고, 이어서 수층을 다이클로로메탄으로 재추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 위에 흡수시키고 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 60% EtOAc)으로 크로마토그래피하여, 218 mg(71%)의 2-(5-폼일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-[5-(1-하이드록시-에틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(5-폼일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(111 mg, 0.225 mmol)를 THF(3 ml)에 현탁하였다. 담황색 현탁액을 0℃로 냉각하고 메틸마그네슘 브로마이드(다이에틸 에터 중 3.0 M, 0.23 ml, 0.69 mmol)를 적가하였다. 짙은 적색 현탁액을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 포화 수성 NH₄Cl로 켄칭하고, 다이클로로메탄으로 2회 추출하였다. 유기층을 합하고 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 80% EtOAc)을 사용하는 12 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 42 mg(37%)의 2-[5-(1-하이드록시-에틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-[5-(1-하이드록시-에틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-[5-(1-하이드록시-에틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드(41 mg, 0.08 mmol)를 테트라부틸암모늄 플루오라이드(THF 중 1.0 M, 0.90 ml, 0.90 mmol)에 용해하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 밤새 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 물, 에틸 아세테이트 및 몇 방울의 메탄올로 마쇄하여, 21 mg(65%)의 2-[5-(1-하이드록시-에틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드를 황색 분말로서 수득하였다.

실시예 270.

2-(6-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3-요오드-6-메탄설폰일-1H-인다졸

25 ml 환저 플라스크 내에서, 6-메틸설폰일-1H-인다졸(250 mg, 1.27 mmol)을 DMF(3.2 ml)에 용해하고, 칼륨 하이드록사이드(277 mg, 4.93 mmol) 및 요오드(647 mg, 2.55 mmol)를 첨가하였다. 짙은 갈색 현탁액을 실온에서 4시간 동안 교반하고, 이어서 수성 10% Na₂S₂O₃으로 켄칭하고, 다이에틸 에터와 EtOAc의 혼합물로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하여, 165 mg의 주황색 오일을 수득하였다. 합한 수층을 다이클로로메탄으로 2회 추출하였다. 유기층을 합하고 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 제 1 추출물로부터의 165 mg의 주황색 오일과 합하고 고진공하에 건조시켜, 401 mg(98%)의 3-요오드-6-메탄설폰일-1H-인다졸을 주황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

3-요오드-6-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 3-요오드-6-메틸설폰일-1H-인다졸(396 mg, 1.23 mmol)을 THF(4.4 ml)에 용해하였다. 주황색 용액을 0℃로 냉각하고, 칼륨 3급-부톡사이드(200 mg, 1.78 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 요오드메탄(0.11 ml, 1.76 mmol)을 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 빙욕을 제거하고 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 위에 흡수시키고, EtOAc/헥산(구배: 0 내지 30% EtOAc)으로 크로마토그래피하여, 251 mg(61%)의 3-요오드-6-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸을 회백색 고체로서 수득하였다. 주요하지 않은 위치이성질체 3-요오드-6-메탄설폰일-2-메틸-2H-인다졸이 또한 관찰되었지만, 단리되지 않았다.

단계 3

6-메탄설폰일-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸

환저 플라스크 내에서, 3-요오드-6-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸(120 mg, 0.36 mmol)을 THF(2 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고, 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 0.25 ml, 0.50 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탄난(0.12 ml, 0.44 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 2.5시간에 걸쳐서 가온시키고, 이어서 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고 여과하고 농축하여, 6-메탄설폰일-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 연황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 4

2-(6-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(110 mg, 0.26 mmol) 및 6-메탄설폰일-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸(단계 3으로부터의 조질물, 330 mg, 0.33 mmol)을 DMF(1.7 ml)에 용해하였다. 플라스크를 증발시키고, 아르곤으로 재충전하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(15 mg, 0.013 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(10 mg, 0.053 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 밤새 냉각하였다. 반응물을 물로 켄칭하고 다이에틸 에터로 2회 및 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기층을 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/헥산(구배: 0 내지 40% EtOAc)을 사용하는 25 g 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여, 79 mg(55%)의 2-(6-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-(6-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

환저 플라스크 내에서, 2-(6-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(76 mg, 0.137 mmol)를 다이클로로메탄(0.7 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.42 ml, 5.45 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(0.7 ml)에 용해하고, 에틸렌다이아민(0.55 ml, 8.14 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 여과하고 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하였다. 수집된 생성물을 고진공하에 건조시켜, 39 mg(67%)의 2-(6-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 271.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-3-아미노-사이클로부틸)-아마이드

단계 1

(시스-3-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로부틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터

환저 플라스크를 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(110 mg, 0.25 mmol) 및 시스-3급-부틸 3-아미노사이클로부틸카바메이트(65 mg, 0.35 mmol)로 채웠다. 이어서, DMF(1.2 ml)를 첨가한 후 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.12 ml, 0.69 mmol) 및 HATU(104 mg, 0.27 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 물 및 석유 에터를 첨가하였다. 현탁액을 여과하고, 교체를 물 및 약간의 석유 에터로 세척하였다. 수집된 생성물을 고진공하에 건조시켜, 145 mg(95%)의 (시스-3-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로부틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터를 회백색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-3-아미노-사이클로부틸)-아마이드

환저 플라스크 내에서, (시스-3-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로부틸)-카르밤산 3급-부틸 에스터(144 mg, 0.236 mmol)를 다이클로로메탄(1.2 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(0.73 ml, 9.48 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1.2 ml)에 현탁하고, 에틸렌다이아민(0.96 ml, 14.2 mmol)을 첨가하였다. 연황색 현탁액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 현탁액을 여과하고, 온수 및 에틸 아세테이트로 세척하였다. 생성물을 고진공하에 건조시켜, 86 mg(91%)의 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(시스-3-아미노-사이클로부틸)-아마이드를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 272.

2-(1-메틸-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

2-[1-하이드록시-메트-(Z)-일리덴]-사이클로헵탄온

0℃에서 다이에틸 에터(25 ml) 중 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60% 분산, 535 mg, 13.4 mmol)의 현탁액에 에탄올(0.06 ml, 1.03 mmol)을 적가하였다. 회색 현탁액을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. 다이에틸 에터(3 ml) 중 사이클로헵탄온(1.58 ml, 13.4 mmol) 및 에틸 포름에이트(1.63 ml, 20.1 mmol)의 용액을 10분에 걸쳐서 적가하였다. 담황색 불균질 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 4시간 동안 가온하였다. 반응물을 에탄올(2 ml)로 조심스럽게 켄칭하고, 이어서 물(25 ml)을 첨가하였다. 층을 분리하고 수상을 다이에틸 에터로 세척하였다. 유기층을 한쪽으로 두고 나중에 폐기하였다. 수층을 pH 2까지 1 M HCl로 산성화하고, 이어서 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기층을 MgSO₄로 건조하고 농축하여, 1.41 g(75%)의 2-[1-하이드록시-메트-(Z)-일리덴]-사이클로헵탄온을 황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸

0℃에서 MeOH(10 ml) 중 2-[1-하이드록시-메트-(Z)-일리덴]-사이클로헵탄온(1.35 g, 9.63 mmol)의 용액에 하이드라진(0.30 ml, 9.63 mmol)을 적가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 CH₂Cl₂에 용해하고, 물로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조하고 농축하여, 1.24 g(95%)의 1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸을 담황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

3-요오드-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸

실온에서 DMF(8 ml) 중 1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸(500 mg, 3.67 mmol)의 용액에 분말 칼륨 하이드록사이드(618 mg, 11.0 mmol) 및 요오드(1.86 g, 7.34 mmol)를 첨가하였다. 밤색 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 수성 10% Na₂S₂O₃으로 켄칭하고, 물로 희석하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 물로 3회 세척하고, MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 20% 내지 50% EtOAc/헥산을 사용하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여, 600 mg(62%)의 3-요오드-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

3-요오드-1-메틸-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸 및 3-요오드-2-메틸-2,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸

0℃에서 THF(8 ml) 중 3-요오드-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸(600 mg, 2.29 mmol)의 용액에 KOt-Bu(360 mg, 3.2 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 요오드메탄(0.20 ml, 3.2 mmol)을 첨가하였다. 교반을 0℃에서 30분 동안 계속하고, 이어서 실온에서 2시간 동안 계속하였다. 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 SiO₂ 위에 흡수시키고, 10% 내지 20% EtOAc/헥산으로 크로마토그래피하여, 387 mg(61%)의 3-요오드-1-메틸-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸을 무색 오일로서 수득하였다.

또한, 200 mg(32%)의 덜 극성인 3-요오드-2-메틸-2,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸을 백색 고체로서 단리하였다.

단계 5

1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸

-10℃(얼음/아세톤)에서 THF(3 ml) 중 3-요오드-2-메틸-2,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸(180 mg, 0.62 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 0.37 ml, 0.74 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 추가 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 0.10 ml, 0.20 mmol)를 첨가하였다. 교반을 -10℃에서 20분 동안 계속하고, 이어서 트라이부틸클로로스탄난(0.20 ml, 0.74 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 1 시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 0% 내지 10% EtOAc/헥산(헥산 중 0.5% Et₃N 스파이크)을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 76 mg(28%)의 1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 6

2-(1-메틸-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

DMF(2 ml) 중 1-메틸-3-트라이부틸스탄닐-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸(74 mg, 0.17 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(60 mg, 0.14 mmol)의 용액에 Pd(PPh₃)₄(8 mg, 0.007 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(5 mg, 0.028 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 1.5시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 물로 3회 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 SiO₂ 위에 흡수시키고, 20% 내지 50% EtOAc/헥산으로 크로마토그래피하여, 42 mg(60%)의 2-(1-메틸-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 담주황-황색 고체로서 단리하였다.

단계 7

2-(1-메틸-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

CH₂Cl₂(2 ml) 중 2-(1-메틸-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(40 mg, 0.08 mmol)의 용액에 TFA(1.0 ml, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 황색 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 CH₂Cl₂(2 ml)에 재용해하고, 에틸렌다이아민(0.1 ml, 1.48 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축하고 0% 내지 3% MeOH/EtOAc를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 직접 정제하여, 20 mg(68%)의 2-(1-메틸-1,4,5,6,7,8-헥사하이드로사이클로헵타피라졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 회백색 고체로서 단리하였다.

실시예 273.

2-(5-하이드록시메틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3-요오드-1-메틸-1H-인다졸-5-카복실산 메틸 에스터

0℃에서 THF(12 ml) 중 3-요오드-1H-인다졸-5-카복실산 메틸 에스터(1.0 g, 3.31 mmol)의 용액에 KOt-Bu(520 mg, 4.63 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 요오드메탄(0.29 ml, 4.63 mmol)을 첨가하였다. 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회, 이어서 CH₂Cl₂로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하여, 950 mg의 3-요오드-1-메틸-1H-인다졸-5-카복실산 메틸 에스터를 담황색 고체로서 수득하였다. 이는 NMR 분석 결과 N1:N2 알킬화된 위치이성질체의 8:1 혼합물로 증명되었다.

단계 2

(3-요오드-1-메틸-1H-인다졸-5-일)-메탄올

0℃에서 CH₂Cl₂(30 ml) 중 3-요오드-1-메틸-1H-인다졸-5-카복실산 메틸 에스터(0.95 g, 3.01 mmol)의 용액에 DIBAL-H(1.18 ml, 6.61 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. MeOH(1 ml)로 조심스럽게 켄칭하고, 이어서 CH₂Cl₂(20 ml)로 희석하고, 포화 수성 Na+K+ 타르트레이트(30 ml)를 첨가하였다. 이상 혼합물을 실온에서 1시간 동안 격렬하게 교반하였다. 층을 분리하고 수상을 CH₂Cl₂로 추출하였다. 합한 유기물을 물로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고 농축하여, 810 mg의 (3-요오드-1-메틸-1H-인다졸-5-일)-메탄올을 황색 왁스형 고체로서 수득하였다.

단계 3

5-(3급-부틸-다이메틸실란일옥시메틸)-3-요오드-1-메틸-1H-인다졸

DMF(9 ml) 중 (3-요오드-1-메틸-1H-인다졸-5-일)-메탄올(810 mg, 2.81 mmol)의 용액에 이미다졸(479 mg, 7.03 mmol)을 첨가한 후 3급-부틸다이메틸실릴 클로라이드(466 mg, 3.09 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 물로 3회 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 10% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 732 mg(65%)의 5-(3급-부틸-다이메틸실란일옥시메틸)-3-요오드-1-메틸-1H-인다졸을 담황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸

-10℃(얼음/아세톤)에서 THF(3 ml) 중 5-(3급-부틸-다이메틸실란일옥시메틸)-3-요오드-1-메틸-1H-인다졸(201 mg, 0.50 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M)(0.30 ml, 0.60 mmol)를 첨가하였다. 담황색 반응 혼합물을 -10℃에서 20분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탄난(0.16 ml, 0.60 mmol)을 첨가하였다. 교반을 -10℃에서 30분 동안 계속하고, 이어서 실온에서 1시간 동안 계속하였다. 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하여, 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 거의 무색인 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 5

2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

DMF(2 ml) 중 5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸(265 mg, 0.47 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(100 mg, 0.23 mmol)의 용액에 Pd(PPh₃)₄(14 mg, 0.012 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(9 mg, 0.047 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 물로 3회 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 위에 흡수시키고 20% 내지 50% EtOAc/헥산으로 크로마토그래피하여, 106 mg(73%)의 2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 베이지색 고체로서 단리하였다.

단계 6

2-(5-하이드록시메틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

THF(2 ml) 중 2-[5-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시메틸)-1-메틸-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(106 mg, 0.17 mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 플루오라이드(THF 중 1.0 M, 1.7 ml, 1.7 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 2시간 동안 환류 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응물을 물로 켄칭하고 EtOAc, 이어서 5% MeOH/CH₂Cl₂로 추출하였다. 합한 유기층을 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/MeOH로 마쇄하고 고체를 여과를 통해 수집하여, 30 mg(47%)의 2-(5-하이드록시메틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 274.

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-메탄올

0℃에서 THF(10 ml) 중 1-메틸-1H-피라졸-4-카복실산(0.50 g, 3.96 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(61 ml, 4.36 mmol)을 첨가한 후 에틸 클로로포름에이트(0.42 ml, 4.36 mmol)를 첨가하였다. 두꺼운 슬러리를 0℃에서 15분 동안 교반하고, 이어서 물(4 ml) 중 나트륨 보로하이드라이드(450 mg, 11.9 mmol)의 용액을 피펫을 통해 분획식으로 조심스럽게 첨가하였다. 격렬한 가스 방출이 관찰되었다. 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 물 및 포화 수성 NH₄Cl로 희석하고 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 30% 내지 80% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 150 mg(34%)의 (1-메틸-1H-피라졸-4-일)-메탄올을 왁스형 백색 고체로서 단리하였다.

단계 2

메탄설폰산 1-메틸-1H-피라졸-4-일메틸 에스터

0℃에서 CH₂Cl₂(4 ml) 중 (1-메틸-1H-피라졸-4-일)메탄올(75 mg, 0.67 mmol)의 부분적인 현탁액에 트라이에틸아민(0.19 ml, 1.34 mmol)을 첨가한 후 메탄설폰일 클로라이드(57 μL, 0.74 mmol)를 첨가하였다. 탁한 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하여, 110 mg의 메탄설폰산 1-메틸-1H-피라졸-4-일메틸 에스터를 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

DMF(2 ml) 중 메탄설폰산 1-메틸-1H-피라졸-4-일메틸 에스터(108 mg, 0.57 mmol)의 용액에 2-(5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(100 mg, 0.19 mmol) 및 Cs₂CO₃(184 mg, 0.57 mmol)을 첨가하였다. 밝은 황색 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 물로 3회 세척하고, MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 50% 내지 100% EtOAc/헥산으로 크로마토그래피하여, 60 mg(51%)의 2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

CH₂Cl₂(2 ml) 중 2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(56 mg, 0.09 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(0.5 ml, 6.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 CH₂Cl₂(2 ml)에 용해하고, 에틸렌다이아민(0.2 ml, 2.96 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 5% MeOH/CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc/Et₂O로 마쇄하고 생성물을 여과를 통해 수집하여, 29 mg(65%)의 2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 275.

2-(5,6,7,8-테트라하이드로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

1-요오드-이미다조[1,5-a]피리딘

EtOH(8 ml) 및 물(4 ml) 중 이미다조[1,5-a]피리딘(0.50 g, 4.23 mmol)의 용액에 나트륨 바이카보네이트(1.07 g, 12.7 mmol)를 첨가한 후 요오드(1.61 g, 6.35 mmol)를 첨가하였다. 짙은 밤갈색 불균질 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 수성 10% Na₂S₂O₃으로 켄칭하고, 물로 희석하고 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기물을 물로 세척하고, MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 20% 내지 50% EtOAc/헥산을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 649 mg(63%)의 1-요오드-이미다조[1,5-a]피리딘을 연갈색 고체(광에 민감함)로서 수득하였다.

단계 2

1-트라이부틸스탄난일-이미다조[1,5-a]피리딘

-10℃(얼음/아세톤)에서 THF(3 ml) 중 1-요오드-이미다조[1,5-a]피리딘(150 mg, 0.62 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2.0 M, 37 ml, 0.74 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃에서 20분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탄난(0.20 ml, 0.74 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 -10℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 실온으로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 물로 켄칭하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하여, 1-트라이부틸스탄난일-이미다조[1,5-a]피리딘을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3

2-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

DMF(2 ml) 중 1-트라이부틸스탄닐-이미다조[1,5-a]피리딘(250 mg, 0.61 mmol) 및 2-브로모-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(150 mg, 0.35 mmol)의 용액에 Pd(PPh₃)₄(20 mg, 0.018 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(13 mg, 0.07 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 밤새 냉각하였다. 반응물을 물로 켄칭하고 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기물을 물로 3회 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 0% 내지 3% MeOH/CH₂Cl₂(0.5%NH₄OH)로 1회 크로마토그래피하고, 이어서 30% 내지 60% EtOAc/헥산으로 크로마토그래피하여, 74 mg(45%)의 2-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(5,6,7,8-테트라하이드로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

TFA(2 ml) 중 2-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(70 mg, 0.15 mmol)의 용액에 백금(IV) 옥사이드(7 mg, 0.03 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소(풍선)하에 6시간 동안 교반하고, 이어서 셀라이트 상에서 여과하고, CH₂Cl₂로 헹궜다. 여액을 농축하였다. 잔사를 CH₂Cl₂(3 ml)에 용해하고 에틸렌다이아민(0.4 ml)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반하고, 이어서 물로 켄칭하고 CH₂Cl₂로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 0% 내지 3% MeOH/CH₂Cl₂(0.5% NH₄OH)를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획을 합하고 농축하여 황색 고체를 수득하고, 이를 Et₂O로 마쇄하여 13 mg(26%)의 2-(5,6,7,8-테트라하이드로-이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드를 담황색 고체 수득하였다.

실시예 276.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-아미노-사이클로헥실)-아마이드(부분입체이성질체 A)

단계 1

(3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로헥실)-카르밤산 3급-부틸 에스터(부분입체이성질체 A 및 부분입체이성질체 B)

(3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로헥실)-카르밤산 3급-부틸 에스터(실시예 442 참조)의 라세미 샘플을, 타르/워터스 멀티그램(Thar/Waters Multigram) II SFC 시스템을 사용하여 30% MeOH/CO₂ 및 220 nM의 15 mg 집적 주입으로 강제 시간 윈도우 수집되고 70 ml/분의 속도로 용리되는 다이셀(Daicel) AD 컬럼 3 x 25 cm에 의해 2 분획으로 분리하였다(각각의 분획은 2개의 부분입체이성질체로 이루어짐). 부분입체이성질체 쌍을 트랜스(부분입체이성질체 A, 53 mg, 연황색 고체, 더욱 극성) 및 시스(부분입체이성질체 B, 66 mg, 회백색 고체, 덜 극성)로서 임의적으로 부여하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-아미노-사이클로헥실)-아마이드(부분입체이성질체 A)

더욱 극성인 (3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로헥실)-카르밤산 3급-부틸 에스터(53 mg, 101 μmol)의 부분입체이성질체 A를 다이클로로메탄(5 ml)에 용해하고 TFA(1.19 g, 803 μL, 10.4 mmol)로 처리하고, 교반을 18시간 동안 실온에서 계속하여, 연황색 용액은 연한 적색-주황색 용액이 되었다. 용매를 증발시키고 잔사를 다이클로로메탄/MeOH에 용해하고, 실리카 겔 위해 흡수시키고 크로마토그래피(25 g 컬럼, 톰슨(Thomson)으로부터의 50 μm, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 10% MeOH, 10분 구배)로 정제하여, 회백색 고체를 수득하고, 이를 MeOH에서 초음파처리하고 방치시켜 완전한 고체 형성을 촉진하였다. 모액을 디켄팅(decanting)하여 고체를 분리하고 고진공하에 건조시켜, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-아미노-사이클로헥실)-아마이드(부분입체이성질체 A)(27 mg, 63%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 277.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-아미노-사이클로헥실)-아마이드(부분입체이성질체 B)

덜 극성인, 실시예 276으로부터 단리된 (3-{[2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카보닐]-아미노}-사이클로헥실)-카르밤산 3급-부틸 에스터(66 mg, 126 μmol)의 부분입체이성질체 B를 다이클로로메탄(5 ml)에 용해하고 TFA(1.48 g, 1 ml, 13.0 mmol)로 처리하였다. 실온에서 18시간 후 용매를 증발시키고 잔사를 다이클로로메탄/MeOH에 용해하고, 실리카 겔 위에 흡수시키고 크로마토그래피(25 g 컬럼, 톰슨으로부터의 50 μm, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH, 20분 구배)로 정제하여, 회백색 잔사를 수득하고, 이를 몇방울의 MeOH를 함유하는 다이클로로메탄에 용해하였다. 사이클로헥산을 첨가하여 고체 형성을 촉진하였다. 모액을 디켄팅함으로써 침전물을 분리하고 고진공하에 건조시켜, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(3-아미노-사이클로헥실)-아마이드(부분입체이성질체 B)(18 mg, 33.7%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 278.

N-아이소프로필-2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-브로모-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(1.12 g, 3.01 mmol) 및 HATU(1.37 g, 3.61 mmol)를 DMF(5.2 ml)와 합하고, 이어서 프로판-2-아민(711 mg, 1.03 ml, 12.0 mmol)을 주사기를 통해 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 교반하였다. 14시간 후, 물(50 ml)을 첨가하고 혼합물을 EtOAc(4 x 50 ml)로 추출하였다. 합한 유기물을 물(30 ml) 및 포화 나트륨 클로라이드 용액(3 x 20 ml)으로 세척하고 MgSO₄로 건조시켰다. 용매를 증발시키고 잔사를 크로마토그래피(실리카, 15분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 30% EtOAc)로 정제하여, 2-브로모-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(1.17 g, 2.83 mmol, 94%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

N-아이소프로필-2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

아르곤하에 2-브로모-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(124 mg, 301 μmol) 및 1,5,5-트라이메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸(실시예 13 참조, 219 mg, 483 μmol, 61)을 DMF(2.5 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(17.4 mg, 15.0 μmol) 및 CuI(5.39 mg, 60.2 μmol, 당량: 0.20)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 잔사를 크로마토그래피(115 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 0 내지 70% EtOAc/헥산, 30분 구배)로 정제하여, N-아이소프로필-2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(113 mg, 227 μmol, 76%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

N-아이소프로필-2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-아이소프로필-2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(113 mg, 227 μmol)의 용액에 TFA(1.48 g, 1 ml, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 증발시켜 황색 고체를 수득하였다. 고체를 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 함유)에 용해하고 크로마토그래피(40 g, 50 μm 입자 크기, 아날로직스, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH, 15분)로 정제하였다. 순수한 생성물을 MeOH에 재용해하고 고체를 형성하기 위해 방치시켰다. 모액을 디켄팅하여 고체를 분리하고, 이어서 건조시켜, N-아이소프로필-2-(1,5,5-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(60 mg, 164 μmol, 72%)를 백색 니들(needle)로서 수득하였다.

실시예 279.

N-아이소프로필-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-아이소프로필-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

아르곤하에 2-브로모-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(107 mg, 259 μmol) 및 1,6,6-트라이메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸(실시예 70 참조, 188 mg, 414 μmol)을 DMF(2.5 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(15.0 mg, 12.9 μmol) 및 CuI(4.64 mg, 51.8 μmol, 당량: 0.20)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 잔사를 크로마토그래피(실리카, 40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 15분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc)로 정제하여, N-아이소프로필-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(90 mg, 181 μmol, 70.0%)를 연황색 고체로서 수득하였고, 순도는 약 75%였다.

이는 NMR 및 LCMS 결과 3-위치에 연결된 테트라하이드로인다졸(MW 326.49)의 다이머로서 확인된 불순물을 나타내었다.

단계 5

N-아이소프로필-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-아이소프로필-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(90 mg, 181 μmol)의 용액에 TFA(1.48 g, 1.00 ml, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 증발시키고 크로마토그래피(40 g, 50 μm 입자 크기, 아날로직스, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH, 15분 구배)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄에 현탁하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체 형성을 촉진하였다. 모액을 디켄팅하여 고체를 분리하고 이어서 건조시켜, N-아이소프로필-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(54 mg, 147 μmol, 81.3%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 280.

N-아이소프로필-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

4-(3-클로로-페녹시)-2-메틸-1-니트로-벤젠

DMF(10 ml) 중 3-클로로-페놀(1.65 g, 12.89 mmol)의 현탁액에 KOH(1.45 g, 25.78 mmol)를 첨가하고, 이 혼합물 110℃에서 30분 동안 가열하였다. 혼합물을 25℃로 냉각하고 4-플루오로-2-메틸-1-니트로-벤젠(0.5 g, 3.22 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 이 혼합물을 130℃로 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 10% NaOH 용액으로 처리하고 EtOAc(3 x 25 ml)로 추출하였다. 유기상을 염수(3 x 5 ml)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카, 헥산 중 0.5% EtOAc)로 정제하여, 4-(3-클로로-페녹시)-2-메틸-1-니트로-벤젠(400 mg, 47%)을 수득하였다.

단계 2

4-(3-클로로-페녹시)-2-메틸-페닐아민

에탄올 및 물 중 4-(3-클로로-페녹시)-2-메틸-1-니트로-벤젠(0.56 g, 2.12 mmol)의 교반된 용액에, 철(594 mg, 10.6 mmol) 및 포화 암모늄 클로라이드(569 mg, 10.6 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 12시간 동안 환류 가열하였다. 이어서, 이 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 이어서 EtOAc(3 x 15 ml)로 추출하였다. EtOAc 층을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 농축하였다. 이어서, 이를 크로마토그래피(헥산 중 11% EtOAc)로 정제하여, 4-(3-클로로-페녹시)-2-메틸-페닐아민(0.43 g, 87%)을 수득하였다.

단계 3

5-(3-클로로-페녹시)-1H-인다졸

4-(3-클로로-페녹시)-2-메틸-페닐아민(0.87 g, 3.74 mmol)을 클로로포름에 용해하였다. 이어서, Ac₂O(0.878 g, 8.61 mmol)를 10분에 걸쳐서 0℃에서 적가하고, 혼합물을 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 칼륨 아세테이트(110 mg, 1.12 mmol) 및 t-부틸 니트라이트(829 mg, 8.05 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 이 혼합물을 농축하고 농축 HBr을 첨가하고 혼합물을 16시간 동안 25℃에서 교반하였다. 혼합물의 pH를 KOH 용액을 사용하여 pH 7로 조정하고 생성된 혼합물을 EtOAc(3 x 50 ml)로 추출하였다. 유기상을 염수(3 x 10 ml)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(헥산 중 11% EtOAc)로 정제하여, 5-(3-클로로-페녹시)-1H-인다졸(152 mg, 17%)을 수득하였다.

단계 4

5-(3-클로로페녹시)-3-요오드-1H-인다졸

25℃에서 DMF(2.36 ml) 중 5-(3-클로로페녹시)-1H-인다졸(152 mg, 621 μmol)의 용액에 칼륨 하이드록사이드(105 mg, 1.86 mmol) 및 요오드(237 mg, 932 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 75분 동안 교반하고, 이어서 10% Na₂S₂O₃으로 켄칭하고 물로 희석하였다. 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하고, 이어서 합한 유기물을 물 및 염수로 2회 세척하고, MgSO₄로 건조하고 농축하여 담황색 오일을 수득하고, 이를 크로마토그래피(실리카, 115 g, 아날로직스로부터의 50 μm, 헥산 중 0 내지 30% EtOAc, 15분)로 정제하여, 5-(3-클로로페녹시)-3-요오드-1H-인다졸(194 mg, 524 μmol, 84%)을 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 5

5-(3-클로로페녹시)-3-요오드-1-메틸-1H-인다졸

0℃에서 THF(5 ml) 중 5-(3-클로로페녹시)-3-요오드-1H-인다졸(194 mg, 524 μmol)의 용액에 KOtBu(82.2 mg, 733 μmol)를 첨가하고 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. MeI(104 mg, 45.8 μL, 733 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 중 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고 다이클로로메탄으로 추출하였다. 합한 유기물을 MgSO₄로 건조하고 투명한 오일로 농축하고, 이어서 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 20분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 20% EtOAc)로 정제하여, 목적한 덜 극성의 5-(3-클로로페녹시)-3-요오드-1-메틸-1H-인다졸(154 mg, 400 μmol, 77%)을 투명한 황색 오일로서 수득하였다.

또한, 위치이성질체 5-(3-클로로페녹시)-3-요오드-2-메틸-2H-인다졸(32 mg, 83.2 μmol, 16%)을 투명한 황색 오일로서 수득하였다.

단계 6

5-(3-클로로페녹시)-1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸

5-(3-클로로페녹시)-3-요오드-1-메틸-1H-인다졸(0.154 g, 400 μmol)을 THF(3.00 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고, 이어서 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2 M, 224 μL, 448 μmol)를 -16℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탄난(150 mg, 125 μL, 460 μmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 다이클로로메탄으로 추출하고, 합한 유기물을 MgSO₄로 건조하고 황색 오일로 농축하였다. 잔사를 고진공하에 건조시켜, 5-(3-클로로페녹시)-1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸을 수득하였다. 이 물질의 질량은 목적 생성물의 이론적인 수율보다 더 크다. 수율을 정량적으로 추산하고, 물질을 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 7

2-(5-(3-클로로페녹시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

아르곤하에 2-브로모-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(103 mg, 250 μmol) 및 5-(3-클로로페녹시)-1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸(219 mg, 400 μmol)을 DMF(2.5 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(14.4 mg, 12.5 μmol) 및 CuI(9.52 mg, 50.0 μmol, 당량: 0.20)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 잔사를 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 30분에 걸쳐서 0 내지 50%)로 정제하여, 2-(5-(3-클로로페녹시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(113 mg, 191 μmol, 77%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 8

N-아이소프로필-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-아이소프로필-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(90 mg, 181 μmol)의 용액에 TFA(1.48 g, 1.00 ml, 13.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 혼합물(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 황색 고체로 증발시키고, 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 함유)에 용해하고 크로마토그래피(40 g, 50 μm 입자 크기, 아날로직스, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄에 현탁하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체 형성을 촉진하였다. 모액을 디켄팅하여 고체를 분리하고, 이어서 건조시켜, N-아이소프로필-2-(1,6,6-트라이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(54 mg, 147 μmol, 81%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 281.

N-아이소프로필-2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

3-요오드-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸

다이클로로에탄(2 ml) 및 물(2.00 ml) 중 5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-카복실산(0.2 g, 813 μmol) 및 나트륨 바이카보네이트(225 mg, 104 μL, 2.68 mmol)의 혼합물에 나트륨 요오다이드(317 mg, 2.11 mmol) 및 요오드(268 mg, 1.06 mmol)를 나눠서 첨가하고, 혼합물을 45분 동안 격렬하게 교반하면서 100℃(오일욕 온도)에서 가열하였다. 25℃로 냉각한 후 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고, 이어서 10% Na₂S₂O₃ 및 포화 NaHCO₃으로 세척하였다. 유기물을 MgSO₄로 건조하고 회백색 고체로 농축하고, 이를 다이클로로메탄에 용해하고, 사이클로헥산을 첨가하여 고체 형성을 촉진하고 방치시켰다. 고체를 여과로 분리하고 건조시켜, 3-요오드-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸(178 mg, 543 μmol, 67%)을 백색 니들로서 수득하였다.

단계 2

3-요오드-1-메틸-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸

0℃에서 THF(5 ml) 중 3-요오드-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸(178 mg, 543 μmol)의 용액에 KOtBu(85.2 mg, 760 μmol)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 MeI(108 mg, 47.5 μL, 760 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 중 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하였다. 합한 유기물을 MgSO₄로 건조하고 투명한 오일로 농축하였다. 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 20분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 20% EtOAc)로 정제하여, 3-요오드-1-메틸-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸(141 mg, 412 μmol, 76%)을 백색 고체로서 수득하였다.

LCMS ESI+ TIC MS 결과 100% 순도를 나타내었다; [M+H]⁺ = 342.8. 또한, 위치이성질체 3-요오드-2-메틸-5-(트라이플루오로메톡시)-2H-인다졸(29 mg, 84.8 μmol, 16%)을 왁스형 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸

3-요오드-1-메틸-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸(0.141 g, 412 μmol)을 THF(3.00 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고, 이어서 THF 중 2 M 아이소프로필마그네슘 클로라이드(231 μL, 462 μmol)를 -16℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하였다. 트라이부틸클로로스탄난(154 mg, 129 μL, 474 μmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 황색 오일로 농축하였다. 잔사를 고진공하에 건조하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 취하였다.

단계 4

N-아이소프로필-2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

25 ml 환저 플라스크 내에서, 아르곤하에 2-브로모-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(107 mg, 258 μmol) 및 1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸(209 mg, 413 μmol)을 DMF(2.5 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(14.9 mg, 12.9 μmol) 및 CuI(9.83 mg, 51.6 μmol, 당량: 0.20)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 잔사를 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc)로 정제하여, N-아이소프로필-2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(113 mg, 206 μmol, 80%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 5

N-아이소프로필-2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(5 ml) 중 N-아이소프로필-2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(113 mg, 206 μmol)의 약간 황색의 투명한 용액에 TFA(1.48 g, 1.00 ml, 13.0 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 연황색 고체로 증발시키고, 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 함유)에 용해하고 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄에 현탁하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체 형성을 촉진하고, 이어서 고체를 여과로 분리하고 건조시켜, N-아이소프로필-2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(78 mg, 186 μmol, 91%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 282.

N-아이소프로필-2-(1-메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

3-요오드-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸

다이클로로에탄(5 ml) 및 물(5 ml) 중 1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸-3-카복실산(0.5 g, 3.29 mmol) 및 나트륨 바이카보네이트(911 mg, 422 μL, 10.8 mmol)의 혼합물에 나트륨 요오다이드(1.28 g, 8.54 mmol) 및 요오드(1.08 g, 4.27 mmol)를 나눠서 첨가하고, 혼합물을 100℃(오일욕 온도)에서 24시간 동안 격렬하게 교반하면서 가열하였다. 25℃로 냉각한 후 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고, 이어서 10% Na₂S₂O₃ 및 포화 NaHCO₃으로 세척하였다. 유기상을 합하고 MgSO₄로 건조하고 황색 고체로 농축하고, 이를 다이클로로메탄에 용해하고, 사이클로헥산을 첨가하여 고체 형성을 촉진하고 방치하였다. 고체를 여과로 분리하고 건조시켜, 3-요오드-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸(580 mg, 2.48 mmol, 75%)을 니들로서 수득하였다.

단계 2

3-요오드-1-메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸

0℃에서 THF(8.51 ml) 중 3-요오드-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸(305 mg, 1.3 mmol)의 용액에 THF(1.82 ml, 1.82 mmol) 중 1 M KOtBu를 첨가하고, 0℃에서 30분 동안 교반하고 혼합물이 담황색 용액이 되면 MeI(259 mg, 114 μL, 1.82 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 중 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 투명한 오일로 농축하였다. 이어서, 톨루엔에 용해하고 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 20분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 20% EtOAc)로 정제하여, 더욱 극성인 목적한 3-요오드-1-메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸(125 mg, 504 μmol, 39%)을 백색 고체로서 수득하였다.

또한, 위치이성질체 생성물 3-요오드-2-메틸-2,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸(125 mg, 504 μmol, 39%)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸

3-요오드-1-메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸(177 mg, 714 μmol)을 THF(3 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하였다. THF(400 μL, 799 μmol) 중 2 M 아이소프로필마그네슘 클로라이드를 -16℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, 트라이부틸클로로스탄난(267 mg, 223 μL, 821 μmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 이어서 EtOAc(3 x 30 ml)로 추출하고, 합한 유기물을 물(20 ml) 및 염수(2 x 20 ml)로 세척하고, MgSO₄로 건조하고 농축하였다. 잔사를 고진공하에 건조시켜, 1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 취하였다.

단계 4

N-아이소프로필-2-(1-메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

아르곤하에 2-브로모-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(184 mg, 446 μmol) 및 1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸(293 mg, 714 μmol)을 DMF(2.5 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(25.8 mg, 22.3 μmol) 및 CuI(17.0 mg, 89.2 μmol)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 잔사를 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc)로 정제하여, N-아이소프로필-2-(1-메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(68 mg, 150 μmol, 34%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 5

N-아이소프로필-2-(1-메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(5 ml) 중 N-아이소프로필-2-(1-메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(68 mg, 150 μmol)의 용액에 TFA(1.48 g, 1.00 ml, 13.0 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 증발시키고 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄에 현탁하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체 형성을 촉진하고, 이를 경사 분리하고 고진공하에 건조시켜, N-아이소프로필-2-(1-메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(45 mg, 139 μmol, 93%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 283.

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1H-인다졸

다이클로로에탄(10.0 ml) 및 물(10.0 ml) 중 5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-카복실산(1 g, 4.38 mmol) 및 나트륨 바이카보네이트(1.22 g, 563 μL, 14.5 mmol)의 혼합물에 나트륨 요오다이드(1.71 g, 11.4 mmol) 및 요오드(1.45 g, 5.7 mmol)를 나눠서 첨가하고, 혼합물을 100℃(오일욕 온도)에서 45분 동안 격렬하게 교반하면서 가열하였다. 25℃로 냉각한 후 혼합물을 다이클로로메탄으로 용해하고, 이어서 10% Na₂S₂O₃ 및 포화 NaHCO₃으로 세척하였다. 유기상을 합하고 MgSO₄로 건조하고 회백색 고체로 농축하고, 이를 다이클로로메탄에 용해하고, 헥산을 첨가하여 고체 형성을 촉진하고 방치시켰다. 형성된 고체를 모액으로 경사 분리하고 건조시켜, 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1H-인다졸(1145 mg, 3.69 mmol, 84.3%)을 백색의 솜털형 고체로서 수득하였다.

단계 2

5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1-메틸-1H-인다졸

0℃에서 THF(10.00 ml) 중 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1H-인다졸(562 mg, 1.81 mmol)의 용액에 KOtBu(THF 중 1 M, 2.54 ml, 2.54 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 MeI(360 mg, 159 μL, 2.54 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 중 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 투명한 오일로 농축하였다. 크로마토그래피(80 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 20분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 20% EtOAc)로 정제하여, 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1-메틸-1H-인다졸(465 mg, 1.43 mmol, 79.2%)을 왁스형 회백색 고체로서 수득하였다.

또한, 위치이성질체 생성물 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-2-메틸-2H-인다졸(108 mg, 333 μmol, 18%)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸

5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1-메틸-1H-인다졸(0.265 g, 818 μmol)을 THF(3.00 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고, 이어서 아이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 2 M, 458 μL, 916 μmol)를 -16℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하고, 이어서 트라이부틸클로로스탄난(306 mg, 255 μL, 940 μmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 황색 오일로 농축하였다. 잔사를 고진공하에 건조하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 취하였다.

단계 4

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

아르곤하에 2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(224 mg, 629 μmol) 및 5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸(398 mg, 818 μmol)을 DMF(3 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(36.3 mg, 31.4 μmol) 및 CuI(24.0 mg, 126 μmol, 당량: 0.20)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 잔사를 크로마토그래피(80 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc)로 정제하여, 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(217 mg, 458 μmol, 72.9%)를 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 5

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

0℃에서 다이옥산(6.5 ml) 및 물(2 ml) 중 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(217 mg, 458 μmol)의 용액에 설팜산(267 mg, 2.75 mmol)을 첨가한 후, 물(4.5 ml) 중 나트륨 클로라이트(67.3 mg, 596 μmol) 및 KH₂PO₄(748 mg, 5.5 mmol)의 용액을 적가 깔때기를 통해 15분에 걸쳐서 적가하였다. 빙욕을 제거하고 연황색 현탁액을 25℃에서 18시간 동안 교반하였다. THF(6.5 ml)를 황색 현탁액에 첨가하고 반응을 25℃에서 2시간 동안 계속하고, 이어서 설팜산(267 mg, 2.75 mmol)을 첨가한 후 물(5 ml) 중 나트륨 클로라이트(67.3 mg, 596 μmol) 및 KH₂PO₄(748 mg, 5.5 mmol)를 적가하였다. 2시간 후 혼합물을 물(20 ml)로 희석하고 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하였다. 합한 유기층을 MgSO₄로 건조하고 증발시켰다. 연황색 고체 잔사를 다이클로로메탄/MeOH에 용해하고, 다이클로로메탄을 증발시켜 고체 형성을 촉진하고, 고체를 여과로 분리하고, MeOH 및 헥산으로 헹구고 이어서 건조시켜, 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(127 mg, 259 μmol, 57%)을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 6

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

16 x 100 mm 스크류 캡 시험 튜브 내에, HATU(28.0 mg, 73.5 μmol) 및 프로판-2-아민(14.5 mg, 21.0 μL, 245 μmol)을 첨가하고, 이어서 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(30 mg, 61.3 μmol) 및 DMF(2 ml)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반하였다. 프로판-2-아민(14.5 mg, 21.0 μL, 245 μmol) 및 HATU(28.0 mg, 73.5 μmol)를 첨가하였다. 3시간 후 용매를 증발시키고 잔사를 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코(Versaflash Supelco), 30분에 걸쳐서 0 내지 50% EtOAc)로 정제하여, 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(32.5 mg, 61.3 μmol, 100%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 7

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(1.44 ml) 중 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(32.5 mg, 61.2 μmol)의 담황색 용액에 TFA(426 mg, 288 μL, 3.73 mmol)를 첨가하고 25℃에서 15시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축한 후 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 회백색 고체로 증발시키고, 이를 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄/MeOH에 용해하고 다이클로로메탄을 증발시켜 고체를 형성시키고, 이어서 고체를 여과로 수집하고 건조시켜, 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(23 mg, 57.4 μmol, 94%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 284.

