KR20140015761A - 센티페드그라스 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 질환 개선용 조성물 - Google Patents
센티페드그라스 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 질환 개선용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 질환 개선용 조성물에 관한 것으로 더욱 상세하게는 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획이 여드름균의 원인균인 표피 포도구균 및 프로피로니박테리움 아크네스, 및 비듬의 원인균인 말라세지아의 성장을 현저히 저해시킴으로서 새로운 천연 여드름 등을 포함한 미생물 유해의 피부질환을 효과적으로 예방, 치료 및 개선에 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 질환 개선용 조성물에 관한 것이다.
여드름(acne vulgaris)은 15세에서 40세 사이에 발생하는 피부질환으로, 특히 사춘기에 흔한 질환으로 알려져 있다. 주로 얼굴, 가슴, 등, 어깨 등에 발생하는 폐쇄성(whiteheads) 또는 개방성(blackheads), 면포(comedo), 구진(papule), 농포(pustule), 결절(nodule) 등의 병변을 특징으로 하는 모피지선에서 발생하는 만성 염증성 질환으로 정의된다. 여드름의 종류로는 흔히 보는 여드름으로서 보통 여드름이 있는데, 이는 심상성 여드름이라고도 하며, 특징으로는 전형적인 면포와 여러 종류의 발진이 섞여 나타난다. 켈로이드성 여드름(acne keloidalis)은 고름 같은 분비물이 여기저기서 분출되는 큰 농양이나 고름 주머니, 그리고 염증성 결절 등이 특징적으로 나타나는데 여드름 중 가장 심한 형태에 속한다. 월경이 시작되기 약 일주일 전에 기존의 여드름이 심해지는 월경 전 여드름(premenstrual acne), 태아시기에 모체로부터 받은 호르몬 중 프로게스테론이 피지선의 분비를 자극하기 때문에 발생하는 신생아 여드름(preadolescent acne)이 있고, 그 외에 입 주위 여드름, 성인형 여드름 등이 있다. 10대의 경우 90%에서 다양한 정도의 여드름을 가지고 있다고 알려져 있으나, 공기 오염, 약물 남용 등으로 근래에는 나이와 상관없이 발생하여 여드름이 생기는 연령층이 넓어지고 있다. 여드름의 발생에는 다양한 요인들이 영향을 미치는 것으로 밝혀져 있으며, 그 중 대표적인 4 가지 요소, 즉 비정상적인 모낭이상 각화, 피지 분비의 증가, 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes, P. acnes)로 대표되는 세균의 증식, 이로 인한 염증 유발이 중요하게 꼽힌다 (오성문, 약용식물로부터 여드름 원인 미생물에 대한 천연 항균제 탐색, 연세대 공학대학원 석사논문, 2006).
예전에는 여드름의 발생이 당연한 성장 과정이나 체질로 여겨졌으나, 최근에는 관심을 가지고 적극적으로 관리 또는 치료하기를 원하는 사람들이 늘고 있다. 대부분의 피부 트러블은 생명 유지에는 지장이 없지만, 대인관계 및 일상생활에 심리적인 영향을 미친다. 특히, 여드름은 다른 질환과는 달리 외부로 노출되고 때로는 직접 만져질 수도 있으므로 다른 내과적 문제보다도 더 심각하게 느낄 수 있다. 더구나 청소년기뿐만 아니라 성인이 되어서도 지속되는 질환이기 때문에 많은 현대인들이 겪는 피부트러블 중의 하나이다 (오혜영 등, 여고생들의 여드름 인식에 대한 연구, 한국미용학회지 14(1), 124-133, 2008).
여드름의 발생 기전을 살펴보면 다음과 같다. 사춘기가 되면 남녀 모두 남성호르몬 분비가 왕성해져서 모낭 옆에 붙어있는 피지선을 자극하게 되고 그 결과 피지선이 커져 많은 피지가 분비된다. 이와 동시에 털구멍, 즉 모공 입구의 각질층이 두꺼워지고 접착력이 높아져 모공이 좁아지거나 막히게 된다. 그 결과 모낭 내에 피지가 쌓이고 모낭 내에 살고 있던 세균이 번식하여 염증으로 발전하는데 이렇게 염증으로 발전한 것이 여드름이다. 근본적으로 피지선을 자극하는 남성호르몬인 안드로겐과 모피지선(毛皮脂腺)에서 번식하여 피지를 분해, 유리지방산을 생성하고 프로피오니박테리움 아크네스가 작용하여 생긴다 (신경훈등, 피지생성과 여드름, 한국피부장벽학회 10(1), 56-60, 2008).
프로피오니박테리움 아크네스 외에 일반적인 피부 상재균 중 피부에 염증을 유발할 수 있는 세균으로는 스타필로코시 에피더미디스(S. epidermidis), 말라세지아 푸르푸르 등이 보고되어 있다. 한편, 여드름 병변에서 분리되는 대표적인 세균은 프로피오니박테리움 아크네스이지만, 스타필로코시 에피더미디스와 같은 다른 균들도 분리되는 것으로 보고되고 있다. 말라세지아(Malassezia) 속의 균들은 오랫동안 피부에 서식하는 균류로, 특정 조건에서 피부 등의 표면 감염을 일으키는 원인이 될 수 있고 이식환자 등에서는 기회주의 병원체가 될 수 있다 (손호용 등, 피부 여드름 치료제 개발을 위한 천연물의 항균활성 검색, 한국미생물생명공학회지 34(3), 265-272, 2006).
프로피오니박테리움 아크네스는 그람 양성 혐기성 세균으로 0.3 ~ 1.3 ㎛ ×1 ~ 10㎛이고 균체 일부가 팽대하며 균단은 뾰족하고 다형성이고 V자 배열을 하고 있다. 정상 성인의 피지선에서 80%까지 검출되는 정상 균총의 하나이나 피지분비가 많은 모공 주변 등에 분포하며 표피성 포도상 구균과 함께 피부에 존재하면서 여드름 등과 같은 모낭염 등 피부질환을 발생과 증상을 악화시키는 원인균이 되기도 한다. 프로피오니박테리움 아크네스는 피지를 주 영양원으로 하며, 피지의 주성분인 중성지방을 지방산과 글리세롤로 분해하며, 이때 생성된 유리 지방산은 피부에 심한 자극을 주어 모낭벽이나 모공 주위에 세포에 염증을 일으킨다. 또한 이 균에 의해 자극을 받은 상피세포는 각질세포 생성이 증가하여 정체 과각화가 이루어져 여드름의 초기단계인 미세면포를 형성하며, 계속하여 각질과 피지가 분해됨으로서 모낭 벽이 얇아지고, 프로피오니박테리움 아크네스를 탐식한 백혈구가 분비하는 가수분해효소의 작용에 의해 모낭 벽이 파열되고 모근 내용물이 진피내로 유리되어 염증반응이 가속화된다 (이경숙 등, 여드름병변에서 채취한 프로피오니박테리움 아크네스의 분리, 동정 및 생화학적 특정 연구, 한국의류산업학회지 8(5), 571-576, 2006).
