KR20140048229A - 건선을 치료하는 방법 - Google Patents

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KR20140048229A KR1020147002833A KR20147002833A KR20140048229A KR 20140048229 A KR20140048229 A KR 20140048229A KR 1020147002833 A KR1020147002833 A KR 1020147002833A KR 20147002833 A KR20147002833 A KR 20147002833A KR 20140048229 A KR20140048229 A KR 20140048229A
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호아킨 마리오 발데스
엘리어트 케이. 차트애쉬
윌리엄 티. 바척
수잔 케이. 폴슨
케네쓰 비. 고든
왈리드 엠. 아우니
옌쥔 바오
윌리엄 쥐. 글래스
이화 구
톰 씨. 해리스
마틴 카울
파르베즈 엠. 물라니
페터 노에르터쇠저
마틴 엠. 오쿤
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애브비 인코포레이티드
아비에 도이치란트 게엠베하 운트 콤파니 카게
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Abstract

본 발명은 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체를 피험자에게 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다.

Description

건선을 치료하는 방법{METHODS FOR TREATING PSORIASIS}
관련 출원
본 출원은 2009년 9월 14일자로 출원된, 건선을 치료하는 방법이라는 명칭의 미국 특허원 일련 번호 제61/242,288호, 2009년 9월 25일자로 출원된 건선을 치료하는 방법이라는 명칭의 미국 특허원 일련 번호 제61/245,967호, 2010년 1월 22일자로 출원된 건선을 치료하는 방법이라는 명칭의 미국 특허원 일련 번호 제61/297623호, 및 2010년 6월 30일자로 출원된, 건선을 치료하는 방법이라는 명칭의 미국 특허원 일련 번호 제61/360,299호에 대한 우선권을 주장하며, 이들 각각의 전체 내용은 본원에 참조문헌으로 표시되어 도입된다.
본 발명은 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체를 피험자에게 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다.
건선은, 비록 세계적인 유행이 광범위하게 변한다고 해도, 성인의 대략 2% 내지 3%에 영향을 미치는 가장 일반적인 자가면역 질환들 중 하나인 것으로 고려되는 T 세포-매개된 염증성 질환이다[참조: Stern R.S., et al., J Investig Dermatol Symp Proc 2004, 9: 136-39; Davidson A and Diamond B. N Engl J Med 2001, 345: 340-50; Langley R.G.B., et al., Ann Rheum Dis 2005, 64(Suppl II): ii18-23]. 건선은 삶의 질에 있어 중요한 영향을 미치며[참조: de Korte J, et al., J Investig Dermatol Symp Proc 2004, 9: 140-7; Krueger G, et al., Arch Dermatol 2001, 137: 280-4; Finlay AY and Coles EC, Br J Dermatol 1995, 132: 236-44], 다수의 정신적 및 사회심리적 문제들과 관련되어 있다[참조: Kimball AB, et al., Am J Clin Dermatol 2005, 6: 383-92; Russo PA, et al., Australas J Dermatol 2004, 45: 155-9]. 많은 전통적인 건선 치료요법은 독성 부작용이 있으므로, 이들의 장기간 사용은 제한된다[참조: Lebwohl M. and Ali S., J Am Acad Dermatol 2001, 45: 487-98; Lebwohl M. and Ali S., J Am Acad Dermatol 2001, 45: 649-61]. 또한, 많은 건선 환자들은 전통적인 치료요법에 불만족하고 있으므로[참조: Stern RS, et al., J Investig Dermatol Symp Proc 2004, 9: 136-39; Finlay AY and Ortonne JP, J Cutan Med Surg 2004, 8: 310-20]; 보다 안전하고 사용하기 보다 용이하며 장기간 기준으로 처방될 수 있는 치료요법에 대해 명확한 요구가 존재한다.
인터류킨-12(IL-12) 및 관련된 사이토킨 IL-23은 공통의 p40 소단위를 공유하는 사이토킨의 IL-12 상과(superfamily)의 구성원이다(참조: Anderson EJR, et al., Springer Semin Immunopathol 2006, 27: 425-42). 사이토킨 둘다는 건선에서 제1형 T 헬퍼 세포(Th1) 면역 반응의 발달에 기여하지만, 각각은 독특한 역할을 갖는다(참조: Rosmarin D and Strober BE, J Drugs Dermatol 2005, 4: 318-25; Hong K, et al., J Immunol 1999, 162: 7480-91; Yawalkar N, et al., J Invest Dermatol 1998, 111: 1053-57). IL-12는 주로 Th1 세포의 분화 및 인터페론-감마의 후속적인 분비를 자극하지만, IL-23은 나이브(naive) T 세포를 전염증성 매개인자, IL-17을 분비하는 효과기 T 헬퍼 세포(Th17)로의 분화를 우선적으로 자극한다(참조: Rosmarin D and Strober BE, J Drugs Dermatol 2005, 4: 318-25; Harrington Le, et al., Nature Immunol 2005, 6: 1123-32; Park H, et al. Nature Immunol 2005, 6: 1132-41). 건선 피부 병변에서 IL-12 p40 및 IL-23 p40 메신저 RNA의 과발현은, IL-12/IL-23 p40 소단위 단백질에 대한 중화 항체를 사용한 IL-12 및 IL-23의 억제가 건선 치료를 위한 효과적인 치료학적 시도를 제공할 수 있음을 제안한다(참조: Yawalkar N, et al., J Invest Dermatol 1998, 111: 1053-57; Lee E, et al., J Exp Med 2004, 199: 125-30; Shaker OG, et al., Clin Biochem 2006, 39: 119-25; Piskin G, et al., J Immunol 2006, 176: 1908-15). 건선 치료를 위한 이러한 치료학적 시도는 당해 분야에서 명확하게 요구되고 있다.
발명의 요약
본 발명은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23에 결합하는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 사용하여 건선, 예를 들면, 만성 건선을 치료하기 위한 방법 및 조성물을 제공한다.
하나의 국면에서, 본 발명은 주기에 따라 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량을 피험자에게 투여하고, 동일한 주기로 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 용량을 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료하는 것을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다.
다른 국면에서, 본 발명은 제1 주기에 따라, IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량을 피험자에게 투여하고, 제2 주기에 따라, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 용량을 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료하는 것을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다.
각종 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량은 적어도 약 100 mg 내지 약 200 mg이고, 적어도 약 100 mg이거나, 적어도 약 200 mg이다. 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량은 약 100 mg, 110 mg, 약 120 mg, 약 130 mg, 약 140 mg, 약 150 mg, 약 160 mg, 약 170 mg, 약 180 mg, 약 190 mg, 약 200 mg이다.
항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 용량은 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량과 동일할 수 있거나, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량과 상이할 수 있다. 각종 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 용량은 적어도 약 100 mg 내지 약 200 mg이고, 적어도 약 200 mg이거나, 적어도 약 100 mg이다. 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 용량은 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%이거나, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 190 내지 210%이다. 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량은 약 100 mg, 110 mg, 약 120 mg, 약 130 mg, 약 140 mg, 약 150 mg, 약 160 mg, 약 170 mg, 약 180 mg, 약 190 mg, 200 mg이다.
항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 및 제2 투여 주기는 주당 약 1회, 매 격주 마다 약 1회, 매 4주 마다 약 1회일 수 있다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 투여 주기는 매 30 내지 200일마다 약 1회이다.
제1 주기의 지속 기간은 적어도 약 12주, 약 8주, 약 4주, 약 2주, 또는 약 1주일 수 있다. 제1 주기의 지속 기간은 적어도 약 12주, 적어도 약 8주, 적어도 약 4주, 적어도 약 2주, 또는 적어도 약 1주일 수 있다.
제2 주기의 지속 기간은 약 60주, 약 44주, 약 12주, 약 4주, 약 2주, 또는 약 1주일 수 있다. 제2 주기의 지속 기간은 적어도 약 60주, 적어도 약 44주, 적어도 약 12주, 적어도 약 4주, 적어도 약 2주, 또는 적어도 약 1주일 수 있다.
하나의 양태에서, 제2 용량은 건선의 발적(flare)시 피험자에게 투여된다. 다른 양태에서, 제2 용량은 건선의 발적 전에 피험자에게 투여된다.
건선의 발적은 건선 면적 및 중증도 지수(Psoriasis Area and Severity Index: PASI) 90 반응의 상실, 건선 면적 및 중증도 지수(PASI) 75 반응의 상실, 건선 면적 및 중증도 지수(PASI) 50 반응의 상실, 또는 명확하거나 최소의 의사의 전반적 평가(Physician's Global Assessment: PGA) 등급(rating)의 상실에 의해 나타낼 수 있다.
PASI 반응의 상실은 1곳의 신체 부위의 PASI 반응의 상실, 2곳의 신체 부위(body region)의 PASI 반응의 상실, 3곳의 신체 부위의 PASI 반응의 상실, 또는 4곳의 신체 부위의 PASI 반응의 상실일 수 있다.
신체 부위는 몸통, 하지, 상지 또는 두부 및 경부일 수 있다.
다른 국면에서, 본 발명은 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 피험자에게 매 4주당 약 1회의 주기에 따라 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료함을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다.
여전히 다른 국면에서, 본 발명은 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 피험자에게 매 12주당 약 1회의 주기에 따라 투여함으로써, 피험자에서 건선을 치료함을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다.
관련된 국면에서, 본 발명은
a) IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량; 및
b) 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량을 매 12주에 약 1회의 주기에 따라 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료함을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다.
하나의 양태에서, 피험자는 적어도 0 또는 1의 적어도 PGA 점수를 달성한다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 PASI 75 반응을 달성한다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 PASI 90 반응을 달성한다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 PASI 100 반응을 달성한다. 하나의 양태에서, 피험자는 치료 동안 0 또는 1의 PGA 점수를 유지한다. 하나의 양태에서, 피험자는 치료 동안 PASI 75 반응을 유지한다. 하나의 양태에서, 피험자는 치료 동안 PASI 90 반응을 유지한다.
하나의 양태에서, 제1 용량은 적어도 약 200 mg이다.
하나의 양태에서, 제2 용량은 적어도 약 100 mg이다.
다른 국면에서, 본 발명은 a) IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량을 매 4주에 약 1회의 제1 주기에 따라 피험자에게 투여하고; b) 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량을 매 4주당 약 1회의 주기에 따라 피험자에게 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료함을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다.
하나의 양태에서, 제1 용량은 적어도 약 200 mg이다.
하나의 양태에서, 제2 용량은 적어도 약 100 mg이다.
하나의 양태에서, 제1 주기의 지속 기간은 적어도 약 8주이다.
하나의 양태에서, 제2 주기의 지속 기간은 적어도 약 4주, 적어도 약 16주, 또는 적어도 약 44주이다.
다른 국면에서, 본 발명은 피험자에게 a) 매 4주당 약 1회의 제1 주기에 따라, IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량; 및 b) 매 4주당 약 1회의 제2 주기에 따라, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량; 및 c) 매 12주당 약 1회의 제 3 주기에 따라, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제2 용량을 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료함을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다.
하나의 양태에서, 제1 용량은 적어도 약 200 mg이다.
하나의 양태에서, 제2 용량은 적어도 약 100 mg이다.
하나의 양태에서, 제1 주기의 지속 기간은 적어도 약 8주이다.
하나의 양태에서, 제2 주기의 지속 기간은 적어도 약 4주이다.
하나의 양태에서, 제 3 주기의 지속 기간은 적어도 약 12주 또는 적어도 약 36주이다.
하나의 양태에서, 피험자는 0 또는 1의 PGA 점수를, 예를 들면, 약 12주까지 달성한다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 PASI 75 반응을, 예를 들면, 약 12주까지 달성한다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 PASI 90 반응을, 예를 들면, 약 12주까지 달성한다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 PASI 100 반응을, 예를 들면, 약 12주까지 달성한다.
하나의 양태에서, 피험자는 치료 기간에 걸쳐 0 또는 1의 PGA 점수를 유지한다. 하나의 양태에서, 피험자는 치료 기간에 걸쳐 PASI 75 반응을 유지한다. 하나의 양태에서, 피험자는 치료 기간에 걸쳐 PASI 90 반응을 유지한다.
다른 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하는, 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법을 제공하며, 여기서, 피험자들의 집단의 적어도 60%가 약 12주까지 PASI 75 반응을 달성한다.
여전히 다른 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하는, 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법을 제공하며, 여기서, 피험자들의 집단의 적어도 25%는 약 12주까지 PASI 90 반응을 달성한다.
여전히 다른 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하는, 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 집단의 적어도 10%는 약 12주까지 PASI 100 반응을 달성한다.
하나의 양태에서, 당해 방법은 집단 내 각각의 피험자에게 a) 매 4주당 약 1회의 제1 주기에 따라, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량; 및 b) 매 4주당 약 1회의 제2 주기에 따라, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량을 투여함을 포함한다.
하나의 양태에서, 당해 방법은 집단 내 각각의 피험자에게 a) 매 4주당 약 1회의 제1 주기에 따라, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량; 및 b) 매 4주당 약 1회의 제2 주기에 따라, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량; 및 c) 매 12주당 약 1회의 제 3 주기에 따라, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제2 용량을 투여함을 포함한다.
하나의 양태에서, 항체는 피하 투여된다.
하나의 양태에서, 항체는 사람 항체이다. 바람직한 양태에서, 항체는 ABT-874이다.
하나의 양태에서, 피험자 또는 피험자들의 집단은 적어도 PASI 75 반응을 약 24주까지 또는 적어도 PASI 75 반응을 약 52주까지 달성한다. 다른 양태에서, 피험자 또는 피험자들의 집단은 적어도 0 또는 1의 PGA 점수를 약 24주까지 또는 적어도 0 또는 1의 PGA 점수를 약 52주까지 달성한다.
다른 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함으로써 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 피험자들의 집단의 적어도 41%는 적어도 PASI 75 반응을 약 24주까지 달성한다.
여전히 다른 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함으로써 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서, 피험자들의 집단의 적어도 35%는 약 24주까지 적어도 0 또는 1의 PGA 점수를 달성한다.
추가의 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함으로써 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 피험자들의 집단의 적어도 25%는 약 52주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성한다.
다른 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함으로써, 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 피험자들의 집단의 적어도 21%는 약 52주까지 적어도 0 또는 1의 PGA 점수를 달성한다.
앞서의 국면들의 특정 양태에서, 피험자 또는 피험자들의 집단은 (i) 적어도 약 -9의 피부과 삶의 질 지수(Dermatology Life Quality Index: DLQI) 점수 또는 평균 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수에서의 개선; (ii) 적어도 약 2의 간이 36문항 건강조사 신체적 부분 일람서[Short Form 36 Health Survey Physical Component Summary(PCS)] 점수 또는 평균 신체적 부분 일람서(PCS) 점수에서의 개선; (iii) 적어도 약 4의 간이 36문항 건강조사 정신적 부분 일람서(MCS) 점수 또는 평균 간이 36문항 건강조사 정신적 부분 일람서(MCS) 점수에서의 개선; (iv) 적어도 약 -25의 건선-관련 통증에 대한 가시적 유사 규모 점수(VAS-Ps) 또는 평균 가시적 유사 규모 점수(VAS-Ps)에 있어서의 개선; (v) 적어도 약 -32의 건선 관절염-관련 통증에 대한 가시적 유사 규모 점수(VAS-PsA) 또는 건선 관절염-관련 통증에 대한 평균 가시적 유사 규모 점수(VAS-PsA)에 있어서의 개선; 및/또는 (vi) 적어도 약 60%의 건선-관련 통증(VAS-Ps)에 대한 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률을 달성한다.
각종 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하는, 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 피험자들의 집단은 (i) 약 12주까지 적어도 약 70%의 피부과 삶의 질 지수(DLQI)에 대해 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률; (ii) 약 52주까지 적어도 약 81%의 피부과 삶의 질 지수(DLQI)에 대한 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률; (iii) 약 12주까지 적어도 약 45%의 총 활동 장해(Total Activity Impairment: TAI)에 대한 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률; 및/또는 (iv) 약 52주까지 적어도 약 57%의 총 활동 장해(TAI)에 대한 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률을 달성한다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 매 4주에 1회 투여된다. 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 매 12주에 1회 투여된다.
추가의 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함으로써, 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 (i) 피험자들의 집단의 적어도 65%는 약 12주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 항체를 투여하기 전에 생물학적 제제(biologic)로 치료되고/되거나; (ii) 피험자들의 집단의 적어도 74%는 약 12주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성하며, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 생물학적 제제로 치료되고/되거나; (iii) 피험자들의 집단의 적어도 78%는 약 12주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 피험자 중 어느 것도 항체 투여 전에 생물학적 제제로 치료되지 않고/않거나; (iv) 피험자들의 집단의 적어도 82%는 약 12주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성하고, 여기서 피험자 중 어느 것도 항체의 투여 전에 생물학적 제제로 치료되지 않고/않거나; (v) 피험자들의 집단의 적어도 78%는 약 52주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 생물학적 제제로 치료되고/되거나; (vi) 피험자들의 집단의 적어도 79%는 약 52주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 피험자 중 어느 것도 항체의 투여 전에 생물학적 제제로 치료되지 않고/않거나; (vii) 피험자들의 집단의 적어도 71%는 약 12주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 건선 관절염의 과거 병력을 가지거나/가지며; (viii) 피험자들의 집단의 적어도 78%는 약 12주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 건선 관절염의 과거 병력을 가지거나/가지며; (ix) 피험자들의 집단의 적어도 77%는 약 12주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 피험자 중 어느 것도 건선 관절염의 과거 병력을 가지지 않고/않거나; (x) 피험자들의 집단의 적어도 81%는 약 12주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성하고, 여기서 피험자 중 어느 것도 건선 관절염의 과거 병력을 가지지 않고/않거나; (xi) 피험자들의 집단의 적어도 77%는 약 52주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 건선 관절염의 과거 병력을 가지고/가지거나; (xii) 피험자들의 집단의 적어도 79%는 약 52주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 피험자 중 어느 것도 건선 관절염의 과거 병력을 가지지 않는다.
여전히 다른 국면에서, 본 발명은 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는, 항체, 또는 이의 항원 결합 부분으로 치료된 피험자가 주요 부작용인 심혈관 현상(Major Adverse Cardiovascular Event: MACE)으로 진행될 위험성을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 (a) (i) 30 초과의 체질량 지수(BMI), (ii) 진성 당뇨병의 병력, (iii) 140/90 초과의 혈압, (iv) 심근경색의 병력, (v) 입원을 필요로 하는 협심증의 병력, (vi) 혈관 재형성을 필요로 하는 관상 동맥 질환의 병력, (vii) 말초 동맥 질환의 병력, (viii) 입원을 필요로 하는 울혈성 심장 기능상실이 병력, (ix) 뇌졸중 또는 일과성 허혈발작의 병력으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 2개 미만의 위험 인자를 지닌 피험자를 선택하는 단계; 및 (b) 선택된 피험자에게 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 투여하는 단계를 포함함으로써; 피험자가 주요 심혈관 유해 사건으로 진행될 위험을 감소시킨다. 특정 양태에서, 항체는 ABT-874 또는 우스테키누마브이다.
특정 양태에서, 피험자는 0 또는 1 위험 인자를 갖는다. 특정 양태에서, MACE는 심근경색 및/또는 뇌혈관성 뇌졸중이다.
다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 선택된 피험자에게 적어도 약 100 mg 내지 약 200 mg의 제1 용량으로 투여된다. 추가의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 선택된 피험자에게 적어도 약 100 mg 내지 약 200 mg의 제2 용량으로 투여된다. 특정 양태에서, 위험 인자는 선택된 피험자에게 제2 용량을 투여하기 전에 재-평가된다.
본 발명의 각종 국면의 특정 양태에서, 피험자는 PASI 점수에서 적어도 50% 감소를 달성한다. 하나의 국면에서 피험자는 약 4주까지 PASI 점수에서 적어도 50% 감소를 달성한다.
본 발명의 각종 국면의 다른 양태에서, 피험자는 PASI 점수에서 적어도 80% 감소를 달성한다. 하나의 국면에서, 피험자는 약 12주까지 PASI 점수에서 적어도 80% 감소를 달성한다.
추가의 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하는, 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서, (i) 피험자들의 집단 중 적어도 69%는 약 12주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 20보다 큰 기준치 PASI를 가졌고/가졌거나; (ii) 피험자들의 집단 중 적어도 79%는 약 12주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하며, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 20 이하의 기준치 PASI를 가졌고/가졌거나; (iii) 피험자들의 집단 중 적어도 79%는 약 12주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 20 초과의 기준치 PASI를 가졌고/가졌거나; (iv) 피험자들의 집단 중 적어도 81%는 약 12주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 20 이하의 기준치 PASI를 가졌고/가졌거나; (v) 피험자들의 집단 중 적어도 67%는 약 12주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 100 킬로그람 이상의 기본 체중을 가졌고/가졌거나; (vi) 피험자들의 집단 중 적어도 80%는 약 12주까지 적어도 PGA 0/1 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 100 킬로그람 미만의 기본 체중을 가졌고/가졌거나; (vii) 피험자들의 집단 중 적어도 72%는 약 12주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 100 킬로그람 이상의 기본 체중을 가졌고/가졌거나 (viii) 피험자들의 집단 중 적어도 85%는 약 12주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성하고, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 100 킬로그람 미만의 기본 체중을 가졌다.
여전히 추가의 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하는, 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 (i) 피험자들의 집단 중 적어도 41%는 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 PGA 0/1 반응을 유지하고/하거나; (ii) 피험자들의 집단 중 적어도 79%는 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 PGA 0/1 반응을 유지하고/하거나; (iii) 피험자들의 집단 중 적어도 45%는 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 PASI 75 반응을 유지하고/하거나; (iv) 피험자들의 집단 중 적어도 82%는 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 PASI 75 반응을 유지하고/하거나; (v) 피험자들의 집단 중 적어도 23%는 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 PASI 75 반응을 유지하고/하거나; (vi) 피험자들의 집단 중 적어도 63%는 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 PASI 75 반응을 유지한다.
본 발명의 각종 국면의 특정 양태에서, 건선을 치료하는 방법은 집단 내 각각의 피험자에게 a) 매 4주당 약 1회의 제1 주기에 따라, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량을 투여하고; b) 매 4주당 약 1회의 제2 주기에 따라, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량을 투여함을 포함한다.
본 발명의 각종 국면의 다른 양태에서, 건선을 치료하는 방법은 집단 내 각각의 피험자에게 a) 매 4주당 약 1회의 제1 주기에 따라, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량; 및 b) 매 4주당 약 1회의 제2 주기에 따라, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량; 및 c) 매 12주 당 약 1회의 제 3 주기에 따라, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제2 용량을 투여함을 포함한다.
본 발명의 각종 국면의 특정 양태에서, 건선에 대해 치료된 피험자는 약 171일 미만에 0 또는 1의 PGA를 달성한다. 일부 양태에서, 건선에 대해 치료된 피험자는 약 30, 40, 50, 60, 70, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170일 미만에서 0 또는 1의 PGA를 달성한다. 특정 양태에서, 환자는 약 69일까지 0 또는 1의 PGA를 달성한다.
본 발명의 각종 국면의 관련 양태에서, 환자는 약 140일 미만에서 PASI 75를 달성한다. 일부 양태에서, 건선에 대해 치료된 피험자는 약 30, 40, 50, 60, 70, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 136, 137, 138 또는 139일 미만에서 PASI 75를 달성한다. 특정 양태에서, 환자는 약 56일까지 PASI 75를 달성한다.
본 발명의 각종 국면의 여전히 다른 양태에서, 피험자는 PASI 점수에서 적어도 60% 개선을 달성하고, 예를 들면, PASI 점수에서 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 60% 개선을 유지한다.
다른 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하는, 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 (i) 피험자들의 집단 중 적어도 10%는 치료 24주까지 0의 PGA 점수를 달성하고/하거나; (ii) 피험자들의 집단 중 적어도 5%는 약 2주까지 적어도 PASI 50 반응을 달성하고/하거나; (iii) 피험자들의 집단 중 적어도 70%는 적어도 PASI 50 반응을 달성하여 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 PASI 50 반응을 유지하고/하거나; (iv) 피험자들의 집단 중 적어도 5%는 약 4주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성하고/하거나; (v) 피험자들의 집단 중 적어도 40%는 적어도 PASI 75 반응을 달성하여 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 PASI 75 반응을 유지하고/하거나; (vi) 피험자들의 집단 중 적어도 10%는 약 8주까지 적어도 PASI 90 반응을 달성하고/하거나; (vii) 피험자들의 집단 중 적어도 25%는 적어도 PASI 90 반응을 달성하여 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 PASI 90 반응을 유지하고/하거나; (viii) 피험자들의 집단 중 적어도 5%는 약 8주까지 적어도 PASI 100 반응을 달성하고/하거나; (ix) 피험자들의 집단 중 적어도 10%는 적어도 PASI 100 반응을 달성하여 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 PASI 100 반응을 유지하고/하거나; (x) 피험자들의 집단 중 적어도 5%는 약 4주까지 적어도 0 또는 1의 PGA 점수를 달성하고/하거나 (xi) 피험자들의 집단 중 적어도 35%는 적어도 0 또는 1의 PGA 점수를 달성하여 적어도 52주의 치료에 걸쳐 적어도 0 또는 1의 PGA 점수를 유지한다.
본 발명의 각종 국면의 특정 양태에서, 피험자는 약 2.1 이하의 손발톱 건선 중증도 지수(Nail Psoriasis Severity Index: NAPSI) 점수를 달성한다. 특정 양태에서, 피험자는 약 24주까지 약 2.1 이하의 손발톱 건선 중증도 지수(NAPSI) 점수를 달성한다. 본 발명의 각종 국면의 관련 양태에서, 피험자는 약 1.2 이하의 손발톱 건선 중증도 지수(NAPSI) 점수를 달성한다. 특정 양태에서, 피험자는 약 52주까지 약 1.2 이하의 손발톱 건선 중증도 지수(NAPSI) 점수를 달성한다.
본 발명의 각종 국면의 다른 양태에서, 피험자는 약 0 또는 1의 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수를 달성한다. 특정 양태에서, 피험자는 약 24주 또는 약 52주까지 약 0 또는 1의 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수를 달성한다.
특정 양태에서, 피험자는 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수에서 임상적으로 의미있는 감소를 달성한다. 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수에서 임상적으로 의미있는 감소는, 예를 들면, DLQI 점수에서 5점 이상의 감소일 수 있다. 하나의 양태에서, 피험자는 DLQI 점수에서 약 24주까지 임상적으로 의미있는 감소를 달성한다. 하나의 양태에서, 피험자는 약 52주까지 DLQI 점수에서 임상적으로 의미있는 감소를 달성한다.
특정 양태에서, 피험자 또는 피험자들의 집단은 예를 들면, 12주까지 적어도 약 -7의 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수에서의 개선을 달성한다.
추가의 국면에서, 본 발명은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하는, 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 (i) 피험자들의 집단 중 적어도 35%는 약 24주까지 0 또는 1의 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수를 달성하고/하거나; (ii) 피험자들의 집단 중 적어도 18%는 약 52주까지 0 또는 1의 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수를 달성하고/하거나; (iii) 피험자들의 집단 중 적어도 50%는 약 24주까지 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수에서 임상적으로 의미있는 감소를 달성하고/하거나 (iv) 피험자들의 집단 중 적어도 20%는 약 52주까지 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수에서 임상적으로 의미있는 감소를 달성한다.
본 발명의 각종 국면의 몇가지 양태에서, 피험자는 피부과 삶의 질 지수(DLQI), 총 활동 장해(TAI), Ps-관련(VAS-Ps) 통증, 건선 관절염-관련(VAS-PsA) 통증, 간이 36문항 건강조사 정신적 부분 일람서(MCS) 점수 및 간이 36문항 건강조사 신체적 부분 일람서(PCS) 점수로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 건강-관련 삶의 질의 결과에 있어서 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID)를 달성한다. 각종 양태에서, 피험자는 피부과 삶의 질 지수(DLQI), 총 활동 장해(TAI), Ps-관련(VAS-Ps) 통증, 건선 관절염 관련(VAS-PsA) 통증, 간이 36문항 건강조사 정신적 부분 일람서(MCS) 점수 또는 간이 36문항 건강조사 신체적 부분 일람서(PCS) 점수 중 2, 3, 4, 5개 또는 6개 모두에 있어서 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCJD)를 달성한다.
관련 양태에서, 피험자들의 집단은 피부과 삶의 질 지수(DLQI), 총 활동 장해(TAI), Ps-관련 (VAS-Ps) 통증, 건선 관절염-관련(VAS-PsA) 통증, 간이 36문항 건강조사 정신적 부분 일람서(MCS) 점수 및 간이 36문항 건강조사 신체적 부분 일람서(PCS) 점수로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 건강-관련 삶의 질의 결과에 대한 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률을 달성한다. 각종 양태에서, 피험자들의 집단은 피부과 삶의 질 지수(DLQI), 총 활동 장해(TAI), Ps-관련(VAS-Ps) 통증, 건선 관절염-관련(VAS-PsA) 통증, 간이 36문항 건강조사 정신적 부분 일람서(MCS) 점수 또는 간이 36문항 건강조사 신체적 부분 일람서(PCS) 점수 중 2, 3, 4, 5개 또는 6개 모두의 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률을 달성한다.
본 발명의 상기 모든 국면 중 하나의 양태에서, 당해 방법은 피험자 또는 집단 내 각각의 피험자에게 a) 매 4주당 약 1회의 제1 주기에 따라, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량을 투여하고; b) 매 4주당 약 1회의 제2 주기에 따라, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량을 투여함을 포함한다.
본 발명의 상기 모든 국면들의 다른 양태에서, 당해 방법은 피험자 또는 집단 내 각각의 피험자에게 a) 약 200 mg의 ABT-874를 2회 용량에 대해 매 4주에 1회; 및 b) 이후에 약 100 mg의 ABT-874를 매 4주 투여함을 포함한다.
본 발명의 상기 국면들 모두의 여전히 다른 양태에서, 당해 방법은 피험자 또는 집단 내 각각의 피험자에게 a) 0 및 4주에 약 200 mg의 ABT-874; 및 b) 8주째에 그리고 이후 매 4주 마다 약 100 mg의 ABT-874를 투여함을 포함한다. 하나의 양태에서, 항체는 ABT-874(즉, briakinumabTM)이다.
추가의 국면에서, 본 발명은 피험자에게 a) 약 200 mg의 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 2회의 용량에 대해 매 4주에 1회; 및 b) 이후에 약 100 mg의 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 매 4주 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료함을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다. 하나의 양태에서, 항체는 ABT-874이다. 하나의 양태에서, 건선은 판형 건선(plaque psoriasis), 예를 들면, 중등도(moderate) 내지 중증(severe)의 만성 판형 건선과 같은 만성 판형 건선이다.
여전히 추가의 국면에서, 본 발명은 피험자에게 a) IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 약 200 mg의 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 0 및 4주에; 및 b) 8주째에 그리고 이후 매 4주 마다 약 100 mg의 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함으로써, 피험자에서 건선을 치료함을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다. 하나의 양태에서, 항체는 ABT-874이다. 하나의 양태에서, 건선은 판형 건선, 예를 들면, 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선과 같은 만성 판형 건선이다.
여전히 추가의 국면에서, 본 발명은 피험자에게 a) 약 200 mg의 ABT-874를 2회의 용량에 대해 매 4주에 1회; 및 b) 이후에 약 100 mg의 ABT-874를 매 4주에 투여함으로써, 피험자에서 건선을 치료함을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다. 하나의 양태에서, 항체는 ABT-874이다. 하나의 양태에서, 건선은 판형 건선, 예를 들면, 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선과 같은 만성 판형 건선이다.
여전히 추가의 국면에서, 본 발명은 피험자에게 a) 약 200 mg의 ABT-874를 0 및 4주에; 및 b) 8주째에 그리고 매 4주 마다 약 100 mg의 ABT-874를 투여함으로써, 피험자에서 건선을 치료함을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다. 하나의 양태에서, 항체는 ABT-874이다. 하나의 양태에서, 건선은 판형 건선, 예를 들면, 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선과 같은 만성 판형 건선이다.
하나의 양태에서, 건선은 만성 건선이다. 하나의 양태에서, 건선은 판형 건선, 예를 들면, 만성 판형 건선이다. 다른 양태에서, 건선은 만성 건선, 예를 들면, 만성 판형 건선이다. 여전히 다른 양태에서, 건선은 중등도 내지 중증의 건선, 예를 들면, 중등도 내지 중증의 판형 건선, 중등도 내지 중증의 만성 건선 또는 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선이다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 6개월 동안 건선의 임상적 진단을 가졌다. 다른 양태에서, 피험자는 적어도 2개월 동안 안정한 판형 건선을 가졌다.
하나의 양태에서, 항체는 피하 주사를 통해 투여된다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위의 에피토프에 결합할 수 있다.
다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은, p40 소단위가 IL-12의 p35 소단위에 결합하는 경우 p40 소단위의 에피토프에 결합할 수 있다. 여전히 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은, p40 소단위가 p19 소단위, 즉, IL-23의 p19 소단위에 결합하는 경우, p40 소단위의 에피토프에 결합할 수 있다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은, p40 소단위가 IL-12의 p35 소단위에 결합하고 p40 소단위가 p19 소단위에 결합하는 경우, p40 소단위의 에피토프에 결합할 수 있다.
하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 Y61 및 J695로 이루어진 그룹 중에서 선택된 항체가 결합하는, IL-12의 p40 소단위의 에피토프에 결합한다.
다른 양태에서, 항체는 제1의 이종이합체(heterodimer)에 추가로 결합할 수 있으며 또한 제2의 이종이합체에 결합할 수 있고, 여기서 제1의 이종이합체는 IL-12의 p40 소단위 및 IL-12의 p35 소단위를 포함하며, 여기서 제2의 이종이합체는 IL-12의 p40 소단위 및 p19 소단위, 즉, IL-23의 p19 소단위를 포함한다.
추가의 양태에서, 항체는 제1의 이종이합체의 활성을 중화시킨다. 다른 양태에서, 항체는 제2의 이종이합체의 활성을 중화시킨다. 여전히 다른 양태에서, 항체는 제1의 이종이합체 및 제2의 이종이합체의 활성을 중화시킨다.
추가의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50으로 억제하거나 사람 IFNγ 생산을 1 x 10-10 M 이하의 IC50으로 억제한다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 표면 플라스몬 공명(surface plasmon resonance)에 의해 측정된 것으로서 IL-12의 p40 소단위로부터 1 x 10-10 M 이하의 Kd 또는 1 x 10-3 s-1 이하의 koff 속도 상수(rate constant)로 해리한다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 분리된 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 키메라 항체, 사람화된 항체 또는 사람 항체이다.
다른 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3 및 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3를 갖는다.
추가의 양태에서, 본 발명의 방법에 사용된 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 서열 번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2 및 서열 번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2를 갖는다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 서열 번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1 및 서열 번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1을 갖는다.
다른 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 p40 소단위를 포함하는 인터류킨에 결합할 수 있다. 하나의 양태에서, 인터류킨은 p40 소단위 및 p35 소단위를 포함하며, 예를 들면, 인터류킨은 IL-12이다. 다른 양태에서, 인터류킨은 p40 소단위 및 p19 소단위를 포함하며, 예를 들면, 인터류킨은 IL-23이다. 여전히 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 인터류킨의 활성을 중화시킨다.
하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 p40 소단위의 에피토프에 결합한다.
하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 피험자에게 항체, 또는 이의 항원 결합 부분, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물로 투여된다. 약제학적 조성물은 또한 치료제와 같은 추가의 제제, 예를 들면, 부데노시드, 상피 성장 인자, 코르티코스테로이드, 사이클로스포린, 설파살라진, 아미노살리실레이트, 6-머캅토퓨린, 아자티오프린, 메트로니다졸, 리폭시게나제 억제제, 메살라민, 올살라진, 발살라지드, 항산화제, 트롬복산 억제제, IL-1 수용체 길항제, 항-IL-1β 모노클로날 항체, 항-IL-6 모노클로날 항체, 성장 인자, 엘라스타제 억제제, 피리디닐-이미다졸 화합물, TNF, LT, IL-1, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF, 및 PDGF의 항체 또는 효능제, CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90의 항체 또는 이들의 리간드, 메토트렉세이트, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 이부프로펜, 코르티코스테로이드, 프레드니솔론, 포스포디에스테라제 억제제, 아데노신 효능제, 항혈전제, 상보체 억제제, 아드레날린제, IRAK, NIK, IKK, p38, MAP 키나제 억제제, IL-1β 전환 효소 억제제, TNFα 전환 효소 억제제, T-세포 시그날링 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체, 가용성 p55 TNF 수용체, 가용성 p75 TNF 수용체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R, 항-염증성 사이토킨, IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 및 TGFβ를 포함할 수 있다.
다른 양태에서, 피험자에게 투여된 약제학적 조성물내 치료제는 항-TNF 항체 및 이의 항체 단편, TNFR-Ig 작제물, TACE 억제제, PDE4 억제제, 코르티코스테로이드, 부데노시드, 덱사메타손, 설파살라진, 5-아미노살리실산, 올살라진, IL-1β 전환 효소 억제제, IL-1ra, 타이로신 키나제 억제제, 6-머캅토퓨린 및 IL-11로 이루어진 그룹 중에서 선택될 수 있다.
다른 양태에서, 치료제는 코르티코스테로이드, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 아자티오프린, 사이클로포스파미드, 사이클로스포린, 메토트렉세이트, 4-아미노피리딘, 티자니딘, 인터페론-β1a, 인터페론-β1b, 공중합체 1, 고압성 산소, 정맥내 면역글로불린, 클라브리빈, TNF, LT, IL-1, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF, PDGF의 항체 또는 효능제, CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD80, CD86, CD90에 대한 항체 또는 이들의 리간드, 메토트렉세이트, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 이부프로펜, 코르티코스테로이드, 프레드니솔론, 포스포디에스테라제 억제제, 아데노신 효능제, 항혈전제, 상보체 억제제, 아드레날린제, IRAK, NIK, IKK , p38 또는 MAP 키나제 억제제, IL-1β 전환 효소 억제제, TACE 억제제, T-세포 시그날링 억제제, 키나제 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체, 가용성 p55 TNF 수용체, 가용성 p75 TNF 수용체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R, sIL-13R, 항-P7, p-셀렉틴 당단백질 리간드 (PSGL), 항-염증성 사이토킨, IL-4, IL-10, IL-13 및 TGFβ로 이루어진 그룹 중에서 선택될 수 있다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23에 결합하며 표면 플라스몬 공명에 의해 측정된 것으로서 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 각각 1 x 10-10 M 이하의 Kd 및 1 x 10-3 s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리된다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 1 x 10-4 s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리된다. 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 1 x 10-5s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리된다.
다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23에 결합하여 표면 플라스몬 공명에 의해 측정된 것으로서, 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 각각 1 x 10-2 s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리된다. 여전히 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 1 x 10-3 s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리된다. 여전히 추가의 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 1 x 10-4 s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리된다. 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 1 x 10-5s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리된다.
여전히 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23에 결합하여 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 각각 1.34 x 10-10 M 이하의 Kd로 해리된다. 여전히 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23에 결합하여 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 각각 9.74 x 10-11 M 이하의 Kd로 해리된다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 재조합체 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 중화 항체이며, 예를 들면, 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23의 활성을 중화한다. 하나의 양태에서, 중화 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50로 억제한다. 다른 양태에서, 중화 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-10M 이하의 IC50로 억제한다. 여전히 다른 양태에서, 중화 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-11M 이하의 IC50로 억제한다. 여전히 다른 양태에서, 중화 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 식물성 혈구 응집소 모세포 증식 검정(PHA 검정)에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-7 M 이하의 IC50로 억제한다. 여전히 다른 양태에서, 중화 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-8 M 이하의 IC50로 억제한다. 하나의 양태에서, 중화 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IFNγ 생산을 1 x 10-10 M 이하의 IC50로 억제한다. 여전히 다른 양태에서, 중화 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IFNγ 생산을 1 x 10-11 M 이하의 IC50로 억제한다. 여전히 추가의 양태에서, 중화 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IFNγ 생산을 5 x 10-12 M 이하의 IC50로 억제한다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은
a) 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9M 이하의 IC50로 억제하고;
b) 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3을 가지고;
c) 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3을 가진다. 하나의 양태에서, 항체는 또한 서열 번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2; 및 서열 번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2를 갖는다. 여전히 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 또한 서열 번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1; 및 서열 번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1을 갖는다. 여전히 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 또한 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-10 M 이하의 IC50로 억제한다. 여전히 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-11 M 이하의 IC50로 억제한다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 32의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 갖는다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA 및 IgE 불변 영역으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 중쇄 불변 영역을 포함한다. 하나의 양태에서, 항체 중쇄 불변 영역은 IgG1이다. 다른 양태에서, 항체는 Fab 단편, F(ab')2 단편, 또는 단일쇄 Fv 단편이다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 1 x 10-10 M 이하의 Kd로 해리되고 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23의 p40 소단위 상의 에피토프에 결합한다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은
a) 표면 플라스몬 공명에 의해 측정된 것으로서 사람 IL-12로부터 1 x 10-3 s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리되고;
b) 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3를 가지며;
c) 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3를 갖는, 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이다.
다른 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12로부터 1 x 10-4 s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리된다. 추가의 양태에서, 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12로부터 1 x 10-5 s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리된다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12에 결합하고,
서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3 도메인; 및
서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3 도메인을 포함하는, 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이다.
하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 갖는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 가지고, 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 갖는 중쇄 가변 영역(HCVR)을 갖는다. 다른 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인을 추가로 갖는 LCVR 및 서열 번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인을 추가로 포함하는 HCVR을 포함한다. 여전히 다른 양태에서, LCVR은 또한 서열 번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인을 갖고 HCVR은 서열 번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인을 갖는다.
하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23에 결합하고 항체 J695(또한 ABT-874로서 언급됨), 또는 이의 항원 결합 부분이다.
하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23에 결합하여 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 1.34 x 10-10M 이하의 Kd로 해리되고 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23을 중화시킨다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12 및/또는 사람 IL-23으로부터 9.74 x 10-11 M 이하의 Kd로 해리된다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-7M 이하의 IC50로 억제한다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-8 M 이하의 IC50로 억제한다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50로 억제한다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-10 M 이하의 IC50로 억제한다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-11 M 이하의 IC50로 억제한다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IFNγ 생산을 1 x 10-10 M 이하의 IC50로 억제한다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IFNγ 생산을 1 x 10-11 M 이하의 IC50로 억제한다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IFNγ 생산을 5 x 10-12 M 이하의 IC50으로 억제한다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법에서 사용된, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 IL-12 또는 IL-23 수용체 결합 검정(RBA)에서 이의 수용체에 대한 IL-12 및/또는 IL-23 결합을, 각각 1 x 10-9 M 이하의 IC50으로 억제한다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 IL-12 또는 IL-23 수용체 결합 검정(RBA)에서 이의 수용체에 대한 IL-12 및/또는 IL-23 결합을, 각각 1 x 10-10 M 이하의 IC50으로 억제한다. 하나의 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 IL-12 또는 IL-23 수용체 결합 검정(RBA)에서 이의 수용체에 대한 IL-12 및/또는 IL-23 결합을, 각각 1 x 10-11 M 이하의 IC50로 억제한다.
도 1은 시도(trial) 중 환자의 기질(disposition)을 나타낸다. (용어 "eow"는 매 격주 투약을 말한다.)
도 2는 시도의 12-주 기간 동안 건선 면적 및 중증도 지수(PASI 75)에 있어서 적어도 75% 개선된 환자의 퍼센트를 나타낸다. 8주까지, 200 mg x 1개 그룹을 제외하고, PASI 75 반응을 가진 환자의 퍼센트는 치료-의사(intention-to-treat) 집단에서 관측된 데이터의 변화량의 분석을 기초로 하여 위약과의 각각의 비교에 대한 각각의 ABT-874 치료 그룹에서 통계적으로 유의적으로 더 컸다(p<0.001). (용어 "eow"는 매 격주 투약을 말한다.)
도 3은 기준치로부터 건선 면적 및 중증도 지수(PASI) 점수에서의 평균 개선 퍼센트를 나타낸다. 데이터는 각각의 ABT-874 치료 그룹에 대한 *p<0.001을 치료-의사 집단으로 관측된 데이터의 변화량의 분석을 기초로 하여, 모든 시점(1주에서 100mg eow 제외, p = 0.023)에서 위약과 비교하였음을 나타낸다. (용어 "eow"는 매 격주 투약을 말한다.)
도 4a 내지 도 4c는 시도 24주째에, 즉, 항체의 불연속 투여 후 12주째에 각각 PASI 50, PASI 75 및 PASI 90 반응을 유지한 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 4d는 시도의 24주 기간 동안 시간에 걸쳐 PASI 75 반응을 유지하는 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 5a는 4주 내지 12주째에 PASI 점수에서 기준치로부터 평균 개선 퍼센트를 나타낸다.
도 5b는 재치료 후 4주 내지 12주째에 PASI 점수에서 기준치로부터 평균 개선 퍼센트를 나타낸다.
도 6a는 ABT-874의 IV 투약을 위한 혈청 농도-시간 곡선을 나타낸다.
도 6b는 ABT-874의 SC 투약을 위한 혈청 농도-시간 곡선을 나타낸다.
도 7a는 재치료 후 PASI 75 반응을 재-달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 7b는 재치료 동안 모든 ABT-874 용량 그룹에 걸쳐 PASI 75 반응을 달성하기 위한 중앙 시간을 나타낸다.
도 7c는 초기 12주 치료 후 PASI 75 반응을 상실하는 중앙 시간을 나타낸다.
도 7d는 재치료 후 0 또는 1의 PGA 점수를 달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 8a 및 도 8b는 생식선 서열 Cos-3/JH3 및 Dpl18 Lv1042와 비교하여 사람 IL-12에 결합하는 일련의 사람 항체의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열 정렬을 나타낸다. 카바트 번호매김(Kabat numbering)을 사용하여 아미노산 위치를 확인한다. Joe 9 야생형의 경우, 완전한 서열이 나타나 있다. 다른 항체의 경우, Joe 9 야생형과는 상이한 이들 아미노산 위치들만이 나타나 있다.
도 8c 및 도 8d는 사람 IL-12에 결합하는 일련의 사람 항체의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열 정렬을 나타낸다. 카바트 번호매김을 사용하여 아미노산 위치를 확인한다. Joe 9 야생형의 경우, 완전한 서열이 나타나 있다. 다른 항체의 경우, Joe 9 야생형과는 상이한 이들 아미노산 위치들만이 나타나 있다.
도 9a 내지 도 9e는 부위-지시된 돌연변이유발 및 각각의 위치에서의 각각의 아미노산 치환에 의해 돌연변이된 Y61 항체의 중쇄내 CDR 위치를 나타낸다. 도면들의 우측의 그래프는 돌연변이되지 않은 Y61(개방 바아)과 비교하여 치환된 항체(검은색 바아)에 대한 오프-율(off-rate)을 나타낸다.
도 9f 내지 도 9h는 부위-지시된 돌연변이유발 및 각각의 위치에서의 각각의 아미노산 치환에 의해 돌연변이된 Y61 항체의 경쇄내 CDR 위치를 나타낸다. 도면들의 우측의 그래프는 돌연변이되지 않은 Y61(개방 바아)과 비교하여 치환된 항체(검은색 바아)에 대한 오프-율을 나타낸다.
도 10은 치료시에 평균 PASI 점수를 나타낸다. 재치료를 받은 58명의 환자 모두에 대한 재치료시 평균 (SD) PASI 점수는 관측/재치료 단계 동안 PASI 50 반응의 상실을 수반한다. N 값은 재치료받은 환자의 수를 나타낸다. EOW = 매 격주; PASI = 건선 면적 및 중증도 지수.
도 11은 관측/재치료 단계 동안 PASI 75의 상실 시간을 나타낸다. 관측/재치료 단계 동안 반응의 상실 시간이 묘사되어 있으며; 당해 상실은 초기 12-주 종말점에서 PASI 75 반응의 주요한 달성을 수반한다. 반응의 상실은 연구의 처음 12주 동안 받은 최종 용량의 시점으로부터 계산하였다. N 값은 반응을 상실한 환자의 수를 나타낸다. EOW = 매 격주; PASI = 건선 면적 및 중증도 지수.
도 12는 관측/재치료 단계 동안 PASI 75를 달성하기 위한 시간을 나타낸다. 관측/재치료 단계 동안 ABT-874 재치료 후 PASI 75 반응을 달성한 환자 중에서, 반응을 달성하기 위한 시간을 각각의 ABT-874 치료 그룹에 대해 묘사한다. N 값은 반응을 달성하는 환자의 수를 나타낸다. EOW = 매 격주; PASI = 건선 면적 및 중증도 지수.
도 13은 12주째에 PASI 75 및 PASI 90을 달성한 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 14a 내지 도 14d는 4개의 특정 신체 부위: (A) 두부 및 경부; (B) 상지; (C) 몸통; 및 (D) 하지에서 12주째에 PASI 75 및 PASI 90을 달성한 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 15는 12주째에 PASI 75 및 PASI 90를 달성한 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 16은 기준치 체중에 의해 12주째에 PASI 75를 달성한 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 17은 건선 관절염의 병력이 있는 환자 및 없는 환자에서 12주째에 PASI 75를 달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 18은 중증 또는 매우 중증 기준치 의사의 전반적 평가를 갖는 환자에서 12주째에 PASI 75 반응을 달성한 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 19는 기준치 PASI에 의해 12주째에 PASI 75 반응을 달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 20은 실시예 12의 VERO 연구 설계를 나타낸다.
도 21은 실시예 12의 VERO 연구 전체에서 피험자의 기질을 나타낸다.
도 22는 VERO 연구에서 12주째에 "완치(clear)" 또는 "최소(minimal)"인 PGA 반응을 나타낸다.
도 23은 VERO 연구의 12주째의 PASI 반응률을 나타낸다.
도 24는 VERO 연구의 비반응자 산입(imputation)을 사용하여 분석한, 12주 내지 52주째의 PGA 0/1 반응률의 유지를 나타낸다.
도 25는 VERO 연구의 비반응자 산입을 사용하여 분석한, 52주째에 PASI 75 및 90 반응을 유지하는 환자의 퍼센트를 나타낸다.
도 26은 VERO 연구의 약물 투약 연구와 관련하여 주요 부작용 심장 사고의 시기를 나타낸다.
도 27은 실시예 13의 연구 설계를 나타낸다.
도 28은 12주* 째에 PGA 0/1("완치" 또는 "최소")을 달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다. PGA = 의사의 전반적 평가; 비-반응자 산입; P < 0.001, ABT-874 대 위약 및 ABT-874 대 에타네르셉트(etanercept).
도 29는 12주* 째에 PASI 75 반응을 달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다. PASI = 건선 면적 및 중증도 지수; *비-반응자 산입; P < 0.001, ABT-874 대 위약 및 ABT-874 대 에타네르셉트.
도 30은 12주* 째에 PASI 90 반응을 달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다. PASI = 건선 면적 및 중증도 지수; *비-반응자 산입; P < 0.001, ABT-874 대 위약 및 ABT-874 대 에타네르셉트.
도 31은 12주* 째에 PASI 100 반응을 달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다. PASI = 건선 면적 및 중증도 지수; *비-반응자 산입; P < 0.001, ABT-874 대 위약 및 ABT-874 대 에타네르셉트.
도 32는 실시예 14에서의 연구 설계를 나타낸다.
도 33은 12주째에 PGA 0/1("완치" 또는 "최소")을 달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다. * P < 0.001, ABT-874 대 위약, † P< 0.001, ABT-874 대 ETN, NRI.
도 34는 12주째에 PASI 75 반응을 달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다. * P < 0.001, ABT-874 대 위약, † P< 0.001, ABT-874 대 ETN, NRI.
도 35는 12주째에 PASI 90 반응률을 나타낸다. * P < 0.001, ABT-874 대 위약, † P< 0.001, ABT-874 대 ETN, NRI.
도 36은 12주째에 PASI 100 반응률을 나타낸다. * P < 0.001, ABT-874 대 위약, † P< 0.001, ABT-874 대 ETN, NRI.
도 37은 실시예 23에 기술된 것으로서, 중등도 내지 중증 건선에 있어서의 ABT-874의 효능을 입증하는 특정의 III 상 임상 연구의 결과를 나타낸다.
도 38은 실시예 23에 기술된 것으로서, ABT-874를 사용한 치료시 시간에 걸친 잠정적인 효능 결과 및 구체적으로 PASI 75를 나타낸다.
도 39는 실시예 23에 기술된 것으로서, ABT-874를 사용한 치료시 시간에 걸친 잠정적인 효능 결과 및 구체적으로 PASI 100을 나타낸다.
도 40은 실시예 23에 기술된 것으로서, ABT-874를 사용한 투여시 MACE의 빈도를 나타낸다.
도 41은 실시예 24에서 기술된 연구 설계를 나타낸다. A = 2:1 무작위 배치; B* = 12주째에 "완치된" 또는 "최소의"의 의사의 전반적 평가 점수를 받은 모든 환자를 유도 단계 동안 받은 치료에 의해 계층화(stratifying)하고 2:2:1로 재-무작위 배치(re-randomizing)하였다.
도 42는 실시예 24에 기술된 것으로서 연구 흐름 및 환자 기질을 나타낸다. †효능의 부족은 "중간" 또는 그 이상의 PGA 점수로서 정의하였다.
도 43은 실시예 24에 기술된 것으로서 유도 단계 동안 치료 그룹에 의한 "완치" 또는 "최소"인 의사의 전반적 평가 점수를 나타낸다. 분석을 처리하기 위한 목적: 의사의 전반적 평가 점수에 미치지 못한 환자들을 비반응자로 고려하였다. 센터에 의해 조정된 코크란-만텔-핸스첼 시험(Cochran-Mantel-Haenszel test)을 기준으로 하여, 12주째에 p<0.001; 1주 동안 p = 0.186, 및 카이-자승 검증(Chi Square test)을 기준으로 하여 4주 내지 12주 동안 p<0.001.
도 44는 실시예 24에 기술된 것으로서 유도 단계 동안 치료 그룹에 의한 건선 면적 및 중증도 지수 점수에서의 평균 개선을 나타낸다. 분석을 처리하기 위한 목적: 건선 면적 및 중증도 점수의 상실은 먼저 수반된, 기준치를 제외한, 최종 관찰에 산입시켰다. 인자로서의 치료 및 공변량(covariate)으로서의 기준치 값을 사용한 ANCOVA를 기초로 모든 시점에 대한 p<0.001.
도 45는 실시예 24에 기술된 것으로서, 52주에 걸쳐 "완치" 또는 "최소"인 의사의 전반적 평가 점수(A), 및 PASI 75 반응을 달성하는 비율(B), 및 52주에 걸쳐 PASI 100 반응(C)의 유지를 나타낸다. *ABT-874 매 4주 그룹에서 1명의 환자를 재-무작위 배치하였으나 유지 단계에서 어떠한 연구 약물도 제공하지 않았다. †는 유도 단계에서 ABT-874를 받은 모든 환자가 12주째에 "완치" 또는 "최소"인 의사의 전반적 평가 점수를 가졌으며 유지 단계에서 재-무작위 배치되었음을 나타낸다. 분석을 처리하기 위한 목적: 의사의 전반적 평가 점수에 미치지 못한 환자를 비-반응자에 포함시켰다(A). 분석을 처리하기 위한 목적: PASI 점수에 미치지 못한 환자를 비-반응자에 포함시켰다(B 및 C). p 값은 카이-자승 검증을 기초로 하였다.
도 46은 실시예 25에 기술된 바와 같은 연구 설계 및 투약 요법(regimen)을 나타낸다. a24주째에, PASI ≥ 75 및 0 또는 1의 PGA를 달성한 환자를 51주에 걸쳐 이들의 현재의 주당 MTX 용량을 유지하였다. 용량은 실험실적 비정상의 경우에만 조절하였다. 24주 후에 PASI ≥75 또는 0 또는 1의 PGA를 달성하지 않았거나 반응을 상실한(PASI <50 및 PGA ≥ 3로 정의됨) 치료 그룹의 환자들은 시도를 중단하였으며 briakinumabTM의 개방-표지 연장 연구(open-label extension study)에 등록할 수 있었다. MTX, 메토트렉세이트; PASI, 건선 활성 및 중증도 지수; PGA, 의사의 전반적 평가.
도 47은 실시예 25에 기술된 환자 기질을 나타낸다. MTX, 메토트렉세이트.
도 48은 실시예 25에 기술된 바와 같이 52주에 걸쳐 건선 활성 및 중증도 지수 (PASI) 반응을 나타낸다. PASI 75(A), PASI 50(B), PASI 90(C), 및 PASI 100(D)를 달성하는 환자의 퍼센트는 8주까지(또는 보다 조기에) 및 52주에 걸쳐 모든 시점에서 메토트렉세이트(MTX) 그룹보다 briakinumabTM 그룹에서 유의적으로 더 컸다. *p<0.001 대 MTX.
비반응자 산입은 상실된 데이터를 취급하기 위해 사용하였다.
도 49는 실시예 25에 기술된 바와 같은 기준치로부터 건선 활성 및 중증도 지수(PASI) 점수에서 평균 개선 퍼센트를 나타낸다. 각각의 방문시, 기준치로부터의 평균 개선 퍼센트는 메토트렉세이트(MTX) 그룹보다 briakinumabTM 그룹에서 유의적으로 더 컸다(모든 시점에서 p<0.001). 차기이월 최종 관측(last observation carried forward)을 사용하여 상실된 데이터를 취급하였다.
도 50은 실시예 25에 기술된 것으로서 52주에 걸쳐 0 또는 1("완치" 또는 "최소")의 의사의 전반적 평가(PGA)를 달성하는 환자의 퍼센트를 나타낸다. *p<0.001 대 메토트렉세이트 (MTX).
도 51은 실시예 25에서 기술된 바와 같은 방문에 의한 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수에서 기준치로부터의 변화를 나타낸다. briakinumabTM 그룹에서 환자는 평가된 모든 시점에서 MTX 그룹과 비교하여 DLQI 점수에서 기준치로부터 통계학적으로 유의적으로 보다 크게 감소하였다. *p<0.001 대 메토트렉세이트 (MTX).
본 발명을 보다 용이하게 이해할 수 있도록 하기 위해, 특정 용어들을 우선 정의한다.
용어 "활성을 향상시키는 아미노산 잔기"는 항체의 활성을 개선시키는 아미노산 잔기를 포함한다. 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 접촉된, 고 돌연변이 또는 바람직한 선택적 돌연변이유발 위치에서 아미노산 잔기를 치환시킬 수 있으며, 또한 하나 이상의 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 하나 이상의 CDR에 존재할 수 있다. 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 항체의 결합 특이성/친화성, 예를 들면, 사람 IL-12에 대한 항-사람 IL-12 항체 결합을 개선시키는 아미노산 잔기를 포함한다. 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 또한 항체, 예를 들면, 사람 IL-12를 억제하는 사람 IL-12 항체의 중화 효능을 개선시키는 아미노산 잔기를 포함하는 것으로 의도된다.
용어 "항체"는 4개의 폴리펩타이드 쇄, 이황화물 결합에 의해 내부-연결된, 2개의 중(H)쇄 및 2개의 경(L)쇄로 구성된 면역글로불린 분자를 포함한다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역(본원에서 HCVR 또는 VH로 약술) 및 중쇄 불변 영역으로 구성된다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인, CH1, CH2 및 CH3으로 구성된다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역(본원에서 LCVR 또는 VL로 약술) 및 경쇄 불변 영역으로 구성된다. 경쇄 불변 영역은 1개의 도메인, CL로 구성된다. VH 및 VL 영역은 또한 골격 영역(FR)으로 명명된, 보다 보존된 영역으로 배치된, 상보성 결정 영역(CDR)으로 명명된 초가변성 영역으로 추가로 세분될 수 있다. 각각의 VH 및 VL은 아미노-말단으로부터 카복시-말단까지 하기 순서로 배열된, 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 하나의 양태에서, 본 발명의 조성물 및 방법에서 사용된 항체는 본원에서 참조로 혼입된 미국 특허 제6,914,128호에 기술된 항체이다. 다른 양태에서, 본 발명의 조성물 및 방법에 사용된 항체는 항체 ABT-874(또한 J695로서도 언급됨; 제조원: Abbott Laboratories)이다.
용어 항체의 "항원-결합 부분"(또는 "항체 부분")은 항원(예를 들면, hIL-12)에 특이적으로 결합하는 능력을 보유한 항체의 단편을 포함한다. 항체의 항원-결합 기능은 전장 항체의 단편에 의해 수행될 수 있다. 용어 항체의 "항원-결합 부분"은 (i) Fab 단편, VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 이루어진 1가 단편; (ii) F(ab')2 단편, 힌지 영역(hinge region)에서 이황화물 브릿지에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편; (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 아암(arm)의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편; (v) VH 도메인으로 이루어진, dAb 단편[참조: Ward et al ., (1989) Nature 341:544-546]; 및 (vi) 분리된 상보성 결정 인자(CDR)를 포함한다. 또한, 비록 Fv 단편의 2개의 도메인, VL 및 VH가 별개의 유전자에 의해 암호화되어 있다고 해도, 이들은 재조합체 방법을 사용하여, 이들을 VL 및 VH 영역이 쌍을 이루어 1가 분자[단일쇄 Fv (scFv)로 공지됨; 참조: 예를 들면, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; 및 Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883]를 형성하는 단일 단백질 쇄로 제조되도록 할 수 있는 합성 링커에 의해 결합될 수 있다. 이러한 단일쇄 항체는 또한 용어 항체의 "항원-결합 부분"내에 포함되는 것으로 의도된다. 디아바디와 같은 단일쇄 항체의 다른 형태도 또한 포함된다. 디아바디는, VH 및 VL 도메인이 단일의 폴리펩타이드 쇄에서 발현되지만 동일한 쇄에서 2개의 도메인 사이에 쌍을 이루도록 하기에는 너무나 짧은 링커를 사용함으로써 도메인이 다른 쇄의 상보성 도메인과 쌍을 이루어 2개의 항원 결합 부분을 생성하는 2가의, 이특이적인 항체이다[참조: 예를 들면, Holliger, P., et al . (1993) Proc . Natl . Acad . Sci . USA 90:6444-6448; Poljak, R.J., et al . (1994) Structure 2:1121-1123]. 또한, 항체 또는 이의 항원-결합 부분은 항체 또는 항체 부분과 하나 이상의 다른 단백질 또는 펩타이드의 공유결합 또는 비-공유결합성 연합에 의해 형성된 보다 큰 면역부착 분자의 일부일 수 있다. 이러한 면역부착 분자의 예는 4합체성 scFv 분자를 제조하기 위한 스트렙트아비딘 코어 영역의 사용[참조: Kipriyanov, S.M., et al . (1995) Human Antibodies and Hybridomas 6:93-101] 및 2가 및 비오티닐화된 scFv 분자를 제조하기 위한 시스테인 잔기, 마커 펩타이드 및 C-말단 폴리히스티딘 태그의 사용[참조: Kipriyanov, S.M., et al. (1994) Mol. Immunol. 31:1047-1058]를 포함한다. Fab 및 F(ab')2 단편과 같은 항체 부분은 전체 항체의 파파인 또는 펩신 분해 각각과 같은 통상의 기술을 사용하여 전체 항체로부터 제조할 수 있다. 또한, 항체, 항체 부분 및 면역부착 분자는 본원에 기술된 바와 같이 표준 재조합체 DNA 기술을 사용하여 수득될 수 있다. 바람직한 항원 결합 부분은 완전한 도메인 또는 완전한 도메인의 쌍이다.
용어 "역돌연변이(backmutaion)"는, 사람 항체의 체세포적으로 돌연변이된 아미노산 중 일부 또는 전부가 동종 생식선 항체 서열로부터의 상응하는 생식선 잔기로 치환되는 공정을 나타낸다. 본 발명의 사람 항체의 중쇄 및 경쇄 서열은 VBASE 데이터베이스내 생식선 서열을 사용하여 별도로 정렬함으로써 최대 상동성을 가진 서열을 확인한다. 본 발명의 사람 항체에 있어서의 차이는 이러한 상이한 아미노산을 암호화하는 정의된 뉴클레오타이드 위치를 돌연변이시킴에 의해 생식선 서열로 돌아온다. 따라서, 역돌연변이용 후보물로서 확인된 각각의 아미노산의 역할은 항체 결합에 있어서 직접적이거나 간접적인 역할에 대해 시험되어야 하고 사람 항체의 어떠한 바람직한 특성에 영향을 미치는 돌연변이 후 발견된 어떠한 아미노산도 최종적인 사람 항체에 포함되지 않아야 하는데; 예로서, 선택적인 돌연변이유발 접근방법에 의해 확인된 활성을 향상시키는 아미노산은 역돌연변이에 적용되지 않을 것이다. 역돌연변이에 적용된 아미노산의 수를 최소화하기 위하여, 가장 근접한 생식선 서열과는 상이하지만 제2 생식선 서열내 상응하는 아미노산과는 동일한 것으로 밝혀진 아미노산 위치를 유지할 수 있으며, 단, 제2 생식선 서열은 본 발명의 사람 항체의 서열과는 문제의 아미노산의 양쪽 측면에서 적어도 10개, 바람직하게는 12개 아미노산에 대해 동일하고 공직선성(colinear)이다. 역돌연변이는 항체 최적화의 어떠한 단계에서도 발생할 수 있으며; 바람직하게는, 역돌연변이는 선택적인 돌연변이유발 시도 전 또는 후에 직접 발생한다. 보다 바람직하게는, 역돌연변이는 선택적인 돌연변이유발 시도 전에 직접 발생한다.