2-(5-다이플루오로메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

16 x 100 mm 스크류 캡 시험 튜브 내에, HATU(28.0 mg, 73.5 μmol) 및 2-메틸프로판-2-아민(17.9 mg, 245 μmol)을 첨가하고, 이어서 DMF(2.00 ml)에 용해된 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(30 mg, 61.3 μmol)을 첨가하여 연황색 용액을 수득하였고, 이는 즉시 백색 침전물을 형성하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하였다. TLC 및 LCMS 결과 불완전 반응이 나타났고, 2-메틸프로판-2-아민(17.9 mg, 245 μmol) 및 HATU(28.0 mg, 73.5 μmol)를 첨가하고, 이어서 반응을 25℃에서 3시간 동안 계속하였다. 용매를 증발시키고 잔사를 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(33.4 mg, 61.3 μmol, 100%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(5-다이플루오로메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(1.44 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(33.4 mg, 61.3 μmol)의 담황색 용액에 TFA(426 mg, 288 μL, 3.74 mmol, 61 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물이 주황색으로 변하였고, 이를 25℃에서 밤새 교반한 후 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 연황색 고체로 증발시키고, 이를 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 함유)에 용해하고 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄/MeOH에 용해하고 다이클로로메탄을 증발시켜 고체를 형성시키고, 고체를 여과로 분리하고 건조시켜, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(23 mg, 55.5 μmol, 90.5%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 285.

2-(5-다이플루오로메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

16 x 100 mm 스크류 캡 시험 튜브 내에, HATU(28.0 mg, 73.5 μmol) 및 2-아미노-2-메틸프로판-1-올(21.8 mg, 245 μmol)를 첨가하고, 이어서 DMF(2.00 ml)에 용해된 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(30 mg, 61.3 μmol)을 첨가하여 연황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하였다. TLC 및 LCMS 결과 불완전 반응으로 나타났고, 2-아미노-2-메틸프로판-1-올(21.8 mg, 245 μmol) 및 HATU(28.0 mg, 73.5 μmol)를 첨가하고 반응을 25℃에서 3시간 동안 계속하였다. 용매를 증발시키고 잔사를 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(34.4 mg, 61.3 μmol, 100%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(5-다이플루오로메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

다이클로로메탄(1.44 ml) 중 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(34.4 mg, 61.4 μmol)의 담황색 용액에 TFA(426 mg, 288 μL, 3.74 mmol, 당량: 60.9)를 첨가하고 반응 혼합물은 주황색으로 변하였고, 25℃에서 밤새 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 연황색 고체로 증발시키고, 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 함유)에 용해하고 15 분에 걸쳐서 0 내지 5% MeOH 함유 10% 암모늄 하이드록사이드(다이클로로메탄)로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, 2개 화합물의 혼합물을 수득하고, 순수한 화합물을 수득하지 않았다. 혼합물을 다시 합하고 분취용 TLC(실리카 GF 1000 μm, 20 x 40 cm(석고 바인더, 형광 지시약))로 정제하여, 목적 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(20 mg, 46.5 μmol, 75.7%)를 백색 니들로서 수득하였다.

실시예 286.

2-(5-다이플루오로메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(4-하이드록시메틸-테트라하이드로-파이란-4-일)-아마이드

단계 1

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(4-(하이드록시메틸)테트라하이드로-2H-파이란-4-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

16 x 100 mm 스크류 캡 시험 튜브 내에, HATU(34.5 mg, 90.7 μmol), (4-아미노테트라하이드로-2H-파이란-4-일)메탄올(39.7 mg, 302 μmol) 및 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(37 mg, 75.6 μmol)을 첨가하고, 이어서 혼합물을 DMF(3 ml)에 용해하여 연황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고 잔사를 30분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(4-(하이드록시메틸)테트라하이드로-2H-파이란-4-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(40 mg, 66.4 μmol, 87.8%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(5-다이플루오로메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(4-하이드록시메틸-테트라하이드로-파이란-4-일)-아마이드

아세토니트릴(6 ml) 중 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(4-(하이드록시메틸)테트라하이드로-2H-파이란-4-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(40 mg, 66.4 μmol)의 용액에 CsF(50.4 mg, 332 μmol, 당량: 5.00) 및 18-크라운-6(17.5 mg, 66.4 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 72시간 동안 환류 가열하고, 이어서 다이클로로메탄(20 ml)으로 희석하고, 셀라이트 상에서 여과하고 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄에 용해하고 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄/MeOH에 용해하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체를 형성시키고, 이를 여과로 분리하고 건조시켜, 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(4-(하이드록시메틸)테트라하이드로-2H-파이란-4-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(16 mg, 33.9 μmol, 51.0%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

또한, 미반응된 출발 물질(11 mg, 27%)을 회수하였다.

실시예 287.

2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3-요오드-5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸

0℃에서 THF(10.0 ml) 중 3-요오드-5-메톡시-1H-인다졸(442 mg, 1.61 mmol)의 용액에 THF(2.26 ml, 2.26 mmol) 중 1 M KOtBu를 첨가하고 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였고, 이는 담갈색 붉은 색을 띠는 용액으로 변하였고, 이어서 MeI(320 mg, 141 μL, 2.26 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 중 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 투명한 오일로 농축하였다. 이어서, 톨루엔에 용해하고 크로마토그래피(80 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 20분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 20% EtOAc)로 정제하여, 3-요오드-5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸(355 mg, 1.23 mmol, 76.4%)을 회백색 고체로서 수득하였다.

또한, 위치이성질체 3-요오드-5-메톡시-2-메틸-2H-인다졸(89 mg, 309 μmol, 19.2%)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

5-메톡시-1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸

3-요오드-5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸(0.355 g, 1.23 mmol)을 THF(3.00 ml)에 용해하였다. 황색 용액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고, THF(690 μL, 1.38 mmol) 중 2 M 아이소프로필마그네슘 클로라이드를 -16℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하였고, 고체가 침전되었다. 이어서, 트라이부틸클로로스탄난(461 mg, 384 μL, 1.42 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하여 황색 오일을 수득하였다. 잔사를 고진공하에 건조시켜 조질 5-메톡시-1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. 조질 물질의 질량이 기대된 양을 초과하였으며, 따라서 수율은 정량적인 것으로 간주되었다.

단계 3

2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

25 ml 환저 플라스크 내에서, 아르곤하에 2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(439 mg, 1.23 mmol) 및 5-메톡시-1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸(556 mg, 1.23 mmol)을 DMF(3.00 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(71.2 mg, 61.6 μmol) 및 CuI(46.9 mg, 246 μmol, 당량: 0.20)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 잔사를 크로마토그래피(80 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc)로 정제하여, 2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(443 mg, 1.01 mmol, 82.2%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

0℃에서 다이옥산(14 ml) 및 물(4 ml) 중 2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(443 mg, 1.01 mmol)의 황색 현탁액에 설팜산(590 mg, 6.07 mmol, 당량: 6.00)을 첨가한 후, 물(4.5 ml) 중 나트륨 클로라이트(149 mg, 1.32 mmol) 및 KH₂PO₄(1.65 g, 12.1 mmol)의 용액을 적가 깔때기를 통해 15분에 걸쳐서 적가하였다. 빙욕을 제거하고 연황색 현탁액을 25℃에서 18시간 동안 교반하였다. LCMS 결과 반응이 약 50% 완료되었음을 나타내었고, THF(10 ml)를 황색 현탁액에 첨가하고 이어서 25℃에서 더 많은 약제, 즉, 설팜산(590 mg, 6.07 mmol, 당량: 6.00) 고체를 첨가한 후, 물(10 ml) 중 나트륨 클로라이트(149 mg, 1.32 mmol) 및 KH₂PO₄(1.65 g, 12.1 mmol)의 용액을 적가하고 25℃에서 4시간 동안 계속 교반하였다. 혼합물 물(50 ml)로 희석하고 다이클로로메탄(3 x 40 ml)으로 추출하였다. 합한 유기층을 MgSO₄로 건조하고, 환류 가열된 일부 챠콜을 첨가하고 25℃로 냉각한 후, 셀라이트 패드를 통해 여과하고 증발시켰다. 연황색 고체 잔사를 다이클로로메탄/MeOH에 용해하고 다이클로로메탄을 증발시켜 고체 형성을 촉진하고, 고체를 여과로 분리하고, MeOH 및 헥산으로 헹구고 건조시켜, 2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(238 mg, 525 μmol, 51.8%)을 수득하였다.

단계 5

N-3급-부틸-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

16 x 100 mm 스크류 캡 시험 튜브 내에, HATU(40.2 mg, 106 μmol) 및 2-메틸프로판-2-아민(25.8 mg, 353 μmol)을 첨가하고, 이어서 DMF(2.00 ml)에 용해된 2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(40 mg, 88.2 μmol)을 첨가하여 연황색 용액을 수득하였고, 이는 즉시 백색 침전물을 형성하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하고, 용매를 증발시키고 잔사를 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(40 mg, 78.6 μmol, 89.2%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 6

2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(2 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(40 mg, 78.6 μmol)의 담황색 용액에 TFA(2.96 g, 2000 μL, 26.0 mmol, 당량: 330)를 첨가하였고, 반응 혼합물은 밝은 주황색으로 변하였고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 밤새 교반하고, 이어서 연황색 고체로 증발시키고, 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 함유)에 용해하고 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 소량의 다이클로로메탄/MeOH에 용해하고, 사이클로헥산을 첨가하고 일부 용매를 증발시켜 고체를 형성하고, 이를 여과로 분리하고 건조시켜, N-3급-부틸-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(25 mg, 66.1 μmol, 84.0%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 288.

2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

16 x 100 mm 스크류 캡 시험 튜브 내에서, HATU(40.2 mg, 106 μmol) 및 2-아미노-2-메틸프로판-1-올(31.4 mg, 353 μmol)을 첨가하고 이어서 DMF(2.00 ml)에 용해된 2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(40 mg, 88.2 μmol)을 첨가하여 연황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하고, 용매를 증발시키고 잔사를 25분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(46.3 mg, 88.2 μmol, 100%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

아세토니트릴(5 ml) 중 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(46.3 mg, 88.2 μmol)의 용액에 CsF(134 mg, 882 μmol) 및 18-크라운-6(70.0 mg, 265 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 48시간 동안 교반하면서 환류 가열하고, 반응 생성물을 다이클로로메탄(20 ml)으로 희석하고, 셀라이트 상에서 여과하고 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄에 용해하고 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄/MeOH에 용해하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체를 형성하고, 이를 경사법으로 분리하고 건조시켜, N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(18 mg, 45.6 μmol, 51.7%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 289.

2-(5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸

5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1H-인다졸(0.175 g, 564 μmol)을 THF(3 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고, THF(621 μL, 1.24 mmol) 중 2 M 아이소프로필마그네슘 클로라이드를 -16℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, 트라이부틸클로로스탄난(220 mg, 184 μL, 677 μmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하여 황색 오일을 수득하였다. 잔사를 고진공하에 건조하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 취하여 5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸을 수득하였고, 조질 질량은 정량적으로 추산된 수율을 초과하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

25 ml 환저 플라스크 내에서, 아르곤하에 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(220 mg, 515 μmol) 및 5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸(268 mg, 566 μmol)을 DMF(1.06 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(29.7 mg, 25.7 μmol) 및 CuI(19.6 mg, 103 μmol, 당량: 0.20)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 잔사를 크로마토그래피(80 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(159 mg, 300 μmol, 58.2%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(55 mg, 104 μmol)의 담황색 용액에 TFA(1.48 g, 1000 μL, 13.0 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물은 주황색으로 변하였고, 25℃에서 밤새 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 연황색 고체로 증발시키고, 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH가 첨가되고 가열됨)에 용해하고 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄에 현탁하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체 형성을 완료하고, 고체를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(26 mg, 64.9 μmol, 62.7%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 290.

2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((3R,4R)-3-아미노-테트라하이드로-파이란-4-일)-아마이드

단계 1

3급-부틸(3R,4R)-4-(2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트

16 x 100 mm 스크류 캡 시험 튜브 내에, HATU(80.5 mg, 212 μmol) 및 3급-부틸(3R,4R)-4-아미노테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트(국제특허출원공개 제 2010/97248 A1 호에 기재된 바와 같이 제조됨(2010); 38.1 mg, 176 μmol)를 첨가하고, 이어서 DMF(2.00 ml)에 용해된 2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 176 μmol)을 첨가하여 연황색 용액을 수득하였고, 이는 즉시 백색 침전물을 형성하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하고, 용매를 증발시키고 잔사를 크로마토그래피(60 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH)로 정제하여, 3급-부틸(3R,4R)-4-(2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트(115 mg, 176 μmol, 100%)를 매우 연한 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

N-((3R,4R)-3-아미노테트라하이드로-2H-파이란-4-일)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(3.00 ml) 중 3급-부틸(3R,4R)-4-(2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트(115 mg, 176 μmol)의 담황색 용액에 TFA(1.48 g, 1.00 ml, 13.0 mmol, 당량: 73.6)를 첨가하고 반응 혼합물은 짙은 적색으로 변하였고, 25℃에서 밤새 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 연황색 고체로 증발시키고, 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH를 함유하고 가열됨)에 용해하고 크로마토그래피(60 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄/MeOH에 용해하고 대부분의 다이클로로메탄을 증발시켜 고체를 형성하고, 고체를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, N-((3R,4R)-3-아미노테트라하이드로-2H-파이란-4-일)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(48 mg, 114 μmol, 64.6%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 291.

2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-아미노-사이클로헥실)-아마이드

단계 1

N-((1R,2S)-2-아미노사이클로헥실)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

16 x 100 mm 스크류 캡 시험 튜브 내에, HATU(80.5 mg, 212 μmol) 및 (1R,2S)-사이클로헥산-1,2-다이아민(20.1 mg, 176 μmol)을 첨가하고, 이어서 DMF(2.00 ml)에 용해된 2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 176 μmol)을 첨가하여 연황색 용액을 수득하였고, 이는 즉시 백색 침전물을 형성하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하고, 용매를 증발시키고 잔사를 크로마토그래피(60 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH)로 정제하여, 목적 N-((1R,2S)-2-아미노사이클로헥실)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(21 mg, 38.2 μmol, 21.7%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산((1R,2S)-2-아미노-사이클로헥실)-아마이드

다이클로로메탄(3.00 ml) 중 N-((1R,2S)-2-아미노사이클로헥실)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(21 mg, 38.2 μmol)의 담황색 용액에 TFA(1.48 g, 1.00 ml, 13.0 mmol, 당량: 340)를 첨가하고 반응 혼합물은 짙은 적색으로 변하였고, 25℃에서 밤새 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 50 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 증발시켜 연황색 고체를 수득하고, 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 첨가 및 가열)에 용해하고 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 10% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 뜨거운 MeOH에 용해하고 고체를 형성하도록 밤새 방치하였다. 고체를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, N-((1R,2S)-2-아미노사이클로헥실)-2-(5-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(9 mg, 21.5 μmol, 56.2%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 292.

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(3-다이메틸아미노-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

25 ml 바이오타지(Biotage) 초음파 바이알 내에서, DMF(2 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(109 mg, 205 μmol), 3-클로로-N,N-다이메틸프로판-1-아미늄 클로라이드(97.4 mg, 616 μmol, 당량: 3.0) 및 Cs₂CO₃(402 mg, 1.23 mmol, 당량: 6.00)을 혼합하였다. 혼합물을 10분 동안 25℃에서 교반하고, 이어서 바이오타지 초음파 반응기에서 100℃로 30분 동안 가열하고, 다이클로로메탄(10 ml)으로 희석하고 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 여액을 고진공하에 65℃에서 농축하고 잔사를 다이클로로메탄에 용해하고, 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(97 mg, 158 μmol, 76.7%)를 연갈색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(3-다이메틸아미노-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(4 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(97 mg, 158 μmol)의 담황색 용액에 TFA(1.48 g, 1 ml, 13.0 mmol, 당량: 82.4)를 첨가하고 반응 혼합물은 주황색으로 변하였고, 25℃에서 2시간 동안 교반하고, 혼합물 농축하고 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 황색 고체로 증발시키고, 이를 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 함유)에 용해하고 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(40 g 컬럼, 20 내지 40 μm 구형 실리카, 텔레딘/이스코(Teledyne/Isco)로부터의 HP 골드)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄에 용해하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체를 형성시키고, 회백색 고체를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(62 mg, 128 μmol, 81.1%)를 수득하였다.

실시예 293.

2-(1-메틸-2-옥시-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

단계 1

3-요오드-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

다이클로로에탄(5 ml) 및 물(5 ml) 중 4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-카복실산(0.57 g, 3.43 mmol) 및 나트륨 바이카보네이트(951 mg, 440 μL, 11.3 mmol)의 혼합물에 나트륨 요오다이드(1.34 g, 8.92 mmol) 및 요오드(1.13 g, 4.46 mmol)를 나눠서 첨가하고 혼합물을 24시간 동안 격렬하게 교반하면서 100℃(오일욕 온도)로 가열하였다. 25℃로 냉각한 후 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고, 이어서 10% Na₂S₂O₃ 및 포화 NaHCO₃으로 세척하였다. 유기상을 합하고 MgSO₄로 건조하고 회백색 고체로 농축하고, 이를 크로마토그래피(115 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH)로 정제하여, 3-요오드-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸(674 mg, 2.72 mmol, 79.2%)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

3-요오드-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

0℃에서 THF(10 ml) 중 3-요오드-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸(674 mg, 2.72 mmol)의 용액에 THF(3.8 ml, 3.8 mmol) 중 1 M KOtBu를 첨가하고 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 혼합물은 적갈색 용액이 되었고, 이어서 MeI(540 mg, 238 μL, 3.8 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 25℃로 가온하고 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 중 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 회백색 고체로 농축하였다. 이어서, 톨루엔에 용해하고 크로마토그래피(115 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 15분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 20% EtOAc)로 정제하여 더욱 극성의 목적 3-요오드-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸(570 mg, 2.17 mmol, 80.0%)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS(M+H)+ = 263(100% 순도);

또한, 위치이성질체 3-요오드-2-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-인다졸(182 mg, 694 μmol, 25.6%)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

3-요오드-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸(300 mg, 1.14 mmol)을 THF(3.00 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하였다. THF 중 2 M 아이소프로필마그네슘 클로라이드(641 μL, 1.28 mmol)를 -16℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, 트라이부틸클로로스탄난(428 mg, 357 μL, 1.32 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 황색 오일로 농축하였다. 잔사를 고진공하에 건조시켜 정량적으로 추산된 1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸을 수득하고, 추가 처리 없이 다음 단계에서 취하였다.

단계 4

2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드

아르곤하에 2-브로모-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(406 mg, 1.14 mmol) 및 1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸(485 mg, 1.14 mmol)을 DMF(3.00 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(65.9 mg, 57.0 μmol) 및 CuI(43.4 mg, 228 μmol, 당량: 0.20)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 짙은 황색 고체 잔사를 크로마토그래피(80 g 컬럼, 실리사이클로부터 50 μm, 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc 구배)로 정제하여, 2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(265 mg, 644 μmol, 56.5%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 5

3-(7-카복시-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드

0℃에서 다이옥산(14.0 ml) 및 물(4 ml) 중 2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(265 mg, 644 μmol)의 황갈색 용액(냉각 후 현탁액이 됨)에 설팜산(375 mg, 3.86 mmol, 당량: 6.00)을 첨가한 후, 물(4.5 ml) 중 나트륨 클로라이트(94.6 mg, 837 μmol) 및 KH₂PO₄(1.05 g, 7.73 mmol)의 용액을 15분에 걸쳐서 적가 깔때기를 통해 적가하였다. 빙욕을 제거하고 연황색 현탁액을 25℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(50 ml)로 희석하고 다이클로로메탄(3 x 40 ml) 중 5% MeOH로 추출하였다. 합한 유기층을 MgSO₄로 건조하고 증발시켰다. 연황색 고체 잔사를 다이클로로메탄에 용해하고 다이클로로메탄 중 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 50 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 화합물을 다이클로로메탄에 용해하고, 일부 사이클로헥산을 첨가하고 다이클로로메탄을 증발시켜 고체 형성을 촉진하고, 고체를 여과로 분리하고, 헥산으로 헹구고 건조시켜, 3-(7-카복시-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드(147 mg, 331 μmol, 51.5%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 6

3-(7-(아이소프로필카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드

16 x 100 mm 스크류 캡 시험 튜브 내에, HATU(46.3 mg, 122 μmol) 및 프로판-2-아민(24.0 mg, 406 μmol)을 첨가한 후 다이클로로메탄(2.50 ml)에 용해된 3-(7-카복시-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드(45 mg, 101 μmol)를 첨가하여 연황색 용액을 수득하고, 이는 즉시 백색 침전물을 형성하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하고, 용매를 증발시키고 잔사를 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, 3-(7-(아이소프로필카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드(45 mg, 92.8 μmol, 91.5%)를 깨끗한 거품으로서 수득하였다.

단계 7

2-(1-메틸-2-옥시-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 아이소프로필아마이드

다이클로로메탄(2.00 ml) 중 3-(7-(아이소프로필카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드(45 mg, 92.8 μmol)의 담황색 용액에 TFA(1.48 g, 1.00 ml, 13.0 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물은 짙은 적색으로 변하였고, 25℃에서 밤새 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 연황색 고체로 증발시키고, 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH를 함유하고 가열됨)에 용해하고 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 10% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 백색 고체 생성물을 헥산으로 초음파처리하였다. 고체를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, 3-(7-(아이소프로필카바모일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드(27 mg, 76.2 μmol, 82.1%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 294.

2-(1-메틸-2-옥시-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드

16 x 100 mm 스크류 캡 시험 튜브 내에, HATU(46.3 mg, 122 μmol) 및 2-메틸프로판-2-아민(29.7 mg, 406 μmol)을 첨가하고 이어서 DMF(2.00 ml)에 용해된 3-(7-카복시-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드(45 mg, 101 μmol)를 첨가하여 연황색 용액을 수득하였고, 이는 즉시 백색 침전물을 형성하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하고, 용매를 증발시키고 잔사를 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, 3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드(43 mg, 86.2 μmol, 85.0%)를 깨끗한 거품으로서 수득하였다.

단계 2

2-(1-메틸-2-옥시-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(2.00 ml) 중 3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드(43 mg, 86.2 μmol)의 담황색 용액에 TFA(1.48 g, 1.00 ml, 13.0 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물은 짙은 적색으로 변하였고, 25℃에서 밤새 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 연황색 고체로 증발시키고, 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH를 함유하고 가열됨)에 용해하고 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 10% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 백색 고체 생성물을 헥산으로 초음파처리하였다. 고체를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, 3-(7-(3급-부틸카바모일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸 2-옥사이드(28 mg, 76.0 μmol, 88.1%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 295.

2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸

25 ml 환저 플라스크 내에서, 3-요오드-1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸(62 mg, 237 μmol)을 THF(3 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고 THF(132 μL, 265 μmol) 중 2 M 아이소프로필마그네슘 클로라이드를 -16℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, 트라이부틸클로로스탄난(88.6 mg, 73.8 μL, 272 μmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하여 회백색 왁스형 고체를 수득하였다. 잔사를 고진공하에 건조시켜, 1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸을 수득하고, 정량적으로 추산하고 추가 처리 없이 다음 단계에서 취하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

아르곤하에 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 234 μmol) 및 1-메틸-3-(트라이부틸스탄닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸(99.5 mg, 234 μmol)을 DMF(2.5 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(13.5 mg, 11.7 μmol) 및 CuI(8.91 mg, 46.8 μmol, 당량: 0.20)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 잔사를 크로마토그래피(60 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(25 mg, 51.8 μmol, 22.1%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(2.00 ml) 중 N-3급-부틸-2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(25 mg, 51.8 μmol)의 담황색 용액에 TFA(2.96 g, 2.00 ml, 26.0 mmol, 당량: 501)를 첨가하였고, 반응 혼합물이 갈색으로 변하였고 25℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 연황색 고체로 증발시키고, 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 함유)에 용해하고 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 생성물을 회백색 고체로서 단리하고, 이를 사이클로헥산으로 초음파처리하고 디켄팅하고, 이어서 다시 MeOH로 초음파처리하고 디켄팅하고 건조시켜, 깨끗한 N-3급-부틸-2-(1-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(8 mg, 22.7 μmol, 43.8%)를 수득하였다.

실시예 296.

2-{1-[3-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로필]-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1H-인다졸

0℃에서 THF(5 ml) 중 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1H-인다졸(250 mg, 806 μmol)의 투명한 무색 용액에 THF(806 μL, 806 μmol) 중 1 M KOtBu를 첨가하고 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하여 담황색 현탁액(대부분 용액)을 형성하고, 이어서 2-(2-브로모에틸)-1,3-다이옥산(189 mg, 131 μL, 968 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 25℃로 가온하고 18시간 동안 교반하고, THF(806 μL, 806 μmol) 중 1 M KOtBu를 추가로 첨가하고 10분 동안 25℃에서 교반하고, 2-(2-브로모에틸)-1,3-다이옥산(189 mg, 131 μL, 968 μmol)을 첨가하고 반응물을 50℃로 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 중 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 투명한 오일로 농축하였다. 이어서 톨루엔에 용해하고 크로마토그래피(80 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 20분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 20% EtOAc)로 정제하여 1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1H-인다졸(242 mg, 571 μmol, 70.8%)을 투명한 고밀도 오일로서 수득하였다.

위치이성질체 2-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-2H-인다졸(백색 왁스형 고체; 40.5 mg, 95.5 μmol, 12%) 및 미반응된 출발 물질(31 mg, 12%)을 또한 수득하였다.

단계 2

1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸

1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-3-요오드-1H-인다졸(242 mg, 571 μmol)을 THF(3.00 ml)에 용해하였다. 무색 용액을 -16℃(NaCl/빙욕)로 냉각하고, THF(319 μL, 639 μmol) 중 2 M 아이소프로필마그네슘 클로라이드를 -16℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -16℃에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, 트라이부틸클로로스탄난(214 mg, 178 μL, 656 μmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃로 가온하고 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 다이클로로메탄(3 x 30 ml)으로 추출하고, 유기물을 MgSO₄로 건조하고 황색 오일로 농축하였다. 잔사를 고진공하에 건조하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 취하여 1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸을 수득하고, 정량적으로 추산하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.

단계 3

2-(1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

아르곤하에 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(244 mg, 571 μmol) 및 1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸(335 mg, 571 μmol)을 DMF(3.00 ml)에 용해하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(33.0 mg, 28.6 μmol) 및 CuI(21.7 mg, 114 μmol, 당량: 0.20)를 첨가하고 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 버블링하면서 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 90℃(오일욕 온도)에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하고 잔사(짙은 고체)를 크로마토그래피(80 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 30분에 걸쳐서 헥산 중 0 내지 50% EtOAc)로 정제하여, 2-(1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(230 mg, 357 μmol, 62.5%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-옥소프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(130 mg, 202 μmol)를 THF(3 ml)에 용해하고, 3 N HCl(672 μL, 2.02 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 밤새 교반한 후, TLC 및 LCMS 결과 약 10% 전환을 나타내었다. 농축 HCl(0.5 ml)을 첨가하고 반응물을 50℃로 48시간 이상 동안 가열하였다. 포화 수성 나트륨 수소 카보네이트 용액을 반응 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 다이클로로메탄(5 x 30 ml)으로 추출하였다. 수득된 유기층을 무수 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시키고 수득된 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(30분에 걸쳐서 0 내지 100% n-헥산-에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-옥소프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(34 mg, 58.0 μmol, 28.7%)를 수득하였다.

미반응된 출발 물질(31 mg, 24%)을 또한 수득하였다.

단계 5

N-3급-부틸-2-(1-(3-(3,3-다이플루오로아제티딘-1-일)프로필)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로에탄(6 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-옥소프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(34 mg, 58.0 μmol)의 용액에 3,3-다이플루오로아제티딘 하이드로클로라이드(9.76 mg, 75.3 μmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 15분 동안 교반하고, 이어서 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(18.4 mg, 86.9 μmol)를 첨가하고 교반을 18시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO₃ 용액으로 희석하고 다이클로로메탄(5 x 20 ml)으로 추출하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조하고 진공에서 농축하였다. 생성된 잔사를 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(1-(3-(3,3-다이플루오로아제티딘-1-일)프로필)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(38 mg, 57.2 μmol, 98.8%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 6

2-{1-[3-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-프로필]-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(4.00 ml) 중 N-3급-부틸-2-(1-(3-(3,3-다이플루오로아제티딘-1-일)프로필)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(38 mg, 57.2 μmol)의 담황색 용액에 TFA(1.48 g, 1.00 ml, 13.0 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물은 주황색으로 변하였고, 25℃에서 18시간 동안 교반하고, 혼합물 농축하고 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 황색 고체로 증발시키고, 이를 다이클로로메탄에 용해하고 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄에 용해하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체를 형성시키고, 회백색 고체를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, N-3급-부틸-2-(1-(3-(3,3-다이플루오로아제티딘-1-일)프로필)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(29.5 mg, 55.3 μmol, 96.6%)를 수득하였다.

실시예 297.

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(2-[1,3]다이옥산-2-일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

2-(1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 155 μmol)를 아세톤(3 ml)에 용해하고, 3 N HCl(1.2 g, 1 ml, 3.00 mmol)을 첨가하였다. 교반하면서 50℃로 가열하고 5일 동안 계속하였다. 포화 수성 나트륨 수소 카보네이트 용액을 반응 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 다이클로로메탄(5 x 30 ml)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시키고 수득된 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(20분에 걸쳐서 0 내지 100% n-헥산-에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-옥소프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(27 mg, 46.0 μmol, 29.7%) 및 소량의 SEM 기 탈보호 생성물 2-(1-(2-(1,3-다이옥산-2-일)에틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(5 mg, 9.72 μmol, 6.27%)를 연황색 니들로서 수득하였다.

또한, 미반응된 출발 물질(34 mg, 34%)을 수득하였다.

실시예 298.

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(3-하이드록시-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-하이드록시프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로에탄(4.76 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-옥소프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(27 mg, 46.0 μmol)의 용액에 아제티딘-3-올 하이드로클로라이드(6.55 mg, 59.8 μmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 15분 동안 교반하고, 이어서 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(14.6 mg, 69.0 μmol)를 첨가하고 교반을 18시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO₃ 용액으로 희석하고 다이클로로메탄(5 x 20 ml)으로 추출하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조하고 진공에서 농축하였다. 생성된 잔사를 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, 미량의 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(3-하이드록시아제티딘-1-일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 수득하고 주로 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-하이드록시프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(17 mg, 28.9 μmol, 62.7%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(3-하이드록시-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(4.00 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-하이드록시프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(17 mg, 28.9 μmol)의 담황색 용액에 TFA(1480 mg, 1.0 ml, 당량: 450)를 첨가하고 반응 혼합물은 주황색으로 변하였고, 25℃에서 24시간 동안 교반하고, 혼합물 농축하고 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 회백색 고체로 증발시키고, 이를 다이클로로메탄에 용해하고 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄에 용해하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체를 형성시키고, 연황색 고체를 여과로 분리하고 고진공하에 건조시켜, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-하이드록시프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(12 mg, 26.2 μmol, 90.6%)를 수득하였다.

실시예 299.

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(3-모폴린-4-일-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-모폴리노프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2 내지 5 ml 바이오타지 초음파 바이알 내에서, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(60 mg, 113 μmol), 4-(3-클로로프로필)모폴린(55.5 mg, 339 μmol, 당량: 3.0) 및 DMF(2 ml) 중 Cs₂CO₃(147 mg, 452 μmol)을 혼합하였다. 혼합물을 10분 동안 25℃에서 교반하고 이어서 바이오타지 초음파 반응기에서 30분 동안 100 ℃로 가열하였다. 이어서, 다이클로로메탄(10 mL)으로 희석하고 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여액을 고진공하에 65℃에서 농축하고 잔사를 다이클로로메탄에 용해하고 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-모폴리노프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(62 mg, 94.2 μmol, 83.4%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(3-모폴린-4-일-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(4.00 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-모폴리노프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(62 mg, 94.2 μmol)의 담황색 용액에 TFA(1.48 g, 1.00 ml, 13.0 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물은 주황색으로 변하였고, 25℃에서 18시간 동안 교반하고, 혼합물을 농축하고 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드의 용액(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 황색 고체로 증발시키고, 이를 다이클로로메탄에 용해하고 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 함유)에 용해하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체를 형성시키고, 연황색 플라스크를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-모폴리노프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(45 mg, 85.3 μmol, 90.5%)를 수득하였다.

실시예 300.

2-{5-다이플루오로메톡시-1-[3-(3-하이드록시-아제티딘-1-일)-프로필]-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

1-(3-클로로프로필)아제티딘-3-올

25 ml 환저 플라스크 내에서, 아제티딘-3-올 하이드로클로라이드(베타 파마(Beta Pharma)로부터 이용가능함, 250 mg, 2.28 mmol) 및 아세토니트릴(5 ml) 중 1-브로모-3-클로로프로판(719 mg, 4.56 mmol)을 교반하면서 혼합하고 Cs₂CO₃(1.86 g, 5.7 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반하고, 이어서 EtOAc(15 ml)로 희석하고 여과하여 고체를 제거하였다. 여액을 증발시키고 잔사를 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄(요오드 챔버 중 개별 TLC) 중 0 내지 5% MeOH 함유 10% 암모늄 하이드록사이드)로 정제하여, 1-(3-클로로프로필)아제티딘-3-올(128 mg, 856 μmol, 37.5%)을 투명한 짙은 액체로서 수득하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(3-하이드록시아제티딘-1-일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2 내지 5 ml 바이오타지 초음파 바이알 내에서, DMF(2 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(50 mg, 94.2 μmol), 1-(3-클로로프로필)아제티딘-3-올(42.3 mg, 283 μmol, 당량: 3.0) 및 Cs₂CO₃(123 mg, 377 μmol)을 혼합하였다. 혼합물을 10분 동안 25℃에서 교반하고, 이어서 100℃로 바이오타지 초음파 반응기에서 30분 동안 가열하였다. LCMS 결과 반응이 완료됨을 나타내었고, 다이클로로메탄(10 mL)으로 희석하고 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여액을 고진공하에 65℃에서 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄에 용해하고 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(3-하이드록시아제티딘-1-일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(40 mg, 62.1 μmol, 65.9%)를 연황색 반고체로서 수득하였다.

단계 3

2-{5-다이플루오로메톡시-1-[3-(3-하이드록시-아제티딘-1-일)-프로필]-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(4.00 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(3-하이드록시아제티딘-1-일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(43 mg, 66.8 μmol)의 담황색 용액에 TFA(740 mg, 0.5 ml, 6.49 mmol, 당량: 97.2)를 첨가하고 반응 혼합물은 주황색으로 변하였고, 25℃에서 18시간 동안 교반하고, 혼합물 농축하고 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 황색 거품으로 증발시키고, 이를 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 함유)에 용해하고 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 10% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄에 용해하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체를 형성시키고, 회백색 고체를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(3-하이드록시아제티딘-1-일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(21 mg, 40.9 μmol, 61.2%)를 수득하였다.

실시예 301.

2-{1-[3-(3-시아노-아제티딘-1-일)-프로필]-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

1-(3-클로로프로필)아제티딘-3-카보니트릴

25 ml 환저 플라스크 내에서, 아세토니트릴(5 ml) 중 아제티딘-3-카보니트릴 하이드로클로라이드(에이에스더블유 메드켐 인코포레이티드(ASW MedChem Inc.)로부터 이용가능함, 250 mg, 2.11 mmol) 및 1-브로모-3-클로로프로판(664 mg, 415 μL, 4.22 mmol)을 교반하면서 혼합하고 현탁액에 Cs₂CO₃(2.06 g, 6.33 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반하고, 이어서 EtOAc(15 ml)로 희석하고 여과하여 고체를 제거하였다. 여액을 증발시키고 잔사를 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH)(요오드 챔버 내의 현상 TLC)로 정제하여, 1-(3-클로로프로필)아제티딘-3-카보니트릴(230 mg, 1.45 mmol, 68.8%)을 투명한 짙은 액체로서 수득하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(1-(3-(3-시아노아제티딘-1-일)프로필)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2 내지 5 ml 바이오타지 초음파 바이알 내에서, DMF(2.00 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(50 mg, 94.2 μmol), 1-(3-클로로프로필)아제티딘-3-카보니트릴(44.8 mg, 283 μmol, 당량: 3.0) 및 Cs₂CO₃(123 mg, 377 μmol)을 혼합하였다. 혼합물을 10분 동안 25℃에서 교반하고, 이어서 100℃로 바이오타지 초음파 반응기에서 30분 동안 가열하였다. LCMS 결과 반응이 완료됨을 나타내었고, 다이클로로메탄(10 mL)으로 희석하고 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여액을 고진공하에 65℃에서 농축하고 잔사를 다이클로로메탄에 용해하고, 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(1-(3-(3-시아노아제티딘-1-일)프로필)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(45 mg, 68.9 μmol, 73.2%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-{1-[3-(3-시아노-아제티딘-1-일)-프로필]-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(4.00 ml) 중 N-3급-부틸-2-(1-(3-(3-시아노아제티딘-1-일)프로필)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(45 mg, 68.9 μmol)의 담황색 용액에 TFA(740 mg, 0.5 ml, 6.49 mmol, 당량: 94.1)를 첨가하고 반응 혼합물은 주황색으로 변하였고, 25℃에서 18시간 동안 교반하고, 혼합물을 농축하고 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 황색 고체로 증발시키고, 이를 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 첨가)에 용해하고 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 다이클로로메탄에 용해하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체를 형성시키고, 연황색 플라스크를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, N-3급-부틸-2-(1-(3-(3-시아노아제티딘-1-일)프로필)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(33 mg, 63.2 μmol, 91.6%)를 수득하였다.

실시예 302.

2-[1-(2-아제티딘-3-일-에틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3급-부틸 3-(2-하이드록시에틸)아제티딘-1-카복실레이트

THF(5.29 ml) 중 2-(1-(3급-부톡시카보닐)아제티딘-3-일)아세트산(529 mg, 2.46 mmol)의 용액을 0℃로 냉각하고 THF(2.46 ml, 4.92 mmol) 중 2 M 보란-메틸 설파이드 착체로 처리하고, 이어서 실온으로 천천히 가온하였다. 18시간 동안 교반 후, 반응 혼합물을 2 N NaOH(7 ml)를 적가하여 켄칭하고, 이어서 다이클로로메탄(4 x 30 ml)으로 추출하였다. 유기층을 합하고 MgSO₄로 건조하고 농축하여, 3급-부틸 3-(2-하이드록시에틸)아제티딘-1-카복실레이트(495 mg, 2.46 mmol, 100%)를 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

3급-부틸 3-(2-요오드에틸)아제티딘-1-카복실레이트

0℃에서 3급-부틸 3-(2-하이드록시에틸)아제티딘-1-카복실레이트(254 mg, 1.26 mmol), Ph₃P(381 mg, 1.45 mmol), 이미다졸(129 mg, 1.89 mmol) 및 아세토니트릴(6.5 ml)의 교반된 용액을 요오드(368 mg, 1.45 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 25℃에 도달하도록 하고 교반을 18시간 동안 계속하였다. 이어서, 반응 혼합물을 물로 희석하고 헥산(6 x 25 ml)으로 추출하였다. 합한 유기물을 MgSO₄로 건조하고 농축하고, 이어서 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm, 15분에 걸쳐서 헥산 0 내지 30% EtOAc)로 정제하여, 3급-부틸 3-(2-요오드에틸)아제티딘-1-카복실레이트(271 mg, 871 μmol, 69.0%)를 무색 오일로서 수득하였다.

단계 3

3급-부틸 3-(2-(3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-6-플루오로-1H-인다졸-1-일)에틸)아제티딘-1-카복실레이트

2 내지 5 ml 바이오타지 초음파 바이알 내에서, DMF(2.00 ml) 중 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(75 mg, 155 μmol), 3급-부틸 3-(2-요오드에틸)아제티딘-1-카복실레이트(68 mg, 219 μmol) 및 Cs₂CO₃(203 mg, 622 μmol)을 혼합하였다. 혼합물을 10분 동안 25℃에서 교반하고, 이어서 100℃로 바이오타지 초음파 반응기에서 30분 동안 가열하고, 다이클로로메탄(10 mL)으로 희석하고 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여액을 고진공하에 65℃에서 농축하고 잔사를 다이클로로메탄에 용해하고 크로마토그래피(40 g 컬럼, 아날로직스로부터의 50 μm 실리카-겔, 20분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% MeOH)로 정제하여, 3급-부틸 3-(2-(3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-6-플루오로-1H-인다졸-1-일)에틸)아제티딘-1-카복실레이트(103 mg, 155 μmol, 99.5%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-[1-(2-아제티딘-3-일-에틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(4.00 ml) 중 3급-부틸 3-(2-(3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-6-플루오로-1H-인다졸-1-일)에틸)아제티딘-1-카복실레이트(43 mg, 64.6 μmol)의 담황색 용액에 TFA(740 mg, 500 μL, 6.49 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물은 주황색으로 변하였고, 25℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고 잔사를 다이클로로메탄/MeOH/암모늄 하이드록사이드(60:10:1, 5 ml)에 재용해하고 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 황색 고체로 증발시키고, 이를 다이클로로메탄(몇 방울의 MeOH 첨가)에 용해하고 30분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 10% MeOH로 용리하는 크로마토그래피(구형 실리카 20 내지 45 μm, 23 g, 베르사플래시 수펠코)로 정제하였다. 순수한 생성물을 몇 방울의 MeOH가 첨가된 다이클로로메탄에 용해하고 사이클로헥산을 첨가하여 고체를 형성시키고, 회백색 고체를 경사법으로 분리하고 고진공하에 건조시켜, 2-(1-(2-(아제티딘-3-일)에틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(23 mg, 52.8 μmol, 81.8%)를 수득하였다.