스타필로코시 에피더미디스(S. epidermidis)는 그람양성 세균에 속하는 스타필로코시(Staphylococcus) 속 중 하나이다. 스타필로코시 에피더미디스의 콜로니는 일반적으로 작고, 흰색에서 노란색이며, 철야(overnight) 배양 후 지름 1 ~ 2 mm 정도로 자란다. 사람과 동물의 피부에서 자주 발생하며, 점막에서도 나타난다. 호기성 호흡이나 발효에 의해 성장하며 혐기성에서도 생존할 수 있다. 항생제인 노보비오신(Novobiocin)에 민감하나, 페니실린(penicillin)과 메티실린(methicillin) 등의 다양한 항생제에는 내성이 있다. 스타필로코시 에피더미디스는 일반적으로 비병원성 균이지만 면역계나 유치(留置)도뇨관 환자에게는 감염을 일으키는 주요한 원인이 된다. 많은 변종들은 의료 보철물의 표면에 접착하여 균막을 형성한다 (장영식 등, 스타필로코시 에피더미디스 각막염의 역학조사, 대한안과학회지 43(4), 665-671, 2002).
말라세지아 푸르푸르(Malassezia furfur, M. furfur)는 두꺼운 다층의 세포벽을 가지는 다형태의 친지방성 미생물로 콜로니는 작고 황갈색이며 선명한 테두리를 가지고 있다. 말라세지아 푸르푸르는 이스트에 속하며, 보통 인간을 포함한 동물 피부 표면에 있다. 감염이 되면 등이나 가슴 부위의 저색소침착증(hypopigmentation)이 일어날 수 있다. 생존하기 위해서는 지방이 필요하며, 따라서 머리가죽, 얼굴, 상반신 등의 대부분이 피지선에 흔하게 존재한다. 자라는 속도가 너무 빠를 때는 세포의 자연 재생이 흐트러져 긁으면 비듬이 발생한다 (김영주 등, 용뇌향(Dryobalanops aromatica) 유래 용뇌의 말라세지아 푸르푸르에 대한 항균 활성, 한국미생물생명공학회지 33(3), 236-239, 2005).
센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides)는 생육이 늦은 난지형 잔디로서 뗏장을 형성하며 포복 생장을 하는 다년생 잔디이다. 벼과 식물에 속하며, 학명은 Eremochloa ophiuroides (Munro) Hack이다. 주로 중국과 동아시아, 인도차이나, 미국 북동부, 메소아메리카와 캐러비안 지역에 분포하고 있으며, 각종 토양조건에 폭 넓게 잘 적응되지만, 특히 습하며 산성토양 및 비옥도가 낮은 사질 토양에서 잘 견딘다.
형태학적 특징으로서, 잎은 길이 15~30 ㎜, 폭 2~4 ㎜이고, 흰 중심맥(mid vein)을 가지는 납작한 모양이며, 경령(collar) 부분을 제외하고 털이 없고, 잎 끝부분은 둥글다. 줄기는 아주 굳게 다문 잎집(sheath)을 가지고, 뿌리는 가는 분기형의 포복경(stolons)이다. 꽃 부분은 3~5 인치 정도의 하나의 총상화서(總狀花序, raceme, = 총상꽃차례)를 가지고, 상기 총상화서는 자줏빛색을 띠고 약간 평평하며 두 줄로 배열된 작은 이삭(小穗, spikelet)을 가진다. 주용도는 잔디 밭 또는 뗏장 잔디로 사용되고 높은 잎의 비율(leafiness)과 좋은 맛 때문에 조사료로 이용된다.
이에 본 발명자들은 독성이 없고 여드름 원인균의 성장을 저해시킴으로서 피부 질환 개선을 효과를 갖는 천연 식물 추출물을 연구하던 중, 센티페드그라스에서 추출한 추출물, 이의 분획물 및 상기 분획물로부터 분리한 활성분획이 여드름균의 원인균인 표피 포도구균 및 프로피로니박테리움 아크네스, 및 비듬의 원인균인 말라세지아의 성장을 현저히 저해시킴으로 피부 질환 개선용 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있음을 밝힘으로서 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 질환 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물의 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피로 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물의 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피로 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 피부 외용제를 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 피부 외용제를 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물의 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피로 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 피부 외용제를 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 건강식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 건강식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물의 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피로 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 건강식품을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 의약외품을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 의약외품을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물의 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피로 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 의약외품을 제공한다.
아울러, 본 발명은 샴푸, 비누, 린스 및 헤어토닉으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나로 사용하는 피부질환 개선용 의약외품을 제공한다.
본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획이 여드름균의 원인균인 표피 포도구균 및 프로피로니박테리움 아크네스, 및 비듬의 원인균인 말라세지아의 성장을 현저히 저해시킴으로서 새로운 천연 여드름 등을 포함한 미생물 유래의 피부질환을 효과적으로 예방, 치료 및 개선용 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 센티페드그라스의 추출물, 이의 분획물 및 상기 분획물로부터 분리한 활성분획을 제조하는 과정을 나타낸 그림이다.