본원에 사용된 것으로서, 어구 "사람 인터류킨 12"(본원에서 hIL-12, 또는 IL-12로 약술)은 대식 세포 및 수지상 세포에 의해 주로 분비되는 사람 사이토킨을 포함한다. 당해 용어는 둘다 이황화물 브릿지와 함께 결합된 35 kD 소단위 (p35) 및 40 kD 소단위 (p40)를 포함하는 이종이합체성 단백질을 포함한다. 이종이합체성 단백질은 "p70 소단위"로서 언급된다. 사람 IL-12의 구조는 예를 들면, 문헌[참조: Kobayashi, et al. (1989) J. Exp Med. 170:827-845; Seder, et al. (1993) Proc. Natl . Acad . Sci . 90:10188-10192; Ling, et al . (1995) J. Exp Med . 154:116-127; Podlaski, et al . (1992) Arch . Biochem . Biophys . 294:230-237]에 추가로 기술되어 있다. 용어 사람 IL-12는 재조합체 사람 IL-12 (rh IL-12)를 포함하는 것으로 의도되며, 이는 표준 재조합체 발현 방법에 의해 제조할 수 있다.
용어 "카바트 번호매김(Kabat numbering)", "카바트 정의(Kabat definition)" 및 "카바트 표지화(Kabat labeling)"는 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 당해 분야에서 인식되는 이들 용어는 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 중쇄 및 경쇄 가변 영역내 다른 아미노산 잔기 이외의 보다 가변적인(즉, 초가변성) 아미노산 잔기의 번호매김 시스템을 말한다[참조: Kabat et al. (1971) Ann. NY Acad , Sci . 190:382-391 및 Kabat, E.A., et al . (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest , Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]. 중쇄 가변 영역의 경우, 초가변 영역은 CDR1에 대한 31번 내지 35번 아미노산 위치에 이르며, CDR2의 경우 50번 내지 65번 아미노산 위치, 및 CDR3의 경우 95번 내지 102번 아미노산 위치에 이른다. 경쇄 가변 영역의 경우, 초가변 영역은 CDR1의 경우 24번 내지 34번 아미노산 위치, CDR2의 경우 50번 내지 56번 아미노산 위치, 및 CDR3의 경우 89번 내지 97번 아미노산 위치에 이른다.
카바트 번호매김은 본원에서 본 발명의 항체내에서 이루어진 아미노산 변형의 위치를 나타낸다. 예를 들면, Y61 항-IL-12 항체는 중쇄 CDR1의 31번 위치에서 세린(S)에서 글루탐산(E)으로 돌연변이될 수 있거나(H31S → E), 글리신(G)은 경쇄 CDR3의 94번 위치에서 타이로신(Y)로 돌연변이될 수 있다(L94G → Y).
용어 "사람 항체"는 카바트(Kabat) 등의 문헌[참조: Kabat, et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]에 기술된 바와 같은 사람 생식선 면역글로불린 서열에 상응하는 가변 및 불변 영역을 가진 항체를 포함한다. 본 발명의 사람 항체는 예를 들면, CDR내에서 및 특히 CDR3에서 사람 생식선 면역글로불린 서열에 의해 암호화되지 않은 아미노산 잔기(예를 들면, 시험관내에서 무작위적인 또는 부위-특이적인 돌연변이유발에 의해 또는 생체내에서 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다. 돌연변이는 바람직하게는 본원에 기술된 "선택적인 돌연변이유발 접근방법"을 사용하여 도입된다. 사람 항체는 아미노산 잔기, 예를 들면, 사람 생식선 면역글로불린 서열에 의해 암호화되지 않은 활성을 향상시키는 아미노산 잔기로 대체된 적어도 하나의 위치를 가질 수 있다. 사람 항체는 사람 생식선 면역글로불린 서열의 부분이 아닌 아미노산 잔기로 대체된 20개 이하의 위치를 가질 수 있다. 다른 양태에서, 10개 이하, 5개 이하, 3개 이하 또는 2개 이하의 위치가 대체된다. 바람직한 양태에서, 이들 대체는 하기 상세히 기술한 바와 같이 CDR 영역내에 있다. 그러나, 본원에 사용된 것으로서, 용어 "사람 항체"는, 마우스와 같은 다른 포유동물 종의 생식선으로부터 기원한 CDR 서열이 사람 골격 서열내로 이식된 항체를 포함하는 것으로 의도되지 않는다.
어구 "재조합체 사람 항체"는 재조합체 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나, 분리된 사람 항체, 예를 들면, 숙주 세포내로 형질감염된 재조합체 발현 벡터를 사용하여 발현된 항체(하기 II 단락에서 추가로 기술됨), 재조합체, 조합적 사람 항체 라이브러리로부터 분리된 항체(하기 III 단락에서 추가로 기술됨), 사람 면역글로불린 유전자에 대해 형질전환 동물(예를 들면, 마우스)로부터 분리된 항체[참조: 예를 들면, Taylor, L.D., et al . (1992) Nucl . Acids Res. 20:6287-6295) 또는 다른 DNA 서열로 사람 면역글로불린 유전자 서열의 스플라이싱을 포함하는 어떠한 다른 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나 분리된 항체를 포함한다. 이러한 재조합체 사람 항체는 사람 생식선 면역글로불린 서열로부터 기원한 가변 및 불변 영역을 갖는다[참조: Kabat, E.A., et al . (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest , Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]. 그러나, 특정 양태에서, 이러한 재조합체 사람 항체는 시험관내 돌연변이유발(또는, 사람 Ig 서열에 대해 형질전환 동물이 사용되는 경우, 생체내 체세포 돌연변이유발)에 적용되고, 따라서 재조합체 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열은, 사람 생식선 VH 및 VL 서열로부터 기원하며 이와 관련되지만, 생체내에서 사람 항체 생식선 레퍼토리(repertoire)내에 천연적으로 존재하지 않을 수 있는 서열이다. 그러나, 특정 양태에서, 이러한 재조합체 항체는 선택적인 돌연변이유발 접근방법 또는 역돌연변이, 또는 이들 둘다의 결과이다.
"분리된 항체"는 상이한 항원적 특이성을 갖는 다른 항체를 실질적으로 포함하지 않는 항체를 포함한다(예를 들면, hIL-12에 특이적으로 결합하는 분리된 항체는 hIL-12 이외의 항원에 특이적으로 결합하는 항체를 실질적으로 포함하지 않는다). hIL-12에 특이적으로 결합하는 분리된 항체는 다른 종으로부터 IL-12 분자에 결합할 수 있다(하기에 추가로 상세히 논의됨). 또한, 분리된 항체는 다른 세포 물질 및/또는 화학물질을 실질적으로 포함하지 않을 수 있다.
"중화 항체"(또는 "hIL-12 활성이 중화된 항체")는 hIL-12에 대한 이의 결합이 hIL-12의 생물학적 활성을 억제하는 항체를 포함한다. hIL-12의 생물학적 활성의 이러한 억제는 식물성 혈구 응집소 모세포 증식 검정(PHA)에서 사람 식물성 혈구 응집소 모세포 증식의 억제, 또는 사람 IL-12 수용체 결합 검정(참조: 실시예 3-미국 특허 제6,914,128호의 인터페론-감마 유도 검정)에서 수용체 결합의 억제와 같은 hIL-12 생물학적 활성의 하나 이상의 지표를 측정함으로써 평가할 수 있다. hIL-12 생물학적 활성의 이러한 지표는 당해 분야에 공지된(참조: 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 3) 몇몇의 표준 시험관내 또는 생체내 검정 중 하나 이상에 의해 평가될 수 있다.
용어 "활성"은 항원에 대한 항체, 예를 들면, IL-12 항원에 결합하는 항-hIL-12 항체의 결합 특이성/친화성 및/또는 항체, 예를 들면, hIL-12에 대한 이의 결합이 hIL-12의 생물학적 활성을 억제하는 항-hIL-12 항체의 중화 효능, 예를 들면, PHA 모세포 증식의 억제 또는 사람 IL-12 수용체 결합 검정(참조: 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 3)에서 수용체 결합의 억제과 같은 활성을 포함한다.
어구 "표면 플라스몬 공명"은 바이오센서 매트릭스내에서 예를 들면, BIAcore 시스템(제조원: Pharmacia Biosensor AB, 스웨덴 웁살라 및 뉴저지주 피츠카타웨이 소재)을 사용한 단백질 농도에 있어서의 변경의 검출에 의한 실시간 생특이적인 상호작용의 분석을 허용하는 광학 현상을 포함한다. 추가의 기술에 대해서는 문헌[참조: 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 5 및 Jonsson, U., et al. (1993) Ann. Biol. Clin. 51:19-26; Johnsson, U., et al. (1991) Biotechniques 11:620-627; Johnsson, B., et al. (1995) J. Mol. Recognit. 8:125-131; 및 Johnson, B., et al. (1991) Anal. Biochem. 198:268-277]을 참조한다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "Koff"는 항체/항원 복합체로부터 항체의 해리에 대한 오프 속도 상수를 말하는 것으로 의도된다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "Kd"는 특정한 항체-항원 상호작용의 해리 상수를 말하는 것으로 의도된다.
어구 "핵산 분자"는 DNA 분자 및 RNA 분자를 포함한다. 핵산 분자는 단일 가닥 또는 이중 가닥일 수 있으나, 바람직하게는 이중 가닥 DNA이다.
"분리된 항체"를 포함하는 hIL-12에 결합하는 항체 또는 항체 부분(예를 들면, VH, VL, CDR3)을 암호화하는 핵산을 참조하여 본원에 사용된 것으로서, 어구 "분리된 핵산 분자"는, 항체 또는 항체 부분을 암호화하는 뉴클레오타이드 서열이, 다른 서열이 사람 게놈 DNA내에서 핵산을 천연적으로 플랭킹(flanking)할 수 있는, hIL-12 이외의 항원에 결합하는 항체 또는 항체 부분을 암호화하는 다른 뉴클레오타이드 서열을 포함하지 않는 핵산 분자를 포함한다. 따라서, 예를 들면, 항-IL-12 항체의 VH 영역을 암호화하는 본 발명의 분리된 핵산은 IL-12 이외의 항원에 결합하는 다른 VH 영역을 암호화하는 다른 서열을 함유하지 않는다. 어구 "분리된 핵산 분자"는, VH 및 VL 영역이 디아바디의 서열 이외의 다른 서열을 함유하지 않는 디아바디(diabody)와 같은 2가의 이특이적 항체를 암호화하는 서열을 포함하는 것으로 의도된다.
용어 "벡터"는 결합된 다른 핵산을 수송할 수 있는 핵산 분자를 포함한다. 벡터의 하나의 유형은 "플라스미드"이며, 이는, 추가의 DNA 분절이 라이게이션될 수 있는 환형의 이중 가닥 DNA 루프를 말한다. 벡터의 다른 유형은 바이러스 벡터이며, 여기서, 추가의 DNA 분절은 바이러스 게놈에 라이게이션될 수 있다. 특정의 벡터는, 이들이 도입된 숙주 세포내에서 자가 복제할 수 있다(예를 들면, 세균 복제 기원을 갖는 세균 벡터 및 에피솜 포유동물 벡터). 다른 벡터(예를 들면, 비-에피솜 포유동물 벡터)는 숙주 세포내로 도입시 숙주 세포의 게놈내로 통합될 수 있어서, 숙주 게놈과 함께 복제된다. 또한, 특정 벡터는, 이들이 작동적으로 결합된 유전자의 발현을 지시할 수 있다. 이러한 벡터는 본원에서 "재조합체 발현 벡터"(또는 단순히, "발현 벡터")로 언급된다. 일반적으로, 재조합체 DNA 기술에서 사용하기 위한 발현 벡터는 흔히 플라스미드의 형태이다. 본 명세서에서, "플라스미드" 및 "벡터"는, 플라스미드가 가장 일반적으로 사용되는 벡터의 형태이므로 상호교환적으로 사용될 수 있다. 그러나, 본 발명은 동일한 기능을 제공하는 바이러스 벡터(예를 들면, 복제 결손 레트로바이러스, 아데노바이러스 및 아데노-관련 바이러스)와 같은 발현 벡터의 이러한 다른 형태를 포함하는 것으로 의도된다.
어구 "재조합체 숙주 세포"(또는 단순히 "숙주 세포")는, 재조합체 발현 벡터가 도입된 세포를 포함한다. 이러한 용어들은 특수한 피험자 세포 뿐 아니라 이러한 세포의 후대세포(progeny)를 나타내는 것으로 의도된다. 특정의 변형이 돌연변이 또는 환경적 영향으로 인해 다음 세대들에서 발생할 수 있으므로, 이러한 후대세포는 실제로 모 세포와 동일하지 않을 수 있을 뿐 아니라, 여전히 본원에 사용된 바와 같은 용어 "숙주 세포"의 영역내에 포함된다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "변형된(되는)"은 항체 또는 이의 항원-결합 부분내 하나 이상의 아미노산의 변화를 말하는 것으로 의도된다. 당해 변화는 하나 이상의 위치에서 아미노산의 첨가, 치환 또는 결실에 의해 생산될 수 있다. 변화는 PCR 돌연변이유발과 같은 공지된 기술을 사용하여 제조할 수 있다.
어구 "접촉 위치"는 26개의 공지된 항체-항원 구조물 중 하나에서 항원에 접촉하는 아미노산에 의해 점유된 항체의 경쇄 가변 영역 또는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2 또는 CDR3내의 아미노산 위치를 포함한다. 항체-항원 복합체의 26개의 공지의 해석된 구조 중 어느 것에서의 CDR 아미노산이 항원과 접촉하는 경우, 이러한 아미노산이 접촉 위치를 점유하는 것으로 고려될 수 있다. 접촉 위치는 비-접촉 위치 이외의 항원과 접촉한 아미노산에 의해 점유되는 보다 높은 가능성을 가진다. 바람직하게는 접촉 위치는 26개 구조물 중 3개 이상(>11.5%)으로 항원과 접촉하는 아미노산을 함유하는 CDR 위치이다. 가장 바람직하게는 접촉 위치는 25개 구조물 중 8개(>32%) 초과로 항원과 접촉하는 아미노산을 함유하는 CDR 위치이다.
용어 "초돌연변이 위치"는 항체의 생체내 친화성 성숙 동안 체세포 초돌연변이에 대한 높은 빈도 또는 가능성을 가진 것으로 고려되는 항체의 중쇄 가변 영역 또는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2 또는 CDR3 영역내 위치를 점유하는 아미노산 잔기를 포함한다. "체세포 초돌연변이에 대한 높은 빈도 또는 가능성"은, 잔기가 항체의 생체내 친화성 성숙 동안 체세포 초돌연변이를 겪을 약 5 내지 약 40% 변화의 빈도 또는 가능성을 포함한다. 당해 기술된 범위내의 모든 범위들, 예를 들면, 5 내지 약 30%, 예를 들면, 5 내지 약 15%, 예를 들면, 15 내지 약 30%는 본 발명의 일부인 것으로 고려된다
용어 "바람직한 선택적 돌연변이유발 위치"는 접촉 및 초돌연변이 위치 둘다인 것으로 고려될 수 있는 중쇄 가변 영역 또는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2 또는 CDR3 영역내 위치를 점유하는 아미노산 잔기를 포함한다.
어구 "선택적 돌연변이유발 접근방법"은 적어도 하나의 바람직한 선택적 돌연변이유발 위치, 초돌연변이 및/또는 접촉 위치에서 CDR 아미노산을 선택적으로 및 개별적으로 돌연변이시킴으로써 항체의 활성을 개선시키는 방법을 포함한다. "선택적으로 돌연변이된" 사람 항체는 선택적 돌연변이유발 시도를 사용하여 선택된 위치에서 돌연변이를 포함하는 항체이다. 다른 양태에서, 선택적 돌연변이유발 시도는 중쇄 가변 영역(이후, 각각 H1, H2, 및 H3)의 CDR1, CDR2 또는 CDR3내 선택된 개개의 아미노산 잔기, 또는 항체의 경쇄 가변 영역(이후, 각각 L1, L2, 및 L3로 언급)의 CDR1, CDR2 또는 CDR3내 선택된 개개 아미노산 잔기를 우선적으로 돌연변이시키는 방법을 제공하는 것으로 의도된다. 아미노산 잔기는 바람직한 선택적 돌연변이유발 위치, 접촉 위치 또는 초돌연변이 위치로부터 선택될 수 있다. 개별 아미노산은 경쇄 또는 중쇄 가변 영역내 이들의 위치를 기준으로 선택된다. 초돌연변이 위치는 또한 접촉 위치일 수 있음이 이해되어야 한다. 하나의 양태에서, 선택적 돌연변이유발 시도는 "표적화된 시도"이다. 언어 "표적화된 시도"는 표적화된 방식, 예를 들면, "그룹-방식 표적화된 시도(Group-wise targeted approach)" 또는 "CDR-방식 표적화된 시도"로 항체의 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2 또는 CDR3 또는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2 또는 CDR3내 선택된 개개 아미노산 잔기를 우선적으로 돌연변이시키는 방법을 포함하는 것으로 의도된다. "그룹-방식 표적화된 시도"에서, 특정 그룹내 개개 아미노산 잔기는 표적화에 대한 선호도 순서로 나열된 그룹인, 그룹 I(L3 및 H3 포함), II(H2 및 L1 포함) 및 III(L2 및 H1 포함)을 포함하는 선택적 돌연변이에 대해 표적화된다. "CDR-방식 표적화된 시도"에서, 특정한 CDR내 개개 아미노산 잔기는 다음과 같은 표적화에 대한 선호도 순서로 선택적인 돌연변이에 대해 표적화된다: H3, L3, H2, L1, H1 및 L2. 선택된 아미노산 잔기는 예를 들면, 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 돌연변이되어, 항체의 활성에 있어서 돌연변이의 효과가 측정된다. 활성은 항체의 결합 특이성/친화성에 있어서의 변화, 및/또는 항체의 중화 효능으로 측정된다. 선택적인 돌연변이유발 접근방법은 파지 디스플레이(phage display), 사람 IgG 생식선 유전자를 지닌 형질전환 동물, 사람 B-세포로부터 분리된 사람 항체를 포함하는 임의의 공급원으로부터 기원된 임의의 항체의 최적화에 사용될 수 있다. 바람직하게는, 선택적인 돌연변이유발 시도는 파지 디스플레이 기술을 사용하여 추가로 최적화될 수 없는 항체에서 사용된다. 파지 디스플레이, 사람 IgG 생식선 유전자를 지닌 형질전환 동물, 사람 B-세포로부터 분리된 사람 항체를 포함하는 임의의 공급원 유래의 항체도 선택적인 돌연변이유발 접근방법 전 또는 후에 역돌연변이에 적용될 수 있는 것으로 이해되어야 한다.
용어 "활성을 향상시키는 아미노산 잔기"는 항체의 활성을 개선시키는 아미노산 잔기를 포함한다. 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 바람직한 선택적 돌연변이유발 위치, 접촉 위치, 또는 초돌연변이 위치에서 아미노산 잔기를 대체할 수 있고, 또한 하나 이상의 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 하나 이상의 CDR내에 존재할 수 있음이 이해되어야 한다. 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 항체, 예를 들면, 사람 IL-12에 결합하는 항-사람 IL-12 항체의 결합 특이성/친화성을 개선시키는 아미노산 잔기를 포함한다. 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 또한 항체, 예를 들면, 사람 IL-12를 억제하는 사람 IL-12 항체의 중화 효능을 증진시키는 아미노산 잔기를 포함하는 것으로 의도된다.
용어 "Cmax"는 이의 투여 후 피험자에서 관측된 제제의 최대 또는 피크 혈청 또는 혈장 농도를 말한다.
용어 "Tmax"는, Cmax가 발생한 시간을 말한다.
용어 "생체 이용률" 또는 "F%"는 제공된 용량형의 투여 후 순환계에 흡수되어 도입된 용량의 분획 또는 퍼센트를 말한다. 제제의 용량은 임의의 경로를 통해서, 및 바람직하게는 정맥내 또는 피하 주사를 통해 투여될 수 있다.
어구 "제2 제제와 병용된 제1 제제"에서와 같은 용어 "병용"은 예를 들면, 동일한 약제학적으로 허용되는 담체속에 용해되거나 상호혼합될 수 있는 제1 제제와 제2 제제의 동시-투여, 또는 제1 제제의 투여 후 제2 제제의 투여, 또는 제2 제제의 투여 후 제1 제제의 투여를 포함한다. 따라서, 본 발명은 병용 치료학적 치료 및 병용 약제학적 조성물의 방법을 포함한다.
어구 "수반된 치료학적 치료"에서와 같은 용어 "수반된"은 제2 제제의 존재하에서 제제를 투여함을 포함한다. 수반된 치료학적 치료 방법은, 제1, 제2, 제 3 또는 추가의 제제를 동시-투여하는 방법을 포함한다. 수반된 치료학적 치료 방법은 또한, 제1 또는 추가의 제제를 제2 또는 추가의 제제의 존재하에 투여하는 방법을 포함하며, 여기서, 제2 또는 추가의 제제는 예를 들면, 먼저 투여할 수 있다. 수반된 치료학적 치료 방법은 상이한 실행자들에 의해 단계별로 수행될 수 있다. 예를 들면, 1명의 실행자가 피험자에게 제1 제제를 투여하고 제2 실행자가 피험자에게 제2 제제를 투여할 수 있으며, 투여 단계는, 제1 제제(및 추가의 제제)가 제2 제제(및 추가의 제제)의 존재하에 투여된 후인 이상, 동시에, 거의 동시에 또는 근접한 시간에 실행될 수 있다. 실행자 및 피험자는 동일한 실체(예를 들면, 사람)일 수 있다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "병용 치료요법"은 2개 이상의 치료 물질, 예를 들면, 항-IL-12, 항-IL-23 항체 및 다른 약물의 투여를 말한다. 다른 약물(들)은 항-IL-12, 항-IL-23 항체의 투여와 동시에, 상기 투여 전 또는 후에 투여할 수 있다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "투약"은 치료학적 목적(예를 들면, 건선의 치료)을 달성하기 위한 물질(예를 들면, 항-IL-12, 항-IL-23 항체)의 투여를 말한다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "용량"은 피험자에게 투여되는 물질의 양, 예를 들면, 밀리그램(mg)을 말한다. 하나의 양태에서, 용량은 고정된 용량이며, 예를 들면, 물질이 투여되는 피험자의 체중에 의존하지 않는다. 다른 양태에서, 용량은 고정된 용량이 아니며, 예를 들면, 물질이 투여되는 피험자의 체중에 의존한다. 본 발명의 방법에서 사용하기 위한 예시적인 용량, 예를 들어, 고정된 용량은 약 100 mg, 약 110 mg, 약 120 mg, 약 130 mg, 약 140 mg, 약 150 mg, 약 160 mg, 약 170 mg, 약 180 mg, 또는 약 190 mg, 약 200 mg, 약 210 mg, 약 220 mg, 약 230 mg, 약 240 mg, 약 250 mg, 약 260 mg, 약 270 mg, 약 280 mg, 약 290 mg, 또는 약 300 mg을 포함한다. 하나의 양태에서, 용량은 약 100 내지 약 300 mg이다. 여전히 다른 양태에서, 용량은 약 100 내지 약 200 mg이다. 중간 내지 상기-인용된 범위까지의 범위들이 본 발명에 의해 고려된다. 예를 들어, 상한 또는 하한과 같이 이들 값들 중 어느 하나를 갖는 범위들, 예를 들면, 약 110 mg 내지 약 170 mg, 약 150 mg 내지 약 220 mg 등이 본 발명의 일부인 것으로 의도된다.
본원에 사용된 것으로서, 이것이 물질(예를 들면, IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합하는 항체)의 투여와 관련된 경우 용어 "주기"는 피험자에게 물질을 투여하는 (정규의) 반복 주기를 말한다. 하나의 양태에서, 피험자에 대한 물질의 투여의 반복 주기는 치료학적 목적을 달성한다. 물질의 투여의 주기는 주당 약 1회, 격주당 약 1회, 매 3주당 약 1회, 매 4주당 약 1회, 매 5주당 약 1회, 매 6주당 약 1회, 매 7주당 약 1회, 매 8주당 약 1회, 매 9주당 약 1회, 매 10주당 약 1회, 매 11주당 약 1회, 매 12주당 약 1회, 매 13주당 약 1회, 매 14주당 약 1회, 매 15주당 약 1회, 매 16주당 약 1회, 매 17주당 약 1회, 매 18주당 약 1회, 매 19주당 약 1회, 매 20주당 약 1회, 매 21주당 약 1회, 매 22주당 약 1회, 매 23주당 약 1회, 매 24주당 약 1회, 매 5 내지 10일 당 약 1회, 매 10 내지 20일 당 약 1회, 매 10 내지 50일 당 약 1회, 매 10 내지 100일 당 약 1회, 매 10 내지 200일 당 약 1회, 매 25 내지 35일 당 약 1회, 매 20 내지 50일 당 약 1회, 매 20 내지 100일 당 약 1회, 매 20 내지 200일 당 약 1회, 매 30 내지 50일 당 약 1회, 매 30 내지 90일 당 약 1회, 매 30 내지 100일 당 약 1회, 매 30 내지 200일 당 약 1회, 매 50 내지 150일 당 약 1회, 매 50 내지 200일 당 약 1회, 매 60 내지 180일 당 약 1회, 또는 매 80 내지 100일 당 약 1회일 수 있다. 중간 내지 상기-언급된 횟수의 주기가 또한 본 발명에 의해 고려된다. 중간 내지 상기-언급한 범위의 범위들이 또한 본 발명에 의해 고려된다. 예를 들면, 상한 또는 하한으로서 이들 값들 중 어느 하나를 갖는 범위들, 예를 들면, 약 110일 내지 약 170일, 약 160일 내지 약 220일 등이 본 발명의 일부인 것으로 의도된다.
본원에 사용된 것으로서, 이것이 물질(예를 들면, IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합하는 항체)의 투여와 관련된 경우 "매 4주당 약 1회의 주기"는 물질을 피험자에게 매 4주당 약 1회의 주기, 매 28일에 약 1회, 또는 매달 약 1회 투여하는 (정규의) 반복 주기를 말한다. 하나의 양태에서, 물질을 피험자에게 투여하는 반복 주기는 치료학적 목적(예를 들면, 건선의 치료)을 단독으로 또는 물질 투여의 다른 반복 주기(예를 들면, 제1 주기인 경우, 이후 제2 및/또는 제 3 주기와 함께; 제2 주기인 경우, 이후 제1 및/또는 제 3 주기와 함께; 및 제 3 주기인 경우, 이후 제1 및 제2 주기와 함께)와 함께 달성하거나 유지한다. 바람직하게는, 물질은 매 22 내지 34일, 매 24 내지 32일, 심지어 보다 바람직하게는 매 26 내지 30일(예를 들면, 매 26, 27, 28, 29 또는 30일), 및 가장 바람직하게는 매 28일에 1회 투여된다.
본원에 사용된 것으로서, 어구 "매 12주에 약 1회의 주기"는 이것이 물질(예를 들면, IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합하는 항체)의 투여에 관한 경우, 물질을 피험자에게 매 12주당 약 1회, 매 84일당 약 1회, 또는 매 3개월당 약 1회 투여하는 (정규의) 반복 주기를 말한다. 하나의 양태에서, 물질을 피험자에게 투여하는 반복 주기는 치료학적 목적(예를 들면, 건선의 치료)을 단독으로, 또는 물질 투여의 다른 반복 주기(예를 들면, 제1 주기인 경우, 이후 제2 및/또는 제 3 주기와 함께; 제2 주기인 경우, 이후 제1 및/또는 제 3 주기와 함께; 및 제 3 주기인 경우, 이후 제1 및 제2 주기와 함께)와 함께 달성하거나 유지한다. 바람직하게는, 물질은 매 78 내지 90일, 매 80 내지 88일, 심지어 보다 바람직하게는 매 82 내지 86일(예를 들면, 매 82, 83, 84, 85 또는 86일), 및 가장 바람직하게는 매 84일에 1회 투여된다.
"주기의 지속 기간"은, 투여의 반복 주기가 발생하는 시간을 말한다.
예를 들어, 물질의 투여 주기의 지속 기간은 약 12주 일 수 있으며, 이 동안 투여 주기는 매주 약 1회이다. 예를 들어, 주기의 지속 기간이 약 6주일 수 있으며, 이 동안 투여 주기는 매 4주당 약 1회인데, 예를 들면, 물질은 0주 및 4주째에 투여된다.
주기의 지속 기간은 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 5주, 약 6주, 약 7주, 약 8주, 약 9주, 약 10주, 약 11주, 약 12주, 약 15주, 약 20주, 약 25주, 약 30주, 약 35주, 약 40주, 약 45주, 약 50주, 약 52주, 약 55주, 약 60주, 약 70주, 약 80주, 약 90주, 또는 약 100주, 또는 그 이상일 수 있다. 하나의 양태에서, 주기의 지속 기간은 치료학적 목적, 예를 들면, 치료, 치료의 유지 등을 달성하기 위해, 예를 들면, PASI 50, PASI 75, PASI 90, PASI 100 점수 또는 0 또는 1의 PGA 점수를 유지하기 위해 요구되거나 필요한 시간의 길이이다. 중간 내지 상기-언급한 시간의 주기의 지속 기간은 또한 본 발명에 의해 고려된다.
주기의 지속 기간은 약 4주, 약 8주, 약 12주, 약 16주, 약 20주, 약 24주, 약 28주, 약 32주, 약 36주, 약 40주, 약 44주, 약 48주, 약 52주, 또는 그 이상일 수 있다. 주기의 지속 기간은 적어도 약 4주, 적어도 약 8주, 적어도 약 12주, 적어도 약 16주, 적어도 약 20주, 적어도 약 24주, 적어도 약 28주, 적어도 약 32주, 적어도 약 36주, 적어도 약 40주, 적어도 약 44주, 적어도 약 48주, 또는 적어도 약 52주일 수 있다.
또한, 주기의 지속 기간은 적어도 약 1주, 적어도 약 2주, 적어도 약 3주, 적어도 약 4주, 적어도 약 5주, 적어도 약 6주, 적어도 약 7주, 적어도 약 8주, 적어도 약 9주, 적어도 약 10주, 적어도 약 11주, 적어도 약 12주, 적어도 약 15주, 적어도 약 20주, 적어도 약 25주, 적어도 약 30주, 적어도 약 35주, 적어도 약 40주, 적어도 약 45주, 적어도 약 50주, 적어도 약 55주, 적어도 약 60주, 적어도 약 70주, 적어도 약 80주, 적어도 약 90주, 또는 적어도 약 100주일 수 있다.
용어 "치료된", "치료하는" 또는 "치료"는 치료되는 상태, 장애 또는 질환과 관련되거나 이에 의해 유발된 적어도 하나의 증상의 소멸 또는 완화를 포함한다. 예를 들어, 치료는 장애의 하나 이상의 증상의 소멸 또는 장애의 완전한 근절일 수 있다. "치료" 또는 "치료하는"(예를 들면, 건선을 치료하는)은 치료 목적을 달성하거나 유지함을 의미한다. "치료" 또는 "치료하는"은 치료 전(예를 들면, 제1 주기에 따라 제1 용량의 투여 후 달성되거나; 제1 주기에 따른 제1 용량 및 제2 주기에 따른 제2 용량의 투여 후 달성되거나; 제1 주기에 따른 제1 용량 및 제2 주기에 따른 제1 또는 제2 용량, 및 제 3 주기에 따른 제1, 제2 또는 제 3 용량의 투여후 달성된 이전 반응)을 유지함을 의미할 수 있다. 건선"의 치료" 또는 "치료하는"은 치료 동안 또는 치료 후 기간(예를 들면, 적어도 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58 또는 60주 또는 그 이상 동안) 동안 0/1의 PGA 점수 또는 PASI 50, PASI 75, PASI 90, 또는 PASI 100 반응 점수를 달성하거나 유지함을 의미할 수 있다. 건선"의 치료" 또는 "치료하는"은 또한 건강-관련 삶의 질(HRQOL)의 결과를 달성하거나 유지함을 의미할 수 있다. HRQOL 결과는 피부과 삶의 질 지수(DLQI), Ps-관련 (VAS-Ps) 및 건선 관절염-관련 (VAS-PsA) 통증에 대한 가시적 유사 규모, 간이 36문항 건강조사 정신적 부분 일람서(MCS) 및 신체적 부분 일람서(PCS) 점수, 및 총 활동 장해(TAI) 점수를 포함한다. 건선 "의 치료" 또는 "치료하는"은 또한 본원에 제공된 HRQOL 결과들 중 어느 것에 대한 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID), 예를 들면, DLQI, VAS-Ps, VAS-PsA, MCS, PCS 및 TAI 중 어느 하나 또는 조합을 달성하거나 유지함을 의미할 수 있다. 건선 "의 치료" 또는 "치료하는"은 또한 본원에서 제공된 HRQOL 결과들 중 어느 것에 대한 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률, 예를 들면, DLQI, VAS-Ps, VAS-PsA, MCS, PCS 및 TAI 중 어느 하나 또는 조합을 달성하거나 유지함을 의미할 수 있다. 건선"의 치료" 또는 "치료하는"은 또한 본원에서 제공된 HRQOL 결과중 어느 것, 예를 들면, DLQI, VAS-Ps, VAS-PsA, MCS, PCS 및 TAI 중 어느 하나 또는 조합에 있어서의 임상적으로 의미있는 감소를 달성하거나 유지함을 의미할 수 있다. 건선"의 치료" 또는 "치료하는"은 또한 치료 동안 또는 치료 후 기간(예를 들면, 적어도 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58 또는 60주 또는 그 이상 동안) 동안 손발톱 건선 중증도 지수(NAPSI) 점수를 달성하거나 유지함을 의미할 수 있다. 건선"의 치료" 또는 "치료하는"은 또한 피험자 집단의 특정 퍼센트(예를 들면, 피험자들의 집단의 적어도 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, 또는 100%에 있어서)를 달성하거나 유지함을 의미할 수 있다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "키트"는 IL-12 관련 장애의 치료를 위한 본 발명의 항-IL-12, 항-IL-23 항체를 투여하는 것과 함께 성분들을 포함하는 포장된 제품을 말한다. 키트는 바람직하게는 키트의 성분들을 유지하는 박스 또는 용기를 포함한다. 박스 또는 용기는 표지 또는 식품 의약국 승인된 프로토콜이 부착되어 있다. 박스 또는 용기는 바람직하게는 플라스틱, 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 에틸렌, 또는 프로필렌 용기 내에 함유된 본 발명의 성분들을 유지한다. 용기는 마개가 있는 튜브 또는 병들일 수 있다. 키트는 또한 항-IL-12, 항-IL-23 항체를 투여하기 위한 지시사항을 포함할 수 있다.
본 발명의 각종 국면을 다음 소단락에서 보다 상세히 기술한다.
I. 사람 IL-12/사람 IL-23의 p40 소단위에 결합하는 사람 항체
본 발명은 건선을 치료하기 위해 사람 IL-12에 결합하는 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 사용하는 방법 및 조성물을 제공한다. 본 발명은 또한 IL-12 및 IL-23 둘다에 결합하는 항체를 사용하는 방법 및 조성물을 포함한다. 바람직하게는 본 발명에 사용된 사람 항체는 재조합체, 중화 사람 항-hIL-12/IL-23 항체이다.
하나의 양태에서, 본 발명에 사용된 항체는 항체 ABT-874(참조: 미국 특허 제6,914,128호)이다. ABT-874는 인터류킨 12(IL-12) 및 IL-23에 대한 완전한 사람 항체이다. 이는 건선(Ps)의 치료시 입증된 표적인 IL-12 및 IL-23 둘다에 대해 일반적인 p40 소단위에 대해 높은 친화성으로 결합한다.
사람 IL-12/IL-23의 p40 소단위에 결합하는 항체는 예를 들면, hIL-12를 지닌 하나 이상의 사람 VL 및 VH cDNA 라이브러리를 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 1에 기술된 파지 디스플레이 기술과 같이 스크리닝함으로써 선택할 수 있다. 사람 VL 및 VH cDNA 라이브러리의 스크리닝은 초기에 일련의 항-IL-12 항체를 확인하였으며, 이중 본원에서 "Joe9"(또는 "Joe 9 야생형")로 불리는 하나의 항체를 추가의 개발을 위해 선택하였다. Joe 9는 비교적 낮은 친화성 사람 IL-12 항체(예를 들면, 약 0.1초-1의 Koff)이지만, 여전히 hIL-12를 특이적으로 결합시키고 검출하는데 유용하다. Joe 9 항체의 친화성은 중쇄 및 경쇄 CDR의 돌연변이유발을 수행하고, "혼합되고 매치된" 및 추가로 돌연변이되어, hIL-12에 대해 친화성이 증가되고(참조: 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 1, 표 2(참조: 본원에 첨부된 부록 A의 표 2)) 및 미국 특허 제6,914,128호의 도 1a 내지 1d의 서열 정렬(참조: 본원의 도 8a 내지 8d)을 가진 다수의 추가의 항-hIL-12 항체를 생성함으로써 개선되었다.
이들 항체 중에서, 본원에서 Y61로 언급된 사람 항-hIL-12 항체는 결합 친화성에 있어서 유의적인 개선(예를 들면, 약 2 x 10-4 초-1의 Koff)을 입증하였다. Y61 항-hIL-12 항체는 중쇄 및 경쇄 CDR내에서 특이적인 아미노산 잔기를 개별적으로 돌연변이시킴으로써 추가의 친화성 성숙을 위해 선택하였다. Y61의 아미노산 잔기는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 및/또는 초돌연변이 위치를 점유하는 아미노산 잔기를 기준으로 부위-특이적인 돌연변이(선택적인 돌연변이유발 접근방법)를 위해 선택하였다. 중쇄 및 경쇄 CDR내 선택된 위치에서의 치환의 요약은 미국 특허 제6,914,128호의 도 2a 내지 2h(본원의 도 9a 내지 9h)에 나타나 있다. 본원에서 J695(또한 ABT-874로 언급됨(Abbott Laboratories))로 언급된 본 발명의 바람직한 재조합체 중화 항체는 Y61의 경쇄 CDR2의 50번 위치에서 Gly로부터 Tyr로의 치환, 및 Y61의 경쇄 CDR3의 94번 위치에서 Gly로부터 Tyr로의 치환을 생성하였다.
Joe9 야생형으로부터 J695로의 계통에서, 본 발명에 사용된 항-IL-12 항체의 패널의 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열 정렬은 미국 특허 제6,914,128호의 도 1a 내지 1d(본원에서 도 8a 내지 8d)에 나타나 있다. 이들 서열 정렬은 hIL-12에 결합하는 본 발명의 항체의 바람직한 중쇄 및 경쇄 가변 영역에 대한 컨센서스 서열, 및 Joe 9로부터 J695까지의 계통에서 CDR3, CDR2, 및 CDR1에 대한 컨센서스 서열의 확인을 허용하였다. 또한, 미국 특허 제6,914,128호의 도 2a 내지 2h(본원의 도 9a 내지 9h)에 요약된 Y61 돌연변이유발 분석은, Y61로부터의 변형을 지닌 서열을 포함하지만 우수한 hIL-12 결합 특징을 보유한 Y61로부터 J695까지의 계통에서 hIL-12에 결합하는 CDR3, CDR2, 및 CDR1에 대한 컨센서스 서열, 및 hIL-12에 결합하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역에 대한 컨센서스 서열의 확인을 허용하였다. 첨부된 서열 목록에서 서열 확인자에 의해 확인된 것으로서 본 발명의 바람직한 CDR, VH 및 VL 서열(컨센서스 서열 포함)은 하기 요약되어 있다.
Figure pat00001
Joe 9 야생형의 친화성 성숙으로부터 생산된 항체를 표면 플라스몬 공명 분석으로 기능적으로 특성화하여 Kd 및 Koff 속도를 측정하였다. 약 0.1 s-1 내지 약 1 x 10-5 s-1 범위의 Koff 속도 및 보다 바람직하게는 약 1 x 10-4 s-1 내지 1 x 10-5 s-1 이하의 Koff를 갖는 일련의 항체를 생산하였다. 항체는 또한 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 3에 기술된 바와 같이, 식물성 혈구 응집소 (PHA) 모세포 증식을 억제하는 이들의 능력에 대해 시험관내에서 특성화하였다. 약 1x10-6 M 내지 약 1x10-11 M, 보다 바람직하게는 약 1x10-10 M 내지 1x10-11 M 이하 범위의 IC50 값을 갖는 일련의 항체들을 생산하였다.
따라서, 하나의 국면에서, 본 발명은 사람 IL-12에 결합하고 표면 플라스몬 공명에 의해 측정한 것으로서 0.1 s-1 이하의 Koff 속도 상수로 사람 IL-12로부터 해리되거나, 시험관내 식물성 혈구 응집소 모세포 증식 검정(PHA 검정)에서 1 x 10-6 M 이하의 IC50으로 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 억제하는 분리된 사람 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 사용하는 방법 및 조성물을 제공한다. 바람직한 양태에서, 분리된 사람 IL-12 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12로부터 1 x 10-2 s-1 이하의 Koff 속도 상수로 해리되거나, 시험관내 PHA 검정에서 1 x 10-7 M 이하의 IC50으로 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 억제한다. 보다 바람직한 양태에서, 분리된 사람 IL-12 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12로부터 1 x 10-3 s-1 이하의 Koff 속도 상수로 해리되거나, 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-8 M 이하의 IC50으로 억제한다. 보다 바람직한 양태에서, 분리된 사람 IL-12 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12로부터 1 x 10-4 s-1 이하의 Koff 속도 상수로 해리되거나, 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50로 억제한다. 보다 바람직한 양태에서, 분리된 사람 IL-12 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12로부터 1 x 10-5 s-1 이하의 Koff 속도 상수로 해리되거나, 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-10 M 이하의 IC50로 억제한다. 심지어 보다 바람직한 양태에서, 분리된 사람 IL-12 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 IL-12로부터 1 x 10-5 s-1 이하의 Koff 속도 상수로 해리되거나, 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-11 M 이하의 IC50로 억제한다.
IL-12 항체의 해리 속도 상수 (Koff)는 표면 플라스몬 공명(참조: 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 5)에 의해 측정할 수 있다. 일반적으로, 표면 플라스몬 공명 분석은 리간드(바이오센서 매트릭스위에 고정된 재조합체 사람 IL-12) 및 분석물(용액중 항체) 사이의 실시간 결합 상호작용을 BIAcore 시스템(제조원: Pharmacia Biosensor, 뉴저지주 피츠카타웨이 소재)을 사용하는 표면 플라스몬 공명(SPR)에 의해 측정한다. 표면 플라스몬 분석은 또한 분석물(바이오센서 매트릭스 상의 항체)을 고정시키고 리간드(용액 중 재조합체 IL-12)를 제시함으로써 수행할 수 있다. IL-12 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 중화 활성은 몇가지 적합한 시험관내 검정 중 하나 이상을 사용하여 평가할 수 있다(참조: 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 3).
항체 중쇄 및 경쇄 CDR이 항원에 대한 항체의 결합 특이성/친화성에 있어 중요한 역할을 하는 것은 당해 분야에 잘 공지되어 있다. 따라서, 본 발명은 Joe9의 경쇄 및 중쇄 CDR을 갖는 사람 항체, 및 항체의 결합 특이성/친화성을 개선시키기 위해 변형된 CDR을 갖는 다른 항체를 포함한다. 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 1에 입증된 바와 같이, 경쇄 및 중쇄 CDR에 대한 일련의 변형은 사람 항-hIL-12 항체의 친화성 성숙을 생성한다. Joe 9 야생형으로부터, 사람 IL-12에 결합하는 J695까지 범위의 일련의 사람 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 아미노산 서열 정렬은 미국 특허 제6,914,128호의 도 1a 내지 1d(본원에서 도 8a 내지 8d)에 나타나 있다. 항체의 CDR에 대한 컨센서스 서열 모티프는 서열 정렬로부터 측정할 수 있다. 예를 들면, Joe 9로부터 J695까지의 계통의 VH CDR3에 대한 컨센서스 모티프는 서열 번호: 7에 나타낸 컨센서스 HCVR의 95번 내지 102번 위치로부터의 아미노산을 포함하는 아미노산 서열: (H/S)-G-S-(H/Y)-D-(N/T/Y) (서열 번호: 1)을 포함한다. VL CDR3에 대한 컨센서스 모티프는 서열 번호: 8에 나타낸 컨센서스 LCVR의 89번 내지 97번 위치로부터의 아미노산을 포함하는 아미노산 서열: Q-(S/T)-Y-(D/E)-(S/R/K)-(S/G/Y)-(L/F/T/S)-(R/S/T/W/H)-(G/P)-(S/T/A/L)-(R/S/M/T/L-V/I/T/M/L) (서열 번호: 2)을 포함한다.
따라서, 다른 국면에서, 본 발명은
a) 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-6 M 이하의 IC50으로 억제하고;
b) 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3을 가지며;
c) 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3을 가지는 특징을 갖는 분리된 사람 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 포함하는 방법 및 조성물을 제공한다.
바람직한 양태에서, 항체는 또한 아미노산 서열: F-I-R-Y-D-G-S-N-K-Y-Y-A-D-S-V-K-G (서열 번호: 3)(이는 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 컨센서스 HCVR의 50 내지 65번 위치로부터의 아미노산을 포함한다)을 포함하는 VH CDR2를 포함하고 아미노산 서열: (G/Y)-N-(D/S)-(Q/N)-R-P-S (서열 번호: 4)(이는 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 컨센서스 LCVR의 50 내지 56번 위치로부터의 아미노산을 포함한다)을 포함하는 VL CDR2을 추가로 포함한다.
다른 바람직한 양태에서, 항체는 또한 아미노산 서열: F-T-F-S-(S/E)-Y-G-M-H (서열 번호: 5)(이는 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 컨센서스 HCVR의 27 내지 35번 위치로부터의 아미노산을 포함한다)을 포함하는 VH CDR1을 포함하고 또한 아미노산 서열: (S/T)-G-(G/S)-(R/S)-S-N-I-(G/V)-(S/A)-(N/G/Y)-(T/D)-V-(K/H) (서열 번호: 6) (이는 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 컨센서스 LCVR의 24 내지 34번 위치로부터의 아미노산을 포함한다)을 포함하는 VL CDR1을 포함한다.
여전히 다른 바람직한 양태에서, 본 발명에 사용된 항체는 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.
추가의 컨센서스 모티프는 J695 항체를 생성하는 Y61상에 수행된 돌연변이 분석을 기초로 하여 측정할 수 있다(미국 특허 제6,914,128호의 도 2a 내지 2h에 요약됨; 본원의 도 9a 내지 9h). 미국 특허 제6,914,128호의 도 2a 내지 2h(본원의 도 9a 내지 9h)에 나타낸 그래프에 의해 입증되는 바와 같이, Y61의 중쇄 및 경쇄 CDR의 특정 잔기는 항체의 hIL-12 결합 특성을 유의적으로 손상시키지 않고 치환될 수 있다. 예를 들면, 12개의 상이한 아미노산 잔기를 갖는 CDR H1내 30번 위치에서 개개 치환은 항체의 Koff 속도를 유의적으로 감소시키지 않았으며, 이는, 각종의 상이한 아미노산 잔기로 치환될 수 있음을 나타낸다. 따라서, 돌연변이 분석(즉, 다른 아미노산 잔기로 치환될 수 있는 Y61내 위치)을 기준으로 하여 컨센서스 모티프를 측정하였다. 중쇄 및 경쇄 CDR3에 대한 컨센서스 모티프는 각각 서열 번호: 9 및 10에 나타내고, 중쇄 및 경쇄 CDR2에 대한 컨센서스 모티프는 각각 서열 번호: 11 및 12에 나타내며, 중쇄 및 경쇄 CDR1에 대한 컨센서스 모티프는 각각 서열 번호: 13 및 14에 나타낸다. VH 및 VL 영역에 대한 컨센서스 모티프는 각각 서열 번호: 15 및 16에 나타낸다.
따라서, 하나의 국면에서, 본 발명은:
a) 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50로 억제하고;
b) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3을 가지며;
c) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3을 갖는 특성을 지닌 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 포함한다.
바람직한 양태에서, 항체는 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 VH CDR2를 추가로 포함하고 서열 번호: 12의 아미노산 서열을 포함하는 VL CDR2를 추가로 포함한다.
다른 바람직한 양태에서, 항체는 서열 번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 VH CDR1을 추가로 포함하고 또한 서열 번호: 14의 아미노산 서열을 포함하는 VL CDR1을 추가로 포함한다.
여전히 다른 바람직한 양태에서, 본 발명에 사용된 항체는 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.
본 발명에서 사용된 바람직한 항체, 사람 항-hIL-12 항체 Y61은 CDR3의 PCR 돌연변이유발(미국 특허 제6,914,128호의 실시예 1에 기술된 바와 같음)에 의한 Joe 9 야생형의 친화성 성숙에 의해 생산될 수 있다. Y61은 표면 플라스몬 공명 및 시험관내 중화 검정에 의해 측정된 개선된 특이성/결합 친화성을 가졌다. Y61의 중쇄 및 경쇄 CDR3은 각각 서열 번호: 17 및 18로 나타내며, Y61의 중쇄 및 경쇄 CDR2는 각각 서열 번호: 19 및 20으로 나타내고, Y61의 중쇄 및 경쇄 CDR1은 각각 서열 번호: 21 및 22에 나타낸다. Y61의 VH는 서열 번호: 23의 아미노산 서열을 갖고 Y61의 VL은 서열 번호: 24의 아미노산 서열을 갖는다(이들 서열은 또한 Joe9와 함께 정렬된 미국 특허 제6,914,128호의 도 1a 내지 도 1d(본원의 도 8a 내지 도 8d)에 또한 나타낸다).
따라서, 다른 국면에서, 본 발명은
a) 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50으로 억제하고;
b) 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3을 가지며;
c) 서열 번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3을 갖는 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 사용을 특징으로 한다.
바람직한 양태에서, 본 발명의 방법 및 조성물에 사용된, 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2 및 서열 번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2를 갖는다.
다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 방법 및 조성물에 사용된, 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1을 갖는다.
여전히 다른 바람직한 양태에서, 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 23의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 24의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 본 발명의 방법 및 조성물에 사용된다.
특정 양태에서, 전장 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA 및 IgE 불변 영역과 같은 중쇄 불변 영역, 및 카바트(Kabat)의 문헌[참조: Kabat, E.A., et al . (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest , Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]에 기술된 바와 같은 이의 임의의 동종이인자형 변이체를 포함한다. 바람직하게는 항체 중쇄 불변 영역은 IgG1 중쇄 불변 영역이다. 또한, 항체 부분은 Fab 단편, F(ab'2) 단편 또는 단일쇄 Fv 단편일 수 있다.
Y61의 개개 잔기의 변형은 미국 특허 제6,914,128호의 도 2a 내지 2h(본원의 도 9a 내지 9h)에 나타낸 항체의 패널의 생산을 가져온다. 각각의 항체의 특이성/결합 친화성은 표면 플라스몬 공명 및/또는 시험관내 중화 검정에 의해 측정되었다.
따라서, 다른 국면에서, 본 발명은
a) 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50으로 억제하고;
b) 서열 번호: 404 내지 서열 번호: 469로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3을 가지며;
c) 서열 번호: 534 내지 서열 번호: 579로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3을 가지는 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 특징으로 한다.
바람직한 양태에서, 본 발명의 방법 및 조성물에 사용된 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 335 내지 서열 번호: 403으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2; 및 서열 번호: 506 내지 서열 번호: 533으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2를 갖는다.
다른 바람직한 양태에서, 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 288 내지 서열 번호: 334로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1; 및 서열 번호: 470 내지 서열 번호: 505로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1을 갖는다.
여전히 다른 바람직한 양태에서, 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 23의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 24의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
특정 양태에서, 전장 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA 및 IgE 불변 영역과 같은 중쇄 불변 영역 및 카바트의 문헌[참조: Kabat, E.A., et al . (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest , Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]에 기술된 바와 같은 임의의 동종이인자형 변이체를 포함한다. 바람직하게는 항체 중쇄 불변 영역은 IgG1 중쇄 불변 영역이다. 또한, 항체 부분은 Fab 단편, F(ab'2) 단편 또는 단일쇄 Fv 단편일 수 있다.
본 발명에서 사용될 수 있는 특히 바람직한 재조합체, 중화 항체, J695는 항체 Y61의 접촉 및 초돌연변이 아미노산 잔기의 부위-지시된 돌연변이유발에 의해 생산된다(참조: 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 2 및 하기 단락 III). J695는 Y61과 경쇄 CDR2의 50번 위치에서 Y61내 Gly로부터 Tyr로의 치환 및 경쇄 CDR3의 94번 위치에서 Gly로부터 Tyr로의 치환에 의해 상이하다. J695의 중쇄 및 경쇄 CDR3은 각각 서열 번호: 25 및 26에 나타내고, J695의 중쇄 및 경쇄 CDR2는 각각 서열 번호: 27 및 28에 나타내며, J695의 중쇄 및 경쇄 CDR1은 각각 서열 번호: 29 및 30에 나타낸다. J695의 VH는 서열 번호: 31의 아미노산 서열을 갖고 J695의 VL은 서열 번호: 32의 아미노산 서열을 갖는다(이들 서열은 또한 Joe9와 함께 정렬된, 미국 특허 제6,914,128호의 도 1a 내지 1d에 나타나 있다(본원의 도 8a 내지 d)).
따라서, 다른 국면에서, 본 발명은 a) 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50로 억제하고; b) 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3을 가지며; c) 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3을 갖는, 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 특징으로 한다.
바람직한 양태에서, 본 발명에 사용된 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2를 갖는다.
다른 바람직한 양태에서, 본 발명에 사용된 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1, 및 서열 번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1을 갖는다.
여전히 다른 바람직한 양태에서, 본 발명에 사용된 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 서열 번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호: 32의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 갖는다.
특정 양태에서, 전장 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA 및 IgE 불변 영역과 같은 중쇄 불변 영역 및 카바트의 문헌[참조: Kabat, E.A., et al . (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest , Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]에 기술된 바와 같은 이의 임의의 동종이인자형 변이체를 포함한다. 바람직하게는, 항체 중쇄 불변 영역은 IgG1 중쇄 불변 영역이다. 또한, 항체 부분은 Fab 단편, F(ab'2) 단편 또는 단일쇄 Fv 단편일 수 있다.
Joe 9 내지 J695의 계통, 또는 계통 Y61 내지 J695에서 항체의 CDR3, CDR2, 및 CDR1에 대한 바람직한 컨센서스 서열에서의 추가의 돌연변이를 제조하여 본 발명의 추가의 항-IL-12 항체를 제공할 수 있다. 이러한 변형 방법은 PCR 돌연변이유발, 경쇄 및/또는 중쇄 CDR내 개개의 접촉 또는 초돌연변이 아미노산 잔기의 표적화에 이어 본원에 기술된 바와 같은 변형된 항체의 역학적 및 기능적 분석(예를 들면, 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 3에 기술된 중화 검정, 및 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 5에 기술된 바와 같은 BIAcore 분석에 의함)과 같은 표준 분자 생물학 기술을 사용하여 수행할 수 있다.
따라서, 다른 국면에서 본 발명은
a) 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-6 M 이하의 IC50으로 억제하고;
b) 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3, 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2 및 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1, 또는 바람직한 선택적 돌연변이유발 위치 또는 초돌연변이 위치에서 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이의 돌연변이체를 포함하며, 여기서, 상기 돌연변이체는 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3, 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2 및 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1을 포함하는 항체보다 10배 이하로 더 높은 koff 속도를 갖고;
c) 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3, 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1, 또는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치 또는 초돌연변이 위치에서 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이의 돌연변이체를 포함하고, 여기서 상기 돌연변이체는 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3, 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1을 포함하는 항체보다 10배 이하로 더 높은 koff 속도를 가지는 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 사용을 특징으로 한다.
다른 국면에서, 본 발명은
a) 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50으로 억제하고;
b) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3, 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2 및 서열 번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1, 또는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 위치 또는 초돌연변이 위치에서 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이의 돌연변이체를 포함하며, 여기서, 상기 돌연변이체는 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3, 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1을 포함하는 항체보다 10배 이하로 더 높은 koff 속도를 가지며;
c) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3, 서열 번호: 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호: 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1, 또는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 위치 또는 초돌연변이 위치에서 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이의 돌연변이체를 포함하고; 여기서 상기 돌연변이체는 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3, 서열 번호: 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호: 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1을 포함하는 항체보다 10배 이하로 더 높은 koff 속도를 갖는 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 사용을 특징으로 한다.
통상의 숙련가들은 또한, 항체의 CDR 영역, 예를 들면, Y61 또는 J695내 추가의 돌연변이를 이루어 본 발명의 추가의 항-IL-12 항체를 제공할 수 있음을 인식할 것이다. 이러한 변형 방법은 위에서 기술한 바와 같은 표준 분자 생물학 기술을 사용하여 수행할 수 있다. 변형된 항체의 기능 및 역학적 분석은 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 3 및 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 5 각각에 기술된 바와 같이 수행할 수 있다. J695를 확인하는 Y61의 개개 잔기의 변형은 미국 특허 제6,914,128호의 도 2a 내지 2h(본원의 도 9a 내지 9h)에 나타나 있고, 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 2에 기술되어 있다.
따라서, 다른 국면에서 본 발명은
a) 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50으로 억제하고;
b) 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3, 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2 및 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1, 또는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치 또는 초돌연변이 위치에서 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이의 돌연변이체를 포함하며, 여기서 상기 돌연변이체는 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3, 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1을 포함하는 항체보다 10배 이하로 더 높은 koff 속도를 가지며;
c) 서열 번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3, 서열 번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1, 또는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치 또는 초돌연변이 위치에서 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이의 돌연변이체를 포함하고, 여기서 상기 돌연변이체는 서열 번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3, 서열 번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1을 포함하는 항체보다 10배 이하로 더 높은 koff 속도를 갖는 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 사용을 특징으로 한다.
다른 국면에서 본 발명은
a) 시험관내 PHA 검정에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-9 M 이하의 IC50으로 억제하고;
b) 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3, 서열 번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2 및 서열 번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1, 또는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치 또는 초돌연변이 위치에서 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이의 돌연변이체를 포함하며, 여기서 상기 돌연변이체는 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3, 서열 번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1을 포함하는 항체보다 10배 이하로 더 큰 koff를 가지며;
c) 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3, 서열 번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1, 또는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치 또는 초돌연변이 위치에서 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이의 돌연변이체를 포함하고, 여기서 상기 돌연변이체는 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3, 서열 번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1을 포함하는 항체보다 10배 이하로 더 큰 koff 속도를 갖는 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 용도를 특징으로 한다.
여전히 다른 양태에서, 본 발명은 사람 IL-12, 및 개코원숭이 IL-12, 마모셋(marmoset) IL-12, 침팬지 IL-12, 시노몰구스(cynomolgus) IL-12 및 레서스(rhesus) IL-12로 이루어진 그룹 중에서 선택된 적어도 하나의 추가의 영장류 IL-12의 활성을 중화하지만 마우스 IL-12의 활성을 중화하지 않는 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 용도를 제공한다.
II 재조합체 사람 항체의 선택
본 발명에서 사용될 수 있는 재조합체 사람 항체는 재조합체 조합적 항체 라이브러리, 바람직하게는 사람 림프구로부터 기원한 mRNA로부터 유래된 사람 VL 및 VH cDNA를 사용하여 제조한 scFvs 파지 디스플레이 라이브러리를 스크리닝하여 분리할 수 있다. 본 발명의 방법 및 조성물에 사용될 수 있는 항체를 확인하는 방법은 본원에 참조로 인용된 미국 특허 6,914,128호에 기술되어 있다. 이러한 라이브러리를 제조하고 스크리닝하는 방법론은 당해 분야에 공지되어 있다. 파지 디스플레이 라이브러리를 생성하기 위한 시판되는 키트(예를 들면, the Pharmacia Recombinant Phage Antibody System, catalog no. 27-9400-01; 및 the Stratagene SurfZAP TM phage display kit, catalog no. 240612) 외에, 항체 디스플레이 라이브러리를 생성하고 스크리닝하는데 사용하기에 특별히 용이한 방법 및 시약의 예는 예를 들면, 캉(Kang) 등의 PCT 공보 제WO 92/18619호; 윈터(Winter) 등의 PCT 공보 제WO 92/20791호; 브라이틀링(Breitling) 등의 PCT 공보 제WO 93/01288호; 맥카퍼티(McCafferty) 등의 PCT 공보 제WO 92/01047호; 게라드(Garrard) 등의 PCT 공보 제WO 92/09690호; Fuchs et al. (1991) Bio/Technology 9:1370-1372; Hay et al. (1992) Hum Antibod Hybridomas 3:81-85; Huse et al. (1989) Science 246:1275-1281; McCafferty et al., Nature (1990) 348:552-554; Griffiths et al. (1993) EMBO J 12:725-734; Hawkins et al. (1992) J Mol Biol 226:889-896; Clackson et al. (1991) Nature 352:624-628; Gram et al. (1992) PNAS 89:3576-3580; Garrad et al. (1991) Bio/Technology 9:1373-1377; Hoogenboom et al. (1991) Nuc Acid Res 19:4133-4137; 및 Barbas et al. (1991) PNAS 88:7978-7982에서 찾을 수 있다.
당해 방법에 사용된 항체 라이브러리는 바람직하게는 사람 VL 및 VH cDNA로부터 제조된 scFv 라이브러리이다. scFv 항체 라이브러리는 항원으로서 재조합체 사람 IL-12를 사용하여 바람직하게 스크리닝하여 IL-12에 대해 결합 활성을 갖는 사람 중쇄 및 경쇄 서열을 선택한다. IL-12의 p35 소단위 또는 p70 이종이합체에 대해 특이적인 항체를 선택하기 위하여, 스크리닝 검정을 과도한 유리된 p40 소단위의 존재하에 수행하였다. 소단위 선호도는 예를 들면, 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 1에 기술된 바와 같이, 마이크로-프리깃 적정(micro-Friguet titration)에 의해 측정할 수 있다.
초기 사람 VL 및 VH 분절이 선택되면, 선택된 VL 및 VH 분절의 상이한 쌍이 IL-12 결합에 대해 스크리닝되는 "혼합 및 매치(mix and match)" 실험을 수행하여바람직한 VL/VH 쌍 조합(참조: 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 1)을 선택한다. 또한, hIL-12 결합에 대한 친화성 및/또는 보다 낮은 오프 속도 상수를 추가로 개선시키기 위해, 바람직한 VL/VH 쌍(들)의 VL 및 VH 분절을 바람직하게는 천연의 면역 반응 동안 항체의 친화성 성숙에 관여하는 생체내 체세포 돌연변이 과정과 유사한 과정에서 VH 및/또는 VL의 CDR3 영역내에서 무작위로 돌연변이시킬 수 있다. 이러한 시험관내 친화성 성숙은 VH CDR3 또는 VL CDR3 각각에 대해 상보성인 PCR 프라이머를 사용하여 VH 및 VL 영역을 증폭시켜 달성할 수 있으며, 당해 프라이머는 특정 위치에서 4개의 뉴클레오타이드 염기의 무작위적인 혼합물로 "스파이크(spiked)"됨으로써 수득되는 PCR 생성물은, 랜덤 돌연변이가 VH 및/또는 VL CDR3 영역내로 도입된 VH 및 VL 분절을 암호화한다. 이러한 무작위적으로 돌연변이된 VH 및 VL 분절은 재선택하여 hIL-12에 대한 결합에 대해 재스크리닝할 수 있으며 IL-12 결합에 대해 높은 친화성 및 낮은 오프 속도를 나타내는 서열을 선택할 수 있다. 미국 특허 제6,914,128호의 부록 A의 표 2(본원에 첨부된 부록 A의 표 2 참조)는 시험관내 친화성 성숙의 결과로서 생산된 변경된 결합 특이성/친화성을 나타낸 항체를 나타낸다.
재조합체 면역글로불린 디스플레이 라이브러리로부터 본 발명의 항-hIL-12 항체의 선택, 분리 및 스크리닝에 이어서, 선택된 항체를 암호화하는 핵산을 파이지 입자(들)(예를 들면, 파지 게놈)으로부터 회수하여 표준 재조합체 DNA 기술에 의해 다른 발현 벡터내로 서브클로닝(subcloning)할 수 있다. 필요에 따라, 핵산을 추가로 조작하여 본 발명의 다른 항체 형태를 생성할 수 있다(예를 들면, 추가의 불변 영역과 같은 추가의 면역글로불린 도메인을 암호화하는 핵산에 연결시킴). 조합적 라이브러리의 스크리닝에 의해 분리된 재조합체 사람 항체를 발현시키기 위하여, 항체를 암호화하는 DNA를 재조합체 발현 벡터내로 클로닝하고 하기 IV 단락에 보다 상세히 기술되어 있는 바와 같이, 포유동물 숙주 세포내로 도입한다.