실시예 303.

N-3급-부틸-2-(2-메틸-1H-인돌-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-1H 인돌

2-메틸-1H-인돌(500 mg, 3.81 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(726 mg, 2.86 mmol) 및 4,4'-다이-3급-부틸-2,2'-다이피리딜(40.9 mg, 152 μmol)의 혼합물을 질소 가스로 1분 동안 퍼징하고, 이어서 헵탄(5 ml)을 첨가하고, 다시 반응물을 질소 가스로 1 분 동안 퍼징하고, 이어서 마지막으로 비스(1,5-사이클로옥타다이엔)다이-무-메톡시다이이리듐(I)(50.5 mg, 76.2 μmol)을 첨가하고, 반응물을 50℃로 가열하였다. 18시간 후, 반응물을 실온으로 냉각하고, 에터로 희석하고, 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하여, 2-메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-1H 인돌(0.960 g)을 짙은 오일로서 수득하였다. 이 물질을 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(2-메틸-1H-인돌-7-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(79 mg, 185 μmol), 칼륨 카보네이트(51.1 mg, 370 μmol) 및 2-메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인돌(95.1 mg, 370 μmol)을 다이옥산(5 ml) 및 물(0.5 ml)에 용해하고, 이어서 반응물을 질소로 1분 동안 퍼징하였다. 이어서, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(21.4 mg, 18.5 μmol)을 첨가하고, 반응물을 질소 대기하에 방치하고 혼합물을 80℃로 2시간 동안 가열하였다. 메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인돌(45 mg)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 추가 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 약 3:1의 에틸 아세테이트:에터로 희석하고, 물 및 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 조질 잔사를 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산 중 3 내지 15% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(2-메틸-1H-인돌-7-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(65 mg)를 오일로서 수득하였다. MS(M+H)⁺ = 478.3.

단계 3

N-3급-부틸-2-(2-메틸-1H-인돌-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(4 ml) 중 N-3급-부틸-2-(2-메틸-1H-인돌-7-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(60 mg, 126 μmol)의 교반된 용액에 에틸렌다이아민(355 mg, 399 μL, 5.9 mmol), 이어서 테트라부틸암모늄 플루오라이드(389 μL, 389 μmol)를 첨가하였다. 용액을 질소 대기하에 20시간 동안 교반하면서 60℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 에터로 희석하고, 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하여 오일을 수득하고, 이를 천천히 결정화하였다. 결정을 물로 2회 마쇄하고 이어서 진공하에 건조시켜, N-3급-부틸-2-(2-메틸-1H-인돌-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(29 mg)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 304.

N-3급-부틸-2-(2-(1H-인돌-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(1H-인돌-7-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(50 mg, 117 μmol), 7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인돌(37.0 mg, 152 μmol) 및 칼륨 카보네이트(16.2 mg, 117 μmol)를 테플론-나사형 밀봉 반응 튜브 내에서 합하고, 다이옥산(2.5 ml) 및 물(0.5 ml)을 첨가하고, 이어서 혼합물을 질소로 1분 동안 탈기하였다. 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(13.5 mg, 11.7 μmol)을 첨가하고, 질소를 1분 동안 버블링하고, 이어서 반응물을 85℃로 6시간 동안, 이어서 75℃에서 추가 15시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 진공에서 농축하고, 잔사를 크로마토그래피(실리카, 헥산 중 1 내지 15% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(1H-인돌-7-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(54 mg)를 오일로서 수득하고, 이를 천천히 결정화하였다. MS(M+H)⁺ = 464.2.

단계 2

N-3급-부틸-2-(2-(1H-인돌-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(1H-인돌-7-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(54 mg, 116 μmol)의 교반된 용액에 에틸렌다이아민(350 mg, 393 μL, 5.82 mmol)을 첨가하고 혼합물을 60℃에서 가열하였다. 72시간 후, 반응 혼합물을 냉각하고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 합하고 물 및 염수로 세척하고, 이어서 MgSO₄로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 에터, 이어서 물로 마쇄하고, 다이클로로메탄으로 희석하고, 마지막으로 용매를 진공에서 제거하여, N-3급-부틸-2-(2-(1H-인돌-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(14 mg)를 수득하였다.

실시예 305.

N-3급-부틸-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)- 5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

20℃에서 DMF(4 ml) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(111 mg, 242 μmol)의 교반된 현탁액에 EDC(107 mg, 557 μmol), HOBT(107 mg, 557 μmol) 및 2-메틸프로판-2-아민(78.6 mg, 0.113 ml, 1.08 mmol)을 첨가하였다. 3시간 후 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 10% 시트르산 용액으로 세척하였다. 이어서, 유기층을 포화 나트륨 바이카보네이트 및 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하여, 조질 N-3급-부틸-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(140 mg)를 연갈색 오일로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

20℃에서 다이클로로메탄(5 ml) 중 N-3급-부틸-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(140 mg, 273 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(3.11 g, 2.1 ml, 27.3 mmol)을 첨가하였다. 6시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고 다시 농축하였다. 이어서, 잔사를 다이클로로메탄(5 ml)에 현탁하고 에틸렌다이아민(1.23 g, 1.38 ml, 20.5 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 15시간 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 잔사를 물로 마쇄하고 고체를 여과로 수득하였다. 크로마토그래피(실리카, 25 g 미리 패킹된 실리사이클 카트리지, 다이클로로메탄 중 0 내지 5% 메탄올, 15분에 걸쳐서 증가하는 구배)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(63 mg, 165 μmol, 60%)를 담황색 분말로서 수득하였다.

실시예 306.

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

6-클로로-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸

THF(25 ml) 중 6-클로로-3-요오드-1H-인다졸(1.11 g, 4.0 mmol)의 교반된 용액에 나트륨 하이드라이드(192 mg, 4.8 mmol)를 첨가하였다. 15분 후 혼합물을 -16℃로 냉각하였다. 아이소프로필마그네슘 클로라이드(3.00 ml, 6.00 mmol)를 적가하고 혼합물을 -16℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 트라이부틸주석 클로라이드(1.56 g, 1.3 ml, 4.8 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온으로 가온하였다. 15시간 후 혼합물을 물 및 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 여과하고 진공에서 농축하였다. 조질 갈색 오일을 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

20℃에서 DMF 중 2-브로모-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(289 mg, 700 μmol) 및 6-클로로-3-(트라이부틸스탄닐)-1H-인다졸(실시예 4 참조, 2.01 g, 4.55 mmol)의 교반된 용액에 구리(I) 요오다이드(25.1 mg, 280 μmol)를 첨가하고, 이어서 혼합물을 아르곤으로 버블링하면서 15분 동안 탈기하였다. 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(80.9 mg, 70.0 μmol)을 첨가하고, 이어서 반응 혼합물을 80℃로 가열하였다. 15시간 후 혼합물을 냉각하고 에틸 아세테이트 및 포화 수성 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 희석하였다. 유기층을 분리하고 염수로 세척하고, 이어서 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 40 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 20 내지 50% 에틸 아세테이트, 15분에 걸친 구배)로 정제하여, 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.080 g)를 연갈색 오일로서 수득하였다. 이는 ¹H NMR에 의해, 6,6'-다이클로로-1H,1'H-[3,3']바이인다졸릴로서 시험적으로(tentatively) 할당된 단일 주 불순물과 함께, 약 75% 순도였고, 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(2 ml) 중 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.080 g, 165 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1.88 g, 1.27 ml, 16.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고 다시 진공에서 농축하고, 이어서 다이클로로메탄에 현탁하고 에틸렌다이아민(743 mg, 0.835 ml, 12.4 mmol)을 첨가하였다. 15시간 후 혼합물을 농축하고 물로 마쇄하고 여과로 수득된 고체를 건조하고 크로마토그래피(실리카, 실리사이클 25 g 카트리지, 다이클로로메탄 중 0 내지 5% 메탄올, 15분에 걸친 구배)로 정제하여, 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(24 mg, 67.0 μmol, 41%)를 담황색 분말로서 수득하였다.

실시예 307

2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 247 μmol)를 DMF(1 ml)에 용해하고 0℃로 냉각하였다. 나트륨 하이드라이드(12.9 mg, 322 μmol)를 첨가하고 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 에틸 요오다이드(57.9 mg, 30.0 μL, 371 μmol)를 첨가하고 혼합물을 20℃로 가온하였다. 15시간 후 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 40 g 아날로직스 미리 패킹된 컬럼, 헥산 중 20 내지 50% 에틸 아세테이트, 15 분 구배)로 정제하여, 2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(78 mg, 152 μmol, 61%)를 황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(78 mg, 152 μmol)를 다이클로로메탄에 용해하고 이에 트라이플루오로아세트산(1.73 g, 1.17 ml, 15.2 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 4시간 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고 재농축하고 마지막으로 다시 다이클로로메탄으로 희석하고 이에 에틸렌다이아민(685 mg, 770 μL, 11.4 mmol)을 첨가하였다. 15시간 후 혼합물을 진공에서 농축하고, 물로 마쇄하고 수집된 고체를 여과하고 건조시켰다. 고체를 크로마토그래피(실리카, 실리사이클 25 g 카트리지, 다이클로로메탄 중 0 내지 5% 메탄올, 15분 구배)로 정제하여, 2-(6-클로로-1-에틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(53 mg, 138 μmol, 91.1%)를 담황색 분말로서 수득하였다.

실시예 308

2-(1-벤질-6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-(1-벤질-6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 247 μmol)를 DMF(1 ml)에 용해하고 0℃로 냉각하였다. 나트륨 하이드라이드(12.9 mg, 322 μmol)를 첨가하고 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 벤질 브로마이드(63.5 mg, 44.1 μL, 371 μmol)를 첨가하고 혼합물을 20℃로 가온하였다. 15시간 후 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 40 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 20 내지 50% 에틸 아세테이트, 15분 구배)로 정제하여, 2-(1-벤질-6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(87 mg, 151 μmol, 61.1%)를 담황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(1-벤질-6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(1-벤질-6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(87 mg, 151 μmol)를 다이클로로메탄(25 ml)에 용해하고 이에 트라이플루오로아세트산(1.72 g, 1.17 ml, 15.1 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 4시간 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고 다시 재농축하고, 이어서 다이클로로메탄에 현탁하고 에틸렌다이아민(682 mg, 0.766 ml, 11.3 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 15시간 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 잔사를 물로 마쇄하고 고체를 여과로 수집하고 건조시켰다. 고체를 실리카 겔 상에 흡착시키고 크로마토그래피(실리카, 실리사이클 25 g 카트리지, 다이클로로메탄 중 0 내지 5% 메탄올, 15분 구배)로 정제하여, 2-(1-벤질-6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(78 mg, 175 μmol, 정량적)를 담황색 분말로서 수득하였다.

실시예 309.

2-(6-클로로-1-(사이클로프로필메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-(사이클로프로필메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 247 μmol)를 DMF(1 ml)에 용해하고 0℃로 냉각하였다. 나트륨 하이드라이드(12.9 mg, 322 μmol)를 첨가하였다. 30분 후 사이클로프로필메틸 브로마이드(50.1 mg, 0.0360 ml, 371 μmol)를 첨가하고 혼합물을 실온으로 가온하였다. 15시간 후, 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 40 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 20 내지 50% 에틸 아세테이트, 15분 구배)로 정제하여, 2-(6-클로로-1-(사이클로프로필메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(99 mg, 184 μmol, 74.2%)를 황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-(사이클로프로필메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1-(사이클로프로필메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(99 mg, 184 μmol)를 다이클로로메탄에 용해하고, 이에 트라이플루오로아세트산(1.73 g, 1.17 ml, 15.2 mmol)을 첨가하였다. 72시간 후 혼합물을 진공에서 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고, 이어서 진공에서 재농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 아날로직스 40 g 카트리지, 다이클로로메탄 중 0 내지 5% 메탄올, 15분에 걸친 구배)로 정제하여, 2-(6-클로로-1-(사이클로프로필메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(15 mg, 36.7 μmol, 20.0%)를 회백색 분말로서 수득하였다.

실시예 310.

2-(6-클로로-1-(아이속사졸-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-(아이속사졸-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(80 mg, 165 μmol)를 DMF(1 ml)에 용해하고 0℃로 냉각하였다. 나트륨 하이드라이드(10.6 mg, 264 μmol)를 첨가하고 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 3-(브로모메틸)아이속사졸(29.4 mg, 181 μmol)을 첨가하고 혼합물을 실온으로 가온하였다. 15시간 후, 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 20 내지 50% 에틸 아세테이트, 15분 구배)로 정제하여, 2-(6-클로로-1-(아이속사졸-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(91 mg, 161 μmol, 97.5%)를 황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-(아이속사졸-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1-(아이속사졸-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 다이클로로메탄에 용해하고 이에 트라이플루오로아세트산(1.79 g, 1.21 ml, 15.7 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 120시간 동안 교반하였다. 침전물이 형성되었고, 이를 여과 제거하였다. 여액을 진공에서 농축하고 고체와 합하여, 중간체 2-(6-클로로-1-(아이속사졸-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-(하이드록시메틸)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(73 mg, 157 μmol)를 수득하였다. 이를 60:20:1 다이클로로메탄:메탄올:암모늄 하이드록사이드(10 ml)에 용해하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고, 다이클로로메탄으로 희석하고 재농축하여, 2-(6-클로로-1-(아이속사졸-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(67 mg, 154 μmol, 98.1%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 311.

2-(6-클로로-1-((1-메틸-1H-이미다졸-2-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-((1-메틸-1H-이미다졸-2-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(80 mg, 165 μmol)를 DMF(1 ml)에 용해하고 0℃로 냉각하였다. 나트륨 하이드라이드(10.6 mg, 264 μmol)를 첨가하고 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 2-(클로로메틸)-1-메틸-1H-이미다졸(23.7 mg, 181 μmol)을 첨가하고 혼합물을 실온으로 가온하였다. 15시간 후 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄)로 정제하여, 2-(6-클로로-1-((1-메틸-1H-이미다졸-2-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(106 mg)를 황색 고체로서 수득하였다. MS(M+H)⁺ = 579.

단계 2

2-(6-클로로-1-((1-메틸-1H-이미다졸-2-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1-((1-메틸-1H-이미다졸-2-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(106 mg, 183 μmol)를 다이클로로에탄(10 ml)에 용해하였다. 이 혼합물에 트라이플루오로아세트산(2.09 g, 1.41 ml, 18.3 mmol)을 첨가하고 혼합물을 80℃로 가열하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 60:20:1 다이클로로메탄:메탄올:암모늄 하이드록사이드(10 ml)에 용해하였다. 2시간 후 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 크로마토그래피(실리카, 아날로직스 40 g, 다이클로로메탄 중 0 내지 5% 메탄올, 15분에 걸쳐서)로 정제하여, 2-(6-클로로-1-((1-메틸-1H-이미다졸-2-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(87 mg, 194 μmol, 106%)를 황색 분말로서 수득하였다.

실시예 312.

2-(6-클로로-1-((5-메틸아이속사졸-3-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-((5-메틸아이속사졸-3-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(80 mg, 165 μmol)를 DMF(1 ml)에 용해하고 0℃로 냉각하였다. 나트륨 하이드라이드(10.6 mg, 264 μmol)를 첨가하고 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 3-(브로모메틸)-5-메틸아이속사졸(31.9 mg, 181 μmol)을 첨가하고 혼합물을 실온으로 가온하였다. 15시간 후, 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 40 g 아날로직스 컬럼, 15분에 걸쳐서 헥산 중 20% 내지 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여, 2-(6-클로로-1-((5-메틸아이속사졸-3-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(89 mg, 153 μmol, 93.0%)를 황색 분말로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-((5-메틸아이속사졸-3-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-클로로-1-((5-메틸아이속사졸-3-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(89 mg, 153 μmol)를 1,2-다이클로로에탄(3 ml)에 용해하고 밀봉된 튜브 내에, 방치하였다. 상기 혼합물에 트라이플루오로아세트산(1.75 g, 1.18 ml, 15.3 mmol)을 첨가하였다. 튜브를 밀봉하고 혼합물을 80℃로 가열하였다. 15시간 후, 혼합물을 냉각하고 진공에서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 95:5 다이클로로메탄:메탄올), 이어서 분취용 TLC(95:5 다이클로로메탄:메탄올)로 정제하여, 2-(6-클로로-1-((5-메틸아이속사졸-3-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(15 mg, 33.3 μmol, 22%)를 수득하였다.

실시예 313.

N-3급-부틸-2-(1-(2-(다이메틸아미노)에틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

N-3급-부틸-2-(1-(2-(다이메틸아미노)에틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.085 g, 153 μmol)를 밀봉된 튜브 내에 넣고 다이클로로메탄(2 ml)에 용해하였다. 트라이플루오로아세트산(1.75 g, 1.18 ml, 15.3 mmol)을 첨가하고 튜브를 밀봉하고 혼합물을 80℃로 가열하였다. 15시간 후 혼합물을 냉각하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올 및 사이클로헥산으로부터 결정화하여, N-3급-부틸-2-(1-(2-(다이메틸아미노)에틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(38 mg, 89.7 μmol, 58.5%)를 백색 분말로서 수득하였다.

실시예 314.

2-(6-플루오로-1-(2-모폴리노-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(2-모폴리노-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(42 mg, 68.9 μmol)를 밀봉된 튜브 내에 넣고 다이클로로메탄(2 ml)에 용해하였다. 트라이플루오로아세트산(785 mg, 531 μL, 6.89 mmol)을 첨가하고 튜브를 밀봉하고 혼합물을 80℃로 가열하였다. 15시간 후 혼합물을 냉각하고 진공에서 농축하였다. 다이클로로메탄/메탄올 및 사이클로헥산으로부터 재결정화하여, 2-(6-플루오로-1-(2-모폴리노-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(7 mg, 16.5 μmol, 24.0%)를 백색 분말로서 수득하였다.

실시예 315.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 d9-3급-부틸아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 d9-3급-부틸아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(99 mg, 224 μmol), N1-((에틸이미노)메틸렌)-N3,N3-다이메틸프로판-1,3-다이아민 하이드로클로라이드(98.9 mg, 516 μmol) 및 1H-벤조[d][1,2,3]트라이아졸-1-올 수화물(98.7 mg, 516 μmol)을 DMF(4 ml)와 합하여 무색 용액을 수득하였다. 3급-부틸-d9-아민(73.7 mg, 897 μmol)을 첨가하였다. 72시간 후 반응 혼합물을 10% 시트르산 용액(10 ml)에 붓고 에틸 아세테이트(3 x 15 ml)로 추출하였다. 조질 물질을 크로마토그래피(실리카 겔, 4 g, 헥산 중 25 내지 70% 에틸 아세테이트)로 정제하여, 약 20% 회수된 출발 물질로 오염된 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 d9-3급-부틸아마이드(80 mg, 127 μmol, 56.4%)를 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 d9-3급-부틸아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 d9-3급-부틸아마이드(80 mg, 158 μmol)를 다이클로로메탄(2 ml)에 용해하였다. 트라이플루오로아세트산(1.35 g, 914 μL, 11.9 mmol)을 첨가하였다. 15시간 후 혼합물을 진공에서 농축하여 황색 고체를 수득하였다. 이 고체를 메탄올:암모늄 하이드록사이드(9:1, 10 ml)에 현탁하고, 15분 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하고 크로마토그래피(구형 실리카 겔, 11 g, 다이클로로메탄 중 4 내지 10% 암모늄 하이드록사이드:메탄올의 1:9 혼합물)로 정제하여, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 d9-3급-부틸아마이드(28 mg, 74.6 μmol, 47.1%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 316.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1,3-다이하이드록시프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b] 피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1,3-다이하이드록시프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(4.0 ml) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴) 에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.15 mmol) 및 HATU(0.07 g, 0.18 mmol)의 교반된 혼합물에 N.N-다이아이소프로필-에틸아민(0.024 g, 0.032 ml, 0.18 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 2-아미노프로판-1,3-다이올(0.021 g, 0.23 mmol)을 첨가하였다. 18시간 후 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 수상을 EtOAc로 추출하고, 이어서 합한 유기상을 물 및 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 여과로 수집하고, 다이클로로메탄으로 세척하고 진공 오븐에서 건조시켜 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1,3-다이하이드록시프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(0.035 g, 0.07 mmol, 43%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1,3-다이하이드록시프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b] 피라진-7-카복스아마이드

20℃에서 다이클로로메탄(3 ml) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1,3-다이하이드록시프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(0.035 g, 0.066 mmol)의 교반된 용액에 TFA(0.38 g, 0.25 ml, 3.3 mmol)를 첨가하였다. 18시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고 다시 농축하였다. 이어서, 잔사를 다이클로로메탄(3 ml)에 현탁하고 에틸렌다이아민(0.2 g, 0.22 ml, 3.3 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 잔사를 여과로 수집하고 MeCN/물(20 내지 95%)로 용리하는 HPLC로 정제하여, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1,3-다이하이드록시프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b] 피라진-7-카복스아마이드(0.009 g, 0.022 mmol, 34%)를 백색 분말로서 수득하였다.

실시예 317.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(사이클로프로필메틸)-5H-피롤로[3,2-b] 피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(사이클로프로필메틸)-5-((2-(트라이메틸실릴) 에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(4.0 ml) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴) 에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.15 mmol) 및 HATU(0.07 g, 0.18 mmol)의 교반된 혼합물에 N.N-다이아이소프로필-에틸아민(0.024 g, 0.032 ml, 0.18 mmol)을 첨가하였다. 30분 후, 사이클로프로필메탄아민(0.016 g, 0.23 mmol)을 첨가하였다. 18시간 후 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 수상을 EtOAc로 추출하고, 이어서 합한 유기상을 물 및 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시켰다. 여과하고 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 30 내지 100% EtOAc, 40분간에 걸친 구배)로 정제하여, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(사이클로프로필메틸)-5-((2-(트라이메틸실릴) 에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(0.049 g, 0.096 mmol, 63%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(사이클로프로필메틸)-5H-피롤로[3,2-b] 피라진-7-카복스아마이드

20℃에서 다이클로로메탄(5 ml) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(사이클로프로필메틸)-5-((2-(트라이메틸실릴) 에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(0.049 g, 0.096 mmol)의 교반된 용액에 TFA(0.55 g, 0.36 ml, 4.78 mmol)를 첨가하였다. 18시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고 다시 농축하였다. 이어서, 잔사를 다이클로로메탄(5 ml)에 현탁하고 에틸렌다이아민(0.29 g, 0.32 ml, 4.78 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 18시간 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 잔사를 물로 마쇄하고 여과로 수집하고, 물로 세척하고 진공 오븐에서 건조시켜, 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(사이클로프로필메틸)-5H-피롤로[3,2-b] 피라진-7-카복스아마이드(0.034 g, 0.089 mmol, 93%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 318.

2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(5-클로로-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-브로모-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(145 mg, 328 μmol)를 톨루엔(3 ml)에 용해하고, 구리(I) 요오다이드(3.29 mg, 36.7 μmol), 나트륨 요오다이드(98.2 mg, 655 μmol) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민(11.9 mg, 83.6 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 버블링하면서 탈기하고, 이어서 밀봉하고 혼합물을 110℃로 가열하였다. 15시간 후, 5-클로로-1H-인다졸(50 mg, 328 μmol) 및 삼염기성 칼륨 포스페이트(146 mg, 688 μmol)를 첨가하고, 다시 혼합물을 탈기하고, 혼합물을 밀봉하고 혼합물을 추가 24시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 여과된 여액을 농축하고 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, 2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(124 mg, 74%) 고체로서 수득하였다.

단계 2(7166-005)

2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

2-(5-클로로-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(124 mg, 241 μmol)를 다이클로로메탄(3 ml)에 용해하고, 이어서 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후 혼합물을 진공에서 농축하고 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄 용액(1/10/60, 25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하고 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(57.7 mg, 62%)를 고체로서 수득하였다.

실시예 319.

2-(5-클로로-3-메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(5-클로로-3-메틸-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-브로모-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(110 mg, 248 μmol)를 톨루엔(1.4 ml)에 용해하고, 구리(I) 요오다이드(2.49 mg, 27.8 μmol), 나트륨 요오다이드(74.4 mg, 496 μmol) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민(9.00 mg, 63.3 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소하에 밀봉하고 혼합물을 110℃에서 가열하였다. 15시간 후, 5-클로로-3-메틸-1H-인다졸(41.3 mg, 248 μmol) 및 삼염기성 칼륨 포스페이트(111 mg 521 μmol)를 첨가하고, 혼합물을 진공하에 탈기하고, 질소로 재충전하고, 혼합물을 밀봉된 튜브에서 110℃로 24시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여액을 농축하고 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, 2-(5-클로로-3-메틸-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(80 mg, 61%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5-클로로-3-메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

2-(5-클로로-3-메틸-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(80 mg, 151 μmol)를 다이클로로메탄(2 ml)에 용해하고, 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 동안 교반한 후 혼합물을 진공에서 농축하고, 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 혼합물(1/10/60, 25 ml)을 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(5-클로로-3-메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(46.8 mg 77%)를 고체로서 수득하였다.

실시예 320.

2-(5-플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(5-플루오로-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5((2(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-브로모-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(110 mg, 248 μmol)를 톨루엔(1.4 ml)에 용해하고, 구리(I) 요오다이드(2.49 mg, 27.8 μmol), 나트륨 요오다이드(74.4 mg, 496 μmol) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민(9.00 mg, 63.3 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소하에 밀봉하고 혼합물을 110℃에서 15시간 동안 가열하였다. 5-플루오로-1H-인다졸(33.8 mg, 248 μmol) 및 삼염기성 칼륨 포스페이트(111 mg 521 μmol)를 첨가하고, 혼합물을 질소로 탈기하고, 혼합물을 밀봉된 튜브에서 110℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, 2-(5-플루오로-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5((2(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(111 mg, 90%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5-플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

다이클로로메탄(2 ml) 중 2-(5-플루오로-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(50 mg, 100 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 혼합물(1/10/60, 25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하고 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(5-플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(25 mg, 68%)를 수득하였다.

실시예 321.

2-인다졸-1-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1(7166-008)

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

톨루엔(2 ml) 중 2-브로모-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(140 mg, 316 μmol)의 교반된 용액에 구리(I) 요오다이드(3.17 mg, 35.4 μmol), 나트륨 요오다이드(94.7 mg, 631 μmol) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민(11.5 mg, 80.5 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소하에 밀봉하고 혼합물을 110℃에서 15시간 동안 가열하였다. 혼합물에 1H-인다졸(37.3 mg, 316 μmol) 및 삼염기성 칼륨 포스페이트(141 mg, 663 μmol)를 첨가하고, 이어서 반응 용기를 탈기하고, 질소로 채우고, 혼합물을 밀봉된 튜브에서 110℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 여액을 진공에서 농축하고 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(112 mg, 74%)를 수득하였다.

단계 2

2-인다졸-1-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

다이클로로메탄(2 ml) 중 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(112 mg, 100 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 농축하고 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 혼합물(1/10/60, 25 ml)을 첨가하고 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올, 15분 구배)로 정제하여, 2-인다졸-1-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(51 mg, 63%)를 수득하였다.

실시예 322.

2-(6-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

톨루엔(2 ml) 중 2-브로모-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(140 mg, 316 μmol)의 교반된 용액에 구리(I) 요오다이드(3.17 mg, 35.4 μmol), 나트륨 요오다이드(94.7 mg, 631 μmol) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민(11.5 mg, 80.5 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소하에 밀봉하고 혼합물을 110℃에서 15시간 동안 가열하였다. 6-클로로-1H-인다졸(48.2 mg, 316 μmol) 및 삼염기성 칼륨 포스페이트(141 mg, 663 μmol)를 첨가하고 혼합물을 탈기하고 질소로 채우고, 이어서 밀봉된 튜브에서 110℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, 2-(6-클로로-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(124 mg, 76%)를 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

다이클로로메탄(2 ml) 중 2-(6-클로로-1H-인다졸-1-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(124 mg, 241 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후 혼합물을 농축하고 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 혼합물(1/10/60, 25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올 용액)로 정제하여, 2-(6-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(75 mg, 81%)를 수득하였다.

실시예 323.

2-(5-메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-메톡시-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

톨루엔(1 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(150 mg, 351 μmol)의 교반된 용액에 구리(I) 요오다이드(3.52 mg, 39.3 μmol), 나트륨 요오다이드(105 mg, 702 μmol) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민(12.7 mg, 89.5 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소하에 밀봉하고 혼합물을 110℃에서 15시간 동안 가열하였다. 5-메톡시-1H-인다졸(52.0 mg, 351 μmol) 및 삼염기성 칼륨 포스페이트(156 mg, 737 μmol)를 첨가하고 혼합물을 탈기하고, 질소로 채우고, 혼합물을 밀봉된 튜브에서 110℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-메톡시-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(22 mg, 13%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5-메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(1 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-메톡시-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(22 mg, 44.5 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(0.3 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 혼합물(1/10/60, 25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% 메탄올 용액)로 정제하여, 2-(5-메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(7.4 mg, 46%)를 수득하였다.

실시예 324.

2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-클로로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

톨루엔(1 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(150 mg, 351 μmol)의 교반된 용액에 구리(I) 요오다이드(3.52 mg, 39.3 μmol), 나트륨 요오다이드(105 mg, 702 μmol) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민(12.7 mg, 89.5 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소하에 밀봉하고 혼합물을 110℃에서 15시간 동안 가열하고, 이어서 5-클로로-1H-인다졸(53.5 mg, 351 μmol) 및 삼염기성 칼륨 포스페이트(156 mg, 737 μmol)를 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 질소로 채우고, 혼합물을 밀봉된 튜브에서 110℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-클로로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(150 mg, 86%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-클로로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(144 mg, 289 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 이어서 15시간 후 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 혼합물(1/10/60, 25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% 메탄올 용액)로 정제하여, 2-(5-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(40.9 mg, 38%)를 수득하였다.

실시예 325.

2-(5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

톨루엔(1 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(150 mg, 351 μmol)의 교반된 용액에 구리(I) 요오다이드(3.52 mg, 39.3 μmol), 나트륨 요오다이드(105 mg, 702 μmol) 및 트랜스-N,N'-다이메틸사이클로헥산-1,2-다이아민(12.7 mg, 89.5 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소하에 밀봉하고 혼합물을 110℃에서 15시간 동안 가열하였다. 5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸(64.6 mg, 351 μmol) 및 삼염기성 칼륨 포스페이트(156 mg, 737 μmol)를 첨가하고, 이어서 혼합물을 탈기하고 혼합물을 밀봉된 튜브에서 110℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(130 mg, 70%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(1 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(130 mg, 245 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 이어서, 15시간 후 혼합물을 진공에서 농축하고 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 혼합물(1/10/60, 25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% 메탄올 용액)로 정제하여, 2-(5-다이플루오로메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(55.3 mg, 56%)를 수득하였다.

실시예 326.

2-(5-플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-플루오로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(2 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(140 mg, 316 μmol) 및 5-플루오로-1H-인다졸(43.0 mg, 316 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(66.8 mg, 695 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(16.1 mg, 31.6 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-플루오로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 76%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5-플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-플루오로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 249 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 용액(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% 메탄올)로 정제하여, 2-(5-플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(24.4 mg, 28%)를 수득하였다.

실시예 327.

2-(5,6-다이플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5,6-다이플루오로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(5.25 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(150 mg, 351 μmol) 및 5,6-다이플루오로-1H-인다졸(54.1 mg, 351 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(74.2 mg, 772 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(17.9 mg, 35.1 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5,6-다이플루오로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 68%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5,6-다이플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5,6-다이플루오로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 240 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올 용액)로 정제하여, 2-(5,6-다이플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(14.4 mg, 16%)를 수득하였다.

실시예 328.

2-(1H-피롤로[2,3-c]피리딘-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

7-브로모-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘

0℃로 냉각된, DMF(5 ml) 중 7-브로모-1H-피롤로[2,3-c]피리딘(0.2 g, 1.02 mmol)의 교반된 용액에 나트륨 하이드라이드(46.7 mg, 1.17 mmol)를 첨가하였다. 10분 후 혼합물을 25℃로 가온하였다. 20분 후 혼합물을 0℃로 재냉각하고, (2-(클로로메톡시)에틸)트라이메틸실란(186 mg, 1.12 mmol)을 적가하였다. 5분 후 혼합물을 25℃로 가온하였다. 20분 후 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 배분하였다. 유기상을 물로 세척하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 12 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 8% 에틸 아세테이트)로 정제하여, 7-브로모-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘(0.28 g, 84%)을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 2

N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-2-(1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

톨루엔(2.5 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.2 g, 468 μmol) 및 헥사메틸다이주석(215 mg, 655 μmol)의 용액에 Pd(Ph₃P)₄(54 mg)를 첨가하였다. 15분 동안 반응 혼합물을 통해 질소로 버블링한 후, 이를 95℃로 가열하였다. 1.5시간 후 7-브로모-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘 및 Pd(Ph₃P)₄(108 mg, 93.6 μmol)를 첨가하였다. 72시간 후 반응 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-2-(1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.13 g, 47%)를 수득하였다.

단계 3

2-(1H-피롤로[2,3-c]피리딘-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(2 ml) 중 N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-2-(1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.13 g, 219 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올 용액)로 정제하여, 2-(1H-피롤로[2,3-c]피리딘-7-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(11 mg, 15%)를 수득하였다.

실시예 329.

2-(6-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(6-클로로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(5.25 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(150 mg, 351 μmol) 및 6-클로로-1H-인다졸(64.3 mg, 421 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(74.2 mg, 772 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(17.9 mg, 35.1 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(6-클로로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 69%)를 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(6-클로로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 240 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% 메탄올 용액)로 정제하여, 2-(6-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(50.4 mg, 57%)를 수득하였다.

실시예 330.

2-(6-트라이플루오로메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(2 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(180 mg, 421 μmol) 및 6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(78.4 mg, 421 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(89.0 mg, 927 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(21.5 mg, 42.1 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 2일 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(110 mg, 49%)를 수득하였다.

단계 2

2-(6-트라이플루오로메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(110 mg, 207 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 15분에 걸쳐서 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(6-트라이플루오로메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(21.8 mg, 26%)를 수득하였다.

실시예 331.

2-(6-메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(6-메틸-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(2 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(140 mg, 328 μmol), 6-메틸-1H-인다졸(41.7 mg, 316 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(66.8 mg, 695 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(16.1 mg, 31.6 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(6-메틸-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 수득하였다.

단계 2

2-(6-메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(6-메틸-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 209 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올, 15분 구배)로 정제하여, 2-(6-메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(35 mg, 48%)를 수득하였다.

실시예 332.

2-(6-플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(2 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(140 mg, 328 μmol), 6-플루오로-1H-인다졸(43.0 mg, 316 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(66.8 mg, 695 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(16.1 mg, 31.6 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 2일 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(101 mg, 209 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(6-플루오로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(31 mg, 42%)를 수득하였다.

실시예 333.

2-(5-메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-메틸-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(2 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(140 mg, 328 μmol), 5-메틸-1H-인다졸(41.7 mg, 316 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(66.8 mg, 695 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(16.1 mg, 31.6 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 2일 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-메틸-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 수득하였다.

단계 2

2-(5-메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-메틸-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.1 g, 209 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(5-메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(19 mg, 26%)를 수득하였다.

실시예 334.

2-(3-트라이플루오로메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타피라졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(3-(트라이플루오로메틸)-5,6-다이하이드로사이클로펜타[c]피라졸-1(4H)-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(5.15 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(200 mg, 468 μmol), 3-(트라이플루오로메틸)-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[c]피라졸(82.4 mg, 468 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(98.9 mg, 1.03 mmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(23.9 mg, 46.8 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 2일 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(3-(트라이플루오로메틸)-5,6-다이하이드로사이클로펜타[c]피라졸-1(4H)-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 수득하였다.

단계 2

2-(3-트라이플루오로메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타피라졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(3-(트라이플루오로메틸)-5,6-다이하이드로사이클로펜타[c]피라졸-1(4H)-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.1 g, 209 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(3-트라이플루오로메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타피라졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(22 mg, 29%)를 수득하였다.

실시예 335.

2-(3-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(3-클로로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(3.5 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(136 mg, 318 μmol), 3-클로로-1H-인다졸(48.6 mg, 318 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(67.3 mg, 700 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(16.3 mg, 31.8 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 2일 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(3-클로로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 수득하였다.

단계 2

2-(3-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(3-클로로-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.1 g, 200 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(3-클로로-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(28 mg, 38%)를 수득하였다.

실시예 336.

2-(5-메틸-피라졸로[3,4-b]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(3.5 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(136 mg, 318 μmol), 5-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘(42.4 mg, 318 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(67.3 mg, 700 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(16.3 mg, 31.8 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 2일 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 30% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 수득하였다.

단계 2

2-(5-메틸-피라졸로[3,4-b]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.1 g, 208 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(5-메틸-피라졸로[3,4-b]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(10 mg, 14%)를 수득하였다.

실시예 337.

2-(5-트라이플루오로메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(3.5 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(200 mg, 468 μmol), 5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(87.1 mg, 468 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(98.9 mg, 1.03 mmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(23.9 mg, 46.8 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 2일 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 30% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(110 mg, 44%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5-트라이플루오로메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(110 mg, 207 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하고, 1시간 동안 교반하였다. 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(5-트라이플루오로메틸-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(6 mg, 7%)를 수득하였다.

실시예 338.

2-(6-메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(6-메톡시-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(3.5 ml) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(200 mg, 468 μmol), 6-메톡시-1H-인다졸(69.3 mg, 468 μmol)의 교반된 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(98.9 mg, 1.03 mmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(23.9 mg, 46.8 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 이어서 밀봉된 튜브에서 125℃로 2일 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 합한 여액을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 30% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(6-메톡시-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(131 mg, 57%)를 수득하였다.

단계 2

2-(6-메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 ml) 중 N-3급-부틸-2-(6-메톡시-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(130 mg, 263 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하고, 1시간 동안 교반하였다. 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 4% 메탄올)로 정제하여, 2-(6-메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(63 mg, 66%)를 수득하였다.

실시예 339.

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(2-다이메틸카바모일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)-3-옥소프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이메틸포름아마이드(2 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 188 μmol), 3-클로로-N,N-다이메틸프로판아마이드(25.6 mg, 188 μmol) 및 세슘 카보네이트(184 mg, 565 μmol)를 초음파에서 150℃로 30분 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 에틸 아세테이트와 물 사이에 배분하고, 물로 3회 세척하고, 건조하고 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 헥산 중 0 내지 100% 에틸 아세테이트)로 정제하여, N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)-3-옥소프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(70 mg, 59%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(2-다이메틸카바모일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(4 ml) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)-3-옥소프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(70 mg, 111 μmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산(1 ml)을 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄의 1/10/60 혼합물(25 ml)을 첨가하였다. 1시간 후 혼합물을 진공에서 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24 g 아날로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0 내지 5% 메탄올)로 정제하여, 2-[5-다이플루오로메톡시-1-(2-다이메틸카바모일-에틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(50 mg, 90%)를 수득하였다.

실시예 340.

2-[1-(4-벤질-모폴린-2-일메틸)-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

2-(1-((4-벤질모폴린-2-일)메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이메틸폼아마이드(1.4 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 188 μmol), 4-벤질-2-(클로로메틸)모폴린(51.0 mg, 226 μmol) 및 세슘 카보네이트(184 mg, 565 μmol)를 초음파에서 100℃에서 45 분 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하고, 유기 상을 합하고, 물로 3 회 세척하였다. 유기 상을 건조하고, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스(Analogix) 컬럼, 헥산 중 0-40% 에틸 아세테이트)로 정제하여 2-(1-((4-벤질모폴린-2-일)메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(67 mg, 49%)를 수득하였다.

단계 2

2-[1-(4-벤질-모폴린-2-일메틸)-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(10 mL) 중 2-(1-((4-벤질모폴린-2-일)메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(40 mg, 55.6 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 15 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하고, 이어서 25mL의 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄을 첨가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-5% 메탄올)로 정제하여 2-[1-(4-벤질-모폴린-2-일메틸)-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(25 mg, 76%)를 수득하였다.

실시예 341.

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-아제티딘-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3급-부틸 3-((3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트

다이메틸폼아마이드(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 188 μmol), 3급-부틸 3-(요오도메틸)아제티딘-1-카복실레이트(56.0 mg, 188 μmol) 및 세슘 카보네이트(184 mg, 565 μmol)를 초음파에서 150℃에서 30 분 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하고, 유기 상을 물로 3 회 세척한 후, 건조하고, 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 0-40% 에틸 아세테이트)로 정제하여 3급-부틸 3-((3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트(108 mg, 82%)를 수득하였다.