도 2는 여드름 원인균인 표피포도구균에 정제하지 않은 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 3은 여드름 원인균인 표피포도구균에 50% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 4는 여드름 원인균인 표피포도구균에 70% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 5는 여드름 원인균인 프로피로니박테리움 아크네스에 정제하지 않은 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 6은 여드름 원인균인 프로피로니박테리움 아크네스에 70% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 7은 비듬의 원인균인 말라세지아에 정제하지 않은 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 8은 비듬의 원인균인 말라세지아에 50% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 9는 비듬의 원인균인 말라세지아에 70% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 2는 여드름 원인균인 표피포도구균에 정제하지 않은 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 3은 여드름 원인균인 표피포도구균에 50% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 4는 여드름 원인균인 표피포도구균에 70% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 5는 여드름 원인균인 프로피로니박테리움 아크네스에 정제하지 않은 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 6은 여드름 원인균인 프로피로니박테리움 아크네스에 70% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 7은 비듬의 원인균인 말라세지아에 정제하지 않은 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 8은 비듬의 원인균인 말라세지아에 50% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
도 9는 비듬의 원인균인 말라세지아에 70% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 다양한 농도로 처리하였을 때 결과를 나타낸 그림이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 센티페드그라스 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다:
1) 센티페드그라스에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
2) 단계 1)의 추출물을 식힌 후 여과하는 단계; 및
3) 단계 2)의 여과한 추출물을 감압농축하는 단계.
상기 방법에 있어서, 단계 1)의 센티페드그라스는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다. 상기 센티페드그라스는 잎, 줄기 또는 뿌리를 모두 이용할 수 있으나, 잎을 이용하는 것이 바람직하다.
상기 추출용매는 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 알코올로는 C1 내지 C4의 저급 알코올을 이용하는 것이 바람직하며, 저급 알코올로는 에탄올 또는 메탄올을 이용하는 것이 바람직하다. 추출방법으로는 진탕추출 또는 환류추출을 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 상기 추출용매를 센티페드그라스 분량에 2 내지 10배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 추출온도는 50 내지 100℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 2 내지 5일인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 아울러, 추출 회수는 1 내지 3회인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
본 발명은 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명은 센티페드그라스 추출물의 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피로 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 센티페드그라스 추출물의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획은 하기의 단계들을 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다:
1) 센티페드그라스 추출물에 추가로 유기용매를 가하여 유기용매 분획물을 제조하는 단계; 및
2) 단계 1)의 분획물을 컬럼크로마토그래피를 실시하여 활성분획을 제조하는 단계.
상기 방법에 있어서, 단계 1)의 유기용매는 n-헥산 또는 에틸아세테이트인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 방법에 있어서, 상기 유기용매 분획물은 n-핵산으로 추출한 후 물층을 에틸아세테이트로 추출한 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 2)의 컬럼크로마토그래피는 실리카겔, 세파덱스, RP-18, 폴리아미드, 도요펄(Toyopearl) 및 XAD 수지로 이루어진 그룹으로부터 선택된 충진제를 이용한 컬럼크로마토그래피를 수행하여 활성분획을 분리 및 정제할 수 있다. 컬럼크로마토그래피는 필요에 따라 적절한 충진제를 선택하여 수차례 실시할 수 있다.
본 발명자들은 센티페드그라스의 에틸아세테이트 분획물을 Flex-ColumTM(3 ㎝ × 25 ㎝) 및 도요펄(Toyoperarl) HW-40(75 ㎛) 컬럼크로마토그래피에 흡착시키고 20, 50 또는 70% 메탄올 용출용매를 사용하여, 에틸아세테이트-20%메탄올, 에틸아세테이트-50%메탄올 및 에틸아세테이트-70%메탄올 활성분획을 얻었다.
본 발명자들은 센티페드그라스 추출물의 농도에 따른 여드름균의 억제 효과를 알아보기 위하여 표피포도구균에 센티페드그라스 추출물의 농도(0.3125, 0.625, 1.25, 2.5, 5 및 10 ug/ml)로 정제하지 않은 센티페드그라스 분획물을 처리하였을 때 각각 1.75, 1.5, 2, 2, 2.75 및 2.75의 평균 면적을 나타내었고(도 2 및 표 5 참조), 각각을 50% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 처리하였을 때 1.75, 2, 2.125, 2.25, 1.375 및 3의 평균 면적을 나타내었으며(도 3 및 표 5 참조), 각각을 70% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 처리하였을 때 평균면적은 1.75, 1.5, 2, 2, 2.75 및 2.75로 나타났다(도 4 및 표 5 참조). 센티페드그라스 추출물이 표피 포도구균의 성장을 저해하는 것을 알 수 있었다.
또한, 본 발명자들은 센티페드그라스 추출물의 농도에 따른 여드름균의 억제 효과를 알아보기 위하여 프로피로니박테리움 아크네스에 센티페드그라스 메탄올 추출물 0.3125, 0.625, 1.25, 2.5, 5 및 10 ug/ml의 농도로 정제하지 않은 센티페드그라스 분획물을 처리하였을 때 각각 1.75, 1.5, 2, 2, 2.75 및 2.75의 평균 면적을 나타내었고(도 5 및 표 6 참조), 각각을 70% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 처리하였을 때 평균면적은 0, 0.25, 0.3, 1, 2.2 및 3.5를 나타냈다(도 6 및 표 6 참조). 센티페드그라스 추출물이 프로피로니박테리움 아크네스의 성장을 저해하는 것을 알 수 있었다.
본 발명자들은 센티페드그라스 추출물의 농도에 따른 비듬균의 억제 효과를 알아보기 위하여 말라세지아에 센티페드그라스 메탄올 추출물 0.3125, 0.625, 1.25, 2.5, 5 및 10 ug/ml의 농도로 정제하지 않은 센티페드그라스 분획물을 처리하였을 때 각각 1.75, 1.5, 2, 2, 2.75 및 2.75의 평균 면적을 나타내었고(도 7 및 표 7 참조), 각각을 50% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 처리하였을 때 1, 1.75, 1.75, 2, 2.25 및 1.75의 평균 면적을 나타내었으며(도 8 및 표 7 참조), 각각을 70% 메탄올로 정제한 센티페드그라스 분획물을 처리하였을 때 평균면적은 0.5, 0.75, 1.5, 1.5, 2 및 2를 나타냈다(도 9 및 표 7 참조). 센티페드그라스 추출물이 말라세지아의 성장을 저해하는 것을 알 수 있었다.
따라서, 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획이 여드름균 및 비듬균의 성장을 현저하게 저해시킴으로서 피부질환 예방 및 치료에 효과적인 약학적 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 상기 피부 질환은 여드름 또는 비듬인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 약학적 조성물은 통상적으로 사용되는 부형제, 붕해제, 감미제, 활택제, 향미제 등을 추가로 포함할 수 있으며, 통상적인 방법에 의해 정제, 캅셀제, 산제, 과립제, 현탁제, 유제, 시럽제, 기타 액제로 제형화될 수 있다.