파지 디스플레이 기술에 의한 사람 IL-12 결합 항체를 선택하는 방법, 및 CDR 영역의 무작위 또는 부위-지시된 돌연변이유발에 의한 선택된 항체의 친화성 성숙은 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 1에 또한 상세히 기술되어 있다.
미국 특허 제6,914,128호의 실시예 1에 기술되어 있는 바와 같이, 사람 VL 및 VH cDNA 라이브러리의 스크리닝은 일련의 항-IL-12 항체를 확인하였으며, 이중 Joe 9 항체를 추가의 개발을 위해 선택하였다. Joe 9의 중쇄 가변 영역과 VBASE 데이터베이스로부터 선택된 중쇄 생식선 서열의 비교는, Joe 9가 COS-3 생식선 서열과 유사하였음을 나타내었다. COS-3은 생식선 서열의 VH3 계열에 속한다.
VH3 계열은 뉴클레오타이드 서열 상동성을 기준으로 하여, 7개의 계열, VH1 내지 VH7로 그룹화되는 사람 VH 생식선 레퍼토리 중 일부이다[참조: Tomlinson et al. (1992) J. Mol. Biol., 227, 776-798 및 Cook et al. (1995) Immunology Today, 16, 237-242]. VH3 계열은 최대 수의 구성원을 함유하며 생식선 레퍼토리에 최대로 기여한다. 특정의 제공된 사람 VH3-생식선 항체 서열의 경우, 전체 VH3 계열내의 아미노산 서열 동질성은 높다[참조: 예를 들면, Tomlinson et al. (1992) J. Mol. Biol., 227, 776-798 및 Cook et al. (1995) Immunology Today, 16, 237-242]. VH3 계열의 특정의 2개의 생식선 VH 서열 사이의 아미노산 서열 동질성의 범위는 대략 100개 VH 잔기중 69 내지 98개 잔기에서 변한다(즉, 특정의 2개의 생식선 VH 서열 사이에서 69 내지 98% 아미노산 서열). 생식선 서열의 대부분의 쌍의 경우, 적어도 80개 이상의 동일한 아미노산 잔기(즉, 적어도 80%의 아미노산 서열 상동성)가 존재한다. VH3 계열 구성원 사이의 고도의 아미노산 서열 상동성은 CDR내 주요 부위 및 VH 쇄의 골격 영역내 주요 위치에 존재하는 특정 아미노산 잔기를 생성한다. 이들 아미노산 잔기는 CDR에서 구조적 특징을 부여한다.
항체 구조의 연구는, CDR 구조가 CDR 및 골격 영역내 특정 위치를 점유하는 주요 아미노산 잔기를 기초로 한 기본 CDR 구조의 계열로 그룹화될 수 있다. 결과적으로, 동일한 주요 아미노산 잔기를 갖는 기본 구조를 가지는 상이한 항체에서 유사한 국소 CDR 구조가 존재한다[참조: Chothia et al. (1987) J. Mol. Biol., 196, 901-917 및 Chothia et al . (1989) Nature, 342, 877-883]. VH3 계열내에서, CDR1 및 CDR2 기본 구조에 대한 주요 부위에서 아미노산 잔기 동질성의 보존이 존재한다[참조: Chothia et al . (1992) J. Mol . Biol ., 227, 799-817].
COS-3 생식선 VH 유전자는 VH3 계열의 구성원이며 3-30 (DP-49) 생식선 VH 대립유전자의 변이체이다. COS-3은 단지 5개 위치에서 Joe9 VH 아미노산 서열과 상이하다. Joe9 VH와 COS-3 사이, 및 Joe9 VH와 다른 VH3 계열 구성원 사이의 고도의 아미노산 서열 상동성은 또한 고도의 CDR 구조적 상동성을 부여한다[참조: Chothia et al. (1992) J. Mol. Biol., 227, 799-817; Chothia et al. (1987) J. Mol. Biol ., 196, 901-917 및 Chothia et al . (1989) Nature, 342, 877-883].
숙련가들은, Joe 9에 대한 높은 아미노산 서열 및 기본 구조적 유사성을 기본으로 하여, 다른 VH3 계열 구성원을 또한 사용하여 사람 IL-12에 결합하는 항체를 생성할 수 있음을 인식할 것이다. 이는 예를 들면, 적절한 VL를 쇄-셔플링 기술(chain-shuffling technique)[참조: Winter et al. (1994) Annual Rev. Immunol., 12, 433-55]을 선택하거나, 본 발명의 항체로부터의 CDR을 포함하는 설치류 또는 다른 사람 항체로부터의 CDR을 VH3 계열 골격에 이식시킴으로써 수행할 수 있다.
사람 V 람다 생식선 레퍼토리는 뉴클레오타이드 서열 상동성을 기준으로 10개 계열로 그룹화된다[참조: Williams et al. (1996) J. Mol. Biol., 264, 220-232]. Joe 9의 경쇄 가변 영역과 VBASE 데이터베이스로부터 선택된 경쇄 생식선 서열의 비교는, Joe 9가 DPL8 람다 생식선과 유사하였음을 나타내었다. Joe9 VL은 DPL8 서열과는 단지 4개의 골격 위치에서 상이하며, 다른 Vλ1 계열 구성원의 골격 서열과 고도로 상동성이다. 높은 아미노산 서열 상동성 및 Joe 9에 대한 기본 구조적 유사성을 기초로 하여, 다른 Vλ1 계열 구성원을 또한 사용하여 사람 IL-12에 결합하는 항체를 생성할 수 있다. 이는 예를 들면, 쇄-셔플링 기술(참조: Winter et al . Supra)로 적절한 VH를 선택함으로써 또는 본 발명의 항체로부터의 CDR을 포함하는 설치류 또는 다른 사람 항체로부터의 CDR을 Vλ1 계열 골격에 이식시킴으로써 수행될 수 있다.
본 발명의 방법은 생식선 서열의 VH3 계열의 구성원으로부터 기원한 중쇄 가변 영역, 및 생식선 서열의 Vλ1 계열의 구성원으로부터 기원한 경쇄 가변 영역을 포함하는, hIL-12에 결합하는 재조합체 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 또한, 숙련가들은, VH3 계열 중쇄 서열의 임의의 구성원도 Vλ1 계열 경쇄 서열의 임의의 구성원과도 조합될 수 있음을 인식할 것이다.
당해 분야의 숙련가들은, 생식선의 아미노산 서열내 변화를 생성하는 DNA 서열 다형성이 집단(예를 들면, 사람 집단)내에 존재할 수 있음을 인식할 것이다. 생식선 서열내 이러한 유전적 다형성은 천연의 대립형질 변이로 인해 집단 내 개인들 중에서 존재할 수 있다. 이러한 천연 대립형질 변이는 전형적으로 유전자의 뉴클레오타이드 서열내 1 내지 5% 변이를 생성할 수 있다. 임의의 및 모든 이러한 뉴클레오타이드 변이 및 천연 대립형질 변이의 결과인 생식선 서열내 수득되는 아미노산 다형성은 본 발명의 영역내에 있는 것으로 의도된다.
따라서, 하나의 국면에서, 본 발명은 다음 특징들을 갖는 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 특징으로 한다:
a) 사람 IL-12에 결합하여, 표면 플라스몬 공명에 의해 측정된 것으로서 사람 IL-12로부터 0.1 s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리되거나, 시험관내 식물성 혈구 응집소 모세포 증식 검정(PHA 검정)에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-6M 이하의 IC50으로 억제한다.
b) VH3 생식선 계열의 구성원으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 가지며, 여기서, 중쇄 가변 영역은 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 갖는 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 돌연변이를 갖는다.
c) Vλ1 생식선 계열의 구성원으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 가지며, 여기서 경쇄 가변 영역은 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 지닌 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 돌연변이를 갖는다.
바람직한 양태에서, 분리된 사람 항체, 또는 항원 결합은 중쇄 CDR3내 돌연변이를 갖는다. 다른 바람직한 양태에서, 분리된 사람 항체, 또는 항원 결합은 경쇄 CDR3내 돌연변이를 갖는다. 다른 바람직한 양태에서, 분리된 사람 항체, 또는 항원 결합은 중쇄 CDR2내 돌연변이를 갖는다. 다른 바람직한 양태에서, 분리된 사람 항체, 또는 항원 결합은 경쇄 CDR2내 돌연변이를 갖는다. 다른 바람직한 양태에서, 분리된 사람 항체, 또는 항원 결합은 중쇄 CDR1내 돌연변이를 갖는다. 다른 바람직한 양태에서, 분리된 사람 항체, 또는 항원 결합은 경쇄 CDR1내 돌연변이를 갖는다.
당해 분야의 통상의 숙련가들은, VH3 생식선 계열의 구성원 사이, 또는 경쇄 Vλ1 생식선 계열의 구성원 사이에 높은 아미노산 서열 유사성을 기초로 하여, 생식선 서열에 대한 돌연변이가 사람 IL-12에 결합하는 추가의 항체를 제공할 수 있음을 인식할 것이다. 미국 특허 제6,914,128호의 표 1(본원에 첨부된 부록 A의 표 1 참조)은 VH3 계열 구성원의 생식선 서열을 나타내며 계열 구성원내 유의적인 서열 상동성을 입증한다. 미국 특허 제6,914,128호의 표 1(본원에 첨부된 부록 A의 표 1 참조)에는 Vλ1 계열 구성원에 대한 생식선 서열이 나타나 있다. Joe 9의 중쇄 및 경쇄 서열은 비교로서 제공된다. VH3 또는 Vλ1 계열 구성원의 생식선 서열에 대한 돌연변이는 예를 들면, 본 발명의 항체에서 이루어진 것과 동일한 아미노산 위치에서 이루어질 수 있다(예를 들면, Joe 9에서의 돌연변이). 변형은 PCR 돌연변이유발, 생식선 서열내 개개 아미노산 잔기의 표적화에 이은, 본원에 기술된 바와 같은 변형된 항체의 역학적 및 기능적 분석(예를 들면, 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 3에 기술된 중화 검정, 및 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 5에 기술된 바와 같은 BIAcore 분석)에 의해서와 같은 표준 분자 생물학 기술을 사용하여 수행할 수 있다.
따라서, 하나의 국면에서, 본 발명은 다음 특징들을 가진, 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 용도를 특징으로 한다:
a) 서열 번호: 595 내지 667로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 가지며, 여기서, 중쇄 가변 영역은 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 가진 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 돌연변이를 갖는다.
b) 서열 번호: 669 내지 675로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 가지고, 여기서 경쇄 가변 영역은 활성 항상 아미노산 잔기를 갖는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 돌연변이를 갖는다.
당해 분야의 통상의 숙련가들은, Joe 9와 COS-3 중쇄 생식선 서열 사이, 및 Joe 9와 DPL8 람다 생식선 서열 사이의 높은 아미노산 서열 유사성을 기초로 하여, 이들 생식선 서열의 CDR 영역에 대한 다른 돌연변이가 사람 IL-12에 결합하는 추가의 항체를 제공할 수 있음을 인식할 것이다. 이러한 변형 방법은 위에 기술된 바와 같은 표준 분자 생물학 기술을 사용하여 수행할 수 있다.
따라서, 하나의 국면에서, 본 발명은 다음 특성들을 갖는, 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 용도를 특징으로 한다:
a) 사람 IL-12에 결합하고 사람 IL-12로부터 표면 플라스몬 공명에 의해 측정된 것으로서, 0.1s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리되거나, 시험관내 식물성 혈구 응집소 모세포 증식 검정(PHA 검정)에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-6M 이하의 IC50으로 억제한다.
b) COS-3 생식선 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 가지며, 여기서 중쇄 가변 영역은 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 갖는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 돌연변이를 갖는다.
c) DPL8 생식선 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 가지며, 여기서 경쇄 가변 영역은 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 갖는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 돌연변이를 갖는다.
경쇄 및 중쇄 가변 영역내 CDR 및 골격 영역내 주요 부위를 점유하는 특정의 아미노산 잔기로 인하여, 구조적 특징이 이들 영역에 부여된다. 특히, CDR2 및 CDR1 영역은 기본 구조적 분류에 적용된다. 계열 구성원들 사이에 고도의 아미노산 서열 상동성이 존재하므로, 이들 기본 특징들은 계열 구성원들 사이에 존재한다. 당해 분야의 숙련가들은, 이들 기본 구조를 부여하는 아미노산 잔기에서의 변형이 IL-12에 결합하는 추가의 항체를 생산할 수 있음을 인식할 것이다. 변형은 위에서 기술한 바와 같이 표준 분자 생물학 기술을 사용하여 수행할 수 있다.
따라서, 다른 국면에서, 본 발명은 다음 특성들을 갖는, 분리된 사람 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 용도를 특징으로 한다:
a) 사람 IL-12에 결합하여 사람 IL-12로부터 표면 플라스몬 공명에 의해 측정된 것으로서 0.1 s-1 이하의 koff 속도 상수로 해리되거나, 시험관내 식물성 혈구 응집소 모세포 증식 검정(PHA 검정)에서 식물성 혈구 응집소 모세포 증식을 1 x 10-6M 이하의 IC50으로 억제한다.
b) VH3 생식선 계열의 구성원으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 가지며, 여기서 중쇄 가변 영역은 다른 VH3 생식선 계열 구성원으로부터의 CDR2와 구조적으로 유사한 CDR2, 및 다른 VH3 생식선 계열 구성원으로부터의 CDR1과 구조적으로 유사한 CDR1을 포함하고, 여기서, 중쇄 가변 영역은 활성 향성 아미노산 잔기를 갖는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 돌연변이를 갖는다.
c) Vλ1 생식선 계열의 구성원으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 갖고, 여기서 경쇄 가변 영역은 다른 Vλ1 생식선 계열 구성원으로부터의 CDR2와 구조적으로 유사한 CDR2, 및 다른 Vλ1 생식선 계열 구성원으로부터의 CDR1과 구조적으로 유사한 CDR1을 포함하고, 여기서 경쇄 가변 영역은 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 갖는 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 돌연변이를 갖는다.
본 발명에서 사용된 재조합체 사람 항체는 VBASE 데이터베이스로부터 선택된 사람 생식선 면역글로불린 서열에 대해 동종인 가변 및 불변 영역을 가진다. 재조합체 사람 항체에 대한 돌연변이(예를 들면, 무작위 돌연변이유발 또는 PCR 돌연변이유발에 의함)는 사람 생식선 면역글로불린 서열에 의해 암호화되지 않은 아미노산을 생성한다. 또한, 사람 공여자로부터 기원한 재조합체 항체의 라이브러리는 B-세포 발달 동안 발생하는 체세포 돌연변이의 정상적인 과정으로 인해 이들의 상응하는 생식선 서열로부터 상이한 항체 서열을 함유할 것이다. PCR 증폭에 의해 수득된 "생식선" 서열이 실제 생식선 구조로부터의 골격 영역에 있어서의 아미노산 차이(즉, 실제 생식선 서열과 비교하여 증폭된 서열에 있어서의 차이)를 암호화하는 경우, 이들 아미노산 차이를 실제 생식선 서열로 역 변화(즉, 골격 잔기의 생식선 구조로의 "역돌연변이")시키는 것이 바람직할 수 있다. 따라서, 본 발명은 임의로 역돌연변이 단계를 포함할 수 있다. 이를 수행하기 위해, 생식선(VBASE 데이터베이스에서의 예로 발견되는 바와 같이)에 의해 암호화된 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열을 우선 가장 가까운 생식선 서열과는 상이한 돌연변이된 면역글로불린 골격 서열내 아미노산 잔기를 확인한다. 이후에, 돌연변이된 면역글로불린 서열의 적절한 뉴클레오타이드를, 유전 코드를 사용하여 생식선 서열에 상응하도록 역 돌연변이시킴으로써 어떠한 뉴클레오타이드 변화가 이루어져야하는지를 측정한다. 돌연변이된 면역글로불린 골격 서열의 돌연변이유발은 PCR-매개된 돌연변이유발(여기서 돌연변이된 뉴클레오타이드는 PCR 프라이머내로 혼입됨으로써 PCR 생성물은 돌연변이를 함유한다) 또는 부위-지시된 돌연변이유발과 같은 표준 방법에 의해 수행된다. 역돌연변이용 후보물로서 확인된 각각의 아미노산의 역할은 항원 결합에 있어 직접적인 또는 간접적인 역할에 대해 시험되어야 하며 사람 항체의 어떠한 바람직한 특성에 영향을 미치기 위한 돌연변이 후 발견된 어떠한 아미노산도 최종의 사람 항체에 포함시키지 않아야 하는데; 예로서, 선택적인 돌연변이유발 접근방법에 의해 확인된 활성을 향상시키는 아미노산은 역돌연변이에 적용되지 않을 것이다. 돌연변이유발로부터 생성되는 항체의 특성을 측정하기 위한 검정은 ELISA, 경쟁적 ELISA, 시험관내 및 생체내 중화 검정 및/또는 (참조: 예를 들면, 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 3) 각종 공급원(사람, 영장류 및/또는 다른 종 포함)으로부터의 조직 단면을 사용한 면역조직화학을 포함할 수 있다.
역돌연변이에 적용된 아미노산의 수를 최소화하기 위하여, 가장 가까운 생식선 서열과 상이하지만 제2 생식선 서열내 상응하는 아미노산과는 동일한 것으로 밝혀진 아미노산 위치들을 잔류시킬 수 있으며, 단, 제2 생식선 서열은 문제의 아미노산의 양쪽 측면에서 적어도 10개, 바람직하게는 12개 아미노산에 대해 본 발명의 사람 항체의 서열과 동일하고 공선형이다. 이는, 본 발명의 사람 항체로 치료된 피험자에서 전문적인 항원 제시 세포에 의한 면역 시스템에 제시된 어떠한 펩타이드 에피토프도 외인성인 것은 아니지만, 자가-항원, 즉, 제2 생식선 서열에 의해 암호화된 면역글로불린과 동일함을 보증할 수 있다. 역돌연변이는 항체 최적화의 어느 단계에서도 발생할 수 있으며; 바람직하게는 역돌연변이는 선택적인 돌연변이유발 접근방법 직전 또는 직후에 발생한다. 보다 바람직하게는, 역돌연변이는 선택적인 돌연변이유발 접근방법 직전에 발생한다.
III. 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 및/또는 초돌연변이 위치에 대한 변형
전형적으로, 친화성이 개선된 항체의 선택은 상기 II 단락 및 본원에 참조로 혼입된 미국 특허 제6,914,128호에 기술된 바와 같은 파지 디스플레이 방법을 사용하여 수행할 수 있다. 이는 CDR 잔기의 조합을 무작위적으로 돌연변이시키고 상이한 서열의 항체를 함유하는 거대한 라이브러리를 생성함으로써 달성할 수 있다. 그러나, 작업하기 위한 이러한 선택 방법의 경우, 항체-항원 반응은 평형을 이루는 경향이 있어야만, 시간에 걸친 항원에 대한 보다 높은 친화성 항체의 우선적인 결합을 허용한다. 달성될 평형을 허용할 수 있는 선택 조건은, 파지 디스플레이 방법이 사용되어, 달성된 특정 수준의 친화성(즉, 항체 Y61의 것)의 획득시, 선택된 항 IL-12 항체의 친화성을 개선시키는 경우 측정될 수 없었다(아마도 항원과 파지 입자 사이의 추가의 비-특이적인 상호작용으로 인함). 따라서, 친화성이 훨씬 더 큰 항체도 파지 디스플레이 방법에 의해 선택될 수 없었다. 따라서, 적어도 특정의 항체 또는 항원의 경우, 파지 디스플레이 방법은 고도로 개선된 결합 특이성/친화성을 가진 항체를 선택하기 위한 이들의 능력에 있어 제한적이다. 따라서, 항체의 파지 디스플레이 친화성 성숙을 요구하지 않는 선택적인 돌연변이유발 접근방법으로 명명된 방법이 확립되어 이러한 제한을 극복하였으며 본 발명에 의해 제공된다. 비록 이러한 선택적인 돌연변이유발 접근방법이 파지 디스플레이 시스템을 사용한 제한을 극복하기 위해 개발되었다고 해도, 당해 방법은 또한 파지 디스플레이 시스템과 함께 사용될 수 있음에 주목하여야 한다. 또한, 선택적인 돌연변이유발 접근방법을 사용하여 임의의 항체의 활성을 개선시킬 수 있다.
항체의 활성(예를 들면, 친화성 또는 중화 활성)을 개선시키기 위하여, 이상적으로는 중쇄 및 경쇄 둘다에서 매 CDR 위치를 매 다른 가능한 아미노산 잔기로 돌연변이시킬 수 있다. 그러나, 평균적으로, 항체내에 70개 CDR 위치가 존재하기 때문에, 이러한 시도는 매우 시간 소모적이고 노동 집약적이다. 따라서, 본 발명의 방법은 중쇄 및/또는 경쇄 CDR내에서 단지 특정의 선택된 잔기만을 돌연변이시킴으로써 항체의 활성을 개선시키도록 허용한다. 또한, 본 발명의 방법은 항체의 다른 바람직한 특성에 영향을 미치지 않으면서 항체의 활성에 있어서 개선을 허용한다.
항체 가변 영역의 어떠한 아미노산 잔기가 항원과 접촉하는지의 결정은 가변 영역내 주요 서열 또는 이들의 위치를 기준으로 정확하게 예측할 수 없다. 그럼에도 불구하고, 카바트 등에 의해 수행된 특이성이 상이한 항체로부터 서열의 정렬은 항체들 중에서 유의적으로 상이한 가변 영역내 국소 영역으로서 CDR을 확인하였다[참조: Kabat et al. (1971) Ann . NY Acad , Sci . 190:382-393, Kabat, E.A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest , Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]. 구조적 연구는, 항원 결합 표면이 CDR내에 존재하는 아미노산 잔기에 의해 형성됨을 나타낸다. CDR 외부의 다른 아미노산 잔기는 또한 구조적 역할을 하거나 항원 결합에 직접 포함되는 것으로 알려져 있다. 따라서, 각각의 항원-항체 쌍의 경우, CDR의 내부 및 외부의 아미노산 잔기는 중요할 수 있다.
톰리슨(Tomlison) 등에 의한 서열 정렬 연구는 중쇄 및 경쇄 CDR1 및 CDR2에서, 및 체세포 돌연변이의 흔한 부위인 카파 쇄 CDR3의 부분에서 다수의 위치를 확인하였다[참조: Tomlison et al (1996) J. Mol . Biol . 256: 813-817]. 특히, 위치 H31, H31B, H33, H33B, H52B, H56, H58, L30, L31, L31A, L50, L53, L91, L92, L93 및 L94는 체세포 돌연변이에 대한 흔한 부위로 확인되었다. 그러나, 이러한 분석은 중요한 중쇄 CDR3 영역 및 항체 결합 부분의 중심에 위치하여 항원과의 중요한 상호작용을 잠재적으로 제공하는 것으로 알려진 경쇄 CDR3의 단면을 배제한다. 또한, 톰리슨 등은, 체세포 다양성만이 항원 결합에 있어서 특이적인 아미노산의 역할을 필수적으로 예측하지 않음을 제안하며, 항원과 접촉하는 보존된 아미노산 잔기, 및 항원과 접촉하지 않는 다양한 아미노산 잔기를 제안한다. 이러한 결론은 또한 항체 친화성에 대한 체세포 돌연변이의 역할에 있어서 돌연변이 연구에 의해 추가로 지지된다[참조: Sharon, (1990), PNAS, 87:4814-7). 고-친화성 항-p-아조페닐아르소네이트(Ars) 항체에서 19개의 체세포 돌연변이를 이들의 상응하는 생식선 잔기로 동시 치환시켜, 활성에 있어서 200배 상실된 항-Ars 항체의 생식선 버젼을 생성한다. 항-Ars 항체의 완전한 친화성은 19개의 체세포 돌연변이중 단지 3개 만을 복원함으로서 회복될 수 있었고, 이는, 항원 결합 활성에 기여하지 않는 많은 체세포 돌연변이가 허용될 수 있음을 입증한다.
당해 결과는 항체 다양성 자체의 특성에 의해 부분적으로 설명될 수 있다. 미성숙 B-세포는 다수의 자가 또는 비-자가 항원을 인식하는 초기에 낮은 친화성 항체를 생산할 수 있다. 또한, 항체는 자가-반응성을 유발할 수 있는 친화성 성숙 서열 변이의 과정을 겪을 수 있다. 이러한 저 친화성 항체의 초돌연변이는 자가-반응성을 폐지하고("음성 선택") 및 외부 항원에 대해 친화성을 증가시키기 위해 제공될 수 있다. 따라서, 다수의 항체의 주요 및 구조 데이터의 분석은 (1) 친화성 성숙 과정 대 원치않는 항원에 대해 친화성을 감소시키는 과정에서 체세포 초-돌연변이 부위의 역할, 또는 (2) 제공된 아미노산이 특이적인 항원-항체 쌍의 특성에 기여하는 방법을 예측하는 방법을 제공하지 않는다.
항원 인식에 있어서 특이적인 아미노산 잔기의 역할에 촛점을 맞춘 다른 시도는 항원-항체 복합체의 다수의 결정 구조들을 분석함으로써 이루어졌다[참조: MacCallum et al . (1996) J. Mol . Biol . 262: 732-745]. CDR의 내부 및 외부에 소재한 위치들의 잠재적인 역할이 나타나 있다. 26개의 분석된 구조 중 10개 이상에서 항원 결합에 포함된 CDR내 위치들은 중쇄내 H31, H33, H50, H52, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98 및 H100, 및 경쇄내 L30A, L32, L91, L92, L93, L94, L96을 포함하였다. 그러나, 저자들은, 이들 및 다른 구조적 데이터를 사용한 항원 접촉의 예측이 예측된 접촉 위치 위 및 아래에 있어서 상이한 전략이 상이한 항원에 적용되어야 할 수 있다는 추측을 생성한다.
피니(Pini) 등은 거대한 파지 디스플레이 라이브러리에서 항체 CDR 서열내 다수의 잔기를 무작위 배치하여 항체 친화성을 신속하게 증가시킴을 기술하고 있다[참조: Pini et al . (1998) J. Biol Chem . 273: 21769-21776]. 그러나, 피니 등에 의해 논의된 고 친화성 항체는 총 8개 위치에서 돌연변이를 가졌으며, 항체의 친화성을 개선시키기 위해 이의 변화가 절대적으로 요구되는 감소적 분석(reductionary analysis)은 최소의 필요한 아미노산에 대해 시험될 다수의 가능한 조합으로 인하여 비현실적으로 된다.
또한, 다수의 잔기의 무작위 배치는 항체의 다른 바람직한 특성을 필수적으로 보존할 수 없다. 항체의 바람직한 특성 또는 특징은 당해 분야에 공지되어 있으며, 예를 들면, 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차 반응성의 보존 및 중화 효능의 사람 생식선 면역글로불린 서열 개선에 가까운 항체 서열의 보존을 포함한다. 다른 바람직한 특성 또는 특징은 종 교차 반응성을 보존하는 능력, 에피토프 특이성을 보존하는 능력 및 포유동물 세포에서 단백질의 높은 발현 수준을 보존하는 능력을 포함한다. 바람직한 특성 또는 특징은 ELISA, 경쟁적 ELISA, 시험관내 및 생체내 중화 검정(참조: 예를 들면, 미국 특허 제6,914,128의 실시예 3), 필요에 따라, 사람, 영장류 또는 다른 공급원을 포함하는 상이한 공급원으로부터의 조직 단면을 사용한 면역조직화학 및, 일시적인 발현 또는 안정한 발현을 사용한 포유동물 세포내 발현에 대한 연구를 포함하나 이에 한정되지 않는 당해 분야에 인식된 기술을 사용하여 관찰하거나 측정할 수 있다.
또한, 피니 등의 방법은 친화성을 개선시키는데 실제로 요구되는 최소의 수보다 더 많은 변화를 도입할 수 있으며 사람 피험자에서 항-사람-항체(HAMA) 형성을 개시(triggering)하는 항체를 생성할 수 있다.
또한, 다른 곳에서 논의한 바와 같이, 본원에 입증된 파지 디스플레이 또는 리보솜 디스플레이를 포함하는 다른 관련된 방법은 항체와 항원 사이의 특정 친화성의 도달시 적절하게 작용하지 않을 수 있으며 평형에 도달하는데 요구되는 조건은, 다른 파지 또는 리보솜 성분 및 항원과의 상호작용을 포함하는 추가의 상호작용으로 인하여 충분한 기간내에 확립될 수 없다.
당해 분야의 통상의 숙련가들은 위에서 논의한 문헌들의 교시로부터 항체 다양성의 기원에 있어서 흥미있는 과학적 정보를 얻을 수 있다. 그러나, 본 발명은 항체의 다른 관련 특징 또는 바람직한 특성을 보존하면서 특이적인 항원-항체 쌍의 항체 친화성을 증가시키는 방법을 제공한다. 이는, 항원 결합을 포함하는 특이적인 항체에 있어서 다수의 상이한 특성을 부여하는 바람직함을 고려할때 특히 중요하다.
개시 항체가 보유하는데 필요한 바람직한 특징 또는 특성을 갖는 경우, 선택적인 돌연변이유발 접근방법은 항체의 활성을 개선시키면서 이들 바람직한 특성을 보존하기 위한 가장 우수한 전략일 수 있다. 예를 들어, Y61의 돌연변이유발에서, 목적은 바람직한 특성을 보존하면서 hIL-12에 대한 친화성을 증가시키고 항체의 중화 효능을 개선시키는 것이었다. Y61의 바람직한 특징은 (1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차 반응성의 보존; (2) 예를 들면, 우수한 에피토프의 특이성의 보존, 즉 바람직하게는 p70(p40/p35) 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및 (3) 이들의 각각의 생식선 면역글로불린 서열과 가능한 한 가까운 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 항체의 생성을 포함하였다.
하나의 양태에서, 본 발명의 방법은 친화성 및/또는 중화 효능을 개선시키면서 항체의 바람직한 특징 또는 특성을 보존하기 위한 전략으로서 선택적인 돌연변이유발 접근방법을 제공한다. 용어 "선택적인 돌연변이유발 접근방법"은 위에서 정의한 바와 같으며 선택된 아미노산 잔기를 개별적으로 돌연변이시키는 방법을 포함한다. 돌연변이될 아미노산 잔기는 우선 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치로부터 선택된 후 접촉 위치로부터 선택된 후 초돌연변이 위치에서 선택될 수 있다. 개개의 선택된 위치는 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 돌연변이될 수 있으며 항체의 바람직한 특성, 및 항체 활성에 있어서의 개선 둘다에서 돌연변이의 효과를 측정한다.
선택적인 돌연변이유발 접근방법은
1) 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치; 2) 접촉 위치; 3) 초돌연변이유발 위치의 순서로 후보물 위치를 선택하여 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역내 위치의 소재를 기준으로 하여 위치를 순위매김(CDR1보다 바람직한 CDR2보다 바람직한 CDR3)하는 단계;
순위매긴 순서로 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 초돌연변이 및/또는 접촉 위치를 모든 가능한 다른 아미노산 잔기로 개별적으로 돌연변이시키고 항체의 활성에 있어서 개개 돌연변이의 효과를 분석함으로서 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 측정하는 단계;
경우에 따라, 개개의 활성을 향상시키는 아미노산 잔기의 단계별 조합을 제조하고 항체의 활성에 있어서 각종 조합의 효과를 분석하는 단계;
활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 갖는 돌연변이체 항체를 선택하고 이들의 면역원성 잠재성과 관련하여 아미노산 치환의 위치 및 동질성을 기준으로 돌연변이체 항체를 순위매기는 단계를 포함한다. 최대 순위매김은 생식선 데이터베이스에 기술된 가변 영역 서열과 거의 동일한 아미노산 서열을 포함하는 돌연변이체 항체에 대해 제공되거나, 다른 사람 항체와 비교가능한 아미노산 서열을 갖는다. 보다 낮은 순위매임은 생식선 서열 또는 다른 사람 항체의 서열에서 드물게 직면하는 아미노산 치환을 함유하는 돌연변이체 항체에 대해 부여된다. 최저 순위매김은 생식선 서열 또는 다른 사람 항체의 서열에서 직면하지 않았던 아미노산 치환을 가진 돌연변이체 항체에 대해 부여된다. 위에 설정된 바와 같이, CDR3 내에 소재한 적어도 하나의, 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 포함하는 돌연변이체 항체가 CDR1에 비해 바람직하다. 중쇄 가변 영역의 CDR은 경쇄 가변 영역의 것들보다 바람직하다.
돌연변이체 항체는 또한, 예를 들어, 이들의 상응하는 모 항체에 대해 비교하는 경우, 활성에 있어서의 개선에 대해 연구할 수 있다. 돌연변이체 항체의 활성에 있어서 이러한 개선은 예를 들면, 중화 검정, 또는 표면 플라스몬 공명 분석(참조: 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 3)에 의한 결합 특이성/친화성에 의해 측정할 수 있다. 바람직하게는, 활성에 있어서의 개선은 모 항체보다 적어도 2 내지 20배 더 높을 수 있다. 활성에 있어서의 이러한 개선은 모 항체보다 적어도 "x1" 내지 "x2" 배 더 높을 수 있으며, 여기서 "x1" 및 "x2"는 2 내지 20 사이의 정수 및 이들을 포함하는 정수, 상태 범위, 예를 들면, 2 내지 15, 예를 들면, 5 내지 10내의 범위를 포함한다.
활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 갖는 돌연변이체 항체를 또한 연구하여, 적어도 하나의 다른 바람직한 특성이 돌연변이후 유지되는지를 측정할 수 있다. 예를 들면, 항-hIL-12 항체를 사용하여 (1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차 반응성의 보존; (2) 에피토프의 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70(p40/p35) 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터의 결합 방해의 예방; 및 (3) 이들의 각각의 생식선 면역글로불린 서열과 가능한 한 가까운 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 항체의 생성, 및 생식선 서열로부터의 다수의 상이점을 기준으로 어느 것이 사람 면역 반응을 유발할 가능성이 있는지를 측정하는 시험을 수행할 수 있다. 동일한 관찰이 하나 이상의 활성을 향상시키는 아미노산 잔기, 예를 들면, 적어도 2개 또는 적어도 3개의 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 갖는 항체를 기초로 수행하여 바람직한 특성 또는 특징의 보유가 발생했는지를 측정할 수 있다.
Y61의 돌연변이유발에서 "선택적인 돌연변이유발 접근방법"의 사용의 예는 하기 기술되어 있다. 개개의 돌연변이 H31S→E, L50→Y, 또는 L94G→Y 각각은 항체의 중화 할성을 개선시켰다. 그러나, 조합 클론을 시험한 경우, 조합된 클론 H31S→E + L50→Y + L94G→Y의 활성은 L50→Y + L94G→Y(J695)보다 우수하지 않았다. 따라서, CDR1의 31번 위치에서 생식선 아미노산 잔기 Ser에서 Glu로의 변화는 Y61을 능가하는 J695의 개선된 활성에 불필요하였다. 따라서, 선택적인 돌연변이유발 접근방법은 최종 활성에 기여함으로써, 최종 항체의 면역원성 잠재성을 감소시키고 항체의 다른 바람직한 특성을 보존시키는 최소 수의 변화를 확인하였다.
선택된 돌연변이유발 접근방법에 의해 생산된 VH 및 VL을 암호화하는 분리된 DNA는 전장 항체 쇄 유전자로, IV 단락에서 기술한 바와 같이 scFV 유전자에 대해서와 같이 Fab 단편 유전자로 전환시킬 수 있다. 선택된 돌연변이유발 접근방법에 의해 생산된 VH 및 VL 영역의 발현을 위해, 중쇄 및 경쇄를 암호화하는 발현 벡터를 IV 단락에서 상세히 기술한 바와 같이 각종 숙주 세포내로 형질감염시킬 수 있다. 바람직한 숙주 세포는 원핵 숙주 세포, 예를 들면, 이. 콜라이, 또는 진핵 숙주 세포, 예를 들면, 효모 세포, 예를 들면, 에스. 세레비지애(S. cerevisae)를 포함한다. 가장 바람직한 진핵 숙주 세포는 IV 단락에 상세히 기술된 포유동물 숙주 세포이다.
선택적인 돌연변이유발 접근방법은 다른 수단에 의한 항체의 사전 친화성 성숙없이 활성이 개선된 항체의 생산 방법을 제공한다. 선택적인 돌연변이유발 접근방법은 역 돌연변이에 적용된 친화성이 개선된 항체의 생산 방법을 제공한다. 선택적인 돌연변이유발 접근방법은 또한 친화성 성숙된 항체의 활성을 개선시키는 방법이 제공된다.
당해 분야의 숙련가는, 선택적인 돌연변이유발 접근방법이 당해 분야에 공지된 표준 항체 조작 기술에서 사용될 수 있음을 인식할 것이다. 예에는 CDR 이식된 항체, 키메라 항체, ScFV 단편, 전장 항체의 Fab 단편 및 다른 공급원, 예를 들면, 형질전환 마우스로부터의 사람 항체를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
항체의 신속한 대규모 돌연변이 분석은 리보솜 디스플레이 기술(ribosome display technology)[참조: 예를 들면, Hanes et al ., (1997) Proc . Natl . Acad . Sci. 94: 4937-4942; Dall Acqua et al .,(1998) Curr . Opin . Struc . Biol . 8: 443-450; He et al., (1997) Nucleic Acid Res. 25: 5132-5134], 및 가와사키(Kawasaki)에게 허여된 미국 특허 제5,643,768호 및 제5,658,754호를 사용한 시험관내 전사 및 해독을 포함한다. 선택적인 돌연변이유발 접근방법은 또한 리보솜 디스플레이 기술을 사용하여 선택할 수 있는 활성이 개선된 항체의 생산 방법을 제공한다.
본 발명의 방법에서, 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 HCVR 및/또는 LCVR의 CDR내 개개 위치를 변경시킴으로써 추가로 변형된다. 비록 이러한 변형이 파지-디스플레이된 항체에서 이루어질 수 있다고 해도, 당해 방법은 세균, 효모 또는 포유동물 세포 발현 시스템과 같은 다른 유형의 숙주 시스템에서 발현된 항체를 사용하여 수행될 수 있다는 점에서 유리하다. 변형을 위해 선택된 CDR내 개개 위치는 접촉 및/또는 초돌연변이 위치인 위치들을 기준으로 한다.
본원에 정의된 바람직한 접촉 위치 및 초돌연변이 위치는 미국 특허 제6,914,128호(참조: 미국 특허 제6,914,128호의 첨부 A 및 이에 부착된 첨부 A의 표 3)에 나타나 있으며 본 발명의 방법에 따른 이들의 변형은 미국 특허 제6,914,128호의 실시예 2에 상세히 기술되어 있다. 바람직한 접촉 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 바람직한 초돌연변이 위치는 H30, H31, H31B, H32, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L53 및 L93으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 보다 바람직한 아미노산 잔기("바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치"로 언급됨)는 둘다 접촉 및 초돌연변이 위치에 있으며 H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93, L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 특히 바람직한 접촉 위치는 L50 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
바람직한 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94, 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 위치에 소재하는 아미노산 잔기를 대체한다. 보다 바람직한 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 위치 H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93, L94에 소재하는 아미노산 잔기를 대체한다. 특히, 바람직한 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 L50 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된 위치에 소재하는 아미노산 잔기를 대체한다.
일반적으로, 본 발명의 방법은 목적한 모 항체, 또는 이의 항원 결합 부분의 중쇄 또는 경쇄의 CDR내 특히 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 및/또는 초돌연변이 위치를 선택하고, 이러한 개개 위치를 무작위로 돌연변이유발(예를 들면, 변형된 항체의 "최소-라이브러리"를 생성하기 위해 돌연변이유발원성 올리고뉴클레오타이드를 사용하는 유전적 수단에 의해)시키거나, 위치를 특이적인 바람직한 아미노산으로 돌연변이시켜 활성을 향상시키는 아미노산 잔기 발현을 확인하고, 변형된 항체(예를 들면, 비-파지 디스플레이 숙주 시스템에서)를 정제하며, 항원에 대한 변형된 항체의 활성을 측정하고(예를 들면, BIAcore 분석에 의해 koff 속도를 측정함으로써), 다른 CDR 위치에 대해 필요할 경우 이들 단계를 반복하고, 활성이 개선된 것으로 밝혀진 개개 돌연변이를 조합하여 조합(들)이 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분보다 훨씬 더 우수한 활성(예를 들면, 친화성 또는 중화 효능)을 가진 항체를 생성하는지를 시험하는 것을 포함한다.
따라서, 하나의 양태에서, 본 발명은:
a) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) 1) 바람직한 선택적 돌연변이유발 위치, 2) 접촉 위치, 또는 3) 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 초돌연변이 위치를 순서대로 선택함으로써 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 확인하는 단계;
c) 상기 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 개별적으로 돌연변이시켜 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성하는 단계;
d) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가하는 단계;
e) 임의로, 단계 a) 내지 d)를 적어도 하나의 다른 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 반복하는 단계;
f) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분에서 활성이 개선된 것으로 밝혀진 개개의 돌연변이를 조합하여 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 형성시키는 단계; 및
g) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여 조합 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 평가하는 단계를 포함하여, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여 활성이 개선된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다. 바람직하게는, 선택된 항체 또는 항체들은 위에서 기술한 바와 같은 모 항체의 적어도 하나의 바람직한 특징 또는 특성의 상실없이 또는 이를 보유하면서 개선된 활성을 갖는다. 바람직한 특징 또는 특성은 당해 분야에 공지된 기술을 사용하여 통상의 숙련가에 의해 측정되거나 관찰될 수 있다.
바람직한 접촉 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 바람직한 초돌연변이 위치는 H30, H31, H31B, H32, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L53 및 L93으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 보다 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 특히 바람직한 접촉 위치는 L50 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
다른 양태에서, 본 발명은
a) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내에서 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 선택하는 단계;
c) 상기 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 개별적으로 돌연변이시킴으로서 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성하는 단계;
d) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 임의로, 적어도 하나의 다른 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에 대해 단계 a) 내지 d)를 반복하는 단계;
f) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분내에서, 활성이 개선된 것으로 밝혀진 2개의 개별적인 활성을 향상시키는 아미노산을 조합하여 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 형성시키는 단계; 및
g) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 2개의 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 갖는 조합 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 평가하는 단계를 포함하여, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직한 접촉 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 바람직한 초돌연변이 위치는 H30, H31, H31B, H32, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L53 및 L93으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 보다 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 특히 바람직한 접촉 위치는 L50 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
다른 양태에서, 본 발명은
a) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내에서 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 선택하는 단계;
c) 상기 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 개별적으로 돌연변이시킴으로써 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성하는 단계;
d) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 임의로, 적어도 하나의 다른 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에 대해 단계 a) 내지 d)를 반복하는 단계;
f) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분내에서, 활성이 개선된 것으로 밝혀진 3개의 개별적인 활성을 향상시키는 아미노산을 조합하여 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 형성시키는 단계; 및
g) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 2개의 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 갖는 조합 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 평가하는 단계를 포함하여, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여 활성이 개선된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직하게는, 활성을 향상시키는 아미노산 잔기는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 위치에 소재하는 아미노산 잔기를 대체한다.
개별적인 선택된 위치의 돌연변이유발에 이어서, 돌연변이된 클론을 서열분석하여 어느 아미노산 잔기가 각각의 클론내에서 선택된 위치내로 도입되어 있는지를 확인할 수 있다. 통계적으로 10 내지 15개의 유일한 항체를 생성하여야 하는, 작은 수의 클론(예를 들면, 약 24개)을 서열 분석을 위해 선택할 수 있는 반면, 다수의 클론(예를 들면, 60개 이상)을 서열분석하여 선택된 위치에서 모든 가능한 치환을 가진 항체를 확인하는 것을 보증할 수 있다.
하나의 양태에서, 중쇄 및/또는 경쇄의 CDR3 영역내 접촉 및/또는 초돌연변이 위치를 우선 돌연변이유발을 위해 선택한다. 그러나, 파지 디스프레이 선택을 통해 CDR3 영역의 무작위적 돌연변이유발에 의해 이미 시험관내 친화성 성숙된 항체의 경우, 중쇄 및/또는 경쇄의 CDR1 또는 CDR2내의 접촉 및/또는 초돌연변이 위치를 우선 선택하는 것이 바람직할 수 있다.
보다 바람직한 양태에서, 중쇄 및/또는 경쇄의 CDR3 영역내 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치를 우선 돌연변이유발을 위해 선택한다. 그러나, 파지 디스플레이 선택을 통한 CDR3 영역의 무작위적 돌연변이에 의해 시험관내에서 이미 친화성 성숙된 항체의 경우에는 중쇄 및/또는 경쇄의 CDR1 또는 CDR2 영역내 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치를 우선 선택하는 것이 바람직할 수 있다.
다른 바람직한 양태에서, 선택적인 돌연변이유발 접근방법에 의한 선택된 항체의 최적화는 다음과 같은 순서로 수행된다: H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93, L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치를 우선 적어도 2개의 다른 아미노산 각각(바람직하게는 5 내지 14개의 다른 아미노산)으로 돌연변이시키고 수득되는 항체를 증가된 친화성, 중화 효능(및 가능하게는 또한 어딘가에 논의된 적어도 하나의 다른 보유된 특징 또는 특성에 대해)에 대해 특징화한다. 단일의 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치의 돌연변이가 친화성 또는 중화 효능을 전적으로 또는 충분히 증가시키지 않고 심지어 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치에서 아미노산을 대체하는 다수의 활성을 향상시키는 아미노산의 조합이 표적 활성(친화성 및/또는 중화 효능 포함)을 충족시키는 조합 항체를 생성하지 않는 경우에도, H35, H50, H53, H54, H95, H96, H97, H98, L30A 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택적인 돌연변이유발을 위해 선택될 추가의 아미노산 잔기를 적어도 2개의 다른 아미노산 각각(바람직하게는 5 내지 14개의 다른 아미노산)으로 돌연변이시키고 수득되는 항체를 증가된 친화성, 중화 효능(및 가능하게는 또한 어딘가에 논의된 적어도 하나의 다른 보유된 특징 또는 특성에 대해)에 대해 특징화한다.
H35, H50, H53, H54, H95, H96, H97, H98, L30A 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 단일의 아미노산 잔기의 돌연변이가 활성(친화성 및/또는 중화 효능 포함)을 전적으로 또는 충분하지 않게 증가시키지 않는 경우, 및 심지어 이들 위치에서 아미노산을 대체한 다수의 활성을 향상시키는 아미노산의 조합이 표적화된 활성(친화성 및/또는 표적 중화 효능 포함)을 충족시키는 조합 항체를 생성하지 않는 경우, H33B, H52B, L31A로 이루어진 그룹 중에서 선택적인 돌연변이유발을 위해 선택될 추가의 아미노산 잔기를 적어도 2개의 다른 아미노산 각각(바람직하게는 5 내지 14개의 다른 아미노산)으로 돌연변이시키고 수득되는 항체를 증가된 친화성, 중화 효능(및 가능하게는 또한 어딘가에 논의된 적어도 하나의 다른 보유된 특징 또는 특성에 대해)에 대해 특징화한다.
순차적인 선택적인 돌연변이유발 접근방법은, 바람직한 활성(친화성 및 중화 효능 포함)을 갖는 항체가 확인되자 마자 상기 요약한 단계중 어느 단계에서도 종결할 수 있다는 것을 이해하여야 한다. 예비선택된 위치의 돌연변이유발이 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하지만 조합 항체가 여전히 활성(친화성 및 중화 효능 포함)에 대한 표적 세트를 충족하지 않는 경우 및/또는 확인된 활성을 향상시키는 아미노산이 또한 다른 바람직한 특성에 영향을 미치고 이에 따라 허용되지 않는 경우, 나머지 CDR 잔기를 돌연변이유발에 적용시킬 수 있다(참조: IV 단락).
본 발명의 방법은 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 활성을 개선시키는데 사용하여 예정된 표적 활성(예를 들면, 예정된 친화성 및/또는 중화 효능, 및/또는 바람직한 특성 또는 특징)에 이르도록 할 수 있다.
따라서, 본 발명은:
a) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93, L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치를 선택하는 단계;
c) 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 개별적으로 돌연변이시킴으로써 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원 결합 부분의 제1 패널을 생성하는 단계;
d) 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원 결합 부분의 제1 패널의 활성을 평가하여 단일의 선택적인 돌연변이유발 위치의 돌연변이가 예정된 표적 활성 또는 부분적인 표적 활성을 갖는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 생산하는지를 측정하는 단계;
e) 모 항체, 또는 이의 항원 결합 부분에서, 활성이 개선된 것으로 밝혀진 개개의 돌연변이를 단계별 양식으로 조합하여, 조합 항체, 또는 이의 항원 결합 부분을 형성시키는 단계;
f) 조합 항체, 또는 이의 항원 결합 부분의 활성을 평가하여 조합 항체, 또는 이의 항원 결합 부분이 예정된 표적 활성 또는 부분적인 표적 활성을 갖는지를 측정하는 단계;
g) 단계 d) 또는 f)가 예정된 표적 활성을 갖는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 생성하지 않거나 단지 부분 활성만을 가진 항체를 생성하는 경우, H35, H50, H53, H54, H95, H96, H97, H98, L30A 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 추가의 아미노산 잔기를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 돌연변이시킴으로써 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 패널을 생성시키는 단계;
h) 돌연변이된 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 제2 패널의 활성을 평가하여 H35, H50, H53, H54, H95, H96, H97, H98, L30A 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 단일 아미노산 잔기의 돌연변이가 예정된 표적 활성 또는 부분 활성을 갖는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 생성하는지를 측정하는 단계;
i) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분에서, 활성이 개선된 것으로 밝혀진 단계 g)의 개별적인 돌연변이를 단계별 양식으로 조합하여 조합 항체, 또는 이의 항원 결합 부분을 형성시키는 단계;
j) 조합 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 활성을 평가하여, 조합 항체, 또는 이의 항원 결합 부분이 예정된 표적 활성 또는 부분적인 표적 활성을 갖는지를 측정하는 단계;
k) 단계 h) 또는 j)가 예정된 표적 활성을 갖는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 생성하지 않거나 단지 부분적인 활성을 갖는 항체를 생성하는 경우, H33B, H52B 및 L31A로 이루어진 그룹 중에서 선택된 추가의 아미노산 잔기를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 돌연변이시킴으로써 돌연변이된 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 제 3 패널을 생성시키는 단계;
l) 돌연변이된 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 제 3 패널의 활성을 평가하여, H33B, H52B 및 L31A로 이루어진 그룹 중에서 선택된 단일의 아미노산 잔기의 돌연변이가 예정된 표적 활성 또는 부분 활성을 갖는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 생성하는지를 평가하는 단계;
m) 모 항체, 또는 이의 항원 결합 부분에서, 활성이 개선된 것으로 밝혀진 단계 k)의 개별적인 돌연변이를 단계적 양식으로 조합하여 조합 항체, 또는 이의 항원 결합 부분을 형성시키는 단계;
n) 조합 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 평가하여 조합 항체, 또는 이의 항원 결합 부분이 예정된 표적 활성을 가짐으로써 예정된 표적 활성을 갖는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 생산하는지를 측정하는 단계를 포함하는, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시켜 예정된 표적 활성을 획득하는 방법을 제공한다.
PCR 조립, 쿤켈(Kunkel)(dut-ung-) 및 티오포스페이트(Amersham Sculptor kit) 올리고뉴클레오타이드-지시된 돌연변이유발을 포함하는 다수의 돌연변이유발 방법을 사용할 수 있다.
세균, 효모, 바큘로바이러스 및 포유동물 발현 시스템(및 파지 디스플레이 발현 시스템)을 포함하는 광범위한 숙주 발현 시스템을 사용하여 돌연변이된 항체를 발현시킬 수 있다. 적합한 세균 발현 벡터의 예는 pUC119(Sfi)이다. 다른 항체 발현 시스템은 당해 분야에 공지되어 있고/있거나 V 단락에서 하기 기술되어 있다.
본 발명의 방법에 의해 생산된 변형된 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 선택을 위한 파지 디스프레이 방법에 의존하지 않고 확인할 수 있다. 따라서, 본 발명의 방법은 파지-디스플레이 시스템에서 선택에 의해 수득되지만 이의 활성이 파지-디스플레이 시스템에서 돌연변이유발에 의해 추가로 개선될 수 없는, 재조합체 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는데 특히 유리하다.
따라서, 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 파지-디스플레이 시스템에서 선택에 의해 수득되지만 이의 활성이 당해 파지-디스플레이 시스템에서 돌연변이유발에 의해 추가로 개선될 수 없는, 재조합체 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 선택함으로써 선택된 접촉 또는 초돌연변이 위치를 확인하는 단계;
c) 상기 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 개별적으로 돌연변이시킴으로써 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성시키고, 상기 패널을 비-파지 디스플레이 시스템에서 발현시키는 단계;
d) 모 항체, 또는 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가하는 단계;
e) 임의로 단계 b) 내지 d)를 적어도 하나의 다른 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에 대해 반복하는 단계;
f) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분내에서, 활성이 개선된 것으로 밝혀진 개별적인 돌연변이를 조합하여 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 형성시키는 단계; 및
g) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 조합 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 평가하는 단계를 포함하는, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 친화성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직한 접촉 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 바람직한 초돌연변이 위치는 H30, H31, H31B, H32, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L53 및 L93으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 보다 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 특히 바람직한 접촉 위치는 L50 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
이용가능한 방법을 사용하여 결합 친화성 및 중화 효능이 증가되면서도 위에서 논의한 바와 같은 항체의 다른 특성 또는 특징을 보유하는 항체를 유도하는 것은 극도로 힘들다. 그러나, 본 발명의 방법은 이러한 항체를 용이하게 확인할 수 있다. 본 발명의 방법에 적용된 항체는 어떠한 공급원으로부터도 기원할 수 있다.
따라서, 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 재조합체 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 선택함으로써 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 확인하는 단계;
c) 상기 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 개별적으로 돌연변이시켜 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성시키고 적절한 발현 시스템에서 상기 패널을 발현시키는 단계;
d) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 항체내에서 유지될 필요가 있는, 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징에 대해 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 평가하는 단계를 포함하는, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선되고 적어도 하나의 보유된 특성 또는 특징을 지닌 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직한 양태에서, 접촉 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
다른 바람직한 양태에서, 초돌연변이 위치는 H30, H31, H31B, H32, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L53 및 L93으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
보다 바람직한 양태에서, 선택적인 돌연변이유발을 위한 잔기는 H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93, L94로 이루어진 그룹으로부터의 바람직한 선택적 돌연변이유발 위치로부터 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
보다 바람직한 양태에서, 접촉 위치는 L50 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
따라서, 특이적인 항원에 대한 항체의 친화성은 개선되지만, 파지 디스플레이(또는 리보솜 디스플레이를 포함하는 관련 시스템) 방법이 더 이상 적용가능하지 않고 다른 바람직한 특성 또는 특징이 보유되어야 하는 경우, 본 발명의 방법을 사용할 수 있다. 따라서, 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 파지-디스플레이 시스템에서 선택에 의해 수득되지만 이의 활성이 당해 파지-디스플레이 시스템에서 돌연변이유발에 의해 추가로 개선될 수 없는 재조합체 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 선택함으로써 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 확인하는 단계;
c) 상기 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 개별적으로 돌연변이시켜 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성시키고 비-파지 디스플레이 시스템에서 상기 패널을 발현시키는 단계;
d) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선되고 적어도 하나의 보유된 특성 또는 특징을 지닌 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체내에서 유지될 필요가 있는, 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징에 대해 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 평가하는 단계;
f) 임의로, 적어도 하나의 다른 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에 대해 단계 a) 내지 e)를 반복하는 단계;
g) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분에서, 활성이 개선되고 적어도 하나의 특성 또는 특징이 보유된 것으로 밝혀진 적어도 2개의 개별적인 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 조합하여 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 형성시키는 단계; 및
h) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 조합 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 평가하는 단계를 포함하여, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선되고 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징이 보유된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직한 양태에서, 접촉 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
다른 바람직한 양태에서, 초돌연변이 위치는 H30, H31, H31B, H32, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L53 및 L93으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고, 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
보다 바람직한 양태에서, 선택적인 돌연변이유발용 잔기는 H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93, L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치로부터 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식이 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
보다 바람직한 양태에서, 접촉 위치는 L50 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
다른 양태에서, 본 발명은:
a) 파지-디스플레이 시스템에서 선택에 의해 수득되지만 이의 활성이 당해 파지-디스플레이 시스템에서 돌연변이유발에 의해 추가로 개선될 수 없는 재조합체 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 선택함으로써 선택된 접촉 또는 초돌연변이 위치를 확인하는 단계;
c) 상기 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 개별적으로 돌연변이시켜 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성시키고 비-파지 디스플레이 시스템에서 상기 패널을 발현시키는 단계;
d) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 항체내에서 유지될 필요가 있는, 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징에 대해 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 평가하는 단계를 포함하는, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선되고 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징이 보유된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직한 양태에서, 접촉 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
다른 바람직한 양태에서, 초돌연변이 위치는 H30, H31, H31B, H32, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L53 및 L93으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
보다 바람직한 양태에서, 선택적인 돌연변이유발용 잔기는 H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93, L94로 이루어진 그룹 중에서 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치로부터 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
보다 바람직한 양태에서, 접촉 위치는 L50 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
다른 양태에서, 본 발명은:
a) 파지-디스플레이 시스템에서 선택에 의해 수득되지만 이의 활성이 당해 파지-디스플레이 시스템에서 돌연변이유발에 의해 추가로 개선될 수 없는 재조합체 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 선택함으로써 선택된 접촉 또는 초돌연변이 위치를 확인하는 단계;
c) 상기 선택된 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치를 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기로 개별적으로 돌연변이시켜 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성시키고 비-파지 디스플레이 시스템에서 상기 패널을 발현시키는 단계;
d) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선되고 적어도 하나의 보유된 특성을 지닌 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체내에서 유지될 필요가 있는, 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징에 대해 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 평가하는 단계;
f) 임의로, 적어도 하나의 다른 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에 대해 단계 a) 내지 e)를 반복하는 단계;
g) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분에서, 활성이 개선되고 적어도 하나의 특성이 보유된 것으로 밝혀진 적어도 2개의 개별적인 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 조합하여 조합 항체, 또는 항원-결합 부분을 형성시키는 단계; 및
h) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 조합 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 평가하는 단계를 포함하는, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선되고 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징이 보유된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직한 양태에서, 접촉 위치는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
다른 바람직한 양태에서, 초돌연변이 위치는 H30, H31, H31B, H32, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L53 및 L93으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
보다 바람직한 양태에서, 선택적인 돌연변이유발용 잔기는 H30, H31, H31B, H32, H33, H52, H56, H58, L30, L31, L32, L50, L91, L92, L93, L94로 이루어진 그룹으로부터의 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치로부터 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
보다 바람직한 양태에서, 접촉 위치는 L50 및 L94로 이루어진 그룹 중에서 선택되고 다른 특징은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
IV. 다른 CDR 잔기의 변형
궁극적으로, 제공된 항체-항원 쌍에서 모든 CDR 잔기는 활성을 향상시키는 아미노산 잔기와 같이 요구되고/되거나 항원에 대한 결합 및/또는 항체의 다른 바람직한 특성 또는 특징의 보유에 대해 직접 또는 간접적으로 요구되는 어떠한 수단에 의해 확인되었다. 이러한 CDR 잔기는 "바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치"로 언급된다. 바람직한 선택적인 돌연변이유발 잔기가 항체 및 항원의 동시-결정화 및 분자 모델화를 포함하는 다른 수단에 의해 또한 확인될 수 있는 특이적인 상황에 주목하여야 한다.
위에서 기술한 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에 촛점을 맞춘 활성을 향상시키는 아미노산을 확인하기 위한 바람직한 시도가 소진되거나, 추가의 개선이 요구되는 경우, 나머지 CDR 잔기를 하기 기술한 바와 같이 변형시킬 수 있다. 항체는 위에서 논의된 양태에 따라서 하나 이상의 어떠한 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 이미 변형될 수 있지만 추가의 개선이 요구될 수 있음이 이해되어야 한다. 따라서, 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96 이외에 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 아미노산 잔기를 선택하는 단계;
c) 예를 들면, 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기에 대해 상기 선택된 위치를 개별적으로 돌연변이시킴으로써 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성시키는 단계;
d) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징에 있어서의 변화에 대해, 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체 또는 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 평가하는 단계를 포함하는, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직하게는, 다른 특징 또는 특성은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
단일 잔기의 돌연변이유발이 충분하지 않은 경우, 다른 잔기를 포함시킬 수 있으므로; 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96 이외의 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 아미노산 잔기를 선택하는 단계;
c) 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기에 대해 상기 선택된 위치를 개별적으로 돌연변이시켜 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성시키는 단계;
d) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) b) 하에 선택된 위치 또는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96에서의 위치가 아닌 적어도 하나의 다른 CDR 위치에 대해 단계 b) 내지 d)를 반복하는 단계;
f) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분내에서, 활성이 개선된 것으로 밝혀진 적어도 2개의 개별적인 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 조합하여, 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 형성시키는 단계; 및
g) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 2개의 활성이 개선된 아미노산 잔기와의 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 평가하는 단계를 포함하는, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선된 항체 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
위에서 기술한 접촉 또는 초돌연변이유발 위치에 촛점을 맞춘 활성을 향상시키는 아미노산을 확인하기 위한 바람직한 시도가 소진되거나, 추가의 개선이 요구되고, 문제의 항체가 돌연변이유발 및 파지 디스플레이(또는 관련된 리보솜 디스플레이) 방법에 의해 추가로 최적화될 수 없는 경우, 나머지 CDR 잔기를 하기 기술한 바와 같이 변형시킬 수 있다. 항체는 위에서 논의된 양태에 따라서 임의의 하나 이상의 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이 위치에서 이미 변형될 수 있지만 추가의 개선이 요구될 수 있음이 이해되어야 한다.
따라서, 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 파지-디스플레이 시스템에서 선택에 의해 수득되지만 이의 활성이 당해 파지-디스플레이 시스템에서 돌연변이유발에 의해 추가로 개선될 수 없는 재조합체 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 이외에 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 아미노산 잔기를 선택하는 단계;
c) 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기에 대해 상기 선택된 접촉 또는 초돌연변이 위치를 개별적으로 돌연변이시킴으로써 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성시키고, 당해 패널을 비-파지 디스플레이 시스템내에서 발현시키는 단계;
d) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징에 있어서의 변화에 대해, 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 평가하는 단계를 포함하여, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직하게는, 다른 특징 또는 특성은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
단일 돌연변이유발이 항체의 친화성을 증가시키기에 충분하지 않은 경우, 다른 잔기를 돌연변이유발에 포함시킬 수 있다. 따라서, 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 파지-디스플레이 시스템에서 선택에 의해 수득되지만 이의 활성이 당해 파지-디스플레이 시스템에서 돌연변이유발에 의해 추가로 개선될 수 없는 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96 이외의 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 아미노산 잔기를 선택하는 단계;
c) 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기에 대해 상기 선택된 위치를 개별적으로 돌연변이시켜 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널 및 비-파지 디스플레이 시스템에서 발현을 생성시키는 단계;
d) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) b) 하에 선택된 위치 또는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94에서의 위치가 아닌 적어도 하나의 다른 위치에 대해 단계 b) 내지 d)를 반복하는 단계;
f) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분내에서, 활성이 개선된 것으로 밝혀진 적어도 2개의 개별적인 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 조합하여, 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 형성시키는 단계; 및
g) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 2개의 활성을 향상시키는 아미노산 잔기와의 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성 및 기타 특성 또는 특징을 평가하는 단계를 포함하여, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선된 항체 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직하게는, 다른 특징 또는 특성은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
위에서 기술한 바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 또는 초돌연변이유발 위치에 촛점을 맞춘 활성을 향상시키는 아미노산을 확인하기 위한 바람직한 시도는 소진되거나, 추가의 개선이 요구될 수 있으며, 항체의 다른 특성 또는 특징을 보유하는 것이 중요하다.