단계 2

2-(1-(아제티딘-3-일메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2,2,2-트라이플루오로에탄올(2 mL) 중 3급-부틸 3-((3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트(180 mg, 257 μmol)의 교반 용액을 초음파에서 150℃에서 6 시간 동안 가열한 후, 냉각하고, 농축하고, 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 3

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-((1-메틸아제티딘-3-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

얼음 욕으로 0℃까지 냉각된 메탄올(4 mL) 중 2-(1-(아제티딘-3-일메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(37 mg, 61.7 μmol)의 교반 용액에 수성 폼알데하이드(1 mL, 13.4 mmol)를 첨가하고, 이어서, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(29.4 mg, 139 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반한 후, 농축하고, 크로마토그래피(실리카, 4g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-10% 메탄올)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-((1-메틸아제티딘-3-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(33 mg, 87%)를 수득하였다. MS (M+H)⁺ = 614.

단계 4

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-아제티딘-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-((1-메틸아제티딘-3-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(33 mg, 53.8 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 실온에서 15 시간 동안 교반 후, 혼합물을 진공 중에 농축하고, 이어서 25 mL의 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄 용액을 첨가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-4% 메탄올)로 정제하여 2-[5-다이플루오로메톡시-1-(1-메틸-아제티딘-3-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(18 mg, 69%)를 수득하였다.

실시예 342.

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(4-메틸-모폴린-2-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(모폴린-2-일메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

에틸 아세테이트(2 mL) 및 메탄올(1 mL) 중 2-(1-((4-벤질모폴린-2-일)메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(실시예 340, 130 mg, 181 μmol)의 교반 용액에 탄소 상의 팔라듐(19.2 mg)을 첨가하고, 혼합물을 수소 기체가 충전된 풍선을 사용하여 수소화시켰다. 실온에서 15 시간 동안 교반 후, 혼합물을 파르(Parr) 수소화기로 옮기고, 40 psi 하에 1 시간 동안 진탕하였다. 혼합물을 여과하고, 진공 중에 농축하고, 이어서 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 0-100% 에틸 아세테이트, 및 이어서 에틸 아세테이트 중 5% 메탄올)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(모폴린-2-일메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.10 g 88%)를 수득하였다. MS (M+H)⁺ = 630.

단계 2

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-((4-메틸모폴린-2-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

얼음 욕으로 0℃까지 냉각된 메탄올(4 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(모폴린-2-일메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 159 μmol)의 교반 용액에 수성 폼알데하이드(1 mL, 13.4 mmol)를 첨가하고, 이어서, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(75.7 mg, 357 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반한 후, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 4g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-10% 메탄올)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-((4-메틸모폴린-2-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(63 mg, 62%)를 수득하였다. MS (M+H)⁺ = 644.

단계 3

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(4-메틸-모폴린-2-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-((4-메틸모폴린-2-일)메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(63 mg, 97.9 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 실온에서 15 시간 동안 교반한 후, 혼합물을 진공 중에 농축하고, 이어서 25mL 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄을 첨가하였다. 1 시간 후 혼합물을 농축하고, 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-4% 메탄올)로 정제하여 2-[5-다이플루오로메톡시-1-(4-메틸-모폴린-2-일메틸)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(22 mg, 43%)를 수득하였다.

실시예 343.

2-{5-다이플루오로메톡시-1-[3-(3,3-다이플루오로-피롤리딘-1-일)-프로필]-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(3,3-다이플루오로피롤리딘-1-일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이메틸폼아마이드(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 188 μmol), 1-(3-클로로프로필)-3,3-다이플루오로피롤리딘(34.6 mg, 188 μmol) 및 세슘 카보네이트(184 mg, 565 μmol)를 초음파에서 100℃에서 30 분 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 상을 물로 3 회 세척한 후, 건조하고, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 0-40% 에틸 아세테이트)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(3,3-다이플루오로피롤리딘-1-일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(91 mg, 72%)를 수득하였다. MS (M+H)⁺ = 678.

단계 2

2-{5-다이플루오로메톡시-1-[3-(3,3-다이플루오로-피롤리딘-1-일)-프로필]-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(3,3-다이플루오로피롤리딘-1-일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(91.4 mg, 135 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 15 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 25mL의 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄을 첨가하고, 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반한 후, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-4% 메탄올)로 정제하여 2-{5-다이플루오로메톡시-1-[3-(3,3-다이플루오로-피롤리딘-1-일)-프로필]-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(32 mg, 43%)를 수득하였다.

실시예 344.

2-(3-메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(3-메톡시-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(2 mL) 중 2-브로모-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(150 mg, 338 μmol), 3-메톡시-1H-인다졸(50.1 mg, 338 μmol)의 교반 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(71.5 mg, 744 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(17.3 mg, 33.8 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기한 후, 밀봉된 관에서 125℃에서 15 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여액을 진공 중에 농축하고, 조질 잔사를 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 0-40% 에틸 아세테이트)로 정제하여 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(3-메톡시-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(138 mg, 80%)를 수득하였다.

단계 2

2-(3-메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

다이클로로메탄(3 mL) 중 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(3-메톡시-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(101 mg, 198 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 15 시간 후 혼합물을 진공 중에 농축하고, 이어서 25 mL의 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄 용액을 첨가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-5% 메탄올)로 정제하여 2-(3-메톡시-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(45 mg, 60%)를 수득하였다.

실시예 345.

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(3-메틸아미노-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3급-부틸 3-(3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)프로필(메틸)카바메이트

다이메틸폼아마이드(4 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(280 mg, 528 μmol), 3급-부틸 3-클로로프로필(메틸)카바메이트(110 mg, 528 μmol) 및 세슘 카보네이트(516 mg, 1.58 mmol)를 초음파에서 100℃에서 30 분 동안 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하고, 이어서 유기 상을 물로 3 회 세척하고, 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 잔사를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS (M+H)⁺ = 702.

단계 2

2-[5-다이플루오로메톡시-1-(3-메틸아미노-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(3 mL) 중 3급-부틸 3-(3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)프로필(메틸)카바메이트(0.1 g, 142 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 15 시간 후 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 25 mL의 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄을 첨가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-5% 메탄올)로 정제하여 2-[5-다이플루오로메톡시-1-(3-메틸아미노-프로필)-1H-인다졸-3-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(53 mg, 78%)를 수득하였다.

실시예 346.

2-{1-[3-(아세틸-메틸-아미노)-프로필]-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(N-메틸아세트아미도)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이메틸폼아마이드(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(83 mg, 138 μmol) 및 세슘 카보네이트(135 mg, 414 μmol)의 교반 용액에 아세틸 클로라이드(10.8 mg, 138 μmol)를 첨가하고, 혼합물을 90℃까지 가온하였다. 2 시간 후, 혼합물을 냉각하고, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 12g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-5% 메탄올)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(N-메틸아세트아미도)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(72 mg, 81%)를 수득하였다. MS (M+H)⁺ = 644.

단계 2

2-{1-[3-(아세틸-메틸-아미노)-프로필]-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(N-메틸아세트아미도)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(72 mg, 112 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 15 시간 후 혼합물을 진공 중에 농축하고, 이어서 25mL의 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄을 첨가하였다. 1 시간 후 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-5% 메탄올)로 정제하여 2-{1-[3-(아세틸-메틸-아미노)-프로필]-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일}-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(32 mg, 56%)를 수득하였다.

실시예 347.

2-(3-피페리딘-4-일-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

3급-부틸 4-(1-(7-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1H-인다졸-3-일)피페리딘-1-카복실레이트

다이옥산(2.5 mL) 중 2-브로모-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(150 mg, 338 μmol), 3급-부틸 4-(1H-인다졸-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(102 mg, 338 μmol)의 교반 용액에 나트륨 3급-부톡사이드(71.5 mg, 744 μmol) 및 비스(트라이-3급-부틸포스핀)팔라듐(0)(17.3 mg, 33.8 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기한 후, 밀봉된 관에서 125℃에서 15 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여액을 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 0-40% 에틸 아세테이트)로 정제하여 3급-부틸 4-(1-(7-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1H-인다졸-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(198 mg, 88%)를 수득하였다.

단계 2

2-(3-피페리딘-4-일-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 3급-부틸 4-(1-(7-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1H-인다졸-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(22 mg, 33.1 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(0.5 mL)을 첨가하였다. 15 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하고, 이어서 25 mL의 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄을 첨가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-5% 메탄올)로 정제하여 2-(3-피페리딘-4-일-인다졸-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(14 mg, 98%)를 수득하였다.

실시예 348.

2-[3-(1-메틸-피페리딘-4-일)-인다졸-1-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(3-(피페리딘-4-일)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2,2,2-트라이플루오로에탄올(2 mL) 중 3급-부틸 4-(1-(7-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1H-인다졸-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(120 mg, 181 μmol)의 교반 용액을 초음파에서 150℃에서 4 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 진공 중에 농축하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 2

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(3-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

얼음 욕에 의해 0℃까지 냉각된 메탄올(4 mL) 중 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(3-(피페리딘-4-일)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 177 μmol)의 교반 용액에 37% 수성 폼알데하이드(1 mL, 13.4 mmol)를 첨가하고, 이어서, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(84.6 mg, 399 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반한 후, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 4g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-6% 메탄올)로 정제하여 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(3-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(57 mg, 56%)를 수득하였다. MS (M+H)⁺ = 578.

단계 3

2-[3-(1-메틸-피페리딘-4-일)-인다졸-1-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

다이클로로메탄(3 mL) 중 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(3-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-인다졸-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(57 mg, 98.7 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 15 시간 후 혼합물을 진공 중에 농축하고, 이어서 25mL의 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄을 첨가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-6% 메탄올)로 정제하여 2-[3-(1-메틸-피페리딘-4-일)-인다졸-1-일]-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(10 mg, 23%)를 수득하였다.

실시예 349.

2-(1-아제티딘-3-일메틸-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸 아마이드 트라이플루오로아세테이트

단계 1

3급-부틸 3-((6-플루오로-3-(7-폼일-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트

다이메틸폼아마이드(4 mL) 중 2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(225 mg, 547 μmol), 3급-부틸 3-(요오도메틸)아제티딘-1-카복실레이트(162 mg, 547 μmol) 및 세슘 카보네이트(534 mg, 1.64 mmol)를 초음파에서 150℃에서 30 분 동안 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 이어서, 유기 상을 물로 3 회 세척하고, 건조하고, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 0-40% 에틸 아세테이트)로 정제하여 3급-부틸 3-((6-플루오로-3-(7-폼일-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트(202 mg, 64%)를 수득하였다.

단계 2

2-(1-((1-(3급-부톡시카보닐)아제티딘-3-일)메틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

0℃까지 냉각된 다이옥산(5 mL) 및 물(2 mL) 중 3급-부틸 3-((6-플루오로-3-(7-폼일-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트(160 mg, 276 μmol) 및 설팜산(161 mg, 1.65 mmol)의 교반 용액에 물(3 mL) 중 나트륨 클로라이트(32.4 mg, 358 μmol) 및 칼륨 이수소 포스페이트(450 mg, 3.31 mmol)의 용액을 적가하였다. 혼합물을 실온까지 가온하였다. 2.5 시간 후, 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하고, 유기 상을 분리하고, 물로 세척한 후, 건조하고, 진공 중에 농축하였다. 정량적인 수율을 추정하고, 조질 잔사를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

단계 3

3급-부틸 3-((3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-6-플루오로-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트

다이메틸폼아마이드(12 mL) 중 2-(1-((1-(3급-부톡시카보닐)아제티딘-3-일)메틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(150 mg, 251 μmol), 2-메틸프로판-2-아민(18.4 mg, 251 μmol), HATU(105 mg, 277 μmol) 및 다이아이소프로필아민(97.5 mg, 754 μmol)을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배한 후, 유기 상을 물로 세척한 후, 건조하고, 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 0-40% 에틸 아세테이트)로 정제하여 3급-부틸 3-((3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-6-플루오로-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트(150 mg, 91.5%)를 수득하였다.

단계 4

2-(1-아제티딘-3-일메틸-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸 아마이드 트라이플루오로아세테이트

다이클로로메탄(5 mL) 중 3급-부틸 3-((3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-6-플루오로-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트(70 mg, 107 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 15 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하고, 잔사를 25mL의 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄에 용해시켰다. 1 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-6% 메탄올) 및 이어서 SFC 크로마토그래피(용리제는 TFA를 함유하였음)로 정제하여 2-(1-아제티딘-3-일메틸-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸 아마이드 트라이플루오로아세테이트(10 mg, 17%)를 수득하였다.

실시예 350.

2-(1-아제티딘-3-일메틸-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

3급-부틸 3-((3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트

다이메틸폼아마이드(3 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(152 mg, 286 μmol), 3급-부틸 3-(요오도메틸)아제티딘-1-카복실레이트(85.1 mg, 286 μmol) 및 세슘 카보네이트(280 mg, 859 μmol)를 초음파에서 150℃에서 30 분 동안 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하고, 물로 세척하고, 건조하고, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 0-40% 에틸 아세테이트)로 정제하여 3급-부틸 3-((3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트를 수득하고, 정제 없이 직접 사용하였다. MS (M+H)⁺ = 702.

단계 2

2-(1-아제티딘-3-일메틸-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 3급-부틸 3-((3-(7-(3급-부틸카바모일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트(80 mg, 114 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 15 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하고, 잔사를 25 mL의 1/10/60 혼합물인 암모늄 하이드록사이드/메탄올/다이클로로메탄에 용해시켰다. 1 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 24g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 10% 암모늄 하이드록사이드를 함유하는 0-4% 메탄올)로 정제하여 2-(1-아제티딘-3-일메틸-5-다이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(22 mg, 41%)를 수득하였다.

실시예 351.

N-3급-부틸-2-(1-(사이클로프로필메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

Ar 하의 DMF(60 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(117.1 mg, 221 μmol) 및 (브로모메틸)사이클로프로판(386 mg, 250 μL, 2.86 mmol)의 교반 용액에 세슘 카보네이트(750 mg, 2.3 mmol)를 단일 분획으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 교반하였다. 18 시간 후, 반응을 25℃까지 냉각하고, 물(200 mL)로 켄칭하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 75 mL)로 추출하고, 유기 물질을 식염수(100 mL)로 세척하였다. 유기 물질을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 농축하여 N-3급-부틸-2-(1-(사이클로프로필메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 205 μmol, 86%)를 수득하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(1-(사이클로프로필메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

Ar 하의 다이클로로메탄(10 mL) 중 N-3급-부틸-2-(1-(사이클로프로필메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(140 mg, 239 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(744 mg, 0.50 mL, 6.53 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 18 시간 후, 반응물을 진공 중에 농축하여 연갈색 잔사를 수득하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올/NH₃OH(3:2:0.25, 10.5 mL)의 혼합물에 용해시키고, 25℃에서 교반하였다. 2.5 시간 후, 반응물을 농축하여 황색 고체를 수득하고, 진공 중에 건조하였다(200 mTorr, 25℃). 고체를 에탄올(4.5 mL, 200 프루프)에 용해시키고, 4℃까지 냉각하였다. 18 시간 후, 침전된 고체를 여과에 의해 단리하고, 진공 중에 건조하여(200 mTorr, 40℃) N-3급-부틸-2-(1-(사이클로프로필메틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(72.8 mg, 160 μmol, 66.9%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 352.

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-옥소-2-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페라진-1-일)에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-클로로-1-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페라진-1-일)에탄온

0℃까지 냉각된 다이클로로메탄(5 mL) 중 1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페라진 다이하이드로클로라이드(181.6 mg, 753 μmol) 및 트라이에틸아민(182 mg, 250 μL, 1.79 mmol)의 교반 용액에 2-클로로아세틸 클로라이드(85.1 mg, 60.0 μL, 753 μmol)를 2 분에 걸쳐 적가한 후, 10 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 3 시간에 걸쳐 25℃까지 가온하였다. 반응 혼합물을 포화 나트륨 바이카보네이트 용액(25 mL)과 다이클로로메탄(25 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 물(25 mL) 및 식염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 농축하여 2-클로로-1-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페라진-1-일)에탄온(123.3 mg, 504 μmol, 67%)을 주황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-옥소-2-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페라진-1-일)에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

Ar 하의 DMF(16 mL) 중 2-클로로-1-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페라진-1-일)에탄온(115 mg, 471 μmol)의 교반 용액에 칼륨 카보네이트(200 mg, 1.45 mmol)를 25℃에서 단일 분획으로 첨가하였다. 1 시간 후, DMF(4.00 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(50 mg, 94.2 μmol)의 용액을 단일 분획으로 첨가하고, 반응물을 60℃에서 교반하였다. 18 시간 후, 반응을 25℃까지 냉각하고, 물(400 mL)로 켄칭하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 150 mL)로 추출하고, 유기 물질을 식염수(200 mL)로 세척하였다. 유기 물질을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 농축하여 황색 오일을 수득하였다. 오일을 진공 중에 건조하고(300 mTorr, 25℃), 크로마토그래피(실리카, 12g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 5-80% 에틸 아세테이트, 1 시간에 걸친 구배)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-옥소-2-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페라진-1-일)에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(69.0 mg, 93.3 μmol, 99%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-옥소-2-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페라진-1-일)에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

Ar 하의 다이클로로메탄(5 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-옥소-2-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페라진-1-일)에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(75.9 mg, 103 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(744 mg, 0.50 mL, 6.52 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 96 시간 후, 반응물을 진공 중에 농축하고, 다이클로로메탄/메탄올/NH₃OH(3:2:0.25, 5.25 mL)의 혼합물 중에서 25℃에서 교반하였다. 2.5 시간 후, 물질을 농축하고, 진공 중에 건조하여(200 mTorr, 25℃) 황색 고체를 수득하였다. 고체를 크로마토그래피(실리카, 12g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 10-100% 에틸 아세테이트, 1 시간에 걸쳐 구배)로 정제하여 황색 오일을 수득하였다. 오일을 에탄올(4.5 mL, 200 프루프)에 용해시키고, 4℃까지 냉각하였다. 침전된 고체를 여과에 의해 단리하고, 진공 중에 건조하여(100 mTorr, 40℃) N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-옥소-2-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페라진-1-일)에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(36.2 mg, 54.1 μmol, 53%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 353.

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(4-메틸피페라진-1-일)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(4-메틸피페라진-1-일)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

Ar 하의 DMF(32.0 mL) 중 2-클로로-1-(4-메틸피페라진-1-일)에탄온(138.2 mg, 782 μmol)의 교반 용액에 칼륨 카보네이트(328.5 mg, 2.38 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 1 시간 후, DMF(8.00 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(80 mg, 151 μmol)를 첨가하고, 반응물을 70℃에서 교반하였다. 18 시간 후, 반응을 25℃까지 냉각하고, 물(350 mL)로 켄칭하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(2 x 250 mL)로 추출하였다. 유기 물질을 합하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 용매를 제거하여 황색 오일을 수득하였다. 고체를 진공 중에 건조하여(200 mTorr, 25℃) 황색 고체를 수득하였다. 고체를 크로마토그래피(실리카, 115g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 3-10% 에틸 아세테이트, 0.5 시간에 걸친 구배)로 정제하여 황색 오일을 수득하였다. 생성물을 농축하여 황색 오일을 수득하고, 진공 중에 건조하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(4-메틸피페라진-1-일)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(41.7 mg, 62.2 μmol, 41.2%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(4-메틸피페라진-1-일)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

Ar 하의 다이클로로메탄(3 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(4-메틸피페라진-1-일)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(41.7 mg, 62.2 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(208 mg, 0.140 mL, 1.83 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 18 시간 후, 반응물을 진공 중에 농축하여 황색 잔사를 수득하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올/NH₃OH(3:2:0.25, 5.25 mL)의 혼합물에 용해시키고, 25℃에서 교반하였다. 2.5 시간 후, 물질을 농축하고, 진공 중에 건조하여(200 mTorr, 40℃) N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(4-메틸피페라진-1-일)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(22.4 mg, 41.4 μmol, 67%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 354.

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(메틸아미노)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(메틸아미노)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

Ar 하의 DMF(28.0 mL) 중 2-클로로-N-메틸아세트아마이드(80 mg, 744 μmol)의 교반 용액에 칼륨 카보네이트(280 mg, 2.03 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 1 시간 후, DMF(7.00 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(70 mg, 132 μmol)를 첨가하고, 반응물을 70℃에서 교반하였다. 6 시간 후, 반응물을 25℃까지 냉각하고, 물(350 mL)로 켄칭하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(2 x 250 mL)로 추출하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 용매를 진공 중에 제거하여 상아색 고체를 수득하였다. 고체를 헥산(20 mL)에서 마쇄하고, 여과하고, 진공 중에 건조하여(200 mTorr, 25℃) N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(메틸아미노)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(62.2 mg, 103 μmol, 78%)를 연갈색 고체로서 수득하였다. MS (M)⁺ = 602;

단계 2

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(메틸아미노)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

Ar 하의 다이클로로메탄(3.00 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(메틸아미노)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(69.0 mg, 115 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(372 mg, 0.25 mL, 3.26 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 18 시간 후, 용매를 제거하고, 잔사를 다이클로로메탄/메탄올/NH₃OH(3:2:0.25, 5.25 mL)의 혼합물에 용해시키고, 교반하였다. 2.5 시간 후, 반응물을 농축하고, 진공 중에 건조하였다(200 mTorr, 25℃). 고체 잔사를 물(50 mL)로 마쇄하고, 여과에 의해 단리하였다. 고체를 물 및 헥산으로 세척하고, 진공 중에 건조하여(200 mTorr, 40℃) N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(메틸아미노)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(45.6 mg, 91.9 μmol, 80%)를 연갈색 고체로서 수득하였다.

실시예 355.

N-3급-부틸-2-(7-에틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

7-에틸-1H-인다졸

질소로 플러슁된 에탄올(16.0 mL) 중 5-브로모-7-에틸-1H-인다졸(900 mg, 4.00 mmol)의 용액에 탄소 상의 팔라듐(128 mg, 1.2 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 H₂ 하에 1 atm에서 교반하였다. 70 시간 후, 반응물을 셀라이트의 패드 상에서 여과하였다. 여액을 수집하고, 농축하였다. 잔사를 에탄올에 용해시키고, 80 mg의 탄소 상의 팔라듐을 첨가하고, H₂ 하에 1 atm에서 교반하였다. 3 시간 후, 추가로 80 mg의 탄소 상의 팔라듐을 첨가하고, H₂ 하에 1 atm에서 교반하였다. 16 시간 후, 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하였다. 여액을 수집하고, 농축하였다. 수득한 황색 고체를 에터로 마쇄하고, 여과하고, 진공 하에 건조하여 7-에틸-1H-인다졸(771 mg, 5.27 mmol, 119%)을 회백색 고체로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 직접 사용하였다.

단계 2

7-에틸-3-요오도-1H-인다졸

물(4.65 mL) 및 에탄올(9.3 mL) 중 나트륨 바이카보네이트(1.67 g, 19.8 mmol)의 교반 용액에 7-에틸-1H-인다졸(771 mg, 5.27 mmol) 및 이어서 요오드(1.87 g, 7.38 mmol)를 첨가하였다. 16 시간 후, 반응 혼합물을 나트륨 티오설페이트로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하였다. 유기 층을 수집하고, 건조하였다(MgSO₄). 크로마토그래피(실리카, 5-25% 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 7-에틸-3-요오도-1H-인다졸(690 mg, 2.54 mmol, 48%)을 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

N-3급-부틸-2-(7-에틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(2.5 mL) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(320 mg, 749 μmol) 및 7-에틸-3-요오도-1H-인다졸(244 mg, 898 μmol)의 교반 용액에 1,1,1,2,2,2-헥사부틸다이스탄난(651 mg, 412 μL, 1.12 mmol)을 N₂ 하에 첨가하였다. 10 분 후, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(43.3 mg, 37.4 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 115℃까지 가열하였다. 16 시간 후, 반응물을 냉각하고, 농축하였다. 잔사를 10% 메탄올/다이클로로메탄으로 희석하고, 셀라이트의 패드를 통해 여과하였다. 여액을 크로마토그래피(실리카, 5-45% 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(7-에틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(45 mg, 91.3 μmol, 12%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

N-3급-부틸-2-(7-에틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(913 μL) 중 N-3급-부틸-2-(7-에틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2 (트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(45 mg, 91.3 μmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(417 mg, 281 μL, 3.65 mmol)을 첨가하고, 실온에서 교반하였다. 16 시간 후, 반응 혼합물을 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(913 μL)에 용해시키고, 에틸렌다이아민(329 mg, 370 μL, 5.48 mmol)을 첨가하고, 실온에서 교반하였다. 1 시간 후, 반응물을 10% 메탄올/다이클로로메탄으로 희석하였다. 크로마토그래피(실리카, MeOH/DCM 구배)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(7-에틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(16 mg, 44.1 μmol, 48%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 356.

N-3급-부틸-2-(6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-((5-클로로피리딘-2-일)메틸)폼아마이드

폼산(5.09 g, 4.24 mL, 106 mmol) 중 (5-클로로피리딘-2-일)메탄아민 하이드로클로라이드(1.0 g, 5.31 mmol)의 용액을 110℃에서 환류하였다. 20 시간 후, 반응물을 0℃까지 냉각하고, 물 중 25% 암모늄 하이드록사이드를 pH가 약 9에 도달할 때까지 첨가하였다. 혼합물을 물로 희석한 후, 다이클로로메탄(3x)으로 희석하였다. 유기 층을 합하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

단계 2

6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘

톨루엔(18.4 mL) 중 N-((5-클로로피리딘-2-일)메틸)폼아마이드(740 mg, 4.34 mmol)의 혼합물에 인 옥시클로라이드(1.21 g, 736 μL, 7.89 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 100℃까지 가열하였다. 16 시간 후, 얼음을 반응 혼합물에 첨가하고, 이어서, 25% 수성 암모늄 하이드록사이드를 pH가 약 9에 도달할 때까지 천천히 첨가하였다. 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고, 다이클로로메탄(2x)으로 추출하였다. 유기 층을 물 및 식염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하였다. 여액을 크로마토그래피(실리카, MeOH/DCM 구배)로 정제하여 6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘(417 mg, 2.73 mmol, 63.0%)을 갈색 오일로서 수득하였다.

단계 3

6-클로로-1-요오도이미다조[1,5-a]피리딘

EtOH(5 mL) 및 물(2.4 mL) 중 6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘(417 mg, 2.73 mmol)의 용액에 나트륨 바이카보네이트(861 mg, 10.2 mmol) 및 요오드(832 mg, 3.28 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 N₂ 하에 교반하였다. 16 시간 후, 반응 혼합물을 나트륨 티오설페이트로 켄칭하고, 이어서, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 물 및 식염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 농축하였다. 여액을 크로마토그래피(실리카, 20-60% 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 6-클로로-1-요오도이미다조[1,5-a]피리딘(271 mg, 973 μmol, 36%)을 갈색 고체로서 수득하였다.

단계 4

N-3급-부틸-2-(6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(2 mL) 중 6-클로로-1-요오도이미다조[1,5-a]피리딘(263 mg, 943 μmol) 및 2-브로모-N-3급-부틸-5-(2-(트라이메틸실릴)에톡시)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(300 mg, 726 μmol)의 교반 용액에 1,1,1,2,2,2-헥사부틸다이스탄난(631 mg, 400 μL, 1.09 mmol) 및 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(41.9 mg, 36.3 μmol)을 N₂ 하에 첨가하였다. 온도를 120℃까지 증가시켰다. 16 시간 후, 반응물을 냉각하고, 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄에 용해시킨 후, 크로마토그래피(실리카, 30-70% 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(50 mg, 100 μmol, 13.8% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.

단계 5

N-3급-부틸-2-(6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(1.5 mL) 중 N-3급-부틸-2-(6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(50 mg, 100 μmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(228 mg, 154 μL, 2.00 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 교반하였다. 16 시간 후, 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄(2 mL), 메탄올(1 mL) 및 암모늄 하이드록사이드(0.22 mL)에 용해시키고, 실온에서 교반하였다. 2 시간 후, 반응물을 진공 중에 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 다이클로로메탄 중 30-100%의 0.5:10:89.5 암모늄 하이드록사이드:메탄올:다이클로로메탄 용액)로 정제하였다. 수거한 물질을 농축하고, 메탄올로 마쇄하고, 여과하여 N-3급-부틸-2-(6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(12 mg, 29.6 μmol, 30%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 357.

N-3급-부틸-2-(6-플루오로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

6-플루오로-1-요오도이미다조[1,5-a]피리딘

물(3.66 mL) 중 나트륨 바이카보네이트(1.3 g, 15.4 mmol)의 용액에 EtOH(7.31 mL) 중 6-플루오로이미다조[1,5-a]피리딘(실시예 32, 560 mg, 4.11 mmol) 및 이어서 요오드(1.46 g, 5.76 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 16 시간 후, 추가로 800 mg의 요오드를 첨가하였다. 추가로 16 시간 후, 반응 혼합물을 나트륨 티오설페이트로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기 상을 물 및 식염수로 세척한 후, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하였다. 생성물은 소량의 불순물을 함유하였고, 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2

6-플루오로-1-(트라이부틸스탄일)이미다조[1,5-a]피리딘

THF(4.64 mL) 중 6-플루오로-1-요오도이미다조[1,5-a]피리딘(158 mg, 603 μmol)의 -16℃ 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(368 μL, 736 μmol)를 적가하였다. 20 분 후, 트라이부틸클로로스탄난(232 mg, 193 μL, 712 μmol)을 -16℃에서 적가하고, 실온까지 가온하였다. 2 시간 후, 반응물을 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 상을 분리하고, 유기 상을 식염수로 세척하였다. 유기 층을 수거하고, 진공 중에 농축하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 3

N-3급-부틸-2-(6-플루오로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(250 mg, 585 μmol), 6-플루오로-1-(트라이부틸스탄일)이미다조[1,5-a]피리딘(400 mg, 564 μmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(33.8 mg, 29.2 μmol) 및 구리(I) 요오다이드(22.3 mg, 117 μmol)의 혼합물에 DMF(5.85 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 N₂ 하에 90℃까지 가열하였다. 16 시간 후, 반응물을 에터, 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 유기 상을 분리하고, 물(1x) 및 식염수(2x)로 세척한 후, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 30-80% 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(6-플루오로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(88 mg, 182 μmol, 31.2%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

N-3급-부틸-2-(6-플루오로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(3 mL) 중 N-3급-부틸-2-(6-플루오로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(95 mg, 197 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(449 mg, 303 μL, 3.94 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 16 시간 후, 반응물을 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 mL), 메탄올(1.5 mL) 및 암모늄 하이드록사이드(0.45 mL)에 용해시켰다. 1 시간 후, 반응물을 농축하였다. 잔사를 물로 마쇄하고, 여과하였다. 고체를 물 및 에터로 세척한 후, 진공 하에 건조하여 N-3급-부틸-2-(6-플루오로이미다조[1,5-a]피리딘-1-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(64 mg, 182 μmol, 92%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 358.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드

단계 1

[(S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-카밤산 3급-부틸 에스터

물(4 mL) 중 나트륨 아세테이트(1.44 g, 17.6 mmol)의 교반 용액에 3,3-다이브로모-1,1,1-트라이플루오로프로판-2-온(2.37 g, 8.8 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 90℃에서 질소 하에 30 분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 0℃까지 냉각하고, 메탄올(20 mL) 및 암모늄 하이드록사이드(6 mL) 중 (R)-3급-부틸 1-옥소프로판-2-일카바메이트(1.39 g, 8 mmol)를 첨가하였다. 3 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하고, 물로 마쇄하고, 고체를 여과에 의해 수득하였다. 조질 물질을 크로마토그래피(실리카, 40g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 0-50% 에틸 아세테이트, 30 분에 걸친 구배)로 정제하여 [(S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-카밤산 3급-부틸 에스터(510 mg, 23%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS, [M+H] = 280.

단계 2

(S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸아민 하이드로클로라이드

다이옥산(2 mL) 중 4 M HCl 중 [(S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-카밤산 3급-부틸 에스터(50 mg, 179 μmol)의 용액을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 중에 농축하고, 이어서 에터로 마쇄하여 (S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸아민 하이드로클로라이드(35 mg, 정량적임)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS, [M+H] = 180.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

얼음 욕 중에서 다이옥산(25 mL) 및 물(0.556 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카브알데하이드(500 mg, 1.18 mmol) 및 설팜산(685 mg, 7.05 mmol)의 교반 현탁액에 물(2.78 mL) 중 나트륨 클로라이트(146 mg, 1.61 mmol) 및 칼륨 이수소 포스페이트(1.92 g, 14.1 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 유기 층을 분리하고, 식염수로 세척한 후, 건조하고(나트륨 설페이트), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 조질 잔사를 에틸 아세테이트 및 헥산으로부터 재결정화시켜 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(467 mg, 89%)을 연황색 고체로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. LC-MS, [M+H] = 442.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드

DMF(2 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(40 mg, 90.6 μmol), (S)-1-(5-(트라이플루오로메틸)-1H-이미다졸-2-일)에탄아민 하이드로클로라이드(32.5 mg, 151 μmol), 다이아이소프로필에틸아민(63.3 μL, 362 μmol)의 교반 용액에 o-(벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)우로늄 헥사플루오로포스페이트(43.0 mg, 99.7 μmol)를 첨가하였다. 15 시간 후, 반응 혼합물을 다이클로로메탄, 물로 희석하였다. 유기 층을 포화 나트륨 카보네이트 및 식염수로 세척한 후, 건조하고(나트륨 설페이트), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 12g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 50-70% 에틸 아세테이트, 30 분에 걸친 구배)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드(34 mg, 62%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS, [M+H] = 603.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드

다이클로로메탄(0.5 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드(34 mg, 56.4 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(174 μL, 2.26 mmol)을 20℃에서 교반하였다. 3 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고, 다시 농축하였다. 이어서, 잔사를 다이클로로메탄(1 mL) 및 에틸렌다이아민(229 μL, 3.39 mmol)으로 현탁하고, 첨가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 유기 층을 식염수로 세척한 후, 건조하고(나트륨 설페이트), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 12g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 0-10% 메탄올, 30 분에 걸친 구배)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 [(S)-1-(5-트라이플루오로메틸-1H-이미다졸-2-일)-에틸]-아마이드(16 mg, 60%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 359.

2-((S)-1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실]-아미노}-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터

단계 1

2-((S)-1-3급-부톡시카보닐아미노-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터

메탄올(6 mL) 중 (S)-3급-부틸 1-(5-(트라이플루오로메틸)-1H-이미다졸-2-일)에틸카바메이트(200 mg, 716 μmol)의 교반 용액에 나트륨 메톡사이드(77.4 mg, 1.43 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 초음파에서 100℃에서 60 분 동안 가열하였다. 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시킨 후, 포화 수성 나트륨 카보네이트, 식염수로 세척하고, 이어서 건조하고(나트륨 설페이트), 여과하고, 진공 중에 농축하여 2-((S)-1-3급-부톡시카보닐아미노-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터(154 mg, 80%)를 황색 고체로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. LC-MS, [M+H] = 270.

단계 2

2-((S)-1-아미노-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터 하이드로클로라이드

다이옥산(2 mL) 중 4 M HCl 중 2-((S)-1-3급-부톡시카보닐아미노-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터 하이드로클로라이드(50 mg, 186 μmol)의 용액을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 중에 농축하고, 에터로 세척하여 2-((S)-1-아미노-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터 하이드로클로라이드(40 mg, 정량적임)를 황색 오일로서 수득하였다, LC-MS, [M+H] = 170.

단계 3

2-((S)-1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실]-아미노}-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터

DMF(2.5 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(50 mg, 113 μmol), (S)-메틸 2-(1-아미노에틸)-1H-이미다졸-5-카복실레이트 하이드로클로라이드(38.3 mg, 186 μmol) 및 다이아이소프로필에틸아민(79.1 μL, 453 μmol)의 교반 용액에 o-(벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)우로늄 헥사플루오로포스페이트(58.6 mg, 136 μmol)를 첨가하였다. 15 시간 후, 반응 혼합물을 다이클로로메탄, 물로 희석하였다. 유기 층을 포화 나트륨 카보네이트 및 식염수로 세척한 후, 건조하고(나트륨 설페이트), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 12g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 50-70% 에틸 아세테이트, 30 분에 걸친 구배)로 정제하여 2-((S)-1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실]-아미노}-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터(35 mg, 52.1%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS, [M+H] = 693.

단계 4

2-((S)-1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실]-아미노}-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터

다이클로로메탄(0.5 mL) 중 2-((S)-1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실]-아미노}-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터(32 mg, 54.0 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(249 μL, 3.24 mmol)을 20℃에서 첨가하였다. 15 시간 후, 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고, 다시 농축하였다. 이어서, 잔사를 다이클로로메탄(1 mL)에 현탁하고, 에틸렌다이아민(219 μL, 3.24 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 유기 층을 식염수로 세척한 후, 건조하고(나트륨 설페이트), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 12g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 0-3% 메탄올, 30 분에 걸친 구배)로 정제하여 2-((S)-1-{[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실]-아미노}-에틸)-3H-이미다졸-4-카복실산 메틸 에스터(18 mg, 72%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 360.

(3-에티닐-아제티딘-1-일)-[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일]-메탄온

단계 1

3-에티닐-아제티딘 하이드로클로라이드

다이옥산(2 mL) 중 4 M HCl 중 3급-부틸 3-에티닐아제티딘-1-카복실레이트(54 mg, 298 μmol)의 용액을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 잔사를 에터로 세척한 후, 고 진공에서 건조하여 3-에티닐-아제티딘 하이드로클로라이드(36 mg, 정량적임)를 백색 결정 고체로서 수득하였다.

단계 2

(3-에티닐-아제티딘-1-일)-[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일]-메탄온

DMF(2.5 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(50 mg, 113 μmol), 3-에티닐-아제티딘 하이드로클로라이드(18.4 mg, 154 μmol), 다이아이소프로필에틸아민(79.1 μL, 453 μmol)의 교반 용액에 o-(벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)우로늄 헥사플루오로포스페이트(48.8 mg, 113 μmol)를 첨가하였다. 15 시간 후, 반응 혼합물을 다이클로로메탄, 물로 희석하였다. 유기 층을 포화 나트륨 카보네이트 및 식염수로 세척한 후, 건조하고(나트륨 설페이트), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 12g 어낼로직스 컬럼, 헥산 중 40-70% 에틸 아세테이트, 30 분에 걸친 구배)로 정제하여 (3-에티닐-아제티딘-1-일)-[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일]-메탄온(64 mg, 100%)을 황색 오일로서 수득하였다.

LC-MS, [M+H] = 505.

단계 3

(3-에티닐-아제티딘-1-일)-[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일]-메탄온

다이클로로메탄(0.5 mL) 중 (3-에티닐-아제티딘-1-일)-[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일]-메탄온(61 mg, 121 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(373 μL, 4.84 mmol)을 20℃에서 첨가하였다. 3 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고, 다시 농축하였다. 이어서, 잔사를 다이클로로메탄(1 mL)에 현탁하고, 에틸렌다이아민(490 μL, 7.24 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 유기 층을 식염수로 세척한 후, 건조하고(나트륨 설페이트), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(실리카, 12g 어낼로직스 컬럼, 다이클로로메탄 중 0-5% 메탄올, 30 분에 걸친 구배)로 정제하여 (3-에티닐-아제티딘-1-일)-[2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-일]-메탄온(25 mg, 55%)을 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 361.

N-3급-부틸-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 메톡시-아마이드

DMF(2 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(50 mg, 113 μmol) 및 O-메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(11.3 mg, 136 μmol) 및 다이아이소프로필에틸아민(79 μL, 453 μmol)의 교반 현탁액에 o-(벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)우로늄 헥사플루오로포스페이트(58.6 mg, 136 μmol)를 20℃에서 밤새 첨가하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 1 N HCl 용액으로 세척하였다. 이어서, 유기 층을 포화 나트륨 바이카보네이트 및 식염수로 세척한 후, 건조하고(나트륨 설페이트), 여과하고, 진공 중에 농축하여 조질 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 메톡시-아마이드(53 mg)를 백색 고체로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. MS (M+H)⁺ = 471.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 메톡시-아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 메톡시-아마이드(53 mg, 113 μmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(0.4 mL, 5.19 mmol)을 20℃에서 첨가하였다. 2 시간 후, 혼합물을 진공 중에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 희석하고, 다시 농축하였다. 이어서, 잔사를 다이클로로메탄(2 mL)에 현탁하고, 에틸렌다이아민(0.4 mL, 5.92 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 교반한 후, 진공 중에 농축하였다. 에틸 아세테이트 및 물을 잔사에 첨가하였다. 이어서, 유기 층을 식염수로 세척한 후, 건조하고(나트륨 설페이트), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 25 g의 미리 패킹된 실리사이클(SiliCycle) 카트리지, 15 분에 걸쳐 증가하는 헥산 중 40-80% EtOAc)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 메톡시-아마이드(45 mg, 0.39 μmol, 39%)를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 362.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(80 mg, 0.187 mmol) 및 6-플루오로-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(0.1 g, 0.228 mmol)을 DMF(3 mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 소거하고, 질소로 충전하였다. 구리(I) 요오다이드(6.71 mg, 0.0749 mmol) 및 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(10.8 mg, 0.00936 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하고, 유기 상을 식염수로 세척한 후, 마그네슘 설페이트 상에서 건조하였다. 조질 화합물을, 25% 에틸 아세테이트/헥산을 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(5 mg, 38%)를 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-1H-인다졸-3-일)-5-((2-트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스이미드(35 mg, 0.0705 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(0.543 mL, 7.05 mmol)을 (3.0 mL)로 용해시켰다. 3 시간 후, 반응 혼합물을 농축 건조하고, 다이클로로메탄에 재용해시켰다. 에틸렌다이아민(0.476 mL, 7.05 mmol)을 상기 혼합물에 첨가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 농축하고, 2 mL 물로 희석하였다. 침전물을 여과하고, 건조하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(9 mg, 35%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 363.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸-아마이드

단계 1

2-(6-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸-실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

2-브로모-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5((2-트라이메틸실릴)에톡시)메틸-5H-피롤로[2,3]피라진-7-카복스아마이드(0.17 g, 0.383 mmol), 6-플루오로-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(0.168 g, 0.383 mmol) 및 구리(I) 요오다이드(14.6 mg, 0.076 mmol)를 DMF(3.0 mL) 중에서 합하였다. 혼합물을 탈기하고, 질소로 충전하였다. 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(46 mg, 0.041 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 90℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 진공 중에 농축하고, 이어서 크로마토그래피(실리카, 3:2 에틸 아세테이트:헥산)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸-실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(80 mg, 40%)를 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.08 g, 0.156 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(1 mL, 13.0 mmol)을 다이클로로메탄에서 15 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 중에 농축하고, 이어서 다이클로로메탄(5 mL) 중 에틸렌다이아민(1 mL, 14.8 mmol)을 첨가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 농축 건조하고, 물(1 mL)을 첨가하였다. 고체 침전물을 여과에 의해 수거하고, 건조하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸-아마이드(24 mg, 36%)를 수득하였다.