구체적으로 본 발명의 약학적 조성물은 경구 투여용 제형, 예를 들면 정체, 트로치제(troches), 로젠지(lozenge), 수용성 또는 우성현탁액, 조제분말 또는 과립, 에멀젼, 하드 또는 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제(elixirs)로 제제화된다. 정제 및 캡슐 등의 제형으로 제제하기 위해 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀롤로오스 또는 젤라틴과 같은 결합제, 디칼슘 포스페이트와 같은 부형제, 옥수수 전분 또는 고구마 전분과 같은 붕해제, 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 칼슘, 스테아릴푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌글리콜 왁스와 같은 윤활유가 함유된다. 캡슐제형의 경우는 상기에서 언급한 물질 이외에도 지방유와 같은 액체 담체를 함유한다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여시 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사 또는 흉부내 주사 주입방식을 선택하는 것이 바람직하다. 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위해서는 본 발명의 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 분획물의 활성분획을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 현탁액으로 제조하고 이를 앰플 또는 바이알의 단위 투여형으로 제제한다.
본 발명에 따른 유효성분의 투여량은 체내에서 활성성분의 흡수도, 불활성화율 및 배설속도, 환자의 연령, 성별 및 상태, 치료할 질병의 중증 정도에 따라 적절히 선택되나, 경구 투여제의 경우 일반적으로 성인에게 1일에 체중 1 ㎏당 본 발명의 추출물을 0.0001 ~ 500 ㎎의 양으로 1회 내지 수회 나누어 투여할 수 있으며, 0.001 ~ 100 ㎎의 양으로 투여하는 것이 바람직하다.
본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물의 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피로 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서 상기 피부질환은 여드름 또는 비듬인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
상기 화장료 조성물은, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.
또한, 상기 화장료 조성물은 본 발명의 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.
본 발명의 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획을 함유하는 화장료 조성물에 있어서, 통상적으로 함유되는 화장료 조성물에 본 발명의 추출물이 1 내지 15 중량%, 바람직하게는 2 내지 10 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명의 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획을 피부 외용제로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부용 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한, 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 피부 외용제를 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 피부 외용제를 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물의 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피로 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 피부 외용제를 제공한다.
본 발명의 피부 외용제에 있어서 상기 피부질환은 여드름 및 비듬인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
피부질환을 효과적으로 치료하기 위해서는 적합한 외용제형을 선택하는 것이 중요하다. 피부질환을 치료하기 위해 센티페드그라스 추출물을 적당히 희석하여 피부에 직접 도포할 수도 있으며, 본 발명의 피부질환 치료용 약학적 조성물이 환부에 효과적으로 적용될 수 있도록 연고제로 제조할 수 있다. 상기 연고제는 본 발명의 피부질환 치료용 약학적 조성물을 무기물질과 배합한 다음, 이를 지용성 기제로 코팅하여 제조한다. 상기 무기물질은 항균성, 소염효과, 표피재생 효과 등이 우수한 소재를 사용하는 것이 바람직하고, 이들의 구체적인 예로는 산화아연, 탄산아연, 산화철 등이 있다. 또한, 수용성 물질인 본 발명의 피부질환 치료용 약학적 조성물을 안전하게 함침 할 수 있는 세라믹 담체를 추가로 사용하는 것이 바람직하다. 상기 세라믹 담체로는 제올라이트, 활석, 석고, 모려분 및 이들의 혼합물이 바람직하게 사용된다. 이러한 세라믹 담체는 수용성 성분의 함침성이 우수하여 피부에 수용성 성분의 공급을 원활히 할 수 있다.
본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 건강식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 건강식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물의 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피로 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 건강식품을 제공한다.
본 발명의 건강식품에 있어서 상기 피부질환은 여드름 및 비듬인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 건강식품은 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
아울러, 본 발명은 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 의약외품을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 의약외품을 제공한다.
또한, 본 발명은 센티페드그라스 추출물의 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피로 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 의약외품을 제공한다.
본 발명의 의약외품에 있어서 상기 피부질환은 여드름 및 비듬인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 의약외품은 샴푸,비누, 린스 및 헤어토닉으로 구성된 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 의약외품은 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
상기 의약외품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성분획을 첨가할 수 있는 모든 의약외품을 포함한다.
이하, 본 발명을 실시예, 실험예, 비교예 및 제조예에 의하여 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예, 실험예, 비교예 및 제조예는 본 발명을 구체적으로 예시하는 것이며, 본 발명의 내용이 실시예, 실험예, 비교예 및 제조예에 의해 한정되는 것은 아니다.
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실시예
1>
센티페드그라스
추출물의 제조
<1-1>
센티페드그라스
메탄올 추출물의 제조
센티페드그라스 종자를 일본의 Fukukaen Nursery and Blub co. Ltd로부터 수입하여 한국원자력연구원 정읍 방사선과학연구소의 포장에서 증식하여 센티페드그라스 잎 시료를 채취하였다. 채취한 잎 시료는 -80℃에 보관하여 사용하였다. 센티페드그라스 잎 5 ㎏을 100% 메탄올(MeOH) 20 ℓ를 첨가하여 믹서기로 마쇄한 후 상온에서 3일간 침지시켜 얻은 추출물을 50℃에서 감압 농축하여 210 g의 센티페드그라스 메탄올 추출물을 수득하였다.
<1-2>
센티페드그라스
에탄올 추출물의 제조
센티페드그라스 종자를 일본의 Fukukaen Nursery and Blub co. Ltd로부터 수입하여 한국원자력연구원 정읍 방사선과학연구소의 포장에서 증식하여 센티페드그라스 잎 시료를 채취하였다. 채취한 잎 시료는 -80℃에 보관하여 사용하였다. 센티페드그라스 잎 5 ㎏을 100% 에탄올(EtOH) 20 ℓ를 첨가하여 믹서기로 마쇄한 후 상온에서 3일간 침지시켜 얻은 추출물을 50℃에서 감압 농축하여 203 g의 센티페드그라스 에탄올 추출물을 수득하였다.