따라서, 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96 이외에 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 아미노산 잔기를 선택하는 단계;
c) 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기에 대해 상기 선택된 위치를 개별적으로 돌연변이시킴으로써 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성시키는 단계;
d) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징에 있어서의 변화에 대해, 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 평가하는 단계를 포함하여, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선되고 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징을 보유한 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 다른 특징에 영향을 미치지 않으면서 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직하게는, 다른 특징 또는 특성은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
단일 잔기의 돌연변이유발이 충분하지 않은 경우, 다른 잔기를 포함시킬 수 있으며; 따라서, 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96 이외의 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 아미노산 잔기를 선택하는 단계;
c) 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기에 대해 상기 선택된 위치를 개별적으로 돌연변이시켜 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 생성시키는 단계;
d) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 모 항체 또는 이의 항원-부분과 비교하여, 적어도 하나의 다른 특징 또는 특성에 있어서의 변화에 대해 돌연변이된 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 평가하는 단계;
e) b) 하에 선택된 위치 또는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96에서의 위치가 아닌 적어도 하나의 다른 CDR 위치에 대해 단계 b) 내지 e)를 반복하는 단계;
f) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분내에서, 활성이 개선된 것으로 밝혀지고 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징이 영향을 받지 않은 것으로 밝혀진 적어도 2개의 개별적인 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 조합하여, 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 형성시키는 단계; 및
g) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 2개의 활성을 향상시키는 아미노산 잔기와의 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성 및 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징의 보유를 평가하는 단계를 포함하여, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선되고 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징이 보유된 항체 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직한 선택적인 돌연변이유발 위치, 접촉 및 초돌연변이 잔기의 돌연변이유발은 항체의 친화성을 충분히 증가시키지 않을 수 있으며 돌연변이유발 및 파지 디스플레이 방법(또는 관련된 리보솜 디스플레이 방법)이 더 이상 유용하지 않고 항체의 적어도 하나의 다른 특징 또는 특성이 보유되어야 한다.
따라서, 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 파지-디스플레이 시스템에서 선택에 의해 수득되지만 이의 활성이 당해 파지-디스플레이 시스템에서 돌연변이유발에 의해 추가로 개선될 수 없는 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96 이외의 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 아미노산 잔기를 선택하는 단계;
c) 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기에 대해 상기 선택된 위치를 개별적으로 돌연변이시킴으로써 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널 및 비-파지 디스플레이 시스템내에서의 발현을 생성시키는 단계;
d) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성을 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징에 있어서의 변화에 대해, 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널을 평가하는 단계를 포함하여, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 활성이 개선된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
바람직하게는, 다른 특징 또는 특성은 1) 다른 단백질 또는 사람 조직과의 비-교차반응성의 보존, 2) 에피토프 인식의 보존, 즉, 바람직하게는 p70 p40/p35 이종이합체와 관련하여 p40 에피토프를 인식함으로써, 유리된 가용성 p40으로부터 결합 방해의 예방; 및/또는 (3) 생식선 면역글로불린 서열과 가까운 서열을 갖는 항체의 생산 중에서 선택된다.
단일 잔기의 돌연변이유발이 충분하지 않은 경우 다른 잔기가 포함될 수 있으며; 따라서, 다른 양태에서, 본 발명은:
a) 파지-디스플레이 시스템에서 선택에 의해 수득되지만 이의 활성이 당해 파지-디스플레이 시스템에서 돌연변이유발에 의해 추가로 개선될 수 없는 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 제공하는 단계;
b) H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94 및 L96 이외의 돌연변이를 위한 상보성 결정 영역(CDR)내 아미노산 잔기를 선택하는 단계;
c) 적어도 2개의 다른 아미노산 잔기에 대해 상기 선택된 위치를 개별적으로 돌연변이시켜 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널 및 비-파지 디스플레이 시스템에서의 발현을 생성시키는 단계;
d) 모 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 돌연변이된 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 패널의 활성 및 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징의 보유를 평가함으로써 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 확인하는 단계;
e) b) 하에 선택된 위치 또는 H30, H31, H31B, H32, H33, H35, H50, H52, H52A, H53, H54, H56, H58, H95, H96, H97, H98, H101, L30, L31, L32, L34, L50, L52, L53, L55, L91, L92, L93, L94, 및 L96에서의 위치가 아닌 적어도 하나의 다른 CDR 위치에 대해 단계 b) 내지 d)를 반복하는 단계;
f) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분내에서, 활성이 개선되지만 적어도 하나의 다른 특성 또는 특징에 영향을 미치지 않는 것으로 밝혀진 적어도 2개의 개별적인 활성을 향상시키는 아미노산 잔기를 조합하여, 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 형성시키는 단계; 및
g) 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 2개의 활성을 향상시키는 아미노산 잔기와의 조합 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성 및 적어도 하나의 특성 또는 특징의 보유를 평가하는 단계를 포함하여, 모 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 비교하여, 개선된 활성 및 적어도 하나의 다른 특징 또는 특성을 보유한 항체 또는 이의 항원-결합 부분이 수득될 때까지 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 활성을 개선시키는 방법을 제공한다.
V. 항체의 발현
본 발명의 항체, 또는 항체 부분은 숙주 세포내에서 면역글로불린 경쇄 및 중쇄 유전자의 재조합체 발현에 의해 제조될 수 있다. 항체를 재조합적으로 발현시키기 위해, 숙주 세포를 항체의 면역글로불린 경쇄 및 중쇄를 암호화하는 DNA 단편을 수반하는 하나 이상의 재조합체 발현 벡터로 형질감염시킴으로써 경쇄 및 중쇄가 숙주 세포내에서 발현되어, 바람직하게는, 숙주 세포가 배양된 배지내로 분비되어, 배지로부터 항체가 회수될 수 있다. 표준 재조합체 DNA 방법론을 사용하여 항체 중쇄 및 경쇄 유전자를 수득하고, 이들 유전자를 재조합체 발현 벡터내로 도입시키고 벡터를 문헌[참조: Sambrook, Fritsch and Maniatis (eds), Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor, N.Y., (1989), Ausubel, F.M. et al. (eds.) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates, (1989) 및 보스(Boss) 등에 의한 미국 특허 제4,816,397호]에 기술된 것들과 같은 숙주 세포내로 도입한다.
Joe 9 wt 또는 Joe 9 wt-관련 항체의 중쇄 가변 영역을 암호화하는 DNA 단편을 수득하기 위해, 사람 IL-12에 대해 특이적인 항체를 사람 라이브러리로부터 스크리닝하고 II 단락에 기술된 바와 같이, 돌연변이시켰다. 일단 Joe 9 wt 또는 Joe 9 wt-관련 VH 및 VL 분절을 암호화하는 DNA 단편이 수득되면, PCR 부위 지시된 돌연변이유발(돌연변이된 뉴클레오타이드를 PCR 프라이머내로 도입시켜 PCR 생성물이 돌연변이를 함유하도록 하는 PCR-매개된 돌연변이유발) 또는 다른 부위-지시된 돌연변이유발 방법과 같은 표준 방법에 의해 이들 서열의 돌연변이유발을 수행한다. 예를 들면, J695에 바람직한 활성 및 결합 특이성/친화성의 수준을 나타낸 사람 IL-12 항체를 표준 재조합체 DNA 기술에 의해 추가로 조작하여, 예를 들면 가변 영역 유전자를 전장 항체 쇄 유전자로, Fab 단편 유전자로 또는 scFv 유전자로 전환시켰다. 이들 조작에서, VL- 또는 VH-암호화 DNA 단편을 항체 불변 영역 또는 가변 링커(flexible linker)와 같은 다른 단백질을 암호화하는 다른 DNA 단편에 작동적으로 연결시킨다. 당해 내용에서 사용된 것으로서, 용어 "작동적으로 연결된"은, 2개의 DNA 단편이 결합함으로써, 2개의 DNA 단편에 의해 암호화된 아미노산 서열이 프레임내(in-frame)에 유지됨을 의미하도록 의도된다.
VH 영역을 암호화하는 분리된 DNA는 VH-암호화 DNA를 중쇄 불변 영역(CH1, CH2 및 CH3)을 암호화하는 다른 DNA 분자에 작동적으로 연결시켜 전장 중쇄 유전자로 전환시킬 수 있다. 사람 중쇄 불변 영역 유전자의 서열은 당해 분야에 공지되어 있으며[참조: 예를 들면, Kabat, E.A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242] 이들 영역을 포함하는 DNA 단편은 표준 PCR 증폭에 의해 수득될 수 있다. 중쇄 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM 또는 IgD 불변 영역 및 카바트(Kabat)의 문헌[참조: Kabat, E.A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]에 기술된 바와 같은 이에 대한 특정의 대립형질 변이체일 수 있으나, 가장 바람직하게는 IgG1 또는 IgG4 불변 영역이다. Fab 단편 중쇄 유전자의 경우, VH-암호화 DNA는 중쇄 CH1 불변 영역만을 암호화하는 다른 DNA 분자에 작동적으로 연결시킬 수 있다.
VL 영역을 암호화하는 분리된 DNA는 VL-암호화 DNA를 경쇄 불변 영역, CL을 암호화하는 다른 DNA 분자에 작동적으로 연결시킴으로써 전장 경쇄 유전자(및 Fab 경쇄 유전자)로 전환시킬 수 있다. 사람 경쇄 불변 영역 유전자의 서열은 당해 분야에 공지되어 있으며[참조: 예를 들면, Kabat, E.A., et al . (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest , Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242] 이들 영역을 포함하는 DNA 단편은 표준 PCR 증폭에 의해 수득될 수 있다. 경쇄 불변 영역은 카파 또는 람다 불변 영역일 수 있으나, 가장 바람직하게는 람다 불변 영역이다.
scFv 유전자를 생성하기 위하여, VH- 및 VL-암호화 DNA 단편을 가변 링커를 암호화하는, 예를 들면, 아미노산 서열(Gly4-Ser)3을 암호화하는 다른 단편에 작동적으로 연결시킴으로써, VH 및 VL 서열이 가변 링커에 의해 결합된 VL 및 VH 영역을 가진 연속된 단일쇄 단백질로서 발현될 수 있도록 한다[참조: 예를 들면, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; McCafferty et al., Nature (1990) 348:552-554].
본 발명의 항체, 또는 항체 부분을 발현시키기 위하여, 위에서 기술한 바와 같이 수득된 부분적인 또는 전장 경쇄 및 중쇄를 암호화하는 DNA를 발현 벡터내로 삽입시켜 유전자가 전사 및 해독 조절 서열에 작동적으로 연결되도록 한다. 이와 관련하여, 용어 "작동적으로 연결된"은, 항체 유전자가 벡터내로 연결됨으로써 벡터내 전사 및 해독 조절 서열이 항체 유전자의 전사 및 해독을 조절하는 이들의 의도된 기능을 제공함을 의미하는 것으로 의도된다. 발현 벡터 및 발현 조절 서열은 사용된 발현 숙주 세포와 혼화성이도록 선택한다. 항체 경쇄 유전자 및 항체 중쇄 유전자를 별개의 벡터내로 삽입시키거나, 보다 통상적으로 유전자 둘다를 동일한 발현 벡터내로 삽입시킨다. 항체 유전자는 표준 방법(예를 들면, 항체 유전자 단편 및 벡터상의 상보성 제한 부위의 연결, 또는 제한 부위가 존재하지 않는 경우 평활 말단 연결)에 의해 발현 벡터내로 삽입된다. J695 또는 J695-관련 경쇄 또는 중쇄 서열의 삽입 전에, 발현 벡터는 항체 불변 영역 서열을 이미 수반할 수 있다. 예를 들면, J695 또는 J695-관련 VH 및 VL 서열을 전장 항체 유전자로 전환시키기 위한 하나의 시도는 이들을 중쇄 불변 및 경쇄 불변 영역 각각을 이미 암호화하는 발현 벡터내로 삽입함으로써, VH 분절을 벡터내 CH 분절(들)내에 작동적으로 연결시키고 VL 분절을 벡터내 CL 분절에 작동적으로 연결시킨다. 추가로 또는 달리는, 재조합체 발현 벡터는 숙주 세포로부터 항체 쇄의 분비를 촉진시키는 시그날 펩타이드를 암호화할 수 있다. 항체 쇄 유전자는 벡터내로 클로닝시켜 시그날 펩타이드가 항체 쇄 유전자의 아미노 말단에 프레임내로 연결되도록 할 수 있다. 시그날 펩타이드는 면역글로불린 시그날 펩타이드 또는 이종의 시그날 펩타이드(즉, 비-면역글로불린 단백질로부터의 시그날 펩타이드)일 수 있다.
항체 쇄 유전자 외에, 본 발명의 재조합체 발현 벡터는 숙주 세포내 항체 쇄 유전자의 발현을 조절하는 조절 서열을 지닌다. 용어 "조절 서열"은 프로모터, 인핸서 및 항체 쇄 유전자의 전사 또는 해독을 조절하는 다른 발현 조절 성분(예를 들면, 폴리아데닐화 시그날)을 포함하는 것으로 의도된다. 이러한 조절 서열은 예를 들면 문헌[참조: Goeddel; Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, CA (1990)]에 기술되어 있다. 당해 분야의 숙련가들은, 조절 서열의 선택을 포함하는, 발현 벡터의 설계가 형질전환될 숙주 세포의 선택, 요구되는 단백질의 발현 수준 등과 같은 이러한 인자들에 의존할 수 있음을 인식할 것이다. 포유동물 숙주 세포 발현을 위한 바람직한 조절 서열은 포유동물 세포내에서 높은 수준의 단백질 발현을 지시하는 바이러스 성분, 예를 들면, 사이토메갈로바이러스(cytomegalovirus: CMV), 시미안 바이러스(Simian Virus) 40(SV40)(예: SV40 프로모터/인핸서), 아데노바이러스[예를 들면, 아데노바이러스 주요 후기 프로모터(adenovirus major late promoter: AdMLP)] 및 폴리오마(polyoma)로부터 기원한 프로모터 및/또는 인핸서(예: CMV 프로모터/인핸서)를 포함한다. 바이러스 조절 성분 및 이의 서열에 대한 추가의 설명에 대해서는, 예를 들면, 스틴스키(Stinski)의 미국 특허 제5,168,062호, 벨(Bell) 등의 미국 특허 제4,510,245호 및 샤프너(Schaffner) 등의 미국 특허 제4,968,615호, 부자드(Bujard) 등의 미국 특허 제5,464,758호 및 부자드 등의 미국 특허 제5,654,168호를 참조한다.
항체 쇄 유전자 및 조절 서열 외에, 본 발명의 재조합체 발현 벡터는 숙주 세포내에서 벡터의 복제를 조절하는 서열과 같은 추가의 서열(예: 복제 기원) 및 선택가능한 마커 유전자를 지닐 수 있다. 선택가능한 마커 유전자는, 벡터가 도입된 숙주 세포의 선택을 촉진한다[참조: 예를 들면, 악셀(Axel) 등의 미국 특허 제4,399,216호, 제4,634,665호 및 제5,179,017호]. 예를 들면, 전형적으로 선택가능한 마커 유전자는, 벡터가 도입된 숙주 세포에서 G418, 하이그로마이신 또는 메토트렉세이트와 같은 약물에 대한 내성을 부여한다. 바람직한 선택가능한 마커 유전자는 디하이드로폴레이트 리덕타제(DHFR) 유전자(메토트렉세이트 선택/증폭을 갖는 dhfr- 숙주 세포에서 사용하기 위함) 및 네오(neo) 유전자(G418 선택의 경우)를 포함한다.
경쇄 및 중쇄의 발현을 위해, 중쇄 및 경쇄를 암호화하는 발현 벡터(들)을 숙주 세포내로 표준 기술에 의해 형질감염시킨다. 용어 "형질감염"의 다양한 형태는 외인성 DNA의 진핵 또는 원핵 숙주 세포내로 도입시키기 위해 일반적으로 사용된 광범위한 기술, 예를 들면, 전기천공(electroporation), 인산칼슘 침전, DEAE-덱스트란 형질감염 등을 포함하는 것으로 의도된다. 비록 본 발명의 항체를 원핵 또는 진핵 숙주 세포내에서 발현시키는 것이 이론적으로 가능하다고 해도, 진핵 세포 및 가장 바람직하게는 포유동물 숙주 세포내에서 항체의 발현은, 이러한 진핵 세포, 및 특히 포유동물 세포가 원핵 세포보다 적절히 폴딩(folding)되어 면역학적으로 활성인 항체를 조립하여 분비하는 경향이 있으므로 가장 바람직하다. 본 발명의 재조합체 항체를 발현하기 위한 바람직한 포유동물 숙주 세포는 차이니즈 햄스터 난소(CHO 세포)[예를 들면, R.J. Kaufman and P.A. Sharp (1982) Mol. Biol. 159:601-621에 기술된 바와 같은 DHFR 선택가능한 마커와 함께 사용된, Urlaub and Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220에 기술된 dhfr- CHO 세포를 포함], NS0 흑색종 세포, COS 세포 및 SP2 세포를 포함한다. 항체 유전자를 암호화하는 재조합체 발현 벡터가 포유동물 숙주 세포로 도입되는 경우, 항체는, 숙주 세포내에서 항체의 발현, 또는 보다 바람직하게는 숙주 세포가 성장하는 배양 배지내로의 항체의 분비를 허용하기에 충분한 기간 동안 숙주 세포를 배양함으로써 생산된다. 항체는 표준 단백질 정제 방법을 사용하여 배양 배지로부터 회수할 수 있다.
숙주 세포를 또한 사용하여 Fab 단편 또는 scFv 분자와 같은 완전한 항체의 부분을 생산할 수 있다. 상기 과정에서 변이는 본 발명의 영역내에 있음은 이해될 것이다. 예를 들면, 숙주 세포를 본 발명의 항체의 경쇄 또는 중쇄(그러나 둘다는 아님)를 암호화하는 DNA로 형질감염시키는 것이 바람직할 수 있다. 재조합체 DNA 기술을 또한 사용하여 hIL-12에 대한 결합에 필수적이지 않은 경쇄 및 중쇄 각각 또는 둘다를 암호화하는 DNA의 일부 또는 전부를 제거할 수 있다. 이러한 절단된 DNA 분자로부터 발현된 분자는 또한 본 발명의 항체에 포함된다. 또한, 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄가 본 발명의 항체이고 다른 중쇄 및 경쇄가 본 발명의 항체를 제2 항체에 표준 화학적 교차결합 방법에 의해 교차결합시킴으로써 hIL-12 이외의 항원에 대해 특이적인 이기능성 항체를 생산할 수 있다.
본 발명의 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 재조합체 발현을 위한 바람직한 시스템에서, 항체 중쇄 및 항체 경쇄 둘다를 암호화하는 재조합체 발현 벡터를 인산칼슘-매개된 형질감염에 의해 dhfr- CHO 세포내로 도입한다. 재조합체 발현 벡터내에서, 항체 중쇄 및 경쇄 유전자 각각은 인핸서/프로모터 조절 성분(예를 들면, CMV 인핸서/AdMLP 프로모터 조절 성분 또는 SV40 인핸서/AdMLP 프로모터 조절 성분과 같이, SV40, CMV, 아데노바이러스 등으로부터 기원)에 작동적으로 연결시켜 유전자의 높은 수준의 전사를 구동시킬 수 있다. 재조합체 발현 벡터는 또한 DHFR 유전자를 수반하며, 이는 메토트렉세이트 선택/증폭을 사용하여 벡터로 형질감염시킨 CHO 세포의 선택을 허용한다. 선택된 형질전환체 숙주 세포는 항체 경쇄 및 중쇄의 발현을 허용하는 배양물이며 완전한 항체가 배양 배지로부터 회수된다. 표준 분자 생물학 기술을 사용하여 재조합체 발현 벡터를 제조하고, 숙주 세포를 형질감염시켜, 형질전환체를 선택하고, 숙주 세포를 배양하여 배양 배지로부터 항체를 회수한다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원-결합 부분은 사람 면역글로불린 유전자에 대해 형질전환 동물(예: 마우스)내에서 발현될 수 있다[참조: 예를 들면, Taylor, L.D. et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20: 6287-6295]. 식물 세포를 또한 변형시켜 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 발현하는 형질전환 식물을 생성할 수 있다.
앞서의 관점에서, 본 발명의 다른 국면은 본 발명의 항체 및 항체 부분의 재조합체 발현에 사용될 수 있는 핵산, 벡터 및 숙주 세포 조성물에 관한 것이다. 바람직하게는, 본 발명은 J695의 CDR, 또는 J695의 완전한 중쇄 및/또는 경쇄 가변 영역을 암호화하는 분리된 핵산을 특징으로 한다. 따라서, 하나의 양태에서, 본 발명은 서열 번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 J695 중쇄 CDR3을 암호화하는 항체 중쇄 가변 영역을 암호화하는 분리된 핵산을 특징으로 한다. 바람직하게는, 항체 중쇄 가변 영역을 암호화하는 핵산은 서열 번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는 J695 중쇄 CDR2를 추가로 암호화한다. 보다 바람직하게는, 항체 중쇄 가변 영역을 암호화하는 핵산은 서열 번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 J695 중쇄 CDR1을 추가로 암호화한다. 심지어 보다 바람직하게는, 분리된 핵산은 서열 번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(J695의 완전한 VH 영역)을 암호화한다.
다른 양태에서, 본 발명은 서열 번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 J695 경쇄 CDR3을 암호화하는 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 분리된 핵산을 특징으로 한다. 바람직하게는, 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 핵산은 또한 서열 번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 J695 경쇄 CDR2를 추가로 암호화한다. 보다 바람직하게는, 항체 경쇄 가변 영역을 암호화하는 핵산은 서열 번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 J695 경쇄 CDR1을 추가로 암호화한다. 심지어 보다 바람직하게는, 분리된 핵산은 서열 번호: 32의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄 가변 영역(J695의 완전한 VL 영역)을 암호화한다.
본 발명은 또한 항체 중쇄 및 항체 경쇄 둘다를 암호화하는 재조합체 발현 벡터를 제공한다. 예를 들면, 하나의 양태에서, 본 발명은:
a) 서열 번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 가변 영역을 갖는 항체 중쇄; 및
b) 서열 번호: 32의 아미노산 서열을 포함하는 가변 영역을 갖는 항체 경쇄를 암호화하는 재조합체 발현 벡터를 제공한다.
본 발명은 또한 본 발명의 재조합체 발현 벡터 중 하나 이상이 도입된 숙주 세포를 제공한다. 바람직하게는, 숙주 세포는 포유동물 숙주 세포이고, 보다 바람직하게는, 숙주 세포는 CHO 세포, NS0 세포 또는 COS 세포이다. 여전히 추가로 본 발명은 본 발명의 숙주 세포를 적합한 배양 배지 속에서 본 발명의 재조합체 사람 항체가 합성될 때까지 배양함으로써 본 발명의 재조합체 사람 항체를 합성하는 방법을 제공한다. 당해 방법은 또한 배양 배지로부터 재조합체 사람 항체를 분리함을 추가로 포함할 수 있다.
VI. 약제학적 조성물 및 약제학적 투여
본 발명의 항체 및 항체-부분은 피험자에 투여하기에 적합한 약제학적 조성물내로 혼입시킬 수 있다. 전형적으로, 약제학적 조성물은 본 발명의 항체 또는 항체 부분 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본원에 사용된 것으로서, "약제학적으로 허용되는 담체"는 생리학적으로 혼용성인 특정의 및 모든 용매, 분산 매질, 피복제, 항세균 및 항진균제, 등장화제 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 약제학적으로 허용되는 담체의 예는 하나 이상의 물, 염수, 인산염 완충된 염수, 덱스트로스, 글리세롤, 에탄올 등, 및 이들의 조합물을 포함한다. 많은 경우에, 등장화제, 예를 들면, 슈크로스, 만니톨, 소르비톨과 같은 다가알코올 또는 염화나트륨을 조성물 속에 포함시키는 것이 바람직할 것이다. 약제학적으로 허용되는 담체는 또한 항체 또는 항체 부분의 저장 수명(shelf life) 또는 유효성을 향상시키는, 습윤제 또는 유화제, 방부제 또는 완충제와 같은 소량의 보조 물질를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 항체 및 항체-부분은 비경구 투여에 적합한 약제학적 조성물내로 혼입될 수 있다. 바람직하게는, 항체 또는 항체-부위는 0.1 내지 250 mg/ml 항체를 함유하는 주사가능한 용액으로 제조될 것이다. 주사가능한 용액은 플린트(flint) 또는 앰버 바이알(amber vial), 앰플 또는 예비-충전된 주사기 속에 액체 또는 동결건조된 용량형으로 구성될 수 있다. 완충제는 L-히스티딘(1 내지 50 mM), 최적으로 5 내지 10 mM을 pH 5.0 내지 7.0(최적으로 pH 6.0)일 수 있다. 다른 적합한 완충제는 석신산나트륨, 시트르산나트륨, 인산나트륨 또는 인산칼륨을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 염화나트륨을 사용하여 0 내지 300 mM(최적으로 액체 용량형의 경우 150 mM)의 농도에서 용액의 독성을 변형시킬 수 있다. 동결보호제, 원칙적으로 0 내지 10% 슈크로스(최적으로 0.5 내지 1.0%)가 동결건조된 용량형에 포함될 수 있다. 다른 적합한 동결보호제는 트레할로스 및 락토스를 포함한다. 증량제(bulking agent), 원칙적으로 1 내지 10%의 만니톨(최적으로 2 내지 4%)이 동결건조된 용량형에 포함될 수 있다. 안정화제, 원칙적으로 1 내지 50 mM L-메티오닌(최적으로 5 내지 10 mM)이 액체 및 동결건조된 용량형 둘다에서 사용될 수 있다. 다른 적합한 증량제는 글리신, 아르기닌을 포함하며, 0 내지 0.05% 폴리소르베이트-80(최적으로 0.005 내지 0.01%)으로 포함될 수 있다. 추가의 계면활성제는 폴리소르베이트 20 및 BRIJ 계면활성제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
하나의 양태에서, 본 발명은 폴리올, 계면활성제, 안정화제, 및 pH가 약 5 내지 5인 완충제 시스템과 조합하여 항체를 포함하는 제형을 제공한다. 하나의 양태에서, 상기 제형은 금속을 함유하지 않는다. 바람직한 양태에서, 상기 제형은 항체 및 만니톨, 히스티딘, 메티오닌, 폴리소르베이트 80, 염산 및 물을 포함한다.
하나의 양태에서, pH-완충액 용액 속에 항체를 포함하는 수성 제형이 제조된다. 본 발명의 완충제는, pH가 약 4 내지 약 8, 바람직하게는 약 4.5 내지 약 7.5, 보다 바람직하게는 약 5 내지 약 7, 보다 바람직하게는 약 5.5 내지 약 6.5, 및 가장 바람직하게는 pH가 약 6.0 내지 약 6.2이다. 특히 바람직한 양태에서, 완충제는, pH가 약 6이다. 상기 인용된 pH의 중간 범위가 또한 본 발명의 일부인 것으로 의도된다. 예를 들어, 상한치 및/또는 하한치로서 상기 인용된 값 중 어느 것의 조합을 사용한 값들의 범위가 포함되는 것으로 의도된다. 당해 범위내에서 pH를 조절할 완충제의 예는 아세테이트(예: 아세트산나트륨), 석시네이트(예: 석신산나트륨), 글루코네이트, 히스티딘, 시트르산염, 인산염 및 다른 유기산 완충제를 포함한다. 본 발명의 바람직한 양태에서, 제형은 히스티딘을 포함하는 완충제 시스템을 함유한다. 본 발명의 바람직한 양태에서, 완충제는 히스티딘, 예를 들면, L-히스티딘이다. 바람직한 양태에서, 본 발명의 제형은 약 1 내지 100mM 히스티딘, 바람직하게는 약 5 내지 50mM 히스티딘, 및 가장 바람직하게는 10mM 히스티딘을 포함하는 완충제 시스템을 포함한다. 당해 분야의 숙련가는, 염화나트륨이 용액의 독성을 조절하기 위해 예를 들면 액체 용량형의 경우 1 내지 300 mM의 농도로, 및 최적으로 150 mM의 농도로 사용될 수 있음을 인식할 것이다.
등장화제로서 작용하며 항체를 안정화시킬 수 있는 폴리올이 또한 제형에 포함된다. 폴리올은 제형의 바람직한 등장성과 관련하여 변할 수 있는 양으로 제형에 가해진다. 바람직하게는 수성 제형은 등장성이다. 첨가된 폴리올의 양은 또한 폴리올의 분자량과 관련하여 변할 수 있다. 예를 들면, 보다 적은 양의 단당류(예를 들면, 만니톨)를 이당류(예: 트레할로스)와 비교하여 첨가할 수 있다. 본 발명의 바람직한 양태에서, 등장화제로서 제형 속에 사용되는 폴리올은 만니톨이다. 바람직한 양태에서, 조성물은 약 10 내지 약 100 mg/ml, 또는 약 20 내지 약 80, 약 20 내지 약 70, 약 30 내지 약 60, 약 30 내지 약 50 mg/ml의 만니톨, 예를 들면, 약 10, 약 20, 약 30, 약 40, 약 50, 약 60, 약 70, 약 80, 약 90, 및 약 100 mg/ml의 만니톨을 포함한다. 바람직한 양태에서, 제형은 약 40 mg/ml의 만니톨(약 4% 만니톨에 상응)을 포함한다. 바람직한 양태에서, 조성물은 약 1% 내지 약 10%의 만니톨, 보다 바람직하게는 약 2% 내지 약 6%의 만니톨, 및 가장 바람직하게는 약 4%의 만니톨을 포함한다. 본 발명의 다른 양태에서, 폴리올 소르비톨이 제형 속에 포함된다.
안정화제 또는 항산화제를 또한 항체 제형에 첨가한다. 안정화제는 액체 및 동결건조된 용량형 둘다로 사용될 수 있다. 본 발명의 제형은 바람직하게는 안정화제 메티오닌, 예를 들면, L-메티오닌을 포함한다. 본 발명의 제형에 유용한 다른 안정화제는 당해 분야의 숙련가에게 공지되어 있으며 글리신 및 아르기닌을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 동결보호제가 동결건조된 용량형의 경우, 원칙적으로 슈크로스(예를 들면, 1 내지 10%의 슈크로스, 및 최적으로 0.5 내지 1.0%의 슈크로스)가 포함된다. 다른 적합한 동결보호제는 트레할로스 및 락토스를 포함한다.
세제 또는 계면활성제를 또한 항체 제형에 첨가한다. 예시적인 세제는 비이온성 세제, 예를 들면, 폴리소르베이트(예를 들면, 폴리소르베이트 20, 80 등) 또는 폴록사머(예를 들면, 폴록사머 188)를 포함한다. 첨가된 세제의 양은, 이것이 제형화된 항체의 응집을 감소시키고/시키거나 제형내 입자의 형성을 최소화시키고/시키거나 흡수를 감소시키는 양이다. 본 발명의 바람직한 양태에서, 제형은 폴리소르베이트인 계면활성제를 포함한다. 본 발명의 다른 바람직한 양태에서, 제형은 세제 폴리소르베이트 80 또는 트윈 80을 포함한다. 트윈 80은 폴리옥시에틸렌(20) 소르비탄모노올레이트를 기술하기 위해 사용된 용어이다(참조: Fiedler, Lexikon der Hifsstoffe, Editio Cantor Verlag Aulendorf, 4th ed., 1996). 하나의 바람직한 양태에서, 제형은 0.001 내지 약 0.1%의 폴리소르베이트 80, 또는 약 0.005 내지 0.05%의 폴리소르베이트 80, 예를 들면, 약 0.001, 약 0.005, 약 0.01, 약 0.05, 또는 약 0.1%의 폴리소르베이트 80을 함유한다. 하나의 바람직한 양태에서, 약 0.01%의 폴리소르베이트 80이 본 발명의 제형 속에서 발견된다.
본 발명의 바람직한 양태에서, 제형은 표 1에 하기 나타낸 성분들을 함유하는 용기내 1.0 mL 용액이다. 다른 양태에서, 제형은 용기내 0.8 mL 용액이다.
[표 1]
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하나의 양태에서, 제형은 이의 전문이 본원에 참조로 표현하에 혼입되어 있는 미국 특허공개공보 제2010/0172862 A1호로 공개된 미국 특허원 제12/625,057호에 기술된 제형이다.
하나의 양태에서, 제형은 상기-확인된 제제(즉, 항체, 폴리올, 계면활성제, 안정화제 및 완충제)를 함유하며 벤질 알코올, 페놀, m-크레졸, 클로로부탄올 및 벤제토늄 Cl과 같은 하나 이상의 방부제를 필수적으로 함유하지 않는다. 다른 양태에서, 방부제는 제형 속에, 특히, 제형이 다중 용량 제형인 경우에 포함될 수 있다. 하나 이상의 다른 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 문헌[참조: Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)]에 기술된 것들과 같은 안정화제도, 이들이 제형의 바람직한 특징에 유의적으로 역 영향을 미치지 않는 한 제공된 제형 속에 포함될 수 있다. 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제는 사용된 용량 및 농도에서 복용자에 대해 무독성이며 추가의 완충제; 보조-용매; 아스코르브산과 같은 항산화제; EDTA와 같은 킬레이트제; 금속 착체(예를 들면, Zn-단백질 착체); 폴리에스테르와 같은 생분해성 중합체; 및/또는 나트륨과 같은 염-형성 상대 이온(counter ion)을 포함한다.
하나의 양태에서, 본 발명의 제형은 당해 분야에 인식된 제형과 비교하여 개선된 특성을 가진다. 예를 들면, 본 발명의 제형은 당해 분야에 인식된 제형과 비교하여 개선된 저장 수명 및/또는 안정성을 갖는다. 하나의 양태에서, 본 발명의 제형은 예를 들면, 액체 상태 또는 고체 상태에서 적어도 18개월의 저장 수명을 갖는다. 다른 양태에서, 본 발명의 제형은 예를 들면, 액체 상태 또는 고체 상태에서 적어도 24 개월의 저장 수명을 갖는다. 바람직한 양태에서, 본 발명의 제형은 2 내지 8℃의 온도에서 적어도 24개월의 저장 수명을 갖는다. 바람직한 양태에서, 본 발명의 제형은 약 -20 내지 -80℃의 온도에서 적어도 18개월 또는 적어도 24개월의 저장 수명을 갖는다. 다른 양태에서, 본 발명의 제형은 제형의 적어도 5회의 동결/해동 주기 이후에도 안정성을 유지한다. 바람직한 국면에서, 본 발명의 제형은, 예를 들면, J695의 람다 경쇄의 적어도 일부를 포함하는 항체를 포함하며, 여기서, 제형은 당해 분야에 인식된 제형과 비교하여, 람다 경쇄의 단편화에 대한 향상된 내성, 예를 들면, 람다 경쇄의 감소된 분해를 제공한다.
하나의 양태에서, 본 발명의 제형은 실질적으로 금속을 함유하지 않는다. 하나의 양태에서, 본 발명의 제형은 실질적으로 Fe2+, Fe3+, Ca2+ 및 Cu1+로 이루어진 그룹 중에서 선택된 금속을 함유하지 않는다. 하나의 양태에서, 본 발명의 제형은 히스티딘의 존재하에서 람다 쇄의 분해를 감소시키거나 방지하기에 충분히 적은 양의 금속을 포함하는데, 예를 들면, 금속은 약 5,060 ppb 미만, 약 1,060 ppb 미만, 약 560 ppb 미만, 약 500 ppb 미만, 약 450 ppb 미만, 약 400 ppb 미만, 약 350 ppb 미만, 약 310 ppb 미만, 약 300 ppb 미만, 약 250 ppb 미만, 약 200 ppb 미만, 약 160 ppb 미만, 약 150 ppb 미만, 약 140 ppb 미만, 약 130 ppb 미만, 약 120 ppb 미만, 약 110 ppb 미만, 약 100 ppb 미만, 약 90 ppb 미만, 약 80 ppb 미만, 약 70 ppb 미만, 약 60 ppb 미만, 약 50 ppb 미만, 약 40 ppb 미만, 약 30 ppb 미만, 약 20 ppb 미만, 약 10 ppb 미만, 또는 약 1 ppb 미만의 농도로 존재한다. 하나의 양태에서, 금속은 약 160 ppb 미만의 농도로 존재한다. 하나의 양태에서, 금속은 약 110 ppb 미만의 농도로 존재한다. 하나의 양태에서, 금속은 약 70 ppb 미만, 예를 들면, 약 60 ppb의 농도로 존재한다. 상기 인용한 농도에 대해 중간인 최대 농도, 예를 들면, 약 65 ppb 미만이 또한 본 발명의 일부인 것으로 의도된다. 또한, 상한치 및/또는 하한치로서 상기 인용된 값들 중의 하나, 예를 들면, 약 50 ppb 내지 약 70 ppb의 농도의 조합을 사용한 값의 범위가 또한 포함되는 것으로 의도된다.
하나의 양태에서, 본 발명의 제형은 여과, 완충제 교환, 크로마토그래피 또는 수지 교환과 같이, 금속을 제거하는 적어도 하나의 절차에 적용된 후 실질적으로 금속을 함유하지 않는다. 본 발명의 제형으로부터 금속을 제거하는데 유용한 절차는 당해 분야의 숙련가에게 공지되어 있으며 또한 본원에 기술되어 있다. 하나의 양태에서, 본 발명의 제형은 예를 들면, 분자가 힌지 영역내에서 분해되지 않거나 금속 킬레이터의 부재하에서 관측된 분해 수준 미만인 수준에서 힌지 영역내에서 분해되도록 하는 금속 킬레이터를 포함한다. 본 발명의 제형에서, 금속 킬레이터는 예를 들면, 시데로포어, 칼릭세렌스, 아미노폴리카복실산, 하이드록시아미노카복실산, N-치환된 글리신, 2-(2-아미노-2-옥소에틸)아미노에탄 설폰산(BES), 비덴테이트, 트리덴테이트 또는 헥사덴테이트 철 킬레이터, 구리 킬레이터, 및 이의 유도체, 유사체 및 조합일 수 있다. 본 발명의 제형에 유용한 금속 킬레이터는 당해 분야의 숙련가에게 공지되어 있으며 또한 하기 기술되어 있다.
본 발명의 제형에 유용한 특별한 시데로포어는 에어로박틴, 아그로박틴, 아조토박틴, 바실리박틴, N-(5-C3-L (5 아미노펜틸)하이드록시카르바모일)-프로피온아미드)펜틸)-3(5-(N-하이드록시아세토아미도)-펜틸)카르바모일)-프로피온하이드록삼산(데페록사민, 데스페리옥사민 또는 DFO 또는 DEF), 데스페린티오친, 엔테로박틴, 에리트로박틴, 페리크롬, 페리옥사민 B, 페리옥사민 E, 플루비아박틴, 푸사리닌 C, 마이코박틴, 파라박틴, 슈도박틴, 비브리오박틴, 불니박틴, 여시니아박틴, 오르니박틴, 및 이의 유도체, 유사체 및 조합을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 제형에 유용한 아미노프로필카복실산은 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA), 니트릴로아세트산(NTA), 트랜스-디아미노사이클로헥산 테트라아세트산(DCTA), 디에틸렌트리아민 펜타아세트산(DTPA), N-2-아세트아미도-2-이미노디아세트산(ADA), 아스파르트산, 비스(아미노에틸)글리콜에테르 N,N,N'N'-테트라아세트산(EGTA), 글루탐산, 및 N,N'-비스(2-하이드록시벤질)에틸렌디아민-N,N'-디아세트산(HBED), 및 이의 유도체, 유사체, 및 조합을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 제형에 유용한 하이드록시아미노카복실산은 N-하이드록시에틸이미노디아세트산 (HIMDA), N,N-비스하이드록시에틸글리신(비신), 및 N-(트리스하이드록시메틸메틸) 글리신(트리신), 및 이의 유도체, 유사체, 및 조합을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. N-치환된 글리신, 예를 들면, 글리실글리신, 및 이의 유도체, 유사체, 또는 조합은 본 발명의 제형에서 금속 킬레이터로 유용하다. 금속 킬레이터 2-(2-아미노-2-옥소에틸)아미노에탄 설폰산(BES), 및 이의 유도체, 유사체, 및 조합이 또한 사용될 수 있다.
본 발명의 제형에 유용한 특수 칼릭사렌은 페놀 및 알데하이드의 하이드록시알킬화 생성물을 기초로 하는 마크로사이클 또는 사이클릭 올리고머, 및 이의 유도체, 유사체, 및 조합을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본 발명에 유용한 특수 구리 킬레이터는 트리에틸렌테트라민(트리엔틴), 에트라에틸렌펜타민, D-페니실아민, 에틸렌디아민, 비스피리딘, 페난트롤린, 바토페난트롤린, 네오큐프로인, 바토큐프로인 설포네이트, 큐프리존, 시스,시스-1,3,5-트리아미노사이클로헥산(TACH), 타크피르, 및 이의 유도체, 유사체, 및 조합을 포함한다.
본 발명의 제형에 사용될 수 있는 추가의 금속 킬레이터는 하이드록시피리딘-유도체, 하이드라존-유도체, 및 하이드록시페닐-유도체, 또는 니코티닐-유도체, 예를 들면, 1,2-디메틸-3-하이드록시피리딘-4-온(데페리프론, DFP 또는 페리프록스); 2-데옥시-2-(N-카르바모일메틸-[N'-2'-메틸-3'-하이드록시피리딘-4'-온])-D-글루코피라노스(페랄렉스-G), 피리독살 이소니코티닐 하이드라존(PIH); 4,5-디하이드로-2-(2,4-디하이드록시페닐)-4-메틸티아졸-4-카복실산(GT56-252), 4-[3,5-비스(2-하이드록시페닐)-[1,2,4]트리아졸-1-일]벤조산(ICL-670); N,N'-비스(o-하이드록시벤질)에틸렌디아민-N,N'-디아세트산 (HBED), 5-클로로-7-요오도-퀴놀린-8-올(클리오퀴놀), 및 이의 유도체, 유사체, 및 조합을 포함한다.
임의의 상기 금속 킬레이터 중 어느 2개 이상의 조합이 본 발명의 제형 중에 함께 사용될 수 있다는 것이 인식될 것이다. 예를 들면, 본 발명의 특정 양태에서, 제형은 DTPA 및 DEF의 조합을 포함한다. 다른 양태에서, 제형은 EDTA, EGTA 및 DEF의 조합을 포함한다.
제형속에 존재하는 항체의 양은 예를 들면, 용량 용적 및 투여 방식(들)을 고려함으로써 결정된다. 본 발명의 하나의 양태에서, 제형 중 항체의 농도는 액체 제형 ml당 약 0.1 내지 약 250 mg의 항체이다. 본 발명의 하나의 양태에서, 제형중 항체의 농도는 액체 제형 ml당 약 1 내지 약 200 mg의 항체이다. 각종 양태에서, 제형중 항체의 농도는 ml당 약 30 내지 약 140 mg, 약 40 내지 약 120 mg/ml, 약 50 내지 약 110 mg/ml, 또는 약 60 내지 약 100 mg/ml이다. 제형은 특히 15 mg/ml 이상의 많은 항체 용량에 특히 적합하다. 각종 양태에서, 제형 중 항체의 농도는 약 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240 또는 250 mg/ml이다. 바람직한 양태에서, 항체의 농도는 50 mg/ml이다. 다른 바람직한 양태에서, 항체의 농도는 100 mg/ml이다. 바람직한 양태에서, 항체의 농도는 적어도 약 100 mg/ml, 적어도 약 110 mg/ml 또는 적어도 약 120 mg/ml이다.
본 발명의 각종 양태에서, 제형 중 항체의 농도는 약 0.1 내지 250 mg/ml, 0.5 내지 220 mg/ml, 1 내지 210 mg/ml, 약 5 내지 200 mg/ml, 약 10 내지 195 mg/ml, 약 15 내지 190 mg/ml, 약 20 내지 185 mg/ml, 약 25 내지 180 mg/ml, 약 30 내지 175 mg/ml, 약 35 내지 170 mg/ml, 약 40 내지 165 mg/ml, 약 45 내지 160 mg/ml, 약 50 내지 155 mg/ml, 약 55 내지 150 mg/ml, 약 60 내지 145 mg/ml, 약 65 내지 140 mg/ml, 약 70 내지 135 mg/ml, 약 75 내지 130 mg/ml, 약 80 내지 125 mg/ml, 약 85 내지 120 mg/ml, 약 90 내지 115 mg/ml, 약 95 내지 110 mg/ml, 약 95 내지 105 mg/ml, 또는 약 100 mg/ml이다. 상기 인용된 농도에 대해 중간의 범위, 예를 들면, 약 31 내지 174 mg/ml가 또한 본 발명의 일부인 것으로 의도된다. 예를 들면, 상한치 및/또는 하한치로서 상기 인용된 값 중 어느 것의 조합을 사용한 값의 범위가 포함되는 것으로 의도된다.
한번에, 제형은 활성 성분, 항체의 주사당 40 mg, 50 mg, 80 mg, 100 mg, 또는 200 mg의 유효 용량을 제공한다. 다른 양태에서, 제형은 약 0.1 내지 250 mg의 항체 범위의 유효 용량을 제공한다. 경우에 따라, 약제학적 제형의 유효 1일 용량은 임의로 단위 용량형으로 하루에 걸쳐 적절한 간격으로 별도로 투여된 2, 3, 4, 5, 6 또는 그 이상의 소-용량으로서 투여할 수 있다. 본 발명의 양태에서, 제형 중 항체의 용량은 약 1 내지 약 200 mg이다. 하나의 양태에서, 제형 중 항체의 용량은 약 30 내지 약 140 mg, 약 40 내지 약 120 mg, 약 50 내지 약 110 mg, 약 60 내지 약 100 mg, 또는 약 70 내지 약 90 mg이다. 하나의 양태에서, 약제학적 조성물은 약 100 내지 약 200 mg의 용량으로 항체를 포함한다. 추가의 양태에서, 조성물은 약 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240 또는 250 mg으로 항체를 포함한다.
상기 열거된 용량에 대해 중간인 범위, 예를 들면, 약 2 내지 139 mg이 또한 본 발명의 일부인 것으로 의도된다. 예를 들면, 상한 및/또는 하한으로서 상기 열거된 값들 중 어느 것의 조합을 사용한 값의 범위가 포함되는 것으로 의도된다.
본 발명의 조성물은 각종 형태일 수 있다. 이들은 예를 들면, 액체, 반-고체 및 고체 용량형, 예를 들면, 액체 용액(예를 들면, 주사가능하고 주입가능한 용액), 분산액 또는 현탁액, 정제, 환제, 산제, 리포솜 및 좌제를 포함한다. 바람직한 형태는 의도된 투여 방식 및 치료학적 적용에 의존한다. 대표적인 바람직한 조성물은 주사가능하거나 주입가능한 용액의 형태, 예를 들면, 다른 항체를 사용한 사람의 수동적 면역화에 사용된 것들과 유사한 조성물의 형태이다. 바람직한 투여 방식은 비경구(예를 들면, 정맥내, 피하, 복강내, 근육내)이다. 바람직한 양태에서, 항체, 또는 이의 항원-결합 단편은 피하 주사로 투여된다.
치료학적 조성물은 전형적으로 제조 및 저장 조건하에서 멸균되고 안정하여야 한다. 조성물은 액제, 미세유제, 분산제, 리포솜 또는 고 약물 농도에 적합한 다른 정렬된 구조로 제형화될 수 있다. 멸균 주사가능한 용액은 필요한 양의 활성 화합물(즉, 항체 또는 항체 부분)을 적절한 용매 속에서 필요에 따라 상기 열거한 성분들 중 하나 또는 조합과 함께 혼입한 후 여과된 멸균에 의해 제조할 수 있다. 일반적으로, 분산제는 활성 화합물을 기본 분산 매질 및 상기 열거된 것들로부터의 필요한 다른 성분들을 함유하는 멸균 비히클내로 혼입시켜 제조한다. 멸균 주사가능한 용액의 제조를 위한 멸균되고, 동결건조된 분말의 경우에, 바람직한 제조 방법은 활성 성분과 이에 앞서 멸균-여과된 용액으로부터의 임의의 추가의 바람직한 성분의 분말을 수득하는 분무-건조 및 진공 건조이다. 용액의 적절한 유동성은 예를 들면, 레시틴과 같은 피복물을 사용하고, 분산제의 경우에 요구된 입자 크기를 유지하며 계면활성제를 사용함으로써 유지시킬 수 있다. 주사가능한 조성물의 연장된 흡수는 흡수를 지연시키는 제제, 예를 들면, 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 조성물 속에 포함시킴으로써 달성할 수 있다.
본 발명의 항체 및 항체-부분은, 비록 많은 치료학적 적용의 경우에, 바람직한 투여 경로/방식이 피하 주사, 정맥내 주사 또는 주입이라고 해도, 당해 분야에 공지된 각종 방법에 의해 투여될 수 있다. 당해 분야의 숙련가에 의해 인식될 바와 같이, 투여 경로 및/또는 방식은 바람직한 결과에 따라 변할 것이다. 특정 양태에서, 활성 성분은 임플란트, 경피 패치, 및 미세캡슐화된 전달 시스템을 포함하는 조절된 방출 제형과 같이, 신속한 방출에 대해 화합물을 보호할 담체와 함께 제조될 수 있다. 에틸렌 비닐 아세테이트, 다중무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산과 같은 생분해성, 생적합성 중합체가 사용될 수 있다. 이러한 제형을 제조하기 위한 많은 방법은 특허되어 있거나 일반적으로 당해 분야의 숙련가에 공지되어 있다(참조: 예를 들면, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978).
특정 양태에서, 본 발명의 항체 또는 항체 부분은 예를 들면, 불활성 희석제 또는 동화가능한 식용 담체와 함께 경구 투여될 수 있다. 화합물(및 경우에 따라 다른 성분)이 또한 연질 또는 경질 쉘 젤라틴 캡슐 속에 봉입되거나, 정제로 압착되거나, 피험자의 식이내로 직접 혼입될 수 있다. 경구 치료학적 투여의 경우, 화합물은 부형제와 함께 혼입되며 식용가능한 정제, 볼내 정제, 트로키제, 캡슐제, 엘릭서르, 현탁제, 시럽제, 웨이퍼 등의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물을 비경구 투여 이외의 방식으로 투여하기 위해서는, 화합물을 이의 불활성화를 방지하는 물질로 피복시키거나, 화합물을 이러한 물질과 함께 동시-투여할 수 있다.
보충적 활성 화합물은 또한 조성물내로 혼입될 수 있다. 특정 양태에서, 본 발명의 항체 또는 항체 부분은 IL-12 활성이 해로운 장애를 치료하기에 유용한 하나 이상의 추가의 치료제와 함께 동시 제형화되고/되거나 동시 투여된다. 예를 들면, 본 발명의 항-hIL-12 항체 또는 항체 부분은 다른 표적(예를 들면, 세포 표면 분자와 결합하거나 다른 사이토킨에 결합하는 항체)에 결합하는 하나 이상의 추가의 항체와 함께 동시 제형화되고/되거나 동시 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 하나 이상의 항체는 2개 이상의 상기 치료제와 함께 사용될 수 있다. 이러한 병용 치료요법은 투여된 치료제의 보다 낮은 용량을 유리하게 이용할 수 있으므로 각종의 단독치료요법과 관련된 가능한 독성 또는 합병증을 피할 수 있다. 당해 분야의 숙련가들은, 본 발명의 항체를 병용 치료요법의 일부로서 사용하는 경우, 보다 적은 용량의 항체가, 항체만을 피험자에게 투여하는 경우보다 바람직할 수 있음을(예를 들면, 상승적 치료 효과는 최종적으로 보다 적은 용량의 항체의 사용을 허용하여 바람직한 치료학적 효과를 달성하는, 병용 치료요법의 사용을 통해 달성될 수 있다) 인식할 것이다.
인터류킨 12는 면역 및 염증성 성분을 포함하는 각종 질환과 관련된 병리학에서 중요한 역할을 한다. 이들 질환은 류마티스 관절염, 골관절염, 소아 만성 관절염, 라임 관절염, 건선 관절염, 반응성 관절염, 척추관절병, 전신홍반루푸스, 크론병(Crohn's disease), 궤양대장염, 염증성 장 질환, 인슐린 의존성 당뇨병, 갑상선염, 천식, 알레르기성 질환, 건선, 피부경화증, 아토피성 피부염, 이식체 대 숙주 질환, 기관 이식 거부증, 기관 이식과 관련된 급성 또는 만성 면역 질환, 사르코이드증, 죽상경화증, 파종 혈관내 응고, 가와사키병(Kawasaki's disease), 그레이브스병(Grave's disease), 신 증후군, 만성 피로 증후군, 베게너 육아종증(Wegener's granulomatosis), 헨노흐-쉔라인 자색반(Henoch-Schoenlein purpurea), 신장의 현미경적 혈관염, 만성 활성 간염, 포도막염, 패혈 쇼크 증후군, 독성 쇼크 증후군, 패혈증 증후군, 악액질, 감염성 질환, 기생충 질환, 후천성 면역결핍 증후군, 급성 횡단 척수염, 헌팅톤무도병, 파킨슨병(Parkinson's disease), 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 뇌졸중, 원발성 담관 간경화증, 용혈 빈혈, 악성 암, 심부전, 심근경색, 애디슨병(Addison's disease), 산발성, 다분비샘 결핍증 제I 형 및 다분비샘 결핍증 제II 형, 슈미트 증후군(Schmidt's syndrome), 성인(급성) 호흡곤란증후군, 탈모증, 원형 탈모증, 혈청음성 관절병증, 관절병증, 라이터병(Reiter's disease), 건선 관절병증, 궤양 대장염 관절병증, 장 질환성 윤활막염, 클라미디아, 여시니아 및 살모넬라 관련 관절병증, 척추관절병증, 죽종병/동맥경화증, 아토피성 알레르기, 자가면역 수포성 질환, 보통천포창, 낙엽천포창, 천포창, 선형 IgA 병, 자가면역 용혈빈혈, 쿰즈 양성 용혈빈혈(Coombs positive haemolytic anaemia), 후천성 악성 빈혈, 소아 악성 빈혈, 근통성 뇌염/로얄 프리병(Royal Free Disease), 만성 점막피부칸디다증, 거대 세포 동맥염, 주요 경화성 간염(primary sclerosing hepatitis), 잠복성 자가면역 간염, 후천성 면역결핍병 증후군, 후천성 면역결핍성 관련병, C형 간염, 일반적인 변이된 면역결핍증(일반적인 가변성 저감마글로불린혈증), 확장심장근육병, 여성 불임, 난소부전, 조기임신 난소부전, 섬유성 폐병, 원인불명 섬유화폐포염, 후-염증성 간질폐병, 간질성 폐렴, 연결 조직병 관련 간질성 폐병, 혼합된 연결조직병 관련 폐병, 전신 경화증 관련 간질성 페병, 류마티스 관절염 관련 간질성 폐병, 전신홍반루푸스 관련 폐병, 피부근염/다발근육염 관련 폐병, 쇼그렌 질환 관련 폐병(Sjogren's disease associated lung disease), 강직척추염 관련 폐병, 혈관염 확산성 폐병(vasculitic diffuse lung disease), 혈철소증 관련 폐병, 약물-유도된 간질성 폐병, 방사선 섬유증, 폐쇄세기관지염, 만성 호산구 폐렴, 림프구 침윤성 폐병, 감염후 간질성 폐병, 통풍 관절염, 자가면역 간염, 제1형 자가면역 간염(전통적인 자가면역 또는 루푸스 간염), 제2형 자가면역 간염(항-LKM 항체 간염), 자가면역 매개된 저혈당증, 흑색가시세포증을 갖는 제B형 인슐린 내성(type B insulin resistance with acanthosis nigrican), 부갑상선 기능 저하, 기관 이식과 관련된 급성 면역병, 기관 이식과 관련된 만성 면역병, 골관절염, 원발 경화성담관염, 특발성 호중구감소증, 자가면역 중성구감소증, 신장병 NOS, 사구체신염, 신장의 현미경적 혈관염, 라임병, 원반모양홍반루푸스, 남성 불임 특발성 또는 NOS, 정자 자가면역성, 다발성 경화증(모든 아형), 인슐린-의존성 당뇨병, 교감눈염증, 연결조직병에 대해 2차적인 폐 고혈압, 굿파스처 증후군(Goodpasture's syndrome), 결절다발동맥염의 폐 증상, 급성 류마티스열, 류마티스척추염, 스틸병(Still's disease), 전신경화증, 다카야스병(Takayasu's disease)/관절염, 자가면역성 혈소판감소증, 특발성 저혈소판증, 자가면역 갑상선 질환, 갑상선기능항진증, 갑상선 자가면역 갑상선 기능 저하증[하시모토병(Hashimoto's disease)], 위축성 자가면역 갑상선기능저하증, 원발성 점액수종, 수정체성 포도막염, 원발성 혈관염 및 백반증을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 사람 항체, 및 항체 부분을 사용하여 자가면역 질환, 특히 류마티스 척추염, 알레르기, 자가면역 당뇨병, 자가면역 포도막염을 포함하는 염증과 관련된 것들을 치료할 수 있다.
바람직하게는, 본 발명의 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 사용하여 VII 단락에 상세히 기술된 바와 같이, 류마티스 관절염, 크론병, 다발성 경화증, 인슐린 의존성 당뇨병 및 건선을 치료한다.
본 발명의 사람 항체, 또는 항체 부분은 또한 자가면역 질환 및 염증성 질환의 치료시 유용한 하나 이상의 추가의 치료제와 함께 투여될 수 있다.
본 발명의 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 단독으로 또는 함께 사용되어 이러한 질환을 치료할 수 있다. 본 발명의 IL-12 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 단독으로 또는 추가의 제제, 예를 들면, 치료제와 함께 사용될 수 있으며, 상기 추가의 제제는 이의 의도된 목적을 위해 당해 분야의 숙련가에 의해 선택된다는 것을 이해하여야 한다. 예를 들면, 추가의 제제는 당해 분야에서 본 발명의 항체에 의해 치료되는 질환 또는 상태를 치료하는데 유용한 것으로 인식된 치료제일 수 있다. 추가의 제제는 또한 치료학적 조성물에 유리하게 기여하는 제제, 예를 들면, 조성물의 점도에 효과가 있는 제제일 수 있다.
본 발명에 포함될 병용물은 이들의 의도된 목적에 유용한 병용물인 것으로 또한 이해될 수 있다. 하기 설정된 제제들은 설명할 목적이며 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 본 발명의 일부인 병용물은 본 발명의 항체 및 하기 목록 중에서 선택된 적어도 하나의 추가의 제제일 수 있다. 병용물은 또한 하나 이상의 추가의 제제, 예를 들면, 병용물인 경우 2 또는 3개의 추가의 제제를 포함함으로써 형성된 조성물이 이의 의도된 기능을 수행할 수 있도록 할 수 있다. 또한, IL-12 항체와 함께 사용된 본원에 기술된 추가의 제제는, 이들이 치료를 위해 기여한 질환에 한정되지 않는다.
바람직한 병용물은 이부프로펜과 같은 약물을 포함하는 NSAIDS로 또한 언급되는 비-스테로이드성 소염제이다. 다른 바람직한 병용물은 프레드니솔론을 포함하는 코르티코스테로이드이며; 스테로이드 사용의 잘 공지된 부작용은 환자를 본 발명의 항-IL-12 항체와 함께 치료하는 경우 요구된 스테로이드 용량을 축소시킴에 의해 감소되거나 심지어 제거할 수 있다. 본 발명의 항체, 또는 항체 부분과 병용될 수 있는 류마티스 관절염용 치료제의 비-제한적 예는 사이토킨 억제성 소염 약물(들)(CSAIDs); 다른 사람 사이토킨 또는 성장 인자, 예를 들면, TNF(아달리무마브/ HUMIRA 포함), LT, IL-1, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF, 및 PDGF에 대한 항체 또는 이의 길항제를 포함한다. 본 발명의 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD80 (B7.1), CD86 (B7.2), CD90, 또는 CD154 (gp39 또는 CD40L)를 포함하는 이들의 리간드와 같은 세포 표면 분자에 대한 항체와 결합시킬 수 있다.
치료제들의 바람직한 병용물은 자가면역 및 후속적인 염증성 캐스케이드(cascade)내 상이한 위치에서 방해할 수 있으며; 바람직한 예는 키메라성, 사람화된 또는 사람 TNF 항체와 같은 TNF 길항제, D2E7, (1996년 2월 9일자로 출원된 미국 특허원 제08/599,226호), cA2(RemicadeTM), CDP 571, 항-TNF 항체 단편(예를 들면, CDP870), 및 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체, 이의 유도체, (p75TNFR1gG (EnbrelTM) 또는 p55TNFR1gG(레네르셉트), 가용성 IL-13 수용체(sIL-13), 및 또한 TNFα 전환 효소(TACE) 억제제를 포함하며; 유사하게 IL-1 억제제(예를 들면, Vx740, 또는 IL-1RA 등과 같은 인터류킨-1-전환 효소 억제제)는 동일한 이유로 효과적일 수 있다. 다른 바람직한 병용물은 인터류킨 11, 항-P7s 및 p-셀렉틴 당단백질 리간드(PSGL)를 포함한다. 여전히 다른 바람직한 병용물은 IL-12 기능에 대해 평행하게, 이에 의존적으로 또는 이와 함께 작용할 수 있는 자가면역 반응의 다른 주요 작용인자이며; IL-18 항체 또는 가용성 IL-18 수용체, 또는 IL-18 결합 단백질을 포함하는 IL-18 길항제가 바람직하다. IL-12 및 IL-18은 오버랩핑되지만 둘다에 대한 명백한 기능 및 길항제의 병용물이 가장 효과적이다. 여전히 다른 바람직한 병용물은 비-감쇠성 항-CD4 억제제이다. 여전히 다른 바람직한 병용물은 항체, 가용성 수용체 또는 길항성 리간드를 포함하는 공-자극성 경로 CD80(B7.1) 또는 CD86(B7.2)의 길항제를 포함한다.
항-IL12 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 메토트렉세이트, 6-MP, 아자티오프린 술파살라진, 메살라진, 올살라진 클로로퀴닌/하이드록시클로로퀸, 페니실아민, 아우로티오말레이트(근육내 및 경구), 아자티오프린, 코치신, 코르티코스테로이드(경구, 흡입 및 국소 주사), 베타-2 아드레노수용체 효능제(살부타몰, 테르부탈린, 살메테랄), 크산틴(테오필린, 아미노필린), 크로모글리케이트, 네도크로밀, 케토티펜, 이프라트로퓸 및 옥시트로퓸, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 예를 들면, 이부프로펜, 프레드니솔론과 같은 코르티코스테로이드, 포스포디에스테라제 억제제, 아덴소신 효능제, 항혈전제, 상보체 억제제, 아드레날린제, TNFα 또는 IL-1(예를 들면, IRAK, NIK, IKK , p38 또는 MAP 키나제 억제제)와 같은 전염증성 사이토킨에 의한 시그날링을 방해하는 제제, IL-1β 전환 효소 억제제(예를 들면, Vx740), 항-P7s, p-셀렉틴 당단백질 리간드(PSGL), TNFα 전환 효소(TACE) 억제제, 키나제 억제제와 같은 T-세포 시그날링 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체[예를 들면, 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체 및 이의 유도체 p75TNFRIgG (EnbrelTM) 및 p55TNFRIgG(레네르셉트), sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R, 가용성 IL-13 수용체 (sIL-13)] 및 항-염증성 사이토킨(예를 들면, IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 및 TGFβ)와 같은 제제와 병용될 수 있다. 바람직한 병용물은 메토트렉세이트 또는 레플루노마이드 및, 중등도 또는 중증 류마티스 관절염 경우에서, 사이클로스포린을 포함한다.
항-IL-12 항체, 또는 항체 부분이 병용될 수 있는 염증성 장 질환에 대한 치료제의 비-제한적 예는 부데노시드; 상피 성장 인자; 코르티코스테로이드; 사이클로스포린, 설파살라진; 아미노살리실레이트; 6-머캅토퓨린; 아자티오프린; 메트로니다졸; 리폭시게나제 억제제; 메살라민; 올살라진; 발살라지드; 항산화제; 트롬복산 억제제; IL-1 수용체 길항제; 항-IL-1β 모노클로날 항체; 항-IL-6 모노클로날 항체; 성장 인자; 엘라스타제 억제제; 피리디닐-이미다졸 화합물; 다른 사람 사이토킨 또는 성장 인자에 대한 항체 또는 길항제, 예를 들면, TNF(아달리무마브/HUMIRA 포함), LT, IL-1, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF, 및 PDGF를 포함한다. 본 발명의 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90 또는 이들의 리간드와 같이 세포 표면 분자에 대한 항체와 병용될 수 있다. 본 발명의 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 메토트렉세이트, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 예를 들면, 이부프로펜, 프레드니솔론과 같은 코르티코스테로이드, 포스포디에스테라제 억제제, 아데노신 효능제, 항혈전제, 상보체 억제제, 아드레날린제, TNFα 또는 IL-1과 같이 전염증성 사이토킨에 의한 시그날링을 방해하는 제제(예를 들면, IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제), IL-1β 전환 효소 억제제(예를 들면, Vx740), 항-P7s, p-셀렉틴 당단백질 리간드 (PSGL), TNFα 전환 효소 억제제, 키나제 억제제와 같은 T-세포 시그날링 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체(예를 들면, 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R, 가용성 IL-13 수용체 (sIL-13)) 및 항-염증성 사이토킨 (예를 들면, IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 및 TGFβ)과 같은 제제와 병용될 수 있다.