실시예 364.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

단계 1

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이메틸-실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(90 mg, 0.203 mmol) 및 6-클로로-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(0.148 g, 0.228 mmol)을 DMF(3 mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 소거하고, 질소로 충전한 후, 구리(I) 요오다이드(9 mg, 0.081 mmol) 및 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(46 mg, 0.046 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 2 시간 동안 가열한 후, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 상을 식염수로 세척한 후, 마그네슘 설페이트 상에서 건조하였다. 조질 물질을, 25% 에틸 아세테이트/헥산을 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이메틸-실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(40 mg, 37%)를 수득하였다.

단계 2

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(0.04 g, 0.076 mmol), 트라이플루오로아세트산(0.582 mL, 7.56 mmol) 및 다이클로로메탄(3.00 mL)을 합하고, 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조하고, 다이클로로메탄(3 mL)으로 희석한 후, 에틸렌다이아민(0.510 mL, 7.56 mmol)을 첨가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 농축 건조하고, 얼음 물(1 mL)을 첨가하였다. 형성된 고체를 여과에 의해 수거한 후, 에틸 아세테이트로 마쇄하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드(5 mg, 16%)를 수득하였다.

실시예 365.

2-(6-메톡시-1-1H-인다졸-3-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

실시예 364에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-메톡시-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸로 6-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 치환하여 제조하였다.

실시예 366.

2-(6-메톡시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

실시예 362에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-메톡시-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸로 6-플루오로-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 치환하여 제조하였다.

실시예 367.

2-(6-에틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

단계 1

2-(6-에틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

실시예 162 단계 1에 개시된 절차에 따라, 6-에틸-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸(실시예 87)로 6-플루오로-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 치환하여 제조하였다.

단계 2

2-(6-에틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

N-3급-부틸-2-(6-에틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(0.03 g, 0.059 mmol), 에틸렌다이아민(1 mL, 15.0 mmol) 및 TBAF(1 mL, 3.45 mmol)를 DMF(3.0 mL)와 함께 합하고, 반응 혼합물을 60℃까지 가온하였다. 3 시간 후, 혼합물을 농축 건조하고, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 상을 진공 중에 농축하고, 이어서 크로마토그래피로 정제하여 2-(6-에틸-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드(5 mg, 22%)를 수득하였다.

실시예 368.

2-(1,6-다이메틸-인다졸-3-일-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

실시예 364에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 6-메틸-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸로 6-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 치환하여 제조하였다.

실시예 369.

2-(7-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

실시예 362에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 7-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸로 6-플루오로-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 치환하여 제조하였다.

실시예 370.

2-(1-메틸-6-트라이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 3급-부틸아마이드

실시예 362에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-6-트라이플루오로메톡시-1H-인다졸로 6-플루오로-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 치환하여 제조하였다.

실시예 371.

2-(1-메틸-6-트라이플루오로메톡시-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)아마이드

실시예 364에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-6-트라이플루오로메톡시-1H-인다졸로 6-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 치환하여 제조하였다.

실시예 372.

2-(7-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-아마이드

실시예 364에 개시된 절차에 따라, 단계 1에서 7-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸로 6-클로로-1-메틸-3-트라이부틸스탄난일-1H-인다졸을 치환하여 제조하였다.

실시예 373.

N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

3-요오도-1-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘

0℃에서 THF(70 mL) 중 3-요오도-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘(3.5 g, 14.3 mmol)의 교반 용액에 칼륨 3급-부톡사이드(1.92 g, 17.1 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 요오도메탄(2.43 g, 1.07 mL, 17.1 mmol)을 적가한 후, 혼합물을 실온까지 가온하였다. 6 시간 후, 혼합물을 물로 희석하고, 다이클로로메탄으로 추출한 후, 합한 유기 상을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공 중에 농축하였다. 크로마토그래피(실리카, 헥산 중 20-60% 에틸 아세테이트)로 정제하여 3-요오도-1-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘(1.14 g, 4.4 mmol, 31%)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS (M+H)⁺ = 260.

단계 2

N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(8 mL) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(400 mg, 936 μmol) 및 3-요오도-1-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘(364 mg, 1.4 mmol)의 용액에 헥사부틸다이틴(814 mg, 709 μL, 1.4 mmol)을 첨가한 후, 혼합물을 질소로 10 분 동안 퍼징하였다. 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(54.1 mg, 46.8 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 125℃에서 가열하였다. 18 시간 후, 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하여 촉매를 제거하고, 이어서, 여액을 진공 중에 농축하고, 크로마토그래피(실리카, 헥산 중 10-70% 에틸 아세테이트)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(306 mg, 638 μmol, 68%)를 회백색 분말로서 수득하였다. MS (M+H)⁺ = 480.

단계 3

N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(15 mL) 중 N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(306 mg, 638 μmol)의 교반 용액에 에틸렌다이아민(1.92 g, 2.15 mL, 31.9 mmol) 및 이어서 TBAF(1.91 mL, 1.91 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 질소 하에 15 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 다이클로로메탄으로 희석하고, 물 및 식염수로 세척하고, 이어서, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 농축하여 오일을 수득하였다. 이를 물로 마쇄하여 테트라부틸암모늄 하이드록사이드를 제거하고, 여과하고, 잔사를 크로마토그래피(실리카, 다이클로로메탄 중 5-10% 메탄올)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(19.2 mg, 55.0 μmol, 9%)를 연황색 분말로서 수득하였다.

실시예 374.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-(하이드록시메틸)사이클로프로필)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

메틸 2-브로모-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트

10 mL의 DMF 중 메틸 2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트(0.24 g, 0.94 mmol) 및 K₂CO₃(0.156 g, 1.13 mmol)의 교반 혼합물에 클로로메틸 피발레이트(0.17 g, 1.13 mmol)를 실온에서 적가하였다. 이어서, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 30 mL의 물에 붓고, 에틸 아세테이트(90 mL)로 추출하였다. 유기 상을 식염수(10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하여 조질 생성물을 수득하였고, 에틸 아세테이트 및 석유 에터의 혼합물(1:1, v/v)로 용리하는 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬)로 정제하여 메틸 2-브로모-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트(0.276 g, 79.5%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

메틸 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트

6 mL의 DMF 중 6-플루오로-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(0.51 g, 0.616 mmol), 메틸 2-브로모-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트(0.18 g, 0.486 mmol)의 교반 용액에 CuI(0.04 g, 0.21 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄(0.057 g, 0.045 mmol)를 하나의 분획으로 질소 하에 실온에서 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 질소를 10 분 동안 발포시킴으로써 탈기하고, 90℃에서 질소 하에 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 70℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 및 석유 에터의 혼합물(1:1, v/v)로 용리하는 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬)로 정제하여 메틸 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트(0.182 g, 85.2%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

메틸 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트(0.24 g, 0.546 mmol), KOH(0.611 g, 10.9 mmol), 물(4 mL) 및 다이옥산(10 mL)의 혼합물을 100℃에서 5 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 1 N HCl로 pH 2까지 처리하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 물로 마쇄한 후(10 mL), 경사분리하고, 40℃에서 감압 하에 건조하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.161 g, 94.8%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-(하이드록시메틸)사이클로프로필)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(3 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(70 mg, 0.225 mmol), (1-아미노사이클로프로필)메탄올(30 mg, 0.337 mmol), HATU(171 mg, 0.45 mmol) 및 DIEA(58 mg, 0.45 mmol)의 혼합물을 25℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하고, 케이크를 MeOH로 세척하였다. 조질 생성물을 제조용-HPLC(제미니(Gemini) 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 55% 아세토니트릴/45% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분 후 선형 방식으로 80% 아세토니트릴/20% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-(하이드록시메틸)사이클로프로필)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(4 mg, 5%)를 수득하였다.

실시예 375.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-3급-펜틸-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(59 mg, 0.19 mmol), HATU(91.20 mmol, 0.24 mmol) 및 DIPEA(49 mg, 0.38 mmol)의 교반 용액에 2-메틸부탄-2-아민(21.60 mg, 0.24 mmol)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 70℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 15% 아세토니트릴/75% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분 후 선형 방식으로 70% 아세토니트릴/30% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-3급-펜틸-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(15 mg, 20.7%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 376.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로부틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(59 mg, 0.19 mmol), HATU(91.20 mmol, 0.24 mmol) 및 DIPEA(49 mg, 0.38 mmol)의 교반 용액에 1-메틸사이클로부탄아민(21.00 mg, 0.25 mmol)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가하고, 반응 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 80℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 48% 아세토니트릴/52% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 70% 아세토니트릴/30% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로부틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(10 mg, 13.7%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 377.

N-(2-시아노프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(3 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(60 mg, 0.193 mmol), 2-아미노-2-메틸프로판니트릴(25 mg, 0.29 mmol), HATU(217 mg, 0.57 mmol) 및 DIEA(74 mg, 0.57 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하고, 케이크를 DMSO 및 MeOH로 세척하여 N-(2-시아노프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(15 mg, 20.5%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 378.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로프로필)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(70 mg, 0.23 mmol), 1-메틸사이클로프로판아민(21 mg, 0.29 mmol), HATU(110 mmol, 0.29 mmol) 및 DIPEA(46 mg, 0.36 mmol)의 용액을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 70℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 다이클로로메탄(10 mL), 메탄올(10 mL)로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로프로필)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(45 mg, 54.9%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 379.

N-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

3급-부틸 2-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로필카바메이트

DMF(3 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(70 mg, 0.225 mmol), 3급-부틸 2-아미노-2-메틸프로필카바메이트(64 mg, 0.338 mmol), HATU(171 mg, 0.45 mmol) 및 DIPEA(58 mg, 0.45 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(5 mL)에 붓고, EtOAc(3 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 잔사를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 482.1.

단계 2

N-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

3급-부틸 2-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로필카바메이트(95 mg,0.198 mmol)를 다이옥산(10 mL) 중 HCl(g)의 포화 용액에 용해시켰다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 3급-부틸 2-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로필카바메이트(35 mg, 46%)를 수득하였다.

실시예 380.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2-메틸부트-3-인-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(3 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(70 mg, 0.225 mmol), 2-메틸부트-3-인-2-아민(28 mg, 0.338 mmol), HATU(171 mg, 0.45 mmol) 및 DIEA(58 mg, 0.45 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물에 붓고, 여과하여 조질 생성물을 수득하였다. 이어서, 조질 화합물을 MeOH로 세척하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2-메틸부트-3-인-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(20 mg, 23.5%)를 수득하였다.

실시예 381.

3급-부틸 2-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로파노에이트

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.323 mmol), 3급-부틸 2-아미노-2-메틸프로파노에이트 하이드로클로라이드(82 mg, 0.42 mmol), HATU(160 mmol, 0.42 mmol) 및 DIPEA(66 mg, 0.51 mmol)의 용액을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 70℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 석유 에터 및 에틸 아세테이트의 혼합물(1:1, v/v)로 용리하는 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬)로 정제하여 3급-부틸 2-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로파노에이트(75 mg, 51.8%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 382.

2-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로판산

10 mL의 다이클로로메탄 중 3급-부틸 2-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로파노에이트(60 mg, 0.13 mmol)의 교반 현탁액에 트라이플루오로아세트산(4 mL)을 실온에서 적가하였다. 이어서, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 60% 아세토니트릴/40% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로판산(21 mg, 40%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 383.

N-(1,3-다이하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2,2,3,3,6,9,9,10,10-노나메틸-4,8-다이옥사-3,9-다이실라운데칸-6-아민

다이클로로메탄(40 mL) 중 2-아미노-2-메틸프로판-1,3-다이올(1.05 g, 0.01 mol)의 교반 용액에 3급-부틸다이메틸실릴 클로라이드(9 g, 0.06 mol) 및 이어서 이미다졸(6.8 g, 0.1 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 물로 희석하고, EtOAc(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 수성 NaHCO₃ 및 식염수로 세척한 후, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 잔사를 EtOAc로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2,2,3,3,6,9,9,10,10-노나메틸-4,8-다이옥사-3,9-다이실라운데칸-6-아민(2.9 g, 87%)을 오일로서 수득하였다.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2,2,3,3,6,9,9,10,10-노나메틸-4,8-다이옥사-3,9-다이실라운데칸-6-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(5 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(70 mg, 0.225 mmol), 2,2,3,3,6,9,9,10,10-노나메틸-4,8-다이옥사-3,9-다이실라운데칸-6-아민(112 mg, 0.338 mmol), HATU(171 mg, 0.45 mmol) 및 DIPEA(58 mg, 0.45 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(5 mL)에 붓고, EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 잔사를 석유 에터/EtOAc(1:1, v/v)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2,2,3,3,6,9,9,10,10-노나메틸-4,8-다이옥사-3,9-다이실라운데칸-6-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(65 mg, 46%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

N-(1,3-다이하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2,2,3,3,6,9,9,10,10-노나메틸-4,8-다이옥사-3,9-다이실라운데칸-6-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(65 mg, 0.104 mmol)를 다이옥산(10 mL) 중 HCl(g)의 포화 용액에 용해시켰다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 MeOH로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 N-(1,3-다이하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(28 mg, 68%)를 수득하였다.

실시예 384.

2-(플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로펜틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

1-아지도-1-메틸사이클로펜탄

BF₃·Et₂O(934 mg, 6.23 mmol)를 6 mL의 톨루엔 중 1-메틸사이클로펜탄올(520 mg, 5.19 mmol) 및 트라이메틸실릴 아지드(716 mg, 6.23 mmol)의 교반 용액에 20℃에서 적가하였다. 이어서, 용액을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 유기 상을 NaHCO₃(10 mL), 물(5 mL) 및 식염수(5 mL)의 10% 용액으로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 용매를 35℃에서 감압 하에 증발시켜 1-아지도-1-메틸사이클로펜탄(720 mg)을 조질 생성물로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

단계 2

1-메틸사이클로펜탄아민 하이드로클로라이드

100 mL의 메탄올 중 1-아지도-1-메틸사이클로펜탄(720 mg, 5.19 mmol) 및 탄소 상의 10% Pd의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 수소(1 atm) 하에 교반하였다. 이어서, 농축 HCl(1 mL)을 첨가하고, 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시켜 1-메틸사이클로펜탄아민 하이드로클로라이드(700 mg, 2 개의 단계에 대해 99%)를 오일로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. ¹H NMR (300 MHz, D₂O): δ 1.59 (brs, 7H), 1.21 (s, 3H).

단계 3

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로펜틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(62 mg, 0.20 mmol), 1-메틸사이클로펜탄아민 하이드로클로라이드(35 mg, 0.26 mmol), HATU(98 mmol, 0.26 mmol) 및 DIEA(42 mg, 0.33 mmol)의 용액을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 70℃에서 감압 하에 증발시켜 조질 생성물을 수득하고, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 55% 아세토니트릴/45% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 80% 아세토니트릴/20% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로펜틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(18 mg, 22.9%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 385.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(4-메틸피페리딘-4-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

3급-부틸 4-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-

10 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.32 mmol)의 교반 용액에 EDCI(122 mg, 0.64 mmol), 3급-부틸 4-아미노-4-메틸피페리딘-1-카복실레이트(103 mg, 0.48 mmol) 및 DMAP(78 mg, 0.64 mmol)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 16 시간 동안 교반한 후, 50 mL의 물에 붓고, 여과하였다. 필터 케이크를 물(10 mL)로 세척하고, 석유 에터 및 에틸 아세테이트의 혼합물(1:2, v/v)로 용리하는 실리카 겔(200-300 메쉬)의 패드를 통과시켜 3급-부틸 4-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-4-메틸피페리딘-1-카복실레이트(100 mg, 61.6%)를 백색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 508.2.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(4-메틸피페리딘-4-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

3급-부틸 4-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-4-메틸피페리딘-1-카복실레이트(100 mg, 0.20 mmol)를 30 mL의 다이옥산 중 HCl(g)의 포화 용액에 용해시키고, 용액을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 다이클로로메탄(20 mL), 다이에틸 에터(30 mL)로 세척하고, 건조하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(4-메틸피페리딘-4-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(29 mg, 33.2%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 386.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸옥세탄-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(105 mg, 0.34 mmol)의 교반 용액에 EDCI(128 mmol, 0.67 mmol), DMAP(82 mg, 0.67 mmol) 및 3-메틸옥세탄-3-아민(44 mg, 0.50 mmol)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 70℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 물(10 mL), 다이클로로메탄(10 mL), 메탄올(15 mL)로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸옥세탄-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(50 mg, 38.9%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 387.

N-(1-시아노사이클로프로필)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(5 mL) 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(90 mg, 0.29 mmol), 1-아미노사이클로프로판카보니트릴 하이드로클로라이드(41 mg, 0.348 mmol), EDCI(110 mg, 0.58 mmol) 및 DMAP(75 mg, 0.58 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물(5 mL)에 붓고, 여과하여 조질 생성물을 수득하고, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 55% 아세토니트릴/45% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(1-시아노사이클로프로필)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(25 mg, 23%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 388.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2-페닐프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), 2-페닐프로판-2-아민(0.05 g, 0.37 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol), HATU(0.114 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하였다. 잔사를 5 mL의 물로 마쇄한 후, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 60% 아세토니트릴/40% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 80% 아세토니트릴/20% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2-페닐프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.017 g, 18%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 389.

(S)-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-페닐에틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), S-1-페닐에탄아민(0.05 g, 0.41 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol), HATU(0.114 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하였다. 잔사를 물로 마쇄한 후, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 55% 아세토니트릴/45% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 80% 아세토니트릴/20% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 S-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-페닐에틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.02 g, 22%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 390.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1,1,1-트라이플루오로-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), 1,1,1-트라이플루오로-2-메틸프로판-2-아민(0.05 g, 0.39 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol), HATU(0.114 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하였다. 잔사를 물로 마쇄한 후, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 55% 아세토니트릴/45% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 80% 아세토니트릴/20% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1,1,1-트라이플루오로-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.015 g, 16%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 391.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-3급-펜틸-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), 2-메틸부탄-2-아민(0.05 g, 0.57 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol), HATU(0.114 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하였다. 잔사를 물로 마쇄한 후, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 57% 아세토니트릴/43% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 80% 아세토니트릴/20% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-3급-펜틸-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.019 g, 22%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 392.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로헥실)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(70 mg, 0.22 mmol)의 교반 용액에 EDCI(64 mg, 0.33 mmol) 및DMAP(42 mg, 0.34 mmol)를 첨가하고, 이어서,1-메틸사이클로헥산아민 하이드로클로라이드(50 mg, 0.33 mmol)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가하고, 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 35 mL의 물에 붓고, 여과하여 조질 생성물을 수득하고, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 55% 아세토니트릴/45% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 88% 아세토니트릴/12% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로헥실)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(26 mg, 28.4%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 393.

N-(3-아미노-2,3-다이메틸부탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.26 mmol)의 교반 용액에 EDCI(102 mg, 0.53 mmol), 2,3-다이메틸부탄-2,3-다이아민 하이드로클로라이드(62 mg, 0.53 mmol) 및 DMAP(76 mg, 0.62 mmol)를 실온에서 첨가하고, 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 50 mL의 물에 붓고, 여과하여 조질 생성물을 수득하고, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 20% 아세토니트릴/80% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 35% 아세토니트릴/65% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(3-아미노-2,3-다이메틸부탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(15 mg, 11.1%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 394.

N-3급-부틸 2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-브로모-N-3급-부틸 5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(5 mL) 중 2-브로모-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(242 mg, 1 mmol), 2-메틸프로판-2-아민(110 mg, 1.5 mmol), EDCI(382 mg, 2 mmol) 및 DMAP(244 mg, 2 mmol)의 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물에 붓고, EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 조질 잔사를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 297.

단계 2

(2-브로모-7-(3급-부틸카바모일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트

DMF(5 mL) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드의 교반 혼합물에 클로로메틸 피발레이트(225 mg, 1.5 mmol) 및 이어서 K₂CO₃(276 mg, 2 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물에 붓고, EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 잔사를 석유 에터/EtOAc(5:1, v/v)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (2-브로모-7-(3급-부틸카바모일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(140 mg, 2 단계에 걸쳐 34%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

3-요오도-1H-인다졸-6-카보니트릴

DMSO(50 mL) 중 1H-인다졸-6-카보니트릴(4.5 g, 31.4 mmol) 및 KOH(5.3 g, 94.2 mmol)의 현탁액에 요오드(15.9 g, 62.8 mmol)를 얼음-물 욕 하에 0℃에서 10 분에 걸쳐 분획식으로 첨가하였다. 최종 혼합물을 추가로 2 시간 실온에서 교반하였다. 혼합물을 포화 나트륨 설파이트(300 mL)에 천천히 첨가하고, 형성된 고체를 10 분 동안 교반하고, 여과하고, 포화 나트륨 설파이트(2 x 50 mL), 물(2 x 20 mL)로 세척하고 건조하여 3-요오도-1H-인다졸-6-카보니트릴을 연황색 고체(8.1 g, 수율 95.6%)로서 수득하였다.

단계 4

3-요오도-1-메틸-1H-인다졸-6-카보니트릴

THF(50 mL) 중 3-요오도-1H-인다졸-6-카보니트릴(2.0 g, 7.43 mmol), t-BuOK (1.2 g, 10.4 mmol)의 현탁액에 THF(5 mL) 중 요오도메탄(1.2 g, 10.4 mmol)을 0℃에서 얼음-물 욕 하에 적가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 각각 N-1 및 N-2 위치에서 메틸화된 2 개의 이성질체가 형성되었다. 과량의 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 EtOAc(100 mL)에 용해시키고, 식염수(2 x 10 mL)로 세척하고, 합한 유기 물질을 Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 건조제 제거 및 농축 후, 조질 혼합물(1.6 g)을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 411;

단계 5

1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-6-카보니트릴

3-요오도-1-메틸-1H-인다졸-6-카보니트릴 및 3-요오도-2-메틸-1H-인다졸-6-카보니트릴(97 mg, 조질)의 조질 혼합물을 THF(4 mL)에 용해시켰다. 용액을 -40℃까지 냉각하였다. 아이소프로필마그네슘 클로라이드(0.21 mL, 0.41 mmol, THF 중 2 M)를 -40℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -40℃에서 20 분 동안 교반하였다. 이어서, 클로로트라이부틸틴(0.11 mL)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 1.5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭시킨 후, EtOAc(3 x 5 mL)로 추출하고, 유기 물질을 물(10 mL), 식염수(2 x 10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 6

(7-(3급-부틸카바모일)-2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트

환저 플라스크 중에서, (2-브로모-7-(3급-부틸카바모일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(140 mg, 0.34 mmol) 및 1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-6-카보니트릴(조질, 약간의 2-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-6-카보니트릴을 함유함)을 DMF(5 mL)에 질소 하에 용해시켰다. Pd(PPh₃)₄(20 mg, 0.017 mmol) 및 CuI(13 mg, 0.068 mmol)를 첨가하고, 혼합물을, 질소를 발포시키면서 5 분 동안 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 제거 후, 잔사를 석유 에터/EtOAc(3:1 → 1:1, v/v)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (7-(3급-부틸카바모일)-2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(80 mg, 48.5%)를 수득하였다.

단계 7

N-3급-부틸-2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

THF(5 mL) 중 (7-(3급-부틸카바모일)-2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(80 mg, 0.164 mmol)의 교반 용액에 15% NaOH 수용액(0.5 mL)을 실온에서 첨가하고, 반응 혼합물을 15 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 15% 아세토니트릴/75% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 70% 아세토니트릴/30% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(45 mg, 74%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 395.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로프로필)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), 1-메틸사이클로프로판아민(0.04 g, 0.56 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반한 후, HATU(0.114 g, 0.3 mmol)를 첨가하였다. 최종 반응 혼합물을 추가로 15 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하였다. 잔사를 물로 마쇄한 후, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 80% 아세토니트릴/20% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로프로필)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.035 g, 43%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 396.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-페닐-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), 아닐린(0.05 g, 0.54 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 이어서, HATU(0.114 g, 0.3 mmol)를 첨가하고, 최종 반응 혼합물을 15 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하였다. 잔사를 물로 마쇄한 후, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 65% 아세토니트릴/35% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 72% 아세토니트릴/28% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-페닐-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.025 g, 29%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 397.

N-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

3급-부틸 2-(2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로필카바메이트

15 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.1 g, 0.3 mmol), 3급-부틸 2-아미노-2-메틸프로필카바메이트(0.1 g, 0.53 mmol), EDCI(0.086 g, 0.45 mmol), DMAP(0.055 g, 0.45 mmol) 및 DIPEA(0.232 g, 1.8 mmol)의 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 이어서, HATU(0.17 g, 0.45 mmol)를 첨가하고, 최종 반응 혼합물을 추가로 15 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 물로 마쇄한 후, 석유 에터 및 에틸 아세테이트(3:1, v/v)의 혼합물로 용리하는 실리카 겔(200-300 메쉬)로 정제하여 3급-부틸 2-(2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로필카바메이트(0.1 g, 조질)를 황색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 498.1.

단계 2

N-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

30 mL의 다이옥산 중 HCl(g)의 포화 용액 중에서 3급-부틸 2-(2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-2-메틸프로필카바메이트(0.05 g, 0.1 mmol)를 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔사를 에틸 아세테이트로 마쇄하고, 여과하고, 필터 케이크를 포화 수성 NaHCO₃ 및 물로 세척하여 N-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(22 mg, 55%)를 황색 고체로서 성공적으로 수득하였다.

실시예 398.

2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-아민

다이클로로메탄(25 mL) 중 2-아미노-2-메틸프로판-1-올(1.78 g, 0.02 mol)의 교반 용액에 3급-부틸다이메틸실릴 클로라이드(5.4 g, 0.036 mol) 및 이어서 이미다졸(3.4 g, 0.05 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 물로 희석하고, EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 NaHCO₃ 수성, 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 잔사를 EtOAc로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-아민(3.1 g, 76%)을 오일로서 수득하였다.

단계 2

2-브로모-N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

5 mL의 DMF 중 2-브로모-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(310 mg, 1.28 mmol), 1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-아민(390 mg, 1.92 mmol), EDCI(489 mg, 2.56 mmol) 및 DMAP(312 mg, 2.56 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물에 붓고, EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 잔사를 추가 처리 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 427.1.

단계 3

(2-브로모-7-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일카바모일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트

DMF(5 mL) 중 2-브로모-N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드의 교반 혼합물에 클로로메틸 피발레이트(288 mg, 1.92 mmol) 및 이어서 K₂CO₃(353 mg, 2.56 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반한 후, 물에 붓고, EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 잔사를 석유 에터/EtOAc(5:1, v/v)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (2-브로모-7-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일카바모일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(305 mg, 2 개의 단계에 걸쳐 44%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-6-카보니트릴

혼합물 3-요오도-1-메틸-1H-인다졸-6-카보니트릴 및 3-요오도-2-메틸-1H-인다졸-6-카보니트릴(160 mg, 0.565 mmol)을 THF(6 mL)에 용해시켰다. 용액을 -40℃까지 냉각하였다. THF 중 2 M의 아이소프로필마그네슘 클로라이드(0.34 mL, 0.678 mmol)를 -40℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -40℃에서 20 분 동안 교반한 후, 클로로트라이부틸틴(0.18 mL, 0.678 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 1.5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 물(10 mL), 식염수(10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 추가 처리 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 5

(2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-7-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일카바모일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트

환저 플라스크 중에서, (2-브로모-7-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일카바모일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(305 mg, 0.565 mmol), 및 1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-6-카보니트릴 및 1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-6-카보니트릴의 조질 혼합물을 DMF(5 mL)에 질소 하에 용해시켰다. Pd(PPh₃)₄(32 mg, 0.028 mmol) 및 CuI(21 mg, 0.113 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 질소를 발포하면서 5 분 동안 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 농축된 혼합물을 석유 에터/EtOAc(1:1, v/v)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-7-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일카바모일)-5H-피롤로[2,3-b] 피라진-5-일)메틸 피발레이트(45 mg, 16%)를 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 504.

단계 6

2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b] 피라진-7-카복스아마이드

2 mL의 THF 중 (2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-7-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일카바모일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(45 mg, 0.089 mmol)의 교반 용액에 10% NaOH(2 mL)의 용액을 실온에서 첨가하고, 반응 혼합물을 15 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 물로 희석하고, pH 5 내지 6까지 조정하였다. 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DMSO(3 mL), MeOH(3 mL)로 세척한 후, 건조하여 2-(6-시아노-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(4.5 mg, 12%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 399.

N-3급-부틸-2-(1H-인다졸-4-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

(2-브로모-7-(3급-부틸카바모일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트

무수 DMF(8 mL) 중 메틸 2-브로모-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(0.345 g, 1.33 mmol), 클로로메틸 피발레이트(406 mg, 2.7 mmol) 및 K₂CO₃(373 mg, 2.7 mmol)의 혼합물을 30℃까지 16 시간 동안 가열하였다. 반응을 물로 켄칭하고, 생성물을 에틸 아세테이트(100 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 물(3 x 10 mL) 및 식염수(2 x 10 mL)로 세척한 후, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 에터(5 mL)로 마쇄하고, 경사분리하고, 건조하여 (2-브로모-7-(3급-부틸카바모일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(414 mg, 조질)를 황색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 411.

단계 2

1-(피발로일옥시메틸)-1H-인다졸-4-일보론산

무수 DMF(10 mL) 중 1H-인다졸-4-일보론산(0.2 g, 1.227 mmol), 클로로메틸 피발레이트(554 mg, 3.68 mmol) 및 K₂CO₃(509 mg, 3.68 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 30℃까지 가열하였다. 반응을 물로 켄칭하고, 생성물을 에틸 아세테이트(150 mL)로 추출한 후, 물(3 x 20 mL) 및 식염수(2 x 20 mL)로 세척하고, 이어서 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 생성물(114 mg, 조질)을 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+Na)⁺ = 299.

단계 3

N-3급-부틸-2-(1H-인다졸-4-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

다이옥산(20 mL) 및 물(5 mL) 중 (2-브로모-7-(3급-부틸카바모일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(170 mg, 0.413 mmol), 1-(피발로일옥시메틸)-1H-인다졸-4-일보론산(114 mg, 0.413 mmol), Pd₂(dba)₃(47 mg, 0.083 mmol), X-Phos(79 mg, 0.166 mmol) 및 Na₂CO₃(131 mg, 1.24 mmol)의 혼합물을 100℃까지 16 시간 동안 가열하였다. 반응을 물로 켄칭하고, 생성물을 에틸 아세테이트(90 mL)로 추출한 후, 물(3 x 10 mL) 및 식염수(2 x 10 mL)로 세척하고, 이어서 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 먼저 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 메탄올:다이클로로메탄 = 1:30으로 용리함) 및 이어서 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 62% 아세토니트릴/38% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 이어서 9 분 직후에 선형 방식으로 64% 아세토니트릴/36% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하였다. 순수한 생성물에 1 mL 농축 HCl을 첨가하고, 5 분 동안 교반하고, 여과하고, 건조하여 N-3급-부틸-2-(1H-인다졸-4-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(33 mg, 22%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 400.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(4-하이드록시-2-메틸부탄-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-(4-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸부탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.32 mmol)의 교반 용액에 EDCI(123 mg, 0.64 mmol), 4-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸부탄-2-아민(139 mg, 0.64 mmol) 및 DMAP(78 mg, 0.64 mmol)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가하고, 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 35 mL의 물에 붓고, 여과하고, 수득한 고체를 실리카 겔(200-300 메쉬, 메탄올 및 에틸 아세테이트의 혼합물(1:20, v/v)로 용리함)의 패드를 통과시켜 N-(4-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸부탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(70 mg, 42.8%)를 연황색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 511.2.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(4-하이드록시-2-메틸부탄-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

N-(4-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸부탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(70 mg, 0.140 mmol)를 30 mL의 다이옥산 중 HCl(g)의 포화 용액에 용해시키고, 용액을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 38% 아세토니트릴/62% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 42% 아세토니트릴/58% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(4-하이드록시-2-메틸부탄-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(15 mg, 27.6%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 401.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2-사이클로프로필프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

(E)-N-(1-사이클로프로필에틸리덴)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드

10 mL의 THF 중 1-사이클로프로필에탄온(1 g, 12 mmol), 2-메틸프로판-2-설핀아마이드(1.7 g, 14 mmol), Ti(OEt)₄(5.5 g, 24 mmol)의 혼합물을 밤새 교반하면서 환류 하에 가열하였다. 혼합물을 실온까지 냉각하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 조질 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 석유 에터 및 에틸 아세테이트(3:1, v/v)로 정제하여 (E)-N-(1-사이클로프로필에틸리덴)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드(0.6 g, 27%)를 투명한 오일로서 수득하였다.

단계 2

N-(2-사이클로프로필프로판-2-일)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드

-78℃에서 30 mL의 톨루엔 중 (E)-N-(1-사이클로프로필에틸리덴)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드(0.6 g, 3.2 mmol)의 교반 용액에 Me₃Al(1.76 mL, 3.5 mmol, 톨루엔 중 2 M)을 질소 대기 하에 첨가하였다. -78℃에서 20 분 교반한 후, MeLi(2.3 mL, 7 mmol, 다이메톡시메탄 중 3 M)를 적가하고, 혼합물을 -78℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응을 2 mL의 물의 첨가에 의해 켄칭하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 석유 에터 및 에틸 아세테이트의 혼합물(4:1, v/v)로 용리함)로 정제하여 N-(2-사이클로프로필프로판-2-일)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드(0.18 g, 28%)를 황색 오일로서 수득하였다.

단계 3

2-사이클로프로필프로판-2-아민 하이드로클로라이드

15 mL의 MeOH 중 N-(2-사이클로프로필프로판-2-일)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드(0.18 g, 0.89 mmol)의 교반 용액에 다이옥산 중 HCl(g)의 포화 용액(2 mL)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 EtOAc로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 2-사이클로프로필프로판-2-아민 하이드로클로라이드(0.12 g, 75%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2-사이클로프로필프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), 2-사이클로프로필프로판-2-아민 하이드로클로라이드(0.05 g, 0.37 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 이어서, HATU(0.114 g, 0.3 mmol)를 첨가하고, 최종 반응 혼합물을 추가로 15 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 교반하면서 30 mL의 물에 부었다. 30 분 후, 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 35% 아세토니트릴/65% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 65% 아세토니트릴/35% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2-사이클로프로필프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.025 g, 28%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 402.

N-(시스-4-아미노사이클로헥실)-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸

THF(25 mL) 중 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1H-인다졸(3 g, 8.0 mmol)의 용액에 KO-tBu(1.28 g, 11.2 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 이어서 MeI(1.58 g, 11.2 mmol)를 첨가하고, 이어서, 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 4 시간 동안 교반하고, 이어서, H₂O(25 mL)를 혼합물에 첨가하고, 생성물을 EtOAc(100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 H₂O(100 mL), 식염수(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하고, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 석유 에터/EtOAc = 5:1로 용리함)로 정제하여 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸(2.5 g, 80.3%)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

3-요오도-1-메틸-1H-인다졸-5-올

THF(5 mL) 중 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸(1 g, 2.57 mmol)의 용액에 TBAF(6.42 mL, 12.85 mmol)를 0℃에서 첨가한 후, 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 0.5 시간 동안 교반하고, 이어서 H₂O(25 mL)를 혼합물에 첨가하고, 생성물을 EtOAc(100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 H₂O(100 mL), 식염수(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하고, 잔사를 석유 에터(5 mL)로 마쇄하고, 여과하고, 건조하여 3-요오도-1-메틸-1H-인다졸-5-올(0.85 g, 93.3%)을 백색 고체로서 수득하였다. 조질 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 275.

단계 3

5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸

다이에틸 브로모다이플루오로메틸포스포네이트(9 g, 10.9 mmol)를 CH₃CN(50 mL) 및 H₂O(50 mL) 중 3-요오도-1-메틸-1H-인다졸-5-올(3 g, 37.8 mmol) 및 KOH(15 g, 267 mmol)의 냉각된(드라이아이스-아세톤 욕) 용액에 교반하면서 하나의 분획으로 첨가하고, 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 0.5 시간 동안 교반하고, 혼합물을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, 유기 층을 H₂O(50 mL), 식염수(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하고, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 석유 에터/EtOAc = 3:1로 용리함)로 정제하여 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸(1.85 g, 53%)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸

무수 THF(15 mL) 중 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸(400 mg, 1.23 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(0.75 mL, 1.3 mmol, THF 중 2 M)를 -16℃에서 질소 대기 하에 적가하고, 30 분 동안 교반한 후, 다이부틸클로로(프로필)스탄난(0.5 mL, 1.45 mmol)을 적가하고, 반응 혼합물을 실온까지 천천히 가온하고, 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NH₄Cl(40 mL)의 포화 용액으로 켄칭하고, EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하고, 잔사(500 mg, 조질)를 오일로서 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 5

메틸 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트

DMF(10 mL) 중 메틸 2-브로모-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(370 mg, 1.0 mmol) 및 5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(500 mg, 1 mmol)의 용액에 CuI(30 mg, 0.16 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄(47 mg, 0.041 mmol)를 첨가하고, 3 분 동안 질소를 발포시킴으로써, 반응 혼합물을 탈기하고, 질소로 재충전하였다. 혼합물을 80℃까지 5 시간 동안 질소 하에 가열하고, 냉각 후, 물(50 mL)을 첨가하고, 생성물을 EtOAc(3 x 40 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 메틸 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트(120 mg, 조질)를 주황색 고체로서 수득하고, 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 6

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

다이옥산/물(10 mL/10 mL) 중 메틸 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트(120 mg, 0.25 mmol)의 현탁액에 NaOH(140 mg, 2.5 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 7 시간 동안 교반하면서 90℃까지 가열하고, 다이옥산을 감압 하에 제거하고, 수성 층을 농축 HCl로 pH 4까지 조정하고, 수득한 침전물을 여과에 의해 수거하고, 물(5 mL)로 세척하고, 건조하여 2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(150 mg)을 조질 주황색 고체로서 수득하고, 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 7

3급-부틸 시스-4-(2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로헥실카바메이트

15 mL의 무수 THF 중 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(150 mg, 0.43 mmol), 3급-부틸 시스-4-아미노사이클로헥실카바메이트(102 mg, 0.48 mmol) 및 HATU(196 mg, 0.51 mmol)를 4 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조하고, 잔사를 50 mL의 0.5 N HCl에 현탁하고, 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 농축하여 3급-부틸 시스-4-(2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로헥실카바메이트(54 mg, 조질)를 수득하였다. LCMS: (M+H)⁺ = 556; (M+Na)⁺ = 578. 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 8

N-(시스-4-아미노사이클로헥실)-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

3 mL의 1,4-다이옥산 중 3급-부틸 시스-4-(2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로헥실카바메이트(54 mg, 0.1 mmol)를 10 mL의 농축 HCl에 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 25℃에서 교반하였다. 감압 하에 증발시킨 후, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하였다. 농축한 후, 조질 고체를 1 N HCl(2 mL)로 처리하고, 혼합물을 10 분 동안 교반한 후, 증발시키고, 건조하여 N-(시스-4-아미노사이클로헥실)-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(13 mg, 29.5%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 403.

N-(3-아미노사이클로헥실)-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), 사이클로헥산-1,3-다이아민(0.05 g, 0.44 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 이어서, HATU(0.114 g, 0.3 mmol)를 첨가하고, 최종 반응 혼합물을 추가로 15 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하였다. 잔사를 물로 마쇄한 후, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 23% 아세토니트릴/77% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 45% 아세토니트릴/55% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(3-아미노사이클로헥실)-2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(0.013 g, 14%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 404.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-시아노페닐)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(5 mL) 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(70 mg, 0.23 mmol), 3-아미노벤조니트릴(41 mg, 0.344 mmol), EDCI(88 mg, 0.46 mmol) 및 DMAP(56 mg, 0.46 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물(5 mL)에 붓고, 여과하여 조질 생성물을 수득하였다. 조질 생성물을 DMSO 및 MeOH로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-시아노페닐)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(20 mg, 20%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 405.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), 피리딘-3-아민(0.05 g, 0.53 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 이어서, HATU(0.114 g, 0.3 mmol)를 첨가하고, 최종 반응 혼합물을 추가로 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하였다. 잔사를 물, EtOAc 및 DMSO로 마쇄하고, 이어서 경사분리하고, 건조하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(피리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.022 g, 26%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 406.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸피롤리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸피롤리딘-1-카복실레이트

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.32 mmol)의 교반 용액에 EDCI(123 mmol, 0.64 mmol), DMAP(110 mg, 0.90 mmol) 및 3급-부틸 3-아미노-3-메틸피롤리딘-1-카복실레이트(128 mg, 0.64 mmol)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가하고, 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 70℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 석유 에터로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 조질 3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸피롤리딘-1-카복실레이트(103 mg, 65.2%)를 황색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 494.1.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸피롤리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

3급-부틸 4-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-4-메틸피페리딘-1-카복실레이트(103 mg, 0.20 mmol)를 20 mL의 다이옥산 중 HCl(g)의 포화 용액에 용해시키고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 20% 아세토니트릴/80% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸피롤리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(30 mg, 36.5%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 407.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2-시아노프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), 2-아미노-2-메틸프로판니트릴 하이드로클로라이드(0.05 g, 0.42 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 이어서, HATU(0.114 g, 0.3 mmol)를 첨가하고, 최종 반응 혼합물을 추가로 15 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거한 후, 잔사를 물 및 에틸 아세테이트로 마쇄하고, 이어서, 경사분리하고, 건조하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(2-시아노프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.026 g, 31%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 408.