<1-3>
센티페드그라스
물 추출물의 제조
센티페드그라스 종자를 일본의 Fukukaen Nursery and Blub co. Ltd로부터 수입하여 한국원자력연구원 정읍 방사선과학연구소의 포장에서 증식하여 센티페드그라스 잎 시료를 채취하였다. 채취한 잎 시료는 -8℃에 보관하여 사용하였다. 센티페드그라스 잎 5 ㎏을 물 20 ℓ를 첨가하여 믹서기로 마쇄한 후 상온에서 3일간 침지시켜 얻은 추출물을 50℃에서 감압 농축하여 198 g의 센티페드그라스 물 추출물을 수득하였다.
<
실시예
2>
센티페드그라스
분획물의
제조
<2-1> n-
헥산
분획물의
제조
상기 실시예 <1-1>에서 수득한 센티페드그라스 메탄올 추출물을 유기용매를 사용하여 극성에 따른 분획을 실시하였다.
<2-2> 에틸아세테이트
분획물의
제조
<도 1>과 같이, 감압농축한 메탄올 추출물을 물에 현탁한 후, 저극성 용매인 n-헥산으로 먼저 추출한 후에 물층을 다시 에틸아세테이트(EtOAc)로 분획하였다.
<2-3> 물
분획물의
제조
상기 실시예 <2-2>에서 n-헥산 및 에틸아세테이트(EtOAc)로 분획한 후 물에 의한 가용 분획물을 마지막으로 수득하였다. 각 용매추출 분획을 감압농축하여 건조시킨 후, 에틸아세테이트 분획물(21 g)을 얻었다.
<
실시예
3>
센티페드그라스
활성분획의 제조
<3-1> 에틸아세테이트-20% 메탄올
분획물의
제조
상기 <실시예 2>의 에틸아세테이트 분획물을 20% 메탄올을 용출용매로 사용하여 Flex-Colum TM(3 ㎝×25 ㎝)과 Toyoperarl HW-40(75 ㎛)를 사용하여 컬럼크로마토그래피를 실시하여 활성분획물을 수득하였다. 에틸아세테이트-20% 메탄올 9.41 g의 활성분획을 수득하였다.
<3-2> 에틸아세테이트-50% 메탄올
분획물의
제조
상기 <실시예 2>의 에틸아세테이트 분획물을 50% 메탄올을 용출용매로 사용하여 Flex-Colum TM(3 ㎝×25 ㎝)과 Toyoperarl HW-40(75 ㎛)를 사용하여 컬럼크로마토그래피를 실시하여 활성분획물을 수득하였다. 에틸아세테이트-50% 메탄올 5.74 g의 활성분획을 수득하였다.
<3-3>에틸아세테이트-70% 메탄올
분획물의
제조
상기 <실시예 2>의 에틸아세테이트 분획물을 70% 메탄올을 용출용매로 사용하여 Flex-Colum TM(3 ㎝×25 ㎝)과 Toyoperarl HW-40(75 ㎛)를 사용하여 컬럼크로마토그래피를 실시하여 활성분획물을 수득하였다. 에틸아세테이트-70% 메탄올 1 g의 활성분획을 수득하였다.
<
실시예
4> 여드름균 및 비듬균의 배양
<4-1> 여드름균
표피 포도구균(taphylococcus epidermidis, Winslow and Winslow, Evans)은 여드름을 발생하는 중요한 균으로서 박테리아이고, 하기 [표 1]의 트립티케이즈 소이(Trypticase soy)배지에서 37℃로 배양하였다.
| 펩톤C(Pancreatic digest of casein) | 17.0 g |
| 소이톤(Soytone) | 3.0 g |
| 염화나트륨 | 5.0 g |
| 디포타슘포스페이트 | 2.5 g |
| 글루코스 | 2.5 g |
| 아가 | 15.0 g |
| 증류수 | 1.0 L |
또한, 프로피로니 박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes, Gilchrist, Douglas and Gunter) 여드름을 발생하는 중요한 균으로서 박테리아이고, 하기 [표 2]의 크로스티리디아(clostridia)가 첨가된 배지에서 37℃로 배양하였다.
| 효모추출물 | 3.0 g |
| 육엑스(beefextract) | 10.0 g |
| 펩톤 | 10.0 g |
| 가용성 녹말 | 1.0 g |
| 글루코스 | 5.0 g |
| 시스테인 염산염 | 0.5 g |
| 염화나트륨 | 5.0 g |
| 아세트산 나트륨 | 3.0 g |
| 아가 | 15.0 g |
| 증류수 | 1.0 L |
<4-2> 비듬균
말라세지아(Malassezia furfur, Robin, Baillon)는 비듬을 유발하는 효모로서, 하기 [표 3]의 1% 올리브 오일을 추가한 배지 37에서 30℃로 배양하였다.
| 효모추출물 | 3.0 g |
| 맥아추출물 | 3.0 g |
| 펩톤 | 5.0 g |
| 덱스트로오스 | 10.0 g |
| 올리브오일 | 10.0 g |
| 아가 | 20.0 g |
| 증류수 | 1.0 L |
<
실험예
1>
센티페드그라스
추출물 또는 이의
분획물의
여드름균에 대한 항균활성
<1-1>
센티페드그라스
추출물 또는 이의
분획물의
농도에 따른
표피포도구균의
억제 효과 측정
표피 포도구균(taphylococcus epidermidis)은 여드름의 원인이 되는 균이다. 표피 포도구균을 실시예 <4-1>의 조건에서 24시간 배양하였다. 배양한 균액 2 ㎖를 원심분리기로 세포를 분리한 후, PBS 완충용액 200 ㎕를 넣어 보텍스(votex)를 이용하여 잘 섞어주고, 배지에 고르게 도말하였다. 멸균된 디스크(Disk, 3M paper)를 동일한 크기(지름 1cm)로 자른 후에 하기와 같이 동일한 간격을 두고 배치하였다. 디스크에 하기 [표 4]의 농도별 센티페드그라스 용액을 10 ul 씩 5번 떨어뜨려 점 분석(Spot assay)을 하기 위하여 건조시켰고, 표피 포도구균을 37℃배양온도에서 배양하며 3시간 별로 확인하였다.