항체 또는 항원 결합 부분이 병용될 수 있는 크론병용 치료제의 바람직한 예는 TNF 길항제(예를 들면, 항-TNF 항체, D2E7(아달리무마브 / HUMIRA), cA2 (RemicadeTM), CDP 571, 항-TNF 항체 단편(예를 들면, CDP870), TNFR-Ig 작제물[p75TNFRIgG (EnbrelTM) 및 p55TNFRIgG (레네르셉트)], 항-P7s, p-셀렉틴 당단백질 리간드 (PSGL), 가용성 IL-13 수용체 (sIL-13), 및 PDE4 억제제를 포함한다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 코르티코스테로이드, 예를 들면, 부데노시드 및 덱사메타손과 병용될 수 있다. 항체는 또한 설파살라진, 5-아미노살리실산 및 올살라진과 같은 제제, 및 IL-1, 예를 들면, IL-1b 전환 효소 억제제 (예를 들면, Vx740) 및 IL-1ra과 같은 전염증성 사이토킨의 합성 또는 작용을 방해하는 제제와 병용될 수 있다. 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 T 세포 시그날링 억제제, 예를 들면, 타이로신 키나제 억제제 6-머캅토퓨린과 함께 사용될 수 있다. 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 IL-11과 병용될 수 있다.
항체, 또는 항체 부분이 병용될 수 있는 다발성 경화증용 치료제의 비-제한적 예는: 코르티코스테로이드; 프레드니솔론; 메틸프레드니솔론; 아자티오프린; 사이클로포스파미드; 사이클로스포린; 메토트렉세이트; 4-아미노피리딘; 티자니딘; 인터페론-β1a(아보넥스; 제조원: Biogen); 인터페론-β1b(베타세론; 제조원: Chiron/Berlex); 공중합체 1(Cop-1; 코팍손; 제조원: Teva Pharmaceutical Industries, Inc.); 고압성 산소; 정맥내 면역글로불린; 클라브리빈; 다른 사람 사이토킨 또는 성장 인자, 예를 들면, TNF, LT, IL-1, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF, 및 PDGF에 대한 항체 또는 길항제를 포함한다. 본 발명의 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD80, CD86, CD90 또는 이들의 리간드와 같은 세포 표면 분자에 대한 항체와 병용될 수 있다. 본 발명의 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 메토트렉세이트, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 예를 들면, 이부프로펜, 프레드니솔론과 같은 코르티코스테로이드, 포스포디에스테라제 억제제, 아덴소신 효능제, 항혈전제, 상보체 억제제, 아드레날린제, TNFα 또는 IL-1(예를 들면, IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제)과 같은 전염증성 사이토킨에 의한 시그날링을 방해하는 제제, IL-1β 전환 효소 억제제(예를 들면, Vx740), 항-P7s, p-셀렉틴 당단백질 리간드 (PSGL), TACE 억제제, 키나제 억제제와 같은 T-세포 시그날링 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체(예를 들면, 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R, 가용성 IL-13 수용체 (sIL-13)) 및 항-염증성 사이토킨 (예를 들면, IL-4, IL-10, IL-13 및 TGFβ)를 포함한다.
항체 또는 이의 항원 결합 부분이 병용될 수 있는 다발성 경화증용 치료제의 바람직한 예는 인터페론-β, 예를 들면, IFNβ1a 및 IFNβ1b; 코팍손, 코르티코스테로이드, IL-1 억제제, TNF 억제제, 및 CD40 리간드 및 CD80에 대한 항체를 포함한다.
항체, 항체 부분은 피부 상태를 치료하기 위한 다른 제제와 함께 사용될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 항체, 항체 부분, 또는 다른 IL-12 억제제는 PUVA 치료요법과 조합된다. PUVA는 소랄렌(P) 및 많은 상이한 피부 상태를 치료하기 위해 사용된 장-파장 자외선(UVA)의 조합이다. 본 발명의 항체, 항체 부분, 또는 다른 IL-12 억제제는 또한 피메크롤리무스와 조합될 수 있다. 다른 양태에서, 본 발명의 항체는 건선을 치료하는데 사용되며, 여기서 항체는 타크롤리무스와 함께 투여된다. 추가의 양태에서, 타크롤리무스 및 IL-12 억제제는 메토트렉세이트 및/또는 사이클로스포린과 함께 투여된다. 여전히 다른 양태에서, 본 발명의 IL-12 억제제는 건선을 치료하기 위한 엑시머 레이저 치료(excimer laser treatment)와 함께 투여된다.
본 발명의 약제학적 조성물은 "치료학적 유효량" 또는 "예방학적 유효량"의 본 발명의 항체 또는 항체 부분을 포함할 수 있다. "치료학적 유효량"은 바람직한 치료학적 결과를 달성하기 위해 필요한 용량에서 및 기간 동안 효과적인 양을 말한다. 항체 또는 항체 부분의 치료학적 유효량은 개인의 질환 상태, 연령, 성별 및 체중과 같은 인자, 및 개인에서 바람직한 반응을 유발시키기 위한 항체 또는 항체 부분의 능력과 같은 인자에 따라 변할 수있다. 치료학적 유효량은 또한, 항체 또는 항체 부분의 어떠한 독성 또는 유해한 효과가 치료학적으로 유리한 효과보다 큰 양이다. "예방학적 유효량"은 바람직한 예방학적 결과를 달성하는데 효과적인 양, 필요한 용량 및 기간을 말한다. 전형적으로, 예방학적 용량은 질환의 이전 또는 보다 조기 단계에서 피험자에게 사용되며, 예방학적 유효량은 치료학적 유효량 미만일 것이다.
용량 요법은 최적의 바람직한 반응(예를 들면, 치료학적 또는 예방학적 반응)을 제공하도록 조절될 수 있다. 예를 들면, 단일의 거환을 투여하거나, 몇개로 분할된 용량을 시간에 걸쳐 투여하거나 용량을 치료학적 상황의 위급성에 의해 나타나는 바와 같이 비례적으로 감소되거나 증가될 수 있다.
투여 용이성 및 용량 균등성을 위한 용량 단위 형태로 비경구 조성물을 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본원에 사용된 용량 단위 형태는 치료될 포유동물 피험자에 대한 통합된 용량으로 적합한 물리적으로 구별된 단위를 말하며; 예정된 양의 활성 화합물을 함유하는 각각의 단위는 요구되는 약제학적 담체와 함께 바람직한 치료학적 효과를 생성하기 위해 계산된 예정된 양의 활성 화합물을 함유한다. 본 발명의 용량 단위형에 대한 명세는 (a) 활성 화합물의 유일한 특성 및 달성될 특수한 치료학적 또는 예방학적 효과, 및 (b) 개인에서 민감성의 치료를 위해 이러한 활성 화합물을 화합하는 당해 분야에서 고유한 제한에 의해 나타내어지거나 직접적으로 의존한다.
건선의 치료는 단일의 주기에 따라 물질의 단일 용량(또는 용량을 조절하는 1개 이상의 소-용량)의 투여에 의해 달성될 수 있다.
하나의 양태에서, 피험자에서 건선을 치료하는 방법은 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 매 4주당 약 1회의 주기에 따라 투여함으로서 피험자에서 건선을 치료함을 포함한다.
다른 양태에서, 피험자에서 건선을 치료하는 방법은 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 매 12주당 약 1회의 주기에 따라 투여함으로써, 피험자에서 건선을 치료함을 포함한다.
따라서, 단일의 주기는 단일 치료 요법으로 사용될 수 있다. 또한, 다중 주기를 단일 치료 요법에 사용할 수 있다. 예를 들면, 제1 용량을 제1 주기에 따라 투여한 후, 제1 용량 또는 제2 용량을 제2 주기에 따라 투여할 수 있다. 또한, 제2 주기에 따라 투여된 제1 용량 또는 제2 용량은 임의로 제 3 주기에 따라 투여된 제1, 제2 또는 제 3 용량을 수반할 수 있다.
하나의 양태에서, IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 주기에 따라 제1 용량으로서 피험자에게 투여되며 또한 동일한 주기로 제2 용량으로서 피험자에게 투여된다.
다른 양태에서, IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 주기에 따라 제1 용량으로서 피험자에게 투여되고 또한 제2 주기에 따라 제2 용량으로서 피험자에게 투여된다.
하나의 양태에서, IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 주기에 따른 제1 용량으로서 피험자에게 투여되고, 또한 제2 주기에 따라 제2 용량으로서 피험자에게 투여되며 또한 제 3 주기에 따라 제1, 제2 또는 제 3 용량으로서 피험자에게 투여된다.
항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량은 적어도 약 100 mg 내지 약 200 mg일 수 있으며, 적어도 약 100 mg이거나, 적어도 약 200 mg이다. 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량은 약 100 mg, 약 110 mg, 약 120 mg, 약 130 mg, 약 140 mg, 약 150 mg, 약 160 mg, 약 170 mg, 약 180 mg, 약 190 mg, 또는 약 200 mg일 수 있다. 하나의 양태에서, 제1 용량은 약 180 내지 220 mg, 185 내지 215 mg, 190 내지 210 mg, 또는 195 내지 205 mg이다. 하나의 양태에서, 제1 용량은 200 mg이다. 하나의 양태에서, 제1 용량은 약 80 내지 120 mg, 85 내지 115 mg, 90 내지 110 mg 또는 95 내지 105 mg이다. 하나의 양태에서, 제1 용량은 100 mg이다. 상기 명시한 용량에 대해 중간인 용량, 예를 들면, 105 mg, 127 mg 등이 본원에 또한 포함됨에 주목하여야 한다.
항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 용량은 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량과 동일하거나, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량과 상이할 수 있다. 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 용량은 적어도 약 100 mg 내지 약 200 mg이거나, 적어도 약 200 mg이거나, 적어도 약 100 mg이다. 달리는, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 용량은 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%(예를 들면, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59 또는 60%), 예를 들면, 약 50%, 또는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 190 내지 210%(예를 들면, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210%), 예를 들면, 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 200%이다. 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 용량은 약 100 mg, 약 110 mg, 약 120 mg, 약 130 mg, 약 140 mg, 약 150 mg, 약 160 mg, 약 170 mg, 약 180 mg, 약 190 mg, 또는 약 200 mg일 수 있다. 하나의 양태에서, 제2 용량은 약 80 내지 120 mg, 85 내지 115 mg, 90 내지 110 mg 또는 95 내지 105 mg이다. 하나의 양태에서, 제2 용량은 100 mg이다. 다른 양태에서, 제2 용량은 약 180 내지 220 mg, 185 내지 215 mg, 190 내지 210 mg, 또는 195 내지 205 mg이다. 하나의 양태에서, 제2 용량은 200 mg이다. 상기 명시된 용량에 대해 중간인 용량, 예를 들면, 105 mg, 127 mg 등이 또한 본원에 포함된다는 것을 주목해야 한다.
항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 투여의 제1 및 제2 주기는 주당 약 1회, 매 격주당 약 1회, 매 4주당 약 1회일 수 있다. 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 투여의 제2 주기는 매 30 내지 200일 당 약 1회일 수 있다.
제1 주기의 지속 기간은 약 12주, 약 8주, 약 4주, 약 2주, 또는 약 1주일 수 있다.
제2 주기의 지속 기간은 약 60주, 약 44주, 약 12주, 약 4주, 약 2주, 또는 약 1주일 수 있다.
제 3 주기의 지속 기간은 예를 들면, 약 4주, 약 12주, 약 24주, 약 36주, 약 48주 또는 약 60주일 수 있다.
따라서, 하나의 국면에서, 피험자에서 건선을 치료하는 방법은 상기 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 제1 용량의 항체, 또는 이의 항원-결합 부분; 및 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량을 매 12주당 약 1회의 주기에 따라 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료함을 포함한다.
다른 국면에서, 피험자에서 건선을 치료하는 방법은 상기 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 제1 용량의 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 매 4주당 약 1회의 주기에 따라 투여하고; 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량을 매 4주당 약 1회의 주기에 따라 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료함을 포함한다.
다른 국면에서, 피험자에서 건선을 치료하는 방법은 상기 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 제1 용량의 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 매 4주당 약 1회의 제1 주기에 따라 투여하고; 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제1 용량의 약 40 내지 60%인 제2 용량을 매 4주당 약 1회의 제2 주기에 따라 투여하고; 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 부분의 상기 제2 용량을 매 12주당 약 1회의 제 3 주기에 따라 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료함을 포함한다.
하나의 양태에서, 제2 용량은 피험자에게 건선의 발적시 투여된다. 다른 양태에서, 제2 용량은 피험자에게 건선의 발적 전에 투여된다.
건선의 발적은 피험자의 건선 면적 및 중증도 지수(PASI), 예를 들면, PASI 100 반응, PASI 90 반응, PASI 75 반응, PASI 50 반응을 측정하여 모니터링할 수 있으며, 예를 들면, 1곳의 신체 부위, 2곳의 신체 부위, 3곳의 신체 부위 또는 4곳의 신체 부위, 예를 들면, 몸통, 하지, 상지 또는 두부 및 경부의 PASI 반응을 측정함으로써 모니터링할 수 있다. 달리는, 건선의 발적은 피험자의 담당 의사의 전반적 평가(PGA) 평점에 의해 모니터링될 수 있다.
하나의 양태에서, 피험자는 치료에 대해 특이적인 반응을 달성하거나 유지한다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 PASI 50 반응을 달성하거나 유지한다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 PASI 75 반응을 달성하거나 유지한다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 PASI 90 반응을 달성하거나 유지한다. 하나의 양태에서, 피험자는 적어도 PASI 100 반응을 달성하거나 유지한다. 하나의 양태에서, PASI 50, 75, 90, 또는 100 반응은 치료 후 약(예를 들면, 적어도 약) 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 또는 52 주까지 달성된다. 하나의 양태에서, PASI 50, 75, 90, 또는 100 반응은 예를 들면, 제1 주기에 따라 제1 용량의 투여 후, 또는 제2 주기에 따라 제1 또는 제2 용량의 투여 후, 또는 제 3 주기에 따라 제1, 제2 또는 제 3 투여 후, 약(예를 들면, 적어도 약) 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52주 동안 유지된다. 하나의 양태에서, PASI 50, 75, 90 또는 100 반응은 치료 기간 전체에서 달성된 후 유지된다.
하나의 양태에서, 피험자는 0 또는 1의 PGA 점수를 달성한다. 하나의 양태에서, 0 또는 1의 PGA 점수는 치료(예를 들면, 초기 치료, 예를 들면, 0주째에) 후 약 (예를 들면, 적어도 약) 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 또는 52 주까지 달성된다. 하나의 양태에서, 0 또는 1의 PGA 점수는 예를 들면, 제1 주기에서 제1 용량의 투여 후, 또는 제2 주기에서 제1 또는 제2 용량의 투여 후, 또는 제 3 주기에 따라서 제1, 제2 또는 제 3 용량의 투여 후 약 (예를 들면, 적어도 약) 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52주까지 달성된다. 하나의 양태에서, 0 또는 1의 PGA 점수는 치료 동안 전체에서 달성된 후 유지된다.
하나의 양태에서, 피험자는 0의 PGA 점수, 즉, 총 완치율(total clearance)을 달성한다. 하나의 양태에서 0의 PGA 점수는 치료(예를 들면, 초기 치료, 예를 들면, 0주째에) 후 약 (예를 들면, 적어도 약) 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 또는 52주까지 달성된다. 하나의 양태에서, 0의 PGA 점수는 예를 들면, 제1 주기에서 제1 용량의 투여 후, 또는 제2 주기에서 제1 또는 제2 용량의 투여 후, 또는 제 3 주기에 따라 제1, 제2 또는 제 3 용량의 투여 후, 약 (예를 들면, 적어도 약) 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52 주까지 달성된다. 하나의 양태에서, 0의 PGA 점수는 치료 동안 전체에서 달성된 후 유지된다.
피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함할 수 있으며, 여기서 피험자들의 집단 중 적어도 60%는 PASI 75 반응을, 예를 들면, 약 12주까지 달성한다.
피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하며, 여기서 피험자들의 집단 중 적어도 25%는 예를 들면, 약 12주까지 PASI 90 반응을 달성한다.
피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법은 집단 내 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하며, 여기서 피험자들의 집단 중 적어도 10%는 예를 들면, 약 12주까지 PASI 100 반응을 달성한다.
피험자 또는 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법은 집단 내 피험자 또는 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함할 수 있으며, 여기서 피험자 또는 피험자들의 집단 중 퍼센트(예를 들면, 피험자들의 집단 중 적어도 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, 또는 100%)는 약 12, 24, 36, 48, 52, 또는 60주까지 적어도 PASI 50 반응을 달성한다.
피험자 또는 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법은 피험자 또는 집단 중 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함할 수 있으며, 여기서 피험자 또는 피험자들의 집단 중 퍼센트(예를 들면, 피험자들의 집단 중 적어도 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, 또는 100%)는 약 12, 24, 36, 48, 52, 또는 60주까지 적어도 PASI 75 반응을 달성한다.
피험자 또는 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법은 피험자 또는 집단 중 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함할 수 있으며, 여기서 피험자 또는 피험자들의 집단 중 퍼센트(예를 들면, 피험자들의 집단 중 적어도 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, 또는 100%)는 약 12, 24, 36, 48, 52, 또는 60주까지 적어도 PASI 90 반응을 달성한다.
피험자 또는 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법은 집단 중 피험자 또는 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함할 수 있으며, 여기서 피험자 또는 피험자들의 집단 중 퍼센트(예를 들면, 피험자들의 집단 중 적어도 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, 또는 100%)는 약 12, 24, 36, 48, 52, 또는 60주까지 적어도 PASI 100 반응을 달성한다.
피험자 또는 피험자들의 집단에서 건선을 치료하는 방법은 피험자 또는 집단 중 각각의 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함할 수 있으며, 여기서 피험자 또는 피험자들의 집단 중 퍼센트(예를 들면, 피험자들의 집단 중 적어도 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, 또는 100%)는 약 12, 24, 36, 48, 52, 또는 60주까지 적어도 0 또는 1의 PGA 점수를 달성한다.
하나의 국면에서, 치료된 피험자 또는 피험자들의 집단은 적어도 약 -6.8, -6.9, -7.0, -8.0, -8.5, -9, -10, -10.5, -11, -12, -13, -14, -15, -16, -17, -18, -19, -20 또는 그 이하의 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수 또는 평균 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수를 달성한다. DLQI에 있어서의 개선은 DLQI 점수에서의 감소, 예를 들면, 적어도 약 6.8, 6.9, 7.0, 8.0, 8.5, 9, 10, 10.5, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 또는 그 이상까지의 감소이다. 피부과 삶의 질 지수(DLQI)는, 건선이 삶의 건강-관련 품질에 영향을 미치는 정도의 환자-보고된 척도이다. DLQI는 보다 낮은 충격을 나타내는 보다 낮은 점수와 함께, 0 내지 30 범위의 점수를 수득한다.
특정 양태에서, 피험자는 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수에서 임상적으로 의미있는 감소를 달성한다. 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수에서 임상적으로 의미있는 감소는 예를 들면, DLQI 점수에서 5점 보다 큰 감소일 수 있다.
다른 국면에서, 치료된 피험자 또는 피험자들의 집단은 적어도 약 2, 3, 4, 5, 6, 또는 그 이상의 간이 36문항 건강조사 신체적 부분 일람서(PCS) 점수 또는 평균 신체적 부분 일람서(PCS) 점수를 달성한다. PCS에 있어서의 개선은 PCS 점수에서의 증가, 예를 들면, 적어도 약 2, 3, 4, 5, 6, 또는 그 이상까지의 증가이다.
다른 국면에서, 치료된 피험자 또는 피험자들의 집단은 적어도 약 3.5, 4, 4.5, 6, 6.5, 7, 또는 그 이상의 간이 36문항 건강조사 정신적 부분 일람서(MCS) 점수 또는 평균 정신적 부분 일람서(MCS) 점수를 달성한다. PCS에 있어서의 개선은 MCS 점수에서의 증가, 예를 들면, 적어도 약 3.5, 4, 4.5, 6, 6.5, 7, 또는 그 이상까지의 증가이다.
다른 국면에서, 치료된 피험자 또는 피험자들의 집단은 건선-관련 통증(VAS-Ps)에 대해 적어도 약 -25, -26, -27, -28, -29, -30, -31, -32, -33, -34, -35, -40, -45, -50 미만의 가시적 유사 규모 점수 또는 평균 가시적 유사 규모 점수에서 개선을 달성한다. VAS-Ps에 있어서의 개선은 VAS-Ps 점수에서의 감소, 예를 들면, 적어도 약 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 40, 45, 50, 또는 그 이상까지의 감소이다.
다른 국면에서, 치료된 피험자 또는 피험자들의 집단은 적어도 약 -25, -26, -27, -28, -29, -30, -31, -32, -33, -34, -35, -40, -45, -50 이하의 건선 관절염-관련 통증 (VAS-PsA)에 대한 가시적 유사 규모 점수 또는 건선 관절염-관련 통증 (VAS-PsA)에 대한 평균 가시적 유사 규모 점수를 달성한다. VAS-PsA에 있어서의 개선은 VAS-Ps 점수에서의 감소, 예를 들면, 적어도 약 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 40, 45, 50, 또는 그 이상까지의 감소이다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단은 예를 들면, 적어도 약 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%의 DLQI, TAI, VAS-Ps, Vas-PsA, MCS 및 PCS를 포함하는 어떠한 하나 이상의 HRQOL 결과에서 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률을 달성한다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단은 예를 들면, 약 12주 또는 약 52주까지 건선-관련 통증 (VAS-Ps)에 대해 적어도 약 60%, 65%, 70%, 75%, 또는 그 이상의 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률을 달성한다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단은 약 12주까지 피부과 삶의 질 지수(DLQI)에 대해 적어도 약 70%, 75%, 80% 또는 그 이상의 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률을 달성한다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단은 약 52주까지 피부과 삶의 질 지수(DLQI)에 대해 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 또는 그 이상의 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률을 달성한다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단은 약 12주까지 총 활동 장해(TAI)에 대해 적어도 약 45%, 50%, 55%, 60%, 70%, 또는 그 이상의 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률을 달성한다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단은 약 52주까지 총 활동 장해(TAI)에 대해 적어도 약 50%, 55%, 57%, 60%, 65% 또는 그 이상의 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID) 반응률을 달성한다.
다른 국면에서, 효능은 0 (손발톱 건선 없음) 내지 80(모든 10개의 손톱에 건선이 있음)의 범위인 손발톱 건선 중증도 지수 (NAPSI) 점수로 평가될 수 있다. 특정 양태에서, 피험자는 약 40, 35, 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 이하의 손발톱 건선 중증도 지수 (NAPSI) 점수를 달성한다. 특정 양태에서, 피험자는 약 2.1 이하의 손발톱 건선 중증도 지수 (NAPSI) 점수를 달성한다. 특정 양태에서, 피험자는 약 2.1 이하의 손발톱 건선 중증도 지수 (NAPSI)점수를 약 24주까지 달성한다. 특정 양태에서, 피험자는 약 1.2 이하의 손발톱 건선 중증도 지수 (NAPSI)점수를 달성한다. 특정 양태에서, 피험자는 약 1.2 이하의 손발톱 건선 중증도 지수 (NAPSI)점수를 약 52주까지 달성한다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단 중 적어도 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 또는 그 이상이 약 12주까지 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 달성하며, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 생물학적 제제로 치료되었다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단 중 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%가 적어도 하나의 PASI 75 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 생물학적 제제로 치료되었다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 78%, 또는 그 이상이 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 피험자 중 누구도 항체의 투여 전에 생물학적 제제로 치료되지 않았다.
다른 국면에서, 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 82% 또는 그 이상이 적어도 하나의 PASI 75 반응을 약 12까지 달성하며, 여기서 피험자 중 누구도 항체의 투여 전에 생물학적 제제로 치료되지 않았다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 78%, 또는 그 이상이 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 약 52주까지 달성하며, 여기서 각각의 피험자는 항체의 투여 전에 생물학적 제제로 치료되었다.
다른 국면에서, 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 79%, 80%, 82% 또는 그 이상이 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 약 52주까지 달성하며, 여기서 피험자 중 누구도 항체의 투여 전에 생물학적 제제로 치료되지 않았다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단 중 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 또는 그 이상이 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 치료된 각각의 피험자는 건선 관절염의 사전 병력을 갖는다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 78%, 또는 그 이상이 적어도 PASI 75 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 치료된 각각의 피험자는 건선 관절염의 사전 병력을 갖는다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 77%, 또는 그 이상이 적어도 PGA 0/1 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 치료된 피험자 중 어느 누구도 건선 관절염의 사전 병력을 갖지 않는다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 81%, 또는 그 이상이 적어도 하나의 PASI 75 반응을 약 12까지 달성하며, 여기서 치료된 피험자 중 어느 누구도 건선 관절염의 사전 병력을 갖지 않는다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 77%, 또는 그 이상이 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 약 52주까지 달성하며, 여기서 치료된 각각의 피험자는 건선 관절염의 사전 병력을 갖는다.
다른 국면에서, 치료된 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 79%, 또는 그 이상이 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 약 52주까지 달성하며, 여기서 피험자 중 어느 누구도 건선 관절염의 사전 병력을 갖지 않는다.
다른 국면에서, 피험자들의 집단 중 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 69%, 또는 그 이상이 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 각각의 피험자의 항체의 투여 전 기준치 PASI는 20 초과이었다.
다른 국면에서, 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 79%, 또는 그 이상이 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 각각의 피험자의 항체 투여 전 기준치 PASI는 20 이하이었다.
다른 국면에서, 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 79%, 또는 그 이상은 적어도 하나의 PASI 75 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 각각의 피험자의 항체의 투여 전 기준치 PASI는 20 초과이였다.
다른 국면에서, 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 81%, 또는 그 이상은 적어도 하나의 PASI 75 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 각각의 피험자의 항체의 투여 전 기준치 PASI는 20 이하이었다.
다른 국면에서, 피험자들의 집단 중 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 67%, 또는 그 이상은 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 각각의 피험자의 항체의 투여 전 기본 체중은 100 킬로그람 이상이었다.
다른 국면에서, 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 또는 그 이상이 적어도 하나의 PGA 0/1 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 각각의 피험자의 항체의 투여 전 기본 체중은 100 킬로그람 미만이었다.
다른 국면에서, 피험자들의 집단 중 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 72% 또는 그 이상이 적어도 하나의 PASI 75 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 각각의 피험자의 항체의 투여 전 기본 체중은 100 킬로그람 이상이었다.
다른 국면에서, 피험자들의 집단 중 적어도 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 또는 그 이상이 적어도 하나의 PASI 75 반응을 약 12주까지 달성하며, 여기서 각각의 피험자의 항체의 투여 전 기본 체중은 100 킬로그람 미만이었다.
용량 값은 완화시킬 상태의 유형 및 중증도에 따라 변할 수 있음에 주목하여야 한다. 또한, 어떠한 특수 피험자의 경우, 구체적인 용량 요법은 개개인의 요구도 및 조성물을 투여하거나 이의 투여를 관리하는 사람의 전문적인 판단에 따라 시간에 걸쳐 조절되어야 하며, 본원에 설정된 용량 범위는 단지 예이고 청구된 조성물의 범위 또는 실시를 한정하는 것으로 의도되어서는 안됨을 추가로 이해하여야 한다.
VII. 본 발명의 용도
본 발명은, IL-12 활성이 유해한 장애로 고생하는 피험자에서 IL-12 활성을 억제하는 방법을 제공한다.
IL-12는 광범위한 질환의 병태생리학에 관련되어 왔다[참조: Windhagen et al., (1995) J. Exp. Med. 182: 1985-1996; Morita et al. (1998) Arthritis and Rheumatism. 41: 306-314; Bucht et al., (1996) Clin. Exp. Immunol. 103: 347-367; Fais et al. (1994) J. Interferon Res. 14:235-238; Parronchi et al., (1997) Am. J. Path. 150:823-832; Monteleone et al., (1997) Gastroenterology. 112:1169-1178, 및 Berrebi et al ., (1998) Am . J. Path 152:667-672; Parronchi et al (1997) Am . J. Path . 150:823-832]. 본 발명은 피험자에게 본 발명의 항체 또는 항체 부분을 투여함으로써 피험자에서 IL-12 활성이 억제되도록 함을 포함하여, 이러한 질환으로 고생하는 피험자에서 IL-12 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 바람직하게는, IL-12는 사람 IL-12이고 피험자는 사람 피험자이다. 또한, 피험자는, 본 발명의 항체가 교차-반응하는 IL-12를 발현하는 포유동물일 수 있다. 여전히 또한, 피험자는 hIL-12(예를 들면, hIL-12의 투여에 의해 또는 hIL-12 형질전환의 발현에 의해)가 도입된 포유동물일 수 있다. 본 발명의 항체는 치료학적 목적(하기에 추가로 논의)으로 사람 피험자에게 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 항체는 항체가 수의과 목적으로 또는 사람 질환의 동물 모델로서 교차-반응하는 IL-12를 발현하는 비-사람 포유동물에게 투여될 수 있다. 후자와 관련하여, 이러한 동물은 본 발명의 항체의 치료학적 효능을 평가(예를 들면, 투여의 용량 및 시간 과정의 시험)에 유용할 수 있다.
본원에 사용된 것으로서, 어절 "IL-12 활성이 유해한 장애"는, 장애로 고생하는 피험자에서 IL-12의 존재가 장애의 병리생리학에 관여하거나 장애의 악화에 기여하는 인자인 것으로 밝혀지거나 추측되는 질환 및 다른 장애를 포함하는 것으로 의도된다. 따라서, IL-12 활성이 유해한 장애는 IL-12 활성의 억제가 장애의 증상 및/또는 진행을 완화시키는 것으로 예측되는 장애이다. 이러한 장애는 예를 들면, 장애로 고생하는 피험자의 생물학적 유액에서 IL-12의 농도에 있어서의 증가(즉, 피험자의 혈청, 혈장, 활막 액 등에서 IL-12의 농도에 있어서의 증가)에 의해 입증될 수 있으며, 이는 위에서 기술한 바와 같은 항-IL-12 항체를 사용하여 검출될 수 있다. IL-12 활성이 유해한 장애의 다수의 예가 존재한다. 하나의 양태에서, 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 본원에 기술된 질환 또는 장애를 치료하기 위한 치료요법에서 사용될 수 있다. 다른 양태에서, 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 본원에 기술된 질환 또는 장애를 치료하기 위한 의약의 제조에 사용될 수 있다. 소수의 비-제한된 특이적인 장애의 치료에서 본 발명의 항체 및 항체 부분은 하기에 추가로 논의된다:
A. 류마티스 관절염
인터류킨-12는 류마티스 관절염과 같은 염증성 질환에서 역할을 담당하는 것으로 암시되어 왔다. 유도성 IL-12p40 메세지는 류마티스 관절염 환자로부터의 윤활액에서 검출되며 IL-12는 류마티스 관절염 환자로부터의 윤활액에 존재하는 것으로 밝혀졌다[참조: 예를 들면, Morita et al., (1998) Arthritis and Rheumatism 41: 306-314]. IL-12 양성 세포는 류마티스 관절염 윤활막의 피막하 층(sublining layer)에 존재하는 것으로 밝혀졌다. 본 발명의 사람 항체, 및 항체 부분은 예를 들면, 류마티스 관절염, 소아 류마티스 관절염, 라임 관절염, 류마티스 척추염, 골관절염 및 통풍 관절염을 치료하는데 사용될 수 있다. 전형적으로, 항체, 또는 항체 부분은 비록 특정 질환의 경우, 항체 또는 항체 부분의 국소 투여가 유리할 수 있다고 해도, 전신적으로 투여된다. 본 발명의 항체, 또는 항체 부분은 자가면역 질환의 치료에 유용한 하나 이상의 추가의 치료제와 함께 투여될 수 있다.
류마티스 관절염에 대한 콜라겐 유도된 관절염 (CIA) 쥐 모델에서, 관절염 이전에 항-IL-12 mAb(랫트 항-마우스 IL-12 모노클로날 항체, C17.15)를 사용한 마우스의 치료는 발병을 완전히 억제하였으며 질환의 발생 및 중증도를 감소시켰다. 관절염의 발병 후 조기에 항-IL-12 mAb를 사용한 치료는 중증을 감소시켰으나 질환의 발병 후 항-IL-12 mAb를 사용한 마우스의 이후의 치료는 질환 중증도에 있어 최소 효과를 가졌다.
B. 크론병
인터류킨-12는 또한 염증성 장 질환, 크론병에서 중요한 역할을 한다. IFN-γ 및 IL-12의 증가된 발현은 크론병 환자의 장 점막에서 발생한다[참조: 예를 들면, Fais et al., (1994) J. Interferon Res. 14: 235-238; Parronchi et al., (1997) Amer. J. Pathol. 150: 823-832; Monteleone et al., (1997) Gastroenterology 112: 1169-1178; Berrebi et al., (1998) Amer. J. Pathol. 152: 667-672]. 항-IL-12 항체는 대장염의 마우스 모델, 예를 들면, TNBS 유도된 대장염 IL-2 녹아웃(knockout) 마우스, 및 최근에 IL-10 녹아웃 마우스에서 질환을 억제하는 것으로 밝혀졌다. 따라서, 본 발명의 항체 및 항체 부분은 염증성 장 질환의 치료에 사용될 수 있다.
C. 다발성 경화증
인터류킨-12는 다발 경화증의 주요 매개인자인 것으로 암시되어 왔다. 유도성 IL-12 p40 메세지 또는 IL-12 자체의 발현은 다발성 경화증 환자의 병변에서 입증될 수 있다[참조: Windhagen et al., (1995) J. Exp . Med . 182: 1985-1996, Drulovic et al ., (1997) J. Neurol . Sci . 147: 145-150]. 다발성 경화증이 있는 만성 진행형 환자에서는 IL-12의 순환하는 수준이 상승되어 있다. 다발성 경화증 환자로부터의 T-세포 및 항원-제시 세포(APC)는 Th1-유형 면역 반응을 유도하는 진행성 다발성 경화증의 기준으로서 자가-영구화 계열의 면역 상호작용을 나타내었다. T 세포로부터 IFN-γ의 증가된 분비는 APC에 의한 증가된 IL-12 생산을 초래하였으며, 이는 Th1-유형 면역 활성화 및 질환의 만성 상태를 가져오는 주기를 영구화시켰다[참조: Balashov et al ., (1997) Proc . Natl . Acad . Sci . 94: 599-603]. 다발성 경화증에서 IL-12의 역할은 다발성 경화증의 마우스 및 랫트 실험적 알레르기 뇌척수염(EAE) 모델에서 시험되어 왔다. 마우스에서 다발성 경화증의 재발-차도(relapsing-remitting) EAE 모델에서, 항-IL-12 mAb를 사용한 예비치료는 마비를 지연시키고 임상 점수를 감소시켰다. 마비의 정점에서 또는 후속된 복구 기간동안 항-IL-12 mAb를 사용한 치료는 임상 점수를 감소시켰다. 따라서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 사람에서 다발성 경화증과 관련된 증상을 완화시키기 위해 제공될 수 있다.
D. 인슐린 의존성 당뇨병
인터류킨-12는 인슐린 의존성 당뇨병(IDDM)의 중요한 매개인자로서 암시되어 왔다. IDDM은 NOD 마우스에서 IL-12의 투여에 의해 유도되었으며, 항-IL-12 항체는 IDDM의 입양 전달(adoptive transfer) 모델에서 보호성이었다. 조기 발병 IDDM 환자는 소위 "허니문 기간(honeymoon period)"을 흔히 경험하며, 이 동안에 일부 잔류성 섬세포(islet cell)가 유지된다. 이들 잔류성 섬 세포는 인슐린을 생산하며 투여된 인슐린보다 우수한 혈당 수준을 조절한다. 항-IL-12 항체를 사용한 이들 조기 발병 환자의 치료는 섬 세포의 추가의 파괴를 방지할 수 있으므로 인슐린의 내인성 공급원을 유지할 수 있다.
E. 건선
인터류킨-12 (IL-12) 및 관련된 사이토킨 IL-23은 건선에서 주요 매개인자로 암시되어 왔다. 건선은 TH1-유형 사이토킨 발현 프로파일과 관련된 급성 및 만성 피부 병변을 포함한다[참조: Hamid et al. (1996) J. Allergy Clin. Immunol. 1:225-231; Turka et al. (1995) Mol. Med. 1:690-699]. IL-12 및 IL-23 둘다는 건선에서 1T 유형 헬퍼 세포 (Th1) 면역 반응의 발달에 기여한다. 또한, IL-12 p40 및 IL-23 p40 메신저 RNA는 건선 피부 병변에서 과발현된다. 따라서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 건선과 같은 만성 피부 질환을 완화시키기 위해 제공될 수 있다.
하나의 양태에서, 본 발명은 건선을 치료하는 방법을 제공한다. 건선에 대한 치료는 흔히 국소 코르티코스테로이드, 비타민 D 유사체, 및 국소 또는 경구 레티노이드, 또는 이의 조합물을 포함한다. 하나의 양태에서, IL-12 및/또는 IL-23 항체는 이러한 일반적인 치료중 하나와 함께 또는 이의 존재하에 투여된다. 건선의 치료를 위해 IL-12 및/또는 IL-23 항체와 조합될 수 있는 추가의 치료제는 하기에 보다 상세히 기술되어 있다.
건선의 진단은 일반적으로 피부의 외관을 기초로 한다. 또한, 피부 생검, 또는 피부 조각(patch)의 부스러기(scraping) 및 배양물이 다른 피부 질환을 배제시키기 위해 요구될 수 있다. 관절 통증이 존재하거나 지속되는 경우 x-선을 사용하여 건선 관절염을 점검할 수 있다.
피험자에서 건선에 있어서의 개선은 피험자의 건선 면적 및 중증도 지수점수(PASI)로 모니터링할 수 있다. PASI를 측정하는 방법은 문헌[참조: Fredriksson and Pettersson (1978) Dermatologica 157:238 및 Marks et al . (1989) Arch Dermatol 125:235]에 기술되어 왔다. 요약하면, 지수는 5점 규모(0=증상 없음; 1=약함; 2=중증도; 3=현저함; 4=매우 현저함)를 사용하는 홍반, 경화, 및 표피탈락의 경우에 두부, 상지, 몸통 및 하지를 포함하는 4개의 해부학적 부위의 평가를 기준으로 한다. 제공된 해부학적 부위에서의 병변 정도에 따라, 영향받은 부위는 수치(0=0; 1 = <10%; 2 = 10-29%; 3 = 30-49%; 4 = 50-69%; 5 = 70-89%; 6 = 90-100%)로 지정한다. 이후에 PASI 점수를 계산하며, 여기서, PASI 점수의 가능한 범위는 가장 중증인 정도의 완전한 홍반을 나타내는 최대 점수와 함께 0.0 내지 72.0이다.
본 발명의 하나의 양태에서, IL-12 및/또는 IL-23 항체는 판형 건선, 예를 들면, 만성 판형 건선, 중등도 판형 건선, 및 중증 판형 건선, 방울 건선, 역 건선, 고름물집 건선, 보통천포창, 홍색피부 건선, 염증성 장 질환(IBD) 관련 건선, 및 류마티스 관절염(RA)과 관련된 건선을 포함하는 건선의 치료에 사용된다. 다른 양태에서, J695/ABT-874와 같은 IL-12 및/또는 IL-23 항체는 PsA와 함께 건선을 가진 피험자를 치료하는데 사용된다. 본 발명의 하나의 양태에서, IL-12 및/또는 IL-23 항체는 손발톱 건선의 치료에 사용된다.
하나의 국면에서, 본 발명은 본 발명의 항체 및 이의 항원 결합 부분, 예를 들면, ABT-874를 투여함으로써 치료하기 어려운 피험자에서 건선을 치료하는 방법을 제공한다. 치료하기 어려운 피험자는 예를 들면, 건선의 치료를 위한 생물학적 제제를 이미 투여받은 피험자, 건선 관절염의 병력을 가진 피험자, 건선이 있고 체중이 100 kg 초과인 피험자, 및 기준치 PASI가 20 초과인 피험자를 포함할 수 있다. 따라서, 하나의 국면에서, 본 발명은 본 발명의 항체, 및 이의 항원 결합 부분, 예를 들면, ABT-874를 투여함으로써 건선의 치료를 위해 생물학적 제제가 이미 투여된 피험자를 치료하는 방법을 제공한다. 구체적으로, 당해 방법은 사전에 생물학적 제제 치료를 제공받은 피험자를 선택하여 본 발명의 항체를 투여함을 포함한다. 실시예 19에 설정된 바와 같이, 데이터는 피험자의 이러한 소그룹에서 건선을 치료하는데 있어서 ABT-874의 효능을 입증한다. 다른 국면에서, 본 발명은 본 발명의 항체, 및 이의 항원 결합 부분, 예를 들면, ABT-874를 투여함으로써 건선 관절염의 병력을 가진 피험자를 치료하는 방법을 제공한다. 구체적으로, 당해 방법은 건선 관절염의 병력을 가진 피험자를 선택하여 본 발명의 항체를 투여함을 포함한다. 다른 국면에서, 본 발명은 본 발명의 항체, 및 이의 항원 결합 부분, 예를 들면, ABT-874를 투여함으로써 체중이 100kg 초과인 피험자를 치료하는 방법을 제공한다. 구체적으로, 당해 방법은, 체중이 100 kg 초과인 피험자를 선택하여 본 발명의 항체를 투여함을 포함한다. 여전히 다른 국면에서, 본 발명은 본 발명의 항체, 및 이의 항원 결합 부분, 예를 들면, ABT-874를 투여함으로써 기준치 PASI가 20 초과인 피험자를 치료하는 방법을 제공한다. 구체적으로, 당해 방법은, 항체를 투여하기 전 기준치 PASI가 20 초과인 피험자를 선택하여 본 발명의 항체를 투여함을 포함한다.
본 발명의 치료 방법에 포함된 건선의 구체적인 유형을 다음에 상세히 기술한다.
a. 만성 판형 건선
만성 판형 건선(또한 심상성 건선으로 언급됨)은 건선의 가장 일반적인 형태이다. 만성 판형 건선은 동전 크기 내지 그 이상 큰 범위의, 피부의 융기된 빨간 조각을 특징으로 한다. 만성 판형 건선에서, 판형는 단일 또는 다수일 수 있으며, 이들은 수 밀리미터 내지 수 센티미터로 크기가 다양할 수 있다. 판형는 일반적으로 비늘이 있는 표면을 가진 적색이며, 약하게 긁을 경우 빛을 반사하여, "실버리(silvery)" 효과를 생성한다. 만성 판형 건선으로부터의 병변(이는 흔히 대칭이다)은 신체 전체에서 발생하나, 무릎, 팔꿈치, 요천골 영역, 두피 및 손발톱을 포함하는 폄 표면(extensor surface)를 선호한다. 때때로 만성 판형 건선은 음경, 외음 및 굴곡(flexure)에서 발생할 수 있으나 비늘벗음은 일반적으로 부재한다. 만성 판형 건선을 가진 환자의 진단은 일반적으로 위에서 기술한 만성적인 특징을 기초로 한다. 특히, 만성 클라크 건선에서 병변의 분포, 색상 및 대표적인 실버리 비늘벗음은 만성 판형 건선의 특징이다.
b. 방울 건선
방울 건선은 특징적인 물방울 형태의 비늘벗음 판형를 갖는 건선의 형태를 말한다. 방울 건선의 발적은 일반적으로 감염, 가장 주목하게는 스트렙토코커스 인후 감염을 수반한다. 방울 건선의 진단은 일반적으로 피부의 외관, 및 최근에 인후통 병력이 있는 사실을 기초로 한다.
c. 역 건선
역 건선은, 환자가 판형 건선과 관련된 비늘벗음과는 다른, 적색 및 염증이 있는 부드럽고, 일반적으로 습윤이 있는 피부 부위를 가지는 건선의 형태이다. 역 건선은 또한 간찰부건선 또는 굽힘쪽 건선으로 언급된다. 역 건선은 대부분 겨드랑이, 서혜부, 유방 아래 및 생식기 주변 기타 피부주름 및 엉덩이에서 발생하며 나타난 위치의 결과로, 문지름 및 땀은 영향받은 부위를 자극할 수 있다.
d. 농포 건선
손발바닥 건선으로 또한 언급되는 농포 건선은, 크기 및 위치가 다양하지만, 손 및 발에서 발생하는 고름이 찬 수포(pus-filled blister)를 유발하는 건선의 형태이다. 수포는 신체의 넓은 부위에 위치하거나 퍼져있을 수 있다. 농포 건선은 따가움 및 통증 둘다가 있을 수 있으며 열을 유발할 수 있다.
e. 다른 건선 질환
IL-12 및/또는 IL-23 항체로 치료할 수 있는 건선 질환의 다른 예는 홍색피부 건선, 보통 건선, IBD와 관련된 건선, 및 류마티스 관절염을 포함하는 관절염과 관련된 건선을 포함한다.
본 발명은 어떠한 방식으로도 제한하는 것으로 고려되지 않아야 하는 다음 실시예에 의해 추가로 설명한다. 본 출원 전체에서 인용된 것으로서, 문헌 참조, 허여된 특허, 및 공개된 특허원을 포함하는 모든 인용된 참조문헌의 내용은 본원에서 참조로 표현하여 본원에 혼입된다. 또한, 본원에 첨부된 표 모두의 내용(참조: 본원에 첨부된 부록 A 및 미국 특허원 제6,914,128호의 부록 A) 및 미국 특허 제6,914,128호의 전체 내용은 본원에 참조로 혼입되어 있음을 이해하여야 한다.
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실시예
실시예 1: 중등도 내지 중증 판형 건선의 치료에 있어서 완전한 사람 IL-12/IL-23 모노클로날 항체, ABT-874의 효능
ABT-874는 인터류킨-12(IL-12) 및 IL-23에 대한 완전한 사람 항체이다. 이는 둘다 건선(Ps)의 치료시 입증된 표적인 IL-12 및 IL-23 둘다에 대해 일반적인 p40 소단위에 대해 높은 친화성으로 결합한다.
다음 연구의 목적은 중등도 내지 중증 판형 Ps를 가진 환자의 치료시 ABT-874의 피하 주사의 효능을 평가하기 위한 것이었다.
Ps가 체 표면적(BSA) 중 10% 이상에 영향을 미치고 기준치에서 건선 면적 및 중증도 지수 (PASI) 점수가 12 이상인 성인 환자가 당해 12주 동안의, 이중-맹검의, 위약-조절된 연구에 적임이었다. 환자를 6개의 아암(arm) 중 1개에 무작위 배치하였다: 1) 12주 동안 매 격주(eow)로 100-mg ABT-874; 2) 0 주째에 1개의 200-mg ABT-874; 3) 4주 동안 매주 200-mg ABT-874; 4) 12주 동안 매 격주에 200-mg ABT-874; 5) 12주 동안 매주 200-mg ABT-874; 또는 6) 위약. 1차 종점은 12주째의 ≥PASI75 반응이었다. 다른 효능 평가는 PASI50 및 의사의 국제적 평가(PGA)를 포함하였다. 1차 종점에 충족된 환자를 36-주 맹검/재치료 상에 도입시키고 반응의 상실까지의 시간에 대해 모니터링하였다.
각각의 아암에서 30명씩 총 180명의 환자를 연구에 등록하였다. 기준치 특징은 아암 및 중등도 내지 중증 Ps의 증상 사이에서 유사하였다(남성 %를 제외한 모든 평균 값): 연령, 46세, 74% 남성; Ps 기간 21년; PASI 19; 및 BSA의 25%가 영향받음. 12주째에, ≥PASI75를 달성하는 환자의 퍼센트는 5 ABT-874 아암 대 위약의 각각에서 환자의 경우 통계적으로 유의적으로 보다 더 컸다(각각 93%, 63%, 90%, 93%, 90%, 대 3%, p<0.001, ITT). 또한, ≥PASI50를 달성한 환자의 퍼센트는 5개의 ABT-874 아암 대 위약 각각에서 환자에 대해 통계적으로 유의적으로 보다 더 컸다(100%, 77%, 97%, 97%, 및 100%, 대 17%, p<0.001). 12주째에 PASI에 있어서 평균 퍼센트 감소(개선)은 ABT-874 아암의 경우 90%, 70%, 92%, 92%, 및 90%이었으며, 위약의 경우 26%이었다. 유사하게, 완치(clear)/최소의 PGA를 갖는 환자의 퍼센트는 ABT-874 아암의 경우 각각 83%, 50%, 73%, 87% 및 87%이고, 위약의 경우 3%였다.
결론적으로, ABT-874는 중등도 내지 중증의 판형 건선의 치료시 위약보다 유의적으로 보다 효과적이었다.
실시예 2: 중등도 내지 중증의 판형 건선의 치료시 완전한 사람 IL-12/-23 모노클로날 항체, ABT-874의 안전성 및 효능
ABT-874는 인터류킨 12 (IL-12) 및 IL-23에 대한 완전한 사람 항체이다. 이는 건선(Ps)의 치료시 유효한 표적인 IL-12 및 IL-23 둘다에 대해 일반적인 p40 소단위에 대해 큰 친화성으로 결합한다. 당해 제II 상 연구의 목적은 중등도 내지 중증 판형 Ps의 치료시 ABT-874의 자발적 주사의 효능 및 안전성을 연구하기 위한 것이었다.
Ps가 체 표면적(BSA) 중 ≥10%에 영향을 미치고 PASI 점수가 ≥12인 성인 환자가 당해 12주 동안의, 이중-맹검의, 위약-조절된 연구에 적임이었다. 환자를 6개의 아암 중 1개에 무작위 배치하였다: 1) 12주 동안 매 격주(eow)로 100-mg ABT-874; 2) 0 주째에 1개의 200-mg ABT-874; 3) 4주 동안 매주 200-mg ABT-874; 4) 12주 동안 매 격주에 200-mg ABT-874; 5) 12주 동안 매주 200-mg ABT-874; 또는 6) 위약. 1차 종점은 12주째의 ≥PASI75 반응이었다. 1차 종점에 충족된 환자를 36-주 맹검/재치료 상에 도입시키고 반응의 상실까지의 시간에 대해 모니터링하였다. 모든 환자를 54주에 걸쳐 안정성에 대해 평가하였다.
각각의 아암에서 30명씩 총 180명의 환자를 연구에 등록하였다. 기준치 특징은 아암들 사이에서 유사하였다(남성 %를 제외하고 나타낸 모든 평균 값): 연령, 46세, 74% 남성; Ps 기간 21년; PASI=19; 및 BSA의 25%가 영향받음. 12주째에, ≥PASI75인 환자의 퍼센트는 5 ABT-874 아암 대 위약의 각각에서 통계적으로 유의적으로 보다 더 컸다(각각 93%, 63%, 90%, 93%, 90%, 대 3%, p<0.001, ITT). 12주 동안에, ABT-874 그룹에 대한 DB 상, 감염성 AE는 23 내지 43%의 범위였고, 위약 그룹의 경우 23%이었으며, 가장 일반적인 것은 코인두염이다(ABT-874의 경우 7 내지 17%; 위약의 경우 3%). 아암들 사이에서 통계적으로 유의적인 차이가 없었다. 심각한 감염성 AE는 보고되지 않았고, 사망도 발생하지 않았다.
결론적으로, ABT-874는 중등도 내지 중증의 Ps의 치료시 위약보다 유의적으로 더 효과적이었으며, 양호한 안정성 프로파일을 갖는 것으로 여겨진다.
실시예 3: 중등도 내지 중증 판형 건선의 치료시 완전한 사람 IL-12/-23 모노클로날 항체, ABT-874를 사용한 반응의 유지
ABT-874의 효능 및 안정성을 12주째에, 제II 상, 무작위적으로 조절된 시도 및 36-주 후속 상에서 평가하였다. 다음 실시예의 목적은 중등도 내지 중증 판형 Ps의 치료에 있어서 ABT-874의 피하 주사의 당해 제II 상 연구의 두번째 12주 동안 치료요법의 중단 후 반응의 유지를 분석하기 위한 것이다.
체 표면적 부위(BSA)의 ≥10%가 영향을 받고 PASI 점수가 ≥12인 Ps을 지닌 환자가 당해 12주의, 이중 맹검, 위약-조절된 연구에 적임이었다. 환자를 6개 아암중 1개에 무작위 배치하였다:
1) 12주 동안 매 격주(eow)로 100-mg ABT-874;
2) 0주째에 1회의 200-mg ABT-874 용량;
3) 4주 동안 매주 200-mg ABT-874;
4) 12주 동안 매 격주에 200-mg ABT-874;
5) 12주 동안 매주 200-mg ABT-874; 또는
6) 위약.
1차 종점은 12주째에 ≥PASI75 반응이었다. 1차 종점을 충족하는 환자를 36-주 맹검/재치료 상에 도입시켰다. 연구 약물을 사용한 치료를 중단하고, 환자를 반응의 상실(PASI 점수에서의 감소, 36주 후속 기간 동안 특정 시간, <PASI 50 까지)을 모니터링하였다. PASI 반응의 유지는 24주에 걸쳐 평가하였다.
총 180명의 환자를 각각의 아암에서 30명씩 등록하였다. 기준치 특징은 아암들사이에서 유사하였다(남성 %를 제외하고 나타낸 평균값): 연령, 46세, 남성 74%; Ps 기간 21년; PASI=19; 및 BSA의 25%가 영향받음.
12주째에, ≥PASI75인 환자의 퍼센트는 5개의 ABT-874 아암 대 위약 각각에서 통계적으로 유의적으로 더 컸다(표 1a). 24주째에, 활성 치료 아암들에서 PASI 75 반응자중 실질적인 퍼센트가 적어도 PASI 50 반응을 유지하였다.
[표 1a]
Figure pat00017
결론적으로, ABT-874는 중등도 내지 중증의 판형 Ps의 치료시 위약보다 유의적으로 보다 더 유효하였다. PASI 75 반응자들의 실질적인 퍼센트는 활성 치료요법의 중단 후 24주째에 당해 반응을 유지하였다.
실시예 4: 중등도 내지 중증 만성 판형 건선의 치료시 완전한 사람 IL-12/-23 모노클로날 항체, ABT-874의 안정성 및 효능
다음 실시예의 목적은 임상적으로 안정한 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선 환자의 치료시 위약과 비교하여 사람 IL-12/23 모노클로날 항체(ABT-874)의 용량 범위의 효능 및 안정성을 입증하기 위한 것이었다.
I. 물질 및 방법
A. 연구 설계: 다음 연구는 12주의, 다중심, 무작위 배치된, 이중-맹검의 제II 상의, 미국(16개 지역) 및 캐나다(8개 지역)에서 24개 도심에서 수행된 위약-조절된 시도였다. ABT-874(제조원: Abbott Laboratories, 일리노이주 애보트 파크 소재)는 IL-12/23 p40 소단위 단백질에 대해 고 친화성을 가진 유전적으로 가공된 상보성-결정 영역을 지닌 사람 모노클로날 항체이다. 환자를 1:1:1:1:1:1 비로 무작위로 나누어서 6개 치료 중 하나를 제공하였다: 0주째 1개 용량으로 200 mg의 ABT-874(200 mg x 1); 12주 동안(100 mg eow) 매 격주(eow)로 100 mg의 ABT-874; 처음 4주(200 mg x 4) 동안 200 mg의 ABT-874; 12주(200 mg eow) 동안 매 격주에 200 mg의 ABT-874; 12주(200 mg 매주) 동안 매주 200 mg의 ABT-874; 또는 위약. 12주 후에, 건선 면적 및 중증도 지수 (PASI 75) 반응에서 적어도 75% 감소를 달성한 모든 환자를 36-주 맹검 관측/재치료 상을 지속하였다.
B. 환자: 환자는 18세 이상의 연령이었고 적어도 6개월 동안 건선의 임상 진단(환자 면담 및 관찰자에 의한 물리적 시험을 통한 진단의 확인으로 측정), 스크리닝 전 적어도 2개월 동안 안정한 판형 건선 및 피험자 면담에 의해 측정된 것으로서 기준치 방문시 ≥ 10% 체 표면적(BSA) 포함으로 정의된 중등도 내지 중증의 판형 건선, 기준치 방문시 ≥ 12의 PASI 점수, 및 기준치 방문에서 적어도 중증도 질환의 의사의 전반적 평가(PGA)를 가졌다.
환자가 전신 또는 생물학적 제제 항-IL-12 치료요법에 대한 사전 노출; 비판형 건선; 기준치 방문 전 다음 치료요법을 중단하는데 불능: 사전에 적어도 2주째에 국소 건선 치료요법, 사전에 적어도 2주째 자외선 B 광 광선 치료요법, 사전에 적어도 4주째에 건선-자외선-광 광선 치료요법, 사전에 적어도 4주째 전신 치료요법, 및 사전에 적어도 12주째에 생물학적 제제 치료요법; 연구 동안 경구 또는 주사가능한 코르티코스테로이드의 섭취 요구(안정한 의학 상태를 위한 흡입된 코르티코스테로이드는 허용되었다); 스크리닝 전 10년내 입원을 필요로 하는 천식의 악화; 중증 감염에 대한 감염 또는 위험 인자; 성공적으로 치료된 기본 세포 암종(편평 세포 암종의 병력을 가진 환자는 제외) 또는 자체내 경부 암종 이외의 악성 종양의 병력; 또는 면역글로불린 G-함유 제제(예를 들면, 정맥내 감마 글로불린, 융합 단백질 또는 모노클로날 항체)에 대한 주요 면역학적 반응(예를 들면, 혈청병(serum sickness) 또는 유사아나필락시스 반응)의 병력을 가진 경우 부적격이었다.
환자를 코르티코스테로이드, 배합(베타- 또는 알파-하이드록시산 제외) 연화제, 또는 제VI 또는 VII류 저-효능 국소 코르티코스테로이드를 사용하여 연구 동안 이들의 손바닥, 발바닥, 얼굴, 염증 부위 및 서혜부 부위를 계속 치료하도록 하였다. 이러한 국소 건선 치료요법의 적용은 연구 방문 24시간내에 발생하지 않았다. 생 바이러스 제제를 사용한 예방접종은 연구 동안 ABT-874를 사용한 투여 전 1개월 내에, 또는 연구 약물의 최종 용량이 투여된 후 1개월 동안 허용되지 않았다.
다음의 임상적으로 유의적인 비정상적인 실험실 결과중 어느 것의 발생도 연구로부터 환자가 즉각적으로 포기하도록 하였다: 정상의 상지의 >5배의 아스파르테이트 트랜스아미나제 또는 알라닌 트랜스아미나제; 정상의 상지의 >3배의 혈청 총 빌리루빈; 정상의 상지의 >3배의 혈청 크레아티닌; 정상의 ㅏㅇ지의 >5배의 크레아틴 포스포키나제; <8 g/dL의 헤모클로빈; <2 x 109/L의 백혈구 세포 수; 또는 <75 x 109/L의 혈소판 수.
C. 효능 평가: 주요 효능 평가는 기준치 점수와 비교하여 PASI 점수에서 적어도 75% 감소로 정의된, 12주째에 PASI 75 반응을 달성하는 환자의 퍼센트였다. PASI는 건선 병변의 중증(홍반, 경화, 및 상피탈락의 측면에서) 및 BSA 관여의 정도의 척도이다. PASI 점수는 0(건선 없음) 내지 72(중증 병)의 범위이다(참조: Fredriksson T, Pettersson U. Dermatologica 1978; 157: 238-44). 다른 효능 척도는 1, 2, 4, 및 8주째에 적어도 PASI 75를 달성한 환자의 퍼센트; 1, 2, 4, 8, 및 12주째에 적어도 PASI 50 또는 PASI 90를 달성한 환자의 퍼센트; 및 12주 및 1, 2, 4, 및 8주째에 완치 또는 최소의 PGA를 획득한 환자의 퍼센트를 포함하였다. PGA는 질환의 중증도를 6-점 규모에서 측정하며, 이는 0(질환이 없거나 또는 완치) 내지 5(매우 심각)으로 측정한다(참조: Ko H-S. Clinical trial design in psoriasis. Presented at: 49th Meeting of the Dermatologic and Ophthalmologic Advisory Committee; March 20, 1998; Bethesda, MD).
D. 안정성 평가: 부작용, 실험실적 데이터 및 활력 징후를 연구 전체에서 평가하였다. 환자를 감염, 악성 암 및 면역학적 반응의 신호에 대해 밀접하게 모니터링하였다. 응급-치료 AE는 0주와 최종의 포함(the last nonmissing) 약물 투여 후 45일의 초반 사이 또는 최초의 재치료 용량(36주 시도를 지속하는 환자들의 경우) 1일 전에 발생한 사건으로 정의하였다.
E. 통계적 분석: 시료 크기를 nQuery Advisor® 4.0(제조원: Statistical Solutions, 매사츄세츠주 사우구스 소재)을 사용하여 계산하였다. 위약 그룹에서 환자의 15%가 12주째에 PASI 75 반응을 달성할 수 있다고 추정하여, 연구 설계자들은, 각각의 용량 그룹내 26의 시료 크기가 0.05 2-측면의 유의성 수준에서 90% 분말을 사용한 피셔 정확도 시험(Fisher exact test)을 이용하여 처리된 그룹으로부터 적어도 45%의 차이를 검출하는데 적절할 수 있음을 측정하였다. 당해 연구는 각각의 그룹에서 환자가 30명인, 대략 180명의 환자를 등록하도록 설계되었다.
치료-의사가 있는 집단은 0주째 무작위 배치된 모든 환자를 포함하였으며 연구 약물의 적어도 1회 주사를 제공받았다; 당해 집단은 효능 분석에 사용하였다. 모든 시험을 α≥0.05에서 수행하였다. 비반응자 산입을 모든 효능 분석에 사용하였으며; 어떠한 방문에서도 PASI 또는 PGA 점수를 잃은 환자를 방문시 비반응자로 고려하였다. 상실된 데이터의 영향을 평가하기 위해, 12-주 데이터의 민감성 분석을 최종-관측-차기-이월 방법(last-observation-carried-forward method)을 사용하여 완료하였다. 12주째에 PASI 75 반응의 주요 분석을 다음 순서를 사용하여 수행함으로써 다양성에 대해 조절하였다: 주당 200 mg 대 위약, 격주 200 mg 대 위약, 격주 100 mg 대 위약, 200 mg x 4 대 위약, 및 200 mg x 1 대 위약. PASI 점수에서 평균 퍼센트 변화에 대한 각각의 ABT-874 치료 그룹과 위약 그룹 사이의 치료 차이를 인자들로서 기준치 PASI 점수 및 치료 그룹을 사용하여, 다양성의 분석을 사용하여 평가하였다. 안정성 분석은 연구 약물의 적어도 1회 주사를 제공받은 모든 환자를 포함한, 안정성 집단을 사용하여 수행하였다.
II. 결과
A. 환자: 총 180명의 환자를 등록시켰으며 6개의 치료 그룹 중 1개 그룹에게 무작위 배치하였다(도 1): 환자의 대부분(위약-치료된 환자의 76.7% 및 모든 ABT-874 치료 그룹 환자의 98%)은 연구의 12-주 부분을 완료하였다.
환자를 모두 인구학적 특징 및 질환 활성과 관련하여 치료 그룹을 따라 잘 조화를 이루었다(표 1b). 환자는 주로 남성(74.4%) 및 백인(92.2%)이었다. 평균 BSA 관여율은 25%이었고 평균 PASI 점수는 18.8이었다.
B. 효능: 12주째에 PASI 75 반응의 1차 종점을 달성하는 환자의 퍼센트는 위약 (3.3%, 30명 중 1명)과 비교하여 ABT-874 치료 그룹(200 mg x 1: 63.3%, 30명 중 19; 매 격주에 100 mg: 93.3%, 30명 중 28명; 200 mg x 4: 90.0%, 30명 중 27명; 매 격주에 200 mg: 93.3%, 30명 중 28명; 매주 200 mg: 90.0%, 30명 중 27명)의 모두에서 통계적으로 유의적으로 보다 더 컸다((p<0.001). 당해 시도의 비교적 짧은 기간 동안, 모든 ABT-874 치료 그룹에서 PASI 75 반응은 200 mg x 1 치료 그룹을 제외하고는 유사하였다(도 2).
인구학(성별, 연령, 인종 및 체중), 기준치 질환 특성(건선 관절염의 병력, BSA, 및 PASI 점수), 및 연구 치료(전신적 생물학적 제제 및 비생물학적 제제, 국소 및 광선 치료요법)의 제공 12개월내 건선에 대한 기준치 치료요법에 의한 소그룹 분석은, 각종 소그룹내에서 ABT-874-치료된 환자가 12주째에 높은 수준의 PASI 75 반응을 지속적으로 달성하였음을 입증하였다.