N-(5-아미노-2-메틸펜탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

단계 1

3급-부틸 4-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-4-메틸펜틸카바메이트

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.32 mmol)의 교반 용액에 EDCI(123 mmol, 0.64 mmol), DMAP(110 mg, 0.90 mmol) 및 3급-부틸 4-아미노-4-메틸펜틸카바메이트(139 mg, 0.64 mmol)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 40 mL의 물에 붓고, 여과하고, 필터 케이크를 석유 에터로 세척한 후, 건조하여 조질 3급-부틸 4-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-4-메틸펜틸카바메이트(75 mg, 46%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 510.2.

단계 2

N-(5-아미노-2-메틸펜탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

6 mL의 다이클로로메탄 중 3급-부틸 4-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-4-메틸펜틸카바메이트(75 mg, 0.15 mmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(3 mL)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가하고, 용액을 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 20% 아세토니트릴/80% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 45% 아세토니트릴/55% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(5-아미노-2-메틸펜탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(35 mg, 58%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 409.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸아제티딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

단계 1

3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸아제티딘-1-카복실레이트

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.26 mmol) 및 DIEA(83 mg, 0.64 mmol)의 교반 용액에 EDCI(98 mg, 0.51 mmol) 및 DMAP(88 mg, 0.72 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 20 분 후, 3급-부틸 3-아미노-3-메틸아제티딘-1-카복실레이트(95 mg, 0.51 mmol)를 하나의 분획으로 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 40 mL의 물에 붓고, 여과하고, 필터 케이크를 석유 에터로 세척하여 조질 3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸아제티딘-1-카복실레이트(75 mg, 76.9%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 480.1.

단계 2

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸아제티딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

6 mL의 다이클로로메탄 중 3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸아제티딘-1-카복실레이트(75 mg, 0.16 mmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(3 mL)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가하였다. 이어서, 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 15% 아세토니트릴/75% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 45% 아세토니트릴/55% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸아제티딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(40 mg, 52%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 410.

N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산

메틸 2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(150 mg, 0.36 mmol), 2.5 mL의 물 중 칼륨 하이드록사이드(280 mg, 5 mmol) 및 5 mL의 1,4-다이옥산의 혼합물을 90 분 동안 가열 환류하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 증발시키고, 1 N HCl로 산성화시키고, 이어서, 여과하고, 건조하여 2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(120 mg, 조질)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 294. 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

20 mL의 무수 THF 중 2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(120 mg, 0.41 mmol), 3급-부틸아민(0.1 mL, 0.9 mmol) 및 HATU(233 mg, 0.61 mmol)를 4 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조하고, 20 mL의 0.5 N HCl을 잔사에 첨가하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트/석유 에터 = 2:1로 용리함)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(47 mg, 33.7%)를 수득하였다.

실시예 411.

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

메틸 2-브로모-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실레이트(370 mg, 1 mmol), 2.5 mL의 물 중 칼륨 하이드록사이드(280 mg, 5 mmol) 및 5 mL의 1,4-다이옥산의 혼합물을 90 분 동안 가열 환류하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 용매를 증발시키고, 잔사를 1 N HCl로 산성화시키고, 여과하고, 건조하여 2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산을 갈색 고체로서 수득하고(320 mg, 조질), 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 2

2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

50 mL의 무수 THF 중 2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(320 mg, 0.9 mmol), 3급-부틸아민(0.5 mL, 4.5 mmol) 및 HATU(684 mg, 1.8 mmol)의 혼합물을 4 시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조하고, 이어서, 잔사를 50 mL의 0.5 N HCl에 현탁하고, 생성물을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고, 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하여 2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(258 mg, 조질)를 수득하고, 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 3

6-플루오로-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸

30 mL의 무수 THF 중 6-플루오로-3-요오도-1H-인다졸(300 mg, 1.1 mmol)을 질소 대기 하에 -20℃까지 냉각한 후, 아이소프로필마그네슘 클로라이드(1.2 mL, 2.42 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 15 분 동안 -20℃에서 교반하였다. 트라이부틸클로로스탄난(0.4 mL, 1.32 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 1 시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하여 6-플루오로-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(500 mg, 조질)을 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

단계 4

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

15 mL의 무수 DMF 중 6-플루오로-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(500 mg, 1.17 mmol), 2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(258 mg, 0.9 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(20 mg, 0.017 mmol), 구리 요오다이드(10 mg 0.052 mmol)의 혼합물을 2.5 시간 동안 질소 대기 하에 90℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 50 mL의 물로 희석하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄 및 고온 메탄올로 세척하고, 이어서 여과하여 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 황색 고체(260 mg, 82%)로서 수득하였다.

실시예 412.

N-3급-부틸-2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

3-요오도-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸

DMSO(20 mL) 중 6-플루오로-1H-인다졸(2.5 g, 13.4 mmol)의 용액에 KOH(2.3 g, 40.6 mmol) 및 I₂(4.3 g, 26.8 mmol)를 연속해서 0℃에서 첨가한 후, 반응 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 물(60 mL)을 첨가하고, 침전물을 여과에 의해 수거하고, 물(30 mL)로 세척한 후, 건조하여 3-요오도-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(4.0 g, 95.2%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 313.

단계 2

3-요오도-1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸

THF(80 mL) 중 3-요오도-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(4.0 g, 12.8 mmol)의 용액에 t-BuOK(2.0 g, 17.9 mmol)를 0℃에서 천천히 첨가하고, 혼합물을 30 분 동안 교반하고, 요오도메탄(1.1 mL, 17.9 mmol)을 0℃에서 첨가한 후, 실온까지 가온하고, 1.5 시간 동안 교반하고, 물(30 mL)로 켄칭하고, EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하고, 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 조질 생성물을 에터(5 mL)로 세척하고, 여과하여 3-요오도-1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(3.3 g, 79.3%)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 327.

단계 3

1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸

무수 THF(15 mL) 중 3-요오도-1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(400 mg, 1.2 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(0.7 mL, 1.3 mmol, THF 중 2 M)를 -16℃에서 질소 대기 하에 적가하고, 30 분 동안 교반하고, 이어서, 트라이부틸클로로스탄난(0.4 mL, 1.3 mmol)을 -16℃에서 질소 하에 적가하고, 반응 혼합물을 실온까지 천천히 가온하고, 2 시간 동안 교반하고, 이어서 포화 NH₄Cl(40 mL)의 용액으로 켄칭하고, 생성물을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하고, 이어서 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하여 1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(500 mg, 조질)을 오일로서 수득하고, 이를 어떠한 추가 정제도 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

단계 4

메틸 2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트

DMF(10 mL) 중 메틸 2-브로모-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(300 mg, 0.81 mmol) 및 1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(396 mg, 0.89 mmol)의 용액에 CuI(30 mg, 0.16 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄(47 mg, 0.041 mmol)를 첨가하고, 3 분 동안 질소를 발포시킴으로써, 반응 혼합물을 탈기하고, 질소로 재충전하였다. 혼합물을 5 시간 동안 질소 하에 80℃까지 가열하고, 냉각 후, 물(50 mL)을 혼합물에 첨가하고, 생성물을 EtOAc(3 x 40 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하고, 잔사를 석유 에터(2 mL)로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 메틸 2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(280 mg, 70.7%)를 주황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 490.

단계 5

2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산

다이옥산/물(4 mL/4 mL) 중 메틸 2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(50 mg, 0.1 mmol)의 현탁액에 NaOH(40 mg, 1.0 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 7 시간 동안 교반하면서 90℃까지 가열하고, 다이옥산을 감압 하에 제거하고, 수성 층을 1 N HCl로 pH 3까지 조정하고, 침전물을 여과에 의해 수거하고, 물(5 mL)로 세척하고, 건조하여 2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(40 mg, 조질)을 주황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 362.

단계 6

N-3급-부틸-2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(15 mL) 중 2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.28 mmol), 2-메틸프로판-2-아민(20 mg, 0.28 mmol), HOBt(149 mg, 1.12 mmol), EDCI(211 mg, 1.12 mmol) 및 트라이에틸아민(133 mg, 1.12 mmol)의 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반한 후, 물(30 mL)을 첨가하고, 생성물을 다이클로로메탄(3 x 30 mL)으로 추출하고, 합한 유기 층을 농축하고, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 석유 에터/에틸 아세테이트 = 10:1로 용리함)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(1-메틸-5-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(18 mg, 15.6%)를 주황색 고체로서 수득하였다.

실시예 413.

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-하이드록시-2-메틸부탄-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

3-아지도-3-메틸부탄-2-온

50 mL의 아세톤 및 5 mL의 물 중 3-브로모-3-메틸부탄-2-온(1 g, 6.1 mmol)의 교반 용액을 NaN₃(0.4 g, 6.1 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 18 시간 동안 환류 하에 교반하고, 이어서 증발 건조하였다. 잔사를 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하고 유기 층을 식염수로 세척하고, 증발 건조하여 3-아지도-3-메틸부탄-2-온(0.5 g, 65%)을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: 어떠한 분자 이온도 목적 질량에 대해 관찰되지 않았다.

단계 2

3-아미노-3-메틸부탄-2-올

30 mL의 무수 THF 중 LiAlH₄(0.4 g, 11 mmol)의 현탁액에 3-아지도-3-메틸부탄-2-온(0.5 g, 3.9 mmol)을 실온에서 분할식으로 첨가하였다. 4 시간 후, 반응물을 5 mL의 물의 첨가에 의해 켄칭하고, 여과하고, 필터 케이크를 메탄올로 세척하였다. 여액을 농축하여 3-아미노-3-메틸부탄-2-올(0.32 g, 79.0%)을 무색 오일로서 수득하였다.

단계 3

2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-하이드록시-2-메틸부탄-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.07 g, 0.3 mmol), 3-아미노-3-메틸부탄-2-올(0.05 g, 0.49 mmol), EDCI(0.057 g, 0.3 mmol), DMAP(0.037 g, 0.3 mmol), HOBt(0.041 g, 0.3 mmol) 및 DIPEA(0.163 g, 1.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하고, 잔사를 물로 마쇄한 후, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 15% 아세토니트릴/75% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 70% 아세토니트릴/30% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-하이드록시-2-메틸부탄-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.025 g, 28%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 414.

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

6-클로로-3-요오도-1H-인다졸

무수 DMF(20 mL) 중 6-클로로-1H-인다졸(2 g, 13.1 mmol), KOH(2.2 g, 39.3 mmol) 및 I₂(6.6 g, 26.2 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 30℃까지 가열하였다. 반응을 물로 켄칭하고, 생성물을 에틸 아세테이트(150 mL)로 추출하고, 유기 상을 물(3 x 10 mL), 식염수(2 x 10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 이어서 여과하고, 농축하여 6-클로로-3-요오도-1H-인다졸(3.0 g, 83%)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 279.

단계 2

6-클로로-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸

무수 테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 6-클로로-3-요오도-1H-인다졸(337 mg, 1.21 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(1.33 mL, THF 중 2 M, 2.66 mmol)를 -16℃에서 N₂ 대기 하에 적가하였다. 20 분 동안 교반한 후, 트라이부틸클로로스탄난(472 mg, 1.45 mmol)을 -16℃에서 적가하고, 이어서, 2 시간 동안 20℃까지 가온하였다. 이어서, NH₄Cl 용액(2 mL)을 첨가하고, 생성물을 다이클로로메탄(15 mL)으로 추출하고, 유기 상을 물(2 x 20 mL) 및 식염수(2 x 20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 6-클로로-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(413 mg, 조질)을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 3

메틸 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트

무수 DMF(3 mL) 중 메틸 2-브로모-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(0.26 g, 0.7 mmol), 6-클로로-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(0.31 g, 0.7 mmol), Pd(PPh₃)₄(81 mg, 0.07 mmol) 및 CuI(27 mg, 0.14 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 90℃까지 가열하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(60 mL)로 추출하고, 유기 상을 물(3 x 10 mL) 및 식염수(2 x 10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 메틸 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(265 mg, 조질)를 갈색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 442.

단계 4

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산

1,4-다이옥산(10 mL) 중 메틸 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(202 mg, 0.457 mmol) 및 KOH(385 mg, 6.86 mmol) 및 물(5 mL)의 혼합물을 3 시간 동안 가열 환류하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 1.0 M 수성 HCl에 의해 pH 5까지 조정하였다. 침전물을 여과에 의해 수거하고, 건조하여 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(178 mg, 조질)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 314.

단계 5

2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 DMF(5 mL) 중 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(140 mg, 0.446 mmol), 2-아미노-2-메틸프로판-1-올(48 mg, 0.536 mmol), EDCI(256 mg, 1.338 mmol), HOBt(181 mg, 1.338 mmol) 및 DIPEA(173 mg, 1.338 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(5 mL)을 첨가하고, 형성된 침전물을 여과에 의해 분리하고, 이어서, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 35% 아세토니트릴/65% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(6 mg, 3%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 415.

N-(4-아미노-2-메틸부탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

단계 1

3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸부틸카바메이트

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.32 mmol) 및 DIEA(124 mg, 0.96 mmol)의 교반 용액에 실온의 EDCI(123 mg, 0.64 mmol) 및 DMAP(110 mg, 0.90 mmol), 및 이어서 3급-부틸 3-아미노-3-메틸부틸카바메이트(260 mg, 1.28 mmol)를 하나의 분획으로 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 40 mL의 물에 붓고, 여과하고, 필터 케이크를 석유 에터로 세척하여 3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸부틸카바메이트(110 mg, 69.4%)를 황색 고체로서 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 496.2.

단계 2

N-(4-아미노-2-메틸부탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

6 mL의 다이클로로메탄 중 3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸부틸카바메이트(110 mg, 0.22 mmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(3 mL)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가하고, 용액을 1 시간 동안 교반하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 20% 아세토니트릴/80% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(4-아미노-2-메틸부탄-2-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(35 mg, 30.9%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 416 및 417.

N-(트랜스-4-아미노-1-메틸사이클로헥실)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드 및 N-(시스-4-아미노-1-메틸사이클로헥실)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

3급-부틸 트랜스-4-하이드록시사이클로헥실카바메이트

THF(100 mL) 중 트랜스-4-아미노사이클로헥산올 하이드로클로라이드(15.1 g, 0.1 mol) 및 Boc₂O(23.7 g, 0.11 mol)의 용액에 하나의 분획으로 물(10 mL) 중 NaHCO₃(10.6 g, 0.1 mol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 과량의 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 EtOAc(3 x 100 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 농축하여 조질 3급-부틸 트랜스-4-하이드록시사이클로헥실카바메이트(20.1 g, 94%)를 백색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+Na)⁺ = 238.2.

단계 2

3급-부틸 4-옥소사이클로헥실카바메이트

100 mL의 다이클로로메탄 중 3급-부틸 트랜스-4-하이드록시사이클로헥실카바메이트(2.0 g, 9.3 mmol)의 교반 용액에 PCC(3.0 g, 14 mmol) 및 셀라이트(5.0 g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 잔사를 감압 하에 농축하였다. 조질 화합물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트 및 석유 에터의 혼합물(1:1, v/v)로 용리함)로 정제하여 3급-부틸 4-옥소사이클로헥실카바메이트(1.6 g, 80%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

3급-부틸 4-(3급-부틸설핀일이미노)사이클로헥실카바메이트

10 mL의 THF 중 3급-부틸 4-옥소사이클로헥실카바메이트(1.0 g, 4.7 mmol), 2-메틸프로판-2-설핀아마이드(0.63 g, 5.17 mmol) 및 Ti(OEt)₄(2.1 g, 9.2 mmol)의 혼합물을 50 내지 60℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온까지 냉각하고, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 석유 에터 및 에틸 아세테이트의 혼합물(4:1, v/v)로 용리함)로 정제하여 3급-부틸 4-(3급-부틸설핀일이미노)사이클로헥실카바메이트(1.0 g, 67%)를 투명 오일로서 수득하였다.

단계 4

3급-부틸 4-(1,1-다이메틸에틸설핀아미도)-4-메틸사이클로헥실카바메이트

-78℃의 40 mL의 톨루엔 중 3급-부틸 4-(3급-부틸설핀일이미노)사이클로헥실카바메이트(0.6 g, 1.9 mmol)의 교반 용액에 질소 대기 하에 톨루엔 중 Me₃Al 2 M(2 mL, 4 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 20 분 동안 -78℃에서 교반한 후, 다이메톡시메탄 중 MeLi 3 M(2.8 mL, 8.4 mmol)의 용액을 천천히 첨가하고, 반응 혼합물을 -78℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응물을 2 mL의 물의 첨가에 의해 켄칭하고, 용매 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔(200-300 메쉬, 석유 에터 및 에틸 아세테이트의 혼합물(4:1, v/v)로 용리함)의 패드를 통과시켜 3급-부틸 4-(1,1-다이메틸에틸설핀아미도)-4-메틸사이클로헥실카바메이트(0.21 g, 33%)를 조질 황색 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 333.2.

단계 5

3급-부틸 4-아미노-4-메틸사이클로헥실카바메이트 하이드로클로라이드

100 mL의 MeOH 중 3급-부틸 4-(1,1-다이메틸에틸설핀아미도)-4-메틸사이클로헥실카바메이트(0.2 g, 0.6 mmol)의 교반 용액에 다이옥산 중 HCl(g)의 포화 용액(0.72 mL)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 EtOAc(15 mL)로 마쇄하고, 이어서 경사분리하고, 건조하여 3급-부틸 4-아미노-4-메틸사이클로헥실카바메이트 하이드로클로라이드(0.1 g, 63%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 6

3급-부틸 4-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-4-메틸사이클로헥실카바메이트

20 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.08 g, 0.26 mmol), 3급-부틸 4-아미노-4-메틸사이클로헥실카바메이트 하이드로클로라이드(0.07 g, 0.26 mmol), EDCI(0.076 g, 0.4 mmol), DMAP(0.05 g, 0.4 mmol), HOBt(0.054 g, 0.4 mmol) 및 DIPEA(0.206 g, 1.6 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카 겔의 패드(200-300 메쉬, 석유 에터 및 에틸 아세테이트의 혼합물(4:1, v/v)로 용리함)를 통과시켜 3급-부틸 4-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-4-메틸사이클로헥실카바메이트(0.065 g, 49%)를 백색 고체로서 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 522.2.

단계 7

N-(트랜스-4-아미노-1-메틸사이클로헥실)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드 및 N-(시스-4-아미노-1-메틸사이클로헥실)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

다이옥산 중 30 mL의 4 N HCl 중 3급-부틸 4-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-4-메틸사이클로헥실카바메이트(0.08 g, 0.19 mmol)를 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 23% 아세토니트릴/77% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 32% 아세토니트릴/68% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(트랜스-4-아미노-1-메틸사이클로헥실)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(18 mg, 26%)를 백색 고체로서 수득하였다.

그리고, N-(시스-4-아미노-1-메틸사이클로헥실)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(12 mg, 17%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 418.

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 DMF 중 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(60 mg, 0.12 mmol) 및 칼륨 카보네이트(100 mg, 0.72 mmol)의 혼합물에 2-요오도-1,1,1-트라이플루오로에탄(0.5 mL, 5.07 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 3 시간 동안 80℃까지 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 50 mL의 물을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하여 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(60 mg, 조질)를 수득하였다.

조질 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

3 mL의 메탄올 중 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(60 mg, 0.12 mmol)의 혼합물에 농축 HCl(10 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃까지 가열하고, 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔사를 3급-부틸 메틸 에터로 마쇄하고, 여과하고, 건조하여 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 황색 고체(30 mg, 58%)로서 수득하였다.

실시예 419.

(S)-2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 DMF(10 mL) 중 2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(200 mg, 0.638 mmol), (S)-2-아미노프로판-1-올(57 mg, 0.765 mmol), EDCI(366 mg, 1.914 mmol), HOBt(258 mg, 1.914 mmol) 및 DIPEA(247 mg, 1.914 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하고, 형성된 침전물을 여과에 의해 분리하고, 메탄올(1 mL)로 세척한 후, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 30% 아세토니트릴/70% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후에 선형 방식으로 60% 아세토니트릴/40% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 (S)-2-(6-클로로-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(46 mg, 2 개의 단계 동안 26%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 420.

N-3급-부틸-2-(1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

3-요오도-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸

무수 DMF(20 mL) 중 6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(0.5 g, 2.69 mmol), KOH(0.45 g, 8.1 mmol) 및 I₂(1.37 g, 5.38 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 실온에서 교반하였다. 에틸 아세테이트(100 mL)를 첨가하고, 혼합물을 물(3 x 10 mL) 및 식염수(2 x 10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 이어서, 잔사를 에터(2 mL)로 세척하고, 여과하여 3-요오도-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(688 mg, 조질)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 313.

단계 2

3-요오도-1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸

무수 테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 3-요오도-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(650 mg, 2.09 mmol)의 용액에 칼륨 2-메틸프로판-2-올레이트(0.35 mL, 3.13 mmol)를 0℃에서 N₂ 대기 하에 첨가하였다. 30 분 후, 요오도메탄(445 mg, 3.13 mmol)을 0℃에서 적가하고, 이어서, 2 시간 동안 실온까지 가온하였다. 물(2 mL)을 첨가하고, 생성물을 다이클로로메탄(150 mL)으로 추출하고, 이어서 유기 상을 물(2 x 20 mL), 식염수(2 x 20 mL)로 세척하고, 이어서 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 석유 에터(2 mL)로 세척하고, 여과하여 3-요오도-1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(491 mg, 72%)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 327.

단계 3

1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸

무수 테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 3-요오도-1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(491 mg, 1.51 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(1.66 mL, THF 중 2 M, 3.31 mmol)를 -16℃에서 N₂ 대기 하에 적가하였다. 20 분 동안 교반한 후, 트라이부틸클로로스탄난(0.49 mL, 1.81 mmol)을 -16℃에서 적가하고, 이어서, 2 시간 동안 실온까지 가온하였다. NH₄Cl 용액(2 mL)을 첨가하고, 생성물을 다이클로로메탄(150 mL)으로 추출하고, 이어서, 물(3 x 20 mL) 및 식염수(2 x 20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(0.98 g, 조질)을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 4

메틸 2-(1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트

무수 DMF(10 mL) 중 메틸 2-브로모-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(0.3 g, 0.81 mmol), 1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸(0.98 g, 1.51 mmol), Pd(PPh₃)₄(174 mg, 0.151 mmol) 및 CuI(58 mg, 0.302 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 90℃까지 가열하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 형성된 침전물을 여과에 의해 분리하고, 석유 에터(3 mL)로 세척하여 메틸 2-(1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(200 mg, 50%)를 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 490.

단계 5

2-(1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산

1,4-다이옥산(5 mL) 및 물(2 mL) 중 메틸 2-(1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(200 mg, 0.409 mmol) 및 KOH(229 mg, 4.09 mmol)의 혼합물을 4 시간 동안 가열 환류하였다. 다이옥산을 농축하고, 잔류하는 수성 층을 1.0 M HCl에 의해 pH 4까지 조정하였다. 침전물을 여과에 의해 수거하고, 건조하여 2-(1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(230 mg, 조질)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 362.

단계 6

N-3급-부틸-2-(1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 DMF(5 mL) 중 2-(1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(190 mg, 0.526 mmol), 2-메틸프로판-2-아민(58 mg, 0.789 mmol), EDCI(301 mg, 1.578 mmol), HOBt(213 mg, 1.578 mmol) 및 DIPEA(204 mg, 1.578 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(5 mL)을 첨가하고, 형성된 침전물을 여과에 의해 분리한 후, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후에 선형 방식으로 90% 아세토니트릴/10% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(1-메틸-6-(트라이플루오로메틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(47 mg, 21%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 421.

N-3급-부틸-2-(1H-인다졸-7-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

7-브로모-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-인다졸

무수 테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 7-브로모-1H-인다졸(1 g, 5.1 mmol)의 용액에 NaH(305 mg, 60%, 7.65 mmol)를 -20℃에서 N₂ 대기 하에 첨가하였다. 20 분 후, (2-(클로로메톡시)에틸)트라이메틸실란(1 g, 6.1 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 20℃까지 가온하고, 1 시간 동안 교반하였다. 물(2 mL)을 첨가하고, 생성물을 다이클로로메탄(100 mL)으로 추출하고, 유기 상을 물(2 x 10 mL) 및 식염수(2 x 10 mL)로 세척하고, 이어서 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트:석유 에터 = 1:20으로 용리함)로 정제하여 7-브로모-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-인다졸(1.27 g, 77%)을 황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-인다졸

다이옥산(20 mL) 중 7-브로모-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-인다졸(0.5 g, 1.53 mmol), 4,4,5,5-테트라메틸-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,3,2-다이옥사보롤란(465 mg, 1.83 mmol), 칼륨 아세테이트(691 mg, 7.04 mmol) 및 PdCl₂(dppf) CH₂Cl₂(125 mg, 153 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 N₂ 대기 하에 100℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 물(10 mL)과 에틸 아세테이트(20 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 식염수(10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 농축하여 7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-인다졸(516 mg, 조질)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 375.

단계 3

N-3급-부틸-2-(1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-인다졸-7-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(20 mL) 및 물(5 mL) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(0.1 g, 0.337 mmol), 7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-인다졸(121 mg, 0.37 mmol), Pd₂(dba)₃(39 mg, 0.067 mmol), X-Phos(64 mg, 0.135 mmol) 및 Na₂CO₃(107 mg,1.01 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 N₂ 대기 하에 90℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 에틸 아세테이트(20 mL)와 물(10 mL) 사이에 분배하고, 유기 상을 식염수(10 mL)로 세척하고, 이어서 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 농축하여 N-3급-부틸-2-(1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-인다졸-7-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 조질)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 465.

단계 4

N-3급-부틸-2-(1H-인다졸-7-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

다이옥산(20 mL) 중 N-3급-부틸-2-(1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-인다졸-7-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(120 mg, 0.258 mmol)의 교반 용액에 HCl 기체를 포화될 때까지 발포시키고, 반응물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후에 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하였다. 농축 HCl을 순수한 생성물을 함유하는 합한 분획에 첨가한 후, 용매를 증발시켜 N-3급-부틸-2-(1H-인다졸-7-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(20 mg, 21%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 422 및 423.

N-(트랜스-3-아미노-1-메틸사이클로부틸)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트; N-(시스-3-아미노-1-메틸사이클로부틸)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

단계 1

3급-부틸 3-옥소사이클로부틸카바메이트

물(10 mL) 및 THF(50 mL) 중 3-아미노사이클로부탄온 하이드로클로라이드(2.0 g, 16.4 mmol), (Boc)₂O(3.9 g, 18 mmol) 및 Na₂CO₃(3.5 g, 33 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시키고, 잔사를 실리카 겔의 패드(200-300 메쉬, 에틸 아세테이트 및 석유 에터(1:3, v/v)의 혼합물로 용리함)를 통과시켜 3급-부틸 3-옥소사이클로부틸카바메이트(2.2 g, 73%)를 황색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 186.1.

단계 2

3급-부틸 3-(3급-부틸설핀일이미노)사이클로부틸카바메이트

20 mL의 THF 중 3급-부틸 3-옥소사이클로부틸카바메이트(2.2 g, 11.9 mmol), 2-메틸프로판-2-설핀아마이드(1.6 g, 13.1 mmol), Ti(OEt)₄(5.5 g, 24 mmol)의 혼합물을 50 내지 60℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온까지 냉각하고, 이어서, 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하였다. 형성된 고체를 여과에 의해 제거하였다. 여액을 증발 건조시키고, 조질 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(200-300 메쉬, 석유 에터 및 에틸 아세테이트(4:1)의 혼합물로 용리함)로 정제하여 3급-부틸 3-(3급-부틸설핀일이미노)사이클로부틸카바메이트를 무색 오일(2.0 g, 58%)로서 수득하였다.

단계 3

3급-부틸 3-(1,1-다이메틸에틸설핀아미도)-3-메틸사이클로부틸카바메이트

-78℃의 60 mL의 톨루엔 중 3급-부틸 3-(3급-부틸설핀일이미노)사이클로부틸카바메이트(0.8 g, 2.8 mmol)의 교반 용액에 Me₃Al(3.1 mL, 6.2 mmol, 톨루엔 중 2 M)을 첨가하였다. -78℃에서 20 분 교반한 후, MeLi(4.1 mL, 12.3 mmol, 다이메톡시메탄 중 3 M)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 추가로 4 시간 동안 교반하고, 이어서 3 mL의 물을 첨가하여 켄칭하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카 겔의 패드(200-300 메쉬, 석유 에터 및 에틸 아세테이트의 혼합물(4:1, v/v)로 용리함)를 통과시켜 3급-부틸 3-(1,1-다이메틸에틸설핀아미도)-3-메틸사이클로부틸카바메이트(0.45 g, 53%)를 조질 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 305.2.

단계 4

3급-부틸 3-아미노-3-메틸사이클로부틸카바메이트 하이드로클로라이드

150 mL의 MeOH 중 3급-부틸 3-(1,1-다이메틸에틸설핀아미도)-3-메틸사이클로부틸카바메이트(0.45 g, 1.48 mmol)의 교반 용액에 다이옥산 중 2 N HCl(1.8 mL)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 EtOAc로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 3급-부틸 3-아미노-3-메틸사이클로부틸카바메이트 하이드로클로라이드(0.22 g, 63%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 5

3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸사이클로부틸카바메이트 하이드로클로라이드

25 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.1 g, 0.32 mmol), 3급-부틸 3-아미노-3-메틸사이클로부틸카바메이트 하이드로클로라이드(0.1 g, 0.42 mmol), EDCI(0.092 g, 0.48 mmol), DMAP(0.059 g, 0.48 mmol), HOBt(0.065 g, 0.48 mmol) 및 DIPEA(0.248 g, 1.92 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카 겔의 패드(200-300 메쉬, 석유 에터 및 에틸 아세테이트의 혼합물(4:1, v/v)로 용리함)를 통과시켜 3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸사이클로부틸카바메이트 하이드로클로라이드(0.11 g, 69%)를 조질 백색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 494.2.

단계 7

N-(시스-3-아미노-1-메틸사이클로부틸)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트; N-(트랜스-3-아미노-1-메틸사이클로부틸)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

트라이플루오로아세트산(10 mL) 및 다이클로로메탄(30 mL)의 혼합물 중 3급-부틸 3-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸사이클로부틸카바메이트 하이드로클로라이드(0.11 g, 0.22 mmol)를 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 23% 아세토니트릴/77% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 32% 아세토니트릴/68% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(트랜스-3-아미노-1-메틸사이클로부틸)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(3 mg, 2.7%)를 수득하였다.

N-(시스-3-아미노-1-메틸사이클로부틸)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(16 mg, 14%)를 수득하였다.

실시예 424.

N-(1-시아노사이클로프로필)-2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

메틸-2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트

DMF(30 mL) 중 메틸 2-브로모-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(2.5 g, 6.74 mmol) 및 3-요오도-1,6-다이메틸-1H-인다졸(1.83 g, 6.74 mmol)의 용액에 헥사-n-부틸다이틴(5.86 g, 10.1 mmol) 및 이어서 Pd(PPh₃)₄(0.78 g, 0.674 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소를 발포시켜 탈기하고, 98℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 농축된 혼합물을 석유 에터/EtOAc(5:1 → 2:1, v/v)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(1.05 g, 36%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산

다이옥산/H₂O(40 mL/10 mL) 중 메틸 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(1 g, 2.3 mmol)의 교반 용액에 물(10 mL) 중 KOH(1.39 g, 34.5 mmol)의 용액을 실온에서 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 4 시간 동안 가열 환류하였다. 실온까지 냉각한 후, 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 물로 희석하고, HCl(수성, 2 M)에 의해 pH 3 내지 4까지 산성화시켰다. 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 건조하여 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(0.6 g, 84.5%)을 고체로서, 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 308.1.

단계 3

N-(1-시아노사이클로프로필)-2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(3 mL) 중 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.26 mmol) 및 1-아미노사이클로프로판카보니트릴 하이드로클로라이드(46 mg, 0.39 mmol)의 교반 혼합물에 EDCI(100 mg, 0.52 mmol) 및 이어서 DMAP(63 mg, 0.52 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물(5 mL)에 붓고, 여과하고, 고체를 DMSO 및 MeOH로 세척한 후, 건조하여 N-(1-시아노사이클로프로필)-2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(22 mg, 23%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 425.

2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸피롤리딘-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

3급-부틸 3-(2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸피롤리딘-1-카복실레이트

DMF(3 mL) 중 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.326 mmol) 및 2-사이클로프로필프로판-2-아민 하이드로클로라이드(100 mg, 0.488 mmol)의 교반 혼합물에 EDCI(125 mg, 0.652 mmol) 및 이어서 DMAP(80 mg, 0.652 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물(5 mL)에 붓고, 여과하여 조질 3급-부틸-3-(2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸피롤리딘-1-카복실레이트(130 mg, 81%)를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 490.2.

단계 2

2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸피롤리딘-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(2.5 mL) 중 3급-부틸 3-(2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)-3-메틸피롤리딘-1-카복실레이트(130 mg, 0.266 mmol)의 교반 혼합물에 트라이플루오로아세트산(2 mL)을 실온에서 적가하고, 반응 혼합물을 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 수성 NaHCO₃으로 희석하고, 여과하고, 물로 세척하고, 건조하여 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸피롤리딘-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(35 mg, 34%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 426.

2-(1-(2-(다이메틸아미노)에틸)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

2-(3-요오도-6-메틸-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸에탄아민

20 mL의 DMF 중 3-요오도-6-메틸-1H-인다졸(516 mg, 2 mmol), 2-클로로-N,N-다이메틸에탄아민 하이드로클로라이드(346 mg, 2.4 mmol) 및 칼륨 카보네이트(828 mg, 6 mmol)의 혼합물을 밤새 80℃까지 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 물(50 mL)을 첨가하고, 생성물을 다이클로로메탄(3 x 50 mL)으로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 농축하여 2-(3-요오도-6-메틸-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸에탄아민(1 g, 100%)을 수득하였다.

단계 2

N,N-다이메틸-2-(6-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)에탄아민

20 mL의 무수 THF 중 2-(3-요오도-6-메틸-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸에탄아민(450 mg, 1.4 mmol)의 용액을 질소 대기 하에 -20℃까지 냉각하고, 아이소프로필마그네슘 클로라이드(1.4 mL, 2.8 mmol, THF 중 2 M)를 첨가하고, 15 분 동안 -20℃에서 교반하였다. 이어서, 트라이부틸클로로스탄난(0.8 mL, 2.8 mmol)을 첨가하고, 실온까지 가온하였다. 반응물을 얼음 욕에서 냉각하고, 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(3 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 농축하여 1.4 g의 조질 N,N-다이메틸-2-(6-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)에탄아민을 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 직접 후속 단계에 사용하였다.

단계 3

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(1-(2-(다이메틸아미노)에틸)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-브로모-N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(210 mg, 0.5 mmol) 및 N,N-다이메틸-2-(6-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)에탄아민(1.4 g, 2.85 mmol)과 15 mL의 무수 DMF 중 구리 요오다이드(10 mg, 0.52 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(20 mg, 0.017 mmol)의 혼합물을 밤새 N₂ 하에 85℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 50 mL의 물로 희석하고, 다이클로로메탄(8 x 50 mL)으로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 농축하였다. 조질 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 550.

단계 4

2-(1-(2-(다이메틸아미노)에틸)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

5 mL의 메탄올 및 1 mL의 THF 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(1-(2-(다이메틸아미노)에틸)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(127 mg, 0.23 mmol)의 용액에 1 mL의 농축 HCl을 첨가한 후, 3 시간 동안 교반하였다. 침전물을 여과하고, 필터 케이크를 2-메톡시-2-메틸프로판(5 mL)으로 세척하여 25 mg의 2-(1-(2-(다이메틸아미노)에틸)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드를 수득하였다.

실시예 427.

N-3급-부틸-2-(1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

3-(3-요오도-6-메틸-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민

50 mL의 DMF 중 3-요오도-6-메틸-1H-인다졸(2.58 g, 10 mmol), 3-클로로-N,N-다이메틸프로판-1-아민 하이드로클로라이드(2.37 g, 15 mmol) 및 칼륨 카보네이트(4.14 g, 30 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 85℃까지 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 100 mL의 물을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(4 x 100 mL)로 추출하였다. 이어서, 합한 유기 상에 20 mL의 6 N HCl을 첨가하고, 용액을 다이클로로메탄(4 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 나트륨 설페이트로 건조하고, 농축하여 3-(3-요오도-6-메틸-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(1.74 g, 50.6%)을 수득하였다.

단계 2

N,N-다이메틸-3-(6-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)프로판-1-아민

20 mL의 무수 THF 중 3-(3-요오도-6-메틸-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(400 mg, 1.2 mmol)의 용액을 -20℃까지 질소 대기 하에 냉각한 후, 아이소프로필마그네슘 클로라이드(1.2 mL, 2.4 mmol, THF 중 2 M)를 첨가하고, 15 분 동안 -20℃에서 교반하였다. 이어서, 트라이부틸클로로스탄난(0.7 mL, 2.4 mmol)을 첨가하고, 실온까지 가온하였다. 반응물을 얼음 욕에서 냉각하고, 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 농축하여 N,N-다이메틸-3-(6-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)프로판-1-아민(1.2 g, 조질)을 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 직접 후속 단계에 사용하였다.

단계 3

N-3급-부틸-2-(1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

15 mL의 무수 DMF 중 2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(150 mg, 0.5 mmol), N,N-다이메틸-3-(6-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)프로판-1-아민(1.2 g, 조질), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(40 mg, 0.035 mmol) 및 구리 요오다이드(20 mg, 0.1 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 N₂ 하에 90℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 50 mL의 물을 첨가하였고, 일부 침전물이 형성되었다. 여과 후, 고체를 1,4-다이옥산(3 mL, 1 N) 중 HCl의 용액에 용해시키고, 5 분 동안 교반하였다. 반응물을 농축하고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후에 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 26 mg의 N-3급-부틸-2-(1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드를 수득하였다.

실시예 428.

N-(2-사이클로프로필프로판-2-일)-2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(3 mL) 중 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.26 mmol) 및 2-사이클로프로필프로판-2-아민 하이드로클로라이드(53 mg, 0.39 mmol)의 교반 혼합물에 EDCI(100 mg, 0.52 mmol) 및 이어서 DMAP(63 mg, 0.52 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반한 후, 물(5 mL)에 붓고, 여과하였다. 조질 고체를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 58% 아세토니트릴/42% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 88% 아세토니트릴/12% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(2-사이클로프로필프로판-2-일)-2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(25 mg, 25%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 429.

2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-(하이드록시메틸)사이클로프로필)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(3 mL) 중 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.26 mmol) 및 (1-아미노사이클로프로필)메탄올(34 mg, 0.39 mmol)의 교반 혼합물에 EDCI(100 mg, 0.52 mmol) 및 이어서 DMAP(63 mg, 0.52 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물(5 mL)에 붓고, 여과하였다. 조질 생성물을 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 35% 아세토니트릴/65% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 45% 아세토니트릴/55% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-(하이드록시메틸)사이클로프로필)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(35 mg, 36%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 430.

2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

DMF(3 mL) 중 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(80 mg, 0.26 mmol) 및 N ¹,N ¹,2-트라이메틸프로판-1,2-다이아민(45 mg, 0.39 mmol)의 교반 혼합물에 EDCI(100 mg, 0.52 mmol) 및 이어서 DMAP(63 mg, 0.52 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물(5 mL)에 붓고, EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 20% 아세토니트릴/80% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 55% 아세토니트릴/45% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(1,6-다이메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(26 mg, 25%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 431.

2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸피롤리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

단계 1

3급-부틸 3-메틸-3-(2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)피롤리딘-1-카복실레이트

6 mL의 DMF 중 2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.34 mmol), EDCI(123 mg, 0.64 mmol), DMAP(110 mg, 0.90 mmol) 및 DIEA(131 mg, 1.02 mmol)의 교반 용액에 3급-부틸 3-아미노-3-메틸피롤리딘-1-카복실레이트(100 mg, 0.54 mmol)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가한 후, 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 40 mL의 물에 붓고, 에틸 아세테이트(150 mL)로 추출하였다. 유기 상을 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 석유 에터로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 조질 3급-부틸 3-메틸-3-(2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)피롤리딘-1-카복실레이트(76 mg, 47.0%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 476.2.

단계 2

2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸피롤리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

6 mL의 다이클로로메탄 중 3급-부틸 3-메틸-3-(2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)피롤리딘-1-카복실레이트(76 mg, 0.16 mmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(3 mL)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가하고, 1 시간 동안 교반하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 20% 아세토니트릴/80% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 45% 아세토니트릴/65% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(3-메틸피롤리딘-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(18 mg, 22.9%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 432.

N-(1-(하이드록시메틸)사이클로프로필)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.34 mmol), EDCI(123 mg, 0.64 mmol) 및 DMAP(110 mg, 0.90 mmol)의 교반 용액에 (1-아미노사이클로프로필)메탄올(59 mg, 0.68 mmol)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가한 후, 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 40 mL의 물에 붓고, 여과하고, 필터 케이크를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 25% 아세토니트릴/75% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(1-(하이드록시메틸)사이클로프로필)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(10 mg, 8.1%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 433.