그 결과, 실시예 <1-1>의 센티페드그라스 메탄올 추출물 0.3125, 0.625, 1.25, 2.5, 5 및 10 ug/ml의 농도로 처리하였을 때 각각 1.75, 1.5, 2, 2, 2.75 및 2.75의 평균 면적을 나타내었고(표 5 및 도 2), 실시예 <3-2>의 센티페드그라스 50% 메탄올 분획물을 처리하였을 때 평균면적은 1.75, 2, 2.125, 2.25, 1.375 및 3의 평균 면적을 나타내었으며(표 5 및 도 3), 실시예 <3-2>의 센티페드그라스 70% 메탄올 분획물을 처리하였을 때 평균면적은 1.75, 1.5, 2, 2, 2.75 및 2.75를 나타냈다(표 5 및 도 4). 따라서 센티페드그라스 추출물 또는 분획물이 표피 포도구균의 성장을 저해하는 것이 확인하였다.
| 이름 | 농도 | 구성 |
| D | 증류수 대조군 | |
| S | 용매 대조군 | 메탄올 50% + 증류수 50% |
| 1 | 10 ug/ml | 센티페드그라스 원액 50 ug/ml를 1/5로 희석-① |
| 2 | 5 ug/ml | ① 용액 50% + 증류수 50%-② |
| 3 | 2.5 ug/ml | ② 용액 50% + 증류수 50%-③ |
| 4 | 1.25 ug/ml | ③ 용액 50% + 증류수 50%-④ |
| 5 | 0.625 ug/ml | ④ 용액 50% + 증류수 50%-⑤ |
| 6 | 0.3125 ug/ml | ⑤ 용액 50% + 증류수 50%-⑥ |
| 농도 | 실시예<1-1>의 추출물 | 실시예<3-2>의 분획물 | 실시예<3-3>의 분획물 |
| 0.3125 ug/ml | 1.75 | 1.75 | 1.75 |
| 0.625 ug/ml | 1.5 | 2 | 1.5 |
| 1.25 ug/ml | 2 | 2.125 | 2 |
| 2.5 ug/ml | 2 | 2.25 | 2 |
| 5 ug/ml | 2.75 | 1.375 | 2.75 |
| 10 ug/ml | 2.75 | 3 | 2.75 |
<1-2>
센티페드그라스
추출물 또는 분획물의 농도에 따른
프로피로니박테리움
아크네스의 억제 효과 측정
프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes, P. acnes)는 여드름의 원인이 되는 균이다. 센티페드그라스 추출물의 농도에 따른 프로피로니박테리움 아크네스의 억제 효과를 알아보기 위하여 스팟 분석을 하였다. 구체적으로, 프로피로니박테리움 아크네스를 실시예 <4-1>의 조건에서 24시간 배양하였다. 배양한 균액 2 ㎖를 원심분리기로 세포를 분리한 후, PBS 완충용액 200 ㎕를 넣어 보텍스(votex)를 이용하여 잘 섞어주고, 배지에 고르게 도말하였다. 멸균된 디스크(Disk)를 동일한 크기(지름 1 cm)로 자른 후에 하기와 같이 동일한 간격을 두고 배치하였다. 디스크에 상기 [표 4]의 농도별 센티페드그라스 용액을 10 ul 씩 5번 떨어뜨려 스팟 분석을 하기 위하여 건조시켰고, 프로피로니박테리움 아크네스를 37℃에서 배양하며 3시간 마다 확인하였다.
그 결과, 실시예 <1-1>의 센티페드그라스 메탄올 추출물을 0.3125, 0.625, 1.25, 2.5, 5 및 10 ug/ml의 농도로 처리하였을 때 각각 1.75, 1.5, 2, 2, 2.75 및 2.75의 평균 면적을 나타내었고(표 6 및 도 5), 실시예 <3-3>의 센티페드그라스 70% 메탄올 분획물을 처리하였을 때 평균면적은 0, 0.25, 0.3, 1, 2.2 및 3.5를 나타냈다(표 6 및 도 6).
따라서 센티페드그라스 추출물 또는 분획물이 프로피로니박테리움 아크네스의 성장을 저해하는 것이 확인하였다.
| 농도 | 실시예<1-1>의 추출물 | 실시예<3-3>의 분획물 |
| 0.3125 ug/ml | 1.75 | 0 |
| 0.625 ug/ml | 1.5 | 0.25 |
| 1.25 ug/ml | 2 | 0.3 |
| 2.5 ug/ml | 2 | 1 |
| 5 ug/ml | 2.75 | 2.2 |
| 10 ug/ml | 2.75 | 3.5 |
<
실험예
2>
센티페드그라스
추출물 또는 이의
분획물의
농도에 따른 비듬균에 대한 항균 활성 측정
말라세지아는 비듬의 원인이 되는 균이다. 센티페드그라스 추출물 또는 이의 분획물의 농도에 따른 말라세지아의 억제 효과를 알아보기 위하여 스팟 분석을 하였다. 구체적으로, 말라세지아를 실시예 <4-2>의 조건에서 24시간 배양하였다. 배양한 균액 2 ㎖를 원심분리기로 세포를 분리한 후, PBS 완충용액 200 ㎕를 넣어 보텍스(votex)를 이용하여 잘 섞어주고, 배지에 고르게 도말하였다. 멸균된 디스크(Disk)를 동일한 크기(지름 1 cm)로 자른 후에 하기와 같이 동일한 간격을 두고 배치하였다. 디스크에 상기 [표 4]의 농도별 센티페드그라스 용액을 10 ul 씩 5번 떨어뜨려 스팟 분석을 하기 위하여 건조시켰고, 말라세지아를 30℃에서 배양하며 3시간마다 확인하였다.
그 결과, 실시예 <1-1>의 센티페드그라스 메탄올 추출물을 0.3125, 0.625, 1.25, 2.5, 5 및 10 ug/ml의 농도로 처리하였을 때 각각 1.75, 1.5, 2, 2, 2.75 및 2.75의 평균 면적을 나타내었고(표 7 및 도 7), 실시예 <3-2>의 세디페트그라스 50% 분획물 처리하였을 때 평균면적은 1, 1.75, 1.75, 2, 2.25 및 1.75의 평균 면적을 나타내었으며(표 7 및 도 8), 실시예 <3-3>의 세디페트그라스 70% 분획물 처리하였을 때 평균면적은 0.5, 0.75, 1.5, 1.5, 2 및 2를 나타냈다(표 7 및 도 9). 따라서 센티페드그라스 추출물 또는 이의 분획물이 말라세지아의 성장을 저해하는 것이 확인하였다.