보다 높은 ABT-874 용량 그룹의 거의 100%가 12주까지 적어도 PASI 50 반응을 획득하였다(200 mg x 1: 76.7%, 30명 중 23명; 매 격주에 100 mg: 100.0%, 30명 중 30명; 200 mg x 4: 96.7%, 30명 중 29명; 매 격주에 200 mg: 96.7%, 30명 중 29명; 주당 200 mg: 100.0%, 30명 중 30명; 위약: 16.7%, 30명 중 5명; 각각 위약과 비교하여 p<0.001). 12주째에 적어도 PASI 90 반응을 달성하는 환자의 퍼센트는 다음과 같이, 위약과 비교한 경우 ABT-874 치료 그룹 중 모두가 아닌 1개 그룹(200　mg x 1)에서 통계적으로 유의적으로 더 높았다(p<0.001): 200　mg x 1: 16.7%, 30명 중 5명; 격 주당 100 mg: 53.3%, 30명 중 16명; 200 mg x 4: 63.3%, 30명 중 19명; 격주당 200　mg: 76.6%, 30명 중 23명; 주당 200 mg: 53.3%, 30명 중 16명; 및 위약: 0%, 30명 중 0명. 또한, 12주까지, 모든 ABT-874 치료 그룹에서 유의적으로 보다 보다 많은(p<0.001) 환자가 다음과 같이, 위약 그룹의 환자와 비교하여 완치 또는 최소의 PGA 비를 달성하였다: 200 mg x 1: 50.0%, 30명 중 15명; 격주당 100 mg: 83.3%, 30명 중 25명; 200 mg x 4: 73.3%, 30명중 22명; 격주당 200 mg: 86.7%, 30명 중 26명; 매주 200 mg: 86.7%, 30명 중 26명; 대 위약: 3.3%, 30명 중 1명.
12주째에 PASI 100 반응의 1차 종점을 달성하는 환자의 퍼센트는 위약 (0%, 30명 중 0명)과 비교하여, 다음 ABT-874 치료 그룹(격주당 200 mg: 46.7%, 30명 중 14명; 매주 200 mg: 36.7%, 30명 중 11명)에서 통계적으로 유의적으로 더 높았다(p<0.001).
ABT-874에 대한 반응은 신속하였다. 기준치로부터 PASI 점수에서 평균 퍼센트 개선은 시간에 걸쳐 모든 ABT-874 치료 그룹의 경우 증가하였고(도 3) 각각의 시점에서 위약과 비교하여 각각의 ABT-874 치료 그룹에서 통계적으로 유의적으로 더 높았다(p<0.001, 1주째에 격 주 그룹 100 mg의 경우 제외, p≥0.023).
C. 안전성: ABT-874 치료요법은 일반적으로 우수하게 내성이었다(표 2). ABT-874로 치료한 1명(0.7%)의 환자는 국소화된 피부 탈색으로 인하여 연구를 중단하였다; 위약으로 치료한 2명(6.7%)의 환자는 건선 관절병으로 인하여 1명, 난소 암으로 인하여 1명이 연구를 중단하였다. 2명(1.1%)의 환자는 심각한 부작용(AE)을 경험하였다; 1명의 위약-치료한 환자는 37일째에 난소 암으로 진단되었으며, 1명의 ABT-874-치료된 환자(200 mg x 1)는 10일째에 늑연골염으로 진단되었다. 어느 환자도 심근 또는 뇌경색증을 경험하지 않았으며, 사망은 없었다.
특정 용량의 ABT-874를 제공받은 환자는 위약을 제공받은 환자보다 상당히(p=0.033) 더 유사하게 연구 약물(ABT-874: 36.0%, 150명 중 54명; 위약: 10.0%, 30명 중 3명; 표 2)과 적어도 가능하게 관련된 AE를 경험하였고; 이들 AE 중 대부분은 주사 부위와 관련되었다(주사-부위 반응, 홍반, 가려움 또는 자극).
대부분의 AE는 약하였다(ABT-874-치료된 환자의 46.0%[150명 중 69명] 및 위약-치료된 환자의 30.0%[30 명 중 9명]에서 약한 AE). 대부분의 일반적인 AE는 주사-부위 반응이었으며, 특정 용량의 ABT-874로 치료한 환자의 16.7%(150명 중 25명)에서 발생하였다(위약-치료된 환자의 경우 주사-부위 반응은 보고되지 않았다; p=0.028; 표 3). 위약-치료한 그룹과 비교하여 ABT-874-치료된 환자에서 다른 AE의 발생들 사이에 통계적으로 유의적인 차이는 없었다. 다음으로 가장 흔히 보도된 AE는 코인두염 및 상기도 감염이었다.
감염성 AE는 모든 환자 중 32.8%(180명 중 59명)(위약: 23.3%, 30명 중 7명; 모든 ABT-874-치료된 환자: 34.7%, 150명 중 52명)로 보고되었다. 특정의 ABT-874 치료 그룹에 대해 보고된 가장 일반적인 감염성 AE는 코인두염(12.0%, 150명 중 18명), 상기도 감염(10.7%, 150명 중 16명), 및 기관지염 및 바이러스 감염(둘다 2.7%, 150명 중 4명)이었다. 심각한 감염성 AE는 보고되지 않았다.
2명의 환자가 연구 동안 악성 암인 것으로 보고되었다. 1명의 위약-치료된 환자는 난소 암으로 진단되었으며, 이는 129일째에 계속 진행중이었다. 1명의 ABT-874-치료된 환자(200　mg x 4)는 비-흑색종 피부 암(평편 세포 암종)으로 진단되었으며 이는 133일째에 완치되었다. 당해 환자에 대한 의학적 병력은 2005년 3월에 성장한 양성 피부 성장의 제거를 포함하였다.
위약과 비교하여, 임상적으로 유의적인 혈액학, 화학(혈당 농도 포함), 또는 활력 징후 변화가 없었다.
[표 1b]
Figure pat00018
[표 2]
Figure pat00019
[표 3]
Figure pat00020

III. 결론
당해 실시예에서 기술된 제II 상의, 다중심, 무작위 배치된, 이중-맹검의, 위약-조절된 시도는 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선의 치료시 ABT-874의 통계적으로 및 임상적으로 유의적인 효능을 입증하였다. ABT-874 200 mg x 1개 치료 그룹을 제외하고는, 모든 ABT-874 치료 그룹 중 90% 또는 그 이상의 환자는 위약-치료된 환자의 3.3%와 비교하여, 12주까지 PASI 75 이상을 달성하였다. 단지 1회 용량의 연구 약물(200 mg x 1)을 제공받은 그룹에서조차, 환자의 대부분(63.3%)이 12주까지 적어도 PASI 75를 달성하였다. 또한, ABT-874로 치료한 한자의 거의 100%가 PASI 50 이상에 도달하였으며, 이는 12주까지 임상적으로 유의적인 개선으로 고려된다(참조: Carlin CS, Feldman SR, Krueger JG, Menter A, Krueger GG. J Am Acad Dermatol 2004; 50: 859-66). PASI 90 및 완치 또는 최소의 PGA와 같은, 다른 제2의 종점에 대한 결과는 주요 효능 분석과 일치하며 이를 뒷받침하였다.
ABT-874에 대한 반응은 신속하였다. 위약 치료된 환자와 ABT-874-치료된 환자 사이에서 통계적으로 유의적인 분리는 PASI 점수에서 평균 퍼센트 개선에 대해 1주 정도로 빨리 발생하였다. 개선은, 심지어 ABT-874 200 mg x 1 및 200 mg x 4 용량 그룹에서의 환자에 대해서 조차, 시도 12주 동안 지속되었다.
ABT-874는 우수하게 견뎌내었으며, 대부분의 AE는 약하였다. 비록 ABT-874-치료된 환자는 연구 약물과 적어도 가능하게 관련된 AE를 유의적으로 보다 더 경험하는 경향이 있었지만, 이들중 대부분은 주사 부위-관련 AE이었다(주사-부위 반응, 홍반, 가려움, 또는 자극). 증가된 용량의 ABT-874와 AE의 증가된 발생 빈도 사이에 명백한 관련은 없었다. 흥미롭게도, 심근 또는 뇌 경색은 없었다.
면역학-관련 현상은 항-IL-12/23 항체를 제공받은 환자의 경우 특히 흥미롭다. 가장 흔히 보고된 감염성 AE는 코인두염, 상기도 감염, 기관지염, 및 바이러스 감염이었다. 당해 시도 기간 동안 보고된 중증 감염성 AE는 없었다. 연구 동안 진단된 2명의 악성 암 중, 난소 암은 위약-치료된 환자에서 진단되었고, 비-흑색종 피부 암은 양성 피부 성장의 병력을 가진 ABT-874-치료된 환자에서 진단되었다.
요약하면, ABT-874는 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선을 지닌 환자의 치료에 통계적으로 및 임상적으로 유의적인 잇점을 입증하였으며 우수하게 견뎌내었다.
실시예 5: 중등도 내지 중증의 판형 건선의 치료시 완전한 사람 IL-12/-23 모노클로날 항체, ABT-874를 사용한 반응의 유지
ABT-874의 효능 및 안전성을 12주째의, 제II 상, 무작위 배치되어 등록된 시도 및 36-주 후속 상에서 평가하였다. 다음 실시예의 목적은 중등도 내지 중증 판형 Ps의 치료시 ABT-874의 피하 주사의 당해 제II 상 연구의 제2의 12주 동안 치료요법의 중단 후 반응의 유지를 분석하기 위한 것이다.
체 표면적(BSA)의 ≥10%가 영향받고 PASI 점수가 12 이상인 성인이 당해 12-주, 이중-맹검, 위약-조절된 연구에 적임이었다. 환자를 6개 암 중 1개에 무작위 배치하였다:
1) 12주 동안 100-mg ABT-874 매 격주 (eow);
2) 0주째에 1회의 200-mg ABT-874 용량;
3) 4주 동안 매주 200-mg ABT-874;
4) 12주 동안 매 격주에 200-mg ABT-874;
5) 12주 동안 매주 200-mg ABT-874 또는
6) 위약.
1차 종점은 12주째에 ≥PASI 75 반응이었다. 1차 종점을 충족시키는 환자를 36-주 맹검 재치료 상에 도입하였다. 연구 약물을 사용한 치료를 중단하고, 환자를 PASI 50, PASI 75 및 PASI 90 반응을 포함하는, 36주 후속 기간 동안 각종 시기에 PASI 점수에 대해 모니터링하였다. PASI 반응의 유지는 24주에 걸쳐 평가하였다.
총 180명의 환자를 각각의 아암에 30명씩 등록하였다. 기준치 특징은 아암 사이에서 유사하였다(남성 %를 제외하고 평균 값을 나타냄): 연령, 46세, 남성 74%; Ps 기간 21년; PASI=19; 및 BSA의 25%가 영향받음.
12주째에, ≥PASI 75인 환자의 퍼센트는 5개의 ABT-874 아암 대 위약 각각에서 통계적으로 유의적으로 보다 더 컸다(표 4). 24주째에, 활성 치료 암에서 PASI 75명의 반응자 중 실질적인 퍼센트가 적어도 >PASI 50의 PASI 점수를 유지하였다. 또한, 활성 치료 아암에서 PASI 75 반응자의 실질적인 퍼센트는 또한 >PASI 75의 적어도 PASI 점수, 및 >PASI 90의 PASI 점수를 유지하였다(표 4 및 도 4a 내지 4c). 24주 기간 동안 시간에 걸친 PASI 75 반응을 유지하는 환자의 퍼센트는 도 4d에 나타낸다.
[표 4]
Figure pat00021
결론적으로, ABT-874는 중등도 내지 중증의 판형 Ps의 치료시 위약보다 유의적으로 보다 효과적이었다. PASI 75 반응자의 실질적인 퍼센트는 활성 치료요법의 중단 후 24주째에 > PASI 50, > PASI 75, 및 > PASI 90 반응을 유지하였다.
실시예 6: 중등도 내지 중증의 판형 건선의 치료시 완전한 사람 IL-12/-23 모노클로날 항체, ABT-874를 사용한 재-치료 반응의 유지
ABT-874의 효능 및 안전성을 48-주, 제II 상의, 12주의 초기 치료상 및 초기 치료에 반응하는 환자의 36주의 재치료상을 포함한 무작위 배치된 조절된 시도에서 평가하였다. 초기 12-주 효능 결과 및 반응 결과의 유지는 상기 실시예에 기술되어 있다. 다음 실시예의 목적은 중등도 내지 중증의 판형 Ps의 치료시 ABT-874의 피하 주사의 이러한 제II 상 연구의 이들의 초기 반응을 상실한 환자에서 36-주 재-치료/후속 상 동안 재-치료 반응을 시험하는 것이다. 다음 실시예의 추가의 목적은 48주에 걸쳐 중등도 내지 중증의 판형 Ps의 치료시 ABT-874의 피하 주사의 안전성을 시험하기 위한 것이었다.
기준치에서, 인구학 및 임상 특징은 치료 그룹에 걸쳐 유사하였다(하기 표 5에 요약됨).
[표 5]
Figure pat00022
체 표면적의 ≥10% 가 영향받은 건선을 지니고 건선 면적 및 중증도 지수 (PASI)점수가 12인 성인을 6개 아암 중 1개에 무작위 배치하였다: 1) 0주째에 1회의 200-mg 용량 ABT-874; 2) 12주 동안 매 격주(eow)로 100 mg의 ABT-874; 3) 4주 동안 매주 200 mg의 ABT-874; 4) 12주 동안 매 격주에 200 mg의 ABT-874; 5) 12주 동안 매주 200 mg의 ABT-874; 또는 6) 위약. 1차 종점은 12주째에 ≥PASI 75 반응이었다. 1차 종점에 충족하는 환자를 36-주 재-치료 상에 도입하였다. 연구 약물을 사용한 치료를 중단하고, 12 내지 36주 동안 반응을 상실한 환자(≥PASI 50)에게 초기 12-주 기간 동안 지정된 동일한 용량의 요법으로 재-치료를 제공하였다. 재-치료는 12주 동안 지속하였다. 기질과 상관없이, 모든 환자를 연구의 전체 기간 동안 또는 중단할 때까지 모니터링하였다.
초기 등록된 180명의 환자 중, 130명(1명 위약)을 재치료 상에 도입시키고 58명(모두 ABT-874)을 재-치료하였다. 12주째 및 이후에 재-치료 후 12주째에 다시 ≥PASI 75를 달성한 환자의 퍼센트는 각각의 그룹에 대해 다음과 같았다: 각각 1회의 200-mg 용량, 63% 대 55%; 매 격주에 100 mg, 93% 대 94%; 4주 동안 주당 200 mg, 90% 대 69%; 매 격주에 200 mg, 93% 대 75%; 및 매주 200 mg, 90% 대 83%. 재 치료한 총 58명의 환자중, 76%가 재-치료 후 12주째에 ≥PASI 75를 달성하였다.
재-치료된 환자의 경우 시간에 걸친 PASI 점수에서의 개선은 도 5a 내지 5b에 나타낸다. 구체적으로, 도 5a는 PASI 반응자에서 4주 내지 12주에 PASI 점수에서 기준치로부터의 평균 개선 퍼센트를 나타내고, 도 5b는 PASI 75 반응자에서 재치료 후 4 내지 12주째에 PASI 점수에서 기준치로부터의 평균 개선 퍼센트를 나타낸다.
재-치료 후 12주째에 ≥PASI 50을 달성한 환자의 퍼센트는 각각의 그룹의 경우 다음과 같았다: 1회의 200-mg 용량, 82%; 매 격주에 100 mg, 100%; 4주 동안 매주 200 mg, 77%; 매 격주에 200 mg, 83%; 및 매주 200 mg, 100%. 재 치료된 총 58명의 환자 중, 88%가 재-치료 후 12주째에 ≥PASI 50을 달성하였다.
재-치료 후 12주째에 "완치" 또는 "최소"의 PGA를 달성한 환자의 퍼센트는 각각의 그룹에 대해 다음과 같았다: 1회의 200-mg 용량, 36%; 매 격주에 100 mg, 75%; 4주 동안 매주 200 mg, 62%; 매 격주에 200 mg, 67%; 및 매주 200 mg, 83%. 재치료된 총 58명의 환자 중, 64%가 재-치료 후 12주째에 "완치" 또는 "최소"의 PGA를 달성하였다.
48주에 걸쳐 하향 순서로 적어도 1개의 치료 그룹에서 ≥5%로 발생하는 부작용 현상(AEs)은: 코인두염, 주사-부위 반응, 상기도 감염, 두통, 고혈압, 및 관절통이었다. 48주에 걸쳐 응급-치료 부작용 현상의 개관은 하기 표 6에 나타낸다. 특정의 치료 그룹에서 ≥5% 발생 빈도를 갖는 응급-치료 부작용 현상은 하기 표 7에 나타낸다.
[표 6]
Figure pat00023
[표 7]
Figure pat00024
앞서의 데이터는, ABT-874가 중등도 내지 중증의 건선의 치료에 매우 효과적이었음을 입증한다. 반응의 상실 및 재-치료시, 환자의 대부분은 PASI 75 반응을 재-달성할 수 있었다. 또한, ABT-874는 장기간에 양호한 안전성 프로파일을 갖는 것으로 나타난다.
실시예 7: 정상의 건강한 자원자에서 완전한 사람 IL-12/-23 모노클로날 항체, ABT-874의 약력학
ABT-874의 내성, 안전성, 및 약력학(PK)를 무작위 배치된, 이중-맹검의, 위약-조절된 용량-범위 연구에서 평가하였다. 다음 실시예의 목적은 건강한 자원자에서 정맥내(IV) 및 피하(SC) 주사의 약력학을 시험하기 위한 것이다.
주요 포함 기준은 다음과 같았다:(i) 18세 내지 45세 사이의 건강한 남성 자원자; (ii) 스크리닝 시험(물리적 시험, 활력 징후, 심전도, 생화학, 혈액학, 뇨분석, 혈청학); 및 (iii) 연구에 도입하기 전 12개월내 정상인 흉부 x-선. 주요 제외 기준은 다음과 같았다: (i) 하루에 10개피 이상의 흡연; (ii) 하루에 30g 이상의 알코올 음주; (iii) 양성 뇨 약물 스크리닝; (iv) 특히 마이코박테리움 투베르쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis)와 같은 세포내 세균 병원체에 의한 만성 감염; 및 (v) 사전 2년내 입원 또는 정맥내 항생제를 요하는 주요 감염.
젊은(18 내지 45세 연령), 건강한 남성 자원자에게 2-기간 교차(2 x 2 라틴정방형) 설계에서 0.1, 0.3, 1.0, 또는 5.0 mg/kg ABT-874의 2개의 동일 용량(8주 간격으로 1회의 정맥내 및 1회의 피하 투여). ABT-874 농도의 측정을 위한 혈액 시료를 제1의 용량(0) 및 투여 후 0.5, 1, 1.5, 2, 4, 8, 12, 24, 48, 72, 120, 168, 336, 504 및 672　시간째에 수집하였다. ABT-874의 혈청 농도를 효소-결합된 면역흡착 검정으로 측정하였다.
ABT-874 혈청 농도를 개별적으로 표로 만들어서 통계적 특징(기하학적 평균 및 기하학적 표준 편차)을 기술하고 정맥내 및 피하 치료 및 각각의 치료 그룹에 대해 개별적으로 및 평균, 중간 및 기하학적 평균 대 시간 곡선으로 나타내었다. 다음 PK 매개변수를 비구획 방법을 사용하여 평가하였다:
Cmax 최대 혈청 농도(㎍/mL)
Tmax Cmax에 도달하는 시간(hr)
AUC 혈청 농도-시간 곡선 아래 영역(㎍ x hr/mL)
t½ 반감기(hr)
CL 완치율(mL/hr)(정맥내 투여의 경우)
Vz 분포 용적(mL) 정맥내 투여의 경우)
CL/F 외견상 CL (mL/hr) (피하 투여의 경우)
V/F 외견상 Vz (mL)(피하 투여의 경우)
총 64명의 환자를 무작위 배치하였다: 각각의 용량 그룹에 대해 12명에게 ABT-874를 제공하고 4명에게 위약을 제공하였다. ABT-874는 정맥내 투여 후 쌍-지수 역학(bi-exponential kinetics)를 따라 투여 후 대략 7일 째에 종료 상에 도입하는 것으로 나타났다. 0.1-, 0.3-, 1.0-, 및 3.0-mg 정맥내 용량에 대한 평균 ± SD 종료 반감기는 각각 81.2±5.6, 147±73.2, 208±79.2, 및 196±55.4 시간이었다. 0.1-, 0.3-, 1.0-, 및 3.0-mg 피하 용량에 대한 평균±SD 종료 반감기는 각각 221±103, 161±92.6, 210±90.9, 및 208±79.2 시간이었다. 피하 투여에 대한 평균 종료 반감기는 81.2±55.6시간 내지 208±79.2 시간의 범위였다. 피하 투여에 대한 평균 종료 반감기는 161±92.6 시간 내지 221±103 시간이었다. 전체 평균 종료 반감기는 8 내지 9일이었다.
ABT-874의 약력학(약물의 최대 농도[Cmax] 또는 곡선 아래 면적[AUC])는 정맥내 및 피하 투여 둘다 이후 용량에 비례하여 증가하였다. 정맥내 및 피하 투여에 대한 혈청 농도-시간 곡선은 각각 도 6a 및 6b에 나타낸다. 분포 용적은 정맥내 투여후 대략 8 내지 10L 내지 피하 투여 후 24 내지 67L의 범위였다. 피하 투여 후, Cmax에 도달하는 시간은 대략 3 내지 4일이었다. 피하 투여 후 생체 이용률은 평가된 용량에 대해 42% 내지 62%의 범위였다. Cmax(㎍/mL의 최대 혈청 농도), AUC(혈청 농도-시간 곡선 아래 면적, ㎍ x hr/mL), tmax(Cmax에 이르는 시간, hr), t1/2 (반감기, hr), CL(완치율, mL/hr) 및 Vz(분포 용적(mL))을 포함하는, 각각의 용량에서 정맥내 및 피하 투여후 약력학적 매개변수는 하기 표 8에 나타낸다.
[표 8]
Figure pat00025
다음 데이터는, 0.1 내지 5.0 mg/kg의 단일 용량으로 정맥내 및 피하 투여된 ABT-874가 젊은 건강한 남성 개인에 의해 우수하게 견디었음을 나타낸다. 반감기가 8 내지 9일인 ABT-874의 약력학적 특성은 IgG1 항체의 경우 예상될 수 있는 바와 같다.
실시예 8: 중등도 내지 중증의 판형 건선의 치료에서 완전한 사람 IL-12/-23 모노클로날 항체, ABT-874를 사용한 재-치료 반응의 유지
ABT-874의 효능 및 안전성을 48-주, 제II 상의, 12주 초기 치료 상 및 초기 치료에 반응하는 환자의 36주 재치료 상을 포함한 무작위 배치된 조절된 시도에서 평가하였다. 초기 12-주 효능 결과 및 반응 결과의 유지를 상기 실시예 1 내지 5에 기술한다. 하기 실시예의 목적은 중등도 내지 중증 판형 Ps의 치료시 ABT-874의 피하 주사의 제II 상 연구의 이들의 초기 반응을 상실한 환자에서 36-주 재-치료/후속 상 동안 재-치료 반응을 시험하기 위한 것이다. 다음 실시예의 추가의 목적은 48주에 걸쳐 중등도 내지 중증 판형 Ps의 치료시 ABT-874의 피하 주사의 안전성을 시험하기 위한 것이었다.
시도에 대한 주요 포함 범주는 다음과 같았다: (i) 적어도 6개월 동안 건선의 임상 진단 및 스크리닝 전 적어도 2개월 동안 안정한 판형 건선을 가진 성인; 및 (ii) 기준치 방문시 중등도 내지 중증의 판형 건선(≥ 10% 체 표면적 포함, 건선 면적 및 중증도 지수 [PASI] 점수 ≥ 12 및 적어도 중증도 질환의 의사의 전반적 평가 [PGA]).
시도에 대한 제1의 배제 기준은 전신적 또는 생물학적 제제 항-IL-12 치료요법에 대한 앞서의 노출이었다. 제2의 배제 기준은 기준치 방문 전 다음 치료요법을 중단하는 것에 대한 불능이었다: 국소 건선 치료요법 ≥2주 전; 자외선(UV)-B 광 광선 치료요법 ≥2주 전; 건선-UV 광 광선 치료요법 ≥4주 전; 전신 치료요법 ≥4주 전; 및 생물학적 제제 치료요법 ≥12주 전.
기준치, 인구학적 및 임상적 특징은 치료 그룹에 걸쳐 유사하였다(상기 실시예 6의 표 5에 요약).
≥10% 체 표면적에 발생한 건선 및 건선 면적 및 중증도 지수 (PASI) 점수가 ≥12인 성인을 6개 암 중 1개에 무작위 배치하였다: 1) 0주째 1회의 200-mg 용량 ABT-874; 2) 12주 동안 매 격주(eow)에 100 mg의 ABT-874; 3) 4주 동안 매주 200 mg의 ABT-874; 4) 12주 동안 매 격주에 200 mg의 ABT-874; 5) 12주 동안 매주 200 mg의 ABT-874주; 또는 6) 위약. 1차 종점은 12주째에 ≥PASI 75 반응이었다. 1차 종점에 충족한 환자를 36주의 재-치료 상에 도입하였다. 연구 약물을 사용한 치료를 중단하고, 12 내지 36주 동안 반응을 상실한 환자(≥PASI 50)를 초기 12주 기간 동안 지정된 동일한 투여 요법을 사용한 재-치료를 제공하였다. 재-치료는 12주 동안 지속하였다. 기질에 상관없이, 모든 환자를 연구의 전체 기간 동안, 또는 중단까지 모니터링하였다.
결과 측정은 다음을 포함한다; (i) PASI 75를 달성하기 위한 평균 시간; (ii) 재치료 후 PASI 75 반응을 달성하기 위한 중간 시간; (iii) PASI 75 반응을 상실하는 중간 시간 (iii) 재치료 후 "완치" 또는 '최소"의 PGA 점수를 갖는 환자의 비율.
통계적 분석은 다음과 같이 수행하였다. 치료 의도(Intention-to-treat: ITT) 분석을 무작위 배치된 치료 그룹으로 수행하였다. ABT-874를 사용한 재치료 후 수득한 PASI 평가를 위해, 평가를 재치료의 제1 용량 후 경과일 수에 따라 방문을 연구하기 위해 지정하였다. PASI 반응(유/무)을 달성한 환자의 비율을 유도된 연구 방문에 따라 나타낸다. 모든 통계적 시험은 0.05의 유의성 값을 사용하여 2-테일드(tailed) 하였다.
초기에 등록된 180명의 환자 중(치료 그룹당 30명의 환자), 130명(1명의 위약)을 재치료상에 도입하였고 58명(모두 ABT-874)을 재-치료하였다. 12주째에 이어 재-치료후 12주째에 ≥PASI 75를 달성한 환자의 퍼센트는 각각의 그룹에 대해 다음과 같았다: 각각 1회의 200-mg 용량, 63% 대 55%; 100 mg eow, 93% 대 94%; 4주 동안 매주 200 mg, 90% 대 69%; 200 mg eow, 93% 대 75%; 및 매주 200 mg, 90% 대 83%. 재 치료된 총 58명의 환자 중, 76%가 재-치료 후 12주째에 ≥PASI 75를 달성하였다. 환자의 대부분은 PASI 75 반응을 재-달성할 수 있었다(도 7a).
모든 ABT-874 용량 그룹에 걸쳐 재치료 상 동안 PASI 75를 달성하기 위한 중간 시간(일)은 도 7b에 나타낸다. 재치료 동안 ≥PASI 75를 달성하기 위한 중간 시간은 각각의 그룹에 대해 다음과 같았다: 각각 60 내지 65 일에서 1회의 200-mg 용량; 55 내지 60 일에서 100 mg eow; 55 내지 60 일에서 4주 동안 매주 200 mg; 25 및 35 일에서 200 mg eow; 및 55 및 60 일에서 매주 200 mg.
초기 12주 치료 후 PASI 75를 상실하는 중간시간(일)을 도 7c에 나타낸다. 초기 12주 치료 후 PASI 75를 상실하는 중간 시간은 각 그룹에 대해 다음과 같았다: 각각 55 내지 60 일 사이의 1회 200-mg 용량; 110 내지 120 일 사이의 100 mg eow; 110 내지 120 일 사이에 4주 동안 매주 200 mg; 160 내지 180 일 사이에 200 mg eow; 및 180 내지 190 일 사이에 200 mg.
재-치료 후 12주째에 "완치" 또는 "최소"의 PGA(예를 들면, 0 또는 1의 PGA)를 달성한 환자의 퍼센트를 도 7d에 나타낸다. 재-치료 동안 0 또는 1의 PGA를 달성한 환자의 퍼센트는 각각의 그룹에 대해 다음과 같았다: 각각 35% 내지 40% 사이에 1회의 200-mg 용량; 70% 내지 80% 사이에 100 mg eow; 60% 내지 65% 사이에 4주 동안 매주 200mg; 60% 내지 70% 사이에 200 mg eow; 및 80% 내지 90% 사이에 매주 200 mg. 재치료된 총 환자 중에서, 60 내지 65%가 재-치료 후 0 또는 1의 PGA를 달성하였다.
48주에 걸쳐 하향 순서로 적어도 하나의 치료 그룹에서 ≥5% 발생하는 부작용 현상(AE)은: 코인두염, 주사-부위 반응, 상기도 감염, 두통, 고혈압, 및 관절통이었다. 48주에 걸쳐 응급-치료 부작용 현상의 개관은 상기 실시예 6의 표 6에 나타나 있다. 특정 치료 그룹에서 ≥5% 발생 정도의 응급-치료 부작용 현상의 개관은 상기 실시예 6의 표 7에 나타나 있다.
상기한 데이터는, ABT-874가 중등도 내지 중증의 건선의 치료시 매우 효과적이었음을 입증한다. 반응 및 재-치료의 상실시, 대부분의 환자는 PASI 75 반응을 재-달성할 수 있었다. 또한, ABT-874는 장기간 동안 양호한 안전성 프로파일을 가지는 것으로 나타난다.
실시예 9: 만성 판형 건선의 치료를 위한 완전한 사람 인터류킨 12/23 모노클로날 항체의 효능 및 안전성: 36-주 관측/재치료 및 60주 개방-표지 연장 상
I. 물질 및 방법
A. 연구 설계
다음은 3개의 상으로 이루어진 2상, 다중심 연구이었다: 12-주, 이중-맹검, 위약-조절된 상; 36-주 관측/재치료 상; 및 60-주, 개방-표지 연장 상. 현재의 연구의 초기 12-주 상으로부터의 데이터는 상기 실시예 1, 2, 4, 및 7에 기술되어 있다. 앞서의 연구를 위한 연구 방법은 36-주 관측/재치료 상 및 60-주, 개방-표지, 연장 상에서의 강조와 함께 당해 실시에에서 간략하게 검토되어 있다.
1. 초기 12-주 및 재치료/관측 상 동안의 치료
환자를 6개 그룹중 하나에 동등하게 무작위 배치하였다. 0주째 1회의 ABT-874 200-mg 용량(200 mg x 1); 12주 동안 매 격주 ABT-874 100 mg(100 mg EOW); 4주 동안 매주 ABT-874 200 mg(200 mg x 4); 12주 동안 ABT-874 200 mg EOW(200 mg EOW); 12주 동안 매주 ABT-874 200 mg주(매주 200 mg); 또는 위약. 반응하는 환자(즉, 12주째에 PASI 75 반응을 달성한 환자)는 36-주 단일-맹검 관측/재치료상 에 도입하였으며, 여기서, 이들은 반응을 상실한 경우에 ABT-874 재치료에 단지 적임이었고; 12주째에 비반응자는 모니터링하였지만, 재치료에 비적임이었다. 36-주 관측/재치료 상 동안, 기준치와 비교하여 PASI 50 반응을 상실한 환자는, 반응의 상실이 12주 후에 및 36주에 걸쳐 발생한 경우 12주의 ABT-874 재치료에 대해 적임이었다. 재치료된 환자에게 12-주 맹검 상 동안 지정된 ABT-874의 동일한 요법을 제공하며, 단 매 격주(EOW) ABT-874 200 mg을 제공받는 위약으로 지정된 환자는 제외하였다. 이들이 도입된 연구 아암과는 상관없이, 모든 환자들은 54주까지 또는 연구 중단까지 모니터링하였다.
2. 개방-표지 연장 상 동안의 치료
초기 치료의 12주째에 적어도 PASI 75 반응을 달성하고 관측/재치료 상에 적극적으로 참여한 환자들이 개방-표지 연장 상에 도입되도록 하였다. 연구의 당해 상 동안, 기준치와 비교하여 PASI 50 반응을 상실한 환자들을 200 mg ABT-874 x 1 용량 또는 x 2 용량(2주 동안 1회 용량/주)으로 연구의 초기 12-주 상 동안의 이들의 투여 요법을 기준으로 하여 재치료하였다. 200 mg의 ABT-874 x 1 용량을 제공받은 환자를 초기에 무작위 배치하여 200 mg x 1, 100 mg EOW, 또는 200 mg x 4를 제공받은 환자들에 포함시켰다. ABT-874 x 2 용량을 제공받은 환자들은 초기에 무작위 배치하여 200 mg EOW, 매주 200 mg, 또는 위약을 제공한 환자들에 포함시켰다. 앞서의 재치료의 12주 미만내에 발생한 PASI 50 반응의 후속적인 상실을 경험한 환자들을 다시 동일한 용량 요법(1 또는 2 용량의 ABT-874)으로 다시 재치료하고; 재치료를 56주의 개방-표지 연장 상까지 반복할 수 있었다.
3. 참여자
주요 포함 기준은 다음과 같았다: 연령 ≥ 18세; ≥ 6개월 동안 건선의 임상적 진단; 스크리닝 전 및 기준치에서 ≥ 2개월 동안 안정한 판형 건선; 중등도 내지 중증의 판형 건선(즉, 기준치에서 ≥ 10% 체 표면적에서 건선); 기준치에서 PASI 점수 ≥ 12; 및 기준치에서 중증도 또는 보다 심한 PGA 점수.
주요 배제 기준은 다음을 포함하였다: 사전 항-IL-12 치료요법; 비판형 건선의 진단; 앞서 정의된 시간표내의 국소 치료요법, 자외선 광 광선 치료요법, 및 전신 치료요법을 포함하는, 건선에 대한 각종 치료의 중단 불능; 선택된 동반이환병 또는 위험 인자; 및 비정상적인 실험실 값.
4. 효능 및 안전성 평가
기준치와 비교하여 12주째에 PASI 75 반응의 주요 연구 결과는 실시예 3 내지 8의 상기에 기술되어 있다. 부작용 현상, 활력 징후, 및 실험실 매개변수를 연구의 모든 상 전체에서 모니터링하였다. 36-주 관측/재치료 상 동안 시험하고, 현 분석에서 평가한 2차 종점은 재치료 12주 후 PASI 50, 75, 및 90 점수를 달성한 재치료된 환자의 비율; PASI 75 반응을 상실하기까지 중간 시간; 재치료된 환자 중에서 PASI 75 반응을 다시 획득하기까지 중간 시간; PGA 점수; 및 안전성. 60-주 개방-표지 연장 상 동안 검정하고 현재의 분석으로 평가한 2차 종점은 재치료 후 12주째에 PASI 50, 75, 및 90 점수를 달성한 환자의 비율; PGA 점수; 및 안전성을 포함한다. 12-주 데이터의 추가의 평가는 PASI 75의 후속적인 달성에 있어서 기준치 공변량(예를 들면, 체중, PASI 또는 PGA 점수, 건선 관절염 병력, 또는 사전 치료요법)의 영향을 시험하고 여기에 나타낸다.
PASI 점수는 0 = "건선 없음" 내지 72 = "중증 질환"의 범위이었고 앞서 기술된 바와 같이 계산하였다. 질환의 중증도는 PGA 점수를 사용하여 측정하였으며, 이는 앞서 기술한 바와 같이 0 = "완치" 내지 5 = "매우 심각"의 범위이었다.
5. 통계적 분석
효능 분석은 치료-의사 집단(N = 180)을 사용하여 수행하였으며, 당해 집단은 0주째에 무작위로 지정되고 처음 12주의 연구의 이중-맹검 상 동안 적어도 1회 연구 약물 주사 받은 모든 환자를 포함하였다. 효능 분석은 0주째에 ABT-874에 대해 무작위 배치되고 12주째에 ≥PASI 75 반응을 달성한 환자(n = 130)에서 관측/재치료 기간 동안 수행되었다. 개방-표지 연장 상을 위해, 당해 상을 지속한 환자들에 대한 데이터만을 분석하였다. 관측/재치료 기간 및 개방-표지 재치료 기간에 있어서의 효능 변수를 요약하였다. PASI 또는 PGA 점수를 상실한 환자를 비반응자로 계수하였다. 범주적인 변수를 환자 수 및 퍼센트를 사용하여 요약하였다. 연속된 변수는 기술적 통계(n, 평균, 및 표준 편차)를 사용하여 요약하였다. 안전성 분석은 적어도 1회의 연구 약물 주사를 제공받은 모든 환자를 포함한, 안전성 집단을 사용하여 수행하였다.
II. 결과
A. 환자 인구학
이들 환자에 대한 인구학적 데이터는 상기 실시예 3 내지 8에 기술되어 있으며 하기 요약한다. ABT-874 치료 아암에서, 환자는 평균적으로 연령(평균, 46세)의 측면에서 유사하였고, 주로 남성(75%)이며 주로 백인종(92%)이고, 체중은 평균 94 kg이었다. 건선의 평균 기간은 21년이고, 평균 PASI 점수는 19이었다. ABT-874를 제공받은 환자는 이들 체 표면적의 평균 25.6%가 영향받은 상태로, PGA 점수에 의해 측정된 것으로서, 중증도(54%) 내지 중증(41%) 건선으로 나누었다. 사전 치료는 국소 치료요법(71%)에 이어서, 전신 비생물학적 제제(20%) 또는 생물학적 제제(18%) 치료 또는 광선 치료요법(15%)으로 이루어졌다.
B. 반응자에서 기준치 공변량
12-주 평가에서, 모든 ABT-874 치료된 환자의 대부분에게 기준치 임상 및 인류학적 공변량 특징(예를 들면, 체중, PASI 또는 PGA 점수, 건선 관절염 병력, 또는 사전 치료요법, 표 9)에 상관없이 PASI 75 점수를 달성하였다.
[표 9]
Figure pat00026
Figure pat00027
C. 관측/재치료상 (36주)
초기 12-주 연구의 말기에 PASI 75 점수로 반응한 환자가 36-주 관측/재치료상 (n=130)에 적임이었고; 비반응자(n=40)는 모니터링하였으나 재치료에 대해 적임은 아니었다.
12주째에 재치료에 적임이어서 재치료에 도입된 130명의 환자 중, 72명의 환자가 반응을 유지한 반면, 58명의 환자는 이들의 PASI 50 반응을 상실하고 후속적인 12주동안 ABT-874로 재치료되었다. 재치료시 모든 58명의 재치료된 환자에 대한 평균 PASI 점수는 13.85이었으며 치료 그룹에 따라 13.2 내지 14.9의 범위였다(도 10). 전체 관측/재치료상(n=120/130) 동안 PASI 75 반응을 상실한 환자에서, 반응의 상실까지의 중간 시간(연구의 초기 12주 동안 제공받은 마지막 용량으로부터 계산됨)은 57 내지 184일의 범위였다(도 11). 재치료된 환자들 중에서, ABT-874 치료요법의 재개시 후 12주째에 PASI 75점수를 달성한 환자의 퍼센트는 200 mg x 1 치료 그룹에 대해 54.5%, 100 mg EOW에 대해 93.8%, 200 mg x 4에 대해 69.2%, 200 mg EOW에 대해 75.0%, 및 매주 200 mg에 대해 83.3%였다. 치료요법의 재개시 후 12주째에 PASI 50 반응은 76.9% 내지 100% 범위였고; PASI 90 반응은 9.1% 내지 83.3% 범위였다(표 10). 단일-용량 치료 그룹 (ABT-874 200 mg x 1)은 일반적으로 제공된 수준의 반응을 달성한 환자의 최저 비율을 가졌다. 재치료 12주 동안 PASI 75 반응을 달성한 환자는 30 내지 62 일 범위의 반응을 달성하는 중간 시간을 나타내었다(도 12).
[표 10]
Figure pat00028
각각의 치료 그룹에서 재치료된 환자의 대부분은 재치료(100 mg EOW, 75.0%; 200 mg x 4, 61.5%; 200 mg EOW, 66.7%; 매주 200 mg, 83.3%) 12주 후 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수를 달성하였으나, ABT-874 200 mg x 1 그룹(200 mg x 1, 36.4%)은 예외였다 재치료 개시 후 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수를 달성하기 위한 중간 시간은 45 내지 85 일(200 mg x 1, 85 d; 100 mg EOW, 58 d; 200 mg x 4, 58 d; 200 mg EOW, 57 d; 매주 200 mg, 45 d)의 범위였다.
연구(초기 12-주 및 36-주 관측/재치료 상)의 처음 48주 동안 ABT-874를 제공받은 환자 중에서, 사망은 없었고 4명의 환자가 심각한 부작용 현상이 있었으며; 1명의 환자는 부작용 현상으로 인해 ABT-874 치료를 중단하였다(표 11). ABT-874를 제공받은 모든 환자 중에서, 주사 부위 반응, 코인두염, 및 상기도 감염이 > 10% 발생정도로 발생한 유일한 부작용 현상이었다(표 12).
[표 11]
Figure pat00029
[표 12]
Figure pat00030

D. 개방-표지 연장 상 (60주)
12주째에 PASI 75를 달성하고 36-주 관측/재치료상 동안 연구에 적극적으로 참여한(즉, 재치료에 적임인) 환자들을 개방-표지 연장 상에 도입되도록 하였다(n=105). 비록 각각의 연령 분류에서 피험자의 분포(P = 0.010)에 있어서 ABT-874 200mg x 1과 ABT-874 x 2 용량 그룹 사이에 통계적으로 유의적인 차이가 있다고 해도, 개방-표지 상에서 전체 인구학적 특징에 있어서 인식가능한 이동은 없었다.
48주 후, 환자에게 반응 (< PASI 50)의 상실시 이들이 초기 무작위 배치된 용량 그룹을 기준으로 200 mg ABT-874 x 1 또는 x 2를 사용한 재치료를 제공하였다. 48주째에 개방-표지 연장 상에 도입된 105명의 피험자 중 96명(ABT-874 200 mg x 1 및 x 2 용량 그룹에 대해 각각 n = 52 및 n = 44)을 적어도 1회 이상 재치료하였다. 환자를 5회까지 재치료하였고, 재치료된 환자의 대부분은 3회 재치료되었다. 9명의 환자들은 PASI 50 반응을 상실하지 않았으므로 개방-표지 연장 상에서 ABT-874로 재치료하지 않았지만, 연구의 말기 전체에서 모니터링하였다.
각각의 재치료 주기를 사용시, PASI 50, 75, 및 90 반응을 달성한 환자의 비율은 일반적으로 감소하였으며, 재치료 후 반응률은 초기 치료 후 관측된 것보다 더 낮았다(표 13). 그러나, PASI 50 반응을 달성한 환자의 비율은 처음 3회의 재치료의 경우 ABT-874 200 mg x 2 용량 그룹에서 유사하였고, 전체 PASI 75 반응률은 제1 및 제2의 재 치료시 유사하였다. 모든 재치료된 환자들의 대부분은 처음 3회 재치료시 PASI 50 반응을 달성하였다.
[표 13]
Figure pat00031
PGA 점수는 또한 개방-표지 재치료의 각각의 주기로 감소되었으며 연구의 초기 상 동안 관측된 것보다 더 낮았다. 재치료의 제1 주기 동안에, ABT-874 200 mg x 1 용량을 제공받은 환자의 30.6% 및 ABT-874 200 mg x 2 용량을 제공받은 환자의 41.5%가 재치료 후 12주째에 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수를 달성하였다. "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수를 달성한 환자의 비율은, 개방-표지 재치료(200 mg x 1, 23.7%; 200 mg x 2, 12주 후 39.4%) 후 어느정도 감소하였으나, 제 3의 재치료(200 mg x 1, 4.8%; 200 mg x 2, 12주 후 7.1%) 후 실질적으로 보다 낮았다.
응급-치료 부작용 현상(각각의 용량의 중단일 이후 45일까지 각각의 개방-표지 ABT-874 용량 제공시 또는 이후 발생)을 경험한 개방-표지 연장 상에서 16명의 환자(16.7%)가 가능하게는 연구 약물-관련된 것으로 고려되었다(표 14). 사망 또는 심각한 감염은 개방-표지 연장 상 동안 보고되지 않았지만, 3명의 환자는 심각한 부작용 현상을 경험하였다. 개방-표지 연장 상 동안에, > 5%, 그러나 10% 미만의 유병률로 발생한 유일한 부작용 현상은 코인두염, 상기도 감염, 주사 부위 반응 및 고혈압이었다(표 14).
[표 14]
Figure pat00032
III. 결론
중등도 내지 중증의 만성 판형 건선에 대해 재치료된 환자에서 ABT-874의 예비 효능 및 안전성 프로파일을 평가하였다. 현재의 연구 데이터는, 항-IL-12/23 치료요법이 중등도 내지 중증의 판형 건선을 가진 환자의 치료 및 재치료에 대해 유의적으로 촉망됨을 나타낸다.
특정의 ABT-874 치료요법을 제공받은 모든 환자 중에서, 대부분의 환자는 기본 체중, PGA 및 PASI 점수, 건선 관절염 병력, 또는 사전 건선 치료와 상관없이, 치료 12주 이후 PASI 75 반응을 달성하였다.
초기 이중-맹검 기간에서 12주의 치료 및 관측/재치료 기간에서 치료 중단 후 PASI 75 반응을 달성한 후, 많은 환자들은 재치료없이 일정 기간 동안 PASI 75 반응을 유지할 수 있었다. 반응의 상실까지의 중간 시간은 ABT-874의 보다 높은 용량을 제공받은 환자에서 더 높았으며, 매주 투여 아암에서 PASI 75 반응의 상실까지 중간 시간은 184일까지 범위였다.
특히 주목할 것은, ABT-874 재치료된 환자 중에서 PASI 75 반응성을 재 획득하는데 요구되는 시간은 30 내지 62 일의 범위로 비교적 짧았다. 이는 시간 지연과 같이, 용량과 관련되는 경향이 있다. 초기 12-주 연구 상에서, PASI 75 반응은 8 내지 12주 후 57 내지 85 일의 중간으로, 각각의 ABT-874 치료 그룹에서 환자 대부분에 의해 달성되었다. 개방-표지 연장 상으로부터의 결과는 ABT-874 재치료의 후속적인 라운드에 대한 축소 반응을 나타낸다. 이러한 감소된 반응에 대한 가능한 설명은 개방-표지 연장(ABT-874 200 mg x 1 또는 x 2) 동안 사용된 축약된 투여 요법, 및 제공받은 약물의 양 및 ABT-874 농도와 같은 상응하는 약력학적 인자를 포함한다.
결론적으로, 이들 데이터는, ABT-874가 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선의 치료 및 재치료를 위한 효과적이고 안전한 치료 선택임을 나타낸다.
실시예 10: 중증도 내지 중증의 건선을 지닌 환자의 신체 부위에 따른 ABT-874, 인터류킨-12/23 모노클로날 항체를 사용한 치료의 효능
I. 물질 및 방법
A. 연구 설계
다음은 12-주의, 무작위 배치된, 이중-맹검, 위약-조절된, 다-중심 연구였다. 체 표면적의 ≥10%가 영향을 받고 건선 면적 및 중증도 지수 (PASI) 점수가 ≥12인 180명의 성인 건선 환자를 다음과 같이 무작위 배치하였다: 0주째에 1회의 200-mg 용량 ABT-874, 12주 동안 매 격주 (eow)로 100 mg ABT-874, 4주 동안 매주 200 mg ABT-874, 12주 동안 200 mg ABT-874 eow, 12주 동안 매주 200 mg ABT-874, 또는 위약. 1차 종점은 12주까지 ≥PASI 75 반응이었다. PASI 평가에 이용된 4개의 신체 부위에서 개개의 PASI 점수를 또한 평가하였다.
B. 주요 포함 및 배제 기준
연구를 위한 주요 포함 기준은 다음과 같다:
적어도 6개월 동안 만성 중등도 내지 중증의 판형 건선을 지닌 성인 환자;
적어도 2개월 동안 안정;
≥ 10% BSA;
PASI ≥ 12; 및
중증도 또는 중증의 의사의 전반적 평가(PGA)
연구에 대한 주요 배제 기준은 다음과 같다;
ABT-874를 포함하는 특정의 전신적 항-IL-12 치료요법에 대한 사전 노출;
수막종 건선, 농포 건선, 의약-의도되거나 의약-악화된 건선, 또는 방울 건선의 새로운 발병의 진단;
건선의 평가를 방해할 수 있는 다른 활성 피부병 또는 피부 감염의 진단;
사전 의약 중단 불능;
2주 동안 국소 및 광선 치료요법;
4주 동안 비생물학적 제제 전신 치료요법; 및
12주 동안 생물학적 제제
C. 효능 측정
다음 효능 측정을 본 연구에 사용하였다:
12주째에 ≥PASI 75 및 ≥PASI 90 반응을 달성한 각각의 그룹에서 환자의 퍼센트; 및
특수 부위: 두부 및 경부; 상지; 몸통; 및 하지에서 12주째에 ≥PASI 75 및 ≥PASI 90 반응을 달성하는 각각의 그룹에서 환자의 퍼센트
D. 안전성 척도
실험실 결과, 활력 징후, 및 부작용 현상(AE)을 사용하여 치료의 안전성을 측정하였다.
E. 통계적 방법
다음의 통계적 방법을 사용하여 치료의 효능을 측정하였다:
비율적으로 차이에 대한 2-측면 95% 신뢰 간격을 갖는, 피셔 정확도 시험(Fisher's exact test)을 사용한 ABT-874 용량 그룹과 위약 그룹 사이에서 12주째에 ≥PASI 75를 달성한 피험자의 비율의 비교;
데이터가 상실된 환자들은 비-반응자(비-반응자 산입)로 고려; 및
통계적 유의성을 나타낸 P < 0.05.
II. 결과
A. 기준치 인구학
기준치 인구학적 및 임상 특징은 치료 그룹을 따라 유사하였다. 표 15 참조.
[표 15]
Figure pat00033
Figure pat00034
B. 효능
특정 용량의 ABT-874로 치료한 환자의 보다 높은 퍼센트가 위약과 비교하여 12주째에 ≥PASI 75 또는 ≥PASI 90을 달성하였다(도 13).
시험한 구체적인 신체 부위에서, ABT-874로 치료한 환자의 보다 높은 퍼센트가 위약과 비교하여 12주째에 ≥PASI 75 및 ≥PASI 90을 달성하였다(도 14a 내지 14d).
12주째에 ≥ PASI 75 또는 ≥PASI 90을 달성한 환자의 퍼센트는 위약 그룹에 대해 조합된 모든 ABT-874 용량 그룹의 경우 보다 더 컸다(각각 86.0% 대 3.3% 및 52.7% 대 0.0%). 조합된 모든 ABT-874 용량 그룹의 경우, 보다 큰 퍼센트의 환자가 다음의 시험한 모든 신체 부위에 대해 위약 환자와 비교하여 PASI 점수에 있어 ≥75% 및 ≥ 90% 개선을 달성하였다: 두부 및 경부(PASI 75, 83.3% 대 13.3%; PASI 90, 72.0% 대 13.3%), 상지(PASI 75, 81.3% 대 3.3%; PASI 90, 57.3% 대 3.3%), 몸통(PASI 75, 82.0% 대 3.3%; PASI 90, 68.0% 대 3.3%), 하지(PASI 75, 78.0% 대 3.3%; PASI 90, 48.0% 대 0.0%).
C. 안전성
응급-치료 부작용 현상을 가진 피험자의 수 및 퍼센트의 개관을 표 16에 나타낸다. 가장 보고된 AE는 중증도에 있어서 경증 또는 중등도였다. 심각한 AE를 경험하는 환자의 퍼센트는 낮았다. 환자의 ≥5%에서 발생하는 가장 흔하게 보고된 응급-치료 부작용 현상은 도 17에 나열한다.
[표 16]
Figure pat00035
[표 17]
Figure pat00036

III. 결론
당해 연구에서, ABT-874을 사용한 치료는 중등도 내지 중증의 건선을 갖는 환자에서 두부 및 경부 및 하지와 같은 전통적으로 내성인 부위를 포함하는, PASI 점수를 포함한 모든 4곳의 신체 부위에서 임상적으로 의미있는 개선을 생성하였다.
· 지역 및 전체 혜택은 위약과 비교하여 모든 용량의 ABT-874로 입증되었다.
· 당해 연구 결과는 만성 판형 건선에서 치료학적 표적으로서 IL-12/23의 용도를 지지한다.
실시예 11: 중등도 내지 중증의 건선의 치료를 위한 ABT-874의 효능에 있어서 기준치 특징의 효과
I. 방법
A. 연구 설계
다음은 12주의, 무작위 배치된, 이중-맹검, 위약-조절된, 다-중심 연구였다. 체 표면적의 ≥10%에 영향을 미치는 건선을 지니고 건선 면적 및 중증도 지수 (PASI)점수가 ≥12인 180명의 성인 환자를 무작위로 다음과 같이 배치하였다: 0주째에 1회의 200-mg 용량 ABT-874, 12주 동안 매 격주(eow)로 100 mg ABT-874, 4주 동안 매주 200 mg ABT-874, 12주 동안 200 mg ABT-874 eow, 12주 동안 매주 200 mg ABT-874, 또는 위약. 12주 PASI 75 반응률에 있어서 다음의 기준치 특징의 효과를 시험하였다: 체중, PsA 병력, PASI 점수, 사전 건선 치료 및 PGA 점수(중증/ 매우 심각). PGA 점수는 포스트-훅(post-hoc) 분석이었다. 결과는 치료 12주 후 조합된 모든 ABT-874 용량 그룹에 대해 나타낸다.
B. 주요 포함 및 배제 기준
연구를 위한 주요 포함 기준은 다음과 같다:
적어도 6개월 동안 만성 중등도 내지 중증의 판형 건선을 지닌 성인 환자;
적어도 2개월 동안 안정;
≥ 10% BSA;
PASI ≥ 12; 및
중등도 또는 중증의 의사의 전반적 평가(PGA)
연구를 위한 주요 배제 기준은 다음과 같다:
ABT-874를 포함하는 특정의 전신 항-IL-12 치료요법에 대한 사전 노출;
홍색피부 건선, 농포 건선, 의약-유도되거나 의약-악화된 건선의 진단, 또는 방울 건선의 신규 발병;
건선의 평가를 방해할 수 있는 다른 활성 피부병 또는 피부 감염의 진단;
사전 의약 중단 불능;
2주 동안 국소 및 광선 치료요법;
4주 동안 비생물학적 제제 전신 치료요법; 및
12주 동안 생물학적 제제
C. 효능 측정
다음 효능 측정을 본 연구에 사용하였다:
12주째에 ≥PASI 75 및 ≥PASI 90 반응을 달성한 각각의 그룹에서 환자의 퍼센트; 및
효능 분석 소그룹(기준치):
체중(≤100kg 또는 >100kg)
건선 관절염(PsA) 병력
선행된 건선 치료
PGA 점수
D. 안전성 척도
실험 결과, 활력 징후, 및 부작용 현상(AE)을 사용하여 치료의 안전성을 측정하였다.
E. 통계적 방법
다음의 통계적 방법을 사용하여 치료의 효능을 측정하였다:
비율적으로 차이에 대한 2-측면 95% 신뢰 간격을 갖는, 피셔 정확도 시험을 사용한 ABT-874 용량 그룹 및 위약 그룹 사이에서 12주째에 ≥PASI 75를 달성한 피험자의 비율의 비교;
데이터가 상실된 환자들은 비-반응자(비-반응자 산입)로 고려; 및
통계적 유의성을 나타낸 P < 0.05.
II. 결과
A. 기준치 인구학
기준치 인구학적 및 임상 특징은 치료 그룹을 따라 유사하였다. 표 18 참조.
[표 18]
Figure pat00037
Figure pat00038
B. 효능
특정 용량의 ABT-874로 치료한 환자의 보다 높은 퍼센트가 위약과 비교하여 12주째에 ≥PASI 75 또는 ≥PASI 90을 달성하였다(도 15).
효능에 있어서 기준치 특징의 효과를 시험하였다. 특정 용량의 ABT-874로 치료한 2개 체중 범주(≤100 kg 또는 >100 kg)의 환자의 유사한 퍼센트는 12주째에 PASI 75를 달성하였다(도 16). 특히, 12주째에, ≤100 kg 또는 >100 kg 그룹에서 PASI 75를 달성한 환자의 퍼센트는 각각 88.7% 대 81.1%였다. PsA의 병력이 있거나 없는 환자의 유사한 퍼센트가 12주째에 PASI 75를 달성하였다(도 17). 특히, 선행된 PsA가 있거나 없는 환자에 대한 PASI 75 반응은 각각 83.7% 대 86.9%였다. 중증 또는 매우 중증의 기준치 PGA 점수를 갖는 환자의 대부분(85.5%)은 12주째에 PASI 75를 달성하였다(도 18). 2개의 기준치 PASI 범주(≤20 또는 >20)에서 환자의 유사한 퍼센트가 12주째에 PASI 75를 달성하였다(도 19). ≤20 또는 >20의 기준치 PASI 점수를 가진 환자의 경우, 87.0% 대 84.0%가 각각 12주째에 PASI 75 반응을 달성하였다. 최종적으로, 전신적 또는 생물학적 제제와 같은 건선 치료전, 국소 또는 광선 치료요법은 PASI 75 반응률에 효과를 미치는 것으로 여져지지 않았으므로, ABT-874의 효능에 있어 최소 효과를 가졌다(표 19).
[표 19]
Figure pat00039
C. 안전성
응급-치료 부작용 현상을 지닌 환자의 수 및 퍼센트의 개관은 표 20에 나타낸다. 최대로 보고된 AE는 중증도에 있어 중등도 내지 중증도이었다. 심각한 AE를 경험한 환자의 퍼센트는 낮았다. 환자의 ≥5%에서 발생하는 가장 흔히 보고된 응급-치료 부작용 현상은 표 21에 나열한다.
[표 20]
Figure pat00040
[표 21]
Figure pat00041

III. 결론
당해 연구에서, ABT-874로 치료한 중등도 내지 중증의 건선을 가진 환자의 대부분은 12주째에 PASI 75 반응을 달성하였다. 12주째에 PASI 75를 달성한 환자의 퍼센트는 체중, 의사의 전반적 평가, PASI 점수, 건선 관절염의 병력, 또는 선행된 건선 치료를 포함하는 기준치 특징에 상관없이 유사하였다.
실시예 12: 중등도 내지 중증의 건선 환자에서 위약에 대한 ABT-874의 2회 용량 요법과 비교하여 제III 상, 무작위 배치되고 조절된 시도로부터의 효능 및 안전성 결과
I. 방법
설계
2개- 상: 유도 및 유지를 지닌 제III 상의, 52-주, 이중-맹검, 위약-조절된, 다-중심 임상 시도(도 20) (NCT00570986)
·유도 상:
환자를 2:1로 무작위 배치하고 2개 치료 중 하나를 제공하였다:
·0 및 4주째 ABT-874, 200 mg에 이어 8주째 100 mg
·위약
·유지 상:
-유도상에서 12주째에 "완치" 또는 "최소"(PGA 0/1)의 의사의 전반적 평가 점수를 달성한 환자를 3개의 아암 중 1개에 대해 2:2:1로 재-무작위 배치하였다(유도 상에서 제공된 치료에 의해 계층화함):
·ABT-874, 100 mg 매 4주(q 4 wk)
· ABT-874, 100 mg 매 12주 (q 12 wk)
·위약 q 4 wk
효능 및 안전성 척도
·효능은 유도상에서 0, 1, 4 및 8주째에 및 유지 상(12주 내지 52주) 동안 매달 6-점 의사의 전반적 평가 (PGA) 규모 및 건선 면적 및 중증도 지수를 사용하여 측정하였다.
· 환자를 연구 전체에서 및 연구 의약의 마지막 용량 후 45일까지 부작용 현상에 대해 평가하였다.
환자
·주요 포함 기준:
- 기준치 전 적어도 6개월 동안 만성 판형 건선(및 적어도 2개월 동안 안정)을 지닌 성인 환자
- 기준치에서 다음에 의해 정의된 중등도 내지 중증 건선:
·영향받은 체 표면적(BSA) ≥10%
·적어도 "중등도"( ≥3로 정의)의 PGA
·PASI ≥12
·주요 배제 기준:
- ABT-874를 포함하는 항-인터류킨 12 치료요법에 대한 선행된 노출
- 건선(판형 건선 이외의)의 다른 형태
- 다음 중 어느 것을 사용한 치료:
· 기준치의 2주내 국소 치료(즉, 코르티코스테로이드, 비타민 D 유사체, 또는 레티노이드) 또는 UVB 광선 치료요법
· 기준치의 4주내 건선에 대한 PUVA 광선 치료요법 또는 전신 치료
· 기준치의 12주내에 생물학적 제제 치료
통계적 방법
· 다음 3개의 1차 종점을 달성한 환자의 비율을 치료 그룹 사이에서 비교하였다:
- 12주째에 PGA 0/1
- 12주째에 PASI(PASI 75)에 있어서 기준치로부터 75% 개선
- 52주째에 PGA 0/1의 유지
·효능 분석을 치료 의사(치료할 의사가 있는) 집단에서 수행하고, 상실된 값은 비-반응자 산입(NRI)를 사용하여 수행하였다.
·모든 통계학적 시험은 2-측면 시험(two-tailed)되었다. 12주째에 주요 분석을 코크란-만텔-핸스첼 시험을 사용하여 수행하였다.
*모든 다른 경우에서, 1개-방식 ANOVA 및 카이-자승 검증/피셔 정확도 시험을 각각 연속적인 및 별개의 변수에 대해 사용하였다.
· 통계적 유의성 수준은 P<.05에서 설정하였다.
* 혼주된 중심에 대해 조절하였으며, 여기서, 최소 중심을 다음의 최소 중심과 혼주시켜 혼주된 중심당 적어도 10명의 환자를 달성하였다.
결과
효능
1465명의 환자를 베로 연구(Vero study)에 등록하였다(도 21)
- 유도 상:
· ABT-874, N = 981
· 위약, N = 484
· 유지 상: (유도 동안 ABT-874를 제공받는 환자에 대해)
· ABT-874 q4 wk, N = 298
· ABT-874 q12 wk, N = 298
· 위약, N = 149
· 기준치 인구학 및 임상 특징은 치료 그룹 사이에서 유사하였다(표 22).
[표 22]
Figure pat00042
q4 = 매 4주; q12 = 매 12주; BSA = 영향받은 체 표면적; PASI = 건선 면적 및 중증도 지수; PGA = 의사의 전반적 평가; CVD = 심혈관병; DM = 당뇨병
aABT-874 q4 그룹에서 1명의 환자를 재-무작위 배치하지만 유지 상에서 어떠한 연구 약물도 제공하지 않았다.
b평균 값 ± SD
· ABT-874 대 위약으로 치료한 환자의 유의적으로 보다 큰 퍼센트가 12주째에 PGA 0/1 및 PASI 75를 달성하였다(P<.001, 각각의 분석에 대해 NRI)(도 22 및 23)
· 12주째에 PGA 0/1 반응을 달성한 피험자에서 ABT-874의 지속된 투여는 치료 포기와 비교하여 52주째에 PGA 0/1 반응의 보다 우수한 유지를 생성하였다(도 24)
· 매 4주째 ABT-874의 투여는 매 12주 투여보다 PASI 75 및 PASI 90 반응의 보다 우수한 유지를 생성하였다(도 25).
안전성
· 유도 상에서 ABT-874에 대해 무작위 배치되고 52주에 걸쳐 특정의 ABT-874를 제공받은 환자 중에서 보고된 가장 일반적인 부작용 현상은 다음과 같다: 코인두염, 두통, 및 상기도 감염(표 23)
· ABT-874 q4 wk 치료 그룹에서 16명의 환자가 q12 wk 그룹에서 6명의 환자 및 위약 그룹에서 3명의 환자와 비교하여 등 통증을 경험하였고, 이는, 당해 현상에 대한 가능한 용량 반응 관계를 제안한다. 특정의 잠재적 관련성에 대한 이유는 알려져 있지 않다.
[표 23]
Figure pat00043
a모든 환자를 유도상에서 ABT-874에 대해 무작위 배치하고 유지 상에서 ABT-874에 대해 재-무작위 배치하였다.
· 심각한 부작용 현상은 유도 상 동안 20명(2.0%)의 ABT-874 및 6명(1.2%)의 위약 치료된 환자에서 발행하였다(표 24)
· 심각한 부작용 현상 중, ABT-874 그룹에서 5명(0.5%) 및 위약 그룹에서 1명(0.2%)이 감염 현상을 포함하였다(표 24)
· 위약-조절된 유도 상 동안, 악성 암의 6개 현상이 ABT-874 그룹에서 보고된 반면, 위약 그룹에서는 전혀 보고되지 않았다.
· ABT-874로 치료된 환자에서 관측된 악성 현상 중, 대부분은 편평 세포 또는 기저 세포 피부 암종이었다(표 24)
· 심근 경색, 뇌졸중 또는 심혈관 사망으로 정의된 총 7개의 주요 부작용 심장 현상(MACE)이 ABT-874를 제공받은 환자에서 발생하였다. 위약을 제공받은 환자에서 MACE 현상은 관측되지 않았다(표 24).