N-(2-사이클로프로필프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.34 mmol), EDCI(130 mg, 0.68 mmol), DMAP(83 mg, 0.68 mmol) 및 DIEA(88 mg, 0.68 mmol)의 교반 용액에 2-사이클로프로필프로판-2-아민 하이드로클로라이드(92 mg, 0.68 mmol)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가한 후, 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 40 mL의 물에 붓고, 여과하고, 필터 케이크를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 45% 아세토니트릴/55% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 75% 아세토니트릴/25% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(2-사이클로프로필프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(12 mg, 9.4%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 434.

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.34 mmol), EDCI(130 mg, 0.68 mmol), DMAP(83 mg, 0.68 mmol) 및 DIEA(88 mg, 0.68 mmol)의 교반 용액에 1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-아민(138 mg, 0.68 mmol)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가한 후, 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 40 mL의 물에 붓고, 여과하고, 필터 케이크를 석유 에터로 세척하여 조질 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(75 mg, 46.0%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 479.2.

단계 2

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(75 mg, 0.16 mmol)를 다이옥산 중 HCl(g)의 포화 용액(15 mL)에 실온에서 첨가하고, 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 2 mL의 메탄올로 세척한 후, 40℃에서 감압 하에 건조하여 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(15 mg, 26.4%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 435.

N-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

3급-부틸 2-메틸-2-(2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)프로필카바메이트

6 mL의 DMF 중 2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.34 mmol), EDCI(130 mmol, 0.68 mmol), DMAP(83 mg, 0.68 mmol) 및 DIEA(88 mg, 0.68 mmol)의 교반 용액에 3급-부틸 2-아미노-2-메틸프로필카바메이트(128 mg, 0.68 mmol)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가한 후, 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 40 mL의 물에 붓고, 여과하고, 필터 케이크를 석유 에터로 세척하여 조질 3급-부틸 2-메틸-2-(2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)프로필카바메이트(100 mg, 63.4%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 463.2.

단계 2

N-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

3급-부틸 2-메틸-2-(2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)프로필카바메이트(100 mg, 0.22 mmol)를 에틸 아세테이트(20 mL) 중 HCl 기체의 포화 용액에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 5 mL의 에틸 아세테이트로 세척하여 N-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(25 mg, 32%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 436.

N-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.34 mmol), DCI(123 mg, 0.64 mmol) 및 DMAP(110 mg, 0.90 mmol)의 교반 용액에 N¹,N¹,2-트라이메틸프로판-1,2-다이아민(100 mg, 0.86 mmol)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가한 후, 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 40 mL의 물에 붓고, 여과하고, 필터 케이크를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 메탄올 및 THF의 혼합물(1:3, v/v)로 용리함)로 정제하여 N-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(22 mg, 16.5%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 437.

N-(1-시아노사이클로프로필)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

6 mL의 DMF 중 2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.34 mmol), DIEA(200 mg, 1.55 mmol), EDCI(123 mg, 0.64 mmol) 및 DMAP(110 mg, 0.90 mmol)의 교반 용액에 1-아미노사이클로프로판카보니트릴 하이드로클로라이드(100 mg, 0.84 mmol)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가한 후, 혼합물을 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 40 mL의 물에 붓고, 여과하고, 필터 케이크를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 35% 아세토니트릴/65% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 70% 아세토니트릴/30% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-(1-시아노사이클로프로필)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(5 mg, 4.1%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 438.

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(3-모폴리노프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

2-브로모-N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 DMF(30 mL) 중 2-브로모-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(2.5 g, 10.33 mmol), 1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-아민(2.52 g, 12.4 mmol), EDCI(1.97 g, 10.33 mmol), HOBt(2.8 g, 20.6 mmol) 및 DIPEA(2.7 g, 20.66 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 30℃까지 가열하였다. 이어서, 물(30 mL)을 첨가하고, 형성된 침전물을 여과에 의해 분리하고, 필터 케이크를 물(10 mL)로 세척하고, 건조하여 1-(2-브로모-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-일)-2-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일아미노)에탄온(2.7 g, 61%)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 427.

단계 2

2-브로모-N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 DMF(20 mL) 중 1-(2-브로모-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-일)-2-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일아미노)에탄온(1.3 g, 3.04 mmol), 클로로트라이페닐메탄(1.0 g, 3.65 mmol) 및 트라이에틸아민(0.46 g, 4.56 mmol)의 혼합물을 5 시간 동안 90℃까지 가열하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(200 mL)로 추출하고, 유기 상을 물(3 x 20 mL) 및 식염수(2 x 20 mL)로 세척하였다. 이어서, 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하고, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트:석유 에터 = 1:10로 용리함)로 정제하여 2-브로모-N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(1.73 g, 85%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 DMF(20 mL) 중 2-브로모-N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(1.73 g, 2.58 mmol), 6-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(1.2g, 2.84 mmol), Pd(PPh₃)₄(298 mg, 0.258 mmol) 및 CuI(98 mg, 0.516 mmol)의 혼합물을 4 시간 동안 90℃까지 가열하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(200 mL)로 추출하고, 유기 상을 물(2 x 50 mL) 및 식염수(2 x 50 mL)로 세척한 후, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 석유 에터(10 mL)로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(1.21 g, 65%)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 721.

단계 4

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(3-모폴리노프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 DMF(20 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 0.139 mmol), 4-(3-클로로프로필)모폴린(27 mg, 0.166 mmol) 및 K₂CO₃(58 mg, 0.417 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 90℃까지 가열하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(100 mL)로 추출하고, 유기 상을 물(3 x 10 mL) 및 식염수(2 x 10 mL)로 세척한 후, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(3-모폴리노프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(95 mg, 조질)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 848.

단계 5

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(3-모폴리노프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

다이옥산(40 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(3-모폴리노프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(95 mg, 0.112 mmol)의 교반 용액에 HCl 기체를 포화될 때까지 발포시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 메탄올(1 mL)로 마쇄하고, 이어서 경사분리하고, 건조하여 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(3-모폴리노프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(42 mg, 71%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 439.

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 DMF(20 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 0.139 mmol), 2-클로로-1-모폴리노에탄온(27 mg, 0.166 mmol) 및 K₂CO₃(58 mg, 0.417 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 90℃까지 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 에틸 아세테이트(100 mL)를 첨가하고, 용액을 물(3 x 10 mL) 및 식염수(2 x 10 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 농축하여 잔사를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 848.

단계 2

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

다이옥산(40 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 0.118 mmol)의 교반 용액에 HCl 기체를 포화될 때까지 발포시키고, 이어서 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 잔사를 메탄올(1 mL)로 마쇄하고, 용매를 경사분리하고, 고체를 건조하여 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노-2-옥소에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(44 mg, 71%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 440.

2-(1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

N,N-다이메틸-3-(6-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)프로판-1-아민

20 mL의 무수 THF 중 3-(3-요오도-6-메틸-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(480 mg, 1.4 mmol)의 용액을 질소 대기 하에 -20℃까지 냉각하고, 아이소프로필마그네슘 클로라이드(1.4 mL, 2.8 mmol, THF 중 2 M)를 첨가하고, 15 분 동안 -20℃에서 교반하였다. 이어서, 트라이부틸클로로스탄난(0.8 mL, 2.8 mmol)을 첨가하고, 실온까지 가온하였다. 반응물을 얼음 욕에서 냉각하고, 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 켄칭하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 농축하여 1.4 g의 조질 N,N-다이메틸-3-(6-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)프로판-1-아민을 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 직접 후속 단계에 사용하였다.

단계 2

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

2-브로모-N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(300 mg, 0.7 mmol) 및 N,N-다이메틸-3-(6-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)프로판-1-아민(1.4 g, 2.76 mmol)과 15 mL의 무수 DMF 중 구리 요오다이드(10 mg, 0.52 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(10 mg, 0.087 mmol)의 혼합물을 밤새 N₂ 하에 85℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 50 mL의 물로 희석하고, 형성된 고체를 여과에 의해 분리하였다. 고체를 2-메톡시-2-메틸프로판(5 mL)으로 세척하여 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(1 g, 조질)를 수득하고, 추가 정제 없이 직접 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 564_.

단계 3

2-(1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

10 mL의 메탄올 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(1 g, 1.78 mmol)의 용액에 1 mL의 농축 HCl을 첨가하고, 3 시간 동안 교반하고, 침전물을 여과하고, 필터 케이크를 2-메톡시-2-메틸프로판으로 세척하여 25 mg의 2-(1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-6-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드를 수득하였다.

실시예 441.

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

3-(5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민

DMF(25 mL) 중 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸(1 g, 3.2 mmol)의 용액에 K₂CO₃(1. 8 g, 12.8 mmol) 및 3-클로로-N,N-다이메틸프로판-1-아민(1.1 g, 6.4 mmol)을 첨가하고, 이어서, 반응 혼합물을 80℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각한 후, H₂O(25 mL)를 첨가하고, 생성물을 에틸 아세테이트(100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 H₂O(100 mL), 식염수(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하고, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 다이클로로메탄/CH₃OH = 10:1로 용리함)로 정제하여 3-(5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(1.1 g, 78.5%)을 황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

3-(5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민

무수 THF(25 mL) 중 3-(5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(1.2 g, 2.78 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(1.5 mL, THF 중 2 M, 3 mmol)를 -16℃에서 질소 대기 하에 적가하고, 30 분 동안 교반하고, 트라이부틸클로로스탄난(3.3 mL, 3.6 mmol)을 -16℃에서 질소 하에 적가하고, 이어서 반응 혼합물을 실온까지 천천히 가온하고, 2 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 NH₄Cl(40 mL)의 포화 용액으로 켄칭하고, EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하여 3-(5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(1.1 g, 71%)을 오일로서 수득하고, 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다.

단계 3

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(10 mL) 중 3-(5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(120 mg, 0.22 mmol) 및 2-브로모-N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(200 mg, 0.26 mmol)의 용액에 CuI(30 mg, 0.16 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄(47 mg, 0.041 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 3 분 동안 질소를 발포시킴으로써, 반응 혼합물을 탈기하고, 질소로 재충전하였다. 혼합물을 5 시간 동안 질소 하에 80℃까지 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 물(50 mL)을 첨가하고, 생성물을 EtOAc(3 x 40 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(88 mg, 조질)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 858.

단계 4

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

3 mL의 다이클로로메탄 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(88 mg, 0.12 mmol)의 용액에 3 mL의 트라이플루오로아세트산을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 용매 증발 후, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드를 황색 고체(22 mg, 34.5%)로서 수득하였다.

실시예 442.

3급-부틸 3-(2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로헥실카바메이트

단계 1

N-(3-아미노사이클로헥실)-2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

15 mL의 DMF 중 2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.2 g, 0.83 mmol), 사이클로헥산-1,3-다이아민(0.473 g, 4.15 mmol), HATU(0.475 g, 1.25 mmol), DIPEA(0.322 g, 2.5 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하여 N-(3-아미노사이클로헥실)-2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드를 조질로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 338.1.

단계 2

3급-부틸 3-(2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로헥실카바메이트

물(50 mL) 및 THF(150 mL)의 혼합물 용액 중 N-(3-아미노사이클로헥실)-2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드, (Boc)₂O(3.0 g, 13.8 mmol) 및 Na₂CO₃(2.9 g, 27.6 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시키고, 잔사를 석유 에터로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 3급-부틸 3-(2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로헥실카바메이트(0.5 g, 2 개의 단계에 걸쳐 수율 72%)를 백색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 438.1.

단계 3

3급-부틸 3-(2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로헥실카바메이트

100 mL의 DMF 중 6-클로로-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(0.47 g, 1.03 mmol), 3급-부틸 3-(2-브로모-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로헥실카바메이트(0.45 g, 1.03 mmol), CuI(0.07 g, 0.37 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄(0.07 g, 0.06 mmol)의 혼합물을 80℃에서 질소 대기 하에 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 85% 아세토니트릴/15% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 3급-부틸 3-(2-(6-클로로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로헥실카바메이트(0.3 g, 56%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 443.

N-(1-(아미노메틸)사이클로프로필)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

에틸 1-아미노사이클로프로판카복실레이트 하이드로클로라이드

300 mL의 에탄올 중 1-아미노사이클로프로판카복실산(5.8 g, 57.4 mmol)의 현탁액을 0℃까지 냉각하고, 티온일 클로라이드(20.5 g, 172.7 mmol)를 30분에 걸쳐 적가하였다. 이어서, 차가운 욕을 제거하고, 반응 혼합물을 2 시간 동안 환류 하에 가열하고, 이어서, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시켜 에틸 1-아미노사이클로프로판카복실레이트 하이드로클로라이드(9.53 g, 100%)를 고체로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

단계 2

에틸 1-(벤질옥시카보닐아미노)사이클로프로판카복실레이트

450 mL의 에틸 아세테이트 중 에틸 1-아미노사이클로프로판카복실레이트 하이드로클로라이드(9.5 g, 57.3 mmol)의 현탁액을 0℃까지 냉각하고, 325 mL의 물 중 NaHCO₃(39.5 g, 470.3 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 이어서, 벤질 클로로폼에이트(13.3 g, 78.2 mmol)를 적가하였다. 차가운 욕을 제거하고, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 유기 상을 1 N HCl(100 mL), 포화 NaHCO₃ 용액(100 mL), 식염수(100 mL)로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 농축하여 백색 고체를 수득하였다. 고체를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트 및 석유 에터(1:3, v/v)의 혼합물로 용리함)로 정제하여 에틸 1-(벤질옥시카보닐아미노)사이클로프로판카복실레이트(13.7 g, 91%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

벤질 1-(하이드록시메틸)사이클로프로필카바메이트

50 mL의 THF 중 에틸 1-(벤질옥시카보닐아미노)사이클로프로판카복실레이트(8.7 g, 33.0 mmol)의 교반 용액에 실온에서 LiBH₄(2.26 g, 103.76 mmol)를 천천히 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃까지 냉각하고, 50% HOAc 용액(10 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 반응 혼합물을 70 mL의 물과 70 mL의 다이에틸 에터 사이에 분배하였다. 유기 상을 포화 수성 NaHCO₃ 용액(15 mL), 식염수(10 mL)로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 40℃에서 감압 하에 증발시켜 조질 생성물을 수득하고, 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 석유 에터 및 에틸 아세테이트(1:1, v/v)의 혼합물로 용리함)로 정제하여 벤질 1-(하이드록시메틸)사이클로프로필카바메이트(6.36 g, 87.1%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

(1-(벤질옥시카보닐아미노)사이클로프로필)메틸 메탄설포네이트

0℃의 100 mL의 다이클로로메탄 중 벤질 1-(하이드록시메틸)사이클로프로필카바메이트(4 g, 18.1 mmol)의 교반 용액에 DIEA(3 g, 23.5 mmol)를 첨가하고, 이어서 MS:Cl(2.28 g, 19.9 mmol)을 천천히 첨가하였다. 용액을 0℃에서 30 분 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO₃ 용액(20 mL)과 식염수(15 mL) 사이에 분배하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 40℃에서 감압 하에 증발시켜 조질 생성물을 수득하고, 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트 및 석유 에터의 혼합물(1:1, v/v)로 용리함)로 정제하여 (1-(벤질옥시카보닐아미노)사이클로프로필)메틸 메탄설포네이트(5 g, 92.4%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 5

벤질 1-(아지도메틸)사이클로프로필카바메이트

100 mL의 DMF 중 (1-(벤질옥시카보닐아미노)사이클로프로필)메틸 메탄설포네이트(5 g, 16.7 mmol)의 교반 용액에 NaN₃(3 g, 46.15 mmol)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 70℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 400 mL의 물에 붓고, 에틸 아세테이트(600 mL)로 추출하였다. 유기 상을 식염수(50 mL)로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 40℃에서 감압 하에 증발시켜 조질 생성물을 무색 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 247.2.

단계 6

[1-(3급-부톡시카보닐아미노-메틸)-사이클로프로필]-카밤산 벤질 에스터

40 mL의 THF 및 20 mL의 물 중 벤질 1-(아지도메틸)사이클로프로필카바메이트(2.78 g, 11.3 mmol)의 교반 용액에 PPh₃(5.92 g, 22.6 mmol)을 하나의 분획으로 실온에서 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. (Boc)₂O(3.75 g, 17.2 mmol) 및 Et₃N(2.3 g, 23 mmol)을 연속적으로 첨가하고, 최종 혼합물을 실온에서 추가로 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 200 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고, 식염수(20 mL)로 세척하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 EtOAc(50 mL)에 용해시키고, 식염수(20 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 조질 백색 고체를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+Na)⁺ = 343.2.

단계 7

3급-부틸(1-아미노사이클로프로필)메틸카바메이트

120 mL의 메탄올 중 [1-(3급-부톡시카보닐아미노-메틸)-사이클로프로필]-카밤산 벤질 에스터(0.912 g, 2.85 mmol)의 교반 용액에 탄소 상의 10% Pd(200 mg)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가하였다. 이어서, 수소를 5 분 동안 발포시킴으로써, 혼합물을 탈기시킨 후, 수소 대기 하에 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하여 촉매를 제거하고, 여액을 40℃에서 감압 하에 증발시켜 3급-부틸(1-아미노사이클로프로필)메틸카바메이트(0.4 g, 75.4%)를 무색 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 187.2.

단계 8

3급-부틸(1-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로프로필)메틸카바메이트

6 mL의 DMF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(0.10 g, 0.32 mmol), EDCI(0.123 g, 0.64 mmol), DMAP(0.122 g, 1 mmol) 및 DIPEA(0.11 g, 0.90 mmol)의 교반 용액에 3급-부틸(1-아미노사이클로프로필)메틸카바메이트(0.20 g, 1.07 mmol)를 하나의 분획으로 실온에서 첨가하고, 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 50 mL의 물에 붓고, 여과하였다. 필터 케이크를 물로 세척하고, 건조하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 480.2.

단계 9

N-(1-(아미노메틸)사이클로프로필)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

3급-부틸(1-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)사이클로프로필)메틸카바메이트(95 mg, 0.20 mmol)를 20 mL의 다이옥산 중 HCl(g)의 포화 용액에 용해시키고, 용액을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 용매를 40℃에서 감압 하에 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(10 mL)로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 N-(1-(아미노메틸)사이클로프로필)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(13 mg, 15.8%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

실시예 444.

N-3급-부틸-2-(아이소퀴놀린-8-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 다이클로로메탄(20 mL) 중 2-브로모-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(0.2 g, 0.83 mmol), 2-메틸프로판-2-아민(66 mg, 0.91 mmol), EDCI(476 mg, 2.49 mmol) 및 HOBt(112 mg, 0.83 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 약 절반 부피로 농축하고, 형성된 침전물을 여과에 의해 분리하고, 필터 케이크를 다이클로로메탄으로 세척하고, 건조하여 2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(103 mg, 42%)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 297.

단계 2

N-3급-부틸-2-(아이소퀴놀린-8-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(20 mL) 및 물(5 mL) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(0.1 g, 0.337 mmol), 아이소퀴놀린-8-일보론산(64 mg, 0.37 mmol), Pd₂dba₃(77 mg, 0.067 mmol), X-Phos(64 mg, 0.135 mmol) 및 Na₂CO₃(107 mg, 1.01 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 N₂ 대기 하에 90℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 제조용-TLC(메탄올:다이클로로메탄 = 1:10)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(아이소퀴놀린-8-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(76 mg, 66%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 445.

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 DMF(20 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(200 mg, 0.277 mmol), 4-(2-클로로에틸)모폴린 하이드로클로라이드(62 mg, 0.333 mmol) 및 K₂CO₃(191 mg, 1.385 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 90℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(100 mL)로 추출하고, 유기 상을 물(3 x 10 mL) 및 식염수(2 x 10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(167 mg, 조질)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 834.

단계 2

N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

다이옥산(20 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(167 mg, 0.2 mmol)의 교반 용액에 HCl 기체를 포화될 때까지 발포시키고, 이어서 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 메탄올(1 mL)로 마쇄하고, 이어서 경사분리하고, 건조하여 N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-메틸-1-(2-모폴리노에틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(76 mg, 64%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 446.

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3,4-다이하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-1H-인다졸

다이클로로메탄(200 mL) 중 1H-인다졸-5-올(5.0 g, 37.3 mol) 및 이미다졸(12.7 g, 186.5 mmol)의 교반 용액에 3급-부틸클로로다이메틸실란(16.8 g, 112 mol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 식염수(3 x 50 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 조질 혼합물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, EtOAc:석유 에터 = 1:10, v/v)로 정제하여 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-1H-인다졸(9.5 g, 수율 100%)을 황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1H-인다졸

0℃의 DMSO(50 mL) 중 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-1H-인다졸(5.3 g, 0.02 mol)의 교반 용액에 KOH(3.36 g, 0.06 mol) 및 이어서 요오드(10.2 g, 0.04 mol)를 분할식으로 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 추가로 10 분 동안 교반한 후, 반응물을 10% Na₂S₂O₃으로 켄칭하고, 물로 희석하였다. 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 물로 세척하고, 건조하여 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1H-인다졸을 수득하였다. 조질 고체를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 375.

단계 3

3급-부틸 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1H-인다졸-1-카복실레이트

다이클로로메탄(100 mL) 중 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1H-인다졸(조질, 0.02 mol)의 교반 용액에 Boc₂O(4.75 g, 0.022 mol) 및 이어서 DMAP(0.48 g, 0.004 mol) 및 Et₃N(2.2 g, 0.022 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 석유 에터/EtOAc(6:1)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1H-인다졸-1-카복실레이트(7.8 g, 2 개의 단계에 걸쳐 82%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

3급-부틸 5-하이드록시-3-요오도-1H-인다졸-1-카복실레이트

THF(10 mL) 중 3급-부틸 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1H-인다졸-1-카복실레이트(1 g, 2.11 mmol)의 교반 용액에 THF(5 mL) 중 TBAF(5.6 g, 21.1 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 0.5 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 물로 희석하고, EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 조질 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: 361 [M + H]⁺.

단계 5

3급-부틸 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸-1-카복실레이트

다이에틸 브로모다이플루오로메틸포스포네이트(1.13 g, 4.22 mmol)를 하나의 분획으로 MeCN/H₂O(20 mL/20 mL) 중 3급-부틸 5-하이드록시-3-요오도-1H-인다졸-1-카복실레이트 및 KOH(2.36 g, 42.2 mmol)의 냉각된(-30℃) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 가온하였다. 20 분 후, 반응 혼합물을 EtOAc(15 mL)로 희석하고, 유기 상을 분리하였다. 수 상을 EtOAc(10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 용매를 증발시켜 조질 생성물을 수득하고, 석유 에터/EtOAc(5:1)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸-1-카복실레이트(0.41 g, 2 개의 단계에 걸쳐 47%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 6

5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸

다이클로로메탄(10 mL) 중 3급-부틸 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸-1-카복실레이트(410 mg, 1 mmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(5 mL)을 실온에서 적가하고, 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 수성 NaHCO₃으로 세척한 후, 유기 물질을 Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸(300 mg, 97%)을 백색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 311.

단계 7

메틸 2-브로모-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트

DMF(10 mL) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 및 (클로로메탄트라이일)트라이벤젠(1.55 g, 5.56 mmol)의 교반 용액에 트라이에틸아민(0.56 g, 5.56 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물에 붓고, EtOAc(3 x 15 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 잔사를 석유 에터/EtOAc(10:1)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(1.1 g, 73%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 8

5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸

플라스크에서, 5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸(1.2 g, 2.93 mmol)을 THF(30 mL)에 용해시켰다. 용액을 -25℃까지 냉각하였다. 아이소프로필마그네슘 클로라이드(8.8 mL, 8.8 mmol, THF 중 1 M)를 -25℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -25℃에서 20 분 동안 교반하였다. 이어서, 클로로트라이부틸틴(1.6 mL, 5.86 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 1.5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭한 후, EtOAc(3 x 20 mL)로 추출하고, 유기 물질을 물(10 mL), 식염수(2 x 10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 석유 에터/EtOAc(8:1)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(1.1 g, 79%)을 오일로서 수득하였다.

단계 9

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

환저 플라스크 중에서, 2-브로모-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(530 mg, 1 mmol) 및 5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(470 mg, 1 mmol)을 DMF(10 mL)에 질소 하에 용해시켰다. Pd(PPh₃)₄(58 mg, 0.05 mmol) 및 CuI(38 mg, 0.2 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 질소를 발포시키면서 5 분 동안 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 농축된 혼합물을 석유 에터/EtOAc(3:1 → 1:1, v/v)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(410 mg, 64%)를 고체로서 수득하였다.

단계 10

2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에틸 메탄설포네이트

0℃의 10 mL의 다이클로로메탄 중 2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에탄올(292 mg, 2.00 mmol)의 교반 용액에 DIEA(284 mg, 2.20 mmol)를 첨가하고, MS:Cl(252 mg, 2.20 mmol)을 천천히 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 0℃에서 30 분 동안 교반하였다. 반응물을 포화 나트륨 바이카보네이트 용액(3 mL)으로 켄칭하고, 유기 상을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 40℃에서 감압 하에 증발시켜 2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에틸 메탄설포네이트(360 mg, 80.20%)를 무색 오일로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

단계 11

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(5 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 0.156 mmol)의 용액에 2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에틸 메탄설포네이트(42 mg, 0.187 mmol) 및 이어서 K₂CO₃(65 mg, 0.468 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 혼합물을 물에 붓고, 여과하고, 필터 케이크를 물로 세척하고, 건조하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드를 수득하였다. 조질 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 771.0.

단계 12

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3,4-다이하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 실온에서 적가하고, 반응 혼합물을 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같았다: 초기 38% 아세토니트릴/62% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 9 분에 걸쳐 선형 방식으로 46% 아세토니트릴/54% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3,4-다이하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(30 mg, 2 개의 단계에 걸쳐 39%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 447.

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

4-클로로부탄-2-온

얼음-물 욕에 함침된 다이클로로메탄(100 mL) 중 4-하이드록시부탄-2-온(1.0 g, 11.36 mmol) 및 NaHCO₃(2.8 g, 33.3 mmol)의 현탁액에 다이클로로메탄(5 mL) 중 SOCl₂(2.7 g, 22.8 mmol)의 용액을 10 분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 추가로 5 시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 분별 깔대기로 옮기고, 식염수(2 x 30 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 농축하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용되는 조질 생성물(1.0 g)을 황색 오일로서 수득하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-옥소부틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(4 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 0.156 mmol)의 용액에 4-클로로부탄-2-온(20 mg, 0.187 mmol) 및 이어서 K₂CO₃(65 mg, 0.468 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 1.5 시간 동안 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 혼합물을 물에 붓고, 여과하고, 건조하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-옥소부틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드를 수득하였다. 조질 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 713.

단계 3

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

MeOH(5 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-옥소부틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(0.156 mmol)의 용액에 NaBH₄(30 mg, 0.78 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 가온하고, 1 시간 동안 교반하였다. 수성 NH₄Cl 용액을 혼합물에 첨가하고, 생성물을 EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 조질 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 715.

단계 4

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 실온에서 적가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 1.5 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 제조용-TLC(실리카 겔, 석유 에터:EtOAc = 1:1)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(22 mg, 3 개의 단계에 걸쳐 30%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 448.

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(5 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 0.156 mmol)의 용액에 1-클로로-3-(메틸설폰일)프로판(30 mg, 0.187 mmol) 및 이어서 K₂CO₃(65 mg, 0.468 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 3 시간 동안 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 혼합물을 물에 붓고, 여과하고, 건조하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(105 mg, 88%)를 수득하였다. 조질 생성물을 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS: (M+H)⁺ = 763.

단계 2

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(4 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(105 mg, 0.138 mmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(2 mL)을 실온에서 적가하고, 반응 혼합물을 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 제조용-TLC(실리카 겔, 용리제로서 EtOAc)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(50 mg, 72% )를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 449.

2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

단계 1

5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸

30 mL의 무수 THF 중 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-요오도-1-메틸-1H-인다졸(3.8 g, 10 mmol)의 용액을 질소 하에 -20℃까지 냉각하고, 아이소프로필마그네슘 클로라이드(6 mL, 12 mmol, THF 중 2 M)를 첨가하고, 15 분 동안 -20℃에서 교반하였다. 트라이부틸클로로스탄난(12 mL, 14 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 암모늄 클로라이드의 포화 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 농축하여 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(5.2 g, 조질)을 무색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

단계 2

메틸 2-(5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트

40 mL의 무수 DMF 중 5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(5.2 g, 전 단계로부터의 조질물), 메틸 2-브로모-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(5.6 g, 11.3 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(300 mg, 0.26 mmol), 구리 요오다이드(260 mg, 1.36 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 질소 하에 90℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 50 mL의 물로 희석하고, 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 유기 층을Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 에터(5 mL)로 마쇄하고, 경사분리하고, 건조하여 2-(5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(3.4 g, 52%)를 수득하였다.

단계 3

메틸 2-(5-하이드록시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트

THF(25 mL) 중 2-(5-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(3.4 g, 4.9 mmol)의 용액에 TBAF(6.42 mL, 12.85 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 첨가가 완료된 후, 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 0.5 시간 동안 교반하고, 이어서, H₂O(25 mL)를 혼합물에 첨가하고, EtOAc(100 mL)로 추출하고, 유기 층을 H₂O(100 mL), 식염수(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하여 메틸 2-(5-하이드록시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(3.2 g, >100%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4

메틸 2-(1-메틸-5-(4-메틸-4-니트로펜틸옥시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트

DMF(25 mL) 중 메틸 2-(5-하이드록시-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(2.2 g, 3.9 mmol)의 용액에 K₂CO₃(1.8 g, 12.8 mmol) 및 1-클로로-4-메틸-4-니트로펜탄(1.0 g, 5.9 mmol)을 첨가하고, 이어서, 반응 혼합물을 4 시간 동안 교반하면서 100℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, H₂O(25 mL)을 첨가하고, 생성물을 EtOAc(100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 H₂O(100 mL) 및 식염수(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 메틸 2-(1-메틸-5-(4-메틸-4-니트로펜틸옥시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(1.8 g, 66.7%)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 695.

단계 5

메틸 2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트

CH₃OH(15 mL) 중 메틸 2-(1-메틸-5-(4-메틸-4-니트로펜틸옥시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(500 mg, 0.72 mmol)의 용액에 Pd/C(0.1 g, 촉매량) 및 HCO₂NH₄(226 mg, 3.6 mmol)를 첨가하고, 이어서, 반응 혼합물을 0.5 시간 동안 교반하면서 80℃까지 가열하고, 이어서 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고, 잔사를 H₂O(25 mL)와 EtOAc(100 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 H₂O(100 mL)로 세척하고, 식염수(100 mL)를 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하여 메틸 2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(400 mg, 85%)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 665.

단계 6

2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산

메틸 2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(100 mg, 0.15 mmol), 2.5 mL의 물 중 칼륨 하이드록사이드(280 mg, 5 mmol) 및 5 mL의 1,4-다이옥산의 혼합물을 90 분 동안 가열 환류하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 용매를 증발시키고, 잔사를 H₂O(25 mL)로 희석하고, 혼합물을 1 N HCl로 pH 7까지 산성화시켰다. 잔사를 EtOAc(100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 H₂O(100 mL), 식염수(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산을 황색 고체(100 mg, >100%)로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 651.

단계 7

2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 무수 THF 중 2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.15 mmol), 3급-부틸아민(0.05 mL, 0.45 mmol) 및 HATU(68.4 mg, 0.18 mmol)의 혼합물을 4 시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조하고, 잔사를 50 mL의 0.5 N HCl에 현탁하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(88 mg, 62%)를 어두운 오일로서 수득하고, 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 706.

단계 8

2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트

3 mL의 다이클로로메탄 중 2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(88 mg, 0.12 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(3 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 25℃에서 교반하였다. 용매 증발 후, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(5-(4-아미노-4-메틸펜틸옥시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트를 황색 고체(9 mg, 13%)로서 수득하였다.

실시예 450.

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

2-브로모-N-아이소프로필-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

20 mL의 무수 THF 중 2-브로모-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(250 mg, 1.03 mmol), 프로판-2-아민(0.15 mL, 1.5 mmol) 및 HATU(456 mg, 1.2 mmol)의 혼합물을 4 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조하고, 잔사를 20 mL의 0.5 N HCl에 현탁하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔. 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트/석유 에터 = 2:1로 용리함)로 정제하여 2-브로모-N-아이소프로필-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(180 mg, 62%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(10 mL) 중 3-(5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(200 mg, 0.36 mmol) 및 2-브로모-N-아이소프로필-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(180 mg, 0.43 mmol)의 용액에 CuI(18 mg, 0.08 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄(14 mg, 0.014 mmol)를 첨가하고, 이어서, 3 분 동안 질소를 발포시킴으로써, 반응 혼합물을 탈기하고, 질소로 재충전하였다. 혼합물을 5 시간 동안 질소 하에 80℃까지 가열하고, 실온까지 냉각한 후, 물(50 mL)을 첨가하고, 생성물을 EtOAc(3 x 40 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-아이소프로필-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드를 황색 고체로서 수득하였다(13 mg, 9%).

실시예 451.

N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

2-브로모-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 DMF(20 mL) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(378 mg, 1.272 mmol), (클로로메탄트라이일)트라이벤젠(426 mg, 1.53 mmol) 및 트라이에틸아민(193 mg, 1.91 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 90℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(100 mL)로 추출하고, 유기 상을 물(3 x 10 mL) 및 식염수(2 x 10 mL)로 세척하고, 이어서 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, EtOAc:석유 에터 = 1:15로 용리함)로 정제하여 2-브로모-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(515 mg, 75%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(1H-인다졸-4-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산(20 mL) 및 물(5 mL) 중 2-브로모-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(0.5 g, 0.928 mmol), 1H-인다졸-4-일보론산(165 mg, 1.02 mmol), Pd(PPh₃)₄(214 mg, 0.186 mmol), X-Phos(177 mg, 0.371 mmol) 및 Na₂CO₃(295 mg, 2.78 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 N₂ 대기 하에 100℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 제조용-TLC(메탄올:다이클로로메탄 = 1:100으로 용리함)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(아이소퀴놀린-8-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(375 mg, 70%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

무수 THF(20 mL) 중 N-3급-부틸-2-(1H-인다졸-4-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(375 mg, 0.65 mmol)의 용액에 칼륨 2-메틸프로판-2-올레이트(109 mg, 0.975 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 30 분 동안 교반한 후, 요오도메탄(138 mg, 0.975 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 이어서, 실온까지 가온하고, 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(2 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트(100 mL)로 추출하고, 이어서, 유기 상을 물(3 x 10 mL) 및 식염수(2 x 10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, EtOAc:석유 에터 = 1:3으로 용리함)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(154 mg, 40%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

다이옥산(20 mL) 중 N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(154 mg, 0.261 mmol)의 교반 용액에 HCl 기체를 포화될 때까지 발포시키고, 이어서 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 메탄올로 마쇄하고(1 mL), 이어서 경사분리하고, 건조하여 N-3급-부틸-2-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(38 mg, 38%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 452.

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로프로필)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트

단계 1

2-브로모-N-(1-메틸사이클로프로필)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

20 mL의 무수 THF 중 2-브로모-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(250 mg, 1.03 mmol), 1-메틸사이클로프로판아민(150 mg, 2.2 mmol) 및 HATU(456 mg, 1.2 mmol)의 혼합물을 4 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조하고, 잔사를 20 mL의 0.5 N HCl에 현탁하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 석유 에터(2 mL)로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 2-브로모-N-아이소프로필-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(125 mg, 조질)를 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 285/287.

단계 2

2-브로모-N-(1-메틸사이클로프로필)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

20 mL의 무수 THF 중 2-브로모-N-(1-메틸사이클로프로필)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(600 mg, 2.1 mmol)의 용액에 Et₃N(0.42 mL, 4.2 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 5 분 동안 교반한 후, (클로로메탄트라이일)트라이벤젠(540 mg, 2.53 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 10 분 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 60℃까지 가열하고, 3 시간 동안 계속 교반하였다. 반응물을 식염수(10 mL)로 켄칭하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하여 2-브로모-N-(1-메틸사이클로프로필)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(400 mg, 37%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로프로필)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(10 mL) 중 3-(5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(200 mg, 0.36 mmol) 및 2-브로모-N-(1-메틸사이클로프로필)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(250 mg, 0.43 mmol)의 용액에 CuI(18 mg, 0.08 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄(14 mg, 0.014 mmol)를 첨가하고, 이어서, 3 분 동안 질소를 발포시킴으로써, 반응 혼합물을 탈기하고, 질소로 재충전하였다. 혼합물을 5 시간 동안 질소 하에 80℃까지 가열하고, 실온까지 냉각한 후, 물(50 mL)을 첨가하고, 생성물을 EtOAc(3 x 40 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로프로필)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드를 황색 고체로서 수득하고(200 mg, 47%), 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 4

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로프로필)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트

3 mL의 다이클로로메탄 중 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로프로필)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(200 mg, 0.3 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(3 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매 증발 후, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-메틸사이클로프로필)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트(20 mg, 7%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 453.

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-에틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트

단계 1

2-브로모-N-에틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

20 mL의 무수 THF 중 2-브로모-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(250 mg, 1.03 mmol), 에탄아민(0.2 mL 2.2 mmol) 및 HATU(456 mg, 1.2 mmol)의 혼합물을 4 시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조하고, 잔사를 20 mL의 0.5 N HCl에 현탁하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트/석유 에터 2:1로 용리함)로 정제하여 2-브로모-N-아이소프로필-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(180 mg, 43%)를 수득하였다.

단계 2

2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-에틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트

DMF(10 mL) 중 3-(5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(200 mg, 0.36 mmol) 및 2-브로모-N-에틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(180 mg, 0.38 mmol)의 용액에 CuI(18 mg, 0.08 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄(14 mg, 0.014 mmol)를 첨가하고, 이어서, 3 분 동안 질소를 발포시킴으로써, 반응 혼합물을 탈기하고, 질소로 재충전하였다. 혼합물을 5 시간 동안 질소 하에 80℃까지 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 물(50 mL)을 혼합물에 첨가하고, 생성물을 EtOAc(3 x 40 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v))로 정제하여 2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(3-(다이메틸아미노)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-에틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트(20 mg, 7%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 454.

2-(1-(4-아미노-4-메틸펜틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트

단계 1

5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸

무수 THF(25 mL) 중 3-(5-(다이플루오로메톡시)-3-요오도-1H-인다졸-1-일)-N,N-다이메틸프로판-1-아민(1.2 g, 2.78 mmol)의 용액에 아이소프로필마그네슘 클로라이드(1.5 mL, THF 중 2 M, 3 mmol)를 -16℃에서 질소 대기 하에 적가하였다. 반응물을 30 분 동안 교반하고, 이어서, 다이부틸클로로 (프로필)스탄난(3.3 mL, 3.6 mmol)을 -16℃에서 질소 하에 적가하고, 이어서 반응 혼합물을 실온까지 천천히 가온하고, 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl(40 mL)의 용액으로 켄칭하고, 생성물을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 오일을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다(1.1 g, 조질).

단계 2

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

10 mL의 무수 DMF 중 5-(다이플루오로메톡시)-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(250 mg, 0.57 mmol), 2-브로모-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(280 mg, 0.58 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(23 mg, 0.02 mmol), 구리 요오다이드(26 mg, 1.36 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 N₂ 하에 90℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 50 mL의 물로 희석하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(208 mg, 조질)를 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 643.

단계 3

N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(4-메틸-4-니트로펜틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(15 mL) 중 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(208 mg, 0.35 mmol)의 용액에 K₂CO₃(193 mg, 1.4 mmol) 및 1-클로로-4-메틸-4-니트로펜탄(100 mg, 0.59 mmol)을 첨가하고, 이어서, 반응 혼합물을 4 시간 동안 교반하면서 100℃까지 가열하였다. 이어서, 혼합물을 H₂O(25 mL)로 켄칭하고, 생성물을 EtOAc(50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 H₂O(100 mL), 식염수(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 N-3급-부틸-2-(5-(다이플루오로메톡시)-1-(4-메틸-4-니트로펜틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(200 mg, 69%)를 황색 고체로서 수득하고, 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 772; (M+Na)⁺ = 794.0.

단계 4

2-(1-(4-아미노-4-메틸펜틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

CH₃OH(10 mL) 중 2-(1-(4-아미노-4-메틸펜틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(200 mg, 0.3 mmol)의 용액에 10% Pd/C(0.1g) 및 HCO₂NH₄(113 mg, 1.8 mmol)를 첨가하고, 이어서, 반응 혼합물을 0.5 시간 동안 교반하면서 80℃까지 가열하고, 이어서 혼합물을 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 H₂O(25 mL)와 EtOAc(50 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 H₂O(100 mL), 식염수(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 2-(1-(4-아미노-4-메틸펜틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(54 mg, 39%)를 백색 고체로서 수득하고, 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 742.

단계 5

2-(1-(4-아미노-4-메틸펜틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트

3 mL의 다이클로로메탄 중 2-(1-(4-아미노-4-메틸펜틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(54 mg, 0.08 mmol)의 용액에 3 mL의 트라이플루오로아세트산을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 용매 증발 후, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(1-(4-아미노-4-메틸펜틸)-5-(다이플루오로메톡시)-1H-인다졸-3-일)-N-3급-부틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(13 mg, 34%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 455.