| 농도 | 실시예 <1-1>의 추출물 | 실시예 <3-2>의 분획물 | 실시예 <3-3>의 분획물 |
| 0.3125 ug/ml | 1.25 | 1 | 0.5 |
| 0.625 ug/ml | 1.75 | 1.75 | 0.75 |
| 1.25 ug/ml | 1.5 | 1.75 | 1.5 |
| 2.5 ug/ml | 1.5 | 2 | 1.5 |
| 5 ug/ml | 2 | 2.25 | 2 |
| 10 ug/ml | 2 | 1.75 | 2 |
<
제조예
1> 약제의 제조
<1-1> 시럽제의 제조
상기 <실시예 3>의 센티페드그라스 에틸아세테이트-20% 메탄올 활성분획을 유효성분으로 함유하는 시럽제는 하기 [표 8]의 조성과 같이 제조하였다.
| 구성성분 | 함량(중량부) |
| 실시예 <3-1>의 20% 메탄올 분획물 | 2 |
| 사카린 | 0.8 |
| 당 | 25.4 |
| 글리세린 | 8 |
| 향미료 | 0.04 |
| 에탄올 | 4 |
| 소르브산 | 0.4 |
| 증류수 | 60 |
<1-2> 정제의 제조
상기 <실시예 3>의 센티페드그라스 에틸아세테이트-20% 메탄올 활성분획을 유효성분으로 함유하는 정제는 하기 [표 9]의 조성과 같이 제조하였다.
| 구성성분 | 함량(중량부) |
| 실시예 <3-1>의 20% 메탄올 분획물 | 250 |
| 락토오스 | 175.9 |
| 감자전분 | 180 |
| 콜롱드성 규산 | 32 |
| 10% 젤라틴 용액 | 5 |
| 감자전분 | 160 |
| 활석 | 50 |
| 스테아르산 마그네슘 | 5 |
상기 <실시예 3>의 에틸아세테이트-20% 메탄올 활성분획 250 중량부, 락토오스 175.9 중량부, 감자전분 180 중량부 및 콜로이드성 규산 32 중량부와 혼합하였다. 상기 혼합물에 10% 젤라틴 용액을 첨가시킨 후, 분쇄하여 14 매쉬체를 통과시켰다. 이것을 건조하고 여기에 감자전분 160 중량부, 활석 50 중량부 및 스테아린산 마그네슘 5 중량부를 첨가하여 얻은 혼합물을 정제로 제조하였다.
<
제조예
2>
화장료의
제조
<2-1> 유연 화장수의 제조
상기 실시예 <1-2>의 센티페드그라스 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 유연 화장수는 하기 [표 10]과 같이 제조하였다.
| 원료 | 함량(중량부) |
| 실시예 <1-1>의메탄올 추출물 | 10.00 |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 1.00 |
| 디소듐이디티에이 | 0.05 |
| 알란토인 | 0.10 |
| 디포타슘글리시리제이트 | 0.05 |
| 시트릭애씨드 | 0.01 |
| 소듐시트레이트 | 0.02 |
| 글리세레스-26 | 1.00 |
| 알부틴 | 2.00 |
| 하이드로제네이티드캐스터오일 | 1.00 |
| 에탄올 | 30.00 |
| 보존제 | 미량 |
| 착색제 | 미량 |
| 착향제 | 미량 |
| 정제수 | 잔량 |
<2-2> 영양 크림의 제조
상기 실시예 <1-2>의 센티페드그라스 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유한 영양크림은 하기 [표 11]의 조성과 같이 제조하였다.
| 원료 | 함량(중량부) |
| 실시예 <1-1>의메탄올 추출물 | 10.0 |
| 1,3-부틸렌 글리콜 | 7.0 |
| 글리세린 | 1.0 |
| D-판테놀 | 0.1 |
| 식물 추출물 | 3.2 |
| 마그네슘알루미늄실리케이트 | 0.3 |
| PEG-40 스테아레이트 | 1.2 |
| 스테아릭애씨드 | 2.0 |
| 폴리소르베이트 60 | 1.5 |
| 친유형글리세릴스테아레이트 | 2.0 |
| 소르비탄세스퀴올리에이트 | 1.5 |
| 세테아릴알코올 | 3.0 |
| 미네랄오일 | 4.0 |
| 스쿠알란 | 3.8 |
| 카르릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 2.8 |
| 식물성 오일 | 1.8 |
| 디메치콘 | 0.4 |
| 디포타슘글리시리제이트 | 미량 |
| 알란토인 | 미량 |
| 소듐 히아루로네이트 | 미량 |
| 토코페릴아세테이트 | 적량 |
| 트리에탄올아민 | 적량 |
| 보존제 | 적량 |
| 착향제 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
<제조예 3> 피부 외용제의 제조
<3-1> 지용성(W/O 제형) 연고
실시예 <3-2>의 아세테이트-70 % 메탄올 센티페드그라스 분획물 0.01 - 10.0%
스테아릴 알콜 7.0%
스테아린산 2.2%
스쿠알렌 3.4%
옥틸두오데칸올 5.0%
올리브유 6.0m%
글리세린모노하우릴 지방산 에스텔 10.0%
이소프로필 아디페이트 2.0%
테고 0.3%
카복실비닐폴리머 3.0%
프로필렌 글리콜 5.0%
코직산 0.05%
알파-케토글루타민산 0.2%
시스테인 0.2%
파라벤류 0.3%
멸균 정제수 또는 0.02M 인산 또는 완충용액 잔량
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 지용성 연고를 제조하였다.
<3-2> 친수성(O/W형) 연고
실시예 <3-2>의 아세테이트-70 % 메탄올 센티페드그라스 분획물 0.01 - 10.0%
백색바세린 25.0%
스테아릴알콜 20.0%
프로필렌글리콜 12.0%
프로필렌미스스틴산 0.1%
소디움 글리세린 모노라우렐 0.2%
폴리옥시에틸렌경화피마자유 4.0%
베타인 함유 양이온성 유화제 0.2%
모노스테아린산글리세린에스텔 0.1%
파라옥시안식향산프로필 0.1%
정제수 잔량
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 친수성 연고를 제조하였다.
<3-3> 크림
실시예 <3-2>의 아세테이트-70 % 메탄올 센티페드그라스 분획물 0.01 - 10.0%
유동파라핀 6.0%
스쿠알란 4.0%
소르비탄세스퀴올레이트 0.5%
폴리솔베이트 60 1.5%
밀랍 10.0%
카프필릭/카프릭프리글리세라이드 5.0%
부틸렌글리콜 6.0%
프리에탄올아민 3.0%
방부제 2.0%
향료 미량
정제수 잔량
상기의 조성으로 센티페드그라스 추출물을 함유하는 크림을 통상의 방법에 따라 제조할 수 있었다.