[표 24]
Figure pat00044
AE = 부작용 현상; SCC = 편평 세포 암종; BCC = 기저 세포 암종; na = 적용되지 않음
a1명의 환자는 사망을 초래하는 심장 마비를 경험하였다(특히 흥미있는 AE, 심혈관으로 또한 나열된 현상).
b사망의 1회의 현상이 특히 흥미있는 AE에서 나열된 심혈관 현상을 가진 환자에서 연구 중단 후 >45일째에 발생하였다.
c1명은 연구 43일 째에 폐암으로 진단되었고, 1명은 연구 15일 째에 코인두암으로 진단되었다.
d1명의 환자가 연구 285일 째에 결장 암으로 진단되었다.
e1명의 환자가 연구 266일 째에 편도암으로 진단되었다.
f1명의 환자가 심장 마비를 가졌고, 3명이 심근 경색을 가졌으며, 1명의 뇌졸중을 가졌다.
g1명의 환자가 급성 관상 증후군의 현상을 가졌다.
h1명의 환자가 심근 경색을 가졌다.
· 7개의 MACE 현상 중 5개가 연구 치료중 처음 2개월내에 발생하였다(도 26).
모든 MACE 현상이 관상 심장병(CHD)2에 대한 위험 인자를 지닌 환자에서 발생하였다.
결론
· ABT-874는 위약과 비교하여 중등도 내지 중증의 건선을 지닌 환자에서 신속하고 유의적으로 보다 높은 효능 반응을 유도하였다.
· 매 4주째에 ABT-874의 투여는 매 12주보다 보다 더 우수한 반응의 유지를 생성하였다.
· 보다 높은 발생 정도의 감염 및 악성 부작용 현상이 ABT-874 대 위약 치료된 환자에서 관측되었다. ABT-874의 면역조절 메카니즘을 고려할 때, 이러한 반응은 예측되지 않은 것이며 이들 현상에 대해 모니터링하고 감시할 필요성을 지지한다.
· 다수의 불균형이 위약 그룹에서 현상이 없는 것과 비교하여 ABT-874 그룹에서 보고된 7개의 경우와 함께 MACE 현상에 대해 관측되었다. 심혈관 현상이 건선 환자 집단에서 예측되지 않는다고 해도, 추가의 평가는, MACE 현상의 수에 있어서의 증가가 ABT-874로 치료한 환자에서 재생가능한 현상인지를 측정할 것이다.
실시예 13. 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선을 지닌 환자에서 에타네르셉트(ETN) 및 위약에 대한 ABT-874의 안전성 및 효능을 비교하는 제III 상의, 무작위 배치된 조절된 시도로부터의 효능 및 안전성 결과
목적
연구 M10-315의 주요 목적은 제III 상 시도에서, 12주에 걸쳐 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선을 지닌 피험자에서 에타네르셉트 및 위약에 대한 ABT-874의 효능 및 안전성을 비교하는 것이었다.
방법
주요 포함 기준
· 적어도 6개월 동안 만성 판형 건선의 임상 진단을 지닌 ≥18세의 남성 및 여성
· 스크리닝 전 및 기준치(0주) 방문시 적어도 2개월 동안 안정한 판형 Ps
· 영향받은 체 표면적(BSA) ≥10%
· 기준치(0주) 방문시 적어도 중증도(≥ 3)의 의사의 전반적 평가(PGA) 및 ≥12의 PASI 점수
주요 배제 기준
· ABT-874를 포함하는 전신적 항-IL-12/23p40 치료요법에 대한 선행된 노출
· ETN에 대한 선행된 노출 또는 ETN에 대한 공지된 고 감작성
· 국소 치료요법, 광 치료요법 또는 전신 치료요법 중단 불능
연구 설계(도 27)
· 12-주, 이중-맹검의, 이중 인체모형(double dummy), 다중심, 무작위 배치된 연구
· 환자를 3개의 다음 치료 아암 중 1개에 무작 배치하였다(2:2:1); "a"는 용량을 매주 2회 투여하는 경우 주의 두번째 투여를 나타낸다:
· 0 및 4주째에 200 mg ABT-874 SC에 이은 8주째에 100 mg ABT-874 SC
· 0, 0a, 1, 1a, 2, 2a, 3, 3a, 4, 4a, 5, 5a, 6, 6a, 7, 7a, 8, 8a, 9, 9a, 10, 10a, 11, 및 11a 주에 3 및 4일 간격으로 주당 2회 50 mg의 ETN SC
· ABT-874 투여와 일치시키기 위한 0 및 4주째에 위약 SC에 이어 8주째에 위약 SC, 또는 ETN 투여와 일치시키기 위한 0, 0a, 1, 1a, 2, 2a, 3, 3a, 4, 4a, 5, 5a, 6, 6a, 7, 7a, 8, 8a, 9, 9a, 10, 10a, 11, 및 11a주째에 3 및 4일 간격으로 주당 2회 위약 SC
효능 척도
· 12주째에 "완치" 또는 "최소"(0/1)의 PGA 점수를 달성하는 환자의 비율
· 12주째에 PASI 75/90/100 반응을 달성하는 환자의 비율
안전성 척도
· 부작용 현상 및 심각한 부작용 현상을 연구 전체에서 평가하였다.
통계적 방법
· 효능 분석을 치료 의사(ITT) 집단에서 수행하였으며; 비-반응자 산입을 사용하여 상실된 데이터를 취급하였다.
·혼주된 중심에 의해 계층화한 코크란-만텔-핸스첼 시험을 사용하여 주요 분석에서 12주째에 PGA 0/1 또는 PASI 75를 달성하는 각각의 치료 그룹에서 환자의 비율을 비교하였다.
· 적절하게는 카이제곱 시험, 또는 피셔 정확도 시험을 사용하여 12주째에 PASI 90 또는 100을 달성하는 각각의 치료 그룹에서 환자의 비율을 비교하였다.
· 모든 통계적 시험은 0.05의 유의성 수준을 사용한 2-측면이었다.
· 안전성 분석은 안전성 집단에서 수행하였다; 안전성 변수는 치료 그룹으로 요약하였다.
결과
· 350명 환자들을 등록하고 분석하였다.
ABT-874, N = 139
에타네르셉트, N = 139
위약, N = 72
기준치 인구학 및 임상 특징은 치료 그룹에 걸쳐 유사하였다(표 25)
[표 25]
Figure pat00045
PGA = 의사의 전반적 평가
PASI = 건선 면적 및 중증도 지수
BSA = 체 표면적
a평균 (SD)
b동일한 신체 시스템에서 2회 이상의 진단으로 보고된 특정 환자는 신체 시스템 전체에서 1회로 단지 계산되었다.
효능
·ABT-874 치료 그룹 중 환자의 통계적으로 유의적인 보다 큰 퍼센트(72.7%)가 위약을 제공받은 환자(4.2%) 또는 에타네르셉트를 제공받은 환자(29.5%)와 비교하여 12주째에 0/1의 PGA를 달성하였다, P<0.001 (도 28)
· ABT-874 치료 그룹에서 환자 중 통계적으로 유의적인 보다 높은 퍼센트(80.6%)가 위약(6.9%) 또는 에타네르셉트(39.6%)를 제공받은 환자와 비교하여 12주째에 PASI 75 반응을 달성하였다 [P<0.001] [도 29]
· 12주째에 PASI 90 및 PASI 100 반응이 위약(각각 4.2% 및 0) 또는 에타네르셉트(각각 13.7% 및 5.8%)를 제공받은 환자와 비교하여 ABT-874 치료 그룹에서 환자중 통계적으로 유의적인 보다 높은 퍼센트(각각 55.4% 및 28.8%)로 달성되었다[도 30 및 31].
안전성
· ABT-874 및 에타네르셉트 치료 그룹에서 환자의 보다 높은 퍼센트가 위약 치료 그룹에서의 환자보다 각각 부작용 현상을 경험하였다(각각 50.4%, 49.6% 및 44.4%)[표 26]
· 치료 중단은 각각의 그룹에서 2.9%(4/139)가 중단하여 에타네르셉트 및 ABT-874 치료 그룹 둘다에서 낮았다(표 26)
· 심각한 부작용 현상은 위약을 제공받은 2명(2.8%)의 환자(관상 동맥병, 건선), 에타네르셉트를 제공받은 1명(0.7%)의 환자(유방암), 및 ABT-874를 제공받은 2명(1.4%)의 환자(결장암, 발작)에서 보고되었다(표 26).
·연구 동안 사망을 발생하지 않았다(표 26).
[표 26]
Figure pat00046
· 감염의 심각한 부작용 현상을 포함하는 감염의 부작용 현상의 발생 정도를 ABT-874 치료 그룹과 에타네르셉트 치료 그룹 사이에서 비교가능하였다(표 27)
· 8명의 환자가 악성 암을 경험하였고; ABT-874 치료 그룹에서 3명(결장, 기저 세포 피부, 편평 세포 피부), 에타네르셉트 치료 그룹에서 4명(2명의 기저 세포 피부, 1명의 편평 세포 피부, 유방) 및 위약 치료 그룹에서 1명의 흑색종을 경험하였다(표 27).
· 8명의 환자에서 허혈성 심장병 관련 현상이 보고되었다. 이들 현상 중 7개는 크레아틴 포스포키나제의 증가이었고 1개 현상은 위약 환자에서 관상 심장병이었다.
· 심근 경색, 뇌졸중 또는 심혈관 사망으로 정의된 주요 부작용 심장 현상(MACE)은 어떠한 치료 그룹에서도 보고되지 않았다(표 27).
[표 27]
Figure pat00047
a1명의 환자는 연구 92일째에 입술 신생물, 정의되지 않은 악성 단계로 진단되었다.
b1명의 환자는 연구 30일 째에 흑색종으로 진단되었다.
c1명의 환자는 연구 110일째에 자체 유방암으로 진단되었다.
d1명의 환자는 연구 66일 째에 결장 암으로 진단되었다.
e1명의 환자는 연구 73일째에 발작으로 진단되었다.
f심근 경색, 뇌졸중 또는 심혈관 사망으로 정의된 주요 부작용 심장 현상
· ABT-874 및 에타네르셉트 치료 그룹 둘다에서 환자의 적어도 5%에서 발생한 가장 흔하게 보고된 응급-치료 부작용 현상은 상기도 감염(각각 7.2% 및 11.5%) 및 코인두염(각각 7.2% 및 7.9%)이었다(표 28)
[표 28]
Figure pat00048
결론
· ABT-874는 12주째에 2개의 동시-주요 정점: PGA 0/1 (P<0.001) 및 PASI 75 (P<0.001)의 통계적으로 유의적인 결과에 의해 입증되는 바와 같이 위약 및 에타네르셉트 둘다에 대해 우수하였다.
당해 연구 집단에서, 사망 없음, MACE 없음, 및 심각한 감염 및 악성 암의 비교가능하게 낮은 발생 정도가 치료 그룹을 따라 보고되었다.
실시예 14. 중등도 내지 중증의 건선을 지닌 환자에서 ABT-874 대 에타네르셉트 및 위약의 효능 및 안전성; VERTO 연구
목적
VERTO 연구의 목적은 12주에 걸쳐 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선의 치료에 대해 에타네르셉트 및 위약과 비교하여 ABT-874의 효능, 안전성 및 내성을 평가하는 것이다.
방법
주요 포함 기준
· 적어도 6개월 동안 만성 판형 건선의 임상 진단을 가진 ≥18세의 남성 및 여성
· 스크리닝 전 및 기준치(0주) 방문시 적어도 2개월 동안 안전한 판형 Ps
· 영향받은 체 표면적(BSA) ≥10%
· 기준치(0주) 방문시 적어도 중증도(≥ 3)의 의사의 전반적 평가(PGA) 및 ≥ 12의 건선 면적 및 중증도 지수 (PASI) 점수
주요 배제 기준
·ABT-874를 포함하는 전신적 항-IL-12/23p40 치료요법에 대한 선행된 노출
· ETN에 대한 선행된 노출 또는 ETN에 대한 공지된 고 감작성
·국소 치료요법, 광선 치료요법, 또는 전신적 치료요법 중단 불능
연구 설계(도 32)
· 12-주 이중-맹검, 이중 인체 모형, 다중심, 무작위 배치된 연구
· 환자를 3개의 후속 치료 아암 중 1개에 무작위 배치하였다(2:2:1); "a"는, 용량을 주당 2회 투여한 경우 주의 두번째 용량을 나타낸다:
· 0 및 4주째에 200 mg ABT-874 SC 및 8주째에 100 mg ABT-874 SC
· 0, 0a, 1, 1a, 2, 2a, 3, 3a, 4, 4a, 5, 5a, 6, 6a, 7, 7a, 8, 8a, 9, 9a, 10, 10a, 11, 및 11a주째에 3 및 4일 간격으로 주당 2회 50 mg의 ETN
·ABT-874 투여와 일치시키기 위한 0 및 4주째에 위약 SC에 이어 8주째에 위약 SC, 또는 ETN 투여와 일치시키기 위한 0, 0a, 1, 1a, 2, 2a, 3, 3a, 4, 4a, 5, 5a, 6, 6a, 7, 7a, 8, 8a, 9, 9a, 10, 10a, 11, 및 11a주째에 3 및 4일 간격으로 매주 2회 위약 SC
효능 측정
· 12주째에 "완치" 또는 "최소"(0/1)의 PGA 점수를 달성하는 환자의 비율
· 12주째에 PASI 75/90/100 반응을 달성하는 환자의 비율
안전성 측정
부작용 현상 및 심각한 부작용 현상(SAE)을 연구 전체에서 평가하였다.
통계적 방법
효능 분석은 치료 의사(ITT) 집단에서 수행하였으며; 비-반응자 산입(NRI)을 사용하여 상실된 데이터를 취급하였다.
· 혼주된 중심에 의해 계층화한 코크란-만텔-핸스첼 시험을 사용하여 12주째에 PGA 0/1 또는 PASI 75를 달성한 각각의 치료 그룹에서 환자의 비율을 비교하였다.
· 적절하게는 카이제곱 시험, 또는 피셔 정확도 시험을 사용하여 12주째에 PASI 90 또는 100을 달성하는 각각의 치료 그룹에서 환자의 비율을 비교하였다.
· 모든 통계적 시험은 0.05의 유의성 수준으로 2-측면화하였다.
· 안전성 분석을 안전성 집단에서 수행하였다; 안전성 변수는 치료 그룹에 의해 요약되었다.
결과
총 347명의 환자를 VERTO에 등록하였다. 기준치 인구학적 및 임상 특징은 치료 그룹에 따라 유사하였다(표 29).
[표 29]
Figure pat00049
효능
· ABT-874 치료 그룹(71.0%)에서 환자의 통계적으로 유의적으로 보다 큰 퍼센트가 위약 (2.9%) 또는 ETN (39.7%; 도 33)을 제공받은 환자와 비교하여 12주째에 0/1의 PGA를 달성하였다.
· ABT-874 치료 그룹 (81.9%)에서 환자의 통계적으로 유의적으로 보다 큰 퍼센트가 위약 (7.4%) 또는 ETN (56.0%; 도 34)을 제공받은 환자와 비교하여 12주째에 PASI 75 반응을 달성하였다.
· 12주째에, PASI 90 및 PASI 100 반응은 위약(각각 1.5% 및 0%) 또는 ETN (각각 23.4% 및 7.1%; 도 35 및 36)과 비교하여 ABT-874 치료 그룹 (각각 59.4% 및 37.0%)에서 환자의 통계적으로 유의적으로 보다 높은 퍼센트로 달성되었다.
안전성
· ETN 또는 ABT-874를 제공받은 환자의 약간 보다 더 높은 퍼센트가 위약을 제공받은 환자와 비교하여 부작용 현상(AE)을 경험하였으나; 2개의 활성 치료에 대한 안전성 프로파일은 유사하였다(표 30)
· 심각한 부작용 현상이 ABT-874를 제공받은 4(2.9%)명의 환자(바이러스 감염, 자체내 흑색종, 흥분/통증, 허리 척추 골절), ETN을 제공받은 1명(0.7%)의 환자(피부 감염) 및 1명(1.5%)의 위약 환자(엉덩뼈 골절; 표 30)에서 보고되었다.
· 연구 동안 사망을 발생하지 않았다(표 30)
[표 30]
Figure pat00050
· 감염의 심각한 부작용 현상을 포함하는, 감염의 부작용 현상을 지닌 환자의 퍼센트는 치료 그룹을 거쳐 비교가능하였다(표 31).
·각각 1개의 악성 암이 ETN 및 ABT-874 그룹에서 보고되었고; ETN을 제공받은 1명의 환자는 84일째에 기본 세포 암종으로 진단되었으며, 1명의 ABT-874 치료된 환자는 연구 29일째에 자체내 악성 흑색종으로 진단되었다(표 31).
· 허혈성 심장병 AE의 3명의 발생 정도가 ETN 그룹에서 보고되었고; 4명의 발생 정도가 ABT-874 치료된 환자에서 보고되었다.
·심근 경색, 뇌졸중, 또는 심혈관 사망으로 정의된 주요 부작용 심장 현상(MACE)은 치료 그룹 중 어디에서도 보고되지 않았다(표 31)
[표 31]
Figure pat00051
· ABT-874 또는 ETN을 제공받은 환자에서 발생하는 가장 일반적인 부작용 현상은 코인두염, 상기도 감염, 주사 부위 반응, 및 두통이며; 위약 환자에서 가장 흔히 보고된 부작용 현상은 상기도 감염이었다(표 32).
[표 32]
Figure pat00052
결론
· 중등도 내지 중증의 건선을 지닌 환자에서, ABT-874는 2개의 동시-1차 종점의 통계적으로 유의적인 결과에 의해 입증되는 바와 같이 위약 및 에타네르셉트 둘다에 대해 우수하였다: 치료 12주 후 PGA 0/1 (P<0.001) 및 PASI 75 (P<0.001)
· 당해 연구 동안 사망 또는 MACE 현상은 발생하지 않았다. 또한, 심각한 감염 또는 악성 암을 경험하는 환자의 퍼센트에 있어서 치료 그룹을 따라 차이가 관측되지 않았다.
실시예 15. 중등도 내지 중증의 건선을 지닌 환자에서 ABT-874 대 메토트렉세이트의 효능 및 안전성
목적: 중등도 내지 중증의 건선의 치료에 대한 ABT-874의 효능 및 안전성을 메토트렉세이트의 것과 비교하기 위한 것이다.
방법: 제III 상, 52-주의, 이중-맹검, 활성-조절된 시도(NCT00679731). 환자를 ABT-874(0 및 4주째에 200 mg에 이어, 8 내지 48주동안 매 4주 마다 100 mg ABT-874) 또는 메토트렉세이트(매주 5 내지 25 mg)에 대해 1:1로 무작위 배치하였다. 비-반응하는 환자(건선 면적이 있고 중증도 지수(PASI)가 <75이며 24주째에 의사의 전반적 평가(PGA)가 >0/1이거나 24주 후 PASI <50 및 PGA >3인 환자)는 연구를 중단하였다. 4개의 1차 종점은 24주째에 PASI 75, 24주째에 PGA 0 또는 1, 52주째에 PASI 75, 및 52주째에 0 또는 1의 PGA 점수를 사용한 환자의 퍼센트였다. 안전성 평가는 연구 전체에서 수행하였다. 비-반응자 산입(NRI)을 사용하여 상실된 데이터를 취급하였다.
결과: 317명의 환자를 연구에 등록하였다. ABT-874-치료된 환자의 68.8%가 메토트렉세이트-치료된 환자의 27.6%와 비교하여 연구를 완료하였다. 24주째에, PASI 75는 ABT-874-치료된 환자의 81.8% 대 메토트렉세이트-치료된 환자의 39.9%(P<0.001)로 달성되었고 0 또는 1의 PGA는 ABT-874 환자의 80.5% 대 메토트렉세이트 환자의 34.4%로 달성되었다(P<0.001). 52주째에, ABT-874 환자의 66.2% 대 메토트렉세이트 환자의 23.9%(P<0.001)가 PASI 75를 달성하였고, ABT-874 환자의 63.0% 대 메토트렉세이트 환자의 20.2%가 0 또는 1의 PGA를 달성하였다(P<0.001). 심각한 부작용 현상 또는 부작용 현상으로 인하여 중단한 환자의 수는 치료 그룹 둘다에서 유사하였다.
결론: 24 및 52주째에, ABT-874는 중등도 내지 중증의 건선을 지닌 환자에서 PASI 75 및 PGA 0/1의 1차 종점과 관련하여 메토트렉세이트보다 우수하였다.
실시예 16. 중등도 내지 중증의 건선에 대한 ABT-874 대 에타네르셉트 또는 위약 치료: 건강-관련 삶의 품질 결과
목적: 건선 환자에서 건강-관련 삶의 질(HRQOL)에 있어서 ABT-874 대 에타네르셉트 또는 위약을 사용한 치료 효과를 평가하기 위한 것이다.
방법: 당해 12-주 이중-맹검 비교가능한 연구에서, 환자를 ABT-874 (0 및 4주째에 200 mg, 8주째에 100 mg), 에타네르셉트(매 주 2회 50 mg), 또는 위약을 사용한 치료에 무작위 배치하였다. HRQOL 결과는 피부과 삶의 질 지수(DLQI), Ps-관련(VAS-Ps) 및 건선 관절염-관련 (VAS-PsA) 통증에 대한 가시적 유사체 규모, 및 간이 36문항 건강조사 정신적(MCS) 및 신체적(PCS) 부분 일람서 점수를 포함하였다. 보다 낮은 DLQI 및 VAS 점수 및 보다 높은 MCS 및 PCS 점수는 보다 우수한 결과를 나타내었다. 최종-관측-차기-이월 방법을 상실된 결과에 사용하였다. 치료는 12주에 대한 기준치로부터의 평균 변화에 대한 공분산 분석을 사용하여 비교하였다. 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID 반응)에서 또는 초과하여 개선된 환자의 퍼센트는 카이제곱 시험으로 비교하였다.
결과: ABT-874 (N=138)를 사용한 치료는 DLQI (-10.3 대 -8.1 또는 -3.0), VAS-Ps (-29.1 대-24.0 또는 -6.1) 및 MCS (5.4 대 3.2 또는 1.0)의 경우 에타네르셉트 (N≥141) 또는 위약 (N≥68)보다 유의적으로(p < 0.05) 보다 높은 평균 개선과 관련되었고, PCS (4.6 대 -0.3) 및 VAS-PsA (-23.5 대 -7.2)에서만 위약에 대해 관련되었다. 유의적으로 보다 높은 MCID 반응률은 MCS이 경우 ABT-874 대 에타네르셉트 또는 위약(43.4 대 30.6 또는 20.6%)으로 및 DLQI(81.5 대 38.1%), PCS (45.0 대 28.6%), VAS-PsA (69.2 대 28.6%), 및 VAS-Ps (56.6 대 25.8%)의 경우 ABT-874 대 위약 만이 관측되었다.
결론: ABT-874는 모든 건강-관련 삶의 품질 결과 측정 대 위약 및 DLQI, VAS-Ps 및 MCS 대 에타네르셉트에서 유의적으로 보다 큰 개선을 입증하였다. 유의적으로 보다 많은 환자가 모든 결과 측정 대 위약 및 MCS 대 에타네르셉트에서 ABT-874를 사용하여 임상적으로 의미있는 개선을 달성하였다.
실시예 17. 중등도 내지 중증의 건선을 지닌 환자에서 건강-관련 삶의 품질에 있어 ABT-874 대 에타네르셉트 또는 위약의 효과
목적: 건선 환자에서 건강-관련 삶의 품질(HRQOL)에 있어서 ABT-874 대 에타네르셉트 또는 위약의 효과 평가
방법: 환자를 ABT-874 (0 및 4주째에 200 mg, 8주째에 100 mg), 에타네르셉트 (매주 2회 50 mg) 또는 위약을 사용한 12-주 이중-맹검 치료에 무작위 배치하였다. 평가는 피부과 삶의 질 지수(DLQI), 건선-관련 (VAS-Ps) 및 건선 관절염-관련 (VAS-PsA) 통증에 대한 가시적 유사 규모, 및 간이 36문항 건강조사 정신적(MCS) 및 신체적(PCS) 부분 일람서 점수를 포함하였다. 최종-관측-차기-이월 방법을 결실 값에 대해 사용하였다. 공분산 분석을 기준치로부터 12주째에 평균 변화에 있어서의 치료와 비교하였다. 카이제곱 시험을 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID 반응)에서 또는 초과의 개선을 가진 환자의 퍼센트에서 치료와 비교하였다.
결과: ABT-874 치료(N=139)은 모든 결과(DLQI, 11.1 대 3.0; PCS, 4.6 대 1.1; MCS, 6.3 대 2.1; VAS-Ps, 36.0 대 7.5; VAS-PsA, 38.6 대 3.2)의 경우 위약(N=72)보다 유의적으로(p<0.05) 보다 크게 개선되었다. ABT-874는 DLQI (11.1 대 9.0), VAS-Ps (36.0 대 29.4), 및 MCS (6.3 대 3.9)에 대해 에타네르셉트 (N=139)보다 유의적으로 보다 큰 개선과 관련되었다. VAS-Ps에 대한 MCID 반응률은 에타네르셉트 또는 위약 (73.9% 대 58.0% 대 29.6%)보다 ABT-874의 경우 유의적으로 더 높았다. DLQI, MCS, PCS, 및 VAS-PsA에 대한 MCID 반응률은 ABT-874 대 에타네르셉트 또는 위약으로 더 높았으나, 차이는 위약에 대해서만 유의적이었다(DLQI, 81.8% 대 32.9%; MCS, 45.6% 대 30.4%; PCS, 55.9% 대 34.8%; VAS-PsA, 83.9% 대 20.0%).
결론: 위약과 비교하여, ABT-874는 모는 HRQOL 측정에서 유의적으로 보다 높은 평균 개선 및 MCID 반응률과 관련되었다. 에타네르셉트와 비교하여, ABT-874는 DLQI, VAS-Ps, 및 MCS에서 유의적으로 보다 높은 개선, 및 VAS-Ps에 대해 보다 높은 MCID 반응율을 가졌다.
실시예 18. ABT-874를 사용한 건선 치료: 건강-관련 삶의 질 및 작업 생산성 및 활동 장해에 있어서 효과
목적: 건선 환자에서 건강-관련 삶의 질(HRQOL), 작업 생산성 및 활성 개선(WPAI)에 있어서 ABT-874의 효과를 평가하는 것이다.
방법: 환자를 무작위 배치하여 유도-상 ABT-874 (0 및 4주째에 200 mg, 8주째에 100 mg) 또는 위약을 제공하였다. "완치/최소"의 12주 의사의 전반적 평가를 달성한 환자를 유지-상 ABT-874(매 4주 마다[q4] 또는 12주 마다[q12] 100 mg) 또는 52주까지 위약으로 재-무작위 배치하였다. HRQOL 결과는 피부과 삶의 질 지수(DLQI), 판형 건선- 및 건선 관절염-관련 통증에 대한 가시적 유사 규모, 및 간이 36문항 건강조사 정신적 부분 일람서 및 신체적 부분 일람서 점수를 포함하였다. 총 활동 장해(TAI)를 WPAI-SHP: PSO 설문지로 평가하였다. 최종-관측-차기-이월 방법을 상실된 값에 대해 사용하였다. 공분산의 분석을 기준치로부터 치료 사이의 12주 및 52주까지의 평균 개선과 비교하였다. 카이제곱 시험을 최소의 임상적으로 중요한 차이(MCID 반응)에서 또는 초과의 개선을 가진 환자의 퍼센트와 비교하였다.
결과: ABT-874 치료 (N=981)는 모든 결과(예를 들면, DLQI, 78.1% 대 19.4%; TAI, 51.4% 대 15.3%)에 대해 위약(N=484)보다 유의적으로(p<0.05) 보다 높은 12주 MCID 반응률을 가졌다. 재-무작위 배치한 후, 52주 MCID 반응률은 건선 관절염-관련된 통증을 제외하고 모든 결과에서 q12 (N=298)의 경우보다 ABT-874 q4 (N≥297) 경우에 유의적으로 더 높았다. ABT-874 그룹 둘다는 모든 결과(예를 들면, DLQI, 81.1% 대 71.1% 대 49.3%; TAI, 56.9% 대 45.1% 대 31.0%)에 대해 위약(N=149)보다 유의적으로 더 높은 MCID 반응률을 가졌다. 모든 결과에서 평균 개선은 12주째에 위약 보다 ABT-874의 경우 및 52주째에 ABT-874 q12 또는 위약보다 ABT-874 q4의 경우 유의적으로 더 높았다.
결론: 건선 대 위약에 대한 ABT-874 치료는 유도 및 유지 상 둘다에서 HRQOL 및 감소된 TAI에 있어서 유의적으로 보다 큰 개선과 관련되었다.
실시예 19. 중등도 내지 중증의 건선을 지닌 환자의 소 그룹에 따른 ABT-874에 대한 반응
목적: 중등도 내지 중증 건선을 가진 환자의 소그룹에서 ABT-874의 효능을 평가하기 위한 것이다.
방법: 52-주째에, 이중-맹검 연구 환자를 ABT-874 (200 mg, 0 및 4주째; 100 mg, 8주째) 또는 위약(PCB)으로 무작위 배치한 후; PGA "완치/최소"(PGA 0/1)를 12주째에 달성한 경우, 매 4주(q4wk) ABT-874 100 mg, 매 12주(q12wk) 100 mg, 또는 PCB q4wk (NCT00570986)에 대해 재-무작위 배치하였다. 1차 종점은 PGA 0/1 (12 및 52주) 및 PASI 75(12주)이었다. 종점의 NRI 분석을 기준치 특징으로 수행하였다. 안전성을 연구 전체에서 평가하였다.
결과: 1,465명의 환자를 기준치(평균 PASI: 19.2±7.4; ABT-874, N=981; PCB, N=484)에서 무작위 배치하였다. 사전 생물학적 제제를 사용한/사용하지 않은 환자에서 12주째 반응은, ABT-874(n=173/808) 대 PCB(n=76/408)의 경우, PGA 0/1: 65.9%/78.2% 대 1.3%/4.9%; 및 PASI 75: 74.6%/82.1% 대 1.3/5.1%; 52주째 반응은 ABT-874-q4wk (n=46/252) 대 -q12wk (n=49/249)의 경우, PGA 0/1: 78.3%/79.4% 대 34.7%/43.0%이었다. PsA의 병력이 있는/없는 환자의 경우, 12주 반응은 ABT-874(n=290/691) 대 PCB(n=150/334)의 경우, PGA 0/1: 71.7%/77.9% 대 0.7%/6.0%; 및 PASI 75: 78.6%/81.6% 대 1.3%/6.0%; 52주째 반응은, ABT-874-q4wk (n=86/212) 대 -q12wk (n≥79/219)의 경우, PGA 0/1: 77.9%/79.7% 대 30.4%/45.7%이었다. 보다 큰 감염 및 악성 암이 12주까지 ABT-874 대 PCB를 제공받은 환자(각각 22.3% 대 19.8% 및 0.6% 대 0%)에서 발생하였다. 주요 부작용 심장 현상(MACE)은 7명의 ABT-874-치료된 환자에서 발생하였다(누구도 사전 생물학적 제제를 사용하지 않았으며; 1명은 PsA를 가졌고; 평균 기준치 PASI: 15.8　±3.2이었다). MACE는 PCB-치료된 환자에서 발생하지 않았다.
결론: ABT-874-치료된 환자의 높은 퍼센트가 선행된 생물학적 제제 치료 또는 PsA의 병력과 상관없이 PGA 0/1 (12 및 52주) 및 PASI 75 (12주)를 달성하였다. 보다 큰 감염, 악성 암 및 MACE가 ABT-874 대 PCB-치료된 환자에서 발생하였으며, 이는 이들 현상에 대한 밀접한 감시의 중요성을 나타낸다.
실시예 20. 개방-표지 연장 연구로부터 중등도 내지 중증 건선-중간 분석의 치료의 경우 ABT-874의 장기간 안전성
도입: 항-IL-12/23 제제, ABT-874의 진행중인, 개방-표지 연장 연구(OLE)로부터의 중간 결과는 예비의, 장기간 안전성 데이터를 제공한다.
방법: 선행된 제2 또는 3상 건선 시도에서 ABT-874에 대해 무작위 배치한 환자가 각각의 선행된 연구에서 반응의 완료 또는 상실시 당해 160-주, 다-중심 OLE에 대해 적임이다. 환자는 OLE 기준치로 시작하여, 매 4주째에 100 mg ABT-874를 제공받는다. 당해 분석은 OLE동안 ≥1 용량의 ABT-874를 제공받은 모든 환자를 포함한다(안전성 세트). OLE 또는 선행 연구로부터에 상관없이, ABT-874의 제1 용량으로부터 및 연구 약물의 최종 용량 후 ≤45일 째의 부작용 현상(AE)을 기록한다. 중간 분석은 2009년 11월 26일 전체에서 이용가능한 데이터를 제공한다.
결과: 마감일자로, 안전성 세트는 2,298명의 환자로 이루어졌다(2904.0 PY 약물 노출, 치료시 421.7 ± 86.8 평균 일; 68.8% 남성; 평균 연령, 45.2 ± 3.2 년). 2.7%는 AE로 인해 포기하였고; 89.1%는 여전히 등록되어 있다. 환자의 ≥5%에서 발생한 AE는 URI (13.6%), 코인두염 (13.4%), 두통 (6.7%), 관절통 (5.8%), 및 고혈압 (5.2%)이었다. 감염성 AE는 45.5%에서 발생하였고; 심각한 감염은 1.0%에서(가장 일반적인 것: 연조직염, n=8; 폐렴, n=5; 패혈증, n=4; 및 곁주머니염, n=3); 및 기회 감염은 0.3%에서(칸디다증, n=3; 경구 칸디다증, n=1; 식도 칸디다증, n=1; 및 콕시디오이데스진균증, n=1)에서 발생하였다. 환자의 1.6%는 악성 암을 가졌고; 1.2%는 NMSC(BCC, n=15; SCC, n=16)를 가졌으며; 1명은 자체내 흑색종이 발생하였다. 림프종은 관측되지 않았다. 18개의 주요 심혈관 유해 사건(MACE)이 발생하였다(선행 연구 동안 7명, OLE 동안 11명; 심근 경색, n=11; 뇌졸중, n=3; 및 심혈관 사망, n=4; 72.2% 남성; 88.9% 연령 ≥45세; 모두 ≥2 CAD 위험을 가졌다; OLE 현상까지의 평균 시간 31.5주).
결론: OLE 중간 분석은 중등도 내지 중증의 건선의 치료를 위해 ABT-874를 제공받은 환자에서 감염, NMSC, 및 MACE의 AE를 밀접하게 모니터링할 필요성을 지지한다.
실시예 21. 항-인터류킨 12/23 모노클로날 항체, ABT-874의 제III상, 무작위 배치된, 위약-조절된 임상 시도의 혼주된 분석
목적: ABT-874 제III 상 임상 시도에 따른 중등도 내지 중증 건선에서 효능 및 안전성 실험을 측정하기 위한 것이다.
방법: 3회의 무작위 배치된, 위약-조절된 연구로부터의 데이터를 12주에 걸쳐 혼주하였다. 모든 연구에서, 중등도 내지 중증 건선을 지닌 환자를 ABT-874 (0 및 4주째에 200 mg에 이어 8주째에 100 mg) 또는 일치하는 위약에 대해 2;1로 무작위 배치하였다. 3회 시도는 의사의 전반적 평가 "완치" 또는 "최소" 점수(PGA 0/1)의 일반적인 1차 종점, 및 12주째에 기준치 건선 면적 및 중증도 지수 (PASI 75)로부터 75% 개선을 측정하였다. 2차 종점은 PASI 90/100, 및 DLQI를 포함하였다. 부작용 현상을 각각의 연구 동안 및 연구 약물의 최종 용량으로부터 45일까지 수집하였다.
결과: 데이터를 1882명의 환자(ABT-874, N=1258 [67.4% 남성, 90.3% 백인, 평균 [SD] 연령 45.3 [13.3]세; 위약, N=624, 유사한 인구학)에 대해 혼주하였다. 기준치 PASI는 그룹 사이에서 유사하였다(ABT-874 및 위약에 대해 각각 19.0 [7.5] 및 19.1 [7.2]). ABT-874-치료된 환자의 75.1% (945/1258) 및 80.8% (1017/1258)가, 위약을 제공받은 환자의 4.2% (26/624) 및 5.1% (32/624)(둘다 종점에 대해 p<0.001)과 비교하여 12주째에 각각 PGA 0/1 및 PASI 75를 달성하였다. 12주째에 PASI 90 반응은 ABT-874 대 위약 그룹에서 각각 60.7% (763/1258) 대 1.8% (11/624)이었고; PASI 100 반응은 ABT-874의 사용시 32.4% (407/1258)이었으며, 위약 그룹(둘다 종점에 대해 p<0.001)에서는 달성되지 않았다. 기준치 DLQI 점수는 ABT-874- 및 위약-치료된 환자의 경우 12.9 [7.0] 및 12.8 [6.9]이었고; 12주째에, 각각의 그룹에 대해 DLQI에 있어서 평균 퍼센트 변화는 각각 -79.1 [28.9] 대 1.4 [69.8]이었다. 심각한 부작용 현상(AE) 발생율은 ABT-874 대 위약에 대해 2.1% 및 1.4%이었다. 감염성 및 심각한 감염성 AE의 발생율은 ABT-874의 경우 22.6% 및 0.5%이고, 위약의 경우 19.1% 및 0.2%이었다. NMSC는 ABT-874를 제공받은 6명의 환자에서 관측되었고; 위약 사용시에는 관측되지 않았다. 5명의 ABT-874-치료된 환자는 주요 심혈관 유해 사건(MACE)을 가졌으며; MACE는 위약 사용시 관측되지 않았다.
결론: 중등도 내지 중증의 건선에서 3회의 제III 상, 위약-조절된 시도로부터 혼주된 효능 결과는 ABT-874 대 위약의 사용시 우수한 PGA 및 PASI 반응을 입증하였다. 보다 높은 감염 율, NMSC, 및 MACE가 ABT-874 대 위약의 사용시 발생하였으며, 보다 많은 건선 집단에서 이들 현상에 대해 모니터링을 강조할 필요가 있다.
실시예 22. 중등도 내지 중증의 건선의 치료를 위해 BriakinumabTM을 에타네르셉트 및 위약과 비교하는 2회의 제III 상 시도로부터의 혼주된 안전성 및 효능 결과
목적: 중등도 내지 중증의 건선 치료를 위해 BriakinumabTM을 에타네르셉트 및 위약에 대해 비교하는 2회의 독립된 시도로부터의 효능 및 안전성 결과의 통합된 분석을 제공하는 것이다.
방법: 효능 및 안전성 데이터를 2회의 12-주, 제III 상, 이중 인체모형, 무작위 배치된 시도(NCT00710580, NCT00691964)로부터 혼주하였다. 환자를 2:2:1로 무작위 배치하여 briakinumabTM(0 및 4주째 200mg에 이어 8주째 100 mg), ETN (매주 2회 50 mg), 또는 일치하는 위약을 제공하였다. 12주째에, 주요 효능 종점은 "완치" 또는 "최소"(0/1)의 PGA 점수를 달성하는 환자의 퍼센트 및 PASI 75 반응을 달성하는 환자의 퍼센트였다. 2차 종점은 12주 PASI 90 및 PASI 100 반응률을 포함하였다. 부작용 현상(AE)은 연구 전체에서 평가하였다. 비-반응자 산입(NRI)을 사용하여 상실된 데이터를 취급하였다.
결과: 개개 시도 결과는 briakinumabTM 대 ETN 및 pbo (P<0.001, briakinumabTM 대 ETN 또는 pbo, 둘다 연구 둘다에 대한 1차 종점 둘다)의 우수한 효능을 입증하였다. 당해 혼주된 분석을 위해, 697명의 환자로부터의 데이터를 분석하였다: briakinumabTM, N=277; ETN, N=280; pbo, N=140. 12주째에, 71.8%, 34.6%, 및 3.6%의 briakinumabTM-, ETN-, 및 pbo-치료된 환자 각각은 PGA 0/1 (P<0.001, briakinumabTM 대 ETN 또는 pbo)를 달성하였다. 12주째에 briakinumabTM, ETN-, 및 pbo-치료된 환자에 대한 PASI 75 반응률은 각각 81.2%, 47.9%, 및 7.1%이었다(P<0.001, briakinumabTM 대 ETN 또는 pbo). 12주째에 PASI 90 및 PASI 100 반응률은 briakinumabTM/ETN/pbo, 각각에 대해 57.4%/18.6%/2.9% 및 32.9%/6.4%/0.0%이었다(P<0.001, PASI 90 및 100 둘다에 대해 briakinumabTM 대 ETN 또는 pbo). 심각한 AE 발생율은 다음과 같다: briakinumabTM/ETN/pbo 환자에 대해 2.2%/0.7%/2.1%. 심각한 감염 발생율은 다음과 같다: briakinumabTM/ETN/pbo 환자에 대해 0.4%/0.4%/0%. 특정 치료 그룹에서 사망 또는 주요 심혈관 유해 사건(MACE)은 없었다.
결론: 2회의 독립된 시도로부터의 혼주된 효능 결과는, briakinumabTM이 중등도 내지 중증의 건선 치료의 경우 ETN 및 pbo에 대해 보다 더 우수하였다. 심각한 부작용 현상은 모든 그룹에서 낮았고 및 MACE는 관측되지 않았다.
실시예 23. 중등도 내지 중증의 건선의 치료에 대한 ABT-874의 장기간 안전성 및 효능 - 개방 표지 연장 연구로부터의 중간 분석
건선의 치료에 있어서 ABT-874의 안전성 및 효능을 2009년 11월 26일자로 수득된 결과 측면에서 중간 분석으로 평가하였다. 환자들은 선행된 ABT-874 건선 제II 상 또는 제III 상 시도에서 반응의 완료 또는 상실 후 등록에 적임이었다. 연구 기간은 0주부터 시작하여 매 4주 마다 100 mg ABT를 포함하는 치료를 사용하여 160주로 계획되었다.
선행된 제II 상 또는 제III 상 임상 시도는 표 33에 설정된 연구를 포함한다:
[표 33]
Figure pat00053
중등도 내지 중증 건선의 치료시 ABT-874의 효능은 도 37에 묘사한 바와 같이 이들 선행 연구에서 입증되었다.
당해 실시예에 나타낸 데이터는 결과의 중간 분석을 나타낸다.
효능의 유지: 평가한 환자는 (i) 선행된 제II 상 또는 III 연구 동안 및 현재의 개방 표지 연장(OLE) 연구에서 적어도 1회 용량의 ABT-874를 사용 및 (ii) OLE에서 제1의 용량시 또는 투여 전에 최종 평가시 "완치" 또는 "최소"(PGA 0/1)인 의사의 전반적 평가 점수를 사용한 것들을 포함하였다. PGA 점수 및 건선 면적 및 중증도 지수(PASI) 반응을 OLE 동안 매 12주 마다 측정하였다(연구 M06-890에 등록된 환자들은 유도 상 동안에 적어도 1회 용량의 ABT-874를 제공받아야 한다).
2298명의 환자에게 당해 중간 분석이래 OLE에서 적어도 1회 용량의 ABT-874를 제공하였다. 구체적으로, 251명(10.9%)의 환자들은 OLE로부터 중단하였고 61명(2.7%)은 부작용 현상으로 인해 포기하였다. 궁극적으로, 625명의 환자가 효능 유지 집단에 대한 기준(즉, 환자는 초기 연구에서 부하된 용량(200-200-100 mg)을 제공받았고 OLE 연구에서 "완치" 또는 "최소"의 PGA-점수를 가졌다)을 충족하였다. 집단의 인구학 및 임상 특징은 다음과 같았다:
[표 34]
Figure pat00054
효능 유지 중간 분석의 결과는 도 38 및 39에 나타낸다. 구체적으로, 도 38은 시간에 걸쳐 PASI 75를 유지한 환자의 퍼센트를 묘사하는 반면, 도 39는, 시간에 걸쳐 PASI 100을 유지하는 환자의 퍼센트를 묘사한다. 당해 결과는, 선행된 제II 상 및 제III 상 연구에서 달성된 것으로서 PASI 및 PGA 반응의 높은 수준이 일반적으로 매 4주 마다 100 mg을 사용한 추가의 치료시 일반적으로 유지되었음을 제안한다.
안전성 분석: 평가한 환자는 (i) 현재의 개방 표지 연장(OLE) 연구에서 적어도 1회 용량의 ABT-874를 사용하고 (ii) 선행된 연구 또는 OLE에서 제공받은 제1 용량의 ABT-874로부터의 부작용 효과를 가진 환자들을 포함하였다. 안전성은 연구 전체에서 및 연구 약물의 최종 용량으로부터 45일까지 평가하엿다.
다음 표는 특수한 부작용 효과의 발생을 요약한다:
[표 35]
Figure pat00055
따라서, 중등도 내지 중증의 건선의 치료를 위해 ABT-874를 제공받은 환자는 특정의 부작용 현상, 특히, 감염, 비-악성 피부 암(NMSC) 및 심혈관 현상에 대해 모니터링되어야 한다.
MACE 분석: 평가한 환자는 선행된 임상 연구 또는 현재의 개방 표지 연장(OLE) 연구(N=2520; 환자 총 연령 3010.6)에서 적어도 1회 용량의 ABT-874를 사용한 환자들을 포함하였다. 총 18명의 MACE(주요 심혈관 유해 사건)가 확인되었다. 7명의 MACE가 초기 12주의 위약 조절된 치료 기간 동안 5명 및 12주 내지 52주 사이에서 2명을 포함한 1회의 무작위 배치된 조절된 예비 임상 시도에서 확인되었다. 또한, 11명의 MACE가 OLE 연구에서 확인되었다.
18명의 MACE 경우 중, 11명은 비-치명적인 심근경색이었고, 3명은 비-치명적인 심혈관 뇌졸중이었으며 4명은 심혈관 사망이었다.
MACE 발생율은 표 36에 나타낸다.
[표 36]
Figure pat00056
MACE의 빈도는 도 40에 나타낸 바와 같이 시간에 걸쳐 동등하게 분포하는 것으로 보였다. 따라서, ABT-874에 대한 노출 지속 기간과의 관련성은 확인되지 않았다.
추가의 위험 분석을 수행함으로써 표준 심혈관 위험 인자들이 제III 상 또는 제II 상 연구 전 또는 OLE에서 적어도 1회 용량의 ABT-874를 사용한 환자에서 일변량해석으로 분석하였다. 표준 심혈관 위험 인자는 체질량 지수(BMI), HDL-콜레스테롤, LDL-콜레스테롤, 트리글리세라이드, 수축기/이완기 혈압, 고혈압 병력, 당뇨병 병력, 심혈관병(CVD)의 병력, 현재 흡연 및 연령을 포함한다.
표 37에 설정된 바와 같이, MACE를 경험한 18명의 피험자가 다음 위험 인자들을 가졌다:
[표 37]
Figure pat00057
(1) 당뇨병 병력; (2) 적어도 30 또는 그 이상의 체질량 지수; (3) 부적절한 혈압 조절(적어도 140/90 또는 그 이상의 혈압; 및 (4) (i) 심근 경색; (ii) 입원을 필요로 하는 협심증; (iii) 재혈관화를 요하는 관상 심장병; (iv) 말초 동맥병; (v) 입원을 필요로 하는 울혈성 심장 부전; (vi) 뇌졸중 또는 (vii) 일시적인 허혈성 쇼크 중 적어도 하나로 정의된 심혈관병의 병력을 포함하는, 4개의 특이적인 심혈관 위험 인자가 MACE에 대해 예측되는 것으로 확인되었다.
결론적으로, 표 38에 설정된 바와 같이, 분석은, MACE의 발생율이 단지 0 또는 1의 심혈관 위험 인자를 갖는 환자와 비교하여 적어도 2개의 심혈관 위험 인자를 가진 환자에서 더 높았음을 나타내었다.
[표 38]
Figure pat00058
*Hx 당뇨병, Hx CVD, 기준치에서 조절되지 않은 BP(≥140/90), BMI ≥ 30
데이터는, 심혈관 위험 인자 1개를 가지거나 없는 환자에서, MACE의 발생율은 ABT-874의 투여시 유의적으로 감소할 수 있음을 입증한다.
실시예 24. 중등도 내지 중증의 건선의 치료를 위한 완전한 사람 인터류킨-12/23 모노클로날 항체, briakinumabTM의 2회 투여 요법의 효능 및 안전성을 평가하는 제III 상, 무작위 배치된, 위약-조절된 시도
도입
선행된 제II 상 연구는, briakinumabTM, 완전한 사람 항-IL12/23 모노클로날 항체가 중등도 내지 중증의 건선의 치료에 효과적이였음을 입증하였다(참조: 예를 들면, 상기 실시예 1 내지 11)(참조: Kimball AB, et al., Arch Dermatol 2008; 144: 200-7). 현재의 연구는 briakinumabTM의 안전성 및 효능을 추가로 평가하여 위약에 대한 2회의 유지 치료요법 투여 요법과 비교하였다. 당해 연구로부터의 발견은 중등도 내지 중증 건선의 치료시 항-IL-12/23 치료에 대한 잇점-위험 프로파일(benefit-risk profile)에 있어서의 확장된 통찰력을 제공한다.
방법
연구 설계, 윤리 및 참여자
52-주의, 무작위 배치된, 이중-맹검, 위약-조절된 시도를 2개 상으로 수행하였다: 12-주 유도 상 및 유지 상, 이 동안 치료가 52주에 걸쳐 지속되었다(도 41). 기준치에서, 환자들을 2:1로 무작위 배치하여 briakinumabTM 또는 위약을 제공하였다. 치료는 0주째에 200 mg 피하 용량의 briakinumabTM에 이어, 4주째에 200 mg, 및 8주째에 100 mg; 또는 0, 4 및 8주째에 일치된 위약으로 시작하였다. 12주째에, "완치" 또는 "최소"의 의사의 전반적 평가 (PGA) 점수를 달성한 환자를 2:2:1로 재-무작위 배치하여 다음 3개의 유지 요법 중 하나를 제공하였다: 매 4주째에 briakinumabTM 100 mg, 매 12주째에 100 mg briakinumabTM, 또는 매 4주째에 위약.
연구 프로토콜 및 환자에게 통지한 동의서는 각각의 참여 연구 위치에서 독립적인 윤리 위원회(Independent Ethics Committee) 또는 기관 검토 이사회(Institutional Review Board)에 의해 승인되었고, 통지된 동의서는 임의의 연구-관련 과정을 시작하기 전에 모든 환자가 서명하였다. 환자는 미국 및 캐나다 내의 116명의 임상 지역로부터 모집하였다. 18세 이상의 성인들은, 이들이 중증 판형형 건선(=10% 이상 영향을 받은 체 표면적, 적어도 "중등도"의 PGA 점수, 및 ≥12의 건선 면적 및 중증도 지수(PASI))을 적어도 6개월 동안 갖는 경우 참여하는데 적임이었고, 전신 치료요법 또는 광선 치료요법에 대한 후보가 되었다.
가임기 여성들은 연구 전반에 걸쳐 및 연구 약물의 최조 투여후 60일 동안 적어도 2가지 피임 방법을 사용할 필요가 있었고; 임신중이었거나 수유중이었던 여성들은 참여에서 배제시켰다. 배제하는 다른 이유들은 IL-12 억제제에 대한 선행된 노출, 또는 건선의 평가를 방해할 수 있는 임의의 활성 피부 상태를 포함하였다. 환자들이 어떠한 불량하게 조절된 의학적 상태, 또는 어떠한 간, 신장 또는 혈액 질환을 가진 경우, 이들은 등록하지 않았다. 감염이나 중중 감염의 위험을 갖는 환자들은 역시 연구에서 배제시켰다. 결핵(TB) 스크리닝은 등록 전에 모든 환자에서 수행하였다. ≥5mm 경화(선행된 BCG 예방접종과 무관하게)의 정제된 단백질 유도체 시험 결과, 및/또는 잠복성 TB를 나타내는 흉부 x선 발견을 갖는 환자들은, 국소 가이드라인에 의해 추천된 예방적 치료가 연구 치료를 개시하기 전에 마련되지 않는 한, 등록시키지 않았다. 성공적으로 치료된 기저 세포 또는 비-전이성 편평 세포 피부암, 또는 동일계내 경구 암종 이외의 악성 암의 병력을 갖는 환자들은 등록시키지 않았다.
다음의 치료요법들을 사용하는 것은 연구 동안에 허용되지 않았으며, 코르티코스테로이드, 비타민 D 유사체, 또는 2주 이내의 레티노이드(손바닥, 발바닥, 얼굴, 염증 부위, 또는 서혜부에서 저 효능 국소 코르티코스테로이드 외에); 2주 내의 UVB 광선 치료요법; 4주 내의 소랄렌 및 UVA 광선 치료요법; 4주내의 전신 비생물학적 치료요법; 또는 12주 내의 생물학적 치료요법을 포함하는, 기준치: 국소적 치료 전에 각각의 시간표 내에서 중단시켜야 했다. 경구 또는 주사가능한 코르티코스테로이드의 임의의 용도는 허용되지 않았지만, 흡입된 코르티코스테로이드는 안정한 의학적 상태 동안에 계속될 수 있었다.
연구 목적 및 결과
연구를 수행하여 중등도 내지 중증 건선의 치료를 위한 briakinumabTM의 효능 및 안전성을 평가하고 위약에 대하여 2개의 유지 용량 요법을 비교하였다. 3개의 1차 종점을 측정하였다: 12주 및 52주째에 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수, 및 12주째에 기준치 PASI (≥PASI 75)로부터 적어도 75% 개선. 통계학적 비교는 다음 순서로 등급을 매겼다: 1) briakinumabTM 대 위약에 대하여 12주째의 PGA "완치" 또는 "최소" 반응 속도; 이후의 2) 2개의 치료 그룹 사이에 12주째의 PASI 75 반응 속도의 비교; 및 이후의 3) 매 4주째에 briakinumabTM 그룹 대 위약에 대한 52주째의 PGA "완치" 또는 "최소" 유지 속도; 이후의 4) 매 12주째의 briakinumabTM 그룹 대 위약에 대한 52주째의 PGA "완치" 또는 "최소" 유지 속도.
2차 효능 분석은 PASI 75, 및 시간에 따른 기준치 PASI (PASI 90 및 PASI 100)으로부터의 90% 및 100% 개선의 비율, 기준치에 대한 PASI의 변화, 및 시간에 따른 피부과 삶의 질 지수(DLQI) 점수를 비교하였다. PASI 100, PASI 90, 및 12주째에 기준치 DLQI로부터의 변화는 제2의 종점으로 랭킹되었지만, 시간에 따른 평균 PASI 점수 및 PASI 반응 속도는 랭킹되지 않았다. 효능 결과는 각각의 briakinumabTM 투여 그룹 대 위약 사이, 및 2개의 briakinumabTM 투여 그룹들 사이에서 비교하였다.
추가의 분석은 PGA "완치" 또는 "최소" 점수, 및 다음 소그룹에 의한 PASI 75 반응을 평가하였다: 선행된 생물학적 제제 치료 유무; 건선 관절염(PsA)의 유무; >20 또는 ≤20의 기준치 PASI 점수; 및 기준치 체중 ≥100 kg 또는 <100 kg. 임의의 심혈관의 의학적 병력 또는 잠재하는 심혈관 위험 인자 중의 우세는 치료 그룹에 의해 이후(post hoc)에 측정하였다. 환자들은 연구 전반에 걸쳐 및 연구 치료의 최종 투여후 54일 동안 부작용 현상에 대해 평가하였다.
통계학적 분석
1350명의 피험자(briakinumabTM를 투여받은 900명, 및 위약을 투여받은 450명)의 시료 크기는 위약에 비해 briakinumabTM의 우수성(각각 12주째에 70% 대 4%의 briakinumabTM 대 위약 치료된 환자에서 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수로서 정의된 우수성)을 입증하는 >90% 힘을 제공할 수 있었다는 선험적 결과를 평가하였다. 12주 후에 각각의 치료 그룹에서 필요한 시료 크기는, 대략 630명의 환자가 재-무작위 배치될 수 있고, 위약을 투여받은 환자들 중 40%가 52주까지 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수를 유지할 수 있다고 가정하여 측정하였다. 재-무작위 배치는 2:2:1 방식으로 12주째에 수행하였으며, 각각의 briakinumabTM 아암에 할당된 250명의 환자 및 위약에 할당된 125명의 환자는 90% 파워를 제공하여 PGA 반응율에서 18% 차이를 검출할 수 있었다.
무작위 배치 스케쥴을 준비하고 통계학의 연구 스폰서의 부서가 유지하였고, 상호작용하는 음성 반응 시스템을 통해 투여하였다. 0주에서의 무작위 배치는 중앙에 의해 수행되었으며; 12주에서의 재-무작위 배치는 0주에서 지정된 치료의 의해 계층화되었다. 연구 약물의 모든 용량은 맹검 방식으로 제공하였으며, 할당된 치료 그룹은 연구 조사자 및 사이트 직원, 피험자, 및 연구의 수행에 책임이 있는 스폰서의 임상 팀으로부터 비밀로 하였다.
모든 통계학적 시험들은 0.05에서 설정된 알파 수준으로 2-측면 시험하였다. 제1의 및 등급화된 제2의 변화물을 단계적 방식으로 분석하였고, 여기서 각각의 연속적인 비교는, 단지 다음의 최고 등급의 변수로 통계학적 유의성이 관측된 경우에만 수행하였다. 효능 분석은, 연속 변수를 위해 먼저 수행된 분류학적 변수 및 최종 관측에 대한 비 반응자 귀속을 이용하여 부여된 값들을 생략하여, 치료-의사 집단에서 수행하였다. 제1의 분석은 센터에 의해 조절된 코크란-만텔-핸스첼 시험을 이용하여 수행하였다. 카이-제곱 시험은 쌍방식 비교에 대해 사용하였다. 평균 변화 점수에 대한 치료 차이는 ANCOVA를 사용하여 분석하였는 데, 이는 인자로서의 치료 및 공변수로서의 기준치 값을 사용하여 수행하였다. 12주째에 매 4주 briakinumabTM 아암에서 무작위 배치된 1명의 피험자는 유지 상 동안에 연구 약물을 제공받지 않았으며 이에 따라 안전성 분석에 포함하지 않았다.
결과
유도 단계
1465명의 환자를 무작위 배치하였다(briakinumabTM n=981; 위약, n=484; 도 42). 기준치 기준치 인구학적 및 임상적 특성은 2개의 치료 그룹들 사이에서 비교가능하였으며(표 39), 중등도 내지 중증 건선에 대한 다른 제III 상 임상 시도에서 관측된 것들과 유사하였다(참조: Reich K, et al. Lancet 2005; 366: 1367-74; Menter A, et al. J Am Acad Dermatol 2008; 58: 106-15; Saurat JH, et al. Br J Dermatol 2008; 158: 558-66; Papp KA, et al. Lancet 2008; 371: 1675-84). 심혈관 관련 의학적 병력 또는 관상 심장병에 대한 위험 인자(CHD)[참조: Executive Summary of The Third Report of The National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, And Treatment of High Blood Cholesterol In Adults (Adult Treatment Panel III). Jama 2001; 285: 2486-97]를 갖는 환자들의 비율은 그룹들 사이에서 일반적으로 유사하였다(표 40).
위약과 비교하여, 12주째에 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수를 달성하는 환자의 비율은 briakinumabTM을 사용하는 경우 상당히 더 높았다(briakinumabTM 그룹에서 76.0% 대 위약 그룹에서 4.3%, p<0.001; 도 43). PASI 75 반응은 22명(4.5%)의 위약 치료된 환자(p<0.001; 표 41)와 비교하여 briakinumabTM을 투여받은 792명(80.7%)의 환자에서 관측되었다. briakinumabTM으로 치료한 환자의 61.6%는 PASI 90을 달성하였고 32.2%는 PASI 100을 달성하였다. 당해 반응은 신속하였다: PASI에서 51.7% 감소가 4주 까지 briakinumabTM을 사용하는 경우 관찰되었고, 개선은 12주에 걸쳐 계속되었으며, 이때 PASI에서의 평균 감소율은 85.4%(도 44)이었다.
평균 DLQI 점수에서의 큰 감소가 또한, 12주 내의 삶의 품질에서의 상당한 이점을 나타내는, briakinumabTM-치료된 환자에서 관측되었다. briakinumabTM을 그룹에 대한 평균 DLQI 점수는 기준치에서 12.8 (SD 7.02)내지 12주째에 2.7 (SD 4.12)로 감소되는 반면, 위약 그룹에서의 DLQI 점수는 이 기간에 걸쳐 비교적 안정하게 잔류하였다(표 41).
소그룹 분석은, briakinumabTM을 투여받은 환자의 65% 초과 내지 70%가, 선행된 생물학적 제제 치료, 기준치 PASI 점수, 건선 관절염의 병력 또는 기준치 체중에 무관하게, 12주째에 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수 및 PASI 75 반응을 달성하였다(표 41).
유지 상
치료한지 12주 후에, 766명의 환자는 "완치" 또는 "최소"의 PGA에 도달하였고 유지 상으로 도입되었으며, 이들 중 대부분은 briakinumabTM 그룹으로부터 존재하였다(n=745; 도 42). 이들 환자에 대해, 596명을 재-무작위 배치하여 4주(n=298) 또는 12주(n=298) 간격에서 계속해서 briakinumabTM을 제공한 반면, 149명은 위약에 할당하였고, 이에 따라 briakinumabTM 치료로부터 회수되었다(회수 그룹). 이들 3개 치료 그룹에 대한 기준치에서 인구학적 및 임상적 특징은 일반적으로 유사하였으며, 유도 상 치료 그룹에서 관찰된 것들과 비교가능하였다(표 42). 이러한 보고는 초기에 위약을 투여받은 환자들에 대한 효능 결과를 배제하였으며 유지 상에서 재-무작위 배치하였는데, 그 이유는 이 그룹에서의 수가 매우 작았기 때문이다(n=21).
52주에 걸쳐 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수를 유지하는 환자의 비율은 치료 회수 그룹에 대한 것보다 2개의 briakinumabTM 치료 그룹에 대하여 더 크고 매 4주 투여 아암에서 최대였다(도 45 [a]). 회수 그룹 중의 149명의 환자 중에서, 6.0%는 각각 매 12주 및 매 4주 치료 그룹(p<0.001)에서 각각 298명의 환자들의 각각 41.6% 및 79.2%와 비교하여 52주째에 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수를 가졌다. 그러나, 높은 반응 수준이 회수 그룹에서 연장된 기간에 걸쳐: 유지 상 동안 24주째에 및 치료 회수 후 12주째에 걸쳐 지연된 유도 동안에 달성되었고, 환자의 45.6%는 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수를 유지하였다.
유지 상 동안의 PASI 75 반응율은 briakinumabTM 치료를 계속한 환자들 중에서 최고이었다: 각각, 매 4주 및 매 12주 투여 그룹에서 환자의 82.6% 및 45.6%, 대 52주째에 당해 효능 반응을 유지한 회수 그룹에서 8.7%(도 45b). 재-무작위 배치에서 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수를 가진 환자의 많은 비율에 의해 달성된 PASI 100 반응은 일반적으로 32주에 걸쳐 진행되는 치료와 함께 계속 증가하였고, 높은 용량 아암에서, 유지 상의 나머지 경우에서 악화되지 않았다(도 45c). 매 4주 및 매 12주째에 briakinumabTM 그룹 각각에서의 63.4% 및 23.5%는, 치료로부터의 회수된 환자들의 4.0%와 비교하여, 52주째에 PASI 100 반응을 가졌다(p<0.001). 치료요법으로부터 회수된 환자에서의 PASI 반응율은, 질환의 기준치 수준에 대하여 지연된 복귀를 갖는, PGA 결과를 반영하였다.