N-3급-부틸-2-(1-(3,4-다이하이드록시부틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

환저 플라스크 중에서, 2-브로모-N-3급-부틸-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(600 mg, 1.12 mmol) 및 6-플루오로-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(475 mg, 1.12 mmol)을 DMF(10 mL)에 질소 하에 용해시켰다. Pd(PPh₃)₄(65 mg, 0.056 mmol) 및 CuI(43 mg, 0.224 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 질소를 발포시키면서 5 분 동안 초음파처리하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매 제거 후, 농축된 혼합물을 석유 에터/EtOAc(3:1 v/v)로 용리하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(180 mg, 27%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

N-3급-부틸-2-(1-(2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(5 mL) 중 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(80 mg, 0.135 mmol)의 용액에 2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에틸 메탄설포네이트(36 mg, 0.162 mmol) 및 이어서 K₂CO₃(56 mg, 0.405 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 4 시간 동안 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 혼합물을 물에 붓고, 여과하고, 건조하여 N-3급-부틸-2-(1-(2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(90 mg, 92%)를 수득하고, 조질 물질을 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 723.

단계 3

N-3급-부틸-2-(1-(3,4-다이하이드록시부틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(1-(2-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)에틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(90 mg, 0.125 mmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(2 mL)을 실온에서 적가하고, 반응 혼합물을 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 30% 아세토니트릴/70% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 이어서 9 분 직후에 선형 방식으로 70% 아세토니트릴/30% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(1-(3,4-다이하이드록시부틸)-6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(30 mg, 54.5%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 456.

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(5 mL) 중 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(60 mg, 0.1 mmol)의 용액에 1-클로로-3-(메틸설폰일)프로판(19 mg, 0.12 mmol) 및 이어서 K₂CO₃(42 mg, 0.3 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 4 시간 동안 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 혼합물을 물에 붓고, 여과하고, 건조하여 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(55 mg, 77%)를 수득하였다. 조질 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 715.

단계 2

N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(55 mg, 0.077 mmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(2 mL)을 실온에서 적가하고, 반응 혼합물을 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 MeOH로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 N-3급-부틸-2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(26 mg, 72% )를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 457.

N-(5-아미노-테트라하이드로-2H-파이란-3-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

단계 1

5-에톡시-2H-파이란-3(6H)-온

50 mL의 에탄올 중 2H-파이란-3,5(4H,6H)-다이온, 나트륨 염(1.36 g, 10 mmol)의 용액에 1.5 mL의 농축 황산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 대부분의 용액을 진공 하에 증발시키고, 잔사를 포화 나트륨 바이카보네이트로 중화시키고, 생성물을 에틸 아세테이트(4 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔. 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트/석유 에터 = 1/1로 용리함)로 정제하여 5-에톡시-2H-파이란-3(6H)-온(641 mg, 45%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2

5-아미노-2H-파이란-3(6H)-온

50 mL의 에탄올 중 5-에톡시-2H-파이란-3(6H)-온(641 mg, 4.5 mmol)의 용액을 드라이아이스 욕에서 냉각시키고, 암모니아 기체를 10 분 동안 발포시켰다. 반응 혼합물을 밤새 교반하고, 농축 건조하고, 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔. 200-300 메쉬, 메탄올/다이클로로메탄 = 1/10으로 용리함)로 정제하여 5-아미노-2H-파이란-3(6H)-온(290 mg, 57%)을 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 3

5-아미노-테트라하이드로-2H-파이란-3-올

20 mL의 에탄올 중 5-아미노-2H-파이란-3(6H)-온(290 mg, 2.6 mmol) 및 500 mg의 습윤 라니 니켈의 혼합물을 수소 장치 중에서 6 시간 동안 4 atm 수소 기체 하에 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 셀라이트 상에서 여과하고, 여액을 농축 건조하여 5-아미노-테트라하이드로-2H-파이란-3-올(389 mg, 조질)을 연황색 고체로서 수득하고, 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 118.

단계 4

3급-부틸 5-하이드록시-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트

40 mL의 THF 중 5-아미노-테트라하이드로-2H-파이란-3-올(389 mg, 조질, 약 3.3 mmol), 다이-3급-부틸 다이카보네이트(700 mg, 3.3 mmol) 및 TEA(0.5 mL, 3.3 mmol)의 혼합물을 4 시간 동안 실온에서 교반한 후, 농축 건조하고, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔. 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트/석유 에터 = 1/1로 용리함)로 정제하여 3급-부틸 5-하이드록시-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트(400 mg, 56%)를 연황색 고체로서 수득하였다.

단계 5

5-(3급-부톡시카보닐아미노)-테트라하이드로-2H-파이란-3-일 메탄설포네이트

10 mL의 다이클로로메탄 중 3급-부틸 5-하이드록시-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트(109 mg, 0.5 mmol) 및 N,N-다이메틸피리딘-4-아민(80 mg, 0.65 mmol)의 용액을 얼음 욕에서 냉각하고, 메탄설폰일 클로라이드(0.05 mL, 0.6 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반한 후, 50 mL의 물로 세척하고, 유기 상을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔. 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트/석유 에터 = 1/1로 용리함)로 정제하여 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-테트라하이드로-2H-파이란-3-일 메탄설포네이트(100 mg, 67%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 6

3급-부틸 5-아지도-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트

10 mL의 무수 N,N-다이메틸폼아마이드 중 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-테트라하이드로-2H-파이란-3-일 메탄설포네이트(90 mg, 0.3 mmol) 및 나트륨 아지드(30 mg, 0.5 mmol)의 용액을 3 시간 동안 100℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 40 mL의 물을 첨가하고, 생성물을 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하여 3급-부틸 5-아지도-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트(100 mg, 조질)를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

단계 7

3급-부틸 5-아미노-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트

30 mL의 에틸 아세테이트 중 3급-부틸 5-아지도-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트(1 g, 4.13 mmol)의 용액에 Pd/C(10%, 1 g)를 첨가하고, 반응 혼합물을 수소 충전된 풍선 하에 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 여액을 농축하여 3급-부틸 5-아미노-테트라하이드로-2H-파이란-3 -일카바메이트(188 mg, 21%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 8

3급-부틸 5-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트

10 mL의 무수 DMF 중 3급-부틸 5-아미노-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트(100 mg, 0.46 mmol), 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(200 mg, 0.7 mmol), EDCI(134 mg, 0.7 mmol), N,N-다이메틸피리딘-4-아민(85 mg, 0.7 mmol), HOBt(95 mg, 0.7 mmol) 및 TEA(0.4 mL, 2.3 mmol)의 혼합물을 6 시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조하고, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 에틸 아세테이트로 용리함)로 정제하여 5-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트(120 mg, 51%)를 황색 고체로서 수득하였다.

단계 9

N-(5-아미노-테트라하이드로-2H-파이란-3-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드

10 mL의 다이옥산 중 5-(2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아미도)-테트라하이드로-2H-파이란-3-일카바메이트(120 mg, 0.24 mmol)의 용액에 HCl 기체를 3 시간 동안 발포시켰다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 형성된 침전물을 여과에 의해 분리하고, 필터 케이크를 10 mL의 에터로 세척하여 30 mg의 N-(5-아미노-테트라하이드로-2H-파이란-3-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드를 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 410.

실시예 458.

N-3급-부틸-2-(5-아이소프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

프로프-1-엔-2-일보론산

실온의 10 mL의 무수 THF 중 프로프-1-엔-2-일마그네슘 브로마이드(THF 10 mL 중 0.5 N, 5 mmol)의 교반 용액에 트라이메틸 보레이트(1.67 mL, 15 mL)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 0℃까지 냉각하였다. 물 중 1 N HCl(6 mL, 6 mmol)을 첨가하고, 10 분 동안 계속 교반하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 조질 프로프-1-엔-2-일보론산(0.6 g, 조질)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

5-(프로프-1-엔-2-일)-1H-인다졸

30 mL의 DMF 및 5 mL의 물의 혼합물 중 프로프-1-엔-2-일보론산(1.2 g), 5-브로모-1H-인다졸(1.0 g, 5.1 mmol), Pd(dba)₂(0.04 g, 0.07 mmol), X-phos(0.04 g, 0.08 mmol) 및 Cs₂CO₃(3.0 g, 9.2 mmol)의 혼합물을 130℃에서 질소 하에 8 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(200-300 메쉬, 에틸 아세테이트 및 석유 에터의 혼합물(1:5, v/v)로 용리함)로 정제하여 2:3 혼합물 5-(프로프-1-엔-2-일)-1H-인다졸 및 1H-인다졸(0.9 g)을 수득하였다. 조질 혼합물을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 3

5-아이소프로필-1H-인다졸

150 mL의 메탄올 중 10% Pd/C(0.2 g), 5-(프로프-1-엔-2-일)-1H-인다졸 및 1H-인다졸의 2:3 혼합물(0.9 g)을 실온에서 H₂ 풍선 하에 3 시간 동안 교반하였다. Pd/C를 여과 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 조질 5-아이소프로필-1H-인다졸(0.85 g)을 오일로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 161.

단계 4

3-요오도-5-아이소프로필-1H-인다졸

주로 70 mL의 DMSO 중 5-아이소프로필-1H-인다졸(0.85 g, 조질)을 함유하는 교반 용액에 KOH(0.52 g, 8 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 이어서, I₂(1.35 g, 5.3 mmol)를 천천히 첨가하고, 이어서 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 200 mL의 포화 Na₂SO₃ 용액에 부은 후, 에틸 아세테이트(2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물(100 mL) 및 식염수(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 조질 3-요오도-5-아이소프로필-1H-인다졸(0.78 g)을 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 287.

단계 5

3-요오도-5-아이소프로필-1-메틸-1H-인다졸

0℃의 50 mL의 THF 중 3-요오도-5-아이소프로필-1H-인다졸(0.75 g, 조질)의 교반 용액에 t-BuOK(0.59 g, 5.2 mmol)를 하나의 분획으로 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30 분 동안 교반하였다. CH₃I(1.1 g, 7.7 mmol)를 첨가하고, 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 30 mL의 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물(100 mL), 식염수(100 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 증발시켜 일부 N-2 알킬화 이성질체를 함유하는 조질 3-요오도-5-아이소프로필-1-메틸-1H-인다졸(0.7 g)을 오일로서 수득하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 301.

단계 6

5-아이소프로필-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸

100 mL의 무수 THF 중 3-요오도-5-아이소프로필-1-메틸-1H-인다졸(0.3 g, 조질)의 교반 용액에 -16℃에서 질소 하에 i-PrMgCl(0.69 mL, 1.38 mmol, THF 중 2 M)을 적가하였다. 이어서, 혼합물을 -16℃에서 20 분 동안 교반하였다. 트라이부틸클로로스탄난(0.39 g, 1.2 mmol)을 천천히 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반하였다. 용액을 40 mL의 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(2 x 100 mL)로 추출하고, 물(2 x 50 mL), 식염수(50 mL)로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 증발시켜 조질 5-아이소프로필-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸을 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 7

(7-(3급-부틸카바모일)-2-(5-아이소프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트

40 mL의 DMF 중 5-아이소프로필-1-메틸-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸, (2-브로모-7-(3급-부틸카바모일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(0.408 g, 1 mmol), CuI(0.06 g, 0.32 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄(0.06 g, 0.052 mmol)의 혼합물을 80℃에서 질소 하에 4 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 물(15 mL) 및 석유 에터(30 mL)로 마쇄하고, 경사분리하고, 건조하여 조질 (7-(3급-부틸카바모일)-2-(5-아이소프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(0.15 g)를 황색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 505.

단계 8

N-3급-부틸-2-(5-아이소프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드

다이옥산/물(5 mL/10 mL) 중 (7-(3급-부틸카바모일)-2-(5-아이소프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-5-일)메틸 피발레이트(0.2 g, 조질)의 교반 용액에 KOH(0.23 g, 4.1 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 1 N HCl로 pH 3 내지 4까지 처리하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 물(15 mL)로 마쇄하고, 건조하여 조질 생성물을 수득하고, 이를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 62% 아세토니트릴/38% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 이어서 9 분 직후에 선형 방식으로 64% 아세토니트릴/36% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(5-아이소프로필-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드(0.05g)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 459 및 460.

N-(5-아미노-테트라하이드로-2H-파이란-3-일)-2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복스아마이드 하이드로클로라이드(부분입체 이성질체 A 및 B)

실시예 457로부터의 여액을 농축 건조하고, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후에 선형 방식으로 10% 아세토니트릴/90% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 2 개의 부분입체 이성질체(각각 10 mg)를 수득하고, 이들의 상대적인 입체화학은 임의로 할당되었다. 보다 극성의 부분입체 이성질체 A:

덜 극성의 부분입체 이성질체 B:

실시예 461.

N-3급-부틸-2-(1-메틸-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

3-요오도-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸

0℃의 DMSO(10 mL) 중 5-(메틸설폰일)-1H-인다졸(430 mg, 2.19 mmol)의 용액에 KOH(0.4 g, 6.57 mmol) 및 I₂(1.2 g, 4.38 mmol)를 연속적으로 첨가한 후, 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 물(40 mL)을 첨가하고, 생성물을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 석유 에터/EtOAc = 20:1로 용리함)로 정제하여 3-요오도-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸(410 mg, 59.9%)을 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

3-요오도-1-메틸-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸

THF(15 mL) 중 3-요오도-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸(400 mg, 1.24 mmol)의 용액에 t-BuOK(208 mg, 1.86 mmol)를 0℃에서 천천히 첨가하고, 혼합물을 30 분 동안 교반하고, 이어서, 요오도메탄(262 mg, 1.86 mmol)을 0℃에서 천천히 첨가하고, 실온까지 가온하고, 2 시간 동안 교반하였다. 반응을 물(40 mL)로 켄칭하고, 생성물을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하여 고체를 수득하고, 이를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, 다이클로로메탄/메탄올 = 10:1로 용리함)로 정제하여 3-요오도-1-메틸-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸(210 mg, 50.6%)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 3

메틸 2-(1-메틸-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트

DMF(8 mL) 중 3-요오도-1-메틸-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸(127 mg, 0.37 mmol), 메틸 2-브로모-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(128 mg, 0.34 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄(20 mg, 0.017 mmol)의 용액에 헥사-N-부틸다이틴(299 mg, 0.51 mmol)을 첨가하였다. 3 분 동안 질소를 발포시킴으로써, 반응 혼합물을 탈기하고, 질소로 재충전하였다. 혼합물을 15 시간 동안 질소 하에 100℃까지 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 물(40 mL)을 첨가하고, 생성물을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 200-300 메쉬, EtOAc/석유 에터 = 2:1로 용리함)로 정제하여 메틸 2-(1-메틸-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(120 mg, 69.7%)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 4

2-(5-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산

다이옥산/물(6 mL/4 mL) 중 메틸 2-(1-메틸-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸-3-일)-5-(피발로일옥시메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실레이트(80 mg, 0.16 mmol)의 현탁액에 NaOH(100 mg, 2.5 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 4 시간 동안 교반하면서 85℃까지 가열하고, 다이옥산을 감압 하에 제거하고, 수성 층을 2 N HCl로 pH 4까지 조정하였다. 형성된 침전물을 여과에 의해 수거하고, 물(3 mL)로 세척하고, 건조하여 2-(5-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(40 mg, 67.7%)을 주황색 고체로서 수득하였다.

단계 5

N-3급-부틸-2-(1-메틸-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(6 mL) 중 2-(5-메탄설폰일-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(75 mg, 0.20 mmol), 2-메틸프로판-2-아민(15 mg, 0.20 mmol), HOBt(108 mg, 0.80 mmol), EDCI(153 mg, 0.80 mmol) 및 DIPEA(103 mg, 0.80 mmol)의 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반한 후, 물(30 mL)을 첨가하고, 생성물을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 30% 메탄올/70% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 이어서 9 분 직후에 선형 방식으로 50% 메탄올/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 N-3급-부틸-2-(1-메틸-5-(메틸설폰일)-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(7 mg, 8.1%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 462.

2-(6-플루오로-1-(3-하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-(3-옥소부틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(4 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(60 mg, 0.083 mmol)의 용액에 4-클로로부탄-2-온(11 mg, 0.1 mmol) 및 이어서 K₂CO₃(34 mg, 0.25 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 1.5 시간 동안 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 혼합물을 물에 붓고, 여과하여 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-(3-옥소부틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(40 mg, 61%)를 수득하였다. 건조 후, 조질 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 795.

단계 2

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-(3-하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

MeOH(5 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-(3-옥소부틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(40 mg, 0.05 mmol)의 용액에 NaBH₄(10 mg, 0.25 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. NH₄Cl(수성)을 혼합물에 첨가하여 반응을 켄칭하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 여과 및 농축 후, 조질 물질을 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 797.

단계 3

2-(6-플루오로-1-(3-하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

다이클로로메탄(2 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-(3-하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 실온에서 적가하고, 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 다이클로로메탄에 용해시키고, NaHCO₃(수성)으로 세척하고, 유기 층을 농축하고, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 36% 아세토니트릴/64% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v), 이어서 9 분 직후에 선형 방식으로 42% 아세토니트릴/58% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산, v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-(3-하이드록시부틸)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(10 mg, 3 개의 단계에 걸쳐 45%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 463.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-((3-하이드록시아제티딘-3-일)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트

단계 1

3급-부틸 3-옥소아제티딘-1-카복실레이트

트라이에틸아민(2.47 mL)을 DMSO(5 mL) 중 3급-부틸 3-하이드록시아제티딘-1-카복실레이트(0.5 g, 2.9 mmol)의 용액에 첨가하였다. DMSO(6.5 mL) 중 피리딘 황 트라이옥사이드(1.8 g,11.3 mmol)의 용액을 상기 혼합물에 적가하고, 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음-물에 붓고, 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하여 3급-부틸 3-옥소아제티딘-1-카복실레이트를 백색 고체로서 수득하였다(500 mg, 100%).

단계 2

3급-부틸 3-시아노-3-(트라이메틸실릴옥시)아제티딘-1-카복실레이트

다이클로로메탄(5 mL) 중 테트라부틸암모늄 시아나이드(28 mg)를 다이클로로메탄(5 mL) 중 3급-부틸 3-옥소아제티딘-1-카복실레이트(250 mg) 및 트라이메틸실릴 시아나이드(0.28 mL)의 교반 용액에 실온에서 질소 하에 적가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 50 mL의 물로 희석하고, 다이클로로메탄(3 x 15 mL)으로 추출하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 농축하여 3급-부틸 3-시아노-3-(트라이메틸실릴옥시)아제티딘-1-카복실레이트(300 mg, 조질)를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.

단계 3

3급-부틸 3-(아미노메틸)-3-하이드록시아제티딘-1-카복실레이트

THF(5 mL) 중 3급-부틸 3-시아노-3-(트라이메틸실릴옥시)아제티딘-1-카복실레이트(300 mg, 1.11 mmol)의 용액을 보란 메틸설파이드 착물(THF 중 2 M, 2 mL)로 처리하고, 혼합물을 70℃에서 1 시간 동안 질소 하에 가열하였다. 이어서, 혼합물을 실온까지 냉각하고, 메탄올(5 mL)로 켄칭하고, 이어서 에틸렌다이아민(0.28 mL)으로 처리하고, 상기 혼합물을 25℃에서 1 시간 동안 교반하고, 이어서 1 시간 동안 55℃까지 가온하였다. 실온까지 냉각한 후, 반응 혼합물을 테트라부틸암모늄 플루오라이드(THF 중 1 M, 2 mL, 2 mmol)로 처리하고, 이어서 25℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 50 mL의 물로 희석하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 25 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하여 3급-부틸 3-(아미노메틸)-3-하이드록시아제티딘-1-카복실레이트(200 mg, 조질)를 백색 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 4

3급-부틸 3-((2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)메틸)-3-하이드록시아제티딘-1-카복실레이트

10 mL의 무수 THF 중 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복실산(100 mg, 0.32 mmol), 3급-부틸 3-(아미노메틸)-3-하이드록시아제티딘-1-카복실레이트(196 mg, 0.64 mmol), HATU(145 mg, 0.38 mmol) 및 DIPEA(0.2 mL, 1.15 mmol)의 혼합물을 4 시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조하고, 잔사를 20 mL의 0.5 N HCl에 현탁하고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하고, 합한 유기 물질을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 석유 에터(1 mL)로 마쇄한 후, 경사분리하고, 건조하여 3급-부틸 3-((2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)메틸)-3-하이드록시아제티딘-1-카복실레이트(86 mg, 54%)를 황색 고체로서 수득하고, 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LC-MS: (M+H)⁺ = 496.

단계 5

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-((3-하이드록시아제티딘-3-일)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트

3 mL의 다이클로로메탄 중 3급-부틸 3-((2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아미도)메틸)-3-하이드록시아제티딘-1-카복실레이트(86 mg, 0.16 mmol)의 용액에 3 mL의 트라이플루오로아세트산을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 용매 증발 후, 잔사를 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 구배 조건은 다음과 같다: 초기 40% 아세토니트릴/60% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v), 이어서 9 분 직후 선형 방식으로 50% 아세토니트릴/50% 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 v/v)까지 진행함)로 정제하여 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-N-((3-하이드록시아제티딘-3-일)메틸)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드 트라이플루오로아세테이트(6 mg, 9%)를 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 464.

2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

단계 1

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

2-브로모-N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(287 mg, 0.674 mmol) 및 6-플루오로-3-(트라이부틸스탄일)-1H-인다졸(450 mg, 0.674 mmol)을 DMF(8 mL)에 질소 하에 용해시켰다. Pd(PPh₃)₄(39 mg, 0.034 mmol) 및 CuI(26 mg, 0.136 mmol)를 첨가하고, 질소를 발포시키면서 혼합물을 5 분 동안 초음파처리하였다. 이어서, 반응 혼합물을 85℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 냉각하고, 진공 중에 농축하고, 이어서 크로마토그래피(실리카, 석유 에터:EtOAC 5:1 v/v)로 정제하여 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(100 mg, 20%)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DMF(3 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(40 mg, 0.055 mmol)의 혼합물에 1-클로로-3-(메틸설폰일)프로판(13 mg, 0.083 mmol) 및 이어서 K₂CO₃(23 mg, 0.165 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 40℃에서 16 시간 동안 교반한 후, 냉각하고, 물에 붓고, 여과하여 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(35 mg, 76%)를 수득하였다. 조질 물질을 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. LC-MS: 845.2 [M + H]⁺.

단계 3

N-3급-2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드

DCM(2 mL) 중 N-(1-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-5-트라이틸-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(35 mg, 0.042 mmol)의 교반 용액에 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 실온에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반한 후, 진공 중에 농축하였다. 수득한 잔사를 DCM에 용해시키고, NaHCO₃(수성)으로 세척한 후, 유기 층을 농축하고, 제조용-HPLC(제미니 5u C18 150 x 21.2 mm; 주입 부피: 3 mL/주입, 유량: 20 mL/분; 파장: 214 nm 및 254 nm; 9 분에 걸쳐 25% 아세토니트릴/75% 물(0.1% TFA에 의해 도핑됨, v/v) → 42% 아세토니트릴/58% 물(0.1% TFA에 의해 도핑됨, v/v))로 정제하여 2-(6-플루오로-1-(3-(메틸설폰일)프로필)-1H-인다졸-3-일)-N-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)-5H-피롤로[3,2-b]피라진-7-카복스아마이드(10 mg, 50%)를 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 465.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-아마이드

단계 1

플라스크를 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산(250 mg, 0.57 mmol), 3-아미노사이클로부탄올 하이드로클로라이드(98 mg, 0.79 mmol) 및 DMF(2.8 mL)로 충전하였다. N,N-다이아이소프로필에틸아민(266 mg, 0.36 mL, 2.06 mmol) 및 이어서 HATU(237 mg, 0.62 mmol)를 첨가하였다. 황색 용액을 실온에서 밤새 교반하였다(침전물이 형성됨). 반응 혼합물을 물 및 석유 에터로 희석하였다. 현탁액을 여과하였다. 고체를 물 및 소량의 석유 에터로 세척하였다. 생성된 회백색 분말을 높은 진공 하에 건조하였다. 시스- 및 트랜스-생성물의 혼합물(265 mg의 회백색 분말)을 SFC 크로마토그래피(크로마실(KROMASIL) OD 3 x 25 cm, 25% MeOH/CO₂ + 0.1% 트라이에틸아민)로 추가 분리하여 139 mg(48%) 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하고, 102 mg(35%) 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (트랜스-3-하이드록시-사이클로부틸)-아마이드를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 2

플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-아마이드(138 mg, 0.27 mmol)를 다이클로로메탄(1.3 mL)에 용해시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.84 mL, 10.9 mmol)을 첨가하고, 주황색 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. 잔사(연한 주황색 포말)를 다이클로로메탄(1.3 mL)에 현탁하고, 에틸렌다이아민(1.1 mL, 16.3 mmol)을 첨가하였다. 연황색 현탁액을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 및 에틸 아세테이트로 희석하였다. 현탁액을 여과하고, 물(고온) 및 에틸 아세테이트로 세척하였다. 생성된 회백색 분말을 높은 진공 하에 건조하여 81 mg(79%) 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (시스-3-하이드록시-사이클로부틸)-아마이드를 수득하였다. LC/MS: [M-H]^- = 379.

실시예 466.

2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (트랜스-3-하이드록시-사이클로부틸)-아마이드

플라스크에서, 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5-(2-트라이메틸실란일-에톡시메틸)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (트랜스-3-하이드록시-사이클로부틸)-아마이드(100 mg, 0.20 mmol)를 다이클로로메탄(1.0 mL)에 용해시켰다. 트라이플루오로아세트산(0.61 mL, 7.92 mmol)을 첨가하고, 주황색 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. 잔사(연한 주황색 포말)를 다이클로로메탄(1.0 mL)에 현탁하고, 에틸렌다이아민(0.80 ml, 11.8 mmol)을 첨가하였다. 연황색 현탁액을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 및 에틸 아세테이트로 희석하였다. 현탁액을 여과하고, 물(고온) 및 에틸 아세테이트로 세척하였다. 생성된 회백색 분말을 높은 진공 하에 건조하여 55 mg(66%; 순도 = 90%) 2-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-3-일)-5H-피롤로[2,3-b]피라진-7-카복실산 (트랜스-3-하이드록시-사이클로부틸)-아마이드를 수득하였다.

생물학적 실시예

JAK 분석 정보

야누스 키나제 ( JAK ) 억제의 IC ₅₀ 의 측정:

사용된 효소 및 펩티드 기질이 하기 기술된다:

JAK1: 인비트로겐(Invitrogen)(카탈로그 번호 PV4774)으로부터의 재조합 인간 키나제 도메인.

JAK3: 밀리포어(Millipore)(카탈로그 번호 14-629)로부터의 또는 제조된 재조합 인간 키나제 도메인.

JAK2: 밀리포어(카탈로그 번호 14-640)로부터의 재조합 인간 키나제 도메인.

기질: 하기 펩티드 기질의 서열을 갖는 JAK1의 활성화 루프로부터 유도된 N-종결 바이오티닐화된 14-mer 펩티드: 바이오틴-KAIETDKEYYTVKD.

사용된 분석 조건이 하기 기술된다:

분석 완충제: JAK 키나제 완충제: 50 mM 헤페스(Hepes)[pH 7.2], 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 1 mg/ml BSA. 상기 분석을 이러한 완충제에서 수행하였다.

분석 포맷: 모든 3 개의 JAK 키나제의 키나제 활성을 방사성, 종말점 분석 및 미량의 ³³P-ATP를 사용하여 측정하였다. 이러한 분석을 96-웰 폴리프로필렌 플레이트를 사용하여 수행하였다.

실험 방법:

모든 농도는 반응 혼합물에서의 최종 농도이고, 모든 항온처리를 실온에서 수행하였다. 분석 단계가 하기 기술된다:

1) 화합물을 전형적으로 1 mM의 10x 출발 농도에서 100% DMSO에 순차적으로 희석하였다. 반응물 중 DMSO의 최종 농도는 10%이었다.

2) 화합물을 효소(0.5 nM JAK3(시판 중), 0.2 nM JAK3(제조됨), 1 nM JAK2, 5 nM JAK1)와 함께 10 분 동안 예비-항온처리하였다.

3) 2 개의 기질(JAK 키나제 완충제 중에서 예비-혼합된 ATP 및 펩티드)의 칵테일을 첨가함으로써, 반응을 개시하였다. JAK2/JAK3 분석에서, ATP 및 펩티드를 각각 1.5 μM 및 50 μM의 농도로 사용하였다. JAK1 분석을 10 μM의 ATP 농도 및 50 μM의 펩티드 농도에서 수행하였다.

4) JAK2 및 JAK3에 대한 분석 시간은 20 분이었다. 모든 3 개의 효소에서, 0.5 M EDTA를 100 mM의 최종 농도까지 첨가함으로써 반응을 종결하였다.

5) 25 μL의 종결된 반응물을 96-웰, 1.2 μm 멀티스크린(MultiScreen)-BV 필터 플레이트 중에 50 mM의 EDTA를 함유하는 MgCl₂- 및 CaCl₂-부재 1x 포스페이트 완충 염수 중 스트렙타비딘-코팅된 세파로스 비드의 7.5% (v/v) 슬러리 150 μL로 옮겼다.

6) 30 분 항온처리 후, 하기 완충제를 사용하여 진공 하에 비드를 세척하였다:

a. 200 μL의 2 M NaCl에 의한 3 또는 4 회 세척.

b. 200 μL의 2 M NaCl + 1%(v/v) 인산에 의한 3 또는 4 회 세척.

c. 물에 의한 1 회 세척.

7) 세척된 플레이트를 60℃ 오븐에서 1 내지 2 시간 동안 건조하였다.

8) 70 μL의 마이크로신트(Microscint) 20 섬광 유체(scintillation fluid)를 필터 플레이트의 각각의 웰에 첨가하고, 30 분 이상의 항온처리 후, 방사성 계수를 퍼킨엘머(Perkinelmer) 마이크로플레이트 섬광 계수기에서 측정하였다.

SYK 분석 정도

비장 티로신 키나제 ( SYK ) 억제의 IC ₅₀ 의 측정:

SYK 키나제 분석은 96-웰 플레이트 포맷으로 적용된 표준 키나제 분석이다. 이러한 분석을 10 1/2 로그 희석법(half log dilution) 및 40 μL 반응 부피를 나타내는 8 개의 샘플을 사용하는 IC₅₀ 측정을 위한 96-웰 포맷에서 수행된다. 이러한 분석은 천연 발생 포스포르어셉터(phosphoracceptor) 공통 서열로부터 유도된 N-종결 바이오티닐화된 펩티드 기질(바이오틴-11aa DY*E)로의 방사선 표지된 ³³P γATP의 혼입을 측정한다. 인산화된 생성물을 스트렙타비딘 코팅된 비드의 첨가 및 EDTA에 의한 반응의 종결 시 검출하였다.

분석 플레이트: 96-웰 멀티스크린 0.65 μm 필터 플레이트(밀리포어 카탈로그 번호: MADVNOB10).

스트렙타비딘 코팅된 비드: 스트렙타비딘 세파로스 TM, 50 mM EDTA/희석된 PBS(1:100) 중 현탁액 5.0 mL(아머샴(Amersham), 카탈로그 번호: 17-5113-01).

화합물: 100% 다이메틸설폭사이드(DMSO) 중 10 mM, 최종 농도: 10% DMSO 중 화합물 0.003 내지 100 μM.

효소: 비장 티로신 키나제 aa 360-635의 SYK RPA의 정제되고 절두된 구조체, 저장 용액 1 mg/mL, MW: 31.2 KDa, 최종 농도:0.0005 μM.

펩티드 1: 바이오티닐화된 펩티드는 천연 발생 포스포르어셉터 공통 서열로부터 유도됨(바이오틴-EPEGDYEEVLE), QCB로부터의 특별 주문, 저장 용액 20 mM, 최종 농도: 5.0 μM.

ATP: 아데노신-5'-트라이포스페이트 20 mM(로슈(ROCHE) 카탈로그 번호: 93202720), 최종 농도: 20 μM.

완충제: 헤페스: 2-하이드록시에틸 피페라진-2-에탄설폰산(시그마(Sigma), 카탈로그 번호: H-3375), 최종 농도: 50 mM 헤페스 pH 7.5.

BSA: 소 혈청 알부민 분획 V, 지방산 부재(로슈 다이아그노스틱스 게엠베하(Roche Diagnostics GmbH), 카탈로그 번호 9100221), 0.1%의 최종 농도까지 희석됨.

EDTA: EDTA 저장 용액 500 mM(깁코(GIBCO), 카탈로그 번호: 15575-038), 최종 농도: 0.1 mM.

DTT: 1,4-다이티오스레이톨(로슈 다이아그노스틱스 게엠베하, 카탈로그 번호: 197777), 최종 농도: 1 mM.

MgCl₂ x 6H₂O: 메르크(MERCK), 카탈로그 번호: 105833.1000, 최종 농도: 10 mM.

분석 희석 완충제(ADB): 50 mM 헤페스, 0.1 mM EGTA, 0.1 mM Na 바나데이트, 0.1 mM β-글리세로포스페이트, 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0,1% BSA, pH 7.5.

비드 세척 완충제: 2 M NaCl + 1% 인산을 갖는 10 g/L PBS(포스페이트 완충 염수).

실험 방법:

40 μL 부피로, 26 μL의 희석된 ADB, 정제된 재조합 인간 SYK360-635[0.5 nM]을 4 μL의 10x 농도의 시험 화합물[통상적으로 100 μM 내지 0.003 μM]과 [10%] DMSO에서 혼합하고, 혼합물을 10 분 동안 실온에서 항온처리하였다.

DYE 펩티드 기질[0 또는 5 μM], ATP [20 μM] 및

PγATP[2 μCi/rxn]를 함유하는 10 μL 4x 기질을 첨가함으로써, 키나제 반응을 개시하였다. 30℃에서 15 분 동안 항온처리한 후, 25 μL의 반응 샘플을, PBS 중에서 200 μL 5 mM EDTA 및 20% 스트렙타비딘 코팅된 비드를 함유하는 96-웰 0.65 μm 밀리포어 MADVNOB 막/플레이트로 옮김으로써, 반응을 종결시켰다.

결합되지 않은 방사성뉴클레오티드를 3 x 250 μL 2 M NaCl; 2 x 250 μL 2 M NaCl + 1% 인산; 1 x 250 μL H₂O로 진공 하에 세척하였다. 마지막 세척 막/플레이트를 어댑터 플레이트로 옮긴 후, 15 분 동안 60℃에서 가열하고, 50 μL 섬광 칵테일을 각각의 웰에 첨가하고, 4 시간 후, 방사능의 양을 탑 계수기(top counter)에서 계수하였다.

억제율(%)을 억제되지 않은 효소 비율에 기초하여 계산하였다:

억제율(%) = 100/(1 + (IC₅₀/억제제 농도)ⁿ)

IC₅₀을 XLfit 소프트웨어(아이디 비즈니스 솔루션 리미티드(ID Business Sollution Ltd.), 영국 서레이 길포드 소재)에 의한 비선형 곡선 정합에 의해 계산하였다.

JAK3 및 SYK 분석에 관한 대표적인 IC₅₀이 하기 표 II에 제시된다:

[표 II]

본 발명은 명료 및 이해의 목적을 위해 발명의 상세한 설명 및 실시예에 의해 다소 자세히 기술되었다. 첨부된 특허청구범위의 범주 내에서 변화 및 개질이 실시될 수 있음이 당업자에게 자명할 것이다. 따라서, 상기 기재내용은 설명적이고 비제한적인 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 본 발명의 범주는 상기 기재내용을 참고하여 결정되어서는 안되고, 대신에 하기 첨부된 특허청구범위를 참고하여, 이러한 특허청구범위가 의도하는 등가물의 전체 범위를 고려하여 결정되어야 한다.

본원에 인용된 모든 특허, 특허출원 및 공개문헌은 모든 목적을 위해 각각의 개별적인 특허, 특허출원 또는 공개문헌이 개별적으로 나타내는 바와 같은 정도로 이의 전체 내용이 본원에 참고로서 인용되어 있다.

Claims (26)

1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
   

   

   I
   상기 식에서,
   R은 H이고; R'는 저급 알콕시 또는

   

   이거나;
   R 및 R'는 함께, 임의적으로 -CN으로 치환되는 헤테로사이클로알킬을 형성하고;
   R¹은 H 또는 R^1a이고;
   R^1a는 저급 알킬, 사이클로알킬, 저급 알콕실, 하이드록시 저급 알킬, 또는 저급 할로알킬이고; R^1'는 H 또는 저급 알킬이거나;
   R^1a 및 R^1'는 함께, 임의적으로 하나 이상의 R^1"로 치환되는, 헤테로사이클로알킬, 사이클로알킬, 인단-1-일, 페닐 또는 헤테로아릴을 형성하고;
   R^1"는 각각 독립적으로 하이드록시, 아미노, 옥소, 저급 알킬, -C(=O)NH₂, -CN, 저급 할로알킬, 벤질, 시아노 저급 알킬, 또는 -NHC(=O)OC(CH₃)₃이고;
   R²는 H, 하이드록시, -CN, -C(=O)NH₂, -C(=O)OH, -C(=O)OC(CH₃)₃, R^2a, 또는 R^2b이고;
   R^2a는, 임의적으로 하나 이상의 R^2a'로 치환되는, 저급 알킬, 페닐, 페닐 저급 알킬, 사이클로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 저급 알킬, 헤테로아릴 저급 알킬, 페닐 저급 알콕시 또는 저급 알콕시이고;
   R^2a'는 각각 독립적으로 하이드록시, -CN, 아미노, 저급 알킬 설폰일아미노, 저급 알콕시, 할로, 저급 알킬, 시아노 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알킬 설폰일, 옥소, 할로 저급 알콕시, 사이클로알킬 또는 -C(=O)OCH₃이고;
   R^2b는 -C(=O)R³ 또는 -CH₂C(=O)R³이고;
   R³는, 임의적으로 하나 이상의 R^3'로 치환되는 헤테로사이클로알킬이고;
   R^3'는 각각 독립적으로 -CN, 할로, 저급 알킬, 또는 저급 알킬 설폰일이고;
   Q는, 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는, 5,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템, 6,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템, 5,5-이환형 헤테로아릴 고리 시스템, 6,5-이환형 헤테로아릴 고리 시스템 또는 5,7-이환형 헤테로아릴 고리 시스템이고;
   Q^a는 각각 독립적으로 할로, -CN, 하이드록시, 또는 -(CH₂)_nC(=O)Q^a' 이고;
   Q^a'는 각각 독립적으로 하이드록시, 아미노, 또는 임의적으로 하나 이상의 Q^a"로 치환되는 헤테로사이클로알킬이고;
   Q^a"는 각각 독립적으로 저급 알킬 또는 저급 할로알킬이고;
   n은 1, 2, 또는 3이고;
   Q^b는 각각 독립적으로, 임의적으로 하나 이상의 Q^b'로 치환되는, 저급 알킬, 사이클로알킬, 저급 알콕시, 페녹시, 저급 알킬 설폰일, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 저급 알킬 또는 헤테로아릴 저급 알킬이고;
   Q^b'는 각각 독립적으로 하이드록시, 할로, -CN, 아미노, 헤테로사이클로알킬, 저급 알킬, 벤질, 또는 저급 알킬 설폰일이다.
2. 제 1 항에 있어서,
   R이 H이고, R'가

   

   인, 화합물.
3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
   R^1'가 H 또는 저급 알킬인, 화합물.
4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
   R¹이 저급 알킬인, 화합물.
5. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
   R¹ 및 R^1'가 둘 다 H인, 화합물.
6. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
   R²가 -C(=O)R³인, 화합물.
7. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
   R²가, 임의적으로 하나 이상의 R^2a'로 치환되는 저급 알킬인, 화합물.
8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
   Q가, 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는 5,6-이환형 헤테로아릴 고리 시스템인, 화합물.
9. 제 1 항에 있어서,
   Q가, 임의적으로 하나 이상의 Q^a 또는 Q^b로 치환되는 인다졸-3-일인, 화합물.
10. 제 1 항 또는 제 9 항에 있어서,
    Q^a가 할로 또는 저급 알킬인, 화합물.
11. 제 1 항, 제 9 항 및 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    Q^b가 저급 알킬인, 화합물.
12. 제 1 항 및 제 9 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R^1a 및 R^1'가 함께, 임의적으로 하나 이상의 R^1"로 치환되는, 헤테로사이클로알킬 또는 사이클로알킬을 형성하는, 화합물.
13. 제 1 항 및 제 9 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R^1"가 아미노 또는 -CN인, 화합물.
14. 제 1 항 및 제 9 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R²가 저급 알킬인, 화합물.
15. 본원의 표 1에 열거된 화합물로부터 선택되는 화합물.
16. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 염증성 또는 자가면역성 증상 치료 방법.
17. 제 16 항에 있어서,
    화학치료제, 항-증식제, 항-염증제, 면역 조절제, 면역 억제제, 신경영양 인자, 심혈관 질환 치료제, 당뇨병 치료제, 및 면역결핍 장애 치료제로부터 선택되는 추가적인 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
18. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 류마티스성 관절염 치료 방법.
19. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 천식 치료 방법.
20. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 루푸스, 다발성 경화증, 류마티스성 관절염, 건선, 유형 I 당뇨병, 장기 이식 또는 이종 기관 이식으로부터의 합병증, 당뇨병, 암, 천식, 아토피성 피부염, 자가면역성 갑상선 질환, 궤양성 대장염, 크론병, 알츠하이머병 및 백혈병을 비롯한 면역 장애의 치료 방법.
21. 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된, 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 약학 조성물.
22. 제 21 항에 있어서,
    화학치료제, 항-증식제, 항-염증제, 면역 조절제, 면역 억제제, 신경영양 인자, 심혈관 질환 치료제, 당뇨병 치료제, 및 면역결핍 장애 치료제로부터 선택되는 추가적인 치료제를 추가로 포함하는, 약학 조성물.
23. 염증성 또는 자가면역성 증상의 치료를 위한 약제 제조에서의, 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
24. 관절염 또는 천식의 치료를 위한 약제의 제조에서의, 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
25. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
    관절염 또는 천식의 치료에 사용하기 위한 화합물.
26. 본원에서 전술된 바와 같은 화합물, 방법, 조성물 또는 용도.