<
제조예
4> 건강식품의 제조
<4-1> 밀가루 식품의 제조
상기 실시예 <1-3>의 센티페드그라스 물 추출물 0.5 ~ 5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하였다.
<4-2>
스프
및 육즙(
gravies
)의 제조
상기 실시예 <1-3>의 센티페드그라스 물 추출물 0.1 ~ 5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
<4-3> 그라운드
비프(ground beef)의
제조
상기 실시예 <1-3>의 센티페드그라스 물 추출물 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
<4-4> 유제품(
dairy
products
)의 제조
상기 실시예 <1-3>의 센티페드그라스 물 추출물 5 ~ 10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
<4-5>
선식의
제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
상기 실시예 <1-3>의 센티페드그라스 물 추출물을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 실시예 <1-3>의 센티페드그라스 물 추출물을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부),
종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부),
실시예 <1-3>의 추출물(3 중량부),
영지(0.5 중량부),
지황(0.5 중량부)
<
제조예
5> 의약외품의 제조
<5-1> 샴푸의 제조
상기 실시예 <3-2> 에틸아세테이트-50% 메탄올 분획물 5 ~ 30 중량%
라우릴황산 암모늄 10.0 중량%
폴리옥시에틸렌 아우릴황산나트륨 5.0 중량%
코코아미도프로필레타인 5.0 중량%
라우로일미리스틸리에탄올아미드 3.0 중량%
에틸렌글리콜디스테아레이트 1.0 중량%
폴리 퀘터늄-7 1.0 중량%
청색 1호 0.0001 중량%
황색 4호 0.0004 중량%
파라옥시안식향산메틸 0.1 중량%
향료 0.5 중량%
구연산 0.2 중량%
정제수 잔부
상기의 조성으로 센티페드그라스 추출물을 함유하는 샴푸를 통상의 방법에 따라 제조할 수 있었다.
<5-2> 비누의 제조
상기 실시예 <3-2> 에틸아세테이트-50% 메탄올 분획물 24 중량%
글리세린 0.2 중량%
폴리에틸렌 글리콜 0.8 중량%
호호바유 0.3 중량%
세탄올 0.15 중량%
비누베이스 72.3 중량%
토코페놀 아세테이트 0.2 중량%
상기의 조성으로 센티페드그라스 추출물을 함유하는 비누를 통상의 방법에 따라 제조할 수 있었다.
<5-3> 린스의 제조
상기 실시예 <1-2> 에틸아세테이트 에탄올 추출물 10 중량%
라우릴황산나트륨(30%) 20 중량%
폴리옥시에틸렌라우릴황산나트륨(30%) 20 중량%
야자유지방산디에탄올아미드 3 중량%
프로필렌글리콜 0.25 중량%
색소 적량
구연산 적량
정제수 잔부
상기의 조성으로 센티페드그라스 추출물을 함유하는 린스를 통상의 방법에 따라 제조할 수 있었다.
<5-4> 헤어토닉의 제조
상기 실시예 <1-2> 에틸아세테이트 에탄올 추출물 10 중량%
디소듐이디티에이 0.05 중량%
판테놀 0.10 중량%
폴리쿼터늄-1 0.30 중량%
그리세릴 스테아레이트 1.50 중량%
폴리소르베이트 60 0.50 중량%
글리세릴 스테아레이트 0.40 중량%
디메치콘 2.00 중량%
미네랄 오일 2.00 중량%
세틸알코올 2.00 중량%
향료 적량
방부제 적량
정제수 잔부
상기의 조성으로 센티페드그라스 추출물을 함유하는 헤어토닉을 통상의 방법에 따라 제조할 수 있었다.
Claims (17)
- 센티페드그라스(Centipede grass, Eremochloa ophiuroides) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제 1항에 있어서, 상기 센티페드그라스 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것을 특징으로 하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제 2항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 센티페드그라스 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제 4항에 있어서, 상기 유기용매는 n-헥산 또는 에틸아세테이트인 것을 특징으로 하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제 4항에 있어서, 상기 분획물은 센티페드그라스 추출물을 n-핵산으로 추출한 후 물층을 에틸아세테이트로 추출한 에틸아세테이트 분획물인 것을 특징으로 하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 센티페드그라스 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 추가적으로 컬럼크로마토그래피에 흡착시키고 메탄올을 용출용매로 사용하여 분리한 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 피부 질환은 여드름 또는 비듬인 것을 특징으로 하는 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제 1항의 센티페드그라스 추출물, 제 4항의 분획물 또는 제 7항의 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 화장료 조성물.
- 제 9항에 있어서, 상기 피부 질환은 여드름 또는 비듬인 것을 특징으로 하는 피부질환 개선용 화장료 조성물.
- 제 1항의 센티페드그라스 추출물, 제 4항의 분획물 또는 제 7항의 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 예방 및 치료용 피부 외용제.
- 제 11항에 있어서, 상기 피부 질환은 여드름 또는 비듬인 것을 특징으로 하는 피부질환 예방 및 치료용 피부 외용제.
- 제 1항의 센티페드그라스 추출물, 제 4항의 분획물 또는 제 7항의 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 건강식품.
- 제 13항에 있어서, 상기 피부 질환은 여드름 또는 비듬인 것을 특징으로 하는 피부질환 개선용 건강식품.
- 제 1항의 센티페드그라스 추출물, 제 4항의 분획물 또는 제 7항의 활성분획을 유효성분으로 함유하는 피부질환 개선용 의약외품.
- 제 15항에 있어서, 상기 피부 질환은 여드름 또는 비듬인 것을 특징으로 하는 피부질환 개선용 의약외품.
- 제 15항에 있어서, 상기 의약외품은 샴푸, 비누, 린스 및 헤어토닉으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나로 사용하는 것을 특징으로 하는 피부질환 개선용 의약외품.
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|---|---|---|---|---|
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| CN104189680A (zh) * | 2014-09-04 | 2014-12-10 | 中南大学湘雅医院 | 一种治疗面部炎症性皮肤病的口服剂 |
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- 2012-07-24 KR KR1020120080623A patent/KR101398549B1/ko active IP Right Grant
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