안전성 결과
briakinumabTM을 제공받은 환자에서의 가장 일반적으로 관찰된 부작용 현상은 코인두염, 두통, 상기도 감염(URI), 및 등 통증(표 43)이었다. 등 통증은 모든 치료 그룹에서 관측되었지만, 매 4주 대 매 12주째에 briakinumabTM을 제공받은 환자에서, 또는 위약을 제공받은 환자에서 더 빈번하게 보고되었다(각각 5.4% 대 2.0% 및 2.0%; 표 41). 심각한 부작용 현상(SAE)는 유도 및/또는 유지 상 동안에 briakinumabTM을 제공받은 모든 환자의 3.3%에서 관측되었다. 유도 상 동안의 SAE 발생율은 briakinumabTM 대 위약(각각 2.0% 대 1.2%)에 대해서와 유사하였다. 유지 상 동안에, SAE 발생율은 매 4주 또는 위약 아암을 사용한 경우와 비교하여 매 12주 투여 아암의 경우 더 높았다(각각 3.0% 대 1.3% 및 1.3%).
briakinumabTM에 노출된 환자에서 전체 감염율은 유도 상 동안의 위약에 대한 감염율 보다 더 높았다(998명의 39.8% 대 484명의 19.8%). 유지 치료 동안의 감염율은 위약-조절된 기간 동안에 관측된 것들 보다 더 높았으며, 매 4주 투여 그룹에서 가장 컷다(표 43). briakinumabTM 치료의 100명 환자-년수당 감염의 총 수는 100.1이었다(663명의 현상, 및 briakinumabTM 노출의 662.2명 환자-년수). 심각한 감염은 모든 치료 그룹에 대해서 비교적 빈번하였지만, 처음 12주 동안에 briakinumabTM- 대 위약-처리된 환자에서 더 흔히 관찰되었다(각각 0.5% 대 0.2%). briakinumabTM-치료된 환자의 0.4%에서 관찰된 소포염은 가장 빈번하게 보고된 심각한 감염이었다. 매 4주 투여를 제공받은 환자에서 12주를 넘어서는 어떠한 심각한 감염도 관측되지 않았으며, 매 12주 및 치료 회수 아암에서 낮은 비율이 관측되었다(각각 0.7% 및 0.7%). 기회 감염은 구강 칸디다증의 2명의 심각하지 않은 현상(유도 상 위약 아암, 및 매 4주째 아암의 유지상에서 각각 1명의 환자); 및 유도 상 동안에 위약을 제공받은 환자에서, 눈에서 측방향으로 국재화된, 악화되는 사이토메갈로바이러스의 한가지 심각한 현상으로 제한되었다. 69명의 환자는 연구 약물 시작 전에 잠재적 TB (briakinumabTM, n=52; 위약, n=17)에 대한 치료를 개시하였다. TB 감염의 어떠한 경우도 이 연구 동안에 관찰되지 않았다.
위약-조절된 및 유지 치료 기간을 조합하면, 비흑색종 피부암이 briakinumabTM으로 치료한 총 10명의 환자에서 관측되었으며(편평 세포 암종을 갖는 6명의 환자, 및 기저 세포 암종을 갖는 4명의 환자; 표 43), 위약 아암에서는 아무것도 보고되지 않았다. 편평 세포 암종의 경우들 중의 4개 경우는 치료의 처음 12주 내에 진단되었다.
심장 마비, 심근 경색, 뇌졸중, 또는 급성 관상 증후군으로 정의된, 주요 부작용인 심혈관 현상(MACE)은 briakinumabTM으로 치료한 7명의 환자에서 관측되었다. 위약-치료된 환자에서 MACE는 관측되지 않았다. 7개의 현상들 중의 5개의 현상이, 연구 치료 개시 후에 21일 내지 55일의 개시 범위로 유도 상 동안에 발생하였다. 2개의 나머지 현상은 유지 상 동안 131일 및 225일에 발생하였다. 유도 상 동안에 관측된 5개 경우 중에서, 하나는 사망에 이르는 심장 마비이었는데, 이는 CHD에 대한 수개의 잠재적인 위험 인자(≥30　kg/m2의 체질량 지수, 기준치 트리글리세라이드 수준 >200 mg/dL, 및 ≥126 mg/dL의 혈당을 포함함)를 갖는 50세 남성 환자에서 38일 째에 발생하였다. 모든 다른 현상은 또한 CHD에 대한 3개 이상의 기존의 위험 인자를 갖는 환자에서 발생하였다.
결론
중등도 내지 중증 건선을 갖는 환자에서의 이러한 대규모의, 무작위 배치된 위약-조절된 시도는, 건선 질환 공정에 이들 사이토킨을 연결한 선행 연구를 추가로 타당하도록 하는, IL12/23 경로를 표적화하는 치료 양식에 대한 견고한 효능 반응을 입증하였다. 치료한지 12주 후에, PGA "완치" 또는 "최소" 및 PASI 75의 1차 종점은 briakinumabTM-치료된 환자의 각각 76% 및 81%에 의해 달성되었다. 더욱이, PASI에서의 52% 평균 개선은 효능의 신속한 개시를 제안하는 4주째까지 관측되었다. PASI 100 반응을 달성하는 환자의 비율은 치료 20주에 걸쳐 계속해서 상승하였으며, 이러한 개선 정도는 52주에 걸쳐 현저히 양호하게 지속되었다. 각각의 종점에서, 반응은 매 4주 투여 요법으로 최고로 유지되었다.
각종 소그룹의 환자에서 관측된 고도의 임상 반응은 주목할만하다. 선행된 생물학적 제제 치료요법에 대한 반응에 실패하고/하거나 중증 건선을 가진 환자들은 일반적으로 치료하기가 더 힘들기 때문에, 본 연구에서 이들 기준을 충족하는 대부분의 환자가 "완치" 또는 "최소"의 PGA 점수 및 PASI 75 반응을 달성하였다는 사실은 briakinumabTM으로 관측한 상당한 효능 이점을 강조한다. 마찬가지로, 동등하게 높은 반응 수준이 관절염 관련된 환자에서 발견되었으며, 체중이 많은 환자일 수록, 이러한 항-IL-12/23 제제의 특히 강력한 효과가 추가로 강조된다.
이러한 제III 상 연구에서의 안전성 발견은 일반적으로, 다른 항-IL12/23 제제(참조: Papp KA, et al. Lancet 2008; 371: 1675-84; Leonardi CL, et al. Lancet 2008; 371: 1665-74)인, ustekinumab에 대해 보고된 것들과 비교가능한, 관측된 감염율과 특히 관련하여, 초기의 용량-범위 연구(참조: Kimball AB, et al. Arch Dermatol 2008; 144: 200-7)에서의 주요 결과와 일치하였다. 이 연구에서, 감염율은 유지 치료 동안에 더 높게 나타났지만, 이는 PGA "완치" 또는 "최소"의 효능 기준을 충족하지 않은 결과로서 12주째에 상실한 다수의 환자와 관련될 수 있다. 여전히, 면역조절 치료에 의한 감염에 대한 잠재적인 증가된 위험은 예측하지 않은 것이며, 항-IL-12/23 제제를 사용한 치료 동안 이들 현상에 대한 모니터링은 근거가 있음을 주목하는 것이 중요하다.
중증 감염 비율은 낮았는데, 대부분의 일반적으로 관측된 현상은 연조직염이었다. 어떠한 TB 또는 중증의 기회적 진균 감염도 이러한 대규모 연구에서 발생하지 않았고; 유지 치료 동안 매 4주 briakinumabTM을 제공받은 환자에서 칸디다증의 단지 1개의 경우만이 관측되었다는 것이 주목할만하다. 보고된 더 일반적인 부작용 현상들 중에서는, 등 통증에 대한 잠재적인 용량-반응 관계가 존재하는 것으로 나타났는데, 그 이유는 이 현상을 보고하는 환자의 비율이, 비록 이에 대한 설명이 불명료하지만, 매 4주 투여 그룹 대 매 12주 또는 위약 그룹에 대한 것보다 더 컸기 때문이다.
7개의 주요 심혈관 유해 사건이 본 연구에서 briakinumabTM을 투여받은 환자 모두에서 발생하였다. 최근의 증거는, 건선 환자가 심장 현상에 대한 주요한 위험 인자일 가능성이 있으며(참조: Ludwig RJ, et al. Br J Dermatol 2007; 156: 271-6; Gisondi P, et al. Br J Dermatol 2007; 157: 68-73), 심근 경색에 대한 더 큰 위험일 수 있음을 제한한다(참조: Gelfand JM, et al. Jama 2006; 296: 1735-41). 건선 환자의 광범위하게 대표적인 집단에서 대규모의, 예측된 집단-기준 연구로부터의 강력한 증거는 젊은 연령 및 중증 질환이 독립적으로 심근경색의 상대 위험을 3배까지 증가시킴을 밝힌 UK's General Practice Research Database로부터 확인되었다. 죽상경화증 병변 내의 사이토킨은 Th1 반응을 촉진시켜 인터페론 γ를 생산시키고, 다른 사이토킨(종양괴사 인자, IL-1, 및 IL-6을 포함함)의 캐스케이드(cascade)를 생성하고, 죽상경화증을 촉진하는 염증 환경을 생성한다(참조: Hansson GK. Inflammation, atherosclerosis, and coronary artery disease. N Engl J Med 2005; 352: 1685-95). 건선에서 Th1-관련된 사이토킨의 역할을 고려하여, 현재의 증거는 관상 동맥병에서 고유한 염증성 과정들과 건선에 포함된 염증성 공정들 사이의 연합을 제한한다. 그러나, 생활방식 위험 인자 또는 스트레스의 불량한 관리와 같은, 건선과 잠재적으로 관련된 기타 변수들이 심장병의 위험에 기여할 수 있는지를 구별하는 데이터가 부족하다.
본 연구에서의 위약-치료된 건선 환자들 중에는 어떠한 주요한 부작용 심혈관 현상도 관측되지 않았다. 이러한 발견은 IL12/23 차단제, 우스테키누마브를 사용하여 치료한 건선 환자에서의 연구들과 일치한다. 제II 상, 위약-조절된 시도에서 우스테키누마브를 투여받은 252명의 환자 중 4명이, 2명의 심근 경색 및 1명이 심장 마비 현상을 포함하여, 입원을 요하는 심장 현상을 경험한 반면; 위약 그룹에서는 어떠한 현상도 발생하지 않았다(참조: Krueger GG, et al. N Engl J Med 2007; 356: 580-92). 우스테키누마브의 대규모 제III 상 연구에서, 753명의 우스테키누마브-치료된 환자들 중의 4명에서 주요한 부작용인 심혈관 현상이 관측되었지만, 우스테키누마브를 제공받기 위해 교차된 후 위약-치료된 환자에서는 하나의 현상이 관측되었다(참조: LeonardiCL,et al. Lancet 2008; 371: 1665-74). 중등도 내지 중증 건선을 갖는 환자에서 우스테키누마브 및 네타네르셉트의 비교인자 시도에서, 우스테키누마브를 사용하여 3개의 주요한 부작용 심혈관 현상이 관찰되었지만, 에티네르셉트를 사용해서는 아무런 현상도 발생하지 않았다(참조: Griffiths CE, et al. N Engl J Med; 362: 118-28). 반대로, briakinumabTM의 제II 상 연구(참조: Kimball AB, et al. Arch Dermatol 2008; 144: 200-7), 또는 우스테키누마브의 제 III 상 시험(참조: Papp KA,et al.Lancet 2008; 371: 1675-84)에서는 어떠한 주요한 부작용 심혈관 현상도 관측되지 않았다. 잠재하는 심장 위험 인자들 중의 본 발명자들의 후속적인 분석은, 그룹들 사이에 약간의 불균형이 나타났지만, 이들 한계적인 차이는 관측된 심장 현상에서 부조화를 설명할 수는 없다. 현재의 연구에서 관측된 MACE 및 우스테키누마브의 선행된 연구에서 관찰된 것들은 항-IL-12/23 치료 노출된 환자에 대하여 대부분 분리되었기 때문에, 이러한 새로운 치료요법, 건선 자체에 의해 부과된 잠재적 위험, 또는 이들 둘의 조합이 이들의 발생에 기여하는지 여부를 측정하기 위해서는 더 많은 증거가 중요할 것이다. 따라서 지금까지의 증거의 가중치의 관점에서, 건선을 가진 환자에서 항-IL 12/23 치료를 개시하기 전의 심장 위험 인자의 확인, 및 치료요법 동안의 근접한 모니터링이 중요한 사전 조치일 것이다.
요약하면, 이러한 52주의, 다중심, 무작위 배치된, 위약-조절된 시도로부터의 효능 결과는, 더 복잡한 치료 문제, 예를 들면, 생물학적 제제 치료요법의 선행된 실패, 관절염 관여 또는 과다 체중을 갖는 것으로 일반적으로 고려되는 것들 조차, briakinumabTM이 중등도 내지 중증 건선을 갖는 환자에서 높은 효능 반응 신속히 유도하여 유지함을 입증한다. 효능 반응은 매달 투여 요법을 사용하여 최적으로 유지되었다. 안전성 결과는 briakinumabTM의 제II 상 시험에서 관찰된 것들과 대부분 일치하였지만, 감염의 수, 비흑색종 피부 암, 및 MACE는 더 많은 환자 집단에서의 추가의 연구를 보증하며, 항-IL12/23 제제를 사용한 이들 현상들에 대해 모니터링할 필요성을 강조한다.
[표 39]
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[표 40]
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[표 41]
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[표 42]
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[표 43]
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실시예 25. 중등도 내지 중증의 만성 판형 건선을 가진 환자에서 BriakinumabTM, 완전한 사람 인터류킨-12/23 모노클로날 항체, 대 메토트렉세이트의 효능 및 안전성: 제III 상, 무작위 배치된, 이중-맹검 시도로부터의 52-주 결과
비록 건선의 치료를 위한 생물학적 치료 요법의 사용을 지지하는 강력한 증거가 있다고 해도(참조: Schmitt J, et al. Efficacy and tolerability of biologic and nonbiologic systemic treatments for moderate-to-severe psoriasis: meta-analysis of randomized controlled trials. Br J Dermatol 2008; 159: 513-26), 메토트렉세이트(MTX)와 같은 전통적인 전신 치료요법에 대한 생물학적 제제, 특히 대안제의 최적 사용을 확립하는 것이 요구되고 있다. MTX는 세계적으로 건선에 대해 가장 일반적으로 처방된 전신 치료요법이다(참조: Menter A, et al. Guidelines of care for the management of psoriasis and psoriatic arthritis: section 4. Guidelines of care for the management and treatment of psoriasis with traditional systemic agents. J Am Acad Dermatol 2009; 61: 451-85). MTX와 관련된 일반적인 부작용은 오심, 식욕부진, 구내염, 및 피로를 포함하며, 관심있는 누적 또는 특이 독성은 간독성, 골수억제, 및 폐 섬유증을 포함한다(참조: Menter A, et al., ibid). 비록 MTX의 대규모 사용한 임상 실험이 풍부하다고 해도, 생물학적 치료요법 대 MTX이 거대한 비교인자 시도는 희박하다. 아달리무마브 대 MTX를 사용한 우수한 효능이 16-주, 제III 상 무작위 배치된 시도(참조: Saurat JH, et al, Efficacy and safety results from the randomized controlled comparative study of adalimumab vs. methotrexate vs. placebo in patients with psoriasis (CHAMPION). Br J Dermatol 2008; 158: 558-66)에서 보고되었으며, 26-주 시도의 예비 결과는 인플릭시마브 대 MTX를 사용한 우수한 효능을 입증하였으나(참조: Reich K, et al., Infliximab is associated with greater improvement in health-related quality of life versus methotrexate for moderate-to-severe plaque-type psoriasis-the RESTORE 1 trial. Abstract P1187), 데이터는 MTX의 장기간 사용으로 한정된다. 당해 실시예에서는, 중등도 내지 중증 판형 건선을 가진 환자에서 briakinumabTM과 비교시 MTX를 사용한 1년 치료의 효능 및 안전성을 평가하기 위한 제1 시도의 결과가 보고되어 있다.
방법
환자
당해 제III 상, 다중심, 무작위 배치된, 이중-맹검 시도를 유럽 및 캐나다의 43개 지역에서 수행하였다. 연령이 ≥18세인 환자가 ≥6 개월의 건선으로 임상 진단되고; ≥2 개월 동안 안전한 판형 건선을 가지며; 전신 치료요법 또는 광 치료요법에 대한 후보대상이며; 체 표면적의 ≥10%가 관여되고 의사의 전반적 평가 (PGA) 점수가 ≥3이며, 건선 활성 및 중증도 지수 (PASI) 점수가 기준치에서 ≥12인 경우 참여시키기에 적임이었다.
환자가 건선의 비판형 형태이거나, IL-12/-23 p40-표적화 치료요법 또는 MTX를 선행하여 제공받은 경우 당해 환자는 비적임이었다. 환자가 선행의 12주 또는 5개 약물 반감기내 생물학적 제제 또는 시험제를 사용한 치료, 선행된 4주내 통상의 전신 건선 치료 또는 광 치료, 또는 연구 기준치의 2주내 국소 치료요법을 제공받은 경우 당해 환자 또한 비적임이었다. 환자가 심각한 감염; 임상적으로 유의적인 혈액학적, 신장 또는 간 질환의 병력; 악성 암(성공적으로 치료된 기저 세포 암종, 비악성 피하 편평세포 암종 또는 자체 경부 암종은 제외)의 병력; 또는 활성 결핵의 병력 또는 말기 결핵의 증거(예방학적 치료를 미리 제공받거나 연구 약물 투여 전에 개시된 경우 배제)를 갖는 경우 환자를 배제하였다.
연구 프로토콜은 각각의 연구 지역에서 독립된 윤리 위원회 또는 기관감사위원회에 의해 승인되었고, 각각의 환자는 서면 통지된 동의서를 제공하였다.
과정
기준치(0 주)에서, 환자를 1:1로 무작위 배치하여 briakinumabTM(0 및 4주째 200 mg 피하 및 8 내지 48주에 매 4주 마다 100 mg) 또는 경구 MTX (0 내지 51주째에 매주 5 내지 25 mg) 및 경구 폴레이트(0 내지 51주째에 매주 5 mg)을 제공하였다(도 46). MTX 그룹에서 환자는 MTX 5 mg을 0주째에, 10 mg을 1주째에, 및 15 mg/wk을 2 내지 9주째에 제공받았다. 10 및 16주째에, MTX 용량은 PASI ≥75 또는 0 또는 1의 PGA를 달성하지 않은 환자의 경우 5 mg(10주째에 20 mg/wk 까지 및 16주째에 25 mg/wk)로 증가시켰다. 맹검을 유지하기 위해, briakinumabTM그룹에서의 환자에게 또한 위약 캡슐을 제공하여 MTX와 일치시키고 위약 정제를 제공하여 폴레이트와 일치시키며, MTX 그룹내 환자에게 또한 위약을 피하 주사하여 briakinumabTM와 일치시켰다.
치료 성공은 24주째에 PASI　≥75 및 0 또는 1의 PGA 둘다를 달성하는 것으로 정의하였다. 치료가 성공한 MTX 그룹내 환자는 연구 기간의 나머지 동안 현재의 매주 MTX 용량을 유지시켰다. 연구 동안 어느 시기에도, 안전성 평가자는 환자-보고된 증상, 물리적 시험, 부작용 현상 또는 실험실적 비정상(아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 또는 알라닌 아미노트렌스퍼라제 ≥1.5 x 정상의 상한치, 혈소판 수 <100,000/mm3, 총 백혈구 세포 수 <3,000/mm3, 크레아티닌 >2 x 정상의 상한치)의 결과로서 MTX 용량을 감소시키거나 유지시킬 수 있었다. 24주 후 치료를 성공하지 않았거나 반응이 상실(PASI <50 및 PGA ≥3로 정의)된 치료 그룹의 환자는 briakinumabTM의 개방-표지 연장 연구에서 등록하기에 적임이었다. 연구에 잔류하는 환자의 퍼센트에 있어서 최대 감소는 24주 내지 28주 사이에 발생하였으며, 효능의 결여로 인하여 중단하는 briakinumabTM 그룹에서 보다 MTX 그룹에서 더 많은 환자들이 잔류하였다. PASI 및 PGA 반응은 비-반응자로서 중단한 환자를 산입시킴으로써 보존 양식으로 계산하엿다.
1차 효능 종점은 24주째에 PASI 75, 24주째에 0 또는 1의 PGA, 52주째에 PASI 75, 및 52주째에 0 또는 1의 PGA를 달성하는 환자의 퍼센트였다. PASI는 0 내지 72 범위의 점수를 갖는 건선의 피부 증상의 중증도의 척도이다(참조: Fredriksson and Pettersson, 1978). 10보다 큰 PASI는 건선의 중등도 내지 중증 피부 증상을 나타내기 위해 고려된다[참조: Pathirana et al, European S3-guidelines on the systemic treatment of psoriasis vulgaris. J Eur Acad Dermatol Venereol 2009; 23(Suppl 2): 1-70; Smith et al, British Association of Dermatologists' guidelines for biologic interventions for psoriasis 2009. Br J Dermatol 2009; 161: 987-1019]. 사용된 PGA는 0="완치"; 1, "최소"; 2, "경증"; 3, "중등도"; 4, "중증"; 및 5, "매우 중증"의 6-점 기수 규모였다(참조: Ko, 1998).
제2 효능 변수는 52주에 걸쳐 PASI 75 반응, PASI 50/75/90/100 반응률을 달성하기 위한 중간 시간, 52주 이후 방문에 의한 0 또는 1의 PGA를 갖는 환자의 비율, 및 기준치로부터 PASI 점수에서 평균 퍼센트 개선을 포함하였다. 효능 평가는 또한 손발톱 건선 중증도 지수(NAPSI) 점수에서 기준치로부터의 변화를 포함하였으며, 이는 0(손발톱 건선 없음) 내지 80(모든 10개 손가락에 건선)의 범위이다(참조: Rich and Scher, 2003). 0이 아닌 기준치 NAPSI 점수를 가진 환자는, NAPSI 점수가 0 내지 8의 범위인, 단일 표적 손톱(손발톱은 대부분 기준치에서 건선에 의해 영향받는다)을 사용하여 후속 방문시 NAPSI 평가를 수행하였다.
추가의 제2 효능 매개변수는 피부과 삶의 질 지수(DLQI), 건선이 건강-관련 삶의 질에 영향을 미치는 정도의 환자가 보고한 척도였다. DLQI는 0 내지 30 범위의 점수를 생성하며, 최저 점수는 보다 적은 충격을 나타낸다(참조: Finlay and Khan, 1994). 평가는 0 또는 1(건선의 효과 없음)의 DLQI 점수를 가진 환자의 퍼센트(참조: Hongbo et al, Translating the science of quality of life into practice: What do dermatology life quality index scores mean? J Invest Dermatol 2005; 125: 659-64), ≥5 점의 감소를 갖는 환자의 퍼센트(임상적으로 의미있는 감소)[참조: Khilji et al, Clinical meaning of change in Dermatology Life Quality Index scores. Br J Dermatol 2002; 147(Suppl 62): 50], 및 기준치 DLQI 점수로부터의 변화를 포함하였다.
부작용 현상, 실험실 데이터, 및 활력 징후는 연구 전체에서 평가하였다. 환자를 감염 징후, 악성 암 및 면역학적 반응에 대해 밀접하게 모니터링하였다. 응급-치료 부작용 현상은 연구 약물의 제1 용량 시 또는 이후에 및 연구 약물의 최종 용량 후 45일 까지 발생하는 것들로 정의하였다.
통계적 분석
원래의 연구 계획에 따라, 대략 250명의 환자를 무작위 배치하였다. 24주째에 PASI 75 반응률이 briakinumabTM 그룹에서 70%이었고 MTX 그룹에서 50%이었던 것을 추정하면, 당해 시료 크기는 MTX보다 briakinumabTM의 우수성을 입증하기 위해 90% 파워를 제공할 수 있다(5% 유의성 수준에서 2-측면 카이-제곱 시험). 그러나, 시기적절한 방식으로 정확한 등록 수를 수득하는데 있어서 곤란성으로 인하여, 250명 이상의 환자를 등록시켰다. 317명의 환자의 실제 등록 수를 제공하여, 효능력을 90%로부터 95%로 증가시켰다. 효능력에 있어서 이러한 변화는 연구에서 관측된 치료 그룹들 사이의 종점에 있어서 큰 차이로 인하여 거의 영향받지 않았다.
치료 의사 집단은 0주째에 무작위 배치된 모든 환자를 포함하였다. 치료 의사 집단을 효능 분석에 사용하였다. 주요 효능 분석을 위해, 모든 비교를 0.05의 알파 수준에서 나라별 조절된 2-측면 코크란-만텔-해스첼 시험을 사용하여 수행하였다. 제I 형 오차율은 통계적 가설의 연역적 정의된 순서에 부착시켜 0.05에서 조절하였다. 비반응자 산입을 사용하여 상실된 데이터를 취급하였다. 방문시 PASI 또는 PGA 점수를 상실한 어떠한 환자도 방문시 비반응자로 고려하였다. 최종 관측 차기 이월(LOCF)은 민감성 분석으로 사용하였다.
단정적 변수의 경우, 카이-제곱 시험 또는 피셔 정확도 시험(예측된 세포 크기는 <5이었다)을 사용하여 briakinumabTM 대 MTX의 우수성을 평가하였다. 비반응자 산입을 사용하여 상실된 데이터를 취급하였다. LOCF는 민감성 분석으로 사용하였다. PASI 75 반응을 달성하고 0 또는 1의 PGA 점수를 달성하기 위한 중간 시간은 카플란-마이어 방법을 사용하여 계산하였다. 치료 그룹 차이는 로그-랭크 시험(log-rank test)을 사용하여 시험하였다. 52주 당시 또는 전에 반응을 달성하지 않은 환자를 최종 PASI/PGA 평가 일에 삭제하였다.
PASI, DLQI에 있어서 변화시 치료 그룹과 기타 연속적인 변수 사이의 차이를 기준치 값 및 모델에서 치료 그룹을 사용한 공분산의 분석을 사용하여 분석하였다. LOCF를 사용하여 상실된 데이터를 취급하였다. 관측된 데이터는 민감성 분석으로 수행하였다. NAPSI 점수에서 변화율을 계산하기 위하여, 0이 아닌 기준치 NAPSI 점수를 가진 환자 만을 분석에 포함시켰다. 윌콕슨 2-시료 시험을 사용하여 변화에 있어서 치료 차이를 비교하였다. LOCF를 사용하여 상실된 데이터를 취급하였다. 관측된 데이터는 민감성 분석으로 수행하였다.
안전성 분석은 연구 약물을 적어도 1회 주사로 제공받은 모든 환자를 포함하는, 안전성 집단을 사용하여 수행하였다.
결과
총 317명의 환자들이 포함 기준을 충족하였으며 briakinumabTM(N≥154) 또는 MTX (N≥163)에 대해 무작위 배치하였다(도 47). 무작위 배치되지 않은 환자들은 효능 분석(치료 의사 집단)으로부터 배제시켰다. briakinumabTM 그룹에서 총 106명(68.8%)의 환자 및 MTX 그룹에서 45명(27.6%)의 환자는 52주에 걸쳐 연구를 완료하였다. 연구 중단 이유는 도 47에 나타낸다.
기준치 인구학, 임상 특징, 및 질환 중증도는 치료 그룹들 사이에서 유사하였다(표 44). 건선의 평균 지속 기간은 18.9년이었고, 평균 PASI 점수는 18.1이었으며 평균 체 표면적 관여는26.1%였다. 환자 중 대략 52%가 전신적 비생물학적 제제 치료(MTX 이외)를 사전 제공받았고 18%는 생물학적 제제 치료요법을 사전 제공받았다.
MTX 그룹보다 briakinumabTM 그룹에서 유의적으로 보다 많은 환자가 24주 째(81.8% 대 39.9%; p<0.001) 및 52주째(66.2% 대 23.9%; p<0.001)에 PASI 75 반응의 1차 종점을 달성하였다. PASI 75 반응을 달성하기 위한 중간 시간은 briakinumabTM 그룹의 경우 56일 대 MTX 그룹의 경우 140 일이었다(p<0.001). PASI 75 반응을 달성한 환자의 퍼센트는 4주까지 및 52주 전체의 모든 싯점에서 briakinumabTM 그룹에서 유의적으로 보다 높았다(도 48a). 유사하게, 치료 그룹 사이의 유의적인 차이는 PASI 50의 경우 2주째에 및 PASI 90 및 PASI 100의 경우 8주째에 시작함이 명백하였으며; briakinumabTM 그룹에서 보다 큰 반응율이 52주에 걸쳐 유지되었다(도 3b 내지 3d). 기준치로부터 PASI 점수에서의 평균 퍼센트 개선은 치료 그룹 둘다에서 시간에 걸쳐 증가하였지만 모든 싯점에서 briakinumabTM 그룹에서 유의적으로 더 높았다(도 49). MTX-치료된 환자는 CHAMPION의 16주째에 관측된 것들과 유사하였다[참조: Saurat JH, Stingl G, Dubertret L, et al; CHAMPION Study Investigators. Efficacy and safety results from the randomized controlled comparative study of adalimumab vs. methotrexate vs. placebo in patients with psoriasis(CHAMPION). Br J Dermatol 2008; 158: 558-66.].
MTX 그룹보다 briakinumabTM 그룹에서 유의적으로 보다 많은 환자들이 0 또는 1의 PGA의 1차 종점을 24주째(80.5% 대 34.4%; p<0.001) 및 52주째(63.0% 대 20.2%; p<0.001)에 달성하였다. 또한, 0의 PGA에 의해 평가되는 것으로서 완치된 질환이 MTX 그룹에서보다 briakinumabTM 그룹에서 24주째(46.1% 대 9.2%; p<0.001) 및 52주째(45.5% 대 9.8%; p<0.001)에 환자가 유의적으로 보다 많음에 의해 명백해졌다. 0 또는 1의 PGA를 달성하기 위한 중간 시간은 briakinumabTM 그룹의 경우 69일 대 MTX 그룹의 경우 171 일이었다(p<0.001). briakinumabTM 그룹에서 유의적으로 보다 많은 퍼센트의 환자가 4주 내지 52주째의 각각의 싯점에서 0 또는 1의 PGA를 달성하였다(도 50).
기준치 NAPSI 점수는 치료 그룹들 사이에서 유사하였다(표 44). briakinumabTM 그룹에서, 표적 손톱에 대한 평균 NAPSI 점수는 기준치에서 4.8로부터 24주째에 2.1 및 52주째에 1.2로 감소하였다. MTX 그룹에서, 표적 손톱에 대한 평균 NAPSI 점수는 기준치 4.8로부터 24주째에 3.0으로 감소하였고 52주째에 또한 3.0이었다. 표적 손톱에 대한 평균 NAPSI 점수에서 기준치로부터의 변화는 24주 및 52주째에 MTX 그룹에서 보다 briakinumabTM 그룹에서 유의적으로 더 높았다(둘다의 비교를 위한 p<0.001).
MTX 그룹에서 보다 briakinumabTM 그룹에서 유의적으로 보다 많은 환자는 0 또는 1의 DLQI 점수를 24주째(70.8% 대 34.4%; p<0.001)에 및 52주째(61.7% 대 17.8%; p<0.001)에 가졌다. 유사하게, MTX 그룹에서 보다 briakinumabTM 그룹에서유의적으로 보다 많은 환자가 DLQI 점수(≥5 점의 감소)에 있어 24주(66.2% 대 47.9%; p<0.001) 및 52 주(56.5% 대 18.4%; p<0.001) 째에 임상적으로 의미있는 감소를 달성하였다. briakinumabTM 그룹에서 환자는 평가된 모든 싯점에서 MTX 그룹과 비교한 DLQI 점수에 있어 기준치로부터 유의적으로 보다 크게 감소하였다(도 51). 24주째에, 평균 DLQI 점수는 기준치에서 11.0으로부터 briakinumabTM 그룹에서 1.6으로 감소하였고, 이에 대해 MTX 그룹에서 기준치에서 11.2로부터 4.6으로 감소하였다(기준치로부터의 변화에 있어서 그룹들 사이의 차이는 -3.0; 95% 신뢰구간[CI]: -3.9, -2.1; p<0.001). 52주째에 DLQI 점수(briakinumabTM 그룹에서 1.5 대 MTX 그룹에서 4.6)는 briakinumabTM 대 MTX(-3.1; 95% CI: -4.0, -2.2; p<0.001)로 기준치로부터 유사하게 보다 큰 변화를 반영하였다.
모든 효능 변수의 경우, 상실된 데이터에 대해 수행된 민감성 분석은 유사한 결과를 생성하였다.
부작용 프로파일은 briakinumabTM 및 MTX 사이에서 유사하였다(표 45). 가장 일반적인 응급-치료 부작용 현상은 코인두염, 두통, 설사, 관절통, 및 상기도 감염이었다. 설사(9.7% 대 3.7%, p≥0.04) 및 주사-부위-관련 부작용 현상(8.4% 대 1.8%; p≥0.009)은 MTX 그룹에서 보다 briakinumabTM 그룹에서 더 흔하였다.
무작위 배치된 317명의 환자 중, 22명의 환자는 1개 이상의 부작용 현상으로 인하여 연구를 중단하였다. briakinumabTM 그룹에서 12명(7.8%)의 환자가 중단하였으며; 5명의 환자에 대한 부작용 현상은 심각하였다[위장의 운동 저하 및 레기오넬라 감염, 유방암, 유방 신생물, 전립샘 암, 및 헤르페스 조스터(herpes zoster)]. MTX 그룹에서 10명(6.1%) 환자가 중단하였고; 5명의 환자에 대한 부작용 현상은 심각하였다(간 효소 증가 및 간염, 엉치엉덩관절염, 곁주머니염, 홍색피부건선, 혈관부종 및 두드러기).
briakinumabTM 그룹에서 14명(9.1%)의 환자 및 MTX 그룹에서 10명(6.1%)의 환자는 응급-치료의 심각한 부작용 현상이 보고되었다. 7명의 환자들은 briakinumabTM 그룹에서의 4명(1명의 경우 레기오넬라 감염과 칸디다혈증, 및 패혈증성 쇼크, 1명의 경우 골수염, 1명의 경우 헤르페스 조스터, 및 1명의 경우 편도염) 및 MTX 그룹에서 3명의 환자(2명의 경우 곁주머니염 및 1명의 경우 간염)를 포함하는 심각한 감염을 경험하였다. 심각한 감염성 부작용 현상의 발생 정도 비율은 briakinumabTM 및 MTX 그룹에서 100세-환자 연령(100-patient-years) 당 각각 4.1 및 2.7이었다.
각각의 치료 그룹에서 14명의 환자는 기준치에서 양성의 정제된 단백질 유도체를 가졌지만; 스크리닝시 활성 결핵 또는 연구 동안 보고된 결핵-관련 부작용 현상을 가졌다. briakinumabTM 그룹에서 3명의 환자들은 악성 암(1명의 환자는 유방 암, 1명의 환자는 유방 신생물, 및 1명의 환자는 전립샘 암을 가졌다)을 경험하였다. 1명의 사망이 보고되었다(MTX 그룹의 환자에서 식도 파열).
갑작스런 심장 사망, 심근경색 또는 뇌졸중과 같은 주요 심혈관 현상의 보고는 없었다. briakinumabTM 그룹에서 6명의 환자 및 MTX 그룹에서 4명의 환자는 허혈성 심장병 부작용 현상(briakinumabTM 그룹에서 2명의 환자는 협심증을 경험하였고 다른 모든 환자들은 증가된 크레아티닌 포스포키나제를 경험하였다)을 경험하였으며, 이들 중 누구도 심각하지 않았다.
결론
당해 52-주, 제III 상, 다중심, 무작위 배치된, 이중-맹검 연구에서, briakinumabTM은 중등도 내지 중증의 판형 건선의 징후 및 증상을 감소시키고, 손발톱 건선을 개선시키며, 환자가 보고한 건강-관련 삶의 질에 양호하게 영향을 미치는데 있어서 MTX보다 우수하였다. briakinumabTM을 사용한 치료는 MTX와 비교하여 52주에 걸쳐 유지된 신속한 임상 반응을 생산하였다. 임상적으로 중요한 안전성 관심은 당해 연구에서 확인되지 않았다.
본 연구는 MTX 대 IL-12/-23 p40-중화 항체의 효능 및 안전성을 평가하기 위한 최초의 경쟁인자 시도이다. MTX와 비교하여, briakinumabTM은 일반적으로 유사한 안전성 프로파일과 함께, 52주에 걸쳐 보다 신속한 작용 개시 및 우수한 효능을 입증하였다. briakinumabTM 그룹에서, PASI 75 반응은 24주째에 환자의 81.8%가, 52주째에 환자의 66.2%가 달성하였다. 당해 시도에서 briakinumabTM 의 사용 대 사전 시도에서 우스테키누마브의 사용으로 1년에 걸친 임상 반응의 유지를 비교하는 것은, briakinumabTM을 사용한 본 연구가 간단한 치료-의사 분석인 반면, 우스테키누마브 시도는 용량 확대[참조: Papp KA, et al., Efficacy and safety of ustekinumab, a human interleukin-12/23 monoclonal antibody, in patients with psoriasis: 52-week results from a randomised, double-blind, placebo-controlled trial (PHOENIX 2). Lancet 2008; 371: 1675-84] 및 반응하는 환자의 몇가지 선택 단계[참조: Leonardi CL, et al., Efficacy and safety of ustekinumab, a human interleukin-12/23 monoclonal antibody, in patients with psoriasis: 76-week results from a randomised, double-blind, placebo-controlled trial (PHOENIX 1). Lancet 2008; 371: 1665-74]를 포함하였으므로 어렵다.
이러한 MTX의 사상 최초의 1-년 연구는 MTX와의 반응의 유지로의 통찰력을 제공한다. 24주 후에, PASI 75 반응(28주째에 30.7%와 비교하여 24주째에 39.9%)을 지닌 MTX-치료된 환자의 퍼센트에 있어서의 비교적 급격한 강화 및 0 또는 1의 PGA를 갖는 환자의 퍼센트(28주째에 28.8%와 비교하여 24주째에 34.4%)에 있어 보다 작은 강하가 있었다. 24주째에, PASI　≥75 및 0 또는 1의 PGA 둘다를 달성하지 않은 환자들은 프로토콜당 중단하였다. 선행의 MTX 비교인자 시도는 짧은 기간에 수행되었다. MTX 대 사이클로스포린의 16-주 연구에서, 임상 반응에 있어서의 차이는 그룹들 간에 관측되지 않았다(참조: Heydendael VM, et al., Methotrexate versus cyclosporine in moderate-to-severe chronic plaque psoriasis. N Engl J Med 2003; 349: 658-65). 보다 최근의 시도는 생물학적 제제 치료요법 대 MTX를 사용한 보다 우수한 효능을 입증하였다. MTX 대 아달리무마브의 16-주 시도에서, 아달리무마브로 치료한 유의적으로 보다 많은 환자들이 16주째에 PASI 75 반응을 달성하였다(80% 대 36%; p<0.001)[참조: Saurat JH, et al., Efficacy and safety results from the randomized controlled comparative study of adalimumab vs. methotrexate vs. placebo in patients with psoriasis (CHAMPION). Br J Dermatol 2008; 158: 558-66]. 또한, 본 연구의 발견과 유사하게, 임상 반응이 MTX를 사용한 경우보다 생물학적 제제 치료요법을 사용하는 경우 더 신속하게 발생하였다. MTX 대 인플릭시마브의 26-주 시도의 주요 결과는, 인플릭시마브로 치료한 유의적으로 보다 많은 환자가 26주째에 PASI 75를 달성하였음을 입증하였다(77% 대 31%; p<0.001)(참조: Reich K, et al., Infliximab is associated with greater improvement in health-related quality of life versus methotrexate for moderate-to-severe plaque-type psorisis-the RESTORE 1 trial. Abstract P1187). 또한, 기준치로부터 26주까지 DLQI 점수에서의 보다 큰 개선이 MTX를 사용할 때보다 인플릭시마브를 사용할 때 명백하였다(-11.3 대 -9.1; p<0.004)(참조: Reich K, et al. Infliximab is associated with greater improvement in health-related quality of life versus methotrexate for moderate-to-severe plaque-type psoriasis-the RESTORE 1 trial. Abstract P1187).
MTX의 장-기간 안전성과 관련하여, 선행된 16-주 시도는 간-관련 부작용 현상이 매주 15mg을 제공받은 43명의 환자 중 12명(28%)에서(참조: Heydendael VM, et al. methotrexate versus cyclosporine in moderate-to-severe chronic plaque psoriasis. N Engl J Med 2003; 349: 658-65) 및 필요할 경우 증가시킨 매주 7.5mg의 MTX 용량으로 출발하여 매주 25mg에 대해 내성인 110명의 환자 중 4명(4%)[참조: Saurat JH, et al. Efficacy and safety results from the randomized controlled comparative study of adalimumab vs. methotrexate vs. placebo in patients with psoriasis (CHAMPION). Br J Dermatol 2008; 158: 558-66]이 중단을 유도하였음을 보고하였다. 52주의 MTX 치료의 본 연구(적정 계획당 매주 5 내지 25 mg)에서, MTX 그룹의 16명(10%)의 환자가 간-관련 부작용 현상을 경험하였으나, 단지 2명(1%)의 환자만이 연구를 중단하였다. 이들 결과는, 나타낸 바와 같이 적정시키고 내성이도록 한 저 용량을 사용하여 MTX를 개시하는 것이 MTX의 장기간 사용에 대해 안전한 전략일 수 있음을 제안한다.
briakinumabTM과 관련하여, 52주 치료는 심각한 부작용 현상의 낮은 발생 정도와 관련되었다. 심각한 감염성 부작용 현상의 발생 빈도는 briakinumabTM을 사용한 100-환자 연령당 4.1 현상이었고 MTX를 사용한 100-환자 연령당 2.7 현상이었다. 선행된 연구는 아달리무마브 또는 인플릭시마브를 사용한 100-환자 연령당 1.3의 심각한 감염 현상의 비율을 보고하여 왔다[참조: Menter A, et al. adalimumab therapy for moderate to severe psoriasis: A randomized, controlled phase III trial. J Am Acad Dermatol 2008; 58: 106-15; Burmester GR, et al. adalimumab safety and mortality rates from global clinical trials of six immune-mediated inflammatory diseases. Ann Rheum Dis 2009; 68: 1863-69]. briakinumabTM의 현재의 연구에서, briakinumabTM(M06-890 참조물질)의 다른 시도 및 우스테키누마브의 시도(참조: Krueger GG, et al. A human interleukin-12/23 monoclonal antiody for the treatment of psoriasis. N Engl J Med 2007; 356: 580-92; Leonardi CL, et al. Efficacy and safety of ustekinumab, a human interleukin-12/23 monoclonal antibody, in patients with psoriasis: 76-week results from a randomised, double-blind, placebo-controlled trial (PHOENIX 1). Lancet 2008; 371: 1665-74; Papp KA, et al. Efficacy and safety of ustekinumab, a human interleukin-12/23 monoclonal antibody, in patients with psoriasis: 52-week results from a randomised, souble-blind, placebo-controlled trial (PHOENIX 2). Lancet 2008; 371: 1675-84]에서 이러한 현상의 낮은 빈도와는 대조적으로, 심각한 심혈관 현상(예를 들면, 심근경색, 뇌졸중)은 보고되지 않았다.
결론
중등도 내지 중증의 판형 건선이 있는 환자에서 briakinumabTM 대 MTX의 당해 직접-대면 시도에서, briakinumabTM는 임상 반응 측정치 및 환자가 보고한 건강-관련 삶의 질을 포함하는 모든 1차 및 2차 종점에서 치료 52주에 걸쳐, MTX와 비교하여 우수한 효능을 입증하였다. MTX와 비교하여 임상적으로 유의적인 발견없이 우수한 효능 및 안전성 프로파일을 근거로 하여, 이들 결과는, 건선의 치료를 위한 치료학적 선택으로서 briakinumabTM 대 MTX에 대한 양호한 이익-위험 비율을 입증한다.
[표 44]
Figure pat00064
값들은 달리 나타내지 않는 한 n(%)이다.
*N=115(briakinumabTM), N=108 (MTX).
†N=154 (briakinumabTM , N=162 (MTX).
BSA, 체 표면적 부위; DLQI, 피부과 삶의 질 지수; MTX, 메토트렉세이트; NAPSI, 손톱 건선 중증도 지수; PASI, 건선 면적 및 중증도 지수; PGA, 의사의 전반적 평가.
[표 45]
Figure pat00065
값들은 n(%)이다.
*연구 약물의 제1 용량 시 또는 이후에 및 연구 약물의 최종 용량 45일 까지 또는 이후 발생.
†치료 그룹에서 환자의 ≥5%에서 발생
‡p=4 대 MTX 그룹.
§갑작스러운 심장병, 심근 경색, 또는 뇌졸중의 특정의 심각한 부작용 현상
∥비-응급-치료 사망 포함
MTX, 메토트렉세이트
등가물
당해 분야의 숙련가들은 통상의 실험 이상을 사용하지 않고도 본원에 기술된 본 발명의 구체적인 양태에 대한 많은 등가물을 인식하거나 확인할 수 있을 것이다. 이러한 등가물은 다음 특허청구의 범위에 포함된 것으로 의도된다.
SEQUENCE LISTING <110> ABBOTT LABORATORIES ABBOTT GMBH & CO. KG <120> METHODS FOR TREATING PSORIASIS <130> 117813-48320 <150> US 61/242,288 <151> 2009-09-14 <150> US 61/245,967 <151> 2009-09-25 <150> US 61/297,623 <151> 2010-01-22 <150> US 61/360,299 <151> 2010-06-30 <160> 675 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 6 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa at position 1 could be either His or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa at position 4 could be either Tyr or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa at position 6 could be either Tyr, Asn or Thr <400> 1 Xaa Gly Ser Xaa Asp Xaa 1 5 <210> 2 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa at position 2 could be either Ser or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa at position 4 could be either Asp or Glu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa at position 5 could be either Ser, Arg or Lys <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa at position 6 could be either Ser, Gly or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa at position 7 could be either Leu, Phe, Thr or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa at position 8 could be either Arg, Ser, Thr, Trp or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa at position 9 could be either Gly or Pro <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa at position 10 could be either Ser, Thr, Ala or Leu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (11)..(11) <223> Xaa at position 11 could be either Arg, Ser, Met, Thr or Leu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (12)..(12) <223> Xaa at position 12 could be either Val, Ile, Thr, Met or Leu <400> 2 Gln Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5 10 <210> 3 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 4 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa at position 1 could be either Gly or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa at position 3 could be either Asp or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa at position 4 could be either Gln or Asn <400> 4 Xaa Asn Xaa Xaa Arg Pro Ser 1 5 <210> 5 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa represents either Ser or Glu <400> 5 Phe Thr Phe Ser Xaa Tyr Gly Met His 1 5 <210> 6 <211> 13 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa at position 1 could be either Ser or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa at position 3 could be either Ser or Gly <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa at position 4 could be either Arg or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa at position 8 could be either Gly or Val <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa at position 9 could be either Ser or Ala <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa at position 10 could be either Asn, Gly or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (11)..(11) <223> Xaa at position 11 could be either Thr or Asp <220> <221> MISC_FEATURE <222> (13)..(13) <223> Xaa at position 13 could be either Lys or His <400> 6 Xaa Gly Xaa Xaa Ser Asn Ile Xaa Xaa Xaa Xaa Val Xaa 1 5 10 <210> 7 <211> 115 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa at position 6 could be either Gln or Glu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> Xaa at position 16 could be either Arg or Gly <220> <221> MISC_FEATURE <222> (31)..(31) <223> Xaa at position 31 could be either Ser or Glu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (84)..(84) <223> Xaa at position 84 could be either Lys or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (97)..(97) <223> Xaa at position 97 could be either Thr, Ala or Lys <220> <221> MISC_FEATURE <222> (98)..(98) <223> Xaa at position 98 could be either Thr or Lys <220> <221> MISC_FEATURE <222> (99)..(99) <223> Xaa at position 99 could be either Ser or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (102)..(102) <223> Xaa at position 102 could be either Tyr or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (104)..(104) <223> Xaa at position 104 could be either Tyr, Asn or Thr <400> 7 Gln Val Gln Leu Val Xaa Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Xaa 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Xaa Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Asx 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Xaa Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Xaa Xaa Xaa Gly Ser Xaa Asp Xaa Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 8 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa at position 1 could be either Ser or Gln <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa at position 2 could be either Tyr or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (13)..(13) <223> Xaa at position 13 could be either Thr or Ala <220> <221> MISC_FEATURE <222> (23)..(23) <223> Xaa at position 23 could be either Ser or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (25)..(25) <223> Xaa at position 25 could be either Gly or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (26)..(26) <223> Xaa at position 26 could be either Arg or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (30)..(30) <223> Xaa at position 30 could be either Gly or Val <220> <221> MISC_FEATURE <222> (31)..(31) <223> Xaa at position 31 could be either Ser or Ala <220> <221> MISC_FEATURE <222> (32)..(32) <223> Xaa at position 32 could be either Asn, Gly or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (33)..(33) <223> Xaa at position 33 could be either Thr or Asp <220> <221> MISC_FEATURE <222> (35)..(35) <223> Xaa at position 35 could be either Lys or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (51)..(51) <223> Xaa at position 51 could be either Gly or Lys <220> <221> MISC_FEATURE <222> (53)..(53) <223> Xaa at position 53 could be either Asp or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (54)..(54) <223> Xaa at position 54 could be either Gln or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (79)..(79) <223> Xaa at position 79 could be either Val or Leu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (91)..(91) <223> Xaa at 91 could be either Ser or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (93)..(93) <223> Xaa at position 93 could be either Asp or Glu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (94)..(94) <223> Xaa at position 94 could be either Ser, Arg or Lys <220> <221> MISC_FEATURE <222> (95)..(95) <223> Xaa at position 95 could be either Ser, Gly or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (96)..(96) <223> Xaa at position 96 could be either Leu, Phe, Thr or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (97)..(97) <223> Xaa at position 97 could be either Arg, Ser, Thr, Trp or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (98)..(98) <223> Xaa at position 98 could be either Gly or Pro <220> <221> MISC_FEATURE <222> (99)..(99) <223> Xaa at position 99 could be either Ser, Thr, Ala or Leu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (100)..(100) <223> Xaa at position 100 could be either Arg, Ser, Met, Thr or Leu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (101)..(101) <223> Xaa at position 101 could be either Val, Ile, Thr, Met or Leu <400> 8 Xaa Xaa Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Xaa Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Xaa Gly Xaa Xaa Ser Asn Ile Xaa Xaa Xaa 20 25 30 Xaa Val Xaa Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Xaa Asn Xaa Xaa Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Xaa Gln 65 70 75 80 Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa Xaa 85 90 95 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 9 <211> 6 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa at position 2 could be either Gly, Val, Cys or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa at position 3 could be either Ser or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa at position 4 could be either His, Thr, Val, Arg, or Ile <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa at position 5 could be either Asp or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa at position 6 could be either Asn, Lys, Ala, Thr, Ser, Phe, Trp, or His <400> 9 His Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5 <210> 10 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa at position 4 could be either Asp or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa at position 5 represents any amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa at position 6 could be either Gly, Asp, Gln, Leu, Phe, Arg, His, Asn or Tyr <400> 10 Gln Ser Tyr Xaa Xaa Xaa Thr His Pro Ala Leu Leu 1 5 10 <210> 11 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa at position 1 could be either Phe, Thr or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa at position 3 could be either Arg or Ala <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa at position 5 could be either Asp, Ser, Glu or Ala <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa at position 6 could be either Gly or Arg <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa at position 8 represents any amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa at position 10 could be either Tyr or Glu <400> 11 Xaa Ile Xaa Tyr Xaa Xaa Ser Xaa Lys Xaa Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 12 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa at position 1 could be either Gly, Tyr, Ser, Thr, Asn or Gln <400> 12 Xaa Asn Asp Gln Arg Pro Ser 1 5 <210> 13 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(5) <223> Xaa at position 4 and 5 represents any amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa at position 6 could be either Tyr or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa at position 7 could be either Gly, Met, Ala, Asn or Ser <400> 13 Phe Thr Phe Xaa Xaa Xaa Xaa Met His 1 5 <210> 14 <211> 13 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa at position 9 could be either Ser, Cys, Arg, Asn, Asp or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa at position 10 could be either Asn, Met or Ile <220> <221> MISC_FEATURE <222> (11)..(11) <223> Xaa at position 11 could be either Thr, Tyr, Asp, His, Lys or Pro <400> 14 Ser Gly Gly Arg Ser Asn Ile Gly Xaa Xaa Xaa Val Lys 1 5 10 <210> 15 <211> 114 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa at position 5 could be either Gln or Glu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (30)..(30) <223> Xaa at position 30 could be Ser or Glu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (83)..(83) <223> Xaa at position 83 could be Lys or Asn <400> 15 Gln Val Gln Val Xaa Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser 1 5 10 15 Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Xaa Tyr Gly 20 25 30 Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala 35 40 45 Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Xaa Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Lys 85 90 95 Thr His Gly Ser His Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 16 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa at position 1 could be either Ser or Gln <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa at position 2 could be Tyr or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (13)..(13) <223> Xaa at position 13 could be either Thr or Ala <220> <221> MISC_FEATURE <222> (25)..(25) <223> Xaa at position 25 could be either Gly or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (51)..(51) <223> Xaa at position 51 could be either Gly or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (79)..(79) <223> Xaa at position 79 could be either Val or Leu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (95)..(95) <223> Xaa at position 95 could be either Gly or Tyr <400> 16 Xaa Xaa Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Xaa Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Xaa Arg Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Thr Val Lys Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Xaa Asn Asp Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Xaa Gln 65 70 75 80 Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Arg Xaa Thr 85 90 95 His Pro Ala Leu Leu Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 17 <211> 6 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 17 His Gly Ser His Asp Asn 1 5 <210> 18 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Gln Ser Tyr Asp Arg Gly Thr His Pro Ala Leu Leu 1 5 10 <210> 19 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 19 Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 20 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Gly Asn Asp Gln Arg Pro Ser 1 5 <210> 21 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His 1 5 <210> 22 <211> 13 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Ser Gly Gly Arg Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Lys 1 5 10 <210> 23 <211> 115 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 23 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Lys Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Lys Thr His Gly Ser His Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 24 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Gly Arg Ser Trp Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Thr Val Lys Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Asn Asp Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Val Gln 65 70 75 80 Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Arg Gly Thr 85 90 95 His Pro Ala Leu Leu Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 25 <211> 6 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 25 His Gly Ser His Asp Asn 1 5 <210> 26 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 26 Gln Ser Tyr Asp Arg Tyr Thr His Pro Ala Leu Leu 1 5 10 <210> 27 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 27 Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 28 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 28 Tyr Asn Asp Gln Arg Pro Ser 1 5 <210> 29 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 29 Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His 1 5 <210> 30 <211> 13 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Ser Gly Ser Arg Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Lys 1 5 10 <210> 31 <211> 115 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 31 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Lys Thr His Gly Ser His Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 32 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 32 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Arg Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Thr Val Lys Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Tyr Asn Asp Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Arg Tyr Thr 85 90 95 His Pro Ala Leu Leu Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 33 <211> 115 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 33 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Lys Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Thr Ser Gly Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 34 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 34 Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Gly Arg Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Thr Val Lys Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Asn Asp Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Val Gln 65 70 75 80 Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu 85 90 95 Arg Gly Ser Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 35 <211> 115 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 35 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ser Gly Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 36 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MISC_FEATURE <222> (32)..(32) <223> Xaa at position 32 represents either Gly or Tyr <400> 36 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Xaa 20 25 30 Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu 85 90 95 Ser Gly Ser Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 37 <211> 115 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 37 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Lys Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Thr His Gly Ser His Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 38 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 38 Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Gly Arg Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Thr Val Lys Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Asn Asp Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Val Gln 65 70 75 80 Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu 85 90 95 Arg Gly Ser Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 39 <211> 115 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 39 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 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Claims (1)

  1. 피험자에게 IL-12 및/또는 IL-23의 p40 소단위에 결합할 수 있는 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 제1 용량을 주기(periodicity)에 따라 투여하고, 상기 항체 또는 이의 항원-결합 부분의 제2 용량을 동일한 주기로 투여함으로써 피험자에서 건선을 치료함을 포함하는, 피험자에서 건선을 치료하는 방법.
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Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7776331B1 (en) 2007-01-16 2010-08-17 Abbott Laboratories Methods of treating plaque psoriasis
RU2497545C2 (ru) 2008-03-18 2013-11-10 Эбботт Лэборетриз Способ лечения псориаза (варианты)
JO3244B1 (ar) 2009-10-26 2018-03-08 Amgen Inc بروتينات ربط مستضادات il – 23 البشرية
MX2013003920A (es) * 2010-10-06 2013-06-03 Abbvie Inc Metodos para el tratamiento de la psoriasis.
SG10201505454SA (en) * 2011-07-13 2015-09-29 Abbvie Inc Methods and compositions for treating asthma using anti-il-13 antibodies
AU2014238148A1 (en) * 2013-03-15 2015-10-08 Amgen Inc. Methods for treating psoriasis using an anti-IL-23 antibody
JP2019529426A (ja) * 2016-09-23 2019-10-17 アッヴィ・インコーポレイテッド 用量調整
MX2020004716A (es) * 2017-11-06 2020-11-06 Janssen Biotech Inc Método seguro y eficaz para tratar la artritis psoriásica con el anticuerpo específico anti-il23.
RU2697415C1 (ru) * 2018-11-12 2019-08-14 Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования "Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова" Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) Способ лечения каплевидного псориаза
IL305836A (en) * 2021-03-12 2023-11-01 Janssen Biotech Inc A method for treating psoriatic arthritis patients with insufficient response to TNF therapy with a specific anti-IL23 antibody
BR112023018353A2 (pt) * 2021-03-12 2024-02-06 Janssen Biotech Inc Método seguro e eficaz para tratamento da artrite psoriática com anticorpo específico anti-il23

Family Cites Families (78)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
US5811523A (en) 1988-11-10 1998-09-22 Trinchieri; Giorgio Antibodies to natural killer stimulatory factor
AU634186B2 (en) 1988-11-11 1993-02-18 Medical Research Council Single domain ligands, receptors comprising said ligands, methods for their production, and use of said ligands and receptors
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
CA2067194C (en) 1989-10-05 2003-03-18 Glenn Kawasaki Cell-free synthesis and isolation of novel genes and polypeptides
US6683046B1 (en) 1989-12-22 2004-01-27 Hoffmann-La Roche Inc. Purification and characterization of cytotoxic lymphocyte maturation factor and monoclonal antibodies thereto
US6713610B1 (en) 1990-01-12 2004-03-30 Raju Kucherlapati Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6673986B1 (en) 1990-01-12 2004-01-06 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
WO1992020791A1 (en) 1990-07-10 1992-11-26 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US7084260B1 (en) 1996-10-10 2006-08-01 Genpharm International, Inc. High affinity human antibodies and human antibodies against human antigens
US6300129B1 (en) 1990-08-29 2001-10-09 Genpharm International Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US6255458B1 (en) 1990-08-29 2001-07-03 Genpharm International High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
ES2108048T3 (es) 1990-08-29 1997-12-16 Genpharm Int Produccion y utilizacion de animales inferiores transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos.
EP0564531B1 (en) 1990-12-03 1998-03-25 Genentech, Inc. Enrichment method for variant proteins with altered binding properties
US5919452A (en) 1991-03-18 1999-07-06 New York University Methods of treating TNFα-mediated disease using chimeric anti-TNF antibodies
US5656272A (en) 1991-03-18 1997-08-12 New York University Medical Center Methods of treating TNF-α-mediated Crohn's disease using chimeric anti-TNF antibodies
US6277969B1 (en) 1991-03-18 2001-08-21 New York University Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US6284471B1 (en) 1991-03-18 2001-09-04 New York University Medical Center Anti-TNFa antibodies and assays employing anti-TNFa antibodies
US5698195A (en) 1991-03-18 1997-12-16 New York University Medical Center Methods of treating rheumatoid arthritis using chimeric anti-TNF antibodies
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
DK0605522T3 (da) 1991-09-23 2000-01-17 Medical Res Council Fremgangsmåde til fremstilling af humaniserede antistoffer
GB9122820D0 (en) 1991-10-28 1991-12-11 Wellcome Found Stabilised antibodies
ES2227512T3 (es) 1991-12-02 2005-04-01 Medical Research Council Produccion de anticuerpos contra auto-antigenos a partir de repertorios de segmentos de anticuerpos fijados en un fago.
CA2140638C (en) 1992-07-24 2010-05-04 Raju Kucherlapati Generation of xenogeneic antibodies
US5652138A (en) 1992-09-30 1997-07-29 The Scripps Research Institute Human neutralizing monoclonal antibodies to human immunodeficiency virus
PT614984E (pt) 1993-03-05 2001-12-28 Bayer Ag Anticorpos humanos anti-tnf
CA2161351C (en) 1993-04-26 2010-12-21 Nils Lonberg Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
CA2125763C (en) 1993-07-02 2007-08-28 Maurice Kent Gately P40 homodimer of interleukin-12
EP0638644A1 (en) 1993-07-19 1995-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Receptors of interleukin-12 and antibodies
EP0659766A1 (en) 1993-11-23 1995-06-28 Schering-Plough Human monoclonal antibodies against human cytokines and methods of making and using such antibodies
ZA95960B (en) 1994-03-14 1995-10-10 Genetics Inst Use of interleukin-12 antagonists in the treatment of autoimmune diseases
US5910486A (en) 1994-09-06 1999-06-08 Uab Research Foundation Methods for modulating protein function in cells using, intracellular antibody homologues
US5562138A (en) * 1994-10-13 1996-10-08 The Longaberger Company Bowing press
CA2219361C (en) 1995-04-27 2012-02-28 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5670057A (en) 1995-04-28 1997-09-23 Baxter International Inc. Apparatus and method for automatically performing peritoneal equilibration tests
EP0823941A4 (en) 1995-04-28 2001-09-19 Abgenix Inc HUMAN ANTIBODIES DERIVED FROM IMMUNIZED XENO MOUSES
US6685940B2 (en) 1995-07-27 2004-02-03 Genentech, Inc. Protein formulation
US5853697A (en) 1995-10-25 1998-12-29 The United States Of America, As Represented By The Department Of Health & Human Services Methods of treating established colitis using antibodies against IL-12
US6297395B1 (en) 1995-11-10 2001-10-02 The Secretary Of State For Defence In Her Brittanic Majesty's Government Of The United Kingdom Of Great Britain And Northern Ireland Calixarenes and their use for sequestration of metals
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
SI9720020B (en) 1996-02-09 2001-12-31 Basf Ag Human antibodies that bind human TNF alpha
WO1998016248A1 (en) 1996-10-11 1998-04-23 The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Methods for enhancing oral tolerance and treating autoimmune disease using inhibitors of interleukin-12
DK0936923T3 (da) 1996-11-15 2004-04-26 Kennedy Inst Of Rheumatology Undertrykkelse af TNFalpha og IL-12 ved terapi
EP1500329B1 (en) 1996-12-03 2012-03-21 Amgen Fremont Inc. Human antibodies that specifically bind human TNF alpha
US6054487A (en) 1997-03-18 2000-04-25 Basf Aktiengesellschaft Methods and compositions for modulating responsiveness to corticosteroids
KR100764256B1 (ko) 1998-01-23 2007-10-05 에프. 호프만-라 로슈 아게 인간 인터루킨-12에 대한 항체
US20020161199A1 (en) 1998-04-08 2002-10-31 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
EP0953639A1 (en) 1998-04-30 1999-11-03 Boehringer Ingelheim International GmbH FAPalpha-specific antibody with improved producibility
US6410824B1 (en) 1998-12-09 2002-06-25 Protein Design Labs, Inc. Animal model for psoriasis for the prevention and treatment of psoriasis in humans
US7883704B2 (en) 1999-03-25 2011-02-08 Abbott Gmbh & Co. Kg Methods for inhibiting the activity of the P40 subunit of human IL-12
IL145134A0 (en) * 1999-03-25 2002-06-30 Knoll Gmbh Human antibodies that bind human il-12 and methods for producing
US6914128B1 (en) 1999-03-25 2005-07-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Human antibodies that bind human IL-12 and methods for producing
US6902734B2 (en) 2000-08-07 2005-06-07 Centocor, Inc. Anti-IL-12 antibodies and compositions thereof
US20040156835A1 (en) 2001-05-30 2004-08-12 Taiji Imoto Protein preparation
CA2492143A1 (en) 2002-07-12 2004-01-22 Medarex, Inc. Methods and compositions for preventing oxidative degradation of proteins
US7608260B2 (en) 2003-01-06 2009-10-27 Medimmune, Llc Stabilized immunoglobulins
US8496930B2 (en) 2003-10-01 2013-07-30 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Method of stabilizing antibody and stabilized solution-type antibody preparation
US20050159364A1 (en) 2003-12-19 2005-07-21 Cooper Garth J. Copper antagonist compounds
JP2007522157A (ja) 2004-02-12 2007-08-09 メルク　パテント　ゲゼルシャフト　ミット　ベシュレンクテル　ハフトング 抗ｅｇｆｒ抗体の高濃縮液体製剤
NZ583153A (en) * 2004-12-21 2011-06-30 Centocor Ortho Biotech Inc Anti-IL-12 antibodies, epitopes, compositions, methods and uses
TR201902033T4 (tr) 2005-06-30 2019-03-21 Janssen Biotech Inc Anti-IL-23 antikorları, bileşimleri, yöntemleri ve kullanımları.
CA2638811A1 (en) 2006-02-03 2007-08-16 Medimmune, Llc Protein formulations
US7776331B1 (en) 2007-01-16 2010-08-17 Abbott Laboratories Methods of treating plaque psoriasis
NZ580379A (en) 2007-03-29 2012-10-26 Abbott Lab Crystalline anti-human il-12 antibodies
RU2497545C2 (ru) 2008-03-18 2013-11-10 Эбботт Лэборетриз Способ лечения псориаза (варианты)
CN102301235B (zh) 2008-11-28 2014-11-19 Abbvie公司 稳定的抗体组合物和用于稳定其的方法
MX2013003920A (es) 2010-10-06 2013-06-03 Abbvie Inc Metodos para el tratamiento de la psoriasis.
TW201309330A (zh) 2011-01-28 2013-03-01 Abbott Lab 包含糖基化抗體之組合物及其用途